(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルギニン及びカルビドパを含む薬学的に許容可能な液体組成物であって、該組成物は、１〜６重量％のカルビドパを含み、該液体組成物は、２５℃で８．０〜９．５のｐＨを有し、及び、該液体組成物は、４８時間以上の間、２５℃で安定である、上記液体組成物。
【請求項２】
カルビドパ及びアルギニンは、１：１〜１：２．５、又は１：１〜１：１．２から選択されるモル比を有する、請求項１に記載の薬学的に許容可能な液体組成物。
【請求項３】
２〜６重量％のカルビドパ及びアルギニンを含み、前記液体組成物のｐＨは、２５℃で８．０〜９．０であり、カルビドパ及びアルギニンは、１：１〜１：２．５のモル比を有し、及び、前記液体組成物は、４８時間以上の間、２５℃で安定である、請求項１に記載の薬学的に許容可能な液体組成物。
【請求項４】
Ｎ−メチルピロリドン、ポリビニルピロリドン、プロピレングリコール、酸化防止剤、又はそれらの組み合わせから選択される薬学的に許容可能な賦形剤を更に含む、請求項１から３までのいずれか一項に記載の薬学的に許容可能な液体組成物。
【請求項５】
（ｉ）水、
（ｉｉ）エンタカポン若しくはトルカポン、又は
（ｉｉｉ）水、及びエンタカポン若しくはトルカポンの両方
を更に含む、請求項１から４までのいずれか一項に記載の薬学的に許容可能な液体組成物。
【請求項６】
ａ）請求項１から５までのいずれか一項に記載の液体組成物を含む、連続投与に適した第１の組成物、
ｂ）レボドパ又はその薬学的に許容可能な塩若しくはエステルを含む、経口投与に適した第２の組成物、及び任意選択で
ｃ）第２の組成物と併用する第１の製剤の投与に関する指示書
を含むキット。
【請求項７】
連続投与用の前記第１の組成物は、経皮、皮内、皮下、静脈内、又は十二指腸内投与用である、請求項６に記載のキット。
【請求項８】
前記連続投与が注入ポンプの使用を含む、請求項７に記載のキット。
【請求項９】
第２の組成物は、カルビドパ、ベンセラジド、エンタカポン、トルカポン、又はそれらの組み合わせを更に含む、請求項６から８までのいずれか一項に記載のキット。
【請求項１０】
第２の組成物はレボドパの薬学的に許容可能な塩を含む、請求項６から９までのいずれか一項に記載のキット。
【請求項１１】
第２の組成物はレボドパのアルギニン塩を含む、請求項１０に記載のキット。
【請求項１２】
不穏下肢症候群、パーキンソン病、続発性パーキンソン症候群、ハンチントン病、パーキンソン様症候群、進行性核上性麻痺、多系統萎縮症、又は筋萎縮性側索硬化症から選択される神経学的障害の治療における使用のための、請求項６から１１のいずれか一項に記載のキット。
【請求項１３】
パーキンソン病の治療における使用のための、請求項１２に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２００９年５月１９日に出願された米国仮特許出願第６１／１７９，５１１号の優先権を主張し、その全体は本明細書に参照として組み込まれている。
【０００２】
本発明は、脳内のドーパミンレベルが低下する疾患及び障害、例えばパーキンソン病を治療する方法に有用な化合物及び製剤に関する。特に、本発明は、カルビドパ及びレボドパのアルギニン塩並びにそれらを含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
パーキンソン病は、脳内の神経伝達物質ドーパミン濃度の低下より特徴付けられる変性状態である。レボドパ（Ｌ−ドーパ又はＬ−３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン）は、ドーパミンの直接の代謝前駆体であり、それはドーパミンとは違って血液脳関門を越えることができ、脳内のドーパミン濃度を回復させるために最も一般的に使用されている。過去４０年間、レボドパは、パーキンソン病治療のための最も効果的な治療薬であり続けている。
【０００４】
しかしながら、レボドパは、血漿中半減期が短いことにより、現行の最善の一般的な標準治療の下でさえ拍動性のドーパミン作動性刺激が生じる。したがって、長期間の治療は、患者によっては重大な障害の原因となり得る運動症状の変動及びジスキネジアを伴う。レボドパ／ドーパミンをより連続的且つ生理学的に脳に最終的に送達することができる治療戦略があれば、運動症状の合併症が低減した標準的なレボドパが有益にも得られ、これは、パーキンソン病及び他の神経学的障害又は運動障害に罹患している患者に非常に必要とされている（Ｏｌａｎｏｗ  ＣＷ；Ｍｏｖ．Ｄｉｓ．２００８，２３（Ｓｕｐｐｌ．３）：Ｓ６１３−Ｓ６２２）。持続放出経口レボドパ製剤が開発されているが、良くても、このような調製物は、標準的な錠剤より有効でないことが見出されている。歩行可能ポンプ又はパッチを用いることによって、十二指腸内投与又は注入によるレボドパの連続投与も試みられている。特に十二指腸内へのこのような治療は、非常に侵襲的であり、不便である。更に、このような治療は、ドーパミン作動性の有害事象を伴う可能性がある。すなわち、レボドパ又はドーパ作動薬の連続投与は、薬物の連続送達にも関わらず自己制御する効果停止期間（ｏｆｆ  ｐｅｒｉｏｄ）をやはり伴う。Ｎｕｔｔ  ＪＧ；Ｍｏｖ．Ｄｉｓ．２００８，２３（Ｓｕｐｐｌ．３）：Ｓ５８０−４。
【０００５】
レボドパからドーパミンへの代謝的変換は、特に、腸粘膜、肝臓、脳及び脳毛細血管内に高濃度で存在する偏在性の酵素である芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ酵素により触媒される。レボドパの脳外の代謝の可能性があるため、多量のレボドパを投与することが必要であり、それにより患者によっては吐気を引き起こすドーパミンの高い脳外濃度を生じる。したがって、レボドパは、通常、カルビドパ又はベンセラジドなどのドーパデカルボキシラーゼ阻害剤の経口投与と同時に投与され、この阻害剤は、臨床反応に必要とされるレボドパ用量を６０〜８０％まで減少させることにより、脳外でのレボドパからドーパミンへの変換を阻害することによってその副作用の一部を防ぐ。まさにこの用量低減を達成する方法は不明確である。レボドパを単独で含むか、又はレボドパの代謝分解と関連する酵素の阻害剤と共に含む様々な製剤、例えば、カルビドパ及びベンセラジドなどのデカルボキシラーゼ阻害剤、エンタカポン及びトルカポンなどのカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤、並びにモクロベミド、ラサギリン又はセレギリン又はサフィナミドなどのモノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）−Ａ若しくはＭＡＯ−Ｂ阻害剤が周知である。現在利用可能な経口薬物としては、カルビドパ又はレボドパを含むＳＩＮＥＭＥＴ（登録商標）及びＳＩＮＥＭＥＴ（登録商標）ＣＲ持続放出錠剤、カルビドパ、エンタカポン及びレボドパを含有するＳＴＡＬＥＶＯ（登録商標）錠剤、並びにレボドパ及びベンセラジドを含有するＭＡＤＯＰＡＲ（登録商標）錠剤が挙げられる。パーキンソン病などの運動障害をより効果的に治療するために、Ｌ−ドーパの持続的刺激をもたらすことができる方法及び組成物に対して依然として差し迫った必要性が存在している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
わずかに水に可溶性である白色結晶化合物のカルビドパ［（−）−Ｌ−α−ヒドラジノ−α−メチル−β−（３，４−ジヒドロキシベンゼン）プロパン酸一水和物］は、レボドパと共に通常投与されているドーパデカルボキシラーゼ阻害剤である。経口投与したカルビドパの４０〜７０％のみが、ヒト、サル及びイヌに吸収される。カルビドパは、３０年以上にわたってレボドパと共に経口投与されているが、例えば、皮下又は経皮送達用に適した量で有効な濃度を有する安定な液体製剤はこれまで実現していない。特に、十二指腸投与などの現在の侵襲的な形よりも容易に患者に投与できるようなカルビドパ製剤に対して差し迫った長年にわたる必要性が存在している。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
現在、本発明に従って、カルビドパのアルギニン塩が、生理学的に許容可能なｐＨにおいて、例えば、連続皮下、経皮、皮内、静脈内及び／又は十二指腸内投与に適した安定な液体製剤を形成できることを見出した。開示されているこのような組成物は、カルビドパを患者に実質的に連続して投与することができる。
【０００８】
レボドパの別個の（例えば経口）同時投与と共に、カルビドパなどのドーパデカルボキシラーゼ阻害剤を実質的に連続して投与することは、Ｌ−ドーパを実質的に連続して刺激できるので、例えば、レボドパ経口投与計画の有効性を延長させ、及び／又はレボドパの１日投与量を減少させるが、パーキンソン病などの運動障害及び／又は神経学的障害を有効に治療することを更に見出した。
【０００９】
一態様において、本発明は、例えば、連続皮下、経皮、皮内、静脈内、経口、又は十二指腸内投与に適した、カルビドパ及びレボドパから選択される活性剤のアルギニン塩に関する。
【００１０】
例えば、経皮パッチ又は皮下ポンプ（例えばインスリン様ポンプ）を、例えば使用して、又は使用せずに、患者に対して実質的に連続投与するのに適切であり得る、カルビドパのアルギニン塩を含む、例えばカルビドパ及びアルギニンを含む、薬学的に許容可能な液体（例えば、室温で液体）製剤若しくは液体組成物又はゲル製剤若しくはゲル組成物も本明細書で企図される。このような企図される液体組成物は、少なくとも１重量％、少なくとも４重量％、少なくとも６重量％又はそれ以上のカルビドパ（例えば約２重量％〜約６重量％のカルビドパ）を含んでもよく、それによって、１重量％未満のカルビドパしかを有することができないカルビドパ製剤と比べて、より少量の薬理学的に許容可能な製剤の投与によって効果を達成するのを容易にし得る。別の実施形態において、カルビドパと塩基性アミノ酸、例えばカルビドパとアルギニンを約１．０：０．５〜約１：約２．５までのモル比、例えば１：１．０〜１．２のモル比で含む、液体組成物又はゲル組成物が本明細書で企図される。本明細書で企図される場合、カルビドパ及びアルギニンを含む液体組成物は、２５℃で、生理学的に許容可能なｐＨ、例えば約６．５〜９．５、例えば約７〜約９、又は約８〜約９のｐＨを有してもよい。
【００１１】
更に別の実施形態において、レボドパとアルギニンを約１．０：０．５〜約１：２のモル比、例えば約１：１．８のモル比で含む、薬学的に許容可能な液体組成物又はゲル組成物が本明細書で企図される。例えば、少なくとも約４重量％、又は少なくとも５重量％、少なくとも６重量％（例えば約３重量％〜約７重量％）又はそれ以上のレボドパを含み得る液体組成物が本明細書で提供される。本明細書で企図される、レボドパ及び塩基性アミノ酸を有する液体組成物は、２５℃で、約８〜１０、例えば約８．５〜約９．５のｐＨを有してもよい。
【００１２】
本明細書で企図される例示的な液体組成物は、液体溶液であってもよく、例えばカルビドパ及びアルギニンを含む、実質的に均一の混合物であってもよく、水を含んでもよく、又は代替として、実質的に非水性であってもよい。他の実施形態において、企図される組成物はまた、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、プロピレングリコール、酸化防止剤又はそれらの組み合わせなどの１つ又は複数の薬学的に許容可能な賦形剤も含んでもよい。
【００１３】
一部の実施形態において、本発明の薬学的に許容可能な液体組成物は、エンタカポン又はトルカポンなどの更なる活性剤を含んでもよい。
【００１４】
ａ）カルビドパのアルギニン塩を含む本発明の液体製剤又はゲル製剤を含む、連続投与に適した第１の組成物と、ｂ）レボドパ又はその薬学的に許容可能な塩若しくはエステルを含む、経口投与に適した第２の組成物と、ｃ）任意選択で、第２の製剤と併用する第１の製剤の投与に関する指示書とを含むキットも本明細書で提供される。
【００１５】
カルビドパのアルギニン塩の連続投与のためのキットにおける第１の組成物は、注入ポンプを使用することなどによって、経皮、皮内、皮下、静脈内、又は十二指腸内投与用に製剤化されてもよい。
【００１６】
キットにおける第２の組成物、すなわちレボドパ組成物は、レボドパ、レボドパの薬学的に許容可能な塩、好ましくは本明細書に開示されているようなレボドパのアルギニン塩を含んでもよく、又はレボドパを含み、更にカルビドパ及び／若しくはベンセラジドなどの１つ若しくは複数のデカルボキシラーゼ阻害剤、又はエンタカポン及び／若しくはトルカポンなどの１つ若しくは複数のカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤、又はセレギリン及び／若しくはラサギリンなどの１つ若しくは複数のＭＡＯ−Ａ若しくはＭＯＡ−Ｂ阻害剤、又はそれらの組み合わせを含む組成物であってもよい。
【００１７】
患者の脳内のドーパミンレベルの低下により特徴付けられる疾患又は障害（例えばパーキンソン病）を治療するための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量のデカルボキシラーゼ阻害剤、その塩、例えばカルビドパのアルギニン塩、又はそのエステルを実質的に連続投与する工程と、治療有効量のレボドパ若しくは薬学的に許容可能なその塩（例えばアルギニンレボドパ）、又はレボドパを含む組成物を投与する工程（例えばその唯一の活性剤としてレボドパを有する組成物、例えば錠剤、又はレボドパ及びカルビドパ、ベンセラジド、エンタカポン、トルカポン、セレギリン及び／若しくはラサギリンなどの１つ若しくは複数の他の活性剤を含む組成物を投与する工程とを含む方法も本明細書で提供される。
【００１８】
一実施形態において、それを必要とする患者において神経学的障害又は運動障害を治療又は改善する方法であって、カルビドパの塩基性アミノ酸塩（例えばカルビドパアルギニン）を含む治療有効量の組成物を投与する工程と、レボドパを含む治療有効量の組成物を投与する工程とを含む方法が提供される。例えば、カルビドパ及びアルギニンを含む組成物は、実質的に連続して投与されてもよく、及び／又はレボドパを含む組成物は、カルビドパアルギニン塩を含む組成物を実質的に連続投与している間、別の間隔で（例えば１日に１回、２回、３回又はそれ以上の回数、経口投与により）投与されてもよい。
【００１９】
カルビドパアルギニンなどのカルビドパ塩を含む液体組成物又はゲル組成物を患者に（例えば実質的に連続して）投与する工程を含む、デカルボキシラーゼ活性を実質的に連続して阻害する方法、及び／又はレボドパを投与した患者においてレボドパの半減期を増加させる方法も本明細書で提供される。例えば、開示されている方法により、カルビドパを連続投与した後の患者の血漿中のレボドパの半減期は、カルビドパの別個の経口投与と共にレボドパを投与した後の患者の血清中のレボドパの半減期と比べて、少なくとも１．５倍、又は少なくとも２倍長くなり得る。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１Ａ】カルビドパ（ＣＤ）アルギニン塩の質量スペクトルを示す。
【図１Ｂ】カルビドパ（ＣＤ）アルギニン塩の質量スペクトルを示す。
【図１Ｃ】カルビドパ（ＣＤ）アルギニン塩の質量スペクトルを示す。
【図２Ａ】レボドパ（ＬＤ）アルギニン塩の質量スペクトルを示す。
【図２Ｂ】レボドパ（ＬＤ）アルギニン塩の質量スペクトルを示す。
【図２Ｃ】レボドパ（ＬＤ）アルギニン塩の質量スペクトルを示す。
【図３Ａ】３％カルビドパ溶液の連続皮下投与と併用した（四角）、又は併用していない（ダイヤモンド）、スタレボ（１００／２５／２００ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ／Ｅ）の経口投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定したカルビドパの平均濃度を示す。
【図３Ｂ】３％カルビドパ溶液の連続皮下投与と併用した（四角）、又は併用していない（ダイヤモンド）、ドピカル（Ｄｏｐｉｃａｒ）＋ロドシン（１２５／２５ｍｇ  ＬＤ／ＣＤ）の経口投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定したカルビドパの平均濃度を示す。
【図３Ｃ】３％カルビドパ溶液の連続皮下投与と併用した（四角）、又は併用していない（ダイヤモンド）、シネメットＣＲ（１００／２５ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ）ｑ８及び１２ｈの経口投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定したカルビドパの平均濃度を示す。
【図４Ａ】カルビドパの連続皮下投与と併用した、又は併用していない、レボドパ／カルビドパの経口投与後にＣＤ−１マウスで測定した、Ｌ−ドーパ及びドーパミンの脳内濃度（それぞれ４Ａの左側パネル及び右側パネル）を示す。
【図４Ｂ】カルビドパの連続皮下投与と併用した、又は併用していない、レボドパ／カルビドパの経口投与後にＣＤ−１マウスで測定した、カルビドパ及びＬ−ドーパの血漿濃度（それぞれ４Ｂの左側パネル及び右側パネル）を示す。
【図５Ａ】Ｓｉｎｅｍｅｔ（登録商標）（１００／２５ｍｇ）ｑ８ｈの経口投与と併用した、０、２及び４％のカルビドパの連続皮下投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定したＬ−ドーパの平均濃度を示す。
【図５Ｂ】Ｓｉｎｅｍｅｔ（登録商標）（１００／２５ｍｇ）ｑ８ｈの経口投与と併用した、０、２及び４％のカルビドパの連続皮下投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定したカルビドパの平均濃度を示す。
【図６Ａ】Ｄｏｐｉｃａｒ（登録商標）（１２５／１２．５ｍｇ  ＬＤ／ＣＤ）＋Ｌｏｄｏｓｙｎ（登録商標）（１２．５ｍｇ  ＣＤ）ｑ１２ｈの経口投与と併用した、２及び４％のカルビドパの連続皮下投与後の２匹の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）（ブタ＃３）の血漿中で測定したＬ−ドーパの平均濃度を示す。
【図６Ｂ】Ｄｏｐｉｃａｒ（登録商標）（１２５／１２．５ｍｇ  ＬＤ／ＣＤ）＋Ｌｏｄｏｓｙｎ（登録商標）（１２．５ｍｇ  ＣＤ）ｑ１２ｈの経口投与と併用した、２及び４％のカルビドパの連続皮下投与後の２匹の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）（ブタ＃４）の血漿中で測定したＬ−ドーパの平均濃度を示す。
【図７】ベンセラジド又はカルビドパの連続皮下投与（６０ｍｇ／日）と併用した、又は併用していない、スタレボ（ＬＤ／ＣＤ／Ｅ  １００／２５／２００）、ｑ８ｈの経口投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定した場合の平均（±ＳＤ）ＬＤ（レボドパ）濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示す。
【図８Ａ】２．５％エンタカポン、及びＬ−ドーパ／カルビドパ（ＬＤ／ＣＤ）の経口投与と併用した、又は併用していない、２％カルビドパの連続皮下投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定した場合のＬ−ドーパの血漿濃度を示す。
【図８Ｂ】２．５％エンタカポン、及びＬ−ドーパ／カルビドパ（ＬＤ／ＣＤ）の経口投与と併用した、又は併用していない、２％カルビドパの連続皮下投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定した場合の３−Ｏ−メチルドーパ（３−ＯＭＤ）の血漿濃度を示す。
【図９】カルビドパプロピルエステル（ＣＤＰＥ）の経皮送達の結果を示す。
【図１０Ａ】シネメット（１００／２５ｍｇ  ＬＤ／ＣＤ）と比較して、アルギニン塩として腸溶コーティングした、又はコーティングしていないＬＤ及びＣＤ（それぞれ、ＬＤ及びＣＤと指定した、１００／２５ｍｇ  ＬＤ／ＣＤ）の経口投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定した場合のレボドパの血漿濃度を示す。
【図１０Ｂ】シネメット（１００／２５ｍｇ  ＬＤ／ＣＤ）と比較して、アルギニン塩として腸溶コーティングした、又はコーティングしていないＬＤ及びＣＤ（それぞれ、ＬＤ及びＣＤと指定した、１００／２５ｍｇ  ＬＤ／ＣＤ）の経口投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定した場合のカルビドパの血漿濃度を示す。
【図１１】カルビドパ及びカルビドパプロピルエステル（ＣＤＰＥ）によるＬ−ドーパ脱カルボキシル化の阻害を示す。
【図１２Ａ】肝臓抽出物中のカルビドパ及びカルビドパプロピルエステルによるＬ−ドーパ脱カルボキシル化の阻害を示す。
【図１２Ｂ】肝臓抽出物中のカルビドパ及びカルビドパプロピルエステルによるＬ−ドーパのドーパミンへの代謝の阻害を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
室温で安定であるカルビドパのアルギニン塩（例えばアルギニン及びカルビドパ）を含む、生理学的に許容可能なｐＨを有する液体組成物であって、その液体組成物は、低侵襲様式で患者に対して有効量のカルビドパの連続送達を容易にすることができる、液体組成物が本明細書に開示される（例えば、開示されている液体製剤は、著しく高い濃度のカルビドパを含むので、大量の液体の投与は必要とされない）。このような製剤は、レボドパの半減期を延長する連続的なデカルボキシラーゼ阻害を促進できる。例えば、以下に記載するように、Ｌ−ドーパを、６〜８時間毎のカルビドパの経口投与と並行して連続して投与したインビボでの研究からの結果により、カルビドパの経口投与計画と一致する、Ｌ−ドーパの血漿中濃度の拍動性パターンが実証されるが、レボドパの別個又は連続投与と併用した、ＣＯＭＴ阻害剤と併用した、又は併用していない、同時及び／又は頻繁に反復される、例えばドーパデカルボキシラーゼ阻害剤（例えばカルビドパ若しくはその塩、又はベンセラジド）の同時投与は、例えばパーキンソン病の治療により効果的である。更に、例えばカルビドパ（エンタカポンと併用した、又は併用していない）の薬物動態プロファイルにより、例えばレボドパ又はその塩の（連続又は別の間隔での）投与と一緒に、ＣＯＭＴ阻害剤と併用して、又は併用せずに、ドーパデカルボキシラーゼ阻害剤（例えばベンセラジド又はカルビドパ若しくはその塩）を実質的に連続投与することを含む、このような新規の治療が立証されることを発見した。
【００２２】
例えば実質的に連続皮下又は経皮投与のために、例えば生理学的に許容可能なｐＨにおいて、より高い濃度（例えば１重量％より多い）のカルビドパ及び／又はレボドパの安定な溶解を、予想外にも可能にするカルビドパの製剤が本明細書で提供される。このような製剤はまた、静脈内、皮内、経口又は十二指腸内投与にも適切であり得る。例えば、投与の際に、ドーパデカルボキシラーゼ活性の実質的に一定の阻害を得ることができ、それによって、投与されたレボドパの半減期を増加させ、レボドパの血漿中濃度の拍動性を実質的に低下させて、血漿中のレボドパの低いトラフ濃度を回避できる製剤及び方法が本明細書で提供される。
【００２３】
本発明による連続カルビドパ投与の治療戦略は、Ｌ−ドーパを実質的に連続して模倣できる。例えば、本発明の治療及び／又は方法は、レボドパの経口投与計画を約２〜約３回／日まで延長でき、及び／又はレボドパの日用量を減少でき、及び／又はパーキンソン病における標準的な経口レボドパ製剤に関連する運動合併症の危険性を減少若しくは排除さえできる。
【００２４】
一実施形態において、カルビドパの実質的に連続投与を可能にする、カルビドパアルギニン塩を含む、薬学的に許容可能な製剤が本明細書で提供される。例えば、カルビドパ遊離塩基は、実際には、アルコール、クロロホルム又はエーテルに不溶性であり、わずかに水に可溶性であるが、例えば、カルビドパを含み、患者に対する実質的な連続投与に適切であり得る、安定な液体製剤が本明細書で提供される。更に、このような製剤は、生理学的に許容可能なｐＨを有し得る。
【００２５】
一態様において、本発明はカルビドパアルギニン塩に関する。
【００２６】
一実施形態において、本開示はまた、本発明のカルビドパ塩を含む液体製剤も提供する。例えば、開示されているカルビドパアルギニン塩は、２５℃又は３０℃で、例えば約６〜９．５、好ましくは約７〜約９、より好ましくは約８〜９のｐＨを有する水性液体に溶解できる。代替として、カルビドパ（遊離塩基）及びアルギニンは、液体（例えば水溶液）中で一緒に溶解して、開示されている液体製剤を形成する。開示されている液体製剤は、約１．０重量％又はそれ以上のカルビドパ又はカルビドパアルギニン塩を含んでもよく、例えば約１重量％〜約２０重量％又はそれ以上のカルビドパ、例えば約２重量％〜約１０重量％のカルビドパを含んでもよい。例えば、液体製剤は、カルビドパ及びアルギニンを、約１：０．５〜約１：２．５、又は約１：１〜約１：１．２、例えば約１：１又は１：１．１のモル比で含んでもよい。
【００２７】
開示されている液体製剤（例えばカルビドパ及びアルギニン又はカルビドパのアルギニン塩を含む液体組成物）は、２５℃にて、２４時間、４８時間、７日間、又はそれ以上、安定であり得る。例えば、例示的な液体製剤は、約２重量％〜約１５重量％、又は約２重量％〜約１０重量％、又は２重量％〜約６重量％のカルビドパと共に、１：１．１のモル比のカルビドパ：アルギニンを含んでもよい。このようなカルビドパ：アルギニン液体製剤は、カルビドパのリシン又はヒスチジン塩を含む液体組成物と比べて、７日間でより安定であり得る。
【００２８】
一部の実施形態において、開示されている液体製剤又は組成物は、液体溶液、すなわち実質的に均一の液体混合物である。このような液体混合物は、水及び／又は他の賦形剤を含んでもよい。別の実施形態において、開示されている液体組成物は実質的に非水溶性であってもよい。
【００２９】
例えば、以下の例６に開示しているように、安定な液体溶液は、予想外にもカルビドパ及びアルギニンから形成できる。このような溶液は室温にて安定であり、例えば、２、３、４、６、及び／又は８重量パーセントのカルビドパの高いカルビドパ濃度でさえ、実質的に透明な溶液である。このような溶液、例えば約６重量パーセントまでのカルビドパは、少なくとも４８時間安定である（例えば沈殿しない）。更に、高濃度のカルビドパでさえも、このような開示されている溶液は、生理学的に許容可能なｐＨを有するので、このような溶液は、適切なｐＨに調整できるが、それでも、より少ない体積でかなりの量のカルビドパを有するので、例えば大量の溶液を投与することなく、患者への投与を容易にできる。
【００３０】
更に、例えば以下の例６に示すように、カルビドパ及びアルギニン（例えばカルビドパのアルギニン塩）を有する溶液は、ヒスチジン又はリシンなどの他の塩基性アミノ酸を含むカルビドパの溶液と比較した場合でさえ、予想外にもより安定である。
【００３１】
一部の実施形態において、企図される液体製剤は、レボドパ若しくはレボドパ及びアルギニン、並びに／又は任意選択で、エンタカポン若しくはトルカポンなどのカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤、並びに／又はモクロベミド、ラサギリン、セレギリン若しくはサフィナミドなどのモノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）−Ａ若しくはＭＡＯ−Ｂ阻害剤を更に含んでもよい。
【００３２】
レボドパのアルギニン塩を含む液体製剤、又はアルギニン及びレボドパを含む液体製剤も本明細書で提供される。一実施形態において、レボドパ及びアルギニンを約１：１．５〜約１：２．５、又は約１：１．８〜約１．２０のモル比で含む液体製剤が本明細書で提供される。このようなレボドパ及びアルギニン製剤又は溶液は、約８〜約１０、例えば約８．５〜約９．５のｐＨを有してもよい。レボドパ及びアルギニンを有する開示されている製剤は、約２重量％、３重量％、４重量％、５重量％、６重量％又はそれ以上のレボドパを含んでもよく、例えば約４重量％又はそれ以上のレボドパを含んでもよい。
【００３３】
一部の実施形態において、開示されている液体製剤は、室温にて、１日、２日、３日、１週、若しくは１ヶ月又はそれ以上の間、安定である。本発明の好ましい実施形態において、開示されている液体製剤は更に、例えばＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、プロピレングリコール、又はそれらの１つ若しくは複数の組み合わせなどの薬学的に許容可能な賦形剤を含み、更に、限定されないが、Ｎ−アセチルシステイン、亜硫酸水素ナトリウム、グルタチオン、及びアスコルビン酸などの１つ若しくは複数の酸化防止剤を含んでもよい。例えば、一実施形態において、約０．５〜約２０重量％のカルビドパ（例えば約２重量％〜約６重量％）、約０．２５〜約２０重量％のアルギニン、約０〜約３０重量％のＮＭＰ、約０〜約５重量％のＰＶＰ、及び／又は約０〜約５重量％の１つ若しくは複数の水溶性酸化防止剤を含む、安定な液体製剤が本明細書で提供される。
【００３４】
本発明は更に、カルビドパアルギニン塩を含む安定な凍結乾燥粉末を提供する。一実施形態において、そのような安定な凍結乾燥粉末は、約２０〜９９％のカルビドパ塩、約０〜６０％のＮＭＰ、約０〜１５％のＰＶＰ、及び約０〜５％の１つ若しくは複数の水溶性酸化防止剤を含んでもよい。凍結乾燥粉末は、水のみ又はＮＭＰを含む水を加えることにより液体製剤に再構成でき、酸化防止剤を含んでもよいか、又は含まなくてもよい。
【００３５】
本発明の液体製剤は、カルビドパ又はレボドパ塩を必要としている患者へのカルビドパ又はレボドパ塩の連続投与のために設計されてもよい。例えば、患者は、開示されているカルビドパアルギニン塩を含む製剤を、実質的に（例えば、皮下、経皮、十二指腸内、皮内、又は静脈内に）連続投与されてもよく、一方で、レボドパ、レボドパ塩、又はレボドパを含む組成物は、別の間隔、例えば１日に２、３、４、又は５回、経口投与される。
【００３６】
本明細書において、その中で使用する場合、用語「レボドパを含む組成物」は、任意選択で、１つ若しくは複数のデカルボキシラーゼ阻害剤、１つ若しくは複数のカテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤、及び／又は１つ若しくは複数のＭＡＯ−Ａ若しくはＭＡＯ−Ｂ阻害剤と一緒に、レボドパを含む製剤を企図する。例えば、レボドパを含む組成物は、レボドパ（又はその塩）及び任意選択で１つ若しくは複数の他の薬物を含む１回分の投薬量の製剤を含んでもよく、その１回分の投薬量の製剤は、経口投与に適した即時放出、制御放出、二重放出又は多重放出製剤であってもよい。
【００３７】
用語「デカルボキシラーゼ阻害剤」とは、ドーパデカルボキシラーゼ（ＤＤＣ）阻害剤、例えば、カルビドパ及びベンセラジドなどの芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼによるレボドパのドーパミンへの末梢代謝を阻害する薬物をいう。
【００３８】
本明細書で使用する場合、用語「薬学的に許容可能な担体」又は「薬学的に許容可能な賦形剤」とは、薬学的投与に適合する、任意及び全ての溶媒、分散媒、防腐剤、酸化防止剤、コーティング、等張剤、及び吸収遅延剤などをいう。薬学的に活性な物質のためのこのような媒体及び薬剤の使用は、当該技術分野において周知である。組成物はまた、補足的、追加的、又は増強的な治療機能を与える、他の活性化合物を含んでもよい。
【００３９】
用語「生理学的に許容可能なｐＨ」は、例えば、顕著な有害作用を有さずに患者に対する組成物の投与を容易にする組成物のｐＨ、例えば約４〜約９のｐＨを意味すると理解される。
【００４０】
用語「ＣＯＭＴ阻害剤」とは、カテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼによるレボドパの３−メチルドーパへの分解を阻害し、レボドパの作用を延長する阻害剤、エンタカポン又はトルカポンなどをいう。例えば、本明細書で企図されるレボドパを含む組成物はまた、デカルボキシラーゼ阻害剤（カルビドパ又はベンセラジド）及びエンタカポンを含んでもよく、例えば「３剤併用」である。
【００４１】
用語「ＭＡＯ−Ａ又はＭＡＯ−Ｂ阻害剤」とは、モノアミンオキシダーゼＡ又はＢによるドーパミンの分解を防ぐ阻害剤、例えばモクロベミド、ラサギリン、セレギリン又はサフィナミド、より好ましくはラサギリンをいう。
【００４２】
ａ）カルビドパアルギニン塩並びに／又はカルビドパ及びアルギニンを含む、連続投与に適した第１の製剤と、ｂ）レボドパ又はレボドパのアルギニン塩を含む、経口投与に適した第２の製剤と、ｃ）製剤ｂ）と併用する製剤ａ）の投与に関する指示書とを含むキットも本明細書で企図される。カルビドパ塩を含む製剤ａ）は、経皮、静脈内、皮下、皮内、筋肉内又は十二指腸内などの任意の適切な経路による連続投与に適切であり得る。
【００４３】
カルビドパ塩を含む企図されるキットの第１の製剤は、液体製剤に再構成できる液体又は凍結乾燥粉末であってもよいか、又は例えば経皮パッチの一部を形成してもよく、限定されないが、経皮、静脈内、皮下、皮内、筋肉内又は十二指腸内などの任意の適切な経路による連続投与のために設計されてもよい。一実施形態において、第１の製剤は開示されているカルビドパアルギニン塩を含み、皮下投与に適している。企図されるキットの第２の製剤は、レボドパ、レボドパエステル、レボドパ塩、又はレボドパを含む組成物を含んでもよく、限定されないが、丸薬、錠剤、分散性錠剤、カプセル、液剤などの任意の適切な経口投薬として提示できる。一実施形態において、第２の製剤は、レボドパ及びベンセラジドの両方、又はレボドパ及びカルビドパの両方を含む、即時放出、制御放出又は二重放出経口製剤の形態であってもよい。丸薬、錠剤などの形態のこのような経口製剤は、約１：１０〜１：４、好ましくは約１：４〜１：１の比のカルビドパ又はベンセラジド対レボドパを含んでもよい。他の企図される第２の製剤は、例えば、レボドパ、カルビドパ、及びエンタカポンを含む錠剤、又は例えば、レボドパアルギニン塩及び／若しくはカルビドパアルギニン塩を含む錠剤である製剤を含む。
【００４４】
別の実施形態において、キットは、限定されないが、経皮、静脈内、皮下、皮内、筋肉内、十二指腸内の連続投与に適した、カルビドパ及びアルギニンを含む第１の液体製剤と、レボドパ及びカルビドパを含む、即時放出、制御放出又は二重放出経口製剤の形態の第２の製剤とを含む。丸薬、錠剤などの形態の経口製剤は、約１：１０〜約１：４、好ましくは約１：４〜約１：１の比のカルビドパ対レボドパを含んでもよい。
【００４５】
別の態様において、本発明は、限定されないが、カルビドパのエチル、プロピル、イソプロピル又はヘキシルエステルなどのカルビドパエステル、及びそれらの塩を含む製剤に関する。本明細書で企図されるレボドパエステルの例としては、アルキルエステル、例えばメチル、エチル、プロピル、若しくはイソプロピルエステル、又はベンジルエステルが挙げられる。
【００４６】
本発明の組成物は、治療有効量のレボドパ若しくはその塩又はレボドパを含む組成物と一緒に、必要とする患者に実質的に連続して同時投与した場合、患者の脳内のドーパミン濃度の低下及び／又は変動によって特徴付けられる疾患又は障害の治療に有用である。例に示すように、患者にレボドパの別個の（例えば経口）投与を用いてでさえも、レボドパの投与と一緒に、カルビドパの別々の連続投与は、現在の標準的な別個のカルビドパ及びレボドパの同時投与と比べて、投与の際に患者の血漿中の著しく高い濃度のレボドパを生じる。例えば、開示されている方法は、（例えば別個の経口投与での）カルビドパの連続投与を併用していない、レボドパの投与後の患者の血清中のレボドパの半減期と比べて、カルビドパの連続投与後、少なくとも１．５倍、又は少なくとも２倍長い、患者の血漿中のレボドパの半減期を生じ得る。
【００４７】
開示されている方法に従う、例えばカルビドパ及びレボドパの企図される投与は、典型的に、所定の期間（通常、選択される組み合わせに依存して、数週、数ヶ月、又は数年）にわたって実施できる。企図される治療は、ドーパデカルボキシラーゼ阻害剤が、実質的に連続して投与され、一方、レボドパが、実質的に同時様式で、企図される治療剤、又は治療剤の少なくとも２つの投与と共に、別の間隔で投与される様式で複数の治療剤の投与を包含することを目的とする。投与は、限定されないが、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路、皮内経路、皮下、経皮を含む、任意の適切な経路、及び粘膜組織を介する直接吸収によって達成できる。
【００４８】
一部の実施形態において、レボドパは、例えば企図されるカルビドパ製剤の投与と比べて、同じ経路によって、又は異なる経路によって投与できる。例えば、カルビドパは、例えば実質的に連続して皮下投与でき、一方、レボドパは、例えば別の間隔で経口投与できる。一実施形態において、（例えばカルビドパ及びアルギニンを有する）開示されている液体カルビドパ組成物は、実質的に連続して投与され、一方、レボドパを含む（及びドーパデカルボキシラーゼ阻害剤などの１つ若しくは複数の他の活性剤も含んでもよい）経口組成物は別の間隔で投与される。代替として、例えば、レボドパ及びカルビドパの両方は、皮下又は経皮に投与できる。
【００４９】
本明細書で企図される、脳内のドーパミン濃度の低下により特徴付けられる疾患又は障害は、不穏下肢症候群、パーキンソン病、続発性パーキンソン症候群、ハンチントン病、パーキンソン様症候群、進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）、多系統萎縮症（ＭＳＡ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ジャイ−ドレーガー症候群及び一酸化炭素又はマンガン中毒を含む脳障害に由来する状態を含む、神経学的又は運動障害である。１つの好ましい実施形態において、治療される疾患はパーキンソン病である。
【００５０】
好ましい実施形態において、企図されるデカルボキシラーゼ阻害剤は、カルビドパのアルギニン塩である。開示されているカルビドパ／アルギニン製剤は、例えば、レボドパ、レボドパのアルギニン塩、又はレボドパを含む組成物の経口投与と併用して、約１０〜２５０μｌ／時間、好ましくは約１５〜８５μｌ／時間の平均速度で、皮下注入のためのポンプ（インスリンポンプ）により、例えば液体製剤を用いて実質的に連続して投与できる。
【００５１】
例えば、本発明によれば、カルビドパ及びアルギニンを含む薬学的に有効な量の組成物（本発明のキットの第１の組成物のカルビドパアルギニン塩）は、神経学的又は運動障害、例えばパーキンソン病を治療するために患者に実質的に連続して投与でき、一方、レボドパ又はその塩、例えばレボドパアルギニン塩を含むキットの第２の組成物は、患者に不連続的に投与される。
【００５２】
一部の実施形態において、カルビドパ及びアルギニンを含む組成物は、室温で液体であってもよい。その組成物は、１２時間、１日、１週間、又はそれ以上にわたって実質的に連続して投与できる。レボドパを含む組成物は、レボドパ及び任意選択で、ベンセラジド又はカルビドパを含む、即時放出、制御放出、又は二重放出経口製剤の全て又は一部を形成してもよく、例えば経口投与によって（例えば錠剤によって）、１日に１、２、３、若しくは４回、又はそれ以上の回数、投与できる。
【００５３】
患者の脳内のドーパミン濃度の低下により特徴付けられる疾患又は障害（例えばパーキンソン病）を治療するための方法であって、それを必要とする患者に治療有効量の開示されているレボドパ塩を実質的に連続して同時投与する工程を含む方法も本明細書で提供される。
【００５４】
ここで、本発明が概して記載され、本発明の特定の態様及び実施形態の例示の目的のみのために含まれる以下の例を参照することによって、本発明はより容易に理解され、以下の例は決して本発明を限定することを意図するものではない。
【実施例】
【００５５】
（例１）カルビドパ−アルギニン塩の調製及び特徴付け
カルビドパ（ＣＤ）−アルギニン塩は以下のように調製した。カルビドパ［Ｔｅｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｌｔｄ．、イスラエル］を、（１：１のモル比で）Ｌ−アルギニン［Ｍｅｒｃｋ］を含む適切な容器内で秤量し、０．２％の亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］水溶液を加えて、４．０％の最終濃度のカルビドパを得た。混合物を、常に撹拌しながら６５±１０℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、溶液を０．４５μＭのナイロン膜を用いて濾過した。濾過した溶液を、ドライアイス中で即座に凍結させ、その後、凍結乾燥に供した。オフホワイトの結晶を得て、その後、ＭＳ分析に供した。ＭＳ分析結果は、カルビドパ及びＬ−アルギニンのイオン及びフラグメントを明確に示した（図１ａ）。ピーク２４９は、フラグメント：２２７、１８８及び１４４を有するカルビドパ＋Ｎａ（２２６＋２３）を表し（図１ｂ）、ピーク１７６は、フラグメント：１５７、１３０及び１１６を有するアルギニン＋２Ｈ（１７４＋２）を表す（図１ｃ）。
【００５６】
（例２）皮下投与のためのカルビドパ溶液／製剤の調製
４％のカルビドパ溶液／製剤は以下のように調製した。カルビドパ［Ａｓｓｉａ  Ｌｔｄ．、イスラエル］を適切な容器内で秤量し、次いで水を加えて、７３％の全ての計画したバッチ重量を得た。混合物を室温で２０分間撹拌した。Ｌ−アルギニン［Ｓｉｇｍａ］を混合物に加えて、カルビドパと１：１のモル比を得た。混合物を常に撹拌しながら６５±１０℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、Ｎ−メチル２−ピロリドン［Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ，ＩＳＰ］を加えて、１０％（ｗ／ｗ）の最終濃度を得た。亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、１％（ｖ／ｗ）の最終濃度を得た。撹拌を６５±３℃にて更に３０分間継続した。その後、ＰＶＰ［ポリビニルピロリドン、Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、１％（ｖ／ｗ）の最終濃度を得た。撹拌を６５±３℃にて３０分間継続した。加熱を停止させて、調製物を室温まで冷却させた。溶液を無菌の０．２２μＭのＰＶＤＦ膜を用いて濾過した。
【００５７】
カルビドパ−アルギニン溶液／製剤、２及び３％を、それぞれの量の再蒸留水（ＤＤＷ）を用いて４％のカルビドパ−アルギニン溶液／製剤を希釈することによって調製した。
【００５８】
（例３）皮下投与のためのカルビドパ溶液／製剤の調製
６％のカルビドパ溶液／製剤を以下のように調製した。カルビドパ［Ｔｅｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｌｔｄ、イスラエル］及びアルギニン［Ｍｅｒｃｋ］（１：１．１のモル比）を適切な容器内で秤量し、次いで水を加えて、８４％の全ての計画したバッチ重量を得た。Ｎ−メチル２−ピロリドン［Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ，ＩＳＰ］を加えて、５％（ｗ／ｗ）の最終濃度を得て、亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、０．１％（ｖ／ｗ）の最終濃度を得た。混合物を常に撹拌しながら６５±１０℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、加熱を停止させ、調製物を室温まで冷却させた。溶液を、無菌の０．２２μＭのＰＶＤＦ膜を用いて濾過した。
【００５９】
（例４）皮下投与のためのカルビドパ溶液／製剤の調製
４％のカルビドパ溶液／製剤は以下のように調製した。カルビドパ［Ｔｅｖａ］及びＬ−アルギニン［Ｍｅｒｃｋ］（１：１．１のモル比）を適切な容器内で秤量し、水を加えて、８９％の全ての計画したバッチ重量を得た。Ｎ−メチル２−ピロリドン［Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ，ＩＳＰ］を加えて、３．５％（ｗ／ｗ）の最終濃度を得た。亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、０．０５％（ｖ／ｗ）の最終濃度を得た。混合物を常に撹拌しながら６５±１０℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、加熱を停止させ、調製物を室温まで冷却させた。溶液を、無菌の０．２２μＭのＰＶＤＦ膜を用いて濾過した。
【００６０】
カルビドパ−アルギニン溶液／製剤、２及び３％を、０．０５％の亜硫酸水素ナトリウムを含むか、又は含まない、３．５％のＮ−ＭＰを含有するそれぞれの量の再蒸留水（ＤＤＷ）を用いて４％のカルビドパ−アルギニン溶液／製剤を希釈することによって調製した。
【００６１】
（例５）経皮送達のためのカルビドパ製剤の調製
８％のカルビドパ製剤は以下のように調製した。カルビドパ［Ｔｅｖａ］及びＬ−アルギニン［Ｍｅｒｃｋ］（１：１のモル比）を適切な容器内で秤量し、プロピレングリコール［Ｍｅｒｃｋ］を加えて、７５％の全ての計画したバッチ重量を得た。亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、０．０５％の最終濃度を得た。混合物を常に撹拌しながら６５±１０℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、加熱を停止させ、調製物を室温まで冷却させた。ＰＥＧ−４００［Ｍｅｒｃｋ］、１０％の全ての計画したバッチ重量を加えた。ｐＨを、８５％の乳酸［Ｆｌｕｋａ］を用いて７．５に調整した。
【００６２】
（例６）カルビドパ−アルギニン、カルビドパ−リシン及びカルビドパ−ヒスチジン溶液／製剤の調製及び安定性
カルビドパ溶液／製剤は以下のように調製した。カルビドパ［Ｔｅｖａ］を、（１：１、１：１．１又は１：２のモル比で）Ｌ−アルギニン［Ｍｅｒｃｋ］又はＬ−リシン［Ｓｉｇｍａ］又はＬ−ヒスチジン［Ｓｉｇｍａ］を含む適切な容器内で秤量し、水を加えた。Ｎ−メチル２−ピロリドン［Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ，ＩＳＰ］を加えて、５％（ｗ／ｗ）の最終濃度を得た。亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、０．０５％（ｖ／ｗ）の最終濃度を得た。混合物を常に撹拌しながら６８±３℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、加熱を停止させ、調製物を室温まで冷却させた。安定な製剤（２％のＣＤ：リシン及び２％のＣＤ：アルギニン、１：１．１のモル比）を、２５℃で、ｔ＝０及びｔ＝７日にて、ＨＰＬＣ分析に更に供した。
【００６３】
その結果は、水溶液中のカルビドパの溶解性及び安定性に対する３つの塩基性アミノ酸［Ｌ−アルギニン（ＰＩ−１０．７６）、Ｌ−リシン（ＰＩ−９．７４）及びＬ−ヒスチジン（ＰＩ−７．５９）］の効果に関して、それらの３つの塩基性アミノ酸の間の有意差を示す。表１は、視覚的（表１Ａ）に、又はＵＶ  ＨＰＬＣ（表１Ｂ）により測定した場合の塩基性アミノ酸（アルギニン、リシン又はヒスチジン）を有するそれらの水溶液中のカルビドパの溶解性及び安定性を示す。アルギニンを用いると、６％のカルビドパの安定な溶液が調製されるのに対して、４％未満のみを有する溶液がリシンを用いて製剤化できた（表１Ａ）。更に、リシンを有する２％のカルビドパの溶液は、２５℃にて７日後、アルギニンを有するものより安定ではなかった（表１Ｂ）。加えて、１％以上の濃度でヒスチジンを有する安定な溶液は作製できなかった（表１Ａ）。
【表１】
0005921002.tif 000002
【表２】
0005921002.tif 000003
【００６４】
（例７）レボドパ−アルギニン塩の調製
レボドパ（ＬＤ）−アルギニン塩は以下のように調製した。レボドパ［Ｔｅｖａ］を、（１：１．８のモル比で）Ｌ−アルギニン［Ｍｅｒｃｋ］を含む適切な容器内で秤量し、０．２％の亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］水溶液を加えて、４．４％の最終濃度のＬ−ドーパを得た。混合物を常に撹拌しながら６５±１０℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、溶液を０．４５μＭのナイロン膜を用いて濾過した。濾過した溶液を、ドライアイス中で即座に凍結し、続いて凍結乾燥に供した。濾過した溶液を、ドライアイス中で即座に凍結し、続いて凍結乾燥に供した。オフホワイトの結晶を得て、続いてＭＳ分析に供した。（図２に示すように）ＭＳ分析の結果は、ＬＤ及びアルギニンイオンを明確に示した。ＬＤ：フラグメント１７８．９７、１５１．９６、１３６．９８を有する１９７（図２ａ及び２ｂ）；アルギニン：フラグメント１３０、１１６を有する１７５（図２ａ及び２ｃ）。
【００６５】
（例８）皮下投与のためのカルビドパ及びカルビドパ／エンタカポンの溶液／製剤の調製、及びブタにおけるそれらの局所的安全性評価
１０％のカルビドパ及び４／６％のカルビドパ／エンタカポンの溶液／製剤は以下のように調製した。カルビドパ［Ａｓｓｉａ  Ｌｔｄ．］を適切な容器内で秤量し、次いで水を加えて、７３％の全ての計画したバッチ重量を得た。混合物を２０分間室温にて撹拌した。Ｌ−アルギニン［Ｓｉｇｍａ］を混合物に加えて、カルビドパと１：１のモル比で得た。混合物を常に撹拌しながら６５±１０℃まで加熱した。固体が完全に溶解してから、Ｎ−メチル２−ピロリドン［Ｐｈａｒｍａｓｏｌｖｅ，ＩＳＰ］を加えて、１０％（ｗ／ｗ）の最終濃度を得た。亜硫酸水素ナトリウム［Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、１％（ｖ／ｗ）の最終濃度を得た。撹拌を６５±３℃にて更に３０分間継続した。その後、ＰＶＰ［ポリビニルピロリドン、Ｓｉｇｍａ］溶液を調製し、加えて、１％（ｖ／ｗ）の最終濃度を得た。撹拌を６５±３℃にて３０分間継続した。加熱を停止させ、調製物を室温まで冷却させた。溶液を、無菌の０．２２μＭのＰＶＤＦ膜を用いて濾過した。濾過した溶液をドライアイス中で即座に凍結し、続いて凍結乾燥に供した。凍結乾燥した結晶を再蒸留水で再構成して、４及び１０％のカルビドパ溶液を得た。エンタカポン［Ｃｏｍｔａｎ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓから抽出した］を４％のカルビドパ溶液に加えて、６％（ｗ／ｖ）の最終濃度を得た。両方の製剤（１０％のＣＤ及び４／６％のＣＤ／Ｅ）を、２１時間、ブタに対して皮下に連続投与して、潜在的局所反応を評価した。巨視的及び微視的評価により、これらのカルビドパ溶液／製剤の２１時間の連続皮下投与が安全であることが示された（表２）。
【００６６】
表２は、２５又は８２μｌ／ｈの速度にて２１時間、１０％のＣＤ（カルビドパ）又は４／６％のＣＤ／エンタカポンの連続皮下投与後の雌のランドレース×大型シロブタから得た皮膚生検の組織学的評価の結果を示す。
【表３】
0005921002.tif 000004
【００６７】
（例９）ブタにおけるレボドパ及びカルビドパの薬物動態プロファイルに対するカルビドパの連続皮下投与の効果
この実験において、ブタにおけるレボドパの薬物動態に対する、経口Ｌ−ドーパ／カルビドパの同時投与を併用して、カルビドパの連続皮下投与の効果を決定することを目的とした。
【００６８】
３０〜３５ｋｇの体重のブタに、６８時間の全時間、カルビドパ（６０ｍｇ／ブタ／日）と併用して、又は併用せずに、１日に３回又は２回（それぞれｑ８又は１２ｈ）、Ｓｔａｌｅｖｏ（登録商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ、１００／２５／２００ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ／Ｅ）、Ｄｏｐｉｃａｒ（登録商標）［Ｔｅｖａ］＋Ｌｏｄｏｓｙｎ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ  ＆  ＣＯ）（１２５／２５ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ）又はＳｉｎｅｍｅｔ  ＣＲ（登録商標）（ＭＳＤ、１００／２５ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ）のいずれかを経口投与した。血液サンプルを所定の時点で回収し、Ｌ−ドーパ及びカルビドパの血漿濃度をＬＣ−ＭＳにより分析した。
【００６９】
結果により、任意の経口ＬＤ調製物と併用したカルビドパの連続皮下同時投与は、レボドパの半減期（ｔ１／２）及びＡＵＣを顕著に（２倍より多く）増加させることが示された。対照的に、増加させたカルビドパの経口投与量又は頻度は、表３に示すように、レボドパのＰＫプロファイルを大幅に向上させなかった。また、ＣＤの一定の定常状態の濃度は、カルビドパの連続皮下投与（６０ｍｇ／ブタ／日）の６８時間の間、１６４±３４ｎｇ／ｍｌにて維持した。これは、変動するパターンと反対であり、標準的な治療の投与後に得たＣＤの非常に低いトラフ濃度であった（図３Ａ〜３Ｃ）。治療に関連する局所又は全身毒性の兆候は、６８時間の研究時間全てにわたって観測されなかった。
【００７０】
レボドパの薬物動態パラメータを、３％のカルビドパ（ＣＤ）溶液の連続皮下（ＳＣ）投与と併用した、又は併用していない、（Ａ）スタレボ（１００／２５／２００ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ／Ｅ）、（Ｂ）ドピカル＋ロドシン（１２５／２５ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ）、（Ｃ）シネメットＣＲ（１００／２５ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ）ｑ８及び１２ｈ（ｑ８ｈ＝８時間ごと）の経口投与後の雌のランドレース×大型シロブタ（３０〜３５ｋｇ）の血漿中で測定し、表３に結果を示す。
【表４】
0005921002.tif 000005
【表５】
0005921002.tif 000006
【表６】
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【００７１】
（例１０）マウスにおけるレボドパ及びドーパミンの脳内分布に対するカルビドパの連続皮下投与の効果
この実験において、マウスにおけるレボドパ／カルビドパ（３２／８ｍｇ／ｋｇのＴＩＤ）の経口投与後の脳内のレボドパ及びドーパミンの濃度に対するカルビドパ（１５ｍｇ／ｋｇ／日）の連続皮下投与の効果を決定することを目的とした。
【００７２】
マウスに、生理食塩水（陰性対照）、媒体又はカルビドパ溶液を含有するアルゼットポンプを皮下に移植した。ＬＤ／ＣＤを注入してから１日後に、ｑ８ｈで経口投与した。脳内のレボドパ及びドーパミンの濃度を、ＬＤ／ＣＤの４回の経口投与後に測定した。その結果により、経口ＬＤの投与後７時間のドーパミン濃度が、カルビドパを連続皮下投与したマウスの脳内で著しくより高く（図４Ａ）、同時に血漿ＬＤのより高い濃度（図４Ｂ）が示された。
【００７３】
（例１１）ブタにおけるレボドパ及びカルビドパの局所的毒性及び薬物動態プロファイルに対するカルビドパの連続皮下投与の用量効果
この実験において、Ｌ−ドーパの局所耐性及び薬物動態に対する、ブタに連続皮下投与したカルビドパの用量効果を決定することを目的とした。
【００７４】
３０〜３５ｋｇの体重のブタに、２４時間の全時間の間、連続皮下の媒体、２％又は４％のカルビドパ（それぞれ、０、４０又は８０ｍｇ／ブタ／日）と併用して、Ｓｉｎｅｍｅｔ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．、１００／２５ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ）、１日に３回（ｑ８ｈ）、又はＤｏｐｉｃａｒ（登録商標）（Ｔｅｖａ）＋Ｌｏｄｏｓｙｎ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．、（１２５／２５ｍｇ、ＬＤ／ＣＤ）、１日に２回（ｑ１２ｈ）を経口投与した。血液サンプルを所定の時点で回収し、Ｌ−ドーパ及びカルビドパの血漿濃度をＬＣ−ＭＳにより分析した。皮膚生検を即座に注入部位から回収し、投与から１週間及び２週間後、局所耐性を、Ｈ＆Ｅで染色したスライドの組織学的分析により評価した。組織学的に治療に関連する異常は注入部位において観測されなかった。
【００７５】
２又は４％のカルビドパ溶液を、Ｓｉｎｅｍｅｔ（登録商標）（図５Ａ〜５Ｂ）又はＤｏｐｉｃａｒ（登録商標）＋Ｌｏｄｏｓｙｎ（登録商標）（図６Ａ〜６Ｂ）と同時投与した場合、Ｌ−ドーパの血漿濃度に対する有意な用量効果は観測されなかった。したがって、利用した実験条件の下で、２％又はそれ未満のカルビドパの連続皮下投与が、ブタにおけるＤＤＣ（ドーパデカルボキシラーゼ）の最適阻害を維持するのに十分であり得ることが示唆された。
【００７６】
（例１２）ブタにおけるレボドパの薬物動態に対する、エンタカポンの連続皮下投与と併用した、又は併用していない、カルビドパの連続皮下投与の効果
この実験において、ブタにおけるＬ−ドーパ／カルビドパの連続経口投与と同時に、エンタカポンと併用した、又は併用していない、カルビドパの連続皮下投与後のＬ−ドーパの血漿濃度を決定することを目的とした。Ｌ−ドーパの血漿濃度をＨＰＬＣ−ＥＣＤにより測定した。図８における結果により、エンタカポンが３−ＯＭＤ（３−オルト−メチルドーパ）の濃度を効果的に減少させた（８Ｂ）が、レボドパの薬物動態は更に延長しない（８Ａ）ことが示され、これは、エンタカポン及び／又はＣＯＭＴ阻害が、カルビドパ／ＤＤＣ−依存性、又は他のＬＤ代謝経路を妨げることを示唆する。
【００７７】
（例１３）ブタにおけるレボドパの薬物動態に対するベンセラジドの連続皮下投与の効果
この実験において、別のＤＤＣ阻害剤であるベンセラジドの連続皮下投与と併用した、経口Ｌ−ドーパ／カルビドパの同時投与後のＬ−ドーパの血漿濃度を決定することを目的とした。Ｌ−ドーパの血漿濃度はＨＰＬＣ−ＥＣＤにより測定した。
【００７８】
その結果により、ベンセラジドは、ＬＤの薬物動態プロファイルを延長させることが示され、これは、任意のＤＤＣ阻害剤による連続ドーパ−デカルボキシラーゼ（ＤＤＣ）阻害が、図７に示すように、ＬＤの排出半減期を増加させることを示唆する。
【００７９】
（例１４）フランツセル送達システムを用いるエキソビボでのブタの全層皮膚を介するカルビドパプロピルエステル（ＣＤＰＥ）の経皮送達
この実験において、フランツセル送達システムを用いるエキソビボでのブタの全層皮膚を介するカルビドパプロピルエステルの経皮送達を決定することを目的とした。ＣＤＰＥを含有するゲル製剤を調製した。サンプルを、皮膚に対する製剤塗布後、０、１６、１９及び２２時間においてレシーバーセルから回収した。レシーバーセル流体中のＣＤ化合物の量を、２８０ｎＭでの分光光度計により決定した。図９に示す結果により、ＣＤＰＥが、エンハンサー用量依存的に皮膚を浸透することが実証された。
【００８０】
（例１５）レボドパ及びカルビドパの薬物動態プロファイルに対するレボドパアルギニン及びカルビドパアルギニン塩の経口投与の効果
この実験において、腸溶コーティングした、又はしていない、いずれかのアルギニン塩として経口投与したＬＤ及びＣＤの薬物動態を決定することを目的とした。ブタに、２５５／４５ｍｇのＬＤ−アルギニン塩（ＬＤ）／ＣＤ−アルギニン塩（ＣＤ）を、ゼラチンでコーティングした、又はコーティングしていないカプセル（１００／２５ＬＤ／ＣＤに対応する）中で３０〜３５ｋｇのブタに経口投与した。ＬＤ及びＣＤの血漿濃度をＨＰＬＣ−ＥＣＤにより測定した。
【００８１】
図１０Ａ〜１０Ｂにおける結果により、ＬＤ及びＣＤが、ＬＤ／ＣＤ（Ｓｉｎｅｍｅｔ（登録商標））と比べて、より急速及び効果的に吸収され、腸溶コーティングしたＬＤ／ＣＤの経口投与が血漿ＬＤ（１０Ａ）及びＣＤ（１０Ｂ）のＰＫを延長させたことが示された。
【００８２】
（例１６）インビトロでのドーパデカルボキシラーゼ（ＤＤＣ）の活性に対するカルビドパエステルの阻害効果
この実験において、ドーパデカルボキシラーゼの活性に対するカルビドパエステル（ＣＤＥ）の阻害効果を決定することを目的とした。ＤＤＣ酵素をブタの肝臓ホモジネートから得て、それらの活性を、カルビドパプロピルエステル（ＣＤＰＥ）を有する、又は有さないＬＤ濃度を比較することにより測定した。肝臓ホモジネート調製は、Ｕｍｅｚａｗａら（Ｊ．Ａｎｔｉｂ．１９７５，２８（１２）：９４７−５２）に記載されている方法に基づいた。
【００８３】
全てのサンプルを高圧液体クロマトグラフィーカラムで分離し、Ｌ−ドーパ及びドーパミンの強度及び濃度を、２８０ｎＭにてＨＰ  ＵＶ−ＨＰＬＣ分析により決定した。
【００８４】
図１１及び１２Ａ〜１２Ｂに示す結果により、ＣＤＰＥが、カルビドパ及びベンセラジドと同様の方法で、Ｌ−ドーパのドーパミンへの脱カルボキシル化を阻害することが実証される。
【００８５】
本発明の主題の特定の実施形態を説明したが、上述の明細書は例示であり、限定ではない。本発明の多くの変更が、本明細書を検討する際に当業者に明らかになるだろう。本発明の全範囲は、等価物、及び本明細書の全範囲と共に、そのような変更と共に、特許請求の範囲を参照して決定されるべきである。
【００８６】
他に示されない限り、本明細書及び特許請求の範囲に使用される成分の量、反応条件などを表す全ての数字は、全ての場合において、用語「約」によって修飾されることが理解されるべきである。したがって、反対に示されない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲に記載されている数値パラメータは、本発明によって得られることを目的とする所望の特性に応じて変化し得る近似値である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
0005921002.tif 000009
【図１Ｃ】
0005921002.tif 000010
【図２Ａ】
0005921002.tif 000011
【図２Ｂ】
0005921002.tif 000012
【図２Ｃ】
0005921002.tif 000013
【図３Ａ】
0005921002.tif 000014
【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
0005921002.tif 000017
【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
0005921002.tif 000019
【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
0005921002.tif 000023
【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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