(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
支持体に備えられた試料滴下部と、
前記試料滴下部から近い順に前記支持体に備えられた第一観測部、第二観測部及び第三観測部とを備えてなり、
前記第一観測部には発色試薬が含まれ、
前記第二観測部には遷移金属を含む試薬が含まれ、
前記第三観測部には還元剤が含まれ、
前記発色試薬が、前記試料滴下部に滴下された試料とともに前記第二観測部に浸潤し、更に、前記試料滴下部に滴下された前記試料及び前記第二観測部に含まれている前記遷移金属とともに前記第三観測部に浸潤する、前記試料の抗酸化能の有無を判定する、抗酸化能判定具であって、
前記発色試薬は、前記第二観測部に含まれている前記遷移金属が前記試料滴下部に滴下された前記試料に含まれている抗酸化物質によって還元された際に発色するとともに、前記第三観測部に浸潤してきた前記遷移金属が前記還元剤によって還元された際に発色するキレート発色剤である
抗酸化能判定具。
【請求項２】
前記第三観測部における発色により前記試料滴下部に滴下された前記試料が前記第三観測部にまで浸潤したことを確認し、
前記第一観測部における発色状態と、前記第二観測部における発色状態との比較により前記試料の抗酸化能の有無を判定する
請求項１記載の抗酸化能判定具。
【請求項３】
前記遷移金属は銅、鉄、又は亜鉛から選択される請求項１又は２記載の抗酸化能判定具。
【請求項４】
前記支持体は紙材又は繊維材よりなる請求項１乃至３のいずれか一項記載の抗酸化能判定具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、抗酸化能判定具に関し、特に、簡易迅速に試料の抗酸化能を判定できる抗酸化能判定具に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、食品などが有する抗酸化能を測定する方法は種々知られており、例えば、ＯＲＡＣ（Oxygen Radical Absorbance Capacity）法や、ＤＰＰＨ（1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl）法などが知られている。
【０００３】
また、本出願人によるＰＡＯ（Potential Anti Oxidant）法が提案されている（特許文献１）。ＰＡＯ法は、試料の添加により還元された銅試薬が、発色試薬によって色が変化することを利用して試料の抗酸化能の有無を測定する方法である。
【０００４】
また、特許文献２には、尿の抗酸化度を測定することにより生体内のストレスを判定する方法等が記載されている。この方法は、２，４，６−トリス（２−ピリジル）−１，３，５−トリアジンと３価の鉄を含有する金属塩とを含む指示薬を含有する測定キットと尿を反応させると、尿の抗酸化度に応じて前記指示薬成分の色が変化することを利用して尿の抗酸化度の高低を測定する方法である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１１−１７６６３号公報
【特許文献２】特開２０１０−２２４５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従来の抗酸化能を測定する方法は、試験、研究のために利用されるものが多く、試料の抗酸化能を測定するのに長時間要するものがある。また、抗酸化能の測定に使用する器具、装置が高価なものや、操作方法も特殊な操作を要するものもある。
【０００７】
従って、高価な装置や特殊な操作方法を要せず、短時間で試料の抗酸化能を判定したいという要望には十分応えられていなかった。
【０００８】
そこで、本発明は、高価な装置や特殊な操作方法を要せず、簡便迅速に試料の抗酸化能を判定できる抗酸化能判定具を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記課題を解決するため、以下の発明を提案する。
【００１０】
請求項１の発明は、
支持体に備えられた試料滴下部と、
前記試料滴下部から近い順に前記支持体に備えられた第一観測部、第二観測部及び第三観測部とを備えてなり、
前記第一観測部には発色試薬が含まれ、
前記第二観測部には遷移金属を含む試薬が含まれ、
前記第三観測部には還元剤が含まれ、
前記発色試薬が、前記試料滴下部に滴下された試料とともに前記第二観測部に浸潤し、更に、前記試料滴下部に滴下された前記試料及び前記第二観測部に含まれている前記遷移金属とともに前記第三観測部に浸潤する、前記試料の抗酸化能の有無を判定する、抗酸化能判定具であって、
前記発色試薬は、前記第二観測部に含まれている前記遷移金属が前記試料滴下部に滴下された前記試料に含まれている抗酸化物質によって還元された際に発色するとともに、前記第三観測部に浸潤してきた前記遷移金属が前記還元剤によって還元された際に発色するキレート発色剤である
抗酸化能判定具である。
【００１１】
請求項２の発明は、前記第三観測部における発色により前記試料滴下部に滴下された前記試料が前記第三観測部にまで浸潤したことを確認し、
前記第一観測部における発色状態と、前記第二観測部における発色状態との比較により前記試料の抗酸化能の有無を判定する
請求項１記載の抗酸化能判定具である。
【００１２】
請求項３の発明は、 前記遷移金属は銅、鉄、又は亜鉛から選択される請求項１又は２記載の抗酸化能判定具。
【００１４】
請求項４の発明は、前記支持体は紙材又は繊維材よりなる請求項１乃至３のいずれか一項記載の抗酸化能判定具である。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、高価な装置や特殊な操作方法を要せず、簡便迅速に試料の抗酸化能を判定できる抗酸化能判定具を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の抗酸化能判定具の一実施例を示す図。
【図２】本発明の一実施形態による抗酸化能の有無を判定するプロセス示す図であって、（ａ）判定前の抗酸化能判定具、（ｂ）試料が抗酸化能を有する場合、（ｃ）試料が抗酸化能を有さない場合、（ｄ）抗酸化能の判定が不可の場合をそれぞれ表す斜視図。
【図３】本発明の抗酸化能判定具を用いて抗酸化能の有無の判定を行った状態を示す図であって、（ａ）抗酸化能があると判定された場合、（ｂ）抗酸化能がないと判定された場合をそれぞれ表す平面図。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、添付図面を参照して本発明の一実施形態について説明する。
【００１８】
図１は、本発明の抗酸化能判定具の一実施形態を示す図である。濾紙などの紙材又は繊維材よりなる支持体２に、抗酸化能を判定すべき試料を滴下する試料滴下部３、発色試薬が含まれた第一観測部４、遷移金属を含む試薬が含まれた第二観測部５及び還元剤が含まれた第三観測部６が備えられ、抗酸化能判定具１が構成される。
【００１９】
本発明では、抗酸化能判定具１を構成する支持体２において、試料滴下部３とする箇所から近い順に、第一観測部４、第二観測部５、第三観測部６としている。そこで、図１図示のように、抗酸化能判定具１を構成する支持体２の一端側を試料滴下部３とし、ここから近い順に、第一観測部４、第二観測部５、第三観測部６とし、前述した発色試薬、遷移金属を含む試薬、還元剤が、それぞれの箇所に含浸されているようにすることが望ましい。
【００２０】
支持体２は、抗酸化能の判定に適宜な形状であればよく、本実施形態では１枚の濾紙をスティック状に形成した。
【００２１】
本発明は、後述するように、支持体２の試料滴下部３に抗酸化能を判定すべき試料を滴下し、滴下した試料が支持体２が備えている吸水性、浸透性により支持体２中を浸透していくことにより試料の抗酸化能を判定するものである。そこで、支持体２は吸水性、浸透性を備えている部材であれば、種々の材質から構成することができる。例えば、支持体２を濾紙などの紙材又は繊維材とすることで、抗酸化能判定具の構成を単純、安価なものとすることができる。
【００２２】
支持体２を展開し、支持体２の一端側である試料滴下部３に抗酸化能を判定すべき試料を滴下すると、支持体２の吸水性、浸透性により前記試料は、試料滴下部３から第一観測部４、第二観測部５、第三観測部６の順に支持体２中に浸潤していく。
【００２３】
例えば、図１図示のように、ガラス製や金属製などの基板７の上に支持体２を展開し、支持体２の一端側の試料滴下部３に抗酸化能を判定すべき試料、例えば果汁などを滴下する。滴下された試料（果汁）は、支持体２の吸水性、浸透性により、試料滴下部３から第一観測部４、第二観測部５、第三観測部６の順に矢印８の方向に沿って支持体２中を浸潤していく。
【００２４】
そこで、第一観測部４では試料（果汁）と発色試薬とが混合し、第二観測部５では試料（果汁）と試薬とが混合し、第三観測部６では試料（果汁）と還元剤とが混合する。
【００２５】
第二観測部５に含まれる試薬には遷移金属、例えば、２価の銅（Ｃｕ２＋）が含まれている。試料（果汁）が第二観測部５に到達すると、試料（果汁）に含まれている抗酸化物質により２価の銅（Ｃｕ２＋）は還元され１価の銅（Ｃｕ1＋）となる。この還元された１価の銅（Ｃｕ1＋）が、第一観測部４で試料（果汁）と混合し、試料（果汁）中に溶解している発色試薬と反応する。この反応によって生じた色を検出することで試料（果汁）が抗酸化能を有するか否か判定することができる。
【００２６】
第三観測部６はポジティブコントロールの役割を果たす部分である。すなわち、試料滴下部３に滴下された試料が第二観測部５を経由して第三観測部６に到達したことを確認するために用いられる部分である。
【００２７】
試料滴下部３に滴下された試料は、第一観測部４で発色試薬と混合し、第二観測部５で遷移金属を含んでいる試薬と混合する。そこで、第三観測部６に到達した試料には、第一観測部４に含まれていた発色試薬、第二観測部５の試薬に含まれていた遷移金属がそれぞれ溶解している。
【００２８】
例えば、前述したように、第二観測部５に含まれる試薬に遷移金属として２価の銅（Ｃｕ２＋）が含まれていて、第三観測部６に含まれる還元剤として尿酸を用いている場合、試料が第三観測部６に到達すると、尿酸に含まれている抗酸化物質により試料に溶解している２価の銅（Ｃｕ２＋）は還元され、１価の銅（Ｃｕ1＋）となる。そして、この１価の銅（Ｃｕ1＋）が、試料に溶解している発色試薬と反応することによって生じた色を検出することで試料が第三観測部６に到達したか否か判定することができる。
【００２９】
次に、本発明の抗酸化能判定具１を用いて、試料が抗酸化能を備えているか否かを判定するプロセスの一例を図２を用いて説明する。
【００３０】
図２（ａ）のように、濾紙製でスティック状の支持体２からなる本発明の抗酸化能測定具１を展開し、試料滴下部３に試料を滴下する。
【００３１】
支持体２の吸水性、浸透性により試料は、試料滴下部３から第一観測部４、第二観測部５、第三観測部６の順に支持体２中を矢印８の方向に沿って浸潤していく。
【００３２】
第一観測部４では滴下された試料と第一観測部４に含有されている発色試薬であるキレート発色剤とが混合し、キレート発色剤が試料中に溶解する。
【００３３】
第二観測部５ではキレート発色剤が溶解している試料が、遷移金属である２価の銅（Ｃｕ２＋）を含んでいて第二観測部５に含有されている試薬と混合する。そこで、第二観測部５に含有されている試薬に含まれている遷移金属である２価の銅（Ｃｕ２＋）が試料中に溶解する。
【００３４】
第三観測部６では、第一観測部４に含有されていたキレート発色剤および、第二観測部５に含有されている試薬に含まれている遷移金属（２価の銅（Ｃｕ２＋））が溶解している試料が、第三観測部６に含有されている還元剤、例えば、尿酸と混合する。
【００３５】
そこで、試料が抗酸化能を有する場合には、図２（ｂ）で示されるような発色パターンになる。
【００３６】
すなわち、試料滴下部３に滴下された試料が第二観測部５に到達すると、試料に含まれている抗酸化物質により、第二観測部５の試薬に含まれている２価の銅（Ｃｕ２＋）が１価の銅（Ｃｕ1＋）に還元される還元反応が生じる。そして、この１価の銅（Ｃｕ1＋）と、第一観測部４で試料に溶解したキレート発色剤とが反応して発色し、発色パターン５ａが形成される。このとき、第一観測部４では発色反応は生じておらず、支持体２が有する発色パターン４ａのままである。
【００３７】
また、試料滴下部３に滴下された試料が第三観測部６に到達すると、第三観測部６に含まれている尿酸に含まれている抗酸化物質により、第二観測部５で試料に溶解した試薬に含まれている２価の銅（Ｃｕ２＋）が１価の銅（Ｃｕ1＋）に還元される還元反応が生じる。そして、この１価の銅（Ｃｕ1＋）が、試料に溶解している第一観測部４のキレート発色剤と反応して発色し、発色パターン６ａが形成される。
【００３８】
そこで、図２（ｂ）図示の発色パターンになった場合には、試料が抗酸化能を備えていると判定することができる。
【００３９】
一方、試料が抗酸化能を有さない場合の発色パターンは図２（ｃ）図示のようになる。
【００４０】
すなわち、試料滴下部３に滴下された試料が第二観測部５に到達し、第二観測部５に含まれている遷移金属、例えば、２価の銅（Ｃｕ２＋）を含んでいる試薬と、第二観測部５に到達した試料とが混合しても、試料が抗酸化能を有さないので、遷移金属（２価の銅（Ｃｕ２＋））との間に還元反応は生じない。
【００４１】
このため、第二観測部５では発色反応も生じず、支持体２が有する発色パターン５ｂのままである。また、第一観測部４でも発色反応は生じておらず、支持体２が有する発色パターン４ｂのままである。
【００４２】
一方、試料滴下部３に滴下された試料が第三観測部６に到達すると、第三観測部６に含まれている尿酸が有する抗酸化物質により、第二観測部５で試料に溶解した試薬に含まれている２価の銅（Ｃｕ２＋）が１価の銅（Ｃｕ1＋）に還元される還元反応が生じる。そして、この１価の銅（Ｃｕ1＋）が、試料に溶解している第一観測部４のキレート発色剤と反応して発色し、発色パターン６ｂが形成される。
【００４３】
こうして、第二観測部５で発色反応が生じなくても、第三観測部６で発色パターンを確認できることにより、試料滴下部３に滴下された試料が第二観測部５を経由して第三観測部６まで到達できたことを確認できる。
【００４４】
そして、試料滴下部３に滴下された試料が第二観測部５を経由して第三観測部６まで到達しているにもかかわらず、第二観測部５で発色反応が生じていないことから、試料が抗酸化能を備えていない、と判定することができる。
【００４５】
なお、図２（ｄ）図示のような発色パターンとなり、第一観測部４、第二観測部５、第三観測部６のいずれにおいても発色反応が発生し、それぞれ、発色パターン４ｃ、５ｃ、６ｃが形成される場合は、判定不能ということになる。
【００４６】
上述したように、本発明の抗酸化能判定具１は極めて簡単、かつ単純な構成にすることができる。
【００４７】
また、抗酸化能を備えているかどうか判定すべき試料を試料滴下部３へ滴下した後、第二観測部５及び第三観測部６それぞれに発色パターンが形成されるまでの要する時間は約３分ほどである。そこで、迅速に、かつ１ステップで半定量の測定結果を得ることができる。
【００４８】
しかも、試薬等の調整も必要なく、判定者は、抗酸化能を備えているかどうか判定すべき試料を試料滴下部３に滴下するだけなので使用方法も簡単である。
【００４９】
なお、前述した図２（ｂ）図示のような発色パターンが形成されている抗酸化能判定具１をスキャナなどの光学機器を用いて分析すれば、抗酸化能の定量測定も可能である。
【００５０】
前記では、抗酸化能判定具１を構成する支持体２の第二観測部５に含有されている遷移金属を銅とし、第一観測部４に含まれている発色試薬（キレート発色剤）には、抗酸化物質によって銅の還元反応が生起された際に発色（色の変化）を起こすものが使用されていた。
【００５１】
しかし、第二観測部５に含有されている試薬に含まれている遷移金属は銅に限られない。第二観測部５に含有されている試薬に含まれている遷移金属を鉄や亜鉛とし、これらと試料が有する抗酸化物質との還元反応を利用して試料が抗酸化能を備えているかどうか判定することができる。なお、これらの場合、第一観測部４に含まれている発色試薬（キレート発色剤）には、抗酸化物質によって鉄や亜鉛の還元反応が生起した際に発色（色の変化）を起こす発色試薬（キレート発色剤）が使用されることになる。
【００５２】
（実験例）
尿酸水溶液及び蒸留水を試料として用いて本発明の抗酸化能判定具１を用いた抗酸化能の判定について確認実験を行った。
【００５３】
本実験例で使用する抗酸化能判定具９は、脱脂綿よりなる支持体１０に、試料を滴下する試料滴下部１１、キレート発色剤が含まれた第一観測部１２、２価の銅（Ｃｕ２＋）を含む試薬が含まれた第二観測部１３及び尿酸が含まれた第三観測部１４を備えている。
【００５４】
試料を尿酸水溶液とした場合、図３（ａ）で示されるように、第一観測部１２では支持体１０の有する発色パターン１２ａが観測され、第二観測部１３では、尿酸が有する抗酸化物質により、尿酸水溶液と混合した試薬に含まれている２価の銅（Ｃｕ２＋）が１価の銅（Ｃｕ1＋）に還元され、この１価の銅（Ｃｕ1＋）と、第一観測部１２で尿酸水溶液に混合、溶解しているキレート発色剤とが反応し、発色パターン１３ａが観測された。
【００５５】
第三観測部１４でも、尿酸水溶液に第二観測部１３で混入、溶解した２価の銅（Ｃｕ２＋）が、第三観測部１４に含まれている還元剤（尿酸）によって１価の銅（Ｃｕ1＋）に還元され、この１価の銅（Ｃｕ1＋）と、第一観測部１２で尿酸水溶液に混合、溶解しているキレート発色剤とが反応し、発色パターン１４ａが観測された。
【００５６】
このような図３（ａ）図示の各発色パターンにより、試料滴下部１１に滴下する試料が、尿酸水溶液のように、抗酸化能を有する場合、前述した図２（ｂ）図示の発色パターンが形成され、本発明の抗酸化能判定具９を用いて試料が抗酸化能を備えているか否かを簡便に判定できることを確認できた。
【００５７】
試料を蒸留水とした場合、図３（ｂ）で示されるように、第一観測部１２及び第二観測部１３では、それぞれ支持体１０の有する発色パターン１２ｂ、１３ｂが観測された。また、第三観測部１４では、第三観測部１４に含まれている尿酸が有する抗酸化物質により、前記蒸留水に第二観測部１３で混入・溶解した前記試薬に含まれている２価の銅（Ｃｕ２＋）が１価の銅（Ｃｕ1＋）に還元され、この１価の銅（Ｃｕ1＋）と、第一観測部１２で蒸留水に混入・溶解したキレート発色剤とが反応して発色し、発色パターン１４ｂが観測された。
【００５８】
このような図３（ｂ）図示の各発色パターンにより、試料滴下部１１に滴下する試料が、蒸留水のように、抗酸化能を有しない場合、前述した図２（ｃ）図示の発色パターンが形成され、本発明の抗酸化能判定具９を用いて試料が抗酸化能を備えているか否かを簡便に判定できることを確認できた。
【００５９】
以上、添付図面を参照して本発明の好ましい実施形態を説明したが、本発明はかかる実施形態に限定されるものではなく、特許請求の範囲の記載から把握される技術的範囲において種々に変更可能である。
【符号の説明】
【００６０】
１、９  抗酸化能判定具
２、１０  支持体
３、１１  試料滴下部
４、１２  第一観測部
５、１３  第二観測部
６、１４  第三観測部
【図１】
0005917951.tif 000002
【図２】
0005917951.tif 000003
【図３】
0005917951.tif 000004