(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）５〜２５ｍｇ／ｍＬ抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、
ｂ）５０ｍＭショ糖、
ｃ）０．０５ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０、および
ｄ）ｐＨ４．４〜５．２の２．５ｍＭクエン酸バッファー
を含む水溶液を凍結乾燥することによって作製される、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥医薬製剤であって、
該抗体またはその抗原結合断片が
ｉ）配列番号３６の配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号４１の配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号４６の配列を含むＣＤＲＬ３を含む軽鎖、および
ｉｉ）配列番号１９の配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２５の配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号３１の配列を含むＣＤＲＨ３を含む重鎖
を含む、前記凍結乾燥医薬製剤。
【請求項２】
前記抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片が前記水溶液中に２５ｍｇ／ｍＬで存在する、請求項１に記載の凍結乾燥医薬製剤。
【請求項３】
前記水溶液が４．８のｐＨを有する、請求項１に記載の凍結乾燥医薬製剤。
【請求項４】
再構成された場合に
ａ）２５〜１００ｍｇ／ｍＬ抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、
ｂ）２００ｍＭショ糖、
ｃ）０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０、および
ｄ）ｐＨ４．４〜５．２の１０ｍＭクエン酸バッファー
を含む、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥医薬製剤であって、該抗体またはその抗原結合断片が
ｉｉｉ）配列番号３６の配列を含むＣＤＲＬ１、配列番号４１の配列を含むＣＤＲＬ２および配列番号４６の配列を含むCDRL3を含む軽鎖、および
ｉｖ）配列番号１９の配列を含むＣＤＲＨ１、配列番号２５の配列を含むＣＤＲＨ２および配列番号３１の配列を含むＣＤＲＨ３を含む、前記凍結乾燥医薬製剤。
【請求項５】
前記抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片が前記再構成された溶液中に１００ｍｇ／ｍＬで存在する、請求項４に記載の凍結乾燥医薬製剤。
【請求項６】
前記再構成された溶液が４．８のｐＨを有する、請求項４に記載の凍結乾燥医薬製剤。
【請求項７】
ａ）抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、
ｂ）クエン酸ナトリウム、
ｃ）ポリソルベート８０、および
ｄ）ショ糖
を含む、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥製剤であって
該抗体またはその抗原結合断片が
ｉ）配列番号１４を含む軽鎖、および
ｉｉ）配列番号６〜８からなる群から選択される配列を含む重鎖
を含む、前記凍結乾燥製剤。
【請求項８】
再構成された場合に４．４と５．２との間のｐＨを有する、請求項７に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項９】
１００ｍｇ／ｍＬの濃度での前記抗体またはその抗原結合断片の再構成を可能にする、請求項７に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項１０】
ポリソルベート８０が、前記抗体またはその抗原結合断片と比較して０．２％の重量比で存在する、請求項７に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項１１】
ショ糖が、前記抗体またはその抗原結合断片と比較して７０％の重量比で存在する、請求項７に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項１２】
抗体またはその抗原結合断片が、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２およびＣＤＲＬ３を含む軽鎖を含み、ＣＤＲＬ１が配列番号３６の配列を含み、ＣＤＲＬ２が配列番号４１の配列を含み、ＣＤＲＬ３が配列番号４６の配列を含む、請求項１、４または７のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
【請求項１３】
抗体またはその抗原結合断片が、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２およびＣＤＲＨ３を含む重鎖を含み、ＣＤＲＨ１が配列番号１９の配列を含み、ＣＤＲＨ２が配列番号２５の配列を含み、ＣＤＲＨ３が配列番号３１の配列を含む、請求項１、４または７のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
【請求項１４】
抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１４の残基１〜１０８を含む軽鎖可変ドメインを含む、請求項１、４または７のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
【請求項１５】
抗体またはその抗原結合断片が、配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列を含む重鎖可変ドメインを含む、請求項１、４または７のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
【請求項１６】
抗体またはその抗原結合断片が
ｉ）配列番号１４を含む軽鎖、および
ｉｉ）配列番号６〜８からなる群から選択される配列を含む重鎖
を含む、請求項１または４に記載の凍結乾燥製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は一般に、治療用抗体の凍結乾燥製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−２３（ＩＬ−２３）は、ＩＬ−２３に特有のｐ１９およびＩＬ−１２と共有するｐ４０の２つのサブユニットからなるヘテロ二量体サイトカインである。ｐ１９サブユニットは、ＩＬ−６、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）およびＩＬ−１２のｐ３５サブユニットと構造的に関連している。ＩＬ−２３は、ＩＬ−２３ＲおよびＩＬ−１２受容体と共有するＩＬ−１２β１からなるヘテロ二量体受容体に結合することによってシグナル伝達を媒介している。いくつもの初期研究において、ｐ４０における遺伝的欠損（ｐ４０ノックアウトマウス；ｐ４０ＫＯマウス）の結果がｐ３５ＫＯマウスにおいて見出されたものより重症であったことが実証された。これらの結果の一部は、ＩＬ−２３の発見およびｐ４０ＫＯがＩＬ−１２だけでなくＩＬ−２３の発現も抑制するという知見によって最終的に説明された。例えば非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５を参照されたい）。
【０００３】
近年の研究は、ｐ４０ＫＯマウスの使用を通じてＩＬ−２３およびＩＬ−１２の両方の阻害が種々の炎症性および自己免疫性の障害に対する効果的な治療であることを示している。しかしｐ４０によるＩＬ−１２の阻害は、日和見微生物感染への易感受性の増大などの種々の全身性の帰結をもたらすようである。非特許文献６。したがって、ＩＬ−２３のｐ１９サブユニットの特異的阻害は、それがＩＬ−１２の活性を妨げることなくＩＬ−２３の活性を妨げることから、ヒト疾患の治療において好ましい。
【０００４】
治療用抗体は、サイトカイン活性を阻害するために使用されうる。抗体を治療剤としてｉｎ  ｖｉｖｏで使用する場合の重大な制限は、抗体の免疫原性である。ほとんどのモノクローナル抗体は、ヒト種に由来するものではないことから、ヒトでの反復使用により治療用抗体に対する免疫応答が生じる。そのような免疫応答は、最小でも治療効果の減少を、そして潜在的には致命的なアナフィラキシー応答をもたらす。したがって、ヒト被験体の治療には、ヒト化抗体または完全ヒト抗体などの、ヒトにおける免疫原性を低減した抗体が好ましい。ＩＬ−２３ｐ１９に対する例示的な治療用抗体は、特許文献１および特許文献２、特許文献３、特許文献４および特許文献５において開示されており、その開示はその全体が本明細書に参照により組み込まれる。別のヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体が、特許文献６および特許文献７として公開された同一人に譲渡された出願、ならびに同一人に譲渡された特許文献８において開示されており、その開示はその全体が本明細書に参照により組み込まれる。
【０００５】
ヒト被験体において使用される抗体は、使用前に保存しなければならず、投与位置に運ばれなければならない。被験体において所望のレベルの抗体薬に達する再現性は、抗体薬の生物活性を維持する製剤中で抗体薬が保存されることを必要とする。例えば炎症性、自己免疫性および増殖性障害の治療において使用される抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の製剤が必要とされている。好ましくは、そのような製剤は長い半減期を示し、保存および輸送のときに安定であり、例えば皮下投与での使用には高濃度の投与を、例えば静脈内投与には低濃度の投与を可能にする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００７／０００９５２６号明細書
【特許文献２】国際特許公開第２００７／０７６５２４号
【特許文献３】国際特許公開第２００７／０２４８４６号
【特許文献４】国際特許公開第２００７／１４７０１９号
【特許文献５】国際特許公開第２００９／０４３９３３号
【特許文献６】国際特許公開第２００８／１０３４３２号
【特許文献７】国際特許公開第２００８／１０３４７３号
【特許文献８】米国特許出願公開第２００７／００４８３１５号明細書
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｏｐｐｍａｎｎら、（２０００年）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ１３巻：７１５〜７２５頁
【非特許文献２】Ｗｉｅｋｏｗｓｋｉら、（２００１年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６巻：７５６３〜７５７０頁
【非特許文献３】Ｐａｒｈａｍら、（２００２年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８巻：５６９９〜７０８頁
【非特許文献４】Ｆｒｕｃｈｔ（２００２年）Ｓｃｉ  ＳＴＫＥ  ２００２、Ｅ１−Ｅ３
【非特許文献５】Ｅｌｋｉｎｓら、（２００２年）Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ７０巻：１９３６〜１９４８頁
【非特許文献６】Ｂｏｗｍａｎら、（２００６年）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１９巻：２４５頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、結合化合物はヒトまたはヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片と定義される、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する結合化合物の凍結乾燥製剤を提供する。
【０００９】
一実施形態において、凍結乾燥製剤は、ヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体（またはその抗原結合断片）、クエン酸ナトリウム、ポリソルベート８０およびショ糖を含む。種々の実施形態において、水での再構成後の製剤のｐＨは、４．８（±０．４）または４．８（±０．２）、例えば４．６と５．０との間、例えば約４．４、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０または５．２である。他の実施形態においてｐＨは、約５．５である。
【００１０】
いくつかの実施形態において、凍結乾燥製剤は、約２５ｍｇ／ｍＬ以上、約５０ｍｇ／ｍＬ以上、約７５ｍｇ／ｍＬ以上または約１００ｍｇ／ｍＬ以上の濃度での抗体（またはその抗原結合断片）の再構成を可能にする。
【００１１】
一実施形態において、植物（非動物）供給源由来のポリソルベート８０は、抗体（またはその抗原結合断片）に対して約０．２％の重量比で凍結乾燥製剤中に存在する。他の実施形態において、ショ糖は、抗体（またはその抗原結合断片）に対して約７０％の重量比で凍結乾燥製剤中に存在する。さらにまた他の実施形態においてクエン酸ナトリウムバッファーは、抗体（またはその抗原結合断片）に対して約２．４％の全重量比で凍結乾燥製剤中に存在する。
【００１２】
他の実施形態において、本発明の抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥製剤は、５〜２５ｍｇ／ｍＬ抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、約５０ｍＭショ糖、約０．０５ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０および約２．５ｍＭクエン酸バッファーｐＨ４．４〜５．２を含む凍結乾燥前溶液を凍結乾燥することによって作製される。一実施形態において、凍結乾燥前溶液は、抗体またはその抗原結合断片を約２５ｍｇ／ｍＬで含む。一実施形態において、凍結乾燥前溶液は、約ｐＨ４．８である。
【００１３】
さらにまた他の実施形態において、本発明の抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥製剤は、再構成された場合に、２５〜１００ｍｇ／ｍＬ抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、約２００ｍＭショ糖、約０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０、および約１０ｍＭクエン酸バッファーｐＨ４．４〜５．２を含む。一実施形態において、再構成された溶液は、抗体またはその抗原結合断片を約１００ｍｇ／ｍＬで含む。一実施形態において、再構成された溶液は、約ｐＨ４．８である。
【００１４】
なおさらなる実施形態において、凍結乾燥製剤は、ガラスバイアル中で提供される。種々の実施形態において、ガラスバイアルは、１バイアル当たり約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、６７．５、７５、１００、１５０、２００、３００、４００、５００ｍｇまたはそれを超えて含有する。
【００１５】
本発明の凍結乾燥製剤における使用のための例示的結合化合物は、配列番号３２〜４６からなる群から選択される１つ、２つまたは３つのＣＤＲを有する抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合断片を含む。一実施形態において、本発明の結合化合物は、配列番号３２〜３６からなる群から選択されるＣＤＲＬ１、配列番号３７〜４１からなる群から選択されるＣＤＲＬ２および配列番号４２〜４６からなる群から選択されるＣＤＲＬ３を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【００１６】
一実施形態において、本発明の凍結乾燥製剤における使用のための結合化合物は、配列番号１５〜３１からなる群から選択される１つ、２つまたは３つのＣＤＲを有する抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合断片を含む。一実施形態において、本発明の結合化合物は、配列番号１５〜１９からなる群から選択されるＣＤＲＨ１、配列番号２０〜２６からなる群から選択されるＣＤＲＨ２および配列番号２７〜３１からなる群から選択されるＣＤＲＨ３を含む重鎖可変ドメインを含む。
【００１７】
いくつかの実施形態において、軽鎖および／または重鎖可変ドメインは、１つまたは複数のＣＤＲの改変体を含む。種々の実施形態において、改変体ドメインは、それぞれの配列番号の配列と比較して１、２、３、４、５個までまたはそれを超える保存的に改変されたアミノ酸残基を含む。保存的なアミノ酸置換は、表１に提供されている。
【００１８】
いくつかの実施形態において、軽鎖可変ドメインは、配列番号１４の残基１〜１０８またはその改変体を含む。いくつかの実施形態において、重鎖可変ドメインは、配列番号６〜８、すなわち配列番号６、配列番号７または配列番号８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列を含む。種々の実施形態において、改変体可変ドメインは、それぞれの配列番号の配列と比較して１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０もしくは５０個までまたはそれを超える保存的に改変されたアミノ酸残基を含む。まだその上さらなる実施形態において、結合化合物は、本段落に記載の軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインまたはそれらの抗原結合断片を含む。
【００１９】
一実施形態において、結合化合物は、配列番号１４の軽鎖配列および／または配列番号６〜８からなる群から選択される重鎖配列を含む。
【００２０】
他の実施形態において、本発明の結合化合物は、配列番号１４の残基１〜１０８から本質的になる軽鎖可変ドメインもしくはその抗原結合断片および／または、配列番号６、配列番号７もしくは配列番号８のような配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列から本質的になる重鎖可変ドメインもしくはその抗原結合断片を含む。
【００２１】
他の実施形態において、本発明の結合化合物は、配列番号１４の残基１〜１０８に少なくとも７５％、９０％、９５％、９８％もしくは９９％の配列相同性を有する軽鎖可変ドメインもしくはその抗原結合断片および／または、配列番号６、配列番号７もしくは配列番号８のような配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列に少なくとも７５％、９０％、９５％、９８％もしくは９９％の配列相同性を有する重鎖可変ドメインもしくはその抗原結合断片を含む。
【００２２】
いくつかの実施形態において、本発明の結合化合物は、γ１、γ２、γ３もしくはγ４ヒト重鎖定常領域またはそれらの改変体を含む重鎖をさらに含む。種々の実施形態において結合化合物は、ラムダまたはカッパヒト軽鎖定常領域を含む軽鎖を含む。
【００２３】
種々の実施形態において、本発明の結合化合物は、例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２およびダイアボディからなる群から選択される抗体断片である。
【００２４】
他の実施形態において、本発明は、これだけに限らないが炎症性疾患、自己免疫疾患、癌、感染性疾患（例えば慢性感染症を含む細菌性、マイコバクテリア性、ウイルス性もしくは真菌性感染症）、関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、多発性硬化症、ぶどう膜炎、全身性エリテマトーデスおよび糖尿病が挙げられる障害の治療における使用のためのヒトもしくはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体またはそれらの抗原結合断片の凍結乾燥製剤に関する。
【００２５】
本発明は、本明細書において説明する任意の凍結乾燥製剤を含む容器（例えばガラスバイアル）を提供する。本発明は、希釈剤およびヒトもしくはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体またはそれらの抗原結合断片の凍結乾燥製剤を含む注射デバイス（例えば皮下針およびシリンジ、自動注入装置、凍結乾燥カートリッジ）も提供する。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
ａ）抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、
ｂ）クエン酸ナトリウム、
ｃ）ポリソルベート８０、および
ｄ）ショ糖
を含む、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥製剤。
（項目２）
再構成された場合に４．４と５．２との間のｐＨを有する、項目１に記載の凍結乾燥製剤。
（項目３）
前記抗体またはその抗原結合断片の再構成を１００ｍｇ／ｍＬの濃度で可能にする、項目１に記載の凍結乾燥製剤。
（項目４）
ポリソルベート８０が、前記抗体またはその抗原結合断片と比較しておよそ０．２％の重量比で存在する、項目１に記載の凍結乾燥製剤。
（項目５）
ショ糖が、前記抗体またはその抗原結合断片と比較しておよそ７０％の重量比で存在する、項目１に記載の凍結乾燥製剤。
（項目６）
ａ）５〜２５ｍｇ／ｍＬ抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、
ｂ）約５０ｍＭショ糖、
ｃ）約０．０５ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０、および
ｄ）約２．５ｍＭクエン酸バッファーｐＨ４．４〜５．２
を含む水溶液を凍結乾燥することによって作製される、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥医薬製剤。
（項目７）
前記抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片が前記水溶液中に約２５ｍｇ／ｍＬで存在する、項目６に記載の凍結乾燥医薬製剤。
（項目８）
前記水溶液が約４．８のｐＨを有する、項目６に記載の凍結乾燥医薬製剤。
（項目９）
再構成された場合に
ａ）２５〜１００ｍｇ／ｍＬ抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片、
ｂ）約２００ｍＭショ糖、
ｃ）約０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０、および
ｄ）約１０ｍＭクエン酸バッファーｐＨ４．４〜５．２
を含む、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片の凍結乾燥医薬製剤。
（項目１０）
前記抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片が前記再構成溶液中に約１００ｍｇ／ｍＬで存在する、項目９に記載の凍結乾燥医薬製剤。
（項目１１）
前記再構成溶液が約４．８のｐＨを有する、項目９に記載の凍結乾燥医薬製剤。
（項目１２）
抗体またはその抗原結合断片が、配列番号３２〜４６からなる群から選択される３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖を含む、項目１、６または９のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
（項目１３）
抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１５〜３１からなる群から選択される３つのＣＤＲ配列を含む重鎖を含む、項目１、６または９のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
（項目１４）
抗体またはその抗原結合断片が
ｉ）配列番号３２〜４６からなる群から選択される３つのＣＤＲ配列を含む軽鎖、およびｉｉ）配列番号１５〜３１からなる群から選択される３つのＣＤＲ配列を含む重鎖
を含む、項目１、６または９のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
（項目１５）
抗体またはその抗原結合断片が、配列番号１４の残基１〜１０８を含む軽鎖可変ドメインを含む、項目１、６または９のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
（項目１６）
抗体またはその抗原結合断片が、配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列を含む重鎖可変ドメインを含む、項目１、６または９のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
（項目１７）
抗体またはその抗原結合断片が
ｉ）配列番号１４を含む軽鎖、および
ｉｉ）配列番号６〜８からなる群から選択される配列を含む重鎖
を含む、項目１、６または９のいずれかに記載の凍結乾燥製剤。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は、本発明の抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての製造プロセスのフローダイアグラムである。プロセスは下の実施例１でさらに十分に記載される。
【図２】図２は、実施例２でより詳細に論じられる、５℃で保存したｐＨ５．５のヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての安定性データ（１８カ月）を示す表である。
【図３】図３は、実施例２でより詳細に論じられる、２５Ｈで保存したｐＨ５．５のヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての安定性データ（１８カ月）を示す表である。
【図４】図４は、実施例２でより詳細に論じられる、ＲＨ４で保存したｐＨ５．５のヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての安定性データ（９カ月）を示す表である。
【図５】図５は、実施例２でより詳細に論じられる、５℃で保存したｐＨ４．８のヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての安定性データ（１２カ月）を示す表である。
【図６】図６は、実施例２でより詳細に論じられる、２５Ｈで保存したｐＨ４．８のヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての安定性データ（１２カ月）を示す表である。
【図７】図７は、実施例２でより詳細に論じられる、ＲＨ４で保存したｐＨ４．８のヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての安定性データ（３カ月）を示す表である。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
添付の特許請求の範囲を含む本明細書において使用される「ａ」「ａｎ」および「ｔｈｅ」などの語の単数形は、文脈上明らかに他の意味を示す場合を除き、それらの対応する複数形関連事項を含む。下の表６は、本出願において使用する配列識別名の表を提供する。他に記載する場合を除いて、本明細書において言及するタンパク質および被験体は、他の種よりも寧ろヒトのタンパク質および被験体である。
【００２８】
本明細書において引用する全ての参照文献は、それぞれ個々の刊行物、データベース登録（例えばＧｅｎｂａｎｋ配列もしくはＧｅｎｅＩＤ登録）、特許出願または特許が参照により組み込まれると明確にかつ個々に示されたのと同程度に参照により組み込まれる。参照により組み込むこの記述は、出願人により、３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５７（ｂ）（１）に従い、個々の刊行物、データベース登録（例えばＧｅｎｂａｎｋ配列もしくはＧｅｎｅＩＤ登録）、特許出願または特許のそれぞれおよび全てに関することが意図され、その引用が参照により組み込むとの特定の目的の陳述にじかに接していない場合でも、そのそれぞれは３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５７（ｂ）（２）に従って明白に確認される。参照により組み込むという特定の目的の陳述を本明細書中に含ませることは、例えあるとしても、参照により組み込むこの全般的陳述を決して弱めることはない。本明細書における参照文献の引用は、参照文献が関連する先行技術であることの承認を意図せず、これらの刊行物または文書の内容または日付へのいかなる承認をも構成しない。
【００２９】
本発明は、操作された抗ＩＬ−２３抗体の凍結乾燥製剤および炎症性、自己免疫性および増殖性障害を治療するためのそれらの使用を提供する。いくつかの実施形態において本発明の凍結乾燥製剤は、その開示が参照により本明細書に組み込まれる同時係属、同一人に譲渡された国際特許公開第ＷＯ２００８／１０３４３２において開示のヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその結合断片を含む。
【００３０】
Ｉ．定義
「増殖活性」は、例えば正常な細胞分裂ならびに癌、腫瘍、異形成、細胞形質転換、転移および新脈管形成を促進する、それらに必要であるまたはそれらに特異的に関連する活性を包含する。
【００３１】
本明細書において使用する用語「抗体」は、所望の生物学的活性を示す任意の形態の抗体を意味する。したがってそれは最も広い意味で使用され、具体的には、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば二重特異性抗体）、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体などが所望の生物学的活性を示す限り含まれる。
【００３２】
本明細書において使用する用語「ＩＬ−２３ｐ１９結合断片」、「その抗原結合断片」、「その結合断片」または「その断片」は、抗原（ヒトＩＬ−２３ｐ１９）に結合し、その活性を阻害する生物学的活性を依然として実質的に保持している抗体の断片または誘導体を包含する。したがって用語「抗体断片」またはＩＬ−２３ｐ１９結合断片は、全長抗体の一部、一般にその抗原結合領域または可変領域を意味する。抗体断片の例としてＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２およびＦｖ断片、ダイアボディ、線状抗体、一本鎖抗体分子（例えばｓｃ−Ｆｖ）ならびに抗体断片から形成された多重特異性抗体が挙げられる。典型的には結合断片または誘導体は、そのＩＬ−２３ｐ１９阻害活性の少なくとも１０％を保持している。所望の生物学的効果を与えるために十分な親和性を有する任意の結合断片が有用であるが、好ましくは結合断片または誘導体は、そのＩＬ−２３ｐ１９の阻害活性の少なくとも２５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％もしくは１００％（またはそれを超える）を保持している。ＩＬ−２３ｐ１９結合断片は、その生物学的活性を実質的に変化させない保存的アミノ酸置換を有する改変体も含みうることも意図される。
【００３３】
「ドメイン抗体」は、重鎖の可変領域または軽鎖の可変領域だけを含有する免疫学的に機能的な免疫グロブリン断片である。場合によっては、２つ以上のＶＨ領域がペプチドリンカーで共有結合して、二価ドメイン抗体を形成する。二価ドメイン抗体の２つのＶＨ領域は、同じまたは異なる抗原を標的にできる。
【００３４】
「二価抗体」は、２つの抗原結合部位を含む。場合によっては２つの結合部位は、同じ抗原特異性を有する。しかし二価抗体は、二重特異性であることもできる。本明細書において使用する用語「二重特異性抗体」は、少なくとも２つの異なる抗原エピトープ、例えばＩＬ−２３ｐ１９およびＩＬ−１７に対して結合特異性を有する抗体、典型的にはモノクローナル抗体を意味する。一実施形態においてエピトープは、同じ抗原由来である。他の実施形態においてエピトープは、２つの異なる抗原由来である。二重特異性抗体を作製するための方法は、当技術分野において公知である。例えば二重特異性抗体は、２つの免疫グロブリン重鎖／軽鎖対の共発現を使用して組換え的に産生されうる。例えばＭｉｌｓｔｅｉｎら、（１９８３年）Ｎａｔｕｒｅ  ３０５巻：５３７〜３９頁を参照されたい。あるいは、二重特異性抗体は、化学結合を使用して調製されうる。例えばＢｒｅｎｎａｎら、（１９８５年）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９巻：８１頁を参照されたい。二重特異性抗体は、二重特異性抗体断片を含む。例えばＨｏｌｌｉｇｅｒら、（１９９３年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９０巻：６４４４〜４８頁、Ｇｒｕｂｅｒら、（１９９４年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２巻：５３６８頁を参照されたい。
【００３５】
本明細書において使用する用語「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体は、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含む抗体断片を意味し、これらのドメインは、一本鎖ポリペプチドの中に存在する。一般にＦｖポリペプチドは、ｓＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成できるようにするポリペプチドリンカーをＶＨドメインとＶＬドメインとの間にさらに含む。ｓＦｖの概説に関してＰｌｕｃｋｔｈｕｎ（１９９４年）ＴＨＥ  ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＹ  ＯＦ  ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ  ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ、１１３巻、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２６９〜３１５頁を参照されたい。
【００３６】
本明細書におけるモノクローナル抗体は、ラクダ化単一ドメイン抗体も含む。例えばＭｕｙｌｄｅｒｍａｎｓら、（２００１年）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．２６巻：２３０頁、Ｒｅｉｃｈｍａｎｎら、（１９９９年）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１巻：２５頁、ＷＯ９４／０４６７８、ＷＯ９４／２５５９１、米国特許第６，００５，０７９号を参照されたい）。一実施形態において本発明は、単一ドメイン抗体が形成されるような改変を有する２つのＶＨドメインを含む単一ドメイン抗体を提供する。
【００３７】
本明細書において使用する用語「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する小さな抗体断片を意味し、その断片は同じポリペプチド鎖中で軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に連結した重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む（ＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨ）。同じ鎖上の２つのドメイン間を対合させるには短すぎるリンカーを使用することにより、ドメインは他の鎖の相補的ドメインと対合するように仕向けられ、２つの抗原結合部位を生じる。ダイアボディは、例えばＥＰ  ４０４，０９７、ＷＯ９３／１１１６１およびＨｏｌｌｉｇｅｒら、（１９９３年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０巻：６４４４〜６４４８頁においてより詳細に記載されている。操作された抗体改変体の概説に関しては、一般的にＨｏｌｌｉｇｅｒおよびＨｕｄｓｏｎ（２００５年）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３巻：１１２６〜１１３６頁を参照されたい。
【００３８】
本明細書において使用する用語「ヒト化抗体」は、非ヒト（例えばネズミ）抗体およびヒト抗体由来の配列を含む抗体の形態を意味する。そのような抗体は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小限の配列を含有する。一般にヒト化抗体は、超可変ループの全体もしくは実質的に全体が非ヒト免疫グロブリンのものに相当し、かつＦＲ領域の全体または実質的に全体がヒト免疫グロブリン配列のものである少なくとも１つ、そして典型的には２つの可変ドメインの実質的に全体を含む。場合によりヒト化抗体も免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）（典型的にはヒト免疫グロブリンのもの）の少なくとも一部を含む。親げっ歯類抗体（例えばマウス１３Ｂ８またはｍ１３Ｂ８）からヒト化抗体（例えばｈｕｍ１３Ｂ８）を区別する必要がある場合は、接頭語「ｈｕｍ」、「ｈｕ」または「ｈ」が抗体クローン記号表示に加えられる。げっ歯類抗体のヒト化形態は、一般に親げっ歯類抗体と同じＣＤＲ配列を含むが、ヒト化抗体の親和性を増大させるため、ヒト化抗体の安定性を増大させるため、または他の理由により特定のアミノ酸置換が含まれうる。
【００３９】
本発明の抗体は、変更されたエフェクター機能を提供するために改変された（またはブロックされた）Ｆｃ領域を有する抗体も含む。例えば米国特許第５，６２４，８２１号、ＷＯ２００３／０８６３１０、ＷＯ２００５／１２０５７１、ＷＯ２００６／００５７７０２、Ｐｒｅｓｔａ（２００６年）Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．５８巻：６４０〜６５６頁を参照されたい。そのような改変は、診断および治療における有益な効果の可能性を有して免疫系の種々の反応を増強または抑制するために使用されうる。Ｆｃ領域の変更は、アミノ酸変更（置換、欠失および挿入）、グリコシル化または脱グリコシル化ならびに複数のＦｃの付加を含む。Ｆｃへの変更は、治療用抗体における抗体の半減期も変更でき、より長い半減期は、利便性の増大および使用する物質の減少を伴うより少ない頻度での投薬をもたらす。Ｐｒｅｓｔａ（２００５年）Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１６巻：７３１号７３４〜３５頁を参照されたい。
【００４０】
用語「完全ヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリンタンパク質配列だけを含む抗体を意味する。完全ヒト抗体は、マウスにおいて、マウス細胞において、またはマウス細胞由来のハイブリドーマにおいて産生される場合は、マウス糖鎖を含みうる。同様に「マウス抗体」は、マウス免疫グロブリン配列だけを含む抗体を意味する。完全ヒト抗体は、ヒトにおいて、ヒト免疫グロブリン生殖系配列を有する遺伝子導入動物において、ファージディスプレイまたは他の分子生物学的方法によって生成されうる。
【００４１】
本明細書において使用する用語「超可変領域」は、抗原結合に関与している抗体のアミノ酸残基を意味する。超可変領域は、「相補性決定領域」もしくは「ＣＤＲ」（例えば、軽鎖可変ドメインにおける残基２４〜３４（ＣＤＲＬ１）、５０〜５６（ＣＤＲＬ２）および８９〜９７（ＣＤＲＬ３）ならびに重鎖可変ドメインにおける残基３１〜３５（ＣＤＲＨ１）、５０〜６５（ＣＤＲＨ２）および９５〜１０２（ＣＤＲＨ３）（Ｋａｂａｔら、（１９９１年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．）由来のアミノ酸残基および／または「超可変ループ」由来の残基（すなわち、軽鎖可変ドメインにおける残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）および９１〜９６（Ｌ３）ならびに重鎖可変ドメインにおける２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）および９６〜１０１（Ｈ３）（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ（１９８７年）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６巻：９０１〜９１７頁）を含む。本明細書において使用する用語「フレームワーク」残基または「ＦＲ」残基は、本明細書においてＣＤＲ残基と定義した超可変領域残基以外の可変ドメイン残基を意味する。上の残基番号は、Ｋａｂａｔ番号付け系に関連しており、添付の配列表での配列番号に必ずしも詳細には対応していない。
【００４２】
本明細書において使用する「結合化合物」は、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合するヒトもしくはヒト化抗体またはそのような抗体の任意の抗原結合断片もしくは誘導体を意味する。
【００４３】
「保存的に改変された改変体」または「保存的置換」は、当業者に公知であり、一般にポリペプチドの必須の（ｅｓｓｅｎｔｉａｌ）領域においてであっても、得られる分子の生物学的活性を変化させることなく作製されうるアミノ酸の置換を意味する。そのような例示的な置換は、好ましくは以下の表１に記載する置換に従って作製される。
【００４４】
【表１】
0005931442.tif 000002
【００４５】
さらに当業者は、一般にポリペプチドの非必須の領域における単一のアミノ酸置換は生物学的活性を実質的に変化させないことを認識している。例えばＷａｔｓｏｎら、（１９８７年）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇｅｎｅ、Ｔｈｅ  Ｂｅｎｊａｍｉｎ／Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．、２２４頁（第４版）を参照されたい。
【００４６】
明細書および特許請求の範囲の全体において使用される句「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」もしくは「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」などの変形体は、列挙されている任意の要素もしくは要素群を含むことを示し、場合により指定された投与計画、方法もしくは組成物の基本的なもしくは新規の特性を実質的に変化させない、列挙されている要素と同じもしくは異なる性質の他の要素を含むことを示す。非限定的な例として、列挙されているアミノ酸配列から本質的になる結合化合物は、結合化合物の特性に実質的に影響を与えない１つまたは複数のアミノ酸残基の置換を含めた、１つまたは複数のアミノ酸も含みうる。
【００４７】
「免疫異常（ｉｍｍｕｎｅ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）」または「免疫障害」は、例えば病理学的炎症、炎症性障害および自己免疫障害または疾患を包含する。「免疫異常」は、免疫系による根絶に抵抗する感染症、腫瘍および癌を含めた、感染症、持続感染症ならびに癌、腫瘍および新脈管形成などの増殖性の異常も意味する。「癌性状態」は、例えば癌、癌細胞、腫瘍、新脈管形成および異形成などの前癌状態を含む。
【００４８】
「炎症性障害」は、病態が例えば免疫系の細胞の数の変化、遊走率の変化または活性化の変化に全体としてまたは部分的に起因する、障害または病理学的状態を意味する。免疫系の細胞として例えばＴ細胞、Ｂ細胞、単球もしくはマクロファージ、抗原提示細胞（ＡＰＣ）、樹状細胞、マイクログリア、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、好中球、好酸球、マスト細胞または免疫学に具体的に関連する任意の他の細胞、例えばサイトカイン産生内皮細胞もしくは上皮細胞、が挙げられる。
【００４９】
意図する方法の抗体または抗体の抗原結合部位に由来する結合組成物は、無関係の抗原との親和性よりも少なくとも２倍大きい、好ましくは少なくとも１０倍大きい、より好ましくは少なくとも２０倍大きい、そして最も好ましくは少なくとも１００倍大きい親和性を有してその抗原に結合する。好ましい実施形態において抗体は、例えばＳｃａｔｃｈａｒｄ分析によって測定された約１０９リットル／モルよりも大きい親和性を有する。Ｍｕｎｓｅｎら、（１９８０年）Ａｎａｌｙｔ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１０７巻：２２０〜２３９頁。
【００５０】
「再構成された」製剤は、タンパク質が再構成された製剤中で分散するように凍結乾燥タンパク質製剤を希釈剤に溶解することによって調製されるものである。再構成された製剤は投与、例えば非経口投与）に適しており、場合により皮下投与にも適し得る。
【００５１】
「等張」製剤は、ヒト血液と本質的に同じ浸透圧を有する。等張製剤は、一般に浸透圧約２５０〜３５０ｍＯｓｍを有する。等張性は、例えば蒸気圧型または氷凝固型浸透圧計を使用して測定することができる。
【００５２】
ＩＩ．ヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体
本発明の凍結乾燥製剤は、一般に本明細書において開示するものなどのヒトまたはヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体を含む抗体を用いて使用されうる。抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体１３Ｂ８のヒト化形態が提供される。抗体１３Ｂ８を発現しているハイブリドーマは、ブダペスト条約に従ってＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ−Ｍａｎａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａ、ＵＳＡ）に２００６年８月１７日に受託番号ＰＴＡ−７８０３で寄託された。本明細書において開示する他の抗体のヒト化形態は、ヒト化１３Ｂ８抗体について開示されたヒトフレームワークを置換することによって構築されうる。ヒト化抗体１３Ｂ８の一部として本明細書において開示されるヒトフレームワークでの置換は、１３Ｂ８に類似するＣＤＲ配列を有する抗体について最も適している。
【００５３】
配列は、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体ｍ１Ａ１１、ｍ１１Ｃ１、ｍ５Ｆ５、ｍ２１Ｄ１、ｍ１３Ｂ８、ｈ１３Ｂ８ａ、ｈ１３Ｂ８ｂ、およびｈ１３Ｂ８ｃについて提供される。ＣＤＲは、表６に示すとおり個々の配列識別名で提供される。抗体について言及する場合、接頭語「ｍ」はマウス抗体を意味し、「ｈ」はヒト化抗体を意味する。下にさらに詳細に論じるとおり、接尾語「ａ」、「ｂ」および「ｃ」は、ヒト化１３Ｂ８重鎖可変ドメインの配列改変体を意味する。
【００５４】
通常、ヒト化抗ＩＬ−２３抗体のアミノ酸配列改変体は、重鎖または軽鎖のいずれかの元のヒト化抗体アミノ酸配列に少なくとも７５％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも８５％、より好ましくは少なくとも９０％および最も好ましくは少なくとも９５、９８または９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を有する。この配列に関する同一性または相同性は、配列（複数）を整列させ、必要な場合は、ギャップを挿入して、最大の配列同一性百分率を達成した後の、ヒト化抗ＩＬ−２３残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基の百分率として本明細書において定義されるが、配列同一性の要素としてはいかなる保存的置換も考慮しない。抗体配列へのＮ末端、Ｃ末端または内部での伸長、欠失または挿入のどれも配列同一性または相同性に影響しないと解釈されるべきである。
【００５５】
構造−機能データは、以下のとおり本発明の抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体について本明細書において提供される。当業者は、ＣＤＲ配列の変更が抗原結合親和性に最も劇的な効果を有すると予測されることを認識するであろう。Ｍｕｒｐｈｙら、ＪＡＮＥＷＡＹ’Ｓ  ＩＭＭＵＮＯＢＩＯＬＯＧＹ、第７版、２００８年第３章。本発明の抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体についてのＣＤＲ領域は、配列表において提供される。追加的に本明細書において開示される抗体相互での比較は、どの残基が抗原結合に、したがって生物学的活性に最も重要であるかを決定するために使用することができる。加えて本発明は、元のマウスＣＤＲＨ２配列（１３Ｂ８  ＨＣ−ａ）およびその２つの改変体を提供する重鎖改変体１３Ｂ８  ＨＣ−ａ、１３Ｂ８  ＨＣ−ｂおよび１３Ｂ８  ＨＣ−ｃを含む１３Ｂ８抗体についてのいくつかの配列改変体を提供する。表２を参照されたい。
【００５６】
ヒトまたはヒト化抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡおよびＩｇＥを含む任意のクラスの免疫グロブリンから選択されうる。好ましくは抗体はＩｇＧ抗体である。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４を含むＩｇＧの任意のアイソタイプが使用されうる。さまざまな定常ドメインが本明細書において提供されるヒト化ＶＬおよびＶＨ領域に付加されうる。例えば、本発明の抗体（または断片）の特定の意図する使用が、エフェクター機能の変化を必要とすることである場合、ＩｇＧ１以外の重鎖定常ドメインが使用されうる。ＩｇＧ１抗体は、長い半減期および、補体活性化や抗体依存性細胞性細胞傷害などのエフェクター機能を提供するが、そのような活性は、抗体の全ての使用については望ましくない場合がある。そのような場合は、例えばＩｇＧ４定常ドメインが使用されうる。
【００５７】
同様に軽鎖のいずれのクラスも本明細書の組成物および方法において使用されうる。具体的には、カッパ、ラムダまたはその改変体は、本組成物および方法において有用である。
【００５８】
ＣＤＲおよびＦＲ残基は、Ｋａｂａｔの標準的配列定義にしたがって決定される。Ｋａｂａｔら、（１９８７年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ  Ｍｄ．。配列番号１〜５は、種々のマウス抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の重鎖可変ドメイン配列を示し、配列番号９〜１３は軽鎖可変ドメイン配列を示している。図１および２は、本発明の種々の抗体の重鎖および軽鎖可変ドメインの配列構成を提供する。ＣＤＲは、図に示されており、個々のＣＤＲ配列は、表６に示すとおり固有の配列識別名と共にそれぞれ示されている。
【００５９】
抗体１３Ｂ８のヒト化形態が提供される。ヒト化軽鎖１３Ｂ８配列（カッパ定常領域を有する）は、配列番号１４で提供され、軽鎖可変ドメインはその配列の残基１〜１０８を含む。ヒト化重鎖１３Ｂ８配列（γ１定常領域を有する）の３つの変形は、配列番号６〜８で提供され、重鎖可変ドメインはこれらの配列の残基１〜１１６を含む。１３Ｂ８重鎖改変体は、親配列からの相違を太字で記載して表２に例示されている。残基の酸化可能性および抗体の不活性化を回避するためにＭｅｔ（Ｍ）は、Ｌｙｓ（Ｋ）に改変された。ＮＥＭＦＥの代わりにＡＱＫＬＱへの置換は、抗体をヒト化するために選択されたヒトフレームワーク由来のヒト生殖系配列でのマウスＣＤＲ配列の置換である。
【００６０】
【表２】
0005931442.tif 000003
【００６１】
本明細書において開示する他の抗体のヒト化形態は、親げっ歯類抗体ＣＤＲを配列番号１４および６で提供されるヒト化１３Ｂ８についての軽鎖および重鎖配列に単純に置換することによって作製されうる。この手法は、抗体１３Ｂ８のＣＤＲに高い相同性を有するＣＤＲを含む抗体鎖、例えば重鎖でのクローン１１Ｃ１および軽鎖でのクローン１１Ｃ１および２１Ｄ１について最も成功する可能性が高い。あるいは、マウス抗体は、本明細書において、例えば実施例１において概説する手法を使用して独立してヒト化されうる。
【００６２】
一実施形態においてＣＤＲは、本明細書において開示する任意の単一配列ＣＤＲ（配列番号１５〜４６）の改変体を含み、表１のデータを使用して決定されるとおり改変体は、開示された配列と比較して１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個またはそれを超える保存的アミノ酸置換を含む。
【００６３】
重鎖および軽鎖配列（配列番号６〜８および１６）は、シグナル配列を含まずに提供される。例示的重鎖および軽鎖シグナル配列は、配列番号５１および５２においてそれぞれ提供される。シグナル配列またはシグナル配列をコードする核酸配列は、宿主細胞からの分泌のための前駆体タンパク質を作製するためにそれぞれの抗体鎖のＮ末端に付加されうる。代替シグナル配列も使用されることができ、いくつかは「ＳＰｄｂ：ａ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｄａｔａｂａｓｅ」Ｃｈｏｏら、（２００５年）ＢＭＣ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ６巻：２４９頁において見出しうる。
【００６４】
ＩＩＩ．ヒト化抗ＩＬ−２３の生物学的活性
皮膚、関節、ＣＮＳの炎症性疾患および増殖性障害は、類似する免疫応答を誘発し、したがってＩＬ−２３の封鎖は、全身性感染症と闘う宿主の能力を含めることなく、これらの免疫介在性炎症性障害の抑制を提供するはずであろ。ＩＬ−２３に拮抗することは、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、乾癬、強直性脊椎炎およびアトピー性皮膚炎に伴う炎症を軽減するはずであろ。ＩＬ−２３阻害剤の使用は、増殖性障害、例えば癌、および自己免疫障害、例えば多発性硬化症、Ｉ型糖尿病ならびにＳＬＥの抑制も提供する。これらの種々の障害におけるＩＬ−２３の記載は、以下の公開されたＰＣＴ出願：ＷＯ０４／０８１１９０、ＷＯ０４／０７１５１７、ＷＯ００／５３６３１およびＷＯ０１／１８０５１において見出されうる。ＩＬ−２３阻害剤は、細菌性、マイコバクテリア性、ウイルス性および真菌性感染症などの慢性感染症を含む感染症の治療における使用も見出しうる。
【００６５】
本発明の凍結乾燥製剤は、再構成された場合に生物学的に活性である抗体およびその断片を含む。本明細書において使用する用語「生物学的に活性」は、所望の抗原エピトープに結合でき、直接的または間接的に生物学的効果を発揮できる抗体または抗体断片を意味する。典型的にはこれらの効果は、ＩＬ−２３がその受容体へ結合できなくなるから生じる。本明細書において使用する用語「特異的」は、抗体の標的抗原エピトープへの選択的結合を意味する。抗体は結合の特異性について一定条件下でＩＬ−２３への結合と、無関係の抗原または抗原混合物への結合とを比較することによって検査されうる。抗体が無関係の抗原または抗原混合物への結合よりもＩＬ−２３へ少なくとも１０倍、好ましくは５０倍多く結合する場合に、それは特異的であると考えられる。ＩＬ−１２に結合する抗体は、ＩＬ−２３特異的抗体ではない。ＩＬ−２３ｐ１９に「特異的に結合する」抗体は、ＩＬ−２３ｐ１９由来の配列を含まないタンパク質に結合しない、すなわち本明細書において使用する「特異的」はＩＬ−２３ｐ１９特異性に関し、当該タンパク質に存在できるいかなる他の配列にも関しない。例えば本明細書において使用する、ＩＬ−２３ｐ１９に「特異的に結合する」抗体は、典型的には、ＩＬ−２３ｐ１９およびＦＬＡＧ（登録商標）ペプチドタグを含む融合タンパク質であるＦＬＡＧ（登録商標）−ｈＩＬ−２３ｐ１９に結合するが、ＦＬＡＧ（登録商標）ペプチドタグ単独に結合しない、またはそれがＩＬ−２３ｐ１９以外のタンパク質に融合している場合には、結合しない。
【００６６】
阻害性ＩＬ−２３ｐ１９特異的抗体などの本発明のＩＬ−２３特異的結合化合物は、これだけに限らないが、腹腔マクロファージによるＩＬ−１βおよびＴＮＦの産生ならびにＴＨ１７Ｔ細胞によるＩＬ−１７の産生を含む、その生物学的活性を任意の手段で阻害できる。Ｌａｎｇｒｉｓｈら、（２００４年）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２０２巻：９６〜１０５頁を参照されたい。抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＣＣＬ７、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２２、ＣＣＲ１およびＧＭ−ＣＳＦの遺伝子発現を阻害することもできる。Ｌａｎｇｒｉｓｈら、（２００５年）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．２０１巻：２３３〜２４０頁を参照されたい。抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体などの本発明のＩＬ−２３特異的結合化合物は、ＴＨ１７細胞の増殖または生存を増強するＩＬ−２３の能力も封鎖する。Ｃｕａ  ａｎｄ  Ｋａｓｔｅｌｅｉｎ（２００６年）Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７巻：５５７〜５５９頁。操作された抗ＩＬ−２３ｐ１９の阻害活性は、炎症性、自己免疫性および増殖性障害の治療において有用である。そのような障害の例は、ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ０４／０８１１９０、ＷＯ０４／０７１５１７、ＷＯ００／５３６３１およびＷＯ０１／１８０５１に記載されている。
【００６７】
本発明の製剤は、例えば、Ｔｈ−１７介在疾患、自己免疫性もしくは慢性炎症性障害または癌などのＩＬ−２３またはＩＬ−２３ｐ１９の活性の上昇を伴う障害の治療または予防における使用のための、ヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体（またはその抗原結合断片）の保存および輸送のために有用である。
【００６８】
ＩＶ．凍結乾燥医薬組成物
治療用タンパク質の凍結乾燥製剤は、いくつかの有利点を提供する。一般に凍結乾燥製剤は、溶液製剤よりも良好な化学的安定性を示し、それにより増大した半減期を示す。凍結乾燥製剤は、投与または投薬の経路などの臨床的要因に応じてさまざまな濃度で再構成もされうる。例えば凍結乾燥製剤は、皮下投与用に必要な場合は高濃度で（すなわち少容量で）、または静脈内に投与される場合は、低濃度で再構成されうる。特定の被験体に対して多量の投薬が要求される場合に、具体的には、注射容量が最小化されなければならない皮下に投与される場合にも高濃度が必要であり得る。そのような１つの凍結乾燥抗体製剤は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，２６７，９５８号において開示されている。他の治療用タンパク質の凍結乾燥製剤は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，２４７，７０７号において開示されている。
【００６９】
典型的には凍結乾燥製剤は、医薬製品（ＤＰ、この場合はヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体またはその抗原結合断片）の高濃度での再構成を想定して、すなわち少容量の水での再構成を想定して調製される。続く水または等張バッファーでの希釈物は、次いでより低い濃度にＤＰを希釈するために容易に使用されうる。典型的には賦形剤は、例えば皮下投与用に、高ＤＰ濃度で再構成された場合にほぼ等張性の製剤が生じるようなレベルで本発明の凍結乾燥製剤に含まれる。低ＤＰ濃度をもたらすための多容量の水での再構成は、再構成された溶液の張度を必然的に低下させるが、そのような低下は皮下用でない投与、例えば静脈内投与では重要ではない場合がある。低ＤＰ濃度で等張性が望まれる場合は、凍結乾燥粉剤は標準的な少容量の水で再構成され、次いで０．９％塩化ナトリウムなどの等張希釈剤でさらに希釈されうる。
【００７０】
本発明の一実施形態において、ヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体（またはその抗原結合断片）は、皮下または静脈内投与用の凍結乾燥粉剤として製剤化される。そのような製剤の１つは、表３に提供され、実施例１に記載されている。一実施形態において、抗体（またはその抗原結合断片）は、１バイアル当たり約５０ｍｇで提供され、使用前に注射用滅菌水で再構成される。所望により、再構成された抗体は、滅菌ＩＶコンテナ中で水または米国薬局方注射用０．９％塩化ナトリウムで無菌的に希釈されうる。再構成された製剤の標的ｐＨは、４．８±０．４であり、場合により４．８±０．２である。種々の実施形態において、本発明の凍結乾燥製剤は、ヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を、例えば約２０、２５、３０、４０、５０、６０、７５、１００ｍｇ／ｍＬまたはそれを超える高濃度に再構成できる。
【００７１】
本発明は、とりわけ、ヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体、約ｐＨ４．８のまたは約ｐＨ５．５の、例えば約３．５、３．８、４．２、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．２、５．５または５．８、より好ましくは約４．６、４．７、４．８、４．９または５．０のクエン酸バッファーを含む凍結乾燥製剤を提供する。ｐＨ値の範囲が「ｐＨ４．４と５．２との間のｐＨ」などと記載されている場合、範囲は記載されている値の全てを含むことを意図する。他に記載される場合を除いて、ｐＨは、本発明の凍結乾燥製剤の再構成後のｐＨを意味する。ｐＨは、標準的ガラス球ｐＨメーターを使用して２５℃で測定される。本明細書において使用する「ｐＨ  Ｘでのクエン酸バッファー」を含む溶液は、クエン酸バッファーを含むｐＨ  Ｘの溶液を意味する、すなわちｐＨは溶液のｐＨを意味することを意図している。
【００７２】
表３および４（実施例１）の処方は、バイアル中に凍結乾燥される場合、および再構成される場合のバッチ製剤中の成分の重量を表わす。凍結乾燥製剤は、定義により本質的に乾燥しており、したがってそれらの記載において濃度の概念は有用ではない。単位用量バイアル中の成分の重量によって凍結乾燥製剤を記載することはより有用であるが、さまざまな用量またはバイアルの大きさに関して、それが変化することから、不確実である。本発明の凍結乾燥製剤の記載において、同一試料（例えばバイアル）中の原薬（ｄｒｕｇ  ｓｕｂｓｔａｎｃｅ）（ＤＳ）の重量と比較した成分の重量の比として成分の量を表すことは有用である。この比は、百分率としても表されうる。そのような比は、バイアルの大きさ、投与量および再構成手順とは無関係に，本発明の凍結乾燥製剤の内在特性を示す。
【００７３】
他の実施形態において、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体または抗原結合断片の凍結乾燥製剤は、表３に開示する凍結乾燥前溶液などの、凍結乾燥製剤を作製するために使用される凍結乾燥前溶液について定義される。凍結乾燥前溶液は、抗体またはその抗原結合断片を約１、３、５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０ｍｇ／ｍＬまたはそれを超える濃度で含みうる。そのような凍結乾燥前溶液は、ｐＨ４．４〜５．２、例えば約ｐＨ４．８であってよく、または約ｐＨ５．５であってもよい。
【００７４】
さらに他の実施形態において、抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体または抗原結合断片の凍結乾燥製剤は、表４に開示する再構成された溶液などの、凍結乾燥製剤から作製された再構成溶液について定義される。再構成溶液は、抗体またはその抗原結合断片を約１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７５、８０、９０もしくは１００ｍｇ／ｍＬまたはそれを超える濃度で含みうる。そのような再構成溶液は、ｐＨ４．４〜５．２、例えば約ｐＨ４．８であってよく、または約ｐＨ５．５であってもよい。
【００７５】
本発明の凍結乾燥製剤は、凍結乾燥前溶液の凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ）（凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｙｉｎｇ））によって作られる。凍結乾燥は、製剤を凍結することおよび続く一次乾燥に適した温度での水の昇華によって達成される。この条件下では製品温度は製剤の共融点または崩壊温度より低い。典型的には、適切な圧力、典型的には約５０〜２５０ｍＴｏｒｒの範囲で、一次乾燥のための棚温度は約−３０〜２５℃の範囲（製品が一次乾燥中に凍結したままであるとの条件で）である。処方、試料を保持している容器（例えばガラスバイアル）の大きさおよび種類ならびに液体の容量は、数時間から数日間（例えば４０〜６０時間）の範囲でありうる乾燥に必要な時間を規定する（ｄｉｃｔａｔｅ）。２次乾燥段階は、主に容器の種類および大きさならびに使用されるタンパク質の種類に応じて約０〜４０℃で実施されうる。２次乾燥時間は、製品中の所望の残存含湿度によって規定され、典型的には少なくとも約５時間（例えば１０〜１５時間）かかる。典型的には凍結乾燥製剤の含湿度は、約５％より少なく、好ましくは約３％より少ない。圧力は、一次乾燥工程時に使用されたのと同じであってよい。凍結乾燥条件は、処方およびバイアルの大きさに応じて変化しうる。
【００７６】
場合によっては、移す工程を避けるために、タンパク質の再構成が実施される容器中でタンパク質製剤を凍結乾燥することが望ましい場合がある。この場合の容器は、例えば３、５、１０、２０、５０または１００ｃｃバイアルであってよい。
【００７７】
本発明の凍結乾燥製剤は投与の前に再構成される。タンパク質は、約１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７５、８０、９０もしくは１００ｍｇ／ｍＬまたはそれを超える濃度で再構成されうる。高タンパク質濃度は、再構成された製剤の皮下送達が予定されている場合に特に有用である。しかし、静脈内投与などの他の投与経路について、より低いタンパク質濃度が望ましい場合がある（例えば約５〜５０ｍｇ／ｍＬ）。
【００７８】
再構成は一般に、完全な水和を確実にするために約２５℃の温度で行われるが、他の温度も所望により使用されうる。再構成に必要な時間は、例えば希釈剤の種類、（１つまたは複数の）賦形剤の量およびタンパク質に依存する。例示的希釈剤として、滅菌水、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、ｐＨ緩衝溶液（例えばリン酸緩衝食塩水）、滅菌食塩水、リンゲル液またはブドウ糖液が挙げられる。希釈剤は、場合により保存剤を含有する、例示的保存剤は、上に記載されており、ベンジルアルコールまたはフェノールアルコールなどの芳香族アルコールが好ましい保存剤である。使用される保存剤の量は、タンパク質との適合性および保存効果検査に関してさまざまな保存剤濃度を評価することによって決定される。例えば保存剤が芳香族アルコール（例えばベンジルアルコール）である場合、約０．１〜２．０％、好ましくは約０．５〜１．５％、最も好ましくは約１．０〜１．２％の量で存在できる。
【００７９】
薬学的に許容される担体または賦形剤の選択を容易にするために種々の参照文献が利用可能である。例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ａｎｄ  Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（１９８４年）；  Ｈａｒｄｍａｎら、（２００１年）Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；  Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００年）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｉａｍｓ，およびＷｉｌｋｉｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；  Ａｖｉｓら（編）、（１９９３年）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；  Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）、（１９９０年）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：  Ｔａｂｌｅｔｓ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；  Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）、（１９９０年）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：  Ｄｉｓｐｅｒｓｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；  ＷｅｉｎｅｒおよびＫｏｔｋｏｓｋｉｅ（２０００年）Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｓａｆｅｔｙ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ、を参照されたい。
【００８０】
毒性は、ヒトまたはヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体（またはその抗原結合断片）などの治療剤の適正な投与量を選択する際に主に考慮すべき点である。単独で、または免疫抑制剤と組み合わせて投与される、抗体組成物の毒性および治療効果は、例えばＬＤ５０（集団の５０％に致死である投与量）およびＥＤ５０（集団の５０％に治療的に有効である投与量）を決定するための、細胞培養または実験動物における標準的薬学的手順によって決定されうる。毒性作用と治療効果との間の用量比は、治療係数であり、それはＬＤ５０のＥＤ５０に対する比で表されうる。高い治療係数を示す抗体が好ましい。これらの細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータは、ヒトにおける使用のための投与量範囲を処方することに使用されうる。そのような化合物の投与量は、好ましくは毒性を殆ど有さないかまたは全く有さないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内にある。投与量は、使用される剤形および利用される投与経路に応じてこの範囲内で変わりうる。
【００８１】
適切な投与経路は、例えば経口、直腸、経粘膜もしくは腸管内投与；筋肉内、皮内、皮下、髄内注射および髄腔内、直接脳室内、静脈内、腹腔内、鼻腔内もしくは眼内注射を含む非経口送達を含みうる。薬剤は、経口摂取、吸引による経肺、局所適用または皮膚、皮下、腹腔内、非経口、動脈内もしくは静脈内注射などの種々の従来の方法において投与されうる。溶液の容量が制限されなければならない投与の様式（例えば皮下投与）は、凍結乾燥製剤が高濃度での再構成が可能であることを必要とする。
【００８２】
あるいは、抗体を全身的様式ではなく局所に、例えば、関節炎の関節または免疫病理学的に特徴付けられる病原体誘発病変への抗体の直接の注射を介して、しばしばデポー剤または徐放性製剤で投与することもできる。さらに、標的化薬剤送達システムで、例えば関節炎の関節または免疫病理学的に特徴付けられる病原体誘発病変を標的とする、例えば組織特異的抗体でコーティングしたリポソームで、抗体を投与することもできる。リポソームは、罹患している組織を標的とし、罹患している組織に選択的に取り込まれる。
【００８３】
治療剤に対する投与計画の選択は、実体に関する血清または組織の代謝回転速度、症状の程度、実体の免疫原性および生体マトリックスにおける標的細胞の到達性を含むいくつかの要因に依存する。好ましくは投与計画は、許容されるレベルの副作用と両立させて患者へ送達される治療剤の量を最大化する。したがって送達される生物学的薬剤の量は、部分的には具体的な実体および治療される状態の重症度に依存する。抗体、サイトカインおよび小分子の適切な投与量の選択について手引き書が利用可能である。例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ（１９９６年）Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｂｉｏｓ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｕｂ．Ｌｔｄ、Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ、ＵＫ；  Ｋｒｅｓｉｎａ（編）（１９９１年）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ａｎｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；  Ｂａｃｈ（編）（１９９３年）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ；  Ｂａｅｒｔら、（２００３年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８巻：  ６０１〜６０８頁；  Ｍｉｌｇｒｏｍら、（１９９９年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１巻：  １９６６〜１９７３頁：  Ｓｌａｍｏｎら、（２００１年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４巻：  ７８３〜７９２頁；  Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚら、（２０００年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２巻：  ６１３〜６１９頁；  Ｇｈｏｓｈら、（２００３年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８巻：  ２４〜３２頁；  Ｌｉｐｓｋｙら、（２０００年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３巻：  １５９４〜１６０２頁；  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ２００３  （Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  第５７版）、Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ、ＩＳＢＮ：１５６３６３４４５７；  第５７版（２００２年１１月）を参照されたい。
【００８４】
適切な投与量の決定は、臨床医によって例えば、治療に影響することが当技術分野において公知であるもしくは疑われるまたは治療に影響すると予測されるパラメーターまたは因子を使用して行われる。タンパク質の適切な投与量（「治療有効量」）は、例えば治療される状態、状態の重症度および経過、タンパク質が予防目的または治療目的のいずれで投与されるのか、先行する治療、患者の病歴およびタンパク質への応答、使用されるタンパク質の種類ならびに担当医師の判断に依存する。一般に投与量は、最適投与量よりいくぶん少ない量で始め、その後、任意の負の副作用と比較して所望のまたは最適な効果が達成されるまで少量ずつ増加させる。重要な診断測定は、例えば炎症の症状の測定または産生される炎症性サイトカインのレベルの測定を含む。タンパク質は患者に１回または繰り返し適切に投与される。タンパク質は単独でまたは他の薬剤もしくは治療と合わせて投与されうる。
【００８５】
抗体、抗体断片およびサイトカインは、持続的な注入によって、または例えば１日、１週間当たり１〜７回、１週間、２週間、毎月、隔月などの間隔での投薬によって提供されうる。好ましい投薬プロトコルは、顕著な望ましくない副作用を回避する最大投与量または投薬頻度を含むものである。１週間の総投与量は、一般に少なくとも体重１ｋｇ当たり０．０５μｇ、０．２μｇ、０．５μｇ、１μｇ、１０μｇ、１００μｇ、０．２ｍｇ、１．０ｍｇ、２．０ｍｇ、１０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇまたはそれを超える。例えばＹａｎｇら、（２００３年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４９巻；  ４２７〜４３４頁；  Ｈｅｒｏｌｄら、（２００２年）Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４６巻；  １６９２〜１６９８頁；  Ｌｉｕら、（１９９９年）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈ．６７巻；  ４５１〜４５６頁；  Ｐｏｒｔｉｅｌｊｉら、（２０００３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．５２巻；  １３３〜１４４頁を参照されたい。小分子治療剤、例えばペプチド模倣物、天然物または有機化学物質の所望の投与量は、モル／ｋｇに基づいて抗体またはポリペプチドについてとほぼ同じである。
【００８６】
皮下投与は、シリンジを使用する、または他の注射デバイス（例えばＩｎｊｅｃｔ−ｅａｓｅ（登録商標）デバイス）、インジェクターペンまたは無針デバイス（例えばＭｅｄｉＪｅｃｔｏｒおよびＢｉｏｊｅｃｔｏｒ（登録商標））を使用する注射によって実施されうる。
【００８７】
ＶＩＩ．使用
本発明は、例えば中枢神経系、末梢神経系および消化管ならびに自己免疫障害および増殖性障害の、炎症性障害および状態の治療に使用するための抗ＩＬ−２３抗体（およびその断片）の凍結乾燥製剤を提供する。
【００８８】
本発明の凍結乾燥製剤は、例えば多発性硬化症（ＭＳ）（再発寛解型ＭＳおよび一次性進行型ＭＳを含む）、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ａ．ｋ．ａ．ＡＬＳ；ルー・ゲーリック病）、虚血性脳傷害、プリオン病およびＨＩＶ関連認知症ならびに神経因性疼痛、外傷後神経障害、ギラン・バレー症候群（ＧＢＳ）、末梢性多発神経障害ならびに神経再生の治療において使用されうる。
【００８９】
本発明の凍結乾燥製剤は、炎症性腸障害、例えばクローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病および過敏性腸症候群の治療においても使用されうる。それらは、乾癬、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、変形性関節炎および乾癬性関節炎を含む関節炎、全身性エリトマトーデスおよびＩ型糖尿病などの自己免疫障害ならびに癌などの増殖性障害などの炎症性障害の治療においても使用されうる。例えば、ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ０４／０８１１９０、ＷＯ０４／０７１５１７、ＷＯ００／５３６３１およびＷＯ０１／１８０５１を参照されたい。
【００９０】
広範にわたる本発明は、具体的な実施形態に本発明を限定することを意図しない以下の実施例を参照して最も理解される。本明細書において記載される具体的な実施形態は、例示の目的でのみ提供され、本発明は、添付の特許請求の範囲の条件によって、その特許請求の範囲が権利を与えられたものの均等物の全ての範囲と共に定義される。
【実施例】
【００９１】
（実施例１）
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤
ヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤は、以下のとおり調製される。ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体についてのバッチ処方は表３に提供されている。ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の最終濃度は２５ｍｇ／ｍＬである。このバッチ製剤は、以下の表４を参照して論じたとおり１バイアル当たり５０ｍｇ単位の凍結乾燥物を調製するために使用されうる。植物原料由来のポリソルベート８０が使用される。追加的クエン酸または水酸化ナトリウムは、ｐＨをおよそ４．８（±０．２）の所望の値に調整するために添加されうる。４．８のｐＨは、抗体がｐＨ５．５〜５．６のクエン酸バッファーから再構成される際の乳光を減少させるために使用される。成分は、注射用滅菌水（ＷＦＩ）で最終容量４０Ｌにされる。それに対応してより小さなロットも、当然ながら、表３に列挙する量を比例的に減少させて調製されうる。
【００９２】
【表３】
0005931442.tif 000004
【００９３】
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９の最終凍結乾燥製剤の単位組成を表４に提供する。
【００９４】
【表４】
0005931442.tif 000005
【００９５】
表４の単位製剤は、水を除去するための凍結乾燥後に、表３のバッチ製剤の１／２００００を含む。ＤＳ  ５０ｍｇは、表３のバッチ製剤２５ｍｇ／ｍＬの２．０ｍＬとして添加され、滅菌ＷＦＩでの、最終容量０．５ｍＬへの再構成により４倍に濃縮される。したがって、初期の２．５ｍＭクエン酸バッファーは、再構成溶液において約１０ｍＭクエン酸バッファーに濃縮され、ショ糖は約５０ｍＭから約２００ｍＭに濃縮される。ＷＦＩ  ０．５ｍＬおよび追加量の０．９％塩化ナトリウムまたはＷＦＩなどのより多容量の液体での再構成によって、より低い最終濃度を得ることもできる。
【００９６】
表示量と一致する送達を確実にするために、製品バイアルは、再構成溶液の回収の間にバイアル中およびシリンジ中に残存する可能性がある残存製品溶液を補うために適正容量の過充填を含ませることができる。例えば公称２．０ｍＬ（５０ｍｇ）の充填は、２．７ｍＬ（６７．５ｍｇ）の過充填まで増量されてもよい。そのような過充填の場合には、当然最終単位組成物は、表４に列挙する各成分の量よりも比例的により多くを含んでいる。公称２．０ｍＬバイアルに対して２．７ｍＬの充填の場合は、表５に例示するとおり、各成分の量は表４に示すものよりも３５％高くなる。２．７ｍＬの過充填に対して、水０．５６ｍＬを用いて最終容量０．６７５ｍＬとし、最終濃度１００ｍｇ／ｍＬへ再構成する。再構成後の最終濃度は、当然、表４においてと同じになる。
【００９７】
【表５】
0005931442.tif 000006
【００９８】
薬剤は、１３ｍｍ灰色ブチルゴム栓で閉じ、ポリプロピレンボンネットを有するアルミニウム圧着シールで封をした滅菌１３ｍｍネック、５ｍＬ、１型管状ガラスバイアルに（ｔｕｂｉｎｇ  ｇｌａｓｓ  ｖｉａｌ）包装される。バイアルは、２〜８℃で保存され、輸送する場合は冷蔵される。
【００９９】
図１は、例えば５０ｍｇ単位用量バイアルへの、本発明のヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤についての製造工程のフローダイアグラムである。
【０１００】
調合は、以下の工程を含む。必要量の注射用水（ＷＦＩ）を風袋を量った調合用容器に入れる。ショ糖、クエン酸三ナトリウム二水和物、クエン酸および植物原料由来ポリソルベート８０を入れ、混合して溶解する。ｐＨを測定する。原薬を周囲温度に平衡化させ、原薬を調合容器にゆっくり入れる。泡立ちを避けるため穏やかに混合を続ける。再度ｐＨを測定し、必要な場合はｐＨをおよそ４．８に調整する。穏やかに混合を続けながらバルク溶液の最終重量までＷＦＩを入れる。
【０１０１】
濾過は、以下の工程を含む。滅菌フィルター（０．２２μｍ）を滅菌受入容器に接続する。滅菌濾過の前に、生物汚染度検査のために一定分量のバルク溶液を回収する。０．２２μｍフィルターを使用する滅菌容器への無菌的濾過を実施する。製品の濾過の前後にフィルター完全性検査を実施する。
【０１０２】
充填は、以下の工程を含む。適切な充填装置を使用し、製品溶液を滅菌Ｉ型管状ガラスバイアルに目的充填容量２．７ｍｌに達するように無菌的に充填する。充填中に充填重量検査を実施する。充填開始時の適切な数のバイアルを除き、バルクの滅菌性および内毒素検査のためにその溶液をプールする。滅菌した凍結乾燥用形状（ｌｙｏ−ｓｈａｐｅ）栓をｍ充填したバイアルに部分的に置く。充填したバイアルを適切な凍結乾燥機に入れる。
【０１０３】
凍結乾燥、密栓および蓋付けは、以下の工程を含む。適切な凍結乾燥サイクルを使用して、充填したバイアルを凍結乾燥する。凍結乾燥が完了した後、０．２２μｍで濾過した窒素をバイアルに戻し、完全に栓をする。栓をしたバイアルを凍結乾燥機から出し、それらに封をする。
【０１０４】
得られたバイアルは、視覚的な不備について検査され、２〜８℃で保存される。完成した単位剤形のバイアルは、冷蔵状態で輸送される。
【０１０５】
（実施例２）
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤の安定性検査
図２〜７は、種々の保存条件下でのヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の凍結乾燥製剤の安定性検査の結果を提供する。いくつかのバイアルを、図に示すとおり、直立および倒立の両方の配置で保存した。下により詳細に論じるとおり、図２〜４は、ｐＨ５．５（クエン酸バッファー）で凍結乾燥した抗体について少なくとも１８カ月間の安定性を示しており、図５〜７は、ｐＨ４．８（クエン酸バッファー）で凍結乾燥した抗体について少なくとも１２カ月間の安定性を示している、ここで１８カ月間および１２カ月間は、実験的に決定された安定性の終点ではなく示された最も長い時点である。
【０１０６】
安定性は、以下のとおり評価された。試料は、５ｍＬ  Ｉ型ガラスバイアル中に凍結乾燥し、１３ｍｍブロモブチルｌｙｏ栓（Ｈｅｌｖｏｅｔ  Ｒｕｂｂｅｒ  ＆  Ｐｌａｓｔｉｃ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＢＶ、Ｈｅｌｌｅｖｏｅｔｓｌｕｉｓ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）およびフリップオフアルミシールで封をした。Ｂ２コート１３ｍｍ灰色ブチルｌｙｏ栓（Ｗｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｌｉｏｎｖｉｌｌｅ、Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ、ＵＳＡ）も使用できる。バイアルは、以下の保存条件下で安定性観察位置に置いた：５Ｃ（５±３℃）、２５Ｈ（２５、６０％相対湿度）、またはＲＨ４（４０℃、７０％相対湿度）。試料は、図に示すとおり開始時点、および０．５、１、２、３、６、９，１２または１８カ月で得た。
【０１０７】
試料の安定性は、図２〜７に表すとおりの種々の特徴によって例示されている。凍結乾燥試料は、目視検査し、再構成し、かつ再構成された製剤を目視検査した。再構成後の試料のｐＨを測定し、タンパク質濃度をＵ．Ｖ．吸光度によって測定した。次いで試料を変性ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）によって不純物の程度（すなわち主要な製品バンド以外の物質）について分析し、各レーンにおける合計強度の百分率として表した。試料の純度は、単量体の百分率および高分子量種（凝集している可能性がある）および遅延溶出ピーク（分解産物の可能性がある）の百分率が測定された高性能サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）によってさらに評価した。
【０１０８】
追加的な試料の特徴付けデータとしては、酸性または塩基性改変体の存在を明らかにすることにより純度を評価するために使用される高性能イオン交換クロマトグラフィー（ＨＰ−ＩＥＸ）が含まれる。結果は、観察された全ての物質の百分率として示される。試料は、ヒトＩＬ−２３ｐ１９への結合についての酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）を使用して、生物学的機能についてさらに特徴付けられた。結果は、試料についてのＥＣ５０として、すなわち最大半量の結合を達成するために必要な濃度として表される。結果は、試料についてのＥＣ５０の、同じ抗体の対照調製物についてのＥＣ５０に対する比の１００倍として算出される、対照と比較する力価百分率としても提供される。凍結乾燥粉剤の含湿度も測定した。
【０１０９】
図２、３および４のデータは、ｐＨ５．５の試料を５Ｃ、２５ＨおよびＲＨ４のそれぞれで保存した場合に得られた。図５、６および７におけるデータは、ｐＨ４．８の試料を５Ｃ、２５ＨおよびＲＨ４のそれぞれで保存した場合に得られた。
【０１１０】
結果は、全体として、ｐＨ５．５および４．８の両方での１、３、６、９、１２および１８カ月間にわたる本発明の凍結乾燥製剤の高い安定性を実証している。データは、冷蔵保存条件での試料について不安定性をもたらす経時的傾向を示さないことを明らかにした。これらの結果に基づいて試料は、少なくとも２４カ月の貯蔵寿命を有すると予測される。
【０１１１】
表６は、配列表における配列の簡潔な記述を提供する。
【０１１２】
【表６−１】
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【０１１３】
【表６−２】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【配列表】
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