(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化９９】
0005931288.tif 000119
またはそのエナンチオマー、もしくはその薬学的に受容可能な塩であって、ここで
Ｒ１は、６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．１］ヘプタン、８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン、３−オキサ−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、２−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナン、および１−オキサ−７−アザスピロ［３．５］ノナンから選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキル、ＣＦ３、置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルコキシ、ＣＯＮ（Ｒ）２、ＣＮおよびＣＯ２Ｒから選択され；
Ｒは、Ｈおよび置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキルから選択される、
化合物またはそのエナンチオマー、もしくはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項２】
前記式Ｉの化合物は、式Ｉａ
【化１００】
0005931288.tif 000120
を有するものであり、ここで
Ｒ１およびＲ２は、請求項１に定義されたとおりである、
請求項１に記載の化合物、またはそのエナンチオマー、もしくはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項３】
前記式Ｉの化合物は、式Ｉｂ
【化１０１】
0005931288.tif 000121
を有するものであり、ここでＲ１およびＲ２は、請求項１に定義されたとおりである、請求項１に記載の化合物、またはそのエナンチオマー、もしくはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項４】
４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（２−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｓ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｒ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｒ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｓ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（１−オキサ−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．１］ヘプタン−３−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；および
４−（２−（（４−（８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド
から選択される化合物、またはそのエナンチオマー、もしくはその薬学的に受容可能な塩。
【請求項５】
前記化合物は、キナーゼインヒビターである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記キナーゼインヒビターは、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３および／もしくはＴＹＫ２インヒビターである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
請求項１に記載の式Ｉの化合物を調製するための方法であって、該方法は、
式ＩＩの化合物
【化１０２】
0005931288.tif 000122
であって、ここで
Ｒ２は請求項１に定義されたものであり、Ｘは脱離基である、
式ＩＩの化合物と、式ＩＩＩの化合物
【化１０３】
0005931288.tif 000123
であって、ここで
Ｒ１は請求項１に定義されたとおりである、
式ＩＩＩの化合物とをカップリングするか、または
式ＩＶの化合物
【化１０４】
0005931288.tif 000124
であって、ここで
Ｒ２およびＸは、上で定義されたとおりであり、そしてＲは、請求項１で定義されたとおりである、
式ＩＶの化合物と、上で定義されたとおりの式ＩＩＩの化合物とをカップリングして、
式Ｖの化合物
【化１０５】
0005931288.tif 000125
であって、ここで
Ｒ１、Ｒ２、ＸおよびＲは、請求項１に定義されるとおりである、
式Ｖの化合物を調製する工程；ならびに
上で定義された式Ｖの化合物と、
【化１０６】
0005931288.tif 000126
とをカップリングする工程
を包含する、方法。
【請求項８】
前記式ＩＩの化合物中のＸは、クロロであり、これは、次に、前記式ＩＩＩの化合物とカップリングする工程の前にヨードに変換される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物を含む、移植物。
【請求項１１】
関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患、リウマチ性多発筋痛症、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）および肺線維症からなる群より選択される免疫学的もしくは炎症性疾患の処置のための組成物であって、該組成物は、請求項１に記載の化合物もしくはその薬学的に受容可能な塩、またはその薬学的組成物を含む、組成物。
【請求項１２】
真性多血症、原発性骨髄線維症、血小板血症、本態性血小板血症、特発性骨髄線維症、慢性骨髄性白血病、全身性肥満細胞腫、慢性好中球性白血病、骨髄異形成症候群および全身性肥満細胞症からなる群より選択される骨髄増殖性疾患の処置のための組成物であって、該組成物は、請求項１に記載の化合物もしくはその薬学的に受容可能な塩、またはその薬学的組成物を含む、組成物。
【請求項１３】
細胞中のキナーゼを阻害するための組成物であって、該組成物は請求項１に記載の化合物を含み、該細胞は該化合物と接触させられることを特徴とする、組成物。
【請求項１４】
式Ｖの化合物
【化１０７】
0005931288.tif 000127
またはそのエナンチオマー、もしくはその薬学的に受容可能な塩であって、ここで、
Ｒ１は、６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．１］ヘプタン、８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン、３−オキサ−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、２−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナン、および１−オキサ−７−アザスピロ［３．５］ノナンから選択され；
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキル、ＣＦ３、置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルコキシ、ＣＯＮ（Ｒ）２、ＣＮおよびＣＯ２Ｒから選択され；
Ｒは、Ｈおよび置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキルから選択される、
化合物またはそのエナンチオマー、もしくはその薬学的に受容可能な塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（分野）
本発明は、ＪＡＫキナーゼを含むプロテインキナーゼのインヒビターであるフェニルアミノピリミジン二環式化合物に関する。特に、上記化合物は、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２キナーゼに対して活性である。上記キナーゼインヒビターは、キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置において使用され得る。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
ＪＡＫは、シグナル伝達兼転写活性化因子（Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ）もしくはＳＴＡＴといわれるタンパク質のグループをリン酸化するキナーゼである。リン酸化される場合、ＳＴＡＴは、二量体化し、核へと位置を換え、遺伝子発現を活性化し、このことから、とりわけ細胞増殖がもたらされる。
【０００３】
いくつかの重要な細胞型の増殖および最終機能の両方のサイトカイン依存性調節においてプロテインチロシンキナーゼのＪＡＫファミリーが果たす中心的な役割は、ＪＡＫキナーゼを阻害し得る剤がこれら酵素に依存する疾患状態の予防および化学療法的処置において有用であることを示す。現在公知である４つのＪＡＫファミリーメンバーの各々の強力かつ特異的なインヒビターは、免疫学的および炎症性疾患、ならびに過剰増殖性疾患（例えば、癌）を引き起こすサイトカインの作用を阻害する手段を提供する。
【０００４】
骨髄増殖性障害（ＭＰＤ）としては、とりわけ、真性多血症（ＰＶ）、原発性骨髄線維症、血小板血症、本態性血小板血症（ＥＴ）、特発性骨髄線維症（ＩＭＦ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、全身性肥満細胞腫（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｍａｓｔｏｃｙｓｔｏｓｉｓ）（ＳＭ）、慢性好中球性白血病（ＣＮＬ）、骨髄異形成症候群（ｍｙｅｌｏｄｉｓｐｌａｓｔｉｃ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）（ＭＤＳ）および全身性肥満細胞症（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｍａｓｔ  ｃｅｌｌ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ＳＭＣＤ）が挙げられる。ＪＡＫ２は、特定の変異（ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ）が真性多血症（ＰＶ）患者のうちの９９％、ならびに本態性血小板減少症（ＥＴ）および特発性骨髄線維症（ＭＦ）のうちの５０％において見いだされた、キナーゼのＪＡＫファミリーのメンバーである。この変異は、ＪＡＫ２を活性化すると考えられており、ＪＡＫ２インヒビターがこれらタイプの疾患を処置するにあたって有用であるという主張を重視する。
【０００５】
喘息は、局所的および全身的なアレルギー性炎症および可逆性の気道閉塞によって特徴付けられる複雑な障害である。喘息症状、特に息切れは、気道閉塞の結果であり、死亡は、ほぼ常に窒息に起因する。気道過敏（ＡＨＲ）、および杯細胞による粘液分泌過剰は、喘息患者における気道閉塞の主な原因のうちの２つである。喘息の動物実験モデルにおける興味ある近年の研究は、喘息の病理での重要なプレイヤーとしてＩＬ−１３の重要性を強調した。特定のＩＬ−１３遮断薬を使用すると、ＩＬ−１３がＩＬ−４とは独立して作用し、ＩｇＥを誘発することなく（すなわち、非アトピー様式で）アレルギー性喘息表現型全体を誘発し得ることが示された。このモデルおよび他のモデルは、留まっているＢ細胞によるＩｇＥの産生にも好酸球の存在にも依存しない、喘息の病態生理を誘発する重要な第２段階の機構を示した。ＩＬ−１３によるＡＨＲの直接的誘発は、新たな治療による介入の優れた標的である可能性のある重要なプロセスを示す。肺へのＪＡＫ１、ＪＡＫ２および／もしくはＴＹＫ２インヒビターの企図された効果は、ＩＬ−１３媒介性ＩｇＥ産生の局所的放出の抑制をもたらし、従って、肥満細胞および好酸球によるヒスタミン放出の低下をもたらす。ＩＬ−１３の非存在のこの結果および他の結果は、喘息の影響のうちの多くが、肺へのＪＡＫ１、ＪＡＫ２および／もしくはＴＹＫ２インヒビターの投与を通じて緩和され得ることを示す。
【０００６】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）は、通常の呼吸を妨げ得る肺疾患の大きなグループをいう用語である。現在の臨床ガイドラインは、ＣＯＰＤを、完全に可逆的ではない気流制限によって特徴付けられる疾患状態として定義している。上記気流制限は、通常は進行性であり、かつ有害な粒子およびガス、特に、煙草の煙および汚染物質への肺の異常な炎症性応答と関連する。いくつかの研究から、ＩＬ−１３の産生の増大とＣＯＰＤとの間の関連が指摘され、ＪＡＫ２インヒビターの使用による喘息症状の可能性のある緩和が、ＣＯＰＤにおいても達成され得るという提唱が支持されている。ＣＯＰＤ患者は、種々の症状（咳、息切れ、および痰の異常な生成が挙げられる）を有する。ＣＯＰＤは、慢性気管支炎および肺気腫を含むいくつかの臨床的な呼吸器症候群を含む。
【０００７】
慢性気管支炎は、粘液の産生増加および他の変化を引き起こす気管支の長年にわたる炎症である。その患者の症状は、咳および痰の喀出である。慢性気管支炎は、より頻繁なかつ重篤な呼吸器感染、気管支の狭窄および栓形成、呼吸困難および障害をもたらし得る。
【０００８】
肺気腫は、肺胞および／もしくは最も細い気管支の終末に影響を及ぼす慢性肺疾患である。肺はその弾性を失い、従って、肺のこれら領域は、拡張している。これら拡張した領域は、古い空気を閉じ込め、その古い空気を新鮮な空気と効率的に交換しない。このことは、呼吸困難をもたらし、血液に送達される酸素が不十分になり得る。肺気腫を有する患者のおもな症状は、息切れである。
【０００９】
さらに、悪性腫瘍、とりわけ、肺癌、乳癌、結腸癌、卵巣癌、前立腺癌および肝臓癌、ならびにホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫および肝細胞癌においてＳＴＡＴ活性化の証拠がある。Ｔｅｌ、ＢｃｒおよびＰＣＭ１へのＪＡＫ２融合を含む染色体転移は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性好酸球性白血病（ＣＥＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性疾患（ＭＰＤ）および急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）を含む多くの造血器悪性腫瘍において記載されてきた。このことは、多発性骨髄腫；前立腺癌、乳癌および肺癌；ホジキンリンパ腫；ＣＭＬ；ＡＭＬ；ＣＥＬ；ＭＤＳ；ＡＬＬ；Ｂ細胞慢性リンパ性白血病；転移性黒色腫；神経膠腫；および肝癌を含む癌のような過剰増殖性障害のＪＡＫインヒビターによる処置が示されることを示唆する。
【００１０】
上記事項に加えて、ＪＡＫ２の強力なインヒビターはまた、血管性疾患（例えば、高血圧症、肥大、心臓虚血、心不全（収縮期心不全および拡張期心不全を含む））、片頭痛および関連脳血管障害、脳卒中、レイノー現象、ＰＯＥＭＳ症候群、プリンツメタル狭心症、脈管炎（例えば、高安動脈炎およびヴェグナー肉芽腫症）、末梢動脈疾患、心疾患および肺動脈高血圧症において有用である。
【００１１】
肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）は、肺動脈圧および肺血管抵抗の上昇をもたらすが、通常のもしくはごく軽度に上昇した左心充満圧（ｌｅｆｔ−ｓｉｄｅｄ  ｆｉｌｌｉｎｇ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）を伴って肺細動脈に影響を及ぼす肺血管性疾患である。ＰＡＨは、肺血管系に影響を及ぼす疾患の一群によって引き起こされる。ＰＡＨは、膠原病性血管障害（例えば、全身性硬化症（強皮症）、非修正先天性心疾患（ｕｎｃｏｒｒｅｃｔｅｄ  ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ  ｈｅａｒｔ  ｄｉｓｅａｓｅ）、肝臓疾患、門脈圧亢進、ＨＩＶ感染、Ｃ型肝炎、特定の毒素、脾臓摘出、遺伝性出血性末梢血管拡張症、および原発性遺伝的異常）によって引き起こされ得るかもしくはこれらに関連し得る。特に、骨形成タンパク質２型レセプター（ＴＧＦ−ｂレセプター）における変異は、家族性原発性肺高血圧症（ＰＰＨ）の原因として同定された。ＰＰＨの症例のうちの６％が家族性であり、残りは、「散発性」であると推定される。ＰＰＨの発生率は、１００万人の集団につき約１症例であると概算される。ＰＡＨの副次的な原因は、遙かにより高い発生率を有する。ＰＡＨの病的なサインは、小さな前毛細血管性肺細動脈における閉塞性の内皮細胞増殖および血管平滑筋細胞肥大からなる肺の叢状病変である。ＰＡＨは、高死亡率と関連する進行性疾患である。ＰＡＨを有する患者は、右心（ＲＶ）不全を発症し得る。ＲＶ不全の程度は、結論を推測し得る。ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路は、近年になって、ＰＡＨの病態生理に結果として影響を与えていた。ＪＡＫは、シグナル伝達兼転写活性化因子もしくはＳＴＡＴといわれるタンパク質のグループをリン酸化するキナーゼである。リン酸化される場合、ＳＴＡＴは二量体化し、核へと位置を換え、遺伝子発現を活性化し、このことは、内皮細胞および平滑筋細胞の増殖をもたらし、心筋細胞の肥大を引き起こす。ＪＡＫには３つの異なるアイソフォーム：ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＪＡＫ３が存在する。ＪＡＫに対して高い相同性を有する別のタンパク質は、Ｔｙｋ２といわれている。ＳＴＡＴ３（ＪＡＫ２の基質）のリン酸化がＰＡＨの動物モデルにおいて増大しているという一連の新しいデータが示された。ラットモノクロタリンモデルにおいて、前有糸分裂促進転写因子（ｐｒｏｍｉｔｏｇｅｎｉｃ  ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ）ＳＴＡＴ３のリン酸化が増大した。この同じ研究において、モノクロタリンで処置した肺動脈内皮細胞（ＰＡＥＣ）は、ＳＴＡＴ３の過剰活性化を発生させた。前有糸分裂促進因子もしくはタンパク質は、細胞増殖を誘発するかもしくはその誘発に寄与する因子もしくはタンパク質である。従って、ＪＡＫ２阻害の１つの効果は、内皮細胞もしくは他の細胞（例えば、平滑筋細胞）の増殖を低下させることである。ＪＡＫ２インヒビターの企図される効果は、肺細動脈内腔を閉塞する内皮細胞もしくは他の細胞の増殖を低下させることである。細胞の閉塞性の増殖を低下させることによって、ＪＡＫ２インヒビターは、ＰＡＨの有効な処置であり得る。
【００１２】
さらに、ウイルス性疾患および代謝疾患の処置のためのＪＡＫキナーゼインヒビターの使用が示される。
【００１３】
ＪＡＫファミリーの他のメンバーは、本質的に全ての組織によって発現されるが、ＪＡＫ３発現は、造血細胞に制限されているようである。これは、ＩＬ−２、ＩＬ４、ＩＬ−７、ＩＬ−９およびＩＬ−１５のレセプターを通じて、ＪＡＫ３とこれら多重鎖レセプター（ｍｕｌｔｉｃｈａｉｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）に共通するガンマ鎖との非共有結合的会合によるシグナル伝達におけるその本質的な役割と一致する。Ｘ連鎖重症複合免疫不全症（ＸＳＣＩＤ）を有する男性は、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９、およびＩＬ−１５のレセプターの共有される本質的成分をコードする、上記共通するサイトカインレセプターγ鎖（γｃ）遺伝子において欠損を有する。ＪＡＫ３タンパク質の変異したもしくは重篤に低下したレベルのいずれかを有する患者が同定されたＸＳＣＩＤ症候群は、免疫抑制がＪＡＫ３経路を通じてシグナル伝達をブロックする結果として生じるはずであることを示唆する。マウスでの遺伝子ノックアウト研究は、ＪＡＫ３がＢリンパ球およびＴリンパ球の成熟において重要な役割を果たすのみならず、ＪＡＫ３がＴ細胞機能を維持するためにも構成的に必要とされることを示唆した。ＩＬ−２およびＩＬ−４レセプターの下流にあるシグナル伝達事象においてＪＡＫ３が関わっていることに関する生化学的証拠とまとめると、これらヒトおよびマウスの変異研究は、ＪＡＫ３の阻害を通じた免役活性の調節がＴ細胞およびＢ細胞増殖障害（例えば、移植片拒絶および自己免疫疾患）の処置において有用であると証明し得ることを示唆する。
【００１４】
ある範囲の疾患状態を標的とする、プロテインキナーゼの種々のタイプの阻害は明らかに有益であるが、今日までに、目的のプロテインキナーゼに対して選択的であり、高い経口バイオアベイラビリティーのような良好な「薬物らしい」特性を有する化合物の同定は、挑戦的な目的であることが実証されてきた。さらに、キナーゼインヒビターの開発における阻害、もしくは選択性の推定が、標的とされる酵素の間での配列類似性のレベルに拘わらず、非常に低いことは、十分に確認されている。
【００１５】
ＪＡＫ１は、ＪＡＫ２と協力して、とりわけ、ＩＬ−６、ＩＬ−１１およびＩＦＮ−γレセプターの下流にあるシグナル伝達に関わっている。ＪＡＫ１は、ＪＡＫ３と協力して、とりわけ、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９およびＩＬ−１５レセプターの下流にあるシグナル伝達に必須である。ＪＡＫ１は、ＴＹＫ２と協力して、とりわけ、ＩＬ−１０、ＩＬ−２２およびＩＦＮ−αレセプターの下流にあるシグナル伝達を担っている。ＴＹＫ２は、とりわけ、ＩＬ−１２およびＩＬ−２３レセプターの下流にあるシグナル伝達に関与している。Ｔ細胞によるＩＦＮγ産生は、ＩＬ−１２シグナル伝達によって媒介され、ＴＹＫ２に非常に依存している。これらサイトカインおよびレセプターは、免疫学的疾患と関連する炎症促進応答に関与している。従って、ＪＡＫ１の阻害は、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬およびクローン病のような疾患を処置する可能性がある。
【００１６】
キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む、過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置における使用のための治療上適切なＪＡＫインヒビターの開発における難題は、適切な特異性を有し、良好な薬物らしさをも有する化合物を設計することを含む。
【００１７】
従って、キナーゼのＪＡＫファミリーを特異的に阻害する化合物、および特に、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２キナーゼに対して活性である化合物を設計および／もしくは同定する必要性が引き続き存在する。ある範囲の疾患の処置をするためのこのような化合物が必要である。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１８】
（要旨）
第１の局面において、式Ｉの化合物
【化１】
0005931288.tif 000002
またはそのエナンチオマー、そのプロドラッグもしくはその薬学的に受容可能な塩が提供され、ここで
Ｒ１は、置換されているかもしくは置換されていない二環式ヘテロシクリルであり；
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキル、ＣＦ３置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルコキシ、ＣＯＮ（Ｒ）２、ＣＮおよびＣＯ２Ｒから選択され；
Ｒは、Ｈおよび置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキルから選択される。
【００１９】
第２の局面において、上で定義された式Ｉの化合物の調製のためのプロセスが提供され、上記プロセスは、式ＩＩの化合物
【化２】
0005931288.tif 000003
であって、ここで
Ｒ２は、上で定義されたものであり、Ｘは、脱離基である式ＩＩの化合物と、式ＩＩＩの化合物
【化３】
0005931288.tif 000004
であって、ここで
Ｒ１は、上で定義されたものであり；そして
Ｍは、Ｂもしくは金属（例えば、Ｓｎ、ＺｎもしくはＭｇ）である式ＩＩＩの化合物とをカップリングするか、または
式ＩＶの化合物
【化４】
0005931288.tif 000005
であって、ここで
Ｒ２、ＸおよびＲは、上で定義されたとおりである式ＩＶの化合物と、上で定義されたとおりの式ＩＩＩの化合物とをカップリングして、式Ｖの化合物
【化５】
0005931288.tif 000006
であって、ここで
Ｒ１、Ｒ２、ＸおよびＲは、上で定義されたとおりである式Ｖの化合物を調製する工程；ならびに
上で定義された式Ｖの化合物と、
【化６】
0005931288.tif 000007
とをカップリングする工程を包含する。
【００２０】
第３の局面において、上で定義された式Ｖの化合物が提供される。
【００２１】
式Ｉの化合物は、キナーゼインヒビター、好ましくは、ＪＡＫインヒビター、より好ましくは、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２キナーゼインヒビターである。これら化合物は、キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む、過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置において有用である。
【００２２】
第４の局面において、上で定義された式Ｉの化合物を含む医薬品もしくはその代謝産物が提供される。
【００２３】
医薬品もしくはその代謝産物としての式Ｉの化合物の使用もまた、提供される。
【００２４】
医薬品もしくはその代謝産物としての使用のための、上で定義された式Ｉの化合物がさらに提供される。
【００２５】
第５の局面において、上で定義された式Ｉの化合物を含むキナーゼインヒビターが提供される。
【００２６】
キナーゼインヒビターとしての、上で定義された式Ｉの化合物の使用もまた提供される。
【００２７】
キナーゼインヒビターとしての使用のための、上で定義された式Ｉの化合物がさらに提供される。
【００２８】
第６の局面において、医薬品もしくはその代謝産物、好ましくは、キナーゼインヒビター、より好ましくは、ＪＡＫキナーゼインヒビター、最も好ましくは、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２キナーゼインヒビターとしての使用のための、上で定義された式１の化合物が提供される。
【００２９】
式Ｉの化合物はまた、薬学的に受容可能なキャリアといっしょに薬学的組成物の形態で投与され得る。
【００３０】
第７の局面において、上で定義された式Ｉの化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物が提供される。
【００３１】
一実施形態において、上記薬学的組成物はまた、１種もしくは複数種のさらなる治療剤を含む。
【００３２】
式Ｉの化合物は、移植物（例えば、薬物溶離ステント）内に含まれ得るかもしくはこれに結合され得る。例えば、肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）の処置のために上記化合物が使用される場合、上記化合物は、肺動脈ステント内に含まれ得るかもしくはこれに結合され得、それは、局所的に作用し得るか、もしくは上記化合物が肺血管系においてその治療活性を発揮する肺循環へとステントから放出され得る。
【００３３】
第８の局面において、上で定義された式Ｉの化合物を含む移植物が提供される。
【００３４】
第９の局面において、キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む、過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置のための方法が提供され、上記方法は、有効量の、上で定義された式Ｉの化合物もしくは薬学的組成物を、その処置を必要とする被験体に投与する工程を包含する。
【００３５】
キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置のための医薬の製造における、上で定義されたとおりの式Ｉの化合物もしくは薬学的組成物の使用もまた提供される。
【００３６】
キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む、過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置における、上で定義されたとおりの式Ｉの化合物もしくは薬学的組成物の使用がさらに提供される。
【００３７】
キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む、過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置における使用のための、上で定義された式Ｉの化合物もしくは薬学的組成物がさらになお提供される。
【００３８】
第１０の局面において、細胞中のキナーゼを阻害する方法が提供され、上記方法は、上記細胞と上で定義された式Ｉの化合物とを接触させる工程を包含する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｉの化合物
【化９９】
0005931288.tif 000008
またはそのエナンチオマー、そのプロドラッグもしくはその薬学的に受容可能な塩であって、ここで
Ｒ１は、置換されているかもしくは置換されていない二環式ヘテロシクリルであり；  
Ｒ２は、Ｈ、ハロゲン、置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキル、ＣＦ３置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルコキシ、ＣＯＮ（Ｒ）２、ＣＮおよびＣＯ２Ｒから選択され；
Ｒは、Ｈおよび置換されているかもしくは置換されていないＣ１−４アルキルから選択される、
化合物またはそのエナンチオマー、そのプロドラッグもしくはその薬学的に受容可能な塩。
（項目２）
前記式Ｉの化合物は、式Ｉａ
【化１００】
0005931288.tif 000009
を有するものであり、ここで
Ｒ１およびＲ２は、項目１に定義されたとおりである、
項目１に記載の化合物、またはそのエナンチオマー、そのプロドラッグもしくはその薬学的に受容可能な塩。
（項目３）
前記式Ｉの化合物は、式Ｉｂ
【化１０１】
0005931288.tif 000010
を有するものであり、ここでＲ１およびＲ２は、項目１に定義されたとおりである、項目１に記載の化合物、またはそのエナンチオマー、そのプロドラッグもしくはその薬学的に受容可能な塩。
（項目４）
４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（２−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｓ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｒ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｒ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
（Ｓ）−４−（２−（（４−（１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナン−６−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（１−オキサ−７−アザスピロ［３．５］ノナン−７−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．１］ヘプタン−３−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；
４−（２−（（４−（（１Ｓ，４Ｓ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド；および
４−（２−（（４−（（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミド
から選択される化合物。
（項目５）
前記化合物は、キナーゼインヒビターである、項目１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
（項目６）
前記キナーゼインヒビターは、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３および／もしくはＴＹＫ２インヒビターである、項目５に記載の化合物。
（項目７）
項目１〜６のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を調製するためのプロセスであって、該プロセスは、
式ＩＩの化合物
【化１０２】
0005931288.tif 000011
であって、ここで
Ｒ２は項目１に定義されたものであり、Ｘは脱離基である、
式ＩＩの化合物と、式ＩＩＩの化合物
【化１０３】
0005931288.tif 000012
であって、ここで
Ｒ１は項目１に定義されたとおりであり、
ＭはＢもしくは金属である、
式ＩＩＩの化合物とをカップリングするか、または
式ＩＶの化合物
【化１０４】
0005931288.tif 000013
であって、ここで
Ｒ２、ＸおよびＲは、上で定義されたとおりである、
式ＩＶの化合物と、上で定義されたとおりの式ＩＩＩの化合物とをカップリングして、
式Ｖの化合物
【化１０５】
0005931288.tif 000014
であって、ここで
Ｒ１、Ｒ２、ＸおよびＲは、項目１に定義されるとおりである、
式Ｖの化合物を調製する工程；ならびに
上で定義された式Ｖの化合物と、
【化１０６】
0005931288.tif 000015
とをカップリングする工程
を包含する、プロセス。
（項目８）
前記式ＩＩの化合物中のＸは、クロロであり、これは、次に、前記式ＩＩＩの化合物とカップリングする工程の前にヨードに変換される、項目７に記載のプロセス。
（項目９）
項目１〜６のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、薬学的組成物。
（項目１０）
項目１〜６のいずれか１項に記載の化合物を含む、移植物。
（項目１１）
キナーゼ関連疾患の処置のための方法であって、該方法は、有効量の、項目１〜６のいずれか１項に記載の化合物または項目９に記載の薬学的組成物を、該処置を必要とする被験体に投与する工程を包含する、方法。
（項目１２）
キナーゼ関連疾患の処置のための医薬の製造における、項目１〜６のいずれか１項に記載の化合物または項目９に記載の薬学的組成物の使用。
（項目１３）
キナーゼ関連疾患の処置のための、項目１〜６のいずれか１項に記載の化合物または項目９に記載の薬学的組成物の使用。
（項目１４）
前記キナーゼ関連疾患は、免疫学的疾患もしくは炎症性疾患；過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；または血管性疾患である、項目１１に記載の方法または項目１２もしくは１３に記載の使用。
（項目１５）
前記免疫学的疾患もしくは炎症性疾患は、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患、リウマチ性多発筋痛症、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）もしくは肺線維症である、項目１４に記載の方法または項目１２もしくは１３に記載の使用。
（項目１６）
前記過剰増殖性疾患は、癌もしくは骨髄増殖性疾患である、項目１５に記載の方法もしくは使用。
（項目１７）
細胞中のキナーゼを阻害する方法であって、該方法は、該細胞と項目１〜６のいずれか１項に記載の化合物とを接触させる工程を包含する、方法。
（項目１８）
項目７に定義されたとおりの式Ｖの化合物。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】図１は、選択されたＪＡＫキナーゼのアミノ酸配列アラインメントを示す。示される配列は、ｊ２ｈ＝ＪＡＫ２（配列番号１）、ｊｌｈ＝ＪＡＫ１（配列番号２）、ｊ３ｈ＝ＪＡＫ３（配列番号３）、およびｔｙｋ２＝ＴＹＫ２（配列番号４）である。上記配列は、ＪＡＫ２配列（Ｇｅｎｂａｎｋ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ＮＰ＿００４９６３から取得）のアミノ酸８３３で出発して、１位で番号づけられ、Ｃ末端アミノ酸で終了する。示される配列は、Ｃ末端キナーゼドメインに相当する。
【図２】図２は、化合物１〜１０のＩＣ５０（ｎＭ）データを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
（詳細な説明）
本発明は、キナーゼ、特に、ＪＡＫキナーゼ（例えば、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２）を阻害し、キナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む、過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）の処置において有用である、式Ｉの化合物に関する。
【００４１】
（化合物）
本発明は、式Ｉの化合物に関する。
【００４２】
一実施形態において、式Ｉの化合物は、式Ｉａ
【化７】
0005931288.tif 000016
を有するもの、またはそのエナンチオマー、そのプロドラッグもしくはその薬学的に受容可能な塩であり、ここで
Ｒ１およびＲ２は、上で定義されたとおりである。
【００４３】
別の実施形態において、式Ｉａの化合物は、式Ｉｂ
【化８】
0005931288.tif 000017
を有するもの、またはそのエナンチオマー、そのプロドラッグもしくはその薬学的に受容可能な塩であり、ここで
Ｒ１およびＲ２は、上で定義されたとおりである。
【００４４】
一実施形態において、Ｒ１は、Ｎ、Ｏおよび／もしくはＳから選択される少なくとも１個のヘテロ原子、好ましくは、一方の環にＮを、そして他方の環にＯを含む、６〜１２員の飽和の縮合もしくは架橋型二環式もしくはスピロ環式ヘテロシクリルである。上記二環式ヘテロシクリルの各環は、アゼチジン、ピロリジンおよびピペリジンを含むＮ含有ヘテロシクリル、ならびにオキセタン、オキソラン、（テトラヒドロフラン）およびジヒドロピランもしくはピランを含むＯ含有ヘテロシクリルを有する４〜６員であり得る。上記Ｎ含有ヘテロシクリル中のＮ原子は、好ましくは、式Ｉもしくは式Ｉａのフェニル環に結合する。６〜１２員のＮおよびＯ含有飽和縮合二環式ヘテロシクリルの例としては、６−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタン、ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２，３−ｃ］ピロールおよび８−オキサ−３−アザビシクロ［４．２．０］オクタンが挙げられる。６〜１２員のＮおよびＯ含有飽和架橋二環式ヘテロシクリルの例としては、６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタン、８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン、２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン、３−オキサ−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタンおよび３−オキサ−６−アザビシクロ［３．１．１］ヘプタンが挙げられる。６〜１２員のＮおよびＯ含有飽和スピロ環式ヘテロシクリルの例としては、１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、２−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、１−オキサ−６−アザスピロ（ｏｚａｓｐｉｒｏ）［３．３］ヘプタン、１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン、１−オキサ−６−アザスピロ（ａｚａｐｉｒｏ）［３．５］ノナンおよび１−オキサ−７−アザスピロ［３．５］ノナンが挙げられる。
【００４５】
一実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、メチル、Ｃｌ、ＢｒもしくはＦ、好ましくは、Ｈもしくはメチルである。式Ｉもしくは式Ｉａの化合物の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない。
【表１−１】
0005931288.tif 000018
【表１−２】
0005931288.tif 000019
【００４６】
用語「Ｃ１−４アルキル」とは、１〜４個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖の炭化水素基をいう。例としては、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。
【００４７】
用語「Ｃ１−４アルコキシ」とは、１〜４個の炭素原子のアルキル部分を有する直鎖もしくは分枝鎖状のオキシ含有基をいう。例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシおよびｔｅｒｔ−ブトキシが挙げられる。
【００４８】
用語「二環式ヘテロシクリル」とは、少なくとも１個のヘテロ原子を含む２個の繋がれた環を有する化合物をいう。上記環の繋がりは、２個の隣接する原子間の結合に亘って（縮合二環式ヘテロシクリル）、一連の原子に亘って（架橋二環式ヘテロシクリル）もしくは単一原子において（環式スピロヘテロシクリル）生じ得る。
【００４９】
上記二環式ヘテロシクリルは、飽和であり得るかもしくは１個もしくは複数の不飽和単位を含む、非芳香族二環式環である。上記二環式環は６〜１２個の環原子を含み得、この６〜１２個の環原子のうち１個もしくは複数の環原子がヘテロ原子（例えば、Ｎ、Ｓおよび／もしくはＯ、例えば、Ｎおよび／もしくはＯ）に置き換えられる。
【００５０】
上記Ｃ、ＮおよびＳ原子は、必要に応じて酸化され得、そして上記Ｎ原子は、必要に応じて四級化され得る。
【００５１】
例としては、ビシクロ［４〜６，４〜６］ヘテロシクリル系（例えば、ビシクロ［４，４］、［４，５］、［５，４］、［５，６］、［６，４］、［６，５］もしくは［６，６］ヘテロシクリル系）が挙げられる。
【００５２】
適切な４〜６員のＮ含有ヘテロシクリルとしては、１個のＮ原子を含むもの（例えば、アゼチジン（４員環）；ピロリジン（テトラヒドロピロール）、ピロリン（例えば、３−ピロリン、２，５−ジヒドロピロール）、２Ｈ−ピロールもしくは３Ｈ−ピロール（イソピロール、イソアゾール）（５員環）；およびピペリジン、ジヒドロピリジンもしくはテトラヒドロピリジン（６員環））；または２個のＮ原子を含むもの（例えば、イミダゾリン、ピラゾリジン（ジアゾリジン）、イミダゾリンもしくはピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（５員環）およびピペラジン（６員環））が挙げられる。
【００５３】
適切な４〜６員のＯ含有ヘテロシクリルとしては、１個のＯ原子を含むもの（例えば、オキセタン（４員環）；オキソラン（テトラヒドロフラン）もしくはオキソール（ジヒドロフラン）（５員環）；およびオキサン（テトラヒドロピラン）、ジヒドロピランもしくはピラン（６員環））；２個のＯ原子を含むもの（例えば、ジオキソラン（５員環）およびジオキサン（６員環））；または３個のＯ原子を含むもの（例えば、トリオキサン（６員環））が挙げられる。
【００５４】
適切な４〜６員のＳ含有ヘテロシクリルとしては、１個のＳ原子を含むもの（例えば、チエタン（４員環）；チオラン（テトラヒドロチオフェン）（５員環）；およびチアン（テトラヒドロチオピラン）（６員環））が挙げられる。
【００５５】
適切な４〜６員のＮおよびＯ含有ヘテロシクリルとしては、１個のＮ原子および１個のＯ原子を含むもの（例えば、テトラヒドロオキサゾール、ジヒドロオキサゾール、テトラヒドロイソオキサゾールもしくはジヒドロイソオキサゾール（５員環）；およびモルホリン、テトラヒドロオキサジン、ジヒドロオキサジンもしくはオキサジン（６員環））；または２個のＮ原子および１個のＯ原子を含むもの（例えば、オキサジアジン（６員環））が挙げられる。
【００５６】
適切な４〜６員のＮおよびＳ含有ヘテロシクリルとしては、チアゾリン、チアゾリジン（５員環）；およびチオモルホリン（６員環）が挙げられる。
【００５７】
適切な４〜６員のＯおよびＳ含有ヘテロシクリルとしては、オキサチオール（５員環）；およびオキサチアン（チオキサン）（６員環）が挙げられる。
【００５８】
適切な４〜６員のＮ、ＯおよびＳ含有ヘテロシクリルとしては、オキサチアジン（６員環）が挙げられる。
【００５９】
一実施形態において、上記二環式ヘテロシクリルは、一方の環にＮを、そして他方の環にＯを含む。
【００６０】
上記Ｎ含有環系は、４〜６員であり、好ましくは、飽和しており、Ｎ原子を介して適切にフェニル環に直接結合する。４〜６員の飽和Ｎ含有ヘテロシクリルの例としては、アゼチジン、ピロリジンおよびピペリジンが挙げられる。
【００６１】
上記Ｏ含有環系は、４〜６員であり、好ましくは、飽和しており、２個の炭素原子間の結合に亘って上記Ｎ含有環へ結合して、６〜１２員の飽和二環式ＮおよびＯ含有縮合二環式ヘテロシクリルを形成するか；１個もしくは複数のＯ原子に必要に応じて置き換えられた一連の３〜４個もしくは３〜５個の炭素原子（環接合原子（ｒｉｎｇ  ｊｕｎｃｔｉｏｎ  ａｔｏｍ）を含む）に亘って上記Ｎ含有環へ結合して、６〜１２員の飽和ＮおよびＯ含有架橋二環式ヘテロシクリルを形成するか；または単一の炭素原子において上記Ｎ含有環へ結合して、６〜１２員の飽和ＮおよびＯ含有スピロ環式ヘテロシクリルを形成する。４〜６員の飽和Ｏ含有ヘテロシクリルの例としては、オキセタン、オキソラン（テトラヒドロフラン）およびジヒドロピランもしくはピランが挙げられる。
【００６２】
適切な６〜１２員の飽和ＮおよびＯ含有縮合二環式ヘテロシクリルとしては、上記の４〜６員の飽和ＮおよびＯ含有ヘテロシクリルを含むもの（例えば、ビシクロ［５，４］系、例えば、６−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．０］ヘプタン；ビシクロ［５，５］系、例えば、ヘキサヒドロ−２Ｈ−フロ［２．３−ｃ］ピロール；およびビシクロ［６，４］系、例えば、８−オキサ−３−アザビシクロ［４．２．０］オクタン）が挙げられる。
【００６３】
適切な６〜１２員の飽和ＮおよびＯ含有架橋二環式ヘテロシクリルとしては、ビシクロ［６，４］系、例えば、６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．１］ヘプタン；ビシクロ［６，５］系、例えば、８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン；ビシクロ［５，５］系、例えば、２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン；およびビシクロ［５，６］系、例えば、３−オキサ−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタンが挙げられる。
【００６４】
適切な６〜１２員の飽和ＮおよびＯ含有スピロ環式二環式ヘテロシクリルとしては、ビシクロ［４，４］系、例えば、１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン、２−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタンおよび１−オキサ−６−アザスピロ［３．３］ヘプタン；ビシクロ［５，４］系、例えば、１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン；ならびにビシクロ［６，４］系、例えば、１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナンおよび１−オキサ−７−アザスピロ［３．５］ノナンが挙げられる。
【００６５】
用語「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素をいう。
【００６６】
用語「置換された」とは、以下から選択される１個もしくは複数の基で置換されている基に言及する：Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルアリール、アリール、ヘテロシクリル、ハロ、ハロＣ１−６アルキル、ハロＣ３−６シクロアルキル、ハロＣ２−６アルケニル、ハロＣ２−６アルキニル、ハロアリール、ハロヘテロシクリル（ｈａｌｏｈｅｔｅｒｏｃｙｃｙｌｙｌ）、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ２−６アルケニルオキシ、Ｃ２−６アルキニルオキシ、アリールオキシ、ヘテロシクリルオキシ、カルボキシ、ハロＣ１−６アルコキシ、ハロＣ２−６アルケニルオキシ、ハロＣ２−６アルキニルオキシ、ハロアリールオキシ、オキソ、ニトロ、ニトロＣ１−６アルキル、ニトロＣ２−６アルケニル、ニトロアリール、ニトロヘテロシクリル、アジド、アミノ、Ｃ１−６アルキルアミノ、Ｃ２−６アルケニルアミノ、Ｃ２−６アルキニルアミノ、アリールアミノ、ヘテロシクロアミノアシル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌａｍｉｎｏ  ａｃｙｌ）、Ｃ１−６アルキルアシル、Ｃ２−６アルケニルアシル、Ｃ２−６アルキニルアシル、アリールアシル、ヘテロシクリルアシル、アシルアミノ、アシルオキシ、アルデヒド、Ｃ１−６アルキルスルホニル、アリールスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、Ｃ１−６アルキルスルホニルオキシ、アリールスルホニルオキシ、Ｃ１−６アルキルスルフェニル、Ｃ２−６アルキルスルフェニル、アリールスルフェニル、カルボアルコキシ、カルボアリールオキシ、メルカプト、Ｃ１−６アルキルチオ、アリールチオ、アシルチオ、およびシアノなど。好ましい置換基は、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルアリール、アリール、ヘテロシクリル、ハロ、オキソ、ハロアリール、ハロヘテロシクリル（ｈａｌｏｈｅｔｅｒｏｃｙｃｙｌｙｌ）、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルコキシ、アリールオキシ、カルボキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキルアシル、アリールアシル、ヘテロシクリルアシル、アシルアミノ、アシルオキシ、Ｃ１−６アルキルスルフェニル、アリールスルホニルおよびシアノからなる群より選択される。
【００６７】
本発明の化合物はまた、薬学的に受容可能である塩として調製され得るが、薬学的に受容可能でない塩もまた本発明の範囲内に入ることが認識される。なぜならこれらは、薬学的に受容可能な塩の調製における中間体として有用であるからである。薬学的に受容可能な塩の例としては、薬学的に受容可能なカチオン（例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、アンモニウムおよびアルキルアンモニウム）の塩；薬学的に受容可能な無機酸（例えば、塩酸、オルトリン酸、硫酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、スルファミン酸および臭化水素酸）の酸付加塩；または薬学的に受容可能な有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、酒石酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フマル酸、クエン酸、乳酸、粘液酸、グルコン酸、安息香酸、コハク酸、シュウ酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、トリハロメタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、イセチオン酸、サリチル酸、スルファニル酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、エデト酸、ステアリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、ラウリン酸、パントテン酸、タンニン酸、アスコルビン酸、吉草酸およびオロト酸）の塩が挙げられる。アミン基の塩はまた、アミノ窒素原子が適切な有機基（例えば、アルキル、アルケニル、アルキニルもしくはアラルキル部分）を有する第四級アンモニウム塩を含み得る。
【００６８】
上記塩は、従来の手段によって（例えば、化合物の遊離塩基形態と、その塩が不溶性である溶媒もしくは媒体中の、または真空中もしくは凍結乾燥によって除去される溶媒（例えば、水）中の１当量もしくは１当量超の適切な酸とを反応させることによって、あるいは既存の塩のアニオンを適切なイオン交換樹脂上の別のアニオンと交換することによって）形成され得る。
【００６９】
化合物がキラル中心を有する場合、上記化合物は、精製されたエナンチオマーもしくはジアステレオマーとして、または立体異性体の任意の比の混合物として、使用され得る。しかし、上記混合物が、好ましい異性体のうちの少なくとも７０％、８０％、９０％、９５％、９７．５％もしくは９９％を含むことが好ましく、この場合、その好ましい異性体は、所望のレベルの有効性および選択性を与える。
【００７０】
本発明はまた、式Ｉの化合物のプロドラッグを包含する。本発明はまた、プロテインキナーゼ（例えば、ＪＡＫ）の阻害によって処置され得る障害を処置する方法を包含し、上記方法は、本発明の化合物の薬物もしくはプロドラッグを投与する工程を包含する。例えば、遊離アミノ基、アミド基、ヒドロキシ基もしくはカルボン酸基を有する式Ｉの化合物は、プロドラッグへと変換され得る。プロドラッグとしては、アミノ酸残基、または２個もしくは２個超の（例えば、２個、３個、もしくは４個の）アミノ酸残基のポリペプチド鎖が本発明の化合物の遊離アミノ基、ヒドロキシ基およびカルボン酸基にペプチド結合によって共有結合している化合物を含む。上記アミノ酸残基は、３文字記号によって一般に示される２０種の天然に存在するアミノ酸を含み、そして、４−ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、デスモシン（ｄｅｍｏｓｉｎｅ）、イソデスモシン（ｉｓｏｄｅｍｏｓｉｎｅ）、３−メチルヒスチジン、ノルバリン（ｎｏｒｖｌｉｎ）、β−アラニン、γ−アミノ酪酸、シトルリン、ホモシステイン、ホモセリン、オルニチンおよびメチオニンスルホン（ｍｅｔｈｉｏｉｎｅ  ｓｕｌｆｏｎｅ）をまた含む。プロドラッグはまた、カーボネート、カルバメート、アミドおよびアルキルエステルが、カルボニル炭素プロドラッグ側鎖を介して本発明の化合物の上記の置換基に共有結合している化合物を含む。プロドラッグはまた、リン−酸素結合によって式Ｉの化合物の遊離ヒドロキシルに結合している化合物のホスフェート誘導体（例えば、酸、酸の塩、もしくはエステル）を含む。プロドラッグはまた、式Ｉ中の適切な窒素原子および硫黄原子のＮ−オキシド、およびＳ−オキシドを含み得る。
【００７１】
（プロセス）
一般式Ｉの化合物は、式ＩＩもしくは式ＩＶの化合物と式ＩＩＩの化合物とをカップリングすることによって調製される。式ＩＶの化合物が使用される場合、式Ｖの化合物が調製され、式Ｖの化合物を、次いで、
【化９】
0005931288.tif 000020
とカップリングして、式Ｉの化合物を調製する。
【００７２】
式ＩＩもしくは式ＩＶの化合物は、２，４  ジクロロピリミジンと適切に官能化されたカップリングパートナーとの間のクロスカップリング反応によって一般に調製され得る。あるいは、上記ジクロロピリミジンは、ジヨードピリミジンに変換され得、ジヨードピリミジンを、次いで、適切に官能化されたカップリングパートナーとカップリングする。代表的なカップリングパートナーは、有機ボロン酸もしくはエステル（鈴木カップリング：例えば、Ｍｉｙａｕｒａ，  Ｎ．  ａｎｄ  Ｓｕｚｕｋｉ，  Ｃｈｅｍ  Ｒｅｖ．  １９９５，  ９５  ２４５７を参照のこと）、有機スタンナン（Ｓｔｉｌｌｅカップリング：例えば、Ｓｔｉｌｌｅ，  Ｊ．Ｋ．，  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．，  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  Ｅｎｇｌ．，  １９８６，  ２５，  ５０８を参照のこと）、グリニャール試薬（熊田カップリング：  Ｋｕｍａｄａ，  Ｍ．；  Ｔａｍａｏ，  Ｋ．；  Ｓｕｍｉｔａｎｉ，  Ｋ．  Ｏｒｇ．  Ｓｙｎｔｈ．  １９８８，  Ｃｏｌｌ．  Ｖｏｌ．６，  ４０７．）もしくは有機亜鉛種（根岸カップリング：  Ｎｅｇｉｓｈｉ，  Ｅ．；  Ｊ．  Ｏｒｇａｎｏｍｅｔ．  Ｃｈｅｍ．  ２００２，  ６５３，  ３４）である。鈴木カップリングは、好ましいカップリング法であり、代表的には、ＤＭＥ、ＴＨＦ、ＤＭＦ、エタノール、プロパノール、トルエン、アセトニトリルもしくは１，４−ジオキサンなどの溶媒中で、水を添加してもしくは添加せずに、塩基（例えば、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウム、水酸化リチウム、炭酸セシウム、水酸化ナトリウム、フッ化カリウムもしくはリン酸カリウム）の存在下で行われる。上記反応は、高温で行われ得、使用されるパラジウム触媒は、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、［ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）］、Ｐｄ２（ｄｂａ）３／Ｐ（ｔ−Ｂｕ）３から選択され得る。
【００７３】
上記プロセスの第２の工程は、適切に置換されたアニリンでの式ＩＩもしくは式ＩＶの化合物の求核性芳香族置換反応を含む。上記求核性芳香族置換は、代表的には、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ジオキサン、ＴＨＦ、ＤＭＦ、トルエンもしくはキシレンなどの溶媒中で上記第１の反応から得られたモノハロ複素環式中間体に上記アニリンを付加することによって行われる。上記反応は、代表的には、高温で、酸（例えば、ＨＣｌもしくはｐ−トルエンスルホン酸）の存在下で、または非求核性塩基（例えば、トリエチルアミンもしくはジイソプロピルエチルアミン）もしくは無機塩基（例えば、炭酸カリウムもしくは炭酸ナトリウム）の存在下で、行われる。
【００７４】
あるいは、上記アニリン置換基は、遷移金属により触媒されるアミノ化反応を通じて導入され得る。このような変換のための代表的な触媒としては、Ｐｄ（ＯＡｃ）２／Ｐ（ｔ−Ｂｕ）３、Ｐｄ２（ｄｂａ）３／ＢＩＮＡＰおよびＰｄ（ＯＡｃ）２／ＢＩＮＡＰが挙げられる。これら反応は、代表的には、トルエンもしくはジオキサンなどの溶媒中で、塩基（例えば、炭酸セシウムまたはナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドもしくはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド）の存在下で、室温から還流までの範囲に及ぶ温度において行われる（例えば、Ｈａｒｔｗｉｇ，  Ｊ．Ｆ．，  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  １９９８，  ３７，  ２０４６）。
【００７５】
これら化合物の合成の第１の工程で使用されるアニリンは、１−フルオロ−４ニトロ−アニリンへの環式アミノの付加、およびその後の、当業者に周知の方法を使用するニトロ基の還元を通じて合成され得る。
【００７６】
いずれかの反応工程から形成される生成物は、当業者に公知の技術を使用してさらに誘導体化され得る。あるいは、上記モノハロ中間体の誘導体化は、そのハロ置換基の置換の前に行われ得る。当業者は、上記合成に関して記載される反応の順序が、特定の環境の中で変えられ得ること、および特定の官能基が、上記の反応が妥当な収率および効率で進行する特定の場合に、誘導体化される（すなわち、保護される）必要があり得ることを認識する。保護官能基のタイプは、当業者に周知であり、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ（Ｇｒｅｅｎｅ，  Ｔ．，  Ｗｕｔｓ，  Ｐ．  （１９９９）  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．  Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ；  ３ｒｄ    ｅｄｉｔｉｏｎ．）に記載されている。
【００７７】
本発明のプロセスにおいて使用される中間体である式ＩＩもしくは式ＩＶの化合物の中の脱離基は、任意の適切な公知のタイプ（例えば、Ｊ．  Ｍａｒｃｈ，  「Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ」  ４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  ｐｐ  ３５２−３５７，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９２（これは、本明細書に参考として援用される）に開示されるもの）であり得る。好ましくは、上記脱離基は、ハロゲン、より好ましくは、塩素もしくはヨウ素である。
【００７８】
（ＪＡＫ阻害）
式Ｉの化合物は、プロテインキナーゼ、特に、ＪＡＫキナーゼに対して活性を有し、最も具体的には、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２に対して活性である。ＪＡＫ２インヒビターは、ＪＡＫ２の活性を選択的に阻害する任意の化合物である。ＪＡＫ２の１つの活性は、ＳＴＡＴタンパク質をリン酸化することである。従って、ＪＡＫ２インヒビターの効果の一例は、１種もしくは複数種のＳＴＡＴタンパク質のリン酸化を低下させることである。上記インヒビターは、ＪＡＫ２のリン酸化形態もしくはＪＡＫ２の非リン酸化形態を阻害し得る。
【００７９】
本発明はまた、キナーゼインヒビター（例えば、ＪＡＫキナーゼインヒビター、特に、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２インヒビター）としての式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００８０】
（薬学的組成物）
本発明は、式Ｉの化合物のうちの少なくとも１種および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。上記キャリアは、上記組成物の他の成分と適合性でありかつ被験体に有害でない「薬学的に受容可能な」手段でなければならない。本発明の組成物は、以下に記載されるとおりの他の治療剤を含み得、薬学的製剤の分野で周知の技術などの技術（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  ２１ｓｔ  Ｅｄ．，  ２００５，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓを参照のこと）に従って、例えば、従来の固体ビヒクル、液体ビヒクル、固体希釈剤、もしくは液体希釈剤、ならびに所望の投与の様式に適したタイプの薬学的添加物（例えば、賦形剤、結合剤、保存剤、安定化剤、矯味矯臭剤など）を使用することによって、製剤され得る。
【００８１】
本発明の化合物は、任意の適切な手段によって、例えば、経口的に（例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤もしくは散剤の形態で）；舌下に；口内に；非経口的に（例えば、皮下、静脈内、筋肉内、皮内（経皮）、または大槽内注射もしくは注入技術によって（例えば、滅菌注射用の水性溶液もしくは非水性溶液もしくは懸濁物として））；鼻に（例えば、吸入スプレーもしくは吸入によって）；局所的に（例えば、クリーム剤もしくは軟膏剤の形態で）、眼に（溶液もしくは懸濁物の形態で）；膣に（ペッサリー、タンポンもしくはクリーム剤の形態で）；あるいは直腸に（例えば、坐剤の形態で）；非毒性の薬学的に受容可能なビヒクルもしくは希釈剤を含む投薬量単位製剤で、投与され得る。上記化合物は、例えば、即時放出もしくは長期放出に適した形態で投与され得る。即時放出もしくは長期放出は、本発明の化合物を含む適切な薬学的組成物の使用によって、もしくは特に、長期放出の場合には、皮下移植物もしくは浸透性ポンプなどのデバイスの使用によって、達成され得る。
【００８２】
本発明の化合物の投与のための上記薬学的組成物は、便宜的に投薬量単位形態で提供され得、薬学分野で周知の方法のうちのいずれかによって調製され得る。これら方法は、一般に、式Ｉの化合物を１種もしくは複数種の補助成分を構成するキャリアと会合した状態にする工程を包含する。一般に、上記薬学的組成物は、式Ｉの化合物を液体キャリアもしくは微細に分割された固体キャリアまたはその両方と均一かつ密に会合した状態にし、次いで、必要であれば、上記生成物を所望の製剤へと成形することによって調製される。上記薬学的組成物において、活性な目的の化合物は、疾患のプロセスもしくは状態に対して所望の効果を生じるのに十分な量で含まれる。本明細書で使用される場合、用語「組成物」は、特定された量の特定された成分を含む生成物、ならびに特定された量で特定された成分の組合せから直接的にもしくは間接的に生じる任意の生成物を含むことが意図される。
【００８３】
式Ｉの化合物を含む上記薬学的組成物は、経口使用に適した形態で（例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性もしくは油性の懸濁物、分散性の散剤もしくは粒剤、エマルジョン、硬質もしくは軟質のカプセル剤、またはシロップ剤もしくはエリキシル剤として）あり得る。経口使用が意図される組成物は、薬学的組成物の製造のために当該分野で公知の任意の方法に従って調製され、このような組成物は、１種もしくは複数種の剤（例えば、甘味剤、矯味矯臭剤、着色剤および保存剤）を、例えば、薬学的に安定でありかつ口にあう調製物を提供するために含み得る。錠剤は、式Ｉの化合物を、錠剤の製造に適した非毒性の薬学的に受容可能な賦形剤と混合した状態で含む。これら賦形剤は、例えば、不活性希釈剤（例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムもしくはリン酸ナトリウム）；造粒剤および崩壊剤（例えば、コーンスターチ、もしくはアルギン酸）；結合剤（例えば、デンプン、ゼラチンもしくはアカシア）、および滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸もしくはタルク）であり得る。上記錠剤は、被覆されなくてもよいし、消化管での崩壊および吸収を遅らせ、それによって、より長期間にわたる持続性の作用を提供するために、公知の技術によって被覆されてもよい。例えば、グリセリルモノステアレートもしくはグリセリルジステアレートのような時間遅延物質（ｔｉｍｅ  ｄｅｌａｙ  ｍａｔｅｒｉａｌ）が使用され得る。それらはまた、放出を制御するための浸透圧治療錠剤（ｏｓｍｏｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｂｌｅｔ）を形成するために被覆され得る。
【００８４】
経口使用のための製剤はまた、式Ｉの化合物が不活性固体希釈剤（例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、もしくはカオリン）と混合されている硬質ゼラチンカプセルとして、または式Ｉの化合物が水もしくは油媒体（例えば、ラッカセイ油、流動パラフィン、もしくはオリーブ油）と混合されている軟質ゼラチンカプセルとして提供され得る。
【００８５】
水性懸濁物は、水性懸濁物の製造に適した賦形剤と混合した状態で活性物質を含む。このような賦形剤は、懸濁化剤（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシ−プロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカントガムおよびアカシアガム）であり；分散剤もしくは湿潤剤は、天然に存在するホスファチド（例えば、レシチン）、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンステアレート）、もしくはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、もしくはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、もしくはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物由来の部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレエート）であり得る。水性懸濁物はまた、１種もしくは複数種の保存剤（例えば、エチル、もしくはｎ−プロピル、ｐ−ヒドロキシベンゾエート）、１種もしくは複数種の着色剤、１種もしくは複数種の矯味矯臭剤、および１種もしくは複数種の甘味剤（例えば、スクロースもしくはサッカリン）を含み得る。
【００８６】
油性懸濁物は、式Ｉの化合物を植物性油（例えば、ラッカセイ油、オリーブ油、胡麻油もしくはココナツ油）中もしくはミネラルオイル（例えば、流動パラフィン）中に懸濁させることによって製剤され得る。上記油性懸濁物は、濃化剤（例えば、蜜蝋、固形パラフィン（ｈａｒｄ  ｐａｒａｆｆｉｎ）もしくはセチルアルコール）を含み得る。甘味剤（例えば、上記のもの）および矯味矯臭剤は、口にあう経口調製物を提供するために添加され得る。これら組成物は、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸）の添加によって保存され得る。
【００８７】
水の添加によって水性懸濁物の調製に適した分散性の散剤および粒剤は、分散剤もしくは湿潤剤、懸濁化剤および１種もしくは複数種の保存剤と混合した状態で式Ｉの化合物を提供する。適切な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁化剤は、既に上述されたものによって例示される。さらなる賦形剤、例えば、甘味剤、矯味矯臭剤および着色剤もまた、存在し得る。
【００８８】
本発明の薬学的組成物はまた、水中油型エマルジョンの形態であり得る。油相は、植物性油（例えば、オリーブ油もしくはラッカセイ油）もしくはミネラルオイル（例えば、流動パラフィン）、またはこれらの混合物であり得る。適切な乳化剤は、天然に存在するガム、例えば、アカシアガムもしくはトラガカントガム、天然に存在するホスファチド、例えば、大豆、レシチン、および脂肪酸およびヘキシトール無水物由来のエステルもしくは部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレエート）、ならびにエチレンオキシドと上記部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）であり得る。上記エマルジョンはまた、甘味剤および矯味矯臭剤を含み得る。
【００８９】
シロップ剤およびエリキシル剤は、甘味剤（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールもしくはスクロース）とともに製剤され得る。このような製剤はまた、粘滑剤、保存剤、ならびに矯味矯臭剤および着色剤を含み得る。
【００９０】
上記薬学的組成物は、滅菌注射用水性もしくは油性懸濁物の形態であり得る。この懸濁物は、上述された適切な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁化剤を使用して公知の技術に従って製剤され得る。上記滅菌注射用調製物はまた、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤もしくは溶媒中の滅菌注射用溶液もしくは懸濁物（例えば、１，３−ブタンジオールの溶液として）であり得る。使用され得る受容可能なビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌の不揮発性油は、溶媒もしくは懸濁媒体として従来から使用されている。この目的で、任意の刺激の少ない不揮発性油が使用され得る（合成のモノグリセリドもしくはジグリセリドが挙げられる）。さらに、脂肪酸（例えば、オレイン酸）は、注射用製剤の調製において有用である。
【００９１】
鼻腔内投与を含む気道への投与のために、上記活性化合物は、気道への投与のために当該分野で使用される方法および製剤のうちのいずれかによって投与され得る。
【００９２】
従って、一般に、上記活性化合物は、溶液もしくは懸濁物の形態で、または乾燥粉末として投与され得る。
【００９３】
溶液および懸濁物は、一般に、水性であり、例えば、水のみ（例えば、滅菌水もしくは発熱物質を含まない水）または水および生理学的に受容可能な共溶媒（例えば、エタノール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ  ４００））から調製される。
【００９４】
このような溶液もしくは懸濁物は、他の賦形剤、例えば、保存剤（例えば、塩化ベンザルコニウム）、可溶化剤／界面活性剤（例えば、ポリソルベート（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ８０、Ｓｐａｎ  ８０、塩化ベンザルコニウム）、緩衝化剤、等張性調節剤（例えば、塩化ナトリウム）、吸収増強剤および粘性増強剤をさらに含み得る。懸濁物は、懸濁化剤（例えば、微結晶性セルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム）をさらに含み得る。
【００９５】
溶液もしくは懸濁物は、従来の手段によって、例えば、点滴器、ピペットもしくはスプレーで、鼻腔へ直接適用される。上記製剤は、単一用量形態もしくは複数用量形態で提供され得る。後者の場合、用量計測の手段が望ましくは提供される。点滴器もしくはピペットの場合、これは、上記溶液もしくは懸濁物の適切な所定の容積を被験体が投与することによって達成され得る。スプレーの場合には、これは、例えば、計量噴霧スプレーポンプによって達成され得る。
【００９６】
気道への投与はまた、上記化合物が適切なプロペラント（例えば、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタンもしくはジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素もしくは他の適切なガス）とともに加圧パックで提供されるエアロゾル製剤によって達成され得る。上記エアロゾルは、従来どおり、界面活性剤（例えば、レシチン）も含み得る。活性化合物の用量は、計量バルブを設けることによって制御され得る。
【００９７】
あるいは、上記活性化合物は、乾燥粉末、例えば、適切な粉末基剤（例えば、ラクトース、デンプン、デンプン誘導体（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリジン（ＰＶＰ）））中の上記化合物の粉末ミックスの形態で提供され得る。便宜的には、上記粉末キャリアは、鼻腔内でゲルを形成する。上記粉末組成物は、単位用量形態で、例えば、例えば、ゼラチンのカプセル剤もしくはカートリッジ、またはブリスターパック（このパックから上記粉末が吸入器によって投与され得る）で提供され得る。
【００９８】
気道への投与が意図される製剤（鼻腔内用製剤を含む）において、上記活性化合物は、一般に、例えば、ほぼ５ミクロン程度もしくはそれ未満の小さな粒度を有する。このような粒度は、当該分野で公知の手段によって、例えば、微粒子化によって得られ得る。
【００９９】
所望の場合、上記活性化合物の持続性放出を与えるのに適合している製剤が使用され得る。
【０１００】
上記活性化合物は、自由流動粉末として経口吸入によって「Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ」（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄの商標）もしくは用量計量式エアロゾル吸入器を介して、投与され得る。
【０１０１】
本発明の化合物はまた、薬物の直腸投与のために坐剤の形態で投与され得る。これら組成物は、上記薬物を、適切な非刺激性賦形剤（これは、通常の温度では固体であるが、直腸温では液体であり、従って、直腸の中で溶けて上記薬物を放出する）と混合することによって調製され得る。このような物質は、カカオ脂およびポリエチレングリコールである。
【０１０２】
膣投与に適した組成物は、上記活性成分に加えて、当該分野で適切であることが公知であるようなキャリアを含む、ペッサリー、タンポン、クリーム剤、ゲル、パスタ剤、泡沫物もしくはスプレーとして提供され得る。
【０１０３】
局所使用のために、本発明の化合物を含む、クリーム剤、軟膏剤、ゼリー剤、液剤もしくは懸濁物などが使用され得る。（本願の目的で、局所適用は、マウスウォッシュおよび含嗽剤を含むものとする）。
【０１０４】
眼への適用に関しては、上記活性化合物は、適切な滅菌水性もしくは非水性ビヒクルの溶液もしくは懸濁物の形態であり得る。添加剤、例えば、緩衝液、保存剤（酢酸フェニル水銀もしくは硝酸フェニル水銀、塩化ベンザルコニウム、またはクロルヘキシジンのような殺菌剤および殺真菌剤を含む）および濃化剤（例えば、ヒプロメロース）もまた、含まれ得る。
【０１０５】
本発明の化合物はまた、リポソームの形態で投与され得る。当該分野で公知であるように、リポソームは、一般に、リン脂質もしくは他の脂質物質から誘導される。リポソームは、水性媒体中に分散するモノラメラもしくはマルチラメラ水和液晶によって形成される。リポソームを形成し得る任意の非毒性の生理学的に受容可能でかつ代謝可能な脂質が使用され得る。リポソーム形態である本発明の組成物は、本発明の化合物に加えて、安定化剤、保存剤、および賦形剤等を含み得る。好ましい脂質は、リン脂質およびホスファチジルコリン（天然および合成の両方）である。リポソームを形成する方法は、当該分野で公知である。
【０１０６】
このクラスの化合物の効力は、薬物溶離ステントに適用可能であり得る。これら化合物を有する薬物溶離ステントの潜在的な適用としては、肺動脈狭窄、肺静脈狭窄、ならびに冠動脈狭窄が挙げられる。薬物溶離ステントはまた、伏在静脈移植片もしくは動脈移植片または導管において使用され得る。このクラスの化合物を放出する薬物溶離ステントはまた、大動脈もしくは末梢動脈（例えば、腸骨動脈、大腿動脈もしくは膝窩動脈）の狭窄を処置するのに適用可能であり得る。上記化合物は、その分野で公知の種々の方法のうちのいずれかによって、上記薬物溶離ステントへと結合され得る。このような方法の例としては、ポリマー、ホスホリルコリン、およびセラミックが挙げられる。上記化合物はまた、生体吸収可能なステントの中に含浸され得る。
【０１０７】
上記活性化合物はまた、例えば、当該分野で従来的である方法によって調製され得る獣医学的組成物の形態での使用に対して提供され得る。このような獣医学的組成物の例としては、以下のことに適合しているものが挙げられる。
（ａ）経口投与、外部適用、例えば、水薬（ｄｒｅｎｃｈ）（例えば、水性もしくは非水性の溶液もしくは懸濁物））；錠剤もしくは大きい丸薬；飼料と混合するための散剤、粒剤もしくはペレット；舌に塗布するためのパスタ剤；
（ｂ）例えば、皮下、筋肉内もしくは静脈内注射による非経口投与（例えば、滅菌溶液もしくは懸濁物として；または（適切な場合）懸濁物もしくは溶液が乳頭部を介して乳腺中に導入される乳房内注射によって）；
（ｃ）局所適用（例えば、皮膚に適用されるクリーム剤、軟膏剤もしくはスプレーとして）；または
（ｄ）直腸もしくは腟内に（例えば、ペッサリー、クリーム剤もしくは泡沫物として）。
【０１０８】
本発明の薬学的組成物および方法は、上述の病的状態の処置において通常適用される、本明細書で示されるとおりの他の治療上活性な化合物をさらに含み得る。併用療法における使用に対する適切な剤の選択は、従来の薬学原理に従って、当業者によってなされ得る。治療剤の組合せは、上記の種々の障害の処置もしくは予防を行うために相乗的に作用し得る。このアプローチを使用すると、各薬剤のより低い投与量で治療効力が達成され得、従って、有害な副作用の可能性が低減され得る。
【０１０９】
他の治療剤の例としては、以下が挙げられる：エンドセリンレセプターアンタゴニスト（例えば、アンブリセンタン、ボセンタン、シタキセンタン）、ＰＤＥ−Ｖインヒビター（例えば、シルデナフィル、タダラフィル、バルデナフィル）、カルシウムチャネルブロッカー（例えば、アムロジピン、フェロジピン、ベラパミル（ｖａｒｅｐａｍｉｌ）、ジルチアゼム、メントール）、プロスタサイクリン、トレプロスチニル、イロプロスト、ベラプロスト、一酸化窒素、酸素、ヘパリン、ワーファリン、利尿薬、ジゴキシン、シクロスポリン（例えば、シクロスポリンＡ）、ＣＴＬＡ４−Ｉｇ、抗体（例えば、ＩＣＡＭ−３、抗ＩＬ−２レセプター（抗Ｔａｃ）、抗ＣＤ４５ＲＢ、抗ＣＤ２、抗ＣＤ３（ＯＫＴ−３）、抗ＣＤ４、抗ＣＤ８０、抗ＣＤ８６）、ＣＤ４０とｇｐ３９との間の相互作用を遮断する剤（例えば、ＣＤ４０および／もしくはｇｐ３９に対して特異的な抗体（すなわち、ＣＤ１５４））、ＣＤ４０およびｇｐ３９から構築された融合タンパク質（ＣＤ４０１ｇおよびＣＤ８ｇｐ３９）、インヒビター（例えば、ＮＦ−κＢ機能の核移行インヒビター（例えば、デオキシスペルグアリン（ＤＳＧ）、コレステロール生合成インヒビター（例えば、ＨＭＧ  ＣｏＡレダクターゼインヒビター（ロバスタチンおよびシンバスタチン）））、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）（例えば、イブプロフェン、アスピリン、アセトアミノフェン、レフルノミド、デオキシスペルグアリン、シクロオキシゲナーゼインヒビター（例えば、セレコキシブ））、ステロイド（例えば、プレドニゾロンもしくはデキサメタゾン）、金化合物、β−アゴニスト（例えば、サルブタモール、ＬＡＢＡ’ｓ（例えば、サルメテロール、ロイコトリエンアンタゴニスト（例えば、モンテルカスト、抗増殖剤（例えば、メトトレキサート、ＦＫ５０６（タクロリムス、プログラフ）、ミコフェノール酸モフェチル、細胞傷害性薬物（例えば、アザチオプリン、ＶＰ−１６、エトポシド、フルダラビン、ドキソルビシン、アドリアマイシン、アムサクリン、カンプトテシン、シタラビン、ゲムシタビン、フルオロデオキシウリジン、メルファランおよびシクロホスファミド）、代謝拮抗物質（例えば、メトトレキサート、トポイソメラーゼインヒビター（例えば、カンプトテシン）、ＤＮＡアルキル化剤（例えば、シスプラチン）、キナーゼインヒビター（例えば、ソラフェニブ）、微小管毒素（例えば、パクリタキセル）、ＴＮＦ−αインヒビター（例えば、テニダップ、抗ＴＮＦ抗体もしくは可溶性ＴＮＦレセプター）、ヒドロキシ尿素およびラパマイシン（シロリムスもしくはラパミューン）またはその誘導体。
【０１１０】
他の治療剤が本発明の化合物と組み合わせて使用される場合、それらは、例えば、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（ＰＤＲ）に示されるとおり、もしくは別の方法で当業者によって決定されるとおりの量で使用され得る。
【０１１１】
（処置方法）
式Ｉの化合物は、キナーゼ関連疾患（ＪＡＫキナーゼ関連疾患（例えば、臓器移植を含む、免疫学的および炎症性疾患；癌および骨髄増殖性疾患を含む、過剰増殖性疾患；ウイルス性疾患；代謝疾患；ならびに血管性疾患）が挙げられる）の処置において使用され得る。
【０１１２】
一般に、用語「処置」とは、所望の薬理学的および／もしくは生理学的効果を得るために被験体、組織もしくは細胞に影響を及ぼすことを意味し、そして、（ａ）疾患に罹りやすい可能性があるが、上記疾患を有するとは未だ診断されていない被験体に上記疾患が起こらないようにすること；（ｂ）上記疾患を阻害すること（すなわち、その発生を止めること）；または（ｃ）上記疾患の影響を軽減もしくは改善すること（すなわち、上記疾患の影響の退縮を引き起こすこと）を含む。
【０１１３】
用語「被験体」とは、式Ｉの化合物での処置を要する疾患を有する任意の動物をいう。
【０１１４】
霊長類（例えば、ヒト）に加えて、種々の他の動物が、本発明の化合物、組成物および方法を使用して処置され得る。例えば、哺乳動物（ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、モルモット、ラットもしくは他のウシ亜科、ヒツジ、ウマ科、イヌ科、ネコ科、齧歯類もしくはマウスの種が挙げられるが、これらに限定されない）が処置され得る。しかし、本発明は、他の種（例えば、トリ種（例えば、ニワトリ））においても実施され得る。
【０１１５】
用語「投与」とは、本発明の化合物を、処置が必要な被験体に提供することを意味することが理解されるべきである。
【０１１６】
用語「キナーゼ関連疾患」とは、異常なキナーゼ活性、特に、ＪＡＫ活性の結果として、直接的にもしくは間接的に生じるかもしくはそれによって悪化し、そして／またはこれらキナーゼ酵素のうちの１種もしくは複数種の阻害によって緩和される障害をいう。
【０１１７】
好ましい実施形態において、上記キナーゼ関連疾患状態には、上記ＪＡＫキナーゼ、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３もしくはＴＹＫ２のうちの１種もしくは複数種が関わる。特に好ましい実施形態において、上記疾患には、ＪＡＫ２キナーゼが関わる。このような疾患としては、以下の表に列挙されるものが挙げられるが、これらに限定されない。
【表３−１】
0005931288.tif 000021
【表３−２】
0005931288.tif 000022
【表３−３】
0005931288.tif 000023
【０１１８】
用語「免疫学的および炎症性疾患」とは、免疫学的、炎症性もしくは自己免疫疾患を指し、上記疾患としては、関節リウマチ、多発性関節炎、リウマチ性脊椎炎、変形性関節炎、痛風、喘息、気管支炎、アレルギー性鼻炎、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺線維症、嚢胞性線維症、炎症性腸疾患、過敏性腸症候群、粘液性腸炎、潰瘍性大腸炎、潰瘍性大腸炎（ｄｉａｂｒｏｔｉｃ  ｃｏｌｉｔｉｓ）、クローン病、自己免疫性甲状腺障害、胃炎、食道炎、肝炎、膵炎、腎炎、湿疹、尋常性ざ瘡、皮膚炎、発疹、多発性硬化症、アルツハイマー病、運動ニューロン疾患（ルー・ゲーリック病）、パジェット病、敗血症、結膜炎、鼻カタル、慢性関節リウマチ、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、多発性筋炎、皮膚筋炎（ＤＭ）、結節性多発動脈炎（Ｐｏｌａｒｉｔｉｓ  ｎｏｄｏａ）（ＰＮ）、リウマチ性多発筋痛症、混合性結合組織疾患（ｍｉｘｅｄ  ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ  ｔｉｓｓｕｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）（ＭＣＴＤ）、シェーグレン症候群、クルーゾン症候群、軟骨形成不全症、全身性エリテマトーデス、強皮症、脈管炎、致死性骨異形成症、インスリン抵抗性、Ｉ型糖尿病、ならびに糖尿病およびメタボリックシンドロームからの合併症が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１９】
用語「過剰増殖性疾患」とは、癌および骨髄増殖性疾患状態を含む（例えば、以下が挙げられるが、これらに限定されない細胞増殖性疾患状態：  心臓：  肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫および奇形腫；  肺：  気管支原性癌（扁平上皮癌、未分化型小細胞癌、未分化型大細胞癌、腺癌）、肺胞（細気管支）癌、気管支腺腫、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫（ｃｈｏｎｄｒｏｍａｔｏｕｓ  ｈａｎｌａｒｔｏｍａ）、内皮腫（ｉｎｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ）；  消化管：食道（扁平上皮癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（管腺癌、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）；  尿生殖路：  腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍［腎芽細胞腫］、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（扁平上皮癌、移行上皮癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（精上皮腫、奇形腫、胎生期癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、間質細胞癌、線維腫、線維腺腫、腺腫様腫瘍、脂肪腫）；  肝臓：  肝癌（肝細胞癌）、胆管癌、肝芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫；  骨：  骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫  脊索腫、骨軟骨腫（ｏｓｔｅｏｃｈｒｏｎｆｒｏｒｎａ）（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫（ｃｈｏｎｄｒｏｍｙｘｏｆｉｂｒｏｍａ）、類骨骨腫および巨細胞腫；  神経系：  頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎（ｏｓｔｅｉｔｉｓ  ｄｅｆｏｒｎｉａｎｓ））、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽腫、神経膠腫、上衣腫、胚細胞腫［松果体腫］、多形性膠芽腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）；  婦人科系：  子宮（子宮内膜癌）、子宮頸部（子宮頸癌、前癌段階の子宮頚部異形成（ｐｒｅ−ｔｕｍｏｒ  ｃｅｒｖｉｃａｌ  ｄｙｓｐｌａｓｉａ）、卵巣（卵巣癌［漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、分類不能癌］、顆粒膜−卵胞膜細胞腫（ｇｒａｎｕｌｏｓａ−ｔｈｅｃａｌ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒｓ）、セルトリ・ライディッヒ細胞腫瘍、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰部（扁平上皮癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮癌、ブドウ状肉腫［胎児性横紋筋肉腫］）、卵管（癌）；  血液系：  血液（骨髄性白血病［急性および慢性］、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫［悪性リンパ腫；  皮膚：  悪性黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮癌、カポジ肉腫、異形成母斑（ｍｏｌｅｓ  ｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  ｎｅｖｉ）、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬；  副腎：  神経芽腫；および骨髄増殖性疾患（例えば、真性多血症（ＰＶ）、原発性骨髄線維症、血小板血症、本態性血小板血症（ＥＴ）、特発性骨髄化性（ＡＭＭ）（特発性骨髄線維症（ＩＭＦ）ともいわれる）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、全身性肥満細胞腫（ＳＭ）、慢性好中球性白血病（ＣＮＬ）、慢性骨髄単球性白血病（ＣＭＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）および全身性肥満細胞症（ＳＭＣＤ））。
【０１２０】
用語「血管性疾患」とは、心血管性疾患、高血圧症、肥大、高コレステロール血症、高脂血症、血栓性障害、脳卒中、レイノー現象、ＰＯＥＭＳ症候群、アンギナ、虚血、片頭痛、末梢動脈疾患、心不全、再狭窄、アテローム性動脈硬化症、左心室肥大、心筋梗塞、心臓、腎臓、肝臓および脳の虚血性疾患、ならびに肺動脈高血圧症が挙げられるが、これらに限定されない疾患をいう。
【０１２１】
ＪＡＫ２インヒビターの好ましい疾患としては、免疫学的および炎症性疾患（例えば、自己免疫疾患（例えば、アトピー性皮膚炎、喘息、関節リウマチ、クローン病、乾癬、クルーゾン症候群、軟骨形成不全、全身性エリテマトーデス、強皮症、混合性結合組織疾患、脈管炎、致死性骨異形成症および糖尿病）；過剰増殖性障害（例えば、癌（例えば、前立腺癌、結腸癌、乳癌、肝癌のような肝臓癌、肺癌、神経膠腫のような頭頸部癌、転移性黒色腫のような皮膚癌、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫および骨髄増殖性疾患（例えば、真性多血症（ＰＶ）、骨髄線維症、血小板血症、本態性血小板血症（ＥＴ）、特発性骨髄化性（ＡＭＭ）（特発性骨髄線維症（ＩＭＦ）ともいわれる）および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）；ならびに血管性疾患（例えば、高血圧症、肥大、脳卒中、レイノー現象、ＰＯＥＭＳ症候群、アンギナ、虚血、偏頭痛、末梢動脈疾患、心不全、再狭窄、アテローム性動脈硬化症および肺動脈高血圧症）が挙げられる。
【０１２２】
ＪＡＫ１およびＴＹＫ２インヒビターの好ましい疾患としては、免疫学的および炎症性疾患（例えば、自己免疫疾患（例えば、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、クローン病および炎症性腸疾患））が挙げられる。ＪＡＫ１インヒビターはまた、過剰増殖性障害（例えば、癌、例えば、前立腺癌、結腸癌、乳癌、肝癌のような肝臓癌、肺癌、神経膠腫のような頭頸部癌、転移性黒色腫のような皮膚癌、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫および骨髄増殖性疾患（例えば、真性多血症（ＰＶ）、骨髄線維症、血小板血症、本態性血小板血症（ＥＴ）、原発性骨髄線維症（ａｇｎｏｎｅｉｃ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｍｅｔａｐｌａｓｉａ）（ＡＭＭ）（特発性骨髄線維症（ＩＭＦ）ともいわれる）および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）））を処置するために使用され得る。
【０１２３】
ＪＡＫ３インヒビターの好ましい疾患は、免疫学的および炎症性疾患であり、上記疾患としては、自己免疫疾患（例えば、全身性エリテマトーデス、混合性結合組織疾患、強皮症、多発性硬化症、自己免疫性神経炎、関節リウマチ、乾癬、インスリン抵抗性、Ｉ型糖尿病および糖尿病からの合併症、メタボリックシンドローム、喘息、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺障害、潰瘍性大腸炎、クローン病、アルツハイマー病、ならびに免疫抑制が望ましいことであり得る他の適応症（例えば、臓器移植および移植片対宿主病）が挙げられる。さらに、ＪＡＫ３の特異的インヒビターは、過剰増殖性疾患（例えば、ＪＡＫ３が過剰活性化される白血病およびリンパ腫）に対する治療処置のための適用が見いだされ得る。
【０１２４】
（投与量）
用語「治療上有効な量」とは、研究者、獣医師、医師もしくは他の臨床家が調べている組織、系、動物もしくはヒトの生物学的もしくは医学的応答を誘起する、式Ｉおよび式ＩＩの化合物の量を指す。
【０１２５】
キナーゼ阻害を要する状態の処置もしくは予防において、適切な投与量レベルは、一般に、約０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ患者体重／日であり、これは、単一用量もしくは複数用量で投与され得る。好ましくは、投与量レベルは、約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ／日；より好ましくは、約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日である。適切な投与量レベルは、約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、もしくは約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日であり得る。この範囲内で、上記投与量は、０．０５〜０．５ｍｇ／ｋｇ／日、０．５〜５ｍｇ／ｋｇ／日もしくは５〜５０ｍｇ／ｋｇ／日であり得る。経口投与に関しては、上記組成物は、好ましくは、１．０〜１０００ミリグラムの上記活性成分、特に、１．０ｍｇ、５．０ｍｇ、１０．０ｍｇ、１５．０ｍｇ、２０．０ｍｇ、２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇ、７５．０ｍｇ、１００．０ｍｇ、１５０．０ｍｇ、２００．０ｍｇ、２５０．０ｍｇ、３００．０ｍｇ、４００．０ｍｇ、５００．０ｍｇ、６００．０ｍｇ、７５０．０ｍｇ、８００．０ｍｇ、９００．０ｍｇ、および１０００．０ｍｇの上記活性成分を含む錠剤の形態で提供される。上記投与量は、治療効力および／もしくは処置される患者への投与量の症状に基づく調節のために、例えば、これらの範囲のうちのいずれかの範囲内の任意の用量へと選択され得る。上記化合物は、好ましくは、１日に１〜４回、好ましくは、１日に１回もしくは２回のレジメンで投与される。
【０１２６】
任意の特定の患者のための特定の用量レベルおよび投与頻度は変動し得、使用される特定の化合物の活性、その化合物の代謝安定性および作用期間、年齢、体重、全身的な健康状態、性別、食餌、投与様式および時間、排出速度、薬物組合せ、特定の状態の重篤度、ならびに宿主が受けている治療を含む種々の要因に基づくことが理解される。
【０１２７】
実施形態において、本発明の化合物は、「骨髄増殖性疾患」および「骨髄増殖性新生物（ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｎｅｏｐｌａｓｍ）（ＭＰＮ）」、最も顕著なことには、真性多血症（ＰＶ）、本態性血小板血症（ＥＴ）および原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）の処置のために投与される。骨髄増殖性新生物研究および処置の国際ワーキンググループ（ＩＷＧ−ＭＲＴ）は、これら状態を線引きしかつ定義するために樹立され（例えば、Ｖａｎｎｕｃｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ，  ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．，  ２００９，  ５９：１７１−１９１を参照のこと）、それらの疾患定義は、本願の目的で利用されるはずである。ＭＰＮの特定の形態の「リスクがある」被験体は、上記疾患の初期ステージ形態を有する被験体であり、例えば、その遺伝子マーカー（例えば、ＰＶ（＞９５％）、ＥＴ（６０％）、およびＰＭＦ（６０％）と関連づけられているＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ対立遺伝子）を有する被験体を含み得る。被験体はまた、彼らが初期ステージ形態の症状を既に発現している場合に、ＭＦＮの形態の「リスクがある」と考えられる。従って、ＭＦＮを示している被験体は、ＰＶ後およびのＥＴ後のリスクがあり、その両方が、ＭＰＮに続いて発現する。このような被験体の処置のために、本発明の化合物は、５０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲内の（特に、１５０ｍｇもしくは３００ｍｇを含む）単位用量の錠剤形態で、１日に１〜４回（例えば、１日に１回もしくは２回）の投与頻度で、投与され得る。このような被験体はまた、上記特定の状態の処置において有用な他の薬物（サリドマイド、レナリドミド、他のＪＡＫ２もしくはＪＡＫ１／２キナーゼインヒビター、ヒドロキシ尿素もしくはアナグレリドのような薬物を含む）と組み合わせて、または骨髄線維症を低下させるためにビスホスホネートと組み合わせて処置され得る。同様に、このような患者はまた、本発明の化合物の投与を含む全体的な治療の一部として、放射線療法もしくは同種異系骨髄移植を受け得る。
【０１２８】
別の実施形態において、本発明の化合物は、具体的には、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）の処置のために投与される。骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、血球減少症（ｂｌｏｏｄ  ｃｙｔｏｐｅｎｉａｓ）および過形成骨髄（ｈｙｐｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ）をもたらす不十分な造血によって特徴付けられる疾患のグループを記載するために使用される用語である。ＭＤＳは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）への悪性転換のリスクの増大が原因で、「前白血病」と同じ意味合いであると伝統的にみなされてきた。ＡＭＬへの進展および血球減少症という臨床的結果は、ＭＤＳにおける罹患率および死亡率の主な原因である。ＭＤＳの衰弱性の症状としては、疲労、蒼白、感染、および出血が挙げられる。貧血、好中球減少症、および血小板減少症はまた、ＭＤＳの共通する臨床所見である。このような被験体の処置のために、本発明の化合物は、５０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲内の（特に、１５０ｍｇもしくは３００ｍｇを含む）単位用量の錠剤形態で、１日に１〜４回（例えば、１日に１回もしくは２回）の投与頻度で、投与され得る。
【０１２９】
他の実施形態において、本発明の化合物は、有効な貧血応答を達成するために、骨髄増殖性疾患と関連する貧血を含む、貧血の処置のために投与される。「貧血応答」とは、患者のヘモグロビンレベルの増大もしくは輸血に依存していた患者が輸血に依存しなくなることを意味する。望ましくは、最低８週間継続して、２．０ｇ／ｄＬのヘモグロビンの最低限の増大が達成され、それは、上記国際ワーキンググループ（ＩＷＧ）のコンセンサス基準において特定された改善のレベルである。しかし、ヘモグロビンのより小さいけれどもなお医学的に有意な増大はまた、本発明の範囲内であると考えられる。本発明の化合物での処置から利益を受ける貧血の被験体としては、化学療法もしくは放射線療法を受けたかもしくは現在受けている被験体（例えば、癌患者）が挙げられる。広く種々の化学療法剤が、機能している赤血球のレベルを低下させるという結果を有することが公知である。同様に、処置候補である被験体は、赤血球数の低下をもたらすかもしくはそれと関連する、血液の癌を含む血液の障害に罹患した被験体である。実施形態において、処置される被験体は、骨髄異形成症候群のような血液の状態と関連するかもしくはその結果として生じる貧血を有する被験体である。他の実施形態において、処置される被験体は、他の血液悪性腫瘍、再生不良性貧血、赤血球などに影響を及ぼす慢性疾患の貧血と関連する貧血のような他の血液の状態と関連するか、またはその結果として生じる貧血を有する被験体である。慢性疾患の貧血は、リンパ腫およびホジキン病を含む特定の癌；自己免疫疾患（例えば、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、炎症性腸疾患およびリウマチ性多発筋痛症；尿路感染症のような長期の感染症、ＨＩＶおよび骨髄炎；心不全；ならびに慢性腎臓疾患のような疾患と関連する。さらに、破壊の増大、赤血球生存期間の減少および脾臓の腐骨形成と関連する状態の結果として生じる貧血を有する患者はまた、本発明の化合物での処置から利益を受け得る。特定の実施形態において、処置される被験体は、サラセミアを経験している貧血の被験体である。他の実施形態において、処置される被験体は、サラセミアを経験している被験体以外の被験体である。従って、これら状態に罹患している患者は、彼らの低下しているかもしくは不足しているヘモグロビンの状態を改善するために処置され得る。このような被験体の処置のために、本発明の化合物は、５０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲内の（特に、１５０ｍｇもしくは３００ｍｇを含む）単位用量の錠剤形態で、かつ１日に１〜４回（例えば、１日に１回もしくは２回）の投与頻度で投与され得る。貧血の被験体の処置のために、本発明の化合物は、輸血、鉄補給食品、エリスロポエチンもしくはダルベポエチン治療などから選択される貧血処置薬、化合物もしくはモダリティーと組み合わせて投与され得る。
【０１３０】
別の実施形態において、本発明の化合物は、多発性骨髄腫（ＭＭ）（特に、ＣＤ４５陰性（ＣＤ４５−）表現型を有するＭＭ細胞、および／もしくはＩＬ−６非応答性と考えられるＭＭ細胞を含む）の処置のために投与される。ＭＭ細胞は、多発性骨髄腫の顕著な特徴である形質細胞腫腫瘍（ｐｌａｓｍａｃｙｔｏｍａ  ｔｕｍｏｕｒ）を形成する疾患細胞である。「ＣＤ４５−表現型」とは、ＣＤ４５として公知のタンパク質マーカー（これは、全ての造血細胞の周知のマーカーである）の表面発現について、中程度から明るいまで全く異なるので、陰性か僅か（ｄｉｍ）かを試験するＭＭ細胞をいう。上記ＣＤ４５−表現型はまた、本明細書で、ＭＭ細胞の集団に関して割り当てられ、その集団の中では、その集団内のＣＤ４５−細胞の普及率は、その集団のうちの少なくとも約１０％（例えば、その集団のうちの少なくとも約１５％、もしくは２０％、もしくは２５％、もしくは３０％、もしくは３５％、もしくは４０％、もしくは４５％、もしくは少なくとも約５０％）を超える。細胞表面でのＣＤ４５の検出は、蛍光標識ＣＤ４５モノクローナル抗体、および蛍光活性化セルソーティング（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ−ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｃｅｌｌ  ｓｏｒｔｉｎｇ）（ＦＡＣＳ）もしくはＣＤ４５抗体を結合させる細胞を同定するための任意の関連する手段のうちの確立された技術を使用して容易に達成される。例えば、Ｍｏｒｅａｕ  ｅｔ  ａｌ，  Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ，  ２００４，  ８９（５）：５４７およびＫｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ，  Ｌｅｕｋｅｍｉａ，  ２００５，  １９：１４６６（これらの開示は、本明細書に参考として援用される）によって発表された論文に対して言及がなされ得る。
【０１３１】
「ＩＬ−６非応答性」であるＭＭ細胞は、生存がインターロイキン−６（ＩＬ−６）の存在に依存しない細胞と同定される。従って、ＩＬ−６非応答性であるＭＭ細胞は、ＩＬ−６の別な方法での刺激性の量（ａｎ  ｏｔｈｅｒｗｉｓｅ  ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙ  ａｍｏｕｎｔ）を用いてインキュベートされる場合、ＩＬ−６レセプター刺激もしくは下流のシグナル伝達事象のような点で微弱な応答を示す。このようなＭＭ細胞は、骨髄環境に留まり、従って骨髄間質細胞と同じ環境で増殖するＭＭ細胞を特に含み得るが、それらはまた、骨髄環境に曝されない循環中のＭＭ細胞を含む。
【０１３２】
ＭＭならびにその進行および発生の範囲内で、ＣＤ４５は、上記疾患ＭＭ細胞の初期マーカーを表す。疾患が進行するにつれて、そういった細胞のＣＤ４５表現型にずれが起こり、ここでＣＤ４５＋細胞の優勢が終わりに近づき、疾患形質細胞の集団が主にＣＤ４５−になる（Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ，  Ｌｅｕｋｅｍｉａ，  ２００５，  １９（８）：１４６６を参照のこと）。ＩＬ−６非応答性細胞の数においてもずれが起こり、この細胞形態は、疾患のより後期のステージで優勢になる。
【０１３３】
本発明の方法において、本発明の化合物の使用は、ＭＭ細胞、ならびにそこから生じ、ＣＤ４５−および／もしくはＩＬ−６非応答性表現型を獲得した形質細胞腫腫瘍の処置のために提唱される。このような被験体の処置のために、本発明の化合物は、５０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲内の（特に、１５０ｍｇもしくは３００ｍｇを含む）の単位用量の錠剤形態で、かつ１日に１〜４回（例えば、１日に１回もしくは２回）の投与頻度で投与され得る。ＭＭ被験体の処置のために、本発明の化合物は、別のＭＭ処置薬、化合物もしくはモダリティー（例えば、メルファランおよびボルテゾミブ）などと組み合わせて投与され得る。
【０１３４】
より明瞭に理解されるように本発明の性質を例示する目的で、以下の非限定的な実施例が提供される。
【実施例】
【０１３５】
（化合物合成）
本発明の化合物は、当業者に周知の方法によって、および選択された化合物について以下に示される合成および実験手順に記載されるとおりに調製され得る。
【０１３６】
定義：
ＤＭＡＰ                        ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＬＭ                          ジクロロメタン
ＴＥＡ                          トリエチルアミン
ＤＩＰＥＡもしくはＤＩＥＡ      ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＳＯ                        ジメチルスルホキシド
ＴＨＦ                          テトラヒドロフラン
ＫＨＭＤＳ                      カリウムヘキサメチルジシラジド
ＴＢＡＦ                        テトラブチルアンモニウムフルオリド
ＴＢＳＣＬ                      テトラブチルジメチルシリルクロリド
ＴＭＳＯＩ                      トリメチルスルホキソニウムヨージド
【０１３７】
（実施例１−化合物１の合成）
【化１０】
0005931288.tif 000024
【０１３８】
（１−１の合成）
【化１１】
0005931288.tif 000025
【０１３９】
Ｈ２ＯおよびＴＨＦ（２００ｍＬ）中の中間体Ａ（１０．００ｇ，９１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（１９．５ｇ  ０．１８ｍｏｌ）を添加し、続いて、Ｃｂｚ−Ｃｌ（１８．４０ｇ，０．１１ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、室温で１時間撹拌した。上記反応混合物を、１Ｍ  水性ＨＣｌを添加することによってクエンチした。その水層をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出し、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その粗生成物を、カラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル  １：４）によって精製して、化合物１−１（１３．６０ｇ，７２％）を白色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）  ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝２０８；  ［Ｍ＋Ｎａ］＝２３０。
【０１４０】
（１−２の合成）
【化１２】
0005931288.tif 000026
【０１４１】
０℃でＤＣＭ（１００ｍＬ）中の中間体１−１（１３．６０ｇ，６６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（５７．５ｍＬ  ０．３３ｍｏｌ）を滴下し、続いて、ＤＭＳＯ（７０ｍＬ）中のピリジン三酸化硫黄（２４．２０ｇ，０．１５ｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を０℃で１時間撹拌した。次いで、上記混合物を氷水へと注ぎ、その水層をＤＣＭで２回抽出した。その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル  １：２）によって精製して、化合物１−２（６．５０ｇ  ４８％）を黄色固体として得た。その構造を、Ｈ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．７（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：１，ｖ／ｖ）。１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：７．３８  （ｍ，  ５Ｈ），５．１７  （ｓ，  ２Ｈ），４．７６  （ｓ，  ４Ｈ）。
【０１４２】
（１−３の合成）
【化１３】
0005931288.tif 000027
【０１４３】
ｔ−ＢｕＯＨ（１００ｍＬ）中のトリメチルスルホキソニウムヨージド（４．２０ｇ，２０．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＫＯｔＢｕ（１１．００ｇ  ５０．０ｍｍｏｌ）を添加し、その反応系を、５０℃で１時間加熱した。１−２（４．８０ｇ，４２．８ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を５０℃でさらに４８時間撹拌し、次いで、飽和ＮＨ４ＣｌおよびＥＡを添加することによってクエンチした。その水層をＥＡで２回抽出し、次いで、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。その粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥＡ／ＰＥ，１：２）によって精製して、化合物Ｄ（５３０ｍｇ，１１％）を黄色油状物として得た。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３６  （シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝２３４；  ［Ｍ＋Ｎａ］＝２５６
１Ｈ−ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：  ７．３６  −  ７．３２  （ｍ，  ５Ｈ），  ５．０８（ｓ，２Ｈ），  ４．５１（ｔ，  Ｊ＝７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．２３−４．１４  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．８３  （ｔ，  Ｊ＝７．５  Ｈｚ，  ２  Ｈ）。
【０１４４】
（１−４の合成）
【化１４】
0005931288.tif 000028
【０１４５】
ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中の中間体１−３（８６０ｍｇ，３．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を添加し、上記反応系を、Ｈ２（５０ｐｓｉ）の下で６０℃において３日間撹拌した。上記反応系をセライトのパッドを通して濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮し、化合物１−４（３６０ｍｇ，９８％）を油状物として得た。これを、さらに精製せずに次の工程に使用した。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．０４（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝１００。
【０１４６】
（１−５の合成）
【化１５】
0005931288.tif 000029
【０１４７】
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の中間体１−４（４３０ｍｇ，４．３４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｋ２ＣＯ３（７２０ｍｇ  ５．２１ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（６１２ｍｇ，３４．３４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、８０℃で５時間撹拌した。上記反応系を室温へと冷却し、水に注いだ。その水層をＥｔＯＡｃで２回抽出し、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１：２）によって精製して、１−５（２２６ｍｇ  ２８％）を黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：  ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２２１，［Ｍ＋Ｎａ］＝２４３。
【０１４８】
（１−６の合成）
【化１６】
0005931288.tif 000030
【０１４９】
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の中間体Ｆ（２２６ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１．０当量）の撹拌溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）を添加し、上記反応系を１ａｔｍのＨ２の下で５０℃において３日間撹拌した。上記反応混合物をセライトのパッドを通して濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。その濾液を減圧下でエバポレートして、１−６（１９２ｍｇ，９８％）を赤色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認し、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．２５（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝１９１。
【０１５０】
（化合物１の合成）
【化１７】
0005931288.tif 000031
【０１５１】
ジオキサン（４０ｍＬ）中の中間体１−６（１９２ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（６５８ｍｇ  ２．０ｍｍｏｌ）およびＸ−ｐｈｏｓ（４８ｍｇ  ０．１ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（９２ｍｇ  ０．１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、１００℃で６時間、Ｎ２下で加熱した。上記反応混合物を室温へと冷却し、セライトのパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を水へと注ぎ、その水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。次いで、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、エバポレートした。その粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１：５０）によって精製して、アナログ１（４１ｍｇ  １０％）を黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよび１Ｈ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４（シリカゲル，ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１：２０，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝４２７。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）  δ（ｐｐｍ）：  ８．４２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．２８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．５５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．５９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．３６  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．１２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．９６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ）。
【０１５２】
（実施例２−化合物２の合成）
【化１８】
0005931288.tif 000032
【０１５３】
（２−２および２−３の合成）
【化１９】
0005931288.tif 000033
【０１５４】
ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）中の２−１（５．００ｇ，２５．１ｍｍｏｌ）の溶液に、４Ｍ  ＨＣｌ−ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を添加し、上記混合物を室温で２時間撹拌した。その固体沈殿物を濾過によって集め、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾過ケーキを減圧下で乾燥させて、白色固体（３．４０ｇ，１００％）を得た。それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
【０１５５】
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ／５０ｍＬ）中の２−２（３．４０ｇ，２５ｍｍｏｌ）の溶液に、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（３．５４ｇ，２５ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（７．６０ｇ，５５ｍｍｏｌ）を添加し、上記混合物を加熱して、一晩還流した。上記混合物を室温へと冷却し、ＥｔＯＡｃで抽出した（２００ｍＬ×３）。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し（１５０ｍＬ）、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた粗製残渣を、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で洗浄して、黄色固体を得た（４．６ｇ，８３％）。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２０  （シリカゲル，ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１／１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝２２１。
【０１５６】
（２−４の合成）
【化２０】
0005931288.tif 000034
【０１５７】
ｔ−ＢｕＯＨ（１００ｍＬ）中のトリメチルスルホキソニウムヨージド（１１．５０ｇ，５２ｍｍｏｌ）の溶液に、ｔ−ＢｕＯＫ（５．００ｇ，５２ｍｍｏｌ）を添加し、その反応系を５０℃で１．５時間撹拌した。２−３（４．６０ｇ，２１ｍｍｏｌ）を添加し、上記反応混合物を５０℃でさらに４８時間撹拌した。上記混合物をＨ２Ｏ（３００ｍＬ）へと注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した（２００ｍＬ×３）。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し（２００ｍＬ）、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた残渣をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄し、得られた黄色固体を減圧下で乾燥させて、生成物を得た（２．３０ｇ，４４％）。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．２０  （シリカゲル，ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１／１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝２４９。
【０１５８】
（２−５の合成）
【化２１】
0005931288.tif 000035
【０１５９】
ＣＨ３ＯＨ（３０ｍｌ）中の２−４（２．３０ｇ，９．３ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（２３０ｍｇ）を添加し、上記反応系を、水素雰囲気下で一晩撹拌した。上記触媒を、セライトのパットを通して濾過することによって除去し、ＭｅＯＨで洗浄した。その濾液を濃縮し、その残渣を（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝８０／１〜２０／１）でのシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、２−５（３２０ｍｇ，１６％）を赤色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝２１９
【０１６０】
（化合物２の合成）
【化２２】
0005931288.tif 000036
【０１６１】
Ｎ２下でジオキサン（３０ｍＬ）中の２−５（１６０ｍｇ，０．７３ｍｍｏｌ）および重要中間体Ａ（２００ｍｇ，０．７３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（８４ｍｇ，０．０７３ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（５８７ｍｇ，１．４６ｍｍｏｌ）およびＸｐｈｏｓ（３５ｍｇ，０．０７３ｍｍｏｌ）を添加した。上記混合物を加熱して３時間還流した。上記反応系を室温へと冷却し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）に注いだ。その水層をＥｔＯＡｃで抽出し（５０ｍＬ×２）、その合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた粗製残渣を、（ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝４０／１−４０／３）でのシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製して、アナログ２（８０ｍｇ，２４％）を淡黄色固体として得た。上記構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３２  （シリカゲル，ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝１／４０，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝４５５。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，  ｄ６−ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）：  ９．４９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．３７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．４０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．４６  −  ４．３１  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．１９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．５，  ３．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．９８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ４．８，  ２．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．３７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  １．８７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １３．７，  ６．９  Ｈｚ，  ４Ｈ）。
【０１６２】
（実施例３−化合物３の合成）
【化２３】
0005931288.tif 000037
【０１６３】
（１−クロロ−３−（４−メトキシ−ベンジルアミノ）−プロパン−２−オールの合成）
【化２４】
0005931288.tif 000038
【０１６４】
ヘキサン（８０ｍＬ）中のＡ（５０ｇ，３６４．５ｍｍｏｌ）およびＢ（３４ｇ，３６７．５ｍｍｏｌ）の混合物を、ＲＴで一晩撹拌した。上記混合物を濾過し、その濾過ケーキをヘキサンおよびＭＴＢＥで洗浄して、所望の生成物（４０ｇ，４８％）を白色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２２９．９  （［Ｍ＋１］＋）。
【０１６５】
（６−クロロメチル−４−（４−メトキシ−ベンジル）−モルホリン−３−オンの合成）
【化２５】
0005931288.tif 000039
【０１６６】
ＤＣＭ（２００ｍＬ）中のＣ（１８ｇ，７８．４ｍｍｏｌ）の溶液に、１．０Ｍ  水性ＮａＯＨ（８５ｍＬ）を添加し、その溶液を０℃へと冷却した。ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のＣｌＣＨ２ＣＯＣｌ（８．５ｍＬ，１１２．９ｍｍｏｌ）の溶液を滴下し、上記反応系を０℃で１時間撹拌した。上記反応系を室温へと加温し、１０．０Ｍ  水性ＮａＯＨ（６０ｍＬ）を添加し、上記混合物をさらに４時間撹拌し、その後、水で希釈し、層分離した。その水層をＤＣＭで抽出し、その合わせた有機層を水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮して、粗生成物を得、これを、シリカゲル上で石油エーテル／ＥｔＯＡｃ（１０：１〜４：１）で精製して、所望の生成物（１１ｇ，５２％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２９１．８  （［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【０１６７】
（３−（４−メトキシ−ベンジル）−６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタン−２−オンの合成）
【化２６】
0005931288.tif 000040
【０１６８】
０℃においてＴＨＦ（１４０ｍＬ）およびトルエン（１４０ｍＬ）中のＤ（８ｇ，２９．７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＫＨＭＤＳ（ＴＨＦ  ５０ｍＬ中１．０Ｍ）の溶液を滴下し、上記反応系を１時間撹拌した。上記反応を、水性ＮＨ４Ｃｌ（１５０ｍＬ）を２０分間、０℃で添加することによってクエンチした。上記混合物を濾過し、その濾過ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄した。層分離し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出し、その合わせた有機層を水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮して、粗生成物（７．５ｇ，１００％）を得、これをさらに精製せずに次の工程に直接使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２５５．８  （［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【０１６９】
（３−（４−メトキシ−ベンジル）−６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタンの合成）
【化２７】
0005931288.tif 000041
【０１７０】
ＴＨＦ（１３０ｍＬ）中のＥ（５．６ｇ，２４ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃においてＭｅ２Ｓ（３０．９ｍＬ）中の２．０Ｍ  ＢＨ３を滴下した。次いで、上記反応系を室温へと加温し、一晩撹拌した。上記反応を、ＭｅＯＨを添加することによってクエンチし、室温で３０分間撹拌した。水性Ｋ２ＣＯ３を添加し、上記混合物を６０℃で３０分間加熱した。上記混合物を室温へと冷却し、上記混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、その合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過およびエバポレートして、粗生成物を得、これをシリカゲル上で石油エーテル／ＥｔＯＡｃ（８：１〜１：１）で精製して、Ｆ（２．５ｇ，４７％）を無色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２２０．０  （［Ｍ＋１］＋）。
【０１７１】
（６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの合成）
【化２８】
0005931288.tif 000042
【０１７２】
ＭｅＯＨ（６０ｍＬ）中のＦ（１．０ｇ，４．６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｂｏｃ２Ｏ（２．０ｇ，９．３ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２担持活性炭（１．０ｇ，１０％）を添加し、上記混合物を５０℃においてＨ２雰囲気下（５０ｐｓｉ）で一晩撹拌した。ＬＣＭＳから、上記反応が完了したことが示された。上記混合物を濾過し、その濾過ケーキをＭｅＯＨで洗浄した。その濾液を濃縮して、その粗生成物（１．１ｇ，１００％）を、いかなる精製もなしに無色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２２２．０  （［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【０１７３】
（６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタンの合成）
【化２９】
0005931288.tif 000043
【０１７４】
ＤＣＭ（２０ｍＬ）中のＧ（９００ｍｇ，４．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃においてＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＣＦ３ＣＯＯＨ（６．０ｇ）の溶液を滴下した。上記反応系を室温で３時間撹拌した。ＬＣＭＳから、上記反応が完了したことが示された。上記溶媒を真空中で除去して、その粗生成物（１．３ｇ，１００％）を無色油状物として得、これを、次の工程において直接使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ９９．８  （［Ｍ＋１］＋）。
【０１７５】
（（１Ｓ，５Ｒ）−３−（４−ニトロフェニル）−６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタンの合成）
【化３０】
0005931288.tif 000044
【０１７６】
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中のＨ（７２０ｍｇ，３．４１ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（４８１ｍｇ，３．４１ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（１．８９ｇ，１３．６４ｍｍｏｌ）を添加した。上記混合物を９０℃へと加熱し、４時間撹拌した。ＴＬＣから、上記反応が完了したことが示された。上記混合物を水（５０ｍＬ）へと注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。溶媒をエバポレートしている間に沈殿物が形成され、それを集めて、１３０ｍｇの生成物を得た。その濾液を濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝５／１）によって精製して、さらに５０ｍｇの所望の生成物（総収量  １８０ｍｇ  ２４％）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２２０．９  （［Ｍ＋１］＋）。
【０１７７】
（４−（（１Ｓ，５Ｒ）−６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタン−３−イル）ベンゼンアミンの合成）
【化３１】
0005931288.tif 000045
【０１７８】
ＣＨ３ＯＨ（３０ｍＬ）中のＩ（１８０ｍｇ，０．８２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％，１８ｍｇ）を添加し、上記混合物を、Ｈ２雰囲気下で室温において３時間撹拌した。上記混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、その濾過ケーキをＣＨ３ＯＨで洗浄した。その濾液を濃縮して、所望の生成物（１４０ｍｇ，９０％）を褐色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  １９１．０  （［Ｍ＋１］＋）。
【０１７９】
（４−（６−（４−（（１Ｓ，５Ｒ）−６−オキサ−３−アザ−ビシクロ［３．１．１］ヘプタン−３−イル）フェニルアミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミドの合成）
【化３２】
0005931288.tif 000046
【０１８０】
ジオキサン（２０ｍＬ）中のＪ（１４０ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ）およびＫ（２０２ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（６４ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）、Ｘ−ｐｈｏｓ（３３ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（５３１ｍｇ，１．６３ｍｍｏｌ）を室温においてＮ２下で添加した。上記混合物を１００℃へと加熱し、５時間撹拌した。上記混合物を室温へと冷却し、濾過した；その濾液に、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、その合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過およびエバポレートして粗生成物を得、これをシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ＝１／１−−−−−ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝５０／１）によって精製して、所望の生成物（１００ｍｇ，３２％）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ４２６．２  （［Ｍ＋１］＋），  １Ｈ−ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ９．３８  （ｓ，  １Ｈ），  ９．３４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．６３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．７２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．７０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．５４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．１０  （ｑ，  Ｊ  ＝  ６．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．９４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  １Ｈ）。
【０１８１】
（実施例４−化合物４の合成）
【化３３】
0005931288.tif 000047
【０１８２】
（３−（４−ニトロフェニル）−８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタンの合成）
【化３４】
0005931288.tif 000048
【０１８３】
ＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中のＡ（２００ｍｇ，１．３４ｍｍｏｌ）およびＢ（２２６ｍｇ，１．６０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（２２１ｍｇ，１．６０ｍｍｏｌ）を添加し、上記混合物を８０℃で一晩撹拌した。上記混合物にＨ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、その生成物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。その有機相をブラインで洗浄し（５０ｍＬ）、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮して、その粗生成物を得、これを２−メトキシ−２−メチルプロパン（１５ｍＬ）で洗浄して、生成物（２４０ｍｇ，７６％）を黄色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋  ２３４．９。
【０１８４】
（４−（８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）アニリンの合成）
【化３５】
0005931288.tif 000049
【０１８５】
ＣＨ３ＯＨ（３０ｍＬ）中のＣ（５５０ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％，５５ｍｇ）を添加し、上記混合物を、Ｈ２雰囲気下で室温において３時間撹拌した。上記混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、その濾液を濃縮して、その粗生成物（４８０ｍｇ）を褐色固体として得、これを、精製せずに次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２０５．１  （［Ｍ＋１］＋）。
【０１８６】
（４−（２−（（４−（８−オキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミドの合成）
【化３６】
0005931288.tif 000050
【０１８７】
ジオキサン（３０ｍＬ）中のＤ（２２０ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）およびＥ（２９４ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１００ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）、Ｘ−ｐｈｏｓ（５２．４ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（８７０ｍｇ，２．１６ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加した。上記混合物を８０℃で８時間撹拌した。上記混合物に、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、その生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（５０ｍＬ×３）。その有機層をブラインで洗浄し（１００ｍＬ）、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮して、その粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝５０／１〜３０／１）によって精製して、上記生成物（７２ｍｇ，１５％）を黄色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ４４１．２  （［Ｍ＋１］＋），  １Ｈ−ＮＭＲ：  ８．４６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．０７  （ｓ，  １Ｈ），  ６．８４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．６０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．５０  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．４２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．３１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．０１  （ｄｄ，  Ｊ１＝２．４  Ｈｚ，  Ｊ２＝１１．６  Ｈ，  ２Ｈ），  １．９７  （ｓ，  ４Ｈ）。
【０１８８】
（実施例５−化合物５の合成）
【化３７】
0005931288.tif 000051
【０１８９】
（５−Ｂの合成）
【化３８】
0005931288.tif 000052
【０１９０】
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ／５０ｍＬ）中の５−Ａ（１０．００ｇ，７３ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（２３．１０ｇ，２１８ｍｍｏｌ）を添加した。ＣｂｚＣｌ（１４．９０ｇ，８７ｍｍｏｌ）を滴下し、上記反応系を、室温で５時間撹拌した。上記混合物をＥｔＯＡｃで抽出し（１００ｍＬ×３）、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによってＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１／１００〜１／４で精製して、５−Ｂ（１６．５０ｇ  ９６％）を無色油状物として得た。ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．６５  シリカゲル  ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１／１  ｖ／ｖ。
【０１９１】
（５−Ｃの合成）
【化３９】
0005931288.tif 000053
【０１９２】
ＣＨ２Ｃｌ２（９０ｍＬ）中の５−Ｂ（１６．５０ｇ，７０ｍｍｏｌ）の撹拌混合物を、０℃へと冷却し、ＤＩＰＥＡ（４５．３０ｇ，０．３５ｍｏｌ）を添加した。ＤＭＳＯ（１００ｍＬ）中のピリジン三酸化硫黄（２５．７０ｇ，０．１６ｍｏｌ）をその温度で滴下し、上記反応混合物を０℃で２時間撹拌した。上記混合物を４Ｍ  ＨＣｌへと注ぎ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（１００ｍＬ×３）。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによってＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１／１００〜１／６で精製して、灰白色固体として得た（１４．９０ｇ．  ９０％）。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ［Ｍ＋１］＋＝２３４。
【０１９３】
（５−Ｄの合成）
【化４０】
0005931288.tif 000054
【０１９４】
ｔ−ＢｕＯＨ（１５０ｍＬ）中のトリメチルスルホキソニウムヨージド（３５．２０ｇ，０．１６ｍｏｌ）の懸濁物に、５０℃においてｔ−ＢｕＯＫ（１７．９５ｇ，０．１６ｍｏｌ）を添加したところ、上記混合物は、濁った懸濁物へと変化した。上記混合物を同じ温度で１．５時間撹拌した。次いで、化合物５−Ｃ（１４．９０ｇ，６４ｍｍｏｌ）をその温度で添加し、上記混合物を５０℃でさらに４８時間撹拌した。上記反応混合物を室温へと冷却し、飽和水性ＮＨ４ＣｌとＥｔＯＡｃとの間で分配した。その有機相を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１／６）によって精製して、無色油状物として得た（２．０ｇ，１１％）。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．５２  シリカゲル  ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１／１
ＬＣ−ＭＳ  ：  ２６２  （［Ｍ＋１］＋），
Ｈ−ＮＭＲ：  ７．３３  （ｍ，  ５Ｈ），  ５．１４  （ｓ，  ２Ｈ），  ４．６６  −  ４．４３  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８２  （ｄ，  Ｊ  ＝  １３．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．６７  −  ３．０７  （ｍ，  ３Ｈ），  ２．３７  （ｍ，  ２Ｈ），  １．９９  −  １．３５  （ｍ，  ４Ｈ）。
【０１９５】
（キラルＨＰＬＣでの分離）
【化４１】
0005931288.tif 000055
【０１９６】
ラセミ体のベンジル１−オキサ−６−アザスピロ［３．５］ノナン−６−カルボキシレートを、エナンチオマー分離のためにＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤＨカラム（０．４６ｃｍ  Ｉ．Ｄ．×１５ｃｍ  Ｌ）および溶離液として１００％  ＥｔＯＨ（流速：  ０．５ｍＬ／分）を使用して分取用クロマトグラフィーに供した。真空中で濃縮して、ピーク１（０．９０ｇ）を油状物として、ピーク２（０．７６ｇ）を油状物として得た。
【０１９７】
（５−２の合成）
【化４２】
0005931288.tif 000056
【０１９８】
ＣＨ３ＯＨ（１５ｍＬ）中の５−１（９００ｍｇ，３．４４ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（１８０ｍｇ）を添加し、上記反応系を、水素雰囲気（４５ｐｓｉ）下で８０℃において５時間撹拌した。上記反応混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を濃縮して、５−２（４３８ｍｇ，１００％）を得、それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＬＣ−ＭＳ：［Ｍ＋１］＋＝１２８，［２Ｍ＋１］＋＝２５５。
【０１９９】
（５−３の合成）
【化４３】
0005931288.tif 000057
【０２００】
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中の５−２（４３８ｍｇ，３．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（４３０ｍｇ，３．０５ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５０６ｍｇ，３．６６ｍｍｏｌ）を添加した。上記混合物を、８０℃で５時間撹拌した。上記反応混合物を室温へと冷却した。水を添加し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その粗製残渣を、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ，６：１〜４：１）によって精製して、５−３（４６９ｍｇ，６２％）を得た。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．３７  （シリカゲル，石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋＝２４９，［Ｍ＋Ｎａ］＝２７１。
【０２０１】
（５−４の合成）
【化４４】
0005931288.tif 000058
【０２０２】
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の５−３（３６０ｍｇ，１．４５ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（５３ｍｇ）を添加し、上記反応系を、水素雰囲気下で一晩撹拌した。上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、５−４（３１７ｍｇ，１００％）を得、これを、さらに精製せずに次の工程に使用した。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．３０  （シリカゲル，石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋＝２１９。
【０２０３】
（化合物５の合成）
【化４５】
0005931288.tif 000059
【０２０４】
ジオキサン（１５ｍＬ）中の５−４（２５０ｍｇ，１．１４ｍｍｏｌ）、重要中間体Ａ（３１２ｍｇ，１．１４ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（７５０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｘｐｈｏｓ（５５ｍｇ，０．１１４ｍｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（１０５ｍｇ，０．１１４ｍｍｏｌ）を添加した。上記反応混合物を窒素雰囲気で１００℃において７時間撹拌した。上記反応系を室温へと冷却し、セライトのパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。上記混合物を、ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとの間で分配し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝５：１〜１：１、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２：ＣＨ３ＯＨ＝５０：１）によって精製して、淡黄色固体を得た。得られた固体をメタノール（５ｍＬ）中に懸濁し、３０分間撹拌し、濾過し、ＭＴＢＥで洗浄し、減圧下で乾燥させて、アナログ５（６５ｍｇ，８％）を淡黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．１３  （シリカゲル，石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋＝４５５
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ（ｐｐｍ）：．  ８．４７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．８９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１８  −  ７．０５  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．００  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．６６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ，  １Ｈ），  ４．６１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ３．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．４２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．４４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．２１  −  ３．１２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．０７  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．８９  （ｍ，  １Ｈ），  ２．４８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０３  −  １．６２  （ｍ，  ４Ｈ）。
【０２０５】
（実施例６−化合物６の合成）
【化４６】
0005931288.tif 000060
【０２０６】
（６−２の合成）
【化４７】
0005931288.tif 000061
【０２０７】
ＣＨ３ＯＨ（１５ｍＬ）中の６−１（７６６ｍｇ，２．９３ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（１８０ｍｇ）を添加し、上記反応系を、８０℃において水素雰囲気下で５時間撹拌した。上記反応混合物を室温へと冷却し、上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去した。その濾液を濃縮して、粗生成物の６−２（３７２ｍｇ，１００％）を得、これを、さらに精製せずに次の工程に使用した。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＝１２８。
【０２０８】
（６−３の合成）
【化４８】
0005931288.tif 000062
【０２０９】
ＤＭＳＯ（１５ｍＬ）中の６−２（３３０ｍｇ，２．５９ｍｍｏｌ）の溶液に、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（３７０ｍｇ，２．５９ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（４２９ｍｇ，３．１１ｍｍｏｌ）を添加した。上記混合物を、８０℃で５時間撹拌し、次いで、室温へと冷却した。水を添加し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝６：１〜４：１）によって精製して、６−２（３１８ｍｇ，４９％）を得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．３７  （シリカゲル，石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＝２４９。
【０２１０】
（６−４の合成）
【化４９】
0005931288.tif 000063
【０２１１】
ＴＨＦ（２０ｍＬ）中の６−３（３１８ｍｇ，１．２８ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（３２ｍｇ）を添加し、上記反応系を、室温において水素雰囲気下で一晩撹拌した。上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去し、上記濾過パッドをＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、粗生成物の６−４（２８０ｍｇ，１００％）を得、これを、さらに精製せずに次の工程に使用した。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．３０  （シリカゲル，石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋＝２１９。
【０２１２】
（化合物６の合成）
【化５０】
0005931288.tif 000064
【０２１３】
ジオキサン（１５ｍＬ）中の６−４（１５０ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ）、重要中間体Ａ（１８８ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（４４８ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｘｐｈｏｓ（３３ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）およびＰｄ２（ｄｂａ）３（６３ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ）を添加した。上記反応系を、窒素雰囲気下で１００℃において７時間撹拌した。上記反応系を室温へと冷却し、セライトのパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。水を添加し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝５：１〜１：１、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２：ＣＨ３ＯＨ＝８０：１）によって精製して、淡黄色固体を得た。上記固体をメタノール（２ｍＬ）中に懸濁させ、３０分間撹拌し、濾過によって集め、ＭＴＢＥで洗浄した。上記固体を減圧下で乾燥させて、アナログ５（８３ｍｇ，２６％）を淡黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．１３  （シリカゲル，石油エーテル：ＥｔＯＡｃ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋＝４５５
１Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ（ｐｐｍ）：．  ８．４４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．０８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．１６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．０８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．９６  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．６７  −  ４．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．４０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．７  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．３９  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．１１  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９３  （ｍ，  １Ｈ），  ２．５７  −  ２．３８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０１  −  １．６６  （ｍ，  ４Ｈ）。
【０２１４】
（実施例７−化合物７の合成）
【化５１】
0005931288.tif 000065
【０２１５】
（Ｂの合成）
【化５２】
0005931288.tif 000066
【０２１６】
Ｈ２Ｏ／ＴＨＦ＝１／１（２００ｍＬ）中の中間体Ａ（１０．００ｇ，８１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（２４．３０ｇ  ０．２３ｍｏｌ）およびＣｂｚ−Ｃｌ（２３．５０ｇ，０．１４ｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、室温で１時間撹拌した。上記反応を、１Ｍ  ＨＣｌを添加することによってクエンチし、その水層をＤＣＭで２回抽出した。次いで、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過および濃縮した。その粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１：４）によって精製して、Ｂ（１５．５０ｇ  ８７％）を白色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：  ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２２２  ；  ［Ｍ＋２３］＝２４４。
【０２１７】
（Ｃの合成）
【化５３】
0005931288.tif 000067
【０２１８】
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中の中間体Ｂ（１５．５０ｇ，０．０７ｍｏｌ）の撹拌溶液に、０℃においてＤＩＰＥＡ（３５．２ｍＬ  ０．２１ｍｏｌ）を添加した。ＤＭＳＯ（７０ｍＬ）中のピリジン三酸化硫黄（２５．２ｇ，０．１６ｍｏｌ）の溶液を滴下し、得られた混合物を０℃で１時間撹拌した。上記反応を、Ｈ２Ｏを添加することによってクエンチし、その水層をＤＣＭで２回抽出した。その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１：２）によって精製して、化合物Ｃ（１３．８０ｇ，９０％）を黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．７（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋２３］＝２４２。
【０２１９】
（Ｄの合成）
【化５４】
0005931288.tif 000068
【０２２０】
ｔ−ＢｕＯＨ（１００ｍＬ）中のトリメチルスルホキソニウムヨージド（３２．７０ｇ，０．１５ｍｏｌ）の撹拌溶液に、ｔ−ＢｕＯＫ（１４．３０ｇ  ０．１３）を添加し、上記反応系を、５０℃で１時間撹拌した。次いで、中間体Ｃ（１３．００ｇ  ６０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を、５０℃でさらに４８時間撹拌した。上記反応混合物を、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を添加することによってクエンチし、ＥｔＯＡｃに対して分配した。その水層をＥｔＯＡｃで２回抽出し、次いで、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１：２）によって精製して、Ｄ（２．７０ｇ  １８％）を黄色油状物として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３６（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：  ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２４８  ；  ［Ｍ＋Ｎａ］＝２７０
Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：  ７．３７  （ｍ，５Ｈ），  ５．１４  （ｄ，  ２Ｈ），  ４．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．８５−３．４７  （ｍ，  ４Ｈ），  ２．６７  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．３８−１．９８  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０２２１】
（キラルＨＰＬＣでの分離）
【化５５】
0005931288.tif 000069
【０２２２】
ラセミ体のベンジル１−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−カルボキシレートを、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＹＨカラム（０．４６ｃｍ  Ｉ．Ｄ．  ×１５ｃｍ  Ｌ）を使用して分取用クロマトグラフィーに供した。ヘキサン／ＥｔＯＨ＝５０／５０を溶離液として使用した（流速：  １ｍＬ／分）。真空中で濃縮して、ピーク１（１．１２ｇ）を油状物として得、ピーク２（１．３３ｇ）を油状物として得た。
【０２２３】
（７−２の合成）
【化５６】
0005931288.tif 000070
【０２２４】
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の中間体７−１（１．１０ｇ，４．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（１１０ｍｇ）を添加し、上記反応系を、水素雰囲気下で２日間加熱して還流した。上記反応系を室温へと冷却し、次いで、セライトのパッドを通して濾過した。上記濾過パッドをＭｅＯＨで洗浄し、その濾液を減圧下で濃縮して、７−２（４９０ｍｇ，９７％）を油状物として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳによって確認した。それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．０４（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝１１４。
【０２２５】
（７−３の合成）
【化５７】
0005931288.tif 000071
【０２２６】
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の７−２（４９０ｍｇ，４．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｋ２ＣＯ３（７１８ｍｇ，５．２ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（６１２ｍｇ，４．３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を８０℃で５時間撹拌した。上記反応系を室温へと冷却し、水に注いだ。その水層をＥｔＯＡｃで抽出し、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１：２）によって精製して、７−３（５６０ｍｇ  ５５％）を黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：  ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２３５；  ［Ｍ＋Ｎａ］＝２５７。
【０２２７】
（７−４の合成）
【化５８】
0005931288.tif 000072
【０２２８】
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の７−３（５６０ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（５０ｍｇ）を添加し、上記反応系を、水素雰囲気下で一晩撹拌した。上記触媒を、セライトを通した濾過によって除去し、その濾液を減圧下で濃縮して、７−４（４８６ｍｇ，９９％）を赤色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳによって確認した。それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．２５（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２０５。
【０２２９】
（化合物７の合成）
【化５９】
0005931288.tif 000073
【０２３０】
ジオキサン（４０ｍＬ）中の７−４（２４３ｍｇ，１．１９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（７７５ｍｇ  ２．３８ｍｍｏｌ）およびＸ−ｐｈｏｓ（５７ｍｇ  ０．１１９ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１０９ｍｇ，０．１１９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、１００℃で６時間、Ｎ２下で加熱した。上記反応物を、セライトのパッドを通して濾過し、上記濾過パッドをＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を水に対して分配し、その水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その得られた粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１：５０）によって精製して、アナログ７（１６５ｍｇ，３１％）を黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４（シリカゲル，ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１：２０，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４１
Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ４−ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）：９．３６  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０１  −  ７．９８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．６６  −  ７．５２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６０  −  ６．４８  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．５０  −  ４．３１  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．５８  −  ３．５２  （ｍ，  １Ｈ），  ３．２９  −  ３．２２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８１  −  ２．６２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．３９  −  ２．１１  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０２３１】
（実施例８−化合物８の合成）
【化６０】
0005931288.tif 000074
【０２３２】
（８−２の合成）
【化６１】
0005931288.tif 000075
【０２３３】
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の８−１（１．３３ｇ，５．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（１３０ｍｇ）を添加し、上記反応系を、８０℃において水素雰囲気下で２日間加熱した。上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去し、上記濾過パッドを、ＭｅＯＨで洗浄した。その濾液を減圧下でエバポレートして、８−２（６０８ｍｇ  １００％）を油状物として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。それを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．０４（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝１１４。
【０２３４】
（８−３の合成）
【化６２】
0005931288.tif 000076
【０２３５】
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中の８−２（６２３ｍｇ，５．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｋ２ＣＯ３（９１４ｍｇ  ６．６ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（７７７ｍｇ，５．５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、８０℃で５時間撹拌した。上記反応混合物を室温へと冷却し、水に注いだ。その水層をＥｔＯＡｃで２回抽出し、次いで、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過およびエバポレートして、その粗生成物を得た。これを、フラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／石油エーテル＝１：２）によって精製して、８−３（６７７ｍｇ，５２％）を黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：２，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：  ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２３５，［Ｍ＋Ｎａ］＝２５７。
【０２３６】
（８−４の合成）
【化６３】
0005931288.tif 000077
【０２３７】
ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の８−３（６７７ｍｇ，２．９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１０％  Ｐｄ／Ｃ（６０ｍｇ）を添加し、上記反応系を、水素雰囲気下で一晩撹拌した。上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去し、その濾過パッドをＭｅＯＨで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、８−４（５５４ｍｇ，９３％）を赤色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。  ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．２５（シリカゲル，ＥＡ：ＰＥ＝１：１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ  ：［Ｍ＋１］＋＝２０５。
【０２３８】
（化合物８の合成）
【化６４】
0005931288.tif 000078
【０２３９】
ジオキサン（４０ｍＬ）中の８−４（２８６ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（９１２ｍｇ  ２．８ｍｍｏｌ）およびＸ−ｐｈｏｓ（６７ｍｇ  ０．１４ｍｍｏｌ）を添加し、続いて、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１２８ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を、１００℃において６時間、窒素雰囲気下で加熱した。上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去し、上記パッドをＥｔＯＡｃで洗浄した。その濾液を水に対して分配し、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。次いで、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。その粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１：５０）によって精製して、アナログ８（１６７ｍｇ，２７％）を黄色固体として得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．４（シリカゲル，ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１：２０，ｖ／ｖ）．
ＬＣ−ＭＳ  ：４４１  （［Ｍ＋１］＋）。
Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）：９．３６  （ｓ，  ２Ｈ），  ８．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０９  −  ７．９８  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．６６  −  ７．５２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ４．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６０  −  ６．４８  （ｍ，  ２Ｈ），  ４．５０  −  ４．３１  （ｍ，  ４Ｈ），  ３．５８  −  ３．５２  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．２９  −  ３．２２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．８１  −  ２．６２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．３９  −  ２．１１  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０２４０】
（実施例９−化合物９の合成）
【化６５】
0005931288.tif 000079
【０２４１】
（（２Ｓ，４Ｒ）−１−ベンジル２−メチル４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの合成）
【化６６】
0005931288.tif 000080
【０２４２】
ＭｅＯＨ（３５０ｍＬ）中のＡ（５０ｇ，３８１．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳＯＣｌ２（３０ｍＬ）を室温で添加した。上記反応混合物を１時間撹拌し、次いで、６５℃に一晩加熱した。上記溶媒をエバポレートし、その残渣をＣＨ２Ｃｌ２（８００ｍＬ）に溶解させた。上記混合物を０℃へと冷却し、ＴＥＡ（１３０ｍＬ）を添加し、次いで、ＣｂｚＣｌ（６２．２ｍＬ）を滴下した。０℃で３０分間撹拌した後、上記反応系を、クエン酸の水溶液（１０％，８００ｍＬ）へと注ぐことによってクエンチし、その生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。その合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過および濃縮して、粗生成物（６４ｇ，６０％）を淡黄色油状物として得た。これを、さらに精製せずに次の工程に使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ３０１．８  （［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【０２４３】
（（２Ｓ，４Ｒ）−１−ベンジル２−メチル４−（メチルスルホニルオキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの合成）
【化６７】
0005931288.tif 000081
【０２４４】
ＤＣＭ（１５００ｍＬ）中のＢ（５０ｇ，１７９ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（２９ｍＬ）を０℃で滴下し、次に、ＭｓＣｌ（１８．８ｍＬ）を滴下した。触媒量のＤＭＡＰ（６．８ｇ）を添加し、上記混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温で２時間撹拌した。上記反応混合物を氷水へと注ぎ、その生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。その合わせた有機層を、１０％  水性ＨＣｌ、５％  水性ＮａＨＣＯ３および水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過および濃縮して、粗生成物（６５ｇ，１００％）を無色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：３７９．８  （［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【０２４５】
（（２Ｓ，４Ｓ）−１−ベンジル２−メチル４−（ベンゾイルオキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの合成）
【化６８】
0005931288.tif 000082
【０２４６】
ＤＭＳＯ（６００ｍＬ）中のＣ（６０．００ｇ，０．１６ｍｏｌ）の溶液に、ＢｚＯＮａ（４９．００ｇ，０．３４ｍｏｌ）を室温で添加し、上記反応混合物を９０℃で一晩加熱した。上記反応混合物を水およびＥｔＯＡｃに注いだ。その有機相を分離し、その水層をＥｔＯＡｃで抽出した。その合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１０：１〜５：１）によって精製して、生成物（２８ｇ，４６％）を白色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ３８３．９  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２４７】
（（２Ｓ，４Ｓ）−１−ベンジル２−メチル４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの合成）
【化６９】
0005931288.tif 000083
【０２４８】
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中のＤ（２３ｇ，６５．８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｋ２ＣＯ３（９．１ｇ，６５．８ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、上記混合物を室温で１時間撹拌した。ＴＬＣから、上記反応が完了したことが示された。上記混合物を濾過し、その濾液を真空中で濃縮して、ＭｅＯＨを除去し、その残渣をＥｔＯＡｃ中に溶解させ、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮して、粗生成物を得た。これを、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝４／１〜１／１）によって精製して、所望の生成物（１２．６ｇ，７０％）を淡黄色油状物として得た。
【０２４９】
（（２Ｓ，４Ｓ）−１−ベンジル２−メチル４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの合成）
【化７０】
0005931288.tif 000084
【０２５０】
ＣＨ２Ｃｌ２（１７０ｍＬ）中のＥ（１１．５０ｇ，４１ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（５．６０ｇ，８２ｍｍｏｌ）およびＴＢＳＣｌ（１１．２ｇ，７４ｍｍｏｌ）を添加した。上記反応混合物を室温で１．５時間撹拌した。上記反応混合物を水およびＥｔＯＡｃへと注ぎ、その有機層を分離し、水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過および濃縮して、所望の生成物（１５．９ｇ，９９％）を無色油状物として得た。
【０２５１】
（（２Ｓ，４Ｓ）−ベンジル４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）−ピロリジン−１−カルボキシレートの合成）
【化７１】
0005931288.tif 000085
【０２５２】
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のＦ（１５．０ｇ，３８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＢＨ４（１．９ｇ，８７ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、上記混合物を室温へと加温し、室温で４時間撹拌したところ、ＴＬＣから、上記反応が完了したことが示され、水を添加した。その生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、その有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過および濃縮して粗生成物（１３．２ｇ，９５％）を無色油状物として得た。これを、次の工程で直接使用した。
【０２５３】
（（２Ｓ，４Ｓ）−ベンジル４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（（メチルスルホニルオキシ）−メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成）
【化７２】
0005931288.tif 000086
【０２５４】
ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）中のＧ（１３．０ｇ，３５．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２．５ｍＬ）の溶液を、ＭｓＣｌ（４．２ｍＬ）で０℃において処理した。上記反応混合物を０℃で１５分間撹拌し、次いで、室温でさらに３０分間撹拌した。上記反応系をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過および濃縮して、粗生成物（１６．５ｇ，１００％）を淡黄色油状物として得た。これを、いかなる精製もせずに次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ４６５．７  （［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【０２５５】
（（１Ｓ，４Ｓ）−ベンジル２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−カルボキシレートの合成）
【化７３】
0005931288.tif 000087
【０２５６】
ＴＨＦ（４００ｍＬ）中のＨ（１５．６ｇ，３５．２ｍｍｏｌ）の溶液を、ＴＢＡＦ（３０．０ｇ，１１４．７ｍｍｏｌ）で処理した。上記反応混合物を室温で３０分間撹拌し、次いで、０℃へと冷却し、ＮａＨ（１．５ｇ，６２．５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で撹拌を２４時間継続した。上記反応を、上記混合物を水に注ぐことによってクエンチし、その生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中でエバポレートして、粗生成物を得、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１０：１〜３：１）によって精製して、所望の生成物（６．２ｇ，７６％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２５５．８  （［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【０２５７】
（（１Ｓ，４Ｓ）−２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタンの合成）
【化７４】
0005931288.tif 000088
【０２５８】
ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中のＧ（１．８０ｇ，７．７ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｈ２雰囲気下で、５０℃においてＰｄ／Ｃ（１０％，０．９ｇ）の存在下で水素化した。上記反応混合物を一晩撹拌した。上記混合物を、セライトのパッドを通して濾過し、上記溶媒を真空中で除去して、その粗生成物（１．３ｇ，１００％）を油状物として得た。これを、いかなる精製もせずに次の工程で直接使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ９９．９  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２５９】
（（１Ｓ，４Ｓ）−２−（４−ニトロフェニル）−５−オキサ−２−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプタンの合成）
【化７５】
0005931288.tif 000089
【０２６０】
ＤＭＳＯ（４０ｍＬ）中のＫ（１．３ｇ，１３．１ｍｍｏｌ）、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（２．２ｇ，１５．７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２．１６ｇ，１５．７ｍｍｏｌ）の混合物を、８０℃で４時間加熱した。上記反応混合物を室温へと冷却し、水を添加し、１０分間撹拌した。上記生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、その有機層を水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過およびエバポレートして、粗生成物を得た。これをＭＴＢＥで洗浄して、所望の生成物（１．２ｇ，４２％）を黄色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２２１  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２６１】
（４−（（１Ｓ，４Ｓ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−イル）アニリンの合成）
【化７６】
0005931288.tif 000090
【０２６２】
ＣＨ３ＯＨ（５０ｍＬ）中のＬ（６００ｍｇ，２．７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（６０ｍｇ）を添加し、上記混合物を、Ｈ２雰囲気下で室温において４時間撹拌した。上記混合物を、セライトを通して濾過して、上記触媒を除去し、その濾液を濃縮して、所望の生成物（５００ｍｇ，９６％）を赤色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  １９１．０  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２６３】
（４−（６−（（４−（（１Ｓ，４Ｓ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−イル）フェニル）アミノ）−ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミドの合成）
【化７７】
0005931288.tif 000091
【０２６４】
ジオキサン（５０ｍＬ）中のＭ（３１５ｍｇ，１．６６ｍｍｏｌ）およびＮ（４５０ｍｇ，１．６６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（１５０ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）、Ｘ−ｐｈｏｓ（７８ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．２１ｇ，３．７ｍｍｏｌ）を室温においてＮ２下で添加した。上記混合物を加熱して還流し、５時間撹拌した。上記混合物を室温へと冷却し、濾紙を通して濾過した；その濾液を水（５０ｍＬ）に対して分配した。その水層をＥｔＯＡｃで抽出し、その合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過およびエバポレートして、粗生成物を得た。これを、シリカゲル（ＰＥ／ＥＡ＝１／１、次いで、ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝５０／１）によって精製して、所望の生成物（７０ｍｇ，１０％）を黄色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ４４１．２  （［Ｍ＋１］＋），  １Ｈ  ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ）  δ  ９．３９  （ｓ，  １Ｈ），  ９．３６  （ｔ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ），  ８．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．５  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．９  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．６０  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５１  （ｓ，  １Ｈ），  ４．３６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．３  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７２  （ＡＢｑ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  Δν＝  ２１．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．５１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．９４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．９５−１．８２  （ｍ，  １Ｈ）。
【０２６５】
（実施例１０−化合物１０の合成）
【化７８】
0005931288.tif 000092
【０２６６】
（（１Ｒ，４Ｒ）−５−アセチル−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−３−オンの合成）
【化７９】
0005931288.tif 000093
【０２６７】
Ａ（５０ｇ，３８１．６ｍｍｏｌ）およびＡｃ２Ｏ（３０５ｍＬ）の撹拌混合物を、９０℃に１６時間、Ｎ２下で加熱し、溶媒を減圧下でエバポレートし、その残渣をＥｔＯＡｃ中に溶解させ、水で洗浄した。その水層をＣＨＣｌ３でさらに抽出し、その合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、エバポレートした。得られた残渣をＥｔＯＡｃから再結晶化して、生成物（２４ｇ，４０％）を白色固体として得た。
【０２６８】
（（２Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸塩酸塩の合成）
【化８０】
0005931288.tif 000094
【０２６９】
２Ｎ  ＨＣｌ（１６０ｍＬ）中のＢ（１４ｇ，９０．３ｍｍｏｌ）の混合物を、１００℃で一晩撹拌したところ、ＬＣＭＳから、上記反応が完了したことが示された。溶媒を真空中で除去し、その残渣をＥｔＯＡｃ中で再結晶化して、所望の生成物を白色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２０５．１  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２７０】
（（２Ｒ，４Ｒ）−メチル  ４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボキシレート塩酸塩の合成）
【化８１】
0005931288.tif 000095
【０２７１】
ＣＨ３ＯＨ（１５０ｍＬ）中のＡ（１６．５６ｇ，９８．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＳＯＣｌ２（３５．２６ｇ，２９６．４ｍｍｏｌ）を室温で添加し、上記混合物を加熱して３時間還流した。上記溶媒を真空中で除去し、得られた灰白色の固体を、さらに精製せずに次の工程で使用した。
【０２７２】
（（２Ｒ，４Ｒ）−１−ベンジル２−メチル４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの合成）
【化８２】
0005931288.tif 000096
【０２７３】
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（１５０ｍＬ／５０ｍＬ）中のＤ（１７．９４ｇ，９８．８ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（１０．５ｇ，９８．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣｂｚＣｌ（２０．２ｇ，１１８．５６ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、上記混合物を室温で２時間撹拌した。上記混合物を、濾紙を通して濾過し、その濾液を濃縮した。水（２００ｍＬ）を添加し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍｌ×３）。その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。その残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝５／１〜２／１）によって精製して、所望の生成物（７．４ｇ，２７％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２７９．９  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２７４】
（（２Ｒ，４Ｒ）−１−ベンジル２−メチル４−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの合成）
【化８３】
0005931288.tif 000097
【０２７５】
ジクロロメタン（７０ｍＬ）中のＥ（７．４ｇ，２６．５ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（３．６ｇ，５３ｍｍｏｌ）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ）中のＴＢＳＣｌを、上記溶液に０℃で添加し、上記反応混合物を室温で一晩撹拌した。上記反応混合物を水（２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、その有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮して、その粗生成物（１０．４ｇ）を淡黄色油状物として得た。これを、精製せずに次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ４１５．９  （［Ｍ＋２３］＋）。
【０２７６】
（（２Ｒ，４Ｒ）−ベンジル４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成）
【化８４】
0005931288.tif 000098
【０２７７】
無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中のＦ（１０．４ｇ，２６．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＢＨ４（０．９２ｇ，４２．４ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、上記混合物を室温で３時間撹拌した。上記反応物をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）に対して分配し、その生成物をＥｔＯＡｃで抽出した（１００ｍＬ×３）。その合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１００／０〜６０／１０）によって精製して、所望の生成物（８．８４ｇ，９１％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ３６５．９  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２７８】
（（２Ｒ，４Ｒ）−ベンジル４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−２−（（メチルスルホニルオキシ）−０メチル）ピロリジン−１−カルボキシレートの合成）
【化８５】
0005931288.tif 000099
【０２７９】
０℃においてＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）およびＥｔ３Ｎ（４．６ｇ，４５．６ｍｍｏｌ）中のＧ（８．３２ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＭｓＣｌ（３．１３ｇ，２７．３ｍｍｏｌ）を添加し、上記混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、上記反応物を、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）に対して分配し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し（１００ｍＬ×３）、その合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮して、その粗生成物（１０．１１ｇ，１００％）を得た。これを、次の工程で直接使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  ４４３．８  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２８０】
（（１Ｒ，４Ｒ）−ベンジル２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−カルボキシレートの合成）
【化８６】
0005931288.tif 000100
【０２８１】
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中のＨ（１０．１１ｇ，２２．８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＢＡＦ（２３．８ｇ，９１．２ｍｍｏｌ）を添加し、上記混合物を５０℃で３時間加熱した。ＮａＨ（１．３７ｇ，３４．２ｍｍｏｌ）を添加し、上記混合物を室温で２時間撹拌した。上記混合物を濃縮して、ＴＨＦを除去し、次いで、ＥｔＯＡｃで希釈し、水に対して分配した。その水層をＥＡで抽出し（１００ｍＬ×３）、その合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１０：１〜５：１）によって精製して、生成物（４．３ｇ，８１％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２３３．９  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２８２】
（（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタンの合成）
【化８７】
0005931288.tif 000101
【０２８３】
ＣＨ３ＯＨ（２０ｍＬ）中のＪ（２ｇ，８．６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（０．２ｇ）を添加し、上記混合物を、Ｈ２バルーン下で５０℃において４時間撹拌した。上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去し、その濾液を濃縮して、その粗生成物（１．１ｇ，１００％）を無色油状物として得た。これを、精製せずに次の工程に使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  １００．５  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２８４】
（（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタンの合成）
【化８８】
0005931288.tif 000102
【０２８５】
ＤＭＳＯ（３０ｍＬ）中のＫ（０．８５ｇ，８．６ｍｍｏｌ）の溶液に、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（１．４６ｇ，１０．３２ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１．４３ｇ，１０．３２ｍｍｏｌ）を添加し、上記混合物を８０℃に加熱し、４時間撹拌した。上記混合物を室温へと冷却し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を添加し、上記混合物をＥＡで抽出し（５０ｍＬ×３）、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮して、黄色固体を得た。これを、２−メトキシ−２−メチルプロパン（１０ｍＬ）で洗浄して、生成物（１．４ｇ，Ｊから７４％）を黄色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ２２１  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２８６】
（４−（（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−イル）アニリンの合成）
【化８９】
0005931288.tif 000103
【０２８７】
ＣＨ３ＯＨ（３０ｍＬ）中のＬ（１．３１ｇ，６．０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％，０．１３ｇ）を添加し、上記混合物をＨ２雰囲気下で４時間撹拌した。上記触媒を、セライトのパッドを通して濾過することによって除去し、その濾液を濃縮して、粗生成物（１．０１ｇ，８８．６％）を褐色固体として得た。これを、精製せずに次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ：  １９１．０  （［Ｍ＋１］＋）。
【０２８８】
（４−（６−（（４−（（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタン−５−イル）フェニル）アミノ）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（シアノメチル）ベンズアミドの合成）
【化９０】
0005931288.tif 000104
【０２８９】
ジオキサン（６０ｍＬ）中のＭ（２９３ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）およびＮ（４２０ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２００ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）、Ｘ−ｐｈｏｓ（１０４ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１．６１ｇ，４．４ｍｍｏｌ）をＮ２下で添加し、上記混合物を１００℃に加熱し、６時間撹拌した。上記反応系を室温へと冷却し、ＥＡ（５０ｍＬ）を添加した。得られた混合物を、濾紙を通して濾過して、上記固体を除去し、その濾液をＨ２Ｏ（１００ｍＬ）に対して分配した。その水層をＥＡで抽出し（５０ｍＬ×３）、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過および濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝１／１−−−−−ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ＝５０／１）によって精製して、所望の生成物（１２３ｍｇ，１３．１％）を黄色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ  ：  ４４１．２  （［Ｍ＋１］＋）
１Ｈ−ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ９．３７  （ｓ，  １Ｈ），  ９．３４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．３６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．６１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．５８  （ｓ，  １Ｈ），  ４．４９  （ｓ，  １Ｈ），  ４．３５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．７０  （Ａｂｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  Δν＝２２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．４９  （ｄｄ，  Ｊ１  ＝  １．２  Ｈｚ，  Ｊ２  ＝  ９．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．９２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．９３  −  １．８０  （ｍ，  ２Ｈ）。
【０２９０】
（実施例１１−化合物１１の合成）
【化９１】
0005931288.tif 000105
【０２９１】
（Ｂの合成）
【化９２】
0005931288.tif 000106
【０２９２】
Ｍｇ（４．８４ｇ，０．２０ｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（５００ｍＬ）中の化合物Ａ（７．３ｇ，２８．８ｍｍｏｌ）の混合物に添加し、１時間超音波処理した。ほぼ全ての溶媒を、減圧下で灰色の反応混合物から除去して、粘性の灰色の残渣を得た。これをエーテル（５００ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。硫酸ナトリウム十水和物（１５．００ｇ）を添加し、得られた明るい灰色の混合物を３０分間激しく撹拌した。上記固体を濾過によって取り出し、その濾過ケーキをエーテルで洗浄し、その濾液を濃縮して、油状物（１．５０ｇ，５３％）を得た。これを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ  ：  Ｒｆ＝０．０２  （シリカゲル，酢酸エチル：石油エーテル＝１：１，ｖ／ｖ）。
【０２９３】
（Ｃの合成）
【化９３】
0005931288.tif 000107
【０２９４】
乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＢ（１．５ｇ，１５．１ｍｍｏｌ）、１−フルオロ−４−ニトロベンゼン（２．１０ｇ，１５．１ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２．５０ｇ，１８ｍｍｏｌ）の溶液を、加熱して２時間還流した。ＴＬＣから、１−フルオロ−４−ニトロベンゼンが完全に消費され尽くしたことが示された。上記反応混合物を室温へと冷却し、減圧下で濃縮した。その残渣を水へと注ぎ、ＤＣＭで抽出した（３×５０ｍＬ）。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られた残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／ＥｔＯＡｃ，５０／１〜１０／１，ｖ／ｖ）によって精製して、黄色固体（１．１５ｇ，３６％）を得た。その構造を、Ｈ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ  ：  Ｒｆ＝０．２  （シリカゲル，酢酸エチル：石油エーテル＝１：５，ｖ／ｖ）
１Ｈ−ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  （ｐｐｍ）：  ８．１１  （  ｄ，  Ｊ＝９．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．３２（  ｄ，  Ｊ＝９．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），    ４．８９  （ｓ，  ４Ｈ），  ４．２２  （ｓ，  ４Ｈ）。
【０２９５】
（Ｄの合成）
【化９４】
0005931288.tif 000108
【０２９６】
ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）の混合物中のＣ（１．５０ｇ，６．８ｍｍｏｌ）および１０％  Ｐｄ／Ｃ（９０ｍｇ）の溶液を、Ｈ２雰囲気下に置き、室温で一晩撹拌した。ＴＬＣから、Ｃの化合物が完全に消費し尽くされたことが示された。上記触媒を、セライトを通した濾過によって除去し、その濾過ケーキをＭｅＯＨで洗浄した。その濾液を減圧下で濃縮して、得られた残渣をクロマトグラフィーによって精製して、黄色固体（１．０５ｇ，８１％）を得た。その構造を、Ｈ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ  ：  Ｒｆ＝０．２  （シリカゲル，酢酸エチル：石油エーテル＝１：２，ｖ／ｖ）
１Ｈ−ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  （ｐｐｍ）：  ６．６５  （  ｄ，  Ｊ＝８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ６．３６  （  ｄ，  Ｊ＝８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），    ４．８３  （ｓ，  ４Ｈ），  ３．９３  （ｓ，  ４Ｈ）。
【０２９７】
（Ｇの合成）
【化９５】
0005931288.tif 000109
【０２９８】
トルエン（２０ｍＬ）、ｎ−ＰｒＯＨ（６．５ｍＬ）および２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３（５ｍＬ）の混合物中のＥ（１．００ｇ，５．５５ｍｍｏｌ）およびＦ（１．６５ｇ，１１．１１ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．６５ｇ，０．０５６ｍｍｏｌ）を添加した。上記反応系を窒素下で撹拌し、加熱して２４時間還流した。ＴＬＣから、Ｅの化合物が完全に消費し尽くされたことが示された。上記反応系を室温へと冷却し、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃの混合物へと注いだ。この混合物を、セライトを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その水層をＥｔＯＡｃで抽出し（５０ｍＬ×３）、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ，１００：０〜９８：２，ｖ／ｖ）によって精製して、上記生成物を白色固体として得た（８００ｍｇ，６１％）。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．５  （シリカゲル，石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋：  ２４９．１／２５１．１＝３／１
【０２９９】
（Ｈの合成）
【化９６】
0005931288.tif 000110
【０３００】
ジオキサン（３０ｍＬ）中のＧ（８００ｍｇ，３．２３ｍｍｏｌ）、Ｄ（６７５ｍｇ，３．２３ｍｍｏｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（２．０９ｇ，６．４２ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、キサントホス（１８６ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（３７２ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）を添加した。上記反応系を加熱して、１６時間還流した。ＴＬＣから、化合物Ｅが完全に消費し尽くされたことが示された。上記反応系を室温へと冷却し、Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃの混合物に注いだ。この混合物を、セライトを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。その水層をＥｔＯＡｃで抽出し（５０ｍＬ×３）、その合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１／５０：１）によって精製して、粘性化合物（６８０ｍｇ，５２％）を得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルおよびＬＣ−ＭＳによって確認し、これが不純物を僅かに含むことを確認した。これを、さらに精製せずに次の工程に使用した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．５  （シリカゲル，石油エーテル：／酢酸エチル＝１／１，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋：４０３．０
【０３０１】
（Ｈの合成）
【化９７】
0005931288.tif 000111
【０３０２】
ＭｅＯＨ（８ｍＬ）および３Ｍ  ＮａＯＨ（８ｍＬ）中のＨ（６５０ｇ，１．６１ｍｍｏｌ）の溶液を、７０℃で２時間加熱した。ＴＬＣから、Ｈの化合物が完全に消費し尽くされたことが示された。有機溶媒を真空中で除去し、その残った水性溶液を水へと注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を廃棄し、残っている水性溶液のｐＨを、２Ｎ  ＨＣｌ（ａｑ）でＰＨ＝５に調節した。上記混合物を室温で３０分間撹拌した。形成された沈殿物を、濾過によって集め、水で洗浄し、真空中で乾燥させて、灰色固体を得た（２３０ｍｇ，３７％）。その構造を、ＬＣ−ＭＳスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．４（シリカゲル＝ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１５／１  ，ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋：３８９．０。
【０３０３】
（化合物１１の合成）
【化９８】
0005931288.tif 000112
【０３０４】
ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＩ（２２０ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）および２−アミノアセトニトリル塩酸塩（１０４ｍｇ，１．１３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＥＡ（４３４ｍｇ，３．３９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（９１ｍｇ，０．６８ｍｍｏｌ）およびＥＤＣ．ＨＣｌ（２３９ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）を添加した。上記反応混合物を撹拌し、１００℃に２時間加熱した。ＴＬＣから、Ｉの大部分が消費し尽くされたことが示され、上記反応系を室温へと冷却した。上記反応混合物を水（１０ｍＬ）へと注ぎ、ＤＣＭで抽出した（３×２０ｍＬ）。その有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。得られた残渣を、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１００：１／５０：１）によって精製して、黄色固体（１２３ｍｇ，５１％収率）を得た。その構造を、ＬＣ−ＭＳおよびＨ−ＮＭＲスペクトルによって確認した。
ＴＬＣ：  Ｒｆ＝０．５（シリカゲル，ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２＝１／１５  ｖ／ｖ）
ＬＣ−ＭＳ：  ［Ｍ＋１］＋：４２７。
１Ｈ−ＮＭＲ  （４００  ＭＨｚ，  ｄ６−ＤＭＳＯ）  δ  （ｐｐｍ）：  ９．４１  （ｓ，  １Ｈ），  ９．３５  （ｔ，  Ｊ＝５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．５１  （  ｄ，  Ｊ＝５．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．２６  （  ｄ，  Ｊ＝８．４  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ８．０２  （  ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．５８  （  ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ７．３８  （  ｄ，  Ｊ＝４．８  Ｈｚ，  １Ｈ）  ６．４４  （  ｄ，  Ｊ＝８．８  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ４．７３  （ｓ，  ４Ｈ），  ４．３６  （  ｄ，  Ｊ＝５．２  Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９４  （ｓ，  ４Ｈ）．
【０３０５】
（化合物分析）
１Ｈおよび１３Ｃ  ＮＭＲデータを、Ｂｒｕｃｋｅｒ  ＡＶ−３００  ＡＶＡＮＣＥ  ＮＭＲ分光計で得た。
【０３０６】
（ＬＣ−ＥＩ−ＭＳおよびＥＩ−ＭＳ）
一般的パラメーター：
ＬＣ−ＥＩ−ＭＳおよびＥＩ−ＭＳデータを、以下で概説する設定とともにＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｌｌｅｎｉｕｍ３２ソフトウェアバージョン４．０の制御下で作動するＷａｔｅｒｓ  ２９９６  Ｐｈｏｔｏｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  ＤｅｔｅｃｔｏｒおよびＩｎｔｅｇｒｉｔｙ  ＴＭＤ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｉｍｐａｃｔ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒに連結したＷａｔｅｒｓ  ２７９５  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣで得た。
【０３０７】
質量分析計パラメーター：
約０．３６Ｌ／分のヘリウム流；スキャンに設定した獲得モード；サンプル取得速度１スペクトル／秒；ソース温度２００℃；ネブライザ温度８０℃；拡張領域温度７５℃；必要に応じて、質量範囲  ｍ／ｚ  １００〜５５０、ｍ／ｚ  １００〜６５０もしくはｍ／ｚ  １００〜７００。
【０３０８】
ＨＰＬＣパラメーター：
ＬＣ−ＭＳパラメーターは、以下に概説される方法の各々について記載されるとおりであった。ＥＩ−ＭＳサンプルを注入し、溶媒流速０．２５ｍＬ／分で、カラムを存在させずに分析した。
【０３０９】
方法Ａ１（ＬＣ−ＥＩ−ＭＳ）
溶媒の勾配：
【表Ａ−１】
0005931288.tif 000113
流速：０．２５ｍＬ／分
カラム：以下のうちの１つ
・Ａｌｌｔｉｍａ  ＨＰ  Ｃ１８  ２．１×１５０ｍｍ，５ミクロン
・ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８，３．０×１００ｍｍ，３．５ミクロン
・ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８，３．０×１００ｍｍ，３．５ミクロン
【０３１０】
方法Ａ２（ＬＣ−ＥＩ−ＭＳ）
溶媒の勾配：
【表Ａ−２】
0005931288.tif 000114
流速：０．２５ｍＬ／分
カラム：以下のうちの１つ
・Ａｌｌｔｉｍａ  ＨＰ  Ｃ１８  ２．１×１５０ｍｍ，５ミクロン
・ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８，３．０×１００ｍｍ，３．５ミクロン
・ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８，３．０×１００ｍｍ，３．５ミクロン
【０３１１】
（ＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ）
一般的パラメーター：
ＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳデータは、以下で概説される設定とともにＭａｓｓｌｙｎｘソフトウェアバージョン４．１を用いてエレクトロスプレーイオン化条件下で作動する、Ｗａｔｅｒｓ  ２９９６  Ｐｈｏｔｏｄｉｏｄｅ  Ａｒｒａｙ  ＤｅｔｅｃｔｏｒおよびＷａｔｅｒｓ  ＺＱ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒに連結したＷａｔｅｒｓ  ２６９５Ｘｅ  ＨＰＬＣで獲得した。
質量分析計パラメーター：
質量範囲：  ｍ／ｚ  １００〜６５０
スキャン時間：  ０．５
スキャン中遅延（Ｉｎｔｅｒ  ｓｃａｎ  ｄｅｌａｙ）：０．１
脱溶媒和ガス：  ５００Ｌ／時間  Ｎ２
コーンガス（Ｃｏｎｅ  Ｇａｓ）：  １００Ｌ／時間  Ｎ２
脱溶媒和温度：  ４００℃
ソース温度：  １２０℃
コーン電圧：  ＥＳＩポジティブモードについては＋３０Ｖ、もしくは
ＥＳＩネガティブモードについては−４５Ｖ
【０３１２】
ＨＰＬＣパラメーター：
以下に概説される条件の以下のセットのうちの１つであった。
【０３１３】
方法Ｂ
溶媒の勾配：
【表Ｂ】
0005931288.tif 000115
流速：０．２５ｍＬ／分
カラム：  ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８，２．１×５０ｍｍ，３．５ミクロン
【０３１４】
方法Ｃ
溶媒の勾配：
【表Ｃ】
0005931288.tif 000116
流速：０．２５ｍＬ／分
カラム：  ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８，２．１×５０ｍｍ，３．５ミクロン
【０３１５】
方法Ｄ
溶媒の勾配：
【表Ｄ】
0005931288.tif 000117
流速：０．２５ｍＬ／分
カラム：  ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８，３．０×１００ｍｍ，３．５ミクロン
【０３１６】
（実施例１２−酵素スクリーニング）
アッセイプロトコル
キナーゼアッセイを、Ａｎａｓｔａｓｓｉａｄｉｓ，Ｔ；  ｅｔ  ａｌ  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  （２０１１）；  ２９  （１１）；  ｐ１０３９−ｐ１０４５  （ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｂｔ．２０１７）によって報告された方法に基づいて行った。
【０３１７】
結果
ＩＣ５０データを、表２に示す。
【表２】
0005931288.tif 000118
【０３１８】
最も重要な化合物は、化合物５、化合物６および化合物９であった。
【０３１９】
（実施例１３−細胞スクリーニング）
細胞アッセイ原理は、Ｄａｌｅｙ  ＆  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ  （Ｄａｌｅｙ  ａｎｄ  Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ；  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ．  １９８８；  ８５（２３）：９３１２−６）によって報告された方法に基づく。この細胞ベースのアッセイにおいて、ＩＬ３依存性Ｂａ／Ｆ３細胞をヒト組換えキナーゼ遺伝子のトランスフェクションによって形質転換する。次に、その改変した細胞は、生存および増殖に関して、上記組換えキナーゼの活性に依存する。増殖に対して上記試験化合物が有する効果を代謝ターンオーバーのＡｌａｍａｒ  ＢｌｕｅおよびＭＴＴアッセイのような従来の読み出し情報を使用して評価する。
【０３２０】
（実施例１４−蛍光活性化セルソーター（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｓｏｒｔｅｒ）（ＦＡＣＳ））
（ＳＴＡＴ  ５リン酸化のマルチパラメーター細胞内フローサイトメトリー分析）
ヒト赤白血病細胞系ＨＥＬ９２．１．７（ＡＴＣＣ，ＴＩＢ−１８０）を、１ｍＭ  ピルビン酸ナトリウムを補充した１０％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０中で増殖させる。ホスホロ−ＳＴＡＴ５決定のために、ＨＥＬ細胞を、ＲＰＭＩ１６４０＋１％ＦＣＳの中で１８時間、３７℃で増殖させ、２×１０５細胞／アッセイ点を、ＤＭＳＯ／試験化合物に２時間、３７℃で曝す。上記細胞を、１３００ｒｐｍで３分間遠心分離し、パラホルムアルデヒド（２％終濃度）中で１５分間３７℃において固定する。遠心分離後、細胞を、９０％メタノール中、４℃で３０分間透過性にする。ＰＢＳ−２％ＦＣＳ中で３回洗浄した後、ＢＤ  ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎフィコエリトリン結合体化マウス免疫グロブリンアイソタイプコントロール（Ｃａｔ．  Ｎｏ．  ５５１４３６）およびＳＴＡＴ５（Ｙ６９４）に対するフィコエリトリン結合体化マウスＩｇＧ１抗体（Ｃａｔ．Ｎｏ．６１２５６７）を使用して、染色を以下のとおり行う。１時間、室温で遮光して染色を行い、続いて、ＰＢＳ−２％ＦＣＳ中で３回洗浄する。次に、上記細胞を、ＦＡＣＳ分析のために８００□Ｌ  ＰＢＳ−ＦＣＳ中で再懸濁させる。フローサイトメトリーを、３種の色および側方散乱能力を有するＢｅｃｋｍａｎ  Ｃｅｌｌ  Ｌａｂ  Ｑｕａｎｔａ  ＳＣ  Ｓｙｓｔｅｍを使用して行う。データ分析を、ＣＸＰ分析ソフトウェア（バージョン２．２）で行う。メジアン蛍光強度（ＭＦＩ）使用して、リン特異的抗体蛍光チャネル（ＦＬ２）に関するＭＦＩ刺激／ＭＦＩ非刺激比として計算される、特異的インヒビター化合物での細胞処理の際の倍数変化を決定する。
【０３２１】
（実施例１５−ウェスタンブロット）
（実験１）
（方法論）
マウスプロＢ細胞系ＢａＦ３を、１０％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地中で慣用的に維持する。実験の日に、細胞をＰＢＳ中で２回洗浄し、０．１％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地中に再懸濁させる。血清除去の２時間後、細胞を、所望の濃度の化合物３、コントロール化合物、もしくはビヒクル単独（ＤＭＳＯ）で、さらに２時間処理する。次いで、マウスＩＬ−３を、終濃度５ｎｇ／ｍｌで１５分間、細胞に添加する。次いで、細胞を氷上に置き、氷冷ＰＢＳ中で２回洗浄する。洗浄した細胞ペレットを、液体窒素中で急速凍結し、−８０℃で貯蔵する。
【０３２２】
細胞ペレットを、ＲＩＰＡ緩衝液中で、氷上で溶解させ、溶解物を遠心分離によって清澄にする（２０，０００×ｇ，４℃，５分）。溶解物のタンパク質濃度をＢｒａｄｆｏｒｄ法によって決定し、等量のタンパク質（６０μｇ／レーン）を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離する。次いで、タンパク質をＰＶＤＦに転写し、チロシン６９４でリン酸化したＳＴＡＴ５を特異的に認識する抗体を使用して、ウェスタンブロットを行う。次いで、上記膜をストリップにし、総ＳＴＡＴ５タンパク質を認識する抗体で再プローブする。
【０３２３】
（実験２）
（方法論）
ヒト赤白血病細胞系ＨＥＬ  ９２．１．７を、１０％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地中で慣用的に維持する。実験前日に、細胞をＰＢＳ中で２回洗浄し、１％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地中に再懸濁させ、一晩培養する。
【０３２４】
翌日、細胞を、所望の濃度の化合物３、コントロール化合物、もしくはビヒクル単独（ＤＭＳＯ）で、２時間処理する。次いで、細胞を氷上に置き、氷冷ＰＢＳ中で２回洗浄する。洗浄した細胞ペレットを、液体窒素中で急速凍結し、−８０℃で貯蔵する。
【０３２５】
細胞ペレットを、氷上で、ＲＩＰＡ緩衝液中で溶解させ、溶解物を遠心分離によって清澄にする（２０，０００×ｇ，４℃，５分）。溶解物のタンパク質濃度をＢｒａｄｆｏｒｄ法によって決定し、等量のタンパク質（６０μｇ／レーン）を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離する。次いで、タンパク質をＰＶＤＦに転写し、チロシン６９４でリン酸化したＳＴＡＴ５を特異的に認識する抗体を使用して、ウェスタンブロットを行う。次いで、上記膜をストリップにし、総ＳＴＡＴ５タンパク質を認識する抗体で再プローブする。
【０３２６】
（実施例１６−さらなる化合物評価）
上記化合物をまた、ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ−陽性骨髄増殖性疾患（ＭＰＤ）のマウスモデルにおいて試験し得る。
【０３２７】
（ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ−陽性ＭＰＤの樹立）
雄性５−フルオロウラシル処置Ｂａｌｂ／ｃマウス由来の骨髄を、ＪＡＫ２−Ｖ６１７Ｆ  −  ＧＦＰレトロウイルスに感染させ得、致死的に照射した雌性レシピエントへと後眼窩に注射し得る。２１日目から、毎日の目視、ＧＦＰ陽性細胞に関して１週間に２回の血球計数＋ＦＡＣＳによってマウスをモニターし得る。ヘマトクリット上昇が２８日目あたりに起こり得、白血球数の上昇が４０日目あたりに起こり得ることが予測される。
【０３２８】
（化合物での処置）
早期介入群：  強制経口投与で与える化合物もしくはキャリアで、２１日目に処置を開始する（各群に１２匹のマウス）。毎日の目視、ＧＦＰ陽性細胞に関して１週間に２回の血球計数＋ＦＡＣＳによってマウスをモニターし得る。６０日目に、最後の薬物投与の８〜１２時間後に動物を屠殺する。瀕死のマウス、または白血球数が２００，０００／ｎｌ超もしくは体重減少が＞２０％であるマウスは、より早期に屠殺し得る。
【０３２９】
後期介入群：  ３匹のマウスの群を、２９日目、３６日目、４３日目、５０日目および５７日目に屠殺し得、骨髄および脾臓を、レチクリン線維症について分析し得る。３／３のマウスで線維症が記録されたら直ぐに、強制経口投与で与えられる化合物もしくはキャリアで、処置を開始し得る。毎日の目視、およびＧＦＰ陽性細胞に関して１週間に２回の血球計数＋ＦＡＣＳによってマウスをモニターし得る。動物を、治療の３０日後に、最後の薬物投与の８〜１２時間後に屠殺し得る。瀕死のマウス、または白血球数が２００，０００／ｎｌ超もしくは体重減少が＞２０％であるマウスは、より早期に屠殺し得る。動物を剖検に供し得る。
【０３３０】
（組織および生存の分析）
肝臓および脾臓の重量を決定し得る。骨髄、肝臓および脾臓の組織切片を、ＨＥ染色によって分析し得る。骨髄および脾臓はまた、銀染色して、レチクリン線維症を評価し得る。脾細胞および骨髄細胞を、ＧＦＰ、系統マーカー、ＪＡＫ２およびＳＴＡＴ５リン酸化について、ＦＡＣＳによって分析し得る。血液を、心臓穿刺によって集め得、薬物濃度測定のために血漿を分離および凍結し得る。群間の生存を、Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｙｅｒ法で比較し得る。
【０３３１】
（ヒト造血細胞のコロニー形成アッセイにおけるＪＡＫ２インヒビターの活性評価）
ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ変異ありもしくはなしのＭＰＤ（主に、骨髄線維症）を有する患者の末梢血単核細胞（各々Ｎ＝１０）および５個の正常コントロールの末梢血単核細胞（商業的供給者）を、密度勾配遠心分離法（Ｆｉｃｏｌｌ）によって単離し得る。ＣＤ３４＋細胞を、市販のキットを使用して選択して、前駆細胞について富化し得る。ＣＤ３４＋細胞を、ウシ胎仔血清およびサイトカイン（±ＥＰＯ）を補充したメチルセルロース中に三連でプレートし得る。上記プレートを２週間インキュベートした後、赤血球および骨髄細胞のコロニー形成を、倒立顕微鏡下で評価し得る。
【０３３２】
（癌）
腫瘍開始、進行および転移に対する上記化合物の効果を、関連するインビボ動物効力モデルにおいて評価し得る。モデルは、ヒト腫瘍細胞系、または好ましくは、原発性もしくは転移性ヒト腫瘍に由来する、免疫不全マウスのヒト腫瘍異種移植片モデルであり得る。他のモデルは、同所部位で増殖させたヒト腫瘍異種移植片、播種性疾患のモデルおよびトランスジェニックモデルもしくは標識腫瘍モデルにおいて増殖させたヒト腫瘍異種移植片であり得る。モデルはまた、原発性腫瘍の外科的切除および転移性疾患の評価を含み得る。
【０３３３】
モデルは、標的化された分子薬物が発現されることを確実にするために選択され得る。ＪＡＫ／ＳＴＡＴ経路の脱調節を示す腫瘍の例としては、前立腺癌、乳癌、結腸癌が挙げられ、白血病、リンパ腫、骨髄腫、卵巣腫瘍、黒色腫、肺癌、神経膠腫、腎細胞腫瘍を含む。
【０３３４】
効力は、腫瘍タイプ（固形、白血病もしくは転移性）に依存して種々の結果によってこれらモデルで測定され得、腫瘍の始まり、腫瘍増殖速度、腫瘍負荷、腫瘍増殖遅延、腫瘍細胞死滅、転移発生率、種々のアプローチ（標識細胞もしくは試薬を含む）による腫瘍および侵襲性／転移の画像化、生存、血管形成、組織病理学の尺度を含み得る。
【０３３５】
上記インビボ動物効力モデルはまた、他の薬物との組合せにおいて上記化合物の相加効果もしくは相乗効果の決定のために使用され得る。
【０３３６】
喘息は、ヒト種に制限されるが、動物モデルは、このヒト疾患の特定の局面を調査するためにしばしば使用される。喘息を有する患者から回収された気管支生検物および気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液は、活性化Ｔ細胞、Ｂ細胞、好酸球および肥満細胞の増大した数を含むことが示された。喘息を有する多くの患者は、１種もしくは複数種の吸入性アレルゲンに感作され、これらに対する特異的免疫グロブリンＥ抗体を有する。アトピーは、喘息の主要な原因と考えられる。アトピーの個体において、アレルゲンの吸入は、Ｔヘルパー２細胞（Ｔｈ２）応答を優先的に誘起する。現在のモデルの大部分において、マウスは、しばしば、Ｔｈ２に傾いたアジュバント（Ｔｈ２  ｓｋｅｗｅｄ  ａｄｊｕｖａｎｔ）（例えば、明礬）といっしょに、オボアルブミン（ＯＶＡ）の腹腔内（ｉｐ）注射によって感作される。喘息の古典的なマウスモデルでは、Ｃ５７／ＢＬ６マウスは、０日目に、１ｍｇの明礬に吸収された１０μｇのＯＶＡのｉｐ注射によって活発に感作される。１４日目から２１日目までに、上記マウスは、３０分間にわたってエアロゾル化ＯＶＡに毎日曝される。２２日目に、気道炎症が明確になる。これら動物から回収されたＢＡＬ液は、単核細胞および好酸球の混合型細胞浸潤からなる細気管支周囲空間の増大を示す。ＯＶＡ特異的ＩｇＥ抗体は、感作した動物の血清中に示され得る。上記単核細胞集団は、サイトカインＩＬ−４およびＩＬ−５を分泌するＴｈ２表現型の細胞から主になる。ＩＬ−４は、Ｂ細胞をＩｇＥ合成に向かわせるアイソタイプ切り替えを促進し、ＩＬ−５は、好酸球の生成、成熟および活性化に影響を及ぼす。
【０３３７】
関節リウマチ（ＲＡ）は、受動的滑膜増殖および炎症細胞の内膜下浸潤によって特徴付けられる、慢性の破壊的炎症性の多発性関節疾患である。原因が解明され続けているものの、一般に、ＲＡが自己免疫疾患であり、関節炎が軟骨特異的自己抗原に対する寛容性を喪失した結果であることは、認識されている。この状況で、１．タイプＩＩコラーゲン誘発性関節炎（ＣＩＡ）および２．グラム陰性細菌（ｇｒａｍ−ｖｅ  ｂａｃｔｅｒｉａ）由来の抗原（ＬＰＳ）と、４種のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）の一団との組合せのような自己抗原によって、ＲＡの誘発を軸に展開する動物モデルが確立された。関節炎の第３のモデルは、主にラットで行われるアジュバント誘発性関節炎（ＡＩＡ）である。ＡＩＡの根底にある機構は、未だ議論の的である。しかし、６５ｋＤのマイコバクテリア熱ショックタンパク質（ｍｙｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｈｅａｔ  ｓｈｏｃｋ  ｐｒｏｔｅｉｎ）は、プロテオグリカンのコアタンパク質分子の中のノナペプチド配列を共有することが示され、ＡＩＡが自己由来抗原によって誘発可能な疾患でもあることを示唆する。
【０３３８】
ＡＩＡにおいて、８週齢のＬｅｗｉｓラットに、１２ｍｇ／ｍｌで流動パラフィン中の熱死滅Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｕｔｙｒｉｃｕｍのエマルジョンとして懸濁させることによって調製した完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）を与える。ＣＦＡ誘発性関節炎は、足蹠もしくは尾の基部いずれかの皮内に５０μｌのＣＦＡエマルジョンを注射することによって刺激され得る。７日目（関節炎の始まり）から、ラットを、０〜４のスケールで臨床的関節炎スコアについて毎日試験する：０，正常；  １，最小限の腫脹；  ２，中程度の腫脹；  ３，重篤な腫脹；  および４，重篤かつ免荷（ｎｏｎ−ｗｅｉｇｈｔ  ｂｅａｒｉｎｇ）。各脚について、前脚中ほど（ｔｈｅ  ｍｉｄ−ｆｏｒｐａｗ）、手関節、指の関節、後ろ脚中ほど（ｍｉｄｆｏｏｔ）、足関節および足趾の関節をスコア付けしたところ、ラット１匹あたり最大４８の臨床スコアが与えられる。上記動物を１７日目に屠殺し、後ろ脚を切断し、７．４％ホルマリン中で固定した。石灰質除去およびパラフィン中に包埋した後、正中矢状面で脚を切片化し、エオシンおよびヘマトキシリンによって染色し、パンヌス形成（軟骨および骨の低下および破壊）、血管分布（ＣＤ３１染色による血管形成）および単核細胞浸潤（Ｔ、Ｂおよびマクロファージ）について検鏡した。
【０３３９】
ＣＩＡにおいて、Ｈ−２ｑ  ＭＨＣハプロタイプを有するＤＢＡ／１マウスを、そのＣＩＡへの罹りやすさから使用する。一般に、異種コラーゲンが同一源のタイプＩＩコラーゲンより免疫原性／関節炎誘発性（ａｒｔｈｉｔｏｇｅｎｉｃ）であることから、それを使用する。上記マウスを、１：１比（終濃度＝２ｍｇ／ｍｌ）のウシタイプＩＩコラーゲンおよび完全フロイントアジュバントからなるエマルジョンで初回刺激する。上記エマルジョン（０．１ｍｌ）を、各マウスの尾部に（基部から約１〜２ｃｍ）注射する。皮膚下への白っぽいボーラスは、目に見えるはずである。タイプＩＩコラーゲンブースター（２００μｇ／マウス）を、２１日目にＰＢＳ中で腹腔内に与える。高ＣＩＡ感受性マウス（ＤＢＡ／１）は、一般に、初回刺激から４〜５週間後に関節炎を発症する。赤く腫脹した足を含む完全に発症した関節炎は、開始後３〜５日間で認められ得、活発な炎症性関節炎が３〜４週間より長く続く。炎症は最終的に静まるにも拘わらず、強直症で認められる程度の関節損傷は不変である。ＣＩＡ症状の評価は、ＡＩＡモデルに本質的に類似しており、ここで臨床徴候は、疾患の重篤度に基づいて臨床スコア（０〜４）に割り当てられる。組織学的測定はまた、ホルマリン固定関節で行われて、びらん（ｅｒｏｓｉｎ）、細胞浸潤および肥厚が評価され得る。
【０３４０】
ＬＰＳ−ｍＡＢ併用誘発性関節炎において、重篤で不変の（ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ）関節炎は、タイプＩＩコラーゲンのＣＢ１１領域の中に位置した８３アミノ酸ペプチドフラグメント内でクラスター化した個々のエピトープを認識するｍＡＢカクテルおよびＬＰＳの組合せによって、マウスで誘発され得る。このモデルを、消化管を通じて吸収される細菌毒素が、ＲＡを引き起こすにあたって、タイプＩＩコラーゲンに対する自己抗体の関節炎誘発性未満のレベルで、相乗効果的かつ病的な役割を果たすという仮説に基づいて開発した。このモデルの利点は、１．同時性を持った関節炎（１００％）が、７日間以内に迅速に誘発されること、２．抗タイプＩＩコラーゲンｍＡＢカクテルの投与が、宿主がタイプＩＩコラーゲンに対する自己抗体を生成する要件を回避し、従って、関節炎がＣＩＡ感受性ＭＨＣハプロタイプを有しないマウスにおいて誘発され得るので、種々のマウス系統が使用され得ること、ならびに３．ｉ．ｖ．経路およびｉ．ｐ．経路のいずれかによるｍＡＢおよびＬＰＳの投与の容易さ、である。
【０３４１】
クローン病（ＣＤ）および潰瘍性大腸炎（ＵＣ）を含む炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、消化管の炎症によって特徴付けられる慢性障害の一群を表す。ＣＤは、消化管のうちのいずれの部分にも影響を及ぼし得るのに対して、ＵＣは、結腸および直腸にのみ影響を及ぼす。ＵＣは、通常はＳ状結腸および直腸に炎症および潰瘍を引き起こす。細胞浸潤は複雑であり、炎症促進性サイトカインは、ＣＤおよびＵＣにおいて明らかである。
【０３４２】
ＵＣの実験モデルは、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｓｐｐ．から単離されたデキストラン硫酸ナトリウム（３％ＤＳＳ）の、飲料水中への投与によって、Ｂａｌｂ／Ｃマウスで確立される。上記実験は、比較的短期間の過程（８日間）を有し、大腸炎の評価に関するパラメーターは、体重減少、糞便の硬さ、直腸出血、結腸の長さの短縮化、陰窩損傷および結腸の環（ｃｏｌｏｎｉｃ  ｒｉｎｇ）のサイトカイン分析を含む。
【０３４３】
ＣＤにおいて、Ｂａｌｂ／Ｃマウスは、０日目に、２×５０μｌのジニトロフルオロベンゼン（ＤＮＦＢ）（５ｍｇ／ｍｌ）で、剃毛した腹部および脚の皮膚上に２日連続で感作させる。ＤＮＦＢは、代表的には、アセトン：オリーブ油（４：１）に溶解する。５日目に、上記マウスに、１０％エタノール中６ｍｇ／ｍｌのジニトロベンゼンスルホン酸（ＤＮＳ）５０μｌを結腸内でチャレンジする。上記マウスを８日目に屠殺する。測定されるパラメーターは、総血球数および細胞型の抑制、血清中の粘膜肥満細胞プロテアーゼ１（ＭＭＣＰ−１）、結腸ホモジネート中のＴＮＦαレベル、糞便の硬さ、血管透過性および結腸斑（ｃｏｌｏｎｉｃ  ｐａｔｃｈ）の数を含む。結腸損傷および死亡インフラックスを示す好中球および肥満細胞の数はまた、組織学的および顕微鏡検査によって評価される。
【０３４４】
（実施例１７−ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ陽性患者由来の細胞でのエキソビボ分析）
ＪＡＫ２の低分子インヒビターの活性を評価するために、下流タンパク質ＳＴＡＴ５のリン酸化状態を測定することによってＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路の活性を定量するアッセイを開発した。リガンド結合の後、造血サイトカインレセプターは、コンホメーション変化を受けて、会合したＪＡＫ２タンパク質を活性化する。活性化したＪＡＫ２は、次に、細胞内シグナル伝達タンパク質の補充のために、結合部位を形成するレセプターの細胞内部分をリン酸化する。ＳＴＡＴ５は、上記活性化サイトカインレセプター複合体に補充される１つのタンパク質であり、ここで、それはリン酸化され、次に核へと移動して、細胞増殖および分化を媒介する一連の遺伝子の発現を調節する。
【０３４５】
細胞内フローサイトメトリーは、系統特異的造血表面マーカーに対してゲート制御することによって、特定の細胞集団中のチロシンリン酸化ＳＴＡＴ５（ｐＹＳＴＡＴ５）を測定するために使用され得る。これは、ＪＡＫ２  Ｖ６１７Ｆ陽性骨髄増殖性疾患の特に重要なマーカーである。なぜなら、上記変異を含むクローンのみが、骨髄内の全ての造血細胞の変動する割合を形成するからである。赤血球系細胞は、この系統がＰＶにおいて過形成であることから、この研究における検査のために選択された。
【０３４６】
（方法）
骨髄は、ＪＡＫ２  Ｖ６１７Ｆ陽性骨髄増殖性疾患を有する患者の回腸の稜（ｉｌｅａｌ  ｃｒｅｓｔ）から集める。フローサイトメトリーアッセイを、生検手順の日に新鮮な骨髄サンプルで行う。骨髄単核細胞を密度勾配遠心分離によって集め、次いで、０．７５〜１．０×１０６細胞を、種々の濃度の試験化合物とともに３７℃で１時間、インジケーターなしのＲＰＭＩ中でインキュベートした。細胞を、エリスロポエチンで１０分間最大限刺激し、次いで、４％ホルムアルデヒドを培養培地に直接添加することによって固定する。次いで、細胞を、冷メタノールによって透過性にし、次いで、至適濃度の蛍光標識抗体を添加する。赤血球系細胞を、細胞表面タンパク質発現に基づいてｐＹＳＴＡＴ５の測定のために選択する（ＣＤ４５ｌｏ，ＣＤ７１ｈｉ集団）。
【０３４７】
本明細書中で言及される全ての刊行物は、本明細書に参考として援用される。本明細書中に含めた文書、行為、資料、デバイス、または論文などの任意の考察は、本発明の前後関係を提供する目的に過ぎない。これら事項のいずれかもしくは全てが先行技術ベースの一部を形成する、または本願の各請求項の優先日前にオーストラリア他で存在するという、本発明に関連する分野の共通する一般的知識であったという自白とみなされるべきでない。
【０３４８】
多くの変化および／もしくは改変が、広く記載された本発明の趣旨もしくは範囲から逸脱することなく、具体的実施形態において示されるように本発明に対して行われ得ることは、当業者によって認識される。従って、本実施形態は、全ての点で例示であって限定ではないとみなされるべきである。
【０３４９】
以下の特許請求の範囲において、および本発明の先の説明において、文言もしくは必要な言外の意味を表すことに起因して状況が別のことを要する場合を除き、語句「含む（包含する）（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、または「含む（包含する）（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含む（包含する）（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」のような変化形は、包括的意味で、すなわち、述べられた特徴の存在を特定するために使用されるが、本発明の種々の実施形態におけるさらなる特徴の存在もしくは付加を排除するために使用されるのではない。
【図１】
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【図２】
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