(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化７６】
0006023097.tif 000093
の化合物またはその塩もしくは溶媒和物であって、式中、
Ｌは、メチルで最大で４回置換されていてもよい、直鎖状（Ｃ１〜Ｃ１２）−アルカンジイルであり、かつ
Ｔは、式：
【化７７】
0006023097.tif 000094
の基であり、式中、
＊は窒素原子との結合部位であり、
Ｒ１はフェニルまたは１Ｈ−インドール−３−イルであり、
Ｒ２は水素または式：
【化７８】
0006023097.tif 000095
の基であり、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基とのそれぞれの結合部位であり、
Ａは直鎖状（Ｃ２〜Ｃ４）−アルケンジイルであり、
Ｒ３は任意選択で（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されているフェニルであり、
ｎは１または２の数であり、
Ｒ４は、ベンジルまたは２−フェニルエチルであり、
Ｈｅｔは、Ｎ、Ｏおよび／またはＳのシリーズからの最大で３個の環ヘテロ原子を有する二価５員ヘテロアリール環であり、かつ
Ｒ５は、フェニルである、
化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｌが、直鎖状（Ｃ１〜Ｃ８）−アルカンジイルであり、かつ
Ｔが、式：
【化７９】
0006023097.tif 000096
の基であり、式中、
＊は窒素原子との結合部位であり、
Ｒ１はフェニルまたは１Ｈ−インドール−３−イルであり、かつ
Ｒ２は水素または式：
【化８０】
0006023097.tif 000097
の基であり、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基との結合部位であり、
Ａはエテン−１，２−ジイルまたはプロペン−１，３−ジイルであり、
Ｒ３は任意選択で（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されているフェニルであり、
Ｈｅｔはピラゾリル、イミダゾリル、１，３−オキサゾリル、１，３−チアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリルおよび１，３，４−オキサジアゾリルのシリーズから選択される二価５員ヘテロアリール環であり、かつ
Ｒ５はフェニルである、
請求項１に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項３】
Ｌが直鎖状（Ｃ１〜Ｃ６）−アルカンジイルであり、かつ
Ｔが、式：
【化８１】
0006023097.tif 000098
の基であり、式中、
＊は窒素原子との結合部位であり、かつ
Ｒ２は水素または式：
【化８２】
0006023097.tif 000099
の基であり、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基との結合部位であり、
Ａはエテン−１，２−ジイルであり、
Ｒ３は任意選択でメトキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されているフェニルであり、
Ｈｅｔは１，３，４−オキサジアゾール−２，５−イルであり、かつ
Ｒ５はフェニルである、
請求項１または２に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を調製するための方法であって、前記方法は：
式（ＩＩ）の化合物：
【化８３】
0006023097.tif 000100
（式中、Ｔは、請求項１から３のいずれか一項で示した意味を有する）
を提供する工程、ならびに
［Ａ］不活性溶媒中の式（ＩＩ）の化合物を、塩基誘発アルキル化によって、式（ＩＩＩ）の化合物：
【化８４】
0006023097.tif 000101
（式中、Ｌは請求項１から３のいずれか一項で示した意味を有し、
Ｅ１は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルであり、かつ
Ｘはクロリド、ブロミド、ヨージド、メシレート、トリフレートおよびトシレートからなる群より選択される離脱基である）
と反応させて式（ＩＶ）の化合物：
【化８５】
0006023097.tif 000102
（式中、ＬおよびＴは、請求項１から３のいずれか一項で示した意味を有し、かつＥ１は、水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルである）を形成する工程であって、ここで、Ｅ１が（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルである場合、エステル基は除去され、それによって、式（ＩＩＩ）のＥ１において水素を生じ、それにより式（Ｉ）のカルボン酸を生成する、工程、あるいは
［Ｂ］不活性溶媒中の式（ＩＩ）の化合物を、適切な還元剤の存在下で式（Ｖ）の化合物：
【化８７】
0006023097.tif 000103
（式中、Ｅ１は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルであり、かつ
ＬＡは請求項１から３のいずれか一項で示したＬの意味を有するが、アルキル鎖長において１つのＣＨ２単位だけ短縮されている）
と反応させて式（ＶＩ）の化合物：
【化８８】
0006023097.tif 000104
（式中、Ｔは、請求項１から３のいずれか一項で示した意味を有し、
Ｅ１は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルであり、かつ
ＬＡは、請求項１から３のいずれか一項で示したＬの意味を有するが、アルキル鎖長において１つのＣＨ２単位だけ短縮されている）を生成する工程であって、ここでＥ１が（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルである場合、エステル基は除去され、それによって、式（Ｖ）および（ＶＩ）のＥ１において水素を生じ、それにより式（Ｉ−Ａ）のカルボン酸：
【化８９】
0006023097.tif 000105
（式中、Ｔは、請求項１から３のいずれか一項で示した意味を有し、かつ
ＬＡは、請求項１から３のいずれか一項で示したＬの意味を有するが、アルキル鎖長において１つのＣＨ２単位だけ短縮されている）
を生成する、工程
を包含する、方法。
【請求項５】
疾患の治療および／または予防のための、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物を含む組成物。
【請求項６】
がんおよび腫瘍状態の治療および／または予防の方法において使用するための、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物を含む組成物。
【請求項７】
がんおよび腫瘍状態の治療および／または予防のための医薬品を調製するための、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項８】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を含み、かつ１つまたは複数の不活性で非毒性の薬学的に適切な賦形剤をさらに含む、医薬組成物。
【請求項９】
１つまたは複数の追加の活性成分をさらに含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
がんおよび腫瘍状態の治療および／または予防のための、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
活性量の請求項１から３のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物または請求項８から１０のいずれか一項に記載の医薬組成物を含む、ヒトおよび動物におけるがんおよび腫瘍状態の治療および／または予防のための組成物。
【請求項１２】
以下：
【化９０】
0006023097.tif 000106
【化９１】
0006023097.tif 000107
【化９２】
0006023097.tif 000108
【化９３】
0006023097.tif 000109
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項１３】
抗増殖結合体であって、請求項１に記載の化合物がタンパク質に接続されている、抗増殖結合体。
【請求項１４】
前記タンパク質が抗体である、請求項１３に記載の抗増殖結合体。
【請求項１５】
抗増殖結合体であって、請求項１２に記載の化合物がタンパク質に接続されている、抗増殖結合体。
【請求項１６】
前記タンパク質が抗体である、請求項１５に記載の抗増殖結合体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本特許出願は、Ｎ末端上でカルボキシアルキル基によって置換されたモノメチルオーリスタチンＥおよびモノメチルオーリスタチンＦの新規な誘導体、これらの誘導体の合成方法、疾患、特に例えば様々な形態のがんなどの過剰増殖性および／または血管新生疾患の治療および／または予防のためのこれらの誘導体の使用ならびに疾患の治療および／または予防用の医薬品の製造のためのこれらの誘導体の使用に関する。そうした治療は、単剤療法の形態であっても、他の薬物または他の治療手段との併用であってもよい。
【背景技術】
【０００２】
がんは、様々な組織の制御されていない細胞成長の結果である。多くの場合、新規細胞は既存組織中へ成長する（侵襲性成長）、または遠位の臓器へ転移する。がんは様々な臓器中で発生し、その病理はしばしば組織特異的な過程を有する。したがってがんという用語は、種々の臓器、組織および細胞型の特定の疾患の大きなグループを記載する総称である。
【０００３】
場合によっては、初期段階の腫瘍は、外科的手段および放射線療法手段によって除去することができる。転移性腫瘍は通常化学療法剤によって待機的にしか治療されない可能性がある。ここでの目標は、延命と生活の質の改善の最適な組合せを見出すことである。
【０００４】
今日非経口的に投与される大部分の化学療法剤は、標的とする仕方で腫瘍組織または腫瘍細胞に分配されず、その代わり、全身投与により患者の身体全体に、すなわち、その薬物への暴露が、例えば健常な細胞、組織および臓器中などのしばしば望ましくない部位で非特異的に分配される。これは、しばしば治療上使用可能な投薬範囲を著しく制限する、または薬物適用の完全な中止を必要とする有害作用をもたらし、さらには重篤な全身毒性作用をもたらす恐れがある。
【０００５】
したがって、腫瘍細胞またはそのすぐ周辺の組織におけるこれらの化学療法剤の改善されかつ選択的な有効性、および一方でのそれに付随する効果の増大、他方での中毒性副作用の最小化は、長年、新規な化学療法薬の開発における研究の焦点であった。これまで、標的細胞中に薬物を導入するための効果的な方法を開発しようとする多くの試みがなされてきた。しかし、薬物と細胞内標的との間の結合を最適化し、例えば隣接細胞へのその薬物の細胞間分布を最少化することは依然として困難な課題である。
【０００６】
例えばモノクローナル抗体は、腫瘍組織および腫瘍細胞の標的化アドレッシングに適している。がんの臨床処置のためのそうした抗体の重要性は、個々の特定の腫瘍状態の治療のために、その間に承認されてきたトラスツズマブ（ハーセプチン（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ））、リツキシマブ（リツキサン（Ｒｉｔｕｘａｎ））、セツキシマブ（エルビタックス（Ｅｒｂｉｔｕｘ））およびベバシズマブ（アバスチン（Ａｖａｓｔｉｎ））のような薬剤の効能に基づいて近年著しく増大してきている（例えば非特許文献１を参照されたい）。結果として、腫瘍関連抗原を対象とする内在化抗体が連結単位（「リンカー」）によって細胞毒性剤と共有結合したいわゆる免疫結合体への関心が大幅に増大してきている。腫瘍細胞中にその結合体を導入し、次いでそれを分割した後、細胞毒性剤は腫瘍細胞内で放出され、ここでその効果を直接的かつ選択的に発現することができる。この仕方で、正常な組織への損傷を、がんのための従来の化学療法と比較して著しく狭い範囲内に保持することができる（例えば、非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５を参照されたい）。
【０００７】
抗体の代わりに、小薬物分子の分野からのバインダーを、例えば受容体などの特定の「標的」と選択的に結合するバインダーとして使用することができる（例えば、Ｅ．Ｒｕｏｓｌａｈｔｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２７９巻、３７７〜３８０頁（１９９８年）；Ｄ．Ｋａｒｋａｎら、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ３巻（６号）、ｅ２４６９（２００８年６月２５日）を参照されたい）。細胞毒性薬と、リガンドとその薬物の間に薬物の放出のための規定切断部位を有するアドレッシングリガンドとの結合体も公知である。１つのそうした「意図的な破壊点（Ｓｏｌｌ−Ｂｒｕｃｈｓｔｅｌｌｅ）」は、例えば作用部位で特定の酵素によって、特定の部位で選択的に切断できるペプチド鎖からなっていてよい（例えば、Ｒ．Ａ．Ｆｉｒｅｓｔｏｎｅ  ａｎｄ  Ｌ．Ａ．Ｔｅｌａｎ、特許文献１を参照されたい）。
【０００８】
オーリスタチンＥ（ＡＥ）およびモノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）は、元々海洋の供給源から単離されたものであり、その一部は腫瘍細胞に対して非常に強力な細胞傷害活性を有する直鎖状疑似ペプチドの特別な群であるドラスタチンの合成類縁体である（概観には、例えば、Ｇ．Ｒ．Ｐｅｔｔｉｔ、Ｐｒｏｇ．Ｃｈｅｍ．Ｏｒｇ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．７０巻、１〜７９頁（１９９７年）；Ｇ．Ｒ．Ｐｅｔｔｉｔら、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  １０巻、５２９〜５４４頁（１９９５年）；Ｇ．Ｒ．Ｐｅｔｔｉｔら、Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  １３巻、２４３〜２７７頁（１９９８年）を参照されたい）。
【０００９】
【化１】
0006023097.tif 000002
しかし、ＭＭＡＥは、比較的高い全身毒性という欠点を有する。さらに、抗体−薬物結合体（免疫結合体）の形態で使用する場合、この化合物は、酵素的に切断可能であり、意図された破壊点をまったくもたない抗体と活性成分／薬物との間の連結単位（リンカー）と適合しない（Ｓ．Ｏ．Ｄｏｒｏｎｉｍａら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１７巻、１１４〜１２４頁（２００６年））。
【００１０】
モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）は、ＭＭＡＥと比較して中程度の抗増殖効果しかもたない、Ｃ末端フェニルアラニン単位を有するオーリスタチン誘導体である。これは、その極性および電荷に起因してこの化合物の細胞の生存に対して負の効果をもつ遊離カルボキシル基のせいである可能性が非常に高い。この文脈で、ＭＭＡＦのメチルエステル（ＭＭＡＦ−ＯＭｅ）は、中性電荷を有し細胞膜を通過できるプロドラッグ誘導体として記載されており；これはまた、種々の癌腫細胞系に関してＭＭＡＦと比較して、数桁大きいインビトロでの高い細胞毒性も有している（Ｓ．Ｏ．Ｄｏｒｏｎｉｎａら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１７巻、１１４〜１２４頁（２００６年））。この効果は、プロドラッグが細胞中に取り込まれた後の細胞内エステル加水分解によってすばやく放出されるＭＭＡＦ自体によって引き起こされると考えられ得る。
【００１１】
【化２】
0006023097.tif 000003
しかし、単純なエステル誘導体をもとにした薬物化合物は一般に、作用の目標部位とは独立した非特異的なエステル加水分解に起因する、例えば血漿中に存在するエステラーゼに起因する化学的不安定性のリスクがある。これは、治療におけるそうした化合物の有用性を著しく限定する可能性がある。さらに、ＭＭＡＥおよびＭＭＡＦなどのオーリスタチン誘導体は、腫瘍細胞によって発現され、これらの活性成分に対する耐性の増進をもたらす可能性がある輸送タンパク質のための基質でもある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００２／０１４７１３８号明細書
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Ｇ．Ｐ．ＡｄａｍｓおよびＬ．Ｍ．Ｗｅｉｎｅｒ、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２００５年）２３巻、１１４７〜１１５７頁
【非特許文献２】Ｊ．Ｍ．Ｌａｍｂｅｒｔ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．（２００５年）５巻、５４３〜５４９頁
【非特許文献３】Ａ．Ｍ．ＷｕおよびＰ．Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２００５年）２３巻、１１３７〜１１４６頁
【非特許文献４】Ｐ．Ｄ．Ｓｅｎｔｅｒ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．（２００９年）１３巻、２３５〜２４４頁
【非特許文献５】Ｌ．ＤｕｃｒｙおよびＢ．Ｓｔｕｍｐ、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．（２０１０年）２１巻、５〜１３頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
したがって、本発明の目的は、これらのオーリスタチン化合物が、中程度の効能しかもたず、かつ／または輸送タンパク質に対してそれほどでもない基質特性しかもたないモノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）と比較して、全細胞アッセイにおいて、より強い細胞傷害活性を有するような特にがんの治療のための新規なオーリスタチン化合物を特定し、それらを供給することであった。そうした物質は、特に抗体などのタンパク質または低分子リガンドと結合して抗増殖効果を有する（免疫）結合体を形成するための坦毒体としても特に適している可能性がある。
【００１５】
モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）ならびにその種々のエステルおよびアミド誘導体はＷＯ２００５／０８１７１１Ａ２に開示されている。Ｃ末端アミド置換フェニルアラニン単位を有する追加的なオーリスタチン類似体はＷＯ０１／１８０３２Ａ２に記載されている。フェニルアラニンの側鎖の改変を含むＭＭＡＦ類似体はＷＯ０２／０８８１７２Ａ２およびＷＯ２００７／００８６０３Ａ１において特許請求されており、ＷＯ２００７／００８８４８Ａ２はフェニルアラニンのカルボキシル基が改変されているものを記載している。Ｎ−またはＣ−末端を介して結合している追加的なオーリスタチン結合体は、ＷＯ２００９／１１７５３１Ａ１に記載されている（Ｓ．Ｏ．Ｄｏｒｏｎｉｎａら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．１９巻、１９６０〜１９６３頁（２００８年）も参照されたい）。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の主題は一般式（Ｉ）：
【００１７】
【化３】
0006023097.tif 000004
の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、およびその塩の溶媒和物であり、式中、
Ｌは、メチルで最大で４回置換されていてよく、かつその中で（ａ）２個の炭素原子が互いに１，２−、１，３−もしくは１，４−の関係で、任意選択でそれらの間に炭素原子を含むことによって橋掛けされて（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル環またはフェニル環を形成していてよい、あるいは（ｂ）互いに近接していない最大で３つのＣＨ２基が−Ｏ−で置き換えられていてよい直鎖状（Ｃ１〜Ｃ１２）−アルカンジイルを表し、かつ
Ｔは、式：
【００１８】
【化４】
0006023097.tif 000005
の基を表し、式中、
＊は窒素原子との結合部位を示し、
Ｒ１はフェニルまたは１Ｈ−インドール−３−イルを表し、かつ
Ｒ２は水素または式：
【００１９】
【化５】
0006023097.tif 000006
の基を表し、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基とのそれぞれの結合部位を示し、
Ａは直鎖状（Ｃ１〜Ｃ４）−アルカンジイルまたは直鎖状（Ｃ２〜Ｃ４）−アルケンジイルを表し、
Ｒ３は（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを表し、
ｎは０、１または２の数を表し、
Ｒ４は、フェニル基において（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニル、ベンジルまたは２−フェニルエチルを表し、
Ｈｅｔは、Ｎ、Ｏおよび／またはＳのシリーズからの最大で３個の環ヘテロ原子を有する二価５員ヘテロアリール環を表し、かつ
Ｒ５は、フェニルで置換されていてよい（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル、フェニルまたは（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルを表し、ここで、上記フェニル基は、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよい。
【００２０】
本発明の化合物は、式（Ｉ）によって網羅され以下に挙げられる化合物がすでに塩および溶媒和物ならびにその塩の溶媒和物でない限りにおいて、式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物ならびにその塩の溶媒和物、式（Ｉ）によって網羅される以下に与えられる式の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物ならびにその塩の溶媒和物、ならびに式（Ｉ）によって網羅され以下に例示的実施形態として参照される化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物ならびにその塩の溶媒和物を含む。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
式（Ｉ）：
【化７６】
0006023097.tif 000007
の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、および上記塩の溶媒和物であって、式中、
Ｌは、メチルで最大で４回置換されていてよく、かつその中で（ａ）２個の炭素原子が互いに１，２−、１，３−もしくは１，４−の関係で、任意選択でそれらの間に炭素原子を含むことによって橋掛けされて（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル環またはフェニル環を形成していてよい、あるいは（ｂ）互いに近接していない最大で３つのＣＨ２基が−Ｏ−で置き換えられていてよい直鎖状（Ｃ１〜Ｃ１２）−アルカンジイルを表し、かつ
Ｔは、式：
【化７７】
0006023097.tif 000008
の基を表し、式中、
＊は窒素原子との結合部位を示し、
Ｒ１はフェニルまたは１Ｈ−インドール−３−イルを表し、
Ｒ２は水素または式：
【化７８】
0006023097.tif 000009
の基を表し、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基とのそれぞれの結合部位を示し、
Ａは直鎖状（Ｃ１〜Ｃ４）−アルカンジイルまたは直鎖状（Ｃ２〜Ｃ４）−アルケンジイルを表し、
Ｒ３は（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを表し、
ｎは０、１または２の数を表し、
Ｒ４は、フェニル基において（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニル、ベンジルまたは２−フェニルエチルを表し、
Ｈｅｔは、Ｎ、Ｏおよび／またはＳのシリーズからの最大で３個の環ヘテロ原子を有する二価５員ヘテロアリール環を表し、かつ
Ｒ５は、フェニルで置換されていてよい（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキル、フェニルまたは（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルを表し、ここで、上記フェニル基は、次に（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよい、
化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、および上記塩の溶媒和物。
（項目２）
Ｌが、（ａ）２個の炭素原子が互いに１，３−もしくは１，４−の関係で、それらの間に炭素原子の１個もしくは２個を含むことによって橋掛けされてフェニル環を形成していてよい、あるいは（ｂ）互いに近接していない最大で２つのＣＨ２基が−Ｏ−で置き換えられていてよい直鎖状（Ｃ１〜Ｃ８）−アルカンジイルを表し、かつ
Ｔが、式：
【化７９】
0006023097.tif 000010
の基を表し、式中、
＊は窒素原子との結合部位を示し、
Ｒ１はフェニルまたは１Ｈ−インドール−３−イルを示し、かつ
Ｒ２は水素または式：
【化８０】
0006023097.tif 000011
の基を示し、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基との結合部位を示し、
Ａはエテン−１，２−ジイルまたはプロペン−１，３−ジイルを示し、
Ｒ３は（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを表し、
Ｈｅｔはピラゾリル、イミダゾリル、１，３−オキサゾリル、１，３−チアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリルおよび１，３，４−オキサジアゾリルのシリーズから選択される二価５員ヘテロアリール環であり、かつ
Ｒ５は（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを表す、
項目に１記載の式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、および上記塩の溶媒和物。
（項目３）
Ｌが直鎖状（Ｃ１〜Ｃ６）−アルカンジイルを表し、かつ
Ｔが、式：
【化８１】
0006023097.tif 000012
の基を表し、式中、
＊は窒素原子との結合部位を示し、かつ
Ｒ２は水素または式：
【化８２】
0006023097.tif 000013
の基を示し、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基との結合部位を示し、
Ａはエテン−１，２−ジイルを示し、
Ｒ３はメトキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを示し、
Ｈｅｔは１，３，４−オキサジアゾール−２，５−イルであり、かつ
Ｒ５はメトキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルである、
項目１または２に記載の式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、および上記塩の溶媒和物。
（項目４）
項目１から３に記載の式（Ｉ）の化合物を調製するための方法であって、
式（ＩＩ）の化合物：
【化８３】
0006023097.tif 000014
（式中、Ｔは上述した意味を有する）
を不活性溶媒中で、以下
［Ａ］塩基誘発アルキル化によって、式（ＩＩＩ）の化合物：
【化８４】
0006023097.tif 000015
（式中、Ｌは項目１から３で示した意味を有し、
Ｅ１は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表し、かつ
Ｘはクロリド、ブロミド、ヨージド、メシレート、トリフレートまたはトシレートなどの離脱基を表す）
と反応させて式（ＩＶ）の化合物：
【化８５】
0006023097.tif 000016
（式中、Ｅ１、ＬおよびＴは上述した意味を有する）
を形成し、次いでＥ１が（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表す場合、このエステル基を従来の方法で分割し、それによって、式（ＩＩＩ）のＥ１が水素を表す場合のような式（Ｉ）のカルボン酸
【化８６】
0006023097.tif 000017
（式中、ＬおよびＴは上述した意味を有する）
を得るか、あるいは、
［Ｂ］適切な還元剤の存在下で式（Ｖ）の化合物：
【化８７】
0006023097.tif 000018
（式中、Ｅ１は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表し、かつ
ＬＡは項目１から３で示したＬの意味を有するが、アルキル鎖長において１つのＣＨ２単位だけ短縮されている）
と反応させて式（ＶＩ）の化合物：
【化８８】
0006023097.tif 000019
（式中、Ｅ１、ＬＡおよびＴは上述した意味を有する）
に転換させ、次いでＥ１が（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表す場合、このエステル基を従来の方法で分割し、それによって、式（Ｖ）のＥ１が水素を表す場合のような式（Ｉ−Ａ）のカルボン酸：
【化８９】
0006023097.tif 000020
（式中、ＬＡおよびＴは上述した意味を有する）
を得、
得られた式（Ｉ）および／または（Ｉ−Ａ）の化合物を任意選択でそれらの鏡像異性体および／またはジアステレオマーに分離する、かつ／または対応する（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基または酸と反応させてそれらの溶媒和物、塩および／または上記塩の溶媒和物を形成させることを特徴とする、方法。
（項目５）
疾患の治療および／または予防のための、項目１から３に記載の化合物。
（項目６）
がんおよび腫瘍状態の治療および／または予防の方法において使用するための、項目１から３に記載の化合物。
（項目７）
がんおよび腫瘍状態の治療および／または予防のための医薬品を調製するための、項目１から３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
（項目８）
１つまたは複数の不活性で非毒性の薬学的に適切な賦形剤と組み合わせて、項目１から３のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬品。
（項目９）
１つまたは複数の追加の活性成分と組み合わせて、項目１から３のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬品。
（項目１０）
がんおよび腫瘍状態の治療および／または予防のための、項目８または９に記載の医薬品。
（項目１１）
活性量の項目１から３のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物または項目８から１０のいずれか一項に記載の医薬品を用いる、ヒトおよび動物におけるがんおよび腫瘍状態の治療および／または予防のための方法。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明による化合物は、その構造に応じて異なる立体異性形態、すなわち立体配置異性体の形態で、また任意選択で配座異性体（アトロプ異性体のものを含む鏡像異性体および／またはジアステレオマー）としても存在することができる。したがって、本発明は、鏡像異性体およびジアステレオマーならびにそれらのそれぞれの混合物を含む。立体異性体的に均一な構成成分を、そうした鏡像異性体および／またはジアステレオマーの混合物から公知の方法で単離することができる。この目的のためには、クロマトグラフ法、特にキラルまたはアキラル相でのＨＰＬＣクロマトグラフィーを用いることが好ましい。
【００２２】
本発明による化合物が互変異性形態で存在可能である場合、本発明はすべての互変異性形態も含む。
【００２３】
本発明の範囲内で、好ましい塩は、本発明による化合物の生理学的に安全な塩である。これは、それ自体は薬学的適用に適していないが、例えば本発明による化合物を単離するまたは精製するのに使用できる塩も含む。
【００２４】
本発明による化合物の生理学的に安全な塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００２５】
本発明による化合物の生理学的に安全な塩には、好ましくは、例えばアルカリ金属塩（例えば、ナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類塩（例えば、カルシウムおよびマグネシウム塩）などの従来の塩基の塩、ならびにアンモニア、または好ましくは、例えばエチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジメチルアミノエタノール、ジエチルアミノエタノール、プロカイン、ジシクロヘキシルアミン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リシンおよび１，２−エチレンジアミンなどの１〜１６個の炭素原子を有する有機アミンから誘導されるアンモニウム塩も含まれる。
【００２６】
本発明の範囲内で、溶媒和物は、溶媒分子と配位することによって固体または液体状態の錯体を形成している本発明による化合物の形態を指す。水和物は、分子が水と配位している溶媒和物の特殊な形態である。水和物は、本発明の範囲内で、好ましい溶媒和物である。
【００２７】
さらに、本発明は、本発明による化合物のプロドラッグも含む。「プロドラッグ」という用語は本明細書では、それ自体生物学的に活性であっても不活性であってもよいが、体内に存在する間に本発明による化合物に転換される（例えば、代謝的または加水分解的に）化合物を指す。
【００２８】
本発明の範囲内で、別段の指定のない限り、置換基は以下の意味を有する：
（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルは、本発明の範囲内で、１〜４個の炭素原子を有する直鎖状または分岐状アルキル基を表す。以下のもの、好ましくは例えば：メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルを挙げることができる。
【００２９】
（Ｃ１〜Ｃ１２）−アルカンジイル、（Ｃ１〜Ｃ８）−アルカンジイルおよび（Ｃ１〜Ｃ６）−アルカンジイルは、本発明の範囲内で、１〜１２個、１〜８個または１〜６個の炭素原子を有する直鎖状α，ω−二価アルキル基を表す。１〜８個、特に好ましくは１〜６個の炭素原子を有する直鎖状アルカンジイル基が好ましい。以下のもの、好ましくは例えば：メチレン、エタン−１，２−ジイル（１，２−エチレン）、プロパン−１，３−ジイル（１，３−プロピレン）、ブタン−１，４−ジイル（１，４−ブチレン）、ペンタン−１，５−ジイル（１，５−ペンチレン）、ヘキサン−１，６−ジイル（１，６−ヘキシレン）、ヘプタン−１，７−ジイル（１，７−ヘキシレン）、オクタン−１，８−ジイル（１，８−オクチレン）、ノナン−１，９−ジイル（１，９−ノニレン）、デカン−１，１０−ジイル（１，１０−デシレン）、ウンデカン−１，１１−ジイル（１，１１−ウンデシレン）およびドデカン−１，１２−ジイル（１，１２−ドデシレン）を挙げることができる。
【００３０】
（Ｃ１〜Ｃ４）−アルカンジイルは、本発明の範囲内で、１〜４個の炭素原子を有する直鎖状α，ω−二価アルキル基を表す。好ましい例には：メチレン、エタン−１，２−ジイル（１，２−エチレン）、プロパン−１，３−ジイル（１，３−プロピレン）およびブタン−１，４−ジイル（１，４−ブチレン）が含まれる。
【００３１】
（Ｃ２〜Ｃ４）−アルケンジイルは、本発明の範囲内で、２〜４個の炭素原子および二重結合を有する直鎖状α，ω−二価アルケニル基を表す。好ましい例には：エテン−１，２−ジイル、プロペン−１，３−ジイル、ブタ−１−エン−１，４−ジイルおよびブタ−２−エン−１，４−ジイルが含まれる。二重結合はｃｉｓ配置であってもｔｒａｎｓ配置であってもよい。
【００３２】
（Ｃ１〜Ｃ１２）−アルコキシは、本発明の範囲内で、１〜４個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルコキシ基を表す。好ましい例には：メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシが含まれる。
【００３３】
（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルは、本発明の範囲内で、カルボニル基［−Ｃ（＝Ｏ）−］を介して酸素原子と結合している１〜４個の炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルコキシ基を表す。好ましい例には：メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニルおよびｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルが含まれる。
【００３４】
（Ｃ３〜Ｃ６）−シクロアルキルは、本発明の範囲内で、３〜６個の炭素原子を有する単環式、飽和シクロアルキル基を表す。好ましい例には：シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが含まれる。
【００３５】
環Ｈｅｔの定義において、５員ヘテロアリールは、Ｎ、Ｏおよび／またはＳのシリーズからの同じであっても異なっていてもよい最大で３個の環ヘテロ原子を含む、２個の環炭素原子または任意選択で１個の環窒素原子および１個の環炭素原子を介して結合している合計５個の環原子を有し、二価芳香族複素環（複素芳香族）を表す。その例には：フリル、ピロリル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、１，２−オキサゾリル、１，３−オキサゾリル、１，２−チアゾリル、１，３−チアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３．４−オキサジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリルおよび１，３，４−チアジアゾリルが含まれる。特に、ピラゾリル、イミダゾリル、１，３−オキサゾリル、１，３−チアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリルおよび１，３．４−オキサジアゾリルなどのＮ、Ｏおよび／またはＳのシリーズからの同じであっても異なっていてもよい２または３個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリール。
【００３６】
本発明の範囲内で、複数回出現するすべての基について、確かにそれらの意味は、互いに独立である。本発明による化合物において基が置換されている場合、その基は、別段の指定のない限り、１または複数回置換されていてよい。同じかまたは異なる１つまたは２つの置換基での置換が好ましい。１つの置換基での置換が特に好ましい。
【００３７】
本発明の範囲内で好ましいものは、式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、およびその塩の溶媒和物であり、ここで、
Ｌが、（ａ）２個の炭素原子が互いに１，３−もしくは１，４−の関係で、それらの間に炭素原子の１個もしくは２個を含むことによって橋掛けされてフェニル環を形成していてよい、あるいは（ｂ）互いに近接していない最大で２つのＣＨ２基が−Ｏ−で置き換えられていてよい直鎖状（Ｃ１〜Ｃ８）−アルカンジイルを表し、かつ
Ｔが式：
【００３８】
【化６】
0006023097.tif 000021
の基を表し、式中、
＊は窒素原子との結合部位を示し、
Ｒ１はフェニルまたは１Ｈ−インドール−３−イルを示し、かつ
Ｒ２は水素または式：
【００３９】
【化７】
0006023097.tif 000022
の基を表し、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基との結合部位を示し、
Ａはエテン−１，２−ジイルまたはプロペン−１，３−ジイルを示し、
Ｒ３は（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを表し、
Ｈｅｔはピラゾリル、イミダゾリル、１，３−オキサゾリル、１，３−チアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリルおよび１，３，４−オキサジアゾリルのシリーズから選択される二価５員ヘテロアリール環であり、かつ
Ｒ５は（Ｃ１〜Ｃ４）−アルコキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを表す。
【００４０】
本発明の範囲内で特に好ましいものは、式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、およびその塩の溶媒和物であり、ここで、
Ｌが直鎖状（Ｃ１〜Ｃ６）−アルカンジイルを表し、かつ
Ｔが式：
【００４１】
【化８】
0006023097.tif 000023
の基を表し、式中、
＊は窒素原子との結合部位を示し、かつ
Ｒ２は水素または式：
【００４２】
【化９】
0006023097.tif 000024
の基を表し、式中、
＊＊はそれぞれの基Ｔの基との結合部位を示し、
Ａはエテン−１，２−ジイルを示し、
Ｒ３はメトキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルを示し、
Ｈｅｔは１，３，４−オキサジアゾール−２，５−イルであり、かつ
Ｒ５はメトキシカルボニルまたはカルボキシルで置換されていてよいフェニルである。
【００４３】
本発明の範囲内で特に重要なものは、式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、およびその塩の溶媒和物であり、ここで、
Ｌがプロパン−１，３−ジイルを表す。
【００４４】
本発明の範囲内で特に重要なものは、式（Ｉ）の化合物ならびにそれらの塩および溶媒和物、およびその塩の溶媒和物であり、ここで、
Ｔが式：
【００４５】
【化１０】
0006023097.tif 000025
の基を表し、式中、
＊は窒素原子との結合部位を示し、
Ｒ２Ａは上記定義のＲ２の意味を有するが、水素は表さない。
【００４６】
基のそれぞれの組合せおよび／または好ましい組合せにおいて詳細に与えられている基の定義は、示されたそれぞれの組合せに関係なく、他の組合せでの任意の基の定義によっても置き換えられる。特に最も好ましいものは、上記定義の好ましい範囲の２つ以上の組合せである。
【００４７】
本発明の方法の追加的な主題は、式（ＩＩ）の化合物
【００４８】
【化１１】
0006023097.tif 000026
（式中、Ｔは上述した意味を有する）
を不活性溶媒中で、以下：
［Ａ］塩基誘発アルキル化によって、式（ＩＩＩ）の化合物
【００４９】
【化１２】
0006023097.tif 000027
（式中、Ｌは上述した意味を有し、
Ｅ１は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表し、かつ
Ｘはクロリド、ブロミド、ヨージド、メシレート、トリフレートまたはトシレートなどの離脱基を表す）
と反応させて式（ＩＶ）の化合物
【００５０】
【化１３】
0006023097.tif 000028
（式中、Ｅ１、ＬおよびＴは上述した意味を有する）
を形成し、次いでＥ１が（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表す場合、このエステル基を従来の方法で分割し、それによって、式（ＩＩＩ）のＥ１が水素を表す場合のような式（Ｉ）のカルボン酸
【００５１】
【化１４】
0006023097.tif 000029
（式中、ＬおよびＴは上述した意味を有する）
を得るか、あるいは、
［Ｂ］適切な還元剤の存在下で式（Ｖ）の化合物
【００５２】
【化１５】
0006023097.tif 000030
（式中、Ｅ１は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表し、かつ
ＬＡは上述したＬの意味を有するが、アルキル鎖長において１つのＣＨ２単位だけ短縮されている）
と反応させて式（ＶＩ）の化合物
【００５３】
【化１６】
0006023097.tif 000031
（式中、Ｅ１、ＬＡおよびＴは上述した意味を有する）
に転換させ、次いでＥ１が（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表す場合、このエステル基を従来の方法で分割し、それによって、式（Ｖ）のＥ１が水素を表す場合のような式（Ｉ−Ａ）のカルボン酸
【００５４】
【化１７】
0006023097.tif 000032
（式中、ＬＡおよびＴは上述した意味を有する）
を得、
得られた式（Ｉ）および／または（Ｉ−Ａ）の化合物を任意選択でそれらの鏡像異性体および／またはジアステレオマーに分離する、かつ／または対応する（ｉ）溶媒および／または（ｉｉ）塩基または酸と反応させてそれらの溶媒和物、塩および／またはその塩の溶媒和物を形成させること
を特徴とする、本発明による式（Ｉ）の化合物を調製するための方法である。
【００５５】
（ＩＩ）＋（ＩＩＩ）→（ＩＶ）の反応に適した不活性溶媒の例には、エーテル、例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、１，２−ジメトキシエタンもしくはビス−（２−メトキシエチル）エーテル、炭化水素、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサンもしくは石油留分、または双極性非プロトン性溶媒、例えばアセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）もしくはピリジンが含まれる。そうした溶媒の混合物を使用することも可能である。アセトンまたはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドが好ましい。
【００５６】
これらのアルキル化反応に適した塩基には、特に、アルカリ水酸化物、例えば水酸化リチウム、水酸化ナトリウムもしくは水酸化カリウム、アルカリ炭酸塩もしくはアルカリ土類炭酸塩、例えば炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウムもしくは炭酸セシウム、または通常の有機アミン、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピリジンもしくは４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンが含まれる。炭酸カリウムまたは炭酸セシウムを使用することが好ましい。例えば臭化リチウムもしくはヨウ化リチウム、ヨウ化ナトリウムもしくはヨウ化カリウム、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムブロミドもしくはヨージドまたはベンジルトリエチルアンモニウムブロミドなどのアルキル化触媒を加えることが場合によって有利である。
【００５７】
反応（ＩＩ）＋（ＩＩＩ）→（ＩＶ）は一般に−２０℃〜＋１００℃、好ましくは０℃〜＋５０℃の温度範囲で実施される。この反応は標準圧力、加圧または減圧下（例えば、０．５バール〜５バール）で行うことができる。これは通常、標準圧力下で実施される。
【００５８】
反応（ＩＩ）＋（Ｖ）→（ＶＩ）は、反応条件下で不活性であり還元的アミノ化のために一般に使用される溶媒中、任意選択で触媒としての酸および／または脱水剤（ｗａｓｓｅｒｅｎｔｚｉｅｈｅｎｄｅｎ  Ｍｉｔｔｅｌｓ）の存在下で行う。そうした溶媒には、例えばアルコール、例えばメタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノールもしくはｔｅｒｔ−ブタノール、エーテル、例えばテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、１，２−ジメトキシエタンもしくはビス−（２−メトキシエチル）エーテルまたは他の溶媒、例えばジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、さらには水が含まれる。同様に、これらの溶媒の混合物を使用することも可能である。本明細書で使用するのに好ましい溶媒は、触媒として酢酸または希塩酸が添加された１，４−ジオキサン／水混合液である。
【００５９】
この反応に適した還元剤には、特に錯体ボロヒドリド、例えばナトリウムボロヒドリド、ナトリウムシアノボロヒドリド、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリドまたはテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムボロヒドリドが含まれる。ナトリウムシアノボロヒドリドが好ましい。
【００６０】
反応（ＩＩ）＋（Ｖ）→（ＶＩ）は一般に０℃〜＋１２０℃、好ましくは＋５０℃〜＋１００℃の温度範囲で行われる。この反応は標準圧力、加圧または減圧下（例えば、０．５バール〜５バール）で行うことができる。これは通常、標準圧力下で実施される。
【００６１】
エステル基Ｅ１は、エステルを不活性溶媒中、酸または塩基で処理することによって、通常の方法によるプロセスステップ（ＩＶ）→（Ｉ）および（ＶＩ）［Ｅ１＝（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジル］で、通常の方法で切断し、それによって最後の変形体において、最初に得られたカルボン酸塩を後続の酸の添加によって遊離カルボン酸に転換させる。ｔｅｒｔ−ブチルエステルの場合、開裂は好ましくは酸を用いることによって実施する。ベンジルエステルの場合、開裂は、例えば活性炭担持パラジウムなどの適切なパラジウム触媒の存在下で水素化分解によって行うこともできる。
【００６２】
化合物（ＩＩＩ）および／または（Ｖ）に由来するエステル基Ｅ１は本明細書では、その開裂の条件が化合物（ＩＶ）および（ＶＩ）のそれぞれの基Ｔと適合するように選択される。
【００６３】
一般的な無機塩基が、エステル加水分解のための塩基として適している。これらには、特にアルカリまたはアルカリ土類の水酸化物、例えばリチウム、ナトリウム、カリウムもしくはバリウムの水酸化物、あるいはアルカリ炭酸塩またはアルカリ土類炭酸塩、例えばナトリウム、カリウムもしくはカルシウムの炭酸塩が含まれる。リチウム、ナトリウムまたはカリウムの水酸化物が好ましい。
【００６４】
エステル開裂反応に適した酸には、任意選択で水を添加した、一般的な硫酸、塩酸／塩化水素、臭化水素酸／臭化水素、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸もしくはトリフルオロメタンスルホン酸またはその混合物が含まれる。ｔｅｒｔ−ブチルエステルの場合、塩酸またはトリフルオロ酢酸が好ましく、メチルエステルの場合、塩酸が好ましい。
【００６５】
これらの反応に適した不活性溶媒には、水またはエステル開裂のために通常使用される有機溶媒が含まれる。これらには好ましくは、低級アルコール、例えばメタノール、エタノール、ｎ−プロパノールもしくはイソプロパノール、エーテル、例えばジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサンもしくは１，２−ジメトキシエタン、または他の溶媒、例えばジクロロメタン、アセトン、メチルエチルケトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドもしくはジメチルスルホキシドが含まれる。これらの溶媒の混合物を使用することも可能である。塩基性エステル加水分解の場合、水と１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノールおよび／またはジメチルホルムアミドの混合物が本明細書での使用に好ましい。トリフルオロ酢酸と反応の場合、ジクロロメタンが好ましく、塩酸と反応の場合、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、１，４−ジオキサンまたは水が好ましい。
【００６６】
エステル開裂は通常−２０℃〜＋１００℃、好ましくは０℃〜＋５０℃の範囲の温度で行う。
【００６７】
式（ＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩ）の化合物
【００６８】
【化１８】
0006023097.tif 000033
（式中、ＰＧは（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルなどのアミノ保護基を表す）
を不活性溶媒中、（ＶＩＩ）のカルボキシル官能基を活性化させて、
［Ｃ］最初に式（ＶＩＩＩ）の化合物
【００６９】
【化１９】
0006023097.tif 000034
（式中、Ｅ２は水素、（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表す）
またはこの化合物の塩とカップリングさせて式（ＩＸ）の化合物
【００７０】
【化２０】
0006023097.tif 000035
（式中、Ｅ２およびＰＧは上述した意味を有する）
を形成させ、Ｅ２が（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジルを表す場合、このエステル基を通常の方法によって切断し、次いで得られた式（Ｘ）のカルボン酸
【００７１】
【化２１】
0006023097.tif 000036
（式中、ＰＧは上述した意味を有する）
を、不活性溶媒中、カルボキシル官能基を式（ＸＩ）の化合物：
【００７２】
【化２２】
0006023097.tif 000037
（式中、Ｔは上述した意味を有する）
またはこの化合物の塩で活性化して式（ＸＩＩ）の化合物
【００７３】
【化２３】
0006023097.tif 000038
（式中、ＰＧおよびＴは上述した意味を有する）
を形成させる、あるいは、
［Ｄ］式（ＸＩＩＩ）の化合物
【００７４】
【化２４】
0006023097.tif 000039
（式中、Ｔは上述した意味を有する）
またはこの化合物の塩とカップリングして、同様に式（ＸＩＩ）の化合物
【００７５】
【化２５】
0006023097.tif 000040
（式中、ＰＧおよびＴは上述した意味を有する）
を形成させ、次いで式（ＸＩＩ）の化合物を通常の仕方で脱保護して式（ＩＩ）の化合物
【００７６】
【化２６】
0006023097.tif 000041
（式中、Ｔは上述した意味を有する）
を形成させることによって、ペプチド化学の通常の方法によって合成することができる。
【００７７】
上述したカップリング反応（それぞれのアミンおよびカルボン酸構成成分からのアミドの生成）はペプチド化学の標準的な方法によって実施される（例えば、Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ、１９９３年；Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ  ａｎｄ  Ａ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ、１９８４年；Ｈ．Ｄ．Ｊａｋｕｂｋｅ  ａｎｄ  Ｈ．Ｊｅｓｃｈｋｅｉｔ、Ａｍｉｎｏｓａｅｕｒｅｎ、Ｐｅｐｔｉｄｅ、Ｐｒｏｔｅｉｎｅ［Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、Ｐｒｏｔｅｉｎｓ］、Ｖｅｒｌａｇ  Ｃｈｅｍｉｅ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、１９８２年を参照されたい）。
【００７８】
これらのカップリング反応（ＶＩＩ）＋（ＶＩＩＩ）→（ＩＸ）、（Ｘ）＋（ＸＩ）→（ＸＩＩ）および（ＶＩＩ）、（ＸＩＩＩ）→（ＸＩＩ）のための不活性溶媒には、例えばエーテル、例えばジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、１，２−ジメトキシエタンもしくはビス−（２−メトキシエチル）エーテル、炭化水素、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサンもしくは石油留分、ハロ炭化水素、例えばジクロロメタン、トリクロロメタン、テトラクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、トリクロロエチレンもしくはクロロベンゼンまたは双極性非プロトン性溶媒、例えばアセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、酢酸エチル、ピリジン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルプロピレン尿素（ＤＭＰＵ）もしくはＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）が含まれる。そうした溶媒の混合物を使用することも可能である。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドが好ましい。
【００７９】
これらのカップリング反応に適した活性化／縮合剤には、例えば、任意選択で追加的な賦形剤、例えば１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）もしくはＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）および塩基、例えばアルカリ炭酸塩、例えばナトリウムもしくはカリウムの炭酸塩または第三アミン塩基、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、ピリジンもしくは４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンと組み合わせた、カルボジイミド、例えばＮ，Ｎ’−ジエチル、Ｎ，Ｎ’−ジプロピル、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピル、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）もしくはＮ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、ホスゲン誘導体、例えばＮ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）もしくはイソブチルクロロホーメート、１，２−オキサゾリウム化合物、例えば２−エチル−５−フェニル−１，２−オキサゾリウム３−スルフェートもしくは２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソオキサゾリウムペルクロラート、アシルアミノ化合物、例えば２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン、α−クロラミン（α−ｃｈｌｏｒｅｎａｍｉｎｅ）、例えば１−クロロ（ｃｈｌｏｒｏｒ）−２−メチル−１−ジメチルアミノ−１−プロペン、リン化合物、例えばプロパンホスホン酸無水物、シアノホスホン酸ジエチルエステル、ビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスホリルクロリド、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートもしくはベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス−（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、またはウロニウム化合物、例えばＯ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＰＴＵ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）もしくはＯ−（１Ｈ−６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）が含まれる。
【００８０】
本発明の関連において、そうしたカップリング反応のための好ましい活性化／縮合剤には、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンと組み合わせたＮ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）または同様にＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンと組み合わせたＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）が含まれる。
【００８１】
カップリング反応（ＶＩＩ）＋（ＶＩＩＩ）→（ＩＸ）、（Ｘ）＋（ＸＩ）→（ＸＩＩ）および（ＶＩＩ）＋（ＸＩＩＩ）→（ＸＩＩ）は通常−２０℃〜＋６０℃、好ましくは０℃〜＋４０℃の温度範囲で実施される。この反応は標準圧力、加圧または減圧下（例えば、０．５バール〜５バール）で行うことができる。慣用的には、標準圧力下で稼働される。
【００８２】
化合物中に任意選択で存在する官能基（特にアミノ、ヒドロキシルおよびカルボキシル基など）は、好都合であるかまたは必要である場合、上記したプロセスステップにおいて、一時的に保護された形態で存在することもできる。そうした保護基は、ペプチド化学の標準的な方法にしたがって導入し取り外される（例えば、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９９年；Ｍ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ  ａｎｄ  Ａ．Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ、１９８４年を参照されたい）。いくつかの保護基の存在下では、これらを任意選択で、一浴（ｏｎｅ−ｐｏｔ）反応かまたは別個の反応ステップで同時に再放出させることができる。
【００８３】
好ましいアミノ保護基はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）または（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル（Ｆｍｏｃ）であり；ヒドロキシルまたはカルボキシル官能基のための保護基ＰＧ２としてｔｅｒｔ−ブチルまたはベンジルを使用することが好ましい。ｔｅｒｔ−ブチルまたはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基は通常ジエチルエーテル、１，４−ジオキサン、ジクロロメタンまたは酢酸などの不活性溶媒中、塩酸、臭化水素酸またはトリフルオロ酢酸などの強酸で処理することによって切断される。この反応は任意選択で不活性溶媒を加えることなく実施することもできる。保護基としてベンジルまたはベンジルオキシカルボニルの場合、そうした保護基は、例えば活性炭担持パラジウムなどの適切なパラジウム触媒の存在下での水素化分解によって取り外すことが好ましい。（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル基は一般に、ジエチルアミンまたはピペリジンなどの第二アミン塩基の助けを得て切断される。
【００８４】
本明細書での化合物（ＶＩＩＩ）［Ｅ２＝（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルまたはベンジル］中のエステル基Ｅ２は、その切断される条件が、化合物（ＶＩＩ）からのそれぞれの保護基ＰＧと適合するように選択される。
【００８５】
式（ＶＩＩ）の化合物は、同様の方法、例えば、最初に、式（ＸＩＶ）のＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−バリン
【００８６】
【化２７】
0006023097.tif 000042
（式中、Ｚはベンジルオキシカルボニル保護基を表す）
を、縮合剤の助けを得て式（ＸＶ）の化合物：
【００８７】
【化２８】
0006023097.tif 000043
（式中、Ｅ３は（Ｃ１〜Ｃ４）−アルキルを表す）
またはこの化合物の塩とカップリングして式（ＸＶＩ）の化合物
【００８８】
【化２９】
0006023097.tif 000044
（式中、Ｅ３およびＺは上述した意味を有する）
を形成させ、次いでＺ保護基を水素化分解的に取り外した後、この化合物を、縮合剤の存在下で式（ＸＶＩＩ）のＮ−保護Ｎ−メチル−Ｌ−バリン：
【００８９】
【化３０】
0006023097.tif 000045
（式中、ＰＧは（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルなどのアミノ保護基を表す）
とカップリングさせて式（ＸＶＩＩＩ）の化合物
【００９０】
【化３１】
0006023097.tif 000046
（式中、Ｅ３およびＰＧは上述した意味を有する）
を形成させ、次いで（ＸＶＩＩＩ）のエステル基−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｅ３を、通常の方法で反応させて遊離カルボン酸（ＶＩＩ）を形成させることによって合成することができる。
【００９１】
カップリング反応（ＸＩＶ）＋（ＸＶ）→（ＸＶＩ）およびＺ脱保護（ＸＶＩ）＋（ＸＶＩＩ）→（ＸＶＩＩＩ）は、方法［Ｃ］および［Ｄ］で示したカップリングステップについて上述したのと同様の反応条件下で実施される。
【００９２】
エステル基−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｅ３は、エステル基Ｅ１のためのプロセスシーケンス［Ａ］および［Ｂ］の一部として上述したものと同様のプロセスで、反応ステップ（ＸＶＩＩＩ）→（ＶＩＩ）で加水分解される。化合物（ＸＶ）のアルキル基Ｅ３は、それらの開裂条件が化合物（ＸＶＩＩ）からのそれぞれの保護基ＰＧと適合するように選択される。
【００９３】
次いで式（ＸＩＩＩ）の化合物は、上記の化合物（ＸＩ）を化合物（ＸＩＸ）：
【００９４】
【化３２】
0006023097.tif 000047
（式中、Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル保護基を表す）
とカップリングして式（ＸＸ）の化合物
【００９５】
【化３３】
0006023097.tif 000048
（式中、ＢｏｃおよびＴは上述した意味を有する）
を得、次いでＢｏｃ保護基を切断することによって到達することができる。
【００９６】
次いでカップリング反応（ＸＩ）＋（ＸＩＸ）→（ＸＸ）を、方法［Ｃ］および［Ｄ］におけるカップリングステップのために上述したものと同様の条件下で実施する。
【００９７】
そのキラルまたはジアステレオマー形態を含む式（ＩＩＩ）、（Ｖ）、（ＶＩＩＩ）、（ＸＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩＩ）および（ＸＩＸ）の化合物は、適用できる場合、市場から入手することができる、またはそれ自体文献に記載されている、あるいは、これらを、文献に公開されているような方法で、当業者に自明の仕方で合成することができる。出発原料の合成に関する文献における多くの詳細な出版物および明細書は、出発化合物および中間体の合成に関する節の実験の部でも見ることができる。
【００９８】
対応する異性体−純粋出発原料が入手できない場合、本発明による化合物を、あらかじめ化合物（ＩＩ）、（ＩＶ）、（ＶＩ）、（ＸＩ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）および（ＸＸ）の段階で対応する鏡像異性体および／またはジアステレオマーに好都合に分離することができ、次いでこれらを、上記の反応ステップにしたがって単離した形態でさらに反応させる。立体異性体のそうした分離は、当業者に周知の通常の方法にしたがって実施することができる。キラルおよび／またはアキラル分離相を用いたクロマトグラフ法を用いることが好ましい。中間体として遊離カルボン酸の場合、キラル塩基の助けを得たジアステレオマー塩による分離も、代替法として実施することができる。
【００９９】
本発明による化合物の合成は、例としての以下の反応スキーム：
【０１００】
【化３４】
0006023097.tif 000049
【０１０１】
【化３５】
0006023097.tif 000050
【０１０２】
【化３６】
0006023097.tif 000051
【０１０３】
【化３７】
0006023097.tif 000052
で示すことができる。
【０１０４】
これらの化合物は有益な薬理学的特性を有しており、ヒトおよび動物の疾患を予防および治療するのに使用することができる。
【０１０５】
当技術分野で公知の他のオーリスタチン誘導体と比較して、本発明による化合物中に存在するＮ末端カルボキシアルキル基［式（Ｉ）のＨＯＯＣ−Ｌ−］は、抗体タンパク質または他のリガンドとの潜在的結合のための単なるリンカーの機能をもつのではなく、その代わり、これらの化合物の特性の驚くほど有利なプロファイルのための構成的な構造要素である。
【０１０６】
本発明によるこれらの化合物は、例えばモノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）と比較してより強い細胞傷害活性を有する、または可能性は低いが、同時に細胞トランスポータータンパク質のための基質でもある。
【０１０７】
したがって、本発明による化合物は、一般にヒトおよび哺乳動物における過剰増殖性疾患の治療に特に適している。これらの化合物は、一方で細胞増殖および細胞分裂を阻害、阻止、低減または抑制し、他方でアポトーシスを増大させることができる。
【０１０８】
その治療のために本発明による化合物を使用できる過剰増殖性疾患には、特にがんおよび腫瘍の疾患の群が含まれる。これらは、これらに限定されないが、特に以下の疾患、すなわち：乳がんおよび乳房の腫瘍（延性（ｄｕｃｔａｌｅｒ）および小葉形態、インサイチュでも）、呼吸器腫瘍（小細胞および非小細胞癌腫、気管支癌腫）、脳腫瘍（例えば、脳幹および視床下部のもの、星状細胞腫、髄芽腫、上衣腫ならびに神経外胚葉性腫瘍および松果体腫瘍）、消化管（食道、胃、胆嚢、小腸、大腸、直腸）の腫瘍、肝臓腫瘍（肝細胞癌腫、胆管がんおよび混合型肝細胞胆管癌腫を含む）、頭頸部（喉頭、下咽頭、鼻咽頭、口腔咽頭部、唇および口腔）の腫瘍、皮膚腫瘍（扁平上皮癌腫、カポジ肉腫、悪性黒色腫、メルケル細胞皮膚がんおよび非黒色腫型皮膚がん）、軟組織の腫瘍（軟組織肉腫、悪性線維性組織球腫、リンパ肉腫および横紋筋肉腫を含む）、眼の腫瘍（眼球内黒色腫および網膜芽腫を含む）、内分泌腺および外分泌腺（例えば、甲状腺および副甲状腺、膵腺ならびに食道腺）の腫瘍、尿路の腫瘍（膀胱、陰茎、腎臓、腎盂および尿道の腫瘍）ならびに生殖器官の腫瘍（女性における子宮内膜、子宮頸部、卵巣、膣、外陰部および子宮の癌腫ならびに男性における前立腺および睾丸の癌腫）を本発明の範囲内に含むと理解される。これらは、固体形態でのおよび循環血液細胞としての増殖性血液疾患、例えばリンパ腫、白血病および骨髄増殖性疾患、例えば急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病およびヘアリー細胞白血病ならびにＡＩＤＳ関連リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫および中枢神経系のリンパ腫も含む。
【０１０９】
十分に特徴付けられているこれらのヒト疾患は他の哺乳動物においても同等の病因で起こる可能性があり、そうした場合、これらを本発明による化合物で治療することもできる。
【０１１０】
本発明による化合物による上記した種類のがんの治療は、そうした腫瘍の治療およびその転移形態または循環形態の治療を含む。
【０１１１】
「治療」または「治療する（ｔｏ  ｔｒｅａｔ）」という用語は、本発明の範囲内では従来の意味で使用され、例えばがんなどにおいて、疾患または健康の逸脱と戦う、それを低減させる、減弱させるまたは改善し、この疾患によって損なわれた生活の質を向上させるという目的を有する患者のケア、治療および対診を指す。
【０１１２】
したがって本発明の追加的な主題は、疾患、特に上述した疾患の治療および／または予防のための本発明による化合物の使用に関する。
【０１１３】
本発明の追加的な主題は、疾患、特に上述した疾患の治療および／または予防用の医薬品を製造するための本発明による化合物の使用である。
【０１１４】
本発明の追加的な主題は、疾患、特に上述した疾患の治療および／または予防のための方法における本発明による化合物の使用である。
【０１１５】
本発明の追加的な主題は、有効量の本発明による化合物の少なくとも１つを用いた疾患、特に上述した疾患の治療および／または予防のための方法である。
【０１１６】
本発明による化合物は単独で使用することも、必要なら、その組合せが有害作用および許容されない副作用をもたらさない限り、１つまたは複数の他の薬理学的に活性な物質と組み合わせて使用することもできる。したがって、本発明の他の主題は、特に上記に挙げた疾患を治療および／または予防するための、本発明による化合物の少なくとも１つおよび１つまたは複数の追加的な活性成分を含む医薬品に関する。
【０１１７】
本発明による化合物は、例えばがんの治療のための公知の抗過剰増殖性、細胞増殖抑制性または細胞傷害性物質と組み合わせることができる。適切な併用薬物の例には、以下のもの、すなわち：アルデスロイキン、アレンドロン酸、アルファフェロン（ａｌｆａｆｅｒｏｎｅ）、アリトレチノイン、アロプリノール、アロプリム（ａｌｏｐｒｉｍ）、アロキシ、アルトレタミン、アミノグルテチミド、アミホスチン（ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）、アムルビシン、アムサクリン、アナストロゾール、アンズメト（ａｎｚｍｅｔ）、アラネスプ、アルグラビン（ａｒｇｌａｂｉｎ）、三酸化ヒ素、アロマシン、５−アザシチジン、アザチオプリン、ＢＣＧまたはタイスＢＣＧ、ベスタチン、酢酸ベタメタゾン、ベタメタゾンリン酸ナトリウム、ベキサロテン、ブレオマイシンスルフェート、ブロクスウリジン（ｂｒｏｘｕｒｉｄｉｎｅ）、ボルテゾミブ、ブスルファン、カルシトニン、キャンパス、カペシタビン、カルボプラチン、カソデックス、セフェゾン（ｃｅｆｅｓｏｎｅ）、セルモロイキン、セルビジン（ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ）、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、クロドロン酸、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノキソーム（ｄａｕｎｏｘｏｍｅ）、デカドロン、デカドロンホスフェート、デレストロゲン（ｄｅｌｅｓｔｒｏｇｅｎ）、デニロイキンジフチトックス、デポメドロール（ｄｅｐｏｍｅｄｒｏｌ）、デスロレリン（ｄｅｓｌｏｒｅｌｉｎ）、デクスラゾキサン、ジエチルスチルベストロール、ジフルカン、ドセタキセル、ドロキシフルリジン、ドキソルビシン、ドロナビノール、ＤＷ−１６６ＨＣ、エリガード、エリテック（ｅｌｉｔｅｋ）、エレンス（ｅｌｌｅｎｃｅ）、エメンド、エピルビシン、エポエチンアルファ、エポゲン、エプタプラチン（ｅｐｔａｐｌａｔｉｎ）、エルガミゾル（ｅｒｇａｍｉｓｏｌｅ）、エストラス（ｅｓｔｒａｃｅ）、エストラジオール、エストラムスチンリン酸ナトリウム、エチニルエストラジオール、エチオル（ｅｔｈｙｏｌ）、エチドロン酸、エトポホス（ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ）、エトポシド、ファドロゾール、ファルストン（ｆａｒｓｔｏｎ）、フィルグラスチム、フィナステリド、フリグラスチム（ｆｌｉｇｒａｓｔｉｍ）、フロクスウリジン、フルコナゾール、フルダラビン、５−フルオロデオキシウリジンモノホスフェート、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フルオキシメステロン、フルタミド、フォルメスタン、フォステアビン（ｆｏｓｔｅａｂｉｎｅ）、ホテムスチン、フルベストラント、ガンマガード、ゲムシタビン、ゲムツズマブ、グリベック、グリアデル（ｇｌｉａｄｅｌ）、ゴセレリン、グラニセトロン塩酸塩、ヒストレリン、ヒカムチン、ハイドロコートン、エリスロヒドロキシノニルアデニン（ｅｙｒｔｈｒｏｈｙｄｒｏｘｙｎｏｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ）、ヒドロキシ尿素、イブリツモマブチウキセタン、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロンα、インターフェロン−α−２、インターフェロン−α−２α、インターフェロン−α−２β、インターフェロン−α−ｎ１、インターフェロン−α−ｎ３、インターフェロン−β、インターフェロン−γ−１α、インターロイキン−２��イントロンＡ、イレッサ、イリノテカン、カイトリル、レンチナンスルフェート、レトロゾール、ロイコボリン、ロイプロリド、酢酸ロイプロリド、レバミソール、レボホリン酸（ｌｅｖｏｆｏｌｉｃ  ａｃｉｄ）カルシウム塩、レボチロイド（ｌｅｖｏｔｈｒｏｉｄ）、レボキシル（ｌｅｖｏｘｙｌ）、ロムスチン、ロニダミン、マリノール、メクロレタミン、メコバラミン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メルファラン、メネスト（ｍｅｎｅｓｔ）、６−メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、メトビクス（ｍｅｔｖｉｘ）、ミルテホシン、ミノサイクリン、マイトマイシンＣ、ミトタン、ミトキサントロン、モドレナル（ｍｏｄｒｅｎａｌ）、ミオセット（ｍｙｏｃｅｔ）、ネダプラチン、ノイラスタ（ｎｅｕｌａｓｔａ）、ノイメガ（ｎｅｕｍｅｇａ）、ニューポジェン（ｎｅｕｐｏｇｅｎ）、ニルタミド、ノルバデックス、ＮＳＣ−６３１５７０、ＯＣＴ−４３、オクトレオチド、オンダンセトロン塩酸塩、オラプレド（ｏｒａｐｒｅｄ）、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペジアプレッド（ｐｅｄｉａｐｒｅｄ）、ペガスパルガーゼ、ペガシス、ペントスタチン、ピシバニール、ピロカルピン塩酸塩、ピラルビシン、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、プレドニムスチン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プレマリン（ｐｒｅｍａｒｉｎ）、プロカルバジン、プロクリット、ラルチトレキセド、レビフ（ｒｅｂｉｆ）、レニウム１８６エチドロネート、リツキシマブ、ロフェロン（ｒｏｆｅｒｏｎｅ）Ａ、ロムルチド、サラジェン（ｓａｌａｇｅｎ）、サンドスタチン、サルグラモスチム、セムスチン、シゾフィラン、ソブゾキサン、ソルメドロール、ストレプトゾシン、ストロンチウム−８９クロリド、シンチロイド（ｓｙｎｔｈｒｏｉｄ）、タモキシフェン、タムスロシン、タソネルミン、タストラクトン（ｔａｓｔｏｌａｃｔｏｎｅ）、タキソテール、テセロイキン、テモゾロミド、テニポシド、プロピオン酸テストステロン、テストレド（ｔｅｓｔｒｅｄ）、チオグアニン、チオテパ、甲状腺刺激ホルモン、チルドロン酸、トポテカン、トレミフェン、トシツモマブ、タスツズマブ（ｔａｓｔｕｚｕｍａｂ）、テオスルファン（ｔｅｏｓｕｌｆａｎｅ）、トレチノイン、トレキサル（ｔｒｅｘａｌｌ）、トリメチルメラミン、トリメトレキサート、酢酸トリプトレリン、パモ酸トリプトレリン、ｕｆｔ、ウリジン、バルルビシン、ベスナリノン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ビルリジン（ｖｉｒｕｌｉｚｉｎ）、ジネカルド（ｚｉｎｅｃａｒｄ）、ジノスタチンスチマラマー、ゾフラン、ＡＢＩ−００７、アコルビフェン（ａｃｏｌｂｉｆｅｎｅ）、アクティミューン（ａｃｔｉｍｍｕｎｅ）、アフィニタク（ａｆｆｉｎｉｔａｋ）、アミノプテリン、アルゾキシフェン、アソプリスニル、アタメスタン（ａｔａｍｅｓｔａｎｅ）、アトラセンタン、アバスチン、ＢＡＹ４３−９００６（ソラフェニブ）、ＣＣＩ−７７９、ＣＤＣ−５０１、セレブレックス（ｃｅｌｅｂｒｅｘ）、セツキシマブ、クリスナトール（ｃｒｉｓｎａｔｏｌ）、酢酸シプロテロン、デシタビン、ＤＮ−１０１、ドキソルビシン−ＭＴＣ、ｄＳＬＩＭ、デュタステリド、エドテカリン（ｅｄｏｔｅｃａｒｉｎ）、エフロルニチン、エクサテカン（ｅｘａｔｅｃａｎ）、フェンレチニド（ｆｅｎｒｅｔｉｎｉｄｅ）、ヒスタミン二塩酸塩、ヒストレリンハイドロゲルインプラント、ホルミウム−１６６−ＤＯＴＭＰ、イバンドロン酸、インターフェロンγ、イントロンＰＥＧ、イクサベピロン、キーホールリンペットヘモシアニン、Ｌ−６５１５８２、ランレオチド、ラソフォキシフェン、リブラ（ｌｉｂｒａ）、ロナファーニブ、ミプロキシフェン（ｍｉｐｒｏｘｉｆｅｎ）、ミノドロン酸（ｍｉｎｏｄｒｏｎａｔｅ）、ＭＳ−２０９、リポソームＭＴＰ−ＰＥ、ＭＸ−６、ナファレリン、ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ネオバスタット（ｎｅｏｖａｓｔａｔ）、ノラトレキセド（ｎｏｌａｔｒｅｘｅｄ）、オブリメルセン、オンコ−ＴＣＳ、オシデム（ｏｓｉｄｅｍ）、パクリタキセルポリグルタメート、パミドロン酸二ナトリウム、ＰＮ−４０１、ＱＳ−２１、クアゼパム、Ｒ−１５４９、ラロキシフェン、ランピルナーゼ（ｒａｎｐｉｒｎａｓｅ）、１３−シス−レチノイン酸、サトラプラチン、セオカルシトール（ｓｅｏｃａｌｃｉｔｏｌ）、Ｔ−１３８０６７、タルセバ、タキソプレキシン（ｔａｘｏｐｒｅｘｉｎｅ）、チモシン−α−１、チアゾフリン、チピファルニブ、チラパザミン、ＴＬＫ−２８６、トレミフェン、トランスミド１０７Ｒ（ｔｒａｎｓｍｉｄ  １０７Ｒ）、バルスポダル（ｖａｌｓｐｏｄａｒ）、バプレオチド（ｖａｐｒｅｏｔｉｄｅ）、バタラニブ、ベルテポルフィン、ビンフルニン、Ｚ−１００、ゾレドロン酸およびその組合せが含まれる。
【０１１８】
好ましい実施形態では、本発明による化合物を、例えば以下の：アミノグルテチミド、Ｌ−アスパラギナーゼ、アザチオプリン、５−アザシチジン、ブレオマイシン、ブスルファン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、コラスパーゼ（ｃｏｌａｓｐａｓｅ）、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ジエチルスチルベストロール、２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン、ドセタキセル、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン、エポチロンおよびセイン誘導体（ｓｅｉｎｅ  ｄｅｒｉｖａｔｅ）、エリスロヒドロキシノニルアデニン、エチニルエストラジオール、エトポシド、リン酸フルダラビン、５−フルオロデオキシウリジン、５−フルオロデオキシウリジン一リン酸塩、５−フルオロウラシル、フルオキシメステロン、フルタミド、ヘキサメチルメラミン、ヒドロキシ尿素、カプロン酸ヒドロキシプロゲステロン、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロン、イリノテカン、ロイコボリン、ロムスチン、メクロレタミン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メルファラン、６−メルカプトプリン、メスナ、メトトレキサート、マイトマイシンＣ、ミトタン、ミトキサントロン、パクリタキセル、ペントスタチン、ｎ−ホスホノアセチル−Ｌ−アスパラギン酸塩（ＰＡＬＡ）、プリカマイシン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プロカルバジン、ラロキシフェン、セムスチン、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テニポシド、プロピオン酸テストステロン、チオグアニン、チオテパ、トポテカン、トリメチルメラミン、ウリジン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびビノレルビンを含む抗過剰増殖剤と組み合わせることができる。ただし、このリストは最終的なものではない。
【０１１９】
１つの非常に有望な特徴によれば、本発明による化合物は、抗体などの生物学的治療剤（例えば、アバスチン、リツキサン、エルビタックス、ハーセプチン）と組み合わせることもできる。本発明による化合物は、例えばアバスチン、アキシチニブ、レセンチン（ｒｅｃｅｎｔｉｎ）、レゴラフェニブ、ソラフェニブまたはスニチニブを用いた血管新生を対象とした治療と組み合わせて好ましい効果を達成することもできる。プロテアソームの阻害剤およびｍＴＯＲの阻害剤との組合せならびに抗ホルモンおよびステロイド代謝酵素阻害剤との組合せも、それらの好都合な副作用プロファイルのため非常に適している。
【０１２０】
一般に、以下の目標を、本発明の化合物と他の活性な細胞増殖抑制剤または細胞傷害剤の組合せで追求することができる：
・単一の薬物での治療と比較して、腫瘍の成長を遅延させる、そのサイズを縮小させる、さらにはそれを完全に排除する効能の改善；
・単剤療法より少ない用量での化学療法薬を使用する可能性；
・単一用量と比較して、有害作用をほとんど伴わない許容される治療の可能性；
・より広範な腫瘍の治療の可能性；
・治療に対するより高い応答率の達成；
・今日の標準的治療と比較して、より長い患者生存時間。
【０１２１】
さらに、本発明による化合物は、放射線療法および／または外科的介入と併用することもできる。
【０１２２】
本発明の他の主題は、通常１つまたは複数の不活性で非毒性の薬学的に適切な賦形剤と一緒に少なくとも１つの本発明による化合物を含む医薬品ならびに上記に示した目的のためのそれらの使用に関する。
【０１２３】
本発明による化合物は全身的および／または局所的に使用可能である。この目的のために、これらは、適切な経路で、例えば経口、非経口、肺、鼻、舌下、舌、口腔、直腸、経皮、結膜もしくは耳の経路でまたは埋め込み物および／またはステントとして投与される。
【０１２４】
これらの投与方法のために、本発明による化合物を適切な剤形で投与することができる。
【０１２５】
経口投与のためには、技術水準にしたがって機能し、迅速にかつ／または改変された形態で本発明による化合物を送達する適切な剤形は、本発明による化合物を、結晶および／または非晶質形態および／または溶解形態で含む（例えば錠剤（例えば腸溶コーティングまたは不溶性コーティングでコーティングされた錠剤、またはコーティングされていない錠剤、あるいは本発明による化合物の放出を制御する遅延放出型の錠剤）、口の中で急速に崩壊する錠剤またはフィルム／オブラート剤、フィルム／凍結乾燥物、カプセル剤（例えば、硬質または軟質ゼラチンカプセル剤）、コーティング丸剤、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または液剤）。
【０１２６】
非経口投与は、吸収ステップを回避する（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内）、または吸収を含めて（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内）用いることができる。非経口投与に適した剤形には、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥物または滅菌散剤の形態の注入および注射用の調製物が含まれる。
【０１２７】
他の投与経路のためには、吸入剤形（粉末吸入器、噴霧器を含む）、点鼻剤、液剤もしくは噴霧剤、舌、舌下もしくは口腔に投与される錠剤、フィルム剤、オブラート剤もしくはカプセル剤、坐剤、耳もしくは眼用調製物、膣坐剤、水性懸濁剤（ローション剤、振とう合剤）、親油性懸濁剤、軟膏剤、クリーム剤、経皮治療システム（例えば、パッチ剤）、乳剤（ｍｉｌｋ）、ペースト剤、泡沫、散布剤（ｄｕｓｔｉｎｇ  ｐｏｗｄｅｒ）、埋め込み物またはステントを使用することが適切である。
【０１２８】
経口または非経口投与、特に経口および静脈内投与が好ましい。
【０１２９】
本発明による化合物は指定された剤形に転換させることができる。これは、公知の方法で、不活性で非毒性の薬学的に適切な賦形剤と混合することによって実施することができる。これらの賦形剤には、とりわけ、ビヒクル（例えば微結晶性セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えば、ドデシル硫酸ナトリウム、オレイン酸ポリオキシソルビタン）、結合剤（例えば、ポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えば、アルブミン）、安定剤（例えば、アスコルビン酸などの酸化防止剤）、着色剤（例えば、例えば酸化鉄などの無機顔料）ならびに矯味および／または矯臭物質）が含まれる。
【０１３０】
非経口投与のためには一般に、効果的な結果を達成するために約０．００１〜１ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０１〜０．５ｍｇ／ｋｇ体重の用量を投与することが有利であることが証明された。経口投与では、その用量は約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重である。
【０１３１】
それでもなお、すなわち、体重、投与経路、活性成分に対する個々の応答、投与のタイプならびにその物質が投与される時間および間隔に応じて、任意選択で、記載されている量から逸脱することが必要であり得る。ある場合は上記最小用量より少ない量で使用して十分であり、他の場合は上記上限を超えなければならないことがある。より多い投与用量の場合、それらを、１日を通して分配された複数の個別用量に分割することが望ましい。
【０１３２】
以下の例示的実施形態は、本発明を明らかにするものである。本発明はこれらの実施例に限定されない。
【０１３３】
以下のテストおよび実施例におけるパーセンテージ量は、別段の表示のない限り重量パーセントである。部は重量部である。液／液溶液についての溶媒比、希釈比および濃度データはそれぞれ体積に基づいている。
【実施例】
【０１３４】
略語および頭字語：
ａｂｓ．      絶対
Ａｃ          アセチル
ａｑ．        水性、水溶液
Ｂｏｃ        ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ｂｒ．        広幅（ＮＭＲにおいて）
Ｂｓｐ．      実施例
ｃａ．        約（ｃｉｒｃａ、ａｐｐｒｏｘ．）
ＣＩ          化学イオン化（ＭＳにおいて）
ｄ            二重線（ＮＭＲにおいて）
ｄ            日
ＴＬＣ        薄層クロマトグラフィー
ＤＣＩ        直接化学イオン化（ＭＳにおいて）
ｄｄ          二重線の二重線（ＮＭＲにおいて）
ＤＭＡＰ      ４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＥ        １，２−ジメトキシエタン
ＤＭＦ        Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ      ジメチルスルホキシド
ＤＰＢＳ      ダルベッコリン酸緩衝食塩水
ｄｔ          三重線の二重線（ＮＭＲにおいて）
ｔｈｅｏｒ．  理論値の
ＥＤＣ        Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩
ＥＩ          電子衝突イオン化（ＭＳにおいて）
ｅｑ．        当量
ＥＳＩ        エレクトロンスプレーイオン化（ＭＳにおいて）
ＦＣＳ        ウシ胎仔血清
Ｆｍｏｃ      （９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル
ＧＣ−ＭＳ    ガスクロマトグラフィー連結型質量分析
ｓａｔ．      飽和（した）
ＧＴＰ        グアノシン５’−三リン酸
ｈ            時間
ＨＡＴＵ      Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，
Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＥＰＥＳ    ４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−エタンスルホン酸
ＨＯＡｃ      酢酸
ＨＯＢｔ      １−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物
ＨＯＳｕ      Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド
ＨＰＬＣ      高圧高速液体クロマトグラフィー
ＨＲ−ＭＳ    高分解能質量分析
ｃｏｎｃ．    濃縮（された）
ＬＣ−ＭＳ    液体クロマトグラフィー連結型質量分析
ｍ            多重線（ＮＭＲにおいて）
ｍｉｎ        分
ＭＳ          質量分析
ＭＴＢＥ      メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＭＴＴ        ３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフ
ェニル−２Ｈ−テトラゾリウムブロミド
ＮＭＭ        Ｎ−メチルモルホリン
ＮＭＰ        Ｎ−メチル−２−ピロリジノン
ＮＭＲ        核磁気共鳴分析法
ＰＢＳ        リン酸緩衝食塩水
Ｐｄ／Ｃ      活性炭担持パラジウム
ｑｕａｎｔ．  定量的（収率において）
ｑｕａｒｔ    四重線（ＮＭＲにおいて）
ｑｕｉｎｔ    五重線（ＮＭＲにおいて）
Ｒｆ          保持指数（ＴＬＣにおいて）
ＲＴ          室温
Ｒｔ          保持時間（ＨＰＬＣにおいて）
ｓ            一重線（ＮＭＲにおいて）
ｔ            三重線（ＮＭＲにおいて）
ｔｅｒｔ      第三
ＴＦＡ        トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ        テトラヒドロフラン
ＵＶ          紫外分光法
ｖ／ｖ        体積対体積比（溶液の）
Ｚ            ベンゾキシカルボニル
ｔｏｇ．      一緒に  。
【０１３５】
ＨＰＬＣ、ＬＣ−ＭＳおよびＧＣ−ＭＳ法：
方法１（ＬＣ−ＭＳ）
機器：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＳＱＤ  ＵＰＬＣシステム；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μ  ５０ｍｍ×１ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．２５ｍＬ  ９９％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．２５ｍＬ  ９９％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  ９０％Ａ→１．２ｍｉｎ  ５％Ａ→２．０ｍｉｎ  ５％Ａ；流量：０．４０ｍＬ／ｍｉｎ；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０〜４００ｎｍ。
【０１３６】
方法２（ＬＣ−ＭＳ）
機器：Ｗａｔｅｒｓ  ＵＰＬＣ  Ａｃｑｕｉｔｙを備えたＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ；カラム：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ＧＯＬＤ  １．９μ  ５０ｍｍ×１ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  ９０％Ａ→０．１ｍｉｎ  ９０％Ａ→１．５ｍｉｎ  １０％Ａ→２．２ｍｉｎ  １０％Ａ；流量：０．３３ｍＬ／ｍｉｎ；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１３７】
方法３（ＬＣ−ＭＳ）
機器：ＨＰＬＣ  Ａｇｉｌｅｎｔシリーズ１１００を備えたＭｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  Ｍｉｃｒｏ  ＭＳ；カラム：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ＧＯＬＤ  ３μ  ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  １００％Ａ→３．０ｍｉｎ  １０％Ａ→４．０ｍｉｎ  １０％Ａ→４．０１ｍｉｎ  １００％Ａ（流量：２．５ｍＬ／ｍｉｎ）→５．００ｍｉｎ  １００％Ａ；オーブン：５０℃；流量：２ｍＬ／ｍｉｎ；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１３８】
方法４（ＬＣ−ＭＳ）
機器タイプ  ＭＳ：Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ；機器タイプ  ＨＰＬＣ：ＨＰ１１００シリーズ；ＵＶ  ＤＡＤ；カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  ３μ  ３０ｍｍ×３．００ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  ９０％Ａ→２．５ｍｉｎ  ３０％Ａ→３．０ｍｉｎ  ５％Ａ→４．５ｍｉｎ  ５％Ａ；流量：０．０ｍｉｎ  １ｍＬ／ｍｉｎ）→２．５ｍｉｎ／３．０ｍｉｎ／４．５ｍｉｎ  ２ｍＬ／ｍｉｎ；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１３９】
方法５（ＨＰＬＣ）
機器：ＨＰ１０９０シリーズＩＩ；カラム：Ｍｅｒｃｋ  Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  Ｓｐｅｅｄ  ＲＯＤ  ＲＰ−１８ｅ、５０ｍｍ×４．６ｍｍ；プレカラム：Ｍｅｒｃｋ  Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ｇｕａｒｄカートリッジキットＲＰ−１８ｅ、５ｍｍ×４．６ｍｍ；注入体積：５μＬ；溶離液Ａ：水に７０％ＨＣｌＯ４（４ｍＬ／Ｌ）；溶離液Ｂ：アセトニトリル；勾配：０．００ｍｉｎ  ２０％Ｂ→４．００ｍｉｎ  ２０％Ｂ；流量：５ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：４０℃。
【０１４０】
方法６（ＨＰＬＣ）
機器：ＤＡＤ  ９９６を備えたＷａｔｅｒｓ  ２６９５；カラム：Ｍｅｒｃｋ  Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  Ｓｐｅｅｄ  ＲＯＤ  ＲＰ−１８ｅ、５０ｍｍ×４．６ｍｍ；プレカラム：Ｍｅｒｃｋ  Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ  ＧｕａｒｄカートリッジキットＲＰ−１８ｃ、５ｍｍ×４．６ｍｍ；溶離液Ａ：水に７０％ＨＣＬＯ４（４ｍＬ／Ｌ）；溶離液Ｂ：アセトニトリル；勾配：０．００ｍｉｎ  ５％Ｂ→３．００ｍｉｎ  ９５％Ｂ→４．００ｍｉｎ  ９５％Ｂ；流量：５ｍＬ／ｍｉｎ。
【０１４１】
方法７（ＬＣ−ＭＳ）
機器タイプ：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ；機器タイプ  ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズ；ＵＶ  ＤＡＤ；カラム：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ＧＯＬＤ  ３μ  ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  １００％Ａ→３．０ｍｉｎ  １０％Ａ→４．０ｍｉｎ  １０％Ａ→４．１ｍｉｎ  １００％Ａ（流量：２．５ｍＬ／ｍｉｎ）；オーブン：５５℃；流量：２ｍＬ／ｍｉｎ；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１４２】
方法８（ＬＣ−ＭＳ）
機器タイプ  ＭＳ：Ｗａｔｅｒｓ  ＺＱ；機器タイプ  ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズ；ＵＶ  ＤＡＤ；カラム：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｈｙｐｅｒｓｉｌ  ＧＯＬＤ  ３μ  ２０ｍｍ×４ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．５ｍＬ  ５０％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  １００％Ａ→２．０ｍｉｎ  ６０％Ａ→２．３ｍｉｎ  ４０％Ａ→３．０ｍｉｎ  ２０％Ａ→４．０ｍｉｎ  １０％Ａ→４．２ｍｉｎ  １００％Ａ（流量：２．５ｍＬ／ｍｉｎ）；オーブン：５５℃；流量：２ｍＬ／ｍｉｎ；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１４３】
方法９（ＬＣ−ＭＳ）
機器：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＳＱＤ  ＵＰＬＣシステム；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μ  ５０ｍｍ×１ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．２５ｍＬ  ９９％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．２５ｍＬ  ９９％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  ９５％Ａ→６．０ｍｉｎ  ５％Ａ→７．５ｍｉｎ  ５％Ａ；オーブン：５０℃；流量：０．３５ｍＬ／ｍｉｎ；ＵＶ検出：２１０〜４００ｎｍ。
【０１４４】
方法１０（ＨＰＬＣ）
機器：Ａｇｉｌｅｎｔ  １２００シリーズ；カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８  ５μ  ４．６ｍｍ×１５０ｍｍ；プレカラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  ＫｒｕｄＫａｔｃｈｅｒ型使い捨てプレカラム；注入体積：５μＬ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．０１％トリフルオロ酢酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル；勾配：０．０ｍｉｎ  １０％Ｂ→１．００ｍｉｎ  １０％Ｂ→１．５０ｍｉｎ  ９０％Ｂ→５．５ｍｉｎ  １０％Ｂ；流量：２ｍＬ／ｍｉｎ；カラム温度：３０℃。
【０１４５】
方法１１（ＬＣ−ＭＳ）
機器：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＳＱＤ  ＵＰＬＣシステム；カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＨＳＳ  Ｔ３  １．８μ  ３０ｍｍ×２ｍｍ；溶離液Ａ：１リットル水＋０．２５ｍＬ  ９９％ギ酸；溶離液Ｂ：１リットル  アセトニトリル＋０．２５ｍＬ  ９９％ギ酸；勾配：０．０ｍｉｎ  ９０％Ａ→１．２ｍｉｎ  ５％Ａ→２．０ｍｉｎ  ５％Ａ；流量：０．６０ｍＬ／ｍｉｎ；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２０８〜４００ｎｍ。
【０１４６】
方法１２（ＧＣ−ＭＳ）
機器：Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＧＣＴ、ＧＣ  ６８９０；カラム：Ｒｅｓｔｅｋ  ＲＴＸ−３５、１５ｍ×２００μｍ×０．３３μｍ；一定流量のヘリウム：０．８８ｍＬ／ｍｉｎ；オーブン：７０℃；入口：２５０℃；勾配：７０℃、３０℃／ｍｉｎ→３１０℃（３ｍｉｎ保持）。
【０１４７】
方法１３（ＨＲ−ＭＳ）
機器：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＬＴＱ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ  ＸＬ；ＦＴＭＳ  ＥＳＩポジティブ  。
【０１４８】
その調製手順が以下で明確に記述されていないすべての反応物および試薬は、一般に利用し得る供給源から商業的に入手することができる。その調製手順がやはり以下で明確に記述されておらず商業的に入手することができない、または一般に利用できない供給源から入手される他のすべての反応物および試薬については、それらの調製を記載している既刊文献を参照した。
【０１４９】
出発化合物および中間体：
出発化合物１
（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（２Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル］−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸（Ｂｏｃ−ドラプロイン（Ｄｏｌａｐｒｏｉｎ））ジシクロヘキシルアミン塩
【０１５０】
【化３８】
0006023097.tif 000053
表題化合物は文献に記載されている手順による種々の方法で合成することができる；例えば、Ｐｅｔｔｉｔら、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １９９６年、７１９頁；Ｓｈｉｏｉｒｉら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９１年、３２巻、９３１頁；Ｓｈｉｏｉｒｉら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９３年、４９巻、１９１３頁；Ｋｏｇａら、Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９１年、３２巻、２３９５頁；Ｖｉｄａｌら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ２００４年、６０巻、９７１５頁；Ｐｏｎｃｅｔら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９４年、５０巻、５３４５頁を参照されたい。本明細書ではＳｈｉｏｉｒｉら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９１年、３２巻、９３１頁）による手順にしたがって合成した。
【０１５１】
出発化合物２
ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）ヘプタノエート塩酸塩（ドライソロイシン（Ｄｏｌａｉｓｏｌｅｕｃｉｎ）ＯｔＢｕ×ＨＣｌ）
【０１５２】
【化３９】
0006023097.tif 000054
表題化合物は文献に記載されている種々の方法で合成することができる；例えばＰｅｔｔｉｔら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９４年、５９巻、１７９６頁；Ｋｏｇａら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９１年、３２巻、２３９５頁；Ｓｈｉｏｉｒｉら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９１年、３２巻、９３１頁；Ｓｈｉｏｉｒｉら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９３年、４９巻、１９１３頁を参照されたい。本明細書ではこれをＫｏｇａら（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９１年、３２巻、２３９５頁）による手順にしたがって合成した。
【０１５３】
中間体１
ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリル｝（メチル）アミノ］−３−メトキシ−５−メチルヘプタノエート
【０１５４】
【化４０】
0006023097.tif 000055
４２５ｍｇ（１．７ｍｍｏｌ）Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリンを５０ｍＬ  ＤＭＦに溶解し、５００ｍｇ（１．７ｍｍｏｌ）ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−５−メチル−４−（メチルアミノ）ヘプタノエート塩酸塩（出発化合物２）、３５６ｍｇ（１．９ｍｍｏｌ）１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩、２８５ｍｇ（１．９ｍｍｏｌ）１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物および６５５ｍｇ（５．１ｍｍｏｌ）Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンと逐次混合した。混合物をＲＴで２０時間撹拌した。次いで１４２ｍｇ（０．５ｍｍｏｌ）Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−バリン、１１９ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩、９５ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物および２１８ｍｇ（１．７ｍｍｏｌ）Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルメチルアミンも加え、混合物を超音波で９０ｍｉｎ処理した。次いでこのバッチを５０％塩化アンモニウム飽和水溶液と酢酸エチルの混合液に注いだ。有機相を分離し、次いで重炭酸ナトリウム飽和溶液および塩化ナトリウム飽和溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。次いで残留物を分取ＨＰＬＣで精製して３２９ｍｇ（理論値の４０％）の表題化合物を無色油状物として得た。
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝２．５ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．４５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝４９３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５５】
中間体２
ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−５−メチル−４−［メチル（Ｌ−バリル）アミノ）ヘプタノエート
【０１５６】
【化４１】
0006023097.tif 000056
５００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−４−［｛Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−（Ｌ−バリル｝（メチル）アミノ］−３−メトキシ−５−メチルヘプタノエート（中間体１）を５０ｍＬメタノールに溶解し、１００ｍｇ１０％活性炭担持パラジウムを加えた後、標準圧力下、ＲＴで１時間水素化した。次いで触媒をろ別し、溶媒を真空下で除去して３７０ｍｇ（定量的）の表題化合物をほぼ無色の油状物として得た。
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝１．５９ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．７４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３５９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５７】
中間体３
Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０１５８】
【化４２】
0006023097.tif 000057
３９６ｍｇ（１．１ｍｍｏｌ）Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンをＤＭＦに溶解し、次いで３６５ｍｇ（１ｍｍｏｌ）ｔｅｒｔ−ブチル−（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−５−メチル−４−［メチル（Ｌ−バリル）アミノ］ヘプタノエート（中間体２）、２３４ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩および１８７ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール水和物と逐次混合した。混合物をＲＴで終夜撹拌した。次いでこのバッチを５０％塩化アンモニウム飽和水溶液と酢酸エチルの混合液に注いだ。有機相を分離し、重炭酸ナトリウム飽和溶液および塩化ナトリウム飽和溶液で逐次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残留物を、さらに精製することなく次のステップで直接使用した。
収量：６６０ｍｇ（理論値の６８％）
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝３．０ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．６１ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６９４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１５９】
中間体４
Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−１−カルボキシ−２−メトキシ−４−メチルヘキサン−３−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０１６０】
【化４３】
0006023097.tif 000058
６５０ｍｇ（０．９４ｍｍｏｌ）Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体３）を５ｍＬジクロロメタンに溶解し、５ｍＬトリフルオロ酢酸と混合し、ＲＴで終夜撹拌した。次いで混合物を真空下で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製して４３０ｍｇ（理論値の７２％）の表題化合物を無色泡状物として得た。
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝２．４ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法２）：Ｒｔ＝１．５１ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６３８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６１】
中間体５
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−１−カルボキシ−２−メトキシ−４−メチル−ヘキサン−３−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０１６２】
【化４４】
0006023097.tif 000059
５１ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）Ｎ−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−１−カルボキシ−２−メトキシ−４−メチルヘキサン−３−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体４）を１０ｍＬ  ＤＭＦに溶解し、０．５ｍＬピペリジンと混合した。ＲＴで１０ｍｉｎ撹拌した後、このバッチを真空下で濃縮し、残留物をジエチルエーテルと撹拌した。不溶性成分をろ別し、ジエチルエーテルで数回洗浄した。次いでフィルター残留物を５ｍＬジオキサン／水（１：１）に溶解し、この溶液を１Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ１１に調節した。超音波で処理しながら、合計３４９ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートを数回に分けて加えた。その間溶液のｐＨを１１に保持した。反応が終了した後、ジオキサンを蒸発させ、水溶液のｐＨをクエン酸で２〜３に調節した。それぞれ５０ｍＬの酢酸エチルで２回抽出を実施した。有機相を一緒にし、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物をジエチルエーテルに溶解し、生成物をペンタンで沈澱させた。溶媒をデカンテーションにより分離した。残留物をペンタンで再度蒸解させ、最後に高真空下で乾燥して３１ｍｇ（理論値の９３％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法６）：Ｒｔ＝２．２ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法２）：Ｒｔ＝１．３２ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝５１６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６３】
中間体６
ベンジル−（２Ｒ，３Ｓ）−メトキシ−２−メチル−３−［（２Ｓ）−ピロリジン−２−イル］プロパノエートトリフルオロ酢酸塩
【０１６４】
【化４５】
0006023097.tif 000060
最初に、（２Ｒ，３Ｒ）−３−［（２Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−イル］−３−メトキシ−２−メチルプロパン酸を１５０ｍＬ酢酸エチルに溶解し、１００ｍＬ  ０．５％硫酸水溶液で抽出することによって、それを、１．８２ｇ（３．８８ｍｍｏｌ）のジシクロヘキシルアミン塩（出発化合物１）から放出させた。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残留物を１０ｍＬジオキサンおよび１０ｍＬ水に溶解し、１５１７ｍｇ（４．６６ｍｍｏｌ）炭酸セシウムと混合し、超音波浴中で５ｍｉｎ処理した。次いでこれを真空下で濃縮し、残留物をＤＭＦで１回共蒸留させた。次いで残留物を１５ｍＬ  ＤＭＦに溶解し、１９９０ｍｇ（１１．６４ｍｍｏｌ）臭化ベンジルと混合した。混合物を超音波浴中で１５ｍｉｎ処理し、次いで真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチルと水に分配させた。有機相を分離し、塩化ナトリウム溶液で洗浄し、次いで濃縮した。残留物を最終的に分取ＨＰＬＣで精製し、それによって１１７０ｍｇ（理論値の８０％）のＢｏｃ保護された中間体ｔｅｒｔ−ブチル−（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−（ベンジルオキシ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−カルボキシレートを得た。
【０１６５】
この１１７０ｍｇの中間体を直ちに１５ｍＬジクロロメタンに溶解し、５ｍＬトリフルオロ酢酸と混合した。ＲＴで１５ｍｉｎ撹拌した後、このバッチを真空下で濃縮し、残留物をジオキサンから凍結乾燥した。高真空下で乾燥した後、１３３３ｍｇ（理論値の８４％）の表題化合物が黄色油状物として残った。
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝１．５ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．５９ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２７８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６６】
中間体７
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０１６７】
【化４６】
0006023097.tif 000061
１２００ｍｇ（２．３３ｍｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）−１−カルボキシ−２−メトキシ−４−メチル−ヘキサン−３−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体５）を、５０ｍＬ  ＤＭＦ中で、９１０．８ｍｇ（２．３３ｍｍｏｌ）ベンジル−（２Ｒ，３Ｒ）−３−メトキシ−２−メチル−３−［（２Ｓ）−ピロリジン−２−イル］プロパノエートトリフルオロ酢酸塩（中間体６）、１３２７ｍｇ（３．４９ｍｍｏｌ）のＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートおよび２０２７μＬのＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンと一緒にし、ＲＴで５ｍｉｎ撹拌した。次に溶媒を真空下で除去した。残留物を酢酸エチルに溶解し、５％クエン酸水溶液および重炭酸ナトリウム飽和溶液で逐次抽出した。有機相を分離し濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣで精製した。生成物画分を一緒にし、濃縮し、残留物を高真空下で乾燥して１０００ｍｇ（理論値の５５％）のベンジルエステル中間体Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−ベンジルオキシ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを樹脂状物として得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．５６ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６８】
得られた中間体全量を、２５ｍＬのメタノールとジクロロメタン（２０：１）の混合液に溶解し、ベンジルエステル基を、標準圧力下で１０％活性炭担持パラジウムを触媒として用いた水素化により取り外した。ＲＴで３０ｍｉｎ撹拌した後、触媒をろ別し、ろ液を真空下で濃縮して８０３ｍｇ（理論値の９１％）の表題化合物を白色固体として得た。
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝２．１ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．２４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６８５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６９】
中間体８
Ｎα−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−Ｌ−フェニルアラニンアミド
【０１７０】
【化４７】
0006023097.tif 000062
１０００ｍｇ（３．７７ｍｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニンを１０ｍＬジクロロメタンに加え、７３３ｍｇ（４．５２ｍｍｏｌ）１，１’−カルボニルジイミダゾールと混合した。このバッチを、ガスの発生が停止するまで１５ｍｉｎ撹拌した。次に、混合物を４４１ｍｇ（４．５２ｍｍｏｌ）Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩および６５７μＬ（３．７７ｍｍｏｌ）Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンと混合し、ＲＴで１時間撹拌した。次に、このバッチをジクロロメタンで希釈し、蒸留水、０．５Ｎ塩酸および塩化ナトリウム飽和溶液で逐次洗浄した。有機相を分離し、一緒にした水相を酢酸エチルで再抽出した。一緒にした有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮して１０９０ｍｇ（理論値の９３％）の表題化合物を得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０２ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３０９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７１】
中間体９
ｔｅｒｔ−ブチル−［（２Ｓ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］カルバメート
【０１７２】
【化４８】
0006023097.tif 000063
１０９０ｍｇ（３．５ｍｍｏｌ）Ｎα−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−Ｌ−フェニルアラニンアミドを２０ｍＬの２−メチルテトラヒドロフランに溶解し、０℃に冷却した。次いで４．２ｍＬ（４．２ｍｍｏｌ）の１Ｍリチウムアルミニウムヒドリド溶液をＴＨＦに徐々に加え、反応混合物を０℃で３０ｍｉｎ撹拌した。次に、５％硫酸水素カリウム水溶液を注意深く加えた。次いでこのバッチを水で希釈し、ＭＴＢＥで抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮して８２０ｍｇ（理論値の９４％）の表題化合物を得た。
ＧＣ−ＭＳ（方法１２）：Ｒｔ＝５．６１ｍｍ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２２０（Ｍ−２９）＋
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］＝１．１５−１．４２（ｍ，  ９Ｈ），  ７．１１−７．３９（ｍ，  ５Ｈ），  ９．５２（ｓ，  １Ｈ）［追加的なシグナルは溶媒ピークの下に隠れた］
中間体１０
（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−アミントリフルオロ酢酸塩
【０１７３】
【化４９】
0006023097.tif 000064
アルゴン下で、ヘキサン中の８４２μＬ（２．１ｍｍｏｌ）の２．５Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液を、１２５ｍＬ  ＴＨＦ中の９８６ｍｇ（２．２ｍｍｏｌ）トリフェニル−（２−フェニルエチル）ホスホニウムブロミド［例えばＲ．Ｗ．Ｈａｒｔｍａｎｎ、Ｍ．Ｒｅｉｃｈｅｒｔ、Ａｒｃｈｉｖ  ｄｅｒ  Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ３３３、１４５頁（２０００年）；Ｋ．Ｃ．Ｎｉｃｏｌａｏｕら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．１巻、４６７頁（１９９５年）にしたがって合成することができる］の−７８℃での懸濁液に加え、次いで混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで反応混合物を冷却して−７８℃に戻し、５ｍＬ乾燥ＴＨＦ中の５００ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）ｔｅｒｔ−ブチル−［（２Ｓ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］カルバメートの溶液を加えた。このバッチを０℃に加熱し、この温度でさらに３時間撹拌した。次いで、塩化アンモニウム飽和水溶液を加えて反応を終了させた。混合物をＭＴＢＥで希釈し、相を分離し、有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残留物を、移動相としてシクロヘキサン／酢酸エチル５：１を用いてシリカゲルカラムで精製した。対応する画分を濃縮した後、１７３ｍｇ（理論値の２５．６％）のＢｏｃ保護された中間体、ｔｅｒｔ−ブチル−［（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−イル］カルバメートを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］＝１．１６−１．４６（ｍ，  ９Ｈ），  ２．６２（ｄｄ，  Ｊ＝１３．２０Ｈｚ，  ７．３４Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．７３−３．１８（ｍ，  １Ｈ），  ４．５６（ｔ，  Ｊ＝７．４６Ｈｚ，  １Ｈ），  ５．２７−５．５７（ｍ，  １Ｈ），  ６．９８−７．３２（ｍ，  １０Ｈ）［追加的なシグナルは溶媒ピークの下に隠れた］。
【０１７４】
１７３ｍｇ（５１２μｍｏｌ）の中間体ｔｅｒｔ−ブチル［（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−イル］カルバメートを１６ｍＬジクロロメタンに加え、４ｍＬトリフルオロ酢酸と混合し、ＲＴで３０ｍｉｎ静置した。次に、反応混合物を濃縮し、残留物を真空下で乾燥して１８０ｍｇ（理論値の９９％）の表題化合物を得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．７４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２３８（Ｍ＋Ｈ）＋。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］＝２．６４−２．８３（ｍ，  １Ｈ），  ２．８８−３．２２（ｍ，  ２Ｈ），  ４．００−４．５５（ｍ，  １Ｈ），  ５．１６−５．４６（ｍ，  １Ｈ），  ５．４８−５．７８（ｍ，  １Ｈ），  ６．６０−６．８９（ｍ，  ２Ｈ），  ７．１４（ｓ，  ３Ｈ），  ７．２２−７．３６（ｍ，  ５Ｈ），  ７．８９−８．２７（ｍ，  ２Ｈ）．
中間体１１
（２Ｓ）−１−（ベンジルスルホニル）−３−フェニルプロパン−２−アミン
【０１７５】
【化５０】
0006023097.tif 000065
２００ｍｇ（１．１３ｍｍｏｌ）（４Ｓ）−４−ベンジル−１，３−ベンジル−１，３−オキサゾリジン−２−オンを３ｍＬのｔｅｒｔ−ブタノールに加え、２８０ｍｇ（２．２６ｍｍｏｌ）ベンジルメルカプタンと混合した。次いで混合物を２日間還流加熱した。次いでこのバッチをロータリーエバポレーターで濃縮し、得られた中間体（２Ｓ）−１−（ベンジルスルファニル）−３−フェニルプロパン−２−アミンを、さらに後処理することなく反応させた。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．６３ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．６７ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２５８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７６】
上記で得た粗製中間体を、２ｍＬ  ３０％過酸化水素および５ｍＬギ酸の溶液に溶解し、ＲＴで１２ｈ撹拌した。次いで反応混合物を硫酸ナトリウム飽和水溶液に注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣで精製して３４３ｍｇ（理論値の６１％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．４０ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．６５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２９０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７７】
中間体１２
（２Ｓ，３Ｚ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−アミン
【０１７８】
【化５１】
0006023097.tif 000066
５５２．７ｍｇ（９．８５ｍｍｏｌ）水酸化カリウムを１．１ｇ酸化アルミニウムで吸収させたメタノールに溶解し、次いで高真空下で乾燥した。５〜１０℃で、３０７μＬ（３．３ｍｍｏｌ）ジブロモジフルオロメタンを、この仕方で酸化アルミニウムを用いた６．２ｍＬ  ｎ−ブタノール中の２４０ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）（２Ｓ）−１−ベンジルスルホニル）−３−フェニルプロパン−２−アミンおよび１．５６ｇの水酸化カリウムの溶液を滴下添加した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌し、次いでセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）でろ過し、残留物をジクロロメタンで十分に再洗浄した。ろ液を濃縮し、得られた残留物を真空下で乾燥した。得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣで精製して９８ｍｇ（理論値の３５％）の表題化合物を４：１のＥ／Ｚジアステレオマー比で得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．４６ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．７５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２２４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７９】
上記で得られたＥ／Ｚジアステレオマー混合物を２ｍＬエタノールおよび０．２ｍＬ  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンに溶解し、キラル相［カラム：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ、５μｍ、２５０ｍｍ×２０ｍｍ；溶離液：ヘキサン／（エタノール＋０．２％ジエチルアミン）５０：５０ｖ／ｖ；ＵＶ検出：２２０ｎｍ；温度：３０℃］を用いてＨＰＬＣで分離した。対応する画分をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物を真空下で乾燥して１０ｍｇの表題化合物を純粋なＺ異性体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］＝２．７１（ｄ，  Ｊ＝６．６０Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７３−３．９５（ｍ，  １Ｈ），  ５．４２−５．６７（ｍ，  １Ｈ），  ６．２１−６．５０（ｍ，  １Ｈ），  ７．０８−７．３８（ｍ，  １０Ｈ）［追加的なシグナルは溶媒ピークの下に隠れた］。
【０１８０】
中間体１３
（２Ｓ，３Ｅ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−アミン
【０１８１】
【化５２】
0006023097.tif 000067
表題化合物（純粋なＥ異性体）を、中間体１２について説明したようにした、キラル相を用いたクロマトグラフによるジアステレオマー分離の過程で４５ｍｇの収量で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：  δ  ［ｐｐｍ］＝２．６２−２．８３（ｍ，  ２Ｈ），  ３．５２−３．７１（ｍ，  １Ｈ），  ６．１８−６．３０（ｍ，  １Ｈ），  ６．３４−６．４６（ｍ，  １Ｈ），  ６．９８−７．５７（ｍ，  １０Ｈ）［追加的なシグナルは溶媒ピークの下に隠れた］。
【０１８２】
中間体１４
（１Ｓ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エタンアミントリフルオロ酢酸塩
【０１８３】
【化５３】
0006023097.tif 000068
２００ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニンを０℃で５．５ｍＬジクロロメタンに加え、１２８ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）１，１’−カルボニルジイミダゾールと混合した。３０ｍｉｎ後、１０３ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ）ベンゾイルヒドラジドを加えた。最後に、０℃で４５ｍｉｎさらにかけた後、５００ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）四臭化炭素および３９５ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）トリフェニルホスフィンを加えた。このバッチをまず０℃で２ｈ撹拌し、次いでＲＴで終夜撹拌した。次いで混合物をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物を高真空下で乾燥した。得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣで精製して２１７ｍｇ（理論値の７８％）のＢｏｃ保護された中間体ｔｅｒｔ−ブチル−［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］カルバメートを得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝３．０１ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．１５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３６６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８４】
２１７ｍｇ（０．５９ｍｍｏｌ）のこの中間体を３ｍＬジクロロメタンに溶解し、０．６ｍＬトリフルオロ酢酸と混合し、ＲＴで３０ｍｉｎ撹拌した。次いで混合物を真空下で濃縮した。残留物を真空下でさらに乾燥し、次いでジオキサンから凍結乾燥し、それによって２１４ｍｇ（理論値の９０％）の表題化合物を白色固体として得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．４３ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．６２ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝２６６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８５】
中間体１５
（１Ｒ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エタンアミントリフルオロ酢酸塩
【０１８６】
【化５４】
0006023097.tif 000069
２００ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニンを０℃で５．５ｍＬジクロロメタンに加え、１２８．３ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）１，１’−カルボニルジイミダゾールと混合した。３０ｍｉｎ後、１０３ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ）ベンゾイルヒドラジドを加えた。最後に、０℃で４５ｍｉｎさらにかけた後、５００ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）四臭化炭素および３９５ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ）トリフェニルホスフィンを加えた。このバッチをまず０℃で２ｈ撹拌し、次いでＲＴで終夜撹拌した。次いで混合物をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物を高真空下で乾燥した。得られた粗生成物を分取ＨＰＬＣで精製して２１９ｍｇ（理論値の８０％）のＢｏｃ保護された中間体ｔｅｒｔ−ブチル−［（１Ｒ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］カルバメートを得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝３．０１ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法２）：Ｒｔ＝１．３６ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３６６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８７】
２１９ｍｇ（０．６ｍｍｏｌ）のこの中間体を３ｍＬジクロロメタンに溶解し、０．６ｍＬトリフルオロ酢酸と混合し、ＲＴで３０ｍｉｎ撹拌した。次に混合物を真空下で濃縮した。残留物を真空下でさらに乾燥し、次いでジオキサンから凍結乾燥し、次いで１９６ｍｇ（理論値の８６％）の表題化合物を白色固体として得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．４１ｍｉｎ。
【０１８８】
中間体１６
メチル−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−アミノ−４−フェニルブタ−１−エン−１−イル）ベンゾエートトリフルオロ酢酸塩
【０１８９】
【化５５】
0006023097.tif 000070
０．９ｍｇ（４μｍｏｌ）酢酸パラジウムを５ｍＬ  ＤＭＦに加え、次いで２０．８ｍｇ（９７μｍｏｌ）メチル−４−ブロモベンゾエート、２０ｍｇ（８１μｍｏｌ）（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−１−フェニルブタ−３−エン−２−イルカルバメート、１．１ｍｇ（８μｍｏｌ）フェニル尿素および１１．２ｍｇ（８１μｍｏｌ）炭酸カリウムと逐次混合した。次いで反応混合物を、マイクロ波装置（Ｅｍｒｙｓ（商標）Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒ）中１６０℃で１５ｍｉｎ撹拌した。次いで混合物をろ過し、ろ液を分取ＨＰＬＣ（溶離液：０．１％ＴＦＡを含むメタノール／水勾配）によりその構成成分に分離して２１．３ｍｇ（理論値の６８％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝３．２３ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１１）：Ｒｔ＝１．３２ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝３８２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９０】
中間体１７
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０１９１】
【化５６】
0006023097.tif 000071
１５ｍｇ（２２μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）を７５０μＬ  ＤＭＦに加え、１１．４４μＬ（６６μｍｏｌ）Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンおよび１０ｍｇ（２６μｍｏｌ  ＨＡＴＵと混合した。このバッチをＲＴで３０ｍｉｎ撹拌した。次いで８．５ｍｇ（２４μｍｏｌ）（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−アミントリフルオロ酢酸塩（中間体１０）を加え、バッチをＲＴで終夜撹拌した。次いで反応混合物を、分取ＨＰＬＣにより直ちにその構成成分に分離して１８．１ｍｇ（理論値の９１％）のＢｏｃ保護された中間体Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−イル］アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを白色固体の形態で得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝４．７４ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１１）：Ｒｔ＝１．５８ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９０５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９２】
１６ｍｇ（１８μｍｏｌ）のこの中間体を１ｍＬジクロロメタンに溶解し、０．２ｍＬトリフルオロ酢酸と混合し、ＲＴで３０ｍｉｎ撹拌した。次いで混合物を真空下で濃縮した。残留物を真空下でさらに乾燥し、次いでジオキサンを凍結乾燥して１５．８ｍｇ（理論値の９７％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．６６ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０３ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９３】
中間体１８
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０１９４】
【化５７】
0006023097.tif 000072
最初に、中間体１７の合成と同様にして、２０ｍｇ（２９μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）を７．１ｍｇ（３２μｍｏｌ）（２Ｓ，３Ｚ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−アミン（中間体１２）と反応させることによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを合成した。
収量：９．２ｍｇ（理論値の３５％）
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝４．５２ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．５４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９５】
次いで、Ｂｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で続いて開裂させることによって９．５ｍｇ（理論値の９９％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．５８ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９７ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９６】
中間体１９
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｅ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０１９７】
【化５８】
0006023097.tif 000073
最初に、中間体１７の合成と同様にして、２０ｍｇ（２９μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）を７．１ｍｇ（３２μｍｏｌ）（２Ｓ，３Ｅ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−アミン（中間体１３）と反応させることによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｅ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを合成した。
収量：１５．１ｍｇ（理論値の５８％）
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝４．２ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．５１ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９８】
次いで、Ｂｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で続いて開裂させることによって１５．７ｍｇ（理論値の９９％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．６２ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９７ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１９９】
中間体２０
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ）−１−ベンジルスルホニル）−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０２００】
【化５９】
0006023097.tif 000074
最初に、中間体１７の合成と同様にして、２０ｍｇ（２９μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）を９．３ｍｇ（２０μｍｏｌ）（２Ｓ）−１−（ベンジルスルファニル）−３−フェニルプロパン−２−アミン（中間体１１）と反応させることによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ）−１−ベンジルスルホニル）−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを合成した。
収量：１９．２ｍｇ（理論値の６８％）
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝３．５ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．４１ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９５７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０１】
次いで、Ｂｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で続いて切断することによって１９．３ｍｇ（理論値の９９％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．５２ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８６ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８５７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０２】
中間体２１
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０２０３】
【化６０】
0006023097.tif 000075
最初に、中間体１７の合成と同様にして、２０ｍｇ（２９μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）を１２．２ｍｇ（３２μｍｏｌ）（１Ｓ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エタンアミントリフルオロ酢酸塩（中間体１４）と反応させることによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを合成した。
収量：２２ｍｇ（理論値の８１％）
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝３．７４ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．４５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０４】
次いで、Ｂｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で続いて切断することによって２２．４ｍｇ（理論値の９８％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．５２ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０５】
中間体２２
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｒ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０２０６】
【化６１】
0006023097.tif 000076
最初に、中間体１７の合成と同様にして、２０ｍｇ（２９μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）を１２．２ｍｇ（３２μｍｏｌ）（１Ｒ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エタンアミントリフルオロ酢酸塩（中間体１５）と反応させることによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｒ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを合成した。
収量：１７ｍｇ（理論値の６４％）
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝３．７４ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．４５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０７】
次いで、Ｂｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で続いて切断することによって１７．１ｍｇ（理論値の９９％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．５５ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１１）：Ｒｔ＝０．８５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２０８】
中間体２３
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−｛［（２Ｓ，３Ｅ）−４−［４−（メトキシカルボニル）フェニル］−１−フェニルブタ−３−エン−２−イル｝アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０２０９】
【化６２】
0006023097.tif 000077
最初に、中間体１７の合成と同様にして、２０ｍｇ（２９μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）を１２．７ｍｇ（３２μｍｏｌ）メチル−４−［（１Ｅ，３Ｓ）−３−アミノ−４−フェニルブタ−１−エン−１−イル］ベンゾエートトリフルオロ酢酸塩（中間体１６）と反応させることによって、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−｛［（２Ｓ，３Ｅ）−４−［４−（メトキシカルボニル）フェニル］−１−フェニルブタ−３−エン−２−イル｝アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを合成した。
収量：８．８ｍｇ（理論値の３２％）
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．５３ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９４９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１０】
次いで、Ｂｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で続いて切断することによって８ｍｇ（理論値の９０％）の表題化合物を得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．００ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８４９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１１】
中間体２４
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０２１２】
【化６３】
0006023097.tif 000078
７６μＬ（４３８μｍｏｌ）Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、８３ｍｇ（２１９μｍｏｌ  ＨＡＴＵおよび２６ｍｇ（１６１μｍｏｌ）２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エタンアミンを、３０ｍＬ  ＤＭＦ中の１００ｍｇ（１４６μｍｏｌ）Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−２−カルボキシ−１−メトキシプロピル］ピロリジン−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（中間体７）のＲＴでの溶液に加えた。混合物をＲＴで１５ｍｉｎ撹拌した。次いで反応混合物を真空下で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣでその構成成分に分離して１０１ｍｇ（理論値の８３％）のＢｏｃ保護された中間体、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［２−（１Ｈ−インドールｌ−３−イル）エチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル）−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドを得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．３２ｍｉｎ；ｍ／ｚ＝８２８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１３】
１０１ｍｇ（１２２μｍｏｌ）のこの中間体を１５ｍＬジクロロメタンに溶解し、１ｍＬトリフルオロ酢酸と混合し、ＲＴで３０ｍｉｎ撹拌した。次いで混合物を真空下で濃縮し、残留物を水／アセトニトリルから凍結乾燥して１０８ｍｇの表題化合物をほぼ無色の泡状物として定量的収率で得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７２８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１４】
中間体２５
Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−［（２−フェニルエチル）アミノ］プロピル｝ピロリジン−１−イル］−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル｝−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩
【０２１５】
【化６４】
0006023097.tif 000079
表題化合物を、中間体２４の合成と同様にして、６０ｍｇ（８８μｍｏｌ）の中間体７から出発して１０ｍｇ（８８μｍｏｌ）２−フェニルエタンアミンとカップリングさせ、次いでトリフルオロ酢酸を用いてＢｏｃを切断することによって、２ステップで得た。これにより３４ｍｇ（理論値の９７％）の表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ（方法５）：Ｒｔ＝２．７１ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８０ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝６８９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１６】
例示的実施形態：
（実施例１）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２１７】
【化６５】
0006023097.tif 000080
１４．５ｍｇ（１６μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，５−ジフェニルペンタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体１７）を１ｍＬジオキサン／水（１：１）に溶解し、２０．４μＬ（３２μｍｏｌ）の４−オキソブタン酸の１５％水溶液と混合した。次いでこのバッチを１００℃で１時間撹拌した。ＲＴに冷却した後、１．１ｍｇ（１７μｍｏｌ）ナトリウムシアノボロヒドリドを加え、約１５０μＬの０．１Ｎ塩酸を加えて混合物をｐＨ３に調節した。次いでこのバッチを１００℃でさらに２時間撹拌した。次いで１．１ｍｇ（１７μｍｏｌ）ナトリウムシアノボロヒドリドを再度加え、次に、約３００μＬの０．１Ｎ塩酸を加えて混合物をｐＨ３に調節した。次いでこのバッチを１００℃で２時間再度撹拌した。反応がまだ不完全であった場合、この手順をもう一度繰り返した。最後に、このバッチを濃縮し、粗生成物を分取ＨＰＬＣで精製し、ジオキサンから凍結乾燥して１３．１ｍｇ（理論値の９３％）の表題化合物を白色固体の形態で得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．６３ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０１ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８９１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２１８】
（実施例２）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２１９】
【化６６】
0006023097.tif 000081
９ｍｇ（１０μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｚ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体１８）を０．６ｍＬジオキサン／水（１：１）に溶解し、ナトリウムシアノボロヒドリドの存在下、実施例１での合成と同様の方法で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させた。ジオキサンから凍結乾燥した後、５．６ｍｇ（理論値の６４％）の表題化合物を白色固体の形態で得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．６１ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１１）：Ｒｔ＝０．９４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８７７（Ｍ＋Ｈ）＋。
ＨＲ−ＭＳ（方法１３）：ｍ／ｚ＝８７６．５。
【０２２０】
（実施例３）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｅ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２２１】
【化６７】
0006023097.tif 000082
１５．５ｍｇ（１０μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ，３Ｅ）−１，４−ジフェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体１９）を１．０ｍＬジオキサン／水（１：１）に溶解し、実施例１での合成と同様にして、ナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させた。ジオキサンから凍結乾燥させた後、１０．３ｍｇ（理論値の６８％）の表題化合物を白色固体の形態で得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．５９ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１１）：Ｒｔ＝０．９４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８７７（Ｍ＋Ｈ）＋。
ＨＲ−ＭＳ（方法１３）：ｍ／ｚ＝８７６．６；
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，  ジクロロメタン−ｄ２）：  δ  ［ｐｐｍ］＝０．７２−１．２１（ｍ，  １８Ｈ），  １．２３−１．４７（ｍ，  ３Ｈ），  １．５１−２．２２（ｍ，  ８Ｈ），  ２．２５−２．５４（ｍ，  ５Ｈ），  ２．６５−２．８６（ｍ，  ２Ｈ），  ２．９０−３．４７（ｍ，  １６Ｈ），  ３．５３−４．４６（ｍ，  ６Ｈ），  ４．７１−５．２７（ｍ，  ４Ｈ），  ５．４６−５．７２（ｍ，  １Ｈ），  ６．１０−６．３６（ｍ，  １Ｈ），  ６．４４−６．６７（ｍ，  ２Ｈ），  ７．０３−７．６７（ｍ，  １０Ｈ），  ９．１３（ｂｒ．  ｓ，  １Ｈ）  。
【０２２２】
（実施例４）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ）−１−（ベンジルスルファニル）−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２２３】
【化６８】
0006023097.tif 000083
１９．３ｍｇ（２０μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（２Ｓ）−１−（ベンジルスルファニル）−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体２０）を１．２ｍＬジオキサン／水（１：１）に溶解し、実施例１での合成と同様にして、ナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させた。ジオキサンから凍結乾燥させた後、８．６ｍｇ（理論値の４５％）の表題化合物を白色固体の形態で得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法１１）：Ｒｔ＝０．８５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９４３（Ｍ＋Ｈ）＋。
ＨＲ−ＭＳ（方法１３）：ｍ／ｚ＝９４２．６；
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，  ジクロロメタン−ｄ２）：  δ  ［ｐｐｍ］＝０．７２−１．２３（ｍ，  １８Ｈ），  １．２６−１．５６（ｍ，  ２Ｈ），  １．６０−１．９４（ｍ，  ４Ｈ），  １．９５−２．１７（ｍ，  ３Ｈ），  ２．２２−２．５４（ｍ，  ５Ｈ），  ２．６９−２．８７（ｍ，  ２Ｈ），  ２．９０−３．２７（ｍ，  １１Ｈ），  ３．３１−３．５３（ｍ，  ８Ｈ），  ３．５８−４．２０（ｍ，  ７Ｈ），  ４．２５−４．５４（ｍ，  ３Ｈ），  ４．５９−５．１５（ｍ，  ４Ｈ），  ６．２２（ｂｒ．  ｓ，  １Ｈ），  ６．９７−８．００（ｍ，  １０Ｈ），  ９．１３（ｂｒ．  ｓ，  １Ｈ）  。
【０２２４】
（実施例５）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２２５】
【化６９】
0006023097.tif 000084
２２．４ｍｇ（２４μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｓ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体２１）を１．４ｍＬジオキサン／水（１：１）に溶解し、実施例１による合成と同様にしてナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させた。ジオキサンから凍結乾燥させた後、８．２ｍｇ（理論値の３８％）の表題化合物を白色固体の形態で得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．５４ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９４ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９１９（Ｍ＋Ｈ）＋。
ＨＲ−ＭＳ（方法１３）：ｍ／ｚ＝９１８．６；
１Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，  ジクロロメタン−ｄ２）：  δ  ［ｐｐｍ］＝０．５８−１．２１（ｍ，  ２０Ｈ），  １．２５−１．５２（ｍ，  ２Ｈ），  １．６２−２．１９（ｍ，  ８Ｈ），  ２．２８−２．５０（ｍ，  ５Ｈ），  ２．６４−２．８４（ｍ，  ２Ｈ），  ２．８９−３．１６（ｍ，  ６Ｈ），  ３．１９−３．５２（ｍ，  １０Ｈ），  ３．５９−４．００（ｍ，  ４Ｈ），  ４．０２−４．４０（ｍ，  ３Ｈ），  ４．６６−５．１３（ｍ，  ３Ｈ），  ５．６１（ｄ，  １Ｈ），  ７．３２（ｄ，  ５Ｈ），  ７．４９−７．６９（ｍ，  ３Ｈ），  ７．９３−８．１６（ｍ，  ２Ｈ），  ９．０７（ｂｒ．  ｓ，  １Ｈ）  。
【０２２６】
（実施例６）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｒ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２２７】
【化７０】
0006023097.tif 000085
１７．１ｍｇ（１８μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−｛［（１Ｒ）−２−フェニル−１−（５−フェニル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体２２）を０．６ｍＬジオキサン／水（１：１）に溶解し、実施例１の合成プロセスと同様のプロセスで、ナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させた。ジオキサンから凍結乾燥させた後、１４．８ｍｇ（理論値の８９％）の表題化合物を白色固体の形態で得た。
ＨＰＬＣ（方法１０）：Ｒｔ＝２．５４ｍｉｎ；
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．９２ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９１９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２２８】
（実施例７）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２２９】
【化７１】
0006023097.tif 000086
表題化合物を、実施例１の合成プロセスと同様にして、１００ｍｇ（１１９μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体２４）をナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させることによって合成した。
収量：５０ｍｇ（理論値の４９％）
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８７ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８１４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２３０】
（実施例８）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−［（２−フェニルエチル）アミノ］プロピル｝ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２３１】
【化７２】
0006023097.tif 000087
表題化合物を、実施例１の合成プロセスと同様にして、５７ｍｇ（７１μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソ−３−［（２−フェニルエチル）アミノ］プロピル｝ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体２５）をナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させることによって合成した。
収量：１０ｍｇ（理論値の１９％）
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．８５ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝７７５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２３２】
（実施例９）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２３３】
【化７３】
0006023097.tif 000088
表題化合物を、実施例１の合成プロセスと同様にして、５７ｍｇ（７１μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩［中間体７を（１Ｓ，２Ｒ）−（＋）−ノルエフェドリンとカップリングし、次いでこれをトリフルオロ酢酸で脱保護することによって中間体１７と同様に合成した］をナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させることによって合成した。
収量：９４ｍｇ（理論値の８４％）
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝０．７９ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝８０５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２３４】
（実施例１０）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−（｛（２Ｓ，３Ｅ）−４−［４−（メトキシカルボニル）フェニル］−１−フェニルブタ−３−エン−２−イル｝アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２３５】
【化７４】
0006023097.tif 000089
表題化合物を、実施例１の合成プロセスと同様にして、４５ｍｇ（４７μｍｏｌ）Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−｛［（２Ｓ，３Ｅ）−４−［４−（メトキシカルボニル）フェニル］−１−フェニルブタ−３−エン−２−イル｝アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミドトリフルオロ酢酸塩（中間体２３）をナトリウムシアノボロヒドリドの存在下で４−オキソブタン酸の１５％水溶液と反応させることによって合成した。
収量：３３．９ｍｇ（理論値の７８％）
ＬＣ−ＭＳ（方法１）：Ｒｔ＝１．０２ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９３３（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２３６】
（実施例１１）
Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−１｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−３−｛［２Ｓ，３Ｅ）−４−（４−カルボキシフェニル）−１−フェニルブタ−３−エン−２−イル］アミノ｝−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−３−メトキシ−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド
【０２３７】
【化７５】
0006023097.tif 000090
３３．９ｍｇ（３６μｍｏｌ）Ｎ−（３−カルボキシプロピル）−Ｎ−メチル−Ｌ−バリル−Ｎ−［（３Ｒ，４Ｓ，５Ｓ）−３−メトキシ−１−｛（２Ｓ）−２−［（１Ｒ，２Ｒ）−１−メトキシ−３−（｛（２Ｓ，３Ｅ）−４−［４−（メトキシカルボニル）フェニル］−１−フェニルブタ−３−エン−２−イル｝アミノ）−２−メチル−３−オキソプロピル］ピロリジン−１−イル｝−５−メチル−１−オキソヘプタン−４−イル］−Ｎ−メチル−Ｌ−バリンアミド（実施例１０）を１．１ｍＬ  ＴＨＦ／水（１：１）に加え、３．５ｍｇ（１４５μｍｏｌ）水酸化リチウムと混合した。反応混合物をＲＴで終夜撹拌し、次いで１Ｎ塩酸を加えて酸性化させ、それぞれ１０ｍＬで２回抽出した。一緒にした有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して１８．３ｍｇ（８４％純度、理論値の４６％）の表題化合物を得た。
ＬＣ−ＭＳ（方法９）：Ｒｔ＝４．９８ｍｉｎ；ＭＳ（ＥＳＩｐｏｓ）：ｍ／ｚ＝９１９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０２３８】
Ｂ．生物学的効能の評価
本発明による化合物の生物学的活性は、当業者に知られているものなどのインビトロおよびインビボでの試験で実証することができる。例えば、化合物の薬理学的および薬物動態的特性は、以下で説明するアッセイの助けを得て本発明にしたがって測定することができる。
【０２３９】
Ｂ−１．ＨＴ２９ｗｔ細胞系に対する抗増殖効果の測定：
規定の細胞数のヒト結腸癌腫細胞系ＨＴ２９ｗｔ（野生型）を、９６ウェルマイクロタイタープレート中で完全培地（１０％ＦＣＳ−ＲＰＭＩ）（２５００細胞／ウェル）に播種し、３７℃／５％ＣＯ２で終夜インキュベートした。１８時間後、播種培地を、１０％ＦＣＳを含む新鮮培地で置き換えた。それぞれのテスト物質を加えて処理を開始させた。試験する物質について、１０−５Ｍ〜１０−１４Ｍの範囲の濃度（１：１０希釈系列）で用量効果曲線を決定した。４８ｈ〜９６ｈのインキュベーション時間を選択した。増殖を、ＭＴＴアッセイ（ＡＴＣＣ、Ｍａｎａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａ、ＵＳＡ、カタログ番号３０−１０１０Ｋ）の助けを得て検出した。選択したインキュベーション時間が終了した後、ＭＴＴ試薬を細胞とともに４ｈインキュベートし、次いで洗浄剤を加えて細胞の溶解を終夜かけて実施した。形成された色素を５７０ｎｍで検出した。テスト物質を含まないこと以外は同様に処理した細胞での増殖を１００％値と規定した。このテストで得られたデータは３連の測定値を表し、少なくとも２つの独立した実験を実施した。
【０２４０】
このアッセイによる代表的な例示的実施形態のＩＣ５０値を以下の表１に挙げる：
【０２４１】
【表１】
0006023097.tif 000091
これと比較して、このテストにおいて、モノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）は１０ｎＭのＩＣ５０値を有していた。
【０２４２】
Ｂ−２．チューブリン重合に対する影響の決定
がん細胞は、細胞分裂の増大によって腫瘍の成長をしばしばもたらす変性または新生細胞である。微小管は、紡錘体装置の紡錘糸を形成するものであり、細胞周期の必須構成要素である。微小管の制御された構築および破壊は娘細胞への染色体の正確な分配を可能にし、これは連続的な動的過程を示す。これらの動力学における混乱は不完全な細胞分裂をもたらし、最終的に細胞死をもたらす。しかし、がん細胞の細胞分裂の増大は、それらを、化学療法の固定成分である紡錘糸毒（Ｓｐｉｎｄｅｌｆａｓｅｒｇｉｆｔ）の影響を特に受け易くする。パクリタキセルまたはエポチロンなどの紡錘糸毒は微小管の重合速度の著しい増大をもたらすが、ビンカアルカロイドまたはモノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）は微小管の重合速度の著しい低下をもたらことになる。どちらの場合でも、細胞周期の必要な動力学は混乱に対して敏感である。本発明の関連で検討する化合物は、微小管の重合速度の低下をもたらす。
【０２４３】
Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ社（Ｄｅｎｖｅｒ、Ｃｏｌｏｒａｄｏ、ＵＳＡ；注文番号ＢＫ０１１）の「蛍光ベースの微小管重合アッセイキット」を、チューブリン重合を試験するために使用した。このアッセイでは、重合が自発的に起き得るように、ＧＴＰを未重合チューブリンに加える。このアッセイは、フルオロフォアの４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドール（ＤＡＰＩ）とチューブリンの結合に基づいている。遊離ＤＡＰＩと結合ＤＡＰＩは、異なる発光スペクトルをもとにして識別することができる。ＤＡＰＩは、未重合チューブリンと比較して、重合チューブリンに対してずっと高い親和性を有しており、そのため、チューブリン重合は、結合ＤＡＰＩフルオロフォアの蛍光の増大をもとにして追跡することができる。
【０２４４】
このアッセイを実施するために、ＤＭＳＯに溶解したテスト物質を１０ｍＭ〜１μＭの初期濃度から水に希釈した。緩衝液対照に加えて、重合増進パクリタキセルおよび重合阻害ビンブラスチンもアッセイ対照として含めた。測定のため、半分の底部面積を有する９６ウェルプレートを使用し、蛍光光度計で、３７℃で１時間チューブリン重合の動力学を追跡した。励起波長は３５５ｎｍであり、発光は４６０ｎｍで追跡した。最初の１０分内での線形上昇の範囲について、微小管の重合速度を表す、１分当たりの蛍光変化（ΔＦ／ｍｉｎ）を計算した。テスト物質の効力を、それぞれの重合速度の低下をもとに定量化した。
【０２４５】
Ｂ−３．インビトロでの血漿安定性の決定
方法Ａ：
それぞれのテスト物質１ｍｇを０．５ｍＬアセトニトリル／ＤＭＳＯ（９：１）に溶解した。この溶液２０μＬを取り出し、３７℃で１ｍＬのラット血漿およびヒト血漿（Ｌｉヘパリンを含む雄性ウィスター系ラットの血漿、Ｈａｒｌａｎ  ＆  Ｗｉｎｋｅｌｍａｎｎおよび／または全血標本からの新鮮なヒト白血球除去血漿）に加えた。標本を加えた直後（参照変数としての初期値）、次いで５、１０、３０、６０、１２０、１８０および２４０分後に、また任意選択で２４時間後にも、１００μＬのアリコートを取り、３００μＬアセトニトリルに加えた。沈澱した血漿タンパク質を５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離にかけ、次いで３０μＬの上清をＨＰＬＣで分析してその未変化テスト物質含量を測定した。結果を、対応するピークの面積パーセントをもとにして定量化した。
【０２４６】
ラット血漿でのＨＰＬＣ法：
機器：ＤＡＤ、バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブンおよびサーモスタットを備えたＡｇｉｌｅｎｔ１２００；カラム：Ｋｒｏｍａｓｉｌ１００  Ｃ１８、２５０ｍｍ×４ｍｍ、５μｍ；カラム温度：４５℃；溶離液Ａ：５ｍＬ過塩素酸／Ｌ水；溶離液Ｂ：アセトニトリル；勾配：０〜８ｍｉｎ  ９８％Ａ、２％Ｂ：８〜１５ｍｉｎ  ５６％Ａ、４４％Ｂ；１５〜２０ｍｉｎ  １０％Ａ、９０％Ｂ；２０〜２１ｍｉｎ  １０％Ａ、９０％Ｂ；２１〜２３ｍｉｎ  ９８％Ａ、２％Ｂ；２３〜２５ｍｉｎ  ９８％Ａ、２％Ｂ；流量：２ｍＬ／ｍｉｎ；ＵＶ検出：２２０ｎｍ。
【０２４７】
ヒト血漿でのＨＰＬＣ法：
機器：ＤＡＤ、バイナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブンおよびサーモスタットを備えたＡｇｉｌｅｎｔ１１００；カラム：Ｋｒｏｍａｓｉｌ１００  Ｃ１８、２５０ｍｍ×４ｍｍ、５μｍ；カラム温度：４５℃；溶離液Ａ：５ｍＬ過塩素酸／Ｌ水；溶離液Ｂ：アセトニトリル；勾配：０〜３ｍｉｎ  ９８％Ａ、２％Ｂ；３〜１０ｍｉｎ  ６５％Ａ、３５％Ｂ；１０〜１５ｍｉｎ  ４０％Ａ、６０％Ｂ；１５〜２１ｍｉｎ  １０％Ａ、９０％Ｂ；２１〜２２ｍｉｎ  １０％Ａ、９０％Ｂ；２２〜２４ｍｉｎ  ９８％Ａ、２％Ｂ；２４〜２６ｍｉｎ  ９８％Ａ、２％Ｂ；流量２ｍＬ／ｍｉｎ；ＵＶ検出：２２０ｎｍ。
【０２４８】
方法Ｂ：
それぞれのテスト物質をラット血漿および／またはヒト血漿中で、かるく撹拌しながら３７℃で５ｈインキュベートした。種々の時間点（０、２、５、１０、２０、３０、６０、１２０、１８０および３００分間）で、１００μＬのアリコートを取った。内部標準（１０μＬ）を加えた後、２００μＬのアセトニトリルを加えてタンパク質を沈澱させ、混合物をエッペンドルフ型遠心分離機で５分間遠心分離にかけた。１５０μＬ酢酸アンモニウム緩衝液、ｐＨ３を１５０μＬの上清に加えた後、未変化テスト物質含量をＬＣ／ＭＳＭＳで分析した。
【０２４９】
Ｂ−４．細胞透過性の測定：
物質の細胞透過性は、Ｃａｃｏ−２細胞を用いたフラックスアッセイで、インビトロでテストすることによって分析することができる［Ｍ．Ｄ．Ｔｒｏｕｔｍａｎ  ａｎｄ  Ｄ．Ｒ．Ｔｈａｋｋｅｒ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２０巻（８号）、１２１０〜１２２４頁（２００３年）］。そうするために、細胞を２４穴フィルタープレート上で１５〜１６日間培養した。透過を測定するために、それぞれのテスト物質をＨＥＰＥＳ緩衝液中で、頂端部（Ａ）または基底部（Ｂ）で細胞に添加し、２ｈインキュベートした。０ｈおよび２ｈ後に、シス位およびトランス位の区画からサンプルを採取した。サンプルを、逆相カラムを用いてＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ１２００、Ｂｏｅｂｌｉｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）で分離した。ＨＰＬＣシステムを、ターボイオンスプレーインターフェースを介してＡＰＩ４０００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ａｐｐｌｅｒａ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）に連結した。透過性を、Ｓｃｈｗａｂら［Ｄ．Ｓｃｈｗａｂら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６巻、１７１７〜１７２５頁（２００３年）］によって公開されている式を用いて計算したＰａｐｐ値をもとにして評価した。Ｐａｐｐ（Ｂ−Ａ）  対  Ｐａｐｐ（Ａ−Ｂ）の比が２超または０．５未満であった場合、その物質を、能動的に輸送されていると分類した。
【０２５０】
ＢからＡへの透過性［Ｐａｐｐ（Ｂ−Ａ）］は、細胞内で放出される坦毒体のために極めて重要である。この透過性が低ければ低いほど、細胞内放出後の細胞中でのその物質の滞留時間は長くなり、したがって、生化学的標的（ここでは：チューブリン）との相互作用のために利用できる時間も長くなる。
【０２５１】
以下の表２は、このアッセイによる代表的な例示的実施形態についての透過性データを示す：
【０２５２】
【表２】
0006023097.tif 000092
これと比較して、モノメチルオーリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）およびモノメチルオーリスタチンＦ（ＭＭＡＦ）はこのテストにおいてそれぞれ８９ｎｍ／ｓまたは７３ｎｍ／ｓのＰａｐｐ値を有していた。
【０２５３】
Ｂ−５．Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）についての物質特性の測定：
多くの腫瘍細胞は、しばしば細胞増殖抑制剤に対する耐性の進行と関係する、活性な成分および薬物のためのトランスポータータンパク質を発現する。したがって、Ｐ−糖タンパク質（Ｐ−ｇｐ）またはＢＣＲＰなどのそうしたトランスポータータンパク質の基質ではない物質は、改善された効果プロファイルを有する可能性がある。
【０２５４】
Ｐ−ｇｐ（ＡＢＣＢ１）のための物質の基質特性を、Ｐ−ｇｐ（Ｌ−ＭＤＲ１細胞）を過剰発現するＬＬＣ−ＰＫ１細胞を用いて、フラックスアッセイによって決定した［Ａ．Ｈ．Ｓｃｈｉｎｋｅｌら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９６巻、１６９８〜１７０５頁（１９９５年）］。そうするめに、ＬＬＣ−ＰＫ１細胞またはＬ−ＭＤＲ１細胞を９６ウェルフィルタープレート上で３〜４日間培養した。透過を測定するために、それぞれのテスト物質を、ＨＥＰＥＳ緩衝液中で単独かまたは阻害剤（例えば、イベルメクチンまたはベラパミル）の存在下、頂端部（Ａ）かまたは基底部（Ｂ）で細胞に添加し、２ｈインキュベートした。０ｈおよび２ｈ後に、シス位およびトランス位の区画からサンプルを採取した。サンプルを、逆相カラムを用いてＨＰＬＣで分離した。ＨＰＬＣシステムを、ターボイオンスプレーインターフェースを介してＡＰＩ３０００三連四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ａｐｐｌｅｒａ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、Ｇｅｒｍａｎｙ）に連結した。透過性を、Ｓｃｈｗａｂら［Ｄ．Ｓｃｈｗａｂら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４６巻、１７１６〜１７２５頁（２００３年）］によって公開されている式を用いて計算したＰａｐｐ値をもとにして評価した。Ｐａｐｐ（Ｂ−Ａ）  対  Ｐａｐｐ（Ａ−Ｂ）の流出比（Ｅｆｆｌｕｘ−Ｖｅｒｈａｅｌｔｎｉｓ）が２超であった場合、その物質をＰ−ｇｐ基質であると分類した。
【０２５５】
Ｌ−ＭＤＲ１細胞とＬＬＣ−ＰＫ１細胞との流出比またはイニシエーターの存在下もしくは非存在下での流出比を、Ｐ−ｇｐ基質特性を評価するための追加的基準として互いに比較することができる。これらの値が２超のファクターで異なる場合、それぞれの物質はＰ−ｇｐ基質である。
【０２５６】
Ｃ．医薬組成物についての例示的実施形態
本発明による化合物は、以下の方法で医薬調製物に転換させることができる：
錠剤：
組成：
１００ｍｇの本発明による化合物、５０ｍｇラクトース（一水和物）、５０ｍｇトウモロコシデンプン（未変性）、１０ｍｇポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）（ＢＡＳＦ、Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）および２ｍｇステアリン酸マグネシウム
錠剤重量２１２ｍｇ；直径８ｍｍ；曲率半径１２ｍｍ。
【０２５７】
調製：
本発明による化合物、ラクトースおよびデンプンの混合物をＰＶＰの５％水溶液（ｗ／ｗ）で顆粒化する。乾燥した後、顆粒をステアリン酸マグネシウムと５分間混合する。この混合物を慣用的な錠剤プレス（錠剤の形式については上記を参照）で圧縮する。１５ｋＮの圧縮力を、錠剤を圧縮するための指針値として用いた。
【０２５８】
経口投与用懸濁剤：
組成：
１０００ｍｇの本発明による化合物、１０００ｍｇエタノール（９６％）、４００ｍｇ  Ｒｈｏｄｉｇｅｌ（登録商標）（ＦＭＣ、Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ、ＵＳＡからのキサンタンガム）および９９ｇ水。
【０２５９】
１０ｍＬ経口懸濁剤は１００ｍｇの本発明による化合物の単一用量に相当する。
【０２６０】
経口投与用液剤：
組成：
５００ｍｇの本発明による化合物、２．５ｇポリソルベートおよび９７ｇポリエチレングリコール４００。２０ｇの経口液剤は１００ｍｇの本発明による化合物の単一用量に相当する。
【０２６１】
調製：
本発明による化合物を、撹拌しながら、ポリエチレングリコールとポリソルベートの混合液中に懸濁させる。撹拌プロセスを、本発明による化合物が完全に溶解するまで続行する。
【０２６２】
ｉ．ｖ．液剤：
本発明による化合物を、飽和溶解度未満の濃度で生理学的に許容される溶媒（例えば、等張食塩水、グルコース溶液５％および／またはＰＥＧ４００溶液３０％）に溶解させる。この溶液を滅菌ろ過し、滅菌したパイロジェンフリーの注射用バイアルに瓶詰する。