(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体：
【化１】
0005859118.tif 000069
［式中：
Ｒ１は、無置換又は１〜３個の同一若しくは異なるＱ１で置換された、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、６〜１０員のオルト縮合環基−Ｃ０−６アルキル及び７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−６アルキル（当該シクロアルキル、オルト縮合環基及びスピロ環基における炭素原子は、１〜３個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよい。）から選ばれ；
Ｑ１は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−６アルキルアシルアミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ及びＣ３−８シクロアルキルからなる群から選ばれ；
Ｒ２は、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された、Ｃ３−４シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、６〜１０員のオルト縮合環基−Ｃ０−６アルキル及び７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−６アルキル（当該シクロアルキル、オルト縮合環基及びスピロ環基における炭素原子は、１〜３個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよい。）から選ばれ；
Ｑ２は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−６アルコキシルカルボニル、Ｃ１−６アルキルアシルアミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル及びＣ１−６アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３は、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシルカルボニル、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−６アルキルアシルアミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル及びＣ１−６アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３’は、存在せず；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ及びジ（Ｃ１−６アルキル）アミノからなる群から選ばれ；
Ｘは、窒素原子であり；
Ｌは、Ｏであり；
Ｔは、共有結合、Ｃ（Ｏ）又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’は、水素又はＣ１−６アルキルからなる群から選ばれる。）からなる群から選ばれ；
Ｚは、水素であり；
ｑは、２であり、Ｒ３は、同一であっても、異なっていてもよく；
ｎは、０又は１からなる群から選ばれる。］。
【請求項２】
Ｒ１が、無置換又は１〜３個の同一若しくは異なるＱ１で置換された、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、６〜１０員のオルト縮合環基−Ｃ０−４アルキル及び７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−４アルキル（当該シクロアルキル、オルト縮合環基又はスピロ環における炭素原子は、１〜３個の同一または異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよい。）からなる群から選ばれ、Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル、Ｃ１−４アルキルスルホニルアミノ及びＣ３−８シクロアルキルからなる群から選ばれるか；或いは
Ｒ２が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された、シクロプロピル−Ｃ０−４アルキル、シクロブチル−Ｃ０−４アルキル、６〜１０員のオルト縮合環基−Ｃ０−４アルキル又は７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−４アルキル（当該シクロプロピル、シクロブチル、オルト縮合環基又はスピロ環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよい。）からなる群から選ばれ；Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれるか；或いは
Ｒ３が、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、カルバモイル、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれるか；或いは
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ及びジ（Ｃ１−４アルキル）アミノからなる群から選ばれるか；或いは
Ｌが、Ｏであるか；或いは
Ｔが、共有結合又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’が、水素又はメチルからなる群から選ばれる。）からなる群から選ばれる、
請求項１に記載の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体。
【請求項３】
Ｒ１が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ１で置換された、
（１）Ｃ１−４アルキル、シクロプロピル−Ｃ０−４アルキル、シクロブチル−Ｃ０−４アルキル、シクロペンチル−Ｃ０−４アルキル、シクロヘキシル−Ｃ０−４アルキル及びシクロヘプチル−Ｃ０−４アルキル（当該シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルにおける炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよい。）；及び
（２）
【化２】
0005859118.tif 000070
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよく、ｐが、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル、エチルスルホニル、メチルスルフィニル、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルからなる群から選ばれ；
Ｒ２が、
（１）無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された、
【化３】
0005859118.tif 000071
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよく、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）；及び
（２）
【化４】
0005859118.tif 000072
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよく、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３が、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、メチル、エチル、エテニル、エチニル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルチオ、メチルカルバモイル、アセチル、メトキシカルボニル、アセトキシ、アセチルアミノ及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、メチル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ又はジメチルアミノからなる群から選ばれ；
Ｘが、窒素原子であり；
Ｌが、Ｏであり；
Ｔが、共有結合又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’が、水素又はメチルからなる群から選ばれる。）からなる群から選ばれ；
Ｚが、水素であり；
ｑが、２であり、Ｒ３は、同一であっても、異なっていてもよく；
ｎが、０又は１からなる群から選ばれる、
請求項１に記載の化合物、及びその医薬上許容される塩又はその立体異性体。
【請求項４】
Ｒ１が、無置換又はＱ１で置換された：
（１）メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル−Ｃ０−３アルキル、シクロブチル−Ｃ０−３アルキル、シクロペンチル−Ｃ０−３アルキル、シクロヘキシル−Ｃ０−３アルキル、アゼチジニル−Ｃ０−３アルキル、テトラヒドロフリル−Ｃ０−３アルキル、ピロリジニル−Ｃ０−３アルキル、ピペリジニル−Ｃ０−３アルキル、モルホリニル−Ｃ０−３アルキル及びピペラジニル−Ｃ０−３アルキル；及び
（２）
【化５】
0005859118.tif 000073
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよく、ｐが、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ又はジエチルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ２が、
（１）無置換又はＱ２で置換された、
【化６】
0005859118.tif 000074
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよく、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）；及び
（２）
【化７】
0005859118.tif 000075
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ及び／又はＮ（Ｈ）ｎで置き換えられていてもよく、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ； 
Ｒ３が、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、メチル、エチル、エテニル、エチニル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルチオ、メチルカルバモイル、アセチル、メトキシカルボニル、アセトキシ、アセチルアミノ及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、メチル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ及びジメチルアミノからなる群から選ばれ；
Ｘが窒素原子であり；
Ｌが、Ｏであり；
Ｔが、共有結合又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’は、水素である。）からなる群から選ばれ；
Ｚが、水素であり；
ｑが、２であり、且つ、Ｒ３が、同一であっても、異なっていてもよく；
ｎが、０又は１からなる群から選ばれる、
請求項３に記載の化合物、及びその医薬上許容される塩又はその立体異性体。
【請求項５】
下記式（Ｉ−１）の構造を有する、請求項１〜４の何れか１項に記載の化合物、及びその医薬上許容される塩又はその立体異性体：
【化８】
0005859118.tif 000076
。
【請求項６】
Ｒ１が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ又はジエチルアミノで置換された、メチル、エチル、
【化９】
0005859118.tif 000077
からなる群から選ばれ；
Ｒ２が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル又はメチルスルホニルアミノで置換された、
【化１０】
0005859118.tif 000078
からなる群から選ばれ；
Ｒ３が、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードから選ばれるハロゲンであり；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素であり；
Ｘが窒素原子であり；
Ｌが、Ｏであり；
ｑが、２であり、かつＲ３が、同一であっても、異なっていてもよい、
請求項５に記載の化合物、及びその医薬上許容される塩又はその立体異性体。
【請求項７】
下記式（Ｉ−２）の構造を有する、請求項６に記載の化合物、及びその医薬上許容される塩又はその立体異性体：
【化１１】
0005859118.tif 000079
［式中、
Ｒ１が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ又はジエチルアミノで置換された、メチル、エチル、
【化１２】
0005859118.tif 000080
からなる群から選ばれ；
Ｒ２が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル又はメチルスルホニルアミノで置換された、
【化１３】
0005859118.tif 000081
からなる群から選ばれ；
Ｌが、Ｏである。］。
【請求項８】
化合物が、
【化１４】
0005859118.tif 000082
【化１５】
0005859118.tif 000083
【化１６】
0005859118.tif 000084
【化１７】
0005859118.tif 000085
【化１８】
0005859118.tif 000086
【化１９】
0005859118.tif 000087
【化２０】
0005859118.tif 000088
【化２１】
0005859118.tif 000089
【化２２】
0005859118.tif 000090
【化２３】
0005859118.tif 000091
【化２４】
0005859118.tif 000092
【化２５】
0005859118.tif 000093
【化２６】
0005859118.tif 000094
【化２７】
0005859118.tif 000095
【化２８】
0005859118.tif 000096
から選ばれる、
請求項１に記載の化合物、及びその医薬上許容される塩又はその立体異性体。
【請求項９】
請求項１〜８の何れか１項に記載の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体を含む医薬組成物。
【請求項１０】
抗腫瘍剤及び免疫抑制剤からなる群から選ばれる第二の治療剤をさらに含む請求項９に記載の医薬組成物であって、当該第二の治療剤が、代謝拮抗剤（カペシタビン及びゲムシタビンを含む）；成長因子阻害剤（パゾパニブ及びイマチニブを含む）；抗体（ハーセプチン及びベバシズマブを含む）；有糸分裂阻害剤（パクリタキセル、ビノレルビン、ドセタキセル及びドキソルビシンを含む）；抗腫瘍性ホルモン薬（レトロゾール、タモキシフェン及びフルベストラントを含む）；アルキル化剤（シクロホスファミド及びカルムスチンを含む）；金属白金類（カルボプラチン、シスプラチン及びオキサリプラチンを含む）；トポイソメラーゼ阻害剤（トポテカンを含む）；及び免疫抑制剤（エベロリムスを含む）からなる群から選ばれる、前記医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜８の何れか１項に記載の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体と、１以上の医薬上許容される担体とを含む医薬製剤。
【請求項１２】
過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患の治療のための医薬の製造における、請求項１〜８の何れか１項に記載の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体の使用。
【請求項１３】
過剰増殖性疾患が、癌性疾患及び非癌性疾患を含み、当該癌性疾患が、脳腫瘍、肺癌、非小細胞性肺癌、扁平上皮細胞、膀胱癌、胃癌、卵巣癌、腹膜癌、膵臓癌、乳癌、頭頸部癌、子宮頚癌、子宮内膜癌、結直腸癌、肝癌、腎癌、食道腺癌、食道扁平上皮癌、充実性腫瘍、非ホジキンリンパ腫、中枢神経系腫瘍（神経膠腫、多形膠芽細胞腫、神経膠肉腫）、前立腺癌又は甲状腺癌からなる群から選ばれ；当該非癌性疾患が、皮膚又は前立腺の良性の増殖性疾患である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
以下の工程を含む、請求項１に記載の化合物の調製方法：
反応手順：
【化２９】
0005859118.tif 000097
【化３０】
0005859118.tif 000098
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３’、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、Ｌ、Ｔ、Ｚ及びｑは、請求項１で定義された通りであり、Ｈａｌ１が、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩからなる群から選ばれ、Ｈａｌ２が、Ｃｌ及びＢｒからなる群から選ばれ、Ｈａｌ１及びＨａｌ２は、同一であっても、異なっていてもよい。］
１）  出発原料（ａ）の化合物を有機溶媒に溶解し、それを無機塩基の存在下、式（Ｖ）の化合物と反応させ、式（ＩＶ）の化合物を得る；
２）  式（ＩＶ）の化合物及び還元剤を反応させ、式（ＩＩＩ）の化合物を得る；
３）  式（ＩＩＩ）の化合物を有機溶媒に溶解し、それを式（ｂ）の化合物と反応させ、式（ＩＩ）の化合物を得る；及び
４）  式（ＩＩ）の化合物及び式（ｃ）の化合物を、塩基の存在下で反応させ、式（Ｉ）の化合物を得る；
必要に応じて、保護する必要がある官能基を保護し、後で従来の方法により脱保護してもよい。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は医薬技術分野に関し、特に、チロシンキナーゼ阻害剤としてのキナゾリン誘導体、その医薬上許容される塩及びその立体異性体、それらの調製方法、上記誘導体を含む医薬組成物及び医薬製剤、過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患の治療における上記化合物の使用、並びに過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患の治療のための医薬の製造における上記化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質チロシンキナーゼは、ＡＴＰから、タンパク質基質に存在するチロシン残基へ触媒的にリン酸基を転移させ、正常な細胞成長において役を果たす酵素である。多くの成長因子受容体タンパク質はチロシンキナーゼを介して働き、このプロセスによりシグナルの伝導経路に影響し、さらに細胞成長を制御する。しかしながら、いくつかの状況で、これらの受容体は、変異したり、過剰発現することにより異常が生じ、制御されない細胞増殖や、腫瘍増殖をもたらし、ついには、よく知られた疾患である癌を引き起こす。成長因子受容体タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤は、上記のリン酸化プロセスの阻害により、癌、及び制御されない細胞増殖或いは異常な細胞増殖を特徴とするその他の疾患を治療し得る。
【０００３】
上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）は、ヒトの身体組織の細胞膜に広く分布する多機能糖タンパク質であり、トリの赤芽球性白血病ウイルス（ｖ−ｅｒｂ−ｂ）の癌遺伝子類似体（ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ａｎａｌｏｇ）である。ヒトＥＧＦＲ／ＨＥＲ１／ＥｒｂＢ−１及びＨＥＲ２（ヒト上皮成長因子受容体−２）／ＥｒｂＢ−２／Ｔｅｕ／ｐ１８５、ＨＥＲ３／ＥｒｂＢ−３、ＨＥＲ４／ＥｒｂＢ−４等が、ＨＥＲ／ＥｒｂＢファミリーに分類され、タンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫｓ）に属する。ＥＧＦＲ等が、頭頸部の扁平上皮癌、乳癌、直腸癌、卵巣癌、前立腺癌、非小細胞肺癌等のような多種の腫瘍で過剰発現することが、臨床研究で示されている。Ｐａｎ−ＨＥＲチロシンキナーゼ阻害剤は、細胞内領域におけるキナーゼ触媒部位へのＡＴＰとの競合的結合により、分子内チロシンの自己リン酸化をブロックし、チロシンキナーゼ活性化をブロックし、ＨＥＲファミリー活性化を阻害し、それにより細胞周期の進行を阻害し、細胞アポトーシスを加速させ、治療効果をもたらす。
【０００４】
ＥＧＦＲは、リガンドが結合した後、ＨＥＲファミリーのサブグループと二量体を形成し、次いで、ＡＴＰと結合し、ＥＧＦＲ自身のチロシンキナーゼ活性を活性化させる。そのため、自己リン酸化が、細胞内キナーゼ領域の複数のチロシン部位で生じる。Ｐａｎ−ＨＥＲチロシンキナーゼ阻害剤は、ＥＧＦＲとＨＥＲ２／４への同時作用により、ＨＥＲファミリーの活性化を阻害し、腫瘍増殖阻害に良好な役割を果たす。
【０００５】
Ｐａｎ−ＨＥＲチロシンキナーゼ不可逆的阻害剤が、ＥＧＦＲを効果的に阻害すると共に、ＨＥＲ２／４に対する阻害活性を有するということが、研究によって示されている。ＨＥＲ／ＥｒｂＢファミリー両方への不可逆阻害を有するこの種の医薬は、薬剤活性を増加させるだけではなく、薬剤耐性の産生を減らし、エルロチニブに耐性を示すＨ１９７５細胞系に対する実質的な阻害活性を有する。
【０００６】
現在市販されている医薬としては、選択的ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ，  ＺＤ１８３９）、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ，  ＯＳＩ−７７４）及び二重ＥＧＦＲ／ＨＥＲ２阻害剤ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ，  ＧＷ５７２０１６）が挙げられ、それらの構造を以下に示す。上記三種の薬剤は、すべて可逆的ＥＧＦ受容体チロシンリン酸化キナーゼ阻害剤である。これらに対して、ある腫瘍は最初に良好な治療反応が起こるが、治療数か月後には、再び疾患の進行が起こり、自然的な或いは二次的な薬剤耐性が形成されるということが研究によって示されている。
【０００７】
【化１】
0005859118.tif 000002
【０００８】
ゲフィチニブ及びエルロチニブのような市販の薬剤が、広く臨床上使用され、末期のＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）の長期治療は、治療効果にネガティブな影響をもたらす後天的な薬剤耐性を引き起こし得るということが、文献（Bioorganic & Medicinal Chemistry (2008) 16 page 3482-3488）にて報告されている。
【０００９】
可逆的ＥＦＧ受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、ＥＦＧ受容体チロシンキナーゼとの結合に対してＡＴＰと競合すると考えられている。細胞内ＡＴＰの相対的に高い濃度（ｍＭオーダー）により、ｉｎ−ｖｉｔｒｏアッセイで高い活性を示す可逆的ＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤が、動物疾病モデルで効果を示すことは困難である。不可逆的ＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤は、ＡＴＰと競合せず、それゆえ、不可逆的なＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤が、良好なｉｎ−ｖｉｖｏ活性を有し得るということが期待される。
【００１０】
ＷＯ９７／３８９８３には、不可逆的ＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤が開示されている。これらの阻害剤において、１つのマイケル受容体がキナゾリンの６位に導入され、それにより、マイケル付加反応が、この受容体と、ＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ活性中心のポケットの壁上のシステイン（Ｃｙｓ７７３）の−ＳＨとの間で起こる。さらに、これらの阻害剤の活性、及びこれらの阻害剤とシステインの−ＳＨとの間のマイケル付加反応の難しさには、正の構造機能相関がある。
【００１１】
ＵＳ２００１００４４４３５  Ａ１には、キナゾリンの６位にラクトン構造を有するキナゾリン誘導体が開示されている。これは、チロシンキナーゼにより媒介されるシグナル変換に対する阻害活性を有すると考えられている。
【００１２】
ＵＳ２００４００４４０１４  Ａ１には、キナゾリンの６位に架橋環構造を有するキナゾリン誘導体が開示されている。これは、チロシンキナーゼにより媒介されるシグナル変換に対する阻害活性を有すると考えられている。
【００１３】
ＰＦ−２９９（Ｐｆｉｚｅｒ）及びアファチニブ（ＢＩＢＷ２９９２）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）が臨床段階ＩＩＩの研究にあり、ネラチニブ（ＨＫＩ２９２）が臨床段階ＩＩの研究にあるということが、文献（Adv Ther (2011) 28(2) p. 1-8）にて報告されている。これらの化合物はいずれも不可逆的チロシンキナーゼ阻害剤であり、ＥＧＦＲ耐性が克服可能であると考えられている。
【００１４】
ＰＦ−００２９９８０４が、一部のタイプの腫瘍に対する活性を有するということが文献（Cancer Res (2007); 67: (24) p. 11924-11932、及びMol Cancer Ther (2008); 7(7) p.1880-1889）にて報告されている。ＰＦ−００２９９８０４は以下の構造を有する。
【００１５】
【化２】
0005859118.tif 000003
【００１６】
本発明者らは、良好な抗腫瘍効果を有し、薬剤耐性の産生を減らし且つ良好な耐性を有する薬剤を開発する中で、一種類のＰａｎ−ＨＥＲ不可逆的阻害機能を有するチロシンキナーゼ阻害剤としてのキナゾリン誘導体を発見した。
【発明の概要】
【００１７】
従って、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩及びその立体異性体を提供する：
【００１８】
【化３】
0005859118.tif 000004
【００１９】
［式中：
Ｒ１は、無置換又は１〜３個の同一若しくは異なるＱ１で置換された、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、６〜１０員の縮合環基−Ｃ０−６アルキル、７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−６アルキル及び７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−６アルキル（当該シクロアルキル、縮合環基、スピロ環基及び架橋環基における炭素原子は、１〜３個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよい。）からなる群から選ばれ；
Ｑ１は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−６アルキルアシルアミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ及びＣ３−８シクロアルキルからなる群から選ばれ；
Ｒ２は、無置換又は１〜３個の同一若しくは異なるＱ２で置換された、Ｃ３−４シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル、６〜１０員の縮合環基−Ｃ０−６アルキル、７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−６アルキル及び７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−６アルキル（当該シクロアルキル、縮合環基、スピロ環基及び架橋環基における炭素原子は、１〜３個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在しない。）からなる群から選ばれ、Ｒ２が、７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−６アルキルである場合、Ｒ１は、Ｃ３−４シクロアルキル−Ｃ０−６アルキル又はＣ１−６アルキルではなく；
Ｑ２は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−６アルコキシルカルボニル、Ｃ１−６アルキルアシルアミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル及びＣ１−６アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３は、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルコキシルカルボニル、Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−６アルキルアシルアミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル及びＣ１−６アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３’は、存在せず；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−６アルコキシル、Ｃ１−６アルキルアミノ及びジ（Ｃ１−６アルキル）アミノからなる群から選ばれ；
Ｘは、シアノ置換メテニル又は窒素原子から選ばれ；
Ｌは、Ｏ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）、Ｎ（ＣＨ３）又はＣ（Ｏ）からなる群から選ばれ；
Ｔは、共有結合、Ｃ（Ｏ）又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’は、水素又はＣ１−６アルキルからなる群から選ばれる。）からなる群から選ばれ；
Ｚは、水素であり；
ｑは、２であり、Ｒ３は、同一であっても、異なっていてもよく；
ｍは、０、１又は２からなる群から選ばれ；
ｎは、０又は１からなる群から選ばれる。］。
【００２０】
また、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体を含む医薬組成物を提供する。
【００２１】
また、本発明は、一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体と、医薬上許容される担体とを含む医薬製剤を提供する。
【００２２】
また、本発明は、過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患の治療のための医薬としての、一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩若しくはその立体異性体、又は一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩若しくはその立体異性体を含む医薬組成物を提供する。
【００２３】
また、本発明は、過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患の治療のための医薬の製造における、一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩若しくはその立体異性体、又は一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩若しくはその立体異性体を含む医薬組成物の使用を提供する。
【００２４】
また、本発明は、有効量の、一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩若しくはその立体異性体、又は一般式（Ｉ）で表される化合物、その医薬上許容される塩若しくはその立体異性体を含む医薬組成物を、それを必要とする対象に投与する工程を含む、過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患の治療方法を提供する。
【００２５】
また、本発明は、下記の工程を含む、一般式（Ｉ）の化合物の調製方法を提供する:
反応手順：
【００２６】
【化４】
0005859118.tif 000005
【００２７】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３’、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、Ｌ、Ｔ、Ｚ及びｑは、上記で定義された通りであり、Ｈａｌ１は、Ｃｌ、Ｂｒ及びＩからなる群から選ばれ、Ｈａｌ２は、Ｃｌ及びＢｒからなる群から選ばれ、Ｈａｌ１及びＨａｌ２は、同一であっても、異なっていてもよい。］
１）  出発原料（ａ）の化合物を有機溶媒（例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、メタノール又はエタノール）中に溶解し、それを式（Ｖ）の化合物と共に無機塩基（例えば、ＮａＨ、ＮａＯＨ又はＫＯＨ）の存在下で反応させ、式（ＩＶ）の化合物を得る；
２）  式（ＩＶ）の化合物及び還元剤（例えば、Ｆｅ粉末、Ｚｎ粉末、Ｐｄ／Ｃ又はラネーＮｉ）を反応させ、式（ＩＩＩ）の化合物を得る；
３）  式（ＩＩＩ）の化合物を有機溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン（ＤＣＭ）又は酢酸エチル（ＥＡ））中に溶解し、式（ｂ）の化合物と反応させ、式（ＩＩ）の化合物を得る；及び
４）  式（ＩＩ）の化合物及び式（ｃ）の化合物を塩基（例えば、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ）、ピリジン、Ｋ２ＣＯ３又はＮａ２ＣＯ３）の存在下で反応させ、式（Ｉ）の化合物を得る；
必要に応じて、保護する必要がある官能基を、従来の方法により保護して、後で脱保護してもよい。
【００２８】
本発明では、用語「Ｃ０−６アルキル」は、０〜６例えば０、１、２、３、４、５又は６の炭素原子数を有する直鎖又は分枝のアルキル基を意味する。炭素原子数がゼロのとき、アルキルが存在しない。アルキルとしては、例えば、「Ｃ０−４アルキル」、「Ｃ１−６アルキル」、「Ｃ２−５アルキル」及び「Ｃ１−４アルキル」が挙げられる。その例としては、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、２−メチルブチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、４−メチルペンチル、３−メチルペンチル、２−メチルペンチル、１−メチルペンチル、３，３−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、１，１−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、１−メチル−２−メチルプロピル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２９】
本発明では、用語「Ｃ２−６アルケニル」は、二重結合を有し、２〜６の炭素原子数を有する、直鎖又は分枝又は環式の炭化水素基を意味し、例えば、「Ｃ３−６アルケニル」、「Ｃ３−５アルケニル」、「Ｃ２−４アルケニル」等が挙げられる。その例としては、例えば、エテニル、１−プロぺニル、２−プロぺニル、１−メチルエテニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、１−メチル−１−プロぺニル、２−メチル−１−プロぺニル、１−メチル−２−プロぺニル、２−メチル−２−プロぺニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、１−メチル−１−ブテニル、２−メチル−１−ブテニル、３−メチル−１−ブテニル、１−メチル−２−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、３−メチル−２−ブテニル、１−メチル−３−ブテニル、２−メチル−３−ブテニル、３−メチル−３−ブテニル、１，１−ジメチル−２−プロぺニル、１，２−ジメチル−１−プロぺニル、１，２−ジメチル−２−プロぺニル、１−エチル−１−プロぺニル、１−エチル−２−プロぺニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、４−ヘキセニル、５−ヘキセニル、１−メチル−１−ペンテニル、２−メチル−１−ペンテニル、３−メチル−１−ペンテニル、４−メチル−１−ペンテニル、１−メチル−２−ペンテニル、２−メチル−２−ペンテニル、３−メチル−２−ペンテニル、４−メチル−２−ペンテニル、１−メチル−３−ペンテニル、２−メチル−３−ペンテニル、３−メチル−３−ペンテニル、４−メチル−３−ペンテニル、１−メチル−４−ペンテニル、２−メチル−４−ペンテニル、３−メチル−４−ペンテニル、４−メチル−４−ペンテニル、１，１−ジメチル−２−ブテニル、１，１−ジメチル−３−ブテニル、１，２−ジメチル−１−ブテニル、１，２−ジメチル−２−ブテニル、１，２−ジメチル−３−ブテニル、１，３−ジメチル−１−ブテニル、１，３−ジメチル−２−ブテニル、１，３−ジメチル−２−ブテニル、２，２−ジメチル−３−ブテニル、２，３−ジメチル−１−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−３−ブテニル、３，３−ジメチル−１−ブテニル、３，３−ジメチル−２−ブテニル、１−エチル−１−ブテニル、１−エチル−２−ブテニル、１−エチル−３−ブテニル、２−エチル−１−ブテニル、２−エチル−２−ブテニル、２−エチル−３−ブテニル、１，１，２−トリメチル−２−プロぺニル、１−エチル−１−メチル−２−プロぺニル、１−エチル−２−メチル−１−プロぺニル、１−エチル−２−メチル−２−プロぺニル、１，３−ブタジエニル、１，３−ペンタジエニル、１，４−ペンタジエニル、１，４−ヘキサジエニル、シクロペンテニル、１，３−シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、１，４−シクロヘキサジエニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３０】
本発明では、用語「Ｃ２−６アルキニル」は、三重結合を有し、２〜６の炭素原子数を有する、直鎖又は分枝の炭化水素基を意味し、例えば、「Ｃ３−６アルキニル」、「Ｃ３−５アルキニル」、「Ｃ２−４アルキニル」等が挙げられる。その例としては、例えば、エチニル、２−プロピニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−メチル−２−プロピニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−メチル−２−ブチニル、１−メチル−３−ブチニル、２−メチル−３−ブチニル、１，１−ジメチル−２−プロピニル、１−エチル−２−プロピニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−メチル−２−ペンチニル、１−メチル−３−ペンチニル、１−メチル−４−ペンチニル、２−メチル−３−ペンチニル、２−メチル−４−ペンチニル、３−メチル−４−ペンチニル、４−メチル−２−ペンチニル、１，１−ジメチル−２−ブチニル、１，１−ジメチル−３−ブチニル、１，２−ジメチル−３−ブチニル、２，２−ジメチル−３−ブチニル、１−エチル−２−ブチニル、１−エチル−３−ブチニル、２−エチル−３−ブチニル、１−エチル−１−メチル−２−プロピニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３１】
本発明では、用語「Ｃ１−６アルコキシル」は、「Ｃ１−６アルキル−Ｏ−」（式中、Ｃ１−６アルキルは上記で定義された通りである）を意味し、例えば、「Ｃ２−５アルコキシル」、「Ｃ１−４アルコキシル」等が挙げられる。その例としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ペントキシ、ネオペントキシ、ヘキシルオキシ等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
本発明では、用語「Ｃ１−６アルキルチオ」は、「Ｃ１−６アルキル−Ｓ−」（式中、Ｃ１−６アルキルは上記で定義された通りである）を意味し、例えば、「Ｃ２−５アルキルチオ」、「Ｃ１−４アルキルチオ」等が挙げられる。その例としては、例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、イソブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオ、ペンチルチオ、ネオペンチルチオ、ヘキシルチオ等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３３】
本発明では、用語「Ｃ１−６アルキルアミノ」は、「Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−」（式中、Ｃ１−６アルキルは上記で定義された通りである）を意味し、例えば、「Ｃ２−５アルキルアミノ」、「Ｃ１−４アルキルアミノ」等が挙げられる。その例としては、例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、イソブチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ｓｅｃ−ブチルアミノ、ペンチルアミノ、ネオペンチルアミノ、ヘキシルアミノ等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３４】
本発明では、用語「ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ」は、「（Ｃ１−６アルキル）２−Ｎ−」（式中、２つのＣ１−６アルキルは、同一であっても、異なっていてもよく、それぞれ上記で定義された通りである）を意味する。
【００３５】
本発明では、用語「Ｃ１−６アルキルカルボニルオキシ」、「Ｃ１−６アルコキシルカルボニル」、「Ｃ１−６アルキルカルボニル」、「Ｃ１−６アルキルスルホニル」、「Ｃ１−６アルキルスルフィニル」、「Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ」、「Ｃ１−６アルキルアシルアミノ」及び「Ｃ１−６アルキルカルバモイル」は、それぞれ、「Ｃ１−６アルキル−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−」、「Ｃ１−６アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」、「Ｃ１−６アルキル−Ｃ（Ｏ）−」、「Ｃ１−６アルキル−ＳＯ２−」、「Ｃ１−６アルキル−ＳＯ−」、「Ｃ１−６アルキル−ＳＯ２−ＮＨ−」、「Ｃ１−６アルキル−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−」及び「Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−」（式中、「Ｃ１−６アルキル」は上記で定義された通りである）を意味する。
【００３６】
本発明では、用語「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード等を意味する。
【００３７】
本発明では、用語「Ｃ３−８シクロアルキル」は、３〜８例えば３、４、５、６、７又は８個の炭素原子を含むアルカンから１個の水素原子を除いたシクロアルキルを意味し、例えば、「Ｃ３−７シクロアルキル」、「Ｃ３−５シクロアルキル」、「Ｃ５−６シクロアルキル」、「Ｃ３−４シクロアルキル」等が挙げられ、好ましくは、「Ｃ３−６シクロアルキル」である。その例としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプタニル、シクロオクタニル、メチルシクロプロピル、ジメチルシクロプロピル、メチルシクロブチル、ジメチルシクロブチル、メチルシクロペンチル、ジメチルシクロペンチル、メチルシクロヘキサニル、ジメチルシクロヘキサニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
本発明では、用語「６〜１０員の縮合環基」は、少なくとも２つの環状構造が結合し、互いに隣り合う２個の原子を共有することによって形成する、６〜１０個の炭素原子を含む飽和又は不飽和の縮合環基であって、シクロ炭素原子が、Ｏ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｍ、ＮＣＨ３及びＣ（Ｏ）からなる群から選ばれる１〜３個の同一又は異なるヘテロ原子及び／又は基で置き換えられていてもよい縮合環基を意味する。その例としては、５，６−ジヒドロイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン−７（８Ｈ）−イル、５，６−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−７（８Ｈ）−イル、５Ｈ−ピロロ［３，４−ｂ］ピリジン−６（７Ｈ）−イル、７，８−ジヒドロピリジノ［４，３−ｄ］ピリミジン−６（５Ｈ）−イル、２，３，６，７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル、６，７−ジヒドロチアゾロ［５，４−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル、３−メチル−６，７−ジヒドロ−３Ｈ−ピラゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル、２−メチルヘキサヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
本発明では、用語「７〜１０員のスピロ環基」は、少なくとも２つの環が１個の原子を共有することによって形成する、７〜１０個の炭素原子を含む飽和又は不飽和の縮合環基であって、シクロ炭素原子が、Ｏ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｍ、ＮＣＨ３及びＣ（Ｏ）からなる群から選ばれる１〜３個の同一又は異なるヘテロ原子及び／又は基で置き換えられていてもよい縮合環基を意味する。その例としては、６−アザスピロ［２．５］オクタン−６−イル、７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−イル、８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル、１−メチル−１，７−ジアザスピロ［４．４］ノナン−７−イル、２−メチル−２，６−ジアザスピロ［３．４］オクタン−６−イル、６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イル、２−オキサ−７−アザスピロ［４．５］デカン−７−イル、２−オキサ−８−アザスピロ［４．５］デカン−８−イル、２−メチル−２，７−ジアザスピロ［４．５］デカン等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
本発明では、用語「７〜１０員の架橋環基」は、任意の２個の環が直接結合しない２個の原子を共有することによって形成する、７〜１０個の炭素原子を含む飽和又は不飽和の縮合環基であって、シクロ炭素原子が、Ｏ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｍ、ＮＣＨ３及びＣ（Ｏ）からなる群から選ばれる１〜３個の同一又は異なるヘテロ原子及び／又は基で置き換えられていてもよい縮合環基を意味する。その例としては、（１Ｓ，４Ｓ）−２−メチル−２−アザビシクロ［２．２．１］ヘキサニル、２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、８−メチルビシクロ［３．２．１］オクタニル、３−オキサ−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタニル、２−アザビシクロ［２．２．２］オクタニル、７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、３−アザビシクロ［３．２．１］オクタニル、３−アザビシクロ［３．３．２］デカニル、７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、８−オキサビシクロ［３．２．１］オクタニル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
本発明では、用語「共有結合」は、二個の原子又は基を連接する単結合を意味する。
【００４２】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の一つの好ましい実施態様において、Ｒ１が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ１で置換された、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、６〜１０員の縮合環基−Ｃ０−４アルキル、７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−４アルキル及び７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−４アルキル（当該シクロアルキル、縮合環基、スピロ環基及び架橋環基における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（式中、ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよい。）からなる群から選ばれ、Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル、Ｃ１−４アルキルスルホニルアミノ及びＣ３−８シクロアルキルからなる群から選ばれる。
【００４３】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ１が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ１で置換された：
（１）Ｃ１−４アルキル、シクロプロピル−Ｃ０−４アルキル、シクロブチル−Ｃ０−４アルキル、シクロペンチル−Ｃ０−４アルキル、シクロヘキシル−Ｃ０−４アルキル及びシクロヘプチル−Ｃ０−４アルキル（当該シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルにおける炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（式中、ｍは、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎは、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよい。）；及び
（２）
【００４４】
【化５】
0005859118.tif 000006
【００４５】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（ｍは、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎは、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよく、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル、エチルスルホニル、メチルスルフィニル、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルからなる群から選ばれる。
【００４６】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ１が、無置換又はＱ１で置換された：
（１）メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル−Ｃ０−３アルキル、シクロブチル−Ｃ０−３アルキル、シクロペンチル−Ｃ０−３アルキル、シクロヘキシル−Ｃ０−３アルキル、アゼチジニル−Ｃ０−３アルキル、テトラヒドロフリル−Ｃ０−３アルキル、ピロリジニル−Ｃ０−３アルキル、ピペリジニル−Ｃ０−３アルキル、モルホリニル−Ｃ０−３アルキル及びピペラジニル−Ｃ０−３アルキル；及び
（２）
【００４７】
【化６】
0005859118.tif 000007
【００４８】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（式中、ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよく、ｐが、０、１又は２からなる群から選ばれる。）からなる群から選ばれ；
Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ及びジエチルアミノからなる群から選ばれる。
【００４９】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ１が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ１で置換された、メチル、エチル、
【００５０】
【化７】
0005859118.tif 000008
【００５１】
からなる群から選ばれ；
Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ及びジエチルアミノからなる群から選ばれる。
【００５２】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の一つの好ましい実施態様において、Ｒ２が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された、シクロプロピル−Ｃ０−４アルキル、シクロブチル−Ｃ０−４アルキル、６〜１０員の縮合環基−Ｃ０−４アルキル、７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−４アルキル又は７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−４アルキル（当該シクロプロピル、シクロブチル、縮合環基、スピロ環基及び架橋環基における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（式中、ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在しない。）からなる群から選ばれ；Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれる。
【００５３】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ２が、
（１）  無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された、
【００５４】
【化８】
0005859118.tif 000009
【００５５】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐが、０、１又は２からなる群から選ばれる。）；及び
（２）
【００５６】
【化９】
0005859118.tif 000010
【００５７】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐが、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれる。
【００５８】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ２が、
（１）  無置換又はＱ２で置換された、
【００５９】
【化１０】
0005859118.tif 000011
【００６０】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えらえていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）；及び
（２）
【００６１】
【化１１】
0005859118.tif 000012
【００６２】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）（ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ、ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれる。
【００６３】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ２が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された：
【００６４】
【化１２】
0005859118.tif 000013
【００６５】
からなる群から選ばれ、Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれる。
【００６６】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の一つの好ましい実施態様において、Ｒ３が、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれる。
【００６７】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ３が、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、メチル、エチル、エテニル、エチニル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルチオ、メチルカルバモイル、アセチル、メトキシカルボニル、アセトキシ、アセチルアミノ及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれる。
【００６８】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ３が、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードからなる群から選ばれるハロゲンである。
【００６９】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の一つの好ましい実施態様において、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ及びジ（Ｃ１−４アルキル）アミノからなる群から選ばれる。
【００７０】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、メチル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ及びジメチルアミノからなる群から選ばれる。
【００７１】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の好ましい実施態様において、Ｘが窒素原子である。
【００７２】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の好ましい実施態様において、Ｌが、Ｏ、Ｓ（Ｏ）ｍ又はＮ（Ｈ）ｎからなる群から選ばれ；特に、好ましくはＯである。
【００７３】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の好ましい実施態様において、Ｔが、共有結合又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’が、水素又はＣ１−４アルキル（例えば、メチル）からなる群から選ばれる。）からなる群から選ばれる。
【００７４】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、Ｔが共有結合であり、その結果、上記化合物が、下記式（Ｉ−１）の構造を有する：
【００７５】
【化１３】
0005859118.tif 000014
【００７６】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、Ｌ及びｑは、上記で定義された通りである。］。
【００７７】
本発明の一般式（Ｉ−１）化合物の一つの好ましい実施態様において、Ｒ３が、クロロ又はフルオロからなる群から選ばれるハロゲンであり、Ｘが窒素原子であるり、上記化合物が、下記式（Ｉ−２）の構造を有する：
【００７８】
【化１４】
0005859118.tif 000015
【００７９】
［Ｒ１、Ｒ２及びＬは、上記で定義された通りである。］。
【００８０】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の他の好ましい実施態様において、
Ｒ１が、無置換又は１〜３個の同一若しくは異なるＱ１で置換された、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル、６〜１０員の縮合環基−Ｃ０−４アルキル、７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−４アルキル及び７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−４アルキル（当該シクロアルキル、縮合環基、スピロ環又は架橋環における炭素原子は、１〜３個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよい。）からなる群から選ばれ、Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル、Ｃ１−４アルキルスルホニルアミノ及びＣ３−８シクロアルキルからなる群から選ばれ；
Ｒ２が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された、シクロプロピル−Ｃ０−４アルキル、シクロブチル−Ｃ０−４アルキル、６〜１０員の縮合環基−Ｃ０−４アルキル、７〜１０員のスピロ環基−Ｃ０−４アルキル又は７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−４アルキル（当該シクロプロピル、シクロブチル、縮合環基、スピロ環又は架橋環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在しない。）からなる群から選ばれ、Ｒ２が、７〜１０員の架橋環基−Ｃ０−４アルキルである場合、Ｒ１は、Ｃ３−４シクロアルキル−Ｃ０−４アルキル又はＣ１−４アルキルではなく；Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３が、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、カルバモイル、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、Ｃ２−４アルキニル、Ｃ１−４アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、Ｃ１−４アルキルチオ、Ｃ１−４アルキルカルバモイル、Ｃ１−４アルキルカルボニル、Ｃ１−４アルコキシルカルボニル、Ｃ１−４アルキルカルボニルオキシ、Ｃ１−４アルキルアシルアミノ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルスルフィニル及びＣ１−４アルキルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３’が、存在せず；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルキル、ハロゲンで置換されたＣ１−４アルコキシル、Ｃ１−４アルキルアミノ及びジ（Ｃ１−４アルキル）アミノからなる群から選ばれ；
Ｘが、シアノ置換メテニル又は窒素原子から選ばれ；
Ｌが、Ｏ、Ｓ（Ｏ）ｍ又はＮ（Ｈ）からなる群から選ばれ；
Ｔが、共有結合又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’が、水素又はメチルからなる群から選ばれる。）からなる群から選ばれ；
Ｚが、水素であり；
ｑが、２であり、Ｒ３が、同一であっても、異なっていてもよく；
ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ；
ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。
【００８１】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の他の好ましい実施態様において、
Ｒ１が、無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ１で置換された：
（１）Ｃ１−４アルキル、シクロプロピル−Ｃ０−４アルキル、シクロブチル−Ｃ０−４アルキル、シクロペンチル−Ｃ０−４アルキル、シクロヘキシル−Ｃ０−４アルキル及びシクロヘプチル−Ｃ０−４アルキル（当該シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルにおける炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよい。）；及び
（２）
【００８２】
【化１５】
0005859118.tif 000016
【００８３】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよく、ｐが、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル、エチルスルホニル、メチルスルフィニル、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルからなる群から選ばれ；
Ｒ２が、
（１）無置換又は１〜２個の同一若しくは異なるＱ２で置換された：
【００８４】
【化１６】
0005859118.tif 000017
【００８５】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）；及び
（２）
【００８６】
【化１７】
0005859118.tif 000018
【００８７】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ、Ｒ２が、
【００８８】
【化１８】
0005859118.tif 000019
【００８９】
である場合、Ｒ１が、Ｃ１−４アルキル、シクロプロピル−Ｃ０−４アルキル又はシクロブチル−Ｃ０−４アルキルではなく；
Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３が、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、メチル、エチル、エテニル、エチニル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルチオ、メチルカルバモイル、アセチル、メトキシカルボニル、アセトキシ、アセチルアミノ及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ３’が、存在せず；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、メチル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ及びジメチルアミノからなる群から選ばれ；
Ｘが、シアノ置換メテニル又は窒素原子から選ばれ；
Ｌが、Ｏであり；
Ｔが、共有結合又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’が、水素又はメチルからなる群から選ばれる）からなる群から選ばれ；
Ｚが、水素であり；
ｑが、２であり、Ｒ３が、同一であっても、異なっていてもよく；
ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ；
ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。
【００９０】
本発明の一般式（Ｉ）化合物のさらに好ましい実施態様において、
Ｒ１が、無置換又はＱ１で置換された：
（１）メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル−Ｃ０−３アルキル、シクロブチル−Ｃ０−３アルキル、シクロペンチル−Ｃ０−３アルキル、シクロヘキシル−Ｃ０−３アルキル、アゼチジニル−Ｃ０−３アルキル、テトラヒドロフリル−Ｃ０−３アルキル、ピロリジニル−Ｃ０−３アルキル、ピペリジニル−Ｃ０−３アルキル、モルホリニル−Ｃ０−３アルキル及びピペラジニル−Ｃ０−３アルキル；及び
（２）
【００９１】
【化１９】
0005859118.tif 000020
【００９２】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよいく、ｐが、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；
Ｑ１が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ及びジエチルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ２が、
（１）無置換又はＱ２で置換された、
【００９３】
【化２０】
0005859118.tif 000021
【００９４】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）；及び
（２）
【００９５】
【化２１】
0005859118.tif 000022
【００９６】
（当該環における炭素原子は、１〜２個の同一又は異なるＯ、Ｓ（Ｏ）ｍ、Ｎ（Ｈ）ｎ及び／又はＣ（Ｏ）で置き換えられていてもよく、ただし、置き換えられた環にエステル構造「−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−」は存在せず、ｐは、０、１又は２からなる群から選ばれる。）
からなる群から選ばれ；Ｒ２が、
【００９７】
【化２２】
0005859118.tif 000023
【００９８】
である場合、Ｒ１が、メチル、エチル、プロピル、シクロプロピル−Ｃ０−３アルキル又はシクロブチル−Ｃ０−３アルキルではなく；
Ｑ２が、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ； 
Ｒ３が、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、カルバモイル、メチル、エチル、エテニル、エチニル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルチオ、メチルカルバモイル、アセチル、メトキシカルボニル、アセトキシ、アセチルアミノ及びメチルスルホニルアミノからなる群から選ばれ；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、メチル、メトキシ、ハロゲンで置換されたメチル、ハロゲンで置換されたメトキシ、メチルアミノ及びジメチルアミノからなる群から選ばれ；
Ｘが窒素原子であり；
Ｌが、Ｏであり；
Ｔが、共有結合又はＣＨ（Ｒ’）（Ｒ’は、水素である。）からなる群から選ばれ；
Ｚが、水素であり；
ｑが、２であり、Ｒ３が、同一であっても、異なっていてもよく；
ｍが、０、１又は２からなる群から選ばれ；
ｎが、０又は１からなる群から選ばれる。
【００９９】
さらに好ましい実施態様において、本発明の一般式（Ｉ）の化合物は、下記式（Ｉ−１）の構造を有する：
【０１００】
【化２３】
0005859118.tif 000024
【０１０１】
（式中：
Ｒ１が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ又はジエチルアミノで置換された、メチル、エチル、
【０１０２】
【化２４】
0005859118.tif 000025
【０１０３】
からなる群から選ばれ；
Ｒ２が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル又はメチルスルホニルアミノで置換された、
【０１０４】
【化２５】
0005859118.tif 000026
【０１０５】
からなる群から選ばれ、Ｒ２が、
【０１０６】
【化２６】
0005859118.tif 000027
【０１０７】
である場合、Ｒ１は、メチル、エチル、
【０１０８】
【化２７】
0005859118.tif 000028
【０１０９】
ではなく；
Ｒ３が、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードからなる群から選ばれるハロゲンであり；
Ｒ４、Ｒ５及びＲ６が、それぞれ独立して、水素であり；
Ｘが窒素原子であり；
Ｌが、Ｏであり；
ｑが、２である。）。
【０１１０】
さらに好ましい実施態様において、本発明では一般式（Ｉ−１）の化合物が、下記式（Ｉ−２）の構造を有する。
【０１１１】
【化２８】
0005859118.tif 000029
【０１１２】
［式中、
Ｒ１が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、カルボキシル、シアノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ又はジエチルアミノで置換された、メチル、エチル、
【０１１３】
【化２９】
0005859118.tif 000030
【０１１４】
からなる群から選ばれ；
Ｒ２が、無置換又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アセトキシ、アセチルアミノ、メチルスルホニル又はメチルスルホニルアミノで置換された、
【０１１５】
【化３０】
0005859118.tif 000031
【０１１６】
からなる群から選ばれ、Ｒ２が、
【０１１７】
【化３１】
0005859118.tif 000032
【０１１８】
である場合、Ｒ１が、メチル、エチル、
【０１１９】
【化３２】
0005859118.tif 000033
【０１２０】
ではなく；
Ｌが、Ｏである。）。
【０１２１】
特に好ましい本発明では化合物としては、以下の化合物、それらの医薬上許容される塩及びそれらの立体異性体が挙げられる: 
【０１２２】
【表Ａ−１】
0005859118.tif 000034
【０１２３】
【表Ａ−２】
0005859118.tif 000035
【０１２４】
【表Ａ−３】
0005859118.tif 000036
【０１２５】
【表Ａ−４】
0005859118.tif 000037
【０１２６】
【表Ａ−５】
0005859118.tif 000038
【０１２７】
本発明の一般式（Ｉ）化合物の調製方法の一つの実施態様において、本発明の一般式（Ｉ）化合物は、例えば、下記工程によって調製することができる：
反応手順：
【０１２８】
【化３３】
0005859118.tif 000039
【０１２９】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ３’、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、Ｌ、Ｔ、Ｚ及びｑは、上記で定義された通りであり、式（ｂ）において、Ｂｒは、Ｃｌ又はＩで置き換えられていてもよく、Ｃｌは、Ｂｒで置き換えられていてもよい。］。
工程１：式（ＩＶ）の化合物の調製
式（Ｖ）の化合物を、有機溶媒（例えば、ＤＭＦ、ＴＨＦ、アセトニトリル、メタノール又はエタノール等）に溶解し、バッチで無機塩基（例えば、ＮａＨ、ＮａＯＨ又はＫＯＨ等）を加え、室温で撹拌しながら反応させる。次いで、式（ａ）の化合物を、反応液に加え、数時間加熱還流下反応させ、式（ＩＶ）の化合物を得る。
工程２：式（ＩＩＩ）の化合物の調製
式（ＩＶ）の化合物を、バッチで極性有機溶媒（例えば、エタノール、メタノール又はＴＨＦ等）及び酸（例えば、酢酸、ギ酸、塩酸又は希硫酸等）の混合溶液に加えた後、還元剤（例えば、Ｆｅ粉末、Ｚｎ粉末、Ｐｄ／Ｃ又はラネーＮｉ等）を加える。加熱して反応させ、式（ＩＩＩ）の化合物を得る。
工程３：式（ＩＩ）の化合物の調製
式（ＩＩＩ）の化合物を、有機溶媒（例えば、ＴＨＦ、ＤＣＭ又はＥＡ等）に溶解し、氷水浴中にて冷却しながら式（ｂ）の化合物を加え、次いで、有機塩基（例えば、トリエチルアミン又はＤＩＰＥＡ等）を滴下する。撹拌して反応させ、式（ＩＩ）の化合物を得る。
工程４：式（Ｉ）の化合物の調製
式（ＩＩ）の化合物を、有機溶媒（例えば、ＴＨＦ、ＤＣＭ、ＤＭＦ又はアセトニトリル等）に溶解し、順次に塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ、ＴＥＡ、ピリジン、Ｋ２ＣＯ３又はＮａ２ＣＯ３等）及び式（ｃ）の化合物を加える。室温で撹拌して反応させ、式（Ｉ）の化合物を得る。
【０１３０】
必要に応じて、保護する必要がある官能基（例えば、ヒドロキシ、アミノ等）を、保護し、後で従来の方法により脱保護してもよい。
【０１３１】
また、本発明には、式（Ｉ）の化合物の「医薬上許容される塩」が含まれる。本発明の式（Ｉ）の化合物の医薬上許容される塩としては、アルカリ金属塩（例えば、Ｎａ塩、Ｋ塩、Ｌｉ塩等）；アルカリ土類金属塩（例えば、Ｃａ塩、Ｍｇ塩等）；他の金属塩（例えば、Ａｌ塩、Ｆｅ塩、Ｚｎ塩、Ｃｕ塩、Ｎｉ塩、Ｃｏ塩等）；無機塩基塩（例えば、アンモニウム塩）；有機塩基塩（例えば、ｔｅｒｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、アルキルフェニルグリシナート塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルコサミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェニルエチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアミン塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩等）；無機酸塩（例えば、ハロゲン酸塩（例えば、フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩等）、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等）；有機酸塩（例えば、低級アルカンスルホン酸塩（例えば、メシル酸塩、トリフルオロメシル酸塩、エタンスルホン酸塩等）、アリールスルホン酸塩（例えば、ベンゼンスルホン酸塩、パラ−ベンゼンスルホン酸塩等）、カルボン酸塩（例えば、酢酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩等）、アミノ酸塩（例えば、グリシン塩、トリメチルグリシン酸塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩等）が挙げられる。
【０１３２】
また、本発明は、式（Ｉ）の化合物の可能性のある異性体すべてを含む。鏡像体は、１以上の不斉炭素原子が化合物構造中に存在する場合に存在し得る；ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ異性体は、化合物がアルケニル基又は環状構造を含む場合に存在し得る；互変異性体は、化合物がケト基又はニトロシル基を含む場合に存在し得る。これらの異性体及びそれらの混合物のすべてが、本発明の範囲内である。
【０１３３】
本発明の一般式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩及びその立体異性体は、経口的、非経口的（静脈内、筋肉内、皮下又は経直腸的等）、経肺的及び局所的に、哺乳動物（例えば、ヒト）に投与することができる。本発明化合物の１日投与量は、約１ないし約１０００ｍｇであり得る。
【０１３４】
本発明の一般式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体は、単独で投与することもでき、或いは他の治療剤（特に、抗腫瘍剤及び免疫抑制剤からなる群から選ばれる第二の治療剤）と組み合わせて投与することもできる。上記第二の治療剤は、代謝拮抗剤（例えば、カペシタビン、ゲムシタビン等が挙げられるが、これらに限定されない）；成長因子阻害剤（例えば、パゾパニブ、イマチニブ等が挙げられるが、これらに限定されない）；抗体（例えば、ハーセプチン、ベバシズマブ等が挙げられるが、これらに限定されない）；有糸分裂阻害剤（例えば、パクリタキセル、ビノレルビン、ドセタキセル、ドキソルビシン等が挙げられるが、これらに限定されない）；抗腫瘍性ホルモン薬（例えば、レトロゾール、タモキシフェン、フルベストラント等が挙げられるが、これらに限定されない）；アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、カルムスチン等が挙げられるが、これらに限定されない）；金属白金類（例えば、カルボプラチン、シスプラチン、オキサリプラチン等が挙げられるが、これらに限定されない）；トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、トポテカン等が挙げられるが、これらに限定されない）；免疫抑制剤（例えば、エベロリムス等が挙げられるが、これらに限定されない）からなる群から選ばれる。投与される全ての成分は、単一の製剤の形態、或いは別々の製剤の組み合わせとして、同時に又は連続的に及び別々に投与することができる。
【０１３５】
式（Ｉ）の本発明化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体は、過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患の治療に用いることができる。過剰増殖性疾患としては、癌性疾患及び非癌性疾患が挙げられる。癌性疾患は、脳腫瘍、肺癌、非小細胞性肺癌、扁平上皮細胞、膀胱癌、胃癌、卵巣癌、腹膜癌、膵臓癌、乳癌、頭頸部癌、子宮頚癌、子宮内膜癌、結直腸癌、肝癌、腎癌、食道腺癌、食道扁平上皮癌、充実性腫瘍、非ホジキンリンパ腫、中枢神経系腫瘍（神経膠腫、多形膠芽細胞腫、神経膠肉腫（glioma sarcomatosis））、前立腺癌又は甲状腺癌から選ばれ；非癌性疾患としては、例えば、皮膚又は前立腺の良性増殖性疾患からなる群から選ばれる。
【０１３６】
また、本発明は、上述のように、本発明の一般式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体と、１以上の医薬上許容される担体とを含む医薬組成物を提供する。上記組成物は、本発明の一般式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体と、１以上の従来の医薬上許容される担体とを混合して得ることができる。上記組成物は、それを必要とする患者に経口的、非経口的、経肺的又は局所的に投与するための、従来の臨床的又は医薬上許容される剤形として得ることができる。
【０１３７】
経口投与のために、本発明の一般式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体は、従来の固体製剤（例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、散剤等）；又は経口液体製剤（例えば、経口液剤、経口懸濁液剤、シロップ剤等）として調剤することができる。経口製剤を調製するために、適切なフィラー、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、希釈剤等を加えてもよい。従来のフィラーとしては、デンプン、粉砂糖、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム二水和物、デキストリン、微結晶性セルロース、ラクトース、アルファデンプン、マンニトール等が挙げられる。従来の結合剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ＰＶＰ−Ｋ３０、ヒドロキシプロピルセルロース、デンプンのり、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒプロメロース、糊化デンプン等が挙げられる。従来の崩壊剤としては、乾燥デンプン、ポリビニルポリピロリドン（ｃＰＶＰ）、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルデンプンナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。従来の潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウム、タルク粉末、ドデシル硫酸ナトリウム、シリカ粉末等が挙げられる。従来の希釈剤としては、水、エタノール、グリセリン等が挙げられる。
【０１３８】
非経口投与するために、従来の方法に従って、本発明の一般式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体は、注射用製剤（注射液、無菌粉末注射剤及び濃縮注射液を含む）に調剤することができる。注射用製剤の調製のために、医薬品製造における従来の方法を用いることができ、水性溶媒又は非水溶媒を用いることができる。最も一般的に用いられる水性溶媒は、注射用水である。また、０．９％ＮａＣｌ水溶液又はその他の適切な水溶液も用いることができる。最も一般的に用いられる非水溶媒は、注射用の植物油（例えば、大豆油）である。また、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等の水溶液も用いることができる。注射用製剤を調製するために、薬剤の性質に合わせて添加剤を加えてもよい。添加剤としては、浸透圧調整剤、ｐＨ値調整剤、可溶化剤、フィラー、酸化防止剤、静菌剤、乳化剤、懸濁化剤等が挙げられる。
【０１３９】
直腸投与、経肺投与又は局所投与するために、本発明の一般式（Ｉ）の化合物、その医薬上許容される塩又はその立体異性体は、従来の方法に従って、吸入製剤、舌下剤、ゲル剤、軟膏、坐剤、ローション剤、点鼻剤、スプレー剤、経皮貼布等に調剤することができる。
【０１４０】
本発明の化合物はチロシンキナーゼ阻害剤であり、優れた抗腫瘍効果を有するということが証明された。従って、本発明の化合物は、過剰増殖性疾患及び慢性閉塞性肺疾患に対する良好な治療効果を有し、薬剤耐性の形成を抑える。さらに、本発明の化合物は、調製が容易であり、本発明の化合物は、安定性を有し、それにより、本発明の化合物を、工業規模で製造することができる。
【０１４１】
（発明実施の最良の形態）
以下実施例は、本発明について例示することを意図し、その範囲を限定することを意図しない。上記開示内容に基づいて達成可能なすべての技術的解決法は本発明の範囲内に含まれる。
【０１４２】
Ｉ．本発明の化合物の調製例
実施例1：(E)-4-[3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-3-イル]-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド (化合物1) 塩酸塩の調製
(1) 4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-6-ニトロ-7-メトキシキナゾリンの調製
【０１４３】
【化３４】
0005859118.tif 000040
【０１４４】
4-(3-クロロ-4-フルオロフェニル)アミノ-6-ニトロ-7-フルオロキナゾリン (25.4 g, 75.4 mmol)及び50% NaOH溶液 (7.85 mL, 98.125 mmol)を、500 mLのメタノールに加え、還流下70℃で2時間反応させた。反応液を氷水に注いだ。大量の固体を析出した。ろ過後、ろ過ケーキを乾燥し、25.3 gの目的生成物を黄色固体として96.4％の収率で得た。
【０１４５】
(2) 4-(3-クロロ-4-フルオロフェニル)アミノ-6-アミノ-7-メトキシキナゾリンの調製
【０１４６】
【化３５】
0005859118.tif 000041
【０１４７】
4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-6-ニトロ-7-メトキシキナゾリン (25.3 g, 72.7 mmol)を500 mLのテトラヒドロフランに溶解し、7.6 gのラネーNiを加えた。得られた混合物に水素ガスを導入し、室温で24時間撹拌し、ろ過し、ロータリーエバポレートし、溶媒を除去した。得られた残渣を、酢酸エチルで洗浄し、13.345 gの4-(3-クロロ-4-フルオロフェニル)アミノ-6-アミノ-7-メトキシキナゾリンを黄色固体として57.7％の収率で得た。
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ10.17 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.15 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.78 (br. s., 1H), 7.35 - 7.55 (m, 2H), 4.05 (s, 3H). 
【０１４８】
(3) (E)-4-ブロモ-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミドの調製
【０１４９】
【化３６】
0005859118.tif 000042
【０１５０】
乾燥した反応フラスコに、4-(3-クロロ-4-フルオロフェニル)アミノ-6-アミノ-7-メトキシキナゾリン (0.567g, 1.778 mmol)及びトリエチルアミン (0.61 mL, 4.387 mmol) を20 mLのテトラヒドロフランに溶解し、(E)-4-ブロモ-2-クロトニル クロリド(0.555 g, 3.023 mmol)を0℃で滴下した。得られた混合物を、温度を維持して1時間撹拌した。反応液に適量の水を加えた。混合物をジクロロメタンで抽出した。有機相をまとめ、食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮し、(E)-4-ブロモ-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド (0.742 g (89.6％の収率))を黄色固体として得た。
【０１５１】
(4) (E)-4-[3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-3-イル]-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド (化合物1) 塩酸塩の調製
【０１５２】
【化３７】
0005859118.tif 000043
【０１５３】
(E)-4-ブロモ-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド (600mg, 1.29mmol)を20mLのTHFに溶解し、3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン塩酸塩 (200mg, 1.69mmol)を加え、次いで、1mLのDIPEAをゆっくり滴下した。混合物を加熱還流下12時間反応させた。反応混合物を濃縮した。得られた濃縮物に適量の水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで、シリカゲルカラム(ジクロロメタン: メタノール=5:1)で分離し、白色固体を得た。当該白色固体を20mLの無水アルコールに溶解した。得られた混合物を、0.5時間氷水浴で冷却しながら塩化水素ガスを導入し反応させ、次いで、ロータリーエバポレートし、真空乾燥し、42mgの目的生成物(E)-4-[3-アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン-3-イル]-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド塩酸塩を6％の収率で得た。
式: C24H24Cl2FN5O2     分子量: 504.4       マススペクトル (m/e): 468.5(M+1)
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ11.58(br, 1H), 11.43(s, 1H), 10.21(s, 1H), 9.18(s, 1H), 8.89(s, 1H), 7.98(d, 1H), 7.69(br, 1H), 7.58(s, 1H), 7.54(t,1H), 6.97(m, 1H), 6.77(d, 1H), 4.07(s, 3H), 3.98(s, 2H), 3.16(t, 2H), 1.75(br, 2H), 1.20(m, 2H), 1.16(m, 1H), 0.61(m, 1H). 
【０１５４】
実施例2：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-[アザスピロ[3.3]ヘプタン-2-イル]-2-ブテンアミド (化合物2) 塩酸塩の調製
【０１５５】
【化３８】
0005859118.tif 000044
【０１５６】
(1) シクロブタン-1,1-ジイルジメタノールの調製
【０１５７】
【化３９】
0005859118.tif 000045
【０１５８】
シクロブタン-1,1-ジカルボン酸 (28.8g, 0.2mol)を100mLのTHFに溶解し、氷水浴中で冷却しながらバッチで水素化アルミニウムリチウム (22g, 0.58mol)を加え、室温で10時間反応させた。反応を酢酸エチル及び水でクエンチした。得られた反応混合物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、ロータリーエバポレートし、溶媒を除去し、21.3gの目的生成物を黄色油状物として92％の収率で得た。粗生成物を、精製することなく次の工程で直接用いた。
【０１５９】
(2) シクロブタン-1,1-ジイルビス(メチレン) ジメタンスルホナートの調製
【０１６０】
【化４０】
0005859118.tif 000046
【０１６１】
前の工程において得られた粗生成物を、1000mLのジクロロメタン及び15mLのトリエチルアミンに溶解し、MsCl (61.56g, 0.55mol)を氷水浴中で冷却しながら滴下した。反応を3時間続けた。ろ過後、ろ液を濃縮し、乾燥し、52.6gの目的生成物を黄色固体として得た。粗生成物を、精製することなく次の工程で直接用いた。
【０１６２】
(3) 2-トシル-2-アザスピロ[3.3]ヘプタンの調製
【０１６３】
【化４１】
0005859118.tif 000047
【０１６４】
粗シクロブタン-1,1-ジイルビス(メチレン)ジメタンスルホナート (25.3g, 0.09mmol)及び炭酸カリウム (27.6g, 0.2mol)を、200mLのDMSOに溶解し、p-トルエンスルホンアミド (34.2g, 0.2mol)を室温で加え、110℃に加熱し、12時間反応させた。反応系を放冷し、1000mLの酢酸エチルを加え、水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ロータリーエバポレートし、乾燥した。得られた残渣をシリカゲルカラム(石油エーテル: 酢酸エチル=7:1)で析出し、14.74gの目的生成物を無色油状物として65％の収率で得た。
【０１６５】
(4) 2-アザスピロ[3.3]ヘプタンの調製
【０１６６】
【化４２】
0005859118.tif 000048
【０１６７】
2-トシル-2-アザスピロ[3.3]ヘプタン (7.3g, 0.03mol) を、30mLの1,2-ジメトキシエタンに溶解し、製造されたばかりの50mLのナトリウムナフタレン溶液を、氷水で冷却しながら滴下し、室温で1時間反応させた。反応を水でクエンチした。反応液を濃縮し、次いで、シリカゲルカラム(ジクロロメタン:メタノール=20: 0 - 1: 0)で精製し、2.41gの2-アザスピロ[3.3]ヘプタンを83％の収率で得た。
【０１６８】
(5) (E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-[2-アザスピロ[3.3]ヘプタン-2-イル]-2-ブテンアミド塩酸塩の調製
【０１６９】
【化４３】
0005859118.tif 000049
【０１７０】
(E)-4-ブロモ-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド (595mg, 1.28mmol)、2-アザスピロ[3.3]ヘプタン(415mg, 4.25mmol)及び炭酸カリウム (781mg, 5.66mmol)を、50mLアセトニトリルに溶解し、60℃で10時間反応させ、室温までに放冷した。混合物に100mLの水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラム(ジクロロメタン: メタノール=20:1)で分離し、72.5mgの黄色固体を12％の収率で得た。当該黄色固体 (150mg, 0.31mmol)を10mL塩化水素/エタノールに溶解し、2時間室温で反応させた。反応液をロータリーエバポレートし、乾燥し、目的生成物 (E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-[アザスピロ[3.3]ヘプタン-2-イル]-2-ブテンアミド塩酸塩を得た。
式: C25H26Cl2FN5O2     分子量: 518.4     マススペクトル (m/e): 482.2 (M+1)
1H-NMR(CDCl3, 400 MHz): δ9.09(s, 1H), 8.63(s, 1H), 8.10(s, 1H), 7.88(d, 1H), 7.71(br, 1H), 7.50(br, 1H), 7.23(s, 1H), 7.10(br, 1H), 6.90(m, 1H), 6.13(d,1H), 4.04(s,3H), 3.24(br, 6H), 2.13(t, 4H), 1.82(t, 2H). 
【０１７１】
実施例3：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(2-アザスピロ[3.4]オクタン-2-イル)-2-ブテンアミド (化合物14) の調製
【０１７２】
【化４４】
0005859118.tif 000050
【０１７３】
乾燥した反応容器に、(E)-4-ブロモ-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド (0.742 g, 1.59 mmol)、2-アザスピロ[3,4]オクタン塩酸塩 (0.307 g, 2.082 mmol)及び無水炭酸カリウム(0.663 g, 4.797 mmol)を、25 mLのDMFに溶解し、室温で24時間撹拌した。得られた反応液に、適量の水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機相をまとめ、水及び食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (ジクロロメタン: メタノール=20:1)で精製し、次いで、アセトニトリルで処理し、110 mgのN-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(2-アザスピロ[3.4]オクタン-2-イル)-2-ブテンアミドを淡黄色固体として13.9％の収率で得た。
式: C26H27ClFN5O2     分子量: 496.0     マススペクトル (m/e): 496.2(M+1)
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ9.79 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.06 - 8.18 (m, 1H), 7.71 - 7.84 (m, 1H), 7.41 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.71 (dt, J = 15.3, 4.8 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.19 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 3.06 (s, 4H), 1.69 (br. s., 4H), 1.49 (br. s., 4H). 
【０１７４】
実施例4：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(2-アザスピロ[3.5]ノナン-2-イル)-2-ブテンアミド (化合物15) の調製
【０１７５】
【化４５】
0005859118.tif 000051
【０１７６】
(E)-4-ブロモ-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-2-ブテンアミド (3.06g, 6.6mmol)及び2-アザスピロ[3.5]ノナン塩酸塩 (2.13g, 13.2mmol)を、10mLのDMFに溶解し、K2CO3 (2.73g, 19.8mmol)を加えた。混合物を、室温で30分間撹拌した。反応完了後、50mLの水を加え、、酢酸エチルで抽出した。有機相を、ロータリーエバポレートし、乾燥した。得られた固体を、シリカゲルカラム(ジクロロメタン: メタノール=15:1) で精製し、1.21gの(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(2-アザスピロ[3.5]ノナン-2-イル)-2-ブテンアミドを36％の収率で得た。
式: C27H29ClFN5O2           分子量: 510.0       マススペクトル (m/e): 510.2 (M+1)
1H-NMR(MeOD-d6, 400 MHz): δ9.26(s, 1H), 8.76(s, 1H), 7.93(d, 1H), 7.67-7.63(m, 1H), 7.40(t, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.00-6.89 (m, 1H), 6.81 (d, 1H), 4.19(s, 3H), 4.02(d, 2H), 3.49-3.45 (d, 2H), 3.04-3.00 (t, 2H), 2.08-1.60(m, 10H). 
【０１７７】
実施例5：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(7-アザスピロ[3.5]ノナン-7-イル)-2-ブテンアミド (化合物17) の調製
【０１７８】
【化４６】
0005859118.tif 000052
【０１７９】
実施例3の方法に基づき、2-アザスピロ[3,4]オクタン塩酸塩を、7-アザスピロ[3.5]ノナン塩酸塩に置き換え、1.21gの(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(7-アザスピロ[3.5]ノナン-7-イル)-2-ブテンアミドを36％の収率で得た。
式: C27H29ClFN5O2           分子量: 510.0       マススペクトル (m/e): 510.2 (M+1)
1H-NMR(MeOD-d6, 400 MHz): δ9.26(s,1H), 8.76(s, 1H), 7.93(d, 1H), 7.67-7.63(m, 1H), 7.38(t, 1H), 7.32(s, 1H), 6.93-6.89 (m, 1H), 6.77(d, 1.0H), 4.37(d, 2H), 4.19-4.05(m, 5H), 3.49-3.48(d, 2H), 2.04-1.78(m, 5H), 1.56-1.29(m, 5H).
【０１８０】
実施例6：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(4-アザスピロ[2.4]ヘプタン-4-イル)-2-ブテンアミド (化合物25) の調製
【０１８１】
【化４７】
0005859118.tif 000053
【０１８２】
実施例3の方法に基づき、2-アザスピロ[3,4]オクタン塩酸塩を、4-アザスピロ[2.4]ヘプタン塩酸塩に置き換え、0.825gの(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(4-アザスピロ[2.4]ヘプタン-4-イル)-2-ブテンアミドを26％の収率で得た。
式: C25H25ClFN5O2           分子量: 482.0       マススペクトル (m/e): 482.2 (M+1)
1H-NMR(MeOD-d6, 400 MHz): δ9.26(s,1H), 8.76(s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.67-7.63 (m, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.89-6.88 (m, 1H), 6.77 (d, 1.0H), 4.19 (s, 3H), 4.05-3.92 (m, 2H), 3.49-3.46 (d, 2H), 2.42-1.99 (m, 4H), 1.56-1.29 (m, 4H).
【０１８３】
実施例7：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(5-アザスピロ[2.4]ヘプタン-5-イル)-2-ブテンアミド (化合物26)の調製
【０１８４】
【化４８】
0005859118.tif 000054
【０１８５】
実施例3の方法に基づき、2-アザスピロ[3.4]オクタン塩酸塩を、5-アザスピロ[2.4]ヘプタン塩酸塩に置き換え、目的化合物を得た。
式: C25H25ClFN5O2       分子量: 482.0       マススペクトル (m/e): 482.2(M+1)
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 9.80 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 8.86 - 8.99 (m, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.06 - 8.18 (m, 1H), 7.75 - 7.87 (m, 1H), 7.41 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.76 - 6.91 (m, 1H), 6.59 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.24 (m, 2H), 2.60 - 2.77 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 0.51 (m, 4H).
【０１８６】
実施例8：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(6-アザスピロ[3.4]ノナン-6-イル)-2-ブテンアミド (化合物27) の調製
【０１８７】
【化４９】
0005859118.tif 000055
【０１８８】
実施例3の方法に基づき、2-アザスピロ[3,4]オクタン塩酸塩を、6-アザスピロ[3.4]オクタン塩酸塩に置き換え、目的化合物を得た。
式: C26H27ClFN5O2       分子量: 496.0       マススペクトル (m/e): 496.2(M+1)
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 9.80 (s, 1H), 9.71 (br. s., 1H), 8.91 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.09 - 8.15 (m, 1H), 7.75 - 7.82 (m, 1H), 7.41 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.80 (dt, J = 15.2, 5.8 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.27 (br. s., 2H), 2.59 (s, 4H), 1.71 - 2.02 (m, 8H).
【０１８９】
実施例9：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(2-オキサ-6-アザスピロ[3.5]ノナン)-6-イル)-2-ブテンアミド (化合物28) の調製
【０１９０】
【化５０】
0005859118.tif 000056
【０１９１】
実施例3の方法に基づき、2-アザスピロ[3.4]オクタン塩酸塩を2-オキサ-6-アザスピロ[3.5]ノナン塩酸塩に置き換え、0.71gの目的化合物 (E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(2-オキサ-6-アザスピロ[3.5]ノナン)-6-イル)-2-ブテンアミドを21％の収率で得た。
式: C26H27ClFN5O3         分子量: 512.0       マススペクトル (m/e): 512.2 (M+1)
1H-NMR(CDCl3-d6, 400 MHz): δ9.11(s,1H), 8.63(s, 1H), 7.96(d, 1H), 7.68-7.60 (m, 2H), 7.34(s, 1H), 7.04(t, 1H), 6.22(d, 1H), 4.42(d, 4H), 4.08(d, 3H), 3.25 (d, 2H), 2.40 (s, 2H), 2.22-2.20 (m, 2H), 2.02 (m, 2H), 1.59-1.56(m, 2H).
【０１９２】
実施例10：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(2-オキサ-7-アザスピロ[3.5]ノナン-7-イル)-2-ブテンアミド (化合物29) の調製
【０１９３】
【化５１】
0005859118.tif 000057
【０１９４】
実施例4の方法に基づき、2-アザスピロ[3.4]オクタン塩酸塩を、2-オキサ-7-アザスピロ[3.5]ノナン塩酸塩に置き換え、目的化合物を得た。
式: C26H27ClFN5O3       分子量: 512.0       マススペクトル (m/e): 512.2(M+1)
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 9.79 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.12 (dd, J = 6.8, 2.3 Hz, 1H), 7.79 (dt, J = 8.5, 3.5 Hz, 1H), 7.41 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.77 (dt, J = 15.3, 6.0 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 4.26 (s, 4H), 4.00 (s, 3H), 3.07 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 2.27 (br. s., 4H), 1.78 (br. s., 4H).
【０１９５】
実施例11：(E)-N-[4-(3-クロロ-4-フルオロフェニルアミノ)-7-メトキシキナゾリン-6-イル]-4-(6-アザスピロ[2.5]オクタン-6-イル)-2-ブテンアミド (化合物30) の調製
【０１９６】
【化５２】
0005859118.tif 000058
【０１９７】
実施例4の方法に基づき、2-アザスピロ[3.4]オクタン塩酸塩を、6-アザスピロ[2.5]オクタン塩酸塩に置き換え、目的化合物を得た。
式: C26H27ClFN5O2       分子量: 496.0       マススペクトル (m/e): 496.2(M+1)
1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 9.79 (s, 1H), 9.69 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.12 (dd, J = 6.8, 2.3 Hz, 1H), 7.79 (dt, J = 8.3, 3.5 Hz, 1H), 7.41 (t, J = 9.2, 1H), 7.27(s, 1H), 6.82 (dt, J = 15.2, 6.1 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.16 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 2.42 (br. s., 4H), 1.35 (br. s., 4H), 0.24 (s, 4H).
【０１９８】
上記の方法を参照して、以下の化合物も得られる。
【０１９９】
【表Ｂ−１】
0005859118.tif 000059
【０２００】
【表Ｂ−２】
0005859118.tif 000060
【０２０１】
【表Ｂ−３】
0005859118.tif 000061
【０２０２】
【表Ｂ−４】
0005859118.tif 000062
【０２０３】
ＩＩ．本発明化合物の抗腫瘍活性のin vitro アッセイ
以下、本発明化合物の有益な効果を、in vitro 酵素阻害活性及びin vitro 細胞阻害活性により説明する。ただし、本発明化合物の有益な効果は、以下に示す効果に限定されないことに留意すべきである。
【０２０４】
アッセイ１
本発明化合物のin vitro 酵素阻害活性
試料：
対照：
PF-00299804（自製）；ゲフィチニブ（安慶沃徳化工有限公司から購入）；エルロチニブ塩酸塩（安慶沃徳化工有限公司から購入）；トシル酸ラパチニブ（台州市晟欣医薬化工有限公司から購入）；上記の４つの化合物の構造については、上記の節[背景技術]を参照；
本発明化合物：自製、これらの化学名及び構造式は、調製例で示した通りである。
【０２０５】
アッセイ手順： 
以下のアッセイで用いる略記は、以下の意味を有する: 
HEPES：ヒドロキシエチルピペラジンエタンスルホン酸; 
Brij-35：ポリエチレングリコールラウリルエーテル; 
DTT：ジチオトレイトール; 
コーティング剤#3：#3コーティング剤; 
EDTA：エチレンジアミン四酢酸（シグマ社から購入）；
FAMラベルペプチド：フルオレセインラベルペプチド22 (GL Biochem)；
ATP：アデノシン三リン酸 (シグマ)；
DMSO：ジメチルスルホキシド；
EGFR：ヒト上皮成長因子受容体 (カルナ)；
HER2：ヒト上皮成長因子受容体2 (カルナ)；
HER4：ヒト上皮成長因子受容体4 (カルナ)。
【０２０６】
１．アッセイで使用された薬剤の配合
(1) 1.25倍 MnCl2不含キナーゼバッファー (62.5 mM HEPES, PH 7.5, 0.001875% Brij-35, 12.5 mM MgCl2, 2.5 mM DTT); 
(2) 1.25倍 MnCl2含有キナーゼバッファー (62.5 mM HEPES, pH 7.5, 0.001875% Brij-35, 12.5 mM MgCl2, 12.5 mM MnCl2, 2.5 mM DTT); 
(3) ストップバッファー (100 mM HEPES, pH 7.5, 0.015% Brij-35, 0.2% コーティング剤#3, 50 mM EDTA); 
(4) 2.5倍キナーゼ溶液 (1.25倍キナーゼバッファーに、対応するキナーゼを加え、2.5倍EGFR、HER2、HER4キナーゼ溶液としたもの); 
(5) 2.5倍ペプチド溶液 (1.25倍キナーゼバッファーに、FAMラベルペプチド及びATPを加え、ペプチド溶液としたもの); 
(6) 5倍化合物溶液 (100% DMSOを使用し、異なる濃度勾配を有する50倍化合物溶液とし、水で10倍に希釈し、異なる濃度勾配を有する5倍化合物溶液として得たもの)；
２．5μLの5倍化合物溶液を384ウェルプレートに加える；
３．10μLの2.5倍キナーゼ溶液を加え、10分間インキュベートする; 
４．次いで、10μLの2.5倍ペプチド溶液を加え、28℃で1時間反応させる；及び
５．最後に、25μLのストップバッファーを加え、反応を終結させ、キャリパーでデータを読む；
６．曲線にあてはめIC50値を得る。
【０２０７】
計算阻害率 (%)=(最大変換率−変換率)/(最大変換率−最小変換率)×100
曲線へのあてはめを、Xlfitソフトウエアで行い、IC50値を得た。
【０２０８】
結果：
下記表１を参照。
表１  本発明の化合物のin vitro酵素阻害活性
【０２０９】
【表１】
0005859118.tif 000063
【０２１０】
結論：
本発明化合物が、EGFR、HER2及びHER4キナーゼに対するより強い阻害活性を有するということが表１から確認することができる。本発明化合物は、トシル酸ラパチニブに比べて、EGFRキナーゼに対する非常に優れた阻害活性を有する；本発明化合物は、ゲフィチニブ及びエルロチニブ塩酸塩に比べ、HER2キナーゼに対する非常に優れた阻害活性を有する；本発明化合物は、エルロチニブ塩酸塩及びトシル酸ラパチニブに比べ、HER4キナーゼに対する非常に優れた阻害活性を有する；本発明化合物は、EGFR、HER2及びHER4キナーゼに対する阻害活性が、PF-00299804と同程度である。
【０２１１】
アッセイ２
本発明化合物のin vitro細胞阻害活性
試料：
対照：
PF-00299804（自製）；ゲフィチニブ（安慶沃徳化工有限公司から購入）；エルロチニブ塩酸塩（安慶沃徳化工有限公司から購入）；トシル酸ラパチニブ（台州市晟欣医薬化工有限公司から購入）；
本発明化合物：自製、これらの化学名及び構造式は、調製例で示した通りである。
【０２１２】
アッセイにおける原料及び器具：
【０２１３】
【表Ｃ】
0005859118.tif 000064
【０２１４】
【表Ｄ】
0005859118.tif 000065
【０２１５】
アッセイ手順：
１．薬剤及び化合物の配合
1) PBSの配合：
NaCl (8g)、KCl (0.2g)、Na2HPO4(1.44g)及びKH2PO4 (0.24g)を、超純水(800mL)に加えた。pHを7.4に調整した後、さらに超純水を体積1Lとなるまで加えた。混合物を20分間加圧滅菌器で処理した。
2) XTT使用液の配合：
暗所下、XTT粉末(100mg)を取り、300mlの血清不含RPMI1640培地（50℃に昇温したもので、フェノールレッドを含まないもの）に溶解した。混合物をろ過し、別々にまとめ、直ぐに用いるか或いは一週間以内に用いた。全てのプロセスを暗所で行うことが必要である。
3) 試験化合物の配合
・試験化合物の保存溶液の配合：
化合物粉末を、濃度10 mMとなるまでDMSOに溶解した。
・試験化合物の勾配希薄溶液の配合：
まず、10mM試験化合物の保存溶液を10の濃度に4倍連続勾配となるようにDMSOに希釈した。DMSO希釈化合物2μLを998μLの10％ FBS含有培地に加えた。その結果、化合物の最大濃度を20μM、DMSOの濃度を0.2％、そして合計10の濃度勾配とした。
【０２１６】
２．細胞培養
1) 細胞の解凍：
・細胞凍結チューブを液体窒素から取り出し、37℃〜39℃の水浴中に入れ、急速に細胞に解凍した。
・凍結保存溶液を15 ml滅菌遠心分離管に移し、そこに、凍結保存溶液の体積の10倍以上の体積になるように培地を加えた。混合物を1000 rpmで4℃にて5 分間遠心分離した。遠心分離管の培地を捨て、次いで、10％ FBSを含む培地を加えた。細胞を再懸濁し培養瓶に移した。次の日、溶液を変えた。
【０２１７】
2) 細胞の継代
・対数増殖期細胞について、培地を捨て、適量のPBSを加え、細胞を一度洗浄した。次いで、0.25％膵酵素及び0.02％EDTAを含有する適量の消化液を加えた。溶液を37℃で2〜5分間置き、次いで、消化液を除去した後、PBSで一度洗浄した。10％FBSを含む適量の培地を加え、消化を停止した。わずかにピペッティングし、細胞を消化させ、細胞通過及びさらなる試験のための細胞懸濁液を得た。
【０２１８】
3) 細胞の凍結保存
・対数増殖期細胞について、0.25％膵酵素及び0.02％EDTAを含む消化液を用いて細胞を消化し、細胞懸濁液を得た。懸濁液を1000 rpmで 4 ℃にて5 分間遠心分離した。培地を捨て、10％DMSO及び90％FBSを含む凍結保存溶液を加え、細胞を再懸濁した。細胞を、別々に2×106 細胞/チューブとなるように細胞凍結チューブに分けた。細胞凍結チューブをプログラム冷却カセットに入れ、-80℃で24時間保持し、次いで、凍結保存のために液体窒素に移した。
【０２１９】
３．細胞の平板培養
1) 細胞懸濁液の調製 
・培地を培養瓶から除去した。細胞をPBSで二度すすぎ洗った。膵酵素を加え、細胞を消化した。消化された細胞を遠心分離し回収した。細胞を、10％ウシ胎児血清を含む培地で再懸濁し、カウントし、適切な濃度(細胞生存率は90％を超えるようにするべき)に調整した。細胞濃度は5×104/mlとした。
【０２２０】
2) 細胞懸濁液を96ウェルプレート(1ウェルあたり100μL)に加えた。
【０２２１】
3) インキュベータにプレートを入れ、37℃で5％CO2下終夜インキュベートした。
【０２２２】
４．薬剤の処理
薬剤を細胞培養プレートに加えた。インキュベータにプレートを入れ、37℃で5％ CO2下72 時間インキュベートした。
【０２２３】
５．XTT法による細胞生死判別試験
XTT使用溶液を加え、37℃で5％CO2下2 時間インキュベートした。次いで、マイクロプレートリーダに入れ、450 nmで吸光度を読み取った。
【０２２４】
６．データ処理
1) パーセント阻害を以下の計算式で計算した。
％阻害=(吸光度(溶媒)−吸光度(化合物))/(吸光度(溶媒)−吸光度(陽性対照))×100％；
2) データをGraphPad Prism 5.0に入力し、曲線にプロットし、IC50を得た。
結果：
下記の表２〜４を参照。
【０２２５】
表２  H1975 (NSCLC、非小細胞性肺癌) に対するin vitro細胞阻害活性
【０２２６】
【表２】
0005859118.tif 000066
【０２２７】
表３  SKOV3 (Ovarian carcinoma、卵巣癌) に対するin vitro 細胞阻害活性
【０２２８】
【表３】
0005859118.tif 000067
【０２２９】
表４  A431 (Epidermoid carcinoma、類表皮癌) に対するin vitro 細胞阻害活性
【０２３０】
【表４】
0005859118.tif 000068
【０２３１】
結論：
表２から、H1975(NSCLC、非小細胞性肺癌)に対する本発明化合物の細胞増殖阻害効果が、エルロチニブ塩酸塩、トシル酸ラパチニブ及びPF-00299804に比べて非常に優れているということがわかる。
表３から、SKOV3(Ovarian carcinoma、卵巣癌)に対する本発明化合物の細胞増殖阻害効果が、エルロチニブ塩酸塩に比べて非常に優れており、PF-00299804及びトシル酸ラパチニブと同程度であるということがわかる。
表４から、A431(Epidermoid carcinoma、類表皮癌)に対する本発明化合物の細胞増殖阻害効果が、エルロチニブ塩酸塩、トシル酸ラパチニブ及びPF-00299804に比べて非常に優れているということがわかる。