(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
酒粕を、中性またはアルカリ性の、水または水の含有割合が２０重量％より多い水溶性溶媒で６０℃以上で抽出する工程を含む乳化剤の製造方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法により製造された乳化剤と脂溶性物質を混合する工程を含む乳化物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な乳化剤に関する。さらに詳しくは、水と油脂の混合物である乳化物を製造する際に助剤として用いられる乳化剤、及びその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
乳化剤は、現代生活には欠かせない物質として、様々な日用製品や食品で使用されるとともに、工業生産過程でも使用されている。洗剤や化粧品などの日用品に使用される乳化剤としては、有機合成的に得られるアルキル硫酸塩やポリオキシエチレン系の低分子量の合成乳化剤が利用されてきたが、これらは環境中での残留による汚染問題や皮膚刺激等の安全性への危惧が指摘されている。
【０００３】
食品に適用される乳化剤としては、シュガーエステル等の合成乳化剤が使用されるが、安全面から、一般消費者は天然物を望んでおり、例えば、天然乳化剤として、カゼイン等の蛋白質、レシチン等の脂質、あるいはアラビアガムのような植物多糖が利用されている。しかしながら、これらは、乳化性は高いものの、溶液の粘性が低いために長時間放置すると水相と油相が分離してしまうという欠点があった。この問題を解決するために乳化剤を多量に添加するか、あるいはキサンタン等の増粘剤との併用による安定化が必要となり、経済上あるいは製造上の課題を有していた。また、アラビアガムは植物由来であるため、その生産量が気候等に左右されやすく、安定的に供給することが難しいという課題もあった。
【０００４】
化粧品に用いられる乳化剤は、脂溶性色素等の脂溶性成分を肌になじませる為、また、化粧品内でこれらを均一に分散させる為等に用いられる。この場合、化学合成乳化剤が多く使用されており、直接肌に塗布し、長期間にわたり使用する場合は、皮膚刺激性が高い等の問題から様々な障害を生じる可能性が指摘されていた。このことから化粧品用途においても肌にやさしい安全性の高い乳化剤が求められていた。
【０００５】
安価で環境負荷が少なく、安全性が高く、かつ乳化性能の高い天然由来の乳化剤として、微生物由来の乳化剤、いわゆるバイオサーファクタントと称される乳化剤が開発されてきている。このバイオサーファクタントは生物毒性や環境残留性がなく、培養によって大量生産が可能であるという長所を有しており、ラムノリピッド（非特許文献１）やソフォロリピド（非特許文献２）など、いくつかのバイオサーファクタントは、生産性を上げて既に実用化されている。しかしながら、これらのバイオサーファクタントの生産菌は、土壌をはじめとする環境中より分離された菌であるため、実際に人間の食経験があるかどうかは不明で、真に安全であるとは言いがたい。
【０００６】
安全な乳化剤の一例として、日本酒製造時及びパン製造時に使用される食用酵母の培養上清中の水溶性成分を乳化剤として使用することが知られている（特許文献１）。しかし、特許文献１では研究用のＹＭ培地で食用酵母が培養されており、この研究用培地に含まれる成分の食経験は不明である。
【０００７】
一方で、日本酒製造時の副生産物である酒粕は、奈良漬などの漬物、甘酒、粕取り焼酎などの食品素材として使用されているにとどまり、有効利用されているとは言い難い。また、近年の食生活の変化によりこのような食品素材としての消費量も減少しており、酒粕、特に液化酒粕の有効利用法の開発が急務となっている。その一例として、化粧料用素材としての酒粕醗酵エキスが開発され、実用化されているが（特許文献２、３）、この醗酵エキスは酒粕の再発酵や有効成分を分離する必要があり、より簡便な酒粕の有効利用が求められている。
【０００８】
酒粕に由来する成分を含む乳化剤が開発されている（特許文献４）。この乳化剤は、酒粕に含まれる有機溶媒可溶性成分を有効成分としており、抽出は酸性条件において常温で行われている。しかし、抽出条件による影響のためか、その乳化作用は不十分であった。
【０００９】
一方、食品の製造工程においては、缶詰などの食品に乳化剤を添加した後、加熱処理を行う場合、加熱により乳化性が損なわれ、脂溶性天然物が表面に浮上し、クリーミング現象が発生するという問題点があった。この問題を解決するために、ショ糖縮合リシノール酸エステルとアルコールを用いて耐熱性乳化剤の開発が試みられている（特許文献５）。しかし、前記の先行技術でも、缶コーヒーのレトルト処理（一般的には１２５℃、２０分）等のように加熱条件が厳しい場合には、乳化作用が損なわれ、クリーミング現象が発生していた。また、従来の乳化剤は総じて食品の味の低下を招き、また強酸性下では乳化性能が不足していた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２００７−２１６２１８号公報
【特許文献２】特開平１０−１３０１２１号公報
【特許文献３】特開２００４−１３７２３５号公報
【特許文献４】特開２０００−１５７２５９号公報
【特許文献５】特開平４−２９９９４０号公報
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｍ．Ｂｅｎｉｎｃａｓａ  ｅｔ  ａｌ．，  ２００２．  Ｊ．Ｆｏｏｄ  Ｅｎｇ．  ５４：２８３−２８８
【非特許文献２】Ｍ．Ｄｅｓｈｐａｎｄｅ  ａｎｄ  Ｌ．Ｄａｎｉｅｌｓ，  １９９５．  Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．  ５３：１４３−１５０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、上記の問題を解決し、食経験のある酒粕から、安価で安全性が高いだけでなく、乳化性と安定性にも優れた新規な乳化剤、及びその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、酒粕の抽出液を脂溶性物質の溶液に添加したところ、脂溶性物質を均質化（乳化）することが可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１４】
すなわち、本発明は、酒粕由来の成分を有効成分として含有することを特徴とする乳化剤に関する。
【００１５】
酒粕由来の成分は、酒粕の、中性またはアルカリ性の水または水溶性溶媒の抽出物であることが好ましい。
【００１６】
また、本発明は、酒粕を水または水溶性溶媒で抽出する工程を含む乳化剤の製造方法に関する。
【００１７】
また、本発明は、前記乳化剤と脂溶性物質を混合する工程を含む乳化物の製造方法に関する。
【００１８】
また、本発明は、前記乳化剤と脂溶性物質を含有する乳化物に関する。
【発明の効果】
【００１９】
本発明によれば、食経験があり、日本酒を製造する際の副産物である酒粕由来の有効成分を使用するので、人体に対する安全性が極めて高く、食品及び化粧品に好適に使用可能であるとともに、経済性が高く、資源の有効利用及び環境保護の点からも好ましいものである。さらに、本発明の乳化剤は、耐熱安定性が高く、長時間に渡って乳化状態を維持することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】実施例８の結果をＡに示し、比較例５の結果をＢに示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明の乳化剤は、酒粕由来の成分を有効成分として含有する。ここで、酒粕とは、酒の製造工程において、発酵後のもろみを搾った固形の残渣である。もろみが発酵するまでには、原材料である米に、麹（こうじ）菌、酵母、及び乳酸菌が加えられているので、酒粕には、酵母以外に、米、麹菌、及び乳酸菌などが含まれるだけでなく、これらの微生物が産生する多くの代謝産物も含まれている。酒粕に含まれる微生物の中で、酵母がブドウ糖をアルコールに変える発酵作用を担っている。酒の製造に使用される酵母としては、アルコールを醸成する能力を有するものであれば特に限定されないが、例えば、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、シゾサッカロマイセス（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、クリベロマイセス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）属、及び、チゴサッカロマイセス（Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｒｏｕｘｉｉ）属に属するものが挙げられる。
サッカロマイセス属の酵母としては、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）、サッカロマイセス・パストリアヌス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐａｓｔｏｒｉａｎｕｓ）、サッカロマイセス・マンジニ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｍａｎｇｉｎｉ）、及び、サッカロマイセス・バヤヌス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｂａｙａｎｕｓ）が挙げられ、シゾサッカロマイセス属の酵母としては、シゾサッカロマイセス・ポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）が挙げられ、キャンディダ属としては、キャンディダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ ｕｔｉｌｉｓ）が挙げられ、クリベロマイセス属としてはクリベロマイセス・ラクチス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｌａｃｔｉｓ）、クリベロマイセス・マルキシアヌス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ ｍａｒｘｉａｎｕｓ）が挙げられ、チゴサッカロマイセス属としては、チゴサッカロマイセス・ルキシ（Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｒｏｕｘｉｉ）が挙げられる。
【００２２】
本発明において用いられる酒粕としては、例えば普通酒、本醸造酒、吟醸酒、大吟醸酒からの醸造過程で副生する酒粕や、これらの酒粕の乾燥品を用いることができる。酒粕の形状としては液体又は固体のいずれも使用可能であり、特に限定されることはない。普通酒等の醸造で副生される液化仕込み由来の酒粕は、糖分以外の成分が濃縮されているため製造工程で扱いやすいので、好適に使用できる。酒粕は、日本酒の酒粕に限定されず、芋、麦、黒糖等を原料として焼酎を製造する際の副産物である酒粕も用いることもできる。
【００２３】
また、酒粕を食用酵母で再発酵したものは、有効成分の含量が高められているので、本発明の乳化剤の原料として好適に使用することができる。食用酵母としては、例えば、パン生地の発酵に用いられるパン酵母、ワイン醸造に用いられるワイン酵母、清酒醸造に用いられる清酒酵母、ビール醸造に用いられるビール酵母、焼酎醸造に用いられる焼酎酵母、みりん醸造に用いられるみりん酵母等が挙げられる。これらの食用酵母としては、その培養が容易であり、また栄養源として安価な材料より生育できる点から、キャンディダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属中の食用酵母が好ましく用いられ、具体的には、Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓａｋｅ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ等がより好ましく用いられる。これらの食用酵母のうち、乳化作用をもつ物質を大量に生産することから、例えば、Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｅ ＮＢＲＣ１２１３、Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｅ ＮＢＲＣ０４３５、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓａｋｅ協会１０号等の醸造用酵母；Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＮＢＲＣ０５３８、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＮＢＲＣ０８５３、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＡＴＣＣ９０１８等のパン酵母が、さらに好ましく用いられる。また、Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｅ ＮＢＲＣ１２１３、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓａｋｅ協会１０号が、特に好ましく用いられる。Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｅ ＮＢＲＣ１２１３、Ｃａｎｄｉｄａ ｓａｋｅ ＮＢＲＣ０４３５、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＮＢＲＣ０５３８、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＮＢＲＣ０８５３は、ＮＢＲＣ（独立行政法人製品評価技術基盤機構バイオテクノロジー本部生物遺伝資源部門）より入手可能である。また、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓａｋｅ協会１０号は、財団法人日本醸造協会より入手可能である。さらに、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＡＴＣＣ９０１８は、ＡＴＣＣ（Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）より入手可能である。また、当該食用酵母は、単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【００２４】
食用酵母をＹＭ培地などで培養した後に、培地から有効成分を抽出する方法では、食経験のない培地からも有効成分が抽出される可能性があるが、酒粕であれば、食経験があり、大きな問題はない。
【００２５】
また、上述のように、酒粕には食用酵母の他に麹菌や乳酸菌が含まれるが、本発明の乳化剤における有効成分は、食用酵母に由来するものに限定されず、麹菌、又は乳酸菌に由来するものであってもよい。或いは、食用酵母、麹菌、及び乳酸菌に由来する有効成分が混合したものであってもよい。
【００２６】
本発明で使用する酒粕由来の有効成分は、乳化力を有する有効成分を酒粕より抽出および回収することで得られる。具体的には、酒粕を水又は水溶性溶媒の抽出溶媒に懸濁し、常温または加熱して抽出した後、分離して得ることができる。
【００２７】
酒粕の抽出溶媒としては、水又は水溶性溶媒を使用する。水溶性溶媒としては、エタノール、メタノール、アセトンなどが挙げられ、食品用途でも使用可能なエタノールが好ましい。中でも、安全性が高く、他の成分への影響が少なく扱いやすい、食品添加時に風味・食感を損なわないなどの点で、水が好ましい。水と水溶性溶媒の混合溶媒を抽出溶媒として使用することもできる。水の含有割合は、２０重量％より多いことが好ましく、５０重量％以上がより好ましく、８０重量％以上がさらに好ましい。
【００２８】
抽出溶媒のｐＨは、酒粕由来の有効成分が抽出できるｐＨであれば特に制限はないが、中性域からアルカリ性域が好ましい。抽出溶媒のｐＨはｐＨ７．０以上であることが好ましく、ｐＨ８．０以上であることがより好ましく、ｐＨ９．０以上であることがさらに好ましい。ｐＨ５．０以下の場合、乳化活性が低下するという傾向がある。
【００２９】
なお、アルカリ性の抽出溶媒を用いた際、抽出後に酸性液で中和しても良い。その際に用いる酸性液に制限はないが、例えば、クエン酸、酢酸、塩酸、硫酸、酒石酸、リン酸、乳酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、アジピン酸などが挙げられる。
【００３０】
酒粕に対する水又は水溶性溶媒の量は、酒粕が懸濁される最低量以上であれば制限はないが、酒粕の固体換算で、下限は酒粕重量比の０．１以上、好ましくは０．２以上、より好ましくは０．５以上である。上限は、酒粕重量比の１０以下、好ましくは５以下である。０．１未満では、酒粕を均一にすることができず、十分な抽出が不可能となり、１０を超えると、濃縮操作が煩雑となる傾向がある。
【００３１】
上記水又は溶媒を添加後、常温でまたは加熱により抽出することができる。また、あらかじめ加温した水又は水溶性溶媒を酒粕に添加してもよい。抽出に際しては、乳化成分を効率よく抽出するために、懸濁液を攪拌することが好ましい。
【００３２】
抽出時の温度の下限は、２５℃以上が好ましく、４０℃以上がより好ましく、６０℃以上がさらに好ましい。一方、抽出時の温度の上限は、特に限定されず、加圧下で１００℃以上の温度で行ってもよい。室温以下で抽出した場合、抽出効率が悪くなる傾向がある。
【００３３】
抽出時間には特に制限はないが、３０分以上が好ましく、６０分以上であることがより好ましい。３０分未満では、抽出効率が悪くなる傾向がある。
【００３４】
抽出後、自然沈降、ろ過及び／または遠心分離等により固形の抽出残渣を除去し、抽出液を回収する。自然沈降、ろ過、及び遠心分離の条件は特に限定されず、固形の抽出残渣を除去できる条件であればよい。この際、この固形の抽出残渣に対してさらに上記の抽出操作を１回以上繰り返すことにより、より効率よく乳化成分を回収することができる。さらに、イオン交換カラム、アフィニティーカラム等の親和性による分画、または限外ろ過、ゲルろ過カラム等の分子量による分画によって、乳化成分を濃縮することができる。
【００３５】
分子量による分画を行う場合、カットオフ値はＭＷ１０，０００以上とすることが好ましく、５０，０００以上がより好ましい。１０，０００未満では、分画に非常に時間を要し、大量に処理する場合の操作性が悪くなる傾向がある。
【００３６】
本発明の乳化剤は、上記方法で得られた抽出物をそのまま使用してもよく、これをさらに処理加工して用いてもよい。例えば、さらに濃縮または希釈してもよく、凍結乾燥、加熱乾燥、ドラム乾燥等の乾燥処理に付して使用してもよく、さらに固形分を水などで抽出して用いてもよい。
【００３７】
本発明の乳化剤には、その性能を損なわない範囲で、種々の添加剤を添加することもできる。添加剤としては、乳化剤の剤型を保つための基材や、乳化成分保護のための安定化剤、実際の使用を容易とするための水等の液体、酸化防止剤、防腐剤、化粧用活性剤、加湿剤、スフィンゴ脂質、脂溶性ポリマー等が挙げられる。さらに、本発明の乳化剤に加えて、既存の他の乳化剤を併用することもできる。添加剤や、既存の乳化剤の添加量は特に限定されるものではなく、その用途に応じて適宜決めることができる。
【００３８】
本発明の乳化剤の剤型としては、特に限定されず、例えば、溶液、懸濁液、半固体（例えば、ペースト状）、固体（例えば、粉末、顆粒）等であってもよい。
【００３９】
酒粕由来の有効成分は、平均分子量は１０万以上が好ましく、２０万以上がより好ましい。１０万未満の成分では乳化作用が減少する傾向がある。ここで、平均分子量は、例えば、レーザー散乱計、ゲルろ過等の公知の方法により求めることができる。ゲルろ過による方法は、得られた抽出物を、ゲルろ過の担体（Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ  Ｓ−４００、アマシャムバイオサイエンス社製、φ１０ｍｍ×長さ１００ｃｍ）に供し、標準高分子キット（東ソー社製）を用いて分子量検量線により算出することができる。
【００４０】
本発明の乳化物の製造方法は、前記乳化剤と、脂溶性物質を混合する工程を含む。
【００４１】
本発明で用いる脂溶性物質としては、食品や化粧品等で用いられる生理学的に認容されるものであれば特に限定されないが、例えば、コエンザイムＱ１０等の脂溶性薬物；脂溶性ビタミンＡ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、及びそれらの誘導体等のビタミン類；精油（例えば、パイン油、ライム油、ゆず油等）、植物油（例えば、大豆油、菜種油、べに花油、コーン油、ごま油、綿実油、オリーブ油、パーム油、ひまわり油、米油等）、動物油（例えば、牛脂、ラード等）、脂溶性色素（例えば、アナトー、ウコン、ベニコウジ、クロロフィル等）、香料（例えば、オレンジオイル等）、カロチノイド（例えば、カンタキサンチン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、リコピン、アポカロチナール、β−カロチン等）等の油脂等及びこれらを含有するものが挙げられる。当該脂溶性物質は、単独で用いることもできるし、２種以上を併用することもできる。
【００４２】
乳化物には、上述の乳化剤で例示した添加剤をはじめ、顔料、香料、調味料、保存料、増粘剤等の高分子物質、抗菌剤等の種々の成分を含有させることができ、食品、化粧品、入浴剤等を含む工業品としての様々な性能を付与することができる。また、当該乳化物には、水、エタノール等のアルコール類等の溶媒を添加することもできる。
【００４３】
前記乳化剤と脂溶性物質を混合（混和）する方法としては、振とう、撹拌等、両者が十分に接触できる条件となるものであれば特に限定されない。脂溶性物質等の粘性が比較的高いものを速やかにかつ十分に混和するために攪拌することが好ましく、さらに撹拌に際しては、激しく撹拌することが好ましい。このような乳化剤と脂溶性物質との混和方法としては、ワーリングブレンダーやジューサーを用いる方法、ポリトロンホモジナイザーやマントン−ゴーリンホモジナイザーを用いる方法、超音波を利用する方法等、公知の方法が利用できる。
【００４４】
また、脂溶性物質と乳化剤とを接触させ、さらに両者を混和させる条件において、処理温度、処理時間、ｐＨ等も考慮する必要があるが、用いる脂溶性物質の種類や、得られる脂溶性物質を含有する乳化物の用途に応じて、適宜適した条件にて行うことでよい。例えば、混和中に熱が発生することがあるため、耐熱性のあまりない材料を用いる場合には、高温とならないように注意して混和する必要がある。具体的には、食品等への適用や、塗料等のように揮発性を有する溶媒等が含まれる場合への適用には、前者については微生物の繁殖がないように、後者については溶媒が揮発してしまわないように、短時間で実施する必要がある。乳化を行う際のｐＨについては、本発明の乳化剤の場合、特に制限はない。本発明の乳化剤は、ｐＨ７．０以下、好ましくはｐＨ５．０以下、より好ましくはｐＨ３．０以下の酸性域においても好適に用いることができる。また、ｐＨ７．０以上のアルカリ性域においても本発明の乳化剤は好適に用いることができる。
【００４５】
また、脂溶性物質に乳化剤を加える場合、両者を一度に加えた後に混和してもよいが、両者を少量ずつ徐々に加えて混和する、また、片方をもう一方へ徐々に加えて混和する等、あらゆる混和方法を採用できる。
【００４６】
また、本発明の乳化剤を使用して様々な粒径の乳化物を作製することができ、粒径の小さな乳化物だけでなく、大きな乳化物を作製することも可能である。粒径の大きな乳化物は、食感やのど越しの改変など食品の物理的変化が可能なだけでなく、見た目など視覚的変化をもたらすことができるというメリットがある。乳化の条件によって粒径の調整は可能であるが、大きな粒の場合、その粒径は、１μｍ以上であり、好ましくは１０μｍ以上、さらに好ましくは５０μｍ以上である。小さな粒の場合、その粒径は１μｍ以下である。粒径は、乳化物や脂溶性物質の添加量、攪拌条件、温度、ｐＨ等の条件を改変することにより変化させることが可能である。
【００４７】
当該乳化物中の酒粕抽出物の含有量としては、特に限定されないが、上限は、固形分換算で乳化物全体の５０重量％以下が好ましく、１０重量％以下がより好ましい。下限は０．０００１重量％以上が好ましく、０．００１重量％以上がより好ましい。０．０００１重量％未満では、乳化作用が減少し、５０重量％を超えると、混合や操作性に問題を生じる傾向がある。
【００４８】
本発明の乳化剤は、上述のように幅広いｐＨ条件で好適に使用することができ、酸性の食品の乳化に用いることも可能である。そういった食品として、酢酸やクエン酸等の酸性物質を使用した食品が挙げられ、例えば、マヨネーズ等のドレッシング類がある。その他、本発明の乳化剤を使用した乳化物は特に限定されず、コーヒー、紅茶、抹茶、汁粉、ジュース等の嗜好飲料、生乳、加工乳、乳酸菌飲料、豆乳等の乳性飲料、カルシウム強化飲料等の栄養強化飲料並びに食物繊維含有飲料等を含む各種の飲料類、アイスクリーム、アイスミルク、ソフトクリーム、ミルクシェーキ、シャーベット等の氷菓類、バター、チーズ、ヨーグルト、コーヒーホワイトナー、ホイッピングクリーム、カスタードクリーム、プリン等の乳製品類、マヨネーズ、マーガリン、スプレッド、ショートニング等の油脂加工食品類、各種のスープ、シチュー、ソース、タレ、ドレッシング等の調味料類、練りがらしに代表される各種練りスパイス、ジャム、フラワーペーストに代表される各種フィリング、各種のアン、ゼリーを含むゲル・ペースト状食品類、パン、麺、パスタ、ピザ、各種プレミックスを含むシリアル食品類、キャンディー、クッキー、チョコレート、餅等を含む和・洋菓子類、蒲鉾、ハンペン等に代表される水産練り製品、ハム、ソーセージ、ハンバーグ等に代表される畜産製品、クリームコロッケ、中華用アン、グラタン、ギョーザ等の各種の惣菜類、塩辛、カス漬等の珍味類、ペットフード類及び経管流動食や栄養剤類等の食品、乳液、ローション、クリームなどの化粧品、入浴剤、塗料、顔料、インクなどが挙げられる。
【００４９】
乳化物は、特に食品等として使用される場合には、通常、高温での加熱処理を行って滅菌される。本発明の乳化剤は、高温で抽出されたものを有効成分として使用しているので、本発明の乳化剤を使用して得られる乳化物は本質的に熱に強く、高温にさらされても乳化状態を安定に保つことができる。たとえば、１００℃で９０分間処理した場合でも、乳化状態が維持される。
【実施例】
【００５０】
以下に、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００５１】
（実施例１）酒粕からの粗乳化剤の調製
液化仕込み由来の酒粕（酒名：佳撰普通酒、清酒酵母（株名：協会７号））４０ｇに対して蒸留水１６０ｍｌを添加し沸騰水浴中で９０分間抽出を行った。その後、５，０００×ｇ、２０分間の遠心分離を行い、上清を約１５０ｍｌ回収した。また、カットオフ値ＭＷ１００，０００の限外ろ過膜を用いて１５ｍｌまで濃縮し、これを粗乳化剤Ａとした。
【００５２】
実施例１で得られた乳化剤を使用して、以下に示す方法で乳化作用、分子量、気泡力と泡の安定性を測定した。
【００５３】
（１）乳化作用（乳化作用評価物質としてケロセンを使用）
試験管（ＩＷＡＫＩ社製、φ１３ｍｍ×１００ｍｍ）中で、実施例１で調製した粗乳化剤Ａを、ａ）粗乳化剤０．５ｍｌと蒸留水０．５ｍｌ、ｂ）粗乳化剤０．０５ｍｌと蒸留水０．９５ｍｌ、ｃ）粗乳化剤０．００５ｍｌと蒸留水０．９９５ｍｌの各希釈率で希釈し、それぞれに１．０ｍｌのケロセン（和光純薬工業社製）を加えた。最大設定にしたボルテックスミキサー（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製）上で１分間混合した後、常温で２４時間静置した。その後、試験液の液体の全高を１とした場合の乳化部分の高さの比率を測定したところ、ａ）０．６４、ｂ）０．３８、ｃ）０．０２であり、粗乳化剤の割合が高いほど、得られた乳化層の高さも大きくなった。
この結果を表１に示す。
【００５４】
【表１】
0005839316.tif 000002
【００５５】
（２）乳化作用（脂溶性物質としてアスタキサンチンを使用）
アスタキサンチン（２ｍｇ／ｍｌになるようにジメチルスルホキシドに溶解、和光純薬工業社製）１０μｌを、９０μｌの緩衝液Ａ（２０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５））に添加し、そこへ実施例１で調製した粗乳化剤Ａ１００μｌを加え、よく混合した。コントロールとしては同量の蒸留水を用いた。２５℃で２４時間後まで静置して観察したところ、コントロールにおいては、約１時間後からアスタキサンチンの凝集物が析出し始め、２４時間後には全てが沈殿してしまっていた。ところが、粗乳化剤Ａを添加したものでは、２４時間経過した時点においても、全く凝集が見られなかった。さらに、これら粗乳化剤とアスタキサンチンとの混合物を１週間、室温で放置しても、凝集物の析出はみられなかった。
【００５６】
（３）乳化作用物質の分子量測定
実施例１で調製した粗乳化剤Ａを、予め緩衝液Ａ（２０ｍＭトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５））で平衡化した陰イオン交換樹脂であるＤＥＡＥ−ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ６５０Ｍ（東ソー社製）１２５ｍｌを充填したカラム（φ２．５ｃｍ×２５ｃｍ）に負荷し、０から１．０Ｍへの塩化ナトリウムの直線濃度勾配法（総溶出量１５００ｍｌ）で溶出させ、塩化ナトリウム濃度が２００ｍＭ付近で溶出してくる約１０ｍｌの乳化活性画分（乳化作用物質）を回収した。なお、乳化活性は、ケロセンに対する乳化作用で判断した。
【００５７】
この粗精製サンプル１０ｍｌ分をカットオフ値ＭＷ１００，０００の限外ろ過膜を用いて１ｍｌまで濃縮し、これをゲルろ過の担体（ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ−４００、１ｃｍ×１２０ｃｍ）に供し、０．４ｍｌ／ｍｉｎ、分画液量１．５ｍｌで分画したところ、フラクションＮｏ．３２付近に活性ピークが得られた。ＧＰＣシステムＨＬＣ−８３２０（東ソー社製）を用いてこの画分の分子量を測定したところ約２７万であった。
【００５８】
（４）気泡力と泡の安定性の測定
実施例１で得られた、酒粕由来の粗乳化剤Ａを２９７ｍＬの蒸留水に対して３ｍＬ添加し、気泡力と泡の安定性の測定を行った。測定方法はＪＩＳ  Ｋ３３６２に準じて行い、試料および装置の温度は１５℃一定で行った。
【００５９】
（比較例１）酵母菌体からの粗乳化剤の調製
ＹＭ培地（１Ｌ中に酵母エキス３．０ｇ、モルトエキス３．０ｇ、ペプトン５．０ｇ、グルコース１０ｇを含む）を調製し、オートクレーブにより滅菌を行った。その後、このＹＭ培地１００ｍＬに、実施例１で用いた酒粕の製造の際に用いた酵母（清酒酵母）（株名：協会７号）を接種し、３０℃、１００ｒｐｍで１日間培養し、これを前培養液とした。この前培養液１００ｍｌをオートクレーブした７ＬのＹＭ培地に接種し、ジャーファメンター（（株）丸菱バイオエンジ製  ＭＤＮ  １０Ｌ）を用いて、３０℃、１００ｒｐｍ、０．２ｖｖｍの条件下で３日間培養した後、培養液を５，０００×ｇ、２０分間の遠心分離を行い、約５０ｇの酵母菌体を得た。この酵母菌体４０ｇに対して蒸留水１６０ｍｌを添加し沸騰水浴中で９０分間抽出を行った。その後、５，０００×ｇ、２０分間の遠心分離により得られた上清を約１５０ｍｌ回収し、これを粗乳化剤Ｂとした。
【００６０】
得られた粗乳化剤Ｂを用いて、前述したように気泡力と泡の安定性の測定を行った。この結果を、粗乳化剤Ａの結果とともに表２に示す。
【００６１】
【表２】
0005839316.tif 000003
【００６２】
次に、以下のようにして、酒粕由来の、水抽出物とエタノール抽出物の効果を比較した。
【００６３】
（実施例２）酒粕由来の水抽出物
実施例１で使用した酒粕１００ｇに対して、蒸留水４００ｍｌを加えた後、沸騰水浴中で攪拌しながら９０分間抽出を行った。その後、５，０００×ｇ、１５分間の遠心分離を行い、上清を得た。その上清をカットオフ値ＭＷ１００，０００の限外ろ過膜を用いて１０倍濃縮し、濃縮画分１．５ｍｌを遠心濃縮器（株式会社トミー精工製  ＣＣ１０１）で乾固させた後、１．５ｍｌとなるように蒸留水で再度溶解させ、粗乳化剤Ｃとした。
【００６４】
（比較例２）酒粕由来のエタノール抽出物
実施例１で使用した酒粕１００ｇに対して、エタノール４００ｍｌを加えた後、ホモジナイザーで分散後、９０分間室温で抽出し、５，０００×ｇ、１５分間の遠心分離を行い、上清を得た。その上清をカットオフ値ＭＷ１００，０００の限外ろ過膜で濃縮し、濃縮画分１．５ｍｌ、及び、素通り画分１．５ｍｌを遠心濃縮器で乾固させた後、それぞれを１．５ｍｌとなるように蒸留水で再度溶解させ、濃縮画分を粗乳化剤Ｄ、素通り画分を粗乳化剤Ｅとした。
【００６５】
粗乳化剤Ｃ、Ｄ及びＥについて、以下のようにして乳化作用を測定した。粗乳化剤：蒸留水：ケロセン＝１：１：２となるように混合し、実施例１（１）と同様にして乳化作用を測定したところ、粗乳化剤Ｃを使用した場合の乳化部分の高さは０．６８であった。粗乳化剤Ｄ、及び、粗乳化剤Ｅを使用した場合の乳化部分の高さは０であり、まったく乳化作用が認められなかった。
【００６６】
本発明の酒粕由来乳化剤は、酵母由来乳化剤と比べて気泡力が大きく、特に泡の安定性を３倍にする能力を有しており、乳化剤としてきわめて優れていることが判明した。
【００６７】
（実施例３）酒粕からのｐＨ５．２での抽出
実施例１で使用した酒粕１００ｇに対して、蒸留水４００ｍｌを加えた後、家庭用ミキサーで粉砕した。粉砕処理物のｐＨは５．２であった。その後、９５℃で９０分間抽出を行い、５，０００×ｇ、１５分間の遠心分離後、上清を得た。その上清をカットオフ値ＭＷ１００，０００の限外ろ過膜を用いて１０倍濃縮し、凍結乾燥で乾固させた。その凍結乾燥後の重量を測定した。次に、この乾燥固体を０．０４重量％になるように蒸留水に溶解させた１．０ｍｌを用意し、それぞれに１．０ｍｌのケロセン（和光純薬工業社製）を加えた。最大設定にしたボルテックスミキサー（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製）上で１分間混合した後、常温で２４時間静置した。その後、試験液の液体の全高を１とした場合の乳化部分の高さの比率を測定した。
【００６８】
（実施例４）酒粕からのｐＨ７．０での抽出
実施例１で使用した酒粕１００ｇに対して、蒸留水４００ｍｌを加えた後、家庭用ミキサーで粉砕した。５Ｎの水酸化ナトリウム液を用いて粉砕処理物のｐＨをｐＨ７．０に調製した以外は実施例３と同様に抽出を行い、凍結乾燥後の重量、および乳化剤による乳化部分の高さの比率を測定した。
【００６９】
（実施例５）酒粕からのｐＨ８．０での抽出
実施例１で使用した酒粕１００ｇに対して、蒸留水４００ｍｌを加えた後、家庭用ミキサーで粉砕した。５Ｎの水酸化ナトリウム液を用いて粉砕処理物のｐＨをｐＨ８．０に調製した以外は実施例３と同様に抽出を行い、凍結乾燥後の重量、および乳化剤による乳化部分の高さの比率を測定した。
【００７０】
（実施例６）酒粕からのｐＨ９．０での抽出
実施例１で使用した酒粕１００ｇに対して、蒸留水４００ｍｌを加えた後、家庭用ミキサーで粉砕した。５Ｎの水酸化ナトリウム液を用いて粉砕処理物のｐＨをｐＨ９．０に調製した以外は実施例３と同様に抽出を行い、凍結乾燥後の重量、および乳化剤による乳化部分の高さの比率を測定した。
【００７１】
実施例３〜６における、抽出物の凍結乾燥後の重量及び乳化部分の高さの測定結果を表３に示す。
【００７２】
【表３】
0005839316.tif 000004
【００７３】
上記の結果から、酒粕から乳化剤を抽出する際に、中性域からアルカリ性域での抽出が抽出効率や乳化特性の点で有効であることが判明した。
【００７４】
（実施例７）酒粕由来乳化剤を使用した酸性条件の乳化物
実施例６でｐＨ９．０の条件で調製した酒粕由来乳化剤を用いて、酸性環境下での各種油（ケロセン、菜種油、コーン油、米油）における乳化効果の違いを測定した。各種乳化剤は１．０重量％になるようにｐＨ９．０、ｐＨ７．０、ｐＨ３．５、ｐＨ２．０の蒸留水に溶解させ、その１．０ｍｌに対し１．０ｍｌの各種油を加えた。最大設定にしたボルテックスミキサー（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製）上で１分間混合した後、常温で２４時間静置した。その後、試験液の液体の全高を１とした場合の乳化部分の高さの比率を測定した。
【００７５】
（比較例３）大豆レシチンを使用した酸性条件の乳化物
乳化剤として、大豆レシチン（ＳＬＰ：ホワイト辻製油）を使用した以外は実施例７と同様にして乳化部分の高さの比率を測定した。
【００７６】
（比較例４）ショ糖脂肪酸エステルを使用した酸性条件の乳化物
乳化剤として、ショ糖脂肪酸エステル（リョートーシュガーエステルＳ−１１７０：三菱化学フーズ）を使用した以外は実施例７と同様にして乳化部分の高さの比率を測定した。
【００７７】
実施例７及び比較例３〜４における、乳化部分の高さの測定結果を表４に示す。
【００７８】
【表４】
0005839316.tif 000005
×＝乳化不可能
【００７９】
上記の結果から、本発明の酒粕乳化剤は幅広いｐＨでの乳化が可能であることが判明した。
【００８０】
（実施例８）酒粕乳化剤による乳化物の粒度径
実施例６でｐＨ９．０の条件で調製した酒粕由来乳化剤を蒸留水で溶解後、糖濃度を測定し糖濃度１０ｍｇ／ｍｌの溶液を調製した。この溶液１．０ｍｌに１．０ｍｌのケロセン（和光純薬工業社製）を加え、最大設定にしたボルテックスミキサー（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ社製）上で１分間混合した後、常温で２４時間静置した後、その粒径を光学顕微鏡で確認した。その結果を図１Ａに示す。
【００８１】
（比較例５）グリセリン脂肪酸エステルによる乳化物の粒度径
乳化剤として市販乳化剤であるグリセリン脂肪酸エステル（パンテック２００：理研ビタミン）の糖濃度１０ｍｇ／ｍｌの溶液を調製し、使用した以外は、実施例８と同様にして、光学顕微鏡で確認した。その結果を図１Ｂに示す。
【００８２】
酒粕乳化剤で乳化した粒子は、グリセリン脂肪酸エステルで乳化した粒子に比べ、大きな粒子を形成、保持していることが判明した。その他、比較例３〜４で使用した大豆レシチン、ショ糖脂肪酸エステルでは、酒粕乳化剤並みの大きさの安定した乳化物は作製できなかった。このことから、酒粕乳化剤では、市販の乳化剤にはない、大きな粒子径の乳化物が作製でき、保持する効果があることが判明した。
【００８３】
（実施例９）酒粕由来乳化剤の植物油に対する乳化性
実施例６でｐＨ９．０の条件で調製した酒粕由来乳化剤を用いて、中性および酸性環境下での各種植物油（コーン油、大豆油、米油、菜種油、ベニ花油、オリーブ油、ゴマ油）における乳化効果の違いを測定した。乳化剤は３．０重量％になるようにｐＨ７．０のクエン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ２．０のクエン酸水溶液に溶解させ、その１．０ｍｌに対し４．０ｍｌの各種植物油を加えた。ポリトロンホモジナイザー（ＫＩＮＥＭＡＴＩＣＡ  ＰＴ１０／３５、ＫＩＮＥＭＡＴＩＣＡ社製）を用いて１３,０００ｒｐｍ、９０秒間撹拌し、３７℃で２４時間静置後、乳化の様子を観察した。
【００８４】
（比較例６）大豆レシチンの植物油に対する乳化性
乳化剤として、大豆レシチン（ＳＬＰ：ホワイト辻製油）を使用した以外は実施例９と同様にして乳化の様子を観察した。
【００８５】
（比較例７）ポリグリセリン脂肪酸エステルの植物油に対する乳化性
乳化剤として、ポリグリセリン脂肪酸エステル（ポエムＪ−００８１ＨＶ：理研ビタミン）を使用した以外は実施例９と同様にして乳化の様子を観察した。
【００８６】
実施例９及び比較例６〜７の結果を表５に示す。乳化したものは○、乳化しなかったものは×とした。乳化の有無は２４時間静置後に乳化層が形成されるか否かにより判断した。
【００８７】
【表５】
0005839316.tif 000006
【００８８】
酒粕乳化剤は、中性でも酸性域においても、ゴマ油以外の各種植物油を半固形状（マヨネーズ状）に乳化する事が出来た。それに対し、合成乳化剤のポリグリセリンエステルで半固形状に乳化できたのはごく一部であり、大豆レシチンでは、全く乳化できなかった。
【００８９】
（用途例１）酒粕乳化剤を用いたマヨネーズ様調味料の作製
実施例６でｐＨ９．０の条件で調製した酒粕由来乳化剤１．０ｇ、大豆油２４ｍｌ、米酢３．０ｍｌ、水３．０ｍｌをポリトロンホモジナイザー（ＫＩＮＥＭＡＴＩＣＡ  ＰＴ１０／３５、ＫＩＮＥＭＡＴＩＣＡ社製）で混合しマヨネーズ様調味料を作製したところ、マヨネーズ様の乳化物が作製可能であった。同様にして市販大豆レシチンを用いたが、これでは良好なマヨネーズ様調味料は作製できなかった。また、この調味料を−３０℃で２日間及び７日間冷凍保存し、３０℃で解凍したところ、冷凍前とまったく変化無く、乳化状態も良好であった。一方、市販マヨネーズ（キューピー社製）は乳化が壊れ、油と水が分離していた。これにより、本発明の酒粕乳化剤はマヨネーズなどへの製造に利用可能であることが判明した。
【００９０】
（用途例２）酒粕乳化剤を用いたアイスクリームの作製
実施例６でｐＨ９．０の条件で調製した酒粕由来乳化剤を蒸留水に１．０重量％で溶解した溶液６０ｍｌに６０ｇの砂糖を懸濁させ、沸騰させた６００ｍｌの牛乳に加え混合した。なお、コントロールは酒粕乳化剤液の代わりに蒸留水を用いた。木ヘラで混ぜながら加温し、沸騰後にボウルに移して氷水上で木ヘラで混ぜ合わせながら冷却した。この混合液をアイスクリーム製造機（ハイパートロンミニＨＴＦ−３：エフ・エム・アイ社製）にかけ、目視、食感、及び光学顕微鏡による粒径の評価を行った。その結果、コントロールはシャーベット上で食感はざらざら、気泡の粒径も大きいものが大半であった。それに対し、酒粕乳化剤を使用したものは、滑らかなアイスクリーム状の食感で、気泡の粒径が細かいことが判明した。これにより、本発明の酒粕乳化剤はアイスクリーム製造に利用可能であることが判明した。
【００９１】
（用途例３）酒粕乳化剤を用いたカスタードクリームの作製
薄力粉を大さじ２杯、砂糖４０ｇに少量の牛乳を添加してよく混和する。そこに実施例６でｐＨ９．０の条件で調製した酒粕由来乳化剤を蒸留水に１．０重量％で溶解した溶液２０ｍｌと牛乳約１カップ分を加えて混合し、電子レンジで２分間加熱した。その後、よく混合して、さらに電子レンジで１分３０秒加熱、この操作を２回繰り返した。そこに１５ｇのバターを加えて混合し、室温で冷却し、冷却後に数滴のバニラエッセンスを加えた。見た目や食感は滑らかで、味の良いカスタードクリームが本発明の酒粕乳化剤で製造できることが確認できた。
【産業上の利用可能性】
【００９２】
本発明の乳化剤は、食経験のある酒粕から製造するので、安価で安全性が高く、さらに単独で高い乳化性、耐熱安定性及び長時間の安定性を示す。食品廃棄物である酒粕の有効利用法として、産業上での貢献は非常に大きいものである。
【図１】
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