(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒアルロニダーゼの活性を阻害する機能を有する美肌成分として、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物を含む美肌用組成物の製造方法であって、
白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物は、
２０〜５０℃の温度下に白ウコン（学名：Curcuma caesia）をヘキサンで抽出して得られる抽出物、または、３５〜８０℃の温度下に白ウコン（学名：Curcuma caesia）を超臨界二酸化炭素で抽出して得られる抽出物であり、
下記式（１）、式（２）、式（３）および式（４）で表されるジテルペン化合物を含有することを特徴とする美肌用組成物の製造方法。
【化９】
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【化１０】
0005843536.tif 000018
【化１１】
0005843536.tif 000019
【化１２】
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【請求項２】
白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物は、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の根の抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の美肌用組成物の製造方法。
【請求項３】
春ウコンの抽出物をさらに含むことを特徴とする請求項１または２に記載の美肌用組成物の製造方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１つに記載の美肌用組成物を含むことを特徴とする化粧料の製造方法。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか１つに記載の美肌用組成物を含むことを特徴とする食品の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、美肌用組成物、化粧料および食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒアルロン酸は、β−Ｄ−Ｎ−アセチルグルコサミンとβ−Ｄ−グルクロン酸とが交互に結合してできた直鎖状の高分子多糖である。水分保持能力が非常に高く、皮膚、関節、脳等の生体内の細胞外マトリックスに存在し、細胞間隙への水分の保持、組織内へのゼリー状のマトリックス形成による細胞の保持、組織の潤滑性および柔軟性の保持などの機能を有する。
【０００３】
ヒアルロニダーゼは、グリコシド結合を切断することによりヒアルロン酸を分解する酵素である。ヒアルロニダーゼは生体内に広く分布し皮膚にも存在する。皮膚のヒアルロニダーゼが活性化されると、皮膚結合組織のヒアルロン酸が分解され、皮膚の弾力性および保湿性低下、しわの発生などにつながる。また、生体内でアレルギー反応が起こる際にもヒアルロニダーゼは活性化し、ヒアルロン酸を分解してアレルギー症状を引き起こす原因となる。
【０００４】
そこで、ヒアルロニダーゼ活性を阻害することが、皮膚の弾力性および保湿性の維持、抗アレルギー性などに寄与すると考えられ、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有し、美肌効果を発揮する美肌用組成物の開発が望まれる。
【０００５】
ショウガ科の植物は、健康商品、化粧料、漢方薬、医薬などの材料として広く利用される。たとえば、特許文献１には、ショウガ科の植物であるミョウガに抗菌作用、抗血栓作用および抗炎症作用を有する成分が含まれていることが開示されている。
【０００６】
また、ショウガ科クルクマ属に属する多年草植物であるウコンとしては、たとえば、春ウコン（学名：Curcuma aromatica Salisb.）、秋ウコン（学名：Curcuma longa Linn）、白ウコン（学名：Curcuma caesia）、紫ウコン（学名：Curcuma zedoaria Roscoe）などの品種が良く知られている。このようなウコンは、独特の風味および香りを有し、肝機能、抗酸化力などを増強するとされるクルクミンと、ターメロン、シネオール、クルクメノン、クルクモール、エレメン、パラメチトルイルカピノール、フラボノイド、アズレン、カンファなどの薬理活性を有する精油成分を含んでいることが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００６−２４１０６８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する有効成分がショウガ科の植物に含まれていることについては知られていない。
【０００９】
したがって本発明の目的は、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分を含有し、皮膚結合組織のヒアルロン酸の分解を抑制する作用に優れる美肌用組成物の製造方法を提供することであり、該美肌用組成物を含む化粧料および食品の製造方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、ヒアルロニダーゼの活性を阻害する機能を有する美肌成分として、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物を含美肌用組成物の製造方法であって、
白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物は、
２０〜５０℃の温度下に白ウコン（学名：Curcuma caesia）をヘキサンで抽出して得られる抽出物、または、３５〜８０℃の温度下に白ウコン（学名：Curcuma caesia）を超臨界二酸化炭素で抽出して得られる抽出物であり、
下記式（１）、式（２）、式（３）および式（４）で表されるジテルペン化合物を含有することを特徴とする美肌用組成物の製造方法である。
【化１】
0005843536.tif 000002
【化２】
0005843536.tif 000003
【化３】
0005843536.tif 000004
【化４】
0005843536.tif 000005
【００１１】
また本発明の美肌用組成物において、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物は、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の根の抽出物であることを特徴とする。
【００１７】
また本発明の美肌用組成物の製造方法は、春ウコンの抽出物をさらに含むことを特徴とする。
また本発明は、前記美肌用組成物を含むことを特徴とする化粧料の製造方法である。
また本発明は、前記美肌用組成物を含むことを特徴とする食品の製造方法である。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、美肌用組成物は、ヒアルロニダーゼの活性を阻害する機能（以下、「ヒアルロニダーゼ活性阻害能」という）を有する成分として、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物を含む。白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物は、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有するので、皮膚結合組織のヒアルロン酸が分解されるのを防止することができる。そのため、美肌用組成物は、皮膚の弾力性および保湿性の維持、抗アレルギー性に寄与することができる。
また、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物は、２０〜５０℃の温度下に白ウコン（学名：Curcuma caesia）をヘキサンで抽出して得られる抽出物、または、３５〜８０℃の温度下に白ウコン（学名：Curcuma caesia）を超臨界二酸化炭素で抽出して得られる抽出物である。白ウコン（学名：Curcuma caesia）をヘキサンまたは超臨界二酸化炭素で抽出してなる抽出物には、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分が多く含まれている。そのため、皮膚結合組織のヒアルロン酸が分解されるのをより効果的に防止することができる。
また、美肌用組成物は、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分として、上記式（１）、式（２）、式（３）および式（４）で表されるジテルペン化合物を含む。上記式（１）、式（２）、式（３）および式（４）で表されるジテルペン化合物は、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する。そのため、上記式（１）、式（２）、式（３）および式（４）で表されるジテルペン化合物を含む美肌用組成物は、皮膚結合組織のヒアルロン酸が分解されるのを効果的に防止することができる。
【００１９】
また本発明によれば、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の抽出物は、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の根の抽出物である。白ウコン（学名：Curcuma caesia）の根には、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分が多く含まれている。そのため、白ウコン（学名：Curcuma caesia）の根の抽出物を含む美肌用組成物は、皮膚結合組織のヒアルロン酸が分解されるのをより効果的に防止することができる。
【００２５】
また本発明によれば、美肌用組成物は、春ウコンの抽出物をさらに含む。春ウコンの抽出物には、高いチロシナーゼ活性阻害能を有する成分が含まれている。チロシナーゼは、メラニン生成の初期反応であるアミノ酸チロシンからＬ−ＤＯＰＡ（L-β-(3,4-Dihydroxyphenyl)alanine）への水酸化、Ｌ−ＤＯＰＡからＤＯＰＡキノンへの酸化を触媒する酵素である。美肌用組成物が、チロシナーゼの活性を阻害することが可能な成分として春ウコンの抽出物を含むことによって、肌の美白効果に寄与することができる。
【００２６】
また本発明によれば、化粧料は、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する美肌用組成物を含むので、皮膚の弾力性および保湿性の維持、抗アレルギー性に寄与する優れた美肌効果を有する。
【００２７】
また本発明によれば、食品は、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する美肌用組成物を含むので、美容食品などとして有用である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
［美肌用組成物］
本実施形態に係る美肌用組成物は、ヒアルロニダーゼの活性を阻害する機能（ヒアルロニダーゼ活性阻害能）を有する成分として、白ウコンの抽出物を含む組成物である。
【００２９】
ここで、白ウコン（学名：Curcuma caesia）は、熱帯アジア原産のショウガ科クルクマ属に属する多年草植物で、別名「ハナショウガ」とも呼ばれ、蝋細工のような赤い綺麗な花を付ける。
【００３０】
本実施形態で用いられる白ウコンは、天然のものであっても、人工栽培されたものであってもよい。本実施形態では、白ウコンは、福岡県みやま市山川町で、葉については７月〜１０月に収穫されたものを使用し、根については１０月〜１２月に収穫されたものを使用する。
【００３１】
抽出に供される白ウコンの部位としては、根、茎、葉など、いずれの部位を用いてもよいが、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分が多く含まれているという観点では、根を用いるのが好ましい。
【００３２】
また、収穫された白ウコンは、乾燥されずにそのまま抽出に供されてもよく、乾燥されて抽出に供されてもよい。また、白ウコンは、粉末化などの加工が施されてから抽出に供されてもよい。抽出効率の観点からは、抽出に供される白ウコンは、乾燥された粉末状であることが好ましい。白ウコンの乾燥粉末は、たとえば、白ウコンをスライスした後、日陰で５〜６時間放置し、熱風乾燥機を用いて約８０℃で熱風乾燥した後、機械的に粉砕して粉末状にすることで得ることができる。
【００３３】
また、白ウコン抽出物を得る抽出方法としては、白ウコンを有機溶剤で抽出する方法、超臨界二酸化炭素で抽出する方法などが挙げられる。白ウコンの抽出に用いる有機溶剤としては、たとえば、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、ノナンおよびデカンなどの炭化水素系溶剤、酢酸エチル、アセトン、アルコール類、水アルコール系溶媒などが挙げられる。これらのうち、ヘキサンが特に好ましい。
【００３４】
有機溶剤を用いて白ウコンを抽出する場合、有機溶剤は、白ウコン１００質量部に対し、３０〜６０質量部用いるようにすればよい。また、抽出の温度は、通常２０〜５０℃の範囲とすることが好ましく、抽出時間は、通常２４〜７２時間とすることが好ましい。
【００３５】
また、超臨界二酸化炭素を用いて白ウコンを抽出する場合、白ウコンと超臨界二酸化炭素とを接触させることによって行われる。抽出条件は特に制限されず、二酸化炭素が超臨界になる条件であれば特に制限されないけれども、好ましくは、圧力８〜３６ＭＰａ、温度３５〜８０℃である。また、白ウコンに対する超臨界二酸化炭素の使用量も特に制限されないけれども、好ましくは白ウコン１００質量部に対して、超臨界二酸化炭素を２０００〜２００００質量部用いればよい。また、抽出時間も特に制限されないけれども、好ましくは１〜１０時間程度である。
【００３６】
前記圧力範囲、温度範囲、超臨界二酸化炭素の使用量範囲、抽出時間範囲の中で、各条件を適宜組み合わせて最適条件を選択すれば、各成分の含有量がさらに高い抽出物を得ることも可能である。抽出は、具体的には、白ウコンを耐圧抽出容器に入れ、白ウコンを超臨界二酸化炭素と同じ温度に保温した後、該耐圧抽出容器内に超臨界二酸化炭素を導入することによって行われる。このようにして得られる白ウコン抽出物はそのまま化粧料、食品などの材料として使用できる。また、油状物である白ウコン抽出物を、濃縮、希釈、濾過、乾燥などの一般的な粉末化の手法によって、粉末化して用いてもよい。
【００３７】
本実施形態に係る美肌用組成物は、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分として、白ウコンの抽出物を含む。
【００３８】
ヒアルロニダーゼは、グリコシド結合を切断することによりヒアルロン酸を分解する酵素である。ヒアルロニダーゼは生体内に広く分布し皮膚にも存在する。皮膚のヒアルロニダーゼが活性化されると、皮膚結合組織のヒアルロン酸が分解され、皮膚の弾力性および保湿性低下、しわの発生などにつながる。また、生体内でアレルギー反応が起こる際にもヒアルロニダーゼは活性化し、ヒアルロン酸を分解してアレルギー症状を引き起こす原因となる。
【００３９】
本実施形態の美肌用組成物は白ウコンの抽出物を含み、その白ウコンの抽出物は、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有するので、皮膚結合組織のヒアルロン酸が分解されるのを防止することができる。そのため、美肌用組成物は、皮膚の弾力性および保湿性の維持、抗アレルギー性に寄与することができる。
【００４０】
次に、白ウコンの抽出物に含まれる成分について説明する。白ウコンの抽出物には、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分が含有されている。白ウコン抽出物のヒアルロニダーゼ阻害活性について、以下の評価を行って確認した。
【００４１】
＜白ウコンの抽出＞
白ウコンの根をスライスした後、日陰で５〜６時間放置し、熱風乾燥機を用いて約８０℃で熱風乾燥した後、粉砕して粉末状にすることで白ウコン根粉末を得た。その乾燥後の白ウコン根粉末１５２．４ｇをヘキサン１．５Ｌ（リットル）に室温下、３日間浸漬させて抽出し、抽出液を得た。この操作をもう一度繰返し、得られた抽出液を合わせてロータリーエバポレータで減圧濃縮し、２．６ｇの白ウコン根ヘキサン抽出物を得た。
【００４２】
＜白ウコン抽出物のヒアルロニダーゼ阻害活性評価＞
白ウコン根ヘキサン抽出物のヒアルロニダーゼ阻害活性について、ヒアルロニダーゼ活性阻害率（測定方法の詳細については後述する）を用いて評価した。ヒアルロニダーゼ活性阻害率は、その値が大きいほど、ヒアルロニダーゼ阻害活性が高いことを示す。白ウコン根抽出物のヒアルロニダーゼ阻害活性評価における試料溶液の濃度は、５ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬおよび０．５ｍｇ／ｍＬとした。評価結果を表１に示す。
【００４３】
【表１】
0005843536.tif 000006
【００４４】
表１から、白ウコンの抽出物は、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有することが明らかである。
【００４５】
＜カラムクロマトグラフィーにより分画した画分のヒアルロニダーゼ阻害活性評価＞
高いヒアルロニダーゼ阻害活性が認められた白ウコン根ヘキサン抽出物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに供して、ヘキサン、酢酸エチル、メタノールを用いて７画分に分画した。分画した７画分のそれぞれのヒアルロニダーゼ活性阻害率を表２に示す。なお、７画分のそれぞれの収量は、フラクション１（以下、「Ｆｒ．１」という）が１９１．１ｍｇ、フラクション２（以下、「Ｆｒ．２」という）が１．２ｇ、フラクション３（以下、「Ｆｒ．３」という）が５３３．６ｍｇ、フラクション４（以下、「Ｆｒ．４」という）が１２７．０ｍｇ、フラクション５（以下、「Ｆｒ．５」という）が２７３．４ｍｇ、フラクション６（以下、「Ｆｒ．６」という）が１８．２ｍｇ、フラクション７（以下、「Ｆｒ．７」という）が７０．５ｍｇであった。
【００４６】
【表２】
0005843536.tif 000007
【００４７】
＜ヒアルロニダーゼ阻害活性成分の同定＞
高いヒアルロニダーゼ阻害活性が認められたＦｒ．２、Ｆｒ．４、Ｆｒ．５およびＦｒ．６を用いて、白ウコンに含まれるヒアルロニダーゼ阻害活性成分の同定を行った。
【００４８】
（Ｆｒ．４に含まれるヒアルロニダーゼ阻害活性成分の同定）
Ｆｒ．４をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン、酢酸エチル）で精製し、その精製した成分のＮＭＲを測定したところ、２成分がほぼ等量で混在していることが確認された。そのため、Ｆｒ．４を高速液体クロマトグラフィー（略称：ＨＰＬＣ、溶出溶媒：ヘキサン、アセトン）を用いて分画することで、２つの成分（第１成分および第２成分）に単離した。
【００４９】
単離された第１成分について、ＭＳ（マススペクトル）および１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを測定した。第１成分のスペクトルデータを表３に示す。
【００５０】
【表３】
0005843536.tif 000008
【００５１】
得られたスペクトルデータは、（Biosci.Biotechnol.Biochem.,70(10),2494-2500,2006）に記載されるスペクトルデータと一致するので、第１成分を、下記式（１）に示す化学構造を有するラブダン型のジテルペン化合物（(E)-8β(17)-labd-12-ene-15,16,17-trial）と同定した。
【化５】
0005843536.tif 000009
【００５２】
また、単離された第２成分について、ＭＳ（マススペクトル）および１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを測定した。第２成分のスペクトルデータを表４に示す。
【００５３】
【表４】
0005843536.tif 000010
【００５４】
得られたスペクトルデータは、（Biosci.Biotechnol.Biochem.,66(12),2698-2700,2002）に記載されるスペクトルデータと一致するので、第２成分を、下記式（２）に示す化学構造を有するラブダン型のジテルペン化合物（(E)-8β(17)-epoxylabd-12-ene-15,16-dial）と同定した。
【化６】
0005843536.tif 000011
【００５５】
（Ｆｒ．６に含まれるヒアルロニダーゼ阻害活性成分の同定）
Ｆｒ．６をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン、酢酸エチル）で精製することによって、1つの成分（第３成分）を単離した。
【００５６】
単離された第３成分について、ＭＳ（マススペクトル）および１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを測定した。第３成分のスペクトルデータを表５に示す。
【００５７】
【表５】
0005843536.tif 000012
【００５８】
得られたスペクトルデータは、（J.Nat.Prod.,60,1287-1293,1997）に記載されるスペクトルデータと一致するので、第３成分を、下記式（３）に示す化学構造を有するラブダン型のジテルペン化合物（16-oxo-8(17),12(E)-labdadien-15-oic acid）と同定した。
【化７】
0005843536.tif 000013
【００５９】
（Ｆｒ．５に含まれるヒアルロニダーゼ阻害活性成分の同定）
Ｆｒ．５に含まれるヒアルロニダーゼ阻害活性成分は、上記のＦｒ．４に含まれる式（１），（２）で表されるジテルペン化合物、および、上記のＦｒ．６に含まれる式（３）で表されるジテルペン化合物であることが確認された。
【００６０】
（Ｆｒ．２に含まれるヒアルロニダーゼ阻害活性成分の同定）
Ｆｒ．２をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ヘキサン、酢酸エチル）で精製することによって、1つの成分（第４成分）を単離した。
【００６１】
単離された第４成分について、ＭＳ（マススペクトル）および１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを測定した。第４成分のスペクトルデータを表６に示す。
【００６２】
【表６】
0005843536.tif 000014
【００６３】
得られたスペクトルデータは、（Phytochemistry,36(3),699-701,1994）に記載されるスペクトルデータと一致するので、第４成分を、下記式（４）に示す化学構造を有するラブダン型のジテルペン化合物（Labda-8(17),12-diene-15,16-dial）と同定した。
【化８】
0005843536.tif 000015
【００６４】
以上の結果から、白ウコン抽出物には、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分として、上記式（１）〜（４）で表されるジテルペン化合物が含まれていることがわかる。したがって、本実施形態の美肌用組成物が、上記式（１）〜（４）で表されるジテルペン化合物の少なくともいずれか１つの化合物を含むように構成されることによって、高いヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する組成物となる。
【００６５】
また、上記では、白ウコン根のヘキサン抽出物に含まれる成分についての同定結果を示したが、白ウコン根の超臨界二酸化炭素抽出物にも同様に、上記式（１）〜（４）で表されるジテルペン化合物が含まれていることを確認した。また、白ウコン葉のヘキサン抽出物または超臨界二酸化炭素抽出物には、上記式（４）で表されるジテルペン化合物が含まれていることを確認した。
【００６６】
また、本実施形態の美肌用組成物は、白ウコンの抽出物以外に、春ウコン（学名：Curcuma aromatica Salisb.）の抽出物をさらに含むことが好ましい。本実施形態では、春ウコンは、福岡県みやま市山川町で、葉については７月〜１０月に収穫されたものを使用し、根については１０月〜１２月に収穫されたものを使用する。
【００６７】
春ウコンの抽出物には、高いチロシナーゼ活性阻害能を有する成分が含まれている。チロシナーゼは、メラニン生成の初期反応であるアミノ酸チロシンからＬ−ＤＯＰＡ（L-β-(3,4-Dihydroxyphenyl)alanine）への水酸化、Ｌ−ＤＯＰＡからＤＯＰＡキノンへの酸化を触媒する酵素である。美肌用組成物が、チロシナーゼの活性を阻害することが可能な成分として春ウコンの抽出物を含むことによって、肌の美白効果に寄与することができる。
【００６８】
また、春ウコンの抽出物には、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する成分として、上記式（４）で表されるジテルペン化合物が含まれていることが確認されている。
【００６９】
抽出に供される春ウコンの部位としては、根、茎、葉など、いずれの部位を用いてもよいが、チロシナーゼ活性阻害能を有する成分が多く含まれているという観点では、根を用いるのが好ましい。
【００７０】
また、収穫された春ウコンは、乾燥されずにそのまま抽出に供されてもよく、乾燥されて抽出に供されてもよい。また、春ウコンは、粉末化などの加工が施されてから抽出に供されてもよい。抽出効率の観点からは、抽出に供される春ウコンは、乾燥された粉末状であることが好ましい。春ウコンの乾燥粉末は、たとえば、春ウコンをスライスした後、日陰で５〜６時間放置し、熱風乾燥機を用いて約８０℃で熱風乾燥した後、機械的に粉砕して粉末状にすることで得ることができる。
【００７１】
また、春ウコン抽出物を得る抽出方法としては、春ウコンを有機溶剤で抽出する方法、超臨界二酸化炭素で抽出する方法などが挙げられる。春ウコンの抽出に用いる有機溶剤としては、前述の白ウコンの抽出と同様の溶剤を挙げることができる。また、春ウコンを超臨界二酸化炭素で抽出する場合には、前述の白ウコンと同様の抽出条件で抽出するようにすればよい。
【００７２】
美肌用組成物に白ウコンの抽出物と春ウコンの抽出物とを含有させる場合には、それぞれ別々に抽出して得られた白ウコンの抽出物と春ウコンの抽出物とを混合するようにしてもよいし、白ウコンおよび春ウコンの混合物を抽出原料とし、その混合物を抽出するようにしてもよい。
【００７３】
［化粧料］
本実施形態の化粧料は、本実施形態の美肌用組成物とともに油性基剤、水性基剤、界面活性剤、ｐＨ調整剤などを含む。
【００７４】
油性基剤としては、たとえば、ミツロウ、カカオ油、カルナバロウ、高級脂肪酸（イソステアリン酸、ウンデシレン酸など）、固形パラフィン、高級アルコール（セチルアルコール、イソステアリルアルコール、ラウリルアルコール、ヘキサデシルアルコール、オクチルドデカノールなど）などの常温固形状油性化合物、ワセリン、ラノリン、還元ラノリンなどの常温固形状油性化合物、ミンク油、カカオ脂、ヤシ油、パーム核油、ツバキ油、ゴマ油、ヒマシ油、オリーブ油、ピーナッツ油、流動パラフィン、オレイン酸、リノール酸、エステル類（ミリスチン酸ミリスチル、ラウリン酸ヘキシル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸イソプロピル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、モノステアリン酸グリセリン、フタル酸ジエチル、モノステアリン酸エチレングリコール、オキシステアリン酸オクチルなど）、シリコーン油（ジメチルポリシロキサン、メチルハイドロジェンポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、ポリエーテル変性オルガノポリシロキサン、フルオロアルキル・ポリオキシアルキレン共変性オルガノポリシロキサン、アルキル変性オルガノポリシロキサン、末端変性オルガノポリシロキサン、フッ素変性オルガノポリシロキサン、アモジメチコーン、アミノ変性オルガノポリシロキサン、シリコーンゲル、アクリルシリコーン、トリメチルシロキシケイ酸など）などが挙げられる。
【００７５】
水性基剤としては、たとえば、グリセリン、ソルビトール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ピロリドンカルボン酸およびその塩、コラーゲン、ヒアルロン酸およびその塩、コンドロイチン硫酸およびその塩などの保湿剤、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルアルコール、キサンタンガム、カルボキシビニルポリマ、ヒドロキシプロピルセルロース、アラビアゴムなどの増粘剤などが挙げられる。油性基剤および水性基剤は化粧料の製剤形態に応じて選択され、それぞれ１種を単独で使用できまたは２種以上を併用できる。
【００７６】
界面活性剤としては、たとえば、イソステアリン酸ポリエチレングリコール、ステアリン酸ソルビタン、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヘキシルデシルエーテルなどの非イオン性界面活性剤、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルリン酸ナトリウムなどのアニオン性界面活性剤、塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウムなどのカチオン型界面活性剤、ショ糖脂肪酸エステル、カゼインナトリウム、レシチン、コラーゲンなどの天然界面活性剤などが挙げられる。界面活性剤は１種を単独で使用できまたは２種以上を併用できる。
【００７７】
ｐＨ調整剤としては、たとえば、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素アンモニウムなどが挙げられる。
【００７８】
また、本実施形態の化粧料は、本実施形態の美肌用組成物とともに、生理活性成分を含んでいてもよい。生理活性成分としては、皮膚に塗布した場合に皮膚に生理活性を付与する化合物であれば特に制限されず、たとえば、本実施形態の美肌用組成物以外のヒアルロニダーゼ活性阻害成分、消炎剤、老化防止剤、紫外線防御剤、スリミング剤、ひきしめ剤、抗酸化剤、賦活剤、発毛剤、育毛剤、保湿剤、血行促進剤、抗菌剤、殺菌剤、乾燥剤、冷感剤、温感剤、ビタミン類、アミノ酸、創傷治癒促進剤、刺激緩和剤、鎮痛剤、細胞賦活剤、酵素成分などが挙げられる。
【００７９】
これらの中でも、天然系の植物抽出成分、海藻抽出成分、生薬成分などが特に好ましい。生理活性成分は１種を単独で使用できまたは２種以上を併用できる。生理活性成分の具体例としては、たとえば、グリチルリチン酸誘導体、グリチルレチン酸誘導体、サリチル酸誘導体、ヒノキチオール、酸化亜鉛、アラントインなどの消炎剤、ビタミンＡ類（パルミチン酸レチノールなど）、ビタミンＢ類（リボフラビン，ニコチン酸アミドなど）、ビタミンＤ類（コレカルシフェロールなど）、ビタミンＥ類（ｄｌ−α−トコフェロールなど）などの抗酸化剤、ローヤルゼリー、コレステロール誘導体、各種アミノ酸などの賦活剤、γ−オリザノール、デキストラン硫酸ナトリウムなどの血行促進剤などが挙げられる。本実施形態の化粧料における生理活性成分の含有量は従来の化粧料におけるのと同程度でよい。
【００８０】
また、本実施形態の化粧料は、化粧料に一般的に用いられる化粧料添加剤の１種または２種以上のそれぞれ適量を含んでいてもよい。化粧料添加剤としては、たとえば、粉剤（顔料、色素、樹脂）、フッ素化合物、樹脂、界面活性剤、増粘剤、防腐剤、香料、紫外線吸収剤、保湿剤、塩類、酸化防止剤、キレート剤、中和剤、ｐＨ調整剤、香料、水、アルコールなどが挙げられる。これらの化粧料添加剤は、化粧料の形態に応じて、適宜選択して用いられる。
【００８１】
本実施形態の化粧料は、従来と同様の製造方法によって、従来から知られる化粧料の形態に調製される。本実施形態の化粧料が採り得る化粧料形態としては特に制限されないけれども、たとえば、美白料、クレンジングクリーム、クレンジングローション、先顔クリーム、石けんなどの皮膚洗浄剤、保湿化粧水、柔軟化粧水、収斂化粧水などの整肌料、ミルキィローション、エモリエントミルク、バニシングクリームなどの保護料、マッサージクリーム、マッサージローション、フォームパック、ピールオフパックなどの賦活料、入浴剤、パップ剤などが挙げられる。その他、石鹸、ボディーソープ、乳液、ボディローション、パック、入浴剤、シャンプー、リンス、コンディショナー、育毛剤、日焼け止め剤などに添加することもできる。
【００８２】
［食品］
本実施形態の食品は、一般的な各種の食品に、本実施形態の美肌用組成物を含有させたものである。本実施形態の食品における美肌用組成物の含有量は特に制限されない。
【００８３】
本実施形態の食品の形態は特に制限されず、固体、半固体、液体、流動食などのいずれであってもよい。その具体例としては、たとえば、ガム、キャンディ、グミ、錠菓、チョコレート、焼き菓子、ケーキなどの菓子類、ゼリー、ムースなどのデザート類、かき氷、シャーベットなどの冷菓、アイスクリーム、生クリーム、ヨーグルト、バター、チーズなどの乳製品、生麺、干麺、ゆで麺、蒸し麺、あげ麺、即席麺など麺類、かまぼこ、ちくわなどの水産加工品、ハム、ソーセージなどの畜産加工品、パン、ジャムなどの農産物加工品、サラダ油、てんぷら油などの食用油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシングなどの油脂加工食品、缶詰、瓶詰などの長期保存用加工食品、ソース、たれ、スープなどの調味料類、炭酸飲料、清涼飲料、乳飲料、コーヒー飲料、紅茶飲料、ミネラルウォーター、アルコール飲料、果汁飲料、栄養飲料などの飲料、ドリンク剤などが挙げられる。また、ハードカプセル、ソフトカプセル、顆粒、錠剤（タブレット）などに成形し、または粉末の状態で、健康食品、機能性食品などとして利用することもできる。
【実施例】
【００８４】
以下に実施例および比較例を挙げ、本発明を具体的に説明する。
（実施例１）
福岡県みやま市山川町で１０月〜１２月に収穫され、約８０℃で熱風乾燥された白ウコンの根を、５ｍｍ以下程度の大きさとなるように粉砕した。このようにして得られた白ウコン根粉末１００．４ｇを３００ｍＬ（ミリリットル）容の耐圧抽出容器に入れ、４０℃に保温した。この耐圧抽出容器に３４．３ＭＰａ、４０℃の超臨界二酸化炭素約９８００ｇを導入し（流速２０ｇ／分）、前記白ウコン根粉末に直接接触させて抽出を行った。抽出終了後、白ウコン根抽出物Ａ３．３ｇ（原料に対して約３．３質量％に相当）が、褐色透明もしくは褐色懸濁の油状あるいは粘性油状物として得られた。このようにして得られた白ウコン根抽出物Ａには、前記式（１）〜（４）で表されるジテルペン化合物が含まれている。この白ウコン根抽出物Ａを実施例１の美肌用組成物とした。
【００８５】
（実施例２）
白ウコンの根に代えて、白ウコンの葉を用いたこと以外は実施例１と同様にして、白ウコンの葉を超臨界二酸化炭素で抽出し、原料に対して約１．７質量％の白ウコン葉抽出物Ｂを得た。このようにして得られた白ウコン葉抽出物Ｂには、前記式（１）〜（４）で表されるジテルペン化合物が含まれている。この白ウコン葉抽出物Ｂを実施例２の美肌用組成物とした。
【００８６】
（実施例３）
約８０℃で熱風乾燥され、粉砕して得られた白ウコン根粉末７９．３ｇをヘキサン０．８Ｌ（リットル）に室温下、３日間浸漬させて抽出し、抽出液を得た。この操作をもう一度繰返し、得られた抽出液を合わせてロータリーエバポレータで減圧濃縮し、１．８ｇの白ウコン根抽出物Ｃ（原料に対して約２．３質量％に相当）を得た。このようにして得られた白ウコン根抽出物Ｃには、前記式（１）〜（４）で表されるジテルペン化合物が含まれている。この白ウコン根抽出物Ｃを実施例３の美肌用組成物とした。
【００８７】
（実施例４）
白ウコンの根をスライスした後、日陰で５〜６時間放置し、約８０℃で熱風乾燥した後、粉砕して粉末状にすることで白ウコン根粉末を得た。その乾燥後の白ウコン根粉末１５２．４ｇをヘキサン１．５Ｌ（リットル）に室温下、３日間浸漬させて抽出し、抽出液を得た。この操作をもう一度繰返し、得られた抽出液を合わせてロータリーエバポレータで減圧濃縮し、２．６ｇの白ウコン根抽出物Ｄ（原料に対して約１．７質量％に相当）を得た。このようにして得られた白ウコン根抽出物Ｄには、前記式（１）〜（４）で表されるジテルペン化合物が含まれている。この白ウコン根抽出物Ｄを実施例４の美肌用組成物とした。
【００８８】
（実施例５）
福岡県みやま市山川町で１０月〜１２月に収穫され、約８０℃で熱風乾燥された春ウコンの根を、５ｍｍ以下程度の大きさとなるように粉砕した。このようにして得られた春ウコン根粉末１００．１ｇを３００ｍＬ（ミリリットル）容の耐圧抽出容器に入れ、４０℃に保温した。この耐圧抽出容器に３４．３ＭＰａ、４０℃の超臨界二酸化炭素約９８００ｇを導入し（流速２０ｇ／分）、前記春ウコン根粉末に直接接触させて抽出を行った。抽出終了後、春ウコン根抽出物Ｅ３．３ｇ（原料に対して約３．３質量％に相当）が、褐色透明もしくは褐色懸濁の油状あるいは粘性油状物として得られた。
【００８９】
上記のようにして得られた春ウコン根抽出物Ｅと、実施例１で得られた白ウコン根抽出物Ａとを、１：１の質量比で混合し、抽出混合物Ｆを得た。この抽出混合物Ｆを実施例５の美肌用組成物とした。
【００９０】
（実施例６）
春ウコンの根に代えて、春ウコンの葉を用いたこと以外は実施例５と同様にして、春ウコンの葉を超臨界二酸化炭素で抽出し、原料に対して約１．８質量％の春ウコン葉抽出物Ｇを得た。
【００９１】
上記のようにして得られた春ウコン葉抽出物Ｇと、実施例１で得られた白ウコン根抽出物Ａとを、１：１の質量比で混合し、抽出混合物Ｈを得た。この抽出混合物Ｈを実施例６の美肌用組成物とした。
【００９２】
（実施例７）
春ウコン根粉末１１０．５ｇをヘキサン１．５Ｌ（リットル）に室温下、３日間浸漬させて抽出し、抽出液を得た。この操作をもう一度繰返し、得られた抽出液を合わせてロータリーエバポレータで減圧濃縮し、２．２１ｇの春ウコン根抽出物Ｉ（原料に対して約２．１質量％に相当）を得た。
【００９３】
上記のようにして得られた春ウコン根抽出物Ｉと、実施例１で得られた白ウコン根抽出物Ａとを、１：１の質量比で混合し、抽出混合物Ｊを得た。この抽出混合物Ｊを実施例７の美肌用組成物とした。
【００９４】
（実施例８）
春ウコンの根をスライスした後、日陰で５〜６時間放置し、約８０℃で熱風乾燥した後、粉砕して粉末状にすることで春ウコン根粉末を得た。その乾燥後の春ウコン根粉末１００．３ｇをヘキサン１．５Ｌ（リットル）に室温下、３日間浸漬させて抽出し、抽出液を得た。この操作をもう一度繰返し、得られた抽出液を合わせてロータリーエバポレータで減圧濃縮し、２．３ｇの春ウコン根抽出物Ｋ（原料に対して約２．３質量％に相当）を得た。
【００９５】
上記のようにして得られた春ウコン根抽出物Ｋと、実施例１で得られた白ウコン根抽出物Ａとを、１：１の質量比で混合し、抽出混合物Ｌを得た。この抽出混合物Ｌを実施例８の美肌用組成物とした。
【００９６】
（比較例１）
ミョウガをヘキサンに室温下、３日間浸漬させて抽出し、抽出液を得た。得られた抽出液をロータリーエバポレータで減圧濃縮し、ミョウガ抽出物を得た。なお、ヒアルロニダーゼ阻害活性評価時の処理条件は、以下のようにした。
・ポジティブコントロール：(＋)−カテキン  ７７．７％（処理濃度２ｍＭ）
ロズマリン酸    ９２．６％（処理濃度２ｍＭ）
【００９７】
実施例１〜８および比較例１の美肌用組成物について、ヒアルロニダーゼ阻害活性およびチロシナーゼ阻害活性を評価した。
【００９８】
＜ヒアルロニダーゼ阻害活性評価方法＞
ヒアルロニダーゼ（ＥＣ  ３．２．１．３５）は、グリコシド結合を切断することによりヒアルロン酸を分解する酵素である。
【００９９】
評価対象の試料をＤＭＳＯ（Dimethyl sulfoxide）に溶解させた試料溶液（処理濃度：５ｍｇ／ｍＬ）４０μＬと、０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ３．８〜４．０）１６０μＬとをチューブに入れてよく混合し、そこへヒアルロニダーゼ溶液（４０００ｕｎｉｔｓ／ｍＬ）１００μＬを添加して、３７℃で２０分間インキュベートした。次に、ヒアルロニダーゼ活性化剤としてＣｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０溶液（０．５ｍｇ／ｍＬ）を２００μＬ加え、さらに３７℃で２０分間インキュベートした。
【０１００】
続いて、ヒアルロン酸ナトリウム溶液（０．８ｍｇ／ｍＬ）５００μＬを添加して３７℃で４０分間インキュベートした。その後、反応停止剤として０．４Ｎ水酸化ナトリウム水溶液２００μＬを加え、氷上で冷却して反応を停止させた。
【０１０１】
反応停止後、０．１Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ９．１）２００μＬを加えてよく混合し、１００℃で５分間加熱した後、氷上で冷却した。続いて、２００００Ｇで１０分間遠心分離した。次に、遠心分離後の上澄み液１４０μＬと発色試薬６００μＬとをよく混合し、３７℃で２０分間インキュベートした。これをサンプルＳ１とする。
【０１０２】
なお、前記発色試薬としては、１０Ｎ塩酸１２．５ｍＬと酢酸３７．５ｍＬとの混液にｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド２５ｇを溶解し、１ヵ月を使用期限として１０℃以下で保存した保存液を、使用直前に酢酸で１０倍に希釈したものを用いた。
【０１０３】
また同様にして、試料溶液の代わりにＤＭＳＯを用いたもの（以下、「コントロールＣ１」という）、ヒアルロニダーゼの代わりに０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ３．８〜４．０）を用いたもの（以下、「サンプルブランクＳＢ１」という）、ならびに、試料溶液の代わりにＤＭＳＯを用い、ヒアルロニダーゼの代わりに０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ３．８〜４．０）を用いたもの（以下、「コントロールブランクＣＢ１」という）を準備した。なお、ヒアルロニダーゼ、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０、およびヒアルロン酸ナトリウムは、いずれも０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ３．８〜４．０）で溶解して試験に用いた。
【０１０４】
コントロールブランクＣＢ１を測定ブランクとして、サンプルＳ１、コントロールＣ１およびサンプルブランクＳＢ１について、波長５８５ｎｍにおける吸光度を測定した。測定結果から、ヒアルロニダーゼ活性阻害率を下記式（Ａ）に従い、算出した。試験は３回行い、その平均を１データとして表した。ヒアルロニダーゼ活性阻害率は、その値が大きいほど、ヒアルロニダーゼ阻害活性が高いことを示す。
ヒアルロニダーゼ活性阻害率（％）＝
｛Ｃ１−（Ｓ１−ＳＢ１）｝／Ｃ１×１００          ・・・（Ａ）
［式中、符号Ｃ１はコントロールＣ１の吸光度を示し、Ｓ１はサンプルＳ１の吸光度を示し、ＳＢ１はサンプルブランクＳＢ１の吸光度を示す。］
【０１０５】
＜チロシナーゼ阻害活性評価方法＞
チロシナーゼ（ＥＣ  １．１４．１８．１）は、メラニン生成の初期反応であるアミノ酸チロシンからＬ−ＤＯＰＡ（L-β-(3,4-Dihydroxyphenyl)alanine）への水酸化、Ｌ−ＤＯＰＡからＤＯＰＡキノンへの酸化を触媒する酵素である。本試験では、Ｌ−ＤＯＰＡを基質として用い、その反応生成物であるＤＯＰＡキノンの吸収波長である４７５ｎｍにおける吸光度を測定し、ＤＯＰＡキノンの生成阻害からチロシナーゼ活性阻害率を求めた。
【０１０６】
評価対象の試料を、２０％ＤＭＳＯ−１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）に溶解させて試料溶液（処理濃度：５ｍｇ／ｍＬ）を調製する。調製した試料溶液１００μＬと１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８、株式会社ヤトロン製）４００μＬとを混合し、これにチロシナーゼ（３０ｕｎｉｔｓ、シグマ（ＳＩＧＭＡ）社製）６０μＬを加え、３７℃のウォーターバス上で２０分間馴致した。その後、２ｍＭに調製したＬ−ＤＯＰＡ（和光純薬株式会社製）４４０μＬを加えて、３７℃で５分間反応させた。これをサンプルＳ２とする。
【０１０７】
また同様にして、試料溶液を添加しないもの（以下、「コントロールＣ２」という）、チロシナーゼを添加しないもの（以下、「サンプルブランクＳＢ２」という）、ならびに試料溶液およびチロシナーゼをともに添加しないもの（以下、「コントロールブランクＣＢ２）を準備した。検定試料、チロシナーゼおよびＬ−ＤＯＰＡは、いずれも１／１５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．８）で溶解して試験に用いた。
【０１０８】
コントロールブランクＣＢ２を測定ブランクとして、サンプルＳ２、コントロールＣ２およびサンプルブランクＳＢ２について、波長４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。測定結果から、チロシナーゼ活性阻害率を下記式（Ｂ）に従い、算出した。試験は３回行い、その平均を１データとして表した。チロシナーゼ活性阻害率は、その値が大きいほど、チロシナーゼ阻害活性が高いことを示す。
チロシナーゼ活性阻害率（％）＝
｛Ｃ２−（Ｓ２−ＳＢ２）｝／Ｃ２×１００          ・・・（Ｂ）
［式中、符号Ｃ２はコントロールＣ２の吸光度を示し、Ｓ２はサンプルＳ２の吸光度を示し、ＳＢ２はサンプルブランクＳＢ２の吸光度を示す。］
【０１０９】
実施例１〜８および比較例１の美肌用組成物についての、ヒアルロニダーゼ阻害活性およびチロシナーゼ阻害活性の評価結果を表７に示す。
【０１１０】
【表７】
0005843536.tif 000016
【０１１１】
表７から明らかなように、白ウコンの根または葉の抽出物を含む実施例１〜８の美肌用組成物は、ヒアルロニダーゼ活性阻害率が高い値を示す。したがって、実施例１〜８の美肌用組成物は、ヒアルロニダーゼが活性化されるのを阻害するので、ヒアルロン酸が分解されるのを防止することができる。
【０１１２】
また、白ウコン根抽出物Ａからなる実施例１の美肌用組成物と、白ウコン葉抽出物Ｂからなる実施例２の美肌用組成物とを比較すると、実施例１の方が実施例２よりも高いヒアルロニダーゼ活性阻害率を示す。このことから、白ウコンの葉よりも根の抽出物の方が、ヒアルロン酸の分解防止効果が高いことがわかる。
【０１１３】
また、白ウコン根抽出物Ｃからなる実施例３の美肌用組成物と、白ウコン根抽出物Ｄからなる実施例４の美肌用組成物とを比較すると、実施例４の方が実施例３よりも高いヒアルロニダーゼ活性阻害率を示す。このことから、白ウコンを日陰で放置した後に熱風乾燥し、その後粉砕して抽出処理を行った場合に、ヒアルロン酸の分解防止効果が高くなることがわかる。
【０１１４】
また、実施例７の美肌用組成物に含まれる春ウコン根抽出物Ｉと、実施例８の美肌用組成物に含まれる春ウコン根抽出物Ｋとを比較すると、春ウコン根抽出物Ｋの方が春ウコン根抽出物Ｉよりも高いヒアルロニダーゼ活性阻害率を示す。このことから、春ウコンを日陰で放置した後に熱風乾燥し、その後粉砕して抽出処理を行った場合に、ヒアルロン酸の分解防止効果が高くなることがわかる。
【０１１５】
また、白ウコン根抽出物Ａと春ウコン抽出物とが混合された抽出混合物からなる実施例５〜８の美肌用組成物は、白ウコン根抽出物Ａのみからなる実施例１の美肌用組成物と比較して、ヒアルロニダーゼ活性阻害率が高い状態で維持された上で、高いチロシナーゼ活性阻害率を示す。実施例５〜８のように、白ウコン抽出物と春ウコン抽出物とを含む美肌用組成物は、ヒアルロニダーゼ阻害活性およびチロシナーゼ阻害活性のいずれの阻害活性も高い組成物であることがわかる。