(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
二価金属カチオン塩および一価塩を含む吸入に適する乾燥粒子を含む吸入に適する乾燥粉末であって、前記吸入に適する乾燥粒子は、非晶質二価金属カチオン相および結晶性一価塩相を含む、吸入に適する乾燥粉末。
【請求項２】
前記非晶質二価金属カチオン相のガラス転移温度は、少なくとも１００℃である、請求項１に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項３】
前記非晶質二価金属カチオン相は、賦形剤をさらに含む、請求項１または２に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項４】
前記賦形剤は、ロイシン、マルトデキストリン、マンニトール、またはそれらの組み合わせである、請求項３に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項５】
前記吸入に適する乾燥粉末は、１．５以下の１／４バールまたは０．５／４バールを有する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項６】
前記吸入に適する乾燥粉末は、５ミクロン以下のＭＭＡＤを有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項７】
前記吸入に適する乾燥粉末は、０．５〜５ミクロンのＶＭＧＤを有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項８】
前記吸入に適する乾燥粉末は、−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜１０ｋｃａｌ／ｍｏｌの溶解熱を有する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項９】
二価金属カチオンは、前記吸入に適する乾燥粉末の少なくとも５重量％で存在する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項１０】
前記二価金属カチオン塩は、カルシウム塩である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項１１】
前記カルシウム塩は、クエン酸カルシウム、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、塩化カルシウム、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項１０に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項１２】
前記一価塩は、ナトリウム塩である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項１３】
前記ナトリウム塩は、塩化ナトリウムである、請求項１２に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項１４】
前記二価金属カチオン塩は、マグネシウム塩である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【請求項１５】
前記吸入に適する乾燥粉末は、０．４ｇ／ｃｍ３（ｃｃ）を超えるタップ密度を有する、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肺疾患を治療するための乾燥粉末製剤および方法に関する。
【０００２】
関連出願
【０００３】
本出願は、２０１０年２月１８日に出願された米国仮出願第６１／３０５，８１９号、２０１０年１月２５日に出願された米国仮出願第６１／２９８，０９２号、２００９年１２月８日に出願された米国仮出願第６１／２６７，７４７号、２００９年１０月２８日に出願された米国仮出願第６１／２５５，７６４号、２００９年３月２６日に出願された米国仮出願第６１／１６３，７７２号、２００９年３月２６日に出願された米国仮出願第６１／１６３，７６７号、および２００９年３月２６日に出願された米国仮出願第６１／１６３，７６３号の利益を主張する。前述の出願の各全体の内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００４】
治療薬の肺送達は、他の送達方法に優るいくつもの利点を提供することができる。これらの利点には、迅速な発現、患者の自己投与の利便性、薬物の副作用の低減の可能性、吸入による送達の容易さ、注射針の排除等が挙げられる。吸入療法は、入院患者または外来患者環境において使い易い薬物送達システムを提供することができ、薬物作用の非常に迅速な発現をもたらし、かつ最小限の副作用を引き起こす。
【０００５】
定量吸入器（ＭＤＩ）は、気道に治療薬を送達するために使用される。ＭＤＩは、加圧下で、揮発性液体中で固体の吸入に適する乾燥粒子に製剤化することができる治療薬を投与するのに概して好適である。弁の開口部は、比較的速い速度で懸濁液を放出する。次に、液体は揮発して、治療薬を含有する乾燥粒子高速エアロゾルを残す。ＭＤＩは、呼吸器疾患の治療において、中程度の大きさの気道のみへの薬物送達に信頼性がある。しかしながら、しばしば喘息ならびに感染等の肺疾患の兆候部位は、小さい大きさの気道（すなわち、細気管支および肺胞）である。
【０００６】
液体エアロゾル送達は、肺の薬物送達の最も古い形態の１つである。典型的には、液体エアロゾルは、速い速度で小さいオリフィスから圧縮空気を放出する空気ジェット噴霧器によって作成され、ベルヌーイ効果により、出口領域で低圧をもたらす。例えば、特許文献１を参照されたい。低圧は、エアロゾル化される流体を第２の管から引き出すために使用される。この流体は、気流で加速する時に、小さい液滴に分かれる。この標準の噴霧器設計の不利点には、吸入に適する大きさの二次的スプラッシュ液滴を生み出すために、バッフル上への一次液滴の衝突をしばしば必要とする比較的大きい初期の液体エアロゾル液滴の大きさ、液体エアロゾル液滴の大きさの均一性の欠如、大量の薬液の著しい再循環、および吸入空気中の小さい吸入に適する液体エアロゾル液滴の低密度が挙げられる。
【０００７】
超音波噴霧器は、液体貯蔵所の表面を共鳴させるために液体貯蔵所の下位に浸された平面または凹面の圧電円板を使用し、その表面からエアロゾル粒子を噴出させる液体円錐体を形成する（特許文献２および特許文献３）。エアロゾル化過程では気流を必要としないため、高いエアロゾル濃度が達成され得るが、しかしながら、圧電部品は、産生するのに比較的高価であり、かつ懸濁液をエアロゾル化するのに非効率的であり、活性薬物が水または生理食塩水溶液中に低濃度で溶解されることを必要とする。最新の液体エアロゾル科学技術は、エアロゾル化される液体をミクロンの大きさの穴に通過させることによって、より小さく、かつより均一の液体の吸入に適する乾燥粒子を生み出すことを含む。例えば、特許文献４、特許文献５、ならびに特許文献６を参照されたい。この技法の不利点には、比較的高価な圧電および微細なメッシュ部品、ならびに残留塩および固体懸濁液による穴部の汚れが挙げられる。
【０００８】
乾燥粉末吸入は、吸入されるのに十分小さいが、それ自身で分散するには十分ではない粒子の投与を可能にするために、歴史上ラクトースブレンディングに依存してきた。この過程は、非効率的であり、かついくつかの薬物に有効ではないことが知られている。いくつかのグループは、吸入および分散可能であり、ひいてはラクトースブレンディングを必要としない乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）製剤を開発することによって、これらの欠点を改善するよう試みている。吸入療法のための乾燥粉末製剤は、Ｓｕｔｔｏｎらの特許文献７、Ｐｌａｔｚらの特許文献８、Ｒｏｂｉｎｓｏｎらの特許文献９、Ｔａｒａｒａらの特許文献１０、Ｂｏｔらの特許文献１１、Ｈａｎｅｓらの特許文献１２、ならびにＥｄｗａｒｄｓらの特許文献１３および特許文献１４に記載されている。
【０００９】
乾燥粉末吸入送達の広範な臨床適用は、適切な粒径、粒子密度、および分散性の乾燥粉末を生み出すこと、乾燥した状態で乾燥粉末を保管すること、ならびに吸入される吸入に適する乾燥粒子を空中に効率的に分散する便利で携帯型のデバイスを開発することの困難により限定されてきた。さらに、吸入送達のための乾燥粉末の粒径は、より小さい吸入に適する乾燥粒子を空中に分散させるのがより困難であるという事実によって本質的に限定されている。乾燥粉末製剤は、厄介な液体剤形ならびに噴射剤駆動型製剤に優る利点を提供する一方で、乾燥粉末に基づく吸入療法の分散性および効率性を大幅に低下させる凝集ならびに低流動性の傾向がある。例えば、粒子間ファンデルワールス相互作用ならびに毛管凝縮効果は、乾燥粒子の凝集に寄与することで知られている。非特許文献１。
【００１０】
粒子間の接着力に打ち勝つために、特許文献１５のＢａｔｙｃｋｙらは、ＨＥＬＯＳ（Ｓｙｍｐａｔｅｃ製、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）等のレーザー回折器具を用いて測定する時に、５ミクロン（μｍ）より大きい幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）を有する、いわゆる「空気力学的に軽い吸入に適する粒子」の産生を教授した。Ｂａｔｙｃｋｙらの７列目４２〜６５行目を参照されたい。１０μｍ未満の平均粒径の吸入に適する粒子の分散性を改善するための別の取り組みは、全組成物の５０％〜９９．９重量％の量の水溶性ポリペプチドの添加または好適な賦形剤（ロイシン等のアミノ酸賦形剤を含む）の添加を含む。Ｅｌｊａｍａｌらの特許文献１６、４列目１２〜１９行目および５列目５５行目〜６列目３１行目。しかしながら、この取り組みは、固定量の粉末を用いて送達され得る活性薬剤の量を低減させる。したがって、増加量の乾燥粉末が、所望の治療結果を達成するために必要とされ、例えば、複数回の吸入および／または頻繁な投与が必要とされ得る。さらに他の取り組みは、投与中または投与直前に粒子間接着を妨害するために、圧縮ガスによる圧力等の機械力を小さい粒子に印加するデバイスの使用を含む。例えば、Ｌｅｗｉｓらの特許文献１７、Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎらの特許文献１８、Ａｓｈｕｒｓｔらの特許文献１９、またはＪｏｈｎｓｔｏｎらの特許文献２０を参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第５，５１１，７２６号
【特許文献２】米国第２００６／０２４９１４４号
【特許文献３】米国第５，５５１，４１６号
【特許文献４】米国特許第６，１３１，５７０号
【特許文献５】米国特許第５，７２４，９５７号
【特許文献６】米国特許第６，０９８，６２０号
【特許文献７】米国特許第５，９９３，８０５号
【特許文献８】米国特許第６，９２１６５２７号
【特許文献９】ＷＯ００００１７６号
【特許文献１０】ＷＯ９９１６４１９号
【特許文献１１】ＷＯ００００２１５号
【特許文献１２】米国特許第５，８５５，９１３号
【特許文献１３】米国特許第６，１３６，２９５号
【特許文献１４】米国特許第５，８７４，０６４号
【特許文献１５】米国特許第７，１８２，９６１号
【特許文献１６】米国特許第６，５８２，７２９号
【特許文献１７】米国特許第７，６０１，３３６号
【特許文献１８】米国特許第６，７３７，０４４号
【特許文献１９】米国特許第６，５４６，９２８号
【特許文献２０】米国特許出願第２００９０２０８５８２号
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｈｉｃｋｅｙ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，「Ｆａｃｔｏｒｓ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｒｙ  Ｐｏｗｄｅｒｓ  ａｓ  Ａｅｒｏｓｏｌｓ」，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ａｕｇｕｓｔ，１９９４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
上の方法の各々によって共有されるさらなる制限は、産生されるエアロゾルには、典型的には、相当量の不活性担体、溶媒、乳化剤、噴射剤、および他の非薬物物質が含まれることである。概して、大量の非薬物物質が、肺胞送達に十分に小さい吸入に適する乾燥粒子（例えば、５ミクロン未満、および好ましくは、３ミクロン未満）の効率的形成に必要である。しかしながら、これらの量の非薬物物質は、送達され得る活性薬物物質の純度および量を減らす働きもする。したがって、これらの方法は、全身送達において、大量の活性薬物投薬量を患者に正確に導入することが実質上できないままである。
【００１４】
したがって、極めて分散可能である小粒径エアロゾルの形成の必要性が未だ存在する。さらに、より大量の薬物およびより少量の非薬物物質を含むエアロゾルを産生する方法が必要とされている。最後に、１回または２回の少量の呼吸で、患者に迅速に単位投薬量を投与するのを可能にする方法が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、活性成分としてのカルシウム（Ｃａ２＋）等の１つ以上の二価金属カチオンを含有する乾燥粒子から成る吸入に適する乾燥粉末、および吸入に適する粒子を含有する乾燥粉末に関する。本発明は、１つ以上の一価カチオン（Ｎａ＋等）を含有する吸入に適する乾燥粒子、および吸入に適する粒子を含有する乾燥粉末にも関する。活性成分（例えば、カルシウムイオン）は、概して、１つ以上の塩の形態で、乾燥粉末ならびに乾燥粒子中に存在し、独立して、結晶性、非晶質、または結晶性および非晶質の組み合わせであり得る。乾燥粉末および乾燥粒子は、任意で、追加の一価塩（例えば、ナトリウム塩）、治療的に活性な薬剤、または薬学的に許容される賦形剤を含み得る。一態様では、吸入に適する乾燥粒子は小さく、かつ極めて分散可能であり得る。別の態様では、吸入に適する乾燥粒子は、大きいか、または小さく、例えば、０．５ミクロン〜３０ミクロンの幾何学径（ＶＭＧＤ）であり得る。任意で、粒子のＭＭＡＤは、０．５〜１０ミクロン、より好ましくは、１〜５ミクロンであり得る。
【００１６】
いくつかの態様では、吸入に適する乾燥粉末は、約１０ミクロン以下の幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）およびレーザー回折（ＲＯＤＯＳ／ＨＥＬＯＳシステム）で測定される時に、約２未満の分散性比率［１バールの分散圧で測定されるＶＭＧＤの４バールで測定されるＶＭＧＤに対する比率］（１／４バール）を有し、かつカルシウム塩を含有し、乾燥粉末の約５重量％以上の量の二価金属カチオンを供給する。吸入に適する乾燥粉末は、粉末の約６重量％以上の量のＮａ＋等の一価カチオンを供給する一価塩をさらに含み得る。
【００１７】
吸入に適する乾燥粉末は、少なくとも４５％の５．６ミクロン未満の細粒分（ＦＰＦ）、少なくとも３０％の３．４ミクロン未満のＦＰＦ、および／または少なくとも４５％の５．０ミクロン未満のＦＰＦを有し得る。あるいは、またはさらには、吸入に適する乾燥粉末は、約５ミクロン以下の空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有し得る。吸入に適する乾燥粒子中に含有される二価金属カチオンの二価金属カチオン塩に対する分子量比は、約０．１超、および／または約０．１６超であり得る。
【００１８】
吸入に適する乾燥粉末組成物には、約５０重量％以下の量、好ましくは、約２０重量％以下の量で存在し得る、ロイシン、マルトデキストリン、またはマンニトール等の薬学的に許容される賦形剤が含まれ得る。
【００１９】
吸入に適する乾燥粉末に存在する二価金属カチオン塩は、ベリリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、ストロンチウム塩、バリウム塩、ラジウム塩、および第一鉄塩であり得る。例えば、二価金属カチオン塩は、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、クエン酸カルシウム、塩化カルシウム、またはそれらの任意の組み合わせ等のカルシウム塩であり得る。吸入に適する乾燥粒子に任意で存在する一価塩は、ナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、またはそれらの任意の組み合わせであり得る。
【００２０】
ある特定の態様では、吸入に適する乾燥粉末は、二価金属カチオン塩および一価塩を含有し、かつ非晶質二価金属カチオン相ならびに結晶性一価塩相を含有する。非晶相のガラス転移温度は、少なくとも約１２０℃であり得る。これらの吸入に適する乾燥粒子は、非晶質、結晶性、または形態の混合物であり得る、ロイシン、マルトデキストリン、およびマンニトール等の賦形剤を任意で含有し得る。吸入に適する乾燥粒子は、約−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜１０ｋｃａｌ／ｍｏｌの溶解熱を有し得る。
【００２１】
好ましくは、二価金属カチオン塩は、カルシウム塩であり、一価塩は、ナトリウム塩である。カルシウム塩は、クエン酸カルシウム、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、塩化カルシウム、またはそれらの任意の組み合わせであり得、ナトリウム塩は、塩化ナトリウムであり得る。
【００２２】
他の態様では、吸入に適する乾燥粉末は、乾燥粉末の約５重量％以上の量のカチオンを供給する二価金属塩を含有し、吸入に適する乾燥粉末は、１．５より大きいハウスナー比および２以下の１／４バールまたは０．５／４バールを有する。
【００２３】
本発明は、クエン酸カルシウムまたは硫酸カルシウムを含有し、ａ）塩化カルシウムの水溶液を含む第１の液体供給原料、および硫酸ナトリウムもしくはクエン酸ナトリウムの水溶液を含む第２の液体供給原料を供給すること、ｂ）第１の液体供給原料および第２の液体供給原料を混合して、アニオン交換反応が起こる混合物を産生し、硫酸カルシウムおよび塩化ナトリウム、またはクエン酸カルシウムおよび塩化ナトリウムを含む飽和もしくは過飽和溶液を産生すること、ならびにｃ）ｂ）で産生された飽和もしくは過飽和溶液を噴霧乾燥して、吸入に適する乾燥粒子を産生することを含む過程を用いて作製される、吸入に適する乾燥粒子を含有する吸入に適する乾燥粉末にも関する。ｂ）における混合は、バッチ混合または静的混合であり得る。
【００２４】
本発明は、喘息、気道過敏反応性、季節性アレルギー性アレルギー、気管支拡張症、慢性気管支炎、肺気腫、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症等の呼吸器疾患を治療するための方法にも関し、その方法は、それを必要とする対象の気道に、有効量の吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末を投与することを含む。本発明は、喘息、気道過敏反応性、季節性アレルギー性アレルギー、気管支拡張症、慢性気管支炎、肺気腫、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症等の慢性肺疾患の急性増悪の治療または予防のための方法にも関し、その方法は、それを必要とする対象の気道に、有効量の吸入に適する乾燥粒子もしくは乾燥粉末を投与することを含む。
【００２５】
本発明は、気道の感染病の伝染を治療、予防、および／または減少させるための方法にも関し、その方法は、それを必要とする対象の気道に、有効量の吸入に適する乾燥粒子もしくは乾燥粉末を投与することをを含む。
【００２６】
本発明は、治療法（例えば、治療、予防、または診断）での使用のための本明細書に記載の吸入に適する乾燥粉末もしくは乾燥粒子にも関する。本発明は、本明細書に記載の治療、予防、または減少での使用のための、ならびに本明細書に記載の呼吸器疾患および／もしくは感染の治療、予防、または診断のための薬剤の製造における、本明細書に記載の吸入に適する乾燥粒子もしくは乾燥粉末の使用にも関する。
【００２７】
即ち、本発明の要旨は、
〔１〕二価金属カチオン塩を含む吸入に適する乾燥粒子を含む吸入に適する乾燥粉末であって、前記二価金属カチオン塩は、前記乾燥粒子の約５重量％以上の量の二価金属カチオンを供給し、前記吸入に適する乾燥粒子は、レーザー回折（ＲＯＤＯＳ／ＨＥＬＯＳシステム）で測定して、約１０ミクロン以下の幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）および約２未満の分散性比率（１／４バール）を有する、吸入に適する乾燥粉末、
〔２〕前記吸入に適する乾燥粉末は、約５．０ミクロン以下の幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）を有する、〔１〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３〕前記吸入に適する乾燥粉末は、レーザー回折（ＲＯＤＯＳ／ＨＥＬＯＳシステム）で測定して、約１．５未満の分散性比率（１／４バール）を有する、〔１〕または〔２〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４〕前記吸入に適する乾燥粉末は、前記粒子の約６重量％以上の量の一価カチオンを提供する一価塩をさらに含む、〔１〕または〔２〕のいずれかに記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔５〕前記吸入に適する乾燥粉末は、少なくとも４５％の５．６ミクロン未満の細粒分（ＦＰＦ）を有する、〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔６〕前記吸入に適する乾燥粉末は、少なくとも３０％の３．４ミクロン未満の細粒分（ＦＰＦ）を有する、〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔７〕前記吸入に適する乾燥粉末は、少なくとも４５％の５．０ミクロン未満の細粒分（ＦＰＦ）を有する、〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔８〕前記吸入に適する乾燥粉末は、約５ミクロン以下の空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する、〔１〕または〔７〕のいずれかに記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔９〕前記二価金属カチオン塩は、水中で０．５ｇ／Ｌ以上の溶解度を有する、〔１〕〜〔８〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１０〕前記吸入に適する乾燥粒子は、リン酸カルシウムを含有しない、〔１〕〜〔９〕のいずれかに記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１１〕二価金属カチオンの前記二価金属カチオン塩に対する分子量比は、約０．１より大きい、〔１〕〜〔１０〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１２〕二価金属カチオンの前記二価金属カチオン塩に対する分子量比は、約０．１６より大きい、〔１〕〜〔１０〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１３〕前記吸入に適する乾燥粉末は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、〔１〕〜〔１２〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１４〕前記少なくとも１つの賦形剤は、約２０重量％以下の量で存在し、かつロイシンを含む、〔１３〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１５〕前記少なくとも１つの賦形剤は、約５０重量％以下の量で存在し、かつロイシンを含む、〔１３〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１６〕前記少なくとも１つの賦形剤は、約２０重量％以下の量で存在し、かつマルトデキストリンまたはマンニトールを含む、〔１３〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１７〕前記少なくとも１つの賦形剤は、約５０重量％以下の量で存在し、かつマルトデキストリンまたはマンニトールを含む、〔１３〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１８〕前記二価金属塩は、マグネシウム塩およびバリウム塩から成る群から選択される、〔１〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔１９〕前記二価金属カチオン塩は、カルシウム塩である、〔１〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２０〕前記カルシウム塩は、硫酸カルシウム、クエン酸カルシウム、塩化カルシウム、酢酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、またはそれらの任意の組み合わせである、〔１９〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２１〕前記カルシウム塩は、乳酸カルシウムである、〔１９〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２２〕前記一価塩は、リチウム塩またはカリウム塩である、〔１〕〜〔２１〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２３〕前記一価塩は、ナトリウム塩である、〔１〕〜〔２１〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２４〕前記ナトリウム塩は、塩化ナトリウムである、〔２３〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２５〕前記ナトリウム塩は、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、または硫酸ナトリウムである、〔２３〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２６〕二価金属カチオン塩および一価塩を含む吸入に適する乾燥粒子を含む吸入に適する乾燥粉末であって、非晶質二価金属カチオン相および結晶性一価塩相を含む、吸入に適する乾燥粉末、
〔２７〕前記非晶相のガラス転移温度は、少なくとも約１２０℃である、〔２６〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２８〕前記非晶相は、賦形剤をさらに含む、〔２６〕または〔２７〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔２９〕前記賦形剤は、ロイシン、マルトデキストリン、マンニトール、またはそれらの組み合わせである、〔２８〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３０〕前記吸入に適する乾燥粉末は、２．０以下の１／４バールまたは０．５／４バールを有する、〔２６〕〜〔２９〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３１〕前記吸入に適する乾燥粉末は、１．５以下の１／４バールまたは０．５／４バールを有する、〔２６〕〜〔２９〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３２〕前記吸入に適する乾燥粉末は、約５ミクロン以下のＭＭＡＤを有する、〔２６〕〜〔３１〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３３〕前記吸入に適する乾燥粉末は、０．５〜約５ミクロンのＶＭＧＤを有する、〔２６〕〜〔３１〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３４〕前記吸入に適する乾燥粉末は、約５ミクロン〜約２０ミクロンのＶＭＧＤを有する、〔２６〕〜〔３１〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３５〕前記吸入に適する乾燥粉末は、約−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜１０ｋｃａｌ／ｍｏｌの溶解熱を有する、〔２６〕〜〔３４〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３６〕前記二価金属カチオンは、前記吸入に適する乾燥粉末の少なくとも約５重量％で存在する、〔２６〕〜〔３５〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３７〕前記二価金属カチオン塩は、カルシウム塩である、〔３６〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３８〕前記カルシウム塩は、クエン酸カルシウム、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、塩化カルシウム、またはそれらの任意の組み合わせである、〔３７〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔３９〕前記一価塩は、ナトリウム塩である、〔２６〕〜〔３８〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４０〕前記ナトリウム塩は、塩化ナトリウムである、〔３９〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４１〕二価金属塩を含む吸入に適する乾燥粒子を含む吸入に適する乾燥粉末であって、前記二価金属塩は、前記乾燥粒子の約５重量％以上の量のカチオンを提供し、前記吸入に適する乾燥粉末は、１．５より大きいハウスナー比および２以下の１／４バールまたは０．５／４バールを有する、吸入に適する乾燥粉末、
〔４２〕前記吸入に適する乾燥粉末は、１．５以下の１／４バールまたは０．５／４バールを有する、〔４１〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４３〕前記ハウスナー比は、１．７より大きい、〔４１〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４４〕前記吸入に適する乾燥粉末は、約５ミクロン以下のＭＭＡＤを有する、〔４１〕〜〔４３〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４５〕前記吸入に適する乾燥粉末は、約−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜１０ｋｃａｌ／ｍｏｌの溶解熱を有する、〔４１〕〜〔４４〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４６〕前記二価金属カチオン塩は、カルシウム塩である、〔４１〕〜〔４５〕のいずれか１項に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４７〕前記カルシウム塩は、クエン酸カルシウム、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、塩化カルシウム、またはそれらの任意の組み合わせである、〔４６〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔４８〕クエン酸カルシウムまたは硫酸カルシウムを含有する吸入に適する乾燥粒子を含む吸入に適する乾燥粉末であって、前記吸入に適する乾燥粒子は、
ａ）塩化カルシウムの水溶液を含む第１の液体供給原料と、硫酸ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムの水溶液を含む第２の液体供給原料とを提供することと、
ｂ）前記第１の液体供給原料および前記第２の液体供給原料を混合して、アニオン交換反応が起こる混合物を産生し、硫酸カルシウムおよび塩化ナトリウム、またはクエン酸カルシウムおよび塩化ナトリウムを含む飽和もしくは過飽和溶液を産生することと、
ｃ）ｂ）で産生された前記飽和もしくは過飽和溶液を噴霧乾燥して、吸入に適する乾燥粒子を産生することと、を含む過程で産生される、吸入に適する乾燥粉末、
〔４９〕ｂ）において、前記第１の液体供給原料および前記第２の液体供給原料は、バッチ混合される、〔４８〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔５０〕ｂ）において、前記第１の液体供給原料および前記第２の液体供給原料は、静的混合される、〔４８〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔５１〕静的混合後、得られた混合物は、５分以内に霧化される、〔５０〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔５２〕静的混合後、得られた混合物は、３０秒以内に霧化される、〔５０〕に記載の吸入に適する乾燥粉末、
〔５３〕呼吸器疾患を治療するための方法であって、それを必要とする患者の気道に、〔１〕〜〔５２〕のいずれか１項に記載の有効量の吸入に適する乾燥粉末を投与することを含む、方法、
〔５４〕呼吸器疾患の急性増悪を治療するための方法であって、それを必要とする患者の気道に、〔１〕〜〔５２〕のいずれか１項に記載の有効量の吸入に適する乾燥粉末を投与することを含む、方法、
〔５５〕気道の感染性疾患を治療または予防するための方法であって、それを必要とする患者の気道に、〔１〕〜〔５２〕のいずれか１項に記載の有効量の吸入に適する乾燥粉末を投与することを含む、方法
に関する。
【発明の効果】
【００２８】
本発明により、肺疾患を治療するための乾燥粉末製剤および方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１Ａ−１】実施例１〜３および１４に記載の供給原料製剤Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ならびにＸＩＶから調製された乾燥粉末の特性を示す表である。図１Ａは、粉末を噴霧乾燥するために使用された噴霧乾燥パラメータを含む。
【図１Ａ−２】図１Ａは、粉末を噴霧乾燥するために使用された噴霧乾燥パラメータを含む。
【図１Ｂ−１】図１Ｂは、粉末中のカルシウムイオン量の割合に対するＨＰＬＣ結果、タップおよびバルク密度を含む密度結果、ならびに粉末中の含水量の割合に対するカールフィッシャー結果を示す。
【図１Ｂ−２】図１Ｂは、粉末中のカルシウムイオン量の割合に対するＨＰＬＣ結果、タップおよびバルク密度を含む密度結果、ならびに粉末中の含水量の割合に対するカールフィッシャー結果を示す。
【図１Ｃ】図１Ｃは、２段階（ＡＣＩ−２）アンダーセンカスケード衝撃装置を用いて収集された粉末の細粒分（ＦＰＦ）データおよび質量の割合を示す。
【図１Ｄ】図１Ｄは、８段階（ＡＣＩ−８）アンダーセンカスケード衝撃装置を用いて収集された粉末の細粒分（ＦＰＦ）データおよび質量の割合を示す。
【図１Ｅ】図１Ｅは、空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）ならびにＦＰＦ（総用量および回収用量に基づく）に関するデータを示す。
【図１Ｆ−１】図１Ｆは、幾何学的体積中位径（ＤＶ５０）、幾何標準偏差（ＧＳＤ）、およびスプレーテック器具で測定された５．０ミクロン未満（Ｖ＜５．０μｍ）の割合量（％）、幾何学もしくは体積粒径分布（ＶＭＧＤ、ｘ５０／ｄｇ、またはｘ５０とも称される）、ＲＯＤＯＳ付属器具を有するＨＥＬＯＳで測定されたＧＳＤ、ならびに１／４バールおよび０．５／４バール情報に関するデータを示す。
【図１Ｆ−２】図１Ｆは、幾何学的体積中位径（ＤＶ５０）、幾何標準偏差（ＧＳＤ）、およびスプレーテック器具で測定された５．０ミクロン未満（Ｖ＜５．０μｍ）の割合量（％）、幾何学もしくは体積粒径分布（ＶＭＧＤ、ｘ５０／ｄｇ、またはｘ５０とも称される）、ＲＯＤＯＳ付属器具を有するＨＥＬＯＳで測定されたＧＳＤ、ならびに１／４バールおよび０．５／４バール情報に関するデータを示す。
【図２】供給原料製剤Ｉ、ＩＩ、ならびにＩＩＩから調製された粒子の平均タップおよびバルク密度とプラセボとの間の比較を示すグラフである。
【図３】レーザー回折計器（ＲＯＤＯＳを有するＨＥＬＯＳ）を使用して測定された幾何学的体積中位径（ｘ５０）における、異なる分散（レギュレータ）圧での粒子間（供給原料製剤Ｉ〜ＩＩＩおよびプラセボから調製）の比較を示すグラフである。
【図４】ＡＣＩ−２およびＡＣＩ−８から得られた平均ＦＰＦにおける、供給原料製剤Ｉ（ＰＵＲ１１１（クエン酸塩）と見なされる）、ＩＩ（ＰＵＲ１１３（乳酸塩）と見なされる）、ならびにＩＩＩ（ＰＵＲ１１２（硫酸塩）と見なされる）、およびプラセボから調製された粒子間の比較を示すグラフである。
【図５Ａ−Ｂ】製剤Ｉ（図５Ａ）、製剤ＩＩ（図５Ｂ）、製剤ＩＩＩ（図５Ｃ）、および製剤ＸＩＶ（図５Ｄ）の電子顕微鏡写真である。
【図５Ｃ−Ｄ】製剤Ｉ（図５Ａ）、製剤ＩＩ（図５Ｂ）、製剤ＩＩＩ（図５Ｃ）、および製剤ＸＩＶ（図５Ｄ）の電子顕微鏡写真である。
【図６Ａ】供給原料製剤６．１〜６．９によって調製された乾燥粉末の特性を示す表である。図５の製剤６．１は、実施例２の製剤ＩＩ−Ｂに対応する。図５の製剤６．４は、実施例１の製剤Ｉ−Ｂに対応する。図５の製剤６．７は、実施例３の製剤ＩＩＩ−Ｂに対応する。表見出しの略称は、明細書の他の部分に記載される。図５において、全ての粉末は、Ｂuｃｈｉ噴霧乾燥機を使用して作製された。
【図６Ｂ】供給原料製剤６．１〜６．９によって調製された乾燥粉末の特性を示す表である。図５の製剤６．１は、実施例２の製剤ＩＩ−Ｂに対応する。図５の製剤６．４は、実施例１の製剤Ｉ−Ｂに対応する。図５の製剤６．７は、実施例３の製剤ＩＩＩ−Ｂに対応する。表見出しの略称は、明細書の他の部分に記載される。図５において、全ての粉末は、Ｂuｃｈｉ噴霧乾燥機を使用して作製された。
【図７】通過モデルの概略図である。
【図８】乾燥粉末への曝露を伴う細菌通過モデルの結果を示すグラフである。硫酸カルシウム含有粉末（４．５μｇのＣａ／ｃｍ２送達用量）は、アルギン酸ナトリウム模倣剤を介して細胞運動を減少させた。ｉｉｉ．図８Ｂは、乾燥粉末への曝露を伴う細菌通過モデルの結果を示すグラフである。供給原料製剤Ａ〜Ｅから調製され、試験されたカルシウム塩乾燥粉末は、０μｇ、４．３μｇ、６．４μｇ、または１０μｇのカルシウムを含有した。硫酸カルシウム（４．３μｇのＣａ／ｃｍ２送達用量）、酢酸カルシウム（１０μｇのＣａ／ｃｍ２送達用量）、および乳酸カルシウム（６．４μｇのＣａ／ｃｍ２送達用量）を含有する粉末は、アルギン酸ナトリウム模倣剤を介して細胞運動を減少させた。
【図９】実施例１０Ａの供給原料製剤１０−１〜１０−４から調製された吸入に適する乾燥粉末の、Ａ型インフルエンザ／ＷＳＮ／３３（Ｈ１Ｎ１）感染に対する、用量依存的様式での効果を示すグラフである。
【図１０】実施例１０Ｂのために調製された吸入に適する乾燥粉末の、Ａ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／９９／２００７（Ｈ３Ｎ２）感染に対する、用量依存的様式での効果を示すグラフである。
【図１１】カルシウム塩および塩化ナトリウムから成る乾燥粉末製剤が、フェレットにおけるインフルエンザの重症度を軽減したことを示すグラフである。図１１Ａは、対照動物と比較した、クエン酸カルシウム粉末で治療されたフェレットの温度の変化を示す。図１１Ｂは、対照動物と比較した、硫酸カルシウム粉末で治療されたフェレットの温度の変化を示す。図１１Ｃは、対照動物と比較した、乳酸カルシウム粉末で治療されたフェレットの温度の変化を示す。図１１Ｄは、研究期間中（０日目〜１０日目）、曲線下面積を用いて、各動物の基準からの温度の変化を示す。データは、各群に対する平均±標準誤差を示す（スチューデントｔ−検定により、ロイシン対照および乳酸群に対してｐ＝０．０９）。
【図１２】乳酸カルシウムおよび塩化ナトリウムと共に異なる賦形剤（マンニトール、マルトデキストリン）から成る乾燥粉末製剤が、製剤ＩＩＩ粉末単独よりも高い濃度でインフルエンザ力価を減少させたことを示すグラフである。
【図１３】カルシウム乾燥粉末製剤は、異なるウイルス性病原体に対して効力が変化することを示すグラフである。製剤に曝露されていないＣａｌｕ−３細胞を対照として使用し、製剤Ｉ、製剤ＩＩ、および製剤ＩＩＩに曝露されたＣａｌｕ−３細胞と比較した。各エアロゾル製剤に曝露された細胞によって放出されたウイルスの濃度を定量化した。記号は、各試験において、複製ウェルの平均および標準偏差を表す。
【図１４】異なる吸入エネルギーでの３つの異なるカプセルの充填重量（２５ｍｇ、６０ｍｇ、７５ｍｇ）での製剤ＩＩＩ粉末の放出用量を示すグラフである。
【図１５】体積中位径（Ｄｖ５０）によって特徴付けられ、印加された吸入エネルギーに対してプロットされた、異なる吸入器から放出さた乳酸カルシウム（製剤ＩＩ）粉末の粒径分布を示すグラフである。減少するエネルギー値でのＤｖ５０の一貫した値は、追加のエネルギーが放出された粉末のさらなる解砕をもたらさないため、粉末が十分に分散されることを示す。
【図１６】製剤Ｉ粉末の高分解能ＸＲＰＤパターンを示す。このパターンは、製剤Ｉ粉末が、結晶塩化ナトリウムおよび結晶性が低いか、または非晶質のクエン酸カルシウムの組み合わせ、ならびに可能性として塩化カルシウムに富んだ相から成ることを示す。
【図１７】塩化ナトリウムからの結晶反射を伴う製剤Ｉ粉末のＸＲＰＤパターンの比較を示す。
【図１８】製剤Ｉの温度サイクリングＤＳＣサーモグラムのオーバーレイを示す。約１６７℃のガラス転移温度が、非晶質カルシウムに富んだ相に関して、サイクルＤＳＣを介して観察された。
【図１９】製剤ＩＩＩ粉末の高分解能ＸＲＰＤパターンを示す。このパターンは、製剤ＩＩ粉末が結晶塩化ナトリウムおよび結晶性が低いか、または非晶質の乳酸カルシウムの組み合わせ、ならびに可能性として塩化カルシウムに富んだ相から成ることを示す。
【図２０】塩化ナトリウムからの結晶反射を伴う製剤ＩＩＩ粉末のＸＲＰＤパターンの比較を示す。
【図２１】製剤ＩＩＩの温度サイクリングＤＳＣサーモグラムのオーバーレイを示す。約１４４℃のガラス転移温度が、非晶質カルシウムに富んだ相に関して、サイクルＤＳＣを介して観察された。
【図２２】製剤ＸＩＶ粉末の高分解能ＸＲＰＤパターンを示す。
【図２３】塩化ナトリウムからの結晶反射を伴う製剤ＸＩＶ粉末のＸＲＰＤパターンの比較を示す。
【図２４】製剤ＸＩＶの温度サイクリングＤＳＣサーモグラムのオーバーレイを示す。約１３４℃のガラス転移温度が、非晶質カルシウムに富んだ相に関して、サイクルＤＳＣを介して観察された。
【図２５Ａ】製剤ＩＩＩ粉末の高分解能ＸＲＰＤパターンを示す。このパターンは、製剤ＩＩＩが、結晶塩化ナトリウムに加えて、存在する結晶性カルシウム塩含有量（硫酸カルシウム）をある程度有することを示す。
【図２５Ｂ】図２５Ｂは、塩化ナトリウムからの結晶反射を伴う製剤ＩＩＩ粉末のＸＲＰＤパターンの比較を示す。
【図２６】製剤ＩＩＩの温度サイクリングＤＳＣサーモグラムのオーバーレイを示す。約１５９℃のガラス転移温度が、非晶質カルシウムに富んだ相に関して、サイクルＤＳＣを介して観察された。
【図２７Ａ】ラマンスペクトルである。図２７Ａは、製剤Ｉ試料からの６個の粒子に対するラマンスペクトルを示し、それらは重なって示される。
【図２７Ｂ】図２７Ｂは、バックグラウンド減算され、かつクエン酸カルシウム四水和物、クエン酸ナトリウム、およびロイシンのラマンスペクトルと重ねられたスペクトル３８９５７５−６を示す。
【図２７Ｃ】図２７Ｃは、製剤ＩＩＩ試料からの８個の粒子に対するラマンスペクトルを示し、それらは重なって示される。
【図２７Ｄ】図２７Ｄは、バックグラウンド減算され、かつ硫酸カルシウム、硫酸カルシウム二水和物、無水硫酸ナトリウム、およびロイシンのラマンスペクトルと重ねられたスペクトル３８８３６９−４を示す。
【図２７Ｅ】図２７Ｅは、製剤ＩＩ試料からの１２個の粒子に対するラマンスペクトルを示し、それらは重なって示される。
【図２７Ｆ】図２７Ｆは、バックグラウンド減算され、かつ乳酸カルシウム五水和物ならびにロイシンのラマンスペクトルと重ねられたスペクトル３８９５７６−７および３８９５７６−１２を示す。
【図２７Ｇ】図２７Ｇは、製剤ＸＩＶ試料からの１２個の粒子に対するラマンスペクトルを示し、それらは重なって示される。
【図２７Ｈ】図２７Ｈにおいて、スペクトル３８９５７７−９がバックグラウンド減算され、乳酸カルシウム五水和物のラマンスペクトルと重ねられている。
【図２８】固体濃度を増加させた、予混合および静的混合された液体供給原料から調製された製剤ＩＩＩ（硫酸カルシウム）の噴霧乾燥した粉末に関する体積粒径結果を示すグラフである。予混合された供給原料中の固体濃度が増加すると、粒径分布が拡大（ＧＳＤが増加）し、平均体積粒径が著しく増加（５０倍）する。粒径分布は、静的混合された供給原料中では、固体濃度が増加しても一定のままである一方で、平均体積粒径は、予想通り、固体濃度を増加させることでわずかに増加する。
【図２９】固体濃度を増加させた、予混合および静的混合された液体供給原料から調製された製剤ＩＩＩ（硫酸カルシウム）の噴霧乾燥した粉末に関する体積粒径分布結果を示すグラフである。粒径分布は、予混合された供給原料中では固体濃度を増加させることで拡大し、静的混合された供給原料中では固体濃度を増加させても狭いままである。三角形：静的混合された５ｇ／Ｌ、四角形：予混合された５ｇ／Ｌ、菱形：静的混合された３０ｇ／Ｌ、円形：予混合された３０ｇ／Ｌ。
【図３０】固体濃度を増加させた、予混合および静的混合された液体供給原料から調製された製剤ＩＩＩ（硫酸カルシウム）の噴霧乾燥した粉末に関するエアロゾル特徴付けの結果を示すグラフである。
【図３１Ａ−Ｂ】極端な条件での使用時の安定性試験の間の、製剤Ｉ（クエン酸カルシウム）、製剤ＩＩ（乳酸カルシウム）、および製剤ＩＩＩ（硫酸カルシウム）の製剤の細粒分（ＦＰＦ）における変化を示すグラフである。グラフは、極端な温度および湿度条件（３０℃、相対湿度７５％）における、チャンバ内で経過した時間に対するＦＰＦ（総用量）＜５．６ミクロン（％）の変化を比較する。説明文中の値は、ゼロ時間における真値を示す。プロットは、ゼロ時間と比較した、変化の関数としての変動を示す。図３１Ｂは、極端な条件での使用時の安定性試験の間の、製剤Ｉ（クエン酸カルシウム）、製剤ＩＩ（乳酸カルシウム）、および製剤ＩＩＩ（硫酸カルシウム）の製剤の体積粒径における変化を示すグラフである。グラフは、極端な温度および湿度条件（３０℃、相対湿度７５％）における、チャンバ内で経過した時間に対する平均体積粒径の変化を比較する。説明文中の値は、ゼロ時間における真値を示す。プロットは、ゼロ時間と比較した、変化の関数としての変動を示す。
【図３１Ｃ−Ｄ】図３１Ｃ、Ｄは、対照の塩化カルシウムと塩化ナトリウムとロイシン粉末、および賦形剤として１０％の（ｉ）ラクトース、（ｉｉ）マンニトール、または（ｉｉｉ）マルトデキストリンを含有する乳酸カルシウムと塩化ナトリウム粉末から成る第２の組の噴霧乾燥製剤に関する類似のデータを示す。図３１Ｃは、第２の組の粉末に関して、極端な温度および湿度条件（３０℃、相対湿度７５％）における、チャンバ内で経過した時間に対するＦＰＦ（総用量）＜５．６ミクロン（％）の変化を比較する。説明文中の値は、ゼロ時間における真値を示す。プロットは、ゼロ時間と比較した、変化の関数としての変動を示す。図３１Ｄは、極端な条件での使用時の安定性試験の間の、第２の組の粉末の体積粒径における変化を示すグラフである。グラフは、極端な温度および湿度条件（３０℃、相対湿度７５％）における、チャンバ内で経過した時間に対する平均体積粒径の変化を比較する。説明文中の値は、ゼロ時間における真値を示す。プロットは、ゼロ時間と比較した、変化の関数としての変動を示す。
【図３２】１週間にわたる相対湿度約４０％の条件への曝露時に体積粒径によって測定された、種々の異なる粉末の粉末安定性を示すグラフである。
【図３３】種々の異なる粉末の、１週間にわたっての相対湿度約４０％の条件への曝露時の体積粒径を示すグラフである。この図は、より良好な詳細を可能にするために塩化物を除去したことを除いて、図３２と同一である。
【図３４】製剤Ｉの代表的なＴＧＡサーモグラムを示すグラフである。
【図３５】製剤ＩからＩＩＩの溶解時に得られた溶液の熱を示すグラフである。製剤ＩからＩＩＩは、未加工塩化カルシウム二水和物二水和物および対照の塩化カルシウムと塩化ナトリウムとロイシン粉末の両者と比較して、著しく低下した溶液の熱をもたらした。
【図３６】生体内肺炎研究の結果を示すグラフである。製剤ＩＩＩ（硫酸カルシウム）で処置した動物は、５倍低い細菌力価を示し、製剤Ｉ（クエン酸カルシウム）で処置した動物は、１０．４倍低い細菌力価を示し、また製剤ＩＩ（乳酸カルシウム）で処置した動物は、５．９倍低い細菌力価を示した。
【図３７】例示的な乾燥粉末製剤の組成を示す表である。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
この発明は、部分的に、活性成分として、カルシウム等の１つ以上の二価金属カチオンを送達する、吸入に適する乾燥粉末、および、その粉末内に含有される二価金属カチオン含有（例えば、カルシウム含有）の吸入に適する乾燥粒子に関する。本発明は、１つ以上の一価カチオン（Ｎａ＋等）を含有する吸入に適する乾燥粒子、および、その吸入に適する粒子を含有する乾燥粉末にも関する。
【００３１】
一態様では、本発明の吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、小さく、かつ分散可能である二価金属カチオン（例えば、カルシウム）の密度が高い吸入に適する粒子であり得る。別の態様では、吸入に適する乾燥粒子は、大きいか、または小さく、例えば、乾燥粉末は、０．５ミクロン〜３０ミクロンの幾何学径（ＶＭＧＤ）を有する。任意で、乾燥粉末のＭＭＡＤは、０．５〜１０ミクロン、より好ましくは、１〜５ミクロンであり得る。
【００３２】
小さい粒子を含有し、空気中に分散可能であり、かつ好ましくは、密度が高い（例えば、活性成分の密度が高い）吸入に適する乾燥粉末は、一般通念からの脱却である。粒子が凝集または集塊する傾向は、粒径が減少するにつれ増加することが周知である。例えば、Ｈｉｃｋｅｙ，Ａ．ｅｔ  ａｌ．，「Ｆａｃｔｏｒｓ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｒｙ  Ｐｏｗｄｅｒｓ  ａｓ  Ａｅｒｏｓｏｌｓ」，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ａｕｇｕｓｔ，１９９４を参照されたい。
【００３３】
本明細書に記載されるように、本発明は、小さく、対象の吸入を超える追加のエネルギー源なしで空気中に分散可能である吸入に適する粒子を含有する吸入に適する乾燥粉末を提供する。したがって、粒子または粉末中に大量の不活性成分（例えば、賦形剤）を含むことなく、または投与中または投与直前に、凝集もしくは集塊粒子を破壊するために機械力を印加するデバイスを使用することによらず、吸入に適する乾燥粉末および吸入に適する乾燥粒子を治療的に使用することができる。
【００３４】
本発明の吸入に適する乾燥粉末および吸入に適する粒子は、概して、１つまたは複数の活性成分、すなわち、二価金属カチオン（例えば、１つまたは複数のカルシウム含有塩）の密度も高い。例えば、本明細書に記載されるように、賦形剤が吸入に適する乾燥粉末または粒子中に含まれる時に、賦形剤は、微量成分（例えば、約５０重量％以下、好ましくは、約２０重量％以下、約１２重量％以下、約１０重量％以下、約８重量％以下、または重量以下）である。したがって、一態様では、吸入に適する粒子は、小さく、かつ極めて分散可能であるばかりでなく、大量の二価金属カチオン、例えば、カルシウム（Ｃａ２＋）を含有することもできる。したがって、二価金属カチオン（例えば、カルシウム）の所望の用量を送達するために、必要とされる粉末の投与量がより少量となる。例えば、カルシウムの所望の用量は、カプセル型またはブリスター型吸入器からの１回もしくは２回の吸入で送達され得る。
【００３５】
定義
本明細書で使用される、「乾燥粉末」という用語は、吸入デバイス内で分散され、その後対象が吸入することができる微細に分散した吸入に適する乾燥粒子を含有する組成物を指す。そのような乾燥粉末もしくは乾燥粒子は、最大で約１５％の水もしくは他の溶媒を含有するか、または実質的に水もしくは他の溶媒を含んでいないか、または無水であり得る。
【００３６】
本明細書で使用される、「乾燥粒子」という用語は、最大で約１５％の水もしくは他の溶媒を含有するか、または実質的に水もしくは他の溶媒を含んでいないか、または無水であり得る吸入に適する粒子を指す。
【００３７】
本明細書で使用される、「吸入に適する」という用語は、吸入によって対象の気道（例えば、肺送達）に送達するのに好適な乾燥粒子または乾燥粉末を指す。吸入に適する乾燥粉末または乾燥粒子は、約１０ミクロン未満、好ましくは、約５ミクロン以下の空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する。
【００３８】
本明細書で使用される、吸入に適する乾燥粒子を「投与」または「投与する」という用語は、対象の気道に、吸入に適する乾燥粒子を導入することを指す。
【００３９】
本明細書で使用される、「気道」という用語には、上気道（例えば、鼻道、鼻腔、咽喉、咽頭）、呼吸気道（例えば、咽頭、気管、気管支、細気管支）、および肺（例えば、呼吸細気管支、肺胞管、肺胞嚢、肺胞）が含まれる。
【００４０】
「分散可能」という用語は、乾燥粉末または乾燥粒子が吸入に適するエアロゾル中散らされる特性を記載する専門用語である。乾燥粉末または乾燥粒子の分散性は、１バールの分散（すなわち、レギュレータ）圧で測定された幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）を４バールの分散（すなわち、レギュレータ）圧で測定されたＶＭＧＤで割った比率、またはＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳで測定された０．５バールでのＶＭＧＤを４バールでのＶＭＧＤで割った比率として本明細書に表される。これらの比率は、本明細書でそれぞれ、「１／４バール」および「０．５／４バール」と称され、分散性は低い比率と相関する。例えば、１／４バールは、ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳによって４バールで測定される同一の吸入に適する乾燥粒子もしくは粉末のＶＭＧＤで割った、ＨＥＬＯＳまたは他のレーザー回折システムによって測定される、約１バールでＲＯＤＯＳ乾燥粉末分散機（または同等の技法）のオフィリスから放出される吸入に適する乾燥粒子もしくは粉末のＶＭＧＤを指す。したがって、極めて分散可能な乾燥粉末または乾燥粒子は、１．０に近い、１／４バールもしくは０．５／４バールの比率を有する。極めて分散可能な粉末は、ともに集塊、凝集、凝塊する低い傾向を有し、および／またはともに集塊、凝集、凝塊される場合、それらが吸入器から放出され、かつ対象によって吸い込まれる時に、容易に分散または解砕される。分散性を、流速の関数として、吸入器から放出される大きさを測定することによっても評価することができる。
【００４１】
本明細書で使用される、「ＦＰＦ（＜５．６）」、「ＦＰＦ（＜５．６ミクロン）」、および「５．６ミクロン未満の細粒分」という用語は、５．６ミクロン未満の空気動力学的直径を有する乾燥粒子の試料の割合を指す。例えば、ＦＰＦ（＜５．６）は、段階１および２段階の破壊的アンダーセンカスケード衝撃装置（ＡＣＩ）の収集フィルタ上で堆積された吸入に適する乾燥粒子の質量を、器具への送達のためのカプセル中に秤量された吸入に適する乾燥粒子の質量で割ることによって決定することができる。このパラメータは、「ＦＰＦ＿ＴＤ（＜５．６）」として特定され得、ＴＤは、総用量を意味する。同様の測定を、８段階ＡＣＩを用いて行うことができる。８段階ＡＣＩカットオフは、標準の６０Ｌ／分の流速では異なるが、ＦＰＦ＿ＴＤ（＜５．６）を８段階の完全なデータセットから外挿することができる。ＦＰＦを決定するために、カプセル内に存在するものの代わりに、ＡＣＩ内で収集された用量を用いるＵＳＰ方法によって、８段階ＡＣＩ結果を計算することができる。
【００４２】
本明細書で使用される、「ＦＰＦ（＜３．４）」、「ＦＰＦ（＜３．４ミクロン）」、および「３．４ミクロン未満の細粒分」という用語は、３．４ミクロン未満の空気動力学的直径を有する吸入に適する乾燥粒子の質量の割合を指す。例えば、ＦＰＦ（＜３．４）は、２段階の破壊的ＡＣＩの収集フィルタ上に堆積された吸入に適する乾燥粒子の質量を、器具への送達のためのカプセル中に秤量された吸入に適する乾燥粒子の全質量で割ることによって決定することができる。このパラメータは、「ＦＰＦ＿ＴＤ（＜３．４）」として特定得、ＴＤは、総用量を意味する。同様の測定を、８段階ＡＣＩを用いて行うことができる。ＦＰＦを決定するために、カプセル内に存在するものの代わりに、ＡＣＩ内で収集された用量を用いるＵＳＰ方法によって、８段階ＡＣＩ結果を計算することができる。
【００４３】
本明細書で使用される、「ＦＰＦ（＜５．０）」、「ＦＰＦ（＜５．０ミクロン）」、および「５．０ミクロン未満の細粒分」という用語は、５．０ミクロン未満の空気動力学的直径を有する吸入に適する乾燥粒子の質量の割合を指す。例えば、ＦＰＦ（＜５．０）は、８段階の完全なデータセットから外挿することによって、標準の６０Ｌ／分の流速で８段階ＡＣＩを用いて決定することができる。このパラメータは、「ＦＰＦ＿ＴＤ（＜５．０）」として特定され得、ＴＤは、総用量を意味する。
【００４４】
本明細書で使用される、「放出用量」もしくは「ＥＤ」という用語は、発射または分散事象後の好適な吸入器デバイスからの薬物製剤の送達を示すものを指す。より具体的には、乾燥粉末製剤において、ＥＤは、単位用量パッケージから取り出され、吸入器デバイスのマウスピースから出る粉末の割合の尺度である。ＥＤは、吸入器デバイスによって送達される用量と名目上の用量との比率（すなわち、発射前に好適な吸入器デバイス内に設置される単位用量当たりの粉末の質量）として定義される。ＥＤは、実験的に測定されるパラメータであり、ＵＳＰセクション６０１エアロゾル、定量吸入器および乾燥粉末吸入器、送達用量均一性、乾燥粉末吸入器からの送達用量のサンプリング、米国薬局方協約、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ，１３ｔｈ  Ｒｅｖｉｓｉｏｎ，２２２−２２５，２００７の方法を用いて決定することができる。この方法は、患者投与を模倣するために設定された生体外デバイスを利用する。
【００４５】
本明細書で使用される、「有効量」という用語は、気道粘液（例えば、気道内膜流体）の表面および／またはバルク粘弾性を増加させるか、気道粘液のゲル化（例えば、表面および／またはバルクのゲル化）を増加させるか、気道粘液の表面張力を増加させるか、気道粘液の弾性（例えば、表面弾性および／またはバルク弾性）を増加させるか、気道粘液の表面粘性（例えば、表面粘性および／またはバルク粘性）を増加させるか、吐き出される粒子の量を減少させるか、病原体（例えば、細菌、ウイルス）負荷を低減させるか、症状（例えば、発熱、咳嗽、くしゃみ、鼻汁、下痢等）を軽減させるか、感染の発生を低減させるか、ウイルス複製を減少させるか、または呼吸機能の悪化を改善もしくは予防する（例えば、努力肺活量ＦＥＶ１／ＦＶＣの割合として１秒量ＦＥＶ１の努力呼気肺活量および／または１秒量ＦＥＶ１の努力呼気肺活量を改善するか、または気管支収縮を軽減する）のに十分な量等の、所望の効果を達成するために必要とされる薬剤の量を指す。特定の用途に対する実際の有効量は、特定の乾燥粉末または乾燥粒子、投与方法、対象の年齢、体重、総体的な健康、ならびに治療される症状もしくは状態の重症度によって変化し得る。これらならびに他の考慮すべき点に基づいて、特定の患者に対する投与される乾燥粉末および乾燥粒子の好適な量、ならびに投薬計画を、当技術分野の臨床医が決定することができる。
【００４６】
本明細書で使用される、「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、肺への著しく有害な毒物学的影響なく、賦形剤を肺内に取り入れることができることを意味する。そのような賦形剤は、米国食品医薬品局によって一般的に安全と見なされる（ＧＲＡＳ）。
【００４７】
乾燥粉末および乾燥粒子
本発明は、活性成分として、ベリリウム（Ｂｅ２＋）、マグネシウム（Ｍｇ２＋）、カルシウム（Ｃａ２＋）、ストロンチウム（Ｓｒ２＋）、バリウム（Ｂａ２＋）、ラジウム（Ｒａ２＋）、または鉄（第一鉄イオン、Ｆｅ２＋）等の１つ以上の二価金属カチオン含有する吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子に関する。活性二価金属カチオン（例えば、カルシウム）は、概して、塩の形態で乾燥粉末および乾燥粒子中に存在し、結晶性または非晶質である。乾燥粉末および乾燥粒子は、任意で、追加の塩（例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、およびリチウム塩等の一価塩）、治療的に活性な薬剤、または薬学的に許容される賦形剤を含むことができる。
【００４８】
いくつかの態様では、吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、ＩＩＡ族の元素の１つ以上の塩（すなわち、１つ以上のベリリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、バリウム塩、ラジウム塩、または前述の任意の組み合わせ）を含有する。より特定の態様では、吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、１つ以上のカルシウム塩、マグネシウム塩、または前述の任意の組み合わせを含有する。特定の実施形態では、吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、１つ以上のカルシウム塩を含有する。他の特定の実施形態では、吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子粒子は、１つ以上のマグネシウム塩を含有する。
【００４９】
好適なベリリウム塩には、例えば、リン酸ベリリウム、酢酸ベリリウム、酒石酸ベリリウム、クエン酸ベリリウム、グルコン酸ベリリウム、マレイン酸ベリリウム、コハク酸ベリリウム、リンゴ酸ベリリウムナトリウム、アルファブロムショウノウスルホン酸ベリリウム、ベリリウムアセチルアセトナート、ギ酸ベリリウム、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。
【００５０】
好適なマグネシウム塩には、例えば、フッ化マグネシウム、塩化マグネシウム、臭化マグネシウム、ヨウ化マグネシウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、亜硫酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、硝酸マグネシウム、ホウ酸マグネシウム、酢酸マグネシウム、クエン酸マグネシウム、グルコン酸マグネシウム、マレイン酸マグネシウム、コハク酸マグネシウム、リンゴ酸マグネシウム、タウリンマグネシウム、オロト酸マグネシウム、グリシン酸マグネシウム、ナフテン酸マグネシウム、マグネシウムアセチルアセトナート、ギ酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、ヘキサフルオロケイ酸マグネシウム、サリチル酸マグネシウム、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。
【００５１】
好適なカルシウム塩には、例えば、塩化カルシウム、硫酸カルシウム、乳酸カルシウム、クエン酸カルシウム、炭酸カルシウム、酢酸カルシウム、リン酸カルシウム、アルギン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、ソルビン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム等が含まれる。
【００５２】
好適なストロンチウム塩には、例えば、塩化ストロンチウム、リン酸ストロンチウム、硫酸ストロンチウム、炭酸ストロンチウム、酸化ストロンチウム、硝酸ストロンチウム、酢酸ストロンチウム、酒石酸ストロンチウム、クエン酸ストロンチウム、グルコン酸ストロンチウム、マレイン酸ストロンチウム、コハク酸ストロンチウム、リンゴ酸ストロンチウム、Ｌおよび／またはＤのいずれかの形態のアスパラギン酸ストロンチウム、フマル酸ストロンチウム、Ｌおよび／またはＤのいずれかの形態のグルタミン酸ストロンチウム、グルタル酸ストロンチウム、乳酸ストロンチウム、Ｌ−トレオン酸ストロンチウム、マロン酸ストロンチウム、ラネリン酸ストロンチウム（有機金属キレート）、アスコルビン酸ストロンチウム、酪酸ストロンチウム、クロドロン酸ストロンチウム、イバンドロン酸ストロンチウム、サリチル酸ストロンチウム、アセチルサリチル酸ストロンチウム、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。
【００５３】
好適なバリウム塩には、例えば、水酸化バリウム、フッ化バリウム、塩化バリウム、臭化バリウム、ヨウ化バリウム、硫酸バリウム、硫化バリウム（Ｓ）、炭酸バリウム、過酸化バリウム、酸化バリウム、硝酸バリウム、酢酸バリウム、酒石酸バリウム、クエン酸バリウム、グルコン酸バリウム、マレイン酸バリウム、コハク酸バリウム、リンゴ酸バリウム、グルタミン酸バリウム、シュウ酸バリウム、マロン酸バリウム、ナフテン酸バリウム、バリウムアセチルアセトナート、ギ酸バリウム、安息香酸バリウム、ｐ−ｔ−ブチル安息香酸バリウム、アジピン酸バリウム、ピメリン酸バリウム、スベリン酸バリウム、アゼル酸バリウム、セバシン酸バリウム、フタル酸バリウム、イソフタル酸バリウム、テレフタル酸バリウム、アントラニル酸バリウム、マンデル酸バリウム、サリチル酸バリウム、タン酸バリウム、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。
【００５４】
好適なラジウム塩には、例えば、フッ化ラジウム、塩化ラジウム、臭化ラジウム、ヨウ化ラジウム、酸化ラジウム、窒化ラジウム、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。
【００５５】
好適な鉄（第一鉄）塩には、例えば、硫酸第一鉄、酸化第一鉄、酢酸第一鉄、クエン酸第一鉄、クエン酸アンモニウム第一鉄、グルコン酸第一鉄第一鉄、シュウ酸第一鉄、フマル酸第一鉄、マレイン酸第一鉄、リンゴ酸第一鉄、乳酸第一鉄、アスコルビン酸第一鉄、エリソルビン酸第一鉄、グリセリン酸第一鉄、ピルビン酸第一鉄、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。
【００５６】
一態様では、本発明の乾燥粒子は、小さく、好ましくは、二価金属カチオン（例えば、カルシウム）の密度が高く、かつ分散可能である。乾燥粒子の大きさを、細粒分（ＦＰＦ）、幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）、または空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）等の当分野の従来の多種多様の方法で表すことができる。概して、本発明の乾燥粒子は、１．０バールでのＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳで測定される時に、約１０μｍ以下（例えば、約０．１μｍ〜約１０μｍ）のＶＭＧＤを有する。好ましくは、本発明の乾燥粒子は、１．０バールでのＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳで測定される時に、約９μｍ以下（例えば、約０．１μｍ〜約９μｍ）、約８μｍ以下（例えば、約０．１μｍ〜約８μｍ）、約７μｍ以下（例えば、約０．１μｍ〜約７μｍ）、約６μｍ以下（例えば、約０．１μｍ〜約６μｍ）、約５μｍ以下（例えば、５μｍ未満、約０．１μｍ〜約５μｍ）、約４μｍ以下（例えば、０．１μｍ〜約４μｍ）、約３μｍ以下（例えば、０．１μｍ〜約３μｍ）、約２μｍ以下（例えば、０．１μｍ〜約２μｍ）、約１μｍ以下（例えば、０．１μｍ〜約１μｍ）、約１μｍ〜約６μｍ、約１μｍ〜約５μｍ、約１μｍ〜約４μｍ、約１μｍ〜約３μｍ、または約１μｍ〜約２μｍのＶＭＧＤを有する。
【００５７】
別の態様では、本発明の乾燥粒子は、大きく、好ましくは、カルシウムの密度が高く、かつ分散可能である。概して、本発明の乾燥粒子は、１．０バールでのＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳで測定される時に、約３０μｍ以下（例えば、約５μｍ〜約３０μｍ）のＶＭＧＤを有する。好ましくは、本発明の乾燥粒子は、１．０バールでのＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳで測定される時に、約２５μｍ以下（例えば、約５μｍ〜約２５μｍ）、約２０μｍ以下（例えば、約５μｍ〜約２０μｍ）、約１５μｍ以下（例えば、約５μｍ〜約１５μｍ）、約１２μｍ以下（例えば、約５μｍ〜約１２μｍ）、約１０μｍ以下（例えば、約５μｍ〜約１０μｍ）、または約８μｍ以下（例えば、６μｍ〜約８μｍ）のＶＭＧＤを有する。
【００５８】
さらに、粒子が小さくても、または大きくても、本発明の乾燥粒子は、分散可能であり、かつ約２．２以下（例えば、約１．０〜約２．２）または約２．０以下（例えば、約１．０〜約２．０）の１／４バールおよび／もしくは０．５／４バールを有する。好ましくは、本発明の乾燥粒子は、約１．９以下（例えば、約１．０〜約１．９）、約１．８以下（例えば、約１．０〜約１．８）、約１．７以下（例えば、約１．０〜約１．７）、約１．６以下（例えば、約１．０〜約１．６）、約１．５以下（例えば、約１．０〜約１．５）、約１．４以下（例えば、約１．０〜約１．４）、約１．３以下（例えば、未満１．３、約１．０〜約１．３）、約１．２以下（例えば、１．０〜約１．２）、約１．１以下（例えば、１．０〜約１．１μｍ）の１／４バールおよび／または０．５／４バールを有するか、または本発明の乾燥粒子は、約１．０の１／４バールを有する。
【００５９】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、約０．５ミクロン〜約１０ミクロンのＭＭＡＤ等の、約１０ミクロン以下のＭＭＡＤを有し得る。好ましくは、本発明の乾燥粒子は、約５ミクロン以下（例えば、約０．５ミクロン〜約５ミクロン、好ましくは、約１ミクロン〜約５ミクロン）、約４ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約４ミクロン）、約３．８ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約３．８ミクロン）、約３．５ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約３．５ミクロン）、約３．２ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約３．２ミクロン）、約３ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約３．０ミクロン）、約２．８ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約２．８ミクロン）、約２．２ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約２．２ミクロン）、約２．０ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約２．０ミクロン）、または約１．８ミクロン以下（例えば、約１ミクロン〜約１．８ミクロン）のＭＭＡＤを有する。
【００６０】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、好ましくは、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、もしくは少なくとも約７０％の約５．６ミクロン未満（ＦＰＦ＜５．６μｍ）のＦＰＦを有し得る。
【００６１】
あるいは、またはさらには、乾燥粉末および本発明の乾燥粒子は、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４５％、好ましくは、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、もしくは少なくとも約７０％の５．０ミクロン未満（ＦＰＦ＿ＴＤ＜５．０μｍ）のＦＰＦを有する。あるいは、またはさらには、乾燥粉末および本発明の乾燥粒子は、少なくとも約４５％、好ましくは、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、もしくは少なくとも約８５％の５．０ミクロン未満の放出用量（ＦＰＦ＿ＥＤ＜５．０μｍ）のＦＰＦを有する。あるいは、またはさらには、本発明の乾燥粉末および乾燥粒子は、少なくとも約２０％、好ましくは、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、もしくは少なくとも約５５％の約３．４ミクロン未満（ＦＰＦ＜３．４μｍ）のＦＰＦを有し得る。
【００６２】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約１．０ｇ／ｃｍ３のタップ密度を有する。例えば、小さく分散可能な乾燥粒子は、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約０．９ｇ／ｃｍ３、約０．２ｇ／ｃｍ３〜約０．９ｇ／ｃｍ３、約０．２ｇ／ｃｍ３〜約０．９ｇ／ｃｍ３、約０．３ｇ／ｃｍ３〜約０．９ｇ／ｃｍ３、約０．４ｇ／ｃｍ３〜約０．９ｇ／ｃｍ３、約０．５ｇ／ｃｍ３〜約０．９ｇ／ｃｍ３、または約０．５ｇ／ｃｍ３〜約０．８ｇ／ｃｍ３、約０．４ｇ／ｃｃ超、約０．５ｇ／ｃｃ超、約０．６ｇ／ｃｃ超、約０．７ｇ／ｃｃ超、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約０．８ｇ／ｃｍ３、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約０．７ｇ／ｃｍ３、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約０．６ｇ／ｃｍ３、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約０．５ｇ／ｃｍ３、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約０．４ｇ／ｃｍ３、約０．１ｇ／ｃｍ３〜約０．３ｇ／ｃｍ３、０．３ｇ／ｃｍ３未満のタップ密度を有する。好ましい実施形態では、タップ密度は、約０．４ｇ／ｃｃより大きい。別の好ましい実施形態では、タップ密度は、約０．５ｇ／ｃｃより大きい。あるいは、タップ密度は、約０．４ｇ／ｃｃ未満である。
【００６３】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子の約１５重量％未満の含水量もしくは溶媒量を有し得る。例えば、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、約１５重量％未満、約１３重量％未満、約１１．５重量％未満、約１０重量％未満、約９重量％未満、約８重量％未満、約７重量％未満、約６重量％未満、約５重量％未満、約４重量％未満、約３重量％未満、約２重量％未満、約１重量％未満の含水量もしくは溶媒量を有し得るか、または無水である。本発明の吸入に適する乾燥粒子は、約６％未満かつ約１％超、約５．５％未満かつ約１．５％超、約５％未満かつ約２％超、約２％、約２．５％、約３％、約３．５％、約４％、約４．５％、約５％の含水量または溶媒量を有し得る。
【００６４】
本明細書に記載されるように、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、１つ以上の二価金属カチオン（例えば、カルシウム（Ｃａ２＋））を、概して塩の形態（例えば、結晶性および／または非晶質）で存在する活性成分として含有する。本発明の吸入に適する乾燥粒子中に存在し得る好適なカルシウム塩には、例えば、塩化カルシウム、硫酸カルシウム、乳酸カルシウム、クエン酸カルシウム、炭酸カルシウム、酢酸カルシウム、リン酸カルシウム、アルギン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、ソルビン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム等が含まれる。ある特定の好ましい態様では、本発明の乾燥粉末または乾燥粒子は、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、アルギン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、またはグルコン酸カルシウムを含有しない。別の好ましい態様では、本発明の乾燥粉末もしくは乾燥粒子は、クエン酸カルシウム、乳酸カルシウム、塩化カルシウム、硫酸カルシウム、またはこれらの塩の任意の組み合わせを含む。別の好ましい態様では、乾燥粉末もしくは乾燥粒子は、クエン酸カルシウム、乳酸カルシウム、またはこれらの塩の任意の組み合わせを含む。所望の場合、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）を含有し、かつナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム、シリコン、スカンジウム、チタニウム、バナジウム、クロム、コバルト、ニッケル、銅、マンガン、亜鉛、錫、銀等の元素の１つ以上の非毒性塩等の１つ以上の追加の塩をさらに含有する。好ましくは、乾燥粒子は、少なくとも１つのカルシウム塩および少なくとも１つの一価カチオン塩（例えば、ナトリウム塩）を含有する。
【００６５】
本発明の吸入に適する乾燥粒子中に存在し得る好適なナトリウム塩には、例えば、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、重リン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、グルコン酸ナトリウム、メタケイ酸ナトリウム等が含まれる。好ましい態様では、乾燥粉末および乾燥粒子は、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、またはこれらの塩の任意の組み合わせを含む。
【００６６】
好適なリチウム塩には、例えば、塩化リチウム、臭化リチウム、炭酸リチウム、硝酸リチウム、硫酸リチウム、酢酸リチウム、乳酸リチウム、クエン酸リチウム、アスパラギン酸リチウム、グルコン酸リチウム、リンゴ酸リチウム、アスコルビン酸リチウム、オロト酸リチウム、コハク酸リチウム、または、およびそれらの組み合わせが含まれる。
【００６７】
好適なカリウム塩には、例えば、塩化カリウム、臭化カリウム、ヨウ化カリウム、重炭酸カリウム、亜硝酸カリウム、過硫酸カリウム、亜硫酸カリウム、重亜硫酸カリウム、リン酸カリウム、酢酸カリウム、クエン酸カリウム、グルタミン酸カリウム、グアニル酸二カリウム、グルコン酸カリウム、リンゴ酸カリウム、アスコルビン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、コハク酸カリウム、酒石酸ナトリウムカリウム、およびそれらの任意の組み合わせが含まれる。
【００６８】
好ましい二価金属塩（例えば、カルシウム塩）は、以下の特性の１つ、好ましくは、２つ以上を有する：（ｉ）吸入に適する乾燥粒子に加工することができ、（ｉｉ）分散可能であり、かつ上昇した湿度への曝露時を含む条件の範囲にわたって物理的に安定している粉末の産生を促進するのに十分な物理化学的安定性を有し、（ｉｉｉ）肺内での堆積時に、例えば、二価金属のカチオンの質量の半分を、３０分未満、１５分未満、５分未満、２分未満、１分未満、もしくは３０秒未満で溶解することができる、迅速な溶解を受け、および（ｉｖ）溶解の著しい発熱もしくは吸熱（ΔＨ）等の低い耐性または有害事象をもたらし得る特性を有さない。例えば、ΔＨは、約−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌより小さいか、または約１０ｋｃａｌ／ｍｏｌより大きい。むしろ、好ましいΔＨは、約−９ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約９ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−８ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約８ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−７ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約７ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−６ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約６ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−５ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約５ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−４ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約４ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−３ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約３ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−２ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約２ｋｃａｌ／ｍｏｌ、約−１ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約１ｋｃａｌ／ｍｏｌ、または約０ｋｃａｌ／ｍｏｌである。
【００６９】
肺内での乾燥粉末または粒子の堆積時の溶解速度に関して、肺内での粒子の迅速な溶解に替えて、二価金属塩は、堆積時に持続した溶解を経る。持続した溶解の期間は、一態様では、分の単位であり、例えば、二価金属塩のカチオンの半分を、約３０分超または約４５分超で粒子から放出することができる。別の態様では、持続した溶解の期間は、時間の単位にわたり、例えば、二価金属塩の半分を、約１時間超、１．５時間超、約２時間超、約４時間超、約８時間超、または約１２時間超で放出することができる。さらなる態様では、持続した溶解は、１日または２日の期間にわたる。
【００７０】
好適な二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）は、所望の溶解度特性を有し得る。概して、極めて、または適度に可溶性の二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）が好ましい。例えば、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末中に含有される好適な二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）は、室温（２０〜３０℃）および１バールで、少なくとも約０．４ｇ／Ｌ、少なくとも約０．８５ｇ／Ｌ、少なくとも約０．９０ｇ／Ｌ、少なくとも約０．９５ｇ／Ｌ、少なくとも約１．０ｇ／Ｌ、少なくとも約２．０ｇ／Ｌ、少なくとも約５．０ｇ／Ｌ、少なくとも約６．０ｇ／Ｌ、少なくとも約１０．０ｇ／Ｌ、少なくとも約２０ｇ／Ｌ、少なくとも約５０ｇ／Ｌ、少なくとも約９０ｇ／Ｌ、少なくとも約１２０ｇ／Ｌ、少なくとも約５００ｇ／Ｌ、少なくとも約７００ｇ／Ｌ、または少なくとも約１０００ｇ／Ｌの蒸留水中での溶解度を有し得る。好ましくは、二価金属カチオン塩は、約０．９０ｇ／Ｌ超、約２．０ｇ／Ｌ超、または約９０ｇ／Ｌ超の溶解度を有する。
【００７１】
所望の場合、水中で極めて可溶性ではない二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）を含有する本発明の乾燥粒子および乾燥粉末を調製することができる。本明細書に記載されるように、そのような乾燥粒子および乾燥粉末を、異なるより可溶性の塩の供給原料を用いて、かつ噴霧乾燥前または噴霧乾燥と同時に、アニオン交換が所望の二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）を産生するのを可能にしながら、調製することができる。
【００７２】
本発明の乾燥粉末および粒子は、組成物中で高い割合の活性成分（例えば、二価金属カチオン（例えば、カルシウム））を含有し、かつ二価金属カチオンの密度が高くあり得る。乾燥粒子は、３％以上、５％以上、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、５０％以上、６０％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、または９５％以上の活性成分を含有し得る。
【００７３】
これは、二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）が、１モルの塩当たり、２モル以上の二価金属カチオン（例えば、Ｃａ２＋）を供給するために分離する時に有利である。そのような塩を、二価金属カチオン（例えば、カルシウム）の密度が高い吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子を産生するために使用することができる。例えば、１モルのクエン酸カルシウムは、溶解時に３モルのＣａ２＋を供給する。二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）は、低分子量であり、および／または低分子量アニオンを含有する塩であることも概して望ましい。カルシウムイオンおよび低分子量アニオンを含有するカルシウム塩等の低分子量二価金属カチオン塩は、高分子塩および高分子量アニオンを含有する塩と比較して、二価カチオン（例えば、Ｃａ２＋）の密度が高い。二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）は、約１０００ｇ／ｍｏｌ未満、約９５０ｇ／ｍｏｌ未満、約９００ｇ／ｍｏｌ未満、約８５０ｇ／ｍｏｌ未満、約８００ｇ／ｍｏｌ未満、約７５０ｇ／ｍｏｌ未満、約７００ｇ／ｍｏｌ未満、約６５０ｇ／ｍｏｌ未満、約６００ｇ／ｍｏｌ未満、約５５０ｇ／ｍｏｌ未満、約５１０ｇ／ｍｏｌ未満、約５００ｇ／ｍｏｌ未満、約４５０ｇ／ｍｏｌ未満、約４００ｇ／ｍｏｌ未満、約３５０ｇ／ｍｏｌ未満、約３００ｇ／ｍｏｌ未満、約２５０ｇ／ｍｏｌ未満、約２００ｇ／ｍｏｌ未満、約１５０ｇ／ｍｏｌ未満、約１２５ｇ／ｍｏｌ未満、または約１００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量を有することが概して好ましい。さらに、またはあるいは、二価金属カチオン（例えば、カルシウムイオン）は、大部分の重量を二価金属カチオン塩の全体の重量に寄与することが概して好ましい。二価金属カチオン（例えば、カルシウムイオン）は、全体の塩の重量の少なくとも１０％、全体の二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）の重量の少なくとも１６％、少なくとも２０％、少なくとも２４．５％、少なくとも２６％、少なくとも３１％、少なくとも３５％、少なくとも３８％に寄与することが概して好ましい。
【００７４】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、二価金属カチオン（Ｃａ２＋）を供給する好適な二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）を含むことができ、二価金属カチオン（例えば、カルシウムイオン）の該塩の全体の重量に対する重量比は、約０．１対約０．５である。例えば、二価金属カチオン（例えば、カルシウムイオン）の該塩の全体の重量に対する重量比は、約０．１５対約０．５、約０．１８対約０．５、約０．２対約５、約０．２５対約０．５、約０．２７対約０．５、約０．３対約５、約０．３５対約０．５、約０．３７対約０．５、または約０．４対約０．５である。
【００７５】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子の少なくとも約５重量％の量で二価カチオン（例えば、Ｃａ２＋）を提供する二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）を含有することができる。例えば、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子の少なくとも約７重量％、少なくとも約１０重量％、少なくとも約１１重量％、少なくとも約１２重量％、少なくとも約１３重量％、少なくとも約１４重量％、少なくとも約１５重量％、少なくとも約１７重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約５５重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約６５重量％、または少なくとも約７０重量％の量で二価カチオン（例えば、Ｃａ２＋）を提供する二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）を含むことができる。
【００７６】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子の少なくとも約５重量％の量で二価金属カチオン（例えば、Ｃａ２＋、Ｂｅ２＋，Mｇ２＋、Ｓｒ２＋、Ｂａ２＋、Ｆｅ２＋）を提供する二価金属カチオン塩を含有することができ、かつ吸入に適する乾燥粒子の少なくとも約３重量％の量で一価カチオン（例えば、Ｎａ＋、Ｌｉ＋、Ｋ＋）を提供する一価塩（例えば、ナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩）も含有することができる。例えば、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子の少なくとも約７重量％、少なくとも約１０重量％、少なくとも約１１重量％、少なくとも約１２重量％、少なくとも約１３重量％、少なくとも約１４重量％、少なくとも約１５重量％、少なくとも約１７重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約４５重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約５５重量％、少なくとも約６０重量％、少なくとも約６５重量％、または少なくとも約７０重量％の量で二価カチオン（例えば、Ｃａ２＋）を供給する二価金属カチオン塩（例えば、カルシウム塩）を含むことができ、かつ吸入に適する乾燥粒子の少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１１％、少なくとも約１２％、少なくとも約１４％、少なくとも約１６％、少なくとも約１８％、少なくとも約２０％、少なくとも約２２％、少なくとも約２５％、少なくとも約２７％、少なくとも約２９％、少なくとも約３２％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、または少なくとも約５５重量％の量で一価アニオン（Ｎａ＋）を提供する一価塩ナトリウム塩をさらに含有することができる。
【００７７】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、二価金属カチオン塩および一価カチオン塩を含有し、１つ以上の塩の成分としての二価カチオンは、乾燥粒子の少なくとも５重量％の量で存在し、かつ二価カチオンの一価カチオンに対する重量比は、約５０：１（すなわち、約５０対約１）〜約０．１：１（すなわち、約０．１対約１）である。二価金属カチオンの一価カチオンに対する重量比は、それぞれ、乾燥粒子中に含有される二価金属カチオン塩および一価塩中に含有される二価金属カチオンならびに一価カチオンの量に基づいている。特定の例では、二価金属カチオンの一価カチオンに対する重量比は、約０．２：１、約０．３：１、約０．４：１、約０．５：１、約０．６：１、約０．７：１、約０．８：１、約０．８６：１、約０．９２：１、約１：１、約１．３：１、約２：１、約５：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約３５：１、約４０：１、約４５：１、もしくは約５０：１、約２０：１〜約０．１：１、約１５：１〜約０．１：１、約１０：１〜約０．１：１、または約５：１〜約０．１：１である。
【００７８】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、二価金属カチオン塩および一価カチオン塩を含有することができ、その中で、二価金属カチオン塩および一価カチオン塩は、対イオンとして塩化物、乳酸塩、クエン酸塩、または硫酸塩を含有し、かつ二価金属カチオン（例えば、Ｃａ２＋、Ｂｅ２＋，Mｇ２＋、Ｓｒ２＋、Ｂａ２＋、Ｆｅ２＋）の一価カチオン（例えば、Ｎａ＋、Ｌｉ＋、Ｋ＋）に対する比率モル：モルは、約５０：１（すなわち、約５０対約１）〜約０．１：１（すなわち、約０．１対約１）である。二価金属カチオンの一価カチオンに対するモル比は、乾燥粒子中に含有される、二価金属カチオン塩および一価カチオン塩中に含有される二価金属カチオンならびに一価カチオンの量に基づいている。好ましくは、１つ以上の二価金属カチオン塩の成分としての二価金属カチオンは、吸入に適する乾燥粒子の少なくとも５重量％の量で存在する。特定の例では、二価金属カチオンおよび一価カチオンは、約８．０：１、約７．５：１、約７．０：１、約６．５：１、約６．０：１、約５．５：１、約５．０：１、約４．５：１、約４．０：１、約３．５：１、約３．０：１、約２．５：１、約２．０：１、約１．５：１、約１．０：１、約０．７７：１、約０．６５：１、約０．５５：１、約０．４５：１、約０．３５：１、約０．２５：１、もしくは約０．２：１、約８．０：１〜約０．５５：１、約７．０：１〜約０．５５：１、約６．０：１〜約０．５５：１、約５．０：１〜約０．５５：１、約４．０：１〜約０．５５：１、約３．０：１〜約０．５５：１、約２．０：１〜約０．５５：１、または約１．０：１〜約０．５５：１のモル比で吸入に適する乾燥粒子中に存在する。
【００７９】
好ましい吸入に適する乾燥粒子は、乳酸カルシウム、クエン酸カルシウム、硫酸カルシウム、および塩化カルシウムから成る群から選択される少なくとも１つのカルシウム塩を含有し、かつ塩化ナトリウムも含有する。
【００８０】
クエン酸カルシウム、硫酸カルシウム、および乳酸カルシウムは、噴霧乾燥を介して吸入に適する乾燥粉末へのそれらの加工を可能にし、かつ肺内での堆積時にそれらの溶解を促進するのに十分な水溶解度を有するが、標準および上昇した湿度への曝露時に、物理的に比較的安定している高いカルシウム塩負荷を伴う乾燥粉末の産生を可能にするのに十分な低吸湿性を有する。クエン酸カルシウム、硫酸カルシウム、および乳酸カルシウムはまた、塩化カルシウムよりも著しく低い溶解熱を有し、これは、気道への投与に有益であり、クエン酸、硫酸、および乳酸イオンは、薬学的組成物中の包含に安全かつ許容可能である。
【００８１】
したがって、本明細書に記載される特長および特性の任意の組み合わせに加えて、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子の総量の少なくとも約５１重量％の１つ以上の塩を含有することができ、１つ以上の塩の各々は、塩の少なくとも１つがルシウム塩であるという条件で、独立して、カルシウムおよびナトリウムならびに乳酸塩（Ｃ３Ｈ５Ｏ３−）、塩化物（Ｃｌ−）、クエン酸塩（Ｃ６Ｈ５Ｏ７３−）、および硫酸塩（ＳＯ４２−）から成る群から選択されるアニオンから成る群から選択されるカチオンから成る。例えば、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子の総量の少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、または少なくとも約９５重量％の塩の１つ以上を含むことができる。
【００８２】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、カルシウム塩およびナトリウム塩を含有することができ、１つ以上のカルシウム塩の成分としてのカルシウムカチオンは、乾燥粒子の少なくとも５重量％の量で存在し、かつカルシウムイオンのナトリウムイオンに対する重量比は、約５０：１（すなわち、約５０対約１）〜約０．１：１（すなわち、約０．１対約１）である。カルシウムイオンのナトリウムイオンに対する重量比は、乾燥粒子中に含有されるカルシウム塩およびナトリウム塩中に含有されるカルシウムイオンならびにナトリウムイオンの量に基づいている。特定の例では、カルシウムイオンのナトリウムイオンに対する重量比は、約０．２：１、約０．３：１、約０．４：１、約０．５：１、約０．６：１、約０．７：１、約０．８：１、約０．８６：１、約０．９２：１、約１：１、約１．３：１、約２：１、約５：１、約１０：１、約１５：１、約２０：１、約２５：１、約３０：１、約３５：１、約４０：１、約４５：１、もしくは約５０：１、約２０：１〜約０．１：１、約１５：１〜約０．１：１、約１０：１〜約０．１：１、または約５：１〜約０．１：１である。
【００８３】
あるいは、またはさらには、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、カルシウム塩およびナトリウム塩を含有することができ、その中で、カルシウム塩およびナトリウム塩は、対イオンとして塩化物、乳酸塩、クエン酸塩、または硫酸塩を含有し、かつカルシウムのナトリウムに対する比率モル：モルは、約５０：１（すなわち、約５０対約１）〜約０．１：１（すなわち、約０．１対約１）である。カルシウムのナトリウムに対するモル比は、乾燥粒子中に含有されるカルシウム塩およびナトリウム塩中に含有されるカルシウムならびにナトリウムの量に基づいている。好ましくは、１つ以上のカルシウム塩の成分としてのカルシウムは、吸入に適する乾燥粒子の少なくとも５重量％の量で存在する。特定の例では、カルシウムおよびナトリウムは、約８．０：１、約７．５：１、約７．０：１、約６．５：１、約６．０：１、約５．５：１、約５．０：１、約４．５：１、約４．０：１、約３．５：１、約３．０：１、約２．５：１、約２．０：１、約１．５：１、約１．０：１、約０．７７：１、約０．６５：１、約０．５５：１、約０．４５：１、約０．３５：１、約０．２５：１、もしくは約０．２：１、約８．０：１〜約０．５５：１、約７．０：１〜約０．５５：１、約６．０：１〜約０．５５：１、約５．０：１〜約０．５５：１、約４．０：１〜約０．５５：１、約３．０：１〜約０．５５：１、約２．０：１〜約０．５５：１、または約１．０：１〜約０．５５：１のモル比で吸入に適する乾燥粒子中に存在する。
【００８４】
所望の場合、本明細書に記載される吸入に適する乾燥粒子は、生理学的または薬学的に許容される担体または賦形剤を含むことができる。例えば、薬学的に許容される賦形剤は、単独または任意の所望の組み合わせでのいずれかで、吸入療法に有用な賦形剤であるとして当分野で知られている標準の炭水化物、糖アルコール、およびアミノ酸担体のいずれかを含む。これらの賦形剤は、概して、比較的流動性の粒子であり、水との接触時に密集または重合せず、分散粉末として吸入される時に毒物学的に無害であり、かつ本発明の塩の所望の生理作用に悪影響を及ぼす形で、活性薬剤と著しく相互作用しない。この点で有用な炭水化物賦形剤には、単糖類および多糖類が含まれる。代表的な単糖類には、右旋糖（無水かつ一水和物であり、ブドウ糖およびブドウ糖一水和物とも称される）、ガラクトース、マンニトール、Ｄ−マンノース、ソルボース等の炭水化物賦形剤が含まれる。代表的な二糖類には、ラクトース、マルトース、サッカロース、トレハロース等が含まれる。代表的な三糖類には、ラフィノース等が含まれる。他の炭水化物賦形剤には、２−ヒドロキシプロピル−ベータ−シクロデキストリン等のマルトデキストリンおよびシクロデキストリンが含まれ、所望に応じて使用することができる。代表的な糖アルコールには、マンニトール、ソルビトール等が含まれる。
【００８５】
好適なアミノ酸賦形剤は、標準の薬剤加工技術下で粉末を形成し、かつ無極性（疎水性）アミノ酸および極性（非荷電、正荷電、ならびに負荷電）アミノ酸を含む自然発生アミノ酸のいずれかを含み、そのようなアミノ酸は、医薬品グレードであり、米国食品医薬品局によって一般的に安全と見なされる（ＧＲＡＳ）。無極性アミノ酸の代表的な例には、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、トリプトファン、およびバリンが挙げられる。極性非荷電アミノ酸の代表的な例には、シスチン、グリシン、グルタミン、セリン、トレオニン、およびチロシンが挙げられる。極性正荷電アミノ酸の代表的な例には、アルギニン、ヒスチジン、およびリジンが挙げられる。負荷電アミノ酸の代表的な例には、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられる。これらのアミノ酸は、概して、Aｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．，Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，Ｗｉｓ．またはＳｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ等の医薬品グレード製品を提供する商業的供給源から入手可能である。
【００８６】
疎水性アミノ酸ロイシン等の好ましいアミノ酸賦形剤は、吸入に適する乾燥粒子の約５０重量％以下の量で、本発明の乾燥粒子中に存在し得る。例えば、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、約５重量％〜約３０重量％、約１０重量％〜約２０重量％、約５重量％〜約２０重量％、約４５重量％以下、約４０重量％以下、約３５重量％以下、約３０重量％以下、約２５重量％以下、約２０重量％以下、約１８重量％以下、約１６重量％以下、約１５重量％以下、約１４重量％以下、約１３重量％以下、約１２重量％以下、約１１重量％以下、約１０重量％以下、約９重量％以下、約８重量％以下、約７重量％以下、約６重量％以下、約５重量％以下、約４重量％以下、約３重量％以下、約２重量％以下、または約１重量％以下の量のアミノ酸ロイシンを含有し得る。
【００８７】
マルトデキストリンおよびマンニトール等の好ましい炭水化物賦形剤は、吸入に適する乾燥粒子の約５０重量％以下の量で、本発明の乾燥粒子中に存在し得る。例えば、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、約４５重量％以下、約４０重量％以下、約３５重量％以下、約３０重量％以下、約２５重量％以下、約２０重量％以下、約１８重量％以下、約１６重量％以下、約１５重量％以下、約１４重量％以下、約１３重量％以下、約１２重量％以下、約１１重量％以下、約１０重量％以下、約９重量％以下、約８重量％以下、約７重量％以下、約６重量％以下、約５重量％以下、約４重量％以下、約３重量％以下、約２重量％以下、または約１重量％以下の量のマルトデキストリンを含有し得る。いくつかの好ましい態様では、乾燥粒子は、ロイシン、マルトデキストリン、マンニトール、およびそれらの任意の組み合わせから選択される賦形剤を含有する。特定の実施形態では、賦形剤は、ロイシン、マルトデキストリン、またはマンニトールである。
【００８８】
特定の実施形態では、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、（ａ）乳酸カルシウム、クエン酸カルシウム、または硫酸カルシウムから選択される、乾燥粒子の少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５重量％、もしくは少なくとも約５０重量％の量のカルシウム塩、ならびに（ｂ）乾燥粒子の少なくとも約２５％もしくは少なくとも約３０重量％の量の塩化ナトリウム等のナトリウム塩を含有し、かつ本明細書に記載の特性または特長のいずれかを有し得る。所望の場合、ロイシン、マルトデキストリン、マンニトール、またはそれらの任意の組み合わせ等の賦形剤は、乾燥粒子の約５０％以下もしくは約２０重量％以下の量で存在し得る。例えば、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、（ａ）乾燥粒子の約３０％〜約６５％、約４０％〜約６５％、もしくは約４５％〜約６５重量％の量のカルシウム塩、（ｂ）乾燥粒子の約２５％〜約６０％もしくは約３０％〜約６０重量％の量の塩化ナトリウム等のナトリウム塩、（ｃ）乾燥粒子の約２０重量％以下、またはより好ましくは、乾燥粒子の約１０重量％以下の量のロイシン、マルトデキストリン、マンニトール、もしくはそれらの任意の組み合わせ等の賦形剤を含み得、かつ（ｄ）本明細書に記載の１／４バール、０．５／４バール、ＶＭＧＤ、ＭＭＡＤ、ＦＰＦ等の特性または特長のいずれかを有し得る。
【００８９】
いくつかの態様では、吸入に適する乾燥粒子は、二価金属イオン塩ならびに一価塩を含み、粒子の結晶および非晶質含有量を特徴とする。例えば、吸入に適する乾燥粒子は、非晶質二価金属イオン塩に富んだ相ならびに結晶性一価塩相等の非晶質および結晶含有量の混合物を含み得る。この種類の吸入に適する乾燥粒子は、いくつかの利点を提供する。例えば、本明細書に記載されるように、結晶相（例えば、結晶塩化ナトリウム）は、乾燥した状態の乾燥粒子の安定性および分散性特性に寄与することができる一方で、非晶相（例えば、非晶質カルシウム塩）は、気道内で堆積時に迅速な水摂取ならびに粒子の溶解を促進することができる。これは、乾燥粒子中に存在する比較的高い水溶解度を有する塩（塩化ナトリウム等）が結晶状態である時、かつ乾燥粒子中に存在する比較的低い水溶解度を有する塩が非晶質状態である時に特に有利である。
【００９０】
非晶相は、少なくとも１００℃、少なくとも１１０℃、１２０℃、少なくとも１２５℃、少なくとも１３０℃、少なくとも１３５℃、少なくとも１４０℃、１２０℃〜２００℃、１２５℃〜２００℃、１３０℃〜２００℃、１２０℃〜１９０℃、１２５℃〜１９０℃、１３０℃〜１９０℃、１２０℃〜１８０℃、１２５℃〜１８０℃、または１３０℃〜１８０℃のＴｇ等の高いガラス転移温度（Ｔｇ）の特徴もある。
【００９１】
いくつかの実施形態では、吸入に適する乾燥粒子は、二価金属カチオン塩に富んだ非晶相および一価塩結晶相を含有し、非晶相の結晶相に対する比率（ｗ：ｗ）は、約５：９５〜約９５：５、約５：９５〜約１０：９０、約１０：９０〜約２０：８０、約２０：８０〜約３０：７０、約３０：７０〜約４０：６０、約４０：６０〜約５０：５０、約５０：５０〜約６０：４０、約６０：４０〜約７０：３０、約７０：３０〜約８０：２０、または約９０：１０〜約９５：５である。他の実施形態では、吸入に適する乾燥粒子は、二価金属カチオン塩に富んだ非晶相および一価塩結晶相を含有し、非晶相の粒子に対する重量比（ｗ：ｗ）約５：９５〜約９５：５、約５：９５〜約１０：９０、約１０：９０〜約２０：８０、約２０：８０〜約３０：７０、約３０：７０〜約４０：６０、約４０：６０〜約５０：５０、約５０：５０〜約６０：４０、約６０：４０〜約７０：３０、約７０：３０〜約８０：２０、または約９０：１０〜約９５：５である。他の実施形態では、吸入に適する乾燥粒子は、二価金属カチオン塩に富んだ非晶相および一価塩結晶相を含有し、結晶相の粒子に対する重量比（ｗ：ｗ）は、約５：９５〜約９５：５、約５：９５〜約１０：９０、約１０：９０〜約２０：８０、約２０：８０〜約３０：７０、約３０：７０〜約４０：６０、約４０：６０〜約５０：５０、約５０：５０〜約６０：４０、約６０：４０〜約７０：３０、約７０：３０〜約８０：２０、または約９０：１０〜約９５：５である。
【００９２】
いくつかの実施形態では、吸入に適する乾燥粒子は、クエン酸カルシウム、硫酸カルシウム、乳酸カルシウム、塩化カルシウム、またはそれらの任意の組み合わせ等のカルシウム塩、ならびに塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、またはそれらの任意の組み合わせ等のナトリウム塩を含み、吸入に適する乾燥粒子は、カルシウム塩に富んだ非晶相および結晶性ナトリウム塩相を含有する。特定の実施形態では、カルシウム塩に富んだ非晶相は、クエン酸カルシウムおよび少なくともいくつかの塩化カルシウム、乳酸カルシウムおよび少なくともいくつかの塩化カルシウム、または硫酸カルシウムおよび少なくともいくつかの塩化カルシウムを含む。いくつかの実施形態では、吸入に適する乾燥粒子は、カルシウム塩に富んだ非晶相およびナトリウム塩結晶相を含有し、非晶相の結晶相に対する比率（ｗ：ｗ）は、５：９５〜約９５：５、約５：９５〜約１０：９０、約１０：９０〜約２０：８０、約２０：８０〜約３０：７０、約３０：７０〜約４０：６０、約４０：６０〜約５０：５０、約５０：５０〜約６０：４０、約６０：４０〜約７０：３０、約７０：３０〜約８０：２０、または約９０：１０〜約９５：５である。他の実施形態では、吸入に適する乾燥粒子は、カルシウム塩に富んだ非晶相およびナトリウム塩結晶相を含有し、非晶相の粒子に対する重量比（ｗ：ｗ）は、約５：９５〜約９５：５、約５：９５〜約１０：９０、約１０：９０〜約２０：８０、約２０：８０〜約３０：７０、約３０：７０〜約４０：６０、約４０：６０〜約５０：５０、約５０：５０〜約６０：４０、約６０：４０〜約７０：３０、約７０：３０〜約８０：２０、または約９０：１０〜約９５：５である。他の実施形態では、吸入に適する乾燥粒子は、カルシウム塩に富んだ非晶相およびナトリウム塩結晶相を含有し、結晶相の粒子に対する重量比（ｗ：ｗ）は、約５：９５〜約９５：５、約５：９５〜約１０：９０、約１０：９０〜約２０：８０、約２０：８０〜約３０：７０、約３０：７０〜約４０：６０、約４０：６０〜約５０：５０、約５０：５０〜約６０：４０、約６０：４０〜約７０：３０、約７０：３０〜約８０：２０、または約９０：１０〜約９５：５である。
【００９３】
好ましくは、吸入に適する乾燥粒子は、本明細書に記載されるように、２以下の１／４バールまたは０．５／４バールを有する。例えば、１．９以下、１．８以下、１．７以下、１．６以下、１．５以下、１．４以下、１．３以下、１．２以下、１．１以下、もしくは約１．０の１／４バールまたは０．５／４。あるいは、またはさらには、吸入に適する乾燥粒子は、約５ミクロン以下ＭＭＡＤを有する。あるいは、またはさらには、吸入に適する乾燥粒子は、約０．５ミクロン〜約５ミクロンのＶＭＧＤ、もしくは約５ミクロン〜約２０ミクロンのＶＭＧＤを有し得る。あるいは、またはさらには、吸入に適する乾燥粒子は、約−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌを超えない（例えば、−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ）溶解熱を有し得る。
【００９４】
本明細書に記載されるように、吸入に適する乾燥粒子は、ロイシン、マルトデキストリン、またはマンニトール等の賦形剤をさらに含み得る。賦形剤は、結晶性もしくは非晶質であり得るか、またはこれらの形態の組み合わせで存在し得る。いくつかの実施形態では、賦形剤は、非晶質であるか、または主に非晶質である。
【００９５】
本明細書に記載される、賦形剤（すなわち、ロイシン、マルトデキストリン）を含有した吸入に適する乾燥粉末のラマンスペクトルは、賦形剤に割り当てられたピークを含まなかった。これは、賦形剤が粒子の表面で濃縮されず、かつ賦形剤が粒子全体に均一に分布されるか、または粒子の表面に曝露されないかのいずれかであることを示す。ロイシン賦形剤は、とりわけ、粒子の表面で濃縮される時に分散性を改善することが報告されている。例えば、米国第２００３／０１８６８９４号を参照されたい。したがって、ロイシンは、この方法で分散エンハンサの機能を果たしているようには見られない。したがって、賦形剤（例えば、ロイシン）を含有する本発明の吸入に適する乾燥粒子において、賦形剤は、粒子表面ではなく粒子内に分布され得るか、または粒子全体に分布（例えば、均一的に分布）され得る。例えば、いくつかの特定の実施形態は、本発明の吸入に適する乾燥粒子は、ラマン分光法下で賦形剤（例えば、ロイシン）の存在を示す特性ピークを生成しない。より特定の実施形態では、ロイシンを含有する吸入に適する乾燥粉末は、ラマン分光法下で特性ロイシンピーク（例えば、１３４０ｃｍ−１）を生成しない。
【００９６】
本明細書に記載される、本発明のいくつかの粉末は、低い流動特性を有する。さらに、驚いたことに、これらの粉末は、極めて分散可能である。流動特性および分散性が、両者ともに粒子集塊または凝集の悪影響を受けると知られているため、これは驚きである。したがって、低い流動特性を有する粒子が極めて分散可能であろうということは予想外であった。
【００９７】
任意の組み合わせにおける本明細書に記載の特長および特性のいずれかに加えて、吸入に適する乾燥粒子は、低い流動特性を有し得るが、良好な分散性を有し得る。例えば、吸入に適する乾燥粒子は、１．３５より大きい（例えば、１．４以上、１．５以上、１．６以上、１．７以上、１．８以上、１．９以上、２．０以上）ハウスナー比を有し得、かつ２以下、１．９以下、１．８以下、１．７以下、１．６以下、１．５以下、１．４以下、１．３以下、１．２以下、１．１以下、もしくは約１．０の１／４バールまたは０．５バールも有し得る。
【００９８】
本明細書に記載の任意の組み合わせの特長および特性のいずれかに加えて、吸入に適する乾燥粒子は、極めて発熱性ではない溶解熱を有し得る。好ましくは、溶解熱は、模擬肺液（例えば、Ｍｏｓｓ，Ｏ．Ｒ．１９７９．Ｓｉｍｕｌａｎｔｓ  ｏｆ  ｌｕｎｇ  ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌ  ｆｌｕｉｄ．  Ｈｅａｌｔｈ  Ｐｈｙｓ．  ３６，４４７−４４８、またはＳｕｎ，Ｇ．２００１．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｌｕｎｇ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｌｉｎｉｎｇ  ｆｌｕｉｄ  ｗｉｔｈ  ｍｅｔａｌ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  ｍａｔｔｅｒ．  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  ２８１，Ｌ８０７−Ｌ８１５に記載される）のイオン液体を用いて、ｐＨ７．４および等温熱量計において３７℃で判定される。例えば、吸入に適する乾燥粒子は、塩化カルシウム二水和物二水和物の溶解熱よりも低い発熱性である溶解熱を有し得、例えば、約−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−９ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−８ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−７ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−６ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−５ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−４ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−３ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−２ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、約−１ｋｃａｌ／ｍｏｌ超、または約−１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ〜約１０ｋｃａｌ／ｍｏｌである溶解熱を有し得る。
【００９９】
所望の場合、塩製剤には、ＣＦの習慣的管理に有用である、去痰剤もしくは粘液溶解剤、界面活性剤、抗生物質、抗ウイルス剤、抗ヒスタミン剤、咳抑制剤、気管支拡張剤、抗炎症剤、ステロイド、ワクチン、免疫賦活剤、去痰薬、巨大分子剤、治療剤等の１つ以上の追加の薬剤が含まれ得る。
【０１００】
好適な去痰剤または粘液溶解剤の例として、ＭＵＣ５ＡＣおよびＭＵＣ５Ｂムチン、ＤＮＡ−ａｓｅ、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）、システイン、ナシステリン、ドルナーゼアルファ、ゲルゾリン、ヘパリン、硫酸ヘパリン、Ｐ２Ｙ２作動薬（例えば、ＵＴＰ、ＩＮＳ３６５）、高浸透圧性生理食塩水、およびマンニトールが挙げられる。
【０１０１】
好適な界面活性剤には、Ｌ−アルファ−ホスファチジルコリンジパルミトイル（「ＤＰＰＣ」）、ジホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−Ｌ−セリン（ＤＰＰＳ）、１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１−パルミトイル−２−オレオイルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、脂肪アルコール、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル、表面活性脂肪酸、トリオレイン酸ソルビタン（スパン８５）、グリココール酸、界面活性剤、ポロキサマー、ソルビタン脂肪酸エステル、チロキサポール、リン脂質、およびアルキル糖類が含まれる。
【０１０２】
所望の場合、塩製剤は、抗生物質を含有し得る。例えば、細菌性肺炎またはＶＡＴを治療するための塩製剤は、マクロライド（例えば、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、およびエリスロマイシン）、テトラサイクリン（例えば、ドキシサイクリン、チゲサイクリン）、フルオロキノロン（例えば、ゲミフロキサシン、レボフロキサシン、シプロフロキサシン、およびモキシフロキサシン）、セファロスポリン（例えば、セフトリアキソン、セフォタキシム、セフタジジム、セフェピム）、アンピシリン−スルバクタム、ピペラシリン−タゾバクタム、およびクラブラン酸チカルシリン等の任意でβ−ラクタマーゼ阻害剤を有するペニシリン（例えば、アモキシシリン、クラブラン酸アモキシシリン、アンピシリン、ピペラシリン、およびチカルシリン）（例えば、スルバクタム、タゾバクタム、およびクラブラン酸）、アミノグリコシド（例えば、アミカシン、アルベカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルミシン、パロモマイシン、ロドストレプトマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、およびアプラマイシン）、ペネムもしくはカルバペネム（例えば、ドリペネム、エルタペネム、イミペネム、およびメロペネム）、モノバクタム（例えば、アズトレオナム）、オキサゾリジノン（例えば、リネゾリド）、バンコマイシン、グリコペプチド抗生物質（例えば、テラバンシン）、結核性マイコバクテリア抗生物質等の抗生物質をさらに含むことができる。
【０１０３】
所望の場合、塩製剤は、ヒト型結核菌等のマイコバクテリアの感染を治療するための薬剤を含有し得る。マイコバクテリア（例えば、ヒト型結核菌）の感染を治療するための好適な薬剤には、アミノグリコシド（例えば、カプレオマイシン、カナマイシン、ストレプトマイシン）、フルオロキノロン（例えば、シプロフロキサシン、レボフロキサシン、モキシフロキサシン）、イソジアニドおよびイソジアニド類似体（例えば、エチオナミド）、アミノサリチル酸、サイクロセリン、ジアリルキノリン、エタンブトール、ピラジンアミド、プロチオナミド、リファンピン等が含まれる。
【０１０４】
所望の場合、塩製剤は、オセルタミビル、ザナミビルアマンタジンまたはリマンタジン、リバビリン、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、ホスカビル、Ｃｙｔｏｇａｍ（登録商標）（Ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｇｌｏｂｕｌｉｎ）、プレコナリル、ルピントリビル、パリビズマブ、モタビズマブ、シタラビン、ドコサノール、デノチビル、シドホビル、およびアシクロビル等の好適な抗ウイルス剤を含有し得る。塩製剤は、ザナミビル、オセルタミビル、アマンタジン、またはリマンタジン等の好適な抗インフルエンザ薬剤を含有し得る。
【０１０５】
好適な抗ヒスタミン剤には、クレマスチン、アゼラスチン、ロラタジン、フェキソフェナジン等が含まれる。
【０１０６】
好適な咳抑制剤には、ベンゾナテート、ベンプロペリン、クロブチノール、ジフェンヒドラミン、デキストロメトルファン、ジブナート、フェドリレート、グラウシン、オキソラミン、ピペリジオン、コデイン等のオピオイド等が含まれる。
【０１０７】
好適な気管支拡張剤には、短時間作用型ベータ２作動薬、長時間作用型ベータ２作動薬（ＬＡＢＡ）、長時間作用型ムスカリン性拮抗薬（ＬＡＭＡ）、ＬＡＢＡおよびＬＡＭＡの組み合わせ、メチルキサンチン等が含まれる。好適な短時間作用型ベータ２作動薬には、アルブテロール、エピネフリン、ピルブテロール、レバルブテロール、メタプロテレノール、Ｍａｘａｉｒ（ピルブテロール）等が含まれる。好適なＬＡＢＡには、サルメテロール、ホルモテロールおよび異性体（例えば、アルホルモテロール）、クレンブテロール、ツロブテロール、ビランテロール（Ｒｅｖｏｌａｉｒ（商標））、インダカテロール等が含まれる。ＬＡＭＡの例として、チオトロピウム、グリコピロレート、アクリジニウム、イプラトロピウム等が挙げられる。ＬＡＢＡおよびＬＡＭＡの組み合わせの例として、インダカテロールとグリコピロレート、インダカテロールとチオトロピウム等が挙げられる。メチルキサンチンの例として、テオフィリン等が挙げられる。
【０１０８】
好適な抗炎症剤には、ロイコトリエン阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、他の抗炎症剤等が含まれる。好適なロイコトリエン阻害剤には、モンテルカスト（シスチニルロイコトリエン阻害剤）、マシルカスト、ザフィルルカスト（ロイコトリエンＤ４およびＥ４受容体阻害剤）、ジロートン（５−リポキシゲナーゼ阻害剤）等が含まれる。好適なＰＤＥ４阻害剤には、シロミラスト、ロフルミラスト等が含まれる。他の抗炎症剤には、オマリズマブ（抗ＩｇＥ免疫グロブリン）、ＩＬ−１３およびＩＬ−１３受容体阻害剤（ＡＭＧ−３１７、ＭＩＬＲ１４４４Ａ、ＣＡＴ−３５４、ＱＡＸ５７６、ＩＭＡ−６３８、アンルキンズマブ（Ａｎｒｕｋｉｎｚｕｍａｂ）、ＩＭＡ−０２６、ＭＫ−６１０５、ＤＯＭ−０９１０等）、ＩＬ−４およびＩＬ−４受容体阻害剤（ピトラキンラ、ＡＥＲ−００３、ＡＩＲ−６４５、ＡＰＧ−２０１、ＤＯＭ−０９１９等）、カナキヌマブ等のＩＬ−１阻害剤、ＡＺＤ１９８１（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａより市販）等のＣＲＴｈ２受容体拮抗薬、ＡＺＤ９６６８（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａより市販）等の好中球エラスターゼ阻害剤、ロスマピモド（Ｌｏｓｍａｐｉｍｏｄ）等のＰ３８キナーゼ阻害剤等が含まれる。
【０１０９】
好適なステロイドには、コルチコステロイド、コルチコステロイドおよびＬＡＢＡの組み合わせ、コルチコステロイドおよびＬＡＭＡの組み合わせ等が含まれる。好適なコルチコステロイドには、ブデソニド、フルチカゾン、フルニソリド、トリアムシノロン、ベクロメタソン、モメタゾン、シクレソニド、デキサメサゾン等が含まれる。コルチコステロイドおよびＬＡＢＡの組み合わせには、サルメテロールとフルチカゾン、ホルモテロールとブデソニド、ホルモテロールとフルチカゾン、ホルモテロールとモメタゾン、インダカテロールとモメタゾン等が含まれる。
【０１１０】
好適な去痰薬には、グアイフェネシン、グアヤコールスルホン酸、塩化アンモニウム、ヨウ化カリウム、チロキサポール、五硫化アンチモン等が含まれる。
【０１１１】
経鼻的に吸入されるインフルエンザワクチン等の好適なワクチン。
【０１１２】
好適な巨大分子には、タンパク質および大ペプチド、多糖およびオリゴ糖、ならびに治療、予防または診断活性を有するＤＮＡおよびＲＮＡ核酸分子ならびにそれらの類似体が含まれる。タンパク質には、モノクローナル抗体等の抗体が含まれ得る。核酸分子には、遺伝子、転写もしくは翻訳を阻害するために、相補的ＤＮＡ、ＲＮＡ、またはリボソームに結合するＳｉＲＮＡ等のアンチセンス分子が含まれる。
【０１１３】
全身適用のために選択される高分子薬物：カルシトニン、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、因子ＩＸ、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー、刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、成長ホルモン、インスリン、インターフェロンアルファ、インターフェロンベータ、インターフェロンガンマ、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）、ＦＳＨ、毛様体神経栄養因子、成長ホルモン放出因子（ＧＲＦ）、インスリン様成長因子、インスリントロピン、インターロイキン−１受容体拮抗薬、インターロイキン−３、インターロイキン−４、インターロイキン−６、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、サイモシンアルファ１、ＩＩｂ／ＩＩＩａ阻害剤、アルファ−１抗トリプシン、抗ＲＳＶ抗体、パリビズマブ、モタビズマブ、およびＡＬＮ−ＲＳＶ、嚢胞性線維性膜貫通調節因子（ＣＦＴＲ）遺伝子、デオキシリボヌクレアーゼ（ＤＮａｓｅ）、ヘパリン、殺菌／透過性増加タンパク質（ＢＰＩ）、抗サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）抗体、インターロイキン−１受容体拮抗薬等。
【０１１４】
ＣＦの習慣的管理に有用である選択される治療には、抗生物質／マクロライド抗生物質、気管支拡張剤、吸入ＬＡＢＡ、および気道分泌物排除を促進する薬剤が含まれる。抗生物質／マクロライド抗生物質の好適な例として、トブラマイシン、アジスロマイシン、シプロフロキサシン、コリスチン等が挙げられる。気管支拡張剤の好適な例として、アルブテロール等の吸入短時間作用型ベータ２作動薬が挙げられる。吸入ＬＡＢＡの好適な例として、サルメテロール、ホルモテロール等が挙げられる。気道分泌物排除を促進する薬剤の好適な例として、ドルナーゼアルファ、高浸透圧性生理食塩水等が挙げられる。
【０１１５】
吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末は、約１キロダルトン（１０００ダルトン、Ｄａ）より大きい分子量を有する塩、賦形剤、または他の活性成分を含有しないのが、概して好ましい。例えば、本発明の吸入に適する粒子は、好ましくは、１ＫＤａ超、約９００Ｄａ超、約８００Ｄａ超、約７００Ｄａ超、または約６００Ｄａ超の分子量を有するタンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチド、核酸、またはオリゴヌクレオチドを含有しない。
【０１１６】
本明細書に記載の吸入に適する乾燥粉末および吸入に適する乾燥粒子は塩を含有するため、それらは吸湿性であり得る。したがって、粉末の水和反応を防止する条件下で、吸入に適する乾燥粉末および吸入に適する乾燥粒子を保管または維持するのが望ましい。例えば、水和反応を防止するのに望ましい場合、保管環境の相対湿度は、７５％未満、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、または５％未満の湿度でなければならない。吸入に適する乾燥粉末および吸入に適する乾燥粒子は、これらの条件下で（例えば、密封カプセル、ブリスター、バイアル内に）包装され得る。
【０１１７】
本発明はまた、本明細書に記載の方法に従って、供給原料溶液、乳濁液、または懸濁液を調製し、かつ供給原料を噴霧乾燥させることによって産生される吸入に適する乾燥粉末もしくは吸入に適する乾燥粒子にも関する。供給原料は、（ａ）（例えば、供給原料を調製するために使用される全溶質の）少なくとも約２５重量％の量の乳酸カルシウムまたは塩化カルシウム等のカルシウム塩、および（ｂ）（例えば、供給原料を調製するために使用される全溶質の）少なくとも約１重量％の量のクエン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、または硫酸ナトリウム等のナトリウム塩を用いて調製され得る。所望の場合、ロイシン等の１つ以上の賦形剤は、（例えば、供給原料を調製するために使用される全溶質の）約７４重量％以下の量で、供給原料に添加され得る。例えば、供給原料を調製するために使用されるカルシウム塩は、供給原料を調製するために使用される全溶質の少なくとも約３０重量％、少なくとも約３５重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約６０重量％、または少なくとも約７０重量％の量であり得る。例えば、供給原料を調製するために使用されるナトリウム塩は、供給原料を調製するために使用される全溶質の少なくとも約２重量％、少なくとも約３重量％、少なくとも約４重量％、少なくとも約５重量％、少なくとも約６重量％、少なくとも約７重量％、少なくとも約８重量％、少なくとも約９重量％、少なくとも約１０重量％、少なくとも約２０重量％、少なくとも約２５重量％、少なくとも約３０重量％、少なくとも約４０重量％、少なくとも約５０重量％、少なくとも約５５重量％、または少なくとも約６５重量％の量であり得る。例えば、供給原料に添加される賦形剤は、供給原料を調製するために使用される全溶質の約５０重量％以下、約３０重量％以下、約２０重量％以下、約１０重量％以下、約９重量％以下、約８重量％以下、約７重量％以下、約６重量％以下、約５重量％以下、約４重量％以下、約３重量％以下、約２重量％以下、約１重量％以下の量であり得る。
【０１１８】
ある実施形態では、吸入に適する乾燥粉末または本発明の吸入に適する乾燥粒子を、（１）（ａ）全乾燥溶質の約１０．０％のロイシン、約３５．１％の塩化カルシウム、および約５４．９％のクエン酸ナトリウムの重量割合を含有する乾燥溶質、ならびに（ａ）溶質の溶解および供給原料の形成に好適な１つ以上の溶媒を含む供給原料を調製すること、かつ（２）供給原料を噴霧乾燥させることによって得ることができる。別の実施形態では、吸入に適する乾燥粉末または本発明の吸入に適する乾燥粒子を、（１）（ａ）全乾燥溶質の約１０．０％のロイシン、約５８．６％の乳酸カルシウム、および約３１．４％の塩化ナトリウムの重量割合を含有する乾燥溶質、ならびに（ａ）溶質の溶解および供給原料の形成に好適な１つ以上の溶媒を含む供給原料を調製すること、かつ（２）供給原料を噴霧乾燥させることによって得ることができる。別の実施形態では、吸入に適する乾燥粉末または本発明の吸入に適する乾燥粒子を、（１）（ａ）全乾燥溶質の約１０．０％のロイシン、約３９．６％の塩化カルシウム、および約５０．４４％の硫酸ナトリウムの重量割合を含有する乾燥溶質、ならびに（ｂ）溶質の溶解および供給原料の形成に好適な１つ以上の溶媒を含む供給原料を調製すること、かつ（２）供給原料を噴霧乾燥させることによって得ることができる。別の実施形態では、吸入に適する乾燥粉末または本発明の吸入に適する乾燥粒子を、（１）（ａ）全乾燥溶質の約１０．０％のマルトデキストリン、約５８．６％の乳酸カルシウム、および約３１．４％の塩化ナトリウムの重量割合を含有する乾燥溶質、ならびに（ａ）溶質の溶解および供給原料の形成に好適な１つ以上の溶媒を含む供給原料を調製すること、かつ（２）供給原料を噴霧乾燥させることによって得ることができる。本明細書に記載されるように、当分野で知られている様々な方法（例えば、静的混合、バルク混合）を、溶質および溶媒を混合して供給原料を調製するために使用することができる。所望の場合、混合の他の好適な方法が使用され得る。例えば、混合を引き起こすか、または促進する追加の成分を供給原料中に含むことができる。例えば、二酸化炭素は、発泡または泡立ちを生成し、それゆえに、溶質および溶媒の物理的混合を促進する働きをすることができる。炭酸または重炭酸の様々な塩は、二酸化炭素が生成する効果と同一の効果を促進することができ、したがって、本発明の供給原料の調製において使用することができる。
【０１１９】
好ましい実施形態では、吸入に適する乾燥粉末または本発明の吸入に適する乾燥粒子は、噴射剤の使用なしで、呼吸器系への吸入に適する乾燥粒子の有効な送達を可能にするエアロゾル特性を有する。
【０１２０】
ある実施形態では、吸入に適する乾燥粉末または本発明の吸入に適する乾燥粒子を、イオン交換反応を介して産生することができる。本発明のある特定の実施形態では、２つの飽和もしくは亜飽和溶液は、静的混合後の飽和または過飽和溶液を得るために、静的混合器内に供給される。好ましくは、混合後の溶液は過飽和である。２つの溶液は、水溶性または有機であり得、好ましくは、実質的に水溶性である。静的混合後の溶液は、次に、噴霧乾燥機の霧化装置内に供給される。好ましい実施形態では、静的混合後の溶液は、即座に霧化器装置内に供給される。霧化器装置のいくつかの例には、二流体ノズル、回転霧化器、または圧力ノズルが挙げられる。好ましくは、霧化器装置は、二流体ノズルである。一実施形態では、二流体ノズルは内部混合ノズルであり、ガスが最外側のオフィリスから出る前に、液体フィードに作用することを意味する。別の実施形態では、二流体ノズルは外部混合ノズルであり、ガスが最外側のオリフィスから出た後に、液体フィードに作用することを意味する。
【０１２１】
本発明の乾燥粒子は、本発明の乾燥粒子および乾燥粉末の高分散性の特性を維持するために、活性成分とブレンドされ得るか、または活性成分と共製剤化され得る。
【０１２２】
一態様では、二価カチオンの塩（例えば、カルシウム、マグネシウム）は、小さい極めて分散可能な粉末、または大きい多孔性粒子を作製するために、無カルシウム活性薬剤と共製剤化され得る。任意で、これらの粒子は、一価カチオン塩（例えば、ナトリウム、カリウム）を含み得、かつ任意で賦形剤（例えば、ロイシン、マルトデキストリン、マンニトール、ラクトース）も含み得る。成分は、噴霧乾燥前に単一粒子内でともに混合（例えば、１つの溶液として混合、２つの溶液として静的混合）され得る。
【０１２３】
別の態様では、本発明の乾燥粒子は、大きく多孔性であり、かつ分散可能である。乾燥粒子の大きさを、多種様々の方法で表すことができる。粒子は、０．５ｇ／ｃｃ未満、好ましくは、０．４ｇ／ｃｃ未満のタップ密度を有する、５〜３０μｍまたは５〜２０μｍのＶＭＡＤを有し得る。
乾燥粉末および乾燥粒子を調製するための方法
【０１２４】
吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を、任意の好適な方法を用いて調製することができる。吸入に適する乾燥粉末および粒子を調製するための多くの好適な方法は、当分野で慣習的であり、単一および二重乳化溶媒蒸発、噴霧乾燥、製粉（例えば、ジェット製粉）、ブレンディング、溶媒抽出、溶媒蒸発、相分離、単純および複合コアセルベーション、界面重合、超臨界二酸化炭素（ＣＯ２）の使用を伴う好適な方法、ならびに他の好適な方法を含む。吸入に適する乾燥粒子を、当分野で知られているミクロスフェアまたはマイクロカプセルを作製するための方法を用いて作製することができる。これらの方法を、所望の空力特性（例えば、空気動力学的直径および幾何学径）を有する吸入に適する乾燥粒子の形成をもたらす条件下で採用することができる。所望の場合、大きさおよび密度等の所望の特性を有する吸入に適する乾燥粒子を、篩等の好適な方法を用いて選択することができる。
【０１２５】
吸入に適する乾燥粒子は、好ましくは、噴霧乾燥される。好適な噴霧乾燥技術は、例えば、Ｋ．Ｍａｓｔｅｒｓの「Ｓｐｒａｙ  Ｄｒｙｉｎｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ」，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８４）に記載される。概して、噴霧乾燥の間、加熱された空気または窒素等の高温ガスからの熱は、連続的な液体フィードを霧化することによって形成される液滴から溶媒を蒸発させるために使用される。所望の場合、乾燥粒子を調製するために使用される噴霧乾燥、または他の器具、例えば、ジェット製粉器具は、吸入に適する乾燥粒子が産生されている時に、それらの幾何学径を判定するインライン幾何学的粒径測定器、および／または吸入に適する乾燥粒子が産生されている時に、それらの空気動力学的直径を決定するインライン空力粒径測定器を含むことができる。
【０１２６】
噴霧乾燥のために、好適な溶媒（例えば、水溶性溶媒、有機溶媒、水溶性有機混合物もしくは乳濁液）中で産生される乾燥粒子の成分を含有する溶液、乳濁液、または懸濁液は、霧化デバイスを介して乾燥容器に分配される。例えば、ノズルまたは回転霧化器は、溶液もしくは懸濁液を乾燥容器に分配するために使用され得る。例えば、４個または２４個の羽根車輪を有する回転霧化器が使用され得る。回転霧化器もしくはノズルのいずれかに装備され得る好適な噴霧乾燥機の例には、両者ともにＮｉｒｏ，Ｉｎｃ．（デンマーク）製である、Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機またはモデルＰＳＤ−１が挙げられる。実際の噴霧乾燥条件は、噴霧乾燥溶液または懸濁液の組成物および物質流速に部分的に依存して変化する。当業者は、噴霧乾燥される溶液、乳濁液、または懸濁液の組成物、所望の粒子特性、および他の要素に基づいて、適切な条件を決定することができる。概して、噴霧乾燥機への入口温度は、約１００℃〜約３００℃であり、好ましくは、約２２０℃〜約２８５℃である。噴霧乾燥機の出口温度は、乾燥される物質のフィード温度および特性のような要因によって変化する。概して、出口温度は、約５０℃〜約１５０℃であり、好ましくは、約９０℃〜約１２０℃、もしくは約９８℃〜約１０８℃である。所望の場合、産生される吸入に適する乾燥粒子を、例えば、篩を用いて体積サイズで分画することができるか、または例えば、サイクロンを用いて空気力学的サイズで分画することができるか、および／または当業者に知られている技術を用いて密度に従ってさらに分離することができる。
【０１２７】
本発明の吸入に適する乾燥粒子を調製するために、概して、乾燥粉末（すなわち、供給原料）の所望の成分を含有する溶液、乳濁液、または懸濁液を、好適な条件下で調製し、噴霧乾燥させる。好ましくは、供給原料中の溶解もしくは懸濁固体濃度は、少なくとも約１ｇ／Ｌ、少なくとも約２ｇ／Ｌ、少なくとも約５ｇ／Ｌ、少なくとも約１０ｇ／Ｌ、少なくとも約１５ｇ／Ｌ、少なくとも約２０ｇ／Ｌ、少なくとも約３０ｇ／Ｌ、少なくとも約４０ｇ／Ｌ、少なくとも約５０ｇ／Ｌ、少なくとも約６０ｇ／Ｌ、少なくとも約７０ｇ／Ｌ、少なくとも約８０ｇ／Ｌ、少なくとも約９０ｇ／Ｌ、または少なくとも約１００ｇ／Ｌである。供給原料を、好適な溶媒中の好適な成分（例えば、塩、賦形剤、他の活性成分）を溶解もしくは懸濁し、単一溶液または懸濁液を調製することによって供給することができる。溶媒、乳濁液、または懸濁液を、組み合わせを形成するために、乾燥および／もしくは液体成分のバルク混合または液体成分の静的混合等の任意の好適な方法を用いて調製することができる。例えば、親水性成分（例えば、水溶液）および疎水性成分（例えば、有機溶液）を、組み合わせを形成するために、静的混合器を用いて混合することができる。次に、組み合わせを、液滴を産生するために霧化することができ、吸入に適する乾燥粒子を形成するために乾燥させる。好ましくは、霧化ステップを、成分が静的混合器内で混合された直後に実行する。
【０１２８】
１つの例では、クエン酸カルシウム、塩化ナトリウム、およびロイシンを含有する吸入に適する乾燥粒子は、噴霧乾燥によって調製される。クエン酸ナトリウムおよびロイシンの水溶液を含む第１の相が調製される。適切な溶媒中に塩化カルシウムを含む第２の相が調製される。１つまたは両者の溶液は、それらの成分の溶解度を確保するために、必要であれば、別々に加熱され得る。第１および第２の相は、次に、組み合わせを形成するために、静的混合器内で混合される。組み合わせは、吸入に適する乾燥粒子を形成するために噴霧乾燥される。
【０１２９】
供給原料もしくは供給原料の成分を、有機溶媒、水溶性溶媒、またはそれらの混合物等の任意の好適な溶媒を用いて調製することができる。採用することができる好適な有機溶媒には、例えば、エタノール、メタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール等およびその他のアルコールが含まれるが、それらに限定されない。他の有機溶媒には、ペルフルオロカーボン、ジクロロメタン、クロロホルム、エーテル、酢酸エチル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、およびその他が含まれるが、それらに限定されない。採用することができる共溶媒には、水溶性溶媒および上に記載の有機溶媒等の有機溶媒が含まれるが、それらに限定されない。水溶性溶媒には、水および緩衝液が含まれる。
【０１３０】
供給原料または供給原料の成分は、任意の所望のｐＨ、粘性、もしくは他の特性を有することができる。所望の場合、ｐＨ緩衝剤を、溶媒もしくは共溶媒または形成された混合物に添加することができる。概して、混合物のｐＨは、約３〜約８の範囲である。
【０１３１】
吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を製作し、次いで、粒子試料に事前選択した分布を提供するために、例えば、サイクロンを用いて濾過または遠心分離によって分離することができる。例えば、試料中の吸入に適する乾燥粒子の約３０％超、約４０％超、約５０％超、約６０％超、約７０％超、約８０％超、または約９０％超が、選択範囲内の直径を有することができる。吸入に適する乾燥粒子のある特定の割合が収まる選択範囲は、例えば、約０．１〜約３ミクロンのＶＭＧＤ等の本明細書に記載の大きさの範囲のいずれかであり得る。
【０１３２】
吸入に適する乾燥粒子の直径、例えば、それらのＶＭＧＤを、Ｍｕｌｔｉｓｉｚｅｒ  ＩＩｅ（Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ，Ｌｕｔｏｎ，Ｂｅｄｓ，Ｅｎｇｌａｎｄ）等の電気ゾーン検出器具、またはＨＥＬＯＳシステム（Ｓｙｍｐａｔｅｃ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）等のレーザー回折器具を用いて測定することができる。粒子の幾何学径を測定するための他の器具が当分野で周知である。試料中の吸入に適する乾燥粒子の直径は、粒子組成物および合成の方法等の要因によって変動する。試料中の吸入に適する乾燥粒子の大きさの分布は、呼吸器系内の標的部位内で最適な堆積を可能にするために選択され得る。
【０１３３】
実験的に、空気動力学的直径を、飛行時間（ＴＯＦ）測定を用いて決定することができる。例えば、空気動力学的直径を測定するために、モデル３２２５Ａｅｒｏｓｉｚｅｒ  ＤＳＰ粒径分析器（Ａｍｈｅｒｓｔ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．，Ａｍｈｅｒｓｔ，ＭＡ）等の器具を使用することができる。Ａｅｒｏｓｉｚｅｒは、個々の吸入に適する乾燥粒子が、２つの固定レーザー光の間を通過するのにかかる時間を測定する。
【０１３４】
空気動力学的直径は、吸入に適する乾燥粒子の試料がある特定の距離を沈降するのに必要とする時間を測定する従来の重力沈降法を用いて、実験的に直接決定することもできる。空気力学的質量中位径を測定するための間接的な方法には、アンダーセンカスケード衝撃装置および多段液体インピンジャ（ＭＳＬＩ）法が含まれる。粒子の空気動力学的直径を測定するための方法および器具が当分野で周知である。
【０１３５】
タップ密度は、粒子を特徴付けるエンベロープ質量密度の尺度である。統計的に等方形状の粒子のエンベロープ質量密度は、粒子の質量を、それが封入され得る最小球体エンベロープ体積で割ったものとして定義される。低いタップ密度に寄与し得る特長には、不規則な表面組織および多孔性構造が含まれる。タップ密度を、Ｄｕａｌ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｍｉｃｒｏｐｒｏｃｅｓｓｏｒ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｔａｐ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｔｅｓｔｅｒ（Ｖａｎｋｅｌ，ＮＣ）、ＧｅｏＰｙｃ（商標）器具（Ｍｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｒｐ．，Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，ＧＡ）、またはＳＯＴＡＸタップ密度テスタモデルＴＤ２（ＳＯＴＡＸ  Ｃｏｒｐ．，Ｈｏｒｓｈａｍ，ＰＡ）等の当業者に知られている器具を用いて測定することができる。タップ密度を、ＵＳＰバルク密度およびタップ密度、米国薬局方協約、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ，１０ｔｈ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ，４９５０−４９５１，１９９９の方法を用いて決定することができる。
【０１３６】
細粒分を、分散粉末のエアロゾル性能を特徴付ける１つの方法として使用することができる。細粒分は、空中の吸入に適する乾燥粒子のサイズ分布を説明する。カスケード衝撃装置を用いる重量分析は、空中の吸入に適する乾燥粒子のサイズ分布または細粒分を測定する１つの方法である。アンダーセンカスケード衝撃装置（ＡＣＩ）は、エアロゾルを空気力学的サイズに基づく９つのはっきりと異なる画分に分離することができる８段階衝撃装置である。各段階のサイズカットオフは、ＡＣＩが操作される流速に依存している。ＡＣＩは、一連のノズル（すなわち、ジェットプレート）および衝突面（すなわち、衝突ディスク）から成る複数の段階で構成されている。各段階において、エアロゾル流はノズルを通過し、表面に作用する。十分に大きい慣性を有するエアロゾル流中の吸入に適する乾燥粒子は、プレートに影響を与える。プレートに影響を与えるのに十分な慣性を有さないより小さい吸入に適する乾燥粒子は、エアロゾル流内に留まり、次の段階に輸送される。ＡＣＩの各連続段階は、より小さい吸入に適する乾燥粒子を各連続段階で収集することができるように、ノズル内でより高いエアロゾル速度を有する。
【０１３７】
所望の場合、２段階の破壊的ＡＣＩを、細粒分を測定するために使用することもできる。２段階の破壊的ＡＣＩは、８段階ＡＣＩの最初の２段階のみから成り、２つの分離した粉末画分の収集を可能にする。具体的には、２段階の破壊的ＡＣＩは、段階１で収集される粉末の画分が、５．６ミクロン未満かつ３．４ミクロン超の空気動力学的直径を有する吸入に適する乾燥粒子から成るように較正される。段階１を通過し、かつ収集フィルタ上に堆積する粉末の画分は、したがって、３．４ミクロン未満の空気動力学的直径を有する吸入に適する乾燥粒子から成る。そのような較正における気流は、約６０Ｌ／分である。
【０１３８】
ＦＰＦ（＜５．６）は、患者の肺まで進むことができる粉末の割合と相関することが示されているが、ＦＰＦ（＜３．４）は、患者の肺深部に到達する粉末の割合と相関することが示された。これらの相関は、粒子最適化のために使用することができる量的指標を提供する。
【０１３９】
本明細書で重量測定回収用量および分析的回収用量と呼ばれている放出用量を概算するために、ＡＣＩを使用することができる。「重量測定回収用量」は、ＡＣＩの全段階のフィルタ上で秤量される粉末の名目上の用量に対する比率と定義される。「分析的回収用量」は、ＡＣＩの全段階、全段階のフィルタ、および誘導ポートをすすぐことによって回収される粉末の、名目上の用量に対する比率と定義される。ＦＰＦ＿ＴＤ（＜５．０）は、ＡＣＩ上に５．０μｍを下回って堆積する粉末の挿入量の名目上の用量に対する比率である。ＦＰＦ＿ＲＤ（＜５．０）は、ＡＣＩ上に５．０μｍを下回って堆積する粉末の挿入量の、重量測定回収用量または分析的回収用量のいずれかに対する比率である。
【０１４０】
放出用量を概算する別の方法は、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）の作動時にどのくらいの粉末がその容器、例えば、キャプチャまたはブリスターを離れるかを決定することである。これは、カプセルを離れる粉末の割合を考慮するが、ＤＰＩに堆積する任意の粉末を考慮しない。放出用量は、吸入器作動前の用量を有するカプセルの重量の、吸入器作動後のカプセルの重量に対する比率である。この測定をカプセル放出粉末質量（ＣＥＰＭ）と呼ぶこともできる。
【０１４１】
多段液体インピンジャ（ＭＳＬＩ）は、細粒分を測定するために使用することができる別の装置である。多段液体インピンジャはＡＣＩと同一の原理で作動するが、８段階ではなく、ＭＳＬＩは５段階を有する。さらに、各ＭＳＬＩ段階は、固体プレートの代わりにエタノールで湿らせたガラス原料から成る。湿らせる段階は、ＡＣＩを使用する時に起こり得る粒子の跳ね返りおよび再飛散を防止するために使用される。
【０１４２】
本発明はまた、クエン酸カルシウムまたは硫酸カルシウムを含有する吸入に適する乾燥粒子を含む吸入に適する乾燥粉末を産生するための方法に関する。方法は、ａ）塩化カルシウムの水溶液を含第１の液体供給原料、および硫酸ナトリウムまたはクエン酸ナトリウムの水溶液を含む第２の液体供給原料を供給すること、ｂ）前記第１の液体供給原料および前記第２の液体供給原料を混合して、アニオン交換反応が起こる混合物を産生し、硫酸カルシウムおよび塩化ナトリウム、またはクエン酸カルシウムおよび塩化ナトリウムを含む飽和もしくは過飽和溶液を産生すること、ならびにｃ）ｂ）で産生された前記飽和もしくは過飽和溶液を噴霧乾燥して、吸入に適する乾燥粒子を産生することを含む。第１の液体供給原料および第２の液体供給原料は、バッチ混合、好ましくは、静的混合され得る。いくつかの実施形態では、得られた混合物は噴霧乾燥され、かつ混合、好ましくは、静的混合の６０分以内、３０分以内、１５分以内、１０分以内、５分以内、４分以内、３分以内、２分以内、１分以内、４５秒以内、３０秒以内、１５秒以内、５秒以内に霧化される。
【０１４３】
本発明は、本明細書に記載の方法のいずれかを用いて産生される吸入に適する乾燥粉末または吸入に適する乾燥粒子にも関する。
【０１４４】
本発明の吸入に適する乾燥粒子は、吸入に適する乾燥粒子が含む塩または賦形剤の化学安定性の特徴もあり得る。構成塩の化学安定性は、塩の保管期間、適切な保存条件、投与のための許容される環境、生物学的適合性、および有効性を含む、吸入に適する粒子の重要な特性をもたらし得る。化学安定性を当分野で周知の技術を用いて評価することができる。化学安定性を強化するために使用することができる技術の１つの例は、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）である。本発明の吸入に適する乾燥粒子は、概して、長期間安定している塩を含む。
【０１４５】
所望の場合、本明細書に記載の吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を、安定性を増加させるためにさらに加工することができる。製薬乾燥粉末の重要な特性は、それらが異なる温度および湿度条件で安定しているかである。不安定な粉末は、環境および集塊から水分を吸収し、それゆえに、粉末の粒径分布を変化させる。
【０１４６】
マルトデキストリン等の賦形剤は、より安定した粒子および粉末を作成するために使用され得る。マルトデキストリンは、非晶相安定剤の機能を果たし、かつ成分が非晶質状態から結晶状態に変換するのを阻害し得る。あるいは、制御された方法で（例えば、高湿でのバグハウスによって）粒子が結晶化過程を通るのを助ける後加工ステップが採用されてもよく、得られた粉末は、可能性として、集塊が結晶化過程中に形成される場合に、集塊を分離するために粒子をサイクロンに通過させること等によって、それらの分散性を回復するようにさらに加工される。別の可能性のある取り組みは、より結晶性であり、したがってより安定している粒子を製造することにつながる加工前後の条件を最適化することである。別の取り組みは、より安定した形態の塩を製造しようと試みるために、異なる賦形剤、または現在の賦形剤の異なるレベルを使用することである。
【０１４７】
本明細書に記載の吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末は、吸入療法に好適である。吸入に適する乾燥粒子は、肺深部または上気道もしくは中枢気道等の呼吸器系の選択領域への局部送達のための適切な物質、表面粗度、直径、およびタップ密度で製作され得る。例えば、より高い密度またはより大きい吸入に適する乾燥粒子が、上気道送達に使用され得るか、または同一もしくは異なる製剤とともに供給される試料中の異なる大きさの吸入に適する乾燥粒子の混合物が、１回の投与で肺の異なる標的領域に投与され得る。
【０１４８】
異なる吸入流速、体積における粉末の分散、および異なる抵抗力の吸入器からの分散を関連付けるために、吸入手技を実行するために必要とされるエネルギーを計算することができる。吸入エネルギーを方程式Ｅ＝Ｒ２Ｑ２Ｖから計算することができ、Ｅはジュール単位での吸入エネルギーであり、ＲはｋＰａ１／２／ＬＰＭ単位での吸入器抵抗力であり、ＱはＬ／分単位での安定した流速であり、かつＶはＬ単位での吸入空気体積である。
【０１４９】
０．０２〜０．０５５ｋＰａ１／２／ＬＰＭの２つの吸入器抵抗力からの流速Ｑに関する、Ｃｌａｒｋｅらによって測定された最大吸気流速（ＰＩＦＲ）（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｍｅｄ，６（２），ｐ．９９−１１０，１９９３）によって測定された最大吸気流速（ＰＩＦＲ）の値を用いて、乾燥粉末吸入器に関するＦＤＡ指針書および多種多様のＤＰＩを介して成人が２．２Ｌの吸入体積を平均とすることを見出したＴｉｄｄｅｎｓら（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｍｅｄ，１９，（４），ｐ．４５６−４６５，２００６）の研究の両方に基づく２Ｌの吸入体積で、健常な成人集団は、２．９〜２２ジュールの吸入エネルギーを達成することができると予測される。
【０１５０】
軽度、中等度、ならびに重度の成人ＣＯＰＤ患者は、それぞれ、５．１〜２１ジュール、５．２〜１９ジュール、および２．３〜１８ジュールの吸入エネルギーを達成することができると予測される。これもまた、吸入エネルギーに関する方程式内の流速Ｑへの測定されたＰＩＦＲ値の使用に基づいている。各群において達成可能なＰＩＦＲは、吸入通過される吸入器抵抗力の関数である。Ｂｒｏｅｄｅｒｓらの研究（Ｅｕｒ  Ｒｅｓｐｉｒ  Ｊ，１８，ｐ．７８０−７８３，２００１）は、それぞれに対して０．０２１および０．０３２ｋＰａ１／２／ＬＰＭの抵抗力の２つの乾燥粉末吸入器を介して、達成可能な最大ならびに最小ＰＩＦＲを予測するために使用された。
【０１５１】
同様に、成人喘息患者は、ＣＯＰＤ集団およびＢｒｏｅｄｅｒｓらからのＰＩＦＲデータと同一の想定に基づいて、７．４〜２１ジュールの吸入エネルギーを達成することができると予測される。
【０１５２】
健常な成人、成人ＣＯＰＤ患者、および喘息成人は、例えば、本発明の乾燥粉末製剤を空にし、かつ分散させるのに十分な吸入エネルギーを提供することができるはずである。例えば、２５ｍｇの用量の製剤ＩＩＩは、その１マイクロメータ以内のＤｖ５０で説明されるように、非常に高い吸入エネルギーでよく解砕される、単回吸入の充填重量の８０％を空にするために０．１６ジュールのみを必要とすることが見出された。上に掲載された全ての成人患者集団は、必要とされるよりも一桁より大きい吸入エネルギーである２ジュール超を達成することができるように計算された。
【０１５３】
本発明の利点は、流速の広範囲にわたってよく分散する粉末の産生であり、比較的流速から独立している。本発明の乾燥粒子および粉末は、幅広い患者集団への単純かつ受動的なＤＰＩの使用を可能にする。
【０１５４】
方法
本発明の吸入に適する乾燥粉末および吸入に適する乾燥粒子は、気道への投与のためである。本発明の乾燥粉末および乾燥粒子を、喘息、気道過敏反応性、季節性アレルギー性アレルギー、気管支拡張症、慢性気管支炎、肺気腫、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症等のようなの呼吸器（例えば、肺）疾患の治療のために、ならびにウイルス感染（例えば、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス、メタ肺炎ウイルス、コクサッキーウイルス、エコーウイルス、コロナウイルス、ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス等）、細菌感染（例えば、一般に肺炎球菌と称される肺炎連鎖球菌、黄色ブドウ球菌、バークホルデリア種、ストレプトコッカスアガラクティエ、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、肺炎桿菌、大腸菌、緑膿菌、カタラリス菌、肺炎クラミジア、肺炎マイコプラズマ、レジオネラニューモフィラ、セラチアマルセッセンス、ヒト型結核菌、百日咳菌等）、真菌感染（例えば、ヒストプラスマカプスラーツム、クリプトコックスネオフォルマンス、ニューモシスチスジロヴェチ、コクシジオイデスイミティス等）もしくは寄生虫感染（例えば、トキソプラズマ原虫、糞線虫等）、または環境アレルゲンおよび刺激物（例えば、花粉およびネコのフケ、浮遊粒子等を含む空気アレルゲン）によって引き起こされる悪化等のこれらの慢性疾患の急性増悪の治療および／または予防のために、それを必要とする対象に投与することができる。
【０１５５】
本発明の乾燥粉末および乾燥粒子を、肺炎（市中肺炎、院内肺炎（病院内肺炎、ＨＡＰ、医療ケア関連肺炎、ＨＣＡＰ）、人工呼吸器関連肺炎（ＶＡＰ）を含む）、人工呼吸器関連気管気管支炎（ＶＡＴ）、気管支炎、クループ（例えば、挿管後のクループ、および感染クループ）、結核、インフルエンザ、風邪、ならびにウイルス感染（例えば、インフルエンザウイルス、パラインフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス、メタ肺炎ウイルス、コクサッキーウイルス、エコーウイルス、コロナウイルス、ヘルペスウイルス、サイトメガロウイルス等）、細菌感染（例えば、一般に肺炎球菌と称される肺炎連鎖球菌、黄色ブドウ球菌、ストレプトコッカスアガラクティエ、インフルエンザ菌、パラインフルエンザ菌、肺炎桿菌、大腸菌、緑膿菌、カタラリス菌、肺炎クラミジア、肺炎マイコプラズマ、レジオネラニューモフィラ、セラチアマルセッセンス、ヒト型結核菌、百日咳菌等）、真菌感染（例えば、ヒストプラスマカプスラーツム、クリプトコックスネオフォルマンス、ニューモシスチスジロヴェチ、コクシジオイデスイミティス等）もしくは寄生虫感染（例えば、トキソプラズマ原虫、糞線虫等）、または環境アレルゲンおよび刺激物（例えば、空気アレルゲン、浮遊粒子等）等の気道の感染病の伝染を治療および／または予防および／または軽減するために、それを必要とする対象に投与することができる。
【０１５６】
気道の粘内膜（例えば、気道内膜流体）ならびに下層組織（例えば、気道上皮）の生物物理学的および／または生物学的特性を変化させるために、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を投与することができる。これらの特性には、例えば、粘液表面におけるゲル化、粘内膜の表面張力、粘内膜の表面弾性および／または粘性、粘内膜のバルク弾性および／または粘性が含まれる。特定の理論に縛られることを望むことなく、本明細書に記載の吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末によって生じる利益および方法（例えば、治療的および予防的利益）は、吸入に適する乾燥粒子もしくは乾燥粉末の投与後の、気道（例えば、肺粘液または気道内膜流体）中のカルシウムカチオン（吸入に適する乾燥粒子もしくは乾燥粉末中のカルシウム塩によって供給されるＣａ２＋）の量の増加に由来する。
【０１５７】
吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子を、粘膜毛様体クリアランスの速度を増加させるために投与することができる。微生物および吸入粒子のクリアランスは、呼吸器感染および潜在的に有害な物質への曝露または潜在的に有害な物質の体内吸収を予防する気道の重要な機能である。これは、気道表面で存在する上皮、粘液分泌性、および免疫反応細胞による統合機能として実行される。それは、顕著に、上皮細胞気道表面に繊毛を含み、その機能は、上を覆う液体粘液ブランケットを近位に（口に向かって）輸送するために同調的に拍動することであり、そこで気道を出て、嚥下または喀痰される。
【０１５８】
これらの機能の全てを援助するために、吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子を投与することができる。表面粘弾性を増加させることによって、吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、それらが宿主への全身曝露を引き起こさない気道粘液ブランケットの表面で微生物および粒子を保持する。高浸透圧の乾燥粉末および乾燥粒子は、気道上皮細胞からの水／液体輸送を誘発して、繊毛周囲の液体層をより低い粘性にし、かつ繊毛拍動の、上を覆う粘液ブランケットの移動および一掃をより効果的にする。薬理学的に活性な薬剤としてカルシウム塩を含有する乾燥粒子および乾燥粉末は、上を覆う粘液の流れのクリアランス速度の結果として起こる増加を伴って、繊毛拍動頻度および繊毛収縮の力もしくは活力の両方の増加も引き起こす。
【０１５９】
粘膜毛様体クリアランスは、溶液中の安全で吸入された放射性同位体調製物（例えば、Ｔｅｃｈｎｉｔｉｕｍ（９９ｍＴｃ））を使用してクリアランスの関数および速度を測定する、確立された技術によって定量的に測定される。放射性同位体は、外部シンチグラフィーによって定量的に測定される。数時間にわたる連続的測定は、基準／対照値に対するクリアランスの速度の評価および薬物の効果を可能にする。
【０１６０】
いくつかの態様では、本発明は、喘息、気道過敏反応性、季節性アレルギー性アレルギー、気管支拡張症、慢性気管支炎、肺気腫、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症等の肺疾患を治療するための方法であり、それを必要とする対象の気道に、本明細書に記載の有効量の吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末を投与することを含む。
【０１６１】
他の態様では、本発明は、喘息、気道過敏反応性、季節性アレルギー性アレルギー、気管支拡張症、慢性気管支炎、肺気腫、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症等の慢性肺疾患の急性増悪の治療もしくは予防のための方法であり、それを必要とする対象の気道に、本明細書に記載の有効量の吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末を投与することを含む。
【０１６２】
他の態様では、本発明は、気道の感染病の伝染を治療、予防、および／または軽減するための方法であり、それを必要とする対象の気道に、本明細書に記載の有効量の吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末を投与することを含む。
【０１６３】
吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を、滴下技術等の任意の好適な方法ならびに／または乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）もしくは定量吸入器（ＭＤＩ）等の吸入デバイスを用いて、それを必要とする対象の気道に投与することができる。米国特許第４，９９５，３８５号および同第４，０６９，８１９号、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｆｉｓｏｎｓ，Ｌｏｕｇｈｂｏｒｏｕｇｈ，Ｕ．Ｋ．）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒｓ（登録商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）、ならびにＤｉｓｋｕｓ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｔｒｉａｎｇｌｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｐａｒｋ，Ｎｏｒｔｈ  Ｃａｒｏｌｉｎａ）、ＦｌｏｗＣａｐｓｓ（登録商標）（Ｈｏｖｉｏｎｅ，Ｌｏｕｒｅｓ，Ｐｏｒｔｕｇａｌ）、Ｉｎｈａｌａｔｏｒｓ（登録商標）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、ならびに当業者に知られているその他に開示される、吸入器等の多数のＤＰＩが入手可能である。
【０１６４】
概して、吸入デバイス（例えば、ＤＰＩ）は、単回吸入における乾燥粉末または乾燥粒子の最大量を送達することができ、それは、ブリスター、カプセル（例えば、１．３７ｍｌ、９５０μｌ、７７０μｌ、６８０μｌ、４８０μｌ、３６０μｌ、２７０μｌ、および２００μｌのそれぞれの体積を有する、０００、００、０Ｅ、０、１、２、３、および４の大きさ）の容量または吸入器内に乾燥粒子もしくは乾燥粉末を含有する他の手段に関連している。したがって、所望の用量または有効量の送達は、２回以上の吸入を必要とし得る。好ましくは、それを必要とする対象に投与される各用量は、有効量の吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末を含有し、かつ約４回以下の吸入を用いて投与される。例えば、吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末の各用量を、単回吸入、または２回、３回、もしくは４回の吸入で投与することができる。吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末は、好ましくは、呼吸活性化ＤＰＩを用いる単回の呼吸活性化ステップで投与される。この種類のデバイスが使用される時、対象の吸入のエネルギーは、吸入に適する乾燥粒子を分散させ、それらを気道内に引き込む。
【０１６５】
吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末を、所望に応じて、吸入によって気道内の所望の領域に送達することができる。約１ミクロン〜約３ミクロンの空気動力学的直径を有する粒子を肺深部に送達することができることは周知である。例えば、約３ミクロン〜約５ミクロンのより大きい空気動力学的直径を中枢気道および上気道に送達することができる。
【０１６６】
活性成分として二価金属塩を含有するいくつかの乾燥粉末が投与される時に、吸入に適する乾燥粉末の少なくともいくつかは、口腔内に堆積し、かつ不快な「口内の塩辛い」感覚を生成すると考えられる。この感覚は、患者が治療指示に従わないか、または治療を中断することに至り得ることが想定される。この発明の吸入に適する乾燥粉末の利点は、これらは小さく、かつ極めて分散可能であり、したがって、口腔内の堆積が減少し、かつ不快な口内の塩辛い感覚の発生が減少または防止されることである。
【０１６７】
乾燥粉末吸入器において、口腔堆積は、慣性衝突によって支配され、そのためエアロゾルのストークス数（ＤｅＨａａｎ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，３５（３），３０９−３３１，２００３）を特徴とする。同等の吸入器形状、呼吸パターン、ならびに口腔形状において、ストークス数および口腔堆積は、最初に吸入粉末の空気力学的サイズの影響を受ける。したがって、粉末の口腔堆積に寄与する要因には、個々の粒子のサイズ分布および粉末の分散性が含まれる。個々の粒子のＭＭＡＤが大きすぎる、例えば、５ｕｍを超える場合、ひいては増加する粉末の割合が口腔内に堆積する。同様に、粉末が低い分散性を有する場合、それは、粒子が乾燥粉末吸入器を離れ、かつ集塊として口腔に入る兆候である。集塊粉末は、集塊と同等の大きさの個々の粒子のように空気力学的に機能し、したがって、個々の粒子が小さい（例えば、５ミクロン以下のＭＭＡＤ）場合でも、吸入粉末のサイズ分布は、５μｍ超のＭＭＡＤを有し得、増大した口腔堆積につながる。
【０１６８】
したがって、粒子が小さく（例えば、５ミクロン以下のＭＭＡＤ、例えば、１〜５ミクロン）、かつ極めて分散可能（例えば、２．０、好ましくは、１．５未満の１／４バール、またはあるいは、０．５／４バール）である粉末を有することが望ましい。より好ましくは、吸入に適する乾燥粉末は、１〜４ミクロンまたは１〜３ミクロンのＭＭＡＤ、かつ１．４未満、もしくは１．３未満、およびより好ましくは、１．２未満の１／４バールを有する吸入に適する乾燥粒子から成る。
【０１６９】
ＨＥＬＯＳシステムを用いて１バールで測定された粒子の絶対的な幾何学径は、ＭＭＡＤが上に記載した範囲の１つにあるように、粒子のエンベロープ密度が十分であるという条件で、重大な意味を持たず、ＭＭＡＤは、ＶＭＧＤをエンベロープ密度の平方根で掛けたものである（ＭＭＡＤ＝ＶＭＧＤ×平方根（エンベロープ密度））。固定容量投与容器を用いて塩の高い単位用量を送達することが所望される場合、より高いエンベロープ密度の粒子が所望される。高いエンベロープ密度は、より多い質量の粉末が固定容量投与容器内に含有されることを可能にする。好ましいエンベロープ密度は、０．１ｇ／ｃｃ超、０．２５ｇ／ｃｃ超、０．４ｇ／ｃｃ超、０．５ｇ／ｃｃ超、および０．６ｇ／ｃｃ超である。
【０１７０】
本発明の吸入に適する乾燥粉末および粒子を、呼吸器系を介する薬物送達に好適な組成物中に採用することができる。例えば、そのような組成物は、本発明の吸入に適する乾燥粒子と、別の活性薬剤を含有する乾燥粒子もしくは粉末等の、または１つ以上の薬学的に許容される賦形剤から成るか、もしくは本質的に成る１つ以上の他の乾燥粒子または粉末とのブレンドを含むことができる。
【０１７１】
本発明の方法の使用に好適な吸入に適する乾燥粉末および乾燥粒子は、上気道（すなわち、中咽頭および咽頭）、気管続いて気管支ならびに細気管支への分岐を含む下気道を通り、呼吸器細気管支に順に分裂する末端細気管支を通って移動し、その後最終的な呼吸器域である肺胞または肺深部に至る。本発明の一実施形態では、吸入に適する乾燥粉末または粒子の質量の大部分は、肺深部内に堆積する。本発明の別の実施形態では、送達は、第一に中枢気道にされる。別の実施形態では、送達は上気道に対してである。
【０１７２】
本発明の吸入に適する乾燥粒子または乾燥粉末を、呼吸周期の様々な部分（例えば、中間呼吸での層流）における吸入によって送達することができる。本発明の乾燥粉末および乾燥粒子の高い分散性の利点は、気道内の堆積を標的化する能力である。例えば、噴霧溶液の呼吸制御送達は、液体エアロゾル送達における最近の開発である（Ｄａｌｂｙ  ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  Ａｅｒｏｓｏｌｓ，ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｈｉｃｋｅｙ  ２００７，ｐ．４３７）。この場合、噴霧液滴は、呼吸周期のある特定の部分の期間のみに放出される。肺深部送達においては、液滴は、吸入周期の初めに放出される一方で、中枢気道堆積においては、それらは吸入の後期に放出される。
【０１７３】
この発明の極めて分散可能な粉末は、呼吸周期における薬物送達のタイミング、およびヒト肺内の位置も同様に標的化する利点を提供する。典型的な吸入手技の割合以内等、本発明の吸入に適する乾燥粉末を迅速に分散することができるので、吸入内の特定の時間にエアロゾルを送達する粉末分散のタイミングを制御することができる。
【０１７４】
極めて分散可能な粉末によって、吸入の初めの部分で完全な用量のエアロゾルを分散することができる。患者の吸入流速が最大吸気流速まで上昇する間、極めて分散可能な粉末は、上昇の初めにすでに分散し始め、かつ吸入の第１の部分で用量を完全に分散させ得る。吸入の初めに吸入される空気は、肺の最深部を換気するので、最も多くのエアロゾルを吸入の第１の部分内に分散させることが、肺深部堆積に好ましい。同様に、中枢堆積において、中枢気道を換気する空気内に、高濃度でエアロゾルを分散させることは、吸入の途中から終わり付近での用量の迅速な分散によって達成され得る。スイッチ条件が満たされた後にのみ分散させるために患者の吸入空気を粉末へと向ける、時間、圧力、または流速によって作動するスイッチ等の多数の機械的および他の手段によってこれを達成することができる。
【０１７５】
エアロゾル投薬量、製剤、および送達システムは、例えば、Ｇｏｎｄａ，Ｉ．「Ａｅｒｏｓｏｌｓ  ｆｏｒ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｎｄ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｔｒａｃｔ」，ｉｎ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，６：２７３−３１３（１９９０）、ならびにＭｏｒｅｎ，「Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ」，ｉｎ  Ａｅｒｏｓｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｍｏｒｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．  ，Ｅｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ（１９８５）に記載されるように、治療的適用のために選択され得る。
【０１７６】
本明細書に記載される、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末の治療的ならびに予防的効果は、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末の投与に続く気道（例えば、肺）内の増加した量のカルシウムの結果である。したがって、供給されるカルシウムの量は、選択される特定の塩によって変化し得るため、投与は、肺に送達される所望の量のカルシウムに基づき得る。例えば、１モルの塩化カルシウム（ＣａＣｌ２）は、１モルのＣａ２＋を供給するために解離するが、１モルのクエン酸カルシウムは、３モルのＣａ２＋を供給することができる。
【０１７７】
概して、有効量の製薬製剤は、約０．００１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約６０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約５０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約４０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約３０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０３ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０４ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１８ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、または約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量の容量を送達する。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、気道（例えば、肺、呼吸気道）に送達されるカルシウムの量は、約０．００１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約６０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約５０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約４０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約３０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０３ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０４ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１８ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、または約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量である。
【０１７９】
他の実施形態では、上気道（例えば、鼻腔）に送達されるカルシウムの量は、約０．００１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約６０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約５０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約４０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約３０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０３ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０４ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．０５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．２ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量〜約０．５ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．１８ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量、約０．００１ｍｇのＣａ＋２／ｋｇの体重／用量である。
【０１８０】
さらに、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末がナトリウム塩を含む時、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を、約０．００１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、もしくは約０．０１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、もしくは約０．１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、もしくは約１．０ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、もしくは約０．００１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、もしくは約０．０１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、もしくは約０．１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、約０．２〜約０．８ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、約０．３〜約０．７ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量、または約０．４〜約０．６ｍｇのＮａ＋／ｋｇの体重／用量の用量を送達するのに十分な量で投与することができる。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、気道（例えば、肺、呼吸気道）に送達されるナトリウムの量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．０１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．００１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．０１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．２〜約０．８ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．３〜約０．７ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．４〜約０．６ｍｇ／ｋｇの体重／用量である。
【０１８２】
他の実施形態では、上気道（例えば、鼻腔）に送達されるナトリウムの量は、約０．００１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．０１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１０ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．００１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．０１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．１ｍｇ／ｋｇの体重／用量〜約１ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．２〜約０．８ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．３〜約０．７ｍｇ／ｋｇの体重／用量、または約０．４〜約０．６ｍｇ／ｋｇの体重／用量である。
【０１８３】
所望の治療的効果を提供する用量間の好適な間隔を、状態（例えば、感染）の重症度、対象の総合的な健康、および対象の吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末への耐性、ならびに他の考慮すべき点に基づいて決定することができる。これらおよび他の考慮すべき点に基づいて、臨床医は、用量間の適切な間隔を判定することができる。概して、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末は、必要に応じて、１日に１回、２回、または３回投与される。
【０１８４】
所望または示される場合、本明細書に記載の吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を１つ以上の他の治療薬とともに投与することができる。他の治療薬を、経口で、非経口で（例えば、静脈内、動脈内、筋肉内、皮下注射）、局所的に、吸入によって（例えば、気管支内、鼻腔内、経口吸入、鼻腔内滴下）、直腸的に、経膣的に等の任意の好適な経路で投与することができる。吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末を、他の治療薬の投与の前に、実質的に同時に、またはその後に投与することができる。好ましくは、吸入に適する乾燥粒子および乾燥粉末ならびに他の治療薬は、薬理活性の実質的重複を提供するように投与される。
【０１８５】
本明細書に記載の吸入に適する乾燥粉末および吸入に適する乾燥粒子によって提供される別の利点は、投与効率が粒子の水分増加による肺内の粒子の吸湿成長の結果の結果として増加し得ることである。本発明の部分的に非晶質な高濃度の塩組成物の上昇した湿度で水を摂取する傾向は、それらの生体内堆積特性に関しても有利であり得る。高湿度でのそれらの迅速な水摂取により、これらの粉末製剤は、それらが肺内を通過する時に、気道内の湿った空気からの水の吸収度に対する吸湿成長を経験し得る。これは、肺内への通行中にそれらの有効な空気動力学的直径の増加をもたらし得、気道内でのそれらの堆積をさらに促進する。
【０１８６】
例証
以下の実施例で使用される物質およびそれらの供給源が以下に記載される。塩化カルシウム二水和物、乳酸カルシウム五水和物、塩化ナトリウム、Ｌ−ロイシン、マルトデキストリン、マンニトール、ラクトース、およびトレハロースをＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）もしくはＳｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｇａｒｄｅｎａ，ＣＡ）から得、硫酸ナトリウムをＥＭＤ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ，ＮＪ）、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．（Ｓｔ．  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ）、またはＳｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｇａｒｄｅｎａ，ＣＡ）から得、クエン酸ナトリウム二水和物をＪ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ  Ｂａｋｅｒ（Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）、またはＳｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｇａｒｄｅｎａ，ＣＡ）から得た。超純水は、水浄化システム（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐ．，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）からであった。
【０１８７】
方法：
幾何学径または体積径。幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）とも称され得る体積中位径（ｘ５０）を、レーザー回折技術を用いて判定した。装置は、ＨＥＬＯＳ回折計およびＲＯＤＯＳ乾燥粉末分散機（Ｓｙｍｐａｔｅｃ，Ｉｎｃ．，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪ）から成った。ＲＯＤＯＳ分散機は、粒子の試料に剪断力を印加し、流入圧縮乾燥空気のレギュレータ圧（典型的には、７ミリバールで設定されたオリフィスリング圧を伴い１．０バールで設定される）によって制御される。圧力設定は、粉末を分散させるために使用されるエネルギーの量を変化させるために変化し得る。例えば、レギュレータ圧は、０．２バール〜４．０バールに変化し得、オリフィスリング圧は、５．００ミリバール〜１１５．００ミリバールに変化し得る。粉末試料は、マイクロスパチュラからＲＯＤＯＳ漏斗に分注される。分散粒子は、典型的には、一連の検出器によるＲ２レンズを用いて、生成された回折光パターンが収集されるレーザー光を通って移動する。アンサンブル回折パターンは、次に、より小さい粒子がより大きな角度で光を回折するという前提で、フラウンホーファー回折モデルを用いて体積に基づく粒径分布に翻訳される。この方法を用いて、幾何学的体積中位径に対する幾何標準偏差（ＧＳＤ）が判定された。
【０１８８】
細粒分。吸入器デバイスから分散された粉末の空力特性を、Ｍｋ−ＩＩ  １  ＡＣＦＭアンダーセンカスケード衝撃装置（Ｃｏｐｌｅｙ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｎｏｔｔｉｎｇｈａｍ，ＵＫ）で評価した。器具を１８〜２５℃および相対湿度（ＲＨ）２０〜４０％の制御された環境条件で稼動した。器具は、慣性衝突に基づくエアロゾル粒子を分離する８段階から成る。各段階において、エアロゾル流は、一組のノズルを通過し、対応する衝突プレートに作用する。十分に小さい慣性を有する粒子は、次の段階までエアロゾル流を続ける一方で、残存粒子はプレートに影響を与える。各連続段階において、エアロゾルは、より速い速度でノズルを通過し、空気力学的により小さい粒子をプレート上に収集する。エアロゾルが最終段階を通過した後、フィルタは、残存する最小の粒子を収集する。次に、粒径分布を判定するために、重量および／または化学分析を実行することができる。２つの空力粒径切点カットポイントを評価する作業時間の低減を可能にするために、ショートスタックカスケード衝撃装置も利用する。この破壊的カスケード衝撃装置を用いて、細粒分および粗粒分を確立するために必要とされるそれらを除いて段階を排除する。
【０１８９】
利用した衝突技術は、２個または８個の分離した粉末画分の収集を可能にした。カプセル（ＨＰＭＣ、サイズ３、Ｓｈｉｏｎｏｇｉ  Ｑｕａｌｉｃａｐｓ，Ｍａｄｒｉｄ，Ｓｐａｉｎ）を粉末で約半分充填し、携帯型呼吸作動乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）デバイス、高抵抗力ＲＳ−０１  ＤＰＩ（Ｐｌａｓｔｉａｐｅ，Ｏｓｎａｇｏ，Ｉｔａｌｙ）内に設置した。カプセルを穿刺し、粉末を６０．０Ｌ／分の流速で２．０秒間操作されたカスケード衝撃装置を介して引き出した。この流速で、８段階に較正されたカットオフ直径は、８．６、６．５、４．４、３．３、２．０、１．１、０．５、ならびに０．３ミクロンであり、ショートスタックカスケード衝撃装置で使用された２段階に較正されたカットオフ直径は、５．６ミクロンおよび３．４ミクロンである。表で分類されるように、装置内にフィルタを設置し、かつＨＰＬＣにおける重量測定または化学測定によってそれらに作用する粉末の量を判定することによって、画分を収集した。衝撃装置の所望の段階から回復した粉末質量を、カプセル中の総粒子質量で割ることによって、有効なカットオフ空気動力学的直径未満またはそれに等しい粉末（ＦＰＦ＿ＴＤ）の総用量の細粒分を計算した。５．６ミクロン未満（ＦＰＦ＜５．６ミクロン）の細粒分および３．４ミクロン未満（ＦＰＦ＜３．４ミクロン）の細粒分として結果を報告する。粉末の回復または放出用量に対して、衝撃装置の所望の段階から回復した粉末質量を、回復した総粉末質量で割ることによって、もう一つの方法として細粒分を計算することができる。
【０１９０】
空気動力学的直径。空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）をアンダーセンカスケード衝撃装置によって得られた情報を用いて決定した。段階を区切る直径下の累積質量を各段階について計算し、粉末の回収用量によって標準化する。次に、粉末のＭＭＡＤを、第５０百分位数を包括する段階カットオフ直径の線形補間によって計算する。
【０１９１】
放出用量。アンダーセンカスケード衝撃装置試験から得られた情報を用いて、粉末の放出特性の尺度を決定した。充填されたカプセルの重量を稼動の初めに記録し、最終のカプセル重量を稼動完了後に記録した。重量の差異がカプセルから放出された粉末の量（ＣＥＰＭまたはカプセル放出粉末質量）を表した。カプセルから放出された粉末の量を、カプセル中の初期の総粒子質量で割ることによって、放出用量を計算した。
【０１９２】
タップ密度。タップ密度を測定するために２つの方法を利用した。（１）より少ない粉末量を必要とする修正法を最初に使用し、続いて、粉末を保持するために１．５ｃｃの微小遠心管（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ  ＡＧ，Ｈａｍｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）の代用でＵＳＰ＜６１６＞を使用した。（２）１００ｃｃのメスシリンダを利用してＵＳＰ＜６１６＞を使用した。当業者に知られているタップ密度を測定するための器具には、Ｄｕａｌ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ  Ｍｉｃｒｏｐｒｏｃｅｓｓｏｒ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｔａｐ  Ｄｅｎｓｉｔｙ  Ｔｅｓｔｅｒ（Ｖａｎｋｅｌ，Ｃａｒｙ，ＮＣ）またはＧｅｏＰｙｃ器具（Ｍｉｃｒｏｍｅｔｒｉｃｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｒｐ．，Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，ＧＡ）が含まれるが、それらに限定されない。タップ密度は、エンベロープ質量密度の標準の尺度である。等方性粒子のエンベロープ質量密度は、それが封入され得る最小球体エンベロープ体積で割った粒子の質量と定義される。
【０１９３】
走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）。Ｅｖｅｒｈａｒｔ  Ｔｈｏｒｎｌｅｙ（ＥＴ）型検出器を装備したＦＥＩ  Ｑｕａｎｔａ  ２００走査型電子顕微鏡（Ｈｉｌｌｓｂｏｒｏ，Ｏｒｅｇｏｎ）を用いてＳＥＭを実行した。それぞれ、ｘＴｍ（ｖ．２．０１）およびＸＴ  Ｄｏｃｕ（ｖ．３．２）ソフトウェアを用いて、画像を収集し、分析した。拡大率は、ＮＩＳＴ追跡可能標準を用いて検証した。分析のために、アルミニウム架台上で支持される炭素付着タブ上に少量を置くことによって各試料を調製した。次に、Ｃｒｅｓｓｉｎｇｔｏｎ  １０８自動スパッタ装置を７５秒間、約２０ｍＡおよび０．１３ミリバール（Ａｒ）で用いて、各試料をＡｕ／Ｐｄでスパッタ被覆した。各画像の下部の情報バーにデータ取得パラメータを表示する。各画像上で報告された拡大率を、初期のデータ取得時に計算した。各画像の下位部に報告されたスケールバーは、大きさ調整時に正確であり、大きさ判定をする時に使用されるべきである。
【０１９４】
噴霧乾燥のための液体供給原料調製。噴霧乾燥均質粒子は、関心の成分が溶液中に可溶化されるか、または均一で安定した懸濁液中に懸濁されることを必要とする。塩化カルシウム、酢酸カルシウム、および乳酸カルシウム等のある特定のカルシウム塩は、好適な噴霧乾燥溶液を調製するのに十分に水溶性である。しかしながら、硫酸カルシウム、クエン酸カルシウム、および炭酸カルシウム等の他のカルシウム塩は、低い水溶解度を有する。例示的なカルシウム塩の水溶解度が表１に記載される。これらの低い溶解度の結果として、噴霧乾燥された可能性のある溶液または懸濁液を調製するために、製剤供給原料の開発作業が必要であった。これらの溶液または懸濁液は、典型的には、水ではあるが、エタノールおよび水の混合物でもある適切な溶媒、または先の明細書に記載したような他の溶媒中の塩の組み合わせを含んだ。
【０１９５】
【表１−１】
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【表１−２】
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【０１９６】
先に述べたように、塩化カルシウムは、高い水溶解度を有する。硫酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、および炭酸ナトリウム等のナトリウム塩は、非常に水溶性でもある。以下の実施例でさらに論じるように、塩化カルシウムおよびナトリウム塩（「出発物質」）を、最終乾燥粉末形態の安定したカルシウム塩を得るために溶液または懸濁液中で混合する。溶液中で塩化カルシウムおよびナトリウム塩を混合する時、ナトリウム塩から寄与されるカルシウムならびにアニオンは、所望のカルシウム塩を産生するために、沈殿反応に対して反応し得る（すなわち、ＣａＣｌ２＋２ＮａＸＸ→ＣａＸＸ＋２ＮａＣｌ）。この場合において、澄明な溶液または安定した懸濁液を維持した最大固体濃度を噴霧乾燥に用いた。ある特定のカルシウム塩は、水中で溶解されるのに十分に可溶性であり、次いで、単独で噴霧乾燥させた。同一の概念が、例えば、塩化マグネシウムを用いてマグネシウム塩に、塩化カリウムを用いてカリウム塩に、およびナトリウム塩に適用され得る。
【０１９７】
「反応完了」と称される完全な沈殿反応が完了に進み得る出発物質が、モル量で供給され得る。例示的なカルシウム塩中のカルシウムイオンの重量パーセントが表２にさらに記載される。
【０１９８】
【表２−１】
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【表２−２】
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【０１９９】
あるいは、塩化カルシウムの所与の量が最終粉末形態で存在する過剰な塩化カルシウムが、不完全反応、または「反応不完了」のために添加され得る。塩化カルシウムが吸湿性である間、その高い水溶解度は、最終産物の溶解度を増加させるために、溶解特性を調整することができるように、かつ製剤中に存在するナトリウムまたは他のカチオンに対する相対カルシウムイオン比率を増加させるために、最終産物で少量を有するのに有益であり得る。製剤開発を簡易化するために、塩化カルシウムとナトリウム塩の必要とされるモル比を、塩化カルシウムとナトリウム塩の質量比に変換した。例は、沈殿反応が以下のように進むクエン酸カルシウム（すなわち、塩化カルシウム＋クエン酸ナトリウム）に関してである。
【０２００】
３  ＣａＣｌ２＋２  Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７→Ｃａ３（Ｃ６Ｈ５Ｏ７）２＋６  ＮａＣｌ
この反応は、カルシウム：ナトリウムイオンの１：２のモル比をもたらす。反応が完了へ進むためには、３モルの塩化カルシウムおよび２モルのクエン酸ナトリウムが必要とされる。グラムの質量および重量比に変換するために、塩のモル数に、１モル当たりのグラムとしての塩の分子量を乗じる。
塩化カルシウムにおいては、    ３ｍｏｌ  ＣａＣｌ２×１１１ｇ／ｍｏｌ＝３３３ｇ  ＣａＣｌ２
クエン酸ナトリウムにおいては、      ２ｍｏｌ  Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７×２５８ｇ／ｍｏｌ＝５１６ｇ  Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７
【０２０１】
したがって、１：１．５５または３９：６１重量比のＣａＣｌ２：Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７が、完全な反応のために必要とされる。「純粋な塩」製剤を産生するために、これらの比率の物質を溶解し、かつ噴霧乾燥させた。さらに、乾燥粉末をロイシンまたはラクトース等の追加の賦形剤とともに産生した。カルシウム塩のナトリウム塩に対する比率は、「反応完了」を生成するために同一のままにした。例えば、５０％（ｗ／ｗ）のロイシンの製剤に関して、残りは、３９：６１のＣａＣｌ２：Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７の重量比が維持される場合に、クエン酸カルシウム（すなわち、ＣａＣｌ２：Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７）等の塩から成る。したがって、その反応のために、５０％（ｗ／ｗ）のロイシン、１９．５％（ｗ／ｗ）のＣａＣｌ２、および３０．５％（ｗ／ｗ）のＮａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７を添加する。噴霧乾燥過程のために、塩および他の賦形剤を、溶媒（すなわち、水）中に溶解または懸濁する。固体濃度（ｗ／ｖ）を異なる成分の溶解度によって選択することができる。クエン酸製剤においては、クエン酸カルシウムの限定された溶解度が、０．９５ｍｇ／ｍＬであると考慮すると、５ｍｇ／ｍＬの濃度が適切である。したがって、５ｇの固体（すなわち、２．５ｇのロイシン、０．９７５ｇの塩化カルシウム、および１．５２５ｇのクエン酸ナトリウム）を１Ｌの超純水中に溶解した。
【０２０２】
さらに、噴霧乾燥溶液を調製する時、水和した出発物質の水の重量が考慮されなければならない。製剤に使用した比率は、無水塩の分子量に基づいた。ある特定の塩については、水和形態が、無水形態よりも容易に入手可能である。これは、無水塩の分子量を水和物の分子量と相関させるために乗数を用いて、最初に計算された比率の調整を必要とした。この計算の例が以下に含まれる。
【０２０３】
上の例において、無水塩化カルシウムの分子量は、１１０．９８ｇ／ｍｏｌであり、二水和物の分子量は、１４７．０１ｇ／ｍｏｌである。無水クエン酸ナトリウムの分子量は、２５８．０７ｇ／ｍｏｌであり、二水和物の分子量は、２９４．１０ｇ／ｍｏｌである。
【０２０４】
乗数は、二水和物の無水分子量に対する比率に類似する、例えば、塩化カルシウムに対して１．３２、クエン酸ナトリウムに対して１．１４である。したがって、二水和物形態のための調整は、２．５ｇのロイシン、１．２８７ｇ（すなわち、０．９７５ｇ×１．３２）の塩化カルシウム二水和物、および１．７３８ｇ（すなわち、１．５２５ｇ×１．１４）のクエン酸ナトリウム二水和物をもたらし、これらは溶解され、噴霧乾燥された。
【０２０５】
Ｎｉｒｏ噴霧乾燥機を用いた噴霧乾燥。サイクロン、生成フィルタ、または両方からの粉末収集物を有するＮｉｒｏ  Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機（ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）を利用して噴霧乾燥させることによって、乾燥粉末を産生した。他の二流体ノズル設定も可能ではあるが、ガスキャップ６７１４７および流体キャップ２８５０ＳＳを有するＮｉｒｏ（ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）または噴霧システム（Ｃａｒｏｌ  Ｓｔｒｅａｍ，ＩＬ）二流体ノズルのいずれかからの並流二流体ノズルを用いて、液体フィードの霧化を実行した。追加の霧化技術は、回転霧化および圧力ノズルを含む。液体フィードを、ギアポンプ（Ｃｏｌｅ−Ｐａｒｍｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｖｅｒｎｏｎ  Ｈｉｌｌｓ，ＩＬ）を用いて、直接二流体ノズルに、または二流体ノズルへの導入の直前に静的混合器（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｏｓｓ  ＆  Ｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｈａｕｐｐａｕｇｅ，ＮＹ）内に供給した。追加の液体供給技術は、加圧容器から供給することを含む。窒素または空気が、その使用前に空気中の水分が少なくとも部分的に除去されるという条件で、乾燥ガスとして使用され得る。加圧窒素または空気を、二流体ノズルへの霧化ガスフィードとして使用することができる。２０ｍＬ／分〜１００ｍＬ／分の液体供給原料速度を伴って、処理ガス入口温度は１００℃〜３００℃、出口温度は５０℃〜１２０℃であり得る。二流体霧化器を供給するガスは、ノズル選択によって変動し、Ｎｉｒｏ並流二流体ノズルにおいては、８ｋｇ／時〜１５ｋｇ／時であり得、かつ０．５バール〜２．０バールの圧力で設定され、ガスキャップ６７１４７および流体キャップ２８５０ＳＳを有する噴霧システム二流体ノズルにおいては、４０〜１００ｇ／分であり得る。作成される液滴の大きさに直接影響を及ぼすある特定のガスと液体質量との比率を達成するために、霧化ガス速度が設定され得る。乾燥ドラム内の圧力は、＋３インチＷＣ〜−６インチＷＣであり得る。噴霧乾燥した粉末をサイクロンの出口で、カートリッジもしくはバグハウスフィルタ上で、またはサイクロンおよびカートリッジもしくはバグハウスフィルタの両方から、容器内に収集することができる。
【０２０６】
Ｂuｃｈｉ噴霧乾燥機を用いた噴霧乾燥。標準または高性能サイクロンのいずれかからの粉末収集物を有するＢuｃｈｉＢ−２９０小型噴霧乾燥機（ＢUＣＨＩ  Ｌａｂｏｒｔｅｃｈｎｉｋ  ＡＧ，Ｆｌａｗｉｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）上で噴霧乾燥させることによって、乾燥粉末を産生した。システムは、噴霧乾燥させるために使用された空気の安定した温度および湿度を確保するために、ＢuｃｈｉＢ−２９６除湿機を用いた。さらに、室内の相対湿度が３０％ＲＨを超えた時、外付けのＬＧ除湿機（モデル４９００７９０３，ＬＧ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ，Ｅｎｇｌｅｗｏｏｄ  Ｃｌｉｆｆｓ，ＮＪ）を絶えず稼動させた。液体フィードの霧化は、１．５ｍｍの直径を有するＢuｃｈｉ二流体ノズルを利用した。３ｍＬ／分〜１０ｍＬ／分の液体供給原料流速で、処理ガスの入口温度は１００℃〜２２０℃、出口温度は８０℃〜１２０℃であり得る。二流体霧化ガスは、２５ｍｍ〜４５ｍｍ（３００ＬＰＨ〜５３０ＬＰＨ）であり、吸引速度は、７０％〜１００％（２８ｍ３／時〜３８ｍ３／時）である。
【０２０７】
表３は、本明細書に記載のいくつかの乾燥粉末の調製で使用される供給原料製剤を提供する。
【０２０８】
【表３】
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【０２０９】
表４は、予想される最終乾燥粉末組成を提供する。これらの組成は、上に記載されるイオン交換反応が製剤ＩおよびＩＩＩの完了まで進むという予想に基づいている。任意の特定の理論に縛られることを望むことなく、噴霧乾燥中に起こる液滴の蒸発は、最初に最も可溶性の低い塩を沈殿に導くはずであり、それは、それぞれ、製剤ＩおよびＩＩＩ中のクエン酸カルシウムならびに硫酸カルシウムである。
【０２１０】
【表４−１】
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【表４−２】
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【０２１１】
プラセボの説明：
１００重量パーセントのロイシンを含むプラセボ製剤を噴霧乾燥で産生した。バッチ処理のために、物質が室温で水に完全に溶解されるまで一定の撹拌で超純水中のロイシンを溶解することによって、水相を調製した。静的混合処理のために、超純水を半分に分割し、全体の所要のロイシンの半分をそれぞれの量の水に溶解した。次に、溶液をＮｉｒｏまたはＢuｃｈｉ噴霧乾燥機を用いて噴霧乾燥させた。プラセボ製剤において、供給原料の２つのバッチ（ＡおよびＢ）を調製し、かつ噴霧乾燥させた。バッチＡの全固体濃度は、１５ｇ／Ｌであり、バッチＢは、５ｇ／Ｌであった。Ｎｉｒｏ  Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機上でバッチＡ（プラセボ−Ａ）を噴霧乾燥させるために使用された処理条件は、実施例１の製剤Ｉ−Ａを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様であった。バッチＢ（プラセボ−Ｂ）を噴霧乾燥させるために使用された処理条件は、製剤プラセボ−Ｂの出口温度が約８２℃であったことを除いて、実施例１の製剤Ｉ−Ｃを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様であった。この実施例で調製された製剤プラセボ−Ａおよびプラセボ−Ｂ粉末ならびに／または粒子の処理条件ならびに特性に関する追加の情報を、図１Ａ〜１Ｆおよび２〜４に示される表もしくはグラフに提供する。
【実施例】
【０２１２】
実施例１
この実施例は、製剤Ｉ：１０．０重量パーセントのロイシン、３５．１重量パーセントの塩化カルシウム、および５４．９重量パーセントのクエン酸ナトリウムの供給原料を用いた乾燥粉末の調製を説明する。
【０２１３】
バッチ処理のために、超純水中でロイシン、次にクエン酸ナトリウム二水和物、最終的に塩化カルシウム二水和物を溶解することによって、水相を調製した。物質が室温で水に完全に溶解されるまで、処理を通して溶液または懸濁液を撹拌し続けた。静的混合処理のために、ナトリウム塩およびカルシウム塩を別々の溶液に保存した。超純水を半分に分割し、全体の所要のロイシンの半分をそれぞれの量の水に溶解した。クエン酸ナトリウム二水和物を１つの水相に溶解し、塩化カルシウム二水和物を第２の水相に溶解した。物質が室温で水に完全に溶解されるまで、処理を通して溶液または懸濁液を撹拌し続けた。次に、溶液をＮｉｒｏまたはＢuｃｈｉ噴霧乾燥機を用いて噴霧乾燥させた。各製剤において、供給原料の３つのバッチ（Ａ、Ｂ、およびＣ）を調製し、かつ噴霧乾燥させた。３つのバッチの各々における液体供給原料調製物の詳細が表５に示され、そこでは全固体濃度を、溶解された無水物質重量の総量として報告する。バッチＡの粒子を、Ｎｉｒｏ噴霧乾燥機上のバッチＡの供給原料を用いて調製した。バッチＢおよびＣの粒子を、Ｂuｃｈｉ噴霧乾燥機上で対応する供給原料を用いて調製した。
【０２１４】
【表５】
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【０２１５】
生成物カートリッジフィルタからの粉末収集物を有するＮｉｒｏ  Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機（ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）上で噴霧乾燥させることによって、バッチＡ（Ｉ−Ａ）の乾燥粉末を産生した。液体フィードの霧化は、１．０ｍｍの挿入部分を有するＮｉｒｏ（ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）の並流二流体ノズルを用いた。液体フィードを、ギアポンプ（Ｃｏｌｅ−Ｐａｒｍｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｖｅｒｎｏｎ  Ｈｉｌｌｓ，ＩＬ）を用いて、二流体ノズルへの導入の直前に静的混合器（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｏｓｓ  ＆  Ｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｈａｕｐｐａｕｇｅ，ＮＹ）内に供給した。窒素を乾燥ガスとして使用した。処理ガスの入口温度を２８２℃に設定し、出口温度は約９８℃を示した。二流体霧化器に供給するガスを１４．５ｋｇ／時の流速および２ｐｓｉの圧力で設定し、処理ガスの流速を８５ｋｇ／時および２５ｐｓｉの圧力で設定し、乾燥ドラム内の圧力は−２インチＷＣだった。液体供給原料の全流速は、７０ｍＬ／分であり、各々の流れは、３５ｍＬ／分で供給された。噴霧乾燥した粉末を生成物収集カートリッジフィルタから収集した。
【０２１６】
直径１．５ｍｍのＢuｃｈｉ二流体ノズルならびに高性能サイクロンからの粉末収集物を有するＢuｃｈｉＢ−２９０小型噴霧乾燥機（ＢUＣＨＩ  Ｌａｂｏｒｔｅｃｈｎｉｋ  ＡＧ，Ｆｌａｗｉｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）上で噴霧乾燥させることによって、バッチＢ（Ｉ−Ｂ）およびバッチＣ（Ｉ−Ｃ）の乾燥粉末を調製した。システムは、噴霧乾燥させるために使用された空気の安定した温度および湿度を確保するために、ＢuｃｈｉＢ−２９６除湿機を用いた。製剤Ｉ−Ｂにおいて６．７ｍＬ／分、および製剤Ｉ−Ｃにおいて７ｍＬ／分の液体供給原料流速で、処理ガスの入口温度を２２０℃に設定した。出口温度は、製剤Ｉ−Ｂにおいて約１０８℃、製剤Ｉ−Ｃにおいて約９５℃であった。二流体霧化ガスは９０％の吸引速度で４０ｍｍであった。
【０２１７】
生成物フィルタ膜からの粉末収集物を有するＮｉｒｏ  Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機（ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）上で噴霧乾燥させることによって、バッチＤ（Ｉ−Ｄ）の乾燥粉末を産生した。液体フィードの霧化は、ガスキャップ６７１４７および流体キャップ２８５０ＳＳを有するＳｐｒａｙｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｃａｒｏｌ  Ｓｔｒｅａｍ，ＩＬ）の二流体ノズルを用いた。液体フィードを、ギアポンプ（Ｃｏｌｅ−Ｐａｒｍｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｖｅｒｎｏｎ  Ｈｉｌｌｓ，ＩＬ）を用いて、二流体ノズルへの導入の直前に静的混合器（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｏｓｓ  ＆  Ｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｈａｕｐｐａｕｇｅ，ＮＹ）内に供給した。窒素を乾燥ガスとして使用した。処理ガスの入口温度を２６５℃に設定し、出口温度は約９９℃を示した。二流体霧化器に供給するガスを８０ｇ／分の流速で設定し、処理ガスの流速を８０ｋｇ／時で設定し、乾燥ドラム内の圧力は−２インチＷＣだった。液体供給原料の全流速は、６６ｍＬ／分であり、各々の流れは、３３ｍＬ／分で供給された。噴霧乾燥した粉末を生成物収集フィルタ膜から収集した。
【０２１８】
４つの別々のバッチ（製剤Ｉ−Ａ、Ｉ−Ｂ、Ｉ−Ｃ、およびＩ−Ｄ）内で得られた粒子の物理的特性のいくつかを表６に集約する。表５に提供されるデータに加えて、供給原料製剤Ｉ−Ａから調製された乾燥粉末に関するさらなるデータを以下のように集約する。重量分析を伴う全８段階のアンダーセンカスケード衝撃装置で測定した細粒分（ＦＰＦ）は、平均して、５．６ミクロン未満のＦＰＦでは５６．２％、３．４ミクロン未満のＦＰＦでは４１．７％であった。重量分析を伴う全段階のＡＣＩで空気動力学的直径も測定した。空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）の平均値は、２．７２ミクロンであった。ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳ定寸装置上でのレーザー回折によって体積サイズを決定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、２．５７ミクロンであった。さらに、粉末は、１．１９であった０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、比較的流速に依存しない挙動を示した。これらの粒子における１／４バールの値は、１．１７であった。
【０２１９】
供給原料製剤Ｉ−Ｄから調製された乾燥粉末の追加の特性を以下のように集約する。重量分析を伴う全８段階のアンダーセンカスケード衝撃装置で測定した細粒分（ＦＰＦ）は、平均して、５．６ミクロン未満のＦＰＦでは５８．８％、３．４ミクロン未満のＦＰＦでは４６．７％であった。重量分析を伴う全段階のＡＣＩで空気動力学的直径も測定した。空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）の平均値は、２．３８ミクロンであった。ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳ定寸装置上でのレーザー回折によって体積サイズを決定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、２．４５ミクロンであった。さらに、粉末は、１．１２であった０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、比較的流速に依存しない挙動を示した。これらの粒子における１／４バールの値は、１．０９であった。
【０２２０】
【表６】
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【０２２１】
この実施例で調製された製剤Ｉ−Ａ粉末および／または粒子の特性に関する追加の情報を、図１Ａ〜１Ｆならびに２〜４の表またはグラフに提供する。図１Ｄにおいて、ＧＳＤは幾何標準偏差を指す。図１Ｆにおいて、Ｄｖ５０は、スプレーテック器具で測定される幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）を指し、Ｖは体積を指す。上述のように（図５Ａ）、ＳＥＭを実行した。
【０２２２】
実施例２
この実施例は、製剤ＩＩ：  １０．０重量パーセントのロイシン、５８．６重量パーセントの乳酸カルシウム、および３１．４重量パーセントの塩化ナトリウムの供給原料を用いた乾燥粉末の調製を説明する。
【０２２３】
バッチ処理のために、超純水中でロイシン、次に塩化ナトリウム、最終的に乳酸カルシウム五水和物を溶解することによって、水相を調製した。物質が室温で水に完全に溶解されるまで、処理を通して溶液または懸濁液を撹拌し続けた。乳酸カルシウム製剤において、供給原料の４つのバッチ（Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ）を調製し、かつ噴霧乾燥させた。４つのバッチの各々における液体供給原料調製物の詳細が表７に示され、全固体濃度を、溶解された無水物質重量の総量として報告する。バッチＡおよびＤの粒子を、それぞれ、バッチＡおよびＤの供給原料を用いてＮｉｒｏ噴霧乾燥機上で調製した。バッチＡ（ＩＩ−Ａ）を噴霧乾燥させるために使用された処理条件は、実施例１の製剤Ｉ−Ａを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様であり、バッチＤ（ＩＩ−Ｄ）の処理条件は、実施例１の製剤Ｉ−Ｄを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様であった。以下の処理条件を除いて、実施例１の製剤Ｉ−ＢおよびＩ−Ｃを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様の処理条件で、Ｂuｃｈｉ小型噴霧乾燥機上で対応する供給原料を用いてバッチＢおよびＣの粒子を調製した。液体供給原料の流速は、製剤ＩＩ−Ｂにおいて５．２ｍＬ／分、製剤ＩＩ−Ｃにおいて６ｍＬ／分で設定した。出口温度は、製剤ＩＩ−Ｂにおいて約９１℃〜１０９℃、製剤ＩＩ−Ｃにおいて約１００℃であった。
【０２２４】
【表７】
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【０２２５】
４つの別々のバッチ（製剤ＩＩ−Ａ、ＩＩ−Ｂ、ＩＩ−Ｃ、およびＩＩ−Ｄ）内で得られた粒子の物理的特性のいくつかを表８に集約する。表８に提供されるデータに加えて、供給原料製剤ＩＩ−Ａから調製された乾燥粉末に関するさらなるデータを以下のように集約する。重量分析を伴う全８段階のアンダーセンカスケード衝撃装置で測定した細粒分（ＦＰＦ）は、平均して、５．６ミクロン未満のＦＰＦでは５５．３％、３．４ミクロン未満のＦＰＦでは３９．７％であった。重量分析を伴う全段階のＡＣＩで空気動力学的直径も測定した。空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）の平均値は、２．８９ミクロンであった。ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳ定寸装置上でのレーザー回折によって体積サイズを決定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、１．５１ミクロンであった。さらに、粉末は、１．１２であった０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、比較的流速に依存しない挙動を示した。これらの粒子における１／４バールの値は、１．０８であった。
【０２２６】
供給原料製剤ＩＩ−Ｄから調製された乾燥粉末の追加の特性を以下のように集約する。重量分析を伴う全８段階のアンダーセンカスケード衝撃装置で測定した細粒分（ＦＰＦ）は、平均して、５．６ミクロン未満のＦＰＦでは６２．２％、３．４ミクロン未満のＦＰＦでは４５．３％であった。重量分析を伴う全段階のＡＣＩで空気動力学的直径も測定した。空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）の平均値は、２．７２ミクロンであった。ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳ定寸装置上でのレーザー回折によって体積サイズを決定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、１．４７ミクロンであった。さらに、粉末は、１．０８であった０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、比較的流速に依存しない挙動を示した。これらの粒子における１／４バールの値は、１．０３であった。
【０２２７】
【表８】
0005964939.tif 000012
【０２２８】
この実施例で調製された製剤ＩＩ粉末および／または粒子の特性に関する追加の情報を、図１Ａ〜１Ｆならびに２〜４の表またはグラフに提供する。上述のように（図５Ｂ）、ＳＥＭを実行した。
【０２２９】
実施例３
この実施例は、製剤ＩＩＩ：１０重量パーセントのロイシン、３９．６重量パーセントの塩化カルシウム、および５０．４重量パーセントの硫酸ナトリウムの供給原料を用いた乾燥粉末の調製を説明する。
【０２３０】
バッチ処理のために、超純水中でロイシン、次に硫酸ナトリウム、最終的に塩化カルシウム二水和物を溶解することによって、水溶性相を調製した。物質が室温で水に完全に溶解されるまで、処理を通して溶液または懸濁液を撹拌し続けた。静的混合処理のために、ナトリウム塩およびカルシウム塩を別々の溶液に保存した。超純水を半分に分割し、全体の所要のロイシンの半分をそれぞれの量の水に溶解した。硫酸ナトリウムを１つの水相に溶解し、塩化カルシウム二水和物を第２の水相に溶解した。物質が室温で水に完全に溶解されるまで、処理を通して溶液または懸濁液を撹拌し続けた。次に、溶液をＮｉｒｏまたはＢuｃｈｉ噴霧乾燥機を用いて噴霧乾燥させた。各製剤において、供給原料の４つのバッチ（Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤ）を調製し、かつ噴霧乾燥させた。４つのバッチの各々における液体供給原料調製物の詳細が表９に示され、全固体濃度を、溶解された無水物質重量の総量として報告する。バッチＡおよびＤの粒子を、それぞれ、バッチＡおよびＤの供給原料を用いてＮｉｒｏ噴霧乾燥機上で調製した。バッチＢおよびＣの粒子を、Ｂuｃｈｉ噴霧乾燥機上で対応する供給原料を用いて調製した。バッチＡ（ＩＩＩ−Ａ）を噴霧乾燥させるために使用された処理条件は、実施例１の製剤Ｉ−Ａを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様であり、バッチＤ（ＩＩＩ−Ｄ）を噴霧乾燥させるために使用された処理条件は、実施例１の製剤Ｉ−Ｄを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様であった。以下の処理条件を除いて、実施例１の製剤Ｉ−ＢおよびＩ−Ｃを噴霧乾燥させるために使用された条件と同様の処理条件で、Ｂuｃｈｉ小型噴霧乾燥機上で対応する供給原料を用いてバッチＢおよびＣの粒子を調製した。液体供給原料の流速は、製剤ＩＩＩ−Ｂにおいて８．３ｍＬ／分、製剤ＩＩＩ−Ｃにおいて７ｍＬ／分で設定した。出口温度は、製剤ＩＩＩ−Ｂにおいて約８３℃、製剤ＩＩＩ−Ｃにおいて約９２℃であった。製剤ＩＩＩ−Ｂのために吸引器を８０％に設定した。
【０２３１】
【表９】
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【０２３２】
４つの別々のバッチ（製剤ＩＩＩ−Ａ、ＩＩＩ−Ｂ、ＩＩＩ−Ｃ、およびＩＩＩ−Ｄ）内で得られた粒子の物理的特性のいくつかを表１０に集約する。表１０に提供されるデータに加えて、供給原料製剤ＩＩＩ−Ａから調製された乾燥粉末に関するさらなるデータを以下のように集約する。重量分析を伴う全８段階のアンダーセンカスケード衝撃装置で測定した細粒分（ＦＰＦ）は、平均して、５．６ミクロン未満のＦＰＦでは６８．７％、３．４ミクロン未満のＦＰＦでは５１．５％であった。重量分析を伴う全段階のＡＣＩで空気動力学的直径も測定した。空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）の平均値は、２．５９ミクロンであった。ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳ定寸装置上でのレーザー回折によって体積サイズを決定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、２．５０ミクロンであった。さらに、粉末は、１．４７であった０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、比較的流速に依存しない挙動を示した。これらの粒子における１／４バールの値は、１．４２であった。
【０２３３】
供給原料製剤ＩＩＩ−Ｄから調製された乾燥粉末の追加の特性を以下のように集約する。重量分析を伴う全８段階のアンダーセンカスケード衝撃装置で測定した細粒分（ＦＰＦ）は、平均して、５．６ミクロン未満のＦＰＦでは７７．９％、３．４ミクロン未満のＦＰＦでは６８．３％であった。重量分析を伴う全段階のＡＣＩで空気動力学的直径も測定した。空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）の平均値は、２．１７ミクロンであった。ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳ定寸装置上でのレーザー回折によって体積サイズを決定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、１．９０ミクロンであった。さらに、粉末は、１．１７であった０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、比較的流速に依存しない挙動を示した。これらの粒子における１／４バールの値は、１．６３であった。
【０２３４】
【表１０】
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【０２３５】
この実施例で調製された製剤ＩＩＩ粉末および／または粒子の特性に関する追加の情報を、図１Ａ〜１Ｆならびに２〜４の表またはグラフに提供する。上述のように（図５Ｃ）、ＳＥＭを実行した。
【０２３６】
実施例４
この実施例は、室内および上昇温度および湿度条件での、乾燥粉末吸入器からの製剤バッチＩ−Ｂ、ＩＩ−Ｂ、およびＩＩ−Ｂの粉末の用量放出を説明する。
【０２３７】
方法：３つの異なる製剤（Ｉ−Ｂ、ＩＩ−Ｂ、およびＩＩＩ−Ｂ）の噴霧乾燥した粉末を、サイズ２のＨＰＭＣカプセル（Ｑｕａｌｉ−Ｖ、Ｑｕａｌｉｃａｐｓ、Ｗｈｉｔｓｅｔｔ、ＮＣ）内に、約半分（粉末によって１３〜３０ｍｇ）まで充填した。カプセル内に適した穴開口部を確保するために、４個のカプセルＤＰＩの１つに装填する前にカプセルを穿刺した。カプセルを吸入器内に水平に装填し、次に、それをカスタム仕様のチャンバに接続した。各乾燥粉末吸入器は、試験中、吸入器を通る流速を監視するために、それに接続する圧力トランスデューサを有した。試験を始めた時に、１分間隔で、それぞれ０．３秒の３回の短い破裂における４５Ｌ／分の気流を、各吸入器を通して引き出した。各々の破裂中に、吸入器を通して引き出した空気は、カプセルに、その中の粉末を、副チャンバの床面を形成する１列の３個の組織培養ウェルを有した４個の副チャンバの１つの中に回転および放出させた。合計３回の破裂において、次の続いて起こる破裂前に、エアロゾル雲を１分間沈降させ、０．６８Ｌの合計空気体積を、吸入器を通して引き出した。期間および全気流速度を流量制御器（ＴＰＫ−２０００，ＭＳＰ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｈｏｒｅｖｉｅｗ，ＭＮ）で制御し、空気流量メータ（モデル番号３０６３，ＴＳＩ  Ｉｎｃ．，Ｓｈｏｒｅｖｉｅｗ，ＭＮ）で記録した。個々の吸入器の気流速度を、以前に較正され、かつその信号がカスタム仕様のＬａｂ−ｖｉｅｗコードを介する流速に変換された圧力センサ（モデル番号ＡＳＣＸ０１ＤＮ，Ｈｏｎｅｙｗｅｌｌ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．，Ｍｏｒｒｉｓｔｏｗｎ，ＮＪ）で監視した。１つの事例において、カスタム仕様のチャンバを室内条件で実験台上に設置した一方で、別の２つの事例では、それを３７℃および相対湿度９０％に設定された安定チャンバ（Ｄａｒｗｉｎ  Ｃｈａｍｂｅｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）内に設置した。安定チャンバ内の第１の事例において、カプセルを穿刺し、吸入器内に室内条件で装填し、チャンバの扉を開いて吸入器を取り付け、カプセルがチャンバに入った約３０秒後に流速を作動させた。第２の事例において、まずカプセルを３分間、穿刺されていない状態で安定チャンバ内に設置し、次に、チャンバから除去し、室内条件で穿刺および装填し、チャンバ内に取り付け、チャンバへの２回目の進入の３０秒以内に作動させた。各々の試験後、カプセルを吸入器から除去し、カプセルから放出された粉末の割合を計算するために、秤量および使用した。３組の条件の各々について、試験した粉末製剤の各々のために、２つの１２ウェル組織培養プレート（各プレートは、粉末を３個のウェルに送達する４個の吸入器内に、それぞれ４個のカプセルを必要とした）を粉末に曝露させ、各々の温度および湿度設定で、各粉末に対して合計８回のカプセル放出をもたらした。
【０２３８】
下の表１１に示されるように、３つ全ての粉末バッチ（Ｉ−Ｂ、ＩＩ−Ｂ、およびＩＩＩ−Ｂ）において、カプセルから放出された粉末の平均量は、カプセルの重量変化に基づいて、９９％超である。
【０２３９】
【表１１】
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【０２４０】
実施例５
この実施例は、表１２に集約されるように、プラセボにおける製剤Ｉ−Ａ、ＩＩ−Ａ、ＩＩＩ−Ａ、ならびにロイシン製剤の分散特性および密度特性を説明する。表１２に見出される全てのデータを、図１Ａ〜１Ｅに見出すこともできる。表１２に示される結果によって証明されるように、全ての製剤は、極めて分散可能であり、それらの測定された体積サイズが、ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳにかかる圧力から比較的独立していることを意味する。表１２に示されるように、低い分散圧（０．５バールまたは１．０バール）および高い分散圧（４．０バール）で得られた体積平均サイズの比率を、分散性の指標として使用することができる。これらの値は、０．５バール／４．０バール比または１．０バール／４．０バール比と称される。
【０２４１】
１．５ｃｃの微小遠心管を用いて修正されたＵＳＰ＜６１６＞方法でタップ密度を決定し、１，０００タップにおけるタップ密度の平均値は、それぞれ、０．２９、０．６９、０．３４、および０．０４ｇ／ｃｃであった。全段階（８段階）アンダーセンカスケード衝撃装置（ＡＣＩ）で測定されたＭＭＡＤは、それぞれ、２．７２、２．８９、２．５９、および４．２９ｕｍであった。全段階ＡＣＩ上で測定された３．４ｕｍ未満のＦＰＦは、それぞれ、４１．７％、３９．７％、５１．５％、および１７．４％であり、５．６ｕｍ未満では、それぞれ、５６．２％、５５．３％、６８．７％、および３２．５％であった。体積サイズをレーザー回折で判定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、それぞれ、２．５７ミクロン、１．５１ミクロン、２．５０ミクロン、および６．４７ミクロンであった。０．５バール、２．０バール、および４．０バールでの圧力値の値を表１２に見ることができる。さらに、粉末は、表１２に示されるように、０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、比較的流速に依存しない挙動を示した。値は、それぞれ、１．１９、１．１２、１．４７、および１．６２である。これは流速依存性の別の尺度であるため、他の方法との比較の目的で、表には、１．０バールと４．０バールとの比率の値が含まれる。
【０２４２】
【表１２】
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【０２４３】
実施例６
この実施例は、下の表１３に記載されるような供給原料製剤６．１〜６．９を用いた乾燥粉末の調製を説明する。
【０２４４】
【表１３】
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【０２４５】
この実施例における乾燥粉末の調製の一般的様式は、この実施例の乾燥粉末の全てを、高性能サイクロンを有するＢuｃｈｉ Ｂ−２９０噴霧乾燥機を用いて噴霧乾燥させたことを除いて、上の実施例の粉末に関して説明した様式と同様である。この実施例の製剤６．１、６．４、および６．７は、それぞれ、上の実施例の製剤ＩＩ−Ｂ、Ｉ−Ｂ、およびＩＩＩ−Ｂに対応する。
【０２４６】
この実施例で得られた粉末ならびに／または粒子の物理的特性を、図６Ａおよび６Ｂに示される表に集約する。表１３の製剤６．１〜６．９は、それぞれ、図６Ａおよび６Ｂに示される製剤６．１〜６．９に相当する。図６Ａにおいて、ｘ５０およびＤｖ５０は、体積中位径または幾何学的体積中位径（ＶＭＧＤ）を指し、ＧＳＤは、幾何標準偏差を指す。図６Ｂにおいて、収率％は、供給原料中の溶質の重量で割った、高性能サイクロンに取り付けられた収集瓶内の回収産物の重量の割合を指す。全ての他の略称は、本明細書の他の箇所で説明される。
【０２４７】
実施例７
この実施例は、室内および上昇条件において、乾燥粉末吸入器からの供給原料製剤６．１〜６．９で調製された粉末の用量放出を説明する。このデータのいくつかは、上の実施例４にも示される。
【０２４８】
方法：９つの供給原料製剤６．１〜６．９の噴霧乾燥した粉末を、別々に、サイズ２のＨＰＭＣカプセル（Ｑｕａｌｉ−Ｖ、Ｑｕａｌｉｃａｐｓ、Ｗｈｉｔｓｅｔｔ、ＮＣ）内に、約半分（粉末によって１３〜３０ｍｇ）まで充填した。カプセル内に適した穴開口部を確保するために、４つのカプセルベースのＤＰＩの１つに装填する前にカプセルを穿刺した。カプセルを吸入器内に水平に装填し、次に、それをカスタム仕様のチャンバに接続した。各乾燥粉末吸入器は、試験中、吸入器を通る流速を監視するために、それに接続した圧力トランスデューサを有した。試験を始めた時に、１分間隔で、それぞれ０．３秒の３回の短い破裂における４５Ｌ／分の気流を、各吸入器を通して引き出した。各々の破裂中に、吸入器を通して引き出した空気は、カプセルに、その中の粉末を、副チャンバの床面を形成する１列の３個の組織培養ウェルを有した４個の副チャンバの１つの中に回転および放出させた。合計３回の破裂において、次の続いて起こる破裂前に、エアロゾル雲を１分間沈降することを許可し、０．６８Ｌの合計空気体積を、吸入器を通して引き出した。期間および全気流速度を流量制御器（ＴＰＫ−２０００，ＭＳＰ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｈｏｒｅｖｉｅｗ，ＭＮ）で制御し、空気流量メータ（モデル番号３０６３，ＴＳＩ  Ｉｎｃ．，Ｓｈｏｒｅｖｉｅｗ，ＭＮ）で記録した。個々の吸入器の気流速度を、以前に較正され、かつその信号がカスタム仕様のＬａｂ−ｖｉｅｗコードを介する流速に変換された圧力センサ（モデル番号ＡＳＣＸ０１ＤＮ，Ｈｏｎｅｙｗｅｌｌ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．，Ｍｏｒｒｉｓｔｏｗｎ，ＮＪ）で監視した。１つの事例において、カスタム仕様のチャンバを室内条件で実験台上に設置し、一方で、別の２つの事例では、それを３７℃および９０％のＲＨに設定された安定チャンバ（Ｄａｒｗｉｎ  Ｃｈａｍｂｅｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）内に設置した。安定チャンバ内の第１の事例において、カプセルを穿刺し、吸入器内に室内条件で装填し、チャンバの扉を開いて吸入器を取り付け、カプセルがチャンバに入った約３０秒後に流速を作動させた。第２の事例において、まずカプセルを３分間、穿刺されていない状態で安定チャンバ内に設置し、次に、チャンバから除去し、室内条件で穿刺および装填し、チャンバ内に取り付け、チャンバへの２回目の進入の３０秒以内に作動させた。各々の試験後、カプセルを吸入器から除去し、カプセルから放出された粉末の割合を計算するために、秤量および使用した。３組の条件の各々において、試験された粉末製剤のそれぞれに対して、２つの１２ウェル組織培養プレート（各プレートは、粉末を３個のウェルに送達する４個の吸入器内に、それぞれ４個のカプセルを必要とした）を粉末に曝露させ、各々の温度および湿度設定で、各粉末に対して合計８回のカプセル放出をもたらした。
【０２４９】
下の表１４に示されるように、（供給原料製剤６．１〜６．９を用いて得られた）９つ全ての粉末バッチにおいて、カプセルから放出された粉末の平均量は、カプセルの重量変化に基づいて、９８％超である。
【０２５０】
【表１４】
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【０２５１】
実施例８
この実施例は、供給原料製剤６．１、６．４、および６．７で調製された乾燥粉末のために行われた短期間安定性研究の結果を説明する。
【０２５２】
製薬乾燥粉末の重要な特性は、異なる温度および湿度条件での安定性である。安定不安定な粉末につながり得る１つの特性は、環境から水分を吸収する粉末の傾向であり、それは次に、粒子の集塊につながる可能性があり、したがって、同様の分散条件で粉末の外見上の粒径を変化させる。噴霧乾燥した粉末を１週間〜３ヶ月以上の期間、条件の範囲で保持し、粒径分布に関して定期的に試験した。保存条件には、２５℃および相対湿度６０％のバイアル内の閉鎖カプセル、４０℃および相対湿度７５％のバイアル内の閉鎖カプセル、室温および相対湿度４０％のバイアル内の閉鎖カプセル、３０℃および相対湿度６５％のバイアル内の開放カプセル、ならびに３０℃および相対湿度７５％のバイアル内の開放カプセルが含まれた。サイズ３のＨＰＭＣカプセル（Ｑｕａｌｉ−Ｖ、Ｑｕａｌｉｃａｐｓ、Ｗｈｉｔｓｅｔｔ、ＮＣ）を各乾燥粉末で半分充填した。１つの試料を、吸入器セル設定を用いて乾燥粉末を吸入器から分散することができるレーザー回折噴霧粒子定寸システムである、スプレーテック（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）内で即座に試験した。供給原料溶液６．１、６．４、および６．７を用いて調製された各粉末で、約１６個のカプセルを充填した。制御された湿度および温度条件（約２３〜２８％のＲＨ）で研究室内に、かつ同様に、異なる湿度および温度条件（約４０〜７５％の相対湿度）で研究室の外で、カプセルを保存した。２５℃および相対湿度６０％、４０℃および相対湿度７５％、３０℃および相対湿度６５％、ならびに３０℃および相対湿度７５％の保存条件で保存されたカプセルを、それらの条件で設定した安定チャンバ（Ｄａｒｗｉｎ  Ｃｈａｍｂｅｒｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）内に保持した。特定の時点（３０分〜３ヶ月）において、各条件からの３つのカプセルの１つを、幾何学的粒径分布に関してスプレーテック上で、かつ空力粒径特性に関してＡＣＩ−２上で試験した。
【０２５３】
概して、バイアル中の閉鎖カプセル内の粉末は、３ヶ月以上の長期間、安定したままであった。バイアルなしの開放カプセル内の粉末は、より高い湿度条件への曝露後に集塊を示した。安定性データを下の表１５に集約する。
【０２５４】
【表１５−１】
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【表１５−２】
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【０２５５】
実施例９
この実施例は、供給原料製剤Ａ〜Ｅを用いて調製された乾燥粉末を使用して実行された細菌通過アッセイを説明する。
【０２５６】
方法：粘液全域での細胞運動へのエアロゾル化乾燥粉末製剤の効果を試験するために、通過モデルを使用した。このモデル内に、２００μＬの４％のアルギン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を１２ｍｍのＣｏｓｔａｒ  Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ膜（Ｃｏｒｎｉｎｇ，Ｌｏｗｅｌｌ，ＭＡ、３．０μｍの細孔径）の先端面に添加し、続いて、乾燥粉末製剤に曝露させた。乾燥粉末を乾燥粉末吹送器（Ｐｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ，Ｉｎｃ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）を用いてチャンバ内でエアロゾル化し、重力で５分間沈降させた。この曝露後、１０μＬの肺炎桿菌（生理食塩水中の約１０７ＣＦＵ／ｍＬ）を模倣剤の先端面に添加した。細菌の添加後の様々な時点において、側底緩衝剤の一定分量を除去し、各々の一定分量中の細菌の数を、連続的希釈および血液寒天プレート上でのプレーティングによって判定した。この方法の概略図が図７に示される。各Ｔｒａｎｓｗｅｌｌに送達された塩の濃度をＨＰＬＣで定量化した。この目的のために、各Ｔｒａｎｓｗｅｌｌに隣接し、かつ製剤の同一用量に曝露した１２ウェル細胞培養プレートの空ウェルを、滅菌水ですすぎ、各粉末中のカルシウム塩を溶解するために酢酸と１：１に希釈した。
【０２５７】
粉末を含有するカルシウムのアルギン酸ナトリウム粘液模倣剤を通る肺炎桿菌運動への効果を試験した。ロイシンおよび塩化ナトリウムを伴って、異なる溶解度特性を有するカルシウム塩を含む乾燥粉末製剤を、活性のためにスクリーニングした。表１６（下）は、試験した粉末の供給原料製剤を列挙する。通過モデルにおける投与および検出限界のため、上の実施例に記載される製剤内に装填する１０．０％（ｗ／ｗ）のロイシンとは対照的に、組成物内に装填する５０．０％（ｗ／ｗ）のロイシンが必要であった。１：１のモル比を標的とするために、カルシウムとナトリウムとのモル比を各製剤のために選択した一方で、任意の特定の塩の相対重量を過度に低くする必要はなかった。したがって、使用した乳酸、クエン酸、ならびに酢酸製剤は、それらの製剤中の塩化ナトリウムおよび塩化カルシウムの重量を、それぞれ、約１０重量％超に保つために、１：１のモル比ではなかった。
【０２５８】
【表１６】
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【０２５９】
この試験の結果が図８Ａおよび８Ｂに示される。２つの異なる図は、同一条件で実行された２組の異なる実験を表す。ロイシン対照および硫酸のデータは、２組の実験間の相対比較を可能にする。硫酸アニオン、乳酸アニオン、ならびに酢酸アニオンを含有する粉末、すなわち、供給原料製剤Ａ、Ｄ、ならびにＥから調製された乾燥粉末は、それぞれ、模倣剤全域で細菌の運動を減少させた一方で、炭酸アニオンおよびクエン酸アニオンを含有する粉末、すなわち、供給原料製剤ＢおよびＣから調製された乾燥粉末は、効果を示さなかった。水中のカルシウム塩の知られている溶解度と相関するこれらの所見は、恐らく炭酸塩およびクエン酸塩が肺炎桿菌の運動を阻害することができなかったことが、アルギン酸ナトリウム模倣剤の表面におけるこれらの粉末の溶解度に関連し得ることを示唆する。この結論は、先に記載したイオン交換反応が噴霧乾燥中に完了し、かつ製剤Ａ〜Ｅ中のカルシウム塩の形態は、それぞれ、硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、クエン酸カルシウム、乳酸カルシウム、および酢酸カルシウムであるという妥当な想定にも基づいている。最小の可溶性から最大の可溶性のこれらの塩の溶解度：炭酸カルシウム＜クエン酸カルシウム＜硫酸カルシウム＜乳酸カルシウム＜酢酸カルシウム。（上の表１を参照されたい。）
【０２６０】
実施例１０
この実施例は、ウイルス複製モデルを利用してウイルス複製を減少させる乾燥粉末の性能を説明する。
【０２６１】
この実施例では、異なるカルシウム塩から成る供給原料製剤から調製される異なる乾燥粉末を用いた一連の用量反応研究を説明する。乾燥粉末をロイシン、カルシウム塩（乳酸塩または塩素化合物）、ナトリウム塩（塩素化合物、硫酸塩、クエン酸塩、または炭酸塩）で作製した。１０−１、１０−２、および１０−３に記載される供給原料製剤を、ＢuｃｈｉＢ−２９０小型噴霧乾燥機上で噴霧乾燥させた。システムは、噴霧乾燥させるために使用される空気の安定した温度および湿度を確保するためにＢuｃｈｉＢ−２９６除湿機を使用した。供給原料製剤１０−４を、窒素を伴う開放サイクルで、Ｎｉｒｏ  Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機上で噴霧乾燥させた。
【０２６２】
表１７に記載されるように、４つの液体供給原料を以下の成分および比率（重量パーセント）で調製した。
【０２６３】
【表１７】
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【０２６４】
ウイルス複製モデルにおける投与および検出限界のため、上の実施例に記載される製剤内に装填する１０．０％（ｗ／ｗ）のロイシンとは対照的に、組成物内に装填する５０．０％（ｗ／ｗ）のロイシンが必要であった。１：１のモル比を標的とするために、カルシウムとナトリウムとのモル比を各製剤のために選択した一方で、任意の特定の塩の相対重量を過度に低くする必要はなかった。したがって、使用した乳酸およびクエン酸製剤は、それらの製剤中の塩化ナトリウムならびに塩化カルシウムの重量を、それぞれ、約１０重量％超に保つために、１：１のモル比ではなかった。
【０２６５】
超純水中に溶解した塩および賦形剤の正確な量ならびにその特定の体積が変化する間、製剤１０−１、１０−２、および１０−３を、５ｇ／Ｌの供給原料固体濃度で噴霧乾燥させた。以下の処理設定を使用した：２２０℃の入口温度、約１０ｍＬ／分の液体流速、２３．２〜２４．６℃および相対湿度１９〜２１％の室内条件、ならびに３〜５℃および相対湿度３０％の除湿機空気。出口温度、サイクロン、および吸引速度が変化した。製剤１０−１を、８０％および９３℃の出口温度での高性能サイクロンを用いて噴霧乾燥させた。乾燥粉末製剤１０−２および１０−３を、通常のサイクロン、１００％および１１１〜１１５℃の出口温度での吸引器で作製した。製剤１０−４を、２．７ｇ／Ｌの固体濃度および以下の処理設定で噴霧乾燥させた：１４０℃の入口温度、７５℃の出口温度、３０ｍＬ／分の液体供給原料流速、１００ｋｇ／時の処理ガス流速、２０ｇ／分の霧化ガス流速、および−２インチＷＣの噴霧乾燥ドラムチャンバ圧力。
【０２６６】
インフルエンザ感染の細胞培養モデルを、製剤１〜４の効果を研究するために使用した。Ｃａｌｕ−３細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓａｓ，ＶＡ）を透過性膜（１２ｍｍのＴｒａｎｓｗｅｌｌ、０．４μｍの細孔径、Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｌｏｗｅｌｌ，ＭＡ）上にコンフルエント（膜が細胞で完全に被覆される）まで培養し、気液界面（ＡＬＩ）培養物が、頂端培地を除去し、かつ３７℃、５％のＣＯ２で培養することによって確立された。各々の実験前に、細胞をＡＬＩで２週間超培養した。各々の実験の前に、各Ｔｒａｎｓｗｅｌｌの先端面をＰＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ，Ｌｏｇａｎ，ＵＴ）で３回洗浄した。Ｃａｌｕ−３細胞を専売の乾燥粉末沈降チャンバを用いて乾燥粉末に曝露させた。細胞を同等の用量のカルシウムに曝露させるために、カプセルを各粉末の異なる量で充填した。各粉末（４．２３ｍｇ、１．０６ｍｇ、および０．３５ｍｇ）によって送達されたカルシウムの量を一致させることに基づいて、高い、中程度、および低い充填重量を計算した。試験した各々の乾燥粉末条件において、粉末の放出用量を判定するために、空の時、充填された時、および曝露後に２つのカプセルを秤量した。表１８（下）は、ＨＰＬＣ測定によって判定された、曝露前後のカプセルの充填重量および細胞に送達されたカルシウムの濃度を示す。曝露の直後、基底外側培地（Ｔｒａｎｓｗｅｌｌの底部側上の培地）を新鮮培地と取り替えた。３重ウェルを、各試験における各々の供給原料製剤からの乾燥粉末に曝露させた。細胞への全体の塩またはカルシウムの送達を定量化するために、第２の細胞培養プレートを供給原料製剤からの同一の乾燥粉末に曝露させた。曝露の１時間後、０．１〜０．０１の感染の多重度（１細胞当たり０．１〜０．０１ビリオン）で、細胞を１０μＬのＡ型インフルエンザ／ＷＳＮ／３３／１（Ｈ１Ｎ１）またはＡ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／２００７／９９（Ｈ３Ｎ２）に感染させた。エアロゾル処理の４時間後、過剰な乾燥粉末および未付着ウイルスを除去するために先端面を洗浄し、細胞を３７℃かつ５％のＣＯ２でさらに２０時間培養した。エアロゾル処理の２４時間後、感染した細胞の先端面に放出したウイルスを培養培地またはＰＢＳ中に収集し、先端洗浄物中のウイルスの濃度を、ＴＣＩＤ５０（５０％の組織培養感染量）アッセイによって定量化した。ＴＣＩＤ５０アッセイは、どれだけのウイルスが試料中に存在するかを定量化するために使用される標準終点希釈アッセイである。
【０２６７】
表１８  供給原料製剤１０−１〜１０−４から調製され、細胞培養モデルにおけるＡ型インフルエンザ／ＷＳＮ／３３／１感染へのそれらの効果を評価するために試験された乾燥粉末。乾燥粉末製剤を、細胞培養モデルにおけるＡ型インフルエンザ／ＷＳＮ／３３／１感染へのそれらの効果を評価するために試験した。同等の量のカルシウムイオン（Ｃａ＋２）を送達するために、各乾燥粉末製剤における所望の充填重量を計算した。放出用量を決定するために、Ｑｕａｌｉｃａｐカプセルを、空の時、充填時、および曝露後に秤量した。３重ウェルを各カプセルに曝露させ、その後、ウェルを洗浄した。これらの試料のＨＰＬＣ分析は、細胞に送達されるＣａ＋２の量を判定した。＊は、所望の充填重量を達成するために２つのカプセルの使用を意味する。ａは、ｎ＝３を意味し、ｂは、ｎ＝１を意味する。
【０２６８】
【表１８−１】
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【表１８−２】
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【０２６９】
実施例１０Ａ
供給原料製剤１０−１〜１０−４から調製された乾燥粉末は、用量依存的様式でＡ型インフルエンザ／ＷＳＮ／３３／１（Ｈ１Ｎ１）感染を減少させる。
【０２７０】
細胞培養モデルにおけるインフルエンザ感染への乾燥粉末製剤の効果を試験するために、Ｃａｌｕ−３細胞を、５０％のロイシン、カルシウム塩、および塩化ナトリウムからそれぞれ成る４つの異なる乾燥粉末製剤に曝露させた。ウイルス感染を、２４時間以上、ウイルス複製の量を定量化することによって評価した。試験した特定の粉末を表１８（上）に記載し、炭酸塩、乳酸塩、硫酸塩、およびクエン酸塩を含んだ。粉末を含有する４つのカルシウムのそれぞれのカルシウムの同等の量に細胞を曝露させるために、カプセルを、投与前に適切な充填重量まで充填した。製剤に曝露していない（空気に曝露した）細胞を対照細胞として使用した。
【０２７１】
図９に見られるように、各粉末は、インフルエンザ感染の用量反応性の減少を示したが、しかしながら、効果の規模は、試験した４つの粉末の間で異なった。低いカルシウム濃度で、乳酸カルシウムは最も効果的であり、試験した粉末の中で最も強力であったことを示唆する。カルシウムのより高い濃度で、乳酸カルシウムおよびクエン酸カルシウム粉末は、同様の効力を示した。さらに高い濃度でのクエン酸カルシウム粉末の追加の試験は、それが最も効果的な粉末であることを示し得る。硫酸カルシウム粉末は、中等の効果を示し、かついくつかの濃度でクエン酸カルシウムに相当した。炭酸カルシウムは、最高濃度（１０倍未満）においてさえ、ウイルス複製への最小の効果しか有さなかった。注目すべきは、炭酸カルシウムが、試験した粉末の中で最も溶けにくいことである。
【０２７２】
図９に示されるように、このために調製された乾燥粉末は、用量依存的様式でインフルエンザ感染を減少させる。製剤に曝露しなかったＣａｌｕ−３を対照として使用し、かつ異なる充填重量で乾燥粉末製剤に曝露したＣａｌｕ−３細胞と比較した。各エアロゾル製剤に曝露した細胞によって放出されたウイルスの濃度を定量化した。棒線は、各条件における３重ウェルの平均および標準偏差を表す。データを一元配置ＡＮＯＶＡおよびチューキー多重比較事後試験によって統計分析した。
【０２７３】
実施例１０Ｂ
表１９の供給原料製剤１０−１〜１０−４から調製された乾燥粉末は、用量依存的様式でＡ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／２００７／９９（Ｈ３Ｎ２）感染を減少させる。
【０２７４】
これらの研究を拡張するために、同一の粉末を第２のインフルエンザ株［Ａ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／２００７／９９（Ｈ３Ｎ２）］で試験した。実施例１０Ａと同様に、Ｃａｌｕ−３細胞を５０％のロイシン、カルシウム塩、および塩化ナトリウムからそれぞれ成る４つの異なる乾燥粉末製剤に曝露させた。ウイルス感染を、２４時間以上、ウイルス複製の量を定量化することによって評価した。試験した特定の粉末を表１９（下）に記載し、炭酸塩、乳酸塩、硫酸塩、およびクエン酸塩を含んだ。粉末を含有する４つのカルシウムのそれぞれのカルシウムの同等の量に細胞を曝露させるために、カプセルを、投与前に適切な充填重量まで充填した。製剤に曝露していない（空気に曝露した）細胞を対照細胞として使用した。
【０２７５】
図１０に見られるように、この株を使用して、各粉末において同様の効力が観察された。乳酸カルシウムは最も効果的であり、クエン酸カルシウムおよび硫酸カルシウムは中程度の効力を示し、炭酸カルシウム粉末は最小限の有効性しか無かった。これらのデータは、複数のインフルエンザ株に対するカルシウム：ナトリウムの乾燥粉末の広範な活性を支援する。
【０２７６】
表１９  供給原料製剤１０−１〜１０−４から調製され、細胞培養モデルにおけるＡ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／９９／２００７（Ｈ３Ｎ２）感染へのそれらの効果を評価するために試験された乾燥粉末。同等の量のＣａ＋２を送達するために、各乾燥粉末製剤における所望の充填重量を計算した。放出用量を決定するために、Ｑｕａｌｉｃａｐカプセルを、空の時、充填時、および曝露後に秤量した。３重ウェルを各カプセルに曝露させ、その後、ウェルを洗浄した。これらの試料のＨＰＬＣ分析は、細胞に送達されるＣａ＋２の量を決定した。
【表１９】
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【０２７７】
図１０に示されるように、この実施例から調製された乾燥粉末は、用量依存的様式でＡ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／９９／２００７（Ｈ３Ｎ２）感染を減少させる。製剤（０μｇ  Ｃａ２＋／ｃｍ２）に曝露しなかったＣａｌｕ−３を対照として使用し、かつカルシウムの異なる充填重量ひいては異なる濃度で乾燥粉末製剤に曝露したＣａｌｕ−３細胞と比較した。各々の実験において細胞に送達される各充填重量におけるカルシウムの濃度を、各々の条件に曝露した空プレートからの洗浄物中のカルシウムのＨＰＬＣ測定を用いて判定した。投与の２４時間後に各エアロゾル製剤に曝露した細胞によって放出されたウイルスの濃度を、ＴＣＩＤ５０アッセイで定量化した。各データ点は、各条件における３重ウェルの平均および標準偏差を表す。
実施例１１生体内インフルエンザモデル
【０２７８】
この実施例は、カルシウム塩および塩化ナトリウムから成る乾燥粉末製剤が、フェレットにおけるインフルエンザ感染の重症度を減少させたことを示す。試験した製剤を表２０に示す。フェレットを、同一の曝露条件下で、１００％のロイシンから成る粉末に曝露させた。生体外予備的生体外研究において、この対照粉末は、ウイルス複製に対して効果を有さなかった。カルシウム粉末および対照（製剤Ｉロット：２６−１９０−Ｆ、製剤ＩＩＩロット：６５−００９−Ｆ、製剤ＩＩロット：６５−００３−Ｆ、およびロイシンロット：６５−０１７−Ｆ）をＰａｌａｓ回転ブラシ発生器１０００固体粒子分散機（ＲＢＧ，Ｐａｌａｓ  ＧｍｂＨ，Ｋａｒｌｓｒｕｈｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）でエアロゾル化した。フェレット（１群につきｎ＝８）を約０．２ｍｇのＣａ／ｋｇに曝露させ、感染の重症度を経時的に評価した。各製剤を鼻のみの曝露システムに、感染の１時間前、感染の４時間後、次いで１日２回４日間（１日目〜４日目）分散させた。研究を１０日目に終了した。体温を研究の０日目から始めて、１日２回判定した。インフルエンザに感染したフェレットは、典型的には、感染の２日以内に体温の増加を示し、研究の過程にわたって体重を落とし、かつ無気力およびくしゃみ等の感染の臨床的兆候を示す。これらの変化は、鼻腔から噴出するインフルエンザウイルス力価の増加および鼻炎の増加と一致する。
【０２７９】
【表２０−１】
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【表２０−２】
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【０２８０】
研究開始の４日前に、フェレットの右後脇腹にマイクロチップを、冗長性のために肩にもう１つ、皮下に埋め込んだ。トランスポンダチップ（ＩＰＴＴ−３００埋め込み型プログラム可能温度および同定トランスポンダ、Ｂｉｏ  Ｍｅｄｉｃ  Ｄａｔａ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ，Ｓｅａｆｏｒｄ，Ｄｅｌａｗａｒｅ１９９７３）は、ＢＭＤＳ電子近接読取りワンド（ＷＲＳ−６００７、Ｂｉｏｍｅｄｉｃ  Ｄａｔａ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ，Ｓｅａｆｏｒｄ，Ｄｅｌａｗａｒｅ）を用いて、フェレットの同定を可能にし、かつ研究にわたって皮下体温データを提供する。研究開始の３日〜−１日前に測った皮下体温を基準温度として使用し、研究の経過にわたって各動物における基準からの変化を計算するために使用した。ロイシン（賦形剤）、乳酸カルシウム（製剤ＩＩＩ）、および塩化ナトリウムから成る乾燥粉末製剤での処置は、体温増加に著しい影響を与えた（図１０Ｃおよび１０Ｄ）。この群における平均体温変化は、研究の経過の間、基準測定値または基準測定値未満に留まり、曲線下面積（ＡＵＣ）測定値は、対照よりも約５倍低かった。試験した２つの他の粉末は、研究の特定の日の対照との差異に制限された、さほど顕著ではない効力を示した。とりわけ、クエン酸カルシウムおよび硫酸カルシウムの両方で治療された群は、研究の３日目に、対照動物よりも低い体温を有し（それぞれ、図１１Ａおよび１１Ｂ）、硫酸カルシウム群は、研究の最終３日間にわたってより低い体温を有した。
【０２８１】
実施例１２
この実施例は、異なる賦形剤から成る乾燥粉末製剤がインフルエンザ感染を減少させるが、ロイシンから成る製剤よりも高い用量で減少させることを示す。
【０２８２】
生体外効力への賦形剤の影響を評価するために、賦形剤の異なる２つの乾燥粉末製剤（表２１）を試験し、インフルエンザ複製モデルを用いてそれらの効力を製剤ＩＩＩ（ロイシンを含有する）と比較した。これらの製剤は、乳酸カルシウムおよび塩化ナトリウムの同一の濃度、ならびに同一の重量パーセントの賦形剤（１０％）を含有した。
【０２８３】
【表２１】
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【０２８４】
製剤に曝露されていないＣａｌｕ−３細胞を対照として使用し、異なる賦形剤を有する乳酸カルシウムおよび塩化ナトリウムから成る乾燥粉末に曝露されたＣａｌｕ−３細胞と比較した。マンニトールおよびマルトデキストリン粉末の３つの異なる充填重量を、１０〜３０μｇのＣａ２＋／ｃｍ２の用量を補うために使用した。各エアロゾル製剤に曝露した細胞によって放出されたウイルスの濃度を定量化した（図１２）。各データ点は、各濃度における複製ウェルの平均および標準偏差を表す。データを一元配置ＡＮＯＶＡおよびチューキー多重比較事後試験によって統計的に分析した。各粉末の低用量に関するデータは、２つの独立した実験を代表する。
【０２８５】
製剤を含有するマンニトールおよびマルトデキストリンの両方は、用量反応様式でインフルエンザ感染を減少させたが、しかしながら、それらは、粉末を含有するロイシンよりも著しく弱かった。１４．８μｇのＣａ２＋／ｃｍ２の用量で、粉末を含有するロイシンは、インフルエンザ感染を２．９±０．２ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ減少させた一方で、マンニトール粉末は、匹敵する用量（１２．２μｇのＣａ２＋／ｃｍ２）で、感染を０．８５±０．０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ減少させ、マルトデキストリン粉末（１１．９μｇのＣａ２＋／ｃｍ２）は、複製に影響を与えなかった（図１２）。さらに高い用量（２７μｇ超のＣａ２＋／ｃｍ２）で、マンニトール（１．９±０．５０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ）およびマルトデキストリン（２．２±０．１４ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ）の最大減少は、ロイシン粉末の最大減少より小さかった。注目すべきは、１００％のロイシンから成る粉末を用いた先の試験が、ウイルス複製における賦形剤単独の効果を見出さなかったことである。これらのデータは、賦形剤の本質が、製剤を含有するカルシウムの効力に影響を与えることができることを示唆する。
【０２８６】
実施例１３
この実施例は、インフルエンザ、パラインフルエンザ、またはライノウイルスに対するカルシウム塩、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、もしくはクエン酸カルシウム粉末を含む乾燥粉末製剤の効力を示す。
【０２８７】
製剤Ｉ、製剤ＩＩ、および製剤ＩＩＩ粉末を、Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機（Ｎｉｒｏ、ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）を利用して噴霧乾燥することによって産生した。全ての溶液は、１０ｇ／Ｌの固体濃度を有し、表２２に記載される成分で調製した。ロイシンおよびカルシウム塩を脱イオン水中に溶解し、ロイシンおよびナトリウム塩を単独で、別々の容器内で保持された２つの溶液と脱イオン水中に溶解した。液体フィードの霧化を並流二流体ノズル（Ｎｉｒｏ、ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）を用いて実行した。液体フィードを、ギアポンプ（Ｃｏｌｅ−Ｐａｒｍｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｖｅｒｎｏｎ  Ｈｉｌｌｓ，ＩＬ）を用いて、二流体ノズルへの導入の直前に静的混合器（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｏｓｓ  ＆  Ｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｈａｕｐｐａｕｇｅ，ＮＹ）内に供給した。窒素を乾燥ガスとして、乾燥圧縮空気を二流体ノズルへの霧化ガスフィードとして使用した。７０ｍＬ／分の液体供給原料速度で、処理ガスの入口温度は２８２℃であり、出口温度は９８℃であった。二流体霧化器を供給するガスは、約１４．５ｋｇ／時であった。乾燥チャンバ内の圧力は、−２インチＷＣであった。噴霧乾燥した産物をフィルタデバイスから容器に収集した。
【０２８８】
【表２２】
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【０２８９】
Ａ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／２００７／９９、ヒトパラインフルエンザ３型（ｈＰＩＶ３）、またはライノウイルス（Ｒｖ１６）感染の細胞培養モデルを、乾燥粉末製剤の効力を評価するために使用した。このモデルは、先に詳しく説明されており（実施例１０を参照）、気道上皮細胞のインフルエンザ感染のモデルとして気液界面で成長するＣａｌｕ−３細胞を利用する。Ｃａｌｕ−３細胞を、乾燥粉末沈降チャンバを用いて乾燥粉末に曝露させた。各ウェルに送達されるカルシウムイオン（Ｃａ２＋）の量を、細胞培養プレート上の空ウェルから回収された乾燥粉末を用いて、ＨＰＬＣで決定した。各研究において堆積したカルシウムの濃度をに表２３示す。
【０２９０】
【表２３】
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【０２９１】
曝露の１時間後、細胞を、０．１〜０．０１の感染の多重度（１細胞当たり０．１〜０．０１ビリオン）で、Ａ型インフルエンザ／Ｐａｎａｍａ／９９／２００７の１０μＬに、０．１〜０．０１の感染の多重度（１細胞当たり０．１〜０．０１ビリオン）で、ヒトパラインフルエンザ３型（ｈＰＩＶ３）に、または０．１〜０．０１の感染の多重度（１細胞当たり０．１〜０．０１ビリオン）で、ライノウイルス（Ｒｖ１６）の１０μＬに感染させた。乾燥粉末処理の４時間後、過剰な製剤および未付着ウイルスを除去するために先端面を洗浄し、細胞を３７℃かつ５％のＣＯ２でさらに２０時間培養した。翌日（感染の２４時間後）、感染細胞の先端面上に放出されたウイルスを培養培地に収集し、先端洗浄物中のウイルスの濃度をＴＣＩＤ５０（５０％の組織培養感染量）アッセイで定量化した。ＴＣＩＤ５０アッセイは、どれだけの所与のウイルスが試料中に存在するかを定量化するために使用される標準終点希釈アッセイである。３つの粉末の各々について、Ｃａｌｕ−３細胞を３つの異なるＣａ２＋用量に曝露し、各ウイルスの複製を評価した。
【０２９２】
インフルエンザ
インフルエンザモデルにおいて、３つ全ての粉末は、最高用量で試験する時に、同程度までウイルス力価を著しく減少させる。製剤Ｉ、製剤ＩＩＩ、および製剤ＩＩは、それぞれ、３．２５、３．８０、および３．９５ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬまでウイルス力価を減少させた（図１３Ａ）。最高用量で試験した時に、これらの粉末がインフルエンザに対して同様の活性を示した一方で、データは、低用量で、最も効果的な粉末が製剤ＩＩ（ロイシン、乳酸カルシウム、および塩化ナトリウムから成る）であることを示唆することに留意するのが重要である。製剤ＩＩは、低用量および中用量でウイルス力価を３．７０および３．７５ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬに減少させた一方で、製剤Ｉおよび製剤ＩＩＩの低用量は、それぞれ、ウイルス力価を２．５０および２．９５ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬに減少させ、かつ製剤Ｉおよび製剤ＩＩＩの中用量は、それぞれ、ウイルス力価を２．６５および３．３０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬに減少させた。
【０２９３】
パラインフルエンザ
製剤Ｉ、製剤ＩＩ、および製剤ＩＩＩを、パラインフルエンザに対して同様の用量範囲で試験した。製剤ＩＩＩで処理された細胞培養中のパラインフルエンザ力価は、インフルエンザ実験で使用した用量と同様のカルシウムの用量で、対照細胞（図１３Ｂ）に相当し、硫酸カルシウムベースの製剤が、特定の病原体に対してのみ活性を示すことを示す。対照的に、製剤Ｉおよび製剤ＩＩ処理は、パラインフルエンザ感染において用量依存的減少をもたらした。高用量で、製剤Ｉおよび製剤ＩＩは、対照細胞と比較して、それぞれ、感染を２．７０および４．１０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ減少させた。同様に、製剤ＩＩは、中用量で試験した時に、製剤Ｉよりも大きな効力を示したが、しかしながら、どの製剤も中用量で試験した時には感染を減少させなかった（図１２Ｂ、表２５）。集合的に、これらのデータは、カルシウムベースの乾燥粉末製剤は、パラインフルエンザの感染性を効率的に減少させることを示す。これらの効果は、ある特定のカルシウム塩に特定され、効果的な用量範囲は、インフルエンザにおいて観察された範囲とは著しく異なる。
【０２９４】
ライノウイルス
インフルエンザおよびパラインフルエンザは、エンベロープウイルスである。カルシウム乾燥粉末製剤の広範なスペクトル活性を試験し、かつこれらの所見を非エンベロープウイルスに拡張するために、同一の粉末をライノウイルスに対して試験した。３つ全ての製剤は、ライノウイルスをある程度減少させ、製剤ＩＩ粉末が最大の活性を示した（図１３Ｃ）。製剤ＩＩ処理は、最大用量で試験した時に、著しい２．８０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬのウイルス減少をもたらした。この粉末の低用量および中用量は、対照細胞と比較して、それぞれ、力価を１．１５および２．１０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬに減少させた。製剤ＩＩよりも小さい程度であったが、製剤Ｉおよび製剤ＩＩＩ処理もライノウイルス感染を減少させた。最高用量で試験された時に、製剤Ｉは、感染を１．７０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬに減少させ、製剤ＩＩＩは、感染を１．６０ｌｏｇ１０  ＴＣＩＤ５０／ｍＬに減少させた。併せて、これらの結果は、カルシウムベースの乾燥粉末製剤が、多様なウイルス感染に広範に適用され得ることを示す。
【０２９５】
上のデータは、カルシウムの送達用量を増加させることで、乾燥粉末製剤が先に低用量で観察された活性よりも大きい活性を示すことを示唆する。試験した３つ全ての粉末でインフルエンザ感染を減少させたが、乳酸カルシウムベースの製剤（製剤ＩＩ）は、硫酸カルシウム（製剤ＩＩＩ）およびクエン酸カルシウム（製剤ＩＩＩ）製剤よりも大きな効能を示した。さらに、３つ全てのウイルス株の全域で、製剤ＩＩ処理がウイルス力価の最大の減少をもたらした。より高い用量で、製剤Ｉは、３つ全てのウイルス株のウイルス力価を効率的に減少させたが、効果は、インフルエンザおよびパラインフルエンザにおいてはるかに顕著であり、ウイルス株特異性に関連し得る機構の違いを示唆する。製剤ＩＩＩ処理は、パラインフルエンザに対して活性であるが、インフルエンザおよびライノウイルスに対してより良好な活性を示し、特定のカルシウム対イオンが、製剤の最適な活性におけるいくつかの役割を有し得ることを示唆する。
【０２９６】
実施例１４．乳酸カルシウム、塩化ナトリウム、マルトデキストリン乾燥粉末
この実施例は、製剤ＸＩＶ：１０．０重量パーセントのマルトデキストリン、５８．６重量パーセントの乳酸カルシウム、および３１．４重量パーセントの塩化ナトリウムの供給原料を用いた乾燥粉末の調製を説明する
【０２９７】
バッチ処理のために、超純水中でマルトデキストリン、次に乳酸カルシウム五水和物、最終的に塩化ナトリウムを溶解することによって、水相を調製した。物質が室温で水に完全に溶解されるまで、処理を通して溶液または懸濁液を撹拌し続けた。マルトデキストリンおよび乳酸カルシウム製剤において、供給原料の３つのバッチ（Ａ、Ｂ、およびＣ）を調製し、かつ噴霧乾燥させた。３つのバッチの各々における液体供給原料調製物の詳細が表２４に示され、全固体濃度を、溶解された無水物質重量の総量として報告する。次に、溶液または懸濁液をＢuｃｈｉ噴霧乾燥機を用いて噴霧乾燥させた。各製剤において、供給原料の３つのバッチ（Ａ、Ｂ、およびＣ）を調製し、かつ噴霧乾燥させた。バッチＡ、Ｂ、およびＣ粒子を、以下の処理条件を除いて、実施例１で製剤Ｉ−ＢおよびＩ−Ｃの噴霧乾燥のために使用した条件と同様の処理条件で、Ｂuｃｈｉ  Ｍｉｎｉ噴霧乾燥機上の対応する供給原料を用いて調製した。液体供給原料流速を、および製剤ＸＩＶ−Ａおよび製剤ＸＩＶ−Ｂにおいて５．２ｍＬ／分、製剤ＸＩＶ−Ｃにおいて５．６ｍＬ／分に設定した。出口温度は、製剤ＸＩＶ−Ａにおいて約９０℃〜９８℃、製剤ＸＩＶ−Ｂにおいて約１００℃、製剤ＸＩＶ−Ｃにおいて約１００℃〜１０６℃であった。
【０２９８】
【表２４】
0005964939.tif 000031
【０２９９】
３つの別々のバッチ（製剤ＸＩＶ−Ａ、ＸＩＶ−Ｂ、およびＸＩＶ−Ｃ）で得られた粒子の物理的特性のいくつかが表２５に集約される。表２５に提供されるデータに加えて、供給原料製剤ＸＩＶ−Ａによって調製された乾燥粒子についてのさらなるデータは、以下に集約される。重量分析を用いて破壊的２段階アンダーセンカスケード衝撃装置で測定された細粒分（ＦＰＦ）は、平均して、５．６ミクロン未満のＦＰＦでは７１．３％、３．４ミクロン未満のＦＰＦでは４７．５％であった。体積サイズをＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳ定寸装置上のレーザー回折で判定し、１バールの圧力での体積中位径（ｘ５０）の平均値は、１．４０ミクロンであった。粉末は、１．０４であった０．５バールで測定されたｘ５０と４．０バールで測定されたｘ５０との比率から見ることができるように、流速依存性質を示した。これらの粒子における１／４バールの値は１．００であり、粒子は極めて分散可能であったことを示す。
【０３００】
【表２５】
0005964939.tif 000032
【０３０１】
この実施例で調製された製剤ＸＩＶ粉末および／または粒子の特性に関連する追加の情報を、図１Ａ〜１Ｆに示される表またはグラフに提供する。
【０３０２】
実施例１５：分散性
この実施例は、様々な吸入手技で異なる乾燥粉末吸入器から送達される時に、かつ同様に分散される従来の微粒薬物産物と比較して、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、またはクエン酸カルシウム粉末を含む乾燥粉末製剤の分散性を示す。
【０３０３】
患者の使用を代表する流速で、乾燥粉末吸入器上で吸入する時に、様々な粉末製剤の分散性を、カプセルから放出された粉末の幾何学的粒径および割合を測定することによって調査した。充填カプセルの粒径分布および重量変化を、２つの受動的乾燥粉末吸入器における流速、吸入体積、および充填重量の関数として、複数の粉末製剤において測定した。
【０３０４】
粉末製剤を、分析用天秤（Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｒｄｏ  ＸＳ２０５）を用いて重量測定法で測定された充填重量で、サイズ３のＨＰＭＣカプセル（Ｃａｐｓｕｇｅｌ  Ｖ−Ｃａｐｓ）内に手で充填した。２５および３５ｍｇの充填重量を製剤Ｉ（ロット番号２６−１９０−Ｆ）に、２５、６０、および７５ｍｇを製剤ＩＩ（ロット番号６９−１９１−１）に、２５および４０ｍｇを製剤ＩＩＩ（ロット番号６５−００９−Ｆ）に、１０ｍｇを噴霧乾燥したロイシン粉末（ロット番号６５−０１７−Ｆ）に、２５ｍｇを微粒硫酸アルブテロール（Ｃｉｒｒｕｓロット番号０７３−００１−０２−０３９Ａ）に充填した。乾燥粉末吸入器抵抗の典型的な範囲にわたる０．０２０および０．０３６ｋＰａ１／２／ＬＰＭの特定の抵抗を有した２つのカプセルベースの受動的乾燥粉末吸入器（ＲＳ−０１モデル７、低抵抗Ｐｌａｓｔｉａｐｅ  Ｓ．ｐ．ＡおよびＲＳ−０１モデル７、高抵抗Ｐｌａｓｔｉａｐｅ  Ｓ．ｐ．Ａ．）を使用した。流速および吸入体積を、流量制御弁（ＴＰＫ２０００，Ｃｏｐｌｅｙ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を有するタイマー制御の電磁弁を用いて設定した。カプセルを適切な乾燥粉末吸入器内に設置し、穿刺し、吸入器をレーザー回折粒径測定器（スプレーテック，Ｍａｌｖｅｒｎ）の入口に対して密封した。ＴＰＫ２０００を用いてシステムを通して安定した気流速度を開始し、全吸入期間に対して少なくとも２秒以上、１ｋＨｚでスプレーテックを介して粒径分布を測定した。計算された粒径分布パラメータは、直径５マイクロメータ未満の粒子の体積中位径（Ｄｖ５０）および幾何標準偏差（ＧＳＤ）ならびに細粒分（ＦＰＦ）を含んだ。吸入期間の終了時に、乾燥粉末吸入器を開き、カプセルを取り外し、カプセルから放出された粉末の質量を計算するために再秤量した。各々の試験条件において、５複製カプセルを測定し、Ｄｖ５０、ＦＰＦ、およびカプセルが放出した粉末質量（ＣＥＰＭ）を平均化した。
【０３０５】
異なる抵抗の吸入器からの異なる流速および体積で粉末の分散を関連付けるために、吸入手技を実行するのに必要とされるエネルギーを計算し、粒径および用量放出データを吸入エネルギーに対してプロットした。吸入エネルギーをＥ＝Ｒ２Ｑ２Ｖとして計算し、Ｅはジュール単位での吸入エネルギー、ＲはｋＰａ１／２／ＬＰＭ単位での吸入器抵抗、ＱはＬ／分単位での安定流速、かつＶはＬ単位での吸入空気体積である。
【０３０６】
図１４は、高抵抗および低抵抗ＲＳ−０１乾燥粉末吸入器の両方を用いて、３つの異なるカプセルの充填重量で製剤ＩＩ粉末のカプセルから放出された用量を示す。各々の充填重量において、安定した吸入は、２Ｌの全体積で、高抵抗吸入器（Ｒ＝０．０３６ｋＰａ１／２／ＬＰＭ）を通る６０Ｌ／分の流速と同等であった９．２ジュールの最大エネルギー条件から、１Ｌの体積まで下がった減少した体積、１５Ｌ／分まで下がった減少した流速、かつＲ＝０．０２０ｋＰａ１／２／ＬＰＭまで下がった吸入器抵抗を有する低エネルギーの範囲であった。図１４で見られるように、最高エネルギー条件で試験される時に、製剤ＩＩの２５、６０、および７５ｍｇの３つ全ての充填重量の単回吸入で、カプセル内に充填された粉末の全質量をカプセルから出して空になる。２５ｍｇの充填重量において、全ての吸入条件に対して平均して充填重量の８０％超が、０．１６ジュールで空になる。６０ｍｇでは、カプセルの用量放出は、０．３６ジュールで充填重量の８０％未満に下がる。７５ｍｇのカプセルの充填重量では、カプセルの用量放出は、１．２ジュールで充填重量の８０％未満に下がる。
【０３０７】
また、１．８マイクロメータの平均粒径にジェットミルし、サイズ３のカプセル内に手充填し、高抵抗ＲＳ−０１吸入器内で分散した微粒硫酸アルブテロール薬物製剤の２５ｍｇおよび４０ｍｇの２つの充填重量が、図１４に示される。２５および４０ｍｇの充填重量の両方に見られるように、９．２ジュールの吸入エネルギー（２Ｌに対して６０Ｌ／分の安定した吸入）において、平均ＣＥＰＭは、カプセルの充填重量の８０％超（２５ｍｇの充填重量において９３％、ならびに４０ｍｇの充填重量において８４％）である。しかしながら、全ての測定されたより低いエネルギーにおいて、ＣＥＰＭは、充填重量の両方において１０ｍｇ未満（＜３０％のカプセルの充填重量）まで下がり、吸入エネルギーの減少を伴って単調に減少する。
【０３０８】
図１５は、体積中位径（Ｄｖ５０）を特徴とし、かつ印加された吸入エネルギーに対してプロットされる吸入器から放出される製剤ＩＩ粉末の粒径分布を示す。減少するエネルギー値で一貫したＤｖ５０の値は、追加のエネルギーが放出された粉末の追加の解砕をもたらさないため、粉末が十分に分散されることを示す。Ｄｖ５０値は、全ての高エネルギー値で、７５、６０、および２５ｍｇの３つ全ての充填重量において一致しており、Ｄｖ５０は、３つ全ての充填重量において０．５１ジュールまで下がって２マイクロメータ未満のままである（図１６）。６０および７５ｍｇの充填重量で、０．５〜１．２ジュール範囲での吸入は、カプセルから粉末を完全に放出しなかった（図１４）ことを考慮して、放出された粉末がＤＰＩによってさらに完全に分散されたことが明らかである（図１５）。この範囲では、Ｄｖ５０は、大きさにおいて著しく増加せず、これは、放出する粉末が多くの集塊を含有し、かつ十分に分散されない場合に予想されるであろう。
【０３０９】
また、１．８マイクロメータの平均粒径にジェットミルし、サイズ３のカプセル内に手充填し、高抵抗ＲＳ−０１吸入器内で分散した微粒硫酸アルブテロール薬物製剤の２５ｍｇおよび４０ｍｇの充填重量が、赤色で図１５に示される。２５および４０ｍｇの充填重量の両方に見られるように、９．２ジュールの吸入エネルギー（２Ｌに対して６０Ｌ／分の安定した吸入）で、平均Ｄｖ５０は、両方の充填重量において２マイクロメータ未満（それぞれ、１．８および１．６μｍ）であり、良好な分散ならびに比較的少ない集塊を示す。しかしながら、全ての測定されたより低いエネルギーで、Ｄｖ５０は、２マイクロメータ超（それぞれ、３．９および３．１μｍ）に増加し、減少する吸入エネルギーを伴って単調に増加し続け、初期の粒子の集塊および不良な分散を示す。
【０３１０】
追加の粉末を全ての試験条件で試験し、平均ＣＥＰＭおよびＤｖ５０を判定した（表２６）。これらの結果は、完全に空にされ、約０．５ジュールまで下がった吸入エネルギーで解砕される粉末製剤の能力を示す。
【０３１１】
【表２６−１】
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【表２６−２】
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【表２６−３】
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【表２６−４】
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【０３１２】
実施例１６：固体状態の粒子分析
Ａ．Ｘ線粉末回折
製剤Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＸＩＶを、高分解能Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）ならびに示差走査熱量測定を用いて、非晶質／結晶性含有量および多形形態において分析した。ＸＲＰＤにおいて、各々のＸＲＰＤパターンで観察された任意の結晶相を特定するために、相同定を実行した。ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  Ｐｒｏ回折計（Ａｌｍｅｌｏ，Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を用いてＸＲＰＤパターンを収集した。Ｏｐｔｉｘ長焦点微小焦点線源を使用して産生されたＣｕ放射を用いて標本を分析した。標本を通して検出器上の供給源のＣｕ  ＫαＸ線の焦点を合わせるために、楕円形に勾配した多層膜鏡を使用した。標本を３ミクロン厚のフィルムの間に挟み、透過幾何学で分析し、かつ標定統計を最適化するために回転させた。光線停止を、空気散乱によって生み出されるバックグラウンドを最小化するために、いくつかの場合においてヘリウムパージとともに使用した。突発事象のためにＳｏｌｌｅｒスリットを使用し、軸分岐を最小化するために光線を回折した。回折パターンを、標本から２４０ｍｍの位置に設置された走査位置感度検出器（Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ）を用いて収集した。各回折パターンのデータ収集パラメータが、付録Ｃの各パターンの画像の上に示される。分析の前に、シリコン１１１ピークの位置を検証するために、シリコン標本（ＮＩＳＴ標準参照物質６４０ｃ）を分析した。可能性のある結晶成分（無水および水和形態を含む）において計算されたパターンを、ケンブリッジ結晶構造データベースまたは国際回析データセンター（ＩＣＤＤ）データベースのいずれかから生成し、かつ実験的パターンと比較した。結晶成分を質的に判定した。上昇した湿度への短期間の曝露時に、該粉末の再結晶化における傾向を評価するために、ＸＲＰＤを、Ｄｙｎａｍｉｃ  Ｖａｐｏｒ  Ｓｏｒｐｔｉｏｎシステム内で３〜４時間、７５％のＲＨで調整された粉末で実行した。
【０３１３】
ＴＡ器具示差走査熱量計Ｑ２０００（Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）を用いて、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を実行した。試料をアルミニウムのＤＳＣ皿の中に置き、重量を正確に記録した。データ収集および処理パラメータを各サーモグラム上に表示した。インジウム金属をキャリブレーション標準として使用した。転移の変曲点または転移の半値幅からガラス転移温度（Ｔｇ）を報告する。粉末の全体の熱挙動を評価するために、初めに標準モードＤＳＣ実験を関心の粉末で行った。標準ＤＳＣサーモグラムで特定された関心の温度領域上のこれらの粉末で起こるガラス転移の発生を特定しようと試みるために、循環モードＤＳＣ実験も実行した。
【０３１４】
驚いたことに、乾燥した状態でのそれらの分散性および安定性ならびに水和状態でのそれらの溶解および吸水特性に対して、最適化特性を有した非晶質および結晶含有量の混合物を有した高カルシウムおよびナトリウム塩含有量粉末が産生された。図１６および１７に示されるように、結晶塩化ナトリウムと不十分に結晶性または非晶質のクエン酸カルシウムと潜在的に塩化カルシウムに富んだ相の組み合わせで構成されるように（この粉末における任意のカルシウム塩形態の任意の特性ピークの観察の欠如、ならびにロイシンの任意の特性ピークの不在によって証明されるような）、製剤Ｉ粉末をＸＲＰＤを介して観察した。図１８に示されるように、約１６７℃のガラス転移温度を非晶質カルシウムに富んだ相に関して循環ＤＳＣを介して観察し、この非晶相が標準の条件（２５℃、３０％のＲＨ）で結晶変換に対して比較的安定であるべきであることを示す。乾燥した状態におけるこの粉末の結晶塩化ナトリウムの存在は、該粉末の分散性および安定性を高め得る。製剤Ｉ粉末における不十分に結晶または非晶質形態のカルシウム塩の存在は、肺内の製剤Ｉ製剤の迅速な水摂取および溶解特性を促進し得る（すなわち、結晶塩化ナトリウムは容易に溶解でき、クエン酸カルシウムは溶解しにくい）。
【０３１５】
同様の結果が粉末製剤ＩＩおよび製剤ＸＩＶで見られた。図１９および２０に示されるように、結晶塩化ナトリウムと不十分に結晶性または非晶質の乳酸カルシウムと潜在的に塩化カルシウムに富んだ相の組み合わせで構成されるように（この粉末における任意のカルシウム塩形態の任意の特性ピークの観察の欠如、ならびにロイシンの任意の特性ピークの不在によって証明されるような）、製剤ＩＩ粉末をＸＲＰＤを介して観察した。図２１に示されるように、約１４４℃のガラス転移温度を非晶質カルシウムに富んだ相に関して循環ＤＳＣを介して観察し、この非晶相が標準の条件（２５℃、３０％のＲＨ）で結晶変換に対して比較的安定であるべきであることを示す。ほぼ同一の結果が、ＸＲＰＤデータならびに約１３４℃のガラス転移温度を示す図２４に関して、１０％のマルトデキストリン対１０％のロイシン（図２２および２３を参照）を含有した製剤ＸＩＶ粉末に見られる。
【０３１６】
対照的に、製剤ＩＩＩ製剤は、結晶塩化ナトリウムに加えて、結晶性カルシウム塩含有量（硫酸カルシウム）のある程度の存在を示した（図２５Ａおよび２５Ｂを参照）。しかしながら、この粉末は、ＤＳＣを介する約１５９℃のガラス転移温度の存在によって証明されるように、著しい程度の非晶質かつカルシウムに富んだ相の含有量を引き続き有した（図２６を参照）。
【０３１７】
Ｂ．表面ラマンマッピング
これらの製剤を含む粒子の表面における化学組成物の性質を判定するために、製剤Ｉ〜ＩＩＩおよびＸＩＶの試料で表面マッピングラマン実験を行った。ラマンマップスペクトルを、Ｌｅｉｃａ  ＤＭ  ＬＭ顕微鏡（Ｗｅｔｚｌａｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を装備したＲｅｎｉｓｈａｗ  ｉｎＶｉａ  Ｒａｍａｓｃｏｐｅ（Ｇｌｏｕｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ，ＵＫ）上で取得した。器具をシリコンウエハ標準を用いて較正した。試料を、分析のためにアルミニウム被覆の顕微鏡スライド上で調製した。高出力近赤外ダイオードレーザ源を用いて、励起波長は７８５ｎｍであった。製剤Ｉ、製剤ＩＩＩ、および製剤ＸＩＶに関するデータ収集は、３０秒の曝露時間および１０回の蓄積を伴う静的スキャンであった。製剤ＩＩに関するデータ収集は、６０秒の曝露時間および１回の蓄積を伴う拡大スキャンであった。画像収集のために、５０倍の対物レンズを有するＰｈｉｌｉｐｓ  ＴｏＵｃａｍ  Ｐｒｏ  ＩＩカメラ（モデルＰＣＶＣ  ８４０Ｋ）（Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を使用した。Ｒｅｎｉｓｈａｗ  ＷｉＲＥ  ３．１（ｓｅｒｖｉｃｅ  ｐａｃｋ  ９）ソフトウェア（Ｇｌｏｕｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ，．ＵＫ）をデータ収集および処理のために使用した。
【０３１８】
ラマンスペクトルを製剤Ｉ試料からの６個の粒子のために取得し、図２７Ａで重なって示される。スペクトルファイル３８９５７５−１および３８９５７５−６は、約１４５０、９６５、および８５０ｃｍ−１での弱いピークの存在を特徴とする。これらのピークは、スペクトルファイル３８９５７５−６において唯一の非常に弱い特長として識別可能であり、かつ残りのスペクトルデータファイルに検出されない。図２７Ｂでは、スペクトル３８９５７５−６は、バックグラウンド減算され、かつクエン酸カルシウム四水和物、クエン酸ナトリウム、およびロイシンのラマンスペクトルと重なる。試料スペクトルは、約１４５０および８５０ｃｍ−１でピークを示し、ロイシンならびにクエン酸塩の両方に共通している。試料スペクトルは、約９６５ｃｍ−１で追加のピークを示し、クエン酸塩（すなわち、クエン酸カルシウム四水和物およびクエン酸ナトリウム）のスペクトルにおける比較的強い強度ピークと一致する。１３４０ｃｍ−１での特性ロイシンピークは、試料スペクトルでは観察されない。
【０３１９】
ラマンスペクトルを製剤ＩＩＩ試料からの８個の粒子のために取得し、図２７Ｃで重なって示される。全ての粒子スペクトルは、約１０６０ｃｍ−１でピークの存在を特徴とする。約６７０ｃｍ−１での追加のピークは、スペクトルファイル３８８３６９−４で観察される。６７０ｃｍ−１のピークもスペクトルデータファイル３８８３６９−１、３、および８で、バックグラウンド減算後に観察可能である（図示せず）。図２７Ｄでは、スペクトル３８８３６９−４は、バックグラウンド減算され、かつ硫酸カルシウム、硫酸カルシウム二水和物、無水硫酸ナトリウム、およびロイシンのラマンスペクトルと重なる。バックグラウンド減算された試料スペクトルは、５２０ｃｍ−１付近の可能性のある第３のピークを示す。１０６０および６７０ｃｍ−１でのピークは、示された硫酸イオンの特性ピークと同様の位置で存在するが、正確には重ならない。試料スペクトルにおける１０６０および６７０ｃｍ−１でのピークの周波数は、それぞれ、硫酸イオン官能基の伸縮および曲げモードと一致する。ロイシンに割当可能なピークは、粒子スペクトルで検出されない。
【０３２０】
ラマンスペクトルを製剤ＩＩ試料からの１２個の粒子のために取得し、図２７Ｅで重なって示される。全ての粒子スペクトルは、約１０４５および８６０ｃｍ−１でピークの存在を特徴とする。追加のピークを、約１４５０、１４３５、１１２５、１０９５、９３０、および７７５ｃｍ−１での様々なスペクトルで観察することができ、概して、１０４５ｃｍ−１での強いピークを有する比較的強度と相関する。図２７Ｆでは、スペクトル３８９５７６−７および３８９５７６−１２は、バックグラウンド減算され、乳酸カルシウム五水和物ならびにロイシンのラマンスペクトルと重なる。試料スペクトルと乳酸カルシウム五水和物スペクトルとの間で、良好な一致が観察された。しかしながら、試料スペクトルは、乳酸カルシウム五水和物のスペクトルにおいて不在である、約１３４５、１１７０、９６０、８３０、および７６０ｃｍ−１での追加の弱いピークを示す。わずかに異なる相対強度および周波数を有するが、同様のピークがロイシンの基準スペクトルで存在する。
【０３２１】
ラマンスペクトルを製剤ＸＩＶ試料からの１２個の粒子のために取得し、図２７Ｇで重なって示される。全ての粒子スペクトルは、約１０４５ｃｍ−１でピークの存在を特徴とする。ファイル３８９５７７−２以外の全ての粒子スペクトルはまた、約８６０ｃｍ−１でピークを示した。追加のピークを、約１４５０、１４３５、１１２５、１０９５、９３０、および７７５ｃｍ−１での様々なスペクトルで観察することができ、概して、１０４５ｃｍ−１での強いピークを有する比較的強度と相関する。図２７Ｈでは、スペクトル３８９５７７−９は、バックグラウンド減算され、乳酸カルシウム五水和物のラマンスペクトルと重なる。試料スペクトルと乳酸カルシウム五水和物スペクトルとの間で、良好な一致が観察された。マルトデキストリンに割当可能なピーク（図示せず）は、試料スペクトルで検出されない。
【０３２２】
したがって、ラマン表面マッピング分析は、製剤Ｉ〜ＸＩＶのそれぞれの表面組成物が、様々なカルシウム塩（製剤Ｉにおいてはクエン酸カルシウム、製剤ＩＩＩにおいては硫酸カルシウム、ならびに製剤ＩＩおよびＸＩＶにおいては乳酸カルシウム）の存在によって独占されることを示す。製剤Ｉ〜ＩＩＩの場合において、これは、該粉末を含む粒子の表面で濃縮することによるエアロゾル化のために、粉末の分散性を増加させる分散強化剤として報告されているロイシンの使用とは対照的である。本明細書に開示される製剤において、表面含有量ならびに分散性に関して製剤ＩＩ（ロイシン含有乳酸カルシウム製剤）およびＸＩＶ（マルトデキストリン含有乳酸カルシウム製剤）に見られる同様の結果でも証明されるように、ロイシンがこの方法で分散性エンハンサとしての機能を果たしているようには見られない。
【０３２３】
実施例１７：過飽和クエン酸カルシウムおよび硫酸カルシウムを噴霧乾燥させるためのイオン交換反応
含水硫酸カルシウムまたはクエン酸カルシウムの飽和もしくは過飽和原料を、出発物質として塩化カルシウムおよび硫酸ナトリウムまたは塩化カルシウムもしくはクエン酸カルシウムを使用して、噴霧乾燥させるために調製した。５〜３０ｇ／Ｌの範囲の全固体濃度を、（ｉ）両方の塩を水に予混合すること、および（ｉｉ）噴霧乾燥の直前にインライン静的混合して別々の水溶液に保存することの両方によって調製した。調製された液体供給原料の全ては、飽和または過飽和硫酸カルシウム量（水中の硫酸カルシウムの溶解限度は２．９８ｇ／Ｌである）および飽和または過飽和クエン酸カルシウム量（水中のクエン酸カルシウムの溶解限度は０．９６ｇ／Ｌである）を含有した。塩化カルシウムおよび硫酸ナトリウム沈殿反応が完了（ＣａＣｌ２＋Ｎａ２ＳＯ４→ＣａＳＯ４＋２  ＮａＣｌ）へ進むことを考慮して、硫酸カルシウムの対応する最終濃度が、表２４に記載される。塩化カルシウムおよびクエン酸ナトリウム沈殿反応（３  ＣａＣｌ２＋２  Ｎａ３Ｃ６Ｈ５Ｏ７→Ｃａ３（Ｃ６Ｈ５Ｏ７）２＋６  ＮａＣｌ）における同様の結果も表２８に示される。
【０３２４】
【表２８】
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【０３２５】
４４重量パーセントの塩化カルシウムおよび５６重量パーセントの硫酸ナトリウムの製剤を、Ｍｏｂｉｌｅ  Ｍｉｎｏｒ噴霧乾燥機（Ｎｉｒｏ、ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）を利用して噴霧乾燥することによって産生した。液体供給原料を５〜３０ｇ／Ｌの範囲の固体濃度で調製した。予混合されたフィードのために、磁気撹拌プレート上で一定に撹拌しながら、ナトリウム塩、次にカルシウム塩をＤＩ水に溶解した。静的混合されたフィードのために、カルシウム塩をＤＩ水に溶解し、ナトリウム塩を単独で、別々の容器内で保持された２つの溶液とＤＩ水に一定に撹拌しながら溶解した。液体フィードの霧化を並流二流体ノズル（Ｎｉｒｏ、ＧＥＡ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｉｎｃ．，Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＤ）を用いて実行した。液体フィードを、ギアポンプ（Ｃｏｌｅ−Ｐａｒｍｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｖｅｒｎｏｎ  Ｈｉｌｌｓ，ＩＬ）を用いて、予混合フィード用の二流体ノズルに直接、または予混合フィード用の二流体ノズルへの導入の直前に静的混合器（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｏｓｓ  ＆  Ｓｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｈａｕｐｐａｕｇｅ，ＮＹ）に、のいずれかで供給した。窒素を乾燥ガスとして、乾燥圧縮空気を二流体ノズルへの霧化ガスフィードとして使用した。５０〜７０ｍＬ／分の液体供給原料速度で、処理ガスの入口温度は２４０〜２５０℃であり、出口温度は９４〜９８８℃であった。二流体霧化器を供給するガスは、約１１ｋｇ／時であった。乾燥チャンバ内の圧力は、−２インチＷＣであった。噴霧乾燥した産物をサイクロンから収集し、ＲＯＤＯＳ付属品を有するＨＥＬＯＳを用いてレーザー回折によって体積粒径を、かつ破壊的２段階ＡＣＩを用いてエアロゾル特性を分析した。
【０３２６】
予混合フィードを溶液安定性および透明度に関して評価した。５ｇ／Ｌの全固体濃度で、最終硫酸カルシウム濃度が硫酸カルシウムの溶解限度をわずかに超えた場合に、溶液は、３０分間の混合および噴霧乾燥の間、透明のままであった。全固体濃度が増加し、かつ最終硫酸カルシウム濃度が溶解限度をはるかに超えた時に、供給原料は濁り、沈殿は明らかであった。１０ｇ／Ｌで液体はわずかに濁り、２０ｇ／Ｌで液体は１０分にわたって次第に濁ってくる前の約５〜１０分間透明であり、３０ｇ／Ｌで液体は混合後約２分間透明であり、可視的な沈殿が約５分後に現れた。
【０３２７】
予混合および静的混合液体供給原料を噴霧乾燥させ、得られた乾燥粉末をサイクロンから収集した。ＲＯＤＯＳを有するＨＥＬＯＳからの結果は、図２９に示される代表的な粒径分布を伴って図２８に示される。供給原料の固体濃度の増加を伴っての粒径の増加（静的混合フィードで見られるような）が予想されるが、予混合フィードにおける著しい粒径増加および広範な粒径分布は望ましくない。
【０３２８】
破壊的ＡＣＩを用いた乾燥粉末のエアロゾル特徴付けの結果が、図３０に示される。
【０３２９】
継続した沈殿を伴う不安定な溶液は、噴霧乾燥中に再生可能な粒子形成に悪影響を及ぼし得、また、広範な粒径分布をもたらし得る。より高い固体濃度で２〜１０分間明らかである過飽和した透明な溶液は、溶液が、再生可能な方法で狭い粒径分布を生成しながら、より高い噴霧乾燥処理能力を達成するために静的混合され得ることを示唆する。
【０３３０】
１０．０重量パーセントのロイシン、３５．１重量パーセントの塩化カルシウム、および５４．９重量パーセントのクエン酸ナトリウム（製剤Ｉ−Ａ）を含む製剤に関して実施例１に示されるように、同様の結果が、クエン酸カルシウムにおいて例証された。沈殿反応は、１０．０重量パーセントのロイシン、５２．８重量パーセントのクエン酸カルシウム、および３７．２重量パーセントの塩化ナトリウムを含む製剤をもたらす。１０ｇ／Ｌの全固体濃度で、最終クエン酸カルシウム濃度は５．３ｇ／Ｌであり、０．９６ｇ／Ｌの水中のクエン酸カルシウム溶解限度を超えた。噴霧乾燥した粉末の特性から見られるように（図１Ａ〜１Ｅおよび２〜４）、この過飽和溶液は、狭い大きさ分布を有する吸入に適する粒子をもたらした。
【０３３１】
実施例１８
小さい分散可能な粒子を、ロイシンを含むカルシウム含有製剤および含まないカルシウム含有製剤、ならびにマグネシウム含有製剤およびナトリウムのみの製剤から作製する。
【０３３２】
以下の粉末を、３０ｍｍ空気の空気供給速度、９０％の速度の吸引器、および小さいガラス収集容器を有する高性能サイクロンを用いて、ＢuｃｈｉＢ−２９０上で噴霧乾燥させた。入口温度は２２０℃であり、出口温度は９６〜１０２℃であった。固体濃度は５ｇ／Ｌであり、それらが記載される順に次の成分を添加する前に、１回に１つの成分を完全に溶解して全て脱イオン水中に混合した。
【０３３３】
１８−１)  １０．０％のラクトース、３０．６％の塩化マグネシウム、５９．４％のクエン酸ナトリウム、カルシウム：ナトリウムの比率＝１：２
１８−２)  ６３．４％の乳酸マグネシウム、３６．６％の塩化ナトリウム、カルシウム：ナトリウムの比率＝１：２
１８−３)  １０．０％のロイシン、５８．４％の乳酸マグネシウム、３１．６％の塩化ナトリウム、カルシウム：ナトリウムの比率＝１：２
１８−４)  ５０．０％のロイシン、５０％の乳酸カルシウム
１８−５)  １０％のロイシン、９０％の塩化ナトリウム
１８−６)  ６０％のロイシン、４０％の塩化ナトリウム
１８−７)  １０．０％のアルブテロール、５８．６％の乳酸カルシウム、３１．４％の塩化ナトリウム
１８−８)  ９０．０％のアルブテロール、５．９％の乳酸カルシウム、３．１％の塩化ナトリウム
【０３３４】
これらの粉末に関する特徴付けの結果が下の表２９に示される。８つ全ての粉末が、ｘ５０  ０．５／４および１／４比率に対して良好な分散性を示した。ＦＰＦの＜５．６ミクロンは、最低１８．７％〜７５．６％に及んだ。
【０３３５】
【表２９】
0005964939.tif 000038
【０３３６】
いくつかの追加の無カルシウムの例示的な製剤を、上に記載の手順と同様の手順に従って、様々な噴霧乾燥機システム（Ｂｕｃｈｉ、Ｌａｂｐｌａｎｔ、およびＮｉｒｏベースのシステム）を利用して産生した。得られた粉末に関する選択された特徴付けの結果が表３０に示される（空試験値の細胞は、その粉末において値が測定されなかったことを示す）。
【０３３７】
【表３０】
0005964939.tif 000039
【０３３８】
さらに、賦形剤なしの組成物か、またはロイシンを含まない賦形剤を含有する組成物のいずれかのいくつかの追加の例も、上に記載の手順と同様の手順に従って、様々な噴霧乾燥機システム（Ｂｕｃｈｉ、Ｌａｂｐｌａｎｔ、およびＮｉｒｏベースのシステム）を利用して産生した。得られた粉末に関する選択された特徴付けの結果が表３１に示される（空試験値の細胞は、その粉末において値が測定されなかったことを示す）。
【０３３９】
【表３１−１】
0005964939.tif 000040
【表３１−２】
0005964939.tif 000041
【表３１−３】
0005964939.tif 000042
【０３４０】
表３２は、上に記載の手順と同様の手順で、ＢｕｃｈｉまたはＮｉｒｏ噴霧乾燥システムを用いて作製された、追加のロイシンおよびカルシウムを含有する小さい分散可能な粉末組成物に関する特徴付けデータを含有する（空試験値の細胞は、その粉末において値が測定されなかったことを示す）。
【０３４１】
【表３２−１】
0005964939.tif 000043
【表３２−２】
0005964939.tif 000044
【表３２−３】
0005964939.tif 000045
【表３２−４】
0005964939.tif 000046
【０３４２】
実施例１９
純粋な塩化カルシウムを、Ｌａｂｐｌａｎｔ噴霧乾燥システム内で１８０℃の入口温度にて噴霧乾燥させた。液体フィードは、Ｄ．Ｉ．水中の塩化カルシウム二水和物の２０ｇ／Ｌの固体濃度から成った。塩化カルシウムが潮解する時に水は収集容器内で凝縮し、粉末を収集することができなかった。排出乾燥ガス中の高い含水量を有する水溶液からの純粋な塩化カルシウムは、噴霧乾燥には吸湿性が高すぎると見なされた。次に、排出ガス中の湿度を低下させるために、固体濃度を２０ｇ／Ｌ、入口温度を２００℃、出口温度を６９℃に保って、液体フィードを７０％のエタノールに変えた。水は収集容器内でさらに凝縮し、粉末は湿ったように見えた。塩化カルシウムは、最終粉末内の塩化カルシウム含有量を減少させるために他の塩または賦形剤と混合することなしでは、噴霧乾燥させるには吸湿性が高すぎると結論付けられた。
【０３４３】
純粋な塩化マグネシウムを、Ｌａｂｐｌａｎｔシステム内で１９５℃の入口温度および６８℃の出口温度にて噴霧乾燥させた。液体フィードは、Ｄ．Ｉ．水中の塩化マグネシウム六水和物の２０ｇ／Ｌの固体濃度から成った。収集容器内の乾燥粉末は湿ったように見え、ＨＥＬＯＳ／ＲＯＤＯＳシステムで測定された平均粒径は、２１ミクロンであった。次に、液体フィードを排出乾燥ガス中の湿度を低下させるために、固体濃度を５０ｇ／Ｌ、入口温度を２００℃、出口温度を７４℃に保って、液体フィードを７０％のエタノールに変えた。この塩化マグネシウム粉末は、湿ったようには見えず、４ミクロンの平均体積粒径を有したが、粉末は粒状のようであり、１９％の５．６ミクロン未満細粒分を有し、粉末は、十分に呼吸可能ではなかったことを示す。
【０３４４】
実施例２０：大きい多孔性粒子
【０３４５】
【表３３−１】
0005964939.tif 000047
【表３３−２】
0005964939.tif 000048
【０３４６】
実施例２１：安定性
乾燥粉末を、３０℃および相対湿度７５％と定義される、極端な温度および湿度条件（ＩＣＨ，Ｃｌｉｍａｔｉｃ  Ｚｏｎｅ  ＸＩＶ）下で、使用中の安定性のために試験した。約２５ｍｇの製剤Ｉ、製剤ＩＩ、および製剤ＩＩＩをカプセル内に充填した。カプセルを開けたままにし、次に定義される条件で１５〜３０分間安定チャンバ内に設置した。カプセルを適切な時点で取り除き、閉鎖し、破壊的２−段階ＡＣＩを用いてａＰＳＤに関して、かつＭａｌｖｅｒｎスプレーテックを用いてｇＰＳＤに関して試験した。両試験を２秒間６０ＬＰＭで行った。各時点をｎ＝２で繰り返した。結果を室温および相対湿度２５〜３０％での粉末からのａＰＳＤ／ｇＰＳＤデータと比較した。
【０３４７】
全ての製剤（製剤Ｉ、製剤ＩＩ、および製剤ＩＩＩ）は、極端な温度および湿度条件（３０℃、相対湿度７５％）への３０分間の曝露後に、標準の条件（２２℃、相対湿度２５〜３０％）における５．６ミクロン未満の総用量の細粒分（ＦＰＦＴＤ）から＋／−５％未満の変化を示した。ｇＰＳＤに関して、製剤Ｉが３０分後に約３０％の増加を示した一方で、製剤ＩＩＩは、ほとんど安定したままであり、製剤ＩＩは、３０分後にＤｖ５０を約１５％減少させた。
【０３４８】
３０分間の３０℃、相対湿度７５％への曝露時に、３つの製剤のエアロゾル特性における著しい変化が見られたが、幾何学的粒径における変化は、より明らかであった（図３１Ａおよび３１Ｂ）。製剤Ｉ（クエン酸カルシウム）の粒径が約３０％増加した一方で、製剤ＩＩ（乳酸カルシウム）の粒径は、約１５％減少した。製剤ＩＩＩ（硫酸カルシウム）の粒径は減少したが、著しくはなかった。
【０３４９】
試験した追加の製剤は、塩化カルシウム粉末（３８．４％のロイシン、３０．０％の塩化カルシウム、３１．６％の塩化ナトリウム）および製剤ＩＩ製剤（１０．０％の賦形剤、５８．６％の乳酸カルシウム、３１．４％の塩化ナトリウム）に調和する異なる賦形剤（ラクトース、マンニトール、マルトデキストリン）を用いた３つの乳酸カルシウム粉末であった。
【０３５０】
極端な温度および湿度条件（３０℃、相対湿度７５％）への３０分間の曝露後に、マルトデキストリン（製剤ＸＩＶ）ならびにマンニトール製剤は、標準の条件（２２℃、相対湿度２５〜３０％）における５．６ミクロン未満の総用量の細粒分から＋／−１０％未満の変化の全体の変化を示した。塩化カルシウム粉末およびラクトース製剤は、それぞれ、５．６ミクロン未満の総用量の細粒分において、５０％超の減少および約２０％の増加の影響を受けたように見える。（図３１Ｃ）ｇＰＳＤにおいて、結果は正反対であり、塩化カルシウム粉末およびラクトース製剤は、３０分後にＤｖ５０における＋／−１０％未満の変化の全体の変化を示した一方で、マンニトール製剤は、試験の間、Ｄｖ５０を３０％〜６０％増加させた。（図３２Ｄ）Ｄｖ５０における変化に関して、マルトデキストリン製剤を試験しなかった。
【０３５１】
実施例２２：室温および相対湿度３０％〜４０％での短期間安定性
噴霧乾燥した粉末を室温、約３０％〜４０％の相対湿度で１週間保存し、粒径分布に関して定期的に試験した。サイズ３のＨＰＭＣカプセル（Ｑｕａｌｉ−Ｖ，Ｑｕａｌｉｃａｐｓ，Ｗｈｉｔｓｅｔｔ，ＮＣ）を各々の乾燥粉末で半分充填した。１つの試料を、乾燥粉末が吸入器セル設定を用いて吸入器から分散することができるスプレーテック（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）、レーザー回折噴霧粒子定寸システムで即座に試験した。約１６個のカプセルを各粉末で充填した。カプセルの半分を、制御された湿度および温度条件（約２３〜２８％の相対湿度）で研究室内に保存し、一方、他の半分を異なる温度および相対湿度（約３８〜４０％の相対湿度）で研究室外に保存した。特定の時点（ｔ＝１時間、２時間、４時間、２４時間、４８時間、１週間）で、環境制御された部屋からの１個のカプセルおよび研究室外からの１個のカプセルを体積粒径分布のためにスプレーテックで試験した。
【０３５２】
５０％のロイシンならびに示される塩化カルシウムおよびナトリウム塩の組み合わせを含有する製剤の選択に関する結果が図３２および図３３に示される。塩化カルシウムおよび塩化ナトリウムを含有する製剤は、より高い湿度条件への曝露後に著しい集塊を示した。酢酸製剤は、初期の時点で不定の結果を有した。硫酸、クエン酸、および炭酸製剤は、試験期間にわたって良好な相対安定性を示した。
【０３５３】
室温および相対湿度４０％で保持された時、塩化カルシウムおよび塩化ナトリウムを含有する乾燥粉末製剤は、曝露の１時間後安定せず、一方で、酢酸製剤も粒径において不定の結果を示した。硫酸および乳酸粉末がわずかに大きさを増大させた一方で、炭酸およびクエン酸粉末は、わずかに大きさを減少させた。塩化物のみを含有する製剤および酢酸を含有する製剤は、さらなる研究において適切に安定しているようであった。
【０３５４】
実施例２１：室温および相対湿度３０％〜４０％での短期間安定性
噴霧乾燥した粉末を室温、約３０％〜４０％の相対湿度で１週間保存し、粒径分布に関して定期的に試験した。サイズ３のＨＰＭＣカプセル（Ｑｕａｌｉ−Ｖ，Ｑｕａｌｉｃａｐｓ，Ｗｈｉｔｓｅｔｔ，ＮＣ）を各々の乾燥粉末で半分充填した。１つの試料を、乾燥粉末が吸入器セル設定を用いて吸入器から分散することができるスプレーテック（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）、レーザー回折噴霧粒子定寸システムで即座に試験した。約１６個のカプセルを各粉末で充填した。カプセルの半分を、制御された湿度および温度条件（約２３〜２８％の相対湿度）で研究室内に保存し、一方、他の半分を異なる温度および相対湿度（約３８〜４０％の相対湿度）で研究室外に保存した。特定の時点（ｔ＝１時間、２時間、４時間、２４時間、４８時間、１週間）で、環境制御された部屋からの１個のカプセルおよび研究室外からの１個のカプセルを体積粒径分布のためにスプレーテックで試験した。
【０３５５】
５０％のロイシンならびに示される塩化カルシウムおよびナトリウム塩の組み合わせを含有する製剤の選択に関する結果が図３２および図３３に示される（塩化物は除去された）。塩化カルシウムおよび塩化ナトリウムを含有する製剤は、より高い湿度条件への曝露後に著しい集塊を示した。酢酸製剤は、初期の時点で不定の結果を有した。硫酸、クエン酸、および炭酸製剤は、試験期間にわたって相対安定性を示した。
【０３５６】
室温および相対湿度４０％で保持された時、塩化カルシウムおよび塩化ナトリウムを含有する乾燥粉末製剤は、曝露の１時間後安定せず、一方で、酢酸製剤も粒径において不定の結果を示した。硫酸および乳酸製剤がわずかに大きさを増大させた一方で、炭酸およびクエン酸製剤は、わずかに大きさを減少させた。塩化物のみを含有する製剤および酢酸を含有する製剤は、さらなる研究において適切に安定しているようであった。
【０３５７】
実施例２２乾燥粉末流動特性
粉末流動性の特徴付けのために、製剤Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＸＩＶ粉末の流動性も、当分野の従来の方法を用いて評価した。各粉末の流動性指数をＦｌｏｄｅｘ粉末流動性試験器具（Ｈａｎｓｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｒｐ．，モデル２１−１０１−０００）を用いて判定した。任意の所与の実行のために、シリンダ内のトラップドア穴の中心に向けられたステンレス漏斗を用いて全ての試料を装填した。シリンダ内の粉末の列を妨害しないように注意を払った。羊斑の電位形成を約３０秒間待った後に、装置にできるだけ小さい振動を引き起こしながら、トラップドアを解放した。粉末がトラップドアを通って落ち、その結果、上からシリンダを通して見下ろせるように穴が可視的であり、かつシリンダ内の残渣が逆円錐型を形成した場合に、試験は合格と見なされ、穴が可視的ではないか、または粉末が円錐型の残渣を残すことなく穴を通って真直に落ちた場合には、試験は失敗であった。粉末が通過するであろう最小の大きさの穴を見出すために、十分な流動ディスクを試験し、肯定的な試験をもたらした。３回の試み中、３回の肯定的な試験を得るために、最小の流動ディスクをさらに２回試験した。流動性指数（ＦＩ）をこの最小穴径として報告する。
【０３５８】
ＳＯＴＡＸタップ密度テスタモデルＴＤ２を用いて、バルクおよびタップ密度を判定した。任意の所与の実行のために、全ての試料をステンレス漏斗を用いて１００−ｍＬの風袋メスシリンダに導入した。粉末質量および初期体積（Ｖ０）を記録し、シリンダをアンビルに取り付け、ＵＳＰ  Ｉ方法に従って稼動させた。第１の通過のために、シリンダをタップカウント１（５００タップ）を用いてタップし、得られた体積Ｖａを記録した。第２の通過のために、タップカウント２を用いて（７５０タップ）タップし、新しく体積Ｖｂ１をもたらした。Ｖｂ１が９８％超のＶａになった場合に試験は完了し、さもなければ、Ｖｂｎが９８％超のＶｂｎ−１になるまで、タップカウント３を反復的に用いた（１２５０タップ）。粉末バルク密度（ｄＢ）、タップ密度（ｄＴ）、ハウスナー比（Ｈ）、および圧縮性指数（Ｃ）を判定するために計算し、それらの後者２つは、粉末流動性の標準測定値である。「Ｈ」は、バルク密度で割ったタップ密度であり、「Ｃ」は１００×（１−（タップ密度で割ったバルク密度））である。粉末の体積を判定するために、骨格密度測定を、ヘリウムガス置換技術を用いたＡｃｃｕｐｙｃ  ＩＩ  １３４０を用いて、Ｍｉｃｒｏｍｅｒｉｔｉｃｓ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓで実行した。器具は、バルク粉末中の格子間空隙およびガスがアクセスした個々の粒子中の任意の開放気孔率を除いて、各試料の体積を測定した。内部（閉鎖）気孔率は、引き続き体積内に含まれた。密度を、この測定された堆積および天秤を用いて決定された試料重量を用いて計算した。各試料において、体積を１０回測定し、骨格密度（ｄＳ）を１０回の密度計算の平均として標準偏差とともに報告した。
【０３５９】
これらの密度および流動性試験の結果が表３４および３５に示される。試験された粉末の４つ全てが、非常に低い流動特性を有する粉末の特性であるとして当分野で説明されるハウスナー比ならびに圧縮性指数を有した（例えば、ＵＳＰ＜１１７４＞を参照）。したがって、これらの粉末が極めて分散可能であり、かつ本明細書に記載される良好なエアロゾル化特性を有することは驚きである。
【０３６０】
【表３４】
0005964939.tif 000049
【０３６１】
【表３５】
0005964939.tif 000050
【０３６２】
先に言及したＵＳＰ＜１１７４＞は、１．３５より大きいハウスナー比を有する乾燥粉末が流動の悪い粉末であることに留意する。流動特性および分散性は、両方ともに粒子集塊または凝集の悪影響を受ける。したがって、１．７５〜２．３１のハウスナー比を有する粉末が極めて分散可能であろうことは予想外である。
【０３６３】
実施例２３：含水量および吸湿性
製剤Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＸＩＶ粉末の含水量を、熱重量分析（ＴＧＡ）およびカールフィッシャー分析の両方を介して決定した。ＴＡ器具Ｑ５０００  ＩＲ熱重量測定分析器（Ｎｅｗ  Ｃａｓｔｌｅ，ＤＥ）を用いて、熱重量分析（ＴＧＡ）を実行した。試料を、アルミニウム試料皿内に置き、ＴＧ炉内に挿入した。データ収集および処理パラメータを各サーモグラム上に表示した。Ｎｉｃｋｅｌ  ａｎｄ  Ａｌｕｍｅｌ（商標）をキャリブレーション標準として使用した。ＴＧＡのために、含水量を、１５０℃の温度に加熱した時に、試料の質量の損失から決定した（ＴＧＡのために、用いた噴霧乾燥溶媒は１００％の水であり、水のみがこれらの粉末中の揮発性成分として存在すると想定された）。粉末製剤Ｉの代表的なＴＧＡサーモグラムが図３４に示される。水判定のために、Ｍｅｔｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  ＤＬ３９  ＫＦ滴定装置（Ｇｒｅｉｆｅｎｓｅｅ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を用いてカールフィッシャー（ＫＦ）電量分析を実行した。試料をＨｙｄｒａｎａｌ-Ｃｏｕｌｏｍａｔ  ＡＤを含有するＫＦ滴定容器内に置き、溶解を確保するために１０秒間混合した。次に、電気化学的酸化によってヨウ素を生成する発生電極の手段で試料を滴定した。２  Ｉ−＝＞Ｉ２＋２ｅ。概して、再現性を確保するために、１つの距離測定走行および２つの反復を得た。これらの方法を用いた粉末含水量に関する要約データが表３６に示される。
【０３６４】
【表３６】
0005964939.tif 000051
【０３６５】
製剤Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＸＩＶ粉末対未加工塩化カルシウム二水和物、ならびに３８．４％のロイシン、３０％のＣａＣｌ２、および３１．６％の塩化ナトリウムを含有する製剤を噴霧乾燥して作製される１：２の塩化カルシウム：塩化ナトリウム対照粉末の吸湿性および水摂取の可能性を比較するために、動的蒸気収着（ＤＶＳ）ステップモード実験を行った（３０重量％が、噴霧乾燥の直後に収集媒体中で潮解を経験することなく、うまく噴霧乾燥粉末内に取り込まれることができた塩化カルシウムの最高の装填レベルであったと判断された）。ＤＶＳ操作条件に関して、粉末を、相対湿度０％で最初に均衡化し、次に、相対湿度３０％に１時間曝露させ、続いて、相対湿度７５％に４時間曝露させた。各々の粉末における水摂取の質量％が表３７に示される。表３７に見られるように、未加工塩化カルシウム二水和物および対照粉末の両方ともに非常に吸湿性であり、相対湿度３０％への１時間の曝露時に約１４〜１５％の水を取り込み、相対湿度７５％への曝露後に、１００％をはるかに超えるそれらの水の質量を取り込んだ。対照的に、製剤Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、およびＸＩＶ粉末は、相対湿度３０％への１時間の曝露時に２．５％未満の水を摂取し、相対湿度７５％への４時間の曝露時に１４％〜３３％の水を取り込んだ。
【０３６６】
【表３７】
0005964939.tif 000052
【０３６７】
実施例２４：溶解熱
（ｉ）３０％の塩化カルシウム、３１．６％の塩化ナトリウム、および３８．４％のロイシンから成る対照粉末、（ｉｉ）未加工塩化カルシウム二水和物、ならびに（ｉｉｉ）未加工ロイシンと比較して、ＨＢＳＳ緩衝剤中での製剤Ｉ〜ＩＩＩの試料の溶解時に、溶解熱を得た。表３８に示されるように、カルシウム含有試料に関して、同等のカルシウムイオンのモルを含有する製剤Ｉ（ＰＵＲ１１１）、ＩＩ（ＰＵＲ１１３）、およびＩＩＩ（ＰＵＲ１１２）粉末の質量を試験した。結果は図３５に示される。図３５に示されるデータから見られるように、製剤Ｉ〜ＩＩＩは、未加工塩化カルシウム二水和物および対照カルシウム粉末の両方と比較して、著しく減少した溶解熱をもたらした。塩化カルシウム二水和物は、高い溶解発熱を有し、水と接触した時に著しい量の熱を放出することで知られている。大量の塩化カルシウム二水和物または高い溶解発熱を有する他の塩を迅速に溶解する時等のある特定の状況下で、熱傷を引き起こす可能性がある大量の熱を放出する。したがって、粘膜表面を塩化カルシウム二水和物と接触させることに関する安全性の懸念が存在する。これらの安全性の懸念を、高い溶解発熱を有さない製剤Ｉ〜ＩＩＩ等の粉末を産生することによって軽減することができ、したがって、望ましくない発熱効果の可能性を減少させた。
【０３６８】
【表３８】
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【０３６９】
実施例２５生体内肺炎モデル
３７℃および５％ＣＯ２で一晩培養物をトリプシン大豆寒天（ＴＳＡ）血液プレート上で成長させることによって、細菌を調製した。単一コロニーを無菌ＰＢＳ中でＯＤ６００約０．３に再懸濁し、その後無菌ＰＢＳ中で１：４に希釈した（約２×１０７コロニー形成単位（ＣＦＵ）／ｍＬ）。麻酔にかかっている間、気道内注入によって、マウスを５０μＬの細菌懸濁液（約１×１０６ＣＦＵ）に感染させた。
【０３７０】
高出力噴霧器または個々に１１匹までの動物を保持するパイチャンバケージに接続されたＰａｒｉ  ＬＣ  Ｓｐｒｉｎｔ噴霧器のいずれかを用いて、Ｃ５７ＢＬ６マウスを、全身曝露システム中のエアロゾル化液体製剤に曝露させた。肺炎球菌への感染２時間前にマウスを乾燥粉末製剤（表３９）で治療した。対照として、動物を同様の量の１００％のロイシン粉末に曝露させた。感染２４時間後、ペントバルビタール注射で安楽死させ、肺を収集し、無菌ＰＢＳ中で均質化した。肺均質試料を無菌ＰＢＳ中で連続的に希釈し、ＴＳＡ血液寒天プレート上にプレーティングした。翌日ＣＦＵを計数した。
【０３７１】
対照動物と比較して、カルシウム乾燥粉末で治療された動物は、感染の２４時間後に減少した細菌力価を示した。具体的には、製剤硫酸カルシウムおよび塩化ナトリウム（製剤ＩＩＩ）から成る製剤で治療された動物は、５倍低い細菌力価を示し、クエン酸カルシウムおよび塩化ナトリウム（製剤Ｉ）から成る製剤で治療された動物は、１０．４倍低い細菌力価を示し、かつ乳酸カルシウムおよび塩化ナトリウム（製剤ＩＩ）から成る製剤で治療された動物は、５．９倍低い細菌力価を示した。（図３６）
【０３７２】
【表３９】
0005964939.tif 000054
【０３７３】
本明細書に示されるデータは、極めて分散可能な二価金属カチオン塩含有乾燥粉末が、細菌およびウイルス感染を治療するために製造ならびに使用されることを示す。
【０３７４】
実施例２６−３ヶ月間冷蔵された、標準および加速条件安定性の研究
サイズ３のＨＰＭＣカプセル（Ｓｈｉｏｎｏｇｉ  Ｑｕａｌｉｃａｐｓ，Ｍａｄｒｉｄ，Ｓｐａｉｎ）内に装填され、以下の条件、（ｉ）２〜８ｏＣの冷蔵保存、（ｉｉ）２５ｏＣ／相対湿度６０％、乾燥剤下で保管されたカプセル、および（ｉｉｉ）４０ｏＣ／相対湿度７５％、乾燥剤下で保管されたカプセルで、設置された製剤Ｉ〜ＩＩＩの代表的な試料を利用して、３ヶ月間の物理的安定性の研究を行った。ＦＰＦ＜５．６および３．４、ならびにＤｖ５０（スプレーテック）および含水量（カールフィッシャー）を３ヶ月時点まで監視した。表４０に示されるように、製剤Ｉ〜ＩＩＩの各々は、これらの条件の各々で評価された物理的特性に関して、良好な安定性を示した。
【０３７５】
【表４０】
0005964939.tif 000055
【０３７６】
本明細書に引用される特許、特許出願、特許公報、出版記事の各々の内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【図１Ａ−１】
0005964939.tif 000056
【図１Ａ−２】
0005964939.tif 000057
【図１Ｂ−１】
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【図１Ｂ−２】
0005964939.tif 000059
【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図１Ｅ】
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【図１Ｆ−１】
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【図１Ｆ−２】
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【図２】
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【図３】
0005964939.tif 000066
【図４】
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【図５Ａ−Ｂ】
0005964939.tif 000068
【図５Ｃ−Ｄ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
0005964939.tif 000071
【図７】
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【図８】
0005964939.tif 000073
【図９】
0005964939.tif 000074
【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５Ａ】
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【図２５Ｂ】
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【図２６】
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【図２７Ａ】
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【図２７Ｂ】
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【図２７Ｃ】
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【図２７Ｄ】
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【図２７Ｅ】
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【図２７Ｆ】
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【図２７Ｇ】
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【図２７Ｈ】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１Ａ−Ｂ】
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【図３１Ｃ−Ｄ】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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