(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記のＧＬＹＸ−１３：
0006035326.tif 000014
又はＧＬＹＸ−１３の医薬的に許容される塩の医薬的有効量を含有する自閉症治療用医薬組成物。
【請求項２】
投与１日後に１以上の自閉症の症状改善を改善する請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
投与８日後に１以上の自閉症の症状を改善する請求項１〜２のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項４】
静脈内、腹膣内、鼻膣、経口、筋肉注射又は皮下投与形態である請求項１〜３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項５】
単回投与用量の形態である請求項１〜４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
下記化合物
0006035326.tif 000015
又は前記化合物の医薬的に許容される塩の有効量を含む、細胞内の自閉症標的遺伝子の発現を変調させる為の医薬組成物。
【請求項７】
前記自閉症標的遺伝子は、ＡＢＡＴ、ＡＰＯＥ、ＣＨＲＮＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＦＡＰ、ＧＲＩＮ２Ａ、ＰＤＹＮ及びＰＥＮＫから選択される、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
下記のＧＬＹＸ−１３：
0006035326.tif 000016
又はＧＬＹＸ−１３の医薬的に許容される塩の医薬的有効量を含む、
アルツハイマー病又は早期のアルツハイマー病に付随する記憶喪失治療用医薬組成物。
【請求項９】
下記のＧＬＹＸ−１３：
0006035326.tif 000017
又はＧＬＹＸ−１３の医薬的に許容される塩の医薬的有効量を含むハンチントン病治療用医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１１年４月２７日に出願された米国特許仮出願番号61/479,593及び２０１１年８月２６日に出願された米国特許仮出願番号61/527,744の優先権を享有し、それら全ての開示内容を参照により本明細書に取り込む。
【背景技術】
【０００２】
自閉症は、社会交流、コミュニケーション及び限定的に繰り返す定型化した行動パターンにおける機能障害によって特定される。自閉症は、現在未解明の環境憎悪因子を伴うもので、今のところ遺伝する発達障害と考えられている。例えば、双生児の研究によると、自閉症の遺伝子は、高確率で遺伝することが認められており、全体人口で０．３％の自閉症が認められるのに対し、二卵性双生児で０〜１０％の自閉症が認められ、一卵性双生児で６０〜９１％の自閉症が認められる。
【０００３】
本分野における１つの主要課題は、自閉症と機能的に関連する対象遺伝子を特定し、さらに、その対象遺伝子を治療する目標として追跡することである。例えば、生物情報学の考え方を用いて、ハブ遺伝子と呼ばれる、他の自閉症候補遺伝子と非常に多数のタンパク質間相互作用を示す自閉症候補遺伝子を特定する。このハブ遺伝子が生体機能を制御する「マスタースイッチ」を提供するものと仮定している。
【０００４】
ヒトにおける自閉症の研究には、低レベル系統のマウスのような低レベル系統の動物を用いてもよい。
【０００５】
薬理学をベースとする治療学においては、ある程度の奏功とともに実質的な副作用がある。それ故、行動変容技術を用いれば、自閉症領域の疾病に対し、最強に有用な治療介入が可能となる。抗精神病薬のリスペリドンは、ＦＤＡ（食品医薬品局）が承認した唯一の自閉症向けの薬物であり、（i）活動過剰及び過敏性病状を顕著に減少させ、(ii)不適当な会話や社会的な引きこもりへの影響もほとんどあるいは全くなく、(iii)体重増加や沈静の副作用を示す。ヒトに関する自閉症の最近の研究によると、ＮＭＤＡＲグリシン部の部分的作動薬であるＤ‐シクロセリン（ＤＣＳ）は、社会的な引きこもりを顕著に改善し得ることが判明している（Posey et al.,2004）。
【０００６】
記憶障害（例えば、アルツハイマー病の初期段階に付随する記憶障害）に関連する神経機能障害に有効な治療法は、ある程度の奏功が確認される別領域である。しかし、海馬スライス中の長期増強は、通常の学習及び記憶の過程のベースとなる生理学の分子メカニズムの研究のモデル系として用いられる。例えばアミロイドベータタンパク質（Ａβ）の自然に分泌されたオリゴマーは、海馬スライスの長期増強を抑止することを示していた。
【０００７】
ハンチントン病（ＨＤ）は、被殻、尾状核及び大脳皮質中におけるニューロンの進行性変性の原因である、不安定なＣＡＧトリヌクレオチド繰り返し単位の拡張によって引き起こされる常染色体優性疾患である。ＨＤは、運動異常、認識機能障害及び情緒不安定によって特定されるもので、運動症状の発病後１５〜２０年で最終的に死に至る。
【０００８】
ＨＤ５１ＣＡＧラットは、５１ＣＡＧ繰り返し単位と対立遺伝子を含んでいるヒトのＨＤ変位株を利用している。このラットのモデルは、進行型神経性、神経障害性及び神経化学性の表現型であって、人間に見られるＨＤの晩期病状及び遅延進行に酷似する表現型を示しており、認識機能障害、進行性運動機能障害と同様、ニューロンの核内含有物及び拡大した側脳質のような神経病理学特性のような、ＨＤに似た病状を表している。ＨＤ５１ＣＡＧラットは、人間の状態に非常に良く似ているので、行動の細胞の分子マーカを研究する適した対象である。
【０００９】
公知の治療では、効能を改善し得る化合物、及び／又は、副作用を減らし得る化合物を用いて、自閉症、ハンチントン病、及びそれに関連する疾病及び/又は病状を治療するアプローチの必要性が高まっている。
【００１０】
要約
本明細書において、ＮＭＤＡ受容体のグリシン部位の部分的作動薬の医薬的有効量を、必要とする自閉症患者に投与することを含む、自閉症患者を治療する方法を提供する。例えば、本発明は、本明細書に開示するように、ＧＬＹＸ−１３又はＧＬＹＸ−１３の前駆体を治療上有効な服用量投与することによって自閉症を治療する方法の分野を対象としている。ここで、ＧＬＹＸ−１３の前駆体とは、例えば、ＮＭＤＡ受容体のグリシン部位の部分的作動薬活性を有する化合物、つまり、本明細書に開示されるような、ＮＭＤＡ受容体のグリシン部位に結合する化合物である。例えば、本明細書は、ＮＭＤＡ受容体のグリシン部位を変調する化合物の医薬的有効量を、必要とする自閉症患者に投与することを含む、自閉症患者を治療する方法を提供する。
【００１１】
別の実施形態において、てんかん、エイズ、エイズ認知症、多系統萎縮症、漸進性核上麻痺、フリードリヒ運動失調症、自閉症（及び部分型自閉症スペクトル障害）、脆弱エックス症候群、結節状硬化、注意欠陥障害、オリーブ橋小脳性萎縮症、脳性麻痺、パーキンソン病、薬物性視覚神経炎、末梢性神経障害、脊髄障害、虚血性網膜症、緑内障、心停止、脳卒中、虚血、行動障害、衝動調節障害、前頭側頭型認知症、精神分裂症、及び双極性障害からなる群より選択される病状を治療する方法が提供される。その方法は、ＧＬＹＸ−１３又は本明細書に開示される化合物のような、ＮＭＤＡ受容体の部分的作動薬を、必要とする患者に投与することを含む。
【００１２】
例えば、ある実施形態において、ＮＭＤＡ受容体のグリシン部位を変調し得ることを考慮した化合物は、ＧＬＹＸ−１３又は、その医薬的に許容される塩で表される。
0006035326.tif 000002
【００１３】
本明細書で考慮するものは、アルツハイマー病又は早期のアルツハイマー病に付随する記憶喪失を治療する方法でもあり、その方法は、開示の化合物を必要とする患者に投与することを含む。
【００１４】
別の実施形態において、本明細書で提供される方法は、注意力欠如障害、ＡＤＨＤ（注意欠陥多動障害）、統合失調症、不安神経症、例えば、鎮静剤中毒、ニコチン中毒及び／又はエタノール中毒等の中毒の改善又は治療、外傷性脳損傷、心的外傷後ストレス障害及び／又はハンチントン舞踏病（つまり、ハンチントン病）を治療する方法であって、その方法は、開示の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む。
【００１５】
ある実施形態では、考慮される化合物を、静脈内に、腹膜内に、筋内に、又は皮下に投与することであり、例えば、考慮される方法は、前述の化合物の１回量を投与する工程を含んでいてもよい。ある実施形態では、開示の方法は、開示の化合物の投与から約１日後から８日後でさえ、患者の自閉症の１以上の兆候に実質的な改善を提供する。
【００１６】
ある実施形態では、開示の化合物を毎日投与することもある。開示の化合物の医薬的な有効量は、約0.01ｍｇ/ｋｇから約1000ｍｇ/ｋｇであり得る。
【００１７】
本明細書が提供するものは、自閉症を治療する方法でもあり、下記で表される化合物の１回服用量を、必要とする患者に投与することを含む。
0006035326.tif 000003
【００１８】
又は、上記化合物の医薬的に許容される塩であって、患者は、１日後又は８日後に、自閉症の兆候を実質的に改善される。１回量は、例えば約0.01ｍｇ/ｋｇから約1000ｍｇ/ｋｇの開示の化合物を含み得る。
【００１９】
別の実施形態において、開示される発明は、ジ-ピロリドンペプチド化合物であって、その化合物が、Thr-Pro-Pro-Thr配列を含む化合物であるか、又は、ヒトを含む哺乳動物の自閉症の治療のための式Ａ(ＧＬＹＸ０１３)で例示される化合物を投与することに関する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
図１Ａは、向社会的超音波音声を誘起する遊びの低い割合又はランダムの割合で選択的に交配した成体のLong Evansラットが直接社会的接触に費やした時間の平均値＋標準誤差を表している。
図１Ｂは、成体のオスの低系統ラット又はランダム系統ラットにおいて、同種の遊びで誘発される向社会的超音波音声（周波数変調50kHzの鳴き声）の割合を表している。
図１Ｃは、同種の遊びで誘発される単調超音波音声（つまり、７kHz未満の帯域幅；１組あたりｎ=14-20）全体の割合を表している。* P<.05 Fisher PLSD post hoc test, 2 tailed.
【００２１】
図２Ａは、溶媒で前処理（1ｍｇ/ｍｌ無菌生理食塩水を皮下注射）した青年期のオスの低系統ラットで、同種の遊びに誘発される向社会的超音波音声（周波数変調50ｋＨｚの鳴き声）の平均値＋標準誤差を表している。
図２Ｂは、被験者内計画を用いた実験の開始15分前にＧＬＹＸ−１３（50ｍｇ/ｋｇ皮下注射）を処方した結果を示している。
図２Ｃは、同種の遊びに誘発される単調超音波音声（７ｋＨｚ未満の帯域幅）の割合を示す。１組あたりn=9. *P<.05 Fisher PLSD post hoc test, 2 tailed.
【００２２】
図３は、非選択的に交配した成体のランダム系統ラットと比較して、成体の低系統ラットの２つの脳領域（内側前頭葉皮質と側坐核）で著しく変化した遺伝子を示す。
【００２３】
図４は、Ｇｌｙｘ−１３の適用下で器官型海馬スライス培養におけるＡβ(1-42)による神経細胞の死を遅延させること；つまり、Αβ(1-42)単独の場合と、Ｇｌｙｘ−１３の指定濃度(ｇ/ｍｌ)存在下のΑβ(1-42)を浴適応した２４時間後のプロビジウム蛍光発光の平均値±標準誤差を示している。(*, P<.0.05, Αβ単独と対比した生徒のt-test)
【００２４】
図５は、Ｇｌｙｘ−１３の存在下でのＣＡ１放射状層のシャッファー側枝シナプス領域でのシナプス伝達の長期増強（ＬＴＰ）のＡβ障害の回復を示している。
Ａ：基礎シナプス伝達におけるΑβ(1-42)のＣＡ１放射状層(Αβ障害;12psi/100ms;黒丸;n=10)への圧出の影響の時間経過、及び溶媒（ＴＦＥ）注入（白丸;n=8）との対比で、高周波刺激（３×１００Ｈｚ／５００ｍｓ）によって誘起されるＬＴＰ
Ｂ：１μＭのＧｌｙｘ−１３の存在下での基礎シナプス伝達におけるΑβ(1-42)のＣＡ１放射状層(Αβ障害;12psi/100ms;黒丸;n=8)への圧出の影響の時間経過、及び溶媒（ＴＦＥ）注入（白丸;n=8）との対比で、高周波刺激（３×１００Ｈｚ／５００ｍｓ）によって誘起されるＬＴＰ
Ｃ：１μＭのＤ−シクロセリンの存在下での基礎シナプス伝達におけるΑβ(1-42)のＣＡ１放射状層(Αβ障害;12psi/100ms;黒丸;n=7)への圧出の影響の時間経過、及び溶媒（ＴＦＥ）注入（白丸;n=8）との対比で、高周波刺激（３×１００Ｈｚ／５００ｍｓ）によって誘起されるＬＴＰ
Ｄ：１００μＭのＤ−セリンの存在下での基礎シナプス伝達におけるΑβ(1-42)のＣＡ１放射状層(Αβ障害;12psi/100ms;黒丸;n=8)への圧出の影響の時間経過、及び溶媒（ＴＦＥ）注入（白丸;n=8）との対比で、高周波刺激（３×１００Ｈｚ／５００ｍｓ）によって誘起されるＬＴＰ
Ａ、Ｂ、Ｃにおける各プロットは、平均値±ｆＥＰＳＰ勾配で規格化した標準誤差である。
【００２５】
図６は、ＧＬＹＸ−１３を投与したＷＴラットとＨＤラットの間の繰り返し測定分散分析及び一連の一元配置分散分析を示している。
図６ｂは、第３段階の疑似ランダム試験における１秒当たりの「正しい」レバーの押下数を観測において、ＷＴラットとＨＤラットの間で「正しい」レバー押下率に有意差がないことを示している。
図６Ｂは、繰り返し測定分散分析からは、全ての試験セッションを通して、ＷＴラットとＨＤラットの間で「間違い」のレバー押下率に有意差が見られ、ＨＤラットが「間違い」の割合がより高いことを表している（p=0.004）
【発明を実施するための形態】
【００２６】
発明の詳細な説明
本明細書で用いる「ＧＬＹＸペプチド」は、ＮＭＤＡＲのグリシン部位の部分的作動薬／拮抗薬活性を有するペプチドを言う。ＧＬＹＸペプチドは、公知の組み換え法又は合成法によって得ることができ、例えば本明細書に参照により取り込まれる、米国特許5,763,393号及び米国特許4,086,196号に開示される方法がある。ある実施形態において、ＧＬＹＸは、Thr-Pro-Pro-Thr(SEQ ID NO:1)アミノ酸配列又はＬ−トレオニン−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−トレオニン アミドを有するテトラペプチドである。
【００２７】
例えば、ＧＬＹＸ‐１３は、以下のように記する化合物である。
0006035326.tif 000004
【００２８】
ＧＬＹＸ１３の、多形体、水和物、同族体、溶媒和体、遊離塩基及び／又は適した塩形態、これに限定されず、酢酸塩も考慮される。
ペプチドは、米国特許5,763,393にさらに開示されるように、環式であってもよいし、非環式であってもよい。ある実施形態において、ＧＬＹＸ−１３の類似としては、１以上のThr群又はPro群の一部の挿入又は欠落を含んでいてもよく、例えば、ＣＨ2、ＯＨ、又はＮＨ2の部位の欠落を含んでいてもよい。別の実施形態において、ＧＬＹＸ−１３は、１以上のハロゲン、（ハロゲン又はアミノと任意に置換される）ＣｒＣ3アルキル、ヒドロキシル、及び／又はアミノと任意に置換されていてもよい。本明細書の使用に考慮される他の化合物としては、本明細書に参照により取り込まれる米国特許5,763,393、米国特許6,107,271,及びWood et al., NeuroReport, 19, 1059-1061, 2008の全内容に開示されるＮＭＤＡＲのグリシン部位の部分的作動薬を含む。
【００２９】
本明細書に開示されるペプチドは、天然アミノ酸及び非天然アミノ酸の両方を含むと理解され、例えば、全ての天然アミノ酸（又はその誘導体）、全ての非天然アミノ酸（又はその誘導体）、又は天然アミノ酸と非天然アミノ酸の混合物を含む。例えば、ＧＬＹＸ‐１３中の、１、２、３、又はそれ以上のアミノ酸は、それぞれ独立してａ,ｄ又は１−立体配座を有していてもよい。
【００３０】
ある実施形態において、１以上の開示の方法で使用される化合物は、式Ｉの化合物、並びに、その医薬的に許容される塩、そのＮ−オキシド、及びその立体異性体。
0006035326.tif 000005
式Ｉ中、Ｔは、互いに独立して、ＣＲ4Ｒ4’であり、ｎは０、１、２又は３であり、
Ａは、任意に存在し、フェニル又はピリジンから選択され、
Ａは、Ｒaから選択される１以上の置換基で任意に置換され、
Ｒ1は、水素、ヒドロキシル、Ｓ（Ｏ）2−Ｃ1-4アルキル、−ＳＯ2、Ｃ1-4アルキル、Ｃ2−Ｃ4アルケニル、フェニル、Ｒ7、又は
0006035326.tif 000006
からなる群から選択され、
Ｃ1-4アルキル、Ｃ2-4アルケニル、又はフェニルは、Ｒaから選択される１以上の置換基で任意に置換され、
Ｘは、ＣＨ又はＮであり、
Ｒ3及びＲ3’は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、フェニル、Ｃ1-4アルキル、アミド、アミン、又はＣ2-4アルケニルからなる群より選択され、
Ｃ1-4アルキル、Ｃ2-4アルケニル及びフェニルは、Ｒaから選択される１以上の置換基で任意に置換され、
Ｒ4及びＲ4’は、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、フェニル、Ｃ1-4アルキル、アミド、アミン、Ｃ1-4アルコキシ、又はＣ2-4アルケニルからなる群より選択され、
Ｃ1-4アルキル、Ｃ2-4アルケニル、Ｃ1-4アルコキシ及びフェニルは、Ｒaから選択される１以上の置換基で任意に置換され、
Ｒ2は、水素、Ｒ7、Ｓ（Ｏ）2、Ｓ（Ｏ）2−Ｃ1−Ｃ4アルキル、Ｃ1-4アルキル、ヒドロキシル、又はフェニルからなる群より選択され、
Ｃ1-4アルキル、Ｃ2-4アルケニル、及びフェニルは、Ｒaから選択される１以上の置換基で任意に置換され、
Ｒ5及びＲ5’は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ、Ｃ2-4アルケニル、シアノ、アミノ、フェニル、及びヒドロキシルからなる群より選択され、
Ｃ1-4アルキル、Ｃ2-4アルケニル、及びフェニルは、Ｒaから選択される１以上の置換基で任意に置換され、
Ｒ7は、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ9、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ9、又は−Ｃ（Ｏ）−ＮＲd−Ｒ9からなる群より選択され、
Ｒ9は、水素、Ｃ1-4アルキル、フェニル、又はヘテロシクリルからなる群より選択され、
Ｃ1-4アルキル、フェニル、又はヘテロシクリルは、Ｒbから選択される１、２又は３の置換基で任意に置換され、
Ｒ8は、水素、−Ｃ（Ｏ）−、Ｃ1-4アルキル、又はＣ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｃ1-4アルキルは、Ｒaから選択される１、２又は３の置換基で任意に置換され、
Ｒaは、それぞれ独立して、カルボキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、フェニル、Ｃ1-4アルキル、及びＣ1-4アルコキシから選択され、
Ｒbは、それぞれ独立して、カルボキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、フェニル、Ｃ1-4アルキル、Ｃ1-4アルコキシ及び−ＮＨ−Ｒcからなる群より選択され、
Ｒcは、それぞれ独立して、Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ1-4アルキル及びＣ（Ｏ）−Ｃ1-4アルキルからなる群より選択され、
Ｒdは、それぞれ独立して、水素及びＣ1-4アルキルから選択される。
【００３１】
例えば、考慮される化合物は、下記の化合物を含む
0006035326.tif 000007
0006035326.tif 000008
【００３２】
ここに開示の化合物は、下記の中からなる群より選択される化合物である。
0006035326.tif 000009
0006035326.tif 000010
【００３３】
0006035326.tif 000011
0006035326.tif 000012
【００３４】
方法
考慮する方法は、自閉症及び／又は自閉症スペクトル疾患の治療方法であって、開示の化合物（例えば上述の化合物）の有効量を患者に投与することを含む治療方法を含む。ある実施形態では、必要とする患者に自閉症の兆候を減らす方法を考慮しており、当該方法は、開示の化合物の有効量を患者に投与することを含む。例えば、アイ・コンタクト回避、社会的活動の怠慢、注意力欠陥、情緒不安定、活動亢進、異常音感度、不適当な会話、睡眠中断及び反響的動作言語症のような、１以上の自閉症の兆候が生じるのを投薬で減らし得る。このような兆候の減少は、未治療の個人又は各人における兆候に対して観察され得る。
【００３５】
ある実施形態では、自閉症を患う患者は、脆弱エックス症候群、結節状硬化、先天性風疹症候群及び無処置フェニルケトン尿症のような、別の疾病を患っていることもある。
【００３６】
別の実施形態で考慮している方法は、必要とする患者のてんかん、エイズ及び／又はエイズ認知症、パーキンソン病、多系統委縮症、漸進性核上麻痺、フリードリヒ運動失調症、自閉症、脆弱エックス症候群、結節状硬化、注意欠陥障害、オリーブ橋小脳性萎縮症、脳性麻痺、薬物性視覚神経炎、末梢性神経障害、脊髄障害、虚血性網膜症、緑内障、心停止、行動障害、及び衝動調節障害からなる群より選ばれる疾患の治療方法であって、開示の化合物、例えばＧＬＹＸ−１３を投与することを含む治療方法である。本明細書は、必要とする患者にＧＬＹＸ−１３を投与することを含む、咳、例えば手に負えない咳を治療する方法をも考慮している。
【００３７】
例えば、本明細書は、良性ローランドてんかん、前頭葉てんかん、乳児痙攣、若年性ミオクローヌスてんかん、Lennox-Gastaut症候群、Landau-Kleffner症候群、Dravet症候群、進展型ミオクローヌスてんかん、反射てんかん、ラスマッセン症候群、側頭葉てんかん、辺縁てんかん、てんかん発作重積、腹部てんかん、両側性ミオクロニー、月経随伴性てんかん、ジャクソン型発作疾病、Lafora病、及び／又は、光過敏性てんかんを治療する方法であって、開示の化合物の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００３８】
１つの実施形態において、本明細書は、ＡＤＨＤ（注意欠陥多動障害）、精神分裂症（例えば分裂情動障害、妄想性障害、例えば、妄想型、破瓜病性及び／又は緊張病型の精神分裂症）、双極性障害（I型双極障害、II型双極障害、循環気質を含む）、境界性人格障害、不安症、（社会不安障害、回避性人格障害を含む）、強迫性障害、アヘン剤改善、ニコチン中毒やエタノール中毒（例えば、このような中毒を治療する方法、又はこのような中毒で取り除かれる副作用を改善する方法）、脊髄損傷糖尿病患者網膜症、外傷性脳損傷、前頭側頭型認知症、心的外傷後ストレス障害及び／又はハンチントン舞踏病を治療する方法であって、必要とする患者に、開示の化合物、例えばＧＬＹＸ−１３を投与することを含む方法も考慮している。例えば、精神分裂症、中毒（例えばエタノールまたはアヘン）、自閉症（及び自閉症スペクトル障害）、ハンチントン舞踏病、外傷性脳損傷、脊髄損傷、心的外傷後ストレス障害及び糖尿病性網膜症を患う患者は、変調したＮＭＤＡ受容体の作用又は機能で苦しむだけの可能性もある。
【００３９】
例えば、本明細書が提供するものは、精神分裂症で苦しむ患者の精神分裂症、例えば拒絶性及び認知性精神分裂症を治療する方法であり、その方法は、開示の化合物の治療上有効量を投与することを含む。
【００４０】
本明細書が考慮するものは、脳卒中及び／又は虚血、例えば虚血性脳卒中、脳虚血、一過性脳虚血発作、心虚血及び／又は心筋梗塞を治療する方法であり、その方法は、必要とする患者に、ＧＬＹＸ−１３の医薬的な有効量を投与することを含む。
【００４１】
本明細書で提供するものは、ＧＬＹＸ−１３のような開示の化合物の有効量を細胞に接触させる工程を含み、細胞内での自閉症標的遺伝子を変調させる方法でもある。自閉症標的遺伝子は、例えば、ＡＢＡＴ、ＡＰＯＲ、ＣＨＲＮＡ４、ＣＨＲＮＡ５、ＧＦＡＰ、ＧＲＩＮ２Ａ、ＰＤＹＮ及びＰＥＮＫから選択されてもよい。別の実施形態において、シナプス可塑性関連疾病で苦しむ患者のシナプス可塑性を変調させる方法であって、ＧＬＹＸ−１３のような開示の化合物、又はその医薬的に受容可能な塩の有効量を患者に投与する工程を含む方法も提供される。
【００４２】
別の実施形態において、アルツハイマー病を治療する方法、すなわち例えば、初期のアルツハイマー病に伴う記憶喪失を治療する方法であって、開示の化合物、例えばＧＬＹＸ−１３を、必要とする患者に投与する工程を含む方法も提供される。本明細書が提供するものは、生体内又は生体外の（例えば細胞内の）アルツハイマーのアミロイドタンパク質（例えばβアミロイドペプチド、例えばイソ型Ａβ）を変調させる方法であって、そのタンパク質に、開示の化合物、例えばＧＬＸＹ−１３の有効量を接触させる工程を含む方法である。例えば、ある実施形態において、ＧＬＸＹ−１３又は別の開示の化合物は、アポトーシスの神経細胞死と海馬スライスにおける長期増強を抑制するためのアミロイドタンパク質の能力を阻害してもよい。ある実施形態において、開示の化合物（例えば、ＧＬＹＸ−１３）は、それを必要とするアルツハイマー患者に神経防護作用の特性を供給してもよく、例えば、末期のアルツハイマー付随する神経細胞死に健康回復の効果を供給してもよい。
【００４３】
ある実施形態において、患者は人間、例えば人間の小児科の患者であってもよい。
【００４４】
ある実施形態において、考慮する方法は、開示の化合物若しくは化合物単体の使用、又は、自閉症又は他の考慮される兆候を治療する薬剤を製造するための１以上の他の化学物質の組合せの使用に関連する。ある実施形態において、本明細書は、それを必要とする患者に、ＧＬＹＸ−１３の有効量を投与することにより、自閉症を治療する方法に関する。
【００４５】
例えば、開示の方法において、考慮される化合物、例えばＧＬＹＸ−１３、又は、考慮される化合物を含む組成物、例えば医薬的に許容される添加剤を、患者に非経口で投与するのみに限られず、患者の皮下及び静脈内に投与してもよい。本発明の化合物又は組成物は、ゆっくりコントロールした点滴注入を通じて、又は、インプラント装置からの放出によって投与されてもよい。ある実施形態において、開示の自閉症を治療する方法は、開示の化合物の１回服用量又は１回以上の服用量を投与する工程を含む。ある実施形態において、患者は、１回（単独）服用量の投与から１２時間後、１日後、１週間後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、又は８日後でさえ、認知症の病状に十分な改善がある。
【００４６】
治療に使用するために必要な開示の化合物の治療の有効量は、治療する自閉症の病状の特質、必要な治療期間、年齢、患者の病状、によって様々であり、究極的には執刀医によって決定される。しかしながら、一般的に、成人男性の治療に使用する服用量は、通常、１日当たり、約０．０１ｍｇ/ｋｇから約１０００ｍｇ/ｋｇの範囲である。服用量は、約１ｍｇ/ｋｇから約１００ｍｇ/ｋｇであってもよい。所望の服用は、都合よく単独服用量で投与されてもよいし、適当な間隔で１日に複数回、例えば、２回、３回、４回、又はそれ以上で投与してもよい。
【００４７】
数多くの要因によって、幅広い投与量の範囲で、開示の発明の化合物を投与することを決定される。開示の化合物の投薬量が他の治療薬との組合せで決めるなら、本発明の化合物の投薬量は、比較的より少ない投薬量であってもよい。結果として、本発明の化合物の投薬量は、約１ｎｇ/ｋｇから約１００ｍｇ/ｋｇであってもよい。本発明の化合物の投薬量は、特に限定されず、いかなる投薬量であってもよく、約１μｇ/ｋｇ、２５μｇ/ｋｇ、５０μｇ/ｋｇ、７５μｇ/ｋｇ、１００μｇ/ｋｇ、１２５μｇ/ｋｇ、１５０μｇ/ｋｇ、１７５μｇ/ｋｇ、２００μｇ/ｋｇ、２２５μｇ/ｋｇ、２５０μｇ/ｋｇ、２７５μｇ/ｋｇ、３００μｇ/ｋｇ、３２５μｇ/ｋｇ、３５０μｇ/ｋｇ、３７５μｇ/ｋｇ、４００μｇ/ｋｇ、４２５μｇ/ｋｇ、４５０μｇ/ｋｇ、４７５μｇ/ｋｇ、５００μｇ/ｋｇ、５２５μｇ/ｋｇ、５５０μｇ/ｋｇ、５７５μｇ/ｋｇ、６００μｇ/ｋｇ、６２５μｇ/ｋｇ、６５０μｇ/ｋｇ、６７５μｇ/ｋｇ、７００μｇ/ｋｇ、７２５μｇ/ｋｇ、７５０μｇ/ｋｇ、７７５μｇ/ｋｇ、８００μｇ/ｋｇ、８２５μｇ/ｋｇ、８５０μｇ/ｋｇ、８７５μｇ/ｋｇ、９００μｇ/ｋｇ、９２５μｇ/ｋｇ、９５０μｇ/ｋｇ、９７５μｇ/ｋｇ、１ｍｇ/ｋｇ、５ｍｇ/ｋｇ、１０ｍｇ/ｋｇ、１５ｍｇ/ｋｇ、２０ｍｇ/ｋｇ、２５ｍｇ/ｋｇ、３０ｍｇ/ｋｇ、４０ｍｇ/ｋｇ、４５ｍｇ/ｋｇ、５０ｍｇ/ｋｇ、６０ｍｇ/ｋｇ、７０ｍｇ/ｋｇ、８０ｍｇ/ｋｇ、９０ｍｇ/ｋｇ又は１００ｍｇ/ｋｇであってもよい。
【００４８】
ある実施形態において、開示の化合物（例えばＧＬＹＸ−１３）は、抗鬱のような、及び／又は精神安定剤のような効果をもたらす量で投与されてもよい。
【００４９】
開示の化合物は、部分的に液状又は固体の製剤として提供されてもよく、例えば、水性又は油性の懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップ及び／又はエリキシル剤として提供されていてもよい。組成物は、使用の前に、水又は他の適した溶媒との構造のための乾燥製品として製剤化してもよい。このような液状の調合液は、添加剤を含んでもよく、その添加剤は、特に限定されず、懸濁化剤、乳化剤、非水性媒体及び防腐剤を含む。懸濁化剤は、特に限定されず、ソルビトールシロップ、メチルセルロース、クルコース／シュガーシロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、及び水素化食用油を含む。乳化剤は、特に限定されず、レチシン、ソルビタンオレイン酸モノエステル、及びアカシアを含む。非水性媒体は、特に限定されず、食用油、アーモンドオイル、分割投与ココナッツオイル、油性エステル、プロピレングリコール及びエチルアルコールを含む。防腐剤は、特に限定されず、ヒドロキシ安息香酸メチル又はヒドロキシ安息香酸プロピル、及びソルビン酸を含む。考慮される化合物は、非経口投与のために製剤化されてもよいが、これに限定されず、注射又は持続注入のために製剤化してもよい。注射のための製剤化は、懸濁液、溶液、又は油性溶媒又は水性溶媒中のエマルジョンの形式であってもよいし、製剤物質を含んでもよい。製剤物質は、特に限定されず、懸濁化剤、安定剤、分散剤を含む。提供される組成物は、再構成のための粉体形状であってもよく、粉体形状は、無菌の、発熱物質を含まない水を含む。
【実施例】
【００５０】
実施例１：低系統ラットとランダム系統ラットの超音波発声の比較
自閉症の主な３つの症状、(1)社会的な感情及び自発性の欠如、(2)意志疎通障害、(3)運動異常（特に反復行動）の高発生は、それぞれ、動物における以下の行動観測によって部分的にモデル化し得る。(1)社会との接触時間を減らす；(2)向社会的発声の割合を減らす、及び(3)超音波発声パターンを阻害する。
【００５１】
遊びで誘発される向社会的な超音波発声（取っ組み合い遊びに反応して発する50-ｋＨｚに変調した周波数の超音波発声）の低い割合又はランダムの割合で、成体のオスのLong-Evansラットを選択的に交配した。そのラットを、選択的に同系統で交配した同種のペアで試験した。図１Ａは、これらのラットが直接、社会的接触に費やした時間の平均値及び標準誤差を示している。図１Ｂは、成体のオスの低系統ラット又はランダム系統ラットにおいて、同種の遊びで誘発される向社会的超音波音声（周波数変調50kHzの鳴き声）の割合を示している。図１Ｃは、同種の遊びで誘発される単調な超音波音声（７kHz未満の帯域幅）全体の割合を示している。周波数変調50kHzの鳴き声は、向社会的な積極的感情状態と関連していることが示されており、単調な鳴き声は意志疎通の欠如によるものと分かる）。データは、Burgdorf et al. Dev. Psychobiol 51, 34-46 (2009)、１組あたりｎ＝14-20. *P<.05 Fisher PLSD post hoc test, 2 tailed.を適用して再分析した。
【００５２】
成体として試験したとき、低系統ラットは、ランダム交配ラットと比較して、同種のラットとの社会的接触が少なく、遊びに誘発される向社会的超音波音声の頻度が少なく、かつ単調超音波音声の発生率が高まった。つまり、この例は、この動物モデルが自閉症の中核の社会的及び意志疎通の症状を表すことを示している。
【００５３】
実施例２：同種の遊びに誘発される向社会的超音波音声におけるGLYX-13の影響
図２Ａに示されるように、溶媒で前処理（1mg/ml無菌生理食塩水を皮下注射）した青年期のオスの低系統ラットで、同種の遊びに誘発される向社会的超音波音声（周波数変調50kHzの鳴き声）を測定した。図２Ｂは、被験者内計画を用いた実験の開始15分前にＧＬＹＸ−１３（50ｍｇ/ｋｇ皮下注射）で処方した結果を示す。図２Ｃは、同種の遊びに誘発される単調超音波音声（７ｋＨｚ未満の帯域幅）の割合を示す。n=9 per group. *P<.05 Fisher PLSD post hoc test, 2 tailed.  ＧＬＹＸ−１３は、遊びに誘発される向社会的超音波音声の頻度を著しく増加させ、かつ単調超音波音声全体の割合を著しく減少させた。
【００５４】
これらの結果は、ＧＬＹＸ−１３が低系統ラットにおける社会的／感情的意志疎通の欠如を治療させ得ることを示している。
【００５５】
実施例３：低系統ラットにおける遺伝子発現変化
低系統ラットにおける遺伝子発現変化は、遊びに誘発される向社会的発声に機能的に関連することが示された２つの脳領域（内側前頭葉皮質と側坐核）(Burgdorf et al., Behav Brain Res 182, 274-283 (2007)において、Burgdorf et al., Neuroscience 168, 769-777 (2010)で以前示された手法を用いたマイクロアレイにより検査した。
【００５６】
図３は、非選択的に交配した成体のランダム系統ラットと比較して、成体の低系統ラットの両方の脳領域で著しく変化した遺伝子のリストを示している。人間の自閉症に関連する遺伝子と低系統ラットで発現に差のある遺伝子との間で、統計的に顕著に重複している（８の変化した自閉症候補遺伝子／３．５倍の濃度を示す、１０１の全変化遺伝子と対比したchip set bias 25/1108;P<.05; Chi square test, two tailed）。
【００５７】
ＮＭＤＡ受容体は、低系統ラットで発現に差のある遺伝子のハブとされる（ＮＭＤＡ受容体のＮＲ2Ａサブユニットに対して３つの結合であるのと比較して、低系統ラットで発現に差のある遺伝子毎の結合の平均値＋標準誤差は(0.985+0.004)である;P<.0001 one tailed t-test）。陰性対照として、自閉症のモデルと考えられていない社会的挫折を経験したラットの皮質のマイクロアレイデータも分析した。そして、自閉症候補遺伝子は、この遺伝子セットにおいて上方制御されず、またＮＭＤＡＲはハブ遺伝子と同定されないことも判明した(全てP>.05)。
【００５８】
遺伝子発現解析は、Burgdorf et al. Neuroscience (2010)の記載されている通り、マイクロアレイによって実行した。検体には、選択的に50-ｋＨｚの超音波音声の割合を低く育成した成体のオスのLong Evansラットの側坐核と内側前頭葉皮質と、非選択的にランダム系統で育成した成体のオスのLong Evansラットの側坐核と内側前頭葉皮質とを、１組当たりｎ＝６で制御した。虚偽発見率を５％に設定した。低系統ラットは、遺伝子に関連する人間の自閉症と著しい関連性を示した。（2.9倍の濃度 v.s. chip set bias, P<.05
【００５９】
実施例４：人間のb-アミロイド(l-42)毒性に対する耐性
Ｇｌｙｘ−１３が生理学的ネットワーク環境の感受性ニューロンへのｈΑβの毒性に対する耐性があるかどうか特定するために、ＮＭＤＡ受容体の繰り込み活性により、様々なＧｌｙｘ−１３濃度におけるｈΑβの長期的影響を比較した。図４に示されるように、ｈΑβ単独５μｇ/ｍｌでは、細胞外適用後２４時間で、ＣＡ１領域のグルタミン酸作動性錐体ニューロンの死を顕著に遅らせた。同濃度のｈΑβとＧｌｙｘ−１３の混合物の適用において、１ｎＭから１μΜまでの低濃度のＧｌｙｘ−１３で、ｈΑβ誘導のＣＡ１錐体ニューロンの死に対する著しい耐性作用を示し、Ｇｌｙｘ−１３が神経保護効用とＵ字線量反応相関を示した。(*, P<0.05, ｈΑβ単独と比して、Duncanの複合範囲のt-test
【００６０】
実施例５：シャッファー側枝ＣＡ１シナプスでの長期増強（ＬＴＰ）のｈＡｂ誘導障害
【００６１】
ＬＴＰは、長期記憶装置の重要なメカニズムであると考えられているため、ｈΑβの急性シナプス毒性作用は、早期のアルツハイマー病の顕著な特徴である認識低下と記憶障害に対して重大な意味を持つ可能性がある。従って、ｈａＢＣもまたｈΑβのこの機能性シナプス毒性作用を高めるのか、そしてグリシン部位部分作動薬はこの毒性からシナプスを保護しうるのかという問題が重要になる。
【００６２】
Ｇｌｙｘ−１３、Ｄ−シクロセリン又は完全作動薬Ｄ−セリンの存在下もしくは非存在下において、ｈΑβを急性体外ラット海馬切片のＣＡ１放射状層のシャッファー側枝シナプス領域に圧出し、ＬＴＰを３０分遅く誘起させようとした。図５Ａは単独のｈΑβが高周波シャッファー側枝刺激によって誘起されるＬＴＰの度合いを著しく減少させる（−２０％）ことを示している。ｈΑβを浴適応したＧｌｙｘ−１３（１μΜ、図５Ｂ,白丸）の存在下に圧出した時、ＬＴＰは通常の抑制レベルにまで回復した。一方、グリシン部位部分作動薬Ｄ−シクロセリン（１μΜ、図５Ｃ、白丸）と、完全作動薬Ｄ−セリン（１００μΜ、図５Ｄ、白丸）のいずれも、ｈΑβ単独注入で処理したシナプス（黒丸）と比べてＬＴＰは回復しなかった。これらのデータは、Ｇｌｙｘ−１３がｈΑβの急性シナプス毒性効果からシナプスのＬＴＰを保護する強い効能があることを示し、Ｇｌｙｘ−１３は、早期のアルツハイマー病における効果的な向知性剤、そして後期の同病における神経保護剤のいずれにもなる可能性を示唆している。
【００６３】
実施例６:ハンチントン病モデル
ハンチントン病モデルの研究にＨＤ５１ＣＡＧ及びＷＴ（野生種）のラットを用い、一連の自発的反復課題を用いた認識検査が行なわれる。ラットには、以下のスケジュールで投薬される。
0006035326.tif 000013
【００６４】
ラットに、まず獲得試験をさせる。獲得試験は、試験時間が８時間であり、ラットは３０秒の変動時間間隔後に「正しい」レバーを押すことでショ糖のペレットを獲得する。この課題により、ペレットを獲得するためにレバーを押さなければならないことをラットに学習させる。ペレットを獲得した数、「正しい」レバー押下率、間違ったレバー押下をしたエラー数とともに「正しい」レバーを同定するために要する時間を測定する。獲得試験は、自由に水を摂取できる条件で行われる。
【００６５】
上記獲得試験の後に、ラットは前進的固定比率（ＦＲ）スケジュールで訓練される。このスケジュールは、レバー押下回数を増やして、１つのペレットを得るために１５回レバーを押下させる（ＦＲ１５）。このスケジュールは通常３日かかる。全ての訓練及び試験セッションの間、自発的プログラムは、最大で６０分間実行されるか、又は、ラットが最大２００個のショ糖ペレットを獲得するまで実行される。その際、ラットは即座にチャンバーから移動させて、通常の飼育ケージに戻す。ＭＥＤ ＰＣ ＩＶプログラムは、ラットのパフォーマンスによって小さくＦＲを増加させるのに用いられる（ラットはＦＲ１で１５ペレット獲得した後、ＦＲをＦＲ２に増加させる）。進歩的ＦＲ訓練が成功すると、ラットは、基準反応速度を確立し、ペレットを得るための多数回のレバー押下に慣れさせるために、ＦＲ１６の訓練で２日続けてチャンバーに入れられる。
【００６６】
試験セッションは、２５日間又は３０日間の前進的ＦＲスケジュールを用いて実行される。試験の第１段階は９日間のＦＲからなり、左のレバーをペレット獲得の「正しい」レバーとする。ラットはＦＲ２からスタートし、それから毎日次の増加したＦＲに移り、最終的にＦＲ５１２に到達する（それぞれ、２、４、８、１６、３２，６４、１２８、２５６、５１２）。左右それぞれの全レバー押下数、１セッションの両側のレバー押下数の和、「正しい」レバー押下率（「正しい」レバー押下/左レバー押下＋右レバー押下に１００を掛けて百分率を得る）、全ペレット獲得数、それぞれのセッションを完了するのに要する時間とともに、左と右のレバーに対する反応速度を記録する。ラットは試験の第２段階が始まる前に１日休ませ、ラットの体重だけ記録する。第１段階の間、ＨＤとＷＴのラット両方ともに、全押下数に比例して正しいレバーを押している。
【００６７】
試験の第２段階は、９日間のＦＲ試験からなり、右レバーをペレット獲得の「正しい」レバーに設定する。試験の第２段階は「正しい」レバーの空間的反転を除いて第１段階と同一である。同じ測定値を記録する。第２段階の間、正しい反応のレバーは右側に切り替えられる。ＨＤラットとＷＴのラットの両方共に全押下数に比例して同様に正しいレバーを押す。しかし、ＨＤラットは２日目に間違いのレバー押下が増え、以後同様のエラー率を示す。
【００６８】
試験第２段階の完了後、ラットを１日休ませて体重だけを記録し、その後疑似ランダム混合スケジュールに入る。疑似ランダム段階はＦＲ３２を実行するラット(その時ラットは最高の反応速度で反応している)で、「正しい」レバーを疑似ランダムに（例えば、左、左、右、右、左、右のように）切り替えて６日間行われる。第３段階の間、ＧＬＹＸ−１３は上記の投薬スケジュールを用いて、課題の実行の前に皮下に20分間注入される。ＧＬＹＸ−１３を投与されたＷＴラット及びＨＤラットの両方が、生理食塩水を注入されたラットよりも高確率に正しいレバーを押下する傾向を示した。図６を参照のこと。
【００６９】
図６Ａは、繰り返し測定分散分析及び一連の一元配置分散分析を示している。これらの分析では、第３段階の疑似ランダム試験で毎秒のレバー押下数で測定されたＷＴラットとＨＤラットの間に「正しい」レバー押下率の有意差は見られなかった。しかし、繰り返し測定分散分析からは、ＷＴラットとＨＤラットの間に、全ての試験セッションを通しての「間違い」のレバー押下率の有意差が見られ、ＨＤラットが高い「間違い」の割合を示した（p=0.004）（図６Ｂ）。一元配置分散分析は、「間違い」の割合を測定した時にそれぞれの日に、ＨＤラットとＷＴラットの間に有意差が見られ、１日目(p=0.05)、２日目(p=0.026)、４日目(p=0.013)、５日目(p=0.018)とそれぞれＨＤラットが高い割合を示していた。
【００７０】
自発性試験の終わりに、ラットを開放領域駆動モニターシステム(Kinder Scientific; Poway, CA)に配置する。ラットに対して、１時間の夜間段階の試験を行い、そして、全移動距離、行った基本動作と微細動作、中心への接近、背面（即ち、後脚立ち）の数を記録する。全移動距離は、ＨＤ５１ＣＡＧラットがなんらかの活動過多もしくは活動不全を示す。後ろ足立ち行動の全数は、探査行動と活動レベルについての付加的な基準であるが、運動異常を検知する手助けにもなり得る。
【００７１】
均等物
当業者は、ここに記述される発明の特定の実施形態に多くの均等物を認識し、又はありふれた実験を行なうことにより確認することができる。このような均等物は、以下の請求項に包含されることを意図する。
【００７２】
参照による取り込み
すべての特許の全内容、公開された特許出願、ウェブサイトとその他のここに引用された文献は、参照によってそれら全体としてここに明らかに取り込まれる。
【図１】
0006035326.tif 000018
【図２】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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