(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化１】
0005909183.tif 000150
【化２】
0005909183.tif 000151
【化３】
0005909183.tif 000152
【化４】
0005909183.tif 000153
【化５】
0005909183.tif 000154
【化６】
0005909183.tif 000155
【化７】
0005909183.tif 000156
【化８】
0005909183.tif 000157
【化９】
0005909183.tif 000158
【化１０】
0005909183.tif 000159
【化１１】
0005909183.tif 000160
および
【化１２】
0005909183.tif 000161
から選択される化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、
ここで、
【化１３】
0005909183.tif 000162
が単結合を示す場合は、
Ｐ１は、水素原子、アルキル、またはヒドロキシ基であり、
Ｒ１は、水素原子、または置換もしくは非置換の、分枝状もしくは非分枝状アルキル基であり、
【化１４】
0005909183.tif 000163
が二重結合を示す場合は、Ｐ１およびＲ１は、存在せず；
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２であり；
Ｒ２は、水素、置換もしくは非置換のアルキル、または、置換もしくは非置換のアリールであり；
そして、化合物の二重結合配置は各々独立してシスまたはトランスのいずれかであり得る、
化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、以下
【化１５】
0005909183.tif 000164
【化１６】
0005909183.tif 000165
【化１７】
0005909183.tif 000166
【化１８】
0005909183.tif 000167
【化１９】
0005909183.tif 000168
【化２０】
0005909183.tif 000169
【化２１】
0005909183.tif 000170
【化２２】
0005909183.tif 000171
【化２３】
0005909183.tif 000172
【化２４】
0005909183.tif 000173
【化２５】
0005909183.tif 000174
および
【化２６】
0005909183.tif 000175
からなる群より選択される、化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を含む、好中球抑制剤。
【請求項４】
請求項１に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を含む医薬。
【請求項５】
前記医薬は、肺切迫症候群、成人呼吸窮迫症候群および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）から選択される肺疾患；虚血性心疾患、虚血性腎疾患、虚血性脳疾患および虚血性肝疾患から選択される虚血性疾患；炎症性疾患；びらん性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、気管支喘息、潰瘍性大腸炎、動脈硬化症、クローン病、悪性腫瘍、卵巣嚢腫、卵管炎、子宮筋腫、子宮内膜症、自然流産、妊娠中毒症、不妊症および月経困難症から選択されるストレス性疾患から選択される疾患、障害または状態を処置または予防するためのものである、請求項４に記載の医薬。
【請求項６】
請求項１または２に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）１７，１８−エポキシエイコサテトラエン酸（１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ）、１９，２０−エポキシドコサペンタエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ）または１９，２０−エポキシドコサテトラエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ）に５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させて酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程
を包含する、方法。
【請求項７】
請求項１または２に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（５−ＨＥＰＥ）、８−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（８−ＨＥＰＥ）、１２−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１２−ＨＥＰＥ）、１５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１５−ＨＥＰＥ）、７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１０−ＨＤｏＨＥ）、１３−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１３−ＨＤｏＨＥ）、１４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１４−ＨＤｏＨＥ）、１７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１０−ＨＤｏＰＥ）、１４−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１４−ＨＤｏＰＥ）、および１７−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１７−ＨＤｏＰＥ）からなる群より選択される少なくとも１つのモノヒドロキシ体にω３エポキシ化酵素を接触させて酵素代謝産物を得る工程；
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程を包含する、方法。
【請求項８】
請求項１または２に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）をそれぞれ
Ａ−１）１７，１８−エポキシ化または１９，２０−エポキシ化してエポキシ体を得る工程、および
Ａ−２）５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させてヒドロキシ体を得る工程
の双方を順不同に行い酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程
を包含する、方法。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物の、医薬品を製造するための使用。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物の、好中球が関連する疾患、障害または状態を処置または予防するための医薬品を製造するための使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規抗炎症性の化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症性疾患は、現代において、対策が必要な重要な疾患分野のひとつであるが、現在の抗炎症薬としては、代表的にステロイド剤、非ステロイド抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）と呼ばれるアスピリン、イブプロフェンなどの物質が使用されている。【０００３】
しかし、これらの物質のうち、ステロイド剤は、効果が高いことから、臨床現場において、急性・慢性のいずれの炎症性疾患の治療薬としても用いられているが、多用することによる抵抗性の獲得、副作用等の問題点が指摘されている。【０００４】
ＮＳＡＩＤは、解熱鎮痛作用を有することから、対症療法として用いられているが、ＮＳＡＩＤもまた、長期間の服用により、消化管に障害が生じたり、心疾患リスクの増大、炎症性組織損傷などの進行が生じることが知られており、深刻な問題点となっている（非特許文献１、２）。【０００５】
また、レゾルビンＥ１（ＲｖＥ１；５Ｓ，１２Ｒ，１８Ｒ−トリヒドロキシエイコサペンタエン酸）などのレゾルビンというエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の１８位と５位にヒドロキシ基を持つ物質およびその誘導体、プロテクチンＤ１（ＰＤ１）というドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の１０位と１７位にヒドロキシ基を持つ物質およびその誘導体が抗炎症活性を有することが知られている（非特許文献３、４）。【０００６】
本出願人は、レゾルビン・プロテクチンとは異なるエイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸の特定のジヒドロキシ体（８，１８−ジヒドロキシエイコサペンタエン酸（８，１８−ｄｉＨＥＰＥ）、１１，１８−ジヒドロキシエイコサペンタエン酸（１１，１８−ｄｉＨＥＰＥ）、１２，１８−ジヒドロキシエイコサペンタエン酸（１２，１８−ｄｉＨＥＰＥ）、１７，１８−ジヒドロキシエイコサペンタエン酸（１７，１８−ｄｉＨＥＰＥ）、１０，２０−ジヒドロキシドコサヘキサエン酸（１０，２０−ｄｉＨＤｏＨＥ）、１３，２０−ジヒドロキシドコサヘキサエン酸（１３，２０−ｄｉＨＤｏＨＥ）、１４，２０−ジヒドロキシドコサヘキサエン酸（１４，２０−ｄｉＨＤｏＨＥ）、１９，２０−ジヒドロキシドコサヘキサエン酸（１９，２０−ｄｉＨＤｏＨＥ）など）に関連する化合物を創製し、出願した（国際出願番号ＰＣＴ／ＪＰ２０１０／５２５０９）。【０００７】
レゾルビン・プロテクチンとは異なるエイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸の誘導体については、上記出願のほか、特許文献１に若干の報告があるが、エイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸等のエポキシド系の化合物、特にω３エポキシ化化合物をさらにヒドロキシ体とすることについてはなんら記載も示唆もされていない。ましてや、このような化合物が実際に抗炎症活性を有しうることについては、なんら実証されていない。また、非特許文献５には、４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥのメチルエステル体が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００６／０５５９６５号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｓｉｎｇｈ  Ｇ．Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．１０５，３１Ｓ−３８Ｓ（１９９８）
【非特許文献２】Ｆｕｎｋ  Ｃ．Ｄ．ａｎｄ  ＦｉｔｚＧｅｒａｌｄ  Ｇ．Ａ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ５０，４７０−４７９（２００７）
【非特許文献３】Ｓｅｒｈａｎ  Ｃ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ７３，１５５−１７２（２００４）
【非特許文献４】Ｅ．Ｔｊｏｎａｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＆  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １３，１１９３−１２０２，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２００６
【非特許文献５】Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ（２０００），１１（４），８５１−８６０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、従来のステロイド剤およびＮＳＡＩＤの上記欠点を克服するため、さらなる新規構造の化合物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、鋭意検討した結果、レゾルビン・プロテクチンと異なり、また、エイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸の特定のジヒドロキシ体とも異なる従来公知とされていないエイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸およびドコサペンタエン酸の特定のエポキシド系の化合物（１７，１８−エポキシ−エイコサテトラエン酸（ＥＴＥ）、１９，２０−エポキシ−ドコサペンタエン酸（ＤＰＥ）、および１９，２０−エポキシ−ドコサテトラエン酸（ＤＴＥ））を起点とした誘導体（５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）、８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（８ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）、および１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）；４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１３ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、および１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）；ならびに１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ（１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）、１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）、および１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ））など（図２Ａ〜Ｃ参照）が好中球の抑制活性を有することを見出し、上記課題を解決した。【００１２】
したがって、本発明は、以下を提供する。【００１３】
（１Ａ）５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−エイコサテトラエン酸（５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）類【００１４】
【化１】
0005909183.tif 000002
【００１５】
８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−エイコサテトラエン酸（８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、８ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）類【００１６】
【化２】
0005909183.tif 000003
【００１７】
１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−エイコサテトラエン酸（１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）類【００１８】
【化３】
0005909183.tif 000004
【００１９】
１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−エイコサテトラエン酸、（１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、１５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）類【００２０】
【化４】
0005909183.tif 000005
【００２１】
４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサペンタエン酸（４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）類【００２２】
【化５】
0005909183.tif 000006
【００２３】
７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサペンタエン酸（７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）類【００２４】
【化６】
0005909183.tif 000007
【００２５】
１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサペンタエン酸（１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）類【００２６】
【化７】
0005909183.tif 000008
【００２７】
１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサペンタエン酸（１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１３ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）類【００２８】
【化８】
0005909183.tif 000009
【００２９】
１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサペンタエン酸（１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）類【００３０】
【化９】
0005909183.tif 000010
【００３１】
１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサペンタエン酸（１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）類【００３２】
【化１０】
0005909183.tif 000011
【００３３】
１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサテトラエン酸（１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ、１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）類【００３４】
【化１１】
0005909183.tif 000012
【００３５】
１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサテトラエン酸（１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ、１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）類【００３６】
【化１２】
0005909183.tif 000013
【００３７】
および
１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ドコサテトラエン酸（１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ、１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）類【００３８】
【化１３】
0005909183.tif 000014
【００３９】
から選択される化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、
ここで、【００４０】
【化１４】
0005909183.tif 000015
【００４１】
が単結合を示す場合は、
Ｐ１は、保護基、水素原子、アルキル、ヒドロキシ基もしくは置換されたヒドロキシ基であり、
Ｒ１は、水素原子、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキル基、置換または非置換のアリール基（例えば、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキルアリール基も含む）であり、【００４２】
【化１５】
0005909183.tif 000016
【００４３】
が二重結合を示す場合は、Ｐ１およびＲ１は、存在せず；
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ２、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ４、−ＣＮであり；
Ｒ２は、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルまたは式：−ＮＲａＲｂ（式中、ＲａおよびＲｂは各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルであるか、またはＲａとＲｂは隣接する窒素原子と一緒になって、置換もしくは非置換の含窒素ヘテロサイクルを形成していてもよい。）であり；
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルであるか、またはＲ３とＲ４は隣接する窒素原子と一緒になって、置換もしくは非置換の含窒素ヘテロサイクルを形成していてもよく；
そして、化合物の二重結合配置は各々独立してシスまたはトランスのいずれかであり得る、化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物。
（１Ｂ）【００４４】
【化１６】
0005909183.tif 000017
【００４５】
【化１７】
0005909183.tif 000018
【００４６】
【化１８】
0005909183.tif 000019
【００４７】
【化１９】
0005909183.tif 000020
【００４８】
【化２０】
0005909183.tif 000021
【００４９】
【化２１】
0005909183.tif 000022
【００５０】
【化２２】
0005909183.tif 000023
【００５１】
【化２３】
0005909183.tif 000024
【００５２】
【化２４】
0005909183.tif 000025
【００５３】
【化２５】
0005909183.tif 000026
【００５４】
【化２６】
0005909183.tif 000027
【００５５】
および【００５６】
【化２７】
0005909183.tif 000028
【００５７】
から選択される化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、
ここで、【００５８】
【化２８】
0005909183.tif 000029
【００５９】
が単結合を示す場合は、
Ｐ１は、保護基、水素原子、アルキル、ヒドロキシ基もしくは置換されたヒドロキシ基であり、
Ｒ１は、水素原子、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキル基、あるいは置換または非置換のアリール基であり、【００６０】
【化２９】
0005909183.tif 000030
【００６１】
が二重結合を示す場合は、Ｐ１およびＲ１は、存在せず；
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ２、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ４、−ＣＮであり；
Ｒ２は、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルまたは式：−ＮＲａＲｂ（式中、ＲａおよびＲｂは各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルであるか、またはＲａとＲｂは隣接する窒素原子と一緒になって、置換もしくは非置換の含窒素ヘテロサイクルを形成していてもよい。）であり；
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルであるか、またはＲ３とＲ４は隣接する窒素原子と一緒になって、置換もしくは非置換の含窒素ヘテロサイクルを形成していてもよく；
そして、化合物の二重結合配置は各々独立してシスまたはトランスのいずれかであり得る、
化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物。【００６２】
（２Ａ）項目１Ａまたは１Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、以下【００６３】
【化３０】
0005909183.tif 000031
【００６４】
【化３１】
0005909183.tif 000032
【００６５】
【化３２】
0005909183.tif 000033
【００６６】
【化３３】
0005909183.tif 000034
【００６７】
【化３４】
0005909183.tif 000035
【００６８】
【化３５】
0005909183.tif 000036
【００６９】
【化３６】
0005909183.tif 000037
【００７０】
【化３７】
0005909183.tif 000038
【００７１】
【化３８】
0005909183.tif 000039
【００７２】
【化３９】
0005909183.tif 000040
【００７３】
【化４０】
0005909183.tif 000041
【００７４】
【化４１】
0005909183.tif 000042
【００７５】
および【００７６】
【化４２】
0005909183.tif 000043
【００７７】
からなる群より選択される、化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物。
（２Ｂ）
項目１Ａまたは１Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、以下【００７８】
【化４３】
0005909183.tif 000044
【００７９】
【化４４】
0005909183.tif 000045
【００８０】
【化４５】
0005909183.tif 000046
【００８１】
【化４６】
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【００８２】
【化４７】
0005909183.tif 000048
【００８３】
【化４８】
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【００８４】
【化４９】
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【００８５】
【化５０】
0005909183.tif 000051
【００８６】
【化５１】
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【００８７】
【化５２】
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【００８８】
【化５３】
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【００８９】
および【００９０】
【化５４】
0005909183.tif 000055
【００９１】
からなる群より選択される、化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物。
（３）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を含む、好中球抑制剤。
（４）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を含む医薬。
（５）前記医薬は、肺切迫症候群、成人呼吸窮迫症候群および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）から選択される肺疾患；虚血性心疾患、虚血性腎疾患、虚血性脳疾患および虚血性肝疾患から選択される虚血性疾患；炎症性疾患；びらん性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、気管支喘息、潰瘍性大腸炎、動脈硬化症、クローン病、悪性腫瘍、卵巣嚢腫、卵管炎、子宮筋腫、子宮内膜症、自然流産、妊娠中毒症、不妊症および月経困難症から選択されるストレス性疾患から選択される疾患、障害または状態を処置または予防するためのものである、項目４に記載の医薬。
（６）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）１７，１８−エポキシエイコサテトラエン酸（１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ）、１９，２０−エポキシドコサペンタエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ）または１９，２０−エポキシドコサテトラエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ）に５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させて酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程
を包含する、方法。
（７Ａ）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（５−ＨＥＰＥ）、８−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（８−ＨＥＰＥ）、１２−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１２−ＨＥＰＥ）、１５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１５−ＨＥＰＥ）、４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（４−ＨＤｏＨＥ）、７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１０−ＨＤｏＨＥ）、１３−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１３−ＨＤｏＨＥ）、１４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１４−ＨＤｏＨＥ）、１７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１０−ＨＤｏＰＥ）、１４−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１４−ＨＤｏＰＥ）、および１７−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１７−ＨＤｏＰＥ）からなる群より選択される少なくとも１つのモノヒドロキシ体にω３エポキシ化酵素を接触させて酵素代謝産物を得る工程；
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程を包含する、方法。
（７Ｂ）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（５−ＨＥＰＥ）、８−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（８−ＨＥＰＥ）、１２−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１２−ＨＥＰＥ）、１５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１５−ＨＥＰＥ）、７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１０−ＨＤｏＨＥ）、１３−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１３−ＨＤｏＨＥ）、１４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１４−ＨＤｏＨＥ）、１７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１０−ＨＤｏＰＥ）、１４−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１４−ＨＤｏＰＥ）、および１７−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１７−ＨＤｏＰＥ）からなる群より選択される少なくとも１つのモノヒドロキシ体にω３エポキシ化酵素を接触させて酵素代謝産物を得る工程；
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程を包含する、方法。
（８Ａ）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）をそれぞれ
Ａ−１）１７，１８−エポキシ化または１９，２０−エポキシ化してエポキシ体を得る工程、および
Ａ−２）５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させてヒドロキシ体を得る工程
の双方を順不同に行い酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程
を包含する、方法。
（８Ｂ）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法であって、
Ａ）エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）をそれぞれ
Ａ−１）１７，１８−エポキシ化または１９，２０−エポキシ化してエポキシ体を得る工程、および
Ａ−２）５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させ、さらに還元することでヒドロキシ体を得る工程
の双方を順不同に行い酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程
を包含する、方法。
（９）炎症性疾患を処置または予防する方法であって、該処置または予防が必要な被験体に項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を投与する工程を包含する、方法。
（１０）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物の、医薬品を製造するための使用。
（１１）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物の、好中球が関連する疾患、障害または状態を処置または予防するための医薬品を製造するための使用。
（１２）項目１Ａ、１Ｂ、２Ａまたは２Ｂに記載の化合物もしくはＰＵＦＡ代謝物、該化合物もしくは該代謝物の溶媒和物、該化合物もしくは該代謝物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分析する方法であって、
以下の液体クロマトグラフィー条件
Ａ液：水／酢酸＝１００／０．１、およびＢ液：アセトニトリル／メタノール＝４／１を用いた溶媒系として用い、流速：０〜３０分→５０μＬ／分、３０〜３３分→８０μＬ／分、３３〜４５分→１００μＬ／分を用い、またはその改変系を用い、および図１Ａに記載のパラメータを用いることを特徴とする、
方法。
上記条件設定においては、合成した化合物についてはＭＳ／ＭＳの実測値からＭＲＭの親マスと子マスのペアーを最適化（衝突エネルギーの最適化）することができる。また検量線を作製すると定量分析が可能になる。合成しないものは仮想条件を設定して、検出目的のＭＲＭを行う。
（１３）  Ａ）１７，１８−エポキシエイコサテトラエン酸（１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ）、１９，２０−エポキシドコサペンタエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ）または１９，２０−エポキシドコサテトラエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ）に５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させて酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程を包含する、方法によって生産される生成物。
（１４Ａ）  Ａ）５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（５−ＨＥＰＥ）、８−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（８−ＨＥＰＥ）、１２−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１２−ＨＥＰＥ）、１５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１５−ＨＥＰＥ）、４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（４−ＨＤｏＨＥ）、７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１０−ＨＤｏＨＥ）、１３−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１３−ＨＤｏＨＥ）、１４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１４−ＨＤｏＨＥ）、１７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１０−ＨＤｏＰＥ）、１４−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１４−ＨＤｏＰＥ）、および１７−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１７−ＨＤｏＰＥ）からなる群より選択される少なくとも１つのモノヒドロキシ体にω３エポキシ化酵素を接触させて酵素代謝産物を得る工程；
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程を包含する、方法によって生産される生成物。
（１４Ｂ）  Ａ）５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（５−ＨＥＰＥ）、８−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（８−ＨＥＰＥ）、１２−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１２−ＨＥＰＥ）、１５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１５−ＨＥＰＥ）、７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１０−ＨＤｏＨＥ）、１３−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１３−ＨＤｏＨＥ）、１４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１４−ＨＤｏＨＥ）、１７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１０−ＨＤｏＰＥ）、１４−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１４−ＨＤｏＰＥ）、および１７−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１７−ＨＤｏＰＥ）からなる群より選択される少なくとも１つのモノヒドロキシ体にω３エポキシ化酵素を接触させて酵素代謝産物を得る工程；
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程を包含する、方法によって生産される生成物。
（１５Ａ）  Ａ）エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）をそれぞれ
Ａ−１）１７，１８−エポキシ化または１９，２０−エポキシ化してエポキシ体を得る工程、および
Ａ−２）５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させてヒドロキシ体を得る工程の双方を順不同に行い酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程
を包含する、方法によって生産される生成物。
（１５Ｂ）  Ａ）エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）をそれぞれ
Ａ−１）１７，１８−エポキシ化または１９，２０−エポキシ化してエポキシ体を得る工程、および
Ａ−２）５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させ、さらに還元することでヒドロキシ体を得る工程
の双方を順不同に行い酵素代謝産物を得る工程；および
Ｂ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程
を包含する、方法によって生産される生成物。【００９２】
上記条件設定においては、合成した化合物についてはＭＳ／ＭＳの実測値からＭＲＭの親マスと子マスのペアーを最適化（衝突エネルギーの最適化）することができる。また検量線を作製すると定量分析が可能になる。合成しないものは仮想条件を設定して、検出目的のＭＲＭを行う。【００９３】
これらのすべての局面において、本明細書に記載される各々の実施形態は、適用可能である限り、他の局面において適用されうることが理解される。【００９４】
複数の実施形態が開示されるが、本発明のなお他の実施形態は、以下の詳細な説明から当業者には明らかになるであろう。明らかであるように、本発明は、すべて本発明の技術思想および範囲から逸脱することなく、種々の明白な態様において修飾が可能である。従って、図面および詳細な説明は、事実上例示的であると見なされ、制限的であるとは見なされない。
【発明の効果】
【００９５】
本発明は、急性炎症時において見出される好中球の組織への浸潤および活性化を、予想外に顕著に抑制する。本発明の化合物は、従来知られていない化合物である。したがって、新たな治療剤としての有用性を提供する。【００９６】
また、本発明の化合物は、生体内においても見出されることが本発明において見出されたことから、中長期の投与において副作用の少ない治療剤であると期待される。また、ステロイド剤およびＮＳＡＩＤとは作用が異なることから、抗炎症剤としても、既存のステロイド剤等との併用することによる効果が期待される。
【図面の簡単な説明】
【００９７】
【図１Ａ】図１Ａは、本発明の化合物もしくはＰＵＦＡ代謝物、該化合物もしくは該代謝物の溶媒和物、該化合物もしくは該代謝物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分析するために使用したグラジエント（勾配）を示すグラフである。Ａ液：水／酢酸＝１００／０．１、およびＢ液：アセトニトリル／メタノール＝４／１を用いた溶媒系として用い、流速：０〜３０分→５０μＬ／分、３０〜３３分→８０μＬ／分、３３〜４５分→１００μＬ／分を用いた。縦軸は、Ｂ液の濃度、横軸は時間（分）である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、本発明において対象となるＭＲＭによる測定対象となっている多不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）化合物のリストである。図中、ｈｙはヒドロキシ、Ｅｐはエポキシ、ＥｐＥＴＥはエポキシエイコサテトラエン酸、ＥｐＤＰＥはエポキシドコサペンタエン酸、ＥｐＤＴＥはエポキシドコサテトラエン酸を表す。
【図２Ａ】図２Ａは、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）およびこれから生成する本発明のオメガ（ω）エポキシド系化合物の代表的構造を示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ドコサヘキサンエン酸（ＤＨＡ）およびこれらから生成する本発明のオメガ（ω）エポキシド系化合物の代表的構造を示す。
【図２Ｃ】図２Ｃは、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）およびこれらから生成する本発明のオメガ（ω）エポキシド系化合物の代表的構造を示す。
【図３Ａ−１】図３Ａは、ＥＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ａ−１は、５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ａ−２】図３Ａは、ＥＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ａ−２は、８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（８ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ａ−３】図３Ａは、ＥＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ａ−３は、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ａ−４】図３Ａは、ＥＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ａ−４は、１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｂ−１】図３Ｂは、ＤＨＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ｂ−１は、４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｂ−２】図３Ｂは、ＤＨＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ｂ−２は、７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｂ−３】図３Ｂは、ＤＨＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ｂ−３は、１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｂ−４】図３Ｂは、ＤＨＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ｂ−４は、１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１３ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｃ−１】図３Ｃは、ＤＨＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果の続きを示す。図３Ｃ−１は１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｃ−２】図３Ｃは、ＤＨＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果の続きを示す。図３Ｃ−２は、１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｄ−１】図３Ｄは、ＤＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ｄ−１は、１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ（１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｄ−２】図３Ｄは、ＤＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ｄ−２は、１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図３Ｄ−３】図３Ｄは、ＤＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。図３Ｄ−３は、１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ）を示す。上段図は液体クロマトグラフィーの流出位置（保持時間）、中段図は質量分析のチャート図（横軸が質量（ｍ／ｚ）、縦軸は信号強度（相対強度）を示す。）、下段図は構造式および右側には質量分析におけるピークの同定を示す。
【図４Ａ】図４Ａは、ザイモザン（ｚｙｍｏｓａｎ）腹膜炎モデルにおける本発明の化合物の抗炎症活性の評価を示す。モデルは、Ｃ５７ＢＬ６マウスに１ｍｇのザイモザンを腹腔内投与して急性腹膜炎を惹起して作製した。左から１７，１８−ＥｐＥＴＥ、５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）、８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（８ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）、および１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）をそれぞれ（化合物については、それぞれ１００ｎｇ）マウス尾静脈から注入し、５分後にザイモザン  １ｍｇを腹腔内投与して腹膜炎を開始した。２時間後に腹腔内の細胞を回収し、ＰＭＮ（好中球）の数についてそれぞれＦＡＣＳを用いた解析を行った結果を示す。各々４〜６回の実験の平均をとり、値は平均±ＳＥＭとして示す。＊は生理食塩水（ビヒクルのみ）に対してｐ＜０．０５、＊＊は生理食塩水に対してｐ＜０．００５を表す。
【図４Ｂ】図４Ｂは、ザイモザン（ｚｙｍｏｓａｎ）腹膜炎モデルにおける本発明の化合物の抗炎症活性の評価を示す。モデルは、Ｃ５７ＢＬ６マウスに１ｍｇのザイモザンを腹腔内投与して急性腹膜炎を惹起して作製した。図４Ａと同様の実験を、１９，２０−ＥｐＤＰＥ、４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１３ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）、および１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）について行ったものを示す。その他は、図４Ａと同様の手順で行った。各々３〜４回の実験の平均をとり、値は平均±ＳＥＭとして示す。＊は生理食塩水に対してｐ＜０．０５を表す。
【図４Ｃ】図４Ｃは、ザイモザン（ｚｙｍｏｓａｎ）腹膜炎モデルにおける本発明の化合物の抗炎症活性の用量依存的評価を示す。モデルは、Ｃ５７ＢＬ６マウスに１ｍｇのザイモザンを腹腔内投与して急性腹膜炎を惹起して作製した。図４Ａと同様の実験を用量依存的に行った。腹膜炎モデルにおける１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥの活性（ＰＭＮ阻害）が用量依存的であることを示す。用量は、０．４４〜４３４．８ｎｇまで振り、結果は平均＋ＳＤで示す。＊は生理食塩水（ビヒクルのみ）に対してｐ＜０．０５、＊＊＊は生理食塩水に対してｐ＜０．０００５を表す。
【図４Ｄ】図４Ｄは、ザイモザン（ｚｙｍｏｓａｎ）腹膜炎モデルにおける本発明の化合物の抗炎症活性の評価を示す。モデルは、Ｃ５７ＢＬ６マウスに１ｍｇのザイモザンを腹腔内投与して急性腹膜炎を惹起して作製した。図４Ａと同様の実験を、１０−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ、１４−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ、１７−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥについて行った。その好中球浸潤抑制のデータを図４Ｄに示す。図４Ａと同様の手順で行った。各々６〜１１回の実験の平均をとり、値は平均±ＳＥＭとして示す。＊は生理食塩水に対してｐ＜０．０５を表し、＊＊は生理食塩水に対してｐ＜０．００５を表す。
【発明を実施するための形態】
【００９８】
以下、本発明を説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当上記分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語および科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。
【００９９】
（用語の定義）
本明細書において、必要に応じて、以下の略語を用いる。
ＣＯＸ：シクロオキシゲナーゼ；ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ
ＤＨＡ：ドコサヘキサエン酸；ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＤＰＡ：ドコサペンタエン酸；ｄｏｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＤＰＥ：ドコサペンタエン酸；ｄｏｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ここで、ＤＰＡとＤＰＥは変換可能に使用される。
ＤＴＥ：ドコサテトラエン酸；ｄｏｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
Ｅｐ：エポキシ；ｅｐｏｘｙ
ＥｐＤＰＥ：エポキシドコサペンタエン酸；ｅｐｏｘｙ  ｄｏｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＥｐＤＴＥ：エポキシドコサテトラエン酸；ｅｐｏｘｙ  ｄｏｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＥｐＥＴＥ：エポキシエイコサテトラエン酸；ｅｐｏｘｙ  ｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＥＰＡ：エイコサペンタエン酸；ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＥＰＥ：エイコサペンタエン酸；ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ここで、ＥＰＡとＥＰＥは変換可能に使用される。
ＥｐＥＰＥ：エポキシエイコサペンタエン酸；ｅｐｏｘｙ  ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＥＴＥ：エイコサテトラエン酸；ｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＨＢＳＳ：ハンクス平衡化塩溶液；ｈａｎｋｓ’  ｂａｌａｎｃｅｄ  ｓａｌｔ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ
ＨＤｏＨＥ：ヒドロキシドコサヘキサエン酸；ｈｙｄｒｏｘｙ  ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＨＤｏＰＥ：ヒドロキシドコサペンタエン酸；ｈｙｄｒｏｘｙ  ｄｏｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＨＥＰＥ：ヒドロキシエイコサペンタエン酸；ｈｙｄｒｏｘｙ  ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＨＥＴＥ：ヒドロキシエイコサテトラエン酸；ｈｙｄｒｏｘｙ  ｅｉｃｏｓａｔｅｔｒａｅｎｏｉｃ  ａｃｉｄ
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー；ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ＬＣ：液体クロマトグラフィー；ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ＬＯＸ：リポキシゲナーゼ；ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ
ＭＲＭ：マルチプルリアクションモニタリング；ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ
Ｎ：ノルマル（規定）
ＰＢＳ：リン酸緩衝化生理食塩水；ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ｂｕｆｆｅｒｅｄ  ｓａｌｉｎｅ
ＰＤ１：プロテクチンＤ１；ｐｒｏｔｅｃｔｉｎ  Ｄ１
ＰＭＮ：多形核白血球（好中球）；ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ
ＰＵＦＡ：多不飽和脂肪酸；ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ
Ｒｖ：レゾルビン；ｒｅｓｏｌｖｉｎ
ｓＬＯＸ：ダイズリポキシゲナーゼ；ｓｏｙｂｅａｎ  ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ
ＵＰＬＣ：超高速液体クロマトグラフィー；ｕｌｔｒａ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
（用語）
以下に本明細書において用いられる各用語の意味を説明する。各用語は本明細書中、統一した意味で使用し、単独で用いられる場合も、または他の用語と組み合わされて用いられる場合も、同一の意味で用いられる。
【０１００】
本明細書中、「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素を意味する。フッ素、塩素、および臭素が好ましい。
【０１０１】
本明細書中、「アルキル」とは、それ自体、または別の置換基の一部として、親のアルカンの単一の炭素原子からの１個の水素原子の除去によって誘導され、言及される数の炭素原子を有する（例えば、Ｃ１〜Ｃ６、本明細書中、Ｃとは炭素を意味し、Ｃｎ（ｎは整数を示す。）は炭素原子の数を示す。例えば、Ｃ１〜Ｃ６は１個〜６個の炭素原子を意味する）、飽和または不飽和の、分枝状の、直鎖状の、または環状の一価炭化水素基をいう。代表的には、炭素原子数１〜８の直鎖または分枝鎖の１価の炭化水素基を包含する。例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ｎｅｏ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル等が挙げられる。１つの例では、Ｃ１〜Ｃ６アルキルが挙げられる。別の例では、Ｃ１〜Ｃ４アルキルが挙げられる。特に炭素数を指定した場合は、その数の範囲の炭素数を有する「アルキル」を意味する。本明細書では、「置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキル基」とは、このようなアルキル基であって、置換されていてもよく置換されていないものであってもよく、また分枝していてもよく分枝していなくてもよい任意のアルキル基を指すことが理解される。
【０１０２】
本明細書中、「ヘテロアルキル」とは、上記「アルキル」の少なくとも１つの炭素原子が、酸素原子、硫黄原子または窒素原子等のヘテロ原子で置き換わったアルキルをいう。
【０１０３】
本明細書中、「アルケニル」とは、それ自体、または別の置換基の一部として、親のアルケンの単一の炭素原子からの１個の水素原子の除去によって誘導され、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、不飽和で分枝状の、直鎖状の、または環状の炭化水素基をいう。代表的には、炭素原子数が２〜８個であり、１個もしくは２個以上の二重結合を有する、直鎖または分枝鎖の１価の炭化水素基を包含する。基は二重結合についてシス配座またはトランス配座のいずれであってもよい。例えば、ビニル、アリル、１−プロペニル、２−ブテニル、２−ペンテニル、２−ヘキセニル、２−ヘプテニル、２−オクテニル等が挙げられる。１つの例では、Ｃ２−Ｃ６アルケニルが挙げられる。別の例では、Ｃ２−Ｃ４アルケニルが挙げられる。
【０１０４】
本明細書中、「アルキニル」とは、炭素原子数が２〜８個であり、１個もしくは２個以上の炭素−炭素三重結合を有する、直鎖または分枝鎖の１価の炭化水素基を包含する。例えば、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、２−ブチニル、２−ペンチニル、２−ヘキシニル、２−ヘプチニル、２−オクチニル等が挙げられる。１つの例では、Ｃ２〜Ｃ６アルキニルが挙げられる。別の例では、Ｃ２〜Ｃ４アルキニルが挙げられる。
【０１０５】
本明細書中、アルキル、アルケニルまたはアルキニルの「ジイル」とは、それ自体、または別の置換基の一部として、親のアルカン、アルケン、アルキンの２個の異なる炭素原子の各々からの１個の水素原子の除去によって、または親のアルカン、アルケン、アルキンの単一の炭素原子からの２個の水素原子の除去によって誘導され、言及される数の炭素原子を有する（すなわち、Ｃ１〜Ｃ６は１個〜６個の炭素原子を意味する）、飽和または不飽和の、分枝状の、直鎖状の、または環状の二価炭化水素基をいう。２個の一価の基の中心または二価の基の中心の各結合価が、同じ原子または異なる原子と結合を形成することができる。典型的なジイル基には以下が含まれるがこれらに限定されない：メタンジイル；エタン−１，１−ジイル、エタン−１，２−ジイル、エテン−１，１−ジイル、エテン−１，２−ジイルなどのエチルジイル；プロパン−１，１−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−２，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、シクロプロパン−１，１−ジイル、シクロプロパン−１，２−ジイル、プロパ−１−エン−１，１−ジイル、プロパ−１−エン−１，２−ジイル、プロパ−２−エン−１，２−ジイル、プロパ−１−エン−１，３−ジイル、シクロプロパ−１−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，１−ジイル、プロパ−１−イン−１，３−ジイルなどのプロピルジイル；ブタン−１，１−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−２，２−ジイル、２−メチル−プロパン−１，１−ジイル、２−メチル−プロパン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，１−ジイル；シクロブタン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，３−ジイル、ブタ−１−エン−１，１−ジイル、ブタ−１−エン−１，２−ジイル、ブタ−１−エン−１，３−ジイル、ブタ−１−エン−１，４−ジイル、２−メチル−プロパ−１−エン−１，１−ジイル、２−メタニリデン−プロパン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，４−ジイル、シクロブタ−１−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１−エン−１，３−ジイル、シクロブタ−２−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−１−イン−１，３−ジイル、ブタ−１−イン−１，４−ジイル、ブタ−１，３−ジイン−１，４−ジイルなどのブチルジイル；など。特定のレベルの飽和が意図される場合、命名法アルキルジイル、アルケニルジイルおよび／またはアルキニルジイルが使用される。２個の結合価が同じ炭素原子上にあることが特に意図される場合、命名法「アルキリデン」が使用される。好ましい実施形態において、アルキルジイル基は（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルジイルである。基の中心が末端の炭素にある飽和非環式アルカニルジイル基、例えば、メタンジイル（メタノ）；エタン−１，２−ジイル（エタノ）；プロパン−１，３−ジイル（プロパノ）；ブタン−１，４−ジイル（ブタノ）；などもまた好ましい（「アルキレノ」ともいう）。
【０１０６】
本明細書中、「シクロアルキル」とは、それ自体、または別の置換基の一部として、親のシクロアルカンの単一の炭素原子からの１個の水素原子の除去によって誘導される、環状の炭化水素基をいう。代表的には、炭素原子数が３〜８個であるシクロアルキルを包含する。例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルが挙げられる。１つの例ではＣ３−Ｃ６シクロアルキルが挙げられる。
【０１０７】
本明細書中、「シクロアルケニル」とは、それ自体、または別の置換基の一部として、親のシクロアルケンの単一の炭素原子からの１個の水素原子の除去によって誘導され、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する、不飽和の環状の炭化水素基をいう。代表的には、炭素原子数が３〜８個であるシクロアルケニルを包含する。例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニルが挙げられる。１つの例ではＣ３−Ｃ６シクロアルケニルが挙げられる。
【０１０８】
本明細書中、「アルコキシ」または「アルキルオキシ」としては、メチルオキシ、エチルオキシ、ｎ−プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、ｎ−ブチルオキシ、イソブチルオキシ、ｓｅｃ−ブチルオキシ、ｔｅｒｔ−ブチルオキシ、ｎ−ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、２−ペンチルオキシ、３−ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イソヘキシルオキシ、２−ヘキシルオキシ、３−ヘキシルオキシ、ｎ−ヘプチルオキシ、ｎ−オクチルオキシ等が挙げられる。好ましくは、Ｃ１−Ｃ６アルキルオキシが挙げられる。さらに好ましくは、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシが挙げられる。特に炭素数を指定した場合は、その数の範囲の炭素数を有する「アルコキシ」または「アルキルオキシ」を意味する。
【０１０９】
本明細書中、「アルキルスルホニル」としては、メチルスルホニル、エチルスルホニル、ｎ−プロピルスルホニル、イソプロピルスルホニル、ｎ−ブチルスルホニル、イソブチルスルホニル、ｓｅｃ−ブチルスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル、ｎ−ペンチルスルホニル、イソペンチルスルホニル、２−ペンチルスルホニル、３−ペンチルスルホニル、ｎ−ヘキシルスルホニル、イソヘキシルスルホニル、２−ヘキシルスルホニル、３−ヘキシルスルホニル、ｎ−ヘプチルスルホニル、ｎ−オクチルスルホニル等が挙げられる。好ましくは、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニルが挙げられる。さらに好ましくは、Ｃ１−Ｃ４アルキルスルホニルが挙げられる。
【０１１０】
本明細書中、「アルキルオキシカルボニル」としては、メチルオキシカルボニル、エチルオキシカルボニル、ｎ−プロピルオキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、ｎ−ブチルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、ｎ−ペンチルオキシカルボニル等が挙げられる。１つの例では、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニルが挙げられる。別の例では、Ｃ１−Ｃ２アルキルオキシカルボニルが挙げられる。
【０１１１】
本明細書中、「アシル」とは、ホルミル、アルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルケニルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロサイクルカルボニルを包含する。例えば、アセチル、プロピオニル、ブチロイル、ベンゾイル等が挙げられる。
【０１１２】
本明細書中、「低級アルキル」とは、炭素数１〜６、好ましくは炭素数１〜３の直鎖または分枝状のアルキルを包含し、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、およびイソヘキシル等が挙げられる。
【０１１３】
「低級アルコキシ」、「ヒドロキシ低級アルキル」、「ヒドロキシ低級アルコキシ」、「低級アルコキシカルボニル」、「低級アルキルアミノ」、「低級アルコキシ低級アルコキシ」、「低級アルキルカルバモイル」、「ヒドロキシ低級アルキルカルバモイル」、「低級アルコキシイミノ」、「低級アルキルチオ」、「低級アルキルスルホニル」、「低級アルキルスルホニルオキシ」「低級アルキルスルファモイル」、および「低級アルキルスルフィニル」の低級アルキル部分も上記「低級アルキル」と同様である。
【０１１４】
本明細書中、「置換もしくは非置換の低級アルキル」は、置換されていてもよく、好ましくは置換基群αから選択される１以上の基で置換されていてもよい。
【０１１５】
ここで置換基群αとは、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルコキシ、低級アルコキシ低級アルコキシ、アシル、アシルオキシ、カルボキシ、低級アルコキシカルボニル、アミノ、アシルアミノ、低級アルキルアミノ、イミノ、ヒドロキシイミノ、低級アルコキシイミノ、低級アルキルチオ、カルバモイル、低級アルキルカルバモイル、ヒドロキシ低級アルキルカルバモイル、スルファモイル、低級アルキルスルファモイル、低級アルキルスルフィニル、シアノ、ニトロ、炭素環式基およびヘテロサイクル基からなる群である。
【０１１６】
本明細書中、「低級アルケニル」とは、任意の位置に１以上の二重結合を有する炭素数２〜１５、好ましくは炭素数２〜１０、より好ましくは炭素数２〜６、さらに好ましくは炭素数２〜４の直鎖または分枝状のアルケニルを包含する。具体的にはビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、プレニル、ブタジエニル、ペンテニル、イソペンテニル、ペンタジエニル、ヘキセニル、イソヘキセニル、ヘキサジエニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル等を包含する。
【０１１７】
本明細書中、「低級アルキニル」とは、任意の位置に１以上の三重結合を有する炭素数２〜１０、好ましくは炭素数２〜８、さらに好ましくは炭素数３〜６の直鎖または分枝状のアルキニルを包含する。具体的には、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル等を包含する。これらはさらに任意の位置に二重結合を有していてもよい。
【０１１８】
本明細書中、「炭素環式基」としては、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリールおよび非芳香族縮合炭素環式基等を包含する。
【０１１９】
本明細書中、「置換もしくは非置換のアミノ」とは、前記「アルキル」、後記「アリール」、後記「ヘテロアリール」、後記「ヘテロサイクル」、前記「アシル」、前記「アルキルオキシカルボニル」、前記「アルキルスルホニル」、後記「アリールスルホニル」、後記「ヘテロアリールスルホニル」、後記「ヘテロサイクルスルホニル」で１または２箇所置換されていてもよいアミノを包含する。例えば、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、ベンジルアミノ、アセチルアミノ、ベンゾイルアミノ、メチルオキシカルボニルアミノ、メチルスルホニルアミノ等が挙げられる。好ましくはアミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセチルアミノ、メチルスルホニルアミノ等が挙げられる。
【０１２０】
本明細書中、「置換もしくは非置換のカルバモイル」とは、置換もしくは非置換のアミノ部分が前記「置換もしくは非置換のアミノ」である置換もしくは非置換のアミノカルボニルを包含する。例えば、カルバモイル、Ｎ−メチルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバモイル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバモイル、Ｎ−ベンジルカルバモイル、Ｎ−アセチルカルバモイル、Ｎ−メチルスルホニルカルバモイル等が挙げられる。好ましくは、カルバモイル、Ｎ−メチルカルバモイル、Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバモイル、Ｎ−メチルスルホニルカルバモイル等が挙げられる。
【０１２１】
本明細書中、「アリール」とは、単環状もしくは縮合環状芳香族炭化水素を包含する。これは前記「シクロアルキル」、後記「ヘテロアリール」、後記「ヘテロサイクル」と可能な全ての位置で縮合していてもよい。アリールが単環および縮合環のいずれである場合も、すべての可能な位置で結合しうる。例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、アントリル、テトラヒドロナフチル、１，３−ベンゾジオキソリル、１，４−ベンゾジオキサニル等が挙げられる。好ましくは、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチルが挙げられる。さらに好ましくは、フェニルが挙げられる。
【０１２２】
本明細書中、「複素環式（基）」、「ヘテロ環式（基）」または「ヘテロサイクル（基）」とは、交換可能に使用され、酸素原子、硫黄原子および窒素原子等のヘテロ原子を環内に１〜４個含んでいてもよく、置換可能な任意の位置に結合手を有していてもよい非芳香族ヘテロサイクル基を包含する。また、そのような非芳香族ヘテロサイクル基がさらに炭素数１〜４のアルキル鎖で架橋されていてもよく、シクロアルカン（５〜６員環が好ましい）やベンゼン環が縮合していてもよい。非芳香族であれば、飽和でも不飽和でもよい。好ましくは５〜８員環であるが、さらに非芳香族ヘテロサイクルが縮合していてもよい。例えば、ピロリニル（例えば、１−ピロリニル、２−ピロリニル、３−ピロリニル）、ピロリジニル（例えば、１−ピロリジニル、２−ピロリジニル、３−ピロリジニル）、ピロリジノン、イミダゾリニル（例えば、１−イミダゾリニル、２−イミダゾリニル、４−イミダゾリニル）、イミダゾリジニル（例えば、１−イミダゾリジニル、２−イミダゾリジニル、４−イミダゾリジニル）、イミダゾリジノン、ピラゾリニル（例えば、１−ピラゾリニル、３−ピラゾリニル、４−ピラゾリニル）、ピラゾリジニル（例えば、１−ピラゾリジニル、３−ピラゾリジニル、４−ピラゾリジニル）、ピペリジノン、ピペリジノ、ピペリジニル（例えば、２−ピペリジニル、３−ピペリジニル、４−ピペリジニル）、ピペラジニル（例えば、１−ピペラジニル、２−ピペラジニル）、ピペラジノン、モルホリニル（例えば、２−モルホリニル、３−モルホリニル）、モルホリノ、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル等が挙げられる。
【０１２３】
本明細書中、「ヘテロアリール」とは、任意に選ばれる、酸素原子、硫黄原子または窒素原子等のヘテロ原子を環内に１個以上含む５〜６員の芳香環を包含する。「ヘテロアリール」は、「ヘテロサイクル」のうち、芳香族環式基であるものを包含する。これは前記「シクロアルキル」、前記「アリール」、前記「ヘテロサイクル」、もしくは他のヘテロアリールと可能な全ての位置で縮合していてもよい。ヘテロアリールが単環および縮合環のいずれである場合も、すべての可能な位置で結合しうる。例えば、ピロリル（例えば、１−ピロリル、２−ピロリル、３−ピロリル）、フリル（例えば、２−フリル、３−フリル）、チエニル（例えば、２−チエニル、３−チエニル）、イミダゾリル（例えば、２−イミダゾリル、４−イミダゾリル）、ピラゾリル（例えば、１−ピラゾリル、３−ピラゾリル、４−ピラゾリル）、イソチアゾリル（例えば、３−イソチアゾリル）、イソキサゾリル（例えば、３−イソキサゾリル）、オキサゾリル（例えば、２−オキサゾリル、４−オキサゾリル、５−オキサゾリル）、チアゾリル（例えば、２−チアゾリル、４−チアゾリル、５−チアゾリル）、ピリジル（例えば、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル）、ピラジニル（例えば、２−ピラジニル）、ピリミジニル（例えば、２−ピリミジニル、４−ピリミジニル）、ピリダジニル（例えば、３−ピリダジニル）、テトラゾリル（例えば、１Ｈ−テトラゾリル）、オキサジアゾリル（例えば、１，３，４−オキサジアゾリル）、チアジアゾリル（例えば、１，３，４−チアジアゾリル）、インドリジニル（例えば、２−インドリジニル、６−インドリジニル）、イソインドリル（例えば、２−イソインドリル）、インドリル（例えば、１−インドリル、２−インドリル、３−インドリル）、インダゾリル（例えば、３−インダゾリル）、プリニル（例えば、８−プリニル）、キノリジニル（例えば、２−キノリジニル）、イソキノリル（例えば、３−イソキノリル）、キノリル（例えば、２−キノリル、５−キノリル）、フタラジニル（例えば、１−フタラジニル）、ナフチリジニル（例えば、２−ナフチリジニル）、キノラニル（例えば、２−キノラニル）、キナゾリニル（例えば、２−キナゾリニル）、シンノリニル（例えば、３−シンノリニル）、プテリジニル（例えば、２−プテリジニル）、カルバゾリル（例えば、２−カルバゾリル、４−カルバゾリル）、フェナントリジニル（例えば、２−フェナントリジニル、３−フェナントリジニル）、アクリジニル（例えば、１−アクリニジル、２−アクリニジル）、ジベンゾフラニル（例えば、１−ジベンゾフラニル、２−ジベンゾフラニル）、ベンゾイミダゾリル（例えば、２−ベンゾイミダゾリル）、ベンゾイソキサゾリル（例えば、３−ベンゾイソキサゾリル）、ベンゾオキサゾリル（例えば、２−ベンゾオキサゾリル）、ベンゾオキサジアゾリル（例えば、４−ベンゾオキサジアゾリル）、ベンゾイソチアゾリル（例えば、３−ベンゾイソチアゾリル）、ベンゾチアゾリル（例えば、２−ベンゾチアゾリル）、ベンゾフリル（例えば、３−ベンゾフリル）、ベンゾチエニル（例えば、２−ベンゾチエニル）、ジベンゾチエニル（例えば、２−ジベンゾチエニル）、ベンゾジオキソリル（例えば、１，３−ベンゾジオキソリル）等が挙げられる。
【０１２４】
本明細書中、「ヘテロサイクル（基）」としては、酸素原子、硫黄原子および窒素原子等から任意に選択されるヘテロ原子を環内に１以上有するヘテロサイクル基を包含し、具体的にはピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアゾリル、トリアジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル等の５〜６員のヘテロアリール；ジオキサニル、チイラニル、オキシラニル、オキセタニル、オキサチオラニル、アゼチジニル、チアニル、チアゾリジニル、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、モルホリノ、チオモルホリニル、チオモルホリノ、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリジル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロチアゾリル、テトラヒドロチアゾリル、テトラヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジニル、ヘキサヒドロアゼピニル、テトラヒドロジアゼピニル、テトラヒドロピリダジニル等の非芳香族ヘテロサイクル基；インドリル、イソインドリル、インダゾリル、インドリジニル、インドリニル、イソインドリニル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、プリニル、プテリジニル、ベンゾピラニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンズオキサジアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾフリル、イソベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾトリアゾリル、チエノピリジル、チエノピロリル、チエノピラゾリル、チエノピラジニル、フロピロリル、チエノチエニル、イミダゾピリジル、ピラゾロピリジル、チアゾロピリジル、ピラゾロピリミジニル、ピラゾロトリアニジル、ピリダゾロピリジル、トリアゾロピリジル、イミダゾチアゾリル、ピラジノピリダジニル、キナゾリニル、キノリル、イソキノリル、ナフチリジニル、ジヒドロチアゾロピリミジニル、テトラヒドロキノリル、テトラヒドロイソキノリル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンズオキサジニル、ジヒドロベンズイミダゾリル、テトラヒドロベンゾチエニル、テトラヒドロベンゾフリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキソニル、クロマニル、クロメニル、オクタヒドロクロメニル、ジヒドロベンゾジオキシニル、ジヒドロベンゾオキセジニル、ジヒドロベンゾジオキセピニル、ジヒドロチエノジオキシニル等の２環の縮合ヘテロサイクル基；およびカルバゾリル、アクリジニル、キサンテニル、フェノチアジニル、フェノキサチイニル、フェノキサジニル、ジベンゾフリル、イミダゾキノリル、テトラヒドロカルバゾリル等の３環の縮合ヘテロサイクル基等を包含する。好ましくは５〜６員のヘテロアリールまたは非芳香族ヘテロサイクル基である。
【０１２５】
本明細書中、「アルキレン」とは、炭素数１〜１０の直鎖状または分枝状のアルキレンを意味し、例えば、メチレン、１−メチルメチレン、１，１−ジメチルメチレン、エチレン、１−メチルエチレン、１−エチルエチレン、１，１−ジメチルエチレン、１，２−ジメチルエチレン、１，１−ジエチルエチレン、１，２−ジエチルエチレン、１−エチル−２−メチルエチレン、トリメチレン、１−メチルトリメチレン、２−メチルトリメチレン、１，１−ジメチルトリメチレン、１，２−ジメチルトリメチレン、２，２−ジメチルトリメチレン、１−エチルトリメチレン、２−エチルトリメチレン、１，１−ジエチルトリメチレン、１，２−ジエチルトリメチレン、２，２−ジエチルトリメチレン、２−エチル−２−メチルトリメチレン、テトラメチレン、１−メチルテトラメチレン、２−メチルテトラメチレン、１，１−ジメチルテトラメチレン、１，２−ジメチルテトラメチレン、２，２−ジメチルテトラメチレン、２，２−ジ−ｎ−プロピルトリメチレン等が挙げられる。特に、炭素数２〜６の直鎖状または分枝状のアルキレンが好ましい。
【０１２６】
本明細書中、「アルケニレン」とは、炭素数２〜１０の直鎖状または分枝状のアルケニレンを意味し、例えば、エテニレン、１−メチルエテニレン、１−エチルエテニレン、１，２−ジメチルエテニレン、１，２−ジエチルエテニレン、１−エチル−２−メチルエテニレン、プロペニレン、１−メチル−２−プロペニレン、２−メチル−２−プロペニレン、１，１−ジメチル−２−プロペニレン、１，２−ジメチル−２−プロペニレン、１−エチル−２−プロペニレン、２−エチル−２−プロペニレン、１，１−ジエチル−２−プロペニレン、１，２−ジエチル−２−プロペニレン、１−ブテニレン、２−ブテニレン、１−メチル−２−ブテニレン、２−メチル−２−ブテニレン、１，１−ジメチル−２−ブテニレン、１，２−ジメチル−２−ブテニレン等が挙げられる。特に、炭素数２〜６の直鎖状または分枝状のアルケニレンが好ましい。
【０１２７】
本明細書中、「アルキニレン」とは、任意の位置に三重結合を有し、さらに二重結合を有していてもよい、直鎖または分枝状の炭素数２〜１０、好ましくは炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４の２価の炭素鎖を包含する。具体的にはエチニレン、プロピニレン、ブチニレン、ペンチニレンおよびヘキシニレン等が挙げられる。
【０１２８】
本明細書中、「アルキルカルボニル」のアルキル部分は、上記「アルキル」を意味する。
【０１２９】
本明細書中、「アルケニルオキシ」および「アルケニルカルボニル」のアルケニル部分は、上記「アルケニル」を意味する。
【０１３０】
本明細書中、「アリールオキシ」および「アリールカルボニル」のアリール部分は、上記「アリール」を意味する。
【０１３１】
本明細書中、「ヘテロアリールカルボニル」のヘテロアリール部分は、上記「ヘテロアリール」を意味する。
【０１３２】
本明細書中、「ヘテロサイクルカルボニル」のヘテロサイクル部分は、上記「ヘテロサイクル」を意味する。
【０１３３】
本明細書中、「アリールスルホニル」のアリール部分は、上記「アリール」を意味する。
【０１３４】
本明細書中、「ヘテロアリールスルホニル」のヘテロアリール部分は、上記「ヘテロアリール」を意味する。
【０１３５】
本明細書中、「ヘテロサイクルスルホニル」のヘテロサイクル部分は、上記「ヘテロサイクル」を意味する。
【０１３６】
本明細書中、炭素原子を置き換えることができる典型的なヘテロ原子および／またはヘテロ原子基には以下が含まれるがこれらに限定されない：−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＰＨ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ’−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’−など、その組み合わせを含む。ここで、各Ｒ’は独立して水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルである。
【０１３７】
本明細書中、「芳香族環系」とは、共役π電子系を有する不飽和環または多環式環系をいう。１つ以上の環が芳香族性であり、１つ以上の環が飽和または不飽和である縮合環系、例えば、フルオレン、インダン、インデン、フェナレン、テトラヒドロナフタレンなどは具体的に「芳香族環系」の定義の中に含まれる。典型的な親の芳香族環系には以下が含まれるがこれらに限定されない：アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランセン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、テトラヒドロナフタレン、トリフェニレン、トリナフタレンなど、ならびにその種々のヒドロ異性体。
【０１３８】
本明細書中、「非芳香族縮合炭素環式基」とは、上記「シクロアルキル」、「シクロアルケニル」および「アリール」から選択される２個以上の環状基が縮合した基を包含し、具体的にはインダニル、インデニル、テトラヒドロナフチルおよびフルオレニル等が挙げられる。
【０１３９】
本明細書中、「置換もしくは非置換の炭素環式基」および「置換もしくは非置換のヘテロサイクル」の置換基としては、任意の置換基が挙げられ、好ましくは低級アルキルおよび置換基群αからなる群から選択される１以上の基が挙げられる。
【０１４０】
本明細書中、「置換もしくは非置換のアルキル」、「置換もしくは非置換のアルケニル」、「置換もしくは非置換のアルキニル」、「置換もしくは非置換のアリール」、「置換もしくは非置換のシクロアルキル」「置換もしくは非置換のシクロアルケニル」、「置換もしくは非置換のヘテロアリール」、「置換もしくは非置換のヘテロサイクル」、「置換もしくは非置換のアシル」、「置換もしくは非置換のアルコキシ」、「置換もしくは非置換のアルキレン」、「置換もしくは非置換のアルケニレン」、および「置換もしくは非置換のアルキニレン」における置換基としては、例えば、ヒドロキシ、カルボキシ、ハロゲン、ハロゲン化アルキル（例：ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＣｌ３）、ニトロ、ニトロソ、シアノ、アルキル（例：メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル）、アルケニル（例：ビニル）、アルキニル（例：エチニル）、シクロアルキル（例：シクロプロピル、アダマンチル）、シクロアルキルアルキル（例：シクロヘキシルメチル、アダマンチルメチル）、シクロアルケニル（例：シクロプロペニル）、アリール（例：フェニル、ナフチル）、アリールアルキル（例：ベンジル、フェネチル）、ヘテロアリール（例：ピリジル、フリル）、ヘテロアリールアルキル（例：ピリジルメチル）、ヘテロサイクル（例：ピペリジル）、ヘテロサイクルアルキル（例：モルホリルメチル）、アルコキシ（例：メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ）、ハロゲン化アルキルオキシ（例：ＯＣＦ３）、アルケニルオキシ（例：ビニルオキシ、アリルオキシ）、アリールオキシ（例：フェニルオキシ）、アルキルオキシカルボニル（例：メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）、アリールアルキルオキシ（例：ベンジルオキシ）、アミノ（例：アルキルアミノ（例：メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ）、アシルアミノ（例：アセチルアミノ、ベンゾイルアミノ）、アリールアルキルアミノ（例：ベンジルアミノ、トリチルアミノ）、ヒドロキシアミノ）、アルキルアミノアルキル（例：ジエチルアミノメチル）、スルファモイル等からなる群から選択される。１〜４個の当該置換基で置換し得る。あるいは、低級アルキルおよび置換基群αからなる群から選択される１以上の基で置換されていてもよい。
【０１４１】
上記に定義した基はさらに十分に認識された置換基を作製するために当該分野において一般的に使用される接頭辞および／または接尾辞を含んでもよい。例として、「アルキルオキシ」または「アルコキシ」とは、式−ＯＲ’’の基をいい、「アルキルアミン」とは式−ＮＨＲ’’の基をいい、「ジアルキルアミン」とは式−ＮＲ’’Ｒ’’の基をいい、ここで、各Ｒ’’は独立してアルキルである。別の例として、「ハロアルコキシ」または「ハロアルキルオキシ」とは、式−ＯＲ’’’の基をいい、ここでＲ’’’はハロアルキルである。
【０１４２】
本明細書中、「溶媒和物」とは、本発明の化合物またはその薬学的に受容可能な塩の溶媒和物を意味し、例えば有機溶媒との溶媒和物（例えば、アルコール（例：エタノール）和物）、水和物等を包含する。水和物を形成する時は、任意の数の水分子と配位していてもよい。水和物としては、１水和物、２水和物等を挙げることができる。
【０１４３】
本明細書において「プロドラッグ」とは、生体の代謝機構を逆手にとり、もとのままの形では薬作用を示さないかまたは非常に弱い活性を示すのみであるが、生体内で代謝されることで、初めて薬理活性を示すか薬理活性が増大されるように修飾されているもののことをいう。本発明の薬学的に受容可能なプロドラッグとしては、当該分野において公知の任意の形態を採用することができる。塩、溶媒和物などのほか、エステル、アミドなどもプロドラッグの一例として挙げることができる。
【０１４４】
本明細書中、「薬学的に受容可能な塩、エステル、アミド、およびプロドラッグ」という用語は、本明細書で使用される場合、本明細書の化合物のカルボン酸塩、アミノ酸付加塩、エステル、アミド、およびプロドラッグをいい、これは、正常な医学的判断の範囲内にあり、過度の毒性、炎症、アレルギー応答などなしで、患者の組織との接触における使用のために適切であるものであり、本発明の化合物のそれらの意図される使用のために有効であるものをいう。
【０１４５】
本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物は、プロドラッグを形成する場合があり、本発明はそのような各種のプロドラッグも包含する。プロドラッグは、化学的または代謝的に分解できる基を有する本発明の化合物の誘導体であり、加溶媒分解によりまたは生理学的条件下でインビボにおいて薬学的に活性な本発明化合物となる化合物である。プロドラッグは、生体内における生理条件下で酵素的に酸化、還元、加水分解等を受けて本発明の化合物に変換される化合物、胃酸等により加水分解されて本発明の化合物に変換される化合物等を包含する。適当なプロドラッグ誘導体を選択する方法および製造する方法は、例えばＤｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ，  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，  Ａｍｓｔｅｒｄａｍ  １９８５に記載されている。プロドラッグは、それ自身が活性を有する場合がある。
【０１４６】
本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物がヒドロキシル基を有する場合は、例えば、ヒドロキシル基を有する化合物と適当なアシルハライド、適当な酸無水物、適当なスルホニルクロライド、適当なスルホニルアンハイドライドおよびミックスドアンハイドライドとを反応させることにより或いは縮合剤を用いて反応させることにより製造されるアシルオキシ誘導体やスルホニルオキシ誘導体のようなプロドラッグが例示される。例えば、ＣＨ３ＣＯＯ−、Ｃ２Ｈ５ＣＯＯ−、ｔ−ＢｕＣＯＯ−、Ｃ１５Ｈ３１ＣＯＯ−、ＰｈＣＯＯ−、（ｍ−ＮａＯＯＣＰｈ）ＣＯＯ−、ＮａＯＯＣＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯ−、ＣＨ３ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯ−、ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２ＣＯＯ−、ＣＨ３ＳＯ３−、ＣＨ３ＣＨ２ＳＯ３−、ＣＦ３ＳＯ３−、ＣＨ２ＦＳＯ３−、ＣＦ３ＣＨ２ＳＯ３−、p−ＣＨ３−Ｏ−ＰｈＳＯ３−、ＰｈＳＯ３−、p−ＣＨ３ＰｈＳＯ３−が挙げられる。
【０１４７】
本明細書中、「塩」という用語は、比較的非毒性の、本発明の化合物の無機または有機の、酸付加塩または塩基付加塩を含む。これらの塩は、化合物の最終的な単離および精製の間に一時的に、またはその遊離塩基型で精製された化合物を適切な有機もしくは無機の酸と別々に反応させること、およびそのように形成された塩を単離することによって調製することができる。あるいは、化合物の最終的な単離および精製の間に一時的に、またはその遊離酸型で精製された化合物を適切な有機もしくは無機の塩基と別々に反応させること、およびそのように形成された塩を単離することによって調製することができる。
【０１４８】
本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩としては、以下の塩が挙げられる。
【０１４９】
本発明の化合物の薬学的に受容可能な塩基性塩として、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アンモニウム塩；トリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、プロカイン塩、メグルミン塩、ジエタノールアミン塩またはエチレンジアミン塩等の脂肪族アミン塩；Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン塩、ベネタミン塩等のアラルキルアミン塩；ピリジン塩、ピコリン塩、キノリン塩、イソキノリン塩等のヘテロサイクル芳香族アミン塩；テトラメチルアンモニウム塩、テトラエチルアンモニウム塩、ベンジルトリメチルアンモニウム塩、ベンジルトリエチルアンモニウム塩、ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチルトリオクチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩等の第４級アンモニウム塩；アルギニン塩、リジン塩等の塩基性アミノ酸塩等が挙げられる。
【０１５０】
本発明の化合物の薬学的に受容可能な酸性塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、過塩素酸塩等の無機酸塩；酢酸塩、プロピオン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩等の有機酸塩；メタンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等のスルホン酸塩；アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等の酸性アミノ酸塩等が挙げられる。
【０１５１】
特に塩酸塩、リン酸塩、酒石酸塩またはメタンスルホン酸塩等が好ましい。これらの塩は、通常行われる方法によって形成させることができる。
【０１５２】
本明細書中、「薬学的に受容可能なエステル」という用語は、本発明の化合物の比較的非毒性の、エステル化生成物をいう。これらのエステルは、化合物の最終的な単離および精製の間にインサイチュで、またはその遊離酸型もしくはヒドロキシル体で精製された化合物を適切なエステル化剤と別々に反応させることによって調製することができる。カルボン酸は、触媒の存在下で、アルコールとの処理を介してエステルに転換することができる。この用語は、生理学的条件下で、溶媒和可能な低級炭化水素基、例えば、アルキルエステル、メチルエステル、エチルエステル、およびプロピルエステルを含むことがさらに意図される。
【０１５３】
本明細書において「異性体」とは、当該分野において使用される通常の意味と同様に用いられ、分子式が同じで構造式や性質の異なる物質をいう。本発明で使用される異性体は、特定の異性体に限定するものではなく、全ての可能な異性体（例えば、ケト−エノール異性体、イミン−エナミン異性体、ジアステレオ異性体、光学異性体、鏡像異性体、幾何異性体、立体異性体、シス−トランス異性体、配座異性体および回転異性体等）やラセミ体を含むものである。本発明の化合物の各々において１つ以上のキラル中心が存在することが理解されるべきである。本発明は、各化合物のすべての立体化学型、例えば、エナンチオマー、ジアステレオマーおよびラセミ化合物を包含することが理解されるべきである。不斉炭素原子が存在する場合、１つより多くの立体異性体が可能であり、すべての可能な異性体型が、示される構造の表現の中に含まれることが意図される。任意に、活性な（Ｒ）および（Ｓ）異性体が、当業者に公知である従来的な技術を使用して分離されてもよい。本発明は、可能なジアステレオマーならびにラセミ化合物および光学分割された異性体を含むことを意図する。
【０１５４】
以下の説明を通して、特定の二重結合が示される場合、シス配置とトランス配置の両方を含むことを意図することが理解されるべきである。例示的な化学式は、特定の配置とともに提供されるが、完全性のために、二重結合を変化させることができる。明細書の簡潔さを維持する目的のため、あらゆる構造異性体が示されるわけではない。しかし、これは、事実上、限定と見なされるべきではない。加えて、合成スキームが提供される場合、すべてのシス／トランス配置異性体もまた意図され、合成方法の範囲内にあることが理解されるべきである。
【０１５５】
本発明の化合物の一つ以上の水素、炭素および／または他の原子は、それぞれ水素、炭素および／または他の原子の同位体で置換され得る。そのような同位体の例としては、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、123Ｉおよび３６Ｃｌのように、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、ヨウ素および塩素が包含される。本発明の化合物は、そのような同位体で置換された化合物も包含する。該同位体で置換された化合物は、医薬品としても有用であり、本発明の化合物のすべての放射性標識体を包含する。また該「放射性標識体」を製造するための「放射性標識化方法」も本発明に包含され、代謝薬物動態研究、結合アッセイにおける研究および／または診断のツールとして有用である。
【０１５６】
本発明の化合物の放射性標識体は、当該技術分野で周知の方法で調製できる。例えば、本発明のトリチウム標識化合物は、例えば、トリチウムを用いた触媒的脱ハロゲン化反応によって、本発明の特定の化合物にトリチウムを導入することで調製できる。この方法は、適切な触媒、例えばＰｄ／Ｃの存在下、塩基の存在下または非存在下で、本発明の化合物が適切にハロゲン置換された前駆体とトリチウムガスとを反応させることを包含する。他のトリチウム標識化合物を調製するための適切な方法としては、文書Ｉｓｏｔｏｐｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．１，Ｌａｂｅｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  （Ｐａｒｔ  Ａ），Ｃｈａｐｔｅｒ  ６  （１９８７年）を参照にできる。１４Ｃ−標識化合物は、１４Ｃ炭素を有する原料を用いることによって調製できる。
【０１５７】
本発明の化合物におけるヒドロキシルは、当該分野において公知の保護基（例えば、トリメチルシリル基（ＴＭＳ）、メトキシメチル基（ＭＯＭ）、２−テトラヒドロピラニル基（ＴＨＰ）、エトキシエチル基（ＥＥ））などの種々の保護基によって保護することができる。
【０１５８】
本明細書中、「保護基」とは、分子中の反応性官能基に結合された場合に、官能基の反応性をマスクし、減少し、または妨害する一群の原子基をいう。典型的には、保護基は、合成の過程の間に所望されるように選択的に除去されてもよい。保護基の例は、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第３版、１９９９，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，ＮＹならびにＨａｒｒｉｓｏｎら、Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ、Ｖｏｌｓ．１−８，１９７１−１９９６，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，ＮＹにおいて見ることができる。代表的な窒素保護基には以下が含まれるがこれらに限定されない：ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（「ＣＢＺ」）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、トリメチルシリル（「ＴＭＳ」）、２−トリメチルシリル−エタンスルホニル（「ＴＥＳ」）、トリチルおよび置換トリチル、アリルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（「ＦＭＯＣ」）、ニトロ−ベラトリルオキシカルボニル（「ＮＶＯＣ」）など。代表的なヒドロキシル保護基には、ヒドロキシ基がアセチル化（エステル化）またはアルキル化されているもの、例えば、ベンジルエーテルおよびトリチルエーテル、ならびにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル（例えば、ＴＭＳ基またはＴＩＰＳ基）、グリコールエーテル（例えば、エチレングリコールおよびプロピレングリコール誘導体）、およびアリルエーテルが含まれるがこれらに限定されない。
【０１５９】
当業者は、どの保護基がヒドロキシ基の保護のために有用であり得るかを容易に決定することができる。標準的な方法は当該分野において公知であり、文献中により完全に記載されている。例えば、適切な保護基は当業者によって選択されることができ、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｃｈａｐｔｅｒｓ  ５および７，１９９１において記載されており、この教示は参考として本明細書に援用される。好ましい保護基には、メチルおよびエチルエーテル、ＴＭＳまたはＴＩＰＳ基、酢酸エステルまたはプロピオン酸エステル基およびグリコールエーテル、例えば、エチレングリコールおよびプロピレングルコール誘導体が含まれる。
【０１６０】
例えば、１つ以上のヒドロキシ基が、酸塩化物またはシリルクロライドの存在下で、穏やかな塩基、例えば、トリエチルアミンで処理され、ヒドロキシルイオンとハロゲン化物との間の反応を容易にすることができる。代替的には、ハロゲン化アルキルが、ヒドロキシルイオン（リチウムジイソプロピルアミドなどの塩基によって生成する）と反応して、エーテル形成を容易にすることができる。
【０１６１】
レゾルビン・プロテクチン類は、以下をいう：５Ｓ，１２Ｒ，１８Ｒ−トリヒドロキシ−６Ｚ，８Ｅ，１０Ｅ，１４Ｚ，１６Ｅ−エイコサペンタエン酸：レゾルビンＥ１ａ；５Ｓ，１８Ｒ−ジヒドロキシ−６Ｅ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１６Ｅ−エイコサペンタエン酸：レゾルビンＥ２；７Ｓ，８，１７Ｒ−トリヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，９Ｅ，１１Ｅ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：アスピリントリガー型レゾルビンＤ１；７Ｓ，１６，１７Ｒ−トリヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，８Ｅ，１０Ｚ，１２Ｅ，１４Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：アスピリントリガー型レゾルビンＤ２；４Ｓ，１１，１７Ｒ−トリヒドロキシ−ドコサ−５，７Ｅ，９Ｅ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：アスピリントリガー型レゾルビンＤ３；４Ｓ，５，１７Ｒ−トリヒドロキシ−ドコサ−６Ｅ，８Ｅ，１０Ｚ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：アスピリントリガー型レゾルビンＤ４；７Ｓ，１７Ｒ−ＤｉＨＤＨＡ７Ｓ，１７Ｒ−ジヒドロキシ−ドコサ−５Ｚ，８Ｅ，１０Ｚ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：アスピリントリガー型レゾルビンＤ５；４Ｓ，１７Ｒ−ＤｉＨＤＨＡ４Ｓ，１７Ｒ−ジヒドロキシ−ドコサ−５Ｅ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：アスピリントリガー型レゾルビンＤ６；１０，１７Ｒ−ＤｉＨＤＨＡ１０，１７Ｒ−ジヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，７Ｚ，１１，１３，１５，１９Ｚ−ヘキサエン酸：アスピリントリガー型１０，１７Ｒ−ドコサトリエン；７Ｓ，８，１７Ｓ−ＴｒｉＨＤＨＡ７Ｓ，８，１７Ｓ−トリヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，９Ｅ，１１Ｅ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：レゾルビンＤ１ａ；７Ｓ，１６，１７Ｓ−ＴｒｉＨＤＨＡ７Ｓ，１６，１７Ｓ−トリヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，８Ｅ，１０Ｚ，１２Ｅ，１４Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：レゾルビンＤ２ａ；４Ｓ，１１，１７Ｓ−ＴｒｉＨＤＨＡ４Ｓ，１１，１７Ｓ−トリヒドロキシ−ドコサ−５，７Ｅ，９Ｅ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：レゾルビンＤ３ａ；４Ｓ，５，１７Ｓ−ＴｒｉＨＤＨＡ４Ｓ，５，１７Ｓ−トリヒドロキシ−ドコサ−６Ｅ，８Ｅ，１０Ｚ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：レゾルビンＤ４ａ；７Ｓ，１７Ｓ−ＤｉＨＤＨＡ７Ｓ，１７Ｓ−ジヒドロキシ−ドコサ−５Ｚ，８Ｅ，１０Ｚ，１３Ｚ，１５Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：レゾルビンＤ５；４Ｓ，１７Ｓ−ＤｉＨＤＨＡ４Ｓ，１７Ｓ−ジヒドロキシ−ドコサ−５Ｅ，７Ｚ，１０Ｚ，１４Ｚ，１６Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：レゾルビンＤ６ａ；１０，１７Ｓ−ＤｉＨＤＨＡ１０，１７Ｓ−ジヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，７Ｚ，１１Ｅ，１３Ｅ，１５Ｚ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：１０，１７Ｓ−ドコサトリエン、ニューロプロテクチンＤ１；１６，１７Ｓ−ジヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１２Ｅ，１４Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：１６，１７Ｓ−ドコサトリエン；１６，１７−エポキシ−ドコサ−４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１２Ｅ，１４Ｅ，１９Ｚ−ヘキサエン酸：１６，１７−エポキシ−ドコサトリエン。
【０１６２】
本発明の化合物は、レゾルビン・プロテクチンとは異なる従来公知ではなかったと考えられる物質である。
【０１６３】
（好ましい実施形態）
本発明の好ましい実施形態を、以下に掲げる。以下に提供される実施形態は、本発明のよりよい理解のために提供されるものであり、本発明の範囲は以下の記載に限定されるべきでない。従って、当業者は、本明細書中の記載を参酌して、本発明の範囲内で適宜改変を行うことができることは明らかである。
【０１６４】
（化合物）
１つの局面において、本発明は、以下の化合物を提供する。
【０１６５】
【化５５】
0005909183.tif 000056
【０１６６】
【化５６】
0005909183.tif 000057
【０１６７】
【化５７】
0005909183.tif 000058
【０１６８】
【化５８】
0005909183.tif 000059
【０１６９】
【化５９】
0005909183.tif 000060
【０１７０】
【化６０】
0005909183.tif 000061
【０１７１】
【化６１】
0005909183.tif 000062
【０１７２】
【化６２】
0005909183.tif 000063
【０１７３】
【化６３】
0005909183.tif 000064
【０１７４】
【化６４】
0005909183.tif 000065
【０１７５】
【化６５】
0005909183.tif 000066
【０１７６】
【化６６】
0005909183.tif 000067
【０１７７】
および
【０１７８】
【化６７】
0005909183.tif 000068
【０１７９】
から選択される化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、
ここで、
【０１８０】
【化６８】
0005909183.tif 000069
【０１８１】
が単結合を示す場合は、
Ｐ１は、保護基、水素原子、アルキル、ヒドロキシ基もしくは置換されたヒドロキシ基であり、
Ｒ１は、水素原子、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキル基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキルアリール基であり、
【０１８２】
【化６９】
0005909183.tif 000070
【０１８３】
が二重結合を示す場合は、Ｐ１およびＲ１は、存在せず；
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ２、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ４、−ＣＮであり；
Ｒ２は、水素、保護基、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルまたは式：−ＮＲａＲｂ（式中、ＲａおよびＲｂは各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルであるか、またはＲａとＲｂは隣接する窒素原子と一緒になって、置換もしくは非置換の含窒素ヘテロサイクルを形成していてもよい。）であり；
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、水素、置換もしくは非置換のアルキル、置換もしくは非置換のアルケニル、置換もしくは非置換のアルキニル、置換もしくは非置換のアリール、置換もしくは非置換のヘテロアリール、置換もしくは非置換のシクロアルキル、置換もしくは非置換のシクロアルケニル、置換もしくは非置換のヘテロサイクルであるか、またはＲ３とＲ４は隣接する窒素原子と一緒になって、置換もしくは非置換の含窒素ヘテロサイクルを形成していてもよく；
そして、化合物の二重結合配置は各々独立してシスまたはトランスのいずれかであり得る、
化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を提供する。
【０１８４】
以下に、これらの化合物をより詳細に説明する。
【０１８５】
（５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−エイコサテトラエン酸（５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０１８６】
【化７０】
0005909183.tif 000071
【０１８７】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０１８８】
【化７１】
0005909183.tif 000072
【０１８９】
、Ｐ１、Ｒ１およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０１９０】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０１９１】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０１９２】
（８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（８ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０１９３】
【化７２】
0005909183.tif 000073
【０１９４】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０１９５】
【化７３】
0005909183.tif 000074
【０１９６】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０１９７】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０１９８】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０１９９】
（１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２００】
【化７４】
0005909183.tif 000075
【０２０１】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２０２】
【化７５】
0005909183.tif 000076
【０２０３】
、Ｐ１、Ｒ１およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２０４】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２０５】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２０６】
（１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２０７】
【化７６】
0005909183.tif 000077
【０２０８】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２０９】
【化７７】
0005909183.tif 000078
【０２１０】
、Ｐ１、Ｒ１およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２１１】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２１２】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２１３】
（４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２１４】
【化７８】
0005909183.tif 000079
【０２１５】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２１６】
【化７９】
0005909183.tif 000080
【０２１７】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２１８】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２１９】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２２０】
（７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２２１】
【化８０】
0005909183.tif 000081
【０２２２】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２２３】
【化８１】
0005909183.tif 000082
【０２２４】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２２５】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２２６】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２２７】
（１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２２８】
【化８２】
0005909183.tif 000083
【０２２９】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２３０】
【化８３】
0005909183.tif 000084
【０２３１】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２３２】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２３３】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２３４】
（１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１３ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２３５】
【化８４】
0005909183.tif 000085
【０２３６】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２３７】
【化８５】
0005909183.tif 000086
【０２３８】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２３９】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２４０】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２４１】
（１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２４２】
【化８６】
0005909183.tif 000087
【０２４３】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２４４】
【化８７】
0005909183.tif 000088
【０２４５】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２４６】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２４７】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２４８】
（１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２４９】
【化８８】
0005909183.tif 000089
【０２５０】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２５１】
【化８９】
0005909183.tif 000090
【０２５２】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２５３】
（１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）関連化合物）
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２５４】
【化９０】
0005909183.tif 000091
【０２５５】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２５６】
【化９１】
0005909183.tif 000092
【０２５７】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２５８】
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２５９】
【化９２】
0005909183.tif 000093
【０２６０】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２６１】
【化９３】
0005909183.tif 000094
【０２６２】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２６３】
１つの局面において、本発明は、化学式：
【０２６４】
【化９４】
0005909183.tif 000095
【０２６５】
を有する、化合物および薬学的組成物を提供する。ここで
【０２６６】
【化９５】
0005909183.tif 000096
【０２６７】
、Ｐ１、Ｒ１、およびＸは各々独立して、上記に定義した通りである。
【０２６８】
特定の実施形態において、Ｐ１は水素原子であり、Ｒ１は、メチル基または水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはカルボン酸エステルである。
【０２６９】
Ｘはカルボン酸、エステル、アミド、チオカルバメート、カルバメート、チオエステル、チオカルボキサミド、またはニトリルでありうる。好ましくは、Ｘはカルボン酸、カルボン酸エステル、または薬学的に受容可能なカルボン酸塩である。
【０２７０】
これらの化合物は、いずれも、ω３系列のＰＵＦＡに属するエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）やドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）のエポキシ化誘導体であり、従来知られておらず、公知のレゾルビン、プロテクチンといった代謝物とは異なる別の系列の代謝物に属するという点で、まったく新規な化合物グループであるといえる。
【０２７１】
特定の実施形態において、Ｒ１およびＰ１が水素原子でありＸがカルボン酸である場合、化合物は単離され、および／または精製されるかのいずれかであってもよい。このような化合物の純度は、ＧＣ、ＭＳ、または１ＨＮＭＲなどを用いた分析測定に基づいて、少なくとも８０％の純度、特に、少なくとも約９０％の純度、より特定すると少なくとも９５％の純度、およびより好ましくは少なくとも約９９％の純度である。これは、本明細書全体で、すべての単離された化合物および／または精製された化合物において適用する。
【０２７２】
（化合物の別の改変形態）
別の局面では、本発明は、以下のように表現することができる。
【０２７３】
【化９６】
0005909183.tif 000097
【０２７４】
【化９７】
0005909183.tif 000098
【０２７５】
【化９８】
0005909183.tif 000099
【０２７６】
【化９９】
0005909183.tif 000100
【０２７７】
【化１００】
0005909183.tif 000101
【０２７８】
【化１０１】
0005909183.tif 000102
【０２７９】
【化１０２】
0005909183.tif 000103
【０２８０】
【化１０３】
0005909183.tif 000104
【０２８１】
【化１０４】
0005909183.tif 000105
【０２８２】
【化１０５】
0005909183.tif 000106
【０２８３】
【化１０６】
0005909183.tif 000107
【０２８４】
【化１０７】
0005909183.tif 000108
【０２８５】
および
【０２８６】
【化１０８】
0005909183.tif 000109
【０２８７】
から選択される化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物であって、
式中、
【０２８８】
【化１０９】
0005909183.tif 000110
【０２８９】
が単結合を示す場合は、
Ｐ１は、保護基、水素原子、アルキル、ヒドロキシ基もしくは置換されたヒドロキシ基であり、
Ｒ１は、水素原子、ハロゲン原子、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキル基、置換または非置換のアリール基（例えば、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキルアリール基を含む）であり、
【０２９０】
【化１１０】
0005909183.tif 000111
【０２９１】
が二重結合を示す場合は、Ｐ１およびＲ１は、存在せず；
Ｘは、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｈ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｓ）Ｈ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲｃＲｃ、−ＣＮであり；
各Ｒｃは、存在する場合、独立して保護基もしくはＲａであり、または、代替的には、各Ｒｃはそれが結合する窒素原子と一緒になって５〜８員シクロヘテロアルキルもしくはヘテロアリールを形成し、これらは１つ以上の同じもしくは異なるさらなるヘテロ原子を任意に含んでもよく、そして１つ以上の同じもしくは異なるＲａ基もしくは適切なＲｂ基で任意に置換されてもよく；
各Ｒｄは、存在する場合、独立して、保護基またはＲａであり；
各Ｒａは、存在する場合、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ８）シクロアルキル、シクロヘキシル、（Ｃ４〜Ｃ１１）シクロアルキルアルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、フェニル、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、ベンジル、２〜６員ヘテロアルキル、３〜８員シクロヘテロアルキル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、ピペリジニル、４〜１１員シクロヘテロアルキルアルキル、５〜１０員ヘテロアリールおよび６〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる基より独立して選択され；
各Ｒｂは、存在する場合、＝Ｏ、−ＯＲｄ、（Ｃ１〜Ｃ３）ハロアルキルオキシ、−ＯＣＦ３、＝Ｓ、−ＳＲｄ、＝ＮＲｄ、＝ＮＯＲｄ、−ＮＲｃＲｃ、ハロゲン、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＮＣ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒｄ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲｄ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−ＯＳ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＲｄ、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−Ｃ（ＮＯＨ）Ｒａ、−Ｃ（ＮＯＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＯＲｄ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＨ）ＮＲｃＲｃ、−ＯＣ（ＮＲａ）ＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＯＲｄ、−［ＮＨＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＲａＣ（Ｏ）］ｎＮＲｃＲｃ、−［ＮＨＣ（ＮＨ）］ｎＮＲｃＲｃおよび−［ＮＲａＣ（ＮＲａ）］ｎＮＲｃＲｃからなる基より独立して選択される適切な基であり；
各ｎは、存在する場合、独立して、０〜３の整数である。
【０２９２】
１つの実施形態では、Ｘは、カルボン酸、エステル、薬学的に受容可能なカルボン酸塩、またはそのプロドラッグである。
【０２９３】
特定の実施形態において、Ｘはカルボン酸の薬学的に受容可能な塩であり、特に、アンモニウム塩であり、またはプロドラッグを形成する。
【０２９４】
また、１つの実施形態では、Ｃ−４、Ｃ−５、Ｃ−６、Ｃ−７、Ｃ−８、Ｃ−１０、Ｃ−１２、Ｃ−１３、Ｃ−１４、Ｃ−１５、Ｃ−１６、Ｃ−１７、Ｃ−１８、Ｃ−１９またはＣ−２０等が、存在する場合、これがキラル中心であるならば、各々独立してＲ配置もしくはＳ配置またはＲ／Ｓ配置を有していてもよい。
【０２９５】
ある実施形態において、Ｐ１は、存在する場合、水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはエステルである。
【０２９６】
他の実施形態において、Ｐ１は存在し、水素原子であり、Ｘはカルボン酸またはエステルである。
【０２９７】
特定の実施形態において、Ｒ１は、存在する場合、メチル、エチルおよびプロピルなどの低級アルキル基であり、トリフルオロメチルのように、ハロゲン化され得る。１つの態様において、Ｒ１は、存在する場合、水素原子以外である。一般的に、Ｘはカルボン酸であり、Ｐ１は水素原子である。
【０２９８】
特定の実施形態において、Ｐ１は、水素原子であり、Ｘはカルボン酸エステルである。他の実施形態において、Ｐ１は、水素原子であり、Ｘはカルボン酸である。他の実施形態において、Ｐ１は、水素原子であり、Ｘはカルボン酸以外である。
【０２９９】
１つの局面において、本明細書に記載される化合物は、単離および／または精製され、特に、Ｐ１は、水素原子であり、Ｘはカルボン酸である化合物が単離および／または精製される。
【０３００】
本発明の化合物は、好中球の抑制によって処置、治療または予防しうる疾患、例えば、炎症性疾患を治療するために有用である。このような用途は、炎症疾患以外にも種々存在し、本明細書において他の箇所に記載されるようなものが例示される。
【０３０１】
従って、好ましい実施形態では、本発明は、以下の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を提供する：
【０３０２】
【化１１１】
0005909183.tif 000112
【０３０３】
【化１１２】
0005909183.tif 000113
【０３０４】
【化１１３】
0005909183.tif 000114
【０３０５】
【化１１４】
0005909183.tif 000115
【０３０６】
【化１１５】
0005909183.tif 000116
【０３０７】
【化１１６】
0005909183.tif 000117
【０３０８】
【化１１７】
0005909183.tif 000118
【０３０９】
【化１１８】
0005909183.tif 000119
【０３１０】
【化１１９】
0005909183.tif 000120
【０３１１】
【化１２０】
0005909183.tif 000121
【０３１２】
【化１２１】
0005909183.tif 000122
【０３１３】
【化１２２】
0005909183.tif 000123
【０３１４】
または
【０３１５】
【化１２３】
0005909183.tif 000124
【０３１６】
。
【０３１７】
本明細書に記載される化合物は、腹膜炎モデルにおける好中球浸潤のダウンレギュレーションによって認められるような抗炎症活性を有する。
【０３１８】
本発明の化合物において見出される「Ｘ」は、当業者によって１つの特定の部分から別のものに変更することができることが理解されるべきである。このことを達成するために、ある特定の例において、１つ以上の基は保護を必要とし得る。このこともまた当業者の範囲内である。例えば、カルボン酸エステルは、アミンを用いる処理によってアミドに転換することができる。このような相互変換は当該分野において公知である。
【０３１９】
本発明の化合物において、「ヒドロキシ」立体化学に対する言及は例示的であること、およびこの用語は保護されたヒドロキシ基ならびに遊離のヒドロキシルを含むことを意味することが理解されるべきである。特定の実施形態において、例えば、Ｃ−１７位などはＲ配置を有する。他の実施形態において、例えばＣ−１７位などはＳ配置を有する。
【０３２０】
本発明の化合物は、当該分野において公知であるものなどの種々の保護基によって保護することができる。当業者は、どの保護基が、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｃｈａｐｔｅｒｓ  ５および７，１９９１、ならびに本願明細書に記載の手法等を用いて、ヒドロキシ基の保護のために有用であり得るかを容易に決定することができる。
【０３２１】
本発明の化合物について、すべてのヒドロキシ基が保護される必要があるわけではないこともまた理解されるべきである。１個または２個すべてのヒドロキシ基を保護することができる。これは、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｃｈａｐｔｅｒｓ  ５および７，１９９１等の公知文献、および本明細書の他の箇所に記載される手法を用いて、ヒドロキシ基を保護するために使用される試薬の化学量論的な選択によって達成することができる。当該分野において公知である方法、例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）、フラッシュクロマトグラフィー、ゲル浸透クロマトグラフィー、結晶化、蒸留などは、モノ保護化またはジ保護化されたヒドロキシ化合物を分離するために使用することができる。
【０３２２】
上記に同定した化合物の各々は、種々の異性体の形態をとりうることが理解される。特に、本発明の化合物において１つ以上のキラル中心が存在することが理解されるべきである。本発明は、各化合物のすべての立体化学型、例えば、エナンチオマー、ジアステレオマーおよびラセミ化合物を包含することが理解されるべきである。不斉炭素原子が存在する場合、１つより多くの立体異性体が可能であり、すべての可能な異性体型が、示される構造の表現の中に含まれることが意図される。任意に、光学活性な（Ｒ）および（Ｓ）異性体が、当業者に公知である従来的な技術を使用して分離されてもよい。本発明は、可能なジアステレオマーならびにラセミ化合物および光学分割された異性体を含むことを意図する。
【０３２３】
本発明の化合物は、アセチレン性および／またはエチレン性不飽和部位を含む。炭素−炭素二重結合が存在する場合、立体配置化学はシス（Ｅ）またはトランス（Ｚ）のいずれかであり得、本明細書全体での表現は限定を意味しない。表現は、一般的に、関連するＤＨＡまたはＥＰＡ化合物の立体配置化学に基づいて提示され、理論によって制限されないが、同様の立体配置化学を有すると考えられる。本明細書全体で、炭素−炭素結合は、特に、結合が最終的に互いに対して配置される様式を示すために、簡素化している。例えば、レゾルビンのアセチレン部分は、実際には、約１８０°のジオメトリーを含んでいることが知られているが、しかし、本発明の化合物においても、合成および最終生成物と出発物質との関係の理解の補助のために、このような角度は、理解を補助するために極端な表現が使用されていることが理解されるべきである。
【０３２４】
本発明はまた、アセチレン部分の水素化によって、１種以上の生成物を生じ得る化合物をも包含することが理解される。すべての可能な生成物が本明細書中に含まれることが意図される。例えば、ジアセチレン性の本発明の化合物の水素化は、８種までの生成物（両方のアセチレン部分の水素化が完了する場合（これは既知の方法によってモニターすることができる）、４種のジエン生成物、すなわち、シス、シス；シス、トランス；トランス、シス；トランス、トランス）、および４種のモノエチレン−モノアセチレン生成物（シスまたはトランス「モノエン」−アセチレン；アセチレン−シスまたはトランス「モノエン」）を産生することができる。すべての生成物は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）、質量分析（ＭＳ）、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、赤外線分析（ＩＲ）等によって分離および同定することができる。
【０３２５】
当該分野において公知の技術は、本発明の化合物のカルボン酸／エステル官能基を、カルボキサミド、チオエステル、ニトリル、カルバメート、チオカルバメートなどに転換するために使用することができ、これらは本明細書に援用される。アミドなどの適切な部分は、当該分野において公知であるように、さらに置換することができる。
【０３２６】
（本発明の化合物の生産）
本発明の化合物は、一般的な有機化学の手法により合成されるか、あるいは、前駆体として公知の物質である１７，１８−エポキシエイコサテトラエン酸（１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ）、１９，２０−エポキシドコサペンタエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ）または１９，２０−エポキシドコサテトラエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ）に５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）、ダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）等の酵素を作用させるか、比較的豊富に存在する５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（５−ＨＥＰＥ）、８−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（８−ＨＥＰＥ）、１２−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１２−ＨＥＰＥ）、１５−ヒドロキシエイコサペンタエン酸（１５−ＨＥＰＥ）、４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（４−ＨＤｏＨＥ）、７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１０−ＨＤｏＨＥ）、１３−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１３−ＨＤｏＨＥ）、１４−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１４−ＨＤｏＨＥ）、１７−ヒドロキシドコサヘキサエン酸（１７−ＨＤｏＨＥ）、１０−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１０−ＨＤｏＰＥ）、１４−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１４−ＨＤｏＰＥ）、および１７−ヒドロキシドコサペンタエン酸（１７−ＨＤｏＰＥ））等のモノヒドロキシ体にω３エポキシ化酵素（例えば、Ｃｙｐ４５０ＢＭ３等）を作用させることによって生産することができる。
【０３２７】
本明細書において「ω３エポキシ化酵素」とは、不飽和脂肪酸のω３位をエポキシ化することができる任意の酵素をいい、例えば、Ｃｙｐ４５０ＢＭ３（例えば、Ｃａｐｄｅｖｉｌａ  ＪＨ，Ｗｅｉ  Ｓ，Ｈｅｌｖｉｇ  Ｃ，Ｆａｌｃｋ  ＪＲ，Ｂｅｌｏｓｌｕｄｔｓｅｖ  Ｙ，Ｔｒｕａｎ  Ｇ，Ｇｒａｈａｍ−Ｌｏｒｅｎｃｅ  ＳＥ，Ｐｅｔｅｒｓｏｎ
ＪＡ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．１９９６  Ｓｅｐ  １３；２７１（３７）：２２６６３−７１を参照）などを挙げることができる。
【０３２８】
したがって、本発明は、本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を製造する方法を提供する。この方法は、Ａ）１７，１８−エポキシエイコサテトラエン酸（１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ）、１９，２０−エポキシドコサペンタエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ）または１９，２０−エポキシドコサテトラエン酸（１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ）に５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）、８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）、およびダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）からなる群より選択される少なくとも１つを接触させて酵素代謝産物を得る工程；およびＢ）必要に応じて該酵素代謝産物を還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製する工程を包含する。過酸化物（ペルヒドロキシ体）ができているときに、これを還元するとヒドロキシ体が生成される。これをさらに酸化すると、対応するケトン体が生成される。これらのいずれも、生理活性物質としての可能性を有する。これらの酵素は、以下を公知の技術を用いて利用することができる。５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ）：Ｒｅｄｄａｎｎａ  Ｐ，Ｗｈｅｌａｎ  Ｊ，Ｍａｄｄｉｐａｔｉ  ＫＲ，Ｒｅｄｄｙ  ＣＣ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１９９０；１８７：２６８−７７、マウス組換え８−ＬＯＸ：Ｊｉｓａｋａ  Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，２７２，２４４１０−２４４１６（１９９７）；血小板型１２−ＬＯＸ：Ｙｏｓｈｉｍｏｔｏ  Ｔ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｖｏｌ．６８−６９，２４５−２６２（２００２）；白血球型１２／１５−ＬＯＸ：Ｋｕｈｎ  Ｈ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｖｏｌ．６８−６９，２６３−２９０（２００２）；ｓＬＯＸ：Ｏｌｉｗ  Ｅ．Ｈ．Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｖｏｌ．６８−６９，３１３−３２４（２００２）。あるいは、このほか、特許文献１において列挙されるリポキシゲナーゼ（ＬＯＸ）、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）、シトクロムＰ４５０（ＣＹＰ）酵素、およびその他のヘム含有酵素も本発明において用いることができる。ここで使用される精製は本明細書に記載される方法が例示され、例えば、ＨＰＬＣなどを挙げることができるがこれに限定されず、分離、精製の程度も適宜調整しうることが理解される。
【０３２９】
例えば、例示的な方法としては、１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、１９，２０−エポキシ−ＤＰＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ等のエポキシ体を１２−ＬＯＸと反応させることによりヒドロキシ化させ、得られた反応生成物を必要に応じて還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製することによって、本発明の化合物を得ることができる。
【０３３０】
あるいは、１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、１９，２０−エポキシ−ＤＰＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ等のエポキシ体をｓＬＯＸと反応させることによりヒドロキシ化させ、得られた反応生成物を必要に応じて還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製することによって、本発明の化合物を得ることができる。
【０３３１】
あるいは、本発明の化合物は、ヒドロキシ体を先に合成してこれをエポキシ化することによっても合成することができる。例示的な合成例としては、各種ＨＥＰＥ、ＨＤｏＨＥまたはＨＤｏＰＥを出発材料として、Ｐ４５０  ＢＭ３などのエポキシ化酵素でこれらの材料をエポキシ化させ、得られた反応生成物を必要に応じて還元または酸化し、必要に応じて置換基を導入し、必要に応じて目的とする該化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分離もしくは精製することによって、本発明の化合物を得ることができる。このような例は、実施例において例示されており、当業者は、この例をもとに適宜本発明の化合物の合成を行うことができる。
【０３３２】
上記したように、本発明の化合物は、長鎖多価不飽和脂肪酸（ＬＣＰＵＦＡ）前駆体を使用する化学合成を介して生成され得るか、または完全に新規に合成され得る。オキシリピン化合物の化学合成法は、当技術分野において公知である（例えば、Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  ａｎｄ  Ｓｐｕｒ  （２００４）；Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ  ａｎｄ  Ｓｐｕｒ，２００５；Ｇｕｉｌｆｏｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）を参照されたい）。さらに、一般的な化学合成法も当技術分野において周知である。例えば、本発明の化合物は、当業者に周知である慣習的合成技法および固相合成技法の両方で調製することができる。有用な慣用技法には、米国特許第５，５６９，７６９号および同第５，２４２，９４０号、ならびにＰＣＴ公報第ＷＯ  ９６／３７４７６号に開示されている技法が含まれ、これらはすべて参考としてその全体が本明細書において援用される。コンビナトリアル合成技法もまた、本発明の化合物の合成に特に有用であり得る。例えば、Ｂｒｏｗｎ，Ｃｏｎｔｅｍｐｏｒａｒｙ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９７，２１６；Ｆｅｌｄｅｒ  ａｎｄ  Ｐｏｐｐｉｎｇｅｒ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．，１９９７，３０，１１１；Ｂａｌｋｅｎｈｏｈｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，１９９６，３５，２２８８；Ｈｅｒｍｋｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９６，５２，４５２７；Ｈｅｒｍｋｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９７，５３，５６４３；Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，１９９６，９６，５５５；およびＮｅｆｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．，１９９７，２，４４９−４７２が参照されうる。
【０３３３】
以上の技術およびその他の公知の技術を用いて、以下の化合物（すなわち、ＥＰＡ，ＤＨＡ、ＤＰＡおよびそれらのエポキシ化化合物）：
【０３３４】
【化１２４】
0005909183.tif 000125
【０３３５】
【化１２５】
0005909183.tif 000126
【０３３６】
【化１２６】
0005909183.tif 000127
【０３３７】
【化１２７】
0005909183.tif 000128
【０３３８】
【化１２８】
0005909183.tif 000129
【０３３９】
【化１２９】
0005909183.tif 000130
【０３４０】
を原料として本発明の化合物を生産することができる。
【０３４１】
ＥＰＡ、ＤＨＡおよびＤＰＡは、生体内に豊富に存在することから、食品等を原料として抽出することもでき、あるいは、市販のものを購入してもよい。ここで、１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、または１９，２０−エポキシ−ＤＰＥは、市販のもの（Ｃａｙｍａｎ社から入手可能）を使用することができ、あるいは、以下の手法を用いて製造することもできる。１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、１９，２０−エポキシ−ＤＰＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＴＥはいずれも、ω３  ＰＵＦＡのまさにω３部位がエポキシ化された代謝物である。
【０３４２】
本発明の生産方法において使用される酵素は、５−リポキシゲナーゼ（例えば、ポテトの５−リポキシゲナーゼ（５−ＬＯＸ））、８−リポキシゲナーゼ（例えば、マウス組換え８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ））、１２−リポキシゲナーゼ（１２−ＬＯＸ）（例えば、血小板型１２−ＬＯＸ）、１２／１５−リポキシゲナーゼ（１２／１５−ＬＯＸ）（例えば、白血球型１２／１５−ＬＯＸ）、ダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）などを挙げることができ、これらは、その基質特異性を考慮しながら、適宜適切な酵素を利用することができることが理解される。
【０３４３】
以下に示す前駆体材料（例えば、本明細書に記載されるヒドロキシ体等）は、例えば、ＥＰＡおよびＤＨＡの系列のものについては、市販の製品（Ｃａｙｍａｎ  Ｉｎｃ．から入手可能）を利用するか、あるいは、ＤＰＡ系列のもの等市販されていないものであっても、酵素合成、化学合成または生体内からの抽出によって得ることができる。例えば、ＤＰＡ系列のものは、ｎ−３  ＤＰＡに、８−ＬＯＸ、１２−ＬＯＸまたはｓＬＯＸを加えて反応させることによって、対応するヒドロキシ体を生産することができる。
【０３４４】
【化１３０】
0005909183.tif 000131
【０３４５】
【化１３１】
0005909183.tif 000132
【０３４６】
【化１３２】
0005909183.tif 000133
【０３４７】
【化１３３】
0005909183.tif 000134
【０３４８】
【化１３４】
0005909183.tif 000135
【０３４９】
【化１３５】
0005909183.tif 000136
【０３５０】
【化１３６】
0005909183.tif 000137
【０３５１】
【化１３７】
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【０３５２】
【化１３８】
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【０３５３】
【化１３９】
0005909183.tif 000140
【０３５４】
【化１４０】
0005909183.tif 000141
【０３５５】
【化１４１】
0005909183.tif 000142
【０３５６】
および
【０３５７】
【化１４２】
0005909183.tif 000143
【０３５８】
。
【０３５９】
本明細書において使用される精製、分離または単離方法または技術には、必要な場合、カラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）、結晶化、および蒸留が含まれる。特徴付けは、紫外線（ＵＶ）分析、質量分析（ＭＳ）、ＭＳ／ＭＳ、ＧＣ／ＭＳ、核磁気共鳴（ＮＭＲ）などによって行うことができる。当業者は、本明細書の教示に基づいて、これらの新規な化合物を調製、単離、および特徴付けするための種々の方法を利用することができる。
【０３６０】
Ｐ１が、水素以外、例えば、保護基、アルキル、ヒドロキシ基もしくは置換されたヒドロキシ基であるときは、当該分野で公知の技術を用いて、前駆体にこれらの置換基を導入した後に、酵素反応をさせるか、あるいは、それぞれが水素である化合物を本明細書に記載される手法によって製造した後置換基を導入する方法によって、あるいはそれらの組み合わせによって、本発明の化合物を製造することが理解される。そのような技術としては、レゾルビン・プロテクチンにおける公知の誘導体製造技術を応用することができる。
【０３６１】
例えば、Ｐ１が水素である化合物を製造した後、これらの化合物のヒドロキシルを、アルキル基あるいは種々の保護基（例えば、当該技術分野で公知のもの）で置換することによってＰ１が水素以外のものを製造することができる。当業者は、これらのヒドロキシ基の保護にはどの保護基が有用であり得るかを容易に決定できる。標準的な方法は、当該技術分野で公知であり、そして文献で十分に記述されている。例えば、アルキル基による置換、適当な保護基での置換は、当業者により実施され、容易に選択され得、そしてＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｃｈａｐｔｅｒｓ  ５および７，１９９１（その教示内容は、本明細書中で参考として援用されている）で記述されている内容を参酌することができる。好ましい保護基には、メチルおよびエチルエステル、ＴＭＳおよびＴＩＰＳ基、酢酸エステルまたはプロピオン酸エステル基およびグリコールエーテル（例えば、エチレングリコールおよびプロピレングリコール誘導体）が挙げられる。そのような技術としては、レゾルビン・プロテクチンにおける公知の誘導体製造技術を応用することができる。
【０３６２】
あるいは、Ｐ１がヒドロキシ基もしくは置換されたヒドロキシ基であるとき、すなわち、過酸化体については、酵素反応によって得られるものを単離するか、置換されたヒドロキシ基の場合は、過酸化体をさらに、上記公知技術を用いてアルキル基、保護基等の置換基で置換してもよい。そのような技術としては、レゾルビン・プロテクチンにおける公知の誘導体製造技術を応用することができる。
【０３６３】
Ｒ１が、水素以外、例えば、ハロゲン原子、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキル基、置換または非置換のアリール基、置換または非置換の、分枝状または非分枝状アルキルアリール基であるときは、当該分野で公知の技術を用いて、前駆体にこれらの置換基を導入した後に、酵素反応をさせるか、あるいは、それぞれが水素である化合物を本明細書に記載される手法によって製造した後置換基を導入する方法によって、あるいはそれらの組み合わせによって、本発明の化合物を製造することが理解される。そのような技術としては、レゾルビン・プロテクチンにおける公知の誘導体製造技術を応用することができる。
【０３６４】
ここで、Ｒ１が、水素以外の場合、すなわち「Ｒ保護化学」の使用は、本発明の化合物中の近接するジオールには必ずしも必要ではない。典型的には、近接するジオールは容易に酸化されず、それゆえに、一般的には、ヒドロキシ基の酸素原子に隣接する水素原子の置換によってこのような保護を必要としない。したがって、このような保護は必要ではないと一般的には見なされているが、保護基として上記のような置換基を用いる、ヒドロキシ基の酸素原子に隣接する水素原子の置換によって、隣接するジオールのヒドロキシ基が、独立して「保護され得る」化合物を調製することが可能である。そのような技術としては、レゾルビン・プロテクチンにおける公知の誘導体製造技術を応用することができる。
【０３６５】
そのようなＲ１基の導入は、例えば、Ｐｆｉｔｚｎｅｒ−Ｍｏｆｆａｔｔ酸化、Ｓｗｅｒｎ酸化、Ｊｏｎｅｓ酸化などによって、ヒドロキシ基を酸化してケトンとし、Ｇｒｉｇｎａｒｄ反応、Ｂａｒｂｉｅｒカップリング反応、ジヨードサマリウム存在下でのＫａｇａｎ−Ｍｏｌａｎｄｅｒ反応等により、アルコールへの還元とともに、Ｒ１がアルキル、アリール、アルキルアリールなどの置換基を導入することができ、必要に応じてＰ１などをさらに導入することができる。そのような技術としては、レゾルビン・プロテクチンにおける公知の誘導体製造技術を応用することができる。
【０３６６】
以下の合成経路は、目的の本発明の化合物を調製するための方法を例証する。調製物は限定を意図しないが、より伝統的に実施に沿って本発明の化合物を調製するための別の手段として働き、上記の生体合成に対する相補物として見なされるべきである。
【０３６７】
本発明の化合物は、有機合成法によっても合成することができる。
【０３６８】
（生物活性、薬剤および医薬、処置、予防および治療法、および医薬の製造における使用）
１つの局面において、本発明は、本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を含む、好中球抑制剤を提供する。
【０３６９】
あるいは、別の局面において、本発明は、炎症性疾患を処置、治療または予防する方法であって、該処置、治療または予防が必要な被験体に本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を投与する工程を包含する、方法を提供する。
【０３７０】
さらに別の局面において、本発明は、炎症性疾患を処置、治療または予防する方法であって、本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物の、医薬品を製造するための使用に関する。
【０３７１】
さらに別の局面において、本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物の、好中球が関連する疾患、障害または状態を処置、治療または予防するための医薬品を製造するための使用に関する。
【０３７２】
これらの医薬、薬剤（好中球抑制剤など）、処置方法、治療方法、予防方法、処置、治療または予防のための医薬品の製造においては、以下のような実施形態がある。以下に順に説明する。
【０３７３】
したがって、本発明は、例えば、急性炎症時における好中球の組織への浸潤および活性化を防止することができる。このような防止能力は、虚血再灌流障害、脳卒中、心筋梗塞、急性腎炎などにおいて見出される好中球の組織への浸潤および活性化を防止するにおいて有用である。したがって、本発明は、非常に低用量で、強力に好中球の組織への浸潤および活性化を抑制することから、その治療薬としての効果を有するものとして有用であることが理解される。また、リウマチ性関節炎、炎症性大腸炎、喘息などの慢性炎症性疾患においても、本発明の化合物は、本来生体内に存在する内在性物質であることも判明したことから、中長期投与による副作用の少ない治療改善効果が期待される。
【０３７４】
本明細書において「好中球に関連する疾患、障害または症状」とは、好中球の阻害によって改善される疾患、障害または症状をいう。このような疾患状態または症状は本明細書全体で記載され、その全体が本明細書に援用される。将来発見される可能性がある、好中球調節と関連する現在未知の状態もまた本発明に包含される。なぜなら、好中球調節に関連する状態としての特徴付けは、当業者によって容易に決定可能であるからである。
【０３７５】
１つの実施形態では、本発明はまた、炎症と関連する疾患状態または症状を処置し、治療する、寛解させ、および治癒させるための方法にも関する。
【０３７６】
本発明が標的とする疾患は、以下を含む。消化器系（口、胃、食道、小腸および大腸）の多くの胃腸の炎症性障害、例えば、口内炎、歯周病、食道炎、胃炎、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患、感染性腸炎（ウイルス性、細菌性、寄生生物性）、抗生物質関連下痢、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ大腸炎、顕微鏡的またはリンパ性大腸炎、膠原性大腸炎、大腸ポリープおよび家族性ポリープ症候群（例えば、家族性ポリポーシス症候群、ガードナー症候群）、ヘリコバクター・ピロリ、過敏性腸症候群、非特異性下痢病、および腸癌；炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、外界からの刺激によって誘導される大腸炎（例えば、化学療法、放射線治療などの投与等の治療レジメンによって引き起こされるか、またはそれと関連する（例えば、副作用として）胃腸の炎症（例えば、大腸炎））、慢性肉芽腫性疾患、セリアック病、セリアックスプルー（腸の裏層が、グルテンとして知られているタンパク質の摂取に応答して炎症を起こす遺伝性疾患）、食物アレルギー、胃炎、感染性胃炎、または全腸炎（例えば、ヘリコバクター・ピロリ感染性慢性活性胃炎）および感染性因子によって引き起こされる他の型の胃腸の炎症などの炎症性疾患；肺切迫症候群、成人呼吸窮迫症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）などの肺疾患；虚血性心疾患、虚血性腎疾患、虚血性脳疾患、虚血性肝疾患などの虚血性疾患；びらん性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、気管支喘息、潰瘍性大腸炎、動脈硬化症、クローン病、悪性腫瘍、卵巣嚢腫、卵管炎、子宮筋腫、子宮内膜症、自然流産、妊娠中毒症、不妊症および月経困難症から選択されるストレス性疾患など。
【０３７７】
炎症には、急性および慢性の炎症状態が包含される。急性炎症は、一般的に、短時間の発症および好中球の浸潤または流入によって特徴付けられる。慢性炎症は、一般的に、比較的長い期間（例えば、数日間、数週間、数ヶ月間、または数年間、および被験体の寿命まで）の発症および単核細胞の浸潤または流入によって特徴付けられる。慢性炎症はまた、典型的には、自発的回復および自発的発生の期間によっても特徴付けられ得る。
【０３７８】
１つの局面において、本発明は、本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を含む医薬を提供する。
【０３７９】
本発明の化合物、該化合物の溶媒和物、該化合物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物は、そのまま単独で投与することも可能であるが、通常各種の医薬製剤として提供するのが好ましい。また、それら医薬製剤は、動物およびヒトに使用される。
【０３８０】
投与経路は、処置、治療、予防等に際し最も効果的なものを使用するのが好ましく、経口または例えば、直腸内、膣内、鼻内、口腔内、舌下、経皮的、皮下、筋肉内、静脈内等の非経口をあげることができる。単回剤形を製造するためにキャリア材料と合わせることができる活性成分の量は、一般的に、治療的または予防的効果を生じる化合物の量である。一般的に、１００パーセントの中から、この量は、約１パーセントから約９９パーセントの活性成分、好ましくは、約５パーセントから約７０パーセント、最も好ましくは、約１０パーセントから約３０パーセントの範囲である。
【０３８１】
投与形態としては、カプセル剤、錠剤、丸薬、顆粒剤、散剤、シロップ剤、ロゼンジ（好ましい基剤、通常はスクロースおよびアカシアもしくはトラガカントを使用する）、乳剤、座剤、注射剤等がある。経口投与に適当な、例えば乳剤およびシロップ剤のような液体調製物は、水、ショ糖、ソルビット、果糖等の糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類、ゴマ油、オリーブ油、大豆油等の油類、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、ストロベリーフレーバー、ペパーミント等のフレーバー類等を使用して製造できる。また、カプセル剤、錠剤、散剤、顆粒剤等は、乳糖、ブドウ糖、ショ糖、マンニット等の賦形剤、澱粉、アルギン酸ソーダ等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク等の滑沢剤、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、ゼラチン等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤等を用いて製造できる。あるいは、水性もしくは非水性液体中の溶液もしくは懸濁液として、または水中油もしくは油中水液体エマルジョンとして、またはエリキシルもしくはシロップとして、または芳香錠（ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアなどの不活性基剤を使用する）、および／またはマウスウォッシュとしてなどであってもよく、各々が所定量の本発明の化合物を活性成分として含む。本発明の化合物はまた、ボーラス、舐剤またはペーストとして投与されてもよい。
【０３８２】
非経口投与に適当な製剤は、好ましくは受容者の血液と等張である活性化合物を含む滅菌水性製剤からなる。例えば、注射剤の場合、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩水とブドウ糖溶液の混合物からなる担体等を用いて注射用の溶液を調製する。
【０３８３】
本明細書中、「薬学的に受容可能なキャリア」とは、それがその意図される機能を実行できるように、被験体の中にまたは被験体に本明細書の化合物を運ぶ際または輸送する際に含まれる、薬学的に受容可能な材料、組成物またはビヒクル、例えば、液体または固体の充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒またはカプセル化材料を意味する。典型的には、このような化合物は、１つの器官、または身体の部分から、別の器官、または身体の部分に運ばれまたは輸送される。各キャリアは、製剤の他の成分と適合性であり、患者に対して有害でないという意味で「受容可能」でなくてはならない。薬学的に受容可能なキャリアとして働くことができる材料のいくつかの例には：ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖；コーンスターチおよびポテトスターチなどのデンプン；カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；ココアバターおよび坐剤ワックスなどの賦形剤；ピーナッツオイル、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油およびダイズ油などのオイル；プロピレングリコールなどのグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張性生理食塩水；リンガー液；エチルアルコール；リン酸緩衝液；および薬学的製剤中で利用される他の非毒性適合性材料などが含まれる。
【０３８４】
特定の実施形態において、本発明の化合物は、１つ以上の酸性官能基を含んでもよく、従って、薬学的に受容可能な塩基と薬学的に受容可能な塩を形成することが可能である。このような塩または塩基などは、例えば、Ｂｅｒｇｅ  Ｓ．Ｍ．ら、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ，１９７７；６６：１−１９を参照をすることができる（これは参考として本明細書に援用される）。
【０３８５】
局所製剤は、活性化合物を１種もしくはそれ以上の媒質、例えば鉱油、石油、多価アルコール等または局所医薬製剤に使用される他の基剤中に溶解または懸濁させて調製する。腸内投与のための製剤は、通常の担体、例えばカカオ脂、水素化脂肪、水素化脂肪カルボン酸等を用いて調製し、座剤として提供される。
【０３８６】
本発明では、非経口剤においても、経口剤で例示したグリコール類、油類、フレーバー類、防腐剤（抗酸化剤を含む）、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤等から選択される１種もしくはそれ以上の補助成分を添加することもできる。
【０３８７】
薬学的に受容可能な抗酸化剤の例には、アスコルビン酸、システイン塩酸塩、重硫酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウムなどの水溶性抗酸化剤；パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、プロピルガレート、α−トコフェロールなどの油溶性抗酸化剤；およびクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸などの金属キレート剤などが含まれる。
【０３８８】
本発明の化合物もしくはその薬学的に受容可能な塩等の適切な１日または１回の用量は、治療効果または予防効果を生じるために有効な最低用量である化合物の量であるが、本発明の化合物もしくはその薬学的に受容可能な塩等の有効用量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、処置、治療、予防すべき症状の性質もしくは重篤度等により異なることが理解される。通常、経口投与量は、１日当たり０．０１〜１０００ｍｇ／人、好ましくは５〜５００ｍｇ／人であり、投与回数は、１日１回または分割して投与するのが好ましい。一般的に、患者のための本発明の化合物もしくはその薬学的に受容可能な塩等の静脈内用量および皮下用量は、示される鎮痛効果のために使用される場合、１日あたり約０．０００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは、１日あたり約０．０１〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重、およびさらにより好ましくは、１日あたり約０．１〜約４０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり、治療的または予防的な有効量としては例えば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは、１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重である。例えば、約０．０１μｇから２０μｇの間、約２０μｇから１００μｇの間、および１０μｇから２００μｇの間の本発明の化合物が、被験体体重の２０ｇあたりに投与される。投薬量の値は、軽減される状態の型および重篤度に伴って変化する可能性があることが注目されるべきである。
【０３８９】
これらの製剤または組成物を調製する方法は、本発明の化合物を、キャリアと、そして任意に、１種以上の補助成分と一緒にする工程を含む。一般的に、製剤は、本発明の化合物を、液体キャリアと、または微細に分割した固体キャリアと、またはその両方と、均一かつ密接に一緒にする工程、次いで、必要な場合、生成物を成型する工程によって調製される。
【０３９０】
本明細書中、経口投与のための本発明の固体剤形（カプセル、錠剤、丸薬、糖衣錠、散剤、顆粒剤など）において、活性成分は、１種以上の薬学的に受容可能なキャリア、例えば、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カリウム、および／または以下のいずれかと混合され得る：デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、および／もしくはケイ酸などの充填剤もしくは増量剤；例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／もしくはアカシアなどの結合剤；グリセロールなどの保湿剤；寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸、および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；パラフィンなどの溶液遅延剤；四級アンモニウム化合物などの吸収加速剤；例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなどの湿潤剤；カオリンおよびベントナイトクレイなどの吸収剤；タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびその混合物などの滑沢剤；ならびに着色料。カプセル、錠剤、および丸薬の場合において、薬学的組成物はまた、緩衝剤を含んでもよい。同様の型の固体組成物はまた、ラクトースなどの賦形剤、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどを使用して、ソフトおよびハード充填ゼラチンカプセル中の充填剤として利用してもよい。
【０３９１】
錠剤は、任意選択的に１種以上の補助成分とともに、圧縮および成型によって作製されてもよい。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、保存料、崩壊剤（例えば、グリコール酸デンプンナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散剤を使用して調製してもよい。成型錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を適切な機械で成型することによって作製してもよい。
【０３９２】
本発明の薬学的組成物の錠剤、または他の固体剤形、例えば、糖衣錠、カプセル、丸薬、および顆粒剤は、コーティングおよび殻、例えば、腸溶コーティングおよび医薬品製剤の分野において周知である他のコーティングとともに、任意に与えられまたは調製されてもよい。これらはまた、その中の活性成分の遅延放出または制御された放出を提供するために、例えば、所望の放出プロフィールを提供するための様々な割合のヒドロキシプロピルメチルセルロース、他のポリマーマトリクス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを使用して、製剤化されてもよい。これらは、例えば、細菌保持フィルターを通した濾過によって、または使用直前に滅菌水もしくはある他の滅菌注射可能媒体の中に溶解することができる滅菌固体組成物の型で滅菌薬剤を組み込むことによって、滅菌されてもよい。これらの組成物はまた、任意に不透明化剤を含んでもよく、これらが活性成分のみを、または優先的に、胃腸管の特定の部分に、任意に、遅延様式で放出する組成物であってもよい。使用することができる包埋組成物の例には、ポリマー性物質およびワックスが含まれる。活性成分はまた、適切な場合、上記の賦形剤の１種以上を伴うマイクロカプセル化型であり得る。
【０３９３】
本発明の化合物の経口投与のための液体剤形には、薬学的に受容可能なエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ、およびエリキシルが含まれる。本発明において使用されうる活性成分に加えて、液体剤形は、当該分野において一般的に使用される不活性希釈剤、例えば、水および他の溶媒、溶解剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、オイル（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、およびこれらの混合物などを含み得る。
【０３９４】
本発明の経口組成物はまた、不活性希釈剤の他に、湿潤剤、乳化剤および懸濁剤、甘味料、香料、着色料、芳香剤、および保存料などのアジュバントを含み得る。
【０３９５】
本発明の懸濁液は、本発明の活性化合物に加えて、懸濁液、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール、およびソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメタ水酸化物、ベントナイト、寒天およびトラガカント、およびその混合物などを含み得る。
【０３９６】
本発明の薬学的組成物の製剤は、直腸または膣投与のために、坐剤として提供されてもよく、これは、室温で固体であるが体温では液体であり、それゆえに、直腸または膣腔中で溶解し、活性化合物を放出する、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、坐剤ワックスまたはサリチル酸塩を含む１種以上の適切な非刺激性の賦形剤またはキャリアと、１種以上の本発明の化合物を混合することによって調製され得る。
【０３９７】
本発明の製剤はまた、膣投与のために、適切であることが当該分野において公知であるようなキャリアを含む、ペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム、またはスプレー製剤を包含する。
【０３９８】
本発明の化合物の局所的または経皮的な投与のための剤形には、散剤、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチ、および吸入剤が含まれる。活性化合物は、滅菌条件下で、薬学的に受容可能なキャリアと、および必要とされ得る任意の保存剤、緩衝剤、または噴霧剤と混合されてもよい。
【０３９９】
軟膏、ペースト、クリーム、およびゲルは、本発明の活性化合物に加えて、動物および植物の脂肪、オイル、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび二酸化亜鉛、またはその混合物などの賦形剤を加えてもよい。
【０４００】
散剤およびスプレーは、本発明の化合物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、およびポリアミド粉末、またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含むことができる。スプレーは、クロロフルオロハイドロカーボンならびにブタンおよびプロパンなどの揮発性の非置換炭化水素等の、慣用的な噴霧剤をさらに含むことができる。
【０４０１】
経皮パッチは、身体への本発明の化合物の制御送達を提供することの付加的な利点を有する。このような剤形は、適切な媒体中で化合物を溶解または分散させることによって作製することができる。吸収増強剤もまた、皮膚を横切る化合物の流入を増加するために使用することができる。このような流入の速度は、速度制御膜を提供すること、またはポリマーマトリックスもしくはゲルに活性化合物を分散させることのいずれかによって制御することができる。
【０４０２】
本発明は、眼科の製剤、眼の軟膏、散剤、溶液などを包含することが意図され、このような溶液は、結膜炎の処置、治療または予防のために有用である。
【０４０３】
本発明の薬学的組成物は、非経口投与のために用いられ、薬学的に受容可能な滅菌等張水溶液または非水性溶液、分散液、懸濁液もしくはエマルジョン、または使用直前に滅菌注射液もしくは分散液に再構成され得る滅菌粉末と組み合わせた１種以上の本発明の組成物を含み、これは、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、製剤を意図されるレシピエントの血液と等張性にする溶質、または懸濁剤もしくは濃厚剤を含んでもよい。
【０４０４】
本発明の薬学的組成物中で利用されてもよい適切な水系および非水系キャリアの例には、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、および適切なその混合物、植物性オイル、例えば、オリーブ油、および注射可能な有機エステル、例えば、オレイン酸エチルが含まれる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用、分散の場合における必要とされる粒子サイズの維持、および界面活性剤の使用によって維持することができる。
【０４０５】
これらの組成物はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤、および分散剤などのアジュバントを含んでもよい。微生物の作用の妨害は、種々の抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などを含めることによって保証されてもよい。等張剤、例えば、糖、塩化ナトリウムなどを組成物に含めることもまた所望され得る。加えて、注射可能な薬学的型の吸収の延長は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなどの吸収を遅延させる剤を含めることによってもたらされ得る。
【０４０６】
ある場合において、薬物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの薬物の吸収を遅くすることが所望される。これは、乏しい水溶性を有する結晶性またはアモルファス性の物質の液体懸濁液の使用によって達成されてよい。次いで、薬物の吸収の速度はその解離の速度に依存し、次には、結晶サイズおよび結晶型に依存し得る。代替的には、非経口的に投与された薬物型の遅延吸収は、オイルビヒクル中に薬物を溶解または懸濁することによって達成される。
【０４０７】
注射可能なデポー型は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生物分解ポリマー中で対象の化合物のマイクロカプセルマトリックスを形成することによって作製される。ポリマーに対する薬物の比率に依存して、利用される特定のポリマーの性質、薬物放出の速度を制御することができる。他の生物分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が含まれる。デポー注射可能製剤はまた、身体組織と適合性であるリポソームまたはマイクロエマルジョン中に薬物を包括することによっても調製される。
【０４０８】
本発明はまた、種々の疾患状態および症状の処置、治療または予防における使用のための、本明細書全体で記載される新規な化合物を含むパッケージされた医薬品を提供する。
【０４０９】
本明細書において、「予防」するとは、本発明の標的とする疾患、障害または症状が発生する前に、何らかの手段により、その疾患、障害または症状を生じさせないかまたは少なくとも遅延させること、あるいは疾患、障害または症状の原因自体が生じたとしてもそれが原因の障害が生じないような状態にすることをいう。
【０４１０】
本明細書において、「治療」するとは、既に発症している本発明の標的とする疾患、障害または症状の進行を食い止めるか、または完全または部分的に拘わらず、本発明の標的とする疾患、障害または症状が改善することをいう。本明細書において、本発明の標的とする疾患、障害または症状の進行を食い止めるか、または完全または部分的に拘わらず、本発明の標的とする疾患、障害または症状を改善するために本発明の化合物、組成物などを投与する等により、対象となる被験体の手当て等を行う行為は、「処置」ということもあるが、格別に峻別して使用しない限り、本明細書において両者は交換可能に使用されることが理解される。
【０４１１】
本明細書において「被験体」とは、本発明の標的とする疾患、障害または症状の対象とされる動物をいう。本発明が対象とする動物は、例えば、鳥類、哺乳動物などであってもよい。好ましくは、そのような動物は、哺乳動物（例えば、単孔類、有袋類、貧歯類、皮翼類、翼手類、食肉類、食虫類、長鼻類、奇蹄類、偶蹄類、管歯類、有鱗類、海牛類、クジラ目、霊長類、齧歯類、ウサギ目など）であり得る。例示的な被験体としては、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ニワトリ、ネコ、イヌなどの動物が挙げられるがそれらに限定されない。さらに好ましくは、マウス、ラット、ウサギ、ハムスター、モルモットなどの小動物が用いられ得る。もちろん、本発明の被験体には、ヒト、イヌ、ネコ、ウシ、ヤギ、およびマウスが含まれる。
【０４１２】
本発明の調製物は、経口的に、非経口的に、局所的に、または直腸的に与えられ得る。これらは、当然、各投与経路について適切である型によって与えられる。例えば、これらは、注射、吸入、眼ローション、軟膏、坐剤などの注射、注入または吸入による投与によって錠剤またはカプセル型で；ローションまたは軟膏によって局所的に；および坐剤によって直腸的に投与される。
【０４１３】
本明細書において、「非経口投与」および「非経口的に投与される」という語句は、本明細書で使用される場合、経口以外の投与であって、通常は注射による経腸的および局所的な投与以外の投与の様式を意味し、非限定的に、静脈内、筋肉内、動脈内、くも膜下腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、および胸骨内の注射および注入を含む。
【０４１４】
本明細書において、「全身投与」、「全身的に投与される」、「末梢投与」および「末梢的に投与される」という語句は、本明細書で使用される場合、中枢神経系への直接的に以外の化合物、薬物または他の物質の投与であって、その結果、それが患者の系に入り、従って、代謝および他の同様のプロセスに供せられる投与、例えば、皮下投与を意味する。
【０４１５】
本発明の化合物は、経口的に、鼻に、例えば、スプレーによって、直腸内、膣内、非経口的に、大槽内、および局所的に、口腔剤および舌下剤を含む散剤、軟膏、またはドロップによってなどを含めた任意の適切な経路によって、治療のためにヒトおよび他の動物に投与され得る。
【０４１６】
選択される投与の経路に関わらず、適切な水和型で使用されてもよい本発明の化合物、および／または本発明の薬学的組成物は、当業者に公知である従来的な方法によって薬学的に受容可能な剤形に製剤化される。
【０４１７】
本発明の薬学的組成物中の活性成分の実際の投薬レベルは、患者に対する毒性を伴うことなく、特定の患者に対する所望の治療的応答、組成、および投与の様式を達成するために有効である活性成分の量を得るように変動され得る。
【０４１８】
選択された投薬レベルは、利用される本発明の特定の化合物、そのエステル、塩、またはアミドの活性、投与の経路、投与の時間、利用される特定の化合物の排出の速度、治療の期間、利用される特定の化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物、および／または物質、治療される患者の年齢、性別、体重、状態、一般的健康状態、および以前の医学的履歴、ならびに医学分野において周知である同様の因子を含む種々の因子に依存する。
【０４１９】
当該分野における通常の技能を有する医師または獣医は、必要とされる薬学的組成物の有効量を容易に決定および処方することができる。例えば、医師または獣医は、所望の治療効果を達成するために必要とされるよりも少ないレベルで、薬学的組成物中の本発明の化合物の投薬を開始し、所望の効果が達成されるまで、投薬量を徐々に増加させ得る。
【０４２０】
一般的に、本発明の化合物の適切な１日の用量は、治療効果を生じるために有効な最低用量である化合物の量である。そのような有効な用量は一般的に上記の因子に依存する。一般的に、患者のための本発明の化合物の静脈内用量および皮下用量は、示される鎮痛効果のために使用される場合、１日あたり約０．０００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは、１日あたり約０．０１〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重、およびさらにより好ましくは、１日あたり約０．１〜約４０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。例えば、約０．０１μｇから２０μｇの間、約２０μｇから１００μｇの間、および１０μｇから２００μｇの間の本発明の化合物が、被験体体重の２０ｇあたりに投与される。
【０４２１】
所望される場合、活性化合物の有効な１日の用量は、単位剤形中で、任意に、１日を通して適切な間隔で、２個、３個、４個、５個、６個またはそれ以上の分割用量として別々に投与され得る。
【０４２２】
本発明の薬学的組成物は、本発明の１種以上の本発明の化合物の「治療有効量」または「予防有効量」を含む。「治療有効量」とは、所望の治療的結果、例えば、種々の疾患状態または症状と関連する効果の減少または予防を達成するために、必要である投薬量および時間での有効量をいう。本発明の化合物の治療有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重などの要因、および個体において所望の効果を誘発する治療化合物の能力に従って変化し得る。治療有効量はまた、治療剤の任意の毒性または有害な影響に対して治療的に有益な効果が上回るものである。「予防有効量」とは、所望の予防的結果を達成するために、必要である投薬量および時間での有効量をいう。典型的には、予防有効量は疾患の前にまたはその初期の段階において使用されるので、予防有効量は治療有効量よりも少ない。
【０４２３】
投薬治療計画（ｒｅｇｉｍｅｎ）は、最適な所望の応答（例えば、治療応答または予防応答）を提供するために調整され得る。例えば、単回ボーラスが投与され得、いくつかの分割用量が時間にわたって投与され得、またはこの用量は治療状態の要件によって示されるように比例的に減少または増加され得る。投与の容易さおよび投薬の均一性のために、単位剤形の非経口組成物を製剤化することがとりわけ有利である。単位剤形とは、本明細書で使用される場合、治療される哺乳動物被験体についての単位投薬量として適している物理的に別個の単位をいい；各単位は、必要とされる薬学的キャリアと共同して、所望の効果を生じるように計算された活性化合物の所定量を含む。本発明の単位剤形についての詳細は、（ａ）本発明の化合物の独特な特性および達成される特定の治療的または予防的効果、ならびに（ｂ）個体における感受性の治療のためにこのような活性化合物を構成することの当該分野における固有の制限によって決定され、かつ直接的にこれらに依存する。
【０４２４】
本発明の化合物の治療的または予防的な有効量についての例示的な非限定的な範囲は、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは、１〜１０ｍｇ／ｋｇである。投薬量の値は、軽減される状態の型および重篤度に伴って変化する可能性があることが注目されるべきである。任意の特定の被験体について、特定の投薬量・投与頻度等は、個体の必要性、ならびに組成物を投与しまたは組成物の投与を監督する人の専門的な判断に従って経時的に調整されるべきであること、ならびに本明細書に示される投薬量範囲は例示のみであり、本発明の範囲および実施を制限することを意図しないことがさらに理解されるべきである。
【０４２５】
本発明の化合物の、吸入による肺への送達は、気管支喘息および慢性閉塞性肺疾患のようなＣＯＰＤ等の一般的な局所的状態を含む種々の呼吸状態（気道の炎症）を治療するための、本明細書全体で記載される１つの方法である。本発明の化合物は、呼吸可能なサイズの粒子（直径で約１０μｍ未満）のエアロゾルの型で肺に投与し得る。このエアロゾル製剤は、液体または乾燥粉末として提供し得る。液体エアロゾル中で適切な粒子サイズを保証するために、懸濁液として、粒子は、呼吸サイズで調製することができ、次いで、噴霧剤を含む懸濁液製剤に取り込み得る。代替的には、製剤は、製剤中の適切な粒子サイズについての懸念を回避するために溶液型で調製し得る。溶液製剤は、呼吸サイズの粒子または液滴を産生する様式で分散されるべきである。
【０４２６】
一旦調製されると、エアロゾル製剤は、定量バルブを備えたエアロゾルキャニスターに満たされる。製剤は、バルブから被験体まで、用量を方向付けるように適合されたアクチュエーターを介して分配される。
【０４２７】
本発明の製剤は、（ｉ）複数の治療有効用量を提供するために十分な量の少なくとも１種の化合物；（ｉｉ）各々の製剤を安定化するために有効な量の水の添加；（ｉｉｉ）エアロゾルキャニスターからの複数の用量を噴霧するために十分な量の噴霧剤；および（ｉｖ）任意のさらなる選択的な成分、例えば、共溶媒としてのエタノールを合わせること；および成分を分散させることによって調製し得る。成分は、従来的なミキサーまたはホモジナイザーを使用して、振盪することによって、または超音波エネルギーによって分散させ得る。バルク製剤は、バルブからバルブへの移動方法を使用すること、圧力の充填によって、または従来的なコールド充填方法を使用することによって、より小さな個々のエアロゾルバイアルに移動させ得る。懸濁液エアロゾル製剤中で使用される安定化剤が噴霧剤中で溶解性であることは必要とはされない。十分に溶解性でないものは、適切な量の薬物粒子にコートし得、次いで、コートされた粒子は、上記のように製剤中に組み込み得る。
【０４２８】
本発明の製剤を送達するためにはまた、慣用されるバルブ、好ましくは定量バルブを備えたエアロゾルキャニスターも、使用することができる。従来的なＣＦＣ製剤を送達するために定量バルブ中で使用される従来的なネオプレンおよびブナのバルブラバーが、ＨＦＣ−１３４ａまたはＨＦＣ−２２７を含む製剤とともに使用することができる。熱可塑性エラストマー材料、例えば、ＦＬＥＸＯＭＥＲＴＭＧＥＲＳ  １０８５  ＮＴポリオレフィン（Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ）からの押し出し、注入成型、または圧縮成型によって形成される隔壁もまた適切である。
【０４２９】
本発明の製剤は、コートされているかまたはコートされていない、陽極酸化したかまたは陽極酸化していない、従来的なエアロゾルキャニスター、例えば、アルミニウム、ガラス、ステンレス鋼、ポリエチレンテレフタレートのそれの中に含めることができる。
【０４３０】
本発明の製剤は、気管支拡張をもたらすために、または本明細書全体で記載されるような、吸入による治療に敏感である状態、例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患などを治療するために、経口吸入によって、呼吸管および／または肺に送達させることができる。
【０４３１】
本発明の製剤はまた、本明細書全体で言及されるような呼吸状態を処置、治療または予防するために、当該分野において公知であるような鼻吸入によって送達することもできる。
【０４３２】
本発明の化合物について、単独で投与されることは可能であるが、薬学的組成物として化合物を投与することが好ましい。
【０４３３】
本発明は、パッケージング材料、およびパッケージング材料中に含まれる本発明の化合物の製剤を含む製造物をも包含する。この製剤は、少なくとも１種の本発明の化合物を含み、パッケージング材料は、製剤が、本明細書に記載されるような１種以上の状態を治療するために、一定量で、一定頻度で、およびこのような状態を処置、治療または予防するために有効な期間、被験体に投与可能であることを示すラベルまたはパッケージ挿入物を含む。このような状態は本明細書全体で言及され、参考として本明細書に援用される。適切な化合物は本明細書に記載されるものを利用することができる。
【０４３４】
より具体的には、本発明は、パッケージング材料、およびパッケージング材料に含まれる少なくとも１種の本発明の化合物を含む製剤を特徴とする。パッケージング材料は、製剤が、本明細書全体で議論されるような疾患と関連する徴候を処置、治療または予防するために被験体に投与可能であることを示すラベルまたは取扱説明書を含む。
【０４３５】
以上から、１つの好ましい局面において、本発明の医薬は、以下を含むがそれらに限定されない疾患、障害、状態などの処置、治療または予防において有用である：肺切迫症候群、成人呼吸窮迫症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）などの肺疾患；虚血性心疾患、虚血性腎疾患、虚血性脳疾患、虚血性肝疾患などの虚血性疾患；消化器系（口、胃、食道、小腸および大腸）の多くの胃腸の炎症性障害、例えば、口内炎、歯周病、食道炎、胃炎、潰瘍性大腸炎およびクローン病などの炎症性腸疾患、感染性腸炎（ウイルス性、細菌性、寄生生物性）、抗生物質関連下痢、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ大腸炎、顕微鏡的またはリンパ性大腸炎、膠原性大腸炎、大腸ポリープおよび家族性ポリープ症候群（例えば、家族性ポリポーシス症候群、ガードナー症候群）、ヘリコバクター・ピロリ、過敏性腸症候群、非特異性下痢病、および腸癌；炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、外界からの刺激によって誘導される大腸炎（例えば、化学療法、放射線治療などの投与等の治療レジメンによって引き起こされるか、またはそれと関連する（例えば、副作用として）胃腸の炎症（例えば、大腸炎））、慢性肉芽腫性疾患、セリアック病、セリアックスプルー（腸の裏層が、グルテンとして知られているタンパク質の摂取に応答して炎症を起こす遺伝性疾患）、食物アレルギー、胃炎、感染性胃炎、または全腸炎（例えば、ヘリコバクター・ピロリ感染性慢性活性胃炎）および感染性因子によって引き起こされる他の型の胃腸の炎症などの炎症性疾患；びらん性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、気管支喘息、潰瘍性大腸炎、動脈硬化症、クローン病、悪性腫瘍、卵巣嚢腫、卵管炎、子宮筋腫、子宮内膜症、自然流産、妊娠中毒症、不妊症および月経困難症から選択されるストレス性疾患。
【０４３６】
本発明は、または、より詳細には、以下をも処置、治療または予防することができる：胃腸炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、感染性腸炎、抗生物質関連下痢、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ大腸炎、顕微鏡的またはリンパ性大腸炎、膠原性大腸炎、大腸ポリープ、家族性ポリープ、家族性ポリポーシス症候群、ガードナー症候群、ヘリコバクター・ピロリ、過敏性腸症候群、非特異性下痢病、および腸癌、あるいは、炎症性疾患（アレルギー性疾患（アレルギー性皮膚炎、アレルギー性鼻炎など）、関節リウマチ、アナフィラキシーなど）、動脈硬化症、血管系・循環器系疾患、がん・腫瘍（過増殖性失調）、免疫系疾患、細胞増殖性疾患、感染症等を含む。例えば乾癬、肺線維症、糸球体腎炎、ガン、アテローム性硬化症、および抗血管形成（例えば、腫瘍成長、糖尿病性網膜症）を含む。具体的には、例えば、本発明医薬組成物は、脳炎、脊髄炎および脳脊髄炎、髄膜炎、炎症性多発性ニューロパチー、神経炎、涙腺炎、眼窩炎、結膜炎（アレルギー性結膜炎、春季角結膜炎など）、角膜炎、網脈絡膜瘢痕、眼内炎、球後視神経炎、網膜症、緑内障、蜂窩織炎、外耳炎、軟骨膜炎、中耳炎、耳管炎、乳突起炎、鼓膜炎、迷路炎、歯髄炎、歯周炎、唾液腺炎、口内炎、舌炎、甲状腺炎、心膜炎、心内膜炎、心筋炎、高血圧症、心不全、動脈硬化（アテローム粥状硬化症など）、再狭窄、虚血再還流障害、血栓症（心筋梗塞、脳梗塞、など）、肥満症、血管炎、脈管炎、多発性動脈炎、リンパ節炎、リンパ腫、ホジキン病、好酸球性疾患（好酸球増多症、肺好酸球症、肺アスペルギルス症など）、炎症性または閉塞性気道疾患（アレルギー性鼻炎、慢性副鼻腔炎、肺炎、喉頭炎、喉頭気管炎、気管支炎、喘息、急性肺障害、急性呼吸促拍症候群、肺気腫、慢性閉塞性肺疾患など）、胸膜炎、塵肺症、中皮腫、食道炎、胃空腸潰瘍、胃炎、十二指腸炎、食物アレルギー、敗血症、肝炎、肝線維症、肝硬変、胆嚢炎、膵炎、腹膜炎、糖尿病（Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病）、炎症性またはアレルギー性皮膚疾患（アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎（アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎など）、乾癬、蕁麻疹、光アレルギー性反応、円形脱毛症など）、皮膚肥厚性障害（皮膚好酸球性肉芽腫など）、皮膚多発性筋炎、皮下脂肪組織炎、甲状腺機能亢進症、サルコイドーシス、自己免疫性血液疾患（溶血性貧血、突発性血小板減少性紫斑病など）、（全身性）紅斑性狼瘡、再発性多発性軟骨炎、多軟髄炎、スクレロドーマ（ｓｃｌｅｒｏｄｏｍａ）、ウェゲナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重筋無力症、スチーブンス−ジョンソン症候群、特発性スプルー、自己免疫炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病など）、内分泌眼病、サルコイドーシス、肺胞炎、慢性過敏性肺臓炎、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、ぶどう膜炎、乾性角結膜炎，間質性肺線維症、虹彩毛様体炎、乾癬性関節炎、糸球体腎炎、全身性硬化症、全身性結合組織疾患（シェーグレン症候群、ベーチェット病、びまん性筋膜炎など）、間質性筋炎、炎症性多発性関節障害、炎症性関節炎、関節リウマチ、変形性関節症，滑膜炎、滑液包炎、腱鞘炎、慢性多発性骨髄炎、腎炎症候群、尿細管間質性腎炎、膀胱炎、前立腺炎、精巣炎、精巣���体炎、卵管炎、卵巣炎、子宮頚部炎、女性骨盤炎症、外陰腟炎症、臓器移植拒絶、骨髄移植拒絶、移植片対宿主病等の疾患の予防および／または治療剤あるいは熱傷、外傷性炎症の治療剤などである。
【０４３７】
以上のように、肥満やインスリン抵抗性（メタボリックシンドローム）において、脂肪組織へのマクロファージ浸潤を伴う炎症性変化が病態に大きく寄与している（Ｔｉｌｇ，Ｈ．ａｎｄ  Ｍｏｓｃｈｅｎ，Ａ．Ｒ．（２００６）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６，７７２−７８３）。したがって、本発明の化合物は、このような生活習慣病に有用であることが理解される。
【０４３８】
別の局面において、本発明はまた、別の抗炎症剤、例えば、ステロイド剤またはＮＳＡＩＤ（アスピリン、イブプロフェンなど）などの他の薬剤との併用での投与によって、被験体における胃腸疾患または状態を処置、治療または予防するための方法にも関する。これらの薬剤は、同時または、２つの異なる時点で投与され得る。
【０４３９】
図面および本明細書におけるすべての結果は、群あたりのｎ匹の動物の平均±ＳＥとして表現する。統計学的有意差は、Ｓｔｕｄｅｎｔ  ｔ検定によって決定した。ｐ値＜０．０５等（場合によっては、０．０７であったり、０．０１であったりする）によって表示されるものが有意な差異とみなす。
【０４４０】
（本発明の化合物の分析法）
１つの局面において、本発明は、本発明の化合物もしくはＰＵＦＡ代謝物、該化合物もしくは該代謝物の溶媒和物、該化合物もしくは該代謝物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分析する方法を提供する。抗炎症のための治療的基礎を開発するための指標としての有効なｎ−３状態レベルを評価するための治療マーカーとして、ヒト体液（血液、尿、母乳）、生検材料などでこれらの化合物をアッセイするために向けることができる。これには、ＬＣ−ＭＳ−ＭＳおよびＧＣ−ＭＳ特性が含まれ、これはまた、これらの新規な生成物をモニターするＥＬＩＳＡアッセイを取り扱うためにはるかに容易な開発をもたらし得る。
【０４４１】
したがって、本発明は、本発明の化合物もしくはＰＵＦＡ代謝物、該化合物もしくは該代謝物の溶媒和物、該化合物もしくは該代謝物の薬学的に受容可能な塩、または該塩の溶媒和物を分析する方法であって、
以下の液体クロマトグラフィー条件
Ａ液：水／酢酸＝１００／０．１、およびＢ液：アセトニトリル／メタノール＝４／１を用いた溶媒系として用い、流速：０〜３０分→５０μＬ／分、３０〜３３分→８０μＬ／分、３３〜４５分→１００μＬ／分、および図１Ａに記載のグラジエントを用い、図１Ｂに記載のパラメータを用いることを特徴とする、マルチプルリアクションモニタリング（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ）を用いる方法を提供する。このような系およびパラメータ等は、当業者は適宜改変して使用することができる。
【０４４２】
条件設定においては、合成された化合物（本件の場合は酵素で合成したもの、例えば本発明のエポキシ化合物等がこれに相当する。）についてはＭＳ／ＭＳの実測値からＭＲＭの親マスと子マスのペアーを最適化（衝突エネルギーの最適化）を行うことができる。また検量線を作製すると、定量分析が可能になる。合成できないものは仮想条件を設定して、検出目的のＭＲＭを行うことができる。この方法を用いることによって、本発明の新規化合物を分析することができる。
【０４４３】
（一般技術）
本明細書において用いられる分子生物学的手法、生化学的手法、微生物学的手法は、当該分野において周知であり慣用されるものであり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（１９８９）．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒおよびその３ｒｄ  Ｅｄ．（２００１）；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９８７）．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９８９）．Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；Ｉｎｎｉｓ，Ｍ．Ａ．（１９９０）．ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９２）．Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９５）．Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂ．Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ；Ｉｎｎｉｓ，Ｍ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．（１９９５）．ＰＣＲ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．（１９９９）．Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ，ａｎｄ  ａｎｎｕａｌ  ｕｐｄａｔｅｓ；Ｓｎｉｎｓｋｙ，Ｊ．Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）．ＰＣＲ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ：Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、別冊実験医学「遺伝子導入＆発現解析実験法」羊土社、１９９７などに記載されており、これらは本明細書において関連する部分（全部であり得る）が参考として援用される。
【０４４４】
人工的に合成した遺伝子を作製するためのＤＮＡ合成技術および核酸化学については、例えば、Ｇａｉｔ，Ｍ．Ｊ．（１９８５）．Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬＰｒｅｓｓ；Ｇａｉｔ，Ｍ．Ｊ．（１９９０）．Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ｅｃｋｓｔｅｉｎ，Ｆ．（１９９１）．Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｕｅｓ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃ，ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ；Ａｄａｍｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔａｌ．（１９９２）．Ｔｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，Ｃｈａｐｍａｎ  ＆  Ｈａｌｌ；Ｓｈａｂａｒｏｖａ，Ｚ．ｅｔ  ａｌ．（１９９４）．Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ；Ｂｌａｃｋｂｕｒｎ，Ｇ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（１９９６）．Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ；Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．（Ｉ９９６）．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓなどに記載されており、これらは本明細書において関連する部分が参考として援用される。
【０４４５】
本明細書において引用された、科学文献、特許、特許出願などの参考文献は、その全体が、各々具体的に記載されたのと同じ程度に本明細書において参考として援用される。
【０４４６】
以上、本発明を、理解の容易のために好ましい実施形態を示して説明してきた。以下に、実施例に基づいて本発明を説明するが、上述の説明および以下の実施例は、例示の目的のみに提供され、本発明を限定する目的で提供したのではない。従って、本発明の範囲は、本明細書に具体的に記載された実施形態にも実施例にも限定されず、特許請求の範囲によってのみ限定される。
【実施例】
【０４４７】
以下、実施例によって本発明を更に詳細に説明するが、この実施例等により本発明の技術的範囲が限定されるものではない。以下において使用した試薬類は、特に言及した場合を除いて、市販されているものを使用した。【０４４８】
（実施例１：本発明のエポキシ体のＰＵＦＡ代謝物の高感度分析法の確立）
本実施例では、新規化合物の分析をも可能にするために、ＰＵＦＡ代謝物を高感度に、かつ多種類のものを一斉に定量分析できる系を確立した。本実施例では、超高速液体クロマトグラフィー−タンデムマススペクトロメトリー（ＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を用いたマルチプルリアクションモニタリング（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｒｅａｃｔｉｏｎ  Ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ；ＭＲＭ）による多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）代謝物の一斉定量分析系を確立した。【０４４９】
ＭＲＭは、ＭＳ／ＭＳを用いて目的の代謝物を選択的に、かつ高感度で分析できる手法である。ＰＵＦＡの代謝物のＭＳ／ＭＳを測定すると、例えば酸化物であれば、そのヒドロキシ基の前後の炭素−炭素結合でフラグメンテーションを起こす。すると、その代謝物の構造に特徴的なＭＳ／ＭＳ値が検出される。そこで、ある代謝物の分子量に由来するＭＳ値（ネガティブイオンモードのため、ＰＵＦＡ代謝物の場合はプロトンが抜けてイオン化した時のＭＳ値である、分子量−１）を親ＭＳ値（Ｍ−）、およびその代謝物の構造に特徴的なＭＳ値を子ＭＳ値（Ａ−）とし、親ＭＳ値／子ＭＳ値の組み合わせを持つ物質のみを選択的に検出する手法がＭＲＭである。具体的には三連四重極型のＭＳを用い、あらかじめ設定した親ＭＳ値をまずＱ１で選択的に検出する。この時他の分子は除外され、Ｑ１を通過した分子のみが次のｑ２でエネルギーを加えられ、フラグメント化される。生じたフラグメントのうち、あらかじめ設定した子ＭＳ値を持つもののみが、次のＱ３で選択的に検出される。この親ＭＳ値／子ＭＳ値の組み合わせを一つのチャンネルとし、目的の分子全てについて、それぞれの親ＭＳ値／子ＭＳ値の組み合わせ、およびそれぞれに最適なコーン電圧、衝突エネルギーを１つのチャンネルとして設定して行く。一つのチャンネルのスキャンスピードが約３０ｍｓｅｃであるので、１００種類の代謝物のチャンネルを分析したとしても、一回のスキャンにかかる時間は約３秒である。従って、ＬＣで分離した際の代謝物の溶出時間が３秒以上であればその代謝物の検出が可能である。実際の溶出時間は十数秒程度であるので、原理的には３００種類以上の代謝物が検出可能である。ただ、ピークトップ付近での検出を行うことを加味すると、およそ百数十種類の代謝物までなら定量性も保ちつつ、一斉に分析を行える。さらにＬＣを用いた分離系を組み合わせることでそれぞれの代謝物に特異的な保持時間（ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ  ｔｉｍｅ）の情報も得られ、それらの情報から、目的の代謝物群の高感度な一斉定量分析を行える。【０４５０】
本実施例では、ほとんどの化合物は合成品を購入して用いたが、一部購入できないものについては、酵素反応により作製した。【０４５１】
具体的な例は、実施例２以下に記載されている。【０４５２】
（順相ＨＰＬＣを用いた化合物の精製）
ヘキサン：和光純薬工業
イソプロパノール：和光純薬工業
酢酸：和光純薬工業。【０４５３】
（ＭＲＭによるＰＵＦＡ代謝物の一斉分析系の確立）
以下の組成物を分析に使用した。入手方法（製造した実施例の番号）を併記する（ｈｙはヒドロキシを意味し、Ｅｐはエポキシを意味する。）。
５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ：実施例２
８ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ：実施例５
１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ：実施例３
１５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ：実施例４
４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ：実施例２
７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ：実施例２
１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ：実施例５
１３ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ：実施例２
１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ：実施例３
１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ：実施例４
１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ：実施例２
１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ：実施例２
１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ：実施例２
これらのパラメータは、図１Ｂに記載される。【０４５４】
（ＬＣの溶媒）
酢酸：和光純薬工業
メタノール：和光純薬工業
アセトニトリル：和光純薬工業。【０４５５】
（ＭＲＭによるＰＵＦＡ代謝物の一斉定量分析系の確立）
（スタンダード化合物のＭＳ／ＭＳ測定）
スタンダードとして用意した化合物をそれぞれ約１μＭとなるようにメタノール／ｍｉｌｌｉＱ／酢酸＝９０／１０／０．１の溶液で調整し、約１５０μｌを１０μＬ／分で送液しながら、Ｑ−ＴＲＡＰ−５５００（アプライドバイオシステム）でＭＳ／ＭＳを測定した。【０４５６】
（コーン電圧および衝突エネルギーの最適化）
それぞれ測定したＭＳ／ＭＳ値から、その化合物の構造に特徴的なＭＳ／ＭＳ値を選び、コーン電圧（Ｃｏｎｅ  Ｖｏｌｔａｇｅ）と衝突エネルギー（Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ  Ｅｎｅｒｇｙ）を振って測定を行うことで、そのＭＳ／ＭＳ値が一番感度良く検出されるような条件を決定した。【０４５７】
（ＬＣによる分離条件の検討）
ポンプはＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）、カラムはＡｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８  １．７μｍ（１．０×１５０ｍｍ）を用いた。溶媒はＡ液：ｍｉｌｌｉＱ／酢酸＝１００／０．１、およびＢ液：アセトニトリル／メタノール＝４／１を基本とし、時間ごとに比率、流速を調節し、スタンダード化合物の混合物（ｍｉｘｔｕｒｅ）が３０分以内で分離度も良く溶出する条件を決定した。最終的なＬＣ条件は以下の通りである。【０４５８】
溶媒グラジエントは、図１Ａおよび以下の表を参照。この条件設定においては、合成した化合物（例えば、酵素で合成したもの。本発明のエポキシ体が相当する。）についてはＭＳ／ＭＳの実測値からＭＲＭの親マスと子マスのペアーを最適化（衝突エネルギーの最適化）することができる。また検量線を作製すると定量分析が可能になる。合成しないものは仮想条件を設定して、検出目的のＭＲＭを行うことができる。
流速  ：  ０〜３０分→５０μＬ／分
３０〜３３分→８０μＬ／分
３３〜４５分→１００μＬ／分。【０４５９】
【表１】
0005909183.tif 000144
【０４６０】
（スタンダード化合物を用いた検量線の作製）
スタンダード化合物を用いて５ｐｇ／１０μＬ〜１ｎｇ／１０μＬまでの希釈系列を作製し、確立したＬＣ条件、およびＭＲＭプログラムで分析し、検量線を作製した。ピークの高さをシグナル強度とした。【０４６１】
（結果）
（ＭＲＭによるＰＵＦＡ代謝物の一斉定量分析系の確立）
（ＰＵＦＡ代謝物の一斉分析系の確立）
スタンダード化合物を用いて、それぞれの化合物に特異的なＭＲＭチャンネルを作製した。また、全く新規の構造の代謝物など、スタンダード化合物が存在しない場合は、構造から推定されるＭＳ／ＭＳ値、および類似の構造の代謝物のコーン電圧および衝突エネルギーを参考に、仮想的にチャンネルを作製した。そういった作業を積み重ねていった結果、本発明の化合物の一斉分析系を確立した（図１Ｂ）。【０４６２】
（ＬＣの分離条件の検討）
次に、ＰＵＦＡ代謝物がうまく分離する条件を検討した。ＰＵＦＡ代謝物（酸化物）は、基本的にはＰＵＦＡの炭素鎖の様々な位置に酸素（ヒドロキシ基）の付加したものであり、構造的に非常に似ているため、分離が難しい。アセトニトリル、メタノール、水を様々な両比で混合し、また流速の最適化も行ったところ、４５分でＰＵＦＡ代謝物を非常によく分離させる系を確立した。【０４６３】
（検量線の作製）
本実施例で確立したＭＲＭ測定メソッドを用いて、スタンダード化合物の混合物を、量を振って測定した。その結果、５ｐｇ〜１ｎｇの範囲で精度の高い検量線を引くことができた。【０４６４】
以上、ＰＵＦＡ代謝物の高感度一斉定量分析系を確立することに成功した。【０４６５】
（実施例２：５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ、１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ、および１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥの合成）
本実施例では、標題化合物を合成した。本実施例では、まず、ヒドロキシ体を生成し、得られたヒドロキシ体をエポキシ化する手法を採用した。【０４６６】
（材料）
３−モルホリノプロパンスルホン酸バッファー（ＭＯＰＳ  ｂｕｆｆｅｒ）（ｐＨ７．４）：ＭＯＰＳ（和光純薬工業）をｍｉｌｌｉＱ水に溶解する。１Ｎの水酸化ナトリウム（和光純薬工業）溶液を加えてｐＨを７．４に設定し、その後ｍｉｌｌｉＱ水でＭＯＰＳが５０ｍＭとなるようにメスアップした。
組換えシトクロムＰ４５０  ＢＭ３：巨大菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍにペントバルビタールを１μＭになるように添加することで目的遺伝子を誘導した。これよりＲＮＡを抽出し、ＲＴ−ＰＣＲにより増幅して、ｐＥＴ２１ａ  ＤＮＡ（ＴａＫａＲａ）ベクターに組み込み、ＢＬ−２１コンピテント細胞に形質転換した。遺伝子が導入された大腸菌をＬＢ培地で培養し、イソプロピル−β−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）を１ｍＭになるように加えて、２０℃でタンパク質の誘導を行った。誘導後の大腸菌を破砕し、遠心した上清をニッケルカラムにかけ、目的のタンパク質を精製した。
ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）：（和光純薬工業）
各種ＨＥＰＥ（５−ＨＥＰＥ）、ＨＤｏＨＥ（４−ＨＤｏＨＥ、７−ＨＤｏＨＥおよび１３−ＨＤｏＨＥ）：Ｃａｙｍａｎ、ＨＤｏＰＥ類は、以下のように酵素により合成した
ジエチルエーテル：昭和エーテル
逆相ＨＰＬＣによる分離のための材料
メタノール：和光純薬工業
０．０１％ｖ／ｖ酢酸：ｍｉｌｌｉＱ水にｖ／ｖで０．０１％となるよう酢酸（和光純薬工業）を加えた。なお、本明細書では、「ｍｉｌｌｉＱ水」とは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから入手可能な超純水製造装置（例えば、Ｍｉｌｌｉ−Ｑ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ）により調製された超純水を指す。【０４６７】
（方法）
（ａ１．酵素反応による前駆体（ＤＰＡ由来代謝物の合成）の合成）
（１０−ＨＤｏＰＥの合成）
ｎ−３  ＤＰＡ（Ｓｉｇｍａ）を反応容器にとり、窒素で溶媒を飛ばし、ここにＤＰＡが３０μｇ／ｍＬになるようにＰＢＳを加えて溶解させた。ここに、８−ＬＯＸを１７μｇ／ｍＬになるように加えて酵素反応を進行させ、その後ＮａＢＨ４を用いて還元反応を行った。ジエチルエーテルを用いて脂肪酸代謝物を抽出した。【０４６８】
（１４−ＨＤｏＰＥの合成）
ｎ−３  ＤＰＡ（Ｓｉｇｍａ）を反応容器にとり、窒素で溶媒を飛ばし、ここにＤＰＡが３０μｇ／ｍＬになるようにトリス塩酸バッファー（ｐＨ７．４）を加えて溶解させた。ここに、１２−ＬＯＸを加えて酵素反応を進行させ、その後ＮａＢＨ４を用いて還元反応を行った。ジエチルエーテルを用いて脂肪酸代謝物を抽出した。【０４６９】
（１７−ＨＤｏＰＥの合成）
ｎ−３  ＤＰＡ（Ｓｉｇｍａ）を反応容器にとり、窒素で溶媒を飛ばし、ここにＤＰＡが１０μｇ／ｍＬになるようにホウ酸緩衝液（ｐＨ９．０）を加えて溶解させた。ここに、ダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）を３３ユニット／ｍＬになるように加えて酵素反応を進行させ、その後ＮａＢＨ４を用いて還元反応を行った。ジエチルエーテルを用いて脂肪酸代謝物を抽出した。【０４７０】
以上のモノヒドロキシ体を以下のｐ４５０  ＢＭ３と反応によるエポキシ体の合成に用いた。【０４７１】
（ａ２．酵素反応による合成）
前駆体であるＨＥＰＥ（５−ＨＥＰＥ）、ＨＤｏＨＥ（４−ＨＤｏＨＥ、７−ＨＤｏＨＥおよび１３−ＨＤｏＨＥ）、ＨＤｏＰＥ（１０−ＨＤｏＰＥ、１４−ＨＤｏＰＥおよび１７−ＨＤｏＰＥ）を反応容器にとり、窒素で溶媒を飛ばし、ここにＨＥＰＥ、ＨＤｏＰＥおよびＨＤｏＰＥの濃度が３０μｇ／ｍＬとなるようにＭＯＰＳ  ｂｕｆｆｅｒを加えて溶解させた。ここに、Ｐ４５０  ＢＭ３を５０ｎＭとなるように加えて５分室温で静置した後、ＮＡＤＰＨを１ｍＭとなるように加えて反応を進行させ、ジエチルエーテルを用いて脂肪酸代謝物を抽出した。【０４７２】
（ｂ．逆相ＨＰＬＣによる化合物の分離、精製）
前述のように調製した脂肪酸代謝物の溶媒を窒素で飛ばし、ＨＰＬＣの初期移動相（Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ／酢酸＝４５／５５／０．０１）に溶解させた。これをＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にかけて、最終的にエタノール溶液として−２０℃で保存した。逆相ＨＰＬＣの条件は以下の通りである。【０４７３】
移動相
Ａ液：メタノール
Ｂ液：ｍｉｌｌｉＱ水／酢酸＝１００／０．０１
０〜５分    Ａ５５％
５〜２５分  Ａ５５％→１００％（グラジェント）
２５〜３５分  Ａ１００％
カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ，４．６ｘ１００ｍｍ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．７ｍＬ／分。【０４７４】
（結果）
以上の結果、５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ、４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ、１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ、１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥ、および１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＴＥが生成していることを確認した。図３Ａ〜図３Ｄには、実施例２〜５において合成した各種化合物の質量分析結果を示す。実施例２の結果は、図３Ａ、図３Ｂおよび図３Ｄに示されている。【０４７５】
図３Ａ−１に、５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０４７６】
図３Ｂ−１は４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示し、図３Ｂ−２は７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示し、図３Ｂ−４は１３−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１３ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０４７７】
図３Ｄは、ＤＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果を示す。ＤＰＡ由来の化合物の構造情報を質量分析（ＭＳ／ＭＳ）によって求めた結果の続きを示す。図３Ｄ−１は１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示し、図３Ｄ−２は１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示し、図３Ｄ−３は１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０４７８】
（実施例３：１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥの合成）
本実施例では、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥを合成した。【０４７９】
（材料）
酵素反応によるヒドロキシ体の作製に使用した材料：
トリス塩酸バッファー（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｂｕｆｆｅｒ、本明細書ではＴｒｉｓとも称する）（ｐＨ７．４）：ＴｒｉｓをｍｉｌｌｉＱ水に溶解する。濃塩酸を加えてｐＨ７．４に設定し、ｍｉｌｌｉＱ水でＴｒｉｓが１００ｍＭになるようメスアップした。【０４８０】
組換えブタ１２−ＬＯＸ：ＳＩＧＭＡ
テトラヒドロホウ酸ナトリウム（水素化ホウ素ナトリウム、ＮａＢＨ４）：和光純薬工業
１７，１８−エポキシＥＴＥおよび１９，２０−エポキシＤＰＥ：Ｃａｙｍａｎ
ジエチルエーテル：昭和エーテル
逆相ＨＰＬＣによる分離に使用した材料：
メタノール：和光純薬工業
０．０１％ｖ／ｖ酢酸：ｍｉｌｌｉＱ水にｖ／ｖで０．０１％となるよう酢酸（和光純薬工業）を加えた。【０４８１】
（方法）
（酵素反応による合成）
１７，１８−エポキシ−ＥＴＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＰＥを反応容器にとり、窒素で溶媒を飛ばし、ここに、１７，１８−エポキシ−ＥＴＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＰＥの濃度が３０μｇ／ｍＬとなるようにトリス塩酸バッファーを加えて溶解させた。ここに、１２−ＬＯＸを８ユニット／ｍＬとなるように加えて酵素反応を進行させ、その後ＮａＢＨ４を用いて還元反応を行った。その後、ジエチルエーテルを用いて脂肪酸代謝物を抽出した。【０４８２】
（逆相ＨＰＬＣによる化合物の分離、精製）
前述のように調製した脂肪酸代謝物の溶媒を窒素で飛ばし、ＨＰＬＣの初期移動相（Ｈ２Ｏ／メタノール（ＭｅＯＨ）／酢酸＝４５／５５／０．０１）に溶解させた。これをＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にかけて、最終的にエタノール溶液として−２０℃で保存した。逆相ＨＰＬＣの条件は以下の通りである。【０４８３】
移動相
Ａ液：メタノール
Ｂ液：ｍｉｌｌｉＱ水／酢酸＝１００／０．０１
０〜５分    Ａ５５％
５〜２５分  Ａ５５％→１００％（グラジェント）
２５〜３５分  Ａ１００％
カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ，４．６ｘ１００ｍｍ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．７ｍＬ／分。【０４８４】
（結果）
本実施例の結果、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥが生成された。その結果は、図３Ａおよび図３Ｃに示されている。【０４８５】
図３Ａ−３に、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０４８６】
図３Ｃ−１に、１４−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０４８７】
（実施例４：１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥの合成）
次に、本実施例では、１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥを合成した。【０４８８】
（材料）
酵素反応によるヒドロキシ体の作製に使用した材料：
ホウ酸緩衝液（ｐＨ９．０）：ホウ酸および塩化カリウム（いずれも和光純薬工業）をｍｉｌｌｉＱ水に溶解した。１Ｎの水酸化カリウム（和光純薬工業）溶液を加えてｐＨを９．０に設定し、ｍｉｌｌｉＱ水でホウ酸および塩化カリウムが５０ｍＭとなるようメスアップした。
ダイズリポキシゲナーゼ（ｓＬＯＸ）：ＳＩＧＭＡ
テトラヒドロホウ酸ナトリウム（ＮａＢＨ４）：和光純薬工業
１７，１８−エポキシＥＴＥおよび１９，２０−エポキシＤＰＥ：Ｃａｙｍａｎ
ジエチルエーテル：昭和エーテル
逆相ＨＰＬＣによる分離に使用した材料：
メタノール：和光純薬工業
０．０１％ｖ／ｖ酢酸：ｍｉｌｌｉＱ水にｖ／ｖで０．０１％となるよう酢酸（和光純薬工業）を加えた。【０４８９】
（方法）
（ａ．酵素反応による合成）
１７，１８−エポキシ−ＥＴＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＰＥを反応容器にとり、窒素で溶媒を飛ばし、ここに、１７，１８−エポキシ−ＥＴＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＰＥの濃度が３０μｇ／ｍＬとなるようにトリス塩酸バッファーを加えて溶解させた。ここに、ｓＬＯＸを２００００ユニット／ｍＬとなるように加えて酵素反応を進行させ、その後ＮａＢＨ４を用いて還元反応を行った。その後、ジエチルエーテルを用いて脂肪酸代謝物を抽出した。【０４９０】
（ｂ．逆相ＨＰＬＣによる化合物の分離、精製）
前述のように調製した脂肪酸代謝物の溶媒を窒素で飛ばし、ＨＰＬＣの初期移動相（Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ／酢酸＝４５／５５／０．０１）に溶解させた。これをＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にかけて、最終的にエタノール溶液として−２０℃で保存した。逆相ＨＰＬＣの条件は以下の通りである。【０４９１】
移動相
Ａ液：メタノール
Ｂ液：ｍｉｌｌｉＱ水／酢酸＝１００／０．０１
（１７，１８−ＥｐＥＴＥの反応物に使用した条件）
０〜２１分  Ａ６５％
２１〜３５分  Ａ１００％
（１９，２０−ＥｐＤＰＥの反応物に使用した条件）
０〜２１分  Ａ７０％
２１〜３５分  Ａ１００％
カラム：１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥはＸＢｒｉｄｇｅ  Ｓｈｉｅｌｄ  ＲＰ１８  ３．５μｍ，４．６ｘ１００ｍｍ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ）を使用し、１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥはＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ，４．６ｘ１００ｍｍ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ）を使用した。
流速：０．７ｍＬ／分。【０４９２】
（結果）
本実施例の結果、１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥが生成された。その結果は、図３Ａおよび図３Ｃに示されている。【０４９３】
図３Ａ−４に、１５−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（１５ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０４９４】
図３Ｃ−２に、１７−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０４９５】
（実施例５：８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥの合成）
本実施例では、８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥを合成した。【０４９６】
（材料）
酵素反応によるヒドロキシ体の作製に使用した材料：
リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）：１３７ｍＭ  塩化ナトリウム（ＮａＣｌ），２．７ｍＭ  塩化カリウム（ＫＣｌ），１０ｍＭ  リン酸水素二ナトリウム（Ｎａ２ＨＰＯ４），２ｍＭ  リン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）；適宜調製した。
組換えマウス８−リポキシゲナーゼ（８−ＬＯＸ）：マウス皮膚からＲＮＡを抽出し、ＲＴ−ＰＣＲにより増幅して、ｐＣｏｌｄ  ＴＦ  ＤＮＡ（ＴａＫａＲａ）ベクターに組み込み、ＢＬ−２１コンピテントセルにトランスフォーメーションした。遺伝子が導入された大腸菌をＬＢ培地で培養し、イソプロピル−β−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）を１ｍＭになるように加えて、１５℃でタンパク質の誘導を行った。誘導後の大腸菌を破砕し、遠心した上清をニッケルカラムにかけ、目的のタンパク質を精製した。
テトラヒドロホウ酸ナトリウム（ＮａＢＨ４）：和光純薬工業
１７，１８−エポキシＥＴＥおよび１９，２０−エポキシＤＰＥ：Ｃａｙｍａｎ
ジエチルエーテル：昭和エーテル
逆相ＨＰＬＣによる分離に使用した材料：
メタノール：和光純薬工業
０．０１％ｖ／ｖ酢酸：ｍｉｌｌｉＱ水にｖ／ｖで０．０１％となるよう酢酸（和光純薬工業）を加えた。【０４９７】
（方法）
（ａ．酵素反応による合成）
１７，１８−エポキシ−ＥＴＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＰＥを反応容器にとり、窒素で溶媒を飛ばし、ここに、１７，１８−エポキシ−ＥＴＥまたは１９，２０−エポキシ−ＤＰＥの濃度が３０μｇ／ｍＬとなるようにＰＢＳを加えて溶解させた。ここに、８−ＬＯＸを０．１ｍｇ／ｍＬとなるように加えて酵素反応を進行させ、その後ＮａＢＨ４を用いて還元反応を行った。その後、ジエチルエーテルを用いて脂肪酸代謝物を抽出した。【０４９８】
（ｂ．逆相ＨＰＬＣによる化合物の分離、精製）
前述のように調製した脂肪酸代謝物の溶媒を窒素で飛ばし、ＨＰＬＣの初期移動相（Ｈ２Ｏ／ＭｅＯＨ／酢酸＝４５／５５／０．０１）に溶解させた。これをＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）にかけて、最終的にエタノール溶液として−２０℃で保存した。逆相ＨＰＬＣの条件は以下の通りである。【０４９９】
移動相
Ａ液：メタノール
Ｂ液：ｍｉｌｌｉＱ水／酢酸＝１００／０．０１
０〜５分    Ａ５５％
５〜２５分  Ａ５５％→１００％（グラジェント）
２５〜３５分  Ａ１００％
カラム：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ５μｍ，４．６ｘ１００ｍｍ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．７ｍＬ／分。【０５００】
（結果）
本実施例の結果、８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥおよび１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥが生成された。その結果は、図３Ａおよび図３Ｂに示されている。【０５０１】
図３Ａ−２に、８−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシ−ＥＴＥ（８ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０５０２】
図３Ｂ−３に、１０−ヒドロキシ−１９，２０−エポキシ−ＤＰＥ（１０ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥ）を示す。各グラフは、横軸が質量（ｍ／ｚ）を示し、縦軸は信号の相対強度を示す。【０５０３】
（実施例６：本発明の化合物の生理活性の評価）
本実施例では、上記実施例で合成された化合物の腹膜炎モデルにおける生理活性の評価を行い、抗炎症活性があるか評価を行った。【０５０４】
（材料）
（１．ザイモザン腹膜炎の誘導）
・マウスＣ５７ＢＬ／６Ｊ  ７週齢、雄性：日本クレア
・生理食塩水：大塚製薬
・ｚｙｍｏｓａｎＡ：和光純薬工業
・リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）
（２．ＦＡＣＳの三色染め（ＣＤ１１ｂ，Ｇｒ−１，Ｆ４／８０））
・抗マウスＣＤ１６／ＣＤ３２（０．５ｍｇ／ｍＬ）：ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ
・ＦＩＴＣ抗マウスＦ４／８０（０．５ｍｇ／ｍＬ）：ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ
・ＰＥ抗マウスＬｙ−６Ｇ＆Ｌｙ−６Ｃ（Ｇｒ−１）（０．２ｍｇ／ｍＬ）：ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ
・ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５抗マウスＣＤ１１ｂ（Ｍａｃ−１）（０．２ｍｇ／ｍＬ）：ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ
・染色抗体ｍｉｘ
ＦＩＴＣ抗マウスＦ４／８０を１．０μＬ／サンプル
ＰＥ抗マウスＬｙ−６Ｇ＆Ｌｙ−６Ｃを０．５μＬ／サンプル
ＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５抗マウスＣＤ１１ｂを０．５μＬ／サンプル
上記の抗体を５０μＬ／サンプルのＰＢＳに希釈する。用事調製。
・ＰＢＳ：実施例５と同様。【０５０５】
（３．急性肺損傷モデルを用いた評価）
・マウスＣ５７ＢＬ／６Ｊ  ７週齢、雄性：日本クレア
・塩酸：ＳＩＧＭＡ
・ネンブタール：大日本住友製薬
・ケタミン：第一三共プロファーマ
・キシラジン：バイエルメディカル
・ＰＢＳ：実施例５と同様に適宜調製
・生理食塩水：大塚製薬
・簡易ギムザ染色液Ｄｉｆｆｑｕｉｃｋ：シスメックス。【０５０６】
（方法）
（ａ．ザイモザン腹膜炎モデルを用いた評価）
炎症モデルには、酵母の細胞壁成分であるザイモザンを腹腔内投与することにより惹起する、ザイモザン腹膜炎を用いた。本モデルは、腹腔内の浸出液を回収できるため、サイトカインやエイコサノイドの分析に適したモデルである。【０５０７】
ザイモザン（ｚｙｍｏｓａｎ）Ａ（和光純薬工業）を１ｍｇ／ｍＬとなるように生理食塩水中に懸濁し、３７℃で３０分間加温した。その後、このｚｙｍｏｓａｎＡ溶液をボルテックスし、室温に戻した。先の実施例で合成した化合物を１．５ｍＬチューブにとり、窒素で溶媒を飛ばして完全に乾固させた後、生理食塩水を加えて溶解させた。次にこの化合物溶液１００μＬを、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（７週齢、オス；日本クレア）の尾静脈から注入した（１ｎｇまたは１０ｎｇ／マウス）。対照として、生理食塩水（Ｓａｌｉｎｅ）のみ、そして、抗炎症性ステロイドであるデキサメタゾン（１０μｇ／マウス）を注入した群を用いた。この約２分後にザイモザンＡ溶液１ｍＬを腹腔内投与した。２時間後、腹腔内に浸出してきた細胞をＰＢＳでチューブに回収し、細胞数をカウントした。その後このチューブを１２００ｒｐｍ、４℃で５分間遠心分離して上清を除き、沈殿物（ペレット）をＰＢＳ中に懸濁させ、ＦＡＣＳの三色染めによるポピュレーションの解析を行った。【０５０８】
（ｂ．ＦＡＣＳの三色染め）
腹腔細胞を２．５×１０６細胞／ｍＬに調整し、２００μＬを５ｍＬ丸底チューブ（ＢＤＦａｌｃｏｎ）に入れた（５×１０５細胞／チューブ）。このチューブに、チューブ１本あたり１μＬの抗マウスＣＤ１６／ＣＤ３２抗体（０．５ｍｇ／ｍＬ；ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を加え、室温で１０分間インキュベーションした。このチューブに、染色抗体ミックス（１サンプルあたり、１．０μＬのＦＩＴＣ結合抗マウスＦ４／８０抗体（０．５ｍｇ／ｍＬ；ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、０．５μＬのＰＥ結合抗マウスＬｙ−６Ｇ＆Ｌｙ−６Ｃ抗体（０．２ｍｇ／ｍＬ；ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）および０．５μＬのＰｅｒＣＰ−Ｃｙ５．５結合抗マウスＣＤ１１ｂ抗体（０．２ｍｇ／ｍＬ；ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を５０μＬのＰＢＳに希釈して調製）を５０μＬ／チューブで添加し、室温、遮光下で１５分間インキュベーションした。測定はＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ（ＢＤＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で行った。【０５０９】
また、この結果、図４Ｃに示すように、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシＥＴＥが１０ｎｇ／マウスというごく低用量で好中球の浸潤を約４０％抑制し、１ｎｇ／マウスでも、３０％の抑制が見られた。この好中球抑制活性は、対照として用いたデキサメタゾンの、１０μｇ／マウスとほぼ同等またはそれ以上であった。【０５１０】
（ｃ．急性肺損傷モデルを用いた解析）
生理食塩水に溶解した本発明の化合物を、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（７週齢、オス；日本クレア）の尾静脈から注入する。１５分後、このマウスにケタミン（第一三共プロファーマ）とキシラジン（バイエル  メディカル）の混合液を腹腔内投与して麻酔をかけ、気管を露出して、塩酸（ｐＨ１．０、０．１Ｎ；ＳＩＧＭＡ）２５μＬを左気管支内に投与する。対照として、生理食塩水のみを注入し、麻酔後に塩酸の左気管支内投与を行った群（ｓａｌｉｎｅ／ＨＣｌ）とインタクト（ｉｎｔａｃｔ）の群とを用いた。１２時間後にこのマウスを屠殺して、０．７ｍＬのＰＢＳで２回気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を行う。ＢＡＬ液中の細胞数をカウントし、簡易ギムザ染色液Ｄｉｆｆｑｕｉｃｋ（シスメックス）を用いた簡易ギムザ染色によって細胞のポピュレーションを定量する。【０５１１】
（結果）
合成した化合物をザイモザン腹膜炎モデルで評価したところ、１２−ヒドロキシ−１７，１８−エポキシＥＴＥの他本発明の化合物のほとんどに、１００ｎｇという低用量で炎症初期の好中球の浸潤を抑制する活性が認められた（図４Ａ〜図４Ｂ）。またこれらの活性は用量依存的である（図４Ｃ；実際のデータは以下のとおりである。）。【０５１２】
（１２ｈｙ−１７，１８−ＥｐＥＴＥのデータ）【０５１３】
【表２】
0005909183.tif 000145
【０５１４】
図４Ｂにおいて示されるように、４ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥおよび７ｈｙ−１９，２０−ＥｐＤＰＥについては、それぞれ１００ｎｇおよび５００ｎｇにおいて好中球浸潤抑制の傾向が見られることから、用量によっては抑制効果が生じる可能性があることが期待される。【０５１５】
１０−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ、１４−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥ、および１７−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥについての好中球浸潤抑制のデータを図４Ｄに示す。示されるように、１４−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥおよび１７−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥについては統計学的に有意な効果が示された。１０−ヒドロキシ−１９，２０−ＥｐＤＴＥについても抑制傾向がみられる。【０５１６】
図４Ａ、図４Ｂおよび図４Ｄの実際のデータは、以下のとおりである。【０５１７】
【表３】
0005909183.tif 000146
【０５１８】
【表４】
0005909183.tif 000147
【０５１９】
【表５】
0005909183.tif 000148
【０５２０】
【表６】
0005909183.tif 000149
【０５２１】
また、腹膜炎で活性の認められた化合物について、好中球の浸潤を腹膜炎モデル以外でも評価するべく、急性肺損傷モデルの解析を行うことができる。これらの分析により、これらの化合物が、好中球の浸潤を特徴とする呼吸器系疾患（虚血再灌流障害や特発性肺繊維症など）に対して治療効果を示すことが期待される。【０５２２】
ザイモザンを腹腔内投与すると、腹腔内にいる常在性のマクロファージがこれを感知し、好中球遊走因子を放出する。すると末梢血中の好中球がインテグリンなどを介して血管内皮細胞と相互作用し、内皮細胞間を浸潤して炎症部位へ遊走する。従って、好中球の浸潤が抑制されたメカニズムとしては、本発明の化合物がマクロファージに作用して好中球遊走因子の放出を抑制している可能性、また血管内皮細胞もしくは好中球に作用して、浸潤を抑制している可能性が考えられる。細胞を用いたアッセイにより、本発明の化合物の作用点を明らかにすることができる。【０５２３】
本発明の化合物が好中球の炎症部位への浸潤を何らかのメカニズムにより抑制し、炎症の収束に寄与している可能性を示すものである。【０５２４】
（実施例７：ヒト好中球の遊走阻害実験）
好中球に対する抑制活性を別の観点で測定するために、ヒト好中球の遊走阻害実験を行う。【０５２５】
実施例２〜５で生産される化合物を用いる。【０５２６】
ヒト末梢血より好中球を単離し（Ｓｅｒｈａｎ  Ｃ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．３４，１４６０９−１４６１５（１９９５）を参照。）、標的となる化合物を加えた培養液（ＲＰＭＩ−０．１％ＢＳＡ）に３×１０５細胞／２００μｌになるように混合し、３７℃１５分間インキュベーションを行う。その後セルカルチャーインサート（ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｉｎｓｅｒｔ）（２４ウェル，３μｍ  ｐｏｒｅ；Ｆａｌｃｏｎ製）に移し、下層に遊走因子としてＬＴＢ４（５ｎＭ）加え、２時間後に下層に移行した好中球数を測定する。【０５２７】
このようにして遊走阻害を行う化合物を分析することができる。【０５２８】
（考察）
本実施例および他の実施例の結果から、本発明の化合物について、以下のように考察することができる。本発明の化合物は上記の通り、インビトロおよびインビボにおいて好中球抑制を示す。したがって本発明医薬組成物は、脳炎、脊髄炎および脳脊髄炎、髄膜炎、炎症性多発性ニューロパチー、神経炎、涙腺炎、眼窩炎、結膜炎（アレルギー性結膜炎、春季角結膜炎など）、角膜炎、網脈絡膜瘢痕、眼内炎、球後視神経炎、網膜症、緑内障、蜂窩織炎、外耳炎、軟骨膜炎、中耳炎、耳管炎、乳突起炎、鼓膜炎、迷路炎、歯髄炎、歯周炎、唾液腺炎、口内炎、舌炎、甲状腺炎、心膜炎、心内膜炎、心筋炎、高血圧症、心不全、動脈硬化（アテローム粥状硬化症など）、再狭窄、虚血再還流障害、血栓症（心筋梗塞、脳梗塞、など）、肥満症、血管炎、脈管炎、多発性動脈炎、リンパ節炎、リンパ腫、ホジキン病、好酸球性疾患（好酸球増多症、肺好酸球症、肺アスペルギルス症など）、炎症性または閉塞性気道疾患（アレルギー性鼻炎、慢性副鼻腔炎、肺炎、喉頭炎、喉頭気管炎、気管支炎、喘息、急性肺障害、急性呼吸促拍症候群、肺気腫、慢性閉塞性肺疾患など）、胸膜炎、塵肺症、中皮腫、食道炎、胃空腸潰瘍、胃炎、十二指腸炎、食物アレルギー、敗血症、肝炎、肝線維症、肝硬変、胆嚢炎、膵炎、腹膜炎、糖尿病（Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病）、炎症性またはアレルギー性皮膚疾患（アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎（アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎など）、乾癬、蕁麻疹、光アレルギー性反応、円形脱毛症など）、皮膚肥厚性障害（皮膚好酸球性肉芽腫など）、皮膚多発性筋炎、皮下脂肪組織炎、甲状腺機能亢進症、サルコイドーシス、自己免疫性血液疾患（溶血性貧血、突発性血小板減少性紫斑病など）、（全身性）紅斑性狼瘡、再発性多発性軟骨炎、多軟髄炎、スクレロドーマ（ｓｃｌｅｒｏｄｏｍａ）、ウェゲナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重筋無力症、スチーブンス−ジョンソン症候群、特発性スプルー、自己免疫炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病など）、内分泌眼病、サルコイドーシス、肺胞炎、慢性過敏性肺臓炎、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、ぶどう膜炎、乾性角結膜炎、間質性肺線維症、虹彩毛様体炎、乾癬性関節炎、糸球体腎炎、全身性硬化症、全身性結合組織疾患（シェーグレン症候群、ベーチェット病、びまん性筋膜炎など）、間質性筋炎、炎症性多発性関節障害、炎症性関節炎、関節リウマチ、変形性関節症，滑膜炎、滑液包炎、腱鞘炎、慢性多発性骨髄炎、腎炎症候群、尿細管間質性腎炎、膀胱炎、前立腺炎、精巣炎、精巣上体炎、卵管炎、卵巣炎、子宮頚部炎、女性骨盤炎症、外陰腟炎症、臓器移植拒絶、骨髄移植拒絶、移植片対宿主病等の疾患の予防および/または治療剤あるいは熱傷、外傷性炎症の治療剤として使用しうる。【０５２９】
（実施例８Ａ  溶解性試験）
化合物の溶解度は、１％  ＤＭＳＯ添加条件下で決定することができる。ＤＭＳＯにて１０ｍｍｏｌ／Ｌ  化合物溶液を調製し、化合物溶液６μＬをｐＨ６．８人工腸液（０．２ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム試液  ２５０ｍＬに０．２ｍｏｌ／Ｌ  水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）試液  １１８ｍＬ、水を加えて１０００ｍＬとした）５９４μＬに添加することができる。２５℃で１６時間静置させた後、混液を吸引濾過することができる。ろ液をメタノール／水＝１／１にて２倍希釈し、絶対検量線法によりＨＰＬＣまたはＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いてろ液中濃度を測定することができる。【０５３０】
（実施例８Ｂ  粉末溶解度試験）
適当な容器に本発明化合物を適量入れ、各容器にＪＰ−１液（塩化ナトリウム２．０ｇ、塩酸７．０ｍＬに水を加えて１０００ｍＬとする）、ＪＰ−２液（ｐＨ６．８のリン酸塩緩衝液５００ｍＬに水５００ｍＬを加えた）、２０ｍｍｏｌ／Ｌ  タウロコール酸ナトリウム（ＴＣＡ）／ＪＰ−２液（ＴＣＡ１．０８ｇにＪＰ−２液を加え１００ｍＬとする）を２００μＬずつ添加する。試験液添加後に全量溶解する場合には、適宜、本発明化合物を追加する。密閉して３７℃で１時間振とう後に濾過し、各濾液１００μＬにメタノール１００μＬを添加して２倍希釈を行う。希釈倍率は、必要に応じて変更する。気泡および析出物がないかを確認し、密閉して振とうする。絶対検量線法によりＨＰＬＣを用いて本発明化合物を定量する。【０５３１】
（実施例９  代謝安定性試験）
市販のプールドヒト肝ミクロソームを用いて、対象化合物を一定時間反応させ、反応サンプルと未反応サンプルの比較により残存率を算出し、肝で代謝される程度を評価することができる。【０５３２】
ヒト肝ミクロソーム０．５ｍｇタンパク質／ｍＬを含む０．２ｍＬの緩衝液（５０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ７．４、１５０ｍｍｏｌ／Ｌ  塩化カリウム、１０ｍｍｏｌ／Ｌ  塩化マグネシウム）中で、１ｍｍｏｌ／Ｌ  ＮＡＤＰＨ存在下で３７℃、０分あるいは３０分間反応させることができる（酸化的反応）。反応後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液の１００μＬに反応液５０μＬを添加、混合し、３０００ｒｐｍで１５分間遠心することができる。その遠心上清中の試験化合物をＬＣ／ＭＳ／ＭＳにて定量し、３０分間反応後の試験化合物の残存率を０分反応時の化合物量を１００％として計算することができる。【０５３３】
結果は、化合物濃度が０．５μｍｏｌ／Ｌの場合、化合物濃度が２μｍｏｌ／Ｌの場合等の種々の場合を評価することができる。【０５３４】
（実施例１０  ＣＹＰ阻害試験）
市販のプールドヒト肝ミクロソームを用いて、ヒト主要ＣＹＰ５分子種（ＣＹＰ１Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、２Ｄ６、３Ａ４）の典型的基質代謝反応として７−エトキシレゾルフィンのＯ−脱エチル化（ＣＹＰ１Ａ２）、トルブタミドのメチル−水酸化（ＣＹＰ２Ｃ９）、メフェニトインの４’−水酸化（ＣＹＰ２Ｃ１９）、デキストロメトルファンのＯ−脱メチル化（ＣＹＰ２Ｄ６）、テルフェナジンの水酸化（ＣＹＰ３Ａ４）を指標とし、それぞれの代謝物生成量が被検化合物によって阻害される程度を評価することができる。【０５３５】
反応条件は以下のとおりである：基質、０．５μｍｏｌ／Ｌ  エトキシレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２）、１００μｍｏｌ／Ｌ  トルブタミド（ＣＹＰ２Ｃ９）、５０μｍｏｌ／Ｌ  Ｓ−メフェニトイン（ＣＹＰ２Ｃ１９）、５μｍｏｌ／Ｌ  デキストロメトルファン（ＣＹＰ２Ｄ６）、１μｍｏｌ／Ｌ  テルフェナジン（ＣＹＰ３Ａ４）；反応時間、１５分；反応温度、３７℃；酵素、プールドヒト肝ミクロソーム  ０．２ｍｇタンパク質／ｍＬ；被検薬物濃度、１、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（４点）。【０５３６】
９６穴プレートに反応溶液として、５０ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液中に各５種の基質、ヒト肝ミクロソーム、被検薬物を上記組成で加え、補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して、指標とする代謝反応を開始し、３７℃、１５分間反応させた後、メタノール／アセトニトリル＝１／１（ｖ／ｖ）溶液を添加することで反応を停止させる。３０００ｒｐｍ、１５分間の遠心操作後、遠心上清中のレゾルフィン（ＣＹＰ１Ａ２代謝物）を蛍光マルチラベルカウンタで、トルブタミド水酸化体（ＣＹＰ２Ｃ９代謝物）、メフェニトイン４’−水酸化体（ＣＹＰ２Ｃ１９代謝物）、デキストロルファン（ＣＹＰ２Ｄ６代謝物）、テルフェナジンアルコール体（ＣＹＰ３Ａ４代謝物）をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで定量することができる。【０５３７】
薬物を溶解する溶媒であるＤＭＳＯのみを反応系に添加することができるものをコントロール（１００％）とし、被検薬物溶液を加えたそれぞれの濃度での残存活性（％）を算出し、濃度と抑制率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０を算出することができる。【０５３８】
（実施例１１  ＣＹＰ３Ａ４蛍光ＭＢＩ試験）
ＣＹＰ３Ａ４蛍光ＭＢＩ試験は、代謝反応による化合物のＣＹＰ３Ａ４阻害の増強を調べる試験であり、酵素に大腸菌発現ＣＹＰ３Ａ４を用いて、７−ベンジルオキシトリフルオロメチルクマリン（７−ＢＦＣ）がＣＹＰ３Ａ４酵素により脱ベンジル化し、蛍光を発する代謝物７−ハイドロキシトリフルオロメチルクマリン（ＨＦＣ）を生成する反応を指標として行う。【０５３９】
反応条件は以下のとおりである：基質、５．６μｍｏｌ／Ｌ  ７−ＢＦＣ；プレ反応時間、０または３０分；反応時間、１５分；反応温度、２５℃（室温）；ＣＹＰ３Ａ４含量（大腸菌発現酵素）、プレ反応時６２．５ｐｍｏｌ／ｍＬ、反応時６．２５ｐｍｏｌ／ｍＬ（１０倍希釈時）；被検薬物濃度、０．６２５、１．２５、２．５、５、１０、２０μｍｏｌ／Ｌ（６点）。【０５４０】
９６穴プレートにプレ反応液としてＫ−Ｐｉ緩衝液（ｐＨ７．４）中に酵素、被検薬物溶液を上記のプレ反応の組成で加え、別の９６穴プレートに基質とＫ−Ｐｉ緩衝液で１／１０希釈されるようにその一部を移行し、補酵素であるＮＡＤＰＨを添加して指標とする反応を開始し（プレ反応無）、所定の時間反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１を加えることによって反応を停止させる。また残りのプレ反応液にもＮＡＤＰＨを添加しプレ反応を開始し（プレ反応有）、所定時間プレ反応後、別のプレートに基質とＫ−Ｐｉ緩衝液で１／１０希釈されるように一部を移行し指標とする反応を開始することができる。所定の時間反応後、アセトニトリル／０．５ｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ（トリスヒドロキシアミノメタン）＝４／１を加えることによって反応を停止することができる。それぞれの指標反応を行ったプレートを蛍光プレートリーダーで代謝物である７−ＨＦＣの蛍光値を測定することができる（Ｅｘ＝４２０ｎｍ、Ｅｍ＝５３５ｎｍ）。【０５４１】
薬物を溶解した溶媒であるＤＭＳＯのみを反応系に添加したものをコントロール（１００％）とし、被検薬物溶液を加えたそれぞれの濃度での残存活性（％）を算出し、濃度と抑制率を用いて、ロジスティックモデルによる逆推定によりＩＣ５０を算出することができる。ＩＣ５０値の差が５μｍｏｌ／Ｌ以上の場合を（＋）とし、３μｍｏｌ／Ｌ以下の場合を（−）とすることができる。【０５４２】
（実施例１２  ＦＡＴ試験）
凍結保存しているネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ  ＴＡ９８株、ＴＡ１００株）２０μＬを１０ｍＬ液体栄養培地（２．５％  Ｏｘｏｉｄ  ｎｕｔｒｉｅｎｔ  ｂｒｏｔｈ  Ｎｏ．２）に接種し３７℃にて１０時間、振盪前培養することができる。ＴＡ９８株は９ｍＬの菌液を遠心（２０００×ｇ、１０分間）して培養液を除去し、９ｍＬのＭｉｃｒｏ  Ｆ緩衝液（リン酸水素二カリウム（Ｋ２ＨＰＯ４）：３．５ｇ／Ｌ、リン酸二水素カリウム（ＫＨ２ＰＯ４）：１ｇ／Ｌ、硫酸アンモニウム（（ＮＨ４）２ＳＯ４）：１ｇ／Ｌ、クエン酸三ナトリウム二水和物：０．２５ｇ／Ｌ、硫酸マグネシウム七水和物（ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０）：０．１ｇ／Ｌ）に菌を懸濁し、１１０ｍＬのＥｘｐｏｓｕｒｅ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏＦ緩衝液）に添加し、ＴＡ１００株は３．１６ｍＬ菌液に対しＥｘｐｏｓｕｒｅ培地１２０ｍＬに添加し試験菌液を調製することができる。被験物質ＤＭＳＯ溶液（最高用量５０ｍｇ／ｍＬから２倍公比で８段階希釈）、陰性対照としてＤＭＳＯ、陽性対照として非代謝活性化条件ではＴＡ９８株に対しては５０μｇ／ｍＬの４−ニトロキノリン−１−オキシドＤＭＳＯ溶液、ＴＡ１００株に対しては０．２５μｇ／ｍＬの２−（２−フリル）−３−（５−ニトロ−２−フリル）アクリルアミドＤＭＳＯ溶液、代謝活性化条件ではＴＡ９８株に対して４０μｇ／ｍＬの２−アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液、ＴＡ１００株に対しては２０μｇ／ｍＬの２−アミノアントラセンＤＭＳＯ溶液それぞれ１２μＬと試験菌液５８８μＬ（代謝活性化条件では試験菌液４９８μＬとＳ９  ｍｉｘ  ９０μＬの混合液）を混和し、３７℃にて９０分間、振盪培養することができる。被験物質を暴露することができる菌液４６０μＬを、Ｉｎｄｉｃａｔｏｒ培地（ビオチン：８μｇ／ｍＬ、ヒスチジン：０．２μｇ／ｍＬ、グルコース：８ｍｇ／ｍＬ、ブロモクレゾールパープル：３７．５μｇ／ｍＬを含むＭｉｃｒｏＦ緩衝液）２３００μＬに混和し５０μＬずつマイクロプレート４８ウェル／用量に分注し、３７℃にて３日間、静置培養する。アミノ酸（ヒスチジン）合成酵素遺伝子の突然変異によって増殖能を獲得した菌を含むウェルは、ｐＨ変化により紫色から黄色に変色するため、１用量あたり４８ウェル中の黄色に変色することができる菌増殖ウェルを計数し、陰性対照群と比較して評価することができる。変異原性が陰性のものを（−）、陽性のものを（＋）として示すことにより評価することができる。【０５４３】
（実施例１３  ｈＥＲＧ試験）
心電図ＱＴ間隔延長のリスク評価を目的として、ｈｕｍａｎ  ｅｔｈｅｒ−ａ−ｇｏ−ｇｏ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｇｅｎｅ（ｈＥＲＧ）チャンネルを発現させたＨＥＫ２９３細胞を用いて、心室再分極過程に重要な役割を果たす遅延整流Ｋ＋電流（ＩＫｒ）への作用を検討することができる。【０５４４】
全自動パッチクランプシステム（ＰａｔｃｈＸｐｒｅｓｓ  ７０００Ａ，Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．）を用い、ホールセルパッチクランプ法により、細胞を−８０ｍＶの膜電位に保持することができる後、＋５０ｍＶの脱分極刺激を２秒間、さらに−５０ｍＶの再分極刺激を２秒間与えた際に誘発されるＩＫｒを記録する。発生する電流が安定した後、被検物質を目的の濃度で溶解させた細胞外液（ＮａＣｌ：１３７ｍｍｏｌ／Ｌ、塩化カリウム（ＫＣｌ）：４ｍｍｏｌ／Ｌ、塩化カルシウム二水和物（ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）：１．８ｍｍｏｌ／Ｌ、塩化マグネシウム六水和物（ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ）：１ｍｍｏｌ／Ｌ、グルコース：１０ｍｍｏｌ／Ｌ、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ）−１−ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）：１０ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ＝７．４）を室温条件下で、１０分間細胞に適用させる。得られたＩＫｒから、解析ソフト（ＤａｔａＸｐｒｅｓｓ  ｖｅｒ．１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用して、保持膜電位における電流値を基準に最大テール電流の絶対値を計測することができる。さらに、被検物質適用前の最大テール電流に対する阻害率を算出し、媒体適用群（０．１％ジメチルスルホキシド溶液）と比較して、被検物質のＩＫｒへの影響を評価することができる。結果は、化合物濃度１μｍｏｌ／Ｌでの阻害率を示すことができる。【０５４５】
（実施例１４  ＢＡ試験）
経口吸収性は、以下のＢＡ試験を用いて実施することができる。【０５４６】
以下に実験材料および方法を示す。
（１）使用動物：ラットあるいはマウスを使用した。
（２）飼育条件：ラットは、固形飼料および滅菌水道水を自由摂取させた。
（３）投与量、群分けの設定：経口投与、静脈内投与を所定の投与量により投与した。以下のように群を設定した。（化合物ごとで投与量は変更有）
経口投与  １〜３０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２〜３）
静脈内投与  ０．５〜１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝２〜３）
（４）投与液の調製：経口投与は溶液または懸濁液として投与した。静脈内投与は可溶化して投与した。
（５）投与方法：経口投与は、経口ゾンデにより強制的に胃内に投与した。静脈内投与は、注射針を付けたシリンジにより尾静脈から投与した。
（６）評価項目：経時的に採血し、血漿中薬物濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて測定した。
（７）統計解析：血漿中濃度推移について、非線形最小二乗法プログラムＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）を用いて血漿中濃度‐時間曲線下面積（ＡＵＣ）を算出し、経口投与群と静脈内投与群のＡＵＣからバイオアベイラビリティ（ＢＡ）を算出した。【０５４７】
結果は、例えば、ラット、経口投与１ｍｇ／ｋｇでのＢＡ値を示すことができる。【０５４８】
製剤例
以下に示す製剤例は例示にすぎないものであり、発明の範囲を何ら限定することを意図するものではない。【０５４９】
（実施例１５：製剤例１  錠剤）
本発明により同定した、医薬成分について、常法により次の組成からなる錠剤を製造する。
本発明の化合物                      １００ｍｇ
乳    糖                              ６０ｍｇ
馬鈴薯でんぷん                        ３０ｍｇ
ポリビニルアルコール                    ２ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム                １ｍｇ
タール色素                                微量。【０５５０】
（実施例１６：製剤例２    散剤）
本発明により同定した、医薬成分について、常法により次の組成からなる散剤を製造する。
本発明の化合物                      １５０ｍｇ
乳    糖                            ２８０ｍｇ。【０５５１】
（実施例１７：製剤例３    シロップ剤）
本発明により同定した、医薬成分について、常法により次の組成からなるシロップ剤を製造する。
本発明の化合物                      １００ｍｇ
精製白糖                              ４０  ｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル          ４０ｍｇ
ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル        １０ｍｇ
チョコフレーバー                    ０．１ｃｃ
これに水を加えて全量１００ｃｃとする。【０５５２】
以上のように、本発明の好ましい実施形態を用いて本発明を例示してきたが、本発明は、この実施形態に限定して解釈されるべきものではない。本発明は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。当業者は、本発明の具体的な好ましい実施形態の記載から、本発明の記載および技術常識に基づいて等価な範囲を実施することができることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願および文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。
【産業上の利用可能性】
【０５５３】
本発明は、好中球抑制に関連する疾患または障害を治療するための医薬、それに使用される化合物、その薬学的に受容可能な塩、またはそれらの水和物等プロドラッグを提供する。本発明の化合物は本明細書において記載されるとおり、優れた好中球抑制作用を示す。したがって、本発明は製薬産業等において有用である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３Ａ−１】
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【図３Ａ−２】
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【図３Ａ−３】
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【図３Ａ−４】
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【図３Ｂ−１】
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【図３Ｂ−２】
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【図３Ｂ−３】
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【図３Ｂ−４】
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【図３Ｃ−１】
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【図３Ｃ−２】
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【図３Ｄ−１】
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【図３Ｄ−２】
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【図３Ｄ−３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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