(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉの化合物、並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩：
【化１】
0005931912.tif 000028
（上記式中、
Ｒ１およびＲ２は、同時または独立にハロゲン、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシ、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルコキシ、ニトリルまたはアリールスルホンアミドであって、そのアリールが直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル基によって置換されていてもよいものから選択される１または数種類の基を表す）。
【請求項２】
請求項１に記載の一般式Ｉの化合物、並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩：
【化２】
0005931912.tif 000029
（上記式中、
Ｒ１は、ヒドロキシ、メトキシまたはシアノ基を表し、
Ｒ２は、ハロゲン、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシ、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルコキシ、ニトリルから選択される１または数種類の基を表す）。
【請求項３】
ハロゲンが、Ｆ、ＣｌまたはＢｒである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物、並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩：
【化３】
0005931912.tif 000030
（上記式中、
Ｒ１は、ヒドロキシ基を表し、
Ｒ２は、ハロゲン、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシ、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルコキシ、ニトリルから選択される１または数種類の基を表す）。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物、並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩：
【化４】
0005931912.tif 000031
（上記式中、
Ｒ１は、置換しているフェニル上でパラ位（４位）に配置されているヒドロキシ基を表し、
Ｒ２は、Ｃｌ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、ニトリルから選択される１または数種類の基を表す）。
【請求項６】
４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン、
４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（（Ｓ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン、
４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（（Ｒ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン、
２，２’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ジベンゾニトリル、
３，３’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ジベンゾニトリル、
４，５−ビス−（４−メトキシ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン、
Ｎ，Ｎ’−３，３’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ビス（３，１−フェニレン））ビス（４−メチルベンゼンスルホンアミド）、
３−（５−（４−メトキシフェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４−イル）−ベンゾニトリル、
２−［５−（４−メトキシ−フェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニル−エチル）−１，６−ジヒドロ-ピリダジン-４−イル］−ベンゾニトリル、
Ｎ−｛３−［５−（３，４−ジメチル−フェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニル−エチル）−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−４−イル］−フェニル｝−４−メチル−ベンゼンスルホンアミド、および
４，５−ビス−（３，４−ジクロロ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン
から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
一般式ＩＩ
【化５】
0005931912.tif 000032
（上記式中、
Ｘは塩素原子または臭素原子のいずれかである）
のジブロモまたはジクロロピリダジノンを、一般式ＩＩＩ
【化６】
0005931912.tif 000033
（上記式中、
Ａがハロゲン原子であるときには、塩基を溶媒中で用い、
ＡがＯＨであるときには、ミツノブカップリング条件が用いられる。）の誘導体と縮合させ、
得られた中間体ＩＶ
【化７】
0005931912.tif 000034
を、次に、塩基とパラジウム触媒の存在下にて溶媒の混合物中で、ホウ素誘導体Ｖ
【化８】
0005931912.tif 000035
（上記式中、
Ｒ１は、請求項１〜６のいずれか一項において定義された通りであり、
Ｕは、Ｂ（ＯＨ）２または
【化９】
0005931912.tif 000036
である）
とカップリングさせ（工程１）、
主として化合物ＶＩ
【化１０】
0005931912.tif 000037
が形成され、および極めて少量の化合物ＶＩＩが形成され、
中間体ＶＩを、次に、
前記カップリング条件でホウ素誘導体Ｖと再度反応させて化合物ＶＩＩ
【化１１】
0005931912.tif 000038
を生成させ、あるいは
ホウ素誘導体ＶＩＩＩ
【化１２】
0005931912.tif 000039
（上記式中、
Ｒ２は、請求項１〜６のいずれか一項において定義された通りであり、
Ｕは、工程１について前記したカップリング条件で前記定義の通りである）
と再度反応させて、化合物ＩＸ
【化１３】
0005931912.tif 000040
を生成する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物の製造方法。
【請求項８】
ピリダジノンＩＩと誘導体ＩＩＩの縮合が、ミツノブカップリング条件下で生じるときには、前記条件がジエチルアゾジカルボン酸エチルおよびトリフェニルホスフィンの存在を含んでなり、反応が溶媒としてＴＨＦ中で行われる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
誘導体ＩＩＩでのＡがハロゲン原子であるときには、ピリダジノンＩＩとの縮合反応での、塩基がＣｓ２ＣＯ３であり、溶媒がＤＭＦである、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
中間体ＩＶとホウ素誘導体Ｖとのカップリングでの、溶媒の混合物がトルエン／エタノールまたは水／アセトニトリルまたはジオキサン／水であり、塩基が炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムであり、触媒がテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムまたはＰｄＣｌ２／２ＰＰＨ３である、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物を含んでなる医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の一般式Ｉの化合物を少なくとも１種類の薬学上許容可能な賦形剤と組み合わせて含んでなる、医薬組成物。
【請求項１３】
カリウムチャネルの遮断薬を必要とする疾患の治療に使用するための、請求項１１または１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
カリウムチャネルの遮断薬を必要とする疾患の予防に使用するための、請求項１１または１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
カリウムチャンネルがＫｖ１．５、Ｋｖ４．３およびＫｖ１１．１チャネルからなる群から選択される、請求項１１〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
カリウムチャンネルの遮断薬を必要とする疾患が心房細動である、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
カリウムチャンネルの遮断薬を必要とする疾患が、心耳心臓不整脈である、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
カリウムチャンネルの遮断薬を必要とする疾患が、心室心臓不整脈である、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
カリウムチャンネルの遮断薬を必要とする疾患が、細胞サイクルおよび／または細胞増殖および／または再生が損なわれる疾患である、請求項１１〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
疾患が癌である、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
疾患が慢性炎症である、請求項１９に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カリウムＫｖチャネル、および更に具体的にはＫｖ１．５、Ｋｖ４．３およびＫｖ１１．１チャネルの遮断薬としてのジアリールピリダジノン誘導体、それらの調製、およびヒトの治療のためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
カリウムチャネルは、約８０の遺伝子を有するヒトゲノムにおけるイオンチャネルの最大のファミリーである(Tamargo et al, Cardiovasc. Res. 2004, 62: 9-33)。これらのカリウムチャネルは、３つのサブファミリー：電位または電圧活性化チャネル（Ｋｖチャネル）およびカルシウム活性化チャネル（ＫＣａチャネル）、内向き整流チャネル（Ｋｉｒ）および２−ポアカリウムチャネル（Ｋ２ｐ）に再分割することができる。電位活性化チャネルのサブファミリーは、人体に最も広く行き渡っており、興奮性細胞（心細胞、ニューロン、横紋または平滑筋細胞）および膵臓、前立腺および副甲状腺細胞などの非興奮性細胞に実質的に偏在分布している（例えば、Gutman G et al, Pharmacol. Rev. 2005, 57: 473-508)。
【０００３】
興奮性細胞におけるＫｖカリウムチャネルの主要な機能は、静止膜電位および活動電位持続時間を制御することである (Nerbonne et Kass, Physiol. Rev. 2005; 85:1205-1253)。この点において、幾つかのＫｖチャネルが、心房と心室の両方におけるこの制御に関与している。Ｋｖ４．３チャネルはＫＣｈＩＰ  ２サブユニットと一体となって活動電位（ＡＰ）の早期再分極相に伴う電流Ｉｔｏを形成し、ＫＶＬＱＴ１／ＭｉｎＫおよびｈＥＲＧチャネルはＡＰの遅延分極相に関与する（それぞれ、電流ＩＫｓおよびＩＫｒを生じる）。前記チャネルは、心房と心室の間に均一に分布している。しかしながら、カリウムチャネルの他の２つのタイプは、心房にだけ分布している。電流ＩＫｕｒの原因である電位依存性カリウムチャネル（Ｋｖ１．５）およびアセチルコリンによって活性化される内向き整流チャネル（電流ＩＫ−Ａｃｈの原因であるＫｉｒ３．１およびＫｉｒ３．４）。
【０００４】
膜電気活性の変化が、多くの疾患、特に不整脈を含む心疾患で観察されている。後者の中では、心房細動（ＡＦ）は、連続した速やかで不規則な電気活性を生じる心房筋細胞の完全に非同期化した活動を含む重篤な不整脈である。ＡＦは、心房組織においてリエントラント型電気回路の出現によって誘発される（Miyasaka Y et al, Circulation 2006, 114: 119-125）。ＡＦの発生率を減少させるための心房レベルでの具体的な抗不整脈治療は現在存在しないので、主要な医学上の必要性を表している（Page et Roden, Nat. Rev. Drug Discov. 2005, 4: 899-910）。
【０００５】
同時に活性化されるマイクロリエントリー回路が多数存在することは、内腔経路(endocavitary route)によりおよびＥＣＧ上の両方で観察される電気活性の無秩序性を説明している。この不整脈は、一般に電気生理学的観点から異常な心房心筋のバックグラウンドに対して現れ、その不応期は極めて短くかつ互いに極めて不均質であり、従って極めて微弱な期外収縮に対して極めて脆弱である。これらの異常は、心房筋細胞の電気生理学的特徴を変更する膜貫通イオン電流調節の変更に加えて形態変化（肥厚、拡大、線維症）を引き起こす圧負荷または伸長に引き続く心筋リモデリングの現象の情況に該当する。ＡＦのそれぞれの発作が機械的および電気生理学的リモデリングのこの過程を持続しまたは更に悪化させるならば、ＡＦが再発の高い可能性を有しかつその自然な展開が慢性化することを理解できる。逆に、心房心筋層が肺静脈へ伸長することがほとんど常に観察される特定点から生じる局所性ＡＦの例が最近になって確認されている。これらのＡＦのかなり稀な例は、実際に同一構造の特性を発作の初期にまたは発作の間に断続的に見られる心房期外収縮に匹敵するいずれかの割合で取っている。総ての場合に、心房収縮の喪失によって心拍出量が減少して２０〜３０％の間で変化し、後者が基底状態で減少する点で更に顕著である。同時に、心房腔(atrial cavities)、特に心耳のような幾つかの盲管(culs-de-sac)における鬱血の存在は、血栓塞栓症(thromboembolitic)の危険の原因である。しかしながら、塞栓症の危険はＡＦの単なる存在によっては部分的に影響されるだけであり、心房鬱血も腔内圧の増加に関係している（心収縮または心拡張左心室機能不全、弁膜症または人工弁）。
【０００６】
従って、電気的リモデリングは、ＡＦの発生の主要基体を構成するが、それはＬ型カルシウムチャネルの活性の減少の結果であり、超急速カリウム電流によってＫｖ１．５カリウムチャネルがそれらの再分極化の役割を完全に果たすことができる (Bhakta et Miller, Expert Opin. Ther. Targets 2007, 11: 1161-1178)。この結果は不応期における劇的な減少であり、マイクロリエントリーについての誘発因子を表している。Ｋｖ１．５カリウムチャネルは心室レベルでは機能的には表されないことは知られているので、これらのチャネルの遮断薬は心室の電気生理学に影響を及ぼすことのない心房レベルの選択的抗不整脈治療薬となる。その薬理学的効果は、それ自身、不応期の延長および従ってマイクロリエントリー回路のより少ない効果において現れる。参照生成物で得られた多数の実験データーにより、治療ターゲットとしてのＫｖ１．５遮断の値が確認される（Gogelein et al, Naunyn Schmiedeberg's Arch Pharmacol 2004, 370: 183-192, Regan et al, J Pharmacol Exp Ther 2008, 324: 322-330）。
【０００７】
膜電位の速やかな変化は興奮性細胞で周知であるが、電位の低速変動は総ての細胞で観察され、細胞サイクルの制御と関連している。細胞サイクルは発生、組織再生および細胞増殖のために調節し連携することが必要な細胞挙動における重要なパラメーターである（Pardo, Physiology, 2004; 19: 285-292; Blackistion et al, Cell Cycle, 2009; 8-21: 3527-3536)。一般的に言えば、カリウムチャネルの遮断により、生理学的モデル（例えば、リンパ球）および病理学的モデル（癌）において増殖が減少する。細胞サイクルの調節におけるカリウムチャネルの役割は、ヒト黒色腫、肺癌、リンパ腫、中皮腫、肝細胞癌、リンパ球および単球に由来する生理学的または病理学的に限らない多くの細胞型（癌系統または腫瘍）で明らかにされた（総説については、Pardo et al, J. Membr. Biol, 2005; 205: 115-124)。
【０００８】
前記で用いたように、「Ｋｖ」という用語はカリウムチャネルの電位依存性ファミリーを指し、様々のサブファミリー（Ｋｖ１．、Ｋｖ２．、Ｋｖ３．  ．．．）を含んでなり、それらの中でＫｖ１．１、Ｋｖ１．２およびＫｖ１．３．．．チャネルが見出されることになる。
【０００９】
「Ｋｖチャネル遮断薬（ブロッカー）」は、チャネルを通るＫ＋イオン流を減少するあるいは遮断する分子を表す。
【００１０】
本明細書で用いられるように、「塩」という用語は、本発明の化合物の無機酸および塩基付加塩を表す。これらの塩は、好ましくは薬学上許容可能であり、すなわち、それらを投与する患者にとって非毒性である。「薬学上許容可能」という用語は、動物またはヒトに投与したときに有害なまたはアレルギー作用または他の望ましくない反応を全く生じない分子実体(molecular entities)および組成物を表す。本明細書で用いるときには、「薬学上許容可能な賦形剤」という用語は、防腐剤、充填剤、崩壊、湿潤、乳化、分散、抗菌または抗真菌剤のような任意の希釈剤、アジュバントまたは賦形剤、または吸収または腸管および消化再吸収を遅らせる更なる薬剤を包含する。これらの媒体または媒介物の使用は、当該技術分野で周知である。この薬剤がジアリールピリダジノン誘導体と化学的に不適合でなければ、本発明による化合物と一緒に医薬組成物でのその使用が予想される。本発明の文脈内では、本明細書で用いられる「治療」という用語は、この用語が適用される疾患または更にこの疾患の１または数種類の症状の出現または進行の防止または抑制を意味する。
【００１１】
本発明の主題は、カリウムＫｖチャネル（更に具体的には、Ｋｖ１．５、Ｋｖ４．３およびＫｖ１１．１チャネル）を遮断するジアリールピリダジノン誘導体およびヒトの治療のためのそれらの使用である。
【００１２】
これらの化合物は、一般式Ｉ：
【化１】
0005931912.tif 000002
（上記式中、
Ｒ１およびＲ２は、同時または独立にＦ、Ｂｒ、Ｃｌのようなハロゲン、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシ、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルコキシ、ニトリルまたはアリールスルホンアミドであって、そのアリールが直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル基によって置換されていてもよいものから選択される１または数種類の基を表す）、
並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩に相当する。
【００１３】
本発明の文脈内では、アリール基は、炭化水素化した芳香族性の５または６員の単環を表す。
【００１４】
本発明の一態様によれば、一般式Ｉの化合物は、化合物
【化２】
0005931912.tif 000003
（上記式中、
Ｒ１は、ヒドロキシ、メトキシまたはシアノ基を表し、
Ｒ２は、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌのようなハロゲン、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシ、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルコキシ、ニトリルから選択される数種類の基を表す）、
並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩である。
【００１５】
本発明のもう一つの態様によれば、一般式Ｉの化合物は、化合物
【化３】
0005931912.tif 000004
（上記式中、
Ｒ１は、ヒドロキシ基を表し、
Ｒ２は、Ｆ、Ｃｌのようなハロゲン、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルキル、ヒドロキシ、直鎖状または分岐状のＣ１−Ｃ４アルコキシ、ニトリルから選択される数種類の基を表す）、
並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩である。
【００１６】
本発明のもう一つの態様によれば、一般式Ｉの化合物は、化合物
【化４】
0005931912.tif 000005
（上記式中、
Ｒ１は、それが置換しているフェニル上でパラ位（４位）に配置されているヒドロキシ基を表し、
Ｒ２は、Ｃｌ、メチル、ヒドロキシ、メトキシ、ニトリルから選択される数種類の基を表す）、
並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および薬学上許容可能なそれらの塩である。
【００１７】
本発明は、
１．  ４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン
２．  ４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（（Ｓ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン
３．  ４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（（Ｒ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン
４．  ２，２’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ジベンゾニトリル
５．  ３，３’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ジベンゾニトリル
６．  ４，５−ビス−（４−メトキシ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン
７．  Ｎ，Ｎ’−３，３’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ビス（３，１−フェイリー(pheylee)））ビス（４−メチルベンゼンスルホンアミド）
８．  ３−（５−（４−メトキシフェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４−イル）ベンゾニトリル
９．  ２−［５−（４−メトキシ−フェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニル−エチル）−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−４−イル］−ベンゾニトリル
１０．  Ｎ−｛３−［５−（３，４−ジメチル−フェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニル−エチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４−イル］−フェニル｝−４−メチル−ベンゼンスルホンアミド
１１．  ４，５−ビス−（３，４−ジクロロ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン
から選択されることを特徴とする、一般式Ｉの化合物に関する。
【００１８】
本発明は、一般式Ｉの化合物の様々な鏡像異性体並びにあらゆる比率でのそれらの混合物も包含する。
【００１９】
あらゆる比率での鏡像異性体の混合物は、ラセミ混合物も包含する。
【００２０】
本発明の主題は、一般式Ｉの化合物の様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、並びに薬学上許容可能な塩にも関する。
【００２１】
本発明は、一般式Ｉの化合物並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物の化学的調製方法も包含する。
【００２２】
二種類の鏡像異性体は、それぞれ（Ｒ）−または（Ｓ）−１−フェニルエタノールからエナンチオ選択的に調製することができる。更に、ラセミ体(the racemic)に基づけば、キラルカラム（例えば、Chiralpack AD-H、溶離液：ヘプタン／ＥｔＯＨ／ジエチルアミン）上で分取ＨＰＬＣ分離によって両鏡像異性体を得ることが可能である。
【００２３】
本発明は、更に一般式Ｉの化合物並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、およびカリウムＫｖチャネルおよび更に具体的にはＫｖ１．５、Ｋｖ４．３およびＫｖ１１．１チャネルの遮断薬としてのそれらの使用のための薬学上許容可能なそれらの塩にも関する。
【００２４】
本発明は、更に一般式Ｉの化合物並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および医薬品としてのそれらの使用のための薬学上許容可能なそれらの塩にも関する。
【００２５】
本発明は、一般式Ｉの化合物並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、およびカリウムＫｖチャネルおよび更に具体的にはＫｖ１．５、Ｋｖ４．３およびＫｖ１１．１チャネルの遮断薬を必要とする疾患の治療および／または予防を目的とする医薬品として使用するための薬学上許容可能なそれらの塩にも関する。
【００２６】
本発明は、一般式Ｉの化合物並びに様々な鏡像異性体およびあらゆる比率でのそれらの混合物、および心房細動および心耳および／または心室性の心臓不整脈のような疾患だけでなく細胞サイクル、細胞増殖および再生が変更される疾患（癌、慢性炎症）の治療および／または予防を目的とする医薬品として使用するための薬学上許容可能なそれらの塩にも関する。
【００２７】
本発明は、活性物質として一般式Ｉの化合物またはその鏡像異性体の一つおよびあらゆる比率でのそれらの混合物、薬学上許容可能なそれらの塩を含むことを特徴とする組成物も包含する。
【００２８】
本発明は、一般式Ｉの化合物またはその鏡像異性体の一つおよびあらゆる比率でのそれらの混合物または薬学上許容可能なそれらの塩の一つを任意の薬学上許容可能な賦形剤と組み合わせて含むことを特徴とする、医薬組成物も包含する。
【００２９】
本発明による医薬組成物は、経口、舌下、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、局所または直腸経路で投与することができる。この場合に、活性物質は、投与単位形態で通常の薬学キャリヤーとの混合物で動物またはヒトに投与することができる。適当な投与単位形態は、錠剤、カプセル、散剤、顆粒剤および経口溶液または懸濁液のような経口経路による形態、舌下およびバッカル(buccal)投与形態、皮下、局所、筋肉内、静脈内、鼻内または眼内投与形態、および直腸投与形態を含んでなる。選択された投与形態に対する適当な処方物は当業者に知られており、例えば、Remington, The science and Practice of Pharmacy、第１９版、１９９５年、Mack Publishing Companyに記載されている。
【００３０】
本発明の組成物における式Ｉの化合物の用量を調整して、投与方法に特定の組成物に所望な治療応答を得るのに効果的な活性成分の量を得ることができる。本発明による化合物の有効用量は、例えば、治療を受けるヒトの感受性に加えて、選択された投与経路、体重、年齢、性別および疾病の性質のような多数のパラメーターによって変化する。従って、最適用量は、この主題の専門家によって関連していると思われるパラメーターの関数として決定される必要がある。
【００３１】
合成
本発明の化合物は、下記の合成経路を用いてまたは当業者に知られている合成経路を用いて合成することができる。
【００３２】
一般式Ｉの化合物のこの合成方法（図１）は、一般式ＩＩ
【化５】
0005931912.tif 000006
（上記式中、
Ｘは塩素原子または臭素原子のいずれかである）
のジブロモまたはジクロロピリダジノンを、一般式ＩＩＩ
【化６】
0005931912.tif 000007
（上記式中、
Ａが塩素または臭素原子のようなハロゲン原子であるときには、Ｃｓ２ＣＯ３のような塩基をジメチルホルムアミドのような溶媒中で用い、
ＡがＯＨであるときには、ＴＨＦのような溶媒中でのジエチルアゾジカルボン酸エチルおよびトリフェニルホスフィンの存在下におけるようなミツノブカップリング条件が用いられる。これらの条件は、特に（Ｒ）または（Ｓ）−１−フェニルエタノールから一般式Ｉの化合物のエナンチオ選択的合成に適用できる）の誘導体と縮合させることを特徴とする。
【００３３】
得られた中間体ＩＶ
【化７】
0005931912.tif 000008
を、次に、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムのような塩基とテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムまたはＰｄＣｌ２／２ＰＰｈ３のような触媒の存在下にてトルエン／エタノールまたは水／アセトニトリルまたはジオキサン／水のような溶媒の混合物中で、ホウ素誘導体Ｖ
【化８】
0005931912.tif 000009
（上記式中、
Ｒ１は、一般式Ｉにおいて定義された通りであり、
Ｕは、Ｂ（ＯＨ）２または
【化９】
0005931912.tif 000010
である）
とカップリングさせる（工程１）。
【００３４】
これらの操作条件により、主として化合物ＶＩが形成され、かつ極めて少量の化合物ＶＩＩが形成される。
【００３５】
中間体ＶＩを、次に
ホウ素誘導体Ｖと前記カップリング条件で再度反応させて化合物ＶＩＩを生成させ、あるいは
ホウ素誘導体ＶＩＩＩ
【化１０】
0005931912.tif 000011
（上記式中、
Ｒ２は、一般式Ｉにおいて定義された通りであり、
Ｕは、工程１について前記したカップリング条件での前記定義の通りである）
と再度反応させて（工程２）、化合物ＩＸを生成させる。
【化１１】
0005931912.tif 000012
【００３６】
中間体および最終化合物は、所望ならば、抽出、濾過、シリカゲル上でのクロマトグラフィー、順相または逆相またはキラル分取ＨＰＬＣおよび結晶化から選択される１または数種類の精製方法に従って精製することができる。
【００３７】
前記の方法に用いられる出発材料は、市販されているかまたは当業者には文献記載の方法に従って容易に得ることができる。
【００３８】
下記の実施例により、本発明を説明するが、その範囲を制限することはない。
【００３９】
元素分析および質量およびＮＭＲスペクトルにより、化合物の構造を確認する。
【００４０】
実施例
Ａ）  中間体
中間体  １：
ａ）４，５−ジクロロ−２−（１−フェニルエチル）ピリダジン−３（２Ｈ）−オン（１ａ）
【化１２】
0005931912.tif 000013
【００４１】
４，５−ジクロロピリダジン−３（２Ｈ）−オン（２０ｇ、１２１ｍｍｏｌ）を、（１−ブロモエチル）ベンゼン（３３．７ｇ、１８２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（４７．４ｇ、１４５ｍｍｏｌ）の存在下において１００ｍｌのＤＭＦに周囲温度で４時間入れる。濃縮乾固した後、残渣を水に溶解し、酢酸エチルを用いて抽出する。有機層を乾燥した後、濃縮乾固する。得られた残渣をシリカ上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製する（石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：９５−５）。透明油状生成物３１ｇが得られる（収率９５％）。ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：９０−１０、Ｒｆ＝０．５０。
【００４２】
ｂ）４，５−ジクロロ−２−（（Ｓ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（１ｂ）
【化１３】
0005931912.tif 000014
【００４３】
４，５−ジクロロピリダジン−３（２Ｈ）−オン（１．３５ｇ、８．２ｍｍｏｌ）を、（Ｒ）−１−フェニルエタノール（１ｇ、８．２ｍｍｏｌ）とトリフェニルホスフィン（２．１５ｇ、８．２ｍｍｏｌ）の存在下において３０ｍｌのＴＨＦ中に入れ、これにジエチルアゾジカルボン酸エチル（１．７１ｇ、９．８２ｍｍｏｌ）を加える。反応媒質を周囲温度で一晩撹拌した後、濃縮乾固する。残渣を水に溶解し、ＳＰＥカラム（珪藻土）上にてジクロロメタンで抽出する。有機層を濃縮乾固し、得られた残渣をシリカ（ＣＨ２Ｃｌ２）上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製する。２．１ｇの黄色油状生成物が単離される（収率８０％）。ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ：９５−５、Ｒｆ＝０．６６。
【００４４】
ｃ）４，５−ジクロロ−２−（（Ｒ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（１ｃ）
【化１４】
0005931912.tif 000015
【００４５】
中間体１ｃ（油状生成物）を、中間体１ｂについて記載した操作方法に従って（Ｓ）−１−フェニルエタノールから調製する（７７％）。ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ５  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ：９０−１０、Ｒｆ＝０．８２。
【００４６】
Ｂ）本発明による化合物
実施例１：４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（１）
【化１５】
0005931912.tif 000016
【００４７】
化合物１を、下記の合成方法に従って調製する。
【００４８】
工程１：中間体１ａ（８．７ｇ、３２．３ｍｍｏｌ）を、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１．１２ｇ、０．９７ｍｍｏｌ）と炭酸ナトリウム（６．８５ｇ、６４．７ｍｍｏｌ）の存在下において５０ｍｌのトルエンおよび５０ｍｌのエタノールの混合物中に入れ、混合物を８０℃に加熱する。１．２当量の４−ヒドロキシフェニルボロン酸を加え、混合物を還流下にて５時間加熱し、更に１．２当量の４−ヒドロキシフェニルボロン酸を加え、還流を一晩中維持する。濃縮乾固した後、残渣を水に溶解し、ＡｃＯＥｔを用いて抽出する。有機層を乾燥し、濃縮乾固した後、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ、グラディエント１００−０〜９７−３、４０分間）によって精製する。０．７ｇの少量化合物１が得られ、８．２ｇの多量の一置換生成物である４−クロロ−５−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（１−フェニルエチル）−ピリダジン−３（２Ｈ）−オンに相当する固形生成物が得られる（収率：７８％）。
【００４９】
工程２：この一置換生成物を、工程１に記載した条件下（４−ヒドロキシフェニルボロン酸の２．４当量、一晩還流）で再度反応させる。反応媒質の処理後、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製する（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ、グラディエント１００−０〜９８−２、２０分間）。残渣をジエチルエーテル−ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ：４０−５−２の混合物中で粉砕し、得られた化合物１（固形生成物）を濾過によって単離する（７．２ｇ、収率７８％）。
【００５０】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２-ＭｅＯＨ：９５−５、Ｒｆ＝０．３５。融点＝１６０℃。  １Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ：９．５６（ｍ，２Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），７．３９（ｍ，５Ｈ），６．９６（ｍ，４Ｈ），６．６３（ｍ，４Ｈ），６．２４（ｍ，１Ｈ），１．７２（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ（＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ３８５  （ＭＨ＋）。
【００５１】
実施例２：４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（（Ｓ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（２）
【化１６】
0005931912.tif 000017
【００５２】
化合物２を、実施例１に記載の合成方法に従って中間体１ｃから調製する（収率：８５％）。
【００５３】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ：９０−１０、Ｒｆ＝０．６０。
融点＝１６８℃。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ：９．７０（ｓ，１Ｈ），９．５４（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），７．３９（ｍ，５Ｈ），６．９７（ｍ，４Ｈ），６．６３（ｍ，４Ｈ），６．２４（ｍ，１Ｈ），１．７２（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ３８５  （ＭＨ＋）。
αｃａｌｃ（ＭｅＯＨ）＝−２５６．５°
キラルＨＰＬＣ：  キラルパックカラム  ＡＤ−Ｈ  ２５０＊４．６ｍｍ  ＤＡＩ,溶離液（１ｍｌ／分）：ヘプタン／ＥｔＯＨ／ジエチルアミン：８０／２０／０．１，保持時間：８．９２分。
【００５４】
実施例３：４，５−ビス−（４−ヒドロキシ−フェニル）−２−（（Ｒ）−１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（３）
【化１７】
0005931912.tif 000018
【００５５】
化合物３を、実施例１に記載の合成方法に従って中間体１ｂから調製する（収率：４．３％）。
【００５６】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２-ＭｅＯＨ：９０−１０、Ｒｆ＝０．６０。
融点＝２２２℃。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ：９．７０（ｓ，１Ｈ），９．５４（ｓ，１Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ），７．３９（ｍ，５Ｈ），６．９７（ｍ，４Ｈ），６．６３（ｍ，４Ｈ），６．２４（ｍ，１Ｈ），１．７２（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ３８５  （ＭＨ＋）。
αｃａｌｃ（ＭｅＯＨ）＝２７２．２°
キラルＨＰＬＣ：キラルパックカラム  ＡＤ−Ｈ  ２５０＊４．６ｍｍ  ＤＡＩ、溶離液（１ｍｌ／分）：ヘプタン／ＥｔＯＨ／ジエチルアミン：８０／２０／０．１、保持時間：７．２３分。
【００５７】
実施例４：２，２’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ジベンゾニトリル（４）
【化１８】
0005931912.tif 000019
【００５８】
化合物４を、合成方法の工程１に従ってＰｄＣｌ２／２ＰＰｈ３、Ｎａ２ＣＯ３および水／アセトニトリル（１／１）の混合物を用いて中間体１ａおよび２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾニトリルから調製する。形成された少量生成物は、化合物４に相当する（収率：３．４％）。
【００５９】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２、Ｒｆ＝０．２３。
融点＝２００℃。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ：８．１９（ｓ，１Ｈ），７．８０（ｄ，２Ｈ），７．７５（ｄ，２Ｈ），７．３６（ｍ，９Ｈ），６．２７（ｑ，１Ｈ），１．７６（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ４０３（ＭＨ＋）。
【００６０】
実施例５：３，３’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ジベンゾニトリル（５）
【化１９】
0005931912.tif 000020
【００６１】
化合物５を、実施例４に記載の条件下で中間体１ａと３−シアノフェニルボロン酸から調製する。形成された少量生成物（固形生成物）は、化合物４に相当する（収率：７．４％）。
【００６２】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２、Ｒｆ＝０．１１。
融点＝２０２℃。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ：８．２３（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｍ，３Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ）），７．４０（ｍ，９Ｈ），６．２８（ｑ，１Ｈ），１．７７（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ４０３（ＭＨ＋）。
【００６３】
実施例６：４，５−ビス−（４−メトキシ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（６）
【化２０】
0005931912.tif 000021
【００６４】
化合物６を、実施例１に記載の条件下でテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、Ｋ２ＣＯ３およびジオキサン／水（３／１）の混合物を用いて中間体１ａと４−メトキシフェニルボロン酸から調製する。化合物６が、固形形態で単離される（収率：７１％）。
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：８０−２０、Ｒｆ＝０．２０。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  ｐｐｍ：７．８８（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，２Ｈ），７．３７−７．３１（ｍ，２Ｈ），７．３０−７．２６（ｍ，１Ｈ），７．１４−７．１３（ｄ，２Ｈ），７．０６−７．０２（ｄ，２Ｈ），６．８０−６．７５（ｍ，４Ｈ），６．４７−６．４０（ｍ，１Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），１．８３（ｓ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ４１３（ＭＨ＋）。
【００６５】
実施例７：Ｎ，Ｎ’−（３，３’−（６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４，５−ジイル）ビス（３，１−フェニレン））ビス（４−メチルベンゼンスルホンアミド）（７）
【化２１】
0005931912.tif 000022
【００６６】
化合物７を、実施例６に記載の条件下において中間体１ａと４−メチル−Ｎ−（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）ベンゼンスルホンアミドから調製する。化合物７は、固形形態で単離される（収率：７４％）。
【００６７】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０  Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：５０−５０、Ｒｆ＝０．４６。
融点＝２０２℃。
１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ）  ｐｐｍ：１０．２６（ｓ，１Ｈ），１０．１４（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，４Ｈ），７．４２−７．２５（ｍ，９Ｈ），７．０８−６．８８（ｍ，６Ｈ），６．５２（ｄｄ，２Ｈ），６．２６−６．１８（ｍ，１Ｈ），２．３１（ｓ，６Ｈ），１．７４（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ６９１（ＭＨ＋）。
【００６８】
実施例８：３−（５−（４−メトキシフェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４−イル）ベンゾニトリル（８）
【化２２】
0005931912.tif 000023
【００６９】
化合物８を、合成方法の工程１に従ってＰｄＣｌ２／２ＰＰｈ３、Ｎａ２ＣＯ３および水／アセトニトリル（１／１）の混合物を用いて中間体１ａと３−シアノフェニルボロン酸から調製する。形成された主生成物（１．９６ｇ、３−（５−クロロ−６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４−イル）ベンゾニトリル、収率：１９％）を単離した後、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、Ｋ２ＣＯ３およびジオキサン／水（２／１）の混合物と共に４−メトキシフェニルボロン酸を用いて合成方法の工程２に導入する。化合物８は、固形形態で単離される（収率：６２％）。
【００７０】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０  Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：５０−５０、Ｒｆ＝０．５３。
融点＝１９８℃。
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０  Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：５０−５０、Ｒｆ＝０．５３。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ：８．１３（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｍ，２Ｈ），７．３８（ｍ，７Ｈ），７．０９（ｄ，２Ｈ），６．８１（ｄ，２Ｈ），６．２８（ｑ，１Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），１．７５（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ４０８（ＭＨ＋）。
【００７１】
実施例９：２−［５−（４−メトキシ−フェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニル−エチル）−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−４−イル］−ベンゾニトリル（９）
【化２３】
0005931912.tif 000024
【００７２】
化合物９を、合成方法の工程１に従ってＰｄＣｌ２／２ＰＰｈ３、Ｎａ２ＣＯ３および水／アセトニトリル（１／１）の混合物を用いて中間体１ａと２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾニトリルから調製する。形成された主生成物（１．５ｇ、２−（５−クロロ−６−オキソ−１−（１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４−イル）ベンゾニトリル、収率：１６％）を単離した後、４−メトキシフェニルボロン酸と共にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、Ｋ２ＣＯ３およびジオキサン／水（２／１）の混合物を用いて合成方法の工程２に導入する。化合物９は、固形形態で単離される（収率：７１％）。
【００７３】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０  Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：７０−３０，Ｒｆ＝０．４５。
融点＝１７６℃。
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０  Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：５０−５０、Ｒｆ＝０．５３。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ：８．０９（ｓ，１Ｈ），７．７９（ｄ，２Ｈ），７．４０（ｍ，７Ｈ），７．０８（ｄ，２Ｈ），６．８１（ｄ，２Ｈ），６．２８（ｑ，１Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），１．７５（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ４０８（ＭＨ＋）。
【００７４】
実施例１０：Ｎ−｛３−［５−（３，４−ジメチル−フェニル）−６−オキソ−１−（１−フェニル−エチル）−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−４−イル］−フェニル｝−４−メチル−ベンゼンスルホンアミド（１０）
【化２４】
0005931912.tif 000025
【００７５】
化合物１０を、合成方法の工程１に従ってＰｄＣｌ２／２ＰＰｈ３、Ｎａ２ＣＯ３および水／アセトニトリル（１／１）の混合物を用いて中間体１ａと４−メチル−Ｎ−（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）ベンゼンスルホンアミドから調製する。形成された主生成物（−Ｎ−（３−（５−クロロ−６−オキソ−１−（５ｇ、１−フェニルエチル）−１，６−ジヒドロピリダジン−４−イル）フェニル）−４−メチルベンゼンスルホンアミド，収率：６２％）を単離した後、３，４−ジメチルフェニルボロン酸と共にテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、Ｋ２ＣＯ３およびジオキサン／水（２／１）の混合物を用いて合成方法の工程２に導入する。化合物１０は、固形形態で単離される（収率：６７％）。
【００７６】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０  Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、ＣＨ２Ｃｌ２-ＭｅＯＨ：９７．５−２．５、Ｒｆ＝０．６５。
１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ）  ｐｐｍ：１０．２４（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），７．５４（ｄ，２Ｈ），７．４１−７．２６（ｍ，７Ｈ），７．１０（ｔ，１Ｈ），７．０４（ｓ，１Ｈ），６．９６−６．９１（ｍ，２Ｈ），６．８８（ｄ，１Ｈ），６．７２（ｄ，１Ｈ），６．６２（ｄ，１Ｈ），６．２７−６．２０（ｍ，１Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），１．７３（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ５５０（ＭＨ＋）。
【００７７】
実施例１１：４，５−ビス−（３，４−ジクロロ−フェニル）−２−（１−フェニル−エチル）−２Ｈ−ピリダジン−３−オン（１１）
【化２５】
0005931912.tif 000026
【００７８】
化合物１１を、実施例１に記載の条件下でテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、Ｋ２ＣＯ３およびジオキサン／水（７／３）の混合物を用いて中間体１ａと３，４−ジクロロフェニルボロン酸から調製する。化合物１２は、固形形態で単離される（収率：５４％）。
融点＝９２℃。
【００７９】
ＴＬＣ  シリカゲル  ６０  Ｆ  ２５４  Ｍｅｒｃｋ、石油エーテル−ＡｃＯＥｔ：８０−２０、Ｒｆ＝０．５４。
１Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ）  ｐｐｍ：８．１９（ｓ，１Ｈ），７．６４（ｄ，１Ｈ），７．６１−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．５４（ｄ，１Ｈ），７．４４−７．２６（ｍ，５Ｈ），７．１３（ｄｄ，１Ｈ），７．０７（ｄｄ，１Ｈ），６．３０−６．２２（ｍ，１Ｈ），１．７５（ｄ，３Ｈ）。
ＭＳ  （＋ＥＳＩ）  ｍ／ｚ  ４９１（ＭＨ＋）。
【００８０】
Ｃ）薬理学的評価
Ｋｖ１．５カリウムチャネルについての化合物の薬理学的評価は、ＦＬＩＰＲ法において９６穴プレートでタリウムイオン測定によって行った。
【００８１】
Ｋｖ１．５チャネルのヒトアイソフォームで安定的にトランスフェクションしたＨＥＫ２９３細胞を、実験の２４時間前に次の培養培地：ＤＭＥＭ、１０％ＳＶＦ、ペニシリン／ストレプトマイシン、選択抗生物質としてのＧ４１８中でポリリジン化した９６穴プレートに播種する（１５  １０６個／プレート、２００μｌ／ウェル）。
【００８２】
ＦＬＩＰＲでの実験は、製造業者(Molecular Devices)によって指示される通りに「ＦＬＩＰＲ・カリウム・イオン・チャネル・アッセイ・キット(FLIPR Potassium Ion Channel Assay Kit)」を用いて行われる。
【００８３】
簡単に説明すれば、培養培地を、タリウムマーカーを含む溶液によって３７℃で９０分間置換する。この工程の後に、試験を行う化合物を、ウェル中の１０μＭの最終濃度に３７℃で１５分間加える。次いで、基底蛍光を６０秒間読み取る。脱分極化媒質（２０ｍＭのカリウムおよび３ｍＭの最終タリウム）を添加すると、カリウムチャネルが開き、ｈＫｖ１．５チャネルを通るタリウムイオンの流入に相当するタリウム蛍光分子（fluorophore）の蛍光の増加を誘発する。測定は、脱分極化溶液の注入の３０秒後に行う。１０μＭのＤＰＯ（Tocris, Ｋｖ１．５ チャネル遮断薬）の適用により、蛍光を標準化することができる。
【００８４】
【表１】
0005931912.tif 000027
【００８５】
得られた結果は、一般式（Ｉ）の化合物はＫｖ１．５チャネルを遮断することを示す。
【００８６】
一般式（Ｉ）の化合物は、Ｋｖ１．５チャネル遮断薬として用いることができる。
【００８７】
Ｄ）略号
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ＤＭＦ  ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＤＰＯ  （２−イソプロピル−５−メチル−シクロヘキシル）ジフェニルホスフィンオキシド
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
Ｒｆ  リファレンス・フロント(Reference front)
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン