(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
0006023814.tif 000128
の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物
（式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イル、非置換フェニルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、
Ａｒ２は、一般式（ｉ）、（ｉｉ）または（ｉｉｉ）：
【化２】
0006023814.tif 000129
であり、
式中、
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、
Ｘ１は、ＮまたはＣ−Ｒ６（式中、Ｒ６はＨ、フルオロまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、
Ｘ３はＮであるか、Ｘ１がＮであり、かつＸ２がＮ−Ｒ７（式中、Ｒ７は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ３はＣＨであり、
Ｒ３は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり、
Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、ＨまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ５は、ＯまたはＳであり、
Ｘ６はＮであるか、Ｘ４がＮであり、かつＸ５がＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ６はＣＨであり、
Ｒ４はハロ、シアノ、メチルまたはヒドロキシルであり、
Ｒ５は、Ｈまたはハロであるが、
但し、Ａｒ２が式（ｉｉｉ）である場合、Ｒ１はメチルであり、かつ
式Ｉの化合物は、
（３−（２−イソブチルチアゾール−４−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン、
［１，１’−ビフェニル］−４−イル（８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）メタノン、
（８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン、
ではない）。
【請求項２】
式Ｉ’：
【化３】
0006023814.tif 000130
を有する請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物
（式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イル、非置換フェニルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、
Ｘ１は、ＮまたはＣ−Ｒ６（式中、Ｒ６はＨ、フルオロまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、
Ｘ３はＮであるか、Ｘ１がＮであり、かつＸ２がＮ−Ｒ７（式中、Ｒ７は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ３はＣＨである）。
【請求項３】
式Ｉ’１：
【化４】
0006023814.tif 000131
を有する請求項１または２に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物
（式中、Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ１およびＸ２は、請求項１において上に定義したとおりである）。
【請求項４】
式Ｉ’ａおよびＩ’ｂ：
【化５】
0006023814.tif 000132
から選択される請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、
Ａｒ１、Ｒ２、Ｘ１およびＸ２は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項５】
式Ｉ’ｃおよびＩ’ｄ：
【化６】
0006023814.tif 000133
から選択される請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｘ１およびＸ２は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項６】
式Ｉ’ｅおよびＩ’ｆ：
【化７】
0006023814.tif 000134
から選択される請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、
Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ２およびＲ６は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項７】
式Ｉ’ｅ−１、Ｉ’ｅ−２、Ｉ’ｆ−１およびＩ’ｆ−２：
【化８】
0006023814.tif 000135
から選択される請求項６に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ６は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項８】
式Ｉ’ｅ−３：
【化９】
0006023814.tif 000136
を有する請求項７に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、
Ｒ２は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項９】
式Ｉ’ｆ−３：
【化１０】
0006023814.tif 000137
を有する請求項７に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、Ｒ２は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項１０】
式Ｉ’ｇ、Ｉ’ｈまたはＩ’ｉ：
【化１１】
0006023814.tif 000138
を有する請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ２およびＲ７は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項１１】
式Ｉ’’：
【化１２】
0006023814.tif 000139
を有する請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物
（式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イル、非置換フェニルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、
Ｒ３は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり、
Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、ＨまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ５は、ＯまたはＳであり、
Ｘ６はＮであるか、Ｘ４がＮであり、かつＸ５がＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ６はＣＨである）。
【請求項１２】
式Ｉ’’ａおよびＩ’’ｂ：
【化１３】
0006023814.tif 000140
から選択される請求項１１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、Ａｒ１、Ｒ３、Ｘ４、Ｘ５およびＸ６は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項１３】
式Ｉ’’ｃおよびＩ’’ｄ：
【化１４】
0006023814.tif 000141
から選択される請求項１１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｘ４、Ｘ５およびＸ６は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項１４】
式Ｉ’’ｅ、Ｉ’’ｆ、Ｉ’’ｇ、Ｉ’’ｈおよびＩ’’ｉ：
【化１５】
0006023814.tif 000142
から選択される請求項１１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ８およびＲ９は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項１５】
式Ｉ’’ｅ−１、Ｉ’’ｆ−１、Ｉ’’ｇ−１、Ｉ’’ｈ−１、Ｉ’’ｉ−１、Ｉ’’ｅ−２、Ｉ’’ｆ−２、Ｉ’’ｇ−２、Ｉ’’ｈ−２およびＩ’’ｉ−２：
【化１６】
0006023814.tif 000143
0006023814.tif 000144
から選択される請求項１４に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ８およびＲ９は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項１６】
式Ｉ’’’：
【化１７】
0006023814.tif 000145
を有する請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物
（式中、
Ａｒ１は、非置換フェニル、非置換チオフェン−２−イルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ４は、ハロ、シアノ、メチルまたはヒドロキシルであり、
Ｒ５は、Ｈまたはハロである）。
【請求項１７】
式Ｉ’’’ａおよびＩ’’’ｂ：
【化１８】
0006023814.tif 000146
から選択される請求項１６に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物（式中、Ｒ４およびＲ５は、請求項１に定義したとおりである）。
【請求項１８】
以下からなる群から選択される請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【表１】
0006023814.tif 000147
0006023814.tif 000148
0006023814.tif 000149
0006023814.tif 000150
0006023814.tif 000151
0006023814.tif 000152
0006023814.tif 000153
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または補助剤とを含む医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１８のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物を含む薬。
【請求項２１】
鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群、炎症性腸疾患、炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮、咳、気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、異常な思春期、子宮線維症、子宮線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多または腺筋症を治療および／または予防するための請求項１〜１８のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項２２】
患者の補助受胎におけるＬＨサージを抑制するための請求項１〜１８のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【請求項２３】
男子去勢を引き起こし、かつ男性の性欲を阻害するための請求項１〜１８のいずれかに記載の化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ニューロキニン−３受容体（ＮＫ−３）に対する選択的拮抗薬であり、かつ特に広範囲な中枢神経系（ＣＮＳ）および末梢の疾患または障害の治療および／または予防において治療用化合物として有用な新規なＮ−アシル−５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物に関する。
【０００２】
また、本発明は、ニューロキニン３受容体（ＮＫ−３）に対する選択的拮抗薬、特に本発明のＮ−アシル−５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンなどの医薬有効成分の合成で使用される５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン中間体の新規なキラル合成にも関する。本発明は、本発明のキラル合成によって得られる新規な立体異性体的に純粋な５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン中間体ならびにこの合成の新規な中間体にも関する。
【背景技術】
【０００３】
タキキニン受容体は、「タキキニン」と総称されるサブスタンスＰ（ＳＰ）、ニューロキニンＡ（ＮＫＡ）およびニューロキニンＢ（ＮＫＢ）を含む構造的に関連するペプチドファミリーの標的である。タキキニンは、ＣＮＳおよび末梢組織で合成され、そこで様々な生物学的活性を発揮する。ニューロキニン−１（ＮＫ−１）、ニューロキニン−２（ＮＫ−２）およびニューロキニン−３（ＮＫ−３）受容体と称される３種類のタキキニン受容体が知られている。タキキニン受容体は、ロドプシン様七回膜貫通型Ｇタンパク質共役受容体に属する。ＳＰはＮＫ−１受容体に対して、ＮＫＡはＮＫ−２受容体に対して、ＮＫＢはＮＫ−３受容体に対して最も高い親和性を有する内因性リガンドであると考えられているが、これらのリガンド間には交差反応性が存在する。ＮＫ−１、ＮＫ−２およびＮＫ−３受容体は、異なる種で同定されている。ＮＫ−１およびＮＫ−２受容体は多種多様な末梢組織で発現し、ＮＫ−１受容体はＣＮＳでも発現するが、ＮＫ−３受容体は、主にＣＮＳで発現する。
【０００４】
ニューロキニン受容体は、ＣＮＳおよび末梢における興奮性神経シグナル（例えば、疼痛）の伝達、平滑筋収縮活動の調節、免疫反応および炎症反応の調節、末梢血管系の拡張による降圧作用の誘導ならびに内分泌腺および外分泌腺分泌の刺激などの様々なタキキニン刺激性生物学的作用を媒介する。
【０００５】
ＣＮＳにおいて、ＮＫ−３受容体は、内側前頭前皮質、海馬、視床および扁桃体などの領域で発現する。さらに、ＮＫ−３受容体は、ドーパミン作動性ニューロンで発現する。ＮＫ−３受容体の活性化は、ドーパミン、アセチルコリンおよびセロトニン放出を調節することが知られており、これは、精神病性障害、不安症、鬱病、統合失調症（旧：精神分裂病）ならびに肥満症、疼痛または炎症などの様々な障害の治療のためのＮＫ−３受容体調節剤の治療的有用性を示唆している（Ｅｘｐ．  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｔｈｅｒ．  Ｐａｔｅｎｔｓ  （２０００），  １０（６），  ９３９−９６０；  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇｓ，  ２００１，  ２（７），  ９５０−９５６およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ，  ２０１０，  １６，  ３４４−３５７）。
【０００６】
統合失調症はサブグループに分類される。妄想型は、妄想および幻覚と、思考障害、解体した行動および感情の平板化(ａｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｆｌａｔｔｅｎｉｎｇ)が存在しないこととを特徴とする。国際疾病分類（ＩＣＤ）では「破瓜型統合失調症」とも称される解体型では、思考障害および平板な感情が共に存在する。緊張型では、顕著な精神運動障害が明白であり、症状としては緊張病性昏迷および蝋屈症が挙げられる。鑑別不能型では、精神病の症状は存在するが、妄想型、解体型または緊張型の判断基準は満たされていない。統合失調症の症状は、それ自体は通常、３つの広義のカテゴリー、すなわち、陽性症状、陰性症状および認知的症状で現れる。陽性症状は、幻覚および妄想などの正常な経験の「過剰」を表す症状である。陰性症状は、患者が、快感消失および社会的交流の欠如などの正常な経験の欠如に悩まされている症状である。認知的症状は、持続的注意力の欠如および意思決定の欠如などの統合失調症患者における認識機能障害に関連する。現在の抗精神病薬（ＡＰＤ）は、陽性症状の治療では、かなりの成功を収めているが、陰性症状および認知的症状ではあまり上手く行っていない。それに反して、ＮＫ−３拮抗薬は、統合失調症患者における陽性症状および陰性症状の両方を臨床的に改善させ（Ｍｅｌｔｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，  １６１，  ９７５−９８４，  ２００４）、かつ統合失調症患者の認知行動を回復させる（Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｏｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｄｒｕｇ，  ６，  ７１７−７２１，  ２００５）ことが分かっている。
【０００７】
ラットにおける形態学的研究により、ＮＫＢニューロンと視床下部の生殖軸との推定相互作用の証拠が提供されている（Ｋｒａｊｅｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ｃｏｍｐ．  Ｎｅｕｒｏｌ．，  ４８９（３），  ３７２−３８６，  ２００５）。弓状核ニューロンでは、ＮＫＢの発現は、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）分泌に対するプロゲステロンフィードバックに関与するエストロゲン受容体αおよびダイノルフィンと共局在化している（Ｂｕｒｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｏｍｐ．  Ｎｅｕｒｏｌ．，  ４９８（５），  ７１２−７２６，  ２００６；  Ｇｏｏｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，  １４５，  ２９５９−２９６７，  ２００４）。さらに、ＮＫ−３受容体は、ＧｎＲＨ放出の制御に関与するニューロンにおいて視床下部弓状核で高度に発現する。
【０００８】
国際公開第００／４３００８号には、特異的ＮＫ−３受容体拮抗薬によりゴナドトロピンおよび／またはアンドロゲン産生を抑制する方法が開示されている。より詳細には、国際公開第００／４３００８号は、ＮＫ−３受容体拮抗薬を投与して黄体形成ホルモン（ＬＨ）の血中濃度を低下させることに関する。ゴナドトロピンの抑制と同時に、あるいはその代わりとして、国際公開第００／４３００８号は、ＮＫ−３受容体拮抗薬によるアンドロゲン産生の抑制にも関する。最近では、ＮＫＢは、弓状核内のキスペプチンニューロンに対して自己シナプス性に（ａｕｔｏｓｙｎａｐｔｉｃａｌｌｙ）作用して、キスペプチンの脈動的分泌を同期および形成し、かつ正中隆起内の繊維からＧｎＲＨの放出を促進すると仮定されている（Ｎａｖａｒｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，  ２３，  ２００９  −  ｐｐ１１８５９−１１８６６）。これらの全ての観察は、性ホルモン依存性疾患に対するＮＫ−３受容体調節剤の治療的有用性を示唆している。
【０００９】
タキキニン受容体のそれぞれに対して非ペプチドリガンドが開発されている。それらのうちのいくつかは、ＮＫ−２およびＮＫ−３受容体の両方を調節することができる二重調節剤として記載されている（国際公開第０６／１２０４７８号）。しかし、公知の非ペプチドＮＫ−３受容体拮抗薬は、安全性プロファイルが著しく不十分であり、かつこれらの化合物の臨床的開発での成功を制限し得る限られたＣＮＳ貫通性といったいくつかの欠点に悩まされている。
【００１０】
上記から、ＮＫ−３受容体の新しい強力かつ選択的な拮抗薬は、ＮＫＢおよびＮＫ−３受容体が関与するＣＮＳおよび末梢の疾患または障害の治療および／または予防に有用な薬物の調製にとって治癒的価値があるものとなり得る。
【００１１】
ニューロキニン−３受容体（ＮＫ−３）に対する拮抗薬
従って、本発明は、一般式Ｉの化合物、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物ならびにＮＫ−３受容体に対する拮抗薬としてのそのような化合物またはそのような化合物を含む組成物の使用方法を包含する。式Ｉの化合物は、Ｎ−アシル−５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンである。本発明の化合物は一般に、国際特許出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１１／０５５２１８号に開示されているが、その中には具体的に何も例示されていない。
【発明の概要】
【００１２】
一般的な態様では、本発明は、一般式Ｉ：
【化１】
0006023814.tif 000002
の化合物およびその薬学的に許容される塩および溶媒和物を提供し、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イル、非置換フェニルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、
Ａｒ２は、一般式（ｉ）、（ｉｉ）または（ｉｉｉ）：
【化２】
0006023814.tif 000003
であり、
式中、
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、
Ｘ１は、ＮまたはＣ−Ｒ６（式中、Ｒ６はＨ、フルオロまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、
Ｘ３はＮであるか、Ｘ１がＮであり、かつＸ２がＮ−Ｒ７（式中、Ｒ７は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）という条件で、Ｘ３はＣＨであり、
Ｒ３は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり、
Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、ＨまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ５は、ＯまたはＳであり、
Ｘ６はＮであるか、Ｘ４がＮであり、かつＸ５がＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ６はＣＨであり、
Ｒ４は、ハロ、シアノ、メチルまたはヒドロキシルであり、
Ｒ５は、Ｈまたはハロであるが、
但し、Ａｒ２が式（ｉｉｉ）である場合、Ｒ１はメチルであり、かつ
式Ｉの化合物は、
（３−（２−イソブチルチアゾール−４−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン、
［１，１’−ビフェニル］−４−イル（８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）メタノン、
（８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン、
ではない。
【００１３】
別の態様では、本発明は、少なくとも１種の本発明に係る化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含む医薬組成物を提供する。
【００１４】
本発明は、上記化合物またはそれらの薬学的に許容される塩および溶媒和物のＮＫ−３受容体調節剤としての使用、好ましくはＮＫ−３受容体拮抗薬としての使用にも関する。
【００１５】
本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、異常な思春期、子宮線維症、子宮線維腫(uterine fibroid tumor)、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防方法をさらに提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【００１６】
本発明は、婦人科疾患および不妊症の治療方法をさらに提供する。特に、本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、補助受胎におけるＬＨサージの抑制方法を提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくは女性である。
【００１７】
本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、男子去勢を引き起こし、かつ男性の性犯罪者における性欲を阻害するようにアンドロゲン産生に影響を与える方法をさらに提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくは男性である。
【００１８】
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の薬としての使用も提供する。好ましくは、上記薬を、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、異常な思春期、子宮線維症、子宮線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防のために使用する。上記薬を、婦人科疾患、不妊症の治療のため、およびアンドロゲン産生に影響を与えて男子去勢を引き起こすために使用してもよい。
【００１９】
５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン化合物のキラル合成
本発明の一般式ＩのＮ−アシル−５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンは、当業者に知られている反応を用いる様々な方法によって調製することができる。
【００２０】
本出願人は、本明細書において、Ｎ−アシル化によって式Ｉの化合物に変換し得る本発明の化合物、特に（Ｒ）−８位置換−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン中間体のための新しいキラル合成をさらに提案する。
【００２１】
（Ｒ）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンの合成に一般に関連する様々な合成法が当該文献で知られている。提供されている関連方法の以下の実施例および実験条件は単に例示である。
【００２２】
方法Ａ（ｉ）（スキームＡを参照）では、当業者によく知られている手順を用いて、２−ヒドラジドピラジン（工程１）のアセチル化、次いで脱水環化反応（工程２）により、［１，２，４］トリアゾロピラジンの中心部ＩＩＩａ（ｉ）を形成する。この方法論は、最初にＮｅｌｓｏｎおよびＰｏｔｔｓによって開発された（Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  １９６２，  ２７，  ３２４３−３２４８）。Ｈ２／Ｐｄによるピラジン環のその後の還元により、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピペラジンが得られる（工程３）。この方法については、当該文献によく記載されており、例えば、シタグリプチンのＭｅｒｃｋ合成で使用されている（Ｈａｎｓｅｎ，  Ｋ．  Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｏｒｇ．  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓ．  Ｄｅｖ．  ２００５，  ９，  ６３４−６３９およびその中の参考文献)。但し、既存の文献を精読すると、ｉ）この手順は一般に、Ｒ１がＨである基質（すなわち、非キラル類似体、スキームＡを参照）と共に使用されること、およびｉｉ）一般式ＩＶａ（ｉ）（方法Ａ（ｉ）における）のキラル［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピペラジンの変形形態を調製するためにこの方法を適用することについては開示されていないことが分かる。この方法論においてＲ１がＨでないピラジン基質の例が不足しているのは、ピラジン還元工程の難しさによるものと思われ、この点に関しては、Ｈａｎｓｅｎらによって報告された最適化方法のスケールアップ手順では、ピラジン（Ｒ１＝Ｈ）還元（工程３、スキームＡ）は、たった５１％の収率で行われたという事実に注目されたい。化学収率の問題に加えて、Ｒ１がＨでない［１，２，４］トリアゾロピラジン基質の還元によりキラル基質を得るには、効率的な非対称水素化条件（収率およびキラル純度の両方に関して）のさらなる挑戦が必要となり、これは、出願人の理解が及ぶ範囲では現在知られていない手順である。従って［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピペラジン構造のキラル合成のための方法Ａ（ｉ）の適用はこれまで知られていない。
【化３】
0006023814.tif 000004
スキームＡ：方法Ａ（ｉ）
【００２３】
方法Ａ（ｉｉ）（スキームＢを参照）は方法Ａ（ｉ）の変形であり、これによりＲ１がＨでない置換された［１，２，４］トリアゾロピラジン基質の還元が回避される。この方法は、Ｍｅｒｃｋのグループにより、シタグリプチンに関する彼らの研究において報告されており（例えば、Ｋｏｗａｌｃｈｉｃｋ，  Ｊ．  Ｅ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．  ２００７，  １７，  ５９３４−５９３９を参照）、ここでは、一般式ＩＶａ（ｉｉ）によって示されているＢｏｃ保護された中間体をテトラメチルエチレンジアミン（ＴＭＥＤＡ）の存在下でｎ−ブチルリチウムなどの強塩基で脱プロトン化した後、そのように生成されたアニオンをハロゲン化アルキルなどの求電子剤で処理する（工程４、スキームＢ）。この方法論のキラル変形形態は、当該文献に報告されていない。
【化４】
0006023814.tif 000005
スキームＢ：方法Ａ（ｉｉ）
【００２４】
ＭａｋｉｎｏおよびＫａｔｏ（日本特許第０１６１２８２６１（Ａ）号、１９９４年）による以前の研究から発想を得て、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピペラジンの合成のためのさらに別の代替法が、主要な試薬としてクロロメチルオキサジアゾールを用いて開発された（Ｂａｌｓｅｌｌｓ，  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２００５，  ７，  １０３９−１０４２）。この方法論（方法Ｂ）を以下のスキームＣに示す。但し、Ｂａｌｓｅｌｌｓらによって報告されているように、この手法は、主に強い電子吸引性のＲ２＝ＣＦ３基がクロロメチルオキサジアゾール試薬中に存在する場合に高収率で行われる。さらに、前記著者らによって提案されている機序では、ＩＶｂ中間体のキラル合成（スキームＣを参照）にこの戦略を適用するのは、不可能でないとしても、可能性は低い。実際に、最新の文献にはそのような手法を用いるラセミ生成物またはアキラル生成物のみが記載されている。従って、キラル［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピペラジン構造の調製への方法Ｂの適用は全く開示されていない。
【化５】
0006023814.tif 000006
スキームＣ：方法Ｂ
【００２５】
［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピペラジンを含む構造の調製のための別の周知の方法を以下のスキームＤ（方法Ｃ）に示す。アセチルヒドラジドをピペラジノイミダート（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｏｉｍｉｄａｔｅ）に添加（工程１）した後に、脱水環化を行って、縮合されたトリアゾロ環を形成する（工程２）。この方法は、当該文献で十分に実証されているが、ラセミもしくはアキラル構造によってのみ例証されている（例えば、ＭｃＣｏｒｔ，  Ｇ．  Ａ．；  Ｐａｓｃａｌ，  Ｊ．  Ｃ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，  １９９２，  ３３，  ４４４３−４４４６、Ｂｒｏｃｋｕｎｉｅｒ，Ｌ．Ｌ．らの国際公開第０３／０８２８１７Ａ２号、Ｃｈｕ−Ｍｏｙｅｒ，Ｍ．Ｙ．らの米国特許第６，４１４，１４９Ｂ１号、Ｂａｎｋａ，Ａ．らの国際公開第２００９／０８９４６２号Ａ１）。本出願人の理解が及ぶ範囲では、本出願人は、キラルピペラジノン（スキームＤのＩｄ）から開始してキラル生成物を得るためのこの方法の適用に関して公開されている報告は全く知らない。
【化６】
0006023814.tif 000007
記号＊は、本スキーム中でその記号が隣に付されている炭素中心すなわちＲ１基が結合されている炭素原子における明確な立体配置を意味する
スキームＤ：方法Ｃ
【００２６】
一般的な方法Ｃによる（Ｒ）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン化合物の合成は、本出願人の名において以前に国際特許出願第ＰＣＴ／ＥＰ２０１１／０５５２１８号に記載されている。そこに開示されている調製をスキームＥに示す：
【化７】
0006023814.tif 000008
注：工程２および工程３は、上記スキーム内のこれらの各工程についてキラル生成物が図示されているが、特にラセミ化しやすい。従って、高いキラル純度（＞８０％の鏡像体過剰率）で中間体／生成物を得るのは可能ではあるが、再現可能的ではない。
スキームＥ：ＰＣＴ／ＥＰ２０１１／０５５２１８に係る（Ｒ）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン中間体の合成
【００２７】
Ｂｏｃ保護されたケトピペラジン（ＩＩｅ）を調製し、次いで、メーヤワイン試薬（例えば、Ｅｔ３ＯＢＦ４）を用いてイミノエーテル（ＩＩＩｅ）に変換した。強制熱還流条件で、あるいは典型的にはやや長い反応時間（多くの場合、数日）にわたって封管中で過剰なマイクロ波照射を当てることにより、アシルヒドラジド（ＩＶｅ）と上記イミノエーテルとの脱水環化反応を行った。マイクロ波照射を用いる場合、前記脱水環化工程中にＮ−Ｂｏｃ脱保護が生じたため、典型的に脱保護工程を行う必要はなかった（すなわち、スキームＥ中のＩＩＩｅ＋ＩＶｅ→ＶＩｅ）。しかし、熱脱水環化条件を適用した場合、Ｂｏｃ脱保護工程が必要であった（すなわち、ＩＩＩｅ＋ＩＶｅ→Ｖｅ→ＶＩｅ）。
【００２８】
上記スキームＥに記載したように、工程２および工程３は、例えば薬学的に有効な成分の調製と同様に、キラル中間体またはキラル生成物の生成が再現可能に必要となる用途への前記手順の適用を著しく制限するという欠点を有する。工程１は、ピペラジノイミダートの形成（すなわち、ＩＩｅ→ＩＩＩｅ）であり、工程２は、前記イミダートとアセチルヒドラジドとの脱水環化工程（すなわち、ＩＩＩｅ＋ＩＶｅ→Ｖｅ）である。
【００２９】
スキームＥの手順の重大な欠点は、工程２〜３で不斉炭素原子のラセミ化が頻繁に生じたことである。従って、前記手順では、稀にしか許容されるキラル純度の最終生成物が得られず、実際には、かなり頻繁に、スキームＥの手順により、当業者によって本質的にラセミ体であると見なされるものとして、本発明の一般式Ｉの化合物に対応する式ＶＩＩｅで表される最終生成物が生成される。従って、前記方法ではキラル中間体（ＩＩＩｅ、Ｖｅ、ＶＩｅ、スキームＥ）が確実に得られず、よって本発明の式Ｉの化合物に対応する一般式ＶＩＩｅによって表されるキラル生成物を得るために信頼性をもって使用することができないため、この方法は、薬学的に有効な成分を調製するための実施において使用することができない。
【００３０】
スキームＥの手順の別の欠点は、脱水環化工程（スキームＥ、ＩＩＩｅ＋ＩＶｅ→Ｖｅ）に必要な過剰に長い反応時間である。ＲがＨである一般式ＩＩｄ（スキームＤ）によって表されるアキラル基質の場合とは異なり、ＲがＨでない一般式ＩＩｄ（スキームＤ）によって表される基質、すなわち、より立体的に密集した類似体を用いる場合は、最長で数日（強制反応条件下、以下の参照）が常に必要となる。そのような著しく長い反応時間（数日）は、臨床研究のために薬学的に有効な成分を調製するのに必要なｃＧＭＰスケールアップ合成のような事例には実用的でない。
【００３１】
上記段落に予示されているように、スキームＥの手順では、脱水環化工程で極めて強制的な条件が必要であった。従って、多くの場合、還流下で、あるいは追加として本質的に最大限実行可能な（実験的安全性の限界の範囲内の）マイクロ波照射（密封容器）の印加により上昇させた温度の（長い期間にわたる）使用が必要であった。
【００３２】
出願人は、スキームＥの一般式ＶＩＩｅによって示されている目的の最終生成物の形成後に、ラセミ５，６，７，（８−メチル）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンからのラセミ合成およびその後のさらなるキラル分取ＨＰＬＣ精製工程に頼った。そのような手法は、小規模での初期の研究開発段階では実行可能であるが、例えば薬学的に有効な成分のｃＧＭＰスケールアップのような必要性に対して、時間、コストおよび一般的な適用性の観点でのスケーラビリティの問題がある。
【００３３】
従って、本発明の一般式Ｉの化合物の合成のために立体異性体的に純粋な５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン中間体を調製するための合成手順の改善が必要である。
【００３４】
そこで、本発明は、式ＩＩ：
【化８】
0006023814.tif 000009
の５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン中間体化合物またはその塩もしくは溶媒和物の調製方法にも関し、
式中、
Ｒ１’は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり、前記アルキルまたはシクロアルキル基はそれぞれ、ハロまたはエステルから選択される１つ以上の基で任意に置換されており、
Ａｒ２’は、５〜６員環のアリールまたはヘテロアリール基であり、アリールまたはヘテロアリール基はそれぞれ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクリル、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、カルバモイル、アルキルカルバモイル、カルバモイルアルキル、カルバモイルアミノ、アルキルカルバモイルアミノ、アルキルスルホニル、ハロアルキルスルホニル、アリールスルホニルアルキル、スルファモイル、アルキルスルファモイル、アルキルスルホニルアミノ、ハロアルキルスルホニルアミノから選択される１つ以上の基で任意に置換されているか、アリールまたはヘテロアリール基に、１つ以上のシクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリール部分が縮合されていてもよく、前記置換基はそれぞれ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシから選択される１つ以上のさらなる置換基で任意に置換されており、
前記方法は、
ａ）式Ａ：
【化９】
0006023814.tif 000010
の化合物（式中、Ｒ１’は、上に定義したとおりである）を、式Ａの化合物のアミン窒素上にＮ−ｓｐ３保護基（ＰＧ）が得られる試薬と反応させて、式Ｃ：
【化１０】
0006023814.tif 000011
の化合物を得る工程と、
ｂ）塩基の存在下で、式Ｃの化合物をトリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩で変換させて、式Ｄ：
【化１１】
0006023814.tif 000012
（式中、Ｒ１’およびＰＧは、上に定義したとおりであり、Ｒ１０は、Ｃ１〜Ｃ２アルキルである）の化合物を得る工程と、
ｃ）式Ｄの化合物を式Ｅ：
【化１２】
0006023814.tif 000013
の化合物（式中、Ａｒ２’は、式ＩＩに関して上に定義したとおりである）またはその塩もしくは溶媒和物と反応させて、式Ｆ：
【化１３】
0006023814.tif 000014
（式中、Ｒ１’、ＰＧおよびＡｒ２’は、上に定義したとおりである）の化合物を得る工程と、
ｄ）式Ｆの化合物を好適な脱保護試薬で脱保護して、式ＩＩの化合物またはその塩もしくは溶媒和物を得る工程と、
を含む。
【００３５】
本発明の方法は、場合により、より再現可能に、最大９８％の良好な鏡像体過剰率を有する式ＩＩの化合物またはその塩もしくは溶媒和物を提供する。
【００３６】
本発明の方法は、軽微な副反応としてラセミ化が生じる場合を除き、キラル（３位置換）−ピペラジン−２−オン出発物質に関して立体化学を保持して行われるため、当該環の８位における立体配置は、上記キラル出発物質の立体配置によって定義される。
【００３７】
有利な実施形態によれば、キラル３位置換−ピペラジン−２−オン出発物質の使用により、本発明の方法では、本方法の間のあらゆる介在するラセミ化を最小限に抑えることにより、５，６，７，（（Ｒ）−８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン化合物が得られる。
【００３８】
別の態様では、本発明は、式Ｄ：
【化１４】
0006023814.tif 000015
の化合物を提供し、
式中、
Ｒ１’は、式ＩＩに関して上に定義したとおりであり、
ＰＧは、保護基（ここでは、アミン窒素は、第三級アミン（すなわち、ｓｐ３混成窒素）のままであり、以後Ｎ−ｓｐ３保護基と呼ぶ）であり、
Ｒ１０は、Ｃ１〜Ｃ２アルキル、好ましくはエチルである。
【００３９】
さらに別の態様では、本発明は、式ＩＩＩ：
【化１５】
0006023814.tif 000016
の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を提供し、
式中、
Ｒ１’およびＡｒ２’は、式ＩＩに関して上に定義したとおりであり、
Ｒ１１は、ＨまたはＮ−ｓｐ３保護基であるが、
但し、式ＩＩＩの化合物は、
（Ｒ）−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−フェニルチアゾール塩酸塩、
（Ｒ）−８−メチル−３−（ピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン二塩酸塩、
（Ｒ）−２−（４−クロロフェニル）−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩、
（Ｒ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩、
（Ｓ）−８−メチル−３−（ピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン、
（Ｓ）−２−（４−フルオロフェニル）−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール、
（Ｓ）−４−（４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール−２−イル）モルホリン、
ではない。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】化合物番号１のＸ線結晶構造（５０％の確率水準で描かれた熱変位楕円体）を示す。
【図２】化合物番号１９のＸ線結晶構造（５０％の確率水準で描かれた熱変位楕円体）を示す。
【図３】投与から１時間後に測定した、去勢した雄のＳＤラットにおける黄体形成ホルモン（「ＬＨ」）の血漿中濃度に対する化合物番号１の単回静脈内１０ｍｇ／ｋｇ投与の効果を示す。ＬＨ濃度は、平均値±標準誤差で表す。ビヒクルは、９％の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン／Ｈ２Ｏ（ｗ／ｗ）である。ビヒクル：１０匹のラット、化合物番号１：９匹のラット。
【図４】投与から１時間後に測定した、去勢した雄のＳＤラットにおける黄体形成ホルモン（「ＬＨ」）の血漿中濃度に対する化合物番号１９の単回静脈内１０ｍｇ／ｋｇ投与の効果を示す。ＬＨ濃度は、平均値±標準誤差で表す。ビヒクルは、９％の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン／Ｈ２Ｏ（ｗ／ｗ）である。ビヒクル：５匹のラット、化合物番号１９：５匹のラット。
【図５】雄のＳＤラットにおけるテストステロンの血漿中濃度に対する化合物番号１の単回静脈内５０ｍｇ／ｋｇ投与の効果を示す。１治療群につき３匹のラット。投与直前と投与から１、５、１５、９０、１５０、２１０分後にテストステロン濃度を測定して、時間応答曲線を得た。データは、テストステロン曲線下面積（「ＡＵＣ」）±標準誤差として表す。ビヒクルは、９％の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン／Ｈ２Ｏ（ｗ／ｗ）である。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
化合物
上に述べたように、本発明は、式Ｉの化合物ならびにそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に関する。
【００４２】
一実施形態によれば、本発明は、一般式Ｉ’：
【化１６】
0006023814.tif 000017
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物を提供し、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イル、非置換フェニルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、
Ｘ１は、ＮまたはＣ−Ｒ６（式中、Ｒ６はＨ、フルオロまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、
Ｘ３はＮであるか、Ｘ１がＮであり、かつＸ２がＮ−Ｒ７（式中、Ｒ７は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ３はＣＨであるが、
但し、式Ｉ’の化合物は、（３−（２−イソブチルチアゾール−４−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノンではない。
【００４３】
式Ｉ’の好ましい化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物は、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イルまたは非置換フェニルであり、好ましくは、Ａｒ１は非置換チオフェン−２−イルであり、かつ／または
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、シクロプロピルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、ビニル、イソプロピル、イソブチル、Ｃ１フルオロアルキル、シクロプロピルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチルまたはシクロプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルであり、かつ／または
Ｘ１は、Ｃ−Ｒ６（式中、Ｒ６は、Ｈまたはメチルである）であり、好ましくは、Ｘ１はＣＨであり、かつ／または
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、好ましくは、Ｘ２はＳであり、かつ／または
Ｘ３はＮである、
化合物である。
【００４４】
一実施形態では、式Ｉ’の好ましい化合物は、式Ｉ’１：
【化１７】
0006023814.tif 000018
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ１およびＸ２は、式Ｉ’に関して上に定義したとおりである。
【００４５】
式Ｉ’１の好ましい化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物は、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イルまたは非置換フェニルであり、好ましくは、Ａｒ１は非置換チオフェン−２−イルであり、かつ／または
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、シクロプロピルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、ビニル、イソプロピル、イソブチル、Ｃ１フルオロアルキル、シクロプロピルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチルまたはシクロプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルであり、かつ／または
Ｘ１は、Ｃ−Ｒ６（式中、Ｒ６は、Ｈまたはメチルである）であり、好ましくは、Ｘ１はＣＨであり、かつ／または
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、好ましくは、Ｘ２はＳである、
化合物である。
【００４６】
一実施形態では、式Ｉ’１の好ましい化合物は、式Ｉ’ａおよびＩ’ｂ：
【化１８】
0006023814.tif 000019
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ａｒ１、Ｒ２、Ｘ１およびＸ２は、式Ｉ’に関して上に定義したとおりである。
【００４７】
式Ｉ’ａおよびＩ’ｂの好ましい化合物は、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イルまたは非置換フェニルであり、好ましくは、Ａｒ１は非置換チオフェン−２−イルであり、かつ／または
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、シクロプロピルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、ビニル、イソプロピル、イソブチル、Ｃ１フルオロアルキル、シクロプロピルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチルまたはシクロプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルであり、かつ／または
Ｘ１は、Ｃ−Ｒ６（式中、Ｒ６は、Ｈまたはメチルである）であり、好ましくは、Ｘ１はＣＨであり、かつ／または
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、好ましくは、Ｘ２はＳである、
化合物である。
【００４８】
一実施形態では、式Ｉ’１の好ましい化合物は、式Ｉ’ｃおよびＩ’ｄ：
【化１９】
0006023814.tif 000020
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｘ１およびＸ２は、式Ｉ’に関して上に定義したとおりである。
【００４９】
式Ｉ’ｃおよびＩ’ｄの好ましい化合物は、
式中、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、シクロプロピルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、ビニル、イソプロピル、イソブチル、Ｃ１フルオロアルキル、シクロプロピルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチルまたはシクロプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルであり、かつ／または
Ｘ１はＣ−Ｒ６（式中、Ｒ６は、Ｈまたはメチルである）であり、好ましくは、Ｘ１はＣＨであり、かつ／または
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、好ましくは、Ｘ２はＳである、
化合物である。
【００５０】
一実施形態では、式Ｉ’１の好ましい化合物は、式Ｉ’ｅおよびＩ’ｆ：
【化２０】
0006023814.tif 000021
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ２およびＲ６は、式Ｉ’に関して上に定義したとおりである。
【００５１】
式Ｉ’ｅおよびＩ’ｆの好ましい化合物は、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イルまたは非置換フェニルであり、好ましくは、Ａｒ１は非置換チオフェン−２−イルであり、かつ／または
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、シクロプロピルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、ビニル、イソプロピル、イソブチル、Ｃ１フルオロアルキル、シクロプロピルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチルまたはシクロプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルであり、かつ／または
Ｒ６は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ６はＨである、
化合物である。
【００５２】
式Ｉ’ｅおよびＩ’ｆの化合物のうち、式Ｉ’ｆの化合物が好ましい。
【００５３】
式Ｉ’ｅおよびＩ’ｆの他の好ましい化合物は、式Ｉ’ｅ−１、Ｉ’ｆ−１、Ｉ’ｅ−２およびＩ’ｆ−２：
【化２１】
0006023814.tif 000022
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ６は、式Ｉ’に関して上に定義したとおりである。
【００５４】
式Ｉ’ｅ−１、Ｉ’ｆ−１、Ｉ’ｅ−２およびＩ’ｆ−２の好ましい化合物は、
式中、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、シクロプロピルまたはジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、ビニル、イソプロピル、イソブチル、Ｃ１フルオロアルキル、シクロプロピルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチルまたはシクロプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルであり、かつ／または
Ｒ６は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ６はＨである、
化合物である。
【００５５】
式Ｉ’ｅ−１、Ｉ’ｆ−１、Ｉ’ｅ−２およびＩ’ｆ−２の化合物のうち、式Ｉ’ｆ−１およびＩ’ｆ−２の化合物が好ましく、式Ｉ’ｆ−２の化合物がさらに好ましい。
【００５６】
式Ｉ’ｅ−２の好ましい化合物は、式Ｉ’ｅ−３：
【化２２】
0006023814.tif 000023
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ｒ２は、式Ｉ’ｅ−２に関して上に定義したとおりであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、イソブチル、ビニル、シクロプロピル、トリフルオロメチルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピルまたはシクロプロピルであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、エチルまたはイソプロピルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はイソプロピルである。
【００５７】
式Ｉ’ｆ−２の好ましい化合物は、式Ｉ’ｆ−３：
【化２３】
0006023814.tif 000024
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ｒ２は、式Ｉ’ｅ−２に関して上に定義したとおりであり、好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、イソブチル、ビニル、シクロプロピル、トリフルオロメチルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、ビニル、シクロプロピルまたはジメチルアミノであり、より好ましくは、Ｒ２は、メチル、エチル、イソプロピル、ビニルまたはジメチルアミノであり、なおより好ましくは、Ｒ２は、メチルまたはエチルであり、さらにより好ましくは、Ｒ２はメチルである。
【００５８】
一実施形態では、式Ｉ’１の化合物は、式Ｉ’ｇ、Ｉ’ｈおよびＩ’ｉ：
【化２４】
0006023814.tif 000025
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ２およびＲ７は、式Ｉ’に関して上に定義したとおりである。
【００５９】
一実施形態によれば、本発明は、一般式Ｉ’’：
【化２５】
0006023814.tif 000026
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物を提供し、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イル、非置換フェニルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、
Ｒ３は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり、
Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、ＨまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、
Ｘ５は、ＯまたはＳであり、
Ｘ６は、Ｎであるか、Ｘ４がＮであり、かつＸ５がＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ６はＣＨである。
【００６０】
式Ｉ’’の好ましい化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物は、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イルまたは非置換フェニルであり、好ましくは、Ａｒ１は非置換チオフェン−２−イルであり、かつ／または
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ３は、メチルまたはイソプロピルであり、かつ／または
Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、Ｈまたはメチルである）であり、Ｘ５は、ＯまたはＳであり、かつＸ６はＮであり、好ましくは、Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、Ｈまたはメチルである）であり、Ｘ５はＳであり、かつＸ６はＮであり、かつ／または
Ｘ４はＮであり、Ｘ５はＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９はメチルである）であり、かつＸ６はＣＨである、
化合物である。
【００６１】
一実施形態では、式Ｉ’’の好ましい化合物は、式Ｉ’’ａおよびＩ’’ｂ：
【化２６】
0006023814.tif 000027
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ａｒ１、Ｒ３、Ｘ４、Ｘ５およびＸ６は、式Ｉ’’に関して上に定義したとおりである。
【００６２】
式Ｉ’’ａおよびＩ’’ｂの化合物のうち、式Ｉ’’ｂの化合物が好ましい。
【００６３】
一実施形態では、式Ｉ’’の好ましい化合物は、式Ｉ’’ｃおよびＩ’’ｄ：
【化２７】
0006023814.tif 000028
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｘ４、Ｘ５およびＸ６は、式Ｉ’’に関して上に定義したとおりである。
【００６４】
式Ｉ’’ｃおよびＩ’’ｄの好ましい化合物は、
式中、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ３は、メチルまたはイソプロピルであり、かつ／または
Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、Ｈまたはメチルである）であり、Ｘ５は、ＯまたはＳであり、かつＸ６はＮであり、好ましくは、Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、Ｈまたはメチルである）であり、Ｘ５はＳであり、かつＸ６はＮであり、かつ／または
Ｘ４はＮであり、Ｘ５はＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９はメチルである）であり、かつＸ６はＣＨである、
化合物である。
【００６５】
一実施形態では、式Ｉ’’の好ましい化合物は、式Ｉ’’ｅ、Ｉ’’ｆ、Ｉ’’ｇ、Ｉ’’ｈおよびＩ’’ｉ：
【化２８】
0006023814.tif 000029
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ａｒ１、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ８およびＲ９は、式Ｉ’’に関して上に定義したとおりである。
【００６６】
式Ｉ’’ｅ、Ｉ’’ｆ、Ｉ’’ｇ、Ｉ’’ｈおよびＩ’’ｉの好ましい化合物は、
式中、
Ａｒ１は、非置換チオフェン−２−イルまたは非置換フェニルであり、好ましくは、Ａｒ１は非置換チオフェン−２−イルであり、かつ／または
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ３は、メチルまたはイソプロピルであり、かつ／または
Ｒ８は、Ｈまたはメチルであり、好ましくはＨであり、かつ／または
Ｒ９はメチルである、
化合物である。
【００６７】
式Ｉ’’ｅ、Ｉ’’ｆ、Ｉ’’ｇ、Ｉ’’ｈおよびＩ’’ｉの化合物のうち、式Ｉ’’ｅ、Ｉ’’ｆ、Ｉ’’ｇおよびＩ’’ｈの化合物が好ましく、特に、式Ｉ’’ｆおよびＩ’’ｈの化合物がさらに好ましい。
【００６８】
式Ｉ’’ｅ、Ｉ’’ｆ、Ｉ’’ｇ、Ｉ’’ｈおよびＩ’’ｉの他の好ましい化合物は、式Ｉ’’ｅ−１、Ｉ’’ｆ−１、Ｉ’’ｇ−１、Ｉ’’ｈ−１、Ｉ’’ｉ−１、Ｉ’’ｅ−２、Ｉ’’ｆ−２、Ｉ’’ｇ−２、Ｉ’’ｈ−２およびＩ’’ｉ−２：
【化２９】
0006023814.tif 000030
0006023814.tif 000031
の化合物およびその薬学的に許容される溶媒和物であり、式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ８およびＲ９は、式Ｉ’’に関して上に定義したとおりである。
【００６９】
式Ｉ’’ｅ−１、Ｉ’’ｆ−１、Ｉ’’ｇ−１、Ｉ’’ｈ−１、Ｉ’’ｉ−１、Ｉ’’ｅ−２、Ｉ’’ｆ−２、Ｉ’’ｇ−２、Ｉ’’ｈ−２およびＩ’’ｉ−２の好ましい化合物は、
式中、
Ｒ１は、Ｈまたはメチルであり、好ましくは、Ｒ１はメチルであり、かつ／または
Ｒ３は、メチルまたはイソプロピルであり、かつ／または
Ｒ８は、Ｈまたはメチルであり、好ましくはＨであり、かつ／または
Ｒ９はメチルである、
化合物である。
【００７０】
式Ｉ’’ｅ−１、Ｉ’’ｆ−１、Ｉ’’ｇ−１、Ｉ’’ｈ−１、Ｉ’’ｉ−１、Ｉ’’ｅ−２、Ｉ’’ｆ−２、Ｉ’’ｇ−２、Ｉ’’ｈ−２およびＩ’’ｉ−２の化合物のうち、式Ｉ’’ｅ−１、Ｉ’’ｆ−１、Ｉ’’ｇ−１、Ｉ’’ｈ−１、Ｉ’’ｅ−２、Ｉ’’ｆ−２、Ｉ’’ｇ−２およびＩ’’ｈ−２の化合物が好ましく、特に、式Ｉ’’ｆ−１、Ｉ’’ｈ−１、Ｉ’’ｆ−２およびＩ’’ｈ−２の化合物がさらに好ましい。
【００７１】
一実施形態によれば、本発明は、一般式Ｉ’’’：
【化３０】
0006023814.tif 000032
の化合物およびその薬学的に許容される塩および溶媒和物を提供し、
式中、
Ａｒ１は、非置換フェニル、非置換チオフェン−２−イルまたは４−フルオロフェニルであり、
Ｒ４は、ハロ、シアノ、メチルまたはヒドロキシルであり、
Ｒ５は、Ｈまたはハロであるが、
但し、式Ｉ’’’の化合物は、
［１，１’−ビフェニル］−４−イル（８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）メタノン、
（８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン、
ではない。
【００７２】
式Ｉ’’’の好ましい化合物およびその薬学的に許容される塩および溶媒和物は、
式中、
Ａｒ１は、非置換フェニルまたは非置換チオフェン−２−イルであり、より好ましくは、Ａｒ１は非置換フェニルであり、かつ／または
Ｒ４は、シアノ、メチルまたはヒドロキシであり、好ましくは、Ｒ４は、シアノまたはメチルであり、より好ましくは、Ｒ４はメチルであり、かつＲ５はＨであり、かつ／または
Ｒ４はメチルであり、かつＲ５はクロロである、
化合物である。
【００７３】
一実施形態では、式Ｉ’’’の好ましい化合物は、式Ｉ’’’ａおよびＩ’’’ｂ：
【化３１】
0006023814.tif 000033
の化合物およびその薬学的に許容される塩および溶媒和物であり、式中、Ｒ４およびＲ５は、式Ｉ’’’に関して上に定義したとおりである。
【００７４】
式Ｉ’’’ａおよびＩ’’’ｂの好ましい化合物は、
式中、
Ｒ４は、シアノ、メチルまたはヒドロキシであり、好ましくは、Ｒ４は、シアノまたはメチルであり、より好ましくは、Ｒ４はメチルであり、かつＲ５はＨであり、かつ／または
Ｒ４はメチルであり、かつＲ５はクロロである、
化合物である。
【００７５】
本発明の式Ｉの特に好ましい化合物は、以下の表１に列挙されている化合物である。
表１
【表１】
0006023814.tif 000034
0006023814.tif 000035
0006023814.tif 000036
0006023814.tif 000037
0006023814.tif 000038
0006023814.tif 000039
0006023814.tif 000040
0006023814.tif 000041
【００７６】
表１の中の「Ｃｐｄ」という用語は、化合物を意味する。
【００７７】
表１の化合物は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ社、米国マサチューセッツ州ケンブリッジ）を用いて命名した。
【００７８】
式Ｉの化合物は、当業者に知られている反応を用いる様々な方法で調製することができる。実施例の箇所に記載されている反応スキームは単なる例示であり、決して本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。一実施形態によれば、式Ｉの化合物は、以下に詳述する本発明のキラル合成を用いて調製することができる。
【００７９】
さらに、本発明は、ＮＫ−３受容体に対する拮抗薬としての本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用に関する。
【００８０】
従って、特に好ましい実施形態では、本発明は、ＮＫ−３受容体拮抗薬としての式Ｉおよび部分式の化合物、特に上記表１の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用に関する。
【００８１】
キラル合成
上に述べたように、本発明は、上記工程ａ）〜ｄ）を含む式ＩＩの化合物の新規な調製方法に関する。
【００８２】
一実施形態では、本発明の方法は、上に定義した式ＩＩ（式中、Ｒ１’およびＡｒ２’は、上に定義したとおりである）の５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン化合物またはその塩もしくは溶媒和物の調製に関し、工程ａ）〜ｄ）は、
ａ）式Ａ：
【化３２】
0006023814.tif 000042
の化合物（式中、Ｒ１’は、上に定義したとおりである）を、式Ａの化合物のアミン窒素上にＮ−ｓｐ３保護基が得られる式Ｂ１または式Ｂ２：
【化３３】
0006023814.tif 000043
の試薬
（式中、
Ｒ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３、Ｒ１３’’およびＲ１４はＨであるか、Ｒ１４はメトキシであり、かつＲ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、あるいはＲ１２、Ｒ１２’およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’はＨであり、
Ｘは、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＭｓ、ＯＴｓ、ＯＴｆである）
と、式Ｂ２の化合物を使用する場合はアミン窒素の直接アルキル化により、あるいは式Ｂ１の化合物を使用する場合は還元剤の存在下で反応させて、最終的に式Ｃ−１：
【化３４】
0006023814.tif 000044
（式中、Ｒ１’、Ｒ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３、Ｒ１３’およびＲ１４は、上に定義したとおりである）の化合物を得る工程、
ｂ）塩基の存在下で、式Ｃの化合物−１を、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩（メーヤワイン型試薬）、または（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル硫酸塩または（Ｃ１〜Ｃ２）クロロギ酸塩で、あるいはＰＣｌ５／ＰＯＣｌ３／（Ｃ１〜Ｃ２）ヒドロキシアルキルの使用により変換させて、式Ｄ−１：
【化３５】
0006023814.tif 000045
の化合物（式中、Ｒ１’、Ｒ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３、Ｒ１３’およびＲ１４は、上に定義したとおりであり、Ｒ１０はＣ１〜Ｃ２アルキルである）を得る工程、
ｃ）式Ｄ−１の化合物を式Ｅ：
【化３６】
0006023814.tif 000046
の化合物（式中、Ａｒ２’は、式ＩＩに関して上に定義したとおりである）またはその塩もしくは溶媒和物と反応させて、式Ｆ−１：
【化３７】
0006023814.tif 000047
の化合物（式中、Ｒ１’、Ｒ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３、Ｒ１３’、Ｒ１４およびＡｒ２’は、上に定義したとおりである）を得る工程、および
ｄ）式Ｆ−１の化合物を、本明細書に定義されている好適な脱保護試薬で脱保護して、式ＩＩの化合物またはその塩もしくは溶媒和物を得る工程、
である。
【００８３】
式ＩＩの好ましい化合物およびその塩もしくは溶媒和物は、
式中、
Ｒ１’は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであり、前記アルキルまたはシクロアルキル基のそれぞれが、１つのエステル基で任意に置換されており、好ましくは、Ｒ１’は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３〜Ｃ４シクロアルキルであるか、
Ｒ１’は、１つのエステル基で任意に置換されたＣ１〜Ｃ２アルキルであり、好ましくは、Ｒ１’は、１つのエステル基で任意に置換されたメチルであり、より好ましくは、Ｒ１’はメチルであり、かつ／または
Ａｒ２’は、５〜６員環のアリールまたはヘテロアリール基であり、アリールまたはヘテロアリール基のそれぞれが、ハロ、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、カルバモイル、アルキルカルバモイル、カルバモイルアルキル、カルバモイルアミノ、アルキルカルバモイルアミノから選択される１つ以上の基で任意に置換されているか、アリールまたはヘテロアリール基に、１つ以上のシクロアルキル、アリール、ヘテロシクリルまたはヘテロアリール部分が縮合されていてもよく、前記置換基はそれぞれ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシから選択される１つ以上のさらなる置換基で任意に置換されており、好ましくは、Ａｒ２’は、５〜６員環のアリールまたはヘテロアリール基であり、アリールまたはヘテロアリール基のそれぞれが、ハロ、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルアミノ、カルバモイル、アルキルカルバモイル、カルバモイルアルキル、カルバモイルアミノ、アルキルカルバモイルアミノから選択される１つ以上の基で任意に置換されており、より好ましくは、Ａｒ２’は、５〜６員環のアリールまたはヘテロアリール基であり、アリールまたはヘテロアリール基のそれぞれが、ハロ、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヒドロキシル、アルキルアミノから選択される１つ以上の基で任意に置換されており、なおより好ましくは、Ａｒ２’は、５〜６員環のアリールまたはヘテロアリール基であり、アリールまたはヘテロアリール基のそれぞれが、フルオロ、分岐鎖状もしくは直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキルハロ（Ｃ１）アルキル、シクロプロピル、アリール、ヒドロキシル、アルキルアミノから選択される１つ以上の基で任意に置換されており、最も好ましくは、Ａｒ２’は、環（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）：
【化３８】
0006023814.tif 000048
からなる群から選択される５〜６員環のヘテロアリール基であり、
式中、
Ｘ１は、ＮまたはＣ−Ｒ６（式中、Ｒ６は、Ｈ、フルオロまたはメチルである）であり、好ましくは、Ｘ１はＣ−Ｒ６（式中、Ｒ６は、Ｈまたはメチルである）であり、より好ましくは、Ｘ１はＣＨであり、かつ／または
Ｘ２は、ＯまたはＳであり、好ましくは、Ｘ２はＳであり、かつ／または
Ｘ３はＮであるか、Ｘ１がＮであり、かつＸ２がＮ−Ｒ７（式中、Ｒ７は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ３アルキルまたはシクロプロピルである）であるという条件で、Ｘ３はＣＨであり、好ましくは、Ｘ３はＮであり、かつ／または
Ｒ２は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノ、フェニル、４−フルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニルまたはＮ−モルホリニルであり、好ましくは、Ｒ２’は、メチル、エチル、イソプロピル、Ｃ１フルオロアルキル、シクロプロピル、ジメチルアミノ、フェニル、４−フルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニルまたはＮ−モルホリニルであり、より好ましくは、Ｒ２’は、メチル、エチル、イソプロピル、トリフルオロメチルまたはシクロプロピルであり、なおより好ましくは、Ｒ２’は、メチル、エチルまたはイソプロピルであり、最も好ましくは、Ｒ２’はメチルであり、かつ／または
Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、ＨまたはＣ１〜Ｃ２アルキルである）であり、Ｘ５は、ＯまたはＳであり、Ｘ６はＮであるか、Ｘ４がＮであり、かつＸ５がＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９は、Ｃ１〜Ｃ２アルキルまたはＣ３シクロアルキルである）であるという条件で、Ｘ６はＣＨであるか、Ｘ４はＮであり、Ｘ５はＮ−Ｒ９（式中、Ｒ９はメチルである）であり、かつＸ６はＣＨであり、好ましくは、Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８はＨまたはメチルである）であり、Ｘ５は、ＯまたはＳであり、かつＸ６はＮであり、より好ましくは、Ｘ４は、ＮまたはＣ−Ｒ８（式中、Ｒ８は、Ｈまたはメチルである）であり、Ｘ５はＳであり、かつＸ６はＮであり、かつ／または
Ｒ３’は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ２〜Ｃ３アルケニル、Ｃ３〜Ｃ４シクロアルキル、ジ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）アミノ、フェニル、４−フルオロフェニル、２，４−ジフルオロフェニルまたはＮ−モルホリニルであり、より好ましくは、Ｒ３’は、直鎖状もしくは分岐鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ３シクロアルキルであり、さらにより好ましくは、Ｒ３’は、メチルまたはイソプロピルであり、かつ／または
Ｒ４’は、シアノ、Ｃ１〜Ｃ２アルキルまたはヒドロキシルであり、好ましくは、Ｒ４’は、シアノ、メチルまたはヒドロキシルであり、好ましくは、Ｒ４’は、メチルまたはヒドロキシルであり、なおより好ましくは、Ｒ４’はメチルである、
化合物である。
【００８４】
式ＩＩの特に好ましい化合物は、以下の表２に列挙されている化合物である。
表２
【表２】
0006023814.tif 000049
0006023814.tif 000050
0006023814.tif 000051
0006023814.tif 000052
0006023814.tif 000053
0006023814.tif 000054
0006023814.tif 000055
【００８５】
表２の化合物は、ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ社（米国マサチューセッツ州ケンブリッジ）から購入したＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２を用いて命名した。
【００８６】
本発明の方法に関する以下の記載は、記載されている全ての実施形態を含む上に定義した本発明の方法に当てはまる。
【００８７】
上に定義した本方法の工程ａ）は、標準的な還元的アミノ化条件を用いて、式Ａの化合物のアミン基を、式Ａの化合物のアミン窒素上に本明細書に定義されているＮ−ｓｐ３保護基が得られる試薬と反応させることによる式Ｃの化合物の調製である。
【００８８】
式Ａの化合物は、Ｒ１’がＣ１〜Ｃ４アルキルであり、前記アルキル基がそれぞれ、ハロまたはエステルから選択される１つ以上の基で任意に置換されており、好ましくは、Ｒ１’がメチルである化合物から選択されると有利である。
【００８９】
この反応により、上に定義したＮ−ｓｐ３保護基（式Ｃの化合物）で、特に式Ｂ１またはＢ２の化合物を使用する場合はベンジル保護基（式Ｃ−１の化合物）で、式Ａのピペラジノンのアミン窒素が保護される。
【００９０】
式Ａの化合物のアミン窒素上に本明細書に定義されているＮ−ｓｐ３保護基が得られる試薬は、上に定義した式Ｂ１またはＢ２の化合物であると有利である。式Ｂ１またはＢ２の化合物は、Ｒ１４がメトキシであり、かつＲ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’がＨである化合物、Ｒ１２およびＲ１４がメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’がＨである化合物、またはＲ１２、Ｒ１２’およびＲ１４がメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’がＨである化合物から選択されると有利であり、特に式Ｂの化合物は、Ｒ１２およびＲ１４がメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’がＨである化合物である。
【００９１】
本発明に係る「ベンジル保護基」という用語は、ベンジル（Ｂｎ）、４−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、２，４−ジメトキシベンジル（ＤＭＢ）および２，４，６−トリメトキシベンジル（ＴＭＢ）として定義し、そのうちＤＭＢおよびＴＭＢ、特にＤＭＢが好ましい。
【００９２】
これらのベンジル保護基は、それらの使用により、工程ｂ）、ｃ）およびｄ）を行うためにＢｏｃ（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）およびＣｂｚ（カルボベンジルオキシ）などの他の保護基を使用する場合と比較して、工程ｂ）、ｃ）およびｄ）中のラセミ化が顕著に減少するため、有利であることが分かった。
【００９３】
排他的にどんな理論にも縛られたくないが、出願人は、本発明に開示されている改良されたキラル合成手順における顕著な改善に潜在的に関連するものとして２つの推測について検討する。第１に、本明細書に定義されているＮ−ｓｐ３保護基、例えば、Ｂｎ、ＰＭＢ、ＤＭＢ、ＴＭＢは、「Ｎ−ｓｐ２保護基」すなわちＢｏｃ、Ｃｂｚ、Ａｌｌｏｃ（アリルオキシカルボニル）などのカルバミン酸エステルとは対照的に、電子吸引性が弱く、そのため、不斉炭素原子の水素の安定性も高く、従ってラセミ化しづらいと考えることができる。第２に、イミディアート（ｉｍｉｄｉａｔｅ）形成（工程ｂ）およびＢｎ、ＰＭＢ、ＤＭＢなどのＮ−ｓｐ３保護基を用いる脱水環化工程（工程ｃ）の両方で観察される反応時間の点で、より高い反応効率ならびに一般により穏やかな反応条件（例えば、非常に過剰なメーヤワイン試薬の必要性がなくなること）は、出発物質、例えば３−メチルピペラジン−２−オンのキラル型に由来するキラル純度の保持に寄与する可能性が高く、その結果、本発明の中間体および最終生成物が本明細書に定義されている高い鏡像異性体純度で得られる。
【００９４】
既に上に記載したように、工程ａ）は、還元剤の存在下で行う。本明細書に使用されている「還元剤」という用語は、限定されるものではないがＮａＢＨ４および関連する誘導体、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）シラン、ボランならびに水素移動試薬を用いることを含む好適な水素化分解（ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｌｙｔｉｃ）条件のように、イミンをアミンに還元することができる全ての試薬を意味する。
【００９５】
還元剤は、好ましくは、水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、トリフルオロアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムからなる群から選択されるアルカリ性カチオン水素化ホウ素試薬であると有利であり、より好ましくは、還元剤はトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムである。
【００９６】
工程ａ）は、当業者によく知られている標準的な手順に従って行う（例えば
（ａ）  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．；  Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｔ．  Ｗ．  Ｉｎ  “Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｈａｐ．  ７，  ｐｐ．  ６９６−９２６、および（ｂ）  Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，  Ｐ．  Ｊ．  Ｉｎ  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ”，  Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ：  Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｈａｐ．  ８，  ｐｐ．  ４８７−６４３を参照）。
【００９７】
式Ａの中間体は、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィまたはシリカゲルクロマトグラフィおよび／または沈殿および／または粉砕および／または濾過および／または再結晶化によって任意に精製してもよい。
【００９８】
本方法の第２の工程すなわち工程ｂ）は、式Ｃのケトピペラジン化合物の式Ｄのイミノエーテル化合物への変換、特に、式Ｃ−１のケトピペラジン化合物の式Ｄ−１のイミノエーテル化合物への変換である。
【００９９】
ＢｏｃなどのＮ−ｓｐ２保護基の場合とは異なり、Ｎ−ｓｐ３保護基を用いる場合、工程ｂ）は、キラリティーの顕著な損失なしに行われ、本明細書に定義されている良好な鏡像異性体純度の対応する生成物が得られる。
【０１００】
上記手順は、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩（メーヤワイン型試薬）または（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル硫酸塩または（Ｃ１〜Ｃ２）クロロギ酸塩あるいはＰＣｌ５／ＰＯＣｌ３／（Ｃ１〜Ｃ２）ヒドロキシアルキルの使用、好ましくは、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩（メーヤワイン型試薬）または（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル硫酸塩、より好ましくは、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩、さらにより好ましくは、Ｅｔ３ＯＢＦ４などのトリ（Ｃ２アルキル）オキソニウム塩を必要とする。
【０１０１】
上に記載したように、工程ｂ）は塩基の存在下で行う。
【０１０２】
以下にさらに述べるように、Ｎａ２ＣＯ３などの穏やかな塩基添加剤を使用せずに工程ｂ）を行った場合、完全な変換を補助するために、３位置換ピペラジン−２−オンに対して少なくとも２当量のトリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩（ｌ）の使用が必要であった。
【０１０３】
いかなる理論にも縛られたくはないが、出願人は、感湿性のトリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩（メーヤワイン型試薬）の使用による副生成物となり得るＨＢＦ４などの酸の形成が、さらに上記生成物の質におけるばらつきを生じさせるのではないかとと考えている。興味深いことに、明確な論理的根拠も詳細な実験条件も提供していないがメーヤワイン試薬の使用と共にＮａ２ＣＯ３などの穏やかな塩基を使用することに言及した２つの参考文献が存在する（（ａ）  Ｓａｎｃｈｅｚ，  Ｊ．  Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２００１，  ６６，  ５７３１−５７３５、（ｂ）  Ｋｅｎｄｅ，  Ａ．  Ｓ．；  ｅｔ  ａｌ．Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  ２００３，  ５，  ３２０５−３２０８を参照）。広範囲な反応の最適化実験後に、出願人は、メーヤワイン試薬に対して塩基、特にＮａ２ＣＯ３を添加することでラセミ化が最小に抑えられることを見い出した。出願人は、穏やかな塩基添加剤、特にＮａ２ＣＯ３の使用により、反応の完了も促進されるように思われ、次いで、その使用がそのような反応におけるラセミ化を最小に抑えることに寄与し得ることをさらに観察した。
【０１０４】
上記塩基は、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウムからなる群から選択されると有利であり、当該塩基は炭酸ナトリウムであることが好ましい。
【０１０５】
好ましい実施形態では、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩に対して１〜５、好ましくは約１．８モル当量の塩基を使用する。
【０１０６】
トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩は、テトラフルオロホウ酸トリメチルオキソニウム、テトラフルオロホウ酸トリエチルオキソニウムからなる群から選択されると有利であり、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩はテトラフルオロホウ酸トリエチルオキソニウムであることが好ましい。有利な実施形態では、１〜２、好ましくは約１．４モル当量のトリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩を使用する。
【０１０７】
イミノエーテル合成工程ｂ）は、有機溶媒、好ましくは無水溶媒、好ましくはジクロロメタン中で行うと有利である。
【０１０８】
上記反応は、有機溶媒の沸点以下の温度で行うと有利であり、上記反応を室温で行うことが好ましい。
【０１０９】
本明細書に使用されている「室温」という用語は、１０℃〜３０℃、好ましくは約２０±５℃に含まれる温度を意味する。
【０１１０】
一実施形態では、特に、式Ｃ−１のケトピペラジン化合物を式Ｄ−１のイミノエーテル化合物に変換する場合、トリ（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキソニウム塩に対して１．８当量の炭酸ナトリウムを用いて、工程ｂ）をＤＣＭ中、室温で行う。
【０１１１】
式Ｄの中間体は、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィまたはシリカゲルカラムクロマトグラフィで任意に精製してもよい。
【０１１２】
本方法の第３の工程すなわち工程ｃ）は、式Ｄのイミノエーテルと式Ｅのアシルヒドラジドまたはその塩もしくは溶媒和物との縮合による式Ｆのトリアゾロピペラジン化合物の調製であり、特に式Ｄ−１のイミノエーテルと式Ｅのアシルヒドラジドまたはその塩もしくは溶媒和物との縮合による式Ｆ−１のトリアゾロピペラジン化合物の調製である。
【０１１３】
いかなる理論にも縛られたくはないが、出願人は、ＢｏｃなどのＮ−ｓｐ２保護基を用いた場合、カルバミン酸エステルの誘起効果によりＣ８位のプロトンがより酸性になり、よって、これにより、観察されるラセミ化（脱プロトン化がヒドラジドの存在下で生じ得る）を説明することができると考えている。
【０１１４】
工程ｃ）は一般に、５０℃〜１３５℃、好ましくは７０℃〜１３５℃に含まれる温度で行う。
【０１１５】
対照的に、Ｂｏｃ保護されたメチルケトピペラジンとの縮合は典型的に、１３５℃、未希釈（ｎｅａｔ）反応媒体、長い反応時間（２４時間超）または数日間に及ぶ過剰なマイクロ波の照射などの非常に強制的な条件下で行われた。そのような条件は、スケールアップのために容易に受け入れられず、さらに、そのような苛酷かつ長い反応条件を用いる場合には、再現不可能なキラル純度も問題であった。
【０１１６】
式Ｆの中間体は、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィまたはシリカゲルカラムクロマトグラフィで任意に精製してもよい。
【０１１７】
本方法の第４の工程すなわち工程ｄ）では、好適な脱保護試薬による式Ｆの化合物、特に式Ｆ−１の化合物の脱保護を行う。
【０１１８】
本発明に係る「好適な脱保護試薬」という用語は、本明細書に定義されているＮ−ｓｐ３保護基、特に本明細書に定義されているベンジル保護基の除去を可能にするあらゆる試薬として定義する。そのような試薬の例は、（ａ）  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．；  Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｔ．  Ｗ．  Ｉｎ  “Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ“，  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｈａｐ．  ７，  ｐｐ．  ６９６−９２６、および（ｂ）  Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ，  Ｐ．  Ｊ．  Ｉｎ  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ”，  Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ：  Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｈａｐ．  ８，  ｐｐ．  ４８７−６４３に報告されており、好適な脱保護試薬としては、水素化分解条件（例えば、Ｈ２、Ｐｄ／Ｃ）または酸分解（ａｃｉｄｏｌｙｔｉｃ）条件（例えば、ＨＣｌ、ＴＦＡ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１９】
好ましい脱保護試薬は、ＴＦＡ、ＨＣｌからなる群から選択され、好ましくはＨＣｌである。
【０１２０】
ＰＭＢ、ＤＭＢおよびＴＭＢなどの本明細書に定義されているベンジル保護基のより酸に不安定な変形形態は、より穏やかな脱保護条件が必要とされるため有利であり、そのため結果的に、本工程で生じ得るあらゆるラセミ化が最小に抑えられることが分かった。
【０１２１】
工程ｄ）は、１，４−ジオキサン、ジクロロメタン、イソプロパノールから選択される有機溶媒中で行うと有利である。
【０１２２】
ＴＦＡまたはＨＣｌの使用などの酸分解脱保護条件を用いると、式ＩＩの化合物がその対応する塩の形態で得られる。
【０１２３】
一実施形態では、工程ｄ）の後に、遊離塩基の形態への変換を任意に行ってもよい。
【０１２４】
一実施形態では、最終的な中間体の化学的純度および／または立体異性体純度を高めるために、塩または遊離塩基の形態のうちのいずれかの形態の式ＩＩの化合物を、キラル酸などの立体異性体塩形成剤を用いて変換して、式ＩＩの立体異性体塩を得る。
【０１２５】
上記立体異性体塩形成剤としては、マンデル酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸およびジトリル酒石酸、フェニルプロピオン酸、全ての関連する立体異性体の酒石酸誘導体、あるいは、より好ましくは、マンデル酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸およびジトリル酒石酸、全ての関連する立体異性体のフェニルプロピオン酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２６】
一実施形態では、工程ｄ）の後に、さらなるアミドカップリング工程ｅ）を行い、そこでは、式ＩＩの化合物またはその塩もしくは溶媒和物を、式Ｇ：
【化３９】
0006023814.tif 000056
の化合物
（式中、
Ａｒ１は、フェニル、チオフェン−２−イルまたは４−フルオロフェニル、好ましくはフェニルまたはチオフェン−２−イルであり、
Ｙは、ヒドロキシル、ハロ、好ましくはＦまたはＣｌ、より好ましくはヒドロキシルおよびＣｌ、さらにより好ましくはＣｌである）
またはその塩もしくは溶媒和物と反応させて、式Ｈ：
【化４０】
0006023814.tif 000057
の化合物（式中、Ａｒ２’は、式ＩＩに関して上に定義したとおりであり、Ａｒ１は、式Ｇに関して上に定義したとおりである）またはその塩もしくは溶媒和物を得る。
【０１２７】
工程ｅ）を、ジクロロメタン、アセトニトリルから選択される有機（好ましくは無水）溶媒、好ましくはジクロロメタン中で行うと有利である。
【０１２８】
上記反応を、有機溶媒の沸点以下の温度、好ましくは室温で行うと有利である。
【０１２９】
Ｙがハロである式Ｇの化合物の場合、上記反応を、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミンからなる群から選択される塩基、好ましくはＮ−メチルモルホリンの存在下で行い、Ｙがヒドロキシルである式Ｇの化合物の場合、当業者に知られている反応条件で、クロロギ酸イソブチル、ＤＩＣ、ＤＣＣ、ＨＯＢｔ、ＨＡＴＵ、ＨＢＴＵ、ＤＥＰＢＴなどのいわゆる活性化基の使用を必要とする従来のアミド結合形成試薬により形成された後者の前記化合物の活性化された無水物、エステル、アシル尿素誘導体の存在下で行い、より好ましくは、Ｙがハロである式Ｇの化合物を用いる場合、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、トリエチルアミンからなる群から選択される塩基、好ましくはＮ−メチルモルホリンの存在下で上記反応を行う。
【０１３０】
キラルＨＰＬＣによる分離の達成は難しかったため、式ＩＩの化合物またはその塩の鏡像体過剰率の値は測定しなかった。しかし、式Ｇの化合物のキラル純度および鏡像体過剰率は測定することができた。出願人は、式Ｄの化合物および式Ｈのアミドに対して同じｅｅ値を観察し、これにより、工程ｄ）およびｅ）の両方が検出可能なラセミ化（キラルＬＣ）を全く生じさせることなく行われたことを確認した。
【０１３１】
別の態様では、本発明は、特に本発明の方法に係る式ＩＩの化合物の合成のための中間体を提供する。これらの中間体は、上に定義した式Ｄの化合物である。
【０１３２】
一実施形態では、式Ｄの化合物は、式Ｄ−１：
【化４１】
0006023814.tif 000058
の化合物であり、
式中、
Ｒ１’およびＲ１０は、式Ｄに関して定義したとおりであり、
Ｒ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３、Ｒ１３’およびＲ１４はＨであるか、Ｒ１４はメトキシであり、かつＲ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２、Ｒ１２’およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’はＨである。
【０１３３】
式Ｄ−１の好ましい化合物は、
式中、
Ｒ１４はメトキシであり、かつＲ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２、Ｒ１２’およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’はＨであり、好ましくは、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２またはＲ１２’およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’がＨであり、より好ましくは、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであり、かつ／または
Ｒ１０はエチルである、
化合物である。
【０１３４】
式Ｄ−１の好ましい化合物は、（Ｒ）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジンである。
【０１３５】
上に記載したように、本発明は、上に定義した式ＩＩＩの化合物も提供する。一実施形態では、式ＩＩＩの化合物またはその塩もしくは溶媒和物は、
式中、
Ｒ１１がＨまたは以下：
【化４２】
0006023814.tif 000059
（式中、
Ｒ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３、Ｒ１３’およびＲ１４はＨであるか、Ｒ１４はメトキシであり、かつＲ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２、Ｒ１２’およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’はＨであり、好ましくは、Ｒ１４はメトキシであり、かつＲ１２、Ｒ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２、Ｒ１２’およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’はＨであり、好ましくは、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであるか、Ｒ１２、Ｒ１２’およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１３およびＲ１３’はＨであり、より好ましくは、Ｒ１２およびＲ１４はメトキシであり、かつＲ１２’、Ｒ１３およびＲ１３’はＨであり、かつ
Ｒ１’およびＡｒ２’は、式ＩＩに関して定義したとおりである）
である化合物である。
【０１３６】
式ＩＩＩの特に好ましい化合物は、以下の表３に列挙されている化合物である。
表３
【表３】
0006023814.tif 000060
0006023814.tif 000061
0006023814.tif 000062
0006023814.tif 000063
0006023814.tif 000064
0006023814.tif 000065
0006023814.tif 000066
0006023814.tif 000067
0006023814.tif 000068
0006023814.tif 000069
0006023814.tif 000070
0006023814.tif 000071
0006023814.tif 000072
0006023814.tif 000073
【０１３７】
式Ｄ、特にＤ−１の化合物および式ＩＩＩ、特に（Ｒ）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジンならびに上記表３の化合物またはその塩もしくは溶媒和物は、選択的ＮＫ−３受容体拮抗薬などの医薬有効成分の合成にとって有用な中間体であるキラル５，６，７，（８位置換）−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンの合成にとって特に興味深い。
【０１３８】
従って、別の態様では、本発明は、選択的ＮＫ−３受容体拮抗薬などの医薬有効成分の合成のためのこれらの化合物またはその塩もしくは溶媒和物の使用に関する。
【０１３９】
用途
従って、本発明の化合物は、特に、鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、異常な思春期、子宮線維症、子宮線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の予防薬および／または治療薬として有用である。
【０１４０】
本発明は、薬学的に有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物をそれを必要としている患者に投与することを含む、患者における鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、異常な思春期、子宮線維症、子宮線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の発症を遅らせる方法も提供する。
【０１４１】
患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【０１４２】
本発明の化合物は、婦人科疾患および不妊症の治療にも有用である。特に、本発明は、補助受胎におけるＬＨサージの抑制方法を提供する。
【０１４３】
本発明の化合物は、男子去勢を引き起こし、かつ男性の性欲を阻害するのにも有用である。これは、男性の性犯罪者の治療において特に興味深い。
【０１４４】
本発明は、患者における鬱病、不安症、精神病、統合失調症、精神病性障害、双極性障害、認知障害、パーキンソン病、アルツハイマー病、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、疼痛、痙攣、肥満症、過敏性腸症候群および炎症性腸疾患などの炎症性疾患、嘔吐、子癇前症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、気道過敏症、気管支収縮および咳などの気道関連疾患、生殖障害、避妊および性ホルモン依存性疾患、例えば、限定されるものではないが、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、乳癌、卵巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症、子宮内膜症、異常な思春期、子宮線維症、子宮線維腫、ホルモン依存性癌、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、月経過多および腺筋症の治療および／または予防のための薬の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用をさらに提供する。
【０１４５】
患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【０１４６】
本発明は、患者の補助受胎におけるＬＨサージを抑制するための薬の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用をさらに提供する。患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくは女性である。
【０１４７】
本発明は、男子去勢を引き起こし、かつ男性の性欲を阻害するための薬の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用をさらに提供する。これは、男性の性犯罪者の治療において特に興味深い。
【０１４８】
本発明のさらなる特徴によれば、そのような治療を必要としている患者、好ましくは温血動物、さらにより好ましくはヒトに、有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を投与することを含む、前記患者におけるＮＫ−３受容体活性の調整方法が提供される。
【０１４９】
一実施形態によれば、本発明の化合物、それらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を、併用療法の一部として投与してもよい。従って、有効成分としての本発明の化合物、その薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に加えて、さらなる治療薬および／または有効成分を含有する組成物および薬の同時投与を含む実施形態は、本発明の範囲に含まれる。多くの場合「併用療法」と呼ばれるそのような多剤投与計画を、ＮＫ−３受容体調節よって媒介されるかそれに関連する疾患または病気のいずれかの治療および／または予防に使用してもよい。そのような治療薬の併用は、治療を必要としている患者またはそのような患者になるリスクのあるものにおける上記障害の治療に特に適している。
【０１５０】
式ＩのＮＫ−３受容体調節化合物またはその医薬用塩もしくは許容される溶媒和物に加えて活性薬剤の使用を必要とし得る治療効果要求に加えて、補助療法を表す、すなわち本発明のＮＫ−３受容体調節化合物によって行われる機能を補足および追加する有効成分を必要とする薬物の併用を強要するか高く推奨するさらなる論理的根拠が存在し得る。補助治療の目的で使用される好適な追加的治療薬としては、ＮＫ−３受容体調節によって媒介されるかそれに関連する疾患または病気を直接治療または予防する代わりに、基礎的すなわち原因となっているＮＫ−３受容体調節性疾患または病気に直接起因するか間接的に付随する疾患または病気を治療する薬物が挙げられる。
【０１５１】
本発明のさらなる特徴によれば、式Ｉの化合物、その薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を抗精神病薬（ＡＰＤ）との併用療法で使用して、有効性を高め、かつ限定されるものではないがドーパミン２／３および５−ＨＴ２受容体拮抗薬を含むＡＰＤに関連する二次的影響を最小限に抑えてもよい。より特に、式Ｉの化合物、その薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を、限定されるものではないが、リスペリドン、クロザピン、オランザピンなどの非定型抗精神病薬と組み合わせて補助療法として使用してもよく、この場合、ＮＫ−３受容体調節剤は、非定型抗精神病薬の用量を制限するものとしての役割を果たすことができ、よって、患者にそれらの非定型抗精神病薬のいくつかの副作用が生じるのを防止する。
【０１５２】
従って、本発明の治療方法および医薬組成物は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される溶媒和物を単剤療法の形態で用いてもよいが、前記方法および組成物を多剤療法の形態で使用してもよく、その場合、１種以上の式Ｉの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物は、１種以上の他の治療薬と組み合わせて同時投与される。
【０１５３】
本発明の上記実施形態の組み合わせでは、式Ｉの化合物、その薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物および他の治療用活性薬剤を、剤形の点で別々または互いに一緒に投与してもよく、それらの投与時間の点で連続的または同時に投与してもよい。従って、１種の成分薬剤の投与は、他の成分薬剤の投与の前であってもそれと同時であってもその後であってもよい。
【０１５４】
本発明は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または補助剤とを含む医薬組成物も提供する。上に示したように、本発明は、有効成分としての本発明の化合物、その薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物に加えて、さらなる治療薬および／または有効成分を含有する医薬組成物も包含する。
【０１５５】
本発明の別の目的は、少なくとも１種の本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を有効成分として含む薬である。
【０１５６】
本発明のさらなる特徴によれば、そのような治療を必要としている患者に有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を投与することを含む、前記患者におけるＮＫ−３受容体活性を調節するための薬の製造のための式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用が提供される。
【０１５７】
患者は、好ましくは温血動物であり、より好ましくはヒトである。
【０１５８】
上に記載したように、本発明の化合物、それらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を単剤療法または併用療法で使用してもよい。従って、一実施形態によれば、本発明は、上に記載した目的のうちの少なくとも１つのための薬の製造のための本発明の化合物の使用を提供し、その使用では、前記薬を、少なくとも１種のさらなる治療薬および／または有効成分と組み合わせて、それを必要としている患者、好ましくは温血動物、さらにより好ましくはヒトに投与する。そのような多剤療法、可能な投与計画ならびに好適なさらなる治療薬および／または有効成分の利益および利点は、上に記載されているものである。
【０１５９】
一般に、医薬用途では、本発明の化合物を、少なくとも１種の本発明の化合物と、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤および／または補助剤と、任意に１種以上のさらなる薬学的に活性な化合物とを含む医薬品として製剤化してもよい。
【０１６０】
非限定的な例として、そのような製剤は、経口投与、非経口投与（例えば、静脈内、筋肉内もしくは皮下注射または静脈内注入）、局所投与（眼投与を含む）、吸入による投与、皮膚パッチによる投与、埋め込み物による投与、坐薬による投与などに適した形態であってもよい。そのような好適な投与形態（投与様式に応じて固体、半固体または液体であってもよい）ならびにその調製に使用される方法および担体、希釈剤および賦形剤は、当業者には明らかであり、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓの最新版を参照する。
【０１６１】
そのような製剤のいくつかの好ましいが非限定的な例としては、錠剤、丸剤、散剤、トローチ剤、小袋、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁液、乳濁液、溶液、シロップ剤、エアロゾル、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、軟および硬ゼラチンカプセル、坐薬、液滴、無菌注射溶液、およびボーラスとしての投与および／または連続投与のための無菌包装粉末（通常、使用前に再構成される）が挙げられ、これらは、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、澱粉、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、セルロース、（無菌）水、メチルセルロース、ヒドロキシ安息香酸メチルおよびヒドロキシ安息香酸プロピル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、食用油、植物油および鉱油または好適なそれらの混合物などのそれ自体がそのような製剤に適した担体、賦形剤および希釈剤と共に製剤化してもよい。上記製剤は、滑沢剤、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、分散剤、崩壊剤、増量剤、充填剤、保存料、甘味料、着香料、流量調整剤、離型剤などの医薬製剤に通常使用される他の物質を任意に含有することができる。また、本組成物を、その中に含有されている活性化合物の即時放出、持続放出または遅延放出を行うように製剤化してもよい。
【０１６２】
本発明の医薬品は単位剤形であることが好ましく、任意に、製品情報および／または使用説明書を含む１枚以上のリーフレットと共に、例えば、箱、ブリスター、バイアル、瓶、小袋、アンプルあるいは任意の他の好適な単回もしくは複数回投与用ホルダーまたは容器（適切にラベルが貼られていてもよい）に適切に包装されていてもよい。一般に、そのような単位投与量は、０．０５〜１０００ｍｇ、通常は１〜５００ｍｇの少なくとも１種の本発明の化合物（例えば、単位投与量当たり約１０、２５、５０、１００、２００、３００または４００ｍｇ）を含む。
【０１６３】
通常は、予防または治療される病気および投与経路に応じて、本発明の活性化合物を、１日につき患者の体重１ｋｇ当たり０．０１〜１００ｍｇ、より多くの場合、０．１〜５０ｍｇ、例えば１〜２５ｍｇ、例えば、約０．５、１、５、１０、１５、２０または２５ｍｇで投与するが、それらを、単回１日用量として投与しても、１日用量を１回以上に分割して投与しても、例えば点滴を用いて本質的に連続的に投与してもよい。
【０１６４】
定義
以下の定義および説明は、本明細書および請求請求の範囲の両方を含む本出願全体を通して使用されている用語のためのものである。
【０１６５】
本発明の化合物について述べる場合、使用されている用語は、特に明記しない限り、以下の定義に従って解釈されるものとする。
【０１６６】
「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。好ましいハロ基は、フルオロおよびクロロである。最も好ましいハロ基は、本明細書中に特に明記しない限り、本発明ではフルオロである。
【０１６７】
単独または別の置換基の一部としての「アルキル」という用語は、式ＣｎＨ２ｎ＋１（式中、ｎは１以上の数である）のヒドロカルビルラジカルを指す。一般に、本発明のアルキル基は、１〜４個の炭素原子、好ましくは１〜３個の炭素原子を含む。アルキル基は、直鎖状であっても分岐鎖状であってもよい。
【０１６８】
好適なアルキル基としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチルおよびｔ−ブチルが挙げられる。
【０１６９】
「ハロアルキル」という用語は、単独または組み合わせで、１つ以上の水素が上に定義したハロゲンで置換されている、上に定義した意味を有するアルキルラジカルを指す。そのようなハロアルキルラジカルの非限定的な例としては、クロロメチル、１−ブロモエチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチルおよび１，１，１−トリフルオロエチルなどが挙げられる。Ｃｘ〜ｙハロアルキルおよびＣｘ−Ｃｙアルキルは、ｘ〜ｙ個の炭素原子を含むアルキル基を指す。好ましいハロアルキル基は、ジフルオロメチル、トリフルオロメチルである。
【０１７０】
本明細書に使用されている「アルケニル」という用語は、１つ以上の炭素−炭素二重結合を含む直鎖状であっても分岐鎖状であってもよい不飽和ヒドロカルビル基を指す。好適なアルケニル基は、２〜３個の炭素原子を含む。アルケニル基の例は、エテニル（ビニル）、２−プロペニル（アリル）である。本明細書中の好ましいアルケニル基はビニル基である。
【０１７１】
本明細書に使用されている「チオフェン−２−イル」という用語は、式：
【化４３】
0006023814.tif 000074
の基を意味し、式中、矢印は結合点を定める。
【０１７２】
本明細書に使用されている「シクロアルキル」という用語は、１個または２個の環式構造を有する、環式のアルキル基すなわち一価の飽和もしくは不飽和ヒドロカルビル基である。シクロアルキルは、単環式のヒドロカルビル基のみを含む。シクロアルキル基は、環中に３個以上の炭素原子を含んでいてもよく、一般に本発明によれば、３〜４個、より好ましくは３個の炭素原子を含む。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピルおよびシクロブチルが挙げられ、シクロプロピルが特に好ましい。
【０１７３】
本明細書に使用されている「エステル」という用語は、非置換Ｃ１〜Ｃ４アルキルオキシカルボニル、非置換フェニルオキシカルボニルまたは非置換フェニル（Ｃ１〜Ｃ２アルキル）オキシカルボニルからなる群から選択される基を意味する。
【０１７４】
好適なエステル基としては、メチルオキシカルボニル、エチルオキシカルボニル、ｎ−プロピルオキシカルボニル、ｉ−プロピルオキシカルボニル、ｎ−ブチルオキシカルボニル、ｉ−ブチルオキシカルボニル、ｓ−ブチルオキシカルボニル、ｔ−ブチルオキシカルボニル、フェニルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルおよびフェネチルオキシカルボニルが挙げられ、これらのうち、メチルオキシカルボニル、エチルオキシカルボニル、プロピルオキシカルボニル、ｉ−プロピルオキシカルボニル、フェニルオキシカルボニルおよびベンジルオキシカルボニルが好ましい。
【０１７５】
本発明の５，６，７，（８位置換）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンの環原子は、以下のスキームに基づいて番号が付されている。
【化４４】
0006023814.tif 000075
【０１７６】
化合物中の不斉炭素からの結合は一般に、実線
【化４５】
0006023814.tif 000076
ジグザグ線
【化４６】
0006023814.tif 000077
実線の楔形
【化４７】
0006023814.tif 000078
または点線のくさび形
【化４８】
0006023814.tif 000079
を用いて表す。不斉炭素原子からの結合を示すための実線の楔形または点線のくさび形のいずれか一方の使用は、図示されている立体異性体のみが含まれることを示すものである。
【０１７７】
本発明の化合物では、Ｃ８位にメチルを有する点線のくさび形
【化４９】
0006023814.tif 000080
は、（Ｒ）−鏡像異性体を示すために使用する。実線の楔形
【化５０】
0006023814.tif 000081
は、（Ｓ）−鏡像異性体を示すために使用する。
【０１７８】
式ＩＩの化合物およびその部分式は、８位に不斉炭素原子を含み、よって、（Ｒ）−および（Ｓ）−鏡像異性体として存在し得る。環の８位と８位に隣接して星印を有するＲ１’との間の結合を示すための実線の使用は、個々の鏡像異性体を意味し、よって、それらのラセミ混合物を排除することを示している。
【０１７９】
環の８位とＲ１’との間の結合のための実線の楔形
【化５１】
0006023814.tif 000082
は、（Ｓ）−鏡像異性体を示すために使用し、環の８位とＲ１’との間の結合のための点線のくさび形
【化５２】
0006023814.tif 000083
は、（Ｒ）−鏡像異性体を示すために使用する。
【０１８０】
例えば、（Ｒ）−８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジンは、
【化５３】
0006023814.tif 000084
として表す。
【０１８１】
プロトトロピー互変異性体の平衡形態が式Ｉ’’’の特定の化合物に存在し得、それは、互変異性体の一方または両方の存在を引き起こす。一例を以下に示す。
【化５４】
0006023814.tif 000085
【０１８２】
本発明の化合物の全ての互変異性型が、どの特定の互変異性体が描かれたり命名されたりしているかに関わらず、適用可能な限り本発明の範囲に含まれる。
【０１８３】
本発明の化合物は、薬学的に許容される塩の形態であってもよい。式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの化合物の薬学的に許容される塩は、その酸付加塩を含む。好適な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成されている。例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、シクラミン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩／塩化物、臭化水素酸塩／臭化物、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩（ｎａｐｈｔｈｙｌａｔｅ）、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、リン酸二水素塩、ピログルタミン酸塩、糖酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリフルオロ酢酸塩およびキシノホ酸塩塩が挙げられる。
【０１８４】
本発明の式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物は、塩形成剤（ｓａｌｔ−ｆｏｒｍｅｒ）を使用して塩の形態で調製してもよい。好適な酸は、限定されるものではないが、薬学的に許容される塩を形成するものとみなされている酸であることが好ましい（例えば、Ｗｅｒｍｕｔｈ，  Ｃ．  Ｇ．；  Ｓｔａｈｌ，  Ｐ．  Ｈ．  Ｉｎ  “Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ”，  Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ２００２を参照）。そのような塩は、付随する塩の中間体の化学的純度を高め、かつ／または貯蔵寿命を延ばすように形成されていてもよい。上述した関連する塩形成剤の例としては、非限定的な意味で、適用可能な限りありとあらゆる立体異性体を介するもの、ＨＣｌ、硫酸、リン酸、酢酸、エタンスルホン酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、マンデル酸、コハク酸、フェニルプロピオン酸、ｐ−トルエンスルホン酸が挙げられる。好ましい塩形成剤としてはＨＣｌが挙げられる。
【０１８５】
式Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩの化合物の薬学的に許容される塩は、以下の方法の１つ以上によって調製してもよい。
（ｉ）式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物を所望の酸と反応させる
（ｉｉ）酸に不安定な保護基を式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物の好適な前駆体から除去する
（ｉｉｉ）適当な酸との反応により、あるいは好適なイオン交換カラムを用いて、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物のある塩を別の塩に変換する
【０１８６】
「溶媒和物」という用語は、本明細書では、化学量論量または準化学量論量のエタノールなどの１種以上の薬学的に許容される溶媒分子を含有する本発明における化合物を記述するために使用する。「水和物」という用語は、前記溶媒が水である場合を指す。
【０１８７】
式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物への言及は全て、その塩、溶媒和物、多成分複合体および液晶への言及を含む。
【０１８８】
本発明の化合物は、その全ての多形および晶癖、プレドラッグ、プロドラッグおよび互変異性体および同位体で標識された式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物などの、本明細書において先に定義した式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物を含む。
【０１８９】
さらに、一般に本発明の化合物の塩に関して、薬学的に許容される塩が好ましいが、本発明は、その最も広い意味では、例えば、本発明の化合物の単離および／または精製で使用し得る薬学的に許容されない塩も含むことに留意されたい。例えば、光学活性の酸または塩基で形成された塩を使用して、上記式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物の光学活性異性体の分離を促進することができるジアステレオマー塩を形成してもよい。
【０１９０】
本発明は一般に、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物の全ての薬学的に許容されるプレドラッグおよびプロドラッグも包含する。
【０１９１】
本明細書に使用されている「プロドラッグ」という用語は、式Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩの化合物の薬理学的に許容される誘導体、例えば、生体内でその生体内変換生成物が生物学的に活性な薬物を生成するエステルなどを意味する。プロドラッグ一般に、生物学的利用能を増加させることを特徴とし、容易に代謝されて生体内で生物学的に活性な化合物になる。
【０１９２】
本明細書に使用されている「プレドラッグ」という用語は、プレドラッグが薬物の投与が指示されている体の領域に到達する前または後のいずれかに、体内または体外のいずれかで修飾が生じる得る薬物種を形成するように修飾されたあらゆる化合物を意味する。
【０１９３】
「患者」という用語は、医療的ケアを受けるのを待っているか受けている途中である、あるいは医療処置の対照であるか今後対照となる温血動物、より好ましくはヒトを指す。
【０１９４】
「ヒト」という用語は、男女両方のあらゆる発達段階（すなわち、新生児、乳幼児、少年、青年、成人）の対象を指す。
【０１９５】
本明細書に使用されている「治療する」「治療すること」および「治療」という用語は、病気または疾患および／またはその付随する症状を緩和、軽減または抑制することを含むものとする。
【０１９６】
本明細書に使用されている「予防する」、「予防すること」および「予防」という用語は、病気または疾患および／またはその付随する症状の発症を遅らせるか妨げる方法、患者が病気または疾患に罹患するのを防止する方法、または患者が病気または疾患に罹患するリスクを減らす方法を指す。
【０１９７】
本明細書に使用されている「治療的有効量」（またはより簡単に「有効量」）という用語は、それが投与される患者において所望の治療効果または予防効果を達成するのに十分な活性薬剤すなわち有効成分（例えばＮＫ−３拮抗薬）の量を意味する。
【０１９８】
「投与」またはその変形形態（例えば「投与すること」）という用語は、活性薬剤すなわち有効成分（例えばＮＫ−３拮抗薬）を、単独または薬学的に許容される組成物の一部として、病気、症状または疾患が治療または予防される患者に与えることを意味する。
【０１９９】
「薬学的に許容される」とは、医薬組成物の成分が互いに適合可能であり、かつその患者に有害でないことを意味する。
【０２００】
本明細書に使用されている「拮抗薬」という用語は、競合的または非競合的に作動薬（例えば、内因性リガンド）と同じ部位で受容体に結合し、かつ受容体の活性型によって開始される細胞内応答を活性化させない化合物を意味する。従って、特異的受容体のための拮抗薬は、その特異的受容体に対する作動薬によって誘発される細胞内応答を阻害する。
【０２０１】
本明細書に使用されている「性ホルモン依存性疾患」という用語は、過剰で不適当または未制御の性ホルモン産生によって悪化されるか引き起こされる疾患を意味する。男性におけるそのような疾患の例としては、良性前立腺肥大（ＢＰＨ）、前立腺肥大、転移性前立腺癌、精巣癌、アンドロゲン依存性座瘡、男性型禿頭症および少年における思春期早発症が挙げられるが、これらに限定されない。女性におけるそのような疾患の例としては、子宮内膜症、異常な思春期、子宮線維症、子宮線維腫、ホルモン依存性癌（卵巣癌、乳癌）、アンドロゲン産生腫瘍（男性化卵巣もしくは副腎腫瘍）、アンドロゲン過剰症、多毛症、男性化、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、月経前不快気分障害（ＰＭＤＤ）、ＨＡＩＲ−ＡＮ症候群（アンドロゲン過剰症、インスリン抵抗性および黒色表皮腫）、卵巣の卵胞膜細胞増殖（卵巣間質における黄体化卵胞膜細胞の過形成を伴うＨＡＩＲ−ＡＮ）、高い卵巣内アンドロゲン濃度を有する他の兆候（例えば、卵胞成熟停止、閉鎖症、無排卵、月経困難症、機能不全性子宮出血、不妊症）、月経過多および腺筋症（子宮の筋肉内での異常な子宮内膜増殖）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２０２】
本明細書に使用されている「精神病性障害」という用語は、精神に影響を及ぼす病気群を意味する。これらの病気は、患者が明瞭に考え、的確な判断をし、感情的に応答し、効果的に意思疎通を図り、現実を理解し、かつ適切に行動する能力を変えてしまう。症状が深刻である場合、精神病性障害を有する患者は、現実と接触し続けることが難しくなり、多くの場合、日常生活の通常の要求を満たすことができなくなる。精神病性障害としては、統合失調症、統合失調症様障害、統合失調性感情障害、妄想性障害、短期精神病性障害、共有精神病性障害、一般的な病状による精神病性障害、物質誘発精神病性障害、またはそれら以外の未特定精神病性障害が挙げられるが、これらに限定されない（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，  Ｅｄ．  ４ｔｈ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，  Ｄ．Ｃ．  １９９４）。
【０２０３】
本明細書に使用されている「賦形剤」という用語は、その中に薬学的に活性な薬剤が製剤化され、かつ／または投与される溶媒または希釈剤として使用される担体または不活性媒体を意味する。賦形剤の非限定的な例としては、クリーム、ゲル、ローション、溶液およびリポソームが挙げられる。
【０２０４】
「式Ａの化合物のアミン窒素上にＮ−ｓｐ３保護基（ＰＧ）が得られる試薬」という表現は、第三級アミンとして、すなわちＮ−ｓｐ３混成形態で保護された窒素原子を保持しながら切断可能な保護基の置換を生じさせるあらゆるそのような試薬を意味する。具体的には、Ｎ−ベンジル、特に電子が豊富な置換Ｎ−ベンジル、特に１種以上の電子供与基、例えば、アルコール基、アルコキシ基（特にメトキシ）、アミノ基、アルキル基などで置換されたＮ−ベンジルは、上記「Ｎ−ｓｐ３保護基」の定義の想定される実施形態である。そのような試薬の例としては、ベンズアルデヒド、４−メトキシベンズアルデヒド、２，４−ジメトキシベンズアルデヒドおよび２，４，６−トリメトキシベンズアルデヒドが挙げられるが、これらに限定されない。Ｎ−ベンジルまたは電子が豊富な置換Ｎ−ベンジル保護基の例としては、Ｎ−ベンジル、Ｎ−４−メトキシベンジル、Ｎ−３，４−ジメトキシベンジル、Ｎ−３−メトキシベンジル、Ｎ−３，５−ジメトキシベンジル、Ｎ−２，４，６−トリメトキシベンジルが挙げられるが、これらに限定されない（Ｗｕｔｓ，  Ｐ．  Ｇ．  Ｍ．；  Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｔ．  Ｗ．  Ｉｎ  “Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｈａｐ．  ７，  ｐｐ．  ６９６−９２６、およびＫｏｃｉｅｎｓｋｉ，  Ｐ．  Ｊ．  Ｉｎ  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ“，  Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ：  Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｈａｐ．  ８，  ｐｐ．  ４８７−６４３を参照）。
【０２０５】
本発明は、以下の実施例を参照すればより理解されるであろう。これらの実施例は、本発明の具体的な実施形態を示すためのものであり、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。
【実施例】
【０２０６】
化学的実施例
報告されている温度は全て摂氏温度（℃）で表し、特に明記しない限り、全ての反応を室温（ＲＴ）で行った。
【０２０７】
全ての反応後に薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）分析（ＴＬＣプレート、シリカゲル６０Ｆ２５４、Ｍｅｒｃｋ社）を行い、それを使用して反応を監視し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィ条件を確立した。本発明で使用した全ての他のＴＬＣ現像主薬／可視化技術、実験手順または精製手順は、具体的詳細に記載していない場合、当業者に知られものと推測し、それらは、ｉ）  Ｇｏｒｄｏｎ，  Ａ．  Ｊ．；  Ｆｏｒｄ，  Ｒ．  Ａ．  “Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔ’ｓ  Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ  −  Ａ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｄａｔａ，  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓおよび参照文献”，  Ｗｉｌｅｙ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９７２、ｉｉ）  Ｖｏｇｅｌ’ｓ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｐｅａｒｓｏｎ  Ｐｒｅｎｔｉｃｅ  Ｈａｌｌ：  Ｌｏｎｄｏｎ，  １９８９などの標準的な参照マニュアルに記載されている。
【０２０８】
ＨＰＬＣ−ＭＳスペクトルは典型的に、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）を用いるＡｇｉｌｅｎｔ社製ＬＣＭＳで得た。Ａｇｉｌｅｎｔ社製機器は、オートサンプラー１２００、バイナリーポンプ１１００、紫外線多波長検出器１１００および６１００シングル四重極質量分析計を備える。使用したクロマトグラフィカラムは、Ｓｕｎｆｉｒｅ（３．５μｍ、Ｃ１８、寸法３．０×５０ｍｍ）であった。
【０２０９】
使用した溶離液は典型的に、溶液Ａ（０．１％のＴＦＡ水溶液）および溶液Ｂ（０．１％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液）の混合物であった。
【０２１０】
以下のように１．３ｍＬ／分の流速で勾配を加えた。勾配Ａ：５％の溶液Ｂの初期条件を０．２分間維持し、６分間で９５％の溶液Ｂまで直線的に増加させ、９５％を１．７５分間維持し、０．２５分間で初期条件に戻し、２．０分間維持する。勾配Ｂ：５％の溶液Ｂの初期条件を０．２分間維持し、２．０分間で９５％まで直線的に増加させ、９５％を１．７５分間維持し、０．２５分間で初期条件に戻し、２分間維持する。
【０２１１】
キラル純度の測定は、手動または自動（オートサンプラー１１００）注入機能を備えたＡｇｉｌｅｎｔ１１００（バイナリーポンプおよび紫外線多波長検出器）で行われるキラルＨＰＬＣを用いて行った。使用したカラムは、定組成モードのＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）またはＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＢ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）であった。溶離液の選択は、各分離の特性（ｓｐｅｃｉｆｉｃｓ）に基づいていた。使用したキラルＨＰＬＣ法に関するさらなる詳細を以下に示す。
【０２１２】
方法Ａ：カラムＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）、溶離液：ＥｔＯＡｃ＋０．１％のＤＥＡ、流速：１．０ｍＬ／分、ＵＶ検出：２５４ｎｍ、室温のカラム、溶離液は試料溶媒として使用した。
【０２１３】
方法Ａ’：カラムＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）、溶離液：ＥｔＯＡｃ＋０．１％のＤＥＡ、流速：１．５ｍＬ／分、ＵＶ検出：２５４ｎｍ、室温のカラム、溶離液は試料溶媒として使用した。
【０２１４】
方法Ｂ：カラムＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）、溶離液：ヘキサン／２−プロパノール／ジクロルメタン（３：１：１ｖ／ｖ）＋０．１％のＤＥＡ、流速：１．０ｍＬ／分、ＵＶ検出：２５４ｎｍ、室温のカラム、溶離液は試料溶媒として使用した。
【０２１５】
方法Ｂ’：カラムＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）、溶離液：ヘキサン／２−プロパノール／ジクロルメタン（３：１：１ｖ／ｖ）＋０．１％のＤＥＡ、流速：１．５ｍＬ／分、ＵＶ検出：２５４ｎｍ、室温のカラム、溶離液は試料溶媒として使用した。
【０２１６】
方法Ｃ：カラムＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＢ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）、溶離液：ヘキサン／エタノール（７：３ｖ／ｖ）＋０．１％のＤＥＡ、流速：１．０ｍＬ／分、ＵＶ検出：２５４ｎｍ、室温のカラム、溶離液は試料溶媒として使用した。
【０２１７】
方法Ｃ’：カラムＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）、溶離液：ヘキサン／エタノール（１：１ｖ／ｖ）＋０．１％のＤＥＡ、流速：１．０ｍＬ／分、ＵＶ検出：２５４ｎｍ、室温のカラム、溶離液は試料溶媒として使用した。
【０２１８】
分取ＨＰＬＣ精製は典型的に、Ｗａｔｅｒｓ社製ＦｒａｃｔｉｏｎＬｙｎｘ機器で行った。この機器は、フラクションコレクタ、２７６７サンプルマネージャ、ポンプ制御モジュールＩＩ、５１５ＨＰＬＣポンプ、２５２５バイナリーグラジエントモジュール、切換弁、２９９６フォトダイオードアレイ検出器およびＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ質量分析計で構成されている。使用したクロマトグラフィカラムは、用いる溶離液系の種類すなわち低ｐＨまたは高ｐＨ条件に応じて、Ｗａｔｅｒｓ社製Ｓｕｎｆｉｒｅ（５μｍ、Ｃ１８、１９×１００ｍｍ）またはＸＢｒｉｄｇｅ（５μｍ、Ｃ１８、１９×１００ｍｍ）であった。
【０２１９】
高ｐＨのＨＰＬＣ精製では、溶離液は典型的に、溶液Ａ（０．０４Ｍの重炭酸アンモニウム水溶液＋０．１％の濃ＮＨ４ＯＨ）と溶液Ｂ（ＭｅＣＮ）との混合物で構成されていた。勾配は、精製した各試料中の不純物プロファイルに応じて調整し、それにより、不純物と所望の化合物を十分に分離することができた。
【０２２０】
手動注入により、Ａｇｉｌｅｎｔ１２００機器（分取ポンプ１２００および紫外線多波長検出器１２００）でキラル分取ＨＰＬＣ精製を行った。使用したキラルカラムは、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、２０×２５０ｍｍ）、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＡ（５μｍ、１０×２５０ｍｍ）またはＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＩＢ（５μｍ、１０×２５０ｍｍ）であった。全てのキラルＨＰＬＣ法を定組成モードで用いた。溶離液混合物は、最良のキラル分離が得られた分析キラルＨＰＬＣ実験（上記を参照）に基づいて選択した。
【０２２１】
Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＲＸ  ３００機器で１Ｈ（３００ＭＨｚ）および13C NMR（７５ＭＨｚ）スペクトルを記録した。化学シフトは１００万分の１（ｐｐｍ、単位：δ）で表す。結合定数はヘルツ（Ｈｚ）で表す。ＮＭＲスペクトルで観察された多重度の省略形は、以下のとおりである：ｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ（幅広い）。
【０２２２】
溶媒、試薬および出発物質を購入し、特に定めがない限り、市販の販売業者から受け取ったものをそのまま使用した。
【０２２３】
以下の略語を使用する。
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
Ｃｐｄ：化合物
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＥＡ：ジエチルアミン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＢ：２，４−ジメトキシベンジル
ＤＭＢ−ＣＨＯ：２，４−ジメトキシベンズアルデヒド
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ｅｅ：鏡像体過剰率
ｅｑ：当量
Ｅｔ：エチル
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
ｇ：グラム
ｈ：時間
ＩＰＡ：２−プロパノール
Ｌ：リットル
ＭｅＯＨ：メタノール
μＬ：マイクロリットル
ｍｇ：ミリグラム
ｍＬ：ミリリットル
ｍｍｏｌ：ミリモル
ｍｉｎ：分
ＮＭＭ：Ｎ−メチルモルホリン
Ｐ：ＨＰＬＣ−ＭＳで測定した２５４ｎｍまたは２１５ｎｍでのＵＶ純度
ＰＭＢ：４−メトキシベンジル
ＰＭＢ−ＣＨＯ：４−メトキシベンズアルデヒド
ＲＴ：室温
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィ
ＴＭＳ：トリメチルシリル
Ｙ：収率
【０２２４】
以下に記載する中間体および化合物は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｕｌｔｒａバージョン１２．０（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ社、米国マサチューセッツ州ケンブリッジ）を用いて命名した。
【０２２５】
Ｉ．ラセミ合成
Ｉ．１．ラセミ合成のための一般的な合成スキーム
ラセミ生成物合成を表すスキーム１に記載されている方法論を用いて、本発明の化合物の大部分を合成した。キラル分離のために、ラセミ生成物をキラルＨＰＬＣに供した。
【化５５】
0006023814.tif 000086
スキーム１：本発明の化合物の調製のための一般的なラセミ合成スキーム
【０２２６】
一般的な合成スキームは、以下の工程を含む。
【０２２７】
工程１：ケトピペラジン（１．１）を保護し、メーヤワイン試薬（Ｅｔ３ＯＢＦ４）を用いてイミノエーテル（１）に変換した。
【０２２８】
工程２：その後、エステル（２．２）をアシルヒドラジド（２）に変換した。エステル（２．２）を酸（２．１）のエステル化によって得てもよい。
【０２２９】
工程３：アシルヒドラジド（２）とイミノエーテル（１）との脱水環化により、保護されたトリアゾロピペラジン（３．１）を得た。その後、３．１を酸分解脱保護に供して３を得た。
【０２３０】
工程４：このようにして得られたトリアゾロピペラジン中間体（３）を、適当な酸塩化物（４．１）との反応によりアシル化して、一般式４によって表わされる最終的なラセミ標的構造を得た。その後、分取キラルＨＰＬＣを用いた精製により、最終的なキラル化合物を得た。
【０２３１】
Ｉ．２．工程１：保護およびイミノエーテル（１）への変換
方法Ａ：Ｂｏｃ保護およびイミノエーテル（１）への変換
方法Ａは、Ｂｏｃ保護によるイミノエーテル中間体（１）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する。
【化５６】
0006023814.tif 000087
スキーム２：Ｂｏｃ基による保護およびイミノエーテル（１）への変換
【０２３２】
方法Ａを、Ｒ１がそれぞれＨおよびＭｅである中間体（１ａ）および中間体（１ｂ）の合成によって例示する。
【０２３３】
３−エトキシ−５，６−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１ａ）の合成
【化５７】
0006023814.tif 000088
スキーム３：３−エトキシ−５，６−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１ａ）の合成
【０２３４】
予め調製したテトラフルオロホウ酸トリエチルオキソニウム（２．３ｇ、０．０１２ｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（２０ｍＬ）溶液に、１．２ａ（２ｇ、０．０１ｍｏｌ）を０℃で添加した。添加が完了した後、氷浴を取り外し、反応混合物を放置して室温まで温め、さらなる時間にわたって撹拌した（反応の進行をＬＣＭＳで監視）。反応が完了するとすぐに、飽和ＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ）溶液を反応混合物にゆっくりと添加し、それを５分間撹拌した。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（２００ｍＬ）でさらに抽出した。その後、１つにまとめた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、さらに真空乾燥して、表題の中間体（１ａ）を粘性の黄色の油として得た。収率：２．０３ｇ（８８％）。1H NMR (CDCl3): δ: 4.1 (q, J = 7.1, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.5 (m, 1H), 3.35 (t, J = 5.1, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.3 (t, J = 7.1, 3H).
【０２３５】
３−エトキシ−２−メチル−５，６−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１ｂ）の合成
【化５８】
0006023814.tif 000089
スキーム４：３−エトキシ−２−メチル−５，６−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１ｂ）の合成
【０２３６】
工程１：２−メチル−３−オキソピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．２ｂ）の合成
ＮＥｔ３（２０ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）を、３−メチルピペラジン−２−オン（１．１ｂ）（１５ｇ、１３１ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（２００ｍＬ）溶液に、窒素中、室温で添加した。１０分間撹拌した後、反応混合物を０℃まで冷却し、Ｂｏｃ２Ｏ（３３ｇ、１５１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、その後すぐに、０．５ＭのＨＣｌ（１５０ｍＬ）、塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、一定重量になるまで濃縮して、２．２を黄色の油として得た（２０．２ｇ、７２％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ２．０分，  （Ｍ＋Ｈ−ｔＢｕ）＋：  １５９
【０２３７】
工程２：３−エトキシ−２−メチル−５，６−ジヒドロピラジン−１（２Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１ｂ）の合成
１．２ｂ（２４ｇ、８７ｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（２５０ｍＬ）溶液に、予め調製したテトラフルオロホウ酸トリエチルオキソニウム（１９．９２ｇ、１０５ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液を窒素雰囲気中、０℃で添加した。反応混合物を放置して室温まで温め、３０分間撹拌し、その後すぐに、飽和ＮａＨＣＯ３（４００ｍＬ）溶液を添加した。次いで、抽出した水層をＤＣＭ（２００ｍｌ）で洗浄し、その後、１つにまとめた有機抽出物を塩水（３００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、さらに真空乾燥して、表題の中間体（１ｂ）を無色の油として得た（２０．７ｇ、９８％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９８  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ＋Ｈ２Ｏ）＋：  ２６１；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ４．３０  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．１１−４．０１  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８４  （ｂｒ，  １Ｈ），  ３．４８−３．４０  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９０  （ｂｒ，  １Ｈ），  １．３２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９，  ３Ｈ），  １．２６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１，  ３Ｈ）．
【０２３８】
方法Ｂ：ＤＭＢなどのベンジル誘導体保護基を用いた保護およびイミノエーテル（１）への変換
方法Ｂは、ＤＭＢなどのベンジル誘導体保護基を用いたイミノエーテル中間体（１）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する：
【化５９】
0006023814.tif 000090
スキーム５：ＤＭＢ基による保護およびイミノエーテル（１）への変換
【０２３９】
方法Ｂを、Ｒ１がＭｅであり、保護基がそれぞれＤＭＢおよびＰＭＢである中間体（１ｃ）および中間体（１ｄ）の合成により例示する。
【０２４０】
１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジン（１ｃ）の合成
【化６０】
0006023814.tif 000091
スキーム６：１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジン（１ｃ）の合成
【０２４１】
工程１：４−（２，４−ジメトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オン（１．２ｃ）の合成
丸底フラスコの中に、３−メチルピペラジン−２−オン（１０ｇ、８８ｍｍｏｌ）、２，４−ジメトキシベンズアルデヒド（１６ｇ、９６ｍｍｏｌ）、酢酸（６．５ｍｌ、１１４ｍｍｏｌ）、およびの市販の無水アセトニトリル（７５０ｍＬ）に入れたトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２２．３ｇ、１０５ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気中、室温で連続的に導入した。反応系を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、泡立ちが観察されなくなるまで、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１００ｍＬ）により０℃で慎重に失活させた。水層および有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（３×３００ｍＬ）で抽出し、１つにまとめた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、表題化合物を黄色の油として得た。次いで、粗製化合物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９８／２〜９５／５）で精製して、所望の生成物（１．２ｃ）を淡黄色の油として得た（２０．６ｇ、７８ｍｍｏｌ、８９％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９７  ％，  保持時間  ＝  １．６分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２６５．
【０２４２】
ＰＭＢおよびＴＭＢ保護の場合、２，４−ジメトキシベンズアルデヒドの代わりに４−メトキシベンズアルデヒドまたは２，４，６−トリメトキシベンズアルデヒドを使用して、４−（４−メトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オンまたは４−（２，４，６−トリメトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オンを得た。
【０２４３】
工程２：１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジン（１ｃ）
乾燥器で乾燥した（１１５℃）炭酸ナトリウム（１８．６ｇ、９８ｍｍｏｌ、２．２５当量）を５００ｍＬの丸底フラスコに入れた。丸底フラスコにアルゴンを充填した後、ゴム隔膜で蓋をした。４−（２，４−ジメトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オン（１．２ｃ）（２０．６ｇ、７８ｍｍｏｌ、１当量）の無水ＤＣＭ（２５０ｍＬ）溶液、次いでテトラフルオロホウ酸トリエチルオキソニウム（１８．６ｇ、９８ｍｍｏｌ、１．２５当量）を一度で添加した。その後、反応混合物を室温でさらに１時間撹拌し、その後すぐに、反応混合物を水（２５０ｍＬ）で希釈した。水層をＤＣＭ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を１つにまとめ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。次いで、粗製化合物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ）で精製して、所望の生成物（１ｃ）を橙黄色の油として得た。収率：１３．２ｇ、５８％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９３  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ＋Ｈ２Ｏ）＋：  ３１１；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．２３  （ｄ，  Ｊ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４８  （ｄ，  Ｊ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．４４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．９１  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １４．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．４６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １４．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．４４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．７９  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３２  （ｍ，  １Ｈ），  １．３５  （ｄ，  Ｊ＝  ６．８  Ｈｚ，  ３Ｈ），  １．２４  （ｔ，  Ｊ＝  ６．０  Ｈｚ，  ３Ｈ）．
【０２４４】
工程２を４−（４−メトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オンから開始することにより、１−（４−メトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジン（１ｄ）を単離することができた。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９５  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ＋Ｈ２Ｏ）＋：  ２８１．
【０２４５】
Ｉ．３．工程２：アシルヒドラジド（２）の形成
方法Ｃ：アシルヒドラジド（２）
方法Ｃは、アシルヒドラジド（２）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する：
【化６１】
0006023814.tif 000092
スキーム７：アシルヒドラジド（２）の形成
【０２４６】
方法Ｃを、中間体（２ａ）、中間体（２ｋ）および中間体（２ｒ）の合成によって例示する。
【０２４７】
２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（２ａ）の合成
【化６２】
0006023814.tif 000093
スキーム８：２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（２ａ）の合成
【０２４８】
冷却器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコの中で、２−メチルチアゾール−４−カルボン酸エチル（２．２ａ）（１０ｇ、５８．４ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（２５ｍＬ）に溶解し、ヒドラジン一水和物（１７．０ｍＬ、３５４．４ｍｍｏｌ、６当量）により室温で処理した。得られた黄色の溶液を還流温度で１４時間加熱した。反応混合物を室温になるまで放置した後、この溶液を減圧濃縮して、１３．４ｇの褐色の油を得た。３×２００ｍＬの市販の無水ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（１：１）混合物と同時蒸発を行って、残留する水を除去した。次いで、残留物を高温のＥｔＯＨ（６０ｍＬ）から再結晶化した。得られた結晶を濾過し、冷却した（０℃）ＥｔＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。橙黄色の固体を１時間真空乾燥して、２ａを得た。収率：５．８５ｇ、６４％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ０．５分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５８；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．３２  （ｂｒ，  １Ｈ），  ７．９６  （ｓ，  １Ｈ），  ４．０７  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ２．７０  （ｓ，  ３Ｈ）．
【０２４９】
一実施形態では、１．２〜２０当量のヒドラジン水和物を使用して、室温〜還流温度の範囲の温度を用いて、この反応を行った。
【０２５０】
一実施形態では、ヒドラジド（２）を再結晶化し、かつ／または沈殿させた。
【０２５１】
一般的な方法Ｃを用いて、アドホックなカルボン酸、メチルまたはエチルエステルから以下の中間体も調製した。
【０２５２】
中間体２ｂ：２−トリフルオロメチルチアゾール−４−カルボヒドラジド。従来のエステル化法（ＴＭＳ−Ｃｌのメタノール溶液など）を用いて、市販されている酸からメチルエステル前駆体を前もって合成した。
【０２５３】
中間体２ｃ：２−エチルチアゾール−４−カルボヒドラジド。
【０２５４】
中間体２ｄ：２−ビニルチアゾール−４−カルボヒドラジド。２−（４−（ヒドラジンカルボニル）チアゾール−２−イル）エチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルをビニル部分の前駆体として使用し、市販されている２−（２−アミノエチル）チアゾール−４−カルボン酸エチル二塩酸塩を前もってＢｏｃ保護し、次いで、従来の方法を用いてエステル化した。
【０２５５】
中間体２ｅ：２−メチルオキサゾール−４−カルボヒドラジド。
【０２５６】
中間体２ｆ：２−イソプロピルオキサゾール−４−カルボヒドラジド。国際公開第２００９／７０４８５Ａ１号に従って、イソブチルアミドと３−ブロモ−２−オキソプロパン酸エチルとの縮合により、エチルエステル前駆体を前もって合成した。
【０２５７】
中間体２ｇ：２−シクロプロピルオキサゾール−４−カルボヒドラジド。エチルエステルを上記のように調製した。
【０２５８】
中間体２ｈ：２，５−ジメチルチアゾール−４−カルボヒドラジド。従来のエステル化法（ＴＭＳ−Ｃｌのメタノール溶液など）を用いて、市販されている酸からメチルエステル前駆体を前もって合成した。
【０２５９】
中間体２ｉ：（４−（ヒドラジンカルボニル）チアゾール−２−イル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル。従来の方法を用いて、２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）チアゾール−４−カルボン酸エチル前駆体を前もってＢｏｃ保護した。
【０２６０】
中間体２ｊ：２−イソプロピルチアゾール−４−カルボヒドラジド。
【０２６１】
４−メチルチアゾール−２−カルボヒドラジド（２ｋ）の合成
【化６３】
0006023814.tif 000094
スキーム９：４−メチルチアゾール−２−カルボヒドラジド（２ｋ）の合成
【０２６２】
冷却器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコの中で、４−メチルチアゾール−２−カルボン酸エステル（２．２ｋ）（５００ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、ヒドラジン一水和物（２１６μＬ、４．４６ｍｍｏｌ、１．５当量）により室温で処理した。得られた溶液を還流温度で１８時間加熱した。反応混合物を室温になるまで放置した後、この溶液を減圧濃縮し、得られた粗製物をシリカパッド（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／０〜９７／３）で精製して、２６６ｍｇの２ｋを白色の固体として得た（２６６ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ、５７％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９０  ％，  保持時間  ＝  ０．７分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５８．
【０２６３】
一般的な方法Ｃを用いて、アドホックなカルボン酸、メチルまたはエチルエステルから以下の中間体も調製した。
【０２６４】
中間体２ｌ：エステル（５．３）から調製した４，５−ジメチルチアゾール−２−カルボヒドラジド。エステル（５．３）は、市販のチアゾール（５．１）から２つの工程で調製した（Ｃａｓｔｅｌｌｓ，  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，  １９８５，  ２６，  ５４５７−５４５８出典の手順)。
【化６４】
0006023814.tif 000095
スキーム１０：４，５−ジメチルチアゾール−２−カルボン酸メチル（２．２ｌ）の合成
【０２６５】
工程１：４，５−ジメチルチアゾール−２−カルボン酸（２．１ｌ）の合成
２．０ｌ（３．０ｇ、２５．７ｍｍｏｌ、１当量）の乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液を、真空ポンプを用いて脱気し、窒素を充填した（３回繰り返した）。次いで、この溶液を−７８℃まで冷却し、ｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍのヘキサン溶液、１１．３ｍＬ、２８．３ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。この溶液を−７８℃で３０分間撹拌し、次いで、この溶液をＣＯ２雰囲気中に置いた（この溶液の中に直接通気）。−７８℃で１時間撹拌した後、この溶液を放置して室温まで温めた。１ＮのＨＣｌ（２５ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）を添加した。両方の相を分離した後、水相をＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機相を１つにまとめ、水で洗浄し、ＭｇｓＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、酸（２．１ｌ）（３．０ｇ、６．３０ｍｍｏｌ）を得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０２６６】
工程２：４，５−ジメチルチアゾール−２−カルボン酸メチル（２．２ｌ）の合成
酸（２．１ｌ）（３．０ｇ、６．３０ｍｍｏｌ、１当量）の市販の乾燥ＭｅＯＨ（１２ｍＬ）溶液に、クロロトリメチルシラン（４．０ｍＬ、３１．５ｍｍｏｌ、５当量）を室温で滴下した。得られた溶液を６０℃で１４時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）で失活させた。水相をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を１つにまとめ、塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗製物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィ（溶離液：石油エーテル／ＥｔＯＡｃ：１００／０〜８０／２０）で精製して、２．２ｌを得た（１．３２ｇ、７．７ｍｍｏｌ、５５％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ３３  ％，  保持時間  ＝  ２．１分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １７２．
【０２６７】
中間体２ｍ：一般的な方法Ｃを用いて、エステル（２．２ｍ）から調製した３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−カルボヒドラジド。エステル（２．２ｍ）は、アセトイミドアミド（２．０ｍ）から１つの工程で調製した（出典：Ｓｔｒｅｅｔ  Ｌｅｓｌｉｅ  Ｊ．  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００４，  ４７（１４），  ３６４２−３６５７）。
【化６５】
0006023814.tif 000096
スキーム１１：３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−カルボン酸エチル（２．２ｍ）の合成
【０２６８】
（Ｅ）−Ｎ’−ヒドロキシアセトイミドアミド（２．０ｍ）（１．０ｇ、１３．５０ｍｍｏｌ、１当量）およびピリジン（４．３５ｍＬ、５４．０ｍｍｏｌ、４当量）の乾燥ＤＣＭ（４０ｍＬ）溶液に、塩化エチルオキサリル（２．４ｇ、１８．０ｍｍｏｌ、１．３当量）を室温で添加した。この溶液を還流下で１４時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（３０ｍＬ）で失活させた。水相をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機相を１つにまとめ、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、２．２ｍを黄色の油として得（１．３２ｇ、８．４５ｍｍｏｌ、６３％）、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９２  ％，  保持時間  ＝  ２．０分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５７．
【０２６９】
中間体２ｎ：一般的な方法Ｃを用いてエステル（２．２ｍ）から調製した３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−カルボヒドラジド。エステル（２．２ｍ）は、アセトアミド（２．０ｎ）、試薬（２．０ｎ’）および試薬（２．０ｎ’’）から１つの工程で調製した（出典：米国特許第５５８３０９２Ａ１号）。
【化６６】
0006023814.tif 000097
スキーム１２：３−メチル−１，２，４−チアジアゾール−５−カルボン酸メチル（２．２ｎ）の合成
【０２７０】
２．０ｎ（５００ｍｇ、８．４６ｍｍｏｌ、１当量）および２．０ｎ’（８２０μＬ、９．３１ｍｍｏｌ、１．２当量）の乾燥トルエン（２３ｍＬ）溶液を、還流下で２時間撹拌した。次いで、溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物をトルエン（１１．３ｍＬ）に再度溶解した。２．０ｎ’’（２．０ｍＬ、２５．４ｍｍｏｌ、３当量）をこの溶液に添加し、得られた混合物を還流下で４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた粗製物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィ（溶離液：ＤＣＭ１００％）で精製して、所望のエステル（２．２ｎ）を褐色の油として得た（１５０ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ、１１％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９７  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５９．
【０２７１】
中間体２ｏ：４−メチルオキサゾール−２−カルボヒドラジド。一般的な方法Ｃを用いてエステル（２．２ｏ）から調製。エステル（２．２ｏ）は、４−メチルオキサゾール（２．０ｏ）から１つの工程で調製した。
【化６７】
0006023814.tif 000098
スキーム１３：４−メチルオキサゾール−２−カルボン酸メチル（２．２ｏ）の合成
【０２７２】
２．０ｏ（１．０ｇ、１２．０ｍｍｏｌ、１当量）の市販の乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（２．５Ｍのヘキサン溶液、５．３０ｍＬ、１３．２４ｍｍｏｌ、１．１当量）をアルゴン雰囲気中、−７８℃で添加した。−７８℃で３０分間撹拌した後、クロロギ酸エチル（１．１６ｍＬ、１２．１３ｍｍｏｌ、１．０当量）を滴下した。３０分間撹拌した後、ドライアイス浴を取り外し、得られた溶液を放置して室温まで温め、１４時間撹拌した。１ＮのＨＣｌ（１５ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）を添加した。両方の相を分離した後、水相をＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機相を１つにまとめ、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇｓＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。得られた粗製物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィ（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／０〜９９．５／０．５）で精製して、エステル（２．２ｏ）（２４０ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ、１３％）を無色の油として得た。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９６  ％，  保持時間  ＝  ２．０分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５６．
【０２７３】
中間体２ｐ：一般的な方法Ｃを用いて、エステル（２．２ｐ）から調製した３−イソプロピル−１，２，４−チアジアゾール−５−カルボヒドラジド。エステル（２．２ｐ）は、以下に示すようにイソブチルアミド（２．０ｐ）、試薬（２．０ｐ’）および試薬（２．０ｐ’’）から１つの工程で調製した。
【化６８】
0006023814.tif 000099
スキーム１４：３−イソプロピル−１，２，４−チアジアゾール−５−カルボン酸メチル（２．２ｐ）の合成
【０２７４】
２．０ｐ（５００ｍｇ、５．７４ｍｍｏｌ、１当量）および２．０ｐ’（５５５μＬ、６．３１ｍｍｏｌ、１．２当量）の乾燥トルエン（１５ｍＬ）溶液を、還流下で２時間撹拌した。次いで、溶媒を減圧下で蒸発させ、残留物をトルエン（７．６ｍＬ）に再度溶解した。２．０ｐ’’（９００μＬ、１１．３４ｍｍｏｌ、２当量）をこの溶液に添加し、得られた混合物を還流下で４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた粗製物（２．２ｐ）（５８７ｍｇ、３．１５ｍｍｏｌ、５５％）を、さらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ４５  ％，  保持時間  ＝  ２．３分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １８７．
【０２７５】
中間体２ｑ：一般的な方法Ｃを用いて、市販のエチルエステルから１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボヒドラジドを調製した。
【０２７６】
６−メチルピコリノヒドラジド（２ｒ）の合成
【化６９】
0006023814.tif 000100
スキーム１５：６−メチルピコリノヒドラジド（２ｒ）の合成
【０２７７】
工程１：６−メチルピコリン酸メチル（２．２ｒ）の合成
６−メチルピコリン酸（２．１ｒ）（３ｇ、２１．８８ｍｍｏｌ）の無水ＭｅＯＨ（７０ｍＬ）溶液に、ＴＭＳ−Ｃｌ（１３．８８ｍＬ、１０９ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気中、室温で添加した。反応混合物を６０℃で一晩撹拌し続け、その後すぐに、混合物を減圧濃縮して、５．５１ｇの黄色の油を得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９５  ％，  保持時間  ＝  １．０２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５２．
【０２７８】
工程２：６−メチルピコリノヒドラジド（２ｒ）の合成
粗製の６−メチルピコリン酸メチル（２．２ｒ）（５．５１ｇ、２１．８８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２２ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（１０．６１ｍＬ、２１９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を９０分間還流加熱した。反応混合物を放置して室温にした後、この溶液を減圧濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィ（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／０〜９６／４）で精製して、所望の生成物（２ｒ）を白色の固体として得た（２．３４ｇ、１５．４８ｍｍｏｌ、７１％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ０．５４分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５２．
【０２７９】
一実施形態では、２．５〜２０当量のヒドラジン水和物を使用して、室温〜還流温度の範囲の温度を用いて、この反応を行った。
【０２８０】
一実施形態では，ヒドラジド（２）を再結晶化し、かつ／または沈殿させた。一般的な方法Ｃを用いて、アドホックなカルボン酸またはカルボン酸エチルエステルから、以下の中間体：
中間体２ｓ：６−ヒドロキシピコリノヒドラジド
中間体２ｔ：６−ブロモピコリノヒドラジド
も調製した。
【０２８１】
Ｉ．４．工程３：トリアゾロピペラジン（３）に導く脱水環化
方法Ｄ：脱水環化および酸分解−Ｂｏｃ保護
方法Ｄは、トリアゾロピペラジン（３）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する：
【化７０】
0006023814.tif 000101
スキーム１６：トリアゾロピペラジン（３）に導く脱水環化
【０２８２】
方法Ｄを、保護基がＢｏｃである中間体（３ａ）、中間体（３ｆ）および中間体（３ｇ）の合成によって例示する。
【０２８３】
２−メチル−４−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩（３ａ）の合成
【化７１】
0006023814.tif 000102
スキーム１７：２−メチル−４−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩（３ａ）の合成
【０２８４】
工程１：８−メチル−３−（２−メチルチアゾール−４−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．１ａ）の合成
冷却器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコの中で、イミノエーテル（１ｂ）（１．０８９ｇ、４．７７ｍｍｏｌ、１当量）を市販の無水ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）に溶解し、ここに、２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（２ａ）（７５０ｍｇ、４．７７ｍｍｏｌ、１当量）を一度で添加した。得られた溶液を還流下で一晩撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、粗製化合物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９９／１〜９８／２）で精製して、所望の生成物（３．１ａ）を白色の固体として得た（１．０７ｇ、３．３３ｍｍｏｌ、７０％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ２．１分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３２１．
【０２８５】
工程２：２−メチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩（３ａ）の合成
４ＭのＨＣｌの１，４−ジオキサン（８．３２ｍＬ、３３．３ｍｍｏｌ）溶液を、３．１ａ（１．０７ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）の市販のイソプロパノール（２０ｍＬ）溶液に一度で添加した。反応混合物を６０℃で撹拌した。１．５時間後（ＬＣ−ＭＳにより完全な変換を確認）、反応混合物を放置して室温まで冷却し、次いで、氷浴でさらに０℃まで冷却した。その後すぐに、１０ｍＬのＥｔ２Ｏを添加した。１５分間撹拌した後、沈殿物を濾過し、真空乾燥して、３ａを白色の固体として得た。収率：７３６ｍｇ（８６％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９７  ％，  保持時間  ＝  ０．５分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２２２．
【０２８６】
一般的な方法Ｄを用いて、アドホックな試薬および中間体から以下の中間体も調製した。
【０２８７】
中間体３ｂ：中間体（１ａ）および中間体（２ｂ）から調製した４−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−（トリフルオロメチル）チアゾール塩酸塩。
【０２８８】
中間体３ｃ：４−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−ビニルチアゾール。中間体（１ａ）および中間体（２ｄ）から調製し、次いで、得られたＢｏｃアミノエチル誘導体（３．１ｃ）を酸性条件（２当量のＨＣｌのジオキサン溶液のみを用いる上記工程２と同様）で脱保護した後、（室温で１０当量のＮａＨおよびＭｅＩを用いて）ジメチルアミンを除去し、次いで、得られたビニル誘導体３．１ｃを上記工程２に供して３ｃを得た。
【０２８９】
中間体３ｄ：中間体（１ａ）および中間体（２ｆ）から調製した４−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−イソプロピルオキサゾール塩酸塩。
【０２９０】
中間体３ｅ：中間体（１ａ）および中間体（２ｊ）から調製した２−イソプロピル−４−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩。
【０２９１】
４−メチル−２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｆ）の合成
【化７２】
0006023814.tif 000103
スキーム１８：４−メチル−２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｆ）の合成
【０２９２】
工程１：３−（４−メチルチアゾール−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．１ｆ）の合成
イミノエーテル（１ａ）（１４８ｍｇ、０．６４９ｍｍｏｌ、１当量）を、無水ＥｔＯＨ（３ｍＬ）に室温で溶解し、ここに、２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（２ｋ）（１０２ｍｇ、０．６４９ｍｍｏｌ、１当量）を添加した。得られた溶液を還流下で一晩撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、粗製化合物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９９／１〜９８／２）で精製して、所望の生成物（３．１ｆ）を黄色の固体として得た（１７４ｍｇ、８３％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９３  ％，  保持時間  ＝  ２．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３２２．
【０２９３】
工程２：２−メチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩（３ｆ）の合成
４ＭのＨＣｌのジオキサン（２．７１ｍＬ、１０．８３ｍｍｏｌ）溶液を、Ｂｏｃ−トリアゾロピペラジン（３．１ｆ）（１．０７ｇ、３．３３ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（３ｍＬ）溶液に室温で添加した。反応混合物を６０℃で撹拌した。１．５時間後（ＬＣ−ＭＳにより完全な変換を確認）、反応混合物を放置して室温まで冷却し、次いで、氷浴でさらに０℃まで冷却した。その後すぐに、５ｍＬのＥｔ２Ｏを添加した。３０分間撹拌した後、沈殿物を濾別し、真空乾燥して、３ｆを白色の固体として得た（１３２ｍｇ、９５％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９７  ％，  保持時間  ＝  ０．９分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２２２．
【０２９４】
８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン（３ｇ）の合成
【化７３】
0006023814.tif 000104
スキーム１９：８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン（３ｇ）の合成
【０２９５】
工程１：８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．１ｇ）の合成
イミノエーテル１ｂ（４６８ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ、１当量）を、無水ＥｔＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、ここに、カルボヒドラジド（２ｒ）（２７０ｍｇ、１．７９ｍｍｏｌ、１当量）を添加した。得られた混合物を油浴中、１３５℃で６３時間撹拌した。反応混合物を放置して室温にし、その後すぐに、揮発性物質を減圧下で除去した。次いで、粗製化合物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９９／１〜９８／２）で精製して、所望の生成物（３．１ｇ）を黄色の油として得た（３８０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、６５％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９５  ％，  保持時間  ＝  ２．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３３０．
【０２９６】
工程２：８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン（３ｇ）二塩酸塩の合成
４ＭのＨＣｌのジオキサン（５．７７ｍＬ、２３．０７ｍｍｏｌ）溶液を、３．１ｇ（３８０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（１０ｍＬ）溶液に添加した。反応混合物を６０℃で１時間撹拌した。反応混合物を放置して室温にし、次いで、０℃までさらに冷却した。最終的に得られた沈殿物を濾過し、真空乾燥して、３ｇを黄色の固体として得た（３６７ｍｇ、定量的）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９２  ％，  保持時間  ＝  ０．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２３０．
【０２９７】
一般的な方法Ｄを用いて、アドホックな試薬および中間体から、以下の中間体： 
中間体３ｈ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｓ）から調製した６−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）ピリジン−２−オール塩酸塩
中間体３ｉ：中間体（１ｂ）および中間体（２ｔ）から調製した３−（６−ブロモピリジン−２−イル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン二塩酸塩
も調製した。
【０２９８】
方法Ｅ：脱水環化および酸分解−ＤＭＢ保護
方法Ｅは、トリアゾロピペラジン（３）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する：
【化７４】
0006023814.tif 000105
スキーム２０：トリアゾロピペラジン（３）に導く脱水環化
【０２９９】
方法Ｅを、保護基がＤＭＢである中間体（３ｊ）および中間体（３ｑ）の合成によって例示する。
【０３００】
２−エチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｊ）の合成
【化７５】
0006023814.tif 000106
スキーム２１：２−エチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｊ）の合成
【０３０１】
工程１：４−（７−（２，４−ジメトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−エチルチアゾール（３．１ｊ）の合成
冷却器を備えた１０ｍＬの丸底フラスコの中で、イミノエーテル１ｃ（７９０ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）に溶解し、ここに、２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（２ｃ）（４６２ｍｇ、２．７０ｍｍｏｌ、１当量）を一度で添加した。得られた溶液を１３５℃で一晩撹拌した。その後、反応混合物を室温にし、揮発性物質を減圧下で除去した。次いで、粗製化合物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９９／１〜９８／２）で精製して、所望の生成物（３．１ｊ）を黄色の固体として得た（８３７ｍｇ、２．１０ｍｍｏｌ、７８％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９７  ％，  保持時間  ＝  １．９分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４００．
【０３０２】
工程２：２−エチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｊ）の合成
１０ｍｌのＤＣＭを含む丸底フラスコの中に、４−（７−（２，４−ジメトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−エチルチアゾール（３．１ｊ）（０．８３７ｇ、２．１０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、ＴＦＡ（１０．４８ｍＬ、１４１ｍｍｏｌ）を反応混合物に室温で添加した。３０分間撹拌した後、混合物を濃縮した。次いで、約２５ｍＬのＤＣＭをこのようにして得られた残留物に添加し、飽和ＮａＨＣＯ３（１５ｍＬ）で洗浄した。水層を２５ｍＬのＤＣＭで２回抽出し、有機層を２５ｍＬの塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、粗製の３ｅを桃色の油として得た（５００ｍｇ、９６％）。粗製物（３ｊ）をさらに精製することなく次の工程で直接使用した。
【０３０３】
一実施形態では、同様に使用される他の後処理では、上で得られた乾燥した残留物を、撹拌しながら４ＭのＨＣｌ／ジオキサン（２０当量）により室温で処理する必要があった。５分後、Ｅｔ２Ｏを添加して沈殿を促進した。この沈殿物を真空中で濾別し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、高真空中で乾燥して、３ｊを得た。
【０３０４】
一般的な方法Ｅを用いて、アドホックな試薬および中間体から以下の中間体も調製した。
【０３０５】
中間体３ｋ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｄ）から調製した４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−ビニルチアゾール。縮合後に単離したＢｏｃアミノエチル誘導体（３．１ｋ）を最初にＢｏｃ脱保護した（８当量のＨＣｌ／ジオキサン）。次いで、（１０当量のＮａＨおよびＭｅＩを室温で用いて）ジメチルアミンを除去した後、得られたビニル部分を、上記工程２と同様にＤＭＢ脱保護して３ｋを得た。
【０３０６】
中間体３ｌ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｅ）から調製した２−メチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）オキサゾール。
【０３０７】
中間体３ｍ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｆ）から調製した２−イソプロピル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）オキサゾール。
【０３０８】
中間体３ｎ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｇ）から調製した２−シクロプロピル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）オキサゾール。
【０３０９】
中間体３ｏ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｈ）から調製した２，５−ジメチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール。
【０３１０】
中間体３ｐ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｇ）から調製した４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール−２−アミン。
【０３１１】
４，５−ジメチル−２−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩（３ｑ）の合成
【化７６】
0006023814.tif 000107
スキーム２２：４，５−ジメチル−２−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール塩酸塩（３ｑ）の合成
【０３１２】
工程１：２−（７−（２，４−ジメトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−４，５−ジメチルチアゾール（３．１ｑ）の合成
イミノエーテル（１ｄ）（７６８ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、ここに、４，５−ジメチルチアゾール−２−カルボヒドラジド（２ｌ）（４５０ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ、１当量）を添加し、得られた反応混合物を４８時間還流させた。次いで、反応混合物を室温にし、揮発性物質を減圧下で除去し、その後すぐに、単離された粗製物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／０〜９８／２）で精製して、所望の生成物（３．１ｑ）を得た（７８６ｍｇ、１．９３ｍｍｏｌ、７４％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ６５  ％，  保持時間  ＝  １．９分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４００．
【０３１３】
工程２：４，５−ジメチル−２−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｃ）の合成
３．１ｑ（０．７８６ｇ、１．９７ｍｍｏｌ）の無水ＤＣＭ（６．６ｍＬ）溶液に、ＴＦＡ（９．１ｍＬ、１４８ｍｍｏｌ）を室温で添加し、混合物を３０分間還流させ、その後すぐに、揮発性物質を真空中で除去した。４ＭのＨＣｌのジオキサン（５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）溶液を撹拌しながら室温で滴下した。５分後、Ｅｔ２Ｏを添加して、生成物の沈殿を促進し、その後すぐに、それを濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、真空乾燥して、３ｑを得た（７２９ｍｇ、１００％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  １．６分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２５０．
【０３１４】
一実施形態では、２０当量のＴＦＡのＤＣＭ溶液（１：１のＤＣＭ／ＴＦＡｖ／ｖ混合物）を室温で使用して、この反応を行った。
【０３１５】
一般的な方法Ｅを用いて、アドホックな試薬および中間体から以下の中間体：
中間体３ｒ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｍ）から調製した３−メチル−５−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−１，２，４−オキサジアゾール塩酸塩
中間体３ｓ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｎ）から調製した３−メチル−５−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−１，２，４−チアジアゾール塩酸塩
中間体３ｔ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｏ）から調製した４−メチル−２−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）オキサゾール塩酸塩
中間体３ｕ：中間体（１ｃ）および中間体（２ｐ）から調製した３−イソプロピル−５−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−１，２，４−チアジアゾール塩酸塩
も調製した。
【０３１６】
方法Ｆ：脱水環化および酸分解−ＰＭＢ保護
方法Ｆは、トリアゾロピペラジン（３）の合成のために使用される手順であり、以下に詳述する：
【化７７】
0006023814.tif 000108
スキーム２３：トリアゾロピペラジン（３）に導く脱水環化
【０３１７】
方法Ｆを、保護基がＰＭＢである中間体（３ｖ）の合成によって例示する。
【０３１８】
４−メチル−２−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｖ）の合成
【化７８】
0006023814.tif 000109
スキーム２４：４−メチル−２−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｖ）の合成
【０３１９】
工程１：２−（７−（４−メトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−４−メチルチアゾール（３．１ｖ）の合成
イミノエーテル（１ｄ）（４４４ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（５ｍＬ）に溶解し、ここに、２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（２ｋ）（２６６ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ、１当量）を添加し、得られた溶液を２４時間還流させた。反応混合物を室温まで冷却し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、粗製化合物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９９／１〜９８／２）で精製して、所望の生成物（３．１ｖ）を淡黄色の固体として得た（３８３ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ、６４％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ７５  ％，  保持時間  ＝  １．９分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３５６．
【０３２０】
工程２：４−メチル−２−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（３ｖ）の合成
無水ＤＣＭ（２．５ｍＬ）を、２−（７−（４−メトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−４−メチルチアゾール（３．１ｖ）（４４３ｍｇ、１．２４６ｍｍｏｌ、１当量）に室温で添加した。次いで、ＴＦＡ（２．５ｍＬ、３３．５ｍｍｏｌ、２７当量）を添加し、反応混合物を１５時間還流させた。飽和ＮａＨＣＯ３溶液を添加して反応を止めた。層を分離し、水層をｐＨが約１４になるまで１ＭのＮａＯＨ溶液で塩基性にし、ＤＣＭ（３×７０ｍＬ）で抽出した。１つにまとめた有機層を塩水（約７０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、３時間の真空後に質量変動なしに３ｖを得た（３４２ｍｇ、１００％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  １．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２３６．
【０３２１】
一般的な方法Ｆを用いて、アドホックな試薬および中間体から以下の中間体：
中間体３ｗ：中間体（１ｄ）および中間体（２ｑ）から調製した３−（１，３−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン
も調製した。
【０３２２】
Ｉ．５．工程４：最終生成物に導くアシル化
方法Ｇ：アシル化およびキラルＨＰＬＣ精製
方法Ｇは、一般式Ｉの最終化合物番号Ｘを得るためのラセミ生成物（４）の合成およびその精製のために使用される手順である。方法Ｇについて以下に詳述する：
【化７９】
0006023814.tif 000110
スキーム２５：アシル化およびキラルＨＰＬＣ精製
【０３２３】
方法Ｇを、一般式Ｉの化合物番号５、１９、２９および３３の合成によって例示する。
【０３２４】
（３−（２−エチルチアゾール−４−イル）−８−メチル−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン（４ａ）および（Ｒ）−（３−（２−エチルチアゾール−４−イル）−８−メチル−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン（化合物番号５）の合成
【化８０】
0006023814.tif 000111
スキーム２６：化合物４ａおよび化合物番号５の合成
【０３２５】
粗製の３ｊ（２５０ｍｇ、１．００３ｍｍｏｌ、１当量）の無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、塩化４−（チオフェン−２−イル）ベンゾイル（４．１ａ）（２９０ｍｇ、１．３０３ｍｍｏｌ、１．３当量）、次いでＮ−メチルモルホリン（０．３５９ｍＬ、３．５１ｍｍｏｌ、３．５当量）を１５秒かけて室温で滴下した。反応混合物を室温で１０分間撹拌し、乳白色の懸濁液を１ＭのＨＣｌ溶液１０ｍＬの中に注ぎ入れた。水相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機相を１つにまとめ、１ＭのＮａＯＨ（２０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固させた。残留物をＤＣＭ（４ｍＬ）に可溶化し、Ｅｔ２Ｏ（５ｍＬ）をゆっくりと添加して沈殿を誘導した。固体を濾別し、２ｍＬのＥｔ２Ｏで洗浄し、真空乾燥して、４ａを黄色の粉末として得た（２３４ｍｇ、０．５３７ｍｍｏｌ、５４％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９７  ％，  保持時間  ＝  ２．４分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４３６．
【０３２６】
上記方法に従って４ａをキラル分取ＨＰＬＣで精製して、表題化合物番号５を白色の粉末として得た。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ４．３分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４３６；  キラルＨＰＬＣ保持時間：  １４．０分；  ｅｅ  ＞  ９９  ％；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．０２  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７０  （ｄ，  Ｊ＝  ８．２，  ２Ｈ），  ７．４７  （ｄ，  Ｊ＝  ８．２，  ２Ｈ），  ７．３１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１２  （ｍ，  １Ｈ），  ５．７７  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．８３  （ｍ，  １Ｈ），  ４．６３  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．２６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．５３  （ｍ，  １Ｈ），  ３．０７  （ｄ，  Ｊ＝  ７．５，  ２Ｈ），  １．７４  （ｄ，  Ｊ＝  ６．９，  ３Ｈ），  １．４３  （ｔ，  Ｊ＝  ７．５，  ３Ｈ）．
【０３２７】
（８−メチル−３−（４−メチルチアゾール−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン（４ｂ）および（Ｒ）−（８−メチル−３−（４−メチルチアゾール−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン（化合物番号１９）の合成
【化８１】
0006023814.tif 000112
スキーム２７：化合物４ｂおよび化合物番号１９の合成
【０３２８】
３ｖ（３４２ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ、１当量）の市販の無水ＤＣＭ（１２ｍＬ）溶液に、塩化４−（チオフェン−２−イル）ベンゾイル（４．１ａ）（３２６ｍｇ、１．４６４ｍｍｏｌ、１．１７当量）、次いでＮ−メチルモルホリン（０．１２８ｍＬ、１．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）を１５秒かけて室温で滴下した。反応混合物を室温で１５分間撹拌し、次いで、ＤＣＭ（６０ｍＬ）で希釈した。有機層を水（４０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で蒸発させた。残留物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９８／２）で精製して、４ｂをＬＣＭＳにより８８％の純度を有する黄色の油として得た。
【０３２９】
ジエチルエーテル（１０ｍＬ）を得られた油の上に添加し、混合物を超音波処理した。白色の固体を沈殿させ、濾過した。濾液を減圧濃縮し、ジエチルエーテル（５ｍＬ）を残留物の上に添加した。超音波処理後に、第２の白色の沈殿物を濾過した。両方の沈殿物を１つにまとめて、４ｂを白色の固体として得た（１８９ｍｇ、３６％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９９  ％，  保持時間  ＝  ４．４分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４２２．
【０３３０】
４ｂを上記方法に従ってキラル分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物番号１９を白色の粉末として得た。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝    １００  ％，  保持時間  ＝  ４．３分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４２２；  キラルＨＰＬＣ保持時間：  ６．６分，  ｅｅ  ＝  ９４  ％；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ２Ｈ），  ７．４８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２，  ２Ｈ），  ７．４０−７．３５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．１３−７．１１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．００  （ｍ，  １Ｈ），  ５．８１  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．９５  （ｄｄ，  Ｊ１  ＝  ３．３，  Ｊ２  ＝  １４．０，  １Ｈ），  ４．６０  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．２７  （ｔｄ，  Ｊ１  ＝  ３．９，  Ｊ２  ＝  １２．７，  １Ｈ），  ３．５１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．５０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．７５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．９，  ３Ｈ）．
【０３３１】
３の塩酸塩を使用した場合、２．２当量のＮ−メチルモルホリンを添加した。
【０３３２】
化合物番号２９：（Ｒ）−［１，１’−ビフェニル］−４−イル（８−メチル−３−（６−メチルピリジン−２−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）メタノンの合成
【化８２】
0006023814.tif 000113
スキーム２８：化合物４ｃおよび番号２９の合成
【０３３３】
３ｇ（５００ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ、１当量）の無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、塩化［１，１’−ビフェニル］−４−カルボニル（４．１ｃ）（４３０ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ、１．２当量）、次いで、Ｎ−メチルモルホリン（５０７μＬ、４．９６ｍｍｏｌ、３．００当量）を室温で添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。その後すぐに、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）およびＤＣＭ（５ｍＬ）を反応混合物に添加した。有機相を抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィ（溶離液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９８：２）で精製して、２６８ｍｇの４ｃを得た。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９８  ％，  保持時間  ＝  ４．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４１０．
【０３３４】
４ｃを上記方法に従ってキラル分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物番号２９を白色の粉末として得た。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ４．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４１０；  キラルＨＰＬＣ保持時間：  ４．７分；  ｅｅ  ＞  ９９  ％。１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．１１  （ｄ，  Ｊ＝  ７．７，  １Ｈ），  ７．６７−７．４０  （ｍ，  １０Ｈ），  ７．２０  （ｄ，  Ｊ＝  ６．７，  １Ｈ），  ５．７８  （ｂｓ，  １Ｈ），  ５．００  （ｄｄ，  Ｊ１＝  ３．３，  Ｊ２＝  １４．０，  １Ｈ），  ４．６７  （ｂｒ，  １Ｈ），  ４．３７  （ｍ，  １Ｈ），  ３．５１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．５８  （ｓ，  ３Ｈ），  １．７６  （ｄ，  Ｊ＝  ６．９，  ３Ｈ）．
【０３３５】
化合物番号３３の合成のために使用される手順は、以下のとおりである：
【化８３】
0006023814.tif 000114
スキーム２９：化合物番号３３の合成
【０３３６】
工程１：（３−（６−ブロモピリジン−２−イル）−８−メチル−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン（４ｄ）の合成
一般的な方法Ｇに従って、３ｉおよび４．１ａから４ｄを調製した。
【０３３７】
工程２：６−（８−メチル−７−（４−（チオフェン−２−イル）ベンゾイル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）ピコリノニトリル（４ｅ）の合成
４ｄ（１４０ｍｇ、０．２９１ｍｍｏｌ）およびシアン化亜鉛（１３７ｍｇ、１．１６６ｍｍｏｌ）の混合物のＤＭＡ（２ｍＬ）溶液を室温で脱気した。次いで、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（６７．４ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１１５℃で３０分間撹拌した。その後すぐに、ＤＣＭ（３０ｍＬ）を添加し、有機層抽出物を水（２×３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：１００／０〜９８／２）で精製して、４ｄを白色の固体として得た（８ｍｇ、６％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９０  ％，  保持時間  ＝  ４．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４２７．
【０３３８】
４ｄを上記方法に従ってキラル分取ＨＰＬＣにより精製して、表題化合物番号３３を白色の粉末として得た。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ４．２分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４２７；  キラルＨＰＬＣ保持時間：  １８．８分；  ｅｅ  ＝  ９８  ％．
【０３３９】
ＩＩ．キラル合成
ＩＩ．１．キラル合成のための一般的な合成スキーム
スキーム３０に記載されている本発明のキラル方法を用いて、本発明の化合物を合成した。
【化８４】
0006023814.tif 000115
スキーム３０：本発明の化合物の調製のための一般的な合成スキーム
【０３４０】
キラルケトピペラジン（Ａ）をＤＭＢ基で保護し、メーヤワイン試薬（Ｅｔ３ＯＢＦ４）を用いてイミノエーテル（Ｄ）に変換した。アシルヒドラジド（Ｅ）とイミノエーテル（Ｄ）との縮合反応を加熱条件下、エタノール中で行って、ＤＭＢ保護されたピペラジン（Ｆ）を得、その後、これをＨＣｌのジオキサン溶液で脱保護して、式ＩＩの化合物を得た。
【０３４１】
一実施形態では、ＴＦＡのＤＣＭ溶液を用いて、ＤＭＢ脱保護工程（ＦからＩＩへ）を行った。
【０３４２】
一実施形態では、ＤＭＢ基脱保護工程（ＦからＩＩへ）をＴＦＡのＤＣＭ溶液を用いて室温で行った後、ＴＦＡ塩をＨＣｌと交換するか高ｐＨで抽出するかのいずれか一方により、遊離ピペラジン（ＩＩ）を回収する。
【０３４３】
適当な酸塩化物によるアシル化により、典型的に＞９０％の鏡像体過剰率（キラルＨＰＬＣ）の式Ｉの最終生成物を得た。
【０３４４】
一般的な方法Ｈ
一般的な方法Ａは、（Ｒ）−４−（２，４−ジメトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オン（（Ｒ）−Ｃ）（スキーム３０を参照）の合成のために使用される手順である。
【０３４５】
丸底フラスコの中で、（Ｒ）−３−メチルピペラジン−２−オン（（Ｒ）−Ａ）（７２５ｍｇ、６．３５ｍｍｏｌ、１当量）、２，４−ジメトキシベンズアルデヒド（Ｂ）（１．１６ｇ、６．９９ｍｍｏｌ、１．１当量）、酢酸（５４５μｌ、９．５３ｍｍｏｌ、１．５当量）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．８８ｇ、８．８９ｍｍｏｌ、１．４当量）を、市販の無水アセトニトリル（６５ｍＬ）の中に、窒素雰囲気中、室温で連続的に導入した。反応系を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、泡立ちが観察されなくなるまで飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１００ｍＬ）により０℃で慎重に失活させた。水層および有機層を分離した。水層をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で抽出し、１つにまとめた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、表題化合物を黄色の油として得た。次いで、粗製化合物をシリカゲル（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９８／２〜９５／５）で精製して、所望の生成物（（Ｒ）−Ｃ）を粘性の淡黄色の油として得た。収率：１．６５ｇ、９８％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  １．６分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２６５；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  ４１．５分，  ｅｅ  ＞  ９９  ％；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．２３  （ｄ，  Ｊ＝  ８．９，  １Ｈ），  ６．４９  （ｄ，  Ｊ＝  ８．９，  １Ｈ），  ６．４６  （ｓ，  １Ｈ），  ６．２９  （ｂｒ，  １Ｈ），  ３．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７８  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １５．０，  １Ｈ），  ３．４９  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １５．０，  １Ｈ），  ３．２７  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．１９  （ｍ，  １Ｈ），  ２．９５  （ｍ，  １Ｈ），  ２．４８  （ｍ，  １Ｈ），  １．４８  （ｄ，  Ｊ＝  ６．８，  ３Ｈ）．
【０３４６】
一般的な方法Ｈを用い、（Ｓ）−３−メチルピペラジン−２−オン（（Ｓ）−Ａ）から開始して、（Ｓ）−４−（２，４−ジメトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オン（（Ｓ）−Ｃ）も調製した。収率：３００ｍｇ、９９％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  １．６分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ２６５；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  ２６．６分，  ｅｅ  ＞  ９９  ％．
【０３４７】
一般的な方法Ｉ：
一般的な方法Ｉは、以下に詳述する（Ｒ）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジン（（Ｒ）−Ｄ）（スキーム３０を参照）の合成のために使用される手順である。
【０３４８】
乾燥器で乾燥した（１１５℃）炭酸ナトリウム（２．４８ｇ、２３．４０ｍｍｏｌ、２．２５当量）を丸底フラスコの中に入れた。丸底フラスコにアルゴンを充填し、次いで、ゴム隔膜で蓋をした。（Ｒ）−４−（２，４−ジメトキシベンジル）−３−メチルピペラジン−２−オン（（Ｒ）−Ｃ）（２．７５ｇ、１０．４０ｍｍｏｌ、１当量）の無水ＤＣＭ（３５ｍＬ）溶液、次いで、新たに調製したテトラフルオロホウ酸トリエチルオキソニウム（２．４８ｇ、１３．０５ｍｍｏｌ、１．２５当量）を一度で添加した。その後、反応混合物を室温でさらに１時間撹拌し、その後すぐに、反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍＬ）で希釈した。水層をＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を１つにまとめ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、３．１ｇの黄色の油を得た。次いで、粗製化合物をシリカゲル（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ：９９／１）で精製して、所望の生成物（（Ｒ）−Ｄ）を淡黄色の油として得た。収率：１．４４ｇ、４８％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９５  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ２Ｏ＋Ｈ）＋：  ３１１；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  １２．３分，  ｅｅ  ＞  ９７  ％。１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．２３  （ｄ，  Ｊ＝  ８．８，  １Ｈ），  ６．４８  （ｄ，  Ｊ＝  ８．８，  １Ｈ），  ６．４４  （ｓ，  １Ｈ），  ４．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．９２  （ｓ，  ６Ｈ），  ３．８６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １４．０，  １Ｈ），  ３．４６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １４．０，  １Ｈ），  ３．４４  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．１０  （ｍ，  １Ｈ），  ２．７９  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３２  （ｍ，  １Ｈ），  １．３５  （ｄ，  Ｊ＝  ６．８，  ３Ｈ），  １．２４  （ｔ，  Ｊ＝  ６．０，  ３Ｈ）．
【０３４９】
一般的な方法Ｉを用い、（Ｓ）−Ｃ（４６ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、５９％）から開始して、（Ｓ）−１−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−エトキシ−６−メチル−１，２，３，６−テトラヒドロピラジン（（Ｓ）−Ｄ）も調製した。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ２Ｏ＋Ｈ）＋：  ３１１；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  １１．３分，  ｅｅ  ＝  ９６  ％．
【０３５０】
一般的な方法Ｊ：
一般的な方法Ｊは、以下に詳述するヒドラジド（Ｅ．ａ）（スキーム３１を参照）の合成のために使用される手順である。
【化８５】
0006023814.tif 000116
スキーム３１：２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（Ｅ．ａ）の合成
【０３５１】
冷却器を備えた１００ｍＬの丸底フラスコの中で、２−メチルチアゾール−４−カルボン酸エチル（Ｅ．１ａ）（１０ｇ、５８．４ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（２５ｍＬ）に溶解し、ヒドラジン一水和物（１７．０ｍＬ、３５４．４ｍｍｏｌ、６当量）により室温で処理した。得られた黄色の溶液を還流温度で１４時間加熱した。反応混合物を放置して室温にし、この溶液を減圧濃縮して、１３．４ｇの褐色の油を得た。３×２００ｍＬの市販の無水ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（１：１）混合物と同時蒸発を行って、残留する水を除去した。次いで、残留物を高温のＥｔＯＨ（６０ｍＬ）から再結晶化した。すなわち、全体が溶解した後、混合物を放置して室温まで冷却し、次いで、４０分間０℃（氷浴）下に置いた。得られた結晶を濾過し、冷却した（０℃）ＥｔＯＨ（２×３０ｍＬ）で洗浄した。橙黄色の固体を１時間真空乾燥して、Ｅ．ａを得た（５．８５ｇ、３７．２ｍｍｏｌ、６４％）。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  １００  ％，  保持時間  ＝  ０．５分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  １５８；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．３２  （ｂｒ，  １Ｈ），  ７．９６  （ｓ，  １Ｈ），  ４．０７  （ｂｒ，  ２Ｈ），  ２．７０  （ｓ，  ３Ｈ）．
【０３５２】
一般的な方法Ｋ：
一般的な方法Ｋは、キラルトリアゾロピペラジン中間体（Ｆ）（スキーム３０を参照）の合成のために使用される一般的な手順であり、以下の（Ｒ）−４−（７−（２，４−ジメトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−メチルチアゾール（（Ｒ）−Ｆ．ａ）の合成を伴うスキーム３２に詳述する。
【化８６】
0006023814.tif 000117
スキーム３２：（Ｒ）−４−（７−（２，４−ジメトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−メチルチアゾール（（Ｒ）−Ｆ．ａ）の合成
【０３５３】
冷却器を備えた５０ｍＬの丸底フラスコの中で、イミノエーテル（（Ｒ）−Ｄ）（４．５１ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）に溶解し、ここに、２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（Ｅ．ａ）（２．３５ｇ、１４．９６ｍｍｏｌ、１当量）を一度で添加した。得られた溶液を７０℃で６時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、粗製化合物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９９／１〜９５／５）で精製して、所望の生成物（Ｒ）−Ｆ．ａを淡黄色の泡状固体として得た。収率：３．７８ｇ、６５％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９６  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３８６；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  １３．９分，  ｅｅ  ＝  ９５  ％；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．８５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４１  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．３８  （ｍ，  １Ｈ），  ４．１６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．８６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １５．０，  １Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７３  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．５６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １５．０，  １Ｈ），  ３．１１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．６６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６２  （ｍ，  １Ｈ），  １．６４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６，  ３Ｈ）；  １３Ｃ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  １６６．２，  １６０．２，  １５８．８，  １５４．６，  １４８．１，  １４３．１，  １３０．９，  １１８．８，  １１８．２，  １０４．２，  ９８．５，  ７７．６，  ７７．２，  ７６．８，  ７０．４，  ７０．２，  ５５．４，  ５５．４，  ５５．８，  ５０．２，  ４５．８，  ４４．２，  １９．２，  １７．７，  １５．７．
【０３５４】
冷却器を備えた丸底フラスコの中で、イミノエーテル（（Ｒ）−Ｄ）（８９０ｍｇ、３．０４ｍｍｏｌ、１当量）を無水ＥｔＯＨ（３ｍＬ）に溶解し、ここに、２−メチルチアゾール−４−カルボヒドラジド（Ｅ．ａ）（４７９ｍｇ、３．０４ｍｍｏｌ、１当量）を添加した。得られた溶液を７０℃で７時間撹拌し、次いで室温にし、揮発性物質を減圧下で除去した。次いで、粗製化合物をシリカゲルクロマトグラフィ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９９／１〜９５／５）で精製して、所望の生成物（Ｆ．ａ）を淡黄色の油として得た。収率：６８５ｍｇ、５８％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９６  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３８６；  キラルＨＰＬＣ保持時間：  １４．３分，  ｅｅ  ＝  ９５  ％；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．８５  （ｓ，  １Ｈ），  ７．１９  （ｓ，  １Ｈ），  ６．４１  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．３８  （ｍ，  １Ｈ），  ４．１６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．９６  （ｍ，  １Ｈ），  ３．８６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １５．０，  １Ｈ），  ３．７４  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７３  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．５６  （ｄ，  ＪＡＢ＝  １５．０，  １Ｈ），  ３．１１  （ｍ，  １Ｈ），  ２．６６  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．６２  （ｍ，  １Ｈ），  １．６４  （ｄ，  Ｊ＝  ６．６，  ３Ｈ）．
【０３５５】
一般的な方法Ｋを用い、（Ｓ）−Ｄ（３６ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、５４％）から開始して、（Ｓ）−４−（７−（２，４−ジメトキシベンジル）−８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）−２−メチルチアゾール（（Ｓ）−Ｆ．ａ）も調製した。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９０  ％，  保持時間  ＝  １．８分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３８６；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  ２１．０分，  ｅｅ  ＝  ９４．０  ％．
【０３５６】
一般的な方法Ｌ：
一般的な方法Ｅは、式ＩＩの化合物の塩（スキーム３０中の化合物ＩＩを参照）の合成のために使用される一般的な手順であり、以下の化合物番号ＩＩ−１：（Ｒ）−８−メチル−３−（２−メチルチアゾール−４−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７−イウム塩化物（（Ｒ）−ＩＩ−１）の合成を伴うスキーム３３に詳述する。
【化８７】
0006023814.tif 000118
スキーム３３：化合物番号１の塩酸塩：（Ｒ）−８−メチル−３−（２−メチルチアゾール−４−イル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７−イウム塩化物（（Ｒ）−ＩＩ−１）の合成
【０３５７】
冷却器を備えた５０ｍＬの丸底フラスコの中に、（Ｒ）−Ｆ．ａ（２６２ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ、１当量）、次いで４ＭのＨＣｌのジオキサン（３．４ｍＬ、１３．６０ｍｍｏｌ、２０当量）溶液を一度で導入した。得られた黄色の溶液を１００℃で撹拌した。６時間後、ｉ−ＰｒＯＨ（６ｍＬ）を高温の反応混合物に添加した。次いで、油浴を取り外して、この溶液を放置して室温にした。次いで、Ｅｔ２Ｏ（１５ｍＬ）を添加し、得られた沈殿物を濾別し、Ｅｔ２Ｏ（３ｍＬ）で洗浄し、一晩空気乾燥して、（Ｒ）−ＩＩ−１（２３５ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ、１００％）を桃色の固体として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０３５８】
以下のとおり、ＴＦＡ手順を用い、（Ｓ）−Ｆ．ａから開始して、（Ｓ）−２−メチル−４−（８−メチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−３−イル）チアゾール（（Ｓ）−ＩＩ−１）を調製した。
【０３５９】
（Ｓ）−Ｆ．ａ（３６ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥ＤＣＭ（５００μＬ）に溶解した。ＴＦＡ（４６７μＬ、６．０ｍｍｏｌ、６５当量）を室温で滴下した。３０分後、濃い桃色の反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）により慎重に失活させた。水相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機相を１つにまとめ、塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、遊離アミン（（Ｓ）−ＩＩ−１）を白色の固体として得（４３ｍｇ、０．１８３ｍｍｏｌ、１００％）、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
【０３６０】
鏡像体過剰率の測定：
上述のとおり、具体的にはそのようなアミンを取り扱う際の技術的なキラルＬＣ問題により、式ＩＩの化合物では鏡像体過剰率（％）のキラルＬＣ測定が難しいと分かったため、アミンをアシル化して、限定されるものではないが式Ｉの化合物番号１によって例示される最終生成物を得る後続の工程で形成された生成物で鏡像体過剰率（％）を測定した。
【０３６１】
一般的な方法Ｍ：
一般的な方法Ｍは、本発明のキラルトリアゾロピペラジン化合物の合成のために使用される一般的な手順であり、式Ｉの（Ｒ）−（８−メチル−３−（２−メチルチアゾール−４−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン（（Ｒ）−化合物番号１）（以後Ｉ−１と記載する）の合成により、以下に詳述する。
【化８８】
0006023814.tif 000119
スキーム３４：（Ｒ）−Ｉ−１の合成
【０３６２】
粗製の（Ｒ）−ＩＩ−１（２３５ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ、１当量）の無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液に、塩化４−（チオフェン−２−イル）ベンゾイル（４．１ａ）（１６５ｍｇ、０．７４２ｍｍｏｌ、１．３当量）、次いで、Ｎ−メチルモルホリン（１６３μＬ、１．４８ｍｍｏｌ、２．２当量）を１５秒かけて０℃で滴下した。反応混合物を室温で１０分間撹拌し、乳白色の懸濁液を１０ｍＬの１ＭのＨＣｌの中に注ぎ入れた。水相をＤＣＭ（３×１０ｍＬ）で抽出した。有機相を１つにまとめ、１ＭのＮａＯＨ（２０ｍＬ）、塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固させた。粗製化合物をシリカゲルクロマトグラフィ（溶離液：ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ：９８／２）で精製して、所望の生成物（（Ｒ）−Ｉ−１）を白色の泡状物として得た。収率：１５８ｍｇ、５５％。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９７  ％，  保持時間  ＝  ４．０分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ４２２；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  １５．４分，  ｅｅ  ＝  ９５  ％；  １Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．９３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．６１  （ｄ，  Ｊ＝  ７．９，  ２Ｈ），  ７．４０  （ｄ，  Ｊ＝  ７．９，  ２Ｈ），  ７．３１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．０４  （ｍ，  １Ｈ），  ５．７３  （ｍ，  １Ｈ），  ４．７８  （ｍ，  １Ｈ），  ４．４６  （ｍ，  １Ｈ），  ４．１４  （ｍ，  １Ｈ），  ３．４７  （ｍ，  １Ｈ），    ２．７０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．６８  （ｄ，  Ｊ＝  ６．７，  ３Ｈ）。１３Ｃ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  １７０．３，  １６６．５，  １５１．９，  １４８．０，  １４２．４，  １３６．４，  １２８．１，  １２５．８，  １２４．０，  １１９．３，  ７７．４，  ７７．０，  ７６．６，  ４４．８，  ３０．７，  １９．６，  １９．１．
【０３６３】
化合物（Ｒ）−Ｉ−１および（Ｒ）−Ｆ．ａに対して同じ鏡像体過剰率（％）が得られ、従って、酸分解脱保護およびＮ−アシル化工程中に検出可能なラセミ化が生じなかったことが確認された。
【０３６４】
一般的な方法Ｆを用い、（Ｓ）−ＩＩ−１（１６ｍｇ、３８．０μｍｏｌ，４０％）から開始して、化合物（Ｓ）−（８−メチル−３−（２−メチルチアゾール−４−イル）−５，６−ジヒドロ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル）（４−（チオフェン−２−イル）フェニル）メタノン（（Ｓ）−Ｉ−１）も調製した。ＬＣＭＳ：  Ｐ  ＝  ９０  ％，  保持時間  ＝  ４．０分，  （Ｍ＋Ｈ）＋：  ３８６．１；  キラルＨＰＬＣ保持時間  ＝  １１．０分，  ｅｅ  ＝  ９２％．
【０３６５】
化合物（Ｒ）−Ｉ−１のＸ線結晶学的構造解析
化合物（Ｒ）−Ｉ−１を、単結晶Ｘ線分光法によって構造解析し、このようにして、より活性な鏡像異性体の立体配置が（Ｒ）−立体配置（図１を参照）であることを確証した。
【０３６６】
方法。ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３）を用いるＭＡＲ３４５イメージプレート（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）で全てのデータを記録した。５０ＫＶおよび７０ｍＡに電力設定したＲＩＧＡＫＵ回転陽極発生器でＸ線を発生させた。Ｚｒフィルターを使用してＭｏＫα放射線を取り出す。Ｘ線実験の前に、ナイロンループに取り付け、かつ角度計で位置合わせをして、顕微鏡で好適な結晶を選択した。２．０°φ回転に対応する全部で１７４枚の画像を室温で回収した。回折像上の反射は、Ａｕｔｏｍａｒデータ処理セット（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）を用いて指数付けを行い、積分した。積分の間、フリーデル対は、絶対構造の決定のために必要な異常シグナルを保存するために、平均しないままにした。構造決定およびその後の精密化のために、Ｘｐｒｅｐ（Ｂｒｕｋｅｒ社）を使用して空間群を決定し、かつ反射および命令ファイルを生成した。ＳＨＥＬＸＳによって構造解析を行い、かつＳＨＥＬＸＬによって精密化を行った（“Ａ  ｓｈｏｒｔ  ｈｉｓｔｏｒｙ  ｏｆ  ＳＨＥＬＸ”．  Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，  Ｇ．Ｍ．  （２００８）．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．  Ａ６４，  １１２−１２２）。Ｃ６−Ｃ１（Ｃ１ＡまたはＣ１Ｂ）の周りでの自由回転により、以下の図１に見られるような５８／４２％の比で回転異性が生じる。以下のＸ線図に示すように、Ｃ２２炭素原子のキラリティーはＲとして確証されている（Ｈ．  Ｄ．  Ｆｌａｃｋ  （１９８３）．  “Ｏｎ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｏｒｐｈ−Ｐｏｌａｒｉｔｙ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ”．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ  Ａ３９：  ８７６−８８１；  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｃｒｙｓｔ．  （２００８），  ４１，  ９６−１０３）。
【０３６７】
化合物（Ｓ）−Ｉ−１のＸ線結晶学的構造解析
化合物（Ｓ）−Ｉ−１を、単結晶Ｘ線分光法によって構造解析し、このようにして、より活性な鏡像異性体の立体配置が（Ｒ）−立体配置（図２を参照）であることを確証した。
【０３６８】
方法。ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３）を用いるＭＡＲ３４５イメージプレート（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）で全てのデータを記録した。５０ＫＶおよび７０ｍＡに電力設定したＲＩＧＡＫＵ回転陽極発生器でＸ線を発生させた。Ｚｒフィルターを使用してＭｏＫα放射線を取り出す。Ｘ線実験の前に、ナイロンループに取り付け、かつ角度計で位置合わせをして、顕微鏡で好適な結晶を選択した。２．５°φ回転に対応する全部で１７４枚の画像を室温で回収した。回折像上の反射は、Ａｕｔｏｍａｒデータ処理セット（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）を用いて指数付けを行い、積分した。積分の間、フリーデル対は、絶対構造の決定のために必要な異常シグナルを保存するために、平均しないままにした。構造決定およびその後の精密化のために、Ｘｐｒｅｐ（Ｂｒｕｋｅｒ社）を使用して空間群を決定し、かつ反射および命令ファイルを生成した。ＳＨＥＬＸＳによって構造解析を行い、かつＳＨＥＬＸＬによって精密化を行った(“Ａ  ｓｈｏｒｔ  ｈｉｓｔｏｒｙ  ｏｆ  ＳＨＥＬＸ”．  Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，  Ｇ．Ｍ．  （２００８）．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．  Ａ６４，  １１２−１２２）。Ｃ６−Ｃ１（Ｃ１ＡまたはＣ１Ｂ）の周りでの自由回転により、以下の図１に見られるような５８／４２％の比で回転異性が生じる。以下のＸ線図に示すように、Ｃ２２炭素原子のキラリティーはＲとして確証されている（Ｈ．  Ｄ．  Ｆｌａｃｋ  （１９８３）．  “Ｏｎ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｏｒｐｈ−Ｐｏｌａｒｉｔｙ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ”．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ  Ａ３９：  ８７６−８８１；  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｃｒｙｓｔ．  （２００８），  ４１，  ９６−１０３）。
【０３６９】
本発明の関連する化合物は、一般的な方法および本明細書に記載されている手順を用いて、アドホックな試薬から合成し得ることが容易に分かる。
【０３７０】
ＩＩＩ．Ｘ線結晶学的構造解析
ＩＩＩ．１．化合物番号１
化合物番号１を、単結晶Ｘ線分光法によって構造解析し、このようにして、より活性な鏡像異性体の立体配置が（Ｒ）−立体配置（図１を参照）であることを確証した。
【０３７１】
方法。ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３）を用いるＭＡＲ３４５イメージプレート（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）で全てのデータを記録した。５０ＫＶおよび７０ｍＡに電力設定したＲＩＧＡＫＵ回転陽極発生器でＸ線を発生させた。Ｚｒフィルターを使用してＭｏＫα放射線を取り出す。Ｘ線実験の前に、ナイロンループに取り付け、かつ角度計で位置合わせをして、顕微鏡で好適な結晶を選択した。２．０°φ回転に対応する全部で１７４枚の画像を室温で回収した。回折像上の反射は、Ａｕｔｏｍａｒデータ処理セット（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）を用いて指数付けを行い、積分した。積分の間、フリーデル対は、絶対構造の決定のために必要な異常シグナルを保存するために、平均しないままにした。構造決定およびその後の精密化のために、Ｘｐｒｅｐ（Ｂｒｕｋｅｒ社）を使用して空間群を決定し、かつ反射および命令ファイルを生成した。ＳＨＥＬＸＳによって構造解析を行い、かつＳＨＥＬＸＬによって精密化を行った（“Ａ  ｓｈｏｒｔ  ｈｉｓｔｏｒｙ  ｏｆ  ＳＨＥＬＸ”．  Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，  Ｇ．Ｍ．  （２００８）．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．  Ａ６４，  １１２−１２２）。Ｃ６−Ｃ１（Ｃ１ＡまたはＣ１Ｂ）の周りでの自由回転により、以下の図１に見られるような５８／４２％の比で回転異性が生じる。Ｘ線図１に示すように、Ｃ２２炭素原子のキラリティーはＲとして確証されている（Ｈ．  Ｄ．  Ｆｌａｃｋ  （１９８３）．  “Ｏｎ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｏｒｐｈ−Ｐｏｌａｒｉｔｙ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ”．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ  Ａ３９：  ８７６−８８１；  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｃｒｙｓｔ．  （２００８），  ４１，  ９６−１０３）。
【０３７２】
ＩＩＩ．２．化合物番号１９
本発明における化合物番号１９を単結晶Ｘ線分光法によって構造解析し、これにより、より活性な鏡像異性体の立体配置が（Ｒ）（図２を参照）であることを確証した。
【０３７３】
方法。ＭｏＫα放射線（λ＝０．７１０７３）を用いるＭＡＲ３４５イメージプレート（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）で全てのデータを記録した。５０ＫＶおよび７０ｍＡに電力設定したＲＩＧＡＫＵ回転陽極発生器でＸ線を発生させた。Ｚｒフィルターを使用してＭｏＫα放射線を取り出す。Ｘ線実験の前に、ナイロンループに取り付け、かつ角度計で位置合わせをして、顕微鏡で好適な結晶を選択した。１．５°φ回転に対応する全部で１０３枚の画像を室温で回収した。回折像上の反射は、Ａｕｔｏｍａｒデータ処理セット（Ｍａｒｒｅｓｅａｒｃｈ社）を用いて指数付けを行い、積分した。積分の間、フリーデル対は、絶対構造の決定のために必要な異常シグナルを保存するために、平均しないままにした。構造決定およびその後の精密化のために、Ｘｐｒｅｐ（Ｂｒｕｋｅｒ社）を使用して空間群を決定し、かつ反射および命令ファイルを生成した。ＳＨＥＬＸＳによって構造解析を行い、かつＳＨＥＬＸＬによって精密化を行った（“Ａ  ｓｈｏｒｔ  ｈｉｓｔｏｒｙ  ｏｆ  ＳＨＥＬＸ”．  Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ，  Ｇ．Ｍ．  （２００８）．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．  Ａ６４，  １１２−１２２）。Ｃ６−Ｃ１（Ｃ１ＡまたはＣ１Ｂ）の周りでの自由回転により、以下の図２に見られるような５６／４４％の比で回転異性が生じる。以下のＸ線図２に示すように、Ｃ２２炭素原子のキラリティーはＲとして確証されている（Ｈ．  Ｄ．  Ｆｌａｃｋ  （１９８３）．  “Ｏｎ  Ｅｎａｎｔｉｏｍｏｒｐｈ−Ｐｏｌａｒｉｔｙ  Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ”．  Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ  Ａ３９：  ８７６−８８１；  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｃｒｙｓｔ．  （２００８），  ４１，  ９６−１０３）。
【０３７４】
ＩＶ．本発明の化合物の合成のために使用される方法および試薬の要約
上記一般的な方法および手順を用いて、アドホックな試薬および中間体から一般式Ｉの本発明の化合物を合成した。以下の表４は、各化合物のために使用される中間体および一般的な方法ならびにＬＣＭＳ分析データをまとめたものである。
表４
【表４】
0006023814.tif 000120
0006023814.tif 000121
0006023814.tif 000122
0006023814.tif 000123
【０３７５】
表４中の「Ｃｐｄ」という用語は、化合物を意味する。
【０３７６】
表４中のキラルＬＣによって分離された各ピークの立体配置は、化合物番号１、化合物番号１９により直接確立されたものであり、類似性により他の事例に適用した。上述した間接的な立体配置の帰属は、急性立体化学ＳＡＲを考慮すると決定的な生物学的活性測定により常に確認された。  
【０３７７】
生物学実施例
機能アッセイ
ヒトＮＫ−３受容体を用いたＡｅｑｕｏｒｉｎアッセイ
細胞内カルシウム濃度の変化は、Ｇタンパク質共役受容体活性の認識されている指標である。生体外でのＡｅｑｕｏｒｉｎ機能アッセイにより、ＮＫＡ媒介性ＮＫ−３受容体活性化を阻害するための本発明の化合物の有効性を評価した。このアッセイのために、ヒトＮＫ−３受容体を発現するチャイニーズハムスター卵巣組み換え細胞および発光タンパク質アポエクオリンをコード化する構築物を使用した。補因子セレンテラジンの存在下で、アポエクオリンは、細胞内（細胞質）遊離カルシウムの量に比例する測定可能な発光を放つ。
【０３７８】
拮抗薬試験
本発明の化合物を細胞と共にプレインキュベートし（３分）、次いで、ＥＣ８０（３ｎＭ）に相当する最終濃度当量で参照作動薬（ＮＫＡ）を添加し、その後の９０秒間にわたって放射光を記録した（Ｈａｍａｍａｔｓｕ社製ＦＤＳＳ６０００）後に、本化合物の拮抗薬活性を測定する。放射光の強度を、リーダーソフトウェアを用いて積分する。ニューロキニンＡの添加に対する発光応答の阻害に基づいて、化合物の拮抗薬活性を測定する
【０３７９】
本発明の化合物の阻害曲線が得られ、参照作動薬応答の５０％を阻害する化合物の濃度（ＩＣ５０）を決定した（以下の表５の結果を参照）。表５に示すＩＣ５０値は、本発明の化合物が強力なＮＫ−３拮抗化合物であることを示している。
表５
【表５】
0006023814.tif 000124
【０３８０】
競合結合アッセイ
十分に特性評価されているＮＫ−３放射性リガンドを競合的かつ可逆的に置き換える本発明の化合物の能力を測定することにより、本発明の化合物のヒトＮＫ−３受容体との親和性を測定した。
【０３８１】
ヒトＮＫ−３受容体との３Ｈ−ＳＢ２２２２００結合競合アッセイ
生体外放射性リガンド結合アッセイにより、ＮＫ−３受容体選択的拮抗薬３Ｈ−ＳＢ２２２２００の結合を阻害するための本発明の化合物の能力を評価した。ヒトＮＫ−３受容体を安定に発現するチャイニーズハムスター卵巣組み換え細胞から膜を調製した。この膜を、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ／０．１ＭのＮａＣｌ／１ｍＭのＣａＣｌ ２／５ＭｍのＭｇＣｌ２／０．５％のＢＳＡ／１ｍｌの緩衝液中に１０μｇのサポニン（ｐＨ７．４）および各種濃度の本発明の化合物中で、５ｎＭの３Ｈ−ＳＢ２２２２００（ＡＲＣ社）と共にインキュベートした。ＴｏｐＣｏｕｎｔ−ＮＸＴリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ社）を用いた膜関連放射活性の定量化により、受容体に結合した３Ｈ−ＳＢ２２２２００の量を濾過後に測定した。本発明の化合物に対して競合曲線が得られ、線形回帰分析により、結合されている放射性リガンドの５０％を置き換えた濃度（ＩＣ５０）を決定し、次いで、飽和結合実験（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ、１９７３年）から導き出された方程式：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／Ｋｄ）（式中、［Ｌ］は遊離放射性リガンドの濃度であり、Ｋｄは受容体におけるその解離定数である）により見かけ上の阻害定数（Ｋｉ）値を計算した（以下の表６の結果を参照）。
【０３８２】
表６は、本発明の化合物による３Ｈ−ＳＢ２２２２００結合競合アッセイを用いて得られた生物学的結果を示す。これらの結果は、本発明の化合物がヒトＮＫ−３受容体との強力な親和性を示すことを表している。
表６
【表６】
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【０３８３】
選択性アッセイ
他のヒトＮＫ受容体すなわちＮＫ−１およびＮＫ−２受容体に対する本発明の化合物の選択性を測定した。
【０３８４】
ヒトＮＫ−１
ＮＫ−１受容体を発現するＣＨＯ組み換え細胞ヒトにおいて、本発明の化合物のＮＫ−１受容体に対する親和性を評価した。これらの細胞から膜懸濁液を調製した。このアッセイでは以下の放射性リガンド：［３Ｈ］サブスタンスＰ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社カタログ番号ＮＥＴ１１１５２０）を使用した。５０ｍＭのＴｒｉｓ／５ｍＭのＭｎＣｌ２／１５０ｍＭのＮａＣｌ／０．１％ＢＳＡ（ｐＨ７．４）中で、結合アッセイを行った。結合アッセイは、２５μｌの膜懸濁液（９６ウェルプレート中、１ウェル当たり約５μｇのタンパク質）、漸増濃度（アッセイ緩衝液で希釈）の５０μｌの化合物または参照リガンド（サブスタンスＰ）および２ｎＭの［３Ｈ］サブスタンスＰで構成されていた。このプレートを水浴に入れ、２５℃で６０分間インキュベートし、次いで、濾過ユニット（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社）を用いて、ＧＦ／Ｃフィルター（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社、６００５１７４、０．５％のＰＥＩに室温で２時間予浸した）で濾過した。ＴｏｐＣｏｕｎｔ−ＮＸＴリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ社）を用いて、フィルターに保持された放射活性を測定した。本発明の化合物に対して競合曲線が得られ、結合されている放射性リガンドの５０％を置き換えた化合物の濃度（ＩＣ５０）を決定し、次いで、飽和結合実験（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ、１９７３年）から導き出された以下の方程式：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／ＫＤ）（式中、［Ｌ］は遊離放射性リガンドの濃度であり、ＫＤは受容体におけるその解離定数である）により、見かけ上の阻害定数Ｋｉ値を計算した。
【０３８５】
ヒトＮＫ−２
ヒトＮＫ−２受容体を発現するＣＨＯ組み換え細胞において、本発明の化合物のＮＫ−２受容体に対する親和性を評価した。これらの細胞から膜懸濁液を調製した。このアッセイでは、以下の放射性リガンド：［１２５Ｉ］−ニューロキニンＡ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社カタログ番号ＮＥＸ２５２）を使用した。２５ｍＭのＨＥＰＥＳ／１ｍＭのＣａＣｌ２／５ｍＭのＭｇＣｌ２／０．５％のＢＳＡ／１０μｇ／ｍｌのサポニン（ｐＨ７．４）中で結合アッセイを行った。結合アッセイは、２５μｌの膜懸濁液（９６ウェルプレート中１ウェルにつき約３．７５μｇのタンパク質）、漸増濃度（アッセイ緩衝液で希釈）の５０μｌの化合物または参照リガンド（ニューロキニンＡ）および０．１ｎＭの［１２５Ｉ］−ニューロキニンＡで構成されていた。このプレートを水浴しながら２５℃で６０分間インキュベートし、次いで、濾過ユニット（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社）を用いて、ＧＦ／Ｃフィルター（Perkin Elmer社、６００５１７４、サポニンを含まないアッセイ緩衝液に室温で２時間予浸した）で濾過した。ＴｏｐＣｏｕｎｔ−ＮＸＴリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ社）を用いて、フィルター上に保持された放射活性を測定した。本発明の化合物に対して競合曲線が得られ、結合されている放射性リガンドの５０％を置き換えた化合物の濃度（ＩＣ５０）を決定し、次いで、飽和結合実験（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ、１９７３年）から導き出された以下の方程式：Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋［Ｌ］／ＫＤ）（式中、［Ｌ］は遊離放射性リガンドの濃度であり、ＫＤは受容体におけるその解離定数である）により、見かけ上の阻害定数Ｋｉ値を計算した。
【０３８６】
上記ＮＫ−１およびＮＫ−２アッセイで試験した本発明の化合物は、ヒトＮＫ−１およびヒトＮＫ−２受容体において低い親和性すなわちヒトＮＫ−３受容体と比較して２００倍を超えるＫｉの変化（表７）を示した。従って、本発明に係る化合物は、ＮＫ−１およびＮＫ−２受容体に対して選択的であることが分かった。
表７
【表７】
0006023814.tif 000126
【０３８７】
ｈＥＲＧ阻害アッセイ
ヒトＥｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ関連遺伝子（ｈＥＲＧ）は、心再分極に関与する心臓の向き整流電位開口型カリウムチャネル（ＩＫｒ）をコード化する。ＩＫｒ電流阻害は、心臓活動電位を延長する（不整脈のリスクの増加に関連する現象）ことが分かっている。ＩＫｒ電流阻害は、薬物誘発性ＱＴ延長の公知の事例の大部分の主な原因である。これらの心臓毒性作用により、いくつかの薬物が後期臨床試験から撤回されているため、創薬では早期に阻害剤を同定することが重要である。
【０３８８】
ｈＥＲＧ阻害研究は、ヒトＥｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ関連遺伝子（ｈＥＲＧ）を安定に形質移入されたＨＥＫ２９３細胞において正常酸素圧条件で生成されたカリウム選択的ＩＫｒ電流に対する生体外での本発明の化合物の効果を定量化することを目的としている。
【０３８９】
電圧パルス中に誘発された全細胞電流（手動パッチクランプによって獲得）を、ベースライン条件および被検化合物の投与（５分間の曝露）後に記録した。被検化合物（０．３μＭ、３μＭ、１０μＭ、３０μＭ）の濃度は、前臨床モデルにおいて期待された有効用量のおける濃度を超えると考えられる範囲を反映したものである。
【０３９０】
印加されるパルス手順は、以下のとおりである。保持電位（３秒ごと）を、−４０ｍＶで開始し、１秒間に＋１０ｍＶの８回の増加で、−８０ｍＶから＋４０ｍＶの最大値まで段階的に変化させた。次いで、これらの各増加工程後に、膜電位を−５５ｍＶに１秒間戻し、最終的に−８０ｍＶに１秒間再分極した。
【０３９１】
記録した電流密度をベースライン条件に対して正規化し、試験化合物を含まない条件で実験設計を用いて、溶媒効果および時間依存的電流ランダウンについて補正した。
【０３９２】
化合物の阻害曲線が得られ、ベースライン条件で測定した電流密度の５０％を減少させる濃度（ＩＣ５０）を決定した。ＩＣ５０値が１０μＭを超える全ての化合物は、ｈＥＲＧチャネルの強力な阻害剤として見なさないが、１μＭ未満のＩＣ５０値を有する化合物は、強力なｈＥＲＧチャネル阻害剤として見なす。
【０３９３】
ｈＥＲＧ阻害アッセイで試験した場合、本発明の化合物は、表８に示すＩＣ５０値を有するものと決定した。
表８
【表８】
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【０３９４】
ラットにおける化合物活性を評価するための生体内アッセイ
黄体形成ホルモン（ＬＨ）分泌を阻害し、かつ血中アンドロゲン濃度を減少させるための本発明の化合物の効果を以下の生物学的研究によって測定する。
【０３９５】
黄体形成ホルモン（ＬＨ）の血中濃度に対する本発明の化合物の効果を評価するための去勢した雄のラットモデル
ヒトおよび齧歯類において、去勢により、ＧｎＲＨシグナル伝達の増大および持続ならびにその結果生じる血中ＬＨの上昇が可能となることが、先例によって十分に支持されている。従って、去勢したラットモデルを使用して、ＧｎＲＨシグナル伝達経路の試験化合物阻害のマーカーとしてＬＨ阻害の測定に関する広範な指標を得る。
【０３９６】
去勢した成体の雄ＳＤラット（１５０〜１７５ｇ）をＪａｎｖｉｅｒ社（フランスのＳｔＢｅｒｔｈｅｖｉｎ）から購入した。、５０±５％の相対湿度および１２時間の明期／１２時間の暗期の光周期（午後６時に消灯）の温度制御された部屋（２２±２℃）の中に、１つのケージに３匹ずつで全ての動物を収容した。これらの動物には、研究前に２週間の術後回復期間が設けられた。動物を毎日世話した。標準的な食餌および水道水を自由に与えた。動物ケージの寝わらを１週間に１回交換した。実験日の実験開始前の１時間で動物を処置室に順化させた。
【０３９７】
本発明の化合物を、９０ｇ／Ｌの（２−ヒドロキシプロピル）−β−シクロデキストリンを含む非発熱性水として製剤化した。
【０３９８】
基準試料採取（Ｔ０）後に、単回用量の本発明の化合物またはビヒクルをラットに静脈内投与した。次いで、投与から６０分後に血液を採取した。尾静脈の出血から血液試料を得、ＥＤＴＡを含む管に引き込み、即座に遠心分離した。血漿試料を採取し、アッセイするまで−８０℃の冷凍庫に保存した。Ｚｅｎｔｅｃｈ社（ベルギーのリエージュ）製のＲＩＡＺＥＮ−Ｒａｔ  ＬＨ放射性免疫測定キットを用いて、血清中ＬＨ濃度を測定した。ベースラインは、最初の基準血液試料と定めた。
【０３９９】
上に記載した去勢した雄のラットモデルで試験した場合、化合物番号１は、血中ＬＨ濃度を有意に抑制した（図３）。
【０４００】
上に記載した去勢した雄のラットモデルで試験した場合、化合物番号１９は、血中ＬＨ濃度を有意に抑制した（図４）。
【０４０１】
テストステロンの血中濃度に対する本発明の化合物の効果を評価するための去勢されていない成体の雄
去勢されていない成体の雄ＳＤラット（２２５〜３８５ｇ、３匹／群）を、５０±５％の相対湿度および１２時間の明期／１２時間の暗期の光周期（午後６時に消灯）の温度制御された部屋（２２±２℃）に収容した。ラット用固形飼料および水道水をラットに自由に与えた。基準血液試料の採取後、単回用量の化合物またはビヒクルのいずれか一方を自由に動き回るラットに０分後に静脈内注射した。次いで、１、５、１５、９０、１５０、２１０分後に、抗凝血薬としてＥＤＴＡを含む管の中に血液を採取し、即座に遠心分離した。血漿試料を採取し、アッセイするまで−８０℃の冷凍庫に保存した。放射性免疫測定キット（Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ社）を用いて、血漿テストステロン濃度を測定した。
【０４０２】
９％の２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン／Ｈ２Ｏ（ｗ／ｗ）に入れて化合物番号１を製剤化した。単回用量の５０ｍｇ／ｋｇの化合物番号１を静脈内に注射した。
【０４０３】
去勢されていない雄のラットで試験した場合、化合物番号１は、２１０分間の試験期間にわたって血漿テストステロン濃度を有意に抑制した（図５）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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