(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
病的血管新生を患う、哺乳類における予防および治療を意図する薬物を製造するための、血管破壊剤として、次の一般式(I)：
【化１】
0005856086.tif 000086
［式中、
1) 炭素 1とX基の間の結合は、単結合または二重結合であり、窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合または二重結合となり得、それは次のように理解される：
a) Xと前記炭素 1の間の結合が二重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合であり、
b) Xと前記炭素 1の間の結合が単結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は二重結合であり、式Iは、次の式I-Aの芳香族系に相当する：
【化２】
0005856086.tif 000087
2) nは0または1を表し、
3) Xは、
a) n = 1のとき: 
O、Sを表し、
b) n = 0のとき: 
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素で置換されたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、O-(C1-C6)アルキル、アルキルが1個以上のフッ素で置換されたO-(C1-C6)アルキル、NH-(C1-C6)アルキル、S(C3-C6)シクロアルキル
を表し、
4) R1は、
OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素で置換されたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、
CF3、CH2OR'（R'は、H、(C1-C6)アルキルまたはアルキルが1以上のフッ素で置換された(C1-C6)アルキルを表す）、CHO、
CONRcRd（RcおよびRdは、互いに独立して、H、C1-C6アルキルを表し、NRcRdはアミン官能基で結合したアミノ酸、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRcおよびRdは一緒にC2-C6アルキルを表す）、
NO2、N3、
【化４】
0005856086.tif 000088
CN、C(=N)NH2、SO3H、SO2NH2、SO2NHCH3、NHSO2CH3、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc、SO2-NRaRb、SO2-イミダゾール、
NRaRb（ここで、
RaおよびRbは、互いに独立して、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表すか、または
Raは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表し、Rb = CORf、COORfまたはCONRfRf'（RfおよびRf'は、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖を表し、RaおよびRbは一緒にC2-C6アルキルを表し、
RaおよびRbは、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、置換または非置換のヘテロアリールを形成し得る）
を表し、
5) R2は、置換または非置換のフェニルであって、
ハロゲン、OH、NHRa（Raは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表す）、
ORe（Reは、ベンジル、置換または非置換のメチレントリアゾールを表す）、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素、NH2で置換されたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、
NH-CORc基（ここで、Rcは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖を表す）、
O-(C1-C6)アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換されたO-(C1-C6)アルキル、
O-COR1（ここで、R1は、O-(C1-C6)アルキルまたはNRiRii（RiおよびRiiはC1-C6アルキルであり得る）、
C2-C4アルキル基、アルキル基が1以上のフッ素で置換されたC2-C4アルキル基、
置換または非置換のC2-C4アルキニル基、
置換または非置換のヘテロアリール、
シクロヘキシル、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン
から選択される1〜3の置換基で置換または非置換のフェニルを表すか、または
4-(NH2-(CH2-CH2O)p)Ph基（ここで、pは1〜6の整数である）を表し、
6) R3は、
H、(C1-C6)アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換された(C1-C6)アルキル、(C3-C6)シクロアルキル、O-(C1-C6)アルキル、NH2、プロパルギル基、CH2CNを表し、
7) R4およびR5は、互いに独立して、
H、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素で置換されたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、O-(C1-C6)アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換されたO-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換されたC1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ハロゲンを表し、
R4およびR5は一緒に、(C1-C2)アルケニル ジオキシまたは1以上のフッ素で置換された(C1-C2)アルケニル ジオキシを表す］
の化合物および医薬的に許容な塩の少なくとも一つの使用。
【請求項２】
病的血管新生が、網膜症、または良性腫瘍もしくは悪性(癌性)腫瘍である、請求項1に記載の一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項３】
病的血管新生を患う哺乳類における予防および治療を意図した薬物を製造するための、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、請求項1または2に記載の一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項４】
病的血管新生を患う哺乳類における予防および治療を意図した薬物を製造するための、チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、請求項1または2に記載の一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項５】
病的血管新生を患う哺乳類における予防および治療を意図した薬物を製造するための、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤、チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、請求項1または2に記載の一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用。
【請求項６】
一般式(I)のR1基が、NO2またはピロールから選択される請求項3〜5のいずれか一つに記載の使用。
【請求項７】
一般式(I)のR2基が、ORe（ここで、Reは請求項1で定義されたとおりである）、ハロゲン、置換または非置換のC2-C4アルキン基から選択される基によってパラ位に置換されたフェニルを表す、請求項3〜5のいずれか一つに記載の使用。
【請求項８】
一般式(I)のR1基がNO2またはピロールから選択され、一般式(I)のR2基が、ORe（Reは請求項1で定義されたとおりである）、ハロゲン、置換または非置換のC2-C4アルキン基から選択される基によってパラ位に置換されたフェニルを表す、請求項1〜5のいずれか一つに記載の使用。
【請求項９】
一般式(I)のR3基がHを表す請求項8に記載の使用。
【請求項１０】
式(I)の化合物が、次のもの：
【化５−１】
0005856086.tif 000089
【化５−２】
0005856086.tif 000090
【化５−３】
0005856086.tif 000091
【化５−４】
0005856086.tif 000092
【化５−５】
0005856086.tif 000093
【化５−６】
0005856086.tif 000094
から選択される、請求項1または2に記載の使用。
【請求項１１】
式(I)の化合物が、次のもの：
【化６】
0005856086.tif 000095
から選択される、請求項1〜9のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１２】
式(I)の化合物が、次のもの：
【化７】
0005856086.tif 000096
から選択される、請求項1〜9のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１３】
式(I)の化合物が、次のもの：
【化８−１】
0005856086.tif 000097
【化８−２】
0005856086.tif 000098
【化８−３】
0005856086.tif 000099
から選択される、請求項1〜9のいずれか一つの記載の使用。
【請求項１４】
式(I)の化合物が、次のもの：
【化９】
0005856086.tif 000100
である、請求項1〜9のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１５】
前記化合物が、1 mg/kg〜200 mg/kgに含まれる用量で経口経路により投与される、請求項1〜14のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１６】
前記化合物が、0.1 mg/kg/d〜100 mg/kg/dに含まれる用量で、非経口、静注経路により投与される、請求項1〜14のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１７】
抗腫瘍薬と組み合わされる、請求項1〜16のいずれか一つに記載の使用。
【請求項１８】
前記抗腫瘍薬が、次のもの：
アブラキサン、アバレリクス、アルデスロウキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アナストロゾール、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザシチジン、ベバシズマブ、ベキサロテン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、静注ブサルファン、経口ブサルファン、カルステロン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダルテパリン ナトリウム、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デニロウキン、デニロウキン ジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロモスタノロン プロピオネート、エクリズマブ、エピルビシン、エルロチニブ、エストラムスチン、エトポシド ホスフェート、エトポシド、エキセメスタン、フェンタニル シトレート、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、5-フルオウラシル、フルベストラント、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ オゾガマイシン、ゴセレリン アセテート、ヒストレリン アセテート、イブリツモマブ チウキセタン、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ メシレート、インターフェロン アルファ 2a、イリノテカン、ラパチニブ ジトシレート、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイプロリド アセテート、レバミソール、ロムスチン、メクロレタミン、メゲストロール アセテート、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、メトキサレン、マイトマイシンC、ミトタン、ミトキサントロン、ナンドロロン フェンプロピオネート、ネララビン、ノフェツモマブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、パニツムマブ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド ジナトリウム、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、サニチニブ、サニチニブ マレエート、タモキシフェン、パクリタキセル、タキソテレ、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ウラシル マスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ボリノスタットおよびゾレドロネートから選択される、請求項17に記載の使用。
【請求項１９】
医薬的に許容なビヒクルと組み合わせて、活性成分として請求項1で定義された式(I)の化合物を含む、哺乳類の網膜症、または良性腫瘍もしくは悪性(癌性)腫瘍の血管破壊用医薬組成物。
【請求項２０】
活性成分として、
− n = 0、炭素 1とX基の間の結合が単結合であり、XがOCH3から選択されるか、または
− n = 1、炭素 1とX基の間の結合が二重結合であり、X = OまたはS、およびR2が、OH、OCH3、O-ベンジル、Br、置換または非置換のC2-C4アルキニル基から選択される基により4位で置換されたフェニルを表す式Iの化合物を含む、請求項19に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
医薬的に許容なビヒクルと組み合わせて、活性成分として、請求項10で定義された化合物を含む、請求項19に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
活性成分として、請求項11で定義された化合物を含む、請求項19に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
活性成分として、請求項12で定義された化合物を含む、請求項19に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
活性成分として、請求項13で定義された化合物を含む、請求項19に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
活性成分として、請求項14で定義された化合物を含む、請求項19に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
1 mg/kg〜200 mg/kgに含まれる用量で、経口経路により投与される、請求項19〜25のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【請求項２７】
0.1 mg/kg/d〜100 mg/kg/dに含まれる用量で、静注経路により投与される、請求項19〜25のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【請求項２８】
次の一般式(I)：
【化１１】
0005856086.tif 000101
［式中、
1) 炭素 1とX基の間の結合は、単結合または二重結合であり、窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合または二重結合となり得、それは次のように理解される：
a. Xと前記炭素 1の間の結合が二重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合であり、
b. Xと前記炭素 1の間の結合が単結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は二重結合であり、式Iは、次の式I-Aの芳香族系に相当する：
【化１２】
0005856086.tif 000102
2) nは0または1を表し、
3) Xは、
a) n =1のとき: 
O、Sを表し、
b) n = 0のとき: 
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素で置換されたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、O-(C1-C6)アルキル、アルキルが1個以上のフッ素で置換されたO-(C1-C6)アルキル、NH-(C1-C6)アルキル、S(C3-C6)シクロアルキル
を表し、
4) R1は、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素で置換されたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、
CF3、CH2OR'（R'は、H、(C1-C6)アルキルまたはアルキルが1以上のフッ素で置換された(C1-C6)アルキルを表す）、
CONRcRd（RcおよびRdは、互いに独立して、H、C1-C6アルキルを表し、NRcRdはアミン官能基で結合したアミノ酸、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRcおよびRdは一緒にC2-C6アルキルを表す）、
NO2、N3、
【化１４】
0005856086.tif 000103
C(=N)NH2、SO3H、SO2NH2、SO2NHCH3、NHSO2CH3、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc、SO2-NRaRb、SO2-イミダゾール、
NRaRb（ここで、
RaおよびRbは、互いに独立して、H、CHO、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、その酸官能基で結合したアミノ酸を表すか、または
Raは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表し、Rb = CORf、COORfまたはCONRfRf'（RfおよびRf'は、H、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRaおよびRbは一緒にC2-C6アルキルを表し、
RaおよびRbは、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、置換または非置換のヘテロアリールを形成し得る）
を表し、
5) R2は、置換フェニルであって、
OH、NHRa（Raは、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表す）、
ORe（Reは、ベンジル、置換または非置換のメチレントリアゾールを表す）、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素、NH2で置換さたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、
NH-CORc基（ここで、Rcは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖を表す）、
O-(C1-C6)アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換されたO-(C1-C6)アルキル、
NH-Rc基（ここで、Rcはその酸官能基で結合したアミノ酸を表す）、
O-COR1（ここで、R1は、O-(C1-C6)アルキルまたはNRiRii（RiおよびRiiはC1-C6アルキルであり得る）、
C2-C4アルキル基、アルキル基が1以上のフッ素で置換されたC2-C4アルキル基、
置換または非置換のC2-C4アルケニル基、
置換または非置換のC2-C4アルキニル基、
置換または非置換のヘテロアリール、
シクロヘキシル、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン
から選択される1〜3の置換基で置換のフェニルを表すか、または
4-(NH2-(CH2-CH2O)p)Ph基（ここで、pは1〜6の整数である）を表し、
6) R3は、
H、(C1-C6)アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換された(C1-C6)アルキル、(C3-C6)シクロアルキル、O-(C1-C6)アルキル、NH2、プロパルギル基、CH2CNを表し、
7) R4およびR5は、互いに独立して、
H、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、アルキルが1以上のフッ素で置換されたOPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、O-(C1-C6)アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換されたO-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、アルキルが1以上のフッ素で置換されたC1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、ハロゲンを表し、
R4およびR5は一緒に、(C1-C2)アルケニル ジオキシまたは1以上のフッ素で置換された(C1-C2)アルケニル ジオキシを表す］
の化合物で、
次の：
X = O、R3 = Hで炭素 1とX基の間の結合が二重結合であるとき、
a. R1 = NH2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
b. R1 = NH2、R2 = フェニル、R4 = HおよびR5 = H、
c. R1 = NO2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
d. R1 = NO2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = HおよびR5 = H、
e. R1 = NH2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = HおよびR5 = H、
f. R1 = NHCHO、R2 = フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
g. R1 = NH2、R2 = フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
h. R1 = NH2、R2 = 置換または非置換のフェニルもしくは4-OH-フェニル、R4 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、およびR5 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル
i. R4およびR5の一つがハロゲンを表す化合物
の化合物を除く。
【請求項２９】
− n = 0、炭素 1とX基の間の結合が単結合であり、XがOCH3であり、R1がNO2であるか、または
− n = 1、炭素 1とX基の間の結合が二重結合であり、X = OまたはS、R2が、OH、OCH3、O-ベンジル、置換または非置換のC2-C4アルキニル基から選択される基により4位で置換されたフェニルを表す、一般式(I)の請求項28に記載の化合物。
【請求項３０】
次の：
【化２０−１】
0005856086.tif 000104
【化２０−２】
0005856086.tif 000105
から選択される、請求項29に記載の化合物。
【請求項３１】
請求項1に記載の式(I)の第1の医薬品と少なくとも一つの抗腫瘍薬を含む第2の医薬品とを含む製品。
【請求項３２】
良性または悪性（癌性）腫瘍を患う哺乳類の治療において、同時、独立または連続使用のための組合せ医薬品として、少なくとも一つの抗腫瘍薬が、
アブラキサン、アバレリクス、アルデスロウキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アナストロゾール、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザシチジン、ベバシズマブ、ベキサロテン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、静注ブサルファン、経口ブサルファン、カルステロン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダルテパリン ナトリウム、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デニロウキン、デニロウキン ジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロモスタノロン プロピオネート、エクリズマブ、エピルビシン、エルロチニブ、エストラムスチン、エトポシド ホスフェート、エトポシド、エキセメスタン、フェンタニル シトレート、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、5-フルオウラシル、フルベストラント、ゲフィチニブ、ゲムシタビン、ゲムツズマブ オゾガマイシン、ゴセレリン アセテート、ヒストレリン アセテート、イブリツモマブ チウキセタン、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ メシレート、インターフェロン アルファ 2a、イリノテカン、ラパチニブ ジトシレート、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイプロリド アセテート、レバミソール、ロムスチン、メクロレタミン、メゲストロール アセテート、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、メトキサレン、マイトマイシンC、ミトタン、ミトキサントロン、ナンドロロン フェンプロピオネート、ネララビン、ノフェツモマブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、パニツムマブ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド ジナトリウム、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、サニチニブ、サニチニブ マレエート、タモキシフェン、パクリタキセル、タキソテレ、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ウラシル マスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ボリノスタットおよびゾレドロネートから選択される、請求項31に記載の製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬物製造のための、新規なイソキノロン類を含むイソキノロン類の使用に関する。
本発明は、これらの新規なイソキノロン類ならびにそれらの合成方法にも関する。
特に、本発明は、病的血管新生、および具体的には癌の治療に用いられるイソキノロン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
手術および放射線治療と一緒の化学療法は、癌治療に対して最も用いられる方法の一つである。数十の抗癌化合物が臨床使用で認可されているが、より選択的で、より効果的でより毒性の少ない新規な治療に対しての不変の必要性が今もなお存在する。
【０００３】
化学療法薬は、それらの作用機序に関しておよび細胞標的に関しての両方で多数かつ種々存在する。これらの薬物の大部分は、次の範疇：アルキル化剤、代謝拮抗剤、植物性アルカロイド、トポイソメラーゼ阻害剤、抗腫瘍および抗有糸分裂抗生物質に入る。ほとんどの抗有糸分裂化合物は、微小管細胞骨格と相互作用する。これらの化合物は、チューブリンおよび／または微小管に直接作用するか、あるいは、ビンブラスチンおよびビンクリスチンのように微小管を解重合するか、タキソールおよびその誘導体のように微小管を安定化させる(Jordan MA and Wilson L, Nat Rev Cancer. 2004, v4(4): pp 253-65)。これらの解重合または安定化している分子は、主に有糸分裂に影響を与え、それらの抗増殖活性は、微小管の「生理学的」動態の抑制に起因する(Jordan MAら, Cancer Res. 1991, v51(8): pp 2212-22; Derry WB, Wilson L and Jordan MA, Biochemistry. 1995; 34(7): pp 2203-11)。微小管動態の抑制は、有糸分裂チェックポイントを活性化された状態に維持する、異常な紡錘体の形成をもたらし、中期における細胞の停止を誘導する。長時間の有糸分裂の停止は、有糸分裂破滅、その結果、細胞死をを引き起こす(Jordan MA and Wilson L, Nat Rev Cancer. 2004 Apr; v4(4): pp 253-65)。急速に分裂する癌細胞は、微小管動態の障害に特に敏感であり、それゆえ、生物の大部分の体細胞と比較して優先的に標的とされるので、この作用機序が、これらの化合物の治療的使用の根拠を構成する。
【０００４】
最もよく知られた安定化させる化合物は、タキソールおよびその誘導体であり、それらは乳癌または卵巣癌の治療に広く用いられている。微小管を不安定にさせる化合物は、ビンブラスチンおよびビンクリスチンのようなビンカ アルカロイドを含み、優先的に、血液腫瘍に対して用いられが肺および精巣癌のような特定の固形腫瘍にも用いられる。
【０００５】
同様に、2-フェニル-4-キノロン類(Ledら, J. Med. Chem., 1994, v37: pp1126-35 and pp3400-07; 2009, 52, 4883-4891)または1,2,3,4-テトラヒドロ-2-フェニル-4-キノロン類(Ledら, J. Med. Chem., 1998, v41, pp.1155-62)のような低分子量の物質も、チューブリン重合阻害作用を示している(抗チューブリン化合物)。
【０００６】
しかしながら、抗チューブリン分子は、多数の癌に効果的であり、臨床的に広く用いられているが、末梢神経毒性および哺乳類、特にヒトで発現する耐性現象は、新たな標的に作用する新規な抗有糸分裂剤を探し出す必要性を示している。
「哺乳類」とは、特に家畜を意味する。
【０００７】
もう一つの大きな部類の抗癌剤は、酵素阻害剤により表され、例えば、メトロレキセート(ジヒドロ葉酸還元酵素(DHFR)阻害剤)、フルオロウラシル(チミジル酸合成酵素阻害剤) グリベック(Gleevec)およびBMS-354825(Bcr-Abl チロシン キナーゼ活性阻害剤)、エルロニチブ(上皮成長因子受容体(EGFR)阻害剤)、PALACI-1040およびPD0325901(マイトジェン活性化プロテインキナーゼ(MAPKK)阻害剤、PALA(アスパラギン酸トランスカルバモイラーゼ阻害剤)、フラボピリドール(Kaur Gら, J Natl Cancer Inst. 1992, v84(22): pp 1736-40)およびR-ロスコビチン(Meijer Lら, Eur J Biochem. 1997, v243(1-2): pp 527-36)、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤である。
【０００８】
酵素阻害剤のうちで、ベンゾピロン誘導体、ポリ-ADPリボース ポリメラーゼ(pADPRT)阻害剤および特に化合物5-ヨード-6-アミノ-1,2-ベンゾピロン(INH2BP)でのE-ras-形質転換ウシ内皮細胞およびヒト前立腺腺癌DU145細胞のインビトロでの前処理は、ヌードマウス異種移植モデルにおいて腫瘍形成阻害活性（これらの前処理細胞において）を示している。
【０００９】
炎症および炎症性疾患、関節炎ならびに心臓発作の治療について、イソキノリノンのような他のpADPRT阻害化合物が、国際出願WO 98/51307(Octamer)に記載されている。
タンパク質リン酸化は、プロテイン キナーゼによる、ATP(アデノシン三リン酸)分子からタンパク質への高エネルギーホスフェートの移動により定義される。タンパク質ホスフェートによるその除去は、脱リン酸化と呼ばれる。タンパク質に結合したホスフェートの98％以上は、セリンまたはスレオニンを通じて結合している(Berndt, Progress in Cell Cycle Res. 2003, (5): pp 497-510)。
【００１０】
タンパク質の可逆的リン酸化は、真核細胞におけるタンパク質の活性の急速な調節に非常に重要な現象である。それは、例えば、遺伝子発現、細胞周期および細胞分化のような種々の細胞活性の調節(活性化／不活性化)に関与している。
【００１１】
リン酸化／脱リン酸化サイクルは、多数のキナーゼ(518)およびホスファターゼ(130以上)によって確保されている(Alonsoら, Cell. 2004 (117): pp 699-711)。後者は、PP1、PP2A、PP2B、PP4、PP5、PP6およびPP7を含むPPP(ホスホ-タンパク質ホスファターゼ)ファミリーを含む。そして、このファミリー内で、二つのタンパク質ホスファターゼPP1およびPP2Aが、細胞内セリン／スレオリン ホスファターゼ活性の90％以上に関与している(Stewartら, Bioorg. Med. Chem., 2007 (15): pp7301-10)。PP1およびPP2Aは、一以上の調節サブ-ユニットと関連した触媒サブ-ユニットにより形成された酵素である。これらの調節部分は、触媒部分を調節し、ホロ酵素の細胞内局在化およびその特異性を決定する。このようにして、触媒サブ-ユニットは、基質の大きなパネル(panel)に作用することができる。
【００１２】
タンパク質ホスファターゼ 1の触媒領域(PP1C)は、三つのイソ型：アルファ、ベータ(デルタとも呼ばれる)およびガンマで存在する。有糸分裂において、これらは有糸分裂紡錘体、正確には、中心体、動原体、微小管および染色体のレベルに見出される(Andreassen PRら, J Cell Biol. 1998, 141(5):pp 1207-15; Trinkle-Mulcahy L and Lamond AI, Curr Opin Cell Biol. 2006, (6): pp 623-31)。
【００１３】
PP1は、その細胞内局在性を制御する調節サブ-ユニットよって、多くの生理学的過程、例えば、タンパク質合成、細胞分裂、グリコーゲン代謝、アポトーシス、カルシウム輸送または筋収縮にも関与している。
【００１４】
多くの論文が、PP1が細胞周期の調節に関与することを示している：
(i)  PP1 blocks entry into S phase, stopping the cells in G1 (Berndt Nら, Curr Biol 1997, v7: pp 375-86)
(ii)  PP1 activity is necessary for entry into M phase (Margolis SSら, EMBO J. 2003, 22(21): pp 5734-45)
(iii)   PP1 is necessary for dephosphorylation of histone H3 and is opposed to the activity of Aurora-B kinase (Goto Hら,  Genes to cells : devoted to molecular & cellular mechanisms." Genes Cells. 2002, 7(1): pp 11-7)
(iv)  PP1 is involved in the cohesion of the centrioles forming the centrosome (Meraldi P and Nigg EA, J Cell Sci. 2001, 114 (Pt 20): pp 3749-57)
【００１５】
(v)   PP1 activity participates at the checkpoint associated with DNA damage (Tang Xら, 2008, Mol Cell Biol., 28(8): pp 2559-66)
(vi)  PP1 is indispensable for inhibition of the spindle checkpoint and disassembly of the kinetochores on leaving the M phase (Emanuele MJら, J Cell Biol. 2008, 181(2): pp241-54)
(vii)  The dephosphorylation of the phosphoproteins by PP1 is indispensable for leaving the M phase (Wu JQら, Nature Cell Biol, 2009, v11(5): pp 644-51)
(viii)  PP1 plays a role in M/G1 transition by contributing to the reassembly of the nuclear envelope on completion of mitosis by dephosphorylating the B lamins (Thompson LJら, 1997, J Biol Chem. 1997, 272(47): pp 29693-7)
【００１６】
上記の要素(i)〜(viii)全て、選択的PP1阻害は、細胞周期調節、特にM期に関して深く影響を及ぼすであろうことを示唆している。そして、細胞周期の進展に影響を及ぼす抗増殖薬の化学療法における使用は、PP1を新規な抗癌分子の開発に対する選択の標的とする。
【００１７】
さらに、PP1は癌の進行に関与する。事実、60の癌細胞株(NCI-60: http://genome-www.stanford.edu/nci60/)の転写物の分析は、PP1の異なるイソ型が、大腸癌、乳癌、肺癌および中枢神経系の癌で過剰発現されていたことを示している(Ross DTら, 2000; Nat Genet., v24(3): pp 227-35)。
【００１８】
さらに、染色体バンド11q13の遺伝子増幅が、口腔咽頭扁平上皮癌(OSCC)でしばしば観察され、この遺伝子増幅は、PP1CA遺伝子(PP1の触媒サブ-ユニットをコードする、アルファ型)に支配されているであろう。他の研究は、PP1CAが、このタイプの癌の腫瘍形成および／または腫瘍進行に直接関与することを示唆している(Hsu LCら, Oncogene, 2006, v25 (40): pp 5517-26)。
PP1の活性を阻害する多くの分子があるが、ほとんど選択的でなく、PP2Aを優先的に標的としない。
【００１９】
例えば、PP1およびPP2Aは、オカダ酸、カリクリン A、トートマイシン、トートマイセチンまたはホストリエシンのような多くの天然毒素によって阻害される(McConnell JL and Wadzinski BE, Mol Pharmacol, 2009, v75: pp 1249-61)。これらの毒素のうち、ホストリエシンは、PP2Aに対して強い選択性(40,000倍)を示すのに対し、(よりPP1-特異的である)トートマイシンおよびトートマイセチンは、PP2Aと比較してPP1に対して弱い選択性(それぞれ、4倍および40倍)を示す。ホスファチジン酸は、PP2AよりPP1に対して100倍の選択性を示すが、阻害剤によるPP1-特異的研究の窓は閉ざされたままである(Stewart SGら, Bioorg. Med. Chem. 2007 (15): pp 7301-10)。
PP1-選択的阻害剤の発見は、PP1阻害作用をPP2A不活化作用から分離することを可能にするであろう。
【００２０】
抗癌剤としてのタンパク質ホスファターゼ阻害剤の可能性は、長い間認識されているけれど、ホストリエシンおよびカンタリジンだけが臨床的に評価されている。ホストリエシン、PP2A-選択的阻害剤は、フェーズI臨床試験が行われ、そこで、その構造的不安定性のために不活性であることが証明された(Le LHら, Invest New Drugs. 2004, v22(2):pp 159-67)。同様に、カンタリジン(非-選択的PP2AおよびPP1阻害剤)での試験もまた、高過ぎる腎毒性のため中止された(Honkanen; "Serine/Threonine Protein Phosphatase Inhibitors with Antitumor Activity", in Inhibitors of Protein Kinases and Protein Phosphatases, Berlin: Springer-Verlag, 2005, v167, ISBN 3-540-21242-6: pp 295-317)。
【００２１】
1982年にJ. Denekampによって提示された、癌を治療するために腫瘍の新血管を破壊する考えは、新しいクラスの抗癌分子、「VDAs」または血管破壊剤(Vascular-disrupting Agents)を生じさせた(Denekamp J, Br J Cancer. 1982, 45(1): pp 136-9; Tozer G ら, Nature Rev. 2005, v5: pp 423-35)。これらの化合物は、新血管の出現および成長を妨げる、抗-血管新生剤とは明らかに異なる。
【００２２】
VDA分子は、腫瘍新血管を構成する内皮細胞に作用し、血管系の崩壊を引き起こし、血流を止め、腫瘍塊の壊死をすぐに引き起こす。
ほとんどの血管破壊剤(VDAs)は、新血管を構成する内皮細胞の微小管を解重合することができる。この解重合は、細胞の球状化(rounding)および血管の真の崩壊を引き起こし、このようにして、血液が流れないようにする。
【００２３】
抗-チューブリンVDAsのうちで、ZD6126 (ANG453; AZD6126)、CA4 (コンブレタスタチン A-4)、CA4P (ジブレスタット, OXi2021, フォスブレタブリン, コンブレタスタチン A-4 二ナトリウムリン酸塩)、BNC105、MN-029 (デニブリン)、 CYT997、AVE8062 (AC7700, オムブラブリン)、NPI-2358 (ジケトピペラジン)、EPC2407 (MX-116407, MX-2407)、TZT-1027 (オーリスタチン PE, ソブリドチン, NSC-654663)、MPC-6827 (アジクサ)、ABT751、トリセノックス (三酸化ヒ素)、OXi4503 (CA1P)、2-メトキシエストラジオール (パンゼム, NSC-659853; 2-ME)が挙げられ得る。
【００２４】
チューブリンに作用しないVDAsのもう一つの範疇もあり、それは、SU6668 (VEGFR, PDGFR, FGFR 阻害剤)、PTK787 (ZK222584; VEGFR1, 2, 3 阻害剤)、ZD6474 (VEGFR2およびEGFR 阻害剤)、ならびにエキスヘリン (ADH-1, アドヘレックス; N-カドヘリン 阻害剤)、ASA404 (DMXAA, AS1404; TNFおよびINFのようなサイトカイン誘導剤)およびFAA (フラボン酢酸, NSC 347512, LM975)を含む。
【００２５】
これらの剤に関連する選択性は、新血管壁を形成する未熟内皮細胞(より脆弱で、より透過性)のより高い感受性に主に起因する(Tozer Gら, Nature Reviews. 2006, v5: pp 423-35)。
有意には、VDAクラスの抗腫瘍剤は、小さい腫瘍は大きな新組織形成より血管新生が少ないので、小さな腫瘍よりもむしろ、活動的に増殖する大きな腫瘍により活性である(Landuyt W., Intl J of Rad Oncol Biol Phys. 2001, v49(2): pp 443-50; Sieman DW and Shi W, Sem in Rad Oncol. 2003, v13(1): pp 53-61)。
【００２６】
それゆえ、VDAsは、病的血管新生の治療に特に適するように思える。血管の過剰および／または異常な形成によって特徴付けられる病的血管新生は、多数の疾患、特に、増殖性疾患、とりわけ、血管の成長に依存する疾患に関与する。過剰および／または異常な血管新生は、癌、乾癬、感染症(病原体自身が血管新生因子を発現し、宿主によるそのような因子の発現を誘導するか、または内皮細胞を形質転換させることができる)、自己免疫疾患(白血球および／またはマスト細胞の活性化を伴った)で観察される。
さらに、脂肪組織において、血管新生は、過剰に脂肪を摂取することによって誘導され得る(血管新生阻害剤の使用は、体重減少を誘導する)。
網膜新生血管、失明の主な原因は、糖尿病性網膜症、加齢黄斑変性症および血管閉塞を含む多数の疾患の合併症である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２７】
本発明の目的の一つは、病的血管新生および／または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍で、それらの起源または大きさに関係なく、一次治療の状況内で、または哺乳類、特にヒトにおいて、通常の治療に耐性の腫瘍の予防または治療を意図した薬物を製造するための、選択的PP1阻害剤、さらにVDA活性および／または微小管解重合活性を有する前記阻害剤を提供することである。
【００２８】
本発明のもう一つの目的は、病的血管新生および／または良性もしくは悪性腫瘍の予防または治療のための、PP1-選択的阻害剤、さらにVDA活性および／または微小管解重合活性を有する前記阻害剤を含む医薬組成物を提供することである。
【００２９】
本発明は、病的血管新生、特に網膜症、良性腫瘍または悪性(癌性)腫瘍を患う患者の予防および／または治療を意図した薬物を製造するための、タンパク質ホスファターゼ 1 および／またはチューブリン重合阻害剤、および／または血管破壊剤(VDA)阻害剤として、以下の一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
【００３０】
本発明は、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患う哺乳類、特にヒトについての予防および治療を意図した薬物を製造するために、血管破壊剤として、次の一般式(I)：
【００３１】
【化１】
0005856086.tif 000002
【００３２】
［式中、
1) 炭素 1とX基の間の結合は、単結合または二重結合であり、窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合または二重結合となり得、それは次のように理解される：
a) Xと前記炭素 1の間の結合が二重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合であり、
b) Xと前記炭素 1の間の結合が単重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は二重結合であり、式Iは、次の式I-Aの芳香族系に相当する：
【化２】
0005856086.tif 000003
【００３３】
2) nは0または1を表し、
3) Xは、
a) n =1のとき: 
O、S、NH、N-(C1-C6)アルキルを表し、
b) n = 0のとき: 
OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、O(C3-C6)シクロアルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、SH、S-(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、特にSCH3、S(C3-C6)シクロアルキル、SO3H、NH-CH2-アリールもしくはヘテロアリール、
OPh、SPh、OCH2Ph、SCH2Ph（これら4つの基のフェニルは、1以上の(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）で置換され得るか、または置換されない）、
【化３】
0005856086.tif 000004
を表し、
【００３４】
4) R1は、
H、ハロゲン、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは1以上のフッ素で任意に置換される）、
CF3、CH2OR'（R'は、Hまたは(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）を表す）、CHO、
CO2R''（R''は、H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
CONRcRd、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc（RcおよびRdは、互いに独立して、H、C1-C6アルキルを表し、NRcRdはアミン官能基で結合したアミノ酸、特にセリンもしくはスレオニン、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRcおよびRdは一緒にC2-C6アルキルを表す）、
【００３５】
NO2、N3、
【化４】
0005856086.tif 000005
CN、C(=N)NH2、SO3H、SO2NH2、SO2NHCH3、NHSO2CH3、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc、SO2-NRaRb、SO2-イミダゾール、
NRaRb（ここで、
RaおよびRbは、互いに独立して、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表すか、または
Raは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表し、Rb = CORf、COORfまたはCONRfRf'（RfおよびRf'は、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表し、RaおよびRbは一緒にC2-C6アルキルを表し、
RaおよびRbは、C5〜C7環、特にピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、テトラゾールを形成し得る）
を表し、
【００３６】
5) R2は、置換または非置換のフェニルであって、
ハロゲン、OH、NHRa、
ORe（Reは、ベンジル、置換、特にC1-C6アルキルによる置換または非置換のメチレントリアゾールを表す）、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素、NH2で任意に置換される）、
NH-CORc基（ここで、Rcは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表す）、
O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
O-COR1（ここで、R1は、O-(C1-C6)アルキルまたはNRiRii（RiおよびRiiはC1-C6アルキルであり得る）、
C2-C4アルキル基（該アルキル基は、1以上のフッ素で任意に置換される）、
置換または非置換のC2-C4アルケニル基、
置換、特にトリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換または非置換のC2-C4アルキニル基、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、ベンゾフラン、チオフェン、ベンゾチオフェン、インドール、シクロヘキシル、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン
から選択される1〜3の置換基で置換または非置換のフェニルを表すか、または
4-(NH2-(CH2-CH2O)p)Ph基（ここで、pは1〜6の整数である）
を表し、
【００３７】
6) R3は、
H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、(C3-C6)シクロアルキル、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、OSO3H、SO3H、O-(C1-C6)アルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、プロパルギル基、CH2CN、(CH2)pOH（pは1〜6で変化する）、CH2OPO3H2、CH2OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、CH2CH2F、CH2CHF2、CH2CF3を表し、
【００３８】
7) R4およびR5は、互いに独立して、
H、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C1-C6アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C3-C6シクロアルキル、ハロゲンを表し、
R4およびR5は一緒に、1以上のフッ素で任意に置換された(C1-C2)ジオキシアルケニルを表す］
の化合物および医薬的に許容な塩の少なくとも一つの使用に関する。
【００３９】
それゆえ、この態様において、一般式(I)および点線は、3つの構造a)、b)およびc)それぞれに対応し得る。
【化５】
0005856086.tif 000006
【００４０】
以下に定義される異なる用語は、明細書の記載を通して同じ意味を有する：
n = 0は、置換基R3が存在せず、その結果、式は、上記のb)およびc)に対応することを意味する。
n = 1は、Hまたは前記で定義された他の置換基のいずれかであり得る置換基R3が存在し、それゆえ、式は上記にa)に対応することを意味する。
【００４１】
ハロゲンの用語は、臭素(Br)、塩素(Cl)、フッ素(F)およびヨウ素(I)を意味する。
アルキルの用語は、アルカンからの水素の喪失により誘導される、直鎖状または分枝鎖状の炭化水素含有基(radical)を意味する。他に特に規定がなければ、それらは1〜10個の炭素原子を含み、全ての可能な位置異性体を含む。
シクロアルキルの用語は、環化したアルカンに対応し、3〜10個の炭素原子を含む。
【００４２】
その酸官能基で結合したアミノ酸は、分子のアミンとアミノ酸の主の酸官能基またはアスパラギン酸もしくはグルタミン酸のような酸性アミノ酸の場合、アミノ酸の側鎖の酸官能基との間でアミド結合(NH-CO)によって結合した天然もしくは非天然のあらゆるアミノ酸を意味する。
【００４３】
置換フェニルの用語は、1〜5個の置換基を含み得るフェニル基を意味し、該置換基は、互いに独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、チオール、シアノ、アジド、ニトロ、モノ-もしくはジ(C1-4)アルキルで任意に置換されたアミノ、(C1-4)アルキル、(C3-6)シクロアルキル、(C2-4)アルケニル、(C2-4)アルキニル、(C1-4)アルキルオキシまたはフェニルであり得る。
【００４４】
置換ヘテロアリールの用語は、O、NまたはSのようなヘテロ原子を少なくとも1つ含み、互いに独立して、前記で定義された置換基を1以上含む、芳香環を意味する。
前記で定義されたR4およびR5基は、前記で定義された置換基、ならびにホスフェート基で任意に置換されたヘテロアリールかフェニルも表し得る
同様に、前記で定義されたR1基は、それが置換もしくは非置換のフェニル、または置換もしくは非置換のヘテロアリールに相当するとき、ホスフェート基でも置換され得る。
【００４５】
「および医薬的に許容な塩」の表現は、
- カルボン酸、またはリン酸(OPO3H)もしくはスルホン酸(SO3H)もしくは硫酸(OSO3H)官能基、またはフェノール官能基（該塩は、例えばリチウム、ナトリウムまたはカリウム塩のようなアルカリ金属塩に導くために、有機もしくは無機塩基を用いて得られる）、
- 置換もしくは非置換のアミン官能基（該塩は、4級アンモニウムを製造するために、無機酸、有機酸またはアルキルハライドの反応によって得られる）
のような塩化可能な官能基を有する本発明の分子の塩を意味する。
【００４６】
医薬的に許容な塩を得ることを可能にする無機酸の例は、それらに限定されないが、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、ギ酸、モノ水素炭酸(monohydrogen carbonic acid)、リン酸、モノ水素リン酸(monohydrogen phosphoric acid)、ジ水素リン酸(dihydrogen phosphoric acid)、過塩素酸、硫酸、モノ水素硫酸(monohydrogen sulphuric acid)、ヨウ化水素酸を含む。
【００４７】
医薬的に許容な塩を得ることを可能にする有機酸の例は、それらに限定されないが、酢酸、乳酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、パルミチン酸(palmic acid)、マレイン酸、グルタミン酸、ヒドロキシマレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、グリコール酸、スベリン酸、フマル酸、マンデル酸、フタル酸、サリチル酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ヒドロキシナフトエ酸を含む。
【００４８】
アルギネート(arginates)およびそれらの等価物のようなアミノ酸の塩もまた、グルクロン酸またはガラクツロン酸およびそれらの等価物のような有機酸の塩と同様に含まれる(例えば、Berge ら, "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19参照)。
【００４９】
医薬的に許容な塩を得ることを可能にするアルキルハライドは、それらに限定されないが、アルキル ブロマイド、アイオダイド、フルオライドまたはクロライドを含み、アルキルハライドにおけるアルキル残基は、1〜20個の炭素原子、または3〜8個の炭素原子のO-シクロアルキル基を有し、飽和もしくは不飽和、直鎖状もしくは分枝状である。
【００５０】
(異常な)病的血管新生の用語は、「異常な」組織、例えば、次のものに限定されないが、腫瘍組織、または健常組織だが「異常な場所で」もしくは「異常な形態」を示す健常組織での血管の増殖、その後の該増殖の持続からなる病的過程を意味する。
【００５１】
「病的血管新生の治療」の表現は、哺乳類、特にヒトが、診断された血管新生／病的血管化を患い、該血管新生／血管化の消失をもたらすために薬物で治療されることを意味する。
【００５２】
「病的血管新生の予防」の表現は、哺乳類、特にヒトが、診断されていない、すなわち、病的血管新生を患っていないがそれに進展しそうであり、本発明の薬物を服用または投与することが、病的血管新生の進展または出現を妨げることを意味する。
【００５３】
病的血管新生の予防は、既に病的血管新生を患っている哺乳類、特にヒトに対して、病的血管新生過程の拡大または延長を制限することを目的とした治療の枠内と想定され得る。
この病的血管新生過程は、網膜の疾患全てを意味する網膜症、特に、糖尿病性、高血圧性または色素性の網膜症、黄斑変性症、ルベオーシス、血管新生緑内障、または未熟児網膜症のような多くの病状で観察される。
【００５４】
病的血管新生は、それらに限定されないが、乾癬もしくは心筋血管新生における表皮の損傷、アテローム性動脈硬化症、冠動脈側副血管新生、脳側副血管新生、動静脈奇形、肢虚血における血管新生、血管形成もしくは動静脈のシャント(shunt)、ディジョージ症候群、血管奇形、遺伝性出血性毛細管拡張症、海綿状血管腫もしくは皮膚血管腫、リンパ管の形成異常、動脈症、アテローム斑の新血管新生、血管腫、血管周囲細胞腫、カポジ型(kaposiform)血管内皮腫、角化血管腫、毛細血管腫、リンパ管腫、聴神経腫、神経線維腫、血管線維腫、化膿性肉芽腫、母斑症、ランデュ‐オースラ‐ウェバー病にも特有である。
【００５５】
「腫瘍」の用語は、良性もしくは悪性型の細胞増殖の統制解除と関連した体内組織の新形成(「新生組織形成」)を意味する。
「良性腫瘍」の表現は、高分化細胞を有し、低い有糸分裂活性を有し、転移を有しない同種組織で形成された、成長が遅く、はっきりと範囲が定められた、それらの起源または大きさを問わない腫瘍を意味する。
【００５６】
「癌性腫瘍」または「悪性腫瘍」の表現は、未熟と称される非分化細胞を有し、顕著な細胞分裂を有し、しばしば転移を有する異種組織で形成された、急速に成長し、侵襲的で、はっきりと範囲が定められない、それらの起源または大きさに関係のない腫瘍を意味する。
「癌性腫瘍」または「悪性腫瘍」の表現は、それらに限定されないが、原発腫瘍、腫瘍転移、固形腫瘍、造血癌、白血病、リンパ腫、上皮性悪性腫瘍、腺癌、肉腫、黒色腫、頭頸部癌、食道の癌、口腔癌および咽頭癌、喉頭癌、膀胱癌、結腸直腸癌、卵巣癌、子宮癌、陰茎癌、外陰癌および膣癌、子宮頸癌、前立腺癌、腎臓癌、皮膚癌、骨癌、関節および関節軟骨の癌、精巣癌、胃癌、消化管癌、泌尿生殖器癌、肺癌、胸腺腫、中皮腫、奇形腫、脳腫瘍、肝臓癌、膵臓癌、神経膠腫、膠芽細胞腫、乏突起星細胞腫、髄膜腫、脳下垂体腺腫、多形性膠芽腫、髄芽細胞腫、上衣細胞腫、未分化星状細胞腫、乏突起膠腫、甲状腺癌、未分化甲状腺癌、血管肉腫、カポジ肉腫、リンパ管肉腫、悪性ガングリオン(ganglion)およびエクストラ-ガングリオン(extra-ganglion)リンパ腫、ホジキンリンパ腫、無痛性リンパ腫非ホジキンリンパ腫、網膜芽細胞腫も意味する。
【００５７】
本発明の分子の利点の一つは、それらが、腫瘍中の血液ネットワークのメカニズムの破壊により、腫瘍の壊死を急速に引き起こす血管破壊作用を有することである。さらに、血流を分断することによって、本発明の分子（ならびに、本発明の分子より前または同時に投与される抗癌物質）は、増大した効率を引き起こす血液循環によって排泄されるよりもむしろ腫瘍中に維持される。
【００５８】
もう一つの観点によれば、本発明は、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤として、前記で定義された一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
「タンパク質ホスファターゼ 1」の表現は、その3つのイソ型の一つのタンパク質ホスファターゼ 1C (PP1C)の触媒領域とミオシン軽鎖ホスファターゼ(MLCP)の触媒サブ-ユニットの両方を意味する。
【００５９】
「タンパク質ホスファターゼ 1」の表現は、それがタンパク質ホスファターゼ 1の触媒部分の3つのイソ型（アルファ、ベータ／デルタおよびガンマ）の一つを含み限りにおいては、タンパク質ホスファターゼ 1ホロ酵素も意味する。
【００６０】
PP1の異なるイソ型が、大腸癌、乳癌、肺癌およびCNSの癌のような、数種類の癌に由来する細胞株に過剰発現されることが知られている(Rossら, Nature Genet. 2000; v24(3): pp 208-9)。さらに、染色体バンド 11q13の遺伝子の増幅が、扁平上皮口腔癌でしばしば観察される。PPP1CA 遺伝子(PP1の触媒サブ-ユニット、アルファ イソ型)が、この11q13の増幅に関係し、次に、それは PP1 アルファの過剰発現と相関する。siRNAsでのPP1 アルファのレベルの減少は、インビトロで、扁平上皮口腔癌の増殖を止めることを可能にする(Hsuら, Oncogene. 2006, v25(40): pp 5517-26)。その結果、PP1-選択的阻害剤は、この種の癌の治療を可能にするであろう。
【００６１】
本発明の分子の第2の利点は、それらが、タンパク質ホスファターゼ 2Aとは対照的に、毒性作用を制限することによって非特異的阻害剤よりも有利な点をそれらに与えるタンパク質ホスファターゼ 1の選択的阻害を有することである。
【００６２】
有利な態様において、本発明は、血管破壊剤、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤および抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトのおける予防および治療を意図した薬物を製造するために、前記で定義された一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
「抗増殖」剤とは、該剤によって影響を及ぼされる細胞周期の相にかかわりなく、細胞の増殖を妨げる薬物を意味する。
(前記に詳述したように)PP1阻害剤の細胞周期の妨害は、抗増殖効果と同等だる。
【００６３】
本発明の分子のもう一つの利点は、それらが、血管破壊作用とタンパク質ホスファターゼ 1の選択的阻害の両方を有することである。
有利な態様において、本発明は、チューブリン重合阻害活性を欠いた、血管破壊剤およびタンパク質ホスファターゼ 1阻害剤および抗増殖剤として、前記で定義された一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。チューブリン重合阻害活性は、哺乳類、特にヒトが末梢神経障害を発症しそうである場合に害を及ぼし得る(Clinical Lung Cancer, Volume 12, Number 1 / January 2011, pages 18-25)。
【００６４】
チューブリン重合阻害活性は、造血の阻害も引き起こし得る。
結果として、この種の化合物の利点の一つは、それらが、造血の阻害を引き起こさずに、末梢神経障害を発症しそうな哺乳類、特にヒトの集団を対象とすることができ、特に、それらが老齢哺乳類、特にヒトを治療できることである。
【００６５】
抗PP1化合物は、特に老齢哺乳類、具体的はヒトにおいて末梢神経障害を引き起こす抗チューブリン剤より低かまたは少なくとも非常に異なった毒性を示す能力がある(Phister JEら, Drugs, 1989, 37[4]pp. 551-65; Repetto L., J Support Oncol., 2003, 1 [4 Suppl 2]: pp18-24)。
【００６６】
有利な態様において、本発明は、血管破壊剤、チューブリン重合阻害剤および抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図した薬物を製造するために、前記で定義された一般式(I)の少なくとも一つの使用に関する。
この態様において、本発明の化合物は、PP1阻害活性をほとんどまたは全く有しない。
【００６７】
本発明の分子のさらなる利点は、それらが、細胞の微小管を解重合する能力を有し、それゆえ、本発明の分子に抗有糸分子分裂作用をもたらし、それゆえ、PP1阻害と独立したメカニズムにより細胞増殖阻害作用を可能にすることである。
【００６８】
有利な態様において、本発明は、タンパク質ホスファターゼ 1およびチューブリン重合阻害剤、血管破壊剤ならびに抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図した薬物を製造するために、前記で定義された一般式(I)の少なくとも一つの使用に関する
【００６９】
本発明の分子のもう一つの利点は、それらが、前記の血管破壊特性およびPP1阻害に加えて、本発明の分子に抗有糸分裂作用を与える、細胞の微小管を解重合する能力を有することである。
【００７０】
本発明の分子は、それらのVDA活性に加えて、抗増殖効果をもたらす、PP1阻害活性および細胞の微小管の解重合活性により、腫瘍の大きさおよびそれらの起源に関係なく、腫瘍に活性である能力を有する。この3つの活性によって引き起こされる腫瘍の壊死は、急速であり、24時間かそれ以下のうちに起こり、特に大きな腫瘍を対象とすることが可能であり、手術不可能な哺乳類、特にヒトを対象とすることも可能である。
【００７１】
前記の4つの活性(抗PP1、抗チューブリンおよび抗増殖ならびにVDA)は、本発明の分子に非常に有益な性質をもたらし、特に耐性の発現なしに、哺乳類、特にヒトへの治療を行うことの可能性をもたらす。
【００７２】
本発明の分子のもう一つの有利な点は、それらが非経口または経口経路による投与後に活性であることである。
本発明の分子のさらにもう一つの有利な点は、それらがインビボで毒性を示さないことであり、最大耐量は、ヌードマウスにおいて200〜400 mg/kgの間と推定され得る。
【００７３】
本発明の化合物は、インビトロで、癌細胞株または原発性皮膚線維芽細胞のそれよりずっと低い半分の増殖阻害濃度(GI50)を有して、臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)ならびにヒト乳腺上皮細胞(HMEC)に非常に活性である(図7および8ならびに表I)。
HMEC細胞で得られた結果は、VDA活性を表している。
(Pasquier E.ら, Mol Cancer Ther; 9(5) 2010. Pp 1408-18: ENMD-1198, a new analogue of 2-methoxyestradiol, displays both antiangiogenic and vascular-disrupting properties)。
【００７４】
本発明の化合物は、内皮系腫瘍細胞を優先的に標的とすることができ、健常組織の「成熟」内皮細胞を、血流によって腫瘍中に運ばれたばかりの「幼若」上皮細胞と区別することができ、すなわち、「幼若」細胞にのみ作用を有し、「成熟」内皮細胞に作用を有さない。
【００７５】
有利な態様において、本発明は、
X、R2、R4およびR5基の少なくとも一つが、ホスフェート基: OPO3H2、アルキル ホスフェート: OPO-(O-(C1-C2)alkyl)2を表し、そして／または
R3基がCH2OPO3H2またはCH2OPO-(O-(C1-C2)alkyl)2基を表し、そして／または
R1およびR2基の少なくとも一つが、ペプチドまたは酸官能基により結合したアミノ酸、特にセリンを表すときの式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００７６】
この場合、本発明の分子はプロドラッグと見なされる、すなわち、プロドラッグの投与後に、遊離のOH官能基またはCH2OHを生じるために、酵素、例えばホスファターゼを用いるかもしくはpHによる加水分解、および／または遊離のNH2官能基を生じるためにアミノペプチダーゼを用いる加水分解により、活性分子が生命体中に放出されるであろう。ここで注目すべきは、腫瘍血管の異常な環境は、プロドラッグの脱リン酸化を可能にする、内皮細胞の表面でのアルカリホスファターゼ、例えばCAP4 (コンブレタスタチン A-4 二ナトリウムリン酸塩)の増大した発現に関連することである。
【００７７】
有利な態様において、本発明は、特に、タンパク質ホスファターゼ 1および／またはチューブリン重合阻害剤、および／または血管破壊剤および／または抗増殖剤として、良性または悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および／または治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、前記の一般式(I)の化合物またはそれらの医薬的に許容な塩の少なくとも一つの使用に関する。
【００７８】
「通常の治療」とは、例えば、限定されないが、手術、放射線治療、化学療法、いわゆる「標的」療法、遺伝子治療、受動または能動免疫物を含む生体物(bioproduits)を用いる療法のような、当業者に周知のあらゆる抗腫瘍治療を意味する。
【００７９】
「化学療法」とは、疾患、特に腫瘍を治療するために化学物質を用いて治療する方法を意味する。「化学療法のための化学物質」とは、それらに限定されないが、次の化合物、例えば、5-フルオロウラシル、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、アルキル化剤、シスプラチン、パクリタキセル、ビンブラスチンまたはビンクリシチンのようなビンカ アルカロイド類、メトトレキセート、カンプトテシン類、エトポシド、ダウノルビシンおよびドキソルビシン等、ならびに当業者に周知のその他の化合物を意味する。
【００８０】
「標的治療」とは、焦点戦略で、いったん不活性化されると癌の退縮または破壊をもたらす、特定の標的または生物シグナル経路に作用する治療的物質または方策を意味する。「標的療法のための物質」とは、それらに限定されないが、化学またはタンパク質／ペプチド起源の物質、例えば、イマチニブ メシレート(グリベック(Gleevec)(登録商標))、ゲフィニチブ(イレッサ(Iressa)(登録商標))、ベバシズマブ(アバスチン(Avastin) (登録商標))、トラスツズマブ(ハーセプチン(Herceptin) (登録商標))、セツキシマブ(エルビタックス(Erbitux) (登録商標))、ヨード131-トシツモマブ(ベキサール(Bexxar) (登録商標))、リツキシマブ(リツキサン(Rituxan) (登録商標))、アレムツズマブ(キャンパス(Campath))、イブリツモマブ チウキセタン(ゼバリン(Zevalin) (登録商標))またはゲムツズマブ オゾガマイシン(マイロターグ(Mylotarg) (登録商標))；アナストロゾール、ロイプロリド、ビカルタミドのような抗ホルモン物質を意味する。
【００８１】
「放射線治療」とは、腫瘍細胞の増殖する能力を遮断することによって腫瘍細胞を破壊するために放射線を用いる、腫瘍の局所領域の治療のための方法を意味する。
「通常の治療に耐性を示す哺乳類、特にヒト」の表現は、開始から通常の治療に耐性を示しているか、治療後に通常の治療に耐性を示すようになる、哺乳類、特にヒトを意味する。
【００８２】
例えば、本発明の化合物は、
− 化学療法剤で一度も治療されたことがない哺乳類、特にヒトにおける化学療法に対する耐性の予防
− 既に化学療法剤に耐性を示す哺乳類、特にヒトにおける化学療法に対する耐性の治療
− 既に化学療法剤に耐性を示す哺乳類、特にヒトにおいて、本発明の生成物と前記哺乳類、特にヒトが耐性を示すものと同一または異なる化学療法剤との組み合わせにより、化学療法に対する耐性の治療
に用いられることができる。
【００８３】
本発明の化合物、特に化合物 6を用いるか、または本発明の化合物と前記哺乳類、特にヒトが耐性を示すものと同一または異なる化学療法剤との組み合わせによる、化学療法剤耐性、特にパクリタキセルに対する化学耐性の調節または治療は、実施例 14の実験計画で評価され得る。
それゆえ、前記の3つの活性の存在は、本発明の分子に、通常の治療に耐性を示す哺乳類、特にヒトを標的とする可能性も与える。
【００８４】
有利な態様において、本発明は、チューブリン重合阻害剤および／または血管破壊剤および抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す良性または悪性腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、一般式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００８５】
有利な態様において、本発明は、チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す良性または悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、一般式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００８６】
有利な態様において、本発明は、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤および／または血管破壊剤ならびに抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す良性または悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、一般式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００８７】
有利な態様において、本発明は、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤、血管破壊剤ならびに抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す良性または悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、一般式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００８８】
有利な態様において、本発明は、タンパク質ホスファターゼ 1および／またはチューブリン重合阻害剤ならびに抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す良性または悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、一般式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００８９】
有利な態様において、本発明は、タンパク質ホスファターゼ 1およびチューブリン重合阻害剤ならびに抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す良性または悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、一般式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００９０】
有利な態様において、本発明は、タンパク質ホスファターゼ 1およびチューブリン重合阻害剤ならびに血管破壊剤ならびに抗増殖剤として、病的血管新生、特に網膜症、または良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患い、通常の治療に耐性を示す良性または悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図するか、または前記薬物での治療後に耐性を出現する能力のない薬物を製造するために、一般式(I)の化合物の少なくとも一つの使用にも関する。
【００９１】
有利な態様において、本発明は、病的血管新生、特に網膜症、またはそれらの大きさまたは起源に関係なく、良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図する薬物を製造するために、一般式(I)の少なくとも一つの化合物の上記の使用の一つに関する。
【００９２】
有利な態様において、前記の分子は、次の：大細胞肺癌、腎細胞癌、子宮の上皮腺癌、前立腺癌、膠芽細胞腫、乳癌、結腸直腸癌および結腸直腸腺癌から選択される、良性もしくは悪性(癌性)腫瘍を患っている哺乳類、特にヒトにおける予防および／または治療を意図する薬物を製造するために用いられる。
【００９３】
有利な態様において、本発明は、一般式(I)のR1基がH、NO2またはピロールから選択される、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
この態様の化合物は、本質的にVDA活性を有し、PP1阻害剤である。
【００９４】
有利な態様において、本発明は、一般式(I)のR1基が、NO2を除いて前記のとおりであり、そして／またはR2が置換されたフェニルに相当する、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
前記置換基は、限定されないが、例えば、OH、OPO3H2、C2-C3アルキル、O-(C1-C3)アルキルから選択される。
【００９５】
この態様の化合物は、VDA活性を有するが、PP1阻害活性はほとんどまたは全く有さず、チューブリン阻害活性を有する。
「ほとんどまたは全くないPP1阻害活性」の表現は、実施例 9に記載の方法による測定で、IC50≧50μMを意味する。
【００９６】
有利な態様において、本発明は、一般式(I)のR2基が特に置換されたフェニルを表す、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
前記置換基は、限定されないが、例えば、トリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルによって置換されたC2-C4アルキニル基から選択される。
【００９７】
この態様の化合物は、本質的にVDA活性を有するが、PP1阻害活性はほとんどまたは全く有さず、チューブリン阻害活性ほほとんどまたは全く有しない。
「ほとんどまたは全くないチューブリン阻害活性」の表現は、実施例 6の試験で測定されたときに、5％未満の阻害パーセントを意味する。
【００９８】
有利な態様において、本発明は、チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、またはタンパク質ホスファターゼ 1およびチューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、一般式(I)のR2基が、ORe（ここで、Reは前記のとおりである）、ハロゲン、置換または非置換のC2-C4アルキン基、特に、トリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換されたC2-C4アルキン基から選択される基によってパラ位に置換されたフェニルを表す、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
この態様の化合物は、本質的にVDA活性を有し、チューブリン阻害活性を有する。
【００９９】
有利な態様において、本発明は、血管破壊剤として、または
タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤および血管破壊剤および抗増殖剤として、または
チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、
一般式(I)のR1がH、NO2またはピロールから選択され、一般式(I)のR2基が高い立体障害の基で置換されたフェニルを表す、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
【０１００】
この態様の化合物は、2つの範疇の化合物：PP1阻害剤であり、そしてまたはチューブリン阻害活性を有さない、本質的にVDA活性を有するもの、およびPP1-阻害活性をほとんどまたは全く有さず、かつチューブリン阻害活性をほとんどまたは全く有さない、本質的にVDA活性を有するものに属する。
【０１０１】
有利な態様において、本発明は、
血管破壊剤として、または
タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤および血管破壊剤および抗増殖剤として、または
チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、または
タンパク質ホスファターゼ 1およびチューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、
一般式(I)のR1基がH、NO2またはピロールから選択され、一般式(I)のR2基が、ORe（Reは前記のとおりである）、ハロゲン、置換または非置換のC2-C4アルキン基、特に、トリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換されたC2-C4アルキン基から選択される基によってパラ位に置換されたフェニルを表す、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
【０１０２】
この態様の化合物は、2つの範疇の化合物：PP1阻害剤であり、そしてチューブリン阻害活性を有するか有さない、本質的にVDA活性を有するもの、および
PP1阻害剤でなく、チューブリン阻害活性を有する、本質的にVDA活性を有するものに属する。
【０１０３】
有利な態様において、本発明は、
血管破壊剤として、または
タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤および血管破壊剤および抗増殖剤として、または
チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、または
タンパク質ホスファターゼ 1およびチューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、
一般式(I)のR3基がHを表す、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
【０１０４】
この態様において、本発明の化合物は、具体的には、病的血管新生、特に網膜症を患う哺乳類、特にヒトにおける予防および治療を意図した薬物を製造するために使用される。
【０１０５】
有利な態様において、本発明は、
血管破壊剤として、または
タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤および血管破壊剤および抗増殖剤として、または
チューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、または
タンパク質ホスファターゼ 1およびチューブリン重合阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、
一般式(I)のR3基がHを除く前記のとおりである、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
【０１０６】
有利な態様において、本発明は、次の一般式(IIa)に相当する、前記の一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化６】
0005856086.tif 000007
【０１０７】
［式中、
1) Xは、
O、S、NH、N-(C1-C6)アルキルを表し、
2) R1は、
H、ハロゲン、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは1以上のフッ素で任意に置換される）、
CF3、CH2OR'（R'は、Hまたは(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、CHO、
CO2R''（R''は、H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
CONRcRd、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc（RcおよびRdは、互いに独立して、H、C1-C6アルキルを表し、NRcRdはアミン官能基で結合したアミノ酸、特にセリンもしくはスレオニン、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRcおよびRdは一緒にC2-C6アルキルを表す）、
【０１０８】
NO2、N3、
【化７】
0005856086.tif 000008
CN、C(=N)NH2、SO3H、SO2NH2、SO2NHCH3、NHSO2CH3、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc、SO2-NRaRb、SO2-イミダゾール、
NRaRb（ここで、
RaおよびRbは、互いに独立して、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表すか、または
Raは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表し、Rb = CORf、COORfまたはCONRfRf'（RfおよびRf'は、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表し、RaおよびRbは一緒にC2-C6アルキルを表し、
RaおよびRbは、C5〜C7環、特にピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、テトラゾールを形成し得る）
を表し、
【０１０９】
5) R2は、置換または非置換のフェニルであって、
ハロゲン、OH、NHRa、
ORe（Reは、ベンジル、置換、特にC1-C6アルキルによる置換または非置換のメチレントリアゾールを表す）、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素、NH2で任意に置換される）、
NH-CORc基（ここで、Rcは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表す）、
O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
O-COR1（ここで、R1は、O-(C1-C6)アルキルまたはNRiRii（RiおよびRiiはC1-C6アルキルであり得る）、
C2-C4アルキル基（該アルキル基は、1以上のフッ素で任意に置換される）、
置換または非置換のC2-C4アルケニル基、
置換、特にトリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換または非置換のC2-C4アルキニル基、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、ベンゾフラン、チオフェン、ベンゾチオフェン、インドール、シクロヘキシル、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン
から選択される1〜3の置換基で置換または非置換のフェニルを表すか、または
4-(NH2-(CH2-CH2O)p)Ph基（ここで、pは1〜6の整数である）
を表し、
【０１１０】
4) R3は、
H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、(C3-C6)シクロアルキル、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、OSO3H、SO3H、O-(C1-C6)アルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、プロパルギル基、CH2CN、(CH2)pOH（pは1〜6で変化する）、CH2OPO3H2、CH2OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、CH2CH2F、CH2CHF2、CH2CF3を表し、
【０１１１】
5) R4およびR5は、互いに独立して、
H、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C1-C6アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C3-C6シクロアルキル、ハロゲンを表し、
R4およびR5は一緒に、1以上のフッ素で任意に置換された(C1-C2)アルケニル ジオキシを表す］。
【０１１２】
有利な態様において、本発明は、次の一般式(IIb)に相当する、前記の一般式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化８】
0005856086.tif 000009
【０１１３】
［式中、
1) Xは、
OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、O(C3-C6)シクロアルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、SH、S-(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、特にSCH3、S(C3-C6)シクロアルキル、SO3H、NH-CH2-アリールもしくはヘテロアリール、
OPh、SPh、OCH2Ph、SCH2Ph（これら4つの基のフェニルは、1以上の(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）で置換され得るか、または置換されない）、
【化９】
0005856086.tif 000010
を表し、
【０１１４】
2) R1は、
H、ハロゲン、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは1以上のフッ素で任意に置換される）、
CF3、CH2OR'（R'は、Hまたは(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）を表す）、CHO、
CO2R''（R''は、H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
CONRcRd、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc（RcおよびRdは、互いに独立して、H、C1-C6アルキルを表し、NRcRdはアミン官能基で結合したアミノ酸、特にセリンもしくはスレオニン、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRcおよびRdは一緒にC2-C6アルキルを表す）、
【０１１５】
NO2、N3、
【化１０】
0005856086.tif 000011
CN、C(=N)NH2、SO3H、SO2NH2、SO2NHCH3、NHSO2CH3、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc、SO2-NRaRb、SO2-イミダゾール、
NRaRb（ここで、
RaおよびRbは、互いに独立して、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表すか、または
Raは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表し、Rb = CORf、COORfまたはCONRfRf'（RfおよびRf'は、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表し、RaおよびRbは一緒にC2-C6アルキルを表し、
RaおよびRbは、C5〜C7環、特にピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、テトラゾールを形成し得る）
を表し、
【０１１６】
5) R2は、置換または非置換のフェニルであって、
ハロゲン、OH、NHRa、
ORe（Reは、ベンジル、置換、特にC1-C6アルキルによる置換または非置換のメチレントリアゾールを表す）、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素、NH2で任意に置換される）、
NH-CORc基（ここで、Rcは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表す）、
O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
O-COR1（ここで、R1は、O-(C1-C6)アルキルまたはNRiRii（RiおよびRiiはC1-C6アルキルであり得る）、
C2-C4アルキル基（該アルキル基は、1以上のフッ素で任意に置換される）、
置換または非置換のC2-C4アルケニル基、
置換、特にトリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換または非置換のC2-C4アルキニル基、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、ベンゾフラン、チオフェン、ベンゾチオフェン、インドール、シクロヘキシル、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン
から選択される1〜3の置換基で置換または非置換のフェニルを表すか、または
4-(NH2-(CH2-CH2O)p)Ph基（ここで、pは1〜6の整数である）
を表し、
【０１１７】
4) R3は、
H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、(C3-C6)シクロアルキル、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、OSO3H、SO3H、O-(C1-C6)アルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、プロパルギル基、CH2CN、(CH2)pOH（pは1〜6で変化する）、CH2OPO3H2、CH2OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、CH2CH2F、CH2CHF2、CH2CF3を表し、
【０１１８】
5) R4およびR5は、互いに独立して、
H、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C1-C6アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C3-C6シクロアルキル、ハロゲンを表し、
R4およびR5は一緒に、1以上のフッ素で任意に置換された(C1-C2)アルケニル ジオキシを表す］。
【０１１９】
有利な態様において、本発明は、次のものから選択される、前記の式(IIa)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１１−１】
0005856086.tif 000012
【０１２０】
【化１１−２】
0005856086.tif 000013
【０１２１】
もう一つの有利な態様において、本発明は、次のものから選択される、前記の式(IIa)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１２−１】
0005856086.tif 000014
【０１２２】
【化１２−２】
0005856086.tif 000015
【０１２３】
【化１２−３】
0005856086.tif 000016
【０１２４】
【化１２−４】
0005856086.tif 000017
【０１２５】
【化１２−５】
0005856086.tif 000018
【０１２６】
化合物12、14-16、18、23-25、28、30、32-36、39-41、44-46、48-50 が、新規化合物である。
【０１２７】
もう一つの有利な態様において、本発明は、次のものから選択される、前記の式(IIb)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１３−１】
0005856086.tif 000019
【０１２８】
【化１３−２】
0005856086.tif 000020
【０１２９】
【化１３−３】
0005856086.tif 000021
【０１３０】
化合物13、17、19-22、26-27、29、31および38が、新規化合物である。
【０１３１】
有利な態様において、本発明は、式(I)の化合物が次のものから選択される、血管破壊剤として、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１４−１】
0005856086.tif 000022
【０１３２】
【化１４−２】
0005856086.tif 000023
【０１３３】
【化１４−３】
0005856086.tif 000024
【０１３４】
【化１４−４】
0005856086.tif 000025
【０１３５】
【化１４−５】
0005856086.tif 000026
【０１３６】
【化１４−６】
0005856086.tif 000027
【０１３７】
この態様の化合物は、本質的にVDA活性を有し、PP1阻害剤でない。
【０１３８】
有利な態様において、本発明は、式(I)の化合物が次のものから選択される、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤、血管破壊剤および抗増殖剤として、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１５】
0005856086.tif 000028
【０１３９】
この態様の化合物は、VDA活性を有し、PP1阻害剤であるが、チューブリン阻害活性をほとんどまたは全く有しない。
【０１４０】
有利な態様において、本発明は、式(I)の化合物が次のものから選択される、タンパク質ホスファターゼ 1阻害剤、血管破壊剤、チューブリン重合阻害剤、および抗増殖剤として、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１６】
0005856086.tif 000029
【０１４１】
有利な態様において、本発明は、式(I)の化合物が次のものから選択される、血管破壊剤および抗増殖剤として、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１７−１】
0005856086.tif 000030
【０１４２】
【化１７−２】
0005856086.tif 000031
【０１４３】
【化１７−３】
0005856086.tif 000032
【０１４４】
この態様の化合物は、VDA活性を有し、PP1阻害活性をほとんどまたは全く有さず、チューブリン阻害活性をほとんどまたは全く有しない。
【０１４５】
有利な態様において、本発明は、式(I)の化合物が次のものから選択される、血管破壊剤、チューブリン重合阻害剤および抗増殖剤として、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する：
【化１８】
0005856086.tif 000033
【０１４６】
この態様の化合物は、VDA活性を有し、PP1阻害活性をほとんどまたは全く有さず、チューブリン阻害活性を有する。
【０１４７】
有利な態様において、本発明は、式(I)の化合物のR4およびR5基が、ハロゲン以外の前記のとおりである、前記の式(I)の少なくとも一つの化合物の使用に関する。
【０１４８】
もう一つの態様において、本発明は、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の少なくとも一つの化合物の使用に関し、式(I)または(IIa)または(IIb)の該化合物は、インビボで、腫瘍の中心で壊死を誘発し、それは、前記化合物の活性用量の経口または非経口経路による投与後、24時間かそれ以下で観察され得る、そして、そのような壊死は、ヘマトキシリン-エオシンで染色されたいくつかの組織学的腫瘍部分（異なる深さレベルから）で観察され、測定される。(Salmonら, Eur. J. Cancer, 2007, v43 (10): pp1622-29)。
【０１４９】
本発明の化合物は、接近するのが困難で、通常に用いられる物質によって普通は破壊されない、特に、有糸核分裂細胞はほとんど腫瘍の外周に見出され、腫瘍の中心には有糸核分裂細胞はほとんどないので、特に抗有糸分裂物質により破壊されない腫瘍内部で窒息を引き起こす。
【０１５０】
本発明の化合物は、壊死部分の周りの組織に炎症も引き起こし、それゆえ、本発明の化合物は、窒息によるばかりでなく、非特異的炎症により腫瘍塊の破壊を引き起こし得る。
【０１５１】
もう一つの有利な態様において、本発明は、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の少なくとも一つの化合物の使用に関し、式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は抗炎症作用を有さない。
本発明の化合物の抗炎症作用の欠如は、実施例 15の実験計画によって評価され得る。
結果として、本発明の物質は、特許出願WO 98/51307に記載の化合物とは違って、抗炎症作用を有さない。
【０１５２】
もう一つの有利な態様において、本発明は、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の少なくとも一つの化合物の使用に関し、式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は、約1 mg/kg〜約200 mg/kgの間に含まれる用量、優先的には約10 mg/kg〜約100 mg/kg、より優先的には20 mg/kg〜50 mg/kg、特に40 mg/kgの用量で経口経路により投与される。
【０１５３】
もう一つの有利な態様において、本発明は、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の少なくとも一つの化合物の使用に関し、式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は、約3 mg/m2〜約600 mg/m2、好ましくは約30 mg/m2〜約300 mg/m2、より好ましくは60 mg/m2〜150 mg/m2、特に120 mg/m2の1以上に分けられた用量で、経口経路によって投与される。
【０１５４】
有利な態様において、治療のために用いられる、前記の式(I)、(II)または(III)の化合物の用量は、約1 mg/kg、約2 mg/kg、約5 mg/kg、約7 mg/kg、約10 mg/kg、約20 mg/kgであり得るか、またはそれは、約30 mg/kg、約40 mg/kg、約50 mg/kg、約60 mg/kg、約80 mg/kg、もしくは約100 mg/kg、約120 mg/kg、約140 mg/kg、約150 mg/kg、約160 mg/kg、約180 mg/kg、約200 mg/kgでもあり得る。
【０１５５】
有利な態様において、治療のために用いられる、前記の式(I)、(II)または(III)の化合物は、約3 mg/m2、約6 mg/m2、約15 mg/m2、約21 mg/m2、約30 mg/m2、約60 mg/m2の1以上に分けられた用量で投与され得るか、またはそれは、約90 mg/m2、約120 mg/m2、約150 mg/m2、約180 mg/m2、約240 mg/m2、もしくは約300 mg/m2、約360 mg/m2、約420 mg/m2、約450 mg/m2、約480 mg/m2、約540 mg/m2、約 600 mg/m2でもあり得る。
【０１５６】
有利な態様において、治療のために用いられる、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物の用量は、哺乳類、特にヒトによる有効用量および／または最大耐量に応じて、約200 mg/kg〜約400 mg/kgの間に含まれ、特に約200〜約300 mg/kg、好ましくは約200 mg/kg、約210 mg/kg、約220 mg/kg、約230 mg/kg、約240 mg/kg、約250 mg/kg、約260 mg/kg、約270 mg/kg、約280 mg/kg、約290 mg/kgまたは約300 mg/kgであり得る。
【０１５７】
有利な態様において、治療のために用いられる、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物は、哺乳類、特にヒトによる有効用量および／または最大耐量に応じて、約600 mg/m2〜約1200 mg/m2の間、特に約600〜約900 mg/m2、好ましくは約600 mg/m2、約630 mg/m2、約660 mg/m2、約690 mg/m2、約720 mg/m2、約750 mg/m2、約780 mg/m2、約810 mg/m2、約840 mg/m2、約870 mg/m2または約900 mg/m2に含まれる1以上に分けられた用量で投与され得る。
【０１５８】
さらに、本発明の化合物、特に化合物 6のインビボでの活性を表す実施例に示されるように、または本発明の化合物のインビボ、特に化合物 6のインビボでの主要毒性の欠如の証拠を示す図14によって、本発明の化合物、特に化合物 6は、本発明の化合物、特に化合物 6の事実上の生物学的利用能を裏付ける効果を示している（図15）。
【０１５９】
有利な態様において、本発明は、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の少なくとも一つの化合物の使用に関し、式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は、約0.1 mg/kg/d〜約100 mg/kg/dの間、特に50 mg/kg/d、特に10 mg/kg/dに含まれる用量で、静注経路で投与される。
【０１６０】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は、限定されないが、次のものから選択される少なくとも一つの抗腫瘍薬と組み合わされる：
アブラキサン、アバレリクス、アルデスロウキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アナストロゾール、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザシチジン、ベバシズマブ、ベキサロテン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、静注ブサルファン、経口ブサルファン、カルステロン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダルテパリン ナトリウム、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デニロウキン、デニロウキン ジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロモスタノロン プロピオネート、エクリズマブ、エピルビシン、エルロチニブ、エストラムスチン、エトポシド ホスフェート、エトポシド、エキセメスタン、フェンタニル シトレート、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、5-フルオウラシル、フルベストラント、ゲフィチニブ、
【０１６１】
ゲムシタビン、ゲムツズマブ オゾガマイシン、ゴセレリン アセテート、ヒストレリン アセテート、イブリツモマブ チウキセタン、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ メシレート、インターフェロン アルファ 2a、イリノテカン、ラパチニブ ジトシレート、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイプロリド アセテート、レバミソール、ロムスチン、メクロレタミン、メゲストロール アセテート、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、メトキサレン、マイトマイシンC、ミトタン、ミトキサントロン、ナンドロロン フェンプロピオネート、ネララビン、ノフェツモマブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、パニツムマブ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド ジナトリウム、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、サニチニブ、サニチニブ マレエート、タモキシフェン、タキソール、タキソテレ、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、タイケルブ、ウラシル マスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ボリノスタットおよびゾレドロネート。
【０１６２】
ほとんどの場合、良性または悪性腫瘍の治療に対して、本発明の化合物と通常の治療との間の付加的または相乗効果を得るために、本発明の化合物を(a) 前記の通常の治療と組み合わせることが有利となり得る。
【０１６３】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は、効果的な量のイオン化放射線と組み合され得る。
本発明の化合物および標準的抗腫瘍薬または効果的な量のイオン化放射線は、同時に、および／または非同時で、すなわち連続して投与され得る。
【０１６４】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は、手術と結び付けられ得る。
その結果、本発明の化合物は、通常の治療の前、間または後に投与され得る。
【０１６５】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の該化合物は、限定されないが、レーザー療法またはアバスチンのような網膜症に対する少なくとも一つの治療と組み合わされる。
網膜症におけるアバスチンの活性は、特にSpaide R.F. and Fisher YL, Retina. 2006, v26(3): pp 275-8に記載されている。
【０１６６】
もう一つの観点によれば、本発明は、医薬的に許容なビヒクル(vehicle)と組み合わせて、活性成分として、次の：
− X = O、n = 1、R3 = H、および炭素 1とX基の間の結合が二重結合であり、
R1 = NH2、R2 = 置換または非置換のフェニルもしくは4-OH-フェニル、R4 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、およびR5 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルのとき、ならびに
【０１６７】
− X = OまたはS、n = 1、R3 = H、および炭素 1とX基の間の結合が二重結合であり、R2が上記と同じ意味を有し、R4とR5の一つがハロゲンを表すとき
の化合物を除く、前記の式(I)の化合物を含む医薬組成物に関する。
【０１６８】
この態様において、一般式(I)と点線は、次の式IV：
【化１９】
0005856086.tif 000034
【０１６９】
（式中、R2 = 置換または非置換のフェニルもしくは4-OH-フェニル、R4 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、およびR5 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル）
の化合物を除いた前記の3つの構造に対応する。
【０１７０】
本発明の医薬組成物という文脈の中で用いることができる医薬的に許容なビヒクルは、当業者によく知られている。
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、
− n = 0、炭素 1とX基の間の結合が単結合であり、Xが、SO3H、OCH3、
【化２０】
0005856086.tif 000035
から選択されるか、または
− n = 1、炭素 1とX基の間の結合が二重結合であり、X = OまたはS、およびR2が、OH、OCH3、O-ベンジル、Br、特にトリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換または非置換のC2-C4アルキニル基から選択される基により4位で置換されたフェニルを表す
式Iの化合物を含む。
【０１７１】
有利な態様において、本発明は、活性成分として、R1 = Hの前記の式Iの化合物を含む医薬組成物に関する。
有利な態様において、本発明は、活性成分として、
− X = OまたはS、n = 1、R3 = Hのとき、および炭素 1とX基の間の結合が二重結合であり、R2、R4およびR5が前記と同じ意味を有するときのR1 = Hの化合物を除く、式Iの化合物を含む医薬組成物に関する。
【０１７２】
有利な態様において、前記の医薬組成物は、医薬的に許容なビヒクル、希釈剤または賦形剤と組み合わせて、活性成分として、前記の式(IIa)の化合物を含む。
この態様において、一般式(IIaおよびIIb)と点線は、前記の2つの構造に対応し、前記と同じ化合物が式(IIaおよびIIb)から除かれる。
【０１７３】
有利な態様において、前記の医薬組成物は、医薬的に許容なビヒクル、希釈剤または賦形剤と組み合わせて、活性成分として、前記の式IIaの化合物を含む。
この態様において、前記で除かれたのと同じ化合物がまた、式(IIa)から除かれる。
【０１７４】
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の式IIbの化合物を含む。
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物1、2、4-10から選択される式IIaの化合物を含む。
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物12、14-16、18、23-25、28、30、32-36、39-41、44-46および48-50から選択される式IIaの化合物を含む。
【０１７５】
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物13、17、19-22、26-27、29、31および38から選択される式IIbの化合物を含む。
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物1、2、7、8、9、10、13-17、23-24、26-27、29、31、33、37-38、40-41、45および48-50から選択される化合物を含む。
【０１７６】
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物6、12、19、20、22、28、30、32、35、39、44および46から選択される化合物を含む。
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物18、21、25、29、34および36から選択される化合物を含む。
【０１７７】
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物1、2、7、8、9、10、13、15、17、23-24、26-27、29、31、33、37-38、41、45および48-49から選択される化合物を含む。
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、前記の化合物14、16、24、26-40および50から選択される化合物を含む。
【０１７８】
有利な態様において、前記の医薬組成物は、活性成分として、X、R2、R4およびR5基の少なくとも一つが、ホスフェート基: OPO3H2、アルキルホスフェート: OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2を表し、そして／または
R3基が、CH2OPO3H2またはCH2OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2基を表し、そして／または
R1およびR2基の少なくとも一つが、その酸官能基で結合したアミノ酸、特にセリンを表す
前記のプロドラッグを含む。
【０１７９】
有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物を含む医薬組成物は、約1 mg/kg〜約200 mg/kg、好ましくは約10 mg/kg〜約100 mg/kg、より好ましくは20 mg/kg〜50 mg/kg、特に40 mg/kgに含まれる用量で、経口経路により投与され得る。
【０１８０】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物を含む医薬組成物は、約3 mg/m2〜約600 mg/m2、好ましくは約30 mg/m2〜約300 mg/m2、より好ましくは60 mg/m2〜150 mg/m2、特に120 mg/m2の1以上の用量に分けられ、経口経路により投与され得る。
【０１８１】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物を含む医薬組成物は、約1 mg/kg、約2 mg/kg、約5 mg/kg、約7 mg/kg、約10 mg/kg、約20 mg/kgに含まれる用量で、経口経路により投与され得るか、または用量は、約30 mg/kg、約40 mg/kg、約50 mg/kg、約60 mg/kg、約80 mg/kg、あるいは約100 mg/kg、約120 mg/kg、約140 mg/kg、約150 mg/kg、約160 mg/kg、約180 mg/kg、約200 mg/kgにもなり得る。
【０１８２】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物を含む医薬組成物は、約3 mg/m2、約6 mg/m2、約15 mg/m2、約21 mg/m2、約30 mg/m2、約60 mg/m2の1以上の用量に分けられ、経口経路により投与され得るか、または用量は、約90 mg/m2、約120 mg/m2、約150 mg/m2、約180 mg/m2、約240 mg/m2、あるいは約300 mg/m2、約360 mg/m2、約420 mg/m2、約450 mg/m2、約480 mg/m2、約540 mg/m2、約600 mg/m2にもなり得る。
【０１８３】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物を含む医薬組成物は、哺乳類、特にヒトによる最大耐量に応じて、約600 mg/m2〜約1200 mg/m2、特に約600〜約900 mg/m2、好ましくは約600 mg/m2、約630 mg/m2、約660 mg/m2、約690 mg/m2、約720 mg/m2、約750 mg/m2、約780 mg/m2、約810 mg/m2、約840 mg/m2、約870 mg/m2または約900 mg/m2の1以上の用量に分けられ、経口経路により投与され得る。
【０１８４】
もう一つの有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物を含む医薬組成物は、哺乳類、特にヒトによる最大耐量に応じて、約3 mg/m2〜約600 mg/m2、好ましくは約30 mg/m2〜約300 mg/m2、より好ましくは60 mg/m2〜150 mg/m2、特に120 mg/m2の1以上の用量に分けられ、経口経路により投与され得る。
【０１８５】
ベータ シクロデキストリン(β-CD)のような医薬的に許容なビヒクルの使用は、本発明の化合物の溶解性を増加させることができ、結果として、本発明の化合物を経口経路により投与することを可能にする。
【０１８６】
ベータ シクロデキストリンは、次の構造：
【化２１】
0005856086.tif 000036
を有するが、アルファ シクロデキストリンまたはガンマ シクロデキストリンも、生成物の水溶解度を増す手段として用いられ得る。
【０１８７】
溶解性を改善しなくても、その他の医薬的に許容なビヒクル、希釈剤または賦形剤が用いられ得ることを十分理解されたい。本発明の生成物と一緒に用いられ得る医薬的なビヒクルのもう一つの例は、アルブミンまたは別のタンパク質および／または発明の生成物と一緒に本来の状態またはナノ粒子の形態で装填される別の医薬的に許容な非タンパク質の高分子である。
【０１８８】
有利な態様において、前記の式(I)、(IIa)または(IIb)の化合物を含む医薬組成物は、例えば、限定されないが、約0.1 mg/kg/d〜約100 mg/kg/d、特に0.1 mg/kg〜50 mg/kg/d、特に10 mg/kg/dに含まれる用量で、非経口、静注経路により投与され得る。
【０１８９】
もう一つの観点によれば、本発明は、次の一般式(I)：
【化２２】
0005856086.tif 000037
【０１９０】
［式中、
1) 炭素 1とX基の間の結合は、単結合または二重結合であり、窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合または二重結合となり得、それは次のように理解される：
a. Xと前記炭素 1の間の結合が二重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合であり、
b. Xと前記炭素 1の間の結合が単重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は二重結合であり、式Iは、次の式I-Aの芳香族系に相当する：
【化２３】
0005856086.tif 000038
【０１９１】
2) nは0または1を表し、
3) Xは、
a) n =1のとき: 
O、S、NH、N-(C1-C6)アルキルを表し、
b) n = 0のとき: 
OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、O(C3-C6)シクロアルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、SH、S-(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、特にSCH3、S(C3-C6)シクロアルキル、SO3H、NH-CH2-アリールもしくはヘテロアリール、
OPh、SPh、OCH2Ph、SCH2Ph（これら4つの基のフェニルは、1以上の(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）で置換され得るか、または置換されない）、
【化２４】
0005856086.tif 000039
を表し、
【０１９２】
4) R1は、
H、ハロゲン、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは1以上のフッ素で任意に置換される）、
CF3、CH2OR'（R'は、Hまたは(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）を表す）、CHO、
CO2R''（R''は、H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
CONRcRd、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc（RcおよびRdは、互いに独立して、H、C1-C6アルキルを表し、NRcRdはアミン官能基で結合したアミノ酸、特にセリンもしくはスレオニン、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRcおよびRdは一緒にC2-C6アルキルを表す）、
【０１９３】
NO2、N3、
【化２５】
0005856086.tif 000040
CN、C(=N)NH2、SO3H、SO2NH2、SO2NHCH3、NHSO2CH3、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc、SO2-NRaRb、SO2-イミダゾール、
NRaRb（ここで、
RaおよびRbは、互いに独立して、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表すか、または
Raは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルを表し、Rb = CORf、COORfまたはCONRfRf'（RfおよびRf'は、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表し、RaおよびRbは一緒にC2-C6アルキルを表し、
RaおよびRbは、C5〜C7環、特にピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、テトラゾールを形成し得る）
を表し、
【０１９４】
5) R2は、置換または非置換のフェニルであって、
ハロゲン、OH、NHRa、
ORe（Reは、ベンジル、置換、特にC1-C6アルキルによる置換または非置換のメチレントリアゾールを表す）、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素、NH2で任意に置換される）、
NH-CORc基（ここで、Rcは、H、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキルまたはアミノ酸鎖(セリンに対するCH(CH2OH)NH2のような)を表す）、
O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
O-COR1（ここで、R1は、O-(C1-C6)アルキルまたはNRiRii（RiおよびRiiはC1-C6アルキルであり得る）、
C2-C4アルキル基（該アルキル基は、1以上のフッ素で任意に置換される）、
置換または非置換のC2-C4アルケニル基、
置換、特にトリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換または非置換のC2-C4アルキニル基、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、ベンゾフラン、チオフェン、ベンゾチオフェン、インドール、シクロヘキシル、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン
から選択される1〜3の置換基で置換または非置換のフェニルを表すか、または
4-(NH2-(CH2-CH2O)p)Ph基（ここで、pは1〜6の整数である）
を表し、
【０１９５】
6) R3は、
H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、(C3-C6)シクロアルキル、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、OSO3H、SO3H、O-(C1-C6)アルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、プロパルギル基、CH2CN、(CH2)pOH（pは1〜6で変化する）、CH2OPO3H2、CH2OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、CH2CH2F、CH2CHF2、CH2CF3を表し、
【０１９６】
7) R4およびR5は、互いに独立して、
H、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C1-C6アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C3-C6シクロアルキル、ハロゲンを表し、
R4およびR5は一緒に、1以上のフッ素で任意に置換された(C1-C2)アルケニル ジオキシを表す］
の前記の化合物に関し、
【０１９７】
次の：
X = O、R3 = Hで炭素 1とX基の間の結合が二重結合であるとき、
a. R1 = NH2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
b. R1 = NH2、R2 = フェニル、R4 = HおよびR5 = H、
c. R1 = NO2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
d. R1 = NO2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = HおよびR5 = H、
e. R1 = NH2、R2 = 4-メトキシ-フェニル、R4 = HおよびR5 = H、
f. R1 = NHCHO、R2 = フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
g. R1 = NH2、R2 = フェニル、R4 = OCH3およびR5 = H、
h. R1 = NH2、R2 = 置換または非置換のフェニルもしくは4-OH-フェニル、R4 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、およびR5 = H、OH、O-(C1-C6)アルキル、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル
i. R4およびR5の一つがハロゲンを表す化合物
の化合物を除く。
【０１９８】
この態様に記載される化合物は新規である。
有利な態様において、本発明は、n = 0、炭素 1とX基の間の結合が単結合であり、Xが、SO3H、CH3、
【化２６】
0005856086.tif 000041
から選択され、R1がH、NO2またはBrから選択されるか、またはn = 1、炭素 1とX基の間の結合が二重結合であり、X = OまたはS、R2が、OH、OCH3、O-ベンジル、Br、特にトリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換または非置換のC2-C4アルキニル基から選択される基により4位で置換されたフェニルを表す、前記の一般式(I)の化合物に関する。
【０１９９】
有利な態様において、本発明は、R1 = Hである前記の一般式(I)の化合物に関する。
有利な態様において、本発明は、次の一般式(I)：
【化２７】
0005856086.tif 000042
【０２００】
［式中、
1) 炭素 1とX基の間の結合は、単結合または二重結合であり、窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合または二重結合となり得、それは次のように理解される：
a. Xと前記炭素 1の間の結合が二重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は単結合であり、
b. Xと前記炭素 1の間の結合が単重結合であるとき、そのときは窒素 2と炭素 1の間の結合は二重結合であり、式Iは、次の式I-Aの芳香族系に相当する：
【化２８】
0005856086.tif 000043
【０２０１】
2) nは0または1を表し、
3) Xは、
a) n =1のとき: 
O、S、NH、N-(C1-C6)アルキルを表し、
b) n = 0のとき: 
OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、O(C3-C6)シクロアルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、SH、S-(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1個以上のフッ素で任意に置換される）、特にSCH3、S(C3-C6)シクロアルキル、SO3H、NH-CH2-アリールもしくはヘテロアリール、
OPh、SPh、OCH2Ph、SCH2Ph（これら4つの基のフェニルは、1以上の(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）で置換され得るか、または置換されない）、
【化２９】
0005856086.tif 000044
を表し、
【０２０２】
4) R1は、
ハロゲン、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは1以上のフッ素で任意に置換される）、
CF3、CH2OR'（R'は、Hまたは(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）を表す）、CHO、
CO2R''（R''は、H、アミノ酸、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
CONRcRd（RcおよびRdは、互いに独立して、H、C1-C6アルキル、アミノ酸、C3-C6シクロアルキルを表すか、またはRcおよびRdは一緒にC2-C6アルキルを表す）、
【０２０３】
NO2、N3、
【化３０】
0005856086.tif 000045
CN、C(=N)NH2、SO3H、SO2NH2、SO2NHCH3、NHSO2CH3、CH2SO2NRcRd、CH2NHSO2Rc、SO2-NRaRb、SO2-イミダゾール、
NRaRb（ここで、
RaおよびRbは、互いに独立して、H、CHO、C1-C6アルキル、C3-C6シクロアルキル、酸官能基で結合したアミノ酸、特にセリンを表し、
RaおよびRbは一緒にC2-C6アルキルを表し、
RaおよびRbは、C5〜C7環、特にピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、テトラゾールを形成し得る）
を表し、
【０２０４】
5) R2は、置換または非置換のフェニルであって、
ハロゲン、OH、NHRa、
ORe（Reは、ベンジル、置換または非置換のメチレントリアゾールを表す）、
OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素、NH2で任意に置換される）、
NH-Rc基（ここで、Rcは、酸官能基で結合したアミノ酸、特にセリンを表す）、
O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、
C2-C4アルキル基（該アルキル基は、1以上のフッ素で任意に置換される）、
置換または非置換のC2-C4アルケニル基、
置換、特にトリメチルシリル、tert-ブチル、ヒドロキシ-2-プロピルまたはイソプロピルで置換または非置換のC2-C4アルキニル基、
置換または非置換のヘテロアリール、特にピリジン、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、ピロール、ベンゾフラン、チオフェン、ベンゾチオフェン、インドール、シクロヘキシル、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペリジン
から選択される1〜3の置換基で置換または非置換のフェニルを表すか、または
4-(NH2-(CH2-CH2O)p)Ph基（ここで、pは1〜6の整数である）
を表し、
【０２０５】
6) R3は、
H、(C1-C6)アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、(C3-C6)シクロアルキル、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、O-(C1-C6)アルキル、NH2、NH-(C1-C6)アルキル、N-[(C1-C6)アルキル]2、NH-(C3-C6)シクロアルキル、N-[(C3-C6)シクロアルキル]2、プロパルギル基、CH2CN、(CH2)pOH（pは1〜6で変化する）、CH2OPO3H2、CH2OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2、CH2CH2F、CH2CHF2、CH2CF3を表し、
【０２０６】
7) R4およびR5は、互いに独立して、
H、OH、OPO3H2、OPO-(O-(C1-C2)アルキル)2（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、O-(C1-C6)アルキル、特にOCH3（前記アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C1-C6アルキル（該アルキルは、1以上のフッ素で任意に置換される）、C3-C6シクロアルキル、ハロゲンを表し、
R4およびR5は一緒に、1以上のフッ素で任意に置換された(C1-C2)アルケニル ジオキシを表す］
の前記の化合物に関する。
【０２０７】
もう一つの態様において、一般式(IIa)の前記の化合物は、次の：
【化３１−１】
0005856086.tif 000046
【０２０８】
【化３１−２】
0005856086.tif 000047
から選択される。
【０２０９】
もう一つの態様において、本発明は、良性または悪性(癌性)腫瘍を患う哺乳類、特にヒトの治療において、同時、独立または連続使用のための組合せ医薬品として、前記の式(I)の第1の医薬品と限定されないが、次の抗腫瘍薬：
アブラキサン、アバレリクス、アルデスロウキン、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アルトレタミン、アナストロゾール、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、アザシチジン、ベバシズマブ、ベキサロテン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、静注ブサルファン、、経口ブサルファン、カルステロン、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、セツキシマブ、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロファラビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダルテパリン ナトリウム、ダサチニブ、ダウノルビシン、デシタビン、デニロウキン、デニロウキン ジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、ドロモスタノロン プロピオネート、エクリズマブ、エピルビシン、エルロチニブ、エストラムスチン、エトポシド ホスフェート、エトポシド、エキセメスタン、フェンタニル シトレート、フィルグラスチム、フロクスウリジン、フルダラビン、5-フルオウラシル、フルベストラント、ゲフィチニブ、
【０２１０】
ゲムシタビン、ゲムツズマブ オゾガマイシン、ゴセレリン アセテート、ヒストレリン アセテート、イブリツモマブ チウキセタン、イダルビシン、イフォスファミド、イマチニブ メシレート、インターフェロン アルファ 2a、イリノテカン、ラパチニブ ジトシレート、レナリドミド、レトロゾール、ロイコボリン、ロイプロリド アセテート、レバミソール、ロムスチン、メクロレタミン、メゲストロール アセテート、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、メトキサレン、マイトマイシンC、ミトタン、ミトキサントロン、ナンドロロン フェンプロピオネート、ネララビン、ノフェツモマブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、パニツムマブ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド ジナトリウム、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、プロカルバジン、キナクリン、ラスブリカーゼ、リツキシマブ、ソラフェニブ、ストレプトゾシン、サニチニブ、サニチニブ マレエート、タモキシフェン、タキソール、タキソテレ、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、サリドマイド、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、トラスツズマブ、トレチノイン、ウラシル マスタード、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ボリノスタットおよびゾレドロネートの少なくとも一つを含む第2の医薬品とを含む新規な製品に関する。
【０２１１】
有利な態様において、本発明は、良性または悪性(癌性)腫瘍を患う哺乳類、特にヒトの治療において、同時、独立または連続使用のための組合せ医薬品として、前記の式(I)の第1の医薬品と前記の抗腫瘍薬の少なくとも一つを含む第2の医薬品とを含む新規な製品に関する。
【０２１２】
もう一つの観点によれば、本発明は、次の段階：
X = Oに対して：
a) 2,3-ジアリールアクリル酸中間体を形成するために、アリール酢酸とアリールカルボキシアルデヒドとの縮合、
b) 混合酸無水物により、酸性基をNaN3を用いて対応するアジドに変換、
c) 3-アリールイソキノリン-1(2H)-オンを製造するために、熱経路によるアジド体の環化、
d) 以下に詳述の実験計画により、官能基の配置、
【０２１３】
X = Sに対して：
a) 3-アリールイソキノリン-1(2H)-オンから出発し、イソキノリン-1(2H)-チオンの合成がローソン試薬を用いて行われる、
b) 3-アリール-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オンから出発し、イソキノリン-1(2H)-チオン合成法は、次の主段階：
i. 1-クロロイソキノリン中間体を形成するために、オキシ塩化リンまたはヴィルスマイヤー試薬を用いての塩素化、
ii. チオウレアを用いて、クロロ基をチオン基へ変換
を含む
を含む、前記の式IIaの化合物の製造法に関する。
【０２１４】
もう一つの観点によれば、本発明は、次の段階：
○3-アリールイソキノリン-1(2H)-オンから出発：イソキノリンIIbの合成は、 K2CO3のような塩基の存在下、目的のハロアルキル体を用いて行われる、
○その合成が前記に述べられた1-クロロ-4-ニトロイソキノリンから出発：イソキノリンIIbの合成は、塩基性媒体中、目的の求核試薬を用いて行われる
を含む、前記の式IIbの化合物の製造法に関する。
【図面の簡単な説明】
【０２１５】
図1A〜1Fは、中間期のヒーラ細胞の微小管およびアクチン細胞骨格に化合物6によって誘導された表現型を示す、間接免疫蛍光画像を表す。この化合物は微小管の解重合およびアクチン細胞骨格の再組織化（細胞皮質のレベルでアクチンの強化(reinforcement)および張線維の減少）を誘導する。
図1A〜1Cは、抗α-チューブリン抗体でラベルされた微小管を表し、図1D〜1Fは、ファロイジン共役(conjugate)Alexa Fluorine(登録商標) 568でラベルされたF-アクチンを表す。
図1Aおよび1Dは、DMSOと一緒にインキュベートされたコントロール細胞を表す。
図1Bおよび1Eは、1 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図1Cおよび1Fは、10 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図2A〜2Iは、有糸分裂でのヒーラ細胞の微小管およびアクチン細胞骨格に化合物6によって誘導された表現型を示す、間接免疫蛍光画像を表す。この化合物は、紡錘体微小管の解重合および皮質のレベルでアクチン ブレブ形成(blebbing)を誘導する。
図2A〜2Cは、抗α-チューブリン抗体でラベルされた微小管を表す。図2D〜2Fは、ファロイジン共役Alexa Fluorine(登録商標) 568でラベルされたF-アクチンを表す。図2G〜2Iは、チューブリンとアクチン、さらに有糸分裂DNA（黒矢印がHoechst 33258でラベルされたDNAに対応する）と共に示す2画像の重ね合わせを表す。
図2A、2Dおよび2Gは、DMSOと一緒にインキュベートされたコントロール細胞を表す。
図2B、2Eおよび2Hは、1 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図2C、2Fおよび2Iは、10 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図3A〜3Fは、中間期の原発性ヒト線維芽細胞の微小管およびアクチン細胞骨格に化合物6によって誘導された表現型を示す、間接免疫蛍光画像を表す。この化合物は微小管の解重合およびアクチン細胞骨格の再組織化（細胞皮質のレベルでアクチンのわずかな強化）を誘導する。
図3A〜3Cは、抗α-チューブリン抗体でラベルされた微小管を表し、図3D〜3Fは、ファロイジン共役Alexa Fluorine(登録商標) 568でラベルされたF-アクチンを表す。
図3Aおよび3Dは、DMSOと一緒にインキュベートされたコントロール細胞を表す。
図3Bおよび3Eは、5 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図3Cおよび3Fは、10 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図4A〜4Iは、有糸分裂での原発性ヒト線維芽細胞の微小管およびアクチン細胞骨格に化合物6によって誘導された表現型を示す、間接免疫蛍光画像を表す。この化合物は、紡錘体微小管の解重合および異所性のしわ(furrows)の形成を誘導する。
図4A〜4Cは、抗α-チューブリン抗体でラベルされた微小管を表し、図4D〜4Fは、ファロイジン共役Alexa Fluorine(登録商標) 568でラベルされたF-アクチンを表す。図4G〜4Iは、チューブリンとアクチン、さらに有糸分裂DNA（黒矢印がHoechst 33258でラベルされたDNAに対応する）と共に示す2画像の重ね合わせを表す。
図4A、4Dおよび4Gは、DMSOと一緒にインキュベートされたコントロール細胞を表す。
図4B、4Eおよび4Hは、5 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図4C、4Fおよび4Iは、10 μMの濃度で化合物6と一緒に24時間インキュベートされた細胞を表す。
図5A〜5Iは、24時間かけた位相差顕微鏡法（ビデオ顕微鏡法）でのヒーラ細胞における化合物6で誘導された有糸分裂停止を示す。
それらは、化合物6 (0.5 μM)の存在で、円形のヒーラ細胞の蓄積を示す。
画像は、Neofluar 20×対物レンズ(Zeiss)を用いて、24時間で5分毎、同じ領域で撮られた。
図6A〜6Dは、ヒーラ細胞（中間期および有糸分裂に）に化合物6 (0.5 μM)で誘導された皮質のブレブ形成を示す位相差顕微鏡画像を表す。
図6A：DMSOと一緒にインキュベートされたコントロール細胞。
図6B：化合物6と一緒に3時間インキュベートした後の細胞。
図6C：化合物6と一緒に3時間インキュベートした後の中間期接着細胞の拡大図（図6B由来）。
図6D：化合物6と一緒に3時間インキュベートした後の円形細胞の拡大図（図6B由来）。
Neofluar 20×対物レンズ(Zeiss)を用いての画像取得。
図7は、異なった細胞種での化合物6の抗増殖活性を示すグラフである。
それは、異なる細胞または細胞株の50％の増殖を阻害（増殖阻害50に対するGI50）するのに必要な化合物6の濃度を示す。
値は、3重で行われた2つの実験の平均±SEMで示される。
図8は、HUVECおよびHTB177細胞株における化合物6の抗増殖活性を示すグラフである。
それは、HTB177細胞（化合物6に最も感受性の細胞株）およびHUVEC(ヒト臍帯静脈内皮細胞)の増殖を50％阻害するのに必要な化合物6の濃度を示す。
値は、3重で行われた2つの実験の平均±SEMで示される。
図9は、インビトロでのチューブリン重合における化合物6 (50 μM)の効果を示すグラフである。
コントロールは、分子6がDMSOに溶解するように分子 6に加えられたDMSOの量に相当する0.5％DMSOで行われる。
値は、3重で行われた2つの実験の平均±SEMで示される。
図10A〜10Cは、化合物6の存在下での有糸分裂の継続ならびに有糸分裂で停止したヒーラ細胞の進展の位相差顕微鏡法の実例を示した図表である。
化合物6は、コントロール細胞(DMSO)と比較して、ヒーラ細胞の有糸分裂を長引かせる。
図10A：有糸分裂は、0.5 μMの化合物6の存在下で22時間続くのに対して、コントロール条件下では1時間続く。
図10B：コントロール。1時間後、細胞は2つの娘細胞に分裂する。
図10C：0.5 μMの化合物6の存在下で有糸分裂をモニターした(位相差の)ビデオ顕微鏡法。有糸分裂は、強い膜のブレブ形成活性と共に細胞死まで22時間続く。観察された有糸分裂細胞の80％は、強いブレブ形成を示し、20％の細胞は円形となる。
細胞は、40×対物レンズ(Zeiss)を用いて、48時間(5分毎の画像取得)に渡って撮影された。
図10Aの値は、50の有糸分裂細胞がモニターされた2つの実験の平均±SEMである。
図11A〜11Dは、siRNAによる、ヒーラ細胞のPP1の3つのイソ型(α+β+γ)の同時抑制が、化合物6により誘導される表現型を再生することを示す位相差顕微鏡法画像である。
siRNAによるPP1の3つのイソ型(α+β+γ)の同時抑制は、トランフェクション後48時間に、ヒーラ細胞の膜のブレブ形成を誘導する。
図11A：コントロール細胞。
図11B：0.5 μMで化合物6と一緒に3時間インキュベートしたヒーラ細胞。
図11C：PP1の3つの触媒サブユニットの抑制は、図11Bのそれと同一の表現型膜のブレブ形成の出現をもたらす。
図11D：対応するsiRNAによるPP2Aの触媒領域の抑制は、円形細胞の蓄積を誘導する。
図12Aおよび12Bは、PP1の触媒領域を特異的に保持する、化合物37を示す。
(A) 化合物37の構造(PEG基を有する化合物6に相当する)。
(B) セファロース樹脂に固定された化合物37は、PP1Cを特異的に保持する。抗PP1Cおよび抗PP2A抗体を用いて条件1および2下での溶出液のイムノブロット解析。
1：モノエタノールアミンでブロックされたセファロースN-ヒドロキシスクシンイミド(コントロール)。
2： NHSセファロースと結合された化合物37。
コントロールにおけるPP1Cの非存在および両条件下(MW：分子量)でのPP2Aの同じ量(トレースの状態)が注目されるべきである。
図13は、インビトロでの、化合物6によるPP1Cα活性の阻害を示すグラフである。PP1Cα(New England Biolabs, 30 mU/ウエル)は、異なる濃度での化合物6と蛍光基質、diFMUPの存在下でインキュベートされた。
コムブレタスタチンA-4 (CA-4) (ネガティブコントロールとして用いられた物質)が、PP1活性を阻害しないことは注目されるべきである。
値は、3重で行われた2つの実験の平均±SEMで示される。
AU：任意の単位。
図14は、63日に渡るヌードマウスの体重変化を示す。マウスは、2ヵ月、週に2回、経口で化合物6 (200 mg/kg)の投与を受けた。
化合物6は、ベータ-シクロデキストリンの60 mg/ml水溶液(ビヒクル)中の8 mg/mlに溶解された。
化合物6は、ヌードマウスの体重に有意な効果を及ぼさない。
図15A〜15Cは、化合物6 (40 mg/kg、週2回の経口で投与)またはビヒクル単独で処理後のヌードマウスに異種移植されたヒト腫瘍(HTB-177：肺癌)の画像を示す。
図15A：7日目のコントロール腫瘍。
図15B：7日目の化合物6で処理された腫瘍。
図15C：20日目の化合物6で処理された腫瘍。
化合物6で経口処理されたHTB-177を異種移植された動物は、化合物6の投与サイクル(7日目)後に、既に中心の壊死を示す。コントロール動物が壊死の兆候を示さないことは注目されるべきである。
図16A〜16Dは、化合物6 (40 mg/kg)の投与後48時間の、移植移植された腫瘍(HTB177)の壊死を示す写真である。腫瘍部分(厚さ10 μm)は、H&E (ヘマトキシリン-エオシン)を用いて染色された。化合物6で処理された、動物由来の腫瘍部分は、広範囲の領域の壊死を示すのに対して、コントロール腫瘍は無損傷である。
図16Aおよび16Cは、コントロール動物から得られた腫瘍部分を示す。
図16Bおよび16Dは、化合物6で処理後の腫瘍部分を示す。
【実施例】
【０２１６】
材料および方法
実施例 1：細胞培養
全ての培地は、ウシ胎仔血清(10%)、ペニシリン(100 U/ml)およびストレプトマイシン(100 mg/ml)で強化された。細胞は、5% CO2存在下、37℃でオーブン中で培養された。
原発性ヒト線維芽細胞(PHFs)は、(Nahm WKら, J Dermatol Sci. 2002, 28(2): pp 152-8)に記載されたように、新生包皮から調製した。
次の細胞株：ヒーラ (ATCC # CCL-2, ヒト子宮頸癌)、NCI-H460 (ATCC # HTB-177, ヒト原発性大細胞癌)、786-O (ATCC # CRL-1932, ヒト腎臓腺癌)、RT-112 (Benham Fら, J Histochem Cytochem. 1977, 25: pp 266-74, ヒト膀胱癌)、HMEC (Pasquier Eら, Mol Cancer Ther 9(5) 2010, pp 1408-18: ENMD-1198, a new analogue of 2-methoxyestradiol, displays both antiangiogenic and vascular-disrupting properties)は、RPMI 1640 培地で培養された。
【０２１７】
次の細胞株：U87 (ATCC # HTB-14, ヒト膠芽細胞腫)、HT-29 (ATCC # HTB-38, グレートII ヒト大腸線種)、MCF7 (ATCC # HTB-22, ヒト乳腺腺癌)は、DMEM 培地で培養された。MCF7に対して、培地はインスリン(0.01 mg/ml)で強化された。
A549細胞 (ATCC #CCL-185, ヒト肺癌)は、F-12K培地で培養された。HUVECs (ヒト臍帯静脈内皮細胞, PromoCell # c-12203)は、供給業者により推奨される内皮細胞成長培地で培養された。
【０２１８】
実施例 2：本発明の分子のインビトロおよびインビボ試験
インビトロ研究に対して、10 mMの保存溶液を製造するため、分子全て無水DMSOに再懸濁し、-20℃で一定量を保存した。
インビボ実験に対して、分子6 (8 mg/ml)が、水に溶解されたβ-シクロデキストリン (Sigma # 4805)の60 mg/ml中で調製され、ボルテックス(vortexed)された。
【０２１９】
実施例 3：アフリカツメガエル卵抽出物
アフリカツメガエル卵細胞質抽出物は、(Desai Aら, Methods Cell Biol. 1999; 61: pp 385-412)に記載された方法に従って、未授精のアフリカツメガエル(Xenopus laevis)卵から調製された。
【０２２０】
実施例 4：細胞の間接免疫蛍光法
細胞は、24-ウエルプレートのスライド上で培養され、1〜10 μMの異なる濃度での分子6と一緒に24時間インキュベートされた。
コントロール ウエル中の培地に、対応する量のDMSOが加えられた。
細胞は、4% パラホルムアルデヒド (PFA)および0.1% グルタルアルデヒド (GA)と一緒のPBS溶液中で15分間固定され、固定の最後の10分間、300 gで遠心分離された。スライドはPBS中に浸され、1 mg/mlのNaBH4を含むPBS中で、2回の連続5分のインキュベーションによって、遊離のアルデヒド基が還元された。
【０２２１】
PBSで1回、次いでPBST (0.5% トリトン-X-100と一緒のPBS)でもう1回洗浄後、細胞を、PBST中で1:200に希釈された抗α-チューブリン モノクローナル抗体 (DM1A クローン, Sigma # T6199)と一緒に周囲温度で30分間インキュベートする。PBSTで3回10-分の洗浄後、細胞を、DNAのラベルのためのHoechst 33258 (1 μg/ml)も含むPBST中のAlexa 488 (1:1000, Molecular Probes # A-11029)と結合されたヤギの抗マウス ポリクロナール抗体およびアクチン (1:2000, Molecular Probes # T7471)をラベルするためにテキサス レッドと結合されたファロイジンの溶液中、周囲温度で、30分間インキュベートする。PBSTで3回10-分の洗浄後、スライドをFluorsave(商標)封入剤 (Calbiochem # 345789)中のプレートに取り付け、Axiovert 200M 倒立型蛍光顕微鏡 (Zeiss(登録商標))を用いて、観察および分析する。画像は、Coolsnap HQ カメラ (Roper Scientifics(登録商標))および Metamorph 取得(acquisition)ソフトウェア (Universal Imaging(商標 Corporation)によって、Plan-Apochromat 63×油対物レンズ(oil objective) (Zeiss(登録商標))を用いて作り出される。
【０２２２】
PHFおよびヒーラ細胞で化合物6の類縁物の効果を評価するため、前記の免疫蛍光技術を用い、96-ウエル ディッシュ型に適用した。これらの細胞を、ガラス製丸底96-ウエル ディッシュに播種し、100 μM〜50 nMの異なる分子の濃度の存在下、24時間インキュベートした。そして、前記と同じようにして、細胞を固定し、免疫標識した。表現型の分析ならびに有糸分裂細胞の計数は、×40 対物レンズ (Olympus)を用いる以外は同じ顕微鏡を用いて行われた。分子は、25および0.3 μMでPHFおよびヒーラ細胞に誘導された有糸分裂停止に対して、お互いに比較された。
【０２２３】
z-シリーズ ビデオ顕微鏡検査に対して、ヒーラ細胞をガラス製丸底ディッシュ(Iwaki, Milian # BY-3910035)中で培養した。該系は、AXIOVERT 200M 倒立型顕微鏡 (Zeiss(登録商標))、37℃の温度および5%の一定CO2 レベルを維持する恒温インキュベーション チャンバー、メタモルフ(Metamorph)取得および分析系 (Universal Imaging(商標) Corporation)と結合されたモーター付きプラットフォームおよびCoolSNAP HQ カメラ (Roper Scientifics(登録商標))を含む。研究は、×20または×40 対物レンズ (Neofluar Zeiss)を用いて行われた。
【０２２４】
最初に、取得領域が選択され、メモリー中に保存され、次いで、実験の期間 (48時間)、画像取り込みの間の間隔 (5分)、または深度(depth) zでのセクションの数 (9セクション)のような取得パラメータが規定された。記録の48時間の最後に、メタモルフ ソフトウェアを用い、同じ焦点を有するzでの画像で、取得一連(cquisition batteries)が、再構成された。
【０２２５】
実施例 5：細胞増殖試験
細胞を96-ウエル プレートに播種(ウエル当たり1,000)し、化合物6の異なる濃度(1 nM〜100 μM)で5 日間(120時間)インキュベートした。このインキュベーションの最後に、培地にHoechst 33342 (1 μg/ml)を加え、生存細胞を蛍光顕微鏡 (Zeiss Axiovert 200M)下で数えた。データは、ランダムに選択された10の領域が、化合物6のそれぞれの濃度に対して分析され、3重で行われた2つの独立した実験の平均を表す。
【０２２６】
実施例 6：ウシの脳のチューブリンの精製およびインビトロでの重合試験
(Castoldi M and Popov AV. Protein Expr Purif. 2003, 32(1): pp 83-8)に記載された重合-解重合法を用いて、ウシの脳からチューブリンを精製した。
インビトロのチューブリン重合試験(50 μMで)を、BRB80緩衝液 (80 mM K-PIPES pH 6.8, 1 mM MgCl2, 1 mM EGTA)中のGTP 1mM存在下、37℃で行った。試験は、96-マイクロウエル プレート (ハーフ-ウエル) (Costar plates, Corning # 3695)中、最終容積70 μl、3重で行われた。チューブリン会合が、化合物6またはその類縁物 (全て50 μMの濃度で用いられた)の存在下で行われ、分光光度計 (Spectramax More, Molecular Devices)を用いる350 nmでの濁度測定によってモニターされた。
【０２２７】
実施例 4、6、9および本発明の化合物を用いて得られたインビトロの結果を、次の表 Iに表示する。
【表１−１】
0005856086.tif 000048
【０２２８】
【表１−２】
0005856086.tif 000049
【０２２９】
【表１−３】
0005856086.tif 000050
【０２３０】
【表１−４】
0005856086.tif 000051
【０２３１】
【表１−５】
0005856086.tif 000052
【０２３２】
【表１−６】
0005856086.tif 000053
【０２３３】
【表１−７】
0005856086.tif 000054
【０２３４】
【表１−８】
0005856086.tif 000055
【０２３５】
【表１−９】
0005856086.tif 000056
【０２３６】
【表１−１０】
0005856086.tif 000057
【０２３７】
【表１−１１】
0005856086.tif 000058
【０２３８】
【表１−１２】
0005856086.tif 000059
【０２３９】
【表１−１３】
0005856086.tif 000060
【０２４０】
【表１−１４】
0005856086.tif 000061
【０２４１】
【表１−１５】
0005856086.tif 000062
【０２４２】
【表１−１６】
0005856086.tif 000063
【０２４３】
【表１−１７】
0005856086.tif 000064
【０２４４】
【表１−１８】
0005856086.tif 000065
【０２４５】
N.B.: MA: 有糸分裂停止; PHF: 原発性ヒト線維芽細胞; MT: 微小管
1. インビトロでのPP1CAの活性に対する効果
IC50の測定は、蛍光基質 (50 μM)および50 μM〜50 nMの分子の異なる濃度の存在下、80 mUでのPP1CAを用いて行われた。
(-) 50 μMでもPP1阻害活性なし
(+) 弱いPP1阻害：IC50 ≧ 50 μM
(++) 中程度PP1阻害： 25〜50 μMの間のIC50
(+++) 顕著なPP1阻害： 10〜24 μMの間のIC50
(++++) 強いPP1阻害：IC50 ≦ 9 μM
NT：試験されなかった分子
【０２４６】
2. インビトロでのチューブリン重合に対する効果
分子の重合に対する効果の測定は、コントロールの値を100%に等しくするのと同じ時間のt = 3000 秒で算出された。
(-) 分子が、インビトロでチューブリン会合阻害をほとんどまたは全く誘導しないことを表す：DMSOコントロールの0 +または-〜5%
(+) 分子が、インビトロで、DMSOコントロールの6〜25%の間に含まれるチューブリン会合阻害を誘導することを表す
(+ +) 分子が、インビトロで、DMSOコントロールの26〜50%の間に含まれるチューブリン会合阻害を誘導することを表す
(+ + +) 分子が、インビトロで、DMSOコントロールに対して50%より大きいチューブリン会合阻害を誘導することを表す
NT：試験されなかった分子。
【０２４７】
3. ヒーラ細胞への効果
MTの有糸分裂インデックスおよび／または解重合が、25 μMで評価された。
-: 25 μMで細胞に対して活性なし (より高い濃度で効果があれば、これが表に明記される)
*: 弱い活性 (MAおよび／またはMTのわずかな解重合および／または増殖のわずかな阻害) 
**: 平均的活性 (MAおよび／またはMTの中程度な解重合および／または増殖の中程度な阻害)
***: 強い活性 (MAおよび／またはMTの顕著な解重合および／または増殖の顕著な阻害)
****: 非常に強い活性 (MAおよび／またはMTの非常に顕著な解重合および／または増殖の強い阻害)
NT：試験されなかった分子。
【０２４８】
4. HMEC細胞でのGI50
HMECを10% コンフルエンスで播種し、異なる濃度 (50 μM〜1 nM)dでの分子と一緒に5日間インキュベートした。GI50 (50% 増殖阻害)は、コントロールに対して、増殖の50% 減少を誘導する濃度を定義する。
(-) 50 μMで細胞への阻害活性なし
(+) 増殖のわずかな阻害：25〜50 μMの間のGI50
(++) 増殖の中程度の阻害：1〜25 μMの間のGI50
(+++) 増殖の顕著な阻害：0.1〜1 μMの間のIC50
(++++) 増殖の強い阻害：IC50 ≦ 0.1 μM
NT：試験されなかった分子。
【０２４９】
実施例 8：アフィニティークロマトグラフィおよびイムノブロット
分子37を、N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)基で活性化されたセファロース樹脂 (GE Healthcare # 17-0906-01)に、次のようにして：PBS, pH 8.3中、周囲温度で1時間でNHS セファロース1 ml当たり100 μgの分子37を固定した。分子37と結合されたセファロースは、「化合物6」樹脂を表す。一方、同時に、もう一つの「コントロール」樹脂は、NHS官能基を中和するため、同じ条件下、0.5 M モノエタノールアミン (MEA), pH 8.3中でのインキュベーションで製造された。PBS, pH 8.3での数回の洗浄後、遊離状態のNHS官能基は、0.5 M MEAを用いて30分間ブロックされた。それらがPBSで完全に洗浄されたら、「コントロール」および「化合物6」の樹脂は、プロテアーゼ阻害剤を含むCSF-XB緩衝液 (#1 873 580 ロシュ(登録商標))中で1:1に希釈されたアフリカツメガエル卵抽出物の1 mlと一緒に4℃で撹拌下、1時間インキュベートされた。PBSTで2回洗浄後、付着状態にある抽出物のタンパク質を、6M 尿素で強化された電気泳動SDS電荷緩衝液 (Laemmli, U.K., Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature 1970; 227, 680-685) 100 μlで溶出した。このように変性された試料をポリアクリルアミドゲル(6〜18%勾配)に溶解し、次いで、ニトロセルロース膜に移した。
【０２５０】
1:1000の希釈でマウス抗-PP1抗体 (Sigma # 7979)またはウサギ抗-PP2A抗体 (Upstate # 07-324)およびHRP0 抗体 (1:5000, ヤギ 抗-マウス IgG, Sigma # A3683; ヤギ 抗-ウサギ IgG, Sigma # A0545)と結合された対応する2次抗体を用いて、免疫検出を行った。
HRPOシグナルを検出するため、Amersham ECLプラス キット (GE Healthcare # RPN2132)を用いた。
【０２５１】
実施例 9：タンパク質ホスファターゼ試験
活性試験のため、全ての類縁物のスクリーニングに対して、30 mUまたは80 mUの最終濃度でPP1α (New England Biolabs # P0754)を用いた。6,8-ジフルオロ-4-メチルウンベリフェリル ホスフェート (DiFMUP, Invitrogen # D6567)を蛍光基質として、60 μMの濃度で用いた。全ての試験は、96-マイクロウエル プレート (Greiner # 655096)中、100 μlの最終濃度で、37℃で行われた。
【０２５２】
化合物6、コムブレタスタチンA4 (CA-4)ならびに全ての類縁物は、PP1緩衝液 (100 mM Tris-HCl, pH 7.5, 4 mM DTT, 0.2 mM EDTA, 0.5 mM MnCl2)の50 μl中、50 μM〜50 nMに希釈された。DMSOの対応する量がコントロールウエルに加えられた。PP1α (30 μlのPP1緩衝液中30または80 mU) がそれぞれのウエルに加えられた。ATで15分間インキュベート後、基質が加えられた(20 μlのPP1緩衝液中)。37℃で20分間インキュベート後、ホスファターゼ活性を評価するため、プレート蛍光光度計中、355〜460 nmで蛍光が測定された。試験は、それぞれの条件に対して、2重で3回行われた。
【０２５３】
実施例 10：インビボ実験
全ての動物実験は、地域倫理委員会の勧告に従って行われた。ヌードマウス(NCr-nu/nu 雌性 (Harlan Laboratories)は、22℃で、濾過空気を有する部屋で、昼間12時間および夜12時間の交互で飼育された。
HTB177細胞 (1×106)をマウスのわき腹の皮下に埋め込んだ。腫瘍の成長は、ノギスを用いて腫瘍の大きさを測定することにより、週2回モニターされ、このようにして、次の式：長さ×幅×高さ×π/6により、mm3 で計算し、腫瘍の容積を評価することできる。
【０２５４】
腫瘍が約250 mm3の大きさに達したとき、処置を開始した。動物の体重、腫瘍の大きさおよび壊死の範囲を週に2回測定した。
腫瘍が2000 mm3に達するか、倫理委員会によって規定された臨床兆候が観察されればすぐに、動物は屠殺された。
マウスは、図の説明文に記載された用量および間隔で、化合物6の経口投与を受けた。コントロールマウスは、ビヒクル(60 mg/mlでのベータ-シクロデキストリンの同一容積)のみを受けた。
【０２５５】
実施例 11：組織学
動物の安楽死後、腫瘍を除去し、正中線に沿って矢状に切り、液体窒素で直ちに冷凍し、-80℃で保存した。
腫瘍部(深さ10 μm)を作成し、次いで標準手順に従ってヘマトキシリン-エオシン(H&E)で染色した。
光学顕微鏡(×10 対物レンズ)下、Olympus BX41 カメラを用いて、腫瘍部の画像を作成した。
【０２５６】
実施例 12：INH2BPを用いた比較試験
特許出願WO 98/51307に記載された、生成化合物の5-ヨード-6-アミノ-1,2-ベンゾピロン(INH2BP)は、ヒーラ細胞において、50 μMで抗増殖活性を示さない。
【０２５７】
実施例 13：分子の合成
化合物1、2、4、6〜8および10は、Bisagniら, Tetrahedron, 1996, 52, 10427-10440に従って合成された。
化合物5は、Croisy-Delseyら, Bioorg. Med. Chem., 200, 8, 2629-2641に従って合成された。
【０２５８】
一般式IIaの化合物は、次のようにして合成できる：
一般的実験計画：
− X = Oに対して、該合成方法は、Bisagniら, Tetrahedron 1996, 52, 10427-10440に従って行われ、次の主段階：
a) 2,3-ジアリールアクリル酸中間体を形成するために、アリール酢酸とアリールカルボキシアルデヒドとの縮合、
b) 混合酸無水物により、酸性基をNaN3を用いて対応するアジドに変換、
c) 3-アリールイソキノリン-1(2H)-オンを製造するために、熱経路によるアジド体の環化、
d) 以下に詳述の実験計画により、官能基の配置
を含み、
【０２５９】
− X = Sに対して、該合成方法は、次の段階
a) 3-アリールイソキノリン-1(2H)-オンから出発し、イソキノリン-1(2H)-チオンの合成がローソン試薬を用いて行われる、
b) 3-アリール-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オンから出発し、イソキノリン-1(2H)-チオン合成法は、次の主段階：
○1-クロロイソキノリン中間体を形成するために、オキシ塩化リンまたはヴィルスマイヤー試薬を用いての塩素化、
○チオウレアを用いて、クロロ基をチオン基へ変換
を含む
を含む。
【０２６０】
一般式IIbの化合物は、次のようにして合成できる：
○3-アリールイソキノリン-1(2H)-オンから出発：イソキノリンIIbの合成は、K2CO3のような塩基の存在下、目的のハロアルキル体を用いて行われる、
○その合成が前記に述べられた1-クロロ-4-ニトロイソキノリンから出発：イソキノリンIIbの合成は、塩基性媒体中、目的の求核試薬を用いて行われる。
【０２６１】
化合物 9：N-(7-メトキシ-1-オキソ-3-フェニル-1,2-ジヒドロイソキノリン-4-イル)メタンアミド：
トルエン (50 mL)中のギ酸 (2.40 mL; 63 mmol)および化合物 10 (500 mg, 1.88 mmol)の溶液を5時間還流下に加熱し、該液体を減圧下に蒸発乾固する。次いで、残渣をギ酸と水 (80/20)の混液中で摩砕し、次いで、冷えるままにし、淡いピンクの微結晶の形態で所期の化合物9 (450 mg; 77%)を得る。
【０２６２】
1H NMR (CDCl3): δ 3.90 (3 H, s), 7.39 (1 H, dd), 7.42-7.5 (5 H, m), 7.52 (1 H, d), 7.67 (1 H, d), 8.18 (1 H, s), 9.43 (1 H, br s), 11.51 (1 H, br s);
分析 C17H14N2O3 ・ 0.17 HCO2Hに対する計算値: C, 68.47; H, 4.76; N, 9.30; 実測値: C, 68.43; H, 4.89; N, 9.35
【０２６３】
化合物 12：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-チオン
アルゴン雰囲気下、無水トルエン (25 mL)中のラクタム 4 (584 mg, 2.1 mmol)の懸濁液に、85℃でローソン試薬 (975 mg, 2.4 mmol)を加える。反応混合物をこの温度で20時間撹拌する。水 (150 mL)を加え、混合物を酢酸エチル (2×150 mL)で抽出する。有機相を塩水 (2×150 mL)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、溶媒の蒸発後に得られる固体の残渣を無水エタノールから再結晶し、鮮黄色の針状の形態で化合物チオラクタム12 (550 mg, 89%)を得る。
【０２６４】
Mp 188-190℃;
1H NMR (DMSO-d6) δ 13.21 (1 H, br s), 8.21 (1 H, d), 7.80-7.70 (3 H, m), 7.45 (1 H, dd), 7.30 (1 H, s), 7.06 (2 H, d), 3.91 (3 H, s), 3.83 (3 H, s); MS 298 (M+H);
分析 C17H15NO2S ・ 0.5 H2Oに対する計算値: C, 66.66; H, 5.22; N, 4.57; 実測値: C, 66.31; H, 4.87; N, 5.05
【０２６５】
化合物 13：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1-スルホン酸
AcOH (4.3 mL)およびAcOEt (1.2 mL)中のチオラクタム 12 (275 mg, 0.9 mmol) 懸濁液に、0℃で、AcOH (650 μL)中の硝酸 (d 1.33; 146 μL)の溶液を加える。次いで、該混合物を周囲温度に戻るままにし、もう１時間撹拌を維持し、それに水 (30 mL)を加える。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥し、次いで、溶出液としてCH2Cl2を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、淡黄色の微結晶の形態で、化合物13 (180 mg; 56%)を得る。
【０２６６】
mp 226-228℃;
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.14 (1 H, s), 8.00 (1 H, d), 7.83 (2 H, d), 7.68 (1 H, d), 7.54 (1 H, dd), 6.72 (2 H, d), 3.97 (3 H, s), 3.71 (3 H, s); MS 344 (M-H)
【０２６７】
化合物 14：4-クロロ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
AcOH (1.2 mL)およびAcOEt (1.2 mL)中に溶解されたラクタム 4 (128 mg, 0.45 mmol)の溶液に、周囲温度で、N-クロロスクシンイミド (67 mg; 0.5 mmol)を一度に加える。反応混合物を24時間撹拌し、新しい量のN-クロロスクシンイミド (67 mg; 0.5 mmol)を加える。もう一度、反応混合物を24 時間撹拌し、次いで、水 (10 mL)を加え、形成される沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥する。次いで、それを溶出液としてCH2Cl2中のエタノールの勾配 (0〜1.5%)を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、淡黄色のゴムの形態で、所期の化合物14 (140 mg; 97%)を得る。
【０２６８】
1H NMR (CDCl3) δ 7.96 (1 H, d), 7.75 (1 H, d), 7.51 (2 H, d), 7.17 (1 H, dd), 6.85 (2 H, d), 6.66 (1 H, br s), 3.98 (3 H, s), 3.77 (3 H, s); MS 316 and 318 (M+H)
【０２６９】
化合物 15：4-ブロモ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
AcOH (1.0 mL)およびAcOEt (1.0 mL)中に溶解されたラクタム4 (108 mg, 0.38 mmol)の溶液に、周囲温度で、N-ブロモスクシンイミド (92 mg; 0.5 mmol)を一度に加える。反応混合物を4時間撹拌し、水 (10 mL)を加え、形成される沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥する。次いで、それを溶出液としてCH2Cl2中のエタノールの勾配 (0〜1%)を用いる中性のアルミナゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、白色の微結晶の形態で、化合物15 (80 mg; 58%)を得る。
【０２７０】
mp 240-242℃;
1H NMR (DMSO-d6) δ 11.72 (1 H, br s), 7.89 (1 H, d), 7.70 (1 H, d), 7.50-7.43 (3 H, m), 7.05 (2 H, d), 3.91 (3 H, s), 3.83 (3 H, s);
MS 359および361 (M+H));
分析 C17H14BrNO3に対する計算値: C, 56.69; H, 3.92; N, 3.89; 実測値: C, 56.58; H, 3.92; N, 3.66
【０２７１】
化合物 16：4-ヨード-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
AcOH (1.2 mL)およびAcOEt (1.2 mL)中に溶解されたラクタム4 (130 mg, 0.46 mmol)の溶液に、周囲温度で、N-ヨードスクシンイミド (127 mg; 0.5 mmol)を一度に加える。反応混合物2.5時間撹拌し、水(10 mL)を加え、形成されるチンで物を濾過し、水で洗浄し、乾燥する。次いで、それを溶出液としてCH2Cl2中のエタノールの勾配 (0〜1%)を用いる中性のアルミナゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、白色の微結晶として、所期の化合物16 (130 mg; 69%)を得る。
【０２７２】
mp 216-218℃;
1H NMR (DMSO-d6) δ 11.72 (1 H, br s), 7.89 (1 H, d), 7.70 (1 H, d), 7.50-7.43 (3 H, m), 7.05 (2 H, d), 3.91 (3 H, s), 3.83 (3 H, s);
MS 408 (M+H); 
分析 C17H14BINO3に対する計算値: C, 50.14; H, 3.47; N, 3.44; 実測値: C, 50.32; H, 3.48; N, 3.45
【０２７３】
化合物17 ：1-クロロ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン
アルゴン雰囲気下、アセトニトリル (27 mL)中のニトロラクタム6 (1.33 g, 40 mmol)およびベンジルトリエチルアンモニウム クロライドの溶液に、オキシ塩化リン (3.2 mL)を一度に加える。次いで、反応混合物を還流下に3時間加熱し、次いで、減圧下に蒸発する。 冷水 (50 mL)を加え、14% NH4OHでpHを7-8に調整する。形成される沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥し、溶出液としてCH2Cl2/アセトン8-2を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、鮮黄色の薄片の形態で所期の化合物17 (1.18 g; 83%)を得る。
【０２７４】
mp 196-198℃;
1H NMR (CDCl3) δ 7.71 (1 H, d), 7.70-7.64 (2 H, m), 7.63 (1 H, d), 7.53 (1 H, dd), 7.00 (2 H, d), 4.03 (3 H, s), 3.86 (3 H, s);
MS 345および347 (M+H);
分析 C17H13ClN2O4に対する計算値: C, 59.23; H, 3.80; N, 8.13; 実測値: C, 59.17; H, 3.75; N, 7.88
【０２７５】
化合物 18：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-チオン
アルゴン雰囲気下、クロロニトロ誘導体17 (230 mg, 0.66 mmol)、チオウレア (164 mg, 2.1 mmol)および無水エタノール (7 mL)により形成された混合物を還流下に4時間加熱する。形成される沈殿物を濾過し、エタノール洗浄し、乾燥し、溶出液としてCH2Cl2を用いる中性のアルミナゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、淡橙色の微結晶の形態で、所期の化合物 18 (150 mg; 65%)を得る。
【０２７６】
mp 226-228℃;
1H NMR (DMSO-d6) δ 13.83 (1 H, br s), 8.31 (1 H, s), 7.61 (2 H, br s), 7.47 (2 H, d), 7.07 (2 H, d), 7.00 (2 H, d), 3.95 (3 H, s), 3.83 (3 H, s);
MS 343 (M+H)
分析 C17H14N2O4S.0.25 H2Oに対する計算値: C, 58.87; H, 4.18; N, 8.08; 実測値: C, 58.83; H, 4.05; N, 7.94
【０２７７】
化合物 19：1,7-ジメトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン
アルゴン雰囲気下、クロロニトロ 誘導体17 (209 mg, 0.60 mmol)、DMF (2 mL)およびメタノール (9 mL)中の30% ナトリウムメトキシド溶液によって形成された混合物を、還流下に18 時間加熱する。冷水 (40 mL)を加え、形成される沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥し、溶出液としてCH2Cl2を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、鮮黄色の薄片の形態で所期の化合物 19 (158 mg; 76%)を得る。
【０２７８】
mp 176-178℃;
1H NMR (CDCl3) δ 7.70-7.65 (3 H, m), 7.57 (1 H, d), 7.42 (1 H, dd), 6.98 (2 H, d), 4.22 (3 H, s), 3.97 (3 H, s), 3.86 (3 H, s);
MS 363 (M+Na);
分析 C18H16N2O5に対する計算値: C, 63.52; H, 4.74; N, 8.23; 実測値: C, 63.46; H, 4.78; N, 7.99
【０２７９】
化合物 20：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロ-1-(フェニルエチオ)イソキノリン
アルゴン雰囲気下、クロロニトロ誘導体 17 (110 mg, 0.32 mmol)、無水エタノール (5 mL)、トリエチルアミン (0.1 mL)およびチオフェノール (70 mg, 0.6 mmol)から形成される混合物を、還流下に18時間加熱する。形成される沈殿物を濾過し、エタノールで洗浄し、乾燥し、鮮黄色の形態で、所期の化合物 20 (120 mg; 90%)を得る。
【０２８０】
mp 169-171℃;
1H NMR (CDCl3) δ 7.70 (1 H, d), 7.67-7.62 (2 H, m), 7.57 (1 H, d), 7.50-7.44 (4 H, m), 7.39 (2 H, d), 6.82 (2 H, d), 4.02 (3 H, s), 3.80 (3 H, s);
MS 419 (M+H); 
分析 C23H18N2O4Sに対する計算値: C, 66.01; H, 4.34; N, 6.39; 実測値: C, 65.85; H, 4.15; N, 6.61
【０２８１】
化合物 21：1-(ベンジルチオ)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン
アルゴン雰囲気下、クロロニトロ 誘導体17 (138 mg, 0.40 mmol)、無水エタノール (4 mL)、トリエチルアミン (0.1 mL)およびベンジルメルカプタン(60 mg, 0.48 mmol)により形成される混合物を、還流下に24時間加熱する。形成される沈殿物を濾過し、エタノールで洗浄し、乾燥し、溶出液としてCH2Cl2用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、淡橙色の微結晶の形態で、所期の化合物 21 (120 mg; 69%)を得る。
【０２８２】
mp 148-150℃;
1H NMR (CDCl3) δ 7.72-7.62 (3 H, m), 7.48-7.42 (4 H, m), 7.36-7.27 (3 H, m), 6.99 (2 H, d), 4.68 (2 H, s), 3.96 (3 H, s), 3.87 (3 H, s);
MS 433 (M+H); 
分析 C24H20N2O4Sに対する計算値: C, 66.65; H, 4.66; N, 6.48; 実測値: C, 66.85; H, 4.58; N, 6.51
【０２８３】
化合物 22：N-ベンジル-N-[7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1-yl]-アミン
アルゴン雰囲気下、クロロニトロ誘導体17 (145 mg, 0.42 mmol)、無水エタノール (4 mL)、トリエチルアミン (0.1 mL)およびベンジルアミン (136 mg, 1.30 mmol) により形成される混合物を、還流下に18時間加熱する。形成される沈殿物を濾過し、エタノールで洗浄し、乾燥し、溶出液としてCH2Cl2を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、淡橙色の微結晶の形態で、所期の化合物 22 (110 mg; 62%)を得る。
【０２８４】
mp 199-201℃;
1H NMR (CDCl3) δ 7.81 (1 H, d), 7.62 (2 H, d), 7.47-7.30 (6 H, m), 7.02-6.92 (3 H, m), 5.75-5.67 (1 H, m), 4.93 (2 H, d), 3.93 (3 H, s), 3.84 (3 H, s); MS 414 (M-H); 
分析 C24H21N3O4.0.25 H2Oに対する計算値: C, 68.65; H, 5.12; N, 10.01; 実測値: C, 68.59; H, 4.92; N, 9.95
【０２８５】
化合物 23：4-(ジメチルアミノ)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
4-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (化合物 1) (200 mg, 0.67 mmol)、37% 水性ホルムアルデヒド (0.54 mL, 6.7 mmol)およびアセトニトリル (5 mL)の混合物に、周囲温度で、シアノボロハイドライド 126 mg (2.01 mmol)を加える。次いで、氷酢酸 (116 μL, 2.01 mmol)をゆっくり加え、混合物を撹拌下に5 時間放置する。再度、第2の量の氷酢酸 (116 μL, 2.01 mmol)を導入し、撹拌をさらに30分間維持し、次いで、混合物を減圧下に蒸発し、エーテル (15 mL)を加える。エーテル相を連続して、KOHの規定液 (3×30 mL)、塩水 (3 mL)で洗浄し、次いで、MgSO4 で乾燥し、減圧下に蒸発させる。残渣を、溶出液としてCH2Cl2中のエタノール勾配 (0〜2%)を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、橙色の固体の形態で、所期の化合物 23 (54 mg, 25%)を得る。
【０２８６】
mp 183-185℃;
1H NMR (CDCl3):δ 8.30 (1 H, br s), 7.85 (1 H, d), 7.81 (1 H, d), 7.38 (2 H, d), 7.33 (1 H, dd), 6.99 (2 H, d), 3.94 (3 H, s), 3.88 (3 H, s), 2.64 (6 H, s); 
MS 325 (M+H); 
分析 C19H20N2O3 ・1.1 H2Oに対する計算値: C, 66.2; H, 6.44; N, 8.13. 実測値: C, 66.24; H, 5.81; N, 8.13
【０２８７】
化合物 24：N-(7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-1-オキソ-1,2-ジヒドロイソキノリン-4-イル)メタンアミド
4-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (化合物 1) (100 mg, 0.33mmol)およびエチルホルメート (7 mL, 水素化カルシウム上で前もって蒸留) の混合物に、ギ酸 (1.6 mL)を加え、混合物を還流下に12 時間加熱する。次いで、混合物を減圧下に蒸発乾固し、得られる残渣をエタノールで洗浄し、濾過し、真空下で乾燥し、36 mgの所期の化合物 24を得る。濾液を濃縮し、次いで、溶出液としてCH2Cl2中のエタノールの勾配 (0〜5%)を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、白色の形態で、第2画分の目的の生成物 24 15 mg (全収率46%)を得る。
【０２８８】
mp >270℃;
1H NMR (CDCl3): δ 11.44 (1 H, br s), 9.41 (1 H, br s), 8.18 (1 H, s), 7.65 (1 H, s), 7.51 (1 H, d), 7.42 (2 H, d), 7.38 (1 H, dd), 7.00 (2 H, d), 3.89 (3 H, s), 3.81 (3 H, s);
MS 347 (M+Na);
分析 C18H16N2O4に対する計算値: C, 66.66; H, 4.97; N, 8.64; 実測値: C, 66.75; H, 4.92; N, 8.53
【０２８９】
化合物 25：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン-4-カルバルデヒド
4-ブロモ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (化合物 15, 200 mg, 0.55 mmol)およびTHF (10 mL)の溶液に、-78℃で、n-BuLi (ヘキサン中1.6M, 1.8 mL, 1.1 mmol)を加える。得られる黄色の懸濁液を、同温度でさらに15 分間撹拌し、次いで、DMF (85 μL, 1.1 mmol)を導入する。-78℃で1時間後、水 (10 mL) を加え、次いで、混合物をジクロロメタン (3×10 mL)で抽出する。合わせた有機相を水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、溶媒の蒸発後に得られる残渣を、溶出液としてCH2Cl2中のエタノールの勾配 (0〜2%)を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、白色の固体の形態で、所期の化合物 25 (46 mg, 27%)を得る。
【０２９０】
mp 232℃; 
1H NMR (CDCl3): δ 3.91 (3 H, s), 3.95 (3 H, s), 7.06 (2 H, d), 7.4 (1 H, dd), 7.48 (2H, d), 7.81 (1 H, d), 8.77 (1 H, br s), 9.15 (1 H, d), 9.79 (1 H, s); 
MS 310 (M+H); 
分析 C18H15NO4 ・ 0.2 H2Oに対する計算値: C, 69.07; H, 4.92; N, 4.47. 実測値: C, 68.68; H, 4.98; N, 4.34
【０２９１】
化合物 26：4-ブロモ-1-クロロ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン
13 mLのジクロロエタン中のヴィルスマイヤー試薬 (1.7 g, 13.2 mmol)の懸濁液を数分間撹拌し、次いで、化合物 4-ブロモ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (2.1 g, 6 mmol)を加える。混合物を還流下に加熱し、次いで1時間後に周囲温度に戻るままにする。次いで、溶液を750 mLのクロロホルムで希釈し、3×200 mLの水で洗浄する。有機相をMgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に蒸発する。得られる白色の固体をメタノールから結晶化する。白色の結晶の形態で、所期の化合物 26 (1.78 g, 95 %)を得る。
【０２９２】
mp 164-166℃;
MS 378 [M+H]+;
1H NMR (CDCl3): δ 3.86 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 6.95-7.02 (m, 2H), 7.47 (dd, J = 2.6およびJ = 9.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7, 65-7.70 (m, 2H), 8.24 (d, J = 9.3 Hz, 1H);
13C NMR (CDCl3): δ 55.4, 55.8, 104.2, 113.4, 117.0, 125.2, 127.7, 129.3, 131.4, 131.8, 133.0, 148.0, 148.5, 159.7, 159.8
【０２９３】
化合物 27：4-ブロモ-1,7-ジメトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン
70 mLのメタノール中の化合物 4-ブロモ-1-クロロ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン 26 (1.78 g, 4.7 mmol)の懸濁液に、ナトリウムメチレート (1.26 g, 23.5 mmol)を加える。反応混合物を2日間還流する。次いで、溶媒を蒸発させ、粗反応物を100 mLの水に再溶解し、300 mLのクロロホルムで抽出する。有機相をMgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。得られる白色の固体を、シリカカラムでのクロマトグラフィー(CH2Cl2/シクロヘキサン 1/1 次いで7/3)により精製する。白色の粉末の形態で、所期の化合物 27 (1.55 g, 88 %)を得る。
【０２９４】
mp 138-140℃;
MS 375および377 [M+H]+;
1H NMR (CDCl3): δ 3.89 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 4.13 (s, 3H), 6.97-7.04 (m, 2H), 7.39 (dd, J = 2.7およびJ = 9.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.74-7.81 (m, 2H), 8.15 (d, J = 9.2 Hz, 1H); 
13C NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 53.8, 55.2, 55.5, 102.4, 109.3, 113.0, 120.5, 123.4, 128.4, 131.4, 132.5, 133.1, 145.8, 158.2, 158.4, 159.3
【０２９５】
化合物 28：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロ-2-(プロパルギル)イソキノリン-1(2H)-オン
42 mLのDMF中の化合物 6 (1.36 g, 4.17 mmol)、K2CO3 (576 mg, 4.17 mmol)の混合物を、周囲温度で15分間撹拌する。次いで、プロパルギル ブロマイド (450 μL, 4.17 mmol)を加え、溶液を周囲温度で撹拌する。24時間後、80 mLの水を加え、混合物を4×40 mLの酢酸エチルで抽出する。有機相を合わせ、2×20 mLのNaClの飽和水溶液で洗浄し、MgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。得られる黄色の油状物を、シリカカラムでのクロマトグラフィー(シクロヘキサン／酢酸エチル 95/5)により精製する。黄色の粉末の形態で、1.1 g (75 %)の化合物 28を得る。
【０２９６】
mp 162-164℃; 
MS 365 [M+H]+; 
1H NMR (CDCl3): δ 2.24 (t, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.55 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 6.98-7.04 (m, 2H), 7.36 (dd, J = 2.7およびJ = 9.0 Hz, 1H), 7.40-7.47 (m, 3H), 7.90 (d, J = 2.7 Hz, 1H);
13C NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 36.2, 55.5, 56.0, 72.4, 78.4, 108.8, 114.6, 121.4, 122.7, 123.2, 124. 125.9, 130.9, 134.0, 136.7.160.1, 160.7, 161.3
【０２９７】
化合物 29：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロ-1-(プロピ-2-イニオキシ)イソキノリン
この化合物は、その製造法が既に記載されている、化合物 7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロ-2-(プロパルギル)イソキノリン-1(2H)-オン 28と同時に形成される。それは、シリカカラムでのクロマトグラフィーにより、黄橙色の固体 29 (228 mg, 11 %)、mp 177-179℃の形態で得られ、より小さい極性の誘導体に相当する。
【０２９８】
MS 365 [M+H]+; 
1H NMR (CDCl3) δ 2.55 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 3.85, 3.96 (2xs, 2x3H), 5.26 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 6.96-7.02 (m, 2H), 7.42 (dd, J = 2.6およびJ = 9.2 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 7.64-7.72 (m, 3H); 
13C NMR (CDCl3): δ 54.6, 55.5, 55.9, 75.0, 78.8, 102.8, 114.3, 119.3, 122.8, 125.3, 126.0, 128.5, 129.8, 138.2, 139.9, 157.4, 159.2, 160.7
【０２９９】
化合物 30：2-(7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロ-1-オキソイソキノリン-2(1H)-イル)エタンニトリル
45 mLのDMF中の化合物 6 (1.47 g, 4.5mmol)、K2CO3 (622 mg, 4.5 mmol)の混合物を、周囲温度で15分間撹拌する。ブロモアセトニトリル (313 μL, 4.5 mmol)を加え、該溶液を周囲温度で撹拌する。3時間後、100 mLの水を加え、混合物を4×100 mLの酢酸エチルで抽出する。有機相を合わせ、2×20 mLのNaClの飽和水溶液で洗浄し、次いで、MgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。得られる黄色の固体を、シリカカラムでのクロマトグラフィー(シクロヘキサン／酢酸エチル 95/5)により精製する。黄色の粉末の形態で、980 mg (60%)の化合物 30を回収する。
【０３００】
mp 194-196℃; 
MS 366 [M+H]+; 
1H NMR (DMSO-d6): δ 3.85 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.65 (s, 2H), 7.14-7.19 (m, 2H), 7.46-7.61 (m, 4H), 7.80 (d, J = 2.4 Hz, 1H); 13C NMR (DMSO, 300 MHz): δ 34.6, 55.4, 55.9, 108.9, 114.8, 115.6, 120.6, 121.9, 123.3, 124.1, 124.9.130.9, 133.8, 136.5, 159.7, 159.8, 161.0
【０３０１】
化合物 31：2-(7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1-イルオキシ)エタンニトリル
この化合物は、その合成法が前で記載されている、化合物 2-(7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロ-1-オキソイソキノリン-2(1H)-イル)エタンニトリル 30と同時に形成される。それは、シリカカラムでのクロマトグラフィーにより、黄色の固体 (118 mg, 11 %), mp 192-194℃の形態で得られ、より小さい極性の誘導体に相当する。
【０３０２】
MS 366 [M+H]+;
1H NMR (CDCl3) δ 3.86 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 5.27 (s, 2H), 6.98-7.02 (m, 2H), 7.46-7.51 (m, 2H), 7.67-7.71 (m, 3H); 
13C NMR (CDCl3): δ 51.2, 55.5, 56.0, 102.3, 114.5, 115.4, 118.8, 123.0, 125.9, 126.2, 127.8, 129.8, 138.9, 139.5, 156.0.159.6, 160.9
【０３０３】
化合物 32：3-(4-ブロモフェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン
分子 32の合成は、4-メトキシフェニル 酢酸を4-ブロモフェニル 酢酸に置き換える以外は、Bisagniら, Tetrahedron 1996, 52, 10427-10440による文献に記載された実験計画に従って行われる。白色の固体の形態で、化合物 32 (7.18 g, 90 %)を得る。
【０３０４】
mp >250℃; 
MS 330および332 [M+H]+; 
1H NMR (DMSO-d6): δ 3.88 (s, 3H), 6.93 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 2.6 and J = 8.6 Hz, 1H), 7.61-7.74 (m, 6H), 11.54 (br s, 1H)
【０３０５】
化合物 33：7-メトキシ-3-(4-((トリメチルシリル)エチニル)フェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
45 mLのDMFおよび12 mLのジイソプロピルエチルアミン中の臭素化誘導体 32 (1 g, 3.03 mmol)、ヨウ化銅 (29 mg, 0.15mmol)、Pd(PPh3)2Cl2 (53mg, 0.076mmol,)およびトリメチルシリルアセチレン (915 μL, 6.1mmol)の混合物を、アルゴン下、80℃で24時間撹拌する。反応混合物をセライトで濾過し、濾液を100 mLの水および500 mLの酢酸エチルに溶解する。有機相を中性までNH4Clの飽和水溶液で洗浄し、MgSO4で乾燥し、減圧下に蒸発する。得られる固体を、シリカカラムでのクロマトグラフィー(シクロヘキサン／酢酸エチル 9/1)により精製し、白色の粉末の形態で、400 mg (40 %)の生成物 33を回収する。
【０３０６】
mp 133-135℃; 
MS 348 [M+H]+; 
1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 0.27 (s, 9H), 3.95 (s, 3H), 6.78 (s, 1H), 7.30 (dd, J = 2.7およびJ = 5.8 Hz, 2H), 7.51-7.67 (m, 5H), 7.80 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 9.9 (br s, 1H)
【０３０７】
化合物 34：3-(4-ブロモフェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
25 mLの酢酸エチルで希釈された硝酸の53% 水溶液 (6 mL, 50 mmol)を、20 mLの酢酸エチルおよび40 mLの酢酸中の懸濁状態の化合物 32 (4 g, 12.1 mmol)に加える。該懸濁液を50℃で2時間加熱する。100 mLの水の存在下で、沈殿を形成し、それを濾過し、乾燥し、トルエンから再結晶し、橙色の固体の形態で、4 g (89%)の化合物 34 を得る。
【０３０８】
mp 222-224℃; 
MS 375および377 [M+H]+; 
1H NMR (DMSO-d6): δ 3.93 (s, 3H), 7.45-7.55 (m, 3H), 7.67 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.69-7.75 (m, 3H), 10.5 (br s, 1H)
【０３０９】
化合物 35：7-メトキシ-4-ニトロ-3-(4-((トリメチルシリル)エチニル)フェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
分子 35の製造は、分子 33を合成するために前に記載された実験計画に従って、化合物 34から出発して行われる。これらの条件下、黄色の粉末の形態で、所期の生成物 35 (2.45 g, 75%)を回収する。
【０３１０】
mp 178-180℃; 
MS 393 [M+H]+; 
1H NMR (DMSO, 300 MHz): δ 0.25 (s, 9H), 3.93 (s, 3H), 7.47-7.6 (m, 5H), 7.65 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 12.3 (br s, 1H);
13C NMR (DMSO-d6): δ 54.9, 55.7, 92.0, 108.2, 123.2, 123.5, 123.6, 123.9, 125.9, 128.7, 130.0, 131.2, 131.8, 136.9.159.2, 160.6
【０３１１】
化合物 36：3-(4-エチニルフェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
100 mLの蒸留されたTHF中の化合物 35 (2 g, 5.1 mmol)溶液に、シリカ上のトリブチルアンモニウム フルオライド (5g, 7.61 mmol)を加える。該混合物を周囲温度で4時間撹拌する。次いで、溶液をセライトで濾過し、濾液を減圧下に蒸発する。次いで、粗生成物を、シリカカラムでのクロマトグラフィー(シクロヘキサン／酢酸エチル 7/3)により精製する。黄色の粉末の形態で、化合物 36  (1.33 g, 81%)を回収する。
【０３１２】
mp 246-248℃;
MS 321 [M+H]+; 
1H NMR (DMSO-d6): δ 3.91 (s, 3H), 4.37 (s, 1H), 7.49-7.54 (m, 3H), 7.61 (m, 2H), 7.68 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 12.2 (br s, 1H);
13C NMR (DMSO-d6): δ 55.7, 82.7, 108.2, 123.1, 123.5, 123.6, 125.9, 128.7, 130.2, 131.2, 132.0, 136.9, 159.1, 160.5
【０３１３】
化合物 37：3-(4-(2-(2-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
18 mLの95°エタノール中の、A. W. Chwabacherら (J. Org. Chem. 1998, 65(5), 1717)に従って得られる、テトラエチレングリコール ジメタンスルホネート (5.25 g, 15 mmol)の溶液に、アジ化ナトリウム (1.0 g)を加える。反応混合物を24時間還流する。次いで、溶媒を蒸発し、粗反応を100 mLの塩水に加え、エーテル 3×100 mLで抽出する。有機相をMgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてヘキサン中のAcOEtの勾配 (1/1〜3/1)を用いるシリカカラムでのクロマトグラフィーにより精製する。2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル モノ-メタンスルホネート 47 (2.10 g, 47%)を得、それを次の段階に直接用いる。
【０３１４】
DMF (6 mL)中の3-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン (化合物 45) (130 mg, 0.48 mmol)の混合物に、2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル メタンスルホネート (175 mg, 0.58 mmol)およびCs2CO3 (190 mg, 0.58 mmol)を加える。反応混合物を80℃で24時間加熱する。溶媒を蒸発し、粗反応物を水 (100 mL)に加え、CH2Cl2 (3×100 mL)で抽出する。有機相をMgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてCH2Cl2中のEtOHの勾配 (1〜3%)を用いるシリカカラムクロマトグラフィーにより精製する。中間体 3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン (52 mg, 23%)を得、それを次の段階に直接用いる。
【０３１５】
E. Bisagniらによって記載された条件 (Tetrahedron, 1996, 52, 10427-10440)に従って、前で得られた化合物 3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オンのニトロ化を行い、化合物 3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリ-1(2H)-オンを収率50%で得る。
【０３１６】
MS 512 [M-H]+; 
1H NMR (CDCl3) δ 8.63 (1H, br s), 7.82 (1H, br s), 7.63 (1H, d), 7.42 (3H, m), 7.03 (2H, d), 4.19 (2H, t), 3.96 (3H, s), 3.89 (2H, t), 3.71 (10H, m), 3.38 (2H, t);
分析 C24H27N5O8.H2Oに対する計算値: C, 54.23; H, 5.50, 実測値: C, 54.49; H, 5.21
【０３１７】
周囲温度で、3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン (56 mg, 0.11 mmol)、トリフェニルホスフィン (52 mg)およびTHF-水 (1/4 v/v, 1 mL)の混合物を、4日間撹拌する。混合物を減圧下に蒸発し、得られる残渣を、溶出液としてCH2Cl2/EtOH/NH4OH混液 90/10/5を用いるシリカカラムでのクロマトグラフィーにより精製し、所期の化合物 37 (20 mg, 38%)を得る。
【０３１８】
MS 488 (M+H);
1H NMR (CDCl3) δ 7.75 (1H, d), 7.57 (1H, d), 7.35 (1H, d), 7.30 (1H, dd), 6.98 (1H, d), 4.16 (2H, t), 3.88 (3H, s), 3.81 (2H, t), 3.66 (2H, m), 3.57 (4H, m), 3.48 (2H, m), 3.36 (2H, t);
分析 C24H29N3O8.H2Oに対する計算値： C, 57.02; H, 6.18, 実測値: C, 57.41; H, 6.39
【０３１９】
化合物 38：4-エチニル-1,7-ジメトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン
化合物 4-ブロモ-1,7-diメトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン (化合物 26) (187 mg, 0.5 mmol)、カリウム (トリメチルシリル)エチニルトリフルオロボレート (133 mg, 0.65 mmol)、パラジウム ジアセテート (3.5 mg, 0.015 mmol)、RuPhos (14 mg, 0.03 mmol)および2 mLの蒸留THF／脱気H2Oの混液 (10/1)に溶解された炭酸カリウム (318 mg, 1.5 mmol)の混合物を、アルゴン下で2時間還流する。反応媒体をシリカで濾過し、次いで、真空下に濃縮する。粗生成物をシリカカラム (シクロヘキサン／ジクロロメタン, 7/3)で精製する。褐色の固体の形態で、182 mg (93%)の1,7-ジメトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-((トリメチルシリル)エチニル)イソキノリン 中間体を得、それを次の段階に直接用いる。
【０３２０】
25 mLの蒸留THF中の1,7-ジメトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-((トリメチルシリル)エチニル)イソキノリン (175 mg, 0.447 mmol)の溶液に、シリカに吸着されたトリブチルアンモニウム フルオライド (450 mg, 0.67 mmol)を加える。混合物を周囲温度で一晩撹拌する。反応溶液をセライトで濾過し、次いで、濾液を減圧下に濃縮する。次いで、粗生成物をシリカカラム (シクロヘキサン／ジクロロメタン, 1/1)で精製する。灰緑色の粉末の形態で、133 mg (90%)の所期の化合物 38 を得る。
【０３２１】
mp 209-210℃;
MS 320 [M+H]+; 
1H NMR (CDCl3) δ 3.52 (s, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 4.20 (s, 3H), 7.00 (m, 2H), 7.38 (dd, J = 2.7およびJ = 9.1 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.14-8.24 (m, 3H);
13C NMR (CDCl3) δ 53.8, 55.3, 55.6, 80.1, 84.9, 102.5, 104.1, 113.2, 118.6, 123.3, 127.1, 131.0, 132.3, 133.2, 134.3, 150.4, 158.3, 158.7, 160
【０３２２】
化合物 39：4-(ピロール-1-イル)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
HOAc (5 mL)中の4-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (化合物 1, 80 mg, 0.27 mmol)の懸濁液に、撹拌下、0℃で、ジメトキシテトラヒドロフラン (42 μL, 0.32 mmol)を加え、次いで、混合物を還流下に2時間加熱する。冷却した反応混合物に、水 (10 mL)および14% NH4OH (2 mL)を導入する。形成される沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥する。濾液をCH2Cl2で抽出し、次いで、有機相をMgSO4で乾燥し、溶媒の蒸発後に得られる残渣と前で得られた沈殿物を合わせ、該混合物を、溶出液としてCH2Cl2 中のエタノールの勾配 (0〜5%)を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、白色の固体の形態で、所期の化合物 39 (26 mg, 28%)を得る。
【０３２３】
mp 238℃;
1H NMR (CDCl3): δ 9.42 (1H, br s), 7.82 (1H, d, J=3Hz), 7.25 (1H, dd, J=6Hz, J=3Hz), 7.18 (2H, d, J=9Hz), 7.05 (1H, d, J=9Hz), 6.85 (2H, d, J= 9Hz), 6.66 (2H, d, J=1.8Hz), 6.29 (2H, d, J=1.8Hz), 6.29 (2H, d, J=1.8Hz), 3.96 (3H, s), 3.81 (3H, s);
MS 347 (M+H);
分析 C21H18N2O3 ・0.5 H2Oに対する計算値: C, 70.98; H, 5.07; N, 7.88. 実測値: C, 70.99; H, 5.41; N, 7.57
【０３２４】
化合物 40：4-(ピペリジン-1-イル)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
CH3CN (5 mL)中に溶解した、4-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (化合物 1, 100 mg, 0.33 mmol)およびグルタルアルデヒド (H2O中25%, 0.377 mL, 0.99 mmol)の溶液に、ナトリウム シアノボロハイドライド (21 mg, 0.33 mmol)をゆっくりと加える。次いで、酢酸 (3滴)を導入し、反応混合物を周囲温度で2時間撹拌後、水 (15 mL)に注ぐ、得られる沈殿物を濾過し、真空下に乾燥し、白色の固体の形態で、所期の化合物 40 (80 mg, 66%)を得る。
【０３２５】
mp 206℃;
1H NMR (CDCl3) δ 8.16 (1H, br s), 7.95 (1H, d), 7.82 (1H, d), 7.36 (2H, d), 7.34 (1H, dd), 7.01 (2H, d), 3.96 (3H, s), 3.90 (3H, s),
MS 387 (M+Na);
分析 C21H18N2O3 ・0.5 H2Oに対する計算値: C, 70.77; H, 6.7; N, 7.5. 実測値: C, 70.63; H, 6.41; N, 7.63
【０３２６】
化合物 41：4-ヒドロキシ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
酢酸 (1 mL)および硫酸 (0.5 mL)中に溶解した、4-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (100 mg, 0.33 mmol)の溶液に、0℃で、水 (0.5mL)中の亜硝酸ナトリウム (24.8 mg, 0.36 mmol)の溶液をゆっくりと加える。低温状態で30分間、撹拌下に放置し、次いで、最少量の水 (0.2 mL)中に溶解したアジ化ナトリウム (25.7mg, 0.39 mmol)をゆっくりと導入する。ずっと低温条件下、さらに3時間撹拌を維持し、次いで、反応混合物に水 (10 mL)を注ぎ、形成される残渣を濾過により集める。溶出液としてCH2Cl2中のエタノールの勾配 (0〜2%)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、白色の固体の形態で、所期の化合物 41 (31 mg, 31%)に相当する、非常に大きな易動性を有する化合物を単離できる。
【０３２７】
1H NMR (CDCl3) δ 7.91 (1H, d), 7.74 (1H, d), 7.41 (2H, d), 7.16 (1H, dd), 6.85 (2H, d), 6.75 (1H, br s), 4.60 (1H, br s), 3.98 (3H, s), 3.78 (3H, s); MS 295 (M-2H)
【０３２８】
化合物 44：3-(4-(ベンジルオキシ)フェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン
4-メトキシフェニル 酢酸を4-ベンジルオキシフェニル 酢酸に置き換えて、E. Bisagniらによって記載された方法 (Tetrahedron, 1996, 52, 10427-10440)に従って、この化合物の合成は行われた。しかしながら、中間体、2-(4-(ベンジルオキシ)フェニル)-3-(4-メトキシフェニル)プロペ-2-エノイル アジドの不安定性のため、それは、無水エタノール中、還流下に加熱することによりカルバメートにすぐに変換される。エチル 1-(4-(ベンジルオキシ)フェニル)-2-(4-メトキシフェニル)ビニルカルバメートの環化は、トリブチルアミンの存在下のジフェニルエーテル (3%, v/v)中で、還流下に3.5時間加熱することにより行われ、収率51%で、所期の生成物 44を得る。
【０３２９】
mp > 260℃;
MS 380 [M+Na]+;
1H NMR (DMSO-d6): δ 11.45 (1H, br s), 7.76 (2H, d), 7.66 (2H, m), 7.42 (6H, m), 7.15 (2H, d), 6.87 (1H, s), 5.22 (2H, s), 3.91 (3H, s);
分析 C23H19NO3 ・1/3 H2Oに対する計算値: C, 76.02; H, 5.45; N, 3.85, 実測値: C, 76.01; H, 5.47; N, 3.93
【０３３０】
化合物 45：3-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン
3-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン 3-(4-(ベンジルオキシ)フェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン (150 mg, 0.42 mmol)、Pd/C (10%, 70 mg)および無水エタノール (60 mL)の混合物を、周囲温度で、常圧の水素化で18時間撹拌する。次いで、触媒を濾過し、アルコールで洗浄し、次いで、溶媒を減圧下に蒸発する。残渣にエチルエーテル (50 mL)を加え、次いで、灰色の固体を集め、それが所期の化合物 3-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン 45 (90 mg, 80%)に相当する。
【０３３１】
mp 255℃;
1H NMR (DMSO-d6): δ 11.36 (1H, br s), 9.88 (1H, br s), 7.68-7.57 (4H, m), 7.36 (1H, dd), 6.88 (2H, d), 6.80 (1H, s), 3.98 (3H, s), 3.90 (3H, s);
MS 268 (M+H); 
分析 C16H13NO3 ・1/3 H2Oに対する計算値: C, 70.32; H, 5.04; N, 5.13. 実測値: C, 69.92; H, 4.95; N, 5.09
【０３３２】
化合物 46：3-(4-(ベンジルオキシ)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オンを3-(4-(ベンジルオキシ)フェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オンに置き換えて、E. Bisagniらによって記載されたニトロ化の方法 (Tetrahedron, 1996, 52, 10427-10440)に従って、この化合物の合成は行われる。それは、黄色の粉末の形態 (収率77%)で得られる。
【０３３３】
mp 252-254℃;
MS 401 [M-H]+;
1H NMR (DMSO-d6): δ 12.11 (1H, s), 7.75 (1H, d), 7.63 (1H, d), 7.55-7.35 (8H, m), 5.21 (2H, s), 3.36 (3H, s);
分析 C23H18N2O5に対する計算値: C, 68.65; H, 4.51; N, 6.96, 実測値: C, 68.72; H, 4.49; N, 6.72
【０３３４】
化合物 47：3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
18 mLの95°エタノール中の、A. W. Chwabacherら (J. Org. Chem. 1998, 65(5), 1717)に従って得られるテトラエチレングリコール ジメタンスルホネート (5.25 g, 15 mmol)の溶液に、アジ化ナトリウム (1.0 g)を加える。反応混合物を24 時間還流する。次いで、溶媒を蒸発し、粗反応物を100 mLの塩水に加え、エーテル (3×100 mL)で抽出する。有機相をMgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてヘキサン中のAcOEtの勾配 (1/1〜3/1)を用いるシリカカラムでのクロマトグラフィーにより精製する。2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル モノ-メタンスルホネート 47 (2.10 g, 47%)を得、それを次の段階に直接用いる。
【０３３５】
DMF (6 mL)中の3-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン (化合物 45) (130 mg, 0.48 mmol)の混合物に、2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル メタンスルホネート (175 mg, 0.58 mmol)およびCs2CO3 (190 mg, 0.58 mmol)を加える。反応混合物を80℃で24時間加熱する。次いで、溶媒を蒸発し、粗反応物を水 (100 mL)に加え、CH2Cl2 (3×100 mL)で抽出する。有機相をMgSO4で乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてCH2Cl2中のEtOHの勾配 (1〜3%)を用いるシリカカラムでのクロマトグラフィーにより精製する。中間体 3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オン (52 mg, 23%)を得、それを次の段階に直接用いる。
【０３３６】
E. Bisagniらによって記載された条件 (Tetrahedron, 1996, 52, 10427-10440)に従って、前で得られた化合物 3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシイソキノリン-1(2H)-オンのニトロ化は行われ、50%の収率で、所期の生成物 3-(4-(2-(2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン 47を得る。
【０３３７】
MS 512 [M-H]+;
1H NMR (CDCl3) δ 8.63 (1H, br s), 7.82 (1H, br s), 7.63 (1H, d), 7.42 (3H, m), 7.03 (2H, d), 4.19 (2H, t), 3.96 (3H, s), 3.89 (2H, t), 3.71 (10H, m), 3.38 (2H, t);
分析 C24H27N5O8.H2Oに対する計算値: C, 54.23; H, 5.50, 実測値: C, 54.49; H, 5.21
【０３３８】
化合物 48：ジメチル 1-[7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-1-オキソ-1,2-ジヒドロイソキノリン-4-イル]-1H-[1,2,3]トリアゾール-4,5-ジカルボキシレート
AcOH (0.7 mL)中の4-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (化合物 1) (47 mg, 0.16 mmol)の溶液に、DMF (0.2ml)中の亜硝酸ナトリウム (12 mg, 0.17 mmol)の溶液を、0℃で滴下する。混合物を0℃で30分間撹拌し、次いで、反応混合物にアジ化ナトリウム (12.3 mg, 0.19 mmol)を加え、該混合物を0℃で1時間撹拌する。10 mLの水を添加することにより反応を停止し、該媒体を3×10 mlのジクロロメタンで抽出する。有機相を3×10 mLの水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。得られる残渣をアルゴン雰囲気下に置き、1 mLのジオキサンに溶解し、次いで、ジメチル アセチレンジカルボキシレート (77.7 μl, 0.63 mmol)を該溶液に加え、次いで、混合物を50℃で12時間加熱する。次いで、溶媒を蒸発し、水を加え、媒体をEtOAcで3回抽出する。有機相をMgSO4で乾燥し、濾過し、次いで蒸発する。残渣を、溶出液としてCH2Cl2-エタノール混液 (100%〜98/2)を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフィーにより精製し、黄色の固体の形態で、所期の化合物 48 (10 mg, 13%)を得る。
【０３３９】
mp 220℃;
1H NMR (CDCl3): δ 9.76 (1H, br s), 7.82 (1H, s), 7.28 (1H, dd), 7.23 (2H, d), 6.86 (2H, d), 6.75 (1H, d), 3.98 (3H, s), 3.95 (3H, s), 3.81 (3H, s), 3.69 (3H, s); MS 487 (M+23)
【０３４０】
化合物 49：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-モルホリノイソキノリン-1(2H)-オン
【化３２】
0005856086.tif 000066
【０３４１】
および化合物 50：4-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチルアミノ)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
【化３３】
0005856086.tif 000067
【０３４２】
水／CH3CNの混液 (1:1; 4 mL)に溶解された1,4-アンヒドロエリトリトール (34 mg, 0.33 mmol)を含むフラスコに、NaIO4 (66 mg, 0.33 mmol)を加え、該混合物を撹拌下に18時間維持する。次いで、4-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (化合物 1) (100 mg, 0.33 mmol)およびNaBH3CN (63 mg, 1 mmol)前もって製造された2.2'-オキシビス(アセトアルデヒド)の溶液に加える。次いで、3滴の酢酸を加え、該媒体を周囲温度で3時間撹拌する。10 mLの水を加えて反応を停止する。該媒体を3×10 mLのジクロロメタンで抽出する。有機相を3×10 mLの水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。残渣を、溶出液としてジクロロメタン-エタノール (100/0〜98/2)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、連続的に、
【０３４３】
i) 白色の固体の形態で、化合物 7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-モルホリノイソキノリン-1(2H)-オン 49 (10 mg, 8%)
mp >270℃; 
1H NMR (CDCl3): δ 8.18 (1H, br s), 7.99 (1H, d), 7.83 (1H, dd), 7.37 (3H, m), 7.03 (2H, d), 3.97 (3H, s), 3.91 (3H, s), 3.72 (4H, m), 2.90 (2H, m), 2.75 (2H, m);
MS 367 (M+H); および
【０３４４】
ii) 白色の固体の形態で、化合物 4-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エチルアミノ)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン 50 (15 mg, 12%)
mp 139℃; 
1H NMR (CDCl3): δ 8.71 (1H, br s), 7.89 (1H, d), 7.82 (1H, s), 7.45 (2H, d), 7.34 (1H, dd), 7.01 (2H, d), 3.94 (3H, s), 3.87 (3H, s), 3.60 (2H, t), 3.49 (2H, t), 3.38 (2H, t), 3.03 (2H, t), 1.75 (1H, br s);
MS 385 (M+H)
を得る。
【０３４５】
化合物 56：4-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-ヒドロキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
【化３４】
0005856086.tif 000068
【０３４６】
シュレンク(Schlenk) フラスコ中で、7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン (化合物 6) (150 mg, 0.46 mmol)およびベンジルトリエチルアンモニウム クロライド (732 mg, 3.22 mmol)を37% 塩酸 (13 mL)に溶解する。該混合物を130℃で20時間加熱する。減圧下に蒸発後、水 (20 ml)を加え、形成される沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥し、溶出液としてCH2Cl2／エタノール: 100/0〜98/2の勾配を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、黒色の固体の形態で、化合物 56 (6 mg, 4%)を得る。
【０３４７】
1H NMR (DMSO-d6) δ 11.42 (s, 1H), 10.20 (s, 1H), 9.82 (s, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.36 (d, 2H), 7.33 (s, 1H), 6.85 (d, 2H)
【０３４８】
化合物 57：7-ヒドロキシ-3-(4-ヒドロキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン:
【化３５】
0005856086.tif 000069
【０３４９】
化合物 7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (300 mg, 1 mmol)、ベンジルトリエチルアンモニウム クロライド (1.68 g, 7 mmol)および37% 塩酸 (20 mL)をシールド管に導入する。該媒体を140℃で20時間加熱し、次いで、混合物を減圧下に蒸発乾固する。得られる残渣に水 (20 mL)を加えた後、沈殿が形成される。それを濾過し、乾燥し、褐色の固体形態で、所期の7-ヒドロキシ-3-(4-ヒドロキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン 57 (200 mg, 74%)を得る。
【０３５０】
1H NMR (DMSO-d6) δ 11.14 (br s, 1H), 9.86 (br s, 1H), 9.74 (br s, 1H), 7.51 (m, 4H), 7.16 (s, 1H), 6.82 (s, 2H), 6.67 (s, 1H);
MS 252 [M+H]+;
分析 C15H11NO3に対する計算値: C, 71.14; H, 4.38; N, 5.53. 実測値: C, 69.77; H, 4.53; N, 5.86
【０３５１】
化合物 58：6-メトキシ-2-(4-メトキシフェニル)キノリン-4(1H)-オン
【化３６】
0005856086.tif 000070
【０３５２】
100-mL フラスコ中で、p-アニシジン (300 mg, 2.4 mmol)を2-メトキシエタノール (20 mL)に溶解する。前記溶液に、エチル 3-(4-メトキシフェニル)-3-オキソプロパノエート (459 μl, 2.4 mmol)を加え、次いで、反応媒体に3滴の酢酸も加える。該混合物を120℃で24時間加熱する。次いで、この混合物を減圧下に蒸発し、得られる残渣をジフェニル エーテル (10 mL)で希釈し、次いで、沸騰するジフェニル エーテル (25 mL)を含む三頸フラスコに加える。該媒体を還流下に1時間加熱し、次いで、冷却された該溶液をヘキサン (100 mL)に注ぐ。形成される沈殿物を濾過し、ヘキサンで洗浄し、乾燥し、溶出液としてCH2Cl2／エタノール: 100/0〜98/2の勾配を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、褐色の粉末の形態で、化合物 58 (100 mg, 15%)を得る。
【０３５３】
1H NMR (DMSO-d6) δ 11.55 (s, 1H), 7.76 (d, 2H), 7.69 (d, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.10 (d, 2H), 6.26 (s, 1H), 3.82 (s, 6H); 
MS 282 [M+H]+;
分析 C17H15 NO3. 0.1 H2Oに対する計算値: C, 72.05; H, 5.36; N, 4.64; 実測値: C, 71.85; H, 5.27; N, 4.94
【０３５４】
化合物 59：3-(4-(3,3-ジメチルブチ-1-イニル)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
【化３７】
0005856086.tif 000071
【０３５５】
化合物 59は、2-メチルブチ-3-イン-2-オールおよびその合成法が前に示される32から出発する以外は、化合物 60と同じようにして合成される。
1H NMR (300 mHz, DMSO): 12.21 (1H), 7.26 (1H), 7.65 (1H), 7.52 (1H), 7.50 (4H), 5.54 (1H), 3.92 (1H), 1.48 (6H)
【０３５６】
化合物 60：3-(4-(3,3-ジメチルブチ-1-イニル)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
【化３８】
0005856086.tif 000072
【０３５７】
シールド管中のTHF/TEAの混液 (1 ml/0.75 ml)中の32 (100 mg, 0.26 mmol, 1.0)溶液に、アルキン (87.6 mg, 1.06 mmol, 4.0 当量) PdCl2(PPh3) (15 mg, 0.021 mmol, 0.08 mol%)およびCuI (2.0 mg, 0.011 mmol, 0.04 mol%)を加える。該反応媒体を70℃で18時間撹拌する。室温に戻した後、反応媒体を減圧下に濃縮し、酢酸エチルで希釈し、セライトで濾過し、酢酸エチルで洗浄する。次いで、粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィー (c-ヘキサン／酢酸エチル 3:2)により精製し、黄色の固体の形態で、3-(4-(3,3-ジメチルブチ-1-イニル)フェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン 60 (70 mg, 収率 = 71%)得る。
【０３５８】
1H NMR (300 mHz, DMSO): 9.02 (1H), 7.8 (1H), 7.65 (1H), 7.42 (2H), 7.38 (3H), 3.96(3H), 1.33 (9H)
【０３５９】
化合物 61：2-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
【化３９】
0005856086.tif 000073
【０３６０】
アルゴン下、25-mL フラスコ中で、7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (100 mg, 0.38 mmol)をDMF (5 mL)に溶解する。0℃で水素化ナトリウム (油中60%, 30 mg, 0.76 mmol)を加える。0℃で30分間撹拌後、O-メシチレンスルホニルヒドロキシルアミン (文献 (Y. Tamura ら, Synthesis 1977, 1)に従って新たに製造) (82 mg, 0.38 mmol)を周囲温度で加える。12時間撹拌を維持し、次いで、反応媒体に水 (20 mL)を加える。この媒体をジクロロメタンで抽出する。有機相を水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてCH2Cl2/エタノール: 100/0〜98/2の勾配を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、橙色の固体の形態で、化合物 61 (51 mg, 46%)を得る。
【０３６１】
1H NMR CDCl3 δ 7.82 (s, 1H), 7.50 (t, 3H), 7.29 (d, 1H), 7.01 (d, 2H), 6.50 (s, 1H), 5.18 (s, 2H), 3.93 (d, 6H);
MS 297 [M+H]+
【０３６２】
化合物 62：2-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
【化４０】
0005856086.tif 000074
【０３６３】
アルゴン下、25-mL フラスコ中で、7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン (化合物 D5, 150 mg, 0.46 mmol)を、5 mLのジメチルホルムアミドに溶解する。0℃で炭酸カリウム (317 mg, 2.3 mmol)を加える。0℃で30分間撹拌後、O-メシチレンスルホニルヒドロキシルアミン (文献 (Y. Tamura ら, Synthesis 1977, 1)に従って新たに製造) (93 mg, 0.46 mmol) を加える。周囲温度で12時間撹拌を維持する。次いで、媒体を20 mLのN 塩酸溶液で中和し、次いで、3×10 mLのジクロロメタンで抽出する。有機相を3×10 mlのH2Oで洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてCH2Cl2／エタノール: 100/0〜97/3の勾配を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、黄色の固体の形態で、化合物 62 (65 mg, 41%)を得る。
【０３６４】
1H NMR CDCl3 δ 7.88 (s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.40 (d, 3H), 7.04 (d, 2H), 5.10 (s, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.88 (s, 3H);
MS 342 [M+H]+
【０３６５】
化合物 64：1,7-ジメトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリンおよび化合物 65, 7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-2-メチルイソキノリン-1(2H)-オン
アルゴン下、25-mL フラスコ中で、7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (200 mg, 0.71 mmol)を5 mLのジメチルホルムアミドに溶解する。0℃で炭酸カリウム (491 mg, 3.5 mmol)を加える。0℃で30分間撹拌後、ヨードメタン (444 μL, 7.1 mmol)を加える。周囲温度で、撹拌を12時間維持する。該媒体を20 mLの1N 塩酸溶液で中和し、次いで、3×10 mLのジクロロメタンで抽出する。 有機相を3×10 mlのH2Oで洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてCH2Cl2／エタノール: 100/0〜95/5の勾配を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、白色の固体の形態で、化合物 64 (39 mg, 18%)を得、ベージュ色の固体の形態で、化合物 65 (122 mg, 58%)を得る。
【０３６６】
化合物 64：
【化４１】
0005856086.tif 000075
【０３６７】
1H NMR CDCl3 δ 8.11 (d, 2H), 7.70 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.03 (d, 2H), 4.25 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.90 (s, 3H);
MS 296 [M+H]+
【０３６８】
化合物 65：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-2-メチルイソキノリン-1(2H)-オン
【化４２】
0005856086.tif 000076
【０３６９】
1H NMR CDCl3 δ 7.84 (s, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.31 (d, 2H), 7.24 (d, 1H), 6.97 (d, 2H), 6.40 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.44 (s, 3H);
MS 296 [M+H]+
【０３７０】
化合物 66：7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-2-メチル-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
【化４３】
0005856086.tif 000077
【０３７１】
25-mL フラスコ中で、7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-2-メチルイソキノリン-1(2H)-オン (化合物 65, 50 mg, 0.17 mmol)を、0.5 mLの酢酸エチルおよび1.5 mLの酢酸中に溶解する。該媒体に、0℃で硝酸 (52.5%で, 38μl, 0.425 mmol)を加え、3時間撹拌を維持する。10 mlの氷水を加え、次いで、得られる黄色の沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥し、黄色の固体の形態で、化合物 66 (25 mg, 44%)を得る。
【０３７２】
1H NMR CDCl3 δ 7.91 (s, 1H), 7.50 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.03 (d, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.35 (s, 3H);
MS 341 [M+H]+
【０３７３】
化合物 67：2-(2-ヒドロキシエチル)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン
【化４４】
0005856086.tif 000078
【０３７４】
アルゴン下、25-mL フラスコ中で、化合物 7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (300 mg, 1.06 mmol)を10 mLのDMFに溶解する。次いで、炭酸カリウム (737mg, 5.3 mmol)を加える。30分間撹拌後、2-ブロモエタノール (746 μl, 10.6 mmol)を加える。100℃で24時間撹拌を維持する。周囲温度に戻るとすぐに、媒体を20 mLのN 塩酸溶液で中和し、次いで、3×10 mLのジクロロメタンで抽出する。有機相を3×10 mLのH2Oで洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。残渣を、溶出液としてシクロヘキサン-酢酸エチル (60/40)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、白色の固体の形態で、67 (35 mg, 10%)を得る。
【０３７５】
1H NMR CDCl3 δ 7.98 (d, 2H), 7.68 (d, 1H), 7.54 (d, 2H), 7.32 (d, 1H), 7.02 (d, 2H), 4.84 (d, 2H), 4.23 (br s, 1H), 4.13 (d, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.87 (s, 3H); 
MS 326 [M+H]+
【０３７６】
化合物 68：2-(2-ヒドロキシエチル)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン
【化４５】
0005856086.tif 000079
【０３７７】
アルゴン下、25-mL フラスコ中で、7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン (化合物 D5, 150 mg, 0.46 mmol)を5 mLのDMFに溶解する。次いで、炭酸カリウム (317 mg, 2.3 mmol)を加える。30分間撹拌後、2-ブロモエタノール (329 μl, 4.6 mmol)を加える。50℃で24時間撹拌を維持する。周囲温度に戻るとすぐに、媒体を20 mLの1N 塩酸溶液で中和し、次いで、3×10 mLの酢酸エチルで抽出する。有機相を3×10 mlのH2Oで洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。得られる残渣を、溶出液としてシクロヘキサン-酢酸エチルの混液 (60/40)を用いるシリカゲルカラムでのクロマトグラフにかけ、黄色の固体の形態で、所期の2-(2-ヒドロキシエチル)-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン 68 (73 mg, 43%)を得る。
【０３７８】
1H NMR CDCl3 δ 7.90 (s, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.34 (d, 2H), 7.02 (d, 2H), 4.12 (d, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 3.80 (d, 2H), 2.80 (br s, 1H); 
MS 393 [M+Na]+
【０３７９】
化合物 69：4-ヨード-7-メトキシ-1-(4-メトキシベンジルオキシ)-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン
【化４６】
0005856086.tif 000080
【０３８０】
アルゴン下、25-mL フラスコ中で、4-ヨード-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン-1(2H)-オン (500 mg, 1.23 mmol)を15 mLの無水THFに溶解する。4-メトキシベンジル アルコール (217μl, 1.84 mmol)、トリフェニルホスフィン (482 mg, 1.84 mmol)およびジイソプロピル アゾジカルボキシレート (261 μl, 1.84 mmol)を前記の溶液に加える。周囲温度で一晩撹拌後、媒体を20 mLの水で加水分解し、3×20 mLのジクロロメタンで抽出する。有機相を3×10 mLの水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮する。エーテルから再結晶することにより、化合物 69 (358 mg, 55%)を得る。
【０３８１】
1H NMR CDCl3 δ 7.94 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 6.98 (d, 2H), 6.91 (d, 2H), 6.81 (d, 2H), 6.72 (d, 2H), 5.19 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 3.74 (s, 3H);
MS 528 [M+H]+
【０３８２】
化合物 70：7-メトキシ-1-(4-メトキシベンジルオキシ)-3-(4-メトキシフェニル)-4-(トリフルオロメチル)イソキノリン
【化４７】
0005856086.tif 000081
【０３８３】
10-mL フラスコ中で、4-ヨード-7-メトキシ-1-((4-メトキシベンジル)オキシ)-3-(4-メトキシフェニル)イソキノリン (100 mg, 0.2 mmol)を2 mLの無水DMFに溶解する。ヨウ化銅 (95.2 mg, 0.5 mmol)およびメチル 2,2-ジフルオロ-2-(フルオロスルホニル)アセテート (119 μl, 0.94 mmol)を、前記の溶液に加える。80℃で一晩撹拌後、反応媒体を濾過し、30 mLのジクロロメタンで洗浄する。得られる濾液を3×10 mLの水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、真空下に濃縮し、所期の化合物 70 (75 mg, 80%)を得る。
【０３８４】
1H NMR CDCl3 δ 7.97 (s, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.37 (dd, 1H), 6.98 (d, 2H), 6.85 (d, 2H), 6.80 - 6.62 (m, 4H), 5.04 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.75 (s, 3H);
MS 470 [M+H]+
【０３８５】
化合物 71：1-アミノ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン
【化４８】
0005856086.tif 000082
【０３８６】
アルゴン下、25-mL シュレンク フラスコ中で、1-クロロ-7-メトキシ-3-(4-メトキシフェニル)-4-ニトロイソキノリン (100 mg, 0.43 mmol)をエタノール中のアンモニア飽和溶液 20 mLに溶解する。80℃で4日間撹拌後、媒体を真空下に濃縮し、次いで、溶出液としてジクロロメタン-エタノール (95/5)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、黄色の形態で、所期の化合物 71 (79 mg, 56%)を得る。
【０３８７】
1H NMR CDCl3 δ 7.81 (d, 1H), 7.60 (d, 2H), 7.45 (d, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.99 (d, 2H), 5.44 (s, 2H), 3.99 (s, 3H), 3.87 (s, 3H);
MS 326 [M+H]+
【０３８８】
化合物 72：3-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン: 
【化４９】
0005856086.tif 000083
【０３８９】
2-(4-(ベンジルオキシ)フェニル)エタン酸 (Mannekens, E.; Tourwe, D.; Lubell, W. D., Synthesis 2000, 2000 (09), 1214.1216)および4-メトキシベンズアルデヒドから出発し、Bisagniによって記載された手順 (Bisagni, E.; Landras, C.; Thirot, S.; Huel, C., Tetrahedron 1996, 52 (31), 10427-10440.)に従って、分子を製造した。次いで、O-ベンジル化された中間体を、Mannekensによって記載された方法 (Mannekens, E.; Tourwe, D.; Lubell, W. D., Synthesis 2000, 2000 (09), 1214.1216)に従って、脱ベンジル化する。
【０３９０】
1H NMR (300 mHz, CDCl3): δ 12.01 (s, 1H), 10.01 (s, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.31 (d, 1H), 6.86 (d, 2H), 3.91 (s, 3H)
【０３９１】
化合物 73：tert-ブチル 4-(7-メトキシ-4-ニトロ-1-オキソ-1,2-ジヒドロイソキノリン-3-イル)フェニル カーボネート
【化５０】
0005856086.tif 000084
【０３９２】
シールド管中、DMF (1 ml)中の3-(4-ヒドロキシフェニル)-7-メトキシ-4-ニトロイソキノリン-1(2H)-オン (50.0 mg, 0.16 mmol, 1.0 当量)、K2CO3 (22.15 mg, 0.16 mmol, 1.0 当量)およびBoc2 (34.9 mg, 0.16 mmol, 1.0 eq.)のアルゴンで脱気された溶液を、室温で18時間撹拌する。反応媒体をH2Oで希釈する。有機相を酢酸エチル(2回)で抽出し、NaClの飽和溶液(2回)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、減圧下に濃縮し、純粋な生成物 (収率= 100%)を得る。
【０３９３】
1H NMR (300 mHz, DMSO): δ 12.21 (s, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.50 (dd, 1H), 7.33 (d, 1H), 3.92 (s, 3H), 1.51 (s, 9H)
【０３９４】
化合物 74：2-(p-ヒドロキシベンジル)-3-フェニルイソキノリン-1(2H)-オン
【化５１】
0005856086.tif 000085
【０３９５】
真空下で乾燥したフラスコに、NaOtBu (68.23 mg, 0.71 mmol, 3.0 当量)、Xantphos (6.8 mg, 0.012 mmol, 5 mol%)、Pd2dba3 (10.8 mg, 0.012 mmol, 5 mol%)を加える。該試薬を、アルゴン下、CaH2を用いて蒸留したトルエン (0.8 ml)に溶解する。該赤色の溶液を、アルゴン下、超音波で30秒間脱気する。アルゴン下、CaH2を用いて蒸留したトルエン (0.8 ml)中に溶解した(Z)-1-ブロモ-2-(2-ブロモ-2-フェニルビニル)ベンゼン (80 mg, 0.24 mmol, 1.0 当量)およびp-メトキシベンジル アミン (114 mg, 0.83 mmol, 3.5 当量)の溶液を、前記触媒系に加える。添加後、反応媒体をアルゴンで脱気し、55℃で1時間30分間撹拌する。次いで、反応媒体を、一酸化炭素 (フラスコ内, 1 気圧)を用いて、55℃で25分間脱気する。次いで、反応媒体を90℃で16時間撹拌する。室温に冷却後、1N HCl 溶液 (5 ml)を用いて、反応媒体をクエンチ(quenched)する。有機相をジクロロメタン(2回)で抽出し、NaClの飽和溶液(2回)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、減圧下に濃出する。次いで、粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィー(ペンタン／ジエチル エーテル (7/3))により精製し、黄色の固体の形態で、2-(4-メトキシベンジル)-3-フェニルイソキノリン-1(2H)-オン (45 mg, 収率=54%)を得る。
【０３９６】
1H NMR (300 mHz, CDCl3): δ 8.49 (d, 1H), 7.67 (t, 1H), 7.50 (m, 2H), 7.44-7.35 (m, 3H), 7.22 (d, 2H), 6.83 (d, 2H), 6.69 (d, 2H), 5.20 (s, 2H), 3.76 (s, 3H);
13C NMR (75 mHz, CDCl3): δ 163.2 (CO); 158.6 (C); 143.9 (C); 136.5 (C); 136.0 (C); 132.5 (CH); 129.8 (CH); 129.3 (CH); 128.8 (CH); 128.4 (CH); 128.3 (CH, CH); 126.7 (CH); 125.6 (CH); 125.3 (C); 113.7 (CH); 108.2 (CH); 55.2 (-OMe); 48.0 (-CH2-)
【０３９７】
BBr3 (CH2Cl2中の(1M)溶液 170 μL)を、-78℃で、前記で得られる2-(4-メトキシベンジル)-3-フェニルイソキノリン-1(2H)-オン (30 mg, CH2Cl2 (1ml)中に0.087)を加える。橙色の溶液を0℃〜周囲温度で、1時間以上撹拌する。TLC (シクロヘキサン／酢酸エチル／トリエチルアミン 1%)が、反応の完了を示す。EtOH (2 ml)、NaHPO4の飽和水溶液およびCH2Cl2 (2 ml)を加える。抽出後、集めた有機相を乾燥(MgSO4)し、真空下に蒸発する。得られる残渣を、SiO2カラムでのクロマトグラフィー (シクロヘキサン-酢酸エチル, 1:1)により精製し、25 mgの74 (93%)を得る。
【０３９８】
1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ 9.27 (S, H); 8.41 (d, 1H, J= 14); 7.66-7.52 (m, H); 7.50-7.40 (m, 1H); 7.46-7.32 (m, 3H); 7.26-7.21 (m, 2H); 6.72 (d, J=7, 1H); 6, (d, J=7, 1H); 6.46 (s, 1H)
【０３９９】
実施例 14：本発明の化合物による、パクリタキセルに対する化学療法抵抗性の調節
「Kyu-Ho Hanら, Modulation of drug resistance by α-tubulin in paclitaxel-resistant human lung cancer cell lines European Journal of Cancer 2000 36 (12): 1565-1571」に記載されているようにして、パクリタキセルに抵抗性のNCI-H460 系列 (ATCC # HTB-177, ヒト大細胞肺癌)のクローンが選択され、NCI-H460/Rと称される。
これらの抵抗性細胞ならびに「正常な」NCI-H460細胞が、96-ウエル プレートに播種(ウエル当たり1000)され、化合物 6またはパクリタキセルまたはビンブラスチンの異なる濃度 (0.01 nM〜100 μM)と一緒に5日間 (120時間)インキュベートされる。
このインキュベーションの最後に、Hoechst 33342 (1 μg/ml)を培地に加え、それぞれの試験化合物について、120時間で、コントロールに対して50%まで細胞の数を減少する濃度を評価するため、蛍光顕微鏡 (Zeiss Axiovert 200M)下で生存細胞を数える。
【０４００】
実施例 15：本発明の化合物の抗炎症活性の評価
ラットまたはマウスの足の炎症性浮腫を誘導するため、カラギーナン(CAR) (1%, v/v)の皮内注射を行い、Winter, C. A., Risley E. A.およびNuss G.W.の方法 (Carrageenan-induced edema in the hindpaw of rats as an assay for anti-inflammatory drugs. Proc. Soc. Axp. Biol. Med, 1962, v.111: pp 544-7)に従って評価する。
【０４０１】
CARの注射前、本発明の化合物を1〜6時間、経口で与える。生理食塩水中のCARの1% 溶液が、ラットの（マウスの）右後足の下位の足底部分にs.c.経路により注射される。次いで、CARの注射後、1〜5時間の間、プレチスモグラフィー(plethysmography)により、炎症反応の体積が測定される。炎症反応の体積が、コントロール(処置なしまたはビヒクルで処置後のCAR注射)のそれと比較される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図８】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１５】
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【図１６】
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【図７】
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【図９】
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【図１０】
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【図１３】
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【図１４】
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