(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
イヌハッカ属に属する植物のスプラウト又はイヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物。
【請求項２】
イヌハッカ属に属する植物のスプラウト又はイヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物を含有することを特徴とする抗酸化剤。
【請求項３】
イヌハッカ属に属する植物のスプラウト又はイヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な抗酸化剤及びその皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
環境中や生体内で過剰に生じた活性酸素は、生体分子、膜、組織の損傷及び生体傷害の原因となる。活性酸素種としては、スーパーオキサイド、ヒドロキシラジカル、過酸化水素、一重項酸素が挙げられ、その内スーパーオキサイドとヒドロキシラジカルがラジカル種であり、特にヒドロキシラジカルは極めて反応性が高いフリーラジカルとして知られている。これら活性酸素種が皮膚の様々な疾患、例えば、炎症、皮膚黒化、ＤＮＡ損傷、シミやシワなどの老化にも密接に関与していることが分かっている。従って、生体内において活性酸素の発生を抑制することは非常に重要なことであり、従来より生体内に発生した活性酸素を消去する作用の探索が広く行われてきた。
【０００３】
例えば、ＢＨＴ（ジブチルヒドロキシトルエン）やＢＨＡ（ブチルヒドロキシアニソール）等の化学的に合成された物質は、極めて高い抗酸化性を有することが知られている。しかし、近年では、これらの化合物は、人体への副作用や変異原性のおそれ、発癌性の疑いが持たれており、食品や化粧品，医薬品等では、その使用を控える傾向にあり、何れも活性酸素消去剤としては実用的とは言い難かった。
【０００４】
一方、天然物から工業的に得ることの出来る抗酸化剤としては、脂溶性のトコフェロール（ビタミンＥ）、水溶性のアスコルビン酸（ビタミンＣ）が挙げられ、食品や化粧品，医薬品等に使用されている。又、最近では、充分な薬効と安全性を求めて、生薬抽出物から活性酸素消去作用を有する物質を得ようとする試みも数多く為されている。しかし、生薬抽出物では、安全性に問題がないものの、活性酸素消去作用の点から言えば未だ十分なものは得られていなかった。
【０００５】
ところで、昨今では植物成体そのものを利用するだけでなく、本葉展開前の幼植物体いわゆるスプラウトの活用が試みられている。これらスプラウトには、成熟体とは異なる様々な効果が見出されることがある。例えば、ブロッコリースプラウト中に含まれるスルフォラファンに皮膚がんを抑制する効果があること（特許文献１）やケールスプラウトにはメラニン合成抑制効果があること（特許文献２）が知られている。
【０００６】
イヌハッカ属に代表されるキャットニップの成熟体の抽出物は、活性酸素消去作用を有することが知られている（特許文献３）。しかしながら、イヌハッカ属に属する植物のスプラウトおよびイヌハッカ属に属する植物のスプラウトの抽出物にキャットニップの種子や成熟体より優れた顕著な抗酸化作用を有することは知られていなかった。更に、イヌハッカ属に属する植物のスプラウトおよびイヌハッカ属に属する植物のスプラウトの抽出物を医薬品、食品、化粧料或いは皮膚外用剤等に含有させて、様々な疾患の予防や治療、老化の防止、改善に用いる試みは従来行われていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００８−５３９２６１号公報
【特許文献２】特開２０１０−１３４１４号公報
【特許文献３】特開平９−１１８６３０号公報
【０００８】
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、天然由来で効果の高い抗酸化剤及びこれを含有した皮膚外用剤の提供を課題としている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは上述の課題解決のために鋭意研究した結果、化粧品分野において新規の成分であるイヌハッカ属に属する植物のスプラウト又はイヌハッカ属に属する植物のスプラウトの抽出物を用いることで上記課題を解決した。
【発明の効果】
【００１１】
本願発明によれば、高い抗酸化効果が期待でき、食品や化粧品、医薬品等に使用出来る。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】抗酸化効果結果を示す図
【発明を実施するための形態】
【００１３】
イヌハッカ属に属する植物は、キャットニップ（Ｎｅｐｅｔａ  ｃａｔａｒｉａ），  ネペタ・ゴヴァニアーナ（Ｎｅｐｅｔａ  ｇｏｖａｎｉａｎａ），  ネペタ・グランディフローラ（Ｎｅｐｅｔａ  ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ），  ネペータ・ネルヴォーサ（Ｎｅｐｅｔａ  ｎｅｒｖｏｓａ），  ネペタ・ファイロクラミス（Ｎｅｐｅｔａ  ｐｈｙｌｌｏｃｈｌａｍｙｓ），  ネペタ・ラセモーサ（Ｎｅｐｅｔａ  ｒａｃｅｍｏｓａ），  ネペタ・シビリカ（Ｎｅｐｅｔａ  ｓｉｂｉｒｉｃａ），  ミソガワソウ（ネペタ・サブセッシリス）（Ｎｅｐｅｔａ  ｓｕｂｓｅｓｓｉｌｉｓ），  ネペタ・ムジニー（Ｎｅｐｅｔａ  ｍｕｓｓｉｎｉｉ） などが挙げられるが、これに限定されるものではない。
【００１４】
一般にスプラウトとは、種子発芽後の本葉展開前の幼植物体の新芽を指すが、本発明で用いるイヌハッカ属に属する植物のスプラウトは、種子発芽後の本葉展開前の幼植物体を指し、根、種子、茎、新芽を含む植物体全体を意味する。本願で用いるイヌハッカ属に属する植物のスプラウトは本葉展開前の幼植物体であれば特に大きさに限定はされない。栽培条件にもよるが、本葉展開直前で茎と新芽を合わせた長さが約２ｃｍ〜１５ｃｍ程度に成長する。
【００１５】
本発明に用いるイヌハッカ属に属する植物のスプラウトの生育方法は限定されない。水耕栽培でも、土壌栽培でも良いし、市販のキットを使用しても良く、公知の方法を用いれば良い。生育環境の管理の面から、水耕栽培が望ましい。水耕栽培であれば、流動法と静置法があるが、いずれの方法でも良い。菌汚染を防止する観点から、流動法が好ましい。コスト面を考慮すれば静置法で十分である。土壌栽培であれば、例えば、用土等に種を直播きする方法、用土等の上に不織布やカット綿、網等を敷いてから種を播く方法いずれの方法でも良い。スプラウトの回収の面から、不織布等を敷いてから種を播く方法が好ましい。
【００１６】
栄養条件は、スプラウトが得られれば特に限定されない。水耕栽培の場合は、水だけでも良く、市販の無機肥料を加えても良い。栽培期間が長期になる場合には、腐敗を防止する観点から適宜防腐剤を加えることが好ましい。土壌栽培の場合は、植物栽培に適した土であれば良く、特に肥料を加える必要はないが、市販の肥料を加えても良い。スプラウト用の市販の用土を使用することも出来る。
【００１７】
光条件についても特に限定されない。暗室のみで育て、緑化させない方法、茎が伸びるまで暗室で育て、その後たっぷり光をあてて緑化させる方法、暗室で発芽後、緑化させる方法、発芽だけさせる方法があるが、種子発芽まで暗室で育て、その後光をあてて育成させることが生育期間の面から好ましい。
【００１８】
本発明に用いるイヌハッカ属に属する植物のスプラウトの栽培温度は、植物の芽が育つ温度であれば限定されないが、好ましくは２０〜３５℃、より好ましくは２５〜３０℃である。
【００１９】
本発明に用いるイヌハッカ属に属する植物のスプラウトは、生であっても、乾燥されたもの、或いはこれらを細断、粉砕したものであってもよい。乾燥は、天日乾燥、加熱乾燥、真空乾燥、凍結乾燥であってもよい。好ましくは、加熱乾燥したイヌハッカ属に属する植物のスプラウトである。また、イヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物は、生のまま又は乾燥したものをそのまま、或いはそれらを細断、粉砕等した上で抽出用に用いることが出来る。
【００２０】
イヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物の調製方法は特に限定されないが、例えば種々の適当な有機溶媒を用いて、低温下から加温下で抽出される。抽出溶媒としては、例えば、水；メチルアルコール、エチルアルコール等の低級１価アルコール；グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン；酢酸エチルなどのアルキルエステル；ベンゼン、ヘキサン等の炭化水素；ジエチルエーテル等のエーテル類；ジクロルメタン、クロロホルム等のハロゲン化アルカン等の１種または２種以上を用いることができる。就中、水、エチルアルコール、１，３−ブチレングリコールの１種または２種以上の混合溶媒が特に好適である。
【００２１】
イヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物の抽出方法は特に限定されないが、例えば乾燥したものであれば質量比で１〜１０００倍量、特に１０〜１００倍量の溶媒を用い、０℃以上、特に２０℃〜４０℃で１時間以上、特に３〜７日間行うのが好ましい。また、６０〜１００℃で１時間、加熱抽出しても良い。
【００２２】
以上のような条件で得られるイヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物は、抽出された溶液のまま用いても良いが、さらに必要により、濾過等の処理をして、濃縮、粉末化したものを適宜使い分けて用いることができる。
【００２３】
本発明を皮膚外用剤として用いる場合におけるイヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物の配合量は、有効量存在すれば良い。一般的には皮膚外用剤の組成物に対して蒸発乾燥分に換算して０．０００１〜１００質量％が好ましく、特に０．０１〜１０．０質量％の範囲が最適である。
【００２４】
本発明の皮膚外用剤は、本発明の効果を損なわない範囲で、たとえば、油脂、ロウ類、炭化水素油、エステル油、高級アルコール、シリコーン油、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、保湿剤、界面活性剤、水溶性高分子、増粘剤、粉体、各種有効成分、皮膚保護剤、老化防止剤、植物抽出物、防腐剤、消炎剤、ｐＨ調整剤、金属イオン封鎖剤、酸化防止剤などを配合することができる。
【００２５】
本発明の皮膚外用剤の剤型は、たとえば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、おしろい、エッセンス、パック、ゲル、ヘアトニック、エアゾール等、化粧料、皮膚外用剤、食品および医薬品等の本発明の配合したものであればいずれでもよく、剤型は特に問わない。
【実施例】
【００２６】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。また、特記しない限り配合量は質量％で示す。
【００２７】
＜被検物質の調製＞
（１）イヌハッカ属のキャットニップ、シカギク属のカモミール（Ｍａｔｒｉｃａｒｉａ  ｒｅｃｕｔｉｔａ）の種子を室温の水に１ｈ浸漬後、水耕栽培用の専用の容器に播種し、静置法で２８℃で１４日間かけて発芽させた。発芽後本葉が出る前まで栽培し、スプラウトを得た（種子から新芽先端までの長さが概ね５〜１０ｃｍ程度）。尚、水耕栽培には水のみを使用し、特段の栄養分は与えないで実験した。又、発芽からスプラウト採取までは暗黒下で栽培した。
（２）キャットニップ、カモミールのスプラウト抽出物は、キャットニップ、カモミールのスプラウト（根、種、茎、新芽を含む）の乾燥物を用いて調製した。それぞれの植物原体１５ｍｇに５０（Ｗ／Ｖ）％エタノール水溶液を１．５ｇ加えて、３時間６０℃で加熱抽出した。抽出後、ろ過をし、キャットニップ、カモミールのスプラウト抽出物を得た。
（３）アスコルビン酸、ＢＨＴ（ジブチルヒドロキシトルエン）はＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）で溶解させ、１ｍＭの濃度に調製した。Ｔｒｏｌｏｘ（６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−カルボン酸）はＤＭＳＯで溶解させ、１０ｍＭの濃度に調製した。
【００２８】
＜ＤＰＰＨラジカル捕捉試験＞
既知の抗酸化物質と植物抽出物のラジカル捕捉能を確認するため、ＤＰＰＨラジカル捕捉試験を用いて、ラジカル捕捉能の評価を行なった。
（１）ＭＥＳ（２−モルホリノエタンスルホン酸）５．５２ｇをｄＨ２Ｏ１００ｍＬで溶解し、４００ｍＭ  ＭＥＳを調製した。
（２）ＤＰＰＨ（１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）０．０１５７ｇをＥｔＯＨ  １００  ｍＬ  で溶解し、０．４ｍＭ  ＤＰＰＨを調製した。
（３）ＤＰＰＨ：ＭＥＳ：ｄＨ２Ｏ＝４：１：３の割合で混合し、これをＤＰＰＨ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎとして調製した。
（４）９６穴マイクロプレートに上述の方法で調製した植物抽出物２０μＬを分注し、ＤＰＰＨ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎを１８０μＬ添加し、プレートミキサーで３０分振とうさせた。
（５）その後、マイクロプレートリーダーで５４０ｎｍの吸光度を測定した。測定後、下記のラジカル捕捉率の計算式を用いて算出した。結果は図１に示す。尚、植物抽出物は植物名のみ表記している。
【００２９】
ラジカル捕捉率の計算式
（１）１０ｍＭ  Ｔｒｏｌｏｘを調製し、それをＤＭＳＯで段階希釈し、標準試薬として用いた。
（２）上記の段階希釈したＴｒｏｌｏｘの吸光度Ａｂ５４０の値と濃度から検量線（Ｙ＝ａＸ＋ｂ、Ｙ＝吸光度、Ｘ＝濃度）を作成した。
（３）その検量線Ｙ＝ａＸ＋ｂから、試料のＴｒｏｌｏｘ当量として濃度を算出した。
【００３０】
（式１）Ｔｒｏｌｏｘ当量＝（測定試料Ａｂ５４０−ｂ）／ａ（ｍＭ）
【００３１】
既知の抗酸化物質である１０ｍＭのアスコルビン酸、１０ｍＭのＢＨＴでは、それぞれＴｒｏｌｏｘ当量が１５．４ｍＭ、１１．１ｍＭで高いラジカル捕捉能が確認された。キャットニップの種子と成熟体は、それぞれＴｒｏｌｏｘ当量が２．１ｍＭ、１．５ｍＭであった。シカギク属の一つであるカモミールは、種子とスプラウトと比較して、成熟体のとき高いラジカル捕捉能を示し、Ｔｒｏｌｏｘ当量が６．０  ｍＭであった。一方で、イヌハッカ属の一つであるキャットニップは、種子と成熟体と比較して、スプラウトのとき高いラジカル捕捉能を示し、Ｔｒｏｌｏｘ当量が１０．０  ｍＭで、既知の抗酸化物質と同程度の顕著に高いラジカル捕捉能を確認した。
【００３２】
以下、本発明に係る皮膚外用剤の処方例を示す。なお、含有量は質量％である。製法は、常法による。
【００３３】
＜処方例１＞化粧水
１，３−ブチレングリコール・・・１０．００
グリセリン・・・２．００
モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）・・・０．１５
エタノール・・・５．００
ネペタ・ゴヴァニアーナのスプラウトの抽出物（乾燥残分換算）・・・０．０８
防腐剤・・・適  量
精製水・・・残  部
合計・・・１００
【００３４】
＜処方例２＞乳液
ネペタ・グランディフローラのスプラウトの抽出物（乾燥残分換算）・・・０．０７
スクワラン・・・８．０
ワセリン・・・２．０
ミツロウ・・・０．５
ソルビタンセスキオレエート・・・０．８
ポリオキシエチレンオレイルエーテル（２０Ｅ．０．）・・・１．２
カルボキシビニルポリマー・・・０．２
プロピレングリコール・・・０．５
水酸化カリウム・・・０．１
エタノール・・・７．０
防腐剤・酸化防止剤・・・適  量
香料・・・適  量
精製水・・・残  部
合計・・・１００
【００３５】
＜処方例３＞クリーム
ネペタ・ファイロクラミスのスプラウトの抽出物（乾燥残分換算）・・・０．０９
ミツロウ・・・２．０
ステアリルアルコール・・・５．０
ステアリン酸・・・８．０
スクワラン・・・１０．０
自己乳化型グリセリルモノステアレート・・・３．０
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．０．）・・・１．０
プロピレングリコール・・・５．０
水酸化カリウム・・・０．３
防腐剤・酸化防止剤・・・適  量
香料・・・適  量
精製水・・・残  部
合計・・・１００
【００３６】
＜処方例４＞おしろい
流動パラフィン・・・２．０
ワセリン・・・１．０
リンゴ酸ジイソステアリル・・・１．０
ポリオキシブチレンポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリセリルエーテル（３Ｂ．Ｏ．）（８Ｅ．Ｏ．）（５Ｐ．Ｏ．）・・・０．２
ラウリルＰＥＧ−９ポリジメチルシロキシエチルジメチコン・・・０．５
ＰＥＧ−９  ポリジメチルシロキシエチルジメチコン・・・０．２
デカメチルシクロペンタシロキサン・・・４．０
メトキシケイヒ酸オクチル・・・２．６
ジエチルアミノヒドロキシベンゾイル安息香酸ヘキシル・・・１．０
セリサイト・・・２０．０
ラウリン酸亜鉛・・・２．０
窒化ホウ素・・・８．０
ネペタ・ムジニーのスプラウトの抽出物（乾燥残分換算）・・・０．０１
防腐剤・・・適  量
タルク・・・残  部
合計・・・１００
【００３７】
＜処方例５＞ドリンク剤
キャットニップのスプラウトの抽出物（乾燥残分換算）・・・１．０
β−グリチルレチン酸・・・０．１
香料・・・適  量
防腐剤・酸化防止剤・・・適  量
精製水・・・残  部
合計・・・１００
【００３８】
＜処方例６＞  錠剤    
キャットニップのスプラウトの乾燥粉砕物・・・０．５
でんぷん・・・９２．５
ショ糖脂肪酸エステル・・・７．５
合計・・・１００
【００３９】
上記処方例においても抗酸化効果が確認され、使用によりハリが感じられるという意見も得た。尚、上記処方例ではイヌハッカ属に属する植物のスプラウトについて５０（Ｗ／Ｖ）％エタノール水溶液抽出した場合の抽出物の結果を示したが、他抽出溶媒においても同様の傾向が確認された。
【要約】      （修正有）【課題】天然由来で効果の高い抗酸化剤及びこれを含有する皮膚外用剤の提供。【解決手段】イヌハッカ属に属する植物のスプラウト又はイヌハッカ属に属する植物のスプラウト抽出物。前記スプラウト又はその抽出物を含有する抗酸化剤。前記抗酸化剤を含有する皮膚外用剤。【選択図】図１【図１】
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