(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
３，６−ビス−［Ｎ−保護アミノアルキル］−２，５−ジケトピペラジンを合成する方法であって、
有機溶媒中で触媒の存在下において一般式Ｉ
【化１】
0006018586.tif 000016
（式中、ＰＧは、トリフルオロアセチルであり、ｎは、１から７である。）のアミノ酸の混合物を加熱するステップを含み、
前記触媒が、五酸化リンであり、且つ五酸化リンの濃度が、前記アミノ酸の濃度の２０％から５０％であり、
前記溶媒が、Ｎ−メチル−２−ピロリドンである方法。
【請求項２】
ｎが３に等しい、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ｎが２に等しい、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
アミノ酸がε−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシンである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
アミノ酸がγ−トリフルオロアセチル−オルニチンである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
混合物を水でクエンチするステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンを合成する方法であって、
ε−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシンの混合物をＮ−メチル−２−ピロリドン中で五酸化リンの存在下において１５０℃から１７５℃の間の温度まで０．２５時間から５時間の間加熱するステップであり、五酸化リンの濃度がリシンの濃度の２０％から３５％であるステップ、および
前記混合物を第２の溶媒でクエンチするステップ
を含む、方法。
【請求項８】
混合物を水でクエンチする、請求項７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、活性剤、特に生物学的活性剤を送達する組成物に関する。開示された実施形態は、化学合成の分野であり、さらに詳細には３，６−二置換−２，５−ジケトピペラジンを調製し精製するための改良された合成法に関連する。
【背景技術】
【０００２】
薬物送達は、患者への活性剤の投与において永続的な問題である。活性剤を送達するための従来の手段は、生物学的、化学的および物理的障壁によって厳しく制限されることが多い。典型的には、これらの障壁は、送達が行われる環境、送達の標的の環境または標的自体によって課せられる。
【０００３】
生物学的活性剤は、特にそのような障壁に弱い。たとえば、薬理学的および治療的な作用剤のヒトへの送達において、障壁は身体によって課せられる。物理的障壁の例は、標的に到達する前に越えねばならない皮膚および様々な器官の膜である。化学的障壁としては、これらに制限されるものではないが、ｐＨ変化、脂質二重層および分解酵素が挙げられる。
【０００４】
これらの障壁は、経口送達システムの設計において特に重要である。生物学的、化学的および物理的障壁、たとえば、胃腸（ＧＩ）管内におけるｐＨの変動、強力な消化酵素および活性剤に対する胃腸膜の不透過性がなければ、多数の生物学的活性剤の経口送達は、動物への投与に対して選択される経路となるはずである。典型的に経口投与に適さない多数の作用剤の中には、生物学的に活性なペプチド、たとえば、カルシトニンおよびインスリン；多糖類、特に、これらに限定されないがヘパリンを含むムコ多糖類；ヘパリン類似物質；抗生物質；ならびに他の有機物質がある。これらの作用剤は、胃腸管の中において酸加水分解、酵素などによって、急速に不活性化または破壊される。
【０００５】
しかしながら、薬物送達システムを広範囲に使用できないことが多い。なぜなら、（１）システムが毒性量のアジュバントまたは阻害剤を必要とする、（２）適当な低分子量の活性剤が入手できない、（３）システムが低い安定性と不十分な貯蔵寿命を示す、（４）システムが製造困難である、（５）システムが活性剤を保護できない、（６）システムが活性剤を不利に変化させる、または（７）システムが活性剤の吸収を可能にするまたは促進することができないからである。
【０００６】
当分野において、容易に調製され、広範囲の活性剤を送達することができる、単純で廉価な送達システムが依然として要求されている。賦形剤として有望な送達システムの１つのクラスはジケトピペラジン（ＤＫＰ）である。特に、３，６−ビス−置換−２，５−ジケトピペラジンは肺の内層を越えて有効に生物学的活性剤を送達することが示された。
【０００７】
ジケトピペラジンの従来の合成は、２個のアミノ酸分子またはジペプチドの環化縮合を経て進行する。ジケトピペラジンの合成のための一つの例示的な方法は、アミノ酸（たとえば、Ｃｂｚ−Ｌ−リシン）をｍ−クレゾール中で１６０−１７０℃において１７から２２時間の間加熱ステップ、およびジケトピペラジンを約４８％の収率で酢酸から再結晶化するステップを伴う。
【０００８】
Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎらの米国特許第７，７０９，６３９号明細書は、ビス−Ｃｂｚ−Ｎ−保護ジケトピペラジンを合成する方法を詳述しており、その開示内容全体を参照により、本明細書に完全に列挙されたかのように本明細書に組み込まれる。
【０００９】
他の研究者は、蒸留により水を除去しながら適切な溶媒中で加熱することによって、単離されたジペプチドからジケトピペラジンを生成した。これらは所望のジケトピペラジンを提供するが、これらの方法の収率は最適とは言えず、長時間の精製が必要となるおそれがある。したがって、保護基を保存したまま、最小の精製しか必要とせずに好収率でＮ−保護ジケトピペラジンを提供する二置換２，５−ジケトピペラジンを合成するための改良された方法が必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第７，７０９，６３９号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
先行技術のこのおよびその他の満たされていない要求は、下記においてさらに詳細に説明される化合物および方法によって満たすことができる。医薬賦形剤として、Ｎ−置換３，６−アミノアルキル−２，５−ジケトピペラジンを使用することは、かなり有望であった。前述したように、これらの化合物は、多くの場合、アミノ酸の環化縮合を経て合成される。アミノ酸がその側鎖（たとえば、リシンまたはオルニチンにおけるように）に遊離窒素を有する場合、環化反応に先立ってこの窒素をブロックすることがしばしば必要とされる。環化後の異種の合成法の可能性があるため、様々な保護基との適合性が望まれる。したがって、いくつかの多様なＮ−保護基に適合することができ、好収率のＮ−保護ジケトピペラジンを生産することができる合成法が望まれる。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
いくつかの有用な保護基には、トリフルオロアセチル、アセチルおよび他のアミド形成保護基、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）およびｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）を含むカルバメート保護基が挙げられる。
【００１３】
一実施形態において、３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンは、ε−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシンをＮ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）等の水混和性溶媒中で、リン酸、硫酸および五酸化リンからなる群から選択される触媒の存在下において約１５０−１７５℃の温度に加熱することにより形成される。前記ジケトピペラジンは、水でクエンチして、得られた固体をろ過することにより単離される。
【００１４】
【化１】
0006018586.tif 000002
【００１５】
開示された実施形態は、３，６−ビス−［Ｎ−保護アミノアルキル］−２，５−ジケトピペラジンを合成する方法であって、有機溶媒中で触媒の存在下において一般式Ｉのアミノ酸の混合物を加熱するステップを含み、前記触媒が、特に、硫酸、リン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、１−プロピルホスホン酸環状無水物、リン酸トリブチル、フェニルホスホン酸および五酸化リンを含む群から選択され、前記溶媒が、特に、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジグライム、エチルグライム、プログライム（ｐｒｏｇｌｙｍｅ）、エチルジグライム、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、キシレン、エチレングリコールおよびフェノールを含む群から選択される、方法を記載する。
【００１６】
開示された実施形態はまた、ｎが１から７の間である方法、ｎが３に等しい方法、ｎは２に等しい方法、ＰＧがアミド形成保護基である方法、前記保護基がトリフルオロアセチルである方法、ＰＧがカルバメート形成保護基である方法、前記保護基がＣｂｚである方法、前記溶媒が実質的に水混和性である方法、前記溶媒がＮ−メチル−２−ピロリドンである方法、アミノ酸がε−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシンである方法、前記アミノ酸がε−Ｃｂｚ−Ｌ−リシンである方法、前記アミノ酸がγ−トリフルオロアセチル−オルニチンである方法、前記アミノ酸がγ−Ｃｂｚ−オルニチンである方法、前記触媒が五酸化リンである方法、五酸化リンの濃度がアミノ酸の濃度の１０％から約５０％である方法、および混合物を水でクエンチするステップをさらに含む実施形態を記載する。
【００１７】
開示された実施形態は、３，６−ビス−［Ｎ−保護アミノブチル］−２，５−ジケトピペラジンを合成する方法であって、Ｎ−保護リシンの混合物を有機溶媒中で触媒の存在下において１１０℃から１７５℃の間の温度で０．２５時間から５時間の間加熱するステップを含み、前記触媒が、硫酸、リン酸および五酸化リンを含む群から選択され、前記触媒の濃度が、リシンの濃度の約５％から約５０％であり、前記溶媒が、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジグライム、エチルグライム、プログライム、エチルジグライム、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、キシレン、エチレングリコールおよびフェノールを含む群から選択される、方法を記載する。
【００１８】
開示された実施形態は、３，６−ビス−４−［Ｎ−トリフルオロアセチル］アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンを合成する方法であって、ε−トリフルオロアセチル−Ｌ−リシンの混合物をＮ−メチル−２−ピロリドン中で五酸化リンの存在下において１５０℃から１７５℃の間の温度で０．２５時間から５時間の間加熱するステップであり、五酸化リンの濃度がリシンの濃度の約１０％から約４０％であるステップ、およびこの混合物を第２の溶媒でクエンチするステップを含む方法、または別法として五酸化リンの濃度がリシンの濃度の２０％から３５％の間であり、この混合物を水によりクエンチする方法を記載する。
【００１９】
その全ての可能な変形形態における前述した構成要素のいかなる組合せも、本文中で特に異なる記載がない限りまたは文脈上明らかに矛盾しない限り、開示された実施形態に包含される。
【００２０】
添付の図面を参照すれば、本発明の例示的な実施形態のより良い理解が得られる。ここに、同一の部分は同一の参照番号で識別される。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】Ｎ−保護アミノ酸のジケトピペラジンへの環化縮合を示すスキームである。
【図２】ε−トリフルオロアセチルリシンの環化縮合を示すスキームである。
【図３】γ−Ｃｂｚ−オルニチンの環化縮合を示すスキームである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本明細書で使用される場合、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチルまたはオクチルおよび全ての結合異性体は、アルキルとみなされる。これらは、（Ｃ１−Ｃ８）−アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ８）−ハロアルキル、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ２、ＮＯ２、ＳＨ、Ｓ−（Ｃ１−Ｃ８）アルキルによって一置換または多置換されていてよい。（Ｃ２−Ｃ８）−アルケニルとしてはメチルを除いて、少なくとも１つの二重結合を有する前記に示される（Ｃ１−Ｃ８）−アルキル基を意味すると理解される。
【００２３】
α−アミノ酸の側鎖基は塩基性アミノ酸としてグリシンのα−Ｃ原子上の変化しうる基を意味する。天然のアミノ酸は、たとえばＢａｙｅｒ−Ｗａｌｔｅｒ、Ｌｅｈｒｂｕｃｈ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ、Ｓ．Ｈｉｒｚｅｌ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、第２２版、８２２ｆｆページに示されている。好ましい合成アミノ酸および保護アミノ酸は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏｍｐａｎｙで入手可能である。側鎖基はそこに引用されたアミノ酸から誘導することができる。
【００２４】
示された化学構造は、個々のキラル中心、軸または平面の配置の変更によって達成できる全ての可能な立体異性体、言い換えれば、全ての可能なジアステレオマーならびにこの群に包含される全ての光学異性体（エナンチオマー）に関連する。
【００２５】
よりよく理解するために図面を参照すると、図１は、二置換のジケトピペラジンの合成の一般的なスキームを示す。このスキームは、もう１個のアミノ酸分子と環化縮合するＮ−保護アミノ酸を示す。この実施形態では、ＰＧは、窒素用の保護基を表わし、ｎは０から７であってもよい。このスキームから、側鎖上にアミンを有するジケトピペラジンを形成する場合、その窒素（複数可）は環化反応に先立ってブロックされなければならない、さもないと収率は、望まれない副次的な縮合によって影響されることが明らかである。環形成の後に実施される化学反応に応じて、様々な保護基が望まれ、したがって多くの基に適合する方法が好ましい。いくつかの有用な保護基には、トリフルオロアセチル、アセチルおよび他のアミド形成保護基、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）およびｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）を含むカルバメート保護基が挙げられる。
【００２６】
アミノ酸の環化縮合によってＤＫＰを形成する既知の方法は、ｎ−ブタノール（水混和率約７−８％）等の溶媒を使用したが、ＮＭＰ等の溶媒は水とより混和性であり、単純な水によるクエンチ／洗浄により反応溶媒が除去され、触媒の水溶解度が大きい場合には、触媒も同時に除去される。一実施形態では、アミノ酸の環化縮合のための触媒は水溶性であり、水によるクエンチおよび後続のろ過による除去が可能である。
【００２７】
図２は、ＰＧがトリフルオロアセチルであり、ｎが３である実施形態を示す。したがって、出発アミノ酸はε−トリフルオロアセチルリシンであり、生成物は３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンである。３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンを合成する方法の例は、以下の通りである。
【実施例】
【００２８】
［実施例１および実施例２］
【００２９】
【化２】
0006018586.tif 000003
【００３０】
窒素パージ、蒸留装置、機械式撹拌機、温度表示付き熱電対を装備した１Ｌの３口丸底フラスコに、ＮＭＰ（２５６ｍＬ）、ＴＦＡ−Ｌｙｓ（１２５ｇ、０．５２モル）およびＰ２Ｏ５（２２ｇ、０．１５モル）を加えた。反応混合物を１６０℃まで加熱し、その温度で１．５時間維持した。その後、この混合物を１００℃まで冷却し、脱イオン水の中に注いだ。この混合物を２５℃以下に冷却し、固体をろ過によって単離し、脱イオン水で洗浄し、５０℃で減圧下に乾燥し、３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンを得た（６５．２８ｇ，５６．４％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１．３（ｍ，４Ｈ）、１．５（ｍ，４Ｈ）、１．７（ｍ，４Ｈ）、３．２（ｑ，４Ｈ）、３．８（ｍ，２Ｈ）、８．１（ｓ，２Ｈ）、９．４（ｓ，２Ｈ）。元素分析、計算値Ｃ：４２．８６；Ｈ：４．９５；Ｎ  １２．５０；Ｆ：２５．４２。実測値：Ｃ：４２．９５；Ｈ：４．９１；Ｎ：１２．５３；Ｆ：２４．９９。
【００３１】
１００ガロンのガラス内張反応器に、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（２００Ｌ）を加え、撹拌を開始した。この溶媒に、ＴＦＡ−リシン（１００ｋｇ、４１３モル）を、周囲温度で添加した。得たスラリーに、五酸化リン（１５．２ｋｇ、１０７モル）を添加した。その後、この混合物を１６０℃で１時間加熱した。１６０℃で１時間の後、この混合物を１００℃まで冷却し、水（５００Ｌ）を加えた。得た混合物を、２５℃まで冷却し、その温度で９０分間保持した。得た固体を水（各２６５Ｌ）で２度洗浄し、ろ過によって単離し、３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンを５０％の収率で得た。
【００３２】
様々な触媒について、二置換ジケトピペラジンの生成を調査した。触媒調査の結果を表１に示す。この調査についての一般的なスキームおよび例は、以下の通りである。
【００３３】
［実施例３］
【００３４】
【化３】
0006018586.tif 000004
【００３５】
Ｃｂｚ−リシン（１０．０ｇ）、ジエチレングリコールジメチルエーテル（ジグライム、５０ｍＬ）および触媒を、２５０ｍＬの丸底フラスコに加えた。この混合物を１６０−１６５℃まで２．５時間加熱した。この反応混合物を水中に注ぎ込み、周囲温度まで一晩中冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。
【００３６】
【表１】
0006018586.tif 000005
【００３７】
ジグライム中での３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンの合成について、硫酸および五酸化リン（２種類の濃度）をさらに調査した。結果を表２に示す。
【００３８】
［実施例４］
【００３９】
【化４】
0006018586.tif 000006
【００４０】
ＴＦＡ−リシン（１０．０ｇ）、ジエチレングリコールジメチルエーテル（５０ｍＬ）および触媒を、２５０ｍＬの丸底フラスコに加えた。この混合物を１６０−１６５℃まで２．５時間加熱した。この反応混合物を水に注ぎ込み、周囲温度まで冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。
【００４１】
【表２】
0006018586.tif 000007
【００４２】
ジメチルアセトアミド（ＤＭＡｃ）中での３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンの合成について、硫酸および五酸化リン（２種類の濃度）をさらに調査した。結果を表３に示す。
【００４３】
［実施例５］
【００４４】
【化５】
0006018586.tif 000008
【００４５】
ＴＦＡ−リシン（２５．０ｇ）、ジメチルアセトアミド（１２５ｍＬ）および触媒を、２５０ｍＬの丸底フラスコに加えた。この混合物を１６０−１６５℃まで２．５時間加熱した。この反応混合物を１００℃まで冷却し、水中に注ぎ込み、周囲温度まで冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。結果を表３に示す。
【００４６】
【表３】
0006018586.tif 000009
【００４７】
五酸化リンの使用を、Ｎ−メチル−２−ピロリドン（ＮＭＰ）中での３，６−ビス−４−（Ｎ−トリフルオロアセチル）アミノブチル−２，５−ジケトピペラジンの合成について異なる時間および異なる温度において検討した。結果を表４に示す。
【００４８】
［実施例６］
【００４９】
【化６】
0006018586.tif 000010
【００５０】
ＴＦＡ−リシン（５０ｇ）、Ｎ−メチルピロリドン（１２５ｍＬ）およびＰ２Ｏ５（８．８ｇ、０．３当量）を、丸底フラスコに加えた。この混合物を反応時間に亘って反応温度に加熱した。この反応混合物を冷却し、水中に注ぎ込み、その後、周囲温度まで冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。
【００５１】
【表４】
0006018586.tif 000011
【００５２】
［実施例７］
【００５３】
【化７】
0006018586.tif 000012
【００５４】
ＴＦＡ−リシン（１０．０ｇ）、ｍ−クレゾール（２２ｍＬ）およびＰ２Ｏ５を、２５０ｍＬの丸底フラスコに加えた。この混合物を１６０−１６５℃まで１時間加熱した。この反応混合物を６５℃まで冷却した、５％ＮａＯＨ水溶液およびメタノールに注ぎ込み、周囲温度まで冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。生成物の収率は１２％であった。
【００５５】
［実施例８］
【００５６】
【化８】
0006018586.tif 000013
【００５７】
ＴＦＡ−リシン（５０．０ｇ）およびエチレングリコール（１５０ｍＬ）を、５００ｍＬの丸底フラスコに加えた。この混合物は１６０−１７０℃まで２時間加熱した。この反応混合物を水中に注ぎ込み、周囲温度まで冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。生成物の収率は２％であった。
【００５８】
［実施例９］
【００５９】
【化９】
0006018586.tif 000014
【００６０】
Ｃｂｚ−リシン（１００．０ｇ）およびエチレングリコール（３００ｍＬ）を、１０００ｍＬの丸底フラスコに加えた。この混合物を１６０−１７０℃まで６時間加熱した。この反応混合物を水とメタノールの混合物中に注ぎ込み、周囲温度まで冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。生成物の収率は６４％であった。
【００６１】
図３は、γ−Ｃｂｚ−オルニチンの環化縮合の一般的なスキームを示す。
【００６２】
［実施例１０］
【００６３】
【化１０】
0006018586.tif 000015
【００６４】
Ｃｂｚ−オルニチン（１００ｇ）、Ｎ−メチルピロリドン（１９４ｍＬ）およびＰ２Ｏ５（８ｇ）を、１０００ｍＬの丸底フラスコに加えた。この混合物を１６０−１６５℃まで２時間加熱した。この反応混合物を水中に注ぎ込み、周囲温度まで冷却した。沈殿した固体をろ過によって単離し、メタノールと水で洗浄し、減圧下に５０℃で乾燥した。生成物の収率は５１％であった。
【００６５】
特に断りのない限り、本明細書および本特許請求の範囲で使用される成分の量、分子量、反応条件等の性質を表現する全ての数は、全ての場合において「約」という語句によって修飾されるものとして理解されるべきである。したがって、特に異議を唱えない限り、以下の明細書および添付した特許請求の範囲に記載した数値パラメータは、開示された実施形態によって獲得しようとされる所望の性質に応じて変化し得る近似値である。控えめに言っても、特許請求の範囲への均等論の適用を限定しようとするものではなく、それぞれの数値パラメータは、少なくとも、報告された有効数字の数を考慮して、通常の四捨五入の適用によって解釈されなければならない。開示された実施形態の広範囲で示す数値的範囲およびパラメータは近似値であるが、具体例に記載の数値は可能な限り正確に報告する。しかしながら、いずれの数値もそれらの各試験測定値において見られる標準偏差から必然的に生じる特定の誤差を本質的に含む。
【００６６】
用語「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」の使用、ならびに開示された実施形態を記載する文脈における（特に以下の特許請求の範囲との関連における）類似の記号は、本明細書で特に指示がないまたは文脈に明白に矛盾しない限り、単数形および複数形の両方に解釈されるべきである。
【００６７】
本明細書における値の範囲の列挙は、単に、その範囲に含まれている個々の値に個別に言及する簡便な方法として役立つよう意図されている。特に指示のない限り、それぞれの個別の値を、あたかも個々に本明細書に列挙されているかのように明細書中に組み込む。本明細書に記載の全ての方法は、他に指示がないまたは他に文脈に明らかに矛盾しない限り、いずれかの好適な順番で実施され得る。本明細書に記載する全ての実施例または例示的語句［たとえば「等の」、「たとえば」（ｓｕｃｈ  ａｓ）］の使用は、開示された実施形態をさらに容易に理解するよう意図されたものにすぎず、特に特許請求しない限り、開示された実施形態の範囲を制限しない。本明細書のどの用語も、開示された実施形態または、この任意の改変体の実施に対して必須の、特許請求されていない構成要素を全て示していると解釈すべきではない。
【００６８】
別の構成要素または本明細書に開示された実施形態のグループ分けは、制限と理解すべきでない。各グループメンバーは、個別に言及して特許請求することもできるまたはグループの他のメンバーまたは本明細書中に見られる他の構成要素と任意に組み合わせて言及して特許請求することもできる。便宜上の点からおよび／または特許性の点から、あるグループの１つ以上のメンバーを、あるグループに組み入れることもできるまたはあるグループから削除することもできると予想される。このような組み入れや削除が行われる場合、本明細書は、グループを修正されたものとして含み、したがって、特許請求の範囲において使用されている全てのマーカッシュグループの記載要件を満たすと見なされる。
【００６９】
本発明（複数可）を実施するために本発明者らが知る最良形態を含め、本発明の好ましい実施形態が説明されている。言うまでもないが、開示された実施形態に対する種々の変形は、上記の説明を読めば当業者にとっては明らかである。本発明者らは、当業者がこのような変形を必要に応じて使用するものと考えており、また本発明（複数可）が、本明細書に具体的に説明されているのとは別のやり方で実施されることを意図している。したがってこの開示は、本明細書に添付する請求項において列挙される特許発明の主題の全ての変形物および均等物を、準拠法によって許されるものとして含む。さらに、特に明記しない限りまたは文脈によって明確に否定しない限り、全ての可能な変形における上記構成要素の任意の組合せも開示された実施形態に包含される。
【００７０】
さらに、本明細書全体を通じて、特許および印刷された刊行物に対して言及してきた。上記の引用文献や印刷刊行物のそれぞれの全記載内容を参照により本明細書に組み込む。
【００７１】
本発明の実施形態を図示し説明したが、説明された本発明に影響を及ぼし、しかも特許請求される発明の範囲に含まれる多くの変形および改変が加えられ得ることは当業者には明白である。さらに、前述の構成要素の多くは、同じ結果をもたらすと共に、特許請求の範囲に記載された本発明の精神に含まれる異なる構成要素によって変更または置換され得る。したがって、本発明は、「特許請求の範囲」の範囲によって示されるようにのみ限定されることが意図される。
【００７２】
本出願は、２０１１年２月１０日に出願された米国仮特許出願第６１／４４１，５２５号の利益を主張するものであり、本明細書に完全に列挙されたかのようにその内容を参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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