(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジアリールヨードニウム塩前駆体からフッ素１８標識フルマゼニルを製造する方法であって、
前記ジアリールヨードニウム塩前駆体及びフッ素１８を、クリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）から選択される相間移動触媒と共に１３０〜１６０℃で反応させることを含み、
前記ジアリールヨードニウム塩前駆体は、下記化学式１で示され、
【化１】
0006035328.tif 000009
化学式１
式中、Ａｒ−は、
【化２】
0006035328.tif 000010
であり、
Ｘ−はトリフルオロメタンスルホネート（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、パーフルオロＣ２−Ｃ１０アルキルスルホネート（ｐｅｒｆｌｕｏｒｏＣ２−Ｃ１０ａｌｋｙｌ ｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ）、トリフルオロアセテート（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ）、テトラフェニルボラート（ｔｅｔｒａｐｈｅｎｙｌｂｏｒａｔｅ）、トルエンスルホネート（ｔｏｌｕｅｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、Ｂｒ−、およびＣｌ−の中から選択されるいずれか一つであり、
前記反応は、反応溶媒に２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）を添加して反応させて行われる、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、［１８Ｆ］フルマゼニルの製造方法に係り、さらに詳しくは、多様なジアリールヨードニウム塩（ｄｉａｒｙｌｉｏｄｏｎｉｕｍ ｓａｌｔ）前駆体から、フッ素１８で標識された［１８Ｆ］フルマゼニル （［１８Ｆ］ｆｌｕｍａｚｅｎｉｌ）を合成する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
てんかん患者の大部分は薬物治療で相当な効果を得るが、てんかん患者の約１０〜１５％は効果がほとんどないと報告されている。このようなてんかん患者において発作を起こし始める頭脳病巣を手術で治療する方法はてんかん治療の非常に重要な分野である。このためには、てんかん病巣部位を正確に把握しなければならないが、このような部位を把握するためにはてんかん病巣部位のベンゾジアゼピン受容体（ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ）を画像化し、定量化することができなければならない。
【０００３】
正常脳において、ベンゾジアゼピン受容体は大脳皮質、小脳および視床に高濃度で存在し、その他にも、尾状核に低濃度で存在する。ベンゾジアゼピン受容体は、てんかん誘発病巣で濃度が減少し、これを用いてベンゾジアゼピン受容体の画像をてんかん誘発病巣の局所化およびてんかんの鑑別診断に応用することができる。
【０００４】
てんかん活性病巣を診断する方法としては磁気共鳴画像（ＭＲＩ）、単一光子放射断層撮影（ＳＰＥＣＴ：ｓｉｎｇｌｅ ｐｈｏｔｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｃｏｍｐｕｔｅｄ ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ：ｐｏｓｉｔｒｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）、発作間欠期の表面脳波検査、発作時の表面脳波検査などの様々な方法があるが、これらの中でも最も広く用いられる診断方法である磁気共鳴画像は頭脳の構造的変化がある場合にのみ病巣を探し出すことができるが、単一光子放射断層撮影と陽電子放射断層撮影は構造的変化がくる前の、生化学的変化のみある場合にも病巣を探し出すことができるので、より初期にてんかん病巣を診断し且つより正確に活性病巣部位を診断することができるという利点がある。
【０００５】
陽電子放射断層撮影によっててんかん部位を画像化するためにはてんかんの代謝或いは生化学的変化について知らなければならないが、現在てんかんの画像のために最も広く用いられる放射性医薬品はフッ素１８で標識されたフルオロ−デオキシグルコース（［１８Ｆ］ＦＤＧ：［１８Ｆ］Ｆｌｕｏｒｏ−ｄｅｏｘｙｇｌｕｃｏｓｅ）である。フルオロ−デオキシグルコースはブドウ糖代謝程度を画像化するので、頭脳の代謝活性状態を示し、脳のブドウ糖代謝評価を陽電子放射断層撮影画像として示す。このようなフルオロ−デオキシグルコースを用いて多くの研究が行われた。その結果、発作間欠期にてんかん部位のブドウ糖代謝が低下していることが確認された。ところが、脳の場合、基本的にフルオロ−デオキシグルコースの吸収が高くてＳ／Ｎ（ｓｉｇｎａｌ ｔｏ ｎｏｉｓｅ）比が低いうえ、てんかん活性病巣以外の周辺にも影響を及ぼして実際のてんかん病巣より少しさらに広い部位に代謝が低下して見えるという欠点がある。また、発作病巣に対する陽電子放射断層撮影画像の信頼性が低下し或いはブドウ糖代謝に影響を及ぼしうる他の薬物または身体的条件に影響されるおそれがあるため、フルオロ−デオキシグルコース単独で診断するには限界がある。
【０００６】
一方、陽電子放射断層撮影画像に使われる数多くの陽電子放出核種の中でも、サイクロントロンで生産される放射性同位元素は、炭素１１（ｔ１／２＝２０．４分）、窒素１３（ｔ１／２＝９．９８分）、酸素１５（ｔ１／２＝２．０３分）、フッ素１８（ｔ１／２＝１０９．８分）、銅６４（ｔ１／２＝１２．７分）、ヨウ素１２４（ｔ１／２＝４．２日）、および発生器で生産されるガリウム６８（ｔ１／２＝６８．０３分）などがある。ベンゾジアゼピン受容体の遮断剤として最も広く用いられる医薬品「フルマゼニル」として炭素１１標識［１１Ｃ］のフルマゼニルを用いて陽電子放射断層撮影画像を得た結果、フルオロ−デオキシグルコースとの比較の際にてんかん病巣の局所化をさらに正確に画像として提供すると知られている。このような炭素１１で標識された［１１Ｃ］フルマゼニルは、ベンゾジアゼピン受容体ターゲット医薬品であるフルマゼニルの化学的構造および化学的性質が全く変わらないという長所がある。ところが、半減期が２０分とあまり短いため、標識作業を行うときに短時間で行わなければならず、放射線被爆が多く、標識後にも速く使用しなければならないという欠点があり、一度生産の際に保有の陽電子放射断層撮影装備の数によって最大２名の患者にのみ適用することができるという欠点がある。
【０００７】
これに対し、陽電子放出核種のフッ素１８は、比較的長い半減期（ｔ１／２＝１０９．８分）を有し、有機合成法による標識方法が容易であるので、時間のかかる放射性医薬品の合成と遅く進行する生理代謝の研究に利用することができる。したがって、フルマゼニルが有するフッ素１９の代わりに、薬物の体内活性を実時間の陽電子放射断層撮影画像から分析することが可能な放射性同位元素のフッ素１８でより簡便かつ効率的に標識されたフルマゼニルが求められている実情である。今まで、フッ素１８で標識された［１８Ｆ］フルマゼニル（［１８Ｆ］ＦＭＺ）の合成は、 ニトロ−マゼニル（ＮＯ２−ｍａｚｅｎｉｌ）前駆体から標識することにより達成されたが、放射性化学収率（ｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｙｉｅｌｄ）が５〜２０％と相対的に低いため、数名以上の患者に利用されるには問題点がある。また、大量合成によって臨床研究需要に合わせるための自動合成装置の応用においても現在まで約１％以下の収率でのみ可能な状態であり、未だ自動合成装置を用いて量産された［１８Ｆ］フルマゼニルは報告されたことがない。これを補完するために、他の研究機関では、フルマゼニル誘導体として、フッ素１８フルオロエチルフルマゼニル（［１８Ｆ］ＦＥＦＭＺ、（５−（２’− ［１８Ｆ］ｆｌｕｏｒｏｅｔｈｙｌ）ｆｌｕｍａｚｅｎｉｌ））とフッ素１８フルオロフルマゼニル（［１８Ｆ］ＦＦＭＺ、（２’− ［１８Ｆ］ｆｌｕｏｒｏｆｌｕｍａｚｅｎｉｌ）が開発されたが、フルマゼニルとは異なる化学的構造および薬物動体学的特性（ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ）を示す。また、脂肪族位置にフッ素１８を標識した構造により体内でフッ素１８が脱フッ素化（ｄｅｆｌｕｏｒｉｎａｔｉｏｎ）されてＳＮ比が低く、フルマゼニルの画像ではなくフッ素１８標識代謝物質の非標的部位の画像により脳のベンゾジアゼピン受容体ＰＥＴ画像の質を低めるという欠点を持っているため、臨床研究に広く用いられてはいない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、てんかん病巣部位を診断する方法の一つである陽電子放射断層撮影画像に使われる放射性医薬品を効果的に合成する方法を提供するもので、炭素１１に比べて相対的に長い半減期を有するフッ素１８で標識された［１８Ｆ］フルマゼニルを高収率で合成しようとする。
【０００９】
また、本発明では、［１１Ｃ］フルマゼニルのような薬物動態学的特性を有しながら炭素１１より半減期が長いフッ素１８で標識された［１８Ｆ］フルマゼニルを新しいジアリールヨードニウム前駆体を用いて高収率で合成し、自動化装置に適用して量産を可能とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記目的を達成するために、本発明は、陽電子放射断層撮影画像に使われる陽電子放出核種の中でも相対的に長い半減期を有するフッ素１８で標識された［１８Ｆ］フルマゼニルを提供し、ジアリールヨードニウム塩前駆体（８ａ〜８ｈ）を用いて前記［１８Ｆ］フルマゼニルを合成するにあたっての最適の反応条件を提供する。
【００１１】
フッ素１８で標識するために、既存の前駆体であるニトロ−マゼニル（ＮＯ２−ｍａｚｅｎｉｌ）の代わりに、ジアリールヨードニウム塩前駆体を使用した。ジアリールヨードニウム塩前駆体を用いた親核性芳香族フッ素１８標識は、ヨウ素を中心として両側に位置した芳香族環間の相対的な電子密度に影響されて選択的により電子密度の少ない芳香族環にフッ素１８が置換される標識法である。このようなフッ素１８標識の選択性を考慮して、それぞれ異なる電子密度を有する８種のジアリールヨードニウム前駆体を合成した。その中の６種を用いてフッ素１８標識研究を行った。
【００１２】
標識反応は、溶媒として、アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ；ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ；Ｎ，Ｎ−ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ；ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）などを使用し、フッ素１８標識反応性を増加させるために、相間移動触媒としてはクリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）、テトラブチルアンモニウムヒドロキシド（ＴＢＡＯＨ）、テトラブチルアンモニウムビカーボネート（ＴＢＡＨＣＯ３）を使用した。ジアリールヨードニウム塩前駆体は、加熱条件または塩基条件で自体のラジカル生成により不安定であるので、ラジカルスカベンジャー（ｓｃａｖｅｎｇｅｒ）である２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）の使用と多様な反応時間、反応温度によるジアリールヨードニウム塩前駆体の標識収率をモニタリングした。
【００１３】
様々な反応条件の中でもラジカルスカベンジャーが存在し、反応溶媒としてアセトニトリルとジメチルスルホキシドよりジメチルホルムアミドを使用するときに高い［１８Ｆ］フルマゼニル標識収率を得た。また、反応温度は１５０℃のときに最適であった。相間移動触媒は大部分の前駆体でクリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）を使用するときに最も良い結果を示した。
【００１４】
使用された６種のジアリールヨードニウム塩前駆体（８ａ〜８ｆ）のうち、相対的に高い電子密度を有する２−チオフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｂ）および３−チオフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｃ）、４−メトキシ−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｄ）および３−メトキシフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｅ）がより高い標識収率を有すると予想されるにも拘らず、４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｆ）が塩基条件を問わず高い収率を得た。このような結果は、ジアリールヨードニウム塩前駆体の２つのアリール基が有する電子密度、そして標識反応時の加熱条件と塩基条件での安定性が芳香族フッ素１８標識反応において非常に重要な要素であることを示唆する。すなわち、ジアリールヨードニウム塩前駆体の中の４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｆ）は、標識条件下で安定性と反応性が高いため、［１８Ｆ］フルマゼニルの合成に最も適した前駆体であることが証明されたと共に、自動化装置を用いた標識においても量産が可能であった。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、ジアリールヨードニウム塩前駆体を用いてフッ素１８標識反応と高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ；ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）分離過程を通じて７０〜７５％の高収率（従来より最大６倍増進）で得ることができるため［１８Ｆ］フルマゼニル合成方法として容易であり、総合成時間が５５分と短いため、経時的に放射能量が減少する放射性同位元素の特性上、短時間で［１８Ｆ］フルマゼニルを合成してベンゾジアゼピン受容体画像研究に利用することができるという利点がある。
【００１６】
また、［１８Ｆ］フルマゼニル合成方法を自動合成装置に適用して生産した場合、６９〜７１％の放射化学的収率（ｄｅｃａｙ−ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ）と９８％超過の放射化学的純度で量産することができ、総合成時間は６０分であった。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】多様な放射性同位元素が導入されたフルマゼニル誘導体の構造を示す図である。
【図２】ジアリールヨードニウム塩とフッ素１８との標識反応を示す図である。
【図３】［１８Ｆ］フルマゼニルの高性能液体クロマトグラフィー分離［ｓｅｍｉ−ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ Ｃ−１８ ｃｏｌｕｍｎ；ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：３ｍＬ／ｍｉｎ；溶媒（２０％ ＣＮ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ）；ｂｌａｃｋ ｌｉｎｅ；ＵＶ−２５４、ｒｅｄ ｌｉｎｅ：ｇａｍｍａ ｒａｙ］結果を示すグラフである。
【図４】［１８Ｆ］フルマゼニルの自動合成装置における高性能液体クロマトグラフィー分離［ｓｅｍｉ−ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ Ｃ−１８ ｃｏｌｕｍｎ；ｆｌｏｗ ｒａｔｅ：４．５ｍＬ／ｍｉｎ；溶媒（２０％ ＣＮ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ）；ｇａｍｍａ ｒａｙ、ｂｏｔｔｏｍ：ｕｐｐｅｒ：ＵＶ−２５４］結果を示すグラフである。
【図５】［１８Ｆ］フルマゼニルと基準物質［１９Ｆ］フルマゼニルの高性能液体クロマトグラフィーへの同時注入後に得たクロマトグラムである（ｂｌａｃｋ ｌｉｎｅ：ＵＶ−２５４、ｒｅｄ ｌｉｎｅ：ｇａｍｍａ ｒａｙ）。
【図６】多様なジアリールヨードニウム塩前駆体の標識過程である加熱条件および塩基条件の下で相対的不安定性を示すグラフである。
【図７】多様なジアリールヨードニウム塩前駆体のフッ化セシウム（ＣｓＦ）下での相対的反応性を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本明細書および請求の範囲に使用された用語または単語は、発明者が自分の発明を最善の方法で説明するために用語の概念を適切に定義することができるという原則に基づいて、本発明の技術的思想に符合する意味と概念で解釈されるべきである。
【００１９】
本発明の一実施例に係る［１８Ｆ］フルマゼニルの製造方法において、ジアリールヨードニウム塩前駆体は、下記化学式１を満足し、
【化１】
0006035328.tif 000002
化学式１

式中、Ａｒ−は下記アリール（Ａｒ−）基の中から選ばれるいずれか一つであり、Ｘ−はトリフルオロメタンスルホネート（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ ｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、パーフルオロＣ２−Ｃ１０アルキルスルホネート（ｐｅｒｆｌｕｏｒｏ Ｃ２−Ｃ１０ａｌｋｙｌ ｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ）、トリフルオロアセテート（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ）、テトラフェニルボラート（ｔｅｔｒａｐｈｅｎｙｌｂｏｒａｔｅ）、トルエンスルホネート（ｔｏｌｕｅｎｅ ｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、Ｂｒ−、およびＣｌ−の中から選ばれるいずれか一つであることを特徴とする。
【化２】
0006035328.tif 000003
アリール（Ａｒ−）基
【００２０】
また、本発明の他の実施例に係る［１８Ｆ］フルマゼニルの製造方法において、ジアリールヨードニウム塩前駆体は、下記化学式２を満足し、
【化３】
0006035328.tif 000004
化学式２
式中、−Ａｒは
0006035328.tif 000005
であり、Ｒ１〜Ｒ３はＨ、Ｃ１アルキル、Ｃ２アルキル、Ｃ１ハロアルキル、およびＣ２ハロアルキルの中から選ばれるいずれか一つであり、Ｘ−はトリフルオロメタンスルホネート（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ ｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、パーフルオロＣ２〜Ｃ１０アルキルスルホネート（ｐｅｒｆｌｕｏｒｏ Ｃ２−Ｃ１０ａｌｋｙｌ ｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ）、トリフルオロアセテート（ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔａｔｅ）、テトラフェニルボラート（ｔｅｔｒａｐｈｅｎｙｌｂｏｒａｔｅ）、トルエンスルホネート（ｔｏｌｕｅｎｅ ｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、Ｂｒ−、およびＣｌ−の中から選ばれるいずれか一つであることを特徴とするヨードニウム塩前駆体である。
【００２１】
まず、<反応式１>を参照して、ジアリールヨードニウムトシレート（ｄｉａｒｙｌｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）前駆体を合成する方法について説明する。
【００２２】
イサト酸無水物（ｉｓａｔｏｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ）（２）をサルコシン（ｓａｒｃｏｓｉｎｅ）、ジメチルスルホキシド（Ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）で加熱して４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（３）を合成した。このような４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（３）は、酢酸で臭素、酢酸ナトリウムと共に臭化反応を介して７−ブロモ−４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（４）を得た。７−ブロモ−４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（４）をエチルイソシアノアセテート（ｅｔｈｙｌ ｉｓｏｃｙａｎｏａｃｅｔａｔｅ）と反応させてイミダゾベンゾジアゼピン（エチル８−ブロモ−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート）（５）を得た。エチル８−ブロモ−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート（５）をトリブチルスズ（ｔｒｉｂｕｔｙｌｔｉｎ）とテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム［（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ］と共に反応を行って有機スズ化合物（エチル５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−８−トリブチルスタニル−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート）（６）を合成した。前記有機スズ化合物（エチル５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−８−トリブチルスタニル−４Ｈ−イミダゾ[１，５−ａ]［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート）（６）は、ヒドロキシ（トシルオキシ）ヨードベンゼン（Ｋｏｓｅｒ’ｓ ｒｅａｇｅｎｔ；［ｈｙｄｒｏｘｙｌ（ｔｏｓｙｌｏｘｙ）ｉｏｄｏ］ｂｅｎｚｅｎｅ）（７ａ）および多様なヒドロキシ（トシロキシ）ヨードアレン（７ｂ〜７ｈ）と反応してジアリールヨードニウムトシレート前駆体８ａ〜８ｈを合成した。
【化４】
0006035328.tif 000006
反応式１．ジアリールヨードニウムトシレート（ｄｉａｒｙｌｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）前駆体の製造方法
【００２３】
一般に、所望の芳香族位置にフッ素１８を標識するためには、ｏｒｔｈｏ−またはｐａｒａ−位置にカルボニル基またはニトロ基などの電子求引基（ＥＷＧ、Ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｗｉｔｈｄｒａｗｉｎｇ ｇｒｏｕｐ）が存在すればこそ、効果的にニトロ基またはハロゲンなどの離脱基の位置に親核性芳香族フッ素１８を標識することができる制限性を持っている。これとは異なり、ジアリールヨードニウム塩は、電子求引基なしで芳香族環（ａｒｏｍａｔｉｃ ｒｉｎｇ）に親核性フッ素１８を標識することができるという利点がある。ジアリールヨードニウム塩を用いた芳香族フッ素１８標識メカニズムは、図２のＡとＢの芳香族化合物間の標識段階を表現したものであって、フッ素１８陰イオンはジアリールヨードニウム塩前駆体の電子が足りない芳香族位置（Ｂ ｒｉｎｇ）を攻撃し、Ａ ｒｉｎｇの電子が多いほどＢのフッ素１８標識収率は増加する。
【００２４】
したがって、相対的にマゼニルより電子が多い環を有するフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ａ）、２−チオフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｂ）、３−チオフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｃ）、ｐ−メトキシフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｄ）、ｍ−メトキシフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｅ）、ｐ−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｆ）、ｍ−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｇ）、ｐ−エチルフェニル−マゼニル−ヨードニウムトシレート（８ｈ）などの多様なジアリールヨードニウム塩前駆体を製造した。
【００２５】
前記ジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｈ）から［１８Ｆ］フルマゼニルを製造するにあたっての反応条件を考察すると、次のとおりである。
【００２６】
サイクロトロンで生産されたフッ素１８は、Ｃｈｒｏｍａｆｉｘ(R)（ＰＳ−ＨＣＯ３）カートレッジに吸着した後、テトラブチルアンモニウムビカーボネート、テトラブチルアンモニウムヒドロキシドおよびクリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）などの相間移動触媒を含むメタノール／水で溶出させた。抽出された溶媒を共沸蒸留（ａｚｅｏｔｒｏｐｉｃ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ）によって乾燥させた後、０．５ｍＬの反応溶媒に溶解したジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｆ）と、前記反応混合物を適正の温度で１５分間攪拌した。合成されたフッ素１８の標識収率はシリカゲルの塗布されたＴＬＣ（ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）に反応混合物をのせた後、展開溶媒である１０％のメタノール／ジクロロメタンを用いて展開し、これをＲａｄｉｏ−ＴＬＣ（ｒａｄｉｏ−ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）スキャナーで確認した。
【００２７】
［１８Ｆ］フルマゼニル合成の最適化のために、反応温度、溶媒、前駆体の量、相間移動触媒の種類、ジアリールヨードニウムトシレート前駆体の種類、および相間移動触媒に含有された塩基／前駆体のモル比による［１８Ｆ］フルマゼニル標識収率をモニタリングした。
【表１】
0006035328.tif 000007
ａ全ての反応は８ａ〜８ｆ（４ｍｇ）と２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル自由ラジカルＴＥＭＰＯ（１ｍｇ）、多様な塩基（０．８当量）を所定の温度でジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）溶媒を用いて１５分間攪拌；
ｂフッ素１８標識収率はｒａｄｉｏ−ＴＬＣで決定（ｎ＝２または３）；
ｃ２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルラジカルスカベンジャー（ＴＥＭＰＯ）を使用していない反応条件；
ｄ反応溶媒：ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；
ｅ反応溶媒：アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）；
ｆ反応溶媒：ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；
ｇ反応温度：１３５℃；
ｈ炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）：１．０当量；
ｉ炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）：０．６当量；
ｊ炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）：０．４当量；
ｋ炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）：０．６当量および反応時間：５分；
ｌ炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３）：０．６当量および８ｆ（８ｍｇ）、反応時間１５分。
【００２８】
上記表１はジアリールヨードニウム塩前駆体（８ａ〜８ｆ）を用いた［１８Ｆ］フルマゼニルの標識反応結果を示す表である。
【００２９】
多様な反応条件の中でも、反応溶媒としてジメチルホルムアミド（ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）を使用し、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）の下で１５０℃、５分間反応し、相間移動触媒としてはクリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）を使用するときが最も良い結果を示した。前記２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシルは、ジアリールヨードニウム塩前駆体を用いたフッ素１８の結合反応で付加的に発生するラジカル生成を抑制するために、ラジカルスカベンジャー（ｒａｄｉｃａｌ ｓｃａｖｅｎｇｅｒ）として使用した。ジアリールヨードニム塩は高い温度と塩基条件で不安定であり、ラジカル分解反応によって芳香族炭化水素（Ｈ−ｍａｚｅｎｉｌ）を生成するから、ラジカルスカベンジャーの使用が必要である。反応温度もフッ素１８の結合収率に影響を及ぼす。大部分の前駆体の種類および塩基でフッ素１８の結合収率が最も良い温度は１３０℃以上であった。本実験では、自動合成装置の安定的運営のために１６０℃未満で行うことが良いので、１５０℃でフッ素１８標識反応結果を観察した。
【００３０】
ジアリールヨードニウム塩前駆体（８ｂ〜８ｅ）は一方の芳香族基が相対的にマゼニルの電子密度より高い。よって、フッ素１８をマゼニル芳香族環に高収率で標識することが可能であると予想されるにも拘らず、高い温度、塩基条件の下でフッ素１８標識収率結果が相対的に低かった。このような低い放射性化学収率からみて、ジアリールヨードニウム塩前駆体が有する標識反応条件の下で安定性も重要因子として思われる。
【００３１】
大部分の前駆体において、相間移動触媒は、テトラブチルアンモニウムヒドロキシドおよびテトラブチルアンモニウムビカーボネートよりクリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）の下でフッ素１８の標識収率がさらに良いと確認された。また、使用された前駆体と炭酸カリウムのモル比（ｍｏｌａｒ ｒａｔｉｏ）は、前駆体と炭酸カリウムの比率が１／０．６（８０．４％）であるときに最も良い収率を得ることができた。したがって、次の前駆体と炭酸カリウムのモル比は芳香族フッ素１８の標識反応効率に重要な要素であることを確認することができた。
【００３２】
表１で提示したジアリールヨードニウム塩（８ａ〜８ｆ）を用いたフッ素１８標識反応条件ではジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ｆ）の量（４ｍｇ ｖｓ ８ｍｇ）は収率の向上にあまり影響を及ぼさなかった。反応時間も５分（８１．２％）と１５分（８０．４％）を比較したとき、標識収率にあまり影響を及ぼさなかった。したがって、放射性同位元素の半減期を考慮したとき、短い反応時間がより有用であるので、５分標識反応時間として最適化された。
【００３３】
ジアリールヨードニウム塩前駆体（８ｂ〜８ｅ）は、前駆体（８ａ）より高い電子密度を有する芳香族環を持つため、より高い収率で標識が可能であると予想されるにも拘らず、高い温度、塩基の条件下でフッ素１８標識の収率が相対的に低かった。このような理由で、前駆体の安定性が重要であることを予想することができた。これを証明するために、フッ素１８がない反応条件で前駆体の安定性を分析した。また、相間移動触媒内に塩基がないフッ化セシウム（ＣｓＦ）条件で反応を行ってそれぞれの前駆体の反応性を分析した。下記反応式２は、それぞれのジアリールヨードニウム塩前駆体が塩基および加熱条件で分解されるときに生成される化合物を示す。２種のＩ−マゼニル（９）およびＨ−マゼニル（１０）の生成濃度を測定することにより、ジアリールヨードニウム塩前駆体の安定性を確認することができる。
【化５】
0006035328.tif 000008
反応式２．ジアリールヨードニウムトシレート前駆体の分解反応
【００３４】
フェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ａ）に比べて芳香族環にさらに多くの電子を含んでいるジアリールヨードニウム塩前駆体は、芳香族放射性フッ素１８標識反応条件に影響される。４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩前駆体（８ｆ）は、２−チオフェニル−マゼニルヨードニウム塩、３−チオフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩、３−メトキシフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩および４−メトキシフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩より相対的な低い電子密度を有する前駆体であるにも拘らず、塩基条件を問わず高い収率を示している。このような結果は、ジアリールヨードニウム塩を用いた芳香族フッ素１８標識反応において、前駆体の安定性が前駆体の電子密度と共に非常に重要な要素であることを示す。事実上、ジアリールヨードニウム塩の形態を有する化合物は、一般に高い温度では不安定であると知られている。ジアリールヨードニウム塩の選択性および安定性を確認するために、フッ素１８がない条件で前駆体の不安定性により生成可能なＩ−マゼニル（９）とＨ−マゼニル（１０）などの副産物の生成程度を高性能液体クロマトグラフィーで分析した。ジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｆ）は、高い温度と塩基の下で反応式２のように分解され、「Ａ経路（Ａ ｐａｔｈｗａｙ）」反応の場合にはＩ−マゼニル（９）を生成し、「Ｂ経路（Ｂ ｐａｔｈｗａｙ）」反応の場合にはＨ−マゼニル（１０）を生成する。
【００３５】
それぞれのジアリールヨードニウム塩前駆体を、分解生産物（９、１０）の量を評価するために、フッ素１８を添加せずに１５０℃で１５分間ジメチルホルムアミド、クリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）の下で反応させ、Ｉ−マゼニル（９）とＨ−マゼニル（１０）の濃度を測定することにより、安定性を測定した（図６）。また、ジアリールヨードニウム塩前駆体の［１９Ｆ］フルマゼニルの標識反応性を評価するために、９０℃で１２０分間ジメチルホルムアミド溶媒の下でフッ化セシウム（ｃｅｓｉｕｍ ｆｌｕｏｒｉｄｅ）と共に反応させた（図７）。図６に示したグラフによって前記反応に対する結果を示す。図６において、ｙ軸は［それぞれのヨードニウム塩の副反応生成濃度（８ａ〜８ｆ）／４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩の副反応生成濃度（８ｆ）］の比で示した。図６に示すように、多様なジアリールヨードニウム塩前駆体の中でも特に４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ｆ）が炭酸カリウム、１５０℃の条件下で最も高い安定性を有し、テトラブチルアンモニウムビカーボネートとテトラブチルアンモニウムヒドロキシドなどの他の塩基下でも類似の傾向を示した。
【００３６】
４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ｆ）の安定性を１．００と仮定したとき、フェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ａ）は１．１１と類似の安定性を有し、電子がさらに多い前駆体（８ｂ〜８ｅ）の場合、４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ｆ）に比べて１．３１〜１．７５倍程度不安定であると確認された。
【００３７】
それだけでなく、フッ化セシウムの下でのみ反応させたヨードニウム塩の反応性を実験した結果を、ｙ軸は［それぞれのヨードニウム塩の［Ｆ−１８］ＦＭＺ生成濃度（８ａ〜８ｆ）／４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩の［Ｆ−１８］ＦＭＺ生成濃度（８ｆ）］の比として図７に示した。４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ｆ）は、熱的安定性効果のため、さらに効率よく［１９Ｆ］フルマゼニルを合成することができることを確認することができた。すなわち、４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ｆ）の反応性（［Ｆ−１８］ＦＭＺ生成濃度）を１．００と仮定したとき、他のジアリールヨードニウム塩（８ａ〜８ｅ）の反応性は０．３９〜０．８８倍と低かった。結論的に、４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ｆ）が電子に富む他のジアリールヨードニウムトシレートに比べて安定性および反応性が高く、芳香族フッ素１８標識反応による［１８Ｆ］フルマゼニルの合成に使用される多様なジアリールヨードニウムトシレート前駆体の中でも最も収率が高い理由を証明した。
【００３８】
最適化された［１８Ｆ］フルマゼニルの合成は、フッ素１８（約３．７ＧＢｑ）、ラジカルスカベンジャー、４ｍｇの４−メチルフェニル−マゼニル−ヨードニウム塩（８ｆ）、および相間移動触媒（５．５ｍｇのクリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３））を使用し、ジメチルホルムアミド溶媒の下で１５０℃で５分間熱を加える方法である。この際、放射化学的収率が７０〜７５％である。高性能液体クロマトグラフィーで分離精製（図３）した後の放射性化学純度を９８％以上と得ることができた。放射化学的収率が従来に比べて最大６倍以上増進させることができた。［１８Ｆ］フルマゼニルの合成にかかる総合成時間は分離精製時間を含んで約５５分程度であった。この際、比放射能（ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ）は１４０〜２４４ＧＢｑ／ｍｍｏｌであった。
【００３９】
また、上述した最適化条件を市販の自動合成装置「ＴｒａｃｅｒＬａｂ ＦＸ−ＦＮ」（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社製）に適用して［１８Ｆ］フルマゼニルの生産を試みた。
【００４０】
図４は自動化装置（ＴｒａｃｅｒＬａｂ ＦＸ−ＦＮ）でＨＰＬＣを用いて分離した高性能液体クロマトグラムである。それぞれの試薬バイアルに通常フッ素１８標識放射性追跡子を生産するために使用する方法に従って適用して生産した場合、約６９〜７２％の放射化学的収率と９８％以上の放射化学的純度で生産することができ、総合成時間は約６０分程度であった。
【００４１】
前記自動合成装置で生産した［１８Ｆ］フルマゼニルが正確に合成されたかを判断するために、高性能液体クロマトグラフィーで分離精製した［１８Ｆ］フルマゼニルを基準物質［１９Ｆ］フルマゼニルと同時注入して高性能液体クロマトグラフィーから同時間帯に溶出（図５）することを確認することにより、本発明の条件で合成した放射性医薬品が［１８Ｆ］フルマゼニルであることを確認した。
【００４２】
下記の実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。
【００４３】
試薬会社から入手することが可能な試薬と溶媒は、特別な場合を除いてはいずれも精製せずにそのまま使用した。試薬と溶媒はＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ＵＳＡ）から購入した。それぞれの反応における分離のためのクロマトグラフィー（Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）はシリカゲル（Ｍｅｒｃｋ、２３０〜４００ｍｅｓｈ、ＡＳＴＭ）を用いて行った。全ての反応有無はプレコートプレート（ｐｒｅ−ｃｏａｔｅｄ ｐｌａｔｅ）（Ｍｅｒｃｋ、ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０Ｆ２５４）で観察した。１Ｈ ａｎｄ １３Ｃ ＮＭＲスペクトルはＶａｒｉａｎ ４００−ＭＲ（４００ＭＨｚ）ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒで分析し、ｐａｒｔｓ ｐｅｒ ｍｉｌｌｉｏｎ（ｐｐｍ、δｕｎｉｔｓ）で表した。水（Ｈ２１８Ｏ）はＴａｉｙｏ Ｎｉｐｐｏｎ Ｓａｎｓｏ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｊａｐａｎ）から購入して使用し、フッ素１８はブンダン所在のソウル大学校病院でＫＯＴＲＯＮ−１３ ｃｙｃｌｏｔｒｏｎ（Ｓａｍｙｏｕｎｇ Ｕｎｉｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）を用いて陽子照射（ｐｒｏｔｏｎ ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ）による１８Ｏ（ｐ，ｎ）１８Ｆ反応で製造した。Ｃｈｒｏｍａｆｉｘ(R)ＰＳ−ＨＣＯ３（４５ｍｇ）カートリッジはＭａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ Ｉｎｓ．（Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入し、Ｓｅｐ−Ｐａｋ(R)Ｃ１８ ｐｌｕｓカートリッジはＷａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐ．（Ｕ．Ｓ．）から購入した。ＨＰＬＣはヨウ化ナトリウム放射線感知器（ＮａＩ ｒａｄｉｏｄｅｃｔｏｒ）（Ｒａｙｔｅｓｔ）と紫外線遮断器（ＵＶ−ｄｅｔｅｃｔｏｒ）が取り付けられたＧｉｌｓｏｎ ３２２で行った。ＨＰＬＣ−ｇｒａｄｅ溶媒（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ、Ｕ．Ｓ．）はＨＰＬＣ精製のためにメンブランフィールタリング（ｍｅｍｂｒａｎｅ ｆｉｌｔｅｒｉｎｇ）（０．２２μｍ、Ｗｈａｔｍａｎ）で濾過した後に使用した。Ｒａｄｉｏ−ＴＬＣはバイオスキャン放射線−ＴＬＣスキャナー（Ｂｉｏｓｃａｎ ｒａｄｉｏ−ＴＬＣ ｓｃａｎｎｅｒ）（Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ、Ｕ．Ｓ．Ａ．）を用いて分析した。全ての放射能量はＶｅｅｎｓｔｒａ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）のＶＤＣ−５０５放射能測定器（ａｃｔｉｖｉｔｙ ｃａｌｉｂｒａｔｏｒ）を用いて測定した。別途明示しない限り、放射化学的収率はｄｅｃａｙ−ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎして表示した。自動化生産のための合成装置としてＴｒａｃｅｒＬａｂ ＦＸ−ＦＮ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）製品を用いて生産した。
【実施例】
【００４４】
以下、イサト酸無水物（ｉｓａｔｏｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ）（２）を出発物質として多様なジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｈ）を製造する各段階について具体的に説明する。
【００４５】
第１段階：４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（３）の製造
６．０９ｇ（３７．３ｍｍｏｌ）のイサト酸無水物（ｉｓａｔｏｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ）（２）、３．４９ｇ（３９．２ｍｍｏｌ）のサルコシン（ｓａｒｃｏｓｉｎｅ）および４０ｍＬのジメチルスルホキシド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）の混合物を窒素の下で２時間１８０℃で加熱した。前記混合物を冷やした後、水に希釈させ、クロロホルム（ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ）で３回抽出する。有機層は無水硫酸ナトリウム（ａｎｈｙｄｒｏｕｓ ｓｏｄｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ）上で乾燥させ、有機層を濃縮した。メタノール／ジクロロメタンで再結晶して５．５８ｇ（７９％）の白色固形である４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（３）を製造した（1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.03 (s, 3H), 3.09 (s, 2H), 7.01 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.29 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.48 (td, J = 7.6, 1.6 Hz, 1H), 7.97 (dd, J= 8.0, 1.6 Hz, 1H), 8.63 (s, 1H)）。
【００４６】
第２段階：７−ブロモ−４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（４）の製造
１．５３ｇ（８．０４ｍｍｏｌ）の４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（３）を２０ｍＬの酢酸に溶かした後、１．６５ｇ（２０．１ｍｍｏｌ）の酢酸ナトリウムと１．０３ｇ（２０．１ｍｍｏｌ）の臭素（Ｂｒ２）をゆっくり滴加し、反応混合物を常温で２４時間攪拌した。その後、２００ｍＬの氷水に前記反応混合物を注いで濾過した。ｆｌａｓｈ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（５％メタノール／ジクロロメタン）で分離して白色固形の１．５８ｇ（７５％）の７−ブロモ−４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（４）を製造した（1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.29 (s, 3H), 3.90 (s, 2H), 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.77 (s, 1H)）。
【００４７】
第３段階：エチル８−ブロモ−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ[１，５−ａ]［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート（５）の製造
３６ｍＬ（１ｍｍｏｌ）／２ｍＬのジメチルホルムアミドと５４ｍＬ（１ｍｍｏｌ）／３ｍＬのテトラヒドロフラン（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｕｒａｎ）に溶解させた５．００ｇ（１８．６ｍｍｏｌ）の７−ブロモ−４−メチル−１Ｈ−１，４−ベンゾジアゼピン−２，５−ジオン（４）溶液を０℃に降温した後、前記溶液に６０％、０．８９０ｇ（２２．３ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｈｙｄｒｉｄｅ）を滴加した。２０分間攪拌させた後、４．８０ｇ（２７．９ｍｍｏｌ）のクロロホスホン酸ジエチル（ｄｉｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｃｈｌｏｒｉｄａｔｅ）をゆっくり投入し、前記溶液を氷浴（ｉｃｅ ｂａｔｈ）の下で３０分間攪拌した。２２ｍＬ（１ｍｍｏｌ）／１ｍＬのジメチルホルムアミドに溶解した２．５２ｇ（２２．３ｍｍｏｌ）のイソシアノ酢酸エチル（ｅｔｈｙｌ ｉｓｏｃｙａｎｏａｃｅｔａｔｅ）と６０％、１．０４ｇ（１９．６ｍｍｏｌ）の水素化ナトリウム溶液をカニューレ（ｃａｎｎｕｌａ）を用いて前記溶液にゆっくり滴加した。１ｍＬの酢酸を投入して反応を停止させた後、前記混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を水、塩水（ｂｒｉｎｅ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム（ａｎｈｙｄｒｏｕｓ ｓｏｄｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ）上で乾燥させて有機層を濃縮した。ｆｌａｓｈ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（３％メタノール／ジクロロメタン）で分離精製した後、白色固形である２．００ｇ（２９％）のエチル８−ブロモ−５，６-ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］[１，４]ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート（５）を製造した(1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.45 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 3.25 (s, 3H), 4.21-4.59 (m, 2H and 1H), 5.04-5.37 (m, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 8.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H))。
【００４８】
第４段階：エチル５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−８−トリブチルスタニル−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート（６）の製造
１００ｍＬのトルエンに溶解した３．５２ｇ（９．６７ｍｍｏｌ）のエチル８−ブロモ−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート（５）溶液を１６．８ｇ（２９．０ｍｍｏｌ）のトリブチルスズと０．３３５ｇ（０．２９０ｍｍｏｌ）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムに滴加した。反応混合物はアルゴンガス（Ａｒ ｇａｓ）の環境下で６時間加熱還流させた。混合物を１００ｍＬの酢酸エチル（ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ）に希釈させ、抽出された有機層を水で洗浄した後、有機層を濃縮した。ｆｌａｓｈ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（５％メタノール／ジクロロメタン）で分離精製した後、白色固形である３．７２ｇ（６６％）のエチル５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−８−トリブチルスタニル−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート（６）を製造した（1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 0.90 (t, J = 7.2 Hz, 9H), 1.09-1.16 (m, 6H), 1.28-1.40 (m, 6H), 1.46 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.49-1.59 (m, 6H), 3.26 (s, 3H), 4.22-4.58 (m, 2H and 1H), 5.19 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.71 (dd, J = 8.0, 1.2 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 8.13 (d, J = 0.8 Hz, 1H)）。
【００４９】
第５段階：ジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｈ）の製造
２ｍＬのアセトニトリルに溶解したヒドロキシル（トシロキシ）ヨードーアリール化合物（ｈｙｄｒｏｘｙｌ（ｔｏｓｙｌｏｘｙ）ｉｏｄｏ−ａｒｙｌ ｍｏｉｅｔｙ）（７ａ〜７ｈ）溶液に、アルゴンガス下の常温で２ｍＬのジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）に溶解したエチル５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−８−トリブチルスタニル−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボキシレート（６）を滴加し、２０時間攪拌した。窒素によって前記溶液を蒸発させた後、混合物を１．０ｍＬのエタノールに溶解させ、２０ｍＬのバイアルに移す。前記溶液に過量のジエチルエーテル（ｄｉｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ）で希釈させる。遠心分離を行った後、溶液を除去し、しかる後に、真空で乾燥させてジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｈ）を製造した。
【００５０】
前記８ａは、エチル８−フェニル（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（ｅｔｈｙｌ ８−ｐｈｅｎｙｌ（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［１，５−ａ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.41 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 2.34 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 4.30-4.51 (m, 2H and 1H), 5.13 (bs, 1H), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.55 (td, J = 7.8, 1.6 Hz, 2H), 7.66 (dd, J = 6.8, 1.6 Hz, 2H), 7.71 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.27 (dd, J= 8.4, 1.2 Hz, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.48 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 8.72 (d, J = 2.0 Hz, 1H)）。
【００５１】
前記８ｂは、エチル８−（２−チオフェニル）（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］[１，４]ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（Ｅｔｈｙｌ ８−（２−ｔｈｉｏｐｈｅｎｙｌ）（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［１，５−ａ］[１，４]ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.41 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 2.36 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 4.40-4.62 (m, 2H and 1H), 5.15 (bs, 1H), 7.20-7.23 (m, 3H), 7.69 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.84 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.94 (dd, J = 5.2, 1.2 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 3.6, 1.2 Hz, 1H), 8.31 (s. 1H), 8.47 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 8.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H)）。
【００５２】
前記８ｃは、エチル８−（３−チオフェニル）（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（Ｅｔｈｙｌ ８−（３−ｔｈｉｏｐｈｅｎｙｌ）（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ[１，５−ａ]［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 4.40-4.61 (m, 2H and 1H), 5.16 (bs, 1H), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.67 - 7.71 (m, 3H), 7.73 - 7.75 (m, 1H), 7.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.44 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 8.60 (dd, J = 2.8, 1.2 Hz, 1H), 8.70 (d, J = 2.4 Hz, 1H)）。
【００５３】
前記８ｄは、エチル８−（４−メトキシフェニル）（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（Ｅｔｈｙｌ ８−（４−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［１，５−ａ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 4.39-4.61 (m, 2H and 1H), 5.16 (bs, 1H), 7.08 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.41 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 8.66 (d, J = 2.0 Hz, 1H)）。
【００５４】
前記８ｅは、エチル８−（３−メトキシフェニル）（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（Ｅｔｈｙｌ ８−（３−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［１，５−ａ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.40 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 4.39 -4.61 (m, 2H and 1H), 5.16 (bs, 1H), 7.23-7.26 (m, 3H), 7.46 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.78-7.88 (m, 3H), 8.29 (s, 1H), 8.46 (d, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 8.74 (d, J = 2.0 Hz, 1H)）。
【００５５】
前記８ｆは、エチル８−（４−メチルフェニル）（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（Ｅｔｈｙｌ ８−（４−ｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［１，５−ａ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.41 (s, 3H), 3.22 (s, 3H), 4.39-4.61 (m, 2H and 1H), 5.16 (bs, 1H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.68 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.43 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 2.4 Hz, 1H)）。
【００５６】
前記８ｇは、エチル８−（３−メチルフェニル）（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（Ｅｔｈｙｌ ８−（４−ｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［１，５−ａ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.40 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 4.35 -4.57 (m, 2H and 1H), 5.11 (bs, 1H), 7.28-7.31 (m, 3H), 7.52 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.81-7.89 (m, 3H), 8.27 (s, 1H), 8.40 (d, J = 8.4, 1.8 Hz, 1H), 8.84 (d, J = 1.8 Hz, 1H)）。
【００５７】
前記８ｈは、エチル８−（４−エチルフェニル）（ヨードニウムトシレート）−５，６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−４Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］［１，４］ベンゾジアゼピン−３−カルボン酸塩（Ｅｔｈｙｌ ８−（４−ｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌ）（ｉｏｄｏｎｉｕｍ ｔｏｓｙｌａｔｅ）−５，６−ｄｉｈｙｄｒｏ−５−ｍｅｔｈｙｌ−６−ｏｘｏ−４Ｈ−ｉｍｉｄａｚｏ［１，５−ａ］［１，４］ｂｅｎｚｏｄｉａｚｅｐｉｎｅ−３−ｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ）である（1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.38 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.41 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.60 (q, 2H), 3.22 (s, 3H), 4.39-4.61 (m, 2H and 1H), 5.16 (bs, 1H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.84 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.28 (s, 1H), 8.35 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 8.76 (d, J = 2.4 Hz, 1H)）。
【００５８】
次に、前記第５段階で製造されたジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｆ）から［１８Ｆ］フルマゼニルを標識（製造）する方法について具体的に説明する。
【００５９】
第６段階：フッ素１８で標識された［１８Ｆ］フルマゼニルの標識（製造）方法
サイクロトロン（Ｃｙｃｌｏｔｒｏｎ）で生産されたフッ素１８（３．７〜３７．０ＧＢｑ）をＣｈｒｏｍａｆｉｘ(R)（ＰＳ−ＨＣＯ３）カートリッジに吸着させた後、テトラブチルアンモニウムビカーボネート、テトラブチルアンモニウムヒドロキシドまたはクリプトフィックス２．２．２．／炭酸カリウム（Ｋ２．２．２．／Ｋ２ＣＯ３）塩基を含むメタノール／水で溶出させた。抽出された溶媒をアセトニトリル（０．５ｍＬ×２）と共沸蒸留（ａｚｅｏｔｒｏｐｉｃ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ）によって乾燥させた後、０．５ｍＬの反応溶媒に溶解したジアリールヨードニウムトシレート前駆体（８ａ〜８ｆ）とＴＥＭＰＯ（１ｍｇ）を添加し、適正の反応温度で５分または１５分間反応させた。反応混合物を氷浴で冷やした後、過量の水を加えて希釈させ、Ｃ１８ ｐｌｕｓ Ｓｅｐ−Ｐａｋに分離した。Ｓｅｐ−ｐａｋからアセトニトリルを用いて［１８Ｆ］フルマゼニルを溶出させた後、ＨＰＬＣで分離精製した。人体に無害な１０％以下のＥｔＯＨ／Ｓａｌｉｎｅ溶液に変換させるために、分離された［１８Ｆ］フルマゼニルを過量の水で希釈させた後、Ｃ１８ ｐｌｕｓ Ｓｅｐ−Ｐａｋに分離した。Ｓｅｐ−ｐａｋからエタノール溶液で溶出させた後、Ｓａｌｉｎｅを加えて１０％以下のＥｔＯＨ／Ｓａｌｉｎｅ溶液に調製した。
【００６０】
以上、本発明は限定された実施例および図面によって説明されたが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではなく、本発明の属する分野における通常の知識を有する者であればこのような記載から多様な修正および変形が可能である。
【００６１】
したがって、本発明の範囲は説明された実施例に極限されて定められてはならず、後述する特許請求の範囲だけでなく、この特許請求の範囲と均等なものによって定められるべきである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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