(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンの塩の結晶であって、ここで、該塩が、ベンゼンスルホン酸塩（ベシル酸塩）、カンファースルホン酸塩（カンシル酸塩）、エタンスルホン酸塩（エシル酸塩）、ＨＢｒ塩、ＨＣｌ塩、メシル酸塩、硫酸塩およびトシル酸塩からなる群から選択される、結晶。
【請求項２】
前記塩がＨＣｌ塩、メシル酸塩またはトシル酸塩である、請求項１に記載の結晶。
【請求項３】
以下からなる群から選択される、請求項１に記載の結晶
８．８＋／−０．５、１０．８＋／−０．５、１６．１＋／−０．５、１７．４＋／−０．５、２０．４＋／−０．５、２０．９＋／−０．５、２１．５＋／−０．５、２１．７＋／−０．５、２６．６＋／−０．５および２８．１＋／−０．５度の２シータ回折角にピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する前記ＨＣｌ塩の結晶、および
７．８＋／−０．５、１０．１＋／−０．５、１２．５＋／−０．５、１８．４＋／−０．５、１９．０＋／−０．５、２０．８＋／−０．５、２３．０＋／−０．５および２３．５＋／−０．５度の２シータ回折角にピークを有するＸ線回折パターンを有する前記ＨＣｌ塩の結晶。
【請求項４】
請求項１に記載の結晶であって、ここで、前記塩がＨＣｌ塩である、結晶。
【請求項５】
約８．８、１０．８、１６．１、１７．４、２０．４、２０．９、２１．５、２１．７、２６．６および２８．１度の２シータ回折角にピークを含むＸＲＰＤパターンを有する前記ＨＣｌ塩の多形（形態Ｉ）であり、ここで、約はプラスまたはマイナス０．５度の２シータの変動を指す、請求項１に記載の結晶。
【請求項６】
約８．７６、１０．７８、１０．９８、１１．３４、１２．６６、１３．１４、１４．０６、１４．３８、１５．４８、１５．８８、１６．１０、１６．６５、１７．０８、１７．４５、１８．１５、１８．３０、１８．４５、１８．８１、１９．３９、２０．３９、２０．８８、２１．４６、２１．７６、２２．０６、２２．６７、２３．４９、２３．６９、２４．３７、２４．７４、２４．９９、２５．１６、２５．４４、２５．６７、２５．８６、２６．６１、２８．０６、２８．３５、２８．８０、２９．０２、および２９．３７度の２シータ回折角にピークを含むＸＲＰＤパターンを有し、ここで、約はプラスまたはマイナス０．５度の２シータの変動を指す、請求項５に記載の結晶。
【請求項７】
約１９１℃に吸熱開始を含むＤＳＣサーモグラムを有し、ここで、約は１９１℃の＋／−３％の変動を指す、請求項５に記載の結晶。
【請求項８】
約１５４、１９３、２１４、２４３、３２４、３４６、３８４、４２０、４６０、４６７、４９５、５３９、５７３、５９６、６２８、６４８、６８０、６８７、７１８、７５１、７６６、７８７、８００、８４５、８５６、９４６、９６７、９９２、１００９、１０５１、１０６８、１０９４、１１１０、１１７２、１２０３、１２２５、１２５３、１２８２、１３００、１３１１、１３３４、１３７５、１３９４、１４０４、１４３２、１４５８、１４７４、１４８０、１５１７、１５３３、１５９１、１６０９、１６３７、２７３４、２８６９、２９０３、２９２８、２９３７、２９６７、２９９９、３０１５、３０３０、３０６３、および３０７５ｃｍ−１の値にピークを含むラマンスペクトルを有し、ここで、約はｃｍ−１の値の＋／−３％の変動を指す、請求項５に記載の結晶。
【請求項９】
約７．８、１０．１、１２．５、１８．４、１９．０、２０．８、２３．０および２３．５度の２シータ回折角にピークを含むＸＲＰＤパターンを有する前記ＨＣｌ塩の多形（形態ＩＩ）であり、ここで、約はプラスまたはマイナス０．５度の２シータの変動を指す、請求項４に記載の結晶。
【請求項１０】
約７．６３、７．７９、８．１４、９．１８、１０．０７、１０．３５、１２．５４、１２．８７、１３．２４、１４．７８、１４．９８、１５．２０、１５．６１、１５．９１、１６．１２、１７．６９、１７．９７、１８．３９、１８．８２、１９．０１、１９．２７、１９．６７、２０．１４、２０．８１、２１．４１、２１．８３、２２．２０、２２．６５、２３．０３、２３．２７、２３．５４、２３．８４、２４．４５、２４．６７、２４．９４、２５．４６、２５．８７、２６．０８、２６．５３、２６．８９、２７．２３、２７．６６、２８．４０、２９．１７、および２９．８７度の２シータ回折角にピークを含むＸＲＰＤパターンを有し、ここで、約はプラスまたはマイナス０．５度の２シータの変動を指す、請求項９に記載の結晶。
【請求項１１】
約１５０℃に吸熱開始を含むＤＳＣサーモグラムを有し、ここで、約は１５０℃の＋／−３％の変動を指す、請求項９に記載の結晶。
【請求項１２】
請求項１から１１のいずれか一項に記載の結晶を含む医薬組成物。
【請求項１３】
アセトン溶液からの５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジン塩酸塩の結晶化を含む、請求項５に記載の結晶を調製する方法。
【請求項１４】
酢酸エチルまたはアセトンを場合によって含有するメタノール溶液からの５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジン塩酸塩の結晶化を含む、請求項９に記載の結晶を調製する方法。
【請求項１５】
Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病およびメタボリック症候群からなる群から選択される疾患を治療するための組成物であって、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の有効量の結晶を含む組成物。
【請求項１６】
前記疾患がＩＩ型糖尿病である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
インスリン産生の刺激、グルコース依存性インスリン分泌の刺激、血中グルコースの低減、または血中トリグリセリドレベルの低減の１つ以上のための組成物であって、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の有効量の結晶を含む組成物。
【請求項１８】
前記組成物がＤＰＰ  ＩＶ阻害薬の治療有効量と組み合わせて投与されることを特徴とする、請求項１５から１７に記載の組成物。
【請求項１９】
ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬が、シタグリプチン、ビルダグリプチン、デナグリプチン、サキサグリプチンおよびアログリプチンからなる群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬がシタグリプチンまたはビルダグリプチンである、請求項１９に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンの結晶性塩、それらの組成物、それらの調製のための方法およびそれらの使用のための方法が提供される。
【背景技術】
【０００２】
特許文献１は、５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジン、ならびに糖尿病および代謝障害の治療のためのその使用を開示している。ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０３８８４７は、５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンを包含するオキシメチレン化合物を、ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＶ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害薬と併用治療する使用を開示している。糖尿病および代謝障害に関係する疾患の治療のための改善された治療に対する必要性が存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開第２００８／０８３２３８号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
一実施形態において、本発明は、ベシル酸、カンシル酸、エシル酸、ＨＢｒ、ＨＣｌ、メシル酸、硫酸およびトシル酸塩からなる群から選択される５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンの結晶性塩を提供する。
【０００５】
別の実施形態において、５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジン塩酸塩の多形（形態１および形態２）が提供される。
【０００６】
他の実施形態において、本明細書に記載の結晶性塩または多形の調製のための方法が提供される。
【０００７】
他の実施形態において、本明細書に記載の結晶性塩または多形、および薬学的に許容される担体を含む組成物が提供される。
【０００８】
他の実施形態において、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病およびメタボリック症候群からなる群から選択される疾患を治療するために、本明細書に記載の結晶性塩または多形を使用する方法、およびそのような医薬の調製におけるそれらの使用が提供される。
【０００９】
他の実施形態において、インスリン産生の刺激、グルコース依存性インスリン分泌の刺激、血中グルコースの低減、または血液トリグリセリドレベルの低減の１つ以上のために、本明細書に記載の結晶性塩または多形を使用するための、およびそのような医薬の調製におけるそれらを使用するための方法が提供される。
【００１０】
他の実施形態において、ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬の治療有効量を用いる併用治療において、本明細書に記載の結晶性塩または多形を使用するための方法が提供される。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
ベシル酸塩、カンシル酸塩、エシル酸塩、ＨＢｒ、ＨＣｌ、メシル酸塩、硫酸塩およびトシル酸塩からなる群から選択される、５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンの結晶性塩。
（項目２）
図１５〜２１のいずれか１つに示されるのと実質的に同一のＸ線粉末（ｐｏｗｅｒ）回折（ＸＲＰＤ）パターンを有する、項目１に記載の塩。
（項目３）
項目１に記載の結晶性塩酸塩。
（項目４）
図２２に示されるのと実質的に同一のＸＲＰＤパターンを有する、項目３に記載の結晶性塩酸塩。
（項目５）
約８．８、１０．８、１６．１、１７．４、２０．４、２０．９、２１．５、２１．７、２６．６および２８．１度の２シータ回折角にピークを含むＸＲＰＤパターンを有する多形（形態Ｉ）である、項目３に記載の結晶性塩酸塩。
（項目６）
図１に示されるのと実質的に同一のＸＲＰＤパターンを有する、項目５に記載の多形。
（項目７）
約１９１℃に吸熱開始を含むＤＳＣサーモグラムを有する、項目５に記載の多形。
（項目８）
図２に実質的に示されるＤＳＣサーモグラムを有する、項目５に記載の多形。
（項目９）
図４に実質的に示されるラマンスペクトルを有する、項目５に記載の多形。
（項目１０）
約７．８、１０．１、１２．５、１８．４、１９．０、２０．８、２３．０および２３．５度の２シータ回折角にピークを含むＸＲＰＤパターンを有する多形（形態ＩＩ）である、項目３に記載の結晶性塩酸塩。
（項目１１）
図５に示されるのと実質的に同一のＸＲＰＤパターンを有する、項目１０に記載の多形。
（項目１２）
約１５０℃に吸熱開始を含むＤＳＣサーモグラムを有する、項目１０に記載の多形。
（項目１３）
図６に実質的に示されるＤＳＣサーモグラムを有する、項目１０に記載の多形。
（項目１４）
項目１から１２のいずれか一項に記載の結晶性塩を含む医薬組成物。
（項目１５）
アセトン溶液からの５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジン塩酸塩の結晶化を含む、項目５に記載の多形（形態Ｉ）を調製する方法。
（項目１６）
酢酸エチルまたはアセトンなどの他の溶媒を場合によって含有するメタノール溶液からの５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジン塩酸塩の結晶化を含む、項目１０に記載の多形（形態ＩＩ）を調製する方法。
（項目１７）
Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病およびメタボリック症候群からなる群から選択される疾患を治療する方法であって、項目１、４、５、または９のいずれか一項に記載の有効量の塩をそのような治療を必要とする対象に投与することを含む方法。
（項目１８）
前記疾患がＩＩ型糖尿病である、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
インスリン産生の刺激、グルコース依存性インスリン分泌の刺激、血中グルコースの低減、または血中トリグリセリドレベルの低減の１つ以上のための方法であって、項目１、４、５、または９のいずれか一項に記載の有効量の塩をそのような治療を必要とする対象に投与することを含む方法。
（項目２０）
ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬の治療有効量を投与することをさらに含む、項目１７から１９に記載の方法。
（項目２１）
ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬が、シタグリプチン、ビルダグリプチン、デナグリプチン、サキサグリプチンおよびアログリプチンからなる群から選択される、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬がシタグリプチンまたはビルダグリプチンである、項目２１に記載の方法。
【００１１】
本発明のこれらおよび他の態様は、以下の本文でさらに記載される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ＨＣｌ塩形態ＩのＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図２】ＨＣｌ塩形態ＩのＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図３】ＨＣｌ塩形態ＩのＴＧＡサーモグラムを示す図である。
【図４】ＨＣｌ塩形態Ｉのラマンスペクトルを示す図である。
【図５】ＨＣｌ塩形態ＩＩのＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図６】ＨＣｌ塩形態ＩＩのＤＳＣサーモグラムを示す図である。
【図７】ＨＣｌ塩形態ＩＩのＴＧＡサーモグラムを示す図である。
【図８】ベシル酸塩のＤＳＣおよびＴＧＡのサーモグラムの重ね合わせを示す図である。
【図９】カンシル酸塩のＤＳＣおよびＴＧＡのサーモグラムの重ね合わせを示す図である。
【図１０】エシル酸塩のＤＳＣおよびＴＧＡのサーモグラムの重ね合わせを示す図である。
【図１１】ＨＢｒ塩のＤＳＣおよびＴＧＡのサーモグラムの重ね合わせを示す図である。
【図１２】メシル酸塩のＤＳＣおよびＴＧＡのサーモグラムの重ね合わせを示す図である。
【図１３】硫酸塩のＤＳＣおよびＴＧＡのサーモグラムの重ね合わせを示す図である。
【図１４】トシレート塩のＤＳＣおよびＴＧＡのサーモグラムの重ね合わせを示す図である。
【図１５】ベシル酸塩のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図１６】カンシル酸塩のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図１７】エシル酸塩のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図１８】ＨＢｒ塩のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図１９】メシル酸塩のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図２０】硫酸塩のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図２１】トシル酸塩のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図２２】ＨＣｌ塩（パターンＯ）のＸ線の粉末パターンを示す図である。
【図２３】オスＳＤラットにおいて、２００ｍｇ／ｋｇの単回経口投薬に続いて、微粉化ＭＢＸ−２９８２遊離塩基、ＨＣｌ形態ＩおよびＩＩ、メシル酸塩およびトシル酸塩の、時間に対する平均血漿中濃度を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本明細書および続く請求項において、いくつかの用語を参照するが、他に指定しない限り、以下の意味を有すると定義するものとする。
略語
【００１４】
ＸＲＰＤ（Ｘ線粉末回折）；ＤＳＣ（示差走査熱量測定法）；ＴＧＡ（熱重量分析）；ベシル酸塩（ベンゼン（ｂｅｚｅｎｅ）スルホン酸塩）；カンシル酸塩（カンファースルホン酸塩）；エシル酸塩（エタンスルホン酸塩）；メシル酸塩（メタンスルホン酸塩）；トシル酸塩（ｐ−トルエンスルホン酸塩）；アセトン（ＣＨ３）２（ＣＯ）；ＲＨ（相対湿度）。
【００１５】
本明細書および請求項において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈に明示されない限り、複数形の照応を含む。
【００１６】
本明細書において使用される場合、「を含む」という用語は、組成物および方法が記述された要素を含むが他のものを除外しないことを意味するよう意図されている。
【００１７】
本明細書において使用される場合、「約」という用語は、測定において用いられる場合、または値、単位、定数、または値の範囲を修飾するために用いられる場合、＋／−３％の変動を指す。
【００１８】
本明細書において使用される場合、「結晶塩」という用語は、無水物で溶媒和されていない結晶に加えて、程度の異なる水和物または溶媒和物と関係し得る結晶を包含する。
【００１９】
本明細書において使用される場合、「実質的に」という用語は、＋／−約１％、約５％、約１０％、約１５％、または約２０％の程度の変動を指す。
【００２０】
本明細書において使用される場合、「実質的に純粋な」という用語は、化合物の特定の多形相に関して、その多形相（ｐｏｌｙｍｏｒｐｈ  ｆｏｒｍ）が約３０重量％未満、または約２０重量％未満、または約１５重量％未満、または約１０重量％未満、または約５重量％未満、または約１重量％未満の不純物を含むことを意味する。このような不純物は、同じ化合物の他の多形相または微量の溶媒を包含し得る。
【００２１】
本明細書において使用される場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、当業界で通常知られているように、あらゆる溶媒および分散媒、被覆物、界面活性剤、抗酸化剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗カビ剤）、等張化剤、吸収遅延剤、塩、防腐剤、薬剤、薬剤安定剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、芳香剤、染料、同様の材料、およびこれらの組合せを含む。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１８版  Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  １９９０年，１２８９〜１３２９頁を参照のこと、また、これは参照により本明細書に組み込まれる。）有効成分と両立困難な場合を除き、任意の従来の担体は、治療組成物または医薬組成物へのその使用が企図される。
【００２２】
本明細書において使用される場合、「対象」という用語は、哺乳動物を指し、ヒト、家庭動物（例えば、イヌまたはネコ）、家畜（ウシ、ウマまたはブタ）、および実験動物（マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ブタ、ラビット、イヌ、またはサル）を含み、これらに限定されない。
【００２３】
「治療有効量」という用語は、下に定義されるように、そのような治療を必要とする哺乳動物に投与された場合、治療を達成するのに十分な有効成分の量を指す。治療有効量は治療される対象および疾患症状、対象の体重および年齢、疾患症状の重篤度、投与方式などに依存して変化し、主治医はこれを容易に決定することができる。
【００２４】
「治療」または「治療すること」という用語は、（ｉ）疾患の予防、すなわち、疾患の臨床症候を発症させないこと；（ｉｉ）疾患の阻止、すなわち、臨床症候の発症を妨げること；および／または（ｉｉｉ）疾患の軽減、すなわち、臨床症候の退行を引き起こすことを含む、哺乳動物における疾患の任意の治療を意味する。
【００２５】
「真性糖尿病」または「糖尿病」という用語は、体内の適切な血糖レベルの維持の不全を生じる、グルコースの産生および利用における代謝障害を一般的特徴とする疾患または症状を意味する。この欠陥の結果が血中グルコースの上昇であり、これを「高血糖」と呼ぶ。糖尿病の２つの主な形態は、Ｉ型糖尿病およびＩＩ型糖尿病である。上記のように、Ｉ型糖尿病は一般的に、グルコース利用を調節するホルモンであるインスリンの絶対的欠乏の結果である。ＩＩ型糖尿病は、インスリンのレベルが正常であるか高いにもかかわらず起こることが多く、細胞組織がインスリンに適切に反応できないことから生じる可能性がある。ＩＩ型糖尿病対象の大部分は、インスリン抵抗性であり、インスリン分泌が末梢組織のインスリン反応抵抗性を補うことができないという点で、インスリンの相対的な欠乏を有する。さらに、多くのＩＩ型糖尿病患者が肥満である。他のタイプのグルコース恒常性障害には、正常なグルコース恒常性と糖尿病との間の代謝中間段階である耐糖能異常、およびＩ型またはＩＩ型糖尿病の病歴がない女性における妊娠中の耐糖能障害である妊娠糖尿病が含まれる。
【００２６】
「メタボリック症候群」という用語は、腹部脂胖症、インスリン抵抗性、耐糖能異常、糖尿病、高血圧および脂質異常症を含む一群の代謝異常を指す。これらの異常は、血管事象の高いリスクを伴うことが知られている。
【００２７】
「腹部脂胖症」という用語は、成人の高血中コレステロール値の検出、評価および治療に関する米国コレステロール教育プログラム専門家パネルの第３報告書（ＮＣＥＰ／ＡＴＰ  Ｐａｎｅｌ  ＩＩＩ）によって推奨される、ウエスト周囲のカットオフポイントが、男性で≧１０２ｃｍおよび女性で≧８０ｃｍであることによって定義される。
【００２８】
「インスリン抵抗性」という用語は、一般に、グルコース代謝の障害として定義することができる。より具体的には、インスリン抵抗性は、インスリンが広範囲の濃度にわたってその生物学的作用を及ぼす能力が低下し、予想されるよりも低い生物学的効果しかもたらさないこととして定義することができる（例えば、Ｒｅａｖｅｎ  ＧＭ，Ｊ．Ｂａｓｉｃ  ＆  Ｃｌｉｎ．  Ｐｈｙｓ．  ＆  Ｐｈａｒｍ（１９９８年）  ９巻：３８７〜４０６頁およびＦｌｉｅ  Ｊ，  Ａｎｎ  Ｒｅｖ．  Ｍｅｄ（１９８３年）３４巻：１４５〜６０頁を参照）。インスリン抵抗性の者は、グルコースを適切に代謝する能力が低下しており、インスリン療法に対し、ほとんど全く反応しない。
【００２９】
インスリン抵抗性の症状発現としては、筋肉におけるグルコースの取込み、酸化および貯蔵に関する不十分なインスリン活性化、ならびに、脂肪組織における脂肪分解、および肝臓におけるグルコース産生および分泌の不適切なインスリン抑制が挙げられる。インスリン抵抗性は、多嚢胞性卵巣症候群、耐糖能異常、妊娠性糖尿病、メタボリック症候群、高血圧、肥満、アテローム性動脈硬化症および様々なその他の障害を引き起こすかまたはこれらの一因となる恐れがある。最終的に、インスリン抵抗性の個体は、糖尿病状態に達する点まで進行し得る。
【００３０】
「アテローム性動脈硬化症」という用語は、関連する医学分野において業務を行っている医師によって認識され理解される、血管の疾患および症状を包含する。アテローム性動脈硬化性の心血管疾患、冠状動脈心疾患（冠動脈疾患または虚血性心疾患としても知られる）、脳血管疾患および末梢血管疾患は、すべてアテローム性動脈硬化症の臨床徴候であり、したがって「アテローム性動脈硬化症」および「アテローム性動脈硬化疾患」という用語によって包含される。
【００３１】
糖尿病の「症候」という用語は、本明細書において用いられる場合、多尿症、多渇症、および多食症をその一般的な用法も含めて含むが、これらに限定されない。例えば、「多尿症」は、所与の期間中の大量の尿の排出を意味し；「多渇症」は、慢性の多渇を意味し；「多食症」は、過度の摂食を意味する。糖尿病のその他の症候には、例えば、ある種の感染（特に、真菌感染およびブドウ球菌感染）に対する感受性の増大、悪心、ならびにケトアシドーシス（血中におけるケトン体の産生増加）が含まれる。
【００３２】
糖尿病の「合併症」という用語は、微小血管合併症および巨大血管合併症を含むが、これらに限定されない。微小血管合併症は、一般に、微小血管の損傷をもたらす合併症である。これらの合併症としては、例えば、網膜症（眼における血管損傷に起因した視力の欠陥または喪失）；神経障害（神経系に対する血管損傷に起因した神経損傷および足の障害）；ならびに腎症（腎臓における血管損傷に起因した腎臓疾患）が挙げられる。巨大血管合併症は、一般に、大血管の損傷から生じる合併症である。これらの合併症としては、例えば、心血管疾患および末梢血管疾患が挙げられる。心血管疾患とは、心臓の血管の疾患のことをいう。例えば、Ｋａｐｌａｎ  ＲＭら、「Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅｓ」ｉｎ  ＨＥＡＬＴＨ  ＡＮＤ  ＨＵＭＡＮ  ＢＥＨＡＶＩＯＲ、２０６〜２４２頁（ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９３年）を参照されたい。心血管疾患は一般的に、例えば、高血圧（ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ）、（高血圧（ｈｉｇｈ  ｂｌｏｏｄ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）ともいわれる）、冠状動脈心臓疾患、発作、およびリウマチ性心疾患を含めて、いくつかの形態のうちの１つである。末梢血管疾患とは、心臓外部の血管のいずれかの疾患のことをいう。末梢血管疾患は多くの場合、血液を脚および腕の筋肉に運搬する血管の狭窄である。
【００３３】
「脂質異常症」という用語は、リポタンパク質レベルの低下および／または上昇（例えば、ＬＤＬおよび／またはＶＬＤＬレベルの上昇、およびＨＤＬレベルの低下）の両方を含む、血漿中のリポタンパク質の異常なレベルを指す。
【００３４】
「高脂血症」という用語には、以下が含まれるが、これらに限定されない。（１）家族性高カイロミクロン血症：脂肪分子を分解する酵素ＬＰリパーゼの不足を引き起こす、稀な遺伝的障害。ＬＰリパーゼの不足は、血中における大量の脂肪またはリポタンパク質の蓄積を引き起こす恐れがある；
（２）家族性高コレステロール血症：根源的欠陥がＬＤＬ受容体の機能不全および／またはＬＤＬ受容体の欠如をもたらす、ＬＤＬ受容体遺伝子の一連の突然変異である場合に引き起こされる比較的よくある遺伝的障害である。これによりＬＤＬ受容体によるＬＤＬのクリアランスが無効となり、血漿中のＬＤＬおよび総コレステロールレベルの上昇が起こる；
（３）家族性複合型高脂血症：多種リポタンパク質型高脂血症としても知られる。対象およびその罹患一親等親族が様々な時点で高コレステロールおよび高トリグリセリドを示しうる遺伝性障害。ＨＤＬコレステロールのレベルは中等度に低下することが多い；
（４）家族性アポリポタンパク質Ｂ−１００欠損は、比較的よくある常染色体優性遺伝子異常である。この欠損は、アルギニンの代わりにグルタミンへの置換を引き起こす１個のヌクレオチドの突然変異によって起こり、ＬＤＬ粒子のＬＤＬ受容体への親和性を低下させる恐れがある。その結果、血漿中のＬＤＬおよび総コレステロールレベルの上昇を引き起こす可能性がある；
（５）家族性異常βリポタンパク質血症は、ＩＩＩ型高リポタンパク質血症とも呼ばれ、アポリポタンパク質Ｅ機能の異常を伴う、血清ＴＧおよびコレステロールレベルの中等度から重度の上昇を来す、まれな遺伝性障害である。ＨＤＬレベルは通常は正常である；および
（６）家族性高トリグリセリド血症は、血漿ＶＬＤＬの濃度が上昇する、よくある遺伝性障害である。これは軽度から中等度のトリグリセリド（ＴＧ）レベルの上昇を引き起こすことがあり（通常はコレステロールレベルの上昇は見られない）、血漿ＨＤＬレベルは低いことが多い。
【００３５】
高脂血症の危険因子としては、以下のものが含まれるが、これらに限定されない：（１）Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、クッシング症候群、甲状腺機能低下症およびある種の腎不全の病歴などの疾患危険因子；（２）経口避妊薬；エストロゲンおよびコルチコステロイドなどのホルモン；ある種の利尿薬；および種々のβ遮断薬を含む薬物危険因子；（３）食事性危険因子には、総カロリー当たり、４０％を超える食物脂肪摂取量；総カロリー当たり、１０％を超える飽和脂肪摂取量；１日当たり３００ｍｇを超えるコレステロール摂取量；習慣的および過度のアルコール摂取；ならびに肥満が含まれる。
【００３６】
「肥満の」および「肥満」という用語は、世界保健機関によれば、男性の場合には２７．８ｋｇ／ｍ２および女性の場合には２７．３ｋｇ／ｍ２を超える肥満度指数（「ＢＭＩ」）のことをいう（ＢＭＩは体重（ｋｇ）／身長（ｍ２）に等しい）。肥満は、糖尿病および高脂血症を含む様々な医学的症状に関連している。肥満はＩＩ型糖尿病発症の公知の危険因子でもある（例えば、Ｂａｒｒｅｔｔ−Ｃｏｎｎｅｒ  Ｅ、Ｅｐｉｄｅｍｏｌ  Ｒｅｖ（１９８９年）１１巻：１７２〜１８１頁；および、Ｋｎｏｗｌｅｒら、Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｎｕｔｒ（１９９１年）５３巻：１５４３〜１５５１頁を参照）。
【００３７】
遊離塩基５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジン（ＭＢＸ−２９８２）は、以下の構造：
【化１】
0005909185.tif 000002
を有する。
【００３８】
本明細書において提供される５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンのベシル酸、カンシル酸、エシル酸、ＨＢｒ、ＨＣｌ、メシル酸、硫酸およびトシル酸の塩は、それらのＸＲＰＤパターンによってさらに証拠づけられるように結晶性（ｃｙｒｓｔａｌｌｉｎｅ）固体であることが見出される。対照的に、酢酸、アジピン酸、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、クエン酸、ギ酸、ゲンチシン酸（２，５−ジヒドロキシ安息香）、Ｌ−グルタミン酸、グルタル酸、乳酸、マレイン酸、Ｌ−リンゴ酸、リン酸、および、Ｌ−酒石酸から形成された塩は、取り扱い、単離するのに困難で、大量調製に使用するのに適切ではない、油状物またはゲルであることが見出された。したがって、結晶性ベシル酸、カンシル酸、エシル酸、ＨＢｒ、ＨＣｌ、メシル酸、硫酸およびトシル酸の塩は、５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンの医薬の（ｐｈａｒａｍｃｅｕｔｉｃａｌ）塩を調製する使用に対して優れている。
【００３９】
塩は、ＤＳＣおよびＴＧＡなどのいくつかの固体状態の技法によって特性評価される。融点温度およびサーモグラムが、機器および、使用される加熱速度を含む使用される手順に依存して変動し得ることは理解される。したがって、本明細書において開示された温度データおよびグラフはそのような変動を含むものと理解されている。
【００４０】
塩はまた、ＸＲＰＤ（Ｘ線粉末回折）によって特性評価される。相対強度およびピーク帰属は、スペクトルを得るために使用される試料調製、ならびに装備および装置、ならびに分析操作法および設定を包含するいくつかの因子に依存して変動し得る。本明細書に記載のピーク帰属は、プラスまたはマイナス０．５度２シータの変動を包含するように意図される。
【００４１】
一実施形態において、約１５３℃にＤＳＣの吸熱を有する結晶性ベシル酸（ｂｅｓｙａｌｔｅ）塩が提供される。一態様において、ベシル酸塩は、図８に実質的に示されるようなＤＳＣまたはＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、ベシル酸塩は、図１５で実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００４２】
一実施形態において、約１８４℃にＤＳＣの吸熱を有する結晶性カンシル酸塩が提供される。一態様において、カンシル酸塩は、図９に実質的に示されるような、ＤＳＣまたはＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、カンシル酸塩は、図１６に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００４３】
一実施形態において、約９９℃でＤＳＣの吸熱を有する結晶性エシル酸塩が提供される。一態様において、エシル酸塩は、図１０に実質的に示されるような、ＤＳＣまたはＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、エシル酸塩は、図１７に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００４４】
一実施形態において、約１４２℃でＤＳＣの吸熱を有する結晶性ＨＢｒ塩が提供される。一態様において、ＨＢｒ塩は、図１１に実質的に示されるような、ＤＳＣまたはＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、ＨＢｒ塩は、図１８に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００４５】
一実施形態において、約８６℃でＤＳＣの吸熱を有する結晶性メシル酸塩が提供される。一態様において、メシル酸塩は、図１２に実質的に示されるようなＤＳＣまたはＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、メシル酸塩は、図１９に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００４６】
一実施形態において、約９７℃でＤＳＣの吸熱を有する結晶性硫酸塩が提供される。一態様において、硫酸塩は、図１３に実質的に示されるようなＤＳＣまたはＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、硫酸塩は、図２０に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００４７】
一実施形態において、約９４℃でＤＳＣの吸熱を有する結晶性トシル酸塩が提供される。一態様において、トシル酸塩塩は、図１４に実質的に示されるようなＤＳＣまたはＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、トシル酸塩は、図２１に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００４８】
一実施形態において、結晶性ＨＣｌ塩が提供される。結晶性（ｃｒｙｔａｌｌｉｎｅ）ＨＣｌ塩は、下記の結晶（ｃｒｙｔｓｔａｌ）「パターンＯ」、および実施例（表６）に記載のものを含む。ＨＣｌ塩はまた、下記の形態Ｉもしくは形態ＩＩなどの多形またはこれらの混合物を含んでいてもよい。結晶性ＨＣｌは、またアセトン、エタノール、メタノールおよび酢酸エチルなどの微量の溶媒を含んでいてもよい。いくつかの態様において、本明細書に提供される形態Ｉ多形は、実質的に純粋であり、残留するアセトン（ａｃｅｔａｏｎｅ）を含んでいてもよい。本明細書に提供される形態ＩＩ多形は、実質的に純粋であり、残留するメタノールおよび／または酢酸エチルを含んでいてもよい。
【００４９】
一実施形態において、微量のエタノールを含有する結晶性ＨＣｌ塩（パターンＯ）が提供される。一態様において、ＥｔＯＨとＨＣｌ塩の比率はおよそ１：６である。一態様において、ＨＣｌ塩は、図２２に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。
【００５０】
一実施形態において、約１９１℃でＤＳＣの吸熱開始点を有する多形（形態Ｉ）ＨＣｌ塩が提供される。一態様において、形態Ｉ多形は、図２に実質的に示されるようなＤＳＣサーモグラムを有する。他の態様において、形態Ｉ多形は、図３に実質的に示されるようなＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、形態Ｉ多形は、図４に実質的に示されるようなラマンスペクトルを有する。他の態様において、形態Ｉ多形は、約８．８、１０．８、１６．１、１７．４、２０．４、２０．９、２１．５、２１．７、２６．６および２８．１度２シータ回折角のＸＲＰＤピークを含む。さらに別の態様において、形態Ｉ多形は、図１に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。表１は観察された形態１のＸＲＰＤピークを列挙し、表２は代表的なピークを列挙し、どちらの表においても相対強度を添えてある。表３は、形態Ｉの観察されたラマンピークを列挙している。
【００５１】
一実施形態において、約１５０℃にＤＳＣの吸熱開始点を有する多形（形態ＩＩ）ＨＣｌ塩が提供される。一態様において、形態ＩＩ多形は、図６に実質的に示されるようなＤＳＣサーモグラムを有する。他の態様において、形態ＩＩ多形は、図７に実質的に示されるようなＴＧＡサーモグラムを有する。他の態様において、形態ＩＩ多形は、約７．８、１０．１、１２．５、１８．４、１９．０、２０．８、２３．０および２３．５度２シータ回折角のＸＲＰＤピークを含む。さらに別の態様において、形態ＩＩ多形は、図５に実質的に示されるようなＸＲＰＤパターンを有する。表４は観察された形態ＩＩのＸＲＰＤピークを列挙し、表５は代表的なピークを列挙し、どちらの表においても相対強度を添えてある。
【００５２】
下表において、ピークの位置は、ＰａｔｔｅｒｎＭａｔｃｈ（商標）３．０．１ソフトウェアを使用して自動的に決定し、上記基準に基づいて小数点より後の１または２つの有効数字に四捨五入した。ピーク位置のばらつきは、Ｘ線粉末回折におけるばらつきの米国薬局方（ＵＳＰ３２，ＮＦ２７，Ｖｏｌ．１，ｐｇ．３９２，２００９）の議論で略述された推奨に基づいて±０．１０度２シータ内で得られる。本明細書において報告する具体的な測定に関連する正確度および精度は求めなかった。さらに、相異なる装置で独立して調製される試料の第三者測定は、±０．１０度２シータ（例えば±０．５０度２シータ以上）より大きいばらつきをもたらし得る。
【表１】
0005909185.tif 000003
【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
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【００５３】
本明細書において開示される結晶性塩は、有機または混合有機溶媒からの沈澱によって調製することができ、有機／水溶媒からも調製することができる。
好適な有機溶媒は、アセトン、アセトニトリル、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、酢酸エチル、エタノール、ヘプタン、ヘキサン、ヘキサフルオロイソプロパノール、イソプロピルアルコール、イソプロピルエーテル、メチルエチルケトン、メタノール、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル、２，２，２−トリフルオロエタノールおよびテトラヒドロフランを含む。
【００５４】
ＨＣｌ塩（形態Ｉ）は、通常、アセトン、アセトニトリル、エタノール／酢酸エチル、メタノール／酢酸エチルおよびＴＨＦなどの溶媒中で高温で遊離塩基にＨＣｌを添加することによって、場合によって、続いてアセトン中でさらに結晶化することによって調製することができる。ＨＣｌ塩（形態ＩＩ）は、通常、メタノール中で結晶化することによって調製することができる。メタノール溶液は、場合によって、酢酸エチルまたはアセトンなどの他の溶媒を含んでいてもよい。
【００５５】
そのような調製の例示の非限定的な例は、以下の実施例の部に示す。当業者は、本開示に接すると、代替結晶化法を想起して実施例を修正することができ、そのような方法が所望の結晶性塩を製造することができるか、判断することができよう。
【００５６】
本発明の実施形態によると、本明細書に記載の１種または複数の結晶性塩を含む医薬組成物が提供される。他の実施形態において、医薬の調製における結晶性塩の使用およびＩ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病およびメタボリック症候群からなる群から選択される疾患の治療におけるそれらの使用が提供される。塩はまた、ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬との併用治療において使用されてもよい。
【００５７】
一実施形態において、インスリン産生の刺激、グルコース依存性インスリン分泌の刺激、血中グルコースの低減、または血中トリグリセリドレベルの低減の１つ以上のために、そのような治療を必要とする対象に本明細書に記載の有効量の結晶性塩を投与することを含む方法が提供される。
【００５８】
本発明において有用なＤＰＰ  ＩＶ阻害薬は、シタグリプチン（Ｍｅｒｃｋ）、ビルダグリプチン（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＭ−４７７１１８（サキサグリプチン）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、Ｒ１４３８（アミノメチルピリジン（Ｒｏｃｈｅ）（ＮＶＰ  ＤＰＰ７２８（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＳＮ９３０１（Ｐｒｏｓｉｄｉｏｎ）、Ｐ３２／９８（イソロイシンｔｈｉｏｚｏｌｉｄｉｄｅ）（Ｐｒｏｂｉｏｄｒｕｇ）、ＧＳＫ８２３０９３Ｃ（デナグリプチン）（Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈｋｌｉｎｅ）、ＳＹＲ−３２２（アログリプチン）（Ｔａｋｅｄａ）、ＮＮ−７２０１（ＮｏｖｏＮｏｒｄｉｓｋ）、ＡＬＳ２−０４２６（Ａｌａｎｔｏｓ）である。（Ｇｒｅｅｎ  ＢＤ，Ｆｌａｔｔ  ＰＲ，Ｂａｉｌｅｙ  ＣＪ，Ｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｐｅｐｔｉｄａｓｅ  ＩＢ（ＤＰＰ  ＩＶ）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ａ  ｎｅｗｌｙ  ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｄｒｕｇ  ｃｌａｓｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｔｙｐｅ  ＩＩ  ｄｉａｂｅｔｅｓ（ジペプチジルペプチダーゼ−ＩＢ（ＤＰＰ  ＩＶ）阻害薬：ＩＩ型糖尿病の治療用に新しく現われた薬物の種類），Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｖａｓｃ  Ｄｉｓ  Ｒｅｓ  ２００６，３：１５９−１６５）好ましいＤＰＰ  ＩＶ阻害薬はシタグリプチン、ビルダグリプチン、デナグリプチン、サキサグリプチンおよびアログリプチンである。より好ましいＤＰＰ  ＩＶ阻害薬はシタグリプチンおよびビルダグリプチンである。シタグリプチンはＪａｎｕｖｉａ（商標）として上市されている承認薬であり、またビルダグリプチンはＧａｌｖｕｓ（商標）として上市されている承認薬である。
【００５９】
結晶性塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬は、単一用量でまたは別々の用量で投与される。単一用量は１日当たり１回または１日当たり複数回投与される。別々の用量として投与される場合、用量は、１日当たり１回または１日当たり複数回投与することができる。
【００６０】
一実施形態において、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬が単一用量で投与される場合、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬は、医薬として単一ピル、単一錠剤、または単一カプセルに製剤化される。塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬が、別々の用量で投与される場合、塩は、ピル、錠剤、またはカプセルに製剤化され、ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬は、医薬として別のピルまたはカプセルに製剤化される。
【００６１】
塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬が別々の用量で投与される場合、本発明の塩を最初に投与し、塩の投与後、次にＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することができる。代替として、ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を最初に投与し、ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬の投与後、次に本発明の塩を投与することができる。順次の第１の投与と第２の投与との時間間隔は、当業者により変動し得る。一実施形態において、第１の投与（塩、またはＤＰＰ  ＩＶ阻害剤）後すぐに、第２の投与（塩、またはＤＰＰ４阻害薬）が行われる。別の実施形態において、第２の投与は、第１の投与後、２分、５分、１０分、１５分、３０分、または６０分、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、または１２時間内である。さらに別の実施形態は、朝に塩および／またはＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を対象に投与した後、夜に塩および／またはＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を先に治療された対象に投与することを提供する。別の実施形態において、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬は、好ましくは一日に一度投与される。
【００６２】
本発明の別の態様は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することによる、対象の血中グルコースレベルを低下させる方法を提供する。本方法は、哺乳動物に、有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与するステップを含む。本方法は、本発明の式（Ｉ）の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与する前後に、血中グルコースレベルを測定するステップをさらに含む。血中グルコースレベルは、血液または尿の試料から血中グルコースを測定する、多くの市販のグルコースモニター装置によって、または本明細書に教示されるように、容易に測定することができる。血中グルコースは、血液または尿試料を必要としない市販の血糖計（ｇｌｕｃｏｍｅｔｅｒ）で測定することもできる。
【００６３】
本発明の別の態様は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することによる、対象の血中インスリンレベルを低下させる方法を提供する。本方法は、哺乳動物に、有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与するステップを含む。本方法は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与する前後に、血中インスリンレベルを測定するステップをさらに含む。血中インスリンレベルは、血液または尿試料からインスリンを測定する、周知のインスリンモニタリングアッセイによって、または本明細書に教示されるように、容易に測定される。
【００６４】
別の態様において、本発明は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することによる、対象の血中インクレチンレベルを上げる方法を提供する。インクレチンはＧＬＰ−１およびＧＩＰである。本方法は、哺乳動物に、有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与するステップを含む。本方法は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与する前後に、血中インクレチンレベルを測定するステップをさらに含む。血中インクレチンレベルは、周知のインクレチンモニタリングアッセイによって、または本明細書に教示されるように、容易に測定される。
【００６５】
本発明のさらに別の態様は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することによる、対象の血中トリグリセリドレベルを低下させる方法を提供する。本方法は、哺乳動物に、有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与するステップを含む。本方法は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与する前後に、血中トリグリセリドレベルを測定するステップをさらに含む。血中トリグリセリドレベルは、血液試料から血中トリグリセリドレベルを測定する多くの市販装置によって、容易に測定される。
【００６６】
本発明のさらなる態様は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することによる、対象の胃内容の排出を低下させる（ｌｏｗｉｎｇ）方法を提供する。本方法は、有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を哺乳動物に投与するステップを含む。本方法は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与する前後に、血中インクレチンレベルを測定するステップをさらに含む。血中インクレチンレベルは、周知のインクレチンモニタリングアッセイによって、または本明細書に教示されるように、容易に測定される。
【００６７】
本発明の別の態様は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することによる、対象の膵島細胞でのインスリン産生量を上げる方法を提供する。本方法は、哺乳動物に、有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与するステップを含む。本方法は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与する前後に、膵臓の膵島細胞またはβ細胞におけるインスリン産生量を測定するステップをさらに含む。膵島細胞およびβ細胞のインスリン産生量は、周知のアッセイによって、または本明細書に教示されるように、容易に測定される。
【００６８】
さらに別の態様において、本発明は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与することによる、対象の膵島機能を保存する方法を提供する。本方法は、哺乳動物に、有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与するステップを含む。本方法は、塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を投与する前後に、膵島細胞またはβ細胞がインスリンを産生する機能を測定するステップをさらに含む。膵島細胞およびβ細胞のインスリン産生量は、周知のアッセイによって、または本明細書に教示されるように、容易に測定される。
【００６９】
治療有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を、ＩＩ型糖尿病の治療および／または血漿グルコースレベルの低下に有用な１種または複数の医薬組成物を調製するのに使用することができる。さらに、治療有効量の塩およびＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を、要素として糖尿病を含む他の適応症（例えば、メタボリック症候群を含む）およびインスリン産生の増大の結果として改善可能な適応症（例えば、Ｉ型糖尿病の初期段階）の治療に有用な１種または複数の医薬組成物を調製するのに使用することができる。
【００７０】
本発明の組成物は、塩、および、場合によって、ＤＰＰ  ＩＶ阻害薬、その薬学的に許容される塩またはその加水分解可能な前駆体を含んでもよい。一般に、塩は、治療有効量で適切な担体または賦形剤と混合される。「治療的に有効な用量」、「治療有効量」、または交換可能に「薬学的に許容される用量」または「薬学的に許容される量」とは、所望の結果を達成する（例えば、ＩＩ型糖尿病の症候または合併症を緩和する）のに、本発明の化合物および薬学的に許容される担体の十分な量が存在することを意味する。
【００７１】
本発明の方法で使用するＭＢＸ−２９８２塩は、治療のために投与する様々な製剤に組み込むことができる。さらに詳しくは、適切な医薬的に許容される担体または希釈剤と組み合わせて、塩を医薬組成物に製剤化することができ、固体形態または半固体形態の調製物（例えば、錠剤、カプセル、丸薬、散剤、顆粒、糖衣錠、ゲル剤、スラリー、軟膏、坐剤、注射液、吸入剤）に製剤化することができる。投与は、経口、口腔内、直腸、皮内、および経皮を含む種々の方法で達成することができる。さらに、デポー製剤または徐放性製剤で、塩を全身ではなく局所的に投与することもできる。さらに、塩をリボソームで投与することができる。
【００７２】
本発明で使用するのに適した製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ  （１９８５）  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，  ＰＡ，  １７ｔｈ  ｅｄ．）に記載されており、本明細書に参照により組み込まれる。本明細書に記載の医薬組成物は、当業者に公知の様式で（すなわち、従来の混合、顆粒化、糖衣錠製造、微粉化、乳化、カプセル化、または封入法によって）製造することができる。以下の方法および賦形剤は、単なる例であり、決して限定するものではない。
【００７３】
経口投与の場合、塩を、当分野で周知の薬学的に許容される担体と混合することによって、容易に製剤化することができる。化合物と固体賦形剤とを混合し、得られた混合物を場合によって粉砕し、顆粒混合物を加工することによって、所望の場合、錠剤または糖衣錠コアを得るために適切な補助剤を加えた後、経口使用の医薬調製物を得ることができる。適切な賦形剤は、特に、充填剤（例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトールを含む糖）、セルロース調製物（例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドンなどの）である。所望の場合、架橋ポリビニルピロリドン、寒天またはアルギン酸もしくはその塩（例えばアルギン酸ナトリウム）などの崩壊剤を加えてもよい。
【００７４】
糖衣錠コアは、適切な被覆が施される。この目的のために、濃縮糖溶液を使用してもよく、この溶液は、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー溶液および適切な有機溶媒または溶媒混合物を場合によって含有してもよい。判別のため、または活性化合物の用量の組み合わせが異なることを知らせるために、錠剤または糖衣錠被覆に染料または顔料を加えてもよい。
【００７５】
経口的に使用することができる医薬調製物は、ゼラチン製のプッシュフィット（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセル、ならびにゼラチンおよび可塑剤（例えば、グリセロールまたはソルビトール）から製造する軟質密閉カプセルが挙げられる。プッシュフィットカプセルは、ラクトースなどの充填剤、デンプンなどの結合剤および／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤、場合によって安定剤と混合して、活性成分を含有してもよい。軟質カプセルの場合、活性化合物は、適切な液体（例えば、脂肪油、液体パラフィンまたは液体ポリエチレングリコール）に溶解または懸濁してもよい。さらに、安定剤を加えてもよい。経口投与用のすべての製剤は、そのような投与に適した用量であるべきである。
【００７６】
口腔投与の場合、組成物は、従来の様式で、錠剤またはロゼンジの形態をとることができる。
【００７７】
吸入投与の場合、本発明による塩は、適切な噴射剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適切な気体）を用い、加圧パックまたはネブライザからエアロゾルスプレー組成の形態で、または噴射剤を使わず、乾燥粉末吸入器によって簡便に送達することができる。加圧エアロゾルの場合、用量単位は、一定量を送達するようにバルブを合わせることによって決定することができる。吸入器または注入器に使用するためのカプセルおよびカートリッジ（例えばゼラチン製）は、化合物と、適切な粉末基剤（例えば、ラクトースまたはデンプン）との粉末混合物を含有するように製剤化することができる。
【００７８】
塩は、例えば、従来の坐剤基剤（例えば、ココアバター、カルボワックス、ポリエチレングリコールまたは他のグリセリド、これらはすべて体温で溶解し、室温では固体である）を含有する直腸組成物（例えば、坐剤または停留浣腸）に製剤化することができる。
【００７９】
先に記載した製剤に加え、塩を、デポー調製物として製剤化することができる。このような長期にわたって作用する製剤は、移植によって投与してもよく（例えば皮下投与または筋肉内投与）、または、筋肉注射によって投与してもよい。したがって、例えば、塩を、適切なポリマー物質または疎水性物質とともに（例えば、許容される油中の乳剤として）、またはイオン交換樹脂とともに、または難溶性誘導体（例えば、難溶性塩）として製剤化することができる。
【００８０】
代替として、疎水性医薬化合物のための他の送達系を利用してもよい。リポソームおよび乳剤は、疎水性薬物を送達するビヒクルまたは担体の周知の例である。現時点で好ましい実施形態において、長期間循環するもの（すなわちステルスリポソーム）を使用してもよい。そのようなリポソームは、一般的に、Ｗｏｏｄｌｅら、米国特許第５，０１３，５５６号に記載されている。本発明の化合物はまた、米国特許第３，８４５，７７０号、同第３，９１６，８９９号、同第３，５３６，８０９号、同第３，５９８，１２３号および同第４，００８，７１９号に記載されている、制御放出手段および／または送達装置によって投与してもよい。
【００８１】
本発明で使用するのに適した医薬組成物は、活性成分を治療有効量含有する組成物を含む。組成物の投与量は、当然、治療の対象、対象の体重、疾患の重篤度、投与様式および主治医の判断によって変わる。有効量の決定は、特に、本明細書の詳細な開示に照らせば、十分に当業者の能力の範囲内である。
【００８２】
担体物質と組み合わせて単一の剤形を製造することができる活性化合物の量は、治療対象の疾患、哺乳動物の種類および具体的な投与様式によって変わる。しかし、一般的指針として、本発明の化合物の適切な単位用量は、例えば、好ましくは、活性化合物を０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇを含むものである。好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約５００ｍｇである。さらに好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約３００ｍｇである。別の好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約１００ｍｇである。他の好ましい単位用量は、２５、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０および５００ｍｇを含む。例えば７０ｋｇの成人の合計用量が対象のｋｇ体重あたり投与あたり、０．００１〜約１５ｍｇとなるように、単位用量はまた、１日に１、２、３、４、５または６回、好ましくは１日に１回または２回、より好ましくは１日に１回投与されてもよい。好ましい用量は、対象のｋｇ体重あたり投与あたり、約０．５から約１０ｍｇ、約０．５から約７．５ｍｇ、約０．５から約５ｍｇ、約０．５から約４ｍｇ、約０．５から約３ｍｇ、約０．５から約２ｍｇまたは約０．５から約１ｍｇであり、このような治療は、数週間または数ヶ月続いてもよく、ある場合には、数年続いてもよい。しかし、任意の特定の対象に対する具体的な用量レベルは、当業者が十分に理解しているように、使用する具体的な化合物の活性、治療対象の個体の年齢、体重、全体的な健康状態、性別および食事、投与時間および投与経路、排泄速度、すでに投与している他の薬物、および治療を受ける具体的な疾患の重篤度を含む種々の要因によって変わることが理解されよう。
【００８３】
典型的な用量は、１ｍｇ〜約５００ｍｇもしくは２５、５０、７５、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００ｍｇの錠剤を１日に１回、または活性化合物の含有量が比例して高い徐放性カプセルまたは徐放性錠剤を１日に１回であってもよい。徐放性の効果は、相異なるｐＨ値で溶解するカプセル材料によって、浸透圧でゆっくりと放出するカプセルによって、または他の既知の制御放出手段によって得ることができる。
【００８４】
さらに、本発明は、単位用量の塩および／またはＤＰＰ  ＩＶ阻害薬を、経口用または注射用の用量で含むキットを提供する。単位用量を含有する容器に加え、糖尿病、肥満、高脂血症、アテローム性動脈硬化およびメタボリック症候群、ならびに／またはそれぞれの関連する症候、合併症および障害を治療する薬物の使用および付随する利益を記載した添付情報文書も含有する。
【００８５】
以下の実施例は、本発明の特定の態様をさらに説明し、当業者が本発明を実施するのを支援するために提供される。これらの実施例は、本発明の範囲を限定するようには意図されない。
【実施例】
【００８６】
【表５Ａ】
0005909185.tif 000008
機器技法
【００８７】
ＸＲＰＤ：ＸＲＰＤパターンは、Ｉｎｅｌ  ＸＲＧ−３０００回折計またはＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ回折計を使用して収集した。
【００８８】
Ｉｎｅｌ：１２０°の２θ範囲で湾曲した位置感受性検出器を装備したＩｎｅｌ  ＸＲＧ−３０００回折計。Ｃｕ  Ｋα照射（４０ｋＶ、３０ｍＡ）の入射光線を使用し、０．０３°２θの分解能でリアルタイムにデータを収集した。分析前に、シリコン標準（ＮＩＳＴ  ＳＲＭ  ６４０ｃ）はＳｉ１１１ピーク位置を分析して検定した。分析のために壁の薄いガラス毛細管に試料を充填することにより、試料を準備した。毛細管を各ゴニオメーター上部に搭載し、データ収集中に回転した。
【００８９】
ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ：Ｏｐｔｉｘ社製の長焦点微小焦点線源（ｌｏｎｇ，ｆｉｎｅ−ｆｏｃｕｓ  ｓｏｕｒｃｅ）を用いてＣｕ  Ｋα放射線の入射光線を生成させた。楕円形の段階型多層鏡を使用し、線源のＣｕ  ＫαＸ線を試験片に通して検出器上に焦点を合わせた。データを収集し、Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ  Ｄａｔａ  Ｃｏｌｌｅｃｔｏｒソフトウェア（ｖ．２．２ｂ）を用いて解析した。分析前に、シリコン試験片（ＮＩＳＴ  ＳＲＭ  ６４０ｃ）を分析して、Ｓｉ１１１ピーク位置を検定した。試験片を３μｍ厚のフィルム間にサンドイッチし、透過幾何学において分析し、回転させて配向統計値を最適化した。軸方向の発散を最小化するため、入射光線および回折光線には、ソーラースリットを使用した。回折パターンは、試験片から２４０ｍｍに配置した走査位置感受性検出器（Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ）を用いて収集した。
【００９０】
ＤＳＣ：ＤＳＣはＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ２０００示差走査熱量計を使用して行った。温度較正をＮＩＳＴ由来のインジウム金属を使用して行った。試料はアルミニウム製ＤＳＣパンに入れ、重量を正確に記録した。レーザーピンホールで穿孔した蓋でパンを覆い、蓋は密封し、または穿孔していない蓋で覆って折り目を付けた。試料セルを−３０℃または２５℃のいずれかで平衡に保ち、２５０℃の最終温度まで１０℃／分の速度で窒素パージ下に加熱した。報告された温度は、転移最高点にある。
【００９１】
ＴＧＡ：ＴＧ分析をＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ５０００  ＩＲ熱重量アナライザーを使用して行った。温度較正はニッケルおよびアルメル（商標）を使用して行った。各試料をアルミニウムパンに装入した。パンは、ＴＧ炉に挿入する直前にパンチ機構を使用して開けた蓋で密封した。３５０℃の最終温度から１０℃／分の速度で、炉を窒素下に加熱した。
【００９２】
１Ｈ  ＮＭＲ：溶液ＮＭＲスペクトルはＶａｒｉａｎＵＮＩＴＹＩＮＯＶＡ４００スペクトロメーターを用いて得られた。試料は、ＤＭＳＯ６中にまたはＣＤＣｌ３中に溶解することにより準備した。
【００９３】
ＦＴ−ラマン分光法：ラマンスペクトルは、インジウムガリウムヒ素（ＩｎＧａＡｓ）検出器を装備した、Ｎｅｘｕｓ６７０ＦＴ−ＩＲ分光光度計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｎｉｃｏｌｅｔ）に接続されたＮｅｘｕｓ  ６７０  ＦＴ−ラマン付属品モジュールで得られた。波長検定は硫黄およびシクロヘキサンを使用して行った。分析のために、試料をガラス管に入れ、金被覆管の保持器内にその管を位置決めすることにより各試料を準備した。
結晶化法
【００９４】
徐冷（ＳＣ）：関心のある遊離塩基および酸を含有する溶液を様々な溶媒中で室温で調製した。固体は溶けにくかったので、溶解を容易にするために試料を加熱した。一旦透明な（固形物を含まない）溶液が得られたら、溶液をゆっくり室温に冷却した。
【００９５】
体積減少（ＶＲ）：関心のある遊離塩基および酸を含有する溶液を様々な溶媒中で室温で調製した。固形物は溶液中に見当たらなかった。試料は蓋をし、常温で数時間から数日間の間放置した。固形物が生じなかった場合、試料の蓋を外し、試料体積を減少させた。試料は蓋をし、常温条件下に静置した。固形物が溶液から沈殿したら、固形物を真空濾過によって集めて乾燥した。
【００９６】
沈澱（Ｐｐｔ）：関心のある遊離塩基および酸を含有する溶液を様々な溶媒中で室温で調製した。固体は溶けにくい場合は、溶解を容易にするために試料を加熱する、または常温に保ち撹拌した。結果として透明な溶液が生じた場合、試料は蓋をし常温で保った。高温の試料を常温に冷却した。生じた固形物は、真空濾過によって集めて乾燥した。
実施例１：遊離塩基５−エチル−２−｛４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−ピリミジンの調製
４−（４−（（４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）チアゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成
【００９７】
４−（４−クロロメチル−チアゾール−２−イル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５４９ｍｇ）、４−テトラゾール−１−イル−フェノール（２７０ｍｇ）、Ｃｓ２ＣＯ３（８９０ｍｇ）のアセトニトリル中混合物を、還流下に終夜加熱した。冷却後、反応混合物を、セライトのパッドに通してろ過し真空内で濃縮した。クロマトグラフィー（４０−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、白色固体として所望の生成物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．０１  （１Ｈ，  ｓ），  ７．６１  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ７．２５  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１５  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ５．２２  （２Ｈ，  ｓ），  ４．２  （２Ｈ，  ｂｒ），  ３．１７  （１Ｈ，  ｍ），  ２．８７  （２Ｈ，  ｍ），  ２．１１  （２Ｈ，  ｍ），  １．７３  （２Ｈ，  ｍ），  １．４６  （９Ｈ，  ｓ）．
４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン塩酸塩の合成
【００９８】
４−（４−（（４−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）フェノキシ）メチル）チアゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．６０ｇ）のメタノール／ジクロロメタン（１．０ｍＬ／１．５ｍＬ）中溶液に、０℃でジオキサン（１．７ｍＬ）中４ＮＨＣｌを添加し、次いで、室温で７時間撹拌した。溶媒を真空内で除去した後、粗製の所望化合物ＨＣｌ塩がオフホワイト色の固体として得られた。
【００９９】
４−［４−（４−テトラゾール−１−イル−フェノキシメチル）−チアゾール−２−イル］−ピペリジン塩酸塩（４０３ｍｇ）、２−クロロ−５−エチルピリミジン（０．１５ｍＬ）及びジイソプロピルエチルアミン（１ｍＬ）のイソプロパノール中混合物を、９０℃で終夜加熱し、ＥｔＯＡｃおよび水の間で分配した。有機層を水／塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空内で濃縮した。クロマトグラフィーによってシリカゲル（４０−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、白色固形物として所望の化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ９．９８  （１Ｈ，  ｓ），  ８．２４  （２Ｈ，  ｓ），  ７．８０  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ７．６６  （１Ｈ，  ｓ），  ７．２８  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ５．２０  （２Ｈ，  ｓ），  ４．６７  （２Ｈ，  ｍ），  ３．３２  （１Ｈ，  ｍ），  ３．０１  （２Ｈ，  ｍ），  ２．４３  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ），  ２．０７  （２Ｈ，  ｍ），  １．５９  （２Ｈ，  ｍ），  １．１１  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ）  ｐｐｍ．
実施例２：ベシル酸塩
【０１００】
ベシル酸塩をアセトン溶液の体積減少試験から生じさせた。この物質は積層プレートとして結晶化した。ＸＲＰＤ分析は、ベシル酸塩が結晶性であることを示した。終夜のＲＨストレスの後にも、この物質は自由流動する粉体であった。ストレスをかけた試料を熱分析すると、１２５℃までにわずかな重量損失（０．９重量％）、および１５３℃を中心とする鋭い吸熱を示した。この吸熱に伴ってショルダーがおよそ１４７℃に認められた。急速な重量損失がおよそ１５５℃を超えて観察された。１Ｈ  ＮＭＲ分光法結果は、１：１塩が存在することを示した。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．９５  （１Ｈ，  ｓ），  ８．５４  （２Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ７．９５  （２Ｈ，  ｍ），  ７．６３  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ  ＝  ３，  ９．２  Ｈｚ），  ７．４０  （３Ｈ，  ｍ），  ７．２９  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１８  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ  ＝  ３，  ９．２），  ５．２４  （２Ｈ，  ｓ），  ４．７６  （２Ｈ，  ｍ），  ３．４２  （３Ｈ，  ｍ），  ２．６１  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．３３  （２Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ  ＝  ３，  １３．８  Ｈｚ），  １．９７  （２Ｈ，  ｍ），  １．２６  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ）．
実施例３：カンシル酸塩
【０１０１】
カンシル酸塩を、沈降反応およびアセトン中での徐冷によって生じさせた。この物質は未知の形態に結晶化した。ＸＲＰＤ分析は、カンシル酸塩が結晶性であることを示した。終夜のＲＨストレスの後にも、この物質は自由流動する粉体であった。ストレスをかけていない試料を熱分析すると、１２５℃までにわずかな重量損失（０．３重量％）、および１８４℃を中心とする鋭い吸熱を示した。急速な重量損失（通常分解を示す）がおよそ１８０℃を超えて観察された。１Ｈ  ＮＭＲ分光法の結果は１：１塩を形成していたことを示す。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．７０  （１Ｈ，  ｓ），  ８．６１  （２Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ７．７４  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ７．２８  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１８  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ５．２４  （２Ｈ，  ｓ），  ４．７８  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  １３．６  Ｈｚ），  ３．４２  （４Ｈ，  ｍ），  ２．９２  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  １５．２  Ｈｚ），  ２．７３  （１Ｈ，  ｍ），  ２．６２  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．３４  （３Ｈ，  ｍ），  １．９９  （４Ｈ，  ｍ），  １．８９  （１Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  １８．４  Ｈｚ），  １．７９  （１Ｈ，  ｍ），  １．３９  （１Ｈ，  ｍ），  １．２７  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  １．１２  （３Ｈ，  ｓ），  ０．８６  （３Ｈ，  ｓ）．
実施例４：エシル酸塩
【０１０２】
エシル酸塩を、アセトン中の沈降反応によって生じさせた。エシル酸塩の物質は積層プレートおよび薄片として存在した。ＸＲＰＤ分析はエシル酸塩が結晶性であることを示した。終夜のストレスの後にも、この物質は自由流動する粉体であった。ストレスをかけた粉体を熱分析すると、１２５℃までに４．８％の重量損失、および９８．５℃を中心とする鋭い吸熱を示した。吸熱の事象は、通常、溶融の事象を示す。重量損失は、塩が溶媒和物または水和物であることを示すことがある。急速な重量損失（通常分解を示す）がおよそ１２５℃を超えて観察された。１Ｈ  ＮＭＲ分光法の結果は１：１塩を形成していたことを示す。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．９５  （１Ｈ，  ｓ），  ８．５６  （２Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ７．６３  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ７．２９  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１８  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ５．２４  （２Ｈ，  ｓ），  ４．７９  （２Ｈ，  ｍ），  ３．４３  （３Ｈ，  ｍ），  ２．９７  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．６１  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．３６  （２Ｈ，  ｍ），  １．９８  （２Ｈ，  ｍ），  １．３９  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  １．２７  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ）．
実施例５：ＨＢｒ塩
【０１０３】
ＨＢｒ塩を、アセトン中の沈降反応によって生じさせた。この物質は未知の形態に結晶化した。ＸＲＰＤの結果はＨＢｒ塩が結晶性であることを示した。終夜のストレスの後にも、この物質は自由流動する粉体であった。ストレスをかけていない物質の熱分析は、分解する前に幅が広く弱い吸熱が存在することを示した。分解以前に１．５％の重量損失が検出された。１Ｈ  ＮＭＲ分光法は、周囲条件下では分解物が形成されないことを示した。塩をＣＤＣｌ３の存在下で沈澱させ、１Ｈ  ＮＭＲ分析をＤＭＳＯ中で行った。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １０．００  （１Ｈ，  ｓ），  ８．３０  （２Ｈ，  ｓ），  ７．８２  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ７．６８  （１Ｈ，  ｓ），  ７．３０  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ５．２２  （２Ｈ，  ｓ），  ４．６６  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  １３．２  Ｈｚ），  ３．３６  （１Ｈ，  ｔｔ，  Ｊ  ＝  ３．８，  １１．６  Ｈｚ），  ３．０８  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ  ＝  ２．６，  １２．８  Ｈｚ），  ２．５０  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ），  ２．１２  （２Ｈ，  ｍ），  １．６４  （２Ｈ，  ｍ），  １．１４  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．４  Ｈｚ）．
実施例６：メシル酸塩
【０１０４】
メシル酸塩を徐冷／体積減少技法を使用して、様々な形態に生じさせた。ＸＲＰＤの結果は、モノ塩が結晶性であることを示した。高いＲＨストレスの後も、この物質は自由流動する粉体であった。ストレス後の試料の熱分析は、８６℃を中心とする吸熱、および１２５℃までに４．５％の重量損失を示した。１つの可能な説明は、溶媒（恐らく水）損失が迅速に生じ、試料は溶融事象後に分解するということである。１Ｈ  ＮＭＲ分光法の結果は、１：１塩が形成されたことを裏付けた。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．９５  （１Ｈ，  ｓ），  ８．５５  （２Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ７．６３  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ７．２９  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１８  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ５．２４  （２Ｈ，  ｓ），  ４．７６  （２Ｈ，  ｍ），  ３．４２  （３Ｈ，  ｍ），  ２．８８  （１Ｈ，  ｓ），  ２．６１  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．３６  （２Ｈ，  ｍ），  １．９９  （２Ｈ，  ｍ），  １．２７  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ）．
【０１０５】
ＸＲＰＤ（Ｉｎｔｅｌ  ＸＲＧ−３０００回折計）の選択した格子面間隔：ｄ間隔［Å］（±０．１Å）：１０．２３、６．２８、４．８３、４．７５、４．５７、４．４３、４．３２、３．４９、３．４３、３．３２．
実施例７：硫酸塩
【０１０６】
硫酸塩を沈澱実験から生じさせた。ＸＲＰＤの結果は、モノ塩が結晶性物質を生じさせたことを示した。高いＲＨストレスの後に、この物質が粘着性になった。ストレスをかけていない試料を熱分析すると、大きい重量損失（１２５℃までで９％）が９７℃を中心とする吸熱に伴っていることを示した。この初期の重量損失の後、さらなる加熱で、水の消失によると思われる物質の急速分解が生じたが、この仮説は検証されなかった。１Ｈ  ＮＭＲ分光法の結果は、分解物が形成されなかったことを示した。塩をＣＤＣｌ３の存在下で沈澱させ、１Ｈ  ＮＭＲ分析をＤＭＳＯ中で行った。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  １０．００  （１Ｈ，  ｓ），  ８．３２  （２Ｈ，  ｓ），  ７．８２  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ７．６８  （１Ｈ，  ｓ），  ７．３０  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ５．２２  （２Ｈ，  ｓ），  ４．６５  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  １３．６  Ｈｚ），  ３．３６  （１Ｈ，  ｔｔ，  Ｊ  ＝  ３．６，  １１．２  Ｈｚ），  ３．０９  （２Ｈ，  ｍ），  ２．４８  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．１２  （２Ｈ，  ｍ），  １．６５  （２Ｈ，  ｍ），  １．１４  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ）．
実施例８：トシル酸塩
【０１０７】
トシル酸塩をアセトン中の徐冷および体積減少によって生じさせた。この物質は未知の形態に結晶化した。ＸＲＰＤの結果は結晶性物質が存在することを示した。高ＲＨ条件に曝露した後でも、この物質は自由流動する粉体であった。この物質の熱分析は、１２５℃までにわずかな（０．９％）重量損失を示し、９４℃を中心とする非常に弱い吸熱を伴っていた。この広く弱い吸熱は溶媒消失を示している可能性がある。１５２℃を中心とする吸熱の後に、大きい重量損失が認められた。１Ｈ  ＮＭＲ分光法の結果は、１：１塩を形成したことを裏付けた。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．９５  （１Ｈ，  ｓ），  ８．５４  （２Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ７．８３  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．０  Ｈｚ），  ７．６３  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ７．３０  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１９  （４Ｈ，  ｍ），  ５．２５  （２Ｈ，  ｓ），  ４．７６  （２Ｈ，  ｍ），  ３．４３  （３Ｈ，  ｍ），  ２．６１  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．３６  （３Ｈ，  ｓ），  ２．３３  （２Ｈ，  ｍ），  １．９６  （２Ｈ，  ｍ），  １．２６  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ）．
【０１０８】
ＸＲＰＤ（Ｉｎｔｅｌ  ＸＲＧ−３０００回折計）の選択した格子面間隔：ｄ間隔［Å］（±０．１Å）：１０．６１，  ８．４１，  ５．７８，  ５．１７，  ５．０２，  ４．８４，  ４．３７，  ４．２２，  ３．９５，  ３．４４．
実施例９：ＨＣｌ塩
【０１０９】
ＨＣｌ塩を調製するための様々な溶媒系の選別を、下記手順に従って実施し、結果は以下の表６に示される。
【０１１０】
蒸発試験：ＨＣｌ塩を所与の溶媒に溶解した。溶液は０．２μｍナイロンフィルターに通して濾過した。周囲温度での蒸発実験のために、溶液は開放したバイアル（高速蒸発）中に放置し、またはピンホールがあるアルミ箔で覆った（遅い蒸発）。真空（回転式の蒸発）下での蒸発実験のために、試料を周囲温度または高温でロータリーエバポレーターに置き、溶媒を蒸発乾固させた。
【０１１１】
徐冷および高速冷却実験：ＨＣｌ塩を所与の溶媒と接触させ、試料はホットプレート上の油浴内で高温にした。選択した試料は０．２μｍナイロンフィルターを使用して濾過した。次いで、熱源を切り、ホットプレートおよびバイアルを油浴内で、徐冷するためにゆっくり常温に放冷し、または高速冷却するために実験台に置いた。常温で固形物を生じなかった選択した試料は、冷蔵庫または冷凍庫に入れた。固形物は真空濾過によって回収した。
【０１１２】
急速冷却実験：飽和溶液を様々な溶媒中で高温で調製した。実験はホットプレート上の油浴内で行った。結果として得られた溶液またはスラリーは、まだ温いうちに、温めた０．２μｍフィルターに通して、開放したバイアル中へ速やかに濾過した。バイアルをドライアイスによって冷却したアセトン浴に入れた。固形物は真空濾過によって集めた。
【０１１３】
蒸気拡散：少量のＭＢＸ２９８２ＨＣｌを最小量の適切な溶媒に溶解した。試料は、０．２μｍナイロンフィルターに通して１ドラムバイアル中へ濾過した。ジエチルエーテルを２０ｍＬシンチレーションバイアルに加えた。１ドラムバイアルの蓋を外し、２０ｍＬバイアルに入れた。２０ｍＬバイアルは蓋をしパラフィルムで封じた。
【表６−１】
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【表６−２】
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【表６−３】
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【０１１４】
実施例１０：ＨＣｌ塩形態Ｉ
遊離塩基（４６．０ｇ）を５００ｍＬＥｔＯＨと接触させ、暖め／撹拌した。９．５ｍＬ濃ＨＣｌを懸濁液に添加した。試料はおよそ３０分間放置し、次いで、室温に冷却した。濾過した物質は、真空乾燥（３日）し、微量のエタノールを含有する「パターンＯ」であると同定した。
【０１１５】
固形物をもとの母液と再度合わせ、試料を速やかに撹拌し、追加の０．５ｍＬ濃ＨＣｌを添加した。試料はおよそ３０分間加熱、撹拌し、次いで、室温にゆっくり冷却した。濾過した物質を、アセトン中にスラリー化し（２６．８ｇ／１２５ｍＬ）、およそ１時間暖めた。試料を常温にゆっくり冷却し、６日間スラリー化しＨＣｌ形態Ｉを得た。
【０１１６】
ＨＣｌ形態Ｉの熱特性評価（ＤＳＣ、ＴＧＡ）の結果は、この物質が恐らく溶媒和されていないことを示した。ＴＧＡ曲線は、〜２３℃から〜７３℃の間で〜０．２％重量損失を示し、これは恐らく残留アセトンの蒸発を伴うものであった（残留アセトンの存在は１Ｈ  ＮＭＲから見られる）。およそ１３．１％の重量損失は、〜１１３℃から〜２１０℃の間で観察され、〜３０２℃（開始点）で、分解によると思われる急落が続いた。この物質は初期にＨＣｌを失うことがあるが、これにはより高温でさらなる分解が伴う。ＤＳＣサーモグラムは〜１９１℃（開始点）で鋭い吸熱事象を示し、続いて直ぐに熱揺らぎがあったが、これは恐らく分解に起因する。
【０１１７】
吸湿性は、〜５％ＲＨで平衡させると結果として〜０．３重量％損失を示した。小さい重量損失はＴＧＡ損失と同等であり、恐らく残留アセトンの損失を伴う。〜５％から〜９５％ＲＨの間では、安定した〜０．９重量％の増加が観察された。完全な脱着が、相対湿度を〜５％に減少させることで生じた（〜９５％から〜５％ＲＨの間で〜０．９重量％損失）。
【０１１８】
１Ｈ  ＮＭＲは、ピリミジン環のプロトンおよび微量の残留アセトン（遊離塩基１モル当たりアセトン〜０．０６モル）に起因する８．４２ｐｐｍのピークの著しいシフトおよびブロード化を示した。
１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．９６  （１Ｈ，  ｓ），  ８．４２  （２Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ７．６３  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ７．２８  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１８  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ５．２４  （２Ｈ，  ｓ），  ４．９８  （２Ｈ，  ｍ），  ３．４５  （３Ｈ，  ｍ），  ２．６１  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．３８  （２Ｈ，  ｍ），  １．９９  （２Ｈ，  ｍ），  １．２７  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ）．
【０１１９】
元素分析データはモノ塩酸塩である物質と一致した：（Ｃ２２Ｈ２５ＣｌＮ８ＯＳ）Ｃ：５４．１６％；Ｈ：５．２９％；Ｎ：２２．８９％；Ｃｌ：７．４０％。
【０１２０】
ＦＴ−ラマンスペクトル：（ｃｍ−１）：１５４，  １９３，  ２１４，  ２４３，  ３２４，  ３４６，  ３８４，  ４２０，  ４６０，  ４６７，  ４９５，  ５３９，  ５７３，  ５９６，  ６２８，  ６４８，  ６８０，  ６８７，  ７１８，  ７５１，  ７６６，  ７８７，  ８００，  ８４５，  ８５６，  ９４６，  ９６７，  ９９２，  １００９，  １０５１，  １０６８，  １０９４，  １１１０，  １１７２，  １２０３，  １２２５，  １２５３，  １２８２，  １３００，  １３１１，  １３３４，  １３７５，  １３９４，  １４０４，  １４３２，  １４５８，  １４７４，  １４８０，  １５１７，  １５３３，  １５９１，  １６０９，  １６３７，  ２７３４，  ２８６９，  ２９０３，  ２９２８，  ２９３７，  ２９６７，  ２９９９，  ３０１５，  ３０３０，  ３０６３，  ３０７５．
実施例１１：アセトンからのＨＣｌ塩形態Ｉ
【０１２１】
ＭＢＸ−２９８２（０．９ｇ）のアセトン（４ｍＬ）中懸濁液に、ＨＣｌ（濃縮水溶液）１当量を５５℃で添加した。この懸濁液を５５℃で２時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。ＨＣｌ塩形態Ｉは固形物として真空濾過によって集めた。Ｉｎｔｅｌ  ＸＲＧ−３０００回折計からのＸ線粉体パターンから選択した格子面間隔：ｄ［Å］  （±０．１  Å）：    １０．０９，  ８．２０，  ５．５１，  ５．０８，  ４．３６，  ４．２６，  ４．１４，  ４．０８，  ３．３５，  ３．１８．
実施例１２：酢酸エチルからのＨＣｌ塩形態Ｉ
【０１２２】
ＭＢＸ−２９８２（２ｇ）の酢酸エチル（９ｍＬ）中懸濁液に、ＨＣｌ１．０５当量（酢酸エチル中の１Ｍ溶液）を、５５℃で添加した。この懸濁液は５５℃で２時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。ＨＣｌ塩形態Ｉは固形物として真空濾過によって集めた。Ｉｎｔｅｌ  ＸＲＧ−３０００回折計からのＸ線粉体パターンから選択した格子面間隔：ｄ  ［Å］  （±０．１  Å）：    １０．０９，  ８．２２，  ５．５１，  ５．０９，  ４．３６，  ４．２６，  ４．１４，  ４．０９，  ３．３５，  ３．１８．
実施例１３：ＨＣｌ塩形態ＩＩ：
【０１２３】
２１．５ｇのパターンＯ物質（実施例１０に記載のように調製した）を、１２５ｍＬＭｅＯＨおよびＨＣｌ形態ＩＩの種と接触させた。試料を室温で６日間スラリー化し、形態ＩＩ物質を得た。
【０１２４】
ＨＣｌ形態ＩＩのＸＲＰＤ分析は、物質が結晶性であることを示す。
【０１２５】
ＨＣｌ形態ＩＩの１Ｈ  ＮＭＲ分析は、ピリミジン環のプロトンに起因する〜８．４２ｐｐｍのピークの著しいシフトおよびブロード化を示し、これはＨＣｌが恐らくピリミジン窒素原子近くに位置することを示唆する。さらにスペクトルは微量のメタノール（塩基の１モル当たり０．３モルのメタノール）および残留酢酸エチルを示した。１Ｈ  ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：  δ  ８．９８  （１Ｈ，  ｓ），  ８．４２  （２Ｈ，  ｂｒ  ｓ），  ７．６３  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ），  ７．２９  （１Ｈ，  ｓ），  ７．１８  （２Ｈ，  ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ），  ５．２４  （２Ｈ，  ｓ），  ４．９８  （２Ｈ，  ｍ），  ３．４７  （３Ｈ，  ｍ），  ２．６１  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ），  ２．３７  （２Ｈ，  ｍ），  １．９９  （２Ｈ，  ｍ），  １．２７  （３Ｈ，  ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ）．
【０１２６】
形態ＩＩの熱特性評価（ＤＳＣ、ＴＧＡ）の結果は、この物質が恐らく溶媒和されていないことを示した。ＴＧ曲線は、〜２１℃から〜１１３℃の間で〜０．６％の重量損失を示し、これは恐らく残留メタノールおよび酢酸エチル蒸発に伴うものである。およそ１４．６％の重量損失は、〜１１３℃から〜２２０℃の間で観察され、〜３１２℃（開始点）で、分解によると思われる急落が続いた。この物質は初期にＨＣｌを失うことがあるが、これにはより高温でさらなる分解が伴う。ＤＳＣサーモグラムは〜１５０℃（開始点）から始まる吸熱事象を示し、続いて幾つかの熱揺らぎがあったが、これは恐らく分解に起因する。
生物学的実施例１
【０１２７】
微晶質のＭＢＸ−２９８２およびＭＢＸ−２９８２の塩形態の全身系の曝露および薬物動態学（ＰＫ）を比較するために、絶食させたオスＳｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットで２００ｍｇ／ｋｇの単回経口胃管栄養（ＰＯ）投薬に続いて、２つの検討を行った。その検討では、ＭＢＸ−２９８２の４種の塩形態（ｆｏｍｓ）を調査した。試験した塩は、ＨＣｌ形態Ｉ、ＨＣｌ塩形態ＩＩ、メシル酸塩およびトシル酸塩であった。
【０１２８】
材料および装置
標準：ＭＢＸ−２９８２
内標準：ＭＢＸ−２９８２、６個のフェニル環炭素原子が１３Ｃとして標識付けされている
ブランクのプールしたラット血漿（Ｂｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ）
薬品：試薬等級
溶媒：ＨＰＬＣ等級
９６ウェルの深いプレートおよびマット：１ｍＬ（Ｃｏｒｎｉｎｇ）
ＨＰＬＣカラム：Ｌｕｎａｒ  Ｃ１８（２）、５μ、内径５０×２．１ｍｍ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）
プレカラムフィルター：０．２μｍ（Ｔｈｅｒｍｏ−  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）
ＬＣシステム：ＬＣ−２０  ＡＤポンプおよびＣＴＣ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  ＡＧ付きＳＣＬ−１０Ａ  ＶＰ  ＬＣコントローラーＰａｌ  Ａｕｔｏｓａｍｐｌｅｒ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，  Ｉｎｃ．）
質量スペクトロメーター：Ａｎａｌｙｓｔ  １．４．２  Ｓｏｆｔｗａｒｅ付き  ４０００  Ｑ−ＴＲＡＰ（登録商標）（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ  Ｉｎｃ．）
化学天秤：モデルａｃｃｕ−１２４（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）
ピペット：（Ｒａｉｎｉｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ，ＬＬＣ）
【０１２９】
試料調製
【０１３０】
試料の調製は、１ｍＬ／ウェルの９６ウェルプレート中の血漿タンパクの溶媒沈澱によって行った。標準は、標準溶液１０μＬ（ＭＢＸ−２９８２を、０．０１、０．０２、０．０５、０．１、０．２、０．５、１、２、５、１０、２０、１００μｇ／ｍＬで含有するアセトニトリル）、および内標準として０．２μｇ／ｍＬ含有するアセトニトリル中の０．１％ギ酸３００μＬを、ブランク血漿１０μＬに加えることにより調製した。血漿試料は、血漿試料１０μＬ、アセトニトリル１０μＬ、およびアセトニトリル中の０．１％のギ酸中の０．２μｇ／ｍＬ内標準３００μＬを添加することにより調製した。有機溶媒の添加後、試料はすべて手短かにボルテックスし、３６００ｒｐｍで１０分間遠心分離機にかけた。試料の一部を、ブランク血漿で１．３から２倍に希釈した。上澄み（２５μＬ）のアリコートを１ｍＬ／ウェルの９６ウェルプレートに移し２００μＬ水／ＡＣＮ（５０／５０、体積／体積）と混合しＨＰＬＣに注入した。
【０１３１】
すべての原液およびスパイク溶液はポリプロピレン管中に保ち、およそ−８０℃で保管した。
【０１３２】
微晶質のＭＢＸ−２９８２（遊離塩基）およびＭＢＸ−２９８２の塩形態の懸濁液を、カルボキシメチルセルロース１％および水中２％（ｗ／ｗ／ｖ）のトゥイーン８０中で調製した。
【０１３３】
動物の５つの群に、ＭＢＸ−２９８２の微晶質および塩形態の懸濁液用量を、それぞれ２００ｍｇ／ｋｇで経口的に与えた。食物は投薬前の夜に保留し、投薬の９時間後に戻した。血液試料は、投薬０．２５、０．５、１、２、４、６、９、２４、３０及び４８時間後に集めた。これらの試料からのＭＢＸ−２９８２血漿中濃度は、検定していない高性能液体クロマトグラフィーによって質量スペクトロメトリー（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）法と組み合わせて分析した。
【０１３４】
個々の動物の血漿中濃度−時間データはＷｉｎＮｏｎｌｉｎソフトウェア（プロフェショナル、バージョン５．０．１；Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐ．）を使用して分析した。非コンパートメントモデル（モデル２００）を使用した。内標準および濃度に対するＭＢＸ−２９８２のピーク面積比率を、アナリストバージョン１．４．２（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ  Ｉｎｃ）の二次回帰プログラムを使用して、二次方程式（検量線）に１／ｘで重み付けしてあてはめた。次いで、この式を使用して、内標準とのピーク面積比率から試料中のＭＢＸ−２９８２の濃度を内挿した。
【０１３５】
以下の薬物動態学のパラメーターを算定した：
１）  Ｃｍａｘ：最大（ピーク）血漿中濃度
２）  Ｔｍａｘ：Ｃｍａｘが生じた時間
３）  ｔ１／２：終末過程半減期
４）  ＡＵＣ０−ｔ：時間０から最後の測定可能濃度にかけての濃度−時間曲線下の面積
５）  ＡＵＣ０−ｉｎｆ：時間０から無限大に外挿した濃度−時間曲線下の面積
【０１３６】
１回の２００ｍｇ／ｋｇＰＯ投薬に続く、オスＳＤラット中のＭＢＸ−２９８２の平均薬物動態学パラメーターを、表７に示す。平均血漿中濃度−時間データおよびプロファイルを表８および図２３に示す。
【０１３７】
その結果、等価な量を投薬した場合、微小化ＭＢＸ−２９８２（遊離塩基）と比較して、試験したＭＢＸ−２９８２の塩形態は高度の薬物曝露を与えた。全身的な薬物曝露は、ＡＵＣ０−ｔで、ＨＣｌ塩形態Ｉ、ＨＣｌ形態ＩＩ、メシル酸塩およびトシル酸塩に対し、それぞれ、２．４倍、２．９倍、１．４倍および１．７に増加した。
【表７】
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【表８】
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【０１３８】
糖尿病の治療において、１日１回の投薬を可能にする時間にわたって、血液中に薬物の有効濃度を維持することは有利である。表８および図２３で示すように、投薬２４時間後では、微粉化遊離塩基ＭＢＸ−２９８２の血漿レベルは０．２６μｇ／ｍｌであった。対照的に、２４時間で、塩形態の血漿レベルは、７．３μｇ／ｍｌ（ＨＣｌ形態Ｉ）、１２．０２μｇ／ｍｌ（ＨＣｌ形態ＩＩ）、０．４７６μｇ／ｍｌ（メシル酸塩）および４．２μｇ／ｍｌ（トシル酸塩）であった。投薬３０時間後では、微粉化遊離塩基ＭＢＸ−２９８２の血漿レベルは、０．０８μｇ／ｍｌであったが、塩形態は、７．５２μｇ／ｌ（ＨＣｌ形態Ｉ）、１４．９μｇ／ｍｌ（ＨＣｌ形態ＩＩ）、０．５７４μｇ／ｍｌ（メシル酸塩）および３．１８μｇ／ｍｌ（トシル酸塩）であった。このようにして、投薬３０時間後での、ＭＢＸ−２９８２の塩の血漿中濃度の倍数の差は、微粉化遊離塩基２９８２と比較した場合、９４倍高い血漿中濃度（ＨＣｌ形態Ｉ）、１８６倍高い血漿中濃度（ＨＣｌ形態ＩＩ）、７倍高い血漿中濃度（メシル酸塩）、および４０倍高い血漿中濃度（トシル酸塩）であった。
【０１３９】
本発明に対する変形は、本開示を得た当業者には明らかであろう。そのような変形、および上記の実施形態および実施例から結果として得られた等価物は、以下の特許請求の範囲の範囲に包含されるように意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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