(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）を有する化合物：
0005851493.tif 000054
式中、
Ｒ１は−（ＣＨ２）２−Ｘ若しくは−ＣＨ３を表し；
Ｒ２は−Ｈ、−ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）２−Ｘ、若しくは−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）２−Ｘを表し；
Ｒ３は−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ２−Ｎ−ピロリジン、若しくは−Ｎ−ピロリジンを表し；
Ｒ４は−Ｈ、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ２−Ｎ−ピロリジン、−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｘ、−Ｏ（ＣＨ２）２−Ｘ、−Ｏ（ＣＨ２）３−Ｘ、−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｘ、若しくは−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｘを表すか、又は
Ｒ１及びＲ２は上記で定義されたものであり、かつＲ３及びＲ４は式（Ｉ）のピリジン環と共にイソキノリン環系を形成し、
式中、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ４のうちの１つはＸ部分を有する基を表し、かつＸはＢｒ、Ｉ、トシレート、又はメシレートを表す。
【請求項２】
Ｒ１がＣＨ２ＣＨ２Ｘを表し、Ｒ２及びＲ３がＨであり、かつＲ４が以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、ｄ、又はｅ：
0005851493.tif 000055
のうちの１つである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ４が置換基ａ、またはｂである、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がＣＨ２ＣＨ２Ｘを表し、Ｒ２がＨであり、かつＲ３及びＲ４がピリジン環と共にイソキノリン環系を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がＣＨ３であり、Ｒ２及びＲ３がＨであり、かつＲ４が以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、ｄ、又はｅ：
0005851493.tif 000056
のうちの１つである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
0005851493.tif 000057
である式：
0005851493.tif 000058
式：
0005851493.tif 000059
または
0005851493.tif 000060
である式：
0005851493.tif 000061
によって表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物を、１８Ｆイオンと反応させて、放射性トレーサー化合物を得る工程を含む、放射性トレーサーの製造方法。
【請求項８】
環状クラウンエーテル化合物、カリウム塩、及び無水極性非プロトン性有機溶媒の存在下で実施される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
７０℃〜１００℃の範囲の温度で２０分未満の時間実施される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
式（Ｉ）を有する放射性トレーサー：
0005851493.tif 000062
式中、
Ｒ１は−（ＣＨ２）２−１８Ｆを表し；
Ｒ２は−Ｈを表し；
Ｒ３は−Ｈを表し；
Ｒ４は−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ２−Ｎ−ピロリジン、若しくは−Ｎ−ピロリジンを表すか、又は
Ｒ１及びＲ２は上記で定義されたものであり、かつＲ３及びＲ４は式（Ｉ）のピリジン環と共にイソキノリン環系を形成する。
【請求項１１】
Ｒ１は−（ＣＨ２）２−Ｘを表し、かつＲ４は−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３を表す、請求項１に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
原発性高アルドステロン症は、診断上の困難な課題を引き起こす。この副腎疾患は、有病率が全高血圧症患者の５〜１２％であり、動脈性高血圧のうちで最も一般的な単一原因因子であることが、最近の研究によって示されている。人口の２５〜３０％が動脈性高血圧に罹患しており、原発性高アルドステロン症が症例の５％を占めていると仮定すると、このことは１０００００人当たり１２５０〜１５００の有病率という結果になる。
【０００２】
確定された原発性高アルドステロン症における診断上の主要な問題は、両側性過形成と片側性腺腫（Conn腺腫）との間の鑑別診断である。この分類は、その後の治療のために極めて重要である。片側性状態（Conn腺腫）に基づく原発性高アルドステロン症は、手術により成功裡に治療することができ、両側性過形成は、薬物により保存的に治療される。
【０００３】
加齢と共に増加する、内分泌不活性副腎偶発腫の高い有病率のために、従来の画像化はこの鑑別に対して極めて限定された適性を有するに過ぎない。加えて、小さいサイズの片側性Conn腺腫の信頼性のある画像を得ることはしばしば不可能である。従って、更なる診断のための、現在の「ゴールドスタンダード」は、両側からのサンプル採取、及び副腎静脈からの血液の分析である。
【０００４】
このゴールドスタンダードと考えられている両側の副腎静脈からの血液採取は、副作用が付随する侵襲的手法である。従って、この方法は熟練した臨床医を必要とし、数少ない医療施設においてのみ確立されている。しかしながら、大きな技術的困難性のために、副腎静脈カテーテルの２０％弱で合併症（例えば、副腎の出血）が発生し、試験では高い割合（約４０％）で、１つ又は両方の副腎静脈の選択的挿管が失敗し、使用可能なデータが得られなくなる。従って、このゴールドスタンダードは大いに改良される必要がある。
【０００５】
特に４０歳を超える患者に対する核磁気共鳴断層撮影法（ＭＲＴ）又はコンピュータ断層撮影法（ＣＴ）の情報的価値は、極めて限定されている。一方では、平均余命が増加するのに伴い、ホルモン的に不活性な副腎腫瘤がより多く検出され、他方では、Conn腺腫は、非常に小さい（＜５ｍｍ）可能性があり、従って画像化による検出を逃れてしまう。
【０００６】
本発明は、上述の最新技術における欠点を克服するものである。
【発明の概要】
【０００７】
本発明によると、（１）ＣＹＰ１１Ｂ１（１１β−ヒドロキシラーゼ）よりもＣＹＰ１１Ｂ２（アルドステロン合成酵素）に選択的に結合する、放射性標識したＣＹＰ１１Ｂ２阻害剤を、副腎を有する哺乳動物に導入する工程、及び（２）副腎の機能的画像を得るために副腎領域で陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）を実施する工程を含む、両側性過形成と片側性腺腫との鑑別のための機能的画像化方法が提供される。
【０００８】
本発明は、上記の方法において、放射性標識したＣＹＰ１１Ｂ２阻害剤として用いられる、式（Ｉ）の構造を有する化合物又はその前駆体にも関連する：
0005851493.tif 000002
式中、
Ｒ１は−（ＣＨ２）２−Ｘ若しくは−ＣＨ３を表し；
Ｒ２は−Ｈ、−ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）２−Ｘ、若しくは−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）２−Ｘを表し；
Ｒ３は−Ｈ、−ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ２−Ｎ−ピロリジン、若しくは−Ｎ−ピロリジンを表し；
Ｒ４は−Ｈ、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ２−Ｎ−ピロリジン、−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｘ、−Ｏ（ＣＨ２）２−Ｘ、−Ｏ（ＣＨ２）３−Ｘ、−ＣＨ２−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｘ、若しくは−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｘを表すか、又は
Ｒ１及びＲ２は上記で定義されたものであり、かつＲ３及びＲ４は式（Ｉ）中のピリジン環と共にイソキノリン環系を形成し、
式中、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ４のうちの１つはＸ部分を有する基を表し、Ｘは１８Ｆ、Ｂｒ、Ｉ、トシレート、又はメシレートを表す。
【０００９】
この化合物が、放射性トレーサーとしての使用を意図したものである場合、Ｘは１８Ｆを表す。この化合物が、トレーサーを作製するための前駆体としての使用を意図したものである場合、ＸはＢｒ、Ｉ、トシレート、又はメシレートを表す。
【００１０】
本発明は、本発明の放射性トレーサーを得るために、Ｒ１〜Ｒ４が上記で定義されたものであり、Ｒ１、Ｒ２、又はＲ４の１つがＸ部分を有する基を表し、かつＸがＢｒ、Ｉ、トシレート又はメシレートを表す、式（Ｉ）の化合物を、１８Ｆイオンと、好ましくは触媒の存在下で反応させる工程を含む、放射性トレーサーの作製方法も含む。
[本発明1001]
（1）ＣＹＰ11Ｂ1（11β−ヒドロキシラーゼ）よりもＣＹＰ11Ｂ2（アルドステロン合成酵素）に選択的に結合する、放射性標識したＣＹＰ11Ｂ2阻害剤を、副腎を有する哺乳動物に導入する工程、及び（2）副腎の機能的画像を得るために副腎領域で陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）を実施する工程を含む、副腎の機能的画像の作成方法。
[本発明1002]
放射性標識したＣＹＰ11Ｂ2阻害剤が18Ｆを含む、本発明1001の方法。
[本発明1003]
放射性標識したＣＹＰ11Ｂ2阻害剤が、式（Ｉ）を有する1つ又は複数の化合物である、本発明1001又は1002の方法：
0005851493.tif 000003
式中、
Ｒ1は−（ＣＨ2）2−18Ｆ若しくは−ＣＨ3を表し；
Ｒ2は−Ｈ、−ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2）2−18Ｆ、若しくは−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ2）2−18Ｆを表し；
Ｒ3は−Ｈ、−ＣＨ3、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ2−Ｎ−ピロリジン、若しくは−Ｎ−ピロリジンを表し；
Ｒ4は−Ｈ、−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）ＯＣＨ3、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ2−Ｎ−ピロリジン、−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ（ＣＨ3）−18Ｆ、−Ｏ（ＣＨ2）2−18Ｆ、−Ｏ（ＣＨ2）3−18Ｆ、−ＣＨ2−Ｏ−（ＣＨ2）2−18Ｆ、若しくは−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ−（ＣＨ2）2−18Ｆを表すか、又は
Ｒ1及びＲ2は上記で定義されたものであり、かつＲ3及びＲ4は式（Ｉ）のピリジン環と共にイソキノリン環系を形成し、
式中、Ｒ1、Ｒ2、又はＲ4の1つは18Ｆ部分を有する基を表す。
[本発明1004]
式（Ｉ）を有する化合物：
0005851493.tif 000004
式中、
Ｒ1は−（ＣＨ2）2−Ｘ若しくは−ＣＨ3を表し；
Ｒ2は−Ｈ、−ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2）2−Ｘ、若しくは−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ2）2−Ｘを表し；
Ｒ3は−Ｈ、−ＣＨ3、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ2−Ｎ−ピロリジン、若しくは−Ｎ−ピロリジンを表し；
Ｒ4は−Ｈ、−ＣＨ2−Ｏ−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）ＯＣＨ3、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ2−Ｎ−ピロリジン、−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｘ、−Ｏ（ＣＨ2）2−Ｘ、−Ｏ（ＣＨ2）3−Ｘ、−ＣＨ2−Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｘ、若しくは−ＣＨ（ＣＨ3）−Ｏ−（ＣＨ2）2−Ｘを表すか、又は
Ｒ1及びＲ2は上記で定義されたものであり、かつＲ3及びＲ4は式（Ｉ）のピリジン環と共にイソキノリン環系を形成し、
式中、Ｒ1、Ｒ2、又はＲ4のうちの1つはＸ部分を有する基を表し、かつＸは18Ｆ、Ｂｒ、Ｉ、トシレート、又はメシレートを表す。
[本発明1005]
Ｒ1がＣＨ2ＣＨ2Ｘを表し、Ｒ2及びＲ3がＨであり、かつＲ4が以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、ｄ、又はｅ：
0005851493.tif 000005
のうちの1つである、本発明1004の化合物。
[本発明1006]
Ｒ1がＣＨ2ＣＨ2Ｘを表し、Ｒ2及びＲ4がＨであり、かつＲ3が以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、ｄ：
0005851493.tif 000006
のうちの1つである、本発明1004の化合物。
[本発明1007]
Ｒ1がＣＨ2ＣＨ2Ｘを表し、Ｒ2がＨであり、かつＲ3及びＲ4がピリジン環と共にイソキノリン環系を形成する、本発明1004の化合物。
[本発明1008]
Ｒ1がＣＨ3であり、Ｒ2及びＲ3がＨであり、かつＲ4が以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、ｄ、又はｅ：
0005851493.tif 000007
のうちの1つである、本発明1004の化合物。
[本発明1009]
Ｒ1がＣＨ3であり、Ｒ2が以下の置換基：
0005851493.tif 000008
のうちの1つであり、かつＲ3及びＲ4がピリジン環と共にイソキノリン環系を形成する、
本発明1004の化合物。
[本発明1010]
Ｒ1がＣＨ3であり、Ｒ2が以下の置換基ａ又はｂ：
0005851493.tif 000009
のうちの1つであり、
Ｒ3がＨであり、かつＲ4が以下の置換基ａ又はｂ：
0005851493.tif 000010
のうちの1つである、本発明1004の化合物。
[本発明1011]
0005851493.tif 000011
である式：
0005851493.tif 000012
式：
0005851493.tif 000013
0005851493.tif 000014
である式：
0005851493.tif 000015
0005851493.tif 000016
である式：
0005851493.tif 000017
又は
0005851493.tif 000018
である式：
0005851493.tif 000019
によって表される、本発明1004の化合物。
[本発明1012]
Ｘが18Ｆを表す、本発明1004〜1011のいずれかの式（Ｉ）の放射性トレーサー化合物を得るために、ＸがＢｒ、Ｉ、トシレート、又はメシレートを表す式（Ｉ）の化合物を、18Ｆイオンと反応させる工程を含む、放射性トレーサーの作製方法。
[本発明1013]
環状クラウンエーテル化合物、カリウム塩、及び無水極性非プロトン性有機溶媒の存在下で実施される、本発明1012の方法。
[本発明1014]
70℃〜100℃の範囲の温度で20分未満の時間実施される、本発明1012又は1013の方法。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
発明の詳細な発明
アルドステロン合成酵素（ＣＹＰ１１Ｂ２）は、副腎のアルドステロン生成組織（球状帯）において特異的に発現される。両側性過形成と同様に、Conn腺腫では、この酵素が最大で１０倍高い水準で発現される。本発明の機能的画像化法は、アルドステロン合成酵素の活性を表示することができ、それによって２つの主な高アルドステロン症の形態の鑑別を可能とする。片側性過形成では、反対側が抑制され、従って、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）スキャニングにかけられた場合に、両側性過形成とは対照的に、両側の明瞭な差異が検知され得る。
【００１２】
ＰＥＴ画像化法は、トレーサー濃度の絶対的定量化を可能とする。好適な実施形態では、ＰＥＴ画像化は、ＰＥＴ／ＣＴ又はＰＥＴ／ＭＲＴ装置により実施され、これらの装置は、ＰＥＴを用いた場合に観察されるトレーサーの濃縮富化の明確な解剖学的割り当て（anatomical assignment）を可能とする。
【００１３】
この放射性トレーサーは、少なくとも１つの放射性同位元素を含む。好適には、この放射性同位元素はハロゲンの同位体である。より好適には、この放射性同位元素は１８Ｆと表記される原子量１８のフッ素の同位体である。この物理的半減期が１１０分であるＰＥＴ核種１８Ｆは、日常的にどのサイクロトロンによっても非常に高い活性レベルで生成され得る。この１８Ｆは、サイクロトロンの目的物から流出してくる１８Ｏ−水から、４級アンモニウム陰イオン交換カラムの使用により単離できる。保持された１８Ｆ−は、Ｍｅｒｃｋ社から入手可能な環状クラウンエーテルである、カタログ番号８１４９２５、ＣＡＳ番号２３９７８−０９−８のＫｒｙｐｔｏｆｉｘ（商標）２２２などのクリプタンド、及び炭酸カリウムなどの適切なカリウム塩を含む非プロトン性極性有機溶媒の溶液中に溶出される。
【００１４】
これにより、フッ素同位体は、上述の溶出溶液の存在下に、［１８Ｆ］ＫＦとして利用可能である。好適には、この混合物は、アルゴンなどの不活性気体の存在下、８５℃などの高温での減圧濃縮により乾燥されて残渣を形成し、次いで、この残渣は、アルゴンなどの不活性気体の存在下において、アセトニトリルなどの無水非プロトン性極性有機溶媒との共沸によって乾燥される。脱水された生成物に前駆体を加えることにより、反応が実施される。
【００１５】
［１８Ｆ］ＫＦと本発明の前駆体との反応は、好適には上述のクリプタンドの存在下において、アセトニトリルなどの極性非プロトン性有機溶媒より成る溶媒中、又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）若しくはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などの別の極性非プロトン性溶媒中で実施される。
【００１６】
この反応は、好適には少なくとも７０℃、より好適には少なくとも８０℃〜最大１８０℃までの、より好適には最大１００℃までの、更により好適には最大９０℃までの温度下で実施される。特に、分解過程を最小化するために、この反応は好適には約８０℃（例えば＋／−５℃）で実施される。
【００１７】
Ｆ−１８の比較的短い半減期のために、好適にはこの反応は好適には２０分未満の最小時間で実施される。この反応は、所望の放射化学的収率を得るために効果的な、時間、温度、及び濃度の下で行われる。かかる条件は、通常の実験、及び／又は化学分野の通常の一般的な知識を通じて容易に確立できる。
【００１８】
この放射性トレーサーは、次いで、反応混合物中の他の成分から単離される。この工程は、例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などのクロマトグラフ法で行うことができる。例えば、反応混合物を室温まで冷却後に、反応生成物を含むこの溶液を、Kromasil 100-10C18を含むＨＰＬＣカラムに直接充填し、容積比が７０：３０：０．１（ｖ／ｖ／ｖ）のＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ／トリエチルアミンの混合溶媒により７ｍＬ／ｍｉｎの流速で溶出させる。
【００１９】
放射化学的収率は、好適には少なくとも１０パーセント、より好適には少なくとも１５パーセントである。
【００２０】
この前駆体は、式（Ｉ）中のＸ位に水酸基を有する化合物を、例えばトリフェニルホスフィンの存在下で四臭化炭素によるなどの、文献において公知の標準的な臭素化反応により合成することができる。
【００２１】
Ｒ１のＸ位に水酸基を有する化合物は、３位にＢｒ又はＩを有し、かつ５位に−Ｈ、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ２−Ｎ−ピロリジン、−Ｎ−ピロリジンを有するピリジン化合物を、６−ヒドロキシエトキシ−２−ナフタレンボロン酸と反応させることにより、作製することができる。
【００２２】
Ｒ２のＸ位に水酸基を有する化合物は、３位にＢｒ又はＩを有し、かつ５位に−Ｈ、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ−ピロリジン、−ＣＨ２−Ｎ−ピロリジン、−Ｎ−ピロリジンを有するピリジン化合物を、３位にＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）２−ＯＨ又は−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）２−ＯＨ置換基を有する６−メトキシ−２−ナフタレンボロン酸と反応させることにより、作製することができる。
【００２３】
Ｒ４のＸ位に水酸基を有する化合物は、３位にＢｒ又はＩを有しかつ５位に水酸基を有するピリジン化合物を、６−メトキシ−２−ナフタレンボロン酸と反応させることにより、作製することができる。
【００２４】
最後の方法は、以下の合成例により説明される。
【００２５】
合成例１
工程１：３−ブロモ−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジンの合成
0005851493.tif 000020
１０ｍＬのＤＭＦ中、２．０ｇ（１１．５ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−５−ヒドロキシピリジン（ガラス器具は脱気）及び１．０ｍＬ（１．７５ｇ、１４ｍｍｏｌ）の２−ブロモエタノールの溶液に、９２０ｍｇ（１３．９ｍｍｏｌ）の水酸化カリウム、及び６３ｍｇ（０．３７ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムの水溶液２ｍＬを加え、この混合物を８５℃で４時間加熱した。室温に冷却後、この混合物をろ過し、ろ液を７０ｍＬの水及び７０ｍＬのジエチルエーテルで希釈した。この有機層を分離し、２０ｍＬの２％ＫＯＨ水溶液で洗浄した。溶媒を揮散後に粗生成物が明色固体として得られた（融点：５３〜５５℃）。
【００２６】
生成物の特性：
収量：３３９ｍｇ（１．５５ｍｍｏｌ、１３．５％）
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  ３−ブロモ−５−ヒドロキシピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．０５
Ｒｆ  ３−ブロモ−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．０５
0005851493.tif 000021
【００２７】
工程２：３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン
0005851493.tif 000022
３７５ｍｇ（１．８５ｍｍｏｌ）の６−メトキシ−２−ナフタレンボロン酸、３３９ｍｇ（１．５５ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン、７２９ｍｇ（２．３２ｍｍｏｌ）の水酸化バリウム八水和物、及び７２ｍｇ（０．０６ｍｍｏｌ）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムを含むフラスコを、アルゴンを用いて５分間フラッシュした。次いで、セプタムを通して、注射器から９ｍＬのジメトキシエタン及び１．５ｍＬの水を加え、この混合物をアルゴン下、８０℃で一晩加熱した。溶媒を揮散後に、残渣を５０ｍＬの水に溶解し、各２５ｍＬのクロロフォルムで３回抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を揮散後に、得られた粗生成物をカラム・クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ９５／５）により精製した。
【００２８】
精製された生成物の特性：
外見：白色固体
融点：１５３〜１５６℃
収量：２４８ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ、５４．２％）
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  ３−ブロモ−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９５／５）＝０．３０
Ｒｆ  ３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９５／５）＝０．２５
0005851493.tif 000023
【００２９】
工程３：３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−ブロモエトキシ）ピリジン（前駆体）
0005851493.tif 000024
７ｍＬの塩化メチレン中、２４８ｍｇ（０．８４ｍｍｏｌ）の３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン、及び４４１ｍｇ（１．６８ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンの溶液を氷浴中で冷却し、３３２ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）の四臭化炭素を加え、氷浴中で１時間撹拌した。溶媒を揮散後に、この粗生成物をカラム・クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ  ９７／３）により精製した。
【００３０】
精製された生成物の特性：
外見：黄色結晶
融点：１０６〜１１０℃
収量：２３８ｍｇ（０．８０ｍｍｏｌ、９５．９％）
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  ３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−ヒドロキシエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９５／５）＝０．２５
Ｒｆ  ３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−ブロモエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９５／５）＝０．４０
0005851493.tif 000025
【００３１】
［１８Ｆ］３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−フルオロエトキシ）ピリジンの放射性合成：
0005851493.tif 000026
サイクロトロンにより生成された［１８Ｆ］フッ化カリウムが固定されたカートリッジから、この放射性核種を、９００μＬのアセトニトリル、１００ μＬの水、２０ｍｇのKryptofix、及び３０μＬの１Ｍ  Ｋ２ＣＯ３溶液よりなる溶液で溶出し、この混合物を、アルゴン気流下、８５℃でエバポレートして乾燥した。この残渣を、アルゴン気流下で、各１ｍＬの無水アセトニトリルを用いて２回、共沸乾燥した。次いで、５ｍｇの３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−ブロモエトキシ）ピリジンの溶液を加え、この混合物を１２０℃で２０分間加熱した。室温に冷却後、この溶液を直接ＨＰＬＣ（Kromasil 100-10 C18、７  ｍＬ／ｍｉｎ、ＣＨ３ＯＨ／Ｈ２Ｏ／トリエチルアミン  ７０／３０／０．１  ｖ／ｖ／ｖ）にかけた。放射化学的収率は２０％であった。
【００３２】
合成例２
工程１：２−ブロモ−６−（２−フルオロエトキシ）ナフタレン
0005851493.tif 000027
２５ｍＬのＤＭＦ中、２．３７ｇ（１０．６ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−６−ナフトール、３．４２ｇ（２４．４ｍｍｏｌ）のＫ２ＣＯ３、及び４．１６ｇ（１９．１ｍｍｏｌ）の２−フルオロエチルトシレートの溶液を６０℃で一晩加熱した。この溶液を３００ｍＬの水に注ぎ、クロロホルム（３ｘ１００ｍＬ）で抽出した。この有機層を、１００ｍＬの１Ｎ ＮａＯＨ及び１００ｍＬの水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を揮散後に、粗生成物をカラム・クロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ８０／２０）で精製した。
【００３３】
生成物の特性：
外見：黄色固体
融点：８３〜８５℃
収量：２．７０ｇ（１０．０ｍｍｏｌ、９４．３％）
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  ２−ブロモ−６−ナフトール（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ８０／２０）＝０．４５
Ｒｆ  ２−ブロモ−６−（２−フルオロエトキシ）ナフタレン（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ８０／２０）＝０．６５
0005851493.tif 000028
【００３４】
工程２：２−（２−フルオロエトキシ）ナフタレン−６−ボロン酸
0005851493.tif 000029
１９ｍＬのトルエン及び５ｍＬのＴＨＦ中、３．５ｍＬ（２．８４ｇ、１５．１ｍｍｏｌ）のホウ酸トリイソプロピルエステル及び３．３５ｇ（１２．４ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−６−（２−フルオロエトキシ）ナフタレンの溶液を、アルゴン下で−４０℃に冷却した。６．３ｍＬ（１５．７ｍｍｏｌ）の２．５Ｍ  ｎ−ブチルリチウム・ヘキサン溶液を注射器により加えた。３０分後に、この溶液を−２０℃まで昇温し、１３ｍＬの２Ｎ  ＨＣｌを滴下により加えた。水層を分離し、固体ＮａＯＨを添加して中和し、５ｇのＮａＣｌで飽和させた。ＴＨＦ（３ｘ３０ｍＬ）による抽出後に、溶媒を減圧下に揮散し、粗生成物を１３ｍＬのアセトニトリルと共に７０℃に加熱した。冷蔵庫中で冷却後に生成物が沈殿した。
【００３５】
生成物の特性：
外見：白色固体
融点：＞２００℃
収量：１．９６ｇ（８．４ｍｍｏｌ、６７．５％）
有機溶媒に不溶；従って１Ｈ−ＮＭＲによる構造決定は行っていない。
【００３６】
工程３：３−（６−（２−フルオロエトキシ）−２−ナフチル）−４−メチルピリジン
0005851493.tif 000030
１１１μＬ（１７２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−４−メチルピリジン、４４ｍｇ（０．０４ｍｍｏｌ）のテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０）、２８１ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）の２−（２−フルオロエトキシ）−２−ナフタレン−６−ボロン酸、及び４７４ｍｇ（１．５１ｍｍｏｌ）水酸化バリウム八水和物の溶液をアルゴンで脱気した。６ｍＬジメトキシエタン及び１ｍＬの水を注射器により加え、この溶液を一晩８０℃で加熱した。溶媒を揮散後に、５０ｍＬの水を加え、溶液をクロロホルム（５ｘ３０ｍＬ）で抽出した。溶液をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、溶媒を揮散後に、粗生成物をカラム・クロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９８／２）により精製した。
【００３７】
生成物の特性：
外見：黄色油状物質
収量：１３０ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ、４６％）
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  ３−ブロモ−４−メチルピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９８／２）＝０．５０
Ｒｆ  ３−（６−（２−フルオロエトキシ）−２−ナフチル）−４−メチルピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９８／２）＝０．２０
0005851493.tif 000031
【００３８】
好適な化合物
式（Ｉ）の化合物は、好適には以下の置換基を有する：
１．  Ｒ１がＣＨ２ＣＨ２Ｘを表す場合：
１．１−  Ｒ２及びＲ３はＨであり、かつＲ４は以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、ｄ、若しくはｅ：
0005851493.tif 000032
のうちの１つであるか、
１．２−  又はＲ２及びＲ４はＨであり、かつＲ３は以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、若しくはｄ：
0005851493.tif 000033
のうちの１つであるか、
１．３−  又はＲ２はＨであり、かつＲ３及びＲ４はピリジン環と共にイソキノリン環系を形成する。
２．  Ｒ１がＣＨ３の場合：
２．１−  Ｒ２及びＲ３はＨであり、かつＲ４は以下の置換基ａ、ｂ、ｃ、ｄ、若しくはｅ：
0005851493.tif 000034
のうちの１つであるか、
２．２−  又はＲ２は以下の置換基ａ若しくはｂ：
0005851493.tif 000035
のうちの１つであり、
かつＲ３及びＲ４はピリジン環と共にイソキノリン環系を形成するか、
２．３−  又はＲ２は以下の置換基ａ若しくはｂ：
0005851493.tif 000036
のうちの１つであり、
かつＲ３はＨであり、かつＲ４は以下の置換基ａ若しくはｂ：
0005851493.tif 000037
のうちの１つである。
【００３９】
好適な化合物として以下のものを含む：
0005851493.tif 000038
である
0005851493.tif 000039
0005851493.tif 000040
0005851493.tif 000041
である
0005851493.tif 000042
0005851493.tif 000043
である
0005851493.tif 000044
0005851493.tif 000045
である
0005851493.tif 000046
。
【００４０】
上記の化合物で、可変部"Ｘ"は上記で定義されたものと同じ意味を有する。特にこの化合物が放射性トレーサーである場合、"Ｘ"は１８Ｆを表し、この化合物が放射性トレーサーを作製するための前駆体である場合、"Ｘ"はＢｒ、Ｉ、トシレート、又はメシレートなどの脱離基を表す。
【００４１】
ＣＹＰ１１Ｂ２（アルドステロン合成酵素）に対するＩＣ５０で表される親和性を試験するため、及びＣＹＰ１１Ｂ１（１１β−ヒドロキシラーゼ）に比較したＣＹＰ１１Ｂ２に対する選択性（以下ではインビトロでの選択度と呼ぶ）を試験するために、上記の放射性トレーサーの、非放射性フッ素によりフッ素化されたいくつかの類似体が、以下のように調製された。
【００４２】
非放射性の参照化合物１ａ＊の合成
工程１：２−フルオロエチルトシレートの合成
0005851493.tif 000047
２２．９ｍＬ（２５ｇ、３９１ｍｍｏｌ）の２−フルオロエタノールのピリジン溶液３００ｍＬを氷浴中で冷却し、そこに１６３ｇ（８５０ｍｍｏｌ）の塩化トシルをアルゴン下で３０分間にわたって少量ずつ加えた。氷浴上で更に４時間撹拌を行い、３００ｇの氷及び５００ｍＬの水を加えた。１０００ｍＬの酢酸エチルを加えた後に層を分離し、この有機層を、５００ｍＬの５％炭酸ナトリウム溶液及び２００ｍＬの水で洗浄した。硫酸ナトリウム上で乾燥した後に、溶媒を揮散すると粗生成物が油状物質として得られ、これをオイル真空ポンプを用いた蒸留（１〜２ｍｂａｒで約１００℃）により精製した。
６１．２７ｇ（２８０．７ｍｍｏｌ、７１．８％収率）の無色液体が得られた。
【００４３】
生成物の特性：
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  塩化トシル（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９８／２）＝０．８５
Ｒｆ  ２−フルオロエチルトシレート（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ９８／２）＝０．３５
0005851493.tif 000048
【００４４】
工程２：３−ブロモ−５−（２−フルオロエトキシ）ピリジンの合成
0005851493.tif 000049
１．０ｇ（５．７５ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−５−ヒドロキシピリジン、１．８５ｇ（１３．２ｍｍｏｌ）のＫ２ＣＯ３、及び２．２５ｇ（１０．３ｍｍｏｌ）２−フルオロエチルトシレートのＤＭＦ溶液１４ｍＬを、一晩６０℃に加熱した。室温に冷却後、オイルポンプにより蒸発除去し、残渣を１００ｍＬの水に吸収させ、各５０ｍＬのクロロフォルムで３回抽出した。溶媒を揮散後、得られた粗生成物をカラム・クロマトグラフィーにより精製した。
１：５００ｍＬ  ＣＨ２Ｃｌ２
２：ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ  ９８／２
１．０４ｇ（４．７３ｍｍｏｌ、８２．２％収率）の黄色固体が得られた。
【００４５】
生成物の特性：
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  ３−ブロモ−５−ヒドロキシピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．０５
Ｒｆ  ３−ブロモ−５−（２−フルオロエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．２５
0005851493.tif 000050
【００４６】
工程３：３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−フルオロエトキシ）ピリジン（１ａ＊）の合成
0005851493.tif 000051
３１ｍＬのメタノール中、６４２ｍｇ（２．５ｍｍｏｌ）の６−メトキシ−２−ナフタレンボロン酸、７００ｍｇ（３．１８ ｍｍｏｌ）の３−ブロモ−５−（２−フルオロエトキシ）ピリジン、２．１０ｇ（１９．７ｍｍｏｌ）のＮａ２ＣＯ３、９ｍＬの水、及び１３７ｍｇ（０．０１３ｍｍｏｌ）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムの溶液を、アルゴン下で一晩８０℃に加熱した。溶媒を蒸発除去後、残渣を５０ｍＬの水に溶解し、塩化メチレンで３回抽出し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、溶媒を揮散後に粗生成物をカラム・クロマトグラフィーにより精製した：
１．ＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）
２．ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ９８／２
６６９ｍｇ（２．２５ｍｍｏｌ、９０．０％収量）の白色固体が得られた。
【００４７】
生成物の特性：
融点：１３９〜１４１℃
薄層クロマトグラフィー（シリカゲル）：
Ｒｆ  ３−ブロモ−５−（２−フルオロエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．２５
Ｒｆ  ３−（６−メトキシ−２−ナフチル）−５−（２−フルオロエトキシ）ピリジン（ＣＨ２Ｃｌ２）＝０．１０
0005851493.tif 000052
【００４８】
上記の１ｂ、１ｊ、２ａ、２ｃ、２ｄ、及び２ｅに対応する非放射性化合物は、上述の非放射性化合物１ａ＊の調製手順と類似の方法により調製した。それらの化合物は、以下では１ｂ＊、１ｊ＊、２ａ＊、２ｃ＊、２ｄ＊、及び２ｅ＊と表される。これらは、フッ素原子が放射性同位元素ではない点以外は、上述の化合物１ｂ、１ｊ、２ａ、２ｃ、２ｄ、及び２ｅと同じ化学式を有する。
【００４９】
ＣＹＰ１１Ｂ１阻害及びＣＹＰ１１Ｂ２阻害のＩＣ５０値の測定のための、非放射性化合物１ａ＊、１ｂ＊、１ｊ＊、２ａ＊、２ｃ＊、２ｄ＊、及び２ｅ＊のインビトロでの試験を実施するため、リポソーム／脂質媒介ＤＮＡトランスフェクションを用いて、Ｙ１細胞中でＣＹＰ１１Ｂ１及びＣＹＰ１１Ｂ２酵素を発現させた。ＣＹＰ１１Ｂ１阻害及びＣＹＰ１１Ｂ２阻害を評価するために、２ｍＬの培地中のｈｓＣＹＰ１１Ｂ１−及びｈｓＣＹＰ１１Ｂ２−発現Ｙ１細胞を、６穴プレート（０．５ｘ１０６ 細胞／ウエル）上で継代培養した。２４時間後に、基質として１１−デオキシコルチゾール（ＲＳＳ）又は１１−デオキシコルチコステロン（ＤＯＣ）のいずれか、及び対応する阻害剤を含む１ｍＬの培地を加えることにより、酵素反応を開始させた。ＲＳＳ及びＤＯＣは、１ μＭの最終試験濃度になるようにエタノールに溶解した。ＩＣ５０ 値の測定のために、これらの阻害剤を０．１ ｎＭ〜１０ μＭの濃度で培地に加え、４８時間インキュベートした。阻害剤を加えずに、同様の方式で処理した細胞を対照とした。更なる対照として、トランスフェクトしていないＹ１ 細胞もそれぞれＲＳＳ及びＤＯＣと共にインキュベートした。ＲＳＳ及びＤＯＣの両方ともＳｉｇｍａ社（デイゼンホーフェン（Ｄｅｉｓｅｎｈｏｆｅｎ）、ドイツ）から入手した。
【００５０】
上記で定義された化合物に対して得られた結果を下表に示す。
0005851493.tif 000053
【００５１】
上の表のデータに見られるように、本明細書に記載される放射性トレーサーに対応する化合物は、選択的にアルドステロン合成酵素に結合し、対応する放射性トレーサーを、副腎を有する哺乳動物の生体内でのアルドステロン合成酵素活性のＰＥＴ画像化に用い得ることを示している。
【００５２】
全体として、本明細書に記載される本発明は、以下の困難を克服するものである：
１．本方法は酵素濃度の定量的な測定を可能にする。
２．本方法の解像度はConn腺腫を検出するのに十分なものである。
３．生体組織を放射線に曝露することを最小化するため、本発明の放射性トレーサーは数時間の範囲の物理的な半減期を有する。
４．望ましくない副作用を最小化するために、片側性及び両側性過形成を鑑別診断するための放射性トレーサーの用量は極めて少ない（＜１μｇ）。
５．アルドステロン合成酵素の酵素濃度は球状帯の規定領域、すなわち腺腫においてのみ高いため、本発明の放射性トレーサーは、ＩＣ５０値において２５ｎＭ未満、好適には１０ｎＭ未満などの、標的酵素に対する高い親和性を有する。
６．最大の問題は、第二の酵素である１１β−ヒドロキシラーゼ（ＣＹＰ１１Ｂ１）の存在である。この酵素はアルドステロン合成酵素に対して高い相同性（９５％）を有するが、原発性高アルドステロン症では過剰発現されず、従って適切な標的酵素にはならない。この困難性は、正常な副腎の１１β-ヒドロキシラーゼが、アルドステロン合成酵素よりも高濃度で発現されるという事実により、いっそう悪化する。従って、適切に放射性標識された酵素阻害剤は、アルドステロン合成酵素にのみ選択的に結合すべきであるが、このことは２つの酵素の類似性による問題を呈示する。本発明の放射性トレーサーは、ＣＹＰ１１Ｂ２対ＣＹＰ１１Ｂ１で、少なくとも５、より好適には少なくとも１０の選択度を有する。
７．本発明の放射性トレーサーは、１８Ｆの半減期以下の時間内に、本発明の前駆体から作製することができる。好適な実施形態では、この時間は１時間以下である。
８．本発明の放射性トレーサーは、本発明の前駆体からワンポット反応により作製でき、好適には、このワンポット反応は、反応を行う要員の被曝の危険性を低下させるために自動化される。
【００５３】
本発明のＰＥＴ解析方法は、困難かつ臨床的に重要な、原発性高アルドステロン症の片側性形態と両側性形態との間の鑑別診断を可能にする。この非侵襲的方法を使用することにより、副腎の静脈カテーテルの上記短所を回避することができる。本発明の放射性トレーサーは、効率的に生産することができ、また、標識核種としてフッ素−１８を使用することにより、自身のＰＥＴ装置は有するがサイクロトロン又は放射化学設備を持たない診療施設若しくは個人の診療所に容易に送付できる。