(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の化合物：
−  化合物１：  ２，２’−｛オキシビス［エタン−２，１−ジイルオキシエタン−２，１−ジイルオキシベンゼン−４，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物２：  ２，２’−｛オキシビス［エタン−２，１−ジイルオキシエタン−２，１−ジイルオキシベンゼン−３，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物３：  ２，２’−｛エタン−１，２−ジイルビス［オキシエタン−２，１−ジイルオキシベンゼン−４，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物４：  ２，２’−｛ヘキサン−１，６−ジイルビス［イミノ（２−オキソエタン−２，１−ジイル）オキシベンゼン−４，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物５：  ２，２’−｛ブタン−１，４−ジイルビス［イミノ（２−オキソエタン−２，１−ジイル）オキシベンゼン−４，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物６：  ２，２’−｛ヘキサン−１，６−ジイルビス［イミノ（２−オキソエタン−２，１−ジイル）オキシベンゼン−３，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物７：  ２，２’−｛ブタン−１，４−ジイルビス［イミノ（２−オキソエタン−２，１−ジイル）オキシベンゼン−３，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
から選択されることを特徴とするＦＧＦ受容体アゴニスト化合物。
【請求項２】
以下の化合物：
−  化合物１：  ２，２’−｛オキシビス［エタン−２，１−ジイルオキシエタン−２，１−ジイルオキシベンゼン−４，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物２：  ２，２’−｛オキシビス［エタン−２，１−ジイルオキシエタン−２，１−ジイルオキシベンゼン−３，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
−  化合物３：  ２，２’−｛エタン−１，２−ジイルビス［オキシエタン−２，１−ジイルオキシベンゼン−４，１−ジイル（２−メチルインドリジン−１，３−ジイル）カルボニル（２，４−ジオキソ−１，４−ジヒドロキナゾリン−６，３（２Ｈ）−ジイル）］｝二酢酸；
から選択される請求項１に記載のＦＧＦ受容体アゴニスト化合物を製造する方法であって、
以下の反応式に従って、式（ＶＩＩ）の化合物を、式（ＸＩＩ）のアリールボロン酸と共にパラジウム触媒有機金属カップリング反応に使用し、
【化１】
0006049755.tif 000016
（Ｘはハロゲン原子であり、Ｒ２はメチル基を表し、ＰＧ1はアルキル基を表す。Ｌは下記のリンカー（Ａ）を表し、ｎは０〜５の整数を表す。）
【化２】
0006049755.tif 000017
弱酸の存在下に溶媒中で６０〜１２０℃に加熱して、
式（ＸＩＩＩ）の化合物を得て、式（ＸＩＩＩ）のエステルを鹸化する、
ことを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項１に記載のＦＧＦ受容体アゴニスト化合物、又は薬学的に許容しうる酸若しくは塩基との該化合物の付加塩を含むことを特徴とする薬剤。
【請求項４】
薬剤としての、請求項１に記載のＦＧＦ受容体アゴニスト化合物。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物、又は該化合物の薬学的に許容しうる塩、及び少なくとも１つの薬学的に許容しうる添加剤を含むことを特徴とする、医薬組成物。
【請求項６】
ＦＧＦ受容体活性化を必要とする疾患の処置を目的とした薬剤を製造するための、請求項１に記載のＦＧＦ受容体アゴニスト化合物の使用。
【請求項７】
心虚血の結果の処置、動脈の狭窄若しくは閉塞若しくは動脈炎に関連する疾患の処置、狭心症の処置、閉塞性血栓血管炎の処置、アテローム性動脈硬化症の処置、血管形成術後若しくは動脈内膜切除術後の再狭窄を阻止するための処置、治癒の処置、筋肉再生のための処置、筋芽細胞生存のための処置、筋肉減少症の処置、括約筋の平滑筋の機能の喪失、侵害受容の処置及び慢性痛の処置、末梢神経障害の処置、糖尿病患者におけるバイオ人工膵臓移植生存の改善のための処置、脂肪症の減少に関連するコレステロールの減少を生じるための処置、移植片血行再建及び移植片生着を改善するための処置、網膜変性症の処置、色素性網膜炎の処置、変形性関節症の処置、子癇前症の処置、血管病変及び急性呼吸促迫症候群の処置、骨保護処置、又は毛包保護及び毛髪成長調節のための処置を目的とした薬剤の製造のための、請求項１に記載のＦＧＦ受容体アゴニスト化合物の使用。
【請求項８】
心虚血の結果の処置、動脈の狭窄若しくは閉塞若しくは動脈炎に関連する疾患の処置、狭心症の処置、閉塞性血栓血管炎の処置、アテローム性動脈硬化症の処置、血管形成術後若しくは動脈内膜切除術後の再狭窄を阻止するための処置、治癒の処置、筋肉再生のための処置、筋芽細胞生存のための処置、筋肉減少症の処置、括約筋の平滑筋の機能の喪失、侵害受容の処置及び慢性痛の処置、末梢神経障害の処置、糖尿病患者におけるバイオ人工膵臓移植生存の改善のための処置、脂肪症の減少に関連するコレステロールの減少を生じるための処置、移植片血行再建及び移植片生着を改善するための処置、網膜変性症の処置、色素性網膜炎の処置、変形性関節症の処置、子癇前症の処置、血管病変及び急性呼吸促迫症候群の処置、骨保護処置、又は毛包保護及び毛髪成長調節のための処置におけるその使用のための、請求項１に記載のＦＧＦ受容体アゴニスト化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の主題は、線維芽細胞増殖因子受容体(FGFR)二量体化を誘導する新規な複素環式化合物、その製造方法、及びその治療上の使用である。本発明の主題は特に、二量体構造を有する、FGFRアゴニストとしての新規な化合物である。
【背景技術】
【０００２】
FGFは、胚発生の間に多数の細胞により、及び様々な病理学的状態下で成体組織の細胞により合成されるポリペプチドのファミリーである。
【０００３】
FGF2(又はb−FGF)は、これらの増殖因子のうち最初に、かつ最もよく特徴づけされているものである。FGF2は18kダルトン(kDa)のタンパク質であり、これは多数の細胞、及び特に内皮細胞、線維芽細胞、平滑筋細胞またあるいは骨細胞による増殖、遊走及びプロテアーゼ産生を誘導する。FGF2は、細胞表面及び細胞外マトリックスに位置する高親和性受容体チロシンキナーゼ(FGFR)及び低親和性ヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)型受容体の２つのクラスの受容体により細胞と相互作用する。従って、FGF2及びその受容体は、新血管形成、並びに平滑筋細胞、骨細胞及び毛包細胞の再生のプロセスを活性化することを目的とした治療のための非常に関連した標的を代表する。
【０００４】
さらに、細胞表面受容体チロシンキナーゼが、細胞膜を通して、特にこれらの受容体の細胞外ドメインの二量体化の機構を介して情報を伝達するということが知られている。
これらの二量体化機構を活性化することができる公知のリガンドは、典型的には天然の化合物、例えばFGF、PDGF(血小板由来増殖因子)、VEGF(血管内皮増殖因子)、EPO(エリスロポエチン)、G−CSF(顆粒球コロニー刺激因子)、TPO(トロンボポエチン)、特定のサイトカイン又はインスリンである。
【０００５】
B.Seed(非特許文献１)は、アンタゴニストの二量体化により細胞受容体のアゴニストを構築することが可能だろうという一般的な原理を提案する。しかし、この概念に従って構築された合成分子の例は記載されていない。S A. Qureshi (非特許文献２)、B E. Welm (非特許文献３)、K. Koide(非特許文献４)のような論文は、非ペプチド化合物又は二量体化の化学誘導物質(CID)を記載し、これらの化合物はキメラ受容体に対して作用するが天然受容体には作用しない。彼らはCIDが天然受容体のシグナル伝達経路を活性化することを可能にするということを示す結果を提示していない。
【０００６】
脊椎動物では、FGFのファミリーに２２のメンバーが存在し、これらは17〜34kDaの範囲に及ぶ分子量を有し、そして13％と71％との間の相同性を共有する。これらのFGFは、遺伝子レベル及びアミノ酸配列レベルの両方で高度に保存されている(非特許文献５)。FGFは高親和性受容体チロシンキナーゼ(FGF−R1、−R2、−R3、−R4)により細胞と相互作用する。FGFの発現は、それらが発生において重要な役割を有するということを示唆する。FGFファミリーの中でも、FGF−2は最も広く記載されているFGFである。これは18kDaのタンパク質であり、様々な細胞型、例えば内皮細胞、平滑筋細胞、線維芽細胞、周皮細胞、骨芽細胞又は毛包細胞において増殖、遊走及びプロテアーゼ産生を誘導する。従って、FGF2が関与する主要な治療領域は、神経及び心血管生理、神経再生、侵害受容、組織修復、ホメオスタシス、及び骨修復を含む。
【０００７】
従って、FGF2及びその受容体は、新血管形成及び動脈新生プロセスを誘導することを目的とした治療に非常に関連した標的を代表する(非特許文献６)。血管が閉塞した場合、虚血期が観察され、これは器官における動脈循環の減少を誘導し、それにより損傷した組織における酸素濃度の減少をもたらす。いくつかの増殖因子は新血管形成及び動脈新生プロセスを刺激するということがインビトロ及びインビボで示されている。FGF2はまたインビボで新血管新生も誘導し、そしてまた薬理モデルにおける血管の結紮後に側副血管の発生も誘導する。
【０００８】
いくつかの証拠は、FGF2が血管芽細胞の内皮前駆細胞への分化にも関与し、従って閉塞後の血行再建にも参加するということを実証する(非特許文献７)。従って、血管樹の細胞の応答を増加させることを目的とした方策は、虚血後の特に心臓又は冠動脈の血行再建を増加させるための適切な方策である(非特許文献８；非特許文献９)。
【０００９】
心虚血の処置については、最も有望な臨床試験のうちの１つは、FGF2がヘパリンの存在下でアルギネートミクロスフェア中に捕捉された試験である(非特許文献１０)。９０日後、FGF2で処置された全ての患者が虚血心臓症状を示さなかった。相対的に、コントロール群では、７人の患者のうち３人が９０日目に持続した症状を有しており、そして２人の患者は心臓手術を頼みとしていた。興味深いことに、治療の利益は３年の経過観察後に維持されていた。さらに、冠動脈へのFGF2の注射に関する３つの臨床試験が冠動脈狭窄の処置において行われた(非特許文献１１；非特許文献１２；非特許文献１３)。これら３つの試験の結果は、FGF2の冠動脈内注入が十分に許容されるものであり、そして患者の臨床状態を有意に改善するということを示す。
【００１０】
別のフェーズI臨床試験において、跛行をもたらす末梢動脈疾患を有する患者にFGF2注射を投与した(非特許文献１４)。この状況において、FGF2はこれらの患者において十分に許容されるものであり、そして臨床データは、遠位血管構造に影響を及ぼし、そして痛み及び潰瘍を伴う肢における遠位動脈炎を特徴とする末梢疾患、例えばバージャー病又は閉塞性血栓血管炎を有する患者における歩行の改善に関してFGF2の特に有益な効果を示唆する。
【００１１】
改善された新血管形成を必要とする別の状況において、バイオ人工膵臓における血管新生はそれらの膵臓にFGF2担持するミクロスフェアを含浸させた場合に非常に高いということが明らかに実証されている(非特許文献１５)。従ってこの血行再建は移植されたバイオ人工膵臓の生存を改善し、そして結果的に移植片の生着を改善する。従って、FGFは糖尿病患者におけるバイオ人工膵臓移植片生着の改善に寄与するようであり、そしてより一般的には、移植片血行再建の改善に寄与するようであり、そして移植片生着に関与するようである。
【００１２】
血管新生誘導効果に加えて、FGF2はアポトーシスの誘導因子に対して内皮細胞を保護する。FGF2は内皮細胞生存因子であることが今や明確に記載されている(非特許文献１６)。急性呼吸促迫症候群(ARDS)は心血管及び精神神経の問題により特徴づけられる。心血管問題の状況において、患者はかなりの血管損傷を示し、そして特に高レベルの内皮細胞アポトーシスの誘導を示す。近年、Hamacherらは、ARDSに罹患した患者からの気管支肺胞洗浄液が肺微小血管内皮細胞に対してアポトーシス促進活性を示すということを実証した(非特許文献１７)。
【００１３】
子癇前症は、血管新生の欠乏に関連する胎盤の病理的状態である(非特許文献１８)。これらの血管新生（vascularization）の欠乏は、新血管形成（angiogenesis）の欠乏に起因し、そして胎仔の死亡を生じ得るレベルの胎盤の破壊をもたらすと考えられている。
【００１４】
治癒は、大部分の場合は処置を必要としない組織再生プロセスである。しかし、感染又はケロイド瘢痕の出現のような合併症は起こり得、このケロイド瘢痕は、線維性コンシステンシー（consistency）のひだ、又は皮膚の弾力性の喪失を生じる皮膚退縮を特徴とする病理的瘢痕である。治癒期は５段階で起こる：第一期は炎症期であり、これは組織修復の開始点である。この炎症反応は血管拡張を引き起こし、そして病変の透過性を増加させる。第二期は新血管形成期であり、これは細胞に必須の栄養分及び酸素の供給を可能にする。第三期は遊走期であり：再生（従って肉芽）組織が適所に置かれる：これが瘢痕生成の始まりである。全ての結合組織細胞は病変の中心へと遊走し、特に線維芽細胞及びケラチノサイトである。第四期は増殖期であり、これは結合組織細胞及び血管発生に関連する線維の大量増殖からなる。最終期は成熟期であり、これは最も長い段階である：これは18〜24日間続く。その後、線維芽細胞の数が減少するに連れて血管の数が減少し、治癒の終了へと至る。糖尿病患者の場合、治癒は遅くかつ困難なプロセスであり、彼らは、二次的に切断に至り得る感染事象をしばしば合併するようになる、治癒が非常に困難な慢性創傷に曝される。それらの多面的活性のために、FGFは特にケラチノサイト及び線維芽細胞を活性化することにより、そして新血管形成事象に参加することにより、組織修復に参加する。従って、FGFは健常患者又は糖尿病患者において、治癒の速度の観点、そして瘢痕の質の観点の両方から治癒の改善において役割を果たすようである。治癒事象に関与する増殖因子、及び特にFGFのレベルが年齢と共に非常に大幅に減少するということも明確に記載されている。従って、高齢患者において、治癒の欠乏及び遅延は皮膚におけるFGFの欠乏と関連付けられる。
【００１５】
グルタミン酸は後根（dorsal）神経節細胞の推定伝達物質であり、そしてブラジキニンは炎症の間に産生される分子であり、侵害受容線維を活性化及び刺激し得る。この状況において、侵害受容線維に対するFGF2の調節作用はインビボで実証されていないが、FGF2は炎症性疼痛を調節し得る。しかし、FGF2がインビトロでブラジキニン刺激グルタミン酸放出を完全に遮断するということが実証されている(非特許文献１９)。従って、FGFは侵害受容及び慢性痛において役割を果たし得る。
【００１６】
末梢神経障害は、運動及び／又は感覚末梢神経に対する軸索又は脱髄損傷であり、四肢遠位の脱感作をもたらす。神経損傷の結果の１つは穿孔性潰瘍で有り得、これは、この場合、体重が常に同じ支持点により支えられる傾向を有するために、重度の感受性に対するかなりの損傷がある場合に特に恐れられる。糖尿病の主要な二次的合併症の１つは末梢神経障害の慢性的な発症である。この状況において、 FGF2が軸索再生を誘導することが実証されており、これは末梢神経損傷の処置、従って末梢神経障害の処置における最適な治療であり得る(非特許文献２０)。
【００１７】
FGF系は筋肉再生、並びに筋芽細胞生存及び増殖に必須の系であるということが提案されてきた(非特許文献２１)。FGF2は特に筋肉減少症、括約筋における平滑筋機能の喪失の場合に、筋肉再生を促進するため、そしてまた特にデュシェンヌ型筋ジストロフィーにおいて、移植された筋芽細胞の生存及び発達のために開発され得る。VEGF又はFGF2のような増殖因子はまた、虚血後の心筋灌流を改善するようであった(非特許文献２２)。さらに、脈管ネットワークは組織発達及び維持のために必須である。栄養分、酸素及び細胞の送達を促進することにより、血管は組織の機能的及び構造的完全性の維持に役立つ。この状況において、新血管形成及び脈管形成は、虚血後に組織を保存し灌流することを可能にする。従ってFGF2のような新血管形成増殖因子は組織再生のための血行再建を促進する。従ってFGF2は、骨格筋細胞及び新血管形成に直接作用することにより、ジストロフィー又は正常筋肉の再生に対して効果を有するだろう(非特許文献２３)。
【００１８】
主要な増殖因子の中でも、FGF2の全身投与は骨折後の骨修復を促進するということが今では明確に確立されている(非特許文献２４)。霊長類においてゼラチンマトリックス中のFGF2の局所投与は骨修復を加速し、骨折の処置におけるFGF2の臨床上の有用性を示唆する。
【００１９】
FGF7(又はKGF)及びFGF18の内因性過剰調節（overregulation）は、病的症例において、又は細胞傷害性薬剤での処置後の毛包の増殖、遊走及び保護を促進するための重要な機構であるようである(非特許文献２５)。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２０】
【非特許文献１】B. Seed  Chemistry and Biology、November、1994、1、125−129
【非特許文献２】S A. Qureshi、PNAS、1999、vol 96、no 21、12156−12161
【非特許文献３】B E. Welm、The Journal of cell biology、2002、vol 157、4、703−714
【非特許文献４】K. Koide、J. Am. Chem. Soc.、2001、123、398−408
【非特許文献５】D Ornitz. & N. Itoh、Fibroblast growth factors. Genome Biology、30005.1−3005.12、2001
【非特許文献６】Khurana、R. & Simons、M. Insights from angiogenesis trials using fibroblast growth factor for advanced arteriosclerotic disease. Trends Cardiovasc Med 13、116−22、2003
【非特許文献７】Burger、P. E. et al. Fibroblast growth factor receptor−1 is expressed by endothelial progenitor cells. Blood 100、3527−35、2002
【非特許文献８】Freedman、S. B. & Isner、J. M. Therapeutic angiogenesis for ischemic cardiovascular disease. J Mol Cell Cardiol 33、379−93、2001
【非特許文献９】Freedman、S. B. & Isner、J. M. Therapeutic angiogenesis for coronary artery disease. Ann Intern Med 136、54−71、2002
【非特許文献１０】Laham、R. J. et al. Local perivascular delivery of basic fibroblast growth factor in patients undergoing coronary bypass surgery：results of a phase I randomized、double−blind、placebo−controlled trial. Circulation 100、1865−71、1999
【非特許文献１１】Laham、R. J. et al. Intracoronary basic fibroblast growth factor (FGF−2) in patients with severe ischemic heart disease：results of a phase I open−label dose escalation study. J Am Coll Cardiol 36、2132−9、2000
【非特許文献１２】Simons、M. et al. Pharmacological treatment of coronary artery disease with recombinant fibroblast growth factor−2：double−blind、randomized、controlled clinical trial. Circulation 105、788−93、2002
【非特許文献１３】Unger、E. F. et al. Effects of a single intracoronary injection of basic fibroblast growth factor in stable angina pectoris. Am J Cardiol 85、1414−9、2000
【非特許文献１４】Lazarous、D. F. et al. Basic fibroblast growth factor in patients with intermittent claudication：results of a phase I trial. J Am Coll Cardiol 36、1239−44、2000
【非特許文献１５】Sakurai、Tomonori；Satake、Akira、Sumi、Shoichiro、Inoue、Kazutomo、Nagata、Natsuki、Tabata、Yasuhiko. The Efficient Prevascularization Induced by Fibroblast Growth Factor 2 With a Collagen−Coated Device Improves the Cell Survival of a Bioartificial Pancreas. Pancreas. 28(3)：e70−e79、April 2004
【非特許文献１６】Role of Raf in Vascular Protection from Distinct Apoptotic Stimuli：A Alavi、J.D. Hood、R. Frausto、D. G. Stupack、D.A. Cheresh：Science 4 July 2003：Vol. 301. no. 5629、pp. 94−96
【非特許文献１７】Tumor necrosis factor−alpha and angiostatin are mediators of endothelial cytotoxicity in bronchoalveolar lavages of patients with acute respiratory distress syndrome. Am J Respir Crit Care Med. 2002 Sep 1；166(5)：651−6：Hamacher J、Lucas R、Lijnen HR、Buschke S、Dunant Y、Wendel A、Grau GE、Suter PM、Ricou B.
【非特許文献１８】Sherer、D. M. & Abulafia、O. Angiogenesis during implantation、and placental and early embryonic development. Placenta 22、1−13、2001
【非特許文献１９】Rydh−Rinder et al. (2001) Regul Pept 102：69−79
【非特許文献２０】Basic fibroblast growth factor isoforms promote axonal elongation and branching of adult sensory neurons in vitro. Klimaschewski L、Nindl W、Feurle J、Kavakebi P、Kostron H. Neuroscience. 2004；126(2)：347−53
【非特許文献２１】Neuhaus、P. et al. Reduced mobility of fibroblast growth factor (FGF)−deficient myoblasts might contribute to dystrophic changes in the musculature of FGF2／FGF6／mdx triple−mutant mice. Mol Cell Biol 23、6037−48、2003
【非特許文献２２】Hendel、R. C. et al. Effect of intracoronary recombinant human vascular endothelial growth factor on myocardial perfusion：evidence for a dose−dependent effect. Circulation 101、118−21、2000
【非特許文献２３】Fibbi、G.、D’Alessio、S.、Pucci、M.、Cerletti、M. & Del Rosso、M. Growth factor−dependent proliferation and invasion of muscle satellite cells require the cell−associated fibrinolytic system. Biol Chem 383、127−36、2002
【非特許文献２４】Acceleration of fracture healing in nonhuman primates by fibroblast growth factor−2. Kawaguchi H、Nakamura K、Tabata Y、Ikada Y、Aoyama I、Anzai J、Nakamura T、Hiyama Y、Tamura M. J Clin Endocrinol Metab. 2001 Feb；86(2)、875−880
【非特許文献２５】Comprehensive Analysis of FGF and FGFR Expression in Skin：FGF18 Is Highly Expressed in Hair Follicles and Capable of Inducing Anagen from Telogen Stage Hair Follicles. Mitsuko Kawano、Akiko Komi−Kuramochi、Masahiro Asada、Masashi Suzuki、Junko Oki、Ju Jiang and Toru Imamura
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
出願者らは今や、FGF受容体二量体化を誘導することができる新規な合成分子を見出し、これはFGFRが関与する多数の機構、例えば新血管形成、又は平滑筋、骨若しくは毛包の細胞再生において有用であり得る。
【００２２】
本発明の目的は、二量体構造を有する新規なFGF受容体アゴニスト化合物を提案することである。
これらの化合物はFGF受容体の二量体化を引き起こし、これがそれらの活性化を生じ、そして結果的に細胞活性化を生じる。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
本発明の主題は、一般式：
M1−L−M2
［式中、M1及びM2は、同一でも異なっていてもよく、それぞれ互いに独立してモノマー単位Mを表し、そしてLはM1とM2とを共有結合で連結するリンカー基を表す］に相当するFGF受容体アゴニスト化合物である。
【００２４】
本発明に従う式M1−L−M2のアゴニストは、M1及びM2と呼ばれる一般式Mの２つのモノマー単位を含み、これらは同一でも異なっていてもよく、それぞれFGFRアンタゴニスト活性を有するように選択される。
【００２５】
本発明の主題は、上記モノマー単位が、以下の一般式M：
【化１】
0006049755.tif 000002
［式中、
*はモノマー単位MとリンカーLとの間の連結部位を示し、
−  R1は、
・  基−NHCOPhを表し、該フェニルは、酸素原子がモノマー単位とリンカーLとの間の連結部位であるように酸素原子で置換され；この基は−NHCOPhO*と表され、
又は
・  アリール基、特にフェニル基、又はヘテロアリール基を表し、該基は、モノマー単位MとリンカーLとの間の連結部位である二価酸素原子、又は窒素原子がモノマー単位とリンカーLとの間の連結部位であるアミド基−CONH*−から選択される基で場合により置換され、
−  R2はアルキル、有利にはメチル基を表し、
−  R3は水素原子又は直鎖、分枝、環状若しくは特に環状のアルキル基を表し、
−  R4は水素原子又はアルキル若しくは−アルキル−COOR5基［R5は水素原子又はアルキル基を表す］を表す］
に相当することを特徴とする、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義されたFGF受容体アゴニスト化合物である。
【００２６】
Lは、２つのモノマー単位M1及びM2間の距離が２つのFGF受容体の二量体化を可能にするように、M1とM2とを共有結合で連結するリンカー基を表す。上記リンカー基は１〜25の連結を含む。上記リンカー基Lは、より詳細には11〜20の連結を含む。用語「連結」は、モノマー単位M1とM2とを接続することを可能にする原子間の結合のみを意味することを意図される。
【００２７】
リンカー基Lは、式M1−L−M2の化合物の各モノマー単位がFGFR膜貫通受容体の細胞外結合部位との接触を確立することを可能にする可撓性を特徴とする。
【００２８】
Lは置換基R1上にある原子により最初に式M1のモノマー単位に結合され、そして次に、置換基R1上にある原子により式M2の他方のモノマー単位に結合され、M1及びM2は同一であるか又は異なる。
【００２９】
本発明に従う部分群の主題は、より詳細には、LがラジカルR1を介して２つのモノマー単位M1及びM2に接続することを特徴とする、上で定義された化合物である。
【００３０】
式Mのモノマー単位の置換基R1上に位置する接続する原子は、酸素又は窒素原子により代表され得る。
【００３１】
Lとモノマー単位との間の接合はC−O又はC−N結合により代表され得る。
【００３２】
本発明に適したリンカー基Lは、直鎖でも分枝でもよく、そして場合により１つ若しく
はそれ以上のヘテロ原子、例えば酸素、窒素及び／若しくはリンが挿入されたアルキルラジカル、１つ若しくはそれ以上の環、１つ若しくはそれ以上のヘテロシクロアルキル（例えばピペラジン)、又は１つ若しくはそれ以上のアリール(例えばフェニル)又はヘテロアリール(例えばピリジン)のような種類の構造から選択され得る。
【００３３】
リンカー基Lは、アミド、アミン、エーテル及び／又はホスホジエステルのような１つ又はそれ以上の官能基を場合により含み得る。
【００３４】
リンカー基Lにおける分枝は、それ自体、直鎖でも分枝でもよく、そして場合により１つ若しくはそれ以上のヘテロ原子、例えば酸素及び／若しくは窒素が挿入されたアルキルラジカル、１つ若しくはそれ以上のヘテロシクロアルキル、１つ若しくはそれ以上のアリール若しくはヘテロアリール、並びに／又は場合により１つ若しくはそれ以上の官能基、例えばアミド、アミン、エーテル、ホスフェート、サルフェート及び／若しくはヒドロキシルを含み得る。
【００３５】
式M1−L−M2のこれらの化合物は、塩基の形態、又は酸若しくは塩基、特に薬学的に許容しうる酸若しくは塩基で塩化された形態で存在し得る。このような付加塩は本発明の一部である。特にD,L−リジン塩又はナトリウム塩が挙げられ得る。
【００３６】
本発明の文脈において、かつ文章中でそうではないと述べられていなければ：
−用語アルキルは、１〜４個の炭素原子を含む、直鎖又は分枝の、飽和炭化水素ベースの脂肪族基を意味することを意図され；例として、メチル、エチル、プロピル及びペンチル基が挙げられ得る；
−用語ヘテロシクロアルキルは、３個と６個との間の炭素原子を含み、そして場合により１個又はそれ以上のヘテロ原子、例えば１又は２個のヘテロ原子、例えば窒素及び／又は酸素を含む、３〜８員を含む環状アルキル基を意味することを意図され、このシクロアルキル基は、場合により１つ又はそれ以上のハロゲン原子及び／又はアルキル基で置換される。例として、シクロプロピル、シクロペンチル、ピペラジニル、ピロリジニル及びピペリジニル基が挙げられ得る；
−用語ハロゲンは、塩素、フッ素、臭素又はヨウ素原子を意味することを意図される；
−用語ハロアルキルは、全て又は一部の水素原子がフッ素原子のようなハロゲン原子で置き換えられているアルキル鎖を意味することを意図される；
−用語アリールは、５個と１０個との間の炭素原子を含む環状芳香族基、例えばフェニル基を意味することを意図される；そして
−用語ヘテロアリールは、１つ又はそれ以上のヘテロ原子、例えば１個と４個との間のヘテロ原子、例えば窒素又は酸素を含めて、３個と１０個との間の原子を含む環状芳香族基であって、１つ又はそれ以上、好ましくは１又は２つの環を含む環状芳香族基を意味することを意図される。ヘテロアリールは、１つ又はそれ以上のアルキル基又は酸素原子で場合により置換される。例として、チエニル、ピリジニル、ピラゾリル、イミダゾリル及びトリアゾリル基が挙げられ得る。
【００３７】
本発明に従う部分群の主題は、より詳細には、上記モノマー単位が、以下の一般式M：
【化２】
0006049755.tif 000003
［式中、
*はモノマー単位ＭとリンカーＬとの間の連結部位を示し、
−  Ｒ1は、
・  基−ＮＨＣＯＰｈを表し、該フェニルは、酸素原子がモノマーとリンカーＬとの間の連結部位であるように酸素原子で置換され；この基は−ＮＨＣＯＰｈＯ*と表され、
又は
・  フェニル基を表し、該基は、モノマー単位MとリンカーLとの間の連結部位である二価酸素原子、又は窒素原子がモノマー単位とリンカーLとの間の連結部位であるアミド基−CONH*−から選択される基で場合により置換され、
−  R2はメチル基を表し、
−  R3は水素原子を表し、
−  R4は−アルキル−COOR5基［R5は水素原子を表す］を表す］
に相当することを特徴とする、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義されたFGF受容体アゴニスト化合物である。
【００３８】
本発明に従う別の部分群の主題は、特に、式中：
R1が−NHCO−PhO*、−Ph−O*又は−Ph−NHCO*基を表す、
式Mのモノマー単位を含む、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義された化合物である。
【００３９】
本発明に従う別の部分群の主題は、特に、式中：
R1は−NHCO−PhO*、−Ph−O*又は−Ph−NHCO*基を表し、
R2はメチル基を表す、
式Mのモノマー単位を含む、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義された化合物である。
【００４０】
本発明に従う別の部分群の主題は特に、式中：
R3は水素原子を表し、
R4は−アルキル−COOR5基を表し、R5は水素原子又はアルキル基、特に水素原子を表す、
式Mのモノマー単位を含む、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、以前に定義された化合物である。
【００４１】
本発明に従う別の部分群の主題は、より詳細には、M1がM2と同一である、以前に定義された式M1−L−M2の化合物である。
【００４２】
リンカー基Lは、より詳細には、以下の式：
【化３】
0006049755.tif 000004
［式中、
*はLをモノマー単位Mと置換基R1上で接続するための原子を示し、
nは０〜５の整数を示し、
mは１〜５の整数を示し、
rは１〜６の整数を示し、
R2’及びR2’’は同一でも異なっていてもよく、１〜５個の炭素原子を有し、そして場合により連結して環を形成し得る、直鎖アルキルラジカルを表し、
R6は：
−  ヒドロキシル、アミン又はNR6’R6’’基［R6’及びR6’’は同一でも異なっていてもよく、水素原子又は直鎖、分枝若しくは環状の(C1−C4)アルキル基から選択される］から選択される基で場合により置換された、アリール基又はヘテロアリール基、
−  直鎖又は分枝のアルキル基で場合により置換された、窒素原子及び酸素原子から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む、ヘテロシクロアルキル基、
−  NR6’R6’’基［R6’及びR6’’は同一でも異なっていてもよく、水素原子又は直鎖、分枝若しくは環状の(C1−C4)アルキル基から選択される］、
−  ヒドロキシル基で場合により置換されたO−(C1−C4)アルキル基、
から選択される１つ又はそれ以上の置換基で場合により置換された(C1−C4)アルキル基、好ましくは−(C1−C2)アルキル基を示す］
を有する、塩基の形態、又は酸との付加塩の形態のラジカルから選択され得る。
【００４３】
本発明に従う別の部分群の主題は、式中：
*はLをモノマー単位Mと置換基R1上で接続するための原子を示し、
nは２又は３を表し、
mは１、２、３又は５を表し、
rは２、４又は６を表し、
R2’及びR2’’は同一でも異なっていてもよく、１〜５個の炭素原子を有し、そして場合により連結して環を形成し得る、直鎖アルキルラジカルを表し、
R6は：
−  NR6’R6’’基［R6’及びR6’’は同一でも異なっていてもよく、直鎖(C1−C4)アルキル基を表す］で場合により置換された、アリール基又はピリジン基
−  直鎖又は分枝のアルキル基で場合により置換された、窒素原子及び酸素原子から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む、ヘテロシクロアルキル基、
−  NR6’R6’’基［R6’及びR6’’は同一でも異なっていてもよく、直鎖−(C1−C4)アルキル基を表す］、
−  ヒドロキシル基で場合により置換されたO−(C1−C4)アルキル基、
から選択される１つ又はそれ以上の置換基で場合により置換された、−(C1−C4)アルキル基、好ましくは−(C1−C2)アルキル基を表す、
塩基の形態、又は酸との付加塩の形態の、上記の式を有するリンカー基Lである。
【００４４】
本発明に従う別の部分群の主題は、特に、リンカー基LがラジカルＡであるような、上で定義された、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の化合物である。
【００４５】
本発明に従う別の部分群の主題は、特に、リンカー基LがラジカルＢであるような、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義された化合物である。
【００４６】
本発明に従う別の部分群の主題は、特に、リンカー基LがラジカルＣであるような、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義された化合物である。
【００４７】
本発明に従う別の部分群の主題は、特に、リンカー基LがラジカルＤであるような、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義された化合物である。
【００４８】
本発明に従う別の部分群の主題は、特に、リンカー基LがラジカルＥであるような、塩基の形態、又は酸若しくは塩基との付加塩の形態の、上で定義された化合物である。
【００４９】
上で定義された部分群はまた、別々に又は組み合わせて考慮されて本発明の一部を形成する。
【００５０】
本発明の化合物の中でも、以下の化合物が特に挙げられ得る：
−化合物1：2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物2：2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−3,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物3：2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[オキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物4：2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物5：2,2’−｛ブタン−1,4−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物6：2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物7：2,2’−｛ブタン−1,4−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物8：2,2’−(｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸；
−化合物9：2,2’−｛(エチルイミノ)ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物10：2,2’−(｛[2−(モルホリン−4−イル)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸；
−化合物11：2,2’−(｛[2−(4−メチルピペラジン−1−イル)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸；
−化合物12：2,2’−｛[(ピリジン−4−イルメチル)イミノ]ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物13：2,2’−(｛[4−(ジメチルアミノ)ベンジル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸；
−化合物14：2,2’−(｛[2−(ジエチルアミノ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸；
−化合物15：2,2’−｛ピペラジン−1,4−ジイルビス[プロパン−3,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物16：[7−(｛1−[4−(｛9−[4−(3−｛[3−(カルボキシメチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸；
−化合物17：2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[オキシエタン−2,1−ジイルカルバモイルベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物18：2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[オキシエタン−2,1−ジイルカルバモイルベンゼン−3,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸；
−化合物19：[7−(｛1−[3−(｛9−[3−(3−｛[3−(カルボキシメチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸；
−化合物20：2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイルカルボニルイミノ(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸。
【００５１】
上記の化合物は、IUPAC命名法を使用してACDLABS 10.0 ACD／name(Advanced Chemistry
development)又はAutoNom(Beilstein Informations system)ソフトウェアを用いて命名されたことに留意すべきである。
【００５２】
以下において、用語「保護基PG」は、第一に、合成の間にヒドロキシル又はアミンのような反応性官能基を保護すること、そして第二に、合成の最後にインタクトな反応性官能基を再生することを可能にする基を意味することを意図される。保護基並びに保護及び脱保護の方法の例は、「Protective Groups in Organic Synthesis」、Green et al.、4th 
Edition (John Wiley & Sons、Inc.、New York)に示される。
【００５３】
以下において、用語「脱離基(LG)」は、電子対の離脱と共にヘテロリティック結合の開裂により分子から容易に切断され得る基を意味することを意図される。従ってこの基は例えば置換反応において別の基と容易に置き換えられ得る。このような脱離基は、例えばハロゲン又は活性化ヒドロキシル基、例えばメシル、トシル、トリフラート、アセチルなどである。脱離基及びそれらを製造するための参考文献の例は、「Advanced Organic Chemistry」、J. March、5st Edition、Wiley Interscience、p. 310−316に示される。
【００５４】
本発明によれば、一般式(Ｉ)の化合物は以下の方法に従って製造され得る。
【００５５】
モノマー単位の製造
スキーム１：
【化４】
0006049755.tif 000005
【００５６】
スキーム１は式(VII)のモノマー単位の合成を示す。式(Ｉ)の酸塩化物を、4−[(フェニルカルボニル)アミノ]ベンゼン−1,3−ジカルボン酸[CAS 121732−46−5；C. K. Lee and
Y. M. Ahn、Journal of Organic Chemistry、1989、54(15)、3744−7]から、1,2−ジクロロメタンのような不活性溶媒中で塩化チオニルで処理して加熱還流させることにより得る。前に定義されたR2を有する式(II)のインドリジンを、式(Ｉ)の酸塩化物と、DCM又はTHFのような不活性溶媒中で、場合によりトリエチルアミンのような弱塩基の存在下にて０℃から周囲温度で反応させて式(III)の化合物を得る。ハロゲン原子(Ｘと示される)の式(III)のインドリジンの１位における位置選択的導入を、場合によりNaHCO3のような弱塩基の存在下で無水又は水性MeOH、ジオキサン又はDCMのような溶媒中で、周囲温度にて、例えば、ヨウ素、NIS、NBS又は臭素のような反応物との芳香族求電子置換反応により行って、式(IV)のハロゲン化誘導体を得る。例えば水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムを用いた塩基性水性媒体中で、場合によりNMPのような共溶媒の存在下で、そして加熱還流により式(IV)の化合物を加水分解して、式(Ｖ)のアントラニル酸を得る。
【００５７】
式(Ｖ)のカルボン酸を、BOP又はPyBOPのような反応物を使用して、例えばトリエチルアミンのような弱塩基の存在下で０℃から周囲温度にて、DMF又はTHFのような不活性溶媒中で活性化し、次いでメチル基又はtert−ブチル基のようなアルキル基及びベンジル基から選択される基PG1でエステル形態で保護されたグリシンと反応させて、式(VI)の化合物を得ることができる。クロロギ酸エチルを式(VI)の化合物とトリエチルアミンのような弱塩基の存在下で反応させて、カルバメート中間体を得、DBU又はDABCOのような塩基を加えた後に式(VII)のキナゾリンジオンを得る。
【００５８】
スキーム２：
【化５】
0006049755.tif 000006
【００５９】
式(VII)のハロゲン化誘導体を、アリールボロン酸又はエステルのいずれかと共に、例えばリン酸カリウムのような弱塩基の存在下で、DMFのような不活性溶媒中で60〜120℃に加熱しながら例えばPdCl2(dppf)を使用するパラジウム触媒有機金属カップリング反応において使用して、ヒドロキシル、あるいはPG2［tert−ブチル基及びベンジル基から選択されるアルキル基である］で場合により保護されたカルボキシ基、あるいは場合により保護された基−O(CH2)m−カルボキシ［m及びPG2は前に定義されたとおりである］を表す基Wを含む式(VIII)の化合物を得ることができる。
【００６０】
式(VIII)の化合物がPG2で保護されたカルボキシ基を含む場合、これを例えばTFAを用いて酸性媒体中で乾燥条件下にて周囲温度で、又はPG1基を維持するような方法でPd／Cの存在下での水素添加により処理して、式(VIII)のカルボン酸を得る。
【００６１】
スキーム３：
【化６】
0006049755.tif 000007
【００６２】
式(VIII)の化合物は、Wがヒドロキシル基である場合、式(LG)−(CH2)m−(LG’)［mは前で定義されたとおりであり、そしてまたLG及びLG’は同一でも異なっていてもよく、ハロゲン原子又は活性化ヒドロキシル基、例えばメシル、トシル、トリフラート、又はアセチル基を表す］の求電子剤と、塩基、例えば、水素化ナトリウムを用いて、脱保護の後、DMF又はTHFのような不活性溶媒中で周囲温度にて反応させて、式(IX)の化合物を得ることができる。
【００６３】
スキーム４：
【化７】
0006049755.tif 000008
【００６４】
式(VII)のハロゲン化化合物を、ベンゾフェノンイミンとのカップリング反応において使用することができる。このカップリングは、場合によりリガンド、例えばキサントホスの存在下で、炭酸セシウムのような塩基の存在下で、60〜120℃に加熱しながら、例えばPd(OAc)2を使用してパラジウムで触媒されて式（Ｘ)のイミンを生じ、例えば塩酸を用いる酸性媒体中での周囲温度での処理後に式(XI)のアミンが得られる。
【００６５】
二量体の製造
スキーム５：経路Ａ(実施例１)
【化８】
0006049755.tif 000009
【００６６】
式(VII)のハロゲン化誘導体を、式(XII)［Lが、出願WO2007080325に記載されるリンカーＡを表す場合］のアリールボロン酸と共に、例えばリン酸カリウムのような弱塩基の存在下で、DMFのような溶媒中で60〜120℃に加熱しながら、例えばPdCl2(dppf)を使用するパラジウム触媒有機金属カップリング反応において使用して、式(XIII)の化合物を得ることができる。式(XIII)のエステルの鹸化により本発明の化合物を得る。
【００６７】
スキーム６：経路Ｂ(実施例２)
【化９】
0006049755.tif 000010
【００６８】
式(VIII)の化合物が非保護カルボキシ基Ｗを有する場合、これを、例えばBOP又はPyBOPを用いて活性化した後に、トリエチルアミンのような弱塩基の存在下で、THF又はDMFのような溶媒中で、０℃から周囲温度の範囲の温度にて式H2N−L−NH2のジアミンとカップリングさせて、式(XIV)の二量体を得ることができる。式(XIV)のエステルの鹸化により本発明の化合物を得る。同じ種類の反応を、Ｗ＝−O(CH2)mCO2Hである場合の式(VIII)の化合
物に適用することができる。
【００６９】
スキーム７：経路Ｃ(実施例３)
【化１０】
0006049755.tif 000011
【００７０】
式(IX)の化合物を、炭酸カリウムのような弱塩基の存在下で周囲温度にて第一級アミンR6−NH2との求核置換反応において使用して、式(XV)の二量体、あるいはアミンR6−NH2が大過剰に存在する場合には式(XVI)の第二級アミンを得ることができる。単離されたアミン(XVI)を、例えば炭酸カリウムのような弱塩基の存在下で周囲温度にて化学量論量の式(IX)の化合物と反応させて、式(XV)の二量体を得ることができる。式(XV)のエステルの鹸化により本発明の化合物が得られる。
【００７１】
スキーム８：経路Ｄ(実施例５)
【化１１】
0006049755.tif 000012
【００７２】
式(XI)のアミンを、例えばBOP又はPyBOPで活性化された式(XVII)のジカルボン酸と、トリエチルアミンのような弱塩基の存在下でTHF又はDMFのような溶媒中にて０℃〜周囲温度でカップリングさせて、式(XVIII)の二量体を得ることができる。式(XVIII)のエステルの鹸化により本発明の化合物が得られる。
【００７３】
上記のスキームにおいて、出発化合物及び反応物は、それらの製造方法が記載されていない場合は、市販されているか、又は文献中に記載されているか、あるいはそれらに記載されている方法若しくは当業者に公知の方法に従って製造され得る。
【００７４】
その別の局面によれば、本発明の主題はまた、上で定義された式(II)〜(XVIII)の化合物である。これらの化合物は、式（Ｉ)の化合物のための合成中間体として有用である。
【００７５】
以下の実施例は、本発明に従う特定の化合物の製造を記載する。これらの実施例は、限定するものではなく、単に本発明を説明するのみである。例示された化合物の番号は、本明細書以後の表において示される番号を指し、この表は本発明に従ういくつかの化合物の化学構造及び物理的特性を示す。
【００７６】
以下の略号及び分子式を使用する：
EtAOc＝酢酸エチル
BOP＝ベンゾトリアゾール−1−イルオキシトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム  ヘキサフルオロホスフェート
DABCO＝1,4−ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン
DBU＝2,3,4,6,7,8,9,10−オクタヒドロピリミド[1,2−a]アゼピン
DCM＝ジクロロメタン
DMF＝N,N−ジメチルホルムアミド
EtOH＝エタノール
h＝時間
KHSO4＝硫酸水素カリウム
LCMS＝液体クロマトグラフィー質量分析
MeOH＝メタノール
MeTHF＝2−メチルテトラヒドロフラン
min＝分
mL＝ミリリットル
(m)mol＝(ミリ)モル
NaHCO3＝炭酸水素ナトリウム
NBS＝N−ブロモスクシンイミド
NIS＝N−ヨードスクシンイミド
NMP＝N−メチル−2−ピロリドン
Pd(PPh3)4＝テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)
PdCl2(dppf)＝1,1’−ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン  ジクロロパラジウム(II)ppm＝百万分の１
PyBop＝ベンゾトリアゾール−1−イルオキシトリスピロリジノホスホニウム  ヘキサフルオロホスフェート
NMR＝核磁気共鳴
HBTU＝2−(1H−ベンゾトリアゾール−1−イル)−1,1,3,3−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート
TFA＝トリフルオロ酢酸
THF＝テトラヒドロフラン
キサントホス＝4,5−ビス(ジフェニルホスフィノ)−9,9−ジメチルキサンテン
【００７７】
以下において：
−  以下に記載されるプロトン磁気共鳴(1H NMR)スペクトルは、400MHz又は500MHzでDMSO−d6中にてDMSO−d6ピークを参照として使用して記録された。化学シフトδを百万分の１(ppm)で表す。観察されたシグナルを以下のように表す：s＝一重線；d＝二重線；t＝三重線；m＝非分解ピーク又はbr.s.＝幅広一重線。
【００７８】
実施例１：2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸のリジン塩（化合物番号1)
工程1.1.    (2E)−2−[(E)−(4−メチリデン−6−オキソ−2−フェニル−4H−1,3−オキサジン−5(6H)−イリデン)メチル]ブタ−2−エノイルクロリド
塩化チオニル(16.9mL、231mmol)及びDMF  0.5mLを、4−[(フェニルカルボニル)アミノ]ベンゼン−1,3−ジカルボン酸[CAS 121732−46−5；C. K. Lee and Y. M. Ahn、Journal of
Organic Chemistry、1989、54(15)、3744−7] (24.7ｇ、92.61mmol)の1,2−ジクロロエタン 310mL中の懸濁液に加えた。この混合物を４時間加熱還流し、次いで濃縮乾固させた。得られた残留物をトルエンに溶解し、次いで濃縮乾固させた(３回)。白色固形物をジイソプロピルエーテルに入れてろ過し、そして真空下で乾燥させて白色粉末26ｇ(98％)を得た。
1H NMR [(CD3)2SO、250 MHz]：δ ppm 13.13 (br. s、1H) 8.63 (d、1H) 8.41 (dd、1H) 8.21−8.29 (m、2H) 7.82 (d、1H) 7.58−7.77 (m、3H)
【００７９】
工程1.2    (5E)−4−メチリデン−5−｛(2E)−2−[(2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]ブタ−2−エン−1−イリデン｝−2−フェニル−4,5−ジヒドロ−6H−1,3−オキサジン−6−オン
2−メチルインドリジン(11.5ｇ；87.7mmol)のTHF 35mL中の溶液を、(2E)−2−[(E)−(4−メチリデン−6−オキソ−2−フェニル−4H−1,3−オキサジン−5(6H)−イリデン)メチル]ブタ−2−エノイルクロリド(25ｇ；87.7mmol)のTHF 140mL中の懸濁液に０℃で窒素下にて滴下した。18時間周囲温度で撹拌した後、反応媒体を酢酸エチルで希釈し、そして溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮乾固させた。得られた残留物をシリカフラッシュクロマトグラフィ(DCM)により精製して黄色粉末22.75ｇ(69％)を得た。
[M+H]+＝381
【００８０】
工程1.3    (5E)−5−｛(2E)−2−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]ブタ−2−エン−1−イリデン｝−4−メチリデン−2−フェニル−4,5−ジヒドロ−6H−1,3−オキサジン−6−オン
N−ブロモスクシンイミド(10.64ｇ；59.8mmol)を、(5E)−4−メチリデン−5−｛(2E)−2−[(2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]ブタ−2−エン−1−イリデン｝−2−フェニル−4,5−ジヒドロ−6H−1,3−オキサジン−6−オン(22.8ｇ；59.8mmol)のDCM 350mL及びNMP 105mL中の溶液に少しずつ加えた。周囲温度で10分間撹拌した後、形成された黄色沈殿物をろ別し、DCMで洗浄しそして真空下で乾燥して黄色粉末23.2ｇ(85％)を得た。
[M+H]+＝460
【００８１】
工程1.4 2−アミノ−5−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]安息香酸
(5E)−5−｛(2E)−2−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]ブタ−2−エン−1−イリデン｝−4−メチリデン−2−フェニル−4,5−ジヒドロ−6H−1,3−オキサジン−6−オン (18.6ｇ；40.4mmol)を、水100mL及びNMP 140mL中の水酸化カリウム(22.7ｇ；0.40 mol)に少しずつ加えた。反応混合物を18時間加熱還流し、周囲温度まで冷却し、そして塩酸溶液(1M)に注いだ。形成された黄色沈殿物をろ別し、そして真空下で乾燥して黄色粉末16.5ｇ(99％)を得た。
[M+H]+＝374 
【００８２】
工程1.5    N−(｛2−アミノ−5−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]フェニル｝カルボニル)グリシン酸メチル
トリエチルアミン(7.34mL；52.3mmol)及びPyBOP (9.97ｇ；19.2mmol)を、2−アミノ−5−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]安息香酸(6.5ｇ；17.4mmol)のNMP 58mL中の溶液に０℃で窒素下にて加えた。０℃で30分間撹拌した後、グリシンメチルエステル塩酸塩(2.4ｇ；19.2mmol)を加えた。周囲温度で１時間撹拌した後、反応媒体を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液中に入れた。形成された黄色沈殿物をろ別し、そして真空下で乾燥して黄色粉末6.45ｇ(83％)を得た。
[M+H]+＝444
【００８３】
工程1.6    ｛6−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸メチル
クロロギ酸エチル (1.3mL；13.5mmol)を、N−(｛2−アミノ−5−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]フェニル｝カルボニル)グリシン酸メチル(２ｇ；4.5mmol)のピリジン９mL中の溶液に０℃で滴下した。周囲温度で15分間撹拌した後、反応媒体を濃縮乾固させ、次いで酢酸エチルで希釈した。この溶液を0.1M塩酸溶液、そして塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮乾固させた。得られた黄色固形物を無水テトラヒドロフラン20mLに溶解し、そしてジアザ(1,3)ビシクロ[5,4,0]ウンデカ−7−エン(1.35mL；９mmol)の存在下で１時間加熱還流した。反応媒体を酢酸エチルで希釈し、0.1M塩酸溶液、そして塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮乾固させて黄色粉末２ｇ(95％)を得た。
[M+H]+＝470
【００８４】
工程1.7    2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸メチル
｛6−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸メチル(0.34ｇ；0.74mmol；２eq)、[オキシビス(エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル)]ジボロン酸[CAS 944446−98−4；WO 2007080325 A1](0.16ｇ；0.37mmol)、第三リン酸カリウムの１モル濃度溶液 (2.2mL；2.21mmol)、DMF ９mL及び触媒PdCl2(dppf)(0.08ｇ；0.11mmol)を続けて反応器にアルゴン下で導入した。この反応混合物を９０℃に２４時間加熱し、周囲温度まで冷却し、そして濃縮乾固した。得られた残留物をKromasil C18逆相での分取HPLC[A＝H2O／(CH3COONH4 0.1 M) 90／10；B＝CH3CN／(CH3COONH4 0.1M) 90／10、グラジエントA／B：90／10〜22／78]により精製して黄色粉末４mg(20％)を得た。
[M−H]+＝1125
【００８５】
工程1.8    2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸
水酸化ナトリウムの１モル濃度溶液(0.15mL；0.15mmol)を、2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸メチル(107mg；0.10mmol)のNMP ４mL中の溶液に加えた。この溶液を周囲温度で24時間撹拌し、次いで塩酸溶液(0.1M)に入れた。得られた沈殿物をろ別し、水で洗浄し、そして真空下で乾燥して黄色−橙色粉末101mg(97％)を得た。
[M−H]-＝1095
【００８６】
工程1.9    2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸のリジン塩
2,2’−｛オキシビス[エタン−2,1−ジイルオキシエタン−2,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸(101mg；0.09mmol)を、リジン(27mg；0.14mmol)の水３mL中の溶液に加えた。この溶液を４時間撹拌し、ろ過し、そして凍結乾燥した。凍結乾燥物をジエチルエーテルに入れて、この懸濁液を３時間撹拌し、ろ過し、そして真空下で乾燥して黄色粉末112mg(２リジン；87％)を得た。
LCMS(方法1)：[M−H]-＝1095、RT＝7.21 min
1H NMR  [(CD3)2SO、400 MHz]：δ ppm  9.42 (d、2H) 8.09 (d、2H) 7.87 (dd、2H) 7.43 (d、2H) 7.30 (d、2H) 7.23 (d、4H) 7.14 (td、2H) 7.01 (d、4H) 6.91 (td、2H) 6.50−9.00 (br. s、8H) 4.28 (s、4H) 4.11 (m、4H) 3.78 (m、4H) 3.55−3.64 (m、8H) 3.15 (t、2H) 2.72 (t、4H) 1.77 (s、6H) 1.28−1.73 (m、12H)
【００８７】
実施例２：  2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸(化合物番号4)
工程2.1    [6−(｛1−[4−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエトキシ)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸メチル
｛6−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸メチル[工程1.5.に記載される](0.85ｇ；1.81mmol)、[4−(4,4,5,5−テトラメチル−1,3,2−ジオキサボロラン−2イル)フェノキシ]酢酸tert−ブチル[CAS 769968−17−4；D. Fan et al、Journal of Organic Chemistry、2007、72(14)、5350−5357](0.91ｇ；2.71mmol)、リン酸カリウムの１モル濃度溶液5.4mL、1,2−ジメトキシエタン  17mL及び触媒PdCl2(dppf) (198mg；0.27mmol)を反応器にアルゴン下で続けて導入した。この混合物を２時間アルゴン下で加熱還流した。反応媒体をセライトを通して濾過した。ろ液を酢酸エチルで希釈し、そしてこの溶液を炭酸水素カリウムの飽和溶液、そして塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮乾固させた。得られた残留物をシリカフラッシュクロマトグラフィ(DCM／EtOH：100／0〜80／10)により精製した。黄色−赤色粉末0.46ｇ(42％)を得た。
[M+H]+＝598
【００８８】
工程2.2    [4−(3−｛[3−(2−メトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,2,3,4−テトラヒドロキナゾリン−6−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェノキシ]酢酸
トリフルオロ酢酸(1.2mL；15.4mmol)を、6−(｛1−[4−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエトキシ)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸メチル(0.46ｇ；0.77mmol)のジクロロメタン４mL中の溶液に加えた。この溶液を周囲温度で４時間撹拌し、次いで濃縮乾固させた。得られた残留物をN,N−ジメチルホルムアミド ５mL中に入れ、そして炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液中に入れた。この溶液をTHF／EtOAc混合物で洗浄し、次いで塩酸の１モル濃度溶液を加えることによりpH7に中和した。形成された沈殿物をろ別し、真空下で乾燥して黄色粉末0.36ｇ(87％)を得た。
[M+H]+＝542
【００８９】
工程2.3    2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸メチル
トリエチルアミン(100μl；0.68mmol)、PyBOP(221mg；0.43mmol)及びヘキサン−1,6−ジアミン(20μl；0.17mmo)を、[4−(3−｛[3−(2−メトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,2,3,4−テトラヒドロキナゾリン−6−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェノキシ]酢酸(184mg；0.34mmol)のNMP ３mL中の溶液に０℃で窒素下にて続けて加えた。この反応混合物を周囲温度で17時間撹拌し、次いで酢酸エチル／THF混合物中に注いだ。有機溶液を0.1M塩酸溶液、炭酸水素ナトリウム飽和溶液、そして塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮乾固させて
褐色ペースト状物質を得、これを以下の鹸化工程において使用した。
[M+H]+＝165
【００９０】
工程2.4    2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸
工程1.8において記載される方法に従って、2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸メチルを使用して、黄色粉末の形態で得た(２工程で32％)。
[M−H]-＝1133
【００９１】
工程2.5    2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸のナトリウム塩
2,2’−｛ヘキサン−1,6−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−6,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸を、水20mLで希釈された水酸化ナトリウムの溶液(1M、70μl；0.07mmol)に加えた。この溶液を周囲温度で撹拌し、そして凍結乾燥した。凍結乾燥物をジイソプロピルエーテルに入れてろ過し、そして真空下で乾燥して黄色粉末29mg(ナトリウム塩；84％)を得た。
LCMS(方法1)：[M−H]-＝1133；RT＝6.90min
1H NMR  [(CD3)2SO、400 MHz]：δ ppm 9.45 (d、2H) 8.15 (d、2H) 8.12 (t、2H) 7.91 (dd、2H) 7.48 (d、2H) 7.32 (d、6H) 7.21 (td、2H) 7.05 (d、4H) 6.96 (td、2H) 4.49 (s、4H) 4.21 (s、4H) 3.06−3.16 (m、6H) 2.62−2.70 (m、4H) 1.84 (s、6H) 1.17−1.76 (m、20H)
【００９２】
実施例３：  2,2’−(｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸のナトリウム塩(化合物番号8)
工程3.1    N−(｛2−アミノ−5−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]フェニル｝カルボニル)グリシン酸tert−ブチル
工程1.5に記載される方法に従って、2−アミノ−5−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]安息香酸及びグリシンのtert−ブチルエステルを使用して、黄色粉末の形態で得た(74％)。
[M+H]+＝486.0
【００９３】
工程3.2    ｛7−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル
工程1.6に記載される方法に従って、N−(｛2−アミノ−5−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]フェニル｝カルボニル)グリシン酸tert−ブチルを使用して、黄色粉末の形態で得た(52％)。
[M+H]+＝511.9
【００９４】
工程3.3    [7−｛[1−(4−ヒドロキシフェニル)−2−メチルインドリジン−3−イル]カルボニル｝−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸tert−ブチル
(4−ヒドロキシフェニル)ボロン酸(404mg、2.93mmol)、2Mリン酸カリウム溶液  ３mL(5.86mmol)及び触媒PdCl2(dppf)(206mg、0.29mmol)を、｛7−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル(１ｇ、1.95mmol)のDMF 20mL中の溶液に加え、窒素下でマイクロ波反応器中に入れた。反応器を密封し、そしてこの溶液を30分間120℃にマイクロ波で加熱した。反応媒体を水中に入れてEtOAcで抽出した。有機相をNaClの飽和水溶液で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、そして濃縮乾固させた。得られた油状物をシリカフラッシュクロマトグラフィ(DCM／EtOH：100／0〜90／10]により精製して黄色固体888mg(86％)を得た。
[M+H]+＝526.0
【００９５】
工程3.4    ｛7−[(1−｛4−[(5−クロロペンチル)オキシ]フェニル｝−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル
水素化ナトリウム(オイル中60％懸濁、332mg、7.61mmol)を、[7−｛[1−(4−ヒドロキシフェニル)−2−メチルインドリジン−3−イル]カルボニル｝−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸tert−ブチル(２ｇ、3.81mmol)のDMF 38mL中有溶液に−５℃で加えた。−５℃で15分間撹拌した後、1−クロロ−5−ヨードペンタン (0.53mL、3.81mmol)を加えた。反応混合物を３時間−５℃で撹拌し、周囲温度に冷却し、そしてKHSO4の１モル溶液に入れた。得られた黄色沈殿物をろ別し、次いでシリカフラッシュクロマトグラフィ(DCM／EtOH：100／0〜90／10)により精製して黄色固体2.11ｇ(収率：88％)を得た。
[M+H]+＝629.2
【００９６】
工程3.5    ｛7−[(1−｛4−[(5−ヨードペンチル)オキシ]フェニル｝−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル
｛7−[(1−｛4−[(5−クロロペンチル)オキシ]フェニル｝−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル(4.0ｇ、6.35mmol)及びヨウ化カリウム(10.53ｇ、63.48mmol)のDMF 63mL中の混合物を80℃で６時間撹拌した。これを周囲温度まで冷却し、そしてKHSO4の１モル濃度溶液に入れた。得られた黄色沈殿物をろ別し、次いで水で洗浄し、真空下で乾燥して黄色固体3.96ｇ(収率：86％)を得た。
[M+H]+＝722.3
【００９７】
工程3.6    ｛7−[(1−｛4−[(5−｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]アミノ｝ペンチル)オキシ]フェニル｝−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル
炭酸カリウム(0.48ｇ、3.46mmol)及び｛7−[(1−｛4−[(5−ヨードペンチル)オキシ]フェニル｝−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル(0.50ｇ、0.69mmol)を、2−(2−アミノエトキシ)エタノール(0.73ｇ、6.93mmol)のDMF ７mL中の溶液に加えた。この溶液を24時間周囲温度で撹拌し、次いでKHSO4の１モル濃度溶液に入れた。形成された沈殿物をろ別し、水で洗浄し、そして真空下で乾燥して褐色粉末380mg(収率：79％)を得た。
[M+H]+＝699.3
【００９８】
工程3.7    2,2’−(｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸tert−ブチル
｛7−[(1−｛4−[(5−ヨードペンチル)オキシ]フェニル｝−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル(0.54ｇ、0.75mmol)を、｛7−[(1−｛4−[(5−｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]アミノ｝ペンチル)オキシ]フェニル｝−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル(0.35ｇ、0.50mmol)及び炭酸カリウム(104mg、0.75mmol)のDMF ５mL中混合物に加えた。この反応混合物を24時間周囲温度で撹拌し、次いでKHSO4の１モル濃度溶液に入れた。形成された沈殿物をろ別し、水で洗浄し、そして真空下で乾燥して褐色粉末588mg(収率：90％)を得た。
[M+H]+＝1291.4
【００９９】
工程3.8    2,2’−(｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸
トリフルオロ酢酸(0.44ｇ、3.89mmol)を、DCM／MeOH混合物(1／1) ４mL中の懸濁液の状態の2,2’−(｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸tert−ブチル(0.50ｇ、0.39mmol)に加えた。この溶液を８時間周囲温度で撹拌した。反応混合物を水に入れた。形成された沈殿物をろ別し、水で洗浄し、次いでエタノールで洗浄し、そして真空下で乾燥した。Kromasil C18 10μm逆相での分取HPLC[A＝H2O／(CH3COONH4 0.1M) 90／10；B＝CH3CN／(CH3COONH4 0.1M) 90／10、グラジエントA／B：70／30〜56／44]により精製して黄色粉末25mg(５％)を得た。
[M+H]+＝1180.2
【０１００】
工程3.9    2,2’−(｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸のナトリウム塩
工程2.5に記載される方法に従って、2,2’−(｛[2−(2−ヒドロキシエトキシ)エチル]イミノ｝ビス[ペンタン−5,1−ジイルオキシベンゼン−4,1−ジイル(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)])二酢酸(25mg、0.02mmol)を使用して、黄色固体の形態で得た。
LCMS(方法1)：[M+H]+＝1180、RT＝7.3min
1H NMR  [(CD3)2SO、500 MHz]：δ ppm 9.20 (br. s.、2H) 8.09 (d、2H) 7.69 (br. s.、2H) 7.44 (d、2H) 7.31 (d、4H) 7.04−7.11 (td、2H)  7.02 (d、4H) 6.85 (td、2H) 4,65 (br. s.、1H) 4.13 (s、4H) 4.00 (t、4H) 3.46 (t、4H) 3.40 (t、2H) 2.56 (t、2H) 2.43 (t、4H) 1.94 (s、6H) 1.75 (m、4H) 1.39−1.50 (m、8H)
【０１０１】
実施例４：  [7−(｛1−[4−(｛9−[4−(3−｛[3−(カルボキシメチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸 (化合物番号16)
工程4.1.    4−(3−｛[3−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,2,3,4−テトラヒドロキナゾリン−7−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)安息香酸ベンジル
｛4−[(ベンジルオキシ)カルボニル]フェニル｝ボロン酸(0.7ｇ、2.73mmol)、リン酸カリウム１モル濃度溶液5.5mL及び触媒PdCl2(dppf)(192mg、0.27mmol)を、窒素下でマイクロ波反応器中に入れられた｛7−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸tert−ブチル[工程3.2.に記載される](１ｇ、1.82mmol)のDMF 20mL中の溶液に加えた。反応器を密封し、そしてこの溶液を30分間80℃でマイクロ波で加熱した。反応媒体を冷却し、そしてKHSO4の１モル濃度溶液に入れ、そしてEtOAcで抽出した。有機相をNaClの飽和水溶液で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、そして濃縮乾固させた。得られた残留物をシリカフラッシュクロマトグラフィ(DCM／EtOH：100／0〜80／20]により精製して黄色固体1.08mg(92％)を得た。
[M+H]+＝644.2
【０１０２】
工程4.2.    4−(3−｛[3−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,2,3,4−テトラヒドロキナゾリン−7−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)安息香酸
炭素担持パラジウム(10％活性、0.2ｇ)及び4−(3−｛[3−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,2,3,4−テトラヒドロキナゾリン−7−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)安息香酸ベンジル(１ｇ、1.55mmol)を、窒素下で、ギ酸アンモニウム(0.97ｇ、15.54mmol)のDMF 15mL中の溶液に加えた。反応混合物を３時間周囲温度で撹拌し、セライトを通してろ過し、そしてろ液を濃縮乾固させた。得られた固形物をジイソプロピルエーテルに入れた。ろ過及び真空下での乾燥後に、緑色固体732mg(収率：85％)を得た。
[M+H]+＝554.1
【０１０３】
工程4.3.    [7−(｛1−[4−(｛9−[4−(3−｛[3−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸tert−ブチル
トリエチルアミン(0.25mL、1.81mmol)及びHBTU(0.16ｇ、0.40mmol)を、4−(3−｛[3−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,2,3,4−テトラヒドロキナゾリン−7−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)安息香酸(0.2ｇ、0.36mmol)のDMF 10mL中の溶液に０℃にて加えた。15分間撹拌した後、リン酸水素ビス(2−アミノエタノール)(0.046ｇ、0.18mmol)を加えた。反応混合物を24時間周囲温度で撹拌し、次いで水に入れた。形成された沈殿物をろ別し、そして真空下で乾燥して黄色固体156mg(収率：34％)を得た。
[M+H]+＝1255.2
【０１０４】
工程4.4.    [7−(｛1−[4−(｛9−[4−(3−｛[3−(カルボキシメチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸
工程3.7に記載される方法に従って、7−(｛1−[4−(｛9−[4−(3−｛[3−(2−tert−ブトキシ−2−オキソエチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸tert−ブチルを使用して、Kromasil C18 10μm逆相での分取HPLC[A＝H2O／(CH3COONH4 0.1M)90／10；B＝CH3CN／(CH3COONH4 0.1M)90／10、グラジエントA／B 95／5〜70／30]により精製した後、黄色粉末の形態で得た(収率＝３％)。
[M+H]+＝1143.2
【０１０５】
工程4.5.    [7−(｛1−[4−(｛9−[4−(3−｛[3−(カルボキシメチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸のナトリウム塩
工程2.5に記載される方法に従って、[7−(｛1−[4−(｛9−[4−(3−｛[3−(カルボキシメチル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7(2H)−イル]カルボニル｝−2−メチルインドリジン−1−イル)フェニル]−4−ヒドロキシ−4−オキシド−9−オキソ−3,5−ジオキサ−8−アザ−4λ5−ホスファノン−1−イル｝カルバモイル)フェニル]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]二酢酸を使用して、黄色固体の形態で得た(収率：75％)。
LCMS(方法2)：[M+H]+＝1143、RT＝9.98min
1H NMR  [(CD3)2SO、500 MHz]：δ ppm 11.87 (br. s.、2H) 9.77 (t、2H) 9.41 (d、2H)
8.15 (d、2H) 8.04 (d、4H) 7.89 (dd、2H) 7.52 (d、2H) 7.42 (d、4H) 7.32 (d、2H) 7.20 (td、2H) 6.97 (td、2H) 4.24 (s、4H) 3.89−3.96 (m、4H) 3.42 (q、4H) 1.84 (s、6H)
【０１０６】
実施例５：  2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイルカルボニルイミノ(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸のナトリウム塩(化合物番号21)
工程5.1.    [7−(｛1−[(ジフェニルメチリデン)アミノ]−2−メチルインドリジン−3−イル｝カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸tert−ブチル
炭酸セシウム(0.51ｇ、1.59mmol)、キサントホス(0.98ｇ、1.70mmol)、酢酸パラジウム(0.19ｇ、0.85mmol)及びベンゾフェノンイミン(2.85mL、17.0mmol)を、｛6−[(1−ブロモ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸メチル[工程1.5.に記載される](2.0ｇ、4.25mmol)のDMF 90mL中の溶液にアルゴン下で加えた。反応媒体をアルゴン下で100℃にて２日間撹拌した。冷却した後、反応媒体を酢酸エチルで希釈し、そしてこの溶液を塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮乾固させた。得られた油状物をシリカフラッシュクロマトグラフィ(トルエン／EtOAc：100／0〜50／50]により精製して赤色粉末1.33ｇを得た。
[MH]+＝571.2
【０１０７】
工程5.2.    ｛7−[(1−アミノ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸メチル塩酸塩
無水ジオキサン中の塩酸の4M溶液0.53mLを、[7−(｛1−[(ジフェニルメチリデン)アミノ]−2−メチルインドリジン−3−イル｝ カルボニル)−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル]酢酸tert−ブチル(1.3ｇ、1.34mmol)のDCM／MeOH混合物(5／1)７mL中の溶液に加えた。周囲温度で24時間撹拌した後、形成された沈殿物をろ別し、DCMで洗浄し、そして真空下で40℃にて乾燥して黄色粉末0.4ｇ(塩酸塩；67％)を得た。
[MH]+＝407.1
【０１０８】
工程5.3    2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイルカルボニルイミノ(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸メチル
トリエチルアミン(0.23mL、1.63mmol)及びHBTU(285mg、0.75mmol)を、3,3’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシ]｝二安息香酸[CAS 94
4446−34−8；WO 2007080325] (136mg、0.33mmol)のDMF ５mL中の懸濁液に０℃で加えた。30分間撹拌した後、｛7−[(1−アミノ−2−メチルインドリジン−3−イル)カルボニル]−2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−3(2H)−イル｝酢酸メチル塩酸塩(318mg、0.72mmol)を加えた。この溶液を10時間周囲温度で撹拌し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に入れた。沈殿物をろ別し、そして水で洗浄し、次いで真空下で乾燥して緑色固体370mg(収率：94％)を得た。
[MH]+＝1193.3
【０１０９】
工程5.4    2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイルカルボニルイミノ(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸
工程1.8に記載される方法に従って、2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイルカルボニルイミノ(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸メチルを使用して、Kromasil C18 10μm逆相での分取HPLC[A＝H2O／(CH3COONH4 0.1M) 90／10；B＝CH3CN／(CH3COONH4 0.1M)90／10、グラジエントA／B：95／5〜69／31]により精製した後、黄色粉末の形態で得た(収率＝59％)。
[MH]+＝1165.1
【０１１０】
工程5.5.    2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイルカルボニルイミノ(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸のナトリウム塩
工程2.5に記載される方法に従って、2,2’−｛エタン−1,2−ジイルビス[イミノ(2−オキソエタン−2,1−ジイル)オキシベンゼン−3,1−ジイルカルボニルイミノ(2−メチルインドリジン−1,3−ジイル)カルボニル(2,4−ジオキソ−1,4−ジヒドロキナゾリン−7,3(2H)−ジイル)]｝二酢酸を使用して、黄色固体の形態で得た(収率：70％)。
LCMS(方法2)：[M+H]+＝1165、RT＝5.95min
1H NMR  [(CD3)2SO、500 MHz]：δ ppm 10.23 (br. s.、2H) 9.44 (br. s、2H) 8.44 (br. s、2H) 8.08 (d、2H) 7.81 (br. s.、2H) 7.64−7.70 (m、4H) 7.47 (d、2H) 7.42 (t、2H) 7.20 (td、2H) 7.17 (br. s.、2H) 7.15 (dd、2H) 6.95 (td、2H) 4.53 (s、4H) 4.12 (s、4H) 3.20−3.24 (m、4H) 1.81 (s、6H)
【０１１１】
以下の表は、本発明に従う化合物のいくつかの実施例の化学構造及び物理的特性を示す。この表において：
−  「塩」のカラムにおいて、「Lys」及び「Na」はそれぞれ、D,L−リジン塩形態又はナトリウム塩形態の化合物を表し、そして括弧内の比は(塩基：二酸)比であり、
−  Phはフェニル基を表し、
−  RTカラムは化合物の保持時間を示し、そして
−  LCMSは、以下に記載されるように、引き続いて、使用されそして以下に詳述される高速液体クロマトグラフィの分析方法(方法１又は２)、質量分析により同定された[M−H]-又は[M+H]+ピーク、及び分で表される化合物の保持時間を特徴付ける。
【０１１２】
*方法１
機器：1100(Agilent)型のHPLCシステム；MSD(Agilent)型の単一（simple）四重極質量分析計
カラム：Waters X Terra C18 3.5μm (2.1 x 50 mm)
溶媒Ａ：H2O + AcONH4 10 mM pH ７；溶媒Ｂ：CH3CN
流量：0.4mL／min
グラジエント：t 0 min B 0％；t 10 min B 90％；t 15min B 90％
検出：UV 220nm
イオン化：ポジティブエレクトロスプレーモードESI+又はESI−
*方法２：グラジエントを変更して方法１を参照のこと
グラジエント：t 0 min B 0％；t 30 min B 90％；t 35 min B 90％
【０１１３】
実施例の表
M1−L−M2 
Mは以下の一般式を有する：
【０１１４】
【表１】
0006049755.tif 000013
【０１１５】
【表２】
0006049755.tif 000014
【０１１６】
本発明の化合物の特性を決定する目的で行われたインビトロ及びインビボでの薬理試験の結果を、以下に挙げる：
【表３】
0006049755.tif 000015
【０１１７】
インビトロ新血管形成モデル
コラーゲン(ラット尾コラーゲン、Ｉ型：Becton dickinson 354236)中に希釈されたマトリゲル(Becton dickinson 356230)上でヒト静脈内皮細胞(HUVEC)の再構成を引き起こすそれらの能力について生成物を試験した。24時間後に、X4対物レンズを用いて顕微鏡下で細胞を観察し、そして擬管（pseudotubules）の長さを画像解析器(BIOCOM−logiciel Visiolab 2000)を用いて測定した。
【０１１８】
インビトロ新血管形成試験については、本発明の化合物は10-6Mと10-12Mとの間の特異的活性を示した。例として、化合物３及び16はインビトロ新血管形成モデルに対して10nMの濃度で活性であった。
【０１１９】
スポンジ新血管形成モデル
スポンジ新血管形成モデルは、Andradeらの技術［Andrade SP、Machado R.、Teixeir A
S、Belo AV、Tarso AM、Beraldo WT − Sponge−induced angiogenesis in mice and the
pharmacological reactivity of the neovasculature quantitated by fluorimetric method、Microvascular Research、1997、54：253−61.］の適応である。
【０１２０】
使用したマウスは、Charles River Laboratoryからの７〜１０週齢のBalbC雌であった。動物を、キシラジン／ケタミン混合物(0.9％ NaCl中それぞれ１mg／kg)の腹腔内注射により麻酔した。動物の背部を剪毛し、そして ヘキソメジン（hexomedine）で消毒した。皮下の５mlの空気ポケットを動物の背部に滅菌空気で作製した。次いで、スポンジをポケット中に移植するために動物の背部の上部に切開(約１cm)を施した。生体適合性セルローススポンジ(Cellspon、Interchim、直径10mm)を事前に滅菌し(オートクレーブ120℃で20分間)、そして試験生成物を含有する滅菌溶液50μlを含浸させた。２つの９mmステンレス鋼autoclipステープル(Subra)を挿入することにより縫合を行った。創傷を再びヘキソメジンで消毒した。実験の期間を通して動物を個々のケージで飼育した。
【０１２１】
試験生成物はPBS／0.1％ BSA混合物溶液であった：組換えヒトFGF2(Peprotech)及び本発明の生成物を、選択された濃度に従ってその場で溶液中に入れた。セルローススポンジの移植後２日で、溶液の試験生成物を、ヘキソメジンでその領域を消毒した後に動物の皮膚を通して移植片中に直接再注射した。
【０１２２】
移植後８日目に、マウスをペントバルビタールナトリウム(CEVA sante animale、10mg／kg)の致死用量を腹腔内投与して屠殺した。スポンジの周囲の皮膚を切開し(約１cm)、そして結合組織を除去することにより皮膚からスポンジを分離した。このスポンジを３又は４片に切り、そしてRIPA溶解緩衝液１mLと共にセラミックビーズを含有するチューブに入れた。２サイクルの20秒間の撹拌(FastPrep(R) FP120)により溶解を行った。上清を−20℃で凍結させた後、チューブを8000rpmで１０分間遠心分離し、そしてヘモグロビンをアッセイするために上清を除去した。
【０１２３】
ヘモグロビンをアッセイするために、各サンプル50μlを９６ウェルプレートに二重に配置した。RIPA溶解緩衝液中４mg／ml〜0.06mg／mlの範囲の溶液をヒトヘモグロビン(ref H7379、Sigma(R))を用いて調製した。Drabkin試薬(Sigma(R))50μlを全てのウェルに配置した（範囲＋サンプル)。プレートを１５分間周囲温度で暗所にてインキュベートした。OD値を、Bioliseソフトウェア(Tecan、France)を使用して405nmで分光光度計で読み取った。各サンプル中のHb濃度を、その範囲を使用して行われた多項式回帰に従ってmg／mLで表す。
【０１２４】
例として、化合物４はインビトロ新血管形成モデルで300μMの濃度で活性であった。
【０１２５】
本発明の化合物はFGF受容体アゴニスト活性を示す。これらは受容体二量体化を誘導し、そしてそれらの低い毒性及びそれらの薬理的及び生物学的特性により、本発明の化合物は、虚血後血行再建、治癒プロセス、並びにニューロン、筋肉及び骨の修復及び再生のプロセスのようなFGFがポジティブな効果を有する病理的状態における最適な治療を代表する。
【０１２６】
本発明の化合物の適用のうちの１つは、末梢動脈の閉塞後の虚血後処置又は心虚血の結果の処置のような新血管形成の増加を必要とする処置である。本発明に記載される化合物は、冠動脈の狭窄又は閉塞に関連する疾患の処置において、そして特に狭心症又は閉塞性血栓血管炎の処置において有用であり得る。さらに、上記発明の化合物は、子癇前症（pre−eclamptic）胎盤における新血管形成の欠乏を代償するための最適な処置となり得る。内皮細胞に対するそれらの高アポトーシス活性により、上記発明の生成物は、血管損傷を患った患者、そして特にARDSに罹患した患者における血管改善の治療選択を提供し得る。
【０１２７】
それらのFGF受容体アゴニスト活性及び新血管形成を誘導するそれらの能力及び治癒期に関与する間葉系細胞を活性化するそれらの能力により、上記発明の化合物は、特に高齢又は糖尿病の患者における治癒処置のための最適な治療となるだろう。本発明において示される化合物は、筋肉再生のための最適な処置となり得る。
【０１２８】
FGF受容体アゴニスト活性により、上記発明の化合物は、侵害受容の処置、慢性痛の処置、及び特に糖尿病患者における末梢神経障害の処置において最適な処置となるだろう。
【０１２９】
FGF受容体アゴニスト特性により、上記発明の化合物は、骨折後の骨修復の処置になり得る。
【０１３０】
本発明の化合物は、糖尿病患者におけるバイオ人工膵臓移植片生着の改善、そしてより一般的には、移植片血行再建及び移植片生着の改善における最適の治療となるだろう。
【０１３１】
それらのFGF受容体アゴニスト活性により、上記発明の化合物は、毛包の修復及び保護のため、並びに毛髪成長の保護及び調節において、最適な処置を提供し得る。
【０１３２】
その別の局面によれば、本発明に従う化合物は、FGF受容体活性化を必要とする疾患の処置において有用である。本発明の主題は、より詳細には、心虚血の処置、動脈の狭窄若しくは閉塞若しくは動脈炎に関連する疾患の処置、狭心症の処置、閉塞性血栓血管炎の処置、アテローム性動脈硬化症の処置、血管形成術後若しくは動脈内膜切除術後の再狭窄を阻止するための処置、治癒の処置、筋肉再生のための処置、筋芽細胞生存のための処置、筋肉減少症の処置、括約筋の平滑筋の機能の喪失、侵害受容の処置及び慢性痛の処置、末梢神経障害の処置、糖尿病患者におけるバイオ人工膵臓移植生存の改善のための処置、脂肪症の減少に関連するコレステロールの減少を生じるための処置、移植片血行再建及び移植片生着を改善するための処置、網膜変性症の処置、色素性網膜炎の処置、変形性関節症の処置、子癇前症の処置、血管病変及び急性呼吸促迫症候群の処置、骨保護処置、又は毛包保護のための処置において有用である薬剤の製造のための、上で定義された化合物の使用である。
【０１３３】
その別の局面によれば、従って本発明の主題は、FGF受容体活性化を必要とする疾患の処置において有用な薬剤を製造するための、上で定義された化合物の使用である。本発明の主題は、より詳細には、心虚血の処置、動脈の狭窄若しくは閉塞若しくは動脈炎に関連する疾患の処置、狭心症の処置、閉塞性血栓血管炎の処置、アテローム性動脈硬化症の処置、血管形成術後若しくは動脈内膜切除術後の再狭窄を阻止するための処置、治癒の処置、筋肉再生のための処置、筋芽細胞生存のための処置、筋肉減少症の処置、括約筋の平滑筋の機能の喪失、侵害受容の処置及び慢性痛の処置、末梢神経障害の処置、糖尿病患者におけるバイオ人工膵臓移植生存の改善のための処置、脂肪症の減少に関連するコレステロールの減少を生じるための処置、移植片血行再建及び移植片生着を改善するための処置、網膜変性症の処置、色素性網膜炎の処置、変形性関節症の処置、子癇前症の処置、血管病変及び急性呼吸促迫症候群の処置、骨保護処置、又は毛包保護のための処置において有用な薬剤を製造するための、上で定義された化合物の使用である。
【０１３４】
その別の局面によれば、本発明は、活性成分として本発明に従う化合物を含む医薬組成物に関する。これらの医薬組成物は、有効用量の本発明に従う少なくとも１つの化合物、又は薬学的に許容しうる塩、及び少なくとも１つの薬学的に許容しうる添加剤も含有する。
【０１３５】
上記添加剤は、所望される医薬形態及び投与様式に従って、当業者に公知の通常の添加剤から選択される。
【０１３６】
経口、舌下、皮下、筋内、静脈内、外用、局所、気管内、鼻腔内、経皮、又は直腸投与のための、本発明の医薬組成物において、上記式（Ｉ）の活性成分、又はその塩は、従来の医薬添加剤との混合物として、単位投薬形態で、上記障害又は疾患の予防又は処置のために動物又はヒトに投与され得る。
【０１３７】
適切な単位投薬形態としては、経口形態、例えば錠剤、軟又は硬ゲルカプセル剤、散剤、顆粒剤及び経口液剤又は懸濁剤、舌下、頬側、気管内、眼内及び鼻腔内の投与形態、吸入による投与形態、外用、経皮、皮下、筋内又は静脈内の投与形態、直腸投与形態、及び移植片が挙げられる。局所適用については、本発明に従う化合物は、クリーム剤、ゲル剤、軟膏又はローション剤で使用され得る。
【０１３８】
例として、錠剤形態の本発明に従う化合物の単位投与形態は以下の成分を含み得る：
本発明の化合物                                            50.0mg
マンニトール                                              223.75mg
クロスカルメロースナトリウム（Sodium croscaramellose）    6.0mg
コーンスターチ                                            15.0mg
ヒドロキシプロピルメチルセルロース                        2.25mg
ステアリン酸マグネシウム                                  3.0mg
【０１３９】
より高いかまたはより低い投薬量が適切である特定の場合があり得る；このような投薬量は、本発明の状況から逸脱しない。通常のやり方に従って、各患者に適した投薬量は、投与方法並びにその患者の体重及び反応に従って医師により決定される。
【０１４０】
その別の局面によれば、本発明はまた、有効用量の本発明に従う化合物、又はその薬学的に許容しうる塩を患者に投与することを含む、上記の病的状態を処置及び／又は予防するための方法に関する。