(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0006035238.tif 000080
（Ｉ）
（式中、
Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノカルボニル、およびニトロから選択され；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択され；
Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択され；
ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノカルボニル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ６ｂは、フルオロであり；
Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノカルボニル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノカルボニル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｘは、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
ここでＲ８がフルオロである場合、Ｒ７ｂは水素ではない）
で示される化合物、またはその塩もしくは立体異性体。
【請求項２】
Ｒ６ａ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、シクロアルキル、アルキル、またはＣ２〜１０アルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ６ａ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つはＣ２〜１０アルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ７ｘはハロアルキルである、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５が、シアノ、ハロゲン、アシル、またはアミノカルボニルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙ１が水素であり、Ｙ２が水素であり、ＲａおよびＲｂが両者ともアルキルであり、ＲｃおよびＲｄが両者ともアルキルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ６ａ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つが、Ｃ２〜１０アルキル、ハロゲン、およびシクロアルキルから選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ７ｂが、水素、アルキル、ハロゲン、またはシクロアルキルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ８が、水素、Ｃ２〜１０アルキル、ハロゲン、シクロアルキル、または置換シクロアルキルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
化合物が、
Ｉ−１:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−２:  ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−３:  ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸アミド;
Ｉ−８:  ２−（２−フルオロ−４−イソプロピル−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−１２:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１３:  ５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１４:  ５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（１,２，２，６，６−ペンタメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１６:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１７:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−（５−シクロプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロフェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１８:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１９: Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−２０: Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−（フルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;および
Ｉ−２１: ｔｒａｎｓ−５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−４−（２−（トリフルオロメチル）シクロプロピル）フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン、
から選択される化合物、またはその溶媒和物、もしくは薬学的に許容し得る塩である、請求項１記載の化合物。
【請求項１１】
化合物が、式：
【化２】
0006035238.tif 000081
Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン（Ｉ−１２）、またはその薬学的に許容し得る塩もしくは立体異性体である、請求項１記載の化合物。
【請求項１２】
薬学的に許容し得る塩がギ酸塩である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物および薬学的に許容し得る担体を含む医薬組成物。
【請求項１４】
プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）活性を介して媒介または維持された疾患または障害を治療する方法における使用のための請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、米国特許法第１１９条（ｅ）の下、２０１０年７月２１日に出願された米国特許出願第６１／３６６，４６４号の優先権を主張するものであり、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
プロテインキナーゼＣ（「ＰＫＣ」）は、細胞増殖、遺伝子発現の調節、およびイオンチャネル活性を含む様々な細胞機能に関与するシグナル伝達における重要な酵素である。アイソザイムのＰＫＣファミリーは、少なくとも１１種類の異なるプロテインキナーゼを含み、それらは相同性および活性化物質への感受性に基づいて、少なくとも３種のサブファミリーに分類することができる。各アイソザイムは、アイソザイムに特有の（「変動性」または「Ｖ」）ドメインが点在する相同性（「保存された」または「Ｃ」）ドメインを多数含む。「古典的」または「ｃＰＫＣ」サブファミリーのメンバーであるＰＫＣα、βｉ、βiiおよびγは、４種の相同性ドメイン（Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３およびＣ４）を含み、活性化にカルシウム、ホスファチジルセリン、およびジアシルグリセロールまたはフォルボールエステルを必要とする。「新規」または「ｎＰＫＣ」サブファミリーのメンバーであるＰＫＣδ、ε、ηおよびθは、Ｃ２相同性ドメインを欠き、活性化にカルシウムを必要としない。最後に「非典型的」または「αＰＫＣ」サブファミリーのメンバーであるＰＫＣζおよびλ／ｉは、Ｃ２相同性ドメインとＣ１相同性ドメインの半分を共に欠き、ジアシルグリセロール、フォルボールエステルおよびカルシウムに非感受性である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本開示は、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）の阻害剤として有用であり、よってＰＫＣの活性により媒介または維持される様々な疾患および障害の治療に有用である化合物に関する。本開示はまた、これら化合物を含んでなる医薬組成物、様々な疾患および障害の治療におけるこれらの化合物の使用方法、これらの化合物を調製するプロセス、ならびにこれらのプロセスにおける有用な中間体にも関する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
例示的な化学構造が、本開示全体をとおして提供される。例として、かかる化合物は、以下の式：
【化１】
0006035238.tif 000002
（Ｉ）
（式中、
Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、およびニトロから選択され；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択され；
Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択され；
ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ６ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｘは、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
ここでＲ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは水素ではなく；
ここでＲ８がフルオロである場合、Ｒ７ｂは水素ではなく；
ここでＲ７ｂがシクロプロピルである場合、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ８、およびＲ７ｘの少なくとも１つは水素ではなく、
ここでＲ８がシクロプロピルである場合、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ７ｘの少なくとも１つは水素ではない）
またはその塩もしくは立体異性体により表わされる。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
本開示は、プロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）の阻害剤として有用であり、よってＰＫＣの活性により媒介または維持される様々な疾患および障害を治療するのに有用である化合物に関する。本開示はまた、これら化合物を含んでなる医薬組成物、様々な疾患および障害の治療におけるこれら化合物の使用方法、これらの化合物を調製するプロセス、ならびにこれらのプロセスにおける有用な中間体にも関する。
【０００６】
本発明を更に説明する前に、本発明が記載された特定の実施形態に限定されず、従って、もちろん変更され得ることを理解しなければならない。本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書に記載の用語は特定の実施形態のみを記載することを目的としており、限定を意図するものでないことも理解しなければならない。
【０００７】
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いられる単数形「a」、「an」および「the」は、文脈において明確に示されない限り、複数の参照を含むことに留意しなければならない。更に、特許請求の範囲が、任意の選択的要素を除外するよう記載され得ることにも留意されたい。従って、本記述は、特許請求の範囲の記載に関連して、、「唯一」「のみ」のような排他的用語の使用または「否定的」限定の使用に関し、予め言及することを意図している。
【０００８】
値の範囲が示されている場合、文脈において明確に示されない限り、その範囲の上限から下限までの間の、下限の単位の１０分の１までの各介在値、および、前記の範囲の任意のその他の記載値または介在値は、具体的に考慮されるべきことを理解されたい。これら小範囲の上限および下限は、それぞれ独立して、前記小範囲内に含まれてもよく、また本発明内に包含され、記載された範囲において具体的に除外された限界のいかなるものにも従うものとする。記載された範囲が限界の一方または両方を含む場合、それらの片方または両方を除外する範囲もまた本発明に含まれるものとする。
【０００９】
本明細書において議論される刊行は、本願の出願日よりも前にそれらの開示のためだけに提供されたものである。本明細書においては、先行発明という理由で、本発明がかかる刊行物に先行する権利がないことを認めるものと解釈してはならない。更に、提供される刊行物の日付が実際の発行日と異なる場合があり、独立してそれぞれ個別に確認する必要がある。
【００１０】
他に定義されない限り、本明細書において用いられる全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書中に記載のものと類似または同等の任意の方法および材料も、本発明の実施または試験に使用することができるが、好ましい方法および材料をここに記載する。本明細書において言及される全ての刊行物は、刊行物が引用されたものと関連の方法および／または材料を開示および記載するために、参照により本明細書中に組み入れられている。
【００１１】
特段の記述がない限り、本発明の実施形態の方法および技術は、一般に、当該技術分野において周知で、本明細書全体をとおして引用および議論される様々な一般的およびより具体的参照において記載される、従来の方法に従って実施される。例えば、Loudon, Organic Chemistry, Fourth Edition, New York: Oxford University Press, 2002, pp. 360-361, 1084-1085; Smith and March, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, 2001;またはVogel, A Textbook of Practical Organic Chemistry, Including Qualitative Organic Analysis, Fourth Edition, New York: Longman, 1978を参照されたい。
【００１２】
表題化合物を命名するのに本明細書において用いられる命名法については、本明細書の実施例に示されている。この命名法は、一般に、市販のＡｕｔｏＮｏｍソフトウエア(ＭＤＬ社、 カリフォルニア州サン・レアンドロ)を用いて誘導された。
用語
【００１３】
以下の用語は、特段の指示がない限り、以下の意味を有する。任意の未定義の用語は、その技術分野で認知されている意味を有する。
【００１４】
「アルキル」は、炭素原子を１〜１０個、好ましくは１〜６個有する一価飽和脂肪族ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、直鎖状および分枝状ヒドロカルビル基、例えばメチル（ＣＨ３−）、エチル（ＣＨ３ＣＨ２−）、ｎ−プロピル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピル（（ＣＨ３）２ＣＨ−）、ｎ−ブチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソブチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２−）、ｓｅｃ−ブチル（（ＣＨ３）（ＣＨ３ＣＨ２）ＣＨ−）、ｔ−ブチル（（ＣＨ３）３Ｃ−）、ｎ−ペンチル（ＣＨ３ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、およびネオペンチル（（ＣＨ３）３ＣＣＨ２−）を含む。
【００１５】
用語「置換アルキル」は、アルキル鎖内の１個またはそれ以上の炭素原子がヘテロ原子、例えば−Ｏ−、−Ｎ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）ｎ−（式中、ｎは、０〜２である）、−ＮＲ−（式中、Ｒは、水素またはアルキルである）で任意選択的に置換されており、かつアルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、および−ＮＲａＲｂ（式中、Ｒ’およびＲ''は、同一または異なっていてもよく、水素、任意選択的に置換アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリールおよび複素環式から選択される）からなる群より選択される置換基１〜５個を有する、本明細書で定義されたアルキル基を指す。
【００１６】
「アルキレン」は、好ましくは炭素原子を１〜６個、より好ましくは１〜３個有する、直鎖または分枝鎖のいずれかであり、−Ｏ−、−ＮＲ１０−、−ＮＲ１０Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１０−などから選択される１個またはそれ以上の基で任意選択的に中断される、２価脂肪族ヒドロカルビル基を指す。本用語は、例として、メチレン（−ＣＨ２−）、エチレン（−ＣＨ２ＣＨ２−）、ｎ−プロピレン（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−）、イソプロピレン（−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ２−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−）、（−Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−）、（−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−）などを含む。
【００１７】
「置換アルキレン」は、以下の「置換されている」の定義における炭素に関して記載されているように、置換基で置き換えられた１〜３個の水素を有するアルキレン基を指す。
【００１８】
用語「アルカン」は、本明細書に定義されたアルキル基およびアルキレン基を指す。
【００１９】
用語「アルキルアミノアルキル」、「アルキルアミノアルケニル」および「アルキルアミノアルキニル」は、Ｒ’ＮＨＲ''−基（式中、Ｒ’は、本明細書で定義されたアルキル基であり、Ｒ''は、本明細書で定義されたアルキレン、アルケニレンまたはアルキニレン基である）を指す。
【００２０】
用語「アルカリール」または「アラルキル」は、アルキレン−アリール基および−置換アルキレン−アリール基（式中、アルキレン、置換アルキレンおよびアリールは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００２１】
「アルコキシ」は、−Ｏ−アルキル基（式中、アルキルは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。アルコキシは、例として、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｎ−ペントキシなどを含む。用語「アルコキシ」もまた、アルケニル−Ｏ−、シクロアルキル−Ｏ−、シクロアルケニル−Ｏ−、およびアルキニル−Ｏ−（式中、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、およびアルキニルは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００２２】
用語「置換アルコキシ」は、置換アルキル−Ｏ−基、置換アルケニル−Ｏ−基、置換シクロアルキル−Ｏ−基、置換シクロアルケニル−Ｏ−基、および置換アルキニル−Ｏ−基（置換アルキル、置換アルケニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニルおよび置換アルキニルは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００２３】
用語「アルコキシアミノ」は、−ＮＨ−アルコキシ基（式中、アルコキシは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００２４】
用語「ハロアルコキシ」は、アルキル基上の１個またはそれ以上の水素原子がハロ基で置換されているアルキル−Ｏ−基を指し、例えば、、トリフルオロメトキシなどの基が挙げられる。
【００２５】
用語「ハロアルキル」は、アルキル基上の１個またはそれ以上の水素原子がハロ基で置換されている、上記の置換アルキル基を指す。かかる基の例としては、非限定的ではあるが、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロエチルなどのフルオロアルキル基が挙げられる。
【００２６】
用語「アルキルアルコキシ」は、−アルキレン−Ｏ−アルキル基、アルキレン−Ｏ−置換アルキル基、置換アルキレン−Ｏ−アルキル基、および置換アルキレン−Ｏ−置換アルキル基（式中、アルキル、置換アルキル、アルキレンおよび置換アルキレンは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００２７】
用語「アルキルチオアルコキシ」は、−アルキレン−Ｓ−アルキル基、アルキレン−Ｓ−置換アルキル基、置換アルキレン−Ｓ−アルキル基および置換アルキレン−Ｓ−置換アルキル基（式中、アルキル、置換アルキル、アルキレンおよび置換アルキレンは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００２８】
「アルケニル」は、炭素原子を２〜６個、好ましくは炭素原子を２〜４個有し、かつ二重結合不飽和を少なくとも１部位、好ましくは１〜２部位有する直鎖状または分枝状ヒドロカルビル基を指す。この用語は、例として、ｂｉ−ビニル、アリル、およびブタ−３−エン−１−イルを含む。この用語に含まれるのは、これらの異性体のｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体または混合物である。
【００２９】
用語「置換アルケニル」は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、および−ＳＯ２−ヘテロアリールから選択される置換基を１〜５個または１〜３個有する、本明細書に定義されたアルケニル基を指す。
【００３０】
「アルキニル」は、炭素原子を２〜６個、好ましくは炭素原子を２〜３個有し、３重結合不飽和を少なくとも１部位、好ましくは１〜２部位有する、直鎖状または分枝状一価ヒドロカルビル基を指す。かかるアルキニル基の例としては、アセチレニル（−Ｃ≡ＣＨ）、およびプロパルギル（−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨ）が挙げられる。
【００３１】
用語「置換アルキニル」は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、および−ＳＯ２−ヘテロアリールから選択される置換基を１〜５個または１〜３個有する、本明細書に定義されたアルキニル基を指す。
【００３２】
「アルキニルオキシ」は、−Ｏ−アルキニル基（式中、アルキニルは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。アルキニルオキシは、例として、エチニルオキシ、プロピニルオキシなどが挙げられる。
【００３３】
「アシル」は、Ｈ−Ｃ（Ｏ）−基、アルキル−Ｃ（Ｏ）−基、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）−基、アルケニル−Ｃ（Ｏ）−基、置換アルケニル−Ｃ（Ｏ）−基、アルキニル−Ｃ（Ｏ）−基、置換アルキニル−Ｃ（Ｏ）−基、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−基、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−基、シクロアルケニル−Ｃ（Ｏ）−基、置換シクロアルケニル−Ｃ（Ｏ）−基、アリール−Ｃ（Ｏ）−基、置換アリール−Ｃ（Ｏ）−基、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−基、置換ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）−基、複素環−Ｃ（Ｏ）−基、および置換複素環−Ｃ（Ｏ）−基（式中、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。例えばアシルは、「アセチル」基ＣＨ３Ｃ（Ｏ）−を含む。
【００３４】
「アシルアミノ」は、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキル基、ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルキル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルキル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）シクロアルケニル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換シクロアルケニル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルケニル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルケニル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アルキニル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アルキニル基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）アリール基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換アリール基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）ヘテロアリール基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換ヘテロアリール基、−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）複素環基および−ＮＲ２０Ｃ（Ｏ）置換複素環基（式中、Ｒ２０は、水素またはアルキルであり、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００３５】
「アミノカルボニル」または用語「アミノアシル」は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２１Ｒ２２基（式中、Ｒ２１およびＲ２２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式からなる群より選択され、Ｒ２１およびＲ２２は、任意選択的に、それらに結合している窒素で連結し、複素環式基または置換複素環式基を形成しており、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００３６】
用語「アルコキシカルボニルアミノ」は、−ＮＲＣ（Ｏ）ＯＲ基（式中、各Ｒは、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、複素環であり、ここでアルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、および複素環は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００３７】
用語「アシルオキシ」は、アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基、アリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基、ヘテロアリール−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基、および複素環−Ｃ（Ｏ）Ｏ−基（式中、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、および複素環は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００３８】
「アミノスルホニル」は、−ＳＯ２ＮＲ２１Ｒ２２基（式中、Ｒ２１およびＲ２２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、置換複素環式からなる群より選択され、Ｒ２１およびＲ２２は、任意選択的に、それらに結合している窒素で連結し、複素環式基または置換複素環式基を形成しており、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００３９】
「スルホニルアミノ」は、−ＮＲ２１ＳＯ２Ｒ２２基（式中、Ｒ２１およびＲ２２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、置換アリール、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式からなる群より選択され、Ｒ２１およびＲ２２は、任意選択的に、それらに結合している窒素で連結し、複素環式基または置換複素環式基を形成しており、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００４０】
「アリール」または「Ａｒ」は、結合点が芳香族アリール基の原子を介していることを条件として、単環（例えば、フェニル）、または縮合環が芳香族であってもなくてもよい多環式縮合環（例えば、ナフチルまたはアントリル）を有する、炭素原子が６〜１４個の一価芳香族炭素環基を指す。この用語は、例として、フェニルおよびナフチルを含む。アリール置換基の定義により特段の制約がない限り、かかるアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、複素環オキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリールおよびトリハロメチルから選択される１〜５個の置換基、または１〜３個の置換基で、任意選択的に置換され得る。
【００４１】
「アリールオキシ」は、−Ｏ−アリール基（式中、アリールは、本明細書に定義されたとおりである）を指し、例として、フェノキシ、ナフトキシなどが挙げられ、任意選択的に、同じく本明細書に定義された置換アリール基が挙げられる。
【００４２】
「アミノ」は、−ＮＨ２基を指す。
【００４３】
用語「置換アミノ」は、−ＮＲＲ基（式中、少なくとも１つのＲが水素でないことを条件に、各Ｒは、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アルケニル、置換アルケニル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、ヘテロアリール、および置換複素環からなる群より選択される）を指す。
【００４４】
用語「アジド」は、−Ｎ３基を指す。
【００４５】
「カルボキシル」、「カルボキシ」または「カルボキシラート」は、−ＣＯ２Ｈまたはその塩を指す。
【００４６】
「カルボキシルエステル」または「カルボキシエステル」または用語「カルボキシアルキル」または「カルボキシアルキル」は、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルキル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルケニル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルケニル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキニル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルキニル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アリール基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−シクロアルキル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルキル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−シクロアルケニル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルケニル基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ヘテロアリール基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロアリール基、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−複素環式基、および−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換複素環式基（式中、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００４７】
「（カルボキシルエステル）オキシ」または「カルボナート」は、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルキル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルケニル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルケニル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキニル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アルキニル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アリール基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換アリール基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−シクロアルキル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルキル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−シクロアルケニル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換シクロアルケニル基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ヘテロアリール基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換ヘテロアリール基、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−複素環式基、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換複素環式基（式中、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００４８】
「シアノ」または「ニトリル」は、−ＣＮ基を指す。
【００４９】
「シクロアルキル」は、縮合環系、架橋環系、およびスピロ環系を含む単環または多環を有し、炭素原子が３〜１０個の環状アルキル基を指す。適切なシクロアルキル基の例としては、例えば、アダマンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどが挙げられる。かかるシクロアルキルは、例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロオクチルなどの単環構造、またはアダマンチルなどの多環構造を含む。
【００５０】
用語「置換シクロアルキル」は、アルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、および−ＳＯ２−ヘテロアリールから選択される置換基を１〜５個または１〜３個有するシクロアルキル基を指す。
【００５１】
「シクロアルケニル」は、単環または多環を有し、かつ少なくとも１つの二重結合、好ましくは１〜２個の２重結合を有する、炭素原子が３〜１０個の非芳香族環状アルキル基を指す。
【００５２】
用語「置換シクロアルケニル」は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、ケト、チオケト、カルボキシル、カルボキシルアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、および−ＳＯ２−ヘテロアリールから選択される置換基を１〜５個または１〜３個有するシクロアルケニル基を指す。
【００５３】
「シクロアルキニル」は、単環または多環を有し、かつ少なくとも１つの三重結合を有する炭素原子が５〜１０個の非芳香族シクロアルキル基を指す。
【００５４】
「シクロアルコキシ」は、−Ｏ−シクロアルキルを指す。
【００５５】
「シクロアルケニルオキシ」は、−Ｏ−シクロアルケニルを指す。
【００５６】
「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを指す。
【００５７】
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、−ＯＨ基を指す。
【００５８】
「ヘテロアリール」は、環内において、炭素原子が１〜１０個、ならびに酸素、窒素、および硫黄からなる群より選択されるヘテロ原子が１〜４個である芳香族基を指す。かかるヘテロアリール基は、結合点が芳香族ヘテロアリール基の原子を介していることを条件として、単環（例えば、ピリジニル、イミダゾリルまたはフリル）または多環式縮合環（例えば、インドリジニル、キノリニル、ベンゾイミダゾリルまたはベンゾチエニル）を有することができ、前記縮合環は、芳香族であってもなくてもよく、および／またはヘテロ原子を含んでいてもいなくてもよい。特定の実施形態において、ヘテロアリール基の窒素および／または硫黄環原子は、任意選択的に酸化され、Ｎ−オキシド（Ｎ→Ｏ）、スルフィニル、またはスルホニル部分を提供する。この用語は、例として、ピリジニル、ピロリル、インドリル、チオフェニル、およびフラニルを含む。ヘテロアリール置換基の定義により特段の制約がない限り、かかるヘテロアリール基は、アシルオキシ、ヒドロキシ、チオール、アシル、アルキル、アルコキシ、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、置換アルキル、置換アルコキシ、置換アルケニル、置換アルキニル、置換シクロアルキル、置換シクロアルケニル、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アシルアミノ、アルカリール、アリール、アリールオキシ、アジド、カルボキシル、カルボキシルアルキル、シアノ、ハロゲン、ニトロ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、アミノアシルオキシ、オキシアシルアミノ、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、およびトリハロメチルから選択される１〜５個の置換基または１〜３個の置換で、任意選択的に置換することができる。
【００５９】
用語「ヘテロアラルキル」は、−アルキレン−ヘテロアリール基（式中、アルキレンおよびヘテロアリールは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。本用語は、例として、ピリジルメチル、ピリジルエチル、インドリルメチルなどを含む。
【００６０】
「ヘテロアリールオキシ」は、−Ｏ−ヘテロアリールを指す。
【００６１】
「複素環」、「複素環式の」、「ヘテロシクロアルキル」、および「複素環」は、縮合環系、架橋環系およびスピロ環系を含む単環または多環縮合環を有し、かつ１〜４個のヘテロ原子を含む３〜１５個の環原子を有する飽和または不飽和基を指す。これらの環原子は、窒素、硫黄、または酸素からなる群より選択され、縮合環系において、結合点が非芳香族環を介していることを条件として、１つまたはそれ以上の環がシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールであり得る。特定の実施形態において、複素環式基の窒素および／または硫黄原子（単数または複数）は、任意選択的に酸化されて、Ｎ−オキシド、−Ｓ（Ｏ）−、またはＳＯ２−部分を提供する。
【００６２】
複素環およびヘテロアリールの例として、アゼチジン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、インドリジン、イソインドール、インドール、ジヒドロインドール、インダゾール、プリン、キノリジン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチルピリジン、キノキサリン、キアゾリン、シンノリン、プテリジン、カルバゾール、カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナントロリン、イソチアゾール、フェナジン、イソキサゾール、フェナキサジン、フェノチアジン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピペリジン、ピペラジン、インドリン、フタルイミド、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン、４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン、チアゾール、チアゾリジン、チオフェン、ベンゾ［ｂ］チオフェン、モルホリニル、チオモルホリニル（チアモルホリニルとも呼ばれる）、１，１−ジオキソチオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジン、テトラヒドロフラニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６３】
複素環式置換基の定義により特段の制約がない限り、かかる複素環式基は、アルコキシ、置換アルコキシ、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アミノ、置換アミノ、アミノアシル、アミノアシルオキシ、オキシアミノアシル、アジド、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシル、オキソ、チオケト、カルボキシル、カルボキシアルキル、チオアリールオキシ、チオヘテロアリールオキシ、チオヘテロシクロオキシ、チオール、チオアルコキシ、置換チオアルコキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、複素環、ヘテロシクロオキシ、ヒドロキシアミノ、アルコキシアミノ、ニトロ、−ＳＯ−アルキル、−ＳＯ−置換アルキル、−ＳＯ−アリール、−ＳＯ−ヘテロアリール、−ＳＯ２−アルキル、−ＳＯ２−置換アルキル、−ＳＯ２−アリール、−ＳＯ２−ヘテロアリール、および縮合複素環から選択される１〜５個の置換基または１〜３個の置換基で、任意選択的に置換され得る。
【００６４】
「複素環オキシ」は、−Ｏ−複素環を指す。
【００６５】
用語「複素環チオ」は、複素環−Ｓ−基を指す。
【００６６】
用語「ヘテロシクレン」は、本明細書に定義された複素環から形成されたジラジカル基を指す。
【００６７】
用語「ヒドロキシアミノ」は、−ＮＨＯＨ基を指す。
【００６８】
「ニトロ」は、−ＮＯ２基を指す。
【００６９】
「オキソ」は、原子（＝Ｏ）を指す。
【００７０】
「スルホニル」は、ＳＯ２−アルキル基、ＳＯ２−置換アルキル、ＳＯ２−アルケニル、ＳＯ２−置換アルケニル、ＳＯ２−シクロアルキル、ＳＯ２−置換シクロアルキル、ＳＯ２−シクロアルケニル、ＳＯ２−置換シクロアルケニル、ＳＯ２−アリール、ＳＯ２−置換アリール、ＳＯ２−ヘテロアリール、ＳＯ２−置換ヘテロアリール、ＳＯ２−複素環式、およびＳＯ２−置換複素環式（式中、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。スルホニルは、例として、メチル−ＳＯ２−、フェニル−ＳＯ２−、および４−メチルフェニル−ＳＯ２−が挙げられる。
【００７１】
「スルホニルオキシ」は、−ＯＳＯ２−アルキル基、ＯＳＯ２−置換アルキル、ＯＳＯ２−アルケニル、ＯＳＯ２−置換アルケニル、ＯＳＯ２−シクロアルキル、ＯＳＯ２−置換シクロアルキル、ＯＳＯ２−シクロアルケニル、ＯＳＯ２−置換シクロアルケニル、ＯＳＯ２−アリール、ＯＳＯ２−置換アリール、ＯＳＯ２−ヘテロアリール、ＯＳＯ２−置換ヘテロアリール、ＯＳＯ２−複素環式、およびＯＳＯ２−置換複素環式（式中、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、複素環式、および置換複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００７２】
用語「アミノカルボニルオキシ」は、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲＲ基（式中、各Ｒは、それぞれ独立して、水素、アルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、または複素環式であり、ここでアルキル、置換アルキル、アリール、ヘテロアリール、および複素環式は、本明細書に定義されたとおりである）を指す。
【００７３】
「チオール」は、−ＳＨ基を指す。
【００７４】
「チオキソ」または用語「チオケト」は、原子（＝Ｓ）を指す。
【００７５】
「アルキルチオ」または用語「チオアルコキシ」は、−Ｓ−アルキル基（式中、アルキルは、本明細書に定義されたとおりである）を指す。特定の実施形態において、硫黄を酸化して−Ｓ（Ｏ）−としてもよい。スルホキシドは、１つまたはそれ以上の立体異性体として存在してもよい。
【００７６】
用語「置換チオアルコキシ」は、−Ｓ−置換アルキル基を指す。
【００７７】
用語「チオアリールオキシ」は、アリール−Ｓ−基（式中、アリール基は本明細書に定義されたとおりであり、同じく本明細書に定義されている置換アリール基を任意選択的に含む）を指す。
【００７８】
用語「チオヘテロアリールオキシ」は、ヘテロアリール−Ｓ−基（式中、ヘテロアリール基は本明細書に定義されたとおりであり、同じく本明細書に定義されている置換アリール基を任意選択的に含む）を指す。
【００７９】
用語「チオヘテロシクロオキシ」は、複素環−Ｓ−基（式中、複素環基は本明細書に定義されたとおりであり、同じく本明細書に定義されている置換複素環基を任意選択的に含む）を指す。
【００８０】
本明細書における開示に加えて、用語「置換」は、特定の基またはラジカルを修飾するために用いられる場合、特定の基またはラジカルの１個またはそれ以上の水素原子が、それぞれ互いに独立して、以下に定義される用に、同一または異なる置換基で置き換えられることを意味し得る。
【００８１】
本明細書における個々の用語に関して開示された基に加えて、特定の基またはラジカル内の飽和炭素原子上で１個またはそれ以上の水素を置換するための置換基（単一炭素上の任意の２個の水素原子が＝Ｏ、＝ＮＲ７０、＝Ｎ−ＯＲ７０、＝Ｎ２または＝Ｓで置換され得る）は、特定の指示がない限り、−Ｒ６０、ハロ、＝Ｏ、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｒ７０、−ＳＯ２Ｏ−Ｍ＋、−ＳＯ２ＯＲ７０、−ＯＳＯ２Ｒ７０、−ＯＳＯ２Ｏ−Ｍ＋、−ＯＳＯ２ＯＲ７０、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｍ＋、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−Ｍ＋、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２−Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０（式中、Ｒ６０は、任意選択的に置換されているアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールおよびヘテロアリールアルキルからなる群より選択され、各Ｒ７０は、それぞれ独立して水素もしくはＲ６０であり；各Ｒ８０は、それぞれ独立してＲ７０であるか、または代替として、２つのＲ８０’を、それらが結合している窒素原子でひとまとめにして５、６もしくは７員ヘテロシクロアルキルを形成し、前記ヘテロシクロアルキルはＯ、ＮおよびＳからなる群より選択される同一もしくは異なる追加のヘテロ原子を１〜４個任意選択的に含んでもよく、前記Ｎは、−ＨもしくはＣ１〜Ｃ３アルキル置換を有していてもよく；および、各Ｍ＋は、実効単一正電荷を有する対イオンである）である。各Ｍ＋は、それぞれ独立して、例えばＫ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋などのアルカリ金属イオン、；Ｎ（Ｒ６０）４などのアンモニウムイオン、；または［Ｃａ２＋］０．５、［Ｍｇ２＋］０．５、または［Ｂａ２＋］０．５などのアルカリ土類金属イオン（下付き文字の０．５は、例えばかかる二価アルカリ土類金属イオンの対イオンの一方が本発明の化合物のイオン化形態であり得ること、かつもう一方の典型的な対イオン、例えば塩素イオン、または本発明の２つのイオン化化合物が、かかる二価アルカリ土類金属イオンの対イオンとして作用し得ること、または本発明の二重イオン化化合物がかかる二価アルカリ土類金属イオンの対イオンとして作用し得ることを意味する）であってもよい。具体的な例として、−ＮＲ８０Ｒ８０は、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、Ｎ−ピロリジニル、Ｎ−ピペラジニル、４Ｎ−メチルピペラジン−１−イルおよびＮ−モルホリニルを含むことを意味する。
【００８２】
本明細書における開示に加えて、「置換されている」アルケン基、アルキン基、アリール基およびヘテロアリール基内の不飽和炭素原子上の水素のための置換基は、特に明記しない限り、−Ｒ６０、ハロ、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−Ｓ−Ｍ＋、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−ＳＯ２Ｒ７０、−ＳＯ３−Ｍ＋、−ＳＯ３Ｒ７０、−ＯＳＯ２Ｒ７０、−ＯＳＯ３−Ｍ＋、−ＯＳＯ３Ｒ７０、−ＰＯ３−２（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−ＣＯ２−Ｍ＋、−ＣＯ２Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣＯ２Ｍ＋、−ＯＣＯ２Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０ＣＯ２−Ｍ＋、−ＮＲ７０ＣＯ２Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０（式中、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０およびＭ＋は、先に定義されたとおりである）である。但し、置換アルケンまたはアルキンの場合、前記置換基は、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、または−Ｓ−Ｍ＋ではない。
【００８３】
本明細書における個々の用語に関して開示された基に加えて、「置換」ヘテロアルキル基およびシクロヘテロアルキル基内の窒素原子上の水素のための置換基は、特に明記しない限り、−Ｒ６０、−Ｏ−Ｍ＋、−ＯＲ７０、−ＳＲ７０、−Ｓ−Ｍ＋、−ＮＲ８０Ｒ８０、トリハロメチル、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ７０、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−Ｍ＋、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ７０、−ＯＳ（Ｏ）２Ｏ−Ｍ＋、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲ７０、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２（Ｍ＋）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）Ｏ−Ｍ＋、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ７０）（ＯＲ７０）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｓ）Ｒ７０、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＯＣ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）Ｒ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｓ）ＯＲ７０、−ＮＲ７０Ｃ（Ｏ）ＮＲ８０Ｒ８０、−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）Ｒ７０および−ＮＲ７０Ｃ（ＮＲ７０）ＮＲ８０Ｒ８０（式中、Ｒ６０、Ｒ７０、Ｒ８０およびＭ＋は、先に定義されたとおりである）である。
【００８４】
本明細書における開示に加えて、特定の実施形態において、置換されている基は、１、２、３、もしくは４個の置換基、１、２、もしくは３個の置換基、１もしくは２個の置換基、または１個の置換基を有する。
【００８５】
先に定義された全ての置換基において、それ自体に更なる置換基を有する置換基を定義することにより達成されたポリマー（例えば、それ自体が、置換アリール基で置換置換基として、置換アリール基を有する置換アリールが、置換アリール基により更に置換、など）は、本明細書における含まれることを意図していない。そのような場合、かかる置換の最大数は３である。例えば、置換アリール基の連続置換は、置換アリール−（置換アリール）−置換アリールに限定される。
【００８６】
特段の指示がない限り、本明細書に明示的に定義されていない置換基の命名は、官能基性の末端部分を命名し、続いて結合点に向かって隣接する官能基性を命名することにより達成される。例えば、置換基「アリールアルキルオキシカルボニル」は、（アリール）−（アルキル）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−基を指す。
【００８７】
１個またはそれ以上の置換基を含む本明細書に開示された任意の基に関して、もちろんかかる基が、立体的に非実用的であり、および／または合成的に実現不可能である任意の置換または置換様式を含まないことを理解されたい。加えて、表題化合物は、これらの化合物の置換から生じる全ての立体化学的異性体を含む。
【００８８】
用語「薬学的に許容し得る塩」は、ホ乳類など、患者への投与を許容し得る塩（例えば、所定の投与レジメンに関してホ乳類動物の安全性確保が許容し得るものである塩）を意味する。かかる塩は、薬学的に許容し得る無機または有機塩基および薬学的に許容し得る無機または有機酸から誘導することができる。「薬学的に許容し得る塩」は、当該技術分野で周知の様々な有機および無機対イオンから誘導される、化合物の薬学的に許容し得る塩を指し、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウム、テトラアルキルアンモニウムなどが挙げられ、その分子が塩基性官能基性を含む場合には、有機または無機酸の塩、例えば塩酸塩、臭化水素塩、ギ酸塩、酒石酸塩、ベシル酸塩、メシル酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩などが挙げられるが、これらは例に過ぎない。
【００８９】
用語「その塩」は、酸の水素が金属陽イオンまたは有機陽イオンなどの陽イオンにより置換場合に形成される化合物を意味する。適用可能ならば、塩は、薬学的に許容し得る塩であるが、これは患者への投与を意図しない中間体化合物の塩には必要とならない。例として、本発明の化合物の塩としては、その化合物を無機または有機酸によりプロトン化すると、塩の陰イオン成分として無機または有機酸の共役塩基を有する陽イオンを形成するものが挙げられる。
【００９０】
「溶媒和物」は、溶媒分子と溶質の分子またはイオンとの組み合わせにより形成される複合体を指す。溶媒は、有機化合物、無機化合物、またはその両方の混合物であってもよい。溶媒の幾つかの実施例としては、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジメチルスルホキシド、および水が挙げられるが、この限りではない。溶媒が水である場合、形成された溶媒和物は水和物である。
【００９１】
「立体異性体（単数）」および「立体異性体（複数）」は、同一の原子連結性（ａｔｏｍｉｃ  ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｉｔｙ）を有しながら、異なる空間内原子配列を有する化合物を指す。立体異性体（複数）としては、ｃｉｓ−ｔｒａｎｓ異性体、ＥおよびＺ異性体、鏡像異性体、およびジアステレオマーが挙げられる。
【００９２】
「互変異性体」は、例えばエノール−ケトおよびイミン−エナミン互変異性体などの原子の電子結合および／またはプロトンの位置のみが異なる別の分子形態、、または例えばピラゾール、イミダゾール、ベンゾイミダゾール、トリアゾール、およびテトラゾールなどの−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−ＮＨ−環原子配列を含むヘテロアリール基の互変異性形態を指す。当業者であれば、他の互変異性環原子配列も可能であることを認識するであろう。
【００９３】
用語「またはその塩もしく溶媒和物もしくは立体異性体」は、表題化合物の立体異性体の薬学的に許容し得る塩の溶媒和物など、塩、溶媒和物および立体異性体の全ての順列を含むよう意図されていることを理解されたい。
【００９４】
「薬学上有効量」および「治療上有効量」は、特定の障害もしくは疾患もしくは１つまたは複数のその症状を治療するのに、および／または前記疾患もしくは障害の発生を予防するのに十分な化合物の量を指す。腫瘍原性増殖性障害に関しては、薬学上または治療上有効な量は、とりわけ、腫瘍を収縮させるのに、または腫瘍の増殖速度を低下させるのに十分な量を含んでなる。
【００９５】
「患者」は、ヒトおよび非ヒト動物、特にホ乳類動物を指す。
【００９６】
本明細書において用いられる用語「治療すること」または「治療」は、：（ａ）疾患もしくは医療的状態の惹起を予防すること、即ち、患者の予防的治療；（ｂ）疾患もしくは医療的状態を寛解すること、即ち、患者の疾患もしくは医療的状態を排除もしくは回復させること；（ｃ）疾患もしくは医療的状態を抑制すること、即ち、患者の疾患もしくは医療的状態の発症を遅延もしくは停止させること、または（ｄ）患者における疾患もしくは医療的状態の症状を軽減することを含む、ホ乳類動物（特にヒト）などの患者における疾患または医療的状態を治療すること、または治療を意味する。
【００９７】
代表的実施形態
以下の置換基および値は、様々な態様および実施形態の代表的例を提供することを意図する。これらの代表的値は、かかる態様を更に定義および例示することを意図したものであって、他の実施形態を除外したり、または本発明の範囲を限定したりするものではない。これに関連して、特定の値または置換基が好まれるとの表示は、特段の指示がないかぎり、他の値または置換基を本発明から除外するものではない。
【００９８】
これらの化合物は、１つまたはそれ以上のキラル中心を含んでいてもよく、それゆえ実施形態は、特段の指示がないかぎり、ラセミ混合物、純粋な立体異性体（即ち、鏡像異性体またはジアステレオマー）：立体異性体を豊富に含む混合物などを対象とする。特定の立体異性体が本明細書において示されまたは命名されている場合、当業者であれば、特段の指示がない限り、微量の他の立体異性体が組成物中に存在してもよいことを理解するであろう。但し、組成物の所望の有用性は、全体として、かかる他の異性体の存在により排除されない。
【００９９】
本開示の組成物は、以下に示された式Ｉ〜Ｖの化合物を含む。本開示の医薬組成物および方法も、式Ｉ〜Ｖの化合物を企図する。
【０１００】
式Ｉ
組成物の態様の１つにおいて、本発明の実施形態は、式（Ｉ）：
【化２】
0006035238.tif 000003
（Ｉ）
（式中、
Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、およびニトロから選択され；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択され；
Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択され；
ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ６ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｘは、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
ここでＲ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは水素ではなく；
ここでＲ８がフルオロである場合、Ｒ７ｂは水素ではなく；
ここでＲ７ｂがシクロプロピルである場合、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ８、およびＲ７ｘの少なくとも１つは水素ではなく；
ここでＲ８がシクロプロピルである場合、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ７ｘの少なくとも１つは水素ではない）
で示される化合物、またはその塩もしくは立体異性体を提供する。
【０１０１】
式ＩＩ
組成物の態様の１つにおいて、本発明の実施形態は、式（ＩＩ）：
【化３】
0006035238.tif 000004
（ＩＩ）
（式中、
Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、およびニトロから選択され；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択され；
Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択され；
ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ６ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｘは、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
ここでＲ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、水素ではない）
で示される化合物、またはその塩もしくは立体異性体を提供する。
【０１０２】
式ＩＩＩ
組成物の態様の１つにおいて、本発明の実施形態は、式（ＩＩＩ）：
【化４】
0006035238.tif 000005
（ＩＩＩ）
（式中、
Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、およびニトロから選択され；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択され；
Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択され；
ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ６ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｘは、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
ここでＲ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、ハロゲンであり；
ここでＲ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、シクロアルキル、アルキル、またはＣ２〜１０アルキルである）
で示される化合物、またはその塩もしくは立体異性体を提供する。
【０１０３】
式ＩＶ
組成物の態様の１つにおいて、本発明の実施形態は、式（ＩＶ）：
【化５】
0006035238.tif 000006
（ＩＶ）
（式中、
Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、およびニトロから選択され；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択され；
Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択され；
ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ６ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｘは、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
ここでＲ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、Ｃ２〜１０アルキルである）
で示される化合物、またはその塩もしくは立体異性体を提供する。
【０１０４】
式Ｖ
組成物の態様の１つにおいて、本発明の実施形態は、式（Ｖ）：
【化６】
0006035238.tif 000007
（Ｖ）
（式中、
Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、およびニトロから選択され；
Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択され；
Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択され；
ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択され；
Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ６ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択され；
Ｒ７ｘは、ハロアルキルである）
で示される化合物、またはその塩もしくは立体異性体を提供する。
【０１０５】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｒ５は、ハロアルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、およびニトロから選択することができる。特定の例において、Ｒ５は、ハロアルキルである。特定の例において、Ｒ５は、アルコキシまたは置換アルコキシである。特定の例において、Ｒ５は、シアノである。特定の例において、Ｒ５は、ハロゲンである。特定の例において、Ｒ５は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードである。特定の例において、Ｒ５は、フルオロである。特定の例において、Ｒ５は、アシルまたはアシルアミノである。特定の例において、Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２である。特定の例において、Ｒ５は、ニトロである。
【０１０６】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｙ１およびＹ２は、それぞれ独立して、水素、アルキル、およびアシルから選択することができる。特定の例において、Ｙ１は、水素である、特定の例において、Ｙ１は、アルキルである。特定の例において、Ｙ１は、アシルである。特定の例において、Ｙ２は、水素である。特定の例において、Ｙ２は、アルキルである。特定の例において、Ｙ２は、アシルである。
【０１０７】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｒ１は、水素、アルキル、および置換アルキルから選択することができる。特定の例において、Ｒ１は、水素またはアルキルである。特定の例において、Ｒ１は、水素である。特定の例において、Ｒ１は、アルキルである。特定の例において、Ｒ１は、メチルである。
【０１０８】
式Ｉ〜Ｖにおいて、ＲａおよびＲｂは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択することができる。特定の例において、ＲａおよびＲｂは、両者ともアルキルである。特定の例において、ＲａおよびＲｂは、両者ともメチルである。特定の例において、ＲａおよびＲｂの少なくとも一方は、アルキルである。
【０１０９】
式Ｉ〜Ｖにおいて、ＲｃおよびＲｄは、それぞれ独立して、水素およびアルキルから選択することができる。特定の例において、ＲｃおよびＲｄは、両者ともアルキルである。特定の例において、ＲｃおよびＲｄは、両者ともメチルである。特定の例において、ＲｃおよびＲｄの少なくとも一方は、アルキルである。
【０１１０】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、Ｃ２〜１０アルキル、ハロゲン、およびシクロアルキルから選択される。
【０１１１】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｒ６ａは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択することができる。特定の例において、Ｒ６ａは、水素、アルキル、ハロゲン、またはシクロアルキルである。
【０１１２】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ６ａは、水素である。特定の例において、Ｒ６ａは、アルキルである。特定の例において、Ｒ６ａは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ６ａは、イソプロピルである。特定の例において、Ｒ６ａは、ハロゲンである。特定の例において、Ｒ６ａは、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードである。特定の例において、Ｒ６ａは、フルオロである。特定の例において、Ｒ６ａは、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ａは、シクロプロピルである。
【０１１３】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ６ａは、置換アルキルである。特定の例において、Ｒ６ａは、置換シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ａは、シアノ、アシル、アミノアシル、またはニトロである。
【０１１４】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｒ６ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択することができる。特定の例において、Ｒ６ｂは、水素、アルキル、ハロゲン、またはシクロアルキルである。
【０１１５】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ６ｂは、水素である。特定の例において、Ｒ６ｂは、アルキルである。特定の例において、Ｒ６ｂは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ６ｂは、イソプロピルである。特定の例において、Ｒ６ｂは、ハロゲンである。特定の例において、Ｒ６ｂは、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードである。特定の例において、Ｒ６ｂは、フルオロである。特定の例において、Ｒ６ｂは、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ｂは、シクロプロピルである。
【０１１６】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ６ｂは、置換アルキルである。特定の例において、Ｒ６ｂは、置換シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ｂは、シアノ、アシル、アミノアシル、またはニトロである。
【０１１７】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｒ７ｂは、水素、アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択することができる。特定の例において、Ｒ７ｂは、水素、アルキル、ハロゲン、またはシクロアルキルである。
【０１１８】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ７ｂは、水素である。特定の例において、Ｒ７ｂは、アルキルである。特定の例において、Ｒ７ｂは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ７ｂは、イソプロピルである。特定の例において、Ｒ７ｂは、ハロゲンである。特定の例において、Ｒ７ｂは、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードである。特定の例において、Ｒ７ｂは、フルオロである。特定の例において、Ｒ７ｂは、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ７ｂは、シクロプロピルである。
【０１１９】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ７ｂは、置換アルキルである。特定の例において、Ｒ７ｂは、置換シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ７ｂは、シアノ、アシル、アミノアシル、またはニトロである。
【０１２０】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、置換アルキル、シアノ、ハロゲン、アシル、アミノアシル、ニトロ、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択することができる。特定の例において、Ｒ８は、水素、Ｃ２〜１０アルキル、ハロゲン、シクロアルキル、または置換シクロアルキルである。
【０１２１】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ８は、水素である。特定の例において、Ｒ８は、Ｃ２〜１０アルキルである。特定の例において、Ｒ８は、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ８は、イソプロピルである。特定の例において、Ｒ８は、ハロゲンである。特定の例において、Ｒ８は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードである。特定の例において、Ｒ８は、フルオロである。特定の例において、Ｒ８は、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ８は、シクロプロピルである。特定の例において、Ｒ８は、置換シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ８は、置換シクロプロピルであり、その置換基は、ハロアルキルである。特定の例において、Ｒ８は、置換シクロプロピルである。特定の例において、Ｒ８は、置換シクロプロピルであり、その置換基は、ハロアルキルである。シクロアルキル環上のハロアルキル置換基の例としては、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、およびフルオロメチルが挙げられる。
【０１２２】
式Ｉ〜Ｖにおいて、特定の例において、Ｒ８は、置換アルキルである。特定の例において、Ｒ８は、シアノ、アシル、アミノアシル、またはニトロである。
【０１２３】
式Ｉ〜Ｖにおいて、Ｒ７ｘは、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、および置換シクロアルキルから選択することができる。特定の例において、Ｒ７ｘは、水素である。特定の例において、Ｒ７ｘは、アルキルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、メチルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、エチルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、プロピルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、イソプロピルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、ハロアルキルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、トリフルオロメチルまたはフルオロメチルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、トリフルオロメチルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、フルオロメチルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、置換シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ７ｘは、シクロプロピルである。
【０１２４】
式Ｉにおいて、
Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、水素ではなく；
Ｒ８が、フルオロであれば、Ｒ７ｂは、水素ではなく；
Ｒ７ｂが、シクロプロピルであれば、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ８、およびＲ７ｘの少なくとも１つは、水素ではなく；
Ｒ８が、シクロプロピルであれば、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ７ｘの少なくとも１つは、水素ではない。
【０１２５】
式ＩＩにおいて、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、水素ではない。特定の例において、式ＩおよびＩＩにおいて、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、ハロゲンである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨードである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、フルオロである。式ＩおよびＩＩの特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの一方は、フルオロであり、他方は、水素である。
【０１２６】
特定の例において、式ＩおよびＩＩにおいて、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、Ｃ２〜１０アルキルである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、イソプロピルである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、シクロプロピルである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、置換アルキルである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、置換シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、シアノ、アシル、アミノアシル、またはニトロである。
【０１２７】
式ＩＩＩにおいて、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、ハロゲンであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、シクロアルキルまたはＣ２〜１０アルキルである。特定の例において、式ＩおよびＩＩＩにおいて、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、ハロゲンであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、ハロゲンであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、Ｃ２〜１０アルキルである。式ＩＩＩの特定の例において、Ｒ６ａおよびＲ６ｂの少なくとも一方は、フルオロであり、他方は、水素である。
【０１２８】
特定の例において、式ＩおよびＩＩＩにおいて、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、フルオロであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、シクロアルキルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、フルオロであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、シクロプロピルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、フルオロであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、Ｃ２〜１０アルキルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、フルオロであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、フルオロであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、イソプロピルである。
【０１２９】
特定の例において、式ＩおよびＩＩＩにおいて、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、ハロゲンであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、シクロプロピルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、ハロゲンであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、ハロゲンであり、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、イソプロピルである。
【０１３０】
式ＩＶにおいて、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、Ｃ２〜１０アルキルである。特定の例において、式ＩおよびIVにおいて、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはイソブチルである。特定の例において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、およびＲ８の少なくとも１つは、イソプロピルである。
【０１３１】
該当する特定の化合物を、以下の表に例示する。
【表１】
0006035238.tif 000008
"
0006035238.tif 000009
"
0006035238.tif 000010
"
【０１３２】
該当する特定の化合物、およびその塩または溶媒和物または立体異性体を挙げる：
Ｉ−１:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−２:  ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−３:  ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸アミド;
Ｉ−４:  ２−（４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−５:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−６:  ２−（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−７:  Ｎ２−（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−８:  ２−（２−フルオロ−４−イソプロピル−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−９:  ５−フルオロ−Ｎ２−（４−イソプロピル−３−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１０:  ２−（４−イソプロピル−３−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸アミド;
Ｉ−１１:  ２−（４−イソプロピル−３−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−１２:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１３:  ５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１４:  ５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（１,２，２，６，６−ペンタメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;および
Ｉ−１５:  Ｎ２−[４−シクロプロピル−３−（５−トリフルオロメチル−テトラゾル−１−イル）−フェニル]−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン、
またはその溶媒和物、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容し得る塩。
【０１３３】
該当する特定の化合物、およびその塩または溶媒和物または立体異性体を挙げる：
Ｉ−１６:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１７:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−（５−シクロプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロフェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１８:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１９: Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−２０: Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−（フルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;および
Ｉ−２１: ｔｒａｎｓ−５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−４−（２−（トリフルオロメチル）シクロプロピル）フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン、
またはその溶媒和物、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容し得る塩。
【０１３４】
該当する特定の化合物、およびその塩または溶媒和物または立体異性体を挙げる：
Ｉ−１:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−２:  ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−３:  ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸アミド;
Ｉ−４:  ２−（４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−５:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−６:  ２−（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−７:  Ｎ２−（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−８:  ２−（２−フルオロ−４−イソプロピル−５−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−９:  ５−フルオロ−Ｎ２−（４−イソプロピル−３−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１０:  ２−（４−イソプロピル−３−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボン酸アミド;
Ｉ−１１:  ２−（４−イソプロピル−３−テトラゾル−１−イル−フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イルアミノ）−ピリミジン−５−カルボニトリル;
Ｉ−１２:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１３:  ５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１４:  ５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−テトラゾル−１−イル−フェニル）−Ｎ４−（１,２，２，６，６−ペンタメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１５:  Ｎ２−[４−シクロプロピル−３−（５−トリフルオロメチル−テトラゾル−１−イル）−フェニル]−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１６:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１７:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−（５−シクロプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロフェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;および
Ｉ−１８:  Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−１９: Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;
Ｉ−２０: Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−（フルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン;および
Ｉ−２１: ｔｒａｎｓ−５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−４−（２−（トリフルオロメチル）シクロプロピル）フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミン、
またはその溶媒和物、プロドラッグ、もしくは薬学的に許容し得る塩。
【０１３５】
記載された化合物はまた、１つまたはそれ以上の原子が従来より天然に見出される原子量とは異なる原子量を有する同位体標識化合物をも包含する。本明細書に開示された化合物に取り込まれ得る同位体の例としては、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏなどが挙げられるが、これらに限定されない。よって、開示された前記化合物は、かかる同位体の天然存在度に比例して、１つまたはそれ以上のこれら同位体を豊富に含み得る。例として重水素（２Ｈ）は、約０．０１５％の天然存在度を有する。したがって自然界で発生する水素原子およそ６，５００個ごとに、１個の重水素原子が存在する。具体的に本明細書では、１つまたはそれ以上の位置に重水素が豊富に存在する化合物が企図される。よって、本開示の重水素含有化合物は、１つまたはそれ以上の位置に（場合に応じて）０．０１５％を超える存在度で重水素を有する。
【０１３６】
化合物は、非溶媒和形態並びに、水和形態を含む溶媒和形態で存在してもよい。一般に、化合物は、水和または溶媒和されていてもよい。特定の化合物は、多結晶または非晶質形態で存在してもよい。一般に、全ての物理的形態は、本明細書において企図される使用と同等であり、本開示の範囲内にあることを意図するものとする。
【０１３７】
本開示はまた、薬学的に許容し得る担体と、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその薬学的に許容し得る塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体の治療上有効な量とを含んでなる医薬組成物を提供する。
【０１３８】
開示された化合物は、単一活性医薬剤として単独投与するか、または１つもしくはそれ以上の式Ｉ〜Ｖ化合物を追加して併用投与するかまたは他の薬剤と協同投与することができる。併用投与される場合、該治療薬は、同時にまたは異なる時間に投与される個別の組成物として処方することができ、または該治療薬は、２つまたはそれ以上の治療薬を組み合わせた単一組成物として一緒に投与することができる。よって、式Ｉ〜Ｖの化合物を含有する本明細書に開示された医薬組成物は、任意選択的に他の治療薬を含有する。したがって特定の実施形態は、当業者に公知の、選択された薬剤の治療上有効量を更に含んでなるかかる医薬組成物を対象とする。
【０１３９】
表題化合物は、プロテインキナーゼＣ活性を阻害することができる。したがって、該化合物は、対象におけるＰＫＣ活性を介した疾患または障害を処置するのに有用である。同じく該化合物は、対象におけるＴ細胞の活性化に関連する疾患または障害を治療するのに有用である。
【０１４０】
本開示は、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を投与することを含む、対象の炎症性疾患の治療方法を提供する。
【０１４１】
本開示はまた、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を投与することを含む、対象の自己免疫疾患の治療方法も提供する。
【０１４２】
本開示はまた、炎症および／または新生血管事象を伴う眼科疾患または障害を治療する方法も提供する。
【０１４３】
本開示はまた、対象の疾患または状態、例えば、アテローム性硬化症、血管傷害による血管閉塞、血管形成術、再狭窄、肥満、シンドロームＸ、耐糖能障害、多嚢胞性卵巣症候群、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、ＣＮＳ疾患、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、双極性疾患、癌、感染性疾患、ＡＩＤＳ、敗血性ショック、成人呼吸促迫症候群、虚血／再灌流傷害、心筋梗塞、卒中、腸管虚血、腎不全、出血性ショック、外傷性ショック、および外傷性脳傷害などを含むがこれらに限定されない、疾患または状態を治療する方法も提供する。
【０１４４】
本開示はまた、対象の疾患または状態、例えば、Ｔ細胞を介した急性もしくは慢性炎症性疾患もしくは障害、または自己免疫疾患、関節リウマチ、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型またはII型糖尿病およびそれに関連する障害、移植片拒絶、移植片対宿主病、呼吸器疾患、喘息、炎症性肺傷害、炎症性肝傷害、炎症性糸球体傷害、免疫を介した障害または疾病の皮膚症状、炎症性および高増殖性皮膚疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎および更なる湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、炎症性眼疾患、ショーグレン症候群、角結膜炎、ブドウ膜炎、炎症性腸疾患、クローン病または潰瘍性大腸炎、ギラン・バレー症候群、ならびにアレルギーなどを含むがこれらに限定されない、疾患または状態を治療する方法も提供する。
【０１４５】
表題化合物は、細胞増殖性障害を治療するのに用いることができる。本開示はまた、対象の疾患または状態、例えば、造血系新生物、リンパ系新生物、Ｔ細胞新生物、Ｔリンパ芽球白血病、Ｂ細胞新生物、Ｂリンパ芽球白血病、バーキットリンパ腫、骨髄新生物、骨髄増殖性疾患、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、骨髄異形成症、慢性骨髄単球性白血病、骨髄異形成症候群、および急性骨髄性白血病などを含むがこれらに限定されない、疾患または状態を治療する方法も提供する。
【０１４６】
表題化合物は、ＰＫＣ阻害特性を有するため、かかる化合物は、研究ツールとしても有用である。したがって本開示はまた、生物学的システムもしくは試料の研究のための、またはＰＫＣ阻害特性を有する新規な化学的化合物を発見するための研究ツールとして、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を用いる方法も提供する。
【０１４７】
実施形態は、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体を調製するのに有用なプロセスおよび新規の中間体も対象とする。
【０１４８】
一実施形態において、上記プロセスは、式Ｉ〜Ｖの化合物の塩を形成する工程を更に含む。実施形態は、本明細書に記載された他のプロセス、および本明細書に記載された任意のプロセスにより調製される生成物を対象とする。
【０１４９】
実施形態はまた、治療用または医薬品として、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体も対象とする。
【０１５０】
加えて、実施形態は、医薬品の製造、特にプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）活性阻害薬の製造のための、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体の使用を対象とする。実施形態はまた、ＰＫＣ活性により媒介または維持されり疾患または障害を治療する医薬品製造のための、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体の使用も対象とする。実施形態はまた、Ｔ細胞活性に関連する疾患または障害を治療する医薬品製造のための、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体の使用も対象とする。対象となる疾患または状態としては、炎症性疾患、免疫障害、自己免疫疾患、炎症および／または新生血管事象を伴う眼科疾患または障害、臓器および骨髄移植拒絶、急性または慢性炎症、アレルギー、接触皮膚炎、乾癬、関節リウマチ、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、II型糖尿病、炎症性腸疾患、ギラン・バレー症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、移植片対宿主病、およびエリテマトーデスが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５１】
実施形態はまた、細胞増殖障害を治療する医薬品製造のための、式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体の使用も対象とする。対象となる疾患または状態としては、造血系新生物、リンパ系新生物、Ｔ細胞新生物、Ｔリンパ芽球白血病、Ｂ細胞新生物、Ｂリンパ芽球白血病、バーキットリンパ腫、骨髄新生物、骨髄増殖性疾患、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、骨髄異形成症、慢性骨髄単球性白血病、骨髄異形成症候群、急性骨髄性白血病が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１５２】
一般的合成手順
開示された化合物を合成するのに有用な、一般に知られる化学的合成スキームおよび条件を提供する多くの一般的参照を入手することは可能である（例えば、Smith and March, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, Fifth Edition, Wiley-Interscience, 2001;またはVogel, A Textbook of Practical Organic Chemistry, Including Qualitative Organic Analysis, Fourth Edition, New York: Longman, 1978を参照のこと）。
【０１５３】
本明細書に記載された化合物は、ＨＰＬＣ、分取薄層クロマトグラフィー、フラッシュカラムクロマトグラフィーおよびイオン交換クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィー手法を含む、当該技術分野で公知の任意の手段により精製することができる。順相および逆相、ならびにイオン樹脂を含む、任意の適切な固定相を用いることができる。最も典型的には、開示された化合物は、シリカゲルおよび／またはアルミナクロマトグラフィーにより精製される。例えば、Introduction to Modern Liquid Chromatography, 2nd Edition, ed. L. R. Snyder and J. J. Kirkland, John Wiley and Sons, 1979;およびThin Layer Chromatography, ed E. Stahl, Springer-Verlag, New York, 1969を参照されたい。
【０１５４】
表題化合物を調製するための任意のプロセスの間に、関係する任意の分子の感受性基または反応性基を保護することが必要および／または望ましい場合がある。これは、標準的著作物、例えば、J. F. W. McOmie, 「Protective Groups in Organic Chemistry」, Plenum Press, London and New York 1973、T. W. Greene and P. G. M. Wuts, 「Protective Groups in Organic Synthesis」, Third edition, Wiley, New York 1999、 「The Peptides」; Volume 3 (editors: E. Gross and J. Meienhofer), Academic Press, London and New York 1981、 「Methoden der organischen Chemie」, Houben-Weyl, 4th edition, Vol. 15/l, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974、H.-D. Jakubke and H. Jescheit, 「Aminosauren, Peptide, Proteine」, Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, and Basel 1982、および／またはJochen Lehmann, 「Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide and Derivate」, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974などに記載されている従来の保護基を用いて実現してもよい。保護基は、当該技術分野で公知の方法を利用して簡便な次の段階で除去してもよい。
【０１５５】
表題化合物は、市販の出発原料および／または従来の合成方法により調製された出発原料を用いて、様々な異なる合成経路を介して合成することができる。本発明の２，４−ピリミジンジアミン化合物およびプロドラッグを合成するのに日常的に採用され得る適切な例示的方法は、その開示が参照により本明細書に組み入れられる米国特許第５，９５８，９３５号に見出される。それゆえ、多数の２，４−ピリミジンジアミン化合物およびプロドラッグ、ならびに中間体の合成を記載する具体的例は、その内容が参照により本明細書に組み入れられる米国特許出願公開第２００４／００２９９０２（Ａ１）号に記載されている。活性２，４−ピリミジンジアミン化合物を合成するのに日常的に利用および／または採用され得る適切な例示的方法はまた、その開示が参照により本明細書に組み入れられる、国際公開第０３／０６３７９４号、２００３年７月２９日出願の米国特許出願第１０／６３１，０２９号、国際公開第２００４／０１４３８２号、米国特許出願公開第２００５−０２３４０４９（Ａ１）号、および国際公開第００５／０１６８９３号において見出すこともできる。本明細書に記載された全ての化合物（プロドラッグを含む）は、通常採用されるこれらの方法により調製することができる。
【０１５６】
本明細書に記載の２，４−置換−ピリミジンジアミンの例示的合成方法は、以下に記載する。当業者であれば、本明細書に記載の特定の２，４−置換−ピリミジンジアミンを合成するこれらの方法を容易に採用することができるであろう。
【０１５７】
本発明の２，４−ピリミジンジアミン化合物を合成するのに用いられ得る様々な例示的合成経路については、以下のスキームに記載する。これらの方法は、本明細書に記載された２，４−ピリミジンジアミン化合物およびプロドラッグを合成するのに日常的に採用され得る。
【０１５８】
化合物の合成
特定の実施形態において、該化合物は、以下のスキーム１に例示されるとおり置換または非置換のウラシルから合成することができる：
スキーム１
【化７】
0006035238.tif 000011
【０１５９】
スキーム１において、Ｒ１、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒ５、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ７ｘ、Ｒ８は、本明細書の先に示されたとおりである。
【０１６０】
スキーム１に従い、ウラシルＡ−１を、標準の脱水−ハロゲン化剤、例えばＰＯＣｌ３（オキシ塩化リン）（または他の標準的ハロゲン化剤）を用いて、標準条件下で２−および４−位でジハロゲン化させて、２，４−ジクロロピリミジンＡ−２を生成させる。ピリミジンジアミンＡ−２における置換基に応じて、Ｃ４位置の塩化物は、Ｃ２位置の塩化物よりも求核試薬に対してより反応的である。この識別的反応性は、最初に２，４−ジクロロピリミジンＡ−２を１当量のアミンＡ−３と反応させて４Ｎ−置換−２−クロロ−４−ピリミジンアミンＡ−４を生成させた後、アミンＡ−５により２，４−ピリミジンジアミン誘導体Ａ−６を生成させることにより、活用することができる。
【０１６１】
典型的にはＣ４ハロゲン化物は、スキームに例示されたとおり求核試薬に対してより反応的である。しかし、置換基の同一性によりこの反応性を変化させる場合があるが、そのことは当業者であれば認識するであろう。例えば置換基がトリフルオロメチルである場合、４Ｎ−置換−４−ピリミジンアミンＡ−４と、対応する２Ｎ−置換−２−ピリミジンアミンとの５０：５０混合物が得られる。反応の位置選択性もまた、当該技術分野で周知のとおり、溶媒および他の合成条件（温度など）を調整することにより制御することもできる。
【０１６２】
特定の実施形態において、ハロゲン化物または擬ハロゲン化物などの求電子性脱離基を有する化合物と、アミノ基を有する化合物とをカップリングするために、求核芳香族置換を用いることができる。例えば、化合物Ａ−２上のハロゲン置換基と化合物Ａ−３上のアミノ基は反応し得る。また、例えば、化合物Ａ−４上のハロゲン置換基と化合物Ａ−５上のアミノ基は反応し得る。求核芳香族置換の条件は、極性非プロトン性溶媒または極性プロトン性溶媒において反応する化合物を含む。適切な溶媒としては、アルコール（イソプロピルアルコール、メタノール、エタノールなど）、ギ酸、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、ジオキサン、およびテトラヒドロフランが挙げられる。反応は、室温で実施することができ、または加熱することができる。
【０１６３】
特定の実施形態において、ハロゲン化物または擬ハロゲン化物などの求電子性脱離基を有する化合物と、アミノ基を有するアリール化合物とをカップリングするために、バックワルドカップリング反応などのカップリング反応を用いることができる。バックワルドカップリング反応は、アリールアミンのパラジウム触媒による合成を含む。出発原料は、ハロゲン化または擬ハロゲン化アリール（例えば、トリフラート）、および第一級または第二級アミンである。かかる反応は、当該技術分野で周知の様々な方法を用いて実施することができ、具体的な例は、本明細書の以下に記載される実施例を参照することにより得ることができる。
【０１６４】
スキーム１に示された反応は、反応混合物をマイクロ波を介して加熱するとより急速に進行する場合がある。この方式で加熱する場合、以下の条件を用いることができる： Ｓｍｉｔｈ  Ｒｅａｃｔｏｒ(Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ社, スウェーデン、ウプサラ)中の密閉された試験管内で（圧力２０バール）、エタノール中で、５〜２０分間１７５℃に加熱する。
【０１６５】
５−フルオロウラシル(Ａｌｄｒｉｃｈ番号３２，９３７−１)を出発原料として用いるスキーム１の具体的実施形態を、以下のスキーム２に例示する。
スキーム２
【化８】
0006035238.tif 000012
【０１６６】
スキーム２において、Ｒ１、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ７ｘ、Ｒ８は、本明細書の先に示されたとおりである。
【０１６７】
非対称の２Ｎ，４Ｎ−二置換−５−フルオロ−２，４−ピリミジンジアミンＡ−１０は、２，４−ジクロロ−５−フルオロピリミジンＡ−８を１当量のアミンＡ−３と反応させ（２−クロロ−Ｎ４−置換−５−フルオロ−４−ピリミジンアミンＡ−９を生成させ）、続いて１当量またはそれ以上のアミンＡ−５と反応させることにより、得ることができる。
【０１６８】
シアノ誘導体を形成させるためのスキーム１の具体的実施形態を、以下のスキーム３に例示する。
スキーム３
【化９】
0006035238.tif 000013
【０１６９】
スキーム３において、Ｒ１、Ｒａ、Ｒｂ、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ７ｘ、Ｒ８は、本明細書の先に示されたとおりである。
【０１７０】
非対称の２Ｎ，４Ｎ−二置換−５−シアノ−２，４−ピリミジンジアミンＡ−１５は、２，４−ジクロロ−５−カルバモイルピリミジンＡ−１２を１当量のアミンＡ−３と反応させること（２−クロロ−Ｎ４−置換−５−カルバモイル−４−ピリミジンアミンＡ−１３を生成させること）により、得ることができる。化合物Ａ−１３のアミド基をシアノ基に変換して、化合物Ａ−１４を生成し、続いて１当量またはそれ以上のアミンＡ−５と反応させる。アミド基からシアノ基への変換は、例えばバージェス試薬または無水トリフルオロ酢酸を使用して、脱水により達成され得る。
【０１７１】
ウラシル出発原料および中間体
ウラシルＡ−１、Ａ−７、およびＡ−１１出発原料は、市販業者から購入、または有機化学の標準技術を用いて調製することができる。本明細書に開示されたスキームにおける出発原料として用いられ得る市販のウラシルは、例えば、ウラシル(Ａｌｄｒｉｃｈ番号１３，０７８−８；ＣＡＳ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ６６−２２−８);５−ブロモウラシル （Ａｌｄｒｉｃｈ番号８５，２４７−３；ＣＡＳ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ５１−２０−７）；５−フルオロウラシル（Ａｌｄｒｉｃｈ番号８５，８４７−１；ＣＡＳ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ５１−２１−８）；５−ヨードウラシル（Ａｌｄｒｉｃｈ番号８５，７８５−８；ＣＡＳ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ６９６−０７−１）；５−ニトロフラシル（Ａｌｄｒｉｃｈ番号８５，２７６−７；ＣＡＳ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ６１１−０８−５）；５−（トリフルオロメチル）−ウラシル（Ａｌｄｒｉｃｈ番号２２，３２７−１；ＣＡＳ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ５４−２０−６）が挙げられるが、これらに限定されない。追加の５−置換ウラシルは、General Intermediates of Canada, Inc.社（カリフォルニア州エドモントン）および／またはInterchim社（フランス、セデックス）から入手することができ、または標準技術を用いて調製することができる。多くの教科書が教示する適切な合成方法を以下に示す。
【０１７２】
アミノ出発原料および中間体
Ａ−３およびＡ−５などのアミンは、市販業者から購入することができ、あるいは標準技術を用いて合成することができる。例えば適切なアミンを、標準的化学作用を利用してニトロ前駆体から合成することができる。例えば、Vogel, 1989, Practical Organic Chemistry, Addison Wesley Longman, Ltd. and John Wiley & Sons, Incを参照されたい。
【０１７３】
テトラゾール中間体
スキーム１〜３におけるＮ−結合のテトラゾールを有する化合物Ａ−５は、スキーム４に例示されたとおり調製したが、スキーム４に例示された手順に従って該化合物へ組み入れてもよい。
スキーム４
【化１０】
0006035238.tif 000014
【０１７４】
スキーム４において、Ｒ６ａ、Ｒ６ｂ、Ｒ７ｂ、Ｒ８およびＲ７ｘは、先に定義されたとおりである。
【０１７５】
化合物Ａ−５を調製するために、化合物Ａ−１６を反応させて、アジ化ナトリウムおよびオルトギ酸トリメチルまたはオルトギ酸トリエチルで処理することにより、テトラゾール化合物Ａ−１７を形成させた。その反応は、任意の適切なアミノフェニル化合物に向かうのが一般的である。化合物Ａ−１７を反応させてニトロ基を還元し、化合物Ａ−５を形成させた。化合物Ａ−５はまた、Satoh et al., Tetrahedron Lett, 1995, 36, 1749; Gupta et al. Tetrahedron Lett, 2004, 45, 4113; Su et al. Eur. J. Org. Chem., 2006, 2723;およびPotewar et al., Tetrahedron Lett, 2007, 48, 172により示された手順に従って調製することもできる。
【０１７６】
置換基を用いた環の置換は、標準的化学作用により実施することができる。特定の実施形態において、置換基を用いた環の置換は、求核芳香族置換により実施することができる。例えばハロゲン置換基は、求核芳香族置換により他の置換基で置換することができる。特定の実施形態において、置換基を用いた環の置換は、金属触媒でのカップリング反応により実施することができる。例えばハロゲン置換基は、金属触媒の利用により別の置換基で置換することがでる。適切な置換基を配置させるための適切な金属触媒反応としては、鈴木カップリング、スティルカップリング、およびバックワルドカップリングが挙げられる。
【０１７７】
化合物Ａ−１７のニトロ基をアミノ基に変換して、化合物Ａ−５を生成した。ニトロ基からアミノ基への変換は、様々な方法により遂行することができる。ニトロ基を還元する適切な方法は、水素および触媒、例えば、炭素上のパラジウム、酸化白金、ラネーニッケル、および二ヨウ化サマリウムであるがこれらに限定されない触媒を用いる触媒水素化である。
【０１７８】
化合物Ａ−１６は、市販業者から購入することができ、または有機化学の標準技術を用いて調製することができる。例えば化合物Ａ−１６は、有機化学の標準技術により対応するアミンから調製することができる。特定の実施形態において、化合物Ａ−１６は、ニトロ基の１つがアミノ基に還元されている、対応するジニトロ化合物から調製することができる。多数の教科書が教示する適切な合成方法を以下に示す。
【０１７９】
先に議論された合成スキームの多くは、保護基の使用を例示していないが、当業者であれば、幾つかの例において、特定の置換基が保護を必要とする官能基を含み得ると認識するであろう。用いられる保護機の厳密な同一性は、とりわけ、保護される官能基の同一性および特定の合成スキームにおいて用いられる反応条件に依存するが、当業者には明白であろう。特定の適用に適した保護基の選択、それらの付着および除去に関する手引きは、例えば、前出のGreene & Wutsの文献に見出すことができる。
【０１８０】
本明細書に記載されたプロドラッグは、先に記載された方法の日常的改良により調製することができる。あるいはかかるプロドラッグは、適宜保護された２，４−ピリミジンジアミンを適切なプロ基と反応させることにより調製することができる。本明細書に記載されたかかる反応を実施する条件および生成物を脱保護してプロドラッグを生成させる条件は周知である。
【０１８１】
一般にピリミジンを合成するのに有用な方法、およびスキーム（Ｉ）〜（VII）に記載された出発原料を教示する多くの参考資料については、当該技術分野で公知である。具体的な手引きに関しては、The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 16 (Weissberger, A., Ed.), 1962, Interscience Publishers, (A Division of John Wiley & Sons), New York (“Brown I”)内のBrown, D. J., 「The Pyrimidines」；The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 16, Supplement I (Weissberger, A. and Taylor, E. C., Ed.), 1970, Wiley-Interscience, (A Division of John Wiley & Sons), New York (Brown II”)内のBrown, D. J., 「The Pyrimidines」；The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 16, Supplement II (Weissberger, A. and Taylor, E. C., Ed.), 1985, An Interscience Publication (John Wiley & Sons), New York (“Brown III”)内のBrown, D. J., 「The Pyrimidines」；The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 52 (Weissberger, A. and Taylor, E. C., Ed.), 1994, John Wiley & Sons, Inc., New York, pp. 1-1509 (Brown IV”)内のBrown, D. J., 「The Pyrimidines」；Heterocyclic Compounds, Volume 6, (Elderfield, R. C., Ed.), 1957, John Wiley, New York, Chapter 7内のKenner, G. W. and Todd, A., (ピリミジン)；Paquette, L. A., Principles of Modern Heterocyclic Chemistry, 1968, W. A. Benjamin, Inc., New York, pp. 1 ? 401 (ウラシル合成pp. 313, 315; ピリミジンアミン合成pp. 313-316; アミノピリミジンジアミン合成pp. 315); Joule, J. A., Mills, K. and Smith, G. F., Heterocyclic Chemistry, 3rd Edition, 1995, Chapman and Hall, London, UK, pp. 1 ? 516; Vorbruggen, H. and Ruh-Pohlenz, C., Handbook of Nucleoside Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 2001, pp. 1-631 (アシル化によるピリミジンの保護pp. 90-91; ピリミジンによるシリル化pp. 91-93); Joule, J. A., Mills, K. and Smith, G. F., Heterocyclic Chemistry, 4th Edition, 2000, Blackwell Science, Ltd, Oxford, UK, pp. 1 ? 589;およびComprehensive Organic Synthesis, Volumes 1-9 (Trost, B. M. and Fleming, I., Ed.), 1991, Pergamon Press, Oxford, UKを参照されたい。
医薬組成物
【０１８２】
開示された化合物は、少なくともＰＫＣ活性の阻害およびＰＫＣ活性を媒介とした疾患または障害の治療に関して有用である。したがって少なくとも１種の開示された化合物を含む医薬組成物も、本明細書に記載される。
【０１８３】
表題化合物を含んでなる医薬組成物は、患者に単独投与してもよく、または他の補助的活性剤と組み合わせた併用投与でもよい。該医薬組成物は、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠化、水簸、乳化、カプセル化、封入、および凍結乾燥をを含むがこれらに限定されない、任意の様々なプロセスを用いて製造してもよい。該医薬組成物は、滅菌溶液、懸濁液、エマルジョン、凍結乾燥物、錠剤、丸薬、ペレット、カプセル、粉末、シロップ、エリキシル、または投与に適した任意の他の剤形を含むがこれらに限定されない、任意の様々な形態をとることができる。
【０１８４】
表題化合物は、疾患状態または症状の所望の低減をもたらすことが可能な任意の簡便な手段を用いて宿主に投与してもよい。よって、表題化合物は、治療的投与のための様々な製剤に組み入れることができる。より詳細には、表題化合物は、適切な薬学的に許容し得る担体または希釈剤と組み合わせることにより医薬組成物に処方され得、、固形、半固形、液体または気体形態の調製物、例えば錠剤、カプセル、粉末、細粒、軟膏、溶液、坐剤、注射薬、吸入剤およびエアロゾルに処方され得る。
【０１８５】
医薬組成物の製剤は、当該技術分野で周知である。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, by E. W. Martin, Mack Publishing Co., Easton, Pa., 19th Edition, 1995には、開示された化合物の薬学的送達に適した例示的製剤（およびその成分）が記載されている。表題化合物の少なくとも１種を含んでなる医薬組成物は、ヒトまたは獣医学的医薬品における使用のために処方され得る。開示された医薬組成物の詳細な製剤は、例えば、投与様式および／または治療対象の感染位置に依存する。幾つかの実施形態において、製剤には、表題化合物などの少なくとも１つの有効成分に加えて、薬学的に許容し得る担体を含む。他の実施形態において、例えば治療される病気に対して類似の、関連する、または補足的な効果を有する他の医薬品または薬剤を医薬組成物中に有効成分として含ませることもできる。
【０１８６】
開示された方法および組成物に有用な薬学的に許容し得る担体は、当該技術分野で従来とおりである。医薬担体の性質は、利用される特定の投与様式に依存する。例えば非経口製剤は通常、水、生理学的生理食塩水、平衡塩溶液、水性デキストロース、グリセロールなどの薬学的および生理学的に許容し得る流体を媒体として含む注射可能な流体を含んでなる。固体組成物（例えば、粉末、丸薬、錠剤、またはカプセル形態）の場合、従来の非毒性固体担体は、例えば、医薬等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、またはステアリン酸マグネシウムを含むことができる。生物学的に中性の担体に加えて、投与される医薬組成物は、微量の非毒性補助物質（例えば、賦形剤）、例えば湿潤剤または乳化剤、防腐剤、およびｐＨ緩衝剤など、例えば酢酸ナトリウムまたはモノラウリン酸ソルビタンなどを任意選択的に含有することができる。他の非限定的賦形剤としては、クレモホールなどの非イオン性可溶化剤、、またはヒト血清アルブミンまたは血漿調製物などのタンパク質が挙げられる。
【０１８７】
薬学的に許容し得る担体として作用し得る材料の幾つかの例としては、（１）糖、例えばラクトース、グルコースおよびスクロース；（２）デンプン、例えばコーンスターチおよびジャガイモデンプン；（３）セルロースおよびその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロース；（４）粉末トラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）賦形剤、例えばココアバターおよび坐剤ワックス；（９）油、例えばピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油および大豆油：（１０）グリコール、例えばプロピレングリコール；（１１）ポリオール、例えばグリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール；（１２）エステル、例えばオレイン酸エチルおよびラウリン酸エチル；（１３）寒天；（１４）緩衝剤、例えば水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウム；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェンフリー水；（１７）等張性生理食塩水；（１８）リンガー液；（１９）エチルアルコール；（２０）ｐＨ緩衝溶液：（２１）ポリエステル、ポリカルボナートおよび／またはポリ酸無水物；ならびに（２２）医薬製剤に使用される他の非毒性適合性物質が挙げられる。
【０１８８】
開示された医薬組成物は、開示された化合物の薬学的に許容し得る塩として処方されてもよい。薬学的に許容し得る塩は、遊離塩基の所望の薬理活性を有する化合物の遊離塩基形態の非毒性塩である。これらの塩は、無機酸または有機酸から誘導されてもよい。適切な無機酸の非限定的例は、塩酸、硝酸、臭化水素酸、硫酸、ヨウ化水素酸、およびリン酸である。適切な有機酸の非限定的例は、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、サリチル酸、ギ酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、アスパラギン酸（ａｓｐａｒａｇｉｃ  ａｃｉｄ）、アスパラギン酸（ａｓｐａｒｔｉｃ  ａｃｉｄ）、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸などである。他の適切な薬学的に許容し得る塩の一覧は、Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th Edition, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985に見出される。薬学的に許容し得る塩は、組成物の浸透圧を調整するよう作用し得る
【０１８９】
表題化合物は、単独で、または適切な添加剤、例えば、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ、またはジャガイモデンプンなどの従来の添加剤、結晶セルロース、セルロース誘導体、アカシア、コーンスターチまたはゼラチンなどのバインダー、コーンスターチ、ジャガイモデンプンまたはカルボキシメチルセルロースナトリウムなどの崩壊剤、タルクまたはステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、および、所望なら、希釈剤、緩衝剤、保湿剤、防腐剤および着香剤と組み合わせて用いて、錠剤、粉末、細粒またはカプセルを作製することができる。かかる調製物は、経口投与に用いることができる。
【０１９０】
表題化合物は、水性または非水性溶媒、例えば植物油もしくは他の類似の油、合成脂肪族酸グリセリド、高級脂肪族酸のエステルまたはプロピレングリコール中で、ならびに、所望なら従来の添加剤、例えば可溶化剤、等調剤、懸濁剤、乳化剤、安定化剤および防腐剤と共に、溶解、懸濁または乳化させることにより、注射用調製物に処方することができる。調製物を乳化してもよく、または有効成分をリポソーム媒体に封入してもよい。注射に適した製剤は、硝子体内、眼内、筋肉内、皮下、舌下、または他の投与経路、例えば歯肉組織または他の口内組織への注射により投与することができる。かかる製剤はまた局所投与にも適している。
【０１９１】
幾つかの実施形態において、表題化合物は、連続送達システムにより送達させることができる。用語「連続送達システム」は、本明細書において「制御送達システム」と同じ意味で用いられ、カテーテル、注射デバイスなどと組み合わせた連続（例えば、制御）送達デバイス（例えば、ポンプ）を包含し、その多様な種類は、当該技術分野で公知である。
【０１９２】
表題化合物は、吸入により投与されるエアロゾル製剤において用いることができる。表題化合物は、加圧された許容し得る噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などに処方され得る。
【０１９３】
更に表題化合物は、様々な塩基、例えば乳化塩基または水溶性塩基と混合することで、坐剤を作製することができる。表題化合物は、坐剤により経直腸投与することができる。坐剤は、体温で融解するが室温では固化されている媒体、例えばココアバター、カルボワックスおよびポリエチレングリコールを含むことができる。
【０１９４】
本明細書において用いられる用語「単位投与剤形」は、ヒトおよび動物対象の単位投与量として適した物理的に分離した単位を指し、それぞれの単位は薬学的に許容し得る希釈剤、担体または媒体と関連して所望の効果を生成するのに十分な量で計算された表題化合物の所定量を含有する。表題化合物の仕様は、用いられる特定の化合物および達成される効果、ならびに宿主における各化合物に関連する薬物動態に依存する。
【０１９５】
開示された医薬組成物の投与形態は、選択された投与様式により決定される。例えば注射可能な流体に加えて、局所または経口投与形態が用いられてもよい。局所調製物には、目薬、軟膏、スプレーなどが含まれ得る。経口製剤は、液体（例えば、シロップ、溶液または懸濁液）、または固体（例えば、粉末、丸薬、錠剤、またはカプセル）であってもよい。かかる投与形態の調製方法は、公知であるか、または当業者に明白であろう。
【０１９６】
表題化合物を含んでなる医薬組成物の特定の実施形態では、精密な投与量の個々の投与に適した単位投与剤形で処方されてもよい。投与される有効成分の量は、治療される対象、病気の重症度、および投与手法に依存し、当業者に公知である。これらの制約の範囲内で、投与される製剤には、本明細書に開示された抽出物または化合物が、治療される対象における所望の効果を実現するのに効果的となる量で含有されている。
【０１９７】
各治療化合物は、それぞれ独立して、任意の投与形態、例えば本明細書に記載されたものなどであってもよく、また、様々な方法で、例えば本明細書に記載されたように投与することもできる。例えば該化合物は、合剤として単独投与単位で（即ち、カプセル、錠剤、粉末、または液体などの１つの形態で一緒に混和されて）一緒に処方してもよい。あるいは単独投与単位として一緒に処方しない場合、個々の表題化合物を別の治療化合物と同時に、または任意の順序で連続して投与してもよい。
【０１９８】
投与方法
表題化合物は、プロテインキナーゼＣ活性を阻害することが可能である。したがって表題化合物は、対象におけるＰＫＣ活性を媒介した疾患または障害を治療するのに有用である。したがって表題化合物は、対象におけるＴ細胞の活性化に関連する疾患または障害を治療するのに有用である。
【０１９９】
投与経路は、治療対象の状態、用いられる製剤および／またはデバイス、治療対象の患者などを含むがこれらに必ずしも限定されない様々な因子に従って選択される。開示された方法において有用な投与経路としては、経口および非経口経路、例えば静脈内（ｉｖ）、腹腔内（ｉｐ）、経直腸、局所、眼内、経鼻、および経皮などが挙げられるが、これらに限定されない。これらの投与形態の製剤は、本明細書に記載されている。
【０２００】
表題化合物の有効量は、少なくとも、特定の使用方法、治療対象、病気の重症度、および治療組成物の投与手法に依存する。組成物の「治療上有効量」は、治療対象（宿主）において所望の効果を実現するのに十分な具体的化合物の量である。例えばこれは、対象におけるＰＫＣ活性を媒介した疾患または障害を予防、阻害、低減または緩和するのに必要となる表題化合物の量であってもよい。理想的には、化合物の治療上有効量は、宿主細胞に対して実質的な細胞毒性作用を誘発せずに、対象におけるＰＫＣ活性を媒介した疾患または障害を予防、阻害、低減または緩和するのに十分な量である。
【０２０１】
表題化合物または医薬組成物の治療上有効用量（または成長阻害量）は、当業者であれば本明細書に開示された適用可能な化合物のＩＣ５０もの高い局所（例えば、組織）濃度の実現を目的にして、決定し得る。
【０２０２】
投与量範囲の例は、経口による単独または分割用量で約０．１〜約２００ｍｇ／ｋｇ体重である。特定の例において、投与量範囲は、経口による単独または分割用量で約１．０〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重、例えば約１．０〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重、約１．０〜約２５ｍｇ／ｋｇ体重、約１．０〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、である（平均体重をおよそ７０ｋｇと仮定；平均前後の体重の人に合わせて調整された値）。経口投与に関して、該組成物は、治療対象への投与量を症状により調整するため、例えば約５０〜約１０００ｍｇの有効成分、詳細には約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７５０ｍｇ、または約１０００ｍｇの有効成分を含有する錠剤の形態で提供される。１つの例示的経口投与レジメンにおいて、約５００ｍｇ〜約１０００ｍｇの有効成分を含有する錠剤が１回投与され（例えば、初回投与）、続いて１／２投与量の錠剤（例えば、約２５０〜約５００ｍｇ）が、６〜２４時間毎に少なくとも３日間投与される。  
【０２０３】
任意の特定対象に対する具体的用量レベルおよび投与回数は変動してもよく、表題化合物の活性、前記化合物の代謝安定性および作用期間、対象の年齢、体重、一般的健康状態、性別および食事、投与の様式および時間、排出速度、薬物の組み合わせ、ならびに治療を受ける宿主の状態の重症度を含む様々な因子に依存する。
【０２０４】
本開示はまた、１つまたはそれ以上の開示された化合物と、疾患または障害の治療に有用となる１つまたはそれ以上の他の薬剤または治療との組み合わせも企図する。特定の場合において、疾患または障害は、対象におけるＰＫＣ活性に媒介される。特定の場合において、疾患または障害は、細胞増殖性障害である。例えば１つまたはそれ以上の開示された化合物は、他の薬品および薬剤の有効量との併用で、またはホルモンもしくは放射線治療などの他の非薬物療法との併用で投与されてもよい。用語「併用投与」は、活性剤の同時投与および連続投与の両方を指す。
【０２０５】
プロテインキナーゼＣ
プロテインキナーゼＣ
ＰＫＣは、セリン／トレオニンキナーゼとして機能する酵素のファミリーである。ＰＫＣのイソ酵素は、組織分布、酵素選択性、Ｃａ２＋の必要性、および調節において異なる。ＰＫＣは、細胞間シグナル伝達、遺伝子発現ならびに細胞の分化および増殖の制御において重要な役割を担う。
【０２０６】
表題化合物は、ＰＫＣ選択的阻害剤、例えば１つまたはそれ以上の他のプロテインキナーゼ、例えば１つまたはそれ以上のチロシンキナーゼ、例えば１つまたはそれ以上の非受容体または受容体チロシンキナーゼ、例えば、１つまたはそれ以上のＰＫＡ、ＰＫＢ、Ａｂｌ  Ｍｅｔ、Ｓｒｃ、Ｉｎｓ−Ｒ、Ｆｌｔ−３、ＪＡＫ−２、ＫＤＲおよび／またはＲｅｔタンパク質に対し、ＰＫＣを選択的に阻害する阻害剤であり得る。選択的なＰＫＣ阻害剤は、任意選択的に、１つまたはそれ以上のセリン／トレオニンキナーゼ、例えばＣＤＫファミリーに属さない１つまたはそれ以上のセリン／トレオニンキナーゼに対し選択的であり得る。表題化合物は、１つまたはそれ以上の他のプロテインキナーゼ、例えば１つまたはそれ以上のチロシンキナーゼ、例えば１つまたはそれ以上の他のプロテインキナーゼ、例えば１つまたはそれ以上のチロシンキナーゼ、例えばＦｌｔ−３、ＪＡＫ−２、ＫＤＲおよび／もしくはＲｅｔタンパク質、またはＣＤＫファミリーに属さない１つまたはそれい以上のセリン／トレオニンキナーゼに対し、少なくとも１０倍、または２０倍、または１００倍のＰＫＣ選択性を示すことができる。
【０２０７】
他のプロテインキナーゼに対するＰＫＣ選択的阻害剤の選択性は、別のキナーゼで測定されたＩＣ５０に対する、本明細書記載のアッセイで測定されたＰＫＣのＩＣ５０の比として計算してもよい。特定の場合において、同種混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイにおいて測定されたＩＣ５０値と、ＢＭアッセイにおいて測定されたＩＣ５０値の比が、５、１０、２０、または３０を超えるＰＫＣ阻害剤が提供される。ＭＬＲおよびＢＭアッセイは、本明細書に開示されたとおり、公知の方法、例えばマウスまたはヒトのＭＬＲおよびＢＭアッセイに従って実施することができる。
【０２０８】
本開示は、表題化合物が１つまたはそれ以上の他のＰＫＣアイソフォームに対しＰＫＣのアイソフォームθおよびαへの選択性を有する、アイソザイム選択的ＰＫＣ阻害剤となり得るＰＫＣの阻害剤を提供する。特定の場合において、前記表題化合物は、１つまたはそれ以上の他のＰＫＣアイソフォームに対し、ＰＫＣのアイソフォームθへの選択性を有する。特定の場合において、前記表題化合物は、１つまたはそれ以上の他のＰＫＣアイソフォームに対し、ＰＫＣのアイソフォームαへの選択性を有する。一実施形態において、開示された化合物は、少なくとも１つのＰＫＣアイソフォームに対し、ＰＫＣθおよびＰＫＣαへの選択性を示す。
【０２０９】
表題化合物は、１つまたはそれ以上の他のＰＫＣアイソフォームのに対し、ＰＫＣのアイソフォームθまたはαに関して少なくとも１０倍、または２０倍、または１００倍の選択性を示すことができる。１つまたはそれ以上の他のＰＫＣアイソフォームのに対し、ＰＫＣアイソフォームθまたはαへの選択性は、ＰＫＣアイソフォームθまたはαに関する表題化合物のＩＣ５０を、他のＰＫＣアイソフォームに関する表題化合物のＩＣ５０と比較することにより、測定することが可能である。特定の場合において、選択性は、ＰＫＣの他のアイソフォームに関する表題化合物のＩＣ５０と、ＰＫＣのアイソフォームθまたはαに関する表題化合物のＩＣ５０の比を計算することにより決定することができる。特定の例において、表題化合物の、他のＰＫＣアイソフォームに対するＰＫＣθ、αまたはその両方の選択性は、少なくとも約２倍、例えば約３倍〜約３００倍、約１０倍〜約１００倍、または約５倍〜５０倍であることが示される。ＩＣ５０値は、例えば本明細書に記載のＰＫＣアッセイに従って得られる。前記表題化合物は、本明細書に開示のアッセイにおいて１μＭまたはそれ未満、例えば約３００ｎＭ未満の、例えば約１ｎＭ〜約２５０ｎＭ、１００ｎＭ未満、またはさらに１０ｎＭ未満の、ＰＫＣのアイソフォームθまたはαに関するＩＣ５０値を示すことができる。
【０２１０】
表題化合物は、ＰＫＣの他のアイソフォームに対し、アイソフォームθまたはμへの選択性、および１つまたはそれ以上の他のプロテインキナーゼ、例えば１つまたはそれ以上のチロシンキナーゼ、またはＣＤＫファミリーに属さない１つまたはそれ以上のセリン／トレオニンキナーゼ、例えば１つまたはそれ以上のＰＫＡ、ＰＫＢ、Ａｂｌ、Ｍｅｔ、Ｓｒｃ、Ｉｎｓ−ｉｔ、Ｆｌｔ−３、ＪＡＫ−２、ＫＤＲおよびＲｅｔタンパク質、例えば１つまたはそれ以上のＦｌｔ−３、ＪＡＫ−２、ＫＤＲおよびＲｅｔタンパク質に対し、選択性を示すことができる。
【０２１１】
ＰＫＣの特定のアイソザイムは、以下のもの：癌（ＰＫＣα、βＩ、βII、およびδ）；心肥大および心不全（ＰＫＣβＩおよびＰＫＣβII）、侵害受容（ＰＫＣγおよびε）；心筋梗塞を含む虚血（ＰＫＣεおよびδ）；免疫反応、詳細にはＴ細胞を介したもの（ＰＫＣθおよびα）；ならびに線維芽細胞増殖および記憶（ＰＫＣδおよびζ）を含むが必ずしもこれらに限定されない、様々な疾患状態のメカニズムに関連づけられた。ＰＫＣεの役割は、疼痛受容にも関連づけられている。ＰＫＣ阻害剤は、炎症および／または新生血管事象を伴う眼疾患または障害を治療するのにも用いられ得る。
【０２１２】
表題化合物は、同じ起源の非疾患組織と比較して、組織におけるＰＫＣアイソザイムの異常な活性上昇を特徴とするホ乳類（特にヒト）疾患状態の治療に用いられ得る。ＰＫＣアイソザイム、ならびにＰＫＣアイソザイムの活性阻害による治療を受け易い疾患状態および／または生物学的機能としては、ＰＫＣα（高増殖性細胞疾患、例えば癌）；ＰＫＣβＩおよびＰＫＣβII（心肥大および心不全）；ＰＫＣγ（疼痛管理）；ＰＫＣδ（虚血、低酸素症（例えば、心筋梗塞および卒中）；ＵＶ照射により誘発されたアポトーシス；および異常な線維芽細胞増殖（例えば、創傷治癒において生じる可能性があるもの））；ＰＫＣε（疼痛管理、心筋機能不全）；ＰＫＣθ（免疫系疾患、詳細にはＴ細胞媒介反応を伴うもの）；ならびにＰＫＣζ（記憶および線維芽細胞増殖）が挙げられるが、必ずしもこれらに限定されない。
【０２１３】
ＰＫＣシータ
ＰＫＣθは、主に、リンパ組織および骨格筋において発現される。ＰＫＣθは、Ｔ細胞において選択的に発現され、成熟したＴ細胞の活性化の役割を担う。ＰＫＣθがＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を介したＴ細胞活性化に関与するが、ＴＣＲに依存した胸腺細胞の発生時には必須でないことが示されている。ＰＫＣθは、これがＴ細胞活性化の中核でＴＣＲとともに局在化する、抗原特異性Ｔ細胞と抗原提示細胞（ＡＰＣ）との間の細胞接触の部位に移動するが、他のＰＫＣアイソフォームはそうではない。ＰＫＣθは、ＦａｓＬプロモーター−レポーター遺伝子を選択的に活性化し、内在性ＦａｓＬのｍＲＮＡまたは細胞表面発現をアップレギュレートすることができるが、α、εまたはζイソ酵素はそうではない。その一方で、ＰＫＣθおよびεは、Ｆａｓ誘導アポトーシスから細胞を防御することにより、Ｔ細胞の生存を促進することができ、この防御効果は、ＢＣＬ−２ファミリーメンバーであるＢＡＤのｐ９０Ｒｓｋに依存したリン酸化を促進することにより媒介された。こうしてＰＫＣθは、Ｔ細胞のアポトーシスにおいて二重の調節的役割を担うようである。
【０２１４】
ＰＫＣθ阻害剤は、Ｔリンパ球を媒介した障害または疾患、例えば、関節リウマチ、乾癬およびエリテマトーデスなどの自己免疫疾患ならびに喘息等および炎症性腸疾患などの炎症性疾患の治療または予防において用途を見出すことができる。
【０２１５】
ＰＫＣθは、移植および自己免疫疾患における免疫抑制のための薬物ターゲットである（Isakov et al. (2002) Annual Review of Immunology, 20, 761-794）。国際公開第２００４／０４３３８６号では、ＰＫＣθを移植拒絶および多発性硬化症の治療のためのターゲットとして同定している。ＰＫＣθはまた、炎症性腸疾患（The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics (2005), 313 (3), 962-982）、喘息（国際公開第２００５０６２９１８号）および狼瘡（Current Drug Targets: Inflammation & Allergy (2005), 4 (3), 295-298）においても役割を担う。
【０２１６】
加えてＰＫＣθは、胃腸間質性腫瘍において高度に発現され（Blay, P. et al. (2004) Clinical Cancer Research, 10, 12, Pt. 1）、ＰＫＣθが、胃腸癌の治療のための分子ターゲットであることが示唆された（Wiedmann, M. et al. (2005) Current Cancer Drug Targets 5(3), 171）。
【０２１７】
ＰＫＣθノックアウトマウスにおいて導入された実験は、ＰＫＣθの不活性化が、骨格筋中のインスリンシグナル伝達およびグルコース輸送において脂肪誘導による欠陥を予防するという結論を導き出した（Kim J. et al, 2004, The J. of Clinical Investigation 114 (6), 823）。このデータは、ＰＫＣθが、２型糖尿病の治療のための治療ターゲットであること、つまりＰＫＣθ阻害剤が、かかる疾患治療に有用となり得ることを示している。
【０２１８】
治療用途
表題化合物は、治療が必要な対象において、ＰＫＣ活性により媒介または悪化した疾患または障害を治療するのに有用である。また、該化合物は、対象において異常なまたはその他の望ましくないＴ細胞活性に関連する疾患または障害を治療するのに有用である。
【０２１９】
したがって本開示は、炎症を治療するために、表題化合物の塩または溶媒和物または立体異性体を含む、該表題化合物の有効量を投与することにより、対象における炎症性疾患を治療する方法を提供する。治療に企図される炎症性疾患は、ＰＫＣ活性により媒介または悪化した急性および慢性炎症を含む。
【０２２０】
本開示はまた、自己免疫疾患を処置するために、表題化合物の塩または溶媒和物または立体異性体を含む、該表題化合物の有効量を対象に投与することにより、対象における自己免疫疾患を処置する方法も提供する。
【０２２１】
本開示はまた、表題化合物の塩または溶媒和物または立体異性体を含む、該表題化合物を有効量投与することにより、炎症および／または新生血管事象を伴う眼疾患または障害を処置する方法も提供する。
【０２２２】
本開示に従って治療する対象の疾患または状態としては、アテローム性硬化症、血管形成術などの血管傷害による血管閉塞、再狭窄、肥満、シンドロームＸ、耐糖能障害、多嚢胞性卵巣症候群、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症などのＣＮＳ疾患、癌、ＡＩＤＳ、敗血性ショックまたは成人呼吸促迫症候群などの感染性疾患、虚血／再灌流傷害、例えば、心筋梗塞、卒中、腸管虚血、腎不全、出血性ショック、および外傷性ショック、例えば外傷性脳傷害が挙げられるが、これらの限定されない。
【０２２３】
本開示に従った治療の対象となる更なる疾患または状態としては、Ｔ細胞を介した急性もしくは慢性炎症性疾患もしくは障害、または自己免疫疾患、関節リウマチ、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型またはII型糖尿病およびそれに関連する障害、移植片拒絶、移植片対宿主病、呼吸器疾患、喘息、炎症性肺傷害、炎症性肝傷害、炎症性糸球体障害、免疫を介した障害または疾病の皮膚症状、炎症性および高増殖性皮膚疾患（乾癬、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎および更なる湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎など）、炎症性眼疾患（ショーグレン症候群、角結膜炎、ブドウ膜炎など）、炎症性腸疾患、クローン病または潰瘍性大腸炎、ギラン・バレー症候群、ならびにアレルギーが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２４】
表題化合物はまた、炎症および／または新血管形成を伴う眼科疾患および障害を予防または治療または遅延させるために用いることもできる。炎症および／または新血管形成事象を伴う眼科疾患および障害としては、黄斑変性（ＡＭＤ）、糖尿病性眼科疾患もしくは障害、ぶどう膜炎、視神経炎、眼浮腫、眼性血管新生、虚血性網膜症、前部乏血性視神経症、視神経症および神経炎、黄斑浮腫、嚢胞様黄斑浮腫（ＣＭＥ）、網膜疾患もしくは障害、例えば網膜剥離、網膜色素変性（ＲＰ）、スターガート病、ベストの卵黄状網膜変性、レーバー先天性黒内障および他の遺伝性網膜変性、ソースビー眼底変性、病的近視、未熟網膜症（ＲＯＰ）、レーバー遺伝性視神経症、角膜移植または屈折角膜手術、角結膜炎、またはドライアイが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２５】
一般に、本明細書に開示された表題化合物で治療可能な細胞増殖性障害は、異常な細胞増殖を特徴とする任意の障害に関係する。これらは、良性または悪性で転移性または非転移性の様々な腫瘍および癌を含む。組織侵襲性または転移など癌の特異的性質が、本明細書に記載された方法を用いて標的化され得る。細胞増殖性障害には、とりわけ、乳癌、卵巣癌、腎臓癌（renal cancer）、胃腸癌、腎臓癌（kidney cancer）、膀胱癌、膵臓癌、肺扁平上皮癌および腺癌を含む様々な癌が含まれる。
【０２２６】
幾つかの実施形態において、治療された細胞増殖性障害は、造血系の細胞の異常増殖である、造血系新生物である。造血系悪性腫瘍は、造血に関与する多能性幹細胞、多能性前駆細胞、寡能性委任前駆細胞（oligopotent committed progenitor cells）、前駆細胞、および末端分化細胞内にその起源を有し得る。幾つかの血液悪性腫瘍は、自己再生の能力を有する造血幹細胞に由来すると考えられる。例えば、移植の際に、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の特定のサブタイプを生み出すことが可能な細胞は、造血幹細胞の細胞表面マーカーを提示し、造血幹細胞が白血病細胞の供給源として関係づけられる。造血幹細胞の細胞マーカー特徴を有さない芽細胞は、移植の際に腫瘍を確立することができないようである（Blaire et al.,1997,Blood 89:3104-3112）。特定の血液悪性腫瘍の幹細胞起源も、特定の型の白血病に関連する特異的染色体異常が、造血系の正常細胞、および白血病芽細胞で見出され得るという観察において裏付けが見出される。例えば、およそ９５％の慢性骨髄性白血病に関連する相互転座ｔ（９ｑ３４；２２ｑ１１）は、骨髄、赤血球、およびリンパ系の細胞内に存在するようであり、染色体異常が造血幹細胞内を起源とすることが示唆される。ＣＭＬの特定の型における細胞の下位集団は、造血幹細胞の細胞マーカー表現型を提示する。
【０２２７】
造血系新生物は多くの場合、幹細胞を起源とするが、委任前駆細胞、または発生系列のより末端分化された細胞も、幾つかの白血病の原因となり得る。例えば、一般的な骨髄前駆細胞または顆粒球／マクロファージ前駆細胞における融合タンパク質Ｂｃｒ／Ａｂｌ（慢性骨髄性白血病に関連する）の強制発現は、白血病様の状態を生じる。その上、白血病のサブタイプに関連する幾つかの染色体異常は、造血幹細胞のマーカー表現型を伴う細胞集団では見出されないが、造血経路のより分化した状態のマーカーを提示する細胞集団で見出される（Turhan et al.,1995,Blood 85:2154-2161）。よって、委任前駆細胞および他の分化細胞の細胞分裂への可能性は限定的であるのに対し、白血病細胞は、未制御に成長する能力を獲得する可能性があり、場合によっては、造血幹細胞の自己再生特徴を模倣する（Passegue et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2003,100:11842-9）。
【０２２８】
幾つかの実施形態において、治療された造血系新生物は、異常細胞がリンパ系の細胞の特徴的表現型に由来および／またはそれを提示する、リンパ系新生物である。リンパ系新生物は、Ｂ細胞新生物、ＴおよびＮＫ細胞新生物、ならびにホジキンリンパ腫に分類され得る。Ｂ細胞新生物はさらに、前駆体Ｂ細胞新生物および成熟／末梢Ｂ細胞新生物に分類され得る。例示的なＢ細胞新生物は、前駆体Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫（前駆体Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病）であり、例示的な成熟／末梢Ｂ細胞新生物は、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、毛様細胞白血病、形質細胞性骨髄腫／形質細胞腫、ＭＡＬＴ型節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性濾胞辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、外套細胞リンパ腫、びまん性大Ｂ細胞リンパ腫、縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、およびバーキットリンパ腫／バーキット細胞白血病である。Ｔ細胞およびＮＫ細胞新生物は、前駆体Ｔ細胞新生物および成熟（末梢）Ｔ細胞新生物に更に分類され得る。例示的な前駆体Ｔ細胞新生物は、前駆体Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病（前駆体Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病）であり、例示的な成熟（末梢）Ｔ細胞新生物は、Ｔ細胞前リンパ球性白血病、Ｔ細胞顆粒性リンパ球性白血病、侵攻性ＮＫ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫／白血病（ＨＴＬＶ−１）、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、鼻型、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、肝脾ガンマデルタＴ細胞リンパ腫、皮下脂肪織炎様Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫／セザリー症候群、未分化大細胞リンパ腫、Ｔ／ヌル細胞、皮膚原発型、末梢Ｔ細胞リンパ腫、他に特徴づけされていないもの、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、Ｔ／ヌル細胞、全身原発型である。リンパ系新生物の第三のメンバーは、ホジキン病とも呼ばれるホジキンリンパ腫である。該化合物で治療され得るこの分類の例示的な診断として、とりわけ、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、およびホジキン病の様々な古典的形態が挙げられ、その例示的なメンバーは、結節硬化型ホジキンリンパ腫（グレード１および２）、リンパ球豊富型古典的ホジキンリンパ腫、混合細胞型ホジキンリンパ腫、およびリンパ球減少型ホジキンリンパ腫である。
【０２２９】
幾つかの実施形態において、治療された造血系新生物は、骨髄新生物である。この群は、骨髄系の細胞の特徴的表現型を伴う、または提示する細胞増殖性障害の大分類を含んでなる。骨髄新生物は、骨髄増殖性疾患、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄異形成症候群、および急性骨髄性白血病に分類され得る。例示的な骨髄増殖性疾患は、慢性骨髄性白血病（例えば、フィラデルフィア染色体陽性（ｔ（９；２２）（ｑｑ３４；ｑ１１））、慢性好中球性白血病、慢性好酸球性白血病／好酸球増加症候群、慢性特発性骨髄線維症、真性多血症、および本態性血小板血症である。例示的な骨髄異形成／骨髄増殖性疾患は、慢性骨髄単球性白血病、異型慢性骨髄性白血病、および若年性骨髄単球性白血病である。例示的な骨髄異形成症候群は、環状鉄芽球を伴うおよび伴わない不応性貧血、多系列異形成を伴う難治性血球減少（骨髄異形成症候群）、過剰芽球を伴う不応性貧血（骨髄異形成症候群）、５ｑ−症候群およびｔ（９；１２）（ｑ２２；ｐ１２）(ＴＥＬ−Ｓｙｋ融合；例えばKuno et al., 2001, Blood 97:1050を参照)を伴う骨髄異形成症候群である。
【０２３０】
幾つかの実施形態において、該組成物は、障害の小分類を独自に有する骨髄新生物の大分類を表す急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療するのに用いることができる。これら小分類には、とりわけ、再発性細胞遺伝学的転座を伴うＡＭＬ、多系列異形成を伴うＡＭＬ、および他に分類されていないその他のＡＭＬが含まれる。再発性細胞遺伝学的転座を伴うＡＭＬの例としては、とりわけ、ｔ（８；２１）（ｑ２２；ｑ２２）を伴うＡＭＬ、ＡＭＬ１（ＣＢＦ−アルファ）／ＥＴＯ、急性前骨髄球性白血病（ｔ（１５；１７）（ｑ２２；ｑ１１−１２）および変異体を伴うＡＭＬ、ＰＭＬ／ＲＡＲ−アルファ）、異常骨髄好酸球を伴うＡＭＬ（ｉｎｖ（１６）（ｐ１３ｑ２２）またはｔ（１６；１６）（ｐ１３；ｑ１１）、ＣＢＦｂ／ＭＹＨ１１Ｘ）、および１１ｑ２３（ＭＬＬ）異常を伴うＡＭＬが挙げられる。例示的な多系列異形成を伴うＡＭＬは、先行の骨髄異形成症候群と関連する、または関連しないものである。任意の定義可能な群にも分類されない他の急性骨髄性白血病としては、最未分化されたＡＭＬ、成熟を伴わないＡＭＬ、成熟を伴うＡＭＬ、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、急性巨核球白血病、急性好塩基球性白血病、および骨髄線維症を伴う急性汎骨髄症挙げられる。
【０２３１】
他の態様において、細胞増殖障害は、ウイルス媒介腫瘍を含む。これらは、正常細胞から腫瘍細胞への形質転換能を有する発癌遺伝子ウイルスによる細胞感染から発生し得る。ウイルス感染の割合は、細胞の形質転換の実際の発生数を大きく超えているため、ウイルスを介した形質転換は、一般に、他の細胞因子と一緒に作用して、形質転換された腫瘍細胞を生成する。よってウイルス媒介腫瘍は、細胞増殖性障害の唯一の原因物質となるのにウイルスを必要とせず、むしろウイルス感染またはウイルスの持続的存在が、腫瘍の発生に関連する。一般に原因物質がウイルスである腫瘍は、典型的にはウイルス感染の一部としてまたはウイルスの存続により発現されるウイルス遺伝子およびウイルス発癌遺伝子の限られた数の継続的発現を有し、正常な細胞内遺伝子発現およびシグナル伝達経路を破壊する。理論に束縛されるものではないが、細胞の形質転換に関与するウイルス発現遺伝子は、４つの主要な細胞内プロセス、すなわち、増殖因子および細胞外マトリクスと相互作用する細胞表面受容体、膜貫通型シグナル伝達ネットワーク、可溶性タンパク質およびセカンドメッセンジャーなどのサイトゾル要素、およびＤＮＡ結合タンパク質をを含む核タンパク質、ならびに遺伝子調節および複製において直接的および間接的に機能する因子を破壊するようである。
【０２３２】
機能的特性の特徴づけ
以下は、該当する化合物の活性を特徴づけるのに有用となる例示的アッセイである。
【０２３３】
Ａ．インビトロ
１．プロテインキナーゼＣアッセイ
ＰＫＣ活性の阻害を、阻害剤の異なる濃度での蛍光偏光によりリン酸化ペプチドの生成をモニタリングすることにより測定した。反応は、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、５ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＤＴＴ、０．０２％のＢｒｉｊ−３５、０．１ｍｇ／ｍＬのホスファチジルセリン、０．０２ｍｇ／ｍＬのジオレイル−ｓｎ−グリセロールおよびＡＴＰおよびペプチド基質をそれぞれ５μＭずつを含有する総容量２０μＬを、９６ウェルプレートフォーマットで実施した。化合物を最初、ＤＭＳＯで系列希釈し、その後、上記濃度のＨＥＰＥＳ、ＭｇＣｌ２、ＣａＣｌ２、ＤＴＴ、およびＢｒｉｊ−３５を含有する溶液に移して、２％ＤＭＳＯ中の５×化合物溶液を生成させ、その後、それを反応溶液に添加した。反応は、以下の表に記載される典型的濃度のＰＫＣを添加することにより開始し、その後、室温で２０分間インキュベートした。この時間の終了時に、クエンチ（ＥＤＴＡ）試薬と検出（ペプチドトレーサーおよび抗体）試薬との混合物を、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｐ２７４８(カリフォルニア州カールズバッド）のプロテインキナーゼＣ蛍光偏光アッセイキット（Protein Kinase C Fluorescence polarization Assay Kit）のプロトコルを用いて添加した。３０分間のインキュベーションの後、生成されたリン酸化ペプチドの量を、Ｔｅｃａｎ  Ｐｏｌａｒｉａｎ機器(スイス)を用いた蛍光偏光（Ｅｘ＝４８５ｎｍ、Ｅｍ＝５３５ｎｍ）により測定した。
【表２】
0006035238.tif 000015
"
【０２３４】
２．ＩＬ−２  ＥＬＩＳＡ、ヒト初代Ｔ細胞、抗ＣＤ３＋ＣＤ２８＋アッセイ
ヒト初代Ｔ細胞の単離および培養：ヒト初代Ｔ細胞を以下のとおり調製した。Ａｌｌ  Ｃｅｌｌｓ社製の新しいＰＢＭＣ(カタログ番号ＰＢ００２)を、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ（Ｌ−グルタミンを含むＲＰＭＩ−１６４０、メディアテック社、バージニア州ハーダン、カタログ番号１０−０４０−ＣＭ）に懸濁させてフラスコに播種し、３７℃で２時間インキュベートして単球を接着させた。その後、非接着細胞を遠心分離して４０Ｕ／ｍｌのＩＬ２を含有するＲＰＭＩ培地に再懸濁させて、１μｇ／ｍｌのαＣＤ３および５μｇ／ｍｌのαＣＤ２８（抗ヒトＣＤ３、ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社のカタログ番号５５５３３６、抗ヒトＣＤ２８、ベックマン・コールター社カタログ番号ＩＭ１３７６）でプレコーティングされたフラスコに播種した。細胞を３〜４日間刺激し、その後、新しいフラスコに移して、１０％ＦＢＳおよび４０Ｕ／ｍＬのＩＬ−２を含むＲＰＭＩ（Ｌ−グルタミンを含むＲＰＭＩ−１６４０、メディアテック社、バージニア州ハーダン、カタログ番号１０−０４０−ＣＭ）で保持した。
【０２３５】
初代Ｔ細胞刺激およびＩＬ２  ＥＬＩＳＡ：ヒト初代Ｔ細胞（１００，０００個／ウェル）を、Ｌ−グルタミンおよび１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ−１６４０中の被験化合物と共にまたは伴わずに３７℃で１時間プレインキュベートした。その後、細胞を、１μｇ／ｍｌのαＣＤ３および５μｇ／ｍｌのαＣＤ２８でプレコーティングされた丸底９６ウェルプレートに移すことにより刺激した。カウンターアッセイとして、代わりに、８×ＰＭＡ保存液ならびにＬ−グルタミンおよび１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ−１６４０中のイオノマイシンを添加することにより、細胞を刺激した（最終濃度０．５ｎｇ／ｍｌのＰＭＡおよび０．１μＭのイオノマイシン、両者ともＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ社製）。細胞を３７℃で２４時間インキュベートした後、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社製のヒトＩＬ−２Ｄｕｏｓｅｔ  ＥＬＩＳＡキット（カタログ番号ＤＹ２０２Ｅ）を用いたＥＬＩＳＡによるＩＬ−２定量のため、上清１００μＬを回収した。
【０２３６】
３．プロテインキナーゼＣアッセイ
表題化合物を、以下の方法に従って異なるＰＫＣアイソフォームへの活性に関して検査することができる。アッセイは、非結合表面を有する白色で透明底の３８４ウェルマイクロタイタープレートで実施した。反応混合物（２５μｌ）は、２０ｍＭトリスＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．４）＋０．１％ＢＳＡ中に、ＡｌａがＳｅｒに置換ＰＫＣαの偽基質配列を模倣している１．５μＭトリデカペプチドアクセプター基質、１０μＭ３３のＰ−ＡＴＰ、１０ｍＭのＭｇ（ＮＯ３）２、０．２ｍＭのＣａＣｌ２、タンパク質濃度が２５〜４００ｎｇ／ｍｌ（用いられたアイソタイプによる）で変動するＰＫＧ、最終脂質濃度０．５ｍＭの脂質小胞（３０モル％ホスファチジルセリン、５モル％ＤＡＧおよび６５モル％ホスファチジルコリンを含有）を含有する。インキュベーションを、室温で６０分間実施する。反応は、停止混合物（１００ｍＭのＥＤＴＡ、２００μＭのＡＴＰ、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、Ｃａなしのリン酸緩衝生理食塩水、Ｍｇ中のストレプトアビジンコーティングされたＳＰＡビーズ０．３７５ｍｇ／ウェル）を添加することにより停止させる。室温での１０分間のインキュベーションの後、懸濁液を３００ｇで１０分間遠沈させた。取り込まれた放射能を、Ｔｒｉｌｕｘカウンターで１分間測定する。ＩＣ５０測定は、１〜１０００μＭの範囲内の濃度の阻害剤の系列希釈をインキュベートすることにより、日常的方法で実施する。ＩＣ５０値を、ＸＬ  Ｆｉｔ（登録商標）ソフトウエアに適合する曲線によりグラフから計算する。
【０２３７】
４．プロテインキナーゼＣαアッセイ
ヒト組換えＰＫＣαをオックスフォードバイオメディカルリサーチから得て、上記Ａ.１項に記載されたアッセイ条件下で用いる。
【０２３８】
５．プロテインキナーゼＣβ１アッセイ
ヒト組換えＰＫＣβ１をオックスフォードバイオメディカルリサーチから得て、上記Ａ.１項に記載されたアッセイ条件下で用いる。
【０２３９】
６．プロテインキナーゼＣδアッセイ
ヒト組換えＰＫＣδをオックスフォードバイオメディカルリサーチから得て、上記Ａ.１項に記載されたアッセイ条件下で用いる。
【０２４０】
７．プロテインキナーゼＣεアッセイ
ヒト組換えＰＫＣεをオックスフォードバイオメディカルリサーチから得て、上記Ａ.１項に記載されたアッセイ条件下で用いる。
【０２４１】
８．プロテインキナーゼＣηアッセイ
ヒト組換えＰＫＣηをＰａｎＶｅｒａ社から得て、上記Ａ.１項に記載されたアッセイ条件下で用いる。
【０２４２】
９．プロテインキナーゼＣθアッセイ
ヒト組換えＰＫＣθを、先に記載されたアッセイ条件下で用いる。
【０２４３】
１０．ＣＤ２８共刺激アッセイ
アッセイは、Baumann GらによりTransplant. Proc. 1992; 24:43-8に記載された、ルシフェラーゼ遺伝子によりβ−ガラクトシダーゼレポーター遺伝子が置換されている（de Wet J., et al., Mol. Cell. Biol. 1987, 7(2), 725-737）、ヒトインターロイキン−２プロモーター／レポーター遺伝子構築物で置換されているトランスフェクトされたジャーカット細胞で実施する。細胞を、以下のとおり固相結合抗体または酢酸ミリスチン酸ホルボール（ＰＭＡ）およびＣａ＋＋イオノフォアイオノマイシンにより刺激する。抗体媒介刺激については、Ｍｉｃｒｏｌｉｔｅ  ＴＭ１マイクロタイタープレート（ダイナテック社）は、ウェルあたり５５μｌのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中の３μｇ／ｍｌヤギ抗マウスＩｇＧ抗体（ジャクソン社）で、室温で３時間コーティングする。ＰＢＳ（ウェルあたり３００μｌ）中の２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）と室温で２時間インキュベートして抗体を除去した後、プレートをブロックする。ウェルあたり３００μｌのＰＢＳで３回洗浄した後、５０μｌの２％ＢＳＡ／ＰＢＳ中の１０ｎｇ／ｍｌの抗Ｔ細胞受容体抗体（ＷＴ３１、ベクトン・ディッキンソン社）および３００ｎｇ／ｍｌの抗ＣＤ２８抗体（１５Ｅ８）を刺激抗体として添加して、４℃で一晩インキュベートする。最後に、プレートをウェルあたり３００μｌのＰＢＳで３回洗浄する。アッセイ培地（５０μＭの２−メルカプトエタノール、１００単位／ｍｌのペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを含有するＲＰＭＩ１６４０／ウシ胎仔血清（ＦＣＳ））中で、被験化合物の３倍連続希釈物７個を２通り別個のプレートに調製し、トランスフェクトされたジャーカット細胞（クローンＫ２２  ２９０＿Ｈ２３）と混合し、５％ＣＯ２中、３７℃で３０分間インキュベートする。その後、細胞１×１０５個を含有するこの混合物１００μｌを、抗体被覆アッセイプレートに移す。同時に１００μｌを４０ｎｇ／ｍｌのＰＭＡおよび２μＭイオノマイシンと共にインキュベートする。５％ＣＯ２中、３７℃での５．５時間のインキュベーションの後、ルシフェラーゼのレベルを生物発光測定により決定する。プレートを５００ｇで１０分間遠心分離し、上清をフリッキングにより除去する。２５ｍＭトリスリン酸塩（ｐＨ７．８）、２ｍＭのＤＴＴ、２ｍＭの１．２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸、１０％（ｖ／ｖ）グリセロールおよび１％（ｖ／ｖ）Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含有する溶解バッファーを添加する（ウェルあたり２０μｌ)。プレートを、持続的に震盪しながら室温で１０分間インキュベートする。２０ｍＭトリシン、１．０７ｍＭの（ＭｇＣＯ３）４Ｍｇ（ＯＨ）２・５Ｈ２Ｏ、２．６７ｍＭのＭｇＳＯ４、０．１ｍＭのＥＤＴＡ、３３．３ｍＭのＤＴＴ、２７０μＭのコエンザイムＡ、４７０μＭ ルシフェリン(Ｃｈｅｍｉｅ  Ｂｒｕｎｓｃｈｗｉｇ  ＡＧ社)、５３０μＭのＡＴＰ（ｐＨ７．８）を含むルシフェラーゼ反応緩衝液をウェルあたり５０μｌ自動添加した後、ルシフェラーゼ活性を生物発光リーダー(Ｌａｂｓｙｓｔｅｍ社、フィンランド、ヘルシンキ）で評価する。遅延時間は、０．５秒であり、全測定時間は、１または２秒である。低対照値は、抗Ｔ細胞受容体−またはＰＭＡ−刺激細���からの光単位であり、高対照は、任意の検査試料を含まない抗Ｔ細胞受容体/抗ＣＤ２８−またはＰＭＡ／イオノマイシン刺激細胞からのものである。低対照を、全ての値から減算する。被験化合物の存在下で得られた阻害は、高対照の％阻害として計算する。５０％ 阻害（ＩＣ５０）を生じる被験化合物の濃度を、用量反応曲線から決定する。
【０２４４】
１１．骨髄増殖（ＢＭ）アッセイ
ＣＢＡマウスから得た骨髄細胞（平底組織培養マイクロタイタープレートでウェルあたり細胞２．５×１０４個）を、１０％のＦＣＳ、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ社、スイス、バーゼル）、５０ｔＪＭの２−メルカプトエタノール（Ｆｌｕｋｅ社、スイス、ブックス）、増殖因子の供給源としてのＷＥＨＩ−３ならしン培地（７．５％ｖ／ｖ）およびＬ９２９ならし培地（３％ｖ／ｖ）、ならびに系列希釈された化合物を含むＲＰＭＩ培地１００μｌ中でインキュベートする。被験化合物あたり、７回の３倍希釈を二重で実施する。４日のインキュベーションの後、１μＣｉ?３Ｈ−チミジンを添加する。更なる５時間のインキュベーション時間の後、細胞を回収し、取り込まれた３Ｈ−チミジンを標準的手順に従って測定する。ならし培地を下記のとおりに調製する。ＷＥＨＩ−３細胞１（ＡＴＣＣ ＴＩＢ６８）およびＬ９２９細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ １）を、ＲＰＭＩ培地中で、コンフルエンスになるまでそれぞれ４日間および１週間増殖させる。細胞を回収し、同じ培養フラスコ内で、ＷＥＨＩ−３細胞については１％ＦＣＳを含む培地Ｃ（Ｓｃｈｒｅｉｅｒ  ａｎｄ  Ｔｅｅｓ  １９８１）中で、そしてＬ９２９細胞についてはＲＰＭＩ培地中で再懸濁させ、２日間（ＷＥＨＩ−３）または１週間（Ｌ９２９）インキュベートする。上清を回収し、０．２μｍでろ過し、分取して−８０℃で貯蔵する。被験化合物を含まず、ＷＥＨＩ−３およびＬ９２９上清を含まない培養物を、低対照値として使用する。低対照値を全ての値から減算する。任意の試料を含まない高対照を１００％増殖とする。試料による％阻害を計算し、５０％阻害に必要となる濃度（ＩＣ５０値）を決定する。
【０２４５】
１２．同種異系混合リンパ球反応（ＭＬＲ）
二方向ＭＬＲを、標準的手順に従って実施する(J. Immunol. Methods, 1973, 2, 279およびMeo T. et al., Immunological Methods, New York, Academic Press, 1979, 227-39)。簡潔に述べると、ＣＢＡおよびＢＡＬＢ／ｃマウス由来の脾臓細胞(平底組織培養マイクロタイタープレートで、ウェルあたり、各系統から細胞１．６×１０５個、合計３．２×１０５個）を、１０％ＦＣＳ、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン(Ｇｉｂｃｏ  ＢＲＬ社、スイス、バーゼル)、５０μＭの２−メルカプトエタノール(Ｆｌｕｋａ社、スイス、ブックス）および連続希釈化合物を含むＲＰＭＩ培地中でインキュベートする。３倍希釈工程を被験化合物あた２部ずつ７回実施する。４日のインキュベーション後、１μＣｉ３Ｈ−チミジンを添加する。更なる５時間のインキュベーション時間の後、細胞を回収し、取り込まれた３Ｈ−チミジンを標準的手順に従って測定する。ＭＬＲの背景値（低い対照値）は、ＢＡＬＢ／ｃ細胞のみの増殖である。低い対照値を全ての値から減算する。任意の試料を含まない高い対照値を１００％増殖として採用する。試料による阻害度を計算し、５０％阻害に必要となる濃度（ＩＣ５０値）を決定する。
【０２４６】
Ｂ．インビボ
心臓移植モデル
使用した系統の組合せ:雄Ｌｅｗｉｓ(ＲＴ1ハプロタイプ)およびＢＮ(ＲＴ1ハプロタイプ)。吸入イソフルランを用いて動物を麻酔する。腹部下大静脈を通じてドナーラットをヘパリン化し、同時に大動脈を介して全採血し、開胸し、心臓を迅速に冷却する。大動脈を結紮し、最初の分岐の遠位で切断し、腕頭動脈を最初の分岐で切断する。左肺動脈を結紮切断し、切り離し、右側は切り離すが開口のままにする。全ての他の血管を切開して遊離させ、結紮し、切断し、ドナー心臓を摘出して氷冷生理食塩水中へ移す。
【０２４７】
レシピエントを開腹し、腎臓下の下腹部大動脈および大静脈クロスクランプをかけて調整する。ドナーの腕頭動脈とレシピエント大動脈との間、およびドナーの右肺動脈からレシピエントの大静脈まで、１０１０モノフィラメント縫合糸を用いて、移植片を端々吻合で移植するする。クランプを除去し、移植片を腹部後方に繋留し、腹部内容物を温かい生理食塩水で洗浄し、動物を閉合し、術創を閉じて加熱灯下で回復させる。移植片生着率は、腹部壁を介してドナー心臓の拍動を毎日触診することによりモニタリングする。拒絶反応は、心拍が停止した時に完了すると考えられる。移植片の生着については、化合物で治療された動物をモニタリングして行われる。
【０２４８】
移植片対宿主モデル
Ｗｉｓｔａｒ／Ｆラット由来の脾臓細胞（２×１０７）を、（Ｗｉｓｔａｒ／Ｆ×Ｆｉｓｃｈｅｒ３４４）Ｆ１ハイブリッドラットの右後足蹠に皮下注射する。左足蹠は、未処置のままとする。動物を４日間（０日目〜３日目）連続して、被験化合物で治療する。膝窩リンパ節を７日目に取り出し、２つの対応するリンパ節の重量差を測定する。結果は、実験群のリンパ節重量差を、被験化合物で治療しなかった動物群の対応するリンパ節間の重量差と比較したリンパ節拡大の阻害(％で示す)として表す。特定の例において、被験化合物は、選択的ＰＫＣ阻害剤である。例えば移植片対宿主病および関連の障害の治療に特に有用な開示化合物は、選択的ＰＫＣαおよびθ阻害剤である。
【０２４９】
ラットコラーゲン誘導性関節炎モデル（ＣＩＡ）
関節リウマチ（ＲＡ）は、慢性の関節炎症を特徴とし、究極的には不可逆的な軟骨破壊をきたす。ＩｇＧ含有ＩＣは、ＲＡ患者の滑膜組織に豊富に存在する。これらの複合体が疾患の病因学および病理学において担う役割については依然として討論されているが、ＩＣはＦｃγＲを介して造血細胞と連通している。
【０２５０】
ＣＩＡは、パンヌス形成および関節変性を特徴とする慢性炎症性滑膜炎をきたす、広く認識されたＲＡの動物モデルである。このモデルでは、フロイント不完全アジュバントで乳化されたネーティブII型コラーゲンでの皮膚内免疫化により、１０または１１日以内に炎症性多発関節炎を、続いて３〜４週間で関節破壊が発症する。
【０２５１】
試験プロトコル
同系ＬＯＵラットを、０日目にネーティブII型コラーゲンで免疫化して、被験化合物の有効性を予防レジメンおよび治療レジメンにおいて評価する。予防プロトコルにおいて、媒体または様々な用量の被験化合物のいずれかを、免疫化の当日（０日目）に開始する強制経口投与により投与する。治療プロトコルにおいて、１０日目の関節炎発症の臨床兆候の後、被験化合物での治療を開始し（例えば、強制経口投与で、１日４回、３００ｍｇ／ｋｇ投与する）、２８日目の殺処分まで継続する。両方のプロトコルにおいて、臨床スコアを毎日取得し、週２回体重を測定する。２８日目に、放射線スコアを取得し、ＥＬＩＳＡによりコラーゲンII抗体の血清レベルを測定する。
【０２５２】
結果の決定
免疫化後１０日目までに、ラットは臨床的ＣＩＡを発症し得、その診断は関節炎スコアの増加により下されるる。１０日目以降に媒体単独で治療したラットの平均関節炎スコアは徐々に増加し、２８日目までに平均臨床スコアは約６．７５に達し得る。免疫化の当日（０日目）から被験化合物で治療した動物の平均臨床スコアは、媒体対照と比較して、１０〜２８日目に有意に減少し得る。疾患発症時に被験化合物で治療したラットでは、１６日目頃に関節炎スコアが有意に低下し、この差は２８日目の試験終了時まで観察し得る。
【０２５３】
ＣＩＡの２８日目に、盲検による放射線スコア（スケール０〜６）を取得し、媒体群の動物と、予防群の動物と、治療群の動物とで比較することができる。
【０２５４】
被験化合物を投与された群は、予防的に（免疫化の際）、または疾患発症後に、、びらんの発症を防止して、軟組織浮腫を低減する可能性がある。同様に被験化合物を投与された群は、血清抗コラーゲンII抗体の減少をもたらし得る。
【０２５５】
マウス実験的自己免疫性脳脊髄炎
自己免疫疾患に対する被験化合物のインビボ有効性を、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）のマウスモデルにおいて実証することができる。
【０２５６】
モデルの説明
ＥＡＥは、ＣＮＳ白質の免疫細胞浸潤により誘発されるＣＮＳの自己免疫疾患である多発性硬化症（ＭＳ）の有用なモデルである。炎症およびそ後続ミエリン破壊は、進行性の麻痺を誘発する。ヒト疾患と同様にＥＡＥは、ミエリンタンパク質、例えばミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）、プロテオリピドタンパク脂質（ＰＬＰ）、またはミエリンオリゴデンドロサイトタンパク質（ＭＯＧ）に対して自己反応的であるＴ細胞の末梢活性化に関連する。活性化された神経抗原特異性Ｔ細胞は、血液脳関門を通過して、限局性単核細胞浸潤および脱髄を誘発する。ＥＡＥは、アジュバントと共にミエリン特異性タンパク質で免疫化することにより、感受性の高いマウス系統に導入され得る。これらの試験に用いられたＳＪＬマウスモデルにおいて、後肢および尾の麻痺が免疫化後１０日目に明らかとなり、疾患の重症度のピークは１０日目〜１４日目までにに観察され得、部分的な自然軽快と続く再発の周期が、３５日目まで観察され得る。結果は、疾患の重症度を抑制し、免疫細胞からのＦｃγＲ媒介サイトカイン放出の結果となり得る疾患症状の再発を予防する、被験化合物の潜在能力を実証することができる。
【０２５７】
試験プロトコル
ＥＡＥのＳＪＬネズミモデルにおいて、各マウスにＰＬＰ／ＣＦＡを感作させる。（に、後側腹部の４部位に、０．０５ｍｌのホモジネート中２００μｇのＣＦＡを含む１５０μｇのＰＬＰ１３９−１５１を合計０．２ｍｌのエマルジョンにして、ＥＡＥを導入）。抑制プロトコルにおいて、媒体または様々な用量の被験化合物のいずれかを、免疫化の当日（０日目）に開始する強制経口投与により投与する。治療プロトコルでは、疾患発症時に、開始時の平均臨床スコアが類似である動物同士が同じ群となるよう動物を分け、強制経口投与により、媒体または様々な投与回数の被験化合物を投与する。両方のプロトコルにおいて、毎日臨床スコアをモニタリングし、週２回体重を測定する。
【０２５８】
結果の決定
ＰＬＰ免疫化後１０日までに、ＳＪＬマウスは臨床的ＥＡＥを発症し得、その診断は平均臨床スコアの増加により下される。麻痺スコアは、免疫化の当日（０日目）から媒体のみで治療された動物では徐々に増加し、１４日目までに平均スコアが約５．１のピークに達し得る。疾患のピーク（例えば１４日目）では、１日１回または１日２回治療した動物における平均臨床スコアは、有意に減少し得る。１６日目までに、動物はＳＪＬモデルの特徴である平均臨床重症度の部分的軽快を示し得る。被験化合物で１日２回治療した動物の低い臨床スコアは、動物が３０日目に殺処分されるまで実験全体を通じて、有意であり続け得る。治療期間全体を通じて、これらの低いスコアは、有意に低い累積疾患指数（ＣＤＩ）および有意に増加する累積体重指数（ＣＷＩ）に反映される。
【０２５９】
被験化合物を治療されたＳＪＬマウスは、疾患発症時（例えば、１１日目）に、ＣＤＩが有意に低下することを示し得る。更に媒体で治療された動物の再発回数と比較して、被験化合物で治療された動物の再発回数は減少し得る。
【０２６０】
研究適用
被験化合物はＰＫＣ活性を阻害できるため、かかる化合物は研究ツールとしても有用である。本開示はまた、生物学的システムもしくは試料を研究するためのまたはＰＫＣ活性を阻害し得る新規な化学化合物を発見するための研究ツールとして、表題化合物の使用方法を提供する。
【０２６１】
本開示は、生物学的システムまたはＰＫＣを含んでなるとして知られる試料を試験する方法を提供し、前記方法には、（ａ）生物学的試料を式Ｉ〜Ｖの化合物またはその塩もしくは溶媒和物もしくは立体異性体と接触させること；および（ｂ）生物学的試料に対する該化合物により引き起こされる阻害的影響を決定することを含んでなる。する。
【０２６２】
ＰＫＣを有する任意の適切な生物学的試料は、インビトロまたはインビボのいずれかで実施され得るかかる試験において用いることができる。かかる試験に適した代表的な生物学的試料としては、細胞、細胞抽出物、形質膜、組織試料、単離された臓器、ホ乳類（マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタ、ヒトなど）などが挙げられ、ホ乳類が特に対象となるが、これらに限定されない。
【０２６３】
研究ツールとして用いられる場合、ＰＫＣを含む生物学的試料を、典型的には、表題化合物のＰＫＣ活性阻害量と接触させる。生物学的試料を該化合物に暴露した後、ＰＫＣ活性阻害の影響を、本明細書に開示されたアッセイなどの従来の手順および器具を用いて測定する。暴露は、生物学的試料を該化合物と接触させること、または該化合物を対象に投与することを包含する。測定方法には、反応の測定（定量分析）または観察（定性分析）が含まれ得る。反応の測定には、例えば、放射性リガンド結合アッセイなどの従来の手順および器具を用いて、および機能的アッセイでリガンド媒介変化を測定することで、生物学的試料に対する該化合物の効果を測定することが含まれる。。アッセイの結果は、所望の結果を実現するのに必要となる活性レベルおよび化合物量、即ちＰＫＣ活性阻害量を決定するのに用いることができる。
【０２６４】
さらに、表題化合物は、他の化学的化合物を評価するための研究ツールとして用いることができ、よって、例えばＰＫＣ阻害活性を有する新規化合物を発見するスクリーンアッセイにおいても有用である。このように、表題化合物をアッセイにおける標準物質として用いて、被験化合物を用いて得られた結果と表題化合物を用いて得られた結果とを比較して、もしあるならば、ほぼ等しいかまたはそれを上回る活性を有するそれらの被験化合物を同定することができる。例えば、１つの被験化合物または１群の被験化合物のＩＣ５０データを、表題化合物のＩＣ５０データと比較して、所望の特性を有するそのような被験化合物、例えば、表題化合物とほぼ等しいかまたはそれを上回るＩＣ５０を有する被験化合物を、もしあれば、同定する。
【０２６５】
この態様は、別個の実施形態として、該当する被験化合物を同定するために、比較データの作成（適切なアッセイを用いる）および試験データの分析の両方を含む。よって、被験化合物は、（ａ）生物学的アッセイを被験化合物を用いて実施して第一のアッセイ値を提供するステップと；（ｂ）生物学的アッセイを表題化合物を用いて実施して第二のアッセイ値を提供するステップと；（ｃ）ステップ（ａ）から得られた第一のアッセイ値をステップ（ｂ）から得られた第二のアッセイ値とを比較するステップとを含み、ステップ（ａ）がステップ（ｂ）の前、後または同時のいずれかで実施される方法による生物学的アッセイにおいて評価することができる。比較データの作成に用いられ得るアッセイ、例えばＰＫＣアッセイなどは、本明細書に開示されている。
【実施例】
【０２６６】
以下の実施例は、当業者に実施形態の作成方法および使用方法に関する完全な開示および記述を提供するために記載されたものであり、本発明人が自らの発明とみなすものの範囲を限定することを意図したものではなく、または、以下の実験が実施された全てまたは唯一の実験であると示すことを意図したものではない。用いられた数値（例えば、量、温度など）に関して正確さを確保するよう努めたが、いくばくかの実験誤差および偏差のあることは考慮されるべきである。特段の指示がない限り、、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏温度であり、圧力は大気圧またはその近傍である。標準的略語が用いられる場合がある。
【０２６７】
実施例１
２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン塩酸塩の合成
【化１１】
0006035238.tif 000016
４−アミノ−１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン（１ｇ）および２，６−ジクロロ−５−フルオロピリミジン（１．５ｇ）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解した。反応溶液を、室温で一晩撹拌した。反応溶液を蒸発させて酢酸エチルおよびヘキサンから結晶化させて、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン塩酸塩（１．６５ｇ、９３％）を生じさせた。
【０２６８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）:δ９．６６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．３２（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１０ (ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），２．６８（ｄ，Ｊ＝ ４．８Ｈｚ，３Ｈ），２．０２（ｍ，４Ｈ），１．４８（ｓ，６Ｈ），１．３８（ｓ，６Ｈ）。
【０２６９】
実施例２
２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン塩酸塩の合成
【化１２】
0006035238.tif 000017
２，４−ジクロロ−５−フルオロピリミジン（２１．７ｇ）をメタノール（４００ｍＬ）に溶解して、０℃に冷却した。４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（１９．２ｍＬ）を滴加した。得られた混合物を室温まで緩やかに昇温させて、一晩撹拌した。反応溶液を蒸発させ、エチルと共に研和して、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン塩酸塩（３６．２ｇ、９３％）を得た。
【０２７０】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．２４（ｄ，１Ｈ），８．１６（ｄ，１Ｈ），４．３８（ｍ，１Ｈ），１．９２（ｄ，２Ｈ），１．６３（ｔ，２Ｈ），  １．３９（ｄ，１２Ｈ）；ｍ／ｚ＝２８７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２７１】
実施例３
５−カルボキシアミド−２，４−ジクロロピリミジンの合成
【化１３】
0006035238.tif 000018
水冷コンデンサーおよびＣａＣｌ２乾燥管を具備した２Ｌ丸底フラスコにおいて、２，４−ジヒドロキシピリミジン（２５ｇ、０．１６モル）をＰＣｌ５（１１７ｇ、０．５６モル）およびＰＯＣｌ３（２５０ｍｌ、２．６モル）に添加した。混合物を１１５℃で一晩加熱し、透明でわずかに淡黄色の溶液を生じさせた。混合物を室温まで冷却し、減圧濃縮して、微黄色がかった油状物を生じさせた。
【０２７２】
この油状物に無水１，４−ジオキサン（３００ｍｌ）を添加して、混合物を氷水浴中で０℃に冷却した。３５ｍｌのＮＨ３水（２８％）を撹拌しながら混合物に滴下し、温度を５℃未満で保持した。混合物が透明から白色に変化し沈殿物が形成され、それを０℃で１時間撹拌して、反応物をＴＬＣ（ヘキサン：酢酸エチルを１：１で）で追跡した。酢酸エチル（７００ｍｌ）および水（５００ｍｌ）を混合物に添加して、二層に分離させた。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させてろ過した。溶液を減圧濃縮して、淡黄色固体を生じさせた。この淡黄色固体を塩化メチレン（２００ｍｌ）と共に音波処理してろ過し、微黄色固体（１６ｇ）を生じさせた。この微黄色固体を酢酸エチル（１．５Ｌ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（５００ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させてろ過し、減圧濃縮して、生成物１３．１ｇを白色固体として生じさせた（収率４４％）。
【０２７３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）: δ ８．８６（ｓ，１Ｈ），８．１４（ｂｓ，１Ｈ），８．０２（ｂｓ，１Ｈ）。
【０２７４】
実施例４
５−カルボキシアミド−２，４−ジクロロピリミジンの合成
【化１４】
0006035238.tif 000019
濃縮水酸化アンモニウム水溶液（８．５Ｍと仮定；１４．１ｍＬ；１２０ｍｍｏｌ）を、−１５〜−２０℃（内部温度）のＣＨ２Ｃl２（３００ｍＬ）中の２，４−ジクロロピリミジン−５−カルボニルクロリド（１２．５ｇ；６０ｍｍｏｌ；Manchester Organics, Sutton Weaver, England）の撹拌溶液に１５〜２０分間かけて添加した［注意：添加時に沈殿物が形成される］。完全に添加した後、混合物をろ過した（ろ過ケークは所望の生成物および不純物を含む−精製については以下を参照）。Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）をろ液に添加して、分配した。有機層を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、所望の生成物（１．１ｇ）を固体で生じさせた。上記のとおり得られたろ過ケークを高温（約５０℃）のＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で研和して、混合物をろ過した（これを更に２回繰り返した）。研和から得られてひとまとめにしたろ液を真空濃縮して、所望の生成物９．１ｇを更に生じさせた。反応から得られた合計収量は、１０．２ｇ（８８％）である。データは、過去の報告と同一であった。
【０２７５】
実施例５
５−カルボキシアミド−２−クロロ−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン塩酸塩の合成
【化１５】
0006035238.tif 000020
５−カルボキシアミド−２，４−ジクロロピリミジン（７．５ｇ、０．０４モル）を溶解して、ＭｅＯＨ（３００ｍｌ）／Ｈ２Ｏ（３０ｍｌ）にとした。溶液を氷水浴中で０℃に冷却して、４−アミノ−１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン（６．６５ｇ、０．０４モル）を滴下した。混合物を０℃で撹拌して、週末の間、室温まで昇温させた。溶液を減圧濃縮して、淡黄色のシャーベット状物（slush）を生じさせた。酢酸エチル（２５０ｍｌ×２）を添加し、その後、減圧濃縮して、残留する微量のメタノールおよび水を除去して、淡黄色がかった固体を生じさせた。その後、この固体を塩化メチレン（１００ｍｌ）と共に音波処理して、ブフナー漏斗を用いてろ過し、所望の生成物である微黄色固体９．５ｇ（収率７５％）を塩酸塩として生じた。
【０２７６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６, ３００ＭＨｚ）：δ ９．７４（ｓ，１Ｈ），９．２３（ｓ，１Ｈ），８．６（ｂｓ，１Ｈ），８．３９（ｂｓ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），４．３６（ｂｓ，１Ｈ），２．６８（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｄ，２Ｈ），１．８８（ｔ，２Ｈ），１．４８（ｓ，６Ｈ），１．３９（ｓ，６Ｈ）。
【０２７７】
実施例６
５−カルボキシアミド−２−クロロ−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン遊離塩基の合成
【化１６】
0006035238.tif 000021
５−カルボキシアミド−２，４−ジクロロピリミジン（７．５ｇ、０．０４モル）を溶解して、ＭｅＯＨ（３００ｍｌ）／Ｈ２Ｏ（３０ｍｌ）にした。溶液を氷水浴中で０℃に冷却して、４−アミノ−２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（６．８ｍｌ、０．０４モル）を滴下した。混合物を０℃で撹拌して、２日間かけて室温まで昇温させた。溶液を減圧濃縮して、淡黄色のシャーベット状物を生じさせた。酢酸エチル（２５０ｍｌ×２）を添加し、その後、減圧濃縮して、残留する微量のメタノールおよび水を除去して、淡黄色がかった固体を生じさせた。その後、この固体を塩化メチレン（１００ｍｌ）と共に音波処理して、ブフナー漏斗を用いてろ過し、微黄色固体を生じさせた。
【０２７８】
この固体を、酢酸エチル（２Ｌ）および飽和ＮａＨＣＯ３で処理して、二層に分離し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。乾燥剤をろ別して、溶液を減圧濃縮し、白色固体を生じさせた（５ｇ、収率４１％）。より多くの酢酸エチルで逆抽出することにより、水相から更なる生成物を回収することができる。
【０２７９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６, ３００ＭＨｚ）: δ ９．１４（ｄ，１Ｈ），８．５４（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｂｓ，１Ｈ），７．６８（ｓ，１Ｈ），４．３０（ｂｓ，１Ｈ），１．７９（ｄ，２Ｈ），１．１５（ｓ，６Ｈ），１．０２（ｓ，６Ｈ）；ｍ／ｚ  ３１２．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８０】
実施例７
５−シアノ−２−クロロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミンの合成
【化１７】
0006035238.tif 000022
バージェス試薬（メチル（Ｎ−トリエチルアンモニウムスルホニル）カルバマート）（２３８ｍｇ；１．０ｍｍｏｌ）を、室温で、１，２−ジクロロエタン（３ｍＬ）中５−カルボキシアミド−２−クロロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン（１５６ｍｇ；０．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に一度に添加した。混合物を７０℃まで加熱し、２時間撹拌した。室温まで放冷した後、混合物に更に１，２−ジクロロエタン（２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３０ｍＬ）を加えて希釈した。水層と有機層とに分配して、有機層を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、その後乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過して溶媒を真空除去し、粗粘性油状物を残留させた（ＮＭＲからこれが生成物および未反応のバージェス試薬であることが示された）。粗油状物を、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（９：１）、その後、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：Ｅｔ３Ｎ（９０：８：２）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物（７５ｍｇ、５１％）を泡状固体として生じさせた。この固体は通常、直接次のステップで用いられた。
【０２８１】
実施例８
５−シアノ−２クロロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミンの合成
【化１８】
0006035238.tif 000023
無水トリフルオロ酢酸（９．４ｍＬ；６７．３ｍｍｏｌ）を、窒素下、−７８℃のＴＨＦ（４０ｍＬ）中の５−カルボキシアミド−２−クロロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン（２．１ｇ、６．７ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１１．３ｍＬ；８０．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に３０〜４５分間かけて滴下した。完全に添加した後、混合物を−７８℃で更に６０分間撹拌し、その後、内部温度を−３０℃未満で保持しながら、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液（３０ｍＬ）を滴下した。ＮａＨＣＯ３を完全に添加した後、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加して、混合物を１０分間撹拌した。更にＨ２Ｏ（２００ｍＬ）を添加して、有機層と水層とに分配した。水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×４）で抽出した（実質的にすべての沈殿材料が溶解してしまうまで）。ひとまとめにした有機抽出物をブライン（１×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、粗固体をＴＦＡＡおよびＥｔ３Ｎ残渣と共に残留させた。固体をＥｔ２Ｏ（５０ｍＬ）と共に研和してろ過し、生成物（２．１ｇ）をＴＦＡ塩として生じさせた。
【０２８２】
実施例９
５−シアノ−２−クロロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミンの遊離塩基の形成
５−シアノ−２−クロロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン（２．１ｇ）のＴＦＡ生成物を、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と０．２ＭのＮａＯＨ（５０ｍＬ）とに分配した。有機層をブライン（５０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、生成物（１．３５ｇ、６８％）を固体として残留させた。
【０２８３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）: δ ８．５１（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），４．４２（ｔ，１Ｈ），１．６１（ｂｒ．ｄ，２Ｈ），１．２３（ｔ，２Ｈ），１．１４（ｓ，６Ｈ），１．０２（ｓ，６Ｈ）；ｍ／ｚ＝２９４．１（Ｍ＋Ｈ）＋ ｆｏｒ  35Ｃｌ。
【０２８４】
実施例１０
５−シアノ−２−クロロ−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミンの合成
【化１９】
0006035238.tif 000024
無水トリフルオロ酢酸（９．３５ｍＬ；６７．３ｍｍｏｌ、１０当量）を、窒素下、−７８℃のＴＨＦ（４５ｍＬ）中の５−カルボキシアミド−２−クロロ−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン塩酸塩（２．１９ｇ、６．７３ｍｍｏｌ、１当量）およびＥｔ３Ｎ（１１．２６ｍＬ；８０．７６ｍｍｏｌ、１２当量）の撹拌溶液に３０〜４５分間かけて滴下した。完全に添加した後、混合物を−７８℃で更に６０分間撹拌し、その後、内部温度を−３０℃未満で保持しながら、ＮａＨＣＯ３の飽和溶液（３０ｍＬ）を滴下した。ＮａＨＣＯ３を完全に添加した後、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加して、混合物を１０分間撹拌した。更にＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加して、有機層と水層とに分配した。水層をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×４）で抽出した（実質的にすべての沈殿材料が溶解してしまうまで）。ひとまとめにした有機抽出物をブライン（５０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、粗固体をＴＦＡＡおよびＥｔ３Ｎ残渣と共に残留させた。粗固体を１００ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解し、１Ｎ水性ＮａＯＨ（５０ｍＬ）で分配した。酢酸エチル層を水性の５０ｍｌの１Ｎ  ＮａＯＨで２回抽出した。ひとまとめにした有機抽出物をブライン（５０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、淡黄色固体（１．８０ｇ、収率８７％）を生じさせた。
【０２８５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）；δ８．５１（ｓ，１Ｈ），８．３７（ｄ，１Ｈ），４．３１（ｂｒ．ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），１．４７−１．６６（ｍ，４Ｈ），１．０６（ｓ，６Ｈ），１．００（ｓ，６Ｈ）;ｍ／ｚ＝３０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２８６】
実施例１１
２−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロアニリンの合成
【化２０】
0006035238.tif 000025
２−ブロモ−４−フルオロアニリン（４７．５ｇ、２５０ｍｍｏｌ）を、内部温度を３０℃未満で保持しながら、濃縮Ｈ２ＳＯ４溶液（３００ｍＬ）に添加した。混合物を約３０〜６０分間熟成させ、その後、−２０℃まで冷却した。内部温度を−１５〜−２０℃で保持しながら、９０％ＨＮＯ３（３５ｇ）を約６０分間かけて滴下した。ＴＬＣで、微量の出発原料が示され、そのため９０％ＨＮＯ３（３ｇ）のアリコットをさらに、−１５〜−２０℃で５分間かけて添加した。その後、低温混合物を氷水（約１Ｌの氷＋５００ｍＬのＨ２Ｏ）およびＥｔＯＡｃ（１Ｌ）に注いだ。水層と有機層とに分配して、有機層を飽和ＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ×２）で洗浄して乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過して溶媒を真空除去して、暗色固体（３５ｇ、６０％）を残留させた。
【０２８７】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）: δ ８．２７（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．４７（ｄ，１Ｈ）; ｍ／ｚ＝２７５．９（Ｍ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ）＋ ｆｏｒ  ７９Ｂｒ
【０２８８】
実施例１２
２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロアニリンの合成
【化２１】
0006035238.tif 000026
トルエン（１２０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（４０ｍＬ）中、２−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロアニリン（１２ｇ、５１ｍｍｏｌ）、シクロプロピルボロン酸ＭＩＤＡエステル（Ａｌｄｒｉｃｈ；２０．１ｇ、１０２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１．７２ｇ、７．７ｍｍｏｌ）、Ｃｙ３Ｐ（４．３ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）、およびＣｓ２ＣＯ３（９８．８ｇ、３０６ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２で１５分間脱気した。その後、混合物を１００℃（オイルバスの温度）で一晩加熱した（反応混合物を加熱還流することもできる）。室温まで放冷した後、混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で希釈して、混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過した。ろ過ケークをＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）で洗浄して、ろ液を分配した。有機層を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、粗残渣を残留させた。該残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：４から３：７へ）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して（残渣をシリカゲルにドライロード）、生成物（８．１ｇ、８１％）を暗色固体として生じさせた。
【０２８９】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６,３００ＭＨｚ）: δ ７．２７（ｄ  １Ｈ），６．８４（ｄ，１Ｈ），５．５２（ｂｒ．Ｓ，２Ｈ），１．７４−１．８３（ｍ，１Ｈ），０．９２−０．９８（ｍ，２Ｈ），０．６２−０．７３（ｍ，２Ｈ）; ｍ／ｚ＝２３８．０（Ｍ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ）＋。
【０２９０】
実施例１３
シクロプロピルトリフルオロホウ酸カリウムを用いた２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロアニリンの合成
【化２２】
0006035238.tif 000027
トルエン（１５０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（６０ｍＬ）中、２−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロアニリン（１３．１ｇ、５６ｍｍｏｌ）、シクロプロピルホウ酸カリウム（１６．５ｇ、１１２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１．８９ｇ、８．４ｍｍｏｌ）、Ｃｙ３Ｐ（４．７ｇ、１６．８ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１０９．５ｇ、３３６ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２で１５分間脱気した。その後、混合物を一晩中加熱還流した（オイルバスの温度１２０℃）。室温まで放冷した後、混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈して、混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過した。ろ過ケークをＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×３）で洗浄して、ろ液を分液漏斗に移した。ブライン（２００ｍＬ）を添加して、水層と有機層とに分配した。有機層を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、粗残渣を残留させた。該残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：９から１：４へ）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して（残渣をシリカゲルにドライロード）、生成物（８．３ｇ、７６％）を暗色固体として生じさせた。データは上記と同様であった。
【０２９１】
実施例１３における反応を、他の反応条件で実施した。例えば、以下の通りに修飾した実施例１３の反応条件を利用した：
１）シクロプロピルトリフルオロホウ酸カリウムの２−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロアニリンに対する比が１：１〜１：５の範囲である；
２）Ｐｄ（ＯＡｃ）２のモル％が０．１〜１５の範囲である；
３）Ｃｙ３Ｐのモル％が０．２〜３０の範囲である；
４）Ｃｓ２ＣＯ３のモル当量が２〜６の範囲である；
５）塩基としてのＣｓ２ＣＯ３の代わりのＫ３ＰＯ４のまたはＫ３ＣＯ３の使用がモル当量で２〜６の範囲である；
６）５００ｍｇの２−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロアニリンの反応に対し、溶媒容量の範囲は７ｍｌからである；
７）溶媒混合物がジオキサン／水である；
８）反応温度が６０℃から還流までの範囲である；
９）反応時間が１６時間から２２時間の範囲である；
【０２９２】
実施例１４
１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールの合成
【化２３】
0006035238.tif 000028
注意：ＴＭＳ−Ｎ３およびテトラゾール生成物は潜在的に爆発性である。この反応ではブラストシールドを用い、傷、ひびなどのないガラス製品を用いること。金属製スパチュラなどの金属との接触を避けること。カラムから得た残留溶媒により生成物のわずかな湿潤を保持すること。
【０２９３】
ＡｃＯＨ（１１０ｍＬ）中、２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロアニリン（１０．９ｇ、５５．６ｍｍｏｌ）、アジ化トリメチルシリル（１４．６ｍＬ、１１１．１ｍｍｏｌ）、オルトギ酸トリメチル（６０．９ｍＬ、５５６ｍｍｏｌ）の混合物を７０℃まで加熱して一晩撹拌し、それらをブラストシールドの後ろで実施した。反応混合物を室温まで放冷した後、混合物をブラストシールドの後ろで真空濃縮した。粗残渣をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）とＨ２Ｏとで分配して、３Ｎ  ＮａＯＨ（３００ｍＬ）で約ｐＨ１２〜１４に調整した。水層と有機層とに分配して、水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物をブライン（１００ｍＬ×１）で洗浄して乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過して溶媒を真空除去した（シリカゲルをこの段階で添加して、粗生成物をシリカゲル上に直接吸収させた）。粗生成物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（
ＥｔＯＡｃを３０〜６０％の範囲で１０％ずつ）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物（１２．２８ｇ、８９％）を微色固体として生じさせた。
【０２９４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）: δ ８．９７（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｄ  １Ｈ），７．０１（ｄ，１Ｈ），１．５８−１．６６（ｍ，１Ｈ），１．１４−１．２１（ｍ，２Ｈ），０．８６−０．９０（ｍ，２Ｈ）; ｍ／ｚ＝２９１．１（Ｍ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ）＋。
【０２９５】
示差走査熱量測定を実施して、生成物が１７０℃を超えると大きなエネルギー放出（「発熱ピーク」）を有することが示された。
【０２９６】
実施例１５
４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミンの合成
【化２４】
0006035238.tif 000029
Ｐａｒｒ容器に１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（２７．２０ｇ、１０９．１４ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１０００ｍＬ）、ＡｃＯＨ（１４ｍＬ）、および１０％Ｐｄ／Ｃ（水中に５０％、 Ｄｅｇｕｓｓａ  ｔｙｐｅ  Ｅ１０１；５．４４ｇ、出発ニトロ化合物２０重量％）を充填して、懸濁液を作成した。容器を密閉して脱気し、Ｈ２（×３）を詰め戻した（back-filled）。その後、容器に３０ｐｓｉのＨ２を充填して、ＬＣＭＳ分析が完全な変換を示すまで震盪させた。反応混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドでろ過して、ＣｅｌｉｔｅのパッドをＤＣＭ／ＭｅＯＨですすいだ（１：９、２００ｍＬ）。ろ液を蒸発乾固して、得られた固体を３０℃の水浴中で一晩真空乾燥させて、任意の微量のＡｃＯＨを除去した。粗生成物をＭｅＯＨと共に研和して、生成物、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１８．６０ｇ、７８％）を黄色固体として生じさせた。
【０２９７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．８１（ｓ，１Ｈ），９．７８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），６．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ），６．８０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），５．４７（ｂｓ，２Ｈ），１．３６−１．４５（ｍ，１Ｈ），０．５８０−０．６４３（ｍ，２Ｈ），０．４１３−０．４６５（ｍ，２Ｈ）; ｍ／ｚ＝２２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２９８】
実施例１６
４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニルアミノ）ピリジン−５−カルボニトリルの合成
【化２５】
0006035238.tif 000030
ＩＰＡ（４ｍＬ）中、４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（１１２ｍｇ、０．３８０ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１００ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（５８ｍｇ、０．３０４ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、８０℃で一晩加熱した。ＬＣＭＳにより  、所望の生成物に加えて、およそ１８％の５−フルオロ−２−イソプロポキシ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン副生成物が示された。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを１回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用して１００：０から９５：５へ）で溶出して所望の生成物を提供し、ＤＣＭ／ＩＰＡで再結晶化させて表題化合物（８８ｍｇ、４９％）を固体として生じさせた。
【０２９９】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．８１（ｓ，１Ｈ），９．５１（ｂｒ．  ｓ，１Ｈ），８．２８（ｓ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），１．４４−１．４７（ｍ，２Ｈ），１．０８−１．１７（ｍ，２Ｈ），０．７６−０．９４（ｍ，１６Ｈ），０．５７−０．５９（ｍ，２Ｈ）；ｍ／ｚ＝４７７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３００】
実施例１７
５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化２６】
0006035238.tif 000031
ＩＰＡ（３ｍＬ）中、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（１００ｍｇ、０．３０９ｍｍｏｌ、１当量）、２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（９０ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ、１．６当量、Ｃｈｅｍｂｒｉｄｇｅ社、カリフォルニア州サンディエゴ）およびＴＦＡ（１００μＬ、１．２４ｍｍｏｌ、４当量）の混合物を、シェーカー内で１００℃まで一晩加熱して融解物を得た。ＬＣＭＳで、ピリミジン：生成物比＝２９：７１が示された。ＩＰＡ（１ｍＬ）およびＴＦＡ（１００μＬ、１．２４ｍｍｏｌ、４当量）を添加し、混合物をシェーカー内で１００℃まで一晩加熱して融解物を得た。ＬＣＭＳで、ピリミジン：生成物比＝４：９６が示された。ＩＰＡ（１ｍＬ）およびＴＦＡ（１０００μＬ、１２．４ｍｍｏｌ、４０当量）を添加し、混合物をシェーカー内で１００℃まで更に５時間加熱して融解物を得た。ＬＣＭＳで、生成物への完全な変換が示された。粗固体を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（１〜２ｍＬ）でクエンチして、ＤＣＭ（３〜５ｍＬ）で希釈し、その後、シリカでパックし、ＤＣＭで充填されたカラムへロードした。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ＝１００：０→９６：４で溶出して、所望の生成物（９０ｍｇ、６８％）を固体として提供した。
【０３０１】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ１０．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１０Ｈｚ），８．７５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．３５−８．３７（ｍ，１Ｈ），７．８６−７．８８（ｍ，１Ｈ），７．４２−７．５２（ｍ，２Ｈ），７．２２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．４０Ｈｚ），４．１７−４．２６（ｍ，１Ｈ），１．５０−１．５９（ｍ，２Ｈ），０．８０−１．１８（ｍ，１５Ｈ）; ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）:４３０（ＭＨ＋）。
【０３０２】
実施例１８
５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化２７】
0006035238.tif 000032
ＩＰＡ（３ｍＬ）中、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（１００ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ、１当量）、２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（８５ｍｇ、０．４７４ｍｍｏｌ、１．６当量）およびＴＦＡ（１００μＬ、１．１９ｍｍｏｌ、４当量）の混合物を、シェーカー内で１００℃まで一晩加熱して融解物を得た。ＬＣＭＳで、ピリミジン：生成物＝５：９５が示された。ＩＰＡ（１ｍＬ）およびＴＦＡ（１００μＬ、１．１９ｍｍｏｌ、４当量）を添加し、混合物をシェーカー内で１００℃まで一晩加熱して融解物を得た。ＬＣＭＳで、ピリミジン：生成物＝２：９８が示された。ＩＰＡ（１ｍＬ）およびＴＦＡ（１０００μＬ、１１．９ｍｍｏ、４０当量）を添加し、混合物をシェーカー内で１００℃まで更に５時間加熱して融解物を得た。ＬＣＭＳで、生成物への完全な変換が示された。粗固体を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（１〜２ｍＬ）でクエンチして、ＤＣＭ（３〜５ｍＬ）で希釈し、その後、シリカでパックし、ＤＣＭで充填されたカラムへロードした。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用したＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ＝１００：０→９７：３で溶出して所望の生成物（９１ｍｇ、６９％）を固体として提供した。
【０３０３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６,３００ＭＨｚ）：δ１０．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１０Ｈｚ），８．７７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．３４−８．３７（ｍ，１Ｈ），７．８８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．４２−７．５２（ｍ，２Ｈ），７．２３（ｂｓ，１Ｈ），４．１７−４．２５（ｍ，１Ｈ），２．０５（ｂｒ．ｓ，３Ｈ），１．５０−１．５９（ｍ，２Ｈ），１．２９−１．３７（ｍ，２Ｈ），０．９７（ｂｒ．ｓ，６Ｈ），０．６６（ｂｒ．ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４４４（ＭＨ＋）。
【０３０４】
実施例１９
４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボキサミドの合成
【化２８】
0006035238.tif 000033
ＩＰＡ（６ｍＬ）中、４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボキサミド（１７８ｍｇ、０．５７０ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１５０ｍｇ、０．６８４ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＰＴＳＡ一水和物（２３０ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ、２．１当量）の混合物を、１００℃まで一晩加熱して沈殿物を生じさせた。沈殿物を真空ろ過により回収して、ＩＰＡですすいだ。固体をＥｔＯＡｃ中に取り出し、その後、１Ｎ  ＮａＯＨで約ｐＨ１２〜１４に調整した。水層および有機層に分配された。水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。ひとまとめにした有機物を１Ｎ  ＮａＯＨ（１５０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過して濃縮し、所望の生成物（１２８ｍｇ、５０％）を固体として生じさせた。
【０３０５】
１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６,３００ＭＨｚ）:δ９．８３（ｓ，１Ｈ），９．０８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．７０Ｈｚ），８．４７（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．９０Ｈｚ），７．０９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１１．７０Ｈｚ），４．２０−４．２２（ｍ，１Ｈ），１．６３−１．６７（ｍ，２Ｈ），１．４３−１．４９（ｍ，１Ｈ），０．９９−１．１９（ｍ，１Ｈ），０．７３−０．９５（ｍ，１５Ｈ），０．５７−０．６１（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）:４９５（ＭＨ＋）。
【０３０６】
実施例２０
Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン１．５ギ酸の合成
【化２９】
0006035238.tif 000034
ＩＰＡ（６ｍＬ）中、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（１８４ｍｇ、５．７０ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１５０ｇ、０．６８４ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＰＴＳＡ一水和物（８７ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、７０℃まで４日間加熱した。ＬＣＭＳで、２〜４％の切断されたテトラゾール生成物（対応するアニリン２Ｎ−（５−アミノ−４−シクロプロピル−２−フルオロフェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン）および５〜７％の未反応の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミンが示された。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を濃縮乾固した。残渣を氷冷水およびＥｔＯＡｃ中に取り出し、１Ｎ  ＮａＯＨで約ｐＨ１２〜１４に調整した。水層および有機層に分配し、水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×１）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去した。粗生成物を、ギ酸を水およびアセトニトリル中の改質剤として用いた逆相ＨＰＬＣにより精製して、ギ酸塩（１４１ｍｇ、４６％）を固体として与えた。
【０３０７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６,３００ＭＨｚ）:δ９．８４（ｓ，１Ｈ），８．６６（ｂｒ．  ｓ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１．５Ｈ，ギ酸），７．８９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．８５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１Ｈｚ），７．４２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０１Ｈｚ），７．０８  （ｄ，１Ｈ，Ｊ ＝１２．０Ｈｚ），４．３１−４．２０（ｍ，１Ｈ），１．６０−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．１０−１．５１（ｍ，１６Ｈ），０．７０−０．７７（ｍ，２Ｈ），０．５４−０．５９（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４７０（ＭＨ+）遊離塩基。
【０３０８】
未反応の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミンを除去するスカベンジング技術を用いた別の合成は、以下のとおりである。
【０３０９】
ＩＰＡ（２００ｍＬ）中、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（６．６８ｇ、２０．６８ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（６．８０ｇ、３１．０２ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＰＴＳＡ一水和物（３．１５ｇ、１６．５４ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、７０℃まで４日間加熱した。ＬＣＭＳで、２〜４％の切断されたテトラゾール生成物および７〜９％の未反応の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミンが示された。反応混合物を周囲温度まで冷却した後、３−アミノ安息香酸（８．５１ｇ、６２．０４ｍｍｏｌ、３当量）を添加して、７０℃まで一晩加熱して、未反応のピリミジンをスカベンジングした。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を濃縮乾固した。残渣を氷冷水およびＥｔＯＡｃ中に取り出し、１Ｎ  ＮａＯＨ（３００ｍＬ）で約ｐＨ１２〜１４に調整した。水層および有機層に分配し、有機層を１Ｎ  ＮａＯＨ（３００ｍＬ×２）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×１）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用したＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ＝１００：０→９６：４で溶出して、所望の生成物を提供し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで研和して、表題化合物（５．１６ｇ、５３％）を固体として生じさせた。
【０３１０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６, ３００ＭＨｚ）:δ９．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．５０Ｈｚ），８．５８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．８１（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．１Ｈｚ），７．１８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ＝１２．０Ｈｚ），４．２０−４．２２（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．５８（ｍ，２Ｈ），１．４２−１．４３（ｍ，１Ｈ），０．９１−１．１１（ｍ，１５Ｈ），０．７１−０．７４（ｍ，２Ｈ），０．５５−０．５６（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）:４７０（ＭＨ＋）
【０３１１】
特定の大規模合成手順は、以下のとおりである：
【０３１２】
ＩＰＡ（４００ｍＬ）中、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（１６．２ｇ、５０．２ｍｍｏｌ）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１５．０ｇ、６０．２ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（７．６４ｇ、４０．１）の混合物を、７０℃まで加熱して４〜５日間撹拌した。冷却後、混合物をろ過し、ろ過ケークをイソプロピルアルコール（５０ｍＬ×２）で洗浄した。ろ過ケークをＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３００ｍＬ）に懸濁させた。１Ｎ  ＮａＯＨを添加して、混合物を塩基性化した。有機層および水層に分配し、有機層を１Ｎ  ＮａＯＨ（３００ｍＬ）、ブライン（３００ｍＬ）で洗浄して、乾燥させて（ＭｇＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、固体を残留させた（ＬＣ／ＭＳで、この固体が９６％を超える純度であることが示された）。固体をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：９；約３００ｍＬ）で研和した。混合物を約５０℃まで加熱して室温まで放冷し、その後、ろ過してろ過ケークをＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：９；１００ｍＬ×２）で洗浄して、表題化合物（１５ｇ、６４％）を固体として生じさせた。特徴づけデータは、上記と同様である。
【０３１３】
実施例２１
４，６−ジニトロ−２−フルオロフェノールの合成
【化３０】
0006035238.tif 000035
０℃の無水ＤＣＭ中の２−フルオロフェノール（１０ｍＬ、１２．１ｇ、１０８ｍｍｏｌ、１当量）に、９０％ＨＮＯ３（１２．６ｍＬ、１７．０ｇ、２７０ｍｍｏｌ、２．５当量）を滴下した。混合物を室温まで昇温させて２時間撹拌し、再度０℃まで冷却して、２Ｎ  ＮａＯＨ溶液（約８０ｍＬ）でｐＨ５までクエンチした。混合物を濃縮して水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。ひとまとめにした有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過して濃縮した。残渣をヘキサン中で研和して、生成物（１８ｇ、８２％）を黄色固体として生じさせた。
【０３１４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３, ３００ＭＨｚ）:δ１０．９７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．９２−８．９０（ｍ，１Ｈ），８．３２（ｄｍ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）; ｍ／ｚ＝２０１（Ｍ−Ｈ）＋。
【０３１５】
実施例２２
２−ブロモ−１，５−ジニトロ−３−フルオロベンゼンの合成
【化３１】
0006035238.tif 000036
ＤＭＦ（２４ｍＬ）およびトルエン（１６０ｍＬ）中の４，６−ジニトロ−２−フルオロフェノール（８ｇ、３９．６０ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＰＢｒ３（５．６ｍＬ、５９．４０ｍｍｏｌ、１．５当量）を室温で添加した。その後、反応混合物を１１０℃で１時間加熱した。室温まで放冷した後、上部の無色層を分液漏斗に注ぎ、ヘキサンで希釈した。有機層を水で洗浄して、ＭｇＳＯ４で脱水して、蒸発乾固し、生成物（１０．３ｇ、９８％）を黄色固体として生じさせた。
【０３１６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３, ３００ＭＨｚ）:δ８．５４（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），８．２２（ｄｄ，Ｊ＝７．５，０．９Ｈｚ，１Ｈ）; ｍ／ｚ＝２６４（Ｍ）＋。
【０３１７】
実施例２３
２−ブロモ−３−フルオロ−５−ニトロアニリンおよび４−ブロモ−３−フルオロ−５−ニトロアニリンの合成
【化３２】
0006035238.tif 000037
ＨＯＡｃ  ３ｍＬ中の２−ブロモ−１，５−ジニトロ−３−フルオロベンゼン（１００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ、１当量）および粉末鉄（６４ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）の混合物を、室温で９０分間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（約ｐＨ７〜８）で希釈した。有機層を分離して、真空蒸発させた。粗残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：４）を溶離液として用いたシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して、４７ｍｇの２−ブロモ−３−フルオロ−５−ニトロアニリン（５２％）を生じさせた。
【０３１８】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3, ３００ＭＨｚ）:δ７．４３−７．３２（ｍ，２Ｈ），４．６３（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），１．４０−１．３５（ｍ，１Ｈ），１．２５−１．２０（ｍ，２Ｈ），０．８５−０．８０（ｍ，２Ｈ）;ｍ／ｚ＝２３５（Ｍ）+  。
【０３１９】
後の分画が、２８ｍｇの４−ブロモ−３−フルオロ−５−ニトロアニリン（３１％）を生じさせた。
【０３２０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３,３００ＭＨｚ）:δ６．９４（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｄｄ，Ｊ＝９．６，２．７Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），１．４０−１．３５（ｍ，１Ｈ），１．２８−１．２３（ｍ，２Ｈ），０．８８−０．８５（ｍ，２Ｈ）; ｍ／ｚ＝２３７（Ｍ＋２Ｈ）＋。
【０３２１】
実施例２４
２−シクロプロピル−３−フルオロ−５−ニトロアニリンの合成
【化３３】
0006035238.tif 000038
トルエン（７０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１４ｍＬ）中の２−ブロモ−３−フルオロ−５−ニトロアニリン（１６ｇ、６．８１ｍｍｏｌ、１当量）、シクロプロピルボロン酸ＭＩＤＡエステル（Ａｌｄｒｉｃｈ；４．０ｇ、２０．４３ｍｍｏｌ、３当量）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（２３８ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ、０．１５当量）、Ｃｙ３Ｐ（５７８ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ、０．３当量）およびＣｓ２ＣＯ３（１３．２６ｇ、４０．８ｍｍｏｌ、６当量）の混合物を、Ｎ２で５分間脱気した。その後、混合物を１００℃（オイルバスの温度）で一晩加熱した。室温まで放冷した後、混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈して、混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過した。ろ過ケークをＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）で洗浄して、ろ液を分配した。有機層を真空蒸発させて粗残渣を残留させ、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：４）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物（１．２ｇ、９０％）を暗黄色固体として生じさせた。
【０３２２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）: δ７．２９−７．２１（ｍ，２Ｈ），４．４４  （ｂｒ．ｓ，２Ｈ），１．５２−１．４２（ｍ，１Ｈ），１．１１−１．０５（ｍ，２Ｈ），０．７３−０．６７（ｍ，２Ｈ）; ｍ／ｚ＝１９７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３２３】
実施例２５
１−（２−シクロプロピル−３−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールの合成
【化３４】
0006035238.tif 000039
注意：ＴＭＳ−Ｎ３およびテトラゾール生成物は潜在的に爆発性である。この反応ではブラストシールドを用い、傷、ひびなどのないガラス製品を用いること。金属製スパチュラなどの金属との接触を避けること。カラムから得た残留溶媒により生成物のわずかな湿潤を保持すること。
【０３２４】
ＡｃＯＨ（３ｍＬ）中の、２−シクロプロピル−３−フルオロ−５−ニトロアニリン（３００ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ、１当量）、アジ化トリメチルシリル（１．０ｍＬ、７．６５ｍｍｏｌ、５当量）、オルトギ酸トリメチル（１．６７ｍＬ、１５．２９ｍｍｏｌ、１０当量）の混合物を、ブラストシールドの後ろで７０℃まで加熱して７時間撹拌した。室温まで放冷した後、混合物を氷水中で更に冷却して、１Ｎ  ＮａＯＨで約ｐＨ１２〜１４に塩基性化させて、ＥｔＯＡｃで希釈した。水層および有機層に分配し、水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を１Ｎ  ＮａＯＨ（１００ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去した。（シリカゲルをこの段階で添加して、粗生成物をシリカゲル上に直接吸収させた）。粗生成物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（ＥｔＯＡｃを３０〜５０％の範囲で１０％ずつ）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物１−（２−シクロプロピル−３−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（３４３ｍｇ、９０％）を白色固体として生じさせた。
【０３２５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６,３００ＭＨｚ）:?９．９６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．３８−８．４４（ｍ，２Ｈ），１．７９−１．８８（ｍ，１Ｈ），０．７５７−０．８２１（ｍ，２Ｈ），０．３７５−０．４２８（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：２５０（ＭＨ+)。
【０３２６】
実施例２６
４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミンの合成
【化３５】
0006035238.tif 000040
丸底フラスコに、１−（２−シクロプロピル−３−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（２８８ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（１２ｍＬ）、および１０％Ｐｄ／Ｃ（水中に５０％、Ｄｅｇｕｓｓａ  ｔｙｐｅ  Ｅ１０１；２４６ｍｇ、出発ニトロ化合物８５重量％）を充填して、懸濁液を作成した。フラスコをゴム栓で密閉して脱気し、Ｈ２を充填されたバルーンからＨ２（×３）を詰め戻した。反応物を、Ｈ２を充填されたバルーンを用いて１時間撹拌した。ＬＣＭＳ分析で、シクロプロピル部分がイソプロピルに４％切断されたことが示された。反応混合物をCeliteのパッドでろ過して、ＣｅｌｉｔｅのパッドをＤＣＭ／ＭｅＯＨですすいだ（１：９、１００ｍＬ）。ろ液を蒸発乾固した（シリカゲルをこの段階で添加して、粗生成物をシリカゲル上に直接吸収させた）。粗生成物をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（ＥｔＯＡｃを５０〜６０％の範囲で１０％ずつ）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（２３４ｍｇ、９２％）を淡褐色固体として生じさせた。
【０３２７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６, ３００ＭＨｚ）:δ９．８１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），６．４９−６．５４（ｍ，２Ｈ），５．７８（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），１．５１−１．６０（ｍ，１Ｈ），０．５０−０．５５（ｍ，２Ｈ），０．００−０．０４（ｍ，２Ｈ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）:２２０（ＭＨ＋）。
【０３２８】
実施例２７
４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−（４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボニトリルの合成
【化３６】
0006035238.tif 000041
ＩＰＡ（２．５ｍＬ）中の４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（７２ｍｇ、０．２４３ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（６４ｍｇ、０．２９２ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＰＴＳＡ一水和物（３７ｍｇ、０．１９５ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、５０℃まで４時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを１回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用して１００：０から９６：４へ）で溶出して所望の生成物を提供し、ＩＰＡ／ヘキサンで再結晶化させて表題化合物（６１ｍｇ、５３％）を固体として生じさせた。
【０３２９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６,３００ＭＨｚ）:δ１０．１２（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），９．８０−９．０（ｍ，１Ｈ），８．２２−８．３３（ｍ，１Ｈ），７．９０−７．９４（ｍ，１Ｈ），７．４３−７．５０（ｍ，２Ｈ），４．４０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），１．５１−１．６１（ｍ，  ３Ｈ），０．９３−１．２２（ｍ，１５Ｈ），０．５３−０．５５（ｍ，２Ｈ），０．３７−０．３９（ｍ，２Ｈ）; ＬＣＭＳ(ｍ／ｚ):４７７（ＭＨ＋）
【０３３０】
実施例２８
（Ｒ９４１３６８）Ｎ２−（４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化３７】
0006035238.tif 000042
ＩＰＡ（２ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（７２ｍｇ、０．１９０ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−３−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（５０ｍｇ、０．２２８ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＰＴＳＡ一水和物（３０ｍｇ、０．１５２ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、７０℃まで３日間加熱した。ＬＣＭＳで、切断されたテトラゾール生成物２〜４％が示された。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを１回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用して１００：０から９６：４へ）で溶出して所望の生成物を提供し、ＩＰＡ／ヘキサンで再結晶化させて表題化合物（５８ｍｇ、６５％）を固体として生じさせた。
【０３３１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．８６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），９．４８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．９１−７．９５（ｍ，１Ｈ），７．８２−７．８６（ｍ，１Ｈ），７．４８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．２６−７．３０（ｍ，１Ｈ），４．２６−４．３２（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．６２（ｍ，４Ｈ），０．９４−１．１３（ｍ，１４Ｈ），０．５１−０．４１（ｍ，２Ｈ），０．１１−０．１２（ｍ，２Ｈ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):４７０（ＭＨ＋）。
【０３３２】
実施例２９
１−ブロモ−２−フルオロ−３，５−ジニトロベンゼンの合成
【化３８】
0006035238.tif 000043
室温の硫酸（１９０ｍＬ）に溶解された１−フルオロ−２，４−ジニトロベンゼン（１３．０ｇ、６９．８５ｍｍｏｌ、１当量）に、臭素（４．３０ｍＬ、８３．８２ｍｍｏｌ、１．２当量）を滴下し、その後、硝酸（７０％、ｄ＝１．５００；３．２５ｍＬ、７６．８４ｍｍｏｌ、１．１当量）を緩やかに滴加した。反応容器を還流冷却器に取り付けて、反応混合物を８０℃で１０時間加熱した。ＬＣＭＳで、反応体：生成物の比が１：１であることが示された。室温まで放冷した後、混合物を氷に注ぎ、ＤＣＭで希釈した。水層および有機層に分配し、水層をＤＣＭ（３００ｍＬ×２）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（２００ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、濃縮乾固した。粗生成物を、シリカゲルのパッドを用いて精製して、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（ＥｔＯＡｃを２５〜３５％の範囲で５％ずつ）で溶出して、生成物１−ブロモ−２−フルオロ−３，５−ジニトロベンゼン（５．５５ｇ、３０％）を淡黄色固体として生じさせた。
【０３３３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．９６−９．０２（ｍ，１Ｈ），８．８２−８．８９（ｍ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）:２６６（ＭＨ＋）。
【０３３４】
実施例３０
３−ブロモ−２−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミンの合成
【化３９】
0006035238.tif 000044
室温（水浴を使用）の酢酸（２００ｍＬ）中の１−ブロモ−２−フルオロ−３，５−ジニトロベンゼン（５．４ｇ、２０．３８ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、粉末鉄（５．７０ｇ、１０２ｍｍｏｌ、５当量）を少しずつ添加した。混合物を３０℃未満の温度で保持しながら、得られた溶液を３時間撹拌した。ＬＣＭＳで、３種の生成物：３−ブロモ−２−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミン−Ｆ３（８６％）、３−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミン−Ｆ２（５％）、および５−ブロモ−４−フルオロベンゼン−１，３−ジアミン−Ｆ１（９％）の形成が示された。［注：この実験が完了した後、位置異性体を同定するために、３−ブロモ−２−フルオロ５−ニトロベンゼンアミンをジアゾ化して脱アミノ化し（E.S. Adams and K. L. Rinehart. The Journal of Antibiotics 1994, 47 (12), 1456-1465参照）、３−ブロモ−４−フルオロニトロベンゼンを生じさせた。これを、市販業者業者から得られた信頼できる試料と比較した］。ＤＣＭを混合物に添加して、得られた混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドでろ過して、ＣｅｌｉｔｅのパッドをＭｅＯＨですすいだ。ろ液を蒸発乾固した。残渣を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、これを１回繰り返した（シリカゲルをこの段階で添加して、粗生成物をシリカゲル上に直接吸収させた）。粗生成物をＤＣＭを用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物３−ブロモ−２−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミン（ＴＣＬではＦ１；１．８７ｇ、３９％）を黄色固体として生じさせた。
【０３３５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ７．５５−７．６０（ｍ，２Ｈ），６．１９（ｂｓ，２Ｈ）；１９Ｆ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ  ｄ６，２８２ＭＨｚ）:δ−１２０（ｓ，１Ｆ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):２３６（ＭＨ＋）。
【０３３６】
ＤＣＭで更に溶出して、３−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミン（ＴＬＣではＦ２）を提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ７．１３−７．２２（ｍ，２Ｈ），５．８４（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，２８２ＭＨｚ）:δ−１３２（ｓ，１Ｆ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):２３６（ＭＨ＋）。
【０３３７】
ＤＣＭで更に溶出して、５−ブロモ−４−フルオロベンゼン−１，３−ジアミン（ＴＬＣではＦ３）を提供した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ５．８９−５．９５（ｍ，２Ｈ），５．０７（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），４．８４（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）；１９Ｆ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，２８２ＭＨｚ）:δ−１４６（ｓ，１Ｆ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ): ２０６（ＭＨ＋）。
【０３３８】
実施例３１
３−シクロプロピル−２−フルオロ−５−ニトロアニリンの合成
【化４０】
0006035238.tif 000045
トルエン／Ｈ２Ｏ（５：１；４５０ｍＬ：９０ｍＬ）と、続くＰｄ（ＯＡｃ）２（０．４２０ｇ、１．８７ｍｍｏｌ、０．２０当量）の中の３−ブロモ−２−フルオロ−５−ニトロアニリン（２．２０ｇ、９．３６ｍｍｏｌ、１当量）、シクロプロピルボロン酸ＭＩＤＡエステル（Ａｌｄｒｉｃｈ；１１．０７ｇ、５６．１７ｍｍｏｌ、６当量）、Ｃｙ３Ｐ（１．０５ｇ、３．７４ｍｍｏｌ、０．４当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（５４．９０ｇ、１６８．５０ｍｍｏｌ、１８当量）の混合物を、真空下の音波処理により１０分間脱気して、Ｎ２を詰め戻した）。その後、混合物を１００℃で一晩加熱した。室温まで放冷した後、混合物を濃縮乾固した。残渣をＤＣＭ中に取り出し、この段階でシリカゲルを添加して、残渣をシリカゲルに直接吸収させた。溶媒を真空除去した後、粗生成物をＤＣＭを用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物３−シクロプロピル−２−フルオロ−５−ニトロアニリン（１．２７ｇ、６９％）を黄色固体として生じさせた。
【０３３９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ７．３８−７．４２（ｍ，１Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝２．７，５．７Ｈｚ，１Ｈ），５．８０（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．００−２．０９（ｍ，１Ｈ），０．９５−１．０１（ｍ，２Ｈ），０．７１−０．７６（ｍ，２Ｈ）;  ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ)：１９７（ＭＨ＋）。
【０３４０】
実施例３２
１−（３−シクロプロピル−２−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールの合成
【化４１】
0006035238.tif 000046
注：ＴＭＳ−Ｎ３およびテトラゾール生成物は潜在的に爆発性である。この反応ではブラストシールドを用い、傷、ひびなどのないガラス製品を用いること。金属製スパチュラなどの金属との接触を避けること。カラムから得た残留溶媒により生成物のわずかな湿潤を保持すること。
【０３４１】
ＡｃＯＨ（１５ｍＬ）中の３−シクロプロピル−２−フルオロ−５−ニトロアニリン（１．２７ｇ、６．４７ｍｍｏｌ、１当量）、アジ化トリメチルシリル（４．２６ｍＬ、３２．３７ｍｍｏｌ、５当量）、オルトギ酸トリメチル（７．０９ｍＬ、６７．７４ｍｍｏｌ、１０当量）の混合物を、ブラストシールドの後ろで７０℃まで加熱して７時間撹拌した。室温まで放冷した後、混合物を氷水中で更に冷却して、１Ｎ  ＮａＯＨで約ｐＨ１２〜１４に塩基性化させて、ＥｔＯＡｃで希釈した。水層および有機層に分配し、水層をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×２）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を１Ｎ  ＮａＯＨ（２００ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去した。（シリカゲルをこの段階で添加して、粗生成物をシリカゲル上に直接吸収させた）。粗生成物を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（ＥｔＯＡｃを３０〜５０％の範囲で１０％ずつ）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物１−（３−シクロプロピル−２−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（１．４９ｇ、９２％）を淡黄色固体として生じさせた。
【０３４２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ１０．０１（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｄｄ，Ｊ＝２．７０Ｈｚ，５．７０Ｈｚ，１Ｈ），８．０２（ｄｄ，Ｊ＝３．０，６．３Ｈｚ，１Ｈ），２．１９−２．２８（ｍ，１Ｈ），１．０９−１．１７（ｍ，２Ｈ），０．９７−１．０３（ｍ，２Ｈ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）:２５０（ＭＨ＋）。
【０３４３】
実施例３３
３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミンの合成
【化４２】
0006035238.tif 000047
丸底フラスコに、１−（３−シクロプロピル−２−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（１．４１ｇ、５．６５ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（５０ｍＬ）、および１０％Ｐｄ／Ｃ（水中に５０％、Ｄｅｇｕｓｓａ  ｔｙｐｅ  Ｅ１０１；１．２０ｇ、出発ニトロ化合物８５重量％）を充填して、懸濁液を作成した。フラスコをゴム栓で密閉して脱気し、Ｈ２を充填されたバルーンからＨ２（×３）を詰め戻した。反応物を、Ｈ２を充填されたバルーンを用いて２時間撹拌した。ＬＣＭＳ分析で、シクロプロピル部分がイソプロピルに４％切断されたことが示された。反応混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドでろ過して、ＣｅｌｉｔｅのパッドをＤＣＭ／ＭｅＯＨですすいだ（１：９、３００ｍＬ）。ろ液を蒸発乾固した（シリカゲルをこの段階で添加して、粗生成物をシリカゲル上に直接吸収させた）。粗生成物をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（ＥｔＯＡｃを５０〜６０％の範囲で１０％ずつ）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１．０ｇ、８１％）を赤淡褐色固体として生じさせた。
【０３４４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）：δ９．８４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），６．６６−６．６９（ｍ，１Ｈ），６．３１−６．３３（ｍ，１Ｈ），５．３４（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），１．９７−２．０５（ｍ，１Ｈ），０．９５−１．０１（ｍ，２Ｈ），０．６６−０．６９（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):２２０（ＭＨ＋）。
【０３４５】
実施例３４
４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボニトリルの合成
【化４３】
0006035238.tif 000048
ＩＰＡ（４ｍＬ）中の４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（１１２ｍｇ、０．３８０ｍｍｏｌ、１当量）、３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１００ｍｇ、０．４５６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＰＴＳＡ一水和物（５８ｍｇ、０．３０４ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、６０℃まで５日間加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を濃縮乾固した。残渣を氷冷水およびＥｔＯＡｃ中に取り出し、その後１Ｎ  ＮａＯＨで約ｐＨ１２〜１４に調整した。水層および有機層に分配し、水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×１）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去した。粗生成物を、水およびアセトニトリル（ＴＦＡ中で不安定な化合物）中の改質剤としての０．１％ギ酸を用いた逆相ＨＰＬＣによる精製のために、分析部門に提出した。ギ酸塩としての生成物を氷冷水およびＥｔＯＡｃ中に取り出し、その後１Ｎ  ＮａＯＨで約ｐＨ１２〜１４に調整した。水層および有機層に分配し、水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、濃縮して、所望の化合物（６３ｍｇ、３５％）を固体として生じさせた。
【０３４６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．９４（ｓ，１Ｈ），９．８０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），８．００−８．１１（ｍ，１Ｈ），７．３５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．２２（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），４．２９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），２．０１−２．１１（ｍ，１Ｈ），１．４８−１．５２（ｍ，２Ｈ），０．７５−１．１９（ｍ，１７Ｈ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):４７７（ＭＨ＋）。
【０３４７】
実施例３５
Ｎ２−（３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２,４−ジアミンの合成
【化４４】
0006035238.tif 000049
ＩＰＡ（８ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（２４６ｍｇ、０．７６０ｍｍｏｌ、１当量）、３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（２００ｍｇ、０．９１２ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＰＴＳＡ一水和物（１１６ｍｇ、０．６０８ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、３日間７０℃まで加熱した。ＬＣＭＳで、切断されたテトラゾール生成物２〜４％が示された。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを２回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用したＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ＝１００：０→９６：４で溶出して所望の生成物を提供し、ＩＰＡ／ヘキサンで再結晶化させて表題化合物（１５４ｍｇ、４３％）を固体として生じさせた。
【０３４８】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ6，３００ＭＨｚ）:δ９．９２（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），９．１６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．１１−８．１５（ｍ，１Ｈ），７．８６−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．５２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），７．１６−７．２１（ｍ，１Ｈ），４．２６−４．３２（ｍ，１Ｈ），１．９４−２．０６（ｍ，１Ｈ），１．７３−１．８１（ｍ，２Ｈ），１．４７−１．５８（ｍ，２Ｈ），０．９９−１．３０（ｍ，１５Ｈ），０．６９−０．７０（ｍ，  ２Ｈ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):４７０（ＭＨ＋）。
【０３４９】
実施例３６
４−フルオロ−５−ニトロ−２−（プロパ−１−エン−２−イル）ベンゼンアミンの合成
【化４５】
0006035238.tif 000050
トルエン（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（２５ｍＬ）中の２−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロアニリン（２．８５ｇ、１２．１３ｍｍｏｌ、１．０当量）、イソプロペニルボロン酸ピナコールエステル（５．０９ｇ、３０．３３ｍｍｏｌ、２．５当量）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（０．８２ｇ、３．６４ｍｍｏｌ、０．３当量）、Ｃｙ３Ｐ（１．７０ｇ、６．０７ｍｍｏｌ、０．５当量）およびＣｓ２ＣＯ３（３９．５１ｇ、１２１．２８ｍｍｏｌ、１０当量）の混合物を、Ｎ２で１５分間脱気した。その後、混合物を１００℃（オイルバスの温度）で加熱した。室温まで放冷した後、混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈して、混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過した。ろ過ケークをＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）で洗浄して、ろ液を分配した。有機層を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、粗残渣を残留させた。該残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：５勾配）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して（残渣をシリカゲルにドライロード）、生成物（１．５９ｇ、６４％）を暗褐色固体として生じさせた。
【０３５０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６,３００ＭＨｚ）: δ７．３５（ｄ，１Ｈ），７．１０（ｄ，１Ｈ），５．３２（ｂｒ．ｓ，３Ｈ），５．０９（ｓ，１Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ）; ｍ／ｚ＝１９７．０（Ｍ＋)＋。
【０３５１】
実施例３７
２−フルオロ−４−イソプロピル−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミンの合成
【化４６】
0006035238.tif 000051
ステップ１：１−（４−フルオロ−５−ニトロ−２−（プロパ−１−エン−２−イル）フェニル）−１Ｈ−テトラゾール
注意：ＴＭＳ−Ｎ３およびテトラゾール生成物は潜在的に爆発性である。この反応ではブラストシールドを用い、傷、ひびなどのないガラス製品を用いること。金属製スパチュラなどの金属との接触を避けること。カラムから得た残留溶媒により生成物のわずかな湿潤を保持すること。
【０３５２】
ＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中の、２−イソプロペニル−４−フルオロ−５−ニトロアニリン（１．３２ｇ、６．７０ｍｍｏｌ、１．０当量）、アジ化トリメチルシリル（３．９０ｇ、３３．５０ｍｍｏｌ、５．０当量）、オルトギ酸トリメチル（７．１１ｇ、６７ｍｍｏｌ、１０当量）の混合物を、ブラストシールドの後ろで７５℃まで加熱して一晩撹拌した。反応混合物を室温まで放冷した後、混合物をブラストシールドの後ろで真空濃縮した。粗反応混合物を、アイスバス中で３Ｎ  ＮａＯＨ（３０ｍＬ）を用いて中和した。形成された茶褐色沈殿物をろ過し、真空乾燥させた。粗生成物を、これ以上精製せずに次のステップに取り入れた。ｍ／ｚ＝２５０。
【０３５３】
ステップ２：２−フルオロ−４−イソプロピル−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン
Ｐａｒｒ容器に、１−（２−イソプロペニル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（０．１００ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（２５ｍＬ）、ＡｃＯＨ（１ｍＬ）、および１０％Ｐｄ／Ｃ（水中に５０％、Ｄｅｇｕｓｓａ  ｔｙｐｅ  Ｅ１０１；０．０５０ｇ、出発ニトロ化合物５０重量％）を充填して、懸濁液を作成した。容器を密閉して脱気し、Ｈ２（×３）を詰め戻した。その後、容器に６０ｐｓｉのＨ２を充填して、ＬＣＭＳ分析で完全な変換が示されるまで震盪させた。反応混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドでろ過して、ＣｅｌｉｔｅのパッドをＤＣＭ／ＭｅＯＨですすいだ（１：９、５０ｍＬ）。ろ液を蒸発乾固した。粗生成物をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（ＥｔＯＡｃを２５〜５０％の範囲で５％ずつ）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物４−イソプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（０．０７５ｇ、８５％）を褐色固体として生じさせる。
【０３５４】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）:δ８．７０（ｓ，１Ｈ），７．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ），６．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），３．９５（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．３９（ｍ，１Ｈ），１．１１（ｓ，３Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ）; ｍ／ｚ＝２２２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３５５】
実施例３８
４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−（２−フルオロ−４−イソプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニルアミノ）ピリジン−５−カルボニトリルの合成
【化４７】
0006035238.tif 000052
ＩＰＡ（５ｍＬ）中の２−クロロ−５−シアノ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン（０．０５ｇ、０．１７ｍｍｏｌ、１当量）、４−イソプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（０．０４５ｇ、０．２０４ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．０２５ｇ、０．１３６ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、８０℃まで一晩加熱した。ＬＣＭＳにより、所望の生成物に加えて、およそ１０％の５−フルオロ−２−イソプロポキシ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン副生成物が示された。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを１回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用して１００：０から９５：５へ）で溶出して所望の生成物を提供し、ＤＣＭ／ＩＰＡで再結晶化させて表題化合物（４５ｍｇ、５５％）を固体として生じさせた。
【０３５６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．７７（ｓ，１Ｈ），９．５３（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．２７（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．３０（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），２．３４（ｍ，１Ｈ），１．４５−１．４８（ｍ，２Ｈ），１．１１−１．１７（ｍ，２Ｈ），１．０９（ｓ，６Ｈ），１．０６（ｓ，３Ｈ），０．９５（ｓ，６Ｈ），０．９０（ｓ，３Ｈ）; ｍ／ｚ＝４７９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３５７】
実施例３９
２−シクロプロピル−５−ニトロベンゼンアミンの合成
【化４８】
0006035238.tif 000053
２５０ｍＬ丸底フラスコにおいて、トルエン（９０ｍＬ）中の２−ブロモ−５−ニトロアニリン（２．３０ｇ、１０．６０ｍｍｏｌ）の溶液に、トリシクロヘキシルホスフィン（０．８９ｇ、３．１８ｍｍｏｌ）、ＣｓＣＯ３（１７．２２ｇ、５２．９９ｍｍｏｌ）、シクロプロピルボロン酸ＭＩＤＡエステル（２．９２ｇ、１４．８４ｍｍｏｌ）および脱イオン水１０ｍｌを添加して、溶液を窒素で３０分間脱気した。前記溶液に、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（０．３６ｇ、１．５９ｍｍｏｌ）を、窒素下で添加して、反応混合物を１２時間還流した。粗反応物のＬＣＭＳ分析で、反応の完了が示された。粗反応混合物をＣｅｌｉｔｅパッドでろ過し、揮発物を減圧除去した。暗褐色油状物を酢酸エチル１００ｍＬ×２および水（１０ｍＬ）を用いてワークアップし、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、酢酸エチルを減圧蒸発させた。粗反応混合物をカラムクロマトグラフィーにより分離して、２−シクロプロピル−５−ニトロベンゼンアミンを収率７０％で生じさせた。
【０３５８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ７．４３（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝１．９，８．３Ｈｚ，１Ｈ），６．９５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），５．７０（ｓ，２Ｈ），１．７５（ｍ，１Ｈ），０．９２−０．９５（ｍ，２Ｈ），０．５６−０．５９（ｍ，２Ｈ);ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ): １７９（ＭＨ＋)
【０３５９】
実施例４０
１−（２−シクロプロピル−５−ニトロフェニル）−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾールの合成
【化４９】
0006035238.tif 000054
ステップ１：（Ｚ）−Ｎ−（１−クロロ−２，２，２−トリフルオロエチリデン）−２−シクロプロピル−５−ニトロベンゼンアミン
２５ｍＬのＣＣｌ４中のＣＦ３ＣＯ２Ｈ（０．９８ｍＬ、１２．６５ｍｍｏｌ、０．９当量）、ＰＰｈ３（９．２１ｇ、３５．１３ｍｍｏｌ、２．５当量）およびＥｔ３Ｎ（１．９６ｍＬ、１４．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）の混合物を、０℃で１０分間撹拌した。２−シクロプロピル−５−ニトロベンゼンアミン（２．５０ｇ、１４．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、その後、反応混合物に添加して、混合物を１２時間還流加熱した。溶媒を減圧除去し、残渣をｎ−ヘキサン：酢酸エチル（１０：１）で溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、半純粋形態の（Ｚ）−Ｎ−（１−クロロ−２，２，２−トリフルオロエチリデン）−２−シクロプロピル−５−ニトロベンゼンアミン中間体を淡黄色固体として生じさせた。この化合物は、これ以上精製せずに次のステップに取り入れた。
【０３６０】
ステップ２：１−（２−シクロプロピル−５−ニトロフェニル）−５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾール
１５ｍＬの無水アセトニトリル中のＮａＮ３（０．５６ｇ、８．５７ｍｍｏｌ、２．５当量）および（Ｚ）−Ｎ−（１−クロロ−２，２，２−トリフルオロエチリデン）−２−シクロプロピル−５−ニトロベンゼンアミン中間体（１．０ｇ、３．４３ｍｍｏｌ、１．０当量）の混合物を、室温で１６時間撹拌した。反応混合物を氷冷した水性Ｎａ２ＣＯ３溶液に注いで、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水してろ過し、真空濃縮した。得られた粗混合物をｎ−ヘキサン：酢酸エチル（ＥｔＯＡｃを１０〜５０％の範囲で１０％ずつ）で溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物を全体的収率３７％（１．５５ｇ）で生じさせた。
【０３６１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．４５（ｄｄ，１Ｈ），８．２０（ｄ，１Ｈ），７．２９（ｄ，１Ｈ），１．２８（ｍ，１Ｈ），１．１８（ｍ，２Ｈ），０．８５（ｍ，２Ｈ）;ｍ／ｚ＝３００（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３６２】
実施例４１
４−シクロプロピル−３−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾール−１−イル）ベンゼンアミンの合成
【化５０】
0006035238.tif 000055
ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（３：１）中のニトロ化合物（０．２５ｇ、０．８３６ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｆｅ（０．１４０ｇ、２．５１ｍｍｏｌ、３．０当量）およびＮＨ４Ｃｌ（０．１３４ｇ、２．５１ｍｍｏｌ、３．０当量）の混合物を、１時間還流した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅパッドでろ過して、溶媒を減圧除去した。粗反応混合物をｎ−ヘキサン：酢酸エチル（ＥｔＯＡｃを１０〜７０％の範囲で１０％ずつ）で溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、必要な生成物を収率７８％（０．１８ｇ）で生じさせた。
【０３６３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３, ３００ＭＨｚ）:δ６．９９（ｄ，１Ｈ），６．８３（ｄ，１Ｈ），６．５５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），１．２５ （ｍ，１Ｈ），０．６５（ｍ，２Ｈ），０．４９（ｍ，２Ｈ）ｍ／ｚ＝２７０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３６４】
実施例４２
Ｎ２−（４−シクロプロピル−３−（５−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化５１】
0006035238.tif 000056
ＩＰＡ（１０ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（０．２１０ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−５−（１−トリフルオロメチル−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（０．２４５ｇ、０．９１０ｍｍｏｌ、１．４当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．０９９ｇ、０．５２０ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、１００℃まで一晩加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを１回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用して１００：０から９５：５へ）で溶出して所望の生成物を提供し、ＤＣＭ／ＩＰＡで再結晶化させて表題化合物（０．１８ｇ、収率５３％）を固体として生じさせた。
【０３６５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．３４（ｓ，１Ｈ），７．８４−７．８９（ｍ，３Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），４．３１（ｂｒ．ｍ，１Ｈ），１．５９−１．６３（ｍ，２Ｈ），１．０９−１．１  ７（ｍ，４Ｈ），０．９９（ｓ，１２Ｈ），０．６６−０．６８（ｍ，２Ｈ），０．５２−０．５５（ｍ，２Ｈ）；ｍ／ｚ＝５２０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３６６】
実施例４３
Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化５２】
0006035238.tif 000057
ＩＰＡ（１５ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（０．１９６ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（０．１４０ｇ、０．６４ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．０９０ｇ、０．４７ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、１００℃まで一晩加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを１回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用して１００：０から９５：５へ）で溶出して所望の生成物を提供し、ＤＣＭ／ヘキサンで研和して表題化合物（０．１００ｇ、収率３６％）を固体として生じさせた。
【０３６７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．８４（ｓ，１Ｈ），８．６０（ｓ，１Ｈ），７．８９（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝１１．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１１−４．１５（ｍ，１Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），１．５０−１．５７（ｍ，２Ｈ），１．３０−１．４４（ｍ，３Ｈ），１．０１（ｓ，６Ｈ），０．７６（ｓ，６Ｈ），０．７１−０．７３（ｍ，２Ｈ），０．５５−０．５７（ｍ，２Ｈ）; ｍ／ｚ＝４８４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３６８】
実施例４４
４−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−５−カルボニトリルの合成
【化５３】
0006035238.tif 000058
ＩＰＡ（２５ｍＬ）中の２−クロロ−５−シアノ−Ｎ−（１，２，２，６，６−ペンタメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン（０．２０５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（０．１６０ｇ、０．７３０ｍｍｏｌ、１．１当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（０．１００ｇ、０．５３０ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、１００℃まで一晩加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固して、それを１回繰り返した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの２％増分を利用して１００：０から９５：５へ）で溶出して所望の生成物を提供し、ＤＣＭ／ヘキサンで再結晶化させて表題化合物（０．１７０ｇ、収率５２％）を固体として生じさせた。
【０３６９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．８１（ｓ，１Ｈ），９．５１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．２９（ｓ，１Ｈ），７．６４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，１Ｈ），４．１０−４．１８（ｍ，  １Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），１．５０−１．５７（ｍ，２Ｈ），１．３７−１．４９（ｍ，  ５Ｈ），０．８９−０．９９（ｍ，６Ｈ），０．７２−０．８２（ｍ，８Ｈ），０．５９−０．６２（ｍ，２Ｈ）; ｍ／ｚ＝４９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３７０】
実施例４５
２−イソプロピル−５−ニトロアニリンの合成
【化５４】
0006035238.tif 000059
７０％  ＨＮＯ３（５．１ｍＬ、８４．７６ｍｍｏｌ、１．２当量）を、０℃の濃硫酸７０ｍＬ中の２−イソプロピルアニリン（１０ｍＬ、９．５５ｇ、７０．６３ｍｍｏｌ、１当量）の混合物に滴下した。反応混合物をこの温度で３０分間撹拌し、その後、氷に注いだ。水性混合物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層をひとまとめにして、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄した。蒸発後に、残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３／７）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物２ｇ（１６％）を暗赤色油状物として生じさせた。
【０３７１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）:δ７．６０（ｄｄ，Ｊ＝８．１，２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｓｅｐｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），１．２８（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ）; ｍ／ｚ＝１８１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３７２】
実施例４６
１−（２−イソプロピル−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールの合成
【化５５】
0006035238.tif 000060
注意：ＴＭＳ−Ｎ３およびテトラゾール生成物は潜在的に爆発性である。この反応ではブラストシールドを用い、傷、ひびなどのないガラス製品を用いること。金属製スパチュラなどの金属との接触を避けること。カラムから得た残留溶媒により生成物のわずかな湿潤を保持すること。
【０３７３】
酢酸１５ｍＬ中の、２−イソプロピル−５−ニトロアニリン（１．０２ｇ、５．６７ｍｍｏｌ、１当量）の溶液にオルトギ酸トリメチル（３．１ｍＬ、２８．３５ｍｍｏｌ、５当量）を添加して、反応混合物を室温で１０分間撹拌した。アジ化ナトリウム（９２１ｍｇ、１４．２ｍｍｏｌ、２．５当量）を添加して、反応混合物をブラストシールドの後ろで１２０℃まで１時間加熱した。０℃まで放冷した後、１５ｍＬの６Ｎ  ＨＣｌを添加した。上記溶液に、水７．５ｍＬ中の亜硝酸ナトリウム（５８７ｍｇ、８．５１ｍｍｏｌ、１．５当量）を滴下した。得られた溶液を、ブラストシールドの後ろで０℃で１５分間撹拌した。約６０ｍＬの２Ｎ  ＮａＯＨを前記の溶液に添加して（約ｐＨ４〜５）、得られた沈殿物をろ過して乾燥させ、所望の生成物（７８０ｍｇ）を茶褐色固体として生じさせた。ろ液をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離して、蒸発させた。残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３／７）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物を更に２００ｍｇ（合計７６％）を生じさせた。
【０３７４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）:δ８．８５（ｓ，１Ｈ），８．４５（ｄｄ，Ｊ＝８．７，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），２．７２（ｓｅｐｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ）; ｍ／ｚ＝２３４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３７５】
実施例４７
４−イソプロピル−３−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミンの合成
【化５６】
0006035238.tif 000061
ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）および水（４ｍＬ）中の１−（２−イソプロピル−４−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（７８０ｍｇ、３．３５ｍｍｏｌ、１当量）、粉末鉄（５６４ｍｇ、１０．０３ｍｍｏｌ、３当量）および塩化アンモニウム（５４１ｍｇ、１０．１０ｍｍｏｌ、３当量）の混合物を、２時間還流した。室温まで冷却した後、反応混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドでろ過し、ＣｅｌｉｔｅのパッドをＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）ですすいだ。ろ液を水で洗浄した。有機層を分離して、蒸発乾固した。残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１／１）を用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物（５００ｍｇ、７４％）を茶褐色固体として生じさせた。ｍ／ｚ＝２０４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３７６】
実施例４８
Ｎ２−（４−イソプロピル−３−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（Ｒ９５２７９９）の合成
【化５７】
0006035238.tif 000062
ＩＰＡ（３ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（１６０ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ、１当量）、４−イソプロピル−３−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１２１ｍｇ、０．５９４ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（７５ｍｇ、０．３９６ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、１００℃まで３時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（９５：５）で溶出して、所望の生成物（１２０ｍｇ、５４％）を白色固体として生じさせた。
【０３７７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．８４（ｓ，１Ｈ），９．２５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．９８−７．９２（ｍ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．２５−７．１５（ｍ，  １Ｈ），４．４０−４．３０（ｍ，１Ｈ），２．２８−２．２２（ｍ，１Ｈ），１．６５−１．６０（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．１０（ｍ，２Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ），１．０５−１．００（ｍ，１２Ｈ）；ｍ／ｚ＝４５４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３７８】
実施例４９
２−（４−イソプロピル−３−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリミジノ−５−カルボキシアミドの合成
【化５８】
0006035238.tif 000063
ＩＰＡ（３ｍＬ）中の２−クロロ−４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリミジノ−５−カルボキシアミド（１６０ｍｇ、０．５１３ｍｍｏｌ、１当量）、４−イソプロピル−３−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１２５ｍｇ、０．６１６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（７８ｍｇ、０．４１０ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、１００℃まで３時間加熱した。固体をろ過し、ＩＰＡで洗浄して、１Ｎ  ＮａＯＨで音波処理した。得られた固体をろ過し、水で洗浄し乾燥させて、表題化合物（２００ｍｇ、８１％）を微白色固体として生じさせた。
【０３７９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．８５（ｓ，１Ｈ），９．６９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），９．１５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．７８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．６２（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．４２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），４．３５−４．２５（ｍ，１Ｈ），２．３０−２．２６（ｍ，１Ｈ），１．７９−１．７５（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．１３（ｍ，２Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ），１．０４（ｓ，１２Ｈ）; ｍ／ｚ＝４７９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３８０】
実施例５０
２−（４−イソプロピル−３−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニルアミノ）−４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）ピリミジノ−５−カルボニトリルの合成
【化５９】
0006035238.tif 000064
ＩＰＡ（２ｍＬ）中の４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イルアミノ）−２−クロロピリミジン−５−カルボニトリル（８０ｍｇ、０．２７２ｍｍｏｌ、１当量）、４−イソプロピル−３−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（６６ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４１ｍｇ、０．２１８ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、８０℃まで３時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨでクエンチし、その後、濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ（９５：５）で溶出して、所望の生成物（８７ｍｇ、７０％）を白色固体として生じさせた。
【０３８１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．９５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），９．８３（ｓ，１Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．５２（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），４．５０−４．４０（ｍ，１Ｈ），２．３２−２．２５（ｍ，１Ｈ），１．５９−１．５５（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．１７（ｍ，２Ｈ），１．０５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ），１．０１（ｓ，６Ｈ），０．９９（ｓ，６Ｈ）; ｍ／ｚ＝４６１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０３８２】
置換テトラゾリル置換基を有する化合物の合成
【化６０】
0006035238.tif 000065
実施例５１
Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）イソブチルアミドの合成
室温のジクロロメタン（５０ｍＬ）中の２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミン（国際公開第２０１１０６８８９８号に記載）（１．９８ｇ、１０．０９ｍｍｏｌ、１当量）の溶液に、ＮａＨＣＯ３（７．６５ｇ、９０．８４ｍｍｏｌ、９当量）を、続いて塩化２−メチルプロパノイル（６．３４ｍＬ、６０．５６ｍｍｏｌ、６当量）を添加した。反応混合物を一晩撹拌した。反応混合物を水に取り出し、層を分離させた。有機層を氷冷１Ｎ  ＮａＯＨで２回、ブラインで１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水して、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルに吸収させて、フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃの１０％増分を利用したヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１００：０→５０〜７０％で溶出して、Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）イソブチルアミド（２．０４ｇ、８４％）を淡褐色固体として得た。
【０３８３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．６３（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．１７−８．１９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．０５−７．１０（ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，１Ｈ），２．６６−２．７５（ｍ，１Ｈ），２．０２−２．１１（ｍ，１Ｈ），１．０４−１．１２（ｍ，８Ｈ），０．７８−０．８３（ｍ，２Ｈ）; １９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ;ｄ６−ＤＭＳＯ）?−１２２．０（ｔ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ)：２６７（ＭＨ＋）。
【０３８４】
実施例５２
Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）シクロプロパンカルボキサミドの合成
実施例５１に記載された一般的手順に従った。Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド（２．４６ｇ、９２％）を、２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミン（国際公開第２０１１０６８８９８号に記載）および塩化シクロプロパンカルボキシルから得た。
【０３８５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．９４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．２７−８．３０（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０４−７．０９（ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｈ），２．１１−２．２０（ｍ，１Ｈ），１．９０−１．９８（ｍ，１Ｈ），１．０７−１．１４（ｍ，２Ｈ），０．８１−０．８６（ｍ，６Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ;ｄ６−ＤＭＳＯ） δ−１２３．０（ｔ）;ＬＣＭＳ(ｍ／ｚ):２６５（ＭＨ＋）。
【０３８６】
実施例５３
Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）アセトアミドの合成
実施例５１に記載された一般的手順に従った。Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）アセトアミド（２．０４ｇ、８４％）を、２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロベンゼンアミン（国際公開第２０１１０６８８９８号に記載）および塩化アセチルから得た。
【０３８７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ９．７１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．２３−８．２６（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０３−７．０７（ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，１Ｈ），２．０８−２．１６（ｍ，４Ｈ），１．０５−１．１２（ｍ，２Ｈ），０．８０−０．８５（ｍ，２Ｈ）; １９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ；ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１２３．０（ｔ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):２３９（ＭＨ＋）。
【０３８８】
実施例５４
１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾールの合成
Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）イソブチルアミド（１．９０ｇ、７．１４ｍｍｏｌ、１当量）を、アルゴン下でアセトニトリル（４０ｍＬ）に溶解して、−５℃（外部温度）に冷却した。温度を−５℃で保持しながら、無水トリフルオロメタンスルホン酸（２．４０ｍＬ、４．０３ｇ、１４．２７ｍｍｏｌ、２当量）を緩やかに滴下して、１〜２分間撹拌した。その後、温度を−５℃で保持しながら、アジ化トリメチルシリル（３．７５ｍＬ、２８．５４ｍｍｏｌ、４当量）を緩やかに滴下した。ＴＣＬ、ＬＣＭＳで、反応が１分未満で完了することが示された。温度を−５℃で保持しながら、反応物を氷冷飽和ＮａＨＣＯ３で緩やかにクエンチして、ＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離して、有機層をブラインで１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水して、濃縮乾固した。粗生成物をシリカゲルに吸収させてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃの５％増分を利用してヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１００：０→ＥｔＯＡｃ２５〜３０％で溶出して、１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾール（１．６９ｇ、７８％）を黄色固体として得た。
【０３８９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．５９−８．６３（ｍ，１Ｈ），７．３５−７．４０（ｍ，１Ｈ），２．９６−３．０８（ｍ，１Ｈ），０．９６−１．２４（ｍ，１１Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ;ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１１４．０（ｔ）;ＬＣＭＳ(ｍ／ｚ):２９２（ＭＨ＋）。
【０３９０】
実施例５５
５−シクロプロピル−１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールの合成
実施例５４に記載された一般的手順に従った。Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）シクロプロパンカルボキサミドを−２０℃で、１時間反応させ、５−シクロプロピル−１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾール（２．１４ｇ、８９％）を得た。
【０３９１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．５６−８．５９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４１−７．４５（ｄ，Ｊ＝１２．６Ｈｚ，１Ｈ），１．８１−１．９０（ｍ，１Ｈ），１．２３−１．３２（ｍ，１Ｈ），０．９３−１．１５（ｍ，８Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ  （２８２ＭＨｚ; ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１１４．０（ｔ）; ＬＣＭＳ(ｍ／ｚ): ２９０（ＭＨ＋）。
【０３９２】
実施例５６
１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−テトラゾールの合成
実施例５４に記載された一般的手順に従った。Ｎ−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）アセトアミドを−７８℃〜室温で一晩中反応させ、１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−テトラゾール（１．９５ｇ、９２％）を得た。
【０３９３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．５２−８．５４（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３９−７．４４（ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ，１Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），１．２１−１．３０（ｍ，１Ｈ），０．９２−１．０４（ｍ，４Ｈ）; １９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ; ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１１４．０（ｔ）;ＬＣＭＳ(ｍ／ｚ):２６４（ＭＨ＋）。
【０３９４】
実施例５７
４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミンの合成
Ｐａｒｒ容器に１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾール（１．６９ｇ、５．８０ｍｍｏｌ）、ＥｔＯＨ（６０ｍＬ）、ＡｃＯＨ（９００μＬ）、および１０％Ｐｄ／Ｃ（水中に５０％、Ｄｅｇｕｓｓａ  ｔｙｐｅ  Ｅ１０１；３４０ｍｇ、出発ニトロ化合物２０重量％）を充填して、懸濁液を作成した。容器を密閉して脱気し、Ｈ２（×３）を詰め戻した。その後、容器に３０ｐｓｉのＨ２を充填して、ＬＣＭＳ分析が変換を示すようになるまで震盪させた。この反応では、ＬＣＭＳ分析で２日目に変換が示された。反応混合物をＣｅｌｉｔｅのパッドでろ過して、ＣｅｌｉｔｅのパッドをＭｅＯＨですすいだ。ろ液を蒸発乾固した。粗生成物をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとで分配して、３Ｎ  ＮａＯＨで約ｐＨ１２〜１４に調整した。水層と有機層に分配して、有機層を３Ｎ  ＮａＯＨで１回洗浄した。水層をＥｔＯＡｃで３回抽出した。ひとまとめにした有機抽出物を乾燥させて（Ｎａ２ＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１．０８ｇ、７１％）をオフホワイト色の固体として生じさせた。
【０３９５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ６.74-6.77(m,1H)6.８１−６．８６（ｍ，１Ｈ），５．４２（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．９２−３．０１（ｍ，１Ｈ），１．２１−１．２４（ｍ，６Ｈ），０．９４−１．０４（ｍ，１Ｈ），０．６３−０．６７（ｍ，２Ｈ），０．４４−０．５７（ｍ，２Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ；ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１３０．０（ｔ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）:２６２（ＭＨ＋）。
【０３９６】
実施例５８
４−シクロプロピル−５−（５−シクロプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロベンゼンアミンの合成
実施例５７に記載された一般的手順に従った。５−シクロプロピル−１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−１Ｈ−テトラゾールを２時間反応させ、４−シクロプロピル−５−（５−シクロプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロベンゼンアミン（２０５ｍｇ、９７％）を得た。
【０３９７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ６．８７−６．９１（ｄ，Ｊ＝１２．６  Ｈｚ，１Ｈ），６．７７−６．８０（ｄ，Ｊ＝８．７０Ｈｚ，１Ｈ），５．４５（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），１．７２−１．８１（ｍ，１Ｈ），１．０３−１．２１（ｍ，５Ｈ），０．６１−０．６７（ｍ，２Ｈ），０．４８−０．５４（ｍ，２Ｈ）; １９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ;ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１３０．０（ｔ）; ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ):２６０（ＭＨ＋）。
【０３９８】
実施例５９
４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−ベンゼンアミンの合成
実施例５７に記載された一般的手順に従った。１−（２−シクロプロピル−４−フルオロ−５−ニトロフェニル）−５−メチル−１Ｈ−テトラゾールを５時間反応させて、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（１．６８ｇ、９７％）を得た。
【０３９９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ６．８４−６．８９（ｄ，Ｊ＝１２．４  Ｈｚ，１Ｈ），６．７３−６．７６（ｄ，Ｊ＝８．８０Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ），１．０５−１．１４（ｍ，１Ｈ），０．６０−０．６６（ｍ，２Ｈ），０．４７−０．５２（ｍ，２Ｈ）；１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ; ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１３０．０（ｔ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ)：２３４（ＭＨ＋)。
【０４００】
実施例６０
Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化６１】
0006035238.tif 000066
イソプロピルアルコール（１０ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（３００ｍｇ、０．９２８ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（２９１ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＰＴＳＡ一水和物（１９１ｍｇ、０．７４２ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、７０℃まで７時間加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗反応混合物を濃縮乾固し、水、ＥｔＯＡｃおよび１Ｎ  ＮａＯＨ中に取り出した。層を分離させた。有機層を１Ｎ  ＮａＯＨで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過して濃縮乾固した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨの１％増分を利用したＤＣＭ：２ＭのＮＨ３／ＭｅＯＨ＝１００：０→９６：４で溶出して、化合物Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（２４５ｍｇ、５２％）を固体として生じさせた。
【０４０１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．５５（ｓ，１Ｈ），７．７１−７．８２（ｍ，２Ｈ），７．１２−７．１９（ｍ，１Ｈ），６．９６−７．００（ｄ，Ｊ＝１１．１Ｈｚ，１Ｈ），４．０１−４．３９（ｍ，１Ｈ），２．９１−２．９９（ｍ，１Ｈ），１．５２−１．５９（ｍ，２Ｈ），０．９８−１．２４（ｍ，２２Ｈ），０．７８−０．８１（ｍ，２Ｈ），０．６０−０．６９（ｍ，２Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ;ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１１７（ｓ），１６７（ｓ）；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ)：５１２（ＭＨ＋）。
【０４０２】
実施例６１
Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−（５−シクロプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロフェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化６２】
0006035238.tif 000067
ＩＰＡ（８ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（２５６ｍｇ、０．７９１ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−５−（５−イソプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロベンゼンアミン（２０５ｍｇ、０．７９１ｍｍｏｌ、１当量）およびＰＴＳＡ一水和物（１２０ｍｇ、０．６３３ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、７０℃まで８日間加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を濃縮乾固し、水、ＥｔＯＡｃおよび１Ｎ  ＮａＯＨ中に取り出した。層を分離させた。有機層を１Ｎ  ＮａＯＨで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過して濃縮乾固した。粗生成物をＥｔＯＡｃ：ヘキサンから研和により精製して、化合物Ｎ２−（４−シクロプロピル−５−（５−シクロプロピル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−２−フルオロフェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（２７６ｍｇ、６８％）を固体として生じさせた。
【０４０３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．５２（ｓ，１Ｈ），７．８１−７．８８（ｍ，２Ｈ），７．１６−７．２０（ｍ，１Ｈ），７．０２−７．０６（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０１−４．３９（ｍ，１Ｈ），１．６９−１．８１（ｍ，１Ｈ），１．５２−１．５９（ｍ，２Ｈ），０．９４−１．２４（ｍ，２０Ｈ），０．７５−０．７９（ｍ，２Ｈ），０．６０−０．６８（ｍ，２Ｈ）；１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ；ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１１８（ｓ），１６６（ｓ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ)：５１０（ＭＨ＋)。
【０４０４】
実施例６２
Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化６３】
0006035238.tif 000068
ＩＰＡ（１３ｍＬ）中の２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−４−アミン塩酸塩（４１６ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、１当量）、４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（３００ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、１当量）およびＰＴＳＡ一水和物（１９６ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、０．８当量）の混合物を、７０℃まで６日間加熱した。周囲温度まで冷却した後、粗混合物を濃縮乾固し、水、ＥｔＯＡｃおよび１Ｎ  ＮａＯＨ中に取り出した。層を分離させた。有機層を１Ｎ  ＮａＯＨで２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で脱水し、ろ過して濃縮乾固した。粗生成物をＥｔＯＡｃ：ヘキサンから研和により精製して、化合物Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−メチル−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミン（３６１ｍｇ、５８％）を固体として生じさせた。
【０４０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ  ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ８．５２（ｓ，１Ｈ），７．７４−７．８１（ｍ，２Ｈ），７．１４−７．１９（ｍ，１Ｈ），６．９８−７．０８（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０１−４．３５（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），１．５２−１．５９（ｍ，２Ｈ），０．９５−１．１４（ｍ，１６Ｈ），０．７４−０．７８（ｍ，２Ｈ），０．６１−０．６７（ｍ，２Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ;ｄ６−ＤＭＳＯ）δ−１１８  （ｓ），１６７（ｓ）;ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：４８４（ＭＨ＋）。
【０４０６】
実施例６３
Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化６４】
0006035238.tif 000069
実施例４０および４１に記載された一般的手順に従った。
【０４０７】
表題化合物の特徴づけデータ：1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：８．５３（ｓ，１Ｈ），７．７９−７．８２（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｄ，１Ｈ），７．０１（ｄ，１Ｈ），４．３２（ｂｒ．ｍ，１Ｈ），１．６１（ｄ，２Ｈ），１．０９−１．１７（ｍ，４Ｈ），０．９９（ｓ，１２Ｈ），０．６７（ｄ，２Ｈ），０．５２（ｍ，２Ｈ）;19Ｆ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）δ：−１６５．９，−１１９．１，−６０．７；ＬＣＭＳ（ｍ／ｚ）：５３８（ＭＨ＋)。
【０４０８】
実施例６４
Ｎ２−（４−シクロプロピル−２−フルオロ−５−（５−トリフルオロメチル）−１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化６５】
0006035238.tif 000070
実施例５１に記載された一般的手順に従ったが、最後の還元ステップは実施例４１の条件で実施した。
【０４０９】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ｄ６−ＤＭＳＯ）δ８．６２（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），７．８４（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．２６（ｄ，１Ｈ），７．０６（ｄ，１Ｈ），５．６７（ｄ，Ｊ ＝４７．４Ｈｚ，２Ｈ），４．３０−４．２０（ｍ，１Ｈ），２．３１−２．２５（ｍ，１Ｈ），１．６８−１．６４（ｍ，２Ｈ），１．２４ −１．２０（ｍ，２Ｈ），１．１１（ｓ，  ６Ｈ），１．０５（ｓ，６Ｈ），０．７４（ｍ，２Ｈ），０．６２（ｍ，２Ｈ）;ｍ／ｚ＝５０２．４（Ｍ＋Ｈ）＋; ｍ／ｚ＝５００．３（Ｍ−Ｈ）＋。
【０４１０】
ｔｒａｎｓ−５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−４−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの合成
【化６６】
0006035238.tif 000071
実施例６５
ｔｒａｎｓ−２−（トリフルオロメチル）シクロプロピルボロン酸ＭＩＤＡエステルの調製
【化６７】
0006035238.tif 000072
ステップ１：トリフルオロメチルジアゾメタンの調製
水（１０ｍＬ）中の亜硝酸ナトリウム（４．６ｇ、６６ｍｍｏｌ）を、０℃の水（２５ｍＬ）およびエーテル（４５ｍＬ）中の２，２，２−トリフルオロエチルアミン塩酸塩（８．１ｇ、６０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に一度に添加した。反応容器をテフロンストッパーで密閉し、混合物を０℃〜室温で撹拌し、室温でおよそ３時間撹拌した。その後、混合物を分液ロートで分配して、生成物を含有するエーテル層をこれ以上精製せずに次のステップで直接使用した。トリフルオロメチルジアゾメタン生成物の収率は、本明細書の引用文献（＝３．３２ｇ）に基づいておよそ５０％であると仮定した。
【０４１１】
手順に関する安全上の注意：ジアゾ化合物は潜在的に爆発性である。反応は、ブラストシードルの後ろで、ひびまたは目立った傷のないガラス製品において実施し、ガラス製品を使用前に点検すること。手順は、全体が参照により本明細書に組み入れられた、J. Am. Chem. Soc. 1943, 65, 1458を参照されたい。
ステップ２：ｔｒａｎｓ−２−（トリフルオロメチル）シクロプロピルボロン酸ＭＩＤＡエステルの調製
Ｅｔ２Ｏ（４５ｍＬ）中のトリフルオロメチルジアゾメタン（３．３２ｇ、３０ｍｍｏｌ）の混合物を、室温のＥｔ２Ｏ中のビニルボロン酸ＭＩＤＡエステル（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社、ミズーリ州セントルイス；１．６５ｇ、９．０ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（５０ｍｇ）の撹拌された懸濁液に滴下した。１０分間添加した後（トリフルオロメチルジアゾメタンの約１／４がこの段階で添加されている）、更なるＰｄ（ＯＡｃ）２（５０ｍｇ）およびＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加して、トリフルオロメチルジアゾメタンを更に２０分間滴下した（この時間の後、およそ３／４が添加された）。ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（５０ｍｇ）をこの時点で添加して、残りのトリフルオロメチルジアゾメタンを１０分間かけて滴下した。トリフルオロメチルジアゾメタンの完全な添加の後、混合物をＴＬＣにより分析して、完全に反応したことが示された。溶媒を真空除去し、残渣をシリカゲルにドライロードして、ＥｔＯＡｃを溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物（１．４５ｇ、６１％）を固体として生じさせた。試料をＥｔＯＡｃから再結晶化させ、その後、１，２−ジクロロエタンから再度少量を再結晶化させて、ｘ線結晶学による分析に適した結晶を生じさせた。示されたｘ線試験から、該材料がｔｒａｎｓ−異性体であることが確認された。注：生成物はｔｒａｎｓ異性体であるがラセミ体である。
【０４１２】
手順は、全体が参照により本明細書に組み入れられた、Tetrahedron Letters 2010, 51, 1009-1011を参照されたい。該手順および以下の手順については、全体が本明細書に組み入れられた、２０１０年１２月１日出願の米国特許仮出願第６１／４１８，６５４号（Attorney Docket No. RIGL-071PRV）、表題「Cyclopropyl MIDA Boronate」を参照されたい。
【０４１３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，３００ＭＨｚ）:δ３．９９−３．７２（ｍ，４Ｈ），２．７０（ｓ，３Ｈ），１．２８（ｍ，１Ｈ），０．５３（ｍ，１Ｈ），０．３１（ｍ，１Ｈ），０．００（ｍ，１Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，２８２ＭＨｚ）:−６５．４。
【０４１４】
実施例６６
ｔｒａｎｓ−４−フルオロ−２−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−ニトロベンゼンアミンの調製
【化６８】
0006035238.tif 000073
トルエン（５ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１．５ｍＬ）中の、２−ブロモ−４−フルオロ−５−ニトロアニリン（３５３ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ｔｒａｎｓ−２−（トリフルオロメチル）シクロプロピルボロン酸ＭＩＤＡエステル（４７７ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（５１ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、Ｃｙ３Ｐ（１２６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２．９３ｇ、９．０ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２で１５分間脱気し、その後、窒素雰囲気下に置いて３時間加熱還流した。混合物の温度を１００℃（ブロック温度）まで低下させて、混合物を一晩撹拌した。反応の完了後、混合物を冷却して、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１００ｍＬ）を添加した。混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過し、ろ過ケークをＨ２Ｏ（５０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ液の水層と有機層とに分配して、水層をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×１）で抽出した。ひとまとめにした有機層をブライン（５０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（ＭｇＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、粗残渣を残留させた。残渣をシリカゲルにドライロードし、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２：８から３：７へ）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物（２１４ｍｇ、５４％）を生じさせた。注：生成物はｔｒａｎｓ異性体であるがラセミ体である。
【０４１５】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ,ｄ６−ＤＭＳＯ）: δ７．３２（ｄｄ，Ｊ＝６．８，２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，２．０Ｈｚ，１Ｈ），５．６０（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．４９−２．４１（ｍ，１Ｈ），２．３６−２．２９（ｍ，１Ｈ），１．４２−１．３５（ｍ，１Ｈ），１．１６−１．１１（ｍ，１Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）:δ−１３５．７（ｄｄ），−６４．８（ｄ）; ｍ／ｚ＝２６５．８７（Ｍ＋Ｈ）＋ ;ｍ／ｚ＝２６３．００（Ｍ−Ｈ）＋
【０４１６】
実施例６７
ｔｒａｎｓ−（４−フルオロ−２−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−ニトロフェニル−１Ｈ−テトラゾールの調製
【化６９】
0006035238.tif 000074
ｔｒａｎｓ−４−フルオロ−２−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−ニトロベンゼンアミン（２００ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）、オルトギ酸トリメチル（０．８３ｍＬ、７．６ｍｍｏｌ）、アジ化トリメチルシリル（２００μＬ、１．５２ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（３ｍＬ）の混合物を、７０℃まで加熱して一晩撹拌した。冷却した後、混合物を真空濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）および１Ｎ  ＮａＯＨ（３０ｍＬ）で分配した。有機層を乾燥させて（ＭｇＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、粗残渣を残留させた。残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（３：７から４：６へ）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（残渣をシリカゲルにドライロードした）により精製して、生成物（１５４ｍｇ、６４％）を生じさせた。注：生成物はｔｒａｎｓ異性体であるがラセミ体である。
【０４１７】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）:δ９．８５（ｓ，１Ｈ），８．５７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ），２．５２（ｍ，１Ｈ），２．１９−２．２０（ｍ，１Ｈ），１．５５−１．４９（ｍ，１Ｈ），１．３８−１．３０（ｍ，１Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）:δ−１１４．６，−６５．８（ｄ）; ｍ／ｚ＝３５９．１０（Ｍ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ）＋; ｍ／ｚ＝３１６．０４（Ｍ−Ｈ）＋
【０４１８】
実施例６８
ｔｒａｎｓ−（２−フルオロ−４−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミンの調製
【化７０】
0006035238.tif 000075
ｔｒａｎｓ−（４−フルオロ−２−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−ニトロフェニル−１Ｈ−テトラゾール（１５０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、パラジウム（チャコール上で１０重量％、Ｄｅｇｕｓｓａ  ｔｙｐｅ  Ｅ１０１（３０ｍｇ）、ＡｃＯＨ（７５μＬ）およびＥｔＯＨ（２０ｍＬ）の混合物を、２５〜３０ｐｓｉで１週間水素化した（ＬＣ／ＭＳで生成物への変換が９５％超となるのが示されるまで。注：ヒドロキシルアミン中間体のアニリン生成物への還元は緩やかなステップである）。その後、混合物をＣｅｌｉｔｅでろ過し、ろ過ケークをＥｔＯＨ（２０ｍＬ×３）で洗浄した。ろ液を真空濃縮して粗残渣を残留させ、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（４：６）を溶離液として用いたシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（残渣をシリカゲルにドライロードした）により精製して、生成物（９４ｍｇ、６９％）固体として生じさせた。注：生成物はｔｒａｎｓ異性体であるがラセミ体である。
【０４１９】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）:δ９．７９（ｍ，１Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），６．８１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），５．６５（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），２．０７−１．９５（ｍ，２Ｈ），１．１７−１．１１（ｍ，１Ｈ），１．０８−１．０１（ｍ，１Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）:δ−１３１．５（ｄｄ），６５．５（ｄ）; ｍ／ｚ＝３２９．１５（Ｍ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ）＋; ｍ／ｚ＝２８６．０８（Ｍ−Ｈ）＋。
【０４２０】
実施例６９
ｔｒａｎｓ−５−フルオロ−Ｎ２−（２−フルオロ−４−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル）−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）ピリミジン−２，４−ジアミンの調製
【化７１】
0006035238.tif 000076
イソプロピルアルコール（２ｍＬ）中のｔｒａｎｓ−（２−フルオロ−４−（２−トリフルオロメチル）シクロプロピル）−５−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゼンアミン（９０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、２−クロロ−５−フルオロ−Ｎ４−（２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−４−イル）−４−ピリミジンアミン塩酸塩（８５ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の混合物を７０℃まで加熱して、週末の間撹拌した。更にイソプロピルアルコール（１０ｍＬ）を添加して、混合物は、７０℃に達した後に均質になった。混合物を室温まで放冷すると、沈殿物が出現した。混合物をろ過し、ろ過ケークをイソプロピルアルコール（２ｍＬ）で洗浄した［注：ろ液中にはまだ生成物が多量に存在する］。その後、ろ過ケークをＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で懸濁させて、０．５Ｎ  ＮａＯＨ（３０ｍＬ）を添加した。水層と有機層とに分配して、有機層をブライン（２０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させて（ＭｇＳＯ４）ろ過し、溶媒を真空除去して、生成物（４９ｍｇ、３５％）を固体として残留させた。注：生成物はｔｒａｎｓ異性体であるがラセミ体である。
【０４２１】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ, ｄ６−ＤＭＳＯ）:δ９．８３（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），８．６５（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｂｒ．ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２９−４．１５（ｍ，１Ｈ），２．１９−２．１０（ｍ，１Ｈ），２．０９−２．０１（ｍ，１Ｈ），１．６１−１．５２（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．０２（ｍ，４Ｈ），０．９７（ｓ，６Ｈ），０．９２（ｓ，６Ｈ）;１９Ｆ  ＮＭＲ（２８２ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）:δ−１６５．７，−１１９．６，−６５．６; ｍ／ｚ＝５３８．４８（Ｍ＋Ｈ）＋; ｍ／ｚ＝５３６．３８（Ｍ−Ｈ）＋。
【０４２２】
実施例７０：ＰＫＣアッセイ
ＰＫＣ−アルファ、ＰＫＣ−ベータ、ＰＫＣ−デルタ、ＰＫＣ−イプシロンおよびＰＫＣ−シータ活性の阻害を、ＥＬＩＳＡにより次のとおり決定した： ＮＵＮＣ  ＭＡＸＩＳＯＲＰ（番号４３６１１０）プレートまたは Ｃｏｓｔａｒ  Ｈｉｇｈ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  （番号３９２２）プレートを、１×ＰＢＳ中０．０１ｍｇ／ｍＬのニュートラアビジン（Neutravidin）(Ｐｉｅｒｃｅ社番号ＰＩ−３１０００）（１００μＬ／ウェル）で、４℃で１８〜２４時間コーティングした。使用する準備が整ったら、プレートを１×ＰＢＳＴで洗浄し、その後、１×ＰＢＳＴ中２％のＢＳＡ（１００μＬ／ウェル）で、室温で最低１時間ブロックした。反応は、６０μＬ／ウェルの容量で実施した。開始する準備が整ったら、プレートを１×ＰＢＳＴで洗浄して、２％ＢＳＡブロッキング溶液を除去した。その後、必要な緩衝液成分ならびに適切な濃度のＡＴＰおよびペプチド基質を含有する反応溶液を、各ウェルに添加した（表３参照）。その後、適切な濃度の被験化合物を添加した（添加される容量については、キナーゼのＤＭＳＯ耐性が約０．２％であることに配慮すべきである）。その後、キナーゼの添加により、反応を開始させたが、そのおおよその最終濃度を表３に列挙している（これが、酵素活性のバッチ変動に応じて変動することに留意）。その後、反応を室温で２０分間放置した後に、プレートを１×ＰＢＳＴで洗浄した。
【表３】
0006035238.tif 000077
"
【０４２３】
その後、反応混合物をプレートから除去し、１×ＰＢＳＴで洗浄した後に、１×ＰＢＳＴ中０．１％のＢＳＡ溶液中で１：１００００希釈した適切な一次および二次抗体（表３）を含有する抗体現像液を各ウェル（１００μＬ／ウェル）に添加した。その後、これを室温で最短１時間放置した。この時間の後、プレートを１×ＰＢＳＴでもう一度洗浄した。その後、ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ  ＥＬＩＳＡ  Ｐｉｃｏ  Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ基質（Ｐｉｅｒｃｅ社番号ＰＩ−３７０６９）を添加して（１００μＬ／ウェル）、プレートを発光プレートリーダーで読み取った。
【０４２４】
実施例７１：ＰＫＣアッセイ
別法として、ＰＫＣ活性の阻害を、異なる濃度の阻害薬での蛍光偏光でリン酸化ペプチドの生成をモニタリングすることにより測定する。反応を９６ウェルプレートフォーマットで、２０ｍＭのヘペス（ｐＨ７．４）、５ｍＭのＭｇＣｌ２、０．２ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＤＴＴ、０．０２％のＢｒｉｊ−３５、０．１ｍｇ／ｍＬのホスファチジルセリン、０．０２ｍｇ／ｍＬのジオレオイル−ｓｎ−グリセロールおよびそれぞれ５μＭのＡＴＰおよびペプチド基質を含有する全容量２０μＬで実施する。化合物を、最初にＤＭＳＯ中で連続希釈し、その後上記の濃度のヘペス、ＭｇＣｌ２、ＣａＣｌ２、ＤＴＴおよびＢｒｉｊ−３５を含有する溶液に移して、５×化合物の２％ＤＭＳＯ溶液を得、その後これを反応溶液に添加する。表４に記載された典型的な濃度で、ＰＫＣを添加することにより反応を開始し、その後室温で２０分間インキュベーションする。この時間の終了時に、Invitrogen社のＰ２７４８プロトコルを使用して、クエンチ（ＥＤＴＡ）試薬および検出（ペプチドトレーサーおよび抗体）試薬の組合せを添加する。３０分間のインキュベーションの後に、Ｔｅｃａｎ  Ｐｏｌａｒｉａｎ装置を使用して、生じたリン酸化ペプチドの量を蛍光偏光（Ｅｘ＝４８５ｎｍ、Ｅｍ＝５３５ｎｍ）により測定する。
【表４】
0006035238.tif 000078
"
【０４２５】
実施例７２：ＩＬ−２ ＥＬＩＳＡ、ヒト初代Ｔ細胞、抗ＣＤ３＋ＣＤ２８＋（全細胞アッセイ）
ヒト初代Ｔ細胞の単離および培養：ヒト初代Ｔ細胞を次のとおり調製した。全血を健常な志願者から得て、ＰＢＳと１：１で混合し、フィコール・ハイパック（Ficoll Hypaque）(Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社、ニュージャージー州ピスカタウェイ、カタログ番号１７−１４４０−０３）に血液／ＰＢＳ：ふぃこール比２：１で重層させて、４℃、１７５０ｒｐｍで３０分間遠心分離した。血清：フィコールの界面の細胞を回収し、５倍容量のＰＢＳで２回洗浄した。これらの新たに単離されたヒト末梢血単核細胞を、１μｇ／ｍＬのαＣＤ３および５μｇ／ｍＬのαＣＤ２８（抗ヒトＣＤ３、ＢＤ  Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ社、カタログ番号５５５３３６、抗ヒトＣＤ２８、ベックマン・コールター社、カタログ番号ＩＭ１３７６）でプレコーティングされたフラスコ内に４０Ｕ／ｍＬのＩＬ２を含有するＹｓｓｅｌ培地中で培養した。細胞を３〜４日間刺激し、その後新たなフラスコに移し、１０％ＦＢＳおよび４０Ｕ／ｍＬのＩＬ−２を含むＲＰＭＩ（Ｌ−グルタミンを含むＲＰＭＩ−１６４０；メディアテック社、バージニア州ハーダンカタログ番号１０−０４０−ＣＭ）中で保持した。その後、初代Ｔ細胞をＰＢＳで２回洗浄して、ＩＬ−２を除去した。
【０４２６】
初代Ｔ細胞刺激およびＩＬ２ ＥＬＩＳＡ：ヒト初代Ｔ細胞（１ウェルあたり細胞１００，０００個）をＹｓｓｅｌ培地中で被験化合物と共に、またはそれを伴わずに、３７℃で１時間プレインキュベートした。その後、細胞を１μｇ／ｍｌのαＣＤ３および５μｇ／ｍｌのαＣＤ２８でプレコーティングされた丸底９６ウェルプレートに移すことにより、細胞を刺激した。カウンターアッセイとして、代わりに、Ｙｓｓｅｌ中のＰＭＡおよびイオノマイシンの８×保存溶液を添加することにより、細胞を刺激した（最終濃度が０．５ｎｇ／ｍｌのＰＭＡおよび０．１μＭのイオノマイシン、両者ともＣａｌｂｉｏｃｈｅｍ社製）。細胞を３７℃で２４時間インキュベートした後、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社製のヒトＩＬ−２ Ｄｕｏｓｅｔ  ＥＬＩＳＡキット、カタログ番号ＤＹ２０２Ｅを使用するＥＬＩＳＡにより、ＩＬ−２の定量のために、上清１００μＬを回収した。
【０４２７】
表５は、全細胞アッセイで検査された化合物でのＩＣ５０値を示しており、ここで「Ａ」は、提示されたアッセイにおける０．２５μＭ未満のＩＣ５０を示し、；「Ｂ」は、０．２５〜０．５μＭであり；「Ｃ」は０．５〜１μＭであり；「Ｄ」は、ＩＣ５０が１μＭを超えることを示す。
【表５】
0006035238.tif 000079
"
【０４２８】
実施例７３：カルシウム流入
ｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴ／ＴＯ＋ｈＴＲＰＶ４ａ、ラットＴＲＰＶ１−ＨＡまたはｒＴＲＰＡ１−ＨＡが安定的にトランスフェクトされているＨＥＫ−ＦＬＰＴＲＥＸ細胞を、１０％テトラサイクリン不含ウシ胎仔血清、ハイグロマイシン（５０μｇ／ｍｌ）およびブラストサイジン（１０μｇ／ｍｌ）を含有するダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で増殖させる。細胞をテトラサイクリン（０．１μｇ／ｍｌ、２０ｈ）で処理して、ＴＲＰ発現を誘発する。ラットまたはマウスの胸髄および腰髄由来のＤＲＧを、低温ハンクス液（ＨＢＳＳ）中で破砕し、１ｍｇ／ｍｌのコラゲナーゼＩＡ型および０．１ｍｇ／ｍｌのＤＮＡｓｅＩＶ型を含有するＤＭＥＭ中、３７℃で６０の間インキュベートし、ペレット化させて、０．２５％トリプシンと共に３０分間インキュベートする。神経細胞をペレット化し、１０％のウシ胎仔血清、１０％のウマ血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、０．１ｍｇ／ｍｌのストレプトマイシン、２ｍＭのグルタミンを含有するＤＭＥＭで懸濁し、溶液が濁って均質になるまで穏やかに研和することにより分離し、ＰｏｌｙＯｎｉｔｉｎｅ／ラミニンでコーティングされたカバーガラスに播種する。神経細胞を、実験前に３〜４日間培養する。
【０４２９】
カバーガラスまたは９６マルチウェルプレート上で増殖させた細胞を、Ｃａ２＋およびＭｇ２＋、２０ｍＭのヘペス緩衝液、０．１％のＢＳＡ、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを含有するＨＢＳＳ（ｐＨ７．４）中で、２．５〜５μＭの Ｆｕｒａ−２ＡＭ(Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社)と共に３７℃で２０〜４５分間インキュベートする。細胞を洗浄し、蛍光をＦ−２５００分光光度計で、Ｆｌｅｘｓｔａｔｉｏｎ３マイクロプレートリーダーＩＩＩ（細胞集団中のカルシウムを測定するため）もしくはＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｖｅｒｔ顕微鏡で、またはＩＣＣＤビデオカメラおよびビデオ顕微鏡収集プログラム（単一の神経細胞中のカルシウム流入を測定するため）を使用して、３４０ｎｍおよび３８０ｎｍの励起ならびに５１０ｎｍの発光で測定する。物質をチャンバーに直接注入する（分光光度計では２０ｍｌを２ｍｌへ；Ｆｌｅｘｓｔａｔｉｏｎでは２００ｍｌ中に２０ｍｌ、単一細胞用のチャンバーでは３５０ｍｌ中に５０ｍｌ）。
【０４３０】
実施例７４：インビボ過形成
機械的疼痛を、０．１７３ｍＮのｖｏｎ  Ｆｒｅｙヘアを５回適用し、それに応答した後肢の逃避回数として定量する。応答をパーセント値として表し（例えば、５回のうち３回の逃避は６０％として記録される）、機械的痛覚過敏は、基礎測定に比較した逃避のパーセント値の上昇と定義する。２）機械的疼痛は、「アップダウンパラダイム」を使用して定量され、足底中央表面に５秒間、または逃避応答が生じるまで適用されたｖｏｎ  Ｆｒｅｙフィラメントに対する５０％応答閾値を決定する。ｖｏｎ  Ｆｒｅｙフィラメントは、強度１．６５、２．４４、２．８３、３．２２、３．６１、３．８４、４．０８の範囲である。
【０４３１】
熱痛覚過敏を、足底検査装置を使用してマウスにおいて評価し、輻射熱に対する肢の逃避潜時として定量する。熱痛覚過敏は、基礎測定に比較した逃避潜時の減少と定義する。基礎レベルを測定した後に、軽ハロセン麻酔（５％）下でマウスに被験化合物を左肢または右肢に注射し（５〜１０μｌ足底内注射）、異なる時点で肢の逃避測定を繰り返す。ＰＡＲ２ ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ４およびＴＲＰＡ１媒介痛覚過敏およびＴＲＰＶ媒介応答の潜在能力を評価するために、マウスをＰＡＲ２−ＡＰで１５分間、続いてカプサイシン、４αＰＤＤまたはＨＮＥで治療する。プロテインキナーゼの役割を評価するために、アゴニストで攻撃する２０〜３０分前に、アンタゴニストまたは対応する媒体を注射する。異なる治療により誘発される効果を同一のラットにおいて、右肢（例えば、食塩水または媒体を受けた）で記録された応答を左肢（例えば、ＰＡＲ２−ＡＰまたは４αＰＤＤを受けた）で得られた応答と比較して評価する。
【０４３２】
ホルマリン誘発痛覚過敏は、疼痛行動を誘発するため、５％ホルマリン溶液を使用して皮内注射によりマウスまたはラット前肢の背側表面に投与することにより評価する。疼痛を、体位に関係する４つのレベルのスケール：０、正常体位のレベル；１、注射された肢は床についたままだが、動物を支えていないレベル；２、注射された肢が明らかに逃避しているレベル；および３、注射された肢を舐めているか、噛んでいるか、または振っているレベル、で評価する。動物を、注射の３分後（侵害受容器の直接刺激から生じる初期相と定義）、その後、注射の３０〜６０分後（炎症現象が生じる増感期間を含む第二相と定義）に観察してスコアづけする。３分間隔毎の侵害受容行動のスコアを、各行動に掛かった秒数の加重平均として算出する。２．５％ホルマリン溶液を足底内注射により投与し、熱的疼痛および機械的疼痛を、上記の通り３０〜６０分後に測定する。プロテインキナーゼの役割を評価するために、アンタゴニストまたはその媒体（対照）を、ホルマリンの２０〜３０分前に右肢に注射する。侵害受容行動を各ラットでスコアづけし、対照と比較する。
【０４３３】
本発明を、その具体的な実施形態を参照して記載したが、当業者には、本発明の真の主旨および範囲を逸脱することなく、様々な変更を施し得ることおよび均等物に置き換え得ることが理解されるべきである。加えて、特定の状況、材料、組成物、方法、方法ステップ（複数可）を本発明の目的、主旨および範囲に適合させるために、多くの改良を施すことができる。かかる改良の全てが、本明細書に添付された特許請求の範囲内にあるものとする。