(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
コウジ酸およびハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液を有効成分とすることを特徴とするＡＧＥｓ産生抑制剤。
【請求項２】
製剤形態が透明系の外用剤であることを特徴とする請求項１記載のＡＧＥｓ産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はコウジ酸およびハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液を有効成分とすることを特徴とするＡＧＥｓ産生抑制剤に関するものである。そしてその製剤形態が透明系の外用剤であることを特徴とするものである。
【背景技術】
【０００２】
本出願人らが長年研究を続けてきたコウジ酸類は、美白効果や消炎効果など、種々の優れた特徴をもつ多機能性の素材として知られているところである（特許文献１乃至８）。
【０００３】
また、老化防止を目的としたものとしては、メイラード反応抑制剤としての機能特性を応用した化粧料も公知である（特許文献９）。メイラード反応は糖化またはグリケーションともいわれ、タンパク質と糖が非酵素的に反応することを意味しており、当該反応により生成する物質の総称としてはAGEs（アドバンスド・グリケーション・エンドプロダクツ）と呼ばれることが多い。
【０００４】
タンパク質の糖化は、いわゆる黄ぐすみや皮膚老化の原因のひとつとして考えられており、この反応を抑えAGEs産生を抑制することはこれら皮膚老化の予防・改善に有効であるとされ、特に黄ぐすみ対策は中高年の消費者にとって高い関心と予防上のニーズがある領域である。
【０００５】
タンパク質と糖の非酵素的反応を阻害する成分としては、アミノグアニジンが良く知られている。しかし、アミノグアニジンは効果の面では優れているが、安全性に問題があり実用化には至っていない。また、これまでの他の探索成分は作用が弱く、十分満足できるものではなかった。
【０００６】
先述のとおり、コウジ酸自体にもAGEs産生抑制作用はある程度は認められるもののその効果は実用的ではなく、十分な効果を期待すべく配合量を増やすと、製剤への着色や安全性の問題があるため、コウジ酸単独使用では十分なAGEs産生抑制作用を発揮させることは難しい。
【０００７】
一方、ハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)はマイカイカとも呼ばれ、老化防止等の機能性を応用した化粧料や安定剤として公知であるが、上記コウジ酸の欠点を改善すべく併用素材として配合された例はない（特許文献１０乃至１３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開昭５５−１５７５０９号公報
【特許文献２】特公昭５６−１８５６９号公報
【特許文献３】特公昭５８−２２１５１号公報
【特許文献４】特公昭５８−３４４４６号公報
【特許文献５】特公昭６０−１０００５号公報
【特許文献６】特公昭６１−１０４４７号公報
【特許文献７】特開昭６２−５９０９号公報
【特許文献８】特開平０４−１９８１１５号公報
【特許文献９】特許第３９８８８３８号公報
【特許文献１０】特許第３４８０９５３号公報
【特許文献１１】特許第３４１３２２０号公報
【特許文献１２】特開２００７−２６９６７２号公報
【特許文献１３】特許第４５９４５８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の課題は、コウジ酸を配合した実効性のあるＡＧＥｓ産生抑制剤を提供することにあり、その細目課題としては、第一にコウジ酸の吸収性を高める作用を有すること、第二にコウジ酸との併用によって実用的なＡＧＥｓ産生抑制効果がえられることおよび第三にコウジ酸の着色抑制効果があることである。
【００１０】
コウジ酸の経時的な着色を解決する手段は出願人らが種々開発し、多くの成功をおさめたが、これら３つの課題を同時に満たす素材は未だ見出されていない。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
出願人らはこれらの事情に鑑みて鋭意検討の結果、ハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)が課題解決の最適素材として配合しうることを見出し、本発明を完成した。
第一にハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液がコウジ酸の吸収性を相乗的に高め得たこと、第二にコウジ酸との併用によって実用的なＡＧＥｓ産生抑制効果（相乗効果）がえられたこと及び第三にコウジ酸の着色を抑制したことを見出した。特にこの第三の課題においては、製剤形態が透明系の外用剤でも安定に製剤設計が可能な水準の効果を奏することが判明した。
【００１２】
すなわち本発明は、前記３つの課題を解決するために提案されたものであり、ＡＧＥｓ産生抑制剤の有効成分として、コウジ酸及びハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液で構成されるものである。そして当該ＡＧＥｓ産生抑制剤は透明系の製剤形態でも製剤設計が可能なものである。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、コウジ酸およびハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液を有効成分とすることを特徴とするＡＧＥｓ産生抑制剤が提供される。また本発明によれば、コウジ酸およびハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液を有効成分とする透明系のＡＧＥｓ産生抑制外用剤が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明についてさらに説明する。
本発明において使用されるコウジ酸（５−オキシ−２−オキシメチル−γ−ピロン）としては、５−オキシ−２−オキシメチル−γ−ピロンの純品はもとより、コウジ酸生産能を有する公知の菌株を培養して得られるコウジ酸を主成分とする発酵液、該発酵液の濃縮液、および該発酵液からコウジ酸を抽出して結晶化したものなどが使用されるほか、味噌や酒粕等の食品素材やこれらの応用素材、抽出物等の利用においてコウジ酸を含有するものを包含する概念である。
【００１５】
ハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)とは、日本国内では主に北海道の海岸線に自生するバラ科バラ属の植物であり、太平洋側では茨城県、日本海側では島根県まで分布している。中国産は生薬としてマイカイカとも呼ばれている。
本発明で使用するハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液は、水とエタノールの混合溶液１００部に対してハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)を０．１部〜１０部添加し、沸点以下の温度で３０分〜７日間の範囲内で抽出して得られる。
【００１６】
本発明のＡＧＥｓ産生抑制剤は、コウジ酸およびハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液を溶解した混合原料そのものの使用でも良いが、当該混合原料の製剤への配合に関しては、効果の面から一定の配慮が必要である。
コウジ酸にはＡＧＥｓ産生抑制作用が認められるものの、単独使用では黄ぐすみの効果を期待するのに３．０％以上の高配合が必須である。
このため、本発明のようなハマナス抽出液との併用に大きな意味がある。すなわち、ハマナス抽出液の併用によってコウジ酸の経皮吸収が向上でき、かつ、ＡＧＥｓ産生抑制効果も向上できることからコウジ酸の配合量を低減できるからである。
【００１７】
具体的には、コウジ酸０．０１乃至３．００重量％、ハマナス抽出液０．００１乃至１０重量％の範囲で併用すると都合がよく、特にコウジ酸が０．１乃至１重量％に対してハマナス抽出液が０．１乃至５重量％であることが好ましい。
【００１８】
本発明の外用剤は、医薬品、医薬部外品および化粧品のカテゴリーとして許容しうる形態を含むものであり、その剤型としては、本発明の目的を損なわない範囲であれば特に制約されないが、特には透明系の製剤設計に利点を有するものである。具体的には例えば、水・エタノール系の溶液製剤、液状かどうかを問わずに本発明の原液を利用したゲル、エッセンス等の可溶化製剤およびエアゾール等の噴射剤混合製剤である。
【００１９】
作用機序の詳細は不明であるが、ハマナス抽出液の添加によってコウジ酸の着色が抑制される結果、経時的にも安定な澄明製剤を提供しうるものと思われる。
【００２０】
製剤設計時の配合基剤については、皮膚施用上許容し得る任意の液状及び固形状の原料を幅広く使用できる。その際、必要に応じて防腐剤、香料、安定剤、着色剤、紫外線吸収剤／散乱剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤など種々の汎用の添加剤を加えることができるのは当然である。
【００２１】
保湿剤としては、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、ジプロピレングリコール等の多価アルコール類、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、フィブロネクチン、セラミド類、ヘパリン類似様物質等を例示することができる。
【００２２】
防腐剤としては、例えば、安息香酸塩、サリチル酸塩、ソルビン酸塩、デヒドロ酢酸塩、パラオキシ安息香酸エステル、２，４，４−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテル、３，４，４’−トリクロロカルバニド、塩化ベンザルコニウム、ヒノキチオール、レゾルシン、エタノール等を例示することができる。
【００２３】
酸化防止剤としては、例えば、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピル、アスコルビン酸等を例示することができる。
【００２４】
紫外線吸収剤としては、例えば、４−メトキシベンゾフェノン、オクチルジメチルパラアミノベンゾエート、エチルヘキシルパラメトキシシンナメート、酸化チタン、カオリン、タルク等を例示することができる。
【００２５】
さらに、キレート剤としては、例えば、エチレンジアミン四酢酸塩、ピロリン酸塩、ヘキサメタリン酸塩、酒石酸、グルコン酸等を例示することができ、ｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウム等をそれぞれ例示することができる。
【００２６】
本発明の有効成分のほか、皮膚外用剤に通常用いられる他の機能性成分は、本発明の効果を損なわない範囲で任意に配合可能である。
具体的には、例えば、塩化リゾチーム、グリチルリチン、アラントインなどの消炎剤、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、マグノリグナン、エラグ酸、ルシノ−ルなどの美白剤、ビタミンＥニコチネート、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル、ショウキョウチンキ、トウガラシチンキなどの末梢血管拡張剤、カンフル、メントールなどの清涼剤、ヒノキチオール、塩化ベンザルコニウム、ウンデシレン酸などの抗菌剤、胎盤抽出液、肝臓抽出物、乳酸菌培養抽出物などの動物・植物・微生物由来の各種抽出物などを適宜添加して使用することができる。
【００２７】
また、ＡＧＥｓ産生抑制として例えば、アマ、アマドコロ、アロエ、オリーブ、カンアオイ、シナノキ、シモツケソウセンブリ、ドクダミ、ニワトコ、ハッカ、バラ、ヒマワリ、ムラサキセンブリ、ユキノシタ、ヨモギ、ワレモコウ等の植物抽出物などが例示できる。
【実施例】
【００２８】
次に、本発明のＡＧＥｓ産生抑制剤の実施例（製造例並びに効果の試験例及び処方例）を挙げるが、これらは本発明を何ら限定するものではない。
【００２９】
以下、本発明のハマナス(Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ)抽出液の製造例を示す。
＜製造例１＞
乾燥したハマナス（Ｒｏｓａ Ｒｕｇｏｓａ）の花５０ｇに水４ｋｇとエタノール１ｋｇを加え、４０℃で３時間加熱抽出しろ過してハマナス抽出液を得た。
【００３０】
＜製造例２＞
乾燥したハマナス（Ｒｏｓａ Ｒｕｇｏｓａ）の花５０ｇに水２．５ｋｇとエタノール２．５ｋｇを加え、室温で２４時間抽出しろ過してハマナス抽出液を得た。
【００３１】
＜製造例３＞
乾燥したハマナス（Ｒｏｓａ Ｒｕｇｏｓａ）の花５０ｇに水２．５ｋｇとエタノール２．５ｋｇを加え、５℃で７日間抽出しろ過してハマナス抽出液を得た。
【００３２】
＜試験例１＞  ＡＧＥｓ産生抑制作用
ａ）試験方法
リン酸緩衝液（100mM Na2HPO4・12H2O、pH7.4）に25mM D-グルコース、25mM
D-(-)-フルクトース、10mg/mL BSAになるように反応液を調製した。
試料（製造例１のハマナス抽出液、比較例として製造例１と同じ方法で抽出したユキノシタ、オリーブ抽出液）およびコントロールは精製水にて濃度を調製し、試験に使用した。ポジティブコントロールのアミノグアニジンは精製水にて最終濃度0.2mMとなるように溶解して使用し、試験の正確性を確認するための指標とした。
試験手順はまず、各濃度に調製した試料およびコントロールを、それぞれ試験管5本に添加した。次に反応液を3本に（n=3）、リン酸緩衝液を2本に（ブランク、n=2）添加した。添加後、良く混合を行い試験管に蓋をし、60℃に設定したヒートブロックにて一晩インキュベートした。インキュベート後、試験管を氷冷し、その後室温程度まで冷却し、分光蛍光光度計にて蛍光強度を測定した（波長；励起350nm・蛍光450nm）。AGEs産生抑制率は、下記式により求めた。
AGEs産生抑制率（％）＝
[１−(試料の蛍光強度−試料ブランクの蛍光強度/コントロールの蛍光強度        
−コントロールフ゛ランクの蛍光強度)]  ×１００                          
【００３３】
ｂ）試験結果
試験結果を表１に示した。コウジ酸とハマナス抽出液を併用することでAGEs産生抑制作用の相乗効果が認められた。  
【表１】
0005855492.tif 000002
【００３４】
＜試験例２＞  経皮吸収促進作用
ａ）試験方法
表２に記載した所定の濃度でコウジ酸の水溶液、植物エキスを調整し、次のin vitroの透過試験を行った。
フランツ型（クラウンガラス社製のＦＤＣ−４００）に、７週齢（体重２５ｇ）の雄性ヘアレスマウスから剥離した背部皮膚をセットした。前記試料１００ｍｌをドナー液、ｐＨ７．４リン酸緩衝液と生理食塩水を等量混合した液に防腐剤として硫酸カナマイシンを２０μｇ／ｍｌ添加した液１６ｍｌをレセプター液として、レセプター液に透過してくるコウジ酸またはコウジ酸誘導体の量を２４時間後にＨＰＬＣ法により定量した。各薬剤につき５回試験を行い、その平均値をデータとして示した。
【００３５】
ｂ）試験結果
試験結果を表２に示す。本発明のハマナス抽出液には、コウジ酸の吸収を促進する作用が認められた。
【表２】
0005855492.tif 000003
【００３６】
＜試験例３＞  着色抑制作用
ａ）試験方法
下記の化粧水基剤を使用し、表中に示した比率でコウジ酸及びハマナス抽出液を配合した製剤を調製した。比較例としては、ユキノシタおよびオリーブを製造例１に従って調製したものをハマナス抽出液に代えて使用した。これらを２オンスローソク瓶に分注後、アルミ箔で遮光し、４５℃恒温槽中に２ケ月間保存した。１ケ月後及び２ケ月後、日本電色（株）の色差計Ｚ−１００１ＤＰを使用して、△Ｅ（色差）を測定した。    
尚、△Ｅは、以下に示す式（１）により算出した。  
△Ｌ＝Ｌt−Ｌ0  △ａ＝ａt−ａ0  △ｂ＝ｂt−ｂ0 
但し、Ｌ0、ａ0、ｂ0：４５℃に保存する前のＬａｂの値  
Ｌt、ａt、ｂt：４５℃、１ケ月又は２ケ月後のＬａｂの値
△Ｅ＝（△Ｌ）２＋（△ａ）２＋（△ｂ）２
＜試験に使用する化粧水基剤＞
（重量％）
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（60E.0.）  ５．０
エタノール                                ５．０
カラギーナン                              ０．２
クインスシードエキス                      ２．０
エチルパラベン                            ０．１
クエン酸                                  ０．０５
クエン酸ナトリウム                        ０．１
１，３−ブチレングリコール                ４．０
エデト酸二ナトリウム                      ０．０１
精製水                                    適  量
上記の各成分を混合、均一に撹拌、溶解し試験用の化粧水基剤を得た。
【００３７】
ｂ）試験結果
試験結果を表３に示した。
すなわち、本発明は、コントロールに比べコウジ酸の製剤特性を損なうことなく有意にコウジ酸の経時的着色を抑制した（これらは△Ｅの値だけでなく、目視的にも着色抑制効果を明確に認識し得るものである。）
このように、本発明のハマナス抽出液には、コウジ酸の着色を経時的に抑制する作用が認められた。
【表３】
0005855492.tif 000004
【００３８】
以下に、本発明の処方例を示す。処方例中、「適量」とは、処方全体が１００重量％になる値を意味する。
【００３９】
＜処方例１＞  化粧水  
（重量％）
コウジ酸                                  ０．１
ハマナス抽出液（製造例１）                ０．５
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（60E.0.）  ８．０
エタノール                              １５．０
カラギーナン                              ０．０８
クインスシードエキス                      １．０
エチルパラベン                            ０．１
クエン酸                                  ０．１
クエン酸ナトリウム                        ０．３
グリセリン                                ２．０
トレハロース                              ０．５
エデト酸二ナトリウム                      ０．０１
精製水                                    適  量
上記の各成分を混合、均一に撹拌、溶解し化粧水を製造した。
【００４０】
＜処方例２＞  エッセンス
（重量％）
コウジ酸                                  ０．５
ハマナス抽出液（製造例２）                ２．０
１％カルボキシビニルポリマー溶液        １０．０
グリセリン                              ２０．０
ヒアルロン酸                              ０．５
コハク化ケフィラン水溶液                  １．０
ポリビニルアルコール（PVA
）              ０．５
カラギーナン                              ０．１
クインスシードエキス                      １．０
エタノール                                ２．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（60E.0.）  １．０
精製水                                    適  量
上記の各成分を混合、均一に撹拌、溶解しエッセンスを製造した。
【００４１】
＜処方例３＞  ゲル剤
（重量％）
Ａ  ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）            ２．５
ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）            １．０
カラギーナン                              １．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（100E.0.）  ３．０
メチルパラベン                            ０．０１
Ｂ  エタノール                              ３０．０
Ｃ  精製水                                    適  量
Ｄ  コウジ酸                                  ３．０
ハマナス抽出液（製造例３）                ５．０
エデト酸二ナトリウム                      ０．０１
オキシベンゾンスルホン酸ナトリウム        ０．７  
ＡをＢに加えて分散させ、Ｃを少しずつ加えて撹拌する。さらにＤを少しずつ添加して均一に混合、撹拌し、ゲル剤を製造した。
【００４２】
＜処方例４＞ エアゾール
Ａ  原液
コウジ酸                                  １．０
ハマナス抽出液（製造例１）                ０．１
ランブータン抽出液                        ０．５
プロピレングリコール                      ２．０
ジグリセリン                              １．５
エタノール・水混液（３０・７０）          適  量
Ｂ  
液化石油ガス（噴射剤）            原液Ａに対する重量比３０
Ａに属する成分を均一に混合溶解してエアゾール容器に入れ、常法によりＢを容器に加圧充填してエアゾールを製造した。
これら処方例1乃至４はいずれも、試験例１乃至３で確認されたと同様、本発明の目的を達成する効果を有していることが確認された。