(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト患者の血清中全分子副甲状腺ホルモンを、高カルシウム血症または高リン血症のリスクを増加させることなく安全に低下させるか、あるいは低下した該ホルモンを維持するための医薬組成物であって、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、ワックス状制御放出性担体物質、類脂質性薬剤、及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2のための油性ビヒクルを含む固体又は半固体のワックス状混合物を含む医薬組成物。
【請求項２】
前記ワックス状制御放出性担体物質が非消化性ワックスを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記類脂質性薬剤が、７未満のＨＬＢを有する親油性乳化剤及び１３〜１８のＨＬＢを有する吸収増強剤の混合物を含む、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記類脂質性薬剤がポリグリコール化グリセリドを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記油性ビヒクルが非消化性オイルを含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
ヒト患者の血清中全分子副甲状腺ホルモンを、高カルシウム血症又は高リン血症のリスクを増加させることなく安全に低下させるか、あるいは低下した該ホルモンを維持するための制御放出性経口製剤であって、軟質カプセル中に１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2及びマトリックスを含み、前記マトリックスが前記１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を拘束し、かつ、前記１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を徐々に放出する、制御放出性経口製剤。
【請求項７】
前記マトリックスが胃及び上部小腸中での消化に対して抵抗性である、請求項６に記載の製剤。
【請求項８】
前記マトリックスがワックス系マトリックスである、請求項６又は７に記載の製剤。
【請求項９】
パラフィンワックス、脂肪酸のモノグリセリドおよびジグリセリド、ミネラルオイル、ポリグリコール化グリセリド、及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含む固体又は半固体のワックス状混合物を含む請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物又は製剤。
【請求項１０】
単位投与量につき５μｇ／日未満の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含む請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物又は製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
米国特許法第１１９条第（ｅ）項により２００７年４月２５日出願の米国特許仮出願第６０／９１３８５３号の利益をこれによって請求する。
【０００２】
本開示は、一般に、ビタミンＤ療法のための方法および化合物に関する。より詳細には、本開示は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する組成物、および疾患の治療および予防におけるその投与方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
二次性副甲状腺機能亢進症は、主としてビタミンＤ欠乏症のため発症する障害である。それは、異常に高められた血中副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）濃度によって特徴付けられ、早期の発見および治療が欠如すると、副甲状腺過形成および一連の代謝性骨疾患が付随するようになる。それは、慢性腎臓病（ＣＤＫ）の広く知られた合併症であり、ＣＫＤが進行するにつれて発生率が上昇する。二次性副甲状腺機能亢進症は、健康な腎臓を有する個体でも、十分なビタミンＤの供給を妨げる環境、文化または食事因子によって発症する場合がある。
【０００４】
二次性副甲状腺機能亢進症およびＣＫＤでのその発生に関して、２５−ヒドロキシビタミンＤ3および２５−ヒドロキシビタミンＤ2からビタミンＤホルモン類（まとめて「１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ」）を合成するための主な部位である、隣接ネフロンの進行性細胞喪失が存在する。さらに、機能しているネフロンの喪失は、Ｄホルモンを産生するための反応を触媒する酵素である腎臓の２５−ヒドロキシビタミンＤ−１α−ヒドロキシラーゼの活性を低下させる過剰なリンの保持につながる。これら２つの事象は、ビタミンＤの供給が十分であるのに中度から重度のＣＫＤを有する患者において普通に見出される１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの低い血清中濃度を説明する。
【０００５】
血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の低下は、直接および間接的機構によって、増大した、そして最終的には過剰なＰＴＨ分泌を引き起こす。生じる副甲状腺機能亢進症は、著しく増大した骨代謝回転、およびその続発症である腎性骨ジストロフィーにつながり、該ジストロフィーには、嚢胞性線維性骨炎、骨軟化症、骨粗鬆症、骨外性石灰化、および関連障害、例えば、骨痛、関節周囲炎症およびＭｏｃｋｅｒｂｅｒｇ硬化症などのその他各種疾患を含めることができる。血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の低下は、また、筋力低下、および骨格変形を伴う発育遅滞（最も多くは小児患者で認められる）を引き起こす場合がある。
【０００６】
「ビタミンＤ」は、広くは、ビタミンＤ2、ビタミンＤ3、ビタミンＤ4などと呼ばれる有機物質を指し、時には、カルシウムおよびリンの恒常性に影響を及ぼすそれらの代謝産物およびホルモン性形態を指すのに大まかに使用される用語である。「ビタミンＤ欠乏症」は、広くは、直ぐ上で定義したビタミンＤの低下したまたは低い血中濃度を指す用語である。
【０００７】
ビタミンＤの最も広く認められる形態は、ビタミンＤ2（エルゴカルシフェロール）およびビタミンＤ3（コレカルシフェロール）である。ビタミンＤ2は、植物中でエルゴステロールから日光曝露中に産生され、ヒトの食餌中には限られた量で存在する。ビタミンＤ3は、ヒトの皮膚内で７−デヒドロコレステロールから日光への曝露中に作り出され、また、ヒトの食餌中では、主として酪農製品（牛乳およびバター）、特定の魚および魚油、および卵黄中に、ビタミンＤ2に比べてより大きな量で見出される。ヒトが使用するためのビタミンＤサプリメントは、ビタミンＤ2またはビタミンＤ3のいずれかからなる。
【０００８】
ビタミンＤ2およびビタミンＤ3は、両方とも、肝臓中に存在する１種または複数の酵素によって代謝されてプロホルモンになる。必要とされる酵素は、ＣＹＰ２７Ａ１、ＣＹＰ２Ｒ１、ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｊ３およびことによるとその他をも含む、ミトコンドリアおよびミクロソームのシトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）アイソフォームである。これらの酵素は、ビタミンＤ2を代謝して、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２４（Ｓ）−ヒドロキシビタミンＤ2として知られる２種のプロホルモンに変え、ビタミンＤ3を代謝して２５−ヒドロキシビタミンＤ3として知られるプロホルモンに変える。２種の２５−ヒドロキシル化プロホルモンは、血液中でより重要であり、集合的に「２５−ヒドロキシビタミンＤ」と呼ばれる。ビタミンＤ2およびビタミンＤ3は、同一（または類似の）酵素を含む腸細胞などの特定の上皮細胞中で代謝されて、それらのそれぞれの肝臓外プロホルモンになり得るが、肝外でのプロホルモン産生は、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度へ多分ほとんど寄与しない。
【０００９】
ビタミンＤプロホルモンの肝内および肝外産生の速度は、厳重には調節されておらず、それらの速度は、主として前駆体（ビタミンＤ2およびビタミンＤ3）の細胞内濃度と共に変動する。どちらかの前駆体のより高い濃度は、プロホルモンの産生を高め、一方、より低い濃度は、産生を低下させる。プロホルモンの肝内産生は、過剰な血中ホルモン濃度の防止に明らかに向けられてはいるが十分には判明していない機構を介して、高濃度の２５−ヒドロキシビタミンＤによって阻害される。
【００１０】
ビタミンＤプロホルモンは、さらに、ＣＹＰ２７Ｂ１（または２５−ヒドロキシビタミンＤ3−１α−ヒドロキシラーゼ）として知られる近位腎尿細管中に存在する酵素によって腎臓中で代謝されて強力なホルモンになる。プロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２４（Ｓ）−ヒドロキシビタミンＤ2は、代謝されて１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシビタミンＤ2として知られるホルモンになる。同様に、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、代謝されて１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3（またはカルシトリオール）として知られるホルモンになる。これらのホルモンは、腎臓によって全身送達のために血液中に放出される。血液中で１α，２４（Ｓ）−ジヒドロキシビタミンＤ2に比べてはるかにより重要であるのが通常である２種の１α，２５−ヒドロキシル化ホルモンは、集合的に「１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ」と呼ばれる。ビタミンＤプロホルモンは、ＣＹＰ２７Ｂ１または類似の酵素を含む角化細胞、肺上皮細胞、腸細胞、免疫系の細胞（例えば、マクロファージ）および特定のその他の細胞中で代謝されて腎臓外ホルモンになるが、このような腎外でのホルモン産生は、進行性ＣＫＤにおいて正常な血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を維持する能力がない。
【００１１】
血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度は、ＰＴＨを含むフィードバック機構によって精密に調節される。腎臓の１α−ヒドロキシラーゼ（またはＣＹＰ２７Ｂ１）は、ＰＴＨによって刺激され、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤによって阻害される。血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度が降下すると、副甲状腺は、細胞内ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）を介してこの変化を感知して、ＰＴＨを分泌する。分泌されたＰＴＨは、腎臓のＣＹＰ２７Ｂ１の発現を刺激し、それによって、ビタミンＤホルモンの産生を増大させる。血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度が再び上昇するにつれて、副甲状腺は、さらなるＰＴＨの分泌を減衰させる。血中ＰＴＨ濃度が降下するにつれて、ビタミンＤホルモンの腎臓での産生が減少する。血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の上昇は、また、ＣＹＰ２７Ｂ１によるさらなるビタミンＤホルモンの産生を直接的に阻害する。
【００１２】
サルコイドーシスなどのいくつかの障害において、またはビタミンＤホルモン補充療法でのボーラス投与の結果として発生し得るような、血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度が過剰に高くなる状況で、ＰＴＨの分泌は異常に抑制され得る。ＰＴＨ分泌の過剰抑制は、カルシウム恒常性の撹乱を引き起こす、または悪化させる場合がある。副甲状腺および腎ＣＹＰ２７Ｂ１は、血中ビタミンＤホルモン濃度の変化に鋭敏であり、その結果、血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤは、任意の２４時間中に２０％未満で上下させて厳重に制御される。ビタミンＤホルモンの腎臓での産生と対照的に、腎臓外での産生は、精密なフィードバック制御下にない。
【００１３】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤおよび基質２５−ヒドロキシビタミンＤプロホルモンの血中濃度、ならびにそれらの調節は、また、１α−ヒドロキシビタミンＤ2および１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2などのビタミンＤホルモン類似体によって影響される場合がある。
【００１４】
ビタミンＤホルモンは、ヒトの健康において、細胞内ＶＤＲによって仲介される重要な役割を有する。特に、ビタミンＤホルモンは、食餌性カルシウムの腸吸収および腎臓によるカルシウムの再吸収を制御することによって血中カルシウム濃度を調節する。ビタミンＤホルモンは、また、細胞の分化および増殖の調節、および正常な骨形成および骨代謝に関与する。さらに、ビタミンＤホルモンは、筋骨格、免疫およびレニン−アンジオテンシン系を正常に機能させるのに必要とされる。ビタミンＤホルモンに関するその他多くの役割は、ほとんどあらゆるヒト組織中で報告されている細胞内ＶＤＲの存在に基づいて仮定され、説明されている。例えば、ビタミンＤは、細胞分化および癌において、免疫系の調節（状況に応じて免疫増強または免疫抑制効果）およびアテローム性動脈硬化症において役割を演じると仮定されている。ビタミンＤ欠乏症は、多くの一般的な癌、多発性硬化症、リウマチ様関節炎、高血圧、心血管性心疾患、およびＩ型糖尿病のリスクを高める。
【００１５】
特定組織に対するビタミンＤホルモンの作用は、それらのホルモンがそれらの組織中の細胞内ＶＤＲに結合（または占有）する程度によって左右される。ＶＤＲへの結合は、ホルモンの細胞内濃度が上昇するにつれて増加し、細胞内濃度が降下するにつれて減少する。すべての細胞中で、ビタミンＤホルモンの細胞内濃度は、血中ホルモン濃度の変化に直接的に比例して変化する。上記で考察したように、ＣＹＰ２７Ｂ１（または類似の酵素）を含む細胞中で、ビタミンＤホルモンの細胞内濃度も、血中および／または細胞内プロホルモン濃度の変化に直接的に比例して変化する。
【００１６】
ビタミンＤ2、ビタミンＤ3およびそれらのプロホルモン性形態は、ＶＤＲに対して、ビタミンＤホルモンのそれに比べて少なくとも１００分の１より低いと見積もられる親和性を有し、受容体を効果的に活性化しない。結果として、生理学的濃度のこれらのホルモン前駆体は、ビタミンＤホルモンへの事前の代謝がなければ、あったとしてもわずかな生物学的作用しか発揮しない。しかし、超生理学的濃度のこれらのホルモン前駆体、特に通常に比べて１０〜１，０００倍高い範囲のプロホルモンは、ＶＤＲを十分に占拠し、ビタミンＤホルモンに似た作用を発揮する。
【００１７】
ビタミンＤ2およびビタミンＤ3の血中濃度は、日光曝露および栄養非補給食から継続的で十分なビタミンＤの供給が与えられるなら、ヒトの血液中に安定な濃度で存在するのが通常である。栄養非補給食は、ビタミンＤで補強された食品を含むものでさえビタミンＤ含有量が低いので、食事後に生じる血中ビタミンＤ濃度の増加は、あってもわずかである。ヒトの食餌のビタミンＤ含有量は、そのように低いので、国立保健研究所（ＮＩＨ）は、「天然食品供給源から十分なビタミンＤを得ることは困難である場合がある」と警告している［ＮＩＨ、食餌サプリメント局（Ｏｆｆｉｃｅ  ｏｆ  Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ）、食餌サプリメントデータ表（Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  Ｆａｃｔ  Ｓｈｅｅｔ）；ビタミンＤ（２００５）］。ヒトのビタミンＤ供給のほとんどすべては、強化食品、日光曝露または食餌サプリメントに由来し、最後の供給源がますます重要になりつつある。皮膚内の７−デヒドロコレステロールは、ＵＶ照射によってプレ−ビタミンＤ3に変えられ、そのプレビタミンは、皮膚内で数日にわたって熱転化を受けてビタミンＤ3となった後に血液中に循環するので、血中ビタミンＤ濃度は、上昇するにしても徐々にしか上昇しない。
【００１８】
健康な個体では、血中ビタミンＤホルモン濃度も、一般には１日を通して一定なままであるが、日光曝露の季節的変化またはビタミンＤ摂取量の継続的変化に応答して長期にわたって相当に変化する場合がある。健康な個体の間で、ビタミンＤホルモンの通常濃度に関して著しい差異が普通に観察され、若干の個体は、ほぼ２０ｐｇ／ｍＬ程度の低い、他の者はほぼ７０ｐｇ／ｍＬ程度の高い安定した濃度を有する。この広い通常範囲のため、医療専門家は、血清中総１，２５−ジヒドロキシビタミンＤに関する実験室での孤立的測定値を解釈する上での困難性を有し；２５ｐｇ／ｍＬの値は、ある個体にとっては正常値に、あるいは別の個体では相対的欠乏症に相当する可能性がある。
【００１９】
一時的に低い血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度は、副甲状腺を刺激して、ＰＴＨを短時間分泌させるが、正常な血中ビタミンＤホルモン濃度に戻ると終了する。対照的に、慢性的に低い血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度は、副甲状腺を絶えず刺激してＰＴＨを分泌させ、二次性副甲状腺機能亢進症として知られる障害をもたらす。慢性的に低いホルモン濃度は、また、腸でのカルシウム吸収を低下させ、血中カルシウム濃度の低下（低カルシウム血症）に至らしめ、このことがさらにＰＴＨ分泌を刺激する。絶えず刺激される副甲状腺は、ますます過形成となり、ついにはビタミンＤホルモンによる調節に対する抵抗性を発現する。早期の発見および治療がないと、二次性副甲状腺機能亢進症は、累進的に重症度を増し、骨粗鬆症および腎性骨ジストロフィーを含む弱体化していく代謝性骨疾患を引き起こす。
【００２０】
慢性的に低い血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度は、ＣＫＤにおいて普通に発生する事態である、必要とされるビタミンＤホルモンの供給量を産生するための腎ＣＹＰ２７Ｂ１の不足が存在する場合に発生する。腎ＣＹＰ２７Ｂ１の活性は、機能するネフロンの減少により糸球体濾過値（ＧＦＲ）がほぼ６０ｍＬ／分／１．７３ｍ2未満に降下すると減退する。末期腎疾患（ＥＳＲＤ）において、腎臓が完全に衰え、生存のために血液透析が必要とされる場合、腎ＣＹＰ２７Ｂ１は、まったく存在しないようになることが多い。任意の残存ＣＹＰ２７Ｂ１は、食事性リンの不十分な腎排泄によって引き起こされる高い血清中リン（高リン血症）によって大きく阻害される。
【００２１】
慢性的に低い血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度は、また、ビタミンＤプロホルモンの欠乏のため発生する。なぜなら、腎でのホルモン産生は、必要とされる前駆体がないと進行できないからである。プロホルモンの産生は、しばしば「ビタミンＤ不足」、「ビタミンＤ欠乏症」または「低ビタミンＤ症」などの用語で説明される状態である、コレカルシフェロールおよびエルゴカルシフェロールが供給不足である場合に著しく低下する。したがって、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度の測定は、ヘルスケアー専門家の間で是認されたビタミンＤの状態を監視するための方法になっている。最近の研究は、大部分のＣＫＤ患者が低い血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を有すること、およびビタミンＤ不足および欠乏症の有病率はＣＫＤが進行するにつれて増大することを報告している。
【００２２】
結果として、慢性的に低い血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を最も発生し易い個体は、ＣＫＤを有する者である。ほとんどのＣＫＤ患者は、典型的には、低下した腎ＣＹＰ２７Ｂ１濃度をおよび２５−ヒドロキシビタミンＤプロホルモンの不足を有する。驚くべきことではないが、ほとんどのＣＫＤ患者は、二次性副甲状腺機能亢進症を発症する。残念ながら、ＣＫＤにおける二次性副甲状腺機能亢進症の早期の発見および治療は、まれであり、ましてや予防は稀有である。
【００２３】
米国腎臓財団（Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）（ＮＫＦ）は、最近、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  Ｑｕａｌｉｔｙ  Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ（Ｋ／ＤＯＱＩ）の慢性腎臓病における骨代謝および骨疾患の臨床実践ガイドライン（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  Ｂｏｎｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ）を発表することによって、二次性副甲状腺機能亢進症の早期の発見および治療に対する必要性に関する医療界の注意に焦点をあわせている（Ａｍ．Ｊ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ．４２：Ｓ１〜Ｓ２０２、２００３）。Ｋ／ＤＯＱＩガイドラインは、二次性副甲状腺機能亢進症の主な病因を慢性的に低い血中１，２５−ジヒドロキシビタミン濃度と認め、ＣＫＤのステージ３〜５において、ステージに特異的なＰＴＨ目標範囲に比較して高められた血中ＰＴＨ濃度について規則的にスクリーニングを行うことを推奨した。ＣＫＤのステージ３は、３５〜７０ｐｇ／ｍＬの全分子ＰＴＨ（ｉＰＴＨ）目標範囲を有する中程度に低下した腎臓機能（３０〜５９ｍＬ／分／１．７３ｍ2のＧＦＲ）と定義され；ステージ４は、７０〜１１０ｐｇ／ｍＬのｉＰＴＨ目標範囲を有する激しく低下した腎臓機能（１５〜２９ｍＬ／分／１．７３ｍ2のＧＦＲ）と定義され；ステージ５は、１５０〜３００ｐｇ／ｍＬのｉＰＴＨ目標範囲を有する腎不全（１５ｍＬ／分／１．７３ｍ2未満のＧＦＲまたは透析）と定義される。スクリーニングによりｉＰＴＨ値がＣＫＤのステージ３および４に対して目標とされる範囲を超えていることが明らかになった場合に、ガイドラインは、ビタミンＤ不足または欠乏症の可能性を発見するために、血清中総２５−ヒドロキシビタミンＤの追跡評価を推奨した。３０ｎｇ／ｍＬ未満の２５−ヒドロキシビタミンＤが観察された場合、推奨される介入は、経口で投与されるエルゴカルシフェロールを使用するビタミンＤ充足療法であった。３０ｎｇ／ｍＬを超える２５−ヒドロキシビタミンＤが観察されたなら、推奨される介入は、既知の経口または静脈内ビタミンＤホルモンもしくは類似体を使用する、ビタミンＤホルモン補充療法であった。ガイドラインは、ビタミンＤホルモン補充製品のための包装挿入物中の食品医薬品庁により要求された警告書と一致して、ビタミンＤ充足およびビタミンＤホルモン補充療法の同時適用を推奨しなかった。
【００２４】
ＮＫＦのＫ／ＤＯＱＩガイドラインは、ビタミンＤの十分量を≧３０ｎｇ／ｍＬの血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度と規定した。１６〜３０ｎｇ／ｍＬの血清中２５−ヒドロキシビタミンＤと規定された「ビタミンＤ不足」を有する患者に対して推奨されるビタミンＤ充足療法は、１カ月につき５０，０００ＩＵの経口ビタミンＤ2を６カ月間と規定し、毎月１回の投与、または１日につきほぼ１，６００ＩＵの分割投与のどちらかで与えられた。「ビタミンＤ欠乏症」を有する患者のための推奨される充足療法は、より集中的であり、５〜１５ｎｇ／ｍＬの血清中２５−ヒドロキシビタミンＤとして規定される「軽度」の欠乏症の場合、ガイドラインは、１週につき５０，０００ＩＵの経口ビタミンＤ2を４週間、続いて、１カ月につき５０，０００ＩＵをさらに５カ月間を推奨し；５ｎｇ／ｍＬ未満の血清中２５−ヒドロキシビタミンＤとして規定される「重症」欠乏症の場合、ガイドラインは、５０，０００ＩＵ／週の経口ビタミンＤ2を１２週間、続いて、５０，０００ＩＵ／月をさらに３カ月間を推奨した。１週につき５０，０００ＩＵの投与量は、１日につき７，０００ＩＵにほぼ相当する。
【００２５】
ビタミンＤの代謝および機能に関するほとんどの概念は、実験モデルとしてのラットおよび／またはニワトリを用いて展開されてきた。ビタミンＤの代謝を研究することは、哺乳動物における通常条件下でのビタミンＤ代謝物の通常の循環濃度に関するデータの不足によって妨げられる。最近のほとんどの研究は、ビタミンＤの状態または異常な生理学的状態の指標としての２５−ヒドロキシビタミンＤおよび１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの分析に焦点を合わせている。
【００２６】
ビタミンＤの発見後まもなく、ビタミンＤ2およびＤ3は、ほとんどの哺乳動物において類似の生物学的活性を有することは明らかであると思われた。高感度分析技術の発見および高比活性3Ｈ標識化ビタミンＤ種の利用可能性によって促進されたより最近の研究は、哺乳動物におけるビタミンＤ2とＤ3との代謝の相違は、ことによると広いことを指摘している。最も注目に値するのは、ブタ（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．２０４：１８５〜１８９）、ウシ（Ｊ  Ｎｕｔｒ  １１３：２５９５〜２６００）、およびヒト（Ｇｅｎｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ｆｕｎｃｔｉｏｎ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ、Ｗａｌｔｅｒ  ｄｅ  Ｇｒｕｙｔｅｒ．Ｂｅｒｌｉｎ、ｐｐ７６５〜７６６）によるビタミンＤ2に対する明らかな差別、ならびにラットによるビタミンＤ2の明らかな優先である（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ２０４：１８５〜１８９、Ｊ  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ  ５（Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ２）：Ｓ２６５）。
【００２７】
ビタミンＤおよびその代謝産物は、ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）に結び付けられて脊椎動物の血中に運ばれる。Ｂａｉｒｄらは、タンパク質への結合が、ステロイドの溶解性を高めること、およびステロイドの代謝クリアランス速度が、それらステロイドの特定の血漿中タンパク質への結合に一部依存することを明らかにした（Ｒｅｃｅｎｔ  Ｐｒｏｇ  Ｈｏｒｍ  Ｒｅｓ．２５：６１１〜６６４）。
【００２８】
ＨａｙおよびＷａｔｓｏｎは、６３種の脊椎動物種におけるＤＢＰの２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3に対する親和性を研究した（Ｃｏｍｐ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ５６Ｂ：３７５〜３８０）。彼らは、研究した種の多くが、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の方を選んで、２５−ヒドロキシビタミンＤ2を差別することを見出した（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ２０４：１８５〜１８９）。しかし、ラットにおいて、差別は、ビタミンＤ3に対してであり、ビタミンＤ2を選ぶ。ラットのＤＢＰは、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3に対して等しい親和性を有するが、ビタミンＤ3に比較してビタミンＤ2に対してより低い親和性を有することが知られている（Ｓｔｅｒｏｉｄｓ  ３７：５８１〜５９２）。Ｒｅｄｄｙらは、ビタミンＤ2に対する親和性が低いほど、肝臓内２５−ヒドロキシル化に対して増強された利用可能性をもたらすことを示唆した（Ｃａｌｃｉ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｉｎｔ  ３６：５２４）。それ故、ＤＢＰの存在下で、等量のビタミンＤ2またはビタミンＤ3の基質をラットの肝臓中に灌流する場合、２５−ヒドロキシビタミンＤ3に比較してより多くの２５−ヒドロキシビタミンＤ2が作られた。Ｒｅｄｄｙらによって行われた実験で、灌流媒体から結合タンパク質を除去すると、等量の２５−ヒドロキシビタミンＤ2と２５−ヒドロキシビタミンＤ3とが合成された。集合的に、これらのデータは、異なる形態のビタミンＤに対する差別が、おそらく、親化合物および／またはそれらの１種もしくは複数の代謝産物に対するＤＢＰの親和性の相違に由来する可能性があることを示唆している。差別の機構にかかわらず、これらの相違は、種に対して、それらの環境中で利用可能な最も豊富なビタミンＤ代謝産物の最も効率的な利用を提供するために存在すると思われる。
【００２９】
ビタミンＤ2の代謝経路の完全な解明に関する重大な疑問は、未回答のままであり、かつビタミンＤ2とＤ3の代謝に関する種差は、今なお、事実上調べられていない。薬理学的介入としてのビタミンＤの導入は、それらの代謝、組織動態、作用機構、および潜在的治療用途に関するまったく異なる一連の論争をもたらしてきた。
【００３０】
ビタミンＤ受容体は、人体のいたるところに広範な種類の細胞中に存在し、ビタミンＤホルモンは、ＰＴＨ系に対するその「古典的」効果を超えて、細胞増殖、免疫系および心血管系に対する多様な「非古典的」生物学的効果を有するという報告が存在している。２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、副甲状腺細胞に対してＰＴＨを抑制する上での直接的効果を有することも報告されている（Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、７０（４）：６５４〜６５９、Ａｕｇｕｓｔ  ２００６）。ビタミンＤ2は、ビタミンＤ3の３分の１未満の効力であり、ビタミンＤ3に比較してより短い作用持続時間を示し；５０，０００ＩＵのエルゴカルシフェロールまたはコレカルシフェロールを健康なヒト男性へ投与すると、投与されたビタミンの血清中濃度が同様に上昇し、同等の吸収を示すが、２５−ヒドロキシビタミンＤ2濃度が早期に降下し、１４日目の時点でベースラインと同じであるのに対して、２５−ヒドロキシビタミンＤ3濃度は、１４日目の時点で最高点に達するという１つの報告が存在している（Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．、８９（１１）：５３８７〜５３９１（２００４））。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００３１】
したがって、２５−ヒドロキシビタミンＤ化合物および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ化合物のＰＴＨ抑制に対する相対的寄与、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のインビボでの相対的効力、およびこれら各ホルモンの非古典的な生物学的効果の範囲は、明瞭には解明されていない。理想的には、低い毒性でもってＰＴＨ濃度、免疫状態および／または心血管の健康状態に対して有益な効果を提供する、代わりのビタミンＤ療法がなお必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００３２】
一態様において、本開示は、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与することによって、患者における血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を高めるか、あるいは維持する方法を提供する。上記で言及したように、北方地域に居住することを含む多くの条件が、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ欠乏症につながることがある。治療を必要とするそれら患者の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2での治療は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤに関する患者の正常な経歴の範囲内に高められ、あるいは維持された血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を提供することができる。このような投与は、そのすべてがビタミンＤ化合物での治療を受ける場合のリスクとして認識されている、高カルシウム血症、高リン血症、または血漿中全分子副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）の過剰抑制のリスクを実質的に高めないで、実施することができる。さらに、血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を、投与の間、スパイク状およびトラフ状濃度パターンを排除して、患者の歴史的生理学的範囲に維持することができる。別の態様において、本開示は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ欠乏症の１つまたは複数の症状、例えば、ビタミンＤの非古典的効果に関する欠乏症の症状を軽減するように、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与する方法を提供する。
【００３３】
さらに別の態様において、本開示は、患者に本明細書中の開示により有効量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与することによって、ヒト患者において同時に次の効果、すなわち、血漿中全分子副甲状腺ホルモン濃度を低下させるか、または維持すること；血清中カルシウム濃度を高める、あるいは維持すること；血清中リン濃度を維持すること；血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を高めること；および血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を維持することの１つまたは複数を有する方法を提供する。多くの疾患は、１種を超えるホルモンおよびミネラルの異常な濃度となって現れる。ＣＫＤにおいて、例えば、患者は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの減少、ＰＴＨの増加、および血清中リンの増加を経験する可能性がある。本開示による治療は、これらの各種ホルモンおよびミネラル濃度の同時の平準化および／または維持を提供することができる。
【００３４】
本明細書中の開示は、患者に本明細書中の開示により有効量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与して、疾患を患うヒト患者における血清中副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）濃度を低下させること（または低く維持すること）によって、慢性腎臓病に続発する副甲状腺機能亢進症を治療および／または予防する方法を提供する。該方法は、このような患者で発症することのある腎性骨ジストロフィーを改善または予防できる。
【００３５】
一態様において、ヒト患者における血清中副甲状腺ホルモンを低下させるか、あるいは低下した該ホルモンを維持する方法は、血清中副甲状腺ホルモン濃度を低下させるか、あるいは低下した該ホルモンを維持するために、本明細書中の開示により１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の治療上有効な量、好ましくは、血清中ＰＴＨ濃度を少なくとも１５％、２０％、２５％、または３０％低下させる量、あるいは血清中ＰＴＨ濃度をＣＫＤステージに関する目標範囲（例えば、ステージ３では３５〜７０ｐｇ／ｍＬ（３．８５〜７．７ピコモル／Ｌに相当）、ステージ４では７０〜１１０ｐｇ／ｍＬ（７．７〜１２．１ピコモル／Ｌに相当）、およびステージ５では１５０〜３００ｐｇ／ｍＬ（１６．５〜３３．０ピコモル／Ｌに相当）である）（Ｋ／ＤＯＱＩガイドラインＮ０．１に定義されている）まで低下させるのに必要な量を前記患者に投与することを含む。
【００３６】
別の態様において、該方法は、慢性腎臓病（ステージ３、４または５）に続発する副甲状腺機能亢進症を患う患者に、血清中ＰＴＨ濃度を低下させるために本明細書中の開示により有効量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与することを含む。二次性副甲状腺機能亢進症およびその他の療法の場合、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、例えば、１週につき１μｇ〜約１００μｇの量で投与されることが考えられる。
【００３７】
本明細書中の開示は、また、血清中（または血漿中）ＰＴＨを低下させる活性を有し、単位剤形中に有効量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および医薬として許容し得る賦形剤を含む、医薬組成物を提供する。
【００３８】
本明細書中に記載の治療方法は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3、１α−ヒドロキシビタミンＤ3、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、およびその他の活性ビタミンＤ類似体を用いる通常のビタミンＤ補充療法に対する代替法である。
【００３９】
実施形態において、該方法は、安全性および他のビタミンＤ2化合物に付随する患者の生存上の利益を有するが、加えて、既知の合成代替物に比べて１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の古典的および非古典的機能をより完全に取って代わることができる活性ビタミンＤ化合物を提供することによって特徴付けられる。かくして、該方法は、ビタミンＤの不足または欠乏症に付随する二次性副甲状腺機能亢進症、およびその他の状態に対する療法に関して久しく感じられていた必要性に焦点をあてる。
【００４０】
方法および組成物は、キロミクロンを介するリンパ系中への吸収よりも血流中への吸収を直接的に促進することによって含有される１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の生物学的利用能を有意に増大させること；上部小腸の腸細胞中での異化を低減することによって含有される１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の生物学的利用能を有意に増大させること；十二指腸上での含有される１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の望ましくない初回通過効果を有意に低下させること；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の有害な超生理学的急増の発生を有意に回避すること；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の最適濃度未満への低下を有意に予防すること；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度まで有意に戻すこと；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度をこのような最適濃度に有意に維持すること；ビタミンＤ代謝の混乱、ならびに関連するＰＴＨ、カルシウムおよびリンの恒常性の異常を有意に低減すること；およびビタミンＤホルモン補充に付随する高カルシウム尿症、高カルシウム血症、高リン血症、およびビタミンＤの毒性を含む深刻な副作用の危険を有意に低減することなどの１種または複数の利点と関連していると思われる。
【００４１】
別の態様において、本発明は、慢性腎臓病（ステージ３、４または５）を患うヒトにおける血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を、慢性治療（例えば、少なくとも３０日、または２、３、４、５もしくは６カ月、または一生を通した継続療法）により、２５−ヒドロキシビタミンＤおよび１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の漸進的減少を回避すると同時に、もとに戻しかつ維持するのに有効な方法を提供する。典型的な実施形態では、慢性腎臓病を有し、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの不足または欠乏症を患うヒトの治療が考えられる。
【００４２】
本明細書に記載の方法は、また、限定はされないが、活性型ビタミンＤの投与に応答する骨量減少性障害；活性型ビタミンＤの投与に応答する免疫応答障害；高血圧；細菌感染症；心血管疾患；吸収不良障害；癌、および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの不足および欠乏症を含む、ヒトにおける状態の治療または予防で有用であることを意図している。期待される有益な効果には、障害の改善が含まれる。
【００４３】
要約すれば、本開示の各種態様は、低い血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度、高められたＰＴＨ濃度、高められた血清中リン濃度、および低い血清中カルシウム濃度に関連するする状態を予防および／または治療するための治療方法を提供することができる。該方法は、血清中カルシウム、血清中リン、および血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の正常化されたまたは目標とする濃度を維持すると同時に、高められた血中副甲状腺ホルモン濃度を低下させるのに、および／または低められた血中ＰＴＨ濃度を維持するのに適している。本明細書中に記載の方法は、また、骨の低い代謝回転速度、すなわち動的骨疾患を回避または予防すると同時に、ＰＴＨ濃度を低下させるまたは維持するために、必要とする対象にある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与することによって、ＰＴＨの過剰抑制のリスクを軽減することを含む。
【００４４】
さらなる態様および利点も、当業者にとっては、以下の詳細な説明を検討することから明らかであろう。方法および組成物は、各種形態での実施形態が可能であるが、以下の説明には、具体的実施形態を含める。その開示は、例示であり、本発明を本明細書に記載の具体的実施形態に限定することを意図しないと理解されたい。
【００４５】
本発明の理解をさらに容易にするために、ここに１２の図面を添付する。
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】実施例３により、対照、カルシトリオール、および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療したアデニン誘発腎不全を有するラットにおいて測定されたｉＰＴＨ濃度を示す図である。
【図２】図２は、実施例３により、カルシトリオールで治療した動物について測定された血清中カルシウム濃度を示す図である。
【図３】図３は、実施例３により、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療した動物について測定された血清中カルシウム濃度を示す図である。
【図４】図４は、実施例３により、カルシトリオールで治療した動物について測定された血清中リン濃度を示す図である。
【図５】図５は、実施例３により、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療した動物について測定された血清中リン濃度を示す図である。
【図６】図６は、実施例３により、カルシトリオールで治療した動物についての生存データを示す図である。
【図７】図７は、実施例３により、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療した動物についての生存データを示す図である。
【図８】実施例３により、対照、カルシトリオール、および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療したアデニン誘発腎不全を有するラットにおける相対的腎内ＦＮ１誘導を示す図である。
【図９】実施例４により、ヒト腸ミクロソームと共にインキュベートした後に残存している％カルシトールおよび％１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を示す図である。
【図１０】図１０は、実施例５により、カルシトリオールおよび１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と共にインキュベートした後に測定されるＣ２ＢＢｅｌ細胞中でのアルカリホスファターゼの活性を示す図である。
【図１１】図１１は、実施例５により、カルシトリオールおよび１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と共にインキュベートした後に測定されるＣ２ＢＢｅｌ細胞中でのＣＹＰ２４の活性を示す図である。
【図１２】実施例６により、カルシトリオール、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、およびビタミンＤ類似体と共にインキュベートした後の、Ｃａｃｏ−２−細胞中での腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）活性を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、慢性腎臓病（ＣＫＤ）を治療するための現在の療法に優るいくつかの重要な潜在的利点を有する。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を包含するＤ2類似体の部類に属する。
【００４８】
しかし、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3と比較して、ビタミンＤ受容体との改変された相互作用、それによる異なる遺伝子発現を生じさせると考えられる重要なＡ環の修正を有する。１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2での慢性治療は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3濃度の低下につながる。また、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2での治療期間（２４〜４８時間）の後に、組織は、該化合物の活性に対して特異的に敏感になる。例えば、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の低カルシウム血症活性は、腸および骨の感受性低下に帰せられており、該低下は、これら組織の代謝活性の変化による。
【００４９】
１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、インビボでの骨吸収を促進する上でのその効力が、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3に比べほぼ１０分の１未満である。しかし、骨代謝のマーカーを調べるインビトロ研究は、培養での１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のＶＤＲ発現、細胞増殖の抑制、オステオカルシンおよびアルカリホスファターゼの活性調節に対する効果は、見分けがつかないことを示す。しかし、逆に、Ｃａｃｏ−２細胞を使用する研究において、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、カルシウム輸送に対して有意な影響を示さなかったが、一方、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3は、カルシウム輸送を９３４％刺激した。また、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、転写レベルでＣＹＰ３Ａ９遺伝子の差別的調節を示す。
【００５０】
なんらかの特定の理論によって拘束されることを意図するものではないが、ＶＤＲのレベルで、ＶＤＲが特定遺伝子の転写調節に対して作用する能力の変化を生じさせる、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2との若干の明白な相互作用が存在すると考えられる。したがって、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3のすべての機能を完全に取って代わることができないと考えられる。
【００５１】
循環している主要なビタミンＤ代謝産物のすべては、ＤＢＰおよび／またはアルブミンあるいはリポタンパク質に結合する。通常、ビタミンＤ代謝産物によるＤＢＰ占有率は、ほぼ２％である。いくつかの研究は、２４，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3、１，２４，２５−トリヒドロキシビタミンＤ3、および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3などの、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の代謝産物が、対応するＤ2の代謝産物に比べて、ＤＢＰに対してより高い親和性を有することを発見したが、ヒトのＤＢＰに関するより最近の研究は、Ｄ2の代謝産物が、ビタミンＤ3の代謝産物のそれに比べて、ＤＢＰに対して同等またはわずかに低い親和性を有することを指摘している。したがって、ＤＢＰへの結合に関して、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3との間に有意な差異は存在しないと考えられる。
【００５２】
対照的に、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、ＤＢＰに対して、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3に比べてより低い（３分の１）親和性を有する。この後者の観察は、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の短縮された半減期（慢性腎不全を有する患者での１５時間、およびステージ４のＣＫＤを有する患者での２０時間に比較して、健康な患者では４〜６時間）を説明できる。短い半減期は、ＣＹＰ２４の誘導が通常のビタミンＤホルモンおよびプロホルモンの貯蔵を涸渇させるにつれて、ホルモンのスパイクに「ビタミンＤ欠乏症」の期間が続く可能性があるので、長期間にわたって患者にとって有害であると考えられる。さらに、後で説明するような維持放出性送達系が望ましい。
【００５３】
１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、すべて、ＣＹＰ２４を誘導するので、これらの薬剤のいずれかでの慢性治療は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の漸進的減少を生じさせる。したがって、補充療法に使用されるビタミンＤホルモンが、長期にわたってビタミンＤ3ホルモンの古典的および非古典的機能のすべてを取って代わることができることが重要である。ビタミンＤ2は、ビタミンＤ3の栄養代替物として使用されている。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、安全性および患者の生存上の利益に基づいて、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3に優る利点を有すると考えられる。さらに、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の古典的および非古典的機能を完全に取って代わることができるので、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2およびその他のビタミンＤホルモン類似体に優る利点を有すると考えられる。
【００５４】
上記で説明したように、１９−ノル−ジヒドロキシビタミンＤ2による差別的遺伝子調節、および腸および腎臓などの特定組織中でのこの化合物に対する獲得抵抗性は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の治療で誘導されるＣＹＰ２４の激減と一緒になって、特定のビタミンＤ依存性機能のためのビタミンＤ欠乏症の長期治療に優る正味の効果を有する可能性がある。例えば、破骨細胞の機能を刺激する上での１９−ノル−ジヒドロキシビタミンＤ2の低下した効力は、破骨細胞機能の調節が、骨の再建にとって決定的に重要なので、長期の療法にわたって重要な考慮すべき事柄である可能性がある。骨再建動力学の変化は、結局、骨の構造的完全性を変える可能性がある。したがって、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、高められた相対的な患者の生存上の利益を伴って、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3に対するそのより密接な生化学的および生理学的同等性に基づいて、長期ホルモン補充療法に対して相当の利益を有すると考えられる。
【００５５】
一実施形態において、本明細書に記載の方法および組成物による１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与は、高められた安全性を伴って、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3に対して生理学的同等性を示す。別の実施形態において、例えば、血清中カルシウム（Ｃａ）濃度を、当技術分野で周知の技術によって比較して安全性を評価することができる。別の例として、無機リン（Ｐｉ）濃度を、当技術分野で周知の技術によって比較して安全性を評価することができる。血漿中全分子副甲状腺ホルモン（ｉＰＴＨ）濃度を、当技術分野で周知の技術によって比較して安全性を評価することができる。
【００５６】
上記で説明したように、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3は、ＰＴＨ系に対するその「古典的」効果を超える、細胞増殖、免疫系および心血管系に対する効果などの多様な「非古典的」な生物学的効果を有する。本明細書に記載の方法および組成物による１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与は、好ましくは、１種または複数の類似の効果を有する。
【００５７】
一実施形態において、本明細書に記載するような１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与は、レニン−アンジオテンシン系に対して、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3によって典型的に示される１種または複数の非古典的効果に寄与する。例えば、実施形態の一類型において、本明細書中に記載するような１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与は、レニン−アンジオテンシン系の負の内分泌調節を提供する。
【００５８】
別の実施形態において、本明細書に記載するような１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与は、骨に対して、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3によって典型的に示される１種または複数の非古典的効果、例えば、カルシウムおよびリンの恒常性に寄与する。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2投与の効果を、骨に対する直接的および間接的効果に関して比較できる。例えば、カルシウム流、オステオカルシン、酸性およびアルカリ性ホスファターゼ活性、ならびにインターロイキン−６（ＩＬ−６）の調節に対する効果を判定できる。動物モデルにおいて骨の無機化に対する効果を直接的に判定できる。
【００５９】
さらに別の実施形態において、本明細書に記載するような１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与は、免疫調節活性に対して、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3によって典型的に示される１種または複数の非古典的効果に寄与する。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の免疫調節特性は、自己免疫疾患の種々のモデルで立証されている。例えば、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3は、樹状細胞のインビトロでの分化および成熟を阻害することが示されており、Ｔ細胞の低応答性の誘導をもたらし、ヒト末梢血リンパ球（ＰＢＬ）の刺激をもたらし、成長促進性リンホカインインターロイキン−２を阻害し、かつマイトジェン活性化リンパ球の増殖を阻害することが示されている。
【００６０】
当業者は、前記のような効果を検出するための方法を決定することができる、さらに、遺伝子配列のマイクロチップ分析によって調整された遺伝子の比較も考えられる。
【００６１】
本明細書中で使用する場合、用語「ビタミンＤの毒性」は、悪心、嘔吐、多尿症、高カルシウム尿症、高カルシウム血症および高リン血症の１つまたは複数を含む、過剰に高められた血中ビタミンＤ濃度で悪化する副作用を指すことを意味する。
【００６２】
「ビタミンＤ不足および欠乏症」は、一般に、３０ｎｇ／ｍＬ未満の血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を有することと定義される（参照により本明細書に組み込まれる、米国腎臓財団のガイドライン、ＮＫＦ、Ａｍ．Ｊ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ．４２：Ｓ１〜Ｓ２０２（２００３）を参照のこと）。
【００６３】
本明細書中で使用する場合、用語「高カルシウム血症」は、１０．２ｍｇ／ｄＬを超える補正後血清中カルシウム濃度を有する患者の状態を指す。ヒトの正常な補正後血清中カルシウム濃度は、約８．６〜１０．２ｍｇ／ｄＬである。
【００６４】
本明細書中で使用する場合、用語「高リン血症」は、４．６ｍｇ／ｄＬを超える血清中リン濃度を有し、正常な腎機能またはステージ３〜４のＣＫＤを有する患者の状態を指す。ステージ５のＣＫＤを有する患者において、高リン血症は、該患者が５．５ｍｇ／ｄＬを超える血清中濃度を有する場合に見出される。ヒトにおける血清中リンの正常値は、２．５〜４．５ｍｇ／ｄＬである。
【００６５】
本明細書中で使用する場合、用語「血漿中ｉＰＴＨの過剰抑制」は、１５ｐｇ／ｍＬ未満の血漿中ｉＰＴＨ濃度を有し、正常な腎機能、またはステージ１〜３のＣＫＤを有する患者の状態を指す。ステージ４のＣＫＤを有する患者において、血漿中ｉＰＴＨの過剰抑制は、該患者が、３０ｐｇ／ｍＬ未満の血漿中ｉＰＴＨ濃度を有する場合に見出される。ステージ５のＣＫＤを有する患者において、血漿中ｉＰＴＨの過剰抑制は、該患者が、１００ｐｇ／ｍＬ未満の血漿中ｉＰＴＨ濃度を有する場合に見出される。
【００６６】
本明細書中で使用する場合、用語「ビタミンＤホルモン補充療法」は、患者に有効量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を、細胞内ＶＤＲを実質的に占拠できるビタミンＤの他の代謝産物および類似体と任意選択で一緒に投与することを指す。好ましくは、活性ビタミンＤの投与は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2単独による。
【００６７】
本明細書中で使用する場合、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の血清中または血中濃度に関して、用語「実質的に一定」は、好ましくは、制御放出性製剤の放出プロフィールが、好ましくは少なくとも３０分、または４時間などから任意に選択される期間にわたって、それぞれ単位投与量の投与後にほぼ７５ｐｇ／ｍＬを超える血清中または血中総１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2濃度の増加を含むべきではないことを意味する。
【００６８】
本明細書中で使用する場合、用語「制御放出（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）」、「持続放出（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）」、および「調節放出（ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）」は、互換的に使用され、投与された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の即放とは別な仕方での放出を指す。用語「制御放出」は、任意選択で遅延放出特性を含む。例えば、遅延放出型の制御放出性製剤は、即放性製剤に関するＣｍａｘを超える時点のＣｍａｘによって特徴付けられる。別の例として、維持放出型の制御放出性製剤は、血清中または血中総１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2濃度が、長期間、例えば２０〜４０分、または１〜１５時間、またはさらにより長く、投与前濃度を超えて維持されるか、あるいは高められるような速度での放出によって特徴付けられる。
【００６９】
「超生理学的」は、ビタミンＤの管腔内、細胞内および血中濃度に関して、ビタミンＤの供給が十分な対象、動物またはヒト患者においてビタミンＤの栄養補給を少なくとも３０日間絶った場合に、実験室測定によって任意の２４時間の過程にわたって観察される一般的な安定濃度を著しく超える１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの総濃度を指す。「有害な超生理学的急増」は、心血管の続発症の可能性を伴う、カルシウムおよびリンの代謝に対する局所的有害効果、ビタミンＤの肝臓内２５−ヒドロキシル化の阻害、ビタミンＤと２５−ヒドロキシビタミンＤとの両方の異化増大、高カルシウム尿症、高カルシウム血症および／または高リン血症につながる過剰な腎臓外ホルモン産生などの有害効果を誘発する、局所または血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を指す。
【００７０】
用語「治療上有効な量」は、患者の状態により左右され、所望の臨床効果を達成するのに、例えば、検査室試験値を正常範囲内またはその患者の状態に対して推奨される範囲内に維持するのに有効な量、あるいは疾患の臨床徴候または症状の発生または重症度を低減するのに有効な量である。いくつかの実施形態において、治療上有効な量は、血清中副甲状腺ホルモン（ｉＰＴＨ）濃度の治療なしのベースライン濃度からの少なくとも１５％、２０％、２５％または３０％の低下を達成するのに概して有効な量である。さらに他の実施形態において、治療上有効な量は、ステージ３では３５〜７０ｐｇ／ｍＬ（３．８５〜７．７ピコモル／Ｌに相当）、ステージ４では７０〜１１０ｐｇ／ｍＬ（７．７〜１２．１ピコモル／Ｌに相当）、ステージ５では１５０〜３００ｐｇ／ｍＬ（１６．５〜３３・０ピコモル／Ｌに相当）である、ＣＫＤステージに特異的なｉＰＴＨの目標範囲（Ｋ／ＤＯＱＩガイドラインＮ０．１に定義される）に到達させるのに該して有効な量である。
【００７１】
本明細書中で使用する場合、用語「副甲状腺機能亢進症」は、原発性副甲状腺機能亢進症、二次性副甲状腺機能亢進症、および慢性腎臓病（ステージ３、４または５）に続く副甲状腺機能亢進症を指す。
【００７２】
本明細書中で使用する場合、用語「血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤに関する患者の正常な経歴の生理学的範囲」は、腎臓が健康である間に得られた血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の少なくとも１年にまたは２年に２回の記録に基づく、患者の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤに関する平均血中濃度範囲を指す。
【００７３】
また、本明細書中で列挙される任意の数値は、低い方の数値から高い方の数値までのすべての値を含み、換言すれば、列挙された最低値から最高値の間の数値のすべての可能な組合せが、本出願中で明白に指定されていると考えるべきであることが、具体的に理解される。例えば、濃度範囲または有益な効果の範囲が１％〜５０％と指定されているなら、２％〜４０％、１０％〜３０％、または１％〜３％などの値は、本明細書中で明白に列挙されていると解釈される。これらは、具体的に解釈されるものの単なる例である。
【００７４】
医療界は、最近、ビタミンＤ3化合物を生物学的に対応するビタミンＤ2化合物と見分けることができないと考えていることに留意されたい。このことは、ヒトでの使用のために調製されるビタミンサプリメントにビタミンＤ2またはＤ3のいずれかを無差別的に包含させることから、およびビタミンＤ欠乏症によって引き起こされる骨疾患の治療においていずれかのビタミンを互換的に使用することから明らかである。奇妙にも、医療専門家は、単一のヒトでの研究からの確証が欠如しているにもかかわらず、２種のビタミンのホルモンとして活性な形態が同等であると考えている。（また、興味深いことに、ビタミンＤ4は、メルクインデックス（Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ、第１１版（１９８９年）９９３２頁）中で疑わしい生物学的活性を有すると記載されていることが注目される）。本明細書中で説明するように、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2化合物は、医薬組成物中の活性化合物として有用である。該ホルモンは、任意の多様な周知の単離または合成法によって製造できる、例えば、米国特許第３８８０８９４号（１９７５年４月２９日）を参照されたい。
【００７５】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2ホルモンを、通常の製薬方法により加工処理して、患者に投与するための医薬を、例えば、非経口（例えば、皮下、静脈内、筋内およびデポ注射）、および経腸（例えば、経口）または局所適用などの非経口に適し、活性化合物と有害に反応しない、医薬として許容し得る有機または無機担体物質などの通常の賦形剤と混合して製造することができる。該ホルモンは、鼻腔内、直腸内および膣内などの鼻咽腔または粘膜吸収を含む替りの方式で投与することもできる。
【００７６】
医薬として許容し得る適切な担体には、限定はされないが、水、塩（緩衝剤）溶液、アルコール、アラビアゴム、ミネラルオイルおよび植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、炭水化物（乳糖、アミロースまたはデンプンなど）、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ケイ酸、各種パラフィン、香油、脂肪酸のモノグリセリドおよびジグリセリド、ペンタエリスリトール脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが含まれる。医薬製剤は、滅菌することができ、所望なら、補助剤、例えば、増量剤、滑沢剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、透過圧変更用塩類、緩衝剤、着色剤、着香剤および／または芳香活性化合物と混合できる。固体担体を使用するなら、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の剤形は、例えば、錠剤、カプセル、粉末、坐剤、またはロゼンジでよい。液状担体を使用するなら、軟質ゼラチンカプセル、経皮パッチ、エアゾルスプレー、局所クリーム、シロップまたは液状の懸濁液、乳液または溶液が考えられる。
【００７７】
剤形中にアルコールが存在すると、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2のＤＢＰに結合する能力を妨害する場合がある。したがって、アルコールを含まないか、あるいは実質的に含まない経口剤形が考えられる。
【００７８】
局所適用の場合、噴霧できない形態として、局所適用に適合性のある担体を含み、かつ好ましくは水を超える動的粘度を有する粘性のある半固体または固体の形態が採用される。適切な製剤には、限定はされないが、溶液、懸濁液、乳液、クリーム、軟膏、粉末、リニメント剤、膏薬、エアゾルなどが含まれ、それらは、所望であれば、滅菌され、あるいは補助薬、例えば保存剤などと混合される。
【００７９】
非経口適用の場合、特に適切なのは、注射可能な無菌溶液、好ましくは油性または水性溶液、および懸濁液、乳液、あるいはインプラント（坐剤を含む）である。アンプルは、便利な単位剤形である。また、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を凍結乾燥し、貯蔵し、得られた凍結乾燥物を製品の調製で使用することができる。例えば、凍結乾燥物を、バイアル瓶中に貯蔵し、投与直前に注射液を再構成するのに使用できる。
【００８０】
経腸適用の場合、特に適切なのは、錠剤、糖衣錠、液体、ドロップ、坐剤、またはカプセルである。加糖ビヒクルを採用するシロップ、エレキシルなどを使用できる。例えば、軟質ゼラチン製剤において、カプセルの充填物は、医薬として許容し得るオイル、例えば、分別ココヤシ油中に溶解された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を適切に含有し、かつ、例えば、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）またはビタミンＥでよい酸化防止剤を含む。カプセルの殻は、ゼラチン、グリセリン、二酸化チタンおよび着色剤を適切に含むことができる。充填物は、カプセル全体の典型的には約５８〜５９質量％である。
【００８１】
適切なら、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を、１種または複数の他の活性化合物、例えば、患者の骨質量または骨中ミネラル含有量の減少を低減させる能力によって特徴付けられる１種または複数の薬剤と組み合わせることができる。このような化合物としては、他のビタミンＤ化合物、複合エストロゲン、フッ化ナトリウム、ビスホスフォネート、コバラミン、百日咳毒素、またはホウ素を挙げることができる。剤形は、保存または安定用補助剤などの補助剤を含むこともできる。特に好ましいのは、経口およびＩＶ剤形である。
【００８２】
剤形としては制御放出／維持放出性組成物が考えられる。一実施形態では、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を制御放出性製剤に含め、治療を必要とするヒトに経口で投与される。例えば、遅延放出、維持放出、および遅延−維持放出性組成物が考えられる。
【００８３】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の制御放出性製剤は、有意に、キロミクロンを介するリンパ系中への吸収よりはむしろ血流中への直接的吸収を促進することによって、含まれる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の生物学的利用能を高めること；上部小腸の腸細胞中での異化を低下させることによって、含まれる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の生物学的利用能を高めること；含まれる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の例えば十二指腸および／または空腸に対する望ましくない初回通過効果を減らすこと；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の有害な超生理学的急増の発現を回避すること；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度（ＣＫＤ患者では２５ｐｇ／ｍＬ以上と規定されている）に戻す上での経口で投与された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の有効性を高めること；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度をこのような最適濃度で（例えば、少なくとも３０日間）維持する上での経口で投与された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の有効性を高めること；ビタミンＤ代謝の混乱および関連するＰＴＨ、カルシウムおよびリンの恒常性の異常を減らすこと；ならびに高カルシウム尿症、高カルシウム血症、高リン血症、およびビタミンＤの毒性を含む、ビタミンＤホルモン補充に付随する深刻な副作用のリスクを軽減することなどの、１つまたは複数の利益を有する。
【００８４】
同様に、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を、ゆるやかな静脈内投与に適した等張性無菌製剤で提供できる。ゆるやかな静脈内投与は、有意に、キロミクロンを介するリンパ系中への吸収よりはむしろ血流中への直接的吸収を促進することによって、含まれる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の生物学的利用能を高めること；上部小腸の腸細胞中での異化を低下させることによって、含まれる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の生物学的利用能を高めること；含まれる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の十二指腸および空腸に対する望ましくない初回通過効果を減らすこと；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の有害な超生理学的急増の発現を回避すること；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度（ＣＫＤ患者では２５ｐｇ／ｍＬ以上と規定されている）に戻す上でのＩＶ投与された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の有効性を高めること；血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度をこのような最適濃度で（例えば、少なくとも３０日間）維持する上での経口で投与された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の有効性を高めること；ビタミンＤ代謝の混乱および関連するＰＴＨ、カルシウムおよびリンの恒常性の異常を減らすこと；ならびに高カルシウム尿症、高カルシウム血症、高リン血症、およびビタミンＤの毒性を含む、ビタミンＤホルモン補充に付随する深刻な副作用のリスクを軽減することなどの、１つまたは複数の利益を有することができる。
【００８５】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の経口投与に適した制御放出性形態の調製は、制御放出の多くの種々の原理により、および多くの種々の製剤技術により、実施することができる。例えば、溶出の調節、拡散の調節、およびイオン交換による制御放出が考えられる。非制限的例には、膜で包まれた貯蔵デバイス、生体内分解性ポリマー、マトリックスシステム、および透過圧システムが含まれる。リポソームを、ホルモンのための制御放出性担体として使用できる。温度および／またはｐＨを、放出のための引き金として使用できる（例えば、コーティングまたはマトリックスの温度に依存する溶解性、および／またはコーティングまたはマトリックスのｐＨに依存する溶解性）。
【００８６】
１つの具体的実施例として、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を、制御放出のために、生分解性ポリマー、水溶性ポリマー、またはその両方の混合物、および任意選択の適切な界面活性剤からなるポリマーマトリックス中に包埋できる。この文脈で、包埋は、ポリマーのマトリックス中に微粒子を組み込むことを意味する。制御放出性製剤は、分散された微粒子または乳化された微小滴（例えば、周知の分散または乳化コーティング技術による）のカプセル化により得ることができる。
【００８７】
別の類型の製剤において、制御放出性剤形は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を拘束し、単純拡散および／またはゆるやかな崩壊によって４〜８時間またはそれ以上にわたる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の緩慢で比較的一様の、好ましくは実質的に一定の放出を可能にするマトリックスを含む。
【００８８】
実施形態の１つの類型は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の制御放出性製剤を含む組成物、ならびにこのような製剤を投与して、ビタミンＤ化合物の十二指腸に対する望ましくない初回通過効果なしに；１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの内腔内、細胞内および血中濃度の有害な超生理学的急増およびそれらの結果なしに；かつビタミンＤの栄養補給に付随する深刻な副作用、すなわちビタミンＤの毒性なしに；今まで得ることのできなかったレベルの有効性で１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの不足および欠乏症を治療する方法を含む。
【００８９】
好ましい制御放出性組成物は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の濃度を２５ｐｇ／ｍＬ以上に、または約２５ｐｇ／ｍＬ〜約６５ｐｇ／ｍＬの範囲に維持するように設計され、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の長期間にわたる制御された、好ましくは実質的に一定の放出をもたらすような方式で調製される。このような組成物を用いて実施される任意選択ではあるが好ましい方法は、体中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の実質的に一定の濃度およびより維持された血中濃度を確実にする。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の長期にわたる緩慢で一様な放出を提供することによって、血中、内腔内および細胞内ビタミンＤ濃度のスパイク、すなわち、有害な超生理学的濃度を、軽減または排除する。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2のゆるやかな増加、およびその後の維持された血中濃度は、血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を最適濃度に戻す上での卓越した有効性、および活性ビタミンＤまたは類似体の今まで知られている経口製剤に比較して卓越した安全性という２つの予想しなかった利益を提供すると予想される。
【００９０】
１つの任意選択の態様において、制御放出性経口製剤は、また、胃液中での崩壊に効果的に抵抗し、さらに任意選択で、該製剤が小腸、およびより好ましくはヒトの小腸の回腸に到達するまで、含まれる１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の実質的（例えば、＞５０％）放出を回避する。
【００９１】
いったん回腸の内腔中に放出されると、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、血流中に吸収される。このような実施形態において、好ましくは、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の主要部分が、十二指腸および空腸を越えた箇所で吸収される。小腸のこれらの近接部分は、ビタミンＤ化合物の高い内腔内濃度に応答することができ、進行中に、相当量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を異化することができる。回腸まで放出を遅延させることによって、医薬組成物は、隣接する腸に対する初回通過効果を実質的に排除し、かつ不必要な異化を低減できる。さらに、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の経回腸吸収を、吸収された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2をキロミクロンを介して血清中ビタミンＤ結合タンパク質（ＤＢＰ）に向けるように設計できる本明細書に記載の製剤を用いて増加させることができる。ＤＢＰに結合された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、肝内異化からより保護されると考えられる。血流中へのその吸収の前または後に投与された１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2のかなりの異化は、その全身性生物学的利用能を有意に低下させる。初回通過効果の排除は、ビタミンＤの毒性のリスクを軽減する。
【００９２】
したがって、本発明の一実施形態は、ある投与区間における１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの最大血清中濃度（Ｃｍａｘ）が、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と比較して低下するように、患者にある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与する方法である。同様に、本発明は、患者に投与した場合に、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2よりも小さな１，２５−ジヒドロキシビタミンＤのＣｍａｘをもたらす、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する制御放出性剤形を提供する。例えば、その低下は、好ましくは、少なくとも５０％、６０％、７０％、または８０％である。
【００９３】
本発明の別の実施形態は、ある投与区間における血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2濃度の最大変化が、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と比較して縮小するように、患者にある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与する方法である。同様に、本発明は、患者に投与した場合に、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2よりも小さな、ある投与区間における血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2濃度の最大変化をもたらす、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する制御放出性剤形を提供する。例えば、その縮小は、好ましくは、少なくとも５０％、６０％、７０％、または８０％である。
【００９４】
本発明のさらに別の実施態様は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与後２４時間以内における血清中最大濃度の投与２４時間後濃度に対する比率（Ｃｍａｘ24hr／Ｃ24hr）が、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と比較して低下するように、患者にある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与する方法である。同様に、本発明は、患者に投与した場合に、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2よりも小さな１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2のＣｍａｘ24hr／Ｃ24hrをもたらす、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する制御放出性経口剤形を提供する。例えば、その低下は、好ましくは、少なくとも５０％、６０％、７０％、または８０％である。
【００９５】
本発明のさらに別の実施形態は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の排除半減期（ｔ1/2）が、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と比較して増大するように、患者にある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与する方法である。同様に、本発明は、患者に投与した場合に、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を超える１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2のｔ1/2をもたらす、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する制御放出性剤形を提供する。例えば、その増大は、好ましくは、少なくとも２５％、３０％、４０％、５０％または６０％である。
【００９６】
本発明のさらなる実施形態は、投与に続くある投与区間において血漿中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2濃度がその最大値に到達する時間（Ｔｍａｘ）が、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2と比較して増大するように、患者にある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与する方法である。同様に、本発明は、患者に投与した場合に、ボーラスＩＶ注射および／または同等の即放性経口剤形によって投与される同量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2のそれを超える１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2によるＴｍａｘをもたらす、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する制御放出性剤形を提供する。例えば、その増大は、好ましくは、少なくとも２５％、３０％、４０％、５０％または６０％である。
【００９７】
本発明の一実施形態において、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2の制御放出性経口製剤は、一般には以下の方法によって調製される。十分な量の１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2を最少容積の米国薬局方級無水エタノール（またはその他の適切な溶媒）に完全に溶解し、室温および通常体温の両方で固体または半固体であるマトリックス、あるいは室温および／または体温で半固体または液体の形態でよい溶媒集合体を形成するのに適切な量および種類の医薬級賦形剤と混合する。該マトリックスまたは溶媒集合体は、胃および上部小腸中での消化に対して、完全に、ほとんど完全に、実質的に、または部分的に抵抗性であり、下部小腸中で徐々に崩壊する。
【００９８】
適切な製剤において、該マトリックスまたは溶媒集合体は、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2を拘束し、単純拡散および／またはゆっくりした崩壊によって、４〜８時間またはそれ以上にわたる下部小腸の内腔の内容物中への１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2の緩慢で比較的一様な、すなわち、実質的に一定の放出を可能にする。この好ましい製剤は、さらに任意選択で、ｐＨが約７．０〜８．０の水性溶液に部分的に溶解する、または単に十分に緩慢に溶解して該製剤が十二指腸および空腸を通過する後まで１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2の有意な放出を遅延させる、腸溶性コーティングを有する。
【００９９】
上記で考察したように、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2の制御放出を提供する手段は、活性成分の約４時間またはそれ以上の過程にわたる既知の制御放出性送達システムのいずれか、例えば、ワックス系マトリックスシステム、およびＥｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ／ＲＬシステム（ドイツ、Ｗｅｉｔｅｒｓｔａｄｔ、Ｒｏｈｍ  Ｐｈａｒｍａ、ＧｍｂＨの）から選択できる。
【０１００】
ワックス系マトリックスシステムは、親油性マトリックスを提供する。ワックス系マトリックスシステムは、蜜蝋、白蝋、マッコウクジラワックスまたは類似の組成物を利用できる。活性ホルモンは、腸液中でゆっくり崩壊して活性成分を徐々に放出するワックス系結合剤中に分散される。１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2を含浸させたワックス系結合剤は、部分架橋軟質ゼラチンカプセル中に充填される。ワックス系マトリックスシステムは、活性成分を、体温で軟化し、腸液中でゆっくり崩壊して活性成分を徐々に放出するワックス系結合剤中に分散させる。該システムは、適切には、体温より高く、かつ軟質および／または硬質ゼラチンカプセルの殻を作り出すのに典型的に使用されるゼラチン製剤の、または腸溶性コーティングを作り出すのに使用されるその他の製剤の融解温度より好ましくは低い融点を達成するためのオイルを任意選択で添加した、ワックスの混合物を含む。
【０１０１】
具体的には、１つの適切な実施形態において、マトリックス用に選択されるワックス類を融解し、完全に混合する。この時点で所望量の任意選択のオイルを添加し、続いて十分に混合する。次いで、ワックス状混合物をその融解点をわずかに超える温度まで徐冷する。エタノールに溶解した所望量の１，２５−ジドロキシビタミンＤ2を、溶融マトリックス中に均一に分配し、該マトリックスを、軟質ゼラチンカプセル中に充填する。充填されたカプセルを、アセトアルデヒドなどのアルデヒドを含む溶液で適切な時間処理してゼラチンをカプセル殻中で部分的に架橋する。ゼラチン殻は、数週間の期間にわたって次第に架橋され、それによって、胃および上部腸の内容物への溶解に対してより抵抗性となる。適切に構成されると、このゼラチン殻は、経口で投与した後に、徐々に溶解し、それが回腸に到達する時点までに（完全に崩壊することなく）十分に多孔性になり、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2がワックス系マトリックスから下部小腸の内容物中にゆっくり拡散することを可能にする。
【０１０２】
貴重である可能性のあるその他脂質系マトリックスの例が、グリセリド、脂肪酸とアルコール、および脂肪酸エステルである。
【０１０３】
したがって、特に好ましい制御放出性製剤の１つの類型は、該製剤を摂取する対象の消化管中でのビタミンＤホルモンの制御放出のための固体または半固体のワックス状医薬製剤である。該製剤は、ワックス状制御放出性担体物質、類脂質性薬剤、ビタミンＤ化合物のための油性ビヒクル、およびビタミンＤホルモン１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含む。該製剤は、その中に組み込まれたビタミンＤ化合物の制御放出を提供する。該製剤は、崩壊剤を含まないか、あるいは本質的に含まない。
【０１０４】
ワックス状制御放出性担体は、室温で固体または半固体、および体温で固体、半固体または液体、好ましくは体温で半固体または液体である製剤を提供する。使用するのに適した担体の例には、合成ワックス、微結晶ワックス、パラフィンワックス、カルナウバワックスおよび蜜蝋などのワックス；ポリエトキシル化ヒマシ油誘導体、水素化植物油、モノ−、ジ−またはトリベヘン酸グリセリル：ステアリルアルコール、セチルアルコールおよびポリエチレングリコールなどの長鎖アルコール；ならびにこれらの任意の混合物が含まれる。硬質パラフィンワックスなどの非消化性ワックス状物質が好ましい。
【０１０５】
ワックス状担体は、好ましくは、任意の付加的な被覆または殻を除く製剤の総質量を基準にして、製剤の約５ｗｔ％を超える量で存在する。例えば、ワックス状担体は、製剤の５ｗｔ％超、製剤の１０ｗｔ％超、製剤の１５ｗｔ％超、製剤の２０ｗｔ％超、および製剤の２５ｗｔ％超を構成することができる。ワックス状担体は、好ましくは、５０ｗｔ％未満、４０ｗｔ％未満、３５ｗｔ％未満、または３０ｗｔ％未満の量で存在する。適切な範囲には、５ｗｔ％〜３５ｗｔ％、１５ｗｔ％〜３５ｗｔ％、および２０ｗｔ％〜３０ｗｔ％が含まれる。例には、１５ｗｔ％、１６ｗｔ％、１７ｗｔ％、１８ｗｔ％、１９ｗｔ％、２０ｗｔ％、２１ｗｔ％、２２ｗｔ％、２３ｗｔ％、２４ｗｔ％、２５ｗｔ％、２６ｗｔ％、２７ｗｔ％、２８ｗｔ％、２９ｗｔ％および３０ｗｔ％が含まれる。
【０１０６】
類脂質性物質は、被治療対象の消化管中での製剤からのビタミンＤ化合物の放出を提供する。いずれか特定の作用理論に拘束されることを意図するものではないが、類脂質性物質は、胃腸液中で油性ビヒクルのマイクロエマルジョンを創り出すこと；該製剤が胃の粘膜層と相互作用するように、例えば生体接着特性による長期胃内停留を提供すること；ならびにビタミンＤ化合物の吸収を増強することなどの１つまたは複数の好ましい機能を提供することができると思われる。しかし、作用機構にかかわらず、本発明は、いずれか特定の作用方式によって限定されるものではない。
【０１０７】
類脂質性物質成分は、好ましくは、該分子またはイオンが、親水性部分と親油性部分の両方を含む両親媒性物質である。これらの成分は、親水性／親油性バランス学説（「ＨＬＢ学説」）を基準にした数値によって規定することができる。ＨＬＢ尺度は、０からほぼ２０までに及ぶ数値尺度であり、数値が小さいほど、より親油性かつ疎水性の物質を意味し、数値が大きいほど、より親水性かつ疎油性の物質を意味する。化合物の水に対する、または油性物質に対する親和性は、実験的に測定され、ＨＬＢ値を割り振られる。本明細書中で採用される疎水性担体のＨＬＢは、好ましくは、約１３〜約１８の範囲である。
【０１０８】
医薬として許容し得る各種の類脂質性物質を、製剤中に組み込むことができる。製剤中に存在する類脂質性物質の量は、好ましくは、少なくとも５ｗｔ％、少なくとも１５ｗｔ％、少なくとも３５ｗｔ％、少なくとも４０ｗｔ％、または少なくとも４５ｗｔ％である。適切な範囲には、約５ｗｔ％〜約６０ｗｔ％、約２０ｗｔ％〜約６０ｗｔ％、および約４０ｗｔ％〜約５０ｗｔ％が含まれる。
【０１０９】
一実施形態において、類脂質性物質は、７未満のＨＬＢを有する親油性乳化剤であり、混合脂肪酸モノグリセリド；混合脂肪酸ジグリセリド、脂肪酸モノ−およびジグリセリドの混合物；親油性ポリグリセロールエステル；モノオレイン酸グリセリル、ジオレイン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、モノパルミチン酸グリセリル、およびジパルミチン酸グリセリルを含むグリセロールエステル；脂肪酸のグリセリル−ラクトエステル；モノパルミチン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、およびモノオレイン酸プロピレングリコールを含むプロピレングリコールエステル；モノステアリン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタンを含むソルビタンエステル；ステアリン酸、パルミチン酸、およびオレイン酸を含む脂肪酸およびそれらの石鹸；ならびにこれらの混合物；モノオレイン酸グリセリル、ジオレイン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、モノパルミチン酸グリセリル、およびジパルミチン酸グリセリル；脂肪酸のグリセリル−ラクトエステル；モノパルミチン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、およびモノオレイン酸プロピレングリコールを含むプロピレングリコールエステル；モノステアリン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタンを含むソルビタンエステル；ステアリン酸、パルミチン酸、およびオレイン酸をはじめとする脂肪酸およびそれらの石鹸；ならびにこれらの混合物からなる群から選択されるメンバーを含む。
【０１１０】
好ましい類脂質性物質は、グリセリドおよびその誘導体から選択される。好ましいグリセリドは、中鎖または長鎖グリセリド、カプリロカプロイルマクロゴールグリセリド、およびこれらの混合物からなる群から選択される。
【０１１１】
好ましい中鎖グリセリドには、限定はされないが、中鎖モノグリセリド、中鎖ジグリセリド、トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリド、モノラウリン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、（カプリル酸／カプリン酸）グリセリド、モノカプリル酸グリセリル、モノジカプリル酸グリセリル、トリ（カプリル酸／カプリン酸／リノール酸）グリセリド、およびトリ（カプリル酸／カプリン酸／コハク酸）グリセリドが含まれる。
【０１１２】
低い融点を有するモノグリセリドは、製剤を製造するのに好ましく、腸中で簡単に溶ける。好ましいモノグリセリドには、限定はされないが、モノステアリン酸グリセリル、モノパルミチン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、モノカプリル酸グリセリル、モノカプリン酸グリセリル、モノラウリン酸グリセリルなどが含まれ、好ましくはモノステアリン酸グリセリル（ＧＭＳ）である。ＧＭＳは、天然の乳化剤である。それは、油溶性であるが、水にわずかに溶ける。ＧＭＳは、３．８のＨＬＢ値を有する。別の好ましいモノグリセリドが、モノオレイン酸グリセリル（ＧＭＯ）である。ＧＭＯも、天然の乳化剤であり、油溶性であるが、水にわずかに溶け、３．８のＨＬＢ値を有する。
【０１１３】
別の実施形態において、グリセリドは、カプリロカプロイルマクロゴールグリセリド類から選択される吸収増強剤である。採用できるカプリロカプロイルマクロゴールグリセリドには、限定はされないが、ポリグリコール化グリセリドまたはＰＥＧ化グリセリドとしても知られる、ポリエチレングリコシル化グリセリドが含まれる。組成物中で採用できるＰＥＧ化グリセリドには、限定はされないが、モノグリセリドとジグリセリドとトリグリセリドとの混合物；ポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステル；ポリエチレングリコシル化アーモンド油グリセリド；ポリエチレングリコシル化コーン油グリセリド；ならびにポリエチレングリコシル化トリ（カプリル酸／カプリン酸）グリセリドが含まれる。吸収増強剤は、好ましくは、１３〜１８、より好ましくは１３〜１５のＨＬＢ値を有する。
【０１１４】
１つの好ましい吸収増強剤は、ＧＥＬＵＣＩＲＥの商品名で知られており、米国ニュージャージー州ＰａｒａｍｕｓのＧａｔｔｅｆｏｓｓｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから市販されている。ＧＥＬＵＣＩＲＥは、グリセロールの脂肪酸エステルおよびポリグリコール化グリセリドとしても知られているＰＥＧエステルのファミリーである周知の賦形剤である。ＧＥＬＵＣＩＲＥは、持続放出性医薬組成物の調製を含む各種応用で使用される。ＧＥＬＵＣＩＲＥ化合物は、両親媒性であり、融点、ＨＬＢ、および各種溶媒への溶解度などの多様な物理的特性の求めに応じることのできる不活性で半固体のワックス状材料である。それらは、本質的に界面活性を有し、水性媒体中に分散または可溶化され、ミセル、顕微鏡的小球または小胞を形成する。それらは、それらの融点／ＨＬＢ値によって識別される。融点は、摂氏で表現される。異なるグレードのＧＥＬＵＣＩＲＥ賦形剤の１つまたは混合物を選択して、融点および／またはＨＬＢ値に関して所望される特性を達成することができる。好ましいＧＥＬＵＣＩＲＥ組成物は、融点が４４℃でＨＬＢが１４の半固体ワックス状材料であるＧＥＬＵＣＩＲＥ４４／１４である。
【０１１５】
別の好ましいポリグリコール化グリセリド系吸収増強剤が、カプリロカプロイルマクロゴール−８−グリセリド（ＣＡＳ  Ｎｏ．８５５３６−０７−８および８４９６３−８８−２）である。これは、グリセロールおよびＰＥＧ４００の中鎖脂肪酸（Ｃ8〜Ｃ10）とのモノ−、ジ−およびトリエステルの混合物であり、例えば、米国ニュージャージー州ＰａｒａｍｕｓのＧａｔｔｅｆｏｓｓｅ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによってＬＡＢＲＡＳＯＬの商品名で上市されている。ＬＡＢＲＡＳＯＬは、１４のＨＬＢ値を有し、次の質量組成：Ｃ8〜Ｃ10モノグリセリドをほぼ４％；Ｃ8〜Ｃ10ジグリセリドをほぼ１７％；Ｃ8〜Ｃ10トリグリセリドをほぼ６％；ＰＥＧ４００のＣ8〜Ｃ10モノエステルをほぼ１４％；ＰＥＧ４００のＣ8〜Ｃ10ジエステルをほぼ３６％；遊離ＰＥＧ４００をほぼ２０％；遊離グリセロールをほぼ３％：を有する。
【０１１６】
好ましくは、類脂質性物質には、７未満のＨＬＢを有する親油性乳化剤、および１３〜１８のＨＬＢ値を好ましくは有する吸収増強剤の混合物が含まれる。親油性乳化剤は、約２０ｗｔ％〜約５０ｗｔ％、好ましくは約３０ｗｔ％〜約４０ｗｔ％の範囲の量で存在するのが好ましく、吸収増強剤は、約５〜約２０ｗｔ％、好ましくは約８〜約１５ｗｔ％の量で存在するのが好ましい。
【０１１７】
低融点の多くの固体類脂質性組成物は、該組成物中に医薬として活性な成分を該活性成分のそれぞれの融点を約０℃〜約５０℃上回る温度で組み込み、次いで溶融物（溶液および／または分散液）を動物性または植物性ゼラチンカプセル中に充填する手段を提供する。溶融物は、室温まで冷却するとカプセル内部で固化する。
【０１１８】
油性成分は、ビタミンＤ化合物のためのビヒクル、好ましくは主要ビヒクルとして役立つ。任意の医薬として許容し得るオイルを使用できる。例には、動物性（例えば、魚）、植物性（例えば、ダイズ）、およびミネラルオイルが含まれる。オイルは、好ましくは使用されるビタミンＤ化合物を容易に溶解する。好ましい油性成分には、ミネラルオイル、特に流動パラフィンなどの非消化性オイル、およびスクアレンが含まれる。オイルビヒクルは、好ましくは、製剤の約１０ｗｔ％〜約５０ｗｔ％、より好ましくは約１５ｗｔ％〜約４５ｗｔ％、約２０ｗｔ％〜約４０ｗｔ％、または約１５ｗｔ％〜約２５ｗｔ％を構成する。１つの好ましい実施形態において、流動パラフィンは、次のパラメーター：約０．８８〜０．８９の比重；約６４〜約７０ｃＳｔ（４０℃）の動粘度；４２４の分子量；約５９の％パラフィン系炭化水素；および−２４℃の流動点の１つまたは複数によって特徴付けることができる。ビタミンＤ化合物の所望される放出速度を達成するために、ワックス状成分と油性成分との比率を最適化することができる。したがって、より重質のオイル成分を使用するなら、比較的少量のワックス状成分を使用することができ、より軽質のオイル成分を使用するなら、比較的多量のワックス状成分を使用できる。
【０１１９】
もう１つの適切な制御放出性経口薬物送達システムが、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ／ＲＳシステムであり、そのシステムでは、活性成分１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2を、２５／３０メッシュの大きさを有する顆粒に形成する。次いで、該顆粒を、非水溶性ではあるが水がゆっくりと透過できる薄いポリマー性ラッカーで均一に被覆する。被覆された顆粒は、酸化防止剤、安定剤、結合剤、滑沢剤、加工助剤などの任意選択の添加物と混合することができる。該混合物を、圧縮して使用前には硬質かつ乾質であり、さらに被覆することができる錠剤とするか、あるいはカプセル中に流し込むことができる。錠剤またはカプセルが、飲み込まれ、水性腸液と接触した後に、薄いラッカーは、膨潤し始め、腸液の透過を徐々に可能にする。腸液は、ラッカーコーティングに徐々に透過するにつれて、含まれる１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、徐々に放出される。錠剤またはカプセルが小腸を通過する約４〜８時間の時点またはより後までに、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、徐々にではあるが完全に放出される。したがって、摂取された錠剤は、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2および任意のその他任意選択の活性成分の流れを放出する。
【０１２０】
Ｅｕｄｒａｇｉｔシステムは、高透過性ラッカー（ＲＬ）および低透過性ラッカー（ＲＳ）から構成される。ＲＳは、小さな比率のメタクリル酸トリメチルアンモニオエチルクロリドを含み、第四級アンモニウム基の中性エステル基に対するモル比が約１：４０である、中性の膨潤性メタクリル酸エステルをベースにした非水溶性フィルム形成物である。ＲＬもまた、小さな比率のメタクリル酸トリメチルアンモニオエチルクロリドを含み、第四級アンモニウム基の中性エステル基に対するモル比が約１：２０である、中性のメタクリル酸エステルをベースにした非水溶性の膨潤性フィルム形成物である。被覆の透過性、したがって薬物放出のタイムコースは、被覆材料ＲＳのＲＬに対する比率を変えることによって設定できる。Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ／ＲＳシステムのさらなる詳細については、Ｒｏｈｍ  Ｔｅｃｈ、Ｉｎｃ．１９５  Ｃａｎａｌ  Ｓｔｒｅｅｔ、Ｍａｉｄｅｎ、マサチューセッツ州、０２１４６から入手できる技術刊行物が参照される。また、参照により本明細書に組み込まれる、Ｋ．Ｌｅｈｍａｎｎ、Ｄ．Ｄｒｅｈｅｒ「流動床技術による錠剤および小粒子のアクリル樹脂でのコーティング（Ｃｏａｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔａｂｌｅｔｓ  ａｎｄ  ｓｍａｌｌ  ｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｗｉｔｈ  ａｃｒｙｌｉｃ  ｒｅｓｉｎｓ  ｂｙ  ｆｌｕｉｄ  ｂｅｄ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）」Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｅｃｈ．＆  Ｐｒｏｄ．Ｍｆｒ．２（ｒ）、３１〜４３（１９８１）を参照されたい。
【０１２１】
不溶性ポリマーの他の例には、ポリビニルエステル、ポリビニルアセタール、ポリアクリル酸エステル、ブタジエンスチレンコポリマーなどが含まれる。
【０１２２】
コーティングされた顆粒またはその他の製剤を、いったん、錠剤に形成するか、カプセル内に入れたら、該錠剤またはカプセルを、ｐＨ７．０〜８．０で溶解する腸溶性コーティング材料で任意にコーティングする。このようなｐＨ依存性腸溶性材料の１つが、腸液に溶解するが、胃液に溶解しないＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ／Ｓである。胃液による溶解に対しては抵抗性であるが腸内エステラーゼの加水分解効果により容易に崩壊する酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）などのその他の腸溶性コーティング材料を使用できる。
【０１２３】
腸溶性コーティング材料および／または制御放出性材料の特定の選択は、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2の実質的な放出を、例えば、製剤が回腸に到達するまで遅延させる。制御放出性の方法および材料（例えば、コーティング、マトリックス、またはその他の媒体）の特定の選択は、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2の４〜８時間またはそれ以上にわたる実質的に一定の放出を提供する。
【０１２４】
１つの好ましい部類の実施形態において、調節放出性製剤は、投与後最初の２４時間以内にビタミンＤ化合物の少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％、例えば約７２％を放出する。
【０１２５】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の本明細書に記載のような投与は、また、予定した投与量のビタミンＤホルモンの患者への有効で予想可能な送達を可能にする。活性ビタミンＤ2ホルモンの一時的および定量的利用能は、肝臓中での活性化またはその他の代謝に依存しない。したがって、任意選択でまたは好ましくは上記の通り副作用を回避または軽減しながら、同等の効果を達成するのに、他のビタミンＤ2類似体に比較してより少ない投与量が可能であると考えられる。
【０１２６】
本明細書に記載のように、経口および静脈内投与製剤および経路が好ましい。このような療法の適用は、間欠的基準、適切には１日１回から１週に６、５、４、３、２、または１回でよい。
【０１２７】
実施形態において、該方法は、血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2濃度を２５ｐｇ／ｍＬ、３０ｐｇ／ｍＬ、またはそれ以上に、例えば、２５〜６５ｐｇ／ｍＬに上昇させ、また好ましくは、長期間、例えば少なくとも１カ月、少なくとも３カ月、少なくとも６カ月、またはそれ以上該濃度を維持するように、本明細書に記載の製剤を投与することを含むと考えられる。
【０１２８】
経口または非経口投与のための１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与量は、一般に、１週につき約０．１μｇ〜１００μｇ、好ましくは１週につき約０．７μｇ〜約７０μｇであり、該投与量は、１日当たり、または血液透析と同時に投与するために１週に３回などの他の周期的投与に分割することができる。典型的な実施形態において、１日につき約０．５μｇ〜約２μｇに相当する非経口投与量が考えられ、一方、１日につき約０．１、０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０μｇに相当する経口投与量が考えられる。
【０１２９】
一般に、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、単位投与量につき医薬として許容し得る担体中に約０．１μｇ〜約１０μｇ、例えば約１μｇ〜約４μｇを含む単位剤形によって投与される。約２μｇ〜約１０μｇ、または約３μｇ〜約５μｇを含有する維持放出、または遅延、維持−放出性単位剤形も考えられる。
【０１３０】
製剤は、当業者に周知の方法によって調製できる。典型的には、医薬として許容し得るワックス、類脂質性物質およびオイルを、必要なら溶融して流動性液体を準備し、それによって均一混合物を得るのをより容易にする。このようにして得られた液状担体に、無水エタノールなどのアルコールに例えば溶解されたビタミンＤ化合物を添加し、成分を混合して均一混合物を準備する。混合物を、冷却、貯蔵し、その後、充填ゼラチンカプセルなどの単位剤形に分割できる。
【０１３１】
１つの好ましい方法では、オイルビヒクルの一部、固体ワックスおよび親油性乳化剤を比較的高い温度（例えば６５℃）まで加熱、混合した後に吸収増強剤を添加し、続いて均一になるまでさらに混合し、次いで中間的に高められた温度（例えば、５０℃〜５５℃）まで冷却する。別の容器中で、酸化防止保存剤および残りのオイルビヒクルを、混合し、中間的に高められた温度（例えば５０℃）まで加熱し、次いでワックス混合物と合わせ、均一溶液が得られるまで混合する。次に、ビタミンＤ化合物のアルコール溶液を、均一ワックス溶液と合わせ、均一溶液が得られるまで混合し、好ましくはカプセル中に充填し、次いで室温まで冷却する。別の好ましい方法では、オイルビヒクルの一部、固体ワックスおよび親油性乳化剤を５５℃〜６０℃の温度で加熱、混合した後、吸収増強剤を添加し、続いて均質になるまでさらに混合する。別の容器中で、酸化防止保存剤および残りのオイルビヒクルを、混合し、５５℃〜６０℃の温度まで加熱し、次いでワックス混合物と合わせ、均一溶液が得られるまで混合する。次に、ビタミンＤ化合物のアルコール溶液を、均一ワックス状溶液と合わせ、均一溶液が得られるまで混合し、好ましくはカプセル中に充填し、次いで室温まで冷却する。
【０１３２】
製剤は、好ましくは、治療を必要とする患者に投与するのに先立ってカプセル中に充填される。このようなカプセルは、硬質または軟質でよいが、軟質カプセルが好ましい。標準的なカプセル充填機を使用し、製剤を溶融することおよび軟質カプセルの殻中に射出充填することなどによって、製剤をゼラチンカプセル中に充填することができる。
【０１３３】
製剤ならびにその使用および製造方法は、特記しない限り、さらに後に記載されるさらなる任意選択の要素、特徴およびステップの１つまたは複数の任意の組合せを含む実施形態を包含すると考えられる。
【０１３４】
したがって、実施形態の一類型において、製剤は、さらに、酸化防止剤などの保存剤を含む。ブチル化ヒドロキシルトルエン（ＢＨＴ）が好ましい。
【０１３５】
実施形態の別の類型において、ビタミンＤ化合物は、１種または複数の他の治療薬と組み合わせて投与される。
【０１３６】
上記で説明したように、製剤は、好ましくはゼラチンカプセル中に充填されるが、製剤のままの形態、または腸溶性被覆などの１つまたは複数の表面被覆層を有する形態で投与することもできる。また、製剤を圧縮して錠剤とすることができると考えられ、このような場合には、１種または複数の錠剤圧縮用賦形剤を含めることができる。
【０１３７】
本明細書に記載の組成物および方法において、好ましいステップ、好ましい成分、その好ましい組成範囲、およびこれらの好ましい組合せは、本明細書中で提供される種々の具体的実施例から選択できる。例えば、好ましい製剤は、治療上有効な量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、約２ｗｔ％（例えば２．３２ｗｔ％）のエタノール、約１０ｗｔ％（例えば９．７５ｗｔ％）のＧＥＬＵＣＩＲＥ４４／１４、約２７ｗｔ％（例えば２７．５１ｗｔ％）の硬質パラフィン、約３８ｗｔ％（例えば３７．８５ｗｔ％）のＧＭＳ、約２２ｗｔ％（例えば２２．４３ｗｔ％）のミネラルオイル、および任意選択で少量の保存剤（例えば、０．０２ｗｔ％のＢＨＴ）を含有する。この製剤の変形体は、約２０％の硬質パラフィンおよび約２９％のミネラルオイルを含有する。
【０１３８】
さらに別の好ましいベースカプセルの充填物製剤の実施形態、および５０μｇの実施形態のための仕様を下表１に示す。
【０１３９】
【表１】
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【０１４０】
本明細書に記載の投与量は、本明細書に記載の任意の治療方法に対して考えられる。具体的症例におけるホルモンの実際の好ましい量は、処方される個々の組成物、適用方式、および治療される個々の場所により異なることが認識される。投与量は、通常の考察を利用して、例えば、ホルモンおよび既知薬の特異的活性の通例的比較によって、例えば、適切な通常の薬理学的プロトコールによって決定することができる。
【０１４１】
各個々の患者に対する具体的投与量は、広範な種類の因子、例えば、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与の時期および方式、排泄速度、併用される医薬、および療法が適用される個々の障害の重症度によって左右される場合がある。
【０１４２】
ビタミンＤの栄養補給を必要とする患者には、健康な対象、およびビタミンＤの不足または欠乏症の危険がある対象、例えば、ステージ１、２、３、４または５の慢性腎臓病を有する対象；ビタミンＤ強化ミルクを飲まない乳児、子供および成人（例えば、乳糖不耐症の対象、牛乳アレルギーを有する対象、牛乳を摂取しないベジタリアン、および母乳栄養乳児）；くる病を有する対象；黒い皮膚を有する対象（例えば、米国で、１５〜４９歳のアフリカ系アメリカ人女性の４２％は、ビタミンＤ欠乏であるが、白人女性では４％である）；高齢者（ビタミンＤを合成する能力が低下し、また、より屋内に留まりそうな人）；施設に収容された成人（屋内に留まりやすい人、アルツハイマー病または精神病を有する対象を含む）；露出する皮膚のすべてを覆う対象（特定の宗教または文化のメンバーなど）；日焼け止めを常用する対象（例えば、８の日光保護係数（Ｓｕｎ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ）（ＳＰＦ）を有する日焼け止めを塗布すると、ビタミンＤの産生が９５％低下し、より大きなＳＰＦ値はビタミンＤをさらに減少させる可能性がある）；脂肪吸収不全症候群を有する対象（限定はされないが、嚢胞精線維症、胆汁鬱滞性肝疾患、その他の肝疾患、胆嚢疾患、膵臓酵素欠乏症、クローン病、炎症性腸疾患；スプルーまたはセリアック病、または胃および／または腸の部分または全部の外科的除去を含む）；炎症性腸疾患を有する対象；クローン病を有する対象；小腸切除を受けた対象；歯肉疾患を有する対象；フェニトイン、フォスフェニトイン、フェノバルビタール、カルバマゼピンおよびリファンピンをはじめとするビタミンＤの異化を増大させる薬物を摂取している対象；コレスチラミン、コレスチポール、オルリスタット、ミネラルオイル、および脂肪代替物をはじめとするビタミンＤの吸収を低下させる医薬を摂取している対象；ケトコナゾールをはじめとするビタミンＤの活性化を阻害する医薬を摂取している対象；コルチコステロイドをはじめとするカルシウム吸収を低下させる医薬を摂取している対象；肥満を有する対象（体脂肪貯蔵部に蓄えられたビタミンＤは生物学的に利用されにくい）；骨粗鬆症を有する対象；および／または閉経後女性が含まれる。ビタミンＤの食事摂取基準（Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｉｎｔａｋｅｓ）に関する医学研究所（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）の報告によれば、食品摂取データは、若年および高齢女性の両方にとってのビタミンＤの中位摂取量が現推奨量よりも低いことを示唆しており；データは、若年および高齢女性の５０％超がビタミンＤの推奨量を摂取していないことを示唆している。本発明の方法から任意選択で除外されるのは、腎性骨ジストロフィー（骨軟化症および嚢胞性線維性骨炎を含む）を患う対象の治療処置である。
【０１４３】
他の態様において、本発明の組成物および方法は、ビタミンＤに応答する疾患、すなわち、活性ビタミンＤが疾患の開始または進行を予防するか、あるいは疾患の徴候または症状を減弱する疾患の予防または治療処置に有用である。このようなビタミンＤに応答する疾患には、癌（例えば、乳房、肺、皮膚、黒色腫、結腸、結腸直腸、直腸、前立腺および骨の癌）が含まれる。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、いくつかの細胞に関してインビトロで細胞分化を誘導し、かつ／または細胞増殖を阻害することが観察されている。ビタミンＤに応答する疾患には、また、自己免疫疾患、例えば、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、リウマチ様関節炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、強皮症、線維症、グレーブス病、橋本病、急性または慢性の移植拒絶、急性または慢性の移植片対宿主病、炎症性腸疾患、クローン病、全身性紅斑性狼瘡、シェーグレン症候群、湿疹および乾癬、皮膚炎（アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎および／または慢性皮膚炎を含む）が含まれる。ビタミンＤに応答する疾患には、また、他の炎症性疾患、例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患、多嚢胞性腎疾患、多嚢胞性卵巣症候群、膵炎、腎炎、肝炎、および／または感染症が含まれる。ビタミンＤに応答する疾患には、高血圧および心血管疾患が含まれることも報告されている。したがって、本発明は、心血管疾患の危険があるまたは該疾患を患う対象、例えば、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、冠動脈疾患、脳血管疾患、末梢血管疾患、心筋梗塞、心筋虚血、脳虚血、脳卒中、鬱血性心不全、心筋症、肥満またはその他の体重障害、脂質障害（例えば、高脂血症、糖尿病付随性異脂肪血症および混合性異脂肪血症、低アルファリポタンパク血症、高グリセリド血症、高コレステロール血症および低ＨＤＬ（高密度リポタンパク）を含む異脂肪血症）、代謝性障害（例えば、メタボリック症候群、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、高インスリン血症、耐糖能障害、インスリン抵抗性、神経障害、腎障害、網膜症、糖尿病性足部潰瘍および白内障を含む糖尿病性合併症）、および／または血栓症を有する対象の予防または治療処置を考えている。
【０１４４】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2またはその類似体の濃度調節から利益を得ることのできる疾患には、限定はされないが、（ｉ）副甲状腺に関して−副甲状腺機能低下症、偽性副甲状腺機能低下症、二次性副甲状腺機能亢進症；（ｉｉ）膵臓に関して−糖尿病；（ｉｉｉ）甲状腺に関して−髄様癌；（ｉｖ）皮膚に関して−乾癬、創傷治癒；（ｖ）肺に関して−サルコイドーシスおよび結核症；（ｖｉ）腎臓に関して−慢性腎臓病、低リン血症性ＶＤＲＲ、ビタミンＤ依存性くる病；（ｖｉｉ）骨に関して−抗痙攣治療、小孔性線維形成不全症、嚢胞性線維性骨炎、骨軟化症、骨粗鬆症、骨減少症、骨硬化症、腎性骨ジストロフィー、くる病；（ｖｉｉｉ）腸に関して−グルココルチコイド拮抗、特発性高カルシウム血症、吸収不良症候群、脂肪便、熱帯性スプルー；および（ｉｘ）自己免疫障害が含まれる。
【０１４５】
本発明の実施形態において、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2またはその類似体の濃度調節から利益を得る疾患は、癌、皮膚科学的障害（例えば、乾癬）、副甲状腺障害（例えば、副甲状腺機能亢進症および二次性副甲状腺機能亢進症）、骨障害（例えば、骨粗鬆症）および自己免疫障害から選択される。
【０１４６】
本明細書に記載の方法および組成物は、異常に高められた血中ＰＴＨ濃度を治療するのに特に有用である。本発明は、該疾患を患う患者における血清中副甲状腺ホルモン濃度を低下させる（または低く維持する）ことによって、二次性副甲状腺機能亢進症などの副甲状腺機能亢進症を治療または予防する方法を提供する。該方法は、同時に、このような患者において発症することのある骨の代謝異常を改善できる。
【０１４７】
二次性副甲状腺機能亢進症は、慢性腎臓病の普通の合併症であり、それ故、考えられる特定の患者群は、ＣＫＤを有する群である。ステージ３、４および／または５のＣＫＤである患者は、本発明により治療することができる。二次性副甲状腺機能亢進症は、十分なビタミンＤの供給を妨げる環境、文化または食餌因子のため、健康な腎臓を有する個体でも発症する場合がある。
【０１４８】
本明細書に記載の方法は、また、限定はされないが、活性型ビタミンＤの投与に応答する骨量減少性障害；活性型ビタミンＤの投与に応答する免疫応答性障害；高血圧；細菌感染症；および心血管疾患を含む、ヒトの状態を治療または予防するのに使用されることを意図している。
【実施例】
【０１４９】
以下の実施例では、例示のために提供され、本発明の範囲を限定することを意図したものではない。
【０１５０】
（実施例１）
低い血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤを有する対象を治療するための１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2
１８〜８５歳の成人５０名が参加する研究において、低い血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤを有する対象に対する治療として、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を使用する。
【０１５１】
対象は、２０ｐｇ／ｍＬ未満の血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を有し、８週のベースライン期間、および次いで経口で投与される１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2での２４週間の療法を完結する。
【０１５２】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の初期投与量は、１．０μｇであり、４週間後に０．５μｇ／日の増量での増加を可能とする。最大投与量を、５．０μｇ／日の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2に制限する。対象を、規則的間隔で、血清中ｉＰＴＨ、血清中カルシウムおよびリン、２４時間および空腹時の尿中カルシウム、血清中の骨特異的マーカー、血漿中総１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、ならびに定型的な血液中化学物質および血液学についてモニターする。
【０１５３】
２４週の治療期間後に、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療された対象は、約２．５〜４．５ｍｇ／ｄＬの平均血清中リン濃度、約８．６〜１０．２ｍｇ／ｄＬの補正後平均血清中カルシウム濃度、約６５ｐｇ／ｍＬ〜１１０ｐｇ／ｍＬの平均血清中全分子副甲状腺ホルモン濃度、および約２０ｐｇ／ｍＬ〜６０ｐｇ／ｍＬの平均血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を示す。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与中の血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度の試験は、患者の血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度が１，２５−ジヒドロキシビタミンＤに関する患者の正常な経歴の生理学的範囲内であることを示す。患者における骨特異的なマーカー、アルカリホスファターゼ、Ｎ−およびＣ−テロペプチド、およびオステオカルシンの血清中濃度は、これらのマーカーの平均的な通常濃度を示す。
【０１５４】
（実施例２）
二次性副甲状腺機能亢進症を示す末期腎疾患（ＥＳＲＤ）患者での二重盲検試験
長期にわたる血液透析を受けている最大１００名までのヒトＥＳＲＤ（末期腎疾患）患者を、多施設、二重盲検、プラセボ対照試験で研究した。選択された患者は、米国大陸内の２箇所の主要大都市区域に居住し、年齢は２０〜７５歳であり、二次性副甲状腺機能亢進症の病歴を有する。彼らは、少なくとも４カ月間、血液透析中であり、正常な（または正常に近い）血清中アルブミンを有し、かつコントロールされた血清中リン（経口リン酸カルシウム結合剤の使用によることが多い）を有する。
【０１５５】
研究に入るに際して、各患者を、２つの治療群の１つに無作為に割り振る。これらの群の１つは、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2での１２週間の療法課程を連続して２回受け入れ、残りの群は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2での１２週間の療法課程を１回、続いて間をおかず、１２週間のプラセボ療法課程を１回受け入れる。各患者は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2療法を開始するに先立って、いかなる１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3療法をも８週間中断する。この８週間の洗浄（または対照）期間、およびそれに続く１２週×２回の治療期間中、患者を、週に１回、血清中のカルシウムおよびリンについてモニターする。血清中全分子ＰＴＨを、週に１回、または２週に１回モニターし、骨特異的血清中マーカー、血清中ビタミンＤ代謝産物、血清中アルブミン、血中化学物質、ヘモグロビンおよびヘマトクリットを、選択された間隔でモニターする。
【０１５６】
研究中、患者は、１．２４ｍＭのカルシウム透析液を使用して定形的な血液透析（週に３回）を受け、リン酸カルシウム結合剤（炭酸カルシウムまたは酢酸カルシウムなど）を、血清中リン酸塩を３．５〜５．５ｍｇ／ｄＬの範囲に維持して保持するのに十分な量で摂取する。患者が、治療期間中に持続性の軽症高カルシウム血症または軽症高リン血症を発症したら、彼らの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2投与量を減量する。患者が、著しい高カルシウム血症（補正後血清中総カルシウム濃度が１０．２ｍｇ／ｄＬを超える）または著しい高リン血症（血清中リン濃度が５．５ｍｇ／ｄＬを超える）を発症したら、治療を直ちに中止する。このような患者は、血清中のカルシウムまたはリンが正常化されるまで週２回の間隔でモニターし、そして１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与を再開する。
【０１５７】
８週間の洗浄期間中、平均血清中ＰＴＨ濃度は、漸進的かつ有意に増大する。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与を開始した後、平均血清中ＰＴＨは、治療前濃度の５０％未満まで有意に低下する。血清中ＰＴＨのこの降下のため、若干の患者では、血清中ＰＴＨの過剰抑制を予防するために、彼らの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2投与量を減量する必要がある。血清中ＰＴＨの過剰抑制を示すこのような患者では、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ2の投与量を適切に減量することによって矯正される一過性の軽症高カルシウム血症が観察される。
【０１５８】
最初の１２週の治療期間の終末時点で、平均血清中ＰＴＨは、末期腎疾患患者にとって望ましい１５０ｐｇ／ｍＬ〜３００ｐｇ／ｍＬの範囲であり、カルシウムおよびリンの血清中濃度は正常または正常に近い。次の１２週の治療期間（この期間中、１つの群では、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2治療を中断し、プラセボ療法で代替する）の終末時点で、プラセボ療法を受け入れている群での平均血清中ＰＴＨ値は、著しく増大し、治療前濃度に達する。効力のある群での平均血清中ＰＴＨは、コントロールされたままであり、カルシウムおよびリンの血清中濃度は、正常または正常に近いままである。この研究は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2が、血清中ＰＴＨ濃度を低下させる上で効果的であり、現在使用されている療法に比べてより安全であることを立証できる。
【０１５９】
（実施例３）
ラットへのカルシトリオールおよび１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の投与
スプラーグドーリーラットに、腎不全を誘導することが既に立証されている（Ｌｅｖｉら、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈ．、１７；１０７〜１１２）０．７５％のアデニンを含有する食餌を与えた。４週間後、すべての動物に通常食を与えた。研究の全過程中、通常食を受け入れる対照群を、通常の対照動物として使用した。アデニン食処置の４週間後、動物に、カルシトリオールまたは１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を０．０１、０．０５、０．１、０．２５および０．５ｍｇ／ｋｇで、静脈内で週３回、２または８週間投与した。２および８週間後に、血清、血漿、腎臓および副甲状腺を採集した。血漿および血清中のそれぞれｉＰＴＨおよびＦＧＦ２３を、市販のＥｌｉｓａキットを使用して測定した。血清中カルシウムは、ＯＲＴＨＯ−ＣＬＩＮＩＣＡＬ  ＶＩＴＲＯＳ  ２５０ケミストリーシステムまたはｏ−クレゾールフタレインコンプレクソンをベースにしたアッセイを使用して測定した。血清中リンは、ＯＲＴＨＯ−ＣＬＩＮＩＣＡＬ  ＶＩＴＲＯＳ  ２５０ケミストリーシステムまたはモリブデン酸アンモニウムをベースにしたアッセイを使用して測定した。フィブロネクチン１は、腎臓から単離されたｃＤＮＡからのリアルタイムＰＣＲにより測定した。
【０１６０】
図１は、アデニンで処置された動物において、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3、またはビヒクルのいずれかを２週間投与された後に測定したｉＰＴＨ濃度を示す。参考のため、研究中に通常食（アデニンなし）を給餌された動物についてのＰＴＨ値も示す。１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の両方とも、用量依存的な挙動で血清中ＰＴＨ濃度を抑制できる。示した投与量についての抑制の程度は２種の化合物間で有意に異なることはない。これらの結果は、これらの化合物が、ＰＴＨの発現を阻害する上でのそれらの効力に関して本質的に同等であることを示唆している。
【０１６１】
図２は、カルシトリオールで治療された動物について測定した血清中カルシウム濃度を示し、図３は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療された動物について測定した血清中カルシウム濃度を示す。カルシトリオールで治療された動物は、０．１０μｇ／ｋｇを超える投与量でカルシウムの有意な上昇を示し、一方、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療された動物は、０．０５μｇ／ｋｇを超える投与量で有意性を示した。０．１０μｇ／ｋｇのカルシトリオール投与量は、約１３．６％のＰＴＨ阻害に相当し、一方、０．０５μｇ／ｋｇの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2投与量は約８２．７％のＰＴＨ阻害に相当する。これらの発見は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2が、同等の効力を有する投与量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3と比べてカルシウム血症を引き起こす可能性が少ないと思われることを示している。
【０１６２】
図４は、カルシトリオールで治療された動物について測定された血清中リン濃度を示し、図５は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療された動物について測定された血清中リン濃度を示す。カルシトリオールで治療された動物は、高い方の２水準の投与量で有意なリンの上昇を示し、一方、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療された動物は、最高投与量でのみ有意性を示した。
【０１６３】
図６は、前向き試験における、カルシトリオールで治療された動物についての生存データを示し、図７は、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療された動物についての生存データを示す。
【０１６４】
図８は、治療１２日後の相対的な腎臓ＦＮ１誘導を示す。０．５ｍｇ／ｋｇで観察される腎臓ＦＮ１発現の抑制程度は、カルシトリオールで治療された動物に比較して、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2で治療された動物で有意に大きかった。０．１ｍｇ／ｋｇでは、２種の化合物間で抑制の相違が観察されなかった。
【０１６５】
（実施例４）
ヒト腸内での化合物の安定性
等部の０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）、ＮＡＤＰＨ、Ｇ−６−Ｐ、およびＧ−６−Ｐデヒドロゲナーゼを混合してＮＡＤＰＨ−生成系を調製し、ＮＡＤＰＨ、Ｇ−６−Ｐ、およびＧ−６−Ｐデヒドロゲナーゼの最終濃度を、０．８ｍＭ、８ｍＭ、および０．８Ｕ／ｍＬとした。
【０１６６】
１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2およびカルシトリオールを、ＮＡＤＰＨ生成系に添加した。２種のビタミンＤ化合物の最終濃度は、それぞれ３．３ｍＭとした。反応物を３７℃で５分間プレインキュベートした後、ヒト腸ミクロソーム（２２ｍｇ／ｍＬ）を添加して反応を開始した。６０分間インキュベートした後、冷した１００％アセトニトリルを添加して反応を終結した。検体のアリコートをＨＰＬＣに注射して化合物の残存％を測定した。
【０１６７】
結果は、図９で示され、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2が、ヒト腸上皮中で代謝的に不安定であることを立証している。腸内での選択的な不安定性は、ビタミンＤ療法において利点であり、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の軽減された毒性を説明する１つの因子である可能性がある。
【０１６８】
（実施例５）
Ｃ２ＢＢｅｌ細胞中でのアルカリホスファターゼおよびＣＹＰ２４の活性
Ｃ２ＢＢｅｌ細胞を、１ｍＭ、１００ｎＭ、および１０ｎＭの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2およびカルシトリオールで処理した。細胞を３７℃で８時間インキュベートした。次いで、該細胞を１ｍＬのトリゾール（ＴＲＩｚｏｌ）試薬中で溶解した。製造業者（ＩＮＶＩＴＲＯＧＥＮ）の説明書通りに細胞溶解物から相分離によりＲＮＡを分離した。ｃＤＮＡを合成した後、リアルタイムＰＣＲを使用してアルカリホスファターゼおよびＣＹＰ２４を定量した。
【０１６９】
測定されたアルカリホスファターゼおよびＣＹＰ２４の活性は、それぞれ図１０および図１１に示され、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2は、ＩＡＰ活性の強力な誘導因子ではないことを立証している。さらに、ＩＡＰおよびＹＰ２４応答の間の類似性は、これらの細胞での代謝の相違を示唆している。
【０１７０】
（実施例６）
Ｃａｃｏ−２細胞中での腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）の誘導
図１２は、カルシトリオール（一番上の線）、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2（すぐ下のデータ群および線）、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2（パリカルシトール、すぐ下のデータ群および線）、および米国特許第６３８０４０８号中で式ＩＸ（化合物１）として開示されている、（５Ｚ，７Ｅ，１６Ｚ，２３Ｅ）−（１Ｓ，３Ｒ）−２５−ノル−２５−ｔ−ブチルスルホニル−９，１０−セコ−５，７，１０（１９），１６，２３−コレスタペンタエン−１，３−ジオール（図中、１番下のデータ群および線）である活性ビタミンＤホルモン類似体での治療に続く、Ｃａｃｏ−２細胞中での腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＰ）活性（単位時間変化当たりのｍＲＮＡ光学密度変化）を示す。該データは、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2が、１９−ノル−１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2およびもう１つのビタミン類似体と比較して、ＩＡＰに対して類似の効果を有することを示している。
【０１７１】
これまでの説明は、明瞭な理解のためにのみ与えられ、本発明の範囲内での修正は、当業者にとって明らかである可能性があるので、その説明から不必要な限定を推測すべきではない。
【０１７２】
本明細書中で引用されるすべての特許、刊行物および参考文献は、ここで参照により完全に組み込まれる。本開示と組み込まれる特許、刊行物および参考文献との間に矛盾が存在する場合には、本開示が、優先するものとする。
【０１７３】
明細書の全体を通して、組成物が成分または材料を含むと記載される場合、特記しない限り、該組成物は、また、列挙した成分または材料の任意の組合せから本質的に構成され得るか、構成され得ると考えられる。
【０１７４】
本明細書中で開示される方法、およびその個々のステップの実施は、手で、および／または機械および／または電子装置の助けを用いて実施できる。該方法は、特定の実施形態に関して説明されるが、当業者は、該方法と関連した行為を実施する他の方法を使用できることを容易に認識するであろう。例えば、各種ステップの順序は、特記しない限り、該方法の範囲または精神から逸脱しないで変更できる。さらに、個々のステップのいくつかを、組み合わせ、削除し、あるいは付加的ステップにさらに再分割できることを認識するであろう。
【０１７５】
以下に本発明の態様を示す。
１．ヒト患者の血清中全分子副甲状腺ホルモンを安全に低下させるか、あるいは低下した該ホルモンを維持する方法であって、該患者に、血清中副甲状腺ホルモン濃度を低下させるか、あるいは低下した該ホルモン濃度を維持するのに有効な量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与することを含む方法。
２．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の前記投与によって、同時に、
（ａ）患者の血清中カルシウム濃度を高めることおよび／または維持すること；
（ｂ）患者の血清中リン濃度を維持すること；
（ｃ）患者の血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を高めること；および
（ｄ）患者の血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を維持すること
をさらに含む、前記１に記載の方法。
３．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の前記投与によって、患者の血清中カルシウム濃度を約８．６〜１０．２ｍｇ／ｄＬの範囲に高めることおよび／または維持することを含む、前記１または２に記載の方法。
４．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の前記投与によって、患者のリン濃度を２．５〜４．５ｍｇ／ｄＬの範囲に維持することを含む、前記１から３までのいずれか１に記載の方法。
５．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の前記投与によって、患者の血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を患者の正常な経歴の生理学的範囲に高めることを含む、前記１から４までのいずれか１に記載の方法。
６．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の前記投与によって、血清中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を患者の正常な経歴の生理学的範囲に少なくとも３０日間維持することを含む、前記１から５までのいずれか１に記載の方法。
７．前記有効量が、血清中全分子副甲状腺ホルモン濃度を少なくとも１５％低下させるのに十分である、前記１から６までのいずれか１に記載の方法。
８．患者に、ある量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与することによって、ヒト患者の血中１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ濃度を安全に高めるか、あるいは維持する方法。
９．ヒト患者における１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ欠乏症の１種または複数の症状を軽減する方法であって、該患者に、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ欠乏症の１種または複数の症状を軽減するような量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を投与することを含む方法。
１０．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ欠乏症の前記１種または複数の症状が、ビタミンＤの非古典的効果に関する欠乏症の症状を包含する、前記９に記載の方法。
１１．患者への１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の前記投与が、患者におけるレニン−アンジオテンシン系の負の内分泌調節を提供する、前記１０に記載の方法。
１２．患者が慢性腎臓病（ＣＫＤ）と診断されている、前記１から１１までのいずれか１に記載の方法。
１３．患者が、慢性腎臓病に続発する副甲状腺機能亢進症（ＳＨＰＴ）と診断されている、前記１から１２までのいずれか１に記載の方法。
１４．前記ＣＫＤが、ステージ１またはステージ２のＣＫＤである、前記１２または１３に記載の方法。
１５．前記ＣＫＤが、ステージ３、ステージ４、またはステージ５のＣＫＤである、前記１２または１３に記載の方法。
１６．投与される１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の量が、血清中ＰＴＨ濃度を、ステージ３のＣＫＤ患者では３５〜７０ｐｇ／ｍＬ、ステージ４のＣＫＤ患者では７０〜１１０ｐｇ／ｍＬ、ステージ５のＣＫＤ患者では１５０〜３００ｐｇ／ｍＬに低下させるのに十分である、前記１５に記載の方法。
１７．投与される１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の量が、１週につき０．１μｇ〜約１００μｇである、前記１から１６までのいずれか１に記載の方法。
１８．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を少なくとも３０日間投与することを含む、前記１から１７までのいずれか１に記載の方法。
１９．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を少なくとも２カ月間投与することを含む、前記１８に記載の方法。
２０．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を少なくとも３カ月間投与することを含む、前記１８に記載の方法。
２１．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を少なくとも４カ月間投与することを含む、前記１８に記載の方法。
２２．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を少なくとも５カ月間投与することを含む、前記１８に記載の方法。
２３．１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を少なくとも６カ月間投与することを含む、前記１８に記載の方法。
２４．患者における２５−ヒドロキシビタミンＤおよび１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の漸進的減少を回避することをさらに含む、前記１８から２３までのいずれか１に記載の方法。
２５．血清中（または血漿中）全分子副甲状腺ホルモンを低下させる活性を有する医薬組成物であって、有効量の１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2および少なくとも１種の医薬として許容し得る賦形剤を含有する医薬組成物。
２６．単位剤形である、前記２５に記載の組成物。
２７．前記医薬として許容し得る少なくとも１種の賦形剤が、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の制御放出を提供する、前記２５または２６に記載の組成物。
２８．前記医薬として許容し得る少なくとも１種の賦形剤が、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の実質的に一定の放出を提供する、前記２７に記載の組成物。
２９．前記医薬として許容し得る少なくとも１種の賦形剤が、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の遅延放出を提供する、前記２７または２８に記載の組成物。
３０．前記医薬として許容し得る少なくとも１種の賦形剤が、患者の小腸への１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の遅延放出を提供する、前記２９に記載の組成物。
３１．前記医薬として許容し得る少なくとも１種の賦形剤が、患者の回腸への１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の遅延放出を提供する、前記２９に記載の組成物。
３２．経口製剤を構成する、前記２５から３１までのいずれか１に記載の組成物。
３３．静脈内製剤を構成する、前記２５から３１までのいずれか１に記載の組成物。
３４．単位剤形が、約０．１μｇ〜約１０μｇの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する、前記２６から３３までのいずれか１に記載の組成物。
３５．単位剤形が、約１μｇ〜約４μｇの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する、前記３４に記載の組成物。
３６．約２μｇ〜約１０μｇの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する、前記２７から３３までのいずれか１に記載の組成物。
３７．約３μｇ〜約５μｇの１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2を含有する、前記３６に記載の組成物。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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