(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）の造影剤を以下の式（ＩＩ）の２種以上の非放射性アリール誘導体及び生体適合性担体と共に含む、哺乳類への投与に適した形態の放射性医薬組成物であって、当該組成物中に存在する式（ＩＩ）の誘導体の合計濃度が１５０μｇ／ｍＬ未満である、放射性医薬組成物。
【化１】
0006055417.tif 000021
式中、
ＢＴＭは生体ターゲティング部分であり、
Ｌ1は式−（Ａ）m−の合成リンカー基であって、各Ａは独立に−ＣＲ2−、−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ2ＣＯ2−、−ＣＯ2ＣＲ2−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＮＲ−、−ＣＲ＝Ｎ−Ｏ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ−、−ＳＯ2ＮＲ−、−ＮＲＳＯ2−、−ＣＲ2ＯＣＲ2−、−ＣＲ2ＳＣＲ2−、−ＣＲ2ＮＲＣＲ2−、Ｃ4-8シクロヘテロアルキレン基、Ｃ4-8シクロアルキレン基、−Ａｒ−、−ＮＲ−Ａｒ−、−Ｏ−Ａｒ−、−Ａｒ−（ＣＯ）−、アミノ酸、糖又は単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックであり、各Ａｒは独立にＣ5-12アリーレン基又はＣ3-12ヘテロアリーレン基であり、
各Ｒは独立にＨ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ2-4アルケニル、Ｃ2-4アルキニル、Ｃ1-4アルコキシアルキル又はＣ1-4ヒドロキシアルキルから選択され、
ｍは１〜２０の整数であり、
Ｙは−Ｏ−であり、
Ｘ1は18Ｆであり、
Ｘ2は−Ｎ+（ＣＨ3）3、−Ｎ（ＣＨ3）2又は−ＯＨであり、
ＢＴＭ、Ｌ1及びＹは式（Ｉ）及び（ＩＩ）で同一である。
【請求項２】
ＢＴＭが、単一のアミノ酸、３〜１００残基ペプチド、酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト、酵素阻害剤又はレセプター結合化合物を含む、請求項１記載の放射性医薬組成物。
【請求項３】
ＢＴＭがＲＧＤペプチドを含む、請求項１又は請求項２記載の放射性医薬組成物。
【請求項４】
ＢＴＭが以下のフラグメントを含むペプチドである、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の放射性医薬組成物。
【化２】
0006055417.tif 000022
【請求項５】
造影剤が以下の式（ＩＡ）の造影剤である、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の放射性医薬組成物。
【化３】
0006055417.tif 000023
【請求項６】
以下の式（Ａ）の放射性アルデヒドの溶液を以下の式（Ｂ）の２種以上の非放射性アルデヒドと共に含む組成物であって、当該成物中に存在する式（Ｂ）の誘導体の合計濃度が１５０μｇ／ｍＬ未満である、組成物。
【化４】
0006055417.tif 000024
式中、Ｘ1は18Ｆであり、Ｘ2は−Ｎ+（ＣＨ3）3、−Ｎ（ＣＨ3）2又は−ＯＨである。
【請求項７】
生体ターゲティング部分を放射性標識する方法であって、
（ｉ）以下の式（ＩＶ）のアミノオキシ基で官能化された生体ターゲティング部分を用意する段階と、
（ｉｉ）段階（ｉ）の官能化生体ターゲティング部分と、請求項６記載の放射性アルデヒド組成物との反応によって、式（Ａ）の放射性アルデヒドを前記アミノオキシ基と縮合させて、以下の式（Ｉ）の放射性標識生体ターゲティング部分を得る段階と
を含む方法。
【化５】
0006055417.tif 000025
式中、ＢＴＭ、Ｌ1、Ｙ及びＸ1は請求項１乃至請求項５のいずれか１項で定義した通りである。
【請求項８】
自動合成装置を用いて実施される、請求項７記載の方法。
【請求項９】
当該放射性医薬組成物が分布した身体の少なくとも一部のＰＥＴ画像を生成する段階を含むヒト又は動物の身体のイメージング方法に使用される請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の放射性医薬組成物。
【請求項１０】
前記方法が薬剤によるヒト又は動物の身体の治療の効果をモニターするために繰返し実施され、前記イメージングが薬剤による治療の前後又は適宜途中に実施される、請求項９記載の放射性医薬組成物。
【請求項１１】
当該放射性医薬組成物が分布した身体の少なくとも一部のＰＥＴ画像を生成する段階を含むイメージング方法を含む、ヒト又は動物の身体の診断方法に使用される請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の放射性医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、18Ｆ標識生体ターゲティング部分を含む改良放射性トレーサー造影剤組成物であって、インビボイメージングに影響を与える不純物が同定されて抑制された組成物に関する。上記改良組成物を、放射性トレーサー組成物の調製に有用な放射性フッ素化アルデヒド組成物と共に含む放射性医薬品も提供する。本発明は、上記放射性医薬組成物を用いたイメージング及び／又は診断方法も包含する。
【背景技術】
【０００２】
国際公開２００４／０８０４９２には、以下の式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応又は式（ＩＩＩ）の化合物と式（ＩＶ）の化合物との反応によってそれぞれ以下の式（Ｖ）又は（ＶＩ）のコンジュゲートを得ることを含むベクターの放射性フッ素化法が開示されている。
【０００３】
【化１】
0006055417.tif 000002
式中、
Ｒ１はアルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、或いは酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することのできる官能基（例えばジオール又はＮ−末端セリン残基）であり、
Ｒ２は、第一級アミン、第二級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノオキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド及びチオセミカルバジドから選択される基であって、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノオキシ基であり、
Ｒ３は、第一級アミン、第二級アミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジン、ヒドラジド、アミノオキシ、フェニルヒドラジン、セミカルバジド又はチオセミカルバジドから選択される基であって、好ましくはヒドラジン、ヒドラジド又はアミノオキシ基であり、
Ｒ４はアルデヒド基、ケトン基、アセタールのような保護アルデヒド、ケタールのような保護ケトン、或いは酸化剤を用いてアルデヒド又はケトンに迅速かつ効率的に酸化することのできる官能基（例えばジオール又はＮ−末端セリン残基）である。
【０００４】
【化２】
0006055417.tif 000003
式中、Ｘは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＮＨＣＯＮＨ−又は−ＮＨＣＳＮＨ−であって、好ましくは−ＣＯ−ＮＨ−、−ＮＨ−又は−Ｏ−であり、ＹはＨ、アルキル又はアリール置換基であり、
式（ＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）及び（ＶＩ）のリンカー基は以下のものから選択される。
【０００５】
【化３】
0006055417.tif 000004
式中、ｎは０〜２０の整数であり、ｍは１〜１０の整数であり、ｐは０又は１の整数であり、ＺはＯ又はＳである。
【０００６】
国際公開２００６／０３０２９１には、以下の式（Ｉ）の化合物と式（ＩＩ）の化合物との反応によって以下の式（ＩＩＩ）の化合物を得ることを含む放射性フッ素化法が開示されている。
【０００７】
【化４】
0006055417.tif 000005
【０００８】
【化５】
0006055417.tif 000006
式中、
ｎは０〜２０の整数であり、
ｍは０〜１０の整数であり、
Ｙは水素、Ｃ1-6アルキル又はフェニルである。
【０００９】
【化６】
0006055417.tif 000007
式中、ｍ、ｎ及びＹは式（ＩＩ）の化合物で定義した通りであり、ベクターは式（Ｉ）の化合物で定義した通りである。
【００１０】
Ｇｌａｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，  １９（４），  ９５１−９５７  （２００８）］には、18Ｆ−フルオロベンズアルデヒドを始めとする18Ｆ標識アルデヒドの合成並びにそれらをアミノオキシ官能化環式ＲＧＤペプチドと結合させることが記載されている。
【００１１】
Ｓｐｅｒａｎｚａ  ｅｔ  ａｌ［Ａｐｐｌ．Ｒａｄ．Ｉｓｏｔｏｐ．，  ６７，  １６６４−１６６９  （２００９）］には、ＴＲＡＣＥＲｌａｂ（商標）装置を用いた［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒド（［18Ｆ］−ＦＢＡ）の自動合成が記載されている。［18Ｆ］−ＦＢＡの精製に、手製の精製デバイスが使用されている。Ｓｐｅｒａｎｚａ  ｅｔ  ａｌには、自動合成装置での合成には、ＨＰＬＣ精製よりもカートリッジ精製の方が好ましいと記載されている。ただし、それらのカートリッジ法では、ジクロロメタン又はクロロホルムが［18Ｆ］−ＦＢＡ精製の最良の溶媒であると示唆されている。いずれの溶媒も、インビボでの使用には不適切な毒性を有しており、水と混和しない。そのため、この方法は放射性医薬品の調製には適していない。
【００１２】
Ｂａｔｔｌｅ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，  ５２（３），  ４２４−４３０  （２０１１）］には、［18Ｆ］−フルシクラチド（ｆｌｕｃｉｃｌａｔｉｄｅ）による抗血管新生療法のモニタリングについて開示されている。
【００１３】
【化７】
0006055417.tif 000008
Ｂａｔｔｌｅ  ｅｔ  ａｌは、水で希釈し、固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジで捕捉することによって、使用した［18Ｆ］−ＦＢＡを精製したと記載されている。前駆体、ＤＭＳＯ、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ−２２２及び親水性副生物のような不純物を廃液として溶出し、しかる後［18Ｆ］−ＦＢＡをエタノールで溶出したと記載されている。しかし、本発明者らは、Ｃ１８  ＳＰＥカートリッジを使用すると、前駆体の一部しか廃液として溶出されず、残りは［18Ｆ］−ＦＢＡをエタノールで溶出する際に同時に溶出するという知見を得た。
【００１４】
したがって、生体ターゲティング部分を18Ｆで標識するための代替法が依然として必要とされている。
【発明の概要】
【００１５】
本発明は、アミノオキシ−又はヒドラジン−官能化ＢＴＭへの18Ｆ−標識アルデヒドの結合によって得られる、改良18Ｆ−放射性標識生体ターゲティング部分（ＢＴＭ）組成物を提供する。本発明は、かかるアルデヒド中に存在する不純物の詳細な解析に基づくものであり、これらがどのようにして放射性標識ＢＴＭ生成物中に持ち込まれるか並びに不要な不純物種を抑制するにはどのようにするのが最適かという知見に基づく。これらの不純物の多くは従来技術では認識されておらず、かかる従来技術の薬剤は、イメージング特性に悪影響を与えかねない不都合な化学種を含んでいた。
【００１６】
さらに、本発明の改良組成物は、調製を短時間で行うことができ、使用前の調製及び精製ステップでの18Ｆ（半減期１０９分）放射能含有量の損失を最小限に抑えることができる。本発明の組成物は、市販の自動合成装置による自動化に適した方法で得ることができ、従来技術のＨＰＬＣ法（自動化できない）に対する長所である。自動化によって、再現性が向上し、オペレーターの被曝線量を低減できる。
【００１７】
さらに、生成物の放射化学収率及び純度の向上は、同じ量の放射性生成物を得るのに必要な官能化ＢＴＭの使用量が少なくてすむことを意味する。非標識ＢＴＭは、生体内で同じ生物学的部位に対して競合するので、官能化ＢＴＭの存在量の低下は、放射性標識生成物の効力を保持するのに役立つ。さらにＢＴＭは、例えば高価で入手に時間がかかる複合ポリペプチド又はタンパク質であることがあるので、時間／材料の効率の点で重要である。
【００１８】
本発明は、所望18Ｆ−放射性フッ素化ＢＴＭの濃度が約４０倍も向上し、化学的不純物が約９９％（即ち約１００倍）低減した組成物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
第１の態様では、本発明は、式（Ｉ）の造影剤を式（ＩＩ）の１種以上の非放射性アリール誘導体と共に含む組成物であって、当該組成物中に存在する式（ＩＩ）の誘導体の合計濃度が１５０μｇ／ｍＬ未満である、組成物を提供する。
【００２０】
【化８】
0006055417.tif 000009
式中、
ＢＴＭは生体ターゲティング分子であり、
Ｌ1は式−（Ａ）m−の合成リンカー基であって、各Ａは独立に−ＣＲ2−、−ＣＲ＝ＣＲ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＲ2ＣＯ2−、−ＣＯ2ＣＲ2−、−ＮＲＣＯ−、−ＣＯＮＲ−、−ＣＲ＝Ｎ−Ｏ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ−、−ＮＲ（Ｃ＝Ｓ）ＮＲ−、−ＳＯ2ＮＲ−、−ＮＲＳＯ2−、−ＣＲ2ＯＣＲ2−、−ＣＲ2ＳＣＲ2−、−ＣＲ2ＮＲＣＲ2−、Ｃ4-8シクロヘテロアルキレン基、Ｃ4-8シクロアルキレン基、−Ａｒ−、−ＮＲ−Ａｒ−、−Ｏ−Ａｒ−、−Ａｒ−（ＣＯ）−、アミノ酸、糖又は単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックであり、各Ａｒは独立にＣ5-12アリーレン基又はＣ3-12ヘテロアリーレン基であり、
各Ｒは独立にＨ、Ｃ1-4アルキル、Ｃ2-4アルケニル、Ｃ2-4アルキニル、Ｃ1-4アルコキシアルキル又はＣ1-4ヒドロキシアルキルから選択され、
ｍは１〜２０の整数であり、
Ｙは−Ｏ−又は−ＮＨ−であり、
Ｘ1は18Ｆ、−Ｏ（ＣＨ2）q18Ｆ又は−ＯＣＨ2−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ218Ｆであって、ｑは２、３又は４であり、
Ｘ2は−Ｎ+（ＣＨ3）3、−Ｎ（ＣＨ3）2、−ＯＣＨ3、Ｈ、−ＣＨ3、−ＯＨ、−ＳＣＨ3、−ＯＣ6Ｈ4ＣＨＯ又は19Ｆであり、
ＢＴＭ、Ｌ1及びＹは式（Ｉ）及び（ＩＩ）で同一である。
【００２１】
「組成物」という用語は、その通常の意味を有し、式（Ｉ）の放射性標識ＢＴＭと式（ＩＩ）の１種以上の非放射性アリール誘導体の混合物をいう。式（ＩＩ）の複数の誘導体が組成物中に存在していてもよいが、式（Ｉ）及び（ＩＩ）において、組成物のすべての成分についてＢＴＭ、Ｌ1及びＹは同一であり、Ｘ1及びＸ2は−Ｃ＝Ｎ基に対してフェニル環の同じオルト、メタ又はパラ位に位置する。したがって、第１の態様に係る組成物の成分の相違点はＸ1及びＸ2の種類だけである。
【００２２】
「存在する式（ＩＩ）の誘導体の合計濃度」という用語は、Ｘ2が異なっていたとしても、存在する式（ＩＩ）のすべての化合物の合計濃度をいう。一例として、本明細書の例２では、体積１．１ｍＬのトリメチルアンモニウムベンズアルデヒド前駆体３．３ｍｇを用いる（３．０ｍｇ／ｍＬ又は３０００μｇ／ｍＬ）。７７ＧＢｑの［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドは約０．０７２μｇに等しい。したがって、化学的には、［18Ｆ］−フッ化物に消費される前駆体は比較的少量であり、本発明の方法でなければ、式（ＩＩ）の不純物レベルは大幅に増大してしまう。１５０μｇ／ｍＬ未満というレベルは、不純物の９０％以上、好ましくは９５％以上を除去しておくことが必要とされる。好ましくは、式（ＩＩ）の誘導体の濃度は１００μｇ／ｍＬ未満、さらに好ましくは４５μｇ／ｍＬ未満である。定量化はＨＰＬＣ−ＭＳによって、既知不純物の標準試料に基づく較正曲線を参照してなされる。また、定量化に役立てるため標準試料の吸光係数も求めた。Ｘ2が19Ｆのときは、使用した18Ｆ放射性同位体に存在する19Ｆ担体に相当する。かかる種は式（ＩＩ）の非放射性不純物の一因になる。
【００２３】
「含む」という用語は、本願全体を通してその通常の意味を有していて、組成物が標記の成分を有していなければならないが、明示していないその他の化合物又は化学種が存在していてもよいことを意味する。この用語は、組成物が標記の成分を有していて他の化合物又は化学種が存在しないことを意味する「から本質的になる」ことを好ましい部分集合として包含する。
【００２４】
式（Ｉ）の造影剤は、放射性フッ素化生体ターゲティング部分（ＢＴＭ）を含む。「造影剤」という用語は、哺乳類の身体のイメージングに適した化合物を意味する。好ましくは、哺乳類は、インタクトな哺乳類の生体であり、さらに好ましくはヒトである。好ましくは、造影剤は、哺乳類の身体に最小限の侵襲的方法で（つまり医学的専門技術の下で実施したときに哺乳類被験体に対して実質的な健康上のリスクを伴わずに）投与できる。かかる最小限の侵襲的な投与は、好ましくは、被験体の末梢静脈への静脈内投与であり、局所又は全身麻酔を必要としない。
【００２５】
本明細書で用いる「インビボイメージング」という用語は、哺乳類被験体の内部構造の全部又は一部の画像を非侵襲的に生成する技術をいう。本発明の好ましいイメージング技術は陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）である。
【００２６】
「生体ターゲティング部分」（ＢＴＭ）という用語は、投与後に、インビボで哺乳類の身体の特定の部位に選択的に取り込まれるか又は局在化する化合物を意味する。かかる部位は、例えば、特定の病態に関係していることもあるし、臓器又は代謝過程がいかに機能しているかの指標となることもある。
【００２７】
「アミノ酸」という用語は、Ｌ−又はＤ−アミノ酸、アミノ酸類似体（例えば、ナフチルアラニン）或いはアミノ酸模倣体を意味し、これらは天然のもの又は純粋に合成由来のものであってよく、光学的に純粋なもの（即ち、単一の鏡像異性体）、したがってキラルなものであるか、或いは鏡像異性体の混合物であってよい。本明細書中では、アミノ酸に関する通常の三文字略語又は一文字略語を用いる。好ましくは、本発明のアミノ酸は光学的に純粋なものである。
【００２８】
「糖」という用語は、単糖、二糖又は三糖を意味する。好適な糖には、グルコース、ガラクトース、マルトース、マンノース及びラクトースがある。任意には、アミノ酸への容易なカップリングを可能にするように糖を官能化することができる。即ち、例えばアミノ酸のグルコサミン誘導体は、ペプチド結合を介して他のアミノ酸に結合させることができる。アスパラギンのグルコサミン誘導体（ＮｏｖａＢｉｏｃｈｅｍ社から市販）はその一例である。
【００２９】
【化９】
0006055417.tif 000010
「ポリエチレングリコールポリマー」又は「ＰＥＧ」という用語は、例えば“Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ”，１４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，７５６８に記載されているような通常の意味を有し、一般式Ｈ（ＯＣＨ2ＣＨ2）nＯＨ（ｎは４以上の整数である。）の液体又は固体ポリマーである。本発明のポリエチレングリコールポリマーは線状でも枝分れでもよいが、好ましくは線状である。ポリマーは好ましくは非デンドリマーである。好ましいＰＥＧ含有リンカー基は、式Ｂｉｏ１又はＢｉｏ２の単分散ＰＥＧ様構造のオリゴマー化で得られる単位を含む。
【００３０】
【化１０】
0006055417.tif 000011
式Ｂｉｏ１（式中、ｐは１〜１０の整数である。）の１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸。或いは、式Ｂｉｏ２のプロピオン酸誘導体に基づくＰＥＧ様構造も使用できる。
【００３１】
【化１１】
0006055417.tif 000012
式中、ｐは式Ｂｉｏ１について定義した通りであり、ｑは３〜１５の整数である。式Ｂｉｏ２において、ｐは好ましくは１又は２であり、ｑは好ましくは５〜１２である。
【００３２】
式（Ｉ）及び（ＩＩ）では、Ｃ＝Ｎ結合での異性は、Ｅ−又はＺ−ジアステレオマーが存在し得ることを意味する。１種類の異性体のみを示したが、式（Ｉ）及び（ＩＩ）は、かかる異性体の混合物、並びにかかるジアステレオマーの１種類が濃縮された混合物、並びに純粋なジアステレオマーを包含する。
【００３３】
好ましい実施形態
第１の態様の式（Ｉ）では、Ｘ1は、好ましくは18Ｆ又は−Ｏ（ＣＨ2）q18Ｆ（ｑは２又は３である。）であり、さらに好ましくは18Ｆ又は−Ｏ（ＣＨ2）318Ｆ、最も好ましくは18Ｆである。
【００３４】
第１の態様の式（Ｉ）及び（ＩＩ）では、Ｘ1及びＸ2は、好ましくはオルト又はパラ位のいずれかに位置し、さらに好ましくはパラ位に位置する。
【００３５】
式（Ｉ）及び（ＩＩ）では、Ｙは好ましくは−Ｏ−である。さらに好ましくは、Ｙは−Ｏ−であり、Ｘ1及びＸ2は好ましくはパラ位に位置する。かかる組合せの各々において、好ましいＢＴＭ基は以下で説明する通りである。
【００３６】
ＢＴＭは合成品でも天然品であってもよいが、好ましくは合成品である。「合成品」という用語はその通常の意味を有し、つまり、天然の起源（例えば、哺乳類の身体）から単離したものではなく、人工のものをいう。かかる化合物は、その製造及び不純物プロファイルを十分に制御できるという利点を有する。したがって、天然由来のモノクローナル抗体及びそのフラグメントは、本明細書で用いる「合成品」という用語の範疇には属さない。ＢＴＭは、好ましくは非タンパク系のもので、タンパク質を含まない。
【００３７】
ＢＴＭの分子量は、好ましくは３００００ダルトン以下である。さらに好ましくは、分子量は２００〜２００００ダルトンの範囲内にあり、最も好ましくは３００〜１８０００ダルトンの範囲内にあり、４００〜１６０００ダルトンが特に好ましい。ＢＴＭが非ペプチドである場合、ＢＴＭの分子量は好ましくは３０００ダルトン以下、さらに好ましくは２００〜２５００ダルトン、最も好ましくは３００〜２０００ダルトンであり、４００〜１５００ダルトンが特に好ましい。
【００３８】
ＢＴＭの分子量は、好ましくは１００００ダルトン以下である。さらに好ましくは、分子量は２００〜９０００ダルトンの範囲内にあり、最も好ましくは３００〜８０００ダルトンの範囲内にあり、４００〜６０００ダルトンが特に好ましい。ＢＴＭが非ペプチド系のものである場合、ＢＴＭの分子量は好ましくは３０００ダルトン以下、さらに好ましくは２００〜２５００ダルトン、最も好ましくは３００〜２０００ダルトンであり、４００〜１５００ダルトンが特に好ましい。
【００３９】
生体ターゲティング部分は、好ましくは、３〜８０残基のペプチド、ペプチド類似体、ペプトイド又はペプチド模倣体（これらは線状ペプチド、環状ペプチド又はこれらの組合せであってもよい。）、単一のアミノ酸、酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト（部分アゴニストを含。む）又は酵素阻害剤、レセプター結合化合物（レセプター基質、アンタゴニスト、アゴニスト又は基質を含む。）、オリゴヌクレオチド、或いはオリゴＤＮＡフラグメント又はオリゴＲＮＡフラグメントからなる。
【００４０】
「ペプチド」という用語は、ペプチド結合（つまり、あるアミノ酸のアミンと別のアミノ酸のカルボキシルとを連結するアミド結合）で連結した２以上のアミノ酸（以下で定義）を含む化合物を意味する。「ペプチド模倣体」又は「模倣体」という用語は、ペプチド又はタンパク質の生物活性を模倣するが、化学的性状がペプチドでない（つまり、ペプチド結合（アミノ酸間のアミド結合）を含まない）生物活性化合物をいう。ここでは、ペプチド模倣体という用語は広義に用いられ、性状が完全にはペプチドでない分子（例えば、プソイドペプチド、セミペプチド及びペプトイド）を包含する。「ペプチド類似体」という用語は、以下に記載する１種以上のアミノ酸類似体を含むペプチドをいう。Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃｓ，  Ｍ．  Ｇｏｏｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ  Ｖｏｌ  Ｅ２２ｃ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｔｈｉｅｍｅ  （２００４）参照。
【００４１】
ＢＴＭが酵素基質、酵素アンタゴニスト、酵素アゴニスト、酵素阻害剤又はレセプター結合化合物である場合、好ましくは非ペプチドであり、さらに好ましくは合成品である。「非ペプチド」という用語は、ペプチド結合（つまり２つのアミノ酸残基間のアミド結合）を含まない化合物を意味する。好適な酵素の基質、アンタゴニスト、アゴニスト又は阻害剤には、グルコース及びグルコース類似体（例えば、フルオロデオキシグルコース）、脂肪酸、或いはエラスターゼ、アンギオテンシンＩＩ又はメタロプロテイナーゼ阻害剤がある。好ましい非ペプチド系アンギオテンシンＩＩアンタゴニストは、ロサルタンである。好適な合成レセプター結合化合物には、エストラジオール、エストロゲン、プロゲスチン、プロゲステロン及び他のステロイドホルモン、ドーパミンＤ−１又はＤ−２レセプター用リガンド又はトロパンのようなドーパミン輸送体用リガンド、並びにセロトニンレセプター用リガンドがある。
【００４２】
ＢＴＭは、最も好ましくは３〜１００残基ペプチド又はペプチド類似体である。ＢＴＭがペプチドである場合、好ましくは４〜３０残基ペプチドであり、最も好ましくは５〜２８残基ペプチドである。ＢＴＭがペプチドである場合、好ましいかかるペプチドには以下のものがある。
−ソマトスタチン、オクトレオチド及び類似体。
−ＳＴレセプターに結合するペプチド（ここで、ＳＴとは大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）その他の微生物によって産生される耐熱性毒素をいう。）。
−ボンベシン。
−血管作用性小腸ペプチド。
−ニューロテンシン。
−ラミニンフラグメント、例えば、ＹＩＧＳＲ、ＰＤＳＧＲ、ＩＫＶＡＶ、ＬＲＥ及びＫＣＱＡＧＴＦＡＬＲＧＤＰＱＧ。
−白血球集積部位をターゲティングするためのＮ−ホルミル走化性ペプチド。
−血小板第４因子（ＰＦ４）及びそのフラグメント。
−ＲＧＤ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）含有ペプチド。例えば、血管新生をターゲティングし得るもの。［Ｒ．Ｐａｓｑｕａｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １９９７  Ｊｕｎ；１５（６）：５４２−６］、［Ｅ．  Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ，  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  １９９７  Ｍａｙ；５１（５）：１４１３−７］。
−α2−抗プラスミン、フィブロネクチン、β−カゼイン、フィブリノーゲン又はトロンボスポンジンのペプチドフラグメント。α2−抗プラスミン、フィブロネクチン、β−カゼイン、フィブリノーゲン又はトロンボスポンジンのアミノ酸配列は、以下の参考文献に見出すことができる。α2−抗プラスミン前駆体［Ｍ．Ｔｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ，１０２，１０３３（１９８７）］、β−カゼイン［Ｌ．Ｈａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｇｅｎｅ，１３９，１９３（１９９４）］、フィブロネクチン［Ａ．Ｇｕｔｍａｎ  ｅｔ  ａｌ，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，２０７，１４５（１９９６）］、トロンボスポンジン１前駆体［Ｖ．Ｄｉｘｉｔ  ｅｔ  ａｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８３，５４４９（１９８６）］、Ｒ．Ｆ．Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５３，１９５（１９８４）。
−アンギオテンシンＩＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（Ｅ．Ｃ．Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，１９７９，Ｖｏｌ  ２２，９，１０３８−１０４４）及び［Ｓａｒ，Ｉｌｅ］アンギオテンシンＩＩ：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ（Ｒ．Ｋ．Ｔｕｒｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７２，１７７，１２０３）のようなアンギオテンシンの基質又は阻害剤であるペプチド。
−アンギオテンシンＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ。
【００４３】
ＢＴＭがペプチドである場合、ペプチドの一端又は両端（好ましくは両端）に代謝阻害基（ＭIG）が結合している。このように両方のペプチド末端を保護することは、インビボイメージング用途で重要である。さもないと、急速な代謝が起こって、ＢＴＭペプチドに対する選択的結合親和性が失われてしまうと予想されるからである。「代謝阻害基（ＭIG）」という用語は、アミノ末端又はカルボキシ末端でのＢＴＭペプチドの酵素（特にカルボキシペプチダーゼのようなペプチダーゼ）代謝を阻害又は抑制する生体適合性基を意味する。かかる基はインビボ用途で特に重要であり、当業者に周知であり、好適には、ペプチドアミン末端に関してはＮ−アシル化基−ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＲG（式中、アシル基−（Ｃ＝Ｏ）ＲGは、Ｃ1-6アルキル、Ｃ3-10アリール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックから選択されるＲGを有する。）から選択される。好適なＰＥＧ基については、リンカー基（Ｌ）に関して上述した。好ましいＰＥＧ基は、式Ｂｉｏ１又はＢｉｏ２（上記）のバイオモディファイアーである。好ましいアミノ末端ＭIG基はアセチル、ベンジルオキシカルボニル又はトリフルオロアセチルであり、最も好ましくはアセチルである。
【００４４】
ペプチドカルボキシル末端に適した代謝阻害基には、カルボキサミド、ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ベンジルエステル、シクロヘキシルエステル、アミノアルコール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックがある。ＢＴＭペプチドのカルボキシ末端アミノ酸残基に適したＭIG基は、アミノ酸残基の末端アミンをＣ1-4アルキル基（好ましくはメチル基）でＮ−アルキル化したものである。好ましいＭIG基はカルボキサミド又はＰＥＧであり、最も好ましい基はカルボキサミドである。
【００４５】
好ましいＢＴＭペプチドは、ＲＧＤペプチドである。さらに好ましいかかるＲＧＤペプチドは、以下のフラグメントを含む。
【００４６】
【化１２】
0006055417.tif 000013
最も好ましいかかるＲＧＤペプチドは、ＢＴＭが次の式（ＢＴＭ１）のペプチドである場合のペプチドである
【００４７】
【化１３】
0006055417.tif 000014
式ＢＴＭ１において、Ｘ7は好ましくはＰＥＧ１であり、「ａ」は好ましくは１である。
【００４８】
式（Ｉ）の好ましい造影剤は式（ＩＡ）の［18Ｆ］−フルシクラチドである。
【００４９】
【化１４】
0006055417.tif 000015
第１の態様の組成物では、Ｘ1が18Ｆであり、Ｘ2が好ましくは−Ｎ+（ＣＨ3）3、−Ｎ（ＣＨ3）2又は−ＯＨである場合、さらに好ましくは式（ＩＩ）の複数の誘導体は、Ｘ2がこれらの基の３つすべてに等しくなるように存在する。これについては、第３の態様（後述）でさらに詳しく説明する。
【００５０】
好ましくは、造影剤組成物は、無菌形態で、即ち第２の態様（後述）に記載の通り、哺乳類への投与に適した形態で提供される。
【００５１】
第１の態様の造影剤組成物は、第４の態様（後述）に記載の通り得ることができる。
【００５２】
第２の態様では、本発明は、第１の態様の造影剤組成物を、生体適合性担体と共に含む、哺乳類への投与に適した形態の放射性医薬組成物を提供する。
【００５３】
第２の態様の造影剤組成物の好ましい態様は、第１の態様（上述）に定義した通りである。
【００５４】
「哺乳類への投与に適した形態」という記載は、無菌でパイロジェンフリーであり、毒性又は有害作用を生じる化合物を含まず、生体適合性ｐＨ（ｐＨ４．０〜１０．５）で製剤化される組成物を意味する。かかる組成物は、インビボで塞栓を生じる危険性のある粒状物質を含んでおらず、しかも体液（例えば、血液）と接触しても沈殿を生じないように製剤化される。かかる組成物は、生物学的に適合性の賦形剤のみを含み、好ましくは等張性である。
【００５５】
「生体適合性担体」とは、造影剤を懸濁又は好ましくは溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるようなものである。生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、発熱物質を含まない注射用の滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性となるように調整するのに都合がよい）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿陽イオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。好ましくは、生体適合性担体は発熱物質を含まない注射用水又は等張食塩水又はリン酸緩衝液である。
【００５６】
造影剤及び生体適合性担体は各々、無菌健全性及び／又は放射能安全性、さらに適宜ヘッドスペースの不活性ガス（例えば、窒素又はアルゴン）を維持できるとともに、注射器又はカニューレでの溶液の添加及び吸引も行うことのできる密封容器からなる適当なバイアル又は容器に入れた状態で供給される。かかる容器として好ましいのは、セプタムシールバイアルであり、気密蓋をオーバーシール（通常はアルミニウム製）と共にクリンプオンする。蓋は、無菌健全性を維持したまま皮下注射針で１回又は複数回穿刺するのに適したもの（例えば、クリンプオン式セプタムシール蓋）である。かかる容器は、所望に応じて（例えばヘッドスペースガスの変更又は溶液の脱気のため）真空に蓋が耐えるとともに、酸素や水蒸気のような外部雰囲気ガスを侵入させずに減圧のような圧力変化に耐えるという追加の利点がある。
【００５７】
好ましい多用量用容器は、患者の複数回分の用量を収容した単一バルクバイアル（例えば容積１０〜５０ｃｍ3のもの）からなり、臨床症状に応じて製剤の有効期間中様々な時間間隔で１回分の用量を臨床グレードの注射器に吸引することができる。プレフィルド型注射器は患者の１回分の用量つまり「単位用量」を収容するように設計され、そのため好ましくは使い捨てその他臨床用に適した注射器である。本発明の医薬組成物は、好ましくは１人の患者用に適した用量を有し、上述のような適当な注射器又は容器に入れて供給される。
【００５８】
医薬組成物は、抗菌保存剤、ｐＨ調整剤、充填剤、放射線防護剤、可溶化剤又はモル浸透圧濃度調整剤のような追加の添加剤を適宜含んでいてもよい。「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生じる含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元反応のような分解反応を抑制する化合物を意味する。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸（つまり４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（つまり２，５−ジヒドロキシ安息香酸）及びそれらの生体適合性陽イオンとの塩から選択される。「生体適合性陽イオン」（Ｂc）という用語は、イオン化した負荷電基と塩を形成する正荷電の対イオンを意味する。この場合、正荷電対イオンも無毒性であり、したがって哺乳類の身体（特に人体）への投与に適している。好適な生体適合性陽イオンの例としては、アルカリ金属であるナトリウム及びカリウム、アルカリ土類金属であるカルシウム及びマグネシウム、並びにアンモニウムイオンが挙げられる。好ましい生体適合性陽イオンはナトリウム及びカリウムであり、最も好ましくはナトリウムである。
【００５９】
放射性医薬組成物が、式（ＩＡ）のフルシクラチドを含む場合、組成物は好ましくは放射線防護剤を含む。好ましくは、放射線防護剤は４−アミノ安息香酸ナトリウム（Ｎａ−ｐＡＢＡ）である。使用されるＮａ−ｐＡＢＡの好ましい濃度は１〜３ｍｇ／ｍＬ、好ましくは１．５〜２．５ｍｇ／ｍＬ、最も好ましくは約２．０ｍｇ／ｍＬである。
【００６０】
「可溶化剤」という用語は、組成物に存在する添加剤であって、溶媒中での造影剤の溶解度を高める添加剤を意味する。かかる溶媒として好ましいのは水性媒質であり、したがって可溶化剤は好ましくは水中での溶解度を高める。かかる可溶化剤として好適なものとして、Ｃ1-4アルコール、グリセリン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、プロピレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノオレエート、ポリソルベート、ポリ（オキシエチレン）ポリ（オキシプロピレン）ポリ（オキシエチレン）ブロック共重合体（Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ（商標））、シクロデキストリン（例えば、α−、β−又はγ−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン或いはヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン）及びレシチンがある。
【００６１】
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、使用する用量に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。本発明の抗菌保存剤の主な役割は、医薬組成物におけるこのような微生物の増殖を阻止することである。ただし、抗菌保存剤は、投与に先立って前記組成物の製造に使用されるキットの１種以上の成分における有害微生物の増殖の防止にも適宜使用できる。好適な抗菌保存剤には、パラベン類（即ち、メチル、エチル、プロピル又はブチルパラベン或いはこれらの混合物）、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールがある。好ましい抗菌保存剤はパラベン類である。
【００６２】
「ｐＨ調整剤」という用語は、組成物のｐＨがヒト又は哺乳類への投与のための許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に確実に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物混合物を意味する。好適なかかるｐＨ調整剤には、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ［即ち、トリス（ヒドロキシルメチル）アミノメタン］のような薬学的に許容される緩衝剤、及び炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物のような薬学的に許容される塩基がある。組成物をキットの形態で使用する場合には、キットのユーザーが多段操作の一部としてｐＨを調整できるように、ｐＨ調整剤を適宜別個のバイアル又は容器に入れて供給してもよい。
【００６３】
「充填剤」という用語は、製造及び凍結乾燥時における材料の取扱いを容易にすることができる薬学的に許容される増量剤を意味する。好適な充填剤には、塩化ナトリウムのような無機塩、及びスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースのような水溶性の糖又は糖アルコールがある。
【００６４】
第４の態様の放射性医薬組成物は、無菌製造条件下で（即ち、クリーンルーム内で）製造して所望の無菌で非発熱性の生成物を得ることができる。基本構成要素、特に関連する試薬並びにイメージング剤に接触する装置部品（例えば、バイアル）は無菌であるのが好ましい。かかる構成要素及び試薬は、無菌濾過或いは（例えば、γ線照射、オートクレーブ処理、乾熱又は（例えば、エチレンオキシドによる。）化学処理を用いる。）終末滅菌をはじめとする、当技術分野で公知の方法によって滅菌できる。一部の構成要素を予め滅菌しておけば、最小限の数の操作を実施すれば済むので好ましい。しかし、予防策として、医薬組成物の製造における最終段階として少なくとも無菌濾過段階を含めることが好ましい。
【００６５】
本発明の放射性医薬組成物は、第４の態様（後述）に記載の通り調製することができる。
【００６６】
第３の態様では、本発明は式（Ａ）の放射性アルデヒドを、式（Ｂ）の１種以上の非放射性アルデヒドと共に含む組成物であって、組成物中に存在する式（Ｂ）の誘導体の合計濃度が１５０μｇ／ｍＬ未満である組成物を提供する。
【００６７】
【化１５】
0006055417.tif 000016
式中、Ｘ1及びＸ2は第１の態様で定義した通りである。
【００６８】
第３の態様のＸ1及びＸ2の好ましい態様は、第１の態様（上述）に定義した通りである。好ましくは、存在する式（Ｂ）の誘導体の濃度は１００μｇ／ｍＬ未満、さらに好ましくは４５μｇ／ｍＬ未満である。
【００６９】
第３の態様の組成物では、Ｘ1は、好ましくは18Ｆであり、Ｘ2は−Ｎ+（ＣＨ3）3、−Ｎ（ＣＨ3）2若しくは−ＯＨ又はその組合せである。
【００７０】
したがって、本発明者らは、［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒド（［18Ｆ］−ＦＢＡ）を従来の放射合成でＴＭＡＢから調製すると、存在する化学的不純物の９５％以上がＴＭＡＢ、ＤＭＡＢ及びＨＢＡに由来することを発見した。
【００７１】
【化１６】
0006055417.tif 000017
さらに、式（ＩＩ）の不純物は、Ｘ2＝−ＳＣＨ3又は−ＯＣ6Ｈ4ＣＨＯである場合に生じ得る。Ｘ2＝−ＳＣＨ3種は、ＤＭＳＯが溶媒として使用される場合に生じ得る。これらの不純物は、ＬＣ−ＭＳ研究によって同定されている。
【００７２】
これらの不純物は、すべてアルデヒドの性質なので、対象となる官能化ＢＴＭを有する［18Ｆ］−ＦＢＡと競合する。このことは、以下の３つの重要な作用を有する。
（ｉ）放射性収率が低下する。
（ｉｉ）全体的な化学的純度が低下する。
（ｉｉｉ）それから生じる造影剤組成物は、複数のＢＴＭで官能化された不純物［式（ＩＩ）の］を含有する場合があり、この不純物は、インビボの所望の生物学的部位を18Ｆ標識造影剤と競合しかねない。
【００７３】
したがって、問題（ｉｉｉ）は、インビボで造影剤の有効性に対して影響を及ぼし得る。さらに、式（Ｉ）及び（ＩＩ）のＢＴＭコンジュゲートは、類似の構造を有するので、これらのコンジュゲートは、形成されると分離することが難しく、組成物中に存在することがある。放射性同位体18Ｆは１０９分の半減期を有し、結果的に、組成物の精製に経過する時間は、問題（ｉ）にも影響を与える。したがって、第３の態様の改良組成物は、第１の態様の造影剤組成物を達成するための重要な寄与因子である。
【００７４】
第３の態様の組成物は、好ましくは溶液として提供される。かかる溶液に適した溶媒は、エタノール、エタノール水溶液、アセトニトリル又はアセトニトリル水溶液である。好ましい溶媒は、エタノール又はエタノール水溶液、さらに好ましくはエタノールである。
【００７５】
第３の態様の組成物は、以下の通り得ることができる。18Ｆ−アルデヒドは、水酸化アンモニウム溶液で希釈され、次にＭＣＸミックスモード固相抽出（ＳＰＥ）カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓから市販、パート番号１８６００３５１６）で精製される。ミックスモードカートリッジは、カチオン交換及び逆相（Ｃ１８）クロマトグラフィーの特徴の両方を有する。粗混合物のアルカリ条件によって、ＨＢＡ、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ  ２２２及び炭酸カリウムと、任意の未反応の［18Ｆ］−フッ化物イオンは、確実にイオン化形態になる。結果的に、それらはカートリッジに結合せず、したがって洗浄して廃棄される。その後、［18Ｆ］−アルデヒドは、ＭＣＸカートリッジからエタノールを用いて溶出される。ＴＭＡＢなどのカチオン種は、カートリッジによって保持され、ＦＢＡが有機溶媒で溶出されるときには溶出されない。
【００７６】
第４の態様では、本発明は、生体ターゲティング分子を放射性標識する方法であって、
（ｉ）アミノオキシ又はヒドラジン基で官能化された生体ターゲティング部分を用意する段階と、
（ｉｉ）段階（ｉ）の官能化生体ターゲティング部分と第３の態様の放射性アルデヒド組成物との反応によって、式（Ａ）の放射性アルデヒドを前記アミノオキシ又はヒドラジン基と縮合させて、放射性標識生体ターゲティング分子を得る段階と
を含む方法を提供する。
【００７７】
第４の態様の生体ターゲティング部分（ＢＴＭ）及びその好ましい実施形態は、第１の態様（上述）に記載した通りである。
【００７８】
「アミノオキシ基」という用語は、ＢＴＭにアミノオキシ官能基が共有結合で結合したものを意味する。かかる基は式−Ｏ−ＮＨ2、好ましくは−ＣＨ2Ｏ−ＮＨ2を有するものであって、アミノオキシ基のアミンは、アルデヒドと縮合反応してオキシムエーテルを生成する際にＬｙｓアミン基よりも反応性が高いという利点を有する。
【００７９】
「ヒドラジン基」は式−ＮＨ−ＮＨ２の官能基である。
【００８０】
第４の態様の方法では、官能化生体ターゲティング部分は好ましくは以下の式（ＩＶ）のものであり、放射性標識生成物は以下の式（Ｉ）のものである。
【００８１】
【化１７】
0006055417.tif 000018
式中、ＢＴＭ、Ｌ1、Ｙ及びＸ1並びにそれらの好ましい態様は、第１の態様（上述）で記載した通りである。
【００８２】
第４の態様の方法は、好ましくは自動合成装置を用いて実施される。「自動合成装置」という用語は、Ｓａｔｙａｍｕｒｔｈｙ  ｅｔ  ａｌ［Ｃｌｉｎ．Ｐｏｓｉｔｒ．Ｉｍａｇ．，２（５），２３３−２５３（１９９９）］に記載されているような単位操作の原理に基づく自動化モジュールを意味する。「単位操作」という用語は、複雑なプロセスが一連の簡単な操作又は反応に集約されることを意味し、広範な材料に適用できる。かかる自動合成装置は、本発明の方法、特に放射性医薬品生成物が所望される場合の本発明の方法に好ましい。これらは、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社、ＣＴＩ社．、Ｉｏｎ  Ｂｅａｍ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ社（ベルギー国、Ｂ−１３４８ルヴァン・ラ・ヌーブ、シュマン・デュ・シクロトロン３）、Ｒａｙｔｅｓｔ社（ドイツ）及びＢｉｏｓｃａｎ社（米国）を始めとする様々な供給業者から市販されている［Ｓａｔｙａｍｕｒｔｈｙ他、上掲］。
【００８３】
市販の自動合成装置は、放射性医薬品の製造の結果として生じる液体放射性廃棄物用の適当な容器も提供する。自動合成装置は、適切に設計された放射能作業セル内で使用するように設計されているので、通例、放射線遮蔽が設けられていない。放射能作業セルは、潜在的な放射線量からオペレーターを保護するのに適した放射線遮蔽をもたらすとともに、化学薬品蒸気及び／又は放射性蒸気を除去するための換気装置を与える。自動合成装置は、好ましくはカセットを備える。「カセット」という用語は、合成装置の可動部材の機械的運動がカセットの外側から（つまり外部から）カセットの動作を制御するように、自動合成装置（上述）に着脱自在かつ交換可能に装着できるように設計された装置を意味する。好適なカセットは直線状に並んだ弁の列を含み、その各々は倒立セプタムシールバイアルの針穿刺又は気密連結継手によって試薬又はバイアルを装着することができるポートに結合している。各弁は、自動合成装置の対応する可動アームとかみ合うはめ込み型継手を有している。カセットを自動合成装置に装着した場合、アームの外部回転が弁の開閉を制御する。自動合成装置の追加の可動部材は、注射器のプランジャー先端をつかみ、注射器外筒を上昇又は降下させるように設計されている。
【００８４】
カセットは融通性の高いものであって、通例は試薬を装着することができる複数の位置、及び試薬のシリンジバイアル又はクロマトグラフィー用カートリッジ（例えば、固相抽出（ＳＰＥ））を装着するために適した複数のポートを有している。カセットは常に反応容器を含んでいる。かかる反応容器は好ましくは０．５〜１０ｍＬ、さらに好ましくは０．５〜５ｍＬ、最も好ましくは０．５〜４ｍＬの容積を有しており、カセットの様々なポートから試薬又は溶媒を移送できるように、カセットの３以上のポートが反応容器に連結されるように構成されている。好ましくは、カセットは直線状に並んだ１５〜４０個の弁、最も好ましくは２０〜３０個の弁を有しており、２５個の弁が特に好ましい。カセットの弁は好ましくは各々同一であり、最も好ましくは三方弁である。本発明のカセットは放射性医薬品の製造に適するように設計され、医薬グレードの材料であって理想的には放射線分解にも耐える材料で製造される。
【００８５】
本発明の好ましい自動合成装置は、放射性ヨウ素化された放射性医薬品の所定バッチの製造を実施するのに必要なすべての試薬、反応容器及び機器を含むディスポーザブルつまり使い捨てカセットを備える。かかるカセットは、単にカセットを交換するだけで、自動合成装置が相互汚染のリスクを最小限に抑えながら各種の放射性ヨウ素標識放射性医薬品を製造できる融通性を有することを意味する。カセットアプローチには、装置構成の単純化とそれに伴うオペレーターエラーのリスクの低減、ＧＭＰ（Good Manufacturing Practice）コンプライアンスの向上、マルチトレーサー能力、生産作業間の迅速な変更、カセット及び試薬の作業前自動診断検査、実施すべき合成と化学試薬との自動バーコードクロスチェック、試薬のトレーサビリティ、使い捨てであり、そのため相互汚染のリスクがなく、改竄及び誤用を防ぐことができるという利点がある。
【００８６】
本発明のこの態様は、第２の態様の放射性医薬組成物を調製するために自動合成装置を使用することが含む。
【００８７】
第４の態様の方法は、好ましくは、第２の態様の医薬組成物が得られるように、無菌的に実施される。本発明の放射性医薬組成物は、以下の様々な方法で調製することができる。
（ｉ）18Ｆ−放射性標識段階がクリーンルーム環境内で実施される、無菌製造技術、
（ｉｉ）18Ｆ−放射性標識が無菌製造を使用せずに実施され、次に最終段階で滅菌される、最終滅菌［例えば、ガンマ照射、オートクレーブ、乾熱又は化学的処理（例えば、エチレンオキシドを用いる。）によって］、
（ｉｉｉ）適切な前駆体及び任意選択の添加剤を含む無菌の非放射性キット製剤を、18Ｆの適切な供給源と反応させる、キットによる方法、
（ｉｖ）18Ｆ−放射性標識段階が自動合成装置を用いて実施される、無菌製造技術。
【００８８】
方法（ｉｖ）が好ましい。
【００８９】
アミノオキシ官能化ペプチドは、Ｐｏｅｔｈｋｏ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，  ４５，  ８９２−９０２  （２００４）］，  Ｓｃｈｉｒｒｍａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，  １８，  ２０８５−２０８９  （２００７）］、Ｓｏｌｂａｋｋｅｎ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ，  １６，  ６１９０−６１９３  （２００６）］又はＧｌａｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．  Ｃｈｅｍ．，  １９，  ９５１−９５７  （２００８）］の方法で調製することができる。アミノオキシ基は、適宜、２つの段階でコンジュゲートすることができる。まず、対応するＮ保護アミノオキシカルボン酸又はＮ保護アミノオキシ活性化エステルを、ペプチドにコンジュゲートする。次に、中間体であるＮ保護アミノオキシ官能化ペプチドを脱保護して、所望の生成物を得る（先に引用したＳｏｌｂａｋｋｅｎ及びＧｌａｓｅｒの論文を参照）。Ｂｏｃ−ＮＨ−Ｏ−ＣＨ2（Ｃ＝Ｏ）ＯＨ及びＥｅｉ−Ｎ−Ｏ−ＣＨ2（Ｃ＝Ｏ）ＯＨなどのＮ保護アミノオキシカルボン酸は、例えばＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ及びＩＲＩＳから市販されている。
【００９０】
ヒドラジン官能基をポリペプチドにコンジュゲートし、その後、放射性標識アルデヒドと縮合させて、ヒドラジンに結合したコンジュゲートの形成方法は、Ｙ．Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ［印刷前に電子出版されたＮｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，  （２０１１）  “Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ［１８Ｆ］ｅｘｅｎｄｉｎ  （９−３９）．．．”、並びにＭｅｓｚａｒｏｓ  ｅｔ  ａｌ［Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ，  ３６３（６），  １０５９−１０６９  （２０１０）］に記載されている。
【００９１】
「保護」とは保護基の使用をいう。「保護基」という用語は、望ましくない化学反応を阻止又は抑制するが、分子の残部を変質させない程度に温和な条件下で問題の官能基から脱離させ得るのに十分な反応性を有するように設計された基を意味する。脱保護後には所望の生成物が得られる。アミン保護基は当業者に周知であり、好適にはＢｏｃ（Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである。）、Ｅｅｉ（Ｅｅｉはエトキシエチリデンである。）、Ｆｍｏｃ（Ｆｍｏｃはフルオレニルメトキシカルボニルである。）、トリフルオロアセチル、アリルオキシカルボニル、Ｄｄｅ［即ち、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）エチル］及びＮｐｙｓ（即ち、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル）から適宜に選択される。さらに他の保護基の使用については、‘Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ’，Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐｅｔｅｒ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９１）に記載されている。好ましいアミン保護基は、Ｂｏｃ及びＥｅｉであり、最も好ましくはＥｅｉである。
【００９２】
式18Ｆ（ＣＨ2）2Ｏ［ＣＨ2ＣＨ2Ｏ］ｑＣＨ2ＣＨＯ（ｑは３である。）の18Ｆ標識脂肪族アルデヒドは、Ｇｌａｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，  １９（４），  ９５１−９５７  （２００８）］の方法で得ることができる。［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドは、Ｇｌａｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，  ５２，  ３２７−３３０  （２００９）］の方法で得ることができる。［18Ｆ18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドの前駆体、即ちＭｅ３Ｎ+−Ｃ6Ｈ4−ＣＨＯ．ＣＦ３ＳＯ３−は、Ｈａｋａ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，  ２７，  ８２３−８３３  （１９８９）］の方法で得られる。
【００９３】
他のペプチドは、Ｐ．  Ｌｌｏｙｄ−Ｗｉｌｌｉａｍｓ，  Ｆ．  Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ  ａｎｄ  Ｅ．  Ｇｉｒａｌｄ；  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９７に記載の通り、固相ペプチド合成によって得ることができる。
【００９４】
第５の態様では、本発明は、ヒト又は動物の身体のイメージング方法であって、第２の態様の放射性医薬組成物が分布した身体の少なくとも一部のＰＥＴ画像を生成する段階を含む、方法を提供する。
【００９５】
第５の態様の放射性医薬組成物及び該組成物中の造影剤の好ましい態様は、それぞれ第２及び第１の態様（上記を参照）に記載した通りである。
【００９６】
第５の態様の方法は、好ましくは、身体の一部が、インテグリンαｖβ３レセプターの異常発現が関与している、特に血管新生が関与している病状である場合に実施される。かかる病状には、関節リウマチ、乾癬、再狭窄、網膜症及び腫瘍増殖が含まれる。第５の態様の好ましいかかる病状は、腫瘍増殖である。インテグリンαｖβ３発現の陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）造影は、Ｂｅｅｒ  ｅｔ  ａｌ［Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ，  １，  ４８−５７  （２０１１）］によって記載されている。
【００９７】
第５の態様のイメージング方法は、薬剤によるヒト又は動物の身体の治療の効果をモニターするために、適宜反復して実施することができ、前記イメージングが薬剤による治療の前後又は適宜途中に実施される。状態が末期になる前に確実に悪性増殖を制御するために、抗血管新生癌の療法の効率を初期にモニターすることが、特に重要である。かかる療法のモニタリング造影は、Ｂａｔｔｌｅ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，  ５２（３），  ４２４−４３０  （２０１１）］及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ［Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，  ５０（１），  １１６−１２２  （２００９）  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ，  １，  １４９−１５３  （２０１１）］に記載されている。
【００９８】
好ましくは、放射性医薬組成物が哺乳類の身体に予め投与されている第５の態様の方法が実施される。「予め投与されている」とは、臨床医が関与して、例えば造影剤を静脈内注射として患者に投与する段階が、造影前に既に実施されていることを意味する。
【００９９】
第６の態様では、本発明は、第５の態様のイメージング方法を含むヒト又は動物の身体の診断方法を提供する。
【０１００】
第６の態様の造影剤、組成物及びイメージング方法の好ましい態様は、第１、第２及び第５の態様（上述）に記載した通りである。
【実施例】
【０１０１】
本発明を、以下に詳説する非限定的な例によって例示する。例１は、本発明の前駆体１の合成について記載する。例２は、［18Ｆ］−ＦＢＡの合成について記載し、例３は、本発明の組成物を得るための［18Ｆ］−ＦＢＡの精製について記載する。例４は、本発明の精製［18Ｆ］−ＦＢＡ組成物を用いた本発明の化合物１の合成について記載する。例５は、不純物の分析について記載し、本発明の方法を用いた不純物種の除去について実証する。
【０１０２】
略語
従来の１文字又は３文字のアミノ酸の略語を使用する。
Ａｃ：アセチル
ＡＣＮ：アセトニトリル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＢ：４−（ジメチルアミノ）ベンズアルデヒド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＥＯＳ：合成の終了
ＦＢＡ：４−フルオロベンズアルデヒド
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメトキシカルボニル
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＡ：４−ヒドロキシベンズアルデヒド
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＭＣＸ：ミックスモードのカチオン交換カートリッジ
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
ＮＭＰ：１−メチル−２−ピロリジノン
ＰＢＳ：リン酸緩衝食塩水
ＰｙＢＯＰ：ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
ＲＡＣ：放射性濃度
ＲＣＰ：放射化学的純度
ＲＴ：室温
ＳＰＥ：固相抽出
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＦＰ：テトラフルオロフェニル
ＴＭＡＢ：４−（トリメチルアンモニウム）ベンズアルデヒド
ＴＲ：保持時間
【０１０３】
【表１】
0006055417.tif 000019
例１：前駆体１の合成
ペプチド１は標準ペプチド合成を用いて合成した。
【０１０４】
（ａ）１，１７−ジアジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン
乾燥ヘキサエチレングリコール（２５ｇ、８８ｍｍｏｌ）及びメタンスルホニルクロライド（２２．３ｇ、１９５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（１２５ｍＬ）溶液を、アルゴン下で維持し、氷／水浴で０℃に冷却した。トリエチルアミン（１９．７ｇ、１９５ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を４５分間滴下した。１時間後、冷却浴を除去し、反応をさらに４時間撹拌した。次いで水（５５ｍＬ）を混合物に添加した後、炭酸水素ナトリウム（５．３ｇ、ｐＨ８まで）及びナトリウムアジド（１２．７ｇ、１９５ｍｍｏｌ）を添加した。ＴＨＦを蒸留によって除去し、水溶液を２４時間還流させた（二層が形成した）。混合物を冷却し、エーテル（１００ｍＬ）を添加し、水相を塩化ナトリウムで飽和させた。各相を分離し、水相をエーテル（４×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を一緒にして、ブライン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を濾過し、蒸発させて、黄色油２６ｇを得た（８９％）。生成物はそれ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１０５】
（ｂ）１７−アジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカンアミン
激しく撹拌した１，１７−ジアジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカン（２５ｇ、７５ｍｍｏｌ）の５％ＨＣｌ（２００ｍＬ）懸濁液に、トリフェニルホスフィン（１９．２ｇ、７３ｍｍｏｌ）のエーテル（１５０ｍＬ）溶液を３時間かけて室温で添加した。反応混合物をさらに２４時間撹拌した。各相を分離し、水相をジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で抽出した。水相を氷／水浴中で冷却し、固体水酸化カリウムの添加によってｐＨを１２に調節した。水相を濃縮し、生成物をジクロロメタン（１５０ｍＬ）に取り込んだ。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して黄色油２２ｇ（９５％）を得た。生成物を、エレクトロスプレー質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）で同定した（ＭＨ＋計算値：３０７．１９、実測値３０７．４）。粗油はそれ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１０６】
（ｃ）２３−アジド−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸
１７−アジド−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカンアミン（１５ｇ、５０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）溶液に、ジグリコール無水物（Ａｃｒｏｓ、６．４ｇ、５５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩撹拌した。反応をＥＳＩ−ＭＳ分析でモニターし、追加の試薬を添加して、反応を完了させた。溶液を濃縮して黄色残渣を得、これを水（２５０ｍＬ）に溶解した。生成物を、ジクロロメタンで一晩続けて抽出することによって、水相から単離した。溶媒の乾燥及び蒸発によって、収量１８ｇ（８５％）を得た。生成物を、ＥＳＩ−ＭＳ分析で特性決定した（ＭＨ＋計算値：４２３．２０、実測値４２３．４）。生成物はそれ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１０７】
（ｄ）２３−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸
２３−アジド−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸（９．０ｇ、２１ｍｍｏｌ）を水（５０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２（ｇ）−Ｐｄ／Ｃ（１０％）を用いて還元した。ＥＳＩ−ＭＳ分析で所望の生成物に完全に添加したことが判明するまで、反応を実施した（ＭＨ＋計算値：３９７．２、実測値３９７．６）。粗生成物はそれ以上精製せずに次の段階で使用した。
【０１０８】
（ｅ）（Ｂｏｃ−アミノオキシ）アセチル−ＰＥＧ（６）−ジグリコール酸
ジシクロヘキシカルボジイミド（５１５ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）のジオキサン（２．５ｍＬ）溶液を、（Ｂｏｃ−アミノオキシ）酢酸（４７７ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（２８７ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）のジオキサン（２．５ｍＬ）溶液に滴下した。反応をＲＴで１時間撹拌し、濾過した。濾液を、２３−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５，１８，２１−ヘキサオキサトリコサン酸（１．０ｇ、２．５ｍｍｏｌ）及びＮＭＭ（２７８μｌ、２．５０ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）溶液の入った反応器に移した。混合物をＲＴで３０分間撹拌した。ＥＳＩ−ＭＳ分析によって、所望の生成物に完全に変換されたことが判明した（ＭＨ＋計算値：５７０．２８、実測値５７０．６）。粗生成物を、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）、２５０×２１．２０ｍｍ、検出：２１４ｎｍ、勾配：６０分で０〜５０％Ｂ、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、流速：１０ｍＬ／分）によって精製して、純粋な生成物５００ｍｇ（３８％）を得た。生成物をＨＰＬＣで分析した（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）、５０×２．００ｍｍ、検出：２１４ｎｍ、勾配：１０分で０〜５０％Ｂ、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、流速：０．７５ｍＬ／分、Ｒｔ＝５．５２分）。さらにＮＭＲ分析による確認を行った。
【０１０９】
（ｆ）ペプチド１への（Ｂｏｃ−アミノオキシ）アセチル−ＰＥＧ（６）−ジグリコール酸の結合
（Ｂｏｃ−アミノオキシ）アセチル−ＰＥＧ（６）−ジグリコール酸（０．１５ｍｍｏｌ、８５ｍｇ）及びＰｙＡＯＰ（０．１３ｍｍｏｌ、６８ｍｇ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解した。ＮＭＭ（０．２０ｍｍｏｌ、２０μＬ）を添加し、混合物を１０分間撹拌した。ペプチド１（０．１００ｍｍｏｌ、１２６ｍｇ）及びＮＭＭ（０．２０ｍｍｏｌ、２０μＬ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液を添加し、反応混合物を２５分間撹拌した。追加のＮＭＭ（０．２０ｍｍｏｌ、２０μＬ）を添加し、混合物をさらに１５分間撹拌した。ＤＭＦを真空中で蒸発させ、生成物を１０％アセトニトリル−水に取り込み、分取ＨＰＬＣで精製して（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ５μ  Ｃ１８（２）、２５０×２１．２０ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、勾配：４０分で５〜５０％Ｂ、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＴＦＡ、流速：１０ｍＬ／分）、半純粋な生成物１００ｍｇを得た。第２の精製段階で、ＴＦＡをＨＣＯＯＨ（勾配：０〜３０％Ｂ、それ以外は先と同じ条件）によって置き換えると、８９ｍｇ（５０％）が得られた。生成物をＨＰＬＣで分析した（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  ３μ  Ｃ１８（２）、５０×２ｍｍ、検出：ＵＶ２１４ｎｍ、勾配：１０分で０〜３０％Ｂ、Ａ＝Ｈ２Ｏ／０．１％ＨＣＯＯＨ及びＢ＝アセトニトリル／０．１％ＨＣＯＯＨ、流速：０．３ｍＬ／分、Ｒｔ：１０．２１分）。生成物の追加の特性決定をＥＳＩ−ＭＳを用いて実施した（ＭＨ２２＋計算値：９０５．４、実測値：９０６．０）。
【０１１０】
（ｇ）脱保護
脱保護を、５％水を含有するＴＦＡをペプチド１０ｍｇに添加することによって実施した。
【０１１１】
例２：18Ｆ−ベンズアルデヒド（18Ｆ−ＦＢＡ）の放射合成
銀ターゲットをもつＧＥＭＳ  ＰＥＴｔｒａｃｅサイクロトロンを用いた［18Ｏ］（ｐ，ｎ）［18Ｆ］核反応によって［18Ｆ］−フッ化物を生成した。全ターゲット体積１．５〜３．５ｍＬを使用した。放射性フッ素を、Ｗａｔｅｒｓ  ＱＭＡカートリッジ（炭酸塩でプレコンディショニングした）に捕捉し、フッ化物を、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ2.2.2（４ｍｇ、１０．７μＭ）及び炭酸カリウム（０．５６ｍｇ、４．１μＭ）の水（８０μＬ）及びアセトニトリル（３２０μＬ）溶液で溶出した。窒素を用いて、溶液をＱＭＡカートリッジから押し出して反応器に入れた。［18Ｆ］−フッ化物を、窒素の定常流及び真空下に１２０℃で９分間乾燥させた。ＤＭＳＯ（１．１ｍＬ）中トリメチルアンモニウムベンズアルデヒドトリフレート［Ｈａｋａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｏｍｐ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．，  ２７，  ８２３−８３３  （１９８９）］（３．３ｍｇ、１０．５μＭ）を、乾燥［18Ｆ］−フッ化物に添加し、混合物を１０５℃で７分間加熱して４−［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドを生成させた。
【０１１２】
例３：18Ｆ−フルオロベンズアルデヒド（18Ｆ−ＦＢＡ）の精製
例２の粗生成物である標識混合物を、水酸化アンモニウム溶液で希釈し、ＭＣＸ＋ＳＰＥカートリッジ（ＦＡＳＴｌａｂシーケンスの一部として水でプレコンディショニングした）にロードした。カートリッジを水洗し、窒素ガスで乾燥させてから、エタノール（１．８ｍＬ）で４−［18Ｆ］−フルオロベンズアルデヒドの溶出を行って反応器に戻した。総体積２．２ｍＬのエタノールを溶出に使用したが、最初の部分（０．４ｍＬ）は、［18Ｆ］−ＦＢＡを含んでいなかったので廃棄した。４〜７％（崩壊について補正）の［18Ｆ］放射活性がカートリッジ上に捕捉されたままであった。
【０１１３】
例４：［18Ｆ］−フルシクラチド（化合物１）の調製
前駆体１（５ｍｇ）との［18Ｆ］−ＦＢＡの結合は、アニリン塩酸塩の存在下でエタノール（１．８ｍＬ）及び水（１．８ｍＬ）溶液中で実施した。反応混合物は６０℃で５分間維持した。
【０１１４】
例５：不純物の分析
ＳＰＥ精製前後のベンズアルデヒドタイプの不純物レベルを、表１に示す通り決定した（ＴＭＡＢトリフレート塩５２５０μｇに対して；ｍｏｌ．ｗｔ３１３）。
【０１１５】
【表２】
0006055417.tif 000020
したがって、ＳＰＥ法で不純物ベンズアルデヒドの９１％が除去された。
【配列表】
0006055417000001.app