(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）
【化９１】
0005957077.tif 000096
［式中、
Ｒ１は、Ｒ２又はＲ２−ＮＨＣ（Ｏ）−であり、
Ｒ２は、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換されたフェニルであり、
或いは
Ｒ２は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリールであるか、又はＲ２は、１個若しくは２個のＮを有する６員ヘテロアリールであり、
前記５及び６員ヘテロアリール環は、ハロ、オキソ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
或いは
Ｒ２は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から選択される３個若しくは４個のヘテロ原子を有する８〜１０員二環式ヘテロアリールであり、
前記８〜１０員二環式ヘテロアリールは、
（ａ）ハロ、
（ｂ）オキソ、
（ｃ）ＯＨ、
（ｄ）ＣＮ、
（ｅ）ＮＯ２、
（ｆ）１つのヒドロキシ若しくは１つのＣ１〜６アルコキシで場合によって置換されたＣ１〜６アルキル、
（ｇ）Ｃ１〜６アルコキシ、
（ｈ）Ｃ１〜６ハロアルキル、
（ｉ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、
（ｊ）ＣＯＯＲａ、
（ｋ）ＮＲａＲｂ、
（ｌ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ、及び
（ｍ）Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ
からなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換されたフェニルであり、
或いは
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって場合によって置換されたインダン−１−オンを形成し、前記インダン−１−オンは、スピロ炭素４を介して式（Ｉ）のピペリジン環に結合し、ハロ及びＣ１〜６アルコキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
Ｒａは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
ｎは、１又は２である］の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
以下の式
【化９２】
0005957077.tif 000097
を有する請求項１に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項３】
Ｒ３がＨである、請求項１若しくは２に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
Ｒ４が場合によって置換されたフェニルである、請求項１から３のいずれか１項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項５】
Ｒ４が置換フェニルである、請求項４に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項６】
Ｒ４がハロ、Ｃ１〜６アルキル及びＣ１〜６アルコキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されたフェニルである、請求項５に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項７】
Ｒ３及びＲ４がそれらが結合している原子と一緒になって場合によって置換されたインダン−１−オンを形成する、請求項１若しくは２に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項８】
ｎが１である、請求項１から７のいずれか１項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項９】
ｎが２である、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１０】
Ｒ１がＲ２である、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１１】
Ｒ２が場合によって置換されたフェニルである、請求項１から１０のいずれか１項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１２】
Ｒ２が場合によって置換された５若しくは６員ヘテロアリールである、請求項１から１０のいずれか１項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１３】
Ｒ２が場合によって置換された８〜１０員二環式ヘテロアリールである、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１４】
Ｒ２が
【化９３】
0005957077.tif 000098
［式中、（ａ）〜（ｌ）のそれぞれは、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換される］である、請求項１から１０のいずれか１項に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１５】
２−クロロ−６−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−ベンゾニトリル；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−クロロ−５−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）ベンゾニトリル；
６−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−１−メチル−１，３ａ，５，７ａ−テトラヒドロ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−４ａ，７ａ−ジヒドロ−３Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−６−メチル−４ａ，７ａ−ジヒドロ−３Ｈ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−クロロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｓ）−２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
２−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−［（Ｓ）−４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−［（Ｒ）−４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−６，７−ジヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−６−メチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
６−エチル−２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−５−メチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−５，６−ジメチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）シクロヘプタ［ｄ］イミダゾール−４（３Ｈ）−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン；
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン；
Ｎ−（５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド；
Ｎ−（５，６−ジヒドロ−チアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−アセトアミド；
Ｎ−（５，６−ジヒドロ−チアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−アセトアミド；
Ｎ−（［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル）アセトアミド；
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）アセトアミド；
Ｎ−（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド；若しくは
Ｎ−イソオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−３−イル−２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−アセトアミドである、請求項１に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１６】
以下の式
【化９４】
0005957077.tif 000099
を有する２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オンである化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１７】
以下の式
【化９５】
0005957077.tif 000100
を有する２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オンである化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１８】
以下の式
【化９６】
0005957077.tif 000101
を有する２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オンである化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１９】
請求項１から１８のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項２０】
有効量の請求項１から１８のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩を含む、癌の治療のための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な４−ピペリジニル化合物、それらを含む医薬組成物、並びにタンキラーゼ阻害剤としての、また、癌を含むが、これに限定されないＷｎｔシグナル伝達並びにタンキラーゼ１及び２シグナル伝達関連障害の治療におけるそのような化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
進化的に保存されたカノニカルＷｎｔ／βカテニンシグナル伝達カスケードは、後生動物の発生の多くの側面を制御する。該経路の状況依存的な活性化は、胚細胞の運命決定、幹細胞の調節及び組織の恒常性に関与する（Clevers H.、Cell、2006年、127巻、469〜80頁）。
【０００３】
Ｗｎｔ／βカテニン経路の重要な特徴は、βカテニン分解複合体による下流エフェクターβカテニンの制御されたタンパク質分解である。βカテニン分解複合体の主要な構成要素は、大腸腺腫性ポリープ（ＡＰＣ）、アキシン及びＧＳＫ３α／βである。Ｗｎｔ経路の活性化が存在しない場合、細胞質ゾルβカテニンが構成的にリン酸化され、分解の標的となる。Ｗｎｔ刺激により、βカテニン分解複合体が解離し、これが核βカテニンの蓄積及びＷｎｔ経路応答性遺伝子の転写をもたらす。
【０００４】
βカテニン分解複合体の構成要素に影響を及ぼし、ひいてはβカテニンの安定化をもたらすＷｎｔタンパク質の過剰発現又は突然変異によって媒介された、該経路の不適切な活性化は、多くの癌において観測された。特に、癌抑制ＡＰＣの短縮型突然変異が直腸結腸癌における最も一般的な遺伝子変異である（Miyaki M.ら、Cancer Res、1994年、54巻、3011〜20頁、Miyoshi Y.ら、Hum Mol Genet、1992年、1巻、229〜33頁及びPowell S. M.ら、Nature、1992年、359巻、235〜7頁）。さらに、アキシン１及びアキシン２突然変異がそれぞれ肝細胞癌及び直腸結腸癌を有する患者において確認された（Taniguchi K.ら、Oncogene、2002年、21巻、4863〜71頁、Liu W.ら、Nat Genet、2000年、146〜7頁、Lammi L.ら、Am J Hum Genet、2004年、74巻、1043〜50頁）。これらの体細胞突然変異は、βカテニンのＷｎｔ非依存性安定化及びβカテニン媒介性転写の構成的活性化をもたらす。
【０００５】
脱調節Ｗｎｔ経路の活性は、結腸直腸、黒色腫、乳、肝、肺及び胃癌を含む多くの他の癌にも関連付けられた（Polakis P.、Curr Opin Genet Dev、2007年、17巻、45〜51頁及びBarker N.ら、Nat Rev Drug Discov、2006年、5巻、997〜1014頁）。異常なＷｎｔシグナル伝達に関連する他の障害は、骨粗鬆症、変形性関節炎、多発性嚢胞腎疾患、肺線維症、糖尿病、統合失調症、血管疾患、心疾患、非発癌性増殖性疾患及びアルツハイマー病などの神経変性疾患などである。
【０００６】
多タンパク質βカテニン分解複合体の効率的なアセンブリは、その主要な構成要素の定常状態レベルに依存する。アキシンは、βカテニン分解複合体の効率の調節における濃度制限因子であることが報告され（Salic A.ら、Mol Cell、2000年、5巻、523〜32頁及びLee E.ら、PLoS Biol、2003年、1巻、E10頁）、アキシンの発現の増大は、短縮型ＡＰＣを発現する細胞系におけるβカテニンの分解を促進し得る（Behrens J.ら、Science、1998年、280巻、596〜9頁、Kishida M.ら、Oncogene、1999年、18巻、979〜85頁及びHart M. J.ら、Curr Biol、1998年、8巻、573〜81頁）。したがって、適切なＷｎｔ経路シグナル伝達を保証するためにアキシンタンパク質レベルを厳密に調節する必要があることは、あり得ることである。
【０００７】
ＷＯ２００９／０５９９９４及びHuangら（Huang S. M.ら、Nature、2009年、461巻、614〜620頁）に説明されているように、ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）酵素タンキラーゼ１及びタンキラーゼ２の阻害によりアキシンを安定化させることによってβカテニンの分解を促進することができることが最近見いだされた。いずれのタンキラーゼのアイソフォームも、アキシンの高度に保存されたドメインと相互作用し、ユビキチン−プロテアソーム経路を介してその分解を刺激する。それによってβカテニンの分解を促進するアキシンタンパク質を安定化するこの以前には未知であったメカニズムは、Ｗｎｔシグナル伝達関連障害を治療するために活用することができる。アキシンタンパク質は、髄鞘再生のための脳希突起神経膠細胞前駆細胞分化（Fancy S.ら、Nature Neuro Sci、2011年、14巻、1009〜1017頁）及び肺線維症時の上皮間葉転換（Ulsamer A.ら、J Bio Chem、2012年、287巻、5164〜5172頁）を含む多様な生理的過程の必須の調節因子である。したがって、アキシンタンパク質を安定化することにより、タンキラーゼ阻害剤は、脳損傷後の髄鞘再生及び肺線維症に対する療法として用いることができる可能性がある。
【０００８】
タンキラーゼは、二本鎖テロメア反復結合タンパク質であるＴＲＦ１（Smith S.ら、Science、1998年、282年、1484〜1487頁）、紡錘体形成における必須タンパク質であるＮｕＭＡ（Chang W.ら、Biochem J、2005年、391巻、177〜184頁）、インスリンに反応したグルコース取込みに関与する膜内在性タンパク質であるＩＲＡＰ（Chi N. W.ら、J Biol Chem、2000年、275巻、38437〜38444頁）及びアポトーシス促進タンパク質であるＭｃｌ−１（Bae J.ら、J Biol Chem、2003年、278巻、5195〜5204頁）を含むいくつかの結合タンパク質パートナーを有する。
【０００９】
その様々な相互作用タンパク質により、タンキラーゼタンパク質は、種々の生物学的機能に関連付けられた。タンキラーゼは、ＴＲＦ１をポリＡＤＰ−リボシル化し、それをテロメアから遊離させ、テロメラーゼへのテロメアのアクセスを促進する。このように、タンキラーゼは、テロメラーゼによるテロメアの伸長の正の調節因子として作用する。これは、タンキラーゼの長期過剰発現がテロメアの伸長をもたらすという知見により裏付けられている（Cook B. D.ら、Mol Cell Biol、2002年、22巻、332〜242頁）。テロメラーゼによるテロメアの維持は、癌細胞の無制限増殖に帰せられた（Hahn W. C.ら、Nat Med、1999年、5巻、1164〜1169頁）。テロメラーゼに対するテロメアのアクセスしやすさを抑制することによって、タンキラーゼを癌療法の標的とし得る。タンキラーゼ阻害は、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、肺及び乳癌を含む広範囲に及ぶ癌を有する患者を治療するための有効な癌療法として用いることができると思われる。
【００１０】
タンキラーゼはまた、１）有糸分裂時にＮｕＭＡをポリＡＤＰ−リボシル化し、紡錘体極においてその機能を調節する（Chang W.ら、Biochem J、2005年、391巻、177〜184頁）ことによって、２）紡錘体の形成及び構造を調節する（Chang P.ら、Nature、2004年、432巻、645〜649頁）ことによって、且つ３）テロメアにおける姉妹染色分体の分割を維持する（Dynek J.ら、Science、2004年、304巻、97〜100頁）ことによって細胞有糸分裂における役割を果たす。タンキラーゼの阻害は、細胞の有糸分裂停止又は老化をもたらし、したがって、癌などの異常な有糸分裂を有する疾患を治療するために利用することができると思われる。例としては、乳腺、肺、卵巣、白血病、リンパ腫及び黒色腫などがある。さらに、タンキラーゼ１は、過剰中心体を有する癌細胞が多極性有糸分裂を抑制し、双極性有糸分裂を可能にするために用いる機構である、中心体クラスタリングに必要な遺伝子として同定された（Kwon M.ら、Genes Dev、2008年、22巻、2189〜2203頁）。したがって、タンキラーゼの阻害は、固形及び血液癌の両方を含む、例として、乳腺、膀胱、肺、大腸及び白血病を含む、中心体増幅を有する癌を治療するために利用することができると思われる。
【００１１】
さらに、タンキラーゼの細胞局在化の１つは、タンキラーゼがＩＲＡＰと会合している場合にグルコース輸送体ＧＬＵＴ４小胞と共局在化するゴルジ装置におけるものであり、タンキラーゼは、脂肪細胞におけるＧＬＵＴ４輸送の調節に関与する（Chi N. W.ら、J Biol Chem、2000年、275巻、38437〜38444頁）。タンキラーゼ欠乏マウスは、脂肪酸酸化とインスリン刺激性グルコース利用の両方の増加による脂肪過多症の低減及びエネルギー消費の増大を示す（Yeh T.ら、Diabetes、2009年）。これは、哺乳動物におけるエネルギー恒常性へのタンキラーゼの関与を裏付けるものであり、タンキラーゼの阻害を肥満などの代謝性疾患を治療するのに利用することができる。
【００１２】
タンキラーゼは、単純疱疹ウイルス（ＨＳＶ）により標的にされ、過剰リン酸化、核輸送及びプロテアソーム分解によりＨＳＶにより調節される宿主タンパク質であると報告された（Li Z.ら、J of Virol、2012年、86巻、492〜503頁）。より重要なことに、効率的なＨＳＶウイルス複製にはタンキラーゼタンパク質の酵素活性を必要とする。阻害剤ＸＡＶ９３９によるタンキラーゼ活性の阻害（ＷＯ２００９／０５９９９４、Huang S. M.ら、Nature、2009年、461巻、614〜620頁）は、ＨＳＶウイルスタンパク質の発現を抑制し、ウイルスの増殖を低下させた。したがって、タンキラーゼの阻害をＨＳＶ感染の治療を含むが、これに限定されない抗ウイルス療法として利用することができる。
【００１３】
したがって、タンキラーゼ（ＴＮＫＳ）及び／又はＷｎｔシグナル伝達を阻害する化合物は、そのような阻害によって媒介される疾患の治療に有用であり得る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、式（Ｉ）
【００１５】
【化１】
0005957077.tif 000002
［式中、Ｒ１〜Ｒ４及びｎは、本明細書で定義する］の化合物を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物及び組合せ並びにタンキラーゼ阻害剤としての、また癌を含むが、これに限定されないＷｎｔシグナル伝達並びにタンキラーゼ１及び２シグナル伝達関連疾患の治療におけるそのような化合物の使用を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、式（Ｉ）
【００１７】
【化２】
0005957077.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、Ｒ２又はＲ２−ＮＨＣ（Ｏ）−であり、
Ｒ２は、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換されたフェニルであり、
或いは
Ｒ２は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリールであるか、又はＲ２は、１個若しくは２個のＮを有する６員ヘテロアリールであり、
前記５及び６員ヘテロアリール環は、ハロ、オキソ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
或いは
Ｒ２は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から選択され１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員二環式ヘテロアリールであり、
前記８〜１０員ヘテロアリールは、
（ａ）ハロ、
（ｂ）オキソ、
（ｃ）ＯＨ、
（ｄ）ＣＮ、
（ｅ）ＮＯ２、
（ｆ）１つのヒドロキシ若しくは１つのＣ１〜６アルコキシで場合によって置換されたＣ１〜６アルキル、
（ｇ）Ｃ１〜６アルコキシ、
（ｈ）Ｃ１〜６ハロアルキル、
（ｉ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、
（ｊ）ＣＯＯＲａ、
（ｋ）ＮＲａＲｂ、
（ｌ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ、及び
（ｍ）Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ
からなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換されたフェニルであり、
或いは
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって場合によって置換されたインダン−１−オンを形成し、前記インダン−１−オンは、スピロ炭素４を介して式（Ｉ）のピペリジン環に結合し、ハロ及びＣ１〜６アルコキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
Ｒａは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
ｎは、１又は２である］の化合物を提供する。
【００１８】
本明細書で用いている「アルキル」という用語は、最大６個の炭素原子を有する完全に飽和した分枝又は非分枝炭化水素部分を意味する。別段の記載がない限り、アルキルは、１〜６個の炭素原子を有する炭化水素部分を意味する。アルキル基は、定義される１つ又は複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。アルキルの代表的な例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル及びｎ−ヘキシルを含むが、これに限定されない。
【００１９】
本明細書で用いている「アルコキシ」という用語は、酸素橋を介して結合しているアルキル部分（すなわち、アルキルが本明細書で定義されている−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル）を意味する。一般的に、アルコキシ基は、１〜６個の炭素原子を有する。アルコキシの代表的な例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、２−プロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシを含むが、これに限定されない。
【００２０】
本明細書で用いている「シクロアルキル」という用語は、４〜７員単環式飽和炭化水素環系を意味する。シクロアルキル基は、本明細書で定義した１つ又は複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。シクロアルキルは、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルを含む。
【００２１】
本明細書で用いている「シクロアルケニル」という用語は、５〜７員単環式の不飽和であるが、芳香族でない炭化水素環系を意味する。シクロアルケニル基は、本明細書で定義した１つ又は複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。シクロアルケニルは、シクロペンテニル、シクロヘキセニル及びシクロヘプテニルを含む。
【００２２】
本明細書で用いている「ハロ」という用語は、フッ素、臭素、塩素又はヨウ素、特に、フッ素又は塩素を意味する。ハロゲンにより置換されたアルキル（ハロアルキル）などの、ハロゲン置換基及び部分は、モノ、ポリ又はペルハロゲン化され得る。
【００２３】
本明細書で用いている「ハロアルキル」という用語は、本明細書で定義した１つ又は複数のハロ基により置換されている、本明細書で定義したアルキルを意味する。ハロアルキルは、モノハロアルキル、ジハロアルキル又はペルハロアルキルを含むポリハロアルキルであり得る。モノハロアルキルは、アルキル基内に１つのヨード、ブロモ、クロロ又はフルオロを有し得る。ジハロアルキル及びポリハロアルキル基は、アルキル内に２つ以上の同じハロ原子又は異なるハロ基の組合せを有し得る。一般的に、ポリハロアルキルは、最大１２、又は１０、又は８、又は６、又は４、又は３、又は２ハロ基を含む。ハロアルキルの非限定的な例は、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、クロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル、ジフルオロクロロメチル、ジクロロフルオロメチル、ジフルオロエチル、ジフルオロプロピル、ジクロロエチル及びジクロロプロピルを含む。ペルハロアルキルは、すべての水素原子がハロ原子で置換されたアルキルを意味する。
【００２４】
本明細書で用いている「ヘテロ原子」という用語は、窒素（Ｎ）、酸素（Ｏ）又は硫黄（Ｓ）原子、特に窒素又は酸素を意味する。
【００２５】
本明細書で用いている「ヘテロアリール」という用語は、特段の記載のない限り、１〜４個のヘテロ原子を有する５又は６員単環式芳香族環系を意味する。代表的な５又は６員ヘテロアリール基は、２−又は３−チエニル、２−又は３−フリル、２−又は３−ピロリル、２−、４−又は５−イミダゾリル、３−、４−又は５−ピラゾリル、２−、４−又は５−チアゾリル、３−、４−又は５−イソチアゾリル、２−、４−又は５−オキサゾリル、３−、４−又は５−イソオキサゾリル、３−又は５−１，２，４−トリアゾリル、４−又は５−１，２，３−トリアゾリル、フラザニル、チアジアゾリル、テトラゾリル、２，３−又は４−ピリジル、３−又は４−ピリダジニル、３−、４−又は５−ピラジニル、２−ピラジニル及び２−、４−又は５−ピリミジニルを含む。
【００２６】
ヘテロアリールはまた、特段の記載のない限り、１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員二環式芳香族環系を意味する。ヘテロアリールはまた、ヘテロ芳香族環が１つのフェニル、シクロアルキル、シクロアルケニル又はヘテロシクリル環と縮合し、ラジカル又は結合点がヘテロ芳香族環上にある、８〜１０員環系を意味する。非限定的な例は、１−、２−、３−、５−、６−、７−又は８−インドリジニル、１−、３−、４−、５−、６−又は７−イソインドリル、２−、３−、４−、５−、６−又は７−インドリル、２−、３−、４−、５−、６−又は７−インダゾリル、２−、４−、５−、６−、７−又は８−プリニル、１−、２−、３−、４−、６−、７−、８−又は９−キノリジニル、２−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−キノリイル、１−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−イソキノリイル、１−、４−、５−、６−、７−又は８−フタラジニル、２−、３−、４−、５−又は６−ナフチリジニル、２−、３−、５−、６−、７−又は８−キナゾリニル、３−、４−、５−、６−、７−又は８−シンノリニル、２−、４−、６−又は７−プテリジニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−４ａＨカルバゾリル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−カルブザオリル、１−、３−、４−、５−、６−、７−、８−又は９−カルボリニル、１−、２−、３−、４−、６−、７−、８−、９−又は１０−フェナントリジニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、７−、８−又は９−アクリジニル、１−、２−、４−、５−、６−、７−、８−又は９−ペリミジニル、２−、３−、４−、５−、６−、８−、９−又は１０−フェナトロリニル、１−、２−、３−、４−、６−、７−、８−又は９−フェナジニル、１−、２−、３−、４−、６−、７−、８−、９−又は１０−フェノチアジニル、１−、２−、３−、４−、６−、７−、８−、９−又は１０−フェノキサジニル、２−、３−、４−、５−、６−又はｌ−、３−、４−、５−、６−、７−、８−、９−又は１０−ベンゾイソキノリニル、２−、３−、４−又はチエノ［２，３−ｂ］フラニル、２−、３−、５−、６−、７−、８−、９−、１０−又は１１−７Ｈ−ピラジノ［２，３−ｃ］カルバゾリル、２−、３−、５−、６−又は７−２Ｈ−フロ［３，２−ｂ］−ピラニル、２−、３−、４−、５−、７−又は８−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］−ｏ−オキサジニル、１−、３−又は５−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］−オキサゾリル、２−、４−又は５４Ｈ−イミダゾ［４，５−ｄ］チアゾリル、３−、５−又は８−ピラジノ［２，３−ｄ］ピリダジニル、２−、３−、５−又は６−イミダゾ［２，１−ｂ］チアゾリル、１−、３−、６−、７−、８−又は９−フロ［３，４−ｃ］シンノリニル、１−、２−、３−、４−、５−、６−、８−、９−、１０又は１１−４Ｈ−ピリド［２，３−ｃ］カルバゾリル、２−、３−、６−又は７−イミダゾ［１，２−ｂ］［１，２，４］トリアジニル、７−ベンゾ［ｂ］チエニル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンゾオキサゾリル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンゾイミダゾリル、２−、４−、４−、５−、６−又は７−ベンゾチアゾリル、１−、２−、４−、５−、６−、７−、８−又は９−ベンゾオキサピニル、２−、４−、５−、６−、７−又は８−ベンゾオキサジニル、１−、２−、３−、５−、６−、７−、８−、９−、１０−又は１１−１Ｈ−ピロロ［１，２−ｂ］［２］ベンゾアザピニルを含む。代表的な縮合ヘテロアリール基は、２−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−キノリニル、１−、３−、４−、５−、６−、７−又は８−イソキノリニル、２−、３−、４−、５−、６−又は７−インドリル、２−、３−、４−、５−、６−又は７−ベンゾ［ｂ］チエニル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンゾオキサゾリル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンズイミダゾリル、２−、４−、５−、６−又は７−ベンゾチアゾリル、シクロヘプタ［ｄ］イミダゾリル、７，８−ジヒドロ−５Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジニル、１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジニル、チエノ［３，２−ｄ］ピリミジニル、６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタピリミジニル、５，６−ジヒドロ−チアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾリル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジニル、７，８−ジヒドロ−５Ｈ−ピラノ［３，４−ｄ］ピリダジニル及びイソオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジニルを含むが、これらに限定されない。
【００２７】
複数のヘテロ原子を含むヘテロアリール基は、特段の記載のない限り、異なるヘテロ原子を含み得る。ヘテロアリール基は、本明細書で定義される１つ又は複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。
【００２８】
本明細書で用いている「ヘテロシクリル」という用語は、１〜４個のヘテロ原子を含む４〜７員単環式飽和又は不飽和環を意味する。ヘテロシクリル環は、芳香族ではない。複数のヘテロ原子を含むヘテロシクリルは、異なるヘテロ原子を含み得る。ヘテロシクリル基は、本明細書で定義した１つ又は複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。ヘテロシクリルの例は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジヒドロフラン、１，４−ジオキサン、モルホリン、１，４−ジチアン、ピペラジン、ピペリジン、１，３−ジオキソラン、イミダゾリジン、イミダゾリン、ピロリン、ピロリジン、テトラヒドロピラン、ジヒドロピラン、オキサチオラン、ジチオラン、１，３−ジオキサン、１，３−ジチアン、オキサチアン、チオモルホリンなどを含む。
【００２９】
アルキル、ヘテロアリール又はフェニルなどの任意の基又は部分を、「からなる群からそれぞれ独立に選択される１つ、１つ若しくは２つ、又は１つから３つの置換基で場合によって置換される」と本明細書で定義する場合、基又は部分が非置換であるか、或いは１つ、１つ若しくは２つ、又は１つから３つの置換基で置換され、各置換基が置換基の列挙された群から独立に選択されると理解される。
【００３０】
当業者は、式（Ｉ）による化合物の薬学的に許容される塩を含む塩を調製することができることを十分に理解する。これらの塩は、化合物の最終的な単離及び精製時にｉｎ  ｓｉｔｕで、又はその遊離酸若しくは遊離塩基の形の精製化合物を適切な塩基若しくは酸とそれぞれ別個に反応させることにより調製することができる。
【００３１】
薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸及び有機酸を用いて生成させることができ、例えば、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、臭素酸／臭化水素酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、カンファースルホン酸塩、塩素酸塩／塩化水素酸塩、クロルテオフィリン酸塩、クエン酸塩、エタンジスルホン酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、馬尿酸塩、ヨウ化水素酸／ヨウ素酸塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフトエ酸塩、ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オクタデカン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸／リン酸水素／リン酸二水素塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、スルホサリチル酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩及びトリフルオロ酢酸塩などである。
【００３２】
塩を得ることができる無機酸は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを含む。
【００３３】
塩を得ることができる有機酸は、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルホサリチル酸などを含む。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機及び有機塩基を用いて生成させることができる。
【００３４】
塩を得ることができる無機塩基は、例えば、アンモニウム塩及び周期表のＩ〜ＸＩＩ列の金属を含む。ある特定の実施形態において、塩は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、銀、亜鉛及び銅から得られ、特に適切な塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム及びマグネシウム塩を含む。
【００３５】
塩を得ることができる有機塩基は、例えば、第一級、第二級及び第三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、塩基性イオン交換樹脂などを含む。ある特定の有機アミンは、イソプロピルアミン、ベンザチン、コリネート、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、リシン、メグルミン、ピペラジン及びトロメタミンを含む。
【００３６】
本発明の薬学的に許容される塩は、慣用の化学的方法により塩基性又は酸性部分から合成することができる。一般的に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸形を化学量論量の適切な塩基（Ｎａ、Ｃａ、Ｍｇ若しくはＫ水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩など）と反応させることにより、又はこれらの化合物の遊離塩基形を化学量論量の適切な酸と反応させることにより調製することができる。そのような反応は、一般的に水中又は有機溶媒中又は２つの混合物中で行わせる。一般的に、実施可能な場合、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリルのような非水媒体の使用が望ましい。さらなる適切な塩の一覧は、例えば、「Remington’s Pharmaceutical Sciences」、第20版、Mack Publishing Company、Easton、Pa. (1985年)並びにStahl及びWermuth (Wiley-VCH、Weinheim、Germany、2002年)による「Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use」に見いだすことができる。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される溶媒和物を含む溶媒和物も調製することができる。「溶媒和物」は、溶質と溶媒により形成される可変化学量論の複合体を意味する。本発明の目的のためのそのような溶媒は、溶質の生物学的活性を妨げる可能性がない。適切な溶媒の例は、水、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ及びＡｃＯＨを含むが、これらに限定されない。水が溶媒分子である溶媒和物は、一般的に水和物と呼ばれる。水和物は、化学量論量の水を含む組成物並びに可変量の水を含む組成物を含む。
【００３８】
本明細書で用いている「薬学的に許容される」という用語は、薬学的使用に適する化合物を意味する。医薬に使用するのに適する本発明の化合物の塩及び溶媒和物（例えば、水和物及び塩の水和物）は、対イオン又は結合溶媒が薬学的に許容されるものである。しかし、薬学的に許容されない対イオン又は結合溶媒を有する塩及び溶媒和物は、例えば、本発明の他の化合物並びにそれらの薬学的に許容される塩及び溶媒和物の調製における中間体としての使用については、本発明の範囲内にある。
【００３９】
その塩及び溶媒和物を含む、式（Ｉ）の化合物は、結晶形、非結晶形又はそれらの混合物の形で存在し得る。化合物又はそれらの塩若しくは溶媒和物は、多形性、すなわち、異なる結晶形で存在する能力も示し得る。これらの異なる結晶形は、一般的に「多形体」として公知である。多形体は、同じ化学組成を有するが、充填、幾何学的配置及び結晶性固体状態の他の記述的特性が異なっている。したがって、多形体は、形状、密度、硬度、変形能、安定性及び溶解特性などの異なる物理的特性を有し得る。多形体は、一般的に異なる融点、ＩＲスペクトル及びＸ線粉末回折パターンを示すものであり、それらのすべてを同定のために用いることができる。当業者は、例えば、式（Ｉ）の化合物を結晶化／再結晶化する際に用いる条件を変更又は調整することによって異なる多形体を生成させることができることを十分に理解する。
【００４０】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の様々な異性体を含む。「異性体」は、同じ組成及び分子量を有するが、物理的及び／又は化学的特性が異なっている化合物を意味する。構成の差異は、構造（幾何異性体）又は偏光面を回転させる能力（立体異性体）にあり得る。立体異性体に関しては、式（Ｉ）の化合物は、１つ又は複数の不斉炭素原子を有する可能性があり、ラセミ体、ラセミ混合物として及び個別の鏡像異性体又はジアステレオ異性体として存在する可能性がある。それらの混合物を含む、そのようなすべての異性体形態は、本発明の範囲内に含まれる。化合物が二重結合を含む場合、置換基は、Ｅ又はＺ配置であり得る。化合物が二置換シクロアルキルを含む場合、シクロアルキル置換基は、シス又はトランス配置を有し得る。すべての互変異性体も含まれるものとする。
【００４１】
式（Ｉ）の化合物の不斉原子（例えば、炭素など）はいずれも、ラセミ又は鏡像異性体的に富化された、例えば、（Ｒ）−、（Ｓ）−又は（Ｒ，Ｓ）−配置で存在し得る。ある特定の実施形態において、各不斉原子は、（Ｒ）−又は（Ｓ）−配置において少なくとも５０％の鏡像体過剰率、少なくとも６０％の鏡像体過剰率、少なくとも７０％の鏡像体過剰率、少なくとも８０％の鏡像体過剰率、少なくとも９０％の鏡像体過剰率、少なくとも９５％の鏡像体過剰率又は少なくとも９９％の鏡像体過剰率を有する。不飽和二重結合を有する原子における置換基は、可能な場合、シス−（Ｚ）又はトランス−（Ｅ）体で存在し得る。
【００４２】
したがって、本明細書で用いている式（Ｉ）の化合物は、可能な異性体、回転異性体、アトロプ異性体、互変異性体又はそれらの混合物の１つの形態で、例えば、実質的に純粋な幾何（シス又はトランス）異性体、ジアステレオ異性体、光学異性体（対掌体）、ラセミ体又はそれらの混合物として存在し得る。
【００４３】
異性体の得られる混合物はいずれも、成分の物理化学的差に基づいて、例えば、クロマトグラフィー及び／又は分別晶出により、純粋又は実質的に純粋な幾何又は光学異性体、ジアステレオ異性体、ラセミ体に分離することができる。
【００４４】
最終生成物又は中間体の得られるラセミ体はいずれも、公知の方法により、例えば、光学的に活性な酸又は塩基を用いて得られたそのジアステレオ異性体塩の分離により光学的対掌体に分割し、光学的に活性な酸性又は塩基性化合物を遊離させることができる。特に、塩基性部分は、例えば、光学的に活性な酸、例えば、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジアセチル酒石酸、ジ−Ｏ，Ｏ’−ｐ−トルオイル酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸又はカンファー−１０−スルホン酸を用いて生成させた塩の分別晶出によって本発明の化合物をそれらの光学的対掌体に分割するためにこのように用いることができる。ラセミ生成物もキラルクロマトグラフィー、例えば、キラル吸着剤を用いた高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分割することができる。
【００４５】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の非標識体並びに同位体標識体を含む。同位体標識化合物は、１つ又は複数の原子が選択される原子質量又は質量数を有する原子により置換されていることを除いて、本明細書に示した式により表現される構造を有する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例は、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素及び塩素の同位体を含む。本発明は、本明細書で定義する様々な同位体標識化合物、例えば、３Ｈ及び１４Ｃなどの放射性同位体がその中に又は２Ｈ及び１３Ｃなどの非放射性同位体がその中に存在するものを含む。そのような同位体標識化合物は、代謝研究（１４Ｃを用いる）、反応速度論研究（例えば、２Ｈ又は３Ｈを用いる）、薬物若しくは基質組織分布アッセイを含む陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）若しくは単光子放射コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）などの検出若しくは撮像技術、又は患者の放射線治療に有用である。特に、１８Ｆ又は標識化合物はＰＥＴ又はＳＰＥＣＴ研究のために特に望ましい可能性がある。式（Ｉ）の同位体標識化合物は、一般的に当業者に公知の従来の技術により、又は以前に用いられた非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を用いて添付の実施例及び調製の項で述べるものと同様の方法により調製することができる。
【００４６】
さらに、より重い同位体、特に重水素（すなわち、２Ｈ又はＤ）による置換は、より大きい代謝安定性に起因するある特定の治療上の利点、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の延長又は必要用量の低減又は治療指数の改善をもたらし得る。この状況における重水素は、式（Ｉ）の化合物の置換基とみなされることが理解される。そのようなより重い同位体、特に重水素の濃度は、同位体濃縮係数により定義することができる。「同位体濃縮係数」という用語は、本明細書で用いているように同位体の存在率と指定の同位体の自然存在率との比を意味する。本発明の化合物における置換基が重水素を意味する場合、そのような化合物は、少なくとも３５００（各指定の重水素原子における５２．５％の重水素組込み）、少なくとも４０００（６０％の重水素組込み）、少なくとも４５００（６７．５％の重水素の組込み）、少なくとも５０００（７５％の重水素の組込み）、少なくとも５５００（８２．５％の重水素の組込み）、少なくとも６０００（９０％の重水素の組込み）、少なくとも６３３３．３（９５％の重水素の組込み）、少なくとも６４６６．７（９７％の重水素の組込み）、少なくとも６６００（９９％の重水素の組込み）又は少なくとも６６３３．３（９９．５％の重水素の組込み）の各指定の重水素原子についての同位体濃縮係数を有する。
【００４７】
代表的な実施形態
本発明の様々な実施形態を本明細書で述べる。各実施形態について明記する特徴を他の明記する特徴と組み合わせて、さらなる実施形態を得ることができることは、認識されよう。
【００４８】
本発明の１つの実施形態は、以下の式（ＩＩ）による化合物である。
【００４９】
【化３】
0005957077.tif 000004
【００５０】
本発明の他の実施形態において、Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、場合によって置換されたフェニルである。適切には、Ｒ４は、ハロ、Ｃ１〜６アルキル及びＣ１〜６アルコキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されたフェニルである。より適切には、Ｒ４は、フルオロ、クロロ、メチル及びメトキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基により場合によって置換されたフェニルである。特に、Ｒ４は、４−メトキシフェニル、４−クロロフェニル、４−フルオロフェニル又は４−メトキシ−３−メチルフェニルである。
【００５１】
他の実施形態において、Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって場合によって置換されたインダン−１−オンを形成する。適切には、インダン−１−オンは、１つのＣ１〜６アルコキシ、例えば、メトキシで場合によって置換される。
【００５２】
他の実施形態において、ｎは１である。他の実施形態において、ｎは２である。適切には、ｎは１である。
【００５３】
他の実施形態において、Ｒ１は、Ｒ２である。適切には、Ｒ２は、場合によって置換されたフェニルである。より適切には、Ｒ２は、ハロ、例えば、クロロ及びシアノからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換されたフェニルである。特に、Ｒ２は、２−クロロベンゾニトリルである。
【００５４】
他の実施形態において、Ｒ２は、場合によって置換された５又は６員ヘテロアリールである。適切には、Ｒ２は、場合によって置換されたピリミジニル又はテトラゾリルである。
【００５５】
他の実施形態において、Ｒ２は、場合によって置換された８〜１０員二環式ヘテロアリールである。
【００５６】
他の実施形態において、Ｒ２は
【００５７】
【化４】
0005957077.tif 000005
［式中、（ａ）〜（ｌ）のそれぞれは、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換される］である。適切には、Ｒ２は、ハロ、ＣＮ及びＣ１〜６アルキルからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換された（ａ）〜（ｌ）である。より適切には、Ｒ２は、クロロ、ブロモ、ＣＮ、メチル及びエチルからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換された（ａ）〜（ｌ）である。適切には、Ｒ２は、場合によって置換された（ｂ）、（ｇ）又は（ｈ）である。より適切には、Ｒ２は、（ｂ）、（ｇ）又は（ｈ）である。
【００５８】
本発明の特定の化合物は、以下を含む。
２−クロロ−６−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−ベンゾニトリル；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−クロロ−５−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）ベンゾニトリル；
６−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−１−メチル−１，３ａ，５，７ａ−テトラヒドロ−ピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−４ａ，７ａ−ジヒドロ−３Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−６−メチル−４ａ，７ａ−ジヒドロ−３Ｈ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−クロロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｓ）−２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
（Ｒ）−２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
２−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−［（Ｓ）−４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−［（Ｒ）−４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン；
２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−６，７−ジヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−６−メチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
６−エチル−２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−５−メチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−５，６−ジメチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン；
２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）シクロヘプタ［ｄ］イミダゾール−４（３Ｈ）−オン；
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン；
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン；
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン；
Ｎ−（５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド；
Ｎ−（５，６−ジヒドロ−チアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−アセトアミド；
Ｎ−（５，６−ジヒドロ−チアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−アセトアミド；
Ｎ−（［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド；
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）アセトアミド；
Ｎ−（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド；及び
Ｎ−イソオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−３−イル−２−｛３−［４−（４−メトキシ−ベンゾイル）−ピペリジン−１−イル］−２−オキソ−ピロリジン−１−イル｝−アセトアミド。
【００５９】
実施形態の列挙
実施形態１．以下の式（Ｉ）
【００６０】
【化５】
0005957077.tif 000006
［式中、
Ｒ１は、Ｒ２又はＲ２−ＮＨＣ（Ｏ）−であり、
Ｒ２は、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換されたフェニルであり、
或いは
Ｒ２は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子を有する５員ヘテロアリールであるか、又はＲ２は、１個若しくは２個のＮを有する６員ヘテロアリールであり、
前記５及び６員ヘテロアリール環は、ハロ、オキソ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
或いは
Ｒ２は、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から選択される３個若しくは４個のヘテロ原子を有する８〜１０員二環式ヘテロアリールであり、
前記８〜１０員ヘテロアリールは、
（ａ）ハロ、
（ｂ）オキソ、
（ｃ）ＯＨ、
（ｄ）ＣＮ、
（ｅ）ＮＯ２、
（ｆ）１つのヒドロキシ若しくは１つのＣ１〜６アルコキシで場合によって置換されたＣ１〜６アルキル、
（ｇ）Ｃ１〜６アルコキシ、
（ｈ）Ｃ１〜６ハロアルキル、
（ｉ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、
（ｊ）ＣＯＯＲａ、
（ｋ）ＮＲａＲｂ、
（ｌ）ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ、及び
（ｍ）Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ
からなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
Ｒ３は、Ｈであり、Ｒ４は、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換されたフェニルであり、
或いは
Ｒ３及びＲ４は、それらが結合している原子と一緒になって場合によって置換されたインダン−１−オンを形成し、前記インダン−１−オンは、スピロ炭素４を介して式（Ｉ）のピペリジン環に結合し、ハロ及びＣ１〜６アルコキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１〜３つの置換基で場合によって置換され、
Ｒａは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒｂは、Ｈ又はＣ１〜６アルキルであり、
ｎは、１又は２である］の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態２．以下の式
【００６１】
【化６】
0005957077.tif 000007
を有する実施形態１に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態３．Ｒ３がＨである、実施形態１若しくは２に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態４．Ｒ４が場合によって置換されたフェニルである、実施形態１から３のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態５．Ｒ４が置換フェニルである、実施形態４に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態６．Ｒ４がハロ、Ｃ１〜６アルキル及びＣ１〜６アルコキシからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基により置換されたフェニルである、実施形態５に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態７．Ｒ３及びＲ４がそれらが結合している原子と一緒になって場合によって置換されたインダン−１−オンを形成する、実施形態１若しくは２に記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態８．ｎが１である、実施形態１から７のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態９．ｎが２である、実施形態１から７のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態１０．Ｒ１がＲ２である、実施形態１から９のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態１１．Ｒ２が場合によって置換されたフェニルである、実施形態１から１０のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態１２．Ｒ２が場合によって置換された５若しくは６員ヘテロアリールである、実施形態１から１０のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態１３．Ｒ２が場合によって置換された８〜１０員二環式ヘテロアリールである、実施形態１から１０のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
実施形態１４．Ｒ２が
【００６２】
【化７】
0005957077.tif 000008
［式中、（ａ）〜（ｌ）のそれぞれは、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルコキシ、Ｃ１〜６ハロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒａ、ＣＯＯＲａ、ＮＲａＲｂ、ＮＨＣ（Ｏ）Ｒａ及びＣ（Ｏ）ＮＲａＲｂからなる群からそれぞれ独立に選択される１つ又は２つの置換基で場合によって置換される］である、実施形態１から１０のいずれか一つに記載の化合物、又は薬学的に許容されるその塩。
【００６３】
一般的合成手順
本発明の化合物は、標準的化学を含む様々な方法により調製することができる。実例となる一般的な合成方法を下文に示し、調製された本発明の特定の化合物を実施例で示す。
【００６４】
式（Ｉ）の化合物は、以下の合成スキームにより一部分示すような有機合成の技術分野で公知の方法により調製することができる。下記のスキームにおいて、一般的原理又は化学に従って必要な場合、感受性又は反応性基の保護基が用いられることは、十分に理解される。保護基は、有機合成の標準的方法により取り扱われる（T. W. Greene及びP. G. M. Wuts、「Protective Groups in Organic Synthesis」、第3版、Wiley、New York、1999年）。これらの基は、当業者に容易に明らかである方法を用いて化合物の合成の好都合な段階で除去される。選択方法並びに反応条件及びそれらの遂行の順序は、式（Ｉ）の化合物の調製と調和するものとする。
【００６５】
当業者は、式（Ｉ）の化合物に立体中心が存在するかどうかを認識する。したがって、本発明は、両方の可能な立体異性体を含み、ラセミ化合物だけでなく、個別の鏡像異性体も含む。化合物を単一鏡像異性体として望む場合、立体特異的合成又は最終生成物若しくは任意の好都合な中間体の分割により得ることができる。最終生成物、中間体又は出発物質の分割は、当技術分野で公知の適切な方法により達成することができる。例えば、E. L. Eliel、S. H. Wilen及びL. N. Manderによる「Stereochemistry of Organic Compounds」（Wiley-interscience、1994年）を参照のこと。
【００６６】
本明細書で述べる化合物は、市販の出発物質から調製或いは公知の有機、無機及び／又は酵素法を用いて合成することができる。
【００６７】
【化８】
0005957077.tif 000009
【００６８】
スキーム１に示すように、１は、一連の適切な温度にわたるアセトニトリル、ＴＨＦ又はＤＭＦなどの適切な溶媒中での水素化ナトリウム又はＫＨＭＤＳなどの適切な塩基の存在下でのハロゲン化アルキル２又はアルキルスルホン酸エステルなどのアルキル化剤によるラクタムの処理を含む、様々な方法により達成することができる３のラクタム部分のアルキル化により調製することができる。
【００６９】
【化９】
0005957077.tif 000010
【００７０】
ハロゲン化アルキル２は、市販されており、又はスキーム２に示すように作製することができる。メタノールなどの適切な溶媒中でのトリエチルアミンなどの適切な塩基の存在下での２−クロロメチルアセトアミドによるβ−ケトエステル４の処理を含む、クロロメチルピリミジノン５を作製するいくつかの方法が存在する。
【００７１】
【化１０】
0005957077.tif 000011
【００７２】
３の合成は、スキーム３に示すような適切に置換された５及び６員ラクタム６の生成を含む様々な方法により達成することができる。アセトニトリル若しくはＤＭＦなどの適切な溶媒中又はアセトニトリル及びトルエンなどの溶媒混合物中の置換ピペリジン７などの適切な求核試薬によるクロロ、ブロモ又はメシレートなどの３位における脱離基の置換は、一連の温度及び反応持続時間にわたって達成することができる。
【００７３】
【化１１】
0005957077.tif 000012
【００７４】
７の合成は、スキーム４に示すようにワインレブケトン合成により達成することができる。このスキームにおいて、ワインレブアミド８をＲ４−Ｂｒの存在下でグリニャール試薬又はｎ−ブチルリチウムなどの有機金属試薬で処理して、ケトン９を生成させる。９のｔｅｒｔ−ブチル保護基をジクロロメタン中トリフルオロ酢酸の添加により除去して、第二級アミン７を得る。
【００７５】
【化１２】
0005957077.tif 000013
【００７６】
７の合成は、スキーム５に示すようにチオエステルボロン酸クロスカップリング反応によっても達成することができる。チオエステル１１は、ＨＡＴＵ、ＤＩＥＡ及びＤＭＦの存在下での適切なアリールチオールによる１０の処理により得られる。ジメトキシエタン（ＤＭＥ）中トリス（２−フリル）ホスフィン及び銅（Ｉ）チオフェン−２−カルボキシレートの存在下でのＰｄ２（ｄｂａ）３などのパラジウム金属触媒の存在下で適切なボロン酸の添加により、１１をケトン１２に変換する。９のｔｅｒｔ−ブチル保護基をジクロロメタン中トリフルオロ酢酸の添加により除去して、第二級アミン７を得る。
【００７７】
【化１３】
0005957077.tif 000014
【００７８】
置換スピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１（３Ｈ）−オンの形成は、下記の方法を含む様々な方法により達成することができる。ビス（２−ブロモエチル）カルバミン酸エチルエステルなどの適切なビス（２−ブロモエチル）カルバミン酸アルキルエステルは、−４０℃〜４０℃の温度でＮａＯＨなどの塩基の存在下で水などの適切な溶媒中のクロロギ酸エチルなどのクロロギ酸アルキルなどのカルバモイル化剤との反応によるカルバミン酸エチルなどのカルバミン酸エステルなどの適切な保護基によるビス（２−ブロモエチル）アミンの保護により合成することができる。保護スピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１（３Ｈ）−オンの形成は、０℃〜１００℃の温度でＤモレキュラーフォーミュラ（Dmolecular formula）などの極性溶媒中で置換インダノンなどの適切なケトンを水素化ナトリウムなどの強塩基と反応させることによって達成することができる。ピペリジニル窒素の脱保護は、０℃〜１００℃の温度で６Ｎ  ＨＣｌなどの強酸又は塩基による処理などの様々な方法により達成することができる。
【００７９】
【化１４】
0005957077.tif 000015
【００８０】
（２−［３−（４−ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イルメチル］−３Ｈ−ピリミジン−４−オン類似体２９の合成は、ピリミジノン環を形成するためのアミジン中間体の使用に依拠する経路を含む様々な方法により達成することができる。２−（３−ブロモ−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトニトリル２６などのラクタムアセトニトリル中間体の合成は、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中でトリエチルアミンなどのアミン塩基などの適切な塩基の存在下でアミノアセトニトリル２５を塩化２，４−ジブロモブタノイル２４などの適切な求電子試薬と反応させることを含む様々な方法により達成することができる。アリールピペリジン−４−イルメタノン類似体７などのピペリジン部分の導入は、アセトニトリルなどの適切な溶媒中でのトリエチルアミンなどのアミン塩基などの適切な塩基の存在下での臭化物などの適切な脱離基の置換などの様々な方法により達成することができる。得られたニトリル２７のアミジン２８への変換は、メタノールなどの適切な溶媒中でのナトリウムメトキシドなどのアルコキシド塩基及び塩化アンモニウムなどのアンモニウム源による処理を含む様々な方法により達成することができる。ピリミジノン部分２９の形成は、エタノールなどの適切な溶媒中でナトリウムエトキシドなどのアルコキシド塩基などの適切な塩基の存在下でアミジン２８を２−オキソシクロペンタンカルボン酸メチルなどの適切に置換されたβ−ケトエステル４と反応させることを含む様々な方法により達成することができる。
【００８１】
【化１５】
0005957077.tif 000016
【００８２】
Ｎ−複素環−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド類似体３６の合成は、複素環式アセトアミドを形成するためのカルボン酸中間体の使用に依拠する経路を含む様々な方法により達成することができる。２−（２，４−ジブロモブタンアミド）酢酸エチル中間体３１の合成は、ジクロロメタン及び水などの適切な溶媒混合物中で２−アミノ酢酸エチル塩酸塩３０を塩化２，４−ジブロモブタノイル２４などの適切な求電子試薬と反応させることにより達成することができる。２−（３−ブロモ−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸エチル３２への環化は、ベンゼンなどの適切な溶媒中での水素化ナトリウムなどの適切な塩基との反応により達成することができる。（４−メトキシフェニル）（ピペリジン−４−イル）メタノンなどのピペリジン部分の導入は、アセトニトリルなどの適切な溶媒中でのトリエチルアミンなどのアミン塩基などの適切な塩基の存在下での臭化物などの適切な脱離基の置換などの様々な方法により達成することができる。得られたカルボン酸エステル３４のカルボン酸３５への変換は、エタノール及び水などの適切な溶媒配合物中の水酸化ナトリウムなどの無機塩基による処理を含む様々な方法により達成することができる。複素環式アセトアミド３６の形成は、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中でＨＡＴＵなどの適切なカップリング試薬及びジイソプロピルエチルアミンなどの適切なアミン塩基の存在下で２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸３５を適切な複素環式アミンと反応させることを含む様々な方法により達成することができる。
【００８３】
組成物
他の態様において、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、経口投与、非経口投与及び直腸投与などの特定の投与経路用に処方することができる。さらに、本発明の医薬組成物は、固体形態（制限なしにカプセル剤、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤若しくは坐剤を含む）に又は液体形態（制限なしに水剤、懸濁剤若しくは乳剤を含む）に調合することができる。医薬組成物は、滅菌などの慣用の製薬工程にかけることができ、且つ／又は慣用の不活性希釈剤、滑沢剤若しくは緩衝化剤並びに保存剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤及び緩衝剤などの佐剤を含んでいてよい。
【００８４】
一般的に、該医薬組成物は、有効成分並びに以下のものを含む錠剤又はゼラチンカプセル剤である。
ａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース及び／又はグリシン；
ｂ）滑沢剤、例えば、シリカ、タルカム、ステアリン酸、そのマグネシウム若しくはカルシウム塩及び／又はポリエチレングリコール；また錠剤用に
ｃ）結合剤、例えば、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム及び／又はポリビニルピロリドン；所望の場合
ｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸若しくはそのナトリウム塩、又は発泡混合物；及び／又は
ｅ）吸収剤、着色剤、着香料及び甘味料。
錠剤は、当技術分野で公知の方法によりフィルムコーティング又は腸溶コーティングを施すことができる。
【００８５】
経口投与用の適切な組成物は、錠剤、トローチ剤、水性若しくは油性懸濁剤、分散性散剤若しくは顆粒剤、乳剤、硬若しくは軟カプセル剤、又はシロップ剤若しくはエリキシル剤の形態の有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を含む。経口用に意図された組成物は、医薬組成物の製造の技術分野で公知の任意の方法により調製され、薬学的に洗練され、味の良い製剤になるようにするために甘味料、着香料、着色剤及び保存剤からなる群から選択される１つ又は複数の作用剤を含み得る。錠剤は、錠剤の製造に適する薬学的に許容される非毒性賦形剤と混合された有効成分を含み得る。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤、造粒及び崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン又はアルギン酸、結合剤、例えば、デンプン、ゼラチン又はアラビアゴム並びに滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクである。錠剤は、被覆されていないか、又は消化管における崩壊及び吸収を遅らせ、それにより、より長期にわたり持続する作用をもたらすために公知の技術により被覆されている。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどの遅延材（time delay material）を用いることができる。経口用製剤は、有効成分が不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリンと混合されている硬ゼラチンカプセル剤として、或いは有効成分が水又は油媒体、例えば、落花生油、流動パラフィン若しくはオリーブ油と混合されている軟ゼラチンカプセル剤として提供することができる。
【００８６】
ある特定の注射用組成物は、水性の等張性溶液又は懸濁液であり、坐剤は、脂肪性乳濁液又は懸濁液から有利に調製される。前記組成物は、滅菌することができ、且つ／又は保存、安定化、湿潤若しくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調整するための塩及び／若しくは緩衝剤などの佐剤を含んでいてもよい。さらに、それらは、他の治療上有用な物質も含んでいてもよい。前記組成物は、それぞれ、慣用の混合、造粒又はコーティング法により調製され、約０．１〜７５％又は１〜５０％の有効成分を含む。
【００８７】
本発明はさらに、水がある特定の化合物の分解を促進する可能性があるので、本発明の化合物を有効成分として含む無水医薬組成物及び剤形を提供する。
【００８８】
本発明の無水医薬組成物及び剤形は、無水又は低水分含有成分及び低水分又は低湿度条件を用いて調製することができる。無水医薬組成物は、その無水性が維持されるように調製し、保存することができる。したがって、無水組成物は、適切な製剤キット（formulary kits）に含めることができるように水への曝露を防ぐことが公知の材料を用いて包装される。適切な包装の例は、密封フォイル、プラスチック、単位用量容器（例えば、バイアル）、ブリスターパック及びストリップパックを含むが、これらに限定されない。
【００８９】
本発明はさらに、有効成分としての本発明の化合物が分解する速度を低下させる１つ又は複数の作用剤を含む医薬組成物及び剤形を提供する。本明細書で「安定化剤」と呼ぶ、そのような作用剤は、アスコルビン酸などの抗酸化剤、ｐＨ緩衝剤又は塩緩衝剤などを含むが、これらに限定されない。
【００９０】
本発明の医薬組成物又は組合せは、約５０〜７０ｋｇの対象に対する約１〜１０００ｍｇの有効成分（単数又は複数）、又は約１〜５００ｍｇ又は約１〜２５０ｍｇ又は約１〜１５０ｍｇ又は約０．５〜１００ｍｇ又は約１〜５０ｍｇの有効成分の単位用量であり得る。化合物、医薬組成物又はその組合せの治療上有効量は、対象の種、体重、年齢及び個々の状態、障害若しくは疾患又は治療されるそれらの重症度に依存する。通常の技量の医師、臨床医又は獣医は、障害又は疾患を予防、治療又はその進行を抑制するのに必要な有効成分のそれぞれの有効量を容易に決定することができる。
【００９１】
使用の方法
式（Ｉ）の化合物は、タンキラーゼ阻害剤であり、したがって、Ｗｎｔシグナル伝達関連障害並びにタンキラーゼ１及び２（ＴＮＫＳ／ＴＮＫＳ２）シグナル伝達関連障害を含む、タンキラーゼにより媒介される疾患の治療に有用であり得る。
【００９２】
Ｗｎｔシグナル伝達関連障害は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する癌（例えば、直腸結腸癌、悪性髄芽腫及び他の原発性ＣＮＳ悪性神経外胚葉腫瘍、横紋筋肉腫、肺癌、特に小細胞肺癌、食道、胃、膵臓及び胆管系の癌を含むが、これらに限定されない腸由来腫瘍、前立腺及び膀胱癌並びに肝臓癌）；増殖性皮膚障害（例えば、乾癬、皮膚炎）などの他の非発癌性増殖性疾患；骨粗鬆症；変形性関節症；線維症；統合失調症；血管疾患；心疾患；アルツハイマー病などの神経変性疾患；脳及び／又は脊髄損傷後の再ミエリン化を含む再ミエリン化；並びに肺線維症を含むが、これらに限定されない異常なＷｎｔシグナル伝達に関連する疾患及び状態を含む。Ｗｎｔシグナル伝達の異常な上方制御は、癌、変形性関節症及び多発性嚢胞腎疾患に関連するが、Ｗｎｔシグナル伝達の異常な下方制御は、骨粗鬆症、肥満及び神経変性疾患に関連付けられた。
【００９３】
タンキラーゼシグナル伝達関連障害は、癌（例えば、白血病、リンパ腫、黒色腫、多発性骨髄腫、肺、卵巣及び乳癌）、代謝性疾患及びウイルス感染（例えば、単純疱疹ウイルス感染）を含むが、これらに限定されない、異常なタンキラーゼ１及び２シグナル伝達に関連する疾患及び状態を含む。
【００９４】
本発明の化合物の「治療上有効量」という用語は、対象の生物学的又は医学的反応、例えば、酵素若しくはタンパク質活性の低下若しくは阻害を引き起こす、又は症状を改善する、状態を軽減する、疾患の進行を遅くする若しくは遅延させる、又は疾患を予防する等の式（Ｉ）の化合物の量を意味する。１つの非限定的な実施形態において、「治療上有効量」という用語は、対象に投与した場合に、（１）（ｉ）タンキラーゼにより媒介される、若しくは（ｉｉ）タンキラーゼ活性に関連する、若しくは（ｉｉｉ）タンキラーゼの活性（正常若しくは異常）によって特徴付けられる状態若しくは障害若しくは疾患を少なくとも部分的に軽減し、抑制し、予防し、且つ／又は改善する、或いは（２）タンキラーゼの活性を低下若しくは阻害する又は（３）タンキラーゼの発現を低下若しくは抑制するのに有効である式（Ｉ）の化合物の量を意味する。他の非限定的な実施形態において、「治療上有効量」という用語は、細胞、若しくは組織、若しくは非細胞性生体物質、若しくは培地に投与した場合に、タンキラーゼの活性を少なくとも部分的に低下若しくは阻害する、又はタンキラーゼの発現を少なくとも部分的に低下若しくは抑制するのに有効である式（Ｉ）の化合物の量を意味する。
【００９５】
本明細書で用いている「対象」という用語は、動物を意味する。一般的に、動物は、哺乳動物である。対象は、例えば、霊長類（例えば、ヒト、男性又は女性）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚、鳥なども意味する。ある特定の実施形態において、対象は、霊長類である。さらに他の実施形態において、対象は、ヒトである。
【００９６】
本明細書で用いている「阻害する」、「阻害」又は「阻害すること」という用語は、所定の状態、症状若しくは障害若しくは疾患の低減若しくは抑制、又は生物学的活性若しくは過程のベースライン活性の有意な低下を意味する。
【００９７】
本明細書で用いている任意の疾患又は障害についての「治療する」、「治療すること」又は「治療」という用語は、１つの実施形態において、疾患又は障害を改善すること（すなわち、疾患又はその臨床症状の少なくとも１つの発現を遅くすること若しくは停止させること若しくは低減すること）を意味する。他の実施形態において、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、患者が認識できる可能性がないものを含む少なくとも１つの身体的パラメーターを軽減又は改善することを意味する。さらに他の実施形態において、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、身体的に（例えば、認識できる症状の安定化）、生理学的に（例えば、身体的パラメーターの安定化）又は両面で疾患又は障害を調節することを意味する。さらに他の実施形態において、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、疾患又は障害の発症又は発現又は進行を予防又は遅延させることを意味する。
【００９８】
本明細書で用いているように、対象がそのような治療により生物学的に、医学的に又は生活の質の面で恩恵を受ける場合、そのような対象は、治療「を必要とする」。
【００９９】
したがって、さらなる実施形態として、本発明は、療法における式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。さらなる実施形態において、療法は、タンキラーゼの阻害により治療することができる疾患から選択される。１つの実施形態において、疾患は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、タンキラーゼシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、肺癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、胆管系癌、卵巣癌、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸癌及び肝臓癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、肺癌、膵臓癌、乳癌及び結腸癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、結腸、膵臓及び乳腺からなる群から選択される癌である。
【０１００】
他の実施形態において、本発明は、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患の治療用の薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。１つの実施形態において、疾患は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、タンキラーゼシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、肺癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、胆管系癌、卵巣癌、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸癌及び肝臓癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、肺癌、膵臓癌、乳癌及び結腸癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、結腸、膵臓及び乳腺からなる群から選択される癌である。
【０１０１】
他の実施形態において、本発明は、治療上有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩をそれを必要とする対象に投与するステップを含む、タンキラーゼの阻害によって媒介される疾患の治療の方法を提供する。１つの実施形態において、疾患は、Ｗｎｔシグナル伝達に関連する障害である。他の実施形態において、疾患は、タンキラーゼシグナル伝達に関連する障害である。さらなる実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、黒色腫、多発性骨髄腫、リンパ腫、肺癌、食道癌、胃癌、膵臓癌、胆管系癌、卵巣癌、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸癌及び肝臓癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、癌、特に、白血病、肺癌、膵臓癌、乳癌及び結腸癌からなる群から選択される癌である。他の実施形態において、疾患は、結腸、膵臓及び乳腺からなる群から選択される癌である。
【０１０２】
併用
本発明の化合物は、１つ又は複数の他の治療薬（単数又は複数）と同時に、又はその前若しくは後に投与することができる。本発明の化合物は、他の薬剤と同じ若しくは異なる投与経路により別個に、又は同じ医薬組成物で一緒に投与することができる。
【０１０３】
１つの実施形態において、本発明は、療法における同時、個別又は逐次使用のための複合製剤（combined preparation）としての式（Ｉ）の化合物及び少なくとも１つの他の治療薬を含む製品を提供する。１つの実施形態において、療法は、ＴＮＫＳ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療である。複合製剤として提供される製品は、同じ医薬組成物に一緒に式（Ｉ）の化合物及び他の治療薬（単数又は複数）を含む組成物、又は別個の形、例えば、キットの形で式（Ｉ）の化合物及び他の治療薬（単数又は複数）を含む。
【０１０４】
１つの実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物及び他の治療薬（単数又は複数）を含む医薬組成物を提供する。場合によって、医薬組成物は、上述のような薬学的に許容される賦形剤を含んでいてもよい。
【０１０５】
１つの実施形態において、本発明は、２つ以上の別個の医薬組成物を含み、その少なくとも１つが式（Ｉ）の化合物を含む、キットを提供する。１つの実施形態において、該キットは、容器、分割されたビン又は分割されたフォイルパケットなどの前記組成物を別個に保持するための手段を含む。そのようなキットの例は、錠剤、カプセル剤などの包装のために一般的に用いられるブリスターパックである。
【０１０６】
本発明のキットは、例えば、経口及び非経口用の異なる剤形を投与するために、別個の組成物を異なる投与間隔で投与するために、又は別個の組成物について互いの用量を調節するために用いることができる。服薬遵守を支援するために、本発明のキットは、一般的に投与指示書を含む。
【０１０７】
本発明の併用療法において、本発明の化合物及び他の治療薬は、同じ又は異なる製造業者により製造され、且つ／又は製剤化され得る。さらに、本発明の化合物及び他の治療薬は、（ｉ）医師への併用製品の引き渡しの前に（例えば、本発明の化合物及び他の治療薬を含むキットの場合）、（ｉｉ）投与直前に医師自身により（又は医師の指導のもとで）、（ｉｉｉ）例えば、本発明の化合物及び他の治療薬の逐次投与時に患者自身で、併用療法に一緒に組み入れることができる。
【０１０８】
したがって、本発明は、薬剤が他の治療薬とともに投与するために調製されている場合に、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。本発明はまた、薬剤を式（Ｉ）の化合物とともに投与する場合に、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための他の治療薬の使用を提供する。
【０１０９】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物が他の治療薬とともに投与するために調製されている場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。本発明はまた、他の治療薬が式（Ｉ）の化合物とともに投与するために調製されている場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための他の治療薬を提供する。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物を他の治療薬とともに投与する場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための式（Ｉ）の化合物を提供する。本発明はまた、他の治療薬を式（Ｉ）の化合物とともに投与する場合に、タンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療の方法に使用するための他の治療薬を提供する。
【０１１０】
本発明はまた、患者が以前に（例えば、２４時間以内に）他の治療薬による治療を受けた場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。本発明はまた、患者が以前に（例えば、２４時間以内に）式（Ｉ）の化合物による治療を受けた場合のタンキラーゼ阻害によって媒介される疾患又は状態の治療のための他の治療薬の使用を提供する。
【０１１１】
１つの実施形態において、他の治療薬は、ヘッジホッグアンタゴニスト、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗薬、微小管阻害剤、テロメラーゼ阻害剤、ＰＡＲＰ阻害剤及びＲＡＦ阻害剤の群から選択されるが、これらに限定されない。
【０１１２】
ヘッジホッグアンタゴニストの例は、２−クロロ−Ｎ−［４−クロロ−３−（２−ピリジニル）フェニル］−４−（メチルスルホニル）ベンズアミド（ＧＤＣ−０４４９としても公知、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０６／０２８９５８に記載）である。
【０１１３】
ＰＩ３Ｋ阻害剤のいくつかの例は、４−［２−（１Ｈ−インダゾール−４−イル）−６−［［４−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−イル］メチル］チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−イル］モルホリン（ＧＤＣ０９４１としても公知、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０９／０３６０８２及びＷＯ０９／０５５７３０に記載）及び２−メチル−２−［４−［３−メチル−２−オキソ−８−（キノリン−３−イル）−２，３−ジヒドロイミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］フェニル］プロピオニトリル（ＢＥＺ２３５又はＮＶＰ−ＢＥＺ２３５としても公知、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０６／１２２８０６に記載）を含む。
【０１１４】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤は、ＸＬ−５１８（Ｃａｓ  Ｎｏ．１０２９８７２−２９−４、ＡＣＣ  Ｃｏｒｐ．から入手可能）である。
【０１１５】
チロシンキナーゼ阻害剤のいくつかの例は、エルロチニブ塩酸塩（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅにより商標Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）のもとに販売）、リニファニブ（Ｎ−［４−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−４−イル）フェニル］−Ｎ’−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）尿素、ＡＢＴ８６９としても公知、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈから入手可能）、スニチニブマレート（Ｐｆｉｚｅｒにより商品名Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）のもとに販売）、ボスチニブ（４−［（２，４−ジクロロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−６−メトキシ−７−［３−（４−メチルピペラジン−１−イル）プロポキシ］キノリン−３−カルボニトリル、ＳＫＩ−６０６としても公知、米国特許第６，７８０，９９６号に記載）、ダサチニブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂにより商品名Ｓｐｒｙｃｅｌ（登録商標）のもとに販売）、パゾパニブ（Ａｒｍａｌａ（商標）としても公知、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅにより商品名Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標）のもとに販売）並びにイマチニブ及びイマチニブメシレート（Ｎｏｖａｒｔｉｓにより商品名Ｇｉｌｖｅｃ（登録商標）及びＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標）のもとに販売）を含む。
【０１１６】
アルキル化剤のいくつかの例は、テモゾロミド（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ／Ｍｅｒｃｋにより商品名Ｔｅｍｏｄａｒ（登録商標）及びＴｅｍｏｄａｌ（登録商標）のもとに販売）、ダクチノマイシン（アクチノマイシン−Ｄとしても公知、商品名Ｃｏｓｍｅｇｅｎ（登録商標）のもとに販売）、メルファラン（Ｌ−ＰＡＭ、Ｌ−サルコリシン及びフェニルアラニンマスタードとしても公知、商品名Ａｌｋｅｒａｎ（登録商標）のもとに販売）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても公知、商品名Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）のもとに販売）、カルムスチン（商品名ＢｉＣＮＵ（登録商標）のもとに販売）、ベンダムスチン（商品名Ｔｒｅａｎｄａ（登録商標）のもとに販売）、ブスルファン（商品名Ｂｕｓｕｌｆｅｘ（登録商標）及びＭｙｌｅｒａｎ（登録商標）のもとに販売）、カルボプラチン（商品名Ｐａｒａｐｌａｔｉｎ（登録商標）のもとに販売）、ロムスチン（ＣＣＮＵとしても公知、商品名ＣｅｅＮＵ（登録商標）のもとに販売）、シスプラチン（ＣＤＤＰとしても公知、商品名Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）及びＰｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）−ＡＱのもとに販売）、クロラムブシル（商品名Ｌｅｕｋｅｒａｎ（登録商標）のもとに販売）、シクロホスファミド（商品名Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）及びＮｅｏｓａｒ（登録商標）のもとに販売）、デカルバジン（ＤＴＩＣ、ＤＩＣ及びイミダゾールカルボキサミドとしても公知、商品名ＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（登録商標）のもとに販売）、アルトレタミン（ヘキサメチルメラミン（ＨＭＭ）としても公知、商品名Ｈｅｘａｌｅｎ（登録商標）のもとに販売）、イフォスファミド（商品名Ｉｆｅｘ（登録商標）のもとに販売）、プロカルバジン（商品名Ｍａｔｕｌａｎｅ（登録商標）のもとに販売）、メクロレタミン（窒素マスタード、ムスチン及びメクロロエタミン塩酸塩としても公知、商品名Ｍｕｓｔａｒｇｅｎ（登録商標）のもとに販売）、ストレプトゾシン（商品名Ｚａｎｏｓａｒ（登録商標）のもとに販売）、チオテパ（チオホスホアミド及びＴＥＳＰＡ及びＴＳＰＡとしても公知、商品名Ｔｈｉｏｐｌｅｘ（登録商標）のもとに販売）を含む。
【０１１７】
代謝拮抗薬のいくつかの例は、クラリビン（２−クロロデオキシアデノシン、商品名ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（登録商標）のもとに販売）、５−フルオロウラシル（商品名Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）のもとに販売）、６−チオグアニン（商品名Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標）のもとに販売）、ペメトレキセド（商品名Ａｌｉｍｔａ（登録商標）のもとに販売）、シタラビン（アラビノシルシトシン（Ａｒａ−Ｃ）としても公知、商品名Ｃｙｔｏｓａｒ−Ｕ（登録商標）のもとに販売）、シタラビンリポソーム（リポソームＡｒａ−Ｃとしても公知、商品名ＤｅｐｏＣｙｔ（商標）のもとに販売）、デシタビン（商品名Ｄａｃｏｇｅｎ（登録商標）のもとに販売）、ヒドロキシ尿素（商品名Ｈｙｄｒｅａ（登録商標）、Ｄｒｏｘｉａ（商標）及びＭｙｌｏｃｅｌ（商標）のもとに販売）、フルダラビン（商品名Ｆｌｕｄａｒａ（登録商標）のもとに販売）、フロクスウリジン（商品名ＦＵＤＲ（登録商標）のもとに販売）、クラドリビン（２−クロロデオキシアデノシン（２−ＣｄＡ）としても公知、商品名Ｌｅｕｓｔａｔｉｎ（商標）のもとに販売）、メトトレキセート（アメトプテリン、メトトレキセートナトリウム（ＭＴＸ）としても公知、商品名Ｒｈｅｕｍａｔｒｅｘ（登録商標）及びＴｒｅｘａｌｌ（商標）のもとに販売）及びペントスタチン（商品名Ｎｉｐｅｎｔ（登録商標）のもとに販売）を含む。
【０１１８】
微小管阻害剤のいくつかの例は、ビノレルビン（商品名Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標）のもとに販売）、ビンデシン（商品名Ｅｌｄｉｓｉｎｅ（登録商標）のもとに販売）、エストラムスチン（商品名Ｅｍｃｙｔ（登録商標）のもとに販売）、ビンクリスチン（Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標））、トリクラベンダゾール（Ｅｇａｔｅｎ（登録商標））、セクニダゾール、キンファミド、ポドフィロトキシン、メベンダゾール、グリセオフルビン、フルベンダゾール、エリブリン、コルヒチン、シクロベンダゾール、カルバジタキセル、アルベンダゾール及びビノレルビンである。
【０１１９】
テロメラーゼ阻害剤の例は、イメテルスタットである。
【０１２０】
ＰＡＲＰ阻害剤のいくつかの例は、オラパリブ（Ａｓｔｒａｚｅｎｅｃａ製）、イニパリブ（ＢＳＩ−２０１としても公知）、ＡＧＯ１４６９９（Ｐｆｉｚｅｒ）、ベリパリブ（ＡＢＴ−８８８としても公知、Ｅｎｚｏ製）及びＭＫ４８２７（Ｍｅｒｃｋ）を含む。
【０１２１】
ＲＡＦ阻害剤のいくつかの例は、２−クロロ−５−［２−フェニル−５−（４−ピリジニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］フェノール（Ｌ−７７９４５０としても公知）、３−（ジメチルアミノ）−Ｎ−［３−［（４−ヒドロキシベンゾイル）アミノ］−４−メチルフェニル］−ベンズアミド（ＺＭ−３３６３７２としても公知）及びソラフェニブ（ＢａｙｅｒによりＮｅｘａｖａｒ（登録商標）として市販）を含む。
【０１２２】
中間体及び実施例
以下の実施例は、実例となるものを意図しているにすぎず、決して限定的なものではない。
【０１２３】
用いる略語は、当技術分野で慣用されているもの又は下記のものである。
ＡｃＯＨ  酢酸
ＢＯＣ  第三級ブチルカルボキシ
Ｃ  セルシウス
ｄ  二重線
ｄｄ  二重線の二重線
ＤＣＭ  ジクロロメタン
ＤＩＥＡ  ジエチルイソプロピルアミン
ＤＭＥ  １，４−ジメトキシエタン
ＤＭＦ  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＥｔＯＨ  エタノール
ＥＤＣＬ  １−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ｇ  グラム
ｈ  時間（単数又は複数）
ＨＢＴＵ  １−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−ベンゾトリアゾリウムヘキサフルオロホスフェート（１−）３−オキシド
ＨＯＢｔ  １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ  高圧液体クロマトグラフィー
ＩＲ  赤外分光法
ｋｇ  キログラム
Ｌ  リットル
ＬＣＭＳ  液体クロマトグラフィー及び質量分析
ＭＴＢＥ  メチル第三級ブチルエーテル
ＭｅＯＨ  メタノール
ＭＳ  質量分析
ＭＷ  マイクロ波
ｍ  多重線
ｍｉｎ  分
ｍＬ  ミリリットル（単数又は複数）
μＭ  マイクロモル
ｍ／ｚ  質量電荷比
ｎｍ  ナノメートル
ｎＭ  ナノモル
Ｎ  規定
ＮＭＲ  核磁気共鳴
Ｐａ  パスカル
Ｐｄ／Ｃ  パラジウム上炭素
ｒａｃ  ラセミ体
ＲＰ−ＨＰＬＣ  逆相高圧液体クロマトグラフィー
ｓ  一重線
ｔ  三重線
ＴＥＡ  トリエチルアミン
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン
【０１２４】
中間体１
４−オキソ−テトラヒドロ−ピラン−３−カルボン酸メチルエステル
【０１２５】
【化１６】
0005957077.tif 000017
テトラヒドロ−ピラン−４−オン（１．３ｋｇ、１２．９８ｍｏｌ）及びカルボン酸ジメチルエステル（１１．６９ｋｇ、１２９．８ｍｏｌ）の溶液に固体カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．８９ｋｇ、１６．０８ｍｏｌ）を窒素保護下で−１０℃で２時間にわたり少しずつ加えた。懸濁液を室温で添加後１０時間撹拌した。ＬＣＭＳ（２１５ｎｍ）によりテトラヒドロ−ピラン−４−オンが完全に消費されたことが示された。反応物をＨＣｌ（２Ｎ）によりｐＨ６〜７に酸性化し、次いで、相を分離した。有機相を水（３Ｌ×２）で洗浄し、合わせた水相をＭＴＢＥ（２．５Ｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を減圧下で２５℃で濃縮して、大部分のＭＴＢＥを除去した。残留物をオイルポンプ（約２００Ｐａ）により７４℃で留出させて、表題化合物を無色油（５４５ｇ、２６．３％）として得た。ＣＨＮ分析：計算（結果）、Ｃ５３．１６（５３．１０）、Ｈ６．３７（６．２４５）、Ｎ０．００（０．００）。
【０１２６】
中間体２
２−クロロ−アセトアミジン
【０１２７】
【化１７】
0005957077.tif 000018
ナトリウム（１８．３ｇ、０．７９５ｍｏｌ）を２ＬのＭｅＯＨに２５℃で完全に溶解し、１時間撹拌した。次いで、溶液にクロロ−アセトニトリル（６００ｇ、７．９５ｍｏｌ）をＮ２の保護下で１滴ずつ１時間で加えた。約２０℃でさらに１時間撹拌した後、ＮＨ４Ｃｌ（５１４ｇ、８．７３ｍｏｌ）を４５分にわたって少しずつ加え（溶液が黄色に、次に赤色になり、次に黒色の液体が得られた）、反応混合物を１５〜２０℃で１６時間撹拌した。ろ過後、ろ液を濃縮して残留物を得た。これをＭＴＢＥ（１Ｌ×２）とともに摩砕して、表題化合物を黒色固体（９８８ｇ、９６％）として得た。
【０１２８】
中間体３
２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０１２９】
【化１８】
0005957077.tif 000019
ＭｅＯＨ（３５６０ｍＬ）中粗４−オキソテトラヒドロ−ピラン−３−カルボン酸メチルエステル（１７８０ｇ、１１ｍｏｌ）及びトリエチルアミン（８３０ｇ、８．２ｍｏｌ）の混合物をＮ２下で０℃に冷却した。８９０ｍＬのＭｅＯＨ中２−クロロ−アセトアミド（５６７ｇ、４．４ｍｏｌ）の溶液を５０分にわたり１滴ずつ加えた。反応混合物を０℃で３０分間、次いで約２０℃で１６時間撹拌した。２１５ｎｍでのＬＣＭＳ及びＴＬＣ（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１）分析で４−オキソテトラヒドロ−ピラン−３−カルボン酸メチルエステルの大部分が消費されたことが示された。次いで、混合物をろ過し、濃縮して、黒色油を得た。これをその後シリカゲル上フラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し、ＤＣＭで溶出して、黄色固体／油混合物を得た。これをさらにＭＴＢＥ（約１２００ｍＬ）及びＨ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ：ＥＡ＝１：１：２（約６００ｍＬ）とともに摩砕して、表題化合物を白色固体（３１８ｇ）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ２０１．２（Ｍ＋Ｈ）、ＣＨＮ分析：計算（結果）  Ｃ４７．８９（４７．９５）、Ｈ４．５２（４．４０１）、Ｎ１３．９６（１３．７６）。
【０１３０】
中間体４
ビス−（２−ブロモ−エチル）−カルバミン酸エチルエステル
【０１３１】
【化１９】
0005957077.tif 000020
０℃の水（１０ｍＬ）中ビス−（２−ブロモ−エチル）−アミンの撹拌溶液にクロロギ酸エチル（０．２９３ｍＬ、３．０８ｍｍｏｌ）を、次にＮａＯＨ（４．０１ｍＬ、８．０２ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１０分間撹拌した。反応混合物を２Ｎ  ＨＣｌによりｐＨ５に酸性化し、２０ｍＬの酢酸エチルで３回抽出し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（３０分に８５：１５〜７０：３０ヘプタン／酢酸エチルの勾配）により精製して、表題化合物（２８７ｍｇ、０．９４７ｍｍｏｌ、収率２９．５％）を得た。Ｃ７Ｈ１４Ｂｒ２ＮＯ２について計算したＭＳ３０４．０、実測値（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３０４．２（Ｍ＋Ｈ）＋、保持時間０．５６分。
【０１３２】
中間体５
５−フルオロ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−カルボン酸エチル
【０１３３】
【化２０】
0005957077.tif 000021
５０℃のＤＭＦ（５ｍＬ）中５−フルオロ−１−インダノン（３０２ｍｇ、２．０１３ｍｍｏｌ）及びビス−（２−ブロモ−エチル）−カルバミン酸エチルエステル（６１０ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＮａＨ（１２１ｍｇ、５．０３ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。５０℃で１６時間撹拌した後、反応物を２５℃に冷却した。反応物を１５ｍＬの酢酸エチルで希釈し、１０ｍｌの水で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュカラム（２０分に８５：１５〜６０：４０ヘプタン／酢酸エチルの勾配）により精製して、表題化合物（１８８ｍｇ、０．６４５ｍｍｏｌ、収率３２．１％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝２９２．４。ＨＰＬＣ保持時間＝１．４６分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０ｃｍ×３．０ｍｍ×３．０ｕｍ  Ｃ８カラム；流量２．０ｍＬ／分；２分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。
【０１３４】
中間体６
５−フルオロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１（３Ｈ）−オン
【０１３５】
【化２１】
0005957077.tif 000022
ＨＣｌ（１９．６１μＬ、０．６４５ｍｍｏｌ）中５−フルオロ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−カルボン酸エチル（１８８ｍｇ、０．６４５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液を１００℃で一夜加熱した。反応混合物をさらに精製せずに濃縮乾燥して、表題化合物（１６０ｍｇ、収率９７％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝２２０．０（Ｍ＋Ｈ）＋、ＨＰＬＣ保持時間＝０．５１分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０ｃｍ×３．０ｍｍ×３．０ｕｍ  Ｃ８カラム；流量２．０ｍＬ／分；２分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。
【０１３６】
中間体７
２，２−ジアリル−５−メトキシインダン−１−オン
【０１３７】
【化２２】
0005957077.tif 000023
周囲温度のＤＭＦ（８０ｍＬ）中５−メトキシ−１−インダノン（５．２４ｇ、３２．３ｍｍｏｌ）及び臭化アリル（９．７７ｇ、８１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＮａＨ（３．２３ｇ、８１ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。１０分間撹拌した後、反応混合物を５０℃で８時間撹拌し、反応溶液を周囲温度に冷却し、次いで、１５ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、水（１０ｍＬ）で２回洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュカラム（２０分で８５：１５〜６０：４０ヘプタン／酢酸エチルの勾配）により精製して、表題化合物（６．７２ｇ、２７．７ｍｍｏｌ）を無色液体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝２４３．７。保持時間１．７９分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０ｃｍ×３．０ｍｍ×３．０ｕｍ  Ｃ８カラム；流量２．０ｍＬ／分；２分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。
【０１３８】
中間体８
２，２−（５−メトキシ−１−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，２−ジイル）ジアセトアルデヒド
【０１３９】
【化２３】
0005957077.tif 000024
ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中２，２−ジアリル−５−メトキシインダン−１−オン（６００ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃のＯ３を１０分間通気し、次いで、過剰のＯ３を除去するためにＮ２を通気した。反応溶液に−７８℃のＰＳ−Ｐｈ３Ｐ（２．７５ｍｇ、４．９５ｍｍｏｌ、１．８ｍｍｏｌ／ｇ）を加えた。周囲温度で１時間撹拌した後、反応混合物をろ過した。ろ液を真空中で濃縮して、表題化合物（５３５ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を得て、精製せずに次のステップに用いた。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 9.61 (s, 2 H), 7.64 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.84 (m., 2 H), 3.81 (s, 3 H), 3.09 (s, 2H), 2.80 (dd, J=69.2 Hz, J=17.7 Hz, 4 H).
【０１４０】
中間体９
（Ｓ）−５−メトキシ−１’−（２−オキソピロリジン−３−イル）スピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１（３Ｈ）−オン
【０１４１】
【化２４】
0005957077.tif 000025
ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中２，２−（５−メトキシ−１−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，２−ジイル）ジアセトアルデヒド（１００ｍｇ、０．４０６ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−３−アミノピロリジン−２−オン（４１ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＯＨ）２（３ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度のバルーンからのＨ２下で５時間撹拌した。反応混合物をろ過した。ろ液を濃縮した。粗生成物をＨＰＬＣ（カラム：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｗａｔｅｒｓ  ５０×５０ｍｍ；移動相：１０分で０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル２０％／Ｈ２Ｏ  ８０％からアセトニトリル５０％／Ｈ２Ｏ  ５０％までの勾配、流量：６５ｍｌ／分）により精製して、表題化合物（３３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝３１５．１。保持時間＝０．６４分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０ｃｍ×３．０ｍｍ×３．０ｕｍ  Ｃ８カラム；流量２．０ｍＬ／分；２分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm 7.58 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 7.28 ( s, 1H), 6.86 (d, J=8.6 Hz, 1 H,), 6.80 (s., 1 H), 4.23 (t, J=9.1 Hz, 1H), 4.05 (br,s, 1H), 3.48 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.73 (s, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.30 (br, s, 1H), 2.97 (s, 2H), 2.52 (m, 2H), 2.04 (br,s, 4H).
【０１４２】
中間体１０
４−（４−メトキシ−３−メチル−ベンゾイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１４３】
【化２５】
0005957077.tif 000026
３０ｍＬ  ＴＨＦ中４−（メトキシ−メチル−カルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．０ｇ、１１．０２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液を０℃に冷却し、次いで、臭化（４−メトキシ−３−メチルフェニル）マグネシウム（６．２１ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）をＮ２下で注射器により１滴ずつ加え、反応混合物を同じ温度で１．５時間撹拌し、次いで、ＬＣＭＳにより反応が完結したと判断された場合、１時間にわたり徐々に室温まで加温した。反応混合物に４０ｍＬの飽和水性ＮＨ４Ｃｌを徐々に加え、次いで、水溶液を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、溶媒を除去して、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる精製により、表題化合物を白色固体（１．９７ｇ、５．６２ｍｍｏｌ、収率５１％）として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３３４．４（Ｍ＋Ｈ＋）；ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ−１８カラム：移動相：０．１％ＴＦＡを含む３５〜９０％アセトニトリル／水、２分にわたり２ｍＬ／分）保持時間＝１．５７分。1H NMR(400MHz, CDCL3) δ ppm 1.48(s, 9H) 1.62-1.91(m, 4H) 2.27(s, 3H) 2.78-3.02(m, 2H) 3.27-3.46(m, 1H) 3.91(s, 3H) 4.12-4.27(m, 2H) 6.87(d, J=8.59Hz, 1H) 7.77(t, J=8.10Hz, 2H).
【０１４４】
代替手順
周囲温度の５０ｍＬ乾燥ＴＨＦ中４−（メトキシ−メチル−カルバモイル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５．０ｇ、１８．３６ｍｍｏｌ）の溶液に臭化（４−メトキシ−３−メチルフェニル）マグネシウム（５５．１ｍＬ、０．５Ｍ）をＮ２下で１滴ずつ加え、反応混合物を同じ温度で１６時間撹拌した。飽和硫酸ナトリウム溶液（１０ｍＬ）により反応を停止させ、食塩水（１５０ｍＬ）と１０％イソプロピルアルコール／クロロホルム（２００ｍＬ）とに分配し、有機層を除去して、粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー（シリカ：５〜３５％酢酸エチル／ペンタン）による精製により、表題化合物を白色固体（６．４ｇ、１９．２１ｍｍｏｌ、収率＞９９％）として得た。ＨＰＬＣ（Ｎａｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ−１８カラム：移動相：２分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝４．１３１分。
【０１４５】
中間体１１
（４−メトキシ−３−メチルフェニル）ピペリジン−４−イルメタノン
【０１４６】
【化２６】
0005957077.tif 000027
トリフルオロ酢酸（５．５５ｍＬ、７２．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）中４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４．８ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）の溶液に加え、室温で４時間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、クロロホルム（２００ｍＬ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、溶媒を真空中で蒸発させて、粗生成物を得、これを未精製のまま次のステップに用いた（白色固体）。計算分子式＝Ｃ１４Ｈ１９ＮＯ２＝２３３．３１３０、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ２３４．４（Ｍ＋Ｈ＋）；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm 1.22 (d, J=6.57 Hz, 6 H) 1.64 - 1.77 (m, 2 H) 1.83 (d, J=1.52 Hz, 2 H) 1.97-2.08 (br. s, 2H) 2.26 (s, 3 H) 2.79 (td, J=12.38, 3.03 Hz, 2 H) 3.21 (dt, J=12.63, 3.79 Hz, 2 H) 3.33 - 3.44 (m, J=11.18, 11.18, 3.79, 3.66 Hz, 1 H) 3.91 (s, 3 H) 4.03 (dq, J=6.32, 6.15 Hz, 0.5 H) 6.87 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 7.83 (dd, J=8.59, 2.53 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=2.02 Hz, 1 H).分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４４４分。
【０１４７】
代替手順１
４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６．４ｇ、１９．２１ｍｍｏｌ）を９０％トリフルオロ酢酸／水（１００ｍＬ）で処理し、室温で３０分間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮し、１０％イソプロパノール／クロロホルム（２００ｍＬ）に溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥し、溶媒を除去して、粗生成物を得、これを未精製のまま次のステップに用いた（白色固体）。計算分子式＝Ｃ１４Ｈ１９ＮＯ２＝２３３．３１３０、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ２３４．４（Ｍ＋Ｈ＋）；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．５１４分。
【０１４８】
代替手順２
６Ｎ  ＨＣｌ（４０ｍＬ）中１−（４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル）エタノン（５．４５ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）の懸濁液を１２時間加熱還流し、次いで、真空中で薄紫色の固体に濃縮した。この物質を約１００ｍＬのＭｅＯＨに加熱及び音波処理しながら溶かし、真空中で約２５ｍＬに濃縮し、ジエチルエーテル（約２００ｍＬ）を加えて、白色沈澱及び紫色の水層を形成させた。水層をピペットにより除去し、真空中で濃縮した。懸濁液をフィルターを介して傾斜して、白色固体（１．３０ｇ）を回収した。水性物質を真空中で濃縮して、紫色がかった油を形成させ、これをジエチルエーテルに溶かし、得られた懸濁液をろ過した（０．８２ｇ）。ろ液を真空中で紫色油に濃縮した。固体物質は、表題化合物であることが確認された。計算分子式＝Ｃ１４Ｈ１９ＮＯ２＝２３３．３１、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ２３３．９（Ｍ＋Ｈ＋）
【０１４９】
中間体１２
４−フェニルスルファニルカルボニル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１５０】
【化２７】
0005957077.tif 000028
４０ｍＬのＤモレキュラーフォーミュラ（Dmolecular formula）中ピペリジン−１，４−ジカルボン酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５．０ｇ、２１．８１ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（５．６４ｇ、４３．６ｍｍｏｌ）の溶液にＨＡＴＵ（９．２ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）及びベンゼンチオール（２．７ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を周囲温度で１５時間撹拌した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で失活させ、次いで、ＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水及び飽和水性ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮して、粗生成物（６．８５ｇ、２０．２５ｍｍｏｌ）を黄色油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ  ３２１．８（Ｍ＋Ｈ＋）；ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ−１８カラム：移動相：２分にわたり２ｍＬ／分で、０．１％ＴＦＡを含む３５〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝１．６６分。
【０１５１】
中間体１３
メタンスルホン酸（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル
【０１５２】
【化２８】
0005957077.tif 000029
（Ｒ）−３−ヒドロキシピロリジン−２−オン（１９．５ｇ、１９３ｍｍｏｌ）及び０℃のトリエチルアミン（９０ｍＬ）の撹拌混合物にＤＣＭ（９０ｍＬ）中メタンスルホン酸無水物（３３．６ｇ、１９３ｍｍｏｌ）の溶液を内部温度を５℃未満に維持しながら３５分間にわたって加えた。０℃で３０分間撹拌した後、反応物を室温まで加温し、さらに１８時間撹拌し、次いで、真空中で濃縮した。この物質を以前のバッチの１２ｇの粗物質と合わせ、次いで、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、３５ｇの表題化合物を得た。
【０１５３】
中間体１４
メタンスルホン酸（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル
【０１５４】
【化２９】
0005957077.tif 000030
１０℃のピリジン（３８．４ｍＬ、４７５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（３Ｌ）中（Ｓ）−３−ヒドロキシピロリジン−２−オン（１２０ｇ、１．１９ｍｏｌ）の１０℃溶液に塩化チオニル（１７３ｍＬ、２．３７ｍｏｌ）を１滴ずつ加え、反応物をさらに３時間撹拌した。反応物を真空中で濃縮し、ジクロロメタンに溶かし、シリカゲルのプラグによりろ過し、１０Ｌの酢酸エチルで溶離することにより精製した。物質を真空中で約１Ｌに濃縮し、１．５Ｌのジエチルエーテルで希釈し、１５分間緩やかに加熱した。懸濁液をろ過し、ジエチルエーテル（５００ｍＬ）で洗浄し、真空中で乾燥し、ジエチルエーテル（１Ｌ）に溶かし、４５℃で加熱し、次いでろ過して、１０５ｇの表題化合物を白色固体として得た。
【０１５５】
中間体１５
メタンスルホン酸２−オキソピペリジン−３−イルエステル
【０１５６】
【化３０】
0005957077.tif 000031
０℃のジクロロメタン（３ｍＬ）中３−ヒドロキシピペリジン−２−オン（５００ｍｇ、４．３４ｍｍｏｌ、１．０当量）及びトリエチルアミン（０．９０８ｍＬ、６．５１ｍｍｏｌ、１．５当量）の懸濁液にジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解した塩化メタンスルホニル（４９７ｍｇ、４．３４ｍｍｏｌ、１．０当量）を１滴ずつ加えた。反応は、ＬＣＭＳにより判断されたように３０分以内に完結した。オレンジ色の沈殿物をろ過し、ジクロロメタンに再溶解し、カラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、表題化合物を白色ワックス状固体（２０４ｍｇ、１．０５６ｍｍｏｌ、収率２４．３％）として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 5.78 (br. s, 1 H) 4.94 - 5.05 (m, 1 H) 3.30 - 3.44 (m, 2 H) 3.27 (s, 3 H) 2.24 - 2.37 (m, 1 H) 2.08 - 2.21 (m, 1 H) 1.98 - 2.08 (m, 1 H) 1.79 - 1.96 (m, 1 H).ＭＳ（ｍ／ｚ、ＭＨ＋）：１９３．７
【０１５７】
中間体１６
３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン
【０１５８】
【化３１】
0005957077.tif 000032
１Ｌ丸底フラスコにＤＩＥＡ（３７９ｍｍｏｌ、６６．３ｍＬ）中メタンスルホン酸（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル（欧州特許出願第２５７６０２号、１９８８年３月２日における手順に従って調製）（９５ｍｍｏｌ、１７ｇ）及び（４−メトキシフェニル）ピペリジン−４−イルメタノン（９５ｍｍｏｌ、２０．８ｇ）を加えた。反応混合物を８５℃で１８時間加熱した。上層を傾斜して除去し、残りの残留物について酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーを実施して、表題化合物を薄ベージュ色の固体（１３ｇ、収率４９％）として得た。計算ＭＳ＝３０２．４、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３０３．４（Ｍ＋Ｈ＋）；1H NMR (400 MHz, MeOD) δppm 1.69 - 1.89 (m, 4 H) 2.11 - 2.18 (m, 1 H) 2.18 - 2.30 (m, 1 H) 2.50 (td, J=11.29, 3.01 Hz, 1 H) 2.78 (td, J=11.54, 3.01 Hz, 1 H) 2.84 - 2.91 (m, 1 H) 3.13 (d, J=11.54 Hz, 1 H) 3.24 - 3.41 (m, 7 H) 3.49 (t, J=8.78 Hz, 1 H) 7.01 (d, J=9.00 Hz, 2 H) 7.96 (d, J=9.03 Hz, 2 H);ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．３０５分。
【０１５９】
中間体１７
４−（４−メトキシベンゾイル）−［１，３’］ビピペリジニル−２’−オン
【０１６０】
【化３２】
0005957077.tif 000033
アセトニトリル（２．５ｍＬ）中メタンスルホン酸２−オキソピペリジン−３−イルエステル（２５０ｍｇ、１／２９４ｍｍｏｌ、１．０当量）及び（４−メトキシフェニル）ピペリジン−４−イルメタノン（３１２ｍｇ、１．４２３ｍｍｏｌ、１．１当量）の溶液にジイソプロピルエチルアミン（３５１ｍｇ、０．４７５ｍＬ、２．１当量）を加え、反応物を８５℃で３時間加熱した。反応物を室温に冷却し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた油性残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、表題化合物を透明な油（１４２ｍｇ、０．４４９ｍｍｏｌ、収率３４．７％）として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δppm 7.95 (d, J=9.09 Hz, 2 H) 7.39-7.43 (br. s, 1 H) 7.04 (d, J=8.59 Hz, 2 H) 3.84 (s, 3 H) 3.23 - 3.33 (m, 2 H) 2.97 - 3.14 (m, 4 H) 2.74 - 2.85 (m, 2 H) 1.75 - 1.91 (m, 2 H) 1.57 - 1.75 (m, 4 H) 1.47-1.54 (m, 2 H).ＭＳ（ｍ／ｚ、ＭＨ＋）：３１６．８
【０１６１】
中間体１８
（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン
【０１６２】
【化３３】
0005957077.tif 000034
室温のアセトニトリル（３８８ｍＬ）中（４−メトキシフェニル）（ピペリジン−４−イル）メタノン（３４ｇ、１５５ｍｍｏｌ）及びメタンスルホン酸（Ｒ）−２−オキソピロリジン−３−イル（３４．７ｇ、１９４ｍｍｏｌ）の懸濁液にＤＩＰＥＡ（１０８ｍＬ、６２０ｍｍｏｌ）を加え、反応物を６０℃に２９時間加熱し、次いで、室温に冷却し、さらに２４時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮して、ワックス状固体を得、これを酢酸エチル（３００ｍＬ）に溶かし、音波処理した。混合物をろ過し、得られた白色固体を酢酸エチル（２００ｍＬ）で洗浄して、２１．０５ｇを得た。合わせたろ液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（３３０ｇ  ｉｓｃｏ  ０．０１％ＮＨ４ＯＨ  ５〜１０％ＭｅＯＨ／酢酸エチル）により精製した。純粋画分を合わせ、真空中で濃縮し、次いで、酢酸エチル（８０〜１００ｍＬ）に溶かし、撹拌した。白色沈澱が形成し、これをろ過により収集した。ろ液を金色の油に濃縮し、酢酸エチルに溶かし、白色沈澱が得られ、これをろ過により収集した。合計２７．７ｇの表題物質が白色固体として得られた。計算ＭＳ＝３０２．４、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３０３．４（Ｍ＋Ｈ＋）
【０１６３】
中間体１９
（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン
【０１６４】
【化３４】
0005957077.tif 000035
１Ｌ丸底フラスコにＤＩＥＡ（７５ｍｍｏｌ、１３．１ｍＬ）中メタンスルホン酸（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル（欧州特許出願第２５７６０２号、１９８８年３月２日における手順に従って調製）（１８．７５ｍｍｏｌ、３．３６ｇ）及び（４−メトキシ−３−メチルフェニル）ピペリジン−４−イルメタノン（１８．７５ｍｍｏｌ、４．３７ｇ）並びにアセトニトリル（１００ｍＬ）を加えた。反応混合物を８５℃で４時間加熱した。反応物を真空中で蒸発させ、残りの残留物について酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーを実施して、表題化合物を白色固体（４ｇ、収率６７．４％）として得た。Ｃ１８Ｈ２４Ｎ２Ｏ３について計算したＭＳ＝３１６．４０３６、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３１７．１８６３（Ｍ＋Ｈ＋）；1H NMR (400 MHz, MeOD) δppm 1.69 - 1.89 (m, 4 H) 2.08 - 2.21 (m, 1 H) 2.24 - 2.30 (m, 1 H) 2.44 - 2.56 (m, 1 H) 2.73 - 2.84 (m, 1 H) 2.84 - 2.92 (m, 1 H) 3.08 - 3.17 (m, 1 H) 3.30 - 3.42 (m, 6 H) 3.45 - 3.54 (m, 1 H) 3.90 (s, 3 H) 6.95 - 7.04 (m, 1 H) 7.72 - 7.81 (m, 1 H) 7.83 - 7.90 (m, 1 H);分析ＲＰ−ＨＰＬＣ保持時間＝４．６７分。
【０１６５】
中間体２０
（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン
【０１６６】
【化３５】
0005957077.tif 000036
１Ｌ丸底フラスコにＤＩＥＡ（７９ｍｍｏｌ、１３．８ｍＬ）中メタンスルホン酸（Ｒ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル（１９．７２ｍｍｏｌ、３．５３ｇ）、（４−メトキシ−３−メチルフェニル）ピペリジン−４−イルメタノン（１９．７２ｍｍｏｌ、４．６０ｇ）並びにアセトニトリル（７５ｍＬ）を加えた。反応混合物を８５℃で１３時間加熱した。反応物を真空中で蒸発させ、残りの残留物について５％ＭｅＯＨ／酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーを実施して、表題化合物を白色固体（４．６ｇ、収率７３．７％）として得た。Ｃ１８Ｈ２４Ｎ２Ｏ３について計算したＭＳ＝３１６．４０３６、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３１７．１８７６（Ｍ＋Ｈ＋）；1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.82 - 1.97 (m, 4 H) 2.15 - 2.36 (m, 5 H) 2.48 - 2.59 (m, 1 H) 2.90 - 3.04 (m, 2 H) 3.07 - 3.15 (m, 1 H) 3.23 - 3.44 (m, 3 H) 3.48 - 3.56 (m, 1 H) 3.91 (s, 3 H) 6.08-6.13 (br. s, 1 H) 6.85 (s, 1 H) 7.77 (s, 1 H) 7.83 (dd, J=8.53, 2.01 Hz, 1 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．５５７分。
【０１６７】
中間体２１
３−［４−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン
【０１６８】
【化３６】
0005957077.tif 000037
１０ｍＬマイクロ波バイアルにＤＩＥＡ（２４．８ｍｍｏｌ、５ｍＬ）中メタンスルホン酸（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル（４．９７ｍｍｏｌ、８９０ｍｇ）及び（４−フルオロフェニル）ピペリジン−４−イルメタノン塩酸塩（４．９７ｍｍｏｌ、１．２１ｇ）を加え、８５℃に１０５分間加熱した。ＤＩＥＡを傾斜し、酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ）を実施して、表題化合物（１１２ｍｇ、収率７．８％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ２９１．２（Ｍ＋Ｈ＋）、計算２９０．３３；ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．３０３分。
【０１６９】
中間体２２
３−［４−（４−クロロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン
【０１７０】
【化３７】
0005957077.tif 000038
ＤＩＥＡ（２．８ｍｍｏｌ、０．５ｍＬ）中メタンスルホン酸（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル（０．５６ｍｍｏｌ、１００ｍｇ）及び（４−クロロフェニル）ピペリジン−４−イルメタノン（０．５６ｍｍｏｌ、１２５ｍｇ）を含む１０ｍＬマイクロ波バイアルを８５℃に１０５分間加熱した。ジイソプロピルエチルアミンを傾斜して除去し、酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ）を実施して、表題化合物（５３ｍｇ、収率３１％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３０７．３（Ｍ＋Ｈ＋）、計算３０６．２；ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．５０６分。
【０１７１】
中間体２３
５−メトキシ−１’−（２−オキソピロリジン−３−イル）スピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１（３Ｈ）−オン
【０１７２】
【化３８】
0005957077.tif 000039
２５０ｍＬ丸底フラスコにＤＩＥＡ（１７．２９ｍｍｏｌ、３．０２ｍＬ）中メタンスルホン酸（Ｓ）−２−オキソピロリジン−３−イルエステル（２）（４．７６ｍｍｏｌ、８５２ｍｇ）及び５−メトキシスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１（３Ｈ）−オン（３）（４．３２ｍｍｏｌ、１．００ｇ）並びにアセトニトリル（２０ｍＬ）を加えた。次いで、溶液を８５℃に９０分間加熱した。反応物を真空中で濃縮し、酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ）を実施して、表題化合物（１．０５ｇ、収率７７％）を得た。計算ＭＳ＝３０６．２、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３０７．３（Ｍ＋Ｈ＋）；ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．２５３分。
【０１７３】
中間体２４
２−（ブロモメチル）−６−クロロベンゾニトリル
【０１７４】
【化３９】
0005957077.tif 000040
四塩化炭素（２０ｍＬ）中２−クロロ−６−メチルベンゾニトリル（２．０ｇ、１３ｍｍｏｌ）及びＮ−ブロモスクシンイミド（２．６ｇ、１５ｍｍｏｌ）の溶液にアゾビスイソブチロニトリル（０．２０ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３時間還流し、次いで、冷却し、ジクロロメタンで希釈し、水及び食塩水で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮した。得られた油をフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン、０：１００〜３０：７０）により精製して、白色固体生成物（１．４ｇ、４６％）を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.43 - 7.59 (m, 3 H), 4.64 (s, 2 H).
【０１７５】
中間体２５
２−（３−ブロモ−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトニトリル
【０１７６】
【化４０】
0005957077.tif 000041
ＤＣＭ（１００ｍＬ）中塩化２，４−ジブロモブタノイル（３．６ｇ、１４ｍｍｏｌ）の溶液及び２−アミノアセトニトリル塩酸塩（１．３ｇ、１４ｍｍｏｌ）に０℃のトリエチルアミン（５．７ｍＬ、４１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。得られた物質に塩化メチレンを加え、それを水、次いで食塩水で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、溶媒を真空中で除去した。得られた残留物をトルエン（１３０ｍＬ）に溶かし、０℃で水素化ナトリウム（５４５ｍｇ、１３．６ｍｍｏｌ、鉱油中６０％）を２０分にわたり少しずつ加えた。反応物を周囲温度で６０時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、次いで、氷水中に注加した。有機層を分離し、食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン、０：１００〜１００：０）により精製して、褐色油（７３０ｍｇ、収率２６％）を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.37-4.50 (m, 2 H), 4.10-4.28 (m, 1 H), 3.70 (dq, J = 7.6, 2.0 Hz, 1 H), 3.51-3.59 (m, 1 H), 2.65-2.79 (m, J = 7.0 Hz, 1 H), 2.33-2.50 (m, 1 H).
【０１７７】
中間体２６
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトニトリル
【０１７８】
【化４１】
0005957077.tif 000042
アセトニトリル（４ｍＬ）中２−（２−ブロモ−５−オキソピロリジン−１−イル）アセトニトリル（７３０ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）及び（４−メトキシフェニル）（ピペリジン−４−イル）メタノン塩酸塩（９２０ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）の溶液にトリエチルアミン（１．５ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１３０℃で１２分間マイクロ波処理した。溶媒を真空中で除去し、残留物を塩化メチレン及び水に溶かした。有機層をフラッシュカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン、１０：９０〜１００：０）により精製して、わずかに黄色の油（９５０ｍｇ、収率７４％）を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.94 (d, J = 8.5 Hz, 2 H), 6.96 (d, J = 8.5 Hz, 2 H), 4.22-4.39 (m, 2 H), 3.90 (s, 3 H), 3.57 (dt, J = 22.6, 9.0 Hz, 2 H), 3.40-3.51 (m, J = 8.5 Hz, 1 H), 3.23-3.39 (br s, 1 H), 2.93-3.20 (m, 3 H), 2.33-2.61 (m, 2 H), 2.13-2.31 (m, 1 H), 1.83-2.03 (m, 4 H).Ｃ１９Ｈ２３Ｎ３Ｏ３について計算したＨＲＭＳ  ３４２．１８１８、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、３４２．１８３０。
【０１７９】
中間体２７
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトイミドアミド塩酸塩
【０１８０】
【化４２】
0005957077.tif 000043
メタノール（１５ｍＬ）中２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトニトリル（６９０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液にナトリウムメトキシド（０．０４６ｍＬ、０．２０ｍｍｏｌ、２５％）を加え、混合物を周囲温度で２時間撹拌した。塩化アンモニウム（１２０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を周囲温度で６０時間撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、ヘプタン中酢酸エチル（４０％）を加え、周囲温度で１時間撹拌し、次いで、ろ過した。得られた固体をエーテルで洗浄して、淡色固体（８００ｍｇ、収率１００％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３４２．４（Ｍ＋１）、保持時間０．７９
【０１８１】
中間体２８
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトニトリル
【０１８２】
【化４３】
0005957077.tif 000044
ＴＨＦ（３０ｍＬ）及びＤＭＦ（５ｍＬ）中３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（１．６５ｍｍｏｌ、５００ｍｇ）及びクロロアセトニトリル（１．６５ｍｍｏｌ、０．１２５ｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、２．４８ｍｍｏｌ、０．０９９ｇ）を加え、７０℃に３０分間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、真空中で乾燥した。酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ）を実施して、表題化合物を灰色がかった白色残留物（１２５ｍｇ、収率２２．１％）として得た。計算ＭＳ＝３４１．４、観察ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３４２．９（Ｍ＋Ｈ＋）；ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４７２分。
【０１８３】
中間体２９
｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトニトリル
【０１８４】
【化４４】
0005957077.tif 000045
０℃のＴＨＦ（６０ｍＬ）中（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（６．３２ｍｍｏｌ、２．０ｇ）及びブロモアセトニトリル（１８．９６ｍｍｏｌ、２．２７５ｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、１８．９６ｍｍｏｌ、０．７６ｇ）を加え、Ｎ２下で１時間撹拌した。周囲温度に加温し、クロロアセトニトリル（２ｍＬ）を加えた。３０分後に、反応物を０℃に冷却し、飽和塩化アンモニウム溶液により反応を停止させた。３％ＭｅＯＨ／酢酸エチル〜１５％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ）を実施して、表題化合物を赤褐色発泡体（１．６ｇ、収率７１．２％）として得た。計算分子式＝Ｃ２０Ｈ２５Ｎ３Ｏ３＝３５５．４４０６、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３５６．６（Ｍ＋Ｈ＋）；分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．８３１分。
【０１８５】
中間体３０
｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトニトリル
【０１８６】
【化４５】
0005957077.tif 000046
ＴＨＦ（５０ｍＬ）中（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（６．３２ｍｍｏｌ、２．０ｇ）及びクロロアセトニトリル（６．３２ｍｍｏｌ、０．４８ｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、９．４８ｍｍｏｌ、０．３８ｇ）を加え、７０℃に３０分間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、真空中で乾燥した。酢酸エチル〜２０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルで溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ）を実施して、表題化合物を灰色がかった白色残留物（１．１ｇ、収率４９％）として得た。計算分子式＝Ｃ２０Ｈ２５Ｎ３Ｏ３＝３５５．４４０６、実測値ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ３５６．１９７８（Ｍ＋Ｈ＋）；分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．５９１分。
【０１８７】
中間体３１
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトアミジン
【０１８８】
【化４６】
0005957077.tif 000047
メタノール（４ｍＬ）中２−（３−（４−４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトニトリル（１２５ｍｇ、０．３６６ｍｍｏｌ）の溶液にナトリウムメトキシド（２ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を加え、周囲温度で２時間撹拌した。塩化アンモニウム（２３．５ｍｇ、０．４３９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、次いで、ペンタン中酢酸エチル（１：１）を加え、室温で１時間撹拌した。ろ過により固体を得、これをエーテルで洗浄して、青白い固体（１３０ｍｇ、１００％）を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ  ３６０．０（Ｍ＋１）、ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．１３９分。
【０１８９】
中間体３２
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトアミジン
【０１９０】
【化４７】
0005957077.tif 000048
メタノール（４０ｍＬ）中｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトニトリル（１．６０ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液にナトリウムメトキシド（５１１ｍｇ、９．４５ｍｍｏｌ）を加え、４０℃で３時間撹拌した。塩化アンモニウム（２６５ｍｇ、９．４５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４０℃で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、次いで、酢酸エチル中クロロホルム（１：２の容積）を加え、周囲温度で１時間撹拌した。１５００ｒｐｍで３０分間遠心分離して、ベージュ色固体（１．８ｇ、９８％）を得た。Ｃ２０Ｈ２９Ｎ４Ｏ３Ｃｌについて計算したＨＲＭＳ  ３７２．４７１２、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、実測値  ３７３．２２４２。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δppm 1.75-1.98 (m, 5 H) 2.19 - 2.40 (m, 7 H) 2.48 - 2.65 (m, 1 H) 2.76 - 3.01 (m, 3 H) 3.16 - 3.36 (m, 3 H) 3.46 - 3.64 (m, 3 H) 3.81 - 3.94 (m, 6 H) 4.34 (d, J=16.56 Hz, 1 H) 4.52 (d, J=16.56 Hz, 1 H) 6.84 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.28 (s, 1 H) 7.70 - 7.87 (m, 3 H) 8.51 (s, 1 H)、ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．３８５分。
【０１９１】
中間体３３
トルエン−４−スルホン酸７−オキソシクロペンタ−１，３，５−トリエニルエステル
【０１９２】
【化４８】
0005957077.tif 000049
表題物質は、Chem. Pharm. Bull.、54巻(5号)、703頁(2006年)に見いだされる条件に従って合成した。
【０１９３】
中間体３４
２−（２，４−ジブロモブタンアミド）酢酸エチル
【０１９４】
【化４９】
0005957077.tif 000050
ジクロロメタン（９ｍＬ）中２−アミノ酢酸エチル塩酸塩（１．５６８ｇ、１１．２４ｍｍｏｌ）及び水（２ｍＬ）の０℃の撹拌混合物にジクロロメタン（２ｍＬ）中塩化２，４−ジブロモブタノイル（３．０ｇ、１０．２１ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。次いで、水酸化ナトリウム水溶液（１１．５Ｍ、２ｍＬ）を徐々に加えた。反応物を０℃で１時間、次いで、室温で１５分間撹拌した。次いで、反応物をジクロロメタン（４０ｍＬ）及び水（２５ｍＬ）で処理した。層を分離し、有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮し、真空中で乾燥して、粗表題ラセミ化合物（純度９０％の３．１６５ｇ、収率８４％）を透明な油として得た。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 6.81 (br s, 1 H), 4.58 (dd, J=8.84, 4.80 Hz, 1 H), 4.21 - 4.31 (m, 2 H), 4.07 (d, J=5.56 Hz, 2 H), 3.51 - 3.63 (m, 2 H), 2.62 - 2.75 (m, 1 H), 2.44 - 2.57 (m, 1 H), 1.28 - 1.36 (m, 3 H).
【０１９５】
中間体３５
２−（３−ブロモ−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸エチル
【０１９６】
【化５０】
0005957077.tif 000051
５℃のベンゼン（８．６ｍＬ）中粗２−（２，４−ジブロモブタンアミド）酢酸エチル（２．８４７ｇ、８．６０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に水素化ナトリウム（２０６ｍｇ、８．６０ｍｍｏｌ）の６０％鉱油分散体（３４４ｍｇ）を２０分にわたり少しずつ加えた。氷水上に注加し、酢酸エチルで希釈する前に、反応物をさらに１０分間撹拌した。層を分離した。有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮し、乾燥した。出発二臭化物及び生成物の混合物を、０〜１００％酢酸エチル／ヘプタン勾配を用いてシリカゲルカラムを通して溶離することにより精製して、表題ラセミ化合物（５２３ｍｇ、収率２４％）を透明な油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝２５１．５。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 4.46 (dd, J=7.07, 3.03 Hz, 1 H), 3.96 - 4.28 (m, 4 H), 3.63 - 3.72 (m, 1 H), 3.43 - 3.53 (m, 1 H), 2.63 - 2.76 (m, 1 H), 2.34 - 2.43 (m, 1 H), 1.26 - 1.34 (m, 3 H).
【０１９７】
中間体３６
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸エチル
【０１９８】
【化５１】
0005957077.tif 000052
（４−メトキシフェニル）（ピペリジン−４−イル）メタノン塩酸塩（５２４ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（８０ｍＬ）中トリエチルアミン（０．６５７ｍＬ、４７７ｍｇ、４．７１ｍｍｏｌ）とともに室温で撹拌した。アセトニトリル（２０ｍＬ）中２−（３−ブロモ−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸エチル（５１３ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）の溶液を混合物に加えた。反応物を４０℃で３時間、次いで、５０℃で一夜撹拌した。２４時間後に反応は完結せず、反応物を７０℃でさらに４８時間撹拌し、次いで、室温に冷却した。溶媒を真空中で除去した。粗オレンジ色固体を０〜１０％メタノール／ジクロロメタン勾配を用いてシリカゲルカラムを通して溶離して、表題ラセミ化合物（７３０ｍｇ、収率８７％、純度９５％）を高粘度の琥珀色の油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝３８９．５。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 7.90 - 7.95 (m, 2 H), 6.91 - 6.96 (m, 2 H), 4.17 - 4.24 (m, 2 H), 3.95 - 4.17 (m, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.56 - 3.64 (m, 1 H), 3.36 - 3.50 (m, 2 H), 3.18 - 3.29 (m, 1 H), 3.04 - 3.13 (m, 1 H), 2.93 - 3.04 (m, 2 H), 2.41 - 2.56 (m, 1 H), 2.20 - 2.35 (m, 1 H), 2.04 - 2.19 (m, 1 H), 1.80 - 1.95 (m, 4 H), 1.26 - 1.32 (m, 3 H).
【０１９９】
中間体３７
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸
【０２００】
【化５２】
0005957077.tif 000053
エタノール（３６ｍＬ）中２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸エチル（７２７ｍｇ、１．７７８ｍｍｏｌ）の溶液に２Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（１．８ｍＬ）を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ７に中和した。溶媒を真空中で除去し、次いで、ジクロロメタンと３回共沸させた。薄黄色の泡状固体を高真空中で乾燥して、表題ラセミ生成物（８３５ｍｇ）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝３６０．９。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δppm 7.89 - 8.01 (m, 2 H), 6.96 - 7.11 (m, 2 H), 3.85 (s, 3 H), 3.46 - 3.68 (m, 2 H), 3.13 - 3.46 (m, 5 H), 2.93 - 3.04 (m, 1 H), 2.61 - 2.84 (m, 1 H), 2.30 - 2.42 (m, 1 H), 1.95 - 2.11 (m, 1 H), 1.81 - 1.95 (m, 1 H), 1.64 - 1.78 (m, 2 H), 1.44 - 1.63 (m, 2 H).
【０２０１】
中間体３８
５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−アミン臭化水素酸塩
【０２０２】
【化５３】
0005957077.tif 000054
表題化合物は、次の引用文献に例示されている手順に従って調製した。On triazoles XLVIII [1]、Synthesis of isomeric aminothiazolo[1,2,4]triazole, amino[1,2,4]triazolo[1,3]thiazine and -[1,3]thiazepine derivatives. Prauda, Ibolya; Reiter, Jozsef、Egis Pharmaceuticals Ltd.、Budapest、Hung. Journal of Heterocyclic Chemistry (2003年)、40巻(5号)、821〜826頁。
【０２０３】
中間体３９
６−ホルミル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−５−カルボン酸エチル
【０２０４】
【化５４】
0005957077.tif 000055
６−メチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−５−カルボン酸エチル（６．０ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）及び二酸化セレン（４．３ｇ、３８．８ｍｍｏｌ）の混合物を酢酸（１４１ｍＬ）中で１１０℃で５時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、ろ過により固体を除去した。ろ液を濃縮し、０〜１５％酢酸エチル／ヘプタン勾配と続く１５％を用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（１．７１０ｇ）を約９０％の純度で琥珀色の油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝１８５．３。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 10.22 (s, 1 H), 4.28 (q, J=7.24 Hz, 2 H), 4.12 - 4.19 (m, 2 H), 2.54 (t, J=6.57 Hz, 2 H), 1.88 - 1.98 (m, 2 H), 1.30 - 1.38 (m, 3 H).
【０２０５】
中間体４０
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５（６Ｈ）−オン
【０２０６】
【化５５】
0005957077.tif 000056
メタノール（８０ｍＬ）中６−ホルミル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−５−カルボン酸エチル（１．７０５ｇ、９．２６ｍｍｏｌ）の０℃の撹拌混合物に３５％ヒドラジン水和物（０．３１１ｇ、９．７２ｍｍｏｌ）を急速に加えた。２０分後に、溶媒を減圧下で除去し、残留物を酢酸（７０ｍＬ）及び水（７ｍＬ）で処理し、１１０℃で２０分間撹拌した。溶媒を真空中で除去した。粗残留物をメタノール／ジクロロメタンの０〜２５％勾配を用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより溶離して、表題化合物（１．３８４ｇ）を９０％より高い純度で薄黄色固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝１５３．２。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 10.56 (br s, 1 H), 7.53 (s, 1 H), 4.17 - 4.35 (m, 2 H), 2.57 (t, J=6.57 Hz, 2 H), 1.99 - 2.08 (m, 2 H).
【０２０７】
中間体４１
５−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン
【０２０８】
【化５６】
0005957077.tif 000057
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５（６Ｈ）−オン（４００ｍｇ、２．６３ｍｍｏｌ）をオキシ塩化リン（４ｍＬ、６．５８ｇ、４２．９ｍｍｏｌ）中で９５℃でほぼ２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、過剰のオキシ塩化リンを真空中で除去した。残留物を氷（約１５ｇ）で処理し、ｐＨ＞７になるまで固形炭酸カリウムで非常にゆっくりと処理した。黄褐色固体をろ過により単離し、真空中で乾燥して、表題化合物（２６７ｍｇ、収率５７％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ）＋］＝１７０．６。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 8.68 (s, 1 H), 4.28 - 4.42 (m, 2 H), 2.78 (t, J=6.32 Hz, 2 H), 2.05 - 2.20 (m, 2 H).
【０２０９】
中間体４２
Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５−アミン
【０２１０】
【化５７】
0005957077.tif 000058
イソプロパノール（２ｍＬ）中５−クロロ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン（１５０ｍｇ、０．８７９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１５４ｍＬ、１１４ｍｇ、０．８７９ｍｍｏｌ）及び２，４−ジメトキシベンジルアミン（２９４ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ）の混合物を、過剰の２，４−ジメトキシベンジルアミン（約２ｇ、１２ｍｍｏｌ）を加える前に封管中で１１５℃で１８時間、次いで、１４５℃で４．５時間加熱した。反応物を１４５℃で１８時間撹拌した。室温に冷却した後、イソプロパノールを真空中で除去した。次いで、粗物質をジエチルエーテル（３０ｍＬ）で処理した。ろ過により黄褐色固体を除去した。ろ液を少量の飽和水性塩化アンモニウムで２回洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、濃縮した。粗物質を０〜１０％メタノール／ジクロロメタン勾配を用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物（１５９ｍｇ）を琥珀色の泡状油として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ）＋］＝３０１．８。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δppm 8.22 (s, 1 H), 7.35 (d, J=8.08 Hz, 1 H), 6.36 - 6.56 (m, 2 H), 4.73 (d, J=5.56 Hz, 2 H), 4.37 - 4.56 (m, 1 H), 4.11 - 4.24 (m, 2 H), 3.86 (s, 3 H), 3.81 (s, 3 H), 2.27 - 2.31 (m, 2 H), 2.04 - 2.11 (m, 2 H).
【０２１１】
中間体４３
３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５−アミン臭化水素酸塩
【０２１２】
【化５８】
0005957077.tif 000059
酢酸（３ｍＬ）中Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５−アミン（１５８、０．５２４ｍｍｏｌ）及び３０重量％臭化水素酸／酢酸（０．３ｍＬ、０．４ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の混合物を９０℃でほぼ２時間撹拌した。次いで、反応物を室温に冷却し、溶媒を真空中で除去した。暗赤色固体をジエチルエーテルで洗浄し、次いで、乾燥して、約６５％の純度の粗表題化合物（１２２ｍｇ）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）［ｍ／ｅ、（Ｍ）＋］＝１５１．７。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δppm 8.22 (s, 1 H), 8.11 (br s, 2 H), 4.36 - 4.40 (m, 2 H), 2.47 (t, J=6.32 Hz, 2 H), 1.98 - 2.06 (m, 2 H).
【０２１３】
実施例１：
２−クロロ−６−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝ベンゾニトリル
【０２１４】
【化５９】
0005957077.tif 000060
テトラヒドロフラン（１ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（０．１ｍＬ）中３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）ピロリジン−２−オン（７０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）及び２−（ブロモメチル）−６−クロロベンゾニトリル（８０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液に水素化ナトリウム（４６ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ、鉱油中６０％）を加えた。混合物を周囲温度で３０分間撹拌した。ジクロロメタン及びメタノールを徐々に加えて、反応を停止させた。次いで、混合物をショートパッドのシリカゲルカラムによりろ過し、溶媒を真空中で除去し、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（最初に酢酸エチル：ヘキサン、１０：９０〜１００：０、次にメタノール：ジクロロメタン、１：９９〜１０：９０）により精製して、褐色油を得、これをさらにＨＰＬＣにより精製して、無色生成物を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.85 (m, 2 H), 7.45 (t, J=8.0 Hz, 1 H), 7.35 - 7.41 (m, 1 H), 7.30 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 6.87 (m, J=9.0 Hz, 2 H), 4.62 (q, J=15.6 Hz, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 3.50 (t, J=9.0 Hz, 1 H), 3.11 - 3.37 (m, 3 H), 2.94 - 3.11 (m, 1 H), 2.75 - 2.94 (m, 2 H), 2.28 - 2.54 (m, 1 H), 2.09 - 2.28 (m, 1 H), 1.90 - 2.09 (m, 1 H), 1.66 - 1.90 (m, 4 H).Ｃ２５Ｈ２６ＣｌＮ３Ｏ３について計算したＨＲＭＳ  ４５２．１７４１、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４５２．１７６０。
【０２１５】
実施例２：
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２１６】
【化６０】
0005957077.tif 000061
ＴＨＦ（４００ｍＬ）及びＤＭＦフォーミュラ（２０ｍＬ）中３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（４３．７ｍｍｏｌ、１３．２ｇ）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（４８ｍｍｏｌ、９．６ｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、１５３ｍｍｏｌ、６．１ｇ）を加え、７０℃に１時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、１Ｌのエーテルで希釈し、得られた懸濁固体をろ過し、真空中で乾燥して、表題化合物を灰色がかった白色固体（２２ｇ、収率９５．３％）として得た。Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ５について計算したＨＲＭＳ  ４６６．５４１７、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４６７．２３０５。1H NMR (400 MHz, MeOD) δppm 1.67 - 1.92 (m, 4 H) 2.05 - 2.24 (m, 2 H) 2.47 - 2.64 (m, 3 H) 2.72 - 2.82 (m, 1 H) 2.84 - 2.93 (m, 1 H) 3.06 - 3.15 (m, 1 H) 3.26 - 3.47 (m, 10 H) 3.68 (t, J=8.78 Hz, 1 H) 3.83 - 3.99 (m, 5 H) 4.16 (d, J=15.56 Hz, 1 H) 4.40 - 4.58 (m, 3 H) 7.01 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.97 (d, J=9.03 Hz, 2 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４５５分。
【０２１７】
実施例３：
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２１８】
【化６１】
0005957077.tif 000062
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（２１ｇ）をメタノール（２．１Ｌ）に溶解し、３０分間音波処理し、非溶解物質をろ過により除去した。１２５バールで７０ｍＬ／分の５０％ＭｅＯＨ／１％イソプロピルアミン／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離する３．０×２５．０ｃｍ（Ｓ，Ｓ）Ｗｈｅｌｋ０−１カラム上のＳＦＣクロマトグラフィーによるキラル分離により、７．９１ｇの物質を得た。物質を乾燥するまで真空中でクロロホルム（１０×１Ｌ）と共蒸留した。乾燥した試料をアセトニトリル／水に溶解し、液体Ｎ２に浸漬することにより凍結し、真空（０．０１４トル）中に３日間おいた。凍結乾燥した物質をアセトニトリルに溶解し、Ｋ２ＣＯ３（６．３ｇ）で処理し、８０℃に４５分間加熱し、ろ過し、乾燥した（９．１ｇ）。塩（８ｇ）を４０ｍＬの水に溶解し、０℃に冷まし、水性ＨＣｌ（０℃に冷ました５ｍＬの１５％溶液）をｐＨ９．５まで１滴ずつ加え、その時点に、溶液が混濁した状態になった。溶液をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で抽出し、濃縮乾燥した。化合物を管内で真空中６５℃でさらに乾燥して、（４．２４６ｇ、収率４０．４％）の遊離塩基を得た。Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ５について計算したＨＲＭＳ  ４６６．５４１７、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４６７．２３０５。；1H NMR (400 MHz, MeOD) δppm 1.67 - 1.91 (m, 4 H) 2.08 - 2.31 (m, 2 H) 2.48 - 2.58 (m, 1 H) 2.59 - 2.66 (m, 2 H) 2.78 - 2.87 (m, 1 H) 2.89 - 2.98 (m, 1 H) 3.11 - 3.19 (m, 1 H) 3.27 - 3.41 (m, 12 H) 3.45 - 3.52 (m, 2 H) 3.64 (t, J=8.53 Hz, 1 H) 3.87 (s, 3 H) 3.91 (t, J=5.52 Hz, 2 H) 4.38 (d, J=10.54 Hz, 2 H) 4.48 (s, 2 H) 7.01 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.96 (d, J=9.03 Hz, 2 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４５５分
【０２１９】
代替手順
ＴＨＦ（２８３ｍＬ）中（Ｓ）−３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）ピロリジン−２−オン（２５．６６ｇ、８５ｍｍｏｌ）の溶液を−１．７℃に冷却し、これに、温度を５℃未満に維持しながらＮａＨ（１０．１８ｇ、２５５ｍｍｏｌ）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（８９ｍｍｏｌ、１７．８８ｇ）を徐々に加えた。反応容器を氷水浴中に浸漬し、浴を一夜で終了させた。ＬＣＭＳにより反応が完結したとき（約１５時間）、反応物を１．７℃に冷却し、内部温度を１０℃未満に保ちながら、飽和ＮＨ４Ｃｌを徐々に加えた。混合物をジクロロメタン（５００ｍＬ）及び１Ｎ  ＮａＯＨ（５００ｍＬ）で希釈し、同等に処理した２つのバッチに分割した。追加の１Ｎ  ＮａＯＨ（５００ｍＬ）を加え、水層をジクロロメタン（２×５００ｍＬ）で洗浄した。水層を、約２５０ｍＬの３Ｎ  ＨＣｌを用いてｐＨ７に調整し、ジクロロメタン（４×５００ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、ろ過し、真空中で濃縮した。粗物質をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶かし、酢酸エチル（５００ｍＬ）を加えた。得られた溶液を約３００ｍＬの容積に濃縮し、純表題化合物を接種し、真空中でさらに濃縮した。この撹拌溶液に酢酸エチル（５００ｍＬ）及び純表題化合物の種子を加えた。懸濁液のろ過により、表題化合物を白色固体（３２．８７ｇ、７０．５ｍｍｏｌ）として得た。
【０２２０】
実施例４：
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２２１】
【化６２】
0005957077.tif 000063
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（３７ｍｇ）を４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のキラルＳＦＣクロマトグラフィーにより精製して、１９ｍｇの粗物質を得、これを４５分にわたる２５〜３５％アセトニトリル／水の勾配を用いて溶離するＨＰＬＣ（３００×５０ｍｍ）によりさらに精製した後、純粋画分の凍結乾燥により、所望の物質のＴＦＡ塩を得た。メタノール（２ｍＬ）、ＤＣＭ（３ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）を用いて溶離する重炭酸塩ＭＰ樹脂カートリッジによるろ過によるＴＦＡ塩の中和によって、表題化合物（５ｍｇ、収率２６％）を得た。Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ５について計算したＭＷ  ４６６．５４１７、ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ実測値  ４６７．２３０５（Ｍ＋Ｈ）＋；1H NMR (400 MHz, MeOD) δppm 1.69 - 1.90 (m, 4 H) 2.09 - 2.32 (m, 2 H) 2.48 - 2.58 (m, 1 H) 2.59 - 2.66 (m, 2 H) 2.77 - 2.87 (m, 1 H) 2.90 - 2.99 (m, 1 H) 3.11 - 3.20 (m, 1 H) 3.26 - 3.42 (m, 12 H) 3.50 (s, 2 H) 3.63 (s, 1 H) 3.87 (s, 3 H) 3.91 (t, J=5.77 Hz, 2 H) 4.39 (s, 2 H) 4.47 (s, 2 H) 7.01 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.96 (d, J=9.03 Hz, 2 H).;ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４５５分
【０２２２】
代替手順
ＴＨＦ（５ｍＬ）中（Ｓ）−３−ヒドロキシピロリジン−２−オンからの（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オンと同様に調製した（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、３３．２ｍｇ）の溶液にＴＨＦ中カリウムヘキサメチルジルシリルアミド（hexamethyldilsilylamide）の１Ｍ溶液（０．３３１ｍｍｏｌ、０．３３１ｍＬ）を−７８℃で２時間にわたって加えた。反応物を１６時間にわたり０℃に加温し、真空中で蒸発させた。残りの残留物を０〜５０％ＭｅＯＨ／酢酸エチルの勾配で溶離するフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ）により精製して、表題化合物を灰色がかった白色固体（２０ｍｇ、収率２５．９％）として得た。Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ５について計算したＨＲＭＳ  ４６６．５４１７、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４６７．２２９６。1H NMR (400 MHz, MeOD) δppm 1.69 - 1.91 (m, 4 H) 2.10 - 2.33 (m, 2 H) 2.49 - 2.59 (m, 1 H) 2.59 - 2.67 (m, 2 H) 2.76 - 2.89 (m, 1 H) 2.91 - 3.01 (m, 1 H) 3.11 - 3.22 (m, 1 H) 3.32 - 3.44 (m, 2 H) 3.46 -3.58 (m, 2 H) 3.59 - 3.71 (t, J=8.78 Hz, 1 H) 3.88 - 3.96 (m, 2 H) 4.04 - 4.14 (d, J=15.56 Hz, 2 H) 4.36 - 4.42 (m, 2 H) 4.44 - 4.51 (m, 2 H) 6.97 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.92 (d, J=9.03 Hz, 2 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ保持時間＝４．０２分。
【０２２３】
実施例５：
２−クロロ−５−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）ベンゾニトリル
【０２２４】
【化６３】
0005957077.tif 000064
ＴＨＦ（１ｍＬ）及びＤＭＦ（０．１ｍＬ）中３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）ピロリジン−２−オン（７０ｍｇ、０．２３２ｍｍｏｌ）及び５−（ブロモメチル）−２−クロロベンゾニトリル（８０ｍｇ、０．３４７ｍｍｏｌ）の混合物にＮａＨ（４６．３ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ、６０％）を加えた。反応物を真空中で濃縮し、次いで、ジクロロメタン及びＭｅＯＨに溶かし、シリカゲルの短いプラグによりろ過した。表題物質を含むプールした画分をプールし、濃縮し、ＮａＨＣＯ３で中和した。ＭｅＯＨを加え、溶液を冷凍庫中で冷却した。ろ過により白色固体を収集することにより表題化合物を得た（４５ｍｇ）。Ｃ２５Ｈ２６ＣｌＮ３Ｏ３について計算したＨＲＭＳ  ４５１．１６７１、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４５２．１７４４。
【０２２５】
実施例６：
６−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−１−メチル−１，３ａ，５，７ａ−テトラヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２２６】
【化６４】
0005957077.tif 000065
ＴＨＦ（２ｍＬ）中３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）及び６−クロロメチル−１−メチル−１，５−ジヒドロピラゾロ［３，４−ｄ］ピリミジン−４−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、３３ｍｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、０．３３１ｍｍｏｌ、２３ｍｇ）を加え、７０℃に１時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、１０ｍＬのエーテルで希釈し、得られた懸濁固体をろ過し、真空中で乾燥して、表題化合物を灰色がかった白色固体（６６．４ｍｇ、収率８７％）として得た。Ｃ２４Ｈ２８Ｎ６Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４６４．５２８６、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４６５．２２５６。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.70 - 1.93 (m, 4 H) 2.09 - 2.31 (m, 2 H) 2.53 - 2.66 (m, 1 H) 2.80 - 2.91 (m, 1 H) 2.93 - 3.02 (m, 1 H) 3.10 - 3.21 (m, 1 H) 3.33 - 3.43 (m, 2 H) 3.48 - 3.57 (m, 2 H) 3.65 - 3.75 (m, 1 H) 3.83 - 3.90 (m, 6 H) 4.37 - 4.51 (m, 2 H) 6.97 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.83 - 7.91 (m, 1 H) 7.97 (d, J=9.03 Hz, 2 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分
【０２２７】
実施例７：
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−４ａ，７ａ−ジヒドロ−３Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２２８】
【化６５】
0005957077.tif 000066
ＴＨＦ（２ｍＬ）中３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）及び２−クロロメチル−３Ｈ−チエノ［３，２−ｄ］ピリミジン−４−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、３３ｍｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、０．３３１ｍｍｏｌ、２３ｍｇ）を加え、７０℃に１時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、１０ｍＬのエーテルで希釈し、得られた懸濁固体をろ過し、真空中で乾燥して、表題化合物を灰色がかった白色固体（７０．５ｍｇ、収率９５．４％）として得た。Ｃ２４Ｈ２６Ｎ４Ｏ４Ｓについて計算したＨＲＭＳ  ４６６．５６３２、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４６７．１７４０。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.65 - 1.92 (m, 4 H) 2.06 - 2.29 (m, 2 H) 2.48 - 2.62 (m, 1 H) 2.78 - 2.89 (m, 1 H) 2.89 - 3.00 (m, 1 H) 3.09 - 3.18 (m, 1 H) 3.34 - 3.53 (m, 4 H) 3.55 - 3.65 (m, 1 H) 3.68 - 3.77 (m, 1 H) 4.23 - 4.32 (m, 1 H) 4.60 - 4.69 (m, 1 H) 6.97 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.17 - 7.24 (m, 1 H) 7.73 - 7.81 (m, 1 H) 7.96 (d, J=9.03 Hz, 2 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ保持時間＝２．７７分
【０２２９】
実施例８：
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−６−メチル−４ａ，７ａ−ジヒドロ−３Ｈ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２３０】
【化６６】
0005957077.tif 000067
ＴＨＦ（２ｍＬ）中３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、５０ｍｇ）及び２−クロロメチル−６−メチル−３Ｈ−チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（０．１６５ｍｍｏｌ、３３ｍｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、０．３３１ｍｍｏｌ、２３ｍｇ）を加え、７０℃に１時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、１０ｍＬのエーテルで希釈し、得られた懸濁固体をろ過し、真空中で乾燥して、表題化合物を灰色がかった白色固体（７０．５ｍｇ、収率９５．４％）として得た。Ｃ２５Ｈ２８Ｎ４Ｏ４Ｓについて計算したＨＲＭＳ  ４８０．５９０３、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４８１．１９０７。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.66 - 1.93 (m, 4 H) 2.05 - 2.30 (m, 2 H) 2.51 - 2.63 (m, 1 H) 2.79 - 2.90 (m, 1 H) 2.90 - 2.98 (m, 1 H) 3.03 - 3.18 (m, 1 H) 3.33 - 3.54 (m, 4 H) 3.65 - 3.75 (m, 1 H) 3.87 (s, 3 H) 4.20 - 4.31 (m, 1 H) 4.51 - 4.62 (m, 1 H) 6.94 - 7.06 (m, 3 H) 7.98 (d, J=9.03 Hz, 2 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ保持時間＝３．２２分
【０２３１】
実施例９：
２−｛３−［４−（４−クロロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２３２】
【化６７】
0005957077.tif 000068
ＴＨＦ（１５ｍＬ）及びＤＭＦ（２．５ｍＬ）中３−［４−（４−クロロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（０．１７ｍｍｏｌ、５３ｍｇ）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（０．１７ｍｍｏｌ、３５ｍｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、０．６ｍｍｏｌ、１４ｍｇ）を加え、７０℃に１５分間加熱した。反応物を真空中で濃縮し、ＤＭＦの残余をＮ２の気流により除去した。粗物質を、４５分にわたる２５〜３５％アセトニトリル／水の勾配により溶離する分取逆相ＨＰＬＣ（３００×５０ｍｍ）により精製した。純粋画分の凍結乾燥により、所望の物質のＴＦＡ塩を得た。メタノール（２ｍＬ）、ＤＣＭ（３ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）を用いて溶離する重炭酸塩ＭＰ樹脂カートリッジによるろ過によるＴＦＡ塩の中和によって、表題化合物（７ｍｇ、収率８．６％）を得た。ＨＲ−ＭＳ  ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋：実測４７１．１８２３、Ｃ２４Ｈ２７ＣｌＮ４Ｏ４について計算＝４６６．５４１７；1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.66 - 1.92 (m, 6 H) 2.05 - 2.28 (m, 3 H) 2.47 - 2.67 (m, 5 H) 2.75 - 2.87 (m, 2 H) 2.88 - 2.97 (m, 2 H) 3.08 - 3.18 (m, 2 H) 3.24 - 3.51 (m, 22 H) 3.61 - 3.70 (m, 2 H) 3.91 (t, J=5.52 Hz, 2 H) 4.20 - 4.32 (m, 1 H) 4.38 - 4.54 (m, 3 H) 7.51 (d, J=8.53 Hz, 2 H) 7.96 (d, J=8.53 Hz, 2 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．６６６分。
【０２３３】
実施例１０：
２−｛３−［４−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２３４】
【化６８】
0005957077.tif 000069
ＴＨＦ（１５ｍＬ）及びＤＭＦ（２．５ｍＬ）中３−［４−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（０．３９ｍｍｏｌ、１１２ｍｇ）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（０．３９ｍｍｏｌ、７６ｍｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、１．３５ｍｍｏｌ、５４ｍｇ）を加え、７０℃に１５分間加熱した。反応物を真空中で濃縮し、ＤＭＦの残余をＮ２の気流により除去した。粗物質を、４５分にわたる２５〜３５％アセトニトリル／水の勾配により溶離する分取逆相ＨＰＬＣ（３００×５０ｍｍ）により精製した後、純粋画分の凍結乾燥により、所望の物質のＴＦＡ塩を得た。メタノール（２ｍＬ）、ＤＣＭ（３ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）を用いて溶離する重炭酸塩ＭＰ樹脂カートリッジによるろ過によるＴＦＡ塩の中和によって、表題化合物（１００ｍｇ、収率５７％）を得た。ＨＲ−ＭＳ  ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋：実測４５５．２１１１、分子式Ｃ２４Ｈ２７ＦＮ４Ｏ４について計算＝４５４．５０５６；1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.58 - 1.85 (m, 4 H) 1.99 - 2.24 (m, 2 H) 2.42 - 2.57 (m, 3 H) 2.67 - 2.81 (m, 1 H) 2.84 - 2.93 (m, 1 H) 3.11-3.17 (m, 1 H) 3.36 - 3.47 (m, 2 H) 3.52 - 3.62 (m, 1 H) 3.76 - 3.86 (m, 2 H) 4.26 - 4.40 (m, 4 H) 7.09 - 7.18 (m, 2 H) 7.91 - 8.00 (m, 2 H);ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４６１分。
【０２３５】
実施例１１：
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２３６】
【化６９】
0005957077.tif 000070
４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のキラルＳＦＣクロマトグラフィーによる２−｛３−［４−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（９０ｍｇ）のキラル分割により４８ｍｇの粗物質を得、これを４５分にわたる２５〜３５％アセトニトリル／水の勾配を用いて溶離するＲＰ−ＨＰＬＣ（３００×５０ｍｍ）によりさらに精製した後、純粋画分の凍結乾燥により、所望の物質のＴＦＡ塩を得た。メタノール（２ｍＬ）、ＤＣＭ（３ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）を用いて溶離する重炭酸塩ＭＰ樹脂カートリッジによるろ過によるＴＦＡ塩の中和によって、表題化合物（５ｍｇ、収率１０．４％）を得た。ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋：実測４５５．２１０１、分子式Ｃ２４Ｈ２７ＦＮ４Ｏ４について計算した値＝４５４．５０５６；1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.87 - 2.10 (m, 2 H) 2.11 - 2.29 (m, 3 H) 2.34 - 2.53 (m, 1 H) 2.53 - 2.70 (m, 3 H) 3.23 - 3.43 (m, 14 H) 3.43 - 3.71 (m, 5 H) 3.71 - 3.84 (m, 1 H) 3.86 - 4.01 (m, 3 H) 4.37 - 4.57 (m, 5 H) 7.22 - 7.33 (m, 2 H) 8.07 - 8.16 (m, 2 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４６１分
【０２３７】
実施例１２：
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２３８】
【化７０】
0005957077.tif 000071
４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のＳＦＣクロマトグラフィーによる２−｛３−［４−（４−フルオロベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（９０ｍｇ）のキラル分割により４８ｍｇの粗物質を得、これを４５分にわたる２５〜３５％アセトニトリル／水の勾配を用いて溶離するＲＰ−ＨＰＬＣ（３００×５０ｍｍ）によりさらに精製した後、純粋画分の凍結乾燥により、所望の物質のＴＦＡ塩を得た。メタノール（２ｍＬ）、ＤＣＭ（３ｍＬ）及びメタノール（２ｍＬ）を用いて溶離する重炭酸塩ＭＰ樹脂カートリッジによるろ過によるＴＦＡ塩の中和によって、表題化合物（２７ｍｇ、収率５６％）の遊離塩基を得た。ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）＋：実測４５５．２０８８、分子式Ｃ２４Ｈ２７ＦＮ４Ｏ４について計算した値＝４５４．５０５；1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.66 - 1.93 (m, 4 H) 2.07 - 2.32 (m, 2 H) 2.47 - 2.58 (m, 1 H) 2.58 - 2.66 (m, 2 H) 2.75 - 2.87 (m, 1 H) 2.89 - 2.99 (m, 1 H) 3.10 - 3.21 (m, 1 H) 3.22 - 3.43 (m, 13 H) 3.44 - 3.53 (m, 2 H) 3.60 - 3.70 (m, 1 H) 3.91 (t, J=5.52 Hz, 2 H) 4.29 - 4.53 (m, 4 H) 7.17 - 7.30 (m, 2 H) 8.00 - 8.12 (m, 2 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４６１分
【０２３９】
実施例１３：
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２４０】
【化７１】
0005957077.tif 000072
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］ピロリジン−２−オン（０．７９ｍｍｏｌ、２５０ｍｇ）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（０．８７ｍｍｏｌ、１７４ｍｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、２．７７ｍｍｏｌ、１１１ｍｇ）を加え、７０℃に１時間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、１００ｍＬのエーテルで希釈し、得られた懸濁固体をろ過し、真空中で乾燥して、表題化合物を灰色がかった白色固体（３００ｍｇ）として得た。４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のキラルＳＦＣクロマトグラフィーによる２−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（３００ｍｇ）のキラル分割により、７７ｍｇの純物質を得た。Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ５について計算したＨＲＭＳ＝４８０．５６８７、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４８１．２４５５。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.69 - 1.90 (m, 4 H) 2.10 - 2.20 (m, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 4 H) 2.48 - 2.58 (m, 1 H) 2.59 - 2.65 (m, 2 H) 2.77 - 2.88 (m, 1 H) 2.90 - 3.06 (m, 1 H) 3.10 - 3.20 (m, 1 H) 3.32 - 3.42 (m, 3 H) 3.46 - 3.54 (m, 2 H) 3.63 (t, J=8.53 Hz, 1 H) 3.88 - 3.94 (m, 5 H) 4.39 (s, 2 H) 4.47 (s, 2 H) 6.99 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.77 (s, 1 H) 7.87 (dd, J=8.53, 2.01 Hz, 1 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．７３１分。
【０２４１】
実施例１４：
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２４２】
【化７２】
0005957077.tif 000073
この物質は、２−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（３００ｍｇ）から４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のキラルＳＦＣクロマトグラフィーにより得られ、１２５ｍｇの純物質を得た。Ｃ２６Ｈ３２Ｎ４Ｏ５について計算したＨＲＭＳ  ４８０．５６８７、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４８１．２４６３。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.69 - 1.91 (m, 4 H) 2.10 - 2.21 (m, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 4 H) 2.59 - 2.66 (m, 2 H) 2.78 - 2.87 (m, 1 H) 2.90 - 2.98 (m, 1 H) 3.11 - 3.20 (m, 1 H) 3.33 - 3.42 (m, 2 H) 3.46 - 3.55 (m, 2 H) 3.63 (t, J=8.78 Hz, 1 H) 4.39 (s, 2 H) 4.47 (s, 2 H) 6.99 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.77 (s, 1 H) 7.87 (dd, J=8.53, 2.01 Hz, 1 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．６９３分。
【０２４３】
実施例１５：
２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン
【０２４４】
【化７３】
0005957077.tif 000074
ＴＨＦ（４０ｍＬ）及びＤＭＦ（５ｍＬ）中５−メトキシ−１’−（２−オキソピロリジン−３−イル）スピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１（３Ｈ）−オン（３．３４ｍｍｏｌ、１．０５ｇ）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（３．６７ｍｍｏｌ、０．７３７ｇ）の溶液に水素化ナトリウム（６０％、１１．６９ｍｍｏｌ、０．４６８ｇ）を加え、懸濁液を７０℃で４５分間加熱した。反応物を周囲温度に冷却し、１００ｍＬのエーテルで希釈し、灰色がかった白色固体をろ過により収集し、真空中で乾燥した。イソプロピルアルコール／メチルアルコールからの再結晶により、表題化合物を灰色がかった白色固体（６６１ｍｇ、収率４１．４％）として得た。計算ＭＳ＝４７８．６、ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｅ  ４７９．０（Ｍ＋Ｈ＋）；1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.33 - 1.46 (m, 2 H) 1.92 - 2.07 (m, 2 H) 2.07 - 2.27 (m, 2 H) 2.49 - 2.65 (m, 3 H) 2.89 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 2 H) 3.02 - 3.15 (m, 3 H) 3.35 - 3.50 (m, 2 H) 3.70 (t, J=8.78 Hz, 1 H) 3.85 - 3.98 (m, 6 H) 4.16 (d, J=15.06 Hz, 1 H) 4.44 - 4.53 (m, 3 H) 6.96 (dd, J=8.53, 2.51 Hz, 1 H) 7.05 (s, 1 H) 7.62 (d, J=9.03 Hz, 1 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．３９１分。
【０２４５】
実施例１６（ピーク１）及び
実施例１７（ピーク２）
４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のキラルＳＦＣクロマトグラフィーによる２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン（６５０ｍｇ）のキラル分割により、２つの鏡像異性体（Ｓ）−２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン及び（Ｒ）−２−（（３−（５−メトキシ−１−オキソ−１，３−ジヒドロスピロ［インデン−２，４’−ピペリジン］−１’−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−７，８−ジヒドロ−３Ｈ−ピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オンを得た。
【０２４６】
ピーク１：１４５ｍｇ、Ｃ２６Ｈ３０Ｎ４Ｏ５について計算したＨＲＭＳ  ４７８．５５２８、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４７９．２２９１。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.39 (dd, J=11.29, 7.78 Hz, 3 H) 1.91 - 2.05 (m, 2 H) 2.06 - 2.26 (m, 2 H) 2.50 - 2.65 (m, 3 H) 3.02 - 3.14 (m, 3 H) 3.23 - 3.32 (m, 3 H) 3.34 (s, 1 H) 3.40 - 3.47 (m, 2 H) 3.68 (t, J=8.78 Hz, 1 H) 3.87 - 3.94 (m, 4 H) 4.18 (d, J=15.56 Hz, 1 H) 4.44 - 4.52 (m, 3 H) 6.96 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.04 (s, 1 H) 7.61 (d, J=8.53 Hz, 1 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４３０分。
【０２４７】
ピーク２：１７７ｍｇ、Ｃ２６Ｈ３０Ｎ４Ｏ５について計算したＨＲＭＳ  ４７８．５５２８、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４７９．２２９４。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.36 - 1.52 (m, 10 H) 1.91 - 2.06 (m, 3 H) 2.08 - 2.30 (m, 3 H) 2.50 - 2.65 (m, 6 H) 2.76 - 2.95 (m, 6 H) 3.03 - 3.14 (m, 5 H) 3.25 - 3.36 (m, 16 H) 3.38 - 3.51 (m, 4 H) 3.58 - 3.74 (m, 3 H) 3.86 - 3.94 (m, 8 H) 4.20 (d, J=15.56 Hz, 2 H) 4.44 - 4.54 (m, 5 H) 6.92 - 6.97 (m, 1 H) 7.05 (s, 2 H) 7.62 (d, J=8.53 Hz, 2 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．４３２分。
【０２４８】
実施例１８：
２−［４−（４−メトキシベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン
【０２４９】
【化７４】
0005957077.tif 000075
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中ＮａＨ（２３．８ｍｇ、０．９４２ｍｍｏｌ、２．１当量）の撹拌溶液に４−（４−メトキシベンゾイル）−［１，３’］ビピペリジニル−２’−オン（１４２ｍｇ、０．４４９ｍｍｏｌ、１．０当量）及び２−クロロメチル−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン（９０ｍｇ、０．４４９ｍｍｏｌ、１．０当量）を加えた。反応物を７０℃で３時間撹拌した。固体沈殿物をろ別し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。母液の溶媒を蒸発させ、残留物をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（０〜１５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）により精製して、表題化合物を灰色がかった白色粉末（６０ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ、収率３１．１％）として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.34 (br s, 1 H) 7.94 (d, J=8.59 Hz, 2 H) 7.03 (d, J=8.59 Hz, 2 H) 4.14 - 4.54 (m, 5 H) 4.06-4.10 (m, 1 H) 3.45 (br s, 1 H) 3.18 (d, J=5.05 Hz, 3 H) 3.03 (br s, 1 H) 2.85 (br s, 2 H) 2.30 - 2.65 (m, 5 H) 1.30 - 2.05 (m, 9 H).ＨＲ−ＭＳ（ｍ／ｚ、ＭＨ＋）：４８１．２４６１、４８２．２４７１。ＨＰＬＣ保持時間：２．７８分（Ａｇｉｌｅｎｔカラム３．０×１００ｍｍ  ３ｕｍ  Ｃ１８カラム；０．１％ＦＡを含む１０分で５％〜９５％アセトニトリルの勾配を用いた１．０ｍＬ／分の流量）
【０２５０】
実施例１９（ピーク１）及び
実施例２０（ピーク２）：
３０％ＭｅＯＨの移動相を用いるＳＦＣによるＯＤ−Ｈカラムを用いた２−［４−（４−メトキシベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オンのキラル分割により、２つの鏡像異性体２−［（Ｓ）−４−（４−メトキシベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オン及び２−［（Ｒ）−４−（４−メトキシベンゾイル）−２’−オキソ−［１，３’］ビピペリジニル−１’−イルメチル］−３，５，７，８−テトラヒドロピラノ［４，３−ｄ］ピリミジン−４−オンを得た。
【０２５１】
ピーク１保持時間＝２．３１分。
ピーク２保持時間＝３．１７分。
【０２５２】
実施例２１：
２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）−６，７−ジヒドロ−３Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４（５Ｈ）−オン
【０２５３】
【化７５】
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エタノール（４ｍＬ）中２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトイミドアミド塩酸塩（１４０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）及び２−オキソシクロペンタンカルボン酸メチル（０．０６０ｍＬ、０．４７ｍｍｏｌ）の溶液にナトリウムエトキシド（０．１６０ｍＬ、０．４４ｍｍｏｌ、２１％）を加えた。混合物を１００℃で２４時間加熱した。得られた混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（メタノール：ジクロロメタン、１：９９〜１０：９０）により精製し、次いでメタノールから晶出させて、わずかに黄色の固体（３３ｍｇ、収率２０％）を得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.85 (s, 1H), 7.95 (d, J=8.5 Hz, 2 H), 6.96 (d, J= 8.5 Hz, 2 H), 4.32 - 4.47 (m, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.60 - 3.73 (m, 1 H), 3.40 - 3.56 (m, 2 H), 3.23-3.37 (br. s, 1 H), 3.00-3.20 (br. s, 3 H), 2.84 (ddd, 4 H, J=14.7, 7.5, 7.4 Hz), 2.46-2.62 (br. s, 1 H), 2.38 (d, 1 H, J=7.0 Hz), 2.15-2.25 (br. s, 1 H), 2.10 (dq, 2 H, J=7.8, 7.6 Hz), 1.82-2.01 (br. s, 4 H)Ｃ２５Ｈ３０Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４５１．２３４５、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４５１．２３６２。
【０２５４】
実施例２２：
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−ピリミジン−４−オン
【０２５５】
【化７６】
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表題化合物（１．８ｍｇ、収率１％）は、実施例２１で述べた方法と同様の方法を用いて（Ｅ）−３−メトキシアクリル酸メチル（０．０５５ｍＬ、０．４７ｍｍｏｌ）から調製した。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.03 (d, J=9.0 Hz, 2 H), 7.92 (d, J=6.5 Hz, 1 H), 7.05 (d, J=9.0 Hz, 2 H), 6.33 (d, J=7.0 Hz, 1 H), 4.48 - 4.58 (m, 2 H), 4.36 - 4.48 (m, 1 H), 3.93-4.05 (br. s. 1 H), 3.89 (s, 3 H), 3.70-3.83 (br. s, 1H), 3.66 (d, J=8.0 Hz, 2 H), 3.51-3.63 (br. s, 2 H), 3.25 - 3.39 (m, 1 H), 2.54 - 2.71 (m, 1 H), 2.47 (d, J=10.0 Hz, 1 H), 2.19 (d, J=14.1 Hz, 2 H), 2.03-2.15 (br. s, 2 H).Ｃ２２Ｈ２６Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４１１．２０３２、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４１１．２０４７。
【０２５６】
実施例２３：
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−６−メチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン
【０２５７】
【化７７】
0005957077.tif 000078
表題化合物（７３ｍｇ、収率４７％）は、実施例２１で述べた方法と同様の方法を用いて（Ｅ）−ブタ−２−エン酸メチル（０．０４４ｍＬ、０．４７ｍｍｏｌ）から調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.30 (s, 1H), 7.95 (d, J=9.0 Hz, 2 H), 6.96 (d, J=9.0 Hz, 2 H), 6.20 (s, 1 H), 4.40 (s, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.70 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 3.40 - 3.57 (m, 2 H), 3.22 - 3.40 (m, 1 H), 2.98-3.21 (br. s, 3 H), 2.45-2.60 (br. s, 1 H), 2.30-2.43 (br. s, 1 H), 2.28 (s, 3 H), 2.11-2.25 (br. s, 1 H), 1.82-1.99 (br. s, 4 H).Ｃ２３Ｈ２６Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４２５．２１８９、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４２５．２１８６。
【０２５８】
実施例２４：
６−エチル−２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−ピリミジン−４−オン
【０２５９】
【化７８】
0005957077.tif 000079
表題化合物（６４ｍｇ、収率４０％）は、実施例２１で述べた方法と同様の方法を用いて３−オキソペンタン酸エチル（０．０６７ｍＬ、０．４７ｍｍｏｌ）から調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.67 (s, 1H), 7.95 (d, J=9.0 Hz, 2 H), 6.96 (d, J=8.5 Hz, 2 H), 6.19 (s, 1 H), 4.42 (s, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.68 (t, J=8.3 Hz, 1 H), 3.40 - 3.55 (m, 2 H), 3.22-3.35 (br. s, 1 H), 3.07-3.18 (br. s, 1 H), 2.98-3.07 (br. s, 2 H), 2.54 (q, J=7.5 Hz, 3 H), 2.25 - 2.43 (m, 1 H), 2.08-2.24 (br. s, 1 H), 1.81-1.97 (br. s, 4 H), 1.15 - 1.33 (m, 3 H).Ｃ２４Ｈ３０Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４３９．２３４５、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４３９．２３５６。
【０２６０】
実施例２５：
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−５−メチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン
【０２６１】
【化７９】
0005957077.tif 000080
表題化合物（９６ｍｇ、収率６２％）は、実施例２１で述べた方法と同様の方法を用いて２−メチル−３−オキソプロパン酸エチル（０．０５７ｍＬ、０．４７ｍｍｏｌ）から調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.65 (s, 1H), 7.95 (d, J=9.0 Hz, 2 H), 7.74 (s, 1 H), 6.96 (d, J=8.5 Hz, 2 H), 4.25 - 4.51 (m, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.65 (t, J=8.5 Hz, 1 H), 3.39 - 3.58 (m, 2 H), 3.17 - 3.37 (m, 1 H), 3.10 (d, J=10.5 Hz, 1 H), 2.99 (br. s, 2 H), 2.47 (br. s, 1 H), 2.22 - 2.40 (m, 1 H), 2.14 (dd, J=13.3, 8.3 Hz, 1 H), 2.07 (s, 3 H), 1.88 (br. s, 4 H).Ｃ２３Ｈ２８Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４２５．２１８９、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４２５．２１９１。
【０２６２】
実施例２６：
２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−５，６−ジメチル−３Ｈ−ピリミジン−４−オン
【０２６３】
【化８０】
0005957077.tif 000081
表題化合物（４０ｍｇ、収率１９％）は、実施例２１で述べた方法と同様の方法を用いて（Ｚ）−３−ヒドロキシ−２−メチルブタ−２−エン酸エチル（０．０８１ｍＬ、０．５６ｍｍｏｌ）から調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.65 (s, 1H), 7.86 (d, J=9.1 Hz, 2 H), 6.87 (d, J=9.1 Hz, 2 H), 4.27 (s, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 3.54 (t, J=8.6 Hz, 1 H), 3.31 - 3.47 (m, 2 H), 3.18 (ddd, J=9.5, 5.3, 4.9 Hz, 1 H), 2.95 - 3.06 (m, 1 H), 2.87 - 2.95 (m, 2 H), 2.33 - 2.45 (m, 1 H), 2.17 - 2.31 (m, 4 H), 1.94 - 2.10 (m, 4 H), 1.70 - 1.88 (m, 4 H).Ｃ２４Ｈ３０Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４３９．２３４５、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、４３９．２３４７。
【０２６４】
実施例２７：
２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）シクロヘプタ［ｄ］イミダゾール−４（３Ｈ）−オン
【０２６５】
【化８１】
0005957077.tif 000082
トルエン−４−スルホン酸７−オキソシクロヘプタ−１，３，５−トリエニルエステル（０．３３ｍｍｏｌ、９１ｍｇ）、２−｛３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトアミジン（０．３３ｍｍｏｌ、１３０ｍｇ）及び臭化テトラブチルアンモニウム（０．１３２ｍｍｏｌ、４２．４ｍｇ）を３０％ＮａＯＨの溶液（１３．１ｍｇ、１ｍＬ）及びトルエン（５ｍＬ）に加え、１６時間撹拌した。反応物を過剰の食塩水で処理し、酢酸エチル（３×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を真空中で濃縮した。粗物質を、４５分にわたる２５〜３５％アセトニトリル／水の勾配を用いて溶離する分取逆相ＨＰＬＣ（３００×５０ｍｍ）により精製した後、純粋画分の凍結乾燥により、表題化合物のＴＦＡ塩（２３．６ｍｇ、収率１４％）を得た。Ｃ２６Ｈ２８Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４６０．４３７５、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、実測値  ４６１．２２００。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ ppm 1.91 - 2.26 (m, 4 H) 2.33 - 2.50 (m, 1 H) 2.54 - 2.68 (m, 1 H) 3.24 - 3.43 (m, 8 H) 3.45 - 3.82 (m, 6 H) 3.88 (s, 3 H) 3.92 - 4.12 (m, 1 H) 4.32 - 4.48 (m, 1 H) 4.72 - 4.92 (m, 2 H) 7.04 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.14 - 7.33 (m, 1 H) 7.42 - 7.65 (m, 1 H) 7.69 - 7.88 (m, 1 H) 8.02 (d, J=9.03 Hz, 2 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．５７２分。
【０２６６】
実施例２８：
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン
【０２６７】
【化８２】
0005957077.tif 000083
トルエン−４−スルホン酸７−オキソシクロヘプタ−１，３，５−トリエニルエステル（０．８６ｍｍｏｌ、２３６ｍｇ）、２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトアミジン（０．８６ｍｍｏｌ、３５０ｍｇ）及び臭化テトラブチルアンモニウム（０．３４ｍｍｏｌ、１１０ｍｇ）を３０％ＮａＯＨの溶液（１３．１ｍｇ、１ｍＬ）及びトルエン（５ｍＬ）に加え、１６時間撹拌した。反応物を過剰の飽和塩化アンモニウムで処理し、１０％イソプロパノール／クロロホルムで希釈し、食塩水で洗浄し、乾燥し、真空中で濃縮した。４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のＳＦＣクロマトグラフィーによる２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）シクロヘプタ［ｄ］イミダゾール−４（３Ｈ）−オン（４０５ｍｇ）のキラル分割により、２１ｍｇの純物質を得た（２１ｍｇ、収率９％）。Ｃ２７Ｈ３０Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４７４．５６４６、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、実測値  ４７５．２３５４。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 1.85 (d, 4 H) 2.00 - 2.15 (m, 1 H) 2.16 - 2.33 (m, 4 H) 2.39 - 2.52 (m, 1 H) 2.90 - 3.00 (m, 2 H) 3.02 - 3.12 (m, 1 H) 3.18-3.31 (br. s, 1 H) 3.38 - 3.55 (m, 8 H) 3.57 - 3.67 (m, 1 H) 3.91 (s, 3 H) 4.68 - 4.86 (m, 2 H) 6.83 - 6.91 (m, 1 H) 6.98 - 7.10 (m, 1 H) 7.25 - 7.34 (m, 3 H) 7.35 - 7.45 (m, 2 H) 7.72 - 7.86 (m, 6 H).ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．９２０分。
【０２６８】
実施例２９：
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン
【０２６９】
【化８３】
0005957077.tif 000084
表題化合物（１８ｍｇ）は、２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシ−３−メチルベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イル｝アセトアミジン（４０５ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）から始めて実施例２８の一般的手順に従って調製した。Ｃ２７Ｈ３０Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４７４．５６４６、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）、実測値  ４７５．２３４５。1H NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 1.74 - 2.11 (m, 4 H) 2.22 - 2.44 (m, 5 H) 2.57 (d, J=8.03 Hz, 1 H) 3.09 (d, J=6.53 Hz, 3 H) 3.28 - 3.40 (m, 1 H) 3.50 (t, J=8.28 Hz, 2 H) 3.62 - 3.83 (m, 1 H) 3.89 - 3.97 (m, 3 H) 4.82 (br. s, 2 H) 6.87 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.00 - 7.11 (m, 1 H) 7.26 - 7.36 (m, 5 H) 7.38 - 7.47 (m, 1 H) 7.72 - 7.86 (m, 3 H)ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．８７４分。
【０２７０】
実施例３０：
２−｛（Ｓ）−３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン
【０２７１】
【化８４】
0005957077.tif 000085
４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のＳＦＣクロマトグラフィーによる２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）シクロヘプタ［ｄ］イミダゾール−４（３Ｈ）−オン（３００ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）のキラル分割により、３５ｍｇの純物質を得た。Ｃ２６Ｈ２８Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４６０．５３７５、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４６１．２１９５。1H NMR (400 MHz, MeOD) 1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 1.17-1.39 (br. s, 2 H) 1.41 - 1.50 (m, 1 H) 1.63 - 1.73 (m, 1 H) 1.76-1.96 (br. s, 4 H) 2.06 - 2.19 (m, 1 H) 2.23 - 2.35 (m, 1 H) 2.42 - 2.55 (m, 1 H) 2.93 - 3.03 (m, 2 H) 3.06 - 3.15 (m, 1 H) 3.22 - 3.32 (m, 1 H) 3.41 - 3.55 (m, 2 H) 3.60 - 3.70 (m, 1 H) 3.89 (s, 3 H) 4.76 - 4.89 (m, 2 H) 6.95 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.02 - 7.11 (m, 1 H) 7.28 (s, 2 H) 7.32 - 7.40 (m, 1 H) 7.40 - 7.50 (m, 1 H) 7.78 (d, J=10.54 Hz, 1 H) 7.94 (d, J=8.53 Hz, 2 H)、分析ＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｎｏｖａｐａｋ  １５０×３．９ｍｍ  Ｃ１８カラム：移動相：５分にわたる２ｍＬ／分の０．１％ＴＦＡを含む１０〜９０％アセトニトリル／水）保持時間＝２．６３８分。
【０２７２】
実施例３１：
２−｛（Ｒ）−３−［４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル］−２−オキソピロリジン−１−イルメチル｝−３Ｈ−シクロヘプタイミダゾール−４−オン
【０２７３】
【化８５】
0005957077.tif 000086
４０％ＩＰＡ／０．２％ＤＥＡ／ＣＯ２（ｖ／ｖ）で溶離するＡＳ−Ｈカラム（６０ｇ／分、２１×２５０ｍｍ）上のＳＦＣクロマトグラフィーによる２−（（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）メチル）シクロヘプタ［ｄ］イミダゾール−４（３Ｈ）−オン（３００ｍｇ）のキラル分割により、３５ｍｇの純物質を得た。Ｃ２６Ｈ２８Ｎ４Ｏ４について計算したＨＲＭＳ  ４６０．５３７５、実測値（ＥＳＩ、［Ｍ＋Ｈ］＋）４６１．２１８１。1H NMR (400 MHz, MeOD) 1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 0.81 - 0.95 (m, 1 H) 1.18 - 1.35 (m, 2 H) 1.78 - 1.93 (m, 4 H) 2.13 (dd, J=11.80, 7.28 Hz, 1 H) 2.22 - 2.34 (m, 1 H) 2.49 (d, J=3.51 Hz, 1 H) 2.91-3.04 (br. s, 2 H) 3.10 (d, J=10.54 Hz, 1 H) 3.21 - 3.31 (m, 1 H) 3.40 - 3.55 (m, 3 H) 3.65 (t, J=8.78 Hz, 1 H) 3.89 (s, 3 H) 4.76 - 4.91 (m, 2 H) 6.95 (d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.06 (dd, J=10.54, 8.53 Hz, 1 H) 7.34 - 7.49 (m, 2 H) 7.78 (d, J=11.04 Hz, 1 H) 7.94 (d, J=8.53 Hz, 2 H).分析ＲＰ−ＨＰＬＣ保持時間＝４．５５分
【０２７４】
実施例３２：
Ｎ−（５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド
【０２７５】
【化８６】
0005957077.tif 000087
５００ｍｇの７６．５％の純度の２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）酢酸（３８２ｍｇ、１．０６１ｍｍｏｌ）及び５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−アミン臭化水素酸塩（２３７ｍｇ、１．０６１ｍｍｏｌ）の混合物を、ＨＡＴＵ試薬（４４４ｍｇ、１．１６１ｍｍｏｌ）の添加の前に、ジイソプロピルエチルアミン（０．７４１ｍＬ、５４９ｍｇ、４．２５ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１０ｍＬ）中で撹拌した。反応物を室温で４５時間にわたり撹拌した。ろ過により少量の灰色がかった白色固体を除去した。ろ液を、０〜１５％メタノール／ジクロロメタン、次に１５％〜３０％、その後、３０％を用いてシリカゲルカラムを通して溶離した。汚染生成物を含む画分を濃縮し、５％〜１２％メタノール／ジクロロメタン勾配と続く１２％を用いて第２のシリカゲルカラムを通して溶離して、表題化合物（１７７ｍｇ）を白色固体として得た。Ｃ２３Ｈ２８Ｎ６Ｏ４Ｓの計算質量＝４８４．５７。ＨＲ−ＭＳ［ｍ／ｚ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝４８５．１９５６。ＨＰＬＣ保持時間＝２．７３分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０×１００ｎｍ  ３ｕｍ  Ｃ１８カラム；流量１．０ｍＬ／分；１０分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.06 (br s, 1 H), 7.94 (d, J=9.09 Hz, 2 H), 7.03 (d, J=8.59 Hz, 2 H), 3.92 - 4.21 (m, 6 H), 3.83 (s, 3 H), 3.39 - 3.51 (m, 1 H), 3.21 - 3.37 (m, 3 H), 2.99 (d, J=13.14 Hz, 1 H), 2.64 - 2.84 (m, 2 H), 2.28 - 2.42 (m, 1 H), 2.03 - 2.18 (m, 1 H), 1.85 - 2.02 (m, 1 H), 1.65 - 1.78 (m, 2 H), 1.44 - 1.60 (m, 2 H).
【０２７６】
実施例３３（ピーク１）及び
実施例３４（ピーク２）：
Ｎ−（５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド（１６６ｍｇ、０．３４３ｍｍｏｌ）を６０％ＣＯ２及び４０％調節剤（７０％ジクロロメタン／エタノール及び０．２％ジエチルアミンからなる）を用いてＳＣＦカラムを通して溶離して（流量７０ｍＬ／分）、２つの鏡像異性体的富化ピークＮ−（５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−（（Ｓ）−３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド及びＮ−（５，６−ジヒドロチアゾロ［２，３−ｃ］［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−２−（（Ｒ）−３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミドを得た。
【０２７７】
ピーク１（５４．５ｍｇ）、ＳＦＣ保持時間＝３．８７分（機器：ｓｆｃ＿ａ−２５０；カラム：Ｗｈｅｌｋｏ（Ｒ，Ｒ）；移動相：４０％（７０％ＤＣＭ／３０％ＥｔＯＨ）０．２％ＤＥＡ）。
ピーク２（６０ｍｇ）、ＳＦＣ保持時間＝６．８５分（機器：ｓｆｃ＿ａ−２５０；カラム：Ｗｈｅｌｋｏ（Ｒ，Ｒ）；移動相：４０％（７０％ＤＣＭ／３０％ＥｔＯＨ）０．２％ＤＥＡ）。
【０２７８】
実施例３５：
Ｎ−（［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド
【０２７９】
【化８７】
0005957077.tif 000088
実施例３２の一般的手順に従って、表題化合物（１１５ｍｇ）を［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン−３−アミン（１０１ｍｇ、０．４７２ｍｍｏｌ）から調製した。後処理及び精製の前に、反応を室温で１時間、５０℃で５．５時間、次いで、室温で６２時間行わせた。Ｃ２５Ｈ２８Ｎ６Ｏ４の計算質量＝４７６．５３。ＨＲ−ＭＳ［ｍ／ｚ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝４７７．２２６９。ＨＰＬＣ保持時間＝２．７０分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０×１００ｎｍ  ３ｕｍ  Ｃ１８カラム；流量１．０ｍＬ／分；１０分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.06 (br s, 1 H), 8.06 (d, J=7.07 Hz, 1 H), 7.94 (d, J=8.59 Hz, 2 H), 7.75 (d, J=9.09 Hz, 1 H), 7.37 - 7.43 (m, 1 H), 6.98 - 7.07 (m, 3 H), 4.16 - 4.29 (m, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3.37 - 3.50 (m, 3 H), 3.26 - 3.30 (m, 2 H), 2.95 - 3.06 (m, 1 H), 2.75 - 2.81 (m, 1 H), 2.31 - 2.43 (m, 1 H), 2.07 - 2.20 (m, 1 H), 1.93 - 2.04 (m, 1 H), 1.63 - 1.77 (m, 2 H), 1.45 - 1.60 (m, 2 H).
【０２８０】
実施例３６：
２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イル）アセトアミド
【０２８１】
【化８８】
0005957077.tif 000089
実施例３２の一般的手順に従って、表題化合物（２１ｍｇ）を１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−アミン（１２．７ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）から調製した。反応を５０℃の後室温で１時間行わせた。Ｃ２１Ｈ２７Ｎ７Ｏ４の計算質量＝４４１．４８。ＨＲ−ＭＳ［ｍ／ｚ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝４４２．２２０９。ＨＰＬＣ保持時間＝２．７３分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０×１００ｎｍ  ３ｕｍ  Ｃ１８カラム；流量１．０ｍＬ／分；１０分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 7.91 (d, J=8.08 Hz, 2 H), 6.93 (d, J=8.08 Hz, 2 H), 4.09 - 4.57 (m, 2 H), 3.75 - 4.06 (m, 6 H), 3.40 - 3.73 (m, 3 H), 3.03 - 3.31 (m, 2 H), 2.75 - 3.02 (m, 2 H), 2.38 - 2.61 (m, 1 H), 2.03 - 2.36 (m, 2 H), 1.66 - 1.95 (m, 4 H).
【０２８２】
実施例３７：
Ｎ−（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド
【０２８３】
【化８９】
0005957077.tif 000090
実施例３２の一般的手順に従って、表題化合物（９８．７ｍｇ）を３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリダジン−５−アミン臭化水素酸塩（１８６ｍｇ、０．５２１ｍｍｏｌ）から調製した。Ｃ２６Ｈ３１Ｎ５Ｏ５の計算質量＝４９３．５５。ＨＲ−ＭＳ［ｍ／ｚ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝４９４．２３９０。ＨＰＬＣ保持時間＝２．８２分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０×１００ｎｍ  ３ｕｍ  Ｃ１８カラム；流量１．０ｍＬ／分；１０分にわたる０．１％ギ酸を含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。1H NMR (400 MHz, クロロホルム-d) δ ppm 8.5-8.8 (br s, 1 H), 7.88 - 7.98 (m, 2 H), 6.89 - 7.00 (m, 2 H), 4.28 - 4.39 (m, 2 H), 4.19 - 4.28 (m, 2 H), 3.88 (s, 3 H), 3.57 - 3.66 (m, 1 H), 3.42 - 3.58 (m, 2 H), 3.19 - 3.32 (m, 1 H), 3.08 - 3.19 (m, 1 H), 2.93 - 3.06 (m, 2 H), 2.59 - 2.72 (m, 2 H), 2.46 - 2.59 (m, 1 H), 2.22 - 2.37 (m, 1 H), 2.10 - 2.22 (m, 1 H), 1.99 - 2.10 (m, 2 H), 1.78 - 1.97 (m, 4 H).
【０２８４】
実施例３８：
Ｎ−（イソオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−３−イル）−２−（３−（４−（４−メトキシベンゾイル）ピペリジン−１−イル）−２−オキソピロリジン−１−イル）アセトアミド
【０２８５】
【化９０】
0005957077.tif 000091
実施例３２の一般的手順に従って、表題化合物（２３．９ｍｇ）をイソオキサゾロ［５，４−ｂ］ピリジン−３−アミン（１００ｍｇ、０．７４０ｍｍｏｌ）から調製した。後処理及び精製の前に、反応を室温で１時間、６０℃で７２時間行わせた。Ｃ２５Ｈ２７Ｎ５Ｏ５の計算質量＝４７７．５１。ＨＲ−ＭＳ［ｍ／ｚ、（Ｍ＋Ｈ）＋］＝４７８．２０９４。ＨＰＬＣ保持時間＝２．６８分（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステム；３．０×１００ｎｍ  ３ｕｍ  Ｃ１８カラム；流量１．０ｍＬ／分；１０分にわたる０．１％ギ酸アンモニウムを含む５〜９５％アセトニトリル／水の勾配）。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.11-12.25 (br. s, 1 H), 8.18 (dd, J=7.07, 2.53 Hz, 1 H), 7.96 (d, J=8.59 Hz, 2 H), 7.62 - 7.67 (m, 1 H), 7.04 (d, J=8.59 Hz, 2 H), 6.36 (t, J=6.82 Hz, 1 H), 4.73 - 4.85 (m, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3.38 - 3.54 (m, 3 H), 3.29 - 3.31 (m, 2 H), 2.98 - 3.05 (m, 1 H), 2.77 - 2.82 (m, 1 H), 2.35 - 2.44 (m, 1 H), 2.13 - 2.24 (m, 1 H), 1.97 - 2.05 (m, 1 H), 1.68 - 1.79 (m, 2 H), 1.47 - 1.63 (m, 2 H).
【０２８６】
生物学的アッセイ及びデータ
ＴＮＫＳ酵素活性の化合物による阻害を測定するための生化学的アッセイ
ヒトタンキラーゼ１のＰＡＲＰ触媒ドメインであるＴＮＫＳ１ＰをＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｇａｔｅｗａｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙを用いてｐＤＯＮＲ２２１ベクターにクローニングした。次いで、このエントリークローンをデスティネーションベクターｐＤＥＳＴ２０にサブクローニングして、Ｎ末端グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）タグ融合タンパク質を得た。次いで、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎバキュロウイルス発現システム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ−Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃ（登録商標）  Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｖｅｒｓｉｏｎ  Ｄ）を用いてＧＳＴ−ＴＮＫＳ１ＰをＳｆ２１細胞において発現させた。タンパク質をＧＳＴｒａｐカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）により精製した。Ｎ末端ＧＳＴタグタンキラーゼ２タンパク質ＰＡＲＰドメインであるＴＮＫＳ２Ｐを同様な方法でクローニングし、発現させ、精製した。ヒトＰＡＲＰ１（カタログ番号４６６８−１００−０１）及び活性化ＤＮＡ（カタログ番号４６７１−０９６−０６）は、Ｔｒｅｖｉｇｅｎ，Ｉｎｃ．から購入した。ＰＡＲＰ２（カタログ番号ＡＬＸ−２０１−０６４−Ｃ０２０）は、Ａｌｅｘｉｓ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌから購入した。
【０２８７】
ＴＮＫＳ１／２又はＰＡＲＰ１／２酵素のオートパーシレーション（autoparsylation）活性は、リードアウトとしてのニコチンアミドの液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣ／ＭＳ）により測定した。ＴＮＫＳ及びＰＡＲＰオートパーシレーションを阻害する化合物の活性は、ＩＣ５０の測定により評価した。化合物スクリーニングアッセイにおいて、反応は、０．００８６〜１８．７５μＭの濃度範囲を有する８ポイント連続希釈の５μＬの化合物、１×アッセイ緩衝液中２０ｎＭの精製酵素及び２５０μＭのβ−ＮＡＤ＋から構成されている。室温で６０分間のインキュベーションの後に、１０μＬの５×クエンチング溶液（水中２０％ギ酸及び５００ｎＭ［ｄ４］−ニコチンアミド）の添加により反応を停止させた。バックグラウンド対照ウエルについては、β−ＮＡＤ＋の添加の前に１ウエル当たり１０μＬの５×クエンチング溶液を加えた。阻害％は、（対照−試料）／（対照−バックグラウンド）＊１００として計算した。「対照」は、化合物を含まない８ウエルの平均値であり、「バックグラウンド」は、反応の開始前に測定した５×クエンチング溶液と混合した８ウエルの平均である。
【０２８８】
実施例１〜３８を上述の１つ又は複数の酵素アッセイにおいて試験し、その結果を表１に示す。
【０２８９】
【表１−１】
0005957077.tif 000092
【表１−２】
0005957077.tif 000093
【０２９０】
Ｗｎｔシグナル伝達活性の化合物による阻害を測定するための細胞リポーター遺伝子アッセイ
ＨＥＫ２９３細胞におけるＷｎｔ応答性Ｓｕｐｅｒ−ＴＯｐＦｌａｓｈ（ＳＴＦ）ルシフェラーゼリポーター遺伝子アッセイを用いて、Ｗｎｔ配位子誘導性シグナル伝達を阻害する化合物の活性を測定した。アッセイの１日目に、細胞を、３８４ウエルプレートの１ウエル当たり８０００個の密度で５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含む２５μＬの培地で平板培養した。２日目に、マウスＬ細胞から産生された２０μＬのＷｎｔ３Ａ条件培地を細胞に加えてＷｎｔシグナル伝達を誘導した後、５μＬの化合物を１０ポイント連続希釈で各ウエルに加えた。３日目にＢｒｉｇｈｔ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイシステムにより製造業者のプロトコール（Ｐｒｏｎｅｇａ、Ｅ２６２０）に従ってルシフェラーゼ活性を測定した。阻害％を（最大Ｗｎｔ誘導性シグナル伝達−試料）／（最大Ｗｎｔ誘導性シグナル伝達−バックグラウンド）＊１００として計算した。「最大Ｗｎｔ誘導性シグナル伝達」は、化合物を含まない２０％Ｗｎｔ３Ａ  ＣＭにより誘導されたＳＴＦシグナルレベルであり、「バックグラウンド」は、Ｗｎｔ３Ａ  ＣＭ又は化合物を添加しない場合のＳＴＦシグナルレベルである。
【０２９１】
アキシン２タンパク質の安定化に対する化合物の効果を測定するための細胞ＥＬＩＳＡアッセイ
結腸直腸細胞株ＳＷ４８０におけるサンドイッチ酵素結合イムノソルベント（ＥＬＩＳＡ）アッセイにより、アキシン２タンパク質を安定化する化合物の活性を測定した。９６ウエルプレートにおいて１ウエル当たり３０，０００個のＳＷ４８０細胞を播種し、化合物処理の前に一夜インキュベートした。次いで、細胞を１０μＭから始まる６ポイント希釈の化合物で２４時間処理した。次いで、細胞を１００μＬの冷リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、プロテアーゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ、１１８３６１７０）及びホスファターゼ阻害剤（Ｓｉｇｍａ、Ｐ２８５０、Ｐ５７２６）を添加した１２５μＬの冷１×溶解緩衝液（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、９８０３）で溶解した。ＥＬＩＳＡアッセイのために、抗アキシン−２捕捉抗体（Ｓｔｒａｔｅｇｉｃ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）抗体を炭酸コーティング緩衝液、ｐＨ９．２（Ｓｉｇｍａ、Ｃ３０４１−５０ＣＡＰ）で１μｇ／ｍｌの濃度（１：１０００）に希釈した。次いで、１ウエル当たり１００μの希釈抗アキシン−２捕捉抗体を用いて４℃で一夜９６ウエルＥＬＩＳＡプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎ  Ｃｏｒｐ．、ＭｉｃｒｏＬｉｔｅ  １平底プレート＃７５７１）をコーティングした。次いで、プレートを３００μｌ／ウエルの洗浄溶液ＰＢＳＴ２０（ＰＢＳ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ）で３回洗浄し、緩やかに振とうしながら３００μｌ／ウエルの１％ＢＳＡ／ＰＢＳ（ＢＳＡ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｒｏｂｕｍｉｎ  ＃８２−０４５−１）で室温で１．５時間ブロッキングした。ブロッキングの後、プレートを３００μｌ／ウエルの洗浄溶液で３回洗浄した。次いで、１００μＬの調製済みＳＷ４８０細胞溶解物を各ウエルに加え、緩やかに振とうしながら室温で２時間インキュベートした。洗浄後、１００μＬのビオチニル化抗アキシン２抗体（ＣＳＴ、２１５１）を各ウエルに加え、室温で２時間インキュベートした。次いで、１％ＢＳＡ／ＰＢＳで１：２００に希釈した１００μＬのストレプトアビジン−ＨＲＰ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ、ＤＹ９９８）を各ウエルに加え、暗所でＲ／Ｔで３０分間インキュベートした。シグナルは、Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ（Ｐｉｅｒｃｅ  ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ  ＥＬＩＳＡ  Ｆｅｍｔｏ  ＃３７０４）により検出し、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｗａｌｌａｃ  １４２０プレートリーダーで測定した。
【０２９２】
癌細胞の増殖の化合物による抑制を測定するための細胞増殖アッセイ
非小細胞肺癌ＡＢＣ−１細胞を９６ウエルプレートで１ウエル当たり５０００個の細胞で平板培養し、最高濃度として１０μＭから始まる化合物の８連続希釈物で処理した。３日間の化合物処理の後にＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｇ７５７０）を用いて生存細胞を測定した。アッセイは、製造業者のプロトコールに従って実施した。増殖曲線のプロット及びＩＣ５０値の計算にＥｘｃｅｌ  ＸＬｆｉｔ  ４を用いた。化合物処理後の増殖％を（処理試料／（ＤＭＳＯ対照）＊１００として計算した。ＩＣ５０値は、細胞の増殖が５０％抑制される化合物の濃度である。
【０２９３】
実施例１〜３８を１つ又は複数の上述の細胞アッセイで試験し、その結果を表２に示す。
【０２９４】
【表２−１】
0005957077.tif 000094
【表２−２】
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