(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）骨格筋量を増加するための、または、
（ｂ）骨格筋萎縮を低減するための
医薬の製造における、式Ｅ１またはＥ２：
【化１】
0006001060.tif 000143
Ｅ１
0006001060.tif 000144
Ｅ２
によって表される構造を有する化合物、または、その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩の使用であって、
式中、Ｒ51は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣＯＲ53から選択され、
Ｒ53は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｚ51は、ＮＲ54であり、
Ｒ54は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択されることを特徴とする、使用。
【請求項２】
前記化合物が、式Ｅ１：
【化２】
0006001060.tif 000145
Ｅ１
によって表される構造を有する、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
Ｒ51が、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される、請求項１または２に記載の使用。
【請求項４】
Ｒ51が、Ｈである、請求項１または２に記載の使用。
【請求項５】
Ｒ54が、Ｈである、請求項１または２に記載の使用。
【請求項６】
前記化合物が、式：
0006001060.tif 000146
によって表される構造を有する、請求項１に記載の使用。
【請求項７】
動物における筋委縮を治療するための医薬の製造における、請求項１、２または６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
動物における筋量を増加するための医薬の製造における、請求項１、２または６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
動物における筋肉形成を向上するための医薬の製造における、請求項１、２または６のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１１年６月６日に出願された米国仮出願第６１／４９３，９６９号の利益を主張し、その出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究の記載
本発明は、Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ  Ｍ．Ａｄａｍｓに対する助成金ＶＡ  Ｃａｒｅｅｒ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ａｗａｒｄ−２、Ｓｔｅｖｅｎ  Ｄ．Ｋｕｎｋｅｌに対するＶＡ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  Ａｗａｒｄ  Ｐｒｏｇｒａｍからの支援、ならびにＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｖｅｔｅｒａｎｓ  Ａｆｆａｉｒｓ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｅｒｖｉｃｅによって授与された助成金ＩＢＸ０００９７６Ａおよび国立衛生研究所・国立関節炎、骨格筋、皮膚疾患研究所（ＮＩＨ／ＮＩＡＭＳ）によって授与された助成金１Ｒ０１ＡＲ０５９１１５−０１の下で、政府支援により行われた。米国政府は本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
骨格筋萎縮は、飢餓、および加齢の一般的な影響の特徴である。それはまた、癌、慢性腎不全、鬱血性心不全、慢性呼吸器疾患、インスリン欠乏、急性重篤疾病、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ等の慢性感染症、筋除神経、ならびに筋肉使用を限定する多くの他の内科的病態および外科的病態を含む、重度のヒト疾病のほぼ普遍的な結果である。しかしながら、ヒト患者における骨格筋萎縮を予防または逆転させるための医学療法は、存在しない。結果として、数百万人の個人が、衰弱、転倒、骨折、日和見呼吸器感染症、および自立の喪失を含む、筋萎縮の後遺症を患う。骨格筋萎縮が個人、彼らの家族、および一般社会に課す負担は、極めて大きい。
【０００４】
骨格筋萎縮の病因は、よく理解されていない。それにもかかわらず、重要な進展がなされてきた。例えば、インスリン／ＩＧＦ１シグナル伝達が、筋肥大を促進し、筋萎縮を阻害するが、それが絶食または筋除神経等の萎縮誘導ストレスによって低減されることが、以前に記載されている（Ｂｏｄｉｎｅ  ＳＣ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｎａｔ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ３（１１）：１０１４−１０１９、Ｓａｎｄｒｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃｅｌｌ  １１７（３）：３９９−４１２１、Ｓｔｉｔｔ  ＴＮ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  １４（３）：３９５−４０３、Ｈｕ  Ｚ，ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  １１９（１０）：３０５９−３０６９、Ｄｏｂｒｏｗｏｌｎｙ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  １６８（２）：１９３−１９９、Ｋａｎｄａｒｉａｎ  ＳＣ＆Ｊａｃｋｍａｎ  ＲＷ（２００６）Ｍｕｓｃｌｅ＆ｎｅｒｖｅ  ３３（２）：１５５−１６５、Ｈｉｒｏｓｅ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ５０（２）：２１６−２２２、Ｐａｌｌａｆａｃｃｈｉｎａ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  ９９（１４）：９２１３−９２１８）。インスリン／ＩＧＦ１シグナル伝達の肥大効果および抗萎縮効果は、少なくとも部分的に、ホスホイノシチド３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）ならびにＡｋｔおよび哺乳類ラパマイシン標的複合体１（ｍＴＯＲＣｌ）を含むその下流エフェクターの増加した活性を通じて媒介される。Ｓａｎｄｒｉ  Ｍ（２００８）Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ）２３：１６０−１７０、Ｇｌａｓｓ  ＤＪ（２００５）Ｔｈｅ  ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆ｃｅｌｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ３７（１０）：１９７４−１９８４）。
【０００５】
別の重要な進展は、齧歯類の筋肉を萎縮させるマイクロアレイ研究からもたらされた（Ｌｅｃｋｅｒ  ＳＨ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｆａｓｅｂ  Ｊ  １８（１）：３９−５１、Ｓａｃｈｅｃｋ  ＪＭ，ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｆａｓｅｂ  Ｊ  ２１（１）：１４０−１５５、Ｊａｇｏｅ  ＲＴ，ｅｔ  ａｌ．Ｆａｓｅｂ  Ｊ  １６（１３）：１６９７−１７１２）。それらの研究は、複数の外見上異質の萎縮誘導ストレス（絶食、筋除神経、および重度の全身疾病を含む）が、骨格筋ｍＲＮＡ発現において多くの共通の変化を生じさせることを示した。それらの萎縮関連変化のうちの幾つかが、マウスにおける筋萎縮を促進し、これらには、アトロジンＩ／ＭＡＦｂｘおよびＭｕＲＦ１（タンパク質分解事象を触媒する２つのＥ３ユビキチンリガーゼ）の誘導をコードするｍＲＮＡ、ならびにＰＧＣ−ｌ  α（筋萎縮を阻害する転写共活性化因子）をコードするｍＲＮＡの抑制が含まれる（Ｓａｎｄｒｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  １０３（４４）：１６２６０−１６２６５、Ｗｅｎｚ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  １０６（４８）：２０４０５−２０４１０、Ｂｏｄｉｎｅ  ＳＣ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ  ２９４（５５４７）：１７０４−１７０８、Ｌａｇｉｒａｎｄ−Ｃａｎｔａｌｏｕｂｅ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｔｈｅ  ＥＭＢＯ  ｊｏｕｒｎａｌ  ２７（８）：１２６６−１２７６、Ｃｏｈｅｎ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  １８５（６）：１０８３−１０９５、Ａｄａｍｓ  Ｖ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ３８４（１）：４８−５９）。しかしながら、齧歯類の筋肉を萎縮させることにおいて増加または減少する多くの他のｍＲＮＡの役割は、未だに定義されていない。ヒト筋萎縮機構についてのデータは、更に一層限定されているが、アトロジンｌおよびＭｕＲＦ１が関与する可能性が高い（Ｌｅｇｅｒ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｆａｓｅｂ  Ｊ  ２０（３）：５８３−５８５、Ｄｏｕｃｅｔ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ａｍｅｒｉｃａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ａｎｄ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｃａｒｅ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １７６（３）：２６１−２６９、Ｌｅｖｉｎｅ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３５８（１３）：１３２７−１３３５）。
【０００６】
筋萎縮の生理学および病態生理学を理解することにおける進展にもかかわらず、筋肉成長の強力、効果的、かつ選択的な調節剤であり、また筋萎縮関連、および筋萎縮または筋肉量を増加させる必要性が関与する疾患の治療においても有効である化合物は、依然として希少である。これらの必要性および他の必要性が、本発明によって満たされる。
【発明の概要】
【０００７】
本明細書に具体化され、広範に記載される、本発明の目的（複数可）によれば、本発明は、一態様では、筋萎縮を治療する方法において有用な化合物に関する。化合物は、タクリンおよび類似体、ナリンゲニンおよび類似体、アラントインおよび類似体、コネッシンおよび類似体、トマチジンおよび類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体、ならびにベツリン酸および類似体、またはそれらの混合物から選択することができる。
【０００８】
タクリンおよび類似体は、構造
【化１】
0006001060.tif 000002
を有することができる。
【０００９】
ナリンゲニンおよび類似体は、構造
【化２】
0006001060.tif 000003
を有することができる。
【００１０】
アラントインおよび類似体は、構造
【化３】
0006001060.tif 000004
を有することができる。
【００１１】
コネッシンおよび類似体は、構造
【化４】
0006001060.tif 000005
を有することができる。
【００１２】
トマチジンおよび類似体は、構造
【化５】
0006001060.tif 000006
を有することができる。
【００１３】
ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体は、構造
【化６】
0006001060.tif 000007
を有することができる。
【００１４】
ベツリン酸および類似体は、構造
【化７】
0006001060.tif 000008
を有することができる。
【００１５】
開示される化合物は、哺乳動物、サカナ、またはトリ等の動物に有効量で投与されるとき、筋萎縮を治療することができる。例えば、ヒト。
【００１６】
また、ウルソール酸、またはベツリン酸類似体等のウルソール酸類似体、およびナリンゲニン等のナリンゲニン類似体を有効量で動物に投与することによって、動物における血糖を低下させる方法においても開示される。
【００１７】
また、ヒッペアストリン等のウンゲリン／ヒッペアストリン類似体を有効量で動物に投与することによって、動物における血糖を低下させる方法においても開示される。
【００１８】
開示される化合物はまた、筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進することを必要とする対象に、有効量の開示される化合物を提供することによって、それらを促進することもできる。
【００１９】
また、本方法において使用される化合物を含む、薬学的組成物も本明細書に開示される。また、本方法において使用される化合物を含む、キットも本明細書に開示される。
【００２０】
更なる態様では、更なる態様では、本発明は、筋萎縮シグネチャ（ｓｉｇｎａｔｕｒｅ）−１、筋萎縮シグネチャ−２、または両方の筋萎縮シグネチャを使用して特定される化合物に関する。依然として更なる態様では、本明細書に具体化され、広範に記載される、本発明の目的（複数可）、本発明は、一態様では、筋肉の健康を調節する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進するための方法、筋萎縮を阻害するための方法、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増加させるための方法、体脂肪を低減するための方法；血糖を低減するための方法、血液トリグリセリドを低減するための方法、血液コレステロールを低減するための方法、肥満を低減するための方法、脂肪性肝疾患を低減するための方法、および糖尿病を低減するための方法において有用な化合物、ならびに本方法において使用される化合物を含む、薬学的組成物に関する。
【００２１】
哺乳動物における筋萎縮を治療するための方法が開示され、本方法は、哺乳動物に有効量の化合物を投与することを含み、その化合物は、（ａ）筋萎縮シグネチャの複数の誘導されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における筋萎縮シグネチャの誘導されたｍＲＮＡの発現レベルと比較して、下方制御し、かつ／または（ｂ）筋萎縮シグネチャの複数の抑制されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における筋萎縮シグネチャの抑制されたｍＲＮＡの発現レベルと比較して、上方制御し、それによって、哺乳動物における筋萎縮を阻害する。
【００２２】
また、筋萎縮の治療を必要とする動物に有効量で投与されるときに筋萎縮を阻害する化合物を特定するための方法も開示され、本方法は、（ｉ）候補化合物を選択するステップと、（ｉｉ）筋萎縮シグネチャの複数の誘導されたｍＲＮＡおよび／または抑制されたｍＲＮＡの細胞の発現レベルへの候補化合物の効果を決定するステップとを含み、その候補化合物は、（ａ）筋萎縮シグネチャの誘導されたｍＲＮＡのうちの２つ以上が、候補化合物の不在下での同一の細胞型における筋萎縮シグネチャの誘導されたｍＲＮＡの発現レベルと比較して、下方制御される場合、および／または（ｂ）筋萎縮シグネチャの抑制されたｍＲＮＡのうちの２つ以上が、候補化合物の不在下での同一の細胞型における筋萎縮シグネチャの抑制されたｍＲＮＡの発現レベルと比較して、上方制御される場合、筋萎縮阻害に好適であると特定される。一態様では、本方法は、候補化合物を動物に投与することを更に含む。候補化合物は、タクリンおよび類似体、ナリンゲニンおよび類似体、アラントインおよび類似体、コネッシンおよび類似体、トマチジンおよび類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体、ならびにベツリン酸および類似体、またはそれらの混合物であり得る。
【００２３】
また、少なくとも１つの開示される化合物または少なくとも１つの開示される生成物を、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることを含む、筋萎縮、または筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／もしくは健康に老化する筋肉を促進する必要性に関連する薬を製造するための方法も開示される。
【００２４】
また、筋萎縮に関連する障害の治療、または筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／もしくは健康に老化する筋肉を促進する必要性のための薬の製造における、開示される化合物または開示される生成物の使用も開示される。
【００２５】
本発明の態様は、システム法定分類等の特定の法定分類において、記載され、特許請求され得るが、これは便宜上のものにすぎず、当業者であれば、本発明の各態様が、任意の法定分類において、記載され、特許請求され得ることを理解するであろう。別途明示的な定めのない限り、本明細書に記述される任意の方法または態様は、そのステップが具体的な順序で行われることを要求するものとして解釈されることは決して意図されない。したがって、方法の請求項が、その請求項または説明において、ステップが具体的な順序に限定されるべきことを特記していない場合には、順序が推論されることは決して意図されない。これは、ステップまたは作業フローの配置に関する論理上の事柄、文法構成もしくは句読点から生じる明白な意味、または本明細書に記載される態様の数または種類を含む、解釈のための任意の可能性のある言外の基準にも適用される。
【００２６】
本明細書に組み込まれ、その一部を構成する添付の図は、本発明の複数の態様を例証し、かつ説明と一緒に、本発明の原則を説明する機能を果たす。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】骨格筋成長を促進し、骨格筋萎縮を阻害する薬理学的化合物に至る、発見プロセスの図式的概観を示す。
【図２】ヒト筋萎縮シグネチャ−１を示す。
【図３】ヒト筋萎縮シグネチャ−２を示す。
【図４Ａ】健康なヒト成人における、骨格筋ｍＲＮＡ発現への絶食の影響についての代表的なデータを示す。
【図４Ｂ】健康なヒト成人における、骨格筋ｍＲＮＡ発現への絶食の影響についての代表的なデータを示す。
【図５】ヒト骨格筋からの代表的な絶食応答性ｍＲＮＡのｑＰＣＲ解析を示す。
【図６Ａ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図６Ｂ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図６Ｃ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図６Ｄ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図６Ｅ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図６Ｆ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図６Ｇ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図６Ｈ】絶食誘導性骨格筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図７Ａ】除神経誘導性筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図７Ｂ】除神経誘導性筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図７Ｃ】除神経誘導性筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図７Ｄ】除神経誘導性筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図７Ｅ】除神経誘導性筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定についての代表的なデータを示す。
【図８Ａ】筋肥大のウルソール酸媒介性誘導についての代表的なデータを示す。
【図８Ｂ】筋肥大のウルソール酸媒介性誘導についての代表的なデータを示す。
【図８Ｃ】筋肥大のウルソール酸媒介性誘導についての代表的なデータを示す。
【図８Ｄ】筋肥大のウルソール酸媒介性誘導についての代表的なデータを示す。
【図８Ｅ】筋肥大のウルソール酸媒介性誘導についての代表的なデータを示す。
【図９】マウス骨格筋特異的強縮性力へのウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ａ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｂ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｃ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｄ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｅ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｆ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｇ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｈ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｉ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｊ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１０Ｋ】筋肉成長、筋萎縮遺伝子発現、栄養遺伝子発現、および骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１１Ａ】ＩＧＦ１遺伝子エクソンの骨格筋発現、脂肪ＩＧＦ１  ｍＲＮＡ発現、および骨格筋インスリンシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１１Ｂ】ＩＧＦ１遺伝子エクソンの骨格筋発現、脂肪ＩＧＦ１  ｍＲＮＡ発現、および骨格筋インスリンシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１１Ｃ】ＩＧＦ１遺伝子エクソンの骨格筋発現、脂肪ＩＧＦ１  ｍＲＮＡ発現、および骨格筋インスリンシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１１Ｄ】ＩＧＦ１遺伝子エクソンの骨格筋発現、脂肪ＩＧＦ１  ｍＲＮＡ発現、および骨格筋インスリンシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１１Ｅ】ＩＧＦ１遺伝子エクソンの骨格筋発現、脂肪ＩＧＦ１  ｍＲＮＡ発現、および骨格筋インスリンシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１１Ｆ】ＩＧＦ１遺伝子エクソンの骨格筋発現、脂肪ＩＧＦ１  ｍＲＮＡ発現、および骨格筋インスリンシグナル伝達への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ａ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｂ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｃ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｄ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｅ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｆ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｇ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｈ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｉ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１２Ｊ】脂肪症および血漿脂質への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１３】食物消費、肝臓重量、腎臓重量、ならびに血漿ＡＬＴ、ビリルビン、およびクレアチニン濃度への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ａ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｂ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｃ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｄ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｅ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｆ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｇ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｈ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１４Ｉ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、体重増加、白色脂肪組織重量、骨格筋重量、褐色脂肪組織重量、およびエネルギー消費への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ａ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ｂ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ｃ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ｄ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ｅ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ｆ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ｇ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１５Ｈ】肥満および代謝症候群のマウスモデルにおける、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高脂血症への、ウルソール酸の効果についての代表的なデータを示す。
【図１６Ａ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｂ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｃ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｄ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｅ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｆ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｇ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｈ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１６Ｉ】オレアノール酸およびメトホルミンが骨格筋萎縮を低減しないという、代表的なデータを示す。
【図１７】ＰＴＰ１Ｂの標的阻害が骨格筋萎縮を阻害しないという、代表的なデータを示す。
【図１８】筋肉量および脂肪症への、ウルソール酸血清濃度の効果についての代表的なデータを示す。
【図１９】ベツリン酸が、ウルソール酸と同様に、不動化誘導性骨格筋萎縮を低減することを示す。マウスに、ビヒクル（トウモロコシ油）または指定される濃度のウルソール酸（Ａ）もしくはベツリン酸（Ｂ）を、腹腔内注射を介して１日に２回、２日間にわたって投与した。一方の前脛骨（ＴＡ）筋を外科用ステープルで不動化して、対側の可動性ＴＡを対象内の対照として残した。ビヒクル、または同一用量のウルソール酸もしくはベツリン酸を、腹腔内注射を介して１日２回、６日間にわたって投与した後、不動性および可動性ＴＡの重量を比較した。データは、１つの条件当たり９〜１０匹のマウスからの平均±標準誤差である。Ａはウルソール酸用量反応関係である。Ｂはベツリン酸用量反応関係である。
【図２０】ナリンゲニンが、不動化誘導性骨格筋萎縮を低減することを示す。マウスに、ビヒクル（トウモロコシ油）、ウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）、ナリンゲニン（２００ｍｇ／ｋｇ）、またはウルソール酸とナリンゲニン（双方とも２００ｍｇ／ｋｇで）を、腹腔内注射を介して１日に２回、２日間にわたって投与した。一方の前脛骨（ＴＡ）筋を外科用ステープルで不動化して、対側の可動性ＴＡを対象内の対照として残した。ビヒクル、または同一用量のウルソール酸および／またはナリンゲニンを、腹腔内注射を介して１日２回、６日間にわたって投与した後、不動性および可動性ＴＡの重量を比較した。データは、１つの条件当たり９〜１０匹のマウスからの平均±標準誤差である。
【図２１Ａ】ウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせが、耐糖能障害、肥満、および脂肪性肝疾患のマウスモデルにおける、空腹時血糖レベルを正常化することを示す。マウスに、標準的な食事（ｃｈｏｗ）、高脂肪食（ＨＦＤ）と、指定される濃度のナリンゲニン、または０．１５％ウルソール酸（ＵＡ）と指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを、５週間にわたって与えた後、空腹時血糖（Ａ）、総体重（Ｂ）、ＮＭＲによる脂肪量（Ｃ）、肝臓重量（Ｄ）、握力（Ｅ）、および骨格筋重量（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋および三頭筋、Ｆ）の測定を行った。破線は、標準的な食事を与えられた対照マウスにおけるレベルを示す。中空の記号は、指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。中実の記号は、０．１５％ＵＡと指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。データは、１つの条件当たり１２匹以上のマウスからの平均±標準誤差である。
【図２１Ｂ】ウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせが、耐糖能障害、肥満、および脂肪性肝疾患のマウスモデルにおける、空腹時血糖レベルを正常化することを示す。マウスに、標準的な食事、高脂肪食（ＨＦＤ）と、指定される濃度のナリンゲニン、または０．１５％ウルソール酸（ＵＡ）と指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを、５週間にわたって与えた後、空腹時血糖（Ａ）、総体重（Ｂ）、ＮＭＲによる脂肪量（Ｃ）、肝臓重量（Ｄ）、握力（Ｅ）、および骨格筋重量（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋および三頭筋、Ｆ）の測定を行った。破線は、標準的な食事を与えられた対照マウスにおけるレベルを示す。中空の記号は、指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。中実の記号は、０．１５％ＵＡと指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。データは、１つの条件当たり１２匹以上のマウスからの平均±標準誤差である。
【図２１Ｃ】ウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせが、耐糖能障害、肥満、および脂肪性肝疾患のマウスモデルにおける、空腹時血糖レベルを正常化することを示す。マウスに、標準的な食事、高脂肪食（ＨＦＤ）と、指定される濃度のナリンゲニン、または０．１５％ウルソール酸（ＵＡ）と指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを、５週間にわたって与えた後、空腹時血糖（Ａ）、総体重（Ｂ）、ＮＭＲによる脂肪量（Ｃ）、肝臓重量（Ｄ）、握力（Ｅ）、および骨格筋重量（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋および三頭筋、Ｆ）の測定を行った。破線は、標準的な食事を与えられた対照マウスにおけるレベルを示す。中空の記号は、指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。中実の記号は、０．１５％ＵＡと指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。データは、１つの条件当たり１２匹以上のマウスからの平均±標準誤差である。
【図２１Ｄ】ウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせが、耐糖能障害、肥満、および脂肪性肝疾患のマウスモデルにおける、空腹時血糖レベルを正常化することを示す。マウスに、標準的な食事、高脂肪食（ＨＦＤ）と、指定される濃度のナリンゲニン、または０．１５％ウルソール酸（ＵＡ）と指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを、５週間にわたって与えた後、空腹時血糖（Ａ）、総体重（Ｂ）、ＮＭＲによる脂肪量（Ｃ）、肝臓重量（Ｄ）、握力（Ｅ）、および骨格筋重量（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋および三頭筋、Ｆ）の測定を行った。破線は、標準的な食事を与えられた対照マウスにおけるレベルを示す。中空の記号は、指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。中実の記号は、０．１５％ＵＡと指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。データは、１つの条件当たり１２匹以上のマウスからの平均±標準誤差である。
【図２１Ｅ】ウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせが、耐糖能障害、肥満、および脂肪性肝疾患のマウスモデルにおける、空腹時血糖レベルを正常化することを示す。マウスに、標準的な食事、高脂肪食（ＨＦＤ）と、指定される濃度のナリンゲニン、または０．１５％ウルソール酸（ＵＡ）と指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを、５週間にわたって与えた後、空腹時血糖（Ａ）、総体重（Ｂ）、ＮＭＲによる脂肪量（Ｃ）、肝臓重量（Ｄ）、握力（Ｅ）、および骨格筋重量（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋および三頭筋、Ｆ）の測定を行った。破線は、標準的な食事を与えられた対照マウスにおけるレベルを示す。中空の記号は、指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。中実の記号は、０．１５％ＵＡと指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。データは、１つの条件当たり１２匹以上のマウスからの平均±標準誤差である。
【図２１Ｆ】ウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせが、耐糖能障害、肥満、および脂肪性肝疾患のマウスモデルにおける、空腹時血糖レベルを正常化することを示す。マウスに、標準的な食事、高脂肪食（ＨＦＤ）と、指定される濃度のナリンゲニン、または０．１５％ウルソール酸（ＵＡ）と指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを、５週間にわたって与えた後、空腹時血糖（Ａ）、総体重（Ｂ）、ＮＭＲによる脂肪量（Ｃ）、肝臓重量（Ｄ）、握力（Ｅ）、および骨格筋重量（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋および三頭筋、Ｆ）の測定を行った。破線は、標準的な食事を与えられた対照マウスにおけるレベルを示す。中空の記号は、指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。中実の記号は、０．１５％ＵＡと指定される濃度のナリンゲニンを含有するＨＦＤを与えられたマウスにおけるレベルを示す。データは、１つの条件当たり１２匹以上のマウスからの平均±標準誤差である。
【図２２Ａ】トマチジンが、不動化誘導性筋萎縮を低減することを示す。マウスに、ビヒクル（トウモロコシ油）または指定される濃度のトマチジンを、腹腔内注射を介して１日に２回、２日間にわたって投与した。一方の前脛骨（ＴＡ）筋を外科用ステープルで不動化し、対側の可動性ＴＡを対象内の対照として残した。ビヒクル、または同一用量のトマチジンを、腹腔内注射を介して１日２回、６日間にわたって投与した後、不動性および可動性ＴＡの重量を比較した。データは、１つの条件当たり９〜１０匹のマウスからの平均±標準誤差である。Ａは５０、１００、および２００ｍｇ／ｋｇトマチジンの効果であり。Ｂは５、１５、および５０ｍｇ／ｋｇトマチジンの効果である。
【図２２Ｂ】トマチジンが、不動化誘導性筋萎縮を低減することを示す。マウスに、ビヒクル（トウモロコシ油）または指定される濃度のトマチジンを、腹腔内注射を介して１日に２回、２日間にわたって投与した。一方の前脛骨（ＴＡ）筋を外科用ステープルで不動化し、対側の可動性ＴＡを対象内の対照として残した。ビヒクル、または同一用量のトマチジンを、腹腔内注射を介して１日２回、６日間にわたって投与した後、不動性および可動性ＴＡの重量を比較した。データは、１つの条件当たり９〜１０匹のマウスからの平均±標準誤差である。Ａは５０、１００、および２００ｍｇ／ｋｇトマチジンの効果であり。Ｂは５、１５、および５０ｍｇ／ｋｇトマチジンの効果である。
【図２３Ａ】トマチジンが、絶食誘導性筋萎縮を低減することを示す。データは、１つの条件当たり９〜１２匹のマウスからの平均±標準誤差である。マウスから食物を断ち、次いでビヒクル（トウモロコシ油）、または指定される濃度のウルソール酸もしくはトマチジンを、腹腔内注射によって投与した。１２時間後、マウスは、ビヒクルまたは同一用量のウルソール酸もしくはトマチジンの更なる腹腔内注射を受けた。１２時間後、骨格筋（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋）を採取し、計量した。Ａは２００ｍｇ／ｋｇウルソール酸および５０ｍｇ／ｋｇトマチジンの比較である。Ｂは５、１５、および５０ｍｇ／ｋｇトマチジンの効果である。
【図２３Ｂ】トマチジンが、絶食誘導性筋萎縮を低減することを示す。データは、１つの条件当たり９〜１２匹のマウスからの平均±標準誤差である。マウスから食物を断ち、次いでビヒクル（トウモロコシ油）、または指定される濃度のウルソール酸もしくはトマチジンを、腹腔内注射によって投与した。１２時間後、マウスは、ビヒクルまたは同一用量のウルソール酸もしくはトマチジンの更なる腹腔内注射を受けた。１２時間後、骨格筋（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、ヒラメ筋、四頭筋）を採取し、計量した。Ａは２００ｍｇ／ｋｇウルソール酸および５０ｍｇ／ｋｇトマチジンの比較である。Ｂは５、１５、および５０ｍｇ／ｋｇトマチジンの効果である。
【図２４】アラントイン、タクリン、ウンゲリン、ヒッペアストリン、およびコネッシンが、絶食誘導性筋萎縮を低減することを示す。マウスから食物を断ち、次いでビヒクル、または指定される用量のウルソール酸、トマチジン、アラントイン、タクリン、ウンゲリン、ヒッペアストリン、もしくはコネッシンを、腹腔内注射によって投与した。１２時間後、マウスは、ビヒクル、または同一用量のウルソール酸、トマチジン、アラントイン、タクリン、ウンゲリン、ヒッペアストリン、もしくはコネッシンの更なる腹腔内注射を受けた。１２時間後、骨格筋（両側前脛骨筋、腓腹（ｇａｓｔｒｃｏｃｎｅｍｉｕｓ）筋、およびヒラメ筋）を採取し、計量した。データは、１つの条件当たり９匹以上のマウスからの平均±標準誤差であり、同一の実験内のビヒクル処置動物と比べた、骨格筋重量における変化パーセントを示す。ウルソール酸、トマチジン、ウンゲリン、ヒッペアストリン、およびコネッシンに対するビヒクルは、トウモロコシ油であった。タクリンおよびアラントインに対するビヒクルは、食塩水であった。
【図２５】ヒッペアストリンおよびコネッシンが、空腹時血糖を低減することを示す。マウスから食物を断ち、次いでビヒクルまたは指定される用量のヒッペアストリンまたはコネッシンを、腹腔内注射によって投与した。１２時間後、マウスは、ビヒクルまたは同一用量のヒッペアストリンまたはコネッシンの更なる腹腔内注射を受けた。１２時間後、血糖を、尾静脈を介して測定した。データは、１つの条件当たり９匹以上のマウスからの平均±標準誤差である。  本発明の更なる利点は、一部には次の説明で述べられ、一部には説明から明白となるか、あるいは本発明の実施によって理解され得る。本発明の利点は、添付の特許請求の範囲において特に指摘される要素および組み合わせを用いて実現され、達成されるであろう。前述の概要および次の詳細な説明の双方は、例および説明となるものにすぎず、特許請求される本発明を制限しないことを理解されたい。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、本発明の次の詳細な説明および本明細書に含まれる実施例への参照によってより容易に理解され得る。
【００２９】
本化合物、組成物、物品、体系、装置、および／または方法が開示および記載される前に、それらが、別途明記されない限り具体的な合成法に、または別途明記されない限り特定の試薬に限定されず、したがって当然のことながら、異なり得ることを理解されたい。本明細書で使用される専門用語は、特定の態様を説明するためのものにすぎず、限定するようには意図されないこともまた理解されたい。本明細書に記載される方法および物質と同様または同等の任意の方法および物質を、本発明の実施または試験で使用することができるが、例となる方法および物質がここで記載される。
【００３０】
本明細書で言及される全ての刊行物は、刊行物を引用するものに関連する方法および／または物質を開示および記載するために、参照により本明細書に組み込まれる。本明細書で考察される刊行物は、本出願の出願日前に単にそれらを開示するためのみに提供される。本明細書には、先願発明に基づいて本発明がかかる刊行物に先行する権利がないことが認められると解釈されるものは何もない。更に、本明細書に提供される刊行物の日付は、実際の刊行日とは異なる可能性があり、独立して確認する必要があり得る。
【００３１】
Ａ．定義
本明細書で使用されるとき、有機化合物を含む、化合物に対する命名は、命名のための一般的名称、ＩＵＰＡＣ、ＩＵＢＭＢ、またはＣＡＳ推奨を使用して与えられ得る。１つ以上の立体化学的特徴が存在するとき、立体化学的順位、Ｅ／Ｚ表記等を指定するための、立体化学についてのカーン・インゴルド・プレローグ則が用いられ得る。当業者は、名称を与えられれば、命名規則を使用した化合物構造の系統的な縮小（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）によって、またはＣＨＥＭＤＲＡＷ（商標）（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅｓｏｆｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）等の市販のソフトウェアによってのいずれかで、化合物の構造を容易に確かめることができる。
【００３２】
本明細書および添付の特許請求の範囲に使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上、そうでないとする明確な指示がない限り、複数形の指示対象を含む。故に、例えば、「官能基」（ａ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｇｒｏｕｐ）、「アルキル」（ａｎ  ａｌｋｙｌ）、または「残基」（ａ  ｒｅｓｉｄｕｅ）への言及は、２つ以上のかかる官能基、アルキル、または残基等の混合物を含む。
【００３３】
範囲は、「約」１つの特定値から、および／または「約」別の特定値までとして、本明細書に表すことができる。かかる範囲が表されるとき、更なる態様は、一方の特定値から、および／または他方の特定値までを含む。同様に、「約」という先行詞の使用によって、値が近似値として示されるとき、その特定値は、更なる態様を形成することが理解されよう。範囲の各々の端点は、他方の端点に関連して、かつ他方の端点から独立して、有意であることが更に理解されよう。本明細書に開示される幾つかの値が存在し、各値がまた、その値自体に加えて「約」その特定値として本明細書に開示されることもまた理解される。例えば、値「１０」が開示される場合、「約１０」もまた開示される。２つの特定の単位の間の各単位がまた、開示されることもまた理解される。例えば、１０および１５が開示される場合、１１、１２、１３、および１４もまた、開示される。
【００３４】
本明細書および結びの特許請求の範囲における、組成物中の特定の要素または構成成分の重量部への言及は、重量部が表される組成物または物品中の、その要素または構成成分と、任意の他の要素または構成成分との間の重量関係を表す。故に、２重量部の構成成分Ｘおよび５重量部の構成成分Ｙを含有する化合物中において、ＸおよびＹは、２：５の重量比で存在し、更なる構成成分が化合物中に含有されているかどうかに関わらず、かかる比で存在する。
【００３５】
構成成分の重量パーセント（重量％）は、特にそれとは反対の定めのない限り、構成成分を含む製剤または組成物の総重量に基づく。
【００３６】
本明細書で使用されるとき、「任意の」または「任意に」という用語は、後述の事象または状況が生じる可能性も生じない可能性もあり、その説明が、該事象または状況が生じる事例、およびそれが生じない事例を含むことを意味する。
【００３７】
本明細書で使用されるとき、「筋萎縮シグネチャ−１」という用語は、筋萎縮に関連する変化した発現パターンを有する、１組のｍＲＮＡを指す。ｍＲＮＡは、筋萎縮の病態生理中に誘導されるかまたは抑制されるかのいずれかであり、本明細書に記載される方法を使用して特定された、ｍＲＮＡを含む。明確にするために、筋萎縮シグネチャ−１は、図２に記載される、誘導されたｍＲＮＡおよび抑制されたｍＲＮＡを含む。
【００３８】
本明細書で使用されるとき、「筋萎縮シグネチャ−２」という用語は、筋萎縮に関連する変化した発現パターンを有する、１組のｍＲＮＡを指す。ｍＲＮＡは、筋萎縮の病態生理中に誘導されるかまたは抑制されるかのいずれかであり、本明細書に記載される方法を使用して特定された、ｍＲＮＡを含む。明確にするために、筋萎縮シグネチャ−２は、図３に記載される、誘導されたｍＲＮＡおよび抑制されたｍＲＮＡを含む。
【００３９】
本明細書で使用されるとき、「筋萎縮シグネチャ−３」という用語は、筋萎縮に関連する変化した発現パターンを有する、１組のｍＲＮＡを指す。ｍＲＮＡは、筋萎縮の病態生理中に誘導されるかまたは抑制されるかのいずれかであり、本明細書に記載される方法を使用して特定された、ｍＲＮＡを含む。明確にするために、筋萎縮シグネチャ−３は、実施例２３に記載される、誘導されたｍＲＮＡおよび抑制されたｍＲＮＡを含む。
【００４０】
本明細書で使用されるとき、「筋萎縮シグネチャ−４」という用語は、筋萎縮に関連する変化した発現パターンを有する、１組のｍＲＮＡを指す。ｍＲＮＡは、筋萎縮の病態生理中に誘導されるかまたは抑制されるかのいずれかであり、本明細書に記載される方法を使用して特定された、ｍＲＮＡを含む。明確にするために、筋萎縮シグネチャ−４は、実施例２４に記載される、誘導されたｍＲＮＡおよび抑制されたｍＲＮＡを含む。
【００４１】
本明細書で使用されるとき、「対象」という用語は、投与の標的、例えば、動物を指す。故に、本明細書に開示される方法の対象は、哺乳類、魚類、鳥類、爬虫類、または両生類等の脊椎動物であり得る。代替的に、本明細書に開示される方法の対象は、ヒト、非ヒト霊長類、ウマ、ブタ、ウサギ、イヌ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ネコ、モルモット、サカナ、トリ、または齧歯類であり得る。この用語は、特定の年齢または性別を表さない。故に、オスであれメスであれ、成体および新生の対象、ならびに胎仔が包含されることが意図される。一態様では、対象は、哺乳動物である。患者は、疾患または障害に罹患した対象を指す。「患者」という用語は、ヒトおよび獣医学的対象を含む。開示される方法の幾つか態様では、対象は、投与するステップの前に、１つ以上の筋肉障害の治療に対する必要性があると診断されている。開示される方法の幾つか態様では、対象は、投与するステップの前に、筋肉の健康を促進することに対する必要性があると診断されている。開示される方法の幾つか態様では、対象は、投与するステップの前に、筋肉の健康を促進すること、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する必要性があると診断されている。
【００４２】
本明細書で使用されるとき、「治療」という用語は、疾患、病的状態、または障害を治癒させる、寛解させる、安定化する、または予防する意図での患者の医療管理を指す。この用語は、例えば、審美（ａｓｔｅｔｉｃ）および自己改善目的のための使用を含み、かかる使用は、機能性食品、医療食、エネルギーバー、エネルギードリンク、栄養補助食品（マルチビタミン等）中における開示される化合物の投与を含むが、これらに限定されない。この用語は、積極的治療、つまり、特定的に疾患、病的状態、または障害の改善を目的とする治療を含み、また、原因治療、つまり、関連する疾患、病的状態、または障害の原因の除去を目的とする治療も含む。加えて、この用語は、一時緩和治療、つまり、疾患、病的状態、または障害の治癒よりもむしろ症状の軽減のために設計される治療；予防的治療、つまり、関連する疾患、病的状態、または障害の発達を最小化するまたは部分的もしくは完全に阻害することを目的とする治療；ならびに支持治療、つまり、関連する疾患、病的状態、または障害の改善を目的とする別の具体的な療法を補充するために用いられる治療を含む。種々の態様では、その用語は、哺乳動物（例えば、ヒト）を含む対象の任意の治療を包含し、次のことを含む：（ｉ）疾患の素因があり得るが、それを有すると未だに診断されていない対象において疾患が生じるのを予防すること、（ｉｉ）疾患を阻害すること、すなわち、その発症を止めること、または（ｉｉｉ）疾患を軽減すること、すなわち、疾患の退縮を引き起こすこと。一態様では、対象は、霊長類等の哺乳動物であり、更なる態様では、対象は、ヒトである。「対象」という用語はまた、飼い慣らされた動物（例えば、ネコ、イヌ等）、家畜（例えば、畜牛、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、サカナ、トリ等）、および実験動物（例えば、マウス、ウサギ、ラット、モルモット、ミバエ等）も含む。
【００４３】
本明細書で使用されるとき、「予防する」または「予防すること」という用語は、とりわけ事前行為によって、何かが起こることを排除する、回避する、未然に防ぐ、食い止める、停止する、または妨げることを指す。低減、阻害、または予防が本明細書で使用される場合、別途具体的な記載のない限り、その他２つの語の使用もまた明示的に開示されることが理解される。
【００４４】
本明細書で使用されるとき、「診断された」という用語は、当業者、例えば、医師による身体検査を受け、本明細書に開示される化合物、組成物、または方法によって診断または治療され得る病態を有することが見出されたことを意味する。例えば、「筋萎縮障害であると診断された」は、当業者、例えば、医師による身体検査を受け、筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進することができる化合物または組成物によって診断または治療され得る病態を有することが見出されたことを意味する。更なる例として、「筋肉の健康を促進することに対する必要性があると診断された」とは、当業者、例えば、医師による身体検査を受け、筋萎縮を特徴とする病態、または筋肉の健康を促進すること、正常な筋肉機能を促進すること、および／もしくは健康に老化する筋肉を促進することが対象にとって有益であろう、他の疾患を有することが見出されたことを指す。かかる診断は、本明細書で考察される、筋萎縮等の障害を参照し得る。
【００４５】
本明細書で使用されるとき、「障害に対する治療を必要とすることが特定される」等の句は、障害の治療に対する必要性に基づく対象の選択を指す。例えば、対象は、当業者による先の診断に基づいて、障害（例えば、筋萎縮に関係する障害）の治療に対する必要性を有するとして特定され、その後、その障害に対する治療を受ける可能性がある。特定は、一態様では、診断を行う人物とは異なる人物によって行われ得ることが企図される。更なる態様では、投与は、その後投与を行う人物によって行われ得ることもまた企図される。
【００４６】
本明細書で使用されるとき、「投与すること」および「投与」という用語は、薬学的調製物を対象に提供する任意の方法を指す。かかる方法は、当業者に周知であり、経口投与、経皮投与、吸入による投与、経鼻投与、局所投与、膣内投与、眼内投与、耳内投与、脳内投与、直腸投与、舌下投与、頬側投与、ならびに静脈内投与、動脈内投与、筋肉内投与、および皮下投与等の注射剤を含む、非経口投与を含むが、これらに限定されない。投与は、連続的または間欠的であり得る。種々の態様では、調製物は、治療的に投与することができ、つまり、既存の疾患または病態を治療するために投与される。更なる種々の態様では、調製物は、予防的に投与することができ、つまり、疾患または病態の予防のために投与される。
【００４７】
本明細書で使用される「接触させること」という用語は、開示される化合物および細胞、標的受容体、または他の生物学的実体を、化合物が、標的（例えば、受容体、転写因子、細胞等）の活性に、直接、すなわち、標的自体と相互作用することによって、または間接的に、すなわち、標的の活性が依存している別の分子、補因子、因子、またはタンパク質と相互作用することによってのいずれかで影響を及ぼし得るような様態で、一緒にすることを指す。
【００４８】
本明細書で使用されるとき、「有効量」および「有効な量」という用語は、所望の結果を達成する、または所望でない病態に対して効果を有するのに十分な量を指す。例えば、「治療上有効量」は、所望の治療的結果を達成する、または所望でない症状に対して効果を有するのに十分であるが、一般に、有害な副作用を引き起こすには不十分な量を指す。いずれの特定患者のための具体的な治療上有効用量レベルも、治療されている障害および障害の重症度；用いられる具体的な組成物；患者の年齢、体重、全般的な健康、性別、および食生活；投与時間；投与経路；用いられる具体的な化合物の排泄率；治療の持続期間；用いられる具体的な化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物を含む、多様な要因、ならびに医療分野において周知の同様の要因に依存する。例えば、化合物の用量を、所望の治療効果を達成するために要求される用量よりも低いレベルで開始し、所望の効果が達成されるまで投薬量を徐々に増加させることは、当該技術分野の技術の範囲に十分に入る。所望される場合、有効な１日用量は、投与の目的で複数回用量に分割することができる。結果的に、単回用量組成物は、１日用量を構成するために、かかる量またはその約数を含有することができる。いかなる禁忌症の場合にも、投薬量は、個々の医師によって調整することができる。投薬量は、変動し得、１回以上の用量投与で毎日、１日以上にわたって投与され得る。所与のクラスの薬学的生成物のために適切な投薬量についての指針は、文献で見出すことができる。更なる種々の態様では、調製物は、「予防上有効量」、つまり、疾患または病態の予防のために有効な量で投与することができる。
【００４９】
本明細書で使用されるとき、「ＥＣ50」は、生物学的プロセスの、またはタンパク質、サブユニット、細胞小器官、リボ核タンパク質等を含む、プロセスの構成要素の、５０％強化または活性化のために必要とされる物質（例えば、化合物または薬物）の濃度または用量を指すことが意図される。ＥＣ50はまた、本明細書の他の箇所に更に定義される、インビボでの５０％強化または活性化のために必要とされる物質の濃度または用量も指す。代替的に、ＥＣ50は、ベースラインと最大応答との中間まで応答を刺激する化合物の濃度または用量を指すことができる。応答は、目的の生体反応に好都合および適切であるように、インビトロ系またはインビボ系において測定することができる。例えば、応答は、培養された筋肉細胞を使用してインビトロで、または単離された筋線維を用いるエクスビボ有機培養系で、測定することができる。代替的に、応答は、マウスおよびラットを含む、齧歯類等の適切な研究モデルを使用してインビボで測定することができる。マウスまたはラットは、肥満または糖尿病等の目的の表現型特性を有する、近交系であり得る。適宜、応答は、疾患プロセスを複製するために、遺伝子（単数または複数）が、適宜、導入またはノックアウトされた、トランスジェニックまたはノックアウトマウスまたはラットにおいて測定することができる。
【００５０】
本明細書で使用されるとき、「ＩＣ50」は、生物学的プロセスの、またはタンパク質、サブユニット、細胞小器官、リボ核タンパク質等を含む、プロセスの構成要素の、５０％阻害または縮小のために必要とされる物質（例えば、化合物または薬物）の濃度または用量を指すことが意図される。ＩＣ50はまた、本明細書の他の箇所に更に定義される、インビボでの５０％阻害または縮小のために必要とされる物質の濃度または用量も指す。代替的に、ＩＣ50はまた、物質の最大半量（５０％）阻害濃度（ＩＣ）または阻害用量も指す。反応は、目的の生体反応に好都合および適切であるように、インビトロ系またはインビボ系において測定することができる。例えば、応答は、培養された筋肉細胞を使用してインビトロで、または単離された筋線維を用いるエクスビボ有機培養系で、測定することができる。代替的に、応答は、マウスおよびラットを含む、齧歯類等の適切な研究モデルを使用してインビボで測定することができる。マウスまたはラットは、肥満または糖尿病等の目的の表現型特性を有する、近交系であり得る。適宜、応答は、疾患プロセスを再現するために、遺伝子（単数または複数）が、適宜、導入またはノックアウトされた、トランスジェニックまたはノックアウトマウスまたはラットにおいて測定することができる。
【００５１】
「薬学的に許容される」という用語は、生物学的にまたは他の方法で望ましくないことのない、すなわち、許容し難いレベルの望ましくない生物学的効果を引き起こすことも、有害な様態で相互作用することもない、物質を説明する。
【００５２】
本明細書で使用されるとき、「誘導体」という用語は、親化合物（例えば、本明細書で開示される化合物）の構造に由来する構造を有し、その構造が、本明細書で開示される構造に十分に類似しており、その類似性に基づいて、当業者によって、特許請求される化合物と同一のもしくは同様の活性および実用性を示すこと、または前駆体として、特許請求される化合物と同一のもしくは同様の活性および実用性を誘導することが予想されるであろう、化合物を指す。例示的な誘導体には、親化合物の塩、エステル、アミド、エステルまたはアミドの塩、およびＮ−オキシドが含まれる。
【００５３】
本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容される担体」という用語は、滅菌水溶液もしくは非水溶液、分散液、懸濁液、または乳濁液、ならびに使用直前に滅菌注射液もしくは分散液に再構成するための滅菌粉末を指す。好適な水性および非水性担体、希釈剤、溶媒、またはビヒクルの例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、カルボキシメチルセルロース、およびそれらの好適な混合物、植物油（オリーブ油等）、ならびにオレイン酸エチル等の注射用有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、例えば、レシチン等のコーティング剤の使用によって、分散液の場合には要求される粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、維持することができる。これらの組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、および分散剤等のアジュバントを含有することができる。微生物の作用の防止は、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸等の種々の抗菌剤および抗真菌剤によって確実にすることができる。糖類、塩化ナトリウム等の等張剤を含むこともまた望ましくあり得る。注射用剤型の持続的吸収は、吸収を遅延させる、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチン等の薬剤の組み込みによってもたらすことができる。注射用デポー形態は、薬物のマイクロカプセル封入マトリックス（ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌｅ  ｍａｔｒｉｃｅｓ）を、ポリラクチド−ポリグリコライド、ポリ（オルトエステル）、およびポリ（無水物）等の生分解性重合体中に形成することによって作製される。薬物対重合体の比および用いられる特定の重合体の性質に応じて、薬物放出の速度を制御することができる。デポー注射用製剤はまた、薬物を、身体組織と適合性のリポソームまたはマイクロエマルション中に封入することによって調製することができる。注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通す濾過によって、または使用直前に滅菌水もしくは他の滅菌注射剤媒体中に溶解もしくは分散させることができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことによって、滅菌することができる。好適な不活性担体は、ラクトース等の糖類を含むことができる。望ましくは、活性成分の粒子の少なくとも９５重量％は、０．０１〜１０マイクロメートルの範囲での有効粒径を有する。
【００５４】
本明細書および結びの特許請求の範囲で使用される、化学種の残基は、特定の反応スキームまたはその後の製剤もしくは化学生成物における化学種の結果として生じる生成物である、部分を指し、その部分が実際に化学種から得られたかどうかに関わらない。故に、ポリエステル中のエチレングリコール残基は、ポリエステル中の１つ以上の−ＯＣＨ2ＣＨ2Ｏ−単位を指し、エチレングリコールを使用してポリエステルを調製したかどうかに関わらない。同様に、ポリエステル中のセバシン酸残基は、ポリエステル中の１つ以上の−ＣＯ（ＣＨ2）8ＣＯ−部分を指し、その残基が、セバシン酸またはそのエステルを反応させてポリエステルを得ることによって得られるかどうかに関わらない。
【００５５】
本明細書で使用されるとき、「置換された」という用語は、有機化合物の全ての許容される置換基を含むことが企図される。広範な態様では、許容される置換基には、有機化合物の、非環式および環式の、分岐したおよび分岐していない、炭素環式および複素環式の、ならびに芳香族および非芳香族の置換基が含まれる。例示説明となる置換基には、例えば、後述のものが含まれる。許容される置換基は、適切な有機化合物に対して、１個以上であり、同じまたは異なり得る。本開示の目的のために、窒素等のヘテロ原子は、水素置換基、および／またはヘテロ原子の原子価を満たす、本明細書に記載される有機化合物の任意の許容される置換基を有することができる。本開示は、有機化合物の許容される置換基によって、いかなる様態でも限定されるようには意図されない。また、「置換」または「で置換された」という用語は、かかる置換が、置換される原子および置換基の許容される原子価に従うこと、ならびにその置換が安定な化合物、例えば、再編成、環化、排除等によって自発的に形質転換を経ない化合物をもたらすこと、という暗黙の但し書きを含む。ある特定の態様では、それとは反対の明示的指示がない限り、個々の置換基が更に任意に置換され得る（すなわち、更に置換されるか、または置換されない）こともまた企図される。
【００５６】
種々の用語を定義する際、「Ａ1」、「Ａ2」、「Ａ3」、および「Ａ4」は、本明細書で、種々の具体的な置換基を表すための包括記号として使用される。これらの記号は、本明細書で開示される置換基に限定されない任意の置換基であり得、それらが１つの事例で、ある特定の置換基であるように定義されるとき、それらは、別の事例では、何らかの他の置換基として定義され得る。
【００５７】
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｓ−ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、エイコシル、テトラコシル等の、１〜２４個の炭素原子の、分岐したまたは分岐していない飽和炭化水素基である。アルキル基は、環式または非環式であり得る。アルキル基は、分岐しているか、または非分岐であり得る。アルキル基はまた、置換されているか、または置換されていない可能性がある。例えば、アルキル基は、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アミノ、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ニトロ、シリル、スルホ−オキソ、またはチオールを含むが、これらに限定されない１個以上の基で置換され得る。「低級アルキル」基は、１〜６個の（例えば、１〜４個の）炭素原子を含有するアルキル基である。
【００５８】
本明細書全体を通じて、「アルキル」は、一般に、非置換アルキル基および置換アルキル基の両方を指すように使用されるが、置換アルキル基はまた、本明細書で、アルキル基上の具体的な置換基（複数可）を特定することによって特定的に言及される。例えば、「ハロゲン化アルキル」または「ハロアルキル」という用語は、１つ以上のハロゲン化物、例えば、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素で置換されているアルキル基を特定的に指す。「アルコキシアルキル」という用語は、後述の１個以上のアルコキシ基で置換されているアルキル基を特定的に指す。「アルキルアミノ」という用語は、後述の１個以上のアミノ基等で置換されているアルキル基を特定的に指す。「アルキル」が１つの事例で使用され、「アルキルアルコール」等の具体的な用語が別の事例で使用されるとき、「アルキル」という用語が「アルキルアルコール」等の特定的な用語までは指さないことを暗示するようには意図されない。
【００５９】
この慣習はまた、本明細書に記載される他の基についても使用される。つまり、「シクロアルキル」等の用語は、非置換および置換シクロアルキル部分の両方を指すが、置換部分は、加えて、本明細書で特定的に特定され得、例えば、特定の置換シクロアルキルが、例えば、「アルキルシクロアルキル」と称され得る。同様に、置換アルコキシが、具体的に、例えば、「ハロゲン化アルコキシ」と称され得、特定の置換アルケニルが、例えば、「アルケニルアルコール」であり得、その他も同様である。再び、「シクロアルキル」等の一般的用語および「アルキルシクロアルキル」等の特定的な用語を使用する慣習は、一般的用語が具体的な用語までは含まないことを暗示するようには意図されない。
【００６０】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という用語は、少なくとも３個の炭素原子からなる非芳香族炭素系環である。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ノルボルニル等が挙げられるが、これらに限定されない。「ヘテロシクロアルキル」という用語は、上に定義されるシクロアルキル基の一種であり、「シクロアルキル」という用語の意味の内に含まれ、ここで環の炭素原子のうちの少なくとも１個は、窒素、酸素、硫黄、またはリン等であるが、これらに限定されないヘテロ原子で置換されている。シクロアルキル基およびヘテロシクロアルキル基は、置換されているか、または置換されていない可能性がある。シクロアルキル基およびヘテロシクロアルキル基は、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アミノ、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ニトロ、シリル、スルホ−オキソ、またはチオールを含むが、これらに限定されない１個以上の基で置換され得る。
【００６１】
本明細書で使用される「ポリアルキレン基」という用語は、互いに結合された２個以上のＣＨ2基を有する基である。ポリアルキレン基は、式−（ＣＨ2）a−によって表すことができ、式中、「ａ」は、２〜５００の整数である。
【００６２】
本明細書で、エーテル結合を通じて結合されるアルキル基またはシクロアルキル基、つまり、「アルコキシ」基を指すように使用される、「アルコキシ」および「アルコキシル」という用語は、−ＯＡ1として定義することができ、式中、Ａ1は、上に定義されるアルキルまたはシクロアルキルである。「アルコキシ」はまた、直前で定義したアルコキシ基の重合体も含み、つまり、アルコキシは、−ＯＡ1−ＯＡ2または−ＯＡ1−（ＯＡ2）a−ＯＡ3等のポリエーテルであり得、式中、「ａ」は、１〜２００の整数であり、Ａ1、Ａ2、およびＡ3は、アルキル基および／またはシクロアルキル基である
【００６３】
本明細書で使用される「アルケニル」という用語は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含有する構造式を有する、２〜２４個の炭素原子の炭化水素基である。（Ａ1Ａ2）Ｃ＝Ｃ（Ａ3Ａ4）等の不斉構造は、ＥおよびＺ異性体の両方を含むことが意図される。これは、不斉アルケンが存在する本明細書における構造式において推定され得、またはそれは、結合記号Ｃ＝Ｃによって明示的に示され得る。アルケニル基は、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソ、またはチオールを含むが、これらに限定されない１個以上の基で置換され得る。
【００６４】
本明細書で使用される「シクロアルケニル」という用語は、少なくとも３個の炭素原子からなり、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合、すなわち、Ｃ＝Ｃを含有する、非芳香族炭素系環である。シクロアルケニル基の例としては、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、ノルボルネニル等が挙げられるが、これらに限定されない。「ヘテロシクロアルケニル」という用語は、上に定義されるシクロアルケニル基の一種であり、「シクロアルケニル」という用語の意味の内に含まれ、ここで環の炭素原子のうちの少なくとも１個は、窒素、酸素、硫黄、またはリン等であるが、これらに限定されないヘテロ原子で置換されている。シクロアルケニル基およびヘテロシクロアルケニル基は、置換されているか、または置換されていない可能性がある。シクロアルケニル基およびヘテロシクロアルケニル基は、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソ、またはチオールを含むが、これらに限定されない１個以上の基で置換され得る。
【００６５】
本明細書で使用される「アルキニル」という用語は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有する構造式を有する、２〜２４個の炭素原子の炭化水素基である。アルキニル基は、置換されていないか、あるいは本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソ、またはチオールを含むが、これらに限定されない１個以上の基で置換されている可能性がある。
【００６６】
本明細書で使用される「シクロアルキニル」という用語は、少なくとも７個の炭素原子からなり、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有する、非芳香族炭素系環である。シクロアルキニル基の例としては、シクロヘプチニル、シクロオクチニル、シクロノニニル等が挙げられるが、これらに限定されない。「ヘテロシクロアルキニル」という用語は、上に定義されるシクロアルケニル基の一種であり、「シクロアルキニル」という用語の意味の内に含まれ、ここで環の炭素原子のうちの少なくとも１個は、窒素、酸素、硫黄、またはリン等であるが、これらに限定されないヘテロ原子で置換されている。シクロアルキニル基およびヘテロシクロアルキニル基は、置換されているか、または置換されていない可能性がある。シクロアルキニル基およびヘテロシクロアルキニル基は、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ−オキソ、またはチオールを含むが、これらに限定されない１個以上の基で置換され得る。
【００６７】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、ベンゼン、ナフタレン、フェニル、ビフェニル、フェノキシベンゼン等を含むが、これらに限定されない、いずれの炭素系芳香族基も含有する基である。「アリール」という用語はまた、「ヘテロアリール」も含み、それは、芳香族基の環内に組み込まれた少なくとも１個のヘテロ原子を有する芳香族基を含有する基として定義される。ヘテロ原子の例としては、窒素、酸素、硫黄、およびリンが挙げられるが、これらに限定されない。同様に、また「アリール」という用語に含まれる「非ヘテロアリール」という用語は、ヘテロ原子を含有しない芳香族基を含有する基を定義する。アリール基は、置換されているか、または置換されていない可能性がある。アリール基は、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、ヘテロアリール、アルデヒド、アミノ、カルボン酸、エステル、エーテル、ハロゲン化物、ヒドロキシ、ケトン、アジド、ニトロ、シリル、スルホ‐オキソ、またはチオールを含むが、これらに限定されない１個以上の基で置換され得る。「ビアリール」という用語は、アリール基の特定の種類であり、「アリール」の定義に含まれる。ビアリールは、ナフタレンにあるように、縮合環構造を介して一緒に結合されるか、またはビフェニルにあるように、１つ以上の炭素−炭素結合を介して結合される、２個のアリール基を指す。
【００６８】
本明細書で使用される「アルデヒド」という用語は、式−Ｃ（Ｏ）Ｈによって表される。本明細書全体を通じて、「Ｃ（Ｏ）」は、カルボニル基、すなわち、Ｃ＝Ｏに対する略記法である。
【００６９】
本明細書で使用される「アミン」または「アミノ」という用語は、式−ＮＡ1Ａ2によって表され、式中、Ａ1およびＡ2は、独立して、水素であるか、または本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、もしくはヘテロアリール基であり得る。
【００７０】
本明細書で使用される「アルキルアミノ」という用語は、式−ＮＨ（−アルキル）によって表され、式中のアルキルは、本明細書に記載される。代表的な例としては、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、ブチルアミノ基、イソブチルアミノ基、（ｓｅｃ−ブチル）アミノ基、（ｔｅｒｔ−ブチル）アミノ基、ペンチルアミノ基、イソペンチルアミノ基、（ｔｅｒｔ−ペンチル）アミノ基、ヘキシルアミノ基等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７１】
本明細書で使用される「ジアルキルアミノ」という用語は、式−Ｎ（−アルキル）2によって表され、式中のアルキルは、本明細書に記載される。代表的な例としては、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジプロピルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基、ジブチルアミノ基、ジイソブチルアミノ基、ジ（ｓｅｃ−ブチル）アミノ基、ジ（ｔｅｒｔ−ブチル）アミノ基、ジペンチルアミノ基、ジイソペンチルアミノ基、ジ（ｔｅｒｔ−ペンチル）アミノ基、ジヘキシルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−プロピルアミノ基等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７２】
本明細書で使用される「カルボン酸」という用語は、式−Ｃ（Ｏ）ＯＨによって表される。
【００７３】
本明細書で使用される「エステル」という用語は、式−ＯＣ（Ｏ）Ａ1または−Ｃ（Ｏ）ＯＡ1によって表され、式中、Ａ1は、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、またはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用される「ポリエステル」という用語は、式−（Ａ1Ｏ（Ｏ）Ｃ−Ａ2−Ｃ（Ｏ）Ｏ）a−または−（Ａ1Ｏ（Ｏ）Ｃ−Ａ2−ＯＣ（Ｏ））a−によって表され、式中、Ａ1およびＡ2は、独立して、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、またはヘテロアリール基であり得、「ａ」は、１〜５００の整数である。「ポリエステル」は、少なくとも２個のカルボン酸基を有する化合物と、少なくとも２個のヒドロキシル基を有する化合物との間の反応によって生成される基を説明するために使用される用語としてのものである。
【００７４】
本明細書で使用される「エーテル」という用語は、式Ａ1ＯＡ2によって表され、式中、Ａ1およびＡ2は、独立して、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、またはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用される「ポリエーテル」という用語は、式−（Ａ1Ｏ−Ａ2Ｏ）a−によって表され、式中、Ａ1およびＡ2は、独立して、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、またはヘテロアリール基であり得、「ａ」は、１〜５００の整数である。ポリエーテル基の例としては、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、およびポリブチレンオキシドが挙げられる。
【００７５】
本明細書で使用される「ハロゲン化物」という用語は、ハロゲンフッ素、塩素、臭素、およびヨウ素を指す。
【００７６】
本明細書で使用される「ヘテロシクル」という用語は、環員のうちの少なくとも１つが炭素以外である、単環式および多環式芳香族または非芳香族環系を指す。ヘテロシクルには、アゼチジン、ジオキサン、フラン、イミダゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、モルホリン、オキサゾール、１，２，３−オキサジアゾール、１，２，５−オキサジアゾール、および１，３，４−オキサジアゾールを含むオキサゾール、ピペラジン、ピペリジン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、１，２，４，５−テトラジンを含むテトラジン、１，２，３，４−テトラゾールおよび１，２，４，５−テトラゾールを含むテトラゾール、１，２，３−チアジアゾール、１，２，５−チアジアゾール、および１，３，４−チアジアゾールを含むチアジアゾール、チアゾール、チオフェン、１，３，５−トリアジンおよび１，２，４−トリアジンを含むトリアジン、１，２，３−トリアゾール、１，３，４−トリアゾールを含むトリアゾール等が含まれる。
【００７７】
本明細書で使用される「ヒドロキシル」という用語は、式−ＯＨによって表される。
【００７８】
本明細書で使用される「ケトン」という用語は、式Ａ1Ｃ（Ｏ）Ａ2によって表され、式中、Ａ1およびＡ2は、独立して、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、またはヘテロアリール基であり得る。
【００７９】
本明細書で使用される「アジド」という用語は、式−Ｎ3によって表される。
【００８０】
本明細書で使用される「ニトロ」という用語は、式−ＮＯ2によって表される。
【００８１】
本明細書で使用される「ニトリル」という用語は、式−ＣＮによって表される。
【００８２】
本明細書で使用される「シリル」という用語は、式−ＳｉＡ1Ａ2Ａ3によって表され、式中、Ａ1、Ａ2、およびＡ3は、独立して、水素であるか、または本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルコキシ、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、もしくはヘテロアリール基であり得る。
【００８３】
本明細書で使用される「スルホ−オキソ」という用語は、−Ｓ（Ｏ）Ａ1、−Ｓ（Ｏ）2Ａ1、−ＯＳ（Ｏ）2Ａ1、または−ＯＳ（Ｏ）2ＯＡ1によって表され、式中、Ａ1は、水素であるか、または本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、もしくはヘテロアリール基であり得る。本明細書全体を通じて、「Ｓ（Ｏ）」は、Ｓ＝Ｏに対する略記法である。「スルホニル」という用語は、本明細書で、式−Ｓ（Ｏ）2Ａ1によって表されるスルホ−オキソ基を指すように使用され、式中、Ａ1は、水素であるか、または本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、もしくはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用される「スルホン」という用語は、式Ａ1Ｓ（Ｏ）2Ａ2によって表され、式中、Ａ1およびＡ2は、独立して、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、またはヘテロアリール基であり得る。本明細書で使用される「スルホキシド」という用語は、式Ａ1Ｓ（Ｏ）Ａ2によって表され、式中、Ａ1およびＡ2は、独立して、本明細書に記載されるアルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、シクロアルキニル、アリール、またはヘテロアリール基であり得る。
【００８４】
本明細書で使用される「チオール」という用語は、式−ＳＨによって表される。
【００８５】
本明細書で使用される「Ｒ1」、「Ｒ2」、「Ｒ3」、「Ｒn」（ｎは整数である）は、独立して、上に列挙される基のうちの１個以上を有することができる。例えば、Ｒ1が直鎖アルキル基である場合、アルキル基の水素原子のうちの１個は、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アルキル基、ハロゲン化物等で任意に置換され得る。選択される基に応じて、第１の基は、第２の基の内に組み込まれ得るか、または代替的に、第１の基は、第２の基に対してペンダント（すなわち、結合される）であり得る。例えば、「アミノ基を含むアルキル基」という表現では、アミノ基は、アルキル基の主鎖内に組み込まれ得る。代替的に、アミノ基は、アルキル基の主鎖に結合され得る。選択される基（複数可）の性質が、第１の基が第２の基に埋め込まれるか、それとも結合されるかを決定する。
【００８６】
本明細書に記載されるとき、本発明の化合物は、「任意に置換された」部分を含有してもよい。一般に、「置換された」という用語は、「任意に」という用語に続くか否かに関わらず、指定の部分の１個以上の水素が好適な置換基で交換されていることを意味する。別途指定されない限り、「任意に置換された」基は、基の各々置換可能な位置で好適な置換基を有してもよく、任意の所与の構造における１つを超える位置が、指定の基から選択される１個を超える置換基で置換され得るとき、その置換基は、あらゆる位置で同じであっても、異なってもよい。本発明によって想定される置換基の組み合わせは、好ましくは、安定なまたは化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものである。ある特定の態様では、それとは反対の明示的指示がない限り、個々の置換基が更に任意に置換され得る（すなわち、更に置換されているか、または置換されていない）こともまた企図される。
【００８７】
本明細書で使用される「安定な」という用語は、本明細書で開示される目的のうちの１つ以上のための、化合物の生成、検出、ならびにある特定の態様では、それらの回収、精製、および使用を可能にするための条件に供されるとき、実質的に変化させられない化合物を指す。
【００８８】
「任意に置換された」基の置換可能な炭素原子上の好適な一価の置換基は独立して、ハロゲン；−（ＣＨ2）0-4Ｒ○；−（ＣＨ2）0-4ＯＲ○；−Ｏ（ＣＨ2）0-4Ｒ○、−Ｏ−（ＣＨ2）0-4Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−（ＣＨ2）0-4ＣＨ（ＯＲ○）2；−（ＣＨ2）0-4ＳＲ○；Ｒ○で任意に置換されてもよい−（ＣＨ2）0-4Ｐｈ；Ｒ○で任意に置換されてもよい−（ＣＨ2）0-4Ｏ（ＣＨ2）0-1Ｐｈ；Ｒ○で任意に置換されてもよい−ＣＨ＝ＣＨＰｈ；Ｒ○で任意に置換されてもよい−（ＣＨ2）0-4Ｏ（ＣＨ2）0-1−ピリジル；−ＮＯ2；−ＣＮ；−Ｎ3；−（ＣＨ2）0-4Ｎ（Ｒ○）2；−（ＣＨ2）0-4Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｓ）Ｒ○；−（ＣＨ2）0-4Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＮＲ○2；−Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｓ）ＮＲ○2；−（ＣＨ2）0-4Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＮＲ○2；−Ｎ（Ｒ○）Ｎ（Ｒ○）Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−（ＣＨ2）0-4Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｃ（Ｓ）Ｒ○；−（ＣＨ2）0-4Ｃ（Ｏ）ＯＲ○；−（ＣＨ2）0-4Ｃ（Ｏ）ＳＲ○；−（ＣＨ2）0-4Ｃ（Ｏ）ＯＳｉＲ○3；−（ＣＨ2）0-4ＯＣ（Ｏ）Ｒ○；−ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ2）0-4ＳＲ−、ＳＣ（Ｓ）ＳＲ○；−（ＣＨ2）0-4ＳＣ（Ｏ）Ｒ○；−（ＣＨ2）0-4Ｃ（Ｏ）ＮＲ○2；−Ｃ（Ｓ）ＮＲ○2；−Ｃ（Ｓ）ＳＲ○；−ＳＣ（Ｓ）ＳＲ○、−（ＣＨ2）0-4ＯＣ（Ｏ）ＮＲ○2；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ○）Ｒ○；−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｃ（Ｏ）ＣＨ2Ｃ（Ｏ）Ｒ○；−Ｃ（ＮＯＲ○）Ｒ○；−（ＣＨ2）0-4ＳＳＲ○；−（ＣＨ2）0-4Ｓ（Ｏ）2Ｒ○；−（ＣＨ2）0-4Ｓ（Ｏ）2ＯＲ○；−（ＣＨ2）0-4ＯＳ（Ｏ）2Ｒ○；−Ｓ（Ｏ）2ＮＲ○2；−（ＣＨ2）0-4Ｓ（Ｏ）Ｒ○；−Ｎ（Ｒ○）Ｓ（Ｏ）2ＮＲ○2；−Ｎ（Ｒ○）Ｓ（Ｏ）2Ｒ○；−Ｎ（ＯＲ○）Ｒ○；−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ○2；−Ｐ（Ｏ）2Ｒ○；−Ｐ（Ｏ）Ｒ○2；−ＯＰ（Ｏ）Ｒ○2；−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ○）2；ＳｉＲ○3；−（Ｃ1-4直鎖もしくは分岐鎖アルキレン）Ｏ−Ｎ（Ｒ○）2；または−（Ｃ1-4直鎖もしくは分岐鎖アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｎ（Ｒ○）2であり、式中、各Ｒ○は、下に定義されるように置換されてもよく、かつ独立して、水素、Ｃ1-6脂肪族、−ＣＨ2Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ2）0-1Ｐｈ、−ＣＨ2−（５〜６員のヘテロアリール環）であるか、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和の環、部分的に不飽和の環、もしくはアリール環であるか、あるいは上の定義にもかかわらず、Ｒ○の２つの独立した出現は、それらの介在原子（複数可）と一緒になって、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する３〜１２員の飽和の多環式もしくは二環式環、部分的に不飽和の多環式もしくは二環式環、またはアリール多環式もしくは二環式環を形成し、それらは下に定義されるように置換されてもよい。
【００８９】
Ｒ○（またはＲ○の２つの独立した出現をそれらの介在原子と一緒にすることによって形成される環）上の好適な一価の置換基は、独立して、ハロゲン、−（ＣＨ2）0-2Ｒ●、−（ハロＲ●）、−（ＣＨ2）0-2ＯＨ、−（ＣＨ2）0-2ＯＲ●、−（ＣＨ2）0-2ＣＨ（ＯＲ●）2；−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｎ3、−（ＣＨ2）0-2Ｃ（Ｏ）Ｒ●、−（ＣＨ2）0-2Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ2）0-2Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−（ＣＨ2）0-2ＳＲ●、−（ＣＨ2）0-2ＳＨ、−（ＣＨ2）0-2ＮＨ2、−（ＣＨ2）0-2ＮＨＲ●、−（ＣＨ2）0-2ＮＲ●2、−ＮＯ2、−ＳｉＲ●3、−ＯＳｉＲ●3、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ●、−（Ｃ1-4直鎖もしくは分岐鎖アルキレン）Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、または−ＳＳＲ●であり、式中、各Ｒ●は、置換されていないか、あるいは「ハロ」に続く場合、それは１つ以上のハロゲンのみで置換され、かつ独立して、Ｃ1-4脂肪族、−ＣＨ2Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ2）0-1Ｐｈ、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和の環、部分的に不飽和の環、もしくはアリール環から選択される。Ｒ○の飽和炭素原子上の好適な二価の置換基には、＝Ｏおよび＝Ｓが含まれる。
【００９０】
「任意に置換された」基の飽和炭素原子上の好適な二価の置換基には、次のものが含まれる：＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＲ*2、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）Ｒ*、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ*、＝ＮＮＨＳ（Ｏ）2Ｒ*、＝ＮＲ*、＝ＮＯＲ*、−Ｏ（Ｃ（Ｒ*2））2-3Ｏ−、または−Ｓ（Ｃ（Ｒ*2））2-3Ｓ−（式中、Ｒ*の各々独立した出現は、水素、下に定義されるように置換されてもよいＣ1-6脂肪族、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する置換されていない５〜６員の飽和の環、部分的に不飽和の環、もしくはアリール環から選択される）。「任意に置換された」基のビシナルな置換可能炭素に結合する、好適な二価の置換基には、−Ｏ（ＣＲ*2）2-3Ｏ−が含まれ、式中、Ｒ*の各々独立した出現は、水素、下に定義されるように置換されてもよいＣ1-6脂肪族、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する置換されていない５〜６員の飽和の環、部分的に不飽和の環、もしくはアリール環から選択される。
【００９１】
Ｒ*の脂肪族基上の好適な置換基には、ハロゲン、−Ｒ●、−（ハロＲ●）、−ＯＨ、−ＯＲ●、−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−ＮＨ2、−ＮＨＲ●、−ＮＲ●2、または−ＮＯ2が含まれ、各Ｒ●は、置換されていないか、あるいは「ハロ」に続く場合、１つ以上のハロゲンのみで置換され、独立して、Ｃ1-4脂肪族、−ＣＨ2Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ2）0-1Ｐｈであるか、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和の環、部分的に不飽和の環、もしくはアリール環である。
【００９２】
「任意に置換される」基の置換可能な窒素上の好適な置換基には、−Ｒ†、−ＮＲ†2、−Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ†、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ2Ｃ（Ｏ）Ｒ†、−Ｓ（Ｏ）2Ｒ†、−Ｓ（Ｏ）2ＮＲ†2、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ†2、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ†2、または−Ｎ（Ｒ†）Ｓ（Ｏ）2Ｒ†が含まれ、各Ｒ†は独立して、水素、下に定義されるように置換されてもよいＣ1-6脂肪族、非置換−ＯＰｈであるか、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する置換されていない５〜６員の飽和の環、部分的に不飽和の環、もしくはアリール環であるか、あるいは上の定義にもかかわらず、Ｒ†の２つの独立した発現は、それらの介在原子（複数可）と一緒になって、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する、置換されていない３〜１２員の飽和の単環式もしくは二環式環、部分的に不飽和の単環式もしくは二環式環、またはアリール単環式もしくは二環式環を形成する。
【００９３】
Ｒ†の脂肪族基上の好適な置換基は、独立して、ハロゲン、−Ｒ●、−（ハロＲ●）、−ＯＨ、−ＯＲ●、−Ｏ（ハロＲ●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ●、−ＮＨ2、−ＮＨＲ●、−ＮＲ●2、または−ＮＯ2であり、各Ｒ●は、置換されていないか、あるいは「ハロ」に続く場合、１つ以上のハロゲンのみで置換され、独立して、Ｃ1-4脂肪族、−ＣＨ2Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ2）0-1Ｐｈであるか、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和の環、部分的に不飽和の環、もしくはアリール環である。
【００９４】
「脱離基」という用語は、結合電子をそれと同伴しながら、安定な種として置換され得る、電子求引能力を有する原子（または原子の群）を指す。好適な脱離基の例としては、トリフル酸塩、メシル酸塩、トシル酸塩、およびブロシル酸塩（ｂｒｏｓｙｌａｔｅ）を含むが、これらに限定されない、ハロゲン化物およびスルホン酸エステルが挙げられる。
【００９５】
「加水分解性基」および「加水分解性部分」という用語は、例えば、塩基性または酸性条件下で、加水分解を経ることが可能な官能基を指す。加水分解性残基の例としては、限定なしに、酸ハロゲン化物、活性カルボン酸、および当該技術分野で既知の種々の保護基が挙げられる（例えば、“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９を参照されたい）。
【００９６】
「有機残基」という用語は、炭素含有残基、すなわち、少なくとも１個の炭素原子を含む残基を定義し、上に定義される炭素含有基、残基、またはラジカルを含むが、これらに限定されない。有機残基は、種々のヘテロ原子を含有するか、または酸素、窒素、硫黄、リン等を含むヘテロ原子を通じて、別の分子に結合され得る。有機残基の例としては、アルキルまたは置換アルキル、アルコキシまたは置換アルコキシ、一置換または二置換アミノ、アミド基等が挙げられるが、これらに限定されない。有機残基は、好ましくは、１〜１８個の炭素原子、１〜１５個の、炭素原子、１〜１２個の炭素原子、１〜８個の炭素原子、１〜６個の炭素原子、または１〜４個の炭素原子を含むことができる。更なる態様では、有機残基は、２〜１８個の炭素原子、２〜１５個の、炭素原子、２〜１２個の炭素原子、２〜８個の炭素原子、２〜４個の炭素原子、または２〜４個の炭素原子を含むことができる。
【００９７】
「残基」という用語に非常に近い同義語は、「ラジカル」という用語であり、それは本明細書および結びの特許請求の範囲で使用されるとき、分子がどのように調製されるかに関わらず、本明細書に記載される分子の断片、基、または部分構造を指す。例えば、特定の化合物中の２，４−チアゾリジンジオンラジカルは、構造
【化８】
0006001060.tif 000009
を有し、チアゾリジンジオンを使用して、化合物を調製するかどうかに関わらない。幾つかの実施形態では、ラジカル（例えば、アルキル）は、１つ以上の「置換基ラジカル」がそこに結合されたことによって、更に修飾され得る（すなわち、置換アルキル）。本明細書の他の箇所でそれとは反対の指示がない限り、所与のラジカルにおける原子の数は、本発明に対して決定的ではない。
【００９８】
「有機ラジカル」は、その用語が本明細書で定義され使用されるとき、１個以上の炭素原子を含有する。有機ラジカルは、例えば、１〜２６個の炭素原子、１〜１８個の炭素原子、１〜１２個の炭素原子、１〜８個の炭素原子、１〜６個の炭素原子、または１〜４個の炭素原子を有することができる。更なる態様では、有機ラジカルは、２〜２６個の炭素原子、２〜１８個の炭素原子、２〜１２個の炭素原子、２〜８個の炭素原子、２〜６個の炭素原子、または２〜４個の炭素原子を有することができる。有機ラジカルはしばしば、有機ラジカルの炭素原子のうちの少なくとも幾つかに結合された水素を有する。無機原子を含まない有機ラジカルの一例は、５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチルラジカルである。幾つかの実施形態では、有機ラジカルは、ハロゲン、酸素、硫黄、窒素、リン等を含む、そこにまたはその中に結合された、１〜１０個の無機ヘテロ原子を含有することができる。有機ラジカルの例としては、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、一置換アミノ、二置換アミノ、アシルオキシ、シアノ、カルボキシ、カルボアルコキシ、アルキルカルボキサミド、置換アルキルカルボキサミド、ジアルキルカルボキサミド、置換ジアルキルカルボキサミド、アルキルスルホニル、アルキルスルフィニル、チオアルキル、チオハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、複素環式、または置換複素環式ラジカルが挙げられるが、これらに限定されず、それらの用語は、本明細書の他の箇所で定義される。ヘテロ原子を含む有機ラジカルの少数の非限定的な例としては、アルコキシラジカル、トリフルオロメトキシラジカル、アセトキシラジカル、ジメチルアミノラジカル等が挙げられる。
【００９９】
「無機ラジカル」は、その用語が本明細書で定義され使用されるとき、炭素原子を含有せず、したがって、炭素以外の原子のみを含む。無機ラジカルは、水素、窒素、酸素、ケイ素、リン、硫黄、セレン、ならびにフッ素、塩素、臭素、およびヨウ素等のハロゲンから選択される、原子の結合された組み合わせを含み、それは個々に存在するか、またはそれらの化学的に安定な組み合わせで一緒に結合され得る。無機ラジカルは、一緒に結合された、上に列挙される１０個以下の、または好ましくは１〜６個もしくは１〜４個の無機原子を有する。無機ラジカルの例としては、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲン、ニトロ、チオール、硫酸塩、リン酸塩、および同様の一般的に知られた無機ラジカルが挙げられるが、これらに限定されない。無機ラジカルは、その中で結合した周期表の金属元素（アルカリ金属、アルカリ土類金属、遷移金属、ランタニド金属、またはアクチニド金属等）を有しないが、かかる金属イオンは時に、硫酸塩、リン酸塩等の陰イオン性無機ラジカル、または同様の陰イオン性無機ラジカルに対する、薬学的に許容される陽イオンとしての機能を果たすことができる。本明細書の他の箇所で特に別途指示しない限り、無機ラジカルは、ボロン、アルミニウム、ガリウム、ゲルマニウム、ヒ素、スズ、鉛、もしくはテルル等の半金属元素、または貴ガス元素を含まない。
【０１００】
本明細書に記載される化合物は、１つ以上の二重結合を含有することができ、故に、シス／トランス（Ｅ／Ｚ）異性体、ならびに他の立体配座異性体を生じさせることができる。それとは反対の定めのない限り、本発明は、全てのかかる可能性のある異性体、ならびにかかる異性体の混合物を含む。
【０１０１】
それとは反対の定めのない限り、実線としてのみ示され、くさび形または破線としては示されない化学結合を有する式は、各々可能性のある異性体、例えば、各鏡像異性体およびジアステレオマー、ならびにラセミまたは非ラセミ（ｓｃａｌｅｍｉｃ）混合物等の異性体の混合物を企図する。本明細書に記載される化合物は、１つ以上の不斉中心を含有することができ、故に、ジアステレオマーおよび光学異性体を生じさせることができる。それとは反対の定めのない限り、本発明は、全てのかかる可能性のあるジアステレオマーならびにそれらのラセミ混合物、それらの実質的に純粋な分解鏡像異性体、全ての可能性のある幾何異性体、およびそれらの薬学的に許容される塩を含む。立体異性体の混合物、ならびに単離された特異的な立体異性体もまた含まれる。かかる化合物を調製するために使用される合成手順の経過中、または当業者に既知のラセミ化もしくは異性化手順を使用する際に、かかる手順の生成物は、立体異性体の混合物である可能性がある。
【０１０２】
多くの有機化合物は、平面偏光の平面を回転させる能力を有する光学活性型で存在する。光学活性化合物を説明する際、接頭辞ＤおよびＬまたはＲおよびＳが、そのキラル中心（複数可）の周りの分子の絶対配置を表すように使用される。接頭辞ｄおよびｌまたは（＋）および（−）が、化合物による平面偏光の回転を表記するために用いられ、このうち（−）は、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）またはｄの接頭辞を有する化合物は、右旋性である。所与の化学構造について、立体異性体と呼ばれる、これらの化合物は、それらが互いに重ね合わせ不可能な鏡像であることを除いて同一である。特定の立体異性体はまた、鏡像異性体と称され得、かかる異性体の混合物は、しばしば鏡像異性体混合物と呼ばれる。鏡像異性体の５０：５０混合物は、ラセミ混合物と称される。本明細書に記載される化合物のうちの多くが、１つ以上のキラル中心を有し得、したがって異なる鏡像異性型で存在し得る。所望される場合、キラル炭素を、アスタリスク（＊）で表記することができる。キラル炭素への結合が開示される式中で直線として図示されるとき、キラル炭素の（Ｒ）および（Ｓ）両方の配置、故にその鏡像異性体および混合物の両方が式内に包含されることが理解される。当該技術分野で使用されるように、キラル炭素についての絶対配置を明記することが所望されるとき、キラル炭素への結合の一方は、くさび形として示され得（平面より上の原子への結合）、他方は、１組のまたはくさび形の短い平行線として示すことができる（平面より下の原子への結合）。カーン・インゴルド・プレローグ系を使用して、（Ｒ）または（Ｓ）配置をキラル炭素に割り当てることができる。
【０１０３】
本明細書に記載される化合物は、それらの天然の同位体存在度および非天然の存在度の両方での原子を含む。開示される化合物は、１個以上の原子が、自然界で典型的に見出される原子質量または質量数から異なる、原子質量または質量数を有する原子によって置換されるという事実を除いて記載されるものと同一である、同位体標識されるか、同位体置換される化合物であり得る。本発明の化合物中に組み込むことができる同位体の例としては、それぞれ、2Ｈ、3Ｈ、13Ｃ、14Ｃ、15Ｎ、18Ｏ、17Ｏ、35Ｓ、18Ｆ、および36Ｃｌ等の、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、および塩素の同位体が挙げられる。化合物は、それらのプロドラッグを更に含み、上述の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する、該化合物のまたは該プロドラッグの薬学的に許容される塩が本発明の範囲内にある。本発明のある特定の同位体標識された化合物、例えば、3Ｈおよび14Ｃ等の放射性同位体が組み込まれる化合物は、薬物および／または基質組織分布アッセイに有用である。トリチウム標識、すなわち3Ｈ、および炭素−１４同位体、すなわち14Ｃは、それらの調製の簡便性および検出性から特に好ましい。更に、重水素、すなわち2Ｈ等のより重い同位体での置換は、より大きい代謝安定性からもたらされるある特定の治療的利点、例えば、インビボでの半減期の増加または必要投薬量の低減を提供することができ、故に、状況によっては好ましい場合がある。本発明の同位体標識された化合物およびそのプロドラッグは、一般に、下記の手順を行うことによって、同位体標識されていない試薬を、容易に入手可能な同位体標識された試薬で置き換えることによって調製することができる。
【０１０４】
本発明に記載される化合物は、溶媒和物として存在し得る。幾つかの場合、溶媒和物を調製するのに使用される溶媒は水溶液であり、そのためその溶媒和物は、しばしば水和物と称される。化合物は、水和物として存在し得、それは、例えば、溶媒または水溶液からの結晶化によって得ることができる。この関連において、１つ、２つ、３つ、またはいずれの任意数の溶媒和物または水分子は、本発明による化合物と組み合わさり、溶媒和物および水和物を形成することができる。それとは反対の定めのない限り、本発明は、全てのかかる可能性のある溶媒和物を含む。
【０１０５】
「共結晶」という用語は、それらの安定性を非共有結合性の相互作用から受ける、２つ以上の分子の物理的会合を意味する。この分子複合体の１つ以上の構成成分は、結晶格子中の安定なフレームワークを提供する。ある特定の事例では、ゲスト分子は、水和物または溶媒和物として結晶格子中に組み込まれ、例えば、「Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｈａｓｅｓ．Ａｌｍａｒａｓｓｏｎ，Ｏ．，ｅｔ．ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｒｏｙａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１８８９−１８９６，２００４を参照されたい。共結晶の例としては、ｐ−トレンスルホン酸およびベンゼンスルホン酸が挙げられる。
【０１０６】
本明細書に記載されるある特定の化合物は、互変異性体の平衡として存在し得ることもまた理解される。例えば、α−水素を有するケトンは、ケト型およびエノール型の平衡で存在し得る。
【化９】
0006001060.tif 000010
【０１０７】
同様に、Ｎ−水素を有するアミドは、アミド型およびイミド酸型の平衡で存在し得る。それとは反対の定めのない限り、本発明は、全てのかかる可能性のある互変異性体を含む。
【０１０８】
化学物質は、多形型または修飾と称される、異なる秩序の状態で存在する固体を形成することで知られている。多形物質の異なる修飾形は、それらの物理的特性において大幅に異なり得る。本発明による化合物は、異なる多形型で存在し得、それによって特定の修飾が準安定であることが可能となる。それとは反対の定めのない限り、本発明は、全てのかかる可能性のある多形型を含む。
【０１０９】
幾つかの態様では、化合物の構造は、式
【化１０】
0006001060.tif 000011
によって表すことができ、それは、式
【化１１】
0006001060.tif 000012
と同等であることが理解され、式中、ｎは、典型的に整数である。つまり、Ｒnは、５つの独立した置換基、Ｒn(a)、Ｒn(b)、Ｒn(c)、Ｒn(d)、Ｒn(e)を表すことが理解される。「独立した置換基」とは、各Ｒ置換基が独立して定義され得ることを意味する。例えば、１つの事例においてＲn(a)がハロゲンである場合、Ｒn(b)は、その事例において必ずしもハロゲンであるわけではない。
【０１１０】
本明細書で開示されるある特定の物質、化合物、組成物、および構成成分は、商業的に得るか、または当業者に一般に知られる技法を使用して容易に合成することができる。例えば、開示される化合物および組成物を調製する際に使用される出発物質および試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓ．）、Ａｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ（Ｍｏｒｒｉｓ  Ｐｌａｉｎｓ，Ｎ．Ｊ．）、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ，Ｐａ．）、もしくはＳｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）等の商業的な供給業者から入手可能であるか、または当業者に知られている方法によって、Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ’ｓ  Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １−１７（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１）、Ｒｏｄｄ’ｓ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １−５  ａｎｄ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｌｓ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９８９）、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌｕｍｅｓ  １−４０（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１）、Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ）、およびＬａｒｏｃｋ’ｓ  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ（ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｉｎｃ．，１９８９）等の参考文献に述べられる手順に従って、調製することができる。
【０１１１】
別途明示的な定めのない限り、本明細書に記述されるいかなる方法も、そのステップが具体的な順序で行われることを要求するものとして解釈されることは決して意図されない。したがって、方法の特許請求が、そのステップによって従われるべき順序を実際に列挙しない場合、または特許請求の範囲または説明において、ステップが具体的な順序に限定されるべきであるという別途具体的な定めのない限り、いかなる点でも順序が推定されることは決して意図されない。これは、ステップまたは作業フローの構成に関する論理上の事柄、文法構成または句読点から生じる明白な意味、および本明細書に記載される実施形態の数または種類を含む、解釈についてのいずれの可能性のある非明示的根拠にも適用される。
【０１１２】
本発明の組成物を調製するために使用されるべき構成成分、ならびに本明細書で開示される方法内で使用されるべき組成物自体が開示される。これらのおよび他の物質が本明細書に開示されているが、これらの物質の組み合わせ、サブセット、相互作用、群等が開示されるとき、これらの化合物の各々種々の個々のおよび集合的な組み合わせおよび置換の具体的な参照が明示的に開示されない可能性があるが、各々が具体的に企図され、本明細書に記載されることが理解される。例えば、特定の化合物が開示および考察され、また化合物を含む幾つかの分子に対して行うことができる幾つかの修飾が考察される場合、特にそれとは反対の指示がない限り、化合物のありとあらゆる組み合わせおよび置換、ならびに可能な修飾が具体的に企図される。故に、分子Ａ、Ｂ、およびＣのクラス、ならびに分子Ｄ、Ｅ、およびＦのクラスが開示され、また組み合わせ分子Ａ−Ｄの一例が開示される場合、たとえ各々が個々に列挙されていなくても、各々は個々にかつ集合的に企図され、つまり、組み合わせＡ−Ｅ、Ａ−Ｆ、Ｂ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、Ｃ−Ｄ、Ｃ−Ｅ、およびＣ−Ｆが、開示されていると見なされる。同様に、これらのいずれのサブセットまたは組み合わせもまた開示される。故に、例えば、Ａ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、およびＣ−Ｅの下位群は、開示されていると見なされる。この概念は、本発明の組成物を作製および使用する方法におけるステップを含むが、これらに限定されない、本出願の全ての態様に適用される。故に、行われ得る多様な追加的ステップが存在する場合、これらの追加的ステップの各々は、本発明の方法の任意の特定の実施形態または実施形態の組み合わせと共に行われ得ることが理解される。
【０１１３】
本明細書で開示される組成物は、ある特定の機能を有することが理解される。開示される機能を行うためのある特定の構造上の要件が本明細書で開示され、開示される構造に関連する同一の機能を行うことができる多様な構造が存在し、これらの構造は典型的に同一の結果を達成するであろうことが理解される。
Ｂ．化合物
【０１１４】
一態様では、本発明は、筋萎縮の阻害を必要とする対象に、本明細書に記載される化合物から選択される有効量の化合物またはその類似体を提供することによって筋萎縮を阻害するための方法において有用な化合物、ならびに本方法において使用される化合物を含む、薬学的組成物に関する。更なる態様では、本発明は、筋萎縮シグネチャ−１、筋萎縮シグネチャ−２、または両方の筋萎縮シグネチャを使用して特定される化合物に関する。更なる態様では、本発明は、筋肉の健康を調節するための方法、筋萎縮を阻害するための方法、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増加させるための方法、体脂肪を低減するための方法；血糖を低減するための方法、血液トリグリセリドを低減するための方法、血液コレステロールを低減するための方法、肥満を低減するための方法、脂肪性肝疾患を低減するための方法、および糖尿病を低減するための方法において有用な化合物、ならびに本方法において使用される化合物を含む、薬学的組成物に関する。
【０１１５】
一態様では、本発明の化合物は、筋肉障害の治療において有用である。更なる態様では、筋肉障害は、栄養失調、筋廃用（随意または不随意の床上安静に続発する）、神経疾患（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重篤疾病ニューロパシー、脊髄損傷、または末梢神経損傷を含む）、整形外科的損傷、ギプス固定、および他の術後の四肢不動化形態、慢性疾患（癌、鬱血性心不全、慢性肺疾患、慢性腎不全、慢性肝臓疾患、糖尿病、クッシング症候群、成長ホルモン欠乏、ＩＧＦ−Ｉ欠乏、アンドロゲン欠乏、エストロゲン欠乏、およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核等の慢性感染症を含む）、熱傷、敗血症、機械的呼吸（ｖｅｎｔｉｌｉａｔｉｏｎ）を必要とする他の疾病、薬物誘導性筋肉疾患（グルコルチコイド（ｇｌｕｃｏｒｔｉｃｏｉｄ）誘導性ミオパシーおよびスタチン誘導性ミオパシー等）、主に骨格筋を侵す遺伝子疾患（筋ジストロフィーおよび筋強直性ジストロフィー等）、骨格筋を侵す自己免疫疾患（多発性筋炎および皮膚筋炎等）、宇宙飛行、または加齢関連サルコペニアに続発する骨格筋萎縮であり得る。
【０１１６】
各々開示される誘導体は、任意に更に置換され得ることが企図される。いずれか１つ以上の誘導体が、本発明から任意に省略され得ることもまた企図される。開示される化合物は、開示される方法によって提供され得ることが理解される。開示される化合物は、開示される使用方法において用いられ得ることもまた理解される。
【０１１７】
１．タクリンおよび類似体
一態様では、化合物は、タクリン類似体であり得る。
【０１１８】
一態様では、タクリン類似体は、式
【化１２】
0006001060.tif 000013
によって表される構造を有し、
式中、Ｒ13aおよびＲ13bは一緒に、
【化１３】
0006001060.tif 000014
から選択される環状体を構成し、
式中、Ｑ11は、ＮおよびＣＲ13cから選択され、
Ｑ12は、ＮおよびＣＲ13dから選択され、
Ｑ13およびＱ14は独立して、ＣＲ13cＲ13d、Ｏ、Ｓ、およびＮＲ14cから選択され、
Ｑ15は、ＣＲ13cＲ13d、Ｏ、Ｓ、およびＮＲ14cから選択され、
Ｑ16は、ＮおよびＣＲ13cから選択され、
Ｑ17およびＱ18は独立して、ＣＲ13cＲ13d、Ｏ、Ｓ、およびＮＲ14cから選択され、
Ｒ11およびＲ12は独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ13c、Ｒ13d、Ｒ13e、およびＲ13fは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
各Ｒ14cは独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ14aおよびＲ14bは一緒に、
【化１４】
0006001060.tif 000015
から選択される環状体を構成し、
式中、Ｑ19、Ｑ20、Ｑ21、Ｑ22、Ｑ23、Ｑ24、およびＱ25の各々は独立して、ＣＲ17aＲ17b、Ｏ、Ｓ、およびＮＲ18から選択され、
Ｒ16aおよびＲ16aは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ17aおよびＲ17bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
各Ｒ18は独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
各Ｒ15は独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
各ｎは独立して、０、１、および２から選択され、
ｍは、１および２から選択され、
ｐは、１、２、および３から選択される化合物、または、
その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩である。
【０１１９】
一態様では、化合物（Ａ）は、式
【化１５】
0006001060.tif 000016
によって表される構造を有し、
式中、Ｒ12は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ13c、Ｒ13d、Ｒ13e、およびＲ13fは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｑ19およびＱ20は独立して、ＣＲ17aＲ17b、Ｏ、Ｓ、およびＮＲ18から選択され、
Ｒ17aおよびＲ17bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、Ｃ２〜Ｃ９ヘテロシクリルであり、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
各Ｒ18は独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
ｎは、０、１、および２から選択される。
【０１２０】
別の態様では、Ｒ12は、Ｈであり、Ｒ13c、Ｒ13d、Ｒ13e、およびＲ13fは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、およびアミノであり、Ｑ19およびＱ20は独立して、ＣＲ17aＲ17b、Ｏ、Ｓ、およびＮＲ18から選択され、式中、Ｒ17aおよびＲ17bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、およびアミノであり、各Ｒ18は独立して、Ｈであり、ｎは、０、１、および２から選択される。
【０１２１】
別の態様では、Ｒ12は、Ｈであり、Ｒ13c、Ｒ13d、Ｒ13e、およびＲ13fは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、およびアミノであり、Ｑ19およびＱ20は独立して、Ｃ  Ｒ17aＲ17bから選択され、式中、Ｒ17aおよびＲ17bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、およびアミノであり、ｎは、１である。
【０１２２】
別の態様では、Ｒ12は、Ｈであり、Ｒ13c、Ｒ13d、Ｒ13e、およびＲ13fは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、およびヒドロキシルから選択され、Ｑ19およびＱ20は独立して、ＣＲ17aＲ17bから選択され、式中、Ｒ17aおよびＲ17bは独立して、Ｈであり、ｎは、１である。
【０１２３】
別の態様では、Ｒ12は、Ｈであり、Ｒ12は、Ｈであり、Ｒ13c、Ｒ13d、Ｒ13e、およびＲ13fは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびハロから選択され、Ｑ19およびＱ20は独立して、ＣＲ17aＲ17bから選択され、式中、Ｒ17aおよびＲ17bは独立して、Ｈであり、ｎは、１である。
【０１２４】
別の態様では、式は、
【化１６】
0006001060.tif 000017
である。
【０１２５】
２．ナリンゲニンおよび類似体
一態様では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。
【０１２６】
一態様では、ナリンゲニン類似体は、式
【化１７】
0006001060.tif 000018
によって表される構造を有し、
式中、各-----は、一重結合または二重結合から選択される共有結合を表し、
Ｒ21a、Ｒ21b、Ｒ21c、Ｒ21d、およびＲ21eは独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｏ−グルコシル、ハロ、シアノ、アミノ、ニトロ、ニトロソ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、アシル、フェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ベンジル−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択され、
Ｒ22は、Ｈ、ＯＨ、Ｏ−グルコシル、ハロ、シアノ、アミノ、ニトロ、ニトロソ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、アシルフェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ベンジル−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択され、
Ｒ23a、Ｒ23b、Ｒ23c、およびＲ23dは独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｏ−グルコシルハロ、シアノ、アミノ、ニトロ、ニトロソ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、Ｃ１〜Ｃ２０アルケニル、Ｃ１〜Ｃ２０アルキニル、Ｃ１〜Ｃ２０アルケニニル、Ｃ１〜Ｃ２０アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、アシル、フェニル−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ベンジル−Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択され、
Ｒ15は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｚは、ＯおよびＳから選択され、
Ｙは、ＯおよびＳから選択される化合物、または、
その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩であり、
その化合物は、構造
【化１８】
0006001060.tif 000019
を有しない。
【０１２７】
一態様では、-----は、共有一重結合を示す。別の態様では、-----は、共有二重結合を示す。
【０１２８】
別の態様では、Ｚは、Ｏであり、Ｙは、Ｏである。
【０１２９】
別の態様では、Ｒ21a、Ｒ21b、Ｒ21c、Ｒ21d、およびＲ21eは独立して、ＨおよびＯＨから選択され、Ｒ22は、ＨおよびＯＨであり、Ｒ23a、Ｒ23b、Ｒ23c、Ｒ23d、およびＲ23eは独立して、ＨおよびＯＨから選択される。
【０１３０】
別の態様では、Ｒ21a、Ｒ21b、Ｒ21c、Ｒ21d、およびＲ21eは独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｏ−グルコシル、ハロ、シアノ、アミノ、ニトロ、およびニトロソから選択される。
【０１３１】
別の態様では、Ｒ22は、Ｈである。
【０１３２】
別の態様では、Ｒ21a、Ｒ21b、Ｒ21d、およびＲ21eは、Ｈであり、Ｒ21cは、ＯＨである。
【０１３３】
別の態様では、Ｒ23aおよびＲ23cは、Ｈであり、Ｒ23bおよびＲ23dは、ＯＨである。
【０１３４】
別の態様では、Ｒ21a、Ｒ21b、Ｒ21d、およびＲ21eは、Ｈであり、Ｒ21cは、ＯＨであり、Ｒ23aおよびＲ23cは、Ｈであり、Ｒ23bおよびＲ23dは、ＯＨである。
【０１３５】
別の態様では、Ｒ21a、Ｒ21d、およびＲ21eは、Ｈであり、Ｒ21bおよびＲ21cは、ＯＨであり、Ｒ23aおよびＲ23cは、Ｈであり、Ｒ23bおよびＲ23dは、ＯＨである。
【０１３６】
別の態様では、化合物は、構造
【化１９】
0006001060.tif 000020
を有する。
【０１３７】
３．アラントインおよび類似体
一態様では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。
【０１３８】
一態様では、アラントイン類似体は、式
【化２０】
0006001060.tif 000021
によって表される構造を有し、
式中、Ｒ31aおよびＲ31bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ32aおよびＲ32bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＣｌ（ＯＨ）4Ａｌ2、ＯＡｌ（ＯＨ）2、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択されるか、または一緒になって、＝Ｏおよび＝Ｓから選択される二重結合を形成し、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ32cおよびＲ32dは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＯＣｌ（ＯＨ）4Ａｌ2、ＯＡｌ（ＯＨ）2、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択されるか、または一緒になって、＝Ｏおよび＝Ｓから選択される二重結合を形成し、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ33aおよびＲ33bは独立して、Ｈ、ＮＲ34aＣＯＮＲ34bＲ34c、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ34a、Ｒ34b、およびＲ34cは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されている化合物、または、
その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩である。
【０１３９】
一態様では、式中、Ｒ31aおよびＲ31bは、Ｈである。
【０１４０】
別の態様では、Ｒ32aおよびＲ32bは、一緒になって、＝Ｏを形成する。
【０１４１】
別の態様では、Ｒ32cおよびＲ32dは、一緒になって、＝Ｏを形成する。
【０１４２】
別の態様では、Ｒ32aおよびＲ32bは、一緒になって、＝Ｏを形成し、Ｒ32cおよびＲ32dは、一緒になって、＝Ｏを形成する。
【０１４３】
別の態様では、Ｒ31aは、Ｈであり、Ｒ31bは、Ｈであり、Ｒ32aおよびＲ32bは、一緒になって、＝Ｏを形成し、Ｒ32cおよびＲ32dは、一緒になって、＝Ｏを形成する。
【０１４４】
別の態様では、Ｒ31aは、Ｈであり、Ｒ31bは、Ｈであり、Ｒ32aおよびＲ32bは、一緒になって、＝Ｏを形成し、Ｒ32cおよびＲ32dは、一緒になって、＝Ｏを形成し、Ｒ33aおよびＲ33bのうちの一方は、ＮＲ34aＣＯＮＲ34bＲ34cであり、Ｒ33aおよびＲ33bのうちの他方は、Ｈである。
【０１４５】
別の態様では、Ｒ33aおよびＲ33bのうちの一方は、ＮＲ34aＣＯＮＲ34bＲ34cであり、Ｒ33aおよびＲ33bのうちの他方は、Ｈである。
【０１４６】
別の態様では、Ｒ32aおよびＲ32bのうちの一方は、ＯＣｌ（ＯＨ）4Ａｌ2であり、Ｒ32aおよびＲ32bのうちの他方は、Ｈである。
【０１４７】
別の態様では、Ｒ32cおよびＲ32dのうちの一方は、ＯＣｌ（ＯＨ）4Ａｌ2であり、Ｒ32cおよびＲ32dのうちの他方は、Ｈである。
【０１４８】
別の態様では、Ｒ32aおよびＲ32bのうちの一方は、ＯＡｌ（ＯＨ）2であり、Ｒ32aおよびＲ32bのうちの他方は、Ｈである。
【０１４９】
別の態様では、Ｒ32cおよびＲ32dのうちの一方は、ＯＡｌ（ＯＨ）2であり、Ｒ32cおよびＲ32dのうちの他方は、Ｈである。
【０１５０】
別の態様では、化合物は、構造
【化２１】
0006001060.tif 000022
を有する。
【０１５１】
４．コネッシンおよび類似体
一態様では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。
【０１５２】
一態様では、コネッシン類似体は、式
【化２２】
0006001060.tif 000023
によって表される構造を有し、
式中、各-----は、原子価が満たされている、一重結合もしくは二重結合から独立して選択される共有結合を表し、
Ｒ41は、ＮＲ48aＲ48b、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、およびヒドロキシルから選択され、
式中、Ｒ48aおよびＲ48bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ42は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、およびヒドロキシルから選択され、
Ｒ43は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ44aおよびＲ44bは独立して、Ｈ、ヒドロキシル、およびＣ１〜Ｃ６アルコキシから独立して選択されるものから選択され、
Ｒ47aおよびＲ47bは独立して、Ｈ、ヒドロキシル、およびＣ１〜Ｃ６アルコキシから独立して選択されるものから選択され、
Ｒ45aおよびＲ45bは一緒に、
【化２３】
0006001060.tif 000024
から選択される環状体を構成し、
式中、Ｒ49aは、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、
Ｒ49bおよびＲ49cは独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択されるか、または一緒になって、＝Ｏを形成する化合物、または、
その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩である。
【０１５３】
一態様では、Ｒ47aおよびＲ47bは独立して、Ｈ、ヒドロキシル、およびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択される。
【０１５４】
別の態様では、Ｒ44aおよびＲ44bは独立して、Ｈ、ヒドロキシル、およびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択される。
【０１５５】
別の態様では、Ｒ42は、Ｈである。
【０１５６】
別の態様では、Ｒ47aおよびＲ47bは、Ｈ、ヒドロキシル、およびＣ１〜Ｃ６アルコキシから選択され、Ｒ44aおよびＲ44bは、Ｈである。
【０１５７】
別の態様では、Ｒ41は、ＮＲ48aＲ48bおよび＝Ｏから選択され、式中、Ｒ48aおよびＲ48bは独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される。
【０１５８】
別の態様では、Ｒ43は、Ｃ１アルキルである。
【０１５９】
別の態様では、式は、構造
【化２４】
0006001060.tif 000025
を有する。
【０１６０】
別の態様では、式は、構造
【化２５】
0006001060.tif 000026
を有する。
【０１６１】
別の態様では、式は、構造
【化２６】
0006001060.tif 000027
を有する。
【０１６２】
別の態様では、式は、構造
【化２７】
0006001060.tif 000028
を有する。
【０１６３】
別の態様では、式は、構造
【化２８】
0006001060.tif 000029
を有する。
【０１６４】
５．トマチジンおよび類似体
一態様では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。
【０１６５】
一態様では、トマチジン類似体は、式
【化２９】
0006001060.tif 000030
によって表される構造を有し、
式中、Ｒ51は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＯＲ53、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ53は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｚ51は、Ｏ、Ｓ、およびＮＲ54から選択され、
Ｒ54は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、ＣＯＲ55、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ55は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されている化合物、または、
その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩である。
【０１６６】
一態様では、Ｒ51は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびＣＯＲ53から選択され、Ｒ53は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１６７】
別の態様では、Ｒ51は、Ｈである。
【０１６８】
別の態様では、Ｚ51は、ＮＲ54である。別の態様では、Ｚ51は、ＮＲ54であり、Ｒ54は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびＣＯＲ55から選択され、Ｒ55は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１６９】
別の態様では、Ｒ51は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびＣＯＲ53から選択され、Ｒ53は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｚ51は、ＮＲ54であり、Ｒ54は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびＣＯＲ55から選択され、Ｒ55は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１７０】
別の態様では、Ｒ51およびＲ54は、同一である。
【０１７１】
別の態様では、構造は、式
【化３０】
0006001060.tif 000031
によって表される。
【０１７２】
別の態様では、構造は、式
【化３１】
0006001060.tif 000032
によって表される。
【０１７３】
別の態様では、式は、構造
【化３２】
0006001060.tif 000033
を有する。
【０１７４】
６．ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体
一態様では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。
【０１７５】
一態様では、ウンゲリン／ヒッペアストリンは、式
【化３３】
0006001060.tif 000034
によって表される構造を有し、
式中、Ｒ61aおよびＲ61bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ62aおよびＲ62bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ63aおよびＲ63bは独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択されるか、または一緒になって、＝Ｏおよび＝Ｓから選択される基を形成し、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ64aおよびＲ64bは独立して、Ｈ、ＯＲ67、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、シアノ、ＮＨＣＯＲ15、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ65は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、Ｃ１〜Ｃ６ジアルキルアミノ、ＣＯＲ66、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ66は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
Ｒ67は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルから選択され、Ｃ６〜Ｃ１０アリール、Ｃ３〜Ｃ１０シクロアルキル、Ｃ５〜Ｃ９ヘテロアリール、およびＣ２〜Ｃ９ヘテロシクリルは独立して、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６モノハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ポリハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、およびＣ１〜Ｃ６ジアルキルアミノから選択される０、１、２、もしくは３個の置換基で置換されており、
各Ｒ15は独立して、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される化合物、または、
その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩であり、
その化合物は、有効量で存在する。
【０１７６】
一態様では、構造は、式
【化３４】
0006001060.tif 000035
によって表される。
【０１７７】
別の態様では、構造は、式
【化３５】
0006001060.tif 000036
によって表される。
【０１７８】
別の態様では、Ｒ61a、Ｒ61b、Ｒ62a、およびＲ62bは、Ｈである。
【０１７９】
別の態様では、Ｒ63aおよびＲ63bのうちの一方は、ヒドロキシルであり、Ｒ63aおよびＲ63bのうちの他方は、Ｈである。
【０１８０】
別の態様では、Ｒ63aおよびＲ63bは、一緒になって、＝Ｏを形成する。
【０１８１】
別の態様では、Ｒ64aおよびＲ64bのうちの一方は、ヒドロキシルまたはＯＲ67であり、Ｒ64aおよびＲ64bのうちの他方は、Ｈである。
【０１８２】
別の態様では、Ｒ64aおよびＲ64bのうちの一方は、ヒドロキシルまたはＯＲ67であり、Ｒ64aおよびＲ64bのうちの他方は、Ｈであり、Ｒ67は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１８３】
別の態様では、Ｒ65は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。
【０１８４】
別の態様では、構造は、式
【化３６】
0006001060.tif 000037
によって表される。
【０１８５】
別の態様では、構造は、式
【化３７】
0006001060.tif 000038
によって表される。
【０１８６】
別の態様では、構造は、式
【化３８】
0006001060.tif 000039
によって表される。
【０１８７】
別の態様では、構造は、式
【化３９】
0006001060.tif 000040
によって表される。
【０１８８】
別の態様では、構造は、式
【化４０】
0006001060.tif 000041
によって表される。
【０１８９】
７．ベツリン酸および類似体
一態様では、化合物は、ベツリン酸誘導体であり得る。
【０１９０】
一態様では、式
【化４１】
0006001060.tif 000042
によって表される構造を有し、
式中、-----は、原子価が満たされている、一重結合および二重結合から選択される共有結合であり、Ｒ70は、任意に存在し、ｎは、０または１であり、Ｒ70は、存在するとき、水素であり、Ｒ71aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）ＺＲ82から選択され、Ｒ71bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択されるか、またはＲ71aおよびＲ71bは、任意に共有結合して、中間の炭素と一緒に、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを構成し、Ｒ72aおよびＲ72bのうちの一方が−Ｚ72であり、他方が水素であるか、またはＲ72aおよびＲ72bは一緒に、＝Ｏを構成し、Ｒ73aおよびＲ73bの各々は独立して、水素、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、およびＣ１〜Ｃ６アルコキシルから選択されるが、但し、Ｒ73aおよびＲ73bが同時にヒドロキシルではないことを条件とし、Ｒ73aおよびＲ73bは、任意に共有結合して、中間の炭素と一緒に、任意に置換されたＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを構成し、Ｒ74、Ｒ75、およびＲ76の各々は独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ77は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）Ｚ71Ｒ80から選択され、Ｒ80は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ78aおよびＲ78bは独立して、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ79aおよびＲ79bの各々は独立して、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、およびＣ２〜Ｃ６アルキニルから選択されるが、但し、Ｒ79aおよびＲ79bが同時に水素ではないことを条件とするか、あるいはＲ79aおよびＲ79bは、共有結合して、中間の炭素と共に、一緒にＣ３〜Ｃ５シクロアルキルまたはＣ２〜Ｃ５ヘテロシクロアルキルを構成し、Ｒ82は、水素およびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｚ71およびＺ72は独立して、−ＯＲ81−および−ＮＲ83−から選択され、Ｒ83およびＲ83は独立して、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択されるか、またはＺ71およびＺ72は独立して、Ｎであり、Ｒ84およびＲ85は、共有結合しており、−ＮＲ84Ｒ85は、式
【化４２】
0006001060.tif 000043
の部分を構成し、
式中、Ｙは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ2−、−ＮＨ−、−ＮＣＨ3−から選択される化合物、またはその立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩である。
【０１９１】
別の態様では、式は、構造
【化４３】
0006001060.tif 000044
を有する。
【０１９２】
別の態様では、式は、構造
【化４４】
0006001060.tif 000045
を有する。
【０１９３】
別の態様では、式は、構造
【化４５】
0006001060.tif 000046
を有する。
【０１９４】
一態様では、-----は、一重結合である。別の態様では、-----は、二重結合である。
【０１９５】
一態様では、ｎは、０である。別の態様では、ｎは、１である。
【０１９６】
別の態様では、Ｒ71aは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ71bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ72aのうちの一方は、−Ｚ72であり、Ｒ72bは、水素であり、Ｒ74、Ｒ75は独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルキルから選択され、Ｒ79bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、およびＣ２〜Ｃ６アルキニルから選択され、Ｚ71は、−Ｏ−であり、Ｚ72は、−ＯＲ8および−ＮＲ83−から選択され、Ｒ81およびＲ83は独立して、水素およびＣ１〜Ｃ４アルキルから選択される。
【０１９７】
別の態様では、Ｒ71aは、Ｃ１アルキルであり、Ｒ71bは、Ｃ１アルキルであり、Ｒ72aは、−Ｚ72であり、Ｒ72bは、水素であり、Ｒ74、Ｒ75は独立して、から選択されＣ１アルキル；Ｒ79bは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、およびＣ２〜Ｃ６アルキニルから選択され、Ｚ71は、−Ｏ−であり、Ｚ72は、から選択され−ＯＲ81および−ＮＲ83−；Ｒ81およびＲ83は、水素である。
【０１９８】
別の態様では、Ｒ71aは、Ｃ１アルキルであり、Ｒ71bは、Ｃ１アルキルであり、Ｒ72aは、−Ｚ72であり、Ｒ72bは、水素であり、Ｒ74、Ｒ75は独立して、Ｃ１アルキルから選択され、Ｒ79bは、Ｃ２〜Ｃ６アルケニルであり、Ｚ71は、−Ｏ−であり、Ｚ72は、−ＯＲ81および−ＮＲ83−から選択され、Ｒ81およびＲ83は、水素である。
【０１９９】
８．筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２によって特定される化合物。
種々の態様では、本発明は、タクリン類似体、ナリンゲニン類似体、アラントイン類似体、コネッシン類似体、トマチジン類似体、ヒッペアストリン／ウンゲリン類似体、およびベツリン酸類似体から選択される、１つ以上の化合物の使用に関する。
【０２００】
ａ．筋萎縮シグネチャ−１
一態様では、開示される化合物は、筋萎縮シグネチャ−１を使用して特定される化合物を含む。かかる化合物には、アラントイン、コネッシン、ナリンゲニン、タクリン、トマチジン、またはそれらの薬学的に許容される塩、互変異性体、立体異性体、水和物、溶媒和物、もしくは多形体が含まれるが、これらに限定されない。なおも更なる態様では、化合物は、上に定義される前述の化合物のうちの１つの類似体である。
【０２０１】
ｂ．筋萎縮シグネチャ−２
更なる態様では、開示される化合物は、筋萎縮シグネチャ−２を使用して特定される化合物を含む。かかる化合物には、アラントイン、ベツリン酸、コネッシン、ナリンゲニン、タクリン、トマチジン、またはそれらの薬学的に許容される塩、互変異性体、立体異性体、水和物、溶媒和物、もしくは多形体が含まれるが、これらに限定されない。なおも更なる態様では、化合物は、上に定義される前述の化合物のうちの１つの類似体である。
【０２０２】
ｃ．筋萎縮シグネチャ−１または筋萎縮シグネチャ−２
更なる態様では、開示される化合物は、筋萎縮シグネチャ−１または筋萎縮シグネチャ−２のいずれかを使用して特定される化合物を含む。かかる化合物には、アラントイン、ベツリン酸、コネッシン、ナリンゲニン、タクリン、トマチジン、またはそれらの薬学的に許容される塩、互変異性体、立体異性体、水和物、溶媒和物、もしくは多形体が含まれるが、これらに限定されない。なおも更なる態様では、化合物は、上に定義される前述の化合物のうちの１つの類似体である。
【０２０３】
ｄ．筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２
更なる態様では、開示される化合物は、筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２の両方を使用して特定される化合物を含み、それは、両方の筋萎縮シグネチャに関連する化合物である。かかる化合物には、アラントイン、コネッシン、ナリンゲニン、タクリン、トマチジン、またはそれらの薬学的に許容される塩、互変異性体、立体異性体、水和物、溶媒和物、もしくは多形体が含まれるが、これらに限定されない。なおも更なる態様では、化合物は、上に定義される前述の化合物のうちの１つの類似体である。
【０２０４】
９．筋萎縮の阻害
一態様では、開示される化合物は、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する、開示される化合物。なおも更なる態様では、開示される化合物は、筋萎縮の阻害をし、筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。更なる態様では、筋萎縮の阻害は、動物におけるものである。より更なる態様では、筋肉の健康を促進すること、正常な筋肉機能を促進すること、および／または健康に老化する筋肉を促進することは、動物におけるものである。依然として更なる態様では、動物は、哺乳動物であり、なおも更なる態様では、その哺乳動物は、ヒトである。更なる態様では、哺乳動物は、マウスである。なおも更なる態様では、哺乳動物は、齧歯類である。
【０２０５】
更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約５ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約１０ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約２５ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約５０ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約７５ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約１００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約１５０ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約２００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約２５０ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。なおも更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約３００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。依然として更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約４００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。より更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約５００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約７５０ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。なおも更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約１０００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。依然として更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約１５００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。より更なる態様では、開示される化合物は、ヒトにおいて１日当たり約２０００ｍｇ超の経口用量で投与されるとき、筋萎縮を阻害する。
【０２０６】
１つ以上の化合物が、開示される発明から任意に省略できることが企図される。
【０２０７】
Ｃ．薬学的組成物
一態様では、本発明は、開示される化合物を含む薬学的組成物に関する。つまり、治療上有効量の少なくとも１つの開示される化合物を含む、薬学的組成物が提供され得る。別の例では、予防上有効量の少なくとも１つの開示される化合物を含む、薬学的組成物が提供され得る。
【０２０８】
一態様では、本発明は、薬学的に許容される担体と化合物とを含む、薬学的組成物に関し、その化合物は、有効量で存在する。化合物は、タクリン類似体、アラントイン類似体、ナリンゲニン類似体、コネッシン類似体、トマチジン類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体、およびベツリン酸類似体から選択することができる。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。
【０２０９】
一態様では、化合物は、５ｍｇ、１０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、７５０ｍｇ、１０００ｍｇ、１，５００ｍｇ、または２，０００ｍｇから選択されるおよその量を超える量で存在する。
【０２１０】
薬学的に許容される担体と、有効量の（ａ）タクリン類似体、アラントイン類似体、ナリンゲニン類似体、コネッシン類似体、トマチジン類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体、およびベツリン酸類似体から選択される化合物、（ｂ）筋萎縮シグネチャ１の複数の誘導されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御する化合物、（ｃ）筋萎縮シグネチャ１の複数の抑制されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御する化合物、（ｄ）筋萎縮シグネチャ２の複数の誘導されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御する化合物、ならびに／または（ｅ）筋萎縮シグネチャ２の複数のｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御する化合物のうちの１つ以上とを含む、薬学的組成物。
【０２１１】
更なる態様では、量は、治療上有効量である。依然として更なる態様では、量は、予防上有効量である。
【０２１２】
更なる態様では、薬学的組成物は、動物に投与される。依然として更なる態様では、動物は、哺乳動物、サカナ、またはトリである。なおも更なる態様では、その哺乳動物は、霊長類である。依然として更なる態様では、その哺乳動物は、ヒトである。より更なる態様では、そのヒトは、患者である。
【０２１３】
更なる態様では、薬学的組成物は、筋萎縮シグネチャ−１を使用して特定される化合物を含む。なおも更なる態様では、薬学的組成物は、筋萎縮シグネチャ−２を使用して特定される化合物を含む。なおも更なる態様では、薬学的組成物は、筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２の両方を使用して特定される化合物を含む。
【０２１４】
更なる態様では、動物は、飼い慣らされた動物である。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、飼い慣らされたサカナ、飼い慣らされた甲殻類、または飼い慣らされた軟体類である。なおも更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家禽類である。より更なる態様では、その家禽類は、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、およびガチョウから選択される。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家畜である。なおも更なる態様では、その家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソン、およびヒツジから選択される。
【０２１５】
更なる態様では、有効量は、治療上有効量である。依然として更なる態様では、有効量は、予防上有効量である。なおも更なる態様では、筋肉障害は、筋萎縮である。より更なる態様では、筋肉障害は、筋肉の健康を促進すること、正常な筋肉機能を促進すること、および／または健康に老化する筋肉を促進することを必要とする病態である。
【０２１６】
更なる態様では、薬学的組成物は、筋萎縮の治療を必要とする哺乳動物の特定後に投与される。依然として更なる態様では、薬学的組成物は、筋萎縮の予防を必要とする哺乳動物の特定後に投与される。より更なる態様では、哺乳動物は、投与するステップの前に、筋萎縮の治療に対する必要性があると診断されている。
【０２１７】
ある特定の態様では、開示される薬学的組成物は、活性成分として開示される化合物（それらの薬学的に許容される塩（複数可）を含む）、薬学的に許容される担体、および任意に、他の治療成分またはアジュバントを含む。本組成物は、経口、直腸、局所、および非経口（皮下、筋肉内、および静脈内を含む）投与に好適な組成物を含むが、いずれの所与の場合にも最も好適な経路は、特定の宿主、ならびに活性成分が投与されている対象となる病態の性質および重症度に依存するであろう。薬学的組成物は、単位剤形で好都合に提示し、薬学技術分野で周知の方法のいずれによっても調製することができる。
【０２１８】
本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される非毒性塩基または酸から調製される塩を指す。本発明の化合物が酸性であるとき、その対応する塩は、無機塩基および有機塩基を含む、薬学的に許容される非毒性塩基から好都合に調製することができる。かかる無機塩基に由来する塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅（第二および第一）、第二鉄、第一鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン（第二および第一）、カリウム、ナトリウム、亜鉛等の塩が含まれる。アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、およびナトリウム塩が特に好ましい。薬学的に許容される有機非毒性塩基に由来する塩には、一級、二級、三級アミン、ならびに天然産および合成置換アミン等の環式アミンおよび置換アミンの塩が含まれる。塩が形成され得る元となる、他の薬学的に許容される有機非毒性塩基には、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミン等のイオン交換樹脂が含まれる。
【０２１９】
本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容される非毒性酸」という用語には、無機酸、有機酸、およびそれらで調製される塩、例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウスルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トレンスルホン酸等が含まれる。クエン酸、臭化水素酸、塩化水素酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、および酒石酸が好ましい。
【０２２０】
実際には、本発明の化合物、または本発明のそれらの薬学的に許容される塩は、従来の薬学的複合技法に従って、薬学的担体との緊密な混和物中に活性成分として組み合わせることができる。担体は、投与、例えば、経口または非経口（静脈内を含む）投与に所望される調製物の形態に応じて多種多様な形態をとることができる。故に、本発明の薬学的組成物は、各々が既定の量の活性成分を含有する、カプセル、カシェット、または錠剤等の、経口投与に好適な個別的な単位として提示することができる。更に、組成物は、粉末として、顆粒として、溶液として、水溶液中の懸濁液として、非水溶液として、水中油乳濁液として、または油中水液体乳濁液として、提示することができる。上述の一般的な剤形に加えて、本発明の化合物、および／またはそれらの薬学的に許容される塩（複数可）はまた、制御放出手段および／または送達装置によって投与することもできる。組成物は、薬学の方法のいずれによっても調製することができる。一般に、かかる方法は、活性成分を、１つ以上の必要な成分を構成する担体と混合するステップを含む。一般に、組成物は、活性成分を、液体担体もしくは微粉固体担体、または両方と均一かつ緊密に混和することによって調製することができる。生成物は次いで、所望の体裁へと好都合に成形することができる。
【０２２１】
故に、本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容される担体と、本発明の化合物またはその化合物の薬学的に許容される塩とを含むことができる。本発明の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩はまた、１つ以上の他の治療的活性化合物と組み合わせて、薬学的組成物中に含まれる可能性もある。
【０２２２】
用いられる薬学的担体は、例えば、固体、液体、または気体であり得る。固体担体の例としては、ラクトース、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、およびステアリン酸が挙げられる。液体担体の例としては、砂糖シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、および水がある。気体担体の例としては、二酸化炭素および窒素が挙げられる。
【０２２３】
経口剤形のための組成物を調製する際、任意の好都合な薬学的媒体を用いることができる。例えば、水、グリコール、油、アルコール、香料剤、防腐剤、着色剤等を使用して、懸濁液、エリキシル、および溶液等の経口液体調製物を形成することができる一方で、デンプン、糖、微晶質セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等の担体を使用して、粉末、カプセル、および錠剤等の経口固体調製物を形成することができる。錠剤およびカプセルが、それらの投与の簡便性から、好ましい経口投薬量単位であり、それによって固体薬学的担体が用いられる。任意に、錠剤は、標準的な水性または非水性技法によってコーティングすることができる。
【０２２４】
本発明の組成物を含有する錠剤は、圧縮または成形によって、任意に１つ以上の副成分またはアジュバントと共に調製することができる。圧縮錠剤は、任意に結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、界面活性剤、または分散化剤と混合された、粉末または顆粒等の自由流動形態の活性成分を、好適な機械において圧縮することによって調製することができる。成形錠剤は、好適な機械において、不活性液体希釈剤で湿潤させた粉末化化合物の混合物を成形することによって作製することができる。
【０２２５】
本発明の薬学的組成物は、活性成分として本発明の化合物（またはその薬学的に許容される塩）、薬学的に許容される担体、および任意に１つ以上の更なる治療剤またはアジュバントを含む。本組成物は、経口、直腸、局所、および非経口（皮下、筋肉内、および静脈内を含む）投与に好適な組成物を含むが、いずれの所与の場合にも最も好適な経路は、特定の宿主、ならびに活性成分が投与されている対象となる病態の性質および重症度に依存するであろう。薬学的組成物は、単位剤形で好都合に提示し、薬学技術分野で周知の方法のいずれによっても調製することができる。
【０２２６】
非経口投与に好適な本発明の薬学的組成物は、水中の活性化合物の溶液または懸濁液として調製することができる。例えば、ヒドロキシプロピルセルロース等の、好適な界面活性剤を含めることができる。分散液もまた、油中のグリセロール、液体ポリエチレングリコール、またはそれらの混合物中に調製することができる。更に、微生物の有害な成長を防止するために防腐剤を含めることができる。
【０２２７】
注射剤用途に好適な本発明の薬学的組成物には、滅菌水溶液または分散液が含まれる。更に、組成物は、かかる滅菌注射液または分散液の即座の調製のための滅菌粉末の形態であり得る。全ての場合において、最終的な注射剤形態は、滅菌されていなければならず、容易にシリンジに入れられるために事実上流体でなければならない。薬学的組成物は、製造および保管の条件下で安定でなければならず、故に、好ましくは、細菌および真菌等の微生物の汚染作用から守られるべきである。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコール）、植物油、およびそれらの好適な混合物を含有する、溶媒または分散媒であり得る。
【０２２８】
本発明の薬学的組成物は、例えば、エアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、散布剤、マウスウォッシュ、うがい薬等の、局所用途に好適な形態であり得る。更に、組成物は、経皮装置において使用するのに好適な形態であり得る。これらの製剤は、本発明の化合物、またはその薬学的に許容される塩を利用して、従来の加工法を介して調製することができる。例として、クリームまたは軟膏は、親水性材料および水を約５重量％〜約１０重量％の化合物と一緒に混合して、所望の稠度を有するクリームまたは軟膏を生成することによって調製することができる。
【０２２９】
本発明の薬学的組成物は、担体が固体である直腸投与に好適な形態であり得る。混合物が、単位用量坐剤を形成することが好ましい。好適な担体には、ココアバターおよび当該技術分野で一般的に使用される他の材料が含まれる。坐剤は、最初に組成物を軟化または融解した担体（複数可）と混和し、続いて冷やし、型中に成形することによって好都合に形成することができる。
【０２３０】
上述の担体成分に加えて、上述の薬学的製剤は、希釈剤、緩衝液、香料剤、結合剤、界面活性剤、増粘剤、滑沢剤、防腐剤（酸化防止剤を含む）等の１つ以上の追加的な担体成分を適宜含むことができる。更に、製剤を意図される受容者の血液と等張性にするために、他のアジュバントを含めることができる。本発明の化合物、および／またはその薬学的に許容される塩を含有する組成物はまた、粉末または液体濃縮形態で調製することもできる。
【０２３１】
筋肉の健康、筋肉機能、および／または健康に老化する筋肉に関係する細胞機能の調節を必要とする治療条件下で、適切な投薬量レベルは、一般に、１日につき患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１〜５００ｍｇとなり、単回または複数回用量で投与することができる。好ましくは、投薬量レベルは、１日につき約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは、１日につき０．５〜１００ｍｇ／ｋｇとなろう。好適な投薬量レベルは、１日につき約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ、１日につき約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ、または１日につき約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。この範囲内で、投薬量は、１日につき０．０５〜０．５、０．５〜５．０、または５．０〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。経口投与について、組成物は、好ましくは、治療対象の患者の投薬量の対症調整（ｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ  ａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ）のために、好ましくは、１．０〜１０００ミリグラムの活性成分、特に１．０、５．０、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００、および１０００ミリグラムの活性成分を含有する錠剤の形態で提供される。化合物は、１日につき１〜４回のレジメンに基づいて、好ましくは１日につき１回または２回投与することができる。この投薬レジメンを調整して、最適な治療反応を提供することができる。
【０２３２】
しかしながら、任意の特定患者のための具体的な用量レベルは、多様な要因に依存するであろうことが理解される。かかる要因には、患者の年齢、体重、全般的な健康、性別、および食生活が含まれる。他の要因には、時間および投与経路、排泄率、薬物組み合わせ、ならびに治療を経ている特定の疾患の種類および重症度が含まれる。
【０２３３】
本発明は、１つ以上の開示される化合物、生成物、または組成物を、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることを含む、哺乳動物（例えば、ヒト）における筋肉の健康、筋肉機能、および／または健康に老化する筋肉に関係する細胞活性を調節する（例えば、筋肉機能障害または萎縮に関連する１つ以上の障害の治療）ための薬の製造のための方法に更に向けられる。故に、一態様では、本発明は、少なくとも１つの開示される化合物または少なくとも１つの開示される生成物を、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることを含む、薬を製造するための方法に関する。
【０２３４】
開示される薬学的組成物は、上述の病的状態の治療において通常適用される、他の治療的活性化合物を更に含むことができる。
【０２３５】
開示される組成物は、開示される化合物から調製され得ることが理解される。開示される組成物は、開示される使用方法において用いられ得ることもまた理解される。
【０２３６】
Ｄ．化合物および組成物を使用する方法
１．筋萎縮
筋萎縮は、筋肉の質量の減少として定義され、それは、筋肉の部分的または完全な累痩であり得る。力を加える能力は、質量に関係するので、筋肉が萎縮するとき、これは筋肉衰弱に至る。筋萎縮は、複数の一般的な疾患の併存症であり、これらの疾患状況において「悪液質」を有する患者は、良好でない予後を有する。
【０２３７】
筋萎縮はまた、栄養失調、老化、筋廃用（随意および不随意の床上安静等、神経疾患（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重篤疾病ニューロパシー、脊髄損傷、末梢ニューロパシー、または末梢神経損傷等）、四肢もしくは間接の損傷、ギプス固定、他の術後の四肢不動化形態、または宇宙飛行等）、慢性疾患（癌、鬱血性心不全、慢性肺疾患、慢性腎不全、慢性肝臓疾患、糖尿病、糖質コルチコイド過剰、成長ホルモン欠乏、ＩＧＦ−Ｉ欠乏、エストロゲン欠乏、およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核等の慢性感染症等）、熱傷損傷、敗血症、機械的呼吸（ｖｅｎｔｉｌｉａｔｉｏｎ）を必要とする他の疾病、薬物誘導性筋肉疾患（糖質コルチコイド誘導性ミオパシーおよびスタチン誘導性ミオパシー等）、主に骨格筋を侵す遺伝子疾患（筋ジストロフィー、筋強直性ジストロフィー、および封入体筋炎等）、または骨格筋を侵す自己免疫疾患（多発性筋炎および皮膚筋炎等）によって引き起こされる、骨格筋喪失または衰弱であり得る。
【０２３８】
筋萎縮を引き起こす多くの疾患および病態が存在し、栄養失調、筋廃用（随意または不随意の床上安静に続発する、神経疾患（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重篤疾病ニューロパシー、脊髄損傷、または末梢神経損傷を含む）、整形外科的損傷、ギプス固定、および他の術後の四肢不動化形態）、慢性疾患（癌、鬱血性心不全、慢性肺疾患、慢性腎不全、慢性肝臓疾患、糖尿病、クッシング症候群、成長ホルモン欠乏、ＩＧＦ−Ｉ欠乏、エストロゲン欠乏、およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核等の慢性感染症を含む）、熱傷、敗血症、機械的呼吸を必要とする他の疾病、薬物誘導性筋肉疾患（グルコルチコイド（ｇｌｕｃｏｒｔｉｃｏｉｄ）誘導性ミオパシーおよびスタチン誘導性ミオパシー等）、主に骨格筋を侵す遺伝子疾患（筋ジストロフィーおよび筋強直性ジストロフィー等）、骨格筋を侵す自己免疫疾患（多発性筋炎および皮膚筋炎等）、宇宙飛行、ならびに老化が含まれる。
【０２３９】
筋萎縮は、タンパク質合成とタンパク質分解との間の正常なバランスにおける変化によって生じる。萎縮中には、タンパク質合成経路の下方制御、およびタンパク質分解経路の活性化が存在する。萎縮を経ている筋肉中で見られる、筋肉喪失の多くに関与すると思われる特定のタンパク質分解経路は、ＡＴＰ依存性のユビキチン／プロテアソーム経路である。この体系において、特定のタンパク質が、ユビキチンと称される小ペプチドの少なくとも４つのコピーの、基質タンパク質上へのライゲーションによる破壊のために標的とされる。基質がこのようにして「ポリ−ユビキチン化される」とき、それは、プロテアソームによる破壊のために標的とされる。ユビキチン／プロテアソーム経路における特定の酵素が、ユビキチン化が幾つかのタンパク質に向けられるが、他のタンパク質には向けられないことを可能にし、この特異性は、標的とされるタンパク質を「Ｅ３ユビキチンリガーゼ」に結合させることによって獲得される。各Ｅ３ユビキチンリガーゼは、特定の１組の基質に結合して、それらのユビキチン化を引き起こす。例えば、骨格筋において、Ｅ３ユビキチンリガーゼアトロジン−１およびＭｕＲＦ１は、タンパク質分解および筋萎縮の必須の役割を果たすことで知られている。
【０２４０】
筋萎縮は、筋肥大、または筋肉サイズにおける増加を誘導するシグナル伝達経路によって、対抗することができる。したがって、運動により筋肉の健康促進、正常な筋肉機能促進、かつ／または健康に老化する筋肉促進を誘導する１つの方法は、反対の影響を有する経路を下方制御することである。筋萎縮に対する１つの重要なリハビリテーションツールには、対麻痺の患者のリハビリテーションにおいて限定的な成功を有した筋肉を刺激するための、機能的電気刺激の使用が含まれる。
【０２４１】
ある種の態様では、開示される化合物は、疾病関連および加齢関連筋萎縮に対する治療法として使用することができる。それは、単剤療法として、またはミオスタチン阻害等の、考慮されてきた他の戦略と組み合わせて有用であり得る（Ｚｈｏｕ，Ｘ．，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｃｅｌｌ  １４２（４）：５３１−５４３）。脂肪症、空腹時血糖、および血漿脂質レベルを低減するその能力を所与として、開示される化合物誘導体はまた、肥満、代謝症候群、および２型糖尿病に対する治療法としても使用することができる。
【０２４２】
開示される化合物は、前述の疾患、障害、および病態の治療、予防、制御、寛解、またはその危険性の低減において、単一薬剤として、または１つ以上の他の薬物と組み合わせて使用することができ、式Ｉの化合物またはその他の薬物は、それらに対する実用性を有し、ここで薬物を一緒に組み合わせたものは、いずれかの薬物単独よりもより安全またはより有効である。他の薬物（複数可）は、一般的に使用される経路および量に従って、開示される化合物と同時にまたは順次に投与することができる。開示される化合物が１つ以上の他の薬物と同時に使用されるとき、かかる薬物および開示される化合物を含有する、単位剤形の薬学的組成物が好ましい。しかしながら、併用療法もまた、重複したスケジュールで施すことができる。１つ以上の活性成分および開示される化合物の組み合わせは、いずれかの単独薬剤としてより効果的であろうこともまた想定される。
【０２４３】
１つ以上の開示される化合物の全身投与（例えば、非経口注射によるまたは経口消費による）を使用して、筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する、ならびに四肢および横隔膜の筋肉を含む全ての筋肉における筋萎縮を低減することができる。局所（ｌｏｃａｌｉｚｅｄ）損傷または外科手術後に必要とされ得るように、開示される化合物の局所（ｌｏｃａｌ）投与（局所（ｔｏｐｉｃａｌ）経路または局所（ｌｏｃａｌｉｚｅｄ）注射による）を使用して、局所（ｌｏｃａｌ）筋肉の健康を促進することができる。
【０２４４】
一態様では、対象化合物は、ウルソール酸、インスリン、インスリン類似体、インスリン様成長因子ｌ、メトホルミン、チアゾラジンジオン（ｔｈｉａｚｏｌａｄｉｎｅｄｉｏｎｅｓ）、スルホニル尿素、メグリチニド、レプチン、ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド−ｌアゴニスト、チロシン−タンパク質ホスファターゼ非受容体型阻害剤、ミオスタチンシグナル伝達阻害剤、クレンブテロールを含むベータ−２アドレナリン作動薬、アンドロゲン、選択的アンドロゲン受容体調節剤（ＧＴｘ−０２４、ＢＭＳ−５６４，９２９、ＬＧＤ−４０３３、ＡＣ−２６２，３５６、ＪＮＪ−２８３３０８３５、ＬＧＤ−２２２６、ＬＧＤ−３３０３、Ｓ−４０５０３、またはＳ−２３等）、アロマターゼ阻害剤（アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、ホルメスタン、ファドロゾール、４−ヒドロキシアンドロステンジオン、１，４，６−アンドロスタトリエン−３，１７−ジオン、および４−アンドロステン−３，６，１７−トリオン等）、成長ホルモン、成長ホルモン類似体、グレリン、グレリン類似体を含む、インスリンシグナル伝達、ＩＧＦｌシグナル伝達、および／または筋肉の健康を刺激する薬剤と共投与することができる。開示される化合物またはその塩は、経口で、筋肉内に、静脈内に、または動脈内に投与することができる。開示される化合物またはその塩は、実質的に純粋であり得る。開示される化合物またはその塩は、約１０ｍｇ／日〜１０ｇ／日で投与することができる。
【０２４５】
別の態様では、対象化合物は、ウルソール酸、インスリン、インスリン類似体、インスリン様成長因子ｌ、メトホルミン、チアゾラジンジオン（ｔｈｉａｚｏｌａｄｉｎｅｄｉｏｎｅｓ）、スルホニル尿素、メグリチニド、レプチン、ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド−ｌアゴニスト、チロシン−タンパク質ホスファターゼ非受容体型阻害剤、ミオスタチンシグナル伝達阻害剤、クレンブテロールを含むベータ−２アドレナリン作動薬、アンドロゲン、選択的アンドロゲン受容体調節剤（ＧＴｘ−０２４、ＢＭＳ−５６４，９２９、ＬＧＤ−４０３３、ＡＣ−２６２，３５６、ＪＮＪ−２８３３０８３５、ＬＧＤ−２２２６、ＬＧＤ−３３０３、Ｓ−４０５０３、またはＳ−２３等）、アロマターゼ阻害剤（アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、ホルメスタン、ファドロゾール、４−ヒドロキシアンドロステンジオン、１，４，６−アンドロスタトリエン−３，１７−ジオン、および４−アンドロステン−３，６，１７−トリオン等）、成長ホルモン、成長ホルモン類似体、グレリン、またはグレリン類似体を刺激する薬剤と組み合わせて投与することができる。開示される化合物またはその塩は、経口で、筋肉内に、静脈内に、または動脈内に投与することができる。開示される化合物またはその塩は、実質的に純粋であり得る。開示される化合物またはその塩は、約１０ｍｇ／日〜１０ｇ／日で投与することができる。
【０２４６】
本発明の薬学的組成物および方法は、上述の病的状態の治療において通常適用される、本明細書で注記される他の治療的活性化合物を更に含むことができる。
【０２４７】
２．治療方法
本明細書に開示される化合物は、多様な筋肉障害を治療する、予防する、寛解させる、制御する、またはその危険性を低減するために有用である。かかる筋肉障害の例としては、栄養失調、筋廃用（随意または不随意の床上安静に続発する）、神経疾患（多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、脊髄性筋萎縮症、重篤疾病ニューロパシー、脊髄損傷、または末梢神経損傷を含む）、整形外科的損傷、ギプス固定、および他の術後の四肢不動化形態、慢性疾患（癌、鬱血性心不全、慢性肺疾患、慢性腎不全、慢性肝臓疾患、糖尿病、クッシング症候群、およびＨＩＶ／ＡＩＤＳまたは結核等の慢性感染症を含む）、熱傷、敗血症、機械的呼吸（ｖｅｎｔｉｌｉａｔｉｏｎ）を必要とする他の疾病、薬物誘導性筋肉疾患（グルコルチコイド（ｇｌｕｃｏｒｔｉｃｏｉｄ）誘導性ミオパシーおよびスタチン誘導性ミオパシー等）、主に骨格筋を侵す遺伝子疾患（筋ジストロフィーおよび筋強直性ジストロフィー等）、骨格筋を侵す自己免疫疾患（多発性筋炎および皮膚筋炎等）、宇宙飛行、または加齢関連サルコペニアに続発する骨格筋萎縮が挙げられるが、これらに限定されない。依然として更なる態様では、本発明は、筋肉の健康を調節するための方法、筋萎縮を阻害するための方法に関係する。
【０２４８】
故に、対象に、少なくとも１つの開示される化合物、少なくとも１つの開示される薬学的組成物、および／または少なくとも１つの開示される生成物を、対象における障害を治療するために有効な投薬量および量で投与することを含む、筋萎縮を治療または予防するための方法が提供される。
【０２４９】
また、対象に、少なくとも１つの開示される化合物、少なくとも１つの開示される薬学的組成物、および／または少なくとも１つの開示される生成物を、対象における障害を治療するために有効な投薬量および量で投与することを含む、筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進するための方法も提供される。
【０２５０】
本明細書に開示される化合物は、多様な代謝障害を治療する、予防する、寛解させる、制御する、またはその危険性を低減するために有用である。更なる態様では、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達の機能障害に関連する障害を治療することにおける、開示される化合物。故に、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増加させるための方法、体脂肪を低減するための方法、血糖を低減するための方法、血液トリグリセリドを低減するための方法、血液コレステロールを低減するための方法、肥満を低減するための方法、脂肪性肝疾患を低減するための方法、および糖尿病を低減するための方法、ならびに本方法において使用される化合物を含む薬学的組成物が提供される。
【０２５１】
ａ．筋萎縮を治療する
動物に有効量の化合物を投与することを含む、動物における筋萎縮を治療する方法が、本明細書に開示される。化合物は、タクリンおよび類似体、ナリンゲニンおよび類似体、アラントインおよび類似体、コネッシンおよび類似体、トマチジンおよび類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体、ならびにベツリン酸および類似体、またはそれらの混合物から選択することができる。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。
【０２５２】
一態様では、化合物は、患者の体重１ｋｇ当たり約０．０１〜５００ｍｇの量で投与され、単回または複数回用量で投与することができる。好ましくは、投薬量レベルは、１日につき約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは、１日につき０．５〜１００ｍｇ／ｋｇとなろう。好適な投薬量レベルは、１日につき約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ、１日につき約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ、または１日につき約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。この範囲内で、投薬量は、１日につき０．０５〜０．５、０．５〜５．０、または５．０〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。経口投与について、組成物は、好ましくは、治療対象の患者の投薬量の対症調整のために、好ましくは、１．０〜１０００ミリグラムの活性成分、特に１．０、５．０、１０、１５、２０、２５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７５０、８００、９００、および１０００ミリグラムの活性成分を含有する錠剤の形態で提供される。化合物は、１日につき１〜４回のレジメンに基づいて、好ましくは１日につき１回または２回投与することができる。この投薬レジメンを調整して、最適な治療反応を提供することができる。
【０２５３】
一態様では、開示される化合物は、筋萎縮を阻害する。更なる態様では、開示される化合物は、筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。なおも更なる態様では、開示される化合物は、筋萎縮の阻害、筋肉の健康を促進すること、正常な筋肉機能を促進すること、かつ／または健康に老化する筋肉を促進することを行う。より更なる態様では、開示される化合物は、筋萎縮の阻害を行う。
【０２５４】
更なる態様では、投与される化合物は、開示される化合物または化合物の開示される作製方法の生成物である。なおも更なる態様では、本発明は、本明細書に開示される少なくとも１つの化合物を含む、薬学的組成物に関する。
【０２５５】
更なる態様では、化合物は、同化剤と共投与される。更なる態様では、その化合物が、ウルソール酸またはウルソール酸誘導体と共投与される。
【０２５６】
更なる態様では、動物は、哺乳動物、サカナ、またはトリである。なおも更なる態様では、その哺乳動物は、霊長類である。依然として更なる態様では、その哺乳動物は、ヒトである。より更なる態様では、そのヒトは、患者である。
【０２５７】
更なる態様では、筋萎縮シグネチャは、筋萎縮シグネチャ１である。依然として更なる態様では、筋萎縮シグネチャは、筋萎縮シグネチャ２である。
【０２５８】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、筋萎縮、糖尿病、肥満、および脂肪性肝疾患から選択される障害の治療に対する必要性があると診断されている。なおも更なる態様では、障害は、筋萎縮である。
【０２５９】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達における機能障害に関連する障害の治療に対する必要性があると診断されている。
【０２６０】
更なる態様では、障害の治療は、筋肉ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増加させる。依然として更なる態様では、障害の治療は、筋肉ＩＧＦ−Ｉ産生を増加させる。
【０２６１】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、レプチンの循環レベルに関連する障害の治療に対する必要性があると診断されている。依然として更なる態様では、治療は、レプチンの循環レベルを減少させる。
【０２６２】
更なる態様では、投与法は、哺乳動物における筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進している。なおも更なる態様では、投与は、エネルギー消費を増加させる。依然として更なる態様では、褐色脂肪を増加させる。より更なる態様では、投与は、褐色脂肪対白色脂肪の比率を増加させる。依然として更なる態様では、投与は、骨格筋対脂肪の比率を増加させる。なおも更なる態様では、化合物は、開示される化合物またはその誘導体と共投与される。
【０２６３】
更なる態様では、動物は、飼い慣らされた動物である。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、飼い慣らされたサカナ、飼い慣らされた甲殻類、または飼い慣らされた軟体類である。なおも更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家禽類である。より更なる態様では、その家禽類は、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、およびガチョウから選択される。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家畜である。なおも更なる態様では、その家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソン、およびヒツジから選択される。
【０２６４】
更なる態様では、有効量は、治療上有効量である。依然として更なる態様では、有効量は、予防上有効量である。なおも更なる態様では、筋萎縮が、化合物の投与によって予防される。より更なる態様では、筋萎縮が、化合物の投与によって治療される。依然として更なる態様では、本方法は、筋萎縮の治療を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。なおも更なる態様では、本方法は、筋萎縮の予防を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。より更なる態様では、哺乳動物は、投与するステップの前に、筋萎縮の治療に対する必要性があると診断されている。
【０２６５】
ｂ．筋肉の健康を促進する
一態様では、本発明は、動物における筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、および／または健康に老化する筋肉を促進するための方法に関し、本方法は、動物に、タクリンおよび類似体、ナリンゲニンおよび類似体、アラントインおよび類似体、コネッシンおよび類似体、トマチジンおよび類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体、ならびにベツリン酸および類似体、またはそれらの混合物から選択される有効量の化合物を投与することを含み、それによって、動物における筋肉の健康を促進する。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。一態様では、本発明は、筋肉の健康を促進するための方法に関する。別の態様では、本発明は、正常な筋肉機能を促進するための方法に関する。別の態様では、本発明は、健康に老化する筋肉を促進するための方法に関する。
【０２６６】
一態様では、本発明は、動物における筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、および／または健康に老化する筋肉を促進するための方法に関し、本方法は、動物に有効量の化合物を投与することを含み、その化合物は、筋萎縮シグネチャ１の誘導されたｍＲＮＡもしくは筋萎縮シグネチャ２の誘導されたｍＲＮＡのうちの少なくとも１つを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御し、かつ／またはその化合物は、筋萎縮シグネチャ１の抑制されたｍＲＮＡもしくは筋萎縮シグネチャ２の抑制されたｍＲＮＡのうちの少なくとも１つを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御し、それによって、動物における筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。
【０２６７】
更なる態様では、動物は、哺乳動物、サカナ、またはトリである。なおも更なる態様では、その哺乳動物は、霊長類である。依然として更なる態様では、その哺乳動物は、ヒトである。より更なる態様では、そのヒトは、患者である。
【０２６８】
更なる態様では、筋萎縮シグネチャは、筋萎縮シグネチャ１である。依然として更なる態様では、筋萎縮シグネチャは、筋萎縮シグネチャ２である。
【０２６９】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、筋萎縮、糖尿病、肥満、および脂肪性肝疾患から選択される障害の治療に対する必要性があると診断されている。なおも更なる態様では、障害は、筋萎縮である。
【０２７０】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達における機能障害に関連する障害の治療に対する必要性があると診断されている。
【０２７１】
更なる態様では、障害の治療は、筋肉ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増加させる。依然として更なる態様では、障害の治療は、筋肉ＩＧＦ−Ｉ産生を増加させる。
【０２７２】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、レプチンの循環レベルに関連する障害の治療に対する必要性があると診断されている。依然として更なる態様では、治療は、レプチンの循環レベルを減少させる。
【０２７３】
更なる態様では、投与は、哺乳動物における筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。なおも更なる態様では、投与は、エネルギー消費を増加させる。依然として更なる態様では、褐色脂肪を増加させる。より更なる態様では、投与は、褐色脂肪対白色脂肪の比率を増加させる。依然として更なる態様では、投与は、骨格筋対脂肪の比率を増加させる。なおも更なる態様では、化合物は、開示される化合物またはその誘導体と共投与される。
【０２７４】
更なる態様では、動物は、飼い慣らされた動物である。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、飼い慣らされたサカナ、飼い慣らされた甲殻類、または飼い慣らされた軟体類である。なおも更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家禽類である。より更なる態様では、その家禽類は、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、およびガチョウから選択される。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家畜である。なおも更なる態様では、その家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソン、およびヒツジから選択される。
【０２７５】
更なる態様では、有効量は、治療上有効量である。依然として更なる態様では、有効量は、予防上有効量である。なおも更なる態様では、筋萎縮が、化合物の投与によって予防される。より更なる態様では、筋萎縮が、化合物の投与によって治療される。依然として更なる態様では、本方法は、筋萎縮の治療を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。なおも更なる態様では、本方法は、筋萎縮の予防を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。より更なる態様では、哺乳動物は、投与するステップの前に、筋萎縮の治療に対する必要性があると診断されている。
【０２７６】
ｃ．筋肉形成を向上させる
一態様では、本発明は、哺乳動物における筋肉形成を向上させる方法に関し、本方法は、動物に、タクリンおよび類似体、ナリンゲニンおよび類似体、アラントインおよび類似体、コネッシンおよび類似体、トマチジンおよび類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体、ならびにベツリン酸および類似体、またはそれらの混合物から選択される有効量の化合物を投与することを含み、それによって、動物における筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。
【０２７７】
更なる態様では、本発明は、哺乳動物における筋肉形成を向上させる方法に関し、本方法は、動物に有効量の化合物を投与することを含み、その化合物は、筋萎縮シグネチャ１の誘導されたｍＲＮＡもしくは筋萎縮シグネチャ２の誘導されたｍＲＮＡのうちの少なくとも１つを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御し、かつ／またはその化合物は、筋萎縮シグネチャ１の抑制されたｍＲＮＡもしくは筋萎縮シグネチャ２の抑制されたｍＲＮＡのうちの少なくとも１つを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御し、それによって、動物における筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。
【０２７８】
更なる態様では、その哺乳動物は、ヒトである。依然として更なる態様では、そのヒトは、患者である。なおも更なる態様では、化合物の投与は、哺乳動物における筋萎縮を予防する。より更なる態様では、化合物の投与は、哺乳動物における筋萎縮を治療する。依然として更なる態様では、化合物の投与は、哺乳動物における筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。
【０２７９】
更なる態様では、化合物は、有効量で投与される。なおも更なる態様では、有効量は、治療上有効量である。依然として更なる態様では、有効量は、予防上有効量である。依然として更なる態様では、本方法は、筋萎縮の治療を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。なおも更なる態様では、本方法は、筋萎縮の予防を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。より更なる態様では、哺乳動物は、投与するステップの前に、筋萎縮の治療に対する必要性があると診断されている。
【０２８０】
更なる態様では、哺乳動物は、飼い慣らされた動物である。なおも更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家畜である。なおも更なる態様では、その家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソン、およびヒツジから選択される。
【０２８１】
３．インビトロでの組織形成を促進する
一態様では、本発明は、インビトロでの組織の健康を向上させる方法に関し、本方法は、組織に有効量の化合物を投与することを含み、その化合物は、筋萎縮シグネチャ１の誘導されたｍＲＮＡもしくは筋萎縮シグネチャ２の誘導されたｍＲＮＡのうちの少なくとも１つを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御し、かつ／またはその化合物は、筋萎縮シグネチャ１の抑制されたｍＲＮＡもしくは筋萎縮シグネチャ２の抑制されたｍＲＮＡのうちの少なくとも１つを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御し、それによって、筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。
【０２８２】
更なる態様では、投与される化合物は、開示される化合物である。更なる態様では、化合物は、タクリンおよび類似体、ナリンゲニンおよび類似体、アラントインおよび類似体、コネッシンおよび類似体、トマチジンおよび類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体、ならびにベツリン酸および類似体、またはそれらの混合物から選択され、それによって、インビトロでの組織形成を促進する。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。
【０２８３】
更なる態様では、その組織は、動物細胞を含む。依然として更なる態様では、動物細胞は、筋肉細胞である。なおも更なる態様では、その筋肉細胞は、骨格筋幹細胞または前駆細胞である。より更なる態様では、その骨格筋幹細胞または前駆細胞は、足場上で成長させられる。
【０２８４】
４．薬の製造
一態様では、本発明は、治療上有効量の開示される化合物または開示される方法の生成物を、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることを含む、筋萎縮を阻害するための、ならびに哺乳動物における筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、および／または健康に老化する筋肉を促進するための、薬の製造のための方法に関する。
【０２８５】
一態様では、本発明は、筋萎縮、または筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／もしくは健康に老化する筋肉を促進する必要性に関連する薬を製造するための方法に関し、本方法は、有効量の（ａ）タクリン類似体、ナリンゲニン類似体、アラントイン類似体、コネッシン類似体、トマチジン類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体、およびベツリン酸類似体、もしくはそれらの混合物から選択される化合物、（ｂ）筋萎縮シグネチャ１の複数の誘導されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御する化合物、（ｃ）筋萎縮シグネチャ１の複数の抑制されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、高める化合物、（ｄ）筋萎縮シグネチャ２の複数の誘導されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御する化合物、ならびに／または（ｅ）筋萎縮シグネチャ２の抑制されたｍＲＮＡのうちの少なくとも１つを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御する化合物のうちの１つ以上を、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせるステップを含む。
【０２８６】
更なる態様では、薬は、開示される化合物を含む。依然として更なる態様では、化合物は、タクリンおよび類似体、ナリンゲニンおよび類似体、アラントインおよび類似体、コネッシンおよび類似体、トマチジンおよび類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリンおよび類似体、ならびにベツリン酸および類似体、またはそれらの混合物から選択される。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。
【０２８７】
更なる態様では、薬は、筋肉の健康を調節する。依然として更なる態様では、薬筋萎縮を阻害する．なおも更なる態様では、薬筋肉の健康を促進し、正常な筋肉機能を促進し、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する。
５．キット
【０２８８】
また、タクリン類似体、ナリンゲニン類似体、アラントイン類似体、コネッシン類似体、トマチジン類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体、およびベツリン酸類似体、またはそれらの混合物と、ａ）動物における筋萎縮を治療することで知られている、少なくとも１つの薬剤、ｂ）動物における筋萎縮を得る危険性を減少させることで知られている、少なくとも１つの薬剤、ｃ）筋萎縮の副作用を有することで知られている、少なくとも１つの薬剤、ｄ）筋萎縮を治療するための指示書、またはｅ）少なくとも１つの同化剤のうちの１つ以上とを含む、キットも本明細書に開示される。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。
【０２８９】
一態様では、キットは、少なくとも１つの薬剤を更に含み、その化合物および薬剤は、共製剤化される。
【０２９０】
別の態様では、化合物および薬剤は、共同パッケージ化（ｃｏ−ｐａｃｋａｇｅｄ）される。薬剤は、同化剤、薬剤筋萎縮の副作用を有することで知られている薬剤、動物における筋萎縮を得る危険性を減少させることで知られている薬剤、または動物における筋萎縮を治療することで知られている薬剤等の、本明細書に開示される任意の薬剤であり得る。
【０２９１】
一態様では、本発明は、有効量の（ａ）タクリン類似体、ナリンゲニン類似体、アラントイン類似体、コネッシン類似体、トマチジン類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体、およびベツリン酸類似体から選択される化合物、（ｂ）筋萎縮シグネチャ１の複数の誘導されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御する化合物、（ｃ）筋萎縮シグネチャ１の複数の抑制されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御する化合物、（ｄ）筋萎縮シグネチャ２の複数の誘導されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、下方制御する化合物、ならびに／または（ｅ）筋萎縮シグネチャ２の複数の抑制されたｍＲＮＡを、化合物の不在下での同一の筋肉細胞の型における発現レベルと比較して、上方制御する化合物のうちの１つ以上と、（ｆ）（ｉ）タンパク質補助食品、（ｉｉ）同化剤、（ｉｉｉ）異化剤、（ｉｖ）栄養補助食品、（ｖ）筋肉累痩に関連する障害を治療することで知られている、少なくとも１つの薬剤、（ｖｉ）コリン作動性活性に関連する障害を治療するための指示書、または（ｖｉｉ）筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、かつ／または健康に老化する筋肉を促進する化合物を使用するための指示書のうちの１つ以上とを含む、キットに関する。
【０２９２】
キットはまた、他の構成成分と共同パッケージ化され、共製剤化され、および／または共送達された、化合物および／または生成物も含む。例えば、薬物製造業者、薬物再販業者、医師、調合店（ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ  ｓｈｏｐ）、または薬剤師は、開示される化合物および／または生成物、ならびに患者への送達のための別の構成要素を含むキットを提供することができる。
【０２９３】
開示されるキットは、開示される作製方法、開示される使用方法、および／または開示される組成物に関連して使用され得ることが企図される。
【０２９４】
６．血糖を低下させる方法
一態様では、本発明は、動物に、ウルソール酸およびナリンゲニン類似体を含む有効量の組成物を投与し、それによって、動物における血糖を低下させることを含む、動物における血糖を低下させる方法に関する。一態様では、ナリンゲニン類似体は、ナリンゲニンであり得る。一態様では、ウルソール酸は、ウルソール酸誘導体であり得る。
【０２９５】
別の態様では、本発明は、動物に、有効量のヒッペアストリン類似体を投与し、それによって、動物における血糖を低下させることを含む、動物における血糖を低下させる方法に関する。一態様では、ヒッペアストリン類似体は、ヒッペアストリンであり得る。
【０２９６】
別の態様では、本発明は、動物に、有効量のコネッシン類似体を投与し、それによって、動物における血糖を低下させることを含む、動物における血糖を低下させる方法に関する。一態様では、コネッシン類似体は、コネッシンであり得る。
【０２９７】
更なる態様では、動物は、哺乳動物、サカナ、またはトリである。なおも更なる態様では、その哺乳動物は、霊長類である。依然として更なる態様では、その哺乳動物は、ヒトである。より更なる態様では、そのヒトは、患者である。
【０２９８】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、血糖を低下させる必要性に関連する障害の治療に対する必要性があると診断されている。．
【０２９９】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達における機能障害に関連する障害の治療に対する必要性があると診断されている。
【０３００】
更なる態様では、障害の治療は、筋肉ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を増加させる。依然として更なる態様では、障害の治療は、筋肉ＩＧＦ−Ｉ産生を増加させる。
【０３０１】
更なる態様では、投与するステップの前に、哺乳動物は、レプチンの循環レベルに関連する障害の治療に対する必要性があると診断されている。依然として更なる態様では、治療は、レプチンの循環レベルを減少させる。
【０３０２】
更なる態様では、動物は、飼い慣らされた動物である。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、飼い慣らされたサカナ、飼い慣らされた甲殻類、または飼い慣らされた軟体類である。なおも更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家禽類である。より更なる態様では、その家禽類は、ニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、およびガチョウから選択される。依然として更なる態様では、その飼い慣らされた動物は、家畜である。なおも更なる態様では、その家畜動物は、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、バイソン、およびヒツジから選択される。
【０３０３】
更なる態様では、有効量は、治療上有効量である。依然として更なる態様では、有効量は、予防上有効量である。なおも更なる態様では、高血糖が、化合物の投与によって予防される。依然として更なる態様では、本方法は、血糖の低下の治療を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。なおも更なる態様では、本方法は、血糖を低下させる必要性の予防を必要とする哺乳動物を特定するステップを更に含む。より更なる態様では、哺乳動物は、投与するステップの前に、血糖の低下に対する必要性があると診断されている。
【０３０４】
７．筋萎縮を阻害する化合物の特定
また、筋萎縮の治療を必要とする動物に有効量で投与されるときに筋萎縮を阻害する化合物を特定するための方法も開示され、本方法は、（ｉ）候補化合物を選択するステップと、（ｉｉ）筋萎縮シグネチャの複数の誘導されたｍＲＮＡおよび／または抑制されたｍＲＮＡの細胞の発現レベルへの候補化合物の効果を決定するステップとを含み、その候補化合物は、（ａ）筋萎縮シグネチャの誘導されたｍＲＮＡのうちの２つ以上が、候補化合物の不在下での同一の細胞型における筋萎縮シグネチャの誘導されたｍＲＮＡの発現レベルと比較して、下方制御される場合、および／または（ｂ）筋萎縮シグネチャの抑制されたｍＲＮＡのうちの２つ以上が、候補化合物の不在下での同一の細胞型における筋萎縮シグネチャの抑制されたｍＲＮＡの発現レベルと比較して、上方制御される場合、筋萎縮阻害に好適であると特定される。一態様では、本方法は、候補化合物を動物に投与することを更に含む。なおも別の態様では、本方法は、報告書を記述することを更に含む。なおも別の態様では、本方法は、結果を報告することを更に含む。なおも別の態様では、本方法は、確認試験等の、候補化合物についての更なる試験を行うことを更に含む。なおも別の態様では、本方法は、候補化合物についての毒性研究を行うことを更に含む。
【０３０５】
更なる態様では、候補化合物は、開示される化合物を含む。依然として更なる態様では、化合物は、本明細書の他の箇所に定義される、タクリン類似体、ナリンゲニン類似体、アラントイン類似体、コネッシン類似体、トマチジン類似体、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体、およびベツリン酸類似体から選択される。例えば、化合物は、タクリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ナリンゲニン類似体であり得る。別の例では、化合物は、アラントイン類似体であり得る。別の例では、化合物は、コネッシン類似体であり得る。別の例では、化合物は、トマチジン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ウンゲリン／ヒッペアストリン類似体であり得る。別の例では、化合物は、ベツリン酸類似体であり得る。
【０３０６】
更なる態様では、動物は、哺乳動物、サカナ、またはトリである。なおも更なる態様では、その哺乳動物は、霊長類である。依然として更なる態様では、その哺乳動物は、ヒトである。より更なる態様では、そのヒトは、患者である。
【０３０７】
更なる態様では、筋萎縮シグネチャは、筋萎縮シグネチャ１である。依然として更なる態様では、筋萎縮シグネチャは、筋萎縮シグネチャ２である。
【０３０８】
更なる態様では、筋萎縮シグネチャは、ａ）筋萎縮を経ている筋肉細胞中のｍＲＮＡ発現レベルを決定するステップと、ｂ）筋萎縮を経ていない筋肉細胞中のｍＲＮＡ発現レベルを決定するステップとを含む、ステップに従って決定され、ここでｍＲＮＡは、（ａ）ｍＲＮＡが、筋萎縮を経ていない筋肉細胞と比較して、筋萎縮を経ている筋肉細胞中で上方制御される場合、または（ｂ）ｍＲＮＡが、筋萎縮を経ていない筋肉細胞と比較して、筋萎縮を経ている筋肉細胞中で下方制御される場合、筋萎縮シグネチャの一部であることが決定される。
【０３０９】
一態様では、萎縮を経ている筋肉細胞および萎縮を経ていない筋肉細胞は、動物から採取される。別の態様では、萎縮を経ている筋肉細胞は、動物が絶食の状態にある間に採取され、萎縮を経ていない筋肉細胞は、絶食の状態の前に採取される。なおも別の態様では、萎縮を経ている筋肉細胞は、不動化された筋肉から採取され、萎縮を経ていない筋肉細胞は、可動の筋肉から採取される。なおも別の態様では、萎縮を経ている筋肉細胞は、脊髄損傷を有する動物から採取され、萎縮を経ていない筋肉細胞は、電気刺激を受けた筋肉から採取される。なおも別の態様では、筋萎縮シグネチャは、本明細書に記載される方法の筋萎縮シグネチャのうちの２つ以上の間で一般的に上方制御されるｍＲＮＡまたは一般的に下方制御されるｍＲＮＡを選択することによって、決定される。
【０３１０】
更なる態様では、本発明は、哺乳動物における筋萎縮を阻害するための方法に関し、本方法は、哺乳動物に、上述の方法を使用して特定される治療上有効量の化合物を投与することを含む。
【０３１１】
８．非医学的使用
また、筋肉の健康を促進する、正常な筋肉機能を促進する、および／または健康に老化する筋肉を促進する新たな治療剤の探索の一部として、ネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラット、サカナ、トリ、およびマウス等の実験動物における筋萎縮関連活性の阻害剤の効果を評価するための、インビトロおよびインビボ試験系の開発および標準化における薬理学的ツールとしての、開示される化合物および生成物の使用も提供される。
【０３１２】
Ｅ．実験
次の実施例は、当業者に、本明細書に特許請求される化合物、組成物、物品、装置、および／または方法をどのように作製し、評価するかについての完全な開示および説明を提供するために提示され、それは本発明を単に例として示すように意図され、発明者らが何を彼らの発明として見なすかについての範囲を限定するようには意図されない。しかしながら、当業者は、本開示に照らして、開示される具体的な実施形態において多くの変更を行い、本発明の趣旨または範囲から逸脱することなく、依然として同様のまたは類似した結果を得ることができることを理解するはずである。
【０３１３】
数値（例えば、量、温度等）に関する正確性を確実にするための努力がなされてきたが、幾つかの誤差および偏差が考慮されるべきである。別途指示しない限り、部分は、重量部であり、温度は、℃単位であるか、または周囲温度であり、圧力は、大気圧またはそれに近い。
【０３１４】
ある種の物質、試薬、およびキットは、下に示される具体的な販売業者から得、適宜、販売業者のカタログ、品目を明記する品番または他の番号が示される。下に示される販売業者は、次の通りである：「Ａｍｂｉｏｎ」は、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ａｕｓｔｉｎ，Ｔｅｘａｓ，ＵＳＡの一部門であるＡｍｂｉｏｎであり、「Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ」は、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡの一部門であるＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓであり、「Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ」は、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｎ，Ｉｎｄｉａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡであり、「ＣａｒｄｉｎａｌＨｅａｌｔｈ」は、Ｃａｒｄｉｎａｌ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｉｎｃ．，Ｄｕｂｌｉｎ，Ｏｈｉｏ，ＵＳＡであり、「Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ」は、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｂｅｖｅｒｌｙ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｔｓ，ＵＳＡであり、「Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔ」は、Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，Ｏｈｉｏ，ＵＳＡであり、「Ｈａｒｌａｎ」は、Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡであり、「Ｉｎｓｔｒｕｍｅｄｉｃｓ」は、Ｉｎｓｔｒｕｍｅｄｉｃｓ，Ｉｎｃ．，Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，ＵＳＡであり、「Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ」は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡであり、「Ｍｉｃｒｏｍ」は、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ，ＵＳＡのＭｉｃｒｏｍ部門（Ｗａｌｌｄｏｒｆ，Ｇｅｒｍａｎｙ）であり、「Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ」は、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ，Ｄａｒｍｓｔａｄｔ，Ｇｅｒｍａｎｙの一部門であるＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｔｓ，ＵＳＡであり、「Ｏｒｔｈｏ」は、Ｏｒｔｈｏ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＵＳＡであり、「Ｐｉｅｒｃｅ」は、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．の一部門であるＰｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，ＵＳＡであり、「Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ，ＵＳＡであり、「Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ」は、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，Ｉｎｄｉａｎａ，ＵＳＡであり、「Ｓａｋｕｒａ」は、Ｓａｋｕｒａ  Ｆｉｎｅｔｅｋ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ．，Ｔｏｒｒａｎｃｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡであり、「Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ」は、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ，ＵＳＡであり、「Ｓｉｇｍａ」は、Ｓ��ｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓａｉｎｔ  Ｌｏｕｉｓ，Ｍｉｓｓｏｕｒｉ，ＵＳＡである。
【０３１５】
１．１．一般的方法
ａ．ヒト対象プロトコル。
本明細書で参照される研究は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ＩｏｗａのＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｂｏａｒｄによって認可され、参加前にインフォームドコンセントを得た７人の健康な成人を含めた。絶食研究の１週間前に、対象は、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｕｎｉｔ（「ＣＲＵ」）を１回訪れ、人体測定、各対象の日常的な食物摂取および食物嗜好を確立する食生活聞き取り調査、ならびにＢＭ／Ｈｉｔａｃｈｉ  ９１１分析器（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｍａｎｎｈｅｉｍ）を使用した血液ヘモグロビン（「Ｈｂ」）Ａ１ｃ比濁測定免疫阻害と、Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用した電気化学発光免疫測定法による血漿トリグリセリドおよび血漿遊離Ｔ４およびＴＳＨと、Ｒｏｃｈｅ  Ｃｏｂａｓ  Ｉｎｔｅｇｒａ（登録商標）高感度アッセイ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用した免疫比濁アッセイによる血漿ＣＲＰと、Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ（登録商標）キット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用した血漿ＴＮＦ−αレベルとのベースライン決定を行った。対象が、絶食研究の前に彼らの日常的な食餌を摂取していことを確実にするために、対象は、絶食研究前の４８時間にわたって、ＣＲＵ栄養士によって（食生活聞き取り調査に基づいて）準備された食事のみを摂取した。絶食研究は、対象がＣＲＵに入り、絶食を開始した、ｔ＝０時間で開始した。絶食の間、対象は、ＣＲＵに留まり、彼らの日常的な身体活動を維持するよう促された。水は自由に許可されたが、カロリー摂取は許容されなかった。約４０時間時点で、経皮生検を、外側広筋から、Ｔｅｍｎｏ（登録商標）Ｂｉｏｐｓｙ  Ｎｅｅｄｌｅ（ＣａｒｄｉｎａｌＨｅａｌｔｈ、カタログ番号Ｔ１４２０）を使用して、超音波誘導下で採取した。対象は次いで、ＣＲＵにより準備された混合食を摂取し、ｔ＝４６時間で、筋肉生検を、対側外側広筋から採取した。血漿ブドウ糖およびインスリンレベルを、ｔ＝３６、４０、４２、および４６時間で測定した。Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）系を使用して、血漿インスリンを定量化した。脊髄損傷を有するヒトの、我々の研究プロトコルは、以前に記載されている（Ａｄａｍｓ  ＣＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ  Ｎｅｒｖｅ．４３（１）：６５−７５）。
【０３１６】
ｂ．ヒト骨格筋ＭＲＮＡレベルのマイクロアレイ解析。
採取後、骨格筋試料を、ＲＮＡｌａｔｅｒ（Ａｍｂｉｏｎ）中に即座に配置し、更に使用するまで−８０℃で保管した。総ＲＮＡを、ＴＲＩｚｏｌ溶液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して抽出し、マイクロアレイハイブリダイゼーションを、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｉｏｗａ  ＤＮＡ  Ｆａｃｉｌｉｔｙにて、以前に記載されたように行った（Ｌａｍｂ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ  ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）。本明細書に示されるｌｏｇ2ハイブリダイゼーションシグナルは、個々のｍＲＮＡに特有の全てのエクソンプローブの平均シグナル強度を反映する。どのヒト骨格筋ｍＲＮＡが絶食によって有意に変化したか（Ｐ≦０．０２）を決定するために、対応のあるｔ検定を使用して、絶食ｌｏｇ2シグナルと摂食ｌｏｇ2シグナルとを比較した。どのマウス骨格筋ｍＲＮＡがウルソール酸によって有意に変化した（Ｐ≦０．００５）かを決定するために、対応のないｔ検定を使用して、対照食餌、またはウルソール酸を補充した食餌を与えられたマウスにおけるｌｏｇ2シグナルを比較した。高度に発現されたｍＲＮＡは、８超のｌｏｇ2シグナルから抑制されたまたは８超のｌｏｇ2シグナルまで誘導された、有意に変化したｍＲＮＡとして定義された。ヒトおよびマウスからのこれらの生のマイクロアレイデータは、ＮＣＢＩのＧｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｏｍｎｉｂｕｓ（「ＧＥＯ」）に寄託されており、それぞれ、ＧＥＯ  Ｓｅｒｉｅｓ受入番号ＧＳＥ２８０１６およびＧＳＥ２８０１７を通じてアクセス可能である。絶食のマウス骨格筋への影響、および脊髄損傷のヒト骨格筋への影響についてのエクソンアレイ研究は、以前に記載されている（Ａｄａｍｓ  ＣＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ＆ｎｅｒｖｅ  ４３（１）：６５−７５、Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）。
【０３１７】
ｃ．定量リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）。
ＴＲＩｚｏｌ抽出ｍＲＮＡを、ＤＮａｓｅ  ＩによりＴｕｒｂｏ  ＤＮＡ−ｆｒｅｅキット（Ａｍｂｉｏｎ）を使用して処理した。ヒトｍＲＮＡおよびマウスＩＧＦ−Ｉ  ｍＲＮＡのｑＰＣＲ解析を、ＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙｓ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して行った。第一鎖ｃＤＮＡを、２μｇのＲＮＡから、Ｈｉｇｈ  Ｃａｐａｃｉｔｙ  ｃＤＮＡ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、品番４３６８８１４）を使用して合成した。リアルタイムＰＣＲは、２０μＬの最終体積中に、２０ｎｇの逆転写ＲＮＡ、１μＬの２０倍ＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙ、および１０μＬのＴａｑＭａｎ  Ｆａｓｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、品番４３５２０４２）を含有した。ｑＰＣＲを、７５００  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、９６００エミュレーションモードで行った。マウスアトロジン−１およびＭｕＲＦ１  ｍＲＮＡレベルのｑＰＣＲ解析を、以前に記載されたように行った（Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）。全てのｑＰＣＲ反応を三重で行い、サイクル閾（Ｃｔ）値を平均化して、最終結果を得た。データを分析するために、ΔＣｔ法を使用し、３６Ｂ４  ｍＲＮＡのレベルが不変異体対照としての役目を果たした。
【０３１８】
ｄ．マウスプロトコル。
６〜８週齢のオスＣ５７ＢＬ／６マウスをＮＣＩから得、１２時間明／／１２時間暗周期でコロニーケージ中に収容し、それらの到着の３週間以内に実験のために使用した。別途指定されない限り、マウスを、標準的な食事（Ｈａｒｌａｎ、Ｔｅｋｌａｄ  Ｄｉｅｔ，Ｆｏｒｍｕｌａ  ７０１３、ＮＩＨ−３１  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｏｐｅｎ  Ｆｏｒｍｕｌａ  Ｍｏｕｓｅ／Ｒａｔ  Ｓｔｅｒｉｌｉｚａｂｌｅ  Ｄｉｅｔ）で維持した。メトホルミン（Ｓｉｇｍａ）を、２５０ｍｇ／ｍＬの濃度の０．９％ＮａＣｌ中に溶解させた。ウルソール酸（Ｅｎｚｏ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を、２００ｍｇ／ｍＬの濃度のトウモロコシ油（腹腔内注射用）中に溶解させたか、代替的に、ウルソール酸を、特化された食事として標準的な食事（Ｈａｒｌａｎ、Ｔｅｋｌａｄ  Ｄｉｅｔ，Ｆｏｒｍｕｌａ  ７０１３）または標準的な高脂肪食（Ｈａｒｌａｎ、Ｔｅｋｌａｄ  Ｄｉｅｔ、Ｆｏｒｍｕｌａ  ＴＤ．９３０７５）に直接添加した。オレアノール酸（Ｓｉｇｍａ）を、２００ｍｇ／ｍＬの濃度のトウモロコシ油中に溶解させた。マウスを、水は除くが、食物を取り上げることによって、２４時間絶食させた。空腹時血糖レベルを、尾静脈から、ＡＣＣＵ−ＣＨＥＫ（登録商標）Ａｖｉｖａ糖測定器（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を用いて取得した。片側後肢の筋除神経を、麻酔下で坐骨神経を横切開することによって行い、続いてウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）またはビヒクル単独（トウモロコシ油）の投与を、腹腔内注射を介して１日２回、７日間にわたって行った。前肢握力を、三角のプルバーを装着した握力測定器（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔ）を使用して決定した。各マウスを、５回の連続試験に供して、ピーク値を得た。血漿ＩＧＦ−Ｉおよびレプチンレベルを、Ｖａｎｄｅｒｂｉｌｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｈｏｒｍｏｎｅ  Ａｓｓａｙ  Ｃｏｒｅ  ＦａｃｉｌｉｔｙにおけるＲＩＡによって測定した。血漿コレステロール、トリグリセリド、クレアチニン、ビリルビン、およびＡＬＴを、ＶＩＴＲＯＳ（登録商標）３５０  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｏｒｔｈｏ）を使用して測定した。全ての動物手技は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｉｏｗａの動物実験委員会によって認可された。
【０３１９】
ｅ．組織学的分析。
採取の後に、組織を、液体Ｎ2で−１６０℃まで冷却されたイソペンタン中に即座に配置した。筋肉を、組織凍結培地中に包埋し、中腹からの１０μｍ切片を、ＣｒｙｏＪａｎｅ薄片化システム（Ｉｎｓｔｒｕｍｅｄｉｃｓ）を装着したＭｉｃｒｏｍ  ＨＭ  ５０５  Ｅクライオスタットを使用して調製した。脂肪組織を、１０％中性緩衝ホルマリン中に固定し、パラフィン中に包埋し、次いで４μｍ切片を、Ｍｉｃｒｏｍ  ＨＭ３５５  Ｓモータ付きミクロトーム（Ｍｉｃｒｏｍ）を使用して調製した。ヘマトキシリンおよびエオシン染色を、ＤＲＳ−６０１自動スライド染色装置（Ｓａｋｕｒａ）を使用して行い、ＤＰ−７０カメラを装着したＯｌｙｍｐｕｓ  ＩＸ−７１顕微鏡上で検査した。画像分析を、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（パブリックドメイン、米国国立衛生研究所から入手可能）を使用して行った。筋線維直径を、他の箇所に記載される（Ｄｕｂｏｗｉｔｚ  Ｖ，ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｍｕｓｃｌｅ  ｂｉｏｐｓｙ  ：ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｓａｕｎｄｅｒｓ  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ）３ｒｄ  Ｅｄ  ｐｐ  ＸＩＩＩ，６１１  ｓ）短径（ｌｅｓｓｅｒ  ｄｉａｍｅｔｅｒ）法を使用して測定した。
【０３２０】
ｆ．ＩＧＦ−Ｉ媒介性およびインスリン媒介性タンパク質リン酸化の分析。
マウス四頭筋を、液体Ｎ2中で急速冷凍し、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ  １００可溶性タンパク質抽出物を、以前に記載されたように調製した（Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）。マウスＣ２Ｃ１２筋芽細胞を、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（「ＡＴＣＣ」）から得、抗生物質（１００単位／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬ硫酸ストレプトマイシン）および１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含有するダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ、ＡＴＣＣ番号３０−２００２）中で維持した。０日目、筋管を、６ウェルプレート中に、２．５×１０5細胞／ウェルの密度で設置した。２日目、筋管への分化を、１０％ＦＢＳを２％ウマ血清で置換することによって誘導した。７日目、筋管を、リン酸緩衝食塩水で２回洗浄し、次いで新鮮な無血清培地を添加することによって、血清飢餓処理した。１６時間の血清飢餓処理後、１０μＭウルソール酸（ＤＭＳＯ中で調製した１０ｍＭ原液から）、または等体積のＤＭＳＯを、１０ｎＭマウスＩＧＦ−Ｉ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｉ８７７９）または１０ｎＭウシインスリン（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｉ６６３４）を含めてまたは含めずに、培地に直接添加した。Ａｋｔ、Ｓ６Ｋ、ＥＲＫ、およびＦｏｘＯリン酸化の分析のために、筋管を、ウルソール酸、ＩＧＦ−Ｉ、および／またはインスリンの存在または不在下で２０分間インキュベートし、次いでＳＤＳ溶解緩衝液（１０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．６、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳ、１μｇ／ｍＬペプスタチンＡ、２μｇ／ｍＬアプロトニン、１０μｇ／ｍＬロイペプチン、２００μＭフッ化フェニルメチルスルホニル、および１：１００希釈のホスファターゼ阻害剤カクテル３（Ｓｉｇｍａ）中に採取した。各筋肉抽出または細胞溶解物のアリコートを、０．２５体積の試料緩衝液（２５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、ｐＨ６．８、１０％ＳＤＳ、２５％グリセロール、０．２％（ｗ／ｖ）ブロモフェノールブルー、および５％（ｗ／ｖ）２−メルカプトエタノール）と混合し、９５℃で５分間加熱した一方で、別個のアリコートを使用して、ＢＣＡキット（Ｐｉｅｒｃｅ）によってタンパク質濃度を決定した。試料（２５μｇ）を、８％ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し、次いでＨｙｂｏｎｄ−Ｃエクストラニトロセルロースフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に移した。免疫ブロットを４℃で１６時間、１：２０００希釈の抗体を使用して行って、総Ａｋｔ、リン酸化Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）、総Ｓ６Ｋ、リン酸化Ｓ６Ｋ（Ｔ４２１／Ｓ４２４）、総ＥＲＫ１／２、リン酸化ＥＲＫ（Ｔ２０２／Ｙ２０４）、ＦｏｘＯ３ａ、またはリン酸化ＦｏｘＯ１（Ｔ２４）／ＦｏｘＯ３ａ（Ｔ３２）（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）を検出した。ＩＧＦ−１受容体またはインスリン受容体リン酸化の分析のために、筋管を、ウルソール酸、ＩＧＦ−Ｉ、および／またはインスリンの存在または不在下で２分間インキュベートし、次いでＲＩＰＡ緩衝液（１０ｍＭトリス−ＨＣＬ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％（ｗ／ｖ）ＳＤＳ、１％（ｗ／ｖ）Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１％デオキシコール酸ナトリウム、５ｍＭ  ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＮａＦ、１ｍＭオルトバナジン酸ナトリウム、１μｇ／ｍＬペプスタチンＡ、２μｇ／ｍＬアプロトニン、１０μｕｇ／ｍＬロイペプチン、２００μＭフッ化フェニルメチルスルホニル、１：１００希釈のホスファターゼ阻害剤カクテル２（Ｓｉｇｍａ）、および１：１００希釈のホスファターゼ阻害剤カクテル３（Ｓｉｇｍａ）中に採取した。タンパク質濃度を、ＢＣＡキットを使用して測定し、その後、抽出物を、ＲＩＰＡ緩衝液中１ｍｇ／ｍＬの濃度に希釈した（最終体積５００μＬ）。次いで２μｇ抗ＩＧＦ−１受容体β抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）または２μｇ抗インスリン受容体β抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）を、５０μＬプロテインＧプラスセファロースビーズ（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）と共に添加し、次いで試料を４℃で１６時間回転させた。免疫沈降物質を２０分間、１ｍＬＲＩＰＡ緩衝液で３回洗浄し、次いで１００μＬ試料緩衝液（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ（ｐＨ６．８）、２％ＳＤＳ、５％グリセロール、０．０４％（ｗ／ｖ）ブロモフェノールブルー、および５％（ｗ／ｖ）２−メルカプトエタノール）と混合し、次いで５分間沸騰させた。免疫沈降物質を、８％ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供した。総ＩＧＦ−１受容体、リン酸化インスリン受容体、および総インスリン受容体の分析のために、タンパク質をＨｙｂｏｎｄ−Ｃエクストラニトロセルロースフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に移した。リン酸化ＩＧＦ−１受容体の分析のために、タンパク質を、ＰＶＤＦ膜（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）に移した  免疫ブロットを、室温で１：２０００希釈の抗ＩＧＦ−１受容体β抗体、１：５０００希釈のマウス抗リン酸化チロシン４Ｇ１０モノクローナル抗体（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、１：２０００希釈の抗インスリン受容体β、または１：２０００希釈の抗リン酸化インスリン受容体β（Ｙ１１６２／１１６３）（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）を使用して行った。
【０３２１】
ｇ．ＲＮＡ干渉を介したＰＴＰ１Ｂ阻害。
ＰＴＰＮ１特異的オリゴヌクレオチド二重鎖（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を、操作されたプレ−ｍｉＲＮＡおよびＥｍＧＦＰの共シストロン性（ｃｏ−ｃｉｓｔｒｏｎｉｃ）発現を主導するＣＭＶプロモーターを含有するｐｃＤＮＡ６．２ＧＷ／ＥｍＧＦＰ  ｍｉＲプラスミド（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に連結反応させることによって、プラスミドｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号１およびｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号２を生成した。ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−対照は、ｐｃＤＮＡ６．２ＧＷ／ＥｍＧＦＰ  ｍｉＲプラスミドにおける非標的型プレ−ｍｉＲＮＡヘアピン配列（ｍｉＲ陰性対照、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）をコードする。オスＣ５７ＢＬ／６マウスを、ＮＣＩから６〜８週齢で得、それらの到着の３週間以内に実験のために使用した。マウス前脛骨筋のエレクトロポレーションおよび骨格筋ＲＮＡの単離を、以前に記載されたように行った（Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）。１本鎖ｃＤＮＡを、２μｇのＲＮＡ、無作為ヘキサマープライマー、および高性能ｃＤＮＡ逆転写キット（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）の構成要素を含有する、２０μＬ反応物中で合成した。ＰＴＰＮ１  ｍＲＮＡレベルのｑＰＣＲ解析を、Ｔａｑｍａｎ発現アッセイを使用して、以前に記載されたように行った（Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）。ｑＰＣＲを、７５００  Ｆａｓｔ  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して行った。全てのｑＰＣＲ反応を三重で行い、サイクル閾（Ｃｔ）値を平均化して、最終結果を得た。倍率変化を、ΔＣｔ法によって決定し、３６Ｂ４  ｍＲＮＡのレベルが不変異体対照としての役目を果たした。骨格筋切片を調製し、トランスフェクトされた（ＥｍＧＦＰ陽性）筋線維を特定し、以前に記載されたように測定した（Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）。
【０３２２】
ｈ．血清ウルソール酸レベルの測定。
ウルソール酸を、血清から、ヘキサン：プロパノールの１０：１混合物（回収率９０％超）を使用して抽出し、次いでそのカルボン酸基を介して、ＴＵＶおよび蛍光検出を強化する部分である、２−（２，３−ナフタルイミノ）エチルトリフルオロメタンスルホン酸塩（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｎｅ−ＯＴｆ）に複合体化させた。誘導体化試料を次いで、１．８μｍビーズ（Ｗａｔｅｒｓ品番１８６００３５３３）を有する１００×２．１ｍｍ  Ｃ１８  ＨＳＳカラムおよびＴＵＶ検出器を装着した、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ上で分析した。
【０３２３】
２．筋萎縮を治療するための治療薬の特定
骨格筋萎縮は、一般的であり、薬理療法を欠く消耗性の病態である。この病態生理的状態に対する新たな治療的アプローチを特定し、開発するために（図１）、遺伝子発現シグネチャを使用して小分子、遺伝子、および疾患を関連付けるアプローチを使用した。簡潔に述べると、ヒト筋肉およびマウス筋肉の両方において絶食によって制御された６３個のｍＲＮＡ、ならびにヒト筋肉において絶食および脊髄損傷の両方によって制御された２９個のｍＲＮＡを特定した。筋萎縮のこれらの２つのバイアスのないｍＲＮＡ発現シグネチャを使用して、遺伝子シグネチャデータセットを使用して小分子、遺伝子、および疾患の間の関係を見出すことを可能にするアルゴリズムである、連結性マップ（Ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ  Ｍａｐ）を照会した。
【０３２４】
ヒトおよびマウスにおける骨格筋ｍＲＮＡレベルの広範囲の萎縮関連変化を特徴付けるための、３つの優遇の（ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙ）研究を行った。これらの３つの研究により、Ａ）本明細書に記載されるヒト骨格筋ｍＲＮＡレベルへの絶食、Ｂ）ヒト骨格ｍＲＮＡレベルへの脊髄損傷（「ＳＣＩ」）（Ａｄａｍｓ  ＣＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ＆ｎｅｒｖｅ  ４３（１）：６５−７５）、およびＣ）マウス骨格筋ｍＲＮＡレベルへの絶食（Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）の影響を決定した。各研究において、エクソン発現アレイを使用して、１６，０００個を超えるｍＲＮＡのレベルを定量化した。各研究において多くの有意な変化が存在したが、分析は、ｍＲＮＡのレベルが少なくとも２つの萎縮モデルにおいて同様に変化したｍＲＮＡに焦点を当てた。このようにして、ヒト骨格筋およびマウス骨格筋への絶食の影響を比較することによって、次の２組のｍＲＮＡが特定された：ａ）両方の種において絶食によって増加した３１個のｍＲＮＡ、およびｂ）両方の種において絶食によって減少した３２個のｍＲＮＡ。これらの進化的に保存された、絶食制御性骨格筋ｍＲＮＡを、「筋萎縮シグネチャ−１」と称した（図２を参照されたい）。次に、ヒト骨格筋への絶食およびＳＣＩの影響を決定し、次の２組のｍＲＮＡを特定した：ａ）絶食およびＳＣＩによって増加した１８個のｍＲＮＡ、ならびにｂ）絶食およびＳＣＩによって減少した１７個のｍＲＮＡ。ｍＲＮＡのこの第２の群を、「筋萎縮シグネチャ−２」と称した（図３を参照されたい）。筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２におけるｍＲＮＡのほぼ全てが、正常なまたは萎縮した骨格筋における以前に特徴付けられなかった役割を有する。次に、細胞ｍＲＮＡレベルに対する影響が筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２と反対である薬理的化合物が、骨格筋萎縮を阻害し得るという仮説を立てた。候補化合物を特定するために、連結性マップ（Ｌａｍｂ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ  ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）を使用して、筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２を、１３００超の生理活性小分子のｍＲＮＡ発現シグネチャと比較した。これらの結果は、ウルソール酸を含む、ヒト骨格筋萎縮の複数の予測される阻害剤を特定した。ヒト骨格筋萎縮の予測される阻害剤、すなわち、筋萎縮シグネチャと負の連結性を有する化合物が、下の表２および３に示される。表２は、ヒト筋萎縮シグネチャ−１と負の連結性を有する化合物を示し（シグネチャにおけるｍＲＮＡについては図２を参照されたい）、他方、表３は、ヒト筋萎縮シグネチャ−２と負の連結性を有する化合物を示す（シグネチャにおけるｍＲＮＡについては図３を参照されたい）。
【０３２５】
本明細書に記載される筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２の実用性の概念実証として、ウルソール酸の効果をマウスにおいて査定し、驚くべきことに、ウルソール酸が筋萎縮を阻害し、筋肥大を促進することが発見された。
【０３２６】
表２．ヒト筋萎縮シグネチャ−１と負の連結性を有する化合物。
0006001060.tif 000047
【０３２７】
表３．ヒト筋萎縮シグネチャ−２と負の連結性を有する化合物。
0006001060.tif 000048
【０３２８】
３．ヒトにおける骨格筋ＭＲＮＡ発現への絶食の影響。
持続的な絶食は、筋萎縮を誘導するが、ヒト骨格筋における広範囲のｍＲＮＡ発現へのその影響は、これまで知られていなかった。広範囲のｍＲＮＡ発現とヒト骨格筋状態との間の関係を決定するために、２５〜６９歳の年齢の範囲（平均＝４６歳）の７人の健康な成人ヒトボランティア（男性３人および女性４人）を研究した。全体的な研究設計が、図４Ａに示される。これらの対象の平均体質量インデックス（±標準誤差）は、２５±１であった。彼らの平均体重は、６９．４±４．８ｋｇであった。ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、遊離チロキシン（遊離Ｔ４）、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、および腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）のベースライン循環レベルは、正常な限界以内であった（図４Ａ）。表（図４Ａ、挿入）は、ベースライン循環代謝および炎症マーカーを示す。グラフは、血漿ブドウ糖およびインスリンレベルを示す（図４Ａ）。データは、７人の研究対象からの平均±標準誤差である。幾つかの実例では、エラーバーは、見えないほどに小さい。Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｉｏｗａ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｕｎｉｔに滞在する間、対象は、水は除くが、食物を差し控えることによって、４０時間絶食した。絶食中の平均体重減少は、１．７±０．１ｋｇ（初期体重の３±０％）であった。
【０３２９】
４０時間の絶食後、筋肉生検を、対象の外側広筋（ＶＬ）筋肉から取得した。筋肉生検の直後に、対象は、混合食を摂取した。５時間後（最初の生検の６時間後）、第２の筋肉生検を、彼らの対側ＶＬ筋肉から取得した。このようにして、各対象は、絶食および非絶食条件下で筋肉生検を受けた。予想通り、血漿ブドウ糖およびインスリンレベルは、４０時間の絶食の終了時に低く、食事後に上昇し、第２の生検の時間までにはベースラインに戻った（図４Ａ）。これらのデータは、第１（絶食）および第２（非絶食）の筋肉生検の時点での血漿ブドウ糖およびインスリンの同程度のレベルを示す。
【０３３０】
骨格筋ｍＲＮＡ発現への絶食の影響を決定するために、ＲＮＡを、対にした筋肉生検から単離し、次いでそれをエクソン発現アレイにより分析した。統計的有意性の基準としてＰ≦０．０２（対応のあるｔ検定による）を使用して、２８１個のｍＲＮＡが、絶食状態においてより高く、２７７が、より低かったことが見出された（測定された１７，０００個超のｍＲＮＡ中、図４Ｂを参照されたい）。これらの絶食応答性ｍＲＮＡの完全な一覧が、下で表Ｘ１に示される（「変化」は、平均ｌｏｇ2変化、または絶食状態と摂食状態との間の差異である）。表Ｘ１におけるデータは、ｍＲＮＡのレベルが絶食によって増加または減少した、本研究における全てのｍＲＮＡに関する（対応のあるｔ検定によるＰ≦０．０２）。
【０３３１】
Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｘｏｎ  １．０  ＳＴアレイによって査定されたときの、代表的な絶食応答性ヒト骨格筋ｍＲＮＡ、およびそれらのｌｏｇ２ハイブリダイゼーションシグナルへの絶食の影響が、図４Ｂに示される。各対象において、絶食シグナルは、同一の対象からの非絶食シグナルに対して正規化された。データは、７人の対象からの平均±標準誤差である。全てのｍＲＮＡについての対応のあるｔ検定によるＰ≦０．０２が示される。４５８個の絶食応答性ｍＲＮＡの完全な組が、表Ｘ１に示される。絶食によって変化したとして特定された、示差的に発現されたｍＲＮＡのほとんどは、筋萎縮における既知の役割を有しなかった。しかしながら、絶食は、脂肪酸化、コレステロール逆輸送、熱発生、タンパク質合成の阻害、オートファジー、ユビキチン媒介性タンパク質分解、グルタミン輸送、およびヘム異化等の異化プロセスにおいて既知の役割を有するタンパク質をコードする、複数のｍＲＮＡを増加させた（図４Ｂ）。これらのうち、アトロジン−１、ＭｕＲＦ１、およびＺＦＡＮＤ５  ｍＲＮＡは、マウスにおける骨格筋萎縮に必要とされることで知られているタンパク質をコードする（Ｂｏｄｉｎｅ  ＳＣ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ  ２９４（５５４７）：１７０４−１７０８、Ｈｉｓｈｉｙａ  Ａ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｔｈｅ  ＥＭＢＯ  ｊｏｕｒｎａｌ  ２５（３）：５５４−５６４）。逆に、絶食は、グリコーゲン合成、脂質合成および取り込み、ポリアミン合成、鉄分取り込み、血管新生、およびミトコンドリア生合成等の同化プロセスにおいて既知の役割を有するタンパク質をコードする、複数のｍＲＮＡを有意に減少させた（図４Ｂ）。これらのうち、ＰＧＣ−１α  ｍＲＮＡは、マウスにおける萎縮関連遺伝子発現および骨格筋萎縮を阻害するタンパク質をコードする（Ｓａｎｄｒｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  １０３（４４）：１６２６０−１６２６５）。
【０３３２】
結果を、ｑＰＣＲを使用して更に検証して、７人の健康なヒト対象から得た、対にした摂食および絶食時骨格筋生検試料からのＲＮＡを分析した（図５を参照されたい、データは平均±標準誤差である、＊対応のあるｔ検定によるＰ≦０．０１。）。各対象において、絶食時ｍＲＮＡレベルは、１で設定された非絶食時レベルに対して正規化された。ミオスタチン（ＭＳＴＮ）をコードするｍＲＮＡは、エクソン発現アレイによって査定されたとき、そのレベルが絶食によって変化しなかった対照転写物である。まとめると、これらのデータは、ヒト骨格筋における絶食のｍＲＮＡ発現シグネチャを確立した。
【０３３３】
表Ｘ１．絶食応答性ヒトｍＲＮＡ。
0006001060.tif 000049
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【０３３４】
４．絶食誘導性筋萎縮の阻害剤としてのウルソール酸の同定。
連結性マップは、複数の培養された細胞株における広範囲のｍＲＮＡ発現への、１３００超の生理活性小分子の影響を説明し、目的の化合物特異的ｍＲＮＡ発現シグネチャとｍＲＮＡ発現シグネチャとの間の比較を可能にする検索アルゴリズムを含む（Ｌａｍｂ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ  ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）。本明細書において、連結性マップを絶食のｍＲＮＡ発現シグネチャ（筋萎縮シグネチャ−１）により照会することが、萎縮関連遺伝子発現の阻害剤、および故に、筋萎縮の可能性のある阻害剤を特定するであろうという仮説を立てた。本明細書において、照会の具体性を増加させることが、出力を強化するであろうこともまた推論された。この目的のために、本明細書に記載されるように、進化的に保存された絶食のｍＲＮＡ発現シグネチャを、ヒト骨格筋への絶食の影響を、マウス骨格筋への２４時間の絶食の影響と比較することによって発見した。マウス研究は、以前に記載されている（Ｅｂｅｒｔ  ＳＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ２４（４）：７９０−７９９）。全体的に、絶食によって増加した３５個のｍＲＮＡおよび絶食によって減少した４０個のｍＲＮＡを、ヒト骨格筋およびマウス骨格筋の両方において特定した（表Ｘ２、「変化」と表示された欄におけるデータは、示される種についての絶食状態と摂食状態との間のｌｏｇ2ハイブリダイゼーションシグナルにおける平均変化を示す［絶食についての平均ｌｏｇ2  ｍＲＮＡレベル］マイナス［非絶食時の平均ｌｏｇ2  ｍＲＮＡレベル］、Ｐ−値は、対応のあるｔ検定により決定した）。表Ｘ２に示されるデータは、ｍＲＮＡのレベルが絶食によってヒト筋肉において増加（Ｐ≦０．０２）、およびマウス筋肉において増加した（Ｐ≦０．０５）、全てのｍＲＮＡ、ならびにｍＲＮＡのレベルが絶食によってヒト筋肉において減少（Ｐ≦０．０２）、およびマウス筋肉において減少した（Ｐ≦０．０５）、全てのｍＲＮＡを含む。表Ｘ２に示されるｍＲＮＡのうち、６３個のｍＲＮＡが連結性マップで使用されるＨＧ−Ｕ１３３Ａアレイ上に表される（図６Ａ）。これらのｍＲＮＡ（３１個は絶食によって増加し、３２個は絶食によって減少した）を使用して、連結性マップを、筋萎縮の候補小分子阻害剤について照会した。
【０３３５】
表Ｘ２．ヒトおよびマウス骨格筋に共通の絶食制御性ｍＲＮＡ。
0006001060.tif 000107
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0006001060.tif 000110
【０３３６】
図６Ｂの左側は、骨格筋における絶食の影響との最も有意な正の相関（Ｐ＜０．００４）を有する、１０個の連結性マップ例（またはデータセット）を示す。ｙ軸上に表される連結性スコアは、相関の強度の測定値であり（Ｌａｍｂ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ  ３１３（５７９５）：１９２９−１９３５）、化合物および細胞株が、連結性スコアを表すバーの下に示される。これらのうち、６つには、ウォルトマンニンまたはＬＹ−２９４００２（ホスホイノシチド３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の阻害剤）またはラパマイシン（哺乳類ラパマイシン標的複合体１（ｍＴＯＲＣ１）の阻害剤）が関与した。ＰＩ３ＫおよびｍＴＯＲＣ１は、インスリンおよびＩＧＦ−Ｉの影響を媒介するため、またインスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達は、筋萎縮および骨格筋ｍＲＮＡ発現における萎縮関連変化を阻害するため（Ｂｏｄｉｎｅ  ＳＣ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｎａｔ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  ３（１１）：１０１４−１０１９；Ｓａｎｄｒｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃｅｌｌ  １１７（３）：３９９−４１２）、これらの結果は、筋萎縮の可能性のある阻害剤を特定するために連結性マップが使用され得るという信頼を与えた。図６Ｂの右側は、骨格筋における絶食の影響との最も有意な負の相関（Ｐ＜０．００４）を有する、１０個の連結性マップ例を示す。培養された細胞株への化合物の影響が、筋肉への絶食の影響と反対である、これらの化合物には、メトホルミン（２型糖尿病を治療するために広範に使用されるインスリン感作剤）、ならびにウルソール酸が含まれた。更なる実験は、メトホルミンおよびウルソール酸に焦点を当てた。メトホルミンおよびウルソール酸が絶食誘導性筋萎縮を低減し得るという仮説を試験するために、各化合物、またはビヒクル単独を、腹腔内注射を介してＣ５７ＢＬ／６マウスに投与した。マウスを次いで絶食させ、１２時間の絶食後、マウスは、化合物またはビヒクルの２回目の用量を受容した。２４時間の絶食後、血糖を測定し、筋肉を採取した。図４Ｃ〜４Ｈに示されるデータは、１６匹のマウスからの平均±標準誤差である。メトホルミン（２５０ｍｇ／ｋｇ）およびウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）の両方が、空腹時血糖を有意に低減した（図４Ｃおよび４Ｄ）。絶食誘導性筋萎縮へのメトホルミンおよびウルソール酸の効果、すなわち、下部後肢骨格筋（両側前脛骨筋（「ＴＡ」筋肉）、腓腹筋、およびヒラメ筋の湿潤重量への２４時間の絶食の影響（不断摂食と比べた）もまた検査した。図４Ｅ〜４Ｇを参照されたい）。メトホルミンおよびウルソール酸の不在下で、絶食は、筋肉重量を９％低減した（図６Ｅ）。メトホルミンは、絶食マウスにおける筋肉重量を変化させなかったが（図６Ｆ）、ウルソール酸は、それを７±２％増加させた。（図６Ｇ）。更に、本明細書に記載される絶食誘導性遺伝子発現への予測される阻害効果と一致して、ウルソール酸は、絶食させられたマウスのＴＡ筋肉におけるアトロジン−１の絶食時レベルおよびＭｕＲＦ１  ｍＲＮＡレベルを低減した（図６Ｈ、示されるデータは、１で設定されたビヒクル処置マウスにおけるレベルに対して正規化される）。図４Ｅ〜４Ｈにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。図４Ｃ〜４Ｈにおいて、Ｐ−値は、対応のないｔ検定を使用して決定された。故に、メトホルミンではなく、ウルソール酸が、絶食誘導性筋萎縮を減少させた。
【０３３７】
５．ウルソール酸は、除神経誘導性筋萎縮を低減する。
連結性マップを、第２のｍＲＮＡ発現シグネチャである筋萎縮シグネチャ−２（上述される）により照会して、この筋萎縮シグネチャもまた、他の化合物の中でもとりわけウルソール酸と相関するかどうかを決定した。上述のように、筋萎縮シグネチャ−２は、絶食によって、また脊髄損傷（「ＳＣＩ」）によっても誘導または抑制されたヒト骨格筋ｍＲＮＡに対する、本明細書に記載されるように特定されたｍＲＮＡ発現シグネチャであった。ヒト骨格筋遺伝子発現へのＳＣＩの影響の研究は、以前に記載されている（Ａｄａｍｓ  ＣＭ，ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｍｕｓｃｌｅ  Ｎｅｒｖｅ．４３（１）：６５−７５）。本明細書に記載される筋萎縮発現シグネチャによるこのアプローチを使用して、絶食およびＳＣＩによって増加した１８個のヒトｍＲＮＡ、ならびに絶食およびＳＣＩによって減少した１７個のヒトｍＲＮＡが存在し、それが表Ｘ３に示される（「変化」は、示される対、例えば、「（絶食〜摂食）」と表示された欄についての絶食および摂食状態、または「（未訓練〜訓練）」と表示された欄についての未訓練および訓練についての、ｌｏｇ2ハイブリダイゼーションシグナルにおける平均変化を表す）。表Ｘ３におけるデータは、ｍＲＮＡのレベルが絶食によって増加（Ｐ≦０．０２）、およびＳＣＩによって（Ｐ≦０．０５）増加した、全てのｍＲＮＡ、ならびにｍＲＮＡのレベルが絶食によって減少（Ｐ≦０．０２）、およびＳＣＩによって（Ｐ≦０．０５）減少した、全てのｍＲＮＡを含む。表Ｘ３におけるＰ値は、対応のあるｔ検定により決定した。
【０３３８】
表Ｘ３．絶食およびＳＣＩによって誘導または抑制されたヒト骨格筋ｍＲＮＡ。
0006001060.tif 000111
0006001060.tif 000112
【０３３９】
表Ｘ３に列挙されるｍＲＮＡのうち、２９個が、連結性マップで使用されるＨＧ−Ｕ１３３Ａアレイ上で表されたが（図７Ａ）、わずか１０個が、筋萎縮シグネチャ−１について上述される第１の連結性マップ照会において使用された６３個のｍＲＮＡに共通であった（ＩＧＦ−ＩＲ、ＮＯＸ４、ＳＵＰＴ６Ｈ、ＭＲＰＳ１５、ＰＤＥ７Ｂ、ＰＧＣ−１ａ、ＴＳＰＡＮ１３、ＴＴＬＬ１、ＶＥＧＦＡ、およびＺＮＦ２８０Ｂ）。図７Ａに列挙されるｍＲＮＡは、ヒト筋萎縮シグネチャ−２、すなわち、ヒト筋肉において絶食およびＳＣＩの両方によって変化したｍＲＮＡを表す。上述のように、これらのｍＲＮＡを使用して、連結性マップを照会した。組み込み基準は、絶食ヒト筋肉においてＰ≦０．０２（ｔ検定による）、未訓練の麻痺した筋肉においてＰ≦０．０５（ｔ検定による）、およびＨＧ−Ｕ１３３Ａアレイ上の優遇の（ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙ）プローブであった。ヒト筋肉における絶食およびＳＣＩの影響との最も有意な正および負の相関を有する連結性マップ例。全ての化合物についてのＰ＜０．００５が、図７Ｂに示される。結果は、第１の検索の結果と部分的に重複し、すなわち、両方の検索戦略が、ＬＹ−２９４００２、ウォルトマンニン、およびラパマイシンを、萎縮誘導ストレスの予測される模倣体として特定し、ウルソール酸（メトホルミンではなく）を、予測される阻害剤として特定した（図７Ｂ）。
【０３４０】
筋萎縮シグネチャ−２は、ＳＣＩ対象からのデータを利用したため、ウルソール酸が除神経誘導性筋萎縮を低減し得るという仮説を立てた。これを試験するために、マウスにおける左後肢筋除神経誘導性骨格筋萎縮モデルを使用した。簡潔に述べると、０日目、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの左後肢を、左坐骨神経を横切開することによって除神経した。このアプローチは、右後肢が対象内対照としての役割を果たすことを可能にした。マウスに次いで、ウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）または等体積のビヒクル単独（トウモロコシ油）を、腹腔内注射を介して１日２回、７日間にわたって投与した。この間、マウスは、食物への不断のアクセスを有し続けた。７日目、筋肉組織を分析のために採取し、両方の群（ウルソール酸投与対ビヒクル投与）における左（除神経された）および右（除神経されていない）後肢筋肉を比較した。ウルソール酸は、除神経誘導性筋肉喪失を有意に減少させた（図７Ｃ）。図７Ｃにおいて、左（除神経された）下部後肢筋肉の重量は、同一のマウスからの右（除神経されていない）下部後肢筋肉の重量に対して正規化された。各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味し、Ｐ値は、対応のないｔ検定を使用して決定された。組織学的に、ウルソール酸のこの効果は、除神経された腓腹筋（Ｄ）およびＴＡ（Ｅ）筋肉における（それぞれ、図５Ｄおよび５Ｅ）、除神経された骨格筋線維直径のサイズにおける増加として反映された。図５Ｄおよび５Ｅに示されるデータは、１条件当たり２５００超の筋線維からのものである。対応のないｔ検定によるＰ＜０．０００１。故に、ウルソール酸は、除神経誘導性筋萎縮を低減した。
【０３４１】
６．ウルソール酸は、骨格筋肥大を誘導する。
除神経誘導性筋萎縮モデルからの結果は、ウルソール酸が筋萎縮を低減したことを示唆し、故に、ウルソール酸が萎縮誘導ストレスの不在下で筋肥大を促進し得るという仮説は、妥当であった。マウスに、標準的な食事（対照食餌）または０．２７％ウルソール酸を補充した標準的な食事（ウルソール酸食餌）のいずれかへの不断のアクセスを、５週間にわたって提供した後、握力を測定し、組織を採取した。５週間後、ウルソールを投与されたマウスは、増加した下部後肢筋肉重量（図８Ａ）、四頭筋重量（図８Ｂ）、および上部前肢筋肉（三頭筋および二頭筋）重量（図８Ｃ）を有した。図６Ａ〜６Ｃにおける各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。本研究における、骨格筋線維サイズ分布へのウルソール酸の効果が、図８Ｄに示される。各分布は、７匹の動物からの８００超の三頭筋線維の測定値を表す（１００超の測定値／動物）、Ｐ＜０．０００１。ピーク握力（体重に対して正規化）へのウルソール酸の効果が、図８Ｅに示される。各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。非正規化握力データは、１５７±９ｇ（対照食餌）および１８１±６ｇ（ウルソール酸食餌）であった（Ｐ＝０．０４）。
【０３４２】
更に、食餌によるウルソール酸は、エクスビボで筋肉によって発生した特定力を増加させた（図９）。簡潔に述べると、６週齢のオスＣ５７ＢＬ／６マウスに、標準的な食餌または０．２７％ウルソール酸を含有する食餌のいずれかを、１６週間にわたって提供した後、安楽死させた。下部後肢を取り出し（上部後肢を大腿部の途中まで横切開することによって）、９５％Ｏ２および５％ＣＯ２で曝気したクレブス液中に配置した。腓腹筋、ヒラメ筋、および前脛骨筋、ならびに脛骨および腓骨の遠位半分を次いで、除去および破棄して、長趾伸筋および腓骨筋を、それらの起始点および停止点と共に無傷で残した。近位腱を通じて縫合を据え付け、遠位大腿部断片に固定した。このエクスビボ調製物を次いで、水ジャケット溶液槽（Ａｕｒｏｒａ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  １２００Ａ  Ｉｎｔａｃｔ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｔｅｓｔ  Ｓｙｓｔｅｍ、曝気したクレブス液で充填）中に、縫合をサーボ制御レバーに取り付け（上方に）、中足を締め付ける（下方に）ことによって、垂直に載置した。受動筋力を、１ｇのベースラインに合わせて調整し、次いで筋肉を、１００Ｈｚの最大上電位（８０Ｖ）で刺激した。安楽死から最大力までの平均時間は、１０分間であった。力測定後、特定の巨大な（ｔｉｔａｎｉｃ）力を算出するために、筋肉を取り出し、計量した。最大強縮性力および筋肉重量は、２つの群の間で異ならなかった（それぞれ、Ｐ＝０．２０および０．２６）。データは、１つの食餌当たり５〜６匹のマウスからの平均±標準誤差である。Ｐ値は、ｔ検定により決定した。まとめて、図６および７におけるデータは、ウルソール酸が骨格筋肥大を誘導したという形態的および機能的証拠を提供する。
【０３４３】
７．ウルソール酸は、骨格筋遺伝子発現における栄養変化を誘導する。
前述の結果は、ウルソール酸が骨格筋遺伝子発現を変化させ得ることを示唆した。この仮説を試験するために、バイアスのないアプローチを使用し、具体的にはエクソン発現アレイを使用して、ウルソール酸を欠くまたは含有する食餌を５週間与えられたマウスにおける、腓腹筋ｍＲＮＡ発現を分析した。マウスに、標準的な食事（対照食餌）または０．２７％ウルソール酸を補充した標準的な食事（ウルソール酸食餌）のいずれかへの不断のアクセスを、５週間にわたって提供した後、腓腹筋ＲＮＡを採取し、Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ  Ｍｏｕｓｅ  Ｅｘｏｎ  １．０  ＳＴアレイによって分析した（ｎ＝１つの食餌当たり４アレイ）。各アレイは、２匹のマウスからのプールされた腓腹筋ＲＮＡを査定した。ｍＲＮＡレベルへのウルソール酸誘導性効果に対しする厳格な基準を使用し（Ｐ＜０．００５）、低レベルの発現を有するｍＲＮＡを無視した（すなわち、８以上の平均ｌｏｇ2ハイブリダイゼーションシグナルまで増加したか、または８以上の平均ｌｏｇ2ハイブリダイゼーションシグナルから抑制された転写物のみを含めた）。結果は、ウルソール酸が１８個のｍＲＮＡを減少させ、５１個のｍＲＮＡを増加させたというものであった（分析された１６，０００個超のｍＲＮＡのうち。結果が、表Ｘ４に示される（「変化」は、ウルソール酸食餌によるマウスと対照食餌によるマウスとの間の平均ｇ  ｌｏｇ2変化または差異、すなわち、［ウルソール酸食餌における平均ｌｏｇ2  ｍＲＮＡレベル］マイナス［対照食餌における平均ｌｏｇ2  ｍＲＮＡレベル］である）。
【０３４４】
表Ｘ４．ウルソール酸によって誘導または抑制されたマウス骨格筋ｍＲＮＡ。
0006001060.tif 000113
0006001060.tif 000114
【０３４５】
上に考察されたように、アトロジン−１およびＭｕＲＦ１は、萎縮誘導ストレスによって転写的に上方制御され（図４ＢおよびＳａｃｈｅｃｋ  ＪＭ，ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｆａｓｅｂ  Ｊ  ２１（１）：１４０−１５５を参照されたい）、それらは、筋萎縮のために必要とされる（Ｂｏｄｉｎｅ  ＳＣ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ  ２９４（５５４７）：１７０４−１７０８）。更に、本明細書に上述される絶食させられたマウスの研究において、ウルソール酸は、アトロジン−１およびＭｕＲＦ１  ｍＲＮＡを低減した（図６Ｈ）。その知見と一致して、そのアレイは、食餌によるウルソール酸が、アトロジン−１  ｍＲＮＡを低減したことを示し、それは最も大幅に抑制されたｍＲＮＡであった（図１０Ａ）。図１０Ａに示される結果は、表Ｘ４からのｍＲＮＡのサブセットを表し、それはウルソール酸に反応して、発現レベルにおける最も大きい増加または減少を有した。ＭｕＲＦ１  ｍＲＮＡは、これらの実験で使用されたアレイによって測定されなかったが、ｑＰＣＲ解析により、食餌によるウルソール酸がアトロジン−１およびＭｕＲＦ１  ｍＲＮＡの両方を抑制したことが確認された（図１０Ｂ、データは平均±標準誤差である）。興味深いことに、最も大幅に上方制御された筋肉ｍＲＮＡのうちの１つは、ＩＧＦ１であり（図８Ａおよび８Ｂ）、それは、局所的に発生する自己分泌／傍分泌ホルモンであるインスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−Ｉ）をコードする。ＩＧＦ１  ｍＲＮＡは、肥大筋肉において転写的に誘導されることで知られている（Ｈａｍｅｅｄ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ５５５（Ｐｔ  １）：２３１−２４０、Ａｄａｍｓ  ＧＲ＆Ｈａｄｄａｄ  Ｆ（１９９６）Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ８１（６）：２５０９−２５１６、Ｇｅｎｔｉｌｅ  ＭＡ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ４４（１）：５５−７３）。加えて、増加した骨格筋ＩＧＦ１発現は、除神経誘導性筋萎縮を低減し（Ｓｈａｖｌａｋａｄｚｅ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌ  Ｄｉｓｏｒｄ  １５（２）：１３９−１４６）、筋肥大を刺激する（Ｂａｒｔｏｎ−Ｄａｖｉｓ  ＥＲ，ｅｔ  ａｌ．（１９９８）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  ９５（２６）：１５６０３−１５６０７、Ｍｕｓａｒo  Ａ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ２７（２）：１９５−２００）。更に、骨格筋インスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を刺激することによって、ＩＧＦ−Ｉは、アトロジン−１およびＭｕＲＦ  ｍＲＮＡ（Ｓａｃｈｅｃｋ  ＪＭ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  ２８７（４）：Ｅ５９１−６０１、Ｆｒｏｓｔ  ＲＡ，ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  １０８（５）：１１９２−１２０２．）を抑制し、同様に、ウルソール酸処置マウスからの筋肉においてアトロジン−１  ｍＲＮＡの次に、２番目に最��大幅に抑制されたｍＲＮＡであった、ＤＤＩＴ４Ｌ  ｍＲＮＡ（同書）を抑制した（図１０Ａ）。故に、５週間の食餌によるウルソール酸は、萎縮を低減し、肥大を促進することで知られている様態で、骨格筋遺伝子発現を変化させ、筋肉特異的ＩＧＦ１誘導は、ウルソール酸誘導性筋肥大における有力な寄与機構として浮上した。主に成長ホルモン媒介性肝ＩＧＦ−Ｉ産生を反映する、血漿ＩＧＦ−Ｉレベルへのウルソール酸の効果もまた決定した（Ｙａｋａｒ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ  ９６（１３）：７３２４−７３２９）。０．１４％または０．２７％ウルソール酸を含有する食餌は、筋肉量を増加させたが（下により詳述される、図１２Ａ）、いずれも血漿ＩＧＦ−Ｉを増加させなかった（図１０Ｃ）。図１０Ｃにおけるデータについて、マウスに、標準的な食事（対照食餌）または指定される濃度のウルソール酸を補充した標準的な食事のいずれかへの不断のアクセスを、７週間にわたって提供した後、血漿ＩＧＦ−Ｉレベルを測定した。各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。Ｐ値は、一元配置ＡＮＯＶＡによって、Ｄｕｎｎｅｔｔの事後検定を用いて決定した。エクソン発現アレイにより、ウルソール酸が全ての測定されたＩＧＦ１エクソンのレベル（エクソン２〜６、図１１Ａ）を増加させたことが示されたことに留意されたい。図１１Ａにおけるデータは、表Ｘ２に記載されるアレイからの平均エクソン特異的ｌｏｇ2ハイブリダイゼーションシグナルである。しかしながら、ウルソール酸は、ミオスタチン（それは筋肉量を低減する、例えば、Ｌｅｅ  ＳＪ（２００４）Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅｖ  Ｂｉｏｌ  ２０：６１−８６を参照されたい）、またはツイストもしくはミオゲニン（それは、発達中にＩＧＦ−Ｉによって誘導される、例えば、Ｄｕｐｏｎｔ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（２８）：２６６９９−２６７０７、Ｔｕｒｅｃｋｏｖａ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ．（２００１）Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（４２）：３９２６４−３９２７０を参照されたい）をコードするｍＲＮＡのレベルを変化させなかった。更に、ウルソール酸は、脂肪組織におけるＩＧＦ１  ｍＲＮＡの量を変化させなかった（図１１Ｂ）。簡潔に述べると、図１１Ｂに示されるデータは、次のように得た：マウスに、標準的な食事（対照食餌）または０．２７％ウルソール酸を補充した標準的な食事（ウルソール酸食餌）のいずれかへの不断のアクセスを、７週間にわたって提供した後、後腹膜脂肪組織を、ＩＧＦ１  ｍＲＮＡのｑＰＣＲ定量化のために採取した。示されるデータは、１群当たり５匹のマウスからの平均±標準誤差である。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ウルソール酸媒介性ＩＧＦ１誘導は、骨格筋に局在化され得る。
【０３４６】
８．ウルソール酸は、骨格筋ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を強化する。
筋肉特異的ＩＧＦ１誘導は、筋肥大に特有であり、筋肥大に寄与するが、肥大を促進することは、それが他の刺激によって開始された後の、比較的後期の事象であり得る（Ａｄａｍｓ  ＧＲ，ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｊ  Ａｐｐｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ８７（５）：１７０５−１７１２）。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ウルソール酸がインスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達へのより近接した効果を有し得る可能性がある。非筋肉細胞株（ＣＨＯ／ＩＲおよび３Ｔ３−Ｌ１細胞）の以前の研究において、ウルソール酸は、インスリン媒介性Ａｋｔ活性化を強化した（Ｊｕｎｇ  ＳＨ，ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｔｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ４０３（２）：２４３−２５０）。ウルソール酸が骨格筋において同様の効果を有し得るかどうかを決定するために、リン酸化されたＡｋｔのレベルを、ウルソール酸を欠くまたは含有する食餌を与えられたマウスの四頭筋において査定した。簡潔に述べると、マウスに、標準的な食事（対照食餌）または０．２７％ウルソール酸を補充した標準的な食事のいずれかへの不断のアクセスを、１６週間にわたって提供した。四頭筋からの総タンパク質抽出物を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供し、続いて、示されるように、リン酸化されたＡｋｔおよび総Ａｋｔについての免疫ブロット分析を行った。代表的な免疫ブロットが、図１０Ｄに示される。免疫ブロットデータを次のように定量化した：各マウスにおいて、リン酸化Ａｋｔのレベルを、総Ａｋｔのレベルに対して正規化し、これらの比率を次いで、対照マウスからの平均リン酸化Ａｋｔ／総Ａｋｔ比率に対して正規化し、その結果が、図１０Ｅに示される（データは、１つの食餌当たり９匹のマウスからの平均±標準誤差である。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された）。データは、四頭筋において、ウルソール酸が、Ａｋｔリン酸化を１．８倍増加させたことを示す。
【０３４７】
Ａｋｔ活性化へのウルソール酸の効果を、骨格筋の定着したインビトロモデルである、Ｃ２Ｃ１２骨格筋管において検査した（Ｓａｎｄｒｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃｅｌｌ  １１７（３）：３９９−４１２；Ｓｔｉｔｔ  ＴＮ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  １４（３）：３９５−４０３）。Ｃ２Ｃ１２骨格筋管等のインビトロ系の使用により、非筋肉組織からの交絡効果の可能性が回避され、ＩＧＦ−Ｉまたはインスリンがウルソール酸の効果のために必要とされるかどうかの決定が可能となった。循環ＩＧＦ−Ｉおよびインスリンは、健康な動物において常に存在するため、後者の考慮事項は重要であった。インビトロ系の使用はまた、明確に規定されたウルソール酸の濃度（１０μＭ、連結性マップにおいて使用されたもの（８．８μＭ）と類似）の、明確に規定されたインキュベーションの時間（２０分間）にわたる試験実施も可能にした。ウルソール酸のインビボ薬物動態特性は、未だに知られていないため、これらの考慮事項は重要であった。
【０３４８】
図８Ｆ〜８Ｋに示されるデータについて、血清飢餓処理されたＣ２Ｃ１２筋管を、示されるように、ウルソール酸（１０μＭ）および／またはＩＧＦ−Ｉ（１０ｎＭ）の不在または存在下で処理した。ＧＦ−Ｉ受容体の研究のために、細胞を、２分後に採取し、タンパク質抽出物を、抗ＩＧＦ−Ｉ受容体β抗体での免疫沈降法、続いて抗リン酸化チロシンまたは抗ＩＧＦ−Ｉ受容体β抗体での免疫ブロット分析に供して、それぞれ、リン酸化および総ＩＧＦ−Ｉ受容体を査定した。他の研究のために、細胞を、ウルソール酸および／またはＩＧＦ−Ｉの添加の２０分後に採取し、免疫ブロット分析を、示される、総細胞タンパク質抽出物、およびリン酸化されたタンパク質または総タンパク質に特異的な抗体を使用して行った。Ａｋｔ（図１０Ｆ）、Ｓ６Ｋ（図１０Ｇ）、およびＩＧＦ−Ｉ受容体（図１０Ｈ）のＩＧＦ−Ｉ媒介性リン酸化へのウルソール酸の効果を示す、代表的な免疫ブロット。免疫ブロットからのデータを次のように定量化した：ウルソール酸およびＩＧＦ−Ｉの存在下でのレベルを、１で設定され、破線によって示される、ＩＧＦ−Ｉ単独の存在下でのレベルに対して正規化した。図１０Ｉに示されるデータは、３つ以上の実験からの平均±標準誤差である。
【０３４９】
図９Ｃ〜９Ｆに示されるデータについて、血清飢餓処理されたＣ２Ｃ１２筋管を、示されるように、ウルソール酸の（１０μＭ）、インスリン（１０ｎＭ）、および／またはＩＧＦ−Ｉ（１０ｎＭ）の不在または存在下で処理した。インスリン受容体の研究のために、細胞を、２分後に採取し、タンパク質抽出物を、抗インスリン受容体β抗体での免疫沈降法、続いて抗リン酸化インスリン受容体β（Ｙ１１６２／１１６３）または抗インスリン受容体β抗体での免疫ブロット分析に供して、それぞれ、リン酸化および総インスリン受容体を査定した。他の研究のために、細胞を、ウルソール酸、インスリン、および／またはＩＧＦ−Ｉの添加の２０分後に採取し、免疫ブロット分析を、示される、総細胞タンパク質抽出物、およびリン酸化されたタンパク質または総タンパク質に特異的な抗体を使用して行った。
【０３５０】
血清飢餓処理された筋管を、ウルソール酸単独で処理したとき、Ａｋｔリン酸化は、増加しなかった（図１０Ｆ）。しかしながら、ＩＧＦ−Ｉの存在下で、ウルソール酸は、Ａｋｔリン酸化を１．９倍増加させた（図８Ｆおよび８Ｉ）。ウルソール酸はまた、インスリンの存在下でのＡｋｔリン酸化も増加させた（図１１Ｃ）。故に、ウルソール酸は、ＩＧＦ−Ｉ媒介性およびインスリン媒介性Ａｋｔリン酸化を強化した。ウルソール酸がインビボおよびインビトロでの筋肉Ａｋｔ活性を強化したという知見は、ウルソール酸のｍＲＮＡ発現シグネチャが、Ａｋｔの上流のインスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を阻害する、ＬＹ−２９４００２およびウォルトマンニンのｍＲＮＡ発現シグネチャと負に相関した（図４Ｂおよび５Ｂ）という知見と一致していた。しかしながら、ウルソール酸のシグネチャはまた、Ａｋｔの下流のインスリン／ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を阻害する、ラパマイシンのシグネチャとも負に相関した。
【０３５１】
ウルソール酸単独では、Ｓ６Ｋリン酸化（図１１Ｄ）を増加させなかったが、それは、ＩＧＦ−Ｉ媒介性およびインスリン媒介性Ｓ６Ｋリン酸化を強化した（図８Ｇ、８Ｉ、および９Ｄ）。その機構を更に調査するために、ＩＧＦ−Ｉ受容体へのウルソール酸の効果を検査した。ウルソール酸は、ＩＧＦ−Ｉ受容体リン酸化を、ＩＧＦ−Ｉの存在下で増加させたが、ＩＧＦ−Ｉの不在下では増加させなかった（図８Ｈおよび８Ｉ）。同様に、ウルソール酸は、インスリン受容体リン酸化を、インスリンの存在下で増加させたが、インスリンの不在下では増加させなかった（図１１Ｅ）。これらの効果の両方は迅速であり、ウルソール酸、およびＩＧＦ−Ｉまたはインスリンのいずれかの添加後の２分以内に生じた。ＩＧＦ−Ｉ受容体およびインスリン受容体のレベルでの強化されたシグナル伝達と一致して、ウルソール酸はまた、ＩＧＦ−Ｉ媒介性およびインスリン媒介性ＥＲＫリン酸化も強化した（図８Ｊおよび９Ｆ）。更に、ウルソール酸は、アトロジン−１およびＭｕＲＦ１  ｍＲＮＡの転写を活性化する、ＦｏｘＯ転写因子のＩＧＦ−Ｉ媒介性リン酸化（阻害）を強化した（図１０Ｋ；Ｓａｎｄｒｉ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｃｅｌｌ  １１７（３）：３９９−４１２；Ｓｔｉｔｔ  ＴＮ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  １４（３）：３９５−４０３．）。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ウルソール酸は、ＩＧＦ−Ｉ受容体およびインスリン受容体の活性を増加させることによって、萎縮関連遺伝子発現を抑制し、筋肥大を促進する。
【０３５２】
９．ウルソール酸は、脂肪症を低減する。
マウスに、示される濃度（食事中の重量パーセント、図１２に示される０．１４％または０．２８％のいずれか）のウルソール酸を補充した標準的な食事への不断のアクセスを、７週間にわたって提供した後、組織を分析のために採取した。データは、１つの食餌当たり１０匹のマウスからの平均±標準誤差である。骨格筋（四頭筋＋三頭筋）、精巣上体脂肪、後腹膜脂肪、および心臓の重量へのウルソール酸の効果についてのデータが、図１２Ａに示される。一元配置ＡＮＯＶＡと線形傾向のための事後検定を用いて決定したＰ値は、筋肉について＜０．００１、精巣上体脂肪および後腹膜脂肪についてそれぞれ０．０１および０．０４、ならびに心臓について０．４６であった。データは、７週間の食餌によるウルソール酸が、骨格筋重量を用量依存的様態で増加させたことを示し、このうちピーク効果は０．１４％ウルソール酸であった。興味深いことに、ウルソール酸は、筋肉重量を増加させたが、それは、総体重を増加させなかった（図１２Ｂ、Ｐ値は、それぞれ初期重量および最終重量について０．７１および０．８０であった）。
【０３５３】
図１２Ａにおけるデータはまた、７週間の食餌によるウルソール酸が、精巣上体脂肪貯蔵および後腹膜脂肪貯蔵の重量を低減したことを示し、ピーク効果は０．１４％であった。別の研究において、マウスに、標準的な食事（対照食餌）または０．２７％ウルソール酸を補充した標準的な食事（ウルソール酸食餌）のいずれかへの不断のアクセスを、５週間にわたって提供した。骨格筋重量（四頭筋、三頭筋、二頭筋、ＴＡ、腓腹筋、およびヒラメ筋）と後腹膜脂肪重量との間の関係が、図１２Ｃに示される。図１２Ｃにおける各データ点は、１匹のマウスを表し、対応のないｔ検定による筋肉および脂肪の両方についてＰ＜０．００１である。データは、５週間のウルソール酸投与（０．１４％）がまた、脂肪重量も低減したことを示す。故に、筋肉重量および脂肪重量は、逆相関した。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、一部には、ウルソール酸がＡｋｔ活性を増加させるため、および筋肥大の二次的結果としてＡｋｔ活性における筋肉特異的増加が脂肪症を低減するため（Ｌａｉ  ＫＭ，ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４（２１）：９２９５−９３０４、Ｉｚｕｍｉｙａ  Ｙ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｃｅｌｌ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ７（２）：１５９−１７２）、ウルソール酸処置マウスは、より少ない脂肪を有した（図８および９を参照されたい）。
【０３５４】
ウルソール酸は、図１０Ｄ〜１０Ｆにおけるデータによって示されるように、脂肪細胞サイズを低減することによって、脂肪重量を低減した。図１２Ｄは、示されるように、対照データまたは０．２７％ウルソール酸を含む食事を与えられた動物についての、後腹膜脂肪の代表的なＨ＆Ｅ染色を示す。図１２Ｄにおけるデータが、図１２Ｅにおいて脂肪細胞直径の点から定量的に示され、ここでデータ点は、１匹のマウスからの１２５個以上の後腹膜脂肪細胞の平均直径を表す。後腹膜脂肪細胞サイズ分布。各分布は、図１２Ｅからの組み合わされた脂肪細胞測定値（１つの食餌当たり１０００超）を表す。
【０３５５】
脂肪細胞サイズにおける変化には、脂肪重量と密接に相関した血漿レプチンレベルにおける有意な低減が伴った（図１０Ｇおよび１０Ｈを参照されたい）。図１２Ｇにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。Ｐ値は、ｔ検定によって決定した。図１２Ｈにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表す。重要なことに、ウルソール酸はまた、血漿トリグリセリド（図１２Ｉ）およびコレステロール（図１２Ｊ）も有意に低減した。図１０Ｉおよび１０Ｊにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。Ｐ値は、対応のないｔ検定によって決定された。ウルソール酸は、レプチンを低減したが、それは、食餌摂取量を変化させなかった（図１３Ａ）。本研究において、マウスに、標準的な食事（対照食餌）または０．２７％ウルソール酸を補充した標準的な食事（ウルソール酸食餌）のいずれかへの不断のアクセスを、４週間にわたって提供した。マウスを次いで、包括的動物代謝監視システム（ＣＬＡＭＳ、Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｃｏｌｕｍｂｕｓ、ＯＨ）に移動させ、同一の食餌への不断のアクセスを提供した。食餌消費を４８時間にわたって測定した。データは、１群当たり６匹のマウスからの平均±標準誤差である。しかしながら、ウルソール酸は、心臓（図１２Ａ）、肝臓または腎臓（図１１Ｂおよび１１Ｃ）の重量を変化させず、肝毒性または腎毒性の血漿マーカー（アラニンアミノトランスフェラーゼ、ビリルビン、およびクレアチニン。図１１Ｄ〜１１Ｆを参照されたい）も亢進しなかった。図１１Ｂ〜１１Ｆにおけるデータは、次のように得た：マウスに、標準的な食事（対照食餌）または０．２７％ウルソール酸を補充した標準的な食事（ウルソール酸食餌）のいずれかへの不断のアクセスを、５週間にわたって提供した後、組織および血漿を、示される測定のために採取した。各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。図１３について、Ｐ値は、対応のないｔ検定により決定された。故に、食餌によるウルソール酸は、次の２つの主要な効果を有した：骨格筋肥大および低減された脂肪症。
【０３５６】
１０．ウルソール酸は、体重増加および白色脂肪組織を低減する。
ウルソール酸が骨格筋を増加させ、脂肪症を減少させたという知見は、ウルソール酸が、肥満抵抗性につながるであろうエネルギー消費を増加させ得ることを示唆した。これを試験するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、０．２７％ウルソール酸を欠くまたは含有する、高脂肪食（ＨＦＤ、Ｔｅｋｌａｄ  ＴＤ．９３０７５、５５％カロリーが脂肪に由来）への不断のアクセスを与えた。７週間後、各群からのマウスを、３日間、包括的実験動物監視システム（「ＣＬＡＭＳ」、Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）において研究した。ＣＬＡＭＳにおいて、マウスを、実験の始まり以来摂取してきた同一の食餌により維持した。ＣＬＡＭＳ後に、組織を分析のために採取した。高脂肪摂食マウスにおいて、ウルソール酸は、体重増加を劇的に低減し、この効果は、１週間以内に明らかとなった（図１４Ａ）。ウルソール酸および標準的な食事（図８）を与えられたマウスにおいて以前に観察されたように、ウルソール酸は、握力および筋肉量を増加させた（図１２Ｂおよび１２Ｃ）。更に、ウルソール酸は、後腹膜脂肪および精巣上体脂肪を低減した（図１２Ｄおよび１２Ｅ）。興味深いことに、白色脂肪および発熱性褐色脂肪の混合を含有する、肩甲骨脂肪パッドにおいて、ウルソール酸は、白色脂肪を低減したが（図１４Ｆ）、褐色脂肪を増加させた（図１４Ｇ）。重要なことに、増加した骨格筋および褐色脂肪組織は、エネルギー消費を増加させることが予測されるであろう。実際、ＣＬＡＭＳにより、ウルソール酸が、エネルギー消費を増加させた（図１４Ｈ）ことが明らかとなったが、それはウルソール酸がどのように脂肪症および肥満を低減するかについての説明を提供している。顕著なことに、ＣＬＡＭＳ分析により、ウルソール酸処置マウスがより多くの食物を消費したが（図１４Ｉ）、それにも関わらずそれらの体重増加がより少なかった（図１４Ａ）ことが明らかとなった。図１４Ａに示されるデータについて、データは、１２匹の対照マウスおよび１５匹の処置マウスからの平均±標準誤差であるが、幾つかのエラーバーは、見えないほどに小さいことに留意すべきである。１週間時点および各々その後の時点でＰ＜０．０１。図１２Ｂ〜１２Ｉにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。Ｐ値は、対応のないｔ検定により決定された。
【０３５７】
１１．ウルソール酸は、肥満関連前糖尿病、糖尿病、脂肪性肝疾患、および高コレステロール血症を低減する。
研究を次のように行った：Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、０．２７％ウルソール酸を欠くまたは含有する、高脂肪食（ＨＦＤ、Ｔｅｋｌａｄ  ＴＤ．９３０７５、５５％カロリーが脂肪に由来）への不断のアクセスを与えた。５週間後、マウスを１６時間絶食させた後、尾静脈を介して血糖を測定した（図１５Ａ）。正常な空腹時血糖：≦１００ｍｇ／ｄｌ。（Ｂ〜Ｉ）７週間後、肝臓および血漿を、分析のために採取した（図１３Ｂ〜１３Ｉ）。図１５Ａに示されるデータは、ウルソール酸を含まないＨＦＤを６週間にわたって与えられたほとんどのマウスが空腹時血糖異常（前糖尿病）または糖尿病を発症したことを示唆する。重要なことに、これは、ウルソール酸によって予防された（図１５Ａ）。加えて、ウルソール酸を含まなくＨＦＤを与えられたマウスは、増加した肝臓重量（正常なマウス肝臓の重量１５００ｍｇを３０％超上回る増加、図１５Ｂ）、肝細胞脂質蓄積（図１５Ｃ、２０倍の倍率でのＨ＆Ｅ染色；図１５Ｄ、１０倍の倍率での脂質染色オスミウム）、および亢進した血漿肝臓機能試験値（図１５Ｅ、ＡＳＴ；１３Ｆ、ＡＬＴ；１３Ｇ、アルカリホスファターゼ（図において「Ａｌｋ．Ｐｈｏｓ．と表示される）；および１３Ｈ、コレステロール）によって明らかとなるように、脂肪性肝疾患を発症した。しかしながら、ウルソール酸は、これらの肝臓変化の全てを予防した（図１５Ｂ〜１３Ｇ）。加えて、ウルソール酸は、肥満関連高コレステロール血症を低減した（図１５Ｈ）。図１３Ａ、１３Ｂ、および１３Ｅ〜１３Ｈにおいて、各データ点は、１匹のマウスを表し、水平バーは、平均を意味する。
【０３５８】
１２．オレアノール酸は、骨格筋質量を増加させない。
骨格筋重量および肝臓重量へのウルソール酸の効果を、オレアノール酸およびメトホルミンによる効果と比較した。メトホルミンは、筋萎縮シグネチャ−１から特定されたが、筋萎縮シグネチャ−２からは特定されなかった、化合物であった。オレアノール酸は、ウルソール酸と同様に、五環性酸トリテルペン（ｔｒｉｔｅｒｐａｎｅ）である。これは、ウルソール酸と構造的に類似した化合物である。しかしながら、２つの化合物は、次のように明確に異なる：オレアノール酸は、２０位において２個のメチル基を有する一方で、ウルソール酸は、１９位および２０位の各々において単一のメチル基を有する（図１４Ａおよび１４Ｄを比較されたい）。ウルソール酸およびオレアノール酸の両方が、血糖、脂肪症、および脂肪肝を低減する（Ｗａｎｇ  ＺＨ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ６２８（１−３）：２５５−２６０、Ｊａｙａｐｒａｋａｓａｍ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  ５４（１）：２４３−２４８、ｄｅ  Ｍｅｌｏ  ＣＬ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  Ｉｎｔｅｒａｃｔ  １８５（１）：５９−６５）。加えて、ウルソール酸およびオレアノール酸の両方が、タンパク質チロシンホスファターゼ（「ＰＴＰ」、Ｚｈａｎｇ  Ｗ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  ａｃｔａ  １７６０（１０）：１５０５−１５１２、Ｑｉａｎ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ  Ｎａｔ  Ｐｒｏｄ  ７３（１１）：１７４３−１７５０、Ｚｈａｎｇ  ＹＮ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  １６（１８）：８６９７−８７０５を参照されたい）のほぼ同等の阻害を含む、多数の細胞効果および生化学標的を有する。しかしながら、骨格筋量へのこれらの化合物の効果は、知られていなかった。
【０３５９】
幾つかのＰＴＰ（特にＰＴＰ１Ｂ）は、インスリン受容体を脱リン酸化する（不活性化する）ため、ＰＴＰ阻害は、インスリンシグナル伝達のウルソール酸媒介性強化を説明するための可能性のある機構を表した。故に、オレアノール酸およびウルソール酸は、インビトロで、ＰＴＰ１Ｂおよび他のＰＴＰを同様の有効性および効力で阻害するため（Ｑｉａｎ  Ｓ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｊ  Ｎａｔ  Ｐｒｏｄ  ７３（１１）：１７４３−１７５０、Ｚｈａｎｇ  ＹＮ，ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  １６（１８）：８６９７−８７０５）、骨格質量へのオレアノール酸の効果を試験することは、ＰＴＰ阻害という可能性のある役割を試験することになる。ことに留意すべきである。ウルソール酸またはオレアノール酸のいずれも、インビボでＰＴＰを阻害することでは知られておらず、これらの化合物のうちのいずれも、ＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を強化することでは知られていない。更に、ウルソール酸のＰＴＰを阻害する能力は、ウルソール酸の、培養された細胞中におけるインスリン受容体脱リン酸化を遅延させることの不成功（Ｊｕｎｇ  ＳＨ，ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｔｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ４０３（２）：２４３−２５０）、およびウルソール酸の、インスリン模倣体として作用する能力（Ｊｕｎｇ  ＳＨ、ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ４０３（２）：２４３−２５０）に基づいて、論議されてきた。加えて、広範囲のＰＴＰ１Ｂおよび筋肉特異的ＰＴＰ１Ｂノックアウトマウスは、増加した筋肉量を有さないが、それらは、肥満および肥満関連障害に対して抵抗性である（Ｄｅｌｉｂｅｇｏｖｉｃ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ２７（２１）：７７２７−７７３４、Ｋｌａｍａｎ  ＬＤ，ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ２０（１５）：５４７９−５４８９）。更に、ウルソール酸は、恐らくはその抗炎症効果を介して、インビボで膵臓ベータ細胞質量および血清インスリンレベルを増加させる（Ｗａｎｇ  ＺＨ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ６２８（１−３）：２５５−２６０、Ｊａｙａｐｒａｋａｓａｍ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊ  Ａｇｒｉｃ  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ  ５４（１）：２４３−２４８、ｄｅ  Ｍｅｌｏ  ＣＬ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０）Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  Ｉｎｔｅｒａｃｔ  １８５（１）：５９−６５）。重要なことに、炎症は、今では、筋萎縮、代謝症候群、肥満、脂肪性肝疾患、および２型糖尿病における中心的な発病機構として認識されている。故に、既存のデータは、ウルソール酸の、インビボでインスリンシグナル伝達を増加させる能力を説明するための、次の少なくとも４つの機構を示唆する：ＰＴＰ阻害、インスリン受容体の直接刺激、増加したインスリン産生、低減された炎症。これらの４つの可能性のある機構のうち、後の３つのみが、インビボで実証されている。
【０３６０】
骨格筋および肝臓重量へのウルソール酸およびオレアノール酸の効果を比較するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、ウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）、オレアノール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）、またはビヒクル単独（トウモロコシ油）を、腹腔内注射を介して投与した。マウスを次いで絶食させ、１２時間の絶食後、マウスは、ウルソール酸、オレアノール酸、またはビヒクルの２回目の用量を受容した。２４時間の絶食後、下部後肢骨格筋および肝臓を採取し、計量した。前に示されるように、ウルソール酸は、骨格筋重量を増加させたが（図１６Ｂ）、肝臓重量を増加させなかった（図１６Ｃ）。対照的に、オレアノール酸は、肝臓重量を増加させたが（図１４Ｆ）、骨格筋重量を増加させなかった（図１６Ｅ）。興味深いことに、メトホルミン（２５０ｍｇ／ｋｇ）は、生体効果においてオレアノール酸に類似しており、すなわちそれは、肝臓重量を増加させたが（図１６Ｉ）、筋肉重量を増加させなかった（図１６Ｈ）。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ウルソール酸は、ＰＴＰ阻害を伴わない経路によって、骨格筋を増加させ、筋萎縮を阻害する。
【０３６１】
１３．ＰＴＰ１Ｂの標的阻害は、骨格筋肥大を誘導しない。
ＰＴＰ１Ｂ阻害の骨格筋肥大における可能性のある役割を更に除外するために、ＰＴＰ１Ｂ発現を、マウス骨格筋において、ＲＮＡ干渉構築物を発現するように構築されたプラスミドＤＮＡをトランスフェクトすることによって特異的に低減した。簡潔に述べると、Ｃ５７ＢＬ／６マウス前脛骨筋を、２０μｇ  ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−対照（左ＴＡにおいてトランスフェクトされた対照プラスミド）、または２０μｇ  ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号１（ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号１をコードする；右ＴＡにおいてトランスフェクトされた）もしくは２０μｇ  ｐＣＭＶ−ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号２（ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号２をコードする；右ＴＡにおいてトランスフェクトされた）のいずれかでトランスフェクトした。ｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号１およびｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ番号２は、ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡの明確に異なる領域を標的とする、２つの明確に異なるＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）構築物をコードする。組織を、トランスフェクションの１０日後に採取した。
【０３６２】
図１７Ａに関して、ｍＲＮＡ測定は、ＴＡ筋肉全体からとられたことに留意されたい。エレクトロポレーションは、筋線維の一部分のみをトランスフェクトするため、データは、トランスフェクトされた筋線維におけるＰＴＰ１Ｂノックダウンを過小評価している。図１７Ａにおいて、右ＴＡにおけるｍＲＮＡレベルは、１で設定された左ＴＡにおけるレベルに対して正規化され、データは、３匹のマウスからの平均±標準誤差である。図１７Ｂにおいて、各ＴＡ筋肉において３００超のトランスフェクトされた線維の平均直径が決定され、データは、１つの条件当たり３つのＴＡ筋肉からの平均±標準誤差である。図１５Ａおよび１５Ｂの両方について、Ｐ値は、対応のある片側ｔ検定により決定された。
【０３６３】
両方のｍｉＲ−ＰＴＰ１Ｂ構築物がＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡを低減したが（図１７Ａ）、いずれも骨格筋線維直径を増加させなかった（図１７Ｂ）。これらのデータは、標的ＰＴＰ１Ｂ阻害が筋線維肥大を引き起こさないことを実証する。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ウルソール酸は、ＰＴＰ１Ｂを阻害することによって骨格筋を増加させない。
【０３６４】
１４．ウルソール酸血清レベルは、増加した筋肉量および減少した脂肪症に関連した。
食餌によるウルソール酸と筋肉重量および脂肪重量との間の用量反応関係を決定するために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、様々な量のウルソール酸を含有する標準的な食事を、７週間にわたって与えた。マウスからの血清ウルソール酸レベルを、上述のように決定した。図１２Ａにおいて前に示されるように、ウルソール酸は、用量依存的様態で、骨格筋重量を増加させ、後腹膜脂肪および精巣上体脂肪パッドの重量を減少させたが、心臓重量を変化させなかった（図１８Ａ、データは平均±標準誤差である）。これらのウルソール酸の効果は、０．０３５％ウルソール酸で識別可能であり、０．１４％ウルソール酸以上の用量で最大であった。血清を、これらの同一のマウスから、検死の時点で収集し、次いで無作為の血清ウルソール酸レベルを、超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）を介して測定した。データは、０．２５〜０．５μｇ／ｍＬの範囲のウルソール酸血清レベルが、筋肉量を増加させ、脂肪症を減少させるのに十分であることを示す（図１８Ｂ、データは平均±標準誤差である）。０．５μｇ／ｍＬは、１．１μＭウルソール酸に等しく、連結性マップ（８．８μＭ）において、および上述のＣ２Ｃ１２実験（１０μＭ）において使用される用量に近いことに留意されたい。
【０３６５】
本明細書に記載されるデータは、ウルソール酸が、マウスにおいて筋萎縮を低減し、筋肥大を刺激したことを示す。重要なことに、筋肉へのウルソール酸の効果には、脂肪症、空腹時血糖および血漿レプチン、コレステロールおよびトリグリセリドにおける低減、ならびに骨格筋対脂肪の比率、褐色脂肪の量、褐色脂肪対白色脂肪の比率における増加、および増加したエネルギー消費が伴った。特定の理論に拘束されることを望むものではないが、ウルソール酸は、骨格筋ＩＧＦ−Ｉ発現およびＩＧＦ−Ｉシグナル伝達を強化すること、ならびに萎縮関連骨格筋ｍＲＮＡ発現を阻害することによって、筋萎縮を低減し、筋肥大を刺激した。
【０３６６】
本明細書に開示され、特許請求される組成物および／または方法の全ては、本開示に照らして過度の実験を用いることなく、行い、実行され得る。本発明の範囲または趣旨から逸脱することなく、本発明において種々の修正および変形が行われ得ることは、当業者に明らかとなろう。より具体的には、化学的かつ生理的に関連するある種の薬剤は、同一のまたは同様の結果を達成しながら本明細書に記載される薬剤を置き換え得る。全てのかかる同様の置き換えおよび修正は、当業者に明らかであり、添付の特許請求の範囲によって規定される本発明の趣旨、範囲、および概念内に入るものとする。本発明の他の実施形態は、本明細書の考慮および本明細書に開示される本発明の実施から、当業者に明らかとなろう。本明細書および実施例は、例示的なものにすぎないと見なされることが意図され、本発明の真の範囲および趣旨は、以下に続く特許請求の範囲によって示される。
【０３６７】
１５．筋萎縮の治療
いくつかの化合物が、下に示されるように、筋萎縮を治療することが示された。
ａ．ベツリン酸
【０３６８】
ベツリン酸は、次の構造を有する。
【化４６】
0006001060.tif 000115
【０３６９】
ベツリン酸のｍＲＮＡ発現シグネチャは、ヒト筋萎縮シグネチャ−２と負に相関した。したがってベツリン酸は、ウルソール酸と同様に、骨格筋萎縮を阻害し得る。これを試験するために、不動化誘導性骨格筋萎縮のマウスモデルを、次のように使用した：マウスに、ビヒクル（トウモロコシ油）または様々な用量のウルソール酸（陽性対照）もしくはベツリン酸を、腹腔内注射を介して１日に２回、２日間にわたって投与した。一方の前脛骨（ＴＡ）筋を外科用ステープルで不動化し、対側の可動性ＴＡを対象内対照として残した。ビヒクル、または同一用量のウルソール酸もしくはベツリン酸を、腹腔内注射を介して１日２回、６日間にわたって継続的に投与した後、不動性および可動性ＴＡの重量を比較した。予想通り、用量依存的様態で、不動化は、筋萎縮を引き起こし、ウルソール酸は、筋萎縮を低減し、このうち最大阻害は２００ｍｇ／ｋｇであった（図１９Ａ）。ベツリン酸もまた、用量依存的様態で筋萎縮を低減し、このうち最大阻害は５０ｍｇ／ｋｇ以下であった（図１９Ｂ）。これらのデータは、ベツリン酸が不動化誘導性筋萎縮を低減し、それがウルソール酸よりも強力であることを示す。
【０３７０】
ｂ．ナリンゲニン
ナリンゲニンは、次の構造を有する。
【化４７】
0006001060.tif 000116
【０３７１】
ナリンゲニンのｍＲＮＡ発現シグネチャは、ヒト筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２と負に相関した。したがってナリンゲニン骨格筋萎縮を阻害し得る。これを試験するために、マウスに、ビヒクル（トウモロコシ油）、ウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）、ナリンゲニン（２００ｍｇ／ｋｇ）、またはウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせ（各々２００ｍｇ／ｋｇで）を、腹腔内注射を介して１日に２回、２日間にわたって投与した。一方の前脛骨（ＴＡ）筋を外科用ステープルで不動化し、対側の可動性ＴＡを対象内の対照として残した。ビヒクル、または同一用量のウルソール酸および／またはナリンゲニンを、腹腔内注射を介して１日２回、６日間にわたって継続的に投与した後、不動性および可動性ＴＡの重量を比較した。ウルソール酸と同様に、ナリンゲニンは、筋萎縮を低減した（図２０）。ウルソール酸およびナリンゲニンの組み合わせもまた、筋萎縮を低減したが、いずれかの化合物単独よりも大きくは低減しなかった（図２０）。これらのデータは、ナリンゲニンが骨格筋萎縮を低減することを示す。
【０３７２】
ウルソール酸と同様に、ナリンゲニンは、血糖、ならびに肥満および脂肪性肝疾患を低減する。したがって、ウルソール酸およびナリンゲニンは、相加的効果を有し得る。これを決定するために、重量を合致させたマウスに、標準（Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ  ｆｏｒｍｕｌａ  ７０１３）、高脂肪食（ＨＦＤ、Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ  ｆｏｒｍｕｌａ  ＴＤ９３０７５）、または様々な濃度のウルソール酸（０．１５％）および／もしくはナリンゲニン（０．５％または１．５％）を含有するＨＦＤへの不断のアクセスを提供した。マウスがこれらの食餌を５週間にわたって消費した後、空腹時血糖、総体重、脂肪量、肝臓重量、握力、および骨格筋重量を測定した。予想通り、ＨＦＤは、血糖を増加させ、この血糖の増加は、ウルソール酸およびナリンゲニンによって部分的に予防された（図２１Ａ）。ウルソール酸と、いずれか用量のナリンゲニンとの組み合わせは、いずれかの化合物単独よりも大きく血糖を低減し、それは血糖を正常なレベルまで回復させた（図２１Ａ）。重要なことに、ウルソール酸およびナリンゲニンは、総体重（図２１Ｂ）、脂肪量（図２１Ｃ）、肝臓重量（図２１Ｄ）、握力（図２１Ｅ）、または骨格筋重量（図２１Ｆ）への相加的効果を有さなかった。加えて、ウルソール酸は、ナリンゲニンよりも大きい程度に強度を増加させ（図２１Ｅ）、ナリンゲニンではなくウルソール酸が、筋肉重量を増加させた（図２１Ｆ）。高脂肪摂食マウスにおけるウルソール酸とナリンゲニンとの間のこれらの差異は、ウルソール酸およびナリンゲニンがそれらの作用機構における差異を有することを示し、それは空腹時血糖へのそれらの相加的効果を説明し得る。
【０３７３】
ｃ．トマチジン
トマチジンは、次の構造を有する。
【化４８】
0006001060.tif 000117
【０３７４】
トマチジンのｍＲＮＡ発現シグネチャは、ヒト筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２と負に相関した。したがって、トマチジンは、骨格筋萎縮を阻害し得る。これを試験するために、マウスに、ビヒクル（トウモロコシ油）またはトマチジン（５０、１００、または２００ｍｇ／ｋｇ）を、腹腔内注射を介して１日に２回、２日間にわたって投与した。一方の前脛骨（ＴＡ）筋を外科用ステープルで不動化し、対側の可動性ＴＡを対象内の対照として残した。ビヒクルまたは同一用量のトマチジンを、腹腔内注射を介して１日２回、６日間にわたって投与した後、不動性および可動性ＴＡの重量を比較した。３つ全ての用量のトマチジンは、筋萎縮を低減し、効果は５０ｍｇ／ｋｇで最大であった（図２２Ａ）。同一のプロトコルを使用して、不動化誘導性筋萎縮へのビヒクル（トウモロコシ油）およびトマチジン（５、１５、または５０ｍｇ／ｋｇ）の効果を比較した。トマチジンは、用量依存的様態で筋萎縮を低減した。、このうち最大効果は５０ｍｇ／ｋｇであり、ＥＣ５０は５ｍｇ／ｋｇ未満であった（図２２Ｂ）。これらのデータは、トマチジンが不動化誘導性筋萎縮を低減し、それがウルソール酸よりも強力であることを示す。
【０３７５】
トマチジンはまた、絶食によって誘導される骨格筋萎縮をも阻害し得る。これを試験するために、マウスから食餌を断ち、次いでビヒクル、ウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）またはトマチジン（５０ｍｇ／ｋｇ）を、腹腔内注射によって投与した。１２時間後、マウスは、ビヒクルまたは同一用量のウルソール酸もしくはトマチジンの更なる腹腔内注射を受けた。１２時間後、骨格筋を採取し、計量した。ウルソール酸およびトマチジンの両方が骨格筋を増加させ、減少した絶食誘導性骨格筋萎縮を示した（図２３Ａ）。我々は次に、同一のプロトコルを使用して、ビヒクル（トウモロコシ油）およびトマチジン（５、１５、および５０ｍｇ／ｋｇ）の効果を比較した。トマチジンは、用量依存的様態で筋萎縮を低減し、このうち最大効果は５０ｍｇ／ｋｇであり、ＥＣ５０は５〜１５ｍｇ／ｋｇであった（図２３Ｂ）。
【０３７６】
ｄ．アラントイン、タクリン、ウンゲリン、ヒッペアストリン、およびコネッシン
アラントインは、次の構造を有する。
【化４９】
0006001060.tif 000118
【０３７７】
タクリンは、次の構造を有する。
【化５０】
0006001060.tif 000119
【０３７８】
ウンゲリンは、次の構造を有する。
【化５１】
0006001060.tif 000120
【０３７９】
ヒッペアストリンは、次の構造を有する。
【化５２】
0006001060.tif 000121
【０３８０】
コネッシンは、次の構造をを有する。
【化５３】
0006001060.tif 000122
【０３８１】
アラントイン、タクリン、ウンゲリン（Ｐｒｅｓｔｗｉｃｋ−６８９）、ヒッペアストリン（Ｐｒｅｓｔｗｉｃｋ−６７５）、およびコネッシンのｍＲＮＡ発現シグネチャもまた、ヒト筋萎縮シグネチャ−１および筋萎縮シグネチャ−２と負に相関した。したがって、これらの化合物は、骨格筋萎縮を阻害し得る。これを試験するために、上述の絶食誘導性筋萎縮モデルを使用して、ウルソール酸（２００ｍｇ／ｋｇ）、トマチジン（５０ｍｇ／ｋｇ）、アラントイン（２ｍｇ／ｋｇ）、タクリン（４ｍｇ／ｋｇ）、ウンゲリン（２ｍｇ／ｋｇ）、ヒッペアストリン（２ｍｇ／ｋｇ）、およびコネッシン（２ｍｇ／ｋｇ）の効果を比較した。ウルソール酸およびトマチジンと同様に、アラントイン、タクリン、ウンゲリン、ヒッペアストリン、およびコネッシンは、絶食マウスにおける筋肉重量を増加させ（図２４）、これらの化合物が骨格筋萎縮を減少させることを示した。
【０３８２】
ウルソール酸およびナリンゲニンが空腹時血糖を低減したことから、ヒッペアストリン（２ｍｇ／ｋｇ）およびコネッシン（２ｍｇ／ｋｇ）は、同様の効果を有し得る。ヒッペアストリンおよびコネッシンは、空腹時血糖を低減した（図２５）。
【０３８３】
１６．タクリンおよび類似体の予見的合成
本明細書に開示される構造式は、アントラニロニトリル誘導体をシクロヘキサノン誘導体と、塩化亜鉛の存在下で反応させることによって合成され得る（Ｐｒｏｃｔｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄｉｃｉ．Ｃｈｅｍ．，２０００，７，２９５−３０２）。かかる反応が、スキーム１Ａに示される。
スキーム１Ａ
【化５４】
0006001060.tif 000123
【０３８４】
故に、タクリンは、スキーム１Ｂに示されるように合成することができる。
スキーム１Ｂ
【化５５】
0006001060.tif 000124
【０３８５】
本明細書に開示される構造式はまた、α−シアノシクロノン（ｃｙａｎｏｃｙｃｌｏｎｏｎｅｓ）を多種多様なアニリンと、ＴｉＣｌ4またはＡｌＣｌ3のいずれかを試薬として使用して、反応させることによっても合成され得る（Ｐｒｏｃｔｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄｉｃｉ．Ｃｈｅｍ．，２０００，７，２９５−３０２）。かかる反応の例が、スキーム１Ｃに示される。
スキーム１Ｃ
【化５６】
0006001060.tif 000125
【０３８６】
故に、タクリンは、スキーム１Ｄに示されるように合成され得る。
スキーム１Ｄ
【化５７】
0006001060.tif 000126
【０３８７】
１７．ナリンゲニンおよび類似体の予見的合成
開示される構造式は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｄｅ  ＫｅｕｋｋｅｌｅｉｒｅによるＰＣＴ出願第ＷＯ  ２００７／０５３９１５号に記載されるように合成され得る。別の例では、グルコイル（Ｇｌｕｃｏｙｌ）置換されたナリンゲニンが、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｋａｓｈｉｗａｂａらによる米国特許第６，７７０，６３０号に記載されるように抽出され得る。Ｄｅ  Ｋｅｕｋｋｅｌｅｉｒｅらによって記載されるように、開示される構造式は、スキーム２Ａに示されるように合成され得る。
スキーム２Ａ
【化５８】
0006001060.tif 000127
【０３８８】
チオケトンの形成は、Ｐａｔｈａｋら（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００８，７３，２８９０−２８９３）によって記載された。スキームにおける＊は、既知の化学作用を使用して、開示されるＲ部分に変換されているか、または変換され得る、部分を表す。例えば、ナリンゲニンの合成が、スキーム２Ｂに示される。
スキーム２Ｂ
【化５９】
0006001060.tif 000128
【０３８９】
１８．アラントインおよび類似体の予見的合成
開示される構造式は、当該技術分野で既知の多様な化学作用を使用して作製され得る。例えば、１組の開示される構造式は、スキーム３Ａに示されるように、および参照によりその全体がこれによって本明細書に組み込まれる、Ｉｎｅａｇａらによる米国特許第４，６４７，５７４号に記載されるように、作製され得る。
スキーム３Ａ
【化６０】
0006001060.tif 000129
【０３９０】
アラントインは、参照によりその全体がこれによって本明細書に組み込まれる、Ｓｃｈｅｒｍａｎｚによる米国特許第５，１９６，５４５号に記載されるように、およびスキーム３Ｂに示されるように、調製され得る。
スキーム３Ｂ
【化６１】
0006001060.tif 000130
【０３９１】
開示される構造式をどのように作製するかについての包括的手引きは、Ｋｉｒｋ−Ｏｔｈｍｅｒ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙにおいて、Ｈｙｄａｎｔｏｉｎ  ａｎｄ  Ｉｔｓ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｂｙ  Ａｖｅｎｄａnｏ  ｅｔ  ａｌ（２０００）の章の下で見出すことができ、それは参照によりその全体がこれによって本明細書に組み込まれる。
【０３９２】
１９．コネッシンおよび類似体の予見的合成
コネッシンは、キョウチクトウファミリーからの植物種において、例えば、ホラルレーナ・フロリブンダ（Ｈｏｌａｒｒｈｅｎａ  ｆｌｏｒｉｂｕｎｄａ）において見出される、ステロイドアルカロイドである。コネッシン誘導体は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、Ｍａｒｘによる米国特許第３，５３９，４４９号、第３，４６６，２７９号、および第３，４８５，８２５号に記載されるように調製され得る。Ｍａｒｘによる米国特許第３，５３９，４４９号、第３，４６６，２７９号、および第３，４８５，８２５号に記載されるように、コネッシン誘導体は、真菌類スタキボトリス・パービスポラ（Ｓｔａｃｈｙｂｏｔｒｙｓ  ｐａｒｖｉｓｐｏｒａ）等の微生物、ならびにグロエオスポリウム（Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍ）、コレクトトリチュム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）、およびミロテシウム（Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ）からの酵素を使用して、調製され得る。例えば、スキーム４Ａを参照されたい。
スキーム４Ａ
【化６２】
0006001060.tif 000131
【０３９３】
コネッシンオキソ誘導体は、還元およびその後の当業者に既知の化学作用を介して、スキーム４Ｂに示されるように更に修飾され得る。
スキーム４Ｂ
【化６３】
0006001060.tif 000132
【０３９４】
ヒドロキシル官能基は、当該技術分野で既知の幾つかの化学反応を経ることができ得る。一例は、スキーム４Ｂに示されるように、ウィリアムソンエーテル合成である。
【０３９５】
コネッシン誘導体は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第２，９１０，４７０号に記載されるように、合成的に調製され得る。コネッシン誘導体はまた、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｏｒｌｏｗによる国際公開第２０１１／０４６９７８号にも記載される。開示される構造式の合成はまた、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｐａｐｐｏによる米国特許第３，６２５，９４１号にも記載される。
【０３９６】
２０．トマチジンおよび類似体の予見的合成
本明細書に開示される構造式は、全て参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、Ｕｈｌｅ，ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．７６，６４１２（１９５４）、Ｕｈｌｅ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８３，１４６０（１９６１）、およびＫｅｓｓａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２７，２８６９（１９７１）によって開示される方法によって合成され得る。開示される化合物はまた、スキーム５Ａに示されるように作製することもできる。
スキーム５Ａ
【化６４】
0006001060.tif 000133
【０３９７】
２１．ヒッペアストリン／ウンゲリンおよび類似体の予見的合成
開示される構造式は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＭａnａｓ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１０，１３２，５１７６−７８）によって開示される方法によって、合成することができる。故に、開示される構造式は、スキーム６Ａに示されるように合成することができる。
スキーム６Ａ
【化６５】
0006001060.tif 000134
故に、例えば、ヒッペアストリンは、スキーム６Ｂに示されるように作製することができる。
スキーム６Ｂ
【化６６】
0006001060.tif 000135
【０３９８】
開示される構造式を作製するための別の経路が、Ｍａｎａｓらによって提示される、スキーム６Ｃに示される。
スキーム６Ｂ
【化６７】
0006001060.tif 000136
【０３９９】
開示される誘導体はまた、Ｈａｎｉｎｇら（Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌｅｃ．Ｃｈｅｍ．２０１１，９，２８０９−２８２０）によって開示される方法を使用して作製することもできる）。
【０４００】
２２．ベツリン酸および類似体の予見的合成
ベツリン酸類似体はまた、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｒｅｇｕｅｉｒｏ−Ｒｅｎらによる国際公開出願第ＷＯ  ２０１１／１５３３１５号に、およびＳａｆｅらによる国際公開出願第ＷＯ  ２００８／０６３３１８号に記載される。本発明の本発明のベツリン酸類似体は、下のスキーム７Ａに示されるように、一般的に調製され得る。出発物質は、当該技術分野で既知の方法により作製され得る。
スキーム７Ａ
【化６８】
0006001060.tif 000137
【０４０１】
化合物は、一般型で表され、このうち置換基は、本明細書の他の箇所における化合物の説明に注記される通りである。より具体的な例は、下のスキーム７Ｂに記述される。
スキーム７Ｂ
【化６９】
0006001060.tif 000138
【０４０２】
２３．筋萎縮シグネチャ−３
誘導されたｍＲＮＡおよび抑制されたｍＲＮＡを、筋萎縮シグネチャ−３について評価した。特定されたｍＲＮＡについての統計的有意性は、Ｐ≦０．０１として定義した。
【０４０３】
誘導されたｍＲＮＡについて：１週間の除神経によって有意に誘導されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ、および２４時間の絶食によって有意に誘導されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ。
【０４０４】
抑制されたｍＲＮＡについて：１週間の除神経によって有意に抑制されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ、および２４時間の絶食によって有意に抑制されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ。
【０４０５】
特定された、誘導されたｍＲＮＡには、１２０００１１Ｉ１８Ｒｉｋ、２３１０００４Ｉ２４Ｒｉｋ、Ａｋａｐ８ｌ、Ａｌｓ２、Ａｎａｐｃ７、Ａｐｏｄ、Ａｒｒｄｃ３、Ａｔｐ６ｖ１ｈ、ＢＣ０２７２３１，Ｂｓｄｃ１、Ｃｃｄｃ７７、Ｃｄ６８、Ｃｄｋｎ１ａ、Ｃｔｐｓ２、Ｃｔｓｌ、Ｄ９３００１６Ｄ０６Ｒｉｋ、Ｄｄｘ２１、Ｄｅｐｄｃ７、Ｄｉｄｏ１、ｎｔｔｉｐ２、Ｅｃｅ１、Ｅｄａ２ｒ、Ｅｇｌｎ３、Ｅｌｋ４、Ｅｒｂｂ２ｉｐ、Ｅｒｒｆｉ１、Ｆｂｘｏ３０、Ｆｂｘｏ３２、Ｆｉｐ１ｌ１、Ｆｒｇ１、Ｇａｂａｒａｐｌ１、Ｇａｄｄ４５ａ、Ｇｎｌ２、Ｇｎｌ３、Ｈｅｒｐｕｄ２、Ｈｐｇｄ、Ｈｓｐｂ７、Ｈｔａｔｉｐ２、Ｉｍｐａｃｔ、Ｋｄｍ３ａ、Ｋｌｈｌ５、Ｌｐｉｎ２、Ｍｅｄ１２、Ｍｆａｐ１ｂ、Ｍｇｅａ５、Ｍｋｎｋ２、Ｎｍｄ３、Ｎｕｐ９３、ＯＲＦ１９、Ｐａｃｒｇｌ、Ｐａｒｐ４、Ｐｄｋ４、Ｐｈｃ３、Ｐｌａａ、Ｐｐｆｉｂｐ１、Ｐｓｍａ２、Ｒａｎｂｐ１０、Ｒａｎｂｐ９、Ｒａｓｓｆ４、Ｒｉｏｋ１、Ｒｌｉｍ、Ｓｆ３ｂ１、Ｓｉｋ１、Ｓｌｃ２０ａ１、Ｓｌｎ、Ｓｐａｇ５、Ｓｒｓｆ２ｉｐ、Ｓｙｆ２、Ｔｂｃ１ｄ１５、Ｔｂｋ１、Ｔｅｋｔ１、Ｔｇｉｆ１、Ｔｍｅｍ１４０、Ｔｍｅｍ７１、Ｔｎｋｓ、Ｔｒｉｍ２５、Ｔｒｍｔ１、Ｔｓｐｙｌ２、Ｔｓｒ１、Ｔｕｌｐ３、Ｔｘｌｎｇ、Ｕｂｆｄ１、Ｕｂｘｎ４、Ｕｔｐ１４ａ、Ｗｄｒ３、およびＸｐｏ４が含まれた。
【０４０６】
特定された、抑制されたｍＲＮＡには、１６０００１４Ｃ１０Ｒｉｋ、１７０００２１Ｆ０５Ｒｉｋ、２３１０００３Ｌ２２Ｒｉｋ、２３１００１０Ｍ２０Ｒｉｋ、２３１００２８Ｏ１１Ｒｉｋ、２３１００６１Ｃ１５Ｒｉｋ、２６１０５２８Ｅ２３Ｒｉｋ、２８１０４３２Ｌ１２Ｒｉｋ、Ａｂｃｄ２、Ａｃｖｒ１、Ａｉｍｐ２、Ａｎｋ１、Ａｑｐ４、Ａｒｌ３、Ａｓｂ１０、Ａｕｒｋａ、Ｂｈｌｈｅ４１、Ｂｐｎｔ１、Ｃａｍｋ２ａ、Ｃｂｙ１、Ｃｃ２ｄ２ａ、Ｃｄｃ１４ａ、Ｃｄｃ４２ｅｐ２、Ｃｌｃｎ１、Ｃｎｔｆｒ、Ｃｏｌ１５ａ１、Ｃｏｌ６ａ３、Ｃｏｘ１１、Ｃｏｘ７ｂ、Ｃｒｈｒ２、Ｄ０Ｈ４Ｓ１１４、Ｄｄｉｔ３、Ｄｅｂ１、Ｄｅｘｉ、Ｄｈｒｓ７ｃ、Ｅｉｆ４ｅ、Ｅｎｄｏｇ、Ｅｐｈａ７、Ｅｘｄ２、Ｆａｍ６９ａ、Ｆｈｏｄ３、Ｆｎ３ｋ、Ｆｎｄｃ５、Ｆｓｄ２、Ｇｃｏｍ１、Ｇｄａｐ１、Ｇｍ４８４１、Ｇｍ５１０５、Ｇｍ９９０９、Ｇｎｂ５、Ｇｐｄ２、Ｇｒｔｐ１、Ｈｅａｔｒ５ａ、Ｈｌｆ、Ｈｏｍｅｒ１、Ｉｋｚｆ２、Ｉｎｐｐｌ１、Ｉｒｘ３、Ｉｔｇｂ６、Ｊａｒｉｄ２、Ｊｐｈ２、Ｋｈｄｒｂｓ３、Ｋｌｆ７、Ｋｌｈｌ２３、Ｋｙ、Ｌｒｐ２ｂｐ、Ｌｒｒｆｉｐ１、Ｍａｐ２ｋ６、Ｍａｐ３ｋ４、Ｍａｔ２ａ、Ｍｋｋｓ、Ｍｋｌ１、Ｍｒｃ２、Ｍｒｅｇ、Ｍｒｐｌ３９、Ｎａｒｆ、Ｎｔｆ５、Ｎｕｄｔ３、Ｏｓｂｐｌ６、Ｏｓｔｃ、Ｐａｒｐ８、Ｐｋｉａ、Ｐｌｃｄ４、Ｐｏｄｘｌ、Ｐｏｌｋ、Ｐｏｌｒ３ｋ、Ｐｐｍ１ｌ、Ｐｐｐｄｅ２、Ｐｒｓｓ２３、Ｐｓｄ３、Ｐｓｐｈ、Ｐｔｐｍｔ１、Ｐｔｘ３、Ｑｒｓｌ１、Ｒａｓｇｒｐ３、Ｒｈｏｂｔｂ３、Ｒｉｃ８ｂ、Ｒｎｆ１５０、Ｒｓｐｈ１、Ｒｕｎｄｃ１、Ｒｘｒｇ、Ｓｅｌ１ｌ３、Ｓｅｍａ３ａ、Ｓｇｃｄ、Ｓｈｉｓａ２、Ｓｉｒｔ５、Ｓｌｃ２５ａ１９、Ｓｌｃ４１ａ３、Ｓｌｃ４ａ４、Ｓｌｃｏ５ａ１、Ｓｎｒｎｐ３５、Ｓｔａｃ３、Ｓｔｏｎ２、Ｓｔｒａｄｂ、Ｓｔｘｂｐ４、Ｔｆｒｃ、Ｔｍｃ７、Ｔｍｅｍ２１８、Ｔｍｔｃ１、Ｔｎｆａｉｐ２、Ｔｏｂ１、Ｔｒｉｍ３５、Ｔｔｌ、Ｖｅｇｆａ、およびＶｇｌｌ４が含まれた。
【０４０７】
２４．筋萎縮シグネチャ−４
誘導されたｍＲＮＡおよび抑制されたｍＲＮＡを、筋萎縮シグネチャ−４について評価した。特定されたｍＲＮＡについての統計的有意性は、Ｐ≦０．０１として定義した。
【０４０８】
誘導されたｍＲＮＡについて：１週間の除神経によって有意に誘導されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ、および１週間のＧａｄｄ４５ａ過剰発現によって有意に誘導されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ。
【０４０９】
抑制されたｍＲＮＡについて：１週間の除神経によって有意に抑制されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ、および１週間のＧａｄｄ４５ａ過剰発現によって有意に抑制されたマウス前脛骨筋ｍＲＮＡ。
【０４１０】
特定された、誘導されたｍＲＮＡには、２４１００８９Ｅ０３Ｒｉｋ、６７２０４５６Ｈ２０Ｒｉｋ、Ａｂｃａ１、Ａｂｈｄ２、Ａｂｒ、Ａｉｆ１ｌ、Ａｋａｐ６、Ａｌｇ８、Ａｌｏｘ５ａｐ、ｍｐｄ３、Ａｎｋｒｄ１、Ａｎｘａ４、Ａｏａｈ、Ａｐｐ、Ａｒａｆ、Ａｒｆｇａｐ３、Ａｒｈｇｅｆ２、Ａｒｐｃ３、Ａｒｐｐ２１、Ａｔｆ７ｉｐ、Ａｔｐ６ａｐ２、Ａｔｐ６ｖ１ｈ、Ａｔｐ７ａ、Ａｔｐ８ｂ１、Ｂ４ｇａｌｔ５、Ｂａｘ、Ｂａｚ２ａ、Ｂｈｌｈｂ９、Ｂｍｐ２ｋ、Ｃ３ａｒ１、Ｃａｎｘ、Ｃａｓｐ３、Ｃｃｄｃ１１１、Ｃｃｄｃ１２２、Ｃｃｄｃ９３、Ｃｃｎｄｂｐ１、Ｃｃｔ４、Ｃｄ６８、Ｃｄ８２、Ｃｄｋｎ１ａ、Ｃｅｐ１９２、Ｃｇｒｅｆ１、Ｃｈｄ４、Ｃｈｒｎａ１、Ｃｈｒｎｂ１、Ｃｈｒｎｇ、Ｃｈｕｋ、Ｃｌｅｃ１２ａ、Ｃｌｅｃ４ａ３、Ｃｏｌ１９ａ１、Ｃｏｐｂ２、Ｃｐｎｅ２、Ｃｓｔｂ、Ｃｔｎｎａ１、Ｃｔｐｓ２、Ｃｔｓｄ、Ｃｔｓｌ、Ｃｔｓｓ、Ｃｔｓｚ、Ｃｙｂ５ｒ３、Ｃｙｂｂ、Ｃｙｒ６１、Ｄ１０Ｗｓｕ５２ｅ、Ｄ９３００１６Ｄ０６Ｒｉｋ、Ｄｃａｆ１３、Ｄｃｌｒｅ１ｃ、Ｄｃｔｎ５、Ｄｄｂ１、Ｄｄｈｄ１、Ｄｅｃｒ２、Ｄｅｒｌ１、Ｄｈｘ９、Ｄｉｄｏ１、Ｄｎａｊｃ１、Ｅｄａ２ｒ、Ｅｅｆ１ｂ２、Ｅｅｆ２、Ｅｍｒ１、Ｅｐｂ４．１ｌ３、Ｅｒｂｂ２ｉｐｍ、Ｅｒｌｉｎ１、Ｅｓｙｔ１、Ｆａｍ１０８ｃ、Ｆａｍ１１５ａ、Ｆｂｘｏ３０、Ｆｒｒｓ１、Ｆｓｔ、Ｆｕｂｐ１、Ｆｙｂ、Ｇａｂ２、Ｇａｂａｒａｐ、Ｇａｄｄ４５ａ、Ｇａｌｃ、Ｇａｌｎｔ７、Ｇａｎａｂ、Ｇｉｇｙｆ２、Ｇｍ３４３５、Ｇｎｂ２ｌ１、Ｇｎｇ２、Ｇｎｌ２、Ｇｎｌ３、Ｇｐｒａｓｐ１、Ｇｐｓｍ２、Ｇｒａｍｄ１ｂ、Ｈ１９、Ｈ２−Ａａ、Ｈｍｇｎ３、Ｈｎ１、Ｈｎｒｎｐｕ、Ｈｐｒｔ、Ｈｓｐ９０ａｂ１、Ｈｓｐ９０ｂ１、Ｈｓｐａ２、Ｈｓｐａ４、Ｈｓｐｂ８、Ｈｔａｔｉｐ２、Ｉｄ２、Ｉｆｉ３０、Ｉｇｂｐ１、Ｉｇｄｃｃ４、Ｉｌｆ３、Ｉｍｐ４、Ｉｍｐａｃｔ、Ｉｒａｋ４、Ｉｔｍ２ｂ、Ｉｖｎｓ１ａｂｐ、Ｋｃｎｎ３、Ｋｄｍ３ａ、Ｋｈｄｒｂｓ１、Ｋｉｆ５ｂ、Ｋｌｈｌ５、Ｋｒｔ１８、Ｌｂｈ、Ｌｇａｌｓ３、Ｌｇｍｎ、Ｌｐａｒ６、Ｌｐｉｎ２、Ｌｙｚ２、Ｍａｃｆ１、Ｍａｐ１ｌｃ３ａ、Ｍａｐ３ｋ１、Ｍａｐ４ｋ４、Ｍａｒｖｅｌｄ２、Ｍａｔｒ３、Ｍｃｍ６、Ｍｄｍ２、Ｍｄｍ４、Ｍｅ２、Ｍｅｄ１２、Ｍｇｅａ５、Ｍｉｃａｌｌ１、Ｍｐｐ１、Ｍｒｃ１、Ｍｔａｐ１ｂ、Ｍｙｆ６、Ｍｙｌ４、Ｍｙｏ５ａ、Ｎｃａｍ１、Ｎｉｐ７、Ｎｌｎ、Ｎｏｐ５８、Ｎｒｃａｍ、Ｎｕｐ９３、Ｎｖｌ、Ｏｂｆｃ２ａ、Ｏｓｂｐｌ８、Ｐａｌｍ２、Ｐａｒｐ４、Ｐｃｂｄ１、Ｐｃｇｆ３、Ｐｄｌｉｍ３、Ｐｆｎ１、Ｐｇｄ，Ｐｉｋ３ｒ３、Ｐｌａａ、Ｐｌｅｋｈａ５、Ｐｌｘｄｃ２、Ｐｌｘｎａ１、Ｐｏｌｒ２ａ、Ｐｏｌｒ３ｂ、Ｐｐｆｉｂｐ１、Ｐｐｉｂ、Ｐｒｅｐ、Ｐｒｋｄｃ、Ｐｒｍｔ１、Ｐｒｓｓ４８、Ｐｒｕｎｅ２、Ｐｓｍｂ１、Ｐｓｍｄ５、Ｒａｄ５０、Ｒａｓｓｆ４、Ｒｂ１、Ｒｂｍ４５、Ｒｅｅｐ５、Ｒｇｓ２、Ｒｉｏｋ３、Ｒｌｉｍ、Ｒｎａｓｅｌ、Ｒｐｌ３１、Ｒｐｓ３、Ｒｐｓ９、Ｒｒａｄ、Ｒｒａｓ２、Ｒｓｐｒｙ１、Ｒｕｎｘ１、Ｓａｐ３０ｂｐ、Ｓｅｍａ４ｄ、Ｓｅｍａ６ａ、Ｓｅｒｆ１、Ｓｅｒｐｉｎｂ６ａ、Ｓｅｓｎ３、Ｓｆ３ｂ１、Ｓｆ３ｂ３、Ｓｇｐｌ１、Ｓｈ３ｄ１９、Ｓｈ３ｐｘｄ２ａ、Ｓｈ３ｒｆ１、Ｓｉｋ１、Ｓｉｒｐａ、Ｓｌｃ２０ａ１、Ｓｌｃ２５ａ２４、Ｓｌｃ９ａ７、Ｓｌｃ９ａ９、Ｓｌｎ、Ｓｍａｒｃａｄ１、Ｓｍｃ１ａ、Ｓｍｃ５、Ｓｎｄ１、Ｓｎｘ５、Ｓｐｉｎ１、Ｓｒｐ１４、Ｓｓｕ７２、Ｓｔａｍ、Ｓｕｐｔ５ｈ、Ｔｂｃ１ｄ８、Ｔｂｃｄ、Ｔｂｘａｓ１、Ｔｅｃ、Ｔｇｆｂｒ１、Ｔｇｓ１、Ｔｈｏｃ５、Ｔｈｕｍｐｄ３、Ｔｉａｍ２、Ｔｌｒ４、Ｔｌｒ６、Ｔｍｅｆｆ１、Ｔｍｅｍ１７６ｂ、Ｔｍｅｍ１７９ｂ、Ｔｍｅｍ２０９、Ｔｍｅｍ３８ｂ、Ｔｎｃ、Ｔｎｆｒｓｆ２２、Ｔｎｆｒｓｆ２３、Ｔｎｎｔ２、Ｔｒｉｍ２５、Ｔｒｐ６３、Ｔｕｂｂ５、Ｔｕｂｂ６、Ｔｙｒｏｂｐ、Ｕｃｈｌ１、Ｕｇｃｇ、Ｕｓｐ１１、Ｕｓｐ５、Ｗａｓｆ２、Ｗｂｐ５、Ｗｂｓｃｒ２７、Ｗｄｒ３６、Ｗｄｒ６１、Ｗｄｒ６７、Ｗｄｒ７７、Ｗｄｙｈｖ１、Ｗｓｂ１、Ｙｌｐｍ１、Ｙｐｅｌ２、Ｙｗｈａｂ、Ｚｆｐ２８０ｄ、Ｚｆｐ３１８、Ｚｆｐ３４６、Ｚｆｐ３６ｌ１、およびＺｍｙｎｄ８が含まれた。
【０４１１】
特定された、抑制されたｍＲＮＡには、０６１００１２Ｇ０３Ｒｉｋ、１１１０００１Ｊ０３Ｒｉｋ、１１１００６７Ｄ２２Ｒｉｋ、２０１０１０６Ｇ０１Ｒｉｋ、２３１０００２Ｌ０９Ｒｉｋ、２３１０００３Ｌ２２Ｒｉｋ、２３１００１０Ｍ２０Ｒｉｋ、２６１０５０７Ｂ１１Ｒｉｋ、２６１０５２８Ｅ２３Ｒｉｋ、２８１０４０７Ｃ０２Ｒｉｋ、４９３１４０９Ｋ２２Ｒｉｋ、４９３３４０３Ｆ０５Ｒｉｋ、５７３０４３７Ｎ０４Ｒｉｋ、９６３００３３Ｆ２０Ｒｉｋ、Ａ２ｌｄ１、Ａ９３００１８Ｍ２４Ｒｉｋ、Ａｂｃｂ１ａ、Ａｂｃｂ４、Ａｂｃｄ２、Ａｂｉ３ｂｐ、Ａｃａａ２、Ａｃａｄｍ、Ａｃａｄｖｌ、Ａｃａｔ１、Ａｃｏｔ１３、Ａｄａｌ、Ａｄｃｙ１０、Ａｄｋ、Ａｄｓｓｌ１、Ａｅｓ、ＡＩ３１７３９５、Ａｉｍｐ２、Ａｋ１、Ａｌａｓ２、Ａｌｄｈ１ａ１、Ａｎｋ、Ａｎｋ１、Ａｎｋｒｄ９、Ａｎｏ２、Ａｎｏ５、Ａｐｌｐ２、Ａｐｏｂｅｃ２、Ａｑｐ４、Ａｒ、Ａｒｈｇａｐ１９、Ａｒｈｇａｐ２０、Ａｒｈｇａｐ３１、Ａｒｌ３、Ａｓｂ１０、Ａｓｂ１１、Ａｓｂ１２、Ａｓｂ１４、Ａｓｂ１５、Ａｔｐ１１ａ、Ａｔｐ１３ａ５、Ａｔｐ１ｂ１、Ａｔｐ５ａ１、Ａｔｐ５ｅ、Ａｔｐ８ａ１、Ａｔｘｎ１、Ｂ４ｇａｌｔ４、Ｂｃｋｄｋ、Ｂｈｌｈｅ４１、Ｂｐｇｍ、Ｂｐｉｌ１、Ｂｒｐ４４、Ｂｔｂｄ１、Ｃ２ｃｄ２、Ｃａｍｋ２ａ、Ｃａｍｋ２ｇ、Ｃａｐｎ５、Ｃａｒ８  ，Ｃａｓｔ  ，Ｃｃ２ｄ２ａ、Ｃｃｎｇ１、Ｃｃｎｋ  ｍＣｄ３４、Ｃｄ３６  ，Ｃｄｃ１４ａ  ，Ｃｄｃ４２ｅｐ３、Ｃｄｈ５、Ｃｄｎｆ、Ｃｅｓ１ｄ、Ｃｈｃｈｄ１０、Ｃｈｃｈｄ３、Ｃｉｂ２、Ｃｋｍ、Ｃｌｃｎ１、Ｃｌｉｃ５、Ｃｍｂｌ、Ｃｎｔｆｒ、Ｃｏｌ１１ａ１  ，Ｃｏｑ９、Ｃｏｘ１１、Ｃｏｘ６ａ２、Ｃｏｘ８ｂ、Ｃｐｔ１ｂ、Ｃｓｒｐ２ｂｐ、Ｃｕｅｄｃ１、Ｃｙｂ５ｂ、Ｃｙｙｒ１、Ｄ０Ｈ４Ｓ１１４、Ｄ１Ｅｒｔｄ６２２ｅ、Ｄａｂ２ｉｐ、Ｄｃｕｎ１ｄ２、Ｄｅｂ１、Ｄｅｃｒ１、Ｄｇｋｂ、Ｄｈｒｓ７ｃ、Ｄｌａｔ、Ｄｌｃ１、Ｄｌｇ１、Ｄｌｓｔ、Ｄｎａｊｂ５、Ｄｕｓｐ２８、Ｅｃｓｉｔ、Ｅｅｆ１ａ２、Ｅｅｐｄ１、Ｅｆｃａｂ２、Ｅｉｆ４ｅ、Ｅｎｄｏｇ、Ｅｎｏ３、Ｅｐａｓ１、Ｅｐｈａ７、Ｅｔｆｂ、Ｅｘｄ２、Ｅｙａ１、Ｆａｍ１３２ａ、Ｆａｓｔｋｄ３、Ｆｂｐ２、Ｆｂｘｏ３、Ｆｄｘ１、Ｆｅｚ２、Ｆｇｆｂｐ１、Ｆｈ１、Ｆｉｔｍ２、Ｆｌｔ１、Ｆｍｏ５、Ｆｓｄ２、Ｆｘｙｄ１、Ｆｚｄ４、Ｇ３ｂｐ２、Ｇａｎｃ、Ｇｂａｓ、Ｇｃｏｍ１、Ｇｄａｐ１、Ｇｈｒ、Ｇｊｃ３、Ｇｌｂ１ｌ２、Ｇｍ４８４１、Ｇｍ４８６１、Ｇｍ４９５１、Ｇｍ５１０５、Ｇｍｐｒ、Ｇｐｃｐｄ１、Ｇｐｄ１、Ｇｐｄ２、Ｇｐｔ２、Ｇｒｓｆ１、Ｇｕｃｙ１ａ３、Ｇｙｓ１、Ｈａｄｈ、Ｈｆｅ２、Ｈｉｖｅｐ２、Ｈｋ２、Ｈｌｆ、Ｈｏｍｅｒ１、Ｈｓｄｌ２、Ｉｄｈ３ａ、Ｉｄｈ３ｇ、Ｉｌ１５ｒａ、Ｉｎｐｐ５ａ、Ｉｒｘ３、Ｊａｋ２、Ｊａｍ２、Ｊｐｈ１、Ｋｃｎａ７、Ｋｃｎｊ２、Ｋｃｎｎ２、Ｋｄｒ、Ｋｈｄｒｂｓ３、Ｋｉｆ１ｂ、Ｋｉｆ１ｃ、Ｋｉｔｌ、Ｋｌｆ１２、Ｋｌｈｌ２３、Ｋｌｈｌ３１、Ｋｌｈｌ３１、Ｋｌｈｌ７、Ｋｙ、Ｌｄｂ３、Ｌｉｆｒ、Ｌｍｂｒ１、Ｌｐｈｎ１、Ｌｐｉｎ１、Ｌｐｌ、Ｌｒｉｇ１、Ｌｒｒｃ３９、Ｌｙｎｘ１、Ｍａｎ２ａ２、Ｍａｏｂ、Ｍａｐ２ｋ６、Ｍａｐ２ｋ７、Ｍａｐ３ｋ４、Ｍａｐｋａｐｋ２、Ｍｂｎｌ１、Ｍｃｃｃ１、Ｍｄｈ１、Ｍｄｈ２、Ｍｅ３、Ｍｆｎ１、Ｍｆｎ２、Ｍｇｓｔ３、Ｍｌｆ１、Ｍｐｎｄ、Ｍｐｚ、Ｍｒ１、Ｍｒｅｇ、Ｍｔｕｓ１、Ｍｙｂｐｃ２、Ｍｙｏ５ｃ、Ｍｙｏｍ２、Ｍｙｏｚ１、Ｎａｒｆ、Ｎｄｒｇ２、Ｎｄｕｆａ３、Ｎｄｕｆａ５、Ｎｄｕｆａ８、Ｎｄｕｆｂ８、Ｎｄｕｆｂ９、Ｎｄｕｆｓ１、Ｎｄｕｆｓ２、Ｎｄｕｆｓ６、Ｎｄｕｆｓ８、Ｎｄｕｆｖ１、Ｎｆ２、Ｎｏｓ１、Ｎｒ１ｄ１、Ｎｕｄｔ３、Ｏａｔ、Ｏｃｉａｄ２、Ｏｃｒｌ、Ｏｓｂｐｌ６、Ｏｓｇｅｐｌ１、Ｏｓｔｎ、Ｐａｑｒ９、Ｐａｒｐ３、Ｐｃｍｔｄ１、Ｐｃｎｔ、Ｐｃｎｘ、Ｐｄｇｆｄ、Ｐｄｈａ１、Ｐｄｐｒ、Ｐｆｋｆｂ３、Ｐｆｋｍ、Ｐｆｎ２、Ｐｇａｍ２、Ｐｈｂ、Ｐｈｋａ１、Ｐｈｋｇ１、Ｐｈｔｆ２、Ｐｈｙｈ、Ｐｉｔｐｎｃ１、Ｐｋｄｃｃ、Ｐｋｉａ、Ｐｌａ２ｇ１２ａ、Ｐｌａ２ｇ４ｅ、Ｐｌｃｂ１、Ｐｌｃｄ４、Ｐｌｎ、Ｐｍｐ２２、Ｐｐａｒａ、Ｐｐａｒｇｃ１ａ、Ｐｐａｔ、Ｐｐｍ１ａ、Ｐｐｍ１ｌ、Ｐｐｐ１ｃｂ、Ｐｐｐ１ｒ１ａ、Ｐｐｐ２ｒ２ａ、Ｐｐｐ３ｃｂ、Ｐｒｅｌｐ、Ｐｒｋａｂ２、Ｐｒｋｃａ、Ｐｒｋｇ１、Ｐｔｐ４ａ３、Ｐｔｐｒｂ、Ｐｔｔｇ１、Ｐｘｍｐ２、Ｐｙｇｍ、Ｒａｂ２８、Ｒａｓｇｒｐ３、Ｒｃａｎ２、Ｒｇｓ５、Ｒｈｏｔ２、Ｒｎｆ１２３、Ｒｐａ１、Ｒｐｌ３ｌ、Ｒｔｎ４ｉｐ１、Ｓａｍｄ１２、Ｓａｍｄ５、Ｓａｔｂ１、Ｓｃｎ４ａ、Ｓｃｎ４ｂ、Ｓｄｈａ、Ｓｄｈｂ、Ｓｄｒ３９ｕ１、Ｓｅｌ１ｌ３、Ｓｅｍａ６ｃ、Ｓｅｒｐｉｎｅ２、Ｓｈｉｓａ２、Ｓｌｃ１５ａ５、Ｓｌｃ１６ａ３、Ｓｌｃ１９ａ２、Ｓｌｃ２４ａ２、Ｓｌｃ２５ａ１１、Ｓｌｃ２５ａ１２、Ｓｌｃ２５ａ３、Ｓｌｃ２５ａ４、Ｓｌｃ２ａ１２、Ｓｌｃ２ａ４、Ｓｌｃ３５ｆ１、Ｓｌｃ３７ａ４、Ｓｌｃ４３ａ３、Ｓｌｃ４ａ４、Ｓｌｃ６ａ１３、Ｓｌｃ６ａ８、Ｓｌｃ９ａ３ｒ２、Ｓｌｃｏ３ａ１、Ｓｍａｒｃａ１、Ｓｍｏｘ、Ｓｍｙｄ１、Ｓｎｒｋ、Ｓｏｒｂｓ２、Ｓｐｏｐ、Ｓｒｌ、Ｓｔ３ｇａｌ３、Ｓｔ３ｇａｌ６、Ｓｔ６ｇａｌｎａｃ６、Ｓｔｋ３８ｌ、Ｓｔｒａｄｂ、Ｓｔｒｂｐ、Ｓｔｒｂｐ、Ｓｔｘｂｐ４、Ｓｕｃｌｇ１、Ｔａｂ２、Ｔａｆ３、Ｔａｒｓｌ２、Ｔｃｅａ３、Ｔｈｒａ、Ｔｉａｍ１、Ｔｉｍｐ４、Ｔｌｎ２、Ｔｍｅｍ１２６ａ、Ｔｍｅｍ１２６ｂ、Ｔｍｅｍ６５、Ｔｎｆａｉｐ２、Ｔｎｍｄ、Ｔｎｎｃ２、Ｔｎｎｉ２、Ｔｎｘｂ、Ｔｏｍｍ４０ｌ、Ｔｒａｋ１、Ｔｒａｋ２、Ｔｒｉｍ２４、Ｔｒｐｃ３、Ｔｕｂａ８、Ｔｘｌｎｂ、Ｔｘｎｉｐ、Ｕ０５３４２、Ｕａｃａ、Ｕｌｋ２、Ｕｑｃｒｃ１、Ｕｑｃｒｆｓ１、Ｕｑｃｒｑ、Ｖａｍｐ５、Ｖｄａｃ１、Ｖｅｇｆａ、Ｖｅｇｆｂ、Ｘｐｒ１、Ｙｉｐｆ７、Ｚｆａｎｄ５、Ｚｆｐ１９１、およびＺｆｐ２３８が含まれた。
【０４１２】
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕
（ａ）骨格筋量を増加するための、
（ｂ）骨格筋萎縮を低減するための、
（ｃ）筋力を増加するための、
（ｄ）エネルギー消費を増加するための、
（ｅ）骨格筋対脂肪比率を増加するための、
（ｆ）肥満を低減するための、
（ｇ）正常な筋肉機能を促進するための、
（ｈ）筋肉機能を向上するための、または、
（ｉ）健康に老化する筋肉を促進するための
医薬の製造における、式Ｅ１またはＥ２：
【化１】
0006001060.tif 000139
Ｅ１
0006001060.tif 000140
Ｅ２
によって表される構造を有する化合物、または、その立体異性体、互変異性体、溶媒和物、もしくは薬学的に許容される塩の使用であって、
式中、Ｒ51は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルおよびＣＯＲ53から選択され、
Ｒ53は、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｚ51は、ＮＲ54であり、
Ｒ54は、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択されることを特徴とする、使用。
〔２〕前記化合物が、式Ｅ１：
【化２】
0006001060.tif 000141
Ｅ１
によって表される構造を有する、前記〔１〕に記載の使用。
〔３〕Ｒ51が、ＨおよびＣ１〜Ｃ６アルキルから選択される、前記〔１〕または〔２〕に記載の使用。
〔４〕Ｒ51が、Ｈである、前記〔１〕または〔２〕に記載の使用。
〔５〕Ｒ54が、Ｈである、前記〔１〕または〔２〕に記載の使用。
〔６〕前記化合物が、式：
0006001060.tif 000142
によって表される構造を有する、前記〔１〕に記載の使用。
〔７〕動物における筋委縮を治療するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔８〕動物における筋量を増加するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔９〕動物における筋肉形成を向上するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔１０〕動物における正常な筋肉機能を促進するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔１１〕動物における健康に老化する筋肉を促進するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔１２〕動物における筋力を増加するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔１３〕動物におけるエネルギー消費を増加するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔１４〕動物における骨格筋対脂肪比率を増加するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
〔１５〕動物における肥満を低減するための医薬の製造における、前記〔１〕、〔２〕または〔６〕のいずれか一項に記載の使用。
Ｆ．参考文献
次の参考文献は、本明細書に記述される手順の詳細または他の詳細に補足的な例となる手順の詳細または他の詳細を提供する程度まで、参照により本明細書に具体的に組み込まれる。
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図６Ｅ】
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【図６Ｆ】
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【図６Ｇ】
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【図６Ｈ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１０Ｄ】
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【図１０Ｅ】
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【図１０Ｆ】
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【図１０Ｇ】
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【図１０Ｈ】
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【図１０Ｉ】
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【図１０Ｊ】
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【図１０Ｋ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１１Ｄ】
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【図１１Ｅ】
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【図１１Ｆ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
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【図１２Ｅ】
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【図１２Ｆ】
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【図１２Ｇ】
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【図１２Ｈ】
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【図１２Ｉ】
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【図１２Ｊ】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１４Ｄ】
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【図１４Ｆ】
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【図１４Ｇ】
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【図１４Ｈ】
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【図１４Ｉ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１５Ｅ】
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【図１５Ｆ】
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【図１５Ｇ】
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【図１５Ｈ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１６Ｄ】
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【図１６Ｅ】
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【図１６Ｆ】
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【図１６Ｉ】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２１Ｃ】
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【図２１Ｄ】
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【図２１Ｅ】
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【図２１Ｆ】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２３Ａ】
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【図２３Ｂ】
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【図２４】
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【図２５】
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