(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物性基質から活性分子を抽出する方法であって、該基質を抽出液と接するように配置する工程を含む方法であり、該抽出液は以下を含むことを特徴とする：
−気温２３℃、圧力１気圧で気体の抽出ガスと
−酢酸を含む抽出溶媒。
【請求項２】
植物性基質から抽出される活性分子が、テルペン、フラボノイド、アントシアン、カテキンを含む群から選択される、請求項１の方法。
【請求項３】
−該テルペンは、ヘミテルペン、モノテルペン、セスキテルペン、ジテルペン、セステルペン、トリテルペン、テトラテルペンを含む群から選択され、
−該フラボノイドは、フラボン、イソフラボン、ネオフラボンを含む群から選択され、
−該アントシアンは、デルフィニジン、ペチュニジン、シアニジン、アントシアニン、マルビジン、ペオニジン、トリセチニジン、アピゲニニジン、ペラルゴニジン、プロアントシアニンを含む群から選択され、
−該カテキンは、エピガロカテキン−３−ガレイト（ＥＧＣＧ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキン−３−ガレイト（ＥＣＧ）、エピカテキン（ＥＣ）、ガロカテキン、カテキンの中から選択されるポリフェノール化合物を含む群から選択される、請求項２の方法。
【請求項４】
植物性基質が、天然樹脂、化石樹脂、種子、樹皮、葉、藻類、エッセンシャルオイル、根、野菜、果物を含む群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項５】
該抽出ガスが、ヘリウム、ネオン、クリプトン、キセノン、二酸化炭素、窒素、酸素、またはこれらの混合物を含む群から選択される請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
該抽出ガスは、抽出溶媒１００重量部に対して、０．１〜１０体積％となるように、液体の該抽出溶媒に添加される請求項５に記載の方法。
【請求項７】
該抽出ガスが、アルゴン、窒素、二酸化炭素、アルゴンと窒素の混合物、アルゴンと二酸化炭素の混合物、窒素と二酸化炭素の混合物、アルゴンと窒素と二酸化炭素の混合物を含む群から選択される請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
該基質を抽出液と接するように配置して得られる活性分子の抽出が、抽出温度２０〜９０℃、圧力１〜５気圧、抽出時間１〜８時間で実施される、請求項１〜７のいずれかに記載の抽出方法。
【請求項９】
該抽出液が、
−アルゴン、窒素、二酸化炭素、アルゴンと窒素の混合物、アルゴンと二酸化炭素の混合物、窒素と二酸化炭素の混合物を含む群から選択される、抽出ガスを含み、
−酢酸の水溶液である、該抽出溶媒を含む、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
アルゴンと窒素の混合物、アルゴンと二酸化炭素の混合物は１：３〜３：１の割合で該抽出ガス中に存在する、請求項９記載の方法。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願発明は、植物性基質、天然樹脂および／またはエッセンシャルオイルから活性分子を抽出する方法に関する。特に、本願発明は、テルペン、フラボノイド、アントシアンおよびカテキンを含む群から選択される活性分子を抽出することに関する。さらに、本願発明は、上述の方法で得られた、好ましくは液体の、抽出物に関する。加えて、本願発明は、テルペン、フラボノイド、アントシアンおよびカテキンを含む群から選択される活性分子を含む上述の抽出物の、食品組成物、サプリメント製品、または医薬組成物の製造への利用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
例えばミルラや香料、プロポリスのような天然樹脂には、テルペンおよび／またはフラボノイドのような活性分子が多量に含まれていることが知られている。活性分子としては、例えば、モノテルペン（イソプレン構成単位２個と炭素原子１０個）、セスキテルペン（イソプレン構成単位３個と炭素原子１５個）、またはトリテルペン（イソプレン構成単位６個と炭素原子３０個）が含まれ得る。また、例えば、クエルセチンやエピカテキンが含まれ得る。
【０００３】
上述の天然樹脂の中には、上述の活性分子とともに、活性分子と結合している糖類、澱粉、粘性の樹脂、その他の高分子化合物が存在するが、それらが活性分子の抽出を妨げている。
【０００４】
天然樹脂に含まれる活性分子を抽出する方法として、水蒸気蒸留による抽出方法が知られている。
【０００５】
しかしながら、水蒸気蒸留による抽出方法は、多くの制限や欠点があるため利用しにくい。制限や欠点とは、例えば、抽出される分子の数が制限されるために、抽出物の収率が低くなるというものである。
【０００６】
ＣＯ２やＮ２のような気体を用いて、超臨界的な環境下（超臨界ガス）で抽出する方法も知られている。例えば、二酸化炭素は、温度３１℃、圧力７３気圧で超臨界となる。
【０００７】
水蒸気蒸留による抽出方法と比較すると、上述の超臨界ＣＯ２、Ｎ２を用いて抽出する方法は、量的な観点からすると、高い収率によって多量の活性分子を抽出することができる。
【０００８】
しかしながら、ＣＯ２やＮ２のような超臨界ガスを用いた前述の抽出方法は、制限や欠点があるため利用しにくい。
【０００９】
欠点の一つは、装置の設置や維持に費用がかかることである。
【００１０】
他の欠点として、抽出の実施条件下で、分子間の交差反応が起こる結果、望まない反応生成物（例えば、分子の会合物および／または副生成物）が生ずることである。こうした理由もあって、水蒸気蒸留による抽出方法が、今日でも最も広く使われる抽出方法となっている。
【００１１】
しかしながら、水蒸気蒸留による抽出方法における大きな制限は、抽出効率、抽出する分子の数、抽出割合、収率を増加するために、抽出する活性分子の化学的、物理的性質を損ない、分子が機能的な活性を失って、結果的に、人体に機能する活性分子としての商業的な利益を失うような、温度、溶剤の混合比、圧力を避けた特定の実施条件で実施しなければならないという事実である。
【００１２】
例えば、１００℃を超える抽出温度で実施する抽出方法では、抽出される感熱性の分子は損傷（変性）する。
【００１３】
例えば、フラボノイドは、温度範囲５２℃から８５℃においては、ほぼ全てが分解される。
【００１４】
欧州特許１６４１９０３Ｂ１は、回転磁場の存在下で、極性溶媒を用いて天然樹脂からテルペンやテルペノイドを抽出する方法に関する。
【００１５】
しかしながら、上述の回転磁場による抽出方法には、制限や欠点があるために利用しにくい。
【００１６】
制限の１つとして、装置の設置や維持に費用がかかることが挙げられる。特に、回転磁場の操作には、適切な磁場間隔を確保するために、高度に精巧な磁場を操作できる装置が必要である。他の制限としては、１０００〜３５００ガウスの磁場を操作しなければならないことである。さらに、抽出容量は、回転磁場を作り出す磁場発生器の大きさによる。それゆえ、１０００〜３５００ガウスの磁場を発生させるには、大きな磁石を用いた大きな装置が必要で、そのような大きな磁石は適切な方法で遮蔽することが必要となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１７】
【特許文献１】ＥＰ１６４１９０３Ｂ１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
したがって、植物性基質および／または天然樹脂および／またはエッセンシャルオイルから活性分子を抽出する方法であって、従来法における制限や欠点がない方法は、なお必要とされている。
【００１９】
特に、植物性基質および／または天然樹脂および／またはエッセンシャルオイルから活性分子を抽出する方法として、簡単で、経済的であり、管理が容易で、実用的な方法であると同時に、抽出効率の高さと、抽出量の多さを保証できるような方法が必要とされている。なお、抽出効率は、抽出された活性分子の量から把握され、抽出量は、抽出された分子の重さから把握される
【００２０】
特に、植物性基質および／または天然樹脂および／またはエッセンシャルオイルから活性分子を抽出する方法として、多くの分子を大量に抽出でき、実施条件においては、抽出された活性分子の化学的ないし物理的構造が損なわれない方法が必要とされている。特に述べるとすれば、結果として人体に機能する活性分子の商業的な価値を失うことになるような、抽出した分子の化学的ないし物理的な劣化／分解や、本来の化学的構造が変化／損失を防ぐことができるような抽出方法が必要とされていると思われる。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
したがって、本願発明は、植物性基質および／または天然樹脂および／またはエッセンシャルオイルから分子を抽出する方法に関するものであり、その特徴は添付した請求の範囲に示すとおりである。
【００２２】
また、本願発明は、植物性基質および／または天然樹脂および／またはエッセンシャルオイルから抽出された活性分子を含む抽出物に関するものであり、その特徴は添付した請求の範囲に示すとおりである。
【００２３】
そして、本願発明は、食品組成物、サプリメント製品、医薬組成物の製造に用いる上述の活性分子の抽出物の利用に関するものであり、その特徴は添付した請求の範囲に示すとおりである。
【００２４】
さらには、本願発明は、上述の抽出方法を実施するための装置に関するものであり、その特徴は添付した請求の範囲に示すとおりである。
【００２５】
本願発明を実施するための好ましい形態は、後に述べるとおりであるが、これは本願発明の範囲を何ら制限するものではない。
【００２６】
表１は、ミルラを用いた実施例１の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００２７】
表２は、香料を用いた実施例２の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００２８】
表３は、ナツシロギク（Tanacetum Parthenium）を用いた実施例３の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００２９】
表４は、クランベリーを用いた実施例４の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００３０】
表５は、プロポリスを用いた実施例５の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００３１】
表６は、クランベリーを用いた実施例６の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００３２】
表７は、ナツシロギク（Tanacetum Parthenium）を用いた実施例７の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００３３】
表８は、香料を用いた実施例８の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００３４】
表９は、ミルラを用いた実施例９の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【００３５】
表１０は、プロポリスを用いた実施例１０の場合の、本願発明の抽出方法を実施して得られた抽出物について行った定性的、定量的な分析結果を示したものである。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】図１は、本願発明の抽出方法を実施するための装置に関する。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
本願出願人は、植物性基質および／または天然樹脂および／またはエッセンシャルオイルに本来的に存在する活性分子を抽出する新しい方法であると考えている。この方法は、少なくとも、上述の植物性基質を抽出液と接するように配置する工程を含み、該抽出液は、気体の抽出ガス（後に述べる）を、極性溶媒および／または無極性溶媒から選択した液状の溶媒（後に述べる）に添加することで得られる。
【００３８】
本願発明の抽出方法は、抽出液を使用することを想定している。該抽出液は、抽出溶媒（Ａ）と抽出ガス（Ｙ）を含むか、またはそれらのみからなる。
【００３９】
該抽出ガス（Ｙ）は、温度２３℃、圧力１気圧において気体であるすべての物質に相当する。超臨界状態（いわゆる超臨界ガス）となったガスは、本願発明の中では考慮されていない。例えば、超臨界二酸化炭素は、本願発明の中では、有効に適用されることはない。
【００４０】
上述の抽出ガス（Ｙ）は、ヘリウム、ネオン、アルゴン、クリプトン、キセノン、二酸化炭素、窒素、酸素を含むか、またはこれらのみからなる群またはこれらの混合物から選択される。
【００４１】
上述の抽出ガスは、アルゴン、窒素、二酸化炭素、またはこれらの混合物を含む群から選択されるのがよい。
【００４２】
使用される抽出溶媒１００体積部に対して、抽出ガス（Ｙ）は、０．１〜１０体積％とする。
【００４３】
好ましくは、使用される抽出溶媒１００体積部に対して、抽出ガスは０．５〜５体積％、さらに好ましくは１〜２．５体積％とするのがよい。
【００４４】
抽出ガスは、温度２３℃、圧力１気圧で気体である、二酸化炭素ＣＯ２を含むのがよい。好ましい実施形態において、抽出ガスは二酸化炭素ＣＯ２のみからなる（Ｙ１）。二酸化炭素を含む、または二酸化炭素のみからなる抽出ガスは、抽出液中に、使用される抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜５体積％、好ましくは２．５〜３体積％含まれる。
【００４５】
抽出ガスは、温度２３℃、圧力１気圧で気体である、アルゴンを含むのがよい。好ましい実施形態において、抽出ガスはアルゴンのみからなる（Ｙ２）。アルゴンを含む、またはアルゴンのみからなる抽出ガスは、抽出液中に、使用される抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜５体積％、好ましくは２．５〜３体積％含まれる。
【００４６】
抽出ガスは、温度２３℃、圧力１気圧で気体である、窒素を含むのがよい。好ましい実施形態において、抽出ガスは窒素のみからなる（Ｙ３）。窒素を含む、または窒素のみからなる抽出ガスは、抽出液中に、使用される抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜５体積％、好ましくは２．５〜３体積％含まれる。
【００４７】
抽出ガスは、温度２３℃、圧力１気圧で気体である、アルゴンと二酸化炭素を含むのがよい。好ましい実施形態において、抽出ガスはアルゴンと二酸化炭素のみからなる（Ｙ４）。アルゴンと二酸化炭素の混合物を含む、または該混合物のみからなる抽出ガスは、抽出液中に、１：３〜３：１、１：１の割合、または、使用される抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜５体積％、好ましくは２．５〜３体積％含まれる。
【００４８】
抽出ガスは、温度２３℃、圧力１気圧で気体である、アルゴンと窒素を含むのがよい。好ましい実施形態において、抽出ガスはアルゴンと窒素のみからなる（Ｙ５）。アルゴンと窒素の混合物を含む、または該混合物のみからなる抽出ガスは、抽出液中に、１：３〜３：１、１：１の割合、または、使用される抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜５体積％、好ましくは２．５〜３体積％含まれる。
【００４９】
抽出ガスは、温度２３℃、圧力１気圧で気体である、窒素、アルゴンおよび二酸化炭素を含むのがよい。好ましい実施形態において、抽出ガスは窒素、アルゴンおよび二酸化炭素のみからなる（Ｙ６）。窒素、アルゴンおよび二酸化炭素の混合物を含む、または該混合物のみからなる抽出ガスは、抽出液中に、１：３：１〜１：１：１（Ｎ２：Ａｒ２：ＣＯ２）の割合、または、使用される抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜５体積％、好ましくは２．５〜３体積％含まれる。
【００５０】
抽出溶媒（Ａ）は、液状であり、下記に説明するように、化合物を１つまたはそれ以上含む。
【００５１】
液体の抽出溶媒は、極性溶媒または極性溶媒の混合物、無極性溶媒または無極性溶媒の混合物、もしくは極性溶媒と無極性溶媒の混合物を含むか、またはそれらのみからなる（グループＡ１）。上述の抽出溶媒は、脂肪族および／または芳香族の性質を有し得る（グループＡ１）。
【００５２】
本願発明において、溶媒は、誘電率の値に基づいて、極性溶媒と無極性溶媒の２つに分類することができる。水の誘電率は、２０℃まではおよそ８０（極性溶媒）であるが、誘電率の値が１５より小さい溶媒は、一般的に無極性に分類される。極性溶媒は、プロトン性の極性溶媒と非プロトン性の極性溶媒に分類することができる。
【００５３】
好ましい実施形態において、抽出溶媒はカルボキシル基および／またはエステル基を少なくとも１つ有する化合物を、少なくとも１つ含む（グループＢ１）。上述の化合物は、少なくとも１つのカルボキシル基を含む（そしてエステル基を含まない）場合、モノカルボン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸、テトラカルボン酸の化合物を少なくとも１つ含むか、またはそれらのみからなる群から選択される。カルボキシル基は、保護された形態、すなわちエステルの形態でも存在し得る（グループＢ２）。
【００５４】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、式（Ｉ）［Ｒ−ＣＯＯＨ］で示される脂肪酸モノカルボン酸化合物を少なくとも１つ含む。ここで、Ｒは、炭素数１〜１０のアルキル基であり、好ましくは、炭素数１〜５であるか、Ｒ１−ＣＨ２（ＯＨ）−基（ここで、Ｒ１はＲと同じ意味）（グループＢ３）。使用する酸は、蟻酸、プロピオン酸またはこれらの混合物とするのが好ましい。
【００５５】
本願発明において、抽出溶媒（Ａ）は、酢酸を含むか、または酢酸のみからなる。酢酸は、６モル濃度の酢酸、１２モル濃度の酢酸、または９５％好ましくは９８％の純度の氷酢酸とすることができる。抽出溶媒は、酢酸溶液と水を含むか、またはそれらのみからなる。好ましくは、酸が酢酸の場合には、１２％水溶液として用いる。
【００５６】
抽出液は、酢酸または酢酸と水との水溶液を含むか、またはこれらのみからなる抽出溶媒（Ａ）と、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、Ｙ６を含む、またはこれらのみからなる群から選択される抽出ガスを含むか、またはこれらのみからなるのがよい。
【００５７】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、式（ＩＩ）［ＨＯＯＣ−（ＣｎＨ２ｎ+２）−ＣＯＯＨ］で示される脂肪酸ジカルボン酸を少なくとも１つ有する。ここで、ｎは、０でもよく、１から１０としてもよいが、このましくはｎ＝０である（グループＢ４）。抽出溶媒は、シュウ酸またはマロン酸、またはこれらの混合物を含むのがよい。
【００５８】
好ましい実施例として、抽出溶媒は、芳香族の化学構造を有しており、カルボキシル基を少なくとも１つ含む（グループＢ５）。
【００５９】
抽出溶媒は、安息香酸（Ｐｈ−ＣＯＯＨ）、またオルト、メタ、パラの位置に、炭素数１〜４の短鎖アルキルの脂肪酸アルキルＲを置換した、式（ＩＩＩ）[Ｒ−Ｐｈ−ＣＯＯＨ]で表される安息香酸を含むのがよい。
【００６０】
抽出溶媒は、オルトの位置にメチル基を置換した安息香酸を含むのがよい。
【００６１】
好ましい実施形態としては、抽出溶媒は、トリカルボン酸化合物を少なくとも１つ含む（グループＢ６）。抽出溶媒は、クエン酸を含むのがよい。
【００６２】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、テトラカルボン酸化合物を少なくとも１つ含む（Ｂ７グループ）。溶媒は、ピロメリト酸を含むのがよい（ＣＡＳ  ８９−０５−４）。
【００６３】
前述のとおり、抽出溶媒は、カルボキシル基および／またはエステル基を少なくとも１つ有する化合物を、少なくとも１つ含み得る（グループＢ１）。
【００６４】
上記の溶媒が、少なくともエステル基を有する（カルボキシル基を含まない）化合物を少なくとも１つ含む場合、上記の化合物は式（IV）Ｒ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ１で表されるエステルを含む群から選択される。ここで、Ｒは、Ｒ１と同一であってもよく、異なっていてもよく、ＲとＲ１は、炭素数１〜５の短鎖アルキル基となり得る。好ましくは、Ｒはメチル基で、Ｒ１はメチル基、エチル基またはプロピル基である（グループＢ８）。
【００６５】
好ましい実施形態として、抽出溶媒（Ａ）は、少なくともカルボキシル基と少なくともアルコール基を有する化合物を少なくとも１つ含む場合には、式（VII）［Ｒ−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＯＯＨ］で表される。ここで、Ｒは、炭素数１〜４の短鎖脂肪族の中から選択される（グループＢ９）。Ｒはメチル基とするのがよい。
【００６６】
上記に明示した化合物（グループＢ２〜Ｂ９）は、すべて化合物Ｂ１に属する。
【００６７】
好ましい実施形態として、抽出溶媒（Ａ）は、少なくともアルコール基を有する化合物を少なくとも１つ含む（グループＣ１）。
【００６８】
上記の少なくともアルコール基を有する化合物は、一級、二級または三級脂肪族アルコールを含むか、またはそれらのみからなる（グループＣ２）。
【００６９】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、式（Ｖ）Ｒ−ＯＨで示される一級脂肪族アルコールを少なくとも１つ有する。ここで、Ｒは炭素数１〜１０のアルキル基を表し、好ましくは炭素数１〜５である（グループＣ３）。アルコールは、エタノール、ヘキサノール、オクタノールから選択するのがよい。
【００７０】
本願発明における１つの実施形態として、抽出溶媒は、１：２〜２：１の比の酢酸とエチルアルコールを含むか、またはこれらのみからなる。好ましくは、酢酸とエチルアルコールの水溶液とする。
【００７１】
抽出液は、酢酸とエチルアルコール、または酢酸とエチルアルコールの水溶液、およびＹ１，Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、Ｙ６を含むか、これらのみからなる群から選択される抽出ガスを含むか、またはこれらのみからなる。
【００７２】
好ましい実施形態において、抽出溶媒は、イソプロピルアルコールとイソブチルアルコールのいずれかから選択される二級脂肪族アルコールを少なくとも含む（グループＣ４）。
【００７３】
好ましい実施形態において、抽出溶媒は、三級脂肪族アルコールを少なくとも含む。アルコールは、ｔ−ブチルアルコールがよい（グループＣ５）。
【００７４】
アルコール基を少なくとも有する化合物（Ｃ１）は、式（ＶＩ）［Ｈ−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−）ｎＯＨ］を有する化合物から選択され得る。ここで、ｎは１〜２５、好ましくは２〜２０、さらに好ましくは４〜１５となり得る（グループＣ６）。
【００７５】
上記した化合物（グループＣ２〜Ｃ６）は、すべて化合物Ｃ１に属する。
【００７６】
以下に、（１）無極性溶媒、（２）非プロトン性の極性溶媒、（３）プロトン性の極性溶媒の例とその誘電率を示す。（１）ペンタン１．８４、ヘキサン１．８８、ジエチルエーテル４．３、（２）エチルアセテート６．０２、（３）蟻酸５８、ｎ−ブタノール１８、イソプロパノール１８、ｎ−プロパノール２０、エタノール３０、酢酸６．２、水８０。
【００７７】
好ましい実施形態としては、抽出溶媒（Ａ）は、水と混合した、グループＡ１に属す化合物を少なくとも１つ含むか、またはそれのみからなる。
【００７８】
他の好ましい実施形態としては、抽出溶媒（Ａ）は、水と混合した、グループＢ１に属す化合物を少なくとも１つ含むか、またはそれのみからなる。
【００７９】
他の好ましい実施形態としては、抽出溶媒（Ａ）は、水と混合した、グループＣ１に属す化合物を少なくとも１つ含むか、またはそれのみからなる。
【００８０】
他の好ましい実施形態としては、抽出溶媒（Ａ）は、水と混合した、グループＢ１に属す化合物のうち少なくとも１つと、グループＣ１に属す化合物のうち少なくとも１つを含むか、またはそれらのみからなる。
【００８１】
本願発明の抽出方法は、抽出液を利用するものである。抽出液は、上記したように、抽出溶媒（Ａ）と抽出ガス（Ｂ）を含むか、それらのみからなる。
【００８２】
抽出溶媒は、脂肪族および／または芳香族の性質を有する、極性および／または無極性溶媒（グループＡ１）を、溶媒の全重量に対して１〜６０重量％、そして水を、溶媒の全重量に対して９９〜４０重量％含み得る。
【００８３】
抽出溶媒は、グループＢ１に属する化合物を少なくとも１つを、溶媒の全重量に対して１〜６０重量％、そして水を、溶媒の全重量に対して９９〜４０重量％含み得る。
【００８４】
抽出溶媒は、グループＣ１に属する化合物を少なくとも１つを、溶媒の全重量に対して１〜２０重量％、そして水を、溶媒の全重量に対して９９〜８０重量％含み得る。
【００８５】
抽出溶媒は、グループＢ１に属する化合物の少なくとも１つを溶媒の全重量に対して１〜６０重量％と、グループＣ１に属する化合物の少なくとも１つを溶媒の全重量に対して１〜２０重量％、そして水を、溶媒の全重量に対して９８〜２０重量％含み得る。
【００８６】
抽出溶媒のｐＨは、１〜７、好ましくは２〜６、さらに好ましくは３〜４であり、これは、使用する溶媒の種類によって異なる。
【００８７】
抽出溶媒と抽出ガスを含む抽出液のｐＨの値は、１〜７、好ましくは２〜６、さらに好ましくは３〜４であり、これは使用する溶媒の種類と抽出ガスの添加量によって異なる。
【００８８】
抽出溶媒は、溶媒の全重量に対して、１〜８０重量％の酢酸と、９９〜２０重量％の水を含むか、または、これらのみからなる。抽出ガスは、二酸化炭素、アルゴン、窒素、二酸化炭素とアルゴン、アルゴンと窒素、二酸化炭素とアルゴンと窒素であって、使用する抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜１０体積％または０．５〜５体積％の濃度で含まれる。好ましくは、酢酸は、２０重量％、４０重量％または８０重量％含まれるのがよく、二酸化炭素、アルゴン、窒素、二酸化炭素とアルゴン、アルゴンと窒素、二酸化炭素とアルゴンと窒素は２．５体積％または３体積％含まれるのがよい。
【００８９】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、溶媒の全重量に対して、１〜２０重量％のエチルアルコールと、９９〜８０重量％の水を含むか、またはこれらのみからなる。抽出ガスは、二酸化炭素であり、使用する抽出溶媒を１００体積部に対して、０．５〜５体積％含まれる。好ましくは、１０重量％のエチルアルコールと、３体積％の二酸化炭素を含むのがよい。
【００９０】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、溶媒の全重量に対して１〜６０重量％の酢酸、溶媒の全重量に対して１〜２０重量％のエチルアルコール、溶媒の全重量に対して９８〜２０重量％の水を含むか、またはこれらのみからなる。
【００９１】
抽出ガスは、二酸化炭素、アルゴン、窒素、二酸化炭素とアルゴン、アルゴンと窒素、二酸化炭素とアルゴンと窒素であり、使用する抽出溶媒１００体積部に対して、０．１〜１０体積％または０．５〜５体積％含む。好ましくは、酢酸は、２０重量％、４０重量％または８０重量％含まれるのがよく、エチルアルコールは１０重量％含まれるのがよく、二酸化炭素またはアルゴンを３体積％、または二酸化炭素とアルゴンとをともに２．５％ずつ含むのがよい。
【００９２】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、溶媒の全重量に対して１〜６０重量％の酢酸、溶媒の全重量に対して１〜１０重量％のエチルアルコール、溶媒の全重量に対して１〜１０重量％の酢酸エチル、溶媒の全重量に対して９７〜２０重量％の水を含むか、またはこれらのみからなる。抽出ガスは、二酸化炭素であって、使用する抽出溶媒１００体積部に対して、０．５〜５体積％含まれる。エチルアルコールが１０重量％、二酸化炭素が３体積％含まれるのがよい。
【００９３】
好ましい実施形態として、抽出溶媒は、溶媒の全重量に対して１〜１０重量％のエチルアルコール、溶媒の全重量に対して１〜１０重量％の酢酸エチル、溶媒の全重量に対して９８〜８０重量％の水を含むか、またはこれらのみからなる。抽出ガスは、二酸化炭素であって、使用する抽出溶媒１００体積部に対して、０．５〜５体積％含まれる。好ましくは、エチルアルコールが１０重量％、二酸化炭素が３体積％含まれるのがよい。
【００９４】
酢酸は、好ましくは１２％酢酸溶液がよい。エチルアルコールまたはエタノールは、好ましくは９６体積％の純エタノールがよく、これは、最大でおよそ０．０５８ｍｇ／ｌの不純物が含まれることが知られている。水は、２回蒸留する。
【００９５】
本願発明の抽出方法は、抽出温度２０〜９０℃で実施される。好ましくは、抽出温度は２５〜６５℃である。さらに好ましくは、抽出温度は４０〜６０℃である。
【００９６】
本願発明の抽出方法は、抽出時間１〜８時間で実施される。好ましくは、抽出時間１．５〜６時間である。さらに好ましくは、抽出時間３〜５時間である。
【００９７】
好ましい実施形態として、本願発明の抽出方法が実施される温度は２５〜６５℃、好ましくは３０〜５０℃であり、抽出時間は２〜６時間、好ましくは４〜５時間である。
【００９８】
本願発明の抽出方法は、平衡状態において、１〜５気圧で実施され、好ましくは１．５〜３気圧がよい。
【００９９】
驚くべきことに、本願発明の抽出方法により、以下に列挙する植物性基質から、実施条件によっては、大量の活性分子を高濃度で抽出することができる。
【０１００】
植物性基質（抽出基質）は、特に制限はなく、以下の実施例で説明するような天然樹脂、化石樹脂、種子、樹皮、葉、藻類、エッセンシャルオイル、野菜、果物を含むか、またはこれらのみからなる群から選択される。
【０１０１】
本願発明においては、天然樹脂とは、植物性原料からなる天然樹脂、植物性樹脂、または有機樹脂を意味する。植物性樹脂は、植物由来の混合物であって、脂溶性であり、揮発性および不揮発性のテルペン化合物および／またはフェノール類化合物を含む。
【０１０２】
好ましくは、本願発明の方法は、以下に列挙する基質を用いて実施するのが有効であり、基質は、例えば、樹皮、葉、種子、根の形態でも、樹脂でもよい。ミルラ、芳香（さまざまな灌木に秘められた含油樹脂に属するものをいう、例えばボスウェリアサクラ（Boswellia sacra））、ダクリオデス属（例えば、ダクリオデスベレメンシス（Dacryodes belemensis）、ブエトネリ（buettneri）、エデュリス（edulis）、エクセルサ（excelsa）、オシデンタリス（occidentalis）、オリビフェラ（olivifera）、ペルビアナ（peruviana）、プベセンス（pubescens））、ダマール（フタバガキ（Dipterocarpaceae）科の植物から得られる、主にサラノキ（Shorea）属、バラノカルプス（Balanocarpus）属またはホペア（Hopea）属の植物）、ベンゾイン（アンソクコウノキ（Styrax benzoin Dryander）またはシャムベンゾイン（Styrax benzoides Craib）、エゴノキ（Styracaceae）科。多心皮の芳香性の木または灌木）、ガラナ（ポーリニアクパナ（Paullinia cupana）、グリフォニア（グリフォニアシンプリシフォリア（Griffonia simplicifolia）、グリフォニアサリシフォリア（Griffonia salicifolia）、マンダリン、カンゾウ、ミント（アクイラリアマラクセンシス（Aquilaria malaccensis））、センナ（カッシアアングスチフォリア（Cassia angustifolia））、ジンジャー、ルバーブ、朝鮮人参、バクシニウム属（クランベリー、ブルーベリー、コケモモ）、ブラックベリー、キク（ナツシロギク（Tanacetum parthenium））、乳香（ボスウェリアカルテリ（Boswellia carterii））、ヤナギ（ヤナギ（Salix）属、ヤナギ（Salicaceae）科の植物）、こはく、プロポリス（ヨーロッパ産プロポリス、ブラジル産プロポリス、インド産プロポリス）、チャ、ヨモギ属（キク（Asteraceae）科に属する植物の属）、シナモン（シナモムンゼイラニクン（Cinnamomum zeylanicum）、シナモムンアロマチクン（Cinnamomum aromaticum））、アカシア（ネムノキ（Mimosaceae）科の植物の属）、カノコソウ（バレリアナオフィシナリス（Valeriana officinalis））。
【０１０３】
本願発明の抽出方法によって、テルペン、フラボノイド、アントシアン、カテキンを含む群から選択した、上述の植物性基質中に存在する分子を抽出することができる。本願発明において、テルペン（またはイソプレノイド）とは、複数のイソプレン構造単位からなる分子を意味し、直鎖状、環状、またはその両方となり得る。一般に、さまざまなテルペノイドを、テルペンという語で表す。
【０１０４】
（Ｃ５Ｈ８）からなるイソプレン構造単位の数に基づいて、以下のように区別できる。ヘミテルペン（単位数１、炭素数５）、モノテルペン（単位数２、炭素数１０）、セスキテルペン（単位数３、炭素数１５）、ジテルペン（単位数４、炭素数２０）、セステルペン（単位数５、炭素数２５）、トリテルペン（単位数６、炭素数３０）、テトラテルペン（単位数８、炭素数４０）。
【０１０５】
本願発明において、フラボノイド（またはバイオフラボノイド）は、ポリフェノール化合物を意味する。特に、下位に分類されるものとして、２−フェニル−クロメン−４−（２−フェニル−１，４−ベンゾピロン）から誘導されるフラボン、３−フェニル−クロメン−４−１（３−フェニル−１，４−ベンゾピロン）から誘導されるイソフラボン、４−フェニルクマリン（４−フェニル−１，２−ベンゾピロン）から誘導されるネオフラボンがある。
【０１０６】
本願発明において、アントシアン（またはアントシアニン）は、フラボノイド科に属する水溶性の植物性化合物の区分を意味する。アントシアニンは、対応するアグリコン（アントシアニジン）に由来し、または、グリコシド基の付加において異なる。自然界には、およそ２０のアグリコンが存在するが、誘導体の数はその１５〜２０倍多い程度である。最初のアグリコンは、自然界においてもっとも多く含まれるものとして、例えば、デルフェニジン、ペツニジン、シアニジン、アントシアニン、マルビジン、ペオニジン、トリセチニジン、アピゲニニジン、ペラルゴニジン、プロアントシアニンであり、これらの名前はそれが多く含まれる植物に由来する。
【０１０７】
本願発明において、カテキンは、広くは、フラバン−３−オール（カテキンとそのエピカテキン異性体）を含むポリフェノール化合物に属し、以下から選択される：エピガロカテキン−３−ガレイト（ＥＧＣＧ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキン−３−ガレイト（ＥＣＧ）、エピカテキン（ＥＣ）、ガロカテキン、カテキン。
【０１０８】
異なるエナンチオマーの混合物としては、（+/-）カテキンまたはＤＬ−カテキン、（+/-）−エピカテキンまたはＤＬ−エピカテキンである。エピガロカテキンとして、例えばエピガロカテキンガレイト（ＥＧＣＧ）も含まれる。
【０１０９】
本願発明は、植物性基質および／または天然樹脂および／またはエッセンシャルオイル（原材料）であって、粉状または粒状で粒子径が１０〜２００ミクロン、好ましくは２０〜１００ミクロン、さらに好ましくは４０〜８０ミクロンのものを、入口手段と出口手段、回転羽根などで撹拌する手段、加熱マントルなどで加熱する手段を備えたタンクのような容器に入れることを想定する。植物性基質および／または天然樹脂（原材料）が、抽出に適さない大きさや物理的な形状、例えば乾燥樹脂であるような場合には、植物性基質および／または天然樹脂は、機械的な粉砕や研削をして、抽出の目的に適した粒子径を有する粉状または粒状とされる。
【０１１０】
そして、上記の抽出用の容器にある天然樹脂には、前述の通り抽出溶媒と抽出ガスからなる抽出液と接するように配置する工程が行われる。活性分子の抽出は、温度、時間、圧力、ｐＨを、前述の通りに調整して行う。
【０１１１】
抽出溶媒と、植物性基質および／または天然樹脂との割合は、重量で１：１〜３０：１、好ましくは５：１〜２５：１、さらに好ましくは１０：１〜１５：１である。
【０１１２】
好ましくは、抽出溶媒は、植物性基質および／または天然樹脂に加えられ、続いて、抽出ガスが抽出溶媒に加えられる。例えば、ブローイングやバブリングによって抽出ガスを抽出溶媒に加えて、抽出液を得る。そして、抽出液が植物性基質および／または天然樹脂内を循環し始めると、前述の抽出時間で、抽出が起こる。
【０１１３】
抽出工程の間、抽出液は、ポンプ手段を利用して、例えば多層フィルターパックなどのろ過手段によりろ過して、装置の中で循環し続ける。
【０１１４】
そして、抽出ガス、抽出溶媒、植物性基質および／または天然樹脂から抽出された活性分子を含む抽出液は、回収タンクに集められる。この方法は、連続的にでも断続的にでも実施することができる。得られる抽出物は、液状か、または高粘度で高濃度の液状となり得る。
【０１１５】
本願発明の要旨は、前述の抽出方法で得られた液状の抽出物に関する。
【０１１６】
抽出物は、例えば液状であって、前述の活性分子を含むものは、使用した抽出液の種類に応じたｐＨ値を有している。一般的に、抽出物のｐＨは１〜７であるが、例えば１．５〜５．５であることもある。
【０１１７】
抽出液が、１以上の酸性基質を含む抽出溶媒からなる場合には、上述したように、液状抽出物のｐＨは７より低くなる。このような場合、抽出物は、炭酸マグネシウムと水酸化ナトリウムから選択したアルカリ性基質を用いて、中性になるように中和する。必要に応じて中和すると、液状抽出物のｐＨをおよそ７にすることができる。
【０１１８】
本願発明の液状抽出物からは、溶媒を蒸発させる工程、もしくは乾燥または凍結乾燥工程により、固体の抽出物（または高濃度／高粘度抽出物）、好ましくは粉状、粒状、凍結乾燥した抽出物を得ることができる。固体の抽出物は、食品組成物、サプリメント製品、自然志向の成分、または内服または外用の、好ましくは局部的なまたは経口用の投薬のための医薬製品の製造に利用できる。
【実施例】
【０１１９】
１）タブレット状の食品サプリメント
タブレット１つあたりの内容
−Noxamicina５０ｍｇ（プロポリスフラボノイド）プロポリスの水性アルコール溶液、２．５８％のバイオフラボノイドで滴定（タブレットあたり１．３ｍｇと等しい）、本願発明による抽出手段で得られたもの。
−反塊状剤：二酸化ケイ素とステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシ
ウム。
−香料：ストロベリー。
【０１２０】
２）タブレット状の食品サプリメント
タブレット１つあたりの内容
−Noxamicina５０ｍｇ（プロポリスフラボノイド）、本願発明による抽出手段で得られたもの。
−クランベリー抽出物９０ｍｇ、８０％プロアントシアニジンで滴定して、７２ｍｇと等しい、本願発明による抽出手段で得られたもの。
−反塊状剤：二酸化ケイ素とステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム。
−香料：ストロベリー。
【０１２１】
３）タブレット状の食品サプリメント
タブレット１つあたりの内容
−グリフォニア２５ｍｇ（グリフォニアシンプリシフォリア（Griffonia simplicifolia））半乾燥の抽出物（９９％５−ヒドロキシトリプトファンで滴定）、本願発明による抽出手段で得られたもの。
−メラトニン５ｍｇ。
−反塊状剤：二酸化ケイ素とステアリン酸マグネシウム。
【０１２２】
４）ドロップ状の食品サプリメント
−水と果糖。
−濃縮剤：植物性グリセリン。
−カノコソウ（バレリアナオフィシナリス（Valeriana officinalis））の根、乾燥抽出物（０．８％バレレニック（valerenic）酸、マルトデキストリン、で滴定、）、本願発明による抽出手段で得られたもの。
−メラトニン５ｍｇ（各４０滴）。
−クエン酸。
−ソルビン酸カリウム。
【０１２３】
本願発明の要旨は、本願発明の抽出方法を実施する装置にも関する（図１）。
【０１２４】
図１に、一定量の抽出溶媒を入れるタンク０１を含む、装置１を示す。溶媒を、撹拌手段０２を用いて、撹拌し続ける。抽出溶媒を、ポンプ０３と連結手段０４を用いて、タンク０１からタンク０５に流す。タンク０５には、加熱手段０６と撹拌手段０９が備わっている。
【０１２５】
抽出される基質は、タンク１１に導入され、目詰まりを避けるために撹拌手段１２を用いて撹拌状態が維持される。
【０１２６】
容器０５は、加熱手段０６で加熱される。ポンプ１０、２０が始動すると、抽出溶媒は、ポンプ１０を含む連結手段を通って、タンク０５からタンク１１へと循環し始める。タンク１１に入った抽出溶媒は、そこに入っている抽出基質と接触して、撹拌手段１２を用いて撹拌状態が維持される懸濁液を形成する。このとき、タンク０７に入っている抽出ガスが、パイプ０８を通って流入する。抽出ガスは二酸化炭素ＣＯ２（圧力１Ａｔｍ、温度２３℃）であり、前述した量を導入する。抽出ガスは、気体用の流量フィラー１０を用いて、タンク０５に入っている抽出溶媒に導入され、抽出液ができあがる。すべての抽出ガスが導入されると、流量フィラー１０は遮断され、該装置は温度、圧力において平衡状態となる。実際には、パイプの中にある空気が追い出され（ガス抜きされ）、抽出温度が均一で一定となるのを待つ。さらに、抽出が行われる圧力に調整する。該装置は、密封される。このとき、抽出工程が始まる。タンク１５は、濾過手段１４を含む連結手段１３を用いて、容器１１に連結される。さらに、タンク１５は、ポンプ２０と濾過手段２１を含む連結手段２２を用いて、タンク０５に連結される。タンク１５には、撹拌手段１６が備わっている。最後に、タンク１５は、ポンプ１７を含む連結手段１８を用いて、回収タンク１９に連結される。抽出液は、フィルター１４、２１で連続的に濾過される。タンク１５に入っている液体は、ポンプ１７によって回収タンク１９に移される。抽出物を濾過し、低圧で蒸発乾燥させると、濃縮ゲルが得られる。濾過ステーション２１は、孔径２００〜４００ミクロン、好ましくは２５０〜３００ミクロンの金属製のメッシュフィルター（ＲＥＰ）と、ポリプロピレンまたはポリエチレンの５ミクロンの濾過容量の繊維質フィルター２〜４個で構成される。例えば、フィルター１４は、１つかそれ以上の金属製フィルターで構成される。本願発明の抽出方法における特徴と利点は、以下の述べる詳細により、さらに明らかになる。実施例の説明における詳細は、本願発明の範囲を制限するものではない。番号は、抽出装置の図面にある番号を示す（図１）。
【０１２７】
例１−ミルラ
本願発明の抽出方法は、ミルラに含まれる活性分子を抽出するのに用いられる。抽出装置には、以下で構成される１５００ｍｌの抽出溶媒を入れる：酢酸（１２％水溶液）５８重量％、蒸留水４２重量％。溶媒：ミルラの割合は、重量で１５：１。１００ｇのミルラは細かい粉状にした（粒子の大きさ１００〜１２０ミクロン）。二酸化炭素は３０ｍｌ用いた（抽出溶媒の全量に対して、２体積％）。前述の量の抽出溶媒（１５００ｍｌ）は、タンク０１に導入され、撹拌手段０２を用いて１５分間、５０ｒｐｍで撹拌される。抽出溶媒は、ポンプ０３と連結手段０４を用いて、タンク０１からタンク０５に流される。タンク０５には、加熱手段０６と撹拌手段０９が備わっている。１００ｇのミルラを秤量して、粉状にし（粒子の大きさ４０〜１００ミクロン）、タンク１１に導入し、目詰まりしないように、撹拌手段１２を用いて撹拌される。容器０５は、加熱手段０６によって４５℃（＋／−０．５℃）にまで加熱される。ポンプ１０と２０が始動し、抽出溶媒は、ポンプ１０を含む連結手段を通って、タンク０５からタンク１１に循環する。タンク１１の中の抽出溶媒は、そこに入っている粉状のミルラと接触して、懸濁液を形成し、それは撹拌手段１２によって撹拌され続ける。ここで、タンク０７に入っている抽出ガスがパイプ０８を通って流入する。抽出ガスは二酸化炭素ＣＯ２（圧力１Ａｔｍ、温度２３℃）であり、抽出溶媒の体積に対して、２体積％の量、つまり３０ｍｌが導入される。抽出ガスは、気体用の流量フィラー１０を用いて、タンク０５に入っている抽出溶媒に導入されて、抽出液となる。抽出ガスがすべて導入されると、流量フィラー１０は遮断され、該装置は温度、圧力において平衡状態となる。実際には、パイプ中にある空気が追い出され（ガス抜きされ）、抽出温度が一定となるのを待つ。さらに、抽出が行われる圧力に調整する。該装置は、密封状態で作動する。ここで、抽出工程が始まる。抽出工程は、４５℃で５時間続く。タンク１５は、フィルター手段１４を含む連結手段１３を用いて、容器１１に連結される。さらに、タンク１５は、ポンプ２０とフィルター手段２１を含む連結手段２２を用いて、タンク０５に連結される。タンク１５は、撹拌手段１６を備える。最後に、タンク１５は、ポンプ１７を含む連結手段１８を用いて、回収タンク１９に連結される。抽出液は、フィルター１４と２１を通って連続的に濾過される。５時間が経過すると、タンク１５の液はポンプ１７によって回収タンク１９に運ばれる。抽出物を濾過し、低圧で蒸発乾燥させると、濃縮ゲルが得られる。抽出液（液体抽出物）または濃縮ゲルは、ＧＣ／ＭＳガスクロマトグラフィ（mass gas chromatography mass）による定性分析、ヒューレットパッカード製ＨＰ６８９０と、ヒューレットパッカード製ＨＰＬＣ Ａｇｉｌｅｎｔ １１００を用いてＧＣ／ＦＩＤによる定量分析を行った（表１）。表１からは、５１種の活性分子がミルラから抽出されたことがわかる。回収された抽出物は、最初に１００ｇあったミルラの抽出基質の全重量に対して、１０５，０００ｐｐｍであり、これは、１００ｇのミルラに対して１０．５％に相当する。
【０１２８】
例２−香料
本願発明の抽出方法は、香料に含まれる活性分子の抽出に用いられる。例２は、前述の例１と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。抽出装置には、以下で構成される１５００ｍｌの抽出溶媒を入れる：酢酸（１２％水溶液）５８重量％；９９％エタノール２０重量％、蒸留水２２重量％。溶媒：香料の割合は、重量で１５：１。１００ｇの香料は細かい粉状にした（粒子の大きさ１００〜１２０ミクロン）。二酸化炭素は、３０ｍｌ（抽出溶媒に全量に対して、２体積％）を用いた。表２からは、香料から４６種の活性分子が抽出されたことがわかる。回収された抽出物は、最初に１００ｇあった香料の抽出基質の全重量に対して、１２５，０００ｐｐｍであり、これは、１００ｇの香料に対して１２．５％に相当する。
【０１２９】
例３−ナツシロギク
本願発明の抽出方法は、ナツシロギク（以下、ＴＰと略す）に含まれる活性分子の抽出に用いられる。例３は、前述の例１と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。抽出装置には、以下で構成される１５００ｍｌの抽出溶媒を入れる：酢酸（１２％水溶液）４０重量％、蒸留水６０重量％。溶媒：ＴＰの割合は、重量で１５：１。１００ｇのＴＰは細かい粉状にした（粒子の大きさ１００〜１２０ミクロン）。二酸化炭素は、４５ｍｌ（抽出溶媒の全量に対して、３体積％）を用いた。表３からは、ＴＰから４９種の活性分子が抽出されたことがわかる。回収された抽出物は、最初に１００ｇあったＴＰの抽出基質の全重量に対して、８５，０００ｐｐｍであり、これは、１００ｇのＴＰに対して８．５％に相当する。
【０１３０】
例４−クランベリー
本願発明の抽出方法は、クランベリーに含まれる活性分子の抽出に用いられる。例４は、前述の例１と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。抽出装置には、以下で構成される１５００ｍｌの抽出溶媒を入れる：酢酸（１２％水溶液）４０重量％、蒸留水６０重量％。溶媒：クランベリーの割合は、重量で１５：１。１００ｇのクランベリーは細かい粉状にした（粒子の大きさ８０〜１００ミクロン）。二酸化炭素は、４５ｍｌ（抽出溶媒の全量に対して、３体積％）を用いた。表４からは、クランベリーから４３種の活性分子が抽出されたことがわかる。回収された抽出物は、最初に１００ｇあったクランベリーの抽出基質の全重量に対して、２７０，０００ｐｐｍであり、これは、１００ｇのクランベリーに対して２７％に相当する。
【０１３１】
例５−プロポリス
本願発明の抽出方法は、プロポリスに含まれる活性分子の抽出に用いられる。例５は、前述の例１と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。抽出装置には、以下で構成される１５００ｍｌの抽出溶媒を入れる：酢酸（１２％水溶液）４０重量％、蒸留水６０重量％。溶媒：プロポリスの割合は、重量で１５：１。１００ｇのプロポリスは細かい粉状にした（粒子の大きさ８０〜１２０ミクロン）。
【０１３２】
二酸化炭素は、４５ｍｌ（抽出溶媒の全量に対して、３体積％）を用いた。表５からは、プロポリスから４４種の活性分子が抽出されたことがわかる。回収された抽出物は、最初に１００ｇあったプロポリスの抽出基質の全重量に対して、１２５，０００ｐｐｍであり、これは、１００ｇのプロポリスに対して１２．５％に相当する。
【０１３３】
出願人は、上述の本願発明の抽出方法を用いて、二酸化炭素を使用する場合と使用しない場合の、例１（ミルラ）と例２（香料）を実施した。二酸化炭素を用いた本願発明の抽出方法の結果は、顕著に高い抽出率となったが、２３℃、１気圧で二酸化炭素を用いない本願発明の抽出方法は、以下に示す値となった。
【０１３４】
0005986579.tif 000002
【０１３５】
欧州特許１６４１９０３Ｂ１に記載された方法によって抽出された活性分子の数と、本願発明の抽出方法によって抽出された活性分子の数の比較を以下に示す。
【０１３６】
0005986579.tif 000003
【０１３７】
さらに、欧州特許１６４１９０３Ｂ１に記載された方法と比較すると、本願発明の方法は、４０００ダルトンまでの分子量を有する分子を抽出することができるのに対し、従来法では６５０ダルトンまでにすぎない。
【０１３８】
本願発明の方法で得られた抽出物は、波長５５００〜７５００Åのルビーレーザー光を有する光散乱分析を行った。このレーザー光はチンダル現象を起こさないことが分かった。このことから、抽出“溶液”において、抽出された分子は、遊離して、孤立していることがわかった。つまり、これらの抽出された分子は、分子動力学が良好であり、脂質媒体中または細胞の境界において高い拡散性を示すことから、生物学的に非常に活動的であることがわかった。
【０１３９】
本願発明の方法により抽出された分子は、遊離した状態（分子凝集体の状態ではない）で抽出され、例えば、粘着性の成分、でんぷん質成分、糖類、タンパク質のような天然樹脂などの植物性基質中に存在する高分子成分を含まない。
【０１４０】
例６クランベリー−比較実験
本願発明の抽出方法は、クランベリーに含まれる活性分子の抽出に用いられる。例６は、前述の例４と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。
【０１４１】
溶媒（Ｓ１〜Ｓ４）の組成：
−Ｓ１：酢酸８０％、水２０％、５％二酸化炭素（ＡＡ＋ＣＯ２）
−Ｓ２：酢酸８０％、水２０％、２．５％二酸化炭素、２．５％アルゴン（ＡＡ＋ＣＯ２＋Ａｒ２）
−Ｓ３：酢酸８０％、水２０％、５％アルゴン（ＡＡ＋Ａｒ２）
−Ｓ４：エタノール８０％、水２０％、二酸化炭素５％（ＥｔＯＨ＋ＣＯ２）
抽出パラメータ：Ｔ４０℃、抽出時間６０分、連続的に濾過。
【０１４２】
例７ナツシロギク−比較実験
本願発明の抽出方法は、ナツシロギクに含まれる活性分子の抽出に用いられる。例７は、前述の例３と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。
【０１４３】
溶媒の組成：
−Ｓ１：酢酸８０％、水２０％、５％二酸化炭素（ＡＡ＋ＣＯ２）
−Ｓ２：酢酸８０％、水２０％、２．５％二酸化炭素、２．５％アルゴン（ＡＡ＋ＣＯ２＋Ａｒ２）
−Ｓ３：酢酸８０％、水２０％、５％アルゴン（ＡＡ＋Ａｒ２）
−Ｓ４：エタノール８０％、水２０％、二酸化炭素５％（ＥｔＯＨ＋ＣＯ２）
抽出パラメータ：Ｔ４５℃、抽出時間６０分、連続的に濾過。
【０１４４】
例８香料−比較実験
本願発明の抽出方法は、香料に含まれる活性分子の抽出に用いられる。例８は、前述の例２と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。
【０１４５】
溶媒の組成：
−Ｓ１：酢酸８０％、水２０％、５％二酸化炭素（ＡＡ＋ＣＯ２）
−Ｓ２：酢酸８０％、水２０％、２．５％二酸化炭素、２．５％アルゴン（ＡＡ＋ＣＯ２＋Ａｒ２）
−Ｓ３：酢酸８０％、水２０％、５％アルゴン（ＡＡ＋Ａｒ２）
−Ｓ４：エタノール８０％、水２０％、二酸化炭素５％（ＥｔＯＨ＋ＣＯ２）
抽出パラメータ：Ｔ７０℃、抽出時間６０分、連続的に濾過。
【０１４６】
例９ミルラ−比較実験
本願発明の抽出方法は、香料に含まれる活性分子の抽出に用いられる。例９は、前述の例１と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。
【０１４７】
溶媒の組成：
−Ｓ１：酢酸８０％、水２０％、５％二酸化炭素（ＡＡ＋ＣＯ２）
−Ｓ２：酢酸８０％、水２０％、２．５％二酸化炭素、２．５％アルゴン（ＡＡ＋ＣＯ２＋Ａｒ２）
−Ｓ３：酢酸８０％、水２０％、５％アルゴン（ＡＡ＋Ａｒ２）
−Ｓ４：エタノール８０％、水２０％、二酸化炭素５％（ＥｔＯＨ＋ＣＯ２）
抽出パラメータ：Ｔ７０℃、抽出時間６０分、連続的に濾過。
【０１４８】
例１０プロポリス−比較試験
本願発明の抽出方法は、香料に含まれる活性分子の抽出に用いられる。実施例１０は、前述の実施例５と同じ操作工程で行われるが、以下において異なる。
【０１４９】
溶媒の組成：
−Ｓ１：酢酸８０％、水２０％、５％二酸化炭素（ＡＡ＋ＣＯ２）
−Ｓ２：酢酸８０％、水２０％、２．５％二酸化炭素、２．５％アルゴン（ＡＡ＋ＣＯ２＋Ａｒ２）
−Ｓ３：酢酸８０％、水２０％、５％アルゴン（ＡＡ＋Ａｒ２）
−Ｓ４：エタノール８０％、水２０％、二酸化炭素５％（ＥｔＯＨ＋ＣＯ２）
抽出パラメータ：Ｔ４０℃、抽出時間１２０分、連続的に濾過。
【０１５０】
表１／１０
0005986579.tif 000004
【０１５１】
表２／１０
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【０１５２】
表３／１０
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【０１５３】
表４／１０
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【０１５４】
表５／１０
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【０１５５】
表６／１０
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【０１５６】
表７／１０
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【０１５７】
表８／１０
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【０１５８】
表９／１０
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【０１５９】
表１０／１０
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【図１】
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