(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化粧品として許容されるビヒクル中に有効量の有効成分を含む組成物であって、
前記有効成分は、配列ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＣＵＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＡ（配列番号１）を有するｍｉＲ−２９ａ、及び／又は配列ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＵＵＧＡＡＡＵＣＡＧＵＧＵＵ（配列番号２）を有するｍｉＲ−２９ｂを抑制し、
前記有効成分は、以下の式を有する化合物であるか、又はその化粧品として許容される酸付加塩である、
【化１】
0005918783.tif 000019
人間の皮膚の美的外観を改善するための皮膚の領域への局所的塗布用組成物。
【請求項２】
化粧品として許容されるビヒクル中に有効量の有効成分を含む組成物であって、
前記有効成分は、配列ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＣＵＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＡ（配列番号１）を有するｍｉＲ−２９ａ、及び／又は配列ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＵＵＧＡＡＡＵＣＡＧＵＧＵＵ（配列番号２）を有するｍｉＲ−２９ｂを抑制し、
前記有効成分は、以下の式を有する化合物であるか、又はその化粧品として許容される塩である、
【化２】
0005918783.tif 000020
人間の皮膚の美的外観を改善するための皮膚の領域への局所的塗布用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、人間の皮膚の美的外観と健康状態を改善する方法、及び皮膚を治療するのに有用な化合物を同定する方法に関する。特に、本発明は、皮膚細胞中でのコラーゲン、エラスチン及び／又はフィブリリンの発現を抑制する所定のマイクロＲＮＡのレベルを低減する化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
消費者は、小皺、皺、及び皮膚の弛みなどの老化の皮膚科学的兆候、及び真皮と表皮の接合部分及び表皮内の細胞間の結合の劣化の進行が原因となる関連する状態を軽減又は遅延させることに関心がある。加齢による老化、ホルモンの変化による老化、光による老化にはそれぞれ、３種の主な皮膚のプロテイン成分、つまり、コラーゲン、エラスチン、及びフィブリリンを分解するプロセスが含まれる。
【０００３】
コラーゲンは、体の主要な構造タンパク質であり、組織と臓器を支え、これらの構造体を骨に接続する。コラーゲンは、細胞の形状と分化を支持するのに役立つ足場構造体となる周囲の細胞を得るのに重要な役割を果たす。エラスチンは、伸長した後、元の状態に素早く戻る能力を皮膚に付与するタンパク質である。フィブリリンは、糖タンパク質であって、結合組織中に見られる弾性線維の形成に不可欠である。フィブリリンは、細胞外マトリックス内に分泌され、エラスチンが堆積する足場をもたらすと考えられる不溶性のミクロフィブリル内に組み込まれるようになる。コラーゲン、エラスチン、及びフィブリリンは、線維芽細胞によって生成される。線維芽細胞とは、真皮内に配置される特別な皮膚細胞である。コラーゲン、エラスチン、及びフィブリリンを刺激すると、皮膚の健康状態と外観を改善できる可能性がある。皮膚の老化は、一般に、これらのタンパク質の損失に関連するからである。本技術分野では、皮膚の老化を遅延させ、皮膚の老化の影響を緩和する（ｒｅｍｅｄｉａｔｅ）組成物が要求されている。
【０００４】
マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）は、短鎖のリボ核酸（ＲＮＡ）分子であり、平均して僅か約２２ヌクレオチドの長さであり、全ての真核細胞内に見られる。ｍｉＲＮＡは、標的となるメッセンジャーＲＮＡ転写物（ｍＲＮＡ）上の相補的な配列に結合して、通常、翻訳抑制と遺伝子発現抑制を行う転写後制御因子であると考えられている。ｍｉＲＮＡと標的となるｍＲＮＡとの間の相補性が完全であれば、ｍＲＮＡが切断されてｍＲＮＡの劣化に繋がる可能性がある。しかしながら、相補性が完全でなければ、翻訳を妨げることによって、細胞老化（ｏｉｓ）を抑制できる。ヒトゲノムは、１０００を上回るｍｉＲＮＡをエンコードすると推定されている。ｍｉＲＮＡは、哺乳動物遺伝子の約６０％を標的にでき、多くのヒト細胞種に豊富に存在している。しかしながら、今日まで、皮膚の外観を改善し老化の兆候に取り組もうとする試みは、マイクロＲＮＡの役割に着目していない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、本発明の目的は、老化の皮膚科学的兆候を治療し、回復し、抑制し、及び／又は防止する組成物と方法を提供することである。
【０００６】
本発明の別の目的は、皮膚の細胞中でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの発現に関連するマイクロＲＮＡのレベルを制御して、老化の皮膚科学的兆候を治療し、回復し、抑制し、及び／又は防止する方法を提供することである。
【０００７】
本発明の更なる目的は、皮膚の細胞中でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの発現に関連するマイクロＲＮＡのレベルを制御する能力に基づいて、老化の皮膚科学的兆候を治療し、回復し、抑制し、及び／又は防止するのに有用な化合物を同定する方法を提供することである。
【０００８】
上述の議論は、技術が直面している問題の本質をより理解するために示されているだけであり、先行技術であることを容認したものとして解釈されるべきではない。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上述の目的及び他の目的に従うと、驚くべきことに、特定のマイクロＲＮＡは、皮膚の細胞内でのコラーゲン、エラスチン及び／又はフィブリリンの発現の負の制御因子であることが分かった。したがって、人間の皮膚の美的外観を改善する方法が提供される。該方法には、化粧品として許容されるビヒクル中に入っていて、好ましくは、マイクロＲＮＡ−２９ａ（ｍｉＲ−２９）及び／又はマイクロＲＮＡ−２８ｂ（ｍｉＲ−２９ｂ）の細胞レベルを低減して制御する有効量の物質を、皮膚内でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの生成を高めるのに十分な時間、改善を必要とする皮膚の領域に局所的に塗布することが含まれる。ｍｉＲ−２９ａには、以下の配列番号１の塩基配列が含まれ、ｍｉＲ−２９ｂには、以下の配列番号２の配列が含まれる。
【００１０】
ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＣＵＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＡ（配列番号１）
【００１１】
ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＵＵＧＡＡＡＵＣＡＧＵＧＵＵ（配列番号２）
【００１２】
種々の実施例において、前記方法は、皮膚細胞内でのｍｉＲ−２９ａのレベルを抑制すること、皮膚細胞内でのｍｉＲ−２９ｂのレベルを抑制すること、または皮膚細胞内でのｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂの両方のレベルを抑制することを要する場合がある。皮膚細胞内でｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂの両方を抑制すると、皮膚内でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの発現を高めるのに相乗的な利益がもたらされると考えられる。
【００１３】
一態様において、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを制御するのに適した化合物は、式Ｉの構造を有してもよい。
【化１】
0005918783.tif 000002
【００１４】
ここで、Ｒ１及びＲ２は、独立して、水素、−Ｒ，又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ＊であり、Ｒ１及びＲ２は、これらが結合される窒素原子と共に３〜６員環を形成してもよい。
【００１５】
Ｒ３は、水素、−Ｒ、−ＯＲ＊、−ＳＲ＊、及び−Ｎ（ＲＮ）（Ｒ＊）の中から選ばれる。
【００１６】
Ｒ４及びＲ５は、各存在位置において、水素、−Ｒ、またはＸ１の中から独立して選ばれる。隣接する任意の２個のＲ５基は、これらが結合されるベンゼン環に縮合される５又は６員間を形成してもよい。
【００１７】
Ｒ６は水素、−Ｒ、又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ＊である。
【００１８】
Ｒ、Ｒ＊、及びＲＮは、独立して、水素、又はＣ１−２０の炭化水素基である。ここで、前記Ｃ１−２０の炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基、及び／又は、酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個のヘテロ原子で置換されてもよい。
【００１９】
Ｘ１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ＊、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ（Ｒ）＝Ｎ−ＲＮ、−Ｃ＝Ｎ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｃ（＝ＮＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２−、−ＣＯ２Ｒ＊、−ＣＳ２Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｓ−Ｒ＊、−Ｓ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−ＯＲ＊、−ＳＲ＊、−ＮＨ２、−ＮＨＲＮ、−ＮＲＮ２、−Ｎ（ＲＮ）３＋、−Ｎ（ＲＮ）−ＯＨ、−Ｎ（→Ｏ）（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｏ−Ｒ＊、−Ｎ（ＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）Ｏ−Ｒ＊、−ＮＲＮ−ＣＨＯ、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）ＮＲＮ、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ＊）２、−Ｎ＝Ｎ−ＲＮ、−ＳＣＮ、−ＮＣＳ、−ＮＳＯ、−ＳＳ−Ｒ＊、−ＳＯ−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｒ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｎ（ＲＮ）−ＳＯ２−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｎ（Ｒ＊）２、−Ｏ−ＳＯ３−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＯ、−ＮＯ２、−ＮＯ３、−Ｏ−ＮＯ、−Ｏ−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｎ２、−Ｎ（Ｃ２Ｈ４）、−Ｓｉ（Ｒ＊）３、−ＣＦ３、−Ｏ−ＣＦ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｐ（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２、及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２からなる群の中から選ばれる。
【００２０】
「ｎ」は、０〜３までの整数であり、「ｎ」が２又は３の場合、Ｒ５は、各存在位置において独立して選ばれる。
【００２１】
また、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを制御するのに適した化合物は、式（Ｉ）の化合物の化粧品として許容される酸付加塩であってもよい。
【００２２】
ある実施形態では、Ｒ１、Ｒ２，Ｒ３、Ｒ４及びＲ６は、独立して、水素又は−Ｒ基であり、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、及びアルキルアリールの中から選ばれ、それぞれ、必要に応じて、ハロゲン、酸素、窒素及び硫黄の中から選ばれる１〜１２のヘテロ原子で置換される。Ｒ１とＲ６は、通常、必須ではないが、水素であり、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、−Ｒ基であってもよい。ここで、Ｒは、−（ＣＨ２）ａ−(ＣＲ＊＝ＣＲ＊)ｂ−(ＣＨ２）ｃ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｙ−（ＣＨ２）ｚ−Ｘ３の形を有する基であり、ａ、ｂ、ｃ、ｘ、ｙ及びｚは、独立して、０〜５までの整数であり、Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−の中から選ばれる、結合又は二価の基若しくは原子の何れかを表している。Ｘ３は、水素、Ｘ１、又はＲ＊を表している。
【００２３】
さらなる実施形態では、Ｒ２は、−（ＣＨ２）ａ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−ＣＨ３の形を有する基であり、及び／又は、Ｒ３は、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ＊の形を有する基である。ここで、Ｒ＊はアリール基であり、及び／又は、Ｒ４は、−（ＣＨ２）ａ−Ｒ＊の形を有する基であり、Ｒ＊はアリール基である。Ｒ５は、ベンゼン環上の１又は複数の利用可能な位置にある置換基であるが、通常、そのような全ての位置において水素である。
【００２４】
一実施形態では、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを制御する化合物は、以下の式で表される。
【化２】
0005918783.tif 000003
【００２５】
あるいは、上記式の化合物の化粧品として許容される酸付加塩である。
【００２６】
ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを制御する化合物の別の好適な類は、式ＩＩの構造を有する。
【化３】
0005918783.tif 000004
【００２７】
ここで、Ｒ５は、水素、−Ｒ，又はＸ１の中から選ばれる。「ｍ」は、０〜５までの整数であり、「ｍ」が２、３、又は４の場合、Ｒ５は、各存在位置において独立して選ばれる。
【００２８】
Ｒ７とＲ８は、独立して、Ｃ１−２０の炭化水素基である。前記Ｃ１−２０の炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜６個のヘテロ原子で置換されてもよい。
【００２９】
Ｒ、Ｒ＊、及びＲＮは、独立して、水素又はＣ１−２０の炭化水素基である。前記Ｃ１−２０の炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基（Ｘ１は先に定義されている）及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個のヘテロ原子で置換されてもよい。また、式ＩＩで表される化合物の化粧品として許容される塩であってもよい。
【００３０】
ある変形例では、Ｒ７とＲ８は、独立して、−Ｒ基である。ここで、Ｒは、−（ＣＨ２）ａ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｂ−(ＣＨ２)ｃ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｙ−（ＣＨ２）ｚ−Ｘ３の形を有する基であり、ａ、ｂ、ｃ、ｘ、ｙ、及びｚは、独立して、０〜５までの整数であり、Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−の中から選ばれる、結合又は二価の基若しくは原子の何れかを表している。Ｘ３は、水素、Ｘ１、又はＲ＊を表している。Ｒ＊は、Ｃ１−２０の炭化水素基であり、該炭化水素は、必要に応じて、Ｘ１基及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２のヘテロ原子で置換される。ＲＮ、Ｒ７、及びＲ８は、例えば、独立して、−Ｒ基であってもよい。ここで、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、及びアルキルアリールの中から選ばれ、それぞれ、必要に応じて、ハロゲン、酸素、窒素及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個のヘテロ原子で置換される。そのような有用な化合物の１つは、以下の式を有する。
【化４】
0005918783.tif 000005
【００３１】
本発明の一態様では、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂの制御因子は、必要に応じて、皮膚、例えば、皺のある皮膚、早々に薄くなった皮膚、弛んだ皮膚に局所的に塗布されて、それらの美的外観を改善する。改善は、以下のようなものであってもよい。
（ａ）小皺又は皺の治療、低減、及び／又は防止
（ｂ）皮膚の細孔の大きさの低減
（ｃ）皮膚の厚さ、ふくよかさ、及び／又はつっぱりの改善
（ｄ）皮膚のしなやかさ及び／又は柔らかさの改善
（ｅ）皮膚の色調、輝き、及び／又は透明感の改善
（ｆ）エラスチンの維持及び再形成の改善
（ｇ）皮膚の肌理の改善及び／又は再組織化（ｒｅｔｅｘｔｕｒｉｚａｔｉｏｎ）の促進
（ｈ）皮膚のバリア修復及び／又は機能の改善
（ｉ）皮膚の輪郭の外観の改善
（ｊ）皮膚の艶及び／又は明るさの回復
（ｋ）閉経により低下した皮膚の外観の改善
（ｌ）皮膚の保湿の改善
（ｍ）皮膚の弾力性及び／又は伸縮性の増加
（ｎ）皮膚の弛みの治療、低減、及び／又は防止、又は、
（ｏ）色素斑の低減
【００３２】
本発明の別の態様では、皮膚の美的外観を改善するのに有用な有効成分を同定する方法が提供される。該方法には、細胞内でのｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを抑制又は下方制御させる候補物質の能力を分析することが含まれる。分析ステップには、人間の真皮線維芽細胞を候補物質とともに培養した後に、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを、例えば、定量的リアルタイムＰＣＲによって測定することが含まれてもよい。ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂ、好ましくは両者のレベルを低減する有効成分は、皮膚内でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンのレベルを高めるのに有用であることが期待される。
【００３３】
本発明の更に別の態様では、細胞内でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの生成を増大して、皮膚の美的外観を改善する方法が提供される。該方法には、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを抑制する有効量の化合物を、改善を必要とする皮膚の領域に局所的に塗布することが含まれる。ここで、前記化合物は、細胞内でのｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂの発現を抑制する物質の能力を測定する分析により同定される。一変形例では、前記方法は、皺と小皺を治療、低減又は回復するためのものであり、ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂを抑制する物質を局所的に塗布することを含む。ここで、該化合物は、細胞内でのｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを抑制する前記物質の能力を測定する分析により同定される。
【００３４】
本発明の更なる態様、特徴及び利点は、本発明の詳細な説明を読むとより理解されるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
本明細書で使用される全ての用語は、特別の定めのない限り、通常の意味を有するように意図される。「化粧品として許容される（ｃｏｓｍｅｔｉｃａｌｌｙ  ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ）」は、特定の成分が、概して、使用されるレベルにおいて、安全で毒性がないと見なされることを意味している。本明細書で使用される「防止する（ｐｒｅｖｅｎｔ）」という語は、特定の皮膚の老化の兆候の発病度を低減すること、あるいは該兆候の発症又は進行を遅延させることを含む。「薄い皮膚（ｔｈｉｎ  ｓｋｉｎ）」という語は、加齢による老化で薄くなった皮膚と共に、例えば、光による老化が原因となって、早々に薄くなった皮膚を意味している。「必要とする個体（ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  ｉｎ  ｎｅｅｄ  ｔｈｅｒｅｏｆ）」という連語は、真皮の外観又は健康状態の改善により利益を得ることができる人間を指していて、男性又は女性を含むものである。「皮膚（ｓｋｉｎ）」という語は、これらに限定される訳ではないが、唇、顔面、手、腕、首及び胸の皮膚を含む。本明細書で使用される「実質的に成る（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」という語は、特定の材料又はステップに本発明を限定するように意図されており、それらは、この詳細な説明を読むと理解されるように、請求項に係る発明の基本的及び新規な特徴に実質的に影響を及ぼさない。
【００３６】
本発明は、老化の皮膚科学的兆候を防止、回復、又は低減する有効成分を提供する。「有効成分」という語は、これらに限定される訳ではないが、有機分子、生体分子（例えば、ペプチド、タンパク質、抗体、核酸オリゴマーなど）、及び植物エキスなどの数種の物質の複合物を含む全ての物質を包含する。有効成分は、特定のマイクロＲＮＡの細胞レベルを制御する。好ましくは、有効成分の存在によりマイクロＲＮＡのレベルが低くなるように、マイクロＲＮＡを阻害し、抑制し、又は下方制御させる制御を行う必要がある。有効成分は、皮膚に局所的に有効量塗布される。有効量とは、皮膚内でのコラーゲン、エラスチン、又はフィブリリンの生成の増加を測定するのに十分な量を意味している。
【００３７】
有効成分は、皮膚の老化の１又は複数の皮膚科学的兆候の改善をもたらすのに十分な時間、皮膚に局所的に塗布される。皮膚の老化のこのような兆候には、これらに限られる訳ではないが、以下のものが含まれる。
（ａ）小皺又は皺の治療、低減、及び／又は防止
（ｂ）皮膚の細孔の大きさの低減
（ｃ）皮膚の厚さ、ふくよかさ、及び／又はつっぱりの改善
（ｄ）皮膚のしなやかさ及び／又は柔らかさの改善
（ｅ）皮膚の色調、輝き、及び／又は透明感の改善
（ｆ）プロコラーゲン及び／又はコラーゲンの生成の改善
（ｇ）エラスチンの維持及び再形成の改善
（ｈ）皮膚の肌理の改善及び／又は再組織化（ｒｅｔｅｘｔｕｒｉｚａｔｉｏｎ）の促進
（ｉ）皮膚のバリア修復及び／又は機能の改善
（ｊ）皮膚の輪郭の外観の改善
（ｋ）皮膚の艶及び／又は明るさの回復
（ｌ）皮膚中での必須の栄養素及び／又成分の補充
（ｍ）閉経により低下した皮膚の外観の改善
（ｎ）皮膚の保湿の改善
（ｏ）皮膚の弾力性及び／又は伸縮性の改善
（ｐ）皮膚の弛みの治療、低減、及び／又は防止、又は、
（ｑ）色素斑の低減
【００３８】
実際には、本発明の組成物は、治療を必要とする皮膚に塗布される。つまり、先述の属性の全てにおいて、欠損又は損失に悩まされる皮膚、あるいは、そうでなければ、先述の皮膚の属性の全てにおいて、改善により利益を得る皮膚のことである。皮膚は、典型的には、１日１回又は２回治療される。治療は、１週間、２週間、４週間、８週間、６ヶ月またはそれ以上続けられてもよい。
【００３９】
一実施形態において、有効成分は、典型的には、化粧品として許容されるビヒクル中に含まれていて、小皺及び／又は皺に悩まされる皮膚に塗布されて、皮膚の小皺及び／又は皺の外観を防止、治療、及び／又は回復する。この場合、組成物は、治療を要する皮膚に塗布される。治療を要する皮膚とは、既に皺及び／又は小皺がある皮膚又は小皺及び／又は皺が出来る危険性がある皮膚を意味している。好ましくは、組成物は、顔、首、胸部、及び／又は手の皮膚上にある小皺及び／又は皺に直に塗布される。
【００４０】
本発明は、細胞内のマイクロＲＮＡを制御することを含む、真皮細胞内でのタンパク質の新規な制御機構の発見を前提としている。本発明は、細胞外マトリックスタンパク質、特に、皮膚細胞内のコラーゲン、エラスチン、及びフィブリリンの負の制御因子として、ｍｉＲ−２９ａ及びｍｉＲ−２９ｂを同定したことに基づいている。本明細書に記載された実験では、ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂのレベルが年齢と共に増加することと、ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂの抑制により、コラーゲン、エラスチン、及びフィブリリンの生成が増加することが示されている。
【００４１】
本発明の有効成分が、ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂのレベルを低減することが示された。ヒトｍｉＲ−２９ａには、以下の配列番号１の塩基配列が含まれ、ヒトｍｉＲ−２９ｂには、以下の配列番号２の配列が含まれる。
【００４２】
ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＣＵＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＡ（配列番号１）
【００４３】
ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＵＵＧＡＡＡＵＣＡＧＵＧＵＵ（配列番号２）
【００４４】
有効成分は、これらのマイクロＲＮＡの何れかのレベルを低減する全ての物質であってもよい。例えば、前記配列に相補的である核酸オリゴマー（ａｎｔｉ−ｍｉＲｓ）が有用であってもよい。ａｎｔｉ−ｍｉＲｓは、配列番号１又は配列番号２の内の少なくとも８個の連続するヌクレオチドに相補的であると好ましい。他の実施形態では、ａｎｔｉ−ｍｉＲｓは、配列番号１又は配列番号２の内の、少なくとも１０個、少なくとも１２個、少なくとも１４個、少なくとも１６個、少なくとも１８個、又は少なくとも２０個の連続するヌクレオチドに相補的である。
【００４５】
これらのマイクロＲＮＡと重要な皮膚のタンパク質の生成との間の相関関係を発見することで、皮膚を治療するのに有用な有効成分を選別できる。したがって、本発明の一実施形態は、このような有効成分を同定するスクリーニング方法である。スクリーニング方法は、一般に、皮膚細胞、特に真皮線維芽細胞を試験すべき候補物質に接触させ、マイクロＲＮＡレベルの低下を測定できるのに十分な期間、細胞を培養することを要する。前記期間は、典型的には少なくとも１時間、より典型的には約１２時間〜約７２時間である。次に、細胞内の核酸ポリマーを定量分析する本技術分野で公知の技術によって、ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂのレベルを測定する。特に有用な方法は、定量ＲＴ−ＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）である。候補物質で治療された細胞内のマイクロＲＮＡレベルを治療されていないコントロールと比較すると、マイクロＲＮＡレベルの低下の大きさを測定できる。
【００４６】
ヒトの真皮線維芽細胞内のｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを少なくとも約５％、好ましくは少なくとも約１０％、より好ましくは少なくとも約２０％、さらに好ましくは少なくとも約３０％だけ低減する能力を示す物質が、更なる評価に用いるために選ばれる。ある実施形態では、選ばれる物質は、ヒトの真皮線維芽細胞内のｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、又は少なくとも約６０％だけ低減する物質である。
【００４７】
一実施形態では、本発明は、皮膚内でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの生成を増やして、皮膚の美的外観を改善する方法に関する。該方法は、改善を必要とする皮膚の領域に、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを抑制する有効量の有効成分を局所的に塗布することを含む。ここで、前記有効成分は、細胞内でのｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂの発現を抑制する物質の能力を測定する分析により、用いるために同定されたものであり、前記分析には本明細書に記載された分析が含まれる。
【００４８】
一実施形態では、有効成分には、式Ｉの構造を有し、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを制御できる化合物が含まれる。
【化５】
0005918783.tif 000006
【００４９】
ここで、Ｒ１及びＲ２は、独立して、水素、−Ｒ、又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ＊であり、Ｒ１及びＲ２は、これらが結合される窒素原子と共に、３〜６員環を形成してもよい。
【００５０】
Ｒ３は、水素、−Ｒ、−ＯＲ＊、−ＳＲ＊、及び−Ｎ（ＲＮ）（Ｒ＊）の中から選ばれる。
【００５１】
Ｒ４及びＲ５は、各存在位置において、水素、−Ｒ、またはＸ１の中から独立して選ばれる。隣接する任意の２個のＲ５基は、これらが結合されるベンゼン環に縮合される５又は６員環を形成してもよい。
【００５２】
Ｒ６は水素、−Ｒ、又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ＊である。
【００５３】
Ｒ、Ｒ＊、及びＲＮは、独立して、水素、又はＣ１−２０の炭化水素基、又はＣ１−１６の炭化水素基、又はＣ１−１２の炭化水素基、あるいはＣ１−１０の炭化水素基である。ここで、前記炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基、及び／又は、酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個、又は１〜８個、又は１〜６個、あるいは１〜４個のヘテロ原子で置換されてもよい。
【００５４】
Ｘ１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ＊、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ（Ｒ）＝Ｎ−ＲＮ、−Ｃ＝Ｎ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｃ（＝ＮＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２−、−ＣＯ２Ｒ＊、−ＣＳ２Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｓ−Ｒ＊、−Ｓ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−ＯＲ＊、−ＳＲ＊、−ＮＨ２、−ＮＨＲＮ、−ＮＲＮ２、−Ｎ（ＲＮ）３＋、−Ｎ（ＲＮ）−ＯＨ、−Ｎ（→Ｏ）（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｏ−Ｒ＊、−Ｎ（ＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）Ｏ−Ｒ＊、−ＮＲＮ−ＣＨＯ、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）ＮＲＮ、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ＊）２、−Ｎ＝Ｎ−ＲＮ、−ＳＣＮ、−ＮＣＳ、−ＮＳＯ、−ＳＳ−Ｒ＊、−ＳＯ−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｒ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｎ（ＲＮ）−ＳＯ２−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｎ（Ｒ＊）２、−Ｏ−ＳＯ３−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＯ、−ＮＯ２、−ＮＯ３、−Ｏ−ＮＯ、−Ｏ−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｎ２、−Ｎ（Ｃ２Ｈ４）、−Ｓｉ（Ｒ＊）３、−ＣＦ３、−Ｏ−ＣＦ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｐ（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２、及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２からなる群の中から選ばれる。
【００５５】
「ｎ」０〜３の整数（つまり、０、１、２又は３）であり、「ｎ」が２又は３の場合、Ｒ５は、各存在位置において独立して選ばれる。
【００５６】
また、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを制御するのに適した化合物は、式（Ｉ）の化合物の化粧品として許容される酸付加塩であってもよい。
【００５７】
ある実施形態では、Ｒ１、Ｒ２，Ｒ３、Ｒ４及びＲ６は、独立して、水素又は−Ｒ基であり、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、及びアルキルアリールの中から選ばれ、それぞれ、必要に応じて、ハロゲン、酸素、窒素及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個、又は１〜８個、又は１〜６個、あるいは１〜４個のヘテロ原子で置換される。Ｒ１とＲ２の両者が水素でないのが好ましい。
【００５８】
ある実施形態では、Ｒ１及び／又はＲ６は水素であり、及び／又はＲ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、−Ｒ基であってもよい。ここで、Ｒは、−（ＣＨ２）ａ−(ＣＲ＊＝ＣＲ＊)ｂ−(ＣＨ２）ｃ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｙ−（ＣＨ２）ｚ−Ｘ３の形を有する基であり、ａ、ｂ、ｃ、ｘ、ｙ及びｚは、独立に、０〜５までの整数（つまり、０、１、２、３、４、及び５）であり、ａ、ｂ、ｃ、ｘ、ｙ及びｚがそれぞれ０の場合も含まれる。Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−の中から選ばれる、結合又は二価の基若しくは原子の何れかを表している。Ｘ３は、水素、Ｘ１、又はＲ＊を表している。
【００５９】
さらなる実施形態では、Ｒ２は、−（ＣＨ２）ａ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−ＣＨ３の形を有する基であり、及び／又は、Ｒ３は、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ＊の形を有する基である。ここで、Ｒ＊はアリール基であり、及び／又は、Ｒ４は、−（ＣＨ２）ａ−Ｒ＊の形を有する基であり、Ｒ＊はアリール基である。Ｒ５は、ベンゼン環上の１又は複数の利用可能な位置にある置換基であるが、通常、そのような全ての位置において水素である。
【００６０】
一実施形態では、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを調節する化合物は、２−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）−Ｎ−（３−エトキシプロピル）−５−[（２Ｅ）−３−フェニルプロプ−２−エンナミド]ベンズアミドであり、以下の式で表される。
【化６】
0005918783.tif 000007
【００６１】
あるいは、上記式の化合物の化粧品として許容される酸付加塩である。
【００６２】
別の実施形態では、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを制御する成分には、式（ＩＩ）の構造を有する化合物が含まれる。
【化７】
0005918783.tif 000008
【００６３】
ここで、Ｒ５は、水素、−Ｒ，又はＸ１の中から選ばれる。「ｍ」は、０〜５までの整数（つまり、０、１、２、３、４又は５）であり、「ｍ」が２、３、又は４の場合、Ｒ５は、各存在位置において独立して選ばれる。
【００６４】
Ｒ７とＲ８は、独立して、Ｃ１−２０の炭化水素基、又Ｃ１−１６の炭化水素基、又はＣ１−１２の炭化水素基、あるいはＣ１−１０の炭化水素基である。前記炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基、及び／又は酸素、窒素及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個、又は１〜６個、あるいは１〜４個のヘテロ原子で置換されてもよい。
【００６５】
Ｒ、Ｒ＊、及びＲＮは、独立して、水素又はＣ１−２０の炭化水素基、又はＣ１−１６の炭化水素基、又はＣ１−１２の炭化水素基、あるいはＣ１−１０の炭化水素基である。前記炭化水素基は、必要に応じて、先に定義されたＸ１基及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個、又は１〜６個、あるいは１〜４個のヘテロ原子で置換されてもよい。また、式ＩＩで表される化合物の化粧品として許容される塩であってもよい。
【００６６】
ある変形例では、Ｒ７とＲ８は、独立して、−Ｒ基である。ここで、Ｒは、−（ＣＨ２）ａ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｂ−(ＣＨ２)ｃ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｙ−（ＣＨ２）ｚ−Ｘ３の形を有する基であり、ａ、ｂ、ｃ、ｘ、ｙ、及びｚは、独立して、０〜５までの整数であり、Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−の中から選ばれる、結合又は二価の基若しくは原子の何れかを表している。Ｘ３は、水素、Ｘ１、又はＲ＊を表している。Ｒ＊は、Ｃ１−２０の炭化水素基、又はＣ１−１６の炭化水素基、又はＣ１−１２の炭化水素基、又はＣ１−１０の炭化水素基、又はＣ１−８の炭化水素基、あるいはＣ１−６の炭化水素基であり、該炭化水素は、必要に応じて、Ｘ１基及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個、又は１〜６個、あるいは１〜４個のヘテロ原子で置換される。
【００６７】
ＲＮ、Ｒ７、及びＲ８は、例えば、独立して、−Ｒ基であってもよい。ここで、Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、及びアルキルアリールの中から選ばれ、それぞれ、必要に応じて、ハロゲン、酸素、窒素及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個のヘテロ原子で置換される。ＲＮ、Ｒ７、及びＲ８は、例えば、独立して、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、シクロヘキシル、フェニル、又はベンジルであってもよい。
【００６８】
該有用な化合物の１つは、Ｎ−（２−メチルプロピル）−Ｎ−[[４−[（メチルスルフォニル）オキシ]フェニル]メチル]−ベンゼンスルホアミドであり、以下の構造を有する。
【化８】
0005918783.tif 000009
【００６９】
本発明に係る化粧組成物は、局所的に塗布するために、種々の形態で処方でき、式（Ｉ）又は式（ＩＩ）に係る１又は複数の化合物を、約０．００００１重量パーセント〜約９０重量パーセント、好ましくは、約０．００１重量パーセント〜約２５重量パーセント、より好ましくは、約０．００１重量パーセント〜約１重量パーセント含んでいる。該組成物には、式（Ｉ）又は式（ＩＩ）で表される化合物が有効量含まれる。有効量とは、局所的に塗布されたときに、マイクロＲＮＡを下方制御させ、次に皮膚の特定の領域でのコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの生成を高めるのに十分な量を意味している。
【００７０】
該組成物には、化粧品として許容されるビヒクルが含まれても良い。該ビヒクルは、皮膚への塗布に適した本技術分野で公知の全ての形態を取ってもよく、これらに限定される訳ではないが、水、植物油、鉱油、パルミチン酸オクタル、ミリスチン酸イソプロピル、及びパルミチン酸イソプロピルなどのエステル、ジカプリルエーテル及びジメチルイソソルバイドなどのエーテル、エタノール及びイソプロパノールなどのアルコール、セチルアルコール、セテアリルアルコール、ステアリルアルコール、及びビフェニルアルコールなどの脂肪族アルコール、イソオクタン、イソドデカン及びヘキサデカンなどのイソパラフィン、シクロメチコンなどのシリコーン油、鉱油、石油、イソエイコサン及びポリイソブテンなどの炭化水素油、プロピレングリコール、グリセリン、ブチレングリコール、ペンチレングリコール及びヘキシレングリコールなどのポリオール、リポソーム、ワックス、又は先述したものの全ての組み合わせ又は混合物が含まれても良い。
【００７１】
ビヒクルには、水相、油相、アルコール、シリコーン相、又はこれらの混合物の全てが含まれてもよく、エマルションの形態であってもよい。好適なエマルションの非限定的な例には、油中水型エマルション、水中油型エマルション、水中シリコーン型エマルション、シリコーン中水型エマルション、油中グリセリン型エマルション、水中ワックス型エマルション、水中油中水型の三相エマルションなどが含まれる。エマルションには、非イオン性、アニオン性、又は両性の界面活性剤などの乳化剤、あるいはゲル化剤が含まれてもよい。
【００７２】
本発明の一実施形態では、組成物には、これらに限定される訳ではないが、植物成分、角質溶解薬、剥離性剤、角質細胞の増殖促進剤、コラゲナーゼ阻害剤、エラスターゼ阻害剤、脱色剤、抗炎症剤、ステロイド、抗ニキビ剤、抗酸化剤、及び後期糖化最終生成物（ＡＧＥ）の生成阻害剤を含む追加の皮膚活性化剤（ｓｋｉｎ  ａｃｔｉｖｅ）が含まれてもよい。
【００７３】
組み合わせると相乗的な改善が得られると考えられるので、組成物に、抗老化の利益が得られる追加の有効成分が含まれてもよい。抗老化成分の例には、これらに限定される訳ではないが、数例を挙げると、植物成分（例えば、ブテア・フロンドーサ（Ｂｕｔｅａ  Ｆｒｏｎｄｏｓａ）抽出物、フィトール、チオジプロピオン酸（ＴＤＰＡ）及びそのエステル、レチノイド（例えば、９−シスレチノイン酸、１３−シスレチノイン酸、全トランス型レチノイン酸およびその誘導体、フィタン酸、レチノール（ビタミンＡ）及びパルミチン酸レチノール、酢酸レチノール及びプロピオン酸レチノールなどのエステル、及びその塩やその他のもの）、（アルファヒドロキシ酸及びベータヒドロキシ酸を含む）ヒドロキシ酸、サリチル酸及びアルキルサリチル酸塩、剥離剤（例えば、グリコール酸、３，６，９−トリオキサウンデカン二酸など）、エストロゲンシンセターゼ刺激化合物（例えば、カフェイン及び誘導体）、５α−リダクターゼ活性を阻害できる化合物（例えば、リノレン酸、リノール酸、フィナステリド及びその混合物）、及びバリア機能促進剤（例えば、セラミド、グリセリド、コレステロール及びそのエステル、アルファヒドロキシ及びオメガヒドロキシ脂肪酸及びそのエステルなど）が含まれる。レチノイドの例には、これらに限定される訳ではないが、レチノイン酸（例えば、全トランス型又は１３−シス）及びその誘導体、レチノール（ビタミンＡ）及びパルミチン酸レチノール、酢酸レチノール、プロピオン酸レチノールなどのエステル、及びその塩が含まれる。
【００７４】
別の実施形態では、本発明の局所組成物には、以下の１又は複数種が含まれてもよい。つまり、皮膚浸透性増強剤（ｓｋｉｎ  ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｒ）、ミリスチン酸イソプロピルなどの皮膚軟化薬、ワセリン、シリコーン（例えば、メチコーン、ジメチコーン）、油分、鉱油、及び脂肪酸エステル、グリセリン又はカプリリルグリコールなどの保湿剤、パルミトイルオリゴペプチド、コラーゲンなどの皮膚プランパー（ｐｌｕｍｐｅｒ）、又はコラーゲン及び／又はグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）促進剤、アボベンゾンなどの日焼け止め、剥離剤、及び抗酸化剤の１又は複数種が含まれてもよい。
【００７５】
好適な剥離剤には、例えば、アルファヒドロキシ酸類、ベータヒドロキシ酸類、オキサ酸類（ｏｘａ−ａｃｉｄｓ）、オキサ二酸類（ｏｘａｄｉａｃｉｄｓ）、及びエステル、無水物などのそれらの誘導体、並びにそれらの塩が含まれる。好適なヒドロキシ酸には、例えば、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、２−ヒドロキシアルカン酸、マンデル酸、サリチル酸、及びそれらの誘導体が含まれる。好適な剥離剤は、グリコール酸である。存在するならば、剥離剤は、組成物に対して、約０．１重量パーセント〜約８０重量パーセント含まれる。
【００７６】
本発明の組成物中で使用され得る抗酸化剤の例には、アスコルビン酸及びその誘導体／エステル、ベータカロテン、カテキン、クルクミン、フェルラ酸の誘導体（例えば、フェルラ酸エチル、フェルラ酸ナトリウム）、没食子酸の誘導体（例えば、没食子酸プロピル）、リコペン、還元酸、ロスマリン酸、タンニン酸、テトラヒドロクルクミン、トコフェロール及びその誘導体、尿酸、それらの全ての混合物などのフェノール性水酸基を有する化合物が含まれる。他の好適な抗酸化剤は、グルタチオン、リポ酸、チオグリコール酸、及び他のスルヒドリル化合物などの１又は複数個のチオール基（−ＳＨ）を有し、還元型又は非還元型の何れかの形態を取るものである。抗酸化剤は、重亜硫酸塩類、メタ重亜硫酸塩類、亜硫酸塩、又は硫黄を含む他の無機塩及び酸などの無機物であってもよい。本発明の組成物は、組成物の総重量に対して、好ましくは約０．００１重量パーセント〜約１０重量パーセント、より好ましくは約０．０１重量パーセント〜約５重量パーセントの抗酸化剤を含んでもよい。
【００７７】
他の慣用の添加剤には、トコフェロール及びアスコルビン酸などのビタミン、モノパルミチン酸アスコルビルなどのビタミン誘導体、ヒドロキシアルキルセルロースなどの増粘剤、ゲル化剤、構造化剤、ＥＤＴＡなどの金属キレート剤、色素、着色剤、及びｐＨ調整剤が含まれる。組成物には、必要に応じて、これらに限定される訳ではないが、フィルム形成剤、保湿剤、ミネラル成分、粘度及び／又はレオロジー調整剤、抗ニキビ剤、防虫剤、皮膚冷却化合物、皮膚保護剤、潤滑剤、芳香剤、防腐剤、安定化剤、及びこれらの混合物を含む当業者に公知の他の成分が含まれてもよい。先述のものに加えて、本発明の化粧組成物は、皮膚の疾患を治療する他の全ての化合物を含んでもよい。
【００７８】
組成物は、例えば、エマルション、ローション、クリーム、美容液、スプレー、エアロゾル、ケーキ、軟膏、エッセンス、ゲル、ペースト、パッチ、鉛筆状、ウェットティッシュ、マスク、スティック状、泡状、エリキシル剤、濃縮物などの、特に局所投与に適した種々の製品形態で処方されてもよい。組成物は、エマルション、ローション、クリーム、軟膏、美容液又はゲルとして処方されると好ましい。
【００７９】
本発明によれば、コラーゲン、エラスチン及び／又はフィブリリンの生成を調節するマイクロＲＮＡを制御する有効成分を含む組成物を、老化の皮膚科学的兆候を低減、回復、後退又は防止するのに十分な期間、影響を受けた領域全体に局所的に塗布して、老化した皮膚を治療する方法が提供される。該有効成分は、これらに限定される訳ではないが、式Ｉ又は式ＩＩを有する化合物を含んでいて、好ましくは、化粧品として許容されるビヒクル中に含まれる。
【００８０】
一般に、状態及び／又は美的外観の改善は、加齢による老化、光による老化、ホルモンの変化による老化、及び／又は化学線による老化の皮膚科学的兆候を低減すること、小皺及び／又は皺の外観を防止及び／又は低減すること、顔の小皺及び皺、頬、額の顔の皺、目の間の垂直な皺、目の上及び口の周りの水平な皺、マリオネットライン、及び特に深い皺又は溝の目立ち感を低減すること、眼窩下の小皺及び／又は眼窩周囲の小皺の外観を改善すること、カラスの足跡（ｃｒｏｗ’ｓ  ｆｏｏｔ）の外観を低減すること、皮膚、特に老化した皮膚を若返らせる及び／又は活性化させること、皮膚の脆弱性を低減すること、グリコサミノグリカン及び／又はコラーゲンの損失を防止及び／又は後退させること、エストロゲン失調の影響を回復すること、皮膚萎縮症を防止すること、色素過剰症を防止、低減、及び／又は治療すること、皮膚変色を最小にすること、皮膚の色調、輝き、透明感、及び／又はつっぱりを改善すること、皮膚の弛みを防止、低減及び／又は回復すること、皮膚の硬さ、ふくよかさ、しなやかさ、及び／又は柔らかさを改善すること、プロコラーゲン及び／又はコラーゲンの生成を改善すること、皮膚の肌理を改善及び／又は再組織化（ｒｅｔｅｘｔｕｒｉｚａｔｉｏｎ）を促進すること、皮膚のバリア修復及び／又は機能を改善すること、皮膚の輪郭の外観を改善すること、皮膚の輝き及び／又は明るさを回復すること、疲労及び／又はストレスの皮膚科学的兆候を最小にすること、環境ストレスに抵抗すること、老化及び／又は閉経によって減少する皮膚中の成分を補充すること、皮膚細胞間の情報伝達を改善すること、細胞の増殖及び／又は繁殖を増大すること、老化及び／又は閉経によって減少する皮膚細胞の代謝を増やすこと、細胞の老化を遅延させること、皮膚の保湿を改善すること、皮膚の厚さを向上させること、皮膚菲薄化を遅延又は停止すること、皮膚の弾力性及び／又は伸縮性を改善すること、剥離性を向上すること、微小循環系を改善すること、セルライトの形成を低減及び／又は防止すること、及びこれらの組み合わせの全てからなる群の中から選ばれる。
【００８１】
組成物は、典型的には、所望の結果を得るのに必要な期間、１日に１、２、又は３回皮膚に塗布される。治療法には、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも４週間、少なくとも８週間、又は少なくとも１２週間あるいはそれ以上の間、毎日塗布することが含まれてもよい。長期的な治療法が意図されてもよい。小皺及び皺の形成又は外観に対する組成物の効果は、例えば、目視検査によって定性的に評価できるし、例えば、顕微鏡による、あるいはコンピュータを利用した皺の形態（例えば、皮膚の単位領域ごとの皺の数、深さ、長さ、領域、体積及び／又は幅）の測定によって定量的に評価できる。
【００８２】
本発明の組成物は、組成物を、改善を必要とする個体の薄い皮膚に局所的に塗布して、薄い皮膚を治療するのに有用であることも考えられる。「薄い皮膚」は、加齢による老化、閉経又は光損傷が原因となって薄くなる皮膚、及び早々に薄くなっている皮膚を含むことを意図している。男性と女性、特に異なる人生の段階にいる女性では、年齢によって皮膚の薄くなり方は異なると考えられるので、ある実施形態では、治療は男性の薄い皮膚に関するものであるのに対し、他の実施形態では、閉経前又は閉経後の女性の薄い皮膚を治療することに関する。
【００８３】
本発明の方法は、皮膚の老化の兆候が現れていない個体、最も一般的には２５歳未満の個体において、予防的に用いられて、老化を未然に防いでもよい。前記方法は、２５歳を超える個体に通常見られる一旦現れた老化の兆候を後退又は治療してもよいし、そのような個体の皮膚科学的な老化の進行を遅延させてもよい。
【実施例】
【００８４】
以下の実施例には、本発明を説明する本発明の特定の態様が記載されているが、本発明及びその種々の態様を理解及び実践するのに役立つ特定の方法論を提供しているだけなので、本発明を限定するものとして構成されるべきではない。
【００８５】
（実施例１）皮膚線維芽細胞中でのｍｉＲ−２９ａ及びｍｉＲ−２９ｂの年齢に関連する発現レベル
若者の皮膚線維芽細胞中と年配者の皮膚線維芽細胞中でのｍｉＲ−２９ａ及びｍｉＲ−２９ｂの発現をｑＲＴ−ＰＣＴで調査した。３組のドナー細胞を用いて実験を行った（つまり、３人の若者のドナー（２２〜２８歳）と３人の年配のドナー（５５〜６６歳））。ＨＤＦａ細胞を、約８０パーセントコンフルエントまで培養した。Ｔａｑｍａｎ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ  Ｃｅｌｌｓ−ｔｏ−Ｃｔ  Ｋｉｔを用いて、細胞を溶解した。ｍｉＲ特異的プライマーとＴａｑＭａｎ  ＭｉｃｒｏＲＮＡ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｋｉｔを用いて、ｃＤＮＡを調製した。事前に設計されたＴａｑＭａｎ  ＭｉｃｒｏＲＮＡ  Ａｓｓａｙを用いて、ｈｓａ−ｍｉＲ−２９ａとｈｓａ−ｍｉＲ−２９ｂ、及びコントロールであるＲＮＵ６ＢとＧＡＰＤＨ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓから購入）に対してｑＰＣＲを実施した。以下の表１に纏めたデータによれば、若者に比べて年配者の皮膚線維芽細胞中では、ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ２９ｂのレベルが顕著に高いことが説明される。
【００８６】
【表１】
0005918783.tif 000010
【００８７】
表１中において、データは、年齢グループごとに３人のドナーの平均を表している。ｐ＜０．０５の場合、全ての値は、統計的に有意である。これらのコホート間において、マイクロＲＮＡのレベルは３〜４倍違っていて、若者のドナーに比べると、年配者のドナーの細胞は急激にレベルが増加することが分かる。
【００８８】
（実施例２）ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂの抑制によるＥＣＭタンパク質の制御
特定のマイクロＲＮＡ、ｍｉＲ２９ａ及びｍｉＲ２９ｂが、コラーゲン、フィブリリン及びエラスチンなどの真皮内のマトリックスタンパク質の発現を制御する能力を、５５歳の年配のドナーからのヒト真皮線維芽細胞を用いて評価した。ｓｉＳＰＯＲＴ  ＮｅｏＦＸ  ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  Ａｇｅｎｔ（Ａｍｂｉｏｎ製）を用いて、細胞に、６０ナノメートルの抗ｍｉＲ−２９ａ又は抗ｍｉＲ−２９ｂの何れか（市販の試薬）を形質移入した。７２時間の形質移入後、細胞を収集し、コラーゲンとフィブリリンのｍＲＮＡレベルをｑＲＴ−ＰＣＲで測定し、エラスチンのタンパク質レベルをＥＬＩＳＡで測定した。これらの実験によって、ｍｉＲ−２９ａ又はｍｉＲ−２９ｂを抑制すると、コラーゲン、フィブリリン及びエラスチンの正味の発現レベルを増加できることが明らかになった（表３）。ｐ＜０．０５の場合、全ての値は、統計的に有意である。
【００８９】
【表２】
0005918783.tif 000011
【００９０】
表２に示されるように、ｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂは、それぞれの抗ｍｉＲによって、明らかに阻害、つまり、５８パーセントと６５パーセント阻害されている。細胞中でｍｉＲ２９ａ又はｍｉＲ２９ｂを抑制すると、コラーゲン、フィブリリン及びエラスチンの発現が増加するようになる。コラーゲン１ａ、フィブリリン及びエラスチンは、抗ｍｉＲを用いていないコントロールに対する増減率として測定された。
【００９１】
（実施例３）特定の化合物によるｍｉＲ−２９ａ又はｍｉＲ−２９ｂの阻害
ヒト真皮線維芽細胞を無血清の状態で一昼夜成長させた後、無血清の状態で０．０００５パーセントの試験化合物で４８時間処理した。実施例１及び２に記載されたように、細胞のｍｉＲ−２９ａとｍｉＲ−２９ｂの発現レベルを、ｑＲＴ−ＰＣＲで分析した。０．０００５パーセントのＮ−（２−メチルプロピル）−Ｎ−[[４−[（メチルスルフォニル）オキシ]フェニル]メチル]−ベンゼンスルホンアミド（１）又は２−（４−ベンジルピペリジン−１−イル）−Ｎ−（３−エトキシプロピル）−５−[（２Ｅ）−３−フェニルプロプ−２−エンナミド]ベンズアミド（２）で処理された細胞は、ビヒクルで処理された細胞と比べて、ｍｉＲ−２９ａ及びｍｉＲ−２９ｂの両方について顕著な阻害を示していた（表３）。これらの化合物で処理された細胞では、ＥＬＩＳＡで測定されたように、コラーゲンタンパク質のレベルが増加することが示された。ｐ＜０．０５の場合、全ての値は、統計的に有意である。
【００９２】
【表３】
0005918783.tif 000012
【００９３】
全ての目的のためにその全てが参照されて包含されるものとして、各個々の公報又は特許又は特許出願が具体的及び個別に示されているように、本明細書で引用された特許出願及び刊行物を含む全ての参照は、その全てが参照され、全ての目的のために同程度ここに包含される。当業者に明らかなように、本発明の精神及び範囲から逸脱しない限り、本発明に多くの改良及び変形をなすことができる。本明細書に記載された特定の実施形態は、単なる例示としてのみ提供されていて、本発明は、添付の特許請求の範囲の用語と、それが権利化されるところの均等物の全範囲によってのみ限定される。
【００９４】
（関連出願の相互参照）
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）に基づいて、２０１０年１２月２８日に出願された米国特許出願第１２／９７９，６９５号の優先権の利益を主張し、該出願の内容の全てはここに参照されて包含される。
（付記）
（付記１）
化粧品として許容されるビヒクル中の有効量の有効成分を、皮膚中のコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの生成を高めるのに十分な時間、改善を必要とする皮膚の領域に局所的に塗布することを含み、
前記有効成分は、配列ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＣＵＧＡＡＡＵＣＧＧＵＵＡ（配列番号１）を有するｍｉＲ−２９ａ、及び／又は配列ＵＡＧＣＡＣＣＡＵＵＵＧＡＡＡＵＣＡＧＵＧＵＵ（配列番号２）を有するｍｉＲ−２９ｂを抑制する、
人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記２）
前記有効成分は、ｍｉＲ−２９ａを抑制する、
付記１に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記３）
前記有効成分は、ｍｉＲ−２９ｂを抑制する、
付記１に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記４）
前記有効成分は、ｍｉＲ−２９ａ及びｍｉＲ−２９ｂを抑制する、
付記１に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記５）
前記有効成分は、式Ｉの構造を有する化合物、及びその化粧品として許容される酸付加塩である、
（ここで、Ｒ１及びＲ２は、独立して、水素、−Ｒ、又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ＊であり、Ｒ１及びＲ２は、これらが結合される窒素原子と共に、３〜６員環を形成してもよく；
Ｒ３は、水素、−Ｒ、−ＯＲ＊、−ＳＲ＊、及び−Ｎ（ＲＮ）（Ｒ＊）の中から選ばれ；
Ｒ４及びＲ５は、各存在位置において、水素、−Ｒ、またはＸ１の中から独立して選ばれ；隣接する任意の２個のＲ５基は、これらが結合されるベンゼン環に縮合される５又は６員間を形成してもよく；
Ｒ６は水素、−Ｒ、又は−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ＊であり；
Ｒ、Ｒ＊、及びＲＮは、独立して、水素、又はＣ１−２０の炭化水素基であり；ここで、前記Ｃ１−２０の炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基、及び／又は、酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個のヘテロ原子で置換されてもよく；
Ｘ１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ＊、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ（Ｒ）＝Ｎ−ＲＮ、−Ｃ＝Ｎ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｃ（＝ＮＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２−、−ＣＯ２Ｒ＊、−ＣＳ２Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｓ−Ｒ＊、−Ｓ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−ＯＲ＊、−ＳＲ＊、−ＮＨ２、−ＮＨＲＮ、−ＮＲＮ２、−Ｎ（ＲＮ）３＋、−Ｎ（ＲＮ）−ＯＨ、−Ｎ（→Ｏ）（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｏ−Ｒ＊、−Ｎ（ＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）Ｏ−Ｒ＊、−ＮＲＮ−ＣＨＯ、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）ＮＲＮ、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ＊）２、−Ｎ＝Ｎ−ＲＮ、−ＳＣＮ、−ＮＣＳ、−ＮＳＯ、−ＳＳ−Ｒ＊、−ＳＯ−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｒ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｎ（ＲＮ）−ＳＯ２−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｎ（Ｒ＊）２、−Ｏ−ＳＯ３−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＯ、−ＮＯ２、−ＮＯ３、−Ｏ−ＮＯ、−Ｏ−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｎ２、−Ｎ（Ｃ２Ｈ４）、−Ｓｉ（Ｒ＊）３、−ＣＦ３、−Ｏ−ＣＦ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｐ（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２、及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２からなる群の中から選ばれ；
「ｎ」は、０〜３までの整数であり、「ｎ」が２又は３の場合、Ｒ５は、各存在位置において独立して選ばれる）
付記４に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
【化９】
0005918783.tif 000013
（付記６）
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ６は、独立して、水素又は−Ｒ基であり、
Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、及びアルキルアリールの中から選ばれ、それぞれ、必要に応じて、ハロゲン、酸素、窒素及び硫黄の中から選ばれる１〜１２のヘテロ原子で置換される、
付記５に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記７）
Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、−Ｒ基であり、
Ｒは、−（ＣＨ２）ａ−(ＣＲ＊＝ＣＲ＊)ｂ−(ＣＨ２）ｃ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｙ−（ＣＨ２）ｚ−Ｘ３の形を有する基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｘ、ｙ及びｚは、独立して、０〜５までの整数であり、
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）−の中から選ばれる、結合又は二価の基若しくは原子の何れかを表していて、
Ｘ３は、水素、Ｘ１、又はＲ＊を表している、
付記６に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記８）
Ｒ１及びＲ６は水素である、
付記７に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記９）
Ｒ２は、−（ＣＨ２）ａ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−ＣＨ３の形を有する基である、
付記８に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記１０）
Ｒ３は、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｒ＊の形を有する基であり、
Ｒ＊はアリール基である、
付記８に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記１１）
Ｒ４は、−（ＣＨ２）ａ−Ｒ＊の形を有する基であり、
Ｒ＊はアリール基である、
付記８に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記１２）
Ｒ５は、水素である、
付記７に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記１３）
前記有効成分は、以下の式を有する化合物であるか、又はその化粧品として許容される酸付加塩である、
付記８に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
【化１０】
0005918783.tif 000014
（付記１４）
前記化合物は、式ＩＩの構造を有するか、又は式ＩＩの構造を有する化合物の化粧品として許容される塩である、
（ここで、Ｒ５は、水素、−Ｒ，又はＸ１の中から選ばれ；
「ｍ」は、０〜５までの整数であり、「ｍ」が２、３、又は４の場合、Ｒ５は、各存在位置において独立して選ばれ；
Ｒ７とＲ８は、独立して、Ｃ１−２０の炭化水素基であり；
前記Ｃ１−２０の炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜６個のヘテロ原子で置換されてもよく；
Ｒ、Ｒ＊、及びＲＮは、独立して、水素又はＣ１−２０の炭化水素基であり；
前記Ｃ１−２０の炭化水素基は、必要に応じて、Ｘ１基及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個のヘテロ原子で置換されてもよく；
Ｘ１は、−Ｆ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＯＨ、−Ｃ≡Ｃ−Ｒ＊、−Ｃ≡Ｎ、−Ｃ（Ｒ）＝Ｎ−ＲＮ、−Ｃ＝Ｎ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｃ（＝ＮＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨＯ、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２−、−ＣＯ２Ｒ＊、−ＣＳ２Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｓ−Ｒ＊、−Ｓ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−ＮＨ２、−（Ｃ＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ２、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−ＯＲ＊、−ＳＲ＊、−ＮＨ２、−ＮＨＲＮ、−ＮＲＮ２、−Ｎ（ＲＮ）３＋、−Ｎ（ＲＮ）−ＯＨ、−Ｎ（→Ｏ）（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｏ−Ｒ＊、−Ｎ（ＲＮ）−Ｎ（ＲＮ）２、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）Ｏ−Ｒ＊、−ＮＲＮ−ＣＨＯ、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＲＮＣ（＝Ｏ）ＮＲＮ、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲＮ）２、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ＊）２、−Ｎ＝Ｎ−ＲＮ、−ＳＣＮ、−ＮＣＳ、−ＮＳＯ、−ＳＳ−Ｒ＊、−ＳＯ−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｒ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｎ（ＲＮ）−ＳＯ２−Ｒ＊、−ＳＯ２−Ｎ（Ｒ＊）２、−Ｏ−ＳＯ３−、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）２−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｏ−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−ＯＲ＊、−Ｓ（＝Ｏ）−Ｒ＊、−ＮＯ、−ＮＯ２、−ＮＯ３、−Ｏ−ＮＯ、−Ｏ−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｎ２、−Ｎ（Ｃ２Ｈ４）、−Ｓｉ（Ｒ＊）３、−ＣＦ３、−Ｏ−ＣＦ３、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｒ＊、−Ｐ（Ｒ＊）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２、及び−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ＊）２からなる群の中から選ばれる）
付記１に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
【化１１】
0005918783.tif 000015
（付記１５）
Ｒ７とＲ８は、独立して、−Ｒ基であり、
Ｒは、−（ＣＨ２）ａ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｂ−(ＣＨ２)ｃ−Ｘ２−（ＣＨ２）ｘ−（ＣＲ＊＝ＣＲ＊）ｙ−（ＣＨ２）ｚ−Ｘ３の形を有する基であり、
ａ、ｂ、ｃ、ｘ、ｙ、及びｚは、独立して、０〜５までの整数であり、
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（ＲＮ）−、−Ｎ（ＲＮ）−Ｃ（＝Ｏ）−の中から選ばれる、結合又は二価の基若しくは原子の何れかを表していて、
Ｘ３は、水素、Ｘ１、又はＲ＊を表していて、
Ｒ＊は、Ｃ１−２０の炭化水素基であり、該炭化水素は、必要に応じて、Ｘ１基及び／又は酸素、窒素、及び硫黄の中から選ばれる１〜１２のヘテロ原子で置換される、
付記１４に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記１６）
ＲＮ、Ｒ７、及びＲ８は、独立して、−Ｒ基であり、
Ｒは、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、及びアルキルアリールの中から選ばれ、それぞれ、必要に応じて、ハロゲン、酸素、窒素及び硫黄の中から選ばれる１〜１２個のヘテロ原子で置換される、
付記１５に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記１７）
前記化合物は、以下の式を有するか、又は以下の式を有する化合物の化粧品として許容される塩である、
付記１６に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
【化１２】
0005918783.tif 000016
（付記１８）
前記皮膚の前記美的改善は、
（ａ）小皺又は皺の治療、低減、及び／又は防止、
（ｂ）皮膚の細孔の大きさの低減、
（ｃ）皮膚の厚さ、ふくよかさ、及び／又はつっぱりの改善、
（ｄ）皮膚のしなやかさ及び／又は柔らかさの改善、
（ｅ）皮膚の色調、輝き、及び／又は透明感の改善、
（ｆ）エラスチンの維持及び再形成の改善、
（ｇ）皮膚の肌理の改善及び／又は再組織化（ｒｅｔｅｘｔｕｒｉｚａｔｉｏｎ）の促進、
（ｈ）皮膚のバリア修復及び／又は機能の改善、
（ｉ）皮膚の輪郭の外観の改善、
（ｊ）皮膚の艶及び／又は明るさの回復、
（ｋ）閉経により低下した皮膚の外観の改善、
（ｌ）皮膚の保湿の改善、
（ｍ）皮膚の弾力性及び／又は伸縮性の増加、
（ｎ）皮膚の弛みの治療、低減、及び／又は防止、又は、
（ｏ）色素斑の低減、
からなる群の中から選ばれる、
付記１に記載の人間の皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記１９）
細胞中のｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを抑制する、又は下方制御させる能力について、候補物質を分析することを含む、
皮膚の美的外観を改善するのに有用な有効成分を同定する方法。
（付記２０）
前記分析ステップには、前記候補物質を用いてヒト真皮線維芽細胞を培養し、次に、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂのレベルを測定することが含まれる、
付記１９に記載の皮膚の美的外観を改善するのに有用な有効成分を同定する方法。
（付記２１）
前記測定ステップは、ｑＲＴ−ＰＣＲで実行される、
付記２０に記載の皮膚の美的外観を改善するのに有用な有効成分を同定する方法。
（付記２２）
皮膚中のコラーゲン、エラスチン、及び／又はフィブリリンの生成を向上して皮膚の美的外観を改善する方法であって、
該方法は、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを抑制する有効量の有効成分を、改善を必要とする皮膚の領域に局所的に塗布することを含み、
前記有効成分は、細胞内のｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂの発現を抑制する物質の能力を測定する分析によって同定される、
皮膚の美的外観を改善する方法。
（付記２３）
コラーゲン、エラスチン、フィブリリン、及びこれらの組み合わせからなる群から選ばれる細胞外マトリックスタンパク質を刺激して、老化した皮膚の外観を改善する方法であって、
改善を必要とする皮膚に、ｍｉＲ−２９ａ及び／又はｍｉＲ−２９ｂを抑制する有効成分を、局所的に許容されるビヒクル中に、有効量含む組成物を局所的に塗布することを含む、
老化した皮膚の外観を改善する方法。
（付記２４）
前記有効成分は、以下の式を有する化合物であるか、又はその化粧品として許容される酸付加塩である、
付記２３に記載の老化した皮膚の外観を改善する方法。
【化１３】
0005918783.tif 000017
（付記２５）
前記化合物は、以下の式を有するか、又は以下の式を有する化合物の化粧品として許容される塩である、
付記２３に記載の老化した皮膚の外観を改善する方法。
【化１４】
0005918783.tif 000018
【配列表】
0005918783000001.app