(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化４】
0005841672.tif 000097
（式中、
Ｒ１は、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又は−ＯＣＯＲ１１であり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９、又はＲ１０は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン又はトリフルオロメチルであり；
Ｒ４は、ハロゲン又はトリフルオロメチルであり；
Ｒ７又はＲ８は、それぞれ独立して−ＣＯＲ１２、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、−ＯＣＨ２ＣＯＲ１２、−ＯＣＯＲ１１又は−ＯＣＨ２ＣＯＢであり；
Ｘは、水素又はＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｙは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＨ２ＣＯＲ１３又は−ＣＯＲ１３であり；
Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ１２は、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又はＢであり；
Ｒ１３は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又はＢであり；
Ｂは
【化５】
0005841672.tif 000098
であり、
ここで、少なくとも１個のＲ７、Ｒ８、及びＹはＢ基を含有するか、又はＸ及びＹは共に水素ではない）
の構造を有するＮ−ベンジルアニリン誘導体、又は医薬的に許容されるその塩。
【請求項２】
Ｒ１が、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ又は−ＯＣＯ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、ヒドロキシル、メトキシ又は−ＯＣＯＣＨ３である、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９又はＲ１０が、それぞれ独立して−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ又は−Ｂｒであり、
Ｒ４が、トリフルオロメチル、−Ｆ、−Ｃｌ又は−Ｂｒである、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ７が、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＲ１１、−ＣＯＲ１２、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又は−ＯＣＨ２ＣＯＲ１２であり、
Ｒ８が、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＲ１１又は−ＣＯＲ１２であり、
Ｒ１１が、Ｃ１−Ｃ６直鎖アルキルであり、
Ｒ１２が、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４直鎖アルコキシ又はＢである、請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ７が、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＣＨ３、−ＯＣＯＣ３Ｈ７、−ＯＣＯＣ５Ｈ１１、−ＣＯＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ２Ｈ５、−ＯＣＨ３、−ＯＣ４Ｈ９、−ＯＣ６Ｈ１２、−ＯＣＨ２ＣＯＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＯＯＣ２Ｈ５又は−ＯＣＨ２ＣＯＢであり、
Ｒ８が、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＣＨ３、−ＣＯＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ又は−ＣＯＯＣ２Ｈ５である、請求項５記載の化合物。
【請求項７】
Ｘが、水素又はＣ１−Ｃ４アルキルであり、
Ｙが、水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル、−ＣＨ２ＣＯＲ１３、−ＣＨ２ＣＯＢ又は−ＣＯＲ１３であり、
Ｒ１３が、Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル又はＣ１−Ｃ４直鎖アルコキシである、請求項１記載の化合物。
【請求項８】
Ｘが、水素又はメチルであり、
Ｙが、水素、−ＣＨ３、−ＣＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＯＣ２Ｈ５、−ＣＨ２ＣＯＢ又は−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３である、請求項７記載の化合物。
【請求項９】
ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−５−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノ安息香酸；
２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノ安息香酸；
メチル−２−ヒドロキシ−５−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
２−ヒドロキシ−５−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノ安息香酸；
ジエチル−４−［Ｎ−（３，５−ジクロロ−２−ヒドロキシベンジル）−Ｎ−メチル］アミノフタレート；
２−ヒドロキシ−４−［１−（２−ヒドロキシ−５−クロロフェニル）］−エチルアミノ安息香酸；
２−ヒドロキシ−４−［１−（２−ヒドロキシ−５−ブロモ−フェニル）］エチルアミノ安息香酸；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノ−５−クロロベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−３−クロロ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノ−５−クロロベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−３−クロロ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ｎ−ヘキシルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヘキサノイルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノ−５−クロロベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−３−クロロ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
メチル−２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
メチル−２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−（２−エトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−（２−エトキシ−２−カルボニルエチル）］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−（２−ボルニル−２−カルボニルエチル）］アミノベンゾエート；
メチル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−（２−ボルニル−２−カルボニルエチル）］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−メトキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−アセチルオキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−メトキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−アセチルオキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−メトキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−アセチルオキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート；
メチル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
メチル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート；
メチル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート
からなる群より選択される、請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
ｎＮＯＳとＰＳＤ−９５タンパク質を脱共役するための医薬の製造における、請求項１〜９のいずれか記載の化合物又は医薬的に許容されるその塩の使用。
【請求項１１】
脳卒中、慢性的な病的疼痛、又は神経変性疾患の処置用医薬の製造における、請求項１〜９のいずれか記載の化合物又は医薬的に許容されるその塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の分野に属し、Ｎ−ベンジルアニリン誘導体、並びにその製造方法及び医薬上の使用を提供する。
【０００２】
発明の背景
脳卒中は、高い死亡率、高い障害率、高い再発率などの特徴を有し、ヒトの健康に著しく有害である。脳組織の微細構造の複雑さに起因し、それは低酸素性虚血性傷害に特に感受性があり、脆弱である。今まで、明確な有効性を有する治療薬物は、臨床的な実施で稀である。脳虚血条件下での興奮性アミノ酸（例えば、グルタミン酸）の過剰放出が、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体（ＮＭＤＡＲ）を過剰に刺激し、これにより一酸化窒素（ＮＯ）がＮＭＤＡＲ−ＰＳＤ−９５−ｎＮＯＳシグナル伝達経路を介して病的に放出されるという研究が示された（Science, 1999, 284, 1845-1848; Nature Medicine 2010, 16, 1439-1443）（ここで、ｎＮＯＳは神経細胞の一酸化窒素合成酵素であり、ＰＳＤ−９５はシナプス後膜肥厚タンパク質−９５である）。それ自体強力な酸化特性を有するＮＯは、ＮＯが過剰に放出され、不十分に取り除かれたとき、表面の脂質、及び細胞を囲む内部構造を直接損傷する。一方、脳の虚血−再灌流中に産生される大量の酸素アニオンフリーラジカル（Ｏ２−）は、ＮＯと反応して、強力かつ安定な酸化剤が細胞により深刻な損傷を引き起こす亜硝酸塩スーパーオキシドアニオンフリーラジカル（ＯＮＯＯ−）を生成する（Cell. Mol. Life Sci., 2004, 61, 657-668）。従って、ｎＮＯＳのＮＭＤＡＲにより仲介される活性化は、神経細胞の興奮毒性発生に対してカギとなる現象である。多数の薬物が、２個の標的分子に基づき開発されたが、それを用いた直接的治療介入は、しばしば、ＮＭＤＡＲ及びｎＮＯＳの非常に重要な生理的機能に起因した激しい副作用を導く（Curr. Opin. Pharmacol., 2006, 6, 53-60）。ＮＭＤＡＲ又はｎＮＯＳを直接的に干渉すること以外のＮＭＤＡＲのＰＳＤ−９５との相互作用の選択的阻害（Science, 2002, 298, 846-850）、又はｎＮＯＳのＰＳＤ−９５との相互作用の選択的阻害（Nature Medicine 2010, 16, 1439-1443）は、ＮＭＤＡＲ及びｎＮＯＳの生理機能に影響することなく脳の虚血後のＮＯの病的放出を、副作用のない、脳の虚血に対して安全かつ有効な治療薬物を得る確率を上昇しつつ、阻害し得る。更に、ｎＮＯＳとＰＳＤ−９５のカップリングは、全シグナル経路中の下流に存在するので、より理想的な薬物標的である（Neuropharmacology, 2003, 45, 738-754）。
【０００３】
ベンジルアニリン誘導体４−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノサリチル酸（ＺＬ００６）であるｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５脱共役剤は、ＮＭＤＡＲ及びｎＮＯＳの生理機能に影響することなく、ＮＭＤＡＲにより仲介される病的なＮＯ放出を低減し、グルタミン酸により誘導される神経細胞損傷に対する有意な神経保護作用を示し、動物の神経障害を改善し、中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）及び再灌流により引き起こされる梗塞容量を低減する（Nature Medicine 2010, 16, 1439-1443）。更に、ＺＬ００６は、ＮＭＤＡＲ又は／及びｎＮＯＳを直接的に干渉することにより引き起こされ得る、学習及び記憶障害、行動異常、及び他の副作用を引き起こさない。従って、ＺＬ００６は、脳の虚血関連疾患の処置により安全かつ有意である（Nature. Rev. Neurol., 2011, 7, 61）。
【０００４】
疼痛は、組織損傷又は可能性のある組織損傷により引き起こされる不快な感情及び情動的経験である。正常な生理条件下で、「疼痛は、身体が危険な兆候下であることを警告する警報シグナルであり」、身体に欠くことができない特別な保護機能でもある。しかしながら、病的条件下で、組織傷害（神経性及び炎症性を含む）は、中枢性感作となり、痛覚過敏及び臨床的にアロディニアとして現れる、脊髄の脊髄後角ニューロンの興奮性亢進を導くことができる。最近の研究は、中枢神経系（ＣＮＳ）における興奮性神経伝達物質受容体系と阻害性神経伝達物質受容体系とのバランスが、正常疼痛閾値の維持において重要な役割を果たすことを示唆している。
【０００５】
多数の実験結果は、グルタミン酸が、中枢神経系における侵害受容性情報伝達プロセスの重要な興奮性神経伝達物質であり、非ＮＭＤＡ受容体及びＮＭＤＡ受容体を含むイオンチャネル型グルタミン酸受容体、及び代謝型グルタミン酸受容体において主に作用することを示した。ここで、研究は、ＮＭＤＡ受容体が、末梢組織損傷又は神経傷害により誘導される痛覚過敏プロセスにおける非常に重要な役割を果たすことを示した（Nature, 1983,306, 686-688）。ＮＭＤＡ受容体の非競合的アンタゴニストであるＭＫ−８０１のくも膜下腔内注射は、カプサイシンに誘導される機械的かつ温熱性痛覚過敏における機械的アロディニア及び温熱性痛覚過敏を有意に軽減し得る（Neuropharmacology, 2005, 48, 325〜332）。ＮＭＤＡ受容体の競合的アンタゴニストであるＡＰ−５の筋内注射は、フロイント完全アジュバント（ＣＦＡ）により誘導される筋肉痛覚過敏を用量に依存した方法で低減することができる（Neuroreport, 2005, 16, 485〜489）。しかしながら、中枢神経系におけるＮＭＤＡ受容体の広域分布し、かつ広範囲の機能に照らし、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニストの使用は、多数の態様における中枢の毒性副作用（例えば、記憶喪失、精神異常、及び運動失調）を生じ、そしてそれは、鎮痛剤としてのＮＭＤＡ受容体アンタゴニストの臨床的適用を大いに制限する。それ故、ＮＭＤＡ受容体自体のチャンネルとしての機能に影響することなく、ＮＭＤＡ受容体により仲介される疼痛に関連する下流シグナル伝達を干渉することにより、鎮痛薬物研究の新規標的となった。ｎＮＯＳは、ＮＭＤＡ受容体シグナル伝達経路における重要なシグナル伝達分子である。ｎＮＯＳは、ＮＭＤＡ受容体により仲介されるＣａ２＋流入により選択的に活性化され得る。ＮＭＤＡ受容体への直接結合に加えて、ＰＳＤ−９５中のＰＤＺ−２は、ＮＭＤＡ受容体により仲介されるＣａ２＋によるｎＮＯＳの選択的活性化のためのプラットフォームを提供するＮＭＤＡ受容体／ＰＳＤ−９５／ｎＮＯＳ３重複合体を形成するｎＮＯＳのＰＤＺと相互作用する。実験は、ＰＳＤ−９５の末端に類似する小分子化合物及びポリペプチドによるＰＳＤ−９５とｎＮＯＳのカップリングとの干渉は、げっ歯類における急性温熱性痛覚過敏及び慢性機械的痛覚過敏を有意に低減し得ることを示した（Journal of Pain Research, 2011, 158, 494-506）。げっ歯類における疼痛モデルは、ｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５脱共役剤である２−［（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−５−アミノ）メチル］−４，６−ジクロロフェノール（ＩＣ８７２０１）が、機械的痛覚過敏及び温熱性痛覚過敏に対する有意な阻害作用を有し、作用の新規メカニズムを有する鎮痛薬物として提供され得ることを示した（Brit. J. Pharmacol., 2009, 158, 494-506）。それ故、ＰＳＤ−９５及びｎＮＯＳ脱共役は、鎮痛薬物の選択的スクリーニングのための新規アプローチを提供する。
【０００６】
ＺＬ００６により表されるｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５脱共役剤の標的は、中枢神経系においてであり、従って、この類の薬物は、中枢神経系内の良好な分布を必要とする。しかしながら、この類の脱共役剤は、高親水性を有し、経口吸収及び中枢神経系内での分布に適合しないので、分子の親油性を増大する必要がある。本発明者等は、ＺＬ００６分子により表されるｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５脱共役剤における親水基のエステル化又はアミド化により形成され、非経腸投与を含む種々の投与経路により投与される新規分子が、脳の虚血に対して良好な保護作用及び鎮痛作用を有することを見出した。
【０００７】
発明の概要
本発明の目的：本発明は、Ｎ−ベンジルアニリン誘導体の類を提供する。この類の薬物の最も顕著な特性は、脳の虚血−再灌流障害に対する保護作用、及び慢性的な病的疼痛に対する鎮静作用を有することであり、脳卒中、神経障害性疼痛、及び炎症性病的疼痛の処置用医薬を製造するために用いられ得る。同時に、この類の薬物の作用の固有メカニズムに起因し、これらはまた、てんかん、情動障害である疾患、及び種々の神経変性疾患の処置用医薬を製造するために用いられ得る。
【０００８】
技術的解決法：式Ｉ
【化１】
0005841672.tif 000002
（式中、
Ｒ１は、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又は−ＯＣＯＲ１１であり；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９、又はＲ１０は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン又はトリフルオロメチルであり；
Ｒ７又はＲ８は、それぞれ独立して−ＣＯＲ１２、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、−ＯＣＨ２ＣＯＲ１２、−ＯＣＯＲ１１又は−ＯＣＨ２ＣＯＢであり；
Ｘは、水素又はＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｙは、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＨ２ＣＯＲ１３又は−ＣＯＲ１３であり；
Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル又はＢであり；
Ｒ１２は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又はＢであり；
Ｒ１３は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又はＢであり；
Ｂは、
【化２】
0005841672.tif 000003
であり、
ここで、Ｒ２、Ｒ４又はＲ１０がハロゲンであるとき、少なくとも１個のＲ７、Ｒ８、及びＹはＢ基を含有するか、又はＸ及びＹは共に水素ではない）
のＮ−ベンジルアニリン誘導体の類、又はその医薬的に許容される塩。
【０００９】
好ましい実施態様において、少なくとも１個のＲ７、Ｒ８及びＹは、Ｂ基を含有する。
【００１０】
別の好ましい実施態様において、Ｘ及びＹは、共に水素ではない。
【００１１】
優先として、Ｒ１は、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ又は−ＯＣＯ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）であり、更に、Ｒ１は、ヒドロキシル、メトキシ又は−ＯＣＯＣＨ３である。
【００１２】
優先として、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９又はＲ１０は、それぞれ独立して−Ｈ、−Ｆ、−Ｃｌ又は−Ｂｒであり；Ｒ４は、トリフルオロメチル、−Ｆ、−Ｃｌ又は−Ｂｒである。
【００１３】
優先として、Ｒ７は、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＲ１１、−ＣＯＲ１２、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ又は−ＯＣＨ２ＣＯＲ１２であり；更に、Ｒ７は、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＣＨ３、−ＯＣＯＣ３Ｈ７、−ＯＣＯＣ５Ｈ１１、−ＣＯＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣ２Ｈ５、−ＯＣＨ３、−ＯＣ４Ｈ９、−ＯＣ６Ｈ１２、−ＯＣＨ２ＣＯＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＯＯＣ２Ｈ５又は−ＯＣＨ２ＣＯＢである。
【００１４】
優先として、Ｒ８は、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＲ１１又は−ＣＯＲ１２であり、更に、Ｒ８は、−ＣＯＢ、−ＯＨ、−ＯＣＯＣＨ３、−ＣＯＯＣＨ３、−ＣＯＯＨ又は−ＣＯＯＣ２Ｈ５である。
【００１５】
優先として、Ｒ１１は、Ｃ１−Ｃ６直鎖アルキルである。
【００１６】
優先として、Ｒ１２は、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４直鎖アルコキシ又はＢである。更に、Ｒ１２は、ヒドロキシル、メトキシ、エトキシ又は−Ｂである。
【００１７】
優先として、Ｒ２、Ｒ４、又はＲ１０がハロゲンであるとき、Ｒ７又はＲ８は−ＣＯＢである。
【００１８】
優先として、Ｘは、水素又はＣ１−Ｃ４アルキルであり；更に、Ｘは、水素又はメチル基である。
【００１９】
優先として、Ｙは、水素、Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル、−ＣＨ２ＣＯＲ１３、−ＣＨ２ＣＯＢ又は−ＣＯＲ１３であり；更に、Ｙは、水素、−ＣＨ３、−ＣＯＣＨ３、−ＣＨ２ＣＯＯＣ２Ｈ５、−ＣＨ２ＣＯＢ又は−ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３である。
【００２０】
優先として、Ｒ１３は、Ｃ１−Ｃ４直鎖アルキル又はＣ１−Ｃ４直鎖アルコキシである。
【００２１】
特に提示されない限り、本明細書及び請求項において用いられる次の用語は、以下に考察される意味を有する。
【００２２】
本出願において述べられる通り、基中の炭素原子数を表す方法（例えば、Ｃ１−Ｃ１０）は、基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子など、及び最大１０個の炭素原子を含有し得ることを意味する。
【００２３】
アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどを含むが、これらに限定されない、直鎖及び分岐炭化水素基を含む飽和脂肪族炭化水素に言及する。
【００２４】
アルコキシは、酸素結合を通じて結合したアルキル又はシクロアルキル基に言及する。
【００２５】
ハロゲン原子は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素基を意味する；
【００２６】
本発明により提供される化合物は、更に、化合物の医薬的に許容される均等物又はその２つ以上の混合物を含む。
【００２７】
優先として、本発明により提供される化合物の医薬的に許容される均等物は、医薬的に許容される塩、水和物、溶媒和物、代謝産物、プロドラッグ又はアイソスターの１つ、又はその２つ以上の混合物を含み得る。
【００２８】
優先として、本発明により提供される化合物の医薬的に許容される均等物のうち、医薬的に許容される塩は、本発明により提供される化合物の酸性塩又は塩基性塩を含む。医薬的に許容される塩は、化合物の医薬活性を有し、生物学的及び実施上の適用における要求に合致する。
【００２９】
本発明により提供される化合物の医薬的に許容される均等物のうち、医薬的に許容される酸性塩は、酢酸塩、硫酸塩、リン酸塩、ギ酸塩、プロピオン酸塩、アジピン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオネート、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホネート、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホネート、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、チオシアン酸塩、トシラート及びウンデカン酸塩を含むが、これらに限定されない。
【００３０】
優先として、本発明により提供される化合物の医薬的に許容される均等物のうち、医薬的に許容される塩基性塩は、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム及びカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム及びマグネシウム塩）、及び有酸塩基で形成された塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄグルカミン塩）、アミノ酸で形成された塩（例えば、アルギニン及びリジン）を含み得る。好ましくは、塩基性窒素を含有する基は、ハロゲン化低級アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル及びブチルの塩化物、臭化物及びヨウ化物）；硫酸ジアルキル（例えば、硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチル、及び硫酸ジアミル）；長鎖ハロゲン化物（例えば、デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルの塩化物、臭化物及びヨウ化物）；ハロゲン化アラルキル（例えば、臭化フェニル）を含むがこれらに限定されない剤により四級化され得る。
【００３１】
優先として、本発明により提供される化合物の医薬的に許容される均等物のうち、プロドラッグは、薬理作用を示す前に生体内分解（例えば、代謝）を必要とする、本発明の化合物の誘導体に言及する。プロドラッグは、化学安定性を改善するか、患者の許容性及び服薬遵守を改善するか、バイオアベイラビリティを改善するか、作用の持続時間を延長するか、器官選択性を改善するか、製剤を改善する（例えば、水溶解性を増大する）か、又は副作用（例えば、毒性）を低減する物質で製剤化される。プロドラッグは、通常の方法により本発明の化合物を用いて調製され得る（BURGER'S MEDICINAL CHEMISTRY AND DRUG CHEMISTRY, 5th Edition, Vo1. 1, pp. 172-178, 949-982 (1995)を参照）。
【００３２】
本発明において、アイソスターは、異なる分子式を有するが、類似又は同一の物理的特性を示す元素、官能基、置換基、分子又はイオンに言及する。例えば、テトラゾールは、たとえ異なる分子式を有していても、カルボン酸に類似する特性を有するので、カルボン酸のアイソスターである。典型的には、２つの等比体積分子は、類似又は同一のサイズ及び形を有する。理想的には、等比体積分子は、同形であり、共結晶化され得る。アイソスター分子の他の物理的特性は、典型的には、沸点、密度、粘度、及び熱伝導度を含む。しかしながら、外軌道関数は別々にハイブリッド形成され得るので、ある種の特性（例えば、双極子モーメント、極性、分極、サイズ、及び形）が異なり得る。物理的類似性に加えて、バイオアイソスターは、ある種の生物学的特性を共有する。典型的には、バイオアイソスターは、同一の認識部位と相互作用するか、又は類似の生物学的作用を広範に生じる。
【００３３】
本発明の化合物、又はその医薬的に許容される塩は、錠剤、カプセル剤、注射液、凍結乾燥粉末などを含むがこれらに限定されない、種々の製剤に処方され得る。
【００３４】
有利な効果：本出願に記載されるＮ−ベンジルアニリン誘導体は、ＰＳＤ−９５−ｎＮＯＳのカップリグを解離し、これにより過剰のＮＯ産生を回避することができる物質である；脳の虚血／再灌流障害に対する保護作用、及び鎮痛作用を有するこの類の物質を用いて、脳卒中、神経障害性疼痛、及び炎症性病的疼痛の処置用医薬が調製され得る。一方、この類の薬物の作用の固有メカニズムのため、これらを用いて、てんかん、情動障害である疾患である疾患、及び種々の神経変性疾患の処置用医薬も調製され得る。
【００３５】
本出願に記載されるＮ−ベンジルアニリン誘導体は、ｎＮＯＳをＰＳＤ−９５及び関連タンパク質から分離し、これによりＮＭＤＡ受容体の電気的生理活性及びｎＮＯＳ又はＮＯＳの他のサブクラスの触媒活性に影響することなく、ＮＭＤＡ受容体−ＰＳＤ−９５−ｎＮＯＳ経路と干渉することができることが、特に強調される。結果として、誘導体は、ＮＭＤＡ受容体の妨害又はｎＮＯＳの酵素活性の阻害により引き起こされる副反応を生じず、慢性病的疼痛、脳卒中、及び神経変性疾患の処置に有意な利点を有する。
【００３６】
本出願は、治療上有効量のＮ−ベンジルアニリン誘導体を、必要とする哺乳類（ヒトを含む）に投与することによる、慢性病的疼痛、麻薬耐性、中枢神経損傷、神経変性疾患、情動障害である疾患の処置方法を提供する。処置され得る特定の疾患及び状態は、神経障害性疼痛、炎症性疼痛、脳卒中、脳外傷、パーキンソン病、てんかん、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、及び更に他の疾患を含む。
【００３７】
かかるＮ−ベンジルアニリン誘導体は、ｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５複合体を特異的に脱共役し、脳の虚血性損傷に対する保護、及び慢性病的疼痛を軽減するための処置作用を発揮し得る。事実、本発明は、ｎＮＯＳとＰＳＤ−９５タンパク質との間の相互作用と関連する他の精神神経障害（例えば、中枢神経系外傷、情動障害、てんかん、パーキンソン病、アルツハイマー病及びハンチントン病を含む神経変性疾患、及び脳卒中、慢性病的疼痛など）を処置するための態様においても用いられるＮ−ベンジルアニリン誘導体の類を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】ＺＬ００６−０５は、グルタミン酸により誘導されるｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５カップリングを阻害する。興奮毒性は、培養初代神経細胞においてグルタミン酸で誘導された。ＺＬ００６−０５は、正常培養神経細胞においてｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５カップリングに作用しなかったが、グルタミン酸により誘導される損傷神経細胞におけるｎＮＯＳ−ＰＳＤ−９５カップリングを有意に低減した。平均±標準誤差、ｎ＝４、ビヒクル群と比較して＊＊Ｐ＜０．０１。
【図２Ａ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の神経障害性疼痛（機械的刺激）に対する鎮痛作用。（１Ａ）用量効果と時間効果の関係曲線。平均±標準誤差、ｎ＝９〜１０。
【図２Ｂ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の神経障害性疼痛（機械的刺激）に対する鎮痛作用。（１Ｂ）時間−効果関係曲線下面積。機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値ベースラインを、ＳＮＬ手術に先立ち測定した。平均±標準誤差、ｎ＝９〜１０、ビヒクル群と比較して＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図３Ａ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の神経障害性疼痛（熱放射刺激）に対する鎮痛作用。（２Ａ）用量効果と時間効果の関係。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１。
【図３Ｂ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の神経障害性疼痛（熱放射刺激）に対する鎮痛作用。（２Ｂ）時間−効果関係曲線下面積。熱放射刺激に対する肢離脱性応答の潜在性を、ＳＮＬ手術に先立ち測定した。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１、ビヒクル群と比較して＊Ｐ＜０．０５、＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図４Ａ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の炎症性疼痛（機械的刺激）に対する鎮痛作用。（３Ａ）機械的刺激への肢離脱性応答の閾値に対するＣＦＡの作用。平均±標準誤差、ｎ＝９〜１０。
【図４Ｂ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の炎症性疼痛（機械的刺激）に対する鎮痛作用。（３Ｂ）５０mg/kg  ＺＬ００６−０５での処置後、異なる時間での機械的刺激への肢離脱性応答の閾値の変化。機械的刺激への肢離脱性応答の閾値ベースラインを、ＳＮＬ手術に先立ち測定した。平均±標準誤差、ｎ＝９〜１０、ビヒクル群と比較して＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図４Ｃ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の炎症性疼痛（機械的刺激）に対する鎮痛作用。（３Ｃ）溶媒対照の割合に対して正規化した、２群の動物の時間−効果曲線下面積。平均±標準誤差、ｎ＝９〜１０、ビヒクル群と比較して＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図５Ａ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の炎症性疼痛（熱放射刺激）に対する鎮痛作用。（４Ａ）機械的刺激への肢離脱性応答の閾値に対するＣＦＡの作用。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１、ビヒクル群と比較して＊＊Ｐ＜０．１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図５Ｂ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の炎症性疼痛（熱放射刺激）に対する鎮痛作用。（４Ｂ）５０mg/kg  ＺＬ００６−０５での処置後、異なる時間での機械的刺激への肢離脱性応答の閾値の変化。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１。
【図５Ｃ】マウスにおけるＺＬ００６−０５（胃内投与）の炎症性疼痛（熱放射刺激）に対する鎮痛作用。（４Ｃ）溶媒対照の割合に対して正規化した、２群の動物の時間−効果曲線下面積。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１、ビヒクル群と比較して＊＊Ｐ＜０．１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図６】マウスにおけるＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２（胃内投与）の神経障害性疼痛（機械的刺激）に対する鎮痛作用。機械的刺激への肢離脱性応答の閾値ベースラインを、ＳＮＬ手術に先立ち測定した。機械的刺激への肢離脱性応答の閾値の変化を、処置後異なる時間で測定した。平均±標準誤差、ｎ＝９〜１０。
【図７Ａ】ラットにおけるＺＬ００６−０５（静脈注射）の急性局所脳虚血／再灌流障害に対する保護作用の用量−効果の関係。ラットのＭＣＡＯ虚血／再灌流障害モデルを用いた。試験薬物を再灌流の１時間後に尾静脈を介して注射し、脳の梗塞領域を決定し、神経障害症状を再灌流の４８時間後に評価した。（６Ａ）脳の梗塞領域を示す、代表的なＴＴＣ−染色脳切片。
【図７Ｂ】ラットにおけるＺＬ００６−０５（静脈注射）の急性局所脳虚血／再灌流障害に対する保護作用の用量−効果の関係。ラットのＭＣＡＯ虚血／再灌流障害モデルを用いた。試験薬物を再灌流の１時間後に尾静脈を介して注射し、脳の梗塞領域を決定し、神経障害症状を再灌流の４８時間後に評価した。（６Ｂ）各用量群の脳の梗塞領域のビヒクル群との比較。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１、ビヒクル群と比較して＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図７Ｃ】ラットにおけるＺＬ００６−０５（静脈注射）の急性局所脳虚血／再灌流障害に対する保護作用の用量−効果の関係。ラットのＭＣＡＯ虚血／再灌流障害モデルを用いた。試験薬物を再灌流の１時間後に尾静脈を介して注射し、脳の梗塞領域を決定し、神経障害症状を再灌流の４８時間後に評価した。（６Ｃ）各用量群の神経性欠損症状スコアのビヒクル群との比較。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１、ビヒクル群と比較して＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．１、＊＊＊Ｐ＜０．００１。
【図８Ａ】ラットにおける急性局所脳虚血／再灌流障害に対するＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２の保護作用。ラットのＭＣＡＯ再灌流障害モデルを用いた。試験薬物を再灌流の１時間後に尾静脈を介して注射し、脳の梗塞領域を決定し、神経障害症状を再灌流の４８時間後に評価した。各薬物の用量は１．５mg/kgであった。（７Ａ）各薬物の脳の梗塞領域のビヒクル群との比較。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１、ビヒクル群と比較して＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．１。
【図８Ｂ】ラットにおける急性局所脳虚血／再灌流障害に対するＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２の保護作用。ラットのＭＣＡＯ再灌流障害モデルを用いた。試験薬物を再灌流の１時間後に尾静脈を介して注射し、脳の梗塞領域を決定し、神経障害症状を再灌流の４８時間後に評価した。各薬物の用量は１．５mg/kgであった。（７Ｂ）各薬物の神経性欠損症状スコアのビヒクル群との比較。平均±標準誤差、ｎ＝１０〜１１、ビヒクル群と比較して＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．１。
【００３９】
詳細な実施態様
以下の実施例により、本発明を決して制限することなく、当業者が本発明を包括的に理解することを可能にする。
【００４０】
実施例に含まれる化合物の構造を表１に示す。
【００４１】
【表１】
0005841672.tif 000004
0005841672.tif 000005
0005841672.tif 000006
【００４２】
実施例に含まれる化合物の合成：
【００４３】
目的化合物（ＩＶ、Ｖ）の合成経路は以下の通りである。
【化３】
0005841672.tif 000007
【００４４】
目的化合物（ＩＶ）を、置換アルデヒド又はケトン（Ｉ）を特定のアニリン誘導体（ＩＩ）と反応させることにより得たイミン（ＩＩＩ）を還元することにより得て、目的化合物（ＩＶ）のアミノをアルキル化又はアシル化することにより、化合物（Ｖ）を得た。
【００４５】
以下の実施例は、化合物の合成経路を詳細に記載し、そしてそれにより、当業者が、本発明を決して制限することなく、本発明を包括的に理解することを可能にする。
【００４６】
実施例１：ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０１）
５−ニトロサリチロイルクロライド：５−ニトロサリチル酸３．６６ｇ（０．０２mmol）、塩化チオニル３５mLを、１００mLのナス型フラスコに加えた。反応物を、室温で２時間、無水塩化カルシウムの乾燥管下で撹拌し、次に１０時間還流した。反応を停止させ、減圧下で蒸留して、未反応の塩化チオニルを取り除き、冷却して、黄褐色の固形物（３．８２ｇ、収率９５．０％）を得た。
【００４７】
ボルニル−５−ニトロサリチル酸塩：ピリジン１０ml、２−ボルネオール３．０８ｇ（０．０２mol）を、５０mLのナス型フラスコに加え、２−ボルネオールが完全に溶解するまで撹拌した。アセトン（１０ml）中の５−ニトロサリチロイルクロライド（３．８０ｇ）の溶液を氷水浴下で滴下し、その後、ボトルネックを無水塩化カルシウムの乾燥管で密封し、反応を１２時間続けた。アセトンを回転蒸発により取り除き、次に、酢酸エチル２０mLをナス型フラスコに加え、反応集団を１００mLの分液ロートに移した。ピリジンを３重量％ＨＣｌ溶液（５０mL×３）で取り除き、次に、残渣をシリカゲルカラムにより石油エーテル：酢酸エチル（v/v）＝５０：１の溶出液で精製して、白色固形物（１．５９ｇ、収率２６．３％）を得た。
【００４８】
【表２】
0005841672.tif 000008
【００４９】
エタノール１５０mL、ラネーニッケル１ｇ、及びボルニル−５−ニトロサリチル酸塩１．５９ｇを、５００mLの高圧反応器に加えた。水素ガスで３回パージした後、反応を１０kg水素ガス圧下、３０℃で１２時間行った。反応溶液を減圧下で蒸留し、約５０mLに濃縮し、次に、１００mLのナス型フラスコに移し、これに３，５−ジクロロサリチルアルデヒド０．８０ｇを加えた。反応溶液を還流温度まで温め、１時間還流し、次に、０℃下に置いて、沈殿した赤色の固形物を得て、濾過して赤色の固形物（１．３８ｇ、収率６０．０％）を得た。１００mLのナス型フラスコに、エタノール１０mL、水素化ホウ素ナトリウム０．２ｇ、及び沈殿した赤色の固形物を加え、反応物を２時間撹拌して、精澄溶液を得た。水４０mLを、撹拌しながら３０分間滴下して、白色の物質を沈殿させ、濾過して、オフホワイト色の粉末（１．２０ｇ、収率８６．４％）を得た。
【００５０】
【表３】
0005841672.tif 000009
【００５１】
実施例２：ボルニル−２−アセチルオキシ−５−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２）
２−アセチルオキシ−５−ニトロ安息香酸の合成：５０mLのナス型フラスコに、５−ニトロサリチル酸３．６６ｇ（０．０２mol）、無水酢酸４mL（約０．０４mol）を加え、１０分間撹拌し、次に、濃硫酸２滴を加えた後、３０分間撹拌を続けた。反応を停止させ、反応集団を１００mLのビーカーに注いだ。水６０mLを加え、１０分間撹拌して、沈殿したオフホワイト色の物質を得て、それを濾過し、濾過ケーキを水で３回（５０mL×３）洗浄し、乾燥させて、オフホワイト色の固形物（４．１４ｇ、収率９２．０％）を得た。
【００５２】
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−５−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．４％、２−アセチルオキシ−５−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【００５３】
【表４】
0005841672.tif 000010
【００５４】
実施例３：ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ヒドロキシ−５−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び５−クロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率１８．４％、５−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【００５５】
【表５】
0005841672.tif 000011
【００５６】
実施例４：ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ヒドロキシ−５−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．６％、２−ヒドロキシ−５−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【００５７】
【表６】
0005841672.tif 000012
【００５８】
実施例５：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２４．６％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【００５９】
【表７】
0005841672.tif 000013
【００６０】
実施例６：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．６％、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【００６１】
【表８】
0005841672.tif 000014
【００６２】
実施例７：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２０．４％、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【００６３】
【表９】
0005841672.tif 000015
【００６４】
実施例８：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０８）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２０．８％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【００６５】
【表１０】
0005841672.tif 000016
【００６６】
実施例９：２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノ安息香酸（ＺＬ００６−０９）
２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジルアミノ）安息香酸（ＺＬ００６）１．６４ｇ（０．００５mol）をエタノール５０mLに溶解し、３７％含水ホルムアルデヒド６mL（０．０８０mmol）を加えた。反応物を１０分間還流し、多量の白色の固形物が沈殿するまで冷却し、濾過し、濾過ケーキをエタノールで洗浄して、イミンを得た。白色の固形物を無水エタノール３０mLに分散し、ＮａＢＨ４１．５ｇ（０．０８０mmol）を加えた後、３０分間撹拌した。ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル（v/v）＝５：１）による完了後、反応物を、ｐＨ６〜７に濃塩酸で調整し、濾過し、濾過ケーキを無水エタノールで洗浄した。濾液を合わせ、石油エーテル：酢酸エチル（v/v）＝１５：１の移動相を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶出液を集め、合わせ、総量約１５mLまで濃縮し、濾過し、真空下で乾燥して、オフホワイト色の粉末（１．０４ｇ、収率６１．３％）を得た。
【００６７】
【表１１】
0005841672.tif 000017
【００６８】
実施例１０：２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノ安息香酸（ＺＬ００６−１０）
５０mLのナス型フラスコに、２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジルアミノ）安息香酸（ＺＬ００６）３．２８ｇ（０．０１mol）、及び無水酢酸６mL（約０．０６mol）を撹拌しながら加えた。次に、反応物を５分間撹拌し、濃硫酸３〜４滴を滴下後、３０分間撹拌を続けた。反応を停止させ、反応集団を１００mLのビーカーに注いだ。水６０mLを加え、１０分間撹拌して、沈殿物した灰色の物質を得て、濾過して、濾過ケーキを水で３回（５０mL×３）洗浄し、乾燥して、灰色の固形物（３．６７ｇ、収率８９．０％）を得た。
【００６９】
【表１２】
0005841672.tif 000018
【００７０】
実施例１１：メチル２−ヒドロキシ−５−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−１１）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、メチル２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジルアミノ）ベンゾエートの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率５９．８％、メチル２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジルアミノ）ベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【００７１】
【表１３】
0005841672.tif 000019
【００７２】
実施例１２：２−ヒドロキシ−５−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノ安息香酸（ＺＬ００６−１２）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロ−ベンジルアミノ）安息香酸の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６２．１％、メチル２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロ−ベンジルアミノ）ベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【００７３】
【表１４】
0005841672.tif 000020
【００７４】
実施例１３：ジエチル４−［Ｎ−（３，５−ジクロロ−２−ヒドロキシベンジル）−Ｎ−メチル］アミノフタレート（ＺＬ００６−１３）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ジエチル４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジルアミノ）−フタレートの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６２．４％、ジエチル４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジルアミノ）−フタレートに基づき計算）として合成した。
【００７５】
【表１５】
0005841672.tif 000021
【００７６】
実施例１４：２−ヒドロキシ−４−［１−（２−ヒドロキシ−５−クロロフェニル）］−エチルアミノ安息香酸（ＺＬ００６−１４）
５０mLの１首フラスコに、５−クロロ−ｏ−ヒドロキシアセトフェノン０．８ｇ（０．００５mol）、ｐ−アミノサリチル酸４．０ｇ（０．０２６mol）、無水エタノール２０mlを加え、氷酢酸を溶液にｐＨ＝６まで滴下した。反応混合物を２４時間油浴中で還流し、冷却し、そのまま置いた。水を反応混合物に滴下した（固形物は沈殿しなかった）。反応混合物を濾過して、黄色の固形物約０．８ｇを得た。５０mLの１首フラスコに、黄色の固形物及び無水エタノール１０mLを加えた。混合物を室温で撹拌し、次に、ＮａＢＨ４をゆっくり加えた。黄色の溶液が無色に変わるときに、反応は完了した。混合物に濃塩酸をｐＨ＝７まで滴下し、沈殿した固形物を濾過して、表題化合物０．１９ｇをオフホワイト色の粉末（収率１２．２％、５−クロロ−ｏ−ヒドロキシアセトフェノンに基づき計算）として得た。
【００７７】
【表１６】
0005841672.tif 000022
【００７８】
実施例１５：２−ヒドロキシ−４−［１−（２−ヒドロキシ−５−ブロモ−フェニル）］エチルアミノ安息香酸（ＺＬ００６−１５）
実施例１４の方法を用いて、表題化合物を、５−ブロモ−ｏ−ヒドロキシアセトフェノン、ｐ−アミノサリチル酸の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率１１．６％、５−ブロモ−ｏ−ヒドロキシアセトフェノンに基づき計算）として合成した。
【００７９】
【表１７】
0005841672.tif 000023
【００８０】
実施例１６：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノ−５−クロロベンゾエート（ＺＬ００６−０１６）
実施例１の方法を用いて、ボルニル−４−アミノサリチレートを、４−ニトロサリチル酸及び２−ボルネオールの出発材料で合成した。
【００８１】
５０mLのナス型フラスコに、氷酢酸２０ml、ボルニル−４−アミノサリチレート２．８９ｇ（０．０１mol）を加え、撹拌して、溶解を完了させた。ナス型フラスコとその含量の総重量が０．７５ｇ（０．０１０５mol）増加するまで、塩素ガスを混合物に氷水浴中で気泡化した。反応物を室温で１２時間撹拌した。混合物を氷水１００ｇに注ぎ、濾過し、溶出液（石油エーテル：酢酸エチル（v/v）＝５０：１）を用いたシリカゲルカラムにより精製して、白色の固形物２−ボルネオール３−クロロ−４−アミノサリチレート（０．６５ｇ、収率２０．１％）を得た。２−ボルネオール４−アミノ−５−クロロサリチレート（０．７７ｇ、収率２４．１％）。
【００８２】
ボルニル−３−クロロ−４−アミノサリチレート：
【００８３】
【表１８】
0005841672.tif 000024
【００８４】
ボルニル−４−アミノ−５−クロロサリチレート：
【００８５】
【表１９】
0005841672.tif 000025
【００８６】
実施例１の方法を用いて、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノ−５−クロロベンゾエート（ＺＬ００６−１６）を、ボルニル−４−アミノ−５−クロロサリチレート、３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、薄緑色の粉末（収率７２．２％、ボルニル−４−アミノ−５−クロロサリチレートに基づき計算）として合成した。
【００８７】
【表２０】
0005841672.tif 000026
【００８８】
実施例１７：ボルニル−２−ヒドロキシ−３−クロロ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０１７）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−３−クロロ−４−アミノサリチレート（調製方法については実施例１６を参照）、３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、薄緑色の粉末（収率７０．４％、ボルニル−４−アミノ−５−クロロサリチレートに基づき計算）として合成した。
【００８９】
【表２１】
0005841672.tif 000027
【００９０】
実施例１８：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノ−５−クロロベンゾエート（ＺＬ００６−０１８）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ボルニル２−アセチルオキシ−４−アミノ−５−クロロベンゾエート、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７１．６％、２−ボルニル２−アセチルオキシ−４−アミノ−５−クロロベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【００９１】
【表２２】
0005841672.tif 000028
【００９２】
実施例１９：ボルニル−２−アセチルオキシ−３−クロロ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０１９）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ボルニル２−アセチルオキシ−３−クロロ−４−アミノベンゾエート及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．５％、２−ボルニル２−アセチルオキシ−３−クロロ−４−アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【００９３】
【表２３】
0005841672.tif 000029
【００９４】
実施例２０：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２０）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−３，５−ジクロロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６２．８％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【００９５】
【表２４】
0005841672.tif 000030
【００９６】
実施例２１：ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２１）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−ｎ−ブトキシ−３，５−ジクロロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６２．２％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【００９７】
【表２５】
0005841672.tif 000031
【００９８】
実施例２２：ボルニル−２−ｎ−ヘキシルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２２）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−ｎ−ヘキシルオキシ−３，５−ジクロロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６３．１％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【００９９】
【表２６】
0005841672.tif 000032
【０１００】
実施例２３：ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２３）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ブチリルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６３．１％、２−ブチリルオキシ−４−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【０１０１】
【表２７】
0005841672.tif 000033
【０１０２】
実施例２４：ボルニル−２−ヘキサノイルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２４）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ヘキサノイルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６１．６％、２−ヘキサノイルオキシ−４−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【０１０３】
【表２８】
0005841672.tif 000034
【０１０４】
実施例２５：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノ−５−クロロベンゾエート（ＺＬ００６−０２５）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ボルニル２−メトキシ−４−アミノ−５−クロロベンゾエート、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６８．４％、２−ボルニル２−メトキシ−４−アミノ−５−クロロベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１０５】
【表２９】
0005841672.tif 000035
【０１０６】
実施例２６：ボルニル−２−メトキシ−３−クロロ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２６）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ボルニル２−メトキシ−３−クロロ−４−アミノ−５−クロロベンゾエート、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６８．４％、ボルニル２−メトキシ−３−クロロ−４−アミノ−５−クロロベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１０７】
【表３０】
0005841672.tif 000036
【０１０８】
実施例２７：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−２７）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７３．４％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１０９】
【表３１】
0005841672.tif 000037
【０１１０】
実施例２８：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−２８）
実施例１０の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６３．８％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１１１】
【表３２】
0005841672.tif 000038
【０１１２】
実施例２９：ボルニル−２−メトキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２９）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０２０）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７１．２％、ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１１３】
【表３３】
0005841672.tif 000039
【０１１４】
実施例３０：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３０）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７１．８％、ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１１５】
【表３４】
0005841672.tif 000040
【０１１６】
実施例３１：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３１）
実施例１０の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．１％、ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１１７】
【表３５】
0005841672.tif 000041
【０１１８】
実施例３２：ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３２）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−アミノベンゾエート、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．１％、ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１１９】
【表３６】
0005841672.tif 000042
【０１２０】
実施例３３：メチル２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３３）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、メチル２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−アミノベンゾエート、及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．３％、メチル２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１２１】
【表３７】
0005841672.tif 000043
【０１２２】
実施例３４：ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３４）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３２）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率６４．６％、ボルニル−２−（２−メトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１２３】
【表３８】
0005841672.tif 000044
【０１２４】
実施例３５：メチル２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３５）
実施例１０の方法を用いて、表題化合物を、メチル２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３３）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．８％、メチル２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１２５】
【表３９】
0005841672.tif 000045
【０１２６】
実施例３６：ボルニル−２−（２−エトキシ−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−（２−エトキシ−２−カルボニルエチル）］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３６）
ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート５．０５ｇ（０．０１mol）を、５０mLのナス型フラスコに注いだ。フラスコに、乳鉢によって挽いた炭酸カリウム微粉２ｇ、ジクロロメタン溶液２０mLを加え、次に、ブロモ酢酸エチル４．９８ｇ（０．０３mol）を撹拌しながら滴下した。反応物を８時間還流し、停止し、わずかに冷却し、濾過して、無機塩を取り除き、濾液を砂状物質まで濃縮し、溶出液（石油エーテル：酢酸エチル（v/v）＝２０：１）を用いたカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色の結晶状粉末（３．１７ｇ、４９．８％）を得た。
【０１２７】
【表４０】
0005841672.tif 000046
【０１２８】
実施例３７：ボルニル−２−（２−ボルニル−２−カルボニルエトキシ）−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−（２−ボルニル−２−カルボニルエチル）］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３７）
実施例３６の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート、及びボルニル−ブロモアセテートの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率４８．２％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１２９】
【表４１】
0005841672.tif 000047
【０１３０】
実施例３８：メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−（２−ボルニル−２−カルボニルエチル）］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−３８）
実施例１の方法を用いて、メチル２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートを、エチル２−アセチルオキシ−４−アミノベンゾエート及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で合成した。
【０１３１】
実施例３６の方法を用いて、メチル２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−（ボルニル−アセテート）］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−３８）を、メチル２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率４７．９％、メチル２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１３２】
【表４２】
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【０１３３】
実施例３９：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３９）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．６％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１３４】
【表４３】
0005841672.tif 000049
【０１３５】
実施例４０：ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４０）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．８％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１３６】
【表４４】
0005841672.tif 000050
【０１３７】
実施例４１：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４１）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−３−クロロ−５−ブロモベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．５％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１３８】
【表４５】
0005841672.tif 000051
【０１３９】
実施例４２：ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４２）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−ｎ−ブトキシ−３−クロロ−５−ブロモベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．６％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１４０】
【表４６】
0005841672.tif 000052
【０１４１】
実施例４３：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−４３）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．８％、２−アセチルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１４２】
【表４７】
0005841672.tif 000053
【０１４３】
実施例４４：ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４４）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ブチリルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．３％、２−ブチリルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１４４】
【表４８】
0005841672.tif 000054
【０１４５】
実施例４５：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４５）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３９）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７１．０％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１４６】
【表４９】
0005841672.tif 000055
【０１４７】
実施例４６：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４６）
実施例１０の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０３９）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．２％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１４８】
【表５０】
0005841672.tif 000056
【０１４９】
実施例４７：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４７）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−トリフルオロメチルサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．８％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１５０】
【表５１】
0005841672.tif 000057
【０１５１】
実施例４８：ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４８）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−トリフルオロメチルサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．６％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１５２】
【表５２】
0005841672.tif 000058
【０１５３】
実施例４９：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４９）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．８％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１５４】
【表５３】
0005841672.tif 000059
【０１５５】
実施例５０：ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５０）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−ｎ−ブトキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．２％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１５６】
【表５４】
0005841672.tif 000060
【０１５７】
実施例５１：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−５１）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−トリフルオロメチルサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．１％、２−アセチルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１５８】
【表５５】
0005841672.tif 000061
【０１５９】
実施例５２：ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５２）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ブチリルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−トリフルオロメチルサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．３％、２−ブチリルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１６０】
【表５６】
0005841672.tif 000062
【０１６１】
実施例５３：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５３）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４７）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７１．１％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１６２】
【表５７】
0005841672.tif 000063
【０１６３】
実施例５４：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５４）
実施例１０の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０４７）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．７％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１６４】
【表５８】
0005841672.tif 000064
【０１６５】
実施例５５：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５５）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．４％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１６６】
【表５９】
0005841672.tif 000065
【０１６７】
実施例５６：ボルニル−２−ヒドロキシ−５−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５６）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．１％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１６８】
【表６０】
0005841672.tif 000066
【０１６９】
実施例５７：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５７）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−３−クロロ−５−フルオロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．６％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１７０】
【表６１】
0005841672.tif 000067
【０１７１】
実施例５８：ボルニル−２−ｎ−ブトキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５８）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−ｎ−ブトキシ−３−クロロ−５−フルオロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．３％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１７２】
【表６２】
0005841672.tif 000068
【０１７３】
実施例５９：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−５９）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．９％、２−アセチルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１７４】
【表６３】
0005841672.tif 000069
【０１７５】
実施例６０：ボルニル−２−ブチリルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６０）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−ブチリルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び３−クロロ−５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．８％、２−ブチリルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１７６】
【表６４】
0005841672.tif 000070
【０１７７】
実施例６１：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）−Ｎ−メチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６１）
実施例９の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５５）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７１．１％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１７８】
【表６５】
0005841672.tif 000071
【０１７９】
実施例６２：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６２）
実施例１０の方法を用いて、表題化合物を、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０５５）の出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率７２．４％、ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエートに基づき計算）として合成した。
【０１８０】
【表６６】
0005841672.tif 000072
【０１８１】
実施例６３：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６３）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．４％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１８２】
【表６７】
0005841672.tif 000073
【０１８３】
実施例６４：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６４）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、出発材料４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−５−ブロモベンズアルデヒドで、オフホワイト色の粉末（収率２２．６％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１８４】
【表６８】
0005841672.tif 000074
【０１８５】
実施例６５：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−６５）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．６％、２−アセチルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１８６】
【表６９】
0005841672.tif 000075
【０１８７】
実施例６６：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６６）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び５−クロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．３％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１８８】
【表７０】
0005841672.tif 000076
【０１８９】
実施例６７：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６７）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−５−クロロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．８％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１９０】
【表７１】
0005841672.tif 000077
【０１９１】
実施例６８：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−クロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−６８）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び５−クロロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．９％、２−アセチルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１９２】
【表７２】
0005841672.tif 000078
【０１９３】
実施例６９：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０６９）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．１％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１９４】
【表７３】
0005841672.tif 000079
【０１９５】
実施例７０：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７０）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−５−フルオロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．５％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１９６】
【表７４】
0005841672.tif 000080
【０１９７】
実施例７１：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−フルオロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７１）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び５−フルオロサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．３％、２−アセチルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０１９８】
【表７５】
0005841672.tif 000081
【０１９９】
実施例７２：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７２）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び５−トリフルオロメチルサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．０％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２００】
【表７６】
0005841672.tif 000082
【０２０１】
実施例７３：ボルニル−２−メトキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７３）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−５−トリフルオロメチルベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．１％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２０２】
【表７７】
0005841672.tif 000083
【０２０３】
実施例７４：ボルニル−２−アセチルオキシ−４−（２−ヒドロキシ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７４）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、２−アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸、２−ボルネオール、及び５−トリフルオロメチルサリチルアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．７％、２−アセチルオキシ−４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２０４】
【表７８】
0005841672.tif 000084
【０２０５】
実施例７５：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−メトキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７５）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−３，５−ジクロロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．８％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２０６】
【表７９】
0005841672.tif 000085
【０２０７】
実施例７６：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−アセチルオキシ−３，５−ジクロロベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７６）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−アセチルオキシ−３，５−ジクロロベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．１％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２０８】
【表８０】
0005841672.tif 000086
【０２０９】
実施例７７：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−メトキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７７）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−３−クロロ−５−ブロモベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．３％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２１０】
【表８１】
0005841672.tif 000087
【０２１１】
実施例７８：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−アセチルオキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７８）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−アセチルオキシ−３−クロロ−５−ブロモベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．１％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２１２】
【表８２】
0005841672.tif 000088
【０２１３】
実施例７９：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−メトキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０７９）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−メトキシ−３−クロロ−５−ブロモベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２１．９％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２１４】
【表８３】
0005841672.tif 000089
【０２１５】
実施例８０：ボルニル−２−ヒドロキシ−４−（２−アセチルオキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０８０）
実施例１の方法を用いて、表題化合物を、４−ニトロサリチル酸、２−ボルネオール、及び２−アセチルオキシ−３−クロロ−５−ブロモベンズアルデヒドの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率２２．１％、４−ニトロサリチル酸に基づき計算）として合成した。
【０２１６】
【表８４】
0005841672.tif 000090
【０２１７】
実施例８１：メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−０８１）
実施例１の方法を用いて、メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）］アミノベンゾエートを、アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸及び３，５−ジクロロサリチルアルデヒドの出発材料で合成した。
【０２１８】
実施例１０の方法を用いて、２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−８１）を、メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）］アミノベンゾエートの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率１３．１％、アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【０２１９】
【表８５】
0005841672.tif 000091
【０２２０】
実施例８２：メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−８２）
実施例１の方法を用いて、メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）］アミノベンゾエートを、アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸及び３−クロロ−５−ブロモサリチルアルデヒドの出発材料で合成した。
【０２２１】
実施例１０の方法を用いて、２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−８２）を、メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−ブロモベンジル）］アミノベンゾエートの出発材料で、オフホワイト色の粉末（収率１３．３％、アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【０２２２】
【表８６】
0005841672.tif 000092
【０２２３】
実施例８３：メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−８３）
実施例１の方法を用いて、メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３，５−ジクロロベンジル）］アミノベンゾエートを、アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸及び３−クロロ−５−トリフルオロメチルサリチルアルデヒドの出発材料で合成した。
【０２２４】
実施例１０の方法を用いて、２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−アセチル］アミノベンゾエート（ＺＬ００６−８３）を、出発材料メチル２−アセチルオキシ−４−［Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−クロロ−５−トリフルオロメチルベンジル）］アミノベンゾエートで、オフホワイト色の粉末（収率１３．０％、アセチルオキシ−４−ニトロ安息香酸に基づき計算）として合成した。
【０２２５】
【表８７】
0005841672.tif 000093
【０２２６】
目的化合物のｎＮＯＳとＰＳＤ−９５との間の相互作用に対する作用
実施例８４：初代神経細胞の培養
２４時間以内の新生マウスを、臭化ベンザルコニウム溶液及び７５％エタノールで十分に消毒し、続いてポビドンヨードで頭部の皮膚を消毒した。首の皮膚を左手で持ち、頭部を固定し、右手で眼科用ピンセットを用いて頭蓋骨を切り開き、２つの脳半球を暴露した。２片の大脳皮質をＤ−ハンクス溶液を含有するペトリディッシュに入れ、髄膜を取り除いた。調製した大脳皮質を５mlの小ビーカーに加え、眼科用はさみを用いて１mm3未満の小片組織にカットし、組織片を５０mlのコニカルフラスコに移した。十分にインキュベーションした０．１２５％トリプシン溶液を２０mlのコニカルフラスコに加え、完全に混合した。インキュベーター（３７℃）にて１０分間切断後、組織片が無くなるまで、懸濁液を優しくピペッティングした。細胞懸濁液を２００メッシュ篩に移して、濾過し、濾液の酵素反応を、１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ／Ｆ１２（１：１）培地により終結させた。濾液を遠心（２５００ｒｐ、３分）し、上清を取り除いた。２％Ｂ２７、０．５mM  Ｌ−グルタミン、５IUペニシリン、及び５μg/mL  ストレプトマイシンを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地で、滑らかなチップを備えたガラスピペットで優しくピペッティングすることにより、細胞を再懸濁し、ＰＯＲＮ（１０μg/ml）でコートしたペトリディッシュに、播種密度５×１０細胞/cm2で播種した。細胞を５％ＣＯ２、３７℃下で維持し、Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地の半量を３〜４日毎に新しくした。
【０２２７】
実施例８５：ｎＮＯＳのＰＳＤ−９５との免疫共沈殿
ペトリディッシュ中の培養溶液を吸引し、ペトリディッシュをＰＢＳで３回洗浄し、これに、２００mM  ＮａＣｌ、１０％グリセロール、２mM  ＮａＯ４Ｐ２Ｏ７、２mM  ＤＴＴ、１mM  ＥＤＴＡ、１mMベンズアミジン、０．１mM  Ｎａ３ＶＯ４、１μMペプスタチン、１０μg/mLアプロチニン、１０μg/mLロイペプチン、及び１０μMフッ化フェニルメチルスルホニルを含有する１００mM  ＨＥＰＥＳ適量を加えた。細胞を細胞スクレーパーで掻爬し、氷上で３０分間溶解し、１２０００×ｇ、４℃で１５分間遠心し、上清をタンパク質抽出物として注意深く集めた。タンパク質Ｇ−セファロースビーズ５０μlをＰＢＳで２回洗浄し、ＰＢＳ５０μlで再懸濁した。ｎＮＯＳ抗体を懸濁液に加え、４℃で３〜４時間振盪した。抽出したタンパク質（初代神経細胞タンパク質又は皮質組織タンパク質のいずれか）の上清を、ｎＮＯＳ抗体の終濃度が１：１００になるようにビーズに加えた。タンパク質−抗体−ビーズを４℃で一晩インキュベーションした。翌日、タンパク質−抗体−ビーズ複合体を、ＰＢＳで３回（毎回、４℃で２０分振盪）繰り返し洗浄した。最終回に、上清を出来る限り完全に取り除き、タンパク質−抗体−ビーズ複合体をＰＢＳ５０μlで再建濁した。
【０２２８】
６×タンパク質ローディングバッファー（３００mmol/L  Ｔｒｉｓ（ｐＨ＝６．８）、６００mmol/l  ＤＴＴ、１２％ＳＤＳ、０．６％ブロモフェノールブルー、６０％グリセロール）０．２容量を、試験すべきタンパク質試料に加えた。混合物を５分間１００℃で沸騰させ、１０分間１２０００rpmで遠心し、上清を分析まで−８０℃で保存した。１０％ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルを調製し、タンパク質試料を１００ｖの定電圧での電気泳動により分離した。電気泳動後、ゲルを取り出し、トランスファーバッファー（３９mmol/lグリシン、４８mmol/lトリス塩基、０．０３７％ＳＤＳ、２０％メタノール）中に１０分間浸漬した。ゲルよりわずかに大きな面積を有するニトロセルロースメンブレン（ＮＣメンブレン）（それぞれ、１ｃｍ長く、幅広）をトランスファーバッファー中に１０分間浸漬した。フィルムとゲルを３層のろ紙内にそれぞれ上部と底部で固定することにより、サンドウィッチを作成し、圧力をかけ、固定した後、電気トランスファータンクに入れた。膜透過を、３００mAの定電流で２．５時間行った。メンブレンをＰｏｎｃｅａｕｘ（ＰｏｎｃｅａｕＳ２ｇ；トリクロロ酢酸３０ｇ；スルホサリチル酸３０ｇ；１００mlまで希釈）で染色して、タンパク質バンドを算定することにより膜透過が十分かどうかを評価した。十分であれば、ＮＣメンブレンを、脱イオン水で数回洗浄し、５％スキムミルクで１時間ブロッキングし、メンブレンをＴＢＳＴで１０分×３回洗浄し、１次抗体と一晩インキュベーションした。翌日、１次抗体を取り除き、メンブレンをＴＢＳＴで１０分×３回洗浄し、西洋ワサビペルオキシダーゼ標識ヤギ抗ウサギ２次抗体と２時間インキュベーションした。メンブレンを、ＴＢＳＴで１０分×３回洗浄し、最終洗浄後、ＥＣＬ発光液体試薬（Super Signal West Pico Trial Kit, Pierce）Ａ及びＢ各１mLを、迅速に混合し、メンブレン上で約５分間反応させ、Ｘ線写真暗所トレー内で固定すべき未使用で保存したフィルムに置き、暗所チャンバー内で写真フィルムで迅速に覆った。フィルムボックスを閉じ、適度に暴露した。フィルムを取り除き、展開溶液に１〜２分間直ちに浸漬し、ネガティブフィルムが完全に固定されるまで、固定溶液中に置いた。フィルムを洗浄し、乾燥させ、ゲル画像システム（Ｂｉｏ−ＲＡＤ）によりスキャンした。画像をスキャンし、その後Ｑｕａｎｔｉｔｙ  Ｏｎｅ（Ｂｉｏ−ＲＡＤ）ソフトウエアを用いてデータを分析した。
【０２２９】
実施例８６：ＺＬ００６−０５はグルタミン酸により誘導されるｎＮＯＳとＰＳＤ−９５のカップリングを阻害した
初代神経細胞を１０日間インビトロで培養し、次に、培地を、Ｍｇ２＋を含有しないロッケ培地（１５４mM  ＮａＣｌ、５．６mM  ＫＣｌ、３．６mM  ＮａＨＣＯ３、１．３mM  ＣａＣｌ２、５．６mM  ｄ−グルコース、及び５mM  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４）により再度置き換えた。５０μMグルタミン酸及び３０μMグリシンを加え、３０分間インキュベーションして、興奮毒性を誘導し、次に免疫共沈殿を実施例１７の方法に従い行った。図１に示す通り、１０μM  ＺＬ００６−０５は、グルタミン酸により誘導されるｎＮＯＳとＰＳＤ−９５のカップリングを有意に阻害した。
【０２３０】
目的化合物の神経障害性疼痛及び炎症性疼痛に対する鎮痛作用
実施例８７：神経障害性疼痛モデルの作成方法
神経障害性疼痛モデルを、脊髄分節神経結紮（ＳＮＬ）により作成した。マウスを、正向反射が喪失した後、２％抱水クロラール（０．２mL/１０ｇ）の腹腔内注射により麻酔し、マウスを腹臥位で固定した。モデルをＫｉｍ及びＣｈｕｎｇの方法によって作製した：長さ約３〜５cm、マウスの背中Ｌ４−Ｓ２レベルでの正中皮膚切開を、むき出しに切り開き、椎骨の横の筋肉を第６腰部突出部まで剥離し、右側のＬ５／Ｌ６関節突出部を露呈させ、切り取り、右側のＬ４−Ｌ６の脊髄神経を露呈させるためにＬ６突起横断部を部分に分けた。Ｌ５神経を優しく単離し、５−０の絹糸を用いてきつく縫合した。次に切開した部位を層毎に縫合し、皮膚をポピドンヨードで消毒し、マウスを覚醒させた。実験動物には手術を行った側の後肢に軽い外反及びトゥ（toe）が起こると共に手術後の足取りの歪みが確認されたが、それ以外には異常な変化は無かった。
【０２３１】
実施例８８：炎症性疼痛モデルの作成方法
メレリル法を用いた。左肢底の周りの皮膚を７５％エタノールで消毒し、フロイント完全アジュバント（ＣＦＡ）１０μlを、右後肢の肢底に皮下注射した。液体が針穴に沿って流れるのを回避するために注射後乾燥綿球で肢底を優しく圧迫した。通常、マウスは数分以内に正常に戻る。ＣＦＡにより誘導される炎症性疼痛は、広く用いられる慢性疼痛モデルである。ＣＦＡ炎症を有するマウスは、肢の腫れ、熱及び機械的痛覚過敏を示した。
【０２３２】
実施例８９：機械的疼痛閾値の決定方法
機械的刺激に対する肢離脱性閾値（ＰＷＴ）応答を測定するとき、フォンフレイフィラメントを用いて、５０％肢離脱性閾値を計算した。５０％肢離脱性閾値の決定は、繰り返された機械的刺激に対して５０％肢離脱性応答を引き起こす機械強度に言及し、この実験において接触刺激（Ｔｏｕｃｈ−ｔｅｓｔ（登録商標）感覚評価試験、U.S. North coast medical, Inc.により供給）を用いて、マウスの後趾を持ち上げる−そして−下げるという方法によって５０％肢離脱性閾値を決定した。後肢を０．０２、０．０４、０．０７、０．１６、０．４、０．６、１．０、１．４、及び２．０gの力で刺激した。プレキシガラスボックス（４５cm×５cm×１１cm）を金属篩の上に設置した。マウスをプレキシガラスボックスに３０分間順応させた後、マウスの後肢肢底の中心をフォンフレイフィラメントで４秒未満の間垂直に刺激した。頭を持ち上げたるか、又は四肢をなめる動物の動作を陽性反応とみなし、逆も真なりで陰性反応と見なした。刺激は０．４gの力で開始し、肢離脱性応答が現れない場合はさらに強い０．６gの力を選択して、後肢を刺激した；肢離脱性応答が現れた場合は、より弱い０．１６gの力を選択して、これを繰り返した。応答が前回の応答と異なった（肢離脱性応答の存在から不存へ、又は肢離脱性応答の不存から存在へ）ときは、５０％肢離脱性閾値の測定を完了するために４回連続継続した刺激を行った（計６回）。必要な力が２．０gより大きいか、又は０．０２g未満であれば、閾値の値を２．０g又は０．０２gと各刺激３０秒間隔で直接記録した。実験においては、一定測定技術（力の方向、力を加える速度、フィラメントの曲率、力の安定性の維持、力の離脱速度等）が維持されるべきである。更に、マウス応答の基準も一定であるべきである。５０％肢離脱性閾値を次の式を用いて計算した：５０％肢離脱性閾値＝１０ｌｏｇ（Ｘ）＋κδ（Ｘは最後の刺激で用いた力；κは異なる刺激のモードの係数（変数表において見ることができる）；δは、刺激の力の平均隣接距離に言及し、ここではδ＝０．２２４である）。
【０２３３】
実施例９０：温熱性疼痛閾値の決定方法
温熱刺激に対する肢離脱性閾値（ＰＷＴ）応答を測定するとき、市販の肢底温熱刺激の疼痛測定システム（ＵＧＯ  ＢＡＳＩＬＥ、Ｉｔａｌｙ）を用いて肢離脱性応答の潜在性を決定した。マウスを、ガラスプラットフォーム上に置いた小さなプラスチックチャンバー内に入れた。ガラスプラットフォームの温度を２２℃に制御した。動物の肢底を赤外線ラジエターで刺激した。組織傷害を防ぐため、刺激時間を３０秒以内に制限した。刺激時間が超えたら、赤外線ラジエターは自動で切れた。疼痛閾値を、刺激開始からガラスプラットフォームから肢を上げる時間により表した。実験の整合性を確かにするため、御悦刺激を受ける動物の部位全てを、後肢底の中心にした。
【０２３４】
実施例９１：薬力学的試験における薬物の組成形態及び投与方法
薬剤を経管投与するとき、細かい粉末に砕いた目的化合物を、水及びナトリウムカルボキシメチルセルロースナトリウムで懸濁した（ここで、ナトリウムカルボキシメチルセルロースの量は１％であった）。懸濁後に、目的化合物は、液体中に均一に懸濁されていなくてはならず、沈殿した顆粒状の目的物、又は液体中に綿状に懸濁した目的物はなかった。薬剤を注射により投与するとき、細かい粉末に砕いた目的化合物を、食塩水で所望の濃度に希釈後、４％Ｔｗｅｅｎ８０で溶解した。
【０２３５】
実施例９２：神経障害性疼痛−用量効果／時間効果関係（機械刺激）に対するＺＬ００６−０５の経管投与の鎮痛作用
機械的刺激に対する５０％肢離脱性閾値のベースラインを測定したマウスに、ＳＮＬ手術を実施した。術後７日目に、マウスを、ＺＬ００６−０５投与群とビヒクル群に無作為に分けた（それぞれに、同量だが異なる用量のＺＬ００６−０５、又は１％のナトリウムカルボキシメチルセルロースの懸濁液を経管投与により投与した（ここで、ＺＬ００６−０５の用量は、それぞれ１０、３０、６０、及び９０mg/kgであった）。機械刺的激に対する肢離脱性応答の閾値の変化を、投与の１時間前（−１時間）、投与の０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、２４時間後に測定した。結果を図２Ａに示し、ＺＬ００６−０５は機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値を用量に依存した方法で有意に増大した（ここで、１０mg/kgが有意な有効性を示し、有効性を示す時間は投与後０．５時間未満であり、有効性のピークは投与後２時間で現れ、１回用量は約８時間、有効性を持続した）。有効性のピーク時で、６０及び９０mg/kg群の疼痛閾値は、対照群の約２０倍であった。曲線下面積（ＡＵＣ）を、各用量群の投与の１２時間後の用量−時間曲線を用いて計算し、薬剤は良好な用量−応答関係を示した。ビヒクル群と比較して、ＡＵＣ９０mg/kg群は、対照の約６倍であった（図２Ｂ）。
【０２３６】
実施例９３：神経障害性疼痛−用量効果／時間効果関係（温度刺激）に対するＺＬ００６−０５の経管投与の鎮痛作用
機械的刺激に対する５０％肢離脱性応答の閾値のベースラインを測定したマウスに、ＳＮＬ手術を実施した。術後７日目、マウスを、ＺＬ００６-０５投与群とビヒクル群に無作為にに分け、それぞれに、同量だが異なる用量のＺＬ００６−０５、又は１％のナトリウムカルボキシメチルセルロースの懸濁液を経管投与により投与した（ここで、ＺＬ００６−０５の用量は、それぞれ１０、３０、６０、及び９０mg/kgであった）。温熱性疼痛応答の潜在性を、投与の０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、及び２４時間後に測定した。結果を図３Ａに示し、ＺＬ００６−０５は温熱疼痛に対する肢離脱性応答の潜在性を、用量に依存した方法で有意に増大した（ここで、１０mg/kgが有意な有効性を示し、有効性を示す時間は０．５時間未満であり、有効性のピーク時は、用量の違いにより１〜４時間の間で変動し、１回用量は約８時間有効性を持続した）。有効性のピーク時に、６０および９０mg/kgの潜在性は、対照群の約２．５倍であった。曲線下面積（ＡＵＣ）を、各投与群の投与後１０時間の用量−時間曲線を用いて計算し、薬物は良好な用量−応答関係を示した。ビヒクル群と比較して、ＡＵＣ９０mg/kg群は、対照の約２倍であった（図３Ｂ）。
【０２３７】
実施例９４：炎症性疼痛−時間効果関係（機械的刺激）におけるＺＬ００６−０５の経管投与の鎮痛作用
機械的刺激に対する５０％肢離脱性応答の閾値のベースラインを決定したマウスの肢底にＣＦＡを注射して、炎症性疼痛を誘導した。炎症モデルマウスを、ＺＬ００６−０５投与群とビヒクル群に無作為に分け、それぞれ、ＺＬ００６−０５、又は同量の１％のナトリウムカルボキシメチルセルロースの懸濁液を経管投与により投与した（ここで、ＺＬ００６−０５の用量は、５０mg/kgであった）。肢離脱性応答の閾値の変化を、投与の０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、及び２４時間後に測定した。結果を図４Ａに示し、ＣＦＡにより誘導された炎症は、機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値を有意義に低減し、一方ＺＬ００６−０５は、機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値を有意に増大した（投与の１時間後に有意な有効性を示し、１回用量は約６時間有効性を持続した（図４Ｂ））。投与後１０時間以内は、機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値の曲線下面積は、群間で有意な違いを示した。投与群の面積は、対照群の約４倍であり（図４Ｃ）、これは、ＺＬ００６−０５が炎症により誘導された機械的痛覚過敏に対して強い鎮痛作用を有することを示している。
【０２３８】
実施例９５：炎症性疼痛−時間効果関係（温熱刺激）に対するＺＬ００６−０５の経管投与の鎮痛作用
温熱疼痛の肢応答の潜在性ベースラインを決定したマウスの肢底にＣＦＡを注射し、炎症性疼痛を誘導した。炎症モデルマウスを、ＺＬ００６−０５投与群とビヒクル群に無作為に分け、それぞれ、ＺＬ００６−０５又は同量の１％のナトリウムカルボキシメチルセルロース懸濁を経管投与した（ここで、ＺＬ００６−０５の用量は、５０mg/kgであった）。温熱疼痛に対する肢離脱性応答の潜在性を、投与の０．５、１、２、４、６、８、１０、及び２４時間後に測定した。結果を図５Ａに示し、ＣＦＡは、温熱刺激に対する肢離脱性応答の有意に低い閾値を誘導し、一方ＺＬ００６−０５は、温熱疼痛に対する肢離脱性応答の潜在性を有意に延長した（投与の１時間後に有意な有効性を示した）。１回用量のＺＬ００６−０５は、有意な鎮痛作用を約１０時間維持した（図５Ｂ）。投与後１０時間以内は、機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値の曲線下面積は、群間で有意な違いを示した。処置群の面積は、対照群の約２倍であり（図５Ｃ）、これは、ＺＬ００６−０５が温熱刺激により誘導される炎症性疼痛に対して強い鎮痛作用を有することを示している。
【０２３９】
実施例９６：神経障害性疼痛−時間効果関係（機械的疼痛）に対するＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２の経管投与の鎮痛作用
機械的刺激に対する５０％肢離脱性応答の閾値のベースラインを決定したマウスに、ＳＮＬ手術を実施した。術後７日目に、マウスを、ＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２投与群とビヒクル群にそれぞれ無作為に分けた。ＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２、及び同量の１％のナトリウムカルボキシメチルセルロースの懸濁液を胃内投与した（ここで、投与群の用量は、４０mg/kgであった）。機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値の変化を、投与の１時間前（−１時間）、投与の０．５、１、２、４、６、１２、２４時間後に測定した。結果を図６に示し、ＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２のそれぞれが、機械的刺激に対する肢離脱性応答の閾値を有意に増大し、有意な有効性を投与の０．５時間後に示し、１回用量は約６時間有効性を持続した。
【０２４０】
神経細胞低酸素障害及び局所脳虚血再灌流障害に対する目的化合物の保護作用
実施例９７：細胞生存性アッセイ
初代神経細胞を９日間培養した後、培地を、１％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ高グルコース培地により置き換え、一晩血清飢餓状態にし、ＯＧＤ培養溶液で２回洗浄した。このＯＧＤ培養溶液は、ＤＭＥＭ培地、１％ＦＢＳ、１％ペニシリン／ストレプトマイシン、Ｂ２７を含有し、糖を含有しない。次に、初代神経細胞を、試験薬物と３０分間インキュベーションし、ＯＧＤ培養溶液を無酸素タンクに加え、２時間酸素除去を行った。ＯＧＤ培養溶液を取り除き、１％ＦＢＳ、１％ペニシリン／ストレプトマイシン、及びＢ２７を含有する酸素−飽和ＤＭＥＭ培地により再度置き換えた。８時間後、培養溶液を集めて、ＬＤＨレベルを測定した。
【０２４１】
初代皮質神経細胞を様々なプロセスで処理した後、６ウェルプレート中の神経細胞培養溶液を１．５mLのプラスチック遠心チューブにピペットで移した；細胞をＰＢＳ溶液で３回洗浄し、各ウェルにＰＢＳ１０００μlを加えた。細胞を凍結し、融解し、これを３回繰り返し、１２０００ｇで、５分間、４℃で遠心し、上清を使用するため取り除いた。ＬＤＨ酵素の活性を、培養溶液５０μl及び上清２５μlで、乳酸脱水素酵素キットを用いて決定した。
【０２４２】
実施例９８：局所脳虚血再灌流モデルの作成
皮質虚血障害を、中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）再灌流モデルにより誘導した。ラットを、２％抱水クロラール（０．２ml/１０ｇ、ｉ．ｐ．）で麻酔した後、動物を手術テーブル上に仰臥位で固定した。頸部の皮膚を、正中線に沿って切開し、頸部筋肉組織をあらわに切り開いて、露呈させ、右側の総頸動脈（ＣＣＡ）を注意深く単離した。付随する迷走神経を優しく剥がし、結紮し、内向きの表面の外頸動脈（ＥＣＡ）を切り出した；頭蓋底近く、内頸動脈（ＩＣＡ）に沿った外向き分枝した動脈である翼口蓋動脈を単離し、結紮した。ＣＣＡの近位末端を手術用ワイヤーで結紮した；結紮糸の遠位端を切り取り、眼科用はさみで小さな孔を形成し、これに、外科手術に使用するためのＭＣＡＯモデルより調製された市販のナイロン糸（Ｎｏ．４／０）を、わずかな抵抗が現れる（これは、糸の先端が前大脳動脈へ達したことを示す）まで、約２０mm挿入した。この時点で、頸動脈、ワルダイエル環の手前の交通枝を含む中大脳動脈（ＭＣＡ）への血液供給を全て遮断した。挿入した糸の深度を、マークに基づき決定した。糸の血管外部分を、結紮し、固定して、滑り落ちるのを防いだ。１２０分の右側の脳の虚血の後、糸を慎重に引き抜き、傷付いた端を結紮して、虚血後再灌流を達成した。皮膚を縫合し、ラットをケージに注意深く戻し、餌を与えた。動物の体温を、手術中、３７±０．５℃で一定に維持した。
【０２４３】
実施例９９：局所脳虚血再灌流障害を有するラットの神経性欠損症状の評価
改変Ｂｅｄｅｒｓｏｎ５スコア法を、神経性欠損症状の評価のために用いた。脳虚血後のラットの神経性欠損症状を、単純盲検法（すなわち、試験動物を、試験設計者、及び動物のグループ分けを知らない神経性欠損症状を評価する試験者によって、群によりマークし、評価後、試験者は、設計者に対する種々のマークを有する評価結果を提出し、設計者は、ブラインドでグループ分けして、各試験群の各動物についてのスコアを得た）により評価した。
【０２４４】
【表８８】
0005841672.tif 000094
【０２４５】
実施例１００：欠損量の測定
動物を、１０％抱水クロラール３．５ml/kgで麻酔し、斬首後、脳を取り出し、嗅球、小脳、及び下位脳幹を取り除いた。脳表面の血液を通常の食塩水で洗浄し、表面上の残りの水を吸収した。脳を−８０℃に７分間置き、一度取り出し、視線面に垂直な冠状交差面で２mmの切片間間隔でスライスした。脳切片を、０．２mol/L  ｐＨ７．４〜７．８のＰＢＳで新たに調製した２０g/L  ＴＴＣ染料を含有する水浴（３７℃、９０分）中に浸漬し、正常脳組織は深紅色に染まり、虚血脳組織は薄かった。組織を通常の食塩水で洗浄後、脳切片を正面から後ろ側の順に一列に迅速に並べ、表面の残りの水を吸収し、表面を乾燥させ、次に、写真撮影した。写真の統計処理を、画像分析ソフトウエアを用いて行い、虚血領域（白色の領域）及び右側の総領域に線を引いた。脳の梗塞領域の割合を、以下の式を用いて計算した。
【０２４６】
【数１】
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【０２４７】
実施例１０１：ラットにおける急性局所脳虚血再灌流障害に対するＺＬ００６−０５の保護作用
ラットをＭＣＡＯ下に１２０分間置き、再灌流の１時間後、異なる用量のＺＬ００６−０５又は同等量の溶媒を、尾静脈を介して注射した（ここで、ＺＬ００６−０５の用量は、それぞれ０．７５、１．５、及び３mg/kgであり、注射した薬物の容量は０．１ml／体重１００ｇであった）。神経性欠損症状を、脳虚血の４８時間後に評価し、次に、動物を屠殺し、脳を取り出し、ＴＴＣ染色し、染色した脳切片の梗塞領域を測定した。結果を図７に示す：溶媒対照群と比較して、ＺＬ００６−０５は、脳梗塞領域を用量に依存して有意に低減し、神経性欠損症状を有意に軽減した。
【０２４８】
実施例１０２：ラットにおける急性局所脳虚血再灌流障害に対するＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２の保護作用
ラットをＭＣＡＯ下に１２０分間置き、再灌流の１時間後、尾静脈を介してＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、ＺＬ００６−８２、又は同等量の溶媒を注射した（ここで、各薬物の用量は１．５mg/kgであり、注射した薬物の容量は０．１ml/体重１００ｇであった）。神経性欠損症状を脳虚血の４８時間後に評価し、次に動物を屠殺し、脳を取り出し、ＴＴＣ染色し、染色した脳切片の梗塞領域を測定した。結果を図８に示す：溶媒対照群と比較して、ＺＬ００６−０６、ＺＬ００６−１６、ＺＬ００６−２８、ＺＬ００６−３０、ＺＬ００６−４３、又はＺＬ００６−８２は、脳の梗塞領域を有意に低減し、神経性欠損症状を有意に軽減した。
【０２４９】
実施例１０３：インビトロで培養した初代皮質神経細胞損傷に対する目的化合物の保護作用（表２を参照）
【０２５０】
表２：ＯＧＤ損傷神経細胞によるＬＤＨの放出に対する目的化合物の阻害作用
【表８９】
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【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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