(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩と少なくとも１つのポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）と少なくとも１つの炭素原子数８〜２４の脂肪酸とを含む組成物であって、
該少なくとも１つのＰＬＧＡの分子量が５０００Ｄａ〜１０００００Ｄａであり、
該少なくとも１つのＰＬＧＡが、９５：５〜５：９５の範囲のラクチド対グリコリドの重合比を有し、
該組成物の総重量に対して、該ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩が２０重量％〜４０重量％であり、該少なくとも１つのＰＬＧＡが５７．５重量％〜７２．５重量％であり、該少なくとも１つの脂肪酸が２．５重量％〜７．５重量％である、ミクロスフェア組成物。
【請求項２】
前記薬学的に許容可能な塩が無機酸又は有機酸とともに形成される、請求項１に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項３】
前記無機酸が塩酸、硫酸、リン酸及び硝酸から選ばれる、請求項２に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項４】
前記有機酸がクエン酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、安息香酸、乳酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸及びトルエン−ｐ−スルホン酸から選ばれる、請求項２に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項５】
前記有機酸が、グルタミン酸及びアスパラギン酸から選ばれる酸性アミノ酸である、請求項２に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項６】
前記組成物の総重量に対して、前記ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩が２０重量％〜４０重量％であり、前記少なくとも１つのＰＬＧＡが５７．５重量％〜７２．５重量％であり、前記脂肪酸が２．５重量％である、請求項１に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項７】
前記組成物の総重量に対して、前記ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩が３０重量％であり、前記少なくとも１つのＰＬＧＡが６２．５重量％〜６７．５重量％であり、前記脂肪酸が２．５重量％〜７．５重量％である、請求項１に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項８】
前記少なくとも１つのＰＬＧＡが、７５：２５〜２５：７５の範囲のラクチド対グリコリドの重合比を有する、請求項１に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項９】
前記少なくとも１つのＰＬＧＡが第１のＰＬＧＡと第２のＰＬＧＡとを含み、該第１のＰＬＧＡが４２０００Ｄａ〜７５０００Ｄａの分子量を有し、該第２のＰＬＧＡが１５０００Ｄａ〜３５０００Ｄａの分子量を有し、該第１のＰＬＧＡと該第２のＰＬＧＡとの重量比が９５：５〜５：９５である、請求項１に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１０】
前記第１のＰＬＧＡがＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及びＰＬＧＡ  ７５２５  ５Ａから選ばれ、前記第２のＰＬＧＡがＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａである、請求項９に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１１】
前記第１のＰＬＧＡと前記第２のＰＬＧＡとの重量比が５０：５０である、請求項９に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１２】
前記組成物の総重量に対して、前記ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩が２０重量％〜４０重量％であり、前記第１のＰＬＧＡ及び前記第２のＰＬＧＡの量が５７．５重量％〜７２．５重量％であり、前記脂肪酸が２．５重量％〜７．５重量％である、請求項９に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１３】
前記組成物の総重量に対して、前記ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩が２０重量％〜４０重量％であり、前記第１のＰＬＧＡ及び前記第２のＰＬＧＡの量が５７．５重量％〜７２．５重量％であり、前記脂肪酸が２．５重量％である、請求項９に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１４】
前記組成物の総重量に対して、前記ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩が３０重量％であり、前記第１のＰＬＧＡ及び前記第２のＰＬＧＡの量が６２．５重量％〜６７．５重量％であり、前記脂肪酸が２．５重量％〜７．５重量％である、請求項９に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１５】
前記組成物の総重量に対して、前記ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩が３０重量％であり、前記第１のＰＬＧＡ及び前記第２のＰＬＧＡの量が６７．５重量％であり、前記脂肪酸が２．５重量％である、請求項１４に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１６】
前記少なくとも１つの脂肪酸がステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、デカン酸、オクタン酸及びリグノセリン酸から選ばれる、請求項１に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１７】
前記少なくとも１つの脂肪酸がステアリン酸である、請求項１６に記載のミクロスフェア組成物。
【請求項１８】
パーキンソン病を治療するための医薬の製造における、請求項１〜１７のいずれか１項に記載のミクロスフェア組成物の使用。
【請求項１９】
ドーパミン受容体に関連する疾患及び／又はパーキンソン病を治療するための医薬の製造における、請求項１〜１７のいずれか１項に記載のミクロスフェア組成物の使用。
【請求項２０】
前記医薬が非経口投与される、請求項１９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示はロチゴチン、その誘導体、又はロチゴチン若しくはその誘導体の薬学的に許容可能な塩の組成物に関する。
【０００２】
本願は、２０１０年１１月２５日付で出願された中国特許出願第２０１０１０５７６４４７．５号の利益を主張するものである。
【背景技術】
【０００３】
肝臓の初回通過効果のために、ロチゴチンの経口バイオアベイラビリティは低く（約１％〜５％）、このためロチゴチンは経口投与に好適ではない。現在、パーキンソン病の治療用の最初の経皮パッチである、Schwarz  Pharma  AGによって開発されたＮｅｕｐｒｏ（商標）という商標の経皮パッチが、ドイツ、イギリス、オーストラリア等で市販されている。しかしながら、結晶ロチゴチンがこの製品の使用中に形成される場合がある。この問題を解決するために、２℃〜８℃の温度でのコールドチェーンによる貯蔵及び流通が採用され、患者がこの製品を使用する上での難しさを増すと考えられる結晶化を回避するためには、１回の処方は１ヶ月を超えるべきではない。
【０００４】
特許文献１は、ロチゴチンと分解性ポリマー補助材料とを含むミクロスフェア配合物を開示している。特許文献１に開示されるロチゴチンミクロスフェア配合物は、長時間作用型持続放出の効果を達成し得るが、バースト放出の問題が生じる可能性がある。特許文献１の図１７（８％の薬物担持率（drug-loading  rate）によるｉｎ  ｖｉｖｏ試験）、図１２（２０％の薬物担持率によるｉｎ  ｖｉｖｏ試験）及び図２０（４０％の薬物担持率によるｉｎ  ｖｉｖｏ試験）に示されるように、薬物担持率が２０％又は４０％である場合、バースト放出効果は明らかである。特許文献１の図２０（４０％の薬物担持率によるｉｎ  ｖｉｖｏ試験）及び図１９（４０％の薬物担持率によるｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験）から、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験におけるロチゴチンの１日の放出量が、ｉｎ  ｖｉｖｏ試験における薬物のバースト放出と相関していることも見て取れる。同じ薬物担持率では、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験における放出量が大きくなるほど、より多くの薬物がｉｎ  ｖｉｖｏでバースト放出される。
【０００５】
加齢に伴う変性疾患として、パーキンソン病は患者の年齢とともに次第に悪化する。このため、投与量も治療の間で漸増させなくてはならない。進行期のパーキンソン病の患者を治療する場合、薬物の１日服用量（daily  dose  intake）を大幅に増大させる必要がある。このため、ロチゴチンミクロスフェアを用いて進行期のパーキンソン病の患者を治療する場合、活性成分の薬物担持率は低すぎてはならない。言い換えると、薬物担持率がより高いミクロスフェアと同じ治療効果を達成するには、薬物担持率がより低いミクロスフェアを比較的多量に投与する必要があり、これは患者に痛みを与える場合がある。しかしながら、ミクロスフェアの薬物担持率が過度に高いと、患者に投与した際に薬物が急激に放出される可能性があり、これは薬物過剰摂取を引き起こす場合がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】中国特許出願公開第１７６２４９５号
【発明の概要】
【０００７】
本開示は、ロチゴチンおよびその誘導体等の薬物、又はロチゴチン若しくはその誘導体の薬学的に許容可能な塩の組成物であって、薬物のバースト放出を十分に減少させる、組成物を提供する。組成物は、ロチゴチン、その誘導体、又はロチゴチン若しくはその誘導体の薬学的に許容可能な塩と、
少なくとも１つのポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）と、
少なくとも１つの脂肪酸と、
を含み、上記の少なくとも１つの脂肪酸が、組成物の総重量に対して少なくとも約０．５重量％、例えば約１重量％〜１５重量％である。
【０００８】
幾つかの実施の形態では、組成物はミクロスフェアの形態である。例えば、ミクロスフェアの粒径は約１ミクロン〜２５０ミクロン、例えば約１０ミクロン〜２００ミクロンであり得る。
【０００９】
幾つかの実施の形態では、組成物はロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩である。
【００１０】
幾つかの実施の形態では、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は、組成物の総重量に対して約２０重量％〜４０重量％である。一例では、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は、組成物の総重量に対して約２５重量％〜３５重量％、約２５重量％〜３０重量％、約２０重量％〜３０重量％、約２０重量％〜３５重量％、約２５重量％〜４０重量％、約３０重量％〜３５重量％、約３０重量％〜４０重量％、又は約３５重量％〜４０重量％であり得る。別の例では、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は、組成物の総重量に対して約２１重量％、２２重量％、２３重量％、２４重量％、２５重量％、２６重量％、２８重量％、２９重量％、３０重量％、３１重量％、３２重量％、３３重量％、３４重量％、３５重量％、３６重量％、３７重量％、３８重量％、３９重量％又は４０重量％であり得る。
【００１１】
幾つかの実施の形態では、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは、組成物の総量に対して約４５重量％〜７９重量％である。上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは、例えば分子量及び／又は重合比が異なり得る２つ、３つ、４つ又は５つの異なるタイプのＰＬＧＡポリマーを含んでいてもよい。一例では、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは、組成物の総量に対して約４７．５重量％〜７７．５重量％、約５０重量％〜７７．５重量％、約５２．５重量％〜７２．５重量％、約５５重量％〜７２．５重量％、約５５重量％〜６９重量％、約５７．５重量％〜７２．５重量％、約５７．５重量％〜７７．５重量％、約６０重量％〜７２．５重量％、約６０重量％〜７０重量％、約６２．５重量％〜６７．５重量％、約４５重量％〜５０重量％、約４７．５重量％〜６０重量％又は約５０重量％〜６０重量％である。別の例では、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは、組成物の総量に対して約４５重量％、約４７．５重量％、約５０重量％、約５２．５重量％、約５５重量％、約５７．５重量％、約６０重量％、約６２．５重量％、約６５重量％、約６７．５重量％、約７０重量％、約７２．５重量％、約７５重量％、約７７．５重量％、約７８重量％又は約７９重量％である。
【００１２】
一部の実施の形態では、薬学的に許容可能な塩はロチゴチンと無機酸又は有機酸とによって形成される。無機酸は塩酸、硫酸、リン酸及び硝酸から選ぶことができる。有機酸はクエン酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、安息香酸、乳酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸及びトルエン−ｐ−スルホン酸から選ばれる。例えば、有機酸はグルタミン酸及びアスパラギン酸等の酸性アミノ酸であってもよい。
【００１３】
一部の実施の形態では、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡの分子量は約５０００Ｄａ〜１０００００Ｄａである。例えば、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡの分子量は、約５５００Ｄａ〜９９０００Ｄａ、約６０００Ｄａ〜９８０００Ｄａ、約６５００Ｄａ〜９７０００Ｄａ、約７０００Ｄａ〜９６０００Ｄａ、約７５００Ｄａ〜９５０００Ｄａ、約８０００Ｄａ〜９４０００Ｄａ、約８５００Ｄａ〜９３０００Ｄａ、約９０００Ｄａ〜９２０００Ｄａ、約９５００Ｄａ〜９１０００Ｄａ、約１００００Ｄａ〜９００００Ｄａ、約１０５００Ｄａ〜８９０００Ｄａ、約１１０００Ｄａ〜８８０００Ｄａ、約１０５００Ｄａ〜８７０００Ｄａ、約１１０００Ｄａ〜８６０００Ｄａ、約１１５００Ｄａ〜８５０００Ｄａ、約１２０００Ｄａ〜８４０００Ｄａ、約１２５００Ｄａ〜８３０００Ｄａ、約１３０００Ｄａ〜８２０００Ｄａ、約１３５００Ｄａ〜８１０００Ｄａ、約１４０００Ｄａ〜８００００Ｄａ、約１４５００Ｄａ〜７９０００Ｄａ、約１５０００Ｄａ〜７８０００Ｄａ、約１５５００Ｄａ〜７７０００Ｄａ、約１６０００Ｄａ〜７６０００Ｄａ、約１６５００Ｄａ〜７５０００Ｄａ、約１７０００Ｄａ〜７４０００Ｄａ、約１７５００Ｄａ〜７３０００Ｄａ、約１８０００Ｄａ〜７２０００Ｄａ、約１８５００Ｄａ〜７１０００Ｄａ、約１９０００Ｄａ〜７００００Ｄａ、約１９５００Ｄａ〜６９０００Ｄａ、約２００００Ｄａ〜６８０００Ｄａ、約２１０００Ｄａ〜６７０００Ｄａ、約２２０００Ｄａ〜６６０００Ｄａ、約２３０００Ｄａ〜６５０００Ｄａ、約２４０００Ｄａ〜６４０００Ｄａ、約２５０００Ｄａ〜６３０００Ｄａ、約２６０００Ｄａ〜６２０００Ｄａ、約２７０００Ｄａ〜６１０００Ｄａ、約２８０００Ｄａ〜６００００Ｄａ、約２９０００Ｄａ〜６００００Ｄａ、約３００００Ｄａ〜５９０００Ｄａ、約３１０００Ｄａ〜５８０００Ｄａ、約３２０００Ｄａ〜５７０００Ｄａ、約３３０００Ｄａ〜５９０００Ｄａ、約３４０００Ｄａ〜５８０００Ｄａ、約３５０００Ｄａ〜５７０００Ｄａ、約３６０００Ｄａ〜５６０００Ｄａ、約３７０００Ｄａ〜５５０００Ｄａ、約３８０００Ｄａ〜５４０００Ｄａ、約３９０００Ｄａ〜５３０００Ｄａ、約４００００Ｄａ〜５２０００Ｄａ、約４１０００Ｄａ〜５１０００Ｄａ、約４２０００Ｄａ〜５００００Ｄａ、約４２０００Ｄａ〜４９０００Ｄａ、約４３０００Ｄａ〜４８０００Ｄａ、約４４０００Ｄａ〜４７０００Ｄａ又は約４５０００Ｄａ〜４６０００Ｄａであり得る。
【００１４】
一部の実施の形態では、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは、約９５：５〜５：９５の範囲のラクチド対グリコリドの重合比を有する。例えば、ラクチド対グリコリドの重合比は、約９０：１０〜１０：９０、約８５：１５〜１５：８５、約８０：２０〜２０：８０、約７５：２５〜２５：７５、約７０：３０〜３０：７０、約６５：３５〜３５：６５、約６０：４０〜４０：６０、又は約５５：４５〜４５：５５であり得る。別の例としては、ラクチド対グリコリドの重合比は約５０：５０であり得る。
【００１５】
一部の実施の形態では、ラクチド対グリコリドの重合比は約７５：２５〜２５：７５の範囲である。
【００１６】
一部の実施の形態では、上記の少なくとも１つの脂肪酸は、炭素原子数８〜２４の脂肪酸から選ばれる。上記の少なくとも１つの脂肪酸はステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、デカン酸、オクタン酸及びリグノセリン酸から選ぶことができる。例えば、上記の少なくとも１つの脂肪酸はステアリン酸であり得る。
【００１７】
一部の実施の形態では、上記の少なくとも１つの脂肪酸は、組成物の総重量に対して少なくとも０．５重量％である。例えば、上記の少なくとも１つの脂肪酸は、組成物の総重量に対して約１重量％〜１５重量％、約２重量％〜１５重量％、約３重量％〜１５重量％、約４重量％〜１５重量％、約５重量％〜１５重量％、約６重量％〜１５重量％、約７重量％〜１５重量％、約８重量％〜１５重量％、約９重量％〜１５重量％、約１０重量％〜１５重量％、約１１重量％〜１５重量％、約１２重量％〜１５重量％、約１３重量％〜１５重量％、約１４重量％〜１５重量％、約１重量％〜１２．５重量％、約２重量％〜１２．５重量％、約３重量％〜１２．５重量％、約４重量％〜１２．５重量％、約５重量％〜１２．５重量％、約６重量％〜１２．５重量％、約７重量％〜１２．５重量％、約８重量％〜１２．５重量％、約９重量％〜１２．５重量％、約１０重量％〜１２．５重量％、約１１重量％〜１２．５重量％、約１重量％〜１０重量％、約２重量％〜１０重量％、約３重量％〜１０重量％、約４重量％〜１０重量％、約５重量％〜１０重量％、約６重量％〜１０重量％、約７重量％〜１０重量％、約８重量％〜１０重量％、約９重量％〜１０重量％、約１重量％〜７．５重量％、約２重量％〜７．５重量％、約３重量％〜７．５重量％、約４重量％〜７．５重量％、約５重量％〜７．５重量％、約６重量％〜７．５重量％、約１重量％〜５重量％、約２重量％〜５重量％、約３重量％〜５重量％、約４重量％〜５重量％、約１重量％〜３重量％、約２重量％〜３重量％、約２重量％〜４重量％、約３重量％〜４重量％である。別の例では、上記の少なくとも１つの脂肪酸は、少なくとも約１％、約１．５％、約２％、約２．５％、約３％、約３．５％、約４％、約４．５％、約５％、約５．５％、約６％、約６．５％、約７％、約７．５％、約８％、約８．５％、約９％、約１０％、約１０．５％、約１１％、約１１．５％、約１２％、約１２．５％、約１３％、約１３．５％、約１４％、約１４．５％又は約１５％であり得る。
【００１８】
一部の実施の形態では、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は、組成物の総重量に対して約２０重量％〜４０重量％であり、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは約５７．５％〜７２．５％であり、上記の少なくとも１つの脂肪酸は約２．５％〜７．５％である。
【００１９】
一部の実施の形態では、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は、組成物の総重量に対して約２０重量％〜４０重量％であり、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは約５７．５％〜７７．５％であり、上記の少なくとも１つの脂肪酸は約２．５％である。
【００２０】
一部の実施の形態では、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は、組成物の総重量に対して約３０重量％であり、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは約５５．５％〜６９％であり、上記の少なくとも１つの脂肪酸は約１％〜１５％である。
【００２１】
一部の実施の形態では、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は、組成物の総重量に対して約３０重量％であり、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは約６２．５％〜６７．５％であり、上記の少なくとも１つの脂肪酸は約２．５％〜７．５％である。
【００２２】
一部の実施の形態では、組成物の総重量に対して、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は約３０％であり、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは約６７．５％であり、脂肪酸は約２．５％である。
【００２３】
一部の実施の形態では、上記の少なくとも１つのＰＬＧＡは第１のＰＬＧＡと第２のＰＬＧＡとを含み、第１のＰＬＧＡは約４２０００Ｄａ〜７５０００Ｄａの分子量を有し、第２のＰＬＧＡは約１５０００Ｄａ〜３５０００Ｄａの分子量を有し、第１のＰＬＧＡと第２のＰＬＧＡとの重量比は約９５：５〜５：９５である。
【００２４】
一部の実施の形態では、第１のＰＬＧＡは約１５０００Ｄａ〜３００００Ｄａ、約１５０００Ｄａ〜２５０００Ｄａ、約１５０００Ｄａ〜２００００Ｄａ、約２００００Ｄａ〜３５０００Ｄａ、約２００００Ｄａ〜３００００Ｄａ、約２００００Ｄａ〜２５０００Ｄａ、約２５０００Ｄａ〜３５０００Ｄａ、約２５０００Ｄａ〜３００００Ｄａ、又は約３００００Ｄａ〜３５０００Ｄａの分子量を有する。
【００２５】
一部の実施の形態では、第２のＰＬＧＡは約４５０００Ｄａ〜７００００Ｄａ、約５００００Ｄａ〜６５０００Ｄａ、約５５０００Ｄａ〜６００００Ｄａ、約４５０００Ｄａ〜６５０００Ｄａ、約４５０００Ｄａ〜６００００Ｄａ、約４５０００Ｄａ〜５５０００Ｄａ、約４５０００Ｄａ〜５００００Ｄａ、約５００００Ｄａ〜７００００Ｄａ、約５００００Ｄａ〜５５０００Ｄａ、約６００００Ｄａ〜６５０００Ｄａ、約６００００Ｄａ〜７００００Ｄａ、約４５０００Ｄａ〜７５０００Ｄａ、約５００００Ｄａ〜７５０００Ｄａ、約５５０００Ｄａ〜７５０００Ｄａ、約６００００Ｄａ〜７５０００Ｄａ、約６５０００Ｄａ〜７５０００Ｄａ、又は約７００００Ｄａ〜７５０００Ｄａの分子量を有する。
【００２６】
一部の実施の形態では、第１のＰＬＧＡと第２のＰＬＧＡとの重量比は、約９０：１０〜１０：９０、約８５：１５〜１５：８５、約８０：２０〜２０：８０、約７５：２５〜２５：７５、約７０：３０〜３０：７０、約６５：３５〜３５：６５、約６０：４０〜４０：６０、又は約５５：４５〜４５：５５であり得る。
【００２７】
一部の実施の形態では、第１のＰＬＧＡはＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ）及びＰＬＧＡ（７５２５  ５Ａ）から選ばれ、第２のＰＬＧＡはＰＬＧＡ（５０５０  ２．５Ａ）である。
【００２８】
一部の実施の形態では、第１のＰＬＧＡと第２のＰＬＧＡとの重量比は約５０：５０である。
【００２９】
一部の実施の形態では、組成物の総重量に対して、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は約２０％〜４０％であり、第１のＰＬＧＡ及び第２のＰＬＧＡの量は約５７．５％〜７２．５％であり、脂肪酸は約２．５％〜７．５％である。
【００３０】
一部の実施の形態では、組成物の総重量に対して、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は約２０％〜４０％であり、第１のＰＬＧＡ及び第２のＰＬＧＡの量は約５７．５％〜７７．５％であり、脂肪酸は約２．５％である。
【００３１】
一部の実施の形態では、組成物の総重量に対して、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は約３０％であり、第１のＰＬＧＡ及び第２のＰＬＧＡの量は約５５％〜６９％であり、脂肪酸は約１％〜１５％である。
【００３２】
一部の実施の形態では、組成物の総重量に対して、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は約３０％であり、第１のＰＬＧＡ及び第２のＰＬＧＡの量は約６２．５％〜６７．５％であり、脂肪酸は約２．５％〜７．５％である。
【００３３】
一部の実施の形態では、組成物の総重量に対して、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩は約３０％であり、第１のＰＬＧＡ及び第２のＰＬＧＡの量は約６７．５％であり、脂肪酸は約２．５％である。
【００３４】
本明細書に開示される組成物は、ロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の長時間作用型持続放出をもたらすことができる。例えば、ロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩とＰＬＧＡと脂肪酸とを含むミクロスフェア調製物は、ミクロスフェア調製物を１日〜４日間投与することで生じ得る低薬物放出効果を減少させることができ、一方で減少したバースト放出効果を有する。本明細書に開示されるように調製したミクロスフェアは、良好なバッチ間一貫性ももたらす。個々の動物間での血中薬物濃度の変動も、大幅に減少させることができる。
【００３５】
本明細書に開示される組成物は、とりわけロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩が、組成物の総重量に対して２０重量％を超える場合にバースト放出効果を減少させることができる。組成物の総重量に対するロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の重量パーセントは、本明細書で「薬物担持率」とも称される。
【００３６】
本明細書に開示される組成物は、薬物を顕著なバースト放出なしに長期にわたって安定して放出するため、長時間作用型持続放出の目的を達成する。
【００３７】
本明細書に開示されるＰＬＧＡは、ラクチド／グリコリドコポリマーであるポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）としても知られる。ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）におけるラクチド対グリコリドの重合比は、任意の適切な比率であり得る。例えば、ラクチド対グリコリドの重合比は約９５：５〜５：９５、例えば約７５：２５〜２５：７５であり得る。
【００３８】
ＰＬＧＡは以下の構造：
【化１】
0006006225.tif 000002
（式中、ｎはゼロ又は正の整数であり、ｍはゼロ又は正の整数であるが、ｎ及びｍが同時にゼロとはならない）によって表すことができる。本明細書に開示されるＰＬＧＡは、更に化学修飾されてもよい。
【００３９】
本明細書に開示されるミクロスフェアは、ポリマーマトリクス全体に均一に溶解及び／又は分散した薬物を含むマトリクスタイプである。
【００４０】
本明細書に開示されるミクロスフェアは、サイズが約１μｍ〜２５０μｍ、例えば約１０μｍ〜２４０μｍ、約２０μｍ〜２３０μｍ、約４０μｍ〜２１０μｍ、約５０μｍ〜２００μｍ、約６０μｍ〜１９０μｍ、約７０μｍ〜１８０μｍ、約８０μｍ〜１７０μｍ、約９０μｍ〜１６０μｍ、約１００μｍ〜１５０μｍ、約１１０μｍ〜１４０μｍ、又は約１２０μｍ〜１３０μｍの範囲であり得る。例えば、本明細書に開示されるミクロスフェアは約１０μｍ、２０μｍ、３０μｍ、４０μｍ、５０μｍ、６０μｍ、７０μｍ、８０μｍ、９０μｍ、１００μｍ、１１０μｍ、１２０μｍ、１３０μｍ、１４０μｍ、１５０μｍ、１６０μｍ、１７０μｍ、１８０μｍ、１９０μｍ、２００μｍ、２１０μｍ、２２０μｍ、２３０μｍ、２４０μｍ又は２５０μｍであり得る。
【００４１】
本明細書に開示されるミクロスフェアは、噴霧乾燥法、溶媒揮発法又はスプレー抽出法を含むが、これらに限定されない当該技術分野の従来の任意の方法によって調製することができる。
【００４２】
ミクロスフェアを溶媒揮発法によって調製する場合、ロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩とＰＬＧＡと脂肪酸とを初めに有機溶媒に溶解し、有機相を調製する。連続水相を水溶性医薬ポリマー補助材料から調製する。次いで、有機相を細い管を通して連続水相に注入して混合物を形成し、これを激しい機械的撹拌又は超音波撹拌下で乳化して、ミクロスフェアを形成する。次に、有機溶媒を蒸発させ、得られるミクロスフェアを濾過して乾燥させる。必要に応じて、ミクロスフェアを従来の方法に従って洗浄、選別等によって後処理し、真空乾燥又は凍結乾燥によって乾燥させ、最後に個包装することもできる。
【００４３】
上記のプロセスでは、有機溶媒は揮発性が十分な低残留物かつ低沸点の溶媒であり得る。例えば、有機溶媒はジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチル、ジエチルエーテル又はそれらの任意の組合せであり得る。連続水相を形成するために使用される水溶性医薬ポリマー補助材料は、ポリビニルアルコール、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリジン、ポリメタクリル酸ナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム及びそれらの任意の組合せから選ぶことができるが、これらに限定されない。
【００４４】
有機溶媒中のロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）及び脂肪酸の量は、それらを有機溶媒に溶解することができる限り特に限定されない。例えば、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）及び脂肪酸は、有機溶媒中に約１％（ｗ／ｖ）〜３０％（ｗ／ｖ）、例えば約５％（ｗ／ｖ）〜２５％（ｗ／ｖ）又は約１０％（ｗ／ｖ）〜２０％（ｗ／ｖ）であり得る。
【００４５】
連続水相がポリビニルアルコール、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリジン、ポリメタクリル酸ナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム又はそれらの任意の組合せから調製される場合、これらのポリマー補助材料の濃度には特別な限定はない。例えば、水相中でのこれらのポリマー補助材料の濃度は、それらの水への溶解度に基づき０．０１％（ｗ／ｖ）〜１２．０％（ｗ／ｖ）、例えば０．０１％（ｗ／ｖ）〜１０．０％（ｗ／ｖ）、例えば０．１％（ｗ／ｖ）〜５％（ｗ／ｖ）であり得る。
【００４６】
有機相を水相に注入し、激しく撹拌してミクロスフェアを形成する場合、水相対有機相の体積比は、有機相を水相に十分に分散させて、十分に小さな粒度かつ良好な均一性のミクロスフェアを形成することができるほど大きいものとする。ただし、水相の量が必要以上に多い場合、後処理が複雑となり、それによりコストが増加する場合がある。例えば、有機相対水相の体積比は約１：４〜１：１００、例えば約１：５、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：４０、約１：５０、約１：６０、約１：７０、約１：８０、約１：９０又は約１：１００であり得る。
【００４７】
ミクロスフェアは噴霧乾燥法によっても調製することができる。例えば、ロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、ＰＬＧＡ及び他の賦形剤を有機溶媒に十分に溶解して、有機溶液を調製する。有機溶液を濾過し、従来の噴霧乾燥法によって乾燥させて、ミクロスフェアを形成する。必要に応じて、ミクロスフェアを従来の方法に従って洗浄、選別等によって後処理した後、個包装することもできる。
【００４８】
ミクロスフェアを上記の噴霧乾燥法によって調製する場合、有機溶媒はジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチル、ジオキサン、ジエチルエーテル、アセトン、テトラヒドロフラン、氷酢酸及びそれらの任意の組合せから選ぶことができるが、これらに限定されない。
【００４９】
有機相を調製する場合、ＰＬＧＡを有機溶媒に溶解することができる限り、有機溶媒中のＰＬＧＡの量には特別な限定はない。例えば、ＰＬＧＡの濃度は約１％（ｗ／ｖ）〜３０％（ｗ／ｖ）、例えば約５％（ｗ／ｖ）〜２５％（ｗ／ｖ）又は約１０％（ｗ／ｖ）〜２０％（ｗ／ｖ）であり得る。
【００５０】
ミクロスフェアはスプレー抽出法によっても調製することができる。ミクロスフェアをスプレー抽出法によって調製する場合、ロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、ＰＬＧＡ及び他の賦形剤を有機溶媒Ａ（その中にロチゴチン等の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、ＰＬＧＡ及び脂肪酸を溶解することができる）に十分に溶解して、有機溶液を調製する。次いで、有機溶液を水又は有機溶媒Ｂ（その中でロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩、ＰＬＧＡ及び脂肪酸は限られた溶解度を有する）中に噴射し、抽出して、ミクロスフェアを形成する。必要に応じて、ミクロスフェアを従来の方法に従って洗浄、選別等によって後処理した後、個包装することもできる。
【００５１】
有機溶媒Ａはジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチル、ジオキサン、ジエチルエーテル、アセトン、テトラヒドロフラン、ベンゼン、トルエン及び氷酢酸から選ばれる少なくとも１つであり得る。有機溶媒Ｂはメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、石油エーテル、アルカン及び鉱物油から選ばれる少なくとも１つであり得る。
【００５２】
ＰＬＧＡを有機溶媒Ａに溶解することができる限り、有機溶媒Ａ中のＰＬＧＡの量には特別な限定はない。例えば、有機溶媒Ａ中のＰＬＧＡの濃度は約１％（ｗ／ｖ）〜３０％（ｗ／ｖ）、例えば約５％（ｗ／ｖ）〜２５％（ｗ／ｖ）又は約１０％（ｗ／ｖ）〜２０％（ｗ／ｖ）であり得る。
【００５３】
形成されるミクロスフェアの粒度の均一性を改善するため、また取扱いの便宜のためには、噴霧乾燥法が溶媒揮発法及びスプレー抽出法よりも好ましい場合がある。しかしながら、初期放出を低下させるために溶媒揮発法が好ましい場合もある。
【００５４】
調製の後、所定の用量に従ってミクロスフェアの粒度選別、清浄化、乾燥及び個包装を行い、粉末注射剤を調製することができる。粒度が十分に均一である場合、粒度選別の工程は省いてもよい。
【００５５】
本開示は、本明細書に開示される組成物を用いて調製される粉末注射剤も提供する。粉末注射剤は使用時にｉｎ  ｓｉｔｕで注入剤に変換することができる。粉末注射剤を例えば本明細書に開示されるようなミクロスフェア形態の組成物から直接調製し、使用前に注射用のカルボキシルメチルセルロースナトリウムと均一に混合する。粉末注射剤は、組成物、例えば本明細書に開示されるようなミクロスフェア形態の組成物と適切な量のカルボキシルメチルセルロースナトリウム、マンニトール、グルコース等とを混合することによっても調製することができる。適切な量の精製水を使用前にそれに添加して、注射液を調製することができる。
【００５６】
本開示は、ドーパミン受容体に関連する疾患及び／又はパーキンソン病を治療する方法であって、有効量の本明細書に開示される組成物を、それを必要とする被験体に投与することを含む、方法も提供する。例えば、該方法は、組成物の総重量に対して約２０重量％〜３５重量％の量のロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩と組成物の総重量に対して約２．５重量％〜１０重量％の量の少なくとも１つの脂肪酸と組成物の総量に対して約５５重量％〜７７．５重量％の量の少なくとも１つのＰＬＧＡとを含む組成物を投与することを含むことができ、組成物はミクロスフェアの形態である。別の例では、該方法は、組成物の総重量に対して約３０重量％の量のロチゴチン又はその薬学的に許容可能な塩と組成物の総重量に対して約２．５重量％の量の少なくとも１つの脂肪酸と組成物の総量に対して約６７．５重量％の量の本明細書に開示される第１のＰＬＡ及び第２のＰＬＧＡ等の少なくとも１つのＰＬＧＡとを含む組成物を投与することを含むことができ、組成物はミクロスフェアの形態である。
【００５７】
本明細書に開示される組成物は、それを必要とする被験体に非経口投与することができる。例えば、組成物は筋肉注射、皮下注射、皮内注射、腹腔内注射等によって投与することができる。投与を容易にするには、本明細書に開示される組成物を筋肉注射又は皮下注射によって投与することができる。
【００５８】
本明細書に開示される組成物は、少なくとも約２週間、例えば約３週間、約４週間、約５週間等の間隔で投与することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５９】
【図１】実施例１において調製される単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率２０％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２】実施例２において調製される単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率２５％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図３】実施例３において調製される単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率３０％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図４】実施例４において調製される単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率３５％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図５】実施例５において調製される単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率４０％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図６】実施例３及び実施例８において調製されるミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ濃度曲線を示す図である。ここで、◆は実施例３において調製されるミクロスフェア（ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ）のｉｎ  ｖｉｖｏ放出薬物−時間曲線を表し、▲は実施例８において調製されるミクロスフェア（２．５％のステアリン酸及びＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａを含有する）のｉｎ  ｖｉｖｏ放出薬物−時間曲線を表す。
【図７】実施例６において調製される単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率２０％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図８】実施例７において調製される単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率２５％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図９】実施例８において調製される単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率３０％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１０】実施例９において調製される単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率３５％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１１】実施例１０において調製される単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率４０％）のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１２】実施例１１において調製される２．５％のオクタン酸（Ｃ８）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１３】実施例１２において調製される２．５％のリグノセリン酸（Ｃ２４）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１４】実施例１３において調製される０．５％のステアリン酸を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１５】実施例１４において調製される１％のステアリン酸を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１６】実施例１５において調製される５％のステアリン酸を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１７】実施例１６において調製される１０％のステアリン酸を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１８】実施例１７において調製される１５％のステアリン酸を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図１９】ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａを含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ薬物−時間曲線図である。
【図２０】実施例１８において調製される、分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝９５：５）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２１】実施例１９において調製される、分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２２】実施例２０において調製される、分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５：９５）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２３】実施例２１において調製される、ステアリン酸（１％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２４】実施例２２において調製される、ステアリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２５】実施例２３において調製される、ステアリン酸（７．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２６】実施例２４において調製される、ステアリン酸（１０％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２７】実施例２５において調製される、オクタン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２８】実施例２６において調製される、リグノセリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図２９】実施例２７において調製される、ステアリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝９５：５）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図３０】実施例２８において調製される、ステアリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５：９５）を含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。ここで、Δは１日放出量を表し、■は累積放出量を表す。
【図３１】ステアリン酸（２．５％）及び種々の重量比の分子量の異なる２つのＰＬＧＡを含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ薬物−時間曲線図である。ここで、◆はミクロスフェア（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝５０：５０）（２．５％のステアリン酸）のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物−時間曲線図を表し、▲はミクロスフェア（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝７０：３０）（２．５％のステアリン酸）のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物−時間曲線図を表し、−はミクロスフェア（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝８０：２０）（２．５％のステアリン酸）のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物−時間曲線図を表し、■はミクロスフェア（７５２５  ４Ａ：５０５０  ２．５Ａ＝９０：１０）（２．５％のステアリン酸）のｉｎ  ｖｉｖｏ薬物−時間曲線図を表す。
【図３２】実施例２２において調製されるロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ−ｉｎ  ｖｉｖｏ相関図である。
【図３３】実施例３において調製される５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。
【図３４】実施例８において調製される５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。
【図３５】実施例１４において調製される５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。
【図３６】実施例１６において調製される５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。
【図３７】実施例１１において調製される５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。
【図３８】実施例１２において調製される５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出図である。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【００６０】
以下の非限定例な実施例を用いて本開示を更に説明する。
【００６１】
実施例１  単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率２０％）
０．３１０４ｇのロチゴチン及び１．２０８３ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａを秤量し、７．５ｍＬのジクロロメタンに撹拌しながら溶解して、混合物を調製した。混合物を７５０ｍＬの０．５％ＰＶＡ水溶液に、撹拌（１２００ｒｐｍ〜２０００ｒｐｍ）しながら蠕動ポンプ（１００ｒｐｍ）によって添加し、これを２分間乳化させた。次いで、撹拌速度を落とし、溶媒を５時間蒸発させた。得られた溶液を１２００メッシュ篩で濾過して、ミクロスフェアを回収した。１２００メッシュ篩上に残ったミクロスフェアを、精製水で３回〜５回洗浄し、凍結乾燥し、１００メッシュ篩で濾過して、最終ミクロスフェアを調製した。
【００６２】
実施例２  単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率２５％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．３７５２ｇのロチゴチン及び１．１２９１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａから実施例１の方法に従って調製した。
【００６３】
実施例３  単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率３０％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２２ｇのロチゴチン及び１．０５１１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａから実施例１の方法に従って調製した。
【００６４】
実施例４  単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率３５％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．５２６８ｇのロチゴチン及び０．９７９０ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａから実施例１の方法に従って調製した。
【００６５】
実施例５  単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア（理論薬物担持率４０％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．６０４３ｇのロチゴチン及び０．９０１９ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａから実施例１の方法に従って調製した。
【００６６】
試験例１
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例１〜実施例５において調製したミクロスフェアについてｉｎ  ｖｉｖｏ条件をシミュレートすることによって行った。
【００６７】
試験条件：温度：３７±０．５℃、回転速度：５０ｒｐｍ
【００６８】
クロマトグラフ条件及びシステム適合性プロトコル：ステアリル結合シリカを充填剤として使用した。０．３％リン酸−アセトニトリル（６６：３４）を移動相として使用した。この場合の０．３％リン酸は、３ｍＬのリン酸を最終容量１０００ｍＬまで水で希釈することによって調製したものである。カラム温度は３５℃とした。検出波長は２２３ｎｍとした。ロチゴチンピークと他のピークとの間の分解能は、要件を満たすものとする。ロチゴチンピークによって算出した理論段数は１００００超であった。
【００６９】
試験方法：薬物放出試験（中国薬局方２００５年版第２巻付録ＸＤ）に従うアッセイ
６ｍｇのミクロスフェアの３つのアリコートを、それぞれプラグ付き遠心分離管（１０ｍＬ容）に入れた。この遠心分離管に、０．２％ＳＤＳを含有する９ｍＬのリン酸緩衝液の放出媒体を添加した。振盪して懸濁させた後、各々の遠心分離管を３７±０．５℃の水浴振盪機内に入れ、５０±３ｒｐｍの速度で振動させた。３時間後、１日後、２日後、４日後、６日後、８日後、１０日後、１２日後、１４日後、１６日後、１８日後及び２０日後にそれぞれ遠心分離管を取り出した。５℃〜８℃で、遠心分離管を３６００ｒｐｍの回転速度で１０分間遠心分離した。次いで、６ｍＬの上清を各々の遠心分離管から取り出し、試験溶液として使用し、同じ温度の６．０ｍＬのリン酸緩衝液の放出媒体を遠心分離管に添加した。振盪して懸濁させた後、遠心分離管を水浴振盪機内に戻し、振動させた。上記の試験溶液をＨＰＬＣによって分析し、累積放出量を外部標準法に従って算出した。ｐＨ７．４下のｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出データを表１に示し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図１〜図５に示す。
【００７０】
【表１】
0006006225.tif 000003
【００７１】
０．１２５日及び１日でのロチゴチンの放出量は、ｉｎ  ｖｉｖｏでの薬物のバースト放出と相関していた。ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの放出量が大きいほど、ｉｎ  ｖｉｖｏでのバースト放出も大きくなる。
【００７２】
表１及び図１〜図５から、ミクロスフェアの薬物担持率を２０％から４０％に増加させると、０．１２５日でのロチゴチンの放出量が１．３３％から４．９７％に増大し、ロチゴチンの１日の累積放出量が５．２４％から２０．４５％に増大したことが見て取れる。すなわち、０．１２５日及び１日の時点でのミクロスフェアの薬物放出が大幅に増大している。表１から、薬物担持率を増加させると、ｉｎ  ｖｉｖｏでのロチゴチンミクロスフェアのバースト放出が増大し得ることが見て取れる。
【００７３】
試験例２  ロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ放出試験
サンプル：実施例３において調製したミクロスフェア
【００７４】
血漿サンプルの処理：１００μＬの内部標準溶液（５００ｎｇ／ｍＬのジアゼパム）、１００μＬのアセトニトリル：水（７５：２５）、及び１００μＬの１Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３を、ボルテックスアジテーターを用いて２分間アジテートした。３ｍＬの抽出試薬（ｎ−ヘキサン：ジクロロメタン：イソプロパノール＝２：１：０．１）を混合物に添加し、ボルテックスアジテーターを用いて１０分間アジテートし、１０分間遠心分離した（３６００ｒｐｍ）。上層の有機相を別の試験管に入れ、３５℃の圧縮空気流下で乾燥させた。残留物を１００μＬのアセトニトリル：水（１ｍＭ酢酸アンモニウム）（７５：２５）に溶解した。１０μＬの溶液をサンプル注射剤として採取し、クロマトグラムを記録した。
【００７５】
クロマトグラフ条件：移動相（Ａ）：（１ｍＭ  ＮＨ４Ａｃ）水、（Ｂ）：アセトニトリル；０分〜０．８分：Ｂ  ７０％→９０％、０．８分〜３．５分：Ｂ  ９０％→９０％、３．５分〜３．６分：Ｂ  ９０％→７０％、３．６分〜７．５分：Ｂ  ７０％→７０％の勾配溶出（gradient  elute）；流量：０．３５ｍｌ／分；カラム温度：３５℃；サンプルサイズ：１０μＬ。
【００７６】
質量スペクトル条件
イオン源：イオンスプレーイオン化源；イオンスプレー電圧：５５００Ｖ；温度：５００℃；ＧＳ１：５０ｐｓｉ；ＧＳ２：５０ｐｓｉ；源におけるカーテンガス（ＣＵＲ）の圧力：１５ｐｓｉ；衝突ガス（ＣＡＤ）の圧力：８ｐｓｉ；カチオン検出モード；走査モード：多重反応モニタリング（ＭＲＭ）；ロチゴチン及びジアゼパムのＤＰ電圧は別個に５０Ｖ及び８８Ｖとする；ＣＥは別個に３６Ｖ及び４７Ｖとする；ＣＸＰはどちらも１０Ｖとする；定量分析のためのイオン反応は別個に３１６．２／１４７．１（ロチゴチン）及び２５６．１／１６７．１（ジアゼパム）とする。
【００７７】
検量線（work  curve）の作成
０．２ｍＬのブランク血漿を、１００μＬのロチゴチン標準溶液及び１００μＬの内部標準（５００ｎｇ／ｍｌのジアゼパム）に添加して、０．０５ｎｇ／ｍＬ、０．２５ｎｇ／ｍＬ、１．００ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬ、１．００ｎｇ／ｍＬ、２．５０ｎｇ／ｍＬ、５．００ｎｇ／ｍＬ及び１２．５ｎｇ／ｍＬのそれぞれの血漿濃度に対応する血漿サンプルを調製した。血漿サンプルを中国薬局方２００５年版第２巻の「血漿サンプルの分析方法（the  analyzing  method  of  the  plasma  sample）」に従って操作し、標準曲線を作成した。血漿中の検査対象の物質の濃度をｘ軸として用い、内部標準物質に対する検査対象の物質のピーク面積比をｙ軸として用いて、標準曲線の回帰計算を加重（Ｗ＝１／ｘ２）最小二乗法に従って行い、標準曲線として一次回帰式を得た。
【００７８】
試験方法
体重９ｋｇ〜１１ｋｇの３匹（雌１匹及び雄２匹）の健常ビーグル犬に飼料及び飲料水を自由に摂らせた。ロチゴチン用量５．５ｍｇ／ｋｇのミクロスフェアを、ビーグルの筋肉に注射することによって投与し、投与の０時間後、１時間後、３時間後、６時間後、２４時間後、４８時間後、９６時間後、１４４時間後、１９２時間後、２４０時間後、２８８時間後、３３６時間後、３８４時間後、４３２時間後及び４８０時間後に、３ｍＬの血液をビーグルの前肢静脈からサンプリングし、ヘパリン入り試験管に入れ、６０００ｒｐｍで１０分間遠心分離して血漿を分離し、−２０℃で保管した。上記の分析方法に従って血漿を分析した。ｉｎ  ｖｉｖｏ放出を図６に示す。表１に示されるように、実施例３において調製したミクロスフェアの０．１２５日及び１日の累積放出量は、それぞれ２．００％及び９．５３％であった。図６から、ビーグルの体内で明らかなミクロスフェアのバースト放出が見られた後、血中薬物レベルが低下し、９６時間後に血中薬物レベルが上昇し、１９２時間後には血中薬物レベルがＣｍａｘまで上昇したことが見て取れる。０．１２５日及び１日での血中薬物レベルがＣｍａｘよりも高かったことから、実施例３において調製したミクロスフェアに明らかなバースト放出があったことが示される。
【００７９】
実施例６  単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率２０％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．３１０４ｇのロチゴチン、１．１６０３ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０３７０ｇのステアリン酸から実施例１の方法に従って調製した。
【００８０】
実施例７  単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率２５％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．３７１２ｇのロチゴチン、１．０８９１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０３７９ｇのステアリン酸から実施例１の方法に従って調製した。
【００８１】
実施例８  単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率３０％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２２ｇのロチゴチン、１．０１３６ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０３７１ｇのステアリン酸から実施例１の方法に従って調製した。
【００８２】
実施例９  単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率３５％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．５２５８ｇのロチゴチン、０．９７９０ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０３７４ｇのステアリン酸から実施例１の方法に従って調製した。
【００８３】
実施例１０  単一のＰＬＧＡ及びステアリン酸を含むミクロスフェア（理論薬物担持率４０％）
ロチゴチンミクロスフェアを、０．６０８３ｇのロチゴチン、０．８６１９ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０３６７ｇのステアリン酸から実施例１の方法に従って調製した。
【００８４】
試験例３
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例６〜実施例１０において調製したミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出データを表２に示し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図７〜図１１に示す。
【００８５】
【表２】
0006006225.tif 000004
【００８６】
表２のデータを表１のデータと比較した。ステアリン酸を用いると、薬物担持率２０％〜４０％のロチゴチンミクロスフェアについては、０．１２５日でのロチゴチンの放出量が１．３３％〜４．９７％から０．５１％〜３．５８％に減少し、ロチゴチンの１日の累積放出量が５．２４％〜２０．４５％から２．８４％〜１０．２９％に減少した。このことから、ステアリン酸の添加がバースト放出効果を効果的に減少させることができることが示される。
【００８７】
試験例４  ロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ放出試験
サンプル：実施例８において調製したミクロスフェア
【００８８】
ｉｎ  ｖｉｖｏ薬物動態試験を試験例２の方法に従って行った。放出を図６に示す。図６から、ステアリン酸を添加するとバースト放出効果が減少するが、１日〜４日での薬物放出量は低かったことが見て取れる。
【００８９】
実施例１１  オクタン酸及び単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２０ｇのロチゴチン、１．０１１９ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０３７１ｇのオクタン酸（２．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【００９０】
実施例１２  リグノセリン酸及び単一のＰＬＧＡを含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４４８９ｇのロチゴチン、１．０１３０ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０３７３ｇのリグノセリン酸（２．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【００９１】
試験例５  ロチゴチンミクロスフェアの薬物放出に対する種々の炭素原子数を有する脂肪酸の影響
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例１１〜実施例１２において調製したミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出データを表３に示し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図１２〜図１３に示す。
【００９２】
【表３】
0006006225.tif 000005
【００９３】
表３のデータを、表１のデータ（３０％の薬物担持率のもの）と比較した。脂肪酸を含まないロチゴチンミクロスフェアと比較すると、オクタン酸（炭素原子数８）及びリグノセリン酸（炭素原子数２４）を含むロチゴチンミクロスフェアについては、０．１２５日でのロチゴチンの放出量が２．００％から１．０１％〜１．１４％に減少し、ロチゴチンの１日の累積放出量が９．５３％から２．８４％〜４．０２％に減少した。このことから、オクタン酸及びリグノセリン酸のどちらの添加も、バースト放出効果を効果的に減少させることができることが示される。表２（炭素原子数１８のステアリン酸）及び表３の結果から、炭素原子数８〜２４の脂肪酸が全て、バースト放出効果を効果的に減少させることができることが見て取れる。
【００９４】
実施例１３  単一のＰＬＧＡ及び０．５％ステアリン酸を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２８ｇのロチゴチン、１．０４３２ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．００７８ｇのステアリン酸（０．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【００９５】
実施例１４  単一のＰＬＧＡ及び１％ステアリン酸を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２８ｇのロチゴチン、１．０３６２ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０１５８ｇのステアリン酸（１％）から実施例１の方法に従って調製した。
【００９６】
実施例１５  単一のＰＬＧＡ及び５％ステアリン酸を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２８ｇのロチゴチン、０．９７５１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．０７５８ｇのステアリン酸（５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【００９７】
実施例１６  単一のＰＬＧＡ及び１０％ステアリン酸を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４４９２ｇのロチゴチン、０．９０２８ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．１５３２ｇのステアリン酸（１０％）から実施例１の方法に従って調製した。
【００９８】
実施例１７  単一のＰＬＧＡ及び１５％ステアリン酸を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２８ｇのロチゴチン、０．８２６１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ及び０．２２５８ｇのステアリン酸（１５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【００９９】
試験例６
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例１３〜実施例１７において調製したミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。
【０１００】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出結果を表４及び図１４〜図１８に示す。
【０１０１】
【表４】
0006006225.tif 000006
【０１０２】
表４のデータと表１のデータとを比較することによって、ステアリン酸の含有率が０．５％である場合に、０．１２５日でのロチゴチンの放出量及びロチゴチンの１日の累積放出量がそれぞれ１．９１％及び１０．９６％であり、実施例３において調製したステアリン酸を含まないミクロスフェアと比較して大幅には変化しなかったことが見て取れる。このことから、０．５％以下の含有率でのステアリン酸の添加がバースト放出効果を大幅には減少させることができないことが示される。ステアリン酸の含有率が０．５％超、例えば１％〜１５％である場合、１％〜１５％のステアリン酸を含むミクロスフェアの０．１２５日でのロチゴチンの放出量及びロチゴチンの１日の累積放出量は、それぞれ０．７５％〜１．２６％及び１．９０％〜５．７０％に減少し、したがって薬物のバースト放出は効果的に減少した。表４のデータ及び図１４〜図１８に示されるように、ステアリン酸の量を増加させると、薬物の放出は遅くなった。
【０１０３】
試験例７  ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａを含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ試験
ｉｎ  ｖｉｖｏ試験を、ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａの代わりにＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａを含み、それ以外は全て等しく又は一定にした実施例３において調製されるミクロスフェアについて、試験例２の方法に従って行った。結果を図１９に示す。
【０１０４】
図１９から、より初期の放出期間ではＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａミクロスフェアの放出速度がより速く、全放出期間がより短かったことが見て取れる。
【０１０５】
実施例１８  分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（９５：５）を含むロチゴチンミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５０４ｇのロチゴチン、及び０．９９７３ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．０５２１ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比９５：５）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１０６】
実施例１９  分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５０：５０）を含むロチゴチンミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４４８９ｇのロチゴチン、及び０．５２６１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．５２５６ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５０：５０）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１０７】
実施例２０  分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５：９５）を含むロチゴチンミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５０８ｇのロチゴチン、及び０．０５１９ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．９９６８ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５：９５）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１０８】
試験例８  ミクロスフェアの薬物放出に対する種々の重量比でのポリマーの組合せの影響
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例１８〜実施例２０において調製したミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出結果を表５及び図２０〜図２２に示す。
【０１０９】
【表５】
0006006225.tif 000007
【０１１０】
表５及び図２０〜図２２から、ミクロスフェア中のＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの含有率を５％から９５％に増大させた場合に、１日〜４日でのロチゴチンの放出量が増大し、またロチゴチンの１日の累積放出量が９．１０％から１６．１２％に増大し、ロチゴチンの４日間の累積放出量が２９．３６％から５３．３４％に増大したことが見て取れる。ミクロスフェアにおけるＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの重量比が５０：５０である場合、表１の実施例３のデータと比較すると、１日〜４日でのロチゴチンの放出量が安定した放出期間を伴って増大し、ロチゴチンの１日の累積放出量が９．５３％から１２．３２％に増大し、ロチゴチンの４日間の累積放出量が２２．９０％から４５．４４％に増大した。
【０１１１】
実施例２１  ステアリン酸（１％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５０：５０）を含むロチゴチンミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５０７ｇのロチゴチン、０．５１７０ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．５１７７ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５０：５０）、及び０．０１５５ｇのステアリン酸（１％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１２】
実施例２２  ステアリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５０：５０）を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４４９１ｇのロチゴチン、０．５０６０ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．５０５５ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５０：５０）、及び０．０３７１ｇのステアリン酸（２．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１３】
実施例２３  ステアリン酸（７．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５０：５０）を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５１０ｇのロチゴチン、０．４６８０ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．４７０１ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５０：５０）、及び０．１１１９ｇのステアリン酸（７．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１４】
実施例２４  ステアリン酸（１０％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５０：５０）を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５０３ｇのロチゴチン、０．４４７９ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．４５０１ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５０：５０）、及び０．１５２０ｇのステアリン酸（１０％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１５】
実施例２５  オクタン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５０：５０）を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４４９０ｇのロチゴチン、０．５１０１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．５０９１ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５０：５０）、及び０．０３８０ｇのオクタン酸（２．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１６】
実施例２６  リグノセリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５０：５０）を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５２０ｇのロチゴチン、０．５０５５ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．５０６２ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５０：５０）、及び０．０３７９ｇのリグノセリン酸（２．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１７】
実施例２７  ステアリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（９５：５）を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５０７ｇのロチゴチン、０．９６２１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．０５０５ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比９５：５）、及び０．０３６９ｇのステアリン酸（２．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１８】
実施例２８  ステアリン酸（２．５％）及び分子量の異なる２つのＰＬＧＡの組合せ（５：９５）を含むミクロスフェア
ロチゴチンミクロスフェアを、０．４５１４ｇのロチゴチン、０．０５０１ｇのＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａと０．９６１０ｇのＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せ（重量比５：９５）、及び０．０３７０ｇのステアリン酸（２．５％）から実施例１の方法に従って調製した。
【０１１９】
試験例９  種々の含有率のステアリン酸及び分子量の異なるＰＬＧＡの組合せを含むロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例２１〜実施例２４において調製したミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出結果を表６及び図２３〜図２６に示す。
【０１２０】
【表６】
0006006225.tif 000008
【０１２１】
表６及び図２３〜図２６の結果と表５の実施例１９の結果とを比較することによって、ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの重量比が５０：５０であり、ミクロスフェア中のステアリン酸の含有率が２．５％〜７．５％である場合に、バースト放出効果が大幅に減少し、累積薬物放出曲線がはるかに線形になることが見て取れる。
【０１２２】
試験例１０  種々の分子量の脂肪酸及び分子量の異なるＰＬＧＡの組合せを含むロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例２２、実施例２５及び実施例２６において調製したミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出結果を表７及び図２４、図２７及び図２８に示す。
【０１２３】
【表７】
0006006225.tif 000009
【０１２４】
表７及び図２４、図２７、図２８の結果と表５の実施例１９の結果とを比較することによって、含有率がそれぞれ２．５％のオクタン酸、ステアリン酸及びリグノセリン酸を配合物に添加した場合に、バースト放出が減少し、薬物放出曲線がより線形となる傾向があったことが見て取れる。このことから、炭素原子数８〜２４の脂肪酸が全て、安定した薬物放出の要件を満たすことができることが示される。
【０１２５】
試験例１１  ステアリン酸（２．５％）及び種々の重量比の分子量の異なるＰＬＧＡの組合せを含むロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験を、実施例２２、実施例２７及び実施例２８において調製したミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出結果を表８及び図２４、図２９及び図３０に示す。
【０１２６】
【表８】
0006006225.tif 000010
【０１２７】
表８並びに図２９及び図３０から、ステアリン酸の含有率が２．５％であり、ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの重量比が９５：５である場合に、１日〜４日での薬物放出量が僅かに低くなり、ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの重量比が５：９５である場合に、１日〜４日での薬物放出量が僅かに高くなり、１０日目には累積放出量が短い放出期間で９３．２６％に達し、ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの重量比が５０：５０である場合に、薬物放出がより安定となり、薬物を１４日間にわたって持続的に放出することができたことが見て取れる。
【０１２８】
試験例１２  或る薬物担持率でステアリン酸（２．５％）及び種々の重量比のＰＬＧＡ  ７５２５  ４ＡとＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せを含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ試験
ミクロスフェアを、９０：１０、８０：２０、７０：３０及び５０：５０というＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの種々の重量比を用いた以外は実施例８に従って調製した。ｉｎ  ｖｉｖｏ放出試験をミクロスフェアについて試験例２の方法に従って行った。結果を図３１に示す。
【０１２９】
ｉｎ  ｖｉｖｏ放出（図３１）から、重量比の異なる２つのＰＬＧＡを種々の重量比で混合すると、ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの含有率が増加するほど、１日〜４日でのミクロスフェアの薬物放出量が増大し、ｉｎ  ｖｉｖｏ放出曲線がより安定となる傾向があり、ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの重量比が５０：５０である場合に、ｉｎ  ｖｉｖｏ放出曲線が顕著なバースト放出効果なしに、より安定していたことが見て取れる。
【０１３０】
上記の結果から示されるように、重量比の異なる２つのＰＬＧＡを種々の重量比で混合することにより、単一のＰＬＧＡの欠点が効果的に克服された。すなわち、１５０００〜３００００の分子量を有するＰＬＧＡ（ＰＬＧＡ  ２．５Ａ）は、１日〜４日でのミクロスフェアの薬物放出量を増大させることができ、４２０００〜７５０００の分子量を有するＰＬＧＡ（ＰＬＧＡ  ４Ａ）は薬物放出期間を延長することができるため、ｉｎ  ｖｉｖｏ薬物放出がより安定したミクロスフェアが得られる。
【０１３１】
試験例１３  或る薬物担持率でステアリン酸（２．５％）及び種々の重量比のＰＬＧＡ  ７５２５  ５ＡとＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａとの組合せを含むミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験
ミクロスフェアを、９０：１０、８０：２０及び７０：３０というＰＬＧＡ  ７５２５  ５Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの種々の重量比を用いた以外は実施例８に従って調製した。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験をミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出データを表９に示す。
【０１３２】
【表９】
0006006225.tif 000011
【０１３３】
表９から、ＰＬＧＡ（７５２５  ５Ａ）及びＰＬＧＡ（５０５０  ２．５Ａ）を種々の重量比で混合すると、調製されるミクロスフェアの薬物放出特性が、ＰＬＧＡ（７５２５  ４Ａ）及びＰＬＧＡ（５０５０  ２．５Ａ）から調製されるミクロスフェアの薬物放出特性と同様になったことが見て取れる。ミクロスフェア中のＰＬＧＡ（５０５０  ２．５Ａ）の含有率が増加するほど、１日〜４日でのミクロスフェアの薬物放出量が相応して増大した。ＰＬＧＡ  ７５２５  ５Ａ対ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａの重量比を９０：１０から７０：３０に変更した場合、１日の累積放出量は４．２８％から７．６４％に増大し、４日間の累積放出量は２４．２９％から３０．２１％に増大した。これらのミクロスフェアは２．５％のステアリン酸を含有するため、０．１２５日及び１日でのミクロスフェアの放出量はより小さく、ミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏバースト放出はより小さかったことが示される。
【０１３４】
試験例１４  ロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ−ｉｎ  ｖｉｖｏ相関試験
図３２に示されるように、実施例２２において調製したミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ累積放出データ及びｉｎ  ｖｉｖｏ放出データを用いて相関図をプロットした（一次方程式：ｙ＝１．２１３７ｘ−３．７４６４、ｒ＝０．９９４３）。図３２から、ロチゴチンミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ薬物放出時間とｉｎ  ｖｉｖｏ吸収率とが良好な相関を有することが見て取れる。このことから、ミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出の評価に選択されるｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出条件を、ミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｖｏ放出プロファイルを予測するために使用することができることが示される。
【０１３５】
試験例１５  ＰＬＧＡの分子量の決定
装置及び試薬
Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００高速液体クロマトグラフ（ｑｕａｔｐｕｍｐ、カラムオーブン、自動サンプラー、ＲＩＤ検出器、及びＧＰＣソフトウェアを用いるＨＰ−ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎを備える）；クロマトグラフカラム：Ｓｔｙｒａｇｅｌ（商標）ＨＴ３（７．８×３００ｍｍ、１０μｍ、分子量範囲：５００〜３００００）、Ｓｔｙｒａｇｅｌ（商標）６Ｅ（７．８×３００ｍｍ、１０μｍ、分子量範囲：５０００〜６０００００）；テトラヒドロフラン（クロマトグラフ的に純粋（chromatographic  pure）、SK  CHEMICAL、Ｇ６ＥＥ３Ｈ）；ポリスチレン分子量標準（Fluka、１２２６６２７）；サンプル：ＰＬＧＡ  ７５２５  ５Ａ、ＰＬＧＡ  ７５２５  ４Ａ、ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ａ（Lakeshore  Biomaterials,  Inc.）。
【０１３６】
サンプルの分子量を、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて決定した。ポリマーＰＬＧＡは脂溶性であり、紫外線吸収を有しないため、サンプルを示差屈折率検出器でテトラヒドロフランを溶媒及び移動相として用いて試験した。ポリマーＰＬＧＡの分子量（Ｍｗ）は約５００００であるため、選択するクロマトグラフカラムの分子量範囲がこの範囲を含み、測定対象のサンプルの分子量分布範囲が選択するクロマトグラフカラムの分子量範囲の中央にあるものとした。Ｓｔｙｒａｇｅｌ（商標）ＨＴ３（７．８×３００ｍｍ、１０μｍ、分子量範囲：５００〜３００００）及びＳｔｙｒａｇｅｌ（商標）６Ｅ（７．８×３００ｍｍ、１０μｍ、分子量範囲：５０００〜６０００００）を直列につないで使用した。ＰＬＧＡの性質はポリスチレンと同様であるため、Fluka  Chemical  Corp.から入手可能なサンプルの分子量範囲を含むポリスチレン混合標準（分子量範囲：５００〜２５０００００）を選択した。
【０１３７】
決定方法
適切な量のサンプルを移動相に添加して、濃度約１ｍｇ／ｍｌの溶液を調製し、振動させて、試験溶液を調製した。一連のポリスチレン分子量標準（３ボトル、各々のボトルは４つの標準分子量の混合標準を含む）を移動相に添加して、濃度１．０ｍｇ／ｍｌの溶液を参照溶液として調製した。試験は、示差屈折率検出器でサイズ排除クロマトグラフィー（中国薬局方２００５年版第２巻付録ＶＨ）に従って、ゲルクロマトグラフカラムを用い、テトラヒドロフランを移動相として用いて、カラム温度３０℃、流量１．０ｍＬ／分及び検出器温度３５℃で行った。所要量のアセトニトリルを移動相で５００倍に希釈した。２０μｌの希釈溶液を液体クロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録した。１００００以上の理論段数がアセトニトリルピークに従って算出された。
【０１３８】
各々２０μｌの参照溶液を液体クロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録し、回帰方程式をＧＰＣソフトウェアによって算出した。２０μｌの試験溶液を同じ方法に従って測定し、サンプルの重量平均分子量、数平均分子量及び分子量分布をＧＰＣソフトウェアによって算出した。結果を表１０、表１１及び表１２に示す。
【０１３９】
【表１０】
0006006225.tif 000012
【０１４０】
Lakeshore  Biomaterials  Inc.からのＰＬＧＡ試験報告の結果を表１１に示す。
【０１４１】
【表１１】
0006006225.tif 000013
【０１４２】
【表１２】
0006006225.tif 000014
【０１４３】
或る特定のＰＬＧＡの分子量を表１２に示す。
【０１４４】
試験例１６  バッチ間一貫性
５バッチのロチゴチンミクロスフェアを、実施例３、実施例８、実施例１１、実施例１２、実施例１４及び実施例１６の方法に従って調製した。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出試験をミクロスフェアについて試験例１の方法に従って行った。実施例３において調製した５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図３３に示す。
【０１４５】
実施例８において調製した５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図３４に示す。
【０１４６】
実施例１４において調製した５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図３５に示す。
【０１４７】
実施例１６において調製した５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図３６に示す。
【０１４８】
実施例１１において調製した５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図３７に示す。
【０１４９】
実施例１２において調製した５バッチのミクロスフェアのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出曲線を図３８に示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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