(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒアルロン酸を含有し、かつ、２〜１５℃又は室温下では溶液である、植物の鮮度保持剤であって、
前記ヒアルロン酸は、平均分子量が３９０〜１，５００，０００であるヒアルロン酸である、前記植物の鮮度保持剤。
【請求項２】
ヒアルロン酸を含有しない植物に、含まれているヒアルロン酸が植物体内に吸収されるように請求項１記載の植物の鮮度保持剤を接触させることを特徴とする、植物の鮮度保持方法。
【請求項３】
請求項２記載の植物の鮮度保持方法によって得られるヒアルロン酸含有植物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物の鮮度保持剤および植物の鮮度保持方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、世界各地において生鮮植物の生産が盛んとなり、大量消費地までの搬送（輸出）の際の鮮度保持方法（保存方法）の開発、改良が求められている。
従来、植物の鮮度を保持させる場合、切断部分を水中に浸す方法、糖類等の栄養源を水に添加する方法、細菌・カビの繁殖を防止する防腐剤・殺菌剤を添加して吸い上げる水の腐敗などによる劣化を防止する方法、チオ硫酸銀を水に添加してエチレンガスの発生を抑制する方法、植物ホルモン剤を水に添加する方法等、各種の方法が行なわれている（例えば、特許文献１，２参照）。上記以外にも植物を保持剤に浸漬して保持剤を吸収させることにより自然状態のまま保存しようとする手法が種々開発されている。例えば保持剤として、フィチン酸（例えば、特許文献３参照）、コウジ酸（例えば、特許文献４参照）を用いることが挙げられる。またグリセリン等の保湿剤の添加は非常に効果があるが、これらは植物が吸収するのに時間がかかるという難点がある。この現象を克服するために、加速剤としてアルカリ金属あるいはアルカリ土類金属の塩を併用する組成物が多く提案されている（例えば、特許文献１参照）。近年、安全・安心志向の高まりから、そのまま食しても安全であり、尚かつ鮮度保持効果を発揮する野菜、果物、花の鮮度保持剤が求められている。例えばサプリメントとして摂取されるような成分によって、野菜、果物、花の鮮度保持効果が発揮される場合、安全な鮮度保持剤としてのみならず、摂取することによる健康増進作用という付加価値も期待できる。
【０００３】
ヒアルロン酸は、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンおよびＤ−グルクロン酸の２糖による繰り返し構造からなる直鎖の多糖であり、高保湿性、高粘弾性、高潤滑性等を示す素材である。それらの特徴を生かして、保湿剤としての化粧品への利用や、関節症治療剤や眼科手術補助剤等の医療分野への利用が広がっている。また、近年は、ヒアルロン酸の健康機能への関心の高まりから、ヒアルロン酸が配合されたサプリメントや嗜好食品（例えば飲料やハム等）が多数販売されている。さらに最近では、食品科学的機能の応用例として、ドレッシングやソースに配合して野菜や果物にかけることで、離水防止効果が働いて喫食時の食感が向上するという報告もある（例えば、特許文献５，６参照）。また、ヒアルロン酸を切り花の鮮度保持剤の支持体として利用することについても記載されている（例えば、特許文献７，８参照）。しかしながら、ヒアルロン酸を野菜、果物、花の保湿剤、すなわち鮮度保持剤として利用された例は報告されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００９−１６７１４９号公報
【特許文献２】特開２００８−８１５１１号公報
【特許文献３】特開昭５９−２０４１１２号公報
【特許文献４】特開平２−４２００１号公報
【特許文献５】特開２０１０−４５９７８号公報
【特許文献６】特開２０１０−４５９７９号公報
【特許文献７】特開２００４−３１５４４９号公報
【特許文献８】特開２００４−３１５４５０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、そのまま食しても安全であり、尚かつ鮮度保持効果を発揮する野菜類や花等の植物の鮮度保持剤および植物の鮮度保持方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、上記課題を解決するため鋭意検討を重ねた結果、ヒアルロン酸が植物の鮮度保持効果を発揮することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち本発明は、
（１）ヒアルロン酸を含有する、植物の鮮度保持剤。
（２）ヒアルロン酸を含有しない植物に、上記（１）記載の植物の鮮度保持剤を接触させることを特徴とする、植物の鮮度保持方法。
（３）上記（２）記載の植物の鮮度保持方法によって得られるヒアルロン酸含有植物。
に関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、ヒアルロン酸を含有する植物の鮮度保持剤および該鮮度保持剤を用いた植物の鮮度保持方法を提供することができる。本発明によって得られる良好に鮮度が保持された植物（特に、ヒアルロン酸を含有する野菜や果物）は、直接摂取することができ、栄養・健康的な機能を高める効果も期待できる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】パセリを用いてヒアルロン酸の鮮度保持効果と濃度依存性を示した写真である。
【図２】パセリを用いてヒアルロン酸の分子量による鮮度保持効果の比較およびでんぷんとの効果の比較を示した写真である。
【図３】パセリを用いてヒアルロン酸の分子量による鮮度保持効果の比較を示した写真である。
【図４】チューリップを用いてヒアルロン酸の鮮度保持効果を示した写真である。
【図５】豆芽を用いてヒアルロン酸の鮮度保持効果を示した写真である。
【図６】空心菜の新芽を用いてヒアルロン酸の鮮度保持効果を示した写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明において、「ヒアルロン酸」とは、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンおよびＤ−グルクロン酸の２糖による繰り返し構造からなる直鎖の多糖であればよく、由来は特に制限されないが、例えばストレプトコッカス・ズーエピデミカス等の乳酸菌由来や鶏冠由来等が挙げられる。その特性、分子量、分子量分布等は特に制限されないが、一態様において、ヒアルロン酸の分子量が、植物によって吸収されやすい程度にまで分解され、かつ保水効果を有する分子量であることが好ましく、例えば、平均分子量３９０〜１，５００，０００であることが望ましく、平均分子量７００〜１，１００，０００がさらに望ましく、平均分子量１，０００〜７００，０００が特に望ましい。平均分子量が異なる市販のヒアルロン酸を２種以上混合して用いることもできる。平均分子量は、例えばサイズ排除クロマトグラフィーと多角度光散乱検出器を組み合わせる方法（ＳＥＣ／ＭＡＬＳ，例えば「国立医薬品食品衛生研究所報告」，２００３年，１２１巻，ｐ．３０−３３）やＭｏｒｇａｎ−Ｅｌｓｏｎ法とＣａｒｂａｚｏｌ硫酸法の組み合わせ等により求めることができる（特開２００９−１５５４８６号公報参照）。低分子化されたヒアルロン酸の製造方法については特に限定されないが、例えば酸分解法（特開２００９−１５５４８６号公報参照）や酵素分解法（特開２００９−６０８８８号公報参照）が挙げられる。ヒアルロン酸のカウンターイオンの有無については特に限定されず、例えば遊離型、ナトリウムイオン、カリウムイオン等が挙げられる。
【００１１】
本発明は、ヒアルロン酸を含有しない植物にヒアルロン酸を含有する植物の鮮度保持剤を接触させることによって行う。「ヒアルロン酸を含有する、植物の鮮度保持剤」の調製方法については特に限定されないが、例えば粉末状のヒアルロン酸を水等の溶液に添加して撹拌する方法が用いられる。このときｐＨをアルカリや酸で適宜調整してもよい。ヒアルロン酸の濃度については、ヒアルロン酸が溶解し、かつ鮮度保持効果が確認できるものであればいかなる濃度でもよいが、例えば０．００００１％〜１％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．０００１％〜０．５％（ｗ／ｖ）、さらに好ましくは０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）で用いることができる。なお、ヒアルロン酸の濃度については、例えば競合法（固相に結合させたヒアルロン酸、検体ヒアルロン酸、およびビオチン等で標識したヒアルロン酸結合性タンパク質を競合反応させて、固相に結合させたヒアルロン酸と該標識したヒアルロン酸結合性タンパク質の複合体を形成させ、該結合体の標識物質を測定する方法、例えば、「Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，１９９９年，６３巻，ｐ．８９２−８９５参照）を利用したヒアルロン酸測定キットが販売されており、このようなキットを用いて測定することができる。またはセチルトリメチルアンモニウムブロミドを用いる濁度法（「Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，（米国），１９５６年，２２０巻，ｐ．３０３−３０６参照）やヒアルロン酸分解酵素で分解して得られるオリゴ糖をＨＰＬＣで定量する方法（「Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」，（米国），２００２年，３０２巻，ｐ．１６９−１７４参照）等も挙げられる。この溶液に、その他の物質が添加されてもよく、例えば、コラーゲン等のタンパク類、アルコール類、ビタミン類、塩類、有機酸類、多糖類、エキス類を１種類以上含有してもよい。
【００１２】
本発明において、「ヒアルロン酸を含有しない植物」は、特に限定されないが、例えば野菜、果物、花卉等が挙げられ、異なる種の植物を複数種混合して使用することもできる。野菜としては、葉、茎、実、根、花のいずれか１種類あるいは複数種類の部位が含まれていればすべて使用できる。乱切り、千切り、みじん切り等でカットされていてもよく、例えばミックスサラダ、コールスローサラダ、スティックサラダ等の形態でも使用できる。種子の状態から発芽させたり、新芽（スプラウト）の形態で使用してもよい。野菜の種類については特に限定されないが、例えば、パセリ、ほうれん草、豆（豆芽、もやし等）、空心菜、小松菜、レタス、サラダ菜、チンゲン菜、ブロッコリー、オクラ、大根（カイワレ大根等）、ニンジン、そば、キャベツ、アルファルファ、ルッコラ、クレス、マスタード（からし菜）、バジル、ミント、オレガノ、トマト、ナス、キュウリ、菜の花、春菊、みつば、ラディッシュ、ささげ菜、ひまわり、ガーデンクレス、オニオン、ガーリック、クレソン、シソ、ゴマ等が挙げられる。果物としては、収穫物そのものでよく、脱皮したものやカットしたものを使用することもできる。果物の種類については特に限定されないが、例えば、イチゴ、スイカ、メロン、ブドウ、ミカン、リンゴ、ナシ、モモ等が挙げられる。花卉としては、花もしくはつぼみのいずれかがあれば特に限定されず、茎、葉、根（球根も含む）、実のいずれか１種類あるいは複数種類の部位が含まれていてもよい。花卉の種類については特に限定されないが、例えば、チューリップ、カーネーション、バラ、菊、ガーベラ、ひまわり、リンドウ、マーガレット、ユリ等が挙げられる。
【００１３】
本発明において、ヒアルロン酸を含有しない植物とヒアルロン酸を含有する植物の鮮度保持剤を接触させる方法としては特に限定されないが、植物の鮮度保持剤に含まれているヒアルロン酸が植物体内に吸収される方法が好ましい。例えば、植物全体もしくは一部を植物の鮮度保持剤（ヒアルロン酸溶液）に浸漬する方法が挙げられ、さらに好ましくは切断面の一部や根から、植物の鮮度保持剤に含まれるヒアルロン酸を吸収させる方法が挙げられる。特に、根から吸収させる場合においては、土壌での栽培のみならず、例えば植物工場での水耕栽培のような形態や、スプラウトを栽培するような形態で実施して、ヒアルロン酸含有植物を収穫することもできる。
【００１４】
接触時間については、鮮度保持効果が確認できるものであればいかなる時間でもよいが、例えば１０秒間〜３ヶ月間、好ましくは１分間〜１ヶ月間、さらに好ましくは１０分間〜１週間である。なお、接触時間については、最大の鮮度保持効果だけでなく、植物中に含まれている栄養分の切断面からの溶出も考慮して決定することがさらに好ましい。この間、ヒアルロン酸を含有する植物の鮮度保持剤（ヒアルロン酸溶液）は新鮮なものに適宜交換してもよい。接触条件については、鮮度保持効果が確認できる条件であれば限定されない。例えば、温度は４〜３５℃であり、鮮度保持剤のｐＨは２〜９である。
【００１５】
本発明においては、ヒアルロン酸を含有しない植物とヒアルロン酸を含有する植物の鮮度保持剤を接触させることにより、植物にヒアルロン酸が含有されたかどうかを確かめることができる。ヒアルロン酸の含有量については、サンプルの一部を採取、破砕し、前記のヒアルロン酸の測定方法で定量することができる。
【００１６】
本発明での鮮度保持機能の評価方法については、鮮度を判定できる方法であれば特に限定されないが、例えば数日間保存した後に、容器や平面等に置いたり、直接触ることによって、葉、茎、花のしなびた様子を観察する方法が挙げられる。もしくはサンプルの一部を採取して、水分量を測定する方法が挙げられる。保存の条件については特に限定されず、保存の温度については、例えば冷蔵庫内（２〜１５℃前後）や室温（１５〜３５℃程度）で行うことができ、保存の期間については、例えば０．５日〜１ヶ月程度で行うことができる。
【００１７】
本発明で得られるヒアルロン酸含有植物は、如何なる形態で流通・保存・加工されてもよい。必要に応じて各種包装がなされていてもよく、２〜１０℃程度の低温状態で流通・保存されることが好ましい。本発明で得られたヒアルロン酸含有植物は、食用としても観賞用としても用いることができるが、特に食用としての利用については、安全面や鮮度保持機能のみならず、栄養・健康的な機能の向上も期待できる。
【００１８】
本発明で得られるヒアルロン酸含有植物は、ヒアルロン酸の保水、保湿効果を視覚的に示すアイテムとして用いることができる。媒体については特に限定されず、写真や映像を利用することができる。このような媒体により、保水、保湿効果がわかりやすく示されたヒアルロン酸は、例えば化粧品や健康食品等に配合することができる。
【００１９】
以下、実施例および比較例（単に「実施例等」という場合がある）により本発明をさらに具体的に説明する。ただし、本発明の技術的範囲は、それらの例により何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００２０】
〔パセリを用いたヒアルロン酸による鮮度保持機能１〕
ヒアルロン酸（ＦＣＨ−Ａ、食品添加物グレード、平均分子量２３，７００、キッコーマンバイオケミファ社製）を０．１％（ｗ／ｖ）、０．０５％（ｗ／ｖ）、０．０１％（ｗ／ｖ）となるように水道水（対照品１）に溶解し、試験品１〜３を作製した。
【００２１】
試験品１〜３および対照品１について、市販のパセリを２６℃にて３０分間浸漬した後、水分を切って冷蔵庫内（４℃）に寝かせて４日間保存した。保存後のパセリをビーカーに立てかけたときの様子を図１に示す。
【００２２】
保存２日後に対照品１に浸漬したパセリはしなびていたが、試験品１〜３は鮮度を保持していた。保存４日後には、鮮度保持効果が濃度依存的に現れ、試験品１については若干しなび始めてきたが、試験品２、３については茎がしっかりしており、依然として鮮度を保持していた。
【実施例２】
【００２３】
〔パセリを用いたヒアルロン酸による鮮度保持機能２〕
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン（ナカライテスク社製）とグルクロン酸（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ社製、９８％）を各０．０２５％（ｗ／ｖ）ずつとなるように水道水（対照品２）に溶解し、対照品３を作製した。
ヒアルロン酸（ＦＣＨ−２００、平均分子量２，０００，０００、キッコーマンバイオケミファ社製）を０．０５％（ｗ／ｖ）となるように水道水（対照品２）に溶解し、対照品４を作製した。
デンプン（和光純薬工業社製、１級）を０．０５％（ｗ／ｖ）となるように水道水（対照品２）に溶解し、対照品５を作製した。
【００２４】
ヒアルロン酸（ＦＣＨ−Ａ、食品添加物グレード、平均分子量２３，７００、キッコーマンバイオケミファ社製）を０．０５％（ｗ／ｖ）となるように水道水（対照品２）に溶解し、試験品４を作製した。
【００２５】
対照品２〜５および試験品４について、市販のパセリを２６℃にて３０分間浸漬した後、水分を切って冷蔵庫内（４℃）に寝かせて３日間保存した。保存後のパセリをビーカーに立てかけたときの様子を図２に示す。
【００２６】
対照品２に浸漬したパセリは茎が細くなり、しなびて、葉が垂れて床についていた。一方で、試験品４では茎の太さや硬さがかなり保持されてしなびた具合も低減され、葉も床についていない状態が保たれており、実施例１で示されたヒアルロン酸（平均分子量２３，７００）の鮮度保持機能を再現していた。
一方で、ヒアルロン酸の構成である２種の単糖を混合した対照品３や、分子量２００万の高分子ヒアルロン酸を添加した対照品４では、試験品４のような鮮度保持機能は確認されなかった。
さらに、多糖類の一種であるデンプンを添加した対照品５についても、試験品４のような鮮度保持機能は確認されなかった。
【実施例３】
【００２７】
〔パセリを用いたヒアルロン酸による鮮度保持機能３〕
特開２００９−１５５４８６号公報記載の方法にて作製した低分子化ヒアルロン酸（平均分子量２，０００）、ヒアルロン酸  ＦＣＨ−Ａ（平均分子量２３，７００、キッコーマンバイオケミファ社製）、ＦＣＨ−８０（平均分子量８００，０００、キッコーマンバイオケミファ社製）およびＦＣＨ−１２０（平均分子量１，２００，０００、キッコーマンバイオケミファ社製）をそれぞれ０．１％（ｗ／ｖ）となるように水道水（対照品６）に溶解し、２Ｎ  水酸化ナトリウム溶液にてｐＨを７．５に調整して、試験品５〜８を作製した。
【００２８】
対照品６および試験品５〜８の中に、市販のパセリの茎の切り口部分を浸漬し、２６℃にて２時間放置した後に、冷蔵庫内（４℃）に寝かせて２日間保存した。保存後のパセリをビーカーに立てかけたときの様子を図３に示す。
【００２９】
試験品５（平均分子量２，０００）および試験品６（平均分子量２３，７００）について、高い鮮度保持機能が確認された。
【００３０】
対照品６および試験品５〜８を吸収させたパセリの組織中のヒアルロン酸量を以下の方法で測定した。まず茎および葉を含む組織を２ｇずつ採取して、乳鉢ですりつぶし、水分を回収するとともに、残渣を水２ｍｌで洗浄して合わせて回収した。トリクロロ酢酸を１０％添加、混合した後、遠心処理して上清を回収した。得られた上清の体積の２倍量のエタノールを添加、混合した後、遠心処理して上清を廃棄した。沈殿を２００μｌの水に溶解した後、適宜希釈してヒアルロン酸測定キット（生化学バイオビジネス社製）を用いて、ヒアルロン酸量を測定した。結果を表１に示す。
【００３１】
【表１】
0005932277.tif 000002
【００３２】
パセリの茎からヒアルロン酸溶液が吸収され、組織内にヒアルロン酸が存在していることが確認された。（用いたヒアルロン酸測定キットは競合法の原理に基づいており、分子量が小さいヒアルロン酸については低値となる。）
【実施例４】
【００３３】
〔チューリップを用いたヒアルロン酸による鮮度保持機能〕
ヒアルロン酸（ＦＣＨ−Ａ、食品添加物グレード、平均分子量２３，７００、フードケミファ社製）を０．０５％（ｗ／ｖ）となるように水道水（対照品７）に溶解し、試験品９を作製した。
【００３４】
試験品９及び対照品７について、市販のチューリップの茎の切断部分を２６℃にて３０分間浸漬した後、冷蔵庫内（４℃）に寝かせて１日間保存した。保存後のチューリップをメスシリンダーに立てかけたときの様子を図４に示す。
【００３５】
保存１日後に対照品７で処理したチューリップは、葉はしなびて垂れ下がり、花びらもつやを失い、茎も柔らかくなって花の重みで著しく曲がっていた。一方で試験品９については、花の重みで茎はたわんでいたが、対照品７のように垂れて曲がっておらず、茎そのものも水分が保持されて硬さを保っていた。葉も鮮度を保って伸びており、花びらにもつやがあり、鮮度保持効果が確認された。
【００３６】
〔豆芽を用いたヒアルロン酸による鮮度保持機能〕
試験品９および対照品７について、市販の豆芽（とうみょう、えんどう豆由来、村上農園社製）を包装から丁寧に取り出して、根が絡まったスポンジごと、そのまま３ｌのポリビーカーに入れ、葉や茎の上部に触れないようにそれぞれ２００ｍｌずつ添加し、２６℃にて１６時間放置した。一部について、茎をカットして十分に水洗して水分をペーパータオルで除去した後、２６℃にて３時間放置した。保存後の豆芽をビーカーに立てかけたときの様子を図５に示す。
【００３７】
対照品７を吸収させた豆芽は茎がしおれていたが、試験品９を吸収させた豆芽は鮮度を保持していた。
【００３８】
対照品７および試験品９を根から吸収させた豆芽の組織中のヒアルロン酸量を以下の方法で測定した。まず茎および葉を含む組織を２ｇずつ採取して、乳鉢ですりつぶし、水分を回収するとともに、残渣を水１ｍｌで洗浄して合わせて回収した。トリクロロ酢酸を１０％添加、混合した後、遠心処理して上清を回収した。得られた上清の体積の４倍量のエタノールを添加、混合した後、遠心処理して上清を廃棄した。沈殿を５００μｌの水に溶解した後、適宜希釈してヒアルロン酸測定キット（生化学バイオビジネス社製）を用いて、ヒアルロン酸量を測定した。結果、対照品７を吸収させた豆芽ではヒアルロン酸は検出限界以下であったが、試験品９を吸収させた豆芽からは０．４μｇ／ｇのヒアルロン酸を検出することができ、ヒアルロン酸が根から吸収されることを確認した。
【００３９】
〔空心菜の新芽を用いたヒアルロン酸による鮮度保持機能〕
試験品９および対照品７について、市販の空心菜の新芽（中津川サラダ農園社製）を包装から丁寧に取り出して、根が絡まったスポンジごと、そのまま１ｌのポリビーカーに入れ、葉や茎の上部に触れないようにそれぞれ１５０ｍｌずつ添加し、２６℃にて１６時間放置した。一部について、茎をカットして十分に水洗して水分をペーパータオルで除去した後、２６℃にて３時間放置した。保存後の様子を図６に示す。
【００４０】
対照品７を吸収させたサンプルは葉がしなびていたが、試験品９を吸収させたサンプルは鮮度を保持していた。
【００４１】
対照品７および試験品９を根から吸収させた空心菜の新芽の組織中のヒアルロン酸量を先の豆芽と同様の方法で測定した。結果、対照品７を吸収させた豆芽ではヒアルロン酸は検出限界以下であったが、試験品９を吸収させた豆芽からは０．０２μｇ／ｇのヒアルロン酸を検出することができ、ヒアルロン酸が根から吸収されることを確認した。
【産業上の利用可能性】
【００４２】
本発明の植物の鮮度保持剤を用いると、野菜、果物、花などの植物の鮮度を良好に保持することができる。特に、ヒアルロン酸を含有する野菜や果物は、直接摂取することができ、栄養・健康的な機能を高める効果も期待できるため、産業上極めて有用である。
【図１】
0005932277.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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