(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
本体と、
この本体に形成された第１および第２の凹部と、
前記本体内部に形成され、前記第１の凹部と前記第２の凹部とを連通する流路と、
前記第２の凹部の内壁面は、前記第１の凹部に供給され、前記流路を介して前記第２の凹部に導入される液体のメニスカスの形状が第１の型となる第１の領域と、前記メニスカスの形状が前記第１の型とは異なる第２の型となる第２の領域とを有する
を備えることを特徴とするフローセル。
【請求項２】
前記第２の凹部は、筒状に形成され、
前記第１の領域は、前記液体に対する接触角が９０度未満となる領域であり、
前記第２の領域は、前記液体に対する接触角が９０度を超える領域である
ことを特徴とする請求項１記載のフローセル。
【請求項３】
前記第１の領域は、前記第２の凹部の内壁面のうち前記第２の凹部の軸線回りの略半分の領域に設けられ、
前記第２の領域は、前記第２の凹部の内壁面のうち前記軸線回りの残りの略半分の領域に設けられる
ことを特徴とする請求項２記載のフローセル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フローセルに関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来より、液体の性状や成分濃度等の特性を測定して、この測定結果に基づいて診療診断などを行うことがなされている。液体の特性の中でも粘度は、液体の運動を予測する上で必要な情報なので、正確に測定することが求められている。
【０００３】
一般に、液体の特性は、マイクロウエルプレートを用いて測定される。この方法では、多数の反応容器（ウエル）にそれぞれ検体と反応試薬とを注入し、分光法や蛍光法により結果反応量を検出している。なお、固相化したり、反応が進んだりしたマイクロウエルプレートは、汚染しているため使い捨てにされる。
ところが、液体の粘度は、マイクロウエルプレートを用いた方法では測定できない。例えば、オストワルドの粘度計のように管を流れる時間を測定したり、回転粘度計のように回転子の抵抗を測定したり、振動子の振動周波数変化を測定したりすることにより測定されている。
【０００４】
液体の混合によって開始される化学変化などで粘度が変化する場合には、その変化から混合した液体の特性を測定することができる。例えば、血漿の凝固試薬を混合した場合には、血漿が凝固するにしたがって粘度が高くなるので、その変化速度から血液の凝固能を測定することができ、医療診断に利用されている（例えば、特許文献１，２参照。）。このような場合、その液体の体積の単位が［μｌ］と小さい為に、上述したような粘度の測定方法では、測定することが難しい。このため、液体の体積が小さくても測定可能な方法が望まれている。
【０００５】
そこで、体積が小さい液体の粘度を測定する方法として、液体がマイクロ流路を流れるときの圧力損失から測定する方法が提案されている。この測定には、例えば図９に示すようなマイクロ流路１０３を備えたフローセル１００が用いられる。このフローセル１００は、板状の本体１０１と、この本体１０１上面に形成された凹部からなる供給部１０２と、本体１０１内部に形成された管からなり、供給部１０２に一端が接続されたマイクロ流路１０３と、本体１０１上面に形成された凹部からなり、底部の側壁にマイクロ流路１０３の他端が接続された液だめ１０４とを備えている。このフローセル１００で測定を行う場合、液だめ１０４に液体吸引用のチューブ（図示せず）を介して圧力制御装置（図示せず）を接続し、この圧力制御装置を大気圧よりも負圧に設定して駆動させるとともに、供給部１０２にサンプルを注入する。すると、マイクロ流路１０３の供給部１０２側（上流側）と液だめ１０４側（下流側）との圧力差により、サンプルは、マイクロ流路１０３の上流側から下流側に流れて、液だめ１０４に到達する。
【０００６】
このようなフローセルのマイクロ流路に水溶液を流す場合、液体の流れを層流と仮定すると、体積流速Ｖvolumeと圧力損失ΔＰ（管の両端の圧力差）の関係を下式（１）で表すことができる。なお、下式（１）において、ηは粘度、Ｌは流路の長さ、ｒ0は流路の半径である。
【０００７】
Ｖvolume・８ηＬ＝πｒ04ΔＰ  ・・・（１）
【０００８】
上式（１）から粘度ηは、下式（２）で表すことができる。
【０００９】
η＝πｒ04ΔＰ／（Ｖvolume８Ｌ）  ・・・（２）
【００１０】
同様に、マイクロ流路の断面形状が幅２ａ、高さ２ｂの矩形の場合には、下式（３）に示すようにアスペクト比Ｓを設定すると、粘度ηは下式（４）で表すことができる。なお、下式（４）において、Ｆ（ｓ）は形状の関数である（例えば、非特許文献１参照。）。
【００１１】
Ｓ＝ａ／ｂ  ・・・（３）
η＝（ａｂ／Ｖvolume）（−ΔＰ／Ｌ）Ｆ（ｓ）  ・・・（４）
【００１２】
なお、管状のマイクロ流路を液体に鉛直に配設した場合、表面張力と流路の壁面との親和性によって、流路が液体を吸い上げたり、押し下げたりする。この液面の変化は、流路中の液面変化量に対応する重量と平衡するところで停止する。その液面の上下では圧力差が生じ、その液面の高さｈは、下式（５）で表すことができる。この下式（５）において、Ｒは流路の半径、θは接触角度、γは表面張力、ρは密度、ｇは重力加速度である（例えば、非特許文献２参照。）。
【００１３】
ｈ＝２γｃｏｓθ／（ρｇＲ）  ・・・（５）
【００１４】
上式（２）や（４）から、圧力制御装置により圧力損失ΔＰが一定となるように液だめ１０４側に圧力をかけて、フローセル１００のマイクロ流路１０３を流れる液体の流速（Ｖvolume）を測定することにより、その液体の粘度を測定することができる。
二種類の液体の混合による化学変化で粘度を変化させる場合、フローセル１００を用いたその粘度の測定は、以下に示す手順で行うことができる。
【００１５】
まず、図１０Ａに示すように、マイクロ流路１０３に予め所定の量の第１の液体（プラグ）を導入し、このプラグの前後が空気に挟まれた状態とした上で、第１の液体の表面張力と液だめ１０４に接続した圧力制御装置がかける負圧とを釣り合わせる。なお、図１０Ａは、マイクロ流路１０３の要部断面を示している。
【００１６】
この状態において、供給部１０２側の空気の圧力（大気圧）をｐ１、プラグ内部の圧力をｐ２、液だめ１０４側の空気の圧力（制御圧力）をｐ３とすると、図１０Ｂに示すように、ｐ２はｐ１，ｐ３よりも低い値となり、かつ、ｐ３は大気圧であるｐ１よりも低い値となっている。なお、図１０Ｂは、図１０Ａの状態におけるマイクロ流路内の圧力分布を示している。
このとき、プラグと供給部１０２側の空気との間には曲率半径ｒ１の気液界面１が形成され、プラグと排出口側の空気との間には曲率半径ｒ２の気液界面２が形成されている。上述したように、ｐ３はｐ１よりも低いので、ｐ３とｐ２の圧力差の方がｐ１とｐ２との圧力差よりも大きいので、曲率半径ｒ２の方が大きくなっている。
【００１７】
この状態で、供給部１０２に第２の液体を供給し、第１の液体と接触させると、第１の液体と第２の液体が連結して気液界面１が消失し、図１０Ｃに示すように、連結した液体の内部圧力がｐ１となる。ただし、供給部１０２の直径は流路の直径よりも大きく、気液界面での圧力差は無視できるとする。液体内部の圧力が大気圧となるので、連結した液体からなるプラグは圧力制御装置により負圧とされている液だめ１０４側に移動する。最終的には、供給部１０２からマイクロ流路１０３内部に導入した液体が、マイクロ流路１０３の出口に接続された液だめ１０４に貯まると、測定が終了する。
なお、マイクロ流路１０３の断面積に比して液だめ１０４の断面積が大きいので、液だめ１０４部分の液面状小による圧力の上昇は無視することができる。
また、このような測定方法では、反応開始で粘度が高くなる直後からマイクロ流路内での測定が可能で、粘度が高くなりすぎてマイクロ流路を詰まらせてしまう可能性が低いとともに、洗浄によってマイクロ流路を再利用することができる。
【００１８】
このようなマイクロ流路１０３内の移動において、プラグでは、マイクロ流路１０３中での拡散と、線流速の位置依存性とによって混合が進行する。このとき、マイクロ流路１０３から液だめ１０４に移動する液体には、図１０Ｄに示すように、その移動に伴って圧力損失ｐ２２（ｐ１−ｐ３＝ΔＰ））が生じている。そこで、この圧力損失ｐ２２が一定となるよう、圧力制御装置により液だめ１０４側に一定の圧力をかけた上で、マイクロ流路１０３内を進行する液体の移動速度を計測することにより、上式（２）や上式（４）から粘度を測定することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１９】
【特許文献１】特開平０８−０７５６２８号公報
【特許文献２】特開２００２−２９６２７２号公報
【非特許文献】
【００２０】
【非特許文献１】P. A. LONGWELL著、大谷寛治訳、化学技術者のための流れ学、共立出版株式会社、昭和４５年１０月５日発行、３８，１３４ページ
【非特許文献２】FRANK M. WHITE、FLUID MECHANICS, SEVENTH EDITION、２０１１年、McGraw-Hill、31-35ページ
【非特許文献３】SDP1108/SDP2108 Low Differential Pressure Sensor with fast response time、SENSIRION THE SENSOR COMPANY、インターネット、<http://www.sensirion.co.jp/pdf/doc_center/04_differential_pressure/01_analog_sensors/03_SDP1108/en/Datasheet_differential_pressure_sensor_SDP1108_SDP2108.pdf>
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
しかしながら、マイクロ流路１０２を流れる液体は、液だめ１０４に流入するときに液だめ１０４との接触面にメニスカスが発生することにより圧力損失を受けるので、正確な圧力損失ΔＰ（管の両端の圧力差）の値を得ることができず、結果として、粘度を正確に測定することが困難であった。
具体的には、図１０Ｄに示すように、液だめ１０４における気液界面２で、メニスカスの発生に由来する圧力差ｐ２３が生じるため、圧力損失ｐ２２がｐ１−ｐ３と等しくならない。その圧力差ｐ２３は、予測が困難な値であり、二種類の液体の混合させる場合も、そうでない場合も生じるものである。そこで、もし、圧力差ｐ２３を小さくできるのであれば、正確な圧力損失ΔＰの値が得られるので、粘度をより正確に測定することが可能となる。その圧力差ｐ２３を小さくする方法としては、いくつかの方法が考えられる。
【００２２】
例えば、液体が液だめ１０４の壁面と垂直に接するように液だめ１０４の面積を大きくすることにより、圧力差ｐ２３を小さくすることができる。
ところが、この方法では、大面積の液だめを容易にしなければならないので、小型化が阻害されてしまう。
【００２３】
また、液だめ１０４の壁面と液体の性質を接触角が９０度となるように条件を選択することにより、圧力差ｐ２３を小さくすることができる。
ところが、この方法では、サンプルと壁面の組み合わせを毎回検査したり、その条件を満たす表面処理を探査したりしなければならないので、手間が掛かってしまう。
【００２４】
さらに、液だめ１０４における液面の形状を制御することによっても、圧力差ｐ２３を小さくすることが実現できる。
ところが、排出口の液面の形状を制御するには、微差圧を測定するセンサと液体に圧力をかける圧力源が必要となるが、小型化の制約とセンサに高精度の温度制御が必要なので、センサと圧力源をフローセルに設置することができない（例えば、非特許文献３参照。）。このため、フローセルの外部に設けたセンサや圧力源を、非圧縮性の液体を満たしたチューブで接続する必要がある。すると、チューブの長さの分だけ液体の移動による圧力損失が発生するので、制御圧力（大気圧との差）がマイクロ流路の排出口の圧力と異なり、結果として、液面の形状を制御することが困難となっていた。特に、マイクロ流路の内部液体が気体と接触する供給部や液だめでは、表面張力のために液体内部の圧力と気体の圧力が異なるので、液体を移動させるためにマイクロ流路内に生じさせる圧力差を設定通りに制御することが困難となっていた。
【００２５】
このように、従来では、メニスカスの影響による圧力差ｐ２３を小さくすることが困難だったので、結果として、粘度を正確に測定することが困難であった。
【００２６】
そこで、本発明は、メニスカスによる圧力損失をより小さくし、液体の粘度をより正確に測定することができるフローセルを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
上述したような課題を解決するために、本発明に係るフローセルは、本体と、この本体に形成された第１および第２の凹部と、本体内部に形成され、第１の凹部と第２の凹部とを連通する流路と、第２の凹部の内壁面は、第１の凹部に供給され、流路を介して第２の凹部に導入される液体のメニスカスの形状が第１の型となる第１の領域と、メニスカスの形状が第１の型とは異なる第２の型となる第２の領域とを有することを特徴とするものである。
【００２８】
上記フローセルにおいて、第２の凹部は、筒状に形成され、第１の領域は、液体に対する接触角が９０度未満となる領域であり、第２の領域は、液体に対する接触角が９０度を超える領域であるようにしてもよい。
【００２９】
上記フローセルにおいて、第１の領域は、第２の凹部の内壁面のうち第２の凹部の軸線回りの略半分の領域に設けられ、第２の領域は、第２の凹部の内壁面のうち軸線回りの残りの略半分の領域に設けられるようにしてもよい。
【発明の効果】
【００３０】
本発明によれば、第２の凹部に導入される液体のメニスカスの形状が、第２の凹部の第１の領域では第１の型となり、第２の領域では第１の型とは異なる第２の型となるので、第２の凹部に導入される液体にかかるメニスカスによる圧力損失をより小さくすることができるので、結果として、流路を流れる液体の粘度をより正確に測定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】図１は、本発明の実施の形態に係るフローセルの構成を模式的に示す断面図である。
【図２Ａ】図２Ａは、液面形状のシミュレーション結果を示す図である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、図２Ａのシミュレーションに用いた流路の構成を示す図である。
【図３Ａ】図３Ａは、流路の内壁面の接触角が１２０度のみの場合の圧力分布のシミュレーション結果を示す図である。
【図３Ｂ】図３Ｂは、流路の内壁面の接触角が１２０度のみの場合の圧力分布のシミュレーション結果を示す図である。
【図３Ｃ】図３Ｃは、流路の内壁面の接触角が１２０度と６０度の２種類の場合の圧力分布のシミュレーション結果を示す図である。
【図４Ａ】図４Ａは、図３ＣのＺＸ平面による断面図である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、図３ＣのＺＹ平面による断面図である。
【図５】図５は、図３Ｃの気液界面の三次元形状を示す図である。
【図６】図６は、気液界面の状態を模式的に示す図である。
【図７】図７は、フローセルの変形例を示す図である。
【図８】図８は、フローセルの変形例を示す図である。
【図９】図９は、従来のフローセルの構成を模式的に示す断面図である。
【図１０Ａ】図１０Ａは、マイクロ流路に液体１のプラグを形成した状態を示す図である。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、図１０Ａの状態におけるマイクロ流路内の圧力分布を示す図である。
【図１０Ｃ】図１０Ｃは、図１０Ｂの状態から液体１，２が接触したときのマイクロ流路内の圧力分布を示す図である。
【図１０Ｄ】図１０Ｄは、マイクロ流路から液だめに移動する液体の圧力分布を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
以下、図面を参照して、本発明の実施の形態について詳細に説明する。
【００３３】
図１に示すように、本実施の形態に係るフローセル１は、本体１１と、この本体１１上面に形成された凹部からなる供給部１２と、本体１１内部に形成された、供給部１１に一端が接続された流路１３と、本体１１に形成された凹部からなり、流路１３の他端が接続された液だめ１４とを備えている。
【００３４】
本体１１は、例えば樹脂材料からなり、略直方体の板状に形成されている。
供給部１２は、一端が本体１１の上面に開口し、他端が封鎖された円筒形状（円管）に形成されている。
流路１３は、本体１１の上面に対して垂直な方向に延在する断面矩形の管であり、一端が供給部１２の底部に接続され、他端が液だめ１４の底部に接続されている。
【００３５】
液だめ１４は、一端が本体１１の上面に開口し、他端が封鎖された円筒形状（円管）に形成されている。液だめ１４の内壁面における軸線回りの略半分の領域には、凹型のメニスカスが形成される、液体に対する接触角が９０度未満の第１の領域１４ａが形成されている。液だめ１４の内壁面における軸線回りの残りの略半分の領域には、凸型のメニスカスが形成される、液体に対する接触角が９０度を超える第２の領域１４ｂとから構成されている。
ここで、第１の領域１４ａおよび第２の領域１４ｂは、上述した液体に対する接触角度を実現するように、表面処理を施したり、特定の材料が用いられている。本実施の形態においては、第１の領域１４ａは、親水性のポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）で形成され、第２の領域１４ｂは、疎水性のＰＤＭＳで形成されている。
【００３６】
＜フローセルの動作＞
次に、本実施の形態に係るフローセルの動作について説明する。なお、例えば、圧力源としてFluigent社製のポンプMFCS-VACを用い、液体の注入操作を武蔵エンジニアリング社製自動分注器PIPETMASTER-200Sを用いることにより、コンピューター制御によって、フローセル１への液体注入とプラグの移動、液だめ１４からの廃液の排出を自動化することができる。
【００３７】
具体的には、液だめ１４に液体吸引用のチューブ（図示せず）を介して圧力制御装置（図示せず）を接続し、この圧力制御装置を大気圧よりも負圧に設定して駆動させるとともに、供給部１２に液体を注入する。すると、流路１３の上流側と下流側との圧力差により、液体は、流路１３の上流側から下流側に流れて、液だめ１４に到達し、液体吸引用のチューブにより外部に排出されることとなる。
【００３８】
流路１３内部にプラグを形成し、圧力損失ｐ２２から液体の粘度を計測する場合には、図１０Ａ〜図１０Ｄを参照して説明した方法により、実現することができる。このとき、本実施の形態では、液だめ１４に第１の領域１４ａおよび第２の領域１４ｂを設けているので、粘度をより正確に計測することができる。この理由について以下に説明する。
【００３９】
発明者らは、円筒状の流路に液体（水）を入れたときの液面形状についてシミュレーションを行った。このシミュレーション結果を図２Ａに示す。なお、このシミュレーションは、図２Ｂに示すように、流路の内壁面の接触角を、半分が１２０度、それ以外が６０度とした場合について行った。なお、以下に説明する各シミュレーションには、流体シミュレーションソフトウエアOpenFOAM（登録商標）を使用した。
【００４０】
図２Ａに示すように、液面は、接触角が小さい面を上り、接触角が大きい面を下り、おおよそ斜めに傾いた形状が形成された。これは、親水性の毛細管を液体が上る、または、疎水性の毛細管では液面が押し下げられる現象に相当する。
【００４１】
次に、その状態での圧力分布についてシミュレーションを行った。図３Ａは、流路の内壁面の接触角が１２０度のみ、図３Ｂは、流路の内壁面の接触角が６０度のみ、図３Ｃは、図２Ｂの場合と同様、流路の内壁面の接触角が１２０度と６０度の２種類の場合のシミュレーション結果である。
【００４２】
図３Ａと図３Ｂに示す流路の内壁面の接触角が１２０度または６０度のみの場合には、液体と気体の間に圧力差が生じている。一方、図３Ｃに示すように、接触角度が２種類の場合には、気液界面で圧力差が生じていない。
また、接触角が１２０度のみの場合には液体側に負圧がかかり、接触角が６０度のみの場合には液体側に正圧がかかっている。このように、メニスカスが凹型か凸型かによって、そのメニスカスによって液体に発生する圧力の符号が異なることがわかる。したがって、気液界面に型が異なる２種類のメニスカスを発生させれば、メニスカスによって生じる圧力が相殺されるものと考えられる。
【００４３】
図３Ｃの断面図を図４Ａ，図４Ｂ、図３Ｃの気液界面の三次元形状を図５に示す。なお、図４Ａは、ＺＸ平面による断面図、図４Ｂは、ＺＹ平面による断面図である。ここで、Ｚ軸は流路の延在方向、Ｘ軸はＺ軸に垂直な方向、Ｙ軸はＺ軸およびＸ軸に垂直な方向である。
図４Ａ，図４Ｂからわかるように、気液界面は、流路の軸線（Ｚ軸）方向に対して斜めに傾いて、平面に近くなっていることがわかる。
また、図５に示すように、気液界面の形状は鞍型になっており、その面内で曲率の符号が反転していることがわかる。このような曲率の正負符号が混在する気液界面は、発生する表面張力を小さくすることができる。これは、上述したように、気液界面に型が異なる２種類のメニスカスが発生することにより、これらのメニスカスによって生じる圧力が相殺されるためであると考えられる。そこで、このような気液界面を液だめ１４内に形成すれば、液だめ１４に生じるメニスカスよってかかる圧力が小さくなる、すなわち、液だめ１４に生じる圧力差ｐ２３が小さくなるので、圧力損失ｐ２２をより正確に求めることができ、結果として、液体の粘度をより正確に求めることができるようになる。
【００４４】
上述した形状の気液界面は、図６に示すように、液だめ１４の内壁面を次のように構成すると実現することができる。すなわち、液体の液だめ１４内の気液界面と接触する壁面が、接触角度が異なる２つの面、望ましくは９０度を挟む相異なる角度（一方は９０度未満、他方は９０度を超える）を持つ２つの面から構成する。液体が水の場合には、２つの壁面のうち一方が親水化領域（水との接触角が小さい）、他方が疎水化領域（水との接触角が大きい）から構成する。このような気液界面では、発生する
そこで、本実施の形態では、液だめ１４の内側面のうち周方向に半分の領域に形成され、凹型のメニスカスが形成される液体との接触角が９０度未満の第１の領域１４ａと、この第１の領域１４ａの残りの領域に形成され、凸型のメニスカスが形成される液体との接触角が９０度を超える第２の領域１４ｂとを設けている。これにより、フローセル１に供給された液体における液だめ１４側の気液界面の形状が平面に近い形状になり、その気液界面に生じる表面張力が小さくなるので、圧力差ｐ２３が小さくすることができる。これにより、圧力損失ｐ２２をｐ１−ｐ３とより等しくできるので、結果として、流路を流れる液体の粘度をより正確に測定することができる。
【００４５】
以上説明したように、本実施の形態によれば、液だめ１４に導入される液体のメニスカスの形状が、第１の領域１４ａでは第１の型となり、第２の領域１４ｂでは第１の型とは異なる第２の型となるので、液だめ１４に導入される液体にかかるメニスカスによる圧力損失をより小さくすることができるので、結果として、流路を流れる液体の粘度をより正確に測定することができる。
【００４６】
なお、本実施の形態では、液だめ１４の内壁面に第１の領域１４ａおよび第２の領域１４ｂを設ける場合を例に説明したが、制御部を設ける位置はこれに限定されず、適宜自由に設定することができる。
例えば、図７に示すように、液だめ１４の開口１４ｃから液だめ１４内部に吸引端を配設した排出チューブ１５の表面と液だめ１４の内壁面とについて、液体との接触角が異なるようにするようにしてもよい。
また、図８に示すように、液だめ１４内部に液体との接触角が異なる二種類のビーズ１６を複数を配設するようにしてもよい。
このようにしても、液体の気液界面に生じる表面張力が小さくなるので、圧力差ｐ２３が小さくなり、結果として、流路を流れる液体の粘度をより正確に測定することができる。
【００４７】
また、本実施の形態では、液だめ１４の内壁面における軸線回りの略半分の領域に第１の領域１４ａ、その軸線回りの残りの略半分の領域に第２の領域１４ｂを設ける場合を例に説明したが、凹型のメニスカスと凸型のメニスカスが液だめ１４内に形成できるのであれば、第１の領域１４ａと第２の領域１４ｂを設ける領域は液だめ１４内の半分づつの領域に限定されず、適宜自由に設定することができる。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明は、粘度を測定する流路を備える各種機構に適用することができる。
【符号の説明】
【００４９】
１…フローセル、１１…本体、１２…供給部、１３…流路、１４…液だめ、１４ａ…第１の領域、１４ｂ…第２の領域、１４ｃ…開口部、１５…排出チューブ、１６…ビーズ。
【図１】
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【図２Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１０Ｄ】
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【図２Ａ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５】
0005992880.tif 000018