(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
卵巣癌の治療における、ゲムシタビンと、シスプラチンおよびカルボプラチンから選択される白金剤との併用療法に使用するための医薬の製造のための、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項２】
前記併用療法において、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与が、ゲムシタビンおよび白金剤の投与に先行する、請求項１に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項３】
前記併用療法において、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与後、ゲムシタビンおよび白金剤が２日までに投与され、ゲムシタビンがその後７日までに再び投与される、請求項１または２に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項４】
前記併用療法において、ゲムシタビンおよび白金剤の投与が、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与に先行する、請求項１に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項５】
前記併用療法において、ゲムシタビンおよび白金剤が同時に投与される、請求項１または２に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項６】
白金剤がシスプラチンである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項７】
白金剤がカルボプラチンである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項８】
２１日の治療サイクルの間に前記併用療法において使用するための医薬の製造のための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項９】
前記薬学的に許容可能な塩がジメタンスルホナート塩である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は卵巣癌のための併用療法に関する。
【背景技術】
【０００２】
卵巣癌は２番目に多い婦人科癌であり、死亡率の絶対数が高い。治療は通常、化学療法および外科手術、および時に、放射線治療を含む。
【０００３】
不幸にも、卵巣癌のための治療は依然として見つけにくいままであり、卵巣癌を治療するのに効果的であることが証明され得る多くの異なる治療についての必要性が存在する。
【０００４】
薬物およびピリミジン類似体を含有する白金を含む、卵巣癌を含む種々の種類の癌を治療するために使用されるいくつかのクラスの抗癌剤が見つかっている。シスプラチン（シスプラチナムまたはｃｉｓ−ジアミンジクロロプラチナム（ＩＩ）としても知られている）は、現在カルボプラチンも含む、白金を含有する抗癌剤のクラスの第１のメンバーであった。これらの白金錯体はインビボで反応し、ＤＮＡに結合し、ＤＮＡの架橋を引き起こし、最終的にアポトーシス（プログラム細胞死）を誘発する。
【０００５】
ゲムシタビン塩酸塩（本明細書以下、ゲムシタビンと称する）はピリミジン類似体である。これは現在、卵巣癌の治療のために、カルボプラチンとの併用も含め、種々の種類の癌を治療するために使用される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ゲムシタビンとシスプラチンは、再発卵巣癌を有する患者において良好な耐容性を示し、有効な療法であることが文献に報告されているが、本発明は、これらの薬剤が、種々の癌の兆候のための可能な治療として現在臨床試験を受けている米国特許第７，５８２，６５２号に開示されている化合物である、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンと併用して使用される場合、この３つの組み合わせが、ゲムシタビンとシスプラチンの組み合わせより効果の改良を提供することを発見した。
【化１】
0006055481.tif 000002
５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミン
【０００７】
さらに、カルボプラチンとゲムシタビンの組み合わせはまた、現在、卵巣癌を治療するために使用されており、同等な効果が、シスプラチンと比べてカルボプラチンの間で卵巣癌の治療において見られる（しかしながら、低い毒性がカルボプラチンで観測された）ことが文献においても報告されているので、本発明者らは、ゲムシタビン、カルボプラチン、および５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンの３つの組み合わせは、シスプラチンの代わりにカルボプラチンを投与することによる低い毒性の潜在的利点と共にゲムシタビンとカルボプラチンの組み合わせより効果的であり得ると結論付けた。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、ゲムシタビンと、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される白金剤と、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩との組み合わせを投与することを含む、哺乳動物における卵巣癌を治療する方法に関する。さらなる実施形態において、投与は同じ日である。別のさらなる実施形態において、投与は２１日の治療サイクルの間である。別のさらなる実施形態において、ゲムシタビンおよび白金剤は、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩が投与された後、２日までに投与され、ゲムシタビンはその後７日までに再び投与される。別のさらなる実施形態において、薬学的に許容可能な塩はジメタンスルホナート塩である。
【０００９】
本発明はまた、ゲムシタビンと、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される白金剤との組み合わせを投与することを含む、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩での併用療法を受けている哺乳動物における卵巣癌を治療する方法に関する。さらなる実施形態において、薬学的に許容可能な塩はジメタンスルホナート塩である。
【００１０】
本発明はまた、ゲムシタビンを投与することを含む、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩と、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される白金剤とで併用療法を受けている哺乳動物における卵巣癌を治療する方法に関する。さらなる実施形態において、薬学的に許容可能な塩はジメタンスルホナート塩である。
【００１１】
本発明はまた、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される白金剤を投与することを含む、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩と、ゲムシタビンとで併用療法を受けている哺乳動物における卵巣癌を治療する方法に関する。さらなる実施形態において、薬学的に許容可能な塩はジメタンスルホナート塩である。
【００１２】
本発明はまた、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、ゲムシタビンと、シスプラチンおよびカルボプラチンからなる群から選択される白金剤とで併用療法を受けている哺乳動物における卵巣癌を治療する方法に関する。さらなる実施形態において、薬学的に許容可能な塩はジメタンスルホナート塩である。
【００１３】
本発明はまた、卵巣癌の治療においてゲムシタビンと、シスプラチンおよびカルボプラチンから選択される白金剤とでの併用療法において使用するための、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩に関する。さらなる実施形態において、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ゲムシタビンおよび白金剤の投与に先行する。さらに別の実施形態において、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩、ゲムシタビンおよび白金剤の投与は、２４時間以内である。別のさらなる実施形態において、ゲムシタビンおよび白金剤は、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与後、２日までに投与され、ゲムシタビンはその後、７日までに再び投与される。別のさらなる実施形態において、ゲムシタビンおよび白金剤の投与は、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与に先行する。別のさらなる実施形態において、ゲムシタビンおよび白金剤は同時に投与される。別のさらなる実施形態において、白金剤はシスプラチンである。別のさらなる実施形態において、白金剤はカルボプラチンである。別のさらなる実施形態において、投与は２１日の治療サイクルの間である。別のさらなる実施形態において、薬学的に許容可能な塩はジメタンスルホナート塩である。
【００１４】
本発明はまた、卵巣癌を治療するための医薬の製造における５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の使用に関し、前記医薬は白金剤およびゲムシタビンと併用して投与される。さらなる実施形態において、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与は、ゲムシタビンおよび白金剤の投与に先行する。別のさらなる実施形態において、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩、ゲムシタビン、および白金剤の投与は２４時間以内である。別のさらなる実施形態において、ゲムシタビンおよび白金剤は、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩が投与された後、２日までに投与され、ゲムシタビンはその後、７日までに再び投与される。別のさらなる実施形態において、ゲムシタビンおよび白金剤の投与は、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンまたはその薬学的に許容可能な塩の投与に先行する。別のさらなる実施形態において、ゲムシタビンおよび白金剤は同時に投与される。別のさらなる実施形態において、白金剤はシスプラチンである。別のさらなる実施形態において、白金剤はカルボプラチンである。別のさらなる実施形態において、投与は２１日の治療サイクルの間である。別のさらなる実施形態において、薬学的に許容可能な塩はジメタンスルホナート塩である。
【００１５】
５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンは、米国特許第７，５８２，６５２号に記載されているような手順に従って作製され得る。あるいは、分子は本明細書に提供される手順に従って作製され得る。試薬および出発物質は、当業者に容易に入手可能であるか、または有機および複素環化学の標準的な技術、もしくは既知の構造的に類似の化合物の合成と類似した技術から選択される手順により作製され得る。調製例および参照実施例１に従う命名は概して、Ｓｙｍｙｘ  Ｉｓｅｎｔｒｉｓ（登録商標）バージョン３．２におけるＩＵＰＡＣ命名特性を使用して行われる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
調製例１
６−クロロ−Ｎ−（２，２−ジメチルプロピル）−３−ニトロ−ピリジン−２−アミン
【化２】
0006055481.tif 000003
２，６−ジクロロ−３−ニトロピリジン（３０ｇ、１５２．３４ｍｍｏｌ）を、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３００ｍＬ）中に溶解して黄色の溶液を得、次いでそれを０〜５℃に冷却する。この溶液にトリエチルアミン（２０ｍＬ、１４３．４９ｍｍｏｌ）を加え、続いてネオペンチルアミン（１６ｍＬ、１３６．４０ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下する。添加が完了した後、反応混合物を５℃にて２時間、次いで室温にて一晩撹拌する。次の日（約１８時間後）に、薄層クロマトグラフィー（ヘキサン中に２０％の酢酸エチル）により反応が完了したことを示す。反応混合物を水（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄する。有機部分をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、次いで残渣に濃縮する。イソプロピルアルコール（２０ｍＬ）を加える。結晶が現れ、冷イソプロピルアルコール（１５ｍＬ）を使用して洗浄しながら濾過により回収して標題化合物（３２ｇ、８６％）を得る。
【００１７】
調製例２
５−クロロ−３−（２，２−ジメチルプロピル）イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−アミン臭化水素酸塩
【化３】
0006055481.tif 000004
６−クロロ−Ｎ−（２，２−ジメチルプロピル）−３−ニトロ−ピリジン−２−アミン（２４．４ｇ、０．１０ｍｏｌ）を、トルエン（３００ｍＬ）と共に１Ｌのオートクレーブ中に入れる。
【００１８】
ビーカー内に、５％のＰｔ／Ｃ（１．５ｇ）を、１０分間撹拌しながら、水（１２ｍＬ）および５０％の次亜リン酸（０．２５ｍＬ）と混合する。Ｐｔ／Ｃ触媒調製物をオートクレーブ中に入れる。反応混合物を５０ｐｓｉの水素にて７５℃まで加熱する。３時間後、ＧＣ分析により、出発物質が１％未満で存在することが示される。反応を停止し、室温に冷やす。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）のパッドを通して濾過し、フィルタケーキをメタノールでリンスする。生成物、６−クロロ−Ｎ２−（２，２−ジメチルプロピル）ピリジン−２，３−ジアミンを含有する濾液を真空下で約１００ｍＬの体積に濃縮し、さらに精製せずに環化に直接使用する。
【００１９】
上記の溶液をメタノール（１５０ｍＬ）で希釈し、氷浴中で冷却する。臭化シアン（１１ｇ、０．１０５ｍｏｌ）を一度に加える。氷浴が温かくなるので撹拌しながら反応物を室温まで加温させる。約５〜１０時間後に反応が完了する。
【００２０】
真空下で反応混合物を約４体積に濃縮する（約６体積の蒸留物を回収する）。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（６体積、１８０ｍＬ）を加える。混合物を氷浴中で冷却し、１時間撹拌する。その物質を濾過して、オフホワイトの固体として標題化合物（２２．０ｇ、７６％）を得る。
【００２１】
調製例３
３−（２，２−ジメチルプロピル）−５−［（Ｅ）−２−（４−フルオロフェニル）ビニル］イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−アミン
【化４】
0006055481.tif 000005
ビス（ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４−ジメチルアミノフェニル）ホスフィン）ジクロロパラジウム（ＩＩ）（ＣＡＳ  Ｎｏ：８８７９１９−３５−９）（１００．４ｍｇ、１４１．８μｍｏｌ）を西洋ナシの形状のフラスコに入れ、５回の真空／窒素サイクルを用いて固体を脱酸素化する。１−ブタノール（５５ｍＬ）を加え、次いでフラスコ内容物を、３回の真空（各々３０秒）／窒素サイクルを用いて、続いて撹拌しながらさらに２回の真空（各々６０秒）／窒素サイクルを用いて脱酸素化する。完全な溶液は得られず、濁った混合物が得られる。
【００２２】
Ｃｌａｉｓｅｎアダプタ、機械的スターラー、熱電温度計、還流冷却器、およびゴム隔膜を備えた三ツ口の丸底フラスコに、５−クロロ−３−（２，２−ジメチルプロピル）イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−アミン臭化水素酸塩（２２．６５ｇ、７０．９ｍｍｏｌ）を加え、次いで上部にできた空間を、１５分間、わずかな窒素スイープで脱酸素化する。綿毛状の白色固体に、各々シリンジを介して、１−ブタノール（４６ｍＬ）、ジイソプロピルエチルアミン（３４．４８ｇ、４６．５ｍＬ、２６６．８ｍｍｏｌ）、および４−フルオロスチレン（１１．６６ｇ、１１．４ｍＬ、９５．５ｍｍｏｌ）を加える。４０分間、窒素を散布することによりこの混合物を脱酸素化した後、触媒／ブタノール混合物をシリンジを介して加える。スラリーに窒素を１０分間散布し、次いで上部にできた空間を窒素で５分間スイープする。反応物を１１８〜１２０℃にて一晩撹拌する。１８時間後、混合物を撹拌しながら冷却する。沈殿または結晶化は４５℃から７０℃の間で起こる。４１℃の温度で開始して、脱イオン水（１００ｍＬ）を１０分にわたって滴下して加えてスラリーを得る。撹拌し、２６℃まで冷却した後、フラスコ内容物を冷却するために氷浴を適用する。１時間後、エタノールおよび十分な氷を浴に加え、温度を−２℃に下げる。混合物を−２〜−５℃にて１時間保持し、次いでポリプロピレンパッドを通して濾過（十分な濾過）し、脱イオン水（４体積）、続いてヘプタン（３体積）でリンスする。その物質を１０分間、真空により空気乾燥し、４０℃にて真空オーブン中でさらに乾燥させて、オフホワイトの固体（２０．２５ｇ、８８％）として標題化合物を得る。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．５１（ｍ，２Ｈ）；７．４１（ｄ，１Ｈ）；７．３２（ｄ，１Ｈ）；７．１９（ｍ，３Ｈ）；７．０８（ｄ，１Ｈ）；６．７９（ｓ，２Ｈ）；３．８９（ｓ，２Ｈ）；１．００（ｓ，９Ｈ）。
【００２３】
調製例４
１−［２−アミノ−３−（２，２−ジメチルプロピル）イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−５−イル］−２−（４−フルオロフェニル）エタン−１，２−ジオン
【化５】
0006055481.tif 000006
３−（２，２−ジメチルプロピル）−５−［（Ｅ）−２−（４−フルオロフェニル）ビニル］イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−アミン（１００．０ｇ、３０８．２６ｍｍｏｌ）を、還流冷却器、熱電温度計、および機械的スターラーを備えた２Ｌの３つ口の丸底フラスコ中でジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）と混合する。１０分間撹拌した後、４８％の臭化水素（２８．６９ｇ、１７０．２０ｍｍｏｌ）を４分にわたって加えて灰色のスラリーにする。２２℃〜３３℃の発熱を観測する。反応混合物に酢酸（９．２８ｇ、１５４．５３ｍｍｏｌ）を加える。１．８時間撹拌した後、さらに４８％の臭化水素（３１．７５ｇ、１８８．３５ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を加熱すると、粘稠になる。酢酸（４００ｍＬ、６．９８ｍｏｌ）を加える。９１℃に達した後、ジメチルスルホキシド（５０ｍＬ）および４０％のＨ２ＳＯ４（１００ｍＬ）を加える。温度を１００℃まで上げる。３時間後、さらに４０％のＨ２ＳＯ４（３００ｍＬ）を加え、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋトラップを取り付けて、硫化ジメチルなどの低沸点溶媒を取り除く。１００℃にてさらに１７時間撹拌した後、さらなる部の４０％Ｈ２ＳＯ４（８０ｍＬ）を反応物に入れる。反応物を１時間撹拌し、次いで脱イオン水（３００ｍＬ）を加える。反応物を３時間撹拌し、次いで温度を１０３℃まで上げ、続いて、さらに脱イオン水（２００ｍＬ）を加える。２．５時間後、十分に撹拌しているさらなる部の脱イオン水（２００ｍＬ）を加える。撹拌および加熱をさらに１．５時間継続し、その時に加熱を止める（４０％のＨ２ＳＯ４の最初の添加の時点から合計で２８時間）。周囲温度で一晩冷却しながら、反応混合物を結晶化する。生成物を濾過し、脱イオン水（２×２００ｍＬ）でリンスし、次いで真空オーブン中で５０℃にて乾燥させる。
【００２４】
固体物質（塩として）を、１８時間撹拌しながら、１Ｍの水酸化ナトリウム（５５０ｍＬ）で処理する。スラリーを濾過し、脱イオン水（５００ｍＬ）でリンスし、５０℃にて真空オーブン中で乾燥させて、標題化合物（８３．７ｇ、７７％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．９５（ｄ，１Ｈ）；７．８７（ｍ，２Ｈ）；７．６０（ｄ，１Ｈ）；７．５８（ｓ，２Ｈ）；７．３９（ｔ，２Ｈ）；３．６０（ｓ，２Ｈ）；０．６１（ｓ，９Ｈ）。
【００２５】
調製例４Ａ（別法）
１−［２−アミノ−３−（２，２−ジメチルプロピル）イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−５−イル］−２−（４−フルオロフェニル）エタン−１，２−ジオン
３−（２，２−ジメチルプロピル）−５−［（Ｅ）−２−（４−フルオロフェニル）ビニル］イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−アミン（１．００ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）を、熱電温度計および還流冷却器を備えた３つ口の丸底フラスコ中で１，４−ジオキサン（４ｍＬ）および５０％硫酸（１ｍＬ）中に懸濁する。混合物は透明な溶液になり、加熱して還流する（９０〜９３℃の内部および１１５℃の油浴温度）。臭化水素（４００μＬ、３．５６ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（２．５０ｍＬ、３５．２０ｍｍｏｌ）をそれぞれ加える。油浴を使用して反応混合物を還流にて加熱し、約１バブル／秒の速度にて窒素を導入した。１時間後、第２の部の５０％硫酸（３ｍＬ、２１．４ｍｍｏｌ）を加える。５時間後、第３の部の５０％硫酸（４ｍＬ、３１ｍｍｏｌ）を加え、還流下で一晩反応を継続する。ＨＰＬＣ分析により、生成物が＞９３％であることが示される。油浴を除去し、反応物を約７０℃に冷やし、その時に水（５ｍＬ）を加える。室温まで冷やした（約３０秒）後、混合物を濾過し、ケーキを水（１０ｍＬ）で洗浄して、生成物（１．３３ｇ）の硫酸水素塩を得る。
【００２６】
上記の塩を１Ｎの水酸化ナトリウム（５０ｍＬ）に加え、室温にて３０分間撹拌して、淡黄色の懸濁液を得る。混合物を濾過し、淡黄色の固体を水（３×１０ｍＬ）で洗浄し、次いで真空下で５５℃にて乾燥させて標題化合物（０．９１ｇ、８８％）を得る。
【００２７】
参照実施例１
５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチルプロピル）イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−アミンジメタンスルホナートまたは５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンジメタンスルホナート
【化６】
0006055481.tif 000007
１−［２−アミノ−３−（２，２−ジメチルプロピル）イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−５−イル］−２−（４−フルオロフェニル）エタン−１，２−ジオン（３５４ｇ、１ｍｏｌ）を、エタノール（２．８Ｌ）、酢酸アンモニウム（５５０．０ｇ、７．１ｍｏｌ）、およびトリメチルアセトアルデヒド（１１０ｇ、１．３ｍｏｌ）と混合する。ＨＰＬＣまたはＬＣ−ＭＳによりモニターしてジオンが消失するまで、反応物を約７０℃で加熱する（ＮＨ４ＯＡｃの昇華を抑制するのに役立つように反応温度は還流以下に維持する）。反応の完了（通常、一晩）後、混合物を真空下で濃縮する。酢酸エチル（５．３Ｌ）および水（３．５Ｌ）、続いて１ＮのＮａＯＨ（１．４Ｌ）を加える。混合物を室温にて２０〜３０分間撹拌する。相を分離し、水相を酢酸エチル（２．８Ｌ）で抽出する。合わせた酢酸エチル部を１０体積のブラインで２回洗浄する。酢酸エチル溶液を約１．２Ｌ（約３体積）に蒸発させる。エタノール（２．８Ｌ）を加え、混合物を約６５℃に加熱する。酢酸エチル（６００ｍＬ）中のメタンスルホン酸（２４０．０ｇ、２．５ｍｏｌ）を高速滴下形式で添加する。混合物を約６５℃にて３時間維持する。熱源を除去し、反応物を２時間以上撹拌しながら室温まで冷やす。固体生成物を濾過により回収し、酢酸エチル（５００ｍＬ）でリンスし、約４５℃にて真空オーブン中で乾燥させて標題化合物（４９０ｇ、８０％）を得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ４２１．５（Ｍ＋１）．１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．９９（ｓ，２Ｈ），７．９０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）；７．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）；７．６０（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．３４（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）；３．６８（ｓ，２Ｈ）；２．３５（ｓ，６Ｈ）；１．５１（ｓ，９Ｈ）；０．７１（ｓ，９Ｈ）。
【００２８】
以下の実施例は、ヒト卵巣癌のマウス異種移植片研究において、ゲムシタビンおよび白金剤の２つの組み合わせより、化合物、５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミン（ジメタンスルホナート塩（化合物Ａ））、ゲムシタビン、および白金剤の３つの組み合わせの投与の改善された効果を例示する。実施例は例示目的のために記載され、限定されず、種々の改変が当業者によりなされてもよいことは理解されるべきである。
【実施例】
【００２９】
実施例１
インビボでの化合物Ａ、ゲムシタビン、およびシスプラチンとの３つの組み合わせ
この研究の目的は、より効果的であるかを決定するためにヒト卵巣癌の異種移植片マウスモデルにおいてゲムシタビンとシスプラチンとの２つの併用療法と、３つの併用療法（化合物Ａを含む）とを比較することである。
【００３０】
ヒト腫瘍マウス異種移植片は、以下の卵巣癌細胞株：Ａ−２７８０（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、ＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃ（ルシフェラーゼを発現するために修飾したＳＫ−ＯＶ−３細胞株（＃１、発現培地）、Ｉｎｄｉａｎａ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）の初期継代から生成される。Ａ−２７８０卵巣癌細胞は、１ｍＭのピルビン酸塩および１０％の認定されたウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ  １６０００、ＦＢＳ）を補った、Ｌ−グルタミン、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ２２４００−０８９）を含むＲＰＭＩ１６４０中で増殖させる。ＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃ細胞（卵巣癌細胞）は、非必須アミノ酸、１ｍＭのピルビン酸塩および１０％のＦＢＳを補った、Ｌ−グルタミン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１６６００−０８２）を含むＭｃＣｏｙ’ｓ５Ａ培地中で増殖させる。
【００３１】
Ｈａｒｌａｎ無胸腺ヌードマウス（６〜７週齢）を、自由に餌および水を取らせて収容し、右後方脇腹への規定した数の細胞の皮下異種移植片移植の前に１週間順応させる。Ａ−２７８０またはＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃインプラントは、０．２ｍＬの最終体積で０．１ｍＬのＭＡＴＲＩＧＥＬ（登録商標）（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を含む無血清培地中の０．１ｍＬの細胞（それぞれ２または５×１０６細胞）からなる。腫瘍を１２０〜１５０ｍｍ３の体積まで成長させ、次いで処置群に無作為化して、全ての群にわたって一定の平均腫瘍サイズを得る。ＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃ研究の各処置群は１２匹の動物であり、Ａ−２７８０研究の各群は２０匹の動物である。
【００３２】
化合物Ａは、ヒドロキシエチルセルロール（ＨＥＣ）１％／ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０  ０．２５％／消泡剤０．０５％（ＨＥＣ／ＴＷＥＥＮ（登録商標））中で毎週調製され、４℃で保存される。ＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃ処置群について３０ｍｇ／ｋｇ（またはＡ−２７８０処置群について１０ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物Ａ、またはそのビヒクルを、３週間、０．２ｍＬの体積で胃強制飼養により１日３回（ＴＩＤ）経口投与する。処置プロトコルは、ゲムシタビンおよびシスプラチン処置を導入する前に化合物Ａでの２日の初期処置を含む。
【００３３】
シスプラチンおよびゲムシタビンはＰＢＳ中で希釈し、０．２ｍＬの腹腔内注射として毎週調製し、投与する。表１に示した体積をコンスタントに投与する。
【００３４】
【表１】
0006055481.tif 000008
【００３５】
毎週化合物Ａまたはビヒクルを投与し、７回投与した（化合物Ａ投薬のちょうど丸２日に対応する）後、ゲムシタビンおよびシスプラチンの週１回（ＱＷ）処置を３日目にそれぞれ０．５および１時間で開始する。ゲムシタビンおよびシスプラチンの最も高い用量は、単一薬剤としての有効性に基づいて選択され、これらの一定比率の希釈物を以下の組み合わせで投与する（別個の化合物としての連続投与）：１００ｍｇ／ｋｇゲムシタビン＋４ｍｇ／ｋｇシスプラチン（１００＋４）；５０ｍｇ／ｋｇゲムシタビン＋２ｍｇ／ｋｇシスプラチン（５０＋２）；または２５ｍｇ／ｋｇゲムシタビン＋１ｍｇ／ｋｇシスプラチン（２５＋１）。以下の投薬レジメンに従ってＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃおよびＡ−２７８０処置群に３つの併用療法を施す。処置を示していない対応するビヒクルが利用される。
１．ＨＥＣ／ＴＷＥＥＮ（登録商標）、０．２ｍＬ、経口、ＴＩＤｘ２１／ＰＢＳ、０．２ｍＬ＋０．２ｍＬ、ＩＰ、ＱＷｘ３
２．化合物Ａ、１０（または３０）ｍｇ／ｋｇ、経口、ＴＩＤｘ２１／ＰＢＳ、０．２＋０．２ｍＬ、ＩＰ、ＱＷｘ３
３．ＨＥＣ／ＴＷＥＥＮ（登録商標）、０．２ｍＬ、経口、ＴＩＤｘ２１／ゲムシタビン＋シスプラチン（２５＋１）ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ、ＱＷｘ３
４．ＨＥＣ／ＴＷＥＥＮ（登録商標）、０．２ｍＬ、経口、ＴＩＤｘ２１／ゲムシタビン＋シスプラチン（５０＋２）ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ、ＱＷｘ３
５．ＨＥＣ／ＴＷＥＥＮ（登録商標）、０．２ｍＬ、経口、ＴＩＤｘ２１／ゲムシタビン＋シスプラチン（１００＋４）ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ、ＱＷｘ３
６．化合物Ａ、１０（または３０）ｍｇ／ｋｇ、経口、ＴＩＤｘ２１／ゲムシタビン＋シスプラチン、２５＋１ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ、ＱＷｘ３
７．化合物Ａ、１０（または３０）ｍｇ／ｋｇ、経口、ＴＩＤｘ２１／ゲムシタビン＋シスプラチン、５０＋２ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ、ＱＷｘ３
８．化合物Ａ、３０ｍｇ／ｋｇ、経口、ＴＩＤｘ２１／ゲムシタビン＋シスプラチン、１００＋４ｍｇ／ｋｇ、ＩＰ、ＱＷｘ３＊
＊ＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃ研究のみ
【００３６】
データ収集および分析ツールを使用して週に２回、腫瘍体積および体重を記録し、分析する。式：ｖ＝ｌ×ｗ２×０．５３６（式中、ｌ＝大きな測定した直径およびｗ＝小さな垂直直径）を使用することにより腫瘍体積（ｍｍ３）を推定する。抗腫瘍活性を、未処置の対照（Ｃ）の腫瘍体積［１−（Ｔ／Ｃ）］×１００に対する、処置した（Ｔ）腫瘍体積の減少率として計算する。腫瘍体積データを、時間および処置群にわたる分散を均質化するために対数スケールに変換する。ＳＡＳソフトウェア（バージョン８．２）におけるＭＩＸＥＤ手順を使用した時間および処置により反復測定２元分散分析を用いて対数体積データを分析する。反復測定のための相関モデルは空間能である。各時点にて処理群を対照群と比較する。ＭＩＸＥＤ手順もまた、各時点における調整した平均および標準誤差を計算するために各処置群について別々に使用する。両方の分析は、各動物内の自己相関および大きな腫瘍を有する動物が初期の研究から除去される場合に生じるデータの損失を考慮する。調整した平均および標準誤差を各処置群対時間についてプロットする。慣例により、ｐ値≦０．０５は腫瘍成長の有意差を示す。体重損失の最大パーセントおよび最後の腫瘍体積測定は、個々の療法と併用療法との間の腫瘍成長阻害の得られた統計比較で示される。
【００３７】
１週間に１回のスケジュールで投与した、化合物Ａ単独、またはゲムシタビンとシスプラチンの低用量の組み合わせ（２５＋１、５０＋２）で３週間処置したＳＫ−ＯＶ−３ｘ．ｌｕｃ異種移植片の最終平均腫瘍体積は、ビヒクル対照と有意に異ならない（表２）。最も高いゲムシタビン＋シスプラチンの組み合わせ（１００＋４）は、ビヒクル対照と比べて腫瘍成長阻害を生じる。化合物Ａと共にゲムシタビン＋シスプラチンで処置した動物の各々の同時処置の結果、腫瘍成長阻害の向上が生じる。化合物Ａとの２５＋１、５０＋２および１００＋４の組み合わせは、１００＋４の組み合わせに対する抗腫瘍反応を達成または上回る。
【００３８】
化合物Ａと共に２５＋１および５０＋２のゲムシタビン＋シスプラチンで処置した動物の各々の３つの併用療法の結果、表２に示すようにゲムシタビン＋シスプラチンの２つの組み合わせより腫瘍成長阻害の向上が生じる。具体的には、化合物Ａとの２５＋１、５０＋２および１００＋４の組み合わせは、それらのそれぞれの２５＋１、５０＋２、および１００＋４の２つの組み合わせに対する抗腫瘍反応を有意に上回る。
【００３９】
【表２】
0006055481.tif 000009
【００４０】
第２のモデルにおいて、Ａ２７８０卵巣腫瘍モデルの、化合物Ａと共にゲムシタビン＋シスプラチン処置した動物の各々の３つの併用療法の結果、表３に示すようにゲムシタビン＋シスプラチンの２つの組み合わせより腫瘍成長阻害の向上が生じる。具体的には、化合物Ａとの２５＋１および５０＋２の組み合わせは、２５＋１および５０＋２の２つの組み合わせに対する抗腫瘍反応を有意に上回る。
【００４１】
【表３】
0006055481.tif 000010
【００４２】
実施例２
インビボでの化合物Ａ、ゲムシタビン、およびカルボプラチンとの３つの併用療法
カルボプラチン（２５ｍｇ／ｋｇ−１００ｍｇ／ｋｇ）を、実施例１に実質的に記載したシスプラチンと置き換えることができる。
【００４３】
本発明に記載した化合物は好ましくは、種々の経路により投与される医薬組成物として製剤化される。最も好ましくは、このような組成物は、経口、静脈内、または腹腔内投与用である。このような医薬組成物およびそれを調製するプロセスは当業者に周知である。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ（Ｄ．Ｔｒｏｙ，ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，２１ｓｔ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２００５）を参照のこと。
【００４４】
本発明の化合物は概して、広い投薬範囲にわたって有効である。通常、投与される５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンの量は、１０日間、１２時間ごとに約１００〜４２０ｍｇ、より好ましくは１０日間、１２時間ごとに１００〜３００ｍｇ、最も好ましくは１０日間、１２時間ごとに２００ｍｇ、あるいは１０日間、１２時間ごとに３００ｍｇの範囲内である。５−［２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−（４−フルオロ−フェニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−３−（２，２−ジメチル−プロピル）−３Ｈ−イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イルアミンは、ゲムシタビンおよびシスプラチンまたはゲムシタビンおよびカルボプラチンレジメンの開始前に少なくとも２日間、投与されることが予測される。
【００４５】
ＦＤＡにより承認された投薬レジメンに従って、ゲムシタビンおよびカルボプラチンの併用投与は、各々２１日の治療サイクルのうちの１および８日目に３０分にわたって１０００ｍｇ／ｍ２の用量にて静脈内に投与されるべきである。カルボプラチンＡＵＣ４は、ゲムシタビン投与の１日後に静脈内に投与されるべきである。患者は、白血球百分率を含む、完全血球数を各投薬の前にモニターされるべきである。患者は、各サイクルの前に１５００×１０６／Ｌ以上の絶対顆粒球数および１００，０００×１０６／Ｌ以上の血小板数を有するべきである。
【００４６】
用量変更
治療サイクル内の血液毒性についてのゲムシタビン投与量の調節は、治療の８日目に得られた顆粒球および血小板数に基づく。骨髄抑制が検出される場合、ゲムシタビン投薬は表４におけるガイドラインに従って変更されるべきである。
【００４７】
【表４】
0006055481.tif 000011
【００４８】
一般に、吐き気／嘔吐を除いて、重度（グレード３または４）の非血液学的毒性に関しては、ゲムシタビンによる治療を治療医師の判断に応じ保持または５０％減少すべきである。カルボプラチン投与量の調節に関しては、製造業者の処方情報を参照のこと。
【００４９】
後のサイクルのためのカルボプラチンと組み合わせたゲムシタビンについての投与量の調節は観察される毒性に基づく。後のサイクルにおけるゲムシタビンの投与量は、以下の血液毒性のいずれかの場合、１および８日目に８００ｍｇ／ｍ２まで減少すべきである：
・５日を超える間、絶対顆粒球数＜５００×１０６／Ｌ
・３日を超える発熱性好中球減少について、絶対顆粒球数＜１００×１０６／Ｌ
・血小板＜２５，０００×１０６／Ｌ
・毒性に起因して１週間を超えるサイクル遅延
【００５０】
開始投与量の減少後に上記の毒性のいずれかが再発する場合、後のサイクルについて、ゲムシタビンは８００ｍｇ／ｍ２で１日のみ与えられるべきである。
【００５１】
シスプラチンはカルボプラチンと同様の様式で投与できると考えられる。
【００５２】
場合によっては、上述の範囲の下限値以下の投薬レベルが十分以上であることもあり、一方、他の場合では、さらに多くの用量が、有害な副作用を引き起こさずに利用されてもよく、したがって、上記の投薬範囲は本発明の範囲を限定することを決して意図するわけではない。実際に投与される化合物の量は、治療される病態、選択される投与経路、投与される実際の化合物（複数も含む）、個々の患者の年齢、体重、反応および患者の症状の重症度を含む、関連状況を考慮して医師により決定されることは理解されるであろう。