(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
緑茶を熱水抽出して得た液体熱水抽出物を麹菌で発酵させることにより得られる緑茶抽出物を含有する美白用化粧料組成物。
【請求項２】
上記麹菌は、生菌数を基準にして原料緑茶のグラム当たり１０5〜１０7生菌数で投入されることを特徴とする請求項１に記載の美白用化粧料組成物。
【請求項３】
上記緑茶抽出物は、組成物の全体重量に対して０．１〜４０重量％の量で含有されることを特徴とする請求項１に記載の美白用化粧料組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、緑茶抽出物を含有する美白用化粧料組成物に関し、より詳細には、緑茶を熱水抽出し、麹菌で液体培養することによって、優れたチロシナーゼ阻害効果を示す緑茶抽出物を含有する美白用化粧料組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
人間の皮膚色は、メラニン色素を作るメラノサイト（ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ）の活動性、血管の分布、皮膚の厚さ、及びカロチノイドやビリルビンなど人体内外の色素含有有無のような様々な要因により決定され、それらのうちメラノサイトでチロシナーゼなどの様々な酵素が作用して生成されるメラニンという黒色色素が最も重要である。メラニン色素の形成には、遺伝的要因、ホルモン分泌もしくはストレスなどと関連した生理的要因又は紫外線の照射などのような環境的要因が影響を及ぼす。メラニンは、皮膚に存在し、紫外線などから身体を保護する重要な機能を有しているが、メラニンが過剰生産されることによって、斑点またはそばかすなどを形成するだけでなく、皮膚老化を促進し、皮膚癌の誘発にも重要な作用をするものと知られている。
【０００３】
斑点、そばかすまたは色素沈着などのような皮膚色素異常沈着症状と紫外線露出などにより発生した過度なメラニン色素沈着とを治療または軽減させるために、古くからアスコルビン酸、コウジ酸、アルブチン、ヒドロキノン、グルタチオンまたはこれらの誘導体などのチロシナーゼ阻害活性を有する物質を化粧料や医薬品に配合して使用してきたが、これらは、不十分な美白効果、皮膚に対する安全性問題、化粧料への配合時の剤形及び安定性問題などに起因してその使用が制限されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
これより、本発明者は、効果的なチロシナーゼ抑制効果を示す物質に対する研究を繰り返して行った結果、緑茶を熱水抽出し、麹菌で液体培養して製造した緑茶抽出物が高いチロシナーゼ阻害効果を示すことを知見し、本発明を完成するに至った。
【０００５】
したがって、本発明の目的は、優れたチロシナーゼ阻害効果を示す緑茶抽出物を含有する美白用化粧料組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために、本発明は、緑茶を熱水抽出して得た液体熱水抽出物を麹菌で発酵させることにより得られる緑茶抽出物を含有する美白用化粧料組成物を提供する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の緑茶抽出物は、緑茶を熱水抽出し、麹菌を利用して液体培養することによって、メラニン細胞の生成に重要な役目をするチロシナーゼの活性を効果的に抑制することができ、窮極的には、優れた皮膚美白効果を示す。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】本発明による麹菌を利用した液体熱水抽出方法による緑茶抽出物の製造工程図である。
【図２】菌類による相対的なチロシナーゼ活性阻害効果を示すグラフである。
【図３】緑茶抽出条件及び麹菌の発酵条件による相対的なチロシナーゼ活性阻害効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明は、緑茶を熱水抽出して得た液体熱水抽出物を麹菌で発酵させることにより得られる緑茶抽出物を含有する美白用化粧料組成物に関する。以下、本発明をより詳しく説明する。
【００１０】
本発明において使用する緑茶抽出物は、次の段階を含む方法で製造することができる。
１）緑茶を熱水抽出する段階と、
２）上記熱水抽出物を自然冷却する段階と、
３）冷却した抽出物を麹菌で発酵する段階。
【００１１】
上記１）段階の麹菌を利用した液体熱水抽出方法を、図１に図式化して示す。
上記１）段階の熱水抽出は、６０〜９０℃、最も好ましくは、８０℃で行われる。これは、６０℃未満なら抽出効率が低下し、９０℃超過なら抽出物が不安定になるので、好ましくないからである。
【００１２】
上記３）段階で、麹菌は、生菌数を基準にして原料緑茶のグラム（ｇ）当たり１０5〜１０7生菌数で投入し、最終産物では、１０6以内で検出される。投入される麹菌の生菌数が１０5未満なら、発酵が起きない。また、１０7超過なら、他の雑菌の汚染が生じるので、好ましくない。
【００１３】
本発明による緑茶を熱水抽出し、麹菌で液体培養した抽出物は、通常的な緑茶抽出物と比べて、優れたチロシナーゼ活性阻害効果を示し、これにより、優れた皮膚美白効果を示す。
【００１４】
本発明は、上記によって製造された緑茶抽出物を含有する美白用化粧料組成物を提供する。本発明において有効成分として使用される緑茶を熱水抽出し、麹菌で液体培養した抽出物は、組成物の全体重量に対して０．１〜４０重量％で含有される。これは、０．１重量％未満なら皮膚美白効果が非常に弱く、４０重量％を超過しても、含量の増加による効果ががあまり増加しないので、好ましくないからである。
【００１５】
本発明の化粧料組成物は、その剤形において特に限定されず、例えば、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、パック、ジェル、パウダー、リップスティック、メーキャップベース、ファウンデーション、ローション、軟膏、ゲル、パッチ、美容液、クレンジングフォーム、クレンジングクリーム、クレンジングウォーター、せっけんまたは噴霧剤などのような剤形を有することができる。
【００１６】
以下、実施例及び試験例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明がこれらの例に限定されるものではない。
【００１７】
［参考例１］発酵緑茶の製造
酵母（サッカロミセス セルビシエ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、枯草菌（バキッルス スプティーリス、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、乳酸菌（ラクトバチルス デルブルッキー サブスピーシズ ブルガリクス、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ  ｓｓｐ．Ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ）、又は麹菌（アスペルギルス オリザエ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）をそれぞれ利用して菌発酵緑茶を製造した。
【００１８】
まず、緑茶２００ｇをイオン水２Ｌに入れ、８０℃で３時間熱水抽出した後、自然冷却し、乳酸を利用してｐＨを３．５に補正した。液体熱水抽出物をそれぞれの菌で培養した。
【００１９】
振動培養器での各菌別培養条件は、次の通りである。サッカロミセス セルビシエは、じゃがいも澱粉０．４％及びデキストロース２％の培地において２５℃で７２時間、バキッルス スプティーリスは、デキストロース２％、ペプトン０．５％及び牛肉抽出物０．２％の培地において３５℃で４８時間、ラクトバチルス デルブルッキー サブスピーシズ ブルガリクスは、デキストロース２％、ペプトン１％、牛肉抽出物１％及び酵母抽出物０．５％の培地において３０℃で４８時間、アスペルギルス オリザエは、スクロース５％及び酵母抽出物０．７５％の培地において３０℃で９６時間の条件でそれぞれ培養した。
【００２０】
培養されたそれぞれの菌株を回収し、１次に遠心分離器で菌株と培地を分離した。０．８〜１．０％濃度の生理食塩水を利用して菌株を２〜４回洗浄した後、それを０．０５〜２２．０％濃度の砂糖及び０．００５〜１０．０％濃度の果糖と混合した後、１２０℃で１５分間高温加圧滅菌し、常温で２５℃まで冷却させた発酵液に入れた。
【００２１】
［試験例１］発酵菌類によるチロシナーゼ活性阻害効果
上記発酵緑茶を利用してチロシナーゼ活性阻害効果をバンニなどの方法（Ａ．Ｖａｎｎｉ、Ａｎｎａｌｉ  Ｄｉ  Ｃｈｉｍｉｃａ、８０、ｐ３５、１９９０）を利用して測定した。具体的には、０．１Ｍポタシウムホスフェート緩衝液（ｐＨ６．８）１．０ｍＬ、０．３ｍｇ／ｍＬチロシン水溶液１．０ｍＬ、及び１２５０ユニット／ｍＬチロシナーゼ０．１ｍＬを混合した後、試料溶液を濃度別にそれぞれ０．２ｍＬ添加し、３７℃で１０分間酵素反応を行い、反応溶液の吸光度を４８０ｎｍの波長で測定した。その結果を図２に示す。
【００２２】
相対的なチロシナーゼ活性阻害効果を示すグラフである図２から、酵母、枯草菌、及び乳酸菌による発酵緑茶は、発酵前の緑茶と同様にチロシナーゼ阻害活性がなかったが、麹菌を２５ｐｐｍで処理した実験群では、チロシナーゼ活性が阻害されることを確認することができた。
【００２３】
［実施例１］麹菌液体熱水抽出物の製造
緑茶２００ｇをイオン水２Ｌに入れ、８０℃で３時間熱水抽出した後、自然冷却し、乳酸を利用してｐＨを３．５に補正した。別に、スクロース２２．５％及び酵母抽出物１％を混合した培地を、乳酸を利用してｐＨを３．０に補正し、１２１℃で１時間滅菌した後、これに上記液体熱水抽出物を１５０ｍＬずつ添加しながら麹菌を接種し、３０℃で発酵した。得られた発酵液を１０分間超音波処理（Sonication）し、セライト(celite)で濾過し、５０ｍＬファルコンチューブに保管及び冷凍し、麹菌液体熱水抽出物を製造した。
【００２４】
［比較例１］麹菌固体アルコール抽出物の製造
緑茶２００ｇを７０％エタノール２Ｌに入れ、常温で３時間アルコール抽出した後、凍結乾燥した。別に、スクロース２２．５％及び酵母抽出物１％を混合した培地を、乳酸を利用してｐＨを３．０に補正し、１２１℃で１時間滅菌した後、これに上記固体アルコール抽出物を１０ｇずつ添加しながら麹菌を接種し、３０℃に発酵した。得られた発酵液を１０分間超音波処理（Sonication）し、セライト(celite)で濾過し、５０ｍＬファルコンチューブに保管及び冷凍し、麹菌固体アルコール抽出物を製造した。
【００２５】
［比較例２］麹菌固体熱水抽出物の製造
緑茶２００ｇをイオン水２Ｌに入れ、８０℃で３時間熱水抽出した後、凍結乾燥した。別に、スクロース２２．５％及び酵母抽出物１％を混合した培地を、乳酸を利用してｐＨを３．０に補正し、１２１℃で１時間滅菌した後、これに上記固体熱水抽出物を１０ｇずつ添加しながら麹菌を接種し、３０℃に発酵した。得られた発酵液を１０分間超音波処理（Sonication）し、セライト(celite)で濾過し、５０ｍＬファルコンチューブに保管及び冷凍し、麹菌固体熱水抽出物を製造した。
【００２６】
［比較例３］麹菌液体アルコール抽出物の製造
緑茶２００ｇを７０％エタノール２Ｌに入れ、常温で３時間アルコール抽出した後、自然冷却し、乳酸を利用してｐＨを３．５に補正した。別に、スクロース２２．５％及び酵母抽出物１％を混合した培地を、乳酸を利用してｐＨを３．０に補正し、１２１℃で１時間滅菌した後、これに上記液体アルコール抽出物を１５０ｍＬずつ添加しながら麹菌を接種し、３０℃に発酵した。得られた発酵液を１０分間超音波処理（Sonication）し、セライト(celite)で濾過し、５０ｍＬファルコンチューブに保管及び冷凍し、麹菌液体アルコール抽出物を製造した。
【００２７】
［比較例４］発酵前緑茶抽出物の製造
乾燥した緑茶葉２００ｇに７０％エタノール２Ｌを入れ、３回還流抽出した後、１５℃で１日間沈積させた。その後、濾過布を用いた濾過と遠心分離により残渣と濾液を分離し、分離した濾液を減圧濃縮し、発酵前緑茶抽出物を製造した。
【００２８】
［試験例２］麹菌の発酵条件及び緑茶抽出条件によるチロシナーゼ活性阻害効果
上記実施例１及び比較例１〜４を利用して、試験例１と同様の方法でそれぞれの試料のチロシナーゼ活性阻害効果の試験を行った。その結果を図３に示す。
【００２９】
相対的なチロシナーゼ活性阻害効果を示すグラフである図３から分かるように、緑茶を熱水抽出した熱水抽出物を麹菌で液体培養発酵させた緑茶抽出物は、濃度の増加に比例して、優れたチロシナーゼ活性阻害効果を示すことを確認することができた。一方、固体アルコール抽出、固体熱水抽出または液体アルコール抽出した比較例１〜３、及び発酵過程を進行させない一般緑茶抽出物である比較例４は、チロシナーゼ活性の阻害効果がほとんど現われなかった
【００３０】
［剤形例１］栄養化粧水（ミルクローション）の製造
【００３１】
【表１】
0005944647.tif 000002
【００３２】
［剤形例２］栄養クリームの製造
【００３３】
【表２】
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【００３４】
［剤形例３］マッサージクリームの製造
【００３５】
【表３】
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【００３６】
［剤形例４］軟膏の製造
【００３７】
【表４】
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【図１】
0005944647.tif 000006
【図２】
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【図３】
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