(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡから、三水和物の形態で（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）を製造する方法であって、
（ａ）Ａのエチルエステルを還元して、（Ｓ）３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−ヒドロキシブタン−１−スルホン酸ネオペンチルＢを得るステップと、
（ｂ）塩基の存在下で、アルコールＢをメタンスルホン酸無水物又は塩化メタンスルホニルと反応させ、（Ｓ）３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（メチルスルホニルオキシ）ブタン−１−スルホン酸ネオペンチルＣを得るステップと、
（ｃ）メシル化アルコールＣをチオ酢酸カリウムと反応させ、（Ｓ）チオ酢酸２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブチルＤを得るステップと、
（ｄ）Ｄを二量体化させ、（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン−１−スルホン酸）ネオペンチルＥを得るステップと、
（ｅ）Ｅのスルホン酸エステル及びアミン基が脱保護され、（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）を得るステップと、
（ｆ）温度が１５℃以上２５℃以下であり、相対湿度が５０％以上であり、大気圧条件下において、上記ステップ（ｅ）で得られた化合物を静置して、三水和物の形態の（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）を得るステップと、
を含む方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、
ステップ（ａ）は、０℃〜２５℃の温度で、ＡをＮａＢＨ４／ＬｉＣｌ−ＴＨＦとエタノールとの混合物、及びＬｉＢＨ４−ＴＨＦから選ばれる還元剤−溶媒カップルと反応させることによって行われる方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法において、
ステップ（ａ）は、２０℃〜２５℃の温度で、ＡをＬｉＢＨ４−ＴＨＦと反応させることによって行われる方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１に記載の方法において、
ステップ（ｂ）は、−１０℃〜１０℃の温度で、塩基とするトリエチルアミンの存在下で、クロロホルム及びＭＴＢＥとトルエンとの混合物から選ばれる溶媒において行われる方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法において、
ステップ（ｂ）は、５℃〜１０℃の温度で、塩基とするトリエチルアミンの存在下で、ＭＴＢＥとトルエンとの３:２体積比での混合物において、Ｂを塩化メタンスルホニルと反応させることによって行われる方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法において、
ステップ（ｃ）は、エタノール及びアセトンから選ばれる溶媒において行われる方法。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法において、
ステップ（ｃ）は、１５℃〜２５℃の温度で、アセトンにおいて行われる方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法において、
ステップ（ｄ）は、１５℃〜２５℃の温度で、Ｄをエタノールにおいて水酸化ナトリウムと接触させ、得られた混合物をエタノールにおいてヨウ素と反応させることによって行われる方法。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法において、
ステップ（ｅ）は、ＴＦＡとアニソールとの混合物においてＥを撹拌することによって行われる方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法において、
ステップ（ｅ）は、ＴＦＡとアニソールとの５:１体積比での還流混合物においてＥを撹拌することによって行われる方法。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法において、
最終生成物の精製は、水中での再結晶によって行われる方法。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法において、
Ａは、Ｌ−ホモシスチンから、
（ａ−１）Ｌ−ホモシスチンをクロロギ酸ベンジルと反応させ、（２Ｓ，２Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン酸）Ｆを得るステップと、
（ｂ−１）Ｆとエタノールとの間でエステル化反応を行って、（２Ｓ，２Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン酸）ジエチルＧを得るステップと、
（ｃ−１）Ｇのジスルフィド結合を酸化的に開裂させ、（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（クロロスルホニル）ブタン酸エチルＨを得るステップと、
（ｄ−１）Ｈをネオペンチルアルコールと反応させ、（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡを得るステップと、
を含む方法で製造される方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法において、
ステップ（ａ−１）は、１５℃〜２５℃の温度で、水酸化ナトリウムの存在下で、ＴＨＦにおいて行われる方法。
【請求項１４】
請求項１２又は１３に記載の方法において、
ステップ（ｂ−１）は、４５℃〜５５℃の温度で、純エタノールにおいて、Ｆを塩化チオニルと反応させることによって行われる方法。
【請求項１５】
請求項１２〜１４のいずれか１項に記載の方法において、
ステップ（ｃ−１）は、５℃〜１０℃の温度で、エタノールにおいて、Ｇを塩素と反応させることによって行われる方法。
【請求項１６】
請求項１２〜１５のいずれか１項に記載の方法において、
ステップ（ｄ−１）は、１５℃〜２５℃の温度で、トリエチルアミンの存在下で、トルエンにおいて行われる方法。
【請求項１７】
以下のＸ線回折性質が本質的に示された結晶（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）三水和物。
0005921556.tif 000018
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡから５つのステップで（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）を調製する新たな方法に関する。（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）は、本発明において「化合物Ｉ」と呼ばれる。
【背景技術】
【０００２】
化合物Ｉは、選択的アミノペプチダーゼＡ（ＡＰＡ）阻害剤３−アミノ−４−メルカプトエタンスルホン酸（先行技術文献でＥＣ３３とも呼ばれる）の二量体であり、２つの３−アミノ−４−メルカプトエタンスルホン酸分子のチオール端の間でジスルフィド結合を形成することによって生成された。二量体化は、分子がプロドラッグとして血液脳関門を通過しやすいようにする。ＢｏｄｉｎｅａｕらのＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ２００８ ５１, １３１８−１３２５．における記載のように、化合物Ｉ（先行技術文献でＲＢ１５０とも呼ばれる）は有効な抗高血圧薬であることが証明されている。
【０００３】
化合物Ｉ及びその抗高血圧薬としての使用は、国際特許公開ＷＯ２００４／００７４４１に開示されている。化合物Ｉを合成するためにこの文献に示される方法の例は、Ｌ−ホモセリンから６つのステップで化合物Ｉの生成を可能にする。技術的仕様、特にこの方法に関与する当量数、溶媒及び／又は精製技術によって、その方法が効率よくかつ容易に工業規模に転換されることはできない。
【０００４】
有機合成における永久的な目的は、工業条件に転換可能な合成プロセスを作成することである。合成の異なるパラメータは、工業プロセスの要件を満たすように最適化される。まず、溶媒は、簡単に回収されるために、できるだけ揮発性物質を含まない。従って、例えばジクロロメタン、クロロホルム及び／又は四塩化炭素などの塩素系揮発性溶媒を回避することが好ましい。さらに、必要な試薬の当量数は限られることが好ましく、関与する温度は簡単に到達可能な範囲内に保たれ、且つ特別に有利な精製ステップを簡単に進めることが望ましい。最後に、反応混合物及び単離された生成物は熱的に安定であることが好ましい。
【０００５】
医薬品適正製造基準（ｃ−ＧＭＰ）は、ヒト又は動物に対して投与される製剤を製造するために定められる。ＧＭＰ規則は、製造に取り組む品質を要求し、企業が汚染、取り違え及びエラーなどを最小限に抑えるか除去することを可能にする。ＧＭＰ規則は、記録管理、職員資格、衛生、清浄度、設備検証、プロセスバリデーション、及び苦情処理などの問題に対処する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本出願人の知る限り、化合物Ｉを合成するための工業的に適用可能なプロセスは、これまでに記載されていない。
【０００７】
従って、本発明の目的は、先行技術と比べて、工業規模に容易かつ効率的に適応できる化合物Ｉを調製する方法であって、ジメチルホルムアミドなどの毒性溶媒及びカラムクロマトグラフィーが使用される方法を提供することである。
【０００８】
また、任意の薬物の高純度、典型的に９９．５％以上の純度の形態がヒトの治療に必要であるので、異性体形成の制御と容易な最終精製を組み合わせる方法は特に有利である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、化合物Ｉを調製する新たな方法に関し、特に、（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡから５つのステップで化合物Ｉを調製する方法に関する。スキーム１は、Ａから化合物Ｉに至る連続的なステップを示している。
【００１０】
特に明記しない限り、以下の略語及び名称は本発明の明細書及び特許請求の範囲にわたって使用される。
【００１１】
Ｅｔ＝エチル、ｔＢｕ＝ｔ−ブチル、ＣＨ２−ｔＢｕ＝ネオペンチル＝２，２−ジメチルプロピル
Ｃｂｚ＝カルボベンジルオキシ
Ｍｓ＝メシル＝ＳＯ２ＣＨ３
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＭＴＢＥ＝メチルｔ−ブチルエーテル
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー
ｅｅ＝鏡像体過剰率
本明細書に記載された各反応は、固相又は液相で行われてもよい。液相反応は、好ましくは、例えばＴＨＦ、エタノール、クロロホルム、ＭＴＢＥ、トルエン、アセトン、ＴＦＡ、及び／又はアニソールなどの有機又は水性溶媒から選ばれる溶媒で行われてもよい。
【００１２】
スキーム１:
0005921556.tif 000002
本発明の第１の目的は、Ａから化合物Ｉを調製する一般的方法に関し、
（ａ）Ａのエチルエステルを還元して（Ｓ）３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−ヒドロキシブタン−１−スルホン酸ネオペンチルＢを得るステップと、
（ｂ）塩基の存在下で、アルコールＢをメタンスルホン酸無水物又は塩化メタンスルホニルと反応させ、（Ｓ）３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（メチルスルホニルオキシ）ブタン−１−スルホン酸ネオペンチルＣを得るステップと、
（ｃ）メシル化アルコールＣをチオ酢酸カリウムと反応させ、（Ｓ）チオ酢酸２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブチルＤを得るステップと、
（ｄ）Ｄを二量体化させて（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン−１−スルホン酸）ネオペンチルＥを得るステップと、
（ｅ）Ｅのスルホン酸エステル及びアミン基が脱保護され、（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）化合物Ｉを得るステップと、
を含む。
【００１３】
上述の方法は、本明細書において、「一般的方法」と呼ばれる。
【００１４】
好ましくは、ステップ（ａ）は、ＡをＮａＢＨ４／ＬｉＣｌ−ＴＨＦとエタノールとの混合物、及びＬｉＢＨ４−ＴＨＦから選ばれる還元剤−溶媒カップルと反応させることによって行われ、好ましくはＴＨＦとエタノールが１：１体積比で混合され、より好ましくは還元剤−溶媒カップルがＬｉＢＨ４−ＴＨＦである。反応は、約０℃〜約２５℃、好ましくは約２０℃〜約２５℃の温度で行われてもよい。
【００１５】
より好ましくは、ステップ（ａ）は、約２０℃〜約２５℃の温度でＡをＬｉＢＨ４−ＴＨＦと反応させることによって行われる。
【００１６】
ＴＨＦに可溶かつ安定であるＬｉＢＨ４の使用は、明らかな安全性の向上を示し、特に、溶媒としてのニートＴＨＦの使用を可能にするので、エタノールにおける水素化ホウ素ナトリウムの分解によって水素ガスを放出することが回避される。
【００１７】
好ましくは、ステップ（ｂ）は、トリエチルアミンの存在下で行われてもよい。反応は、クロロホルム、及びＭＴＢＥとトルエンとの混合物から選ばれる溶媒で行われてもよく、好ましくは溶媒がＭＴＢＥとトルエンとの混合物であり、より好ましくはＭＴＢＥとトルエンが３：２の体積比で混合される。反応は、約−１０℃〜約１０℃、好ましくは約５℃〜約１０℃の温度で行われてもよい。
【００１８】
合成の工業的転換は、好ましくは揮発性溶媒が低揮発性及び／又は回収しやすい溶媒に置き換えられることを必要とする。この発明におけるステップ（ｂ）のためのより好ましい条件は、クロロホルムがＭＴＢＥとトルエンとの３：２体積比での混合物などの低揮発性及び／又は回収しやすい溶媒に置き換えられることを含む。
【００１９】
より好ましくは、ステップ（ｂ）は、約５℃〜約１０℃の温度で、ＭＴＢＥとトルエンとの３：２体積比での混合物においてトリエチルアミンの存在下で行われてもよい。
【００２０】
好ましくは、ステップ（ｃ）は、エタノール及びアセトンから選ばれる溶媒で行われてもよく、好ましくは溶媒がアセトンである。反応は、約１５℃〜約２５℃の温度で行われてもよい。
【００２１】
より好ましくは、ステップ（ｃ）は、約１５℃〜約２５℃の温度でアセトンにおいて行われてもよい。
【００２２】
好ましくは、ステップ（ｄ）は、まずＤを水酸化ナトリウムと接触させ、その後、得られた混合物をヨウ素と反応させることによって行われてもよい。溶媒はエタノールであってもよい。反応は約１５℃〜約２５℃の温度で行われてもよい。
【００２３】
好ましくは、ステップ（ｅ）は、ＴＦＡとアニソールとの混合物においてＥを撹拌することによって行われてもよい。より好ましくは、ステップ（ｅ）は、ＴＦＡとアニソールとの還流混合物においてＥを撹拌することによって行われてもよく、好ましくはＴＦＡとアニソールが５：１の体積比で混合される。
【００２４】
本発明の最も好ましい形態は、前述の一般的方法であって、
−ステップ（ａ）は、約２０℃〜約２５℃の温度でＡをＬｉＢＨ４−ＴＨＦと反応させることによって行われ、
−ステップ（ｂ）は、約５℃〜約１０℃の温度で、ＭＴＢＥとトルエンとの３：２体積比での混合物において、トリエチルアミンの存在下で行われ、
−ステップ（ｃ）は、約１５℃〜約２５℃の温度で、アセトンにおいて行われ、
−ステップ（ｄ）は、まず約１５℃〜約２５℃の温度でエタノールにおいてＤを水酸化ナトリウムと接触させた後、約１５℃〜約２５℃の温度でエタノールにおいて得られた混合物をヨウ素と反応させることによって行われ、かつ
−ステップ（ｅ）は、ＴＦＡとアニソールとの５：１体積比での還流混合物においてＥを撹拌することによって行われる。
【００２５】
この方法は、工業的応用に最適化されたステップ（ａ）〜（ｅ）を含み、特にステップ（ｂ）〜（ｅ）は、さらにｃ−ＧＭＰ要件に適合している。
【００２６】
合成の工業的転換は、パラメータを最適化する必要がある。特に、高エンタルピー反応を回避することが好ましい。高純度レベルは、生成物のために好ましい。単離された生成物は、熱的に安定であることが好ましい。
【００２７】
表１は、この好ましい方法における各ステップの生成物の反応エンタルピー、純度（ＨＰＬＣで測定し、モルパーセントで表す）及び安定性を提供する。
【００２８】
【表１】
0005921556.tif 000003
合成の工業的転換は、好ましくは簡単な精製ステップ、特に合成の最後の精製ステップを必要とする。
【００２９】
本発明の好ましい形態は、前述のように、化合物Ｉの精製が水中での再結晶によって行われる化合物Ｉを合成する方法に関する。
【００３０】
合成の工業的転換は、好ましくは化合物の最も安定した形、特に最終生成物の最も安定した形を必要とする。
【００３１】
化合物Ｉで行われる研究は、化合物の水和物形態、特に三水和物形態がニート形態より安定であることが示される。三水和物形態の化合物Ｉ（３Ｈ２Ｏ）は、周囲条件下で最も安定した形態である。化合物Ｉの水和物の任意の混合物は、周囲条件で数日以内に三水和物へ変化している。本明細書中で使用される周囲条件は、１５℃〜２５℃の温度、大気圧、５０％以上の相対湿度のことを指す。
【００３２】
本発明の好ましい形態は、前述のように、化合物Ｉが水和物形態、好ましくは三水和物形態として得られる化合物Ｉを合成する方法に関する。
【００３３】
本発明の別の目的は、化合物Ｉの結晶三水和物形態を得ることである。特に、化合物Ｉ三水和物の結晶構造は、実施例２で詳しく説明する。
【００３４】
上記一般的方法における出発物質（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡの合成は、４，４’−チオビス（３−アミノブタン−１−ネオペンチルスルホン酸）ビス−トリフルオロアセテートの合成における中間体として、国際特許公開ＷＯ２００４／００７４４１に記載されている。その単離は、必要に応じて当業者によって容易に行える。
【００３５】
本発明の別の目的は、上記の一般的方法であって、Ｌ−ホモシスチンからの化合物Ａの合成は、
（ａ−１）Ｌ−ホモシスチンをクロロギ酸ベンジルと反応させ、（２Ｓ，２Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン酸）Ｆを得るステップと、
（ｂ−１）Ｆとエタノールとの間でエステル化反応を行って、（２Ｓ，２Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン酸）ジエチルＧを得るステップと、
（ｃ−１）Ｇのジスルフィド結合を酸化的に開裂させ、（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（クロロスルホニル）ブタン酸エチルＨを得るステップと、
（ｄ−１）スルホニルクロリドＨをネオペンチルアルコールと反応させ、（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡを得るステップと、
を含む。
【００３６】
Ｌ−ホモシスチンからのＡの合成は、スキーム２に示されている。
【００３７】
スキーム２:
0005921556.tif 000004
Ａから化合物Ｉを合成する際に考えられる最も重要な条件と同じ条件でＡを合成する方法は、できる限り工業的要件に従うように最適化されてもよい。
【００３８】
好ましくは、ステップ（ａ−１）は、水酸化ナトリウムの存在下で行われてもよい。溶媒はＴＨＦであってもよい。反応は、約５℃〜約２５℃の温度で行われてもよく、好ましくは、試薬の添加中に、温度が約５℃〜約１０℃の間に保たれてもよい。
【００３９】
分析の容易さは、工業に適している合成の重要な基準である。化合物ＦにＣｂｚアミン保護基の存在は、その合成を分析、特にＨＰＬＣ分析にもっと適応させることができる。
【００４０】
好ましくは、ステップ（ｂ−１）は、Ｆを塩化チオニルと反応させることによって行われてもよい。溶媒は純エタノールであってもよい。反応は、約４５℃〜約５５℃の温度で行われてもよい。
【００４１】
好ましくは、ステップ（ｃ−１）は、Ｇを塩素と反応させることによって行われてもよい。溶媒はエタノールであってもよい。反応は、約５℃〜約１０℃の温度で行われてもよい。
【００４２】
好ましくは、ステップ（ｄ−１）は、トリエチルアミンの存在下で行われてもよい。溶媒はトルエンであってもよい。反応は、約１５℃〜約２５℃の温度で行われてもよい。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】図１は、化合物Ｉ三水和物の比較ＸＲＰＤ（Ｘ線粉末回折）図形であり、単結晶構造（下側のスペクトル）及び実験（上側のスペクトル）から計算した。
【図２】図２は、化合物Ｉ三水和物のＯＲＴＥＰ（オークリッジ熱振動楕円体描画）図像である。
【図３】図３は、化合物Ｉ三水和物の軸に沿って得られた投影である。Ｈ結合は点線で表される。
【発明を実施するための形態】
【００４４】
（実施例１）
＜（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡからの化合物Ｉの合成＞
ステップ（ａ）：（Ｓ）３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−ヒドロキシブタン−１−スルホン酸ネオペンチルＢ
0005921556.tif 000005
（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡ（４１．５５ｇ、１００．０ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）を、ＬｉＢＨ４のＴＨＦ溶液２Ｍ（５０ｍＬ、４４．８ｇ、１００．０ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）に滴下して添加した。その添加は、室温で３時間以上行われた。添加が終了したときに、転換が完了するまで（Ａ＜１％）、混合物を室温で攪拌した。トルエンを添加した後、ＨＣｌで加水分解させ、有機層をＮａＨＣＯ３及び水で洗浄し、真空下で濃縮し、所望の生成物を定量的収率（ｅｅ＝９８％）で淡黄色油として得、室温で４日又は５日間にわたって徐々に結晶化させた。
【００４５】
Ｂは、ＤＳＣ分析によって非常に低い融点を有することが分かるように、単純な結晶化によって固体として単離されることはできなかった。Ｂを溶液中で以下のステップにおいてさらに精製せずに使用することが決まった。
【００４６】
ステップ（ｂ）:（Ｓ）３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（メチルスルホニルオキシ）ブタン−１−スルホン酸ネオペンチルＣ
0005921556.tif 000006
Ｂ（５７．６４ｇ、１５４．３４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）のトルエン（１１５ｍＬ、２．０ｖｏｌ．）溶液を室温でＭＴＢＥ（１７３ｍＬ、３．０ｖｏｌ．）によって希釈された。その後、塩化メシル（１７．９ｍＬ,２６．５ｇ,２３１．５０ｍｍｏｌ,１．５ｅｑ．）を室温で添加し、均一混合物を１０℃に冷却した。トリエチルアミン（４３．０ｍＬ、３１．２ｇ、３０８．６７ｍｍｏｌ、２．０ｅｑ．）の添加はＴ＜２０℃で行われた。添加が終了したときに、転換が完了するまで（Ｂ＜１％）、混合物を１０℃で攪拌した。希ＨＣｌで加水分解した後、有機層をＮａＨＣＯ３、水及び塩水で洗浄し、続いて、減圧下で部分的濃縮した。その後、対応するメシレートを４０℃でヘプタン（５．０ｖｏｌ．）の添加によって結晶化させた。冷却、ろ過、乾燥した後、所望の生成物を９２．５％の収率、非常に高い化学的純度（９８％）で白色固体として単離した。
【００４７】
ステップ（ｃ）:（Ｓ）チオ酢酸２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブチルＤ
0005921556.tif 000007
メシレートＣ（８１．３ｇ、８０．０５ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）のアセトン（２０３ｍＬ、２．５ｖｏｌ．）溶液を、室温でチオ酢酸カリウム（４１．１ｇ、３６０．１ｍｍｏｌ、２．０ｅｑ．）のアセトン（２０３ｍＬ、２．５ｖｏｌ．）懸濁液に２時間以上滴下して添加した。転換が完了するまで（Ｃ＜１％）、反応混合物を室温で攪拌した。塩をろ過してトルエン（４．０ｖｏｌ．）を添加した後、アセトンを２５℃で減圧蒸留により除去した。その後、溶液を活性炭で処理し、２．０倍体積に濃縮した。室温でヘプタン（５．０ｖｏｌ．）を徐々に添加した後、０℃に冷却、ろ過、４５℃で乾燥し、所望の生成物を７８．２％の収率、非常に高い化学的純度（９８％）で白色固体として得た。
【００４８】
ステップ（ｄ）:（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン−１−スルホン酸）ネオペンチルＥ
0005921556.tif 000008
Ｄ（５９．１６ｇ、１３７．１ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）がエタノール（２０３ｍＬ、２．５ｖｏｌ．）に懸濁された溶液を、０℃に冷却した。その後、温度が１０℃以下に保たれて、水（１６．９ｍＬ、０．２８５ｖｏｌ．）で希釈された２０％の水酸化ナトリウム（２５．１ｍＬ、１５０．８ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ．）を懸濁液に滴下して添加した。反応混合物を室温に昇温させ、転換が完了するまで（Ｄ＜１％）攪拌した。中間体チオールをヨウ素（２０．９ｇ、８２．３ｍｍｏｌ、０．６ｅｑ．）のエタノール（１１８ｍＬ、２．０ｖｏｌ．）溶液と室温で反応させた。反応は、酸化剤の添加が終了したときに完了した。過剰の残留したヨウ素を還元するために、Ｎａ２Ｓ２Ｏ５（１３．０ｇ、６８．５ｍｍｏｌ、０．５ｅｑ．）の水溶液（１１８ｍＬ、２．０ｖｏｌ．）を添加し、その後、エタノールを４０℃で減圧蒸留により除去した。室温で水（３．０ｖｏｌ．）を添加した後、０℃に冷却、ろ過、４５℃〜５０℃で乾燥し、所望の二量体を９８．３％の収率、非常に高い化学的純度（９７．０％）で白色固体として得た。
【００４９】
ヨウ素の還元によって生成されたヨウ化物イオンの量は、試料において電位差測定法でチェックされた。
【００５０】
Ｅ０（Ａｇ＋／Ａｇ（Ｓ））＝０．８０Ｖ
ＫｓＡｇＩ＝１．５．１０−１６
［ＡｇＮＯ３］＝０．１Ｎ
電極：Ｅ＝Ｅ０（Ａｇ＋／Ａｇ（Ｓ））＋０．０６ｌｏｇ［Ａｇ＋］
［Ａｇ＋］＝ＫＳＩ／［Ｉ−］
Ｅ＝Ｅ０（Ａｇ＋／Ａｇ（Ｓ））＋０．０６ｌｏｇ（ＫＳＩ／［Ｉ−］）
測定：［Ｉ−］減少及びＥ増加
ＬＯＤ＝１ｍｇ
ヨウ化物イオンが検出されなくなるまで、水で４回の洗浄をさらに行った。結果は表２に示される。
【００５１】
【表２】
0005921556.tif 000009
ステップ（ｅ）:（３Ｓ，３Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（３−アミノブタン−１−スルホン酸）化合物Ｉ
0005921556.tif 000010
Ｅ（４４．０ｇ、５６．６ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）のＴＦＡ（２２０ｍＬ、５．０ｖｏｌ．）及びアニソール（４４ｍＬ、１．０ｖｏｌ．）溶液を加熱還流（７５℃）し、転換が完了するまで（Ｅ＜１％）、反応混合物をこれらの条件で攪拌した。ＴＦＡを５０℃で減圧蒸留により除去した。ＭＴＢＥ（５．０ｖｏｌ．）を室温で徐々に添加し、所望の生成物沈殿物を得た。粉砕、濾過、ＭＴＢＥ（１．０ｖｏｌ．）で洗浄した後、粗固体をメタノール（２２０ｍＬ、５．０ｖｏｌ．）に懸濁させた。新たに粉砕、濾過、ＭＴＢＥ（１．０ｖｏｌ．）で洗浄し、その後、減圧下で乾燥し、化合物Ｉを９２．５％の収率で白色固体として得た。
ＮＭＲ：１Ｈ（溶媒Ｄ２Ｏ、４００ＭＨｚ、ｐｐｍ）：４．７０（ｓ、６Ｈ、Ｈ５）；３．７７（ｍ、２Ｈ、Ｈ２）；３．１４（ｄｄ、２Ｈ、Ｈ１）；２．９８（ｄｄ、４H、H４）;２．８６（ｄｄ、２Ｈ、Ｈ１）；２．１３（ｍ、４Ｈ、Ｈ３）。１３Ｃ（溶媒Ｄ２Ｏ、１００ＭＨｚ、ｐｐｍ）：４９．４（２Ｃ、Ｃ２）；４６．６（２Ｃ、Ｃ４）；３８．３（２Ｃ、Ｃ１）；２６．９（２Ｃ、Ｃ３）。
（実施例２）
＜化合物Ｉ三水和物の結晶学的データ＞
実施例１で得られた化合物Ｉは、三水和物形態のみが含有されるために、周囲条件で２２日間保存した。
−データ収集−
化合物Ｉ三水和物[Ｃ８Ｓ４Ｎ２Ｏ６Ｈ２０、３（Ｈ２Ｏ）]の結晶構造は、単結晶Ｘ線回折（ＸＲＤ）によって測定された。選択された結晶を、ガラス繊維に貼り付け、ＣＣＤ面検出器でＢｒｕｋｅｒＳＭＡＲＴ ＡＰＥＸ回折計の完全三円測角器に取り付けた。３組の照射（合計１８００フレーム）を、φの３つの異なった値のための３つのωスキャン（０．３°のステップ）に対応して記録した。
【００５２】
図１は、化合物Ｉ三水和物の実験及び計算ＸＲＤ図形を示す。
【００５３】
表３は、化合物Ｉ三水和物構造のためのＰｏｗｄｅｒＣｅｌｌから計算された反射の選択、並びに対応する実験ピーク位置及び強度を示す。結晶化プロセスに依存する優先的方位効果が極めて重要であるので、実験ピークの強度値は、それほど重要なものではない。
【００５４】
【表３】
0005921556.tif 000011
結晶のセルパラメータ及び方位マトリックスは、ＳＭＡＲＴソフトウェアを用いて予備測定された。データ統合及びグローバルセルの精密化は、ＳＡＩＮＴソフトウェアで行われる。強度は、ローレンツ、分極、減衰及び吸収効果（ＳＡＩＮＴ及びＳＡＤＡＢＳソフトウェア）に対して補正され、Ｆｏ２に減少した。プログラムパッケージＷｉｎＧＸ３は、空間群決定、構造解析及び精密化に用いられる。
【００５５】
−データ精密化−
標準空間群Ｐ２１（ｎ°４）は、同等精密化の体系的消滅及び相対的なＦｏ２から決定された。構造は、直接法（ＳＩＲ９２）によって解明された。異方性変位パラメータは、すべての非水素原子のために精密化された。水素原子は、後続の差フーリエ合成によって位置付けられ、幾何学的制約（ＳＨＥＬＸＬ）によって取り付けた。Ｆ２に対する完全行列最小二乗法の精密化の最終サイクルは、３７１４の観測された精密化及び２３４の可変パラメータに基づき、次の非加重及び加重ａｇｒｅｅｍｅｎｔ  ｆａｃｔｏｒｓによって収束した。
【００５６】
[Ｆ2>２σ（Ｆ2）]に対して、Ｒ１＝０．０３４７、ｗＲ２＝０．０８４５。すべてのデータに対して、Ｒ１＝０．０３７１、ｗＲ２＝０．０９３４．
結晶は、化合物Ｉの飽和水溶液を周囲温度で徐々に蒸発させて得られた。
−結晶学的データ−
【００５７】
【表４】
0005921556.tif 000012
表５は、原子座標（×１０４）及び等価等方性変位パラメータ（Å２×１０３）を示す。Ｕ（ｅｑ）は、直交化されたＵｉｊテンソルのトレースの三分の一と定義された。
【００５８】
【表５】
0005921556.tif 000013
−構造記述−
非対称ユニットは、３分子の水と結合した単一の化合物Ｉ分子からなる。図２は化合物Ｉ分子と３分子の水との非対称ユニットを示す。
【００５９】
ｂ軸に沿って、化合物Ｉの連続的な分子は、酸素原子Ｏ１Ａと水素原子Ｈ（Ｎ１Ａ）（ｄ〜１．９４Å）との間、及び酸素原子Ｏ１と水素原子Ｈ（Ｎ１）（ｄ〜１．９９Å）との間に形成された２種類の水素結合を介して相互作用する。ａ軸に沿って、化合物Ｉの２つの連続的な分子は、酸素原子Ｏ２Ａと水素原子Ｈ（Ｎ１Ａ）（ｄ〜１．９８Å）との間の水素結合を介して相互作用する。ａ方向及びｂ方向に配向するこれらの相互作用は、（１１０）に平行な層につながる。また、水分子（ＯＷＡ）は、これらの分子の間に挿入して、３つの異なる水素結合、すなわち、酸素原子ＯＷＡを水素原子Ｈ（Ｎ１Ａ）（ｄ〜２．０２Å）に結合する第１の水素結合と、酸素原子Ｏ３Ａを水素原子Ｈ（ＯＷＡ）（ｄ〜１．９４Å）に結合する第２の水素結合と、酸素原子Ｏ１をＨ（ＯＷＡ）（ｄ〜１．９７Å）に結合する第３の水素結合とを形成する。スライス（１１０）は、ｄ００１（〜１７．５Å）の厚さを示す。これらのスライスの内部にａ軸に沿う異なる相互作用は、より具体的に図３に示される。２つの連続した層は、（００２）面に位置する他の２つの水分子ＯＷＢ及びＯＷＣによって形成する水素結合を介して、ｃ軸に沿って相互作用する。ＯＷＢ水分子の酸素原子は、第１のスライスから、水素原子Ｈ（Ｎ１からの）（ｄ〜２．００Å）とともに水素結合を形成し、酸素原子Ｏ３及び水素原子Ｈ（ＯＷＢからの）（ｄ〜１．９２Å）による水素結合を介して、次のスライスと接続する。ＯＷＣ水分子の酸素原子は、第１のスライスに対して、水素原子Ｈ（Ｎ１からの）（ｄ〜１．８６Å）とともに水素結合を形成し、そして、スルホネート部分Ｓ２からの２つの酸素原子の相互作用を介して、２つの水素結合によって隣接したスライスと結合する。酸素原子Ｏ２及び酸素原子Ｏ３は、それぞれｄ〜２．３０Å及びｄ〜２．０３Åの結合長さで、水分子ＯＷＣの２つの水素原子と相互作用する。
（実施例３）
＜Ｌ−ホモシスチンからの（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡの合成＞
ステップ（ａ−１）：（２Ｓ，２Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン酸）Ｆ
0005921556.tif 000014
Ｌ−ホモシスチン（２００．０ｇ、７４５．５ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）をＴＨＦ（１０００ｍＬ、５．０ｖｏｌ．）に懸濁させ、５℃〜１０℃に冷却した。２０％水酸化ナトリウム（５２１．７ｍＬ、６２６．２ｇ、１００％で１２５．２５ｇ、３．１３ｍｍｏｌ、４．２ｅｑ．）を添加した後、クロロギ酸ベンジル（２２０．３ｍＬ、２６７ｇ、１５６５．５ｍｍｏｌ、２．１ｅｑ．）を添加した。転換は、室温で一晩後に完成した（Ｌ−ホモシスチン＜１％）。水で有機層を抽出して洗浄し、定量的収率で単離した黄色油状物を得、室温で黄色固体として徐々に結晶化した。
【００６０】
ステップ（ｂ−１）：（２Ｓ，２Ｓ’）４，４’−ジスルファンジイルビス（２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）ブタン酸ジエチル）Ｇ
0005921556.tif 000015
Ｆ（１４０．０ｇ、２６０．８９ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）を純エタノール（７００ｍＬ、５．０ｖｏｌ．）に懸濁させ、５０℃に加熱した。堆積を避けるために、ＳＯＣｌ２（４１．６ｍＬ、６８．３ｇ、５７３．９６ｍｍｏｌ、２．２ｅｑ．）を５０℃で添加した。転換は、５０℃で１時間後に完成した（Ｆ＜１％）。粗混合物を濃縮した後、酢酸エチルに溶解し、有機層を洗浄して部分的に濃縮した澄明な液を得た。５．０倍（体積）のヘプタンを徐々に添加し、所望の生成物を結晶化して白色固体として得た。ろ過、乾燥した後、ビス−エステルを９２％の収率で単離した。
【００６１】
ステップ（c-１）：（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（クロロスルホニル）ブタン酸エチルＨ
0005921556.tif 000016
Ｇ（１００．０ｇ、１６８．７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）をエタノール（５００ｍＬ、５．０ｖｏｌ．）に懸濁させ、５℃に冷却した。１０℃未満の温度でＣｌ２（８３．７ｇ、１．１８ｍｏｌ、７．５ｅｑ．）を添加した。反応混合物完全に均一になったときに、転換は完成した（Ｇ＜１％）。スルホニルクロリド溶液を水性炭酸塩溶液とトルエンとの混合物に注ぎ、温度を２０℃以下に維持した。有機層を洗浄した後、減圧下で濃縮し、所望の生成物を９６．８％の収率で無色油状物として得た。
【００６２】
濃縮された生成物のトルエン溶液（２．０ｖｏｌ．）に５．０倍（体積）のヘプタンを徐々に添加するとき、所望の生成物を白色固体として単離することができる。それにもかかわらず、純度は大して上がらず、収率は激減した（７５％〜８０％）。したがって、スルホニルクロリドＨは、１．０倍（体積）のトルエンにおいて単離され、さらに精製されることなく、以下のステップに用いられる。
【００６３】
ステップ（ｄ−１）：（Ｓ）２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−（ネオペンチルオキシスルホニル）ブタン酸エチルＡ
0005921556.tif 000017
ネオペンチルアルコール（２９．１ｇ、３２９．８４ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．）をトルエン（４００ｍＬ、４．０ｖｏｌ．）に溶解し、Ｈ（１００．０ｇ、２７４．８７ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ．）のトルエン（１００ｍＬ、１．０ｖｏｌ．）溶液を室温で添加した。その後、均一混合物を０℃に冷却した。０℃でトリエチルアミン（４６．０ｍＬ、３３．４ｇ、３２９．８４ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ．）を添加した。添加の終わりに、転換が完成する（Ｈ＜１％）まで、混合物を室温に加熱した。希釈ＨＣｌで加水分解した後、有機層をＮａＨＣＯ３、水及び塩水で洗浄し、減圧下で濃縮して所望の生成物Ａを９４．４％の収率で淡黄色油状物として得た。
【図１】
0005921556.tif 000019
【図２】
0005921556.tif 000020
【図３】
0005921556.tif 000021