(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
併用チアジド系利尿薬を受け取る患者の痛風を処置するための製剤の製造における、アロプリノールと組み合わせた化合物の使用であって、
化合物はｌｅｓｉｎｕｒａｄである、ことを特徴とする使用。
【請求項２】
ｌｅｓｉｎｕｒａｄの投与量は２００ｍｇである、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項３】
ｌｅｓｉｎｕｒａｄの投与量は４００ｍｇである、ことを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項４】
チアジド処置を受ける患者の高尿酸血症または痛風の発生率または可能性を減少させる、あるいは、高尿酸血症または痛風を覆すための製剤の製造における、アロプリノールと組み合わせた化合物の使用であって、
化合物は２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸又はその薬学的に許容可能な塩である、ことを特徴とする使用。
【請求項５】
チアジドによる処置は、ヒドロクロロチアジド、ベンズチアジド、ベンゾチアジアジン、ヒドロフルメチアジド、クロロチアジド、メチクロチアジド、ポリチアジド、クロルサリドン、メトラゾン、インダパミド、キネサゾン又はトリクロルメチアジドによる処置である、ことを特徴とする請求項４に記載の使用。
【請求項６】
ヒドロクロロチアジドを受け取る患者において高尿酸血症または痛風を減少させる、または、覆すための製剤の製造における、アロプリノールと組み合わせた化合物の使用であって、
化合物が、２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸又はその薬学的に許容可能な塩である、ことを特徴とする使用。
【請求項７】
高血圧症に苦しむ患者の血清尿酸値を下げるための製剤の製造における、アロプリノールと組み合わせた化合物の使用であって、
患者はチアジド系利尿薬を受け取り、
チアジド系利尿薬の投与は血清尿酸値の上昇をもたらし、及び
化合物は２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸又はその薬学的に許容可能な塩であることを特徴とする使用。
【請求項８】
（ｉ）チアジド系利尿薬、
（ｉｉ）２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸、または、その薬学的に許容可能な塩、  （ｉｉｉ）アロプリノール、及び
（ｉｖ）薬学的に許容可能な賦形剤または担体、を含む組成物。
【請求項９】
（ｉ）ヒドロクロロチアジド、
（ｉｉ）２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸、または、その薬学的に許容可能な塩、  （ｉｉｉ）アロプリノール、及び
（ｉｖ）薬学的に許容可能な賦形剤または担体、を含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
＜相互参照＞
本出願は、２０１１年５月２４日に出願された米国仮特許出願第６１／４８９，５９７号の利益を主張するものであり、該出願は引用によって本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
高血圧症は、血清尿酸値を上昇させることもあるチアジド系利尿薬などの抗高血圧症薬で治療される。
【発明の概要】
【０００３】
本明細書のある実施形態では、必要としている被験体で高血圧症を処置するための方法が提供され（例えば、前記処置は、血清尿酸値の増加をもたらさず、血清尿酸値の異常な上昇をもたらさず、高尿酸血症をもたらさず、６ｍｇ／ｄＬ以上の血清尿酸値をもたらさず、あるいは、被験体の痛風の進行を生じさせない）、前記方法は、
ａ．チアジド系利尿薬、および、
ｂ．有機的なアニオン輸送体４（ＯＡＴ４）阻害剤
を被験体に投与する工程を含む。
【０００４】
実施形態によっては、チアジド系利尿薬は、ヒドロクロロチアジド、ベンドロフルメサイアザイド、ベンゾチアジアジン、ヒドロフルメチアジド、クロロチアジド（ｃｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅ）、メチクロチアジド、ポリチアジド、クロルサリドン、メトラゾン、インダパミド、ブメタニド、エタクリン酸、フロセミド、または、トルセミドから選ばれる。
【０００５】
特定の具体的な実施形態において、ＯＡＴ４阻害剤は、２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸、または、その薬学的に許容可能な塩である。
【０００６】
幾つかの実施形態では、さらに本明細書に記載の任意の方法は、被験体にＵＲＡＴ１阻害剤を投与する工程を含む。特定の実施形態では、ＯＡＴ４阻害剤およびＵＲＡＴ１阻害剤は同じ薬物である。
【０００７】
本明細書の実施形態によっては、必要としている被験体の高血圧症を処置するための方法が提供され、処置は、血清尿酸値の上昇をもたらさず、
ａ．ヒドロクロロチアジド、
ｂ．２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸、または、その薬学的に許容可能な塩
を被験体に投与する工程を含む。
【０００８】
本明細書の実施形態によっては、高血圧症に苦しむ被験体において、血清尿酸を減らし、痛風を処置し、または、血清尿酸の上昇または痛風の発生率を減少させる方法が提供され、該方法は、本明細書に記載のＯＡＴ４阻害剤などの、ＯＡＴ４阻害剤の投与を含む。具体的な実施形態では、血清尿酸の上昇または痛風は、チアジド利尿薬の投与によって誘発される。特定の実施形態では、２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸、その薬学的に許容可能な塩、または、そのアナログを、被験体に投与することによって、被験体のＯＡＴ４媒介性の疾患を処置する方法が本明細書で提供される。具体的な実施形態では、ＯＡＴ４媒介性の疾患は、ＯＡＴ４を媒介とした高尿酸血症、あるいは、ＯＡＴ４媒介性の痛風である。
【０００９】
幾つかの実施形態では、患者にＯＡＴ４阻害剤を投与する工程を含む、チアジド処置を受ける患者の高尿酸血症または痛風の発生率、可能性を減少させる、あるいは、高尿酸血症または痛風の診断を覆す方法が本明細書では提供される。
【００１０】
特定の実施形態では、被験体に有効な量のＯＡＴ−４阻害剤を投与する工程を含む、高血圧症に苦しむ患者の血清尿酸値を下げる方法が本明細書で提供され、患者はチアジド系利尿薬を受け取り、（ＯＡＴ−４阻害剤の投与がないときは）、チアジド系利尿薬の投与は血清尿酸値の上昇をもたらす。
【００１１】
実施形態によっては、
ａ．チアジド系利尿薬、
ｂ．ＯＡＴ−４阻害剤、および、
ｃ．薬学的に許容可能な賦形剤または担体
を含む医薬組成物が本明細書で提供される。
【００１２】
具体的な実施形態において、
ａ．ヒドロクロロチアジド；
ｂ．２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸、または、その薬学的に許容可能な塩、および、
ｃ．薬学的に許容可能な賦形剤または担体、
を含む医薬組成物が本明細書で提供される。
【００１３】
＜参照による組み込み＞
本明細書で言及されるすべての公開公報および特許出願は、それぞれの個々の公開公報または特許出願が引用によって明確かつ別々に組み込まれるように意図されたかのような同程度まで、引用によって本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
本発明の新規な特徴は、とりわけ添付の特許請求の範囲で説明される。本発明の特徴および利点のより良い理解は、本発明の原理が用いられる例証的な実施形態を説明する以下の詳細な説明と、以下の添付図面とを引用することによって得られるであろう。
【００１５】
【図１】ヒドロクロロチアジド（ＨＣＴＺ）によって誘発される高尿酸血症の２つの機構の図による記載を表す：ａ）直接−ＯＡＴ４による尿酸の取り込みの直接的なＨＣＴＺ改善、および、ｂ）間接−ＨＣＴＺはＯＡＴ４刺激タンパク質（ＮＨＥ３）を増強する。
【図２】（ａ）ＯＡＴ４を欠く対照プラスミド（ｐＣＭＶ）または（ｂ）ＯＡＴ４のいずれかで一時的にトランスフェクトさせたＨＥＫ２９３Ｔ細胞において、５０μＭ  Ｌｅｓｉｎｕｒａｄ（黒）またはビヒクル（明るい灰色）でインキュベートした６−カルボキシフルオセイン（ＣＦ）基質のＯＡＴ４輸送活性を表す。
【図３】ＣＦ（ＥＣ５０〜９００μＭ）のＯＡＴ４の競合的な基質として機能する尿酸塩を例証している様々な量（０、０．５、１、２ｎＭ）の冷尿酸を含む６−カルボキシフルオセイン（ＣＦ）基質でインキュベートした、ＯＡＴ４を欠く対照プラスミド（ｐＣＭＶ、黒）、または、ＯＡＴ４で一時的にトランスフェクトしたＨＥＫ２９３Ｔ細胞（灰色）を表す。
【図４】多様な量のＬｅｓｉｎｕｒａｄ（■）およびベンズブロマロン（▲）の存在下でのＯＡＴ４尿酸塩輸送体の量（ｃｐｍ）を表す。ＬｅｓｉｎｕｒａｄのＯＡＴ４  ＩＣ５０＝５μＭ；および、ベンズブロマロン＝１０μＭ。
【図５】様々な濃度でＬｅｓｉｎｕｒａｄによる、ＵＲＡＴ１および／またはＯＡＴ４を発現する２９３Ｔ細胞中のＵＡ輸送のパーセント阻害を表しており、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄが同様の効能で、ＵＲＡＴ１およびＯＡＴ４を阻害していることを示している。
【図６】１ｍＭのヒドロクロロチアジド（ＨＣＴＺ）がある状態（実線）とない状態（破線）で、および、様々なＬｅｓｉｎｕｒａｄ濃度下での、ＯＡＴ４を安定的に発現する２９３Ｔ細胞中の３Ｈ−エストロン硫酸塩（ＥＳ）輸送体のパーセントを表しており、ＨＣＴＺがＯＡＴ４輸送体活性のＬｅｓｉｎｕｒａｄを媒介とする阻害に対して効果がないことを示している。
【図７】ＯＡＴ４を発現するＨＥＫ２９３細胞中で、ビヒクル、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄ、オキシプリノール、または、アロプリノールの存在下（１００μＭ−５分間のインキュベーション）で、（ａ）６−カルボキシフルオセイン（ＣＦ−５μＭ）および（ｂ）１４Ｃ尿酸（ＵＡ−１００μＭ）基質のＯＡＴ４輸送活性を表わし、オキシプリノールとアロプリノールがＯＡＴ４を阻害しないことを示している。
【図８】様々な濃度のＬｅｓｉｎｕｒａｄ（２５、５０、１００μＭ−外部；  ２２、４４、４４４μＭ−内部）とビヒクルを注入した、ＯＡＴ４を発現する卵母細胞中での３Ｈエストロン硫酸塩（ＥＳ）の取り込みパーセントを表しており、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄが主として細胞外（尖端）の側からＯＡＴ４を阻害することを示している。
【図９】Ｌｅｓｉｎｕｒａｄ（５０ｎＬ）を注入して、３０分間インキュベートした後の、ＯＡＴ４を発現する卵母細胞の内部と外部における１４Ｃで標識化したＬｅｓｉｎｕｒａｄ（シンチレーション計数によって測定された）の量を表わしており、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄが実験のあいだ、注入された卵母細胞内部で維持することを示している。
【図１０Ａ】臨床的な第２相試験設計の概略を表す。
【図１０Ｂ】利尿薬を摂取する群（黒色）と利尿薬を摂取しない群（明るい灰色）とに分類した、６ｍｇ／ｄＬ未満の血清尿酸（ｓＵＡ）値を持った患者の割合を表しており、利尿薬を受け取る患者がＬｅｓｉｎｕｒａｄによく応答したことを示している。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明の特定の実施形態が本明細書中で示され記載されているが、このような実施形態はほんの一例として提供されていることが当業者には明らかであろう。多くの変更、変化および置換が、本発明から逸脱することなく、当業者に思い当たるであろう。本明細書に記載される実施形態に対する様々な代替物が、状況によっては本発明を実行するために用いられてもよいことが理解されよう。以下の請求項は本発明の範囲を定義するものであり、この請求項とその均等物の範囲内の方法および構造体がそれによって包含されるものであるということが意図されている。
【００１７】
本明細書で使用される段落の表題は、組織化を目的としたものに過ぎず、記載された主題を制限するとして解釈されるものではない。特許、特許出願、記事、書籍、説明書、および、論文を含む、出願で引用されるすべての文献または文献の一部は、限定されることなく、任意の目的のためにそのまま引用されることで、これによって明確に組み込まれる。
【００１８】
（利尿薬と高尿酸血症）
高血圧症は痛風患者でよく見られ、１９５０年代から血清尿酸値を上昇させるものとして知られるようになったチアジド系利尿薬などの抗高血圧症薬でしばしば治療される（Ｈｅａｌｅｙ  ｅｔ。ａｌ．，  ＮＥＪＭ、１９５９，２６１，１３５８）。例えば、１つの研究は、一日当たり２５ｍｇ以上の投与量のチアジド系利尿薬の使用が、抗痛風治療を始めるリスクの著しい増加に関係していることを明らかにした（Ｇｕｒｗｉｔｚ  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｊ  Ｃｌｉｎ．  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ．  １９９７，  ５０（８），  ９５３）。
【００１９】
一方で、尿酸を低下させる治療法は、利尿薬を同時に摂取する患者ではあまり効率的には作用しないと一般に考えられている（Ｒｅｙｅｓ，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．  Ｄｒｕｇｓ  Ｔｈｅｒ．，  ２００３，  １７（５−６），  ３９７）。この効果は、２つの異なる機構：ＯＡＴ４による尿酸取り込みのチアジド増強によって直接、（Ｈａｇｏｓ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．，  ２００７，  １８，  ４３０）、あるいは、ＯＡＴ４  刺激タンパク質のチアジド増強を介して間接（ナトリウム／水素交換体３；  ＮＨＥ３）（Ｎｉｊｅｎｈｕｉｓ  ｅｔ．  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ２００５，  １１５，  １６５１）によるＯＡＴ４の活性化によって増強された尿酸再吸収で媒介されるものと考えられている（図１を参照）。
【００２０】
ＵＲＡＴ１に加えて、有機的なアニオン輸送体４（ＯＡＴ４）は、尿酸排出の重要な制御因子と考えられている。有機的なアニオン輸送体４（ＯＡＴ４）は尿酸輸送体であり、チアジド系利尿薬などの抗高血圧症薬の腎分泌にも関与している。幾つかの例では、ＯＡＴ４は、尿酸に対してこれらの薬物を交換し、それによって、高尿酸血症効果をもたらす尿酸の再吸収を強化する。ＯＡＴ４はいくつかの利尿薬に関連した高尿酸血症の原因かもしれないと推測されてきた。
【００２１】
幾つかの例においては、利尿薬の使用は、痛風のリスクの増大と、血清尿酸値の上昇につながっている（Ａｒｃｈ．  Ｉｎｔｅｒｎ．  Ｍｅｄ．  ２００５；  １６５：  ７４２−８）。確かに、すべてのループ利尿薬、または、多くのチアジドタイプの利尿薬は、チエニル酸（尿酸排泄性で、血清尿酸を減少させる）を例外として、血清尿酸を上げる。その機構は各薬物分類ごとにおそらく異なるが、ナトリウムチャネル遮断薬（アミロライドとトリアムテレンなど）とアルドステロン受容体遮断薬（スピロノラクトンとエプレレノンなど）も血清尿酸値を上げる。尿酸の分画排出は、利尿薬で処理された被験体では減少する（Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  １８：３１０１，  ２００７）。幾つかの例においては、これらの観察を説明する機構は、利尿薬の潜在的な体積効果、近位尿細管（ＮＰＴ）での尿酸分泌物輸送体の阻害、および、ＯＡＴ４（ＳＬＣ２２Ａ１１）とＵＲＡＴ１の直接的または間接的な活性化を含んでいる（Ｒｅｙｅｓ，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｓｅｒｕｍ  Ｕｒｉｃ  Ａｃｉｄ，  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ  １７：３９７，  ２００４．）
【００２２】
幾つかの例においては、利尿薬は、尿酸の再吸収を促進するＯＡＴ４によって尿へ分泌される、対イオン基質として機能する。例えば、ヒドロクロロチアジド（Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  a１８：４３０，  ２００７）と、トラセミド（Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１８：３１０１，２００７）は、ＯＡＴ４の尿酸輸送活性を増加させる。
【００２３】
遺伝学的証拠が、痛風、高尿酸血症、および、ＯＡＴ４利尿薬によって誘発された高尿酸血症におけるＯＡＴ４とＵＲＡＴ１の役割を支持し、それによると、２つの関連研究がＯＡＴ４の独立した関連性を示しており（Ｃｉｒｃ．  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．  Ｇｅｎｅｔ．  ２０１０；  ３；  ５２３−５３０  ａｎｄ  Ｋｏｌｚ  ｅｔ  ａｌ，  ２００９．  Ｖｏｌ  ５：６）、別の研究が、利尿薬によって誘発された高尿酸血症とのＯＡＴ４の関連を示している（ＭｃＡｄａｍｓ発現ＡＣＲ関節炎＆リウマチ（ＭｃＡｄａｍｓ  ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ＡＣＲ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，  Ｖｏｌｕｍｅ  ６３，  Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１１  Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）。
【００２４】
幾つかの例においては、流体の体積の変化は、ナトリウム輸送体の遮断による利尿薬の優性効果であり、および、尿酸吸収は近位尿細管によるＮａＣｌ吸収に類似する。鉄尿酸値と血清尿酸値は、体積状態とよく相関する。高尿酸血症は、重要な役割を果たす体積状態と一致して、利尿薬で処置した患者に食塩負荷することによって抑制される（塩類が不足した患者の高尿酸血症で、一日当たり〜２０ｍｅｑｕ／の塩分制限を課した高血圧性患者と、一日当たり２５０ｍＥｑｕの塩負荷を課した高血圧性患者の間でＳＵＡの２ｍｇ／ｄｌの減少）。幾つかの例では、利尿薬は尿酸の分画排泄の減少を引き起こし、ｓＵＡに対する体積効果はＵＲＡＴ１とＯＡＴ４の活性化につながる近位尿細管細胞中のナトリウムと陽子バランスの変化が原因である可能性がある（Ａｍ．  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  １９９６  Ｎｏｖ；  ２７１（５  Ｐｔ  ２）：Ｆ１０９３−９  ，  Ｎｉｊｅｎｈｕｉｓ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  １１５：１６５１，  ２００５；  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  １８：  ３１０１−３１０９，  ２００７）。
【００２５】
ある研究（Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ，  Ｖｏｌｕｍｅ  ６３，  『ｔ（Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１１）ｔ』  Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ，  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍ  Ｃｏｌｌ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ／Ａｓｓｏｃ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｓ  Ａｎｎｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｍｅｅｔｉｎｇ）は、尿酸の遺伝子と利尿薬の相互作用（ａ  ｕｒａｔｅ  ｇｅｎｅ−ｂｙ−ｄｉｕｒｅｔｉｃ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ）を示唆し、尿酸代謝に影響を及ぼす遺伝形質の重要な相互作用を描写し、かつ高血圧の被験体においては利尿薬使用で対処する、高い血清尿酸レベルに関してより高い遺伝的危険度スコアを有する被験体の間にのみ、高血圧の被験体での利尿薬使用に関する痛風の増加が観察されると結論付けた。
【００２６】
＜Ｌｅｓｉｎｕｒａｄ＞
Ｌｅｓｉｎｕｒａｄは、２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）酢酸の属名であり、その化学構造は以下のものである。
【００２７】
【００２８】
【化１】
0005964952.tif 000002
【００２９】
幾つかの例では、用語Ｌｅｓｉｎｕｒａｄは、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄのナトリウム塩、すなわち、ナトリウム２−（５−ブロモ−４−（４−シクロプロピルナフタレン−１−イル）−）−４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−３−イルチオ）アセテートも含む。
【００３０】
Ｌｅｓｉｎｕｒａｄは、痛風の処置の臨床的な発達におけて尿酸を低下させる療法である。幾つかの例では、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄは、ＵＲＡＴ１輸送体を阻害することにより腎臓近位尿細管内の尿酸（ＵＡ）の再吸収を遮断する。
【００３１】
＜チアジド／チアジド系利尿薬＞
チアジドまたはチアジド系利尿薬は、高血圧症（高血圧）及び浮腫（心臓、肝臓、又は腎臓の疾患によって引き起こされたものなど）を処置するために使用され、高血圧による、死亡、脳卒中、心臓発作および心不全のリスクを減らす。チアジドは、米国で推奨される第１選択処置として、また欧州で推奨される処置として、最も一般的に使用される利尿薬である。チアジドは、チアジド感受性Ｎａ＋−Ｃｌ−共輸送体を遮断することによって、腎臓内の遠位尿細管からのナトリウムと塩素のイオンの再吸収を阻害することで働き、ナトリウム分泌の増加およびそれによる水分排泄の増加（すなわち排尿の増加）につながる。幾つかの例において、身体中の水の量を減少させることは、結果としてより低い血液量をもたらし、それにより心拍出量を減少させ、動脈圧の低下につながる。
【００３２】
用語「チアジド」は、「チアジド受容体」に作用する薬物を指し、またチアジド同様に作用するがベンゾチアジアジン分子構造を含有しない「チアジド様利尿薬」を含む。「チアジド様利尿薬」の例は、限定されないが、ベンドロフルメチアジド、ベンズチアジド、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、インダパミド、メチクロチアジド、ポリチアジド、キネサゾン、トリクロルメチアジド、クロルタリドン及びメトラゾンを含む。
【００３３】
【化２】
0005964952.tif 000003
【００３４】
＜ヒドロクロロチアジド＞
ヒドロクロロチアジド、６−クロロ−１，１−ジオキソ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，２，４−ベンゾチアジアジン−７−スルホンアミド（ＨＣＴＺ、ＨＣＴ又はＨＺＴ）は、しばしば高血圧症とうっ血性心不全の処置のために処方される。
【００３５】
【化３】
0005964952.tif 000004
【００３６】
ヒドロクロロチアジドは、ナトリウム再吸収を減少させるために腎臓に作用し、水を保持する腎臓の能力を阻害し、それにより血液量を減少させ、心臓へ戻る血液を減らすことが一般に理解されている。ヒドロクロロチアジドは、Ｎａ＋／Ｃｌ−共同輸送体上の塩素部位を競い、それによりナトリウム輸送を弱める。ある研究は、ヒドロクロロチアジドの使用は、ＯＡＴ４媒介性の尿酸吸収の２．６倍の増加をもたらすことを観察した。
【００３７】
＜有機陰イオン輸送体−４（ＯＡＴ４）＞
ヒト有機陰イオン輸送体４（ｈＯＡＴ４）は腎臓で発現され、いくつかの例では、５５０のアミノ酸残基タンパク質をコード化する。幾つかの例では、ｈＯＡＴ４は、多くの薬物および薬物動態と同様、内因性物質の腎臓の分泌および再吸収に関わる。一般に、ＯＡＴ４は近位尿細管管腔の側面膜に存在し得、エステロン硫酸（ｅｓｔｅｒｏｎ硫酸（ＥＳ））、デヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）硫酸、およびオクラトキシンＡ、パラアミノ馬尿酸（ρ―ａｍｉｎｏｈｉｐｐｕｒａｔｅ）（ＰＡＨ）などの有機陰イオンの輸送を媒介する。
【００３８】
ベンズブロマロンおよび６−ヒドロキシベンズブロマロン（ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｂｒｏｍａｒｏｎｅ）は、ＯＡＴ４の阻害剤である（それにより尿酸分泌を促進させる）。ベンズブロマロンは、５．４μｍｏｌ／ＬのＩＣ５０の３Ｈエストロン硫酸のＯＡＴ４吸収を阻害し、６−ヒドロキシベンズブロマロンは、３．２μｍｏｌ／ＬのＩＣ５０の３Ｈエストロン硫酸のＯＡＴ４吸収を阻害する。
【００３９】
＜実施例＞
以下に提供される実施例および調製は、本発明の化合物およびそのような化合物を調製する方法をさらに示し例証する。本発明の範囲が、以下の実施例および調製の範囲によっていかなる方法においても限定されないことを理解されたい。
【００４０】
尿酸輸送体ＯＡＴ４は、培養細胞と卵母細胞で安定して発現された。
【００４１】
培養細胞に関して、安定して輸送体を発現するＨＥＫ２９３細胞は、高い輸送体活性による、輸送体、抗生物質選択、及びクローンのクローン選択を保有するＤＮＡコンストラクトの導入を通じて生成された。あるいは、輸送体を一時的に発現する細胞は、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞のリバーストランスフェクションによって生成された。トランスフェクタントは、ポリ−Ｌ−リジンコートマルチウェルプレート上へと高密度で蒔かれ、１乃至２日後にアッセイされた。結果は、安定かつ一過性の発現細胞のものと類似していた。
【００４２】
卵母細胞はＯＡＴ４発現用のｃＲＮＡを注入され、３乃至４日後にアッセイされた。
【００４３】
活性アッセイは、１２５ｍＭのグルコン酸ナトリウム、４．８ｍＭのグルコン酸カリウム、１．２  ｍＭの第一リン酸ナトリウム、１．２ｍＭの硫酸マグネシウム、１．３ｍＭのグルコン酸カルシウム、５．６ｍＭのグルコース、及び２５ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．１を含有するアッセイバッファーにおいて、輸送体基質で細胞をインキュベートすることによって実行され、被験薬は、示された時間の間、基質の追加前に細胞へ加えられた。使用された基質は、５μＭの６−カルボキシフルオレスセイン（ＣＦ）、５０  ｎＭの３Ｈエストロン硫酸（ＥＳ）、及び１００μＭの１４Ｃ尿酸（ＵＡ）であった。トランスフェクトされた細胞に関して、基質は２分間インキュベートされ、次に、吸入により取り除かれ、および１２５ｍＭのグルコン酸ナトリウム及び２５ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ  ７．１を含有する洗浄バッファー内で３度洗浄された。次に、細胞は、ＣＦ輸送に関する蛍光測定及びＥＳとＵＡに関する液体シンチレーション計数の前に、１Ｍの水酸化ナトリウム内で溶解された。卵母細胞アッセイは、被験薬が注入されたこと以外は同様に行われ、次に、輸送は３０分（ＥＳ）又は６０分（ＵＡ）後に測定された。これらのアッセイの結果は、以下に記載されるような図に要約される。
【００４４】
図１はヒドロクロロチアジド（ＨＣＴＺ）によって誘発される高尿酸血症の２つの機構の図を表す；−ＯＡＴ４による尿酸の取り込みの直接的なＨＣＴＺ改善、及びｂ）間接−ＨＣＴＺはＯＡＴ４刺激タンパク質（ＮＨＥ３）を増強する。
【００４５】
図２は、（ａ）ＯＡＴ４を欠く対照プラスミド（ｐＣＭＶ）または（ｂ）ＯＡＴ４のいずれかで一時的にトランスフェクトさせたＨＥＫ２９３Ｔ細胞において、５０μＭ  Ｌｅｓｉｎｕｒａｄ（黒）またはビヒクル（明るい灰色）でインキュベートした６−カルボキシフルオセイン（ＣＦ）基質のＯＡＴ４輸送活性を表す。
【００４６】
図３は、ＣＦ（ＥＣ５０〜９００μＭ）のＯＡＴ４の競合的な基質として機能する尿酸塩を例証している様々な量（０、０．５、１、２ｎＭ）の冷尿酸を含む６−カルボキシフルオセイン（ＣＦ）基質でインキュベートした、ＯＡＴ４を欠く対照プラスミド（ｐＣＭＶ、黒）、または、ＯＡＴ４で一時的にトランスフェクトしたＨＥＫ２９３Ｔ細胞（灰色）を表す。
【００４７】
図４は、多様な量のＬｅｓｉｎｕｒａｄ（■）およびベンズブロマロン（▲）の存在下でのＯＡＴ４尿酸塩輸送体の量（ｃｐｍ）を表す。  ＬｅｓｉｎｕｒａｄのＯＡＴ４  ＩＣ５０＝５μＭ；  および、ベンズブロマロン＝１０μＭ。
【００４８】
図５は、様々な濃度でＬｅｓｉｎｕｒａｄによって、ＵＲＡＴ１および／またはＯＡＴ４を発現する２９３Ｔ細胞中のＵＡ輸送のパーセント阻害を表しており、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄが同様の効能で、ＵＲＡＴ１およびＯＡＴ４を阻害していることを示している。
【００４９】
図６は、１ｍＭのヒドロクロロチアジド（ＨＣＴＺ）がある状態（実線）とない状態（破線）で、および、様々なＬｅｓｉｎｕｒａｄ濃度下での、ＯＡＴ４を安定的に発現する２９３Ｔ細胞中の３Ｈ−エストロン硫酸塩（ＥＳ）輸送体のパーセントを表しており、ＨＣＴＺがＯＡＴ４輸送体活性のＬｅｓｉｎｕｒａｄを媒介とする阻害に対して効果がないことを示している。
【００５０】
図７は、ＯＡＴ４を発現するＨＥＫ２９３細胞中で、ビヒクル、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄ、オキシプリノール、または、アロプリノールの存在下（１００μＭ−５分間のインキュベーション）で、（ａ）６−カルボキシフルオセイン（ＣＦ−５μＭ）および（ｂ）１４Ｃ尿酸（ＵＡ−１００μＭ）基質のＯＡＴ４輸送活性を表わし、オキシプリノールとアロプリノールがＯＡＴ４を阻害しないことを示している。
【００５１】
図８は、様々な濃度のＬｅｓｉｎｕｒａｄ（２５、５０、１００μＭ−外部；２２、４４、４４４μＭ−内部）とビヒクルを注入した、ＯＡＴ４を発現する卵母細胞中での３Ｈエストロン硫酸塩（ＥＳ）の取り込みパーセントを表しており、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄが主として細胞外（尖端）の側からＯＡＴ４を阻害することを示している。
【００５２】
図９は、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄ（５０ｎＬ）を注入して、３０分間インキュベートした後の、ＯＡＴ４を発現する卵母細胞の内部と外部における１４Ｃで標識化したＬｅｓｉｎｕｒａｄ（シンチレーション計数によって測定された）の量を表わしており、Ｌｅｓｉｎｕｒａｄが実験のあいだ、注入された卵母細胞内部で維持することを示している。
【００５３】
図１０Ａは、臨床的な第２相試験設計の概略を表す。試験は、少なくとも６週間、安定量のアロプリノールを受けている間に、血清尿酸（ｓＵＡ）を有するアロプリノール＞６ｍｇ／ｄＬに十分に反応していなかった２０８人の痛風患者における、４週、二重盲検、プラセボ−対照臨床試験であった。Ｌｅｓｉｎｕｒａｄの３つの用量のうちの１つ又は一致するプラセボは、患者アロプリノールレジメンに加えられた。試験の主要エンドポイントは、４週目のｓＵＡの平均減少であり、重要な副次エンドポイントは４週目にｓＵＡ＜６．０ｍｇ／ｄＬの患者の割合であった。この試験における少数の患者は、処置期間中にチアジド利尿薬を受け、彼らの反応率は併用チアジド利尿薬を受けていなかった患者と比較され、その結果は図１０Ｂに示されている。この図は、６ｍｇ／ｄＬ以下の血清尿酸（ｓＵＡ）を有する患者の割合を表わしており、様々な用量のＬｅｓｉｎｕｒａｄについて、利尿薬を摂取する群（黒色）と利尿薬を摂取しない群（明るい灰色）とに分類されており、利尿薬を受ける患者がＬｅｓｉｎｕｒａｄによく反応したことを示している。
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１】
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