(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
クスノハガシワ樹皮部抽出物を有効成分として含有することを特徴とするメラニン産生抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メラニン産生抑制剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚においてメラニンは、紫外線から生体を保護する役目も果たしているが、過剰生成や不均一な蓄積は、皮膚の黒化やシミの原因となる。一般にメラニンは、色素細胞の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、ついで５，６−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成されるものとされている。したがって、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）、シミ、ソバカス等を予防、治療又は改善するためには、メラニンの産生を抑制することが考えられる。
【０００３】
このような観点から、従来、メラニン産生抑制作用を有するものとして、例えば、トウゴマ根部からの抽出物（特許文献１参照）、サウスウレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物（特許文献２参照）等が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−２１３７５７号公報
【特許文献２】特開２００２−２０１１２２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、安全性の高い天然物の中からメラニン産生抑制作用を有するものを見出し、それを有効成分とするメラニン産生抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を解決するために、本発明のメラニン産生抑制剤は、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物及びマツホド抽出物からなる群より選択される１種又は２種以上の抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、優れたメラニン産生抑制作用を有し、かつ安全性の高いメラニン産生抑制剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本実施形態のメラニン産生抑制剤は、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物及びマツホド抽出物からなる群より選択される１種又は２種以上の抽出物を有効成分として含有するものである。
【０００９】
ここで、本実施形態において「抽出物」には、各天然物等を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１０】
本実施形態において使用する抽出原料は、マチルス（学名：Machilus odoratissima）、クスノハガシワ（学名：Mallotus philippinensis Mueller-Argoviensis）、ヒマラヤンラズベリー（学名：Rubus ellipticus Smith）、アセンヤク（学名：Uncarina gambir）、プルーン（学名：Prunus domestica）又はマツホド（学名：Poria cocos）である。
【００１１】
マチルス（Machilus odoratissima）は、クスノキ科マチルス属に属する常緑高木であって、雲南、貴州、四川、チベット等に分布しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、樹皮部、葉部、幹部、地上部、花部、果実部、種子部、根部、全草又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは樹皮部である。
【００１２】
クスノハガシワ（Mallotus philippinensis Mueller-Argoviensis，中国名：呂宋楸毛（ルソンシュウモウ））は、トウダイグサ科アカメガシワ属に属する常緑小高木であって、広東、広西、湖南、雲南、四川、浙江、福建、江西、台湾等に分布しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、葉部、花部、根部、樹皮部、枝部又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは樹皮部である。
【００１３】
ヒマラヤンラズベリー（Rubus ellipticus Smith）は、ヒマラヤから東南アジア、中国東南部で自生し又は栽培されているバラ科キイチゴ属に属する常緑低木であり、これらの地域から容易に入手することができる。ヒマラヤンラズベリーの新鮮な果実は香りがあり、食用にされている。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、葉部、幹部、地上部、花部、果実部、種子部、根部、全草又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは根部である。
【００１４】
アセンヤク（Uncarina gambir）は、東南アジア等に分布しているアカネ科に属する植物であり、これらの地域から容易に入手可能である。抽出原料として使用する構成部位としては、例えば、花（蕾）部、葉部、枝部、樹皮部、根部等が挙げられるが、好ましくは葉部である。
【００１５】
プルーン（Prunus domestica）は、バラ科の植物であり、ヨーロッパ、アメリカで栽培されておりこれらの地域から容易に入手可能である。抽出原料として使用する構成部位としては、例えば、葉部、枝部、茎部、花（蕾）部、果実部、果肉部、樹皮部、根部、塊根部、地上部またはこれらの混合物が挙げられるが、これらの中でも果肉部を酵素処理したものが好ましい。
【００１６】
マツホド（Poria cocos）は、マツ科の植物などの針葉樹の根に寄生するサルノコシカケ科の単子菌類である。抽出原料として使用し得る部位としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選定することができるが、菌核が好ましく、生薬名はブクリョウと呼ばれる。
【００１７】
マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物及びマツホド抽出物に含まれるメラニン産生抑制作用を有する物質の詳細は不明であるが、天然物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、これらの天然物からメラニン産生抑制作用を有する抽出物を得ることができる。
【００１８】
例えば、上記抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、上記抽出原料の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００１９】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用するのが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００２０】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２１】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２２】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２３】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００２４】
なお、上述のようにして得られた抽出液はそのままでもメラニン産生抑制剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００２５】
また、上記各抽出物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００２６】
以上のようにして得られる上記各抽出物は、優れたメラニン産生抑制作用を有しているため、メラニン産生抑制剤の有効成分として用いることができる。
【００２７】
なお、本実施形態においては、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物のうちのいずれか一つを上記有効成分として用いてもよいし、これらを混合して上記有効成分として用いてもよい。マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物を混合して上記有効成分として用いる場合、その配合比は、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物が有するメラニン産生抑制作用の程度等により適宜調整すればよい。
【００２８】
本実施形態のメラニン産生抑制剤は、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物及びこれらの混合物のみからなるものでもよいし、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物及びこれらの混合物を製剤化したものでもよい。
【００２９】
本実施形態のメラニン産生抑制剤は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等を用いることができる。メラニン産生抑制剤は、他の組成物（例えば、皮膚外用剤、美容用飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００３０】
本実施形態のメラニン産生抑制剤を製剤化した場合、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物及びこれらの混合物の含有量は、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定することができる。
【００３１】
なお、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、必要に応じて、メラニン産生抑制作用を有する他の天然抽出物等を、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物及びこれらの混合物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００３２】
本実施形態のメラニン産生抑制剤の患者に対する投与方法としては、経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。
【００３３】
また、本実施形態のメラニン産生抑制剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００３４】
本実施形態のメラニン産生抑制剤は、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物が有するメラニン産生抑制作用を通じて、シミ、ソバカス等を予防、治療又は改善することができる。また、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、メラニンの異常産生に起因する疾患の予防・治療用医薬品又は医薬部外品の有効成分として用いることができる。ただし、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、これらの用途以外にもメラニン産生抑制作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３５】
また、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、優れたメラニン産生抑制作用を有するため、例えば、皮膚外用剤又は飲食品に配合するのに好適である。この場合に、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物及びこれらの混合物をそのまま配合してもよいし、マチルス抽出物、クスノハガシワ抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、アセンヤク抽出物、プルーン抽出物又はマツホド抽出物及びこれらの混合物から製剤化したメラニン産生抑制剤を配合してもよい。
【００３６】
ここで、皮膚外用剤としては、その区分に制限はなく、経皮的に使用される皮膚化粧料、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものであり、具体的には、例えば、軟膏、クリーム、乳液、美容液、ローション、パック、ファンデーション、リップクリーム、入浴剤等の皮膚化粧料；ヘアートニック、ヘアーローション、シャンプー、リンス、整髪料等の頭髪化粧料等が挙げられる。
【００３７】
飲食品としては、その区分に制限はなく、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００３８】
また、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、優れたメラニン産生抑制作用を有するので、メラニンの産生機構に関連する研究のための試薬としても好適に利用することができる。
【００３９】
なお、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば，マウス，ラット，ハムスター，イヌ，ネコ，ウシ，ブタ，サル等）に対して適用することもできる。
【実施例】
【００４０】
以下、試験例等を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の試験例等に何ら制限されるものではない。なお、下記試験例においては、被験試料として、表１に示す製品の凍結乾燥品（試料１〜６）を使用した。
【００４１】
【表１】
0005896618.tif 000002
【００４２】
〔試験例１〕Ｂ１６メラノーマ細胞に対するメラニン産生抑制作用試験
上記各抽出物（試料１〜６）について、以下のようにしてＢ１６メラノーマ細胞に対するメラニン産生抑制作用を試験した。
【００４３】
Ｂ１６メラノーマ細胞を、１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２４．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように１０％ＦＢＳ及び１ｍｍｏｌ／Ｌテオフィリン含有ダルベッコＭＥＭ培地で希釈した後、４８ウェルプレートに１ウェルあたり３００μＬずつ播種し、６時間培養した。
【００４４】
培養終了後、被験試料（試料１〜６，試料濃度は下記表２を参照）を添加した１０％ＦＢＳ及び１ｍｍｏｌ／Ｌテオフィリン含有ダルベッコＭＥＭ培地又は試料無添加の１０％ＦＢＳ及び１ｍｍｏｌ／Ｌテオフィリン含有ダルベッコＭＥＭ培地を各ウェルに３００μＬ添加し、４日間培養した。培養終了後、各ウェルから培地を取り除き、２ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨ溶液２００μＬを添加して超音波破砕機により細胞を破壊し、波長４７５ｎｍにおける吸光度を測定してメラニン産生量とした。
【００４５】
また、細胞生存率を測定するために、上記と同様にして培養した後、培地を除去し４００μＬのＰＢＳ緩衝液で洗浄して、終濃度０．０５ｍｇ／ｍＬで１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭに溶解したニュートラルレッドを各ウェルに２００μＬ添加し、２．５時間培養した。培養後、ニュートラルレッド溶液を除去し、エタノール・酢酸溶液（エタノール：酢酸：水＝５０：１：４９）を各ウェルに２００μＬ添加し、色素を抽出した。抽出後、波長５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。得られた結果から、下記式により細胞生存率により補正したメラニン産生抑制率（％）を算出した。
【００４６】
メラニン産生抑制率(％)＝{１−（Ｂ／Ｄ）／（Ａ／Ｃ）}×１００
上記式において、Ａは「試料無添加時の４７５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｂは「被験試料添加時の４７５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｃは「試料無添加時の５４０ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｄは「被験試料添加時の５４０ｎｍにおける吸光度」を表す。
結果を表２に示す。
【００４７】
【表２】
0005896618.tif 000003
【００４８】
表２に示すように、マチルス抽出物（試料１）、クスノハガシワ抽出物（試料２）、ヒマラヤンラズベリー抽出物（試料３）、アセンヤク抽出物（試料４）、プルーン抽出物（試料５）、及びマツホド抽出物（試料６）は、いずれも優れたメラニン産生抑制作用を有することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４９】
本発明のメラニン産生抑制剤は、皮膚の色素沈着等の予防・改善に大きく貢献できる。