(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式1：
【化１】
0005952494.tif 000051
[式中、
R1とR2とは独立して-H、-OH又は無置換のグリコシルであり、
R1とR2は同時に-Hではなく、
R3は-H或いは-OHであり、
R4は、式2、式3或いは式4で表される基：
【化２】
0005952494.tif 000052
[式中、R9、R10及びR11はそれぞれ独立してC1〜C3アルキルであり、dは1〜3の整数である]
【化３】
0005952494.tif 000053
[式中、R12、R13及びR14はそれぞれ独立してC1〜C3アルキルであり、eは1〜3の整数である]
【化４】
0005952494.tif 000054
[式中、R15及びR16はそれぞれ独立してC1〜C3アルキルであり、fは1〜3の整数である]
である]
で表される一種類或いは二種類のサポニンを含む、サポニンナノミセル。
【請求項２】
R1とR2は独立して下記の基の1つであり：
（1）-H、-OH；ここで、-Hは水素基であり、-OHは水酸基であり；
（2）R6、ここでR6は下記の基：-O-Glc、-O-Rha、-O-Lyx、-O-Xyl、-O-Ara(p)、-O-Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(4→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara(p)；ここで、Glcはグルコピラノシルであり、Xylはキシロピラノシルであり、Rhaはラムノピラシルであり、Ara（p）はアラビノピラノシルであり、Ara(f)はアラビノフラノシルであり、Lyxはリキソース基である；
の1つである、請求項1記載のサポニンナノミセル。
【請求項３】
R4が、式2-1、式3-1、或は式4-1：
【化５】
0005952494.tif 000055
【化６】
0005952494.tif 000056
【化７】
0005952494.tif 000057
で表される基である請求項1記載のサポニンナノミセル。
【請求項４】
B型サポニン及び／或はC型サポニンを含み；ここで、前記B型サポニンは、式1-2：
【化８】
0005952494.tif 000058
により表されるサポニンの一種類或は多種類であり、前記C型サポニンは、式1-3：
【化９】
0005952494.tif 000059
により表されるサポニンの一種類或は多種類である、請求項1に記載のサポニンナノミセル。
【請求項５】
前記サポニンナノミセルがB型サポニン又はC型サポニンを含む場合、前記B型サポニン又はC型サポニンの質量含有量は70％以上であり；
或は、前記B型サポニン又はC型サポニンのモル含有量は70％以上である、請求項4記載のサポニンナノミセル。
【請求項６】
前記サポニンナノミセルがA型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンから成る群から選択されるいずれか二種類のサポニンを含み；当該二種類のサポニンの質量含有量はそれぞれ25％以上であり、該二種類のサポニンの総質量含有量は70％以上であり；
或は、前記サポニンナノミセルがB型サポニン及びC型サポニンを含み、B型サポニン及びC型サポニンのモル含有量はそれぞれ25％以上であり、B型サポニンとC型サポニンとの総モル含有量は70％以上であり；
ここで、前記A型サポニンは、式1-1：
【化１０】
0005952494.tif 000060
により表されるサポニンの一種類或は多種類であり、前記B型サポニンは、式1-2：
【化１１】
0005952494.tif 000061
により表されるサポニンの一種類或は多種類であり、前記C型サポニンは、式1-3：
【化１２】
0005952494.tif 000062
により表されるサポニンの一種類或は多種類である、請求項1記載のサポニンナノミセル。
【請求項７】
前記サポニンナノミセルがA型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンから成る群から選択されるいずれか二種類のサポニンを含む場合、当該二種類のサポニンの質量比率は0.8〜1.2であり、
前記サポニンナノミセルがB型サポニン及びC型サポニンを含む場合、前記B型サポニンと前記C型サポニンとのモル比率は0.8〜1.2である、請求項6記載のサポニンナノミセル。
【請求項８】
Rg5型ギンセノシドを含み、前記ギンセノシドRg5の質量含有量は50％以上であり、又は、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は50％以上であり、
或は、ギンセノシドRk1を含み、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が50％以上であり、又は、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は50％以上であり；
或は、ギンセノシドRk4を含み、前記ギンセノシドRk4の質量含有量が50％以上であり、又は、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は50％以上であり；
或は、ギンセノシドRg6を含み、前記ギンセノシドRg6の質量含有量が50％以上であり、又は、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は50％以上であり；
或は、ギンセノシドRg5とギンセノシドRk1とを含み、前記ギンセノシドRg5の質量含有量が15％以上であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が15％以上であり、且つ、前記ギンセノシドRg5とギンセノシドRk1との総質量含有量が50％以上であり、又は、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は15％以上であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は15％以上であり、且つ前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が50％以上であり；
或は、ギンセノシドRk4とギンセノシドRg6とを含有し、前記ギンセノシドRk4の質量含有量が15％以上であり、前記ギンセノシドRg6の質量含有量が15％以上であり、且つ、前記ギンセノシドRk4とギンセノシドRg6との総質量含有量が50％以上であり、又は、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は15％以上であり、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は15％以上であり、且つ、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が50％以上である、請求項1記載のサポニンナノミセル。
【請求項９】
ギンセノシド(S)-Rg3とギンセノシドRg5とギンセノシドRk1とを含み、前記ギンセノシド(S)-Rg3の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシド(S)-Rg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総質量含有量が70％以上であり、又は、前記ギンセノシド(S)-Rg3のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシド(S)-Rg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が70％以上であり、
或は、ギンセノシドRh2とギンセノシドRh3とギンセノシドRk2とを含有し；ここで前記ギンセノシドRh2の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRh3の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk2の質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総質量含有量が70％以上であり、又は、前記ギンセノシドRh2のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRh3のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk2のモル含有量は15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総モル含有量が70％以上であり；
或は、ギンセノシドRg2とギンセノシドRk4とギンセノシドRg6とを含有し、前記ギンセノシドRg2の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk4の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg6の質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総質量含有量が70％以上であり、又は、前記ギンセノシドRg2のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が70％以上であり、
或は、ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3とを含有し；ここで、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量含有量が70％以上であり、又は、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総モル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総モル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総モル含有量は15%〜45%であり、且つ、ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総モル含有量が70％以上である、サポニンナノミセル。
【請求項１０】
前記サポニンナノミセルが、ギンセノシド(S)-Rg3とギンセノシドRg5とギンセノシドRk1とを含む場合、前記ギンセノシド(S)-Rg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、又は、前記ギンセノシド(S)-Rg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1とのモル比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、
前記サポニンナノミセルが、ギンセノシドRh2とギンセノシドRh3とギンセノシドRk2とを含む場合、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、又は、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2とのモル比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、
前記サポニンナノミセルが、ギンセノシドRg2とギンセノシドRk4とギンセノシドRg6とを含む場合、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、又は、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6とのモル比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、
前記サポニンナノミセルが、ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3とを含む場合、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総質量と、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総質量と、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）である、請求項9記載のサポニンナノミセル。
【請求項１１】
サポニンナノミセルの調製方法であって、以下の工程：請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンを、サポニンを溶解することができる有機溶媒と混合する工程、及び前記有機溶媒を除去する工程を含む、方法。
【請求項１２】
前記サポニンを溶解することができる有機溶媒が、メタノール、エタノール、N,N-ジメチルホルムアミド、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択され；そして/あるいは前記混合の温度は30℃〜80℃であり；そして/あるいは前記有機溶媒を除去する方法は、30℃〜80℃、減圧下での濃縮及び乾燥である、請求項11記載の調製方法。
【請求項１３】
サポニンナノミセルの調製方法であって、以下の工程：
（1）ウコギ科（Araliaceae）植物及び/或はウリ科（Cucurbitaceae）植物の抽出物を原料として用い、酸性水溶液の中で酸分解反応を行って、サポニン混合物を含む反応液を得る工程、及び
（2）精製して前記工程（1）で得られるサポニン混合物を含む反応液中の不純物を除去した後、サポニンを溶解することができる有機溶媒と混合して、そして前記有機溶媒を除去して、サポニンナノミセルを得る工程、
或は、前記工程（1）で得られるサポニン混合物を含む反応液を精製及び分離し、多種のサポニンモノマーを得て、サポニンモノマー中、請求項１に記載の式1で表されるギンセノシドの一種類或は多種類を、サポニンを溶解することができる有機溶媒と混合し、そして前記有機溶媒を除去して、サポニンナノミセルを得る工程
を含み、
ここで、前記不純物を除去するための精製方法は、以下の方法1又は方法2のうちの1つであり、
前記方法1は、以下の工程：
（a）工程（1）において得られるサポニン混合物を含有している反応液を冷却し、静置し、そして沈殿物を除去する工程；
（b）工程（a）により得られる反応液のpHをアルカリによりアルカリ範囲まで調整し、沈殿物を得る工程；
（c）30℃〜80℃で、沈殿物と有機溶媒と混合し、サポニン混合液を得る工程であって、前記有機溶媒が、メタノール、エタノール、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択される、工程；
（d）工程（c）において得られるサポニン混合物を5℃未満まで冷却させ、沈殿物を除去し、乾燥させる工程
を含み、前記方法2は、以下の工程：
S1. 工程（1）において得られるサポニン混合物を含む反応液のpHをアルカリによって、pH 8〜14に調整し、沈殿物を除去して、溶液Aを得る工程；
S2.工程S1により得られる溶液A中のサポニンをn-ブタノールにより抽出し、n-ブタノール層を得て、その後n-ブタノール層を水で洗浄し、そしてn-ブタノール層の溶媒を除去する工程
を含む、調製方法。
【請求項１４】
工程（1）において、前記ウコギ科植物は、中国人参(Panax ginseng)、高麗人参(P. Sinensis J.Wen)、アメリカ人参(P. quique folius)、日本人参（P. japonicus）、ベトナム人参（P. vientnamensis）、ヒマラヤ人参（P. Pseudoginseng）及び三七人参（P. notoginseng）からなる群から選択され；そして前記ウリ科植物は、甘茶蔓（Gynostemma pentaphyllum）であり；
及び/或は、工程（1）において、前記ウコギ科植物及び/或はウリ科植物の抽出物は下記の条件：総ギンセノシド質量の含有質量％≧60%である；あるいは質量の含有質量％≧60%を有する下記ギンセノシド：ギンセノシドRb1、ギンセノシドRb2、ギンセノシドRb3、ギンセノシドRe、ギンセノシドRc、ギンセノシドRd、ギンセノシドRg1、ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRh1、ギンセノシドRh2、ギンセノシドRh3、ギンセノシドF1、ギンセノシドF2及びノトギンセノシドR1のいずれか1つを含む、を満たし；
及び/或は、工程（1）において、前記酸性水溶液中の酸性化合物は、クエン酸、酢酸、蟻酸、シュウ酸、コハク酸、サリチル酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、メタンスルホン酸、安息香酸、塩酸、硝酸、硫酸及びリン酸からなる群から選択され；
及び/或は、工程（1）において、前記酸性水溶液のpH値は、≦6.5であり、
及び/或は、工程（1）において、前記酸分解反応の温度は、60℃〜100℃であり前記酸分解反応の時間は、2時間〜48時間である、
請求項13記載のサポニンナノミセルの調製方法。
【請求項１５】
工程（a）においては、前記冷却は、-20℃〜30℃まで冷却することであり、前記静置の時間は、4時間以上であり；
及び/或は、工程（b）においては、前記アルカリは、有機塩基及び／又は無機塩基であり；前記有機塩基は、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム、トリエチルアミン、アンモニア、メタノールアミン、カリウム tert‐ブトキシド及びナトリウム tert‐ブトキシドからなる群から選択され、前記無機塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム及び炭酸水素カリウムからなる群から選択され；前記反応液の中の前記アルカリの濃度は、0.05mol/L〜1mol/Lであり；
及び/或は、工程（b）においては、前記アルカリ範囲までpHを調整する方法は、8〜14までpHを調整することであり；
及び/或は、工程（b）においては、前記沈殿物の乾燥を行ってから工程（c）を行い、前記乾燥させる方法は、30℃〜80℃で、乾燥による損失質量が5質量%未満になるまで乾燥することであり；
及び/或は、工程（c）においては、前記有機溶媒の使用量は前記沈殿物を溶解することができる量であり；
及び/或は、工程（c）においては、前記混合の温度は30℃〜80℃であり；
及び/或は、工程（d）においては、前記冷却の温度は-20℃〜5℃であり；
及び/或は、工程（d）においては、前記乾燥の方法は減圧下での濃縮及び乾燥であり；
及び/或は、工程S1においては、前記アルカリは、有機塩基及び／又は無機塩基であり；前記有機塩基は、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム、トリエチルアミン、アンモニア、メタノールアミン、カリウムtert‐ブトキシド及びナトリウムtert‐ブトキシドからなる群から選択され、前記無機塩基は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム及び炭酸水素カリウムからなる群から選択され；前記反応液の中の前記アルカリの濃度は、0.05mol/L〜1mol/Lであり；
及び/或は、工程S2においては、前記抽出の回数は1〜5回であり、前記n-ブタノールと前記溶液Aとの容積比は（1:0.5）〜（1:4）であり、前記n-ブタノールと前記n-ブタノールと洗浄水との容積比は（1:0.5）〜（1:4）であり、前記n-ブタノール層の溶媒を除去する操作は減圧下での濃縮及び乾燥である、請求項13記載の調製方法。
【請求項１６】
工程（2）においては、前記精製及び分離の方法が、カラムクロマトグラフィーであり；
及び/或は、工程（2）においては、前記サポニンモノマーが、ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRg4、ギンセノシドRg5、ギンセノシドRg6、ギンセノシドRh1、ギンセノシドRh2、ギンセノシドRh3、ギンセノシドRh4、ギンセノシドRf、ギンセノシドRs3、ギンセノシドRk1、ギンセノシドRk2、ギンセノシドRk3、ギンセノシドRk4、ギンセノシド、ギンセノシドF4、ノトギンセノシドR2及びノトギンセノシドT5からなる群から選択される、請求項13又は14記載の調製方法。
【請求項１７】
工程（2）においては、サポニンが溶解することができる前記有機溶媒が、メタノール、エタノール、N,N-ジメチルホルムアミド（DMF）、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択され、
及び/或は、工程（2）においては、前記混合の温度は30℃〜80℃であり、
及び/或は、工程（2）においては、前記有機溶媒を除去する方法は、30℃〜80℃、減圧下での濃縮及び乾燥である、請求項13又は14記載の調製方法。
【請求項１８】
以下の工程（1’）〜（4’）：
（1’）酢酸、水、及びサポニンの質量含有量が60％超のウコギ科及び/或はウリ科植物の抽出物を混合し、前記酢酸の用量はウコギ科及び/或はウリ科植物抽出物1g当たり4ml〜6mlであり、前記酸性水溶液の濃度は容積百分率40%〜60%であり、それから80℃〜90℃で3時間〜5時間の反応を行い、反応が終わってから反応液を冷却し、4〜24時間静置し、沈殿物を除去する工程；
（2’）工程（1’）において処理された反応液をNa2CO3で中和し、静置し、沈殿物を得る工程；
（3’）工程（2’）において得られる沈殿物と30℃〜80℃で無水エタノールとを混合し、5℃未満まで冷却して、4〜24時間静置し、沈殿物を除去し、その後減圧下で濃縮し、濃縮物を得て；（3’）における前記操作を1〜3回繰り返す工程；
（4’）工程（3’）において得られる濃縮物を乾燥させ、サポニンナノミセルを得る工程
を含み、
ここで、工程（1’）のサポニンが、以下のサポニン化合物：総ギンセノシドRa0、総ギンセノシドRa1、総ギンセノシドRa2、総ギンセノシドRa3、ギンセノシドRb1、ギンセノシドマロニル-Rb1、ギンセノシドRb2、ギンセノシドマロニル-Rb2、ギンセノシドRb3、ギンセノシドマロニル-Rb3、ギンセノシドRg1、ギンセノシドマロニル-Rg1、ギンセノシドRc、ギンセノシドマロニル-Rc、ギンセノシドF2、ギンセノシドRe、ギンセノシドRd、ギンセノシドマロニル-Rd、アメリカニンジンR1、ギンセノシドRs1、ギンセノシドRs2、ノトギンセノシドD、ノトギンセノシドK、ノトギンセノシドR1、ノトギンセノシドR3、ノトギンセノシドR4、ノトギンセノシドR6、ノトギンセノシドI、ノトギンセノシドFa、ノトギンセノシドFc、ノトギンセノシドFd、ノトギンセノシドFe、ノトギンセノシドT、ノトギンセノシドL、ノトギンセノシドO、ノトギンセノシドP、ノトギンセノシドQ、ノトギンセノシドS、ギペノシドIX及びギペノシドXVIIのいずれか一種である、或いは、
以下の工程（1″）〜（6″）：
（1″）クエン酸、水、及びサポニン質量含有量60％超のウコギ科及び/或はウリ科植物抽出物を混合し、前記クエンの用量はウコギ科及び/或はウリ科植物抽出物1g当たりで4ml〜6mlであり、前記クエン酸水溶液の濃度は容積百分率40%〜60%であり、それから80℃〜90℃で3時間〜6時間の反応を行なう工程；
（2″）工程（1″）から得られる反応液を15℃〜30℃に冷却し、反応溶液をNa2CO3で中和し、そして沈殿物を除去して溶液Aを得る工程；
（3″）工程（2″）において得られる溶液Aを水及びn-ブタノールと混合し、抽出及び分離を1〜4回行う工程；
（4″）工程（3″）で得られるn-ブタノール層を水で1〜3回洗浄し、減圧下で濃縮して固体物を得る工程；
（5″）工程（4″）において得られる固体物を55℃〜65℃で無水エタノールと混合し、5℃未満まで冷却されて、4〜24時間静置し、沈殿物を除去し、その後減圧下で濃縮し、濃縮物を得て、それから当該工程（5″）の操作を1〜3回繰り返す工程；
（6″）工程（5″）において得られる濃縮物を乾燥させ、サポニンナノミセルを得る工程を含み、
工程（1″）のサポニンが、以下のサポニン化合物：総ギンセノシドRa0、総ギンセノシドRa1、総ギンセノシドRa2、総ギンセノシドRa3、ギンセノシドRb1、ギンセノシドマロニル-Rb1、ギンセノシドRb2、ギンセノシドマロニル-Rb2、ギンセノシドRb3、ギンセノシドマロニル-Rb3、ギンセノシドRg1、ギンセノシドマロニル-Rg1、ギンセノシドRc、ギンセノシドマロニル-Rc、ギンセノシドF2、ギンセノシドRe、ギンセノシドRd、ギンセノシドマロニル-Rd、アメリカニンジンR1、ギンセノシドRs1、ギンセノシドRs2、ノトギンセノシドD、ノトギンセノシドK、ノトギンセノシドR1、ノトギンセノシドR3、ノトギンセノシドR4、ノトギンセノシドR6、ノトギンセノシドI、ノトギンセノシドFa、ノトギンセノシドFc、ノトギンセノシドFd、ノトギンセノシドFe、ノトギンセノシドT、ノトギンセノシドL、ノトギンセノシドO、ノトギンセノシドP、ノトギンセノシドQ、ノトギンセノシドS、ギペノシドIX及びギペノシドXVIIのいずれか一種である、請求項13記載の調製方法。
【請求項１９】
サポニンナノ正ミセルの調製方法であって、以下の工程：
サポニンナノ逆ミセル、サポニンを溶解することができる有機溶媒、及びサポニンナノ正ミセルの種結晶を混合し、有機溶媒を除去し、サポニンナノ正ミセルを得る工程を含み、ここで、前記サポニンナノ正ミセルの種結晶は、請求項1〜3のいずれか1項記載の式1(式中、R2が-H或は-OHであり、且つ、R1が-OH又は無置換のグリコシルである）で表されるサポニンの一種類或は多種類であり；前記サポニンナノ逆ミセルは、請求項11〜18のいずれか一項記載の調製方法により調製されるサポニンナノ逆ミセルであるか、又は、請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンナノミセル中のサポニンナノ逆ミセルである、方法。
【請求項２０】
前記サポニンナノ正ミセルの種結晶が、ギンセノシド(S)-Rg3、ギンセノシドRg5及びギンセノシドRk1からなる群から選択され、
及び/或は、前記サポニンナノ逆ミセルが、ギンセノシドRg2、ギンセノシドRk4及びギンセノシドRg6を含むサポニンナノミセルであり、
及び/或は、前記サポニンを溶解することができる有機溶媒が、メタノール、エタノール、N,N-ジメチルホルムアミド、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択され、
及び/或は、前記混合の温度は30℃〜80℃であり、
及び/或は、前記有機溶媒を除去する方法は、30℃〜80℃、減圧下での濃縮及び乾燥である、請求項19記載のサポニンナノ正ミセルの調製方法。
【請求項２１】
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ正ミセルである場合、前記サポニンナノミセルは、脂溶性化合物又は組成物の水性溶解補助剤として使用され、或いは、脂溶性化合物又は組成物の医薬担体として使用され、或いは、水に難溶性の活性成分を含む医薬組成物、健康ケア組成物又は化粧品組成物を調製するために使用され、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ逆ミセルである場合、前記サポニンナノミセルは、水溶性化合物又は組成物の脂質溶解補助剤として使用され、又は水溶性化合物又は組成物の医薬担体として使用される、請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンナノミセルの使用。
【請求項２２】
請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンナノミセルを含む、医薬組成物であって、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ正ミセルである場合、水に難溶性の活性成分をさらに含み、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ逆ミセルである場合、水溶性の活性化合物又は組成物をさらに含む、前記医薬組成物。
【請求項２３】
請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンナノミセルを含む、健康ケア組成物であって、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ正ミセルである場合、水に難溶性の活性成分をさらに含み、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ逆ミセルである場合、水溶性の活性化合物又は組成物をさらに含む、前記健康ケア組成物。
【請求項２４】
請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンナノミセルを含む、化粧品組成物であって、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ正ミセルである場合、水に難溶性の活性成分をさらに含み、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ逆ミセルである場合、水溶性の活性化合物又は組成物をさらに含む、前記化粧品組成物。
【請求項２５】
請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンナノミセルを含む溶解補助剤であって、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ正ミセルである場合には脂溶性化合物又は組成物の水性溶解補助剤であり、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ逆ミセルである場合には水溶性化合物又は組成物の脂質溶解補助剤である、前記溶解補助剤。
【請求項２６】
請求項1〜10のいずれか一項記載のサポニンナノミセルを含む医薬担体であって、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ正ミセルである場合には脂溶性化合物又は組成物の医薬担体であり、
前記サポニンナノミセルがサポニンナノ逆ミセルである場合には水溶性化合物又は組成物の医薬担体である、前記医薬担体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は製薬分野に関し、具体的にサポニンナノミセルの種類、並びにその調製方法、応用及び医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
先行技術
両親媒性はポリマーミセルの一般的な特徴であり、すなわち、ポリマーミセルは同時に親水基と疎水基を有する。一般的に、疎水基はポリマーミセルの中にコアを形成し、親水基は外で殻を形成し、重合して形成されたポリマーはポリマーミセルの疎水コアで脂溶性薬物成分を包むことによって、薬物を載せたポリマーミセルを形成することができ、また、それらの末端親水基により、水或いはアルコールに溶解させることができる。かかる薬物を載せたポリマーミセルは、血液の中における薬物の循環時間及び生物半減期を延長することができ、病変部位への薬物の蓄積を増加することと不良反応を減少することができ、特殊な担体、抗体或いは配位子との連接によって、標的細胞の受容器と結合し、治療効果を上げることができる。従来のミセルを薬物の担体として利用することに関する研究は、ほとんどポリマーミセルを利用して行うことである。ポリ‐Ｌ‐グルタミン酸、ポリ‐Ｌ‐リジン、多糖類ポリマーであるキチン質、ポリマーであるキトサンなどは、これらのポリマーミセルの代表物である。
【０００３】
然し、従来の研究では、ポリマーミセルを薬物担体として利用して薬物成分を安全的に搬送する効果が良くない。ポリマーミセルの薬物搭載率が低く、且つ、ポリマーミセルの調製や薬物搭載の手順が複雑であるため、大規模生産には限界がある。そして、いくつかの合成材料は細胞毒性があって、目標分布が悪くて標的の要求を満足させることができないことや、保存中の安定性が悪くて、ミセル粒径の増加或いは薬物分解の可能性があることや、放出中に即時放出減少が発生する可能性があることなどの欠点がある。脂溶性薬物の親水性問題を解決するため、溶解補助剤或いはポリマーミセルが使用されている。例えば、溶解し難い活性成分を溶解するために、添加剤を化粧品（例えばTweenシリーズに属するTween80が通常に使用されている）に加えることがある。然し、これらの添加剤は、通常一定の毒性及び／又は副作用を有する。Tween80中の脂溶性成分は、しばしば容易に参加される不飽和脂肪酸を含み、多くの毒性成分を生産し、そして生産された毒素及び副作用は、製品自身がもたらす利益よりも大きい。医学分野において、ショック、呼吸困難、低血圧、血管性浮腫、風疹などのアレルギー反応、が、Tween80は注射により引き起こす可能性があることが確認されている。これらの有害反応は、ヒト臨床試験において、大変に深刻であり、死亡の報道もある。従って、Tween80の安全使用量は、薬品、食品、健康食品において厳格に制限されている。従来技術における他の種類のポリマーミセルも、調製や生物学的利用度などに対して同様の問題が多少存在している。
【０００４】
従って、上述の問題を解決するために、薬物搭載能力及び生体適合性の高い、新規且つ有効的なミセルの開発が急務であり、必要とされている。この現象を解決する必要性が存在する。
【０００５】
サポニン化合物は、天然的及び人工半合成的なサポニン化合物を含む。現在、ギンセノシドやノトギンセノシドなどの天然サポニン化合物に関する修飾技術は成熟しており、多くの半合成サポニン誘導体が得られている。例えば、出願番号CN200910217947.7、公表番号CN101824065Aである特許文献にはギンセノシドの二次配糖体Rh1を修飾することが開示され、出願番号CN201110054137.1、公表番号CN102174191Aである特許文献にはポリエチレングリコールの使用により、ギンセノシドのようなサポニン化合物の修飾方法も開示され；出願番号CN2010548971.1、公表番号CN102603847Aである特許文献にはギンセノシドRh2の脂肪酸エステル化合物の調製方法が開示され；出願番号CN201210207368.6、公表番号CN102766187Aである特許文献には四種類のギンセノシド化合物-Kのエステル誘導体及びそれらの調製方法が開示されており「ギンセノシドRg1 PEGの修飾及び安定性」（劉梅、王莉、胡凱莉、奉建芳、中国漢方雑誌、第37巻、第10号、2012年5月、1378〜1382頁）にはギンセノシドRh1の修飾方法が開示され、「ギンセノシドRh2及びその誘導体の研究進展」（曹満、張潔、宋新波、馬百平、世界科学技術―漢方医学の現代化、第14巻第6号、2012）にはギンセノシドRH2の誘導体及びその調製方法が開示されている。
【０００６】
逆ミセルは、非極性有機溶媒の中に一定の数量の両親媒性物質で自発的に形成される集合体（自己組織体）である。ここで、両親媒性物質の極性基がミセル内部へ、非極性基がミセル外部の連続的な油相に向き、逆ミセルの内部の極性環境によって、水溶性物質を可溶化することができる。逆ミセルは薬物の担体として、薬物の安定性を高めることができ、体液と接触して液晶構造に変わることによって、薬物の溶出を止めて、徐放性及び／又は放出制御薬物送達を実現する。逆ミセルはまた、経皮薬物送達システムの担体としても用いることができる。一方で、逆ミセルは、ナノ粒子製剤技術として用いられ、そして調製されたナノ粒子は粒子径が小さく、粒子径分布が狭いという特徴を持つ。最も一般的に用いられる逆ミセルは、レシチン逆ミセルとジ-2-エチルヘキシルスルホコハク酸ナトリウム（AOT）逆ミセルである。
【０００７】
セグメント化コポリマーミセル及び／又は樹状ポリマーミセルに関する多くの総説は存在するが、製薬の分野における逆ミセルに関する研究及び文献は少ない。特に、動物、特にヒトにおけるさらなる研究及び／又は評価における徐放性及び放出制御薬物送達システムとしての逆ミセル、並びに薬物放出機構、薬物動態的特徴及び毒物学の態様における逆ミセルの使用は、成熟していない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の内容
本発明は、脂溶性薬物が水に溶解し難い或いは水溶性薬物が脂質系に溶解し難いという問題を解決し、従来のポリマーミセル或いは逆ミセルの薬物搭載能力が不足、生物適合性が悪いという問題を克服するものであり、サポニンナノミセルの種類並びにその調製方法、応用、及び医薬組成物を提供する。
【０００９】
本発明の発明者は多くの実験及び繰り返される検証により、ウコギ科（Araliaceae）の植物における根、茎、葉、実に由来する、または人工合成される特定の構造を有する１又は複数のギンセノシド及び／或いはノトギンセノシドを、サポニンナノミセルを調製するために作ることができ、これを可溶化剤又は抗腫瘍医薬成分、不溶性化粧成分及び不溶性健康食品成分の化合物調製物として用いることができることを発見した。ここで、正ミセルは水に難溶な脂溶性薬物成分の薬物搭載ミセルとして用いることができ、用いられるギンセノシド及び／又はノトギンセノシド成分は天然であり、毒性と副作用を有しないので、効果は優れており；同時に、これらのサポニンから調製される逆ミセルは水溶性薬物又は水溶性成分の溶解補助剤又は化合物調製物として用いることができ、そして水溶性薬物或いは成分の薬物搭載ミセルとして用いることもできる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図1は実施例2における反応物の各成分の濃度の時間による変化関係図である。
【図２】図2は適用例1の薬物搭載ギンセノシドナノミセルにおける粒子径分布図である。
【図３】図3は適用例1〜2の薬物搭載ミセル溶液及びその対照のイメージング図である。
【図４】図4は適用例7の薬物搭載ギンセノシドナノミセルにおける粒子径分布図である。
【図５】図5は適用例8の薬物搭載ギンセノシドナノミセルにおける粒子径の分布図である。
【図６】図6は適用例12のレスベラトロール薬物搭載ミセル溶液及びその対照のイメージング図である。
【図７】図7は5％のグルコース溶液中の適用例1のギンセノシドナノミセルにおける粒子径分布図である。
【図８】図8は5％のグルコース溶液中の適用例2のギンセノシドナノミセルにおける粒子径分布図である。
【図９】図9は実施例1のHSE型ギンセノシドナノミセルの透過型電子顕微鏡像である。
【図１０】図10は実施例2のRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルの透過型電子顕微鏡像である。
【図１１】図11は実施例5のRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルの透過型電子顕微鏡像である。
【図１２】図12は実施例1のパクリタキセル薬物搭載ギンセノシドナノミセルの透過型電子顕微鏡像である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明は、以下の技術的解決策により、上記の技術的課題を解決する。
この発明は式1；
【００１２】
【化１】
0005952494.tif 000002
［式中、R1とR2はそれぞれ独立して-H或いは親水基であり、R3は-H或いは-OHであり、R4は親油基である］
により表される一種類或いは多種類のサポニンを含む、サポニンナノミセルを提供する。
【００１３】
本発明においては、前記親水基は当該分野における一般的な意味の親水基である。ここで、前記親水基は、好ましくは、-OH、グリコシル、修飾されたグリコシル、脂肪族アシル基、アミノ酸基、有機酸エステル基及びサルフェートである。ここで、好ましくは、修飾されたグリコシルは、ポリマー修飾されたグリコシル基、脂肪族アシル基修飾されたグリコシル基、アミノ酸基修飾されたグリコシル又は有機酸エステル基修飾されたグリコシルである。
【００１４】
本発明においては、好ましくは、R1とR2は同時に-Hではない。
【００１５】
本発明においては、より好ましくは、R1とR2はそれぞれ独立して下記の基の1つである：
（1）-H、-OH；ここで、-Hは水素基であり、-OHは水酸基であり；
（2）R6、ここで、R6は下記の基の1つである：
-O-Glc、-O-Rha、-O-Lyx、-O-Xyl、-O-Ara(p)、-O-Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc（数字は炭素の位置を表す。以下同じ）、-O-Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(4→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara(p)、ここでGlcはグルコピラノシルであり、Xylはキシロピラノシルであり、Rhaはラムノピラシルであり、Ara（p）はアラビノピラノシルであり、Ara(f)はアラビノフラノシルであり、Lyxはリキソース基であり；
（3）R7、R7は前記R6における一個以上の水酸基がR5で置き換えられた場合に形成される基であり、ここでR5は下記の基の1つである：
I）-mPEG、-Z-mPEG、-mPEO、-Z-PEO、-mPVP、-Z-PVP、-mEPEG或いは-Z-EPEG；ここで、mはH、アルキル或いはアシルであり、Zは-CO(CH2)aCO-、-NH(CH2)aCO-、-NH(CH2)bX-或いは-CO-Ar-CH2-であり；ここで、XはO、S或いはNHであり、Arはアリールであり、aは1〜8の整数であり、bは1〜10の整数であり；
II）C4〜C22の直鎖脂肪族アシル基、リン酸基、コハク酸エステル基、n-ブチル酸エステル基、スルホン酸基、リンゴ酸エステル基或いは硫酸ナトリウム塩、
III）Boc-グリシン（Gly）、Boc-アラニン（Ala）、Boc-アルギニン（Arg）、Boc-リジン（Lys）、Boc-セリン（Ser）、アセチルフェニルアラニン（Ac-Phe-OH）、アセチルプロリン（Ac-Pro-OH）、アセチルフェニルアラニン（Ac-Phe-OH）、アスパラギン（Asn）、アスパラギン酸（Asp）、システイン（Cys）、グルタミン（Gln）、グルタミン酸（Glu）、ヒスチジン（His）、イソロイシン（Ile）、ロイシン（Leu）、メチオニン（Met）、フェニルアラニン（Phe）、プロリン（Pro）、トレオニン（Thr）、トリプトファン（Trp）、チロシン（Tyr）或いはバリン（Val）のうちの1つのカルボキシルを脱水素化することにより形成される基であり、
（4）-O-PEO、-O-PVP、-O-PEG、-O-MPEG、-O-EPEG、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Mal或は-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ac、ここでMalはマロニルであり、Acはアセチルであり、PEGはポリエチレングリコールであり、PEOはポリオキシエチレンであり、MPEGは末端がモノメトキシである（end-monomethoxy）ポリエチレングリコールであり、EPEGは末端がエポキシ（end-epoxy）であるポリエチレングリコールであり、PVPはポビドンであり、
（5）R8、R8は下記の基の1つである：
I）-mPEG、-Z-mPEG、-mPEO、-Z-PEO、-mPVP、-Z-PVP、-mEPEG或いは-Z-EPEG、ここで、mはH、アルキル或いはアシルであり、Zは-CO(CH2)aCO-、-NH(CH2)aCO-、-NH(CH2)bX-或いは-CO-Ar-CH2-であり、ここでXはO、S或いはNHであり、Arはアリールであり、aは1〜8の整数であり、bは1〜10の整数であり、
II）C4〜C22の直鎖脂肪族アシル基、リン酸基、コハク酸エステル基、n-ブチル酸エステル基、スルホン酸基、リンゴ酸エステル基或いは硫酸ナトリウム塩、
III）Boc-グリシン（Gly）、Boc-アラニン（Ala）、Boc-アルギニン（Arg）、Boc-リジン（Lys）、Boc-セリン（Ser）、アセチルフェニルアラニン（Ac-Phe-OH）、アセチルプロリン（Ac-Pro-OH）、アセチルフェニルアラニン（Ac-Phe-OH）、アスパラギン（Asn）、アスパラギン酸（Asp）、システイン（Cys）、グルタミン（Gln）、グルタミン酸（Glu）、ヒスチジン（His）、イソロイシン（Ile）、ロイシン（Leu）、メチオニン（Met）、フェニルアラニン（Phe）、プロリン（Pro）、トレオニン（Thr）、トリプトファン（Trp）、チロシン（Tyr）或いはバリン（Val）のうちの1つのカルボキシルを脱水素化することにより形成される基であり、
且つ、R1とR2は同時に-Hではない。
【００１６】
ここで、好ましくは、前記PEG、PEO、PＶP及びEPEGの分子量はそれぞれ独立して200〜20000である。
【００１７】
ここで、前記直鎖脂肪族アシル基は天然の飽和或いは不飽和の直鎖脂肪族アシル基であり、人工合成された飽和或いは不飽和の直鎖脂肪族アシル基であってもよく、好ましくはステアリル或はパルミチルである。
【００１８】
ここで、具体的に、-O-Glcにおいては、Glcの構造は
【化２】
0005952494.tif 000003
であり、-O-Ara(p)においては、Ara(p)の構造は
【化３】
0005952494.tif 000004
であり、-O-Lyxにおいては、Lyxの構造は
【化４】
0005952494.tif 000005
であり、-O-Ara(f)においては、Ara(f)の構造は
【化５】
0005952494.tif 000006
であり、-O-Rhaにおいては、Rhaの構造は
【化６】
0005952494.tif 000007
であり、-O-Xylにおいては、Xylの構造は
【化７】
0005952494.tif 000008
であり、Malの構造は
【００１９】
【化８】
0005952494.tif 000009
である。
【００２０】
ここで、R1とR2がそれぞれ独立してR7である場合、R7は前記R6における一個以上の水酸基をR5で置き換えられた場合に形成される基であり、
具体的には、R6が-O-Glc、-O-Rha、-O-Lyx、-O-Xyl、-O-Ara(p)或は-O-Ara(f)である場合に、好ましくは、R7はR6における1〜4個の水酸基がR5で置き換えられた場合に形成される基であり、
R6が-O-Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Lyx或は-O-Glc(6→1)Lyxである場合に、好ましくは、R7はR6における1〜7個の水酸基がR5で置き換えられた場合に形成される基であり、
R6が-O-Glc(2→1)Glc(4→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(f)、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara(f)、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara(p)、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara(f)或は-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara(p)である場合に、好ましくは、R7はR6における1〜10個の水酸基がR5で置き換えられた場合に形成される基である。
【００２１】
本発明においては、前記親油基は当該分野における一般的な意味の親油基である。本発明においては、R4は、好ましくは、式2、式3或は式4：
【化９】
0005952494.tif 000010
［式中、R9、R10及びR11はそれぞれ独立してC1〜C3のアルキルであり、dは1〜3の整数である］
【化１０】
0005952494.tif 000011
［式中、R12、R13及びR14はそれぞれ独立してC1〜C3のアルキルであり、eは1〜3の整数である］
【化１１】
0005952494.tif 000012
［式中、R15及びR16はそれぞれ独立してC1〜C3のアルキルであり、fは1〜3の整数である］
で表される基である。
【００２２】
本発明においては、R4は、最も好ましくは、式2-1、式3-1或は式4-1：
【化１２】
0005952494.tif 000013
で表される基である。
【００２３】
本発明においては、好ましくは、前記サポニンナノミセルにおいては、式1により表されるサポニンはA型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンであり、或は、好ましくは、前記サポニンナノミセルにおいては、式1により表されるサポニンはB型サポニン及び／或はC型サポニンであり、ここで、前記A型サポニンは、式1-1により表されるサポニンの一種類或は多種類であり、前記B型サポニンは、式1-2により表されるサポニンの一種類或は多種類であり、前記C型サポニンは、式1-3により表されるサポニンの一種類或は多種類である。
【００２４】
【化１３】
0005952494.tif 000014
【００２５】
ここで、前記サポニンナノミセルにおいては、式1により表されるサポニンはA型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンである場合、前記A型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンにおけるモル比は、好ましくは、（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）である。
【００２６】
本発明においては、最も好ましくは、前記サポニンナノミセルにおいては、式1により表されるサポニンはB型サポニン及びC型サポニンであり、且つ、前記サポニンナノミセルにA型サポニンが含有されていない。
【００２７】
本発明のサポニンナノミセルは、サポニンナノ正ミセル及びサポニンナノ逆ミセルという二種類に分けることができる。ここで、サポニンナノ正ミセルは脂溶性薬物成分を包むことができる特性を有し、それに、サポニンナノ逆ミセルは水溶性薬物成分を包むことができる特性を有する。
【００２８】
本発明における一つのサポニンナノミセルにおいて、式1により表されるサポニンの一種類或は多種類においては、R2が-H或は-OHであり、且つR1が-OH以外の親水基である場合に、該サポニンナノミセルはサポニンナノ正ミセル、例えばRg5型ギンセノシドナノ正ミセル、Rg5/Rk1型ギンセノシドナノ正ミセル、Rg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノ正ミセルであり、
ここで、式1により表されるサポニンの一種類或は多種類において、R1が-H或は-OHであり、且つR2が-OH以外の親水基である場合に、該サポニンナノミセルはサポニンナノ逆ミセル、例えば、Rk4型ギンセノシドナノ逆ミセル、Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセル、Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルであり、
ここで、式1により表されるサポニンの一種類或は多種類において、R1が不完全に-H或は-OHであり、R2が不完全に水酸基である場合に、該サポニンナノミセルはサポニンナノ正ミセル、例えば、HSE型ギンセノシドナノ正ミセル、Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ正ミセルである。
【００２９】
本発明においては、前記サポニンナノミセルは、一種類或は多種類の式1により表されるサポニンから形成されることができる。以下、「質量含有率」とは、各物質が前記サポニンナノミセルの総質量に占める質量百分率の含有量を意味し、「モル含有量」とは、各物質が前記サポニンナノミセルの総質量に占めるモル百分率の含有量を意味する。
【００３０】
前記サポニンナノミセルは一種類の式1により表されるサポニンから形成される場合に、前記サポニンは前記A型サポニン、B型サポニン又はC型サポニンであり、前記サポニンの質量含有量は70％以上であり、好ましくは80％以上であり、より好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。例えば、上述サポニン含有量により、サポニンナノミセルは、それぞれギンセノシドRg5、ギンセノシドRk1、ギンセノシドRk4、ギンセノシドRg6により形成され、ここでギンセノシドRg5及びギンセノシドRk1から形成されるギンセノシドナノミセルはギンセノシドナノ正ミセルであり、ギンセノシドRk4及びギンセノシドRg6から形成されるギンセノシドナノミセルはギンセノシドナノ逆ミセルである。
【００３１】
或は、前記サポニンナノミセルは、前記B型サポニン或は前記C型サポニンから形成され、前記サポニンのモル含有量は70％以上であって、好ましくは80％以上であり、更に好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００３２】
前記サポニンナノミセルは二種類の式1により表されるサポニンから形成される場合に、即ち、前記サポニンは前記A型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンの中におけるいずれか二種類のサポニンである場合に、該二種類のサポニンの質量含有量はそれぞれ25％以上であり、好ましくは、該二種類のサポニンの質量比率は0.8〜1.2であり、且つ、該二種類のサポニンの総質量含有量は90％以上であり、更に好ましくは、該二種類のサポニンの質量比率は1:1であり、且つ、該二種類のサポニンの総質量含有量は95％以上である。例えば、上述サポニン含有量に従って、Rg5/Rk1型ギンセノシドナノ正ミセルはギンセノシドRg5とギンセノシドRk1から形成され、Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルはギンセノシドRk4及びギンセノシドRg6から形成される。
【００３３】
或は、前記サポニンミセルは前記B型サポニン及び前記C型サポニンから形成され、前記B型サポニン及びC型サポニンのモル含有量はそれぞれ25％以上であり、前記B型サポニンとC型サポニンとの総モル含有量は70％以上であり、好ましくは、前記B型サポニンと前記C型サポニンとのモル比率は0.8〜1.2であり、且つ、前記B型サポニンとC型サポニンとの総モル含有量は90％以上であり、更に好ましくは、前記B型サポニンとC型サポニンとのモル比率は1:1であり、且つ、前記B型サポニンとC型サポニンとの総モル含有量は95％以上である。
【００３４】
前記サポニンナノミセルが三種類の式1により表されるサポニンから形成された場合に、即ち、前記サポニンが前記A型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンである場合に、前記A型サポニン、B型サポニン及びC型サポニンの質量含有量はそれぞれ15%〜45%であり、前記A型サポニンと、B型サポニンと、C型サポニンとの総質量含有量は70％以上であり、
【００３５】
好ましくは、前記A型サポニンの質量含有量は15%〜25%であり、前記B型サポニンの質量含有量は35%〜45%であり、前記C型サポニンの質量含有量は15%〜25%であり、且つ、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、前記C型サポニンとの総質量含有量は80％以上であり、更に好ましくは、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、前記C型サポニンとの質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、前記C型サポニンとの総質量含有量は90％以上であり、最も好ましくは、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、前記C型サポニンとの質量比率は1:2:1であり、且つ、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、前記C型サポニンとの総質量含有量は95％以上である。
【００３６】
例えば、上述サポニン含有量により、Rg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノ正ミセルは、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRg5及びギンセノシドRk1より形成され、Rh2/Rh3/Rk2型ギンセノシドナノ正ミセルはギンセノシドRh2、ギンセノシドRh3及びギンセノシドRk2より形成され、そしてRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルはギンセノシドRg2、ギンセノシドRk4及びギンセノシドRg6より形成される。別の例では、上述サポニン含有量により、A型サポニン：ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRh1、B型サポニン：ギンセノシドRg5、ギンセノシドRk4、ギンセノシドRh4、及びC型サポニン：ギンセノシドRk1、ギンセノシドRg6、ギンセノシドRk3は、共にHSE型ギンセノシドナノ正ミセルを形成する。
【００３７】
或は、前記サポニンミセルは前記A型サポニン、前記B型サポニン及び前記C型サポニンから形成され、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、前記C型サポニンとのモル含有量はそれぞれ15%〜45%であり、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、C型サポニンとの総モル含有量は70％以上であり、
【００３８】
好ましくは、前記A型サポニンのモル含有量は15%〜25%であり、前記B型サポニンのモル含有量は35%〜45%であり、前記C型サポニンのモル含有量は15%〜25%であり、且つ、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、C型サポニンとの総モル含有量は80％以上であり、更に好ましくは、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、C型サポニンとのモル比率は（0.8〜1.2）: （1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、C型サポニンとの総モル含有量は90％以上であり、最も好ましくは前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、C型サポニンとのモル比率は1:2:1であり、前記A型サポニンと、前記B型サポニンと、C型サポニンとの総モル含有量は95％以上である。
【００３９】
本発明においては、前記サポニンナノ正ミセルは一般的なポリマーミセルのように両親媒性を有し、即ち、親水基と疎水基の両方を有する。コアは、疎水基により中心に形成され、R1及び/或はR2は親水基であり、ミセルの外側に並んで殻を形成し、該サポニンナノミセルは、ミセルの疎水性コア中に脂溶性薬物成分を包むことにより、薬物を載せたミセルを形成することができ、また、それらの親水基末端より水或いはアルコールに溶解することができる。該サポニンナノ正ミセルは脂溶性薬物分子をミセルの内部に包むことができ、血液中の薬物の循環時間及び生物半減期を延長させ、病変部位への薬物の蓄積を増加させ、有害反応を減少させることができ、特殊な担体、抗体或いは配位子との連接によって、標的細胞の受容器と結合して、治療効果を改善することができる。
【００４０】
本発明においては、前記サポニンナノ逆ミセルは一般的なポリマー逆ミセルのように、両親媒性を有し、即ち、親水基と疎水基両方を有する。コアは、親水基により中央に形成され、R1及び/或はR2は親水基であり、ミセルの内側に並んで親水性コアを形成し、該サポニンナノミセルはミセルの親水性コアに水溶性薬物成分を包むことによって、薬物を載せたミセルを形成することができ、また、それらの末端疎水基をエステル或は油に溶解することができる。該サポニンナノ逆ミセルは水溶性薬物分子をミセルの内部に包むことができ、薬物の血液の中における循環時間及び生物半減期を延長させ、病変部位への薬物の蓄積を増加させ、有害反応を減少させることができ、特殊な担体、抗体或いは配位子との連接によって、標的細胞の受容器と結合して、治療効果を改善することができる。
【００４１】
本発明においては、式1で表されるようなサポニンは、主にギンセノシド及び/或はノトギンセノシドの原料に由来し、例えば、ウコギ科（Araliaceae）或はウリ科アマチャヅル属（Gynostemma Bl. Cucurbitaceae）の植物から調製されるギンセノシド、ノトギンセノシド及びその類似体である。前記サポニンナノミセルにおいては、式1で表されるようなサポニンを除き、残る成分は、必須ではない成分として考えられ、一般的には避けられない不純物であり、通常、A型サポニン、B型サポニン及びC型サポニン以外の他種類の参サポニン及び/或はノトギンセノシドであり、即ち、該化合物は式1により表されない。以下、これらは「他種類のサポニン」と明確に称される。
【００４２】
以下は、式1で表されるようなサポニンが容易に工業或は実験室で調製されるという視点から、以下の8種類の最も代表的なサポニンナノミセルを好ましい実施形態として、詳細に述べる。但し、本発明における請求の範囲はこれらの8種類のサポニンミセルに制限されない。
【００４３】
以下の好ましい実施形態1〜8により言及される式1により表されるギンセノシドの特定の名称と分子式を以下に示す。
【００４４】
【化１４】
0005952494.tif 000015
【００４５】
【化１５】
0005952494.tif 000016
【００４６】
【化１６】
0005952494.tif 000017
【００４７】
【化１７】
0005952494.tif 000018
【００４８】
【化１８】
0005952494.tif 000019
【００４９】
【化１９】
0005952494.tif 000020
【００５０】
【化２０】
0005952494.tif 000021
【００５１】
【化２１】
0005952494.tif 000022
【００５２】
【化２２】
0005952494.tif 000023
【００５３】
【化２３】
0005952494.tif 000024
【００５４】
【化２４】
0005952494.tif 000025
【００５５】
【化２５】
0005952494.tif 000026
【００５６】
本発明における好ましい実施形態1においては、前記サポニンナノミセルは、Rg5型ギンセノシドナノ正ミセルであり、これはギンセノシドRg5を含み、ギンセノシドRg5の質量含有量は50％以上である。
【００５７】
ここで、前記ギンセノシドRg5の質量含有量は、好ましくは、70％以上であり、更に好ましくは、85％以上であり、更に好ましくは、90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００５８】
或は、前記サポニンナノミセルはギンセノシドRg5を含有し、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は50％以上であり、好ましくは、70％以上であり、更に好ましくは、85％以上であり、更に好ましくは、90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００５９】
ここで、前記ギンセノシドRg5は上述のギンセノシド原料の酸分解及び精製により得られるモノマーのギンセノシドRg5である。
【００６０】
好ましい実施形態1においては、前記ギンセノシドRg5以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【００６１】
前記ギンセノシドRg5の他にも、サポニンナノ正ミセルは、ギンセノシドRk1、ギンセノシドRs5、ギンセノシドRk2、ギンセノシドRh3、ギンセノシドRs4或はR1が親水基であり、且つ、R2が-H或は-OHのギンセノシドであるいずれか1つの前記B型サポニン及び前記C型サポニンによっても形成され得る。
【００６２】
例えば、本発明の好ましい実施形態1の一つの改変された形態では、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRk1を含むRk1型ギンセノシドナノ正ミセルであり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量は50％以上である。
【００６３】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRk1の質量含有量は70％以上であり、更に好ましくは85％以上であり、更に好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００６４】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRk1を含有し、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は50％以上であり、好ましくは70％以上であり、更に好ましくは85％以上であり、更に好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００６５】
ここで、前記ギンセノシドRg1は、上述のギンセノシド原料の酸分解及び精製により得られるモノマーのギンセノシドRg1である。
【００６６】
好ましい実施形態1においては、前記ギンセノシドRg1以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【００６７】
本発明の好ましい実施形態2においては、前記サポニンナノミセルは、Rk4型ギンセノシドナノ逆ミセルであり、これはギンセノシドRk4を含み、ギンセノシドRk4の質量含有量は50％以上である。
【００６８】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRk4の質量含有量は70％以上であり、更に好ましくは85％以上であり、更に好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００６９】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRk4を含有し、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は50％以上であり、好ましくは、70％であり、更に好ましくは85％以上であり、更に好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００７０】
ここで、前記ギンセノシドRk4は、上述のギンセノシド原料の酸分解及び精製により得られるモノマーのギンセノシドRk4である。
【００７１】
好ましい実施形態2においては、前記ギンセノシドRk4以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【００７２】
前記ギンセノシドRk4の他にも、サポニンナノ逆ミセルは、ギンセノシドRk3、ギンセノシドF4、ギンセノシドRs7、ギンセノシドRh4、ギンセノシドRs6、ギンセノシドRg6、ノトギンセノシドT5或はR1が-H或は-OH、且つ、R2は親水基であるギンセノシドであるいずれか１つの前記B型サポニン及び前記C型サポニンによっても形成され得る。
【００７３】
例えば、本発明の好ましい実施形態2の一つの改変された形態では、前記サポニンナノミセルは、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRg6を含むRg6型ギンセノシドナノ逆ミセルであり、前記ギンセノシドRg6の質量含有量は50％以上である。
【００７４】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg6の質量含有量が70％以上であり、更に好ましくは85％以上であり、更に好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００７５】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRk6を含有し、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は50％以上であり、好ましくは70％以上であり、更に好ましくは85％以上であり、更に好ましくは90％以上であり、最も好ましくは95％以上である。
【００７６】
ここで、前記ギンセノシドRg6は、上述のギンセノシド原料の酸分解及び精製により得られるモノマーのギンセノシドRg6である。
【００７７】
好ましい実施形態2における一つの改変された形態においては、前記ギンセノシドRg6以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【００７８】
本発明の好ましい実施形態3においては、前記サポニンナノミセルは、Rg5/Rk1型ギンセノシドナノ正ミセルであり、これはギンセノシドRg5とギンセノシドRk1を含み、ギンセノシドRg5の質量含有量は15％以上であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量は15％以上であり、且つ、前記ギンセノシドRg5とギンセノシドRk1との総質量含有量は50％以上である。
【００７９】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg5の質量含有量が25%以上であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が25%以上であり、且つ、前記ギンセノシドRg5とギンセノシドRk1との総質量含有量が80％以上であり、
【００８０】
或いは、好ましくは、前記ギンセノシドRg5の質量含有量が25%〜60%であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が25%〜60%であり、且つ、前記ギンセノシドRg5とギンセノシドRk1との総質量含有量が70％以上であり、
【００８１】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg5の質量含有量が35%〜50%であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が35%〜50%であり、且つ、前記ギンセノシドRg5とギンセノシドRk1との総質量含有量が80％以上であり、
【００８２】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との質量比率は0.8〜1.2であり、且つ、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総質量含有量が80％以上であり、
【００８３】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との質量比率は0.8〜1.2であり、且つ、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総質量含有量が90％以上であり、
【００８４】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との質量比率は1:1であり、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総質量含有量が95％以上である。
【００８５】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1とを含有し、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は15％以上であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は15％以上であり、且つ前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が50％以上である。
【００８６】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は25％以上であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は25％以上であり、且つ前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が80％以上であり、
【００８７】
或は、好ましくは、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は25%〜60%であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は25%〜60%であり、且つ前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が70％以上であり、
【００８８】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は35%〜50%であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は35%〜50%であり、且つ前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が80％以上であり、
【００８９】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1とのモル比率は0.8〜1.2であり、且つ、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が80％以上であり、
【００９０】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1とのモル比率は0.8〜1.2であり、且つ、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が90％以上であり、
【００９１】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1とのモル比率は1：1であり、且つ、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が95％以上である。
【００９２】
好ましい実施形態3においては、前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【００９３】
ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1の他にも、サポニンナノ正ミセルは、R1が親水基であり、且つ、R2が-H或は-OHである前記B型サポニン及び前記C型サポニンいずれか2つによっても形成され得る。
【００９４】
本発明の好ましい実施形態4においては、前記サポニンナノミセルは、Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルであり、これはギンセノシドRk4とギンセノシドRg6を含み、ギンセノシドRk4の質量含有量は15％以上であり、前記ギンセノシドRg6の質量含有量は15％以上であり、且つ、前記ギンセノシドRk4とギンセノシドRg6との総質量含有量は50％以上である。
【００９５】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRk4の質量含有量が25%〜60%であり、前記ギンセノシドRg6の質量含有量が25%〜60%であり、且つ、前記ギンセノシドRk4とギンセノシドRg6との総質量含有量が70％以上であり、
【００９６】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRk4の質量含有量が35%〜50%であり、前記ギンセノシドRg6の質量含有量が35%〜50%であり、且つ、前記ギンセノシドRk4とギンセノシドRg6との総質量含有量が80％以上であり、
【００９７】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との質量比率は0.8〜1.2であり、且つ、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総質量含有量が90％以上であり、
【００９８】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との質量比率は1:1であり、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総質量含有量が95％以上である。
【００９９】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRk4とギンセノシドRg6とを含有し、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は15％以上であり、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は15％以上であり、且つ、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が50％以上である。
【０１００】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は25％〜60%であり、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は25％〜60%であり、且つ前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が70％以上であり、
【０１０１】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は35%〜50%であり、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は35%〜50%であり、且つ、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が80％以上であり、
【０１０２】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6とのモル比率は0.8〜1.2であり、且つ、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が90％以上であり、
【０１０３】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6とのモル比率は1：1であり、且つ、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が95％以上である。
【０１０４】
好ましい実施形態4においては、前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【０１０５】
ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6の他にも、R1は-H或は-OHであり、且つ、R2が親水基である前記B型サポニン及び前記C型サポニンのいずれかの二種類によっても形成され得る。
【０１０６】
本発明の好ましい実施形態5においては、前記サポニンナノミセルは、Rg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノ正ミセルであり、これはギンセノシドRg3とギンセノシドRg5とギンセノシドRk1とを含み、前記ギンセノシドRg3の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総質量含有量が70％以上である。
【０１０７】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg3の質量含有量が15%〜25%であり、前記ギンセノシドRg5の質量含有量が35%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が15%〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総質量含有量が80％以上であり、
【０１０８】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総質量含有量が90％であり、
【０１０９】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との質量比率は1:2:1であり、
【０１１０】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRg3とギンセノシドRg5とギンセノシドRk1とを含有し、前記ギンセノシドRg3のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が70％以上であり、
【０１１１】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg3のモル含有量は15%〜25%であり、前記ギンセノシドRg5のモル含有量は35％〜45%であり、前記ギンセノシドRk1のモル含有量は15％〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が80％以上であり、
【０１１２】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1とのモル比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1との総モル含有量が90％であり、
【０１１３】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1とのモル比率は1:2:1である。
【０１１４】
好ましい実施形態5においては、前記ギンセノシドRg3と前記ギンセノシドRg5と前記ギンセノシドRk1以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【０１１５】
本発明の好ましい実施形態6においては、前記サポニンナノミセルは、Rh2/Rh3/Rk2型ギンセノシドナノ正ミセルであり、これはギンセノシドRh2とギンセノシドRh3とギンセノシドRk2とを含有し、前記ギンセノシドRh2の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRh3の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk2の質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総質量含有量が70％以上である。
【０１１６】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRh2の質量含有量が15%〜25%であり、前記ギンセノシドRh3の質量含有量が35%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が15%〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総質量含有量が80％以上であり、
【０１１７】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総質量含有量が90％であり、
【０１１８】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との質量比率は1:2:1である。
【０１１９】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRh2とギンセノシドRh3とギンセノシドRk2とを含有し、前記ギンセノシドRh2のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRh3のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk2のモル含有量は15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総モル含有量が70％以上である。
【０１２０】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRh2のモル含有量は15%〜25%であり、前記ギンセノシドRh3のモル含有量は35％〜45%であり、前記ギンセノシドRk2のモル含有量は15％〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総モル含有量が80％以上であり、
【０１２１】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2とのモル比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2との総モル含有量が90％以上であり、
【０１２２】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2とのモル比率は1:2:1である。
【０１２３】
好ましい実施形態6においては、前記ギンセノシドRh2と前記ギンセノシドRh3と前記ギンセノシドRk2以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【０１２４】
本発明の好ましい実施形態7においては、前記サポニンナノミセルは、Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドミセルであり、これはギンセノシドRg2とギンセノシドRk4とギンセノシドRg6とを含有し、前記ギンセノシドRg2の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk4の質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg6の質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総質量含有量が70％以上である。
【０１２５】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg2の質量含有量が15%〜25%であり、前記ギンセノシドRk4の質量含有量が35%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1の質量含有量が15%〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総質量含有量が80％以上であり、
【０１２６】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総質量含有量が90％以上であり、
【０１２７】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との質量比率は1:2:1であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総質量含有量は95％以上である。
【０１２８】
或は、前記サポニンナノミセルは、ギンセノシドRg2とギンセノシドRk4とギンセノシドRg6とを含有し、前記ギンセノシドRg2のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が70％以上である。
【０１２９】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg2のモル含有量は15%〜25%であり、前記ギンセノシドRk4のモル含有量は35％〜45%であり、前記ギンセノシドRg6のモル含有量は15％〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が80％以上であり、
【０１３０】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6とのモル比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が90％以上であり、
【０１３１】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6とのモル比率は1:2:1であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量は95％以上である。
【０１３２】
好ましい実施形態7においては、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6以外である。この場合、Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルは、Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルであり、成分の残りは、他の種類のギンセノシドである。
【０１３３】
特に、Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルが、正ミセルを形成することができる式1により表されるサポニン、例えば、一種類或は多種類の微量なギンセノシドRg3、ギンセノシドRg5及びギンセノシドRk1のギンセノシドを含有している場合に、該Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルはRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ正ミセルである。
【０１３４】
本発明の好ましい実施形態8においては、前記サポニンナノミセルは、HSE型ギンセノシドナノミセルであり、これはギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3とを含有し、ここで、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総質量含有量が15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量含有量が15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量含有量が70％以上である。
【０１３５】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総質量含有量が15%〜25%であり、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総質量含有量が35%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量含有量が15%〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量含有量が80％以上であり、
【０１３６】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総質量と、前記ギンセノシドRg5と、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総質量と、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量との質量比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総質量含有量が95％以上であり、
【０１３７】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRh1の総質量と、前記ギンセノシドRg5、ギンセノシドRk4、ギンセノシドRh4の総質量と、前記ギンセノシドRk1、ギンセノシドRg6、ギンセノシドRk3の総質量との質量比率は1:2:1である。
【０１３８】
或は、前記サポニンナノミセルは、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3とを含有し、ここで、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総モル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総モル含有量は15%〜45%であり、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総モル含有量は15%〜45%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総モル含有量が70％以上である。
【０１３９】
ここで、好ましくは、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1との総モル含有量は15%〜25%であり、前記ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4との総モル含有量は35％〜45%であり、前記ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総モル含有量は15％〜25%であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3との総モル含有量が80％以上であり、
【０１４０】
更に好ましくは、前記ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRh1の総モル量と、前記ギンセノシドRg5、ギンセノシドRk4、ギンセノシドRh4の総モル量と、前記ギンセノシドRk1、ギンセノシドRg6、ギンセノシドRk3の総モル量とのモル比率は（0.8〜1.2）:（1.8〜2.2）:（0.8〜1.2）であり、且つ、前記ギンセノシドRg2と前記ギンセノシドRk4と前記ギンセノシドRg6との総モル含有量が95％以上であり、
【０１４１】
最も好ましくは、前記ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRh1の総モル量と、前記ギンセノシドRg5、ギンセノシドRk4、ギンセノシドRh4の総モル量と、前記ギンセノシドRk1、ギンセノシドRg6、ギンセノシドRk3の総モル量とのモル比率は1:2:1である。
【０１４２】
好ましい実施形態8においては、前記ギンセノシドRg2と、ギンセノシドRg3と、ギンセノシドRh1と、ギンセノシドRg5と、ギンセノシドRk4と、ギンセノシドRh4と、ギンセノシドRk1と、ギンセノシドRg6と、ギンセノシドRk3以外の成分は全て他種類のギンセノシドである。
【０１４３】
本発明は、以下の工程：式1で表されるサポニンと、サポニンを溶解することができる有機溶媒とを混合し、その後前記有機溶媒を除去する工程を含む、サポニンナノミセルの調製方法を更に提供する。
【０１４４】
ここで、サポニンを溶解することができる前記有機溶媒は、当該分野において、ギンセノシド及び/或はノトギンセノシドを溶解するために用いられる従来の有機溶媒であってもよく、好ましくは、メタノール、エタノール、N,N-ジメチルホルムアミド（DMF）、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択される。
【０１４５】
ここで、混合のために用いられる方法及び条件は、当該分野における従来の方法及び条件であってもよく、混合の均一化に供される。好ましくは、前記混合の温度は30℃〜80℃である。
【０１４６】
ここで、前記有機溶媒を除去するために用いられる方法と条件は、当該分野における従来の方法と条件であってもよい。前記有機溶媒を除去する方法は、好ましくは、30℃〜80℃で減圧下での濃縮及び乾燥である。前記有機溶媒を除去する方法は、更に好ましくは、前記減圧下で濃縮及び乾燥後、乾燥の質量損失率が3質量％未満までの30℃〜80℃での真空下乾燥である。
【０１４７】
本発明は、更に、以下の工程：
（1）原料として、ウコギ科（Araliaceae）及び/或はウリ科（Cucurbitaceae）植物の抽出物を用い、酸性水溶液の中で酸分解反応を行って、サポニン混合物を含む反応液を得る工程、及び
（2）前記工程（1）で得られるサポニン混合物を含む反応液中の不純物を取り除くために精製後、サポニンを溶解することができる有機溶媒と混合して、そして有機溶媒を除去し、サポニンナノミセルを得る工程、
或は、前記工程（1）で得られるサポニン混合物を含む反応液を精製及び分離し、サポニンモノマーの種類を得て、サポニンモノマー中の式1で表される一種類或は多種類のギンセノシドと、サポニンを溶解することができる有機溶媒とを混合し、そして有機溶媒を除去して、サポニンナノミセルを得る工程
を含むサポニンナノミセルを調製する方法を提供する。
【０１４８】
工程（1）においては、前記ウコギ科の植物の抽出物は、当該分野における一般的な植物であり、一般的には、ウコギ科の植物の根・茎・葉・実の一種類或は多種類の抽出物である。前記ウコギ科の植物は、好ましくは、中国人参(Panax ginseng)、高麗人参(P. Sinensis J.Wen)、アメリカ人参(P. quique folius)、日本人参（P. japonicus）、ベトナム人参（P. vientnamensis）、ヒマラヤ人参（P. Pseudoginseng）及び三七人参（P. notoginseng）からなる群から選択される。前記ウリ科植物の抽出物は、当該分野における一般的な植物であり、一般的には、ウリ科アマチャヅル属（Gynostemma Bl. Cucurbitaceae）の植物における根・茎・葉・実からなる群から選択される。好ましくは、前記ウリ科植物は甘茶蔓（Gynostemma pentaphyllum）である。
【０１４９】
工程（1）においては、好ましくは、前記ウコギ科植物及び/或はウリ科植物の抽出物は下記の条件：総ギンセノシド質量パーセント含有率％≧60%、好ましくは≧80%、更に好ましくは≧90%、或いは質量パーセント含有率％≧60%、好ましくは≧80%、更に好ましくは≧90%の質量含有率を有する以下のギンセノシド：ギンセノシドRb1、ギンセノシドRb2、ギンセノシドRb3、ギンセノシドRe、ギンセノシドRc、ギンセノシドRd、ギンセノシドRg1、ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRh1、ギンセノシドRh2、ギンセノシドRh3、ギンセノシドF1、ギンセノシドF2及びノトギンセノシドR1、更に好ましくは、ギンセノシドRb1、ギンセノシドRe或はギンセノシドF2のいずれか1つを含む、を満足している。前記コギ科植物及び/或はウリ科植物の抽出物は全て市販されていて、或はCN200610093610.6に述べられる方法のような従来技術文献により得られる。
【０１５０】
工程（1）においては、前記酸性水溶液は当該分野において記載される従来の溶液であってもよく、前記酸性水溶液中の酸性化合物は有機酸及び/或は無機酸であってもよく、好ましくは、クエン酸、酢酸、蟻酸、シュウ酸、コハク酸、サリチル酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、メタンスルホン酸、安息香酸、塩酸、硝酸、硫酸及びリン酸からなる群から選択され、更に好ましくは、酢酸及び/或はクエン酸である。
【０１５１】
工程（1）においては、前記酸性水溶液のpH値は、好ましくは、≦6.5であり、更に好ましくは、酢酸及び/或はクエン酸によりpH値を≦6.5に調整され、更に好ましくは、前記酸性水溶液のpH値は≦3であり、最も好ましくは、酢酸及び/或はクエン酸によりpH値を≦3に調整される。
【０１５２】
工程（1）においては、前記酸分解反応の条件は当該分野における常用な条件であってもよい。前記酸分解反応の温度は、好ましくは、60℃〜100℃であり、更に好ましくは80℃〜90℃である。前記酸分解反応の時間は、好ましくは2時間〜48時間であり、更に好ましくは3時間〜6時間である。
【０１５３】
工程（2）においては、不純物を除去するための精製方法は当該分野における従来の方法であってもよく、これはサポニン反応溶液の中のサポニン混合物以外の不純物だけを除去することのみが必要であり、好ましくは、不純物を除去するための精製方法は下記の方法1或いは方法2である。
【０１５４】
前記方法1は下記の工程：
（a）工程（1）で得られるサポニン混合物を含有している反応液を冷却し、静置して、沈殿物を除去する工程、
（b）工程（a）で得られる反応液のpHをアルカリによりアルカリpH範囲まで調節して、沈殿物を得る工程、
（c）30℃〜80℃で、沈殿物を有機溶媒と混合して、サポニン混合液を得る工程、ここで前記有機溶媒は、メタノール、エタノール、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択される、
（d）工程（c）で得られるサポニン混合物液を5℃未満まで冷却して、沈殿物を除去し、そして乾燥する工程
を含む。
【０１５５】
工程（a）においては、前記冷却及び静置は当該分野における従来の操作であり、前記冷却は、好ましくは、-20℃〜30℃まで冷却することで有り、前記静置の時間は、好ましくは4時間以上である。前記沈殿物の除去の方法は当該分野における従来の操作であり、一般的には濾過或は遠心分離である。
【０１５６】
工程（b）においては、前記アルカリは当該分野における従来のアルカリであり、有機塩基及び/或は無機塩基であってもよく、前記有機塩基は、好ましくは、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、酢酸カリウム、酢酸ナトリウム、トリエチルアミン、アンモニア、メタノールアミン、カリウム tert‐ブトキシド及びナトリウム tert‐ブトキシドからなる群から選択され、前記無機塩基は、好ましくは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム及び炭酸水素カリウムからなる群から選択され、より好ましくは炭酸ナトリウム及び／又は炭酸水素カリウムである。前記反応液の中の前記アルカリの濃度は、好ましくは0.05mol/L〜1mol/Lである。前記アルカリ範囲までのpHの調節の方法は、好ましくは、pHを8〜14に調節することである。
【０１５７】
工程（b）においては、前記沈殿物は、好ましくは、当該分野における従来の方法で乾燥され、その後工程（c）を行い、前記乾燥する方法は、乾燥による損失質量が5質量％未満まで30℃〜80℃で乾燥することである。
【０１５８】
工程（c）においては、前記有機溶媒の使用量は当該分野における常用な使用量であり、好ましくは前記沈殿物を溶解するための量であり、更に好ましくは、前記沈殿物と前記有機溶媒との容積比は（1:1）〜（1:5）である。前記混合温度は30℃〜80℃であることが好ましい。
【０１５９】
工程（d）においては、好ましくは、前記冷却の温度は-20℃〜5℃である。前記沈殿物の除去する方法は、当該分野における常用な操作であり、一般的に濾過である。乾燥する方式は、当該分野における従来の方法であり、好ましくは減圧下での濃縮及び乾燥である。
【０１６０】
前記方法2は下記の工程を含む：
S1. 工程（1）で得られるサポニン混合物を含む反応液のpHをアルカリによって、pH 8〜14に調節し、沈殿物を除去して、溶液Aを得る工程、
S2. n-ブタノールによって、工程S1で得られる溶液A中のサポニンを抽出し、n-ブタノール層を得て、その後n-ブタノール層を水で洗浄し、そしてn-ブタノール層の溶媒を除去する工程。
【０１６１】
工程S1において、前記アルカリは前記工程（b）におけるアルカリに従う。
【０１６２】
工程S2において、前記抽出の回数は当該分野における従来の回数であり、好ましくは1〜5回である。好ましくは、前記n-ブタノールと前記溶液Aとの容積比は、（1:0.5）〜（1:4）である。好ましくは、前記n-ブタノールと前記洗浄水との容積比は（1:0.5）〜（1:4）である。前記n-ブタノール層の溶媒を除去する操作は当該分野において従来の操作であり、好ましくは減圧下での濃縮及び乾燥である。
【０１６３】
工程（2）においては、前記精製及び分離の方法と条件は当該分野における従来の方法と条件であってもよく、好ましくはカラムクロマトグラフィーである。
【０１６４】
工程（2）においては、前記サポニンモノマーはギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRg4、ギンセノシドRg5、ギンセノシドRg6、ギンセノシドRh1、ギンセノシドRh2、ギンセノシドRh3、ギンセノシドRh4、ギンセノシドRf、ギンセノシドRs3、ギンセノシドRk1、ギンセノシドRk2、ギンセノシドRk3、ギンセノシドRk4、ギンセノシド、ギンセノシドF4、ノトギンセノシドR2及びノトギンセノシドT5からなる群から選択される。
【０１６５】
工程（2）においては、好ましくは、前記サポニンを溶解することができる有機溶媒はメタノール、エタノール、N,N-ジメチルホルムアミド（DMF）、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択される。ここで、前記混合は当該分野における従来の操作であり、前記混合は均一な混合に供される。前記混合の温度は、好ましくは30℃〜80℃である。前記有機溶媒を除去する方法は当該分野における常用な方法であってもよく、好ましくは、30℃〜80℃、減圧下での濃縮及び乾燥であり、更に好ましくは、前記減圧下での濃縮及び乾燥後の、乾燥による質量損失率が3質量％未満までの、30℃〜80℃、真空下での乾燥である。
【０１６６】
本発明における一つの好ましい実施形態においては、前記サポニンナノミセルの調製方法は、以下の工程：
（1’）酢酸、水、及びサポニン質量百分含有量60％超のウコギ科及び/或はウリ科植物抽出物を混合し、前記酢酸の用量は、ウコギ科及び/或はウリ科植物抽出物1ｇ当たり4ml〜6mlであり、前記酸性水溶液の濃度は容積百分率40%〜60%であり、それから80℃〜90℃で3時間〜5時間反応を行い、反応後に反応液を冷却し、4〜24時間静置し、沈殿物を除去する工程、
（2’）工程（1’）によって処理された反応液をNa2CO3で中和し、静置し、沈殿物を得る工程、
（3’）工程（2’）によって得られる沈殿物を30℃〜80℃において無水エタノールと混合し、その後5℃未満にまで冷却し、4〜24時間静置し、沈殿物を除去し、その後減圧下で濃縮し、濃縮物を得て、工程（3’）に前述の操作を1〜3回繰り返す工程、及び
（4’）その後工程（3’）によって得られる濃縮物を乾燥させ、サポニンナノミセルを得る工程
を含む。
【０１６７】
ここで、工程（1’）のサポニンは、下記：総ギンセノシドRa0、総ギンセノシドRa1、総ギンセノシドRa2、総ギンセノシドRa3、ギンセノシドRb1、ギンセノシドマロニル-Rb1、ギンセノシドRb2、ギンセノシドマロニル-Rb2、ギンセノシドRb3、ギンセノシドマロニル-Rb3、ギンセノシドRg1、ギンセノシドマロニル-Rg1、ギンセノシドRc、ギンセノシドマロニル-Rc、ギンセノシドF2、ギンセノシドRe、ギンセノシドRd、ギンセノシドマロニル-Rd、アメリカニンジンR1、ギンセノシドRs1、ギンセノシドRs2、ノトギンセノシドD、ノトギンセノシドK、ノトギンセノシドR1、ノトギンセノシドR3、ノトギンセノシドR4、ノトギンセノシドR6、ノトギンセノシドI、ノトギンセノシドFa、ノトギンセノシドFc、ノトギンセノシドFd、ノトギンセノシドFe、ノトギンセノシドT、ノトギンセノシドL、ノトギンセノシドO、ノトギンセノシドP、ノトギンセノシドQ、ノトギンセノシドS、ギペノシドIX及びギペノシドXVIIのいずれか1つのサポニン化合物である。ここで、ギンセノシドマロニル-Rg1はマロニルギンセノシドRg1である。本発明においては、マロニル（Malonyl）はまた、マロニル（Malonyl）を意味する。
【０１６８】
前記サポニンが総ギンセノシドである場合に、前記サポニンナノミセルはHSE型ギンセノシドナノ正ミセルであり、前記サポニンがギンセノシドRb1である場合に、前記サポニンナノミセルはRg3型ギンセノシドナノ正ミセルであり、前記サポニンがギンセノシドF2である場合に、前記サポニンナノミセルはRh2型ギンセノシドナノ正ミセルであり、前記サポニンがギンセノシドReである場合に、前記サポニンナノミセルはRg2型ギンセノシドナノ逆ミセルである。
【０１６９】
本発明における別の好ましい実施形態においては、前記サポニンナノミセルの調製方法は、以下の工程：
（1″）クエン酸、水、及びサポニン質量百分含有量60％超のウコギ科及び/或はウリ科植物抽出物を混合し、前記クエン酸の用量は、ウコギ科及び/或はウリ科植物抽出物1ｇ当たり4ml〜6mlであり、前記クエン酸水溶液の濃度は容積百分率40%〜60%であり、それから80℃〜90℃で3時間〜6時間反応を行う工程
（2″）工程（1″）によって得られた反応液を15℃〜30℃に冷却し、反応溶液をNa2CO3で中和し、沈殿物を除去し、溶液Aを得る工程、
（3″）工程（2″）によって得られる溶液Aを水及びn-ブタノールと混合し、抽出及び分離を1〜4回行う工程、
（4″）工程（3″）で得られたn-ブタノール層を1〜3回水で洗浄し、減圧下で濃縮し、固体を得る工程、
（5″）工程（4″）によって得られる固体を55℃〜65℃で無水エタノールと混合し、その後5℃未満まで冷却し、4〜24時間の静置をし、沈殿物を除去し、減圧下濃縮し、濃縮物を得て、当該工程（5″）の操作を1〜3回繰り返す工程、及び
（6″）工程（5″）によって得られる濃縮物を乾燥させ、サポニンナノミセルを得る工程
を含む方法である。
【０１７０】
工程（1″）のサポニン、下記：総ギンセノシドRa0、総ギンセノシドRa1、総ギンセノシドRa2、総ギンセノシドRa3、ギンセノシドRb1、ギンセノシドマロニル-Rb1、ギンセノシドRb2、ギンセノシドマロニル-Rb2、ギンセノシドRb3、ギンセノシドマロニル-Rb3、ギンセノシドRg1、ギンセノシドマロニル-Rg1、ギンセノシドRc、ギンセノシドマロニル-Rc、ギンセノシドF2、ギンセノシドRe、ギンセノシドRd、ギンセノシドマロニル-Rd、アメリカニンジンR1、ギンセノシドRs1、ギンセノシドRs2、ノトギンセノシドD、ノトギンセノシドK、ノトギンセノシドR1、ノトギンセノシドR3、ノトギンセノシドR4、ノトギンセノシドR6、ノトギンセノシドI、ノトギンセノシドFa、ノトギンセノシドFc、ノトギンセノシドFd、ノトギンセノシドFe、ノトギンセノシドT、ノトギンセノシドL、ノトギンセノシドO、ノトギンセノシドP、ノトギンセノシドQ、ノトギンセノシドS、ギペノシドIX及びギペノシドＸVIIのいずれか1つのサポニン化合物である。
【０１７１】
前記サポニンが総ギンセノシドである場合に、前記サポニンナノミセルはHSE型ギンセノシドナノ正ミセルであり、前記サポニンがギンセノシドRb1である場合に、前記サポニンナノミセルはRg3型ギンセノシドナノ正ミセルであり、前記サポニンがギンセノシドF2である場合に、前記サポニンナノミセルはRh2型ギンセノシドナノ正ミセルであり、前記サポニンがギンセノシドReである場合に、前記サポニンナノミセルはRg2型ギンセノシドナノ逆ミセルである。
【０１７２】
本発明は更に、前述のような調製方法で調製されるサポニンナノミセルを提供する。
【０１７３】
本発明は更に、サポニンナノ正ミセルの調製方法であって、以下の工程：
サポニンナノ逆ミセルと、サポニンを溶解することができる有機溶媒と、サポニンナノ正ミセルの種結晶とを混合し、有機溶媒を除去してサポニンナノ正ミセルを得る工程であって、ここで前記サポニンナノ正ミセルの種結晶は、R2が-H或は-OHであり、且つ、R1が親水基である前記式1で表されるようなサポニンの一種類或は多種類であり、前記サポニンナノ逆ミセルは前記の調製方法により調製されるサポニンナノ逆ミセル及び前記いずれかのサポニンナノ逆ミセルの一種類或は多種類である、工程を含む方法を提供する。
【０１７４】
ここで、前記サポニンナノ正ミセルの種結晶においては、好ましくは、R1はグリコシル基或は修飾されたグリコシルであり、更に好ましくは前記表される更に好ましいな、具体的なR1基の中にHと-OH以外のいずれかの一種類である。前記サポニンナノ正ミセルの種結晶は最も好ましくはギンセノシドRg3、ギンセノシドRg5及びギンセノシドRk1の中の一種類或は多種類である。
【０１７５】
ここで、前記サポニンナノ逆ミセルは上記の前記調製方法により調製される前記サポニンナノ逆ミセル及び/或は前記のいずれかのサポニンナノ逆ミセルであり、好ましくは、Rg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルである。
【０１７６】
ここで、前記サポニンを溶解することができる有機溶媒は当該分野においてギンセノシド及び/或はノトギンセノシドを溶解するために一般的に用いられる有機溶媒であってもよく、好ましくはメタノール、エタノール、N,N-ジメチルホルムアミド（DMF）、n-ブタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン及びピリジンからなる群から選択される。
【０１７７】
ここで、前記混合の方法と条件は当該分野における従来の方法及び条件であり、均一混合に供される。好ましくは、前記混合の温度は30℃〜80℃である。
【０１７８】
ここで、前記有機溶媒を除去する方法と条件は、当該分野における一般的な方法と条件であってもよい。前記有機溶媒を除去する方法は、好ましくは、30℃〜80℃、減圧下での濃縮及び乾燥である。前記有機溶媒を除去する方法は、更に好ましくは、前記減圧下での濃縮及び乾燥後の、乾燥による質量損失率が3質量％未満までの30℃〜80℃、真空下での乾燥である。
【０１７９】
本発明は更に前記のような調製方法により調製されるサポニンナノ正ミセルを提供する。
【０１８０】
本発明は、水性溶解補助剤、又は脂溶性化合物若しくは組成物の医薬的担体としての上述のサポニンナノミセルの使用をさらに提供し、そして前記サポニンナノミセルはサポニンナノ正ミセルである。
【０１８１】
ここで、前記脂溶性化合物或は組成物は当該分野における常用な脂溶性化合物或は組成物であってもよく、好ましくは、大豆イソフラボン、カルダモニン、レスベラトロール、補酵素Q10、ビタミンA、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンK、イチョウ抽出物、メラトニン、リコピン及びβ‐カロテンからなる群から選択される。好ましくは、前記脂溶性化合物或は組成物と前記サポニンナノ正ミセルとの質量比は（1:1）〜（15:1）であり、更に好ましくは1:9である。
【０１８２】
本発明においては、前記水性溶解補助剤は、水溶液系における水に難溶な物質の溶解度を増大することができる溶解補助剤を意味する。
【０１８３】
本発明はまた、更に前記のような水に難溶性の薬物の医薬調製物、健康ケア製品又は化粧品の調製におけるサポニンナノミセルの使用を提供し、前記サポニンナノミセルはサポニンナノ正ミセルである。
【０１８４】
ここで、前記水に難溶性の薬物は当該分野における常用な水に難溶性の薬物であり、好ましくは、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、塩酸イリノテカン、塩酸トポテカン、ヒドロキシルカンプトセシン、ミノキシジル、アジスロマイシン、塩酸エピルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸ドキソルビシンアンモニア、タクロリムス、フルオロウラシル、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンデシン、酒石酸ビノレルビン、フペルジンA、ホモハリングトニン塩基（homoharrigtonine bases）、3ハリングトニン（three harrigtonine）、エポチロンA、エポチロンB、エポチロンC、エポチロンD、エポチロンE、エポチロンF、ボルテゾミブ、リン酸エトポシド、塩酸ゲムシタビン、リン酸フルダラビン、フルバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチン、メバスタチン、セリバスタチン、ロスバスタチン、アトルバスタチンカルシウム及びロスバスタチンカルシウムからなる群から選択される。好ましくは、前記水に難溶性の薬物と前記サポニンナノミセルとの質量比は（1:3）〜（1:12）であり、更に好ましくは1:6である。
【０１８５】
本発明は更に前記のようなサポニンナノミセルと前記水に難溶性の薬物とを含む医薬組成物を提供し；前記サポニンナノミセルは、サポニンナノ正ミセルである。
【０１８６】
ここで、好ましくは、前記水に難溶性の薬物と前記サポニンナノ正ミセルとの質量比は（1:3）〜（1:12）であり、更に好ましくは1:6である。
【０１８７】
本発明は、脂質溶解補助剤又は水溶性化合物若しくは組成物の医薬担体としてのサポニンナノミセルの使用をさらに提供し、そして前記サポニンナノミセルはサポニンナノ逆ミセルである。
【０１８８】
ここで、前記水溶性化合物或は組成物は、当該分野における従来の水溶性化合物或は組成物であってもよく、好ましくは、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸（DNA或はRNA（好ましくはRNAi）或はその断片）、インスリン、エリスロポエチン、レプチン、成長因子、成長ホルモン放出ホルモン、コロニー刺激因子、水溶性ホルモン、（副甲状腺ホルモン又はその断片若しくはアナログ）、黄体形成ホルモン放出ホルモン（LHRH）及びそのアナログ（例えば、ナファレリン、ブセレリン、ゴセレリン）、インターフェロン、サイトカイン、多糖類（例えばヘパリン）、ヘパリン化合物、DNA、RNA断片及びそのプラスミド、RNA干渉剤及びその免疫剤とワクチン剤からなる群から選択される。好ましくは、前記水溶性化合物或は組成物と前記サポニンナノ逆ミセルとの質量比は（1:1）〜（15:1）であり、更に好ましくは1:9である。
【０１８９】
本発明においては、前記脂質溶解補助剤とは、油、脂質系における脂質に難溶な物質の溶解度を増大する溶解補助剤を意味する。
【０１９０】
本発明は更に前記のようなサポニンナノミセルと前記水溶性化合物或いは組成物を含む医薬組成物を提供し、前記サポニンナノミセルはサポニンナノ逆ミセルである。
【０１９１】
ここで、好ましくは、前記水溶性化合物或は組成物と前記サポニンナノ逆ミセルとの質量比は（1:1）〜（15:1）であり、更に好ましくは1:9である。
【０１９２】
本発明において、言及される最適化された条件は、当該技術分野における一般的な知識に基づいて任意に組み合わされ、好ましい実施形態を得ることができる。
【０１９３】
本発明において、用いられる試薬及び原料は全て市場で入手することができる。
【０１９４】
本発明における優れた効果は下記である：
1. 本発明のサポニンナノミセルは初めての創作であり、ここで、正ミセルは食品、健康ケア製品及び化粧品において脂溶性相関成分に用いられ、脂溶性相関成分を水或はアルコールの中に溶解させ、ナノ結晶化を実現し、製品開発の適用範囲に対して重要な役割を果たし、加えて、実際に使用する場合に、相関成分が作用部位に輸送さ、生理条件で加水分解し、放出し、そして効能又は有効性を生じる一方で、ギンセノシド及び/或はノトギンセノシドも効能を生じ、有用な役割を果たす。
2. 本発明のサポニンナノミセルは薬物担体として使用され、或は薬物に適用され、正ミセルは、水に難溶性の薬物の活性成分を封入し、高い搭載能力、高い生物的適合性、及び少なくとも95％以上の薬物不可速度を有し、そしてその封入率は、薬物搭載量は99.5%以上であり、得られた薬物搭載ミセルをグルコース溶液の中に10時間超放置した後も、その封入率は90％以上である。薬物成分の運搬媒質として、正ミセルは、従来の薬物担体、例えば医薬溶解補助剤又はポリマーミセルを置き換えることができ、現在の医薬溶解補助剤又はポリマーミセルの安全性の問題を克服し、非常に重要で有り、逆ミセルは溶解補助剤又は水溶性薬物若しくは水溶性成分の調製、及び水溶性薬物若しくは水溶性成分の薬物搭載ミセルとして用いることができる。
【実施例】
【０１９５】
好ましい実施形態の詳細な記載
以下に、実施例を挙げて、本発明をさらに詳しく説明するが、本発明は前記の実施例に限定されるものではない。下記の実施例中の具体的な条件が記載されてない試験方法は、常用の方法と条件に従って行なわれ、或は商品の説明書に従って選択する。
【０１９６】
下記の実施例に用いられるギンセノシド化合物は全て市場で入手することができ、そして以下の方法により、文献に従って調製することもできる。
【０１９７】
総ギンセノシドは、中国特許文献CN200610093610.6に述べられた方法に従って調製され、これは、原材料として中国人参(Panax ginseng)、高麗人参(P. Sinensis J.Wen)、アメリカ人参(P. quique folius)、日本人参（P. japonicus）、ベトナム人参（P. vientnamensis）、シベリア人参（Eleutherococcus senticosus）、ヒマラヤ人参（P. Pseudoginseng）及び三七人参（P. notoginseng）から選択される根、茎、葉、及びアマチャヅルを使用し、そして該ギンセノシドは、マクロ孔樹脂吸着法（例えば中国特許出願CN201010527369.Xに述べられた方法）により、ギンセノシドRe及びギンセノシドRg1を主に含む混合サポニンAと、ギンセノシドF1、ギンセノシドRg2、ギンセノシドF2、ノトギンセノシドFe、ギンセノシドRd、ギンセノシドRb2、ギンセノシドRc、ギンセノシドRb1及びギンセノシドRb3を主に含む混合サポニンBとに分けられ、その後、再結晶或はアルミナカラムクロマトグラフィー法（例えば中国特許文献CN200610093615.9に述べられた方法）により単純な組成物のギンセノシド混合物を得て、そして最後に、カラムクロマトグラフィー分析により、ギンセノシドのモノマー：ギンセノシドRb1、ギンセノシドRb2、ギンセノシドRb3、ギンセノシドRe、ギンセノシドRd、ギンセノシドRg1、ギンセノシドRg2、ギンセノシドRg3、ギンセノシドRh1、ギンセノシドRh2、ギンセノシドRh3、ギンセノシドF1、ギンセノシドF2及びノトギンセノシドR1をそれぞれ得る。
【０１９８】
下記の実施例に用いられるギンセノシドモノマーの調製方法は以下である：
ギンセノシドRb1、ギンセノシドRb3、ギンセノシドRd、ギンセノシドRe等のモノマーをアメリカ人参(American ginseng)の根の抽出物により調製する：
81％サポニンの質量含有量を有する人参の根300ｇを4Lのメタノールに溶解し、超音波で溶解後、6Lの水を加え、40v/v％水性メタノール溶液のギンセノシドサンプル溶液を調製した。
10Lのサンプル溶液を分取カラム（内径200mm、高さ2000mm、カラム充填10μm-C18）の中に注入し、流速は500 ml/分であり、移動相勾配溶出を用い、先ず、40v/v%水性メタノール 200Lにより溶出し、50v/v%水性メタノール 200Lにより溶出し、60v/v%水性メタノール 400Lにより溶出し、90v/v%水性メタノール 200Lにより溶出し、オンラインUVモニタリングに従った画分回収により、Rb1部分、Rb3部分、Rd部分、Re部分をそれぞれ得る。回収された溶液はナノ濾過膜により1L未満にまで濃縮し、n-ブタノールで3回抽出を行った。n-ブタノールを合わせ、濃縮して乾燥させ、乾燥後、28.5gの91.8%のギンセノシドRe、6.8gの90.3%のギンセノシドRb1、3.6gの90.1%のギンセノシドRb3と、及び36.0gの92.5%のギンセノシドRdをそれぞれ得る。
【０１９９】
上述方法に従って、繰り返してカラムクロマトグラフィーに通すことにより、カラムにサンプル溶液を注入して調製を繰り返して調製し、500gの90%以上のギンセノシドRe、500gの90%以上のギンセノシドRb1、500gの90%以上のギンセノシドRb3、及び500gの90%以上の90%のギンセノシドRdがそれぞれ得られる。
【０２００】
実施例1
総ギンセノシドによりHSE型ギンセノシドナノミセルを調製する方法：
1). 81%のサポニン質量含有量を有する人参根100gを反応フラスコに加え、500ml の50v/v%酢酸溶液を加え、90℃で4時間の加水分解を行い、反応が終わってから、反応フラスコを室温で12時間放置し、これを0.4μmの濾紙で濾過し、9.1gの不溶化物を除去し、濾液を2.4Lの10wt%Na2CO3で中和して、静置して沈殿させ、10μmの濾紙で濾過して、回収された沈殿物を得る。
2). 沈殿物を1.0Lのエタノールで60℃まで加熱及び溶解し、4℃で2時間放置し、そして10μmの濾紙で濾過し、沈殿物を除去し、濾液を減圧下で濃縮し、その後濃縮による濃縮物を減圧下で0.4Lの無水エタノールに溶解し、4℃で2時間放置し、1.0μmの濾紙で濾過し、減圧下濃縮して乾燥させ、153gのHSE型ギンセノシドナノミセルを調製により得る。
【０２０１】
実施例1において用いられた原料及び調製されたHSE型ギンセノシドナノミセルの成分のHPLCによる分析結果を表2に示す。
【０２０２】
HPLC分析の条件は：カラムがZORBAX Eclipse XDB-C18  4.6×250mmであり、検出波長がUV/Vis，203mmであり、流速が1.0ml/分であり、カラム温度が50℃であり、システム運行時間は80分であり、移動相（勾配）を下記表に示す。
【０２０３】
【表１】
0005952494.tif 000027
【０２０４】
【表２】
0005952494.tif 000028
【０２０５】
実施例2
ギンセノシドRb1からRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを調製する方法:
（1）100gサポニンRb1を反応ベッセルに入れ、50ml pH値3.0のクエン酸溶液を加え、50mlの水を加え、80℃で1〜6時間分解する。
（2）工程（1）における反応で得られた反応液を室温で30℃までに冷却させ、10wt%炭酸ナトリウムで中和後、10μmの濾紙で濾過し、沈殿物を除去して濾液を得る。
（3）200mlの水と100mlのn-ブタノールで濾液を2回抽出分離し、その後抽出分離から得られる200mlのn-ブタノールに70mlの水を加え、n-ブタノール層を減圧下で濃縮して固体物を得る。固体物を500mlのエタノールに溶解させ、5℃で3時間冷蔵放置する。そして濾液を0.45μmの濾紙で濾過し、その濾液を減圧下で濃縮し、粉砕する。33gのRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを得る。
【０２０６】
当該実施例の調製過程において、実施例1と同じ条件下でHPLCにより検出及び分析し、表3と図1は、その反応液における成分の質量百分率は時間の変化とともに変化することを示し、その条件下で、ギンセノシドナノミセル組成物表3に示すように調製され、反応時間が経つにつれて、ギンセノシドRb1が少なくなって、最終的には、質量比率がRg3:Rk1:Rg5=（1:1:2）であるRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルが得られる。
【０２０７】
【表３】
0005952494.tif 000029
【０２０８】
当該実施例で調製されたRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルは従来のCremophor EL或はTween80に取って代わることができる。
【０２０９】
実施例3
ギンセノシドRb3から、Rg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを調製する方法:
100gサポニンRb3を反応ベッセルに加えて、調製方法は実施例2と同じ方法であり、38gのRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを得ることができる。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表4に示す。
【０２１０】
【表４】
0005952494.tif 000030
【０２１１】
実施例4
ギンセノシドRdから、Rg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを調製する方法:
100gサポニンRdを反応ベッセルに加えて、調製方法は実施例2と同じ方法であり、23gのRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを得ることができる。成分は、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析され、結果を表5に示す。
【０２１２】
【表５】
0005952494.tif 000031
【０２１３】
実施例5
ギンセノシドReからRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを調製する方法:
100gサポニンReを反応ベッセルに加えて、調製方法は実施例2と同じ方法であり、30gのRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを得ることができる。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表6に示す。
【０２１４】
【表６】
0005952494.tif 000032
【０２１５】
実施例6
ギンセノシドReからRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ正ミセルを調製する方法:
100gサポニンReを反応ベッセルに加えて、調製方法は実施例5と同じ方法であり、30gのRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを得ることができる。
【０２１６】
10gのRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを採取し、200mlの無水エタノールに溶解し、100mlにまで減圧下で濃縮し、少量のRg3/Rg5/Rk1ミセルの種結晶を加え、そして冷却及び結晶化し、その後濾過して、乾燥させ、5.4gのRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ正ミセルを得る。
【０２１７】
当該実施例に用いられる原料ギンセノシドRe及び調製されたRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ正ミセルの成分を実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表7に示す。
【０２１８】
【表７】
0005952494.tif 000033
【０２１９】
実施例7
ギンセノシドF2からRh2型ギンセノシドナノミセルを調製する方法:
100gギンセノシドF2を取り、調製方法は実施例1と同じ方法であり、16gのRh2型ギンセノシドナノミセルを得ることができる。
【０２２０】
前記ギンセノシドF2は下記の方法で調製される：
高純度の200gのギンセノシドF2を反応ベッセルに加えて、そして500mlの純水とαガラクトシダーゼとを加え、30℃で、4〜44時間（より好ましくは8〜12時間）の酵素分解を行い、200mlのn-ブタノールで3回抽出を行って、n-ブタノールを合わせ、減圧下で濃縮し、乾燥させ、136gのギンセノシドF2を得る。
【０２２１】
当該実施例に使われる原料ギンセノシドRb1、及びギンセノシドF2及び当該実施例におおいて調製されたRh2型ナノミセルを、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表8に示す。
【０２２２】
【表８】
0005952494.tif 000034
【０２２３】
実施例8
原料としてRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルからRg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを調製する方法:
100gのRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを原料として、前記ギンセノシドモノマーの調製方法と同じ方法により分離し、カラムクロマトグラフィー分離後、断片化し、ナノ濾過膜で濃縮し、n-ブタノールで抽出し、減圧下濃縮し、乾燥させ、36gのRg5:Rk1=1:1の混合物を得る。そして36gの混合物を200mlの無水エタノールに溶解し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、36gのRg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを得る。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表9に示す。
【０２２４】
【表９】
0005952494.tif 000035
【０２２５】
実施例9
原料としてRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルからRg5型ギンセノシドナノミセルを調製する方法:
調製方法は実施例8と同じ方法であり、Rg5の富化部分を取り、ナノ濾過膜により濃縮し、n-ブタノールで抽出し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後8.5gのRg5モノマーを得る。そして8.5g Rg5モノマーを50mlの無水エタノールに溶解し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、8.6gのRg5型ギンセノシドナノミセルを得る。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表10に示す。
【０２２６】
【表１０】
0005952494.tif 000036
【０２２７】
実施例10
原料としてRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルからRk1型ギンセノシドナノミセルを調製する方法:
調製方法は実施例8と同じ方法であり、Rk1の富化部分を取り、ナノ濾過膜により濃縮し、n-ブタノールで抽出し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後2.6gのRk1モノマーを得る。そして2.6gのRk1モノマーを20mlの無水エタノールに溶解し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、2.6gのRk1型ギンセノシドナノミセルを得る。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表11に示す。
【０２２８】
【表１１】
0005952494.tif 000037
【０２２９】
実施例11
原料としてRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルからRk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを調製する方法:
100gのRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルを取り、前記ギンセノシドモノマーの調製方法と同じ方法により分離を行い、カラムクロマトグラフィー分離後、断片化し、ナノ濾過膜により濃縮し、n-ブタノールで抽出し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、27gのRk4:Rg6=1:1の混合物を得る。そして27gの混合物を200mlの無水エタノールに溶解し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、27gのRk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを得る。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表12に示す。
【０２３０】
【表１２】
0005952494.tif 000038
【０２３１】
実施例12
原料としてRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルからRk4型ギンセノシドナノ逆ミセルを調製する方法:
調製方法は実施例11と同じ方法であり、Rk4の富化部分を取り、ナノ濾過膜により濃縮し、n-ブタノールで抽出し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、そして3.3gのRk4モノマーを得る。そして3.3gの混合物を20mlの無水エタノールに溶解し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、3.3gのRk4型ギンセノシドナノ逆ミセルを得る。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表13に示す。
【０２３２】
【表１３】
0005952494.tif 000039
【０２３３】
実施例13
原料としてRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドミセルからRg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを調製する方法:
調製方法は実施例11と同じ方法であり、Rg6の富化部分を取り、ナノ濾過膜により濃縮し、n-ブタノールで抽出し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後3.0gのRg6モノマーを得る。そして3.0gの混合物を20mlの無水エタノールに溶解し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、3.0gのRg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを得る。成分を、実施例1と同様にHPLCにより検出及び分析し、結果を表14に示す。
【０２３４】
【表１４】
0005952494.tif 000040
【０２３５】
実施例14〜43
実施例14〜43における各成分の含有量を表15〜18に示し、各成分をエタノールに溶解し、その後有機溶媒を除去して、ギンセノシドナノミセルを得る。
【０２３６】
【表１５】
0005952494.tif 000041
【０２３７】
【表１６】
0005952494.tif 000042
【０２３８】
【表１７】
0005952494.tif 000043
【０２３９】
【表１８】
0005952494.tif 000044
【０２４０】
適用例1
パクリタキセル及びRg3/Rg5/Rk1型ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのパクリタキセル（Paclitaxel）と実施例2の180mgのRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを5mlの小さいボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたパクリタキセルを溶解する溶液が調製される。粒子径分布を検出し、結果を図2に示す。
【０２４１】
前記のミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、12時間室温で静置後のイメージング図を図3Bに示し、対照として、市販の北京協和製薬工場の30mgのパクリタキセル注射剤を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、12時間室温で静置し、得られたイメージング図を図3Dに示す。明らかに、パクリタキセルミセル溶液は、透明（clear）且つ澄明（transparent）である。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２４２】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液も調製される。
【０２４３】
適用例2
パクリタキセル及びRg5/Rk1型ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのパクリタキセル（Paclitaxel）と実施例8の180mgのRg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加えて、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたパクリタキセルを溶解する溶液が調製される。
【０２４４】
前記のミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置し、対照として、市販の北京協和製薬工場の30mgのパクリタキセル注射剤を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置する。明らかに、パクリタキセルミセル溶液が、透明（clear）且つ澄明（transparent）である一方で、対照サンプルは濁っていた。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２４５】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液も調製される。
【０２４６】
適用例3
パクリタキセル及びRg5型ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのパクリタキセル（Paclitaxel）と実施例9の180mgのRg5型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加えて、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたパクリタキセルを溶解する溶液が調製される。
【０２４７】
前記のミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置し、対照として、市販の北京協和製薬工場の30mgのパクリタキセル注射剤を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置する。パクリタキセルミセル溶液が、透明（clear）且つ澄明（transparent）であるのが明らかである一方、対照サンプルは濁った。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２４８】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液も調製される。
【０２４９】
適用例4
パクリタキセル及びRh2型ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのパクリタキセル（Paclitaxel）と実施例7の180mgのRh2型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加えて、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたパクリタキセルを溶解する溶液が調製される。
【０２５０】
前記のミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置し、対照として、市販の北京協和製薬工場の30mgのパクリタキセル注射剤を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置する。明らかに、パクリタキセルミセル溶液が、透明（clear）且つ澄明（transparent）である一方で、対照サンプルは濁っていた。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２５１】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液も調製される。
【０２５２】
適用例5
パクリタキセル及びRg2/Rk4/Rg6型ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのパクリタキセル（Paclitaxel）と実施例6の180mgのRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加えて、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたパクリタキセルを溶解する溶液が調製される。
【０２５３】
前記のミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置し、対照として、市販の北京協和製薬工場の30mgのパクリタキセル注射剤を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置する。明らかに、パクリタキセルミセル溶液が、透明（clear）且つ澄明（transparent）である一方で、対照サンプルは濁っていた。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２５４】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化されたパクリタキセル溶解溶液も調製される。
【０２５５】
適用例6
無水ドセタキセル及びRg5/Rk1型ミセルの薬物搭載製剤：
30mgの無水ドセタキセルと実施例8の180mgのRg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加えて、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたパクリタキセルを溶解する溶液が調製される。
【０２５６】
前記のミセルによりカプセル化された無水ドセタキセル溶解溶液を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置し、対照として、市販の山東斉魯製薬工場の30mgのパクリタキセル注射剤を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、その後12時間室温で静置する。明らかに、パクリタキセル溶液が、透明（clear）且つ澄明（transparent）である一方で、対照サンプルは濁っていた。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２５７】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化された無水ドセタキセル溶解溶液も調製される。
【０２５８】
適用例7
無水ドセタキセル及びRg3/Rg5/Rk1型ミセルの薬物搭載製剤：
20mgの無水ドセタキセルと実施例2の120mgのRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたパクリタキセルを溶解する溶液が調製される。粒子径分布を検出し、結果を図4に示す。
【０２５９】
前記のミセルによりカプセル化された無水ドセタキセル溶解溶液を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、12時間室温で静置後のイメージング図を図3Aに示し、対照として、市販の江蘇恒瑞医薬株式有限公司の20mgのドセタキセル注射剤を75mlの市販の注射用ブドウ糖溶液に加えて、12時間室温で静置し、得られたイメージング図を図3Cに示す。明らかに、パクリタキセルミセル溶液が、透明（clear）且つ澄明（transparent）である一方で、対照サンプルは濁っていた。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２６０】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化された無水ドセタキセル溶解溶液も調製される。
【０２６１】
適用例8
ドセタキセル三水和物及びRh2型ミセルの薬物搭載製剤：
20mgのドセタキセル三水和物と実施例7の120mgのRh2型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたドセタキセル三水和物を溶解する溶液が調製される。粒子径分布を検出し、結果を図5に示す。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２６２】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化されたドセタキセル三水和物溶解溶液も調製される。
【０２６３】
適用例9
ミノキシジル及びHSE型ミセルの薬物搭載製剤：
20mgのミノキシジルと実施例1の120mgのHSE型ギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入して、2.0mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後ミセルによりカプセル化されたミノキシジルを溶解する溶液が調製される。粒子径分布を検出し、結果を図5に示す。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２６４】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと30mg、10mgと120mg又は10mgと60mgである、ミセルによりカプセル化されたミノキシジル溶解溶液も調製される。
【０２６５】
適用例10
イソフラボン及びHSE型ミセルの薬物搭載製剤：
1.0gのイソフラボン（Isoflavone40%）と実施例1の9.0gのHSE型ギンセノシドナノミセルを50mlのビーカーに投入して、10mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、その後イソフラボンをカプセル化したナノミセルが調製される。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２６６】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと10mg、10mgと120mg又は10mgと90mgである、イソフラボンをカプセル化したナノミセルが調製される。
【０２６７】
適用例11
カルダモニン及びHSE型ミセルの薬物搭載製剤：
化粧品用難溶性成分である1.0gのカルダモニンを実施例1の9.0gのHSE型ギンセノシドナノミセルとともに50mlのビーカーに投入して、10mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後カルダモニンをカプセル化したナノミセルを調製した。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２６８】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと10mg、10mgと120mg又は10mgと90mgである、カルダモニンをカプセル化したナノミセルが調製される。
【０２６９】
適用例12
レスベラトロール及びRg2/Rk4/Rg6型正ミセルの薬物搭載製剤：
1.0gのレスベラトロールと実施例6の9.0gのRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ正ミセルを50mlのボトルに投入して、10mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、乾燥させ、レスベラトロールをカプセル化したナノミセルが調製される。
【０２７０】
ここで、上述の濾液のイメージング図を図6Aに示し、そして対照として1.0gのレスベラトロール50mlのボトルに加え、そして10mlの無水エタノールを加え、その後これを溶解し、得られたイメージング図を図6Bに示し、明らかに、レスベラトロール薬物搭載ミセル溶液が、透明（clear）且つ澄明（transparent）である一方で、対照サンプルは濁っていいた。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをブドウ糖溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２７１】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと10mg、10mgと120mg又は10mgと90mgである、レスベラトロールをカプセル化したナノミセルが調製される。
【０２７２】
適用例13
ビタミンC及びRk4型逆ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのビタミンCと180mgの実施例12のRk4型ギンセノシドナノ逆ミセルを50mlのビーカーに投入して、2mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後ビタミンCをカプセル化したナノミセルを調製した。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをオリーブ油溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２７３】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと10mg、10mgと120mg又は10mgと90mgである、ビタミンCをカプセル化したナノミセルが調製される。
【０２７４】
適用例14
ビタミンC及びRg6型逆ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのビタミンCと180mgの実施例13のRg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを50mlのビーカーに投入して、2mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後ビタミンCをカプセル化したナノミセルを調製した。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをオリーブ油溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２７５】
その他に、下記の薬物とギンセノシドナノミセルの質量におけるビタミンCミセル被包性溶解液も調製される：10mgと10mg、10mgと120mg或は10mgと90mg。
【０２７６】
適用例15
ビタミンC及びR4/Rg6型逆ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのビタミンCと180mgの実施例13のR4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを50mlのビーカーに投入して、2mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後ビタミンCをカプセル化したナノミセルを調製した。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをオリーブ油溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２７７】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと10mg、10mgと120mg又は10mgと90mgである、ビタミンCをカプセル化したナノミセルが調製される。
【０２７８】
適用例16
ビタミンC及びRg2/Rk4/Rg6型逆ミセルの薬物搭載製剤：
30mgのビタミンCと180mgの実施例13のRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノ逆ミセルを50mlのビーカーに投入して、2mlの無水エタノールを加え、その後これらをボルテックスミキサーにより溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、減圧下で濃縮し、乾燥させ、その後ビタミンCをカプセル化したナノミセルを調製した。試験により、ギンセノシドナノミセルの薬物搭載率は少なくとも99.5％であり、得られた薬物搭載ミセルをオリーブ油溶液に少なくとも10時間静置後、封入効率はなおも90％以上である。
【０２７９】
上記に加えて、薬物及びギンセノシドミセルの重量が以下の組み合わせ：10mgと10mg、10mgと120mg又は10mgと90mgである、ビタミンCをカプセル化したナノミセルが調製される。
【０２８０】
効果実施例
ギンセノシドナノミセルにおける粒状度測定、並びにギンセノシドナノミセル及び適用例の粒子測定
1. サンプルの調製及び測定方法
粒状度分析装置の仕様と分析条件は以下：型式ELS800；検出条件：直径1855.3nm；多分散性20994e-001；拡散パラメーター2.5347e-008；温度23.2℃；溶剤は水であり；屈折率0.9242；粘度0.9242；光散乱強度6560CPSである。
【０２８１】
480mgの実施例1のギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入し、2.0mlの無水エタノールを加え、ボルテックスミキサーにより撹拌及び溶解させ、0.45μmの濾紙で濾過し、1mlを採取し、99mlの5%ブドウ糖溶液に溶解する。粒状度分析装置により得られた測定結果を表7に示し、結果のデータを表19に記載する。
【０２８２】
【表１９】
0005952494.tif 000045
【０２８３】
480mgの実施例2のギンセノシドナノミセルを5mlのボトルに投入し、2.0mlの無水エタノールを加え、ボルテックスミキサーにより撹拌及び溶解し、0.45μmの濾紙で濾過し、1mlを採取し、99mlの5%ブドウ糖溶液に溶解する。粒状度分析装置により得られる測定結果を図8に示し、結果データは表20に記載する。
【０２８４】
【表２０】
0005952494.tif 000046
【０２８５】
粒状度分析装置により得られる適用例1の薬物搭載ミセルの測定結果を図2に示し、結果データを表21に記載する。
【０２８６】
【表２１】
0005952494.tif 000047
粒状度分析装置により得られる適用例7の薬物搭載ミセルの測定結果を図4に示し、結果データを表22に記載する。
【０２８７】
【表２２】
0005952494.tif 000048
【０２８８】
粒状度分析装置により得られる適用例8の薬物搭載ミセルの測定結果を図5に示し、結果データを表23に記載する。
【０２８９】
【表２３】
0005952494.tif 000049
【０２９０】
2. 本発明におけるサポニンナノミセル、及び現在の一般的なポリマーミセルの
性能パラメーターの対比結果を、結果を表24に示す。
【０２９１】
【表２４】
0005952494.tif 000050
【０２９２】
3、JEM-1400型透過型電子顕微鏡による、サポニンナノミセルの微細形態学試験：
実施例1、実施例2、及び実施例5における180mgのギンセノシドナノミセル、並びに適用例1の180mgのパクリタキセル薬物搭載ギンセノシドナノミセルをそれぞれ採取し、2.5mLの分散されるエタノールを添加し、超音波により分散を行い、そして微細形態学により試験し、各サンプルの試験結果を図9〜12に示す。
【０２９３】
ここで、図9は実施例1のHSE型ギンセノシドナノミセルの透過型電子顕微鏡像である。図10は実施例2のRg3/Rg5/Rk1型ギンセノシドナノミセルの透過型電子顕微鏡像である。図11は実施例5のRg2/Rk4/Rg6型ギンセノシドナノミセルの透過型電子顕微鏡像である。図12は適用例1のパクリタキセル薬物搭載ギンセノシドナノミセルの透過型電子顕微鏡像である。前記図から、本発明のサポニンナノミセルが実質的に球形であり、通常のミセル構造を有し、その構造が安定的であったことを理解することができる。
【０２９４】
本発明の特定の実施例は上述されるが、当該分野における当業者は、これらは単なる例示であり、本発明における原理及び趣旨から離れない条件において、これらの実施形態を変更又は改変することが可能であると理解すべきである。従って、本発明の保護範囲は特許請求の範囲により定義される。
【図２】
0005952494.tif 000063
【図３】
0005952494.tif 000064
【図４】
0005952494.tif 000065
【図５】
0005952494.tif 000066
【図６】
0005952494.tif 000067
【図７】
0005952494.tif 000068
【図８】
0005952494.tif 000069
【図９】
0005952494.tif 000070
【図１０】
0005952494.tif 000071
【図１１】
0005952494.tif 000072
【図１２】
0005952494.tif 000073
【図１】
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