(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物であって、
ミロシナーゼの供給源を準備することと、
アスコルビン酸カルシウムを該ミロシナーゼの供給源に添加することと、
該ミロシナーゼの供給源を約１０４°Ｆ（約４０℃）以上の温度に加熱することと、
加熱後にミロシナーゼ／アスコルベート混合物を噴霧乾燥させることと、
を含む工程から生成される、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。
【請求項２】
前記アスコルビン酸カルシウムが加熱工程前に前記ミロシナーゼの供給源に添加される、請求項１に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。
【請求項３】
前記アスコルビン酸カルシウムが加熱工程後に前記ミロシナーゼの供給源に添加される、請求項１に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。
【請求項４】
前記ミロシナーゼの供給源がブロッコリーの種子である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。 
【請求項５】
前記ミロシナーゼの供給源が少なくとも７分間加熱される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。
【請求項６】
前記ミロシナーゼの供給源及び前記アスコルビン酸カルシウムが水溶液に添加され、該ミロシナーゼ供給源と該アスコルビン酸カルシウムとを含む該水溶液が約１０４°Ｆ〜約２２５°Ｆ（約４０℃〜約１０７℃）の温度に加熱され、該水溶液が残留固形物から分離され、噴霧乾燥される、請求項１、２、４及び５のいずれか一項に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。
【請求項７】
前記混合物が、噴霧乾燥される前に均質化される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。
【請求項８】
水が約４．５〜約７．５のｐＨを有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物と、グルコラファニンの供給源とを含む、錠剤又はカプセル剤。
【請求項１０】
前記グルコラファニンの供給源がブロッコリーの種子である、請求項９に記載の錠剤又はカプセル剤。
【請求項１１】
アスコルベートを更に含む、請求項９又は１０に記載の錠剤又はカプセル剤。
【請求項１２】
前記噴霧乾燥ミロシナーゼ及び前記グルコラファニンの供給源が腸溶性コーティングに封入される、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の錠剤又はカプセル剤。
【請求項１３】
前記錠剤又はカプセル剤が、水に溶解させた後２時間〜３時間で、約１２μｍｏｌ〜約２０μｍｏｌのスルフォラファンを生成することができる、請求項９〜１２のいずれか一項に記載の錠剤又はカプセル剤。
【請求項１４】
イソチオシアネートを生成する方法であって、請求項１〜８のいずれか一項に記載の噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を、水溶液中でグルコシノレートの供給源と混合させることを含む、イソチオシアネートを生成する方法。
【請求項１５】
前記水溶液がアスコルベートを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記水溶液を少なくとも約９０°Ｆ（約３２℃）の温度に加熱する、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を製造する方法であって、
ミロシナーゼの供給源を準備する工程と、
アスコルビン酸カルシウムを該ミロシナーゼの供給源に添加する工程と、
該ミロシナーゼの供給源を約１０４°Ｆ〜約２２５°Ｆ（約４０℃〜約１０７℃）の温度に加熱する工程と、
ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を噴霧乾燥させる工程と、
を含む、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を製造する方法。
【請求項１８】
前記ミロシナーゼの供給源がブロッコリーの種子である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ミロシナーゼの供給源を少なくとも７分間加熱する、請求項１７又は１８一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１１年２月２２日付で出願された米国仮特許出願第６１／４４５１５６号（その開示は全体を引用することにより本明細書の一部をなすものとする）の利益を主張するものである。
【０００２】
或る特定の野菜、とりわけアブラナ科の野菜を食べることによって発がんリスクを減らすことができることが数多くの研究により示されてきた。この化学防御効果の要因は概して、植物細胞壁が破られたときに内因性ミロシナーゼ酵素と接触することによってイソチオシアネートに変換される、野菜に含まれるグルコシノレートにある。これらのイソチオシアネートの幾つかは、発がん性物質の毒性効果及び腫瘍効果から細胞を守ることができる強力な第ＩＩ相酵素誘導物質であることが示されている。
【０００３】
ミロシナーゼは、イソチオシアネートへのグルコシノレートの変換を触媒するものである。イソチオシアネートの変換速度及び収率は、ミロシナーゼの供給源及び品質によって変わる可能性がある。１つの既知のイソチオシアネートはスルフォラファンである。
【０００４】
グルコシノレートは、ミロシナーゼ酵素の使用によりイソチオシアネートへと変換され得る。しかしながら、変換中、生成されるイソチオシアネートの量及び純度を減少させる他の生成物も形成される可能性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物が、ミロシナーゼの供給源を準備することと、アスコルベートをミロシナーゼの供給源に添加して、混合物を生成することと、混合物を溶媒中で約１０４°Ｆ（約４０℃）以上の温度に加熱することと、ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を噴霧乾燥させることとを含む工程から生成される。
【０００６】
一実施の形態において、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を製造する方法は、ミロシナーゼの供給源を準備する工程と、アスコルベートをミロシナーゼの供給源に添加することであって、ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を生成する工程と、混合物を溶媒中で約１０４°Ｆ（約４０℃）以上の温度に加熱する工程と、ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を噴霧乾燥させる工程とを含む。
【０００７】
一実施の形態において、イソチオシアネートを製造する方法は、約５〜約６．５のｐＨの水中で、グルコシノレートを含む植物原材料と、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物と、アスコルベートとを混合することを含む。
【０００８】
活性錠剤又は活性カプセル剤は、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物とグルコラファニンとを含む。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
グルコシノレートは、ミロシナーゼ酵素による触媒作用によりイソチオシアネートに変換することができる。グルコシノレート及びミロシナーゼはともに、多くのアブラナ科植物に見ることができ、概して植物の他の部分よりも新芽及び種子中における濃度が高い。よく知られているイソチオシアネートは、第２相酵素活性を誘導することにより哺乳動物の解毒作用及び化学防御の強力な誘導物質となるスルフォラファンである。グルコシノレートであるグルコラファニンは、スルフォラファンの前駆物質である。
【００１０】
グルコラファニンからのスルフォラファンの収率は、ミロシナーゼとともにアブラナ科植物中に同様に存在するエピチオ特異タンパク質（ＥＳＰ）によって低減される。ＥＳＰは、スルフォラファンニトリルの形成を触媒し、この代替反応経路は、スルフォラファンを作る反応経路と競合する。ＥＳＰを不活性化させる１つの方法は加熱によるものである。
【００１１】
一実施形態において、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物は、ミロシナーゼの供給源をアスコルベートと混合して、混合物を約１０４°Ｆ（約４０℃）以上の温度に加熱した後、混合物を噴霧乾燥させることによって作られる。得られる噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物の特性は他のミロシナーゼよりも改善される。噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物はより安定であり、加えて、グルコラファニンからスルフォラファンを生成する上でより活性である。噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物は、スルフォラファンの収率を改善させることができるか、より速い速度でスルフォラファンを生成することができるか、又はその両方を満たす。
【００１２】
別の実施形態では、ミロシナーゼの供給源を約１０４°Ｆ（約４０℃）以上の温度に加熱した後、アスコルベートと混合し、約９５°Ｆ（３５℃）以上の温度に加熱し、その後噴霧乾燥させる。アスコルベートとミロシナーゼの供給源とを混合した後、噴霧乾燥させる前に混合物をインキュベートしてもよい。
【００１３】
ミロシナーゼの供給源は、ダイコン、ブロッコリー及び菜種等のアブラナ科の植物由来のものであってもよい。一実施形態において、ミロシナーゼの供給源は、アブラナ科の植物の種子、小花又は新芽であってもよい。別の実施形態では、ミロシナーゼの供給源がブロッコリー植物であってもよい。別の実施形態では、ミロシナーゼの供給源がブロッコリー植物の種子であってもよい。ブロッコリー植物の種子は、粉末へと磨砕することによって加工されていてもよい。別の実施形態では、種子を破砕するか又はさもなければ、外殻を割るか若しくは除去するように加工してもよい。
【００１４】
アスコルベートはアスコルビン酸の塩と定義される。アスコルベートの例としては、アスコルビン酸カルシウム、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸カリウム及びアスコルビン酸マグネシウムが挙げられる。一実施形態において、噴霧乾燥ミロシナーゼの生成に使用されるアスコルベートはアスコルビン酸カルシウムである。アスコルベートの量は、水溶液のｐＨを変えるのに十分なものである必要はない。一実施形態において、アスコルベートの量は水１０Ｌ当たり約５グラムである。別の実施形態では、アスコルベートの量が水１０Ｌ当たり約１グラム〜約５グラムである。別の実施形態では、アスコルベートの量が、水１０Ｌ当たり、約１グラム〜約１０グラム、約２グラム〜約１０グラム又は約３グラム〜約１２グラムであってもよい。一実施形態では、ブロッコリーの種子ミールを水中でアスコルビン酸カルシウムと混合する。混合物は約１０４°Ｆ（約４０℃）以上の温度に加熱した後、噴霧乾燥させる。
【００１５】
ミロシナーゼの供給源を加熱する。典型的に、ミロシナーゼは、約１０４°Ｆ（約４０℃）以上の温度範囲に加熱する。一実施形態において、ミロシナーゼは約１０４°Ｆ〜約２２５°Ｆ（約４０℃〜約１０７℃）、約１１０°Ｆ〜約２２０°Ｆ（約４３℃〜約１０４℃）、約１２０°Ｆ〜約１９０°Ｆ（約４９℃〜約８８℃）、約１３０°Ｆ〜約１８０°Ｆ（約５４℃〜約８２℃）、約１３５°Ｆ〜約１７５°Ｆ（約５７℃〜約７９℃）、約１４０°Ｆ〜約１７５°Ｆ（約６０℃〜約７９℃）、約１４５°Ｆ〜約１７５°Ｆ（約８２℃〜約７９℃）、約１５０°Ｆ〜約１７５°Ｆ（約６６℃〜約７９℃）、約１５５°Ｆ〜約１７５°Ｆ（約６８℃〜約７９℃）、約１６０°Ｆ〜約１７５°Ｆ（約７１℃〜約７９℃）、約１６４°Ｆ〜約１７５°Ｆ（約７３℃〜約７９℃）、又は約１６４°Ｆ（約７３℃）に加熱する。
【００１６】
ミロシナーゼの供給源を加熱すると、ＥＳＰは不活性化すると考えられる。より高温であれば時間はそれほど必要ないが、より低温では時間が長く必要とされる。一実施形態において、ミロシナーゼの供給源を約１分以上加熱する。ミロシナーゼの供給源を約２分以上、３分以上、４分以上、５分以上、６分以上、７分以上又は１０分以上加熱してもよい。
【００１７】
ミロシナーゼの供給源及びアスコルベートを水溶液中で加熱してもよい。ミロシナーゼの供給源とアスコルベートとの水性混合物のｐＨは典型的に、初め約４．５〜約７．５である。一実施形態において、ｐＨ範囲は、約５〜約７．５、約５．５〜約７．５、約５．５〜約７．０、約６．０〜約７．０、又は約５．０〜約６．０である。混合物を水溶液中に入れた後、ｐＨは変化する可能性がある。
【００１８】
一実施形態において、水溶液中の熱処理されたミロシナーゼ／アスコルベート混合物は、種子ミール又は他の植物原材料から分離される。別の実施形態では、ミロシナーゼを濾過してもよい。その後、ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を含有する溶液を噴霧乾燥させる。別の実施形態では、種子ミール又は他の植物原材料から分離する必要がない代わりに、ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を均質に噴霧乾燥させる。一実施形態において、ミロシナーゼ／アスコルベート混合物及び種子ミール又は他の植物原材料を均質化してから、噴霧乾燥させる。別の実施形態では、ミロシナーゼ／アスコルベート混合物及び種子ミール又は他の植物原材料を超音波処理してから、噴霧乾燥させる。
【００１９】
ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を、噴霧乾燥前にデンプン物質と混合してもよい。デンプン物質の例は、シクロデキストリン、マルトデキストリン、スクロース、デキストロース、コーンスターチ及び植物ガムである。デンプン物質の量は約１０重量％とすることができる。ミロシナーゼ／アスコルベート混合物が噴霧されるエアの温度は約１８０°Ｆ〜約２１５°Ｆであってもよい。噴霧乾燥の方法は当業者に既知のものである。典型的に、噴霧乾燥される材料は、溶解されているか、懸濁されているか、又は別の形で溶液形態でなければならない。加熱工程を溶液中でミロシナーゼの供給源に実施しなかった場合には、噴霧乾燥工程前に液体を添加しなければならない。
【００２０】
スルフォラファン等のイソチオシアネートは、グルコシノレートを含有する植物原材料から生成することができる。一実施形態において、グルコシノレートの供給源は、米国特許出願公開第２００９／００８１１３８号（その全体が引用することにより本明細書の一部をなすものとする）に記載される方法を含む当該技術分野で既知の任意の方法によって生成することができるグルコラファニンである。グルコシノレートの他の供給源は、キャベツ、ケール、カリフラワー、ブロッコリー、カラシナ、コールラビ、芽キャベツ、カブ及びホースラディッシュルート等の他のアブラナ科の植物である。典型的に、新芽及び種子が最も多くのグルコシノレートを含有するが、植物の他の部分を使用してもよい。
【００２１】
一実施形態において、グルコシノレート及び噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を水中で合わせて混合する。混合物は少なくとも１分間９５°Ｆ超に加熱してもよい。混合物は約７０分〜１００分間加熱してもよい。イソチオシアネートへのグルコシノレートの変換速度は温度に依存する。より低温では変換に長く時間がかかる可能性があり、より高温では変換時間が短くなるであろう。混合物を９５°Ｆ超に加熱する必要はない。この手法は、様々なグルコシノレートをイソチオシアネートへ、例えばグルコラファニンをスルフォラファンへと変換するのに使用することができる。
【００２２】
変換プロセスには様々な溶媒を使用してもよい。一実施形態において、グルコシノレート及び噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物のための溶媒は、鉄イオン又は亜鉛イオンを実質的に含まないため、蒸留水又は脱イオン水である。別の実施形態では、水が蒸留水でも脱イオン水でもない。別の実施形態では、溶媒が水を含む水溶液であってもよい。
【００２３】
一実施形態において、グルコシノレート及び噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物の初期ｐＨは、約５〜約６．５である。一実施形態において、ｐＨ範囲は、約５〜約７．５、約５．５〜約７．５、約５．５〜約７．０、約６．０〜約７．０、又は約５．０〜約６．０である。混合物を水溶液中に入れた後、ｐＨは変化する可能性がある。
【００２４】
一実施形態において、グルコラファニンの供給源と噴霧乾燥ミロシナーゼとの混合物は、アスコルベートを更に含む。一実施形態において、アスコルベートの量は、約０．１重量％〜約２重量％、約０．５重量％〜約１．５重量％、又は約１重量％であってもよい。
【００２５】
イソチオシアネートへのグルコシノレートの変換後、イソチオシアネートの溶液を噴霧乾燥させてもよい。
【００２６】
活性錠剤又は活性カプセル剤は、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物と、グルコラファニン等のグルコシノレートとを含んでいてもよい。人によっては腸管内でグルコラファニンをスルフォラファンに変換することができるが、全ての人が効率よくそうすることができるとは限らない。ミロシナーゼとグルコラファニンとを含有する錠剤又はカプセル剤は、生体内でグルコラファニンをスルフォラファンに変換するのに用いることができる。これは、スルフォラファンのより確実かつばらつきのない用量をもたらすであろう。スルフォラファンはグルコラファニン及びミロシナーゼよりも安定でなく、分解してしまう。そのため、生体内でスルフォラファンを生成する噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物を含有する錠剤又はカプセル剤の方が、スルフォラファンを含有する錠剤又はカプセル剤よりも長い保存寿命を有すると考えられる。
【００２７】
錠剤又はカプセル剤はまたアスコルベートを含んでいてもよい。一実施形態において、錠剤又はカプセル剤は、２時間〜３時間で約１２μｍｏｌ〜約２０μｍｏｌのスルフォラファンを生成することができる、アスコルベートと、グルコラファニンと、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物との混合物を含む。この組成の錠剤は、固定用量のスルフォラファンを生成することができる。生体内で生成されるスルフォラファンの量は、錠剤又はカプセル剤に使用されるグルコラファニンの量に依存すると考えられる。一実施形態において、錠剤又はカプセル剤は、約１００ｍｇのグルコラファニンを含む。錠剤又はカプセル剤に使用される、アスコルベートと、グルコラファニンと、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物との混合物は、アスコルベート１ｇ、噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物７．５ｇ、及びグルコラファニン１００ｇの比率で混合することができる。成分の比率は様々な値をとることができる。
【００２８】
腸管を介して小腸に錠剤を送るために、腸溶性コーティングを錠剤上に形成してもよい。別の実施形態では、錠剤が持続放出コーティング又は制御放出コーティングを有していてもよい。噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物及びグルコラファニン粒子は、腸溶性コーティングで、別々にコーティングされても又は混合物としてコーティングされてもよい。腸溶性コーティング、持続放出コーティング及び制御放出コーティングの使用がよく知られている。腸溶性コーティングは腸内で内容物を放出する。別の実施形態では、カプセル剤を使用してもよい。噴霧乾燥ミロシナーゼ、グルコラファニン及びアスコルベートは、カプセル剤内において腸溶性コーティングでコーティングされていてもよい。
【００２９】
本開示は本明細書によって幾つかの実施形態を例示しており、かつ例示的な実施形態をかなり詳細に記載しているが、添付の特許請求の範囲をこのような詳述に制限又は多少なりとも限定することは本出願人の意図するところではない。更なる利点及び変更形態は当業者にとって容易に明らかにすることができる。
【実施例】
【００３０】
実施例１（噴霧乾燥ミロシナーゼ）
ミロシナーゼを含有するブロッコリーの種子（２００ｇ）を粉末に粉砕した。粉末化した種子は９５°Ｆ（３５℃）の蒸留水（２００ｍＬ）と混合した。この混合物を５分間急速に混合した後、１６５°Ｆ〜１７５°Ｆ（７４℃〜７９℃）に加熱し、その温度で５分間保持した。アスコルビン酸カルシウム（１０ｍｇ）を混合物に添加し、その後これを９８°Ｆ（３７℃）で２４時間インキュベートした。混合物を漉して液体を均質化した。その後、均質化した液体を噴霧乾燥させた。
【００３１】
実施例２（スルフォラファンへのグルコラファニンの変換）
高濃度のグルコラファニン（スルフォラファングルコシノレート）を含有するブロッコリーの種子を２７０°Ｆ（１３２℃）において押出機内で破砕した。破砕させた種子を、超臨界ＣＯ２を用いた超臨界抽出によって脱脂すると、グルコラファニン粉末が生成された。
【００３２】
実施例１による噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物（１００ｍｇ）、グルコラファニン粉末（１ｇ、１３０μｍｏｌのグルコラファニン／ｇ）、及びアスコルビン酸カルシウム（１０ｍｇ）を９９．５°Ｆ（３７．５℃）の蒸留水（５００ｍＬ）中で合わせて混合した。７０分〜１００分後、液体を濾過して、噴霧乾燥させると、スルフォラファン（６２μｍｏｌ）が生成された。
【００３３】
実施例３
グルコラファニン（スルフォラファングルコシノレート）を含有するブロッコリーの種子を２７０°Ｆ（１３２℃）において押出機内で破砕した。破砕させた種子を、超臨界ＣＯ２を用いた超臨界抽出によって脱脂した。水をこの種子ミールに添加した（５：１  水：種子ミール）。
【００３４】
ミロシナーゼ酵素の供給源であるブロッコリーの種子を粉砕した。粉砕させた種子は水に水和させた（５：１  水：粉砕させた種子（重量基準））。この混合物を１３５°Ｆ〜１４５°Ｆ（５７℃〜６３℃）に３分〜５分間加熱した後、およそ９０°Ｆに冷却させた。アスコルベート（０．０１ｇ／ｇ  粉砕させた種子ミール）を水和させた粉砕種子に添加した。この混合物のｐＨは約５．９〜６．１であった。混合物は９９．５°Ｆ（３７．５℃）で２４時間インキュベートした。
【００３５】
ミロシナーゼ混合物をグルコラファニン混合物に９９．５°Ｆ（３７．５℃）で添加した（１：１００  ミロシナーゼ：グルコラファニン（重量基準））。７０分〜１００分後、液体を濾過して噴霧乾燥させると、スルフォラファンが生成された。
【００３６】
実施例４
グルコラファニン粉末及び脱イオン水（１：５〜１：１０（重量比））を１３５°Ｆの温度で１５分間混合した。混合物は９５°Ｆ〜１００°Ｆ（３５℃〜３８℃）に冷却させ、アスコルビン酸カルシウム（０．０１：１のアスコルベート対ミロシナーゼ（重量基準））を混合物に添加した。実施例１による噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベート混合物（０．１：１のミロシナーゼ対グルコラファニン（重量基準））を混合物に添加し、９５°Ｆ〜１００°Ｆ（３５℃〜３８℃）で１時間インキュベートした。
【００３７】
実施例５（噴霧乾燥ミロシナーゼ）
ブロッコリーの種子（１００ｇ）を磨砕し、７３℃（１６４°Ｆ）の蒸留水（１０Ｌ）に添加した。アスコルベート（５ｇ）を添加し、混合物を７分間撹拌した後、冷却させた。この混合物を３５℃（９５°Ｆ）で２４時間放置した。液体を傾瀉し、１０重量％のマルトデキストリンとともに噴霧乾燥させた。この手法を用いて４つのサンプルを作製した。使用されるアスコルベートは以下の表に示す。サンプル３は、他のサンプルと違い、混合物を冷却した後に傾瀉し、３５℃（９５°Ｆ）で２４時間放置しなかった。噴霧乾燥ミロシナーゼのサンプルは全て、生成することができるスルフォラファンの速度及び量について試験したので、以下の表を参照されたい。アスコルベート（１ｇ）と、噴霧乾燥ミロシナーゼ（７．５ｇ）と、グルコラファニン（１００ｇ）との混合物からの１グラムのサンプルを試験した。
【００３８】
噴霧乾燥ミロシナーゼ／アスコルベートは、噴霧乾燥ミロシナーゼよりも迅速にスルフォラファンを生成することができた。３時間でそれぞれ３０．２μｍｏｌ及び４７．７μｍｏｌのスルフォラファンを生成したサンプル１及びサンプル３を参照されたい。これらのサンプルは、アスコルベートと混合させなかったミロシナーゼ（２５．２μｍｏｌのスルフォラファン）及びアスコルビン酸と混合させたミロシナーゼ（２０．７９μｍｏｌのスルフォラファン）と比較して３時間でより多くのスルフォラファンを生成させた。スルフォラファンへのグルコラファニンの完全な変換が起きた場合、グルコラファニンは消化管内に２４時間留まることはないと考えられるため、３時間でのスルフォラファンの急速な生成が全収率よりも重要となる。
【００３９】
【表１】
0006009467.tif 000002
【００４０】
【表２】
0006009467.tif 000003