(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
(ａ)式(Ｉ)
【化１】
0006006308.tif 000021
のピリミジンスルホンアミドまたは(ｂ)薬学的に許容されるその塩である、化合物。
【請求項２】
式(Ｉ)の、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物および薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体を含む、医薬組成物。
【請求項４】
ケモカイン介在疾患状態処置のための、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
喘息、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、骨関節症、骨粗鬆症、リウマチ性関節炎または乾癬の処置のための、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項６】
結晶形態である、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２の２シータ(度)から選択される少なくとも１個のピークを有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられる、請求項６に記載の結晶形態。
【請求項８】
Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２の２シータ(度)から選択される少なくとも２個以上のピークを有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられる、請求項６に記載の結晶形態。
【請求項９】
Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２の２シータ(度)から選択される少なくとも３個のピークを有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられる、請求項６に記載の結晶形態。
【請求項１０】
Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２の２シータ(度)にピークを有するＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられる、請求項６に記載の結晶形態。
【請求項１１】
Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して実質的に図１
【表１】
0006006308.tif 000022
に示すＸ線粉末回折パターンを有することにより特徴付けられる、請求項６に記載の結晶形態。
【請求項１２】
(ａ)式(VIII)
【化２】
0006006308.tif 000023
のアゼチジンスルホンアミドまたは(ｂ)その塩である、化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明はある種のヘテロ環式化合物、その製造に使用する方法および中間体、それらを含む医薬組成物および治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
ケモカイン類は、喘息およびアレルギー性疾患を含む種々の疾患および障害における免疫および炎症性応答、ならびに自己免疫性病態、例えばリウマチ性関節炎およびアテローム性動脈硬化症において重要な役割を有する。これらの分泌性小分子は、保存されたシステインモチーフにより特徴付けされる８〜１４kDaタンパク質の増大しつつあるスーパーファミリーである。現時点で、ケモカインスーパーファミリーは、特徴的構造モチーフを示す三群、Ｃ−Ｘ−Ｃ、Ｃ−ＣおよびＣ−Ｘ３−Ｃファミリーに分類される。Ｃ−Ｘ−ＣおよびＣ−Ｃファミリーは配列類似性を有し、互いに、システイン残基のＮＨ−近位対の間における1アミノ酸挿入に基づいて区別される。Ｃ−Ｘ３−Ｃファミリーは他の２つのファミリーと、システイン残基のＮＨ−近位対の間に３アミノ酸挿入を有することに基づき区別される。
【０００３】
Ｃ−Ｘ−Ｃケモカイン類は、数種の強力な好中球の化学誘引物質およびアクティベーター、例えばインターロイキン−８(ＩＬ−８)および好中球活性化ペプチド２(ＮＡＰ−２)を含む。
【０００４】
Ｃ−Ｃケモカイン類は、好中球ではなく、単球およびリンパ球の強力な化学誘引物質を含む。例は、ヒト単球走化性タンパク質１〜３(ＭＣＰ−１、ＭＣＰ−２およびＭＣＰ−３)、ＲＡＮＴＥＳ(Regulated on Activation, Normal T Expressed and Secreted)、エオタキシンおよびマクロファージ炎症性タンパク質１αおよび１β(ＭＩＰ−１αおよびＭＩＰ−１β)を含む。
【０００５】
Ｃ−Ｘ３−Ｃケモカイン(フラクタルカインとしても知られる)は、中枢神経系(ＣＮＳ)のミクログリアならびに単球、Ｔ細胞、ＮＫ細胞および肥満細胞の強力な化学誘引物質およびアクティベーターである。
【０００６】
ケモカイン類の作用は、Ｇタンパク質共役受容体、特に、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ２Ａ、ＣＣＲ２Ｂ、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０およびＣＣＲ１１(Ｃ−Ｃファミリーについて)；ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４およびＣＸＣＲ５(Ｃ−Ｘ−Ｃファミリーについて)およびＣ−Ｘ３−ＣファミリーについてＣＸ３ＣＲ１と呼ばれる受容体により介在されることが試験により証明されている。これらの受容体は、これらの受容体を調節する薬剤が上記のもののような障害および疾患の処置に有用であるため、薬剤開発の格好の標的となっている。
【０００７】
ＰＣＴ特許出願ＷＯ２００４／０１１４４３、ＷＯ２００６／０２４８２３およびＷＯ２０１０／００７４２７は、ケモカイン受容体のモジュレーターとして使用するためのピリミジニルスルホンアミド誘導体を開示する。
【発明の概要】
【０００８】
発明の記載
本発明は、(ａ)式(Ｉ)
【化１】
0006006308.tif 000002
のピリミジンスルホンアミドまたは(ｂ)その薬学的に許容される塩である、化合物を提供する。
【０００９】
本発明の代表的化合物は、イヌにおいて予想外に長い半減期を示す。前臨床動物種(例えばイヌ)における長い半減期は、ヒトにおける長い半減期が達成できることを示唆する(Obach et al. (1997), J. Pharmacol. Exp. Ther., 283: 46-58)。ヒトにおける１２時間を超える半減期は、１日１回投与に相応する。
【００１０】
加えて、ヒトにおける標的受容体に拮抗し、そうして所望の生物学的効果を生じるために、化合物は受容体機能を阻害する十分な濃度で血漿に存在しなければならず、この濃度は、投与間に継続して受容体阻害をするのに十分な時間維持されていなければならない。故に、化合物は高い効力および長い半減期の両者の組み合わせを示さなければならない。本発明の代表的化合物は、イヌにおいて高い効力と長い測定半減期の組み合わせを示す。
【００１１】
要求される効果を惹起発現するのに必要な最小濃度はＣｍｉｎであり、投与間隔の終了時(例えば１日１回投与薬物では２４時間経過時)にＣｍｉｎを維持するために血漿において到達する最高濃度はＣｍａｘである。故に、高Ｃｍａｘレベルは望まない効果をもたらす可能性が高いため、小さいＣｍａｘ／Ｃｍｉｎ比(長い半減期によりもたらされる)が有利である。本発明の化合物は小さいＣｍａｘ／Ｃｍｉｎ比を有することが予測される。
【００１２】
さらなる面において本発明の化合物は、塩形態ではない式(Ｉ)の化合物である。
本発明において、本発明の化合物は互変異性現象を示し、本明細書中の式は、可能な互変異性形態の１個のみを描記していることが理解されるべきである。本発明はあらゆる互変異性形態およびそれらの混合物を包含し、式で描記した１個の互変異性形態にのみ限定されないことが理解されるべきである。
【００１３】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される非毒性塩基、例えば無機または有機塩基から製造される塩を含み得る。無機塩基由来の塩は、例えば、アルミニウム塩、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩または亜鉛塩であり得る。有機塩基由来の塩は、例えば、１級、２級または３級アミンの塩であり得る。
【００１４】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、インサイチュで化合物の最終単離および精製中にまたは別途化合物と適切な塩基を反応させ、こうして形成した塩を単離することにより製造してよい。
【００１５】
本発明の化合物は溶媒和物(例えば水和物)として存在でき、本発明は全てのこのような溶媒和物を包含する。
本発明の化合物は、式(Ｉ)の化合物のインビボで加水分解されるエステルとして存在し得る。
【００１６】
ヒドロキシ基を含む本発明の化合物のインビボ加水分解性エステルは、例えば、ヒトまたは動物体内で加水分解されて、親アルコールを生じる薬学的に許容されるエステルである。
【００１７】
ヒドロキシ基を含む本発明の化合物のインビボ加水分解性エステルは、無機エステル類、例えばホスフェートエステル類(ホスホルアミド酸環状エステル類)およびα−アシルオキシアルキルエーテル類およびエステルなど、インビボ加水分解の結果分解されて親ヒドロキシ基を有する関連化合物を含むエステルである。α−アシルオキシアルキルエーテル類の例は、アセトキシメトキシおよび２,２−ジメチルプロピオニルオキシ−メトキシを含む。ヒドロキシのためのインビボ加水分解性エステル形成基の選択は、アルカノイル、ベンゾイル、フェニルアセチルおよび置換ベンゾイルおよびフェニルアセチル、アルコキシカルボニル(炭酸アルキルエステル類となる)、ジアルキルカルバモイルおよびＮ−(ジアルキルアミノエチル)−Ｎ−アルキルカルバモイル(カルバミン酸エステル類となる)、ジアルキルアミノアセチルおよびカルボキシアセチルを含む。
【００１８】
本発明の化合物は結晶形態で存在し得る。故に、本発明のさらなる面によって、実質的に結晶形態の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩類が提供される。
【００１９】
ここで本発明の化合物を結晶として記載するとき、適切にはＸ線粉末回折データにより決定した結晶化度は、例えば約６０％を超え、例えば約８０％を超え、特に約９０％を超え、より具体的には約９５％を超える。本発明の態様において、Ｘ線粉末回折データにより決定した結晶化度は約９８％を超え、ここで、％結晶化度は、結晶である総サンプル質量の重量％を意味する。
【００２０】
式(Ｉ)の化合物は、無水和物である結晶形態の形態で製造し得ると前に記載している。これにより、我々は、結晶形態が１０％未満の式(Ｉ)の化合物の水和物形態(例えば一水和物)を包含することを意味する。
【００２１】
本発明のさらなる面によって、実質的に結晶無水和物形態の式(Ｉ)の化合物が提供される。さらに別の面において、式(Ｉ)の化合物は塩の形態ではない。さらに別の面において、式(Ｉ)の化合物は溶媒和物の形態ではない、すなわち“非溶媒和物”である。故に、用語“無水和物”は“非溶媒和物”を包含する。
【００２２】
本発明のさらなる面によって、次の約１７６℃の融解吸熱の開始温度を示す、窒素雰囲気下、密閉アルミニウムカップ中の１０℃／分の加熱速度での示差走査熱量測定曲線により特徴付けされ得る無水和物結晶形態の式(Ｉ)の化合物が提供される。
【００２３】
本発明のさらに別の面によって、次の近似２シータ値(度)を用いた特徴的ピークを含む、Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定してＸ線粉末回折パターンにより特徴付けされ得る結晶形態の式(Ｉ)の化合物が提供される。
【００２４】
Ｎ−(６−((２Ｒ,３Ｓ)−３,４−ジヒドロキシブタン−２−イルオキシ)−２−(４−フルオロベンジルチオ)ピリミジン−４−イル)−３−メチルアゼチジン−１−スルホンアミドの結晶形態Ａ(以後‘形態Ａ’)：約１７６℃の融解吸熱の開始温度を示す、窒素雰囲気下、密閉アルミニウムカップ中の１０℃／分の加熱速度での特徴的示差走査熱量測定曲線。
【００２５】
さらなる面において形態Ａは、Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して、８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２の２シータ(度)で特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する。
【００２６】
さらなる面において、形態Ａは、Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して、８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２の２シータ(度)での特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する。
【００２７】
他の面において、形態Ａは、Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して、８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２から選択される２シータ(度)での少なくとも３個の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する。
【００２８】
さらなる面において、形態Ａは、Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して、８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２から選択される２シータ(度)での少なくとも２個の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する。
【００２９】
さらに別の面において、形態Ａは、Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して、８.５、９.７、１０.６、１７.１、１９.９および２１.２から選択される２シータ(度)での少なくとも１個の特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する。
【００３０】
他の面において、形態Ａは、Ｘ線１.５４１８Åの波長を使用して測定して、図１に示す特徴的Ｘ線粉末回折パターンピークを有する。
他の面において、形態Ａは、実質的に図２に示す特徴的示差熱量測定曲線を有する。
【００３１】
適切には、本発明の化合物の結晶修飾は、実質的に本化合物の他の結晶修飾を含まない。適切には、記載した式(Ｉ)の化合物の結晶修飾は、例えば、２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満、３％未満または特に、１重量％未満のその化合物の他の結晶形態を含む。
【００３２】
式(Ｉ)の化合物の結晶無水和物は、ここに記載するとおり、式(Ｉ)の化合物を１種以上の適切な溶媒またはそれらの混合物から結晶化させることにより製造し得る。無水和物は、実質的に水不含の溶媒系(乾燥しているものであってよいおよび／または結晶化工程中に乾燥してよい)から結晶化させることにより製造し得る。溶媒を結晶化工程中に、例えば適切な有機溶媒／水性溶媒系中の結晶化させる化合物の混合物の水含量を減らすことにより、乾燥してよい(例えば存在する有機溶媒の量を増やすことによりおよび／または共沸混合物の形成と続く蒸留による水除去により)。しかしながら、式(Ｉ)の化合物の結晶無水和物は水および／または水／アルコール混合物からも製造し得る。
【００３３】
無水和物である本発明の化合物は、典型的に最大で２％、特に１％、より具体的には０.５％、より具体的には０.２％(ｗ／ｗ)の水を含み、このような水は結合しているか(結晶水またはそれ以外)または結合していない。
【００３４】
ここに記載の結晶形態が他の結晶形態が存在せずに製造できることを確実にするために、結晶化は、他の結晶形態の核および／または種結晶非存在下の所望の結晶形態の核および／または種結晶の種晶添加により行い得る。
【００３５】
当業者は、結晶化すべき化合物の溶液中の濃度および使用する溶媒系が結晶化温度および結晶化時間に影響を及ぼし得ることを認識する。
【００３６】
異なる結晶形態は、異なる有機溶媒に任意のある温度で異なる溶解度を有し得る。この点において、上にまたは他に記載した、溶媒を“貧溶媒”(すなわち本発明の化合物が難溶性であるが、本発明の化合物がより可溶性である他の溶媒と混和性である溶媒)として用いてよく、こうして結晶化工程を助け得る。
【００３７】
当業者には認識され得るとおり、得られる結晶形態は、結晶化工程の動力学および熱力学の両者に依存する。ある熱力学的条件下(溶媒系、温度、圧力および本発明の化合物の濃度)、一つの結晶形態は他の一つ(または実際他のすべて)より安定であり得る。しかしながら、比較すると、相対的に低い熱力学的安定性を有し得る他の結晶形態が、動力学的に好ましいことがある。故に、さらに、動力学的因子、例えば時間、不純物プロファイル、撹拌、種晶の存在なども、その形態が出現するかに影響し得る。故に、ここに記載する方法は、特定の結晶形態の式(Ｉ)の化合物を得るために適宜当業者により改良され得る。
【００３８】
本発明の化合物は、標準的方法を使用して乾燥し得る。当業者には当然であるが、乾燥温度および乾燥時間は、本発明の化合物の固体状態特性および／または固体状態形態に影響し得る。例えば、脱水は低湿度および／または高温および／または減圧下に行い得る。故に、本発明の化合物の結晶無水和物は、水和物の脱水によっても形成し得る。
【００３９】
本発明の化合物の製造および特徴付けは、当分野で知られた方法の改良によりまたは実施例に記載する製造方法の使用または改良により行い得る。本発明の化合物の種々の結晶形態を、例えば下記のとおり、Ｘ線粉末回折(ＸＲＰＤ)方法を使用して容易に特徴付けし得る。標準ＤＳＣ技術も使用し得る。
【００４０】
本発明の化合物を下記スキーム１および下記実施例に従い製造し得る。
【化２】
0006006308.tif 000003
(ｉ) 酢酸ナトリウム、水、アセトニトリル；
(ii) オキシ塩化リン、塩化ベンジルトリエチルアンモニウム、ジメトキシエタン；
(iii) 水素化ナトリウム、テトラヒドロフラン；
(iv) 炭酸セシウム、ジシクロヘキシル(２’,４’,６’−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)、ジオキサン；
(ｖ) トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン。
【００４１】
式(II)および(III)の化合物は市販されているかまたは当業者に良く知られた方法を使用して合成し得る。
【００４２】
式(VI)の化合物は文献に以前に記載された方法を製造し得る(例えばMulzer, J. et al, Liebigs Ann. Chem., 1987, 7-14; Braun, M. et al, Liebigs Annalen, 1995, 1, 29-40; Wang, B-L. et al, Tetrahedron, 2007, 63(51), 12671-12680参照)。あるいは式(VI)の化合物を下記スキーム２、スキーム３およびスキーム３’および下記実施例に従い製造し得る。
【化３】
0006006308.tif 000004
【化４】
0006006308.tif 000005
ここで、Ｚは２,３,４−トリ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２,４,５−トリ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２,４,６−トリ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、３,４,５−トリ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２,３−ジ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２,４−ジ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２,５−ジ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２,６−ジ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、３,４−ジ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、３,５−ジ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、３,６−ジ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、４−フェニルフェニル、２−Ｃ１−４アルコキシフェニル、３−Ｃ１−４アルコキシフェニル、４−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２−ニトロフェニル、３−ニトロフェニル、４−ニトロフェニル、３,５−ジニトロフェニル、１−ナフトエ酸および２−ナフトエ酸から選択される。特に、Ｚは３,４,５−トリ−Ｃ１−４アルコキシフェニル、４−フェニルフェニル、４−Ｃ１−４アルコキシフェニル、２−ニトロフェニル、４−ニトロフェニルおよび３,５−ジニトロフェニルから選択される。一つの面において、ＺにおけるＣ１−４アルキル基は独立してメチルおよびエチルから選択され、ＺにおけるＣ１−４アルコキシ基はメトキシおよびエトキシから独立して選択される。一つの面において、Ｚは３,４,５−トリメトキシフェニルである。
【００４３】
スキーム３に示す本方法の特定の面をスキーム３’に示す。
【化５】
0006006308.tif 000006
ここで、Ｒ’はＣ１−４アルキルである。特に、Ｒ’はメチルおよびエチルから独立して選択される。他の面において、Ｒ’はメチルである。
【００４４】
スキーム３に記載した式(VI)の化合物の新規方法は、先の方法より工程数が少ない利点を有する。故に本発明の他の面は、式(XII)の化合物からの式(VI)の化合物の製造である。本発明の他の面は、式(XI)の化合物からの式(VI)の化合物の製造である。本発明の他の面は、式(XII’)の化合物からの式(VI)の化合物の製造である。本発明の他の面は、式(XI’)の化合物からの式(VI)の化合物の製造である。
【００４５】
式(VIII)の化合物は、下記実施例に示す方法に従い製造し得る。本発明の他の面において、(ａ)式(VIII)のアゼチジンスルホンアミドまたは(ｂ)その塩(以後“本発明の中間体”と呼ぶ)が提供される。
【００４６】
スキーム３において、Ｅ−クロチルアルコールは、乾燥剤を使用して予め乾燥しておくのが好都合である。適切な乾燥剤の例は、モレキュラー・シーブ(例えばモレキュラー・シーブ３Å)である。予め乾燥したＥ−クロチルアルコールを酒石酸Ｌ−(＋)−ジ−イソプロピルまたは酒石酸Ｌ−(＋)−ｔｅｒｔ−ブチルと、オルトチタン酸テトライソプロピルの存在下、有機溶媒中で反応させ、続いて有機過酸化物、例えばクメンヒドロペルオキシドと反応させ、その後Ｚ−ＣＯＯＨと反応させて、式(XI)の化合物を得ることができる。一つの面において、本工程における溶媒および反応材中の合わせた水含量はＥ−クロチルアルコールに対して０.０３８モル当量を超えない。
【００４７】
式(XI)の化合物を、ジメトキシプロパンと触媒である酸、例えばパラ−トルエンスルホン酸の存在化、有機溶媒中で反応させ、続いて穏やかな水性塩基、例えば重炭酸カリウム水溶液を添加することにより式(XII)の化合物に変換し得る。あるいは、非水性塩基を水性後処理の後に使用してよい。
【００４８】
式(XII)の化合物を、塩基と反応させることにより式(VI)の化合物に変換し得る。適切な塩基は、例えば、水酸化ナトリウムである。
【００４９】
式(XI’)の化合物またはその塩は新規であり、本発明の他の面を形成する。式(XII’)の化合物またはその塩は新規であり、本発明の他の面を形成する。
【００５０】
本発明のさらなる面において、ケモカイン受容体活性を調節する化合物の製造における本発明の中間体の使用が提供される。さらに別の面において、式(Ｉ)の化合物または薬学的に許容されるその塩の製造における、本発明の中間体の使用が提供される。
【００５１】
本発明の化合物は医薬として、特にケモカイン受容体(特にＣＸＣＲ２)活性のモジュレーターの活性を有し、ケモカイン類の過剰なまたは非制御の産生により悪化するまたはそれが原因のヒトおよび非ヒト動物における状態／疾患の処置(治療的または予防的)に使用し得る。このような状態／疾患の例は次の物を含み、ここで、各状態／疾患は独立してまたはその任意の組み合わせで引用される。
(１)  呼吸器  −  慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)を含む閉塞性気道疾患；喘息、例えば気管支、アレルギー性、内因性、外因性および塵埃喘息、特に慢性または難治性喘息(例えば遅発性喘息および気道過剰応答)；気管支炎；乾酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、化膿性鼻炎、乾燥性鼻炎および薬物性鼻炎を含む急性、アレルギー性、萎縮性鼻炎および慢性鼻炎；クループ性、線維素性および偽膜性鼻炎および腺病性鼻炎を含む膜性鼻炎；神経性鼻炎(枯草熱)を含む季節性鼻炎および血管運動神経性鼻炎；サルコイドーシス、農夫肺および関連疾患、類繊維肺および特発性間質性肺炎；
【００５２】
(２)  骨および関節  −  リウマチ性関節炎、骨関節症、血清反応陰性脊椎関節症(強直性脊椎炎、乾癬性関節炎およびライター病を含む)、ベーチェット病、シェーグレン症候群および全身性硬化症；
【００５３】
(３)  皮膚  −  乾癬、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎および他の湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、扁平苔癬、天疱瘡、水疱性天疱瘡、表皮水疱症、蕁麻疹、皮膚脈管炎、脈管炎、紅斑、皮膚好酸球増加症、ブドウ膜炎、円形脱毛症および春季結膜炎；
【００５４】
(４)  消化器  −  セリアック病、直腸炎、好酸球性胃腸炎、肥満細胞症、クローン病、潰瘍性大腸炎、分類不能腸炎、顕微鏡的大腸炎、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、非炎症性下痢、腸から離れた部位に発現する食物関連アレルギー、例えば、片頭痛、鼻炎および湿疹；
【００５５】
(５)  中枢および末梢神経系  −  神経変性疾患および認知症疾患、例えばアルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症および他の運動神経疾患、クロイツフェルト−ヤコブ病および他のプリオン疾患、ＨＩＶ脳症(ＡＩＤＳ性認知症合併症)、ハンチントン病、前頭側頭骨性認知症、レヴィー小体認知症および血管性認知症；多発神経障害、例えばギランバレー症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経根筋障害、多巣性運動神経障害、神経叢障害；ＣＮＳ脱髄、例えば多発性硬化症、急性汎発性／出血性脳脊髄炎および亜急性硬化性全脳炎；神経筋疾患、例えば重症筋無力症およびランバート−イートン症候群；脊髄疾患、例えば熱帯性痙攣不全対麻痺およびスティッフマン症候群：新生物随伴症候群、例えば小脳変性および脳脊髄炎；ＣＮＳ外傷；片頭痛；および卒中。
【００５６】
(６)  その他の組織および全身性疾患  −  アテローム性動脈硬化症、後天性免疫不全症候群(ＡＩＤＳ)、エリテマトーデス、全身性狼瘡、エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、Ｉ型糖尿病、ネフローゼ症候群、好酸球性筋膜炎、高ＩｇＥ症候群、らい腫性らいおよび特発性血小板減少性紫斑；手術後癒着および敗血症。
【００５７】
(７)  同種移植片拒絶反応  −  例えば、腎臓、心臓、肝臓、肺、骨髄、皮膚および角膜移植後の急性および慢性；および慢性移植片対宿主病；
【００５８】
(８)  癌  −  特に非小細胞性肺癌(ＮＳＣＬＣ)、悪性黒色腫、前立腺癌および扁平上皮肉腫および腫瘍転移、非黒色腫皮膚癌および化学予防転移；
【００５９】
(９)  疾患−  血管形成がＣＸＣＲ２ケモカインレベル上昇と関連するもの(例えばＮＳＣＬＣ、糖尿病性網膜症)；
【００６０】
(１０)  嚢胞性線維症；
【００６１】
(１１)  火傷および慢性皮膚潰瘍；
【００６２】
(１２)  生殖器疾患−  例えば排卵、月経および着床の障害、早産、子宮内膜症；
【００６３】
(１３)  再潅流傷害  −  心臓、脳、末梢肢および他の臓器におけるもの、アテローム性動脈硬化症の阻害。
【００６４】
故に、本発明は、治療において使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００６５】
故に、本発明は、治療において使用するための上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその互変異性体または薬学的に許容されるその塩を提供する。
【００６６】
好都合には、本発明の化合物を使用して、ケモカイン受容体がＣＸＣケモカイン受容体サブファミリーに属する疾患の処置に使用でき、より好都合には、標的ケモカイン受容体はＣＸＣＲ２受容体である。
【００６７】
本発明の化合物で処置できる特定の状態は癌、血管形成がＣＸＣＲ２ケモカインレベル上昇と関連する疾患および炎症性疾患、例えば喘息、アレルギー性鼻炎、ＣＯＰＤ、リウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、骨関節症または骨粗鬆症である。上記各状態／疾患は、独立してまたは任意の組み合わせて取り上げたとき、本発明の独立した態様となる。
【００６８】
本発明の化合物は、ケモカイン受容体がＣＣＲケモカイン受容体サブファミリーに属する疾患の処置にも使用でき、より好都合には、標的ケモカイン受容体はＣＣＲ２ｂ受容体である。
【００６９】
さらなる面において、本発明は、医薬として使用するための、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００７０】
さらに別の面において、本発明は、ケモカイン受容体活性の調節が有益であるヒト疾患または状態の処置用医薬として使用するための、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７１】
さらに別の面において、本発明は、喘息、アレルギー性鼻炎、癌、ＣＯＰＤ、リウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、骨関節症または骨粗鬆症の処置用医薬として使用するための、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７２】
さらなる面において、本発明は、治療において使用するための医薬の製造における、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７３】
さらに別の面において、本発明は、ケモカイン受容体活性の調節が有益であるヒト疾患または状態の処置用医薬の製造における、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７４】
さらに別の面において、本発明は、喘息、アレルギー性鼻炎、癌、ＣＯＰＤ、リウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、骨関節症または骨粗鬆症の処置用医薬の製造における、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７５】
さらに別の面において、本発明は、喘息、アレルギー性鼻炎またはＣＯＰＤの処置用医薬の製造における、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７６】
さらに別の面において、本発明は、ＣＯＰＤの処置用医薬の製造における、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７７】
さらに別の面において、本発明は、喘息の処置用医薬の製造における、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
【００７８】
本明細書の文脈において、用語“治療”はまた、特に断らない限り、“予防”も含む。用語“治療上”および“治療的”もこれに従い解釈すべきである。
【００７９】
本発明は、さらに、患者に上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を投与することを含む、ケモカインがケモカイン(特にＣＸＣＲ２)受容体に結合するケモカイン介在疾患の処置方法を提供する。
【００８０】
本発明はまた、患者に上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を投与することを含む、炎症性疾患、特に喘息、アレルギー性鼻炎、ＣＯＰＤ、リウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、骨関節症または骨粗鬆症の、該疾患を有するまたはリスクのある患者における処置方法を提供する。
【００８１】
本発明はまた、患者に上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を投与することを含む、炎症性疾患、特に喘息、アレルギー性鼻炎またはＣＯＰＤの、該疾患を有するまたはリスクのある患者における処置方法を提供する。
【００８２】
上記治療使用において、投与する投与量は、当然、用いる化合物、投与方法、望む処置および適応される障害により異なる。
【００８３】
式(Ｉ)の化合物およびその薬学的に許容される塩類はそれ自体で使用してよいが、一般的に、式(Ｉ)化合物／塩(活性成分)が薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と組み合わされている医薬組成物の形で投与する。投与方法によって、医薬組成物は、好都合には０.０５〜９９％ｗ(重量パーセント)、より好都合には０.０５〜８０％ｗ、さらに好都合には０.１０〜７０％ｗ、なお好都合には０.１０〜５０％ｗの活性成分を含み、全重量パーセントは総組成物に基づく。
【００８４】
本発明はまた上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体と共に含む医薬組成物を含む。
【００８５】
本発明は、さらに、上に定義した式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩と薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤または担体を混合することを含む、本発明の医薬組成物の製造方法を提供する。医薬組成物は、溶液、懸濁液、ヘプタフルオロアルカンエアロゾルおよび乾燥粉末製剤の形態で局所的(例えば肺および／または気道または皮膚)に；または全身的に、例えば錠剤、カプセル剤、シロップ剤、散剤または顆粒剤の形態での経口投与によりまたは溶液または懸濁液の形態での非経腸投与によりまたは皮下投与によりまたは坐薬の形態での直腸投与によりまたは経皮的に投与し得る。好都合には、本発明の化合物は経口で投与する。
【００８６】
治療薬としてのその使用に加えて、式(Ｉ)の化合物およびその薬学的に許容される塩類はまた新規治療剤研究の一環として、実験動物、例えばネコ、イヌ、ウサギ、サル、ラットおよびマウスにおけるケモカイン調節活性の効果を評価するためのインビトロおよびインビボ試験系における開発および標準化における薬理学的ツールとしても有用である。
【００８７】
本発明は、さらに、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩または式(Ｉ)の化合物を含む医薬組成物または製剤を喘息、アレルギー性鼻炎、癌、ＣＯＰＤ、リウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、骨関節症または骨粗鬆症のいずれか一つ処置のための治療および／または薬剤と同時にまたは逐次的に投与する、組み合わせ治療に関する。
【００８８】
特に、炎症性疾患リウマチ性関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、ＣＯＰＤ、喘息およびアレルギー性鼻炎の処置のために、本発明の化合物はＴＮＦ−α阻害剤、例えば抗ＴＮＦモノクローナル抗体(例えばレミケード、CDP-870およびD2.E7.)およびＴＮＦ受容体免疫グロブリン分子、例えばエタネルセプト(Enbrel)、非選択的ＣＯＸ−１／ＣＯＸ−２阻害剤(例えばピロキシカム、ジクロフェナク)、プロピオン酸類、例えばナプロキセン、フルルビプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェンおよびイブプロフェン)、フェナメート(例えばメフェナム酸、インドメタシン、スリンダク、アパゾン)、ピラゾロン類(例えばフェニルブタゾン)、サリチレート(例えばアスピリン)、ＣＯＸ−２阻害剤(例えばメロキシカム、セレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブおよびエトリコキシブ)、低用量メトトレキサート、レフノミド；シクレソニド；ヒドロキシクロロキン、ｄ−ペニシラミン、オーラノフィンまたは非経腸または経口金製剤のような薬剤と組み合わせ得る。炎症性腸疾患および過敏性腸障害に対して、さらに好都合な薬剤はスルファサラジンおよび５−ＡＳＡ類、局所および全身ステロイド類、免疫調節剤および免疫抑制剤、抗生物質、プロバイオティクスおよび抗インテグリン類を含む。
【００８９】
本発明は、さらに本発明の化合物とロイコトリエン生合成阻害剤、５−リポキシゲナーゼ(５−ＬＯ)阻害剤または５−リポキシゲナーゼ活性化タンパク質(ＦＬＡＰ)アンタゴニスト、例えばジロートン；ABT-761；フェンレウトン；テポキサリン；Abbott-79175；Abbott-85761；Ｎ−(５−置換)−チオフェン−２−アルキルスルホンアミド類；２,６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェノールヒドラゾン類；メトキシテトラヒドロピラン類、例えばZeneca ZD-2138；化合物SB-210661；ピリジニル−置換２−シアノナフタレン化合物、例えばL-739,010；２−シアノキノリン化合物、例えばL-746,530；インドールおよびキノリン化合物、例えばMK-591、MK-886およびBAY x 1005の組み合わせに関する。
【００９０】
本発明は、さらに、本発明の化合物とフェノチアジン−３−オン類、例えばＬ−６５１,３９２；アミジノ化合物、例えばCGS-25019c；ベンゾキサルアミン類、例えばオンタゾラスト；ベンゼンカルボキシミドアミド類、例えばBIIL 284/260；および化合物、例えばザフィルカスト、アブルカスト(ablukast)、モンテルカスト、プランルカスト、ベルルカスト(verlukast)(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、イラルカスト(CGP 45715A)およびBAY x 7195から成る群から選択されるロイコトリエン類ＬＴＢ.sub4.、ＬＴＣ.sub4.、ＬＴＤ.sub4.およびＬＴＥ.sub4.に対する受容体アンタゴニストの組み合わせに関する。
【００９１】
本発明は、さらに、本発明の化合物とアイソフォームＰＤＥ４Ｄの阻害剤を含むＰＤＥ４阻害剤の組み合わせに関する。
【００９２】
本発明は、さらに、本発明の化合物と抗ヒスタミン性Ｈ.sub1.受容体アンタゴニスト、例えばセチリジン、ロラタジン、デスロラタジン、フェキソフェナジン、アステミゾール、アゼラスチンおよびクロルフェニラミンの組み合わせに関する。
【００９３】
本発明は、さらに、本発明の化合物と胃保護性Ｈ２受容体アンタゴニストの組み合わせに関する。
【００９４】
本発明は、さらに、本発明の化合物とα１−およびα２−アドレナリン受容体アゴニスト血管収縮神経交感神経刺激剤、例えばプロピルヘキセドリン、フェニレフリン、フェニルプロパノールアミン、シュードエフェドリン、塩酸ナファゾリン、塩酸オキシメタゾリン、塩酸テトラヒドロゾリン、塩酸キシロメタゾリンおよび塩酸エチルノルエピネフリンの組み合わせに関する。
【００９５】
本発明は、さらに、本発明の化合物と抗コリン作動剤、例えば臭化イプラトロピウム；臭化チオトロピウム；臭化オキシトロピウム；ピレンゼピン；およびテレンゼピンの組み合わせに関する。
【００９６】
本発明は、さらに、本発明の化合物とβ１−〜β４−アドレナリン受容体アゴニスト、例えばメタプロテレノール、イソプロテレノール、イソプレナリン、アルブテロール、サルブタモール、フォルモテロール、サルメテロール、テルブタリン、オルシプレナリン、ビトルテロールメシレートおよびピルブテロール；またはテオフィリンおよびアミノフィリンを含むメチルキサンタニン類；クロモグリク酸ナトリウム；またはムスカリン受容体(Ｍ１、Ｍ２およびＭ３)アンタゴニストの組み合わせに関する。
【００９７】
本発明は、さらに、本発明の化合物とインシュリン様増殖因子Ｉ型(ＩＧＦ−１)模倣剤の組み合わせに関する。
【００９８】
本発明は、さらに、本発明の化合物と全身副作用が減少した吸入グルココルチコイド、例えばプレドニゾン、プレドニゾロン、フルニソリド、トリアムシノロンアセトニド、二プロピオン酸ベクロメタゾン、ブデソニド、プロピオン酸フルチカゾンおよびフロ酸モメタゾンの組み合わせに関する。
【００９９】
本発明は、さらに、本発明の化合物とマトリックスメタロプロテアーゼ群(ＭＭＰｓ)、すなわち、ストロメライシン群、コラゲナーゼ類およびゼラチナーゼ、ならびにアグリカナーゼ；特にコラゲナーゼ−１(ＭＭＰ−１)、コラゲナーゼ−２(ＭＭＰ−８)、コラゲナーゼ−３(ＭＭＰ−１３)、ストロメライシン−１(ＭＭＰ−３)、ストロメライシン−２(ＭＭＰ−１０)およびストロメライシン−３(ＭＭＰ−１１)およびＭＭＰ−１２の阻害剤の組み合わせに関する。
【０１００】
本発明は、さらに、本発明の化合物とケモカイン受容体機能、例えばＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ２Ａ、ＣＣＲ２Ｂ、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０およびＣＣＲ１１(Ｃ−Ｃファミリーについて)；ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４およびＣＸＣＲ５(Ｃ−Ｘ−Ｃファミリーについて)およびＣ−Ｘ３−ＣファミリーについてＣＸ３ＣＲ１の他のモジュレーターの組み合わせに関する。
【０１０１】
本発明は、さらに、本発明の化合物と抗ウィルス剤、例えばビラセプト、ＡＺＴ、アシクロビルおよびファムシクロビルおよび抗敗血症化合物、例えばValantの組み合わせに関する。
【０１０２】
本発明は、さらに、本発明の化合物と心血管剤、例えばカルシウムチャネルブロッカー、脂質低下剤、例えばスタチン、フィブラート、ベータブロッカー、ＡＣＥ阻害剤、アンギオテンシン−２受容体アンタゴニストおよび血小板凝集阻害剤の組み合わせに関する。
【０１０３】
本発明は、さらに、本発明の化合物とＣＮＳ剤、例えば抗うつ剤(例えばセルトラリン)、抗パーキンソン病剤(例えばデプレニル、Ｌ−ドーパ、レキップ、ミラペックス、ＭＡＯＢ阻害剤、例えばセレギリンおよびラサギリン、ｃｏｍＰ阻害剤、例えばタスマール、Ａ−２阻害剤、ドーパミン再取込み阻害剤、ＮＭＤＡアンタゴニスト、ニコチンアゴニスト、ドーパミンアゴニストおよび神経型一酸化窒素合成酵素の阻害剤)および抗アルツハイマー剤、例えばドネペジル、タクリン、ＣＯＸ−２阻害剤、プロペントフィリンまたはメトリホネートの組み合わせに関する。
【０１０４】
本発明は、さらに、本発明の化合物と(ｉ)トリプターゼ阻害剤；(ii)血小板活性化因子(ＰＡＦ)アンタゴニスト；(iii)インターロイキン変換酵素(ＩＣＥ)阻害剤；(iv)ＩＭＰＤＨ阻害剤；(ｖ)ＶＬＡ−４アンタゴニストを含む接着分子阻害剤；(vi)カテプシン類；(vii)ＭＡＰキナーゼ阻害剤；(viii)グルコース−６ホスフェートデヒドロゲナーゼ阻害剤；(ix)キニン−Ｂ.sub1.−およびＢ.sub2.−受容体アンタゴニスト；(ｘ)抗痛風剤、例えば、コルヒチン；(xi)キサンチンオキシダーゼ阻害剤、例えば、アロプリノール；(xii)尿酸排泄促進剤、例えば、プロベネシド、スルフィンピラゾンおよびベンズブロマロン；(xiii)成長ホルモン分泌促進物剤；(xiv)トランスフォーミング増殖因子(ＴＧＦβ)；(xv)血小板由来増殖因子(ＰＤＧＦ)；(xvi)線維芽細胞増殖因子、例えば、塩基正線維芽細胞増殖因子(ｂＦＧＦ)；(xvii)顆粒球マクロファージコロニー刺激因子(ＧＭ−ＣＳＦ)；(xviii)カプサイシンクリーム；(xix)ＮＫＰ−６０８Ｃ；ＳＢ−２３３４１２(タルネタント)；およびＤ−４４１８から成る群から選択されるタキキニンＮＫ.sub1.およびＮＫ.sub3.受容体アンタゴニスト；(xx)ＵＴ−７７およびＺＤ−０８９２から成る群から選択されるエラスターゼ阻害剤；(xxi)ＴＮＦα変換酵素阻害剤(ＴＡＣＥ)；(xxii)誘導型一酸化窒素合成酵素阻害剤(ｉＮＯＳ)または(xxiii)ＴＨ２細胞上に発現される化学誘引物質受容体−相同性分子(ＣＲＴＨ２アンタゴニスト)の組み合わせに関する。
【０１０５】
本発明の化合物はまた骨粗鬆症剤、例えばラロキシフェン、ドロロキシフェン、ラソフォキシフェンまたはフォサマックスおよび免疫抑制剤剤、例えばFK-506、ラパマイシン、シクロスポリン、アザチオプリンおよびメトトレキサートと組み合わせても使用し得る。
【０１０６】
本発明の化合物はまた骨関節症の処置用の既存の治療剤と組み合わせても使用し得る。組み合わせで使用する適切な薬剤は、標準非ステロイド性抗炎症剤(以後ＮＳＡＩＤ)、例えばピロキシカム、ジクロフェナク、プロピオン酸類、例えばナプロキセン、フルルビプロフェン、フェノプロフェン、ケトプロフェンおよびイブプロフェン、フェナメート、例えばメフェナム酸、インドメタシン、スリンダク、アパゾン、ピラゾロン類、例えばフェニルブタゾン、サリチレート、例えばアスピリン、ＣＯＸ−２阻害剤、例えばセレコキシブ、バルデコキシブ、ロフェコキシブおよびエトリコキシブ、鎮痛剤および関節内治療剤、例えばコルチコステロイドおよびヒアルロン酸類、例えばhyalganおよびsynviscおよびＰ２Ｘ７受容体アンタゴニストと組み合わせても使用し得る。
【０１０７】
本発明の化合物はまた癌の処置用の既存の治療剤と組み合わせても使用し得る。組み合わせで使用する適切な薬剤は次のものを含む：
(ｉ)腫瘍内科学において使用される抗増殖性／抗新生物剤およびその組み合わせ、例えばアルキル化剤(例えばシスプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、窒素マスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファンおよびニトロソウレア類)；代謝拮抗剤(例えば抗葉酸剤、例えばフルオロピリミジン類、例えば５−フルオロウラシルおよびテガフール、ラルチトレキセド、メトトレキサート、シトシンアラビノシド、ヒドロキシウレア、ゲムシタビンおよびパクリタキセル(タキソール(登録商標))；抗腫瘍抗生物質(例えばアントラサイクリン類、例えばアドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシンおよびミトラマイシン)；有糸分裂阻害剤(例えばビンカアルカロイド、例えばビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビンおよびタキソイド類、例えばタキソールおよびタキソテール)；およびトポイソメラーゼ阻害剤(例えばエピポドフィロトキシン、例えばエトポシドおよびテニポシド、アムサクリン、トポテカンおよびカンプトテシン)；
【０１０８】
(ii)細胞増殖抑制剤、例えば抗エストロゲン類(例えばタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェンおよびイドキシフェン)、エストロゲン受容体下方調節剤(例えばフルベストラント)、抗アンドロゲン類(例えばビカルタミド、フルタミド、ニルタミドおよび酢酸シプロテロン)、ＬＨＲＨアンタゴニストまたはＬＨＲＨアゴニスト(例えばゴセレリン、ロイプロレリンおよびブセレリン)、プロゲストゲン(例えば酢酸メゲストロール)、アロマターゼ阻害剤(例えばアナストロゾール、レトロゾール、ボラゾールおよびエキセメスタン)および５α−レダクターゼ阻害剤、例えばフィナステリド；
【０１０９】
(iii)癌細胞浸潤を阻害する薬剤(例えばメタロプロテイナーゼ阻害剤、例えばマリマスタットおよびウロキナーゼプラスミノーゲンアクティベーター受容体機能阻害剤)；
【０１１０】
(iv)増殖因子機能阻害剤、例えばこのような阻害剤は増殖因子抗体、増殖因子受容体抗体(例えば抗ｅｒｂｂ２抗体トラスツマブ[HerceptinＴＭ]および抗ｅｒｂｂ１抗体セツキシマブ[Ｃ２２５])、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤およびセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤、例えば上皮細胞増殖因子ファミリー阻害剤(例えばＥＧＦＲファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、例えばＮ−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)−７−メトキシ−６−(３−モルホリノプロポキシ)キナゾリン−４−アミン(ゲフィチニブ、AZD1839)、Ｎ−(３−エチニルフェニル)−６,７−ビス(２−メトキシエトキシ)キナゾリン−４−アミン(エルロチニブ、OSI-774)および６−アクリルアミド−Ｎ−(３−クロロ−４−フルオロフェニル)−７−(３−モルホリノプロポキシ)キナゾリン−４−アミン(CI 1033))、例えば血小板由来増殖因子ファミリー阻害剤および例えば肝細胞増殖因子ファミリー阻害剤；
【０１１１】
(ｖ)抗血管新生剤、例えば血管内皮細胞増殖因子の作用を阻害するもの(例えば抗血管内皮細胞増殖因子抗体ベバシズマブ[AvastinＴＭ]、化合物、例えば国際特許出願ＷＯ９７／２２５９６、ＷＯ９７／３００３５、ＷＯ９７／３２８５６およびＷＯ９８／１３３５４)に記載のものおよび他の機構により作用する化合物(例えばリノミド(linomide)、インテグリンαｖβ３機能阻害剤およびアンジオスタチン)；
【０１１２】
(vi)血管傷害剤、例えばコンブレタスタチンＡ４および国際特許出願ＷＯ９９／０２１６６、ＷＯ００／４０５２９、ＷＯ００／４１６６９、ＷＯ０１／９２２２４、ＷＯ０２／０４４３４およびＷＯ０２／０８２１３に開示の化合物；
【０１１３】
(vii)アンチセンス治療、例えば上記の標的を指向するもの、例えばISIS 2503、抗ｒａｓアンチセンス；
【０１１４】
(viii)例えば異常遺伝子、例えば異常ｐ５３または異常ＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２を置き換える手法を含む遺伝子治療手法、ＧＤＥＰＴ(遺伝子指向酵素プロドラッグ治療)手法、例えばシトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼまたは細菌ニトロレダクターゼ酵素を使用するものおよび化学療法または放射線療法に対する患者耐容性を高める手法、例えば多剤耐性遺伝子治療；および
【０１１５】
(ix)例えば患者腫瘍細胞の免疫原性を高めるためのエキソビボおよびインビボ手法を含む免疫治療法、例えばサイトカイン類、例えばインターロイキン２、インターロイキン４または顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子でのトランスフェクション、Ｔ細胞アネルギーを低下させるための手法、トランスフェクト免疫細胞、例えばサイトカイン−トランスフェクト樹状細胞を使用する手法、サイトカイン−トランスフェクト腫瘍細胞株を使用する手法および抗イディオタイプ抗体を使用する手法。
【０１１６】
本発明をここで次の具体的記載、実施例および生物学的データを引用して説明するが、これらに限定されない。
【発明を実施するための形態】
【０１１７】
具体的記載
下記表１は測定した本発明の化合物のインビトロ効力および測定したイヌのインビボでの半減期を示す。
【表１】
0006006308.tif 000007
【０１１８】
前臨床動物種(例えばイヌ)における長い半減期は、ヒトにおける相当な半減期が達成できることを示唆する(Obach et al, 1997)。本発明の化合物のイヌで測定された半減期は３.７時間である。
【０１１９】
さらに、投与間に所望の生物学的効果を生じるために、化合物は長い半減期に加えて高い効力を示さなければならない。本発明の化合物は、イヌにおける高い効力(ｐＩＣ５０８.４)および長い測定半減期(３.７時間)の必要な組み合わせを示す。
【０１２０】
生物学的データ
効力(ｐＩＣ５０)  −  リガンド結合アッセイ
American Type Culture Collectionからのヒト胚腎臓２９３細胞(ＨＥＫ２９３細胞)を、予め真核発現ベクターpIRES-Neo2(Clontech)にクローン化したヒトＣＸＣＲ２  ｃＤＮＡ(RefSeqNM_001557)でトランスフェクトした。ジェネテシン(Invitrogen)耐性細胞集団をＣＸＣＲ２の安定発現について選択し、クローンを、９６ウェル組織培養プレートにおける希釈クローニング(０.３細胞／ウェル)により産生した。
【０１２１】
最高発現クローンの細胞(クローン６、ＦＡＣＳ分析により同定)を採取し、１０mlの氷冷低張緩衝液(２０mM  ＨＥＰＥＳ、１mM  ＥＤＴＡ、０.１mM  ＤＴＴ、０.１mM  フェニルメチルスルホニルフルオライドおよび０.１mg／Ｌ  バシトラシン、ｐＨ７.４)中５mM  酪酸ナトリウムで２４時間前処置し、１０分間膨潤させた。遠心分離(２００ｇ、５分間、４℃)後、細胞を低張緩衝液に再懸濁し、膜をポリトロン組織ホモジナイザーを使用して調製した(３×１０秒間処置。ホモジネートを遠心分離(２００ｇ、１０分間、４℃)して細胞片を除去し、得られた上清を高速で遠心分離した(１５,０００ｇ、６０分間、４℃)。膜を低張緩衝液に再懸濁し、１０回、加圧型細胞破砕装置で均質化し、−８０℃で貯蔵した。
【０１２２】
全アッセイを黒色、３８４ウェルプレート(Greiner)で行った。ＣＸＣＲ２膜をビオチン標識レクチン(lectin biotin)と、１時間、氷上で予混合した。SpheroＴＭビーズ(ストレプトアビジンポリスチレン粒子、６.０〜８.０μm)をリン酸緩衝化食塩水(ＰＢＳ)で洗浄し、ＣＸＣＲ２膜−ビオチン標識レクチン混合物で、３０分間、ローターで、室温でコーティングした。膜被覆SpheroＴＭビーズをＰＢＳ(１９００ｇ、５分間)で２回洗浄し、化合物連続希釈物、１nM最終アッセイ濃度のAlexa６４７  ＩＬ−８(Albachem)およびアッセイ緩衝液(１０mM  ＨＥＰＥＳ、０.１％(ｗ／ｖ)  ゼラチンおよび０.２５mg／ml  バシトラシン含有ハンクス平衡塩溶液(Invitrogen)、ｐＨ７.４)とインキュベートした。アッセイを、１.２５％(ｖ／ｖ)ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)存在下、４０μlの最終体積で行った。Alexa６４７  ＩＬ−８の全結合を競合化合物非存在下に測定し、Alexa６４７  ＩＬ−８の非特異的結合を０.３μM  １−(４−クロロ−２−ヒドロキシ−３−スルファモイル−フェニル)−３−(２,３−ジクロロフェニル)ウレア存在化に測定した。プレートを２.５時間、室温でインキュベートし、FMAT8200(Applied BioSystems)で読んだ。ｐＩＣ５０値を、特異的Alexa６４７  ＩＬ−８結合の５０％減少に必要な化合物のモル濃度の負の対数として決定した。
上記プロトコルを使用して、本発明の化合物のｐＩＣ５０値が８.４であることを見出した。
【０１２３】
イヌ半減期(測定)
次に、雄ビーグル犬におけるインビボ薬物動態パラメータを得るために使用した方法を記載する。これはあらゆる化合物を用いて使用するために応用できるが、デフォルト製剤、投与量レベルまたはサンプリング間隔が不適であるとき、溶解度、アッセイ感受性、予測されるクリアランスおよび半減期のようなパラメータに基づき修飾する必要がある可能性がある。ここに記載する方法は標準的手法を示し、そこから正当化され記録された修飾をすることができる。
【０１２４】
製剤
１mgmL−１の標準投与溶液を調製した。推奨投与媒体(化合物が等張食塩水に十分可溶性ではないとき)は、ｐＨを１Ｍ  ＨＣｌまたはＮａＯＨで調節した１０％ＤＭＳＯ：９０％滅菌水または食塩水であった。化合物の必要量を、水添加前にＤＭＳＯに溶解した。投与溶液中の化合物濃度を、一定量をある名目上の濃度に一定量を希釈し(三連で)、１０μlのこれを５０μlブランク血漿に添加し、試験サンプルと共に分析することによりアッセイした。
【０１２５】
投与
化合物を、２尾のビーグル犬(１１〜１５kg)の尾静脈に３０分間静注することにより投与した(約１mLkg−１)。送達された投与量を体重減少により概算した。
【０１２６】
サンプル採取および分析
血液サンプル(〜１ml)をＥＤＴＡ処理サンプリングチューブに採り、サンプル採取直後に血漿を遠心分離により調製した(３分間、１３０００rpm)。サンプルを２４時間(例えば０分、５分、１５分、３０分、３５分、４５分、６０分、９０分、１２０分、１８０分、２４０分、３００分、３６０分、４２０分、７２０分、１４４０分)の予定された時間に採った。被分析物の血漿中濃度をマススペクトロメトリーにより定量的に決定した。適切であれば、標準曲線範囲内にあることを確認するために試験サンプルをブランク血漿で希釈した。
【０１２７】
標準およびＱＣ液の調製
標準および品質管理貯蔵液を、メタノール中１mg／mlで調製した化合物を別に秤量し、さらに１００μg／mlに希釈することにより調製した。標準およびＱＣ貯蔵液をメタノールで手動で希釈し、次の表により血漿に添加した。
【表２】
0006006308.tif 000008
【０１２８】
標準貯蔵液の連続希釈により作製した１０μlの上記溶液Ａ〜Ｋの溶液およびＱＣ貯蔵液の連続希釈により作製した１０μLの溶液Ｂ、ＦおよびＪの各々を、５０μlブランク血漿を含む９６ウェル１.２mLポリプロピレンチューブに添加した。製造した標準曲線およびＱＣサンプルの最終濃度は上記表に示す。
【０１２９】
サンプルの調製
試験サンプル、投与試験、標準およびＱＣの各々に、１００μL(投与試験、標準およびＱＣについては９０μl)のメタノール、１００μlの内部標準を添加した。サンプルに蓋し、反復倒置により混合し、３５００rpmで２０分間遠心分離した。一定量(１２０μL)の各サンプルを、ＨＰＬＣ／ＭＳ−ＭＳでの分析の準備ができたマイクロタイタープレートに移した。
【０１３０】
マススペクトロメトリー
ＨＰ１１００  ＨＰＬＣシステムと共にＴＳＱ７００またはＴＳＱまたはＳＳＱ７０００マススペクトロメーターを使用した。使用した起源はＡＰＣＩまたはＥＳＩであった。試験サンプルにおいて見られた濃度の範囲を変換した標準およびＱＣサンプルは、名目上の濃度２５％以内であることが予測された。
【０１３１】
結果
薬物動態データ分析および作表を、非コンパートメント解析ツールおよびExcelを使用して達成した。要約すれば、血漿濃度の自然対数を時間に対してプロットして、濃度−時間プロファイルを示した。初期分布相が過ぎた後濃度が半減するのに必要な時間として定義される消失半減期(疑似定常状態)を、最小４データ点を使用して各動物について個々に決定した。関係する曲線下面積(ＡＵＣ)が＞５０％であることを確認し、治療関与半減期が算定できることを確認にした。ＰＫプロファイルが疑われる腸肝再循環のため三相であるとき、最終相を、半減期を含むＰＫパラメータの計算のためのプロファイルから除いた。引用された半減期値は最低２尾のビーグル犬の平均を表す。
上記プロトコルを使用して、本発明の化合物は、イヌにおける半減期が３.７時間であることが判明した。
【０１３２】
ヒト肝固有クリアランスの測定(ＣＬｉｎｔ)
大多数の薬物にとって、血漿クリアランスの大きな構成要素は肝代謝である。固有クリアランス(ＣＬｉｎｔ)は、化合物が代謝を受ける可能性の指標であり、血漿タンパク質結合および肝血流を考慮して、インビボでの肝クリアランスに関し得る。それ故に、ＣＬｉｎｔを、ヒトにおける化合物の半減期の予測においてキー・パラメータとして使用し得る。
【０１３３】
試験明細
ＨＳＡ(ヒト血清アルブミン)を含まず、ｐＨ７.４の生理学的状態を維持する懸濁液緩衝液を使用した、ヒト肝細胞インキュベーションから固有クリアランス(ＣＬｉｎｔ)を概算する方法を次に記載する。
【０１３４】
当業者がこの試験方法の動作特性を再現するために、試験方法の初期確認および最終化の時点で使用した試薬について、具体的仕入先およびカタログ番号を記載する。これは、同等な仕様が文書化され、または置き換えが本アッセイの作動特性に大きく影響しないことが実験的に確認されている、適切な代替試薬への置き換えを除外するものではない。
【０１３５】
肝細胞単離および収率および生存能の推定
凍結保存されたヒト肝細胞(複数ドナー)をCellzdirect(Carlsbad, U.S.)から購入し、液体窒素中に保存した。細胞を、無タンパク質肝細胞懸濁液緩衝液(レシピ：Milli-Q水で１Ｌにし、１Ｍ  ＨＣｌを用いてｐＨ７.４にした２.３４ｇ  Ｎａ  ＨＥＰＥＳ、０.４ｇ  Ｄ−フルクトース、ＤＭＥＭ(１Ｌ粉末当量、Sigma；１ｇ.ｌ−１  グルコース含有、Ｎａ  ピルベート含有、ＮａＨＣＯ３不含、フェノールレッド不含))に再懸濁した。凍結保存された細胞を融解して、次のとおり使用した。細胞の各バイアルを３７℃の水浴に浸し、全ての氷が溶けるまで約２分間穏やかに振盪させた。融解した細胞懸濁液を、次いで、丸底遠心管中の予め温めた１５ml肝細胞懸濁液緩衝液に仕込み、遠心管を倒置することにより穏やかに混合した。細胞懸濁液を６００rpmで環境温度(〜２６℃)で５分間遠心分離し、上清を吸引し、廃棄した。ペレットを肝細胞緩衝液(１.５ml／細胞バイアル)に穏やかに再懸濁させて、均質細胞懸濁液を得た。
【０１３６】
一定量の細胞懸濁液(０.２mL)を０.２ml  無タンパク質懸濁液緩衝液で希釈した。希釈した細胞に、０.２mL  トリパンブルー溶液(０.４％ｗ／ｖ)を添加し、穏やかに混合した。１分後、パスツールピペットを使用してサンプルを採り、毛管作用によりImproved Neubauer Counting Chamberに満たした。細胞を倒立顕微鏡を使用して計数し(中心四角のみ)、生存細胞は色素を排泄でき、非生存細胞は染色されている。調製物中の生存細胞のパーセンテージは故に次のとおり計算された。
【数１】
0006006308.tif 000009
【０１３７】
生存細胞の濃度を次のとおり計算した。
【数２】
0006006308.tif 000010
計数方法を２連で行った。
【０１３８】
細胞懸濁液を適当な体積の無タンパク質懸濁液緩衝液で希釈して、必要な濃度の生存細胞を得て、使用前最大１時間氷上に保存した。
【０１３９】
試験方法
インキュベートすべき試験化合物を、ＤＭＳＯ(１％ｖ／ｖ最終溶媒濃度)中０.１mMの濃縮貯蔵液から、適切なバイアル中の適当な体積(０.３ml)の無タンパク質懸濁液緩衝液に添加した。２×１０６細胞・ml−１濃度(最終インキュベーション細胞濃度の２倍、トリパンブルー排除により生存能＞８５％)の適当な体積の細胞(＞０.３ml)を別のバイアルに入れ、両バイアルを３７℃の水浴でプレインキュベートした。
【０１４０】
５分間プレインキュベーション後、適当な体積の細胞(０.３ml)を、１×１０６細胞・ml−１の最終細胞濃度および１μMの化合物濃度とするために緩衝液および化合物に添加し、反応を進行させた。
【０１４１】
適当な時点(例えば５分、１５分、３０分、４５分、６０分、７５分、９０分および１２０分)で、一定量(４０μl)をインキュベーション混合物から採り、３体積のメタノールに添加して反応を停止させ、肝細胞を変性させた。細胞が除外された対照インキュベーションも行った。インキュベーションが止まったら、サンプルを混合し、−２０℃以下で２時間保存してタンパク質沈殿を促し、１５分間、３６００rpmおよび４℃で遠心分離した。上清をマイクロタイタープレートに移し、適切な出発点として次の方法を使用してＨＰＬＣ−ＭＳＭＳにより分析した。
溶媒：Ａ：０.１％ギ酸のメタノール溶液およびＢ：０.１％ギ酸の水溶液(ｖ／ｖ)
カラム：Waters Xterra C1８  ２０×３.９mm、３.５μm
流速：１.５ml.分−１
勾配：０％Ｂを０.３分間、０％〜１００％Ｂを０.７分間かけて、１００％Ｂに０.２分間維持、１００％〜０％Ｂを０.０１分間かけて。
【０１４２】
データ解析および計算方法
インキュベートした化合物の得られたピーク面積をExcel表計算ソフトに入力し、ｌｎ[残存濃度]対時間のプロットを作成し、残存スロープから、ｔ1/2を概算した。データ処理は一区画、薬物動態モデルと同種であり、消失速度定数(ｋ)＝ｌｎ(２)／ｔ1/2を使用し、ｔ1/2の観点でＣＬｉｎｔを表す方程式を次の方程式に示すとおりに導くことができ、ここで、体積をml.１０６細胞−１で表す。
【数３】
0006006308.tif 000011
【０１４３】
インキュベーションからの親化合物消失についてのｔ1/2およびＣＬｉｎｔを次いで決定した。
上記プロトコルを使用して、本発明の化合物は、２.９(±０.９４)μL／分／１０６細胞のヒト肝細胞固有クリアランスを有することが判明した。
【０１４４】
ヒトにおける低代謝クリアランスは、典型的に相当長いヒト半減期をもたらす。ヒトにおける代謝クリアランスを予測する方法は当業者に周知である。例えば、ヒト代謝クリアランスは、測定されたインビトロヒト肝細胞固有クリアランスデータ、測定されたインビトロヒト血漿タンパク質結合データおよび測定された分配係数(logD7.4)から予測し得る(特にAustin et al (2005), Drug Metab. Dispos., 33, 419-425;およびRiley et al (2005), Drug Metab. Dispos., 33, 1304-1311参照)。
【０１４５】
ヒト血漿タンパク質結合(ｈＰＰＢ)の測定
薬物が血漿タンパク質に結合する程度は、インビボでの効力および薬物動態の測定における重要因子である。血漿タンパク質結合の程度を決定するために使用する方法は、化合物の３７℃での血漿と緩衝液の間の平衡透析である。血漿および緩衝液中の化合物濃度を、高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)と質量分析(ＭＳ)検出を使用して決定する。透析方法は、同時に１０化合物までの混合物の使用を含む。アッセイで使用する濃度で、化合物を単独でまたは混合物で流したときの結果に有意な差はない。
【０１４６】
試験の説明
膜(分子量カットオフ５０００)を、最初に透析緩衝液に最低１時間浸漬することにより調製した。透析膜を次いで透析セルにマウントした。
【０１４７】
ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)中の化合物の貯蔵液を調製した。このおよび全ての続く液体処理工程は通常Tecan液体処理ロボットで行った。最大５化合物の混合物を使用した。混合物中の各化合物の濃度は通常１mMであった。混合物を、各混合物が、全てが分子量で互いに少なくとも５単位異なる化合物を含むように選択した。
凍結血漿(ＥＤＴＡ抗凝固剤)を通常ヒト血漿結合実験に使用した。血漿のｐＨを使用直前に１Ｍ  ＨＣｌを使用して７.４に調節した。
【０１４８】
化合物中のＤＭＳＯ貯蔵液(７.５μL)を透析セルに血漿(７５０μl)と共に添加した。これを各混合物について２連で行った。これにより、１０μM濃度の各化合物を伴う、血漿溶液中の１％ＤＭＳＯとなった(貯蔵液が標準１mMであるならば)。透析セルに蓋し、Dianorm回転子ユニットに固定し、１８時間、３７℃で平衡化した。透析セルが平衡化されたら、ＤＭＳＯ貯蔵液を、血漿および緩衝液サンプルの最終分析に使用するための最適化ＨＰＬＣ／ＭＳ方法の作製に使用した。
【０１４９】
平衡化後、セルを開け、Tecan液体処理ロボットを使用して一定量を各透析セルの血漿側および緩衝液側から採った。各サンプルが６倍希釈血漿の行列となるようにブランク血漿を緩衝液サンプルに添加し、緩衝液を血漿サンプルに添加した。標準をＤＭＳＯ貯蔵液およびブランク６倍希釈血漿から調製した。４個の標準の濃度は、通常５０nM、１５０nM、５００nMおよび２５００nMであった。
【０１５０】
サンプルおよび標準を、ＭＳ検出を伴うＨＰＬＣで分析し、これは複数化合物の混合物のデコンボリューションを可能にした。ＨＰＬＣ方法は、希釈血漿の直接注入を可能にする前向きフラッシングカラムスイッチング技術を含んだ。
【０１５１】
結果の計算
クロマトグラムを、混合物中の各化合物の較正曲線を自動的に計算し、緩衝液および血漿サンプルの濃度を内挿するMassLynxソフトウェアを使用して処理した。これらの濃度はまだ血漿の希釈についての補正が必要である。結合パーセントを、次の方程式を使用してMassLynxデータから計算した。
【数４】
0006006308.tif 000012
分子の１.２の計数は水性サンプルの血漿での小さな希釈に起因する。分母における６の計数は、血漿サンプルの緩衝液での６倍希釈の補正をする。
【０１５２】
各化合物についての％遊離(１００−％結合)を濃度データから計算し、記録した。
上記プロトコルを使用して、本発明の化合物は、０.１１(±０.０５)のヒト血漿タンパク質結合(％遊離)であることが判明した。
【０１５３】
ｐＨ７.４での分配係数の測定(ＬｏｇＤ７.４)
目的の化合物(１mg)を個々の１mLポリプロピレンバイアルに分配し、９６ウェルプレートに１−オクタノール(７００μL)と共に維持し、０.０２Ｍ  リン酸緩衝液(ｐＨ７.４)で予め飽和させた。プレートを一夜振盪し、遠心分離(８００ｇで１５分間)して、不溶性固体を沈殿させた。１０化合物(またはそれ未満)の２４個までの混合物を、１−オクタノール溶液(１００μL)を１２mL  ガラスサンプルチューブのプレートに貯めることにより調製した。溶液の貯留を、各混合物中の化合物のいずれも、互いに２ダルトン以内のモノアイソトピック質量を有さず、ＭＳ定量中の混合物の要素の容易な分割を可能とするように、特注型アルゴリズムを使用して行った。化合物の貯留を自動で行い、ロボット制御で作成された特中型ワークリストを使用して制御した。混合物が１０個未満の化合物を含むならば、１−オクタノール(０.０２Ｍ  リン酸緩衝液[ｐＨ７.４]で予め飽和)を添加して、１−オクタノール相の総体積を１mLとした。１−オクタノール飽和リン酸緩衝液(０.０２Ｍ、ｐＨ７.４、２mL)を各混合物に添加し、振盪(４５０rpmで３０分間)および遠心分離(８００ｇで１５分間)した。各分配混合物の最終１−オクタノールおよび水相をロボット制御で分配した。最初の工程は、１−オクタノール液体クラスを使用したＬＣ分析のための一定量の１−オクタノール相(２０μL)の採取であった。第二工程は、水相に曝すための過剰の１−オクタノール相の除去であった。これは、１−オクタノールをサンプルチューブの種々の位置から繰り返し吸引することにより行った。分離の最終工程は、一定量の水相(５０μL)の採取であった。１−オクタノールおよび水相の一定量をＤＭＳＯを使用して連続的に希釈して、ＬＣ／ＭＳ分析用最終サンプルを得た。各最終１−オクタノール相で、濃度で１００００倍範囲に変換される５連続希釈を行った。これらの溶液のＭＳピーク面積を使用して、対数(相対濃度)検量線に対する対数(ピーク面積)を作成した。１００倍濃度範囲に変換される最終水相の３連続希釈も調製し、ＬＣ／ＭＳピーク面積を、相対濃度の内挿を可能にする検量線の範囲内で最良に適合するこれらの希釈の一つを選択した。持ち越し汚染の程度を最小化するために、ＬＣ／ＭＳ分析の順番は１−オクタノールの最も濃縮されていない希釈物から開始し、その後、より濃縮された希釈物が続き、２回ブランク注入し、次いで水相希釈物の濃度を増加させていった。ＬｏｇＤ７.４を１−オクタノールおよび水溶液の両者の希釈の程度について補正後、１−オクタノール相対濃度の一つ対内挿水性相対濃度の比から計算した。
上記プロトコルを使用して、本発明の化合物は１.９のＬｏｇＤ７.４を有することが判明した。
【０１５４】
参考例
本発明を次の非限定的実施例により説明し、添付する図面を参照する。
次の略語を使用し得る。
【表３】
0006006308.tif 000013
【０１５５】
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを記載するときは、Bruker Avance 600 (600 MHz)、Bruker DRX 500 (500 MHz)、Bruker 300 (300 MHz)またはVarian UnityInova 500 MHz、400 MHzまたは300 MHz装置で記録した。クロロホルム−ｄ(ＣＤＣｌ３；δＨ  ７.２７ppm)、ジメチルスルホキシド−ｄ６(ｄ６−ＤＭＳＯ；δＨ  ２.５０ppm)またはメタノール−ｄ４(ＣＤ３ＯＤ；δＨ  ３.３１ppm)の中心ピークまたはテトラメチルシラン(ＴＭＳ；δＨ  ０.００ppm)の内部標準を対照として使用した。サンプル溶液またアッセイ判定のための内部標準(例えばマレイン酸、２,３,５,６−テトラクロロニトロベンゼンまたは安息香酸ベンジル)を含んでよくおよび／または検体共鳴から交換可能プロトンシグナルを離すための(例えばマレイン酸から)トリフルオロ酢酸が添加されていてよい。スペクトルデータは化学シフトの一覧(δ、ppm)として記載し、各シグナルの記載において、標準的略語(ｓ＝一重項、ｄ＝二重項、ｍ＝多重項、ｔ＝三重項、ｑ＝四重項、ｂｒ＝幅広など)を使用する。当分野では、化学シフトおよびＪカップリング定数はサンプル調製の差異、例えば検体濃度および添加物(例えばＮＭＲアッセイ標準またはトリフルオロ酢酸)が包含されているか否かによりわずかに変わり得ることが知られている。
【０１５６】
大規模反応を、熱伝達ジャケットに装着し、適切な補助装置を付したステンレススチールまたはグラスライニング・スチール反応器で行った。
【０１５７】
マススペクトルを分析ＨＰＬＣ後のAgilent MSD(＋ｖｅおよび−ｖｅ  ＡＰＣＩおよび／またはエレクトロスプレー(例えばマルチモード))またはWaters Micromass ZQ(＋ｖｅおよび−ｖｅエレクトロスプレー)で記録した。ｍ／ｚの値が記載されているとき、一般的に親質量を示すイオンのみ示し、引用されたマスイオンは正または負のマスイオンである：[Ｍ]＋、[Ｍ＋Ｈ]＋、[Ｍ−Ｈ]−または[Ｍ＋２Ｈ−ＢＯＣ]＋。
【０１５８】
実施例および製造法の表題および副題化合物は、CambridgeSoft CorporationのIUPAC name program Struct=Name 9.0.7により命名した。
【０１５９】
高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)を、オクタデシル結合シリカを充填した逆相カラムで行った。ＵＶディテクター(λ＝２３０nm)および勾配ポンプを備えたＨＰＬＣ装置を使用した。具体的検体に適切な固定相粒子径、カラム寸法、移動相(アセトニトリルおよび水、トリフルオロ酢酸でｐＨ調節)、勾配時刻表、流速および温度を使用した。サンプル溶液を、適切な希釈剤を使用して約０.５mgmL−１の主検体濃度で調節した。
【０１６０】
特に断らない限り、出発物質は市販されている。全ての溶媒および市販反応材は研究室グレードであり、納品されたものを使用した。全ての操作を環境温度で、すなわち１７〜２８℃の範囲で、適当であれば、不活性ガス、例えば窒素の雰囲気下で行った。出発物質(Ｅ)−ブト−２−エン−１−オールを使用前に３Åモレキュラー・シーブで乾燥した。
【０１６１】
分析ＨＰＬＣを、０.１％トリフルオロ酢酸水溶液、０.１％ギ酸水溶液、０.１％酢酸アンモニウム水溶液または０.１％アンモニア水溶液のいずれか中のアセトニトリルの勾配で溶出するWaters XBridgeTM C8  ３.５μmカラム；０.１％アンモニア水溶液中のアセトニトリルの勾配で溶出するWaters XBridgeTM C18  ３.５μmカラム；０.１％トリフルオロ酢酸水溶液中のアセトニトリルの勾配で溶出するWaters SymmetryTM C18  ３.５μmカラム；０.１％トリフルオロ酢酸水溶液中のアセトニトリルの勾配で溶出するWaters SunfireTM C8  ３.５μmカラム；０.１％トリフルオロ酢酸水溶液中のアセトニトリルの勾配で溶出するPhenomenex GeminiTM C18  ３μmカラム；０.１％ギ酸水溶液中のメタノールの勾配で溶出するPolaris Amide C18  ３.５μMカラム；または０.１％ギ酸水溶液中のメタノールの勾配で溶出するAce Phenyl  ３.５μmカラムを使用して行った。溶出ピークのＵＶスペクトルは、Agilent 1100(登録商標)システムまたは同等物でダイオードアレイを使用して測定した。
【０１６２】
キラル分析的ＧＣを、スプリット／スプリットレスインジェクターを用いるAgilent 6890シリーズＧＣを、ChromPak Chiraldex CBカラム(２５ｍ×０.２５mmと０.２５μm相厚)またはChromPak Chiraldex CBカラム(２５ｍ×０.３２mmと０.２５μm相厚)を使用して実施した。溶出ピークのスペクトルを水素炎イオン化ディテクターを使用して記録した。全サンプルはＧＣ分析前に酢酸無水物または(Ｎ,Ｏ−ビス(トリメチルシリル)トリフルオロアセトアミド)で誘導体化した。
【０１６３】
キラル分析的ＨＰＬＣを、２５％エタノールのイソヘキサン溶液で溶出するAD-H Chiral Pak  ５μmカラムで行った。ＵＶ溶出ピークのスペクトルは、Agilent 1100(登録商標)システムまたは同等物でダイオードアレイを使用して測定した。
水分析をカールフィッシャー滴定法で行った。
【０１６４】
Ｘ線粉末回折分析(ＸＲＰＤ)を、Giacovazzo, C. et al (1995), Fundamentals of Crystallography, Oxford University Press; Jenkins, R. and Snyder, R. L. (1996), Introduction to X-Ray Powder Diffractometry, John Wiley & Sons, New York; Bunn, C. W. (1948), Chemical Crystallography, Clarendon Press, London;またはKlug, H. P. & Alexander, L. E.  (1974), X-ray Diffraction Procedures, John Wiley and Sons, New Yorkに記載のような標準方法に従い調製したサンプルで行った。Ｘ線解析を、PANalytical X'Pert機で２θ−θ配置またはPANalytical Cubix機でθ−θ配置を使用して、走査範囲２°〜４０°  ２θで０.０２°増分あたり１００秒間暴露で行った。Ｘ線は、４５kVおよび４０mAで走査する銅長高精度焦点チューブで発生させた。銅Ｘ線の波長は１.５４１８Åであった。データを、〜２mgの化合物を置いた０バックグラウンドホルダー上に集めた。ホルダーはシリコンの単結晶から成り、これは非回折面に添って切断されて、光学的に平らな仕上がりまで磨かれている。この表面へのＸ線入射はブラッグ消光により打ち消された。
【０１６５】
Ｘ線粉末回折パターンは、測定条件(例えば設備、サンプル調製または使用機器)によって１個以上の測定誤差を有して得られることがあることが当分野で知られている。特に、Ｘ線粉末回折パターンの強度は測定条件およびサンプル調製により変動し得ることは一般的に知られている。例えば、Ｘ線粉末回折分野の当業者は、ピークの相対強度が、試験下のサンプルの向きおよび使用装置のタイプおよび設定により変わり得ることを理解する。当業者はまた反射の位置も回折計に置かれたサンプルの厳密な高さおよび回折計の零較正により影響され得ることを理解する。サンプルの表面平面性も小さな影響を有し得る。故に当業者は当然であるが、ここに示す回折パターンデータは絶対値と解釈してはならず、ここに開示するものと実質的に同一の粉末回折パターンをもたらすあらゆる結晶形態は本開示の範囲内に入る。一般的に、Ｘ線粉末回折パターンにおける回折角の測定誤差は、典型的に±０.２°  ２シータである。
【０１６６】
融点を、標準方法、例えばHoehne, G. W. H. et al (1996), Differential Scanning Calorimetry, Springer, Berlinに記載されたものを使用した示差走査熱量測定(ＤＳＣ)により決定した。上昇している温度に対する試験サンプルの熱量測定応答を、アルミニウムパンを用いるTA Q2000示差走査熱量計を使用して試験した。サンプル重量を０.５〜５mgで代えた。本方法を窒素ガス流(５０ml／分)下で行い、試験温度は１０℃／分の一定温度上昇で２５〜３００℃であった。融点が引用されているとき、これは融解吸熱の開始温度である。
【０１６７】
当業者には当然であるが、ＤＳＣにおける融点のわずかな変動が、サンプル純度、サンプル調製および測定条件(例えば加熱速度)の変動の結果として生じ得る。融点の別の読み取りは他のタイプの設備または後記と異なる条件の使用によりもたらされ得る。故に、ここに記載された融点および吸熱数値は絶対値ととってはならず、このような測定誤差をＤＳＣデータの解釈のときには考慮すべきである。当業者には認識されるとおり、融点はサンプル純度およびサンプルの結晶化度により異なり得る。低レベルでさえ、不純物は測定された融点に影響を与え得る。それ故に、ここに開示された融点は、ここに記載された値から±５℃で変わり得て、“約”の融点を有する物質は、記載された値から±５℃の値を有すると解釈すべきである。ここに開示する融点は、融解吸熱開始の温度である。当業者は、ここに示したデータと同等のデータが再現できるように、示差走査熱量計についての機器パラメータを設定するために日常的に最適化／較正をする。
【０１６８】
実施例１
Ｎ−(６−((２Ｒ,３Ｓ)−３,４−ジヒドロキシブタン−２−イルオキシ)−２−(４−フルオロベンジルチオ)ピリミジン−４−イル)−３−メチルアゼチジン−１−スルホンアミド
【化６】
0006006308.tif 000014
ｉ)  ２−(４−フルオロベンジルチオ)ピリミジン−４,６−ジオール
酢酸ナトリウム(１１３ｇ)を２−メルカプトピリミジン−４,６−ジオール(８０ｇ)の水(９００mL)懸濁液に室温で添加した。１−(ブロモメチル)−４−フルオロベンゼン(１０５ｇ)のアセトニトリル(９０mL)溶液を２時間にわたり滴下した。反応物を２０時間撹拌し、懸濁液を濾過し、水(３×)およびイソヘキサン(３×)で洗浄した。固体を真空で２時間乾燥し、トルエン(３×)と共沸蒸留して、副題生成物(１２５ｇ)を白色固体として得た。
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 11.62 (s, 2H), 7.57 - 7.36 (m, 2H), 7.14 (dd, J = 6.0, 14.8 Hz, 2H), 5.18 (s, 1H), 4.37 (d, J = 6.5 Hz, 2H)
【０１６９】
ii)  ４,６−ジクロロ−２−(４−フルオロベンジルチオ)ピリミジン
オキシ塩化リン(９２mL)を、工程(ｉ)の副題生成物(１００ｇ)および塩化ベンジルトリエチルアンモニウム(９ｇ)のジメトキシエタン(５００mL)懸濁液に添加し、１０時間加熱還流した。反応物を氷−水に注意深く注ぎ、水(４００mL)および酢酸エチル(４００mL)に分配し、有機相を取り、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させた。粗製の生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィーで、溶出勾配１〜４０％ジクロロメタンのイソヘキサン溶液で溶出して精製した。精製フラクションを蒸発乾固して、副題生成物(８６ｇ)を赤色油状物として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.46 - 7.34 (m, 2H), 7.08 - 6.94 (m, 3H), 4.34 (s, 2H)
【０１７０】
iii)  ４−クロロ−６−((Ｒ)−１−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)エトキシ)−２−(４−フルオロベンジルチオ)ピリミジン
工程(ii)の副題生成物(８５.７ｇ)および６０％水素化ナトリウム(１４.２ｇ)をテトラヒドロフラン(１０００mL)に懸濁し、氷／水で３０分間冷却した。(Ｒ)−１−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)エタノール(中間体Ａ)の２−メチルテトラヒドロフラン(５３％ｗ／ｖ)(１０４mL)溶液を２０分間かけて滴下し、反応物を０℃〜室温で２０時間撹拌した。反応物を水(５００mL)および酢酸エチル(５００mL)に分配した。水相を酢酸エチル(２×５００mL)で再抽出し、合わせた有機相を乾燥し、真空で蒸発させた。粗製の物質をIsolera LSを使用して勾配溶出０〜３０％酢酸エチルのイソヘキサン溶液を用いるシリカフラッシュクロマトグラフィーで精製した。精製フラクションを蒸発乾固して、副題生成物(９４ｇ)を黄色油状物として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.43 - 7.35 (m, 2H), 7.04 - 6.95 (m, 2H), 6.41 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 5.27 - 5.17 (m, 1H), 4.33 (s, 2H), 4.20 - 4.15 (m, 1H), 4.07 - 4.02 (m, 1H), 3.83 - 3.76 (m, 1H), 1.39 (dd, J = 6.9, 27.4 Hz,6H), 1.31 (d, J = 6.3 Hz, 3H)
【０１７１】
iv)  Ｎ−(６−((Ｒ)−１−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)エトキシ)−２−(４−フルオロベンジル−チオ)ピリミジン−４−イル)−３−メチルアゼチジン−１−スルホンアミド
ジオキサン(７００mL)に溶解した工程(iii)の副題生成物(９４ｇ)を３−メチルアゼチジン−１−スルホンアミド(中間体Ｂ)(４２.５ｇ)、炭酸カリウム(６５.１ｇ)、ジシクロヘキシル(２’,４’,６’−トリイソプロピルビフェニル−２−イル)ホスフィン(１１.２ｇ)およびトリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(０)(１０.８ｇ)で窒素下処理した。得られた混合物を１００℃で６０分間撹拌した。反応混合物を水(５００mL)で希釈し、酢酸エチル(５００mL)で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空で蒸発させて、粗製の生成物を得た。粗製の生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィーで３０％酢酸エチルのイソヘキサン溶液で溶出して精製した。精製フラクションを蒸発乾固して、副題生成物(９８ｇ)を赤色油状物として得た。
m/z [M+H]+ = 513 (calc=512)(APCI)
【０１７２】
ｖ)  Ｎ−(６−((２Ｒ,３Ｓ)−３,４−ジヒドロキシブタン−２−イルオキシ)−２−(４−フルオロベンジルチオ)ピリミジン−４−イル)−３−メチルアゼチジン−１−スルホンアミド
工程(ｖ)の副題生成物(９８ｇ)をジクロロメタン(２００mL)中、０℃で撹拌し、トリフルオロ酢酸(２００mL)を添加した。反応物を室温に温め、さらに１８時間撹拌した(アルコールのＴＦＡエステル形成)。揮発物を真空で除去し、残渣をメタノール(２０mL)で希釈し、７Ｍアンモニアのメタノール溶液(１００mL)で処理した。溶液を２０分間撹拌し、蒸発乾固して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィーで勾配溶出５０％〜１００％酢酸エチルのイソヘキサン溶液で精製した。精製フラクションを蒸発させて、表題生成物を白色固体として得て、それをアセトニトリルから結晶化させて、白色結晶固体(４６.８ｇ)を得た。
m/z [M+H]+ = 473 (calc=472)(APCI)
1H NMR (500 MHz, d6-DMSO) δ 11.06 (s, 1H), 7.49 (dd, 2H), 7.13 (t, 2H), 6.09 (s, 1H), 5.28 - 5.18 (m, 1H), 4.93 (d, 1H), 4.65 (t, 1H), 4.37 (q, 2H), 3.97 (t, 2H), 3.70 - 3.60 (m, 1H), 3.58 - 3.49 (m, 2H), 3.37 (t, 2H), 2.59 (td, 1H), 1.20 (d, 3H), 1.09 (d, 3H)
【０１７３】
実施例１の表題生成物の結晶をＸＲＰＤで分析した。結果を図１に示し、ＸＲＰＤディフラクトグラムにおける特徴的ピークのいくつかを下表に示す(ＲＩは相対強度を表す)。弱いおよび極めて弱いピークの多くを表から省いている。好ましい配向効果のために、弱い省いたピークの一部はより顕著になり得る。
【表４】
0006006308.tif 000015
略語
ｖｓ＝極めて強い；ｓ＝強い；ｍ＝中程度；ｗ＝弱い
【０１７４】
実施例１の表題生成物の示差走査熱量測定プロファイルを図２に示す。
【０１７５】
中間体Ａ
(Ｒ)−１−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)エタノール
【化７】
0006006308.tif 000016
ｉ)  ５,６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸
Ｌ−アスコルビン酸(６５kg、３６９mol)、アセトン(２８３kg)および２,２−ジメトキシプロパン(４６kg、４４３mol)の混合物にｐ−トルエンスルホン酸(１.１kg、５.５mol)を添加した。温度を２５±５℃に調節した。スラリーを２時間撹拌し、その間窒素を、物質が反応器の底に沈降するのを防ぐために、底のバルブから頻繁に流した。ＮＭＲ分析(溶媒：Ｄ２Ｏ)は９８.５％変換を示した。
ヘプタン(２２２kg)を添加し、温度を５±５℃に調節した。反応混合物を少なくとも３０分間撹拌し、濾過した。反応器中のアセトニド生成物の残りを母液を使用してフィルターケーキ上に濯ぎ入れた。フィルターケーキをヘプタン(１１１kg)で洗浄し、５０℃で乾燥して、５,６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸(７３kg、３３６mol)をほとんど白色の粉末として得た。収率：９１％。
1H NMR (400 MHz, d6-DMSO, マレイン酸およびTFAと) δ 4.71 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.28 (m, 1H), 4.11 (dd, J = 7.0, 8.4 Hz, 1H), 3.90 (dd, J = 6.3, 8.4 Hz, 1H), 1.27 (s, 6H)
【０１７６】
ii)  (Ｒ)−メチル２−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−ヒドロキシアセテート
５,６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸(５８.８kg、２７２mol)を水(２９４kg)で希釈した水酸化ナトリウム溶液(２７.５kg、５０％、３４０mol)に添加し、温度を３０±５℃に調節した。重炭酸ナトリウム(５７kg、６８０mol)を添加し、混合物を１５分間撹拌し、温度を４０±５℃に上げた。３５％過酸化水素(５５kg、５６２mol)を混合物に３５〜６０℃で６０分間をかけて添加した。反応混合物を２時間撹拌し、ＮＭＲ分析(溶媒：Ｄ２Ｏ)は＜１％残存出発物質を示した。
亜硫酸ナトリウム(４.２kg、３３mol)を反応器に添加し、３０分間撹拌後、過酸化物の試験は陰性であった。
さらに重炭酸ナトリウム(３４kg、４０８mol)添加後、混合物を７０±５℃に加熱し、少なくとも１時間撹拌し、ＮＭＲ分析(溶媒：Ｄ２Ｏ)は次の中間体である(２Ｒ)−[(４Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル](ヒドロキシ)エタン酸への９８.５％変換を示した。
約１５０Ｌの水を減圧下除去し、塩類を濾過して除去した。フィルターケーキを水(３０Ｌ)で洗浄した。
ＮＭＰ(３３０kg)を合わせた母液／洗浄液に添加し、温度を３０±５℃に調節した。ヨウ化メチル(８３kg、５８５mol)を添加し、反応器を閉じた。温度を５５±５℃に調節し、反応混合物を少なくとも１２０分間反応させて、ＮＭＲ分析(溶媒：Ｄ２Ｏ)は６％の残存ヒドロキシエタン酸中間体を示した。
水(１４７kg)に溶解した亜硫酸ナトリウム(５６kg、４４６mol)を添加し、混合物を３０分間撹拌した。溶液を、総量４０６kgのトルエンを使用して、１０分間、３０±１０℃で４回抽出した。合わせた有機相の残存量が約３５０Ｌとなるまで、溶媒を減圧下、最高温度７０℃で除去することにより濃縮した。溶液を３０℃以下に冷却し、Milliporeフィルターでスチールバレルに移して、(Ｒ)−メチル２−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−ヒドロキシアセテートのトルエン溶液(３５９kg、９.４％、１７７mol)を得た。収率：６５％。
１Ｈ  ＮＭＲは、副題生成物の市販サンプルと一致した。
【０１７７】
iii)  (Ｒ)−メチル２−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−(トシルオキシ)アセテート
(Ｒ)−メチル２−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−ヒドロキシアセテートのトルエン溶液(３５９kg、９.４％、１７７mol)から、トルエンを凝縮が止むまで減圧下、最高温度７０℃で留去した。
アセトニトリル(１５３kg)を添加し、温度を２５±５℃に調節した。トリエチルアミン(４１kg、４０５mol)、４−(ジメチルアミノ)ピリジン(１.１２kg、９.２mol)および約３０分間、ｐ−トルエンスルホニルクロライド(５２.５kg、２７６mol)のアセトニトリル(１４６kg)溶液を２５±５℃で添加した。反応混合物をさらに３時間撹拌後、ＮＭＲ分析(溶媒：ｄ６−ＤＭＳＯ)は満足すべき変換を示した(９４％)。
ＭＴＢＥ(２３５kg)および水(３２６kg)を添加し、二相系を約３時間撹拌し、その後ＨＰＬＣ分析は、ｐ−トルエンスルホニルクロライドのレベルは、総ピーク面積の＜０.１％であることを示した。温度を２５±５℃に調節し、１５分間分離させた。水相を取り、さらにＭＴＢＥ(１５６kg)で抽出して、廃棄した。２個の有機相を合併し、水(３２６kg)で洗浄した。有機相を塩化ナトリウム(各回１６kg)の水溶液(各回１４０kg)で４回、各々５〜１０分間、２５±５℃で洗浄した。有機相を水(各回１８５kg)で２回、各々５〜１０分間、２５±５℃で洗浄した。ＮＭＲ分析(溶媒：ｄ６−ＤＭＳＯ)は、スルホン酸エステル中間体に対するmoleで＜２％ＮＭＰ(出発溶液からの残存)であることを示した。
活性炭(６.０kg)を添加し、スラリーを１５分間、２５±５℃で撹拌し、炭素を２個のパラレル・バッグ・フィルターで濾去した。０.６μmのカートリッジフィルターをバッグフィルター後に使用した。フィルターおよびパイプをＭＴＢＥ(２７kg)で濯いだ。
母液および洗液を合わせ、凝縮が止むまで、溶媒を減圧下および最高温度５０℃で除去することにより体積を減らした。ヘプタン(１０６kg)を添加し、溶液を再び凝縮が止むまで、溶媒を減圧下に、最高温度５０℃で除去することにより減らし、約６０Ｌの溶液を反応器に残した。ＭＴＢＥ(１８５kg)を添加し、温度を２５±５℃に調節後、ヘプタン(７５kg)を添加した。溶液を３０分間以上かけて０〜５℃に冷却し、ヘプタン(１５０kg)をさらに２０分間かけて添加した。スラリーを１時間、０〜５℃で撹拌し、濾過した。フィルターケーキをＭＴＢＥ(１６kg)とヘプタン(３０kg)の混合物で洗浄した。湿生成物をバキュームトレイドライヤーに載せ、３５℃(１００mbar未満)で乾燥して、(Ｒ)−メチル２−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−(トシルオキシ)アセテート(５１.３kg、１５４mol)を明褐色粉末として得た。収率：８７％。
1H NMR (400 MHz, CDCL3) δ 7.83 (m, 2H), 7.35 (m, 2H), 4.84 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.04 (dd, J = 6.6, 9.1 Hz, 1H), 3.97 (dd, J = 5.2, 9.1 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.29 (s, 3H)
【０１７８】
iv)  (Ｓ)−２,２−ジメチル−４−((Ｒ)−オキシラン−２−イル)−１,３−ジオキソラン
(Ｒ)−メチル２−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−(トシルオキシ)アセテート(７６.１kg、２２１mol)をメタノール(５７kg)およびジクロロメタン(２０８kg)に溶解した。
メタノール(１４kg)、ジクロロメタン(５３kg)および出発物質溶液の１／３(７４mol)を反応器に仕込んだ。溶液を１０〜１５℃に調節した。水素化ホウ素ナトリウム(６.３kg、１６９mol)を、１８回に分けて８〜１５℃に温度を維持した反応器に添加した。添加完了後、混合物を０.５時間撹拌した。さらに上記と同じ方法を使用して出発物質溶液の１／３(７４mol)およびさらに水素化ホウ素ナトリウム(６.３kg、１６９mol)を添加し、０.５時間撹拌した。この方法を、出発物質溶液の最後の１／３(７４mol)およびさらなる水素化ホウ素ナトリウム(６.３kg、１６９mol)で再度繰り返した。ＨＰＬＣ分析は、中間体(Ｓ)−１−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−ヒドロキシエチル４−メチルベンゼンスルホネートへの＞９９.９％変換を示した。
ジクロロメタン(２００kg)を反応混合物に加えた。ナトリウムメトキシドのメタノール溶液(４３kg、３０％、２３９mol)を２０〜２５℃で６０分間添加した。約０.５時間後、ＨＰＬＣ分析は中間体アルコールの９９.７％消費を示した。
酢酸ナトリウム(２５kg)の水(２３０Ｌ)溶液を反応混合物に添加した。混合物を１０〜１５分間、２０〜２５℃で撹拌した。１５分間の分離後、下部有機相を除いた。上部水相をジクロロメタン(３７６kg)で抽出した。下部有機相を取り、最初の有機相と合わせ、水相を廃棄した。
水(３５９Ｌ)を合併した有機相に添加した。１０〜１５分間、２０〜２５℃で撹拌し、１５分間分離させた後、下部有機相を硫酸ナトリウム(６３kg)を含む反応器に移した。
混合物の体積を溶媒を除去することにより３１０Ｌまで減少させ、硫酸ナトリウムを濾別した。フィルターケーキをジクロロメタン(９４kg)で洗浄した。合併した液相を激しく混合し、ポリプロピレンバッグフィルターを介してスチールドラムに注いで、(Ｓ)−２,２−ジメチル−４−((Ｒ)−オキシラン−２−イル)−１,３−ジオキソランのＤＣＭ溶液(４６７.５kg、６.２％、２０３mol)を透明黄色液体として得た。収率：９１％。
溶媒を除去した少量のサンプルを溶媒の蒸発と真空下の蒸留により得る。
1H NMR (単離サンプル, 400 MHz, d6-DMSO) δ 4.01 (dd, J = 6.6, 8.2 Hz, 1H), 3.92 (m, 1H), 3.72 (dd, J = 5.8, 8.2 Hz, 1H), 3.03 (ddd, J = 2.6, 4.1, 5.2 Hz, 1H), 2.77 (dd, J = 4.1, 5.0 Hz, 1H), 2.58 (dd, J = 2.6, 5.0 Hz, 1H), 1.34 (s, 3H), 1.27 (s, 3H)
【０１７９】
ｖ)  (Ｒ)−１−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)エタノール
(Ｓ)−２,２−ジメチル−４−((Ｒ)−オキシラン−２−イル)−１,３−ジオキソランのジクロロメタン溶液(４６５kg、６.２％、２００mol)から、ジクロロメタンを４１〜４２℃で蒸留し、ＴＨＦ(１２９kg)に置き換えた。反応器内で設定した体積(２３５Ｌ)に到達するまで蒸留を６０℃で続けた。リチウムアルミニウムハイドライド(ＬＡＨ)のＴＨＦ(２６.４kg、１０％、７０mol)溶液を反応器に２２℃で添加し、２５℃で約１時間撹拌後に、ＧＣ分析は出発物質の＞９９.９％消費を示した。
水を少しずつ温度および泡立ちを制御するよう調節した速度で添加漏斗を介して添加した。計２.６Ｌの水(１Ｌ／kgＬＡＨ)を添加した。水酸化ナトリウム溶液(２.６kg、１５％、１Ｌ／kgＬＡＨ)を上記水の場合と同じ方法で添加した。水(７.９Ｌ、３Ｌ／kgＬＡＨ)を前記と同じ方法を使用してもう１度添加漏斗を介して添加した。
スラリーを濾過し、フィルターケーキをＴＨＦ(３６kg)で洗浄した。濾液を、最高温度８５℃で、凝縮が止むまでＴＨＦを除去することにより濃縮した。２−ＭｅＴＨＦ(１２９kg)を反応器に添加し、約１２０Ｌの液量となるまで溶媒を留去した。ＫＦ分析は＜０.１％水を示した。溶液をカートリッジフィルターを通してＰＥ裏打ちドラムに注いで、(Ｒ)−１−((Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)エタノール溶液(１０３kg、２７％、１８７mol)を透明、明黄色液体として得た。収率：９４％。
溶媒を除いた少量サンプルを溶媒の蒸発と真空下の蒸留により得る。
1H NMR (単離サンプル, 400 MHz, d6-DMSO) δ ppm 4.77 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 8.0, 6.2 Hz, 1H), 3.76 (dd, 8.0, 6.0 Hz, 1H), 3.70 (m, 1H), 3.46 (m, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.07 (d, J = 6.2 Hz, 3H)
【０１８０】
あるいは、中間体Ａ[(Ｒ)−１−[(Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル]エタノール]を次のとおり製造し得る。
方法Ａ：
４０ｇの(１Ｒ)−１−[(４Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル]エチル]−３,４,５−トリメトキシベンゾエート(１１７.５mmol)を７倍相対体積(２８０mL)のメタノールに溶解した。この溶液に２０ｇの４７％ｗ／ｗ水酸化ナトリウム水溶液(２当量、２３５mmol)を添加し、溶液を５０℃に加熱した。典型的に１〜２時間以内に反応は完了し、減圧下蒸発させた。２−メチル−テトラヒドロフラン(１６０mL、４倍相対体積)を添加し、混合物を再び減圧下蒸発させて、痕跡量のメタノールを除去した。さらに２−メチル−テトラヒドロフラン(２００mL、５相対体積)を添加し、得られた懸濁液を環境温度で３０分間撹拌し、濾過した。フィルターケーキを７２mL(１.８体積)の２−メチルテトラヒドロフランで洗浄した。透明濾液を再び減圧下で濃縮して、アルコールを無色油状物として得た。
収率：１３.４ｇ(７８％)
【０１８１】
方法Ｂ：
２０ｇの(１Ｒ)−１−[(４Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル]エチル]−３,４,５−トリメトキシベンゾエート(５８.７６mmol)を１０倍相対体積(２００mL)の２−メチルテトラヒドロフランに溶解した。透明溶液に４.２４mLのメチル−トリブチル塩化アンモニウム(７５％水溶液、１１.７５mmol)、９.８９ｇ(５８.７６mmol)の５０％水酸化カリウム水溶液を添加した。得られた混合物を再び５０℃で撹拌し、典型的に２０時間以内に完了した(＜１％残存出発物質)。懸濁液を濾過し、透明濾液を約１００mL体積まで蒸留することによりさらに乾燥した。混合物を濾過し、１００mLの２−メチルテトラヒドロフランを層積し、再び２０mL総体積まで濃縮した。得られた透明溶液を、容器の濯ぎに先に使用した３０mLの２−メチルテトラヒドロフランで希釈した。
収率：２−メチルテトラヒドロフラン中の５０mL溶液は７.９ｇ(理論値の９２％)(Ｒ)−１−[(Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル]エタノール含有する。
溶媒を除いた少量のサンプルを溶媒の蒸発と真空下の蒸留により得る。
1H NMR (単離サンプル, 400 MHz, d6-DMSO) δ ppm 4.77 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 8.0, 6.2 Hz, 1H), 3.76 (dd, 8.0, 6.0 Hz, 1H), 3.70 (m, 1H), 3.46 (m, 1H), 1.29 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.07 (d, J = 6.2 Hz, 3H)
【０１８２】
(１Ｒ)−１−[(４Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル]エチル]−３,４,５−トリメトキシベンゾエートを次のとおり製造した。
[(１Ｒ,２Ｓ)−２,３,−ジヒドロキシ−１−メチル−プロピル]３,４,５−トリメトキシベンゾエート
【化８】
0006006308.tif 000017
生成物の収率およびエナンチオマー過剰は溶媒および反応材中に残留する水のレベルに大きく依存するため、本反応は乾燥剤、典型的にモレキュラー・シーブ３Åの助けを必要とする。溶媒および反応材中の合わせた水含量は、Ｅ−クロチルアルコールに対して０.０３８モル当量を超えてはならない。
Ｅ−クロチルアルコール(１００％ｗ／ｗで２０kg、２７７mol)を、約２０℃で３Åモレキュラー・シーブペレット(８kg)を含むカートリッジを一定速度で約８０分間かけて通し、乾燥回収容器に入れた。約３２分間の維持後、カートリッジは褐色となり、約３１分間加圧窒素を使用して浄化した。投入Ｅ−クロチルアルコールの約８５％を乾燥Ｅ−クロチルアルコールとして回収した。
乾燥Ｅ−クロチルアルコール(１００％ｗ／ｗで２０kg、２７７mol)の溶液に、酒石酸Ｌ−(＋)−ジイソプロピル(１１.７kg、５０mol)およびトルエン(１６７kg)を約−８℃でオルトチタン酸テトライソプロピル(１１.８kg、４２mol)およびトルエン(３３kg)と共に添加した。バッチを約３０分間撹拌し、クメンヒドロペルオキシド(８７％ｗ／ｗ、５８.２kg、３３３mol)およびトルエン(７８kg)を少なくとも４時間かけて添加した。バッチを約２時間撹拌し、３,４,５−トリメトキシ安息香酸(２.９kg、１３.９mol)を添加した。バッチを、約１時間かけてオルトチタン酸テトライソプロピル(７.９kg、２８mol)、３,４,５−トリメトキシ安息香酸(４７.１kg、２２２mol)およびトルエン(１５２kg)のスラリーに約３０℃で添加し、トルエン(１７kg)でラインを洗浄した。オルトチタン酸テトライソプロピル(２３.７kg、８３mol)およびトルエン(４０kg)を約２時間かけて添加し、バッチを約３時間撹拌した。バッチを冷却し、亜リン酸トリメチル(１７.２kg、１３９mol)およびトルエン(３５kg)を添加した。バッチを約３０℃に温め、塩酸水溶液(１０％ｗ／ｗ、８４kg、次いで６３kg)で２回洗浄し、水(３×６０kg)で３回洗浄した。合わせた水相を２−メチルテトラヒドロフラン(３４４kg)で洗浄した。有機相を合わせ、水(６０kg)で洗浄し、真空下で約２６０±４０Ｌのバッチ体積まで蒸留した。
温度を約３５℃に調節し、ヘキサン(６５kg)を少なくとも３０分間かけて添加した。バッチに種晶を添加し、少なくとも１時間撹拌し、約０℃で少なくとも３時間かけて冷却した。[種晶は、溶液の一部を別の容器に採取し、これを過飽和温度またはそれ以下まで冷却することにより得られる。沈殿した固体を濾過し、直接メインバッチに戻し、その後の制御された結晶化において種結晶として機能させ得る。]
さらなるヘキサン(３２５kg)を少なくとも２時間かけて添加し、スラリーを少なくともさらに１時間熟成させ、固体を濾過により単離した。固体をヘキサン(２×１３０kg)で洗浄し、一定重量となるまで乾燥した。収率：１００％ｗ／ｗで５７％。強度＝９３％ｗ／ｗ[３,４,５−トリメトキシ安息香酸(ＴＭＢＡ)も含有]。
1H NMR [500 MHz, CDCl3, 内部標準としての2,3,5,6-テトラクロロニトロベンゼン(TCNB)と共に];δ 7.71 (s, TCNB), 7.33 (s, 残存TMBA), 7.26 (s, 2H), 7.24 (s, CDCl3), 5.13 (m, 1H), 3.89 (m, 9H), 3.73 (m, 2H), 3.63 (1H, m), 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 2H)
エナンチオマー過剰：典型的に９７％
【０１８３】
(１Ｒ)−１−[(４Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル]エチル−３,４,５−トリメトキシベンゾエート
【化９】
0006006308.tif 000018
[(１Ｒ,２Ｓ)−２,３,−ジヒドロキシ−１−メチル−プロピル]−３,４,５−トリメトキシベンゾエート(１００％ｗ／ｗで４３.８kg、１４６mol、約９７％エナンチオマー過剰)の２−メチルテトラヒドロフラン(２２６kg)溶液を、約３０℃でパラ−トルエンスルホン酸(０.６kg、３mol)と共に添加した。２,２−ジメトキシプロパン(３８.０kg、３６５mol)を約４０分間かけて添加した。バッチを約２.５時間撹拌し、重炭酸カリウム水溶液(７％ｗ／ｗ、１６７kg)を添加した。温度を約６０℃に調節し、バッチを静止容器に濾過し、残存チタニウム種を除去した。下部水相を除去し、バッチを水(１３１kg)で洗浄し、約１３０±２０Ｌの体積まで真空下に蒸留した。イソオクタン(２１２kg)を添加し、溶液をさらに約２４０±２０Ｌの体積まで蒸留した。バッチに６０℃で種晶添加し、少なくとも１時間撹拌し、約５℃で少なくとも８時間かけて冷却した。[種晶は、溶液の一部を別の容器に採取し、これを過飽和温度またはそれ以下まで冷却することにより得られる。沈殿した固体を濾過し、直接メインバッチに戻し、その後の制御された結晶化において種結晶として機能させ得る。]バッチを少なくとも２時間熟成させ、固体を濾過により単離した。固体をヘキサン(８５kg)で約−５℃で洗浄し、一定重量まで乾燥した。収率：１００％ｗ／ｗで８４％。強度＝１００％ｗ／ｗ。
1H NMR [400 MHz, CDCl3, with 2,3,5,6-テトラクロロニトロベンゼン(TCNB)];δ 7.71 (s, TCNB), 7.28 (s, 2H), 7.24 (s, CDCl3), 5.15 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.92 (m, 1H), 3.88 (s, 9H), 1.36 (m, 9H)
エナンチオマー過剰：典型的に＞９９％ｅｅ(単離温度を、出発[(１Ｒ,２Ｓ)−２,３,−ジヒドロキシ−１−メチル−プロピル]−３,４,５−トリメトキシベンゾエートのエナンチオ過剰および所望の単離(１Ｒ)−１−[(４Ｓ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル]エチル−３,４,５−トリメトキシベンゾエートのエナンチオ過剰によって調節し得る)
【０１８４】
中間体Ｂ
３−メチルアゼチジン−１−スルホンアミド
【化１０】
0006006308.tif 000019
ｉ)  ベンジル３−メチルアゼチジン−１−イルスルホニルカルバメート
酢酸イソプロピル(３００mL)を１０００mlの３口フラスコに添加し、−１０〜−５℃に冷却した。イソシアン酸クロロスルホニル(４４.５mL)を−５〜１０℃で添加し、フェニルメタノール(５０.５mL)の酢酸イソプロピル(６０mL)溶液を−５〜１０℃で６０分間かけて添加した。混合物を−５〜１０℃で反応させ、ベンジルアルコール含量が＜２％となるまでＨＰＬＣモニターした(１時間、０℃の後)。アセトニトリル(３００mL)、３−メチルアゼチジンヒドロクロライド(５０ｇ)(中間体Ｃ、市販品または下記のとおり製造)およびトリエチルアミン(１６２mL)の混合物を２０００mLの３口フラスコで撹拌し、これに中間体ベンジルクロロスルホニルカルバメートの酢酸イソプロピル(３６０mL)溶液を＜−５℃で９０分間かけて滴下した。混合物をＲＴに一夜温めた。酢酸で反応停止させ、ｐＨを４〜５に調節した。混合物を分離し、水相を酢酸イソプロピル(５００ml)で洗浄し、分離した。有機相を合わせ、１０％塩水(２×１２０ml)で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、フィルターケーキを酢酸イソプロピル(３０ml)で洗浄し、濾過して、副題生成物(１４５ｇ)を赤色油状物として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 11.43 (s, 1H), 7.57 (m, 5H), 5.18 (s, 2H), 4.08 - 3.96 (m, 2H), 3.60 - 3.50 (m, 2H), 2.67 - 2.54 (m, 1H), 1.22 - 1.11 (d, 3H)
【０１８５】
ii)  ３−メチルアゼチジン−１−スルホンアミド
２個の反応器に分けた工程(ｉ)の副題生成物(１３２ｇ)を撹拌中の１０％Ｐｄ／Ｃ(４.９４ｇ)のエタノール(１０００mL)溶液に添加した。混合物を３.００barで１６時間水素化した。溶媒を蒸発させて、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を３０％酢酸エチルのジクロロメタンで溶出するシリカフラッシュクロマトグラフィーで精製した(ＫＭｎＯ４で染色)。純粋フラクションを蒸発乾固して、表題生成物(６０.３ｇ)を白色固体として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.82 (s, 2H), 3.75 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.36 - 3.24 (m, 2H), 2.59 - 2.46 (m, 1H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 3H)
【０１８６】
中間体Ｃ
３−メチルアゼチジン塩酸塩
【化１１】
0006006308.tif 000020
ｉ)  ベンジル３−ヒドロキシアゼチジン−１−カルボキシレート
ＴＨＦ(１７０mL)および水(８５mL)に溶解したアゼチジン−３−オール(１４.７ｇ)の溶液を炭酸カリウム(３７.１ｇ)で窒素下に処理した。混合物をＲＴで３０分間撹拌し、０℃に冷却し、クロロギ酸ベンジル(２０.０mL)を３０分間かけて、０℃で滴下した。得られた混合物を２０℃で６０時間撹拌した。反応混合物を水(１５０mL)で希釈し、酢酸エチル(２００mL)で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させて、粗製の生成物を無色油状物として得た。粗製の生成物を５０％酢酸エチルのイソヘキサン溶液〜１００％酢酸エチルで溶出するシリカフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純粋フラクションを蒸発乾固して、副題生成物(１９.４０ｇ、６９.８％)を無色油状物として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCL3) δ 7.41 - 7.28 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 4.70 - 4.54 (m, 1H), 4.23 (dd, J = 6.7, 9.9 Hz, 2H), 3.89 (dd, J = 4.4, 10.0 Hz, 2H), 2.34 (d, J = 6.1 Hz, 1H)
【０１８７】
ii)  ベンジル３−オキソアゼチジン−１−カルボキシレート
工程(ｉ)の副題生成物(１７.９ｇ)のＤＭＳＯ(１００mL)溶液を、１５分間かけて、ピリジン・三酸化硫黄(４４.７ｇ)およびトリエチルアミン(３９.３mL)のＤＭＳＯ(２００ml)溶液に０℃で添加した(５℃までわずかに発熱)。混合物を５分後ＲＴに温め、１６時間撹拌した。混合物を氷／水に注ぎ、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空で濃縮して、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を１００％ジクロロメタンで溶出するシリカフラッシュクロマトグラフィーで精製した。純粋フラクションを蒸発乾固して、副題生成物(１７.９ｇ)を淡黄色油状物として得た。
1H NMR (500 MHz, CDCL3) δ 7.40 - 7.31 (m, 5H), 5.17 (s, 2H), 4.78 (s, 4H)
【０１８８】
iii)  ベンジル３−メチレンアゼチジン−１−カルボキシレート
メチルトリフェニルホスホニウムブロマイド(９３ｇ)およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド(２９.３ｇ)のジエチルエーテル(７００mL)懸濁液をＲＴで２０分間撹拌し、３５℃で１時間、窒素下に加熱した。輝黄色混合物を工程(ii)の副題生成物(１７.９ｇ)のジエチルエーテル(２００mL)溶液を１時間、３５℃で滴下することにより処理した(橙色懸濁液形成)。得られた混合物を３５℃で１２時間撹拌した。混合物を冷却し、セライトパッドで濾過し、ジエチルエーテルで洗浄した。濾液を水(３００mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、蒸発させて、粗製の生成物を得た。粗製の生成物を１０％酢酸エチルのイソヘキサン溶液〜５０％酢酸エチルのイソヘキサン溶液で溶出するシリカフラッシュクロマトグラフィーで精製した(ＫＭｎＯ４で染色)。精製フラクションを蒸発乾固して、副題生成物(１４.１)を無色油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCL3) δ 7.39 - 7.28 (m, 5H), 5.12 (s, 2H), 5.01 (m, 2H), 4.57 (t, 4H)
【０１８９】
iv)  ３−メチルアゼチジン塩酸塩
エタノール(１００mL)に溶解した工程(iii)の副題生成物(１４.１ｇ)溶液を１０％Ｐｄ／Ｃ(ＪＭ型８７Ｌ)(１.４８ｇ)で水素下に処理した。得られた混合物を２０℃で４０時間、４.５０bar圧の水素ガス中で撹拌した。Ｃｂｚ保護基がなお結合していたため、水酸化パラジウム／炭素(２ｇ)のエタノール(１００mL)溶液に変えた。混合物をさらに２４時間、４.５０barで水素化した。混合物をセライトパットで濾過し、濾液を氷浴で０℃に冷却した。４Ｍ  ＨＣｌのジオキサン溶液(２６.０mL)を滴下し、溶液を蒸発乾固して、表題生成物(７.４６ｇ)を明褐色油状物として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCL3) δ 9.24 (s, 2H), 3.95 (ddd, J = 7.4, 9.8, 11.4 Hz, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 2H), 2.85 (dt, J = 6.7, 14.2 Hz, 1H), 1.16 (d, 3H)
【図面の簡単な説明】
【０１９０】
（原文に記載なし）
【図１】
0006006308.tif 000024
【図２】
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