(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の構造式（I）で表されることを特徴とする化合物またはその薬理学的に許容しうる塩。
【化１】
0005851053.tif 000029
（該構造式中、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６炭化水素基を表わし、Ｒ２は、ハロゲンを表す）
【請求項２】
Ｒ１は、メチル基またはエチル基を表すことを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容しうる塩。
【請求項３】
Ｒ２は、塩素またはフッ素を表すことを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容しうる塩。
【請求項４】
次の構造式で表される化合物またはその薬理学的に許容しうる塩であることを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容しうる塩。
【化２】
0005851053.tif 000030
【請求項５】
前記その薬理学的に許容しうる塩は、請求項１に記載の化合物のアルギニン塩、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩または酒石酸塩であることを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容しうる塩。
【請求項６】
請求項１に記載の化合物またはその薬理学的に許容しうる塩、および薬理学的に許容しうる担体を含む医薬組成物。
【請求項７】
請求項１〜６の何れか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容しうる塩を用いて、腫瘍性疾患を治療する薬物を製造する方法。
【請求項８】
前記腫瘍性疾患は、胃癌、肺癌、肝臓癌、乳癌、結腸癌、前立腺癌または口腔癌であることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、薬化学分野に関し、特にアザベンゾ[ｆ]アズレン誘導体（I）およびその抗腫瘍作用に関する。
【背景技術】
【０００２】
悪性腫瘍は、人々の健康を深刻に脅かしている。ＷＴＯの統計によれば、悪性腫瘍で亡くなった人数は、毎年平均で、全世界の５０億余りの人口のうち６９０万人以上に上がっている。また、新たに発症した者は８７０万人になり、さらにこの数は毎年増えている。
【０００３】
従って、抗腫瘍薬物の研究・開発は、現今のライフサイエンスにおいて、すでに非常に挑戦に富んだ重要な意義を持つ分野となった。近年、ライフサイエンス研究の急速な発展につれ、悪性腫瘍細胞内の信号変換、細胞周期調節、細胞アポトーシス(ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)誘導、血管新生（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）および細胞と細胞外の基質相互作用等の基本プロセスが次第に解明されてきた。その結果として、現今の抗腫瘍薬の研究・開発の焦点は、従来の低選択性かつ高毒性の細胞障害性薬物から、腫瘍細胞分化増殖に関連する細胞信号の伝達経路の鍵酵素を薬物標的として、特定の薬物標的に選択的に作用される高効率、低毒性かつ特異性の強い新型の抗腫瘍薬を発見することに移行してきた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、アザベンゾ[ｆ]アズレン誘導体を開示する。本発明の化合物が優れた抗腫瘍作用を有することは、薬理試験によって証明された。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明のアザベンゾ[ｆ]アズレン誘導体の構造式（I）は、次の通りである。
【０００６】
【化１】
0005851053.tif 000002
【０００７】
式中、Ｒ１はＣ１〜Ｃ６の炭化水素基を表わし、Ｒ２はハロゲンを表すものである。
【０００８】
Ｒ１は、好ましくはメチル基またはエチル基を表すものである。
【０００９】
Ｒ２は、好ましくは塩素またはフッ素を表すものである。
【００１０】
さらに好ましい化合物は、次の通りである。
【００１１】
【化２】
0005851053.tif 000003
【００１２】
化合物I−２は、９−（２−クロロフェニル）―６−エチル−１−メチル−２，４−二水素―２，３，４，７，１０−ペンタアザベンゾ[ｆ]アズレン（９−（２−ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）−６−ｅｔｈｙｌ−１−ｍｅｔｈｌｙ−２，４−ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎ−２，３，４，７，１０−ｐｅｎｔａａｚａ−ｂｅｎｚｏｔａａｚａ−ｂｅｎｚｏ[ｆ]ａｚｕｌｅｎｅ）と名付けられる。
【００１３】
本発明の化合物（I）は、薬理学的に許容される塩と化合して塩を形成する。薬理学的に許容される塩として、有機酸形態または無機酸形態を採用することができる。例えば、塩は、塩酸、硫酸、リン酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、酒石酸または似たような酸であって薬理学的に許容される既知の酸によって形成される。
【００１４】
本発明の化合物（I）は次の方法を用いて製造することができる。
【００１５】
【化３】
0005851053.tif 000004
【００１６】
構造式中、Ｒ１およびＲ２は、前で定義されたものと同一である。
【００１７】
本発明の化合物は、薬理学的に許容される担体（ｃａｒｒｉｅｒ）を添加して汎用薬剤の製造に使用されることができる。該汎用薬剤は、例えば、タブレット、カプセル、パウダー、シロップ、溶液（ｓｏｌｕｔｉｏｎ）、懸濁液（ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）、注射液（ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）がある。該汎用薬剤に、香料、甘味料、液体または固体充填剤、または希釈液等の汎用賦形剤（ｃｏｍｍｏｎ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ）を加えることができる。
【００１８】
本発明の前記化合物は、臨床上の投与方法として内服と注射等がある。
【００１９】
本発明の化合物は、臨床用量が０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇ／日である。また、症状の程度または剤系（ｄｏｓａｇｅ ｆｏｒｍ）に応じてこの範囲から外れた用量を用いてもよい。
【００２０】
薬理試験により、本発明の化合物は優れた抗腫瘍活性を有し、そのＩＣ５０値は０．０３〜１２．６μＭの範囲にある。このため、本発明の化合物は腫瘍薬物の製造に使用されうる。以下に本発明の一部の化合物の薬効試験の結果を示す。化合物I−１とI−３の構造式は実施例を参照されたい。
【００２１】
一．ＭＴＴ法を用いて、化合物I−１、I−２およびI−３による、複数のヒト腫瘍細胞株（ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ）の増殖抑制に対する作用を評価する。
【００２２】
評価の方法は、次の通りである。
【００２３】
対数増殖期にある細胞（ヒト胃癌細胞株ＳＧＣ−７９０１、ＭＧＣ−８０３、ヒト口腔類表皮癌細胞株ＫＢ、ヒト非小細胞肺癌細胞株Ａ５４９、ヒト乳癌細胞株ＢＴ−５４９、ヒト前立腺癌細胞株ＰＣ−３、ヒト結腸癌細胞株ＨＴ−２９、ヒト膠芽腫細胞株（ｈｕｍａｎ ｂｒａｉｎ ａｓｔｒｏｃｙｔｉｃ ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ）Ｕ−８７ＭＧおよびヒト肝臓癌細胞株ＳＭＭＣ−７７２１）は、１．５×１０４の濃度で、９６ウェルプレートに栽培された。細胞を２４時間栽培して付着後、本来の培地を除去した。試験は、空白対照群（ｂｌａｎｋ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ）と薬物治療群（ｄｒｕｇ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｇｒｏｕｐ）に分けられた。空白対照群については、１０％のウシ胎仔血清を含んだ１６４０培地で置き換えられた。薬物治療群については、濃度がそれぞれ１００μＭ、５０μＭ、１０μＭ、１μＭ、０．１μＭ、０．０１μＭ、０．００１μＭ、０．０００１μＭと０．００００１μＭである、測定される化合物I−１、I−２およびI−３を含んだ培地で置き換えられた。９６時間の栽培後、試験対象物に、５ｍｇ／ｍＬ濃度のＭＴＴを添加して、ＣＯ２インキュベータに入れ、４時間栽培した。そして、培養液の上部に沿って、１００μＬの上清液（ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ）を取り、１００μＬのＤＭＳＯを添加して暗所に１０分置いた。そして、マイクロプレートリーダー（Ｓｕｎｒｉｓｅ社製）を用いて吸光度（波長５７０ｎｍ）を測定し、吸光度の値に基づいて細胞の生存状況を算出した。処理毎に６つの二重ウェル（ｄｕｐｌｉｃａｔｅ ｗｅｌｌ）が設けられている。細胞の生存率（％）は、ΔＯＤ薬物処理／ΔＯＤ空白対照×１００である。
【００２４】
その結果として、３種の化合物は複数の種類のヒト腫瘍細胞株の生成に一定の抑制作用を有することが分かった。そのうち、化合物I−１とI−２は極めて顕著な抑制作用を有する。ソフトウェアＳｉｇｍａｐｌｏｔ（登録商標）１０．０を用いて、３種の化合物の複数の種類のヒト腫瘍細胞株の生長に対して抑制するＩＣ５０値のそれぞれを算出した（次の表１参照）。
【００２５】
【表１】
0005851053.tif 000005
【００２６】
二．生体内動物試験により、本発明の化合物による、ヌードマウス（ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ）に移植されたヒト胃癌ＳＧＣ−７９０１の増殖に対する抑制作用が確認された。
【００２７】
試験の方法は、次の通りである。
【００２８】
１．以下は、ヌードマウス移植のヒト胃癌細胞ＳＧＣ−７９０１のモデルの確立および動物のグループ分けである。ＳＧＣ−７９０１細胞は、１０％のウシ胎仔血清を含んだＲＰＭＩ１６４０培養液で培養される。対数増殖期のＳＧＣ−７９０１細部を取り、トリプシン処理して単細胞懸濁液を調製した。そして、ＲＰＭＩ１６４０培養液を用いて、細胞を、最終濃度が５×１０７個／ｍＬになるように調整した。ヌードマウス毎に、右前腋窩線に０．２ｍＬの細胞懸濁液を皮下注射した。接種１４日後、腫瘍のサイズが１３０〜１８０ｍｍ３になったとき、腫瘍のサイズと体重に応じてヌードマウスを、ランダムに５つのグループに分けた。１つのグループに８〜１２匹のヌードマウスがいる。５つのグループのそれぞれは、空白対照群（０．５％のヒドロキシプロピルメチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙ  ｌｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）と０．１％のツイン８０（ｔｗｅｅｎ８０）を含んだ純水で、朝晩１回ずつ、１０日間、灌胃（ｇａｖａｇｅ）で薬投与した）と、１２．５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇの化合物I−１の治療群（朝晩１回ずつ、１０日間連続で、灌胃で薬投与した）と、１００ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミド群（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）（ＣＹＰ）（腹腔内注射を５日に１回、２週間続けた）であった。
【００２９】
２．以下、ヒト胃癌のヌードマウス皮下移植瘤の生長状況および腫瘍抑制効果に対する観察について説明する。薬の投与日から、２日毎に、ヌードマウスの体重および瘤体の最大径（Ｄ）と最小径（ｄ）を観測した。そして、数式Ｖ＝Ｄｄ２／２に基づいて腫瘍の体積を算出して、腫瘍生長曲線を描いた。試験終了後、腫瘍を完全に剥離して、写真を撮った。ヌードマウスの治療前後の体重増加率は、[（治療後体重−治療前体重）／治療前体重]×１００％であり、腫瘍抑制率は、［１−（試験群の治療後の瘤体体積−試験群治療前の瘤体体積）／（空白対照群の治療後の瘤体体積−空白対照群治療前の瘤体体積）］×１００％である。
【００３０】
その結果として、図１と図２から分かるように、化合物I−１は、ヒト胃癌ＳＧＣ−７９０１のヌードマウス移植瘤の生長を抑制する、比較的に高い活性を有する。化合物I−１の治療群、特に最大用量群は、移植瘤を顕著に抑制することができる。１２．５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇおよび５０ｍｇ／ｋｇI−１の治療群の、最終的な腫瘍生長抑制率のそれぞれは、６７．５％、８３％、および８８．６％であった（表２参照）。図３から分かるように、化合物I−１は、薬物の最大用量５０ｍｇ／ｋｇ時にのみ、ヌードマウスの体重増加に微小な影響を与えた。このことから、化合物I−１は毒性副作用が低く安全性が高いものであり、抗腫瘍薬物に開発される潜在的価値を有する。
【００３１】
【表２】
0005851053.tif 000006
【００３２】
三．生体内動物試験により、本発明の化合物による、ヌードマウスに移植されたヒト胃癌ＭＧＣ−８０３の成長に対する抑制作用が確認された。
【００３３】
試験方法は次の通りである。
【００３４】
１．以下は、ヌードマウス移植のヒト胃癌細胞ＭＧＣ−８０３のモデルの確立および動物のグループ分けである。ＭＧＣ−８０３細胞は、１０％のウシ胎仔血清を含んだＲＰＭＩ１６４０培養液で培養される。対数増殖期のＭＧＣ−８０３細胞を取り、トリプシン処理して単細胞懸濁液を調製した。そして、最終濃度が５×１０７個／ｍＬになるように、ＲＰＭＩ１６４０培養液を用いて懸濁液を調整した。ヌードマウス毎に、右前腋窩線に０．２ｍＬの細胞懸濁液を皮下注射した。接種８日後、腫瘤の体積が約１１０ｍｍ３になったとき、腫瘤の体積とヌードマウスの体重に応じて、ヌードマウスをランダムに５つのグループに分け、１つのグループに８〜１２匹のヌードマウスがいる。５つのグループのそれぞれは、空白対照群（０．５％のヒドロキシプロピルメチルセルロースと０．１％のツイン８０を含んだ純水で、１日１回、１０日連続で、灌胃で薬投与した）と、４ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇおよび９ｍｇ／ｋｇの化合物I−２の治療群（１日１回、１７日連続、灌胃で薬投与した）と、１００ｍｇ／ｋｇのシクロホスファミド群（腹腔内注射を、７日に１回、３週間続けた）であった。
【００３５】
２．以下、ヒト胃癌のヌードマウス皮下移植瘤の生長状況および腫瘍抑制効果に対する観察について説明する。薬の投与日から、３〜４日毎に、ヌードマウスの体重および瘤体の最大径（Ｄ）と最小径（ｄ）を観測した。そして、数式Ｖ＝Ｄｄ２／２に基づいて腫瘍の体積を算出して、腫瘍生長曲線を描いた。試験終了後、腫瘍を完全に剥離して、写真を撮った。ヌードマウスの治療前後の体重増加率は、[（治療後体重−治療前体重）／治療前体重]×１００％、腫瘍抑制率は、［１−（試験群の治療後の瘤体体積−試験群治療前の瘤体体積）／（空白対照群の治療後の瘤体体積−空白対照群治療前の瘤体体積）］×１００％によって算出された。
【００３６】
その結果として、図４と図５から分かるように、化合物I−２はヒト胃癌ＭＧＣ−８０３のヌードマウス移植瘤の生長を抑制する、優れた活性を有することが分かった。表３から分かるように、化合物I−２の治療群は、ヒト胃癌移植瘤の生長を顕著に抑制することができる。４ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇおよび９ｍｇ／ｋｇの化合物I−２の治療群の、最終的な腫瘍生長抑制率のそれぞれは、７２．５％、９７．３％、および１００％であった。また、図６から分かるように、化合物I−２は、３〜６日の治療で薬物の最大用量９ｍｇ／ｋｇ時にのみ、ヌードマウスの体重増加に微小な影響を与えた。このことから、化合物I−２は毒性副作用が低く安全性が高いものであり、抗腫瘍薬物に開発される潜在的価値を有する。
【００３７】
【表３】
0005851053.tif 000007
【００３８】
以上の試験から明らかなように、本発明の化合物は、多種類のヒト腫瘍細胞株に対して顕著な抗増殖活性を有する。さらに、動物試験から分かるように、化合物I−２は、生体内の腫瘍生長を抑制する高効率な活性を有するだけでなく、毒性副作用が低く、安全性が高い。これらの試験結果により、本発明の化合物は、癌治療、特に胃癌、肺癌、肝臓癌、乳癌、結腸癌、前立腺癌と口腔癌等の固形腫瘍の治療に有用であることが示された。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】化合物I−１のヒト胃癌ＳＧＣ−７９０１移植瘤生長に対する影響を示す図である。
【図２】５群のヒト胃癌ＳＧＣ−７９０１移植瘤治療後の腫瘍の大きさを示す図である。
【図３】各群のヌードマウスの薬物治療後の体重変化を示す図である。
【図４】化合物I−２のヒト胃癌ＭＧＣ−８０３移植瘤生長に対する影響を示す図である。
【図５】５群のヒト胃癌ＭＧＣ−８０３移植瘤治療後の腫瘍の大きさを示す図である。
【図６】各群のヌードマウスの薬物治療後の体重変化を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
以下に、本発明の実施例を説明する。これら実施例は、本発明の（ａ）化合物またはその薬理学的に許容しうる塩、（ｂ）化合物またはその薬理学的に許容しうる塩、および薬理学的に許容しうる担体を含む医薬組成物、（ｃ）化合物またはその薬理学的に許容しうる塩の用途のいずれかの実施例に相当する。
【００４１】
本発明では、前述の構造式I−１およびI−２に関連して説明したように、Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６炭化水素基を表わし、Ｒ２は、ハロゲンを表す。Ｒ１は、例えばメチル基またはエチル基を表す。Ｒ２は、例えば塩素またはフッ素を表す。
【００４２】
本発明の薬理学的に許容しうる塩は、例えば化合物のアルギニン塩、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩または酒石酸塩である。
【００４３】
化合物またはその薬理学的に許容しうる塩の用途として、腫瘍性疾患を治療する薬物を、製造するために用いる。腫瘍性疾患は、例えば胃癌、肺癌、肝臓癌、乳癌、結腸癌、前立腺癌または口腔癌である。
【００４４】
（実施例１）
以下、化合物I−１の製造について説明する。
【００４５】
化合物III−１は、次のように合成される。
【００４６】
【化４】
0005851053.tif 000008
【００４７】
トリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）（５６ｇ，５５３．５ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を、化合物II−１（６９ｇ，３６９ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）のジクロロメタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ）（ＤＣＭ）（１Ｌ）溶液に添加して、０℃まで冷却した。そして、得られた溶液に、ピバロイルクロリド（ｐｉｖａｌｏｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（５３．４ｇ，４４２．８ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）のＤＣＭ（１７０ｍＬ）溶液を滴加した。得られた溶液を１５℃まで加熱して、１０時間攪拌反応させた。その後、反応溶液を水で洗い、そして塩水で洗ってから、無水硫酸ナトリウム（ａｎｈｙｄｒｏｕｓ ｓｏｄｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ）で乾燥させ、濃縮して７６ｇの白色固体である化合物III−１を得た。その収率（ｙｉｅｌｄ）は７６．０％であった。
【００４８】
化合物IV−１は次のように合成される。
【００４９】
【化５】
0005851053.tif 000009
【００５０】
Ｎ２環境下および−７８℃下で、化合物III−１（６７．８ｇ，０．２５ｍｏｌ，１．０ｅｑ）とテトラメチルエチレンジアミン（ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ）（ＴＭＥＤＡ）（８７．１５ｇ，０．７５ｍｏｌ，３．０ｅｑ）のＴＨＦ（６００ｍＬ）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍのノルマルヘキサン溶液）（３００ｍＬ，０．７５ｍｏｌ，３．０ｅｑ）を滴加する。滴加終了後に、反応物を−７８℃下で、２時間攪拌しながら反応させた。そして、−７８℃下で、前記反応物に、２−クロロベンズアルデヒド（２−Ｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚａｌｄｅｈｙｄｅ）のテトラヒドロフラン（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｕｒａｎ）（ＴＨＦ）（２００ｍＬ）溶液を滴加する。滴加終了後に、−７８℃下で、４時間攪拌反応させた。そして、得られた反応物に、−７８℃下で、Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）をゆっくり滴加して、室温まで昇温させた。そして、酢酸エチル（ＥＡ）を添加し、有機相（ｏｒｇａｎｉｃ ｐｈａｓｅ）を水で洗い、そして塩水で洗った。次に、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。さらに、石油エーテル（ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ）（ＰＥ）：ＥＡ＝３：１の溶液を溶離液として、カラムクロマトグラフィー（ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）で７０．０ｇの白色固体である化合物IV−１を得た。その収率は８４．１％であった。
【００５１】
化合物V−１は次のように合成される。
【００５２】
【化６】
0005851053.tif 000010
【００５３】
化合物IV−１（７０ｇ，０．２１ｍｏｌ，１．０ｅｑ）のＥＡ（１３００ｍＬ）溶液に、ＭｎＯ２（１２７．９ｇ，１．４７ｍｏｌ，７．０ｅｑ）を添加し、Ｎ２環境下で、１５時間加熱還流した（ｈｅａｔｅｄ ｔｏ ｒｅｆｌｕｘ）。そして、得られた溶液を濾過し、濾過した濾液を濃縮して４９．８ｇの白色固体である化合物V−１を得た。その収率は７１．７％であった。
【００５４】
化合物VI−１は次のように合成される。
【００５５】
【化７】
0005851053.tif 000011
【００５６】
化合物V−１（４９．８ｇ，０．１５ｍｏｌ，１．０ｅｑ）をメタノール（ｍｅｔｈａｎｏｌ）（ＭｅＯＨ）（１Ｌ）に溶解させ、２ＭのＮａＯＨ水溶液（１５０ｍＬ）を添加して、５時間加熱還流した。そして、冷却、濃縮後に３５．４ｇの白色固体である化合物VI−１を得た。その収率は９５．６％であった。
化合物VII−１は次のように合成される。
【００５７】
【化８】
0005851053.tif 000012
【００５８】
トリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）（１５．９ｇ，０．１５７ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を、化合物VI−１（３５．３ｇ，０．１４３ｍｏｌ，１．０ｅｑ）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に添加した。その後、得られた溶液を氷浴下で０℃まで冷却した。そして、臭化ブロモアセチル（ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）（３１．６ｇ，０．１５７ｍｏｌ，１．１ｅｑ）を、当該溶液に滴加した。滴加終了後、得られた溶液を室温において５時間攪拌した。次に、反応物を１００ｍＬの氷水に入れ、ＥＡで抽出した。そして、有機相が結合された後、水で洗い、塩水で洗ってから、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して、ＰＥ：ＥＡ＝２：１を用いてカラムクロマトグラフィーで、３４．２ｇの淡黄色固体である、化合物VII−１を得た。その収率は６５．１％であった。
化合物VIII−１は、次のように合成される。
【００５９】
【化９】
0005851053.tif 000013
【００６０】
化合物VII−１（１４．８ｇ，４０．２５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）と、（ＮＨ４）２ＣＯ３（３０．９ｇ，３２２ｍｍｏｌ，８．０ｅｑ）とアセトニトリル（ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ）（１４００ｍＬ）を、５０℃まで加熱し、１０時間反応させた。得られた反応物を冷却、濾過し、濾液を濃縮して１２．２ｇの白色固体である化合物VIII−１を得た。その収率は１００％であった。
化合物IX−１は次のように合成される。
【００６１】
【化１０】
0005851053.tif 000014
【００６２】
化合物VIII−１（１２．２ｇ，４０．２５ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を、エタノール（ｅｔｈａｎｏｌ）（４５０ｍＬ）に添加し、２４時間加熱還流した。粗生成物を濃縮して、ＰＥ／ＥＡを用い再結晶して、１０．０ｇの白色固体である化合物IX−１を得た。その収率は８７．０％であった。
【００６３】
化合物X−１は次のように合成される。
【００６４】
【化１１】
0005851053.tif 000015
【００６５】
化合物IX−１（１２．０ｇ，４２ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とローソン試薬（Ｌａｗｅｓｓｏｎ’ｓ ｒｅａｇｅｎｔ）（２０．３８ｇ，５０．４ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を、ジメトキシエタン（ｄｉｍｅｔｈｏｘｙｅｔｈａｎｅ）（ＤＭＥ）（１２００ｍＬ）に添加し、８５℃まで加熱して３時間反応させた。そして、得られた溶液を半分まで濃縮し、濃縮した残留物（ｒｅｓｉｄｕｅ）を、冷たいＮａ２ＣＯ３水溶液に入れた。その後、ＥＡ（３００ｍＬ×２）を用いて抽出し、有機相が結合された後、水で洗い、塩水で洗った。そして、得られた溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。得られた粗生成物をＥＡで再結晶して、８．３１ｇの淡黄色固体である化合物X−１を得た。その収率は６５．５であった。
【００６６】
化合物XI−１は次のように合成される。
【００６７】
【化１２】
0005851053.tif 000016
【００６８】
化合物X−１（４．２７ｇ，１４．１４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とＮ,Ｎ-ジメチルアセトアミドジメチルアセタール（Ｎ,Ｎ-Ｄｉｍｅｔｈｙｌａｃｅｔａｍｉｄｅ Ｄｉｍｅｔｈｙｌ Ａｃｅｔａｌ）（ＤＭＡ−ＤＭＡ）（７．５３ｇ，５６．５６ｍｍｏｌ，４．０ｅｑ）を、Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（Ｎ,Ｎ-Ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）（ＤＭＦ）（６０ｍＬ）に添加した。得られた溶液を２０℃で２時間攪拌した後、１１０℃まで加熱し、１０時間反応させた。そして、反応物を濃縮して、４．５７ｇの赤色固体である化合物XI−１を得た。その収率は１００％であった。
【００６９】
化合物I−１は次のように合成される。
【００７０】
【化１３】
0005851053.tif 000017
【００７１】
化合物XI−１（４．５７ｇ，１４．１４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）と無水ヒドラジン（ａｎｈｙｄｒｏｕｓ ｈｙｄｒａｚｉｎｅ）（２．２６ｇ，７０．７ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）を、ＭｅＯＨ（２６ｍＬ）とＤＣＭ（７２ｍＬ）に添加して、２０℃で２４時間を反応させた。得られた反応物を濃縮して粗生成物を得た。そして、得られた粗生成物をＥＡで再結晶して、３．５ｇのオレンジ色固体である化合物I−１を得た。その収率は７６．５％、純度は９９％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）１１．７（ｓ,１Η）,８．４７（ｓ,１Η），７．３６〜７．４９（ｍ,４Ｈ）,７．０６（ｓ,１Ｈ）,６．３５（ｓ,１Ｈ）,２．１３（ｓ,３Ｈ）,１．９８（ｓ,３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋ＡＰＣＩ）Ｍ＋１＝３２４。
【００７２】
（実施例２）
以下、化合物I−２の製造について説明する。
【００７３】
化合物III−２は次のように合成される。
【００７４】
【化１４】
0005851053.tif 000018
【００７５】
化合物II−２（５４．６ｇ，２７２．９ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とトリエチルアミン（Ｅｔ３Ｎ）（１５３．３ｇ，１．０９ｍｏｌ，４．０ｅｑ）を、７００ｍＬのＤＣＭに添加した。そして、得られた溶液を氷浴下で５℃以下まで冷却した。そして、得られた反応液に、ピバロイルクロリド（Ｐｉｖａｌｏｙｌ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（９８．７ｇ，８１８．７ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）が１７０ｍＬのＤＣＭに溶解された溶液を滴加した。滴加終了後、反応液を室温まで昇温し、約１０時間攪拌させた。その後、反応液を水で洗い、塩水で洗ってから、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して５８．１ｇの白色固体である化合物III−２を得た。その収率は７４．７％であった。
【００７６】
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）８．５５（ｓ,１Η）,８．３４（ｓ,１Η），８．１６（ｂｒ,１Ｈ）,２．７６〜２．８１（ｑ,Ｊ＝７．５６，２Ｈ）,１．３７（ｓ,９Ｈ）,１．２８〜１．３２（ｔ,Ｊ＝７．５６，３Ｈ）。
【００７７】
化合物IV−２は次のように合成される。
【００７８】
【化１５】
0005851053.tif 000019
【００７９】
Ｎ２環境による保護下で、化合物III−２（５８．１ｇ，２０３．７ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とＴＭＥＤＡ（７１．０ｇ，６１１．２ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を、６００ｍＬのＴＨＦに溶解した。反応液を−７８℃まで降温して、ｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍのノルマルヘキサン溶液，２４４．５ｍＬ，６１１．２ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を滴加した。滴加終了後、反応液を−７８℃に維持して、１時間攪拌反応させた。次に、ｏ−クロロベンズアルデヒド(ｏ−Ｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚａｌｄｅｈｙｄｅ)（５７．８ｇ，４０７．４ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）が２００ｍＬのＴＨＦに溶解された溶液を、前記反応液に滴加し、反応温度を、−７８℃未満維持した。滴加終了後、反応液を、−７８℃未満維持しつつ、２．５時間攪拌反応させた。反応終了後、−７８℃の時に、酢酸（ａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＡｃＯＨ）（３６．７ｇ，６１１．２ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を滴加して消光反応（ｑｕｅｎｃｈ ｒｅａｃｔｉｏｎ）させた。そして、反応液を室温に昇温した後、ＥＡと水を添加して反応液を希釈した。混合液を分液して有機相を得た。ＥＡを用いて水相を一度抽出した。有機相を結合して、飽和食塩水で一度洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機相を濃縮して、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１〜３：１）で、６０．１ｇの白色固体である化合物IV−２を得た。その収率は８５．２％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）９．６６（ｂｒ,１Η）,８．３０（ｓ,１Η），７．８８（ｓ,１Ｈ）,７．４３（ｄ,Ｊ＝７．７６，１Ｈ）,７．２２〜７．３２（ｍ,１Ｈ）,６．２１（ｓ,１Ｈ），４．９４（ｂｒ，１Ｈ），２．７４〜２．８０（ｑ，Ｊ＝７．５６，２Ｈ），１．２７（ｓ，９Ｈ），１．２８〜１．３０（ｔ，Ｊ＝７．５６，３Ｈ）。
【００８０】
化合物V−２は次のように合成される。
【００８１】
【化１６】
0005851053.tif 000020
【００８２】
化合物IV−２（２２．３ｇ，６４．３ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を５００ｍＬのＥＡに溶解して、ＭｎＯ２（５５．９ｇ，６４３．０ｍｍｏｌ，１０．０ｅｑ）を、３０分置きに１回添加し、計１０回添加した。添加終了後、反応液を室温において８時間攪拌反応させて終了した。反応液を濾過して、濾液を直接に濃縮し乾燥して、２２．２ｇの無色油状物である化合物V−２を得た。その収率は１００．０％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）１１．９５（ｂｒ,１Η）,８．６８（ｓ,１Η），８．４７（ｓ,１Ｈ）,７．４６〜７．５２（ｍ,２Ｈ）,７．３６〜７．４４（ｍ,２Ｈ）,２．８３〜２．８９（ｑ，Ｊ＝７．５６，２Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ），１．３２〜１．３６（ｔ，Ｊ＝７．５６，３Ｈ）。
【００８３】
化合物VI−２は次のように合成される。
【００８４】
【化１７】
0005851053.tif 000021
【００８５】
化合物V−２（２２．２ｇ，６４．３ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を、１ＮのＮａＯＨ（１４０ｍＬ，２．０ｅｑ）水溶液と５００ｍＬのＭｅＯＨの混合溶剤に溶解した。反応液を加熱還流して、４時間攪拌反応させた。ＬＣ−ＭＳ検知材ＸＶＩ−２がなくなると反応が完了した。反応液を濃縮して、残留水相をＥＡで数回抽出した。そして、有機相を結合し、飽和食塩水で１回洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮して１７．５ｇの褐色油状物である化合物VI−２を得た。その収率は１００．０％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）８．２４（ｓ,１Ｈ）,７．３３〜７．４９（ｍ,４Ｈ）,６．４６（ｓ,１Ｈ）,２．６９〜２．７４（ｑ，Ｊ＝７．５６，２Ｈ），１．６０（ｂｒ，２Ｈ），１．２９〜１．３１（ｔ，Ｊ＝７．５６，３Ｈ）。
【００８６】
化合物VII−２は次のように合成される。
【００８７】
【化１８】
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【００８８】
化合物VI−２（１７．５ｇ，６７．１ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とＥｔ３Ｎ（１５．９ｇ，７３．８ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を４００ｍＬのＴＨＦに溶解して、反応液を０℃まで冷却した。このとき、臭化ブロムアセチル（Ｂｒｏｍｏａｃｅｔｙｌ ｂｒｏｍｉｄｅ）（１４．９ｇ，７３．８ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を、反応液にゆっくり滴加し、反応温度を０℃未満維持した。滴加終了後、反応液を室温まで昇温し、一晩攪拌反応させた。反応完了後、反応液を１００ｇの氷水に入れ、得られた混合液から有機相を分離させた。ＥＡで水相を抽出し、有機相を結合した。次に、飽和食塩水で１回洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮して１６．５ｇの黄色固体である化合物VII−２を得た。その収率は６４．７％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）１１．６７（ｂｒ,１Ｈ）,８．３４（ｓ,１Ｈ）,８．３２（ｓ,１Ｈ）,７．６０〜７．６４（ｍ，３Ｈ），７．５２〜７．５５（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｓ，２Ｈ），２．７８〜２．８４（ｑ，Ｊ＝７．５６，２Ｈ），１．２１〜１．２５（ｔ，Ｊ＝７．５６，３Ｈ）。
【００８９】
化合物VIII−２は次のように合成される。
【００９０】
【化１９】
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【００９１】
化合物VII−２（１４．０ｇ，３６．７ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を１４００ｍＬのＣＨ３ＣＮに溶解した。次に、（ＮＨ４）２ＣＯ３（３５．２ｇ，３６６．８ｍｍｏｌ，８．０ｅｑ）を添加した。反応液を室温において一晩攪拌反応させた。反応の終了後、反応液を濾過し、濾過した濾液を直接に濃縮して１１．７ｇの赤色油状物である化合物VIII−２を得た。その収率は１００％であった。
【００９２】
化合物IX−２は次のように合成される。
【００９３】
【化２０】
0005851053.tif 000024
【００９４】
化合物VIII−２（１１．７ｇ，３６．７ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を２００ｍＬのＥｔＯＨに溶解し、加熱還流しながら、約３時間攪拌反応させた。反応が完了した。反応液を直接に濃縮して、粗生成物を得た。ＰＥとＥＡを用いて再結晶して、９．４ｇの黄色固体である化合物IX−２を得た。その収率は８５．４％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）９．２７（ｂｒ,１Ｈ）,８．２４（ｓ,１Ｈ）,７．５３〜７．５６（ｍ，１Ｈ），７．３７〜７．４５（ｍ，３Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），４．４７（ｓ，２Ｈ）２．８５〜２．９０（ｑ，Ｊ＝７．５６，２Ｈ），１．３２〜１．３６（ｔ，Ｊ＝７．５６，３Ｈ）。
【００９５】
化合物X−２は次のように合成される。
【００９６】
【化２１】
0005851053.tif 000025
【００９７】
化合物IX−２（５．０ｇ，１６．７ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を５００ｍＬのＤＭＥに溶解し、ローソン試薬（８．１ｇ，２０．０ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を添加した。反応液を加熱還流して、３時間攪拌反応させた。反応終了後、反応液を、溶剤が半分除去されるように濃縮して、残留の反応液を氷の飽和Ｎａ２ＣＯ３水溶液に入れた。得られた水相を、ＴＨＦで数回抽出した。そして、有機相を結合し、飽和食塩水で１回洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮して粗生成物を得た。さらに、ＥＡを用いて再結晶し、３．５ｇの淡黄色固体である化合物X−２を得た。その収率は６６．５％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）９．８８（ｂｒ,１Ｈ）,８．２５（ｓ,１Ｈ）,７．５５〜７．５７（ｍ,１Ｈ）,７．３７〜７．４４（ｍ,３Ｈ）,６．８６（ｓ,１Ｈ）, ４．８８（ｓ,２Ｈ）,２．８６〜２．９２（ｑ，Ｊ＝７．５６，２Ｈ），１．３２〜１．３６（ｔ，Ｊ＝７．５６，３Ｈ）。
【００９８】
化合物XI−２は次のように合成される。
【００９９】
【化２２】
0005851053.tif 000026
【０１００】
化合物X−２（４．１ｇ，１３．１ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）とＤＭＡ−ＤＭＡ（８，７ｇ，６５．５ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）を８５ｍＬのＤＭＦに溶解した。得られた溶液を、室温において、２時間攪拌反応させた後、８０℃まで昇温し、一晩攪拌反応させた。反応液を直接に濃縮乾燥して、５．２ｇの褐色油状物である粗化合物XI−２を得た。その収率は１００％であった。この粗化合物XI−２は直接に次のステップで使われることになる。
【０１０１】
化合物I−２は次のように合成される。
【０１０２】
【化２３】
0005851053.tif 000027
【０１０３】
化合物XI−２（５．２ｇ，１３．１ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）と無水ヒドラジン（２．１ｇ，６５．５ｍｍｏｌ，５．０ｅｑ）を、６０ｍＬのＭｅＯＨと１２０ｍＬのＤＣＭとの混合溶剤に溶解した。反応液を、室温において、２４時間攪拌反応させた。得られた反応物を濃縮して粗生成物を得た。そして、粗生成物を、ＥＡを用い再結晶して、３．１ｇの黄色固体である純製品I−２を得た。その収率は７１．８％、純度は９８％であった。1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）１１．７（ｂｒ,１Η）,８．４４（ｓ,１Η），７．４６〜７．５０（ｍ,１Ｈ）,７．３７〜７．４４（ｍ,３Ｈ）,７．１０（ｓ,１Ｈ）,６．３９（ｓ,１Ｈ）,２．３８〜２．４４（ｑ,Ｊ＝７．５６，２Ｈ）；１．９８（ｓ，３Ｈ），１．０６〜１．１０（ｔ，Ｊ＝７．５６，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋ＡＰＣＩ）Ｍ＋１＝３３８。
【０１０４】
（実施例３）
以下、化合物I−３の製造について説明する。
【０１０５】
【化２４】
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【０１０６】
具体的な合成方法は、実施例１および実施例２を参照する。
【０１０７】
1ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）１１．６（ｓ,１Ｈ）,８．４４（ｓ,１Ｈ）,７．３０〜７．４９（ｍ,４Ｈ）,７．０６（ｓ，１Ｈ），６．３５（ｓ，１Ｈ），２．１３（ｓ，３Ｈ）；１．９８（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋ＡＰＣＩ）Ｍ＋１＝３０８。
【図１】
0005851053.tif 000031
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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