(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトＩＣＯＳに特異的に結合する抗体を含む無菌の安定した水性製剤であって、
ａ）前記抗体は、フコースが糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含み、
ｂ）前記抗体は、溶液中で可逆的な自己会合を起こし、前記可逆的な自己会合は、凝集体形成を誘発せず、
ｃ）前記抗体の少なくとも１０モル％は、３７℃、１０ｍｇ／ｍＬの抗体濃度のＰＢＳ中で三量体として存在し、
ｄ）前記抗体は配列番号７の重鎖可変配列、および配列番号２の軽鎖可変配列を含み、かつ、
前記製剤は、５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬの前記抗体、５ｍＭ〜２５ｍＭのヒスチジン、２％〜１５％のトレハロース、および０．００５％〜１％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨは５．５〜６．５である、
前記製剤。
【請求項２】
前記製剤は、１０ｍｇ／ｍＬの前記抗体、１０ｍＭのヒスチジン、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０を含み、前記製剤の前記ｐＨは６である、請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
前記抗体は、配列番号６の重鎖配列および配列番号１の軽鎖配列を含む、請求項１または２に記載の製剤。
【請求項４】
前記製剤は等張性である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項５】
前記製剤は、薬学的に許容される製剤である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項６】
前記抗体は、５℃での３ヶ月間の前記製剤の保存中に、そのヒトＩＣＯＳ結合活性の２０％以下を失う、請求項１〜５のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項７】
前記抗体の５％未満は、ＨＰＳＥＣによって測定される通り、４０℃で１ヶ月間保存すると、凝集体を形成する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項８】
前記抗体の５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって測定される通り、４０℃で２ヶ月間保存すると、断片化される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項９】
前記製剤は注射製剤である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項１０】
前記製剤は、静脈内、皮下、または筋肉内投与に適している、請求項９に記載の製剤。
【請求項１１】
適切な容器に請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体製剤を含む、ヒトに対する非経口投与に適している薬学的単位剤形。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の製剤を含有する、プレフィルドシリンジ。
【請求項１３】
ヒトにおける自己免疫病または疾患を治療するための請求項１〜１０のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項１４】
前記自己免疫病または疾患は、ＳＬＥまたは強皮症である、請求項１３に記載の製剤。
【請求項１５】
ヒト移植患者における拒絶を治療または防止するための請求項１〜１０のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項１６】
ヒトにおける炎症性疾病または疾患を治療するための請求項１〜１０のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項１７】
ヒト患者においてＩＣＯＳを発現するＴ細胞を枯渇させるための請求項１〜１０のいずれか１項に記載の製剤。
【請求項１８】
霊長類動物の二次リンパ器官の胚中心構造を破壊するための請求項１〜１０のいずれか１項に記載の製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．序文
本開示は、ヒトＩＣＯＳポリペプチドに特異的に結合し、増加したインビボＡＤＣＣ活性を示し、溶液中で可逆的な自己会合を起こす抗体またはその断片の液体製剤に関し、製剤は、長期間の保存中でさえも安定性、低レベルから検出不能なレベルの抗体の断片化、低レベルから検出不能なレベルの凝集、およびほんのわずかから皆無の抗体の生物活性の損失を示す。本開示は、ヒトＩＣＯＳポリペプチドに特異的に結合し、増加したインビボＡＤＣＣ活性を示す抗体またはその断片の高濃度液体製剤を利用する、ＩＣＯＳ媒介疾病または疾患（例えば、限定されないが、全身性エリテマトーデス、筋肉炎、多発性硬化症、強皮症、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、乾癬、自己免疫性甲状腺炎、関節リウマチおよび糸球体腎炎、移植拒絶反応、移植片対宿主病）に付随した症状を防止(予防)する、治療する、管理する、または寛解させる方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
２．背景
ＩＣＯＳは、細胞外（Ｉｇ）Ｖ様ドメインを含むＩ型膜貫通タンパク質である。ＩＣＯＳは、Ｂ７ｈ同時刺激分子に対する受容体として機能する。ＩＣＯＳ発現は、ナイーブヒトＴ細胞では低いが、ＴＣＲ結合の数時間後には上方制御される。ＩＣＯＳ発現は、Ｔｈ１、Ｔｈ２、およびＴｈ１７ＣＤ４＋細胞等の活性化したＴ細胞の亜集団上で持続する。
【０００３】
ＩＣＯＳ発現が活性化したヘルパーＴ細胞集団に集中することを考えると、増強したエフェクター機能を有する抗ＩＣＯＳ抗体の治療用途は、増強したエフェクター機能を有する治療用抗ＩＣＯＳ抗体を使用して、限定されないが、慢性感染、自己免疫病または疾患、炎症性疾病または疾患、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、移植拒絶反応、およびＴ細胞増殖性疾患等の、Ｔ細胞媒介疾病および疾患の治療および防止の有効性を改善することが期待できる。
【０００４】
現在、多くの抗体は、凍結乾燥製剤として提供されている。抗体の凍結乾燥製剤には、凍結乾燥のための長期のプロセスおよび製造によって生じる高コストを含む、多くの制限がある。さらに、凍結乾燥製剤は、患者に投与する前に医療関係者によって、無菌で正確に再構成されなければならい。したがって、投与する前に製剤を再構成する必要がないように、再構成した凍結乾燥製剤に相当する、またはそれよりも高い濃度での抗体、特に抗ヒトＩＣＯＳ抗体の液体製剤が必要である。これによって、医療関係者による、患者へのはるかに迅速かつ容易な抗体の投与が可能となる。
【０００５】
従来の液体抗体調製物は、有効期間が短く、保存中の化学的および物理的な不安定性から生じる、抗体の生物活性の喪失の可能性がある。化学的な不安定性は、脱アミド、ラセミ化、加水分解、酸化、ベータ脱離、またはジスルフィド交換によって生じる可能性があり、物理的な不安定性は抗体の変性、凝集、沈殿または吸着によって生じる可能性がある。それらの中で、凝集、脱アミド、および酸化は、抗体の分解の最も一般的な原因として知られている（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｊ．ｏｆ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ４２（Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ４−Ｓ２６、Ｃｌｅｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  １０（４）：３０７−３７７）。したがって、抗体の安定な液体製剤、特に安定な液体抗ヒトＩＣＯＳ抗体が必要である。
【発明の概要】
【０００６】
３．概要
本開示は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合し、増強したエフェクター機能を有し、溶液中で可逆的な自己会合を起こす抗体またはその断片を含む、無菌の安定な水性製剤に関する。一実施形態において、本開示は、米国特許出願第１２／１１６，５１２号に記載される抗ＩＣＯＳ抗体の製剤を提供する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、フコースが糖鎖の還元末端でＮ−アセチルグルコサミンと結合しない、複合Ｎ−グリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列および配列番号１の軽鎖配列を含む抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含む。さらなる実施形態において、本明細書に記載する製剤は、溶液中で可逆的な自己会合を起こす抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含み、抗体の少なくとも１０モル％は、３７℃で１０ｍｇ／ｍＬの抗体濃度のＰＢＳ中で三量体として存在し、可逆的な自己会合は凝集体形成を誘発しない。一実施形態において、本開示の製剤はプレフィルドシリンジで提供される。
【０００７】
本開示は、抗ヒトＩＣＯＳ抗体またはその断片を安定化させる方法を提供する。
【０００８】
本開示は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合する抗体またはその断片を含む無菌の安定な水性製剤を作製するプロセスにさらに関する。
【０００９】
本開示は、炎症性疾病または疾患、自己免疫病または疾患、増殖性疾病、Ｔ細胞増殖性疾病、感染、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性に付随したまたはそれを特徴とする疾病または疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性に付随したまたはそれを特徴とする疾病または疾患、またはそれらの１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法も包含し、該方法は、それを必要とする対象に、予防上または治療上有効な量の抗ヒトＩＣＯＳ抗体製剤を投与することを含む。本開示は、増強したエフェクター機能を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤を使用して、これらに限定されないが、慢性感染、自己免疫病または疾患、炎症性疾病または疾患、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、移植拒絶反応、およびＴ細胞増殖性疾患等のＴ細胞媒介疾病および疾患を治療または防止する方法にも関する。
【００１０】
３．１．定義
対象の抗原（例えば、ＩＣＯＳ）と特異的に結合する抗体および／または抗体の断片のすべての製剤は、本明細書において総括して「本開示の製剤」、「本開示の液体製剤」、「本開示の高濃度の安定な液体製剤」、「本開示の抗体液体製剤」、または「本開示の抗体製剤」と称される。
【００１１】
本明細書で使用する「抗体（単数および複数）」（免疫グロブリン）という用語は、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、少なくとも２つの無傷の抗体から形成される多特異的な抗体（例えば、二重特異性抗体）、ヒト抗体、ヒト化抗体、ラクダ化抗体、キメラ抗体、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、一本鎖抗体、単一ドメイン抗体、ドメイン抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、所望の生物活性を示す抗体の断片、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、および抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば抗Ｉｄ抗体〜本開示の抗体を含む）、細胞内抗体、および上記のうちのいずれかのエピトープ結合断片を包含する。特に、抗体は免疫グロブリン分子、開示した分子の生物活性断片、および免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な断片、すなわち抗原結合部位を含有する分子を含む。免疫グロブリン分子は、任意の種類（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２）またはサブクラスであってよい。
【００１２】
天然抗体は大抵、２つの同一の軽鎖（Ｌ）および２つの同一の重鎖（Ｈ）からなる約１５０，０００ダルトンのヘテロテトラマー糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合により重鎖と結合されるが、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖の間で変化する。それぞれの重鎖および軽鎖は、規則的間隔をおいた鎖内ジスルフィド架橋も有する。それぞれの重鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、後にある数の定常ドメインが続く。それぞれの軽鎖は、１つの末端に可変ドメインを（ＶＬ）、もう一方の末端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖の可変ドメインは重鎖の可変ドメインと整列する。軽鎖は、軽鎖の定常ドメインのアミノ酸配列を基にλ鎖またはκ鎖のどちらかに分類される。κ軽鎖の可変ドメインは、本明細書においてＶＫとしても示され得る。重鎖または軽鎖の可変ドメインを説明するために、「可変領域」という用語も使用され得る。特定のアミノ酸残基は、軽鎖および重鎖の可変ドメイン間のインターフェースとして形成されると考えられる。かかる抗体は、ヒト、サル、ブタ、ウマ、ウサギ、イヌ、ネコ、マウス等を含むがこれに限定されない、いずれの哺乳動物から生じるものであってもよい。
【００１３】
「可変」という用語は、可変ドメインの特定部分が、抗体間で、配列が広範囲にわたって異なる、および特定の抗原に対して各特定の抗体の結合特異性の原因であるという事実を指している。しかし、可変性は、均一に抗体の可変ドメインにわたって分布されない。可変性は、軽鎖および重鎖可変ドメインの両方の、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される部分に集中している。可変ドメインのより高度に保存された部位は、フレームワーク領域（ＦＷ）と称される。天然の重鎖および軽鎖の可変ドメインのそれぞれは、主としてβシート配置をとる４つのＦＷ領域を含み、これらは、このβシート構造を結び付け、場合によってはその一部を形成するループを形成する３つのＣＤＲによって結び付けらている。各鎖におけるＣＤＲは、ＦＷ領域によって極めて接近して保持され、他の鎖からのＣＤＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）を参照）。定常ドメインは、一般的に抗原結合に直接関与しないが、抗原結合親和性に影響を与え、ＡＤＣＣ、ＣＤＣ、抗体依存性食作用および／またはアポトーシスへの抗体の関与等の様々なエフェクター機能を示すことができる。
【００１４】
本明細書で使用する場合、「超可変領域」は、抗原への結合に関連する抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」のアミノ酸残基（例えば、軽鎖可変ドメインの残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、および８９〜９７（Ｌ３）、および重鎖可変ドメインの残基３１〜３５（Ｈ１）、５０〜６５（Ｈ２）、および９５〜１０２（Ｈ３）、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１））および／または「超可変ループ」からの残基（例えば、軽鎖可変ドメインにおける残基２６〜３２（Ｌｌ）、５０〜５２（Ｌ２）および９１〜９６（Ｌ３）、および重鎖可変ドメインにおける残基２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、および９６〜１０１（Ｈ３）、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１−９１７（１９８７））を包含する。「フレームワーク」または「ＦＷ」残基は、ＣＤＲに隣接するそれらの可変ドメイン残基である。ＦＷ残基は、キメラの、ヒト化の、ヒト、ドメイン抗体、二特異性抗体、ワクシボディ（ｖａｃｃｉｂｏｄｙ）、直線状抗体、および二重特異性抗体に存在する。
【００１５】
本明細書で使用する「Ｆｃ領域」は、第１の定常領域の免疫グロブリンドメインを除く抗体の定常領域を含むポリペプチドを含む。したがってＦｃは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＧの最後の２つの定常領域の免疫グロブリンドメイン、ＩｇＥおよびＩｇＭの最後の３つの定常領域の免疫グロブリンドメイン、ならびにこれらのドメインに対する可動性のヒンジのＮ末端を指す。ＩｇＡおよびＩｇＭに対して、ＦｃはＪ鎖を含むことができる。ＩｇＧに対して、Ｆｃは免疫グロブリンドメインＣガンマ２およびＣガンマ３（Ｃγ２およびＣγ３）ならびにＣガンマ１（Ｃγ１）とＣガンマ２（Ｃγ２）との間のヒンジを含む。Ｆｃ領域の境界は変化し得るが、ヒトＩｇＧ重鎖のＦｃ領域は大抵、Ｃ２２６またはＰ２３０からそのカルボキシル末端までの残基を含むものと定義され、番号付けは、Ｋａｂａｔら（１９９１，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ９１−３２４２，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ，ＶＡ）に記載のＥＵインデックスに従う。「Ｋａｂａｔに記載のＥＵインデックス」は、上記のＫａｂａｔらに記載されるヒトＩｇＧ１ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。Ｆｃは、この領域単独、または抗体、抗体の断片、もしくはＦｃ融合タンパク質と関連したこの領域、を指すことができる。Ｆｃ変異タンパク質は、抗体、Ｆｃ融合、またはＦｃ領域を含む任意のタンパク質もしくはタンパク質ドメインであり得る。特に好ましくは、Ｆｃ領域の非自然発生変異である、変異Ｆｃ領域を含むタンパク質である。（本明細書において「変異Ｆｃ領域」としても称される）非自然発生Ｆｃ領域のアミノ酸配列は、野生型アミノ酸配列と比べて少なくとも１つのアミノ酸残基の置換、挿入、および／または欠失を含む。挿入または置換の結果として変異Ｆｃ領域の配列に現れる任意の新しいアミノ酸残基は、非自然発生アミノ酸残基として称され得る。注釈：  多型は、Ｋａｂａｔ２７０、２７２、３１２、３１５、３５６、および３５８を含むがこれらに限定されない、多くのＦｃ位置に認められており、したがって提示された配列と先行技術の配列との間にわずかな差異が存在する可能性がある。
【００１６】
本明細書で使用する「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得た抗体を指す、すなわち集団を構成する個々の抗体は、少量に存在する可能性のある可能な自然発生的な突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、単一抗原部位に対して作られる。さらに、典型的に異なる決定因子（エピトープ）に対して作られる異なる抗体を含む、従来の（ポリクローナル）抗体調製物と対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定因子に対して作られる。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、それらが他の免疫グロブリン産出細胞によって汚染されていないハイブリドーマ細胞によって合成され得るという点で有利である。別の産出方法は当業者に知られており、例えばモノクローナル抗体をコードする重鎖および軽鎖遺伝子を安定的にまたは一過性に形質移入された細胞によって、モノクローナル抗体を産出することができる。
【００１７】
修飾語「モノクローナル」は、抗体の実質的に均一な集団から得られる抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の操作を必要とすると解釈されない。本明細書で使用する「モノクローナル」という用語は、任意の真核生物、原核生物、またはファージクローンを含む細胞のクローン集団に由来する抗体を指し、抗体を操作した方法ではない。例えば、本開示に従って使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）によって初めて説明されたハイブリドーマ法によって作製され得るものであり、または例えばＣｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８（１９９１）ａｎｄ  Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）に記載される技法を使用した、ファージ抗体ライブラリーからの単離を含む任意の組換えＤＮＡ法（例えば米国特許第４，８１６，５６７号）によって作製され得る。これらの方法は、モノクローナル哺乳類、キメラ、ヒト化、ヒト、ドメイン抗体、二特異性抗体、ワクシボディ（ｖａｃｃｉｂｏｄｙ）、直線状抗体、および二重特異性抗体を産出するために使用され得る。
【００１８】
「ヒト抗体」は、ヒトに由来する抗体、または抗原投与に反応して特異的なヒト抗体を産出するために「操作された」形質転換体から得られた抗体であり得、当該技術において知られている任意の方法によって産出され得る。ある技法において、ヒト重鎖および軽鎖の座位の要素は、内在性重鎖および軽鎖の座位の標的破損を含有する胚性幹細胞系に由来する生物の株に導入される。形質転換体は、ヒト抗原に対して特異的なヒト抗体を合成することができ、生物はヒト抗体を分泌するハイブリドーマを産出するために使用され得る。ヒト抗体は、重鎖および軽鎖がヒトＤＮＡの１つ以上の源に由来するヌクレオチド配列によってコードされる抗体でもあり得る。完全ヒト抗体は、遺伝子的または染色体の形質移入法、ならびにファージディスプレイ技術、またはインビトロで活性化したＩＣＯＳ発現Ｔ細胞によっても構成され得、これらすべては、当該技術において知られている。
【００１９】
「抗体依存性細胞傷害」および「ＡＤＣＣ」は、非特異性の細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、およびマクロファージ）が標的細胞の結合抗体を認識し、続いて標的細胞の溶解を引き起こす細胞性反応を指す。一実施形態において、かかる細胞はヒト細胞である。任意の特定の作用のメカニズムに限定されることを望まないが、ＡＤＣＣを媒介するこれらの細胞傷害性細胞は、一般的にＦｃ受容体（ＦｃＲ）を発現する。ＡＤＣＣを媒介する主たる細胞、ＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩを発現し、一方単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、および／またはＦｃγＲＩＶを発現する。造血細胞上のＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，９：４５７−９２（１９９１）に要約される。分子のＡＤＣＣ活性を査定するために、米国特許第５，５００，３６２号または第５，８２１，３３７号に記載されるインビトロＡＤＣＣアッセイ等を、実施することができる。かかるアッセイの有用なエフェクター細胞は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む。代わりに、またはさらに、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えばＣｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：６５２−６５６（１９８８）に開示される動物モデル等においてインビボで査定されることができる。
【００２０】
「補体依存性細胞傷害」または「ＣＤＣ」は、補体活性化を開始し、補体の存在下で標的を溶解する分子の能力を指す。補体活性化経路は、補体系（Ｃ１ｑ）の第１の構成要素と同族の抗原と複合体を形成した分子（例えば、抗体）との結合によって開始される。補体活性化を査定するために、例えばＧａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔａｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０２：１６３（１９９６）に記載されるＣＤＣアッセイを、実施することができる。
【００２１】
本明細書に記載する「抗体依存性食作用」または「オプソニン化」は、細胞媒介反応を指し、ＦｃγＲｓを発現する非特異的な細胞傷害性細胞は、標的細胞上に結合した抗体を認識し、続いて標的細胞の食作用を生じる。
【００２２】
「エフェクター細胞」は、１つ以上のＦｃＲを発現する白血球であり、エフェクター機能を実施する。細胞は、少なくともＦｃγＲＩ、ＦＣγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、および／またはＦｃγＲＩＶを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を実行する。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞、および好中球を含む。
【００２３】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域と結合する受容体を説明するために使用される。一実施形態において、ＦｃＲは天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、ある実施形態において、ＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）と結合し、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃγＲＩＶサブクラスの受容体を含むものであり、対立遺伝子変異型および、あるいは、これらの受容体のスプライスされた形態を含む。ＦｃγＲＩＩ受容体は、主に細胞質ドメインが異なる同様のアミノ酸配列を有するＦｃγＲＩＩＡ（「活性化する受容体」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「抑制する受容体」）を含む。活性化する受容体ＦｃγＲＩＩＡは、細胞質ドメインに免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する。抑制する受容体ＦｃγＲＩＩＢは、細胞質ドメインに免疫受容抑制性チロシンモチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する。（Ｄａeｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５：２０３−２３４（１９９７）を参照）。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，９：４５７−９２（１９９１）、Ｃａｐｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ，４：２５−３４（１９９４）、およびｄｅ  Ｈａａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．，１２６：３３０−４１（１９９５）でレビューされている。将来同定されるものを含む他のＦｃＲは、本明細書において「ＦｃＲ」という用語で包含される。その用語は、胎児へ母性ＩｇＧを移動する新生児受容体、ＦｃＲｎも含む（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１７：５８７（１９７６）およびＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２４：２４９（１９９４））。
【００２４】
本明細書に記載する治療に使用されるエピトープに対する抗体の「親和性」は、当該技術においてよく理解される用語であり、エピトープと抗体との結合の範囲、強さを意味する。親和性は、平衡解離定数（ＫＤまたはＫｄ）、見かけの平衡解離定数（ＫＤ’またはＫｄ’）、およびＩＣ５０（拮抗実験の５０％抑制を生じるために必要な量）を含むがこれらに限定されない当該技術において知られている多くの方法で測定および／または表現され得る。本開示のために、親和性は、エピトープと結合する抗体のある集団に対する平均親和性であることを理解されたい。１ｍＬ当たりのｍｇ  ＩｇＧまたはｍｇ／ｍＬに関して本明細書で報告するＫＤ’の値は、血漿を使用することができるが、血清の１ｍＬ当たりのｍｇ  Ｉｇを示す。抗体親和性が本明細書に記載する治療方法の投与の根拠、または本明細書に記載の治療方法の選択として使用される場合、抗体親和性を治療の前および／または治療中に測定することができ、得られた値をヒト患者が治療に対して適切な候補であるか否か査定する際に、臨床医が使用することができる。
【００２５】
本明細書で使用する「結合活性」という用語は、抗体が抗原と結合する全体的な結合強さ（すなわち、両方の抗体アーム）の尺度である。抗体結合活性を、これだけに限定されないが、Ｇｒａｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．Ｍｅｔｈ．，４４：１１−２４．（１９９３）に記載される間接蛍光抗体の修飾によって等の、当該技術において知られている任意の手段を使用して抗原過剰の状態での抗原抗体結合の解離を測定することによって決定することができる。
【００２６】
「エピトープ」は、当該技術においてよく理解される用語であり、抗体との特異的な結合を示す任意の化学的な部分を意味する。「抗原」はエピトープを含有する部分または分子であり、従って、やはり抗体と特異的に結合する。
【００２７】
本明細書で使用する「抗体半減期」という用語は、抗体分子の投与後の平均生存期間の尺度である抗体の薬物動態特性を意味する。抗体半減期は、例えば血清または血漿で測定して（すなわち循環半減期）または他の組織で測定して、患者の体またはその特定の区画から免疫グロブリンの既知量の５０％を排除するために必要な時間として表現することができる。半減期は、免疫グロブリンまたは免疫グロブリンのクラスによって異なる。一般的には、抗体半減期の増加は、投与された抗体に対する循環の平均滞留時間（ＭＲＴ）の増加を引き起こす。
【００２８】
「アイソタイプ」という用語は、抗体の重鎖または軽鎖の定常領域の分類を指す。抗体の定常ドメインは、抗原との結合に関与しないが、様々なエフェクター機能を示す。重鎖定常領域のアミノ酸配列に依存して、所与のヒト抗体または免疫グロブリンは、免疫グロブリンの５つの主要クラスＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭ．のうちの１つに割り当てることができる。これらのクラスのうちのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１（γ１）、ＩｇＧ２（γ２）、ＩｇＧ３（γ３）、およびＩｇＧ４（γ４）、ならびにＩｇＡ１およびＩｇＡ２にさらに分けられることができる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常領域は、それぞれα、δ、ε、γ、およびμと称される。免疫グロブリンの異なるクラスの構造および三次元配置は、よく知られている。様々なヒト免疫グロブリンのクラスのうち、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、およびＩｇＭのみが補体を活性化することで知られている。ヒトＩｇＧ１およびＩｇＧ３は、ヒトにおいてＡＤＣＣを媒介することで知られている。ヒト軽鎖定常領域は、κおよびλの２つの主要クラスに分類することができる。
【００２９】
本明細書に使用する「免疫原性」は、化合物が免疫応答を誘発することができる（特定の抗体の産出および／または特定のＴ細胞の増殖を刺激する）ことを意味する。
【００３０】
本明細書で使用する、「抗原性」は、化合物が抗体によって認識されること、または抗体と結合し、免疫応答を誘発することができることを意味する。
【００３１】
本明細書で使用する「賦形剤」という用語は、増加したタンパク質安定性、増加したタンパク質溶解性、および減少した粘度等の製剤に対して有益な物理的性質を分け与える薬物に対する希釈剤、媒体、防腐剤、結合剤、または安定化剤として一般に使用される不活性物質を指す。賦形剤の例は、タンパク質（例えば、これに限定されないが血清アルブミン）、アミノ酸（例えば、これらに限定されないがアスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、グリシン）、界面活性剤（例えば、これらに限定されないが、ＳＤＳ、Ｔｗｅｅｎ２０、Ｔｗｅｅｎ８０、ポリソルベート、および非イオン界面活性剤）、糖類（例えば、これらに限定されないが、グルコース、ショ糖、マルトース、およびトレハロース）、ポリオール（例えば、これらに限定されないが、マンニトールおよびソルビトール）、脂肪酸およびリン脂質（例えば、これらに限定されないが、スルホン酸アルキルおよびカプリル酸）を含むがこれらに限定されない。賦形剤についての追加情報については、本明細書においてすべてが組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ｂｙ  Ｊｏｓｅｐｈ  Ｐ．Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，１８ｔｈｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）を参照されたい。
【００３２】
本明細書に記載する「薬学的に許容される」という語句は、連邦または州政府の規制当局によって許可された、または動物、および特にヒトでの使用に対して米国薬局方、欧州薬局方、または他の一般的に認識されている薬局方に記載されたことを意味する。
【００３３】
対象の抗原（例えば、ＩＣＯＳ）と特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）を含む液体製剤と関連して、本明細書で使用する「安定性」および「安定な」という用語は、ある製造、調製、輸送、および保存条件下で、凝集、分解、または断片化に対する製剤の抗体（その抗体断片を含む）の耐性を指す。本開示の「安定な」製剤は、ある製造、調製、輸送、および保存条件下にて生物活性を保持する。参照製剤と比較して、ＨＰＳＥＣ、逆相クロマトグラフィー、静的光散乱（ＳＬＳ）、動的光散乱（ＤＬＳ）、フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）、円二色性（ＣＤ）、尿素アンフォールド技術、内在性のトリプトファン蛍光、示差走査熱量測定、および／またはＡＮＳ結合技術によって、測定する凝集、分解、または断片化の度合いによって、該抗体（その抗体断片を含む）の安定性を、査定することができる。例えば、参照製剤は、８０ｍＭＮａＣｌ、４％トレハロース、および０．０２％ポリソルベート８０を含有する１０ｍＭヒスチジン、ｐＨ６．０〜６．５で、１０ｍｇ／ｍＬの抗体（その抗体断片を含む）（例えば、これに限定されないが、配列番６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、およびフコースが糖鎖の還元末端にてＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗体）からなる−７０℃で凍結した標準試料であってよく、この参照製剤は、ＨＰＳＥＣによって単一の単量体ピーク（例えば≧９７％範囲）を定期的に示す。抗体（その抗体断片を含む）を含む製剤の全体の安定性を、例えば、ＥＬＩＳＡおよび単離された抗原分子を使用した放射免疫アッセイを含む様々な免疫学的アッセイによって査定することができる。
【００３４】
本明細書で使用する「凝集の低から検出不能なレベル」という語句は、高速サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）または静的光散乱（ＳＬＳ）技術によって測定されるタンパク質の約５重量％以下、約４重量％以下、約３重量％以下、約２重量％以下、約１重量％以下、および約０．５重量％以下の凝集を含有する試料を指す。
【００３５】
本明細書で使用する「断片化の低から検出不能なレベル」という用語は、非分解抗体またはその非分解断片を示し、総タンパク質の約５％を超える、約４％を超える、約３％を超える、約２％を超える、約１％を超える、または約０．５％を超える量をそれぞれに有する他の単一ピークを含有しない、例えばＨＰＳＥＣまたは逆相クロマトグラフィーによって測定される単一ピーク、または還元キャピラリーゲル電気泳動（ｒＣＧＥ）によって測定される２つのピーク（例えば、重鎖および軽鎖）（またはサブユニットと同じ数のピーク）に、総タンパク質量の約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９８％、または約９９％と同等またはそれ以上を含有する試料を指す。本明細書で使用する「還元キャピラリーゲル電気泳動」という用語は、抗体のジスルフィド結合を還元するために十分な還元条件下でのキャピラリーゲル電気泳動を指す。
【００３６】
本明細書で使用する「疾患」および「疾病」という用語は、対象が、健康な、無影響の対象と異なる対象の状態を指すために互換的に使用される。特に、「自己免疫病」という用語は、対象自身の細胞、組織および／または臓器に対する対象の免疫性反応によって生じた細胞、組織および／または臓器損傷を特徴とする対象の状態を指すために、「自己免疫疾患」という用語と互換的に使用される。「炎症性疾病」という用語は、炎症、例えば、これに限定されないが、慢性炎症を特徴とする対象の状態を指すために、「炎症性疾患」という用語と互換的に使用される。自己免疫疾患は、炎症を伴っても伴わなくてもよい。さらに、炎症は、自己免疫疾患に起因するものであってもそうでなくてもよい。ある状態は、２つ以上の疾患として特徴付けられる可能性がある。例えば、ある状態は、自己免疫疾患および炎症性疾患の両方として特徴付けられる可能性がある。
【００３７】
「治療（単数および複数）」という用語は、疾病もしくは疾患の防止（予防）、治療、および／または管理で用いることができる、任意の１もしくは複数のプロトコール、方法、および／または薬剤を指すことができる。
【００３８】
「治療する」、「治療」、または「の治療」（または文法的に同等の用語）の用語は、対象の状態の重症度が、縮小した、または少なくとも部分的に改善した、または寛解した、および／または少なくとも１つの臨床症状の多少の軽減、緩和、または減少が達成された、および／または状態の進行の抑制または遅延、および／または疾病または病気の発症の防止または遅延があることを意味する。したがって、「治療する」、「治療」、または「の治療」（または文法的に同等の用語）の用語は、予防的および治療的処置管理体制の両方を指す。
【００３９】
本明細書で使用する「管理する」、「管理している」、および「管理」という用語は、疾病の治癒につながらない、対象が治療（例えば、予防的または治療剤）から得られる有益な効果を指す。ある実施形態において、疾病の進行または悪化を防止するために、疾病を「管理する」ために対象に１つ以上の治療（例えば１つ以上の予防的または治療剤）を実行する。
【００４０】
本明細書で使用する「防止（予防）する」、「防止している」、および「防止」という用語は、治療の実行（例えば、予防剤または治療剤）、または治療の組み合わせの実行（例えば予防剤または治療剤の組み合わせ）の結果起きた、疾病または疾患の発達または発症の抑制、または対象の疾病または疾患の１つ以上の症状の再発、発症、または発達の防止を指す。
【００４１】
本明細書で使用する「予防剤（単数および複数）」という用語は、疾病または疾患の発症、再発、または発達の防止に使用され得る任意の薬剤を指す。ある実施形態において、「予防剤」という用語は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合する抗体を指す。ある他の実施形態において、「予防剤」という用語は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合する抗体以外の薬剤を指す。ある実施形態において、予防剤は、疾病または疾患の発症、発達、進行および／または重症度を防止する、または妨害するために有用と知られている、またはそのために使用されてきた、または現在使用されている薬剤である。
【００４２】
本明細書で使用される、免疫調節剤、免疫調節体、または免疫調節薬を含むがこれらに限られない「免疫調節剤」という用語およびその変種は、宿主の免疫系を調節する薬剤を指す。特定の実施形態において、免疫調節剤は、対象の免疫応答の一態様を変化する薬剤である。ある実施形態において、免疫調節剤は、対象の免疫系（すなわち、免疫抑制剤）を抑制するまたは減少する薬剤である。ある他の実施形態において、免疫調節剤は、対象の免疫系を活性化する、または増加する薬剤である（すなわち免疫賦活剤）。本開示に従って、本開示の治療と組み合わせて使用される免疫調節剤は、本開示の抗体を含まない。免疫調節剤は、小分子、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸（例えば、これらに限定されないが、アンチセンスヌクレオチド配列、三重らせん体、ＲＮＡｉ、および生物活性タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むがこれらに限定されないＤＮＡおよびＲＮＡヌクレオチド）、抗体、合成または天然の無機分子、模倣剤、および合成または天然の有機分子を含むがこれらに限定されない。
【００４３】
本明細書で使用する、「十分な量」または特定の結果を達成「するために十分な量」は、随意に（すなわち、治療有効量の投与による）治療効果である所望の効果を産生するために有効的である本開示の抗体または組成物の量を指す。例えば、「十分な量」または「するために十分な量」は、Ｔ細胞を発現するＩＣＯＳを枯渇させるために効果的である量であり得る。
【００４４】
本明細書で使用する「治療効果のある」量は、対象にとっていくらかの改善または利益を提供する量である。別の言い方をすると、「治療効果のある」量は、少なくとも１つの臨床症状で、緩和、軽減、および／または低減を提供する量である。本発明の方法で治療され得る疾患と関連する臨床症状は、当業者によく知られている。さらに、当業者は、対象にいくつかの利益が提供される限り、治療効果は完全または治癒するものである必要がないことを理解するであろう。
【００４５】
本開示の抗ＩＣＯＳ抗体の「治療効果のある投与量」は、少なくとも１つの疾病の症状の重症度の減少、疾病の無症状期間の頻度および期間の増加、または疾病の苦痛による機能障害または能力障害の防止という結果をもたらす。例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の場合、治療効果のある用量によって、例えば、痛みまたは疲労等の、少なくとも１つのＳＬＥと関係する身体的な症状のさらなる悪化を防止する。疾病の早期または事前の徴候がある場合、治療効果のある用量は、所望であり得る等のＳＬＥの発症をも防止するまたは遅延する。同様に、ＳＬＥと関連する慢性の進行を遅延することを含む。ＳＬＥの診断で利用される臨床検査は、化学、血液学、血清学、および放射線学を含む。その結果、前述のもののうちのいずれかを監視する任意の臨床的なまたは生化学的なアッセイを、特定の処置がＳＬＥを治療するために治療効果のある用量であるか否か決定するために使用することができる。当業者は、対象の大きさ、対象の症状の重症度、および選択した特定の組成物または投与の経路等の因子を基にしてかかる量を決定することができるであろう。
【００４６】
本明細書で使用する「対象」という用語は、任意のヒトまたは非ヒト動物を含む。「非ヒト動物」という用語は、例えばこれらに限定されないが、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、雌ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類等の、哺乳動物および非哺乳動物の、すべての脊椎動物を含む。
【００４７】
本明細書で使用する「非反応性」および「抵抗性」という用語によって、疾病または疾患に対して現在用いられている治療（例えば、予防剤または治療剤）で処置された患者を記述する。かかる患者は、重症の、持続的に活発な疾病に罹患している可能性が高く、その疾患と関連した症状を寛解するための追加治療を必要とする。
【００４８】
濃度、量、細胞数、割合、および他の数値は、本明細書において範囲の形式として提示され得る。かかる範囲の形式は、単に便利さおよび簡潔さに対して使用され、範囲の制限として明確に列挙された数値を含むだけでなく、各数値および部分的な範囲が明確に列挙されているかのごとく、その範囲内に包含される個々の数値または部分的な範囲を含むことが柔軟に解釈されるべきであることを理解されたい。
【００４９】
４．図面の簡単な説明
本開示の代表的な実施形態を図示するために、本明細書において図面を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００５０】
【図１】２５ｍＭ（ｐＨ６．０）のヒスチジン中の１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＤＳＣプロファイル。
【図２】１３６抗ＩＣＯＳ抗体の熱安定性に対するｐＨの効果。温度の関数として、（３３０ｎｍで測定した）トリプトファン蛍光強度プロフィルを示す。トリプトファン蛍光強度プロフィル測定を、各種のｐＨで実施した。
【図３】抗ＩＣＯＳ製剤のコロイド安定性のｐＨ依存性。温度の関数として各種のｐＨを用いた製剤の３５０ｎｍの吸収を示す。
【図４】賦形剤スクリーニングのためのコロイド安定性測定の使用の概略図。
【図５】単一賦形剤スクリーニング：１３６製剤のコロイド安定性に対するポリソルベート、トレハロース、ショ糖、およびリジンの効果。
【図６】単一賦形剤スクリーニング：１３６製剤のコロイド安定性に対する増加するＮａＣｌ濃度の効果。
【図７】単一の賦形剤スクリーニング：１３６製剤のコロイド安定性に対する増加するＮａＣｌまたはアルギニン濃度の効果。
【図８】賦形剤スクリーニング：１３６製剤のコロイド安定性に対するトレハロースおよびアルギニンの組み合わせの効果。
【図９】１３６抗ＩＣＯＳ抗体製剤の安定性。抗体製剤の安定性を、ＳＥＣを用いて確認した。表は、４０℃で保存後、ＳＥＣを用いて測定した、製剤の単量体含有量パーセント（％）を表示する。
【図１０】１３６抗ＩＣＯＳ抗体製剤の安定性。９０ｍｇ／ｍＬの１３６、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ６．０）、４％のトレハロース、および８０ｍＭのＮａＣｌ（Ａ）または１００ｍＭのアルギニンＨＣｌ（Ｂ）のいずれか、を含む抗体製剤の安定性を、ＳＥＣを用いて確認した。製剤を、ＳＥＣ分析を実施する前に、４０℃で２１日間保存した。ＳＥＣタンパク質の溶出プロファイルを示す。
【図１１】１３６抗ＩＣＯＳ抗体製剤の安定性に対するポリソルベート８０の効果。０％、０．０２％、または０．０５％のポリソルベート８０を含む１３６製剤（１０５ｍｇ／ｍＬの１３６、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ６．０）、８０ｍＭのＮａＣｌ）の安定性を、４０℃で保存後、確認した。表は、様々な時点においてＳＥＣによって測定された製剤の単量体含有量パーセント（％）を表す。
【図１２】１３６抗ＩＣＯＳ抗体製剤の安定性に対するポリソルベート８０の効果。０％、０．０２％、または０．０５％のポリソルベート８０を含む１３６製剤（１０５ｍｇ／ｍＬの１３６、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ６．０）、８０ｍＭのＮａＣｌ）の安定性を、４０℃で保存後、確認した。表は、様々な時点においてＳＥＣによって測定された製剤の断片含有量パーセント（％）を表す。
【図１３】１３６抗ＩＣＯＳ抗体製剤の安定性に対するポリソルベート８０の効果。０％、０．０２％、または０．０５％のポリソルベート８０を含む１３６製剤（１０５ｍｇ／ｍＬの１３６、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ６．０）、８０ｍＭのＮａＣｌ）の安定性を、４０℃で保存後、確認した。表は、様々な時点においてＳＥＣによって測定された製剤の二量体含有量パーセント（％）を表す。
【図１４】２〜８、２５または４０℃で保存した１３６抗ＩＣＯＳ抗体製剤の安定性。１０５ｍｇ／ｍＬの１３６、１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ６．０）、８０ｍＭのＮａＣｌ、および０．０２％のポリソルベート８０を含む１３６製剤の安定性を、２〜８、２５または４０℃で保存した後に確認した。表は、様々な時点においてＳＥＣを用いて測定した、製剤の単量体含有量パーセント（％）を表す。
【図１５Ａ】Ａ）フコシル化したおよびアフコシル化した抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂと、マウスＦｃｇＲＩＶとのＢＩＡｃｏｒｅ結合親和性。
【図１５Ｂ】Ｂ）脾臓ナイーブおよびヘルパーメモリーＴ細胞（中枢およびエフェクター）のＩＣＯＳ発現の定常状態の免疫表現型の特徴付け。
【図１５Ｃ】Ｃ）フコースなしの抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ（ＩｇＧ２ａ−ａＦｕｃ）によって、ＩＣＯＳを担持するＴ細胞のより効果的な枯渇を媒介する。ナイーブＢａｌｂ／ｃマウスへ、示した抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂを１回単一腹腔内注射した際の（２５０μｇ／動物）、脾臓ヘルパー中枢およびエフェクターメモリーＩＣＯＳ担持Ｔ細胞の薬力学的分析。
【図１６】抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ（ＩｇＧ２ａ−ａＦｕｃ）によって、移植片対宿主強皮症の臨床スコアが減少する。抗マウスＩＣＯＳ  ＩＧ２ａ−ａＦｕｃまたはアイソタイプコントロールＭＡｂ（ｎ＝１０）を用いた隔週の処置（開始時間：８日目）後の平均臨床疾病スコアを示す。ベースライン皮膚スコアの測定を、研究の６日目に取得した。（＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．００５）。
【図１７−１】抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂは、ＩＣＯＳを担持するＴＦＨの効果的な除去を媒介し、胚中心のＢ細胞の増殖を抑制する。Ｂａｌｂ／ｃコントロールマウスから、および抗ＩＣＯＳまたはアイソタイプコントロールＭＡｂのいずれかで処置したｒａｇ２欠損マウスから単離された脾臓、リンパ節、ならびに末梢血Ｔｈメモリー（Ａ）およびＴｈメモリーＩＣＯＳ＋細胞（Ｂ、Ｃ）（図１Ｃに示すようにゲーティングした）の免疫表現型分析。Ｄ）抗ＩＣＯＳ治療は、ＴＦＨ細胞の増殖を防止する。抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂは総脾臓Ｂ細胞（ＣＤ１９＋）の全体数を変更しないが（Ｅ）、胚中心Ｂ細胞のＴＦＨ媒介増殖を著しく抑制する（Ｆ）。ＩＣＯＳを担持するＴ細胞の枯渇は、全体のＣＤ４＋（Ｇ）およびＣＤ８＋（Ｈ）Ｔ細胞区画を撹乱させない。
【図１７−２】図１７−１の続きである。
【図１７−３】図１７−２の続きである。
【図１７−４】図１７−３の続きである。
【図１８】アイソタイプコントロールＭＡｂ処置した動物（Ａ、Ｅ、）および抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ処置した動物（Ｃ）のＲＡＧ２−／−脾臓および腎臓の組織学。アイソタイプ（Ｂ）と比較して、脾臓の高い拡大率（２００倍）によって、抗ＩＣＯＳ処置した動物（Ｄ）の胚中心形成の不足を証明する。元の拡大率、１００倍；挿入図、１０００倍。
【図１９】抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂを用いての処置によって、ＧｖＨＤ−ＳＳｃ皮膚病変を著しく抑制する。Ｂａｌｂ／ｃ（Ａ、Ｂ）、またはアイソタイプコントロールＭＡｂ群（Ｃ、Ｄ）および抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ処置群（Ｅ、Ｆ）からの脾細胞を用いて移植して４週間のＲＡＧ２−／−マウス、のいずれかからの背部皮膚の組織学を示す。組織切片を、ヘマトキシリンおよびエオシン染色（上列）またはマッソン３色染色法（下列）のいずれかを用いて染色した。元の拡大率、２００倍。
【図２０−１】ＩＣＯＳ  ＭＡｂの処置は、ＴヘルパーおよびＴＦＨ関連遺伝子および皮膚の自己免疫性遺伝子のフィンガープリントに影響を与える。
【図２０−２】図２０−１の続きである。
【図２０−３】図２０−２の続きである。
【図２０−４】図２０−３の続きである。
【図２１】１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学直径に対する濃度の効果。図の黒三角は、１３６抗ＩＣＯＳ抗体を用いて取得したデータを示し、黒丸は、非干渉モノクローナル抗体（ｍＡｂＢ）を用いて取得したデータを示す。
【図２２】２３℃（黒丸）および３７℃（黒三角）の１３６抗ＩＣＯＳ抗体ＲＳＡに対する塩化ナトリウム濃度の効果。
【図２３】１３６抗ＩＣＯＳ抗体ＲＳＡに対するｐＨの効果。コントロール非干渉抗体を用いて取得したデータ）ｍＡｂＢ）も示す。
【図２４】１３６抗ＩＣＯＳ抗体ＲＳＡに対する温度の効果。ｍＡｂＢは、非干渉コントロール抗体である。
【図２５】１３６抗ＩＣＯＳ抗体の解離速度に対する温度の効果。
【発明を実施するための形態】
【００５１】
５．詳細な説明
１３６抗ＩＣＯＳ抗体の物理化学の性質の特徴付けによって、溶液中にて可逆的な自己会合を起こす抗体の意外な発見をもたらした。１３６抗体の認められた可逆的な自己会合は、一意的であり、凝集体形成を引き起こさない。自己会合のため、１３６抗体のかなりの割合が、溶液に三量体として存在する。追加の実験研究は、溶液の１３６の単量体と三量体形成との間の平衡が、抗体の濃度、温度、イオン強度、およびｐＨによって影響されることを証明する。例えば、１３６抗体の少なくとも１０モル％は、３７℃で１０ｍｇ／ｍＬの抗体濃度のＰＢＳに三量体として存在する。本明細書に記載するものは、ヒトＩＣＯＳを特異的に結合し、溶液中にて可逆的な自己会合を起こす抗体を含む安定した液体製剤である。
【００５２】
本開示は、ＩＣＯＳに特異的に結合し、溶液中にて可逆的な自己会合を起し、増強したエフェクター機能（例えば、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、および／または抗体依存性食作用）を有する、抗体またはその断片の安定した液体製剤に関する。ある実施形態において、抗ヒトＩＣＯＳ抗体またはその断片の安定した液体製剤は、ヒト対象に対する非経口投与に適している。特定の実施形態において、本開示の安定した液体製剤は、ヒト対象に対する皮下投与に適している。
【００５３】
５．１．抗体製剤
特定の実施形態において、本開示は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合し、溶液中にて可逆的な自己会合を起こし、増強したエフェクター機能（例えば、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、および／または抗体依存性食作用）を有する抗体の安定した液体製剤を包含し、製剤は、製造、調製、輸送、および長期間の保存中に、皆無かそれに近い生物活性を用いて低〜検出不能なレベルの抗体凝集および／または断片化を示す。本開示は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合し、溶液中にて可逆的な自己会合を起こし、増強したエフェクター機能を有し、増加したインビボ半減期を有する抗体の安定した液体製剤も包含し、該製剤は、製造、調製、輸送、および長期間の保存中、低〜検出不能なレベルの抗体凝集および／または断片化、および抗体の皆無かそれに近い生物活性を示す。特定の実施形態において、本開示の製剤は、増加したインビボＡＤＣＣ活性を有する抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は、製造、調製、輸送、および長期間の保存中、低〜検出不能なレベルの抗体凝集および／または断片化、および抗体の皆無かそれに近い生物活性を示す。
【００５４】
一実施形態において、本開示の液体製剤は、水性製剤である。特定の実施形態において、本開示の液体製剤は、水性製剤であり、水性担体は蒸留水である。
【００５５】
一実施形態において、本開示の製剤は、無菌である。
【００５６】
一実施形態において、本開示の製剤は均一である。
【００５７】
一実施形態において、本開示の製剤は等張性である。
【００５８】
本開示は、増強したエフェクター機能を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含む安定した高濃度の液体製剤を提供する。一実施形態において、本開示の製剤は、米国特許出願第１２／１１６，５１２号に記載された抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【００５９】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含み、該抗体またはその断片は、配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＨドメインおよび配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＬドメインを含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、フコースが糖鎖の還元末端のＮアセチルグルコサミンと結合しない、複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含む。
【００６０】
本開示は、対象の単一の抗体（その抗体断片を含む）、例えば、ＩＣＯＳポリペプチドと特異的に結合する抗体を含む安定した液体製剤を包含する。本開示は、２つ以上の対象の抗体（その抗体の断片を含む）、例えば、ＩＣＯＳポリペプチドと特異的に結合する抗体を含む安定した液体製剤も包含する。
【００６１】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約３０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約４０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約６０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約７０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約８０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約９０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１３０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１４０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１６０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１７０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１８０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１９０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２５０ｍｇ／ｍＬ、または少なくとも約３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、抗少なくとも約１５ｍｇ／ｍＬのＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１２５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１３０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約９０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの間、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの間、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬの間、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約７５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約１２５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約１５０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの間、約７５ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの間、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの間、約１２５ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの間、約７５ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの間、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬの間、約７５ｍｇ／ｍＬ〜約１００ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約７５ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約７５ｍｇ／ｍＬの間、または約２５ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約９０ｍｇ／ｍＬ〜約１１０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２１０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。さらなる実施形態において、本明細書に記載する製剤は、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約３ｍｇ／ｍＬ、約４ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１４０ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１６０ｍｇ／ｍＬ、約１７０ｍｇ／ｍＬ、約１８０ｍｇ／ｍＬ、約１９０ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ、または約３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１２５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１３０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【００６２】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも３０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも４０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも６０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも７０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも８０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも９０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１３０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１４０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１６０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１７０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１８０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１９０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５０ｍｇ／ｍＬ、または少なくとも３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１２５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１７５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、１ｍｇ／ｍ〜２０ｍｇ／ｍＬの間、５ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬの間、１ｍｇ／ｍＬ〜２５ｍｇ／ｍＬの間、１ｍｇ／ｍＬ〜２００ｍｇ／ｍＬの間、２５ｍｇ／ｍＬ〜２００ｍｇ／ｍＬの間、５０ｍｇ／ｍＬ〜２００ｍｇ／ｍＬの間、７５ｍｇ／ｍＬ〜２００ｍｇ／ｍＬの間、１００ｍｇ／ｍＬ〜２００ｍｇ／ｍＬの間、１２５ｍｇ／ｍＬ〜２００ｍｇ／ｍＬの間、１５０ｍｇ／ｍＬ〜２００ｍｇ／ｍＬの間、２５ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの間、５０ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの間、７５ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの間、１００ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの間、１２５ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの間、２５ｍｇ／ｍＬ〜１２５ｍｇ／ｍＬの間、５０ｍｇ／ｍＬ〜１２５ｍｇ／ｍＬの間、７５ｍｇ／ｍＬ〜１２５ｍｇ／ｍＬの間、１００ｍｇ／ｍＬ〜１２５ｍｇ／ｍＬの間、２５ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬの間、５０ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬの間、７５ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬの間、２５ｍｇ／ｍＬ〜７５ｍｇ／ｍＬの間、５０ｍｇ／ｍＬ〜７５ｍｇ／ｍＬの間、または２５ｍｇ／ｍＬ〜５０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、５ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、９０ｍｇ／ｍＬ〜１１０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、１００ｍｇ／ｍＬ〜２１０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。さらなる実施形態において、本明細書に記載する製剤は、１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ、３ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、１５ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、６０ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ、８０ｍｇ／ｍＬ、９０ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍＬ、１１０ｍｇ／ｍＬ、１２０ｍｇ／ｍＬ、１３０ｍｇ／ｍＬ、１４０ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬ、１６０ｍｇ／ｍＬ、１７０ｍｇ／ｍＬ、１８０ｍｇ／ｍＬ、１９０ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍＬ、２５０ｍｇ／ｍＬ、または３００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、１００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、１２５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、１７５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、２００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【００６３】
随意に、本開示の製剤は、緩衝剤、糖類、塩、および界面活性剤等の一般的な賦形剤および／または添加物をさらに含むことができる。さらにまたはあるいは、本開示の製剤は、限定しないが、可溶化剤、希釈剤、結合剤、安定剤、塩、親油性溶媒、アミノ酸、キレート剤、防腐剤等の一般的な賦形剤および／または添加物を含むことができる。
【００６４】
ある実施形態において、緩衝剤を、ヒスチジン、クエン酸、リン酸、グリシン、および酢酸からなる群から選択する。他の実施形態において、糖類賦形剤を、トレハロース、ショ糖、マンニトール、マルトース、およびラフィノースからなる群から選択する。さらに他の実施形態において、界面活性剤をポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート８０、およびプルロニックＦ６８からなる群から選択する。さらに他の実施形態において、塩をＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ２、およびＣａＣｌ２からなる群から選択する。
【００６５】
随意に、本開示の製剤は、他の一般的な補助的な構成要素、これらに限定されないが、適切な賦形剤、ポリオール、可溶化剤、希釈剤、結合剤、安定剤、親油性溶媒、キレート剤、防腐剤等をさらに含むことができる。
【００６６】
本開示の製剤は、改善したｐＨ制御を提供するために緩衝剤またはｐＨ調整剤を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、約３．０〜約９．０の間、約４．０〜約８．０の間、約５．０〜約８．０の間、約５．０〜約７．０の間、約５．０〜約６．５の間、約５．５〜約８．０の間、約５．５〜約７．０の間、または約５．５〜約６．５の間のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約３．０、約３．５、約４．０、約４．５、約５．０、約５．１、約５．２、約５．３、約５．４、約５．５、約５．６、約５．７、約５．８、約５．９、約６．０、約６．１、約６．２、約６．３、約６．４、約６．５、約６．６、約６．７、約６．８、約６．９、約７．０、約７．５、約８．０、約８．５、または約９．０のｐＨを有する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約６．０のｐＨを有する。
【００６７】
本開示の製剤は、改善したｐＨ制御を提供するために緩衝剤またはｐＨ調整剤を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、３．０〜９．０の間、４．０〜８．０の間、５．０〜８．０の間、５．０〜７．０の間、５．０〜６．５の間、５．５〜８．０の間、５．５〜７．０の間、または５．５〜６．５の間のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、３．０、３．５、４．０、４．５、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．５、８．０、８．５、または９．０のｐＨを有する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、６．０のｐＨを有する。
【００６８】
製剤のｐＨは、一般的に製剤で使用される特定の抗体（その抗体断片を含む）の等電点（例えば、これらだけに限定されないが、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、およびフコースが糖鎖の還元末端のＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合の糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体の等電点）と同等であるべきではなく、約４．０〜約８．０の範囲であり得るか、または約５．５〜約６．５の範囲であり得る。
【００６９】
典型的に、緩衝剤は有機もしくは無機酸または塩基から調製される塩である。代表的な緩衝剤は、クエン酸、アスコルビン酸、グルコン酸、炭酸、酒石酸、コハク酸、酢酸、またはフタル酸の塩等の有機酸塩；トリス、トロメタミンハイドロクロライド、またはリン酸緩衝液を含むがこれらに限定されない。さらに、アミノ酸の構成要素は、緩衝能で機能することもできる。本開示の製剤で緩衝剤として利用されることができる代表的なアミノ酸の構成要素は、グリシンおよびヒスチジンを含むがこれらに限定されない。ある実施形態において、緩衝剤を、ヒスチジン、クエン酸、リン酸、グリシン、および酢酸からなる群から選択する。特定の実施形態において、緩衝剤はヒスチジンである。別の特定の実施形態において、緩衝剤はクエン酸である。緩衝剤の純度は、少なくとも９８％、または少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％であるべきである。本明細書で使用される、ヒスチジンと関連する「純度」という用語は、例えば、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ，１３ｔｈｅｄ．，Ｏ’Ｎｅｉｌ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄ．（Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，２００１）に記載される、当該技術において理解されるヒスチジンの化学的な純度を指す。
【００７０】
緩衝剤を、所望のイオン強度および必要な緩衝能に応じて、典型的に約１ｍＭ〜約２００ｍＭの間の濃度またはその中の任意の範囲または値で使用する。非経口製剤で採用される従来の緩衝剤の通常の濃度は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌｕｍｅ  １，  ２ｎｄＥｄｉｔｉｏｎ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ５，ｐ．１９４，Ｄｅ  Ｌｕｃａ  ａｎｄ  Ｂｏｙｌａｎ，「Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｍａｌｌ  Ｖｏｌｕｍｅ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌｓ」，Ｔａｂｌｅ  ５：Ｃｏｍｍｏｎｌｙ  ｕｓｅｄ  ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ｉｎ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓで見出すことができる。一実施形態において、緩衝剤は、約１ｍＭ、または約５ｍＭ、または約１０ｍＭ、または約１５ｍＭ、または約２０ｍＭ、または約２５ｍＭ、または約３０ｍＭ、または約３５ｍＭ、または約４０ｍＭ、または約４５ｍＭ、または約５０ｍＭ、または約６０ｍＭ、または約７０ｍＭ、または約８０ｍＭ、または約９０ｍＭ、または約１００ｍＭの濃度である。一実施形態において、緩衝剤は、１ｍＭ、または５ｍＭ、または１０ｍＭ、または１５ｍＭ、または２０ｍＭ、または２５ｍＭ、または３０ｍＭ、または３５ｍＭ、または４０ｍＭ、または４５ｍＭ、または５０ｍＭ、または６０ｍＭ、または７０ｍＭ、または８０ｍＭ、または９０ｍＭ、または１００ｍＭの濃度である。特定の実施形態において、緩衝剤は約５ｍＭ〜約５０ｍＭの間の濃度である。別の特定の実施形態において、緩衝剤は、５ｍＭ〜２０ｍＭの間の濃度である。
【００７１】
緩衝剤は、所望のイオン強度および必要な緩衝能に応じて、典型的に１ｍＭ〜２００ｍＭの間の濃度またはその中の任意の範囲または値で使用する。非経口製剤で採用される従来の緩衝剤の通常の濃度は、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｖｏｌｕｍｅ  １，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ５，ｐ．１９４，Ｄｅ  Ｌｕｃａ  ａｎｄ  Ｂｏｙｌａｎ，「Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｍａｌｌ  Ｖｏｌｕｍｅ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌｓ」，Ｔａｂｌｅ５：  Ｃｏｍｍｏｎｌｙ  ｕｓｅｄ  ａｄｄｉｔｉｖｅｓ  ｉｎ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓで見出すことができる。一実施形態において、緩衝剤は、１ｍＭ、または５ｍＭ、または１０ｍＭ、または１５ｍＭ、または２０ｍＭ、または２５ｍＭ、または３０ｍＭ、または３５ｍＭ、または４０ｍＭ、または４５ｍＭ、または５０ｍＭ、または６０ｍＭ、または７０ｍＭ、または８０ｍＭ、または９０ｍＭ、または１００ｍＭの濃度である。一実施形態において、緩衝剤は、１ｍＭ、または５ｍＭ、または１０ｍＭ、または１５ｍＭ、または２０ｍＭ、または２５ｍＭ、または３０ｍＭ、または３５ｍＭ、または４０ｍＭ、または４５ｍＭ、または５０ｍＭ、または６０ｍＭ、または７０ｍＭ、または８０ｍＭ、または９０ｍＭ、または１００ｍＭの濃度である。特定の実施形態において、緩衝剤は、５ｍＭ〜５０ｍＭの間の濃度である。別の特定の実施形態において、緩衝剤は、５ｍＭ〜２０ｍＭの間の濃度である。
【００７２】
ある実施形態において、本開示の製剤は緩衝剤を含む。一実施形態において、該緩衝剤を、ヒスチジン、クエン酸、リン酸、グリシン、および酢酸からなる群から選択する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、緩衝剤としてヒスチジンを含む。
【００７３】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１ｍＭ、少なくとも約５ｍＭ、少なくとも約１０ｍＭ、少なくとも約２０ｍＭ、少なくとも約３０ｍＭ、少なくとも約４０ｍＭ、少なくとも約５０ｍＭ、少なくとも約７５ｍＭ、少なくとも約１００ｍＭ、少なくとも約１５０ｍＭ、または少なくとも約２００ｍＭのヒスチジンを含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、約１ｍＭ〜約２００ｍＭの間、約１ｍＭ〜約１５０ｍＭの間、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの間、約１ｍＭ〜約７５ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約２００ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約１５０ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約１００ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約７５ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約４０ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭの間、約２０ｍＭ〜約７５ｍＭの間、約２０ｍＭ〜約５０ｍＭの間、約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの間、または約２０ｍＭ〜約３０ｍＭのヒスチジンを含む。本開示のさらなる実施形態において、約１ｍＭ、約５ｍＭ、約１０ｍＭ、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約６０ｍＭ、約７０ｍＭ、約８０ｍＭ、約９０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１５０ｍＭ、または約２００ｍＭのヒスチジンを含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約１０ｍＭのヒスチジンを含む。
【００７４】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１ｍＭ、少なくとも５ｍＭ、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２０ｍＭ、少なくとも３０ｍＭ、少なくとも４０ｍＭ、少なくとも５０ｍＭ、少なくとも７５ｍＭ、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも１５０ｍＭ、または少なくとも２００ｍＭのヒスチジンを含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、１ｍＭ〜２００ｍＭの間、１ｍＭ〜１５０ｍＭの間、１ｍＭ〜１００ｍＭの間、１ｍＭ〜７５ｍＭの間、１０ｍＭ〜２００ｍＭの間、１０ｍＭ〜１５０ｍＭの間、１０ｍＭ〜１００ｍＭの間、１０ｍＭ〜７５ｍＭの間、１０ｍＭ〜５０ｍＭの間、１０ｍＭ〜４０ｍＭの間、１０ｍＭ〜３０ｍＭの間、２０ｍＭ〜７５ｍＭの間、２０ｍＭ〜５０ｍＭの間、２０ｍＭ〜４０ｍＭの間、または２０ｍＭ〜３０ｍＭの間のヒスチジンを含む。本開示のさらなる実施形態において、１ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ、２５ｍＭ、３０ｍＭ、３５ｍＭ、４０ｍＭ、４５ｍＭ、５０ｍＭ、６０ｍＭ、７０ｍＭ、８０ｍＭ、９０ｍＭ、１００ｍＭ、１５０ｍＭ、または２００ｍＭのヒスチジンを含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、１０ｍＭのヒスチジンを含む。
【００７５】
ある実施形態において、本開示の製剤は、炭水化物の賦形剤を含む。炭水化物の賦形剤は、例えば、粘性増強剤、安定剤、充填剤、および／または可溶化剤等として作用することができる。炭水化物の賦形剤は、一般的に重量または容量で約１％〜約９９％の間に存在する。一実施形態において、炭水化物の賦形剤は約０．１％〜約２０％の間に存在する。別の実施形態において、炭水化物の賦形剤は約０．１％〜約１５％の間に存在する。特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、約０．１％〜約５％の間、または約１％〜約２０％の間、または約５％〜約１５％の間、または約８％〜約１０％の間、または約１０％〜約１５％の間、または約１５％〜約２０％に存在する。別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、０．１％〜２０％の間、または５％〜１５％の間、または８％〜１０％の間、または１０％〜１５％の間、または１５％〜２０％の間に存在する。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、約０．１％〜約５％の間に存在する。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、約５％〜約１０％の間に存在する。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、約１５％〜約２０％の間に存在する。さらに他の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、１％、または１．５％、または２％、または２．５％、または３％、または４％、または５％、または１０％、または１５％、または２０％に存在する。
【００７６】
ある実施形態において、本開示の製剤は、炭水化物の賦形剤を含む。炭水化物の賦形剤は、例えば、粘性増強剤、安定剤、充填剤、および／または可溶化剤等として作用することができる。炭水化物の賦形剤は、一般的に重量または容量で１％〜９９％の間に存在する。一実施形態において、炭水化物の賦形剤は、０．１％〜２０％の間に存在する。別の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、０．１％〜１５％の間に存在する。特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、０．１％〜５％の間、または１％〜２０％の間、または５％〜１５％の間、または８％〜１０％の間、または１０％〜１５％の間、または１５％〜２０％の間に存在する。別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、０．１％〜２０％の間、または５％〜１５％の間、または８％〜１０％の間、または１０％〜１５％の間、または１５％〜２０％の間に存在する。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は０．１％〜５％に存在する。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は５％〜１０％の間に存在する。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、１５％〜２０％の間に存在する。さらに他の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤は、１％、または１．５％、または２％、または２．５％、または３％、または４％、または５％、または１０％、または１５％、または２０％に存在する。
【００７７】
本開示の製剤での使用に適した炭水化物の賦形剤は、例えば、果糖、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ−マンノース、ソルボース等の単糖類；ラクトース、ショ糖、トレハロース、セロビオース等の二糖類；ラフィノース、メレチトース、マルトデキストリン、デキストラン、デンプン等の多糖類；およびマンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトールソルビトール（グルシトール）等のアルジトールを含む。一実施形態において、本開示における使用のための炭水化物の賦形剤を、ショ糖、トレハロース、ラクトース、マンニトール、およびラフィノースからなる群から選択する。特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤はトレハロースである。別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤はマンニトールである。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤はショ糖である。さらに別の特定の実施形態において、炭水化物の賦形剤はラフィノースである。炭水化物の賦形剤の純度は、少なくとも９８％、または少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％であるべきである。
【００７８】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約４％、少なくとも約８％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、または少なくとも約４０％のトレハロースを含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、約１％〜約４０％の間、約１％〜約３０％の間、約１％〜約２０％の間、約２％〜約４０％の間、約２％〜約３０％の間、約２％〜約２０％の間、約４％〜約４０％の間、約４％〜約３０％、または約４％〜約２０％の間のトレハロースを含む。さらなる実施形態において、本開示の製剤は約１％、約２％、約４％、約８％、約２０％、約３０％、または約４０％のトレハロースを含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約４％のトレハロースを含む。
【００７９】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１％、少なくとも２％、少なくとも４％、少なくとも８％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、または少なくとも４０％のトレハロースを含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、１％〜４０％の間、１％〜３０％の間、１％〜２０％の間、２％〜４０％の間、２％〜３０％の間、２％〜２０％の間、４％〜４０％の間、４％〜３０％の間、または４％〜２０％の間のトレハロースを含む。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１％、２％、４％、８％、２０％、３０％、または４０％のトレハロースを含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、４％のトレハロースを含む。
【００８０】
一実施形態において、本開示の製剤は、賦形剤を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、糖、塩、界面活性剤、アミノ酸、ポリオール、キレート剤、乳化剤、および防腐剤からなる群から選択される少なくとも１つの賦形剤を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、塩を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２、およびＭｇＣｌ２からなる群から選択された塩を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤はＮａＣｌを含む。
【００８１】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１０ｍＭ、少なくとも約２５ｍＭ、少なくとも約５０ｍＭ、少なくとも約７５ｍＭ、少なくとも約８０ｍＭ、少なくとも約１００ｍＭ、少なくとも約１２５ｍＭ、少なくとも約１５０ｍＭ、少なくとも約１７５ｍＭ、少なくとも約２００ｍＭ、または少なくとも約３００ｍＭの塩化ナトリウムを含む。さらなる実施形態において、本明細書に記載される製剤は、約１０ｍＭ〜約３００ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約２００ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約１７５ｍＭの間、約１０ｍＭ〜約１５０ｍＭの間、約２５ｍＭ〜約３００ｍＭの間、約２５ｍＭ〜約２００ｍＭの間、約２５ｍＭ〜約１７５ｍＭの間、約２５ｍＭ〜約１５０ｍＭの間、約５０ｍＭ〜約３００ｍＭの間、約５０ｍＭ〜約２００ｍＭの間、約５０ｍＭ〜約１７５ｍＭの間、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの間、約７５ｍＭ〜約３００ｍＭの間、約７５ｍＭ〜約２００ｍＭの間、約７５ｍＭ〜約１７５ｍＭの間、約７５ｍＭ〜約１５０ｍＭの間、約１００ｍＭ〜約３００ｍＭの間、約１００ｍＭ〜約２００ｍＭの間、約１００ｍＭ〜約１７５ｍＭの間、または約１００ｍＭ〜約１５０ｍＭの間の塩化ナトリウムを含む。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１０ｍＭ、約２５ｍＭ、約５０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１５０ｍＭ、約１７５ｍＭ、約２００ｍＭ、または約３００ｍＭの塩化ナトリウムを含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【００８２】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１０ｍＭ、少なくとも２５ｍＭ、少なくとも５０ｍＭ、少なくとも７５ｍＭ、少なくとも８０ｍＭ、少なくとも１００ｍＭ、少なくとも１２５ｍＭ、少なくとも１５０ｍＭ、少なくとも１７５ｍＭ．少なくとも２００ｍＭ、または少なくとも３００ｍＭの塩化ナトリウムを含む。さらなる実施形態において、本明細書に記載される製剤は、１０ｍＭ〜３００ｍＭの間、１０ｍＭ〜２００ｍＭの間、１０ｍＭ〜１７５ｍＭの間、１０ｍＭ〜１５０ｍＭの間、２５ｍＭ〜３００ｍＭの間、２５ｍＭ〜２００ｍＭの間、２５ｍＭ〜１７５ｍＭの間、２５ｍＭ〜１５０ｍＭの間、５０ｍＭ〜３００ｍＭの間、５０ｍＭ〜２００ｍＭの間、５０ｍＭ〜１７５ｍＭの間、５０ｍＭ〜１５０ｍＭの間、７５ｍＭ〜３００ｍＭの間、７５ｍＭ〜２００ｍＭの間、７５ｍＭ〜１７５ｍＭの間、７５ｍＭ〜１５０ｍＭの間、１００ｍＭ〜３００ｍＭの間、１００ｍＭ〜２００ｍＭの間、１００ｍＭ〜１７５ｍＭの間、１００ｍＭ〜１５０ｍＭの間の塩化ナトリウムを含む。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１０ｍＭ、２５ｍＭ、５０ｍＭ、７５ｍＭ、８０ｍＭ、１００ｍＭ、１２５ｍＭ、１５０ｍＭ、１７５ｍＭ、２００ｍＭ、または３００ｍＭの塩化ナトリウムを含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【００８３】
本開示の製剤は、界面活性剤をさらに含むことができる。本明細書に使用される「界面活性剤」という用語は、両親媒性構造を有する有機物を指し、すなわち、それらは溶解性の傾向が反対である基、典型的には油溶性の炭化水素鎖および水溶性イオン性基からなる。界面活性剤は、界面活性部分の電荷に応じて、陰イオン性、陽イオン性、および非イオン性の界面活性剤へ分類することができる。界面活性剤は、各種の薬学的な組成物および生物物質の調製物に対する湿潤、乳化、可溶、および分散剤として多くの場合使用される。ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０または８０）；ポリオキサマー（例えば、ｐｏｌｏｘａｍｅｒ１８８）；トリトン；ナトリウムオクチルグリコシド；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−、またはステアリル−スルホベタイン；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−またはステアリル−サルコシン；リノレイル−、ミリスチル−、またはセチル−ベタイン；ラウロアミドプロピル−、コカミドプロピル−、リノールアミドプロピル−、ミリストアミドプロピル−、パルミドプロピル−、またはイソステアルアミドプロピル−ベタイン（例えば、ラウロアミドプロピル）；ミリストアミドプロピル−、パルミドプロピル−、またはイソステアルアミドプロピル−ジメチルアミン；ナトリウムメチルココイル−、または二ナトリウムメチルオレイル−タウレート；およびＭＯＮＡＱＵＡ（商標）シリーズ（Ｍｏｎａ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｐａｔｅｒｓｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール、ならびにエチレンおよびプロピレングリコールのコポリマー（例えば、プルロニック、ＰＦ６８等）のような薬学的に許容される界面活性剤は、凝集を減少するために、随意に本開示の製剤に追加することができる。界面活性剤は、製剤を投与するために、ポンプまたはプラスチック容器を使用する場合、特に有用である。薬学的に許容される界面活性剤の存在は、タンパク質の凝集する性質を軽減する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約０．００１％〜約１％の間、または約０．００１％〜約０．１％の間、または約０．０１％〜約０．１％の間の範囲の濃度であるポリソルベートを含む。他の特定の実施形態において、本開示の製剤は、０．００１％または、０．００２％または、０．００３％または、０．００４％または、０．００５％または、０．００６％または、０．００７％または、０．００８％または、０．００９％または、０．０１％または、０．０１５％または、０．０２％の濃度であるポリソルベートを含む。別の特定の実施形態において、ポリソルベートはポリソルベート−８０である。特定の実施形態において、本開示の製剤は、０．００１％〜１％、または０．００１％〜０．１％、または０．０１％〜０．１％の間の範囲の濃度であるポリソルベートを含む。他の特定の実施形態において、本開示の製剤は、０．００１％または、０．００２％または、０．００３％または、０．００４％または、０．００５％または、０．００６％または、０．００７％または、０．００８％または、０．００９％または、０．０１％または、０．０１５％または、０．０２％の濃度であるポリソルベートを含む。別���特定の実施形態において、ポリソルベートはポリソルベート−８０である。
【００８４】
一実施形態において、本開示の製剤は、界面活性剤を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、またはポリソルベート８０を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、ポリソルベート８０を含む。
【００８５】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約０．００１％、少なくとも約０．００２％、少なくとも約０．００５％、少なくとも約０．０１％、少なくとも約０．０２％、少なくとも約０．０５％、少なくとも約０．１％、少なくとも約０．２％、または少なくとも約０．５％のポリソルベート８０を含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、約０．００１％〜約０．５％の間、約０．００１％〜約０．２％の間、約０．００１％〜約０．１％の間、約０．００１％〜約０．０５％の間、約０．００２％〜約０．５％の間、約０．００２％〜約０．２％の間、約０．００２％〜約０．１％の間、約０．００２％〜約０．０５％の間、約０．００５％〜約０．５％の間、約０．００５％〜約０．２％の間、約０．００５％〜約０．１％の間、約０．００５％〜約０．０５％の間、約０．０１％〜約０．５％の間、約０．０１％〜約０．２％の間、約０．０１％〜約０．１％の間、または約０．０１％〜約０．０５％のポリソルベート８０を含む。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約０．００１％、約０．００２％、約０．００５％、約０．０１％、約０．０２％、約０．０５％、約０．１％、約０．２％、および約０．５％のポリソルベート８０を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約０．０２％のポリソルベート８０を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約０．０４％のポリソルベート８０を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、約０．０５％のポリソルベート８０を含む。
【００８６】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも０．００１％、少なくとも０．００２％、少なくとも０．００５％、少なくとも０．０１％、少なくとも０．０２％、少なくとも０．０５％、少なくとも０．１％、少なくとも０．２％、または少なくとも０．５％のポリソルベート８０を含む。別の実施形態において、本開示の製剤は、０．００１％〜０．５％の間、０．００１％〜０．２％の間、０．００１％〜０．１％の間、０．００１％〜０．０５％の間、０．００２％〜０．５％の間、０．００２％〜０．２％の間、０．００２％〜０．１％の間、０．００２％〜０．０５％の間、０．００５％〜０．５％の間、０．００５％〜０．２％の間、０．００５％〜０．１％の間、０．００５％〜０．０５％の間、０．０１％〜０．５％の間、０．０１％〜０．２％の間、０．０１％〜０．１％の間、または０．０１％〜０．０５％の間のポリソルベート８０を含む。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、０．００１％、０．００２％、０．００５％、０．０１％、０．０２％、０．０５％、０．１％、０．２％、および０．５％のポリソルベート８０を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、０．０２％のポリソルベート８０を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、０．０４％のポリソルベート８０を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、０．０５％のポリソルベート８０を含む。
【００８７】
随意に本開示の製剤は、希釈剤、結合剤、安定剤、親油性溶媒、防腐剤、アジュバント等を含むがこれらに限定されない他の一般的な賦形剤および／または添加物をさらに含むことができる。薬学的に許容される賦形剤および／または添加物を、本開示の製剤において使用することができる。薬学的に許容されるキレート剤（例えば、これらに限定されないが、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、またはＥＧＴＡ）等の一般に使用される賦形剤／添加物を、凝集を減少するために、随意に本開示の製剤に追加することができる。これらの添加物は、製剤を投与するために、ポンプまたはプラスチック容器を使用する場合、特に有用である。
【００８８】
フェノール等の防腐剤、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、オルトクレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、亜硝酸フェニル水銀、フェノキシエタノール、ホルムアルデヒド、クロロブタノール、塩化マグネシウム（例えばこれに限定されないが、六水和物）、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチル等）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、およびチメロサール、またはそれらの混合物は、約０．００１％〜約５％の間等の、またはその中の範囲または値の任意の適した濃度で、随意に本開示の製剤に追加される。本開示の製剤において使用する防腐剤の濃度は、抗菌効果を引き起こすために十分な濃度である。そのような濃度は、選択した防腐剤に依存し、当業者によって容易に決定される。
【００８９】
本開示の製剤において利用され得る他の検討された賦形剤／添加物は、例えば、調味料、抗菌剤、甘味料、抗酸化剤、帯電防止剤、リン脂質または脂肪酸等の脂質、コレステロール等のステロイド、血清アルブミン等のタンパク質賦形剤（ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、組換えヒトアルブミン（ｒＨＡ））、ゼラチン、カゼイン、ナトリウム等の塩形成対イオン等を含む。本開示の製剤における使用に対して適しているこれらおよび追加の既知の薬学的な賦形剤および／または添加物は、例えば“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２１ｓｔ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，（２００５）、および“Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ”，６０ｔｈ  ｅｄ．，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，Ｎ．Ｊ．（２００５）に記載されているように、当該技術において知られている。当該技術において知られている通り、または本明細書に記載される通り、投与のモード、Ｆｃ変異タンパク質の溶解性および／または安定性に対して適している薬学的に許容される担体を、ルーチン的に選択することができる。
【００９０】
本開示の製剤がヒト血液と等張性であり得る、すなわち本開示の製剤が、実質的に、ヒト血液と同等の浸透圧を有することが、当業者によって理解されるであろう。かかる等張性製剤は、一般的に約２５０ｍＯＳｍから約３５０ｍＯＳｍまでの浸透圧を有するであろう。等張性を、例えば、蒸気圧または氷結タイプの浸透圧計を使用して測定することができる。製剤の張性を、張性の修飾因子の使用によって調整する。「張性の修飾因子」は、製剤の等張性を提供するために、製剤へ追加することができる薬学的に許容される不活性物質である。本開示に対して適した張性の修飾因子は、糖類、塩、およびアミノ酸を含むがこれらに限定されない。
【００９１】
ある実施形態において、本開示の製剤は、約１００ｍＯＳｍから約１２００  ｍＯＳｍまで、または約２００ｍＯＳｍから約１０００ｍＯＳｍまで、または約２００ｍＯＳｍから約８００ｍＯＳｍまで、または約２００ｍＯＳｍから約６００ｍＯＳｍまで、または約２５０ｍＯＳｍから約５００ｍＯＳｍまで、または約２５０ｍＯＳｍから約４００ｍＯＳｍまで、または約２５０ｍＯＳｍから約３５０ｍＯＳｍまでの浸透圧を有する。
【００９２】
ある実施形態において、本開示の製剤は、１００ｍＯＳｍから１２００ｍＯＳｍまで、または２００ｍＯＳｍから１０００ｍＯＳｍまで、または２００ｍＯＳｍから８００ｍＯＳｍまで、または２００ｍＯＳｍから６００ｍＯＳｍまで、または２５０ｍＯＳｍから５００ｍＯＳｍまで、または２５０ｍＯＳｍから４００ｍＯＳｍまで、または２５０ｍＯＳｍから３５０ｍＯＳｍまでの浸透圧を有する。
【００９３】
本開示の製剤の各種の構成要素のうちのいずれか１つまたは任意の組み合わせの濃度を、最終製剤の所望の張性を達成するために調節する。例えば、炭水化物の賦形剤と抗体の比率を、当該技術において知られている方法（例えば、米国特許第６，６８５，９４０号）の方法によって調節することができる。ある実施形態において、炭水化物の賦形剤対抗体のモル比は、約１００モルから約１０００モルまでの炭水化物の賦形剤対約１モルの抗体、または約２００モルから約６０００モルまでの炭水化物の賦形剤対約１モルの抗体、または約１００モルから約５１０モルまでの炭水化物の賦形剤対約１モルの抗体、または約１００モルから約６００モルまでの炭水化物の賦形剤対約１モルの抗体であり得る。
【００９４】
本開示の製剤の各種の構成要素のうちのいずれか１つまたは任意の組み合わせの濃度を、最終製剤の所望の張性を達成するために調節する。例えば、炭水化物の賦形剤と抗体の比率を、当該技術において知られている方法（例えば、米国特許第６，６８５，９４０号）の方法によって調節することができる。ある実施形態において、炭水化物の賦形剤対抗体のモル比は、１００モルから１０００モルまでの炭水化物の賦形剤対１モルの抗体、または２００モルから６０００モルまでの炭水化物の賦形剤対１モルの抗体、または１００モルから５１０モルまでの炭水化物の賦形剤対１モルの抗体、または１００モルから６００モルまでの炭水化物の賦形剤対１モルの抗体であり得る。
【００９５】
最終製剤の所望の等張性を、製剤の塩濃度を調整することによっても達成することができる。薬学的に許容され、張性修飾因子として本開示に適した塩は、塩化ナトリウム、塩化ナトリウム、硫酸ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム、硫酸マグネシウム、および塩化カルシウムを含むがこれらに限定されない。特定の実施形態において、本開示の製剤は、ＮａＣｌ、ＭｇＣｌ２、および／またはＣａＣｌ２を含む。一実施形態において、ＮａＣｌの濃度は、約７５ｍＭ〜約１５０ｍＭの間である。別の実施形態において、ＭｇＣｌ２の濃度は、約１ｍＭ〜約１００ｍＭの間である。薬学的に許容され、張性修飾因子として本開示に対して適しているアミノ酸は、プロリン、アラニン、Ｌ−アルギニン、アスパラギン、Ｌ−アスパラギン酸、グリシン、セリン、リジン、およびヒスチジンを含むがこれらに限定されない。
【００９６】
一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジン、塩化ナトリウム、トレハロース、およびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、塩化ナトリウム、トレハロース、およびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジン、トレハロース、およびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジン、塩化ナトリウム、およびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジン、塩化ナトリウム、およびトレハロースを含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジンおよび塩化ナトリウムを含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジンおよびトレハロースを含む。一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジンおよびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、塩化ナトリウムおよびトレハロースを含む。一実施形態において、本開示の製剤は、塩化ナトリウムおよびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、トレハロースおよびポリソルベート８０を含む。
【００９７】
一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジン、塩化ナトリウム、トレハロース、およびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、約５ｍＭ〜約１００ｍＭの間のヒスチジン、約１０ｍＭ〜約３００ｍＭの間の塩化ナトリウム、約０．３％〜約１０％の間のトレハロース、および約０．００５％〜約０．１％の間のポリソルベート８０を含み、該製剤は約５．０〜約７．０の間のｐＨを有する。別の実施形態において、本開示の製剤は、約５ｍＭ〜約５０ｍＭの間のヒスチジン、約５０ｍＭ〜約２００ｍＭの間の塩化ナトリウム、約１％〜約８％の間のトレハロース、および約０．０１％〜約０．０５％の間のポリソルベート８０を含み、該製剤は、約５．５〜約６．５の間のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０を含み、該製剤は、約６．０のｐＨを有する。
【００９８】
一実施形態において、本開示の製剤は、ヒスチジン、塩化ナトリウム、トレハロース、およびポリソルベート８０を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、５ｍＭ〜１００ｍＭの間のヒスチジン、１０ｍＭ〜３００ｍＭの間の塩化ナトリウム、１％〜１０％の間のトレハロース、および０．００５％〜０．１％の間のポリソルベート８０を含み、該製剤は、５．０〜７．０の間のｐＨを有する。別の実施形態において、本開示の製剤は、５ｍＭ〜５０ｍＭの間のヒスチジン、５０ｍＭ〜２００ｍＭの間の塩化ナトリウム、１％〜６％の間のトレハロース、および０．０１％〜０．０５％の間のポリソルベート８０を含み、該製剤は、５．５〜６．５の間のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０を含み、該製剤は、６．０のｐＨを有する。
【００９９】
一実施形態において、本開示の製剤は、約２０ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。別の実施形態において、本開示の製剤は、約５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１２０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１３０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１００】
一実施形態において、本開示の製剤は、２０ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。別の実施形態において、本開示の製剤は、５０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１２０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１３０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１０１】
一実施形態において、本開示の製剤は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。別の実施形態において、本開示の製剤は、約５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、約１５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は約６．０のｐＨを有する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端においてフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１０２】
一実施形態において、本開示の製剤は、５ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。別の実施形態において、本開示の製剤は、５ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、１０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。さらなる実施形態において、本開示の製剤は、２０ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体、１０ｍＭのヒスチジン、８０ｍＭの塩化ナトリウム、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０からなり、該製剤は６．０のｐＨを有する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１０３】
一実施形態において、本開示の製剤は、実質的にエンドトキシンおよび／または関連する発熱物質が含まれないパイロジェンフリー製剤である。エンドトキシンは、微生物の中に閉じ込められた毒素を含み、微生物が分解または死んだ場合のみに放出される。発熱物質は、細菌および他の微生物の外膜からの発熱を誘発する、熱安定性物質（糖タンパク質）も、含む。これらの物質の両方は、ヒトに対して投与した場合、熱、低血圧、およびショックを発生することができる。悪影響が考えられるため、少量のエンドトキシンであっても、静脈内投与される薬学的な薬液から除かなければならない。米国食品薬品局（「ＦＤＡ」）は、静脈内薬物の使用に対して単一時間でキログラム体重当たりの用量につき５エンドトキシン単位（ＥＵ）の上限を設定した（Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ  Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａｌ  Ｆｏｒｕｍ  ２６（１）：２２３（２０００））。治療タンパク質は、キログラム体重当たり数百または数千ミリグラムの量で投与された場合、抗体に関する場合のように、微量の有害なおよび危険なエンドトキシンでさえも取り除かれなければならない。ある特定の実施形態において、組成物のエンドトキシンおよびパイロジェンレベルは、１０ＥＵ／ｍｇ未満、または５ＥＵ／ｍｇ未満、または１ＥＵ／ｍｇ未満、または０．１ＥＵ／ｍｇ未満、または０．０１ＥＵ／ｍｇ未満、または０．００１ＥＵ／ｍｇである。
【０１０４】
インビボ投与に使用される場合、本開示の製剤は、無菌であるべきである。本開示の製剤を、滅菌ろ過、放射線等を含む各種の滅菌法によって無菌化することができる。一実施形態において、抗体製剤を、予め無菌化しておいた０．２２−ミクロンフィルタを用いてろ過無菌化する。注射のための無菌組成物は、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２１ｓｔ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，（２００５）に記載される従来の薬務に従って処方することができる。本明細書に記載されるような、抗体を含む製剤は、通常、凍結乾燥した形式または溶液中で保存されるであろう。抗体を含む無菌組成物は、皮下注射針で穴を開けることができるストッパー等の製剤の取り出しを可能とするアダプターを有する静脈注射用の溶液袋またはバイアルを例とする、無菌の取り出し口を有する容器に配置されることが検討される。一実施形態において、本開示の組成物は、プレフィルドシリンジとして提供される。
【０１０５】
５．２．製剤の安定性
一実施形態において、本開示の製剤は、凝集、断片化、および／または脱アミドに影響されやすい抗体またはその断片を含む。
【０１０６】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を安定させる。一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片の凝集を防止する。別の実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片の断片化を防止する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１０７】
本開示は、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を含む安定な液体製剤を提供する。参照抗体を含む参照製剤と比較して、ＨＰＳＥＣ、逆相クロマトグラフィー、静的光散乱（ＳＬＳ）、動的光散乱（ＤＬＳ）、フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）、円二色性（ＣＤ）、尿素アンフォールド技術、内在性のトリプトファン蛍光、示差走査熱量測定、および／またはＡＮＳ結合技術によって、測定する凝集、断片化、または断片化の度合いによって、該抗体の安定性を、査定することができる。例えば、参照製剤は、８０ｍＭのＮａＣｌ、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０を含有する１０ｍＭのヒスチジン（ｐＨ６．０）の１０ｍｇ／ｍＬの参照抗体（その抗体断片を含む）（例えば、これに限定されないが、糖鎖の還元末端でＮ−アセチルグルコサミンが結合されないフコースの複合Ｎ−グリコシド−結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む１３６抗ＩＣＯＳ抗体）からなる−７０℃で冷凍した標準試料であってよく、この参照製剤は、ＨＰＳＥＣによって定期的に単一単量体ピークを示す（例えば、≧９５％範囲）。ある実施形態において、参照製剤は、安定性を試験した製剤と同一であり、参照製剤を、元の状態で参照製剤を保存するために、安定性試験の間、−７０℃で冷凍保存することができる。例えば、４０℃で保存した製剤のＩＣＯＳ抗原結合活性のいくらかの損失を査定するための標準試料は、３０日間、−７０℃で保存した同一の製剤であることができる。抗体（その抗体断片を含む）を含む製剤の全体の安定性を、例えば、ＥＬＩＳＡおよび単離された抗原分子を使用した放射免疫アッセイを含む様々な免疫学的アッセイによって査定することもできる。さらに、抗体を含む製剤の安定性を、抗体の機能的な特徴を測定するために設計された各種のアッセイ、例えば、抗原結合親和性、インビトロＡＤＣＣ活性、インビボ枯渇活性、インビトロＣＤＣ活性を測定するように設計されたアッセイを使用しても査定することができる。
【０１０８】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、または少なくとも約４週間の間約４０℃で保存した際、安定している。一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、または少なくとも約６ヶ月の間、約４０℃で保存する際安定している。特定の実施形態において、本開示の製剤は、プレフィルドシリンジで保存した際、安定している。
【０１０９】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、または少なくとも約１２ヶ月の間、約５℃で保存した際、安定している。一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、少なくとも約５年間、少なくとも約６年間、少なくとも約７年間、少なくとも約８年間、少なくとも約９年間、少なくとも約１０年間、少なくとも約１１年間、または少なくとも約１２年間の間、約５℃で保存した際、安定している。特定の実施形態において、本開示の製剤は、プレフィルドシリンジで保存した際、安定している。
【０１１０】
一実施形態において、本開示の製剤は、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約４０℃で保存した際、安定している。一実施形態において、本開示の製剤は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約４０℃で保存した際、安定している。特定の実施形態において、本開示の製剤は、プレフィルドシリンジで保存した際、安定している。
【０１１１】
一実施形態において、本開示の製剤は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、または約１２ヶ月の間、約５℃で保存した際、安定している。一実施形態において、本開示の製剤は、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１１年間、または約１２年間の間、約５℃で保存した際、安定している。特定の実施形態において、本開示の製剤は、プレフィルドシリンジで保存した際、安定している。
【０１１２】
一実施形態において、本開示の製剤は、参照抗体のＩＣＯＳ結合活性の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％であるＩＣＯＳ結合活性を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約４０℃で保存されたものである。一実施形態において、本開示の製剤は、参照抗体のＩＣＯＳ結合活性の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％であるＩＣＯＳ結合活性を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月の間、約４０℃で保存されたものである。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１１３】
一実施形態において、本開示の製剤は、参照抗体のＩＣＯＳ結合活性の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％であるＩＣＯＳ結合活性を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約２５℃で保存されたものである。一実施形態において、本開示の製剤は、参照抗体のＩＣＯＳ結合活性の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％であるＩＣＯＳ結合活性を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約２５℃で保存されたものである。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１１４】
一実施形態において、本開示の製剤は、参照抗体のＩＣＯＳ結合活性の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％であるＩＣＯＳ結合活性を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、または約１２ヶ月の間、約５℃で保存されたものである。一実施形態において、本開示の製剤は、参照抗体のＩＣＯＳ結合活性の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％であるＩＣＯＳ結合活性を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１１年間、または約１２年間の間、約５℃で保存されたものである。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１１５】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約４０℃で製剤を保存中に、抗体は、そのＩＣＯＳ結合活性の約５０％以下、約４０％以下、約３０％以下、約２０％以下、約１０％以下、約５％以下、または約１％以下を失う。一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約４０℃で製剤を保存中に、抗体はそのＩＣＯＳ結合活性を約５０％以下、約４０％以下、約３０％以下、約２０％以下、約１０％以下、約５％以下、または約１％以下を失う。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端においてフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１１６】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約２５℃で製剤の保存中に、抗体は、そのＩＣＯＳ結合活性の約５０％以下、約４０％以下、約３０％以下、約２０％以下、約１０％以下、約５％以下、または約１％以下を失う。一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約２５℃で製剤を保存中に、抗体はそのＩＣＯＳ結合活性を約５０％以下、約４０％以下、約３０％以下、約２０％以下、約１０％以下、約５％以下、または約１％以下を失う。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１１７】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、または約１２ヶ月の間、約５℃で製剤を保存中、抗体は、そのＩＣＯＳ結合活性の約５０％以下、約４０％以下、約３０％以下、約２０％以下、約１０％以下、約５％以下、または約１％以下を失う。一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１１年間、または約１２年間の間、約５℃で製剤を保存中に、抗体はそのＩＣＯＳ結合活性の約５０％以下、約４０％以下、約３０％以下、約２０％以下、約１０％以下、約５％以下、または約１％以下を失う。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１１８】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、または少なくとも約４週間の間、約４０℃で保存する前の、抗体を表す参照抗体と比較して、ヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、また少なくとも９９％を保持する。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、または少なくとも約６ヶ月の間、約４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比較して、ヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％を保持する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１１９】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、または少なくとも約１２ヶ月の間、約５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比較して、ヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％を保持する。一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、少なくとも約５年間、少なくとも約６年間、少なくとも約７年間、少なくとも約８年間、少なくとも約９年間、少なくとも約１０年間、少なくとも約１１年間、または少なくとも約１２年間の間、約５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比較して、ヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％を保持する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２０】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比較して、ヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％を保持する。一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比較して、ヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％を保持する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２１】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、または約１２ヶ月の間、約５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比較してヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％を保持する。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該抗体は、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１１年間、または約１２年間の間、約５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比較して、ヒトＩＣＯＳとの結合能力の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％を保持する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２２】
一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、または少なくとも約４週間の間、約４０℃で保存する際に、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、または少なくとも約６ヶ月の間、約４０℃で保存する際、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２３】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、または少なくとも約１２ヶ月の間、約５℃で保存する際、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、少なくとも約５年間、少なくとも約６年間、少なくとも約７年間、少なくとも約８年間、少なくとも約９年間、少なくとも約１０年間、少なくとも約１１年間、または少なくとも約１２年間の間、約５℃で保存する際に、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２４】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約４０℃で保存する際に、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約４０℃で保存する際に、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２５】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、または約１２ヶ月の間、約５℃で保存する際に、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１１年間、または約１２年間の間、約５℃で保存する際に、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、ＨＰＳＥＣで測定される凝集体を形成する。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２６】
一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、または少なくとも約４週間の間、約４０℃で保存する際、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は断片化される。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、または少なくとも約６ヶ月の間、約４０℃で保存する際に、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、断片化される。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２７】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、または少なくとも約１２ヶ月の間、約５℃で保存する際に、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、断片化される。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、少なくとも約５年間、少なくとも約６年間、少なくとも約７年間、少なくとも約８年間、少なくとも約９年間、少なくとも約１０年間、少なくとも約１１年間、または少なくとも約１２年間の間、約５℃で保存する際に、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、満３％未、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、断片化される。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２８】
一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約４０℃で保存する際、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、断片化される。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約４０℃で保存する際に、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、断片化される。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１２９】
一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、または約１２ヶ月の間、約５℃で保存する際に、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は、断片化される。一実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１１年間、または約１２年間の間、約５℃で保存する際に、ＲＰ−ＨＰＬＣで測定して、該抗体の１％未満、２％未満、３％未満、４％未満、５％未満、７％未満、または１０％未満は断片化される。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１３０】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１週間、少なくとも約２週間、少なくとも約３週間、または少なくとも約４週間の間、約４０℃で保存する際に、目視検査で測定して、透明および無色である。一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、または少なくとも約６ヶ月の間、約４０℃で保存する際に、目視検査で測定して、透明および無色である。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１３１】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１ヶ月、少なくとも約２ヶ月、少なくとも約３ヶ月、少なくとも約４ヶ月、少なくとも約５ヶ月、少なくとも約６ヶ月、少なくとも約７ヶ月、少なくとも約８ヶ月、少なくとも約９ヶ月、少なくとも約１０ヶ月、少なくとも約１１ヶ月、または少なくとも約１２ヶ月の間、約５℃で保存する際、目視検査で測定して、透明および無色である。一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも約１年間、少なくとも約２年間、少なくとも約３年間、少なくとも約４年間、少なくとも約５年間、少なくとも約６年間、少なくとも約７年間、少なくとも約８年間、少なくとも約９年間、少なくとも約１０年間、少なくとも約１１年間、または少なくとも約１２年間の間、約５℃で保存する際、目視検査で測定して、透明および無色である。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１３２】
一実施形態において、本開示の製剤は、約１週間、約２週間、約３週間、または約４週間の間、約４０℃で保存する際、目視検査で測定して、透明および無色である。一実施形態において、本開示の製剤は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、または約６ヶ月の間、約４０℃で保存する際、目視検査で測定して、透明および無色である。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１３３】
一実施形態において、本開示の製剤は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、または約１２ヶ月の間、約５℃で保存する際、目視検査で測定して、透明および無色である。一実施形態において、本開示の製剤は、約１年間、約２年間、約３年間、約４年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１１年間、または約１２年間の間、約５℃で保存する際、目視検査で測定して、透明および無色である。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１３４】
ある実施形態において、本開示の製剤は、例えば、室温または４℃で長期間（例えば、これらに限定されないが１週間、１ヶ月、６ヶ月、１年間、２年間、３年間、または５年間）、または３８℃〜４２℃などの高温で（これらに限定されないが、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、または６ヶ月等）の期間保存する際、改善した凝集プロファイルを維持する。ある実施形態において、製剤は、１０％以下の、または２０％以下の、または３０％以下の、または４０％以下の、または５０％以下の、または６０％以下の、または７０％以下の、または８０％以下の、または９０％以下の、または１００％以下の相対湿度を含むがこれらに限定されない様々な湿度条件で光に曝される、または暗い場所で保存される間、保存する際に、改善した凝集プロファイルを維持する。「環境」条件という用語が、一般的に光への曝露と共に、１０％〜６０％の間の相対湿度で約２０℃の温度を指すことを当該技術において理解されるであろう。同様に、約１０％未満の相対湿度で約２℃〜約８℃の間の温度は、総括して「４℃」または「５℃」を指し、約６０％の相対湿度で約２３℃〜約２７℃の間の温度は、総括して「２５℃」を指し、約７５％の相対湿度で約３８℃〜約４２℃の間の温度は、総括して「４０℃」を指す。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。
【０１３５】
ある実施形態において、少なくとも１ヶ月間４℃で保存した後、粒子マルチサイザーで測定する時に、本開示の製剤は、直径２〜４μｍの約３．４Ｅ＋５粒子／ｍＬ未満、直径４〜１０μｍの約４．０Ｅ＋４粒子／ｍＬ未満、直径１０〜２０μｍの約４．２Ｅ＋３粒子／ｍＬ未満、直径２０〜３０μｍの約５．０Ｅ＋２粒子／ｍＬ未満、直径３０〜４０μｍの約７．５Ｅ＋１粒子／ｍＬ未満、および直径４０〜６０μｍの約９．４粒子／ｍＬ未満の粒子プロファイルを含む（または凝集画分としては、そのプロファイルから構成される）。ある実施形態において、本開示の製剤は、４０μｍを超える、または３０μｍを超える検出可能な粒子を含有しない。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで保存する。
【０１３６】
タンパク質製剤（例えば、本開示の抗体製剤）における凝集の度合い、および／またはそこに存在する凝集体の種類、および／または大きさを測定するための有用な数々の方法は当該技術において知られており、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、高速サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）、静的光散乱（ＳＬＳ）、フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）、円二色性（ＣＤ）、尿素を誘発するタンパク質アンフォールディング手法、内在性のトリプトファン蛍光、示差走査熱量測定、および１−アニリノ−８−ナフタレンスルホン酸（ＡＮＳ）タンパク質結合技術を含むがこれらに限定されない。例えば、適切な樹脂を詰め込んだカラム上に分子を通過させて、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を、分子の大きさに基づいて分子を分離するために実施することができ、大きな分子（例えば、凝集体）は小さな分子（例えば、単量体）より先に溶出する。分子を、一般的に２８０ｎｍでのＵＶ吸光度で検知し、さらなる特徴付けのために収集することができる。高圧液体クロマトグラフカラムは、よくＳＥＣ分析（ＨＰ−ＳＥＣ）で利用される。具体的なＳＥＣ方法を、以下の「実施例」の表題の項で詳述する。あるいは、超遠心分析法（ＡＵＣ）を利用することができる。ＡＵＣは、液体試料で高分子の沈降係数（スベドベリ、Ｓで報告される）を測定する直交法である。ＳＥＣのように、ＡＵＣは、単量体から抗体断片／凝集体を分離および検出することができ、分子量の情報を提供することがさらにできる。製剤のタンパク質の凝集を、コールターカウンターを使用した粒子カウンター分析によって、または濁度計を使用した濁度測定によって、特徴付けることもできる。濁度は粒子による溶液散乱光の量の尺度であり、したがってタンパク質の凝集の一般指標として使用され得る。さらに、非還元のポリアクリルアミドゲル電気泳動法（ＰＡＧＥ）またはキャピラリーゲル電気泳動（ＣＧＥ）を、本開示の製剤中の抗体もしくはその断片の凝集および／または断片化状態を特徴付けるために使用することができる。
【０１３７】
一実施形態において、本開示の製剤は、非経口的投与用である。一実施形態において、本開示の製剤は注射製剤である。一実施形態において、本開示の製剤は、静脈内、皮下、または筋肉内投与用である。特定の実施形態において、本開示の製剤は抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該製剤は皮下注射用である。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで提供する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１３８】
一実施形態において、本開示の製剤は静脈内投与用であり、該製剤は約２０ｍｇ／ｍＬ〜約４０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１３９】
一実施形態において、本開示の製剤は皮下投与用であり、該製剤は約７０ｍｇ／ｍＬ〜約２５０ｍｇ／ｍＬの間の抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで提供する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１４０】
一実施形態において、本開示の製剤は、エアロゾル投与用である。
【０１４１】
本開示は、適した容器に抗ＩＣＯＳ抗体製剤を含む、ヒトに対しての非経口的投与に適した薬学的な単位剤形も提供する。一実施形態において、本開示の薬学的な単位投与量は、静脈内、皮下、または筋肉内で送達する抗ＩＣＯＳ抗体製剤を含む。別の実施形態において、本開示の薬学的な単位投与量は、エアロゾル送達された抗ＩＣＯＳ抗体製剤を含む。特定の実施形態において、本開示の薬学的な単位投与量は、皮下送達された抗ＩＣＯＳ抗体製剤を含む。別の実施形態において、本開示の薬学的な単位投与量は、エアロゾル送達された抗ＩＣＯＳ抗体製剤を含む。さらなる実施形態において、本開示の薬学的な単位投与量は、鼻腔内に投与された抗ＩＣＯＳ抗体製剤を含む。一実施形態において、適切な容器は、プレフィルドシリンジである。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１４２】
一実施形態において、本開示の製剤は、密閉された容器で提供される。特定の実施形態において、本開示の製剤をプレフィルドシリンジで提供する。特定の実施形態において、本開示の製剤は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、および糖鎖の還元末端でフコースがＮアセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１４３】
本開示は、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤を含むキットをさらに提供する。
【０１４４】
本開示は、循環するＩＣＯＳを発現する細胞を枯渇させるために十分な量の増強したエフェクター機能（例えば、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、および／または抗体依存性の食作用）を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤を必要とするヒトに投与することを含む、これらに限定されないが、ヒトの慢性感染、自己免疫病または疾患、炎症性疾病または疾患、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、移植拒絶反応、およびＴ細胞増殖性疾患等の、Ｔ細胞媒介疾病および疾患を治療し防止する方法にも関する。特定の態様において、本開示は、ＩｇＧ１またはＩｇＧ３ヒトアイソタイプの増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体の治療効果のある療法の投与を含む、これらに限定されないが、ヒトの慢性感染、自己免疫病または疾患、炎症性疾患または疾患、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、移植拒絶反応、およびＴ細胞の増殖性疾患等のＴ細胞媒介疾病および疾患を治療し防止する方法にも関係する。
【０１４５】
本開示は、炎症性疾病または疾患、自己免疫病または疾患、増殖性疾病、感染、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随した、またはそれらを特徴とする疾病または疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随した、またはそれらを特徴とする疾病または疾患、またはこれらの１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法も提供する。
【０１４６】
一実施形態において、本開示の方法は、抗ＩＣＯＳ抗体製剤の予防的または治療的効果のある量を必要とする対象に投与することを含む。一実施形態において、本開示の方法は、多発性硬化症、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、乾癬、自己免疫性甲状腺炎、関節リウマチ、糸球体腎炎、全身性エリテマトーデス、特発性炎症性筋疾患（ＩＩＭ）、皮膚筋炎（ＤＭ）、多発性筋炎（ＰＭ）、および封入体筋炎（ＩＢＭ）からなる群から選択した疾病または疾患の防止、処置、管理または寛解のためである。特定の実施形態において、本開示の方法は、全身性エリテマトーデスの防止、処置、管理、または寛解用である。特定の実施形態において、本開示の方法は、乾癬の防止、処置、管理、または寛解用である。特定の実施形態において、本開示の方法は、自己免疫性糖尿病の防止、処置、管理、または寛解用である。別の実施形態において、本開示の方法は、移植拒絶反応または移植片対宿主病の防止、処置、管理、または寛解用である。さらなる実施形態において、本開示の方法は、特発性炎症性筋疾患（ＩＩＭ）、皮膚筋炎（ＤＭ）、多発性筋炎（ＰＭ）、および封入体筋炎（ＩＢＭ）の防止、処置、管理、または寛解用である。
【０１４７】
一実施形態において、疾病または疾患の防止、処置、管理、または寛解用の本開示の方法は、ＩＣＯＳと特異的に結合する抗体または抗体断片以外の予防または治療剤の予防的または治療的効果のある量を該対象に投与することをさらに含む。
【０１４８】
一実施形態において、疾病または疾患の防止、処置、管理、または寛解用の本開示の方法は、ＩＣＯＳと特異的に結合する抗体または抗体断片以外の予防または治療剤の予防的または治療的効果のある量を該対象に投与することをさらに含み、該予防または治療剤は、抗炎症剤、免疫調節剤、血管新生阻害剤、または抗癌剤である。
【０１４９】
５．３．本開示の製剤で有用な抗体
本開示は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合し、増強したエフェクター機能を有する抗体の製剤を提供する。一実施形態において、本開示の製剤は、これらに限定されないが、増強したＡＤＣＣ、増強したＣＤＣ、および増強した抗体依存性食作用等の、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。特定の実施形態において、本開示の製剤は、増強したＡＤＣＣ活性を含む抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含む。これらの抗体を、予防目的含む治療のために使用することができ、例えばＩＣＯＳの産出または発現が病的症状と付随している場合の状況である。かかる抗体を、各種の疾病の診断またはかかる疾病の進化の研究のために使用することもできる。
【０１５０】
本開示で有用な抗体は、モノクローナル抗体、合成抗体、（二重特異性抗体を含む）多特異的な抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、（二重特異性ｓｃＦｖを含む）一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単鎖抗体、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）断片、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、および上記のうちのいずれかのエピトープ結合断片を含むがこれらに限定されない。特に、本開示の抗体は、免疫グロブリン分子および免疫グロブリン分子の免疫学的に活性な部分、すなわち抗原と特異的に結合する抗原結合部位を含有する分子を含む。本開示の免疫グロブリン分子は、任意の種類（例えばＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２）または免疫グロブリン分子のサブクラスであることができる。
【０１５１】
本開示に有用な抗体を、鳥および哺乳動物（例えば、これらに限定されないがヒト、マウス、ロバ、ヒツジ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ウマ、またはニワトリ）を含む任意の動物起源から提供することができる。特定の実施形態において、抗体はヒトまたはヒト化のモノクローナル抗体である。
【０１５２】
本開示で有用な抗体は、単一特異性、二重特異性、三重特異性、またはより多い多特異性であり得る。多特異的な抗体は、ポリペプチドの異なるエピトープと特異的に結合することができ、またはポリペプチド、ならびに異種性ポリペプチドまたは固形支持体等の異種性エピトープの両方と特異的に結合することができる。例えば、国際公開ＷＯ第９３／１７７１５号、ＷＯ第９２／０８８０２号、ＷＯ第９１／００３６０号、ＷＯ第９２／０５７９３号；Ｔｕｔｔ，  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０−６９；米国特許第  ４，４７４，８９３号、第４，７１４，６８１号、第４，９２５，６４８号、第５，５７３，９２０号、および第５，６０１，８１９号；ならびにＫｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：１５４７−１５５３を参照されたい。
【０１５３】
本開示で有用な抗体は、一本鎖抗体であり得る。一本鎖抗体の設計および構成は、すべてが参照により本明細書に組み込まれるＭａｒａｓｃｏ  ｅｔ  ａｌ，１９９３，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ９０：７８８９−７８９３に記載される。
【０１５４】
本開示は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合し、増強したエフェクター機能を有する抗体の製剤を提供する。一実施形態において、本開示の製剤は、これらに限定されないが、増強したＡＤＣＣ、増強したＣＤＣ、および増強した抗体依存性食作用等の、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。
【０１５５】
本開示はマウス異種移植モデルシステムでＩＣＯＳを発現する細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤をさらに提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、マウス異種移植モデルシステムのＩＣＯＳを発現する細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１５６】
本開示は、形質転換マウスモデルシステムでＩＣＯＳを発現する細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤をさらに提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、形質転換マウスモデルシステムのＩＣＯＳを発現する細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１５７】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現する細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現する細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１５８】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴ細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴ細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１５９】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するヘルパーＴ細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴヘルパー細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１６０】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴｈ１細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴｈ１細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１６１】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴｈ２細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴｈ２細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１６２】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴｈ１７細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するＴｈ１７細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１６３】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するメモリーヘルパーＴ細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＣＯＳを発現するメモリーヘルパーＴ細胞の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１６４】
特定の細胞型の枯渇は、該細胞型の分泌物の枯渇を引き起こすことができる。例えば、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体を使用したＴｈ１７細胞の枯渇は、ＩＬ−１７の枯渇を引き起こすことができる。本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＬ−１７を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＬ−１７の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１６５】
本開示は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＬ−２を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）のＩＬ−２の少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９９％、または少なくとも約１００％の枯渇を達成することができる。
【０１６６】
本開示は、投与する際、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）の二次リンパ器官の胚中心の形成を効率的に防止する抗ＩＣＯＳ抗体の製剤を提供する。一実施形態において、二次リンパ器官はリンパ節である。別の実施形態において、二次リンパ器官は脾臓である。さらなる実施形態において、二次リンパ器官は扁桃腺である。一実施形態において、二次リンパ器官は腸間膜リンパ節である。
【０１６７】
本開示は、投与する際に、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）の二次リンパ器官の胚中心構造を効率的に破壊する抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、二次リンパ器官はリンパ節である。別の実施形態において、二次リンパ器官は脾臓である。さらなる実施形態において、二次リンパ器官は扁桃腺である。一実施形態において、二次リンパ器官は腸間膜リンパ節である。
【０１６８】
本開示は、投与の際に、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）の二次リンパ器官から胚中心Ｂ細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、二次リンパ器官はリンパ節である。別の実施形態において、二次リンパ器官は脾臓である。さらなる実施形態において、二次リンパ器官は扁桃腺である。一実施形態において、二次リンパ器官は腸間膜リンパ節である。
【０１６９】
本開示は、投与の際に、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）の循環する種類を切り替えられたＢ細胞を効率的に枯渇させる抗ＩＣＯＳ抗体の製剤も提供する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の１つ以上の治療用量の投与は、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも５日、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも９ヶ月の間、霊長類（非ヒト霊長類またはヒト）の循環する種類を切り替えられたＢ細胞を枯渇させる。循環する種類を切り替えられたＢ細胞の数が、未処理の対照試料の循環する種類を切り替えられたＢ細胞の数よりも抗体を処理した試料において少なくとも１０％低い場合、循環する種類を切り替えられたＢ細胞の枯渇は、抗ＩＣＯＳ抗体の１つ以上の用量の投与後の期間の間、「実質的に持続する」と考えられている。
【０１７０】
一実施形態において、本開示の製剤は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、および／または抗体依存性食作用を媒介する抗ＩＣＯＳ抗体を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および／または抗体依存性食作用を媒介する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、増強した抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を有する。
【０１７１】
一実施形態において、本開示の製剤は、増強した抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介する変異Ｆｃ領域を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、残基２３９、３３０、および３３２からなる群から選択されたアミノ酸残基の少なくとも１つの置換を含む変異Ｆｃ領域を含み、アミノ酸残基の位置はＥＵコンベンションによって決定される。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、およびＩ３３２Ｅからなる群から選択された少なくとも１つのアミノ酸置換を含む変異Ｆｃ領域を含み、アミノ酸残基の位置は、ＥＵコンベンションによって決定される。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、２３９の位置のＤ、３３０の位置のＬ、および３３２の位置のＥからなる群から選択された少なくとも１つのアミノ酸残基を含み、アミノ酸残基の位置はＥＵコンベンションによって決定される。
【０１７２】
一実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１つの操作されたグリコフォームを含む操作されたＦｃ領域を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該操作されたＦｃ領域は増強した抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、グリコシル化が欠乏している操作されたＦｃ領域を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、フコースが還元末端でＮ−アセチルグルコサミンと結合しないＡｓｎ２９７と結合した複合Ｎ−グリコシド結合糖鎖を有する操作されたＦｃ領域を含む。
【０１７３】
ある実施形態において、本開示の製剤は、限定されないがＦｃ受容体、Ｃ１ｑ等のＦｃ結合タンパク質に対して野生型Ｆｃ領域よりも高い親和性を有する変異Ｆｃ領域を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、野生型Ｆｃ領域よりもＦｃγＲＩＩＩＡ受容体タンパク質に対して高い親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。
【０１７４】
ある実施形態において、本開示の製剤は、少なくとも１つの操作されるグリコフォームを含む操作されたＦｃ領域を有する抗ＩＣＯＳ抗体を含み、該操作されるＦｃ領域は、限定されないがＦｃ受容体、Ｃ１ｑ等のＦｃ結合タンパク質に対して野生型Ｆｃ領域よりも高い親和性を有する。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つの操作されたグリコフォームを含む操作されたＦｃ領域を含み、該操作されたＦｃ領域は、野生型Ｆｃ領域よりもＦｃγＲＩＩＩＡ受容体タンパク質に対して高い親和性を有する
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は変異Ｆｃ領域を含む。別の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｆｃリガンドタンパク質に対して変化させた親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＩＢ、ＦｃγＲＩＶ、およびＣ１ｑからなる群から選択されたＦｃリガンドに対して変化させた親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して変化させた親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｃ１ｑタンパク質に対して変化させた親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。特定の実施形態において、Ｆｃリガンドタンパク質は、マウス、ヒト、または霊長類（例えば、カニクイザル）Ｆｃリガンドタンパク質であり得る。
【０１７５】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｆｃリガンドタンパク質に対して増加した親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＩＢ、ＦｃγＲＩＶ、およびＣ１ｑからなる群から選択されたＦｃリガンドに対して増加した親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して増加した親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｃ１ｑタンパク質に対して増加した親和性を有する変異Ｆｃ領域を含む。特定の実施形態において、Ｆｃリガンドタンパク質は、マウス、ヒト、または霊長類（例えば、カニクイザル）Ｆｃリガンドタンパク質であり得る。
【０１７６】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、変異Ｆｃ領域を含み、該変異Ｆｃ領域は少なくとも１つのアミノ酸置換、挿入、または欠失を含む。別の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのアミノ酸置換、挿入、または欠失を含む変異Ｆｃ領域を含み、該少なくとも１つのアミノ酸残基置換、挿入、または欠失は、ＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＩＢ、ＦｃγＲＩＶ、およびＣ１ｑからなる群から選択されるＦｃリガンドに対して増加した親和性を引き起こす。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのアミノ酸置換、挿入、または欠失を含む変異Ｆｃ領域を含み、該少なくとも１つのアミノ酸残基の置換、挿入、または欠失は、ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して増加した親和性を引き起こす。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのアミノ酸置換、挿入、または欠失を含む変異Ｆｃ領域を含み、該少なくとも１つのアミノ酸残基の置換、挿入、または欠失は、Ｃ１ｑタンパク質に対して増加した親和性を引き起こす。特定の実施形態において、Ｆｃリガンドタンパク質は、マウス、ヒト、または霊長類（例えば、カニクイザル）Ｆｃリガンドタンパク質であり得る。
【０１７７】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのアミノ酸の置換、挿入、または欠失を含む変異Ｆｃ領域を含み、該少なくとも１つのアミノ酸残基は、残基２３９、３３０、および３３２からなる群から選択され、アミノ酸残基は、ＥＵインデックスに従って番号付けられる。別の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのアミノ酸置換、挿入、または欠失を含む変異Ｆｃ領域を含み、該少なくとも１つの置換された、挿入された、または欠失されたアミノ酸残基は、残基２３９、３３０、および３３２からなる群から選択され、アミノ酸残基は、ＥＵインデックスに従って番号付けられる。さらなる実施形態において、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのアミノ酸置換を含む変異Ｆｃ領域を含み、該少なくとも１つの置換されたアミノ酸残基は、残基２３９、３３０、および３３２からなる群から選択され、アミノ酸残基は、ＥＵインデックスに従って番号付けられる。別の実施形態において、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１つのアミノ酸置換を含む変異Ｆｃ領域を含み、該少なくとも１つのアミノ酸置換は、Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ａ３３０Ｙ、およびＩ３３２Ｅからなる群から選択され、アミノ酸残基は、ＥＵインデックスに従って番号付けられる。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、およびＩ３３２Ｅアミノ酸の置換を含む変異Ｆｃ領域を含み、アミノ酸残基はＥＵインデックスに従って番号付けられる。
【０１７８】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、残基２３９のＤ、残基２３９のＥ、残基３３０のＬ、残基３３０のＹ、残基３３２のＥ、および残基３３２のＤからなる群から選択されたアミノ酸残基のうちの少なくとも１つを含む変異Ｆｃ領域を含み、アミノ酸残基は、ＥＵインデックスに従って番号付けられる。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、残基２３９のＤ、残基３３０のＬ、および残基３３２のＥを含む変異Ｆｃ領域を含み、アミノ酸残基はＥＵインデックスに従って番号付けられる。
【０１７９】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、操作されたＦｃ領域を含み、操作されたＦｃ領域は、親抗ＩＣＯＳ抗体のものと異なる翻訳後修飾を含む。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、操作されたＦｃ領域を含み、該操作されたＦｃ領域は、フコースが糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎグリコシド結合糖鎖を含む。
【０１８０】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｆｃリガンドタンパク質に対して変化した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＩＢ、ＦｃγＲＩＶ、およびＣ１ｑからなる群から選択されたＦｃリガンドに対して変化した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して変化した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｃ１ｑタンパク質に対して変化した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。
【０１８１】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｆｃリガンドタンパク質に対して増加した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＩＢ、ＦｃγＲＩＶ、およびＣ１ｑからなる群から選択されたＦｃリガンドに対して増加した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して増加した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｃ１ｑタンパク質に対して増加した親和性を有する操作されたＦｃ領域を含む。
【０１８２】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、操作されたＦｃ領域を含み、該操作されたＦｃ領域は、天然抗体と比較して縮小したレベルのフコースを含む。別の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、縮小したレベルのフコースを含む操作されたＦｃ領域を含み、該フコースレベルの縮小は、ＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＩＢ、ＦｃγＲＩＶ、およびＣ１ｑからなる群から選択されたＦｃリガンドに対して増加した親和性を引き起こす。特定の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、縮小したレベルのフコースを含む操作されたＦｃ領域を含み、該フコースレベルの縮小は、ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して増加した親和性を引き起こす。さらなる実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、縮小したレベルのフコースを含む操作されたＦｃ領域を含み、該フコースレベルの縮小は、Ｃ１ｑタンパク質に対して増加した親和性を引き起こす。
【０１８３】
本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、ヒトＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して高い結合親和性を有するＦｃ領域を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１０３Ｍ−１、少なくとも５×１０３Ｍ−１、少なくとも１０４Ｍ−１、少なくとも５×１０４Ｍ−１、少なくとも１０５Ｍ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１、少なくとも１０６Ｍ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１、少なくとも１０７Ｍ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１、少なくとも１０８Ｍ−１、少なくとも５×１０８Ｍ−１、少なくともｌ０９Ｍ−１、少なくとも５×１０９Ｍ−１、少なくとも１０１０Ｍ−１、少なくとも５×１０１０Ｍ−１、少なくとも１０１１Ｍ−１、少なくとも５×１０１１Ｍ−１、少なくとも１０１２Ｍ−１、または少なくとも５×１０１２Ｍ−１の親和性定数またはＫａ（ｋｏｎ／ｋｏｆｆ）を有するＦｃ領域を含む。別の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、５×１０−３Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、５×１０−１０Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、５×１０−１１Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、５×１０−１２Ｍ未満、または１０−１２Ｍ未満の解離定数またはＫｄ（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）を有するＦｃ領域を含む。
【０１８４】
本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法を使用して査定した（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）（Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、３０００ｎＭ未満、２５００ｎＭ未満、２０００ｎＭ未満、１５００ｎＭ未満、１０００ｎＭ未満、７５０ｎＭ未満、５００ｎＭ未満、２５０ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、１５０ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、７５ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２５ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満の解離定数（Ｋｄ）を含むヒトＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。特定の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定した、１〜３０００ｎＭ、１〜３０００ｎＭ、１〜２０００ｎＭ、１〜１５００ｎＭ、１〜１０００ｎＭ、１〜７５０ｎＭ、１〜５００ｎＭ、１〜２５０ｎＭ、１〜１００ｎＭ、１〜５０ｎＭ、１〜２５ｎＭ、１〜１０ｎＭの間の解離定数（Ｋｄ）を含むヒトＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。別の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗ＩＣＯＳ抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定した、５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１００ｎＭ、７５ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１０ｎＭ、または１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を含むヒトＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。
【０１８５】
本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）ＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して高い結合親和性を有するＦｃ領域を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１０３Ｍ−１、少なくとも５×１０３Ｍ−１、少なくとも１０４Ｍ−１、少なくとも５×１０４Ｍ−１、少なくとも１０５Ｍ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１、少なくとも１０６Ｍ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１、少なくとも１０７Ｍ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１、少なくとも１０８Ｍ−１、少なくとも５×１０８Ｍ−１、少なくとも１０９Ｍ−１、少なくとも５×１０９Ｍ−１、少なくとも１０１０Ｍ−１、少なくとも５×１０１０Ｍ−１、少なくとも１０１１Ｍ−１、少なくとも５×１０１１Ｍ−１、少なくとも１０１２Ｍ−１、または少なくとも５×１０１２Ｍ−１の親和性定数またはＫａ（ｋｏｎ／ｋｏｆｆ）を有するＦｃ領域を含む。別の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、５×１０−３Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、５×１０−１０Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、５×１０−１１Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、５×１０−１２Ｍ未満、または１０−１２Ｍ未満の解離定数またはＫｄ（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）を有するＦｃ領域を含む。
【０１８６】
本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法を使用して査定した（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）（Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、３０００ｎＭ未満、２５００ｎＭ未満、２０００ｎＭ未満、１５００ｎＭ未満、１０００ｎＭ未満、７５０ｎＭ未満、５００ｎＭ未満、２５０ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、１５０ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、７５ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２５ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満の解離定数（Ｋｄ）を含む非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）ＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。特定の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定した、１〜３０００ｎＭ、１〜３０００ｎＭ、１〜２０００ｎＭ、１〜１５００ｎＭ、１〜１０００ｎＭ、１〜７５０ｎＭ、１〜５００ｎＭ、１〜２５０ｎＭ、１〜１００ｎＭ、１〜５０ｎＭ、１〜２５ｎＭ、１〜１０ｎＭの間の解離定数（Ｋｄ）を含む非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）ＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。別の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗ＩＣＯＳ抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定した、５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１００ｎＭ、７５ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１０ｎＭ、または１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を含む非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル）ＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。
【０１８７】
本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、マウスＦｃγＲＩＩＩＡタンパク質に対して高い結合親和性を有するＦｃ領域を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１０３Ｍ−１、少なくとも５×１０３Ｍ−１、少なくとも１０４Ｍ−１、少なくとも５×１０４Ｍ−１、少なくとも１０５Ｍ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１、少なくとも１０６Ｍ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１、少なくとも１０７Ｍ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１、少なくとも１０８Ｍ−１、少なくとも５×１０８Ｍ−１、少なくとも１０９Ｍ−１、少なくとも５×１０９Ｍ−１、少なくとも１０１０Ｍ−１、少なくとも５×１０１０Ｍ−１、少なくとも１０１１Ｍ−１、少なくとも５×１０１１Ｍ−１、少なくとも１０１２Ｍ−１、または少なくとも５×１０１２Ｍ−１の親和性定数またはＫａ（ｋｏｎ／ｋｏｆｆ）を有するＦｃ領域を含む。別の実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、５×１０−３Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、５×１０−１０Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、５×１０−１１Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、５×１０−１２Ｍ未満、または１０−１２Ｍ未満の解離定数またはＫｄ（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）を有するＦｃ領域を含む。
【０１８８】
本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法を使用して査定した（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）（Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、３０００ｎＭ未満、２５００ｎＭ未満、２０００ｎＭ未満、１５００ｎＭ未満、１０００ｎＭ未満、７５０ｎＭ未満、５００ｎＭ未満、２５０ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、１５０ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、７５ｎＭ未満、５０ｎＭ未満、２５ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１ｎＭ未満の解離定数（Ｋｄ）を含むマウスＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。特定の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定した、１〜３０００ｎＭ、１〜３０００ｎＭ、１〜２０００ｎＭ、１〜１５００ｎＭ、１〜１０００ｎＭ、１〜７５０ｎＭ、１〜５００ｎＭ、１〜２５０ｎＭ、１〜１００ｎＭ、１〜５０ｎＭ、１〜２５ｎＭ、１〜１０ｎＭの間の解離定数（Ｋｄ）を含むマウスＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。別の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗ＩＣＯＳ抗体は、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定した、５００ｎＭ、２５０ｎＭ、１００ｎＭ、７５ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ、１０ｎＭ、または１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を含むマウスＦｃγＲＩＩＩＡと結合するＦｃ領域を含むことができる。
【０１８９】
本開示は、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合し、増強したエフェクター機能を有する抗体の製剤を提供する。一実施形態において、本開示の製剤は、これらに限定されないが、増強したＡＤＣＣ、増強したＣＤＣ、および増強した抗体依存性食作用等の、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む。一実施形態において、本開示の製剤は、２００８年５月７日に出願された米国特許出願第１２／１１６，５１２号に開示された抗ＩＣＯＳ抗体を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、１、２、３、４、５、または６つすべてのＪＭＡｂ−１３６のＣＤＲを含む（例えば、米国特許第６，８０３，０３９号）。
【０１９０】
Ｋａｂａｔによって定義されたＪＭＡｂ−１３６の重鎖可変領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３に対するアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８、配列番号９、および配列番号１０として同定される。Ｋａｂａｔによって定義されたＪＭＡｂ−１３６の軽鎖可変領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３に対するアミノ酸配列は、それぞれ配列番号３、配列番号４、および配列番号５として同定される。
【０１９１】
Ｋａｂａｔ番号方式は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅによって３巻として出版されたＫａｂａｔらの（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ公開第９１−３２４２号の影響力のある研究を基にしている（以下「Ｋａｂａｔ」）。Ｋａｂａｔは、数々の種類の抗体アイソタイプからの免疫グロブリン鎖の複数の配列の整列を提供する。整列された配列は、単一番号方式、Ｋａｂａｔ番号方式によって番号が付けられる。Ｋａｂａｔ配列は、１９９１の出版以来更新されてきており、電子配列データベース（最新のダウンロード可能なバージョンは、１９９７）として利用可能である。任意の免疫グロブリン配列は、Ｋａｂａｔによると、Ｋａｂａｔ参照配列で整列をすることによって、番号が付けられ得る。したがって、Ｋａｂａｔ番号方式は、免疫グロブリン鎖の番号付けのための、統一システムを提供する。別の方法で示されない限り、本明細書に記載されるすべての免疫グロブリンアミノ酸配列は、Ｋａｂａｔ番号方式によって番号付けられる。同様に、本明細書に参照されるすべての単一アミノ酸の位置は、Ｋａｂａｔ番号方式によって番号付けられる。
【０１９２】
ある実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する少なくとも１つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、ＶＨ、を含むことができる。ある実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を有するＶＨドメインを含むことができる。
【０１９３】
ある実施形態において、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号３、配列番号４、および配列番号５からなる群から選択されたアミノ酸配列を有する少なくとも１つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域、ＶＫ、を含むことができる。ある実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＫドメインを含むことができる。
【０１９４】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＫドメインを含み、配列番号７のアミノ酸配列を有するＶＨドメインをさらに含む。
【０１９５】
本開示は、ヒトＩＣＯＳと結合することができる本明細書に記載されるＶＨドメイン、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＫドメイン、ＶＫ  ＣＤＲ１、ＶＫ  ＣＤＲ２、またはＶＫ  ＣＤＲ３の誘導体を含む、ヒトＩＣＯＳと結合する抗体を包含する。当業者に知られている標準的な技術を、抗体をコードするヌクレオチド配列に突然変異（例えば、付加、欠失、および／または置換）を導入するために使用することができ、例えば、アミノ酸置換を生成するためにルーチン的に使用される部位特異的変異誘発およびＰＣＲ媒介変異誘発を含む。一実施形態において、ＶＨおよび／またはＶＫ  ＣＤＲ誘導体は、ＪＭａｂ−１３６抗ＩＣＯＳ抗体の本来のＶＨおよび／またはＶＫ  ＣＤＲと比べて２５個未満のアミノ酸置換、２０個未満のアミノ酸置換、１５個未満のアミノ酸置換、１０個未満のアミノ酸置換、５個未満のアミノ酸置換、４個未満のアミノ酸置換、３個未満のアミノ酸置換、２個未満のアミノ酸置換、または１個のアミノ酸置換を含むことができる。別の実施形態において、ＶＨおよび／またはＶＫ  ＣＤＲ誘導体は、１つ以上の予測された非必須アミノ酸残基（すなわち、ヒトＩＣＯＳと特異的に結合するための抗体に対して重大ではないアミノ酸残基）で作製された保存アミノ酸の置換（例えば、上記）を有することができる。突然変異は、飽和変異誘発性等によって、ＶＨおよび／またはＶＫ  ＣＤＲをコードする配列のすべてまたは一部に従って無作為に導入することもでき、結果としての変異体を、活性を保持する変異体を同定するために、生物活性に対してスクリーニングすることができる。変異誘発後、コードされた抗体を、発現することができ、抗体の活性を測定することができる。
【０１９６】
本開示は、ヒトＩＣＯＳと結合する抗体、１つ以上のＣＤＲを含む該抗体または抗体断片をさらに含有し、該ＣＤＲは、ＪＭａｂ−１３６抗ＩＣＯＳ抗体の１つ以上のＣＤＲのアミノ酸配列と少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。２つのアミノ酸配列の同一性パーセントは、ＢＬＡＳＴタンパク質検索を含むがこれに限定されない、当業者に知られている、任意の方法によって測定することができる。
【０１９７】
本開示は、ヒトＩＣＯＳと結合する抗体、ＶＨおよび／またはＶＫドメインを含む該抗体または抗体断片をさらに包含し、該ＶＨおよび／またはＶＫドメインは、ＪＭａｂ−１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＶＨおよびＶＫドメインのアミノ酸配列と少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、また少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含む。２つのアミノ酸配列の同一性パーセントは、ＢＬＡＳＴタンパク質検索を含むがこれに限定されない、当業者に知られている、任意の方法によって測定することができる。
【０１９８】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＪＭａｂ−１３６抗ＩＣＯＳ抗体のものに相当する親和性を含むヒトＩＣＯＳと結合することができる。
【０１９９】
一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＪＭａｂ−１３６抗ＩＣＯＳ抗体と同じＩＣＯＳのエピトープと特異的に結合する。
【０２００】
一実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳ結合に対してＪＭａｂ−１３６抗ＩＣＯＳ抗体と特異的に競合する。拮抗実験を、当該技術において知られている任意の結合アッセイ、例えば、限定されないがＥＬＩＳＡアッセイ、放射免疫アッセイ、およびフローサイトメトリーを使用して実施することができる。
【０２０１】
本開示は、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドをさらに提供する。本開示は、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体をコードするポリヌクレオチドに対して、本明細書に定義される通り、ストリンジェントなまたは低ストリンジェンシーであるハイブリダイゼーション条件下でハイブリッド形成するポリヌクレオチドも包含する。
【０２０２】
本開示の別の実施形態は、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体をコードする１つ以上のヌクレオチド配列を含むベクターである。
【０２０３】
本開示は、ベクターを含む単離された細胞にさらに関し、該ベクターは、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体をコードする１つ以上のヌクレオチド配列を含む。
【０２０４】
本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４ヒトアイソタイプのものを含む。
【０２０５】
本開示は、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体、ならびにそれらの抗体を含む組成物に関する。ある実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介することができる。他の実施形態において、本開示は、ヒトＡＤＣＣ、ＣＤＣ、および／または抗体依存性の食作用を媒介することができる、ＩｇＧ１および／またはＩｇＧ３ヒトアイソタイプの抗ＩＣＯＳ抗体、ならびにＩｇＧ２および／またはＩｇＧ４ヒトアイソタイプの抗ＩＣＯＳ抗体を含む組成物に向けられている。
【０２０６】
本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、ヒトＩＣＯＳ抗原に対して高い結合親和性を有することができる。例えば、本明細書に記載される抗体は、少なくとも２×１０５Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１ｓ−１、少なくとも１０６Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１ｓ−１、少なくとも１０７Ｍ−１ｓ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１ｓ−１、または少なくとも１０８Ｍ−１ｓ−１の会合速度定数またはｋｏｎ速度（抗体（Ａｂ）＋抗原（Ａｇ）ｋ−ｏｎ→Ａｂ−Ａｇ）を有することができる。
【０２０７】
別の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、５×１０−１ｓ−１未満、１０−１ｓ−１未満、５×１０−２ｓ−１未満、１０−２ｓ−１未満、５×１０−３ｓ−１未満、１０−３ｓ−１未満、５×１０−４ｓ−１未満、または１０−４ｓ−１未満のｋｏｆｆ速度（（Ａｂ−Ａｇ）ｋ-ｏｆｆ→抗体（Ａｂ）＋抗原（Ａｇ））を有することができる。別の実施形態において、本開示の抗体は、５×１０−５ｓ−１未満、１０−５ｓ−１未満、５×１０−６ｓ−１未満、１０−６ｓ−１未満、５×１０−７ｓ−１未満、１０−７ｓ−１未満、５×１０−８ｓ−１未満、１０−８ｓ−１未満、５×１０−９ｓ−１未満、１０−９ｓ−１未満、または１０−１０ｓ−１未満のｋｏｆｆを有する。
【０２０８】
別の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、少なくとも１０２Ｍ−１、少なくとも５×１０２Ｍ−１、少なくとも１０３Ｍ−１、少なくとも５×１０３Ｍ−１、少なくとも１０４Ｍ−１、少なくとも５×１０４Ｍ−１、少なくとも１０５Ｍ−１、少なくとも５×１０５Ｍ−１、少なくとも１０６Ｍ−１、少なくとも５×１０６Ｍ−１、少なくとも１０７Ｍ−１、少なくとも５×１０７Ｍ−１、少なくとも１０８Ｍ−１、少なくとも５×１０８Ｍ−１、少なくともｌ０９Ｍ−１、少なくとも５×ｌ０９Ｍ−１、少なくとも１０１０Ｍ−１、少なくとも５×１０１０Ｍ−１、少なくとも１０１１Ｍ−１、少なくとも５×１０１１Ｍ−１、少なくとも１０１２Ｍ−１、少なくとも５×１０１２Ｍ−１、少なくとも１０１３Ｍ−１、少なくとも５×１０１３Ｍ−１、少なくとも１０１４Ｍ−１、少なくとも５×１０１４Ｍ−１、少なくともｌ０１５Ｍ−１、または少なくとも５×１０１５Ｍ−１の親和性定数またはＫａ（ｋｏｎ／ｋｏｆｆ）を有することができる。さらに別の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、５×１０−２Ｍ未満、１０−２Ｍ未満、５×１０−３Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、５×１０−１０Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、５×１０−１１Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、５×１０−１２Ｍ未満、１０−１２Ｍ未満、５×１０−１３Ｍ未満、１０−１３Ｍ未満、５×１０−１４Ｍ未満、１０−１４Ｍ未満、５×１０−１５Ｍ未満、または１０−１５Ｍ未満の解離定数または、Ｋｄ（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）を有することができる。
【０２０９】
本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、ＩＣＯＳと免疫特異的に結合することができ、本明細書に記載されるまたは当業者に知られる方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）（Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して査定される、３０００ｐＭ未満、２５００ｐＭ未満、２０００ｐＭ未満、１５００ｐＭ未満、１０００ｐＭ未満、７５０ｐＭ未満、５００ｐＭ未満、２５０ｐＭ未満、２００ｐＭ未満、１５０ｐＭ未満、１００ｐＭ未満、７５ｐＭ未満の解離定数（Ｋｄ）を有することができる。特定の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗体は、ヒトＩＣＯＳ抗原と免疫特異的に結合することができ、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定される、２５〜３４００ｐＭ、２５〜３０００ｐＭ、２５〜２５００ｐＭ、２５〜２０００ｐＭ、２５〜１５００ｐＭ、２５〜１０００ｐＭ、２５〜７５０ｐＭ、２５〜５００ｐＭ、２５〜２５０ｐＭ、２５〜１００ｐＭ、２５〜７５ｐＭ、２５〜５０ｐＭの間の解離定数（Ｋｄ）を有することができる。別の実施形態において、本明細書に記載される方法と一致して使用される抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳと免疫特異的に結合することができ、本明細書に記載されるまたは当業者に知られている方法（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅアッセイ、ＥＬＩＳＡ）を使用して査定される、５００ｐＭ、１００ｐＭ、７５ｐＭ、または５０ｐＭの解離定数（Ｋｄ）を有することができる。
【０２１０】
ＩＣＯＳと特異的に結合する抗体は、すなわち、共有結合がヒトＩＣＯＳとの結合を除去しないように、任意の種類の分子と抗体との共有結合によって修飾された誘導体を含む。例えば、限定するわけではないが、抗体の誘導体は、例えば、限定されないが、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、既知の保護基／遮断基による誘導体化、タンパク質切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質との結合等によって修飾された抗体を含む。任意の数々の化学的な修飾を、特異的な化学的な切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成等を含むがこれらに限定されない既知の技術によって実施することができる。さらに、誘導体は、１つ以上の非古典的なアミノ酸を含有することができる。
【０２１１】
ヒトＩＣＯＳと特異的に結合する本開示の抗体の製剤は、単一特異性、二重特異性、三重特異性、またはこれらより多い多特異性であり得る。多特異的な抗体は、ヒトＩＣＯＳの異なるエピトープに対して特異的であることができるか、またはヒトＩＣＯＳならびに異種性ポリペプチドまたは固形支持物質等の異種性エピトープの両方に対して特異的であることができる。
【０２１２】
５．４．モノクローナル抗ＩＣＯＳ抗体
モノクローナル抗ＩＣＯＳ抗体は、ヒトＩＣＯＳ抗原に対して結合特異性を示し、ヒトＡＤＣＣ、ＣＤＣおよび／または抗体依存性食作用を媒介することができる。かかる抗体を、ハイブリドーマ、組換え、およびファージディスプレイ法、またはそれらの組み合わせを使用することを含む、当該技術において知られている幅広い種類の技術を使用して生成することができる。抗体は、非常に特異的であり、単一抗原部位に対して作られる。操作された抗ＩＣＯＳ抗体を、以下に記載する技術およびそれらの技術の改善を含むがこれらに限定されない、当該技術において知られている任意の方法で産生することができる。大規模高収率生産は、典型的には、操作された抗ＩＣＯＳ抗体を産生する宿主細胞を培養し、宿主細胞培養から抗ＩＣＯＳ抗体を回収することを含む。
【０２１３】
５．４．１．ハイブリドーマ技法
モノクローナル抗体を、当該技術において知られており、例えば、ＨａｒｌｏｗらＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）；ＨａｍｍｅｒｌｉｎｇらのＭｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ，５６３-６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１）（該参考文献は、すべてが参照によって本明細書に組み込まれる）の教えを含むハイブリドーマ技法を使用して産生することができる。例えば、ハイブリドーマ方法で、マウスまたはハムスターもしくはマカクザル等の他の適切な宿主動物を、免疫化に対して使用されるタンパク質と特異的に結合する抗体を産生するまたは産生することが可能であるリンパ球を、誘発するために免疫化する。リンパ球をインビトロで免疫化することもできる。リンパ球は、ハイブリドーマ細胞を形成するために、ポリエチレングリコール等の適した融合剤を使用して骨髄腫細胞と融合する（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。
【０２１４】
このようにして調製されたハイブリドーマ細胞を、融合していない、親骨髄腫細胞の成長または生存を抑制する１つ以上の物質を含有する適切な培地に播き、成長させる。例えば、親骨髄腫細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠乏する場合、ハイブリドーマの培地は、典型的にヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジン（ＨＡＴ培地）を含み、これらの物質がＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を防止する。
【０２１５】
特定の実施形態は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞による抗体の安定した高レベル産生を支援し、ＨＡＴ培地等の培地に対して感受性がある骨髄腫細胞を利用する。これらの骨髄腫細胞系の中でも、Ｓａｌｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ，ＵＳＡより入手可能なＭＯＰＣ−２１およびＭＰＣ−１１マウス腫瘍およびＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，  Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ，ＵＳＡより入手可能なＳＰ−２またはＸ６３−Ａｇ８．６５３細胞に由来するもの等のマウス骨髄腫系統である。ヒト骨髄腫およびマウスヒトヘテロ骨髄腫細胞系を、ヒトモノクローナル抗体の産生のためにも記載した（Ｋｏｚｂｏｒ，  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３（Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７））。
【０２１６】
ハイブリドーマ細胞が成長している培地を、ヒトＩＣＯＳ抗原に対して作られるモノクローナル抗体の産生に対してアッセイする。ハイブリドーマ細胞によって産生されたモノクローナル抗体の結合特異性を、免疫沈降によって、または放射免疫アッセイ（ＲＩＡ）または酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）等のインビトロ結合アッセイによって、測定することができる。
【０２１７】
ハイブリドーマ細胞は、所望の特異性、親和性、および／または活性の抗体を産生することが同定された後、クローンを、希釈手順を限定することによってサブクローンすることができ、標準方法によって成長させることができる（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。この目的に対する適切な培地は、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ１６４０培地を含む。さらに、ハイブリドーマ細胞は、動物の腹水腫瘍としてインビボで成長させることができる。
【０２１８】
サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体を、例えば、タンパク質Ａ−セファロース、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、または親和性クロマトグラフィー等の従来の免疫グロブリン精製手順によって培地、腹水、または血清から適切に分離することができる。
【０２１９】
５．４．２．組換えＤＮＡ技法
本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体をコードするＤＮＡを、従来の手順を使用して（例えば、抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子と特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離し、配列決定する。ハイブリドーマ細胞は、かかるＤＮＡの源として役立つ。単離されるとすぐに、ＤＮＡを発現ベクターに配置し、続いてこれを大腸菌細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）細胞、またはそうでなければ免疫グロブリンタンパク質を産生しない骨髄腫細胞等の宿主細胞に形質移入して、この組換え宿主細胞内での抗ＩＣＯＳ抗体の合成を得る。
【０２２０】
ファージディスプレイ法では、機能的抗体ドメインを、それらをコードするポリヌクレオチド配列を保有するファージ粒子の表面上に提示させる。特に、ＶＨおよびＶＬドメインをコードするＤＮＡ配列を、動物ｃＤＮＡライブラリー（例えば、影響された組織のヒトまたはマウスｃＤＮＡライブラリー）から増幅する。ＶＨおよびＶＬドメインをコードするＤＮＡを、ＰＣＲによりｓｃＦｖリンカーと共に組み換え、ファージミドベクターにクローン化する。このベクターを大腸菌に電気穿孔し、この大腸菌をヘルパーファージに感染させる。これらの方法で使用されるファージは、典型的にｆｄおよびＭ１３を含む糸状ファージであり、ＶＨおよびＶＬドメインは、大抵はファージ遺伝子ＩＩＩまたは遺伝子ＶＩＩＩのいずれかと組換え融合される。特定の抗原と結合する抗原結合ドメインを発現するファージを、例えば、標識抗原、または固体表面もしくはビーズと結合またはこれに捕獲された抗原を使用して、抗原と共に選択、または同定することができる。本開示の抗体を作製するために使用することができるファージディスプレイ法の例は、それぞれが参照によってすべてが本明細書に組み込まれているＢｒｉｎｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１８２：４１−５０；Ａｍｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１８４：１７７−１８６、Ｋｅｔｔｌｅｂｏｒｏｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２４：９５２−９５８、Ｐｅｒｓｉｃ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｇｅｎｅ，１８７：９−１８、Ｂｕｒｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，５７：１９１−２８０、国際出願ＰＣＴ／ＧＢ第９１／Ｏ１  １３４号、国際出願ＷＯ第９０／０２８０９号、ＷＯ第９１／１０７３７号、ＷＯ第９２／０１０４７号、ＷＯ第９２／１８６１９号、ＷＯ第９３／１１２３６号、ＷＯ第９５／１５９８２号、ＷＯ第９５／２０４０１号、ＷＯ第９７／１３８４４号、および米国特許第５，６９８，４２６号、第５，２２３，４０９号、第５，４０３，４８４号、第５，５８０，７１７号、第５，４２７，９０８号、第５，７５０，７５３号、第５，８２１，０４７号、第５，５７１，６９８号、第５，４２７，９０８号、第５，５１６，６３７号、第５，７８０，２２５号、第５，６５８，７２７号、第５，７３３，７４３号、および第５，９６９，１０８号に開示されているものを含む。
【０２２１】
上記の参考文献に記載されるとおり、ファージ選択後、抗体をコードする領域をファージから単離し、ヒト抗体、またはその他の所望の抗原結合断片を含む全抗体を生成するために使用することができ、例えば、下記に記載するとおり、哺乳類細胞、昆虫細胞、植物細胞、酵母、および細菌を含む任意の所望の宿主内で発現することができる。Ｆａｂ、Ｆａｂ’、およびＦ（ａｂ’）２断片を組換え産生する技法を、ＰＣＴ公開ＷＯ第９２／２２３２４号、Ｍｕｌｌｉｎａｘ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，１２（６）：８６４−８６９、Ｓａｗａｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，ＡＪＲＩ，３４：２６−３４、およびＢｅｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４０：１０４１−１０４３（該参考文献は参照によってすべてが組み込まれている）に開示されているもの等、当該技術において知られている方法を使用して利用することができる。
【０２２２】
抗体を、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２−５５４（１９９０）Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８  （１９９１）に記載される技法を使用して生成された抗体ファージライブラリーから単離することができる。Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７（１９９１）は、ファージライブラリーを使用して、それぞれマウスおよびヒト抗体の単離を説明する。鎖の組換えは、コンビナトリアル感染および非常に大きなファージライブラリーを構成する戦略としてのインビボ組換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．，２１：２２６５−２２６６（１９９３））と並んで、高い親和性の（ｎＭ範囲）ヒト抗体の産生に使用することができる（Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９−７８３（１９９２））。したがって、これらの技法は、抗ＩＣＯＳ抗体の単離に対する伝統的なモノクローナル抗体のハイブリドーマ技法の実行可能な代替案である。
【０２２３】
全抗体を生成するために、ＶＨまたはＶＬヌクレオチド配列を含むＰＣＲプライマー、制限部位、制限部位を保護するための隣接配列を、ｓｃＦｖクローンのＶＨまたはＶＬ配列を増幅するために使用することができる。当業者に知られているクローン技法を利用し、ＰＣＲ増幅したＶＨドメインを、重鎖の定常領域、例えばヒトガンマ４定常領域を発現するベクターにクローン化することができ、ＰＣＲ増幅したＶＬドメインを、軽鎖の定常領域、例えばヒトカッパまたはラムダ定常領域を発現するベクターにクローン化することができる。ＶＨまたはＶＬドメインを発現するためのベクターは、ＥＦ−１αプロモーター、分泌シグナル、可変ドメインに対するクローン部位、定常ドメイン、およびネオマイシン等の選択マーカーを含むことができる。ＶＨおよびＶＬドメインを、必要な定常領域を発現する１つのベクターにクローン化することもできる。次に、重鎖変換ベクターおよび軽鎖変換ベクターを、当業者に知られている技法を使用して、全長抗体、例えばＩｇＧ、を発現する安定なまたは一過性の細胞系を生成するために細胞系へ同時形質移入する。
【０２２４】
ＤＮＡを、例えば、相同マウス配列の代わりにヒト重鎖および軽鎖の定常ドメインのためのコード配列で置換することによって（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１（１９８４））、または非免疫グロブリンポリペプチドに対するコード配列のすべてまたは一部に免疫グロブリンのコード配列を共有結合的に連結させることによって、修飾することができる。
【０２２５】
５．５．キメラ抗体
本明細書の抗ＩＣＯＳ抗体は、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来する、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一または相同であり、一方、この（これらの）鎖の別の部分が、別の種に由来する、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一または相同であるキメラ抗体（免疫グロブリン）、ならびに、所望の生物活性を示す限りにおいて、かかる抗体の断片を、特異的に含む（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５（１９８４））。本明細書の対象のキメラ抗体は、  非ヒト霊長類に由来する可変ドメイン抗原結合配列（例えば、ヒヒ、アカゲザル、またはカニクイザル等の旧世界ザル）およびヒト定常領域配列を含む「霊長類化（ｐｒｉｍａｔｉｚｅｄ）」した抗体を含む（米国特許第５，６９３，７８０号）。
【０２２６】
５．６．変化した／変異体抗体
本明細書に記載する組成物および方法の抗ＩＣＯＳ抗体は、変異体抗体であることができる。本明細書で使用する「抗体変異体」または「変化した抗体」は、抗ＩＣＯＳ抗体のアミノ酸配列の変異を指し、抗ＩＣＯＳ抗体のアミノ酸残基の１つ以上が修飾されたものである。抗ＩＣＯＳ抗体のアミノ酸配列の修飾は、抗原に対する抗体の親和性または結合活性を改善することができる配列の修飾、および／またはエフェクター機能を改善することができる抗体のＦｃ部分の修飾を含む。
【０２２７】
したがって本開示は、本明細書に開示する増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体、ならびに変化したヒトＩＣＯＳ結合特徴、例えば変化した会合定数ｋＯＮ、解離定数ｋＯＦＦ、および／または平衡定数または結合親和性、ＫＤを示すものを含むがこれらに限定されないその抗体の変化した／変異した誘導体に関する。ある実施形態において、ヒトＩＣＯＳに対する本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体またはその変化した／変異した誘導体のＫＤ、は、約１０−６Ｍ、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、または１０−９Ｍ以下であることができる。本開示の抗体、またはその変化した／変異した誘導体のかかる結合特性の測定に適した方法および試薬は、当該技術において知られており、および／または市販されている（上記および例えばそれぞれが参照によってすべてが組み込まれている米国特許第６，８４９，４２５号、米国特許第６，６３２，９２６号、米国特許第６，２９４，３９１号、および米国特許第６，１４３，５７４号）。さらに、かかる動態分析用の機材およびソフトウェアは、市販されている（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ａ１００、およびＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）２０００機器、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）。
【０２２８】
修飾を、任意の既知の抗ＩＣＯＳ抗体または本明細書に記載する同定された抗ＩＣＯＳ抗体に作製することができる。かかる変化した抗体は、必ず１００％未満の既知の抗ＩＣＯＳ抗体との配列同一性または類似度を有する。一例として、変化した抗体は、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖または軽鎖可変ドメインのいずれかのアミノ酸配列と約２５％〜約９５％同一または同等の範囲内であるアミノ酸配列を有することができる。変化した抗体は、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖または軽鎖可変ドメインのいずれかのアミノ酸配列と少なくとも２５％、３５％、４５％、５５％、６５％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％のアミノ酸配列同一性または類似度を有するアミノ酸配列を有することができる。別の実施形態において、変化した抗体は、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３のアミノ酸配列と少なくとも２５％、３５％、４５％、５５％、６５％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％のアミノ酸配列同一性または類似度を有するアミノ酸配列を含むことができる。一実施形態において、変化した抗体は、ヒトＩＣＯＳ結合能力を維持することができる。ある実施形態において、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくともまたは約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれを超える割合で同一であるＶＨを含むことができる。
【０２２９】
別の実施形態において、変化した抗体は、本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、またはＣＤＲ３のアミノ酸  配列と少なくとも２５％、３５％、４５％、５５％、６５％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％のアミノ酸配列同一性または類似度を有するアミノ酸配列を含むことができる。ある実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体は、配列番号２のアミノ酸配列と少なくともまたは約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれを超える割合で同一であるＶＬを含むことができる。
【０２３０】
配列に関して同一性または類似度を、必要であれば、最大配列同一性パーセントを達成するために、配列を整列し、ギャップを導入したあと、抗ＩＣＯＳ抗体残基と同一（すなわち、同じ残基）または同様（すなわち、共通の側鎖性質を基にした同じ群からのアミノ酸残基、下記を参照）である候補の配列のアミノ酸残基の割合として本明細書で定義する。Ｎ末端、Ｃ末端、または可変ドメインの外側の抗体配列への内部伸張、欠失もしくは挿入のいずれも、配列同一性または類似度に影響するとして解釈されるべきではない。
【０２３１】
当該技術において知られている「％同一性」は、ポリヌクレオチドまたはポリペプチドの配列を比較することによって測定される２つのポリヌクレオチドまたは２つのポリペプチド間の関係の尺度である。一般的に、比較される２つの配列を、配列間の最大の相関を得るために整列する。２つの配列の整列を、検査し、２つの配列間のアミノ酸またはヌクレオチドが完全に一致する位置の数を測定し、整列の全体の長さでわり、１００をかけることで、％同一性の数値を得る。この％同一性の数値は、比較する配列の全長にわたって測定してよく、これは同じまたは非常に似た長さであり、非常に相同的な配列に対して特に適しており、または、より短い限定された長さにわたって測定してもよく、これは不均等な長さ、もしくは相同性の低いレベルを有する配列により適している。
【０２３２】
例えば、配列を、「．ａｌｎ」の拡張子のファイルを生成するＵｎｉｘ下のソフトウェアｃｌｕｓｔａｌｗを用いて整列することができ、次にこのファイルを、．ａｌｎファイルを開く、Ｂｉｏｅｄｉｔプログラムにインポートすることができる（Ｈａｌｌ，Ｔ．Ａ．１９９９，ＢｉｏＥｄｉｔ：ａ  ｕｓｅｒ−ｆｒｉｅｎｄｌｙ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  ｅｄｉｔｏｒ  ａｎｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｐｒｏｇｒａｍ  ｆｏｒ  Ｗｉｎｄｏｗｓ  ９５／９８／ＮＴ．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．４１：９５−９８）。Ｂｉｏｅｄｉｔウィンドウで、個々の配列（一度に２つ）およびそれらの整列を選択することができる。この方法は、全体の配列の比較を可能にする。
【０２３３】
２つ以上の配列の同一性を比較する方法は、当該技術においてよく知られている。したがって、例えばプログラムは、Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐａｃｋａｇｅ，  ｖｅｒｓｉｏｎ  ９．１で入手可能である（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡより入手可能、Ｄｅｖｅｒｅｕｘ  Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１２：３８７-３９５，１９８４）。２つの配列間の同一性パーセントの測定を、数学アルゴリズムを使用して達成することができる。例えば、ＢＥＳＴＦＩＴおよびＧＡＰプログラムを、２つのポリヌクレオチド間の％同一性および２つのポリペプチド配列間の％同一性を測定するために使用することができる。ＢＥＳＴＦＩＴは、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔｅｒｍａｎの「局部相同性」アルゴリズムを使用し（Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃｓ，２：４８２-４８９，１９８１）、２つの配列間の類似度の最も良い単一領域を見出す。ＢＥＳＴＦＩＴは、長さが似ていない２つのポリヌクレオチドまたは２つのポリペプチド配列を比較することにより適しており、このプログラムは短い方の配列が長い方の一部を表すと仮定する。相対的に、ＧＡＰは、ＮｅｄｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈのアルゴリズムによって「最大の類似度」を見出し、２つの配列を整列する（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，４８：４４３-３５４，１９７０）。ＧＡＰは、およそ同じ長さである配列を比較することにより適しており、整列は、全長に対して予期される。好ましくは、それぞれのプログラムで使用する「Ｇａｐ  Ｗｅｉｇｈｔ」および「Ｌｅｎｇｔｈ  Ｗｅｉｇｈｔ」のパラメータは、ポリヌクレオチドに対してそれぞれ５０および３であり、ポリペプチドに対して１２および４である。好ましくは、比較される２つの配列を最適に配列する場合、％同一性および類似度を、測定する。
【０２３４】
配列間の同一性および／または類似度を測定するための他のプログラムも、当該技術、例えばプログラムのＢＬＡＳＴファミリー（Ｋａｒｌｉｎ  ＆  Ａｌｔｓｃｈｕｌ，１９９０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８７：２２６４−２２６８、Ｋａｒｌｉｎ  ＆  Ａｌｔｓｃｈｕｌ，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：５８７３−５８７７で修正され、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢ），Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ，ＵＳＡより入手可能であり、ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖのＮＣＢＩのホームページ上でアクセス可能である）において知られている。これらのプログラムは、２つの配列の比較のために領された数学アルゴリズムの限定されない例である。かかるアルゴリズムは、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．，２１５：４０３−４１０のＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラムに組み込まれる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索を、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体の場合、すべてまたは一部をコードする核酸分子と相同であるヌクレオチド配列を得るために、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワード長＝１２、を用いて実施することができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索を、本開示のタンパク質分子と相同であるアミノ酸配列を得るために、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３、を用いて実施することができる。比較目的のためギャップのある整列を得るために、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴをＡｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，２５：３３８９−３４０２に記載されるように利用できる。ＰＳＩ−Ｂｌａｓｔも、分子間の距離関係を検知する反復検索を実施するために使用することができる（同上）。ＢＬＡＳＴ、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴ、およびＰＳＩ−Ｂｌａｓｔプログラムを利用する際、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメータを使用することができる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照されたい。
【０２３５】
当該技術において知られている配列間の同一性および／または類似度を測定するためのプログラムの別の限定されない例は、ＦＡＳＴＡである（Ｐｅａｒｓｏｎ  Ｗ．Ｒ．ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ  Ｄ．Ｊ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５：２４４４-２４４８，１９８８，Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐａｃｋａｇｅの一部として入手可能）。好ましくは、ＢＬＯＳＵＭ６２アミノ酸置換マトリックス（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ  Ｓ．ａｎｄ  Ｈｅｎｉｋｏｆｆ  Ｊ．Ｇ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：１０９１５-１０９１９，１９９２）を、ヌクレオチド配列を、比較する前にアミノ酸配列へ先ず翻訳する場合を含む、ポリペプチド配列の比較に使用する。
【０２３６】
アミノ酸配列間の同一性および／または類似度を測定するための当該技術において知られているプログラムのさらに別の限定されない例は、プログラムのデフォルトアルゴリズムおよびパラメータ設定、ｂｌｏｓｕｍ６２、ｇａｐ  ｗｅｉｇｈｔ  ８、ｌｅｎｇｔｈ  ｗｅｉｇｈｔ  ２を用いて利用するＳｅｑＷｅｂソフトウェア（ａ  ｗｅｂ−ｂａｓｅｄ  ｉｎｔｅｒｆａｃｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  ＧＣＧ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｐａｃｋａｇｅ：Ｇａｐ  ｐｒｏｇｒａｍ）である。
【０２３７】
２つの配列間の同一性パーセントは、ギャップの許可有りまたは無しで、上記と似た技法を使用して測定することができる。同一性パーセントを計算する際、典型的に完全一致を数える。
【０２３８】
好ましくは、ＢＥＳＴＦＩＴプログラムを、クエリーおよび参照配列を最適に整列し、ならびにプログラムのパラメータをデフォルト値で設定して、本開示のポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列に関してクエリーポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列の％同一性を測定するために使用する。
【０２３９】
変化した抗体を生成するために、１つ以上のアミノ酸変化（例えば、置換）を種依存的な抗体の１つ以上の超可変領域に導入する。これらの結果が、二次哺乳類種の抗原に対する抗体変異体の結合親和性の改善を生じる場合、フレームワーク領域の残基の１つ以上の変化（例えば、置換）を抗ＩＣＯＳ抗体に導入することもできる。修飾するためのフレームワーク領域の残基の例は、抗原に直接非共有結合的に結合する（Ａｍｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３３：７４７−７５３（１９８６））、ＣＤＲの高次構造と相互作用／に影響する（Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１−９１７（１９８７））、および／またはＶＬ−ＶＨ界面に関与する（ＥＰ２３９  ４００Ｂ１）ものを含む。ある実施形態において、１つ以上のかかるフレームワーク領域の残基の修飾は、二次哺乳類種の抗原に対する抗体の結合親和性の増強を生じる。例えば、約１〜約５つのフレームワーク残基を、本開示の本実施形態で変化させることができる。場合によっては、超可変領域の残基が１つも変化されない場合でも、これは、前臨床試験で使用するために適している抗体変異体を産生するために十分であり得る。しかし、普段は、変化した抗体は、追加的な超可変領域の変化を含むであろう。
【０２４０】
特に二次哺乳類種の抗原に対する抗ＩＣＯＳ抗体の開始結合親和性がかかる無作為に産生された、変化した抗体が容易にスクリーニングすることができるようである場合、変化した超可変領域の残基を、無作為に変更することができる。
【０２４１】
かかる変化した抗体を生成するための有用な一手順を、「アラニンスキャンニング変異原性」と称する（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５（１９８９））。ここで、１つ以上の超可変領域の残基を、二次哺乳類種の抗原とアミノ酸の相互作用に影響するため、アラニンまたはポリアラニン残基で置き換える。次に、置換に対して機能感受性を証明するそれらの超可変領域の残基を、置換の部位で、またはその部位に対する追加または他の突然変異を導入することによって改良する。したがって、アミノ酸配列変異を導入するための部位が既定されているが、突然変異自体の性質は、既定される必要はない。このように産生されたＡｌａ変異体を、本明細書に記載されるようにそれらの生物活性に対してスクリーニングする。
【０２４２】
かかる変化した抗体を生成するための別の手順は、ファージディスプレイを使用した親和性成熟が関与する（Ｈａｗｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２５４：８８９−８９６（１９９２）およびＬｏｗｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０（４５）：１０８３２−１０８３７（１９９１））。簡潔に、いくつかの超可変領域の部位（例えば、６〜７部位）を、各部位ですべての可能なアミノ酸置換を生成するために突然変異させる。こうして生成させた抗体変異体を、したがって、各粒子内にパッケージされたＭ１３の遺伝子ＩＩＩ産物に対する融合として糸状ファージ粒子から一価様式で提示される。ファージ表示変異体を、次に本明細書に開示するそれらの生物活性に対してスクリーニングする（例えば、結合親和性）。
【０２４３】
抗体配列の突然変異は、置換、内部欠失を含む欠失、融合タンパク質を産生する付加を含む付加、またはアミノ酸配列内および／またはそれに隣接するアミノ酸残基の保存置換を含むことができるが、それは「サイレント」変化を引き起こすため、その変化は、機能的に同等の抗ＩＣＯＳ抗体を産生する。保存アミノ酸置換を、極性、電荷、溶解性、疎水性、親水性、および／または関与する残基の両親媒性質における類似度に基づいて作製することができる。例えば、非極性（疎水性）アミノ酸は、アラニン、ロイシン、イソロイシン、バリン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、およびメチオニンを含み、極性中性アミノ酸は、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、およびグルタミンを含み、正電荷を持つ（塩基性）アミノ酸は、アルギニン、リジン、およびヒスチジンを含み、負の電荷を持つ（酸性）アミノ酸は、アスパラギン酸およびグルタミン酸を含む。さらに、グリシンおよびプロリンは、鎖配向に影響することができる残基である。非保存置換は、これらの種類のうちの１つのメンバーと別の種類のメンバーとを交換することを必要とするであろう。さらに、必要であれば、非古典的なアミノ酸または化学的なアミノ酸類似体を、置換または抗体配列の付加として導入することができる。非古典的なアミノ酸は、一般的なアミノ酸のＤ異性体、α−アミノイソ酪酸、４−アミノ酪酸、Ａｂｕ、２−アミノ酪酸、γ−Ａｂｕ、ε−Ａｈｘ、６−アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２−アミノイソ酪酸、３−アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコシン、シトルリン、システイン酸、ｔ−ブチルグリシン、ｔ−ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、β−アラニン、フルオロアミノ酸、一般的に、β−メチルアミノ酸、Ｃα−メチルアミノ酸、Ｎα−メチルアミノ酸、およびアミノ酸類似体等の、デザイナーアミノ酸を含むがこれらに限定されない。
【０２４４】
別の実施形態において、修飾に対して選択した部位を、ファージディスプレイを使用して親和性成熟する（上記参照）。
【０２４５】
当該技術において知られている変異誘発の任意の技法を、抗体配列にアミノ酸置換を作製するため、またはさらなる操作を容易にするために、制限部位を作製する／除去するために、ＤＮＡ配列の個々のヌクレオチドを修飾するために使用することができる。かかる技法は、化学的な変異誘発、インビトロ部位特異的な変異誘発（Ｋｕｎｋｅｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：４８８（１９８５）、Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏｎ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５３：６５５１（１９７８））、オリゴヌクレオチド指定変異誘発（Ｓｍｉｔｈ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．，１９：４２３−４６３（１９８５）、Ｈｉｌｌｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１５５：５５８−５６８（１９８７））、ＰＣＲベース重複伸張（Ｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ，７７：５１−５９（１９８９））、ＰＣＲベースメガプライマー変異誘発（Ｓａｒｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，８：４０４−４０７（１９９０））等を含むがこれらに限定されない。修飾を、二本鎖ジデオキシＤＮＡ配列によって確認することができる。
【０２４６】
本開示のある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を、融合タンパク質、すなわち異種性タンパク質、ポリペプチドまたはペプチドと融合した抗体、またはその断片を産生するために修飾することができる。ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体の一部と融合したタンパク質は、抗体指向性酵素プロドラッグ治療（ＡＤＥＰＴ）の酵素成分である。抗ＩＣＯＳ抗体を用いて融合タンパク質として操作され得る他のタンパク質またはポリペプチドの例は、リシン、アブリン、リボヌクレアーゼ、デオキシリボヌクレアーゼＩ、ブドウ球菌エンテロトキシンＡ、ヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、ゲロニン、ジフテリア毒素、緑膿菌外毒素、および緑膿菌内毒素等の、毒素を含むがこれらに限定されない。例えばＰａｓｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，４７：６４１（１９８６）、およびＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ，４４：４３（１９９４）を参照されたい。使用することができる酵素的に活発な毒素およびその断片は、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（緑膿菌から）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、αサルシン、シナアブラギリタンパク質、ジアンチンタンパク質、ヨウシュヤマゴボウタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、ニガウリ阻害剤、クルシン、クロチン、サボンソウ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、およびトリコテシンを含む。例えば、１９９３年、１０月２８日に公開されたＷＯ第９３／２１２３２号を参照されたい。
【０２４７】
追加融合タンパク質を、遺伝子シャフリング、モチーフシャフリング、エクソンシャフリング、および／またはコドンシャフリング（総括して「ＤＮＡシャフリング」と称する）の技法を介して生成することができる。ＤＮＡシャフリングを、抗ＩＣＯＳ抗体またはその断片（例えば、高い親和性および低い解離速度を含む抗体またはその断片）の活性を変化させるために利用することができる。概略は、米国特許第  ５，６０５，７９３号、第５，８１１，２３８号、第５，８３０，７２１号、第５，８３４，２５２号、および第５，８３７，４５８号、およびＰａｔｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，８：７２４−３３；Ｈａｒａｙａｍａ，１９９８，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６（２）：７６−８２；Ｈａｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２８７：２６５−７６、およびＬｏｒｅｎｚｏ  ａｎｄ  Ｂｌａｓｃｏ，１９９８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ２４（２）：３０８−３１３（これらの特許および文献のそれぞれは、すべてが本明細書に参照によって組み込まれる）を参照されたい。本明細書に参照によってすべてが組み込まれている、すべてＬｅｄｂｅｔｔｅｒらによる、米国公開第２００３０１１８５９２号、米国公開第２００３３０１３３９３９号、およびＰＣＴ公開ＷＯ第０２／０５６９１０号に記載されるように、抗体は、さらに結合ドメイン免疫グロブリン融合タンパク質であり得る。
【０２４８】
５．７．ドメイン抗体
本開示の組成物および方法の抗ＩＣＯＳ抗体は、ドメイン抗体、例えばヒト抗体の重鎖（ＶＨ）または軽鎖（ＶＬ）の可変領域に対応する、抗体の小さな機能結合単位を含む抗体であることができる。ドメイン抗体の例は、治療標的に対して特異的であるＤｏｍａｎｔｉｓ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫ）およびＤｏｍａｎｔｉｓ  Ｉｎｃ．（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ，ＵＳＡ）から入手可能であるものを含むがこれらに限定されない（例えば、ＷＯ第０４／０５８８２１号、ＷＯ第０４／００３０１９号、米国特許第６，２９１，１５８号、第６，５８２，９１５号、第６，６９６，２４５号、および第６，５９３，０８１号を参照されたい）。商用のドメイン抗体のライブラリーを、抗ＩＣＯＳドメイン抗体を同定するために使用することができる。ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳ機能結合単位およびＦｃガンマ受容体の機能結合単位を含む。
【０２４９】
一実施形態において、抗ＩＣＯＳドメイン抗体は、ＪＭａｂ−１３６モノクローナル抗体の重鎖または軽鎖のＣＤＲのうちのいずれか１つまたはそれらの任意の組み合わせを含むことができる。
【０２５０】
別の実施形態において、抗ＩＣＯＳドメイン抗体は、ＪＭａｂ−１３６モノクローナル抗体の重鎖または軽鎖の可変領域によって含まれたＣＤＲの任意の組み合わせと共にＪＭａｂ−１３６のＶＨ  ＣＤＲ３を含むことができる。抗ＩＣＯＳドメイン抗体は、ＪＭａｂ−１３６モノクローナル抗体の重鎖または軽鎖の可変領域によって含まれたＣＤＲの任意の組み合わせと共にＪＭａｂ−１３６のＶＫ  ＣＤＲ３も含むことができる。
【０２５１】
さらに別の実施形態において、抗ＩＣＯＳドメイン抗体は、ＪＭａｂ−１３６のＶＨ  ＣＤＲ３  を含むことができる。抗ＩＣＯＳドメイン抗体は、ＪＭａｂ−１３６のＶＫ  ＣＤＲ３もさらに含むことができる。
【０２５２】
５．８．二特異性抗体
本開示のある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は「二特異性抗体」である。「二特異性抗体」という用語は、同じポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬ）において軽鎖可変領域（ＶＬ）と結合した重鎖可変領域（ＶＨ）を含む断片の２つの抗原結合部位を含む小さい抗体の断片を指す。同じ鎖において２つのドメイン間で組み合わせることを可能にするには短すぎるリンカーを使用して、そのドメインは、強制的に別の鎖の相補ドメインと組み合わせられ、２つの抗原結合部位を作製する。二特異性抗体は、例えば、ＥＰ第４０４，０９７号、ＷＯ第９３／１１１６１号、およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）により詳しく記載される。
【０２５３】
５．９．ワクシボディ
本開示のある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体はワクシボディである。ワクシボディは、二量体のポリペプチドである。ワクシボディの各単量体は、二次ｓｃＦｖに対してヒンジ領域およびＣγ３ドメインを介して結合した、ＡＰＣ上の表面分子に対する特異性を含むｓｃＦｖからなる。本開示の他の実施形態において、ｓｃＦｖの１つとして抗ＩＣＯＳ抗体断片を含有するワクシボディを、破壊されるＩＣＯＳを発現する細胞およびＡＤＣＣを媒介するエフェクター細胞を並置するために使用することができる。例えば、Ｂｏｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，米国特許出願公開第２００４０２５３２３８号を参照されたい。
【０２５４】
５．１０．直線状抗体
本開示のある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は直線状抗体である。直線状抗体は、抗原結合領域の一対を形成する縦列Ｆｄ断片（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）の一対を含む。直線状抗体は、二重特異性または単一特異性であることができる。Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．，８（１０）：１０５７−１０６２（１９９５）を参照されたい。
【０２５５】
５．１１．親抗体
本開示のある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は親抗体である。「親抗体」は、本明細書に開示する変化した／変異した抗体と比較して、その１つ以上の超可変領域内またはそれに隣接するアミノ酸残基の１つ以上が欠乏することができる、または欠損することができるアミノ酸配列を含む抗体である。したがって、親抗体は、本明細書に開示する抗体変異体の対応する超可変領域より短い超可変領域を有することができる。親ポリペプチドは、天然抗体配列（すなわち、自然発生的な対立遺伝子変異型を含む自然発生）または自然発生的な配列の既存のアミノ酸配列の修飾を含む（他の挿入、欠失、および／または置換等の）抗体配列を含むことができる。親抗体は、ヒト化抗体またはヒト抗体であることができる。
【０２５６】
５．１２．抗体断片
「抗体断片」は、全長抗体の一部、一般的にはその抗原結合領域または可変領域を含む。抗体断片の例は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、およびＦｖ  断片；二特異性抗体；直線状抗体；一本鎖抗体分子；および抗体断片から形成された多特異的な抗体を含む。
【０２５７】
伝統的に、これらの断片は、無傷の抗体のタンパク質消化を通して派生した（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，２４：１０７−１１７（１９９２）、およびＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１（１９８５）を参照）。しかし、これらの断片を、現在では組換え宿主細胞によって直接産生することができる。例えば、抗体断片を、上記で論じた抗体ファージライラリーから単離することができる。Ｆａｂ’−ＳＨ  断片を、大腸菌から直接回収し、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成するために化学的にカップリングすることもできる（Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：１６３−１６７（１９９２））。別のアプローチによると、Ｆ（ａｂ’）２断片を、組換え宿主細胞培養から直接単離することができる。抗体断片の産生に対する他の技法は、当業者に理解されるであろう。他の実施形態において、選択する抗体は、一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。例えば、ＷＯ第９３／１６１８５号を参照されたい。ある実施形態において、抗体は、Ｆａｂ断片ではない。
【０２５８】
５．１３．二重特異性抗体
二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープのための結合特異性を有する抗体である。代表的な二重特異性抗体は、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の表面マーカーの２つの異なるエピトープに結合することができる。他のかかる抗体は、第一のＩＣＯＳを発現するＴ細胞マーカーと結合し、第二のＩＣＯＳを発現するＴ細胞の表面マーカーとさらに結合することができる。抗ＩＣＯＳを発現するＴ細胞のマーカー結合アームは、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞へ細胞防御メカニズムを集中せるために、Ｔ細胞受容体分子（例えば、ＣＤ２またはＣＤ３）、またはＩｇＧ（ＦｃγＲ）に対するＦｃ受容体等の白血球上でトリガー分子と結合するアームとも組み合わさることができる。二重特異性抗体は、細胞傷害性薬物を、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞に局部集中するためにも使用されることができる。これらの抗体は、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞結合アームおよび細胞傷害性薬物を結合するアームを持つ（例えばサポリン、抗インターフェロン−α、ビンカアルカロイド、リシンＡ鎖、メトトレキサート、または放射性同位元素ハプテン）。二重特異性抗体は、全長抗体または抗体断片として調合されることができる（例えば、Ｆ（ａｂ′）２二重特異性抗体）。
【０２５９】
二重特異性抗体の作製方法は、当業者に知られている。（例えば、Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３０５：５３７−５３９（１９８３）、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１０：３６５５−３６５９（１９９１）、Ｓｕｒｅｓｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１２１：２１０（１９８６）、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８（５）：１５４７−１５５３（１９９２）、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８（１９９３）、Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８（１９９４）、米国特許第４，４７４，８９３号、第４，７１４，６８１号、第４，９２５，６４８号、第５，５７３，９２０号、第５，６０１，８１号、第９５，７３１，１６８号、第４，６７６，９８０号、および第４，６７６，９８０号、ＷＯ第９４／０４６９０号、ＷＯ第９１／００３６０号、ＷＯ第９２／２００３７３号、ＷＯ第９３／１７７１５号、ＷＯ第９２／０８８０２号、およびＥＰ０３０８９。）
一実施形態において、本開示の組成物および方法の抗ＩＣＯＳ抗体は、二重特異性であり、抗ＩＣＯＳ抗体はヒトまたはヒト化であることができ、ヒトＩＣＯＳおよびＴ細胞上のエピトープに対する特異性を有することができるか、または例えば、細胞死を引き起こす単球／マクロファージおよび／またはナチュラルキラー細胞等のヒトエフェクター細胞と結合することができる。
【０２６０】
５．１４．可変Ｆｃ領域
本開示は、変異Ｆｃ領域を含むタンパク質の形成を提供する。すなわち、非自然発生的Ｆｃ領域、例えば１つ以上の非自然発生的アミノ酸残基を含むＦｃ領域である。また、本開示の変異Ｆｃ領域によって包含されるものは、アミノ酸欠失、付加、および／または修飾を含むＦｃ領域である。
【０２６１】
本明細書に使用するＦｃ領域が、第一の定常領域の免疫グロブリンのドメインを除外する抗体の定常領域を含むポリペプチドを含むことが理解されるであろう。したがってＦｃは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＧの最後の２つの定常領域の免疫グロブリンドメイン、ＩｇＥおよびＩｇＭの最後の３つの定常領域の免疫グロブリンドメイン、およびこれらのドメインに対する可動性のヒンジのＮ末端を指す。ＩｇＡおよびＩｇＭに対して、ＦｃはＪ鎖を含むことができる。ＩｇＧに対して、Ｆｃは免疫グロブリンドメインＣガンマ２およびＣガンマ３（Ｃγ２およびＣγ３）ならびにＣガンマ１（Ｃγ１）とＣガンマ２（Ｃγ２）との間のヒンジを含む。Ｆｃ領域の境界は異なることができるが、ヒトＩｇＧ重鎖のＦｃ領域は大抵、Ｃ２２６またはＰ２３０からそのカルボキシル末端までの残基を含むものと定義され、番号付けは、Ｋａｂａｔら（１９９１，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ９１−３２４２，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ，ＶＡ）に記載のＥＵインデックスに従う。「Ｋａｂａｔに記載のＥＵインデックス」は、上記のＫａｂａｔらに記載されるヒトＩｇＧ１ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。Ｆｃは、この領域単独、または抗体、抗体の断片、もしくはＦｃ融合タンパク質と関連したこの領域、を指すことができる。Ｆｃ変異タンパク質は、抗体、Ｆｃ融合、またはＦｃの非自然発生的な変異である変異Ｆｃ領域を含むタンパク質を含むがこれに限定されないＦｃ領域を含む任意のタンパク質もしくはタンパク質ドメインであることができる。注釈：多型は、Ｋａｂａｔ２７０、２７２、３１２、３１５、３５６、および３５８を含むがこれらに限定されない、多くのＦｃ位置において認められており、したがって提示された配列と先行技術における配列との間にわずかな差異が存在する可能性がある。
【０２６２】
本開示は、比較可能な分子（例えば、野生型Ｆｃ領域を有することを除いて同じアミノ酸配列を有するタンパク質）と比べてＦｃリガンド（例えば、Ｆｃ受容体、Ｃ１ｑ）に対する変化した結合性質を有するＦｃ変異タンパク質を包含する。結合性質の例は、結合特異性、平衡解離定数（ＫＤ）、解離および会合速度（それぞれｋｏｆｆおよびｋｏｎ）、結合親和性および／または結合活性を含むがこれらに限定されない。低ＫＤを含む結合分子（例えば、抗体等のＦｃ変異タンパク質）が高ＫＤを含む結合分子より好ましいことが一般的に理解される。しかし、場合によっては、ｋｏｎまたはｋｏｆｆ値は、ＫＤ値よりも関係性がある可能性がある。当業者は、どの動態学的パラメータがある抗体の使用に対して最も重要であるかを決定することができる。
【０２６３】
Ｆｃドメインのリガンドに対するＦｃドメインの親和性および結合性質を、平衡方法（例えば、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、または放射免疫アッセイ（ＲＩＡ））、または動態学的（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析）、および間接的結合アッセイ、競合阻害アッセイ、蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）、ゲル電気泳動およびクロマトグラフィー（例えば、ゲルろ過）等の他の方法を含むがこれらに限定されない、Ｆｃ−ＦｃγＲの相互作用、すなわちＦｃγＲとＦｃ領域との特異的な結合を測定するための当該技術において知られている各種のインビトロアッセイ方法（生化学的または免疫学的ベースのアッセイ）によって、測定することができる。これらのおよび他の方法は、検査されている１つ以上の構成要素の標識を利用する、および／または発色性、蛍光、発光、または同位体標識を含むがこれらに限定されない各種の検出方法を利用することができる。結合親和性および動態学的の詳細説明を、抗体免疫原の相互作用に集中するＰａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，ｅｄ．，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ  Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ−Ｒａｖｅｎ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（１９９９）で見出すことができる。
【０２６４】
一実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子と比べて１つ以上のＦｃリガンドとの結合が増強した。別の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子の親和性よりも、少なくとも２倍、または少なくとも３倍、または少なくとも５倍、または少なくとも７倍、または少なくとも１０倍、または少なくとも２０倍、または少なくとも３０倍、または少なくとも４０倍、または少なくとも５０倍、または少なくとも６０倍、または少なくとも７０倍、または少なくとも８０倍、または少なくとも９０倍、または少なくとも１００倍、または少なくとも２００倍であるＦｃリガンドの親和性を有する。特定の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、Ｆｃ受容体との結合が増強した。別の特定の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、Ｆｃ受容体ＦｃγＲＩＩＩＡとの結合が増強した。さらに別の特定の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、Ｆｃ受容体ＦｃＲｎと結合し、増強した。さらに別の特定の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子と比べてＣ１ｑとの結合が増強した。
【０２６５】
Ｆｃ領域を含むタンパク質の血清半減期は、ＦｃＲｎに対するＦｃ領域の結合親和性を増加させることによって増加することができる。一実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、同等の分子に比べて血清半減期を強化した。
【０２６６】
「抗体依存性細胞傷害」または「ＡＤＣＣ」は、ある細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、およびマクロファージ）上に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲ）と結合した分泌されたＩｇが、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が抗原を持つ標的細胞と特異的に結合し、その後に細胞毒素を用いて標的細胞を殺すことを可能にする、細胞傷害性の形成を指す。標的細胞の表面に向けた特異的な高い親和性ＩｇＧ抗体は、細胞傷害性細胞を「アーム」し、かかる死滅に対して確実に必要である。標的細胞の溶解は、細胞外であり、直接細胞と細胞の接触が必要であり、補体を含まない。抗体に加えて、抗原を持つ標的細胞と特異的に結合する能力を有するＦｃ領域を含む他のタンパク質、特にＦｃ融合タンパク質が、細胞を媒介した細胞傷害性を引き起こすことができるであろうことが検討される。簡単にするために、Ｆｃ融合タンパク質の活性から生じる細胞を媒介した細胞傷害性も、ＡＤＣＣ活性として本明細書にて称される。
【０２６７】
ＡＤＣＣによって標的細胞の溶解を媒介する任意の特定のＦｃ変異タンパク質の能力を、アッセイすることができる。ＡＤＣＣ活性を査定するために、対象のＦｃ変異タンパク質を、標的細胞の細胞溶解を生じる抗原抗体の複合体によって活性化することができる免疫エフェクター細胞と併せて、標的細胞に追加する。細胞溶解は、一般的に溶解した細胞から標識（例えば、放射性基質、蛍光染料、または天然の細胞内タンパク質）を放出することによって検出される。かかるアッセイの有用なエフェクター細胞は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む。インビトロＡＤＣＣアッセイの具体的な例は、Ｗｉｓｅｃａｒｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８５  ７９：２７７−２８２、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８７，Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ１６６：１３５１−１３６１、Ｗｉｌｋｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ２５８：１８３−１９１、Ｐａｔｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １８４：２９−３８に記載される。対象のＦｃ変異タンパク質のＡＤＣＣ活性を、インビボでも査定することができ、例えばＣｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９５：６５２−６５６に記載されるもの等の動物モデルである。
【０２６８】
一実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子と比較してＡＤＣＣ活性を増強した。特定の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子のＡＤＣＣ活性よりも少なくとも２倍、または少なくとも３倍、または少なくとも５倍、または少なくとも１０倍、または少なくとも５０倍、または少なくとも１００倍多いＡＤＣＣ活性を有する。別の特定の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、Ｆｃ受容体ＦｃγＲＩＩＩＡとの結合が増強し、比較可能な分子と比べてＡＤＣＣ活性を増強した。他の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子と比べてＡＤＣＣ活性を増強し、血清の半減期を増強した。
【０２６９】
「補体依存性細胞傷害」および「ＣＤＣ」は、補体の存在下で標的細胞を溶解することを指す。補体活性化経路は、補体系（Ｃ１ｑ）の第１の構成要素と同族の抗原と複合体を形成した分子、例えば、抗体との結合によって開始される。補体活性化を査定するために、例えばＧａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０２：１６３に記載されるＣＤＣアッセイを、実施することができる。一実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子と比べてＣＤＣ活性を増強した。特定の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子のＡＤＣＣ活性よりも少なくとも２倍、または少なくとも３倍、または少なくとも５倍、または少なくとも１０倍、または少なくとも５０倍、または少なくとも１００倍多いＣＤＣ活性を有する。他の実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、比較可能な分子と比べてＣＤＣ活性を増強し、血清の半減期を増強した。
【０２７０】
一実施形態において、本開示は組成物を提供し、Ｆｃ領域は、Ｋａｂａｔによって規定されたＥＵインデックスによって番号付けられた２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０、２４１、２４３、２４４、２４５、２４７、２５１、２５２、２５４、２５５、２５６、２６２、２６３、２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、２６９、２７９、２８０、２８４、２９２、２９６、２９７、２９８、２９９、３０５、３１３、３１６、３２５、３２６、３２７、３２８、３２９、３３０、３３２、３３３、３３４、３３９、３４１、３４３、３７０、３７３、３７８、３９２、４１６、４１９、４２１、４４０、および４４３からなる群から選択された１つ以上の位置で非自然発生的なアミノ酸残基を含む。随意に、Ｆｃ領域は、当業者に知られている追加のおよび／または別の位置に非自然発生的なアミノ酸残基を含むことができる（例えば、米国特許第５，６２４，８２１号、第６，２７７，３７５号、第６，７３７，０５６号、ＰＣＴ特許公開ＷＯ第０１／５８９５７号、ＷＯ第０２／０６９１９号、ＷＯ第０４／０１６７５０号、ＷＯ第０４／０２９２０７号、ＷＯ第０４／０３５７５２号、ＷＯ第０４／０７４４５５号、ＷＯ第０４／０９９２４９号、ＷＯ第０４／０６３３５１号、ＷＯ第０５／０７０９６３号、ＷＯ第０５／０４０２１７号、ＷＯ第０５／０９２９２５号、ＷＯ第０６／０２０１１４号）。
【０２７１】
特定の実施形態において、本開示はＦｃ変異タンパク質の組成物を提供し、Ｆｃ領域は、Ｋａｂａｔによって規定されたＥＵインデックスによって番号付けられた２３４Ｄ、２３４Ｅ、２３４Ｎ、２３４Ｑ、２３４Ｔ、２３４Ｈ、２３４Ｙ、２３４Ｉ、２３４Ｖ、２３４Ｆ、２３５Ａ、２３５Ｄ、２３５Ｒ、２３５Ｗ、２３５Ｐ、２３５Ｓ、２３５Ｎ、２３５Ｑ、２３５Ｔ、２３５Ｈ、２３５Ｙ、２３５Ｉ、２３５Ｖ、２３５Ｆ、２３６Ｅ、２３９Ｄ、２３９Ｅ、２３９Ｎ、２３９Ｑ、２３９Ｆ、２３９Ｔ、２３９Ｈ、２３９Ｙ、２４０Ｉ、２４０Ａ、２４０Ｔ、２４０Ｍ、２４１Ｗ、２４１Ｌ、２４１Ｙ、２４１Ｅ、２４１Ｒ、２４３Ｗ、２４３Ｌ、２４３Ｙ、２４３Ｒ、２４３Ｑ、２４４Ｈ、２４５Ａ、２４７Ｌ、２４７Ｖ、２４７Ｇ、２５１Ｆ、２５２Ｙ、２５４Ｔ、２５５Ｌ、２５６Ｅ、２５６Ｍ、２６２Ｉ、２６２Ａ、２６２Ｔ、２６２Ｅ、２６３Ｉ、２６３Ａ、２６３Ｔ、２６３Ｍ、２６４Ｌ、２６４Ｉ、２６４Ｗ、２６４Ｔ、２６４Ｒ、２６４Ｆ、２６４Ｍ、２６４Ｙ、２６４Ｅ、２６５Ｇ、２６５Ｎ、２６５Ｑ、２６５Ｙ、２６５Ｆ、２６５Ｖ、２６５Ｉ、２６５Ｌ、２６５Ｈ、２６５Ｔ、２６６Ｉ、２６６Ａ、２６６Ｔ、２６６Ｍ、２６７Ｑ、２６７Ｌ、２６８Ｅ、２６９Ｈ、２６９Ｙ、２６９Ｆ、２６９Ｒ、２７０Ｅ、２８０Ａ、２８４Ｍ、２９２Ｐ、２９２Ｌ、２９６Ｅ、２９６Ｑ、２９６Ｄ、２９６Ｎ、２９６Ｓ、２９６Ｔ、２９６Ｌ、２９６Ｉ、２９６Ｈ、２６９Ｇ、２９７Ｓ、２９７Ｄ、２９７Ｅ、２９８Ｈ、２９８Ｉ、２９８Ｔ、２９８Ｆ、２９９Ｉ、２９９Ｌ、２９９Ａ、２９９Ｓ、２９９Ｖ、２９９Ｈ、２９９Ｆ、２９９Ｅ、３０５Ｉ、３１３Ｆ、３１６Ｄ、３２５Ｑ、３２５Ｌ、３２５Ｉ、３２５Ｄ、３２５Ｅ、３２５Ａ、３２５Ｔ、３２５Ｖ、３２５Ｈ、３２７Ｇ、３２７Ｗ、３２７Ｎ、３２７Ｌ、３２８Ｓ、３２８Ｍ、３２８Ｄ、３２８Ｅ、３２８Ｎ、３２８Ｑ、３２８Ｆ、３２８Ｉ、３２８Ｖ、３２８Ｔ、３２８Ｈ、３２８Ａ、３２９Ｆ、３２９Ｈ、３２９Ｑ、３３０Ｋ、３３０Ｇ、３３０Ｔ、３３０Ｃ、３３０Ｌ、３３０Ｙ、３３０Ｖ、３３０Ｉ、３３０Ｆ、３３０Ｒ、３３０Ｈ、３３２Ｄ、３３２Ｓ、３３２Ｗ、３３２Ｆ、３３２Ｅ、３３２Ｎ、３３２Ｑ、３３２Ｔ、３３２Ｈ、３３２Ｙ、３３２Ａ、３３９Ｔ、３７０Ｅ、３７０Ｎ、３７８Ｄ、３９２Ｔ、３９６Ｌ、４１６Ｇ、４１９Ｈ、４２１Ｋ、４４０Ｙ、および４３４Ｗからなる群から選択された、少なくとも１つの非自然発生的なアミノ酸残基を含む。随意に、Ｆｃ領域は、当業者に知られている追加のおよび／または別の非自然発生的なアミノ酸残基を含むことができる（例えば、米国特許第５，６２４，８２１号、第６，２７７，３７５号、第６，７３７，０５６号、ＰＣＴ特許公開ＷＯ第０１／５８９５７号、ＷＯ第０２／０６９１９号、ＷＯ第０４／０１６７５０号、ＷＯ第０４／０２９２０７号、ＷＯ第０４／０３５７５２号、ＷＯ第０５／０４０２１７）。
【０２７２】
別の実施形態において、本開示はＦｃ変異タンパク質の組成物を提供し、Ｆｃ領域は、Ｋａｂａｔによって規定されたＥＵインデックスによって番号づけされた２３９、３３０、および３３２からなる群から選択された１つ以上の位置おける少なくとも１つの非自然発生的アミノ酸を含む。特定の実施形態において、本開示はＦｃ変異タンパク質製剤を提供し、Ｆｃ領域は、Ｋａｂａｔによって規定されたＥＵインデックスによって番号づけされた２３９Ｄ、３３０Ｌ、および３３２Ｅからなる群から選択された少なくとも１つの非自然発生的アミノ酸を含む。任意に、Ｆｃ領域は、Ｋａｂａｔに記載のＥＵインデックスによって番号付けられた２５２、２５４、および２５６からなる群から選択される、１つ以上の位置において追加の非自然発生的アミノ酸をさらに含むことができる。特定の実施形態において、本開示はＦｃ変異タンパク質製剤を提供し、Ｆｃ領域は、Ｋａｂａｔに記載のＥＵインデックスによって番号づけされた２３９Ｄ、３３０Ｌ、および３３２Ｅからなる群から選択された少なくとも１つの非自然発生的アミノ酸、およびＫａｂａｔによって規定されたＥＵインデックスによって番号づけされた２５２Ｙ、２５４Ｔ、および２５６Ｅからなる群から選択された１つ以上の位置の少なくとも１つの非自然発生的アミノ酸を含む。
【０２７３】
一実施形態において、本開示のＦｃ変異は、Ｇｈｅｔｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  １５：６３７−４０；Ｄｕｎｃａｎ  ｅｔ  ａｌ，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：５６３−５６４、Ｌｕｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４７：２６５７−２６６２、Ｌｕｎｄ  ｅｔ  ａｌ，１９９２，Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２９：５３−５９、Ａｌｅｇｒｅ  ｅｔ  ａｌ，１９９４，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ５７：１５３７−１５４３、Ｈｕｔｃｈｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ  ９２：１１９８０−１１９８４、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ，１９９５，Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｌｅｔｔ．４４：１１１−１１７、Ｌｕｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｆａｓｅｂ  Ｊ  ９：１１５−１１９、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ，１９９６，Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｌｅｔｔ  ５４：１０１−１０４、Ｌｕｎｄ  ｅｔ  ａｌ，１９９６，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５７：４９６３−４９６９、Ａｒｍｏｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２９：２６１３−２６２４、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ，２０００，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６４：４１７８−４１８４、Ｒｅｄｄｙ  ｅｔ  ａｌ，２０００，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６４：１９２５−１９３３、Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２００：１６−２６、Ｉｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ，２００１，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６６：２５７１−２５７５、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７６：６５９１−６６０４、Ｊｅｆｆｅｒｉｓ  ｅｔ  ａｌ，２００２，Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｌｅｔｔ  ８２：５７−６５、Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  Ｔｒａｎｓ  ３０：４８７−４９０）、米国特許第５，６２４，８２１号、第５，８８５，５７３号、第５，６７７，４２５号、第６，１６５，７４５号、第６，２７７，３７５号、第５，８６９，０４６号、第６，１２１，０２２号、第５，６２４，８２１号、第５，６４８，２６０号、第６，５２８，６２４号、第６，１９４，５５１号、第６，７３７，０５６号、第６，８２１，５０５号、第６，２７７，３７５号、米国特許公開第  ２００４／０００２５８７号およびＰＣＴ公開ＷＯ第９４／２９３５１号、ＷＯ第９９／５８５７２号、ＷＯ第００／４２０７２号、ＷＯ第０２／０６０９１９号、ＷＯ第０４／０２９２０７号、ＷＯ第０４／０９９２４９号、ＷＯ第０４／０６３３５１号に開示されるもの等の他の既知のＦｃ変異と併用することができる。また、欠失、付加、および／または修飾を含むＦｃ領域が、本開示によって包含される。Ｆｃドメインのさらなる他の修飾／置換／付加／欠失を、当業者は容易に理解するであろう。
【０２７４】
非自然発生的Ｆｃ領域を生成する方法は、当業者に知られている。例えば、アミノ酸置換および／または欠失は、部位特異的な変異誘発（Ｋｕｎｋｅｌ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：４８８−４９２  （１９８５））、ＰＣＲ変異誘発（Ｈｉｇｕｃｈｉ，  ｉｎ  “ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ｐｐ．１７７−１８３（１９９０））、およびカセット変異誘発（Ｗｅｌｌｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ３４：３１５−３２３（１９８５））を含むがこれに限定されない変異誘発の方法によって生成されることができる。好ましくは、部位特異的な変異誘発は、重複伸長ＰＣＲ方法により実施される（Ｈｉｇｕｃｈｉ，  ｉｎ  “ＰＣＲ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ＤＮＡ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ”，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐｐ．６１−７０（１９８９））。重複伸長ＰＣＲの技術（Ｈｉｇｕｃｈｉ、同上）を、任意の所望の突然変異を標的配列（出発ＤＮＡ）に導入するためにも使用することができる。例えば、重複伸長法のＰＣＲの第１回目は、２つのＰＣＲセグメント（セグメントＡおよびＢ）を産出する、外部プライマー（プライマー１）および内部変異誘発プライマー（プライマー３）による、および別に第２の外部プライマー（プライマー４）および内部プライマー（プライマー２）による標的配列の増幅を含む。その内部変異誘発プライマー（プライマー３）は、所望の突然変異を特定する標的配列に対するミスマッチを含有するように設計される。ＰＣＲの第２回目において、ＰＣＲの第１回目の生成物（セグメントＡおよびＢ）は、２つの外部プライマー（プライマー１および４）を使用してＰＣＲによって増幅される。結果として生じた全長ＰＣＲのセグメント（セグメントＣ）は、制限酵素で消化され、結果として生じた制限断片は、適切なベクターにクローン化される。変異誘発の第１段階として、出発ＤＮＡ（例えば、Ｆｃ融合タンパク質、抗体または単にＦｃ領域をコードする）は、変異誘発ベクターに操作可能にクローン化される。プライマーは、所望のアミノ酸置換を反映するように設計されている。変異Ｆｃ領域の生成に有用な他の方法は、当業者に知られている（例えば、米国特許第５，６２４，８２１号、第５，８８５，５７３号、第５，６７７，４２５号、第６，１６５，７４５号、第６，２７７，３７５号、第５，８６９，０４６号、第６，１２１，０２２号、第５，６２４，８２１号、第５，６４８，２６０号、第６，５２８，６２４号、第６，１９４，５５１号、第６，７３７，０５６号、第６，８２１，５０５号、第６，２７７，３７５号、米国特許公開第２００４／０００２５８７号およびＰＣＴ公開第ＷＯ９４／２９３５１号、第ＷＯ９９／５８５７２号、第ＷＯ００／４２０７２号、第ＷＯ０２／０６０９１９号、第ＷＯ０４／０２９２０７号、第ＷＯ０４／０９９２４９号、第ＷＯ０４／０６３３５１を参照）。
【０２７５】
いくつかの実施形態において、Ｆｃ変異タンパク質は、操作された糖型、すなわちＦｃ領域を含む分子に、共有結合している炭水化物組成を１つ以上含む。操作された糖型は、エフェクター機能の増幅または削減を含むがこれに限定されない、様々な目的で使用することができる。操作された糖型は、当業者に知られている任意の方法、例えば操作されたまたは変異発現株を使用することによって、１つ以上の酵素、例えばＤＩ  Ｎアセチルグルコサミン転移酵素ＩＩＩ（ＧｎＴＩ１１）との同時発現によって、各種生物または各種生物からの細胞系中にてＦｃ領域を含む分子を発現させることによって、またはＦｃ領域を含む分子が発現された後に炭水化物を修飾することによって、生成されることができる。操作された糖型を生成する方法は、当業者に知られており、Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ，１９９９，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  １７：１７６−１８０、Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００１７  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｅｎｇ  ７４：２８８−２９４、Ｓｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ，２００２，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７７：２６７３３−２６７４０、Ｓｈｉｎｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７８：３４６６−３４７３）米国特許第６，６０２，６８４号、米国第１０／２７７，３７０号、米国第１０／１１３，９２９号、ＰＣＴ第ＷＯ００／６１７３９Ａ１号、ＰＣＴ第ＷＯ０１／２９２２４６Ａ１号、ＰＣＴ第ＷＯ０２／３１１１４０Ａ１号、ＰＣＴ第ＷＯ０２／３０９５４Ａ１号、Ｐｏｔｅｌｌｉｇｅｎｔ（登録商標）技術（Ｂｉｏｗａ，Ｉｎｃ．、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＧｌｙｃｏＭＡｂ（登録商標）糖鎖付加技術工学（ＧＬＹＣＡＲＴ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ＡＧ、Ｚｕｒｉｃｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）に記載されるものを含むがこれに限定されない。例えば、第ＷＯ０００６１７３９号、第ＥＡ０１２２９１２５号、米国第２００３０１１５６１４号、Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，ＪＭＢ，３３６：  １２３９−４９を参照。
【０２７６】
５．１５．抗体のグリコシル化
さらに別の実施形態において、本開示と一致して利用される抗体のグリコシル化を修飾する。例えば、アグリコシル化抗体を作製することができる（すなわち、抗体は、グリコシル化を欠乏する）。グリコシル化を、例えば、標的抗原に対する抗体の親和性を増加するために、変化させることができる。かかる炭水化物の修飾を、例えば、抗体配列内のグリコシル化の１つ以上の部位を変化することによって達成することができる。例えば、１つ以上のアミノ酸置換を作製することができ、１つ以上の可変領域のフレームワークのグリコシル化部位の除去を引き起こし、その結果その部位でグリコシル化を除去する。かかるグリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を増加することができる。かかるアプローチは、米国特許第  ５，７１４，３５０号、および第６，３５０，８６１号にさらなる詳細が記載される。１つ以上のアミノ酸置換を、Ｆｃ領域に存在するグリコシル化部位の除去を引き起こすように作製することもできる（例えば、ＩｇＧのアスパラギン２９７）。さらに、アグリコシル化した抗体を、必要なグリコシル化の機構が欠乏する細菌細胞で産生することができる。
【０２７７】
抗体を、フコシル残基の縮小した量を有する低フコシル化した抗体またはバイセクティング（ｂｉｓｅｃｔｉｎｇ）ＧｌｃＮＡｃ構造が増加した抗体等のグリコシル化の変化したタイプを有するように、作製することもできる。かかる変化したグリコシル化のパターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を増加させることが証明されている。かかる炭水化物の修飾を、例えば、変化したグリコシル化機構を含む宿主細胞中にて抗体を発現させることによって達成することができる。変化したグリコシル化機構を含む細胞は、当該技術で説明され、本開示の組換え抗体を発現する宿主細胞として使用することができ、その結果変化したグリコシル化を含む抗体を産生する。例えば、それぞれが本明細書に、参照によってすべてが組み込まれるＳｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７：２６７３３−２６７４０、Ｕｍａｎａ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１７：１７６−１、ならびに米国特許ＵＳ第６，９４６，２９２号、欧州特許ＥＰ第１，１７６，１９５号、ＰＣＴ公開ＷＯ第０３／０３５８３５号、ＷＯ第９９／５４３４２号を参照されたい。
【０２７８】
変化したグリコシル化パターンを含む抗体を、それぞれが本明細書に参照によってすべてが組み込まれる米国特許ＵＳ第７０２９８７２号、米国特許ＵＳ第２００６０１４８０３５Ａ１号に記載されるように修飾したグリコシル化機構を含む下等真核生物の宿主細胞を使用して生成することもできる。
【０２７９】
５．１６．エフェクター機能の操作
例えば、Ｔ細胞を媒介した疾病を治療する際に抗体の効果を増幅するために、エフェクター機能に関して本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を修飾することが望ましい場合がある。例えば、１もしくは複数のシステイン残基を、Ｆｃ領域に導入することができ、その結果、この領域で鎖間のジスルフィド結合の形成を許す。このようにして生成したホモ二量体抗体は、内部移行能力を改善することができ、ならびに／または補体を媒介した細胞死滅、および／もしくは抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、および／もしくは抗体依存の食作用を増加する。Ｃａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．，１７６：１１９１−１１９５（１９９２）およびＳｈｏｐｅｓ，Ｂ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８：２９１８−２９２２（１９９２）を参照されたい。増強した抗腫瘍活性を含むホモ二量体抗体を、Ｗｏｌｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５３：２５６０−２５６５（１９９３）に記載されるように、ヘテロ二官能性架橋剤を使用して調製することもできる。抗体は、二重Ｆｃ領域を有する操作されたものであることもでき、その結果、増強した補体の溶解、抗体依存性の食作用および／またはＡＤＣＣ能力を有することができる。Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，３：２１９−２３０（１９８９）を参照されたい。
【０２８０】
エフェクター機能を変化させるための、抗体のＦｃ領域を操作する他の方法は、当該技術において知られている（例えば、ＦＣγＲＩＩＡに対する結合親和性と比較して、ＦｃγＲＩＩＢに対する結合親和性を増幅するため、Ｆｃ領域を変化させることを説明する、両方ともＫｏｅｎｉｇらによる、米国特許公開第２００４０１８５０４５号、およびＰＣＴ公開ＷＯ第２００４／０１６７５０号；ＡｒｍｏｕｒらのＰＣＴ公開ＷＯ第９９／５８５７２号、ＩｄｕｓｏｇｉｅらのＷＯ第９９／５１６４２号、およびＤｅｏらのＵ．Ｓ．第６，３９５，２７２号も参照；これらの開示は本明細書にすべてが参照によって組み込まれている）。ＦｃγＲＩＩＢに対する結合親和性を減少するためにＦｃ領域を修飾する方法も、当該技術において知られている（例えば開示は本明細書にすべて組み込まれている、両方ともＲａｖｅｔｃｈらの、米国特許公開第２００１００３６４５９号、およびＰＣＴ公開ＷＯ第０１／７９２９９号）。野生型のＦｃ領域と比べてＦｃγＲＩＩＩＡおよび／またはＦｃγＲＩＩＡに対する増強した結合親和性を含む変異Ｆｃ領域を有する修飾された抗体も、説明された（例えば、開示は本明細書においてすべて組み込まれる、ＳｔａｖｅｎｈａｇｅｎらのＰＣＴ公開ＷＯ第２００４／０６３３５１号）。
【０２８１】
当該技術において知られているインビトロアッセイは、本開示の組成物および方法で使用する抗ＩＣＯＳ抗体が、本明細書に記載されるもの等のＡＤＣＣ、ＣＤＣ、および／または抗体依存食作用を媒介することが可能であるか否か、測定するために使用することができる。
【０２８２】
５．１７．抗ＩＣＯＳ抗体の製造／産生
所望の抗ＩＣＯＳ抗体を操作した時点で、抗ＩＣＯＳ抗体を、抗体の大規模製造のために、当該技術においてよく知られている方法を使用して商業規模で産生することができる。例えば、これは、限定されないが、以下に記載するもの等の組換え発現システムを使用して達成することができる。抗原と特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）を、抗体の合成に対して当該技術において知られている任意の方法によって、特に、化学的な合成によって、または組換え発現技法（米国特許出願第１２／１１６，５１２号を参照）によって、産生することができる。
【０２８３】
５．１８．組換え発現システム
抗体またはその変異の組換え発現は、一般的に抗体をコードするポリヌクレオチドを含有する発現ベクターの構成を必要とする。抗体分子、または抗体の重鎖もしくは軽鎖、またはその一部をコードするポリヌクレオチドが得られた時点で、抗体分子の産生のためのベクターを、当該技術においてよく知られている技法を使用して組換えＤＮＡ技術において産生することができる。例えば、本明細書に参照によってすべてが組み込まれる、米国特許第６，３３１，４１５号を参照されたい。したがって、抗体をコードするヌクレオチド配列を含有するポリヌクレオチドを発現することによってタンパク質を調製するための方法を、本明細書に記載する。当業者によく知られている方法を、抗体をコードする配列、ならびに適切な転写および翻訳制御シグナルを含有する発現ベクターを構成するために、使用することができる。これらの方法は、例えば、インビトロ組換えＤＮＡ技法、合成技法、およびインビボ遺伝子的組換えを含む。本開示は、したがって、抗体分子、抗体の重鎖もしくは軽鎖、抗体の重鎖もしくは軽鎖可変ドメイン、またはその一部、または重鎖もしくは軽鎖ＣＤＲをコードする、プロモーターと操作可能に結合したヌクレオチド配列を含む、複製可能なベクターを提供する。かかるベクターは、抗体分子の定常領域をコードするヌクレオチド配列を含むことができ（例えば、国際公開第ＷＯ第８６／０５８０７号およびＷＯ第８９／０１０３６号、および米国特許第５，１２２，４６４号）、抗体の可変ドメインを、すべての重鎖、すべての軽鎖、またはすべての重鎖および軽鎖の両方の発現に対するかかるベクターにクローン化することができる。
【０２８４】
別の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を、抗ＩＣＯＳ抗体のすべてまたは一部を産生するために標的相同的組換えを使用して作製することができる（米国特許第６，０６３，６３０号、第６，１８７，３０５号、および第６，６９２，７３７号を参照）。ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を、抗ＩＣＯＳ抗体のすべてまたは一部を産生するために無作為の組換え技術を使用して作製することができる（米国特許第６，３６１，９７２号、第６，５２４，８１８号、第６，５４１，２２１号、および第６，６２３，９５８号を参照）。抗ＩＣＯＳ抗体を、Ｃｒｅを媒介した部位特異的な相同的組換えを使用して修飾した免疫グロブリン遺伝子座を含む細胞のゲノム配列から抗体を発現する細胞中にて産生することもできる（米国特許第６，０９１，００１号を参照）。宿主細胞系を、マウス、およびチャイニーズハムスターを含むがこれらに限定されないヒトまたは非ヒトの種類に由来することができる。ヒトまたはヒト化抗体の産生が、望ましい場合、宿主細胞系は、ヒト細胞系であるべきである。これらの方法を、抗体分子を持続的に発現する安定した細胞系を操作するために都合よく使用することができる。
【０２８５】
発現ベクターが従来の技法によって宿主細胞に移動した時点で、形質移入した細胞を次に、抗体を産生するために従来の技法によって培養する。したがって、本開示は、本開示の抗体またはその断片、またはその重鎖もしくは軽鎖、またはその一部、または本開示の一本鎖抗体をコードする、異種性プロモーターと操作可能に結合したポリヌクレオチドを含有する宿主細胞を含む。ある実施形態において、二本鎖抗体の発現に対して、重鎖および軽鎖の両方をコードするベクターを、以下の詳細のように、すべての免疫グロブリン分子の発現のために、宿主細胞で同時発現することができる。
【０２８６】
様々な宿主発現ベクターシステムを、抗ＩＣＯＳ抗体の操作および生成で使用することができる抗ＩＣＯＳ抗体およびその一部を発現するために利用することができる（例えば、米国特許第５，８０７，７１５号を参照）。例えば、ヒトサイトメガロウイルスからの主要な中間の初期遺伝子プロモーター要素等のベクターと組み合わせて、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）等の哺乳類細胞は、抗体に対して効果的な発現システムである（Ｆｏｅｃｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ，４５：１０１（１９８６）、およびＣｏｃｋｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，８：２（１９９０））。さらに、挿入した抗体配列の発現を調節する、または所望の特異的な様式で抗体遺伝子産物を修飾し、加工する宿主細胞株を選択することができる。タンパク質産物のかかる修飾（例えば、グリコシル化）および加工（例えば、切断）は、タンパク質の機能に対して重要である可能性がある。異なる宿主細胞は、タンパク質および遺伝子産物の翻訳後加工ならびに修飾に対する特徴的なおよび特異的なメカニズムを有する。適切な細胞系または宿主システムを、発現される抗体またはその一部の正確な修飾および加工を確実にするために、選択することができる。そのために、一次転写物の加工、グリコシル化、および遺伝子産物のリン酸化を適切に行うための細胞機構を持つ真核生物宿主細胞を使用することができる。かかる哺乳類宿主細胞は、ＣＨＯ、ＶＥＲＹ、ＢＨＫ、Ｈｅｌａ、ＣＯＳ、ＭＤＣＫ、２９３、３Ｔ３、Ｗ１３８、ＢＴ４８３、Ｈｓ５７８Ｔ、ＨＴＢ２、ＢＴ２ＯおよびＴ４７Ｄ、ＮＳ０（機能的な免疫グロブリン鎖を少しも内因的に産生しないマウス骨髄腫細胞系）、ＣＲＬ７Ｏ３ＯおよびＨｓＳ７８ＢｓＴ細胞を含むがこれらに限定されない。
【０２８７】
一実施形態において、ヒトリンパ球を不死化することで発生するヒト細胞系を、モノクローナルヒト抗ＩＣＯＳ抗体を組換え産生するために使用することができる。一実施形態において、ヒト細胞系ＰＥＲ．Ｃ６．（Ｃｒｕｃｅｌｌ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を、モノクローナルヒト抗ＩＣＯＳ抗体を組換え産生するために使用することができる。
【０２８８】
細菌系では、多くの発現ベクターを、発現した抗体分子の意図される使用次第で、都合よく選択することができる。例えば、多量のかかる抗体を産生する場合、抗ＩＣＯＳ抗体を含む薬学的な組成物の生成のため、容易に精製することができる高レベルの融合タンパク質産物の発現を方向付けるベクターが望ましくあり得る。かかるベクターは、抗体をコードする配列を、融合タンパク質を産生するため、ｌａｃ  Ｚコード領域とインフレームでベクターへ個々に連結することができる大腸菌発現ベクターｐＵＲ２７８（Ｒｕｔｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ，１２：１７９１（１９８３））；ｐＩＮベクター（Ｉｎｏｕｙｅ＆Ｉｎｏｕｙｅ，１９８５，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．１３：３１０１−３１０９（１９８５）、Ｖａｎ  Ｈｅｅｋｅ＆Ｓｃｈｕｓｔｅｒ，１９８９，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２４：５５０３−５５０９（１９８９））等を含むがこれに限定されない。ｐＧＥＸベクターを、グルタチオンＳ−転移酵素（ＧＳＴ）を含む融合タンパク質として、外来性ポリペプチドを発現するためにも使用することができる。一般的に、かかる融合タンパク質は可溶性であり、グルタチオンアガロース親和性マトリックスとの吸着および結合、およびそれに続く遊離グルタチオンの存在下で溶出によって、溶解した細胞から容易に精製することができる。ｐＧＥＸベクターを、クローン化した標的遺伝子産物を、ＧＳＴ部分から放出することができるように、トロンビンおよび／または因子Ｘａプロテアーゼ切断部位を発現したポリペプチドへ導入するように設計する。
【０２８９】
昆虫系で、オートグラファカルフォルニカ多角体ウイルス（ＡｃＮＰＶ）を、外来性の遺伝子を発現するためのベクターとして使用する。そのウイルスは、スポドプテラフルギペルダ細胞中で成長する。抗体をコードする配列を、そのウイルスの非必須領域（例えば、ポリヘドリン遺伝子）へ個々にクローン化し、ＡｃＮＰＶプロモーター（例えば、ポリヘドリンプロモーター）の制御下に配置することができる。
【０２９０】
哺乳類宿主細胞では、多くのウイルスベースの発現系を利用することができる。アデノウイルスを発現ベクターとして使用される場合、対象とする抗体をコードする配列をアデノウイルス転写／翻訳制御複合体、例えば、後期プロモーターおよび三者間リーダー配列と連結することができる。このキメラ遺伝子を、次に、インビトロまたはインビボ組換えによりアデノウイルスゲノムに挿入することができる。ウイルスゲノムの非必須領域（例えば、領域ＥｌまたはＥ３）への挿入は、生存可能であり、感染した宿主で抗体分子を発現する能力を持つ組換えウイルスを生じるであろう（例えば、Ｌｏｇａｎ＆Ｓｈｅｎｋ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：３５５−３５９（１９８４）を参照）。特異的な開始シグナルも、挿入した抗体をコードする配列の効率的な翻訳のために必要である。これらのシグナルは、ＡＴＧ開始コドンおよび隣接した配列を含む。さらに、開始コドンは、すべての挿入の翻訳を確かにするために、所望のコード配列の読み枠とインフレームであるべきである。これらの外因性の翻訳制御シグナルおよび開始コドンは、様々な源、天然および合成の両方であることができる。発現の効率性を、適切な転写エンハンサー要素、転写ターミネーター等を含むことによって増強することができる（例えば、Ｂｉｔｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１５３：５１−５４４（１９８７）を参照）。
【０２９１】
安定した発現を、組換えタンパク質の長期、高収率生産のために使用することができる。例えば、抗体分子を安定的に発現する細胞系を生成することができる。宿主細胞を、発現制御要素（例えば、プロモーター、エンハンサー、転写ターミネーター、ポリアデニル化部位等）、および選択可能なマーカー遺伝子を含む適切な操作したベクターで形質転換することができる。外来性ＤＮＡの導入後、細胞を、濃縮した培地に１〜２日間成長させておき、その後選択的な培地と切り替える。組換えプラスミドの選択可能なマーカーは、選択に対する耐性を与え、プラスミドを細胞の染色体に安定的に組み込んだ細胞が、成長し、順番に細胞系へクローン化し拡大することができる病巣を形成することを可能とする。抗ＩＣＯＳ抗体をコードするプラスミドを、培養の産生に対して適した任意の細胞系へ遺伝子／ｃＤＮＡを導入するために使用することができる。
【０２９２】
単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，１１：２２３（１９７７））、ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｓｚｙｂａｌｓｋａ＆Ｓｚｙｂａｌｓｋｉ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，４８：２０２（１９９２））、およびアデニンホスホリボシル転移酵素（Ｌｏｗｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，２２：８−１７（１９８０））遺伝子を含むがこれらに限定されない、多くの選択システムを使用することができ、それぞれｔｋ−、ｈｇｐｒｔ−またはａｐｒＴ−細胞に使用することができる。また、代謝拮抗薬の耐性を以下の遺伝子に対する選択の基盤として使用することができる。メトトレキサートに対して耐性を与えるｄｈｆｒ（Ｗｉｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：３５７（１９８０）、Ｏ’Ｈａｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７８：１５２７（１９８１））、ミコフェノール酸に対して耐性を与えるｇｐｔ（Ｍｕｌｌｉｇａｎ＆Ｂｅｒｇ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７８：２０７２（１９８１））、アミノグリコシドＧ−４１８に対して耐性を与えるｎｅｏ（Ｗｕ  ａｎｄ  Ｗｕ，Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ  ３：８７−９５（１９９１）、Ｔｏｌｓｔｏｓｈｅｖ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３２：５７３−５９６（１９９３）、Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６０：９２６−９３２（１９９３）、およびＭｏｒｇａｎ  ａｎｄ  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６２：１９１−２１７（１９９３）、Ｍａｙ，ＴＩＢ  ＴＥＣＨ１１（５）：ｌ５５−２  １５（１９９３））、およびハイグロマイシンに対して耐性を与えるｈｙｇｒｏ（Ｓａｎｔｅｒｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ，３０：１４７（１９８４））。組換えＤＮＡ技術の一般に当該技術において知られている方法を、所望の組換えクローンを選択するために、ルーチン的に適用され、かかる方法は、例えば、本明細書すべてが参照によって組み込まれるＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９３）、Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ（１９９０）、およびＣｈａｐｔｅｒｓ  １２  ａｎｄ  １３，Ｄｒａｃｏｐｏｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（１９９４）、Ｃｏｌｂｅｒｒｅ−Ｇａｒａｐｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１５０：１に説明される。
【０２９３】
抗体分子の発現レベルを、ベクター増幅によって増加することができる（概説については、Ｂｅｂｂｉｎｇｔｏｎ  ａｎｄ  Ｈｅｎｔｓｃｈｅｌ，Ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｖｅｃｔｏｒｓ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ｇｅｎｅ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｃｌｏｎｅｄ  ｇｅｎｅｓ  ｉｎ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ＤＮＡ  ｃｌｏｎｉｎｇ，Ｖｏｌ．３．Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８７）を参照）。抗体を発現するベクターシステムのマーカーが増幅可能である場合、宿主細胞の培養に存在する抑制剤のレベルの増加は、マーカー遺伝子のコピーの数を増加するであろう。増幅した領域は抗体遺伝子と関連するため、抗体の産生も、増加するであろう（Ｃｒｏｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，３：２５７（１９８３））。抗体発現レベルを、周囲の染色質を再構築し活発な人工的な転写ドメインの形の導入遺伝子発現を拡大する技法を含む、組換えタンパク質産生の当業者に知られている組換え方法およびツールの使用を介して増幅することができる。
【０２９４】
宿主細胞を、２つの発現ベクター、重鎖に由来するポリペプチドをコードする一次ベクターおよび軽鎖に由来するポリペプチドをコードする二次ベクターを同時に形質移入することができる。２つのベクターは、同一のまたは異なる選択可能なマーカーを含有することができる。重鎖および軽鎖ポリペプチドの両方をコードし、発現することができる単一ベクターも、使用することができる。かかる状況で、軽鎖は、毒性なしの重鎖の過剰量を防ぐために、重鎖に５’を配置すべきである（Ｐｒｏｕｄｆｏｏｔ，Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：５６２−６５（１９８６）、およびＫｏｈｌｅｒ，１９８０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：２１９７（１９８０））。重鎖および軽鎖に対するコード配列は、ｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡを含むことができる。
【０２９５】
抗体分子を組換え発現によって産生した時点で、それを、免疫グロブリン分子の精製のために、当該技術において知られている任意の方法によって、例えば、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、親和性、特に特異的な抗原タンパク質Ａまたはタンパク質Ｇに対する親和性による、およびサイジングカラムクロマトグラフィー）、遠心分離、差次的溶解性、タンパク質を精製するための他の標準技法によって、精製することができる。さらに、本開示の抗体およびその断片は、精製を容易にするために、本明細書に記載されるまたは他の当該技術において知られている異種性ポリペプチド配列を融合することができる。
【０２９６】
５．１９．抗体精製および単離
組換え技法を使用する際、抗体を、細胞膜周辺腔で細胞内産生することができる、または培地へ直接分泌することができる。抗体を細胞内産生する場合、第１ステップとして、微粒子破片、宿主細胞または溶解した断片のいずれかを、例えば、遠心分離または限外ろ過によって取り除く。Ｃａｒｔｅｒら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：１６３−１６７（１９９２）は、大腸菌の細胞膜周辺腔へ分泌された抗体を単離するための手順を説明する。簡潔に、細胞ペーストを、約３０分間かけて、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、およびフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）の存在下で解凍する。細胞破片を、遠心分離によって取り除くことができる。抗体変異体を培地へ分泌する場合、かかる発現システムの上澄みを、商用タンパク質濃縮フィルタ、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外ろ過ユニットを使用して一般的に先ず濃縮する。ＰＭＳＦ等のプロテアーゼ抑制剤を、タンパク質分解を抑制するために任意の前述のステップに含むことができ、抗生物質を不定の汚染物質の成長を防止するために含むことができる。
【０２９７】
細胞から調製した抗体組成物を、例えば、単独で、または他の精製ステップと組み合わせて、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、および／または親和性クロマトグラフィーを使用して精製することができる。親和性リガンドとしてタンパク質Ａの適合性は、抗体変異体に存在する任意の免疫グロブリンＦｃドメインの種類およびアイソタイプに依存する。タンパク質Ａを、ヒトγ１、γ２、またはγ４重鎖を基にした抗体を精製するために使用することができる（Ｌｉｎｄｍａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，６２：１−１３（１９８３））。タンパク質Ｇは、すべてのマウスアイソタイプに対しておよびヒトγ３に対して推奨される（Ｇｕｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，５：１５６７１５７５（１９８６））。親和性リガンドが付着したマトリックスは、大抵、アガロースであるが、他のマトリックスも利用可能である。制御した細孔ガラスまたはポリ（スチレンジビニル）ベンゼン等の機械的に安定なマトリックスは、アガロースを用いて達成することができるよりも早い流速および短い加工時間を可能とする。抗体がＣＨ３ドメインを含む場合、ＢａｋｅｒｂｏｎｄＡＢＸ樹脂（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）は、精製に有用である。イオン交換カラム上での分画、エタノール沈殿、逆相ＨＰＬＣ、シリカのクロマトグラフィー、ヘパリンのクロマトグラフィー、（ポリアスパラギン酸カラム等の）アニオンまたは陽イオン交換樹脂のセファロースクロマトグラフィー、等電点電気泳動、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、および硫酸アンモニウム沈殿等の、タンパク質精製に対する他の技法も、回復される抗体次第で利用することが可能である。
【０２９８】
任意の予備精製ステップ後、対象の抗体および汚染物質を含む混合物を、約２．５〜４．５の間のｐＨで溶出緩衝液を使用して低いｐＨの疎水性相互作用クロマトグラフィーに供することができ、低い塩の濃度（例えば、約０〜０．２５Ｍ塩から）で実施される。
【０２９９】
５．２０．治療抗ＩＣＯＳ抗体
本開示の組成物および方法で使用する抗ＩＣＯＳ抗体は、Ｔ細胞系統ＡＤＣＣ、抗体依存性食作用および／またはＣＤＣを媒介することができるヒト抗体もしくはヒト化抗体であることができ、またはＴ細胞系統ＡＤＣＣ、抗体依存性食作用および／またはＣＤＣを媒介することができる既知の抗ＩＣＯＳ抗体から選択することができる。ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体はキメラ抗体であることができる。ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、モノクローナルヒト、ヒト化、またはキメラ抗ＩＣＯＳ抗体であることができる。本開示の組成物および方法で使用する抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩｇＧ１もしくはＩｇＧ３ヒトアイソタイプ、またはヒト集団に認められる任意のＩｇＧ１もしくはＩｇＧ３対立遺伝子のヒト抗体もしくはヒト化抗体であることができる。他の実施形態において、本開示の組成物および方法で使用する抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩｇＧ２もしくはＩｇＧ４ヒトアイソタイプ、またはヒト集団に認められる任意のＩｇＧ２もしくはＩｇＧ４対立遺伝子のヒト抗体もしくはヒト化抗体であることができる。
【０３００】
かかる抗体を上記の技法を使用して生成することができるが、本開示の他の実施形態において、ヒトＪＭａｂ−１３６抗ＩＣＯＳ抗体（米国特許第６，８０３，０３９号）を、限定されないが、ＡＤＣＣ、抗体依存性食作用および／またはＣＤＣ等の増強したエフェクター機能を持つ抗ＩＣＯＳ抗体を生成するために、修飾することができる。例えば、使用することができる既知の抗ＩＣＯＳ抗体は、米国特許第６，８０３，０３９号およびｃｌｏｎｅ  ＩＳＡ−３（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，ＵＳ）に開示される抗ヒトＩＣＯＳモノクローナル抗体を含むがこれらに限定されない。
【０３０１】
ある実施形態において、抗体は、上述のもの等の（例えば、ＩｇＧ１またはＩｇＧ３ヒトアイソタイプに対する）既知の抗体のアイソタイプ切り替え変異体である。
【０３０２】
本開示の組成物および方法で使用する抗ＩＣＯＳ抗体は、裸抗体、免疫複合体、または融合タンパク質であることができる。本開示の組成物および方法で使用するための上述の抗ＩＣＯＳ抗体は、それで治療したヒトにおいて、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞および循環免疫グロブリンを減少または枯渇させることができる。Ｔ細胞の枯渇は、循環するＴ細胞、または限定されないが骨髄、脾臓、腸管関連リンパ組織、および／またはリンパ節等の、特定の組織内であることができる。かかる枯渇を、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、および／または抗体依存食作用、および／または目的のリガンドを用いてＩＣＯＳ相互作用をブロックすることによって、および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）等の各種のメカニズムを介して達成することができる。Ｔ細胞の「枯渇」によって、少なくとも約２５％、４０％、５０％、６５％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくはそれ超える割合による循環するＩＣＯＳを発現するＴ細胞および／または特定の組織中のＩＣＯＳを発現するＴ細胞の削減を意味する。特定の実施形態において、実質的にすべての検出可能なＩＣＯＳを発現するＴ細胞を、循環および／または特定の組織から枯渇する。循環免疫グロブリン（Ｉｇ）の「枯渇」は、少なくとも約２５％、４０％、５０％、６５％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくはそれ超える割合による削減を意味する。特定の実施形態において、実質的にすべての検出可能なＩｇを循環から枯渇する。
【０３０３】
５．２１．ヒトＩＣＯＳ結合に対する抗体のスクリーニング
結合アッセイを、ヒトＩＣＯＳ抗原と結合する抗体を同定するために使用することができる。結合アッセイを、直接結合アッセイとして、または競合結合アッセイとしてのいずれかで実施することができる。結合を、標準ＥＬＩＳＡまたは標準フローサイトメトリーアッセイを使用して検出することができる。直接結合アッセイで、候補抗体をヒトＩＣＯＳ抗原と結合するために試験する。ある実施形態において、スクリーニングアッセイは、第二のステップで、ヒトＩＣＯＳを発現するＴ細胞で、下流シグナル制御イベントを誘発するために抗体の能力を測定することを含む。競合結合アッセイは、一方で、既知の抗ＩＣＯＳ抗体またはヒトＩＣＯＳと結合する他の化合物を用いて競合するために、候補抗体の能力を査定する。
【０３０４】
直接結合アッセイで、ヒトＩＣＯＳ抗原は、ヒトＩＣＯＳ抗原と候補抗体の結合を可能にする条件下、候補抗体と接触する。結合は、溶液または固形の表面で実施することができる。候補抗体を、検出のために事前に標識することができる。任意の検出可能な化合物を標識のために使用することができ、限定されないが、発光、蛍光、もしくは放射性の同位体、またはこれらを含有する基、または、酵素もしくは色素等の非同位体標識等である。結合に十分なインキュベーション期間を実施後、反応を、過剰量または非特異的に結合した抗体を取り除く条件および操作に曝す。典型的に、適切な緩衝液を用いて洗浄することを含む。最終的に、ＩＣＯＳ抗体複合体の存在を検出する。
【０３０５】
競合結合アッセイで、候補抗体を、ヒトＩＣＯＳ抗原と既知の抗ＩＣＯＳ抗体（または他の化合物）との結合を抑制するまたは置換するための能力を評価する。ＩＣＯＳの標識された既知の結合剤を、候補抗体と混合することができ、候補抗体の追加の有り無し関係なく、それらの間の相互作用が通常発生するであろう条件下に配置される。ヒトＩＣＯＳと結合するＩＣＯＳの標識した既知の結合剤の量は、候補抗体の存在または不在の際に結合する量と比較することができる。
【０３０６】
一実施形態において、結合アッセイを、抗体抗原複合体の形成および検出を容易にするために、固形表面上で固定化した１つ以上の構成要素を用いて実施する。様々な実施形態において、固形支持体は、フッ化ポリビニリデン、ポリカーボネート、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ガラス、ニトロセルロース、デキストラン、ナイロン、ポリアクリルアミド、およびアガロースであることができるがこれらに制限されない。支持構造は、ビーズ、膜、微粒子、マイクロタイタープレート、試験管、または他の反応容器等の反応容器の内部表面を含むことができる。ヒトＩＣＯＳ、または他の構成要素の固定化を、共有結合または非共有結合を通して達成することができる。一実施形態において、結合は、間接、すなわち付着した抗体を介して実施されることができる。別の実施形態において、固体表面の付着が抗ＧＳＴ（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）等の商用抗体によって媒介することができるように、グルタチオンＳ−転移酵素（ＧＳＴ）等の、エピトープを用いてヒトＩＣＯＳ抗原および負の対照にタグをつける。
【０３０７】
例えば、かかる親和性結合アッセイを、固形支持体を固定化するヒトＩＣＯＳ抗原を使用して実施することができる。典型的に、結合反応の非固定化構成要素、この場合候補の抗ＩＣＯＳ抗体、を検出可能にするために、標識する。様々な標識方法が利用可能であり、発光、発色団、蛍光、もしくは放射性同位体、またはこれらを含有する基、および酵素もしくは色素等の非同位体標識を使用することができる。一実施形態において、候補の抗ＩＣＯＳ抗体を、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓより入手可能）等のフルオロフォアを用いて標識する。かかる親和性結合アッセイを、固形表面上で固定化したヒトＩＣＯＳ抗原を使用して実施することができる。抗ＩＣＯＳ抗体を、この抗原と共にインキュベートし、抗体の特異的な結合を、ＢｉａＣｏｒｅ  Ａｎａｌｙｓｅｓ、ＥＬＩＳＡ、ＦＭＥＴ、およびＲＩＡ方法を含むがこれらに限定されない、当該技術において知られている方法によって検出する。
【０３０８】
最終的に、固体表面上に残る標識を、当該技術において知られている任意の検出方法によって検出することができる。例えば、候補の抗ＩＣＯＳ抗体を、フルオロフォアを用いて標識する場合、蛍光光度計を、複合体を検出するために使用することができる。
【０３０９】
ヒトＩＣＯＳ抗原を、ヒトＩＣＯＳ抗原を発現する無傷の細胞、またはヒトＩＣＯＳ抗原を含有する単離された膜の形態で結合アッセイへ追加することができる。したがって、ヒトＩＣＯＳ抗原に対する直接結合を、候補の抗ＩＣＯＳ抗体の有無に関わらず、培養または動物モデルの無傷の細胞でアッセイすることができる。標識した候補の抗ＩＣＯＳ抗体を、ヒトＩＣＯＳ抗原を発現する細胞と、またはかかる細胞から得られた粗エキスと混合することができ、候補の抗ＩＣＯＳ抗体を追加することができる。単離された膜を、ヒトＩＣＯＳと相互作用する候補の抗ＩＣＯＳ抗体を同定するために使用することができる。例えば、単離された膜を使用した典型的な実験では、細胞を、ヒトＩＣＯＳ抗原を発現するために遺伝子的に操作することができる。膜を、標準技法を用いて収集することができ、インビトロ結合アッセイで使用することができる。標識した候補の抗ＩＣＯＳ抗体（例えば、蛍光標識した抗体）を膜と結合させ、特異的な活性についてアッセイをし、特異的な結合を、過剰な非標識の（非放射性の）候補抗ＩＣＯＳ抗体の存在下で実施する結合アッセイと比べて、測定することができる。可溶性ヒトＩＣＯＳ抗原を、組換え発現することができ、ヒトＩＣＯＳ抗原と結合する抗体を同定するために非細胞ベースのアッセイで利用することができる。組換え発現したヒトＩＣＯＳポリペプチドを、非細胞ベースのスクリーニングアッセイで使用することができる。ヒトＩＣＯＳ抗原の１つ以上の結合部分に対応するペプチド、またはヒトＩＣＯＳ抗原の１つ以上の結合部分を含有する融合タンパク質を、ヒトＩＣＯＳ抗原の一部と結合する抗体を同定するために、非細胞ベースのアッセイシステムで使用することもできる。非細胞ベースアッセイで、組換え発現したヒトＩＣＯＳを、当業者に知られている方法によって、試験管、マイクロタイターウェルまたはカラム等の固形基質に付着する（上記Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，を参照）。ヒトＩＣＯＳ抗原と結合する能力に関して、試験抗体をアッセイする。
【０３１０】
結合反応を溶液中で実施することもできる。このアッセイで、標識した構成要素を溶液中で結合パートナーと相互作用することが可能である。標識した構成要素とその結合パートナーとの間のサイズ差が、かかる分離を可能にする場合、細孔が、非結合の標識した構成要素の通過を可能にするが、その結合パートナーの通過またはパートナーと結合した標識した構成要素の通過は可能ではない限外ろ過を介して結合反応の産物を通過することによって、分離を達成することができる。結合パートナー等に対する抗体等の、溶液から標識した構成要素の結合パートナーの捕獲を可能にする任意の試薬を使用して、分離を達成することもできる。
【０３１１】
別の特定の実施形態において、固形支持体は、マイクロタイター皿に付着したヒトＩＣＯＳ抗原を含有する膜である。候補抗体は、例えば、マイクロタイター皿のライブラリーメンバーの発現を可能にする条件下で培養された、ライブラリー抗体を発現する細胞を結合することができる。ヒトＩＣＯＳと結合するライブラリーメンバーを収集する。かかる方法は、一般的にＰａｒｍｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ，１９８８，Ｇｅｎｅ，７３：３０５−３１８、Ｆｏｗｌｋｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，１３：４２２−４２７、ＰＣＴ公開ＷＯ第９４／１８３１８号、および上記の本明細書に引用した参考文献に例として記載される。ヒトＩＣＯＳ抗原に結合すると同定された抗体は、上述の抗体の種類または修飾のうちのいずれであってもよい。
【０３１２】
５．２１．１．ヒトＡＤＣＣエフェクター機能に対する抗体のスクリーニング
血清中での長い半減期、および様々なエフェクター機能を媒介する能力等の機能的特徴を有するヒトＩｇＧクラスの抗体を、本開示のある実施形態において使用する（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  １（１９９５））。ヒトＩｇＧクラスの抗体を、以下の４のサブクラスにさらに分類する。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４。多くの研究が、ＩｇＧクラスの抗体のエフェクター機能としてＡＤＣＣおよびＣＤＣに対してこれまで実施されてきており、そしてヒトＩｇＧクラスの抗体の中で、ＩｇＧ１サブクラスがヒトにおいて最も高いＡＤＣＣ活性およびＣＤＣ活性を有することが報告されている（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６５，８８（１９９７））。
【０３１３】
ヒトＩｇＧ１サブクラスの抗体のＡＤＣＣ活性およびＣＤＣ活性の発現は、一般的に、キラー細胞、ナチュラルキラー細胞、または活性化したマクロファージ等のエフェクター細胞の表面上に存在する抗体の受容体（本明細書で「ＦｃγＲ」として以下参照する）と抗体のＦｃ領域との結合に関与する。様々な補体の構成要素を結合することができる。結合について、ヒンジ領域のいくつかのアミノ酸残基および抗体のＣ領域の二次ドメイン（「Ｃγ２ドメイン」として本明細書で参照する）が重要であり（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２３，１０９８（１９９３）、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８６，３１９（１９９５），Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６５，８８（１９９７）、Ｃγ２ドメイン（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６５，８８（１９９７））の糖鎖も重要であることが示唆されている。
【０３１４】
抗ＩＣＯＳ抗体を、エフェクター機能に関して、例えば、抗体のＡＤＣＣおよび／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を拡大するために、修飾することができる。これは、抗体のＦｃ領域で１つ以上のアミノ酸置換を導入することで、達成することができる。システイン残基を、Ｆｃ領域に導入することもでき、この領域で鎖間のジスルフィド結合の形成を可能にする。この方法により、改善された内部移行能力、ならびに  または増加した補体を媒介した細胞死滅およびＡＤＣＣ、を有するホモ二量体抗体を生成することができる（Ｃａｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１７６：１１９１−１１９５（１９９２）、およびＳｈｏｐｅｓ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４８：２９１８−２９２２（１９９２））。ヘテロ二官能性の架橋剤を、増強した抗腫瘍活性を持つホモ二量体抗体を生成するために、使用することもできる（Ｗｏｌｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５３：２５６０−２５６５（１９９３））。抗体を、増強した補体溶解およびＡＤＣＣ能力を生じる２つ以上のＦｃ領域を有するために操作することもできる（Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，（３）２１９−２３０  （１９８９））。
【０３１５】
エフェクター機能を変化させるための、抗体のＦｃ領域を操作する他の方法は、当該技術において知られている（例えば、ＦＣγＲＩＩＡに対する結合親和性と比較して、ＦｃγＲＩＩＢに対する結合親和性を増幅するため、Ｆｃ領域を変化させることを説明する、両方ともＫｏｅｎｉｇらによる、米国特許公開第２００４０１８５０４５号、およびＰＣＴ公開ＷＯ第２００４／０１６７５０号；ＰＣＴ公開ＷＯ第９９／５８５７２号、ＩｄｕｓｏｇｉｅらのＷＯ第９９／５１６４２号、およびＤｅｏらのＵ．Ｓ．第６，３９５，２７２号も参照）。ＦｃγＲＩＩＢに対する結合親和性を減少するためにＦｃ領域を修飾する方法も、当該技術において知られている（例えば開示は本明細書にすべて組み込まれている、両方ともＲａｖｅｔｃｈらの、米国特許公開第２００１００３６４５９号、およびＰＣＴ公開ＷＯ第０１／７９２９９号）。野生型のＦｃ領域と比べてＦｃγＲＩＩＩＡおよび／またはＦｃγＲＩＩＡに対する増強した結合親和性を含む変異Ｆｃ領域を有する修飾された抗体も、説明された（例えば、開示は本明細書においてすべて組み込まれる、ＳｔａｖｅｎｈａｇｅｎらのＰＣＴ公開ＷＯ第２００４／０６３３５１号）。
【０３１６】
それぞれＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）、およびＦｃγＲＩＶと称される、少なくとも４つの異なる種類のＦｃγＲが認められた。ヒトにおいて、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩを、それぞれＦｃγＲＩＩａおよびＦｃγＲＩＩｂ、ならびにＦｃγＲＩＩＩａおよびＦｃγＲＩＩＩｂにさらに分類する。ＦｃγＲは、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する膜タンパク質であり、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃγＲＩＶは、２つの免疫グロブリン様ドメインを含有する細胞外領域を有するα鎖を有し、ＦｃγＲＩは、構成要素として、３つの免疫グロブリン様ドメインを含有する細胞外領域を有するα鎖を有し、このα鎖はＩｇＧ結合活性に関与する。さらに、ＦｃγＲＩおよびＦｃγＲＩＩＩは、α鎖と関連するシグナル伝達機能を有する構成要素としてγ鎖またはζ鎖を有する（Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１８，７０９（２０００），Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９，２７５（２００１））。ＦｃγＲＩＶは、Ｂｒｕｈｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｍｅｄ．，（Ｃａｎａｄａ）２７：３Ｄ（２００４）に記載される。
【０３１７】
対象の抗ＩＣＯＳ抗体のＡＤＣＣ活性を査定するために、米国特許第５，５００，３６２号、または第５，８２１，３３７号に記載されるものなど、インビトロＡＤＣＣアッセイを使用することができる。アッセイを、商用キット、例えばＣｙｔｏＴｏｘ９６（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して実施することもできる。かかるアッセイに対する有用なエフェクター細胞は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、およびＮＫ細胞系を含むがこれらに限定されない。遺伝子導入Ｆｃ受容体（例えばＣＤ１６）を発現するＮＫ細胞系および関連したシグナルポリペプチド（例えばＦＣεＲＩ−γ）は、エフェクター細胞としても役立つことができる（例えば、ＣａｍｐｂｅｌｌへのＷＯ第２００６／０２３１４８号Ａ２を参照）。例えば、補体活性化および／またはＡＤＣＣによる標的細胞の溶解を媒介する任意の特定の抗体の能力を、アッセイすることができる。対象の細胞を成長させ、インビトロ標識する。抗原抗体複合体によって活性化することができる免疫細胞、すなわちＡＤＣＣ応答に含まれるエフェクター細胞と組み合わせて、その抗体を細胞培養に追加する。抗体を、補体活性化に関して試験することもできる。どちらの場合でも、標的細胞の細胞溶解を、溶解した細胞から標識の放出によって検出する。標的細胞溶解の程度を、上澄みへの細胞質のタンパク質（例えばＬＤＨ）の放出を検出することによって測定することもできる。実際は、抗体を、補体および／または免疫細胞の源として患者自身の血清を使用してスクリーニングすることができる。インビトロ試験でヒトＡＤＣＣを媒介することができる抗体を、その特定の患者に治療的に使用することができる。例えばＣｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）９５：６５２−６５６（１９９８）で開示されたもの等の動物モデルで、対象の分子のＡＤＣＣ活性をインビボで査定することもできる。さらに、抗体のＡＤＣＣおよび随意にＣＤＣ  活性のレベルを調節（すなわち、増加または減少）するための技術は、当該技術においてよく知られている。例えば米国特許第６，１９４，５５１号を参照されたい。本開示の抗体は、ＡＤＣＣおよび／またはＣＤＣを誘発する能力を有することが可能である、またはそのために、修飾することができる。ＡＤＣＣ機能を測定するためのアッセイを、ヒトＡＤＣＣ機能を査定するためにヒトエフェクター細胞を使用して実施することができる。かかるアッセイは、壊死性および／またはアポトーシス性のメカニズムによって細胞死を誘発する、媒介する、増強する、ブロックする抗体に関してスクリーニングすることを目的とするものも含むことができる。実行可能な色素を利用するアッセイ、カスパーゼを検出し分析する方法、およびＤＮＡ切断を測定するアッセイを含むかかる方法を、対象の抗ＩＣＯＳ抗体を用いてインビトロで培養した細胞のアポトーシス性の活性を査定するために使用することができる。
【０３１８】
例えば、アネキシンＶまたはタネル染色（ＴＵＮＥＬ）アッセイを、アポトーシス性の活性を検出するために、Ｄｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ（ＵＳＡ）１０３：２７１８−２７２５（２００４）に開示された通り、実施することができる。ＴＵＮＥＬアッセイは、ＤＮＡ鎖切断に取り込みいれるために、フルオレセイン標識したｄＵＴＰを用いて対象の細胞を培養することを含む。細胞を、フローサイトメトリーによる分析のために処理することができる。アネキシンＶアッセイは、暴露したＰＳ分子を特異的に認識するフルオレセインを共役したアネキシンＶを使用してアポトーシス性の細胞の細胞膜の外側でホスファチジルセリン（ＰＳ）の出現を検出する。同時に、ヨウ化プロピジウム等の実行可能な色素を、後期アポトーシス性の細胞を除くために、使用することができる。細胞を、標識したアネキシンＶを用いて染色し、フローサイトメトリーによって分析する。
【０３１９】
５．２２．免疫複合体および融合タンパク質
本開示のある態様によれば、治療剤または毒素を、本開示の組成物および方法を使用するための抗ＩＣＯＳ抗体と共役することができる。ある実施形態において、これらの共役体を、融合タンパク質として生成することができる。治療剤および毒素の例は、カリチアマイシンおよびエスペラミシン等の分子のエンジインファミリーのメンバーを含むがこれに限定されない。化学的な毒素を、デュオカルマイシン（例えば、米国特許第５，７０３，０８０号、および米国特許第４，９２３，９９０号）、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、エトポシド、ブレオマイシン、および５−フルオロウラシルからなる群から取ることもできる。化学療法剤の例は、アドリアマイシン、ドキソルビシン、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド（Ａｒａ−Ｃ）、シクロホスファミド、チオテパ、タキソテール（ドセタキセル）、ブスルファン、サイトキシン、タキソール、メトトレキサート、シスプラチン、メルファラン、ビンブラスチン、ブレオマイシン、エトポシド、イホスファミド、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、カルボプラチン、テニポシド、ダウノマイシン、カルミノマイシン、アミノプテリン、ダクチノマイシン、マイトマイシン、エスペラミシン、（米国特許第４，６７５，１８７号を参照）、メルファラン、および他の関係するナイトロジェンマスタードも、含む。
【０３２０】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を、細胞分裂阻害剤、細胞傷害性薬物、または免疫抑制剤と共役し、細胞傷害性薬物を、エンジイン、レキシトロプシン、デュオカルマイシン、タキサン、ピューロマイシン、ドラスタチン、マイタンシノイド、およびビンカアルカロイドからなる群から選択する。ある、より特定の実施形態において、細胞傷害性薬物は、パクリタキセル、ドセタキセル、ＣＣ−１０６５、ＳＮ−３８、トポテカン、モルフォリノ−ドキソルビシン、リゾキシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、ドラスタチン−１０、エキノマイシン、コンブレタスタチン、カリチアマイシン、マイタンシン、ＤＭ−１、アウリスタチンＥ、ＡＥＢ、ＡＥＶＢ、ＡＥＦＰ、ＭＭＡＥ（米国特許出願第１０／９８３，３４０号を参照）、またはネトロプシンである。
【０３２１】
ある実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体−細胞傷害性薬物共役体の細胞傷害性薬物は、抗チューブリン剤である。特定の実施形態において、細胞傷害性薬物を、ビンカアルカロイド、ポドフィロトキシン、タキサン、バッカチン誘導体、クリプトフィジン、マイタンシノイド、コンブレタスタチン、およびドラスタチンからなる群から選択する。他の実施形態において、細胞傷害性薬物は、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ＶＰ−１６、カンプトテシン、パクリタキセル、ドセタキセル、エピチロンＡ、エピチロンＢ、ノコダゾール、コイチシン、コルシミド、エストラムスチン、セマドチン、ディスコデルモリド、マイタンシン、ＤＭ−１、ＡＥＦＰ、アウリスタチンＥ、ＡＥＢ、ＡＥＶＢ、ＡＥＦＰ、ＭＭＡＥまたはエリュテロビンである。
【０３２２】
特定の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を、リンカーを通して細胞傷害性薬物と共役し、リンカーは、ペプチドリンカーである。他の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を、リンカーを通して細胞傷害性薬物と共役し、リンカーは、ｖａｌ−ｃｉｔリンカー、ｐｈｅ−ｌｙｓリンカー、ヒドラゾンリンカー、またはジスルフィドリンカーである。
【０３２３】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体−細胞傷害性薬物共役体の抗ＩＣＯＳ抗体を、リンカーを通して細胞傷害性薬物と共役し、リンカーは、５．５未満のｐＨで加水分解性である。  特定の実施形態において、リンカーは、５．０未満のｐＨで加水分解性である。
【０３２４】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体−細胞傷害性薬物共役体の抗ＩＣＯＳ抗体を、リンカーを通して細胞傷害性薬物と共役し、リンカーは、プロテアーゼによって切断可能である。特定の実施形態において、プロテアーゼは、リソソームのプロテアーゼである。他の実施形態において、プロテアーゼは、特に、膜と関連したプロテアーゼ、細胞内プロテアーゼ、またはエンドソームのプロテアーゼである。
【０３２５】
本発明の免疫抱合体において使用できる他の毒素は、毒レクチン、リシン、アブリン、モデシン、ボツリヌス、およびジフテリア毒素等の植物毒素を含む。もちろん、様々な毒素の組み合わせは、１つの抗体分子とカップリングされることができ、それによって、様々な細胞傷害性を適応させる。本開示の併用療法において適切に利用された毒素の実例は、リシン、アブリン、リボヌクレアーゼ、デオキシリボヌクレアーゼＩ、ブドウ球菌エンテロトキシンＡ、ヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、ゲロニン、ジフテリア毒素、緑膿菌外毒素、およびシュードモナスエンドトキシンである。例えばＰａｓｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，４７：６４１（１９８６）、およびＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ，４４：４３（１９９４）を参照されたい。使用することができる酵素的に活発な毒素およびその断片は、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（緑膿菌から）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、αサルシン、シナアブラギリタンパク質、ジアンチンタンパク質、ヨウシュヤマゴボウタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、ニガウリ阻害剤、クルシン、クロチン、サボンソウ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、およびトリコテシンを含む。例えば、１９９３年、１０月２８日に公開されたＷＯ第９３／２１２３２号を参照されたい。
【０３２６】
適切な毒素および化学療法剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９ｔｈ  Ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．１９９５）、およびＧｏｏｄｍａｎ  Ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，７ｔｈ  Ｅｄ．（ＭａｃＭｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．１９８５）に記載される。他の適切な毒素および／または化学療法剤は、当業者に知られている。
【０３２７】
本開示は、診断目的に対して適した放射性剤を含むまたはそれと共役した抗体（抗体断片またはその変異を含む）を包含する。適した放射性物質の例は、ヨウ素（１２１Ｉ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ）、炭素（１４Ｃ）、硫黄（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１１Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１１３ｍＩｎ、１１５ｍＩｎ）、テクネチウム（９９Ｔｃ、９９ｍＴｃ）、タリウム（２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３５Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、および９７Ｒｕを含むがこれらに限定されない。
【０３２８】
さらに、（ｓｃＦｖ、または抗体断片もしくはその変異を含むか、あるいはそれらからなる他の分子を含む）本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を、治療目的で利用する放射性金属イオンと結合することができる、またはカップリングすることができる。適切な放射性イオンの例は、２１３Ｂｉ等のアルファ放射体、または１０３Ｐｄ、１３５Ｘｅ、１３１Ｉ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８５Ｓｒ、３２Ｐ、３５Ｓ、９０Ｙ、１５３Ｓｍ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ、９０Ｙ、１１７Ｔｉｎ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、および１６６Ｈｏ等の他の放射性同位体を含むがこれらに限定されない。特定の実施形態において、抗体またはその断片を、１７７Ｌｕ、９０Ｙ、１６６Ｈｏ、および１５３Ｓｍを含むがこれらに限定されない放射性金属イオンをポリペプチドへキレート化する大環状キレート剤に付着させる。特定の実施形態において、大環状キレート剤は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ'，Ｎ''，Ｎ'''−四酢酸（ＤＯＴＡ）である。他の特定の実施形態において、ＤＯＴＡを、リンカー分子を通して本開示の抗体またはその断片に付着させる。ＤＯＴＡとポリペプチドとを共役するために有用であるリンカー分子の例は、一般に当該技術において知られている−−例えば、すべてが参照によって本明細書に組み込まれる、ＤｅＮａｒｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ４（１０）：２４８３−９０，１９９８、Ｐｅｔｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ  Ｃｈｅｍ  １０（４）：５５３−７，１９９９、およびＺｉｍｍｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ  Ｍｅｄ  Ｂｉｏｌ  ２６（８）：９４３−５０，１９９９を参照されたい。
【０３２９】
本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を、抗体と、プロドラッグ（例えば、ぺプチジル化学療法剤、ＷＯ第８１／０１１４５号を参照）を活発な抗癌剤に変換するプロドラッグを活性化する酵素とを共役することによってＡＤＥＰＴで使用することもできる。例えば、ＷＯ第８８／０７３７８号および米国特許第４，９７５，２７８号を参照されたい。ＡＤＥＰＴに有用である免疫複合体の酵素の要素は、より活発な、細胞傷害性の形式に変換するような方法で、プロドラッグ上で作用することができる任意の酵素を含む。
【０３３０】
本開示の方法で有用な酵素は、リン酸を含有するプロドラッグを遊離薬物へ変換するために有用なアルカリ性ホスファターゼ；硫酸を含有するプロドラッグを遊離薬物へ変換するために有用なアリールスルファターゼ；非毒性５−フルオロシトシン、５−フルオロウラシルを抗癌剤へ変換するために有用なシトシンデアミナーゼ；ペプチドを含有するプロドラッグを遊離薬物へ変換するために有用であるセラチアプロテアーゼ、サーモリシン、スブチリシン、カルボキシペプチダーゼ、および（カテプシンＢおよびＬ等の）カテプシン等のプロテアーゼ；Ｄ−アミノ酸置換基を含有するプロドラッグを変換するために有用であるＤ−アラニルカルボキシペプチダーゼ；グリコシル化したプロドラッグを遊離薬物へ変換するために有用なβ−ガラクトシダーゼおよびノイラミニダーゼ等の炭水化物を切断する酵素；α−ラクタムを用いて誘導体化された薬物を遊離薬物へ変換するために有用なβ−ラクタマーゼ；フェノキシアセチルまたはフェニルアセチル基を用いてアミン窒素で誘導体化された薬物をそれぞれ、遊離薬物へ変換するために有用であるペニシリンＶアミダーゼまたはペニシリンＧアミダーゼ等のペニシリンアミダーゼを含むがこれらに限定されない。「抗体酵素」としても当該技術において知られている酵素活性を含む抗体を、プロドラッグを遊離で活発な薬物へ変換するために同様に使用することができる（例えば、Ｍａｓｓｅｙ，Ｎａｔｕｒｅ  ３２８：４５７−４５８（１９８７）を参照）。抗体−抗体酵素共役体を、本明細書に記載される通り、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の悪性度によって影響されたヒトの一部へ、要求通りに抗体酵素を送達することに対して調製することができる。
【０３３１】
本開示の抗体を、上記のヘテロ二官能性の架橋試薬の使用等の、当該技術においてよく知られている技術によって、酵素と共有結合的に結合することができる。酵素の少なくとも機能的に活発な部分と結合した抗ＩＣＯＳ抗体の少なくとも抗原結合領域を含む融合タンパク質は、当該技術においてよく知られている組換えＤＮＡ技法を使用しても構成することができる（例えば、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３１２：６０４−６０８（１９８４）を参照）。
【０３３２】
抗ＩＣＯＳ抗体の共有結合の修飾を、本開示の範囲内に含む。妥当な場合、化学的な合成によって、または抗体の酵素もしくは化学的な切断によってそれらを作製することができる。抗ＩＣＯＳ抗体の共有結合の修飾の他の種類を、選択された側鎖またはＮもしくはＣ末端残基を用いて反応させることができる有機誘導化剤を用いて、抗体の標的アミノ酸残基を反応させることによって、分子に導入する。
【０３３３】
システイニル残基を、カルボキシメチルまたはカルボキシアミドメチル誘導体を得るために、クロロ酢酸またはクロロアセトアミド等のα−ハロ酢酸（および対応するアミン）と最も一般的に、反応させる。同様に、ヨード試薬を使用することもできる。システイニル残基は、ブロモトリフルオロアセトン、α−ブロモ−β−（５−イミダゾイル）プロピオン酸、クロロアセチルリン酸、Ｎ−アルキルマレイミド、３−ニトロ−２−ピリジルジスルフィド、メチル２−ピリジルジスルフィド、ｐ−クロロ第二水銀安息香酸、２−クロロ水銀−４−ニトロフェノール、またはクロロ−７−ニトロベンゾ−２−オキサ−１，３−ジアゾールとの反応によっても誘導体化する。
【０３３４】
この薬剤は、ヒスチジル側鎖に対して比較的に特異的であるため、ヒスチジル残基を、ｐＨ５．５〜７．０でジエチルピロカルボネートとの反応によって誘導体化する。パラ−ブロモフェナシルブロミドも有用であり、反応を、ｐＨ６．０で０．１Ｍのカコジル酸ナトリウムで実施することができる。
【０３３５】
リジルおよびアミノ末端残基を、コハク酸または他のカルボン酸無水物と反応させる。これらの薬剤を用いた誘導体化は、リジニル残基の電荷を逆転する効果を有する。α−アミノを含有する残基および／またはε-アミノを含有する残基を誘導体化するための他の適した試薬は、メチルピコリンイミデート等のイミドエステル、ピリドキサールリン酸、ピリドキサール、クロロ水素化ホウ素酸、トリニトロベンゼンスルホン酸、０−メチルイソ尿素、２，４−ペンタンジオン、およびグリオキシル酸を含むトランスアミナーゼが触媒した反応を含む。
【０３３６】
アルギニル残基を、１つまたはいくつかの従来の試薬との反応によって修飾し、その試薬は、フェニルグリオキサール、２，３−ブタンジオン、１，２−シクロヘキサンジオン、およびニンヒドリンである。アルギニル残基の誘導体化は、一般的にグアニジン官能基の高いｐＫａのために、アルカリ性の条件下で反応を実施することが必要である。さらに、これらの試薬は、リジンのε−アミノ基ならびにアルギニンのエプシロン−アミノ基と反応することができる。
【０３３７】
チロシル残基の特異的な修飾を、芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンとの反応によってスペクトル標識をチロシル残基へ導入することに特に関心をおいて、作製することができる。最も一般的に、Ｎ−アセチルイミダゾールおよびテトラニトロメタンを、それぞれＯ−アセチルチロシル種および３−ニトロ誘導体を形成するために使用する。放射免疫アッセイで使用するための標識したタンパク質を調製するために、１２５Ｉまたは１３１Ｉを使用して、チロシル残基をヨウ素化する。
【０３３８】
カルボキシル側鎖（アスパルチルまたはグルタミル）は、カルボジイミド（Ｒ−−Ｎ＝Ｃ＝Ｎ−−Ｒ’）との反応によって選択的に修飾され、ここで、ＲおよびＲ’は、１−シクロヘキシル−３−（２−モルフォリニル−−４−エチル）カルボジイミドまたは１−エチル−３−（４−アゾニア−４，４−ジメチルペンチル）カルボジイミド等の、異なるアルキル基である。さらに、アスパルチルおよびグルタミル残基を、アンモニウムイオンとの反応によるアスパラギニルおよびグルタミニル残基へ変換する。
【０３３９】
グルタミニルおよびアスパラギニル残基は、それぞれに対応するグルタミルおよびアスパルチル残基に頻繁に脱アミド化される。これらの残基は、中性または塩基性の条件下で、脱アミド化される。これらの残基の脱アミド化された形態は、本開示の範囲内である。
【０３４０】
他の修飾は、プロリンおよびリジンのヒドロキシル化、セリルまたはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リジン、アルギニン、およびヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ｐｐ．７９−８６（１９８３））、Ｎ末端アミンのアセチル化、ならびに任意のＣ末端カルボキシル基のアミド化を含む。
【０３４１】
共有結合の修飾の別の種類は、グリコシドと抗体との化学的なまたは酵素的な結合を含む。これらの手順は、Ｎ−またはＯ−結合したグリコシル化に対してグリコシル化の能力を有する宿主細胞の抗体の産生を必要としないという点で有利である。使用する結合モードによって、糖は、（ａ）アルギニンおよびヒスチジン、（ｂ）遊離カルボキシル基（ｃ）システインのもの等の遊離スルフヒドリル基、（ｄ）セリン、トレオニン、もしくはヒドロキシプロリンのもの等の遊離ヒドロキシル基、（ｅ）フェニルアラニン、チロシン、もしくはトリプトファンのもの等の芳香族残基、または（ｆ）グルタミンのアミド基に付着することができる。これらの方法は、１９８７年９月１１日に公開されたＷＯ第８７／０５３３０号およびＡｐｌｉｎ  ａｎｄ  Ｗｒｉｓｔｏｎ，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，ｐｐ．２５９−３０６（１９８１）に記載される。
【０３４２】
５．２３．化学療法の組み合わせ
本開示によれば、限定されないが、化学療法、放射線治療、ホルモン治療、および／または生物学的治療／免疫療法等の１つ以上の治療の投与と組み合わせて抗ＩＣＯＳ抗体の製剤の投与によって、癌またはその１つ以上の症状を、防止する、治療する、管理する、または寛解することができる。
【０３４３】
特定の実施形態において、本開示の方法は、限定されないが、アンジオスタチン（プラスミノーゲン断片）；血管新生抑制の抗トロンビンＩＩＩ；Ａｎｇｉｏｚｙｍｅ；ＡＢＴ−６２７；Ｂａｙ１２−９５６６；Ｂｅｎｅｆｉｎ；ベバシズマブ；ＢＭＳ−２７５２９１；軟骨由来の抑制剤（ＣＤＩ）；ＣＡＩ；ＣＤ５９補体断片；ＣＥＰ−７０５５；Ｃｏｌ３；コンブレタスタチンＡ−４；エンドスタチン（コラーゲンＸＶＩＩＩ断片）；フィブロネクチン断片；Ｇｒｏ−ｂｅｔａ；ハロフジノン；ヘパリナーゼ；ヘパリン六糖断片；ＨＭＶ８３３；ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）；ＩＭ−８６２；インターフェロンアルファ／ベータ／ガンマ；インターフェロン誘導タンパク質（ＩＰ−１０）；インターロイキン−１２；クリングル５（プラスミノーゲン断片）；マリマスタット；メタロプロテアーゼ阻害剤ｓ（ＴＩＭＰ）；２−メトキシエストラジオール；ＭＭＩ２７０（ＣＧＳ２７０２３Ａ）；ＭｏＡｂＩＭＣ−１Ｃ１１；ネオバスタット；ＮＭ−３；Ｐａｎｚｅｍ；ＰＩ−８８；胎盤リボヌクレアーゼ抑制剤；プラスミノーゲン活性化因子阻害因子；血小板因子−４（ＰＦ４）；プリノマスタット；プロラクチン１６ｋＤ断片；プロリフェリン関連タンパク質（ＰＲＰ）；ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５９４；レチノイド；ソリマスタット（Ｓｏｌｉｍａｓｔａｔ）；スクアラミン；ＳＳ３３０４；ＳＵ５４１６；ＳＵ６６６８；ＳＵ１１２４８；テトラヒドロコルチゾール−Ｓ；テトラチオモリブデート；サリドマイド；トロンボスポンジン−１（ＴＳＰ−１）；ＴＮＰ−４７０；形質転換増殖因子−ベータ（ＴＧＦ−ｂ）；バスキュロスタチン（Ｖａｓｃｕｌｏｓｔａｔｉｎ）；バソスタチン（カルレティキュリン断片）；ＺＤ６１２６；ＺＤ６４７４；ファルネシル基転移酵素阻害剤（ＦＴＩ）；ならびに（限定されないがアレンドロン酸、クロドロン酸、エチドロン酸、イバンドロン酸、パミドロン酸、リセドロン酸、チルドロン酸、およびゾレドロン酸等の）ビスホスホネート等の血管新生の拮抗薬のうちの１つ以上の投与を包含する。
【０３４４】
特定の実施形態において、本開示の方法は、限定されないが、化学療法剤および非化学療法免疫調節剤等の免疫調節剤のうちの１つ以上の投与を包含する。化学療法剤の限定されない例は、メトトレキサート、シクロスポリンＡ、レフルノミド、シスプラチン、イホスファミド、タキソールおよびパクリタキセル等のタキサン、トポイソメラーゼＩ抑制剤（例えば、ＣＰＴ−１１、トポテカン、９−ＡＣ、およびＧＧ−２１１）、ゲムシタビン、ビノレルビン、オキサリプラチン、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ロイコボリン、ビノレルビン、テモダール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テニポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンＤ、１−デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、およびピューロマイシン相同体、およびシトキサンを含む。非化学療法の免疫調節剤の例は、抗Ｔ細胞受容体の抗体（例えば、抗ＣＤ４抗体（例えば、ｃＭ−Ｔ４１２（Ｂｏｅｒｉｎｇｅｒ）、ＩＤＥＣ−ＣＥ９．１（登録商標）（ＩＤＥＣおよびＳＫＢ）、ｍＡＢ４１６２Ｗ９４、ＯｒｔｈｏｃｌｏｎｅおよびＯＫＴｃｄｒ４ａ（Ｊａｎｓｓｅｎ−Ｃｉｌａｇ））、抗ＣＤ３抗体（例えば、Ｎｕｖｉｏｎ（Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ）、ＯＫＴ３（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、またはＲｉｔｕｘａｎ（ＩＤＥＣ））、抗ＣＤ５抗体（例えば、抗ＣＤ５リシン−結合免疫複合体）、抗ＣＤ７抗体（例えば、ＣＨＨ−３８０（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、抗ＣＤ８抗体、抗ＣＤ４０リガンドモノクローナル抗体（例えば、ＩＤＥＣ−１３１（ＩＤＥＣ））、抗ＣＤ５２抗体（例えば、ＣＡＭＰＡＴＨ１Ｈ（Ｉｌｅｘ））、抗ＣＤ２抗体（例えば、ＭＥＤＩ−５０７（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ、Ｉｎｃ、国際公開ＷＯ第０２／０９８３７０号およびＷＯ第０２／０６９９０４号）、抗ＣＤ１１ａ抗体（例えば、Ｘａｎｅｌｉｍ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））、および抗Ｂ７抗体（例えば、ＩＤＥＣ−１１４）（ＩＤＥＣ））；抗サイトカイン受容体抗体（例えば、抗ＩＦＮ受容体抗体、抗ＩＬ−２受容体抗体（例えば、Ｚｅｎａｐａｘ（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ））、抗ＩＬ−４受容体抗体、抗ＩＬ−６受容体抗体、抗ＩＬ−１０受容体抗体、および抗ＩＬ−１２受容体抗体）、抗サイトカイン抗体（例えば、抗ＩＦＮ抗体、抗ＴＮＦ−α抗体、抗ＩＬ−１β抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−８抗体（例えば、ＡＢＸ−ＩＬ−８（Ａｂｇｅｎｉｘ））、抗ＩＬ−１２抗体および抗ＩＬ−２３抗体））；ＣＴＬＡ４−免疫グロブリン；ＬＦＡ−３ＴＩＰ（Ｂｉｏｇｅｎ、国際公開ＷＯ第９３／０８６５６号および米国特許第６，１６２，４３２号）；可溶性サイトカイン受容体（例えば、ＴＮＦ−α受容体またはその断片の細胞外ドメイン、ＩＬ−１β受容体またはその断片の細胞外ドメイン、およびＩＬ−６受容体またはその断片の細胞外ドメイン）；サイトカインまたはその断片（例えば、インターロイキン（ＩＬ）−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ��６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２３、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、インターフェロン（ＩＦＮ）−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、およびＧＭ−ＣＳＦ）；および抗サイトカイン抗体（例えば、抗ＩＬ−２抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−１０抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１５抗体、抗ＴＮＦ−α抗体、および抗ＩＦＮ−γ抗体）、および腫瘍関連抗原と免疫特異的に結合する抗体（例えば、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））を含むがこれらに限定されない。ある実施形態において、免疫調節剤は、化学療法剤以外の免疫調節剤である。他の実施形態において、免疫調節剤は、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＴＮＦ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、Ｍ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−３、またはエリスロポエチン等のサイトカインまたは造血性以外の免疫調節剤である。さらに他の実施形態において、免疫調節剤は、化学療法剤およびサイトカインまたは造血性因子以外の薬剤である。
【０３４５】
特定の実施形態において、本開示の方法は、限定されないが非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド系抗炎症薬、β刺激薬、抗コリンジェリック（ａｎｔｉｃｈｏｌｉｎｇｅｒｉｃ）剤、およびメチルキサンチン等の抗炎症剤の１つ以上の投与を包含する。ＮＳＡＩＤの例は、アスピリン、イブプロフェン、セレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標））、ジクロフェナク（ＶＯＬＴＡＲＥＮ（商標））、エトドラク（ＬＯＤＩＮＥ（商標））、フェノプロフェン（ＮＡＬＦＯＮ（商標））、インドメタシン（ＩＮＤＯＣＩＮ（商標））、ケトロラク（ＴＯＲＡＤＯＬ（商標））、オキサプロジン（ＤＡＹＰＲＯ（商標））、ナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮ（商標））、スリンダク（ＣＬＩＮＯＲＩＬ（商標））、トルメチン（ＴＯＬＥＣＴＩＮ（商標））、ロフェコキシブ（ＶＩＯＸＸ（商標））、ナプロキセン（ＡＬＥＶＥ（商標）、ＮＡＰＲＯＳＹＮ（商標））、ケトプロフェン（ＡＣＴＲＯＮ（商標））、およびナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮ（商標））を含むがこれらに限定されない。かかるＮＳＡＩＤは、シクロオキシゲナーゼ酵素（例えば、ＣＯＸ−１および／またはＣＯＸ−２）を抑制することによって機能する。ステロイド系抗炎症薬の例は、グルココルチコイド、デキサメタゾン（ＤＥＣＡＤＲＯＮ（商標））、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン（ＤＥＬＴＡＳＯＮＥ（商標））、プレドニゾロン、トリアムシノロン、アザルフィジン、ならびにプロスタグランジン、トロンボキサン、およびロイコトリエン等のエイコサノイドを含むがこれらに限定されない。
【０３４６】
別の特定の実施形態において、本開示の方法は、１つ以上の抗ウイルス剤（例えば、アマンタジン、リバビリン、リマンタジン、アシクロビル、ファムシクロビル、ホスカルネット、ガンシクロビル、トリフルリジン、ビダラビン、ジダノシン、スタブジン、ザルシタビン、ジドブジン、インターフェロン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン、およびアントラマイシン（ＡＭＣ））、制吐薬（例えば、アルプラゾラム、デキサメタゾン、ドンペリドン、ドロナビノール、ドロペリドール、グラニセトロン、ハロペリドール、ハロペリドール、イオラゼパム（ｉｏｒａｚｅｐａｍ）、メチルプレドニゾロン、メトクロプラミド、ナビロン、オンダンセトロン、プロクロルペラジン）、抗真菌剤（例えば、アンホテリシン、クロトリマゾール、エコナゾール、フルコナゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾールおよびニスタチン）、抗寄生虫剤（例えば、デヒドロエメチン、ジロキサニドフロエート、エメチン、メフロキン、メラルソプロール、メトロニダゾール、ニフルチモックス、パロモマイシン、ペンタビジン（ｐｅｎｔａｂｉｄｉｎｅ）、イセチオン酸ペンタミジン、プリマキン、キナクリン、キニジン）またはその組み合わせの投与を、包含する。
【０３４７】
薬学的な組成物ならびに剤形およびキットを含む、本開示の様々な実施形態で使用することができる抗癌剤の具体的な例は、アシビシン；アクラルビシン；アコダゾールハイドロクロライド（ａｃｏｄａｚｏｌｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；アクロニン；アドゼレシン；アルデスロイキン；アルトレタミン；アンボマイシン（ａｍｂｏｍｙｃｉｎ）；酢酸アメタントロン；アミノグルテチミド；アムサクリン；アナストロゾール；アントラマイシン；アスパラギナーゼ；アスペルリン；アザシチジン；アゼテパ；アゾトマイシン（ａｚｏｔｏｍｙｃｉｎ）；バチマスタット；ベンゾデパ（ｂｅｎｚｏｄｅｐａ）；ビカルタミド；ビサントレンハイドロクロライド；ビスナフィドジメシレート（ビスナフィド  ｄｉｍｅｓｙｌａｔｅ）；ビセレシン；ブレオマイシン硫酸；ナトリウムブレキナル；ブロピリミン；ブスルファン；カクチノマイシン；カルステロン；カラセミド（ｃａｒａｃｅｍｉｄｅ）；カルベチマー（ｃａｒｂｅｔｉｍｅｒ）；カルボプラチン；カルムスチン；塩酸カルビシン；カルゼルシン；セデフィンゴール（Ｃｅｄｅｆｉｎｇｏｌ）；クロラムブシル；シロレマイシン（Ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）；シスプラチン；クラドリビン；メシル酸クリスナトール；シクロホスファミド；シタラビン；ダカルバジン；ダクチノマイシン；ダウノルビシンハイドロクロライド；デシタビン；デキソルマプラチン（Ｄｅｘｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）；デザグアニン（ｄｅｚａｇｕａｎｉｎｅ）；デザグアニン（ｄｅｚａｇｕａｎｉｎｅ）メシレート；ジアジクオン；ドセタキセル；ドキソルビシン；ドキソルビシンハイドロクロライド；ドロロキシフェン；ドロロキシフェンクエン酸；プロピオン酸ドロモスタノロン；デュアゾマイシン（Ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）；エダトレキサート；エフロルニチンハイドロクロライド；エルサミトルシン（ｅｌｓａｍｉｔｒｕｃｉｎ）；エンロプラチン（Ｅｎｌｏｐｌａｔｉｎ）；エンプロメート（Ｅｎｐｒｏｍａｔｅ）；エピプロピジン（ｅｐｉｐｒｏｐｉｄｉｎｅ）；塩酸エピルビシン；エルブロゾール（ｅｒｂｕｌｏｚｏｌｅ）；塩酸エソルビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；エストラムスチン；リン酸エストラムスチンナトリウム；エタニダゾール；エトポシド；リン酸エトポシド；エトプリン（ｅｔｏｐｒｉｎｅ）；塩酸ファドロゾール；ファザラビン（ｆａｚａｒａｂｉｎｅ）；フェンレチニド；フロクスウリジン；リン酸フルダラビン；フルオロウラシル；フルロシタビン（ｆｌｕｒｏｃｉｔａｂｉｎｅ）；ホスキドン（ｆｏｓｑｕｉｄｏｎｅ）；フォストリエシンナトリウム；ゲムシタビン；ゲムシタビンハイドロクロライド；ヒドロキシ尿素；塩酸イダルビシン；イホスファミド；イルモホシン；（組換えインターロイキンＩＩ、またはｒＩＬ２を含む）インターロイキンＩＩ、インターフェロンアルファ−２ａ；インターフェロンアルファ−２ｂ；インターフェロンアルファ−ｎ１；インターフェロンアルファ−ｎ３；インターフェロンベータ−Ｉａ；インターフェロンガンマ−Ｉｂ；イプロプラチン；塩酸イリノテカン；酢酸ランレオチド；レトロゾール；酢酸ロイプロリド；塩酸リアロゾール；（ロメトレキソール（ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ）ナトリウム）；ロムスチン；塩酸ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；マソプロコール；マイタンシン；塩酸メクロレタミン；酢酸メゲストロール；酢酸メレンゲストロール；メルファラン；メノガリル；メルカプトプリン；メトトレキサート；メトトレキサートナトリウム；メトプリン；メツレデパ；ミチンドミド；ミトカルシン（ｍｉｔｏｃａｒｃｉｎ）；ミトクロミン；ミトジリン（ｍｉｔｏｇｉｌｌｉｎ）；ミトマルシン（ｍｉｔｏｍａｌｃｉｎ）；マイトマイシン；ミトスペル（ｍｉｔｏｓｐｅｒ）；ミトーテン；ミトキサントロンハイドロクロライド；ミコフェノール酸；ノコダゾール；ノガラマイシン；オルマプラチン；オキシスラン；パクリタキセル；ペグアスパルガーゼ；ペリオマイシン（ｐｅｌｉｏｍｙｃｉｎ）；ペンタムスチン（ｐｅｎｔａｍｕｓｔｉｎｅ）；硫酸ペプロマイシン；ペルホスファミド（ｐｅｒｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；ピポブロマン；ピポスルファン；塩酸ピロキサントロン（ｐｉｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；プリカマイシン；プロメスタン；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニムスチン（ｐｒｅｄｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）；塩酸プロカルバジン；ピューロマイシン；ピューロマイシンハイドロクロライド；ピラゾフリン；リボプリン（ｒｉｂｏｐｒｉｎｅ）；ログレトイミド（ｒｏｇｌｅｔｉｍｉｄｅ）；サフィンゴール；サフィンゴールハイドロクロライド；セムスチン；シムトラゼン；スパルホサートナトリウム（ｓｐａｒｆｏｓａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）；スパルソマイシン；塩酸スピロゲルマニウム；スピロムスチン；スピロプラチン；ストレプトニグリン；ストレプトゾシン；スロフェヌル（ｓｕｌｏｆｅｎｕｒ）；タリソマイシン（ｔａｌｉｓｏｍｙｃｉｎ）；テコガランナトリウム；テガフール；塩酸テロキサントロン（ｔｅｌｏｘａｎｔｒｏｎｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；テモポルフィン；テニポシド；テルオキシロン（ｔｅｒｏｘｉｒｏｎｅ）；テストラクトン；チアミプリン（ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎｅ）；チオグアニン；チオテパ；チアゾフリン；チラパザミン；クエン酸トレミフェン；酢酸トレストロン（ｔｒｅｓｔｏｌｏｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）；リン酸トリシリビン（ｔｒｉｃｉｒｉｂｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）；トリメトレキサート；グルクロン酸トリメトレキサート；トリプトレリン；塩酸ツブロゾール（ｔｕｂｕｌｏｚｏｌｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ウラシルマスタード；ウレデパ（ｕｒｅｄｅｐａ）；バプレオチド（ｖａｐｒｅｏｔｉｄｅ）；ベルテポルフィン；ビンブラスチン硫酸；ビンクリスチン硫酸；ビンデシン；ビンデシン硫酸；硫酸ビネピジン；硫酸ビングリシナート（ｖｉｎｇｌｙｃｉｎａｔｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）；硫酸ビンロイロシン（ｖｉｎｌｅｕｒｏｓｉｎｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）；酒石酸ビノレルビン；硫酸ビンロシジン（ｖｉｎｒｏｓｉｄｉｎｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）；硫酸ビンゾリジン（ｖｉｎｚｏｌｉｄｉｎｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）；ボロゾール；ゼニプラチン；ジノスタチン；塩酸ゾルビシンを含むがこれらに限定されない．他の抗癌剤は、２０−エピ−１，２５ジヒドロキシビタミンＤ３；５−エチニルウ��シル；アビラテロン（ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ）；アクラルビシン；アシルフルベン；アデシペノール（ａｄｅｃｙｐｅｎｏｌ）；アドゼレシン；アルデスロイキン；ＡＬＬ−ＴＫ拮抗薬；アルトレタミン；アンバムスチン；アミドックス（ａｍｉｄｏｘ）；アミホスチン（ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）；アミノレブリン酸；アムルビシン；アムサクリン；アナグレリド；アナストロゾール；アンドログラフォリド；血管新生抑制剤；拮抗薬Ｄ；拮抗薬Ｇ；アンタレリクス（ａｎｔａｒｅｌｉｘ）；抗背方化形態形成タンパク質−１；抗アンドロゲン、前立腺癌；抗エストロゲン；抗腫瘍薬；アンチセンスオリゴヌクレオチド；アフィジコリングリシネート；アポトーシス遺伝子モジュレーター；アポトーシスレギュレーター；アプリン酸；ａｒａ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ；アルギニンデアミナーゼ；アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）；アタメスタン；アトリムスチン；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）１；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）２；アキシナスタチン（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ）３；アザセトロン；アザトキシン（ａｚａｔｏｘｉｎ）；アザチロシン；バッカチンＩＩＩ誘導体；バラノール（ｂａｌａｎｏｌ）；バチマスタット；ＢＣＲ／ＡＢＬ拮抗薬；ベンゾクロリン（ｂｅｎｚｏｃｈｌｏｒｉｎ）；ベンゾイルスタウロスポリン（ｂｅｎｚｏｙｌｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）；βラクタム誘導体；β−アレチン；β−クラマイシン（ｃｌａｍｙｃｉｎ）Ｂ；ベツリン酸；ｂＦＧＦ抑制剤；ビカルタミド；ビサントレン；ビスアジリジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｉｒｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）；ビスナフィド；ビストラテン（ｂｉｓｔｒａｔｅｎｅ）Ａ；ビセレシン；ブレフラート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）；ブロピリミン；ブドチタン；ブチオニンスルホキシミン；カルシポトリオール；カルホスチン（ｃａｌｐｈｏｓｔｉｎ）Ｃ；カンプトテシン誘導体；カナリアポックスＩＬ−２；カペシタビン；カルボキサミド−アミノ−トリアゾール；カルボキシアミドトリアゾール；ＣａＲｅｓｔＭ３；ＣＡＲＮ７００；軟骨由来の抑制剤；カルゼルシン；カゼインキナーゼ抑制剤（ＩＣＯＳ）；カスタノスペルミン；セクロピンＢ；セトロレリクス；クロルルン（ｃｈｌｏｒｌｎ）；クロロキノキサリンスルホンアミド（ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ）；シカプロスト；シスポルフィリン；クラドリビン；クロミフェン類似体；クロトリマゾール；コリスマイシン（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ）Ａ；コリスマイシン（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ）Ｂ；コンブレタスタチンＡ４；コンブレタスタチン類似体；コナゲニン；クランベシジン８１６；クリスナトール；クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎ）８；クリプトフィシン（ｃｒｙｐｔｏｐｈｙｃｉｎ）Ａ誘導体；キュラシンＡ；シクロペンタアントラキノネス（ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｔｈｒａｑｕｉｎｏｎｅｓ）；シクロプラタム（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）；シペマイシン（ｃｙｐｅｍｙｃｉｎ）；シタラビンオクホスフェート；細胞溶解因子；シトスタチン（ｃｙｔｏｓｔａｔｉｎ）；ダクリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）；デシタビン；デヒドロジデムニン（ｄｅｈｙｄｒｏｄｉ��ｅｍｎｉｎ）Ｂ；デスロレリン；デキサメタゾン；デキシホスファミド；デキスラゾキサン；デキスベラパミル（ｄｅｘｖｅｒａｐａｍｉｌ）；ジアジクオン；ジデムニンＢ；ジドキス（ｄｉｄｏｘ）；ジエチルノルスペルミン；ジヒドロ−５−アザシチジン；ジヒドロタキソール、９−；ジオキサマイシン（ｄｉｏｘａｍｙｃｉｎ）；ジフェニルスピロムスチン；ドセタキセル；ドコサノール；ドラセトロン；ドキシフルリジン；ドロロキシフェン；ドロナビノール；デュオカルマイシンＳＡ；エブセレン；エコムスチン；エデルホシン；エドレコロマブ；エフロルニチン；エレメン；エミテフル（ｅｍｉｔｅｆｕｒ）；エピルビシン；エプリステリド；エストラムスチン類似体；エストロゲンアゴニスト；エストロゲン拮抗薬；エタニダゾール；リン酸エトポシド；エキセメスタン；ファドロゾール；ファザラビン（ｆａｚａｒａｂｉｎｅ）；フェンレチニド；フィルグラスチム；フィナステリド；フラボピリドール；フレゼラスチン（ｆｌｅｚｅｌａｓｔｉｎｅ）；フルアステロン；フルダラビン；塩酸フルオロダウノルニシン（ｆｌｕｏｒｏｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）；ホルフェニメクス；ホルメスタン；ホストリエシン；ホテムスチン；ガドリニウムテキサフィリン；硝酸ガリウム；ガロシタビン；ガニレリキス（ｇａｎｉｒｅｌｉｘ）；ゼラチナーゼ阻害剤；ゲムシタビン；グルタチオン抑制剤；ヘプスルファム（ｈｅｐｓｕｌｆａｍ）；ヘレグリン；ヘキサメチレンビスアセトアミド；ヒペリシン；イバンドロン酸；イダルビシン；イドキシフェン；イドラマントン；イルモホシン；イロマスタット（ｉｌｏｍａｓｔａｔ）；イミダゾアクリドネス（ｉｍｉｄａｚｏａｃｒｉｄｏｎｅｓ）；イミキモド；免疫促進剤ペプチド；インシュリン様増殖因子−１受容体抑制剤；インターフェロンアゴニスト；インターフェロン；インターロイキン；イオベングアン；ヨードドキソルビシン；イポメアノール（ｉｐｏｍｅａｎｏｌ）、４−；イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）；イルソグラジン（ｉｒｓｏｇｌａｄｉｎｅ）；イソベンガゾール；イソホモハリコンドリン（ｉｓｏｈｏｍｏｈａｌｉｃｏｎｄｒｉｎ）Ｂ；イタセトロン；ジャスプラキノリド；カハラリドＦ；ラメラリン（ｌａｍｅｌｌａｒｉｎ）−Ｎトリアセテート；ランレオチド；レイナマイシン；レノグラスチム；硫酸レンティナン；レプトルスタチン；
レトロゾール；白血病抑制因子；白血球αインターフェロン；ロイプロリド＋エストロゲン＋プロゲステロン；ロイプロレリン（ｌｅｕｐｒｏｒｅｌｉｎ）；レバミソール；リアロゾール；直鎖状ポリアミン類似体；脂溶性二糖類ペプチド；脂溶性白金化合物；リソクリンアミド（ｌｉｓｓｏｃｌｉｎａｍｉｄｅ）７；ロバプラチン；ロンブリシン；ロメトレキソール（ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ）；ロニダミン；ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；（限定されないがロバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、スタチン、シンバスタチン、およびアトルバスタチン等の）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素抑制剤；ロキソリビン（ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ）；ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）；ルテチウムテキサフィリン（ｌｕｔｅｔｉｕｍ  ｔｅｘａｐｈｙｒｉｎ）；リソフィルリン（ｌｙｓｏｆｙｌｌｉｎｅ）；溶菌性ペプチド；マイタンシン；マンノスタチンＡ；マリマスタット；マソプロコール；マスピン；マトリリシン阻害剤；マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤；メノガリル；メルバロン（ｍｅｒｂａｒｏｎｅ）；メテレリン（ｍｅｔｅｒｅｌｉｎ）；メチオニナーゼ；メトクロプラミド；ＭＩＦ抑制剤；ミフェプリストン；ミルテホシン；ミリモスチム；ミスマッチ二本鎖ＲＮＡ；ミトグアゾン；ミトラクトール；マイトマイシン類似体；ミトナフィド（ｍｉｔｏｎａｆｉｄｅ）；ミトトキシン（ｍｉｔｏｔｏｘｉｎ）繊維芽細胞増殖因子−サポリン（ｓａｐｏｒｉｎ）；ミトキサントロン；モファロテン；モルグラモスチム；モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン；モノホスホリルリピドＡ＋ミオバクテリウム細胞壁ｓｋ；モピダモール（ｍｏｐｉｄａｍｏｌ）；多剤耐性遺伝子阻害剤；多発性腫瘍サプレッサー１−ベースの治療；マスタード（ｍｕｓｔａｒｄ）抗癌剤；ミカペルオキシド（ｍｙｃａｐｅｒｏｘｉｄｅ）Ｂ；マイコバクテリア細胞壁抽出物；ミリアポロン（ｍｙｒｉａｐｏｒｏｎｅ）；Ｎ−アセチルジナリン；Ｎ−置換ベンズアミド；ナファレリン；ナグレスチプ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）；ナロキソン＋ペンタゾシン；ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）；ナフテルピン；ナルトグラスチム；ネダプラチン；ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）；ネリドロン酸；中性エンドペプチダーゼ；ニルタミド；ニサマイシン（ｎｉｓａｍｙｃｉｎ）；一酸化窒素モジュレーター；ニトロキシド抗酸化剤；ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）；Ｏ６−ベンジルグアニン；オクトレオチド；オキセノン（ｏｋｉｃｅｎｏｎｅ）；オリゴヌクレオチド；オナプリストン；オンダンセトロン；オンダンセトロン；オラシン（ｏｒａｃｉｎ）；経口サイトカインインデューサー；オルマプラチン；オサテロン；オキサリプラチン；オキサウノマイシン（ｏｘａｕｎｏｍｙｃｉｎ）；パクリタキセル；パクリタキセル類似体；パクリタキセル誘導体；パラウアミン（ｐａｌａｕａｍｉｎｅ）；パルミトイルリゾキシン；プアミドロン酸（ｐａｍｉｄｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）；パナキシトリオール；パノミフェン；パラバクチン（ｐａｒａｂａｃｔｉｎ）；パゼリプチン（ｐａｚｅｌｌｉｐｔｉｎｅ）；ペグアスパルガーゼ；ペルデシン；ペントサンポリサルフェートナトリウム（ｐｅｎｔｏｓａｎ  ｐｏｌｙｓｕｌｆａｔｅ  ｓｏｄｉｕｍ）；ペントスタチン；ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）；ペルフルブロン；ペルホスファミド（ｐｅｒｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；ペリリルアルコール；フェナジノマイシン；酢酸フェニル；脱リン酸化酵素阻害剤；ピシバニール；塩酸ピロカルピン；ピラルビシン；ピリトレキシム（ｐｉｒｉｔｒｅｘｉｍ）；プラセチンＡ；プラセチンＢ；プラスミノーゲン活性化因子阻害因子；白金錯体；白金化合物白金トリアミン錯体；ポルフィマーナトリウム；ポルフィロマイシン；プレドニゾン；プロピルビスアクリドン；プロスタグランジンＪ２；プロテアソーム阻害剤；プロテインＡ系免疫変調成分；タンパク質キナーゼＣ抑制剤；タンパク質キナーゼＣ抑制剤、ミクロアルガール（ｍｉｃｒｏａｌｇａｌ）；タンパク質チロシン脱リン酸化酵素阻害剤；プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤；プルプリン；ピラゾロアクリジン；ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレンコンジュゲート；ｒａｆ拮抗薬；ラルチトレキセド；ラモセトロン；ｒａｓファルネシルタンパク質転移酵素阻害剤；ｒａｓ抑制剤；ｒａｓ−ＧＡＰ抑制剤；ジメチル化レテリプチン；レニウムＲｅ１８６エチドロン酸；リゾキシン；リボザイム；ＲＩＩレチンアミド；ログレトイミド（ｒｏｇｌｅｔｉｍｉｄｅ）；ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）；ロムルチド；ロキニメックス（ｒｏｑｕｉｎｉｍｅｘ）；ルビギノン（ｒｕｂｉｇｉｎｏｎｅ）Ｂ１；ルボキシル（ｒｕｂｏｘｙｌ）；サフィンゴール；サイントピン（ｓａｉｎｔｏｐｉｎ）；ＳａｒＣＮＵ；サルコフィトールＡ；サルグラモスチム；Ｓｄｉ１擬似体；セムスチン；老化誘導阻害剤１；センスオリゴヌクレオチド；シグナル伝達抑制剤；シグナル伝達モジュレーター；単鎖抗原結合タンパク質；シゾフィラン；ソブゾキサン；ボロカプト酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）；ナトリウム酢酸フェニル；ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）；ソマトメジン結合タンパク質；ソネルミン；スパルホス酸；スピカマイシンＤ；スピロムスチン；スプレノペンチン；スポンギスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）１；スクアラミン；幹細胞阻害剤；幹細胞分裂阻害剤；スチピアミド（ｓｔｉｐｉａｍｉｄｅ）；ストロメリシン阻害剤；スルフィノシン（ｓｕｌｆｉｎｏｓｉｎｅ）；超活性脈管活性腸管ペプチド拮抗薬；スラジスタ（ｓｕｒａｄｉｓｔａ）；スラミン；スワインソニン；合成グリコサミノグリカン；タリムスチン（ｔａｌｌｉｍｕｓｔｉｎｅ）；タモキシフェンメトヨージド（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ  ｍｅｔｈｉｏｄｉｄｅ）；タウロムスチン（ｔａｕｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）；タザロテン；テコガランナトリウム；テガフール；テルラピリリウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）；テロメラーゼ阻害剤；テモポルフィン；テモゾロミド；テニポシド；テトラクロロデカオキシド（ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｏｄｅｃａｏｘｉｄｅ）；テトラゾミン（ｔｅｔｒａｚｏｍｉｎｅ）；タリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）；チオコラリン（ｔｈｉｏｃｏｒａｌｉｎｅ）；トロンボポイエチン；トロンボポイエチン擬似体；チマルファシン；チモポイエチン受容体アゴニスト；チモトリナン；甲状腺���激ホルモン；スズエチルエチオプルプリン（ｔｉｎ  ｅｔｈｙｌ  ｅｔｉｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）；チラパザミン；チタノセンジクロリド；トプセンチン（ｔｏｐｓｅｎｔｉｎ）；トレミフェン；全能性幹細胞因子；翻訳抑制剤；トレチノイン；トリアセチルウリジン；トリシリビン（ｔｒｉｃｉｒｉｂｉｎｅ）；トリメトレキサート；トリプトレリン；トロピセトロン（ｔｒｏｐｉｓｅｔｒｏｎ）；ツロステリド（ｔｕｒｏｓｔｅｒｉｄｅ）；チロシンキナーゼ抑制剤；チルホスチン；ＵＢＣ抑制剤；ウベニメクス；尿生殖洞由来増殖抑制因子；ウロキナーゼ受容体拮抗薬；バプレオチド（ｖａｐｒｅｏｔｉｄｅ）；バリオリンＢ；ベクター系、赤血球遺伝子治療；ベラレソール；ベラミン（ｖｅｒａｍｉｎｅ）；ベルジン（ｖｅｒｄｉｎ）；ベルテポルフィン；ビノレルビン；ビンキサルチン；Ｖｉｔａｘｉｎ（登録商標）；ボロゾール；ザノテロン（ｚａｎｏｔｅｒｏｎｅ）；ゼニプラチン；ジラスコルブ；およびジノスタチンスチマラマーを含むがこれらに限定されない。追加の抗癌剤は、５−フルオロウラシルおよびロイコボリンである。これら２つの薬剤は、サリドマイドおよびトポイソメラーゼ抑制剤を利用する方法で使用された場合、有用である可能性がある。特定の実施形態において、抗癌剤は、化学療法剤ではない。
【０３４８】
より特定な実施形態において、本開示は、制限されないが、上記の通り、胸、卵巣、黒色腫、前立腺、結腸、および肺癌の処置の為に、表１に開示されたもの等の抗癌剤等の治療の１つ以上の投与と組み合わせる、抗ＩＣＯＳ抗体製剤の投与も含む。併用療法で使用する場合、表１に記載した投与量および／または投与の頻度を減少することができる。
【表１】
0005933975.tif 000002
【０３４９】
0005933975.tif 000003
【０３５０】
0005933975.tif 000004
【０３５１】
本開示は、癌細胞を破壊するために、Ｘ線、ガンマ線、および放射線の他の源の使用を含む放射線治療と組み合わせた本開示の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の投与も包含する。特定の実施形態において、放射線処置を、外部ビーム放射線または遠隔療法として投与し、放射線を遠隔光源から向ける。他の実施形態において、放射線処置を内部治療または近距離照射療法として投与し、放射性源癌細胞または腫瘍量の近くの体内に配置する。
【０３５２】
癌治療およびその投与量、投与経路、および所要量は、当該技術において知られており、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（５６ｔｈ  ｅｄ．，２００２）等の文献に記載される。
【０３５３】
５．２４．増加する半減期を有する抗体
本開示は、インビボにて延長した半減期を有する対象の（例えば、ＩＣＯＳ）抗原と特異的に結合する抗体および抗体断片の製剤を提供する。特に本開示は、哺乳類（例えば、限定されないがヒト）で３日間を超える、７日間を超える、１０日間を超える、１５日間を超える、２５日間を超える、３０日間を超える、３５日間を超える、４０日間を超える、４５日間を超える、２ヶ月を超える、３ヶ月を超える、４ヶ月を超える、または５ヶ月を超える半減期を有する対象の（例えば、ＩＣＯＳ）抗原と特異的に結合する抗体および抗体断片製剤を提供する。
【０３５４】
インビボで抗体（例えば、限定されないがモノクローナル抗体および単鎖抗体）または抗体断片（例えば、限定されないがＦａｂ断片）の血清循環を延長させるために、例えば、高分子量のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）等の不活性ポリマー分子を、ＰＥＧと抗体のＮ−もしくはＣ−末端との部位−特異的な共役を介して、またはリジン残基上に存在するエプシロン−アミノ基を通して、多官能リンカーの有り無し関係なく抗体（その抗体断片を含む）に付着することができる。生物活性の最小の損失を生じる線状または分岐ポリマー誘導体化は、使用されるであろう。結合度を、抗体とＰＥＧ分子との適切な共役を確かにするためＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび質量分析によって厳重に観察することができる。未反応ＰＥＧを、サイズ排除によってまたはイオン交換クロマトグラフィーによって抗体ＰＥＧ共役体から分離することができる。ＰＥＧ誘導体化された抗体（その抗体断片を含む）を、当業者に知られている方法、例えば、本明細書に記載される免疫測定法を使用して、結合活性について、ならびにインビボ有効性について試験することができる。
【０３５５】
インビボで増加した半減期を有する抗体を、１つ以上のアミノ酸修飾（すなわち、置換、挿入、または欠失）を、ＩｇＧ定常ドメイン、またはそのＦｃＲｎ結合断片（例えば、Ｆｃまたはヒンジ−Ｆｃドメイン断片）へ導入して、生成することもできる。例えば、すべてが本明細書に参照によって組み込まれる国際公開ＷＯ第９８／２３２８９号、国際公開ＷＯ第９７／３４６３１号、および米国特許第６，２７７，３７５号を参照されたい。
【０３５６】
さらに、インビボでより安定した抗体（その抗体の断片を含む）を作製するまたはインビボでより長い半減期を有するために、抗体（その抗体断片を含む）を、アルブミンと共役することができる。技法は、当該技術によく知られており、例えば、すべてが本明細書に参照によって組み込まれる、国際公開ＷＯ第９３／１５１９９号、ＷＯ第９３／１５２００号、およびＷＯ第０１／７７１３７号、ならびに欧州特許ＥＰ第４１３，６２２号を参照されたい。
【０３５７】
５．２５．抗体製剤を調整する方法
本開示は、対象の抗原（例えば、ヒトＩＣＯＳポリペプチド）と特異的に結合する抗体または誘導体、類似体、またはそれらの断片の液体製剤を調製するための方法を提供する。本開示の液体製剤を調製するための方法は、条件培地（培地の単一ロットまたはプールロットのいずれか）から抗体（その抗体の断片を含む）を精製すること、および約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１７５ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ、または約３００ｍｇ／ｍＬの最終濃度に精製された抗体（その抗体の断片を含む）の画分を濃縮することを含むことができる。抗体（その抗体断片を含む）、例えばＩＣＯＳと特異的に結合する抗体を含有する条件培地を、ＣＵＮＯろ過に共することができ、ろ過された抗体をＨＳ５０陽イオン交換クロマトグラフィーに共する。ＨＳ５０陽イオン交換クロマトグラフィーからの画分に、低ｐＨ処置後、ＭＥＰＨｙｐｅｒｃｅｌクロマトグラフィーを施す。ＭＥＰＨｙｐｅｒｃｅｌクロマトグラフィーからの画分は、ナノろ過の対象である。ナノろ過後に得られた精製された抗体またはその断片を、緩衝液交換および同じ膜を使用して製剤の緩衝液へ濃縮するために、透析ろ過および限外ろ過に共する。
【０３５８】
本開示の液体製剤を、１回の使用のために、液体製剤のアリコートを含有するバイアルを調製することによって、単位投薬の形態として調製することができる。例えば、１バイアル当たりの単位投与量は、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約３００ｍｇ／ｍＬの範囲のＩＣＯＳと特異的に結合する抗体（その抗体の断片を含む）の１ｍＬ、２ｍＬ、３ｍＬ、４ｍＬ、５ｍＬ、６ｍＬ、７ｍＬ、８ｍＬ、９ｍＬ、１０ｍＬ、１５ｍＬ、または２０ｍＬの異なる濃度を含有することができる。必要であれば、これらの調製物を、各バイアルに無菌の希釈剤を追加することによって所望の濃度を調節することができる。特定の実施形態において、本開示の液体製剤をｐＨ６．０の１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８０ｍＭのＮａＣｌ、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０を含有する無菌の液体として単一用量のバイアルに処方する。各１．０ｍＬの溶液は、１００ｍｇの抗体（その抗体断片を含む）を含有する。一実施形態において、本開示の抗体（その抗体断片を含む）を、３ｃｃ  ＵＳＰ  Ｔｙｐｅ  Ｉのホウケイ酸琥珀バイアル（Ｗｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ−部品番号６８００−０６７５）内に１００ｍｇ／ｍＬ供給する。標的充填量は、１．２ｍＬである。
【０３５９】
本開示の液体製剤を、１回の使用のために、液体製剤のアリコートを含有するプレフィルドシリンジを調製することによって、単位投薬の形態として調製することができる。例えば、プレフィルドシリンジ１つ当りの単位投与量は、約１０ｍｇ／ｍＬ〜約３００ｍｇ／ｍＬの範囲のＩＣＯＳと特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）の０．１ｍＬ、０．２ｍＬ、０．３ｍＬ、０．４ｍＬ、０．５ｍＬ、０．６ｍＬ、０．７ｍＬ、０．８ｍＬ、０．９ｍＬ、１ｍＬ、２ｍＬ、３ｍＬ、４ｍＬ、５ｍＬ、６ｍＬ、７ｍＬ、８ｍＬ、９ｍＬ、１０ｍＬ、１５ｍＬ、または２０ｍＬの異なる濃度を有することができる。特定の実施形態において、本開示の液体製剤をｐＨ６．０の１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８０ｍＭのＮａＣｌ、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０を含有する無菌の液体として単一用量のプレフィルドシリンジに処方する。各１．０ｍＬの溶液は、１００ｍｇの抗体（その抗体断片を含む）を含有する。
【０３６０】
本開示の液体製剤を、無菌ろ過、放射線等を含む様々な滅菌法によって無菌化することができる。特定の実施形態において、透析ろ過した抗体製剤を、事前に無菌化した０．２ミクロンフィルタを用いて無菌ろ過する。ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、自己免疫病もしくは疾患、炎症性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞増殖性疾病もしくは疾患、悪性腫瘍、Ｔ細胞悪性腫瘍、移植拒絶反応、移植片対宿主病、またはそれらの症状のうちの１つ以上を防止する、治療する、および／または管理するために、本開示の無菌化した液体製剤を、対象に投与することができる。
【０３６１】
本開示は、液体非凍結乾燥した製剤を対象とするが、必要であれば、本開示の製剤を凍結乾燥することができることが、相当物のために、留意されるべきである。したがって、本開示は、本開示の製剤の凍結乾燥した形態を包含する。
【０３６２】
５．２６．抗体製剤の安定性および凝集を監視する方法
タンパク質の物理的なおよび化学的な構造ならびにそれらの生物活性を基にした、抗体製剤を含むタンパク質製剤の安定性を査定するために、様々な方法が存在する。例えば、タンパク質の変性を研究するために、電荷移動吸収、熱分析、蛍光分光法、円二色性（ＣＤ）、ＮＭＲ、還元キャピラリーゲル電気泳動（ｒＣＧＥ）および高速サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）、接線流ろ過（ＴＦＦ）、静的光散乱（ＳＬＳ）、フーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）、尿素誘発タンパク質アンフォールディング技法、内在性のトリプトファン蛍光、示差走査熱量測定、ならびに１−アニリノ−８−ナフタレンスルホン酸（ＡＮＳ）タンパク質結合技術等の方法が使用可能である。例えば、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，Ｊ．ｏｆ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ４２（Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ４−Ｓ２６を参照されたい。
【０３６３】
ｒＣＧＥおよびＨＰＳＥＣは、タンパク質凝集体の形成、タンパク質分解、およびタンパク質断片化を査定するために、最も一般的および容易な方法である。したがって、本開示の液体製剤の安定性を、これらの方法によって査定することができる。
【０３６４】
例えば、本開示の液体製剤の安定性を、ＨＰＳＥＣによって評価することができ、ピークの面積率は、非分解抗体または非分解抗体断片を表す。特に、約２５０μｇの抗体（その抗体断片を含む）（１０ｍｇ／ｍＬの該抗体または抗体断片を含む約２５μＬの液体製剤）を、ＴＳＫ  ＳＷ  ｘ１ガードカラム（６．０ｍｍ  ＣＸ  ４．０ｃｍ）を備えるＴｏｓｏＨ  Ｂｉｏｓｅｐ  ＴＳＫ  Ｇ３０００ＳＷＸＬカラム（７．８ｍｍ×３０ｃｍ）に注入する。抗体（その抗体断片を含む）を、０．８〜１．０ｍＬ／ｍｉｎの流速で０．１Ｍの硫酸ナトリウムおよび０．０５％のアジ化ナトリウムを含有する０．１Ｍのリン酸二ナトリウムを用いて均一濃度で溶出する。溶出したタンパク質を、２８０ｎｍでＵＶ吸光度を使用して検出する。標準試料を、対照としてアッセイを実施し、結果は、約１２〜１４分で認められた含まれた容積のピーク以外のすべての他のピークと比べて、産物の単量体ピークの面積率として報告される。単量体ピークより早く溶出するピークは、凝集率として記録される。
【０３６５】
本開示の液体製剤は、上記の方法のうちのいずれかによって測定される低から検出不能なレベルの凝集、すなわちタンパク質量で５％以下、４％以下、３％以下、２％以下、１％以下、および０．５％以下の凝集、および低から検出不能なレベル断片化、すなわち無傷の抗体（その抗体断片を含む）を表すピークの総ピーク面積の８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、または９９％以上、または９９．５％以上を示す。ＳＤＳ−ＰＡＧＥを、抗体断片化を測定するために使用する場合、染色したまたは放射性同位体を用いて標識した各バンドの密度または放射活性を、測定することができ、非分解抗体（その抗体断片を含む）を表すバンドの密度％または放射活性％を得ることができる。
【０３６６】
本開示の液体製剤の安定性を、製剤の抗体の生物活性を測定する任意のアッセイによって査定することができる。抗体の生物活性は、抗原結合活性、リガンド−受容体の相互作用の遮断等を含むがこれらに限定されない（以下を参照）。抗体（その抗体断片を含む）の抗原結合活性を、ＥＬＩＳＡ、放射免疫アッセイ、ウエスタンブロット等を含む、当業者に知られている任意の方法によって測定することができる。また、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）（本明細書にすべてが参照によって組み込まれる）を参照されたい。ＥＬＩＳＡベースのアッセイを、例えば、ＩＣＯＳポリペプチドと特異的に結合するための抗体（その抗体断片を含む）の能力と標準試料の抗体のものとを比較するために使用することができる。
【０３６７】
本開示の液体抗体製剤の純度を、例えば、限定されないがＨＰＳＥＣ等の当業者によく知られている任意の方法によって測定することができる。液体抗体製剤の無菌性を、例えば無菌の大豆カゼイン消化培地および液体チオグリコール酸培地に、０．４５μｍの表面気孔率を有する無菌のフィルタを介して液体抗体製剤をフィルタすることによって試験液体抗体製剤を接種する等の当業者によく知られた任意の方法によって査定することができる。Ｓｔｅｒｉｓｕｒｅ（商標）またはＳｔｅｒｉｔｅｓｔ（商標）方法を使用する場合、各フィルタ装置を無菌的に約１００ｍＬの無菌の大豆カゼイン消化培地または液体チオグリコール酸培地で充填する。従来の方法を使用する場合、検証したフィルタを、１００ｍＬの無菌の大豆カゼイン消化培地または液体チオグリコール酸培地へ無菌的に移動する。培地を適切な温度でインキュベートし、細菌または真菌の成長の形跡について１４日間３回観察する。
【０３６８】
５．２７．抗体製剤を投与する方法
本開示は、疾患、例えば、本開示の液体製剤の有効量の対象に対して投与することによって、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、自己免疫病もしくは疾患、炎症性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞増殖性疾病もしくは疾患、悪性腫瘍、Ｔ細胞悪性腫瘍、移植拒絶反応、移植片対宿主病、またはそれらの症状の１つ以上の防止、処置および／または管理の方法を、提供する。様々な送達系が知られており、本開示の液体製剤または予防もしくは治療剤を投与するために使用され得る。本開示または治療（例えば、予防または治療剤）の抗体液体製剤を投与する方法は、非経口的投与（例えば、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、および皮下）、硬膜外投与、局所投与、およびムコサール投与（例えば、限定されないが鼻腔内および経口経路）を含むがこれらに限定されない。特定の実施形態において、本開示の液体製剤を、筋肉内、静脈内、または皮下に投与する。一実施形態において、本開示の液体製剤を皮下投与する。任意の簡便な経路によって、例えば注入または急速投与によって、上皮または粘膜皮膚の内張り（例えば、口腔粘膜、直腸および腸管粘膜等）を介しての吸収によって製剤を、投与することができ、他の生物活性剤と共に投与することができる。投与を全身または局部に行うことができる。
【０３６９】
本開示は、本開示の液体製剤が、抗体（その抗体の断片を含む）の量を示したアンプルまたは小袋等の密閉した容器にパッケージされるように提供する。一実施形態において、本開示の液体製剤は、抗体（その抗体の断片を含む）の量および濃度を示して密閉された容器にある。一実施形態において、本開示の液体製剤は、密閉した容器内に供給され、約１ｍＬ、約２ｍＬ、約３ｍＬ、約４ｍＬ、約５ｍＬ、約６ｍＬ、約７ｍＬ、約８ｍＬ、約９ｍＬ、約１０ｍＬ、約１５ｍＬ、または約２０ｍＬの量で、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１７５ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ、または約３００ｍｇ／ｍＬのヒトＩＣＯＳと特異的に結合する抗体（その抗体の断片を含む）を含む。本開示の特定の実施形態において、本開示の液体製剤は、密閉した容器に供給され、静脈内注射に関して、ヒトＩＣＯＳ（例えば、限定されないが、またはその抗原結合断片）と特異的に結合する少なくとも約１５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１３０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１７５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２５０ｍｇ／ｍＬまたは少なくとも約３００ｍｇ／ｍＬの抗体（その抗体の断片を含む）、および反復皮下投与に関してヒトＩＣＯＳ（例えば、限定されないがまたはその断片）と特異的に結合する少なくとも約１５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約８０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１３０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１７５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２５０ｍｇ／ｍＬまたは少なくとも約３００ｍｇ／ｍＬの抗体（その抗体の断片を含む）を含む。
【０３７０】
ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、自己免疫病もしくは疾患、炎症性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞増殖性疾病もしくは疾患、悪性腫瘍、Ｔ細胞悪性腫瘍、移植拒絶反応、移植片対宿主病、またはそれらの症状うちの１つ以上の防止、処置および／または管理に効果的であろう本開示の液体製剤の量を、当該技術においてよく知られているまたは本明細書に記載される．標準的な臨床的な技法によって測定することができる。製剤で利用される正確な用量は、投与の経路、および炎症性疾患、または自己免疫疾患の重篤度次第でもあり、医師およびそれぞれの患者の状況の判断によって決定されるべきである。効果的な用量を、インビトロまたは動物モデル試験システムに由来する用量反応曲線から外挿することができる。
【０３７１】
５．２８．薬学的な製剤
本開示は、ＩＣＯＳ抗原と結合しヒトＡＤＣＣを媒介する治療抗体を使用して、限定されないが、ヒト対象の慢性感染、自己免疫病もしくは疾患、炎症性疾病もしくは疾患、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、移植拒絶反応、およびＴ細胞増殖性疾患等の、ヒト対象のＴ細胞媒介疾病および疾患の処置に対する免疫療法製剤および方法にも関する。
【０３７２】
本開示は、エフェクター機能を増強したＩｇＧ１またはＩｇＧ３ヒトアイソタイプの抗ＩＣＯＳ抗体を含む薬学的な製剤に関する。本開示は、ヒトＡＤＣＣを媒介するＩｇＧ２またはＩｇＧ４ヒトアイソタイプのヒトまたはヒト化抗ＩＣＯＳ抗体を含む薬学的な製剤にも関する。ある実施形態において、本開示は、増強したエフェクターを含むモノクローナル抗ＩＣＯＳ抗体を含む薬学的な製剤にも関する。
【０３７３】
治療製剤および療法を、限定されないが、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、糖尿病、乾癬、および過敏症反応（例えば、アレルギー、枯草熱、喘息、および急性浮腫原因タイプＩ過敏症反応）等の自己免疫病と診断されたヒト対象を治療するために記載する。本開示は、限定されないが炎症性腸疾患（クローン病および潰瘍性大腸炎）、グレーブス病、橋本甲状腺炎、および真性糖尿病等の慢性炎症性疾患と診断されたヒト対象の処置のための製剤および療法に関する。
【０３７４】
治療製剤および療法を、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞およびそれらの前駆物質から由来したＴ細胞悪性腫瘍と診断されたヒト対象を治療するために記載する。
【０３７５】
特定の実施形態において、本開示の製剤は、補体依存性細胞傷害活性、または抗体依存性食作用を媒介することができる抗ＩＣＯＳ抗体を含む。本開示の製剤および方法は、他のＴ細胞指向性免疫療法よりも、Ｔ細胞のより限られた集団を標的とする利点も有する。例えば、本開示の製剤は、活性化したＴ細胞、例えば、限定されないが活性化したＴ細胞を特異的に標的とするために効果的であることができる。したがって、本開示の方法および製剤は、循環する活性化したＣＤ４＋Ｔ細胞ならびに活性化したＣＤ８＋Ｔ細胞を減少するまたは枯渇させるために効果的であることができる。
【０３７６】
したがって、一様態において、本開示は、あまり標的にされない治療剤および療法よりも少数のおよび／または軽症の合併症と付随したＧＶＨＤおよび移植片拒絶の処置および防止に対する抗ＩＣＯＳ抗体製剤を提供する。一実施形態において、本開示の製剤および方法を、本開示の方法および製剤の不在下で可能性のある量より低用量の従来の治療剤と共に使用する。別の実施形態において、本開示の製剤および方法は、放射線治療、高用量化学療法、または脾摘出術等の治療のより過酷な形態を不必要にする。
【０３７７】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体製剤を、ＧＶＨＤおよび移植片拒絶の処置または防止のために、単独または他の治療剤または療法と組み合わせて、移植の前または後に移植患者に投与することができる。例えば、抗ＩＣＯＳ抗体製剤を、同種移植片の移植前またはその後、移植患者から活性化したＴ細胞を枯渇させるために使用することができる。抗ＩＣＯＳ抗体製剤を、移植前、またはドナー内、またはＧＶＨＤおよび移植片拒絶に対する予防として、エクスビボの移植片から活性化したＴ細胞を枯渇させるために使用することもできる。
【０３７８】
５．２９．薬学的な製剤、投与、および投薬
本開示の薬学的な製剤は、増強したエフェクター機能を含む活発な成分の抗ＩＣＯＳ抗体を含む。製剤は、ヒト患者への投与に対して適切な重量および容積の単位で所望の応答を産生するために有効な量にて裸抗体、免疫複合体、または融合タンパク質を含み、好ましくは無菌である。その応答は、例えば、限定されないがＴ細胞枯渇、ＩＬ−１７枯渇、Ｔ細胞悪性腫瘍の退行、または疾病症状の減少等の抗ＩＣＯＳ抗体製剤の生理学的効果を測定することで測定することができる。他のアッセイは、当業者に知られるであろう、そしてその応答（例えば、限定されないがＳＬＥＤＡＩ、ＢＩＬＡＧ、ＰＲＯ）のレベルを測定するために利用することができる。応答を監視するために使用することができる追加アッセイは、組織生検（例えば、皮膚生検）の免疫組織化学、組織試料（例えば、皮膚生検、扁桃腺生検、血液）のＩＣＯＳｍＲＮＡ発現、血液細胞のフローサイトメトリー、組織試料（例えば、皮膚生検、血液）のマイクロアレイ分析、組織試料（例えば、皮膚生検、血液）のプロテオミクス分析、抗体アレイ分析、ＳＮＰ分析を含むがこれらに限定されない。
【０３７９】
５．２９．１．投与および投薬
ヒト患者に対する本開示の製剤の投与を、局所カテーテルを介して灌流によって、または直接病巣内注射によって、静脈内、皮内、経皮、皮下、筋肉内、吸入（例えば、エアロゾルを通して）、頬側（例えば、舌下）、局所（すなわち気道表面を含む、皮膚およびムコサール表面の両方）、くも膜下腔内、関節内、胸膜内、脳内、動脈内、腹腔内、経口、リンパ内、鼻腔内、直腸または腟内投与を含むがこれらに限定されない、任意の経路によって実施することができる。一実施形態において、本開示の製剤を、規定した期間（例えば、０．５〜２時間）に与えられた静脈内プッシュまたは静脈内注入よって投与することができる。ある症例で最も適した経路は、当該技術においてよく知られているように、対象の種類、年齢、性別、および全体の状況等の因子、治療している状況の本質および重症度および／または投与されている特定の製剤（すなわち投与量、製剤）の本質に依存するであろうが、本開示の製剤を、蠕動方法または徐放性製剤の形態で送達することができる。特定の実施形態において、投与の経路は、ある期間にわたって１週間に１回または２回、急速投与または継続注入を経由する。他の特定の実施形態において、投与の経路は、随意に１ヶ月に１、２、３回または４回皮下注射によって実施する。一実施形態において、本開示の製剤および／または方法を、外来患者ベースで投与する。
【０３８０】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤の用量を、患者体重のｍｇ／ｋｇの単位で測定する。他の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤の用量を、患者除脂肪体重（すなわち、体重マイナス体脂肪量）のｍｇ／ｋｇの単位で測定する。さらに他の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤の用量を、患者の体表面積のｍｇ／ｍ２の単位で測定する。さらに他の実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤の用量を、患者へ投与する用量につきｍｇの単位で測定する。用量のいずれかの測定を、本開示の製剤および方法と併せて使用することができ、投与量単位を、当該技術の標準方法によって変換することができる。
【０３８１】
当業者は、投与量が、対象（例えば、疾病の段階）の年齢、性別、種類、および状態、細胞枯渇の所望の度合い、治療される疾病および／または使用される特定の抗体もしくは抗原結合断片を含む多くの要素を基にして選択することができ、当業者によって測定することができることが理解されるであろう。例えば、本開示の製剤の有効量を、インビトロ試験システムまたは動物モデル（例えば、コットンラットまたはサル）試験システムから派生した用量反応曲線から外挿することができる。抗体の効果の評価に対するモデルおよび方法は、当該技術において知られている（Ｗｏｏｌｄｒｉｄｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，８９（８）：２９９４-２９９８（１９９７））、本明細書にすべてが参照によって組み込まれる）。ある実施形態において、特定のＩＣＯＳを発現するＴ細胞悪性腫瘍に対して、抗体治療に対する当該技術における治療療法基準を、本開示の製剤および方法と共に使用することができる。
【０３８２】
本開示の方法で使用することができる投与計画の例は、１日に１回、週に３回（間欠）、週に１回、隔週に１回、月に１回、隔月に１回、または年に４回（３ヶ月に１回）を含むがこれらに限定されない。ある実施形態において、投与計画は、月に１回の投薬または投薬を６〜８週間に１回を含むがこれらに限定されない。
【０３８３】
当業者は、投与量が維持療法と比べて初回の処置に対して、一般的に高い、および／または投与の頻度が多いことが理解されるであろう。
【０３８４】
本開示のいくつかの実施形態において、抗ＩＣＯＳ抗体は、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞と結合し、結果としてＩＣＯＳを発現するＴ細胞（本明細書に記載されるように）の効率的な（すなわち、低投与量）枯渇を生じることができる。ある実施形態において、（薬学的な製剤の一部として薬学的に許容される担体に随意にある）抗体の投与量は、少なくとも約０．０００５、０．００１、０．０５、０．０７５、０．１、０．２５、０．３７５、０．５、１、２．５、５、１０、２０、３７．５、または５０ｍｇ／ｍ２および／または約５００、４７５、４５０、４２５、４００、３７５、３５０、３２５、３００、２７５、２５０、２２５、２００、１７５、１５０、１２５、１００、７５、６０、５０、３７．５、２０、１５、１０、５、２．５、１、０．５、０．３７５、０．１、０．０７５、または０．０１ｍｇ／ｍ２未満である。ある実施形態において、投与量は、約０．０００５〜約２００ｍｇ／ｍ２の間、約０．００１〜１５０ｍｇ／ｍ２の間、約０．０７５〜１２５ｍｇ／ｍ２の間、約０．３７５〜１００ｍｇ／ｍ２の間、約２．５〜７５ｍｇ／ｍ２の間、約１０〜７５ｍｇ／ｍ２の間、および約２０〜５０ｍｇ／ｍ２の間である。関連した実施形態において、使用される抗ＩＣＯＳ抗体の投与量は、患者の体重の少なくとも約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０、１０．５、１１、１１．５、１２、１２．５、１３、１３．５、１４、１４．５、１５、１５．５、１６、１６．５、１７、１７．５、１８、１８．５、１９、１９．５、２０、２０．５ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態において、使用する裸抗ＩＣＯＳ抗体の用量は、患者の体重の少なくとも約１〜１０、５〜１５、１０〜２０または１５〜２５ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態において、使用する抗ＩＣＯＳ抗体の用量は、患者の体重の少なくとも約１〜２０、３〜１５、または５〜１０ｍｇ／ｋｇである。他の実施形態において、使用する抗ＩＣＯＳ抗体の用量は、患者の体重の少なくとも約５、６、７、８、９、または１０ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態において、（薬学的な製剤の一部として薬学的に許容される担体に随意にある）抗体の単一投与量単位は、少なくとも約０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、１３６、１３８、１４０、１４２、１４４、１４６、１４８、１５０、１５２、１５４、１５６、１５８、１６０、１６２、１６４、１６６、１６８、１７０、１７２、１７４、１７６、１７８、１８０、１８２、１８４、１８６、１８８、１９０、１９２、１９４、１９６、１９８、２００、２０４、２０６、２０８、２１０、２１２、２１４、２１６、２１８、２２０、２２２、２２４、２２６、２２８、２３０、２３２、２３４、２３６、２３８、２４０、２４２、２４４、２４６、２４８、または２５０マイクログラム／ｍ２であることができる。他の実施形態において、用量は、単一投与量単位当たり１００ｍｇ以下である。
【０３８５】
本開示の方法のいくつかの実施形態において、本開示の抗体および／または製剤を、約３７５ｍｇ／ｍ２よりも低い用量、約３７．５ｍｇ／ｍ２よりも低い用量、約０．３７５ｍｇ／ｍ２よりも低い用量および／または約０．０７５ｍｇ／ｍ２〜約１２５ｍｇ／ｍ２の間の用量で投与することができる。本開示の方法のある実施形態において、投与計画は、間隔を繰り返して投与される低用量を含む。例えば、一実施形態において、本開示の製剤を、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１４、１５、２０、２１、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２０、１２５、１５０、１７５、または２００日に１回の間隔で約３７５ｍｇ／ｍ２より低い用量で投与することができる。
【０３８６】
規定の投与量は、結果として、少なくとも約１、２、３、５、７、１０、１４、２０、３０、４５、６０、７５、９０、１２０、１５０、または１８０日以上の期間、本開示の製剤および方法を使用して治療されるヒトにおいてＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を生じることができる。ある実施形態において、本開示の方法は、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞を、本開示の製剤および方法の使用前に治療されている患者のＩＣＯＳを発現するＴ細胞レベルと比べて少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％枯渇する。本開示の方法の他の実施形態において、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞を、ヒトに対する典型的な標準ＩＣＯＳを発現するＴ細胞レベルと比べて少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％枯渇させる。関連した実施形態において、ヒトに対する典型的な標準ＩＣＯＳを発現するＴ細胞レベルを、年齢、性別、体重、および他の要因について治療されている患者と比較可能な患者を使用して測定する。
【０３８７】
本開示のある実施形態において、抗体または抗原結合断片の約１２５ｍｇ／ｍ２以下の投薬によって、結果として約７、１４、２１、３０、４５、６０、９０、１２０、１５０、または２００日の期間、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を生じる。別の代表的な実施形態において、３７．５ｍｇ／ｍ２以下の投薬によって、少なくとも約７、１４、２１、３０、４５、６０、９０、１２０、１５０、または２００日の期間、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞を枯渇させる。さらに他の実施形態において、約０．３７５ｍｇ／ｍ２以下の投薬によって、結果として少なくとも約７、１４、２１、３０、４５、または６０日間ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を生じる。別の実施形態において、約０．０７５ｍｇ／ｍ２以下の投薬によって、結果として、少なくとも約７、１４、２１、３０、４５、６０、９０、１２０、１５０、または２００日の期間ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を生じる。さらに他の実施形態において、約０．０１ｍｇ／ｍ２、０．００５ｍｇ／ｍ２またはさらに０．００１ｍｇ／ｍ２以下の投薬によって、結果として、少なくとも約３、５、７、１０、１４、２１、３０、４５、６０、９０、１２０、１５０、または２００日間、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を生じる。これらの実施形態によって、投与量を任意の適した経路で投与することができるが、皮下経路で随意に投与する。
【０３８８】
別の態様として、本開示は、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇および／またはＴ細胞媒介疾患の処置が、現在用いられている方法を利用するよりも、抗体または抗体断片の低投与量を達成することができるという発見を提供する。したがって、別の実施形態において、本開示は、ＩＣＯＳと特異的に結合する抗体の有効量をヒトに投与することを含む、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞を枯渇させる、および／またはＴ細胞媒介疾患を治療する方法を提供し、約５００、４７５、４５０、４２５、４００、３７５、３５０、３２５、３００、２７５、２５０、２２５、２００、１７５、１５０、１２５、１００、７５、６０、５０、３７．５、２０、１０、５、２．５、１、０．５、０．３７５、０．２５、０．１、０．０７５、０．０５、０．００１、０．０００５ｍｇ／ｍ２以下の投与量によって、結果として、少なくとも約３、５、７、１０、１４、２１、３０、４５、６０、７５、９０、１２０、１５０、１８０、または２００日以上の期間、２５％、３５％、５０％、６０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％以上のＩＣＯＳを発現するＴ細胞（循環するおよび／または組織ＩＣＯＳを発現するＴ細胞）の枯渇を生じる。代表的な実施形態において、約１２５ｍｇ／ｍ２または７５ｍｇ／ｍ２以下の投与量によって、結果として少なくとも約７、１４、２１、３０、６０、７５、９０、１２０、１５０、または１８０日間、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の少なくとも約５０％、７５％、８５％、または９０％枯渇を生じる。他の実施形態において、約５０、３７．５または１０ｍｇ／ｍ２の投与量によって、結果として、少なくとも約７、１４、２１、３０、６０、７５、９０、１２０、または１８０日間、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の少なくとも約５０％、７５％、８５％、または９０％枯渇を生じる。さらに他の実施形態において、約０．３７５または０．１ｍｇ／ｍ２の投与量によって、結果として、少なくとも約７、１４、２１、３０、６０、７５、または９０日間、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の少なくとも約５０％、７５％、８５％、または９０％枯渇を生じる。さらなる実施形態において、約０．０７５、０．０１、０．００１、または０．０００５ｍｇ／ｍ２の投与量によって、少なくとも約７、１４、２１、３０、または６０日間、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の少なくとも約５０％、７５％、８５％、または９０％枯渇を生じる。
【０３８９】
本開示のある実施形態において、用量を、限定されないが、骨髄等の血液または組織で一定の用量を維持するために増やすまたは縮小することができる。関連した実施形態において、本開示の製剤および方法の抗体の所望のレベルを維持するために、用量を、約２％、５％、８％、１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、および９５％増やすまたは縮小する。
【０３９０】
ある実施形態において、投与量を、調節することができる、および／または注入速度を、本開示の製剤および方法に対する患者の免疫原反応を基に縮小することができる。
【０３９１】
本開示で包含される抗体、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、および融合タンパク質の製剤について、患者に投与した投与量を、投与される用量をｍｇ／ｋｇでかけたキログラム（ｋｇ）で表した患者の体重を使用して計算することができる。投与される（ｍＬでの）必要な容積を、抗体製剤の濃度で割った必要なｍｇ用量を使用して決定する。最終の計算された必要な容積は、本開示の抗体製剤を投与するために、シリンジへ必要な限りバイアルの内容物をプールすることによって得られるであろう。最終の計算された必要な容積は、薬物を投与するために、シリンジへ必要な限りバイアルの内容物をプールすることによって得られるであろう。抗体製剤の最大容積の２．０ｍＬを、部位ごとに注入することができる。（ｍＬでの）用量を、以下の式を使用して計算することができる。用量（ｍＬ）＝［ボランティアの体重］（ｋｇ）×［用量］ｍｇ／ｋｇ÷抗体製剤の１００ｍｇ／ｍＬ。一般的に、ヒト抗体は、外来性ポリペプチドに対する免疫応答によって、他の種類の抗体よりもヒト体内でより長い半減期を有する。したがって、ヒト抗体の低投与量および投与の低下は、多くの場合可能である。さらに、製剤の抗体（その抗体断片を含む）の濃度を増加する、抗体（その抗体断片を含む）の親和性および／または結合活性を増加する、および／または抗体（その抗体断片を含む）の半減期を増加することによって、本開示の液体製剤の投与の投与量、容積、および頻度を、縮小することができる。
【０３９２】
特定の実施形態において、患者に対して投与される投与量を、投与される用量をｍｇ／ｋｇでかけたキログラム（ｋｇ）で表した患者の体重を使用して計算するであろう。投与される（ｍＬでの）必要な容積を、製剤（１００ｍｇ／ｍＬ）の抗体（その抗体の断片を含む）の濃度で割った必要なｍｇ用量を使用して決定する。最終の計算された必要な容積を、薬物を投与するために、シリンジへ必要な限りバイアルの内容物をプールすることによって得ることができる。製剤の抗体（その抗体の断片を含む）の最大容積の２．０ｍＬを、部位ごとに注入することができる。
【０３９３】
一実施形態において、本開示の液体製剤のヒトＩＣＯＳ（例えば、限定されないが、またはその断片）と特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）の０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ／週、０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ／週、０．０１〜５ｍｇ／週、０．０１〜２ｍｇ／週、０．０１〜１ｍｇ／週、０．０１〜０．５ｍｇ／週、０．０１〜０．２ｍｇ／週、０．０１〜０．１ｍｇ／週を、炎症性疾患、自己免疫疾患、または悪性腫瘍の対象に投与する。別の実施形態において、本開示の液体製剤のヒトＩＣＯＳ（例えば、限定されないが、またはその断片）と特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）の０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ／月、０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ／月、０．０１〜５ｍｇ／月、０．０１〜２ｍｇ／月、０．０１〜１ｍｇ／月、０．０１〜０．５ｍｇ／月、０．０１〜０．２ｍｇ／月、０．０１〜０．１ｍｇ／月を、炎症性疾患、自己免疫疾患、または悪性腫瘍の対象に投与する。さらなる実施形態において、本開示の液体製剤のヒトＩＣＯＳ（例えば、限定されないが、またはその断片）と特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）の０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ／２ヶ月、０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ／２ヶ月、０．０１〜５ｍｇ／２ヶ月、０．０１〜２ｍｇ／２ヶ月、０．０１〜１ｍｇ／２ヶ月、０．０１〜０．５ｍｇ／２ヶ月、０．０１〜０．２ｍｇ／２ヶ月、０．０１〜０．１ｍｇ／２ヶ月を、炎症性疾患、自己免疫疾患、または悪性腫瘍の対象に投与する。別の実施形態において、本開示の液体製剤の予防または治療効果のある量の１つ以上の用量を対象に投与し、予防または治療効果のある量は、それぞれの用量で異なる。
【０３９４】
一実施形態において、本開示の液体製剤を、ＩＣＯＳを発現する細胞を継続的に枯渇させる所望のレベル（例えば、約０．００１〜約１００μｇ／ｍＬ）でヒトＩＣＯＳに対して特異的な抗体の血漿濃度を維持する投与計画で投与する。特定の実施形態において、抗体の血漿濃度を、約０．００１μｇ／ｍＬ、約０．０１μｇ／ｍＬ、約０．１μｇ／ｍＬ、約０．２μｇ／ｍＬ、約０．５μｇ／ｍＬ、約１μｇ／ｍＬ、約２μｇ／ｍＬ、約３μｇ／ｍＬ、約４μｇ／ｍＬ、約５μｇ／ｍＬ、約６μｇ／ｍＬ、約７μｇ／ｍＬ、約８μｇ／ｍＬ、約９μｇ／ｍＬ、約１０μｇ／ｍＬ、約１５μｇ／ｍＬ、約２０μｇ／ｍＬ、約２５μｇ／ｍＬ、約３０μｇ／ｍＬ、約３５μｇ／ｍＬ、約４０μｇ／ｍＬ、約４５μｇ／ｍＬ、または約５０μｇ／ｍＬで維持する。対象の望ましい血漿濃度は、疾病または疾患の本質、疾病または疾患の重症度、および対象の状態を含むがこれらに限定されないいくつかの要因次第で変化するであろう。かかる投与計画を、慢性疾病または疾患の防止、処置、および／または管理において、特に有益である。
【０３９５】
別の実施形態において、ヒト対象に、本開示の液体製剤のヒトＩＣＯＳと特異的に結合する抗体の予防または治療効果のある量の１つ以上の用量を投与し、該対象に投与した本開示の液体製剤の抗体の用量の予防または治療効果のある量は、処置の進展につれて、例えば、約０．０１μｇ／ｋｇ、約０．０２μｇ／ｋｇ、約０．０４μｇ／ｋｇ、約０．０５μｇ／ｋｇ、約０．０６μｇ／ｋｇ、約０．０８μｇ／ｋｇ、約０．１μｇ／ｋｇ、約０．２μｇ／ｋｇ、約０．２５μｇ／ｋｇ、約０．５μｇ／ｋｇ、約０．７５μｇ／ｋｇ、約１μｇ／ｋｇ、約１．５μｇ／ｋｇ、約２μｇ／ｋｇ、約４μｇ／ｋｇ、約５μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ、約１５μｇ／ｋｇ、約２０μｇ／ｋｇ、約２５μｇ／ｋｇ、約３０μｇ／ｋｇ、約３５μｇ／ｋｇ、約４０μｇ／ｋｇ、約４５μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ、約５５μｇ／ｋｇ、約６０μｇ／ｋｇ、約６５μｇ／ｋｇ、約７０μｇ／ｋｇ、約７５μｇ／ｋｇ、約８０μｇ／ｋｇ、約８５μｇ／ｋｇ、約９０μｇ／ｋｇ、約９５μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ、または約１２５μｇ／ｋｇ増加する。
【０３９６】
別の実施形態において、対象（例えば、ヒト）に、本開示の液体製剤のヒトＩＣＯＳと特異的に結合する抗体の予防または治療効果のある量の１つ以上の用量を投与し、該対象に投与した本開示の液体製剤の抗体の予防または治療効果のある量の用量は、処置が進展するにつれ、例えば、約０．０１μｇ／ｋｇ、約０．０２μｇ／ｋｇ、約０．０４μｇ／ｋｇ、約０．０５μｇ／ｋｇ、約０．０６μｇ／ｋｇ、約０．０８μｇ／ｋｇ、約０．１μｇ／ｋｇ、約０．２μｇ／ｋｇ、約０．２５μｇ／ｋｇ、約０．５μｇ／ｋｇ、約０．７５μｇ／ｋｇ、約１μｇ／ｋｇ、約１．５μｇ／ｋｇ、約２μｇ／ｋｇ、約４μｇ／ｋｇ、約５μｇ／ｋｇ、約１０μｇ／ｋｇ、約１５μｇ／ｋｇ、約２０μｇ／ｋｇ、約２５μｇ／ｋｇ、約３０μｇ／ｋｇ、約３５μｇ／ｋｇ、約４０μｇ／ｋｇ、約４５μｇ／ｋｇ、約５０μｇ／ｋｇ、約５５μｇ／ｋｇ、約６０μｇ／ｋｇ、約６５μｇ／ｋｇ、約７０μｇ／ｋｇ、約７５μｇ／ｋｇ、約８０μｇ／ｋｇ、約８５μｇ／ｋｇ、約９０μｇ／ｋｇ、約９５μｇ／ｋｇ、約１００μｇ／ｋｇ、または約１２５μｇ／ｋｇ減少する。
【０３９７】
予防または治療剤の投与量は、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（６０ｔｈ  ｅｄ．，２００６）に記載される。
【０３９８】
５．２９．２．毒性試験
本開示の製剤および／または処置療法の耐性、毒性、および／または有効性を、細胞培養また実験用動物において標準的な薬学的な手順によって、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％に対して致死的な用量）、ＥＤ５０（集団の５０％で治療効果のある用量）、およびＩＣ５０（５０％抑制を達成するために効果的な用量）を決定するために、測定することができる。一実施形態において、用量は、循環するＩＣＯＳを発現するＴ細胞の少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または９９％枯渇を達成するために効果的な用量である。有毒と治療効果との用量割合は治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０の割合として現すことができる。大きな治療指数を示す治療が好ましくあり得る。有毒な副作用を示す治療を使用することができるが、ＩＣＯＳ陰性細胞に対して、潜在的な損害を最小限にするために、ＩＣＯＳを発現する細胞に対してかかる薬剤を標的とする送達系を設計するために、注意を払うべきであり、その結果、副作用を減少する。
【０３９９】
細胞培養アッセイおよび動物研究から得たデータを、ヒトに使用するための製剤および／または処置療法の投与量の範囲を処方するために、使用することができる。かかる薬剤の投与量は、毒性をほとんどあるいは全く持たないＥＤ５０を含む循環する濃度の範囲内にあることができる。投与量は、利用した剤形および利用した投与の経路によって、この範囲内で変化することができる。本開示の方法で使用する任意の治療について、治療効果のある用量を適切な動物モデルによって見積もることができる。例えば、Ｆｒｅｉｒｅｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ａｇｅｎｔｓ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ，  ｒａｔ，  ｍｏｎｋｅｙ，  ｄｏｇ，  ａｎｄ  ｈｕｍａｎ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  Ｒｅｐｏｒｔｓ，ＮＣＩ１９６６  ４０：２１９-２４４で提供されているように、動物モデルの種類次第で、用量を当該技術で認められた式によってヒト用に量ることができる。細胞培養アッセイから得られるデータは、可能性のある毒性の予測に有用であり得る。細胞培養で測定されるように、ＩＣ５０（すなわち、症状の最大半量の抑制を達成する試験化合物の濃度）を含む循環する血漿濃度範囲を達成するための特定の用量を処方するために、動物研究を使用することができる。かかる情報を、ヒトで有用な用量をより正確に測定するために使用することができる。血漿薬物レベルを、例えば、高速液体クロマトグラフィー、ＥＬＩＳＡによって、または細胞ベースアッセイによって測定することができる。
【０４００】
５．３０．治療上の使用
増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤を、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、多発性硬化症、糖尿病、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ならびに乾癬、炎症性腸疾患（クローン病および潰瘍性大腸炎）、グレーブス病、橋本甲状腺炎、および真性糖尿病等の慢性炎症性疾患等の自己免疫病の処置のために使用することができる。本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ製剤を、毒素性ショック症候群、炎症性腸疾患、輸血による同種抗原感作、Ｔ細胞依存性Ｂ細胞媒介疾病、および移植片対宿主疾病の処置を軽減するためにも使用することができる。さらに、本開示の製剤および方法は、抗体産生の抑制または増強を要求する治療指標に有用であり得る。
【０４０１】
増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤を、骨髄および臓器移植のための免疫抑制剤としても使用でき、移植片生着を延長するために使用することができる。かかる製剤は、既存の処置に対するかなりの利点を提供することができる。骨髄および臓器移植治療によって、宿主による異質細胞または組織のＴ細胞媒介拒絶と争わなければならない。Ｔ細胞媒介拒絶を抑制するための本治療療法は、シクロスポリンまたはＦＫ５０６の薬物を用いた処置を含む。薬物は効果的であるが、患者は、肝毒性、腎毒性、および神経毒性を含む深刻な副作用を患う。治療のシクロスポリン／ＦＫ５０６クラスに対する標的は、カルシニューリン、遍在性発現を含むホスファターゼである。ＩＣＯＳ発現は、Ｔ細胞に限定されるため、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇は、本免疫療法剤を使用して認めた重症の副作用を欠乏することができる。
【０４０２】
過敏症は、悪化したまたは不適正な、標準的には、有益な免疫応答であり、炎症性反応および組織損傷を引き起こす。抗体媒介である過敏症反応は、ＩＣＯＳを発現する細胞の枯渇による拮抗作用に特に影響されやすい可能性がある。アレルギー、枯草熱、喘息、および急性浮腫は、タイプＩの過敏症反応を引き起こし、これらの反応を、ＩＣＯＳを発現する細胞の枯渇によって抑制することができる。
【０４０３】
全身性エリテマトーデス、関節炎（関節リウマチ、反応性関節炎、乾癬性関節炎）、腎症（糸球体腎炎、膜性、膜性増殖性、巣状分節性、巣状壊死性、半月体、増殖性−−細尿管症）、皮膚障害（天疱瘡および類天疱瘡、結節性紅斑）、内分泌疾患（甲状腺炎−−グレーブス病、橋本病−−インスリン依存性糖尿病）、様々な肺疾患（特に外因性肺胞炎）、様々な脈管障害、セリアック病、ＩｇＡの異常産生を含む、多くの貧血および血小板減少症、ギラン・バレー症候群、ならびに重症筋無力症を含む抗体媒介性過敏症反応を引き起こす疾病を、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤を使用して治療することができる。
【０４０４】
さらに、骨髄腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、およびクリオグロブリン血症等のリンパ球増殖性疾患を、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤を投与することによって抑制することができる。さらに、移植片対宿主病、「人工的な」免疫疾患は、ＩＣＯＳを発現する細胞の枯渇から利益を得ることができる。
【０４０５】
ＩＣＯＳ依存性同時刺激経路は、ＩｇＥ産生を制御するために含まれる。ＩｇＥは、喘息、食品アレルギー、枯草熱、タイプ１の過敏症および副鼻腔炎症等のアレルギー応答を媒介するために、特異的に関与する免疫グロブリンアイソタイプである。アレルゲンへの曝露の際、Ｔ細胞およびＢ細胞の協働を含むプロセスは、結果としてアレルゲンに対して特異的なＩｇＥのＢ細胞産生を生じる。Ｂ細胞によって循環に放出されたアレルゲンに特異的なＩｇＥは、高親和性のＩｇＥ受容体（ＦｃｅＲＩ）を介してマスト細胞および好塩基球と結合する。ＩｇＥと結合するマスト細胞および好塩基球は、感作され、その後のアレルゲンへの曝露が、結果として、表面受容体の架橋とヒスタミンの放出とを生じる。
【０４０６】
本開示は、ＩｇＥ産生を制御するために、およびＩｇＥ媒介疾患を防止するまたは治療するために、抗ＩＣＯＳ抗体の使用について提供する。例として、かかる疾患は、喘息、食品アレルギー、枯草熱、過敏症、および副鼻腔炎症等のアレルギー応答を含む。一実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を、ＩｇＥ産生を部分的にまたは完全に抑制するために使用する。本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を、ＩｇＥレベルを減少するために、処置療法で、別々に、または組み合わせて、使用することができる。
【０４０７】
本開示は、ＩｇＥ産生を部分的または完全に抑制するために、および過剰のまたは不適正なＩｇＥ産生を特徴とする疾患を防止するおよび／または治療するために、ＩｇＥ拮抗薬と組み合わせて抗ＩＣＯＳ抗体の使用に対しても提供する。本明細書で使用する「ＩｇＥ拮抗薬」という用語は、アレルゲン刺激に対する応答を減弱するまたは除去するように、ＩｇＥと細胞上の高親和性の受容体ＦｃｅＲＩとの相互作用を破壊するまたは遮断することが可能な化合物を指す。拮抗薬は、抗ＩｇＥ抗体およびその断片、可溶性ＦｃｅＲＩ受容体およびその断片、抗ＦｃｅＲＩ抗体およびその断片、ＩｇＥ変異およびその断片、ＩｇＥ結合ペプチド、ＦｃｅＲＩ受容体結合ペプチド、ならびにＩｇＥと結合するまたはＦｃｅＲＩ受容体と結合するために、ＩｇＥと競争することができる小分子を含む。本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を、アレルギー性疾患の処置に対して、抗ヒスタミン、アレルゲン脱感作、アレルゲンへの曝露の減少等と組み合わせて使用することもできる。
【０４０８】
本開示は、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体単独で、または治療する喘息に対する１つ以上の薬剤と組み合わせて投与することを含む喘息の防止および／または処置に対しても提供する。かかる薬剤の例は、上記に規定されたように気管支拡張剤（抗コリン剤、ベータ−２アドレナリン受容体刺激薬、ロイコトリエンＤ−４拮抗薬、ニューロキニン拮抗薬、チャネル開口薬、物質Ｐ拮抗薬、トロンボキサンＡ−２拮抗薬、およびキサンチン）、抗炎症薬（５−リポキシゲナーゼ抑制剤、５−リポキシゲナーゼを活性化するタンパク質抑制剤、ホスホジエステラーゼＩＶ抑制剤、血小板活性化因子拮抗薬、呼吸ＮＳＡＩＤＳ、ステロイド、およびチロシンキナーゼ抑制剤）、サイトカイン抑制剤（ＣＤ４、ＩＬ−４およびＩＬ−５抑制剤）ならびにＩｇＥ拮抗薬を含む。
【０４０９】
本開示による製剤および方法は、ＩＣＯＳを発現する細胞の増殖またはＩＣＯＳを発現する細胞によるサイトカイン（例えば、ＩＬ−１７）の産生を制御する（抑制するまたは刺激する）ことができ、その結果様々な病態の抑制およびＩＣＯＳによるシグナル伝達媒介に関する多様な生理学的現象によって生じる様々な疾患の処置または防止を可能にする。
【０４１０】
本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤は、例えば、限定されないが、関節リウマチ、多発性硬化症、自己免疫性甲状腺炎、アレルギー性接触型皮膚炎、慢性炎症性皮膚症（例えば、扁平苔癬）、全身性エリテマトーデス、インスリン依存性真性糖尿病、乾癬、自己免疫性またはアレルギー性疾患、自己免疫病および細胞性免疫によって生じる遅延性アレルギー、関節症（例えば、限定されないが関節リウマチ（ＲＡ）および変形性関節症（ＯＡ））、炎症（例えば、肝炎）、移植片対宿主反応（ＧＶＨ反応）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、組織（例えば、皮膚、、角膜、骨）または臓器（例えば、肝臓、心臓、肺、腎臓、膵臓）の移植に伴う免疫拒絶、異質抗原または自己抗原によって誘発された免疫応答（例えば、該抗原に対する抗体の産生、細胞増殖、サイトカインの産生）、ならびに異常な腸免疫によって生じた疾患（例えば、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、食物アレルギー）の抑制、防止、および／または処置を可能にする。
【０４１１】
さらに、本明細書に記載される製剤および方法を、サイトカイン転写（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、ヌクレオチド合成（例えば、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル）、成長因子シグナル伝達（例えば、シロリムス、ラパマイシン）、およびＴ細胞インターロイキン２受容体（例えば、ダクリズマブ、バシリキシマブ）の抑制剤等の既知の免疫抑制剤と組み合わせて、移植拒絶反応またはＧＶＨＤの抑制／処置に対して利用することができる。特定の実施形態において、本開示の製剤および方法と組み合わせて使用する免疫抑制剤は、以下のうちの１つ以上を含む。アドリアマイシン、アザチオプリン、ブスルファン、シクロホスファミド、シクロスポリンＡ（「ＣｙＡ」）、細胞毒、フルダラビン、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＯＦＥＴＩＬ）、非ステロイド性抗炎症性（ＮＳＡＩＤ）、ラパマイシン、およびタクロリムス（ＦＫ５０６）。
【０４１２】
本開示の製剤および方法を、炎症性疾患、例えば、様々な関節炎（例えば、関節リウマチ、変形性関節症）を伴った炎症、肺炎、肝炎（ウイルス肝炎を含む）、感染症を伴う炎症、炎症性腸疾患、腸炎、腎炎（例えば、糸球体腎炎、腎線維症（ｎｅｐｈｒｏｆｉｂｒｏｓｉｓ））、胃炎、血管炎、膵炎、腹膜炎、気管支炎、心筋炎、脳炎、虚血後の再灌流傷害（心筋虚血再灌流傷害）の炎症、組織および臓器の移植後免疫拒絶に起因する炎症、火傷、様々な皮膚炎症（乾癬、アレルギー性接触型皮膚炎、扁平苔癬）、複数の臓器不全の炎症、ＰＴＣＡまたはＰＴＣＲの手術後の炎症、および動脈硬化症を伴う炎症、および自己免疫性甲状腺炎に対して適用することができる。
【０４１３】
活性成分として増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体を含む本開示の製剤を、様々な疾病、例えば、これらに限定されないが、関節リウマチ、多発性硬化症、自己免疫性甲状腺炎、アレルギー性接触皮膚炎、扁平苔癬、全身性エリテマトーデス、インスリン依存性糖尿病、乾癬、自己免疫病またはアレルギー性疾患、細胞性免疫によって媒介した遅延性アレルギー；関節症（例えば、関節リウマチ（ＲＡ）、変形性関節症（ＯＡ））、炎症（例えば、肝炎）、移植片対宿主反応（ＧＶＨ反応）、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、組織（例えば、皮膚、角膜、および骨）または臓器（例えば、肝臓、心臓、肺、腎臓、膵臓）の移植と付随した免疫拒絶反応、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、および食物アレルギーを抑制する、治療するおよび／または防止するために使用することができる。
【０４１４】
本開示と一致した製剤は、例えば、様々な関節炎（例えば、関節リウマチ、変形性関節症）と付随した炎症、肺炎、（ウイルス肝炎を含む）肝炎、感染症と付随した炎症、炎症性腸疾患、腸炎、腎炎、糸球体腎炎、腎線維症と付随した炎症、胃炎、血管炎、膵炎、腹膜炎、気管支炎、心筋炎、脳炎、炎症と付随した虚血再灌流障害、心筋虚血再灌流障害、組織または臓器の移植後の免疫拒絶反応と付随した炎症、乾癬、アレルギー性接触皮膚炎、扁平苔癬、複数の臓器不全と付随した炎症、ＰＴＣＡまたはＰＴＣＲの手術後の炎症、粥状動脈硬と付随した化炎症、ならびに自己免疫性甲状腺炎など、様々なステロイド薬が抗炎症性剤として使用されるいくつかの炎症を治療するまたは防止することを可能にする。
【０４１５】
５．３１．移植
本開示のある態様によると、本開示の製剤および方法で使用される処置療法および用量を、例えば、移植拒絶反応が発生する危険に患者を置くような臨床的な徴候、またはかかる拒絶が発生しているという臨床的な証拠を含む多くの要因を基に選択する。
【０４１６】
本開示は、ＧＶＨＤ、拒絶発症、もしくは移植後リンパ増殖性障害の発生度、重症度、または期間を減少するために、効果的な製剤、方法、および療法を提供する。ある実施形態において、本開示の製剤および方法は、固形の組織または臓器の移植片の虚血性再灌流傷害に対する宿主応答を弱毒化することに効果的である。一実施形態において、本開示の製剤および方法は、移植患者の移植片生着を延長するために、効果的である。
【０４１７】
本開示は、移植患者に対して自家性、同種、または異種である移植片を包含する。本開示によって包含された移植片の種類は、骨髄移植片、末梢性幹細胞移植片、皮膚の移植片、動脈性および静脈性移植片、膵島細胞移植片、ならびに腎臓、肝臓、膵臓、甲状腺、および心臓の移植片を含むがこれらに限定されない組織および臓器の移植片を含む。「移植片」および「移植」という用語を、本明細書で互換的に使用する。一実施形態において、自家性移植片は、骨髄移植片、動脈性移植片、静脈性移植片、または皮膚の移植片である。一実施形態において、同種移植片は、骨髄移植片、角膜ｌ移植片、腎臓移植、膵島細胞移植、または腎臓および膵臓の混合移植である。一実施形態において、移植片は、異種移植であり、可能性のある動物ドナーは、ブタを含むがこれに限定されない。本開示の製剤および方法を、人工的な関節、ステント、またはペースメーカ装置を含むがこれらに限定されない非生物学的な移植片もしくはインプラントに対する有害な免疫応答を抑制するためにも使用することができる。
【０４１８】
本開示の抗ＩＣＯＳ抗体、製剤、および方法を、移植の必要を初めに引き起こす特定の兆候または移植した組織の特定の種類を問わずＧＶＨＤ、拒絶、または移植後リンパ増殖性障害を治療する、または防止するために使用することができる。
【０４１９】
本開示の治療製剤および療法を、関節リウマチ、ＳＬＥ、ＩＴＰ、天疱瘡関連疾患、糖尿病、および強皮症を含むがこれらに限定されない自己免疫病または疾患と診断されたヒト対象を治療するために記載する。
【０４２０】
適切な処置療法を、特定の患者または患者集団に対して、当業者によって決定することができる。特定の実施形態において、処置療法は、移植前処置、移植後維持療法、または移植後処置または急性もしくは慢性拒絶である。ある実施形態において、拒絶が低リスクであると査定された患者に対する療法と比べて、特定の療法は、拒絶応答の発生が高または中間のリスクであると査定された患者に対して異なる。
【０４２１】
ある実施形態において、特定の療法は、拒絶の段階によって異なり、拒絶の遅い段階の患者はより積極的な治療の必要を示す。体液性拒絶反応の段階を、当該技術および知識によって分類することができる。例えば、体液性拒絶反応の段階を、以下の基準によってＩ〜ＩＶの段階のうちの１つとして分類することができる。段階Ｉ潜在的応答：循環する抗ドナー同種抗体、特に抗ＨＬＡ抗体によって特徴付けられる；段階ＩＩサイレント反応：組織学変化または移植片機能障害のない、循環する抗ドナー同種抗体、特に抗ＨＬＡ抗体、およびＣ４ｄ沈着によって特徴付けられる；段階ＩＩＩ無症候性拒絶：移植片の機能障害のない、循環する抗ドナー同種抗体、特に抗ＨＬＡ抗体、Ｃ４ｄ沈着、および組織病理学によって特徴付けられる；段階ＩＶ体液性拒絶反応：循環する抗ドナー同種抗体、特に抗ＨＬＡ抗体、Ｃ４ｄ沈着、組織病理学、および移植の機能障害によって特徴付けられる。
【０４２２】
本開示の抗ＩＣＯＳ抗体、製剤および方法を、単独でまたは他の治療剤もしくは処置療法と組み合わせて、ＧＶＨＤ、拒絶、または移植後のリンパ球増殖性疾患を、治療するまたは防止するために実行することができる。ＧＶＨＤ、拒絶、または移植後のリンパ球増殖性疾患の処置または防止に対する他の治療療法は、例えば、抗リンパ球治療、ステロイド治療、抗体枯渇治療、免疫抑制治療、および血漿交換のうちの１つ以上を含むことができる。
【０４２３】
抗リンパ球治療は、サイモグロブリンとしても称される抗胸腺細胞グロブリンの移植患者に対する投与を含むことができる。抗リンパ球治療は、Ｔ細胞表面抗原に対して作られるモノクローナル抗体のうちの１つ以上の投与も含むことができる。かかる抗体の例は、限定なしに、ＯＫＴ３（商標）（ムロモナブ−ＣＤ３）、ＣＡＭＰＡＴＨ（商標）−１Ｈ（アレムツズマブ）、ＣＡＭＰＡＴＨ（商標）−１Ｇ、ＣＡＭＰＡＴＨ（商標）−１Ｍ、ＳＩＭＵＬＥＣＴ（商標）（バシリキシマブ）、およびＺＥＮＡＰＡＸ（商標）（ダクリズマブ）を含む。特定の実施形態において、抗リンパ球治療は、限定されないがＲＩＴＵＸＡＮ（商標）（リツキシマブ）を含むＢ細胞に対して作られる１つ以上の抗体を含む。
【０４２４】
ステロイド治療は、コルチゾール、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、およびインドメタシンからなる群から選択される１つ以上のステロイドの移植患者への投与を含むことができる。１つ以上のステロイドは、コルチゾール、プレドニゾン、およびメチルプレドニゾロンを限定なしに含む副腎皮質ステロイド薬であることができる。
【０４２５】
抗体枯渇治療は、例えば、静注用免疫グロブリンの移植患者への投与を含むことができる。抗体枯渇治療は、移植前に、エクスビボで移植片に適応される免疫吸着治療も含むことができる。免疫吸着を、任意の適した技法、例えば、タンパク質Ａ親和性、または、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２０抗体、および抗ＣＤ２２抗体等のＴ細胞またはＢ細胞表面マーカーに対して作られる抗体を使用しての抗体ベースの親和性の技法、を使用して達成することができる。
【０４２６】
免疫抑制治療は、サイトカイン転写の抑制剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）、ヌクレオチド合成の抑制剤（例えば、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル）、成長因子シグナル伝達の抑制剤（例えば、シロリムス、ラパマイシン）、およびＴ細胞インターロイキン２受容体の抑制剤（例えば、ダクリズマブ、バシリキシマブ）等の免疫抑制剤のうちの１つ以上の投与を含むことができる。特定の実施形態において、本開示の製剤および方法と組み合わせて使用する免疫抑制剤は、以下のうちの１つ以上を含む。アドリアマイシン、アザチオプリン、ブスルファン、シクロホスファミド、シクロスポリンＡ（「ＣｙＡ」）、細胞毒、フルダラビン、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＯＦＥＴＩＬ）、非ステロイド性抗炎症性（ＮＳＡＩＤ）、ラパマイシン、およびタクロリムス（ＦＫ５０６）。免疫抑制剤は、例えば、Ｂｕｅｒｋｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６７：５３７５−８０（２００１）に記載されるとおり補体の抑制剤、例えば、可溶性補体受容体−１、抗Ｃ５抗体、またはＣ１の小分子抑制剤、も含むことができる。
【０４２７】
一実施形態において、本開示の製剤および方法を、タクロリムスおよびミコフェノール酸モフェチル治療、免疫吸着、静注用免疫グロブリン治療、ならびに血漿交換を限定なしに含む拒絶を抑制するための治療療法の１つ以上の組み合わせで使用することができる。
【０４２８】
５．３２．炎症性疾患
本開示の抗ＩＣＯＳ抗体を、炎症性疾患（例えば、喘息）またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解するために、投与が必要な対象に対して投与することができる。本開示の製剤は、炎症性疾患またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解するために、１つ以上の他の治療、好ましくは（本明細書に記載される予防または治療剤を含むがこれらに限定されない）炎症性疾患の防止、管理、処置、または寛解のために治療を必要としている対象に対して有用な治療と組み合わせて投与することもできる。特定の実施形態において、本開示は、炎症性疾患またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法を提供し、該方法は、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量を必要とする対象に対して投与することを含む。別の実施形態において、本開示は、炎症性疾患またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法を提供し、該方法は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量およびＩＣＯＳポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）以外の１つ以上の治療（例えば、予防または治療剤）の予防または治療効果のある量の用量を、投与を必要とする対象に対して投与することを含む。
【０４２９】
本開示は、かかる炎症性疾患のための従来の治療（例えば、メトトレキサートおよびＴＮＦ−アルファ拮抗薬（例えば、ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標）またはＥＮＢＲＥＬ（商標）））に対して抵抗性のある対象の炎症性疾患のうちの１つ以上の症状を管理する、治療する、または寛解させるための方法を提供し、該方法は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量を該対象に投与することを含む。本開示は、かかる炎症性疾患に対する既存の単一薬剤治療に対して抵抗性のある対象の炎症性疾患の１つ以上の症状を管理する、治療する、または寛解させるための方法も提供し、該方法は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量およびＩＣＯＳポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）以外の１つ以上の治療（例えば、予防または治療剤）の予防または治療効果のある量の用量を該対象へ投与することを含む。本開示は、他の処置に対して抵抗性を認めたが、これらの処置をすでに受けていない患者に対して、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体とその他の処置とを組み合わせて、投与することによって炎症性疾患を管理する、または治療する方法も提供する。本開示は、別の治療で過度の有毒を認めた、または認める可能性のある、すなわち治療される対象に対して容認できないまたは耐えられない副作用を生じる炎症性疾患の処置に対する別の方法も提供する。例えば、本開示の製剤を、対象に対して投与することができ、対象は、ＴＮＦ拮抗薬またはメトトレキサートに対して抵抗性である。さらに、本開示は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体を投与することによって治療され、疾病活性を有さない患者の炎症性疾患の再発を防止するための方法を提供する。
【０４３０】
本開示によって包含される方法によって治療することができる炎症性疾患は、喘息、脳炎、炎症性腸疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、アレルギー性疾患、敗血症性ショック、肺線維症、未分化脊椎関節症、未分化関節症、関節炎、変形性関節症、脊椎関節症（例えば、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、ライター症候群（反応性関節炎）、炎症性骨溶解症、ウィルソン病および、慢性のウイルスまたは細菌感染から生じる慢性炎症を含むがこれらに限定されない。本明細書に記載される通り、いくつかの自己免疫疾患は、炎症性状態に付随する。
【０４３１】
抗炎症性治療およびそれらの投与量、投与の経路、および推奨用法は、当該技術において知られており、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ'ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（６１ｔｈ  ｅｄ．，２００７）等の文献に記載される。
【０４３２】
５．３２．１．抗炎症性治療
本開示は、炎症性疾患またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法を提供し、該方法は、投与を必要とする対象に対して本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体およびＩＣＯＳポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）以外の１つ以上の治療（例えば、予防または治療剤を投与することを含む。炎症性疾患またはその１つ以上の症状の防止、管理、処置、または寛解のために有用であることが知られている、使用されたまたは現在使用されている任意の薬剤または治療は、本明細書に記載される本開示と一致して本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて使用することができる。
【０４３３】
当業者に良く知られる炎症性疾患のための治療で有用である薬剤を含む任意の抗炎症性剤を、本開示の製剤および方法で使用することができる。抗炎症剤の限定されない例は、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド系抗炎症薬、抗コリン薬（例えば、硫酸アトロピン、硝酸メチルアトロピン、および臭化イプラトロピウム（ＡＴＲＯＶＥＮＴ（商標）））、ベータ２−刺激薬（例えば、アルブテロール（ＶＥＮＴＯＬＩＮ（商標）およびＰＲＯＶＥＮＴＩＬ（商標））、ビトルテロール（ＴＯＲＮＡＬＡＴＥ（商標））、レバルブテロール（ＸＯＰＯＮＥＸ（商標））、メタプロテレノール（ＡＬＵＰＥＮＴ（商標））、ピルブテロール（ＭＡＸＡＩＲ（商標））、テルブタリン（ＢＲＥＴＨＡＩＲＥ（商標）およびＢＲＥＴＨＩＮＥ（商標））、アルブテロール（ＰＲＯＶＥＮＴＩＬ（商標）、ＲＥＰＥＴＡＢＳ（商標）、およびＶＯＬＭＡＸ（商標））、ホルモテロール（ＦＯＲＡＤＩＬ  ＡＥＲＯＬＩＺＥＲ（商標））、およびサルメテロール（ＳＥＲＥＶＥＮ（商標）およびＳＥＲＥＶＥＮＴ  ＤＩＳＫＵＳ（商標）））、ならびにメチルキサンチン（例えば、テオフィリン（ＵＮＩＰＨＹＬ（商標）、ＴＨＥＯ−ＤＵＲ（商標）、ＳＬＯ−ＢＩＤ（商標）、ＡＮＤ  ＴＥＨＯ−４２（商標）））を含む。ＮＳＡＩＤの例は、アスピリン、イブプロフェン、セレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標））、ジクロフェナク（ＶＯＬＴＡＲＥＮ（商標））、エトドラク（ＬＯＤＩＮＥ（商標））、フェノプロフェン（ＮＡＬＦＯＮ（商標））、インドメタシン（ＩＮＤＯＣＩＮ（商標））、ケトロラク（ＴＯＲＡＤＯＬ（商標））、オキサプロジン（ＤＡＹＰＲＯ（商標））、ナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮ（商標））、スリンダク（ＣＬＩＮＯＲＩＬ（商標））、トルメチン（ＴＯＬＥＣＴＩＮ（商標））、ロフェコキシブ（ＶＩＯＸＸ（商標））、ナプロキセン（ＡＬＥＶＥ（商標）、ＮＡＰＲＯＳＹＮ（商標））、ケトプロフェン（ＡＣＴＲＯＮ（商標））、およびナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮ（商標））を含むがこれらに限定されない。かかるＮＳＡＩＤは、シクロオキシゲナーゼ酵素（例えば、ＣＯＸ−１および／またはＣＯＸ−２）を抑制することによって機能する。ステロイド系抗炎症薬の例は、グルココルチコイド、デキサメタゾン（ＤＥＣＡＤＲＯＮ（商標））、副腎皮質ステロイド薬（例えば、メチルプレドニゾロン（ＭＥＤＲＯＬ（商標）））、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン（プレドニゾン（商標）およびＤＥＬＴＡＳＯＮＥ（商標））、プレドニゾロン（ＰＲＥＬＯＮＥ（商標）およびＰＥＤＩＡＰＲＥＤ（商標））、トリアムシノロン、アザルフィジン、エイコサノイド（例えば、プロスタグランジン、トロンボキサン、およびロイコトリエン）の抑制剤を含むがこれらに限定されない。
【０４３４】
一実施形態において、本開示の１つ以上の製剤の有効量を、炎症性疾患の危険性のある、または患っている対象に対してマスト細胞プロテアーゼ抑制剤と組み合わせて投与する。別の実施形態において、マスト細胞プロテアーゼ抑制剤は、限定されないがＧＷ−４５、ＧＷ−５８、およびゲニステイン等の、トリプターゼキナーゼ抑制剤である。特定の実施形態において、マスト細胞プロテアーゼ抑制剤は、限定されないがカルホスチン（カルホスチン）Ｃ等のホスファチジルイノシチド−３'（ＰＩ３）−キナーゼ抑制剤である。別の実施形態において、マスト細胞プロテアーゼ抑制剤は、限定されないがスタウロスポリン等のタンパク質キナーゼ抑制剤である。一実施形態において、マスト細胞プロテアーゼ抑制剤を、患部に局部的に投与する。
【０４３５】
炎症性疾患を患った対象に対して本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて投与することができる免疫調節剤の具体的な例は、メトトレキサート、レフルノミド、シクロホスファミド、シトキサン、イムラン、シクロスポリンｅＡ、ミノサイクリン、アザチオプリン、抗生物質（例えば、ＦＫ５０６（タクロリムス））、メチルプレドニゾロン（ＭＰ）、副腎皮質ステロイド薬、ステロイド、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン（シロリムス）、ミゾリビン、デオキシスパガリン、ブレキナル、マロノニトリロアミンド（ｍａｌｏｎｏｎｉｔｒｉｌｏａｍｉｎｄｅ）（例えば、レフルノミド）、抗Ｔ細胞受容体抗体（例えば、抗ＣＤ４抗体（例えば、ｃＭ−Ｔ４１２（Ｂｏｅｒｉｎｇｅｒ）、ＩＤＥＣ−ＣＥ９．１．ＲＴＭ．（ＩＤＥＣおよびＳＫＢ）、ｍＡＢ４１６２Ｗ９４、ＯｒｔｈｏｃｌｏｎｅおよびＯＫＴｃｄｒ４ａ（Ｊａｎｓｓｅｎ−Ｃｉｌａｇ））、抗ＣＤ３抗体（例えば、Ｎｕｖｉｏｎ（Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ）、ＯＫＴ３（Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｊｏｈｎｓｏｎ）、またはＲｉｔｕｘａｎ（ＩＤＥＣ））、抗ＣＤ５抗体（例えば、抗ＣＤ５リシン結合免疫複合体）、抗ＣＤ７抗体（例えば、ＣＨＨ−３８０（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、抗ＣＤ８抗体、抗ＣＤ４０リガンドモノクローナル抗体（例えば、ＩＤＥＣ−１３１（ＩＤＥＣ））、抗ＣＤ５２抗体（例えば、ＣＡＭＰＡＴＨ  １Ｈ（Ｉｌｅｘ））、抗ＣＤ２抗体（例えば、ＭＥＤＩ−５０７（Ｍｅｄｌｍｍｕｎｅ、Ｉｎｃ．、国際公開ＷＯ第０２／０９８３７０号およびＷＯ第０２／０６９９０４号）、抗ＣＤ１１ａ抗体（例えば、Ｘａｎｅｌｉｍ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ））、および抗Ｂ７抗体（例えば、ＩＤＥＣ−１１４）（ＩＤＥＣ））；抗サイトカイン受容体抗体（例えば、抗ＩＦＮ受容体抗体、抗ＩＬ−２受容体抗体（例えば、Ｚｅｎａｐａｘ（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌａｂｓ））、抗ＩＬ−４受容体抗体、抗ＩＬ−６受容体抗体、抗ＩＬ−１０受容体抗体、および抗ＩＬ−１２受容体抗体）、抗サイトカイン抗体（例えば、抗ＩＦＮ抗体、抗ＴＮＦ−アルファ抗体、抗ＩＬ−１ベータ抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−８抗体（例えば、ＡＢＸ−ＩＬ−８（Ａｂｇｅｎｉｘ））、および抗ＩＬ−１２抗体））；ＣＴＬＡ４−免疫グロブリン；ＬＦＡ−３ＴＩＰ（Ｂｉｏｇｅｎ、国際公開ＷＯ第９３／０８６５６号および米国特許第６，１６２，４３２号）；可溶性サイトカイン受容体（例えば、ＴＮＦ−アルファ受容体の細胞外ドメインまたはその断片、ＩＬ−１ベータ受容体の細胞外ドメインまたはその断片、およびＩＬ−６受容体の細胞外ドメインまたはその断片）；サイトカインまたはその断片（例えば、インターロイキン（ＩＬ）−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１１２、ＩＬ−１５、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ、インターフェロン（ＩＦＮ）−アルファ、ＩＦＮ−ベータ、ＩＦＮ−ガンマ、およびＧＭ−ＣＳＦ）；ならびに抗サイトカイン抗体（例えば、抗ＩＬ−２抗体、抗ＩＬ−４抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−９抗体、抗ＩＬ−１０抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１５抗体、抗Ｉ��１７抗体、抗ＴＮＦ−アルファ抗体、および抗ＩＦＮ−ガンマ抗体）を含むがこれらに限定されない。
【０４３６】
当業者によく知られる任意のＴＮＦ−アルファ拮抗薬は、本開示の製剤および方法に使用することができる。炎症性疾患を患った対象に対して本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体を組み合わせて投与することができるＴＮＦ−アルファ拮抗薬の限定されない例は、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、融合タンパク質、ＴＮＦ−アルファと免疫特異的に結合する抗体等の抗体（例えば、ヒト、ヒト化、キメラ、モノクローナル、ポリクローナル、Ｆｖ、ＳｃＦｖ、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ）２断片、およびその抗原結合断片）、核酸分子（例えば、アンチセンス分子または三重らせん体）、有機分子、無機分子、およびＴＮＦ−アルファの機能、活性および／または発現を遮断する、減少する、抑制する、または中和する小分子を含む。様々な実施形態において、ＴＮＦ−アルファ拮抗薬は、リン酸緩衝食塩液（ＰＢＳ）等の対照と比べてＴＮＦ−アルファの機能、活性および／または発現を少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％減少する。ＴＮＦ−アルファと免疫特異的に結合する抗体の例は、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標）；Ｃｅｎｔａｃｏｒ）、Ｄ２Ｅ７（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ／Ｋｎｏｌｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏ．、Ｍｔ．Ｏｌｉｖｅ、Ｎ．Ｊ．）、ＨＵＭＩＣＡＤＥ（商標）としても知られるＣＤＰ５７１、およびＣＤＰ−８７０（両方とも、Ｃｅｌｌｔｅｃｈ／Ｐｈａｒｍａｃｉａ、Ｓｌｏｕｇｈ、Ｕ．Ｋ．）、およびＴＮ３−１９．１２（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９１：２７６２−２７６６；Ｔｈｏｒｂｅｃｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８９：７３７５−７３７９）を含むがこれらに限定されない。本開示は、本開示の製剤および方法における、以下の米国特許に開示されたＴＮＦ−アルファと免疫特異的に結合する抗体の使用も包含する。それぞれが本明細書にすべて参照によって組み込まれる、第５，１３６，０２１号、第５，１４７，６３８号、第５，２２３，３９５号、第５，２３１，０２４号、第５，３３４，３８０号、第５，３６０，７１６号、第５，４２６，１８１号、第５，４３６，１５４号、第５，６１０，２７９号、第５，６４４，０３４号、第５，６５６，２７２号、第５，６５８，７４６号、第５，６９８，１９５号、第５，７３６，１３８号、第５，７４１，４８８号、第５，８０８，０２９号、第５，９１９，４５２号、第５，９５８，４１２号、第５，９５９，０８７号、第５，９６８，７４１号、第５，９９４，５１０号、第６，０３６，９７８号、第６，１１４，５１７号、および第６，１７１，７８７号。可溶性ＴＮＦ−アルファ受容体の例は、ＴＮＦ−Ｒ１（Ａｍｇｅｎ）、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（商標）；Ｉｍｍｕｎｅｘ）お���びそのラット相同体ＲＥＮＢＲＥＬ（商標）、ＴＮＦｒＩ、ＴＮＦｒＩＩ（Ｋｏｈｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７：８３３１−８３３５）、ならびにＴＮＦ−アルファＩｎｈ（Ｓｅｃｋｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１９９０，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７：５１８８−５１９２）に由来するＴＮＦ−アルファの可溶性の抑制剤を含むがこれらに限定されない。
【０４３７】
本開示によって包含された他のＴＮＦ−アルファ拮抗薬は、インターフェロンガンマ活性マクロファージを通してＴＮＦ−アルファ産生を遮断することで知られるＩＬ−１０（Ｏｓｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８９：８６７６−８６８０）、ＴＮＦＲ−ＩｇＧ（Ａｓｈｋｅｎａｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８８：１０５３５−１０５３９）、マウス製品ＴＢＰ−１（Ｓｅｒｏｎｏ／Ｙｅｄａ）、ワクチンＣｙｔｏＴＡｂ（Ｐｒｏｔｈｅｒｉｃｓ）、アンチセンス分子１０４８３８（ＩＳＩＳ）、ペプチドＲＤＰ−５８（ＳａｎｇＳｔａｔ）、サリドマイド（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＣＤＣ−８０１（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＤＰＣ−３３３（Ｄｕｐｏｎｔ）、ＶＸ−７４５（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＡＧＩＸ−４２０７（ＡｔｈｅｒｏＧｅｎｉｃｓ）、ＩＴＦ−２３５７（Ｉｔａｌｆａｒｍａｃｏ）、ＮＰＩ−１３０２１−３１（Ｎｅｒｅｕｓ）、ＳＣＩＯ−４６９（Ｓｃｉｏｓ）、ＴＡＣＥ  ｔａｒｇｅｔｅｒ（Ｉｍｍｕｎｉｘ／ＡＨＰ）、ＣＬＸ−１２０５００（Ｃａｌｙｘ）、Ｔｈｉａｚｏｌｏｐｙｒｉｍ（Ｄｙｎａｖａｘ）、オーラノフィン（Ｒｉｄａｕｒａ）（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、キナクリン（メパクリンジクロロ水和物）、テニダップ（Ｅｎａｂｌｅｘ）、メラニン（Ｌａｒｇｅ  Ｓｃａｌｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）、およびＵｒｉａｃｈによる抗ｐ３８ＭＡＰＫ薬剤を含むがこれらに限定されない。
【０４３８】
炎症性疾患を患った対象へ本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて投与することができる抗炎症剤の限定されない例は、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイド系抗炎症薬、β刺激薬、抗コリンジェリック（ａｎｔｉｃｈｏｌｉｎｇｅｒｉｃ）剤、およびメチルキサンチンを含む。ＮＳＡＩＤの例は、アスピリン、イブプロフェン、セレコキシブ（ＣＥＬＥＢＲＥＸ（商標））、ジクロフェナク（ＶＯＬＴＡＲＥＮ（商標））、エトドラク（ＬＯＤＩＮＥ（商標））、フェノプロフェン（ＮＡＬＦＯＮ（商標））、インドメタシン（ＩＮＤＯＣＩＮ（商標））、ケトロラク（ＴＯＲＡＤＯＬ（商標））、オキサプロジン（ＤＡＹＰＲＯ（商標））、ナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮ（商標））、スリンダク（ＣＬＩＮＯＲＩＬ（商標））、トルメチン（ＴＯＬＥＣＴＩＮ（商標））、ロフェコキシブ（ＶＩＯＸＸ（商標））、ナプロキセン（ＡＬＥＶＥ（商標）、ＮＡＰＲＯＳＹＮ（商標））、ケトプロフェン（ＡＣＴＲＯＮ（商標））、およびナブメトン（ＲＥＬＡＦＥＮ（商標））を含むがこれらに限定されない。かかるＮＳＡＩＤは、シクロオキシゲナーゼ酵素（例えば、ＣＯＸ−１および／またはＣＯＸ−２）を抑制することによって機能する。ステロイド系抗炎症薬の例は、グルココルチコイド、デキサメタゾン（ＤＥＣＡＤＲＯＮ（商標））、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン（ＤＥＬＴＡＳＯＮＥ（商標））、プレドニゾロン、トリアムシノロン、アザルフィジン、ならびにプロスタグランジン、トロンボキサン、およびロイコトリエン等のエイコサノイドを含むがこれらに限定されない。
【０４３９】
特定の実施形態において、変形性関節症を患った患者に、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量を他の薬剤、または鎮痛剤（限定されない例は、４０００ｍｇ／ｄ以下の用量のアセトアミノフェン、フェナセチン、および２００〜３００ｍｇの範囲の１日の用量のトラマドールである）；ＮＳＡＩＤ（限定されない例は、アスピリン、ジフルニサル、ジクロフェナク、エトドラク、フェナム酸、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、サリチル酸メチル、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、スリンダク、およびトルメチンを含むがこれらに限定されない。低用量のＮＳＡＩＤ、例えば１２００ｍｇ／ｄのイブプロフェン、５００ｍｇ／ｄのナプロキセンが、好ましい。胃保護剤、例えば、ミソプロストール、ファモチジン、またはオメプラゾールは、ＮＳＡＩＤと同時に使用することが好ましい）；サルサラートを含むがこれに限定されない非アセチル化サリチル酸；セレコキシブおよびロフェコキシブを含むが限定されないシクロオキシゲナーゼ（Ｃｏｘ）−２−特異的抑制剤（ＣＳＩ）；徐放性製剤グルココルチコイド調製物の関節内または周囲注射；ヒアルロン酸の関節内注射；カプサイシンクリーム；フィブリン、軟骨の欠片および他のデブリを流すために、変形性関節症の膝の大量洗浄；ならびに関節置換手術を含むがこれらに限定されない変形性関節症の防止、処置、管理、または寛解に有用な治療と組み合わせて、投与する。本開示の製剤および方法は、関節負荷の削減（限定されない例は、悪い姿勢の修正、過度の腰椎前弯に対しての支持、関与する間接の過度の負荷を避ける、長期間の立ち、跪き、およびしゃがみこみを避けることである）；患部関節に対する熱の適応；有酸素運動および他の物理的な治療を、含むが限定されない変形性関節症の防止、処置、管理、および寛解のための他の非薬理学的な手段と組み合わせて使用することもできる。
【０４４０】
特定の実施形態において、関節リウマチを患った患者に、ＮＳＡＩＤ（限定されない例は、アスピリン、ジフルニサル、ジクロフェナク、エトドラク、フェナム酸、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、サリチル酸メチル、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、スリンダク、およびトルメチンを含むがこれらに限定されない）；鎮痛剤（限定されない例は、アセトアミノフェン、フェナセチン、およびトラマドールである）；セレコキシブ、およびロフェコキシブを含むがこれらに限定されないＣＳＩ；グルココルチコイド（好ましくは低用量の経口グルココルチコイド、例えば、＜７．５ｍｇ／ｄのプレドニゾン、または高用量グルココルチコイドの毎月のパルス投与、または関節内グルココルチコイド）；メトトレキサート（好ましくはある間欠的に低い用量、例えば、１週間に一度７．５〜３０ｍｇ）、金化合物（例えば、金塩）、Ｄ−ペニシラミン、抗マラリア剤（例えば、クロロキン）、およびスルファサラジンを含むがこれらに限定されない疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）；エタネルセプトおよびインフリキシマブを含むがこれらに限定されないＴＮＦ−アルファ中和剤；免疫抑制および細胞傷害性薬物（例は、アザチオプリン、レフルノミド、シクロスポリン、およびシクロホスファミドを含むがこれらに限定されない）、ならびに手術（例は、関節形成術、関節全置換、手の再建手術、開または関節鏡滑膜切除術、および手首の早期腱鞘切除術を含むがこれらに限定されない）を含むがこれらに限定されない関節リウマチの防止、処置、管理、および寛解に有用な他の薬剤または治療と本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量とを組み合わせて投与する。本開示の製剤および方法は、安静、炎症した関節の不要な動きを減少するために副木すること、運動、様々な装具および支援機器の使用、および他の物理的な治療を含むがこれらに限定されない関節リウマチの防止、処置、管理、および寛解の際に、他の手法と組み合わせて使用することもできる。本開示の製剤および方法は、食事（例えば、魚油に見られるエイコサペンタエン酸等のオメガ−３脂肪酸と肉に見られる食事性オメガ−６必須脂肪酸との置換）、ワクチン、ホルモンおよび局所調製を含むがこれらに限定されない関節リウマチの防止、処置、管理、および寛解の際の、いくつかの非伝統的アプローチと組み合わせて使用することもできる。
【０４４１】
特定の実施形態において、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を患った患者に、短時間および長時間作用のベータ２−アドレナリン刺激薬を含むがこれらに限定されない気管支拡張剤（短時間作用のベータ２刺激薬の例は、アルブテロール、ピルブテロール、テルブタリン、およびメタプロテレノールを含むがこれらに限定されない；長時間作用のベータ２刺激薬の例は、経口徐放性アルブテロールおよび吸入サルメテロールを含むがこれらに限定されない）、抗コリン薬（例は、臭化イプラトロピウムを含むがこれに限定されない）、ならびにテオフィリンおよびその誘導体（テオフィリンの治療範囲は、好ましくは１０〜２０μｇ／ｍＬである）；グルココルチコイド；外因性アルファ１ＡＴ（例えば、週に一度の用量の６０ｍｇ／ｋｇを静脈内投与した貯蔵したヒト血漿に由来するアルファ１ＡＴ）；酸素；肺移植；肺容量減少術；気管内挿管、換気サポート；年に一度のインフルエンザワクチンおよび２３−価の多糖類を含む肺炎球菌ワクチン；運動；および禁煙を含むがこれらに限定されないＣＯＰＤの防止、処置、管理、および寛解の際に有用な他の薬剤または治療と組み合わせて本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量を投与する。
【０４４２】
特定の実施形態において、喘息を患った患者に、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量と喘息治療に有用な１つ以上の他の薬剤の有効量とを組み合わせて、投与する。かかる薬剤の限定されない例は、アドレナリン刺激物質（例えば、カテコラミン（例えば、エピネフリン、イソプロテレノール、およびイソエタリン）、レゾルシノール（例えば、メタプロテレノール、テルブタリン、およびフェノテロール）、およびサリゲニン（例えば、サルブタモール））、アドレノコルチコイド、ブルココルチコイド（ｂｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ）、副腎皮質ステロイド薬（例えば、ベクロメタドンス（ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｄｏｎｓｅ）、ブデソニド、フルニソリド、フルチカゾン、トリアムシノロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、およびプレドニゾン）、他のステロイド、ベータ２−刺激薬（例えば、アルブテロール、ビトルテロール、フェノテロール、イソエタリン、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルブタモール、テルブタリン、ホルモテロール、サルメテロール、およびアルブタモール（ａｌｂｕｔａｍｏｌ）テルブタリン）、抗コリン作動薬（例えば、臭化イプラトロピウムおよび臭化オキシトロピウム）、ＩＬ−４拮抗薬（抗体を含む）、ＩＬ−５拮抗薬（抗体を含む）、ＩＬ−９拮抗薬（抗体を含む）、ＩＬ−１３拮抗薬（抗体を含む）、ＩＬ＿１７拮抗薬（抗体を含む）、ＰＤＥ４−抑制剤、ＮＦ−カッパ−ベータ抑制剤、ＶＬＡ−４抑制剤、ＣｐＧ、抗ＣＤ２３、セレクチン拮抗薬（ＴＢＣ１２６９）、マスト細胞プロテアーゼ抑制剤（例えば、トリプターゼキナーゼ抑制剤（例えば、ＧＷ−４５、ＧＷ−５８、およびゲニステイン）、ホスファチジルイノシチド−３'（ＰＩ３）−キナーゼ抑制剤（例えば、カルホスチン（カルホスチン）Ｃ）、および他のキナーゼ抑制剤（例えば、スタウロスポリン）（Ｔｅｍｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６９（５）：２６６２−２６６９、Ｖｏｓｓｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ  ８（５）：９０９−９２２、およびＮａｇａｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ２０８（２）：５７６−５８１）を参照）、Ｃ３受容体拮抗薬（抗体を含む）、免疫抑制剤（例えば、メトトレキサートおよび金塩）、マスト細胞モジュレーター（例えば、クロモグリク酸ナトリウム（ＩＮＴＡＬ（商標））およびネドクロミルナトリウム（ＴＩＬＡＤＥ（商標）））、ならびに粘液溶解薬（例えば、アセチルシステイン））を含む。特定の実施形態において、抗炎症性剤は、ロイコトリエン抑制剤（例えば、モンテルカスト（ＳＩＮＧＵＬＡＩＲ（商標））、ザフィルルカスト（ＡＣＣＯＬＡＴＥ（商標））、プランルカスト（ＯＮＯＮ（商標））、またはジロートン（ＺＹＦＬＯ（商標）））である。
【０４４３】
特定の実施形態において、アレルギーを患った患者に、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量とアレルギー治療に有用な１つ以上の他の薬剤の有効量とを組み合わせて、投与する。かかる薬剤の限定されない例は、抗メディエーター薬（例えば、抗ヒスタミン薬）、副腎皮質ステロイド薬、うっ血除去薬、交感神経刺激薬（例えば、アルファ−アドレナリン作用薬およびベータ−アドレナリン作用薬）、ＴＮＸ９０１（Ｌｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３４８（１１）：９８６−９９３（２００３））、ＩｇＥ拮抗薬（例えば、抗体ｒｈｕＭＡｂ−Ｅ２５オマリズマブ（Ｆｉｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  １１１（２）：２７８−２８４、Ｃｏｒｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３  Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  １１１（１）：８７−９０、Ｂｕｓｓｅ  ａｎｄ  Ｎｅａｖｉｌｌｅ，２００１  Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  １（１）：１０５−１０８、およびＴａｎｇ  ａｎｄ  Ｐｏｗｅｌｌ，２００１，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｅｄｉａｔｒ１６０（１２）：６９６−７０４を参照）、ＨＭＫ−１２および６ＨＤ５（Ｍｉｙａｊｉｍａ  ｅｔ  ａｌ．，２２０２  Ｉｎｔ  Ａｒｃｈ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏ  １２８（１）：２４−３２）、およびｍＡＢ  Ｈｕ−９０１（ｖａｎ  Ｎｅｅｒｖｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１  Ｉｎｔ  Ａｒｃｈ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｉｍｍｕｎｏ  １２４（１−３）：４００を参照）、テオフィリンおよびその誘導体、グルココルチコイド、ならびに免疫療法（例えば、アレルゲンの反復長期間注射、短コース脱感作、およびハチ毒免疫療法）を含む。
【０４４４】
５．３３．自己免疫病
本開示のある態様によると、本開示の製剤および方法と共に用いられる処置療法および用量を、治療している自己免疫病または疾患の段階を含むがこれらに限定されない多くの要因を基に選択する。適切な処置療法を、患者または患者集団の自己免疫病または疾患の特定の段階に対して、当業者によって決定することができる。自己免疫病または疾患の異なる段階を有する患者を治療するために、本開示の製剤の有効量を決定するために、用量反応曲線を、当該技術における標準プロトコールを使用して作成することができる。一般的に、自己免疫病または疾患の活性をより多く有する患者は、自己免疫病または疾患の活性が少ない患者と比べて、長期間投与することができるより高い用量および／または高頻度の用量を必要とするであろう。
【０４４５】
抗ＩＣＯＳ抗体、製剤、および方法を、自己免疫病または疾患を治療するために実行することができる。「自己免疫病または疾患」という用語は、自身の細胞、組織および／または臓器へ対象の免疫性反応によって引き起こされた細胞、組織、および／または臓器障害を特徴とする対象の状況を指す。「炎症性疾病」という用語は、慢性炎症を含むがこれに限定されない炎症を特徴とする対象における状態を指すために、「炎症性疾患」という用語と互換的に使用される。自己免疫疾患は、炎症に付随することができるとは限らない。さらに、炎症は、自己免疫疾患によって生じるとは限らない。したがって、ある疾患は、自己免疫性および炎症性疾患の両方として特徴付けられる可能性がある。代表的な自己免疫病または疾患は、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群、自己免疫性アジソン病、副腎の自己免疫病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性卵巣炎および精巣炎、自己免疫性血小板減少症、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、セリアックスプルー皮膚炎、慢性疲労免疫機能不全症候群（ＣＦＩＤＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、チャーグ・ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡、クレスト症候群、寒冷凝集素症、クローン病、円板状狼瘡、必須混合型クリオグロブリン血症、糖尿病、好酸球性筋膜炎（ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉｃ  ｆａｓｃｉｔｅｓ）、線維筋痛症−線維筋炎、糸球体腎炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本甲状腺炎、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、特発性肺線維症、特発性／自己免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ神経障害、若年性関節炎、扁平苔癬、紅斑性狼瘡、メニエール病、混合性結合組織病、多発性硬化症、タイプ１または免疫媒介真性糖尿病、重症筋無力症、天疱瘡関連疾患（例えば、尋常性天疱瘡）、悪性貧血、結節性多発動脈炎、多発性軟骨炎、多腺性症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎および皮膚筋炎、原発性無ガンマグロブリン血症、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、乾癬性関節炎、レイノー現象、ライター症候群、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、全身硬直症候群、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、スイート症候群、スチル病、紅斑性狼瘡、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、潰瘍性大腸炎、ぶどう膜炎、疱疹状皮膚炎血管炎等の脈管炎、白斑、ならびにウェゲナー肉芽腫症を含むがこれらに限定されない。炎症性疾患の例は、喘息、脳炎、炎症性腸疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、アレルギー性疾患、敗血症性ショック、肺線維症、未分化脊椎関節症、未分化関節症、関節炎、炎症性骨溶解症、移植片対宿主病、蕁麻疹、フォークト・小柳・原田症候群ならびに慢性ウイルスまたは細菌感染から生じる慢性炎症を含むがこれらに限定されない。
【０４４６】
５．３３．１．自己免疫疾患の処置
本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体を、自己免疫疾患またはその症状のうちの１つ以上を防止する、管理する、治療する、または寛解するために、投与が必要な対象に投与することができる。本開示の製剤を、自己免疫疾患またはその症状のうちの１つ以上を、防止する、管理する、治療する、または寛解するために、投与を必要とする対象に、１つ以上の他の治療、好ましくは自己免疫疾患（予防または治療剤を含むがこれらに限定されない）の防止、管理、または処置に有用な治療と組み合わせて投与することもできる。特定の実施形態において、本開示は、自己免疫疾患またはその症状のうちの１つ以上を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法を提供し、該方法は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量を、対象に投与することを含む。別の実施形態において、本開示は、自己免疫疾患またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法を提供し、該方法は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量およびＩＣＯＳポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）以外の１つ以上の治療（例えば、予防または治療剤）の予防または治療効果のある量の用量を、投与を必要とする対象に対して投与することを含む。
【０４４７】
本開示は、かかる自己免疫疾患に対する従来の治療に抵抗性のある対象の自己免疫疾患またはその１つ以上の症状を管理する、治療する、または寛解させる方法を提供し、該方法は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量を該対象に投与することを含む。本開示は、かかる自己免疫疾患に対する既存の単一薬剤治療に対して抵抗性のある対象の自己免疫疾患の１つ以上の症状を管理する、治療する、または寛解させるための方法も提供し、該方法は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量の用量およびＩＣＯＳポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）以外の１つ以上の治療（例えば、予防または治療剤）の予防または治療効果のある量の用量を該対象へ投与することを含む。本開示は、他の処置に対して抵抗性を認めたが、これらの処置をすでに受けていない患者に対して、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体とその他の処置と組み合わせて投与することによって、自己免疫疾患またはその１つ以上の症状を管理する、治療する、または寛解させる方法も提供する。本開示は、別の治療で過度の有毒を認めた、または認めることができる、すなわち治療される対象に対して容認できないまたは耐えられない副作用を生じる自己免疫疾患の管理または処置に対する別の方法も提供する。特に、本開示は、患者は他の治療に対して抵抗性がある場合、自己免疫疾患の管理または処置の別の方法を提供する。さらに、本開示は、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体を投与することによって治療され、疾病活性を有さない患者の自己免疫疾患の再発を防止するための方法を提供する。
【０４４８】
本開示の方法で治療することができる自己免疫疾患の例は、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群、自己免疫性アジソン病、副腎の自己免疫病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性卵巣炎および精巣炎、自己免疫性血小板減少症、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、セリアックスプルー皮膚炎、慢性疲労免疫機能不全症候群（ＣＦＩＤＳ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、チャーグ・ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡、クレスト症候群、寒冷凝集素症、クローン病、円板状狼瘡、必須混合型クリオグロブリン血症、線維筋痛症−線維筋炎、糸球体腎炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本甲状腺炎、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ神経障害、若年性関節炎、扁平苔癬、紅斑性狼瘡、メニエール病（Ｍｎｉｒｅ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、混合性結合組織病、多発性硬化症、タイプ１または免疫媒介真性糖尿病、重症筋無力症、尋常性天疱瘡、悪性貧血、結節性多発動脈炎、多発性軟骨炎、多腺性症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎および皮膚筋炎、原発性無ガンマグロブリン血症、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、乾癬性関節炎、レイノー現象、ライター症候群、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、全身硬直症候群、全身性エリテマトーデス、紅斑性狼瘡、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、潰瘍性大腸炎、ぶどう膜炎、疱疹状皮膚炎血管炎等の脈管炎、白斑、ならびにウェゲナー肉芽腫症を含むがこれらに限定されない。
【０４４９】
自己免疫治療およびそれらの投与量、投与の経路、および推奨用法は、当該技術において知られており、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（６１ｔｈ  ｅｄ．，２００７）等の文献に記載される。
【０４５０】
５．３３．２．自己免疫疾患の治療
本開示は、自己免疫疾患またはその症状の１つ以上を防止する、管理する、治療する、または寛解させる方法を提供し、該方法は、投与を必要とする対象に対して本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体およびＩＣＯＳポリペプチドと免疫特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）以外の１つ以上の治療（例えば、予防または治療剤を投与することを含む。自己免疫疾患またはその症状の１つ以上の防止、管理、処置、または寛解のために有用であることが知られている、使用されたまたは現在使用されている任意の薬剤または治療は、本明細書に記載される本開示と一致して本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて使用することができる。かかる薬剤の例は、免疫調節剤、抗炎症剤、およびＴＮＦ−アルファ拮抗薬を含むがこれらに限定されない。自己免疫疾患の防止、管理、処置、または寛解に対して、本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて使用することができる免疫調節剤、抗炎症剤、およびＴＮＦ−アルファ拮抗薬の具体的な例を、本明細書に開示する。
【０４５１】
特定の実施形態において、多発性硬化症（ＭＳ）を患った患者に、ＩＦＮ−ｂｅｔａ１ｂ（Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ）（例えば、８００万国際単位（ＭＩＵ）を１日おきに皮下注射で投与する）；ＩＦＮ−ベータ１ａ（Ａｖｏｎｅｘ）（例えば、６．０ＭＩＵを１週間に１回筋肉内注射で投与する）；酢酸グラチラマー（Ｃｏｐａｘｏｎｅ）（例えば、２０ｍｇを毎日皮下注射で投与する）；ミトキサントロン（例えば、１２ｍｇ／ｍ２を、３ヶ月に１回静脈内注入で投与する）；アザチオプリン（例えば、２〜３ｍｇ／ｋｇ体重を毎日経口投与する）；メトトレキサート（例えば、７．５ｍｇを１週間に１回経口投与する）；シクロホスファミド；静注用免疫グロブリン（例えば、０．１５〜０．２ｇ／ｋｇ体重を２年以下の間１ヶ月に１回投与する）；グルココルチコイド；メチルプレドニゾロン（例えば、高用量で２ヶ月に一度投与する）；２−クロロデオキシアデノシン（クラドリビン）；バクロフェン（例えば、１５〜８０ｍｇ／ｄを分割した用量で、または２４０ｍｇ／ｄ以下の高用量を経口で、または留置カテーテルを通してくも膜下腔内で）；塩酸シクロベンザプリン（例えば、５〜１０ｍｇ  ｂｉｄまたはｔｉｄ）；クロナゼパム（例えば、０．５〜１．０ｍｇ  ｔｉｄ、就寝前用量を含む）；塩酸クロニジン（例えば、０．１〜０．２ｍｇｔｉｄ、就寝前用量を含む）；カルバマゼピン（例えば、１００〜１２００ｍｇ／ｄを分割して、漸増用量）；ガバペンチン（例えば、３００〜３６００ｍｇ／ｄ）；ディランチン（例えば、３００〜４００ｍｇ／ｄ）；アミトリプチリン（例えば、２５〜１５０ｍｇ／ｄ）；バクロフェン（例えば、１０〜８０ｍｇ／ｄ）；プリミドン（例えば、１２５〜２５０ｍｇ  ｂｉｄまたはｔｉｄ）；オンダンセトロン（例えば、４〜８ｍｇ  ｂｉｄまたはｔｉｄ）；イソニアジド（例えば、１２００ｍｇ以下を分割した用量で）；オキシブチニン（例えば、５ｍｇ  ｂｉｄまたはｔｉｄ）；トルテロジン（例えば、１〜２ｍｇ  ｂｉｄ）；プロパンテリン（例えば、７．５〜１５ｍｇ  ｑｉｄ）；ベタネコール（例えば、１０〜５０ｍｇ  ｔｉｄまたはｑｉｄ）；塩酸テラゾシン（例えば、就寝時に１〜５ｍｇ）；クエン酸シルデナフィル（例えば、５０〜１００ｍｇ  ｐｏ  ｐｒｎ）；アマンタジン（例えば、１００ｍｇ  ｂｉｄ）；ペモリン（例えば、３７．５ｍｇ  ｂｉｄ）；高用量のビタミン；オロト酸カルシウム；ガンシクロビル；抗生物質；ならびに血漿交換を含むがこれらに限定されないＭＳの防止、処置、管理、および寛解に有用な他の薬剤または治療と本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量とを組み合わせて投与する。
【０４５２】
特定の実施形態において、乾癬を患った患者に、局所ステロイドクリームまたは軟膏；タール（例は、Ｅｓｔａｒ、Ｐｓｏｒｉｇｅｌ、Ｆｏｔｏｔａｒクリーム、およびＮｕｔｒａｄｅｒｍローションのＬＣＤ１０％またはトリアムシノロン０．１％のクリームと直接混合したものを含むがこれらに限定されない）；閉塞症；局所ビタミンＤ類似体（限定されない例は、カルシポトリエン軟膏である）；紫外線；ＰＵＶＡ（ソラレンプラス長波長紫外線）；メトトレキサート（例えば、１週間に１回、２５ｍｇ以下または１週間に１回、３用量を１２時間おきに分割した用量で）；合成レチノイド（限定されない例は、エトレチナートを例えば、０．５〜１ｍｇ／ｋｇ／ｄの投与量ので）；免疫調節治療（限定されない例は、シクロスポリンである）；スルファサラジン（例えば、１日に３回１ｇの投与量で）を含むがこれらに限定されない乾癬の防止、処置、管理、および寛解に有用な他の薬剤または治療と本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量とを組み合わせて投与する。
【０４５３】
特定の実施形態において、クローン病を患った患者に、止痢薬（例えば、２〜４ｍｇ以下のロペラミドを１日に４回、アトロピンを含むジフェノキシラート１錠剤を１日に４回まで、アヘンのチンキを８〜１５滴、１日に４回まで、２〜４ｇのコレスチラミンまたは５ｇのコレスチポールを１日１回または２回）、鎮痙剤（例えば、食前に、プロパンテリン１５ｍｇ、ジサイクロミン１０〜２０ｍｇ、またはヒヨスチアミン０．１２５ｍｇを投与）、５−アミノサリチル酸薬剤（例えば、１．５〜２ｇのスルファサラジンを１日２回、メサラミン（ＡＳＡＣＯＬ（商標））およびその持続放出製剤（ＰＥＮＴＡＳＡ（商標））、特に高い投与量で、例えば、１ｇのＰＥＮＴＡＳＡ（商標）を１日に４回および０．８〜１．２ｇのＡＳＡＣＯＬ（商標）を１日に４回）、副腎皮質ステロイド薬、免疫調節薬（例えば、アザチオプリン（１〜２ｍｇ／ｋｇ）、メルカプトプリン（５０〜１００ｍｇ）、シクロスポリン、およびメトトレキサート）、抗生物質、ＴＮＦ抑制剤（例えば、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標）））、免疫抑制剤（例えば、タクロリムス、ミコフェノール酸モフェチル、およびサリドマイド）、抗炎症性サイトカイン（例えば、ＩＬ−１０およびＩＬ−１１）、栄養治療、成分栄養を含む経腸治療（例えば、Ｖｉｖｏｎｅｘを４週間）、および総合的な非経口栄養を含むがこれらに限定されないクローン病の防止、処置、管理、および寛解に有用な他の薬剤または治療と本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量とを組み合わせて投与する。
【０４５４】
特定の実施形態において、紅斑性狼瘡を患った患者は、（ヒドロキシクロロキンを含むがそれに限定されない）抗マラリア剤；グルココルチコイド（例えば、低用量、高用量、または高用量静脈内パルス療法を使用することができる）；（シクロホスファミド、クロラムブシル、およびアザチオプリンを含むがこれらに限定されない）免疫抑制剤；（メトトレキサートおよびミコフェノール酸モフェチルを含むがこれらに限定されない）細胞傷害性薬物；（ダナゾールを含むがこれに限定されない）アンドロゲンステロイド；（ワルファリンを含むがこれに限定されない）抗凝固剤；ならびにＢリンパ球刺激因子抑制剤（例えば、ベリムマブ）を含むがこれらに限定されない紅斑性狼瘡の防止、処置、管理、および寛解に有用な他の薬剤または治療と本開示のエフェクター機能を増強した抗ＩＣＯＳ抗体の予防または治療効果のある量とを組み合わせて投与する。特定の実施形態において、紅斑性狼瘡を患った患者に、本明細書に記載される製剤の予防または治療効果のある量と、ベリムマブとを組み合わせて投与する。
【０４５５】
本開示の抗体製剤または本開示の併用療法を、自己免疫疾患またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、および／または寛解するために、１次、２次、３次、４次、または５次治療として使用することができる。本開示は、他の疾病または疾患に対する治療を受けている患者の自己免疫疾患またはその１つ以上の症状を防止する、治療する、管理する、および／または寛解させる方法も含む。本開示は、本開示の抗体以外の治療に対する任意の有害作用または不耐性が発生する前に、患者の自己免疫疾患またはその１つ以上の症状を防止する、管理する、治療する、および／または寛解させる方法を包含する。本開示は、抵抗性の患者の自己免疫疾患またはその症状を防止する、治療する、管理する、および／または寛解させる方法も包含する。本開示は、本開示の抗体、製剤、または併用療法以外の治療に対する抵抗性を認めた患者の増殖性疾患またはその症状を防止する、治療する、管理する、および／または寛解させるための方法を包含する。かかる状況で、技術で許可された意味の「抵抗性」を使用して、自己免疫疾患の処置の効果をアッセイするために、患者が抵抗性か否かの判断を、当該技術において知られている任意の方法によってインビボまたはインビトロで行うことができる。ある実施形態において、自己免疫疾患の１つ以上の症状が、防止されず、管理されず、および／または軽減されない場合、自己免疫疾患を患った患者は、治療に対して抵抗性を持つ。本開示は、従来の治療に対する有害反応に影響されやすい患者の自己免疫疾患またはその症状を防止する、管理する、治療する、および／または寛解させる方法も包含する。
【０４５６】
本開示は、他の従来の治療の代わりとして、自己免疫疾患またはその１つ以上の症状を防止する、治療する、管理する、および／または寛解させるための方法を包含する。特定の実施形態において、本開示の方法と一致して管理されるまたは治療される患者は、他の治療に対して抵抗性がある、またはかかる治療からの有害反応に影響されやすい。患者は、免疫系抑制を持つ人（例えば、術後患者、化学療法患者、および免疫不全疾病を患った患者、気管支肺異形成症を患った患者、先天性心疾患を患った患者、嚢胞性線維症を患った患者、後天性または先天性心疾患を患った患者、および感染を受けた患者）、腎機能障害または肝機能障害を患った人、高齢者、小児、乳児、未熟児、精神神経疾患を患った人、もしくは向精神薬を服用する人、発作歴のある人、または、自己免疫病もしくは疾患を防止する、管理する、治療する、または寛解するために使用する従来の薬剤と逆相互作用する可能性のある薬物を服用している人であることができる。
【０４５７】
自己免疫治療およびそれらの投与量、投与の経路、および推奨用法は、当該技術において知られており、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ'ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（６１ｔｈ  ｅｄ．，２００７）等の文献に記載される。
【０４５８】
５．３３．３．自己免疫病または疾患の診断
自己免疫病または疾患の診断は、自己免疫病または疾患のそれぞれのタイプが患者間で異なって現れるため、複雑である。症状のこの不均一性は、臨床的な診断に達するために、複数の要因を典型的に使用することを意味する。一般的に、臨床医は、限定されないが、自己免疫病または疾患の一次指標として自己抗体の存在、上昇したサイトカインレベル、特異的な臓器の機能障害、皮疹、関節腫脹、痛み、骨リモデリング、および／または動作の減少等の要因を使用する。ＲＡおよびＳＬＥ等ある自己免疫病または疾患に対して、診断の基準は、当該技術において知られている。ある自己免疫病または疾患に対して、疾病の段階は、特徴付けられており、当該技術においてよく知られている。自己免疫病および疾患、ならびに疾病の段階および活性の規模および／または当該技術においてよく知られている疾病の重症度を診断するためのこれらの技術に認められた方法を、本開示の製剤および方法を使用して自己免疫病または疾患の処置を必要とする患者および患者の集団を確認するために使用することができる。
【０４５９】
５．３３．４．自己免疫病または疾患を診断するための臨床的な基準
異なる自己免疫病または疾患の診断基準は、当該技術において知られている。歴史的に、診断は、典型的に物理的な症状の組み合わせを基にしている。最近では、遺伝子発現プロファイリング等の分子技法は、自己免疫病または疾患の分子定義を開発するために、適用されている。特定の自己免疫病または疾患の臨床的な診断に対する代表的な方法を以下に提供する。他の適切な方法は、当業者に対して明白であろう。
【０４６０】
ある実施形態において、（段階が認められている疾病に対して）低レベルの自己免疫病活性を持つ患者または自己免疫病の初期段階である患者を、抗ＩＣＯＳ抗体製剤および方法を使用する処置に対して確認することができる。自己免疫病は、全身的な症状であり、疾病間で症状が重なることから、その初期診断は困難である。かかる実施形態において、初期段階で治療されたまたは自己免疫病活性のレベルの低い患者は、自己免疫病または疾患の少なくとも１つの症状を含む症状を有する。関連した実施形態において、初期段階で治療されたまたは自己免疫病のレベルの低い患者は、自己免疫病または疾患の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５症状を含む症状を有する。症状は、任意の自己免疫病および疾患またはその組み合わせであることができる。自己免疫病および疾患の症状の例を、以下に記載する。
【０４６１】
５．３４．免疫療法のプロトコール
「抗ＩＣＯＳ免疫療法」として本明細書で称される治療療法／プロトコールで使用する抗ＩＣＯＳ抗体製剤は、裸抗体、免疫複合体、および／または融合タンパク質であることができる。本開示の製剤を、単一薬剤治療としてまたは他の治療剤または療法と組み合わせて使用することができる。抗ＩＣＯＳ抗体または免疫複合体を、１つ以上の治療剤の投与の前に、それと同時に、またはその後に投与することができる。本開示の製剤を用いた併用療法で使用することができる治療剤は、細胞の機能を抑制するまたは防止するおよび／または細胞の破壊を生じる任意の物質を含む。例は、放射性同位体、化学療法剤、および細菌、真菌、植物、もしくは動物起源の酵素的に活発な毒素等の毒素またはその断片を含むがこれらに限定されない。
【０４６２】
本明細書に記載される治療療法、または任意の所望の処置療法によって、天然ＩＣＯＳ抗原の代わりにヒトＩＣＯＳ抗原を発現する遺伝子導入動物モデルを使用して、有効性について試験することができる。したがって、抗ＩＣＯＳ抗体の処置療法によって、ヒトに投与する前に、有効性を測定するために、動物モデルに対して試験することができる。
【０４６３】
５．３５．抗ＩＣＯＳの免疫療法
本開示と一致して「抗ＩＣＯＳ免疫療法」は、本明細書に記載される任意の治療療法と一致する本開示の抗ＩＣＯＳ抗体のいずれかの投与を包含する。抗ＩＣＯＳ抗体を、裸抗体、または免疫複合体または融合タンパク質として投与することができる。一実施形態において、Ｔ細胞媒介疾病または疾患を有するヒト対象を、ヒトＡＤＣＣを媒介することが可能な抗ＩＣＯＳ抗体を投与することによって治療することができる。
【０４６４】
ＩｇＧ１またはＩｇＧ３のヒトアイソタイプの抗体は、場合によっては治療にとって好ましい。しかし、関連するエフェクター機能、例えばヒトＡＤＣＣを有することを前提として、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４のヒトアイソタイプを、使用することもできる。インビトロまたはインビボのエフェクター細胞によって標的細胞の溶解を媒介するために、問題となっている抗体の能力を測定することによって、かかるエフェクター機能を、査定することができる。
【０４６５】
一実施形態において、使用する抗体の用量は、循環するＩＣＯＳを発現するＴ細胞を枯渇させるために十分であるべきである。治療の進展を、血液試料を分析することによって、患者で監視することができる。臨床的な改善の他の兆候を、治療を監視するために使用することができる。
【０４６６】
本開示の製剤および方法と関連して使用することができるＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を計る方法は、当該技術においてよく知られており、以下の実施形態を含むがそれに限定されない。一実施形態において、循環するＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の量を定めるために、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞と結合する抗ＩＣＯＳ抗体以外の試薬を使用してフローサイトメトリーを用いて測定することができる。別の実施形態において、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞を同定するために、免疫化学的な染色をすることによって測定することができる。かかる実施形態において、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞、または患者から抽出されたＩＣＯＳを発現するＴ細胞を含む組織もしくは血清を、顕微鏡のスライドに配置し、標識し、存在または不在に対して検査することができる。関連した実施形態において、ＩＣＯＳを発現するＴ細胞の存在の相違を測定するために、治療前と治療後に抽出したＩＣＯＳを発現するＴ細胞間で比較することができる。
【０４６７】
抗ＩＣＯＳ抗体が単一薬剤治療として投与された場合の本開示の実施形態において、本開示は、異なる処置療法の使用を検討する。
【０４６８】
本開示のある態様によると、本開示の製剤および方法で使用する抗ＩＣＯＳ抗体は、裸抗体である。関連した実施形態において、使用される裸抗ＩＣＯＳ抗体の用量は、患者の体重に対して少なくとも約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０、１０．５、１１、１１．５、１２、１２．５、１３、１３．５、１４、１４．５、１５、１５．５、１６、１６．５、１７、１７．５、１８、１８．５、１９、１９．５、２０、２０．５ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態において、使用される裸抗ＩＣＯＳ抗体の用量は、患者の体重に対して少なくとも約１〜１０、５〜１５、１０〜２０、または１５〜２５ｍｇ／ｋｇである。ある実施形態において、使用する裸抗ＩＣＯＳ抗体の用量は、患者の体重に対して少なくとも約１〜２０、３〜１５、または５〜１０ｍｇ／ｋｇである。他の実施形態において、使用する裸抗ＩＣＯＳ抗体の用量は、患者の体重に対して少なくとも約５、６、７、８、９、または１０ｍｇ／ｋｇである。
【０４６９】
ある実施形態において、用量は、約１、２、３、４、５、６、７、または８週間連続で、１週間に１回投与する約３７５ｍｇ／ｍ２の抗ＩＣＯＳ抗体を含む。ある実施形態において、用量は、約１、２、３、４、５、６、７、または８週間連続で、１週間に１回投与する患者の体重に対して少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５ｍｇ／ｋｇである。
【０４７０】
上記の抗ＩＣＯＳ抗体の代表的な用量を、本明細書に記載される通りに投与することができる。一実施形態において、上記の用量は、単一の用量の注入である。他の実施形態において、用量を、一定期間にわたって投与する。他の実施形態において、用量を一定期間にわたって複数回投与する。期間を、日、週、月で計ることができる。抗ＩＣＯＳ抗体の複数の用量を、有毒な副作用とバランスを取りながら、治療効果を達成するために適した間隔で投与することができる。例えば、複数の用量が使用される場合、抗体を用いた反復処置の前に、患者の単球数の回復を可能にするために、間隔を調節することが好ましくあり得る。単球集団は、患者のＡＤＣＣ機能を反映するため、この投与計画は処置の効率を最適化するであろう。
【０４７１】
ある実施形態において、患者が治療に応答性である限り、本開示の製剤をヒト患者に投与する。他の実施形態において、患者の疾病が進行しない限り、本開示の製剤を、ヒト患者に投与する。関連した実施形態において、本開示の製剤を、患者の疾病が進行しない、または一定期間進行しなくなるまで、ヒト患者に投与し、疾病が再発、または進行が再開しない限り、患者に本開示の製剤を投与しない。疾病の進行が止まるまたは逆転する場合、患者は、患者に再発する、すなわち治療している疾病が再発または進行するまで、本開示の製剤を投与しないであろう。この再発または進行の際、患者を初回に使用した同じ投与計画を用いて、または上記の他の用量を使用して再度治療することができる。
【０４７２】
ある実施形態において、本開示の製剤を、負荷投与量として、その後一定期間、複数の低用量（維持量）で投与することができる。かかる実施形態において、効果的なＩＣＯＳを発現するＴ細胞の枯渇を維持するために、用量を、時間を計り、量を調節することができる。ある実施形態において、負荷投与量は、患者の体重に対して約１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、または１８ｍｇ／ｋｇであり、維持量は、患者の体重に対して少なくとも約５〜１０ｍｇ／ｋｇである。他の実施形態において、維持量を７、１０、１４、または２１日おきの間隔で投与する。
【０４７３】
本開示の抗体組成物を、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、多発性硬化症（ＭＳ）、炎症性腸疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎およびセリアック病を含むＩＢＤ）、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）、乾癬、自己免疫性甲状腺炎、関節リウマチ（ＲＡ）、および糸球体腎炎等の、自己免疫病の処置に使用することができる。さらに、本開示の抗体組成物を、移植拒絶反応を抑制もしくは防止するために、または移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）の処置をするために使用することができる。
【０４７４】
本開示の液体製剤を治療として、体内に局所的または全身的に使用することができる。本開示の製剤を、１つ以上の他の治療（例えば、１つ以上の他の予防または治療剤）と組み合わせて利用することもできる。１つ以上の他の治療（例えば、予防または治療剤）が使用される場合、それらを、任意の適切な形状で、および任意の適切な経路で、別々に投与することができる。治療または予防剤は、小分子、合成薬、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸（例えば、これらに限定されないが、アンチセンスヌクレオチド配列、三重らせん体、ＲＮＡｉ、および生物活性タンパク質、ポリペプチド、またはペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むがこれらに限定されないＤＮＡおよびＲＮＡヌクレオチド）、抗体、合成または天然の無機分子、模倣剤、および合成または天然の有機分子を含むがこれらに限定されない。
【０４７５】
ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれらを特徴とする疾病または疾患、ＩＣＯＳ受容体または１つ以上のそのサブユニットの異常発現および／または活性と付随したまたはそれらを特徴とする疾病または疾患、自己免疫病、移植拒絶反応、移植片対宿主病と付随した１つ以上の症状の防止、処置および／または管理のために、有用であることが知られている、または使用されている、または現在使用されている任意の治療（例えば、予防または治療剤）を、本明細書に記載される本開示と一致して本開示の液体抗体製剤と組み合わせて使用することができる。例えば、治療、特に、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれらを特徴とする疾病または疾患、ＩＣＯＳ受容体またはその１つ以上のサブユニットの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病または疾患、自己免疫病、炎症性疾患、またはそれらの１つ以上の症状を防止する、治療するおよび／または管理するために使用されてきた、または現在使用されている予防または治療剤に関する情報について、Ｇｉｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ：Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｔｅｎｔｈ  Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００１、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂｅｒｋｏｗ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），１７ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍｅｒｃｋ  Ｓｈａｒｐ  ＆  Ｄｏｈｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ，１９９９、およびＣｅｃｉｌ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０ｔｈ  Ｅｄ．，Ｂｅｎｎｅｔｔ  ａｎｄ  Ｐｌｕｍ（ｅｄｓ．），Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，１９９６を参照されたい。予防および治療剤の例は、免疫調節剤、抗炎症剤（例えば、限定されないが、アドレノコルチコイド、副腎皮質ステロイド薬（例えば、限定されないが、ベクロメタゾン、ブデソニド、フルニソリド、フルチカゾン、トリアムシノロン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン）、グルココルチコイド、ステロイド、非ステロイド性抗炎症性薬（例えば、限定されないが、アスピリン、イブプロフェン、ジクロフェナク、およびＣＯＸ−２抑制剤）、およびロイコトリエン拮抗薬（例えば、限定されないが、モンテルカスト、メチルキサンチン、ザフィルルカスト、およびジロートン）、ベータ２−刺激薬（例えば、限定されないがアルブテロール、ビテロール（ｂｉｔｅｒｏｌ）、フェノテロール、イソエタリン、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルブタモール、テルブタリンホルモテロール、サルメテロール、およびサルブタモールテルブタリン）、抗コリン剤（例えば、限定されないが臭化イプラトロピウムおよび臭化オキシトロピウム）、スルファサラジン、ペニシラミン、ダプソン、抗ヒスタミン、抗マラリア剤（例えば、限定されないが、ヒドロキシクロロキン）、抗ウイルス剤、ならびに抗生物質（例えば、限定されないが、ダクチノマイシン（以前はアクチノマイシン）、ブレオマイシン、エ��スロマイシン、ペニシリン、ミトラマイシン、およびアントラマイシン（ＡＭＣ））を含むがこれらに限定されない。
【０４７６】
本開示の液体製剤を、１つ以上の他の治療（例えば、１つ以上の他の予防または治療剤）と同時にヒトに投与することができる。「同時に」という用語は、全く同じ時に、予防または治療剤／治療を投与することに限定されないが、むしろ本開示の液体製剤および他の薬剤／治療が、液体製剤に含有されるＩＣＯＳと特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）が、別の方法で投与された場合よりも増加する利益を提供するために、他の薬剤／治療と共に作用するように、連続でおよび時間間隔内で、哺乳類に投与されることを意味する。
【０４７７】
各種の実施形態において、本開示の液体製剤および１つ以上の他の治療（例えば、１つ以上の他の予防または治療剤）を、１時間未満空けて、約１時間空けて、約１時間〜約２時間空けて、約２時間〜約３時間空けて、約３時間〜約４時間空けて、約４時間〜約５時間空けて、約５時間〜約６時間空けて、約６時間〜約７時間空けて、約７時間〜約８時間空けて、約８時間〜約９時間空けて、約９時間〜約１０時間空けて、約１０時間〜約１１時間空けて、約１１時間〜約１２時間空けて、２４時間以下空けて、または４８時間以下空けて、投与する。特定の実施形態において、本開示の液体製剤および１つ以上の他の治療を、同じ患者の来診内で投与する。他の実施形態において、本開示の液体製剤および１つ以上の他の治療を、約２〜４日空けて、約４〜６日空けて、約１週間空けて、約１〜２週間空けて、または２週間を超える期間空けて、投与する。特定の実施形態において、本開示の液体製剤および１つ以上の他の治療を、両方の薬剤がまだ活発である時間枠で投与する。当業者は、投与した薬剤の半減期を測定することによって、かかる時間枠を決定することができるであろう。
【０４７８】
ある実施形態において、本開示の液体製剤および１つ以上の他の治療（例えば、１つ以上の他の予防または治療剤）を、対象へ周期的に投与する。サイクリング治療は、一定期間、第１の薬剤の投与、その後一定期間、第２の薬剤および／または第３の薬剤の投与、およびこの順次的な投与の繰り返しを含む。サイクリング治療は、１つ以上の治療に対する耐性の発達を減少する、１つの治療の副作用を回避するまたは減少する、および／または処置の有効性を改善することができる。
【０４７９】
他の実施形態において、本開示の液体製剤および１つ以上の他の治療（例えば、予防または治療剤）を、長い休息期間なしで、連続的な注入または高頻度の投与のいずれかによって、メトロノミック投与計画で投与する。かかるメトロノミック投与は、休息期間なしに、一定間隔で投薬することを含む。典型的に、予防または治療剤、特に細胞傷害性薬物を低用量で使用する。かかる投与計画は、長期間、比較的低い用量の慢性的な連日投与を包含する。特定の実施形態において、低用量の使用は、有毒な副作用を最小化し、休息期間を除去することができる。ある実施形態において、予防および治療剤を、約２４時間〜約２日、〜約１週間、〜約２週間、〜約３週間、〜約１ヶ月、〜約２ヶ月、〜約３ヶ月、〜約４ヶ月、〜約５ヶ月、〜約６ヶ月の範囲で、慢性的に低用量または継続注入によって送達する。
【０４８０】
一実施形態において、本開示の液体製剤を、ＩＣＯＳを発現する細胞の枯渇を維持する、所望のレベル（例えば、約０．１〜約１００μｇ／ｍＬ）でＩＣＯＳに対して特異的である抗体（その抗体断片を含む）の血漿濃度を維持する投与計画で、投与する。特定の実施形態において、抗体（その抗体断片を含む）の血漿濃度を、０．００１μｇ／ｍＬ、０．００５μｇ／ｍＬ、０．０１μｇ／ｍＬ、０．０５μｇ／ｍＬ、０．１μｇ／ｍＬ、０．２μｇ／ｍＬ、０．５μｇ／ｍＬ、１μｇ／ｍＬ、２μｇ／ｍＬ、３μｇ／ｍＬ、４μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、６μｇ／ｍＬ、７μｇ／ｍＬ、８μｇ／ｍＬ、９μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、１５μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、２５μｇ／ｍＬ、３０μｇ／ｍＬ、３５μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍＬ、４５μｇ／ｍＬ、または５０μｇ／ｍＬで維持する。対象の望ましい血漿濃度は、疾病または疾患の本質、疾病または疾患の重症度、および対象の状態を含むがこれらに限定されないいくつかの要因次第で変化するであろう。かかる投与計画は、慢性疾病または疾患の防止、処置、および／または管理において、特に有益である。
【０４８１】
一実施形態において、ＩＣＯＳを発現する細胞の少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の枯渇を維持するレベルのＩＣＯＳと特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）の血漿濃度を維持する投与計画を使用して、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病または疾患、ＩＣＯＳ受容体または１つ以上のそのサブユニットの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病または疾患、自己免疫病、悪性の疾病、移植拒絶反応、移植片対宿主病、またはその１つ以上の症状を患った対象に、本開示の液体製剤を、投与する。特定の実施形態において、ＩＣＯＳと特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）の血漿濃度を、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病または疾患、ＩＣＯＳ受容体またはその１つ以上のサブユニットの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病または疾患、自己免疫病、悪性度、移植拒絶反応、移植片対宿主病、またはその１つ以上の症状を患った対象において約０．００１μｇ／ｍＬ〜約１００μｇ／ｍＬで維持する。
【０４８２】
いくつかの実施形態において、本開示の液体製剤を間欠的に対象に投与し、液体製剤は、部分と共役した抗体（その抗体断片を含む）を含む。
【０４８３】
他の治療（例えば、予防および／または治療剤）と組み合わせて使用した場合、本開示の液体製剤および他の治療によって、相加的にまたは相乗的に作用することができる。本開示は、本開示の液体製剤の投与と、投与の同じまたは異なる経路、例えば、限定されないが経口および非経口で、他の治療（例えば、予防または治療剤）と組み合わせて検討する。ある実施形態において、本開示の液体製剤を（毒性を含むがこれに限定されない）有害な副作用を潜在的に産生する１つ以上の治療（例えば、予防または治療剤）と同時に投与する場合、治療（例えば、予防または治療剤）は、有害な副作用を誘発する許容限界以下の用量で有利に投与することができる。
【０４８４】
５．３６．化学療法剤との組み合わせ
（裸抗体、免疫複合体、または融合タンパク質を使用して）抗ＩＣＯＳ免疫療法は、化学療法、放射免疫療法（ＲＩＴ）、化学療法、および外部ビーム放射線（集学的療法、ＣＭＴ）、または併用放射免疫療法（ＣＭＲＩＴ）のみもしくは組み合わせ等を含むがこれらに限定されない他の治療と組み合わせて使用することができる。ある実施形態において、本開示の抗ＩＣＯＳ抗体治療を、ＣＨＯＰ（シクロホスファミド−ヒドロキシドキソルビシン−オンコビン（ビンクリスチン）−プレドニゾロン）と組み合わせて投与することができる。本明細書で使用される、「と組み合わせて投与する」という用語は、抗ＩＣＯＳ免疫療法を、利用する他の治療の前、その間、またはその後に投与することができることを意味する。
【０４８５】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ免疫療法は、細胞傷害性放射性核種または放射線治療の同位体と組み合わせる。例えば、２２５Ａｃ、２２４Ａｃ、２１１Ａｔ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉ、２１２Ｐｂ、２２４Ｒａ、または２２３Ｒａ等のアルファ発光同位体。細胞傷害性の放射性核種は、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、９０Ｙ、１３１Ｉ、６７Ｃｕ、１７７Ｌｕ、１５３Ｓｍ、１６６Ｈｏ、または６４Ｃｕ等のベータ発光同位体であることもできる。さらに、細胞傷害性の放射性核種は、オージェおよび低エネルギー電子を発光し、同位体１２５Ｉ、１２３Ｉ、または７７Ｂｒを含むことができる。他の実施形態において、同位体は、１９８Ａｕ、３２Ｐ、等であることができる。ある実施形態において、対象に投与した放射性核種の量は、約０．００１ｍＣｉ／ｋｇ〜約１０ｍＣｉ／ｋｇの間である。
【０４８６】
いくつかの実施形態において、対象に投与した放射性核種の量は、約０．１ｍＣｉ／ｋｇ〜約１．０ｍＣｉ／ｋｇである。他の実施形態において、対象に投与した放射性核種の量は、約０．００５ｍＣｉ／ｋｇ〜０．１ｍＣｉ／ｋｇの間である。
【０４８７】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ免疫療法は、化学的な毒素または化学療法剤を組み合わせる。化学的な毒素または化学療法剤を、カリチアマイシンおよびエスペラミシン等のエンジイン、デュオカルマイシン、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、エトポシド、ブレオマイシン、ならびに５−フルオロウラシルからなる群から選択することができる。
【０４８８】
抗ＩＣＯＳ免疫療法を含む併用療法で使用することができる適切な化学的な毒素または化学療法剤は、カリチアマイシンおよびエスペラミシン等の分子のエンジインファミリーのメンバーを含む。化学的な毒素は、デュオカルマイシン（例えば、米国特許第５，７０３，０８０号、および米国特許第４，９２３，９９０号を参照）、メトトレキサート、ドキソルビシン、メルファラン、クロラムブシル、ＡＲＡ−Ｃ、ビンデシン、マイトマイシンＣ、シスプラチン、エトポシド、ブレオマイシン、および５−フルオロウラシルからなる群からも取ることができる。化学療法剤の例は、アドリアマイシン、ドキソルビシン、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）、シクロホスファミド、チオテパ、タキソテール（ドセタキセル）、ブスルファン、サイトキシン、タキソール、メトトレキサート、シスプラチン、メルファラン、ビンブラスチン、ブレオマイシン、エトポシド、イホスファミド、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、カルボプラチン、テニポシド、ダウノマイシン、カルミノマイシン、アミノプテリン、ダクチノマイシン、マイトマイシン、エスペラミシン、（米国特許第４，６７５，１８７号を参照）、メルファラン、および他の関係するナイトロジェンマスタードも、含む。
【０４８９】
他の実施形態において、例えば、「ＣＶＢ」（１．５ｇ／ｍ２シクロホスファミド、２００−４００ｍｇ／ｍ２エトポシド、および１５０−２００ｍｇ／ｍ２カルムスチン）を本開示の併用療法で使用することができる。ＣＶＢは、非ホジキンリンパ腫を治療するために、使用する療法である。Ｐａｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．５１：１８（１９９３）。他の適切な組み合わせの化学療法計画は、当業者によく知られている。例えば、Ｆｒｅｅｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ  Ｌｙｍｐｈｏｍａｓ，”ｉｎ  ＣＡＮＣＥＲ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ，ＶＯＬＵＭＥ  ２，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｈｏｌｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），ｐｐ．２０２８−２０６８（Ｌｅａ  ＆  Ｆｅｂｉｇｅｒ  １９９３）を参照されたい。説明として、中間のグレードの非ホジキンリンパ腫の処置に対する第一世代の化学療法計画は、Ｃ−ＭＯＰＰ（シクロホスファミド、ビンクリスチン、プロカルバジン、およびプレドニゾン）およびＣＨＯＰ（シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）を含む。有用な第二世代の化学療法計画は、ｍ−ＢＡＣＯＤ（メトトレキサート、ブレオマイシン、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、デキサメタゾン、およびロイコボリン）であるが、適した第三世代の療法は、ＭＡＣＯＰ−Ｂ（メトトレキサート、ドキソルビシン、シクロホスファミド、ビンクリスチン、プレドニゾン、ブレオマイシン、およびロイコボリン）である。追加の有用な薬物は、フェニル酪酸およびブロスタチン−１（ｂｒｏｓｔａｔｉｎ−１）を含む。集学的治療で、化学療法薬およびサイトカインの両方を、本開示に従って抗体、免疫複合体、または融合タンパク質と同時投与する。サイトカイン、化学療法薬、および抗体、免疫複合体、または融合タンパク質を、任意の順番で、または同時に投与することができる。
【０４９０】
本開示の製剤および方法で使用することができる他の毒素は、有毒なレクチン、リシン、アブリン、モデシン、ボツリヌスおよびジフテリア毒素等の植物毒素を含む。もちろん、様々な毒素の組み合わせは、１つの抗体分子とカップリングされることができ、それによって、様々な細胞傷害性を適応させる。本発明の併用療法において適切に利用された毒素の実例は、リシン、アブリン、リボヌクレアーゼ、デオキシリボヌクレアーゼＩ、ブドウ球菌エンテロトキシンＡ、ヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質、ゲロニン、ジフテリア毒素、緑膿菌外毒素、およびシュードモナスエンドトキシンである。例えばＰａｓｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ，４７：６４１（１９８６）、およびＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃｉａｎｓ，４４：４３（１９９４）を参照されたい。使用することができる酵素的に活発な毒素およびその断片は、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（緑膿菌から）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、αサルシン、シナアブラギリタンパク質、ジアンチンタンパク質、ヨウシュヤマゴボウタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、ニガウリ阻害剤、クルシン、クロチン、サボンソウ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、およびトリコテシンを含む。例えば、１９９３年、１０月２８日に公開されたＷＯ第９３／２１２３２号を参照されたい。
【０４９１】
適切な毒素および化学療法剤は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ，１９ｔｈ  Ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．１９９５）、およびＧＯＯＤＭＡＮ  ＡＮＤ  ＧＩＬＭＡＮ’Ｓ  ＴＨＥ  ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＢＡＳＩＳ  ＯＦ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，７ｔｈ  Ｅｄ．（ＭａｃＭｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．１９８５）に記載される。他の適切な毒素および／または化学療法剤は、当業者に知られている。
【０４９２】
本開示の抗ＩＣＯＳ免疫療法は、プロドラッグ（例えば、ぺプチジル化学療法剤、ＷＯ第８１／０１１４５号を参照）を活発な抗癌剤へ変換するプロドラッグを活性化する酵素とも組合すことができる。例えば、ＷＯ第８８／０７３７８号および米国特許第４，９７５，２７８号を参照されたい。かかる組み合わせの酵素の成分は、より活発な、細胞傷害性の形状に、変換するようにプロドラッグに働くことができる任意の酵素を含む。本出願で使用する「プロドラッグ」という用語は、親薬物と比較して、腫瘍細胞に対してよりも低い細胞傷害性であり、酵素的に活性化することが可能である、またはより活発な親の形態へ変換される薬学的に活発な物質の前駆物質または誘導体の形態を指す。例えば、Ｗｉｌｍａｎ，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ”Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ，１４，ｐｐ．３７５−３８２，６１５ｔｈ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ｂｅｌｆａｓｔ（１９８６）およびＳｔｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：  Ａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄ．），ｐｐ．２４７−２６７，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ（１９８５）を参照されたい。抗ＩＣＯＳ抗体と組み合わせて使用することができるプロドラッグは、リン酸を含有するプロドラッグ、チオリン酸を含有するプロドラッグ、硫酸を含有するプロドラッグ、ペプチドを含有するプロドラッグ、Ｄ−アミノ酸修飾プロドラッグ、グリコシル化したプロドラッグ、α−ラクタムを含有するプロドラッグ、随意に置換されるフェノキシアセトアミドを含有するプロドラッグまたは随意に置換されるフェニルアセトアミドを含有するプロドラッグ、より活発な細胞傷害性の遊離薬物に変換することができる５−フルオロシトシンおよび他の５−フルオロウリジンプロドラッグを含むがこれらに限定されない。本開示の使用のためにプロドラッグの形態に誘導体化することができる細胞傷害性薬の例は、上記の化学療法剤を含むがこれらに限定されない。
【０４９３】
ある実施形態において、本開示の製剤および方法の投与は、中毒治療の延期を可能にでき、不必要な副作用および化学療法に付随した合併症の危険性を回避することおよび化学療法に対する耐性の発達を遅延することを援助することができる。ある実施形態において、中毒治療および／または中毒治療に対する耐性は、本開示の製剤および方法を投与された患者で遅延し、約６ヶ月、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０年間までの間遅延する。
【０４９４】
５．３７．治療抗体との組み合わせ
本明細書に記載される抗ＩＣＯＳ免疫療法を、抗ＣＤ１９ｍＡｂ、抗ＣＤ５２ｍＡｂ、抗ＣＤ２２抗体、およびＲＩＴＵＸＡＮ（商標）（Ｃ２Ｂ８；ＲＩＴＵＸＩＭＡＢ（商標）；ＩＤＥＣ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）等の抗ＣＤ２０抗体を含むがこれらに限定されない他の抗体と組み合わせて投与することができる。本開示の抗体と組み合わせてまたは本開示の製剤で使用することができる治療抗体の他の例は、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（商標）（トラスツズマブ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＭＹＬＯＴＡＲＧ（商標）（ゲムツズマブオゾガマイシン；Ｗｙｅｔｈ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＣＡＭＰＡＴＨ（商標）（アレムツズマブ；Ｂｅｒｌｅｘ）、ＺＥＶＡＬＩＮ（商標）（イブリツモマブチウキセタン；Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ＢＥＸＸＡＲ（商標）（トシツモマブ；ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｃｏｒｉｘａ）、ＥＲＢＩＴＵＸ（商標）（セツキシマブ；Ｉｍｃｌｏｎｅ）、およびＡＶＡＳＴＩＮ（商標）（ベバシズマブ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）を含むがこれらに限定されない。
【０４９５】
５．３８．単球またはマクロファージ機能を増強する併用化合物
本開示の方法のある実施形態において、単球またはマクロファージ機能を増強する化合物（例えば、少なくとも約２５％、５０％、７５％、８５％、９０％、９５％以上）を、抗ＩＣＯＳ免疫療法と組み合わせて使用することができる。かかる化合物は、当該技術において知られており、限定なしに、インターロイキン（例えば、ＩＬ−１２）等のサイトカイン、およびインターフェロン（例えば、アルファまたはガンマインターフェロン）を含む。
【０４９６】
単球またはマクロファージ機能または増強を増強する化合物を、抗体、免疫複合体、または抗原結合断片として、同じ薬学的な製剤に処方することができる。別々に投与した際、抗体／断片および化合物を、同時に（互いの数時間の期間内で）投与することができる、一連の同じ治療の過程で投与することができる、または連続的に投与することができる（すなわち、患者が先ず、一連の抗体／断片の処置を受け、次にマクロファージ／単球機能を増強する化合物を受ける、またはその反対）。かかる実施形態において、単球またはマクロファージ機能を増強する化合物を、他の治療療法および／または本開示の製剤を用いた処置の前に、同時にまたはその後に、ヒト対象へ投与する。一実施形態において、ヒト対象は、ヒトの正常範囲内である血液白血球、単球、好中球、リンパ球、および／または好塩基球数を有する。ヒト血液白血球（総数）の正常範囲は、約３．５〜約１０．５（１０９／Ｌ）である。ヒト血液好中球の正常範囲は、約１．７〜約７．０（１０９／Ｌ）であり、単球は約０．３〜約０．９（１０９／Ｌ）であり、リンパ球は約０．９〜約２．９（１０９／Ｌ）であり、好塩基球は約０〜約０．３（１０９／Ｌ）であり、好酸球は約０．０５〜約０．５（１０９／Ｌ）である。他の実施形態において、ヒト対象は、ヒトの正常範囲未満、例えば少なくとも約０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、または０．８（１０９／Ｌ）白血球である血液白血球数を有する。
【０４９７】
５．３９．免疫調節剤との組み合わせ
本開示の抗ＩＣＯＳ免疫療法は、免疫調節剤と組み合わせることもできる。併用療法に対して本明細書で使用する「免疫調節剤」という用語は、宿主の免疫系を抑制する、遮蔽する、または増強するために作用する物質を指す。
【０４９８】
免疫調節剤の例は、サイトカイン、ペプチド擬似体、および抗体（例えば、ヒト、ヒト化、キメラ、モノクローナル、ポリクローナル、Ｆｖ、ＳｃＦｖ、Ｆａｂ、またはＦ（ａｂ）２断片、またはエピトープ結合断片）等のタンパク質剤、核酸分子（例えば、アンチセンス核酸分子、ＲＮＡｉおよび三重らせん体）、小分子、有機化合物、および無機化合物を含むがこれらに限定されない。特に、免疫調節剤は、メトトレキサート、レフルノミド、シクロホスファミド、シトキサン、イムラン、シクロスポリンＡ、ミノサイクリン、アザチオプリン、抗生物質（例えば、ＦＫ５０６（タクロリムス））、メチルプレドニゾロン（ＭＰ）、副腎皮質ステロイド薬、ステロイド剤、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン（シロリムス）、ミゾリビン、デオキシスパガリン、ブレキナル、マロノニトリロアミンド（ｍａｌｏｎｏｎｉｔｒｉｌｏａｍｉｎｄｅ）（例えば、レフルノミド）、Ｔ細胞受容体モジュレーター、ならびにサイトカイン受容体モジュレーターを含むがこれらに限定されない。免疫抑制剤の例は、ミコフェノール酸モフェチル（ＣＥＬＬＣＥＰＴ（商標））、Ｄ−ペニシラミン（ＣＵＰＲＩＭＩＮＥ（商標）、ＤＥＰＥＮ（商標））、メトトレキサート（ＲＨＥＵＭＡＴＲＥＸ（商標）、ＴＲＥＸＡＬＬ（商標））、およびヒドロキシクロロキン硫酸（ＰＬＡＱＵＥＮＩＬ（商標））を含むがこれらに限定されない。
【０４９９】
免疫調節剤は、サイトカイン産生を抑制する、自己抗原発現を下方制御するもしくは抑制する、またはＭＨＣ抗原を遮蔽する物質も含むであろう。かかる薬剤の例は、２−アミノ−６−アリール−５−修飾ピリミジン（米国特許第４，６６５，０７７号を参照）、アザチオプリン（またはアザチオプリンに対して有害反応がある場合、シクロホスファミド）；ブロモクリプチン；（米国特許第４，１２０，６４９号に記載される通りＭＨＣ抗原を遮蔽する）グルタルアルデヒド；ＭＨＣ抗原およびＭＨＣ断片のための抗イディオタイプ抗体；シクロスポリンＡ；糖質コルチコステロイド等のステロイド、例えば、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、およびデキサメタゾン；抗インターフェロン−ガンマ、−ベータ、または−アルファ抗体を含むサイトカインまたはサイトカイン受容体拮抗薬；抗腫瘍壊死因子−アルファ抗体；抗腫瘍壊死因子−ベータ抗体；抗インターロイキン−２抗体および抗ＩＬ−２受容体抗体；抗Ｌ３Ｔ４抗体；異種性抗リンパ球グロブリン；ｐａｎ−Ｔ抗体、好ましくは抗ＣＤ３または抗ＣＤ４／ＣＤ４ａ抗体；ＬＦＡ−３結合ドメインを含有する可溶性ペプチド（１９９０年７月２６日に公開されたＷＯ第９０／０８１８７号）；ストレプトキナーゼ；ＴＧＦ−．ベータ．；ストレプトドルナーゼ；宿主からのＲＮＡまたはＤＮＡ；ＦＫ５０６；ＲＳ−６１４４３；デオキシスパガリン；ラパマイシン；Ｔ細胞受容体（米国特許第５，１１４，７２１号）；Ｔ細胞受容体断片（Ｏｆｆｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５１：４３０−４３２（１９９１）；ＷＯ第９０／１１２９４号；およびＷＯ第９１／０１１３３号）；ならびにＴ１０Ｂ９等のＴ細胞受容体抗体（ＥＰ３４０，１０９）を含む。
【０５００】
サイトカインの例は、リンホカイン、モノカイン、および伝統的ポリペプチドホルモンを含むがこれらに限定されない。サイトカイン間で含まれるものは、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、およびウシ成長ホルモン等の成長ホルモン；パラ甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、および黄体ホルモン（ＬＨ）等の糖タンパク質ホルモン；肝臓成長因子；線維芽細胞成長因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；腫瘍壊死因子−アルファ；ミュラー管抑制因子；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−アルファ等の神経成長因子；血小板−成長因子；ＴＧＦ−アルファおよびＴＧＦ−アルファ等の形質転換増殖因子（ＴＧＦ）；インシュリン様増殖因子−−Ｉおよび−ＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子；インターフェロン；マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）等のコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；顆粒球−マクロファージ−ＣｇＰ（ＧＭ−ＣＳＰ）；および顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）；ＩＬ−１、ＩＬ−１ａ、ＩＬ−２、１Ｌ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５等のインターロイキン（ＩＬ）；ＴＮＦ−アルファまたはＴＮＦ−ベータ等の腫瘍壊死因子；ならびにＬＩＦおよびにＫｉｔリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子である。本明細書で使用する、サイトカインという用語は、天然源からまたは組換え細胞培養からのタンパク質、および天然配列サイトカインの生物活性均等物を含む。ある実施形態において、本方法は、１つ以上の免疫調節剤、好ましくはサイトカインを対象に投与することをさらに含む。好ましいサイトカインを、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポイエチン、およびガンマインターフェロンからなる群から選択する。
【０５０１】
ある実施形態において、免疫調節剤はサイトカイン受容体モジュレーターである。サイトカイン受容体モジュレーターの例は、可溶性サイトカイン受容体（例えば、ＴＮＦ−アルファ受容体またはその断片の細胞外ドメイン、ＩＬ−１ベータ受容体またはその断片の細胞外ドメイン、およびＩＬ−６受容体またはその断片の細胞外ドメイン）、サイトカインまたはその断片（例えば、インターロイキン（ＩＬ）−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ、インターフェロン（ＩＦＮ）−アルファ、ＩＦＮ−ベータ、ＩＦＮ−ガンマ、およびＧＭ−ＣＳＦ）、抗サイトカイン受容体抗体（例えば、抗ＩＬ−２受容体抗体、抗ＩＬ−４受容体抗体、抗ＩＬ−６受容体抗体、抗ＩＬ−１０受容体抗体、および抗ＩＬ−１２受容体抗体）、抗サイトカイン抗体（例えば、抗ＩＦＮ受容体抗体、抗ＴＮＦ−アルファ抗体、抗ＩＬ−１ベータ抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−９、抗ＩＬ−１７抗体、抗体、および抗ＩＬ−１２抗体）を含むがこれらに限定されない。特定の実施形態において、サイトカイン受容体モジュレーターはＩＬ−４、ＩＬ−１０、またはそれらの断片である。別の実施形態において、サイトカイン受容体モジュレーターは、抗ＩＬ−１ベータ抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＩＬ−１２受容体抗体、抗ＴＮＦ−アルファ抗体である。別の実施形態において、サイトカイン受容体モジュレーターは、ＴＮＦ−アルファ受容体またはその断片の細胞外ドメインである。ある実施形態において、サイトカイン受容体モジュレーターはＴＮＦ−アルファ拮抗薬ではない。
【０５０２】
ある実施形態において、免疫調節剤はＴ細胞受容体モジュレーターである。Ｔ細胞受容体モジュレーターの例は、抗Ｔ細胞受容体抗体（例えば、抗ＣＤ４抗体（例えば、ｃＭ−Ｔ４１２（Ｂｏｅｒｉｎｇｅｒ）、ＩＤＥＣ−ＣＥ９．１（ＩＤＥＣおよびＳＫＢ）、ｍＡＢ４１６２Ｗ９４、ＯｒｔｈｏｃｌｏｎｅおよびＯＫＴｃｄｒ４ａ（Ｊａｎｓｓｅｎ−Ｃｉｌａｇ））、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ５抗体（例えば、抗ＣＤ５リシン結合免疫複合体）、抗ＣＤ７抗体（例えば、ＣＨＨ−３８０（Ｎｏｖａｒｔｉｓ））、抗ＣＤ８抗体、抗ＣＤ４０リガンドモノクローナル抗体、抗ＣＤ５２抗体（例えば、ＣＡＭＰＡＴＨ１Ｈ（Ｉｌｅｘ））、抗ＣＤ２モノクローナル抗体）およびＣＴＬＡ４−免疫グロブリンを含むがこれらに限定されない。
【０５０３】
ある実施形態において、免疫調節剤は、ＴＮＦ−アルファ拮抗薬である。ＴＮＦ−アルファ拮抗薬の例は、抗体（例えば、インフリキシマブ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（商標）；Ｃｅｎｔｏｃｏｒ）、Ｄ２Ｅ７（Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ／Ｋｎｏｌｌ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｃｏ．，Ｍｔ．Ｏｌｉｖｅ，Ｎ．Ｊ．）、ＨＵＭＩＲＡ（商標）およびＣＤＰ−８７０（Ｃｅｌｌｔｅｃｈ／Ｐｈａｒｍａｃｉａの両方，Ｓｌｏｕｇｈ，Ｕ．Ｋ．）としても知られるＣＤＰ５７１、およびＴＮ３−１９．１２（Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９１：２７６２−２７６６；Ｔｈｏｒｂｅｃｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：７３７５−７３７９））可溶性ＴＮＦ−アルファ受容体（例えば、ｓＴＮＦ−Ｒ１（Ａｍｇｅｎ）、エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（商標）；Ｉｍｍｕｎｅｘ）およびそのラット相同体ＲＥＮＢＲＥＬ（商標）、ＴＮＦｒＩ、ＴＮＦｒＩＩに由来するＴＮＦ−アルファの可溶性の抑制剤（Ｋｏｈｎｏ  ｅｔ  ａｌ．、１９９０、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８７：８３３１−８３３５）、およびＴＮＦ−アルファＩｎｈ（Ｓｅｃｋｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ、１９９０、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８７：５１８８−５１９２））、ＩＬ−１０、ＴＮＦＲ−ＩｇＧ（Ａｓｈｋｅｎａｚｉ  ｅｔ  ａｌ．、１９９１、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８８：１０５３５−１０５３９）、マウス製品ＴＢＰ−１（Ｓｅｒｏｎｏ／Ｙｅｄａ）、ワクチンＣｙｔｏＴＡｂ（Ｐｒｏｔｈｅｒｉｃｓ）、アンチセンス分子１０４８３８（ＩＳＩＳ）、ペプチドＲＤＰ−５８（ＳａｎｇＳｔａｔ）、サリドマイド（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＣＤＣ−８０１（Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ＤＰＣ−３３３（Ｄｕｐｏｎｔ）、ＶＸ−７４５（Ｖｅｒｔｅｘ）、ＡＧＩＸ−４２０７（ＡｔｈｅｒｏＧｅｎｉｃｓ）、ＩＴＦ−２３５７（Ｉｔａｌｆａｒｍａｃｏ）、ＮＰＩ−１３０２１−３１（Ｎｅｒｅｕｓ）、ＳＣＩＯ−４６９（Ｓｃｉｏｓ）、ＴＡＣＥ  ｔａｒｇｅｔｅｒ（Ｉｍｍｕｎｉｘ／ＡＨＰ）、ＣＬＸ−１２０５００（Ｃａｌｙｘ）、Ｔｈｉａｚｏｌｏｐｙｒｉｍ（Ｄｙｎａｖａｘ）、オーラノフィン（Ｒｉｄａｕｒａ）（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ  Ｂｅｅｃｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、キナクリン（メパクリンジクロロ水和物）、テニダップ（Ｅｎａｂｌｅｘ）、メラニン（Ｌａｒｇｅ  Ｓｃａｌｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）、ならびにＵｒｉａｃｈによる抗ｐ３８ＭＡＰＫ薬剤を含むがこれらに限定されない。
【０５０４】
抗ＩＣＯＳ免疫療法は、免疫調節剤と組合すこともできる。このアプローチで、キメラ、ヒト、またはヒト化抗ＩＣＯＳ抗体を使用することができる。併用療法に対して本明細書で使用する「免疫調節剤」という用語は、宿主の免疫系を抑制する、遮蔽する、または増強するために作用する物質を指す。これは、サイトカイン産生を抑制する、自己抗原発現を下方制御するまたは抑制する、またはＭＨＣ抗原を遮蔽する物質を含むであろう。かかる薬剤の例は、２−アミノ−６−アリール−５−置換ピリミジン（米国特許第４，６６５，０７７号を参照）、アザチオプリン（またはアザチオプリンに対する有害反応である場合、シクロホスファミド）；ブロモクリプチン；（米国特許第４，１２０，６４９号に記載されるように、ＭＨＣ抗原を遮蔽する）グルタルアルデヒド；ＭＨＣ抗原およびＭＨＣ断片に対する抗イディオタイプ抗体；シクロスポリンＡ；糖質コルチコステロイド等のステロイド、例えば、プレドニゾン、メチルプレドニゾロン、およびデキサメタゾン；抗インターフェロン−γ、−β、または−α抗体を含むサイトカインまたはサイトカイン受容体拮抗薬；抗腫瘍壊死因子−α抗体；抗腫瘍壊死因子−β抗体；抗インターロイキン−２抗体および抗ＩＬ−２受容体抗体；抗Ｌ３Ｔ４抗体；異種性抗リンパ球グロブリン；ｐａｎ−Ｔ抗体、例えば抗ＣＤ３または抗ＣＤ４／ＣＤ４ａ抗体；ＬＦＡ−３結合ドメインを含有する可溶性ペプチド（１９９０年７月２６日に公開されたＷＯ第９０／０８１８７号）；ストレプトキナーゼ；ＴＧＦ−β；ストレプトドルナーゼ；宿主からのＲＮＡまたはＤＮＡ；ＦＫ５０６；ＲＳ−６１４４３；デオキシスパガリン；ラパマイシン；Ｔ細胞受容体（米国特許第５，１１４，７２１号）；Ｔ細胞受容体断片（Ｏｆｆｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５１：４３０−４３２（１９９１）；ＷＯ第９０／１１２９４号；およびＷＯ第９１／０１１３３号）；ならびにＴ１０Ｂ９等のＴ細胞受容体抗体（ＥＰ３４０，１０９）を含む。サイトカインの例は、リンホカイン、モノカイン、および伝統的ポリペプチドホルモンを含むがこれらに限定されない。サイトカイン間で含まれるものは、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、およびウシ成長ホルモン等の成長ホルモン；パラ甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；リラキシン；プロリラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、および黄体ホルモン（ＬＨ）等の糖タンパク質ホルモン；肝臓成長因子；線維芽細胞成長因子；プロラクチン；胎盤性ラクトゲン；腫瘍壊死因子−α；ミュラー管抑制因子；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−α等の神経成長因子；血小板−成長因子；ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−α等の形質転換増殖因子（ＴＧＦ）；インシュリン様増殖因子−Ｉおよび−ＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子；インターフェロン；マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）等のコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；顆粒球−マクロファージ−ＣｇＰ（ＧＭ−ＣＳＰ）；および顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）；ＩＬ−１、ＩＬ−ｌａ、ＩＬ−���、１Ｌ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１Ｉ、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５等のインターロイキン（ＩＬ）；ＴＮＦ−αまたはＴＮＦ−β等の腫瘍壊死因子；ならびにＬＩＦおよびＫｉｔリガンド（ＫＬ）を含む他のポリペプチド因子である。本明細書で使用する、サイトカインという用語は、天然源からまたは組換え細胞培養からのタンパク質、および天然配列サイトカインの生物活性均等物を含む。ある実施形態において、本方法は、１つ以上の免疫調節剤、例えばサイトカインを対象に投与することをさらに含む。適切なサイトカインを、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−１８、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポイエチン、およびγインターフェロンからなる群から選択することができる。
【０５０５】
これらの免疫調節剤を、抗ＩＣＯＳ抗体と同時に、または別々の時間に投与する。好ましい免疫調節剤は、治療される疾患の種類を含む多くの要因ならびに患者の病歴に依存するであろうが、多くの場合、薬剤はシクロスポリンＡ、糖質コルチコステロイド（例えばプレドニゾンまたはメチルプレドニゾロン）、アザチオプリン、ブロモクリプチン、異種性抗リンパ球グロブリン、またはそれらの混合物から選択することができる。
【０５０６】
５．４０．他の治療剤との組み合わせ
腫瘍血管新生上で作用する薬剤を、抗ＩＣＯＳ免疫療法と組み合わせて使用することもでき、コンブレスタチン（ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ）Ａ４（Ｇｒｉｇｇｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．２：８２，（２００１））およびアンジオスタチンおよびエンドスタチン（本明細書に参照によって組み込まれるＲｏｓｅｎ，Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ  ５：２０（２０００）で概説された）等のチューブリン結合薬剤を含む。抗ＩＣＯＳ抗体との併用に適した免疫調節剤は、α−インターフェロン、γ−インターフェロン、および腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）を含むがこれらに限定されない。ある実施形態において、本開示の製剤および方法を使用した併用療法で使用する治療剤は、ペプチドである。
【０５０７】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ免疫療法は、１つ以上のカリチアマイシン分子と組み合わせる。抗菌のカリチアマイシンファミリーは、サブピコモル濃度において破壊する二本鎖のＤＮＡを産出することができる。使用することができるカリチアマイシンの構造的類似物は、γ１Ｉ、γ２Ｉ、γ３Ｉ、Ｎ−アセチル−γ１Ｉ、ＰＳＡＧおよびθＩ１を含むがこれに限定されない（Ｈｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５３：３３３６−３３４２（１９９３）およびＬｏｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５８：２９２５−２９２８（１９９８））。
【０５０８】
ある実施形態において、処置療法は抗ＩＣＯＳ抗体製剤の細胞傷害性効果を軽減する化合物を含む。かかる化合物は、鎮痛剤（例えば、アセトアミノフェン）、ビスホスホネート、抗ヒスタミン（例えば、マレイン酸クロルフェニラミン）、およびステロイド（例えば、デキサメタゾン、レチノイド、デルトイド（ｄｅｌｔｏｉｄ）、ベタメタゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾン、デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、ミネラルコルチコイド、エストロゲン、テストステロン、プロゲスチン）を含む。
【０５０９】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ免疫療法と併用する治療剤は、小分子である（すなわち、約２５００ダルトン未満の分子量を有する無機または有機化合物）。例えば、小分子のライブラリーを、Ｓｐｅｃｓ  ａｎｄ  ＢｉｏＳｐｅｃｓ  Ｂ．Ｖ．（Ｒｉｊｓｗｉｊｋ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）、Ｃｈｅｍｂｒｉｄｇｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）、Ｃｏｍｇｅｎｅｘ  ＵＳＡ  Ｉｎｃ．（Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、ＮＪ）、およびＭａｙｂｒｉｄｇｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｌｔｄ．（Ｃｏｒｎｗａｌｌ  ＰＬ３４  ＯＨＷ、Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ）から商業的に得ることができる。
【０５１０】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ免疫療法を、抗細菌薬と併用して投与することができる。抗細菌薬の限定されない例は、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、融合タンパク質、抗体、核酸分子、有機分子、無機分子、ならびに細胞感染を抑制するおよび／または減少する、細胞の複製を抑制するおよび／または減少する、または他の細胞もしくは対象に細胞が伝播することを抑制するおよび／または減少する小分子を含む。抗細菌薬の具体的な例は、ペニシリン、セファロスポリン、イミペネム、アズトレオナム、バンコマイシン、サイクロセリン、バシトラシン、クロラムフェニコール、エリスロマイシン、クリンダマイシン、テトラサイクリン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ゲンタマイシン、アミカシン、カナマイシン、ネオマイシン、スペクチノマイシン、トリメトプリム、ノルフロキサシン、リファンピン、ポリミキシン、アンホテリシンＢ、ニスタチン、ケトコナゾール、イソニアジド、メトロニダゾール、およびペンタミジン等の抗生物質を含むがこれらに限定されない。
【０５１１】
ある実施形態において、抗ＩＣＯＳ免疫療法を、抗真菌剤と併用して投与することができる。抗真菌剤の具体的な例は、アゾール剤（例えば、ミコナゾール、ケトコナゾール（ＮＩＺＯＲＡＬ（登録商標））、カスポファンギン酢酸塩（ＣＡＮＣＩＤＡＳ（登録商標））、イミダゾール、トリアゾール（例えば、フルコナゾール（ＤＩＦＬＵＣＡＮ（登録商標）））、およびイトラコナゾール（ＳＰＯＲＡＮＯＸ（登録商標）））、ポリエン（例えば、ニスタチン、アンホテリシンＢ（ＦＵＮＧＩＺＯＮＥ（登録商標））、アンホテリシンＢ脂質複合物（「ＡＢＬＣ」）（ＡＢＥＬＣＥＴ（登録商標））、アンホテリシンＢコロイド分散液（「ＡＢＣＤ」）（ＡＭＰＨＯＴＥＣ（登録商標））、リポソームアンホテリシンＢ（ＡＭＢＩＳＯＮＥ（登録商標）））、ヨウ化カリウム（ＫＩ）、ピリミジン（例えば、フルシトシン（ＡＮＣＯＢＯＮ（登録商標））、およびボリコナゾール（ＶＦＥＮＤ（登録商標）））を含むがこれらに限定されない。抗細菌および抗真菌剤の投与は、患者のＩＣＯＳを発現するＴ細胞が著しく枯渇する場合、本開示の方法で発生する可能性のある感染症の影響または増大を軽減することができる。
【０５１２】
本開示のある実施形態において、本開示の製剤の投与を伴うことができる有毒な副作用を軽減するために、抗ＩＣＯＳ免疫療法を上記の薬剤のうちの１つ以上と併用して投与することができる。他の実施形態において、抗ＩＣＯＳ免疫療法を、抗体投与、化学療法、毒素、または薬物の副作用を軽減するために使用する当該技術においてよく知られている薬剤のうちの１つ以上と併用して投与することができる。
【０５１３】
抗ＩＣＯＳ免疫療法が別の抗体もしくは複数の抗体および／または薬剤と併用して投与される場合の本開示の実施形態において、追加の抗体または複数の抗体および／または薬剤を、本開示の抗体の投与に関連する任意の順序で投与することができる。例えば、追加抗体または複数の抗体を、ヒト対象へ抗ＩＣＯＳ抗体または免疫複合体の投与する前、それと同時に、および／またはその後に、投与することができる。追加の抗体または複数の抗体は、本開示の抗体と同じ薬学的な製剤に存在すること、および／または異なる薬学的な製剤に存在することができる。本開示の抗体の投与の用量およびモードならびに追加抗体または複数の抗体の用量は、本出願に提供される通り、および当該技術においてよく知られている通り、投与の投与量およびモードの教示のいずれかと一致して、同じまたは異なることができる。
【０５１４】
５．４１．Ｔ細胞の悪性腫瘍を診断する際の抗ＩＣＯＳ抗体の使用
本開示は、ヒトＩＣＯＳ抗原と免疫特異的に結合する抗ＩＣＯＳ抗体およびその製剤も包含し、その抗ＩＣＯＳ抗体は、診断または検出可能な薬剤と共役する。ある実施形態において、抗体は、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体である。かかる抗ＩＣＯＳ抗体は、特定の治療の有効性を判断する等の臨床試験の手順の一部として、Ｔ細胞悪性腫瘍の発達または進行を監視するまたは予知するために有用であることができる。かかる診断および検出は、ヒトＩＣＯＳ抗原と免疫特異的に結合する抗ＩＣＯＳ抗体と、特定されないが西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼ等の様々な酵素；限定されないがストレプトアビジンビオチンおよびアビジン／ビオチン等の接合団；限定されないが、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセンフルオレセイン、ダンシルクロライド、またはフィコエリトリン等の蛍光物質；限定されないがルミノール等の発光物質；限定されないがルシフェラーゼ、ルシフェリン、およびエクオリン等の生物発光物質；ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ，）、炭素（１４Ｃ）、イオウ（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ，）、およびテクネチウム（９９Ｔｃ）、タリウム（２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８５Ｓｒ、３２Ｐ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ、および１１７Ｔｉｎ等の放射性物質；様々なポジトロン発光断層撮影法を使用したポジトロン発光金属、非放射性常磁性金属イオン、ならびに放射標識するまたは特異的な放射性同位体と共役する分子を含むがこれらに限定されない検出可能な物質とを共役することによって達成することができる。容易に測定することができる任意の検出可能な標識を、抗ＩＣＯＳ抗体と共役し、Ｔ細胞悪性腫瘍を診断する際に使用することができる。検出可能な物質を、当該技術において知られている技法を使用して中間体（例えば、当該技術において知られているリンカー等）を介して、抗体と直接または間接的にカップリングするまたは共役することができる。例えば、本開示に従って、診断上使用するための抗体と共役できる金属イオンについて米国特許第４，７４１，９００号を参照されたい。ある実施形態において、本開示は、診断または検出可能な薬剤と共役した抗ＩＣＯＳ抗体を含む診断キットを提供する。
【０５１５】
５．４２．免疫再構築を監視する際の抗ＩＣＯＳ抗体の使用
本開示は、ヒトＩＣＯＳ抗原と免疫特異的に結合する抗ＩＣＯＳ抗体およびその製剤も包含し、その抗ＩＣＯＳ抗体は、診断または検出可能な薬剤と共役する。かかる抗ＩＣＯＳ抗体は、免疫抑制治療または骨髄移植後に、免疫系再構築を監視するために有用であることができる。かかる監視は、ヒトＩＣＯＳ抗原と免疫特異的に結合する抗ＩＣＯＳ抗体と、特定されないが西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼ等の様々な酵素；限定されないがストレプトアビジンビオチンおよびアビジン／ビオチン等の接合団；限定されないが、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセンフルオレセイン、ダンシルクロライド、またはフィコエリトリン等の蛍光物質；限定されないがルミノール等の発光物質；限定されないがルシフェラーゼ、ルシフェリン、およびエクオリン等の生物発光物質；ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ，）、炭素（１４Ｃ）、イオウ（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ，）、およびテクネチウム（９９Ｔｃ）、タリウム（２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８５Ｓｒ、３２Ｐ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ、および１１７Ｔｉｎ等の放射性物質；様々なポジトロン発光断層撮影法を使用したポジトロン発光金属、非放射性常磁性金属イオン、ならびに放射標識するまたは特異的な放射性同位体と共役する分子を含むがこれらに限定されない検出可能な物質とを共役することによって達成することができる。容易に測定することができる任意の検出可能な標識を、抗ＩＣＯＳ抗体と共役し、自己免疫病または疾患を診断する際に使用することができる。検出可能な物質を、当該技術において知られている技法を使用して中間体（例えば、当該技術において知られているリンカー等）を介して、抗体と直接または間接的にカップリングするまたは共役することができる。例えば、本開示に従って、診断上使用するための抗体と共役できる金属イオンについて米国特許第４，７４１，９００号を参照されたい。ある実施形態において、本開示は、診断または検出可能な薬剤と共役した抗ＩＣＯＳ抗体を含む診断キットを提供する。
【０５１６】
５．４３．自己免疫病または疾患を診断する際の、抗ＩＣＯＳ抗体の使用
本開示は、ヒトＩＣＯＳ抗原と免疫特異的に結合する抗ＩＣＯＳ抗体およびその製剤も包含し、その抗ＩＣＯＳ抗体は、診断または検出可能な薬剤と共役する。ある実施形態において、抗体は、増強したエフェクター機能を含む抗ＩＣＯＳ抗体である。かかる抗ＩＣＯＳ抗体は、特定の治療の有効性を判断する等の臨床試験の手順の一部として、自己免疫病もしくは疾患の発達もしくは進行を監視するまたは予知するために有用であることができる。かかる診断および検出は、ヒトＩＣＯＳ抗原と免疫特異的に結合する抗ＩＣＯＳ抗体と、特定されないが西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼ等の様々な酵素；限定されないがストレプトアビジンビオチンおよびアビジン／ビオチン等の接合団；限定されないが、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセンフルオレセイン、ダンシルクロライド、またはフィコエリトリン等の蛍光物質；限定されないがルミノール等の発光物質；限定されないがルシフェラーゼ、ルシフェリン、およびエクオリン等の生物発光物質；ヨウ素（１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ，）、炭素（１４Ｃ）、イオウ（３５Ｓ）、トリチウム（３Ｈ）、インジウム（１１５Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ，）、およびテクネチウム（９９Ｔｃ）、タリウム（２０１Ｔｉ）、ガリウム（６８Ｇａ、６７Ｇａ）、パラジウム（１０３Ｐｄ）、モリブデン（９９Ｍｏ）、キセノン（１３３Ｘｅ）、フッ素（１８Ｆ）、１５３Ｓｍ、１７７Ｌｕ、１５９Ｇｄ、１４９Ｐｍ、１４０Ｌａ、１７５Ｙｂ、１６６Ｈｏ、９０Ｙ、４７Ｓｃ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１４２Ｐｒ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ、６８Ｇｅ、５７Ｃｏ、６５Ｚｎ、８５Ｓｒ、３２Ｐ、１５３Ｇｄ、１６９Ｙｂ、５１Ｃｒ、５４Ｍｎ、７５Ｓｅ、１１３Ｓｎ、および１１７Ｔｉｎ等の放射性物質；様々なポジトロン発光断層撮影法を使用したポジトロン発光金属、非放射性常磁性金属イオン、ならびに放射標識するまたは特異的な放射性同位体と共役する分子を含むがこれらに限定されない検出可能な物質とを共役することによって達成することができる。容易に測定することができる任意の検出可能な標識を、抗ＩＣＯＳ抗体と共役し、自己免疫病または疾患を診断する際に使用することができる。検出可能な物質を、当該技術において知られている技法を使用して中間体（例えば、当該技術において知られているリンカー等）を介して、抗体と直接または間接的にカップリングするまたは共役することができる。例えば、本開示に従って、診断上使用するための抗体と共役できる金属イオンについて米国特許第４，７４１，９００号を参照されたい。ある実施形態において、本開示は、診断または検出可能な薬剤と共役した抗ＩＣＯＳ抗体を含む診断キットを提供する。
【０５１７】
５．４４．キット
本開示は、本開示の液体製剤が充填された１つ以上の容器を含む薬学的なパックまたはキットを提供する。一実施形態において、本開示の液体製剤が充填された容器は、プレフィルドシリンジである。特定の実施形態において、本開示の液体製剤は、異種性タンパク質、異種性ポリペプチド、異種性ペプチド、大きな分子、小分子、マーカー配列、診断または検出可能な薬剤、治療部分、薬物部分、放射性金属イオン、二次抗体、および固形支持体を含むがこれらに限定されない別の部分と組換えで融合するまたは化学的に共役する抗体（その抗体断片を含む）を含む。本開示は、疾病または疾患、例えば、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれらを特徴とする疾病または疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随したまたはそれらを特徴とする疾病または疾患、自己免疫病または疾患、炎症性疾患または疾患、Ｔ細胞増殖性疾病または疾患、Ｔ細胞悪性腫瘍、移植拒絶反応、移植片対宿主病、または１つ以上のそれらの症状の防止、管理または処置のために有用な本開示の液体製剤の１つ以上の一次容器および１つ以上の他の予防または治療剤の１つ以上の二次容器を含む薬学的なパックまたはキットも提供する。特定の実施形態において、本開示の液体製剤は、ｐＨ６．０の１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８０ｍＭのＮａＣｌ、４％のトレハロース、および０．０２％のポリソルベート８０を含有する無菌液として単一用量バイアルに処方する。本開示の製剤を、１．２ｍＬの標的容積を３ｃｃ  ＵＳＰタイプＩホウケイ酸琥珀バイアル（Ｗｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｅｒｉｃｅｓ−Ｐａｒｔ  Ｎｏ．６８００−０６７５）にて供給することができる。かかる容器と随意に関連することは、通知によってヒト投与に対する製造、使用、販売の機関による承認を反映する薬学的なまたは生物学的な製品の製造、使用または販売を規制する行政機関によって、処方された形式の通知であることができる。別の実施形態において本開示の製剤を、プレフィルドシリンジにて供給することができる。
【０５１８】
一実施形態において、本開示の液体製剤を充填する容器は、プレフィルドシリンジである。当業者に知られている任意のプレフィルドシリンジを、本開示の液体製剤と併用して使用することができる。使用可能なプレフィルドシリンジは、例えば、これらに限定されないが、ＰＣＴ公開ＷＯ第０５０３２６２７号、ＷＯ第０８０９４９８４号、ＷＯ第９９４５９８５号、ＷＯ第０３０７７９７６号、米国特許ＵＳ第６７９２７４３号、ＵＳ第５６０７４００号、ＵＳ第５８９３８４２号、ＵＳ第７０８１１０７号、ＵＳ第７０４１０８７号、ＵＳ第５９８９２２７号、ＵＳ第６８０７７９７号、ＵＳ第６１４２９７６号、ＵＳ第５８９９８８９号、米国特許公開ＵＳ第２００７０１６１９６１Ａ１号、ＵＳ第２００５００７５６１１Ａ１号、ＵＳ第２００７００９２４８７Ａ１号、ＵＳ第２００４０２６７１９４Ａ１号、ＵＳ第２００６０１２９１０８Ａ１号に記載される。プレフィルドシリンジは、様々な物質からなることができる。一実施形態において、プレフィルドシリンジは、ガラスシリンジである。別の実施形態において、プレフィルドシリンジは、プラスチックシリンジである。当業者は、シリンジを製造するために使用する物質の性質および／または品質が、シリンジに保存されるタンパク質製剤の安定性に影響する可能性があることを理解する。例えば、シリンジチャンバーの内表面に沈着するシリコンベースの潤滑剤が、タンパク質製剤で、粒子の形成に影響することができることを理解される。一実施形態において、プレフィルドシリンジは、シリコーンベースの潤滑剤を含む。一実施形態において、プレフィルドシリンジは、シリコーン上で焼くことを含む。別の実施形態において、プレフィルドシリンジは、シリコーンベースの潤滑剤を含まない。当業者は、シリンジバレル、シリンジ先端のキャップ、プランジャー、または栓から、製剤へ浸出する少量の汚染要素が、製剤の安定性にも影響する可能性があることも理解する。例えば、製造プロセスの間に導入されるタングステンが、製剤の安定性に逆に影響する可能性があることが理解される。一実施形態において、プレフィルドシリンジは、５００ｐｐｂを超えるレベルのタングステンを含むことができる。別の実施形態において、プレフィルドシリンジは、低タングステンシリンジである。別の実施形態において、プレフィルドシリンジは、約５００ｐｐｂ〜約１０ｐｐｂ間、約４００ｐｐｂ〜約１０ｐｐｂ間、約３００ｐｐｂ〜約１０ｐｐｂ間、約２００ｐｐｂ〜約１０ｐｐｂ間、約１００ｐｐｂ〜約１０ｐｐｂ間、約５０ｐｐｂ〜約１０ｐｐｂ間、約２５ｐｐｂ〜約１０ｐｐｂ間のレベルのタングステンを含むことができる。
【０５１９】
本開示は、上記の方法で使用することができるキットを提供する。一実施形態において、キットは１つ以上の容器で本開示の液体製剤を含む。別の実施形態において、キットは、１つ以上の容器で本開示の液体製剤、ならびにＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれらを特徴とする疾病もしくは疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随したまたはそれらを特徴とする疾病もしくは疾患、自己免疫病もしくは疾患、炎症性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞増殖性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞悪性腫瘍、移植拒絶反応、移植片対宿主病、または１つ以上のそれらの症状の防止、管理、または処置に対して有用な１つ以上の他の予防または治療剤を含む。特定の実施形態において、該液体製剤に含まれる抗体（その抗体断片を含む）は、抗原結合断片である。キットは、疾患を防止する、治療する、および／または管理するための（例えば、本開示の液体製剤を単独で、または別の予防または治療剤と組み合わせて使用して）、ならびに投与の方法に対する副作用および投与量情報についての説明を、さらに含むことができる。
【０５２０】
５．４５．製造品
本開示は、パッケージし、ラベルした薬学的な完成製品も包含する。この製造品は、適切なベッセルまたはガラスバイアル、プレフィルドシリンジまたは密閉した他の容器等の容器の適切な単位剤形を含む。単位剤形を、非経口投与に適した抗ＩＣＯＳ抗体を含む無菌の微粒子を含まない溶液として提供する。
【０５２１】
一実施形態において、単位剤形は、静脈内、筋肉内、鼻腔内、経口、局所、または皮下送達に適している。したがって、本開示は、それぞれの送達経路に適した無菌の溶液を包含する。
【０５２２】
任意の薬学的な製品のように、包装材料および容器は、保存および輸送中に、製品の安定性を守るように設計される。さらに、本開示の製品は、使用説明書、または問題の疾病もしくは疾患を適切に防止するまたは治療する方法について医師、技術者または患者に勧告する他の情報資料を含む。言い換えれば、製造品は、実際の用量、監視手順、および他の監視情報を含むがこれらに限定されない投与計画を示すまたは示唆する説明方法を含む。
【０５２３】
特に、本開示は、箱、ビン、管、バイアル、容器、プレフィルドシリンジ、噴霧器、散布器、静脈内（ｉ．ｖ．）バッグ、封筒等の包装材料を含む製造品；および該包装材料内に含有される薬学的な薬剤の少なくとも１つの単位剤形を提供し、薬学的な薬剤は抗体を含有する液体製剤を含む。包装材料は、該抗体が特定の用量を投与すること、および本明細書に記載される特定の投与計画を使用することによって、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、自己免疫病もしくは疾患、炎症性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞増殖性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞悪性腫瘍、移植拒絶反応、移植片対宿主病、または１つ以上のその症状と付随した１つ以上の症状を防止する、治療するおよび／または管理するために使用することができることを示す説明方法を含む。
【０５２４】
本開示は、箱、ビン、管、バイアル、容器、プレフィルドシリンジ、噴霧器、散布器、静脈内（ｉ．ｖ．）バッグ、封筒等の包装材料を含む製造品；および該包装材料内に含有される薬学的な薬剤の少なくとも１つの単位剤形も提供し、ある薬学的な薬剤は、ＩＣＯＳと特異的に結合する抗体を含有する液体製剤を含み、他の薬学的な薬剤はＩＣＯＳと特異的に結合する抗体以外の予防または治療剤を含み、該包装材料は、特定の用量を投与することによって、および本明細書に記載される特定の投与計画を使用することによって、該薬剤を、ＩＣＯＳの異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、ＩＣＯＳ受容体の異常発現および／または活性と付随したまたはそれを特徴とする疾病もしくは疾患、自己免疫病もしくは疾患、炎症性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞増殖性疾病もしくは疾患、Ｔ細胞悪性腫瘍、移植拒絶反応、移植片対宿主病、または１つ以上のそれらの症状と付随した１つ以上の症状を、防止する、治療するおよび／または管理するために使用することができることを示す説明方法を含む。
【０５２５】
本開示は、本開示の方法によって縮小するまたは回避することができる有害作用が、自己免疫疾患、炎症性疾患、悪性腫瘍または感染と付随した１つ以上の症状を防止する、治療するおよび／または管理する際に使用する製造品に同封される情報資料に示されることを提供する。本開示の方法によって縮小するまたは回避することができる有害作用は、生活反応の異常（熱、頻拍、徐脈、高血圧、低血圧）、血液学的事象（貧血、リンパ球減少症、白血球減少症、血小板減少症）、頭痛、悪寒、めまい、吐気、無力症、背痛、胸痛（胸部圧迫感）、下痢、筋肉痛、痛み、そう痒、乾癬、鼻炎、発汗、注射部位反応、および血管拡張作用を含むがこれらに限定されない。
【０５２６】
さらに、本明細書に記載される製造品に同封される情報資料によって、外来性タンパク質が、結果としてアナフィラキシーを含むアレルギー反応、またはシトシン放出症候群を発生することもできることを示すことができる。情報資料は、アレルギー反応が軽度のそう痒性皮疹としてのみ現れる可能性があること、またはそれは、紅皮症、スティーブンス・ジョンソン症候群、血管炎、またはアナフィラキシー等、重症である可能性があることを示すべきである。情報資料は、アナフィラキシー性の反応（アナフィラキシー）は重大であり、時折致死的過敏症反応であることを示すべきでもある。アナフィラキシーを含むアレルギー反応は、任意の外来性のタンパク質が体内に注入される場合に発生する可能性がある。それらは、蕁麻疹または発疹等の軽度の徴候から致死的な全身反応までにおよぶ可能性がある。アナフィラキシー性の反応は、曝露後、大抵１０分以内に発生する。患者は、錯感覚、低血圧、喉頭浮腫、精神状態変化、顔面もしくは咽頭血管浮腫、気道妨害物、気管支痙攣、蕁麻疹およびそう痒、血清病、関節炎、アレルギー腎炎、糸球体腎炎、側頭部関節炎、または好酸球増加症を経験する可能性がある。
【０５２７】
５．４６．特定の実施形態
実施形態１．ヒトＩＣＯＳと特異的に結合する抗体を含み、抗体は、フコースが糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド−結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む無菌の、安定な水性製剤。
【０５２８】
実施形態２．該抗体が凍結乾燥に共されなかった、実施形態１に記載の製剤。
【０５２９】
実施形態３．該抗体は、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＹ、およびＩｇＧからなる群から選択される免疫グロブリンタイプに由来する、実施形態１に記載の製剤。
【０５３０】
実施形態４．該抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４ヒトアイソタイプのものである、実施形態１に記載の製剤。
【０５３１】
実施形態５．該抗体は、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、またはヒト抗体である、実施形態１に記載の製剤。
【０５３２】
実施形態６．該抗体は配列番号７の重鎖可変配列を含む、実施形態１〜５に記載の製剤。
【０５３３】
実施形態７．該抗体は配列番号２の軽鎖可変配列を含む、実施形態１〜５に記載の製剤。
【０５３４】
実施形態８．該抗体は、配列番７の重鎖可変配列および配列番号２の軽鎖可変配列を含む、実施形態１〜５のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５３５】
実施形態９．該抗体は、配列番号６の重鎖配列および配列番号１の軽鎖配列を含む、実施形態１〜５のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５３６】
実施形態１０．該抗体の濃度は、少なくとも約１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約３ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約４ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約３０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約４０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約６０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約７０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約８０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約９０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１２０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１６０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約１８０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも約２５０ｍｇ／ｍＬ、または少なくとも約３００ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５３７】
実施形態１１Ａ．該抗体の濃度は、少なくとも約１ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５３８】
実施形態１１Ｂ．該抗体の濃度は、少なくとも約２ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５３９】
実施形態１１Ｃ．該抗体の濃度は、少なくとも約３ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４０】
実施形態１１Ｄ．該抗体の濃度は、少なくとも約４ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４１】
実施形態１１Ｅ．該抗体の濃度は、少なくとも約５ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４２】
実施形態１１Ｆ．該抗体の濃度は、少なくとも約１０ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４３】
実施形態１１Ｇ．該抗体の濃度は、少なくとも約２０ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４４】
実施形態１１Ｈ．該抗体の濃度は、少なくとも約５０ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４５】
実施形態１１Ｉ．該抗体の濃度は、少なくとも約１００ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４６】
実施形態１２．該抗体の濃度は、少なくとも約１２５ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のいずれか１つに記載の製剤。
【０５４７】
実施形態１３．該抗体の濃度は、少なくとも約１５０ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４８】
実施形態１４．該抗体の濃度は、少なくとも約１７５ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５４９】
実施形態１５．該抗体の濃度は、少なくとも約２００ｍｇ／ｍＬである、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５０】
実施形態１６Ａ．該抗体の濃度は約１ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬ間である、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５１】
実施形態１６Ｂ．該抗体の濃度は約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬ間である、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５２】
実施形態１６Ｃ．該抗体の濃度は約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬ間である、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５３】
実施形態１６Ｄ．該抗体の濃度は約９０ｍｇ／ｍＬ〜約２５０ｍｇ／ｍＬ間である、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５４】
実施形態１７．該抗体の濃度は約１１０ｍｇ／ｍＬ〜約２５０ｍｇ／ｍＬ間である、実施形態１〜９のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５５】
実施形態１８．該製剤は、少なくとも約１つの緩衝成分をさらに含む、実施形態１〜１７のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５６】
実施形態１９．該製剤は、少なくとも約１つの賦形剤をさらに含む、実施形態１〜１８のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５５７】
実施形態２０．該緩衝成分は、ヒスチジン、クエン酸、リン酸、グリシン、および酢酸からなる群から選択される、実施形態１８または１９に記載される製剤。
【０５５８】
実施形態２１．該緩衝成分は、ヒスチジンである、実施形態１８または１９に記載される製剤。
【０５５９】
実施形態２２．該ヒスチジンは、約１ｎＭから約２００ｎＭまでの濃度である、実施形態２１に記載の製剤。
【０５６０】
実施形態２３．該ヒスチジンは、約１ｎＭから約５０ｎＭまでの濃度である、実施形態２１に記載の製剤。
【０５６１】
実施形態２４．該ヒスチジンは、約５ｎＭから約２０ｎＭまでの濃度である、実施形態２１に記載の製剤。
【０５６２】
実施形態２５．該ヒスチジンは、約１０ｎＭ、約１５ｎＭ、または約２０ｎＭの濃度である、実施形態２１に記載の製剤。
【０５６３】
実施形態２６．該賦形剤は糖類である、実施形態１９に記載の製剤。
【０５６４】
実施形態２７．該糖類は二糖類である、実施形態２６に記載の製剤。
【０５６５】
実施形態２８．該二糖類はトレハロースまたはショ糖である、実施形態２７に記載の製剤。
【０５６６】
実施形態２９．該二糖類はトレハロースである、実施形態２７に記載の製剤。
【０５６７】
実施形態３０．該トレハロースは、約１％から約４０％までの濃度である、実施形態２９に記載の製剤。
【０５６８】
実施形態３１．該トレハロースは、約２％から約２０％までの濃度である、実施形態２９に記載の製剤。
【０５６９】
実施形態３２．該トレハロースは、約２％から約１０％までの濃度である、実施形態２９に記載の製剤。
【０５７０】
実施形態３３．トレハロースは約２％、約４％、または約８％の濃度である、実施形態２９に記載の製剤。
【０５７１】
実施形態３４．該賦形剤は塩である、実施形態１９に記載の製剤。
【０５７２】
実施形態３５．該塩は塩化ナトリウムである、実施形態３４に記載の製剤。
【０５７３】
実施形態３６．該塩化ナトリウムは、約５０ｍＭから約２００ｍＭまでの濃度である、実施形態３５に記載の製剤。
【０５７４】
実施形態３７．該塩化ナトリウムは、約７０ｍＭ、約８０ｍＭ、約９０ｍＭ、約１００ｍＭ、約１２０ｍＭ、または約１５０ｍＭの濃度である、実施形態３５に記載の製剤。
【０５７５】
実施形態３８．該賦形剤は界面活性剤である、実施形態１９に記載の製剤。
【０５７６】
実施形態３９．該界面活性剤はポリソルベートである、実施形態３８に記載の製剤。
【０５７７】
実施形態４０．該ポリソルベートはポリソルベート２０またはポリソルベート８０である、実施形態３９に記載の製剤。
【０５７８】
実施形態４１．該ポリソルベートはポリソルベート８０である、実施形態３９に記載の製剤。
【０５７９】
実施形態４２．該ポリソルベート８０は、約０．００１％から約２％までの濃度である、実施形態４１に記載の製剤。
【０５８０】
実施形態４３．該ポリソルベート８０は、約０．０１％、約０．０２％、約０．０４％、または約０．０８％の濃度である、実施形態４１に記載の製剤。
【０５８１】
実施形態４４．該製剤は約５．５〜約６．５の間のｐＨを有する、実施形態１〜４３のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５８２】
実施形態４５．該製剤は約６．０のｐＨを有する、実施形態１〜４３のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５８３】
実施形態４６．該製剤は等張性である、実施形態１〜４５のうちのいずれか１つのの製剤。
【０５８４】
実施形態４７．該製剤は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する際に安定している、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５８５】
実施形態４８．該製剤は、少なくとも約３ヶ月、５℃で保存する際に安定している、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５８６】
実施形態４９．該製剤は、少なくとも約１２ヶ月、５℃で保存する際に安定している、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５８７】
実施形態５０．該抗体は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５８８】
実施形態５１．該抗体は、少なくとも約３ヶ月、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５８９】
実施形態５２．該抗体は、少なくとも約１２ヶ月、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９０】
実施形態５３．該抗体は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９１】
実施形態５４．該抗体は、少なくとも約３ヶ月、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９２】
実施形態５５．該抗体は、少なくとも約１２ヶ月、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９３】
実施形態５６．該抗体は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９４】
実施形態５７．該抗体は、少なくとも約３ヶ月、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９５】
実施形態５８．該抗体は、少なくとも約１２ヶ月、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９６】
実施形態５９．該抗体は凝集または断片化に影響されやすい、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９７】
実施形態６０．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、４０℃で少なくとも約４週間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９８】
実施形態６１．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、５℃で少なくとも約３ヶ月間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０５９９】
実施形態６２．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、５℃で少なくとも約１２ヶ月間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０６００】
実施形態６３．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、４０℃で少なくとも約４週間保存する際に、断片化される、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０６０１】
実施形態６４．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、５℃で少なくとも約３ヶ月間保存する際に、断片化される、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０６０２】
実施形態６５．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、５℃で少なくとも約１２ヶ月間保存する際に、断片化される、実施形態１〜４６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０６０３】
実施形態６６．該製剤は注射製剤である、実施形態１〜６５のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０６０４】
実施形態６７．該製剤は、静脈内、皮下、または筋肉内投与に適している実施形態６６に記載の製剤。
【０６０５】
実施形態６８．該製剤は静脈内投与に適しており、抗体または抗体断片濃度は約２０ｍｇ／ｍＬから約４０ｍｇ／ｍＬまでである、実施形態６７に記載の製剤。
【０６０６】
実施形態６９．該製剤は皮下投与に適しており、抗体または抗体断片濃度は約７０ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬまでである、実施形態６７に記載の製剤。
【０６０７】
実施形態７０．該製剤はエアロゾル投与に適している、実施形態１〜６５のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０６０８】
実施形態７１．適切な容器において、実施形態１〜６５のうちのいずれか１つに記載の抗体製剤を含む、ヒトに対する非経口投与に適している薬学的単位剤形。
【０６０９】
実施形態７２．抗体製剤を、静脈内、皮下、または筋肉内に投与する、実施形態７１に記載の薬学的単位剤形。
【０６１０】
実施形態７３．適切な容器において、実施形態１〜６５のうちのいずれか１つに記載の抗体製剤を含む、ヒトに対する非エアロゾル投与に適している薬学的単位剤形。
【０６１１】
実施形態７４．抗体製剤を鼻腔内に投与する、実施形態７３に記載の薬学的単位投与量。
【０６１２】
実施形態７５．実施形態１〜７４のうちのいずれか１つに記載の製剤を含有する密閉容器。
【０６１３】
実施形態７６．実施形態１〜７４のうちのいずれか１つに記載の製剤を含むキット。
【０６１４】
実施形態７７．ヒトにおける自己免疫病または疾患を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１〜７４のいずれか１項に記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６１５】
実施形態７８．自己免疫病または疾患はＳＬＥまたは強皮症である、実施形態７７に記載の方法。
【０６１６】
実施形態７９．ヒト移植患者における拒絶を治療または防止する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１〜７４のいずれか１項に記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６１７】
実施形態８０．ヒトにおけるＴ細胞悪性腫瘍を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１〜７４のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６１８】
実施形態８１．ヒトにおける炎症性疾病もしくは疾患を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１〜７４のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６１９】
実施形態８２．炎症性疾病または疾患は、筋炎である、実施形態８１に記載の方法。
【０６２０】
実施形態８３．筋炎は、封入体筋炎（ＩＢＭ）、多発性筋炎（ＰＭ）、または皮膚筋炎（ＤＭ）である、実施形態８２に記載の方法。
【０６２１】
実施形態８４．ヒト患者においてＩＣＯＳを発現するＴ細胞を枯渇させる方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１〜７４のいずれか１項に記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６２２】
実施形態８５．枯渇は、抗体の投与後、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、または少なくとも約４週間、実質的に持続する、実施形態８４に記載の方法。
【０６２３】
実施形態８６．少なくとも約９５％のＴ細胞は、枯渇する、実施形態８４に記載の方法。
【０６２４】
実施形態８７．ＩＣＯＳを発現するＴ細胞はメモリーＴ細胞である、実施形態８４に記載の方法。
【０６２５】
実施形態８８．ＩＣＯＳを発現するＴ細胞は循環するＴ細胞である、実施形態８４に記載の方法。
【０６２６】
実施形態８９．実施形態１〜７４のいずれか１つに記載の有効量の製剤を投与することを含む、霊長類動物の二次リンパ器官の胚中心構造を破壊する方法。
【０６２７】
実施形態９０．霊長類は、非ヒト霊長類である、実施形態８９に記載の方法。
【０６２８】
実施形態９１．実施形態１〜７４のうちのいずれか１つの製剤の有効量を投与することを含む、霊長類の二次リンパ器官から胚中心のＢ細胞を枯渇する方法。
【０６２９】
実施形態９２．霊長類は、非ヒト霊長類である、実施形態９１に記載の方法。
【０６３０】
実施形態９３．霊長類はヒトである、実施形態９１に記載の方法。
【０６３１】
実施形態９４．枯渇は、抗体の投与後、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、または少なくとも約４週間、実質的に持続する、実施形態９１に記載の方法。
【０６３２】
実施形態９５．実施形態１〜７４のうちのいずれか１つの製剤の有効量を投与することを含む、霊長類で循環する種類を切り替えられたＢ細胞を枯渇する方法。
【０６３３】
実施形態９６．霊長類は、非ヒト霊長類である、実施形態９５に記載の方法。
【０６３４】
実施形態９７．霊長類はヒトである、実施形態９５に記載の方法。
【０６３５】
実施形態９８．枯渇は、抗体の投与後、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、または少なくとも約４週間、実質的に持続する、実施形態９５に記載の方法。
【０６３６】
実施形態９９．少なくとも約９５％の循環する種類を切り替えられたＢ細胞は、枯渇する、実施形態９５に記載の方法。
【０６３７】
実施形態１００．抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含み、ヒスチジン、塩化ナトリウム、トレハロース、またはポリソルベート８０をさらに含み、抗体は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、およびフコースは糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド−結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む、無菌の、安定した水性製剤。
【０６３８】
実施形態１０１．抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含み、ヒスチジン、塩化ナトリウム、トレハロース、およびポリソルベート８０をさらに含み、抗体は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、およびフコースは糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド−結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む、無菌の、安定した水性製剤。
【０６３９】
実施形態１０２Ａ．該製剤は、約１ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１ｍＭ〜約１００ｍＭのヒスチジン、約１％〜約４０％のトレハロース、および約０．００１％〜約５％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約５〜約７である、実施形態１０１に記載の製剤。
【０６４０】
実施形態１０２Ｂ．該製剤は、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１ｍＭ〜約１００ｍＭのヒスチジン、約１％〜約４０％のトレハロース、および約０．００１％〜約５％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約５〜約７である、実施形態１０１に記載の製剤。
【０６４１】
実施形態１０３Ａ．該製剤は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約１５ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのヒスチジン、約２％〜約１５％のトレハロース、および約０．００５％〜約１％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約５．５〜約６．５である、実施形態１０１に記載の製剤。
【０６４２】
実施形態１０３Ｂ．該製剤は、約８０ｍｇ／ｍＬ〜約１２０ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのヒスチジン、約２％〜約１５％のトレハロース、および約０．００５％〜約１％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約５．５〜約６．５である、実施形態１０１に記載の製剤。
【０６４３】
実施形態１０４Ａ．該製剤は、約１０ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約６である、実施形態１０１に記載の製剤。
【０６４４】
実施形態１０４Ｂ．該製剤は、約１００ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約６である、実施形態１０１に記載の製剤。
【０６４５】
実施形態１０５．該製剤は等張性である、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つのの製剤。
【０６４６】
実施形態１０６．該製剤は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する際に安定している、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つのの製剤。
【０６４７】
実施形態１０７．該製剤は、少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する際に安定している、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６４８】
実施形態１０８．該製剤は、少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する際に安定している、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６４９】
実施形態１０９．該抗体は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５０】
実施形態１１０．該抗体は、少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５１】
実施形態１１１．該抗体は、少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５２】
実施形態１１２．該抗体は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５３】
実施形態１１３．該抗体は、少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５４】
実施形態１１４．該抗体は、少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５５】
実施形態１１５．該抗体は、少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５６】
実施形態１１６．該抗体は、少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５７】
実施形態１１７．該抗体は、少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５８】
実施形態１１８．該抗体は凝集または断片化に影響されやすい、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６５９】
実施形態１１９．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、４０℃で少なくとも約４週間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６０】
実施形態１２０．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、５℃で少なくとも約３ヶ月間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６１】
実施形態１２１．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、５℃で少なくとも約１２ヶ月間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６２】
実施形態１２２．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、４０℃で少なくとも約４週間保存する際に、断片化される、請求項１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６３】
実施形態１２３．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、５℃で少なくとも約３ヶ月間保存する際に、断片化される、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６４】
実施形態１２４．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、５℃で少なくとも約１２ヶ月間保存する際に、断片化される、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６５】
実施形態１２５．該製剤は目視検査によって測定される通り、少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する際に、透明および無色である、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６６】
実施形態１２６．該製剤は目視検査によって測定される通り、少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する際に、透明および無色である、実施形態１０１〜１０４のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６７】
実施形態１２７．該製剤は注射製剤である、実施形態１０１〜１２６のうちのいずれか１つの製剤。
【０６６８】
実施形態１２８．該製剤は、静脈内、皮下、または筋肉内投与に適している実施形態１２７に記載の製剤。
【０６６９】
実施形態１２９．該製剤は、静脈内投与に適している、実施形態１２８に記載の製剤。
【０６７０】
実施形態１３０．該製剤は、皮下投与に適している、実施形態１２８に記載の製剤。
【０６７１】
実施形態１３１．該製剤はエアロゾル投与に適している、実施形態１０１〜１２６のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０６７２】
実施形態１３２．製剤の調製プロセスであり、
ａ）約１０ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬに抗ヒトＩＣＯＳ抗体溶液を濃縮することと、
ｂ）ヒスチジンを含む溶液で該濃縮された抗体を透析ろ過することと、を含む実施形態１０１〜１２６のうちのいずれか１つに従う製剤の調製プロセス。
【０６７３】
実施形態１３３．実施形態１３２に記載のプロセスであり、
（ｃ）ヒスチジンを含む溶液で透析ろ過された抗体を、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約２５０ｍｇ／ｍＬに濃縮することと、
（ｄ）濃縮された抗体溶液を少なくとも約１つの賦形剤を含む少なくとも約１つの溶液と混合することと、をさらに含む実施形態１３２に記載のプロセス。
【０６７４】
実施形態１３４．該抗体とｐＨ６でヒスチジン−ＨＣｌ、塩化ナトリウム、トレハロース、およびポリソルベート８０とを組み合わせることを含み、抗体は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、およびフコースは糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド−結合糖鎖を有するＦｃ領域を含む、抗ヒトＩＣＯＳ抗体を安定させる方法。
【０６７５】
実施形態１３５．抗体濃度は、約８０ｍｇ／ｍＬ〜約１２０ｍｇ／ｍＬである、実施形態１３４に記載の方法。
【０６７６】
実施形態１３６．適切な容器において、実施形態１０１〜１３１のうちのいずれか１つに記載の抗体製剤を含む、ヒトに対する非経口投与に適している薬学的単位剤形。
【０６７７】
実施形態１３７．抗体製剤を、静脈内、皮下、または筋肉内に投与する、実施形態１３６に記載の薬学的単位剤形。
【０６７８】
実施形態１３８．適切な容器において、実施形態１０１〜１３１のうちのいずれか１つに記載の抗体製剤を含む、ヒトに対する非エアロゾル投与に適している薬学的単位剤形。
【０６７９】
実施形態１３９．抗体製剤を鼻腔内に投与する、実施形態１３８に記載の薬学的単位投与量。
【０６８０】
実施形態１４０．実施形態１０１〜１３１のうちのいずれか１つに記載の製剤を含有する密閉容器。
【０６８１】
実施形態１４１．実施形態１０１〜１３１のうちのいずれか１つに記載の製剤を含むキット。
【０６８２】
実施形態１４２．ヒトにおける自己免疫病または疾患を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１０１〜１３１のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６８３】
実施形態１４３．自己免疫病または疾患はＳＬＥまたは強皮症である、実施形態１４２に記載の方法。
【０６８４】
実施形態１４４．ヒト移植患者における拒絶を治療または防止する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１０１〜１３１のいずれか１項に記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６８５】
実施形態１４５．ヒトにおけるＴ細胞悪性腫瘍を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１０１〜１３１のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６８６】
実施形態１４６．ヒトにおける炎症性疾病もしくは疾患を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１０１〜１３１のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６８７】
実施形態１４７．炎症性疾病または疾患は、筋炎である、実施形態１８０に記載の方法。
【０６８８】
実施形態１４８．筋炎は、封入体筋炎（ＩＢＭ）、多発性筋炎（ＰＭ）、または皮膚筋炎（ＤＭ）である、実施形態１４７に記載の方法。
【０６８９】
実施形態１４９．ヒト患者においてＩＣＯＳを発現するＴ細胞を枯渇させる方法であって、それを必要とするヒトに、実施形態１０１〜１３１のいずれか１項に記載の治療有効量の製剤を投与することを含む、方法。
【０６９０】
実施形態１５０．枯渇は、抗体の投与後、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、または少なくとも約４週間、実質的に持続する、実施形態１４９に記載の方法。
【０６９１】
実施形態１５１．少なくとも約９５％のＴ細胞は、枯渇する、実施形態１４９に記載の方法。
【０６９２】
実施形態１５２．ＩＣＯＳを発現するＴ細胞はメモリーＴ細胞である、実施形態１４９に記載の方法。
【０６９３】
実施形態１５３．ＩＣＯＳを発現するＴ細胞は循環するＴ細胞である、実施形態１４９に記載の方法。
【０６９４】
実施形態１５４．実施形態１０１〜１３１のいずれか１つに記載の有効量の製剤を投与することを含む、霊長類動物の二次リンパ器官の胚中心構造を破壊する方法。
【０６９５】
実施形態１５５．霊長類は、非ヒト霊長類である、実施形態１４９に記載の方法。
【０６９６】
実施形態１５６．実施形態１０１〜１３１のうちのいずれか１つの製剤の有効量を投与することを含む、霊長類の二次リンパ器官から胚中心のＢ細胞を枯渇する方法。
【０６９７】
実施形態１５７．霊長類は、非ヒト霊長類である、実施形態１５６に記載の方法。
【０６９８】
実施形態１５８．霊長類はヒトである、実施形態１５６に記載の方法。
【０６９９】
実施形態１５９．枯渇は、抗体の投与後、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、または少なくとも約４週間、実質的に持続する、実施形態１５６に記載の方法。
【０７００】
実施形態１６０．実施形態１０１〜１３１のうちのいずれか１つの製剤の有効量を投与することを含む、霊長類で循環する種類を切り替えられたＢ細胞を枯渇する方法。
【０７０１】
実施形態１６１．霊長類は、非ヒト霊長類である、実施形態１９４に記載の方法。
【０７０２】
実施形態１６２．霊長類はヒトである、実施形態１９４に記載の方法。
【０７０３】
実施形態１６３．枯渇は、抗体の投与後、少なくとも約１、少なくとも約２、少なくとも約３、または少なくとも約４週間、実質的に持続する、実施形態１９４に記載の方法。
【０７０４】
実施形態１６４．少なくとも約９５％の循環する種類を切り替えられたＢ細胞は、枯渇する、実施形態１９４に記載の方法。
【０７０５】
実施形態１６５．製剤は、薬学的に許容される製剤である、実施形態１〜７０または１０１〜１３１のいずれか１つに記載の製剤。
【０７０６】
実施形態１６６．製剤は、プレフィルドシリンジにある、実施形態６６、６７、６９、１２７、１２８、または１３０のうちのいずれか１つに記載の製剤。
【０７０７】
実施形態１６７．プレフィルドシリンジは、針を含む、実施形態１６６に記載の製剤。
【０７０８】
実施形態１６８．プレフィルドシリンジは、プラスチックシリンジまたはガラスシリンジである、実施形態１６６に記載の製剤。
【０７０９】
実施形態１６９．プレフィルドシリンジは、プラスチックシリンジである、実施形態１６６に記載の製剤。
【０７１０】
実施形態１７０．プレフィルドシリンジは、ガラスシリンジである、実施形態１６８に記載の製剤。
【０７１１】
実施形態１７１．プレフィルドシリンジは、実質的にタングステンを含まない物質で作られる、実施形態１６６に記載の製剤。
【０７１２】
実施形態１７２．プレフィルドシリンジは、実質的にシリコーンを含まない、実施形態１６６に記載の製剤。
【０７１３】
実施形態１７３．プレフィルドシリンジは、シリコーンベースの潤滑剤を含まない、実施形態１６６に記載の製剤。
【０７１４】
実施形態１７４．プレフィルドシリンジは、フルオロポリマー樹脂ディスクを有するプランジャーを含む、実施形態１６６に記載の製剤。
【０７１５】
実施形態１７５．適切な容器はプレフィルドシリンジである、実施形態７１、７２、１３６、または１３７のうちのいずれか１つに記載の薬学的単位投与量。
【０７１６】
実施形態１７６．プレフィルドシリンジは、針を含む、実施形態１７２に記載の薬学的単位投与量。
【０７１７】
実施形態１７７．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジまたはガラスシリンジである、実施形態１７２に記載の薬学的単位投与量。
【０７１８】
実施形態１７８．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジである、実施形態１７８に記載の薬学的単位投与量。
【０７１９】
実施形態１７９．プレフィルドシリンジはガラスシリンジである、実施形態１７８に記載の薬学的単位投与量。
【０７２０】
実施形態１８０．プレフィルドシリンジは、実質的にタングステンを含まない物質で作られる、実施形態１７２に記載の薬学的単位投与量。
【０７２１】
実施形態１８１．プレフィルドシリンジは実質的にシリコーンを含まない、実施形態１７２に記載の薬学的単位投与量。
【０７２２】
実施形態１８２．プレフィルドシリンジは、シリコーンベースの潤滑剤を含まない、実施形態１７２に記載の薬学的単位投与量。
【０７２３】
実施形態１８３．プレフィルドシリンジはフルオロポリマー樹脂ディスクを有するプランジャーを含む、実施形態１７２に記載の薬学的単位投与量。
【０７２４】
実施形態１８４．密閉容器はプレフィルドシリンジである、実施形態７５または１４０のうちのいずれか１つの密閉容器。
【０７２５】
実施形態１８５．プレフィルドシリンジは針を含む、実施形態１８４に記載の密閉容器。
【０７２６】
実施形態１８６．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジまたはガラスシリンジである、実施形態１８４に記載の密閉容器。
【０７２７】
実施形態１８７．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジである、実施形態１８６に記載の密閉容器。
【０７２８】
実施形態１８８．プレフィルドシリンジはガラスシリンジである、実施形態１８６に記載の密閉容器。
【０７２９】
実施形態１８９．プレフィルドシリンジは、実質的にタングステンを含まない物質で作られる、実施形態１８４に記載の密閉容器。
【０７３０】
実施形態１９０．プレフィルドシリンジは実質的にシリコーンを含まない、実施形態１８４に記載の密閉容器。
【０７３１】
実施形態１９１．プレフィルドシリンジは、シリコーンベースの潤滑剤を含まない、実施形態１８４に記載の密閉容器。
【０７３２】
実施形態１９２．プレフィルドシリンジはプランジャーを含み、プランジャーはフルオロポリマー樹脂ディスクを含む、実施形態１８４に記載の密閉容器。
【０７３３】
実施形態１９３．キットはプレフィルドシリンジを含む、実施形態７６または１４１のうちのいずれか１つに記載のキット。
【０７３４】
実施形態１９４．プレフィルドシリンジは針を含む、実施形態１９３に記載のキット。
【０７３５】
実施形態１９５．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジまたはガラスシリンジである、実施形態１９３に記載のキット。
【０７３６】
実施形態１９６．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジである、実施形態１９５に記載のキット。
【０７３７】
実施形態１９７．プレフィルドシリンジはガラスシリンジである、実施形態１９５に記載のキット。
【０７３８】
実施形態１９８．プレフィルドシリンジは実質的にタングステンを含まない物質で作られる、実施形態１９３に記載のキット。
【０７３９】
実施形態１９９．プレフィルドシリンジは実質的にシリコーンを含まない、実施形態１９３に記載のキット。
【０７４０】
実施形態２００．プレフィルドシリンジはシリコーンベースの潤滑剤を含まない、実施形態１９３に記載のキット。
【０７４１】
実施形態２０１．プレフィルドシリンジはプランジャーを含み、プランジャーはフルオロポリマー樹脂ディスクを含む、実施形態１９３に記載のキット。
【０７４２】
実施形態２０２．抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含み、ヒスチジン、塩化ナトリウム、トレハロース、またはポリソルベート８０をさらに含み、抗体は、配列番号６の重鎖配列、配列番号１の軽鎖配列、およびフコースは糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド−結合糖鎖を有するＦｃ領域を含んでいる、無菌の、安定した水性製剤を含有するプレフィルドシリンジ。
【０７４３】
実施形態２０３．プレフィルドシリンジは針を含む、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７４４】
実施形態２０４．事前に補充されたものは密閉される、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７４５】
実施形態２０５．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジまたはガラスシリンジである、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７４６】
実施形態２０６．プレフィルドシリンジはプラスチックシリンジである、実施形態２１１に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７４７】
実施形態２０７．プレフィルドシリンジはガラスシリンジである、実施形態２１１に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７４８】
実施形態２０８．プレフィルドシリンジは実質的にタングステンを含まない物質で作られる、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７４９】
実施形態２０９．プレフィルドシリンジは実質的にシリコーンを含まない、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５０】
実施形態２１０．プレフィルドシリンジは、シリコーンベースの潤滑剤を含まない、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５１】
実施形態２１１．プレフィルドシリンジはフルオロポリマー樹脂ディスクを有するプランジャーを含む、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５２】
実施形態２１２．シリンジはフルオロポリマー樹脂ディスクを有するプランジャーを含む実質的にシリコーンおよびタングステンを含まないプラスチックシリンジである、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５３】
実施形態２１３．該製剤は抗ヒトＩＣＯＳ抗体、ヒスチジン、塩化ナトリウム、トレハロース、およびポリソルベート８０を含む、実施形態２０２〜２１２のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５４】
実施形態２１４．該製剤は約５０ｍｇ／ｍＬ〜約１５０ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１ｍＭ〜約１００ｍＭのヒスチジン、約１０ｍＭ〜約２００ｍＭのＮａＣｌ、約１％〜約４０％のトレハロース、および約０．００１％〜約５％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約５〜約７である、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５５】
実施形態２１５．該製剤は約８０ｍｇ／ｍＬ〜約１２０ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１ｍＭ〜約５０ｍＭのヒスチジン、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭのＮａＣｌ、約１％〜約２０％のトレハロース、および約０．００５％〜約１％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約５．５〜約６．５である、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５６】
実施形態２１６．該製剤は約１００ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭのＮａＣｌ、約４％のトレハロース、および約０．０１％〜約０．０５％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約６である、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５７】
実施形態２１７．該製剤は約１００ｍｇ／ｍＬの抗ヒトＩＣＯＳ抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約８０ｍＭのＮａＣｌ、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０を含み、該製剤のｐＨは約６である、実施形態２０２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５８】
実施形態２１８．該製剤は等張性である、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７５９】
実施形態２１９．少なくとも約４週間、４０℃で保存する際、該製剤は安定である、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６０】
実施形態２２０．少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する際、該製剤は安定である、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６１】
実施形態２２１．少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する際、該製剤は安定である、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６２】
実施形態２２２．該抗体は少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６３】
実施形態２２３．該抗体は少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６４】
実施形態２２４．該抗体は少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約８０％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６５】
実施形態２２５．該抗体は少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６６】
実施形態２２６．該抗体は少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６７】
実施形態２２７．該抗体は少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９０％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６８】
実施形態２２８．該抗体は少なくとも約４週間、４０℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７６９】
実施形態２２９．該抗体は少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７０】
実施形態２３０．該抗体は少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する前の抗体を表す参照抗体と比べて、ヒトＩＣＯＳポリペプチドとの結合能力の少なくとも約９５％を保持する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７１】
実施形態２３１．該抗体は凝集または断片化に影響されやすい、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７２】
実施形態２３２．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、少なくとも約４週間、４０℃で保存する際に凝集体を形成する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７３】
実施形態２３３．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、５℃で少なくとも約３ヶ月間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７４】
実施形態２３４．該抗体の約２％未満は、ＨＰＳＥＣによって定められる通り、５℃で少なくとも約１２ヶ月間保存する際に、凝集体を形成する、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７５】
実施形態２３５．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、４０℃で少なくとも約４週間保存する際に、断片化される、請求項２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７６】
実施形態２３６．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、５℃で少なくとも約３ヶ月間保存する際に、断片化される、請求項２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７７】
実施形態２３７．該抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって定められた通り、５℃で少なくとも約１２ヶ月間保存する際に、断片化される、請求項２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７８】
実施形態２３８．該製剤は目視検査によって測定される通り、少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する際に、透明および無色である、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７７９】
実施形態２３９．該製剤は目視検査によって測定される通り、少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する際に、透明および無色である、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７８０】
実施形態２４０．目視検査によって測定される通り、少なくとも約３ヶ月間、５℃で保存する際に、該製剤は実質的に微粒子を含まない、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７８１】
実施形態２４１．目視検査によって測定される通り、少なくとも約１２ヶ月間、５℃で保存する際に、該製剤は実質的に微粒子を含まない、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７８２】
実施形態２４２．該製剤は注射製剤である、実施形態２０２〜２１７のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７８３】
実施形態２４３．該製剤は皮下または筋肉内に適している、実施形態２４２に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７８４】
実施形態２４４．該製剤は皮下注射に適している、実施形態２４３に記載のプレフィルドシリンジ。
【０７８５】
実施形態２４５．該製剤は薬学的に許容される製剤である、実施形態２０２〜２４４のうちのいずれか１つに記載のプレフィルドシリンジ。
【０７８６】
実施形態２４６．実施形態２０２〜２４５のプレフィルドシリンジを含むキット。
以下、更に本発明の実施形態を示す。
（１）ヒトＩＣＯＳに特異的に結合する抗体を含む無菌の安定した水性製剤であって、
ａ）前記抗体は、フコースが糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域を含み、
ｂ）前記抗体は、溶液中で可逆的な自己会合を起こし、前記可逆的な自己会合は、凝集体形成を誘発せず、かつ
ｃ）前記抗体の少なくとも１０モル％は、３７℃、１０ｍｇ／ｍＬの抗体濃度のＰＢＳ中で三量体として存在する、
前記製剤。
（２）前記製剤は、約５ｍｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの前記抗体、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのヒスチジン、約２％〜約１５％のトレハロース、および約０．００５％〜約１％のポリソルベート８０を含み、前記製剤のｐＨは約５．５〜約６．５である、（１）に記載の製剤。
（３）前記製剤は、約１０ｍｇ／ｍＬの前記抗体、約１０ｍＭのヒスチジン、約４％のトレハロース、および約０．０２％のポリソルベート８０を含み、前記製剤の前記ｐＨは約６である、（１）に記載の製剤。
（４）前記抗体は配列番号７の重鎖可変配列、および配列番号２の軽鎖可変配列を含む、（１）〜（３）のいずれか１に記載の製剤。
（５）前記抗体は、配列番号６の重鎖配列および配列番号１の軽鎖配列を含む、（１）〜（３）のいずれか１に記載の製剤。
（６）前記製剤は等張性である、（１）〜（５）のいずれか１に記載の製剤。
（７）前記製剤は、薬学的に許容される製剤である、（１）〜（６）のいずれか１に記載の製剤。
（８）前記抗体は、５℃での約３ヶ月間の前記製剤の保存中に、そのヒトＩＣＯＳ結合活性の約２０％以下を失う、（１）〜（７）のいずれか１に記載の製剤。
（９）前記抗体の約５％未満は、ＨＰＳＥＣによって測定される通り、４０℃で約１ヶ月間保存すると、凝集体を形成する、（１）〜（７）のいずれか１に記載の製剤。
（１０）前記抗体の約５％未満は、ＲＰ−ＨＰＬＣによって測定される通り、４０℃で約２ヶ月間保存すると、断片化される、（１）〜（７）のいずれか１に記載の製剤。
（１１）前記製剤は注射製剤である、（１）〜（１０）のいずれか１に記載の製剤。
（１２）前記製剤は、静脈内、皮下、または筋肉内投与に適している、（１１）に記載の製剤。
（１３）適切な容器に（１）〜（１２）のいずれか１に記載の抗体製剤を含む、ヒトに対する非経口投与に適している薬学的単位剤形。
（１４）（１）〜（１２）のいずれか１に記載の製剤を含有する、プレフィルドシリンジ。
（１５）ヒトにおける自己免疫病または疾患を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、（１）〜（１２）のいずれか１に記載の製剤の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
（１６）前記自己免疫病または疾患は、ＳＬＥまたは強皮症である、（１５）に記載の方法。
（１７）ヒト移植患者における拒絶を治療または防止する方法であって、それを必要とするヒトに、（１）〜（１２）のいずれか１に記載の製剤の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
（１８）ヒトにおける炎症性疾病または疾患を治療する方法であって、それを必要とするヒトに、（１）〜（１２）のいずれか１に記載の製剤の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
（１９）ヒト患者においてＩＣＯＳを発現するＴ細胞を枯渇させる方法であって、それを必要とするヒトに、（１）〜（１２）のいずれか１に記載の製剤の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
（２０）（１）〜（１２）のいずれか１に記載の製剤の有効量を投与することを含む、霊長類動物の二次リンパ器官の胚中心構造を破壊する方法。
【０７８７】
当業者は、本明細書に記載される本開示の特別な実施形態の等価物を認める、または枠を超えない日常的な実験で解明することができるであろう。かかる等価物を、以下の請求項によって包含することを目的とする。
【０７８８】
各刊行物、特許、または特許出願が、参照によって本明細書に組み込まれるように明確におよび個々に示された場合と同様に、本明細書に記載されたすべての刊行物、特許、特許出願は、本明細書に参照によって組み込まれる。
【０７８９】
本明細書の参考文献の引用または考察は、それらが本開示の先行技術であることの承認であると解釈されるべきではない。
【実施例】
【０７９０】
６．実施例
これらの実施例は、例示のみを目的として提供され、本開示は、決してこれらの実施例に限定されるものとして解釈されるべきではなく、むしろ、本明細書に提供される教示の結果明白となる、ありとあらゆる変形を包含すると解釈されるべきである。
【０７９１】
以下の項では、抗ヒトＩＣＯＳ抗体を含む製剤の開発について記載する。別途記載されない限り、本明細書に示される実験結果は、配列番号６の重鎖配列と、配列番号１の軽鎖配列と、フコースが糖鎖の還元末端のＮ−アセチルグルコサミンと結合しない複合Ｎ−グリコシド結合糖鎖を有するＦｃ領域とを含む、１３６抗ヒトＩＣＯＳ抗体を使用して生成された（２００８年５月７日に出願された米国特許出願第１２／１１６，５１２号を参照）。
【０７９２】
６．１．実験方法
精製した抗ヒトＩＣＯＳ抗体は、本明細書に記載される標準的な工業規模のプロトコールに従って生成することができる。タンパク質濃度は、２８０ｎｍでの光学密度測定から推測することができる。
【０７９３】
精製した抗ヒトＩＣＯＳ抗体を、Ｐｌａｎｏｖａ  ２０Ｎフィルタを使用してナノろ過し、微粒子状物質を除去する。抗ヒトＩＣＯＳ抗体製剤は、接線流ろ過（ＴＦＦ）を使用して調製する。ナノろ過した抗ヒトＩＣＯＳ抗体を、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｌａｂｓｃａｌｅ  ＴＦＦデバイス上で約２５ｍｇ／ｍＬに濃縮する。次いで、抗ヒトＩＣＯＳ抗体を、適切な緩衝液（例えば、１０ｍＭヒスチジン−ＨＣＬ（ｐＨ６．０）、８０ｍＭ  ＮａＣｌ）中に５倍透析ろ過する。緩衝液交換が終了したら、抗体を約１５０ｍｇ／ｍＬに濃縮する。濃縮した抗体調製物を適切な濃縮原液でスパイクすることによって、賦形剤を導入する。例えば、４％トレハロースの最終濃度を、１００ｍＬごとの濃縮した抗体調製物に、１１ｍＬの１０ｍＭヒスチジン−ＨＣｌ、８０ｍＭ  ＮａＣｌ、４０％トレハロース（ｐＨ６．０）を添加することにより達成する。複数の賦形剤を、連続的なステップで導入することができる。例えば、０．０２％のポリソルベート８０の最終濃度は、１０ｍＭヒスチジン−ＨＣｌ（ｐＨ６．０）、８０ｍＭ  ＮａＣｌ、４％トレハロース、２％ポリソルベート８０の原液を、抗体調製物を含有するトレハロースで１００倍に希釈することによって、トレハロースの添加後に導入する。最終抗体濃度を、最終製剤緩衝液（例えば、１０ｍＭヒスチジン−ＨＣｌ（ｐＨ６．０）、８０ｍＭ  ＮａＣｌ、４％トレハロース、０．０２％ポリソルベート８０）で１００±５ｍｇ／ｍＬに調整する。
【０７９４】
以下の項は、無菌の水溶液中の、１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）、８０ｍＭ  ＮａＣｌ、４％トレハロース、０．０２％ポリソルベート８０中の１００ｍｇ／ｍＬの抗ＩＣＯＳ抗体を含む製剤を特徴付けるために使用され得る方法について記載する。
【０７９５】
製剤の安定性を、長期間保存した単一用量のアリコートの物理的性質を分析することによって試験する。一部のアリコートは、臨床的な保存に推奨される温度（５℃）下で保存する。他のアリコートは、非常に長期の保存の効果をシミュレートするために、高温（２５℃または４０℃）下で保管する。
【０７９６】
製剤の安定性に影響を及ぼし得るさらなる保存条件には、光強度、光波長、湿度、バイアル組成、および共栓組成が含まれるが、これらに限定されない。また、製剤の安定性についてのこれらのパラメータの効果も、本明細書に記載される方法を使用して測定することができる。
【０７９７】
サイズ排除クロマトグラフィーを利用して、製剤中の抗体凝集体（例えば、二量体）の量および断片化の程度を測定することができる。ＳＥＣは、以下のように、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）システムを使用して実施することができる。試料を１０ｍｇ／ｍＬに希釈する。２５０ｕｇのタンパク質を含有する２５μＬの希釈した試料を、ＴＳＫ−Ｇｅｌ  ３０００カラム（サイズ７．８ｍｍ×３０．０ｃｍ、Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）に注入する。タンパク質溶出プロファイルを、２８０ｎｍでの溶出液の光学密度に従って測定する。データ分析は、ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ（Ａｇｉｌｅｎｔ）自動積分パラメータを使用して実施することができる。
【０７９８】
また、逆送高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）を使用して、製剤中の抗体断片の量を測定することもできる。ＲＰ−ＨＰＬＣは、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）システムを使用して実施する。試料を、Ｍｉｃｈｒｏｍ  ＢｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓからのＰＬＲＰ−Ｓ（８ｕｍ、４０００Ａ、２．０×１５０ｍｍ）カラム上で分析する。タンパク質溶出プロファイルを、２８０ｎｍでの溶出液の光学密度に従って測定する。データ分析は、ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ（Ａｇｉｌｅｎｔ）自動積分パラメータを使用して実施することができる。
【０７９９】
イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＣ）を利用して、様々な製剤中の電荷イソ型の不均質を測定することができる。この分析に、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）システムを使用することができる。試料を、Ｐｒｏｐａｃ  ＷＣＸ−１０Ｇ（４×２５０ｍｍ）Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ｄｉｏｎｅｘ）上で分析する。データ分析は、ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎ（Ａｇｉｌｅｎｔ）自動積分パラメータを使用して実施する。
【０８００】
目視検査：ある製剤中の色、透明度、および微粒子の量を、肉眼で試料を検査することによって判定する。
【０８０１】
６．１．１．サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）
サイズ排除クロマトグラフィーは、抗体凝集体および断片の存在について抗体製剤を分析するために実施することができる。試験試料を、高分解能のサイズ排除カラム（例えば、Ｇ３０００  ＳＷＸＬ  ５μｍ、３００Å、７．８×３００ｍｍ、Ｔｏｓｏ  Ｈａａｓ）に注入する。移動相は、０．２５〜１．０ｍＬ／分の流速の均一濃度で移動する０．１Ｍリン酸２ナトリウム、０．１Ｍ硫酸ナトリウム、および０．０５％アジ化ナトリウム（ｐＨ６．７）である。溶出されたタンパク質は、２８０ｎｍでの紫外吸光度によって検出し、さらなる特徴付けのために収集することができる。検出されたいずれかのタンパク質種の相対量は、初期除外容積ピークを除く、検出されたすべての他のピークの総面積と比較した、生成物ピークの面積百分率として報告される。抗体単量体ピークより早く溶出されるピークは凝集体百分率で記録し、一方抗体単量体ピークより遅いが、緩衝液ピークより遅く溶出されるピークは、断片百分率で記録する。個々のピークの流体力学半径および分子量は、結合多角度光散乱検出器で得ることができる。
【０８０２】
ＳＥＣを使用して、長期間保存された製剤中の抗体凝集体の形成および抗体の断片化を監視（例えば、９ヶ月にわたって複数回測定を実施する）することができる。製剤は、異なる温度範囲（例えば、２〜８℃、２０〜２４℃、および３８〜４２℃）で保存することができる。９ヶ月を超える保存の効果をシミュレートする目的で、製剤にストレスを加えるために、提案されている臨床的保存温度（２〜８℃）を超えた温度範囲を使用する。断片と凝集体との比率は、時間と共に増加することが予測され、この増加は、高温で加速される可能性が高い。断片化および凝集速度が各温度範囲内で一定であるという知見は、より高い保存温度が加速された時間尺度を正確にシミュレートしていることを示しているだろう。
【０８０３】
断片化／凝集の予測される速度の対数（ｌｏｇ（ｒａｔｅ））も、決定することができる。ログ（速度）が、保存温度の逆数（１／Ｔ（Ｋ−１）への線形の依存性を示すという知見によって、研究者が、任意の温度での製剤の凝集／断片化速度、より重要なことには、所与の温度での任意の時点の製剤特徴を予測することが可能になるだろう。
【０８０４】
凝集体および断片に相当するクロマトグラフィーピークが、相互に、または単量体ピークと十分には識別可能でない状況（例えば、凝集体／断片の相対的レベルが低い）では、ＳＥＣは、断片化／凝集の正確な測定基準として機能しない場合がある。
【０８０５】
６．１．２．超遠心分析法
また、超遠心分析法（ＡＵＣ）を使用して、抗体凝集体および断片の存在について抗体製剤を特徴付けることができる。ＡＵＣは、液体試料中の高分子の沈降係数（スベドベリ、Ｓで報告される）を決定する、直交法である。ＳＥＣと同様、ＡＵＣは、単量体から抗体断片／凝集体を分離および検出することができ、さらに、分子質量に関する情報を提供することができる。ＳＥＣと比較すると、ＡＵＣは、固相の相互作用のための凝集体の損失の可能性を排除し、所与の高分子の異なる種をより良好に分解することができる。
【０８０６】
分析用超遠心機、例えば、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｏｐｔｉｍａ  ＸＬ−Ａを使用して、沈降速度実験を実施することができる。試験試料を、基準緩衝液（例えば、２０ｍＭクエン酸、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１．５％マンニトール、５０μＭジエチレントリアミン５酢酸、０．０２％ポリソルベート８０、ｐＨ６．０）で０．５ｍｇ／ｍＬの抗体濃度に希釈する。４１５μＬの希釈した抗体試料および４１２μＬの基準緩衝液を、それぞれ試料および基準チャネル中の１２ｍｍの遠心分離セルに装填する。装填したセルを、ＡＮ−５０Ｔｉ分析用ローターに入れ、２５℃に平衡化する。試料を、２８０ｎｍ、４２０００ｒｐｍのローター速度、完全真空でスキャンする。分析のために、各セルに対して合計８０回スキャンを収集する。メニスカスによって生じる人為的影響を避けるために、後処理データプロセスからそれぞれの試料の最初のスキャンは除外する。
【０８０７】
Ｎ．Ｉ．Ｈ．のＰｅｔｅｒ  Ｓｈｕｃｋによって開発されたｃ（ｓ）方法、およびｃ（ｓ）を実装したＳＥＤＦＩＴ（バージョン８．８）プログラムを使用して、データを分析する。ｃ（ｓ）方法を使用して、沈降係数の分布を導出するために生のデータスキャンをＳのＬａｍｍ関数に直接当てはめる。当てはめの手順に使用されるパラメータは、解像度４００、信頼区間０．７５、グリッドサイズ１０００、部分比体積０．７２４５、緩衝液密度１．０００、および緩衝液粘度０．１００２である。摩擦比、メニスカス、および底部位置を近似パラメータとして設定する。時間に依存しないノイズも近似する。検出されたピークを積分し、以下のように分類する：０〜６Ｓは断片、６〜９Ｓは単量体、および９〜２０Ｓは凝集体。
【０８０８】
ＡＵＣを使用して、低い相対的レベルの凝集および断片化を有する抗体製剤を特徴付けることができる。ＡＵＣは、ＳＥＣピークの分解能を超える状況において、単量体種からの抗体断片および凝集体のより良好な分解を可能にし得る。また、凝集体ピークの分子質量のＡＵＣ推定値は、その組成物の指標として使用することができる（例えば、二量体対より高い多量体）。
【０８０９】
また、ＳＥＣと比較すると、ＡＵＣは、所与の高分子の異なる種をより良好に分解することができる。しかしながら、ＡＵＣのノイズ／シグナル比は試料中の抗体濃度に依存するため、先ず適切な試料希釈率を確立する必要がある。
【０８１０】
６．１．３．濁度測定：
抗体製剤中のタンパク質凝集は、濁度測定によっても特徴付けることができる。濁度は溶液中の粒子が光を散乱させる量の測定値であり、したがって、タンパク質の凝集または変性の一般的な指標として使用することができる。高い濁度は、より高レベルの凝集、または粒子の数／粒経の増加を示し得る。
【０８１１】
濁度測定は、製造業者の指示に従い、濁度計（例えば、２１００ＡＮまたは２１００Ｎ、Ｈａｔｃｈ）を使用して実施することができる。約３〜４ｍＬの製剤試料をガラス試験管に移し、インラインの真空システムを用いて２分間脱気する。次いで、脱気した試料を、分析のために室温で濁度計（例えば、２１００ＡＮまたは２１００Ｎ、Ｈａｔｃｈ）の試料区画に入れる。濁度計を、４０、２００、１０００、および４０００ＮＴＵ（比濁分析濁度単位）で、ＳＴＡＢＬＣＡＬ（登録商標）Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  Ｆｏｒｍａｚｉｎ  Ｔｕｒｂｉｄｉｔｙ標準（Ｈａｔｃｈ）を用いて較正し、ホルマジンの対照懸濁液を３、６、１８、３０、および６０ＮＴＵで分析することによって検証する。
【０８１２】
６．１．４．粒子数
特定の製剤中の粒子の数および粒経は、製造業者の指示に従って、粒子計数器（例えば、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｍｕｌｔｉｓｉｚｅｒ  ３）を使用して測定することができる。
【０８１３】
６．１．５．粘度プロファイル
抗体製剤の粘度は、粘度計（例えば、ＶｉｓｃｏＬａｂ  Ｐｉｓｔｏｎ（０．３０５５インチ、１〜２０ｃＰ）を備える、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  ＳｙｓｔｅｍｓからのＶｉｓｃｏＬａｂ  ４０００  Ｖｉｓｃｏｍｅｔｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ）を使用して測定することができる。粘度計は、使用前に、適切な標準（例えば、Ｋｏｅｈｌｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｉｎｃ．からのＳ６Ｓ標準試料）を用いて較正する。この系を２０℃に平衡化するために、粘度計を水浴に接続する。Ｓ６Ｓ粘性標準試料（２０．００℃で８．５３０ｃＰ）を使用して、ピストンを確認する。ピストンは、ＲＯＤＩ  Ｈ２Ｏ（２０．０℃で１．００ｃＰ）を使用しても確認される。ピストンは、それぞれの異なる溶液種類の測定ごとに、石鹸および水で完全に清潔にし、すすぐ。その後、この系を≦２℃に冷却する。系の温度が２℃以下になったら、試料をチャンバ内に装填し、ピストンを試料中に下げる。試料がチャンバの温度に平衡化した後、測定を開始する。≧２５℃の最終温度になるまで、温度を７〜１０分ごとに１℃刻みで上昇させる。粘度結果を、温度を上昇する直前に記録する。再平衡化の必要性を最小限に抑えるために、測定中ピストンを動かし続ける。
【０８１４】
６．１．６．示差走査熱量測定
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を使用して、特定の製剤中の抗体の熱安定性における経時的変化を確認することができる。熱溶融温度（Ｔｍ）を、製造業者の指示に従って、示差走査熱量計（例えば、ＭｉｃｒｏＣａｌ，ＬＬＣからのＶＰ−ＤＳＣ）で測定する。一例では、ＶＰ−ＤＳＣを、１．０℃／分の走査速度および２５〜１２０℃の温度範囲で使用する。５分間の走査前の恒温状態と共に、８秒間のフィルタ期間を用いる。試料は、透析カップ（３．５ｋＤ）を用いた２５ｍＭヒスチジン−ＨＣｌ、ｐＨ６への透析によって調製する。Ａ２８０によって決定される平均Ｍａｂ濃度は、５００μｇ／ｍＬである。溶融温度は、系と共に供給されたソフトウェアを使用して、製造業者の指示に従って決定する。
【０８１５】
６．１．７．液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ−ＭＳ）
液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ−ＭＳ）を使用して、抗体製剤中でＳＥＣまたはＡＵＣによって検出された分解断片を特徴付けることができる。
【０８１６】
分解断片を含有するピークＳＥＣカラム分画を収集し、ＰＮＧａｓｅ  Ｆとしても知られるＮ−グリコシダーゼＦを用いて、３７℃で終夜消化させる。ＰＮＧａｓｅ  Ｆは、タンパク質試料を脱グリコシル化するために使用されるアミダーゼである。この酵素は、Ｎ結合糖タンパク質の高マンノース、ハイブリッドおよび複合オリゴ糖の最も内側のＧｌｃＮＡｃとアスパラギン残基との間を開裂する。脱グリコシル化された試料を還元緩衝液（例えば、２．５ｍｇ／ｍＬのＤＴＴ、６．０ＭグアニンジンＨＣｌ、ｐＨ８．２）と混合し、水浴中５６℃に６０分間保つ。次いで、未希釈４−ビニルピリジン（例えば、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．、ＷＩ）を試料に添加し、反応混合物を周囲温度に３０分間保つ。脱グリコシル化し、還元し、アルキル化された試料を、逆相カラムに直ぐに装填し、修飾された試料を反応物から分離する。
【０８１７】
脱グリコシル化し、還元し、アルキル化された試料を、二成分勾配ＨＰＬＣ系（Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００）で、逆相カラム（例えば、Ｊｕｐｉｔｅｒ  ５μｍ  Ｃ４、３００Å、２５０×２．００ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）を使用して分画する。移動相Ａは、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中の３０％アセトニトリルからなり、移動相Ｂは、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水中の５０％アセトニトリルからなる。試料を、水中の３０〜５０％アセトニトリルの直線勾配を使用して、約２００μＬ／分の流速で１６分間にわたって分離する。カラム溶出液を紫外線検出器に導き、次いで、１：１に分割し、半分にＩｏｎ  Ｔｒａｐ質量分析計（例えば、ＬＴＱ、ＴｈｅｒｍｏＥｌｅｃｔｒｏ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ）の切り替え弁に送り、残りの半分を廃棄する。
【０８１８】
イオントラップ質量分析計は、カフェイン、酢酸Ｌ−メチオニル−アルギニル−フェニルアラニル−アラニン・Ｈ２Ｏ、およびＵｌｔｒａｍａｒｋ  １６２の混合物を使用して、実験を実行する前に較正する。エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）データを、陽性ＥＳＩフルスキャンモードで得る。ＢｉｏＷｏｒｋの逆重畳プログラム（ＴｈｅｒｍｏＦｉｎｎｉｇａｎ）を使用して、質量スペクトルを再構築し、それらの元の質量スペクトルからペプチド／タンパク質の分子質量を得ることができる。その後、質量データを使用して、分解断片の同一性を決定する。
【０８１９】
６．１．８．等電点電気泳動ゲル電気泳動
等電点測定値を使用して、所与の製剤中の抗体の化学的安定性を確認することができる。等電点は、多温度（ｍｕｌｔｉ  ｔｅｍｐ）３冷蔵浴循環装置およびＥＰＳ  ３５０１  ＸＬ電源を備えたＰｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  Ｍｕｌｔｉｐｈｏｒ  ２電気泳動系を用いて測定する。予め成形されたアンフォラインゲル（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ｐＩ範囲２．５〜１０）に５μｇのタンパク質を装填する。広範囲ｐＩマーカー標準物質（Ａｍｅｒｓｈａｍ、ｐＩ範囲３〜１０、８μＬ）を使用して、Ｍａｂの相対ｐＩを決定する。電気泳動を１５００Ｖ、５０ｍＡで１０５分間実施する。ゲルは、Ｓｉｇｍａの固定液（５倍）を精製水で１倍に希釈して使用し、固定する。染色は、Ｓｉｍｐｌｙ  Ｂｌｕｅ染料（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、室温で終夜実施する。脱染は、２５％エタノール、８％酢酸、および６７％精製水の溶液中で行う。等電点は、Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｅｒを使用して、標準物質の較正曲線に対して決定する。
【０８２０】
６．１．９．ジスルフィド結合の測定
ジスルフィド結合測定プロトコールを使用して、特定の抗体製剤中のジスルフィド架橋の安定性を監視することができる。抗体試料を、例えば、１０ｍＭリン酸緩衝液、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＮＥＭ、６Ｍグアニジン、ｐＨ７．０中で、３７℃で１〜３時間変性させる。変性させた試料を１００ｍＭリン酸緩衝液、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．０で６倍に希釈し、これにＥｎｄｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｌｙｓ−Ｃ（例えば、Ｒｏｃｈｅ）を１：１０の酵素／タンパク質比で添加する。反応混合物を３７℃で１６〜２４時間インキュベートする。反応混合物の半分で、５−１０μＬの１００ｍＭ  ＤＴＴを添加し、その後３７℃で１時間インキュベートすることによって、ジスルフィド架橋を還元する。Ｌｙｓ−Ｃ消化試料を、逆相ＨＰＬＣ（例えば、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｊｕｐｉｔｅｒ  ５ｍ  Ｃ１８カラム、２５０×２．１ｍｍ）によって分画する。溶離液を、紫外線検出器およびインラインのＬＣＱまたはＬＴＱ  Ｉｏｎ  Ｔｒａｐ質量分析計（例えば、ＴｈｅｒｍｏＥｌｅｃｔｒｏｎ）によって分析する。ＲＰ−ＨＰＬＣ移動相Ａは、Ｈ２Ｏ中の０．１％ＴＦＡであり、移動相Ｂは、アセトニトリル中の０．１％ＴＦＡである。ペプチドを、０．２ｍＬ／分の流速で、以下の段階勾配：１）０〜２分間、５％移動相Ｂ、２）２〜３２分間、５〜２０％移動相Ｂ、３）３２〜１３２分間、２０〜４０％、移動相Ｂ、４）１３２〜１５２分間、４０〜６０％移動相Ｂ、５）１５２〜１５５分間、６０〜９５％移動相Ｂを用いて溶出する。
【０８２１】
イオントラップ質量分析計を、カフェイン、酢酸Ｌ−メチオニル−アルギニル−フェニルアラニル−アラニン・Ｈ２Ｏ、およびＵｌｔｒａｍａｒｋ  １６２の混合物を使用して、実験を実行する前に較正する。エレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩ−ＭＳ）データを、陽性ＥＳＩフルスキャンモードで得る。ＢｉｏＷｏｒｋの逆重畳プログラム（ＴｈｅｒｍｏＦｉｎｎｉｇａｎ）を使用して、質量スペクトルを再構築し、それらの元の質量スペクトルからペプチドの分子質量を得ることができる。ＤＴＴで還元した試料および非還元試料を使用して得た質量データの比較により、ジスルフィド架橋ペプチドの同定が可能になる。
【０８２２】
６．１．１０．結合親和性の特徴付け
長期保存（例えば、４０℃で１ヶ月または５℃で６ヶ月）後に製剤から回収されたモノクローナル抗体の結合親和性は、ＢＩＡｃｏｒｅ  ３０００計器（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用して、表面プラズモン共鳴法（例えば、Ｊｏｎｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  １１（５）：６２０−６２７（１９９１）、Ｊｏｈｎｅ，Ｂ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ９（１）：６５−７１（１９８９）を参照）によって決定することができる。抗体を、Ｐｒｏｔ−Ｇで被覆したＣＭ５チップに捕捉する。参照目的で、捕捉アイソタイプ対照ヒト−ＩｇＧ（Ｓｉｇｍａ）抗体を含むＰｒｏｔ−Ｇで被覆したＣＭ５チップを使用する。ＨＢＳ−ＥＰランニング緩衝液に溶解したＩＣＯＳ−Ｆｃ融合タンパク質を、２５ｕＬ／分の速度でチップに通過させる。５分間の会合時間後に、１０分間の解離期間が続く。異なる濃度のＩＣＯＳ−Ｆｃ（例えば、１０ｎＭ〜８０ｎＭの濃度）にチップを曝露することにより、単独測定を実施する。２０ｍＭ  ＮａＯＨ＋４００ｍＭ  ＮａＣｌを用いて１００ｕＬ／分の流速で０．４分間洗浄することにより、チップを再生する。全体のデータセットが回収された時点で、ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用して、得られた結合曲線を１：１ラングミュア結合モデルに全体的に当てはめる。このアルゴリズムは、会合速度（ｋｏｎ）および解離速度（ｋｏｆｆ）の両方を計算し、そこから見かけの平衡結合定数、ＫＤが、２つの速度定数、ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比率として推測される。個々の速度定数を導出する方法のより詳細な説明は、ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）に見出すことができる。
【０８２３】
６．２．製剤の開発
アフコシル化された１３６抗体の物理化学的特性を、以下のように特徴付けた。アフコシル化された１３６のＤＳＣプロファイルを、上述の通り決定した。ＤＳＣ測定は、２５ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）緩衝液中で実施した。アフコシル化された１３６抗体のＤＳＣプロファイル（図１）は、フコシル化された親抗体のものと本質的に同一である。
【０８２４】
１３６抗体の熱安定性に対するｐＨの効果を、様々なｐＨでの温度の関数としてトリプトファン蛍光を測定することによって確認した。実験結果の代表的な標本を図２に示す。１３６抗体は、ｐＨ５〜７の範囲で安定であると思われた。
【０８２５】
コロイド安定性に対する製剤のｐＨの効果を、温度の関数として様々な１３６製剤の濁度（Ａ３５０ｎｍ）を測定することによって評価した。実験結果の代表的な標本を図３に示す。１３６抗体は、４〜７のｐＨ範囲で安定であると思われた。
【０８２６】
１３６抗体を安定化することができる賦形剤を同定するために、ハイスループットスクリーニングを設計した。１３６抗体のｐＨ感受性に基づいて、スクリーニングのために準安定な対照緩衝液（ｐＨ７．２の２０ｍＭリン酸）を選択した。対照緩衝液中の１３６のコロイド安定性を、単一のさらなる賦形剤を含む緩衝液中の１３６のコロイド安定性と比較することにより、賦形剤をスクリーニングした。コロイド安定性の変化は、製剤濁度（Ａ  ３５０ｎｍ）をある時間にわたって測定することで追跡した。安定化賦形剤は、ある時間にわたる濁度の増加を減速させるか、または排除し、一方不安定化賦形剤は、濁度の増加を加速させる。代表的な結果を図４に示す。安定化賦形剤を含む緩衝液中の濁度変化は、対照緩衝液中で認められた濁度変化の比率と比較して、減速または排除された。ハイスループットスクリーニングによって、ヒスチジン、クエン酸、アルギニン、リジン、塩化ナトリウム、およびトレハロースが、１３６抗体に対する安定化賦形剤として同定された（図５〜７）。１３６の安定性に対する３つの賦形剤の組み合わせの効果を確認するために、さらなる実験を実施した（図８）。最も顕著な安定化効果が、４％トレハロースと組み合わせて使用されたときの１００ｍＭのアルギニンまたはリジンで認められた。
【０８２７】
ハイスループットスクリーニングの結果に基づいて、長期安定性実験のために２つの候補製剤を選択した。製剤１は１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）を含み、製剤２は１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）および１５０ｍＭ  ＮａＣｌを含み、製剤３は、１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）、１００ｍＭアルギニン−ＨＣｌ、および４％トレハロースを含んだ。これらの製剤中の１３６抗体（６０ｍｇ／ｍＬ）の安定性を、４０℃で保存後に単量体濃度を測定することによって評価した。単量体濃度は、本明細書に記載されるようにＳＥＣによって測定した。得られた安定性結果の例を図９に示す。この結果によって、アルギニン／トレハロースまたはＮａＣｌの添加によって、１３６抗体の安定性が増加したことが確認された。アルギニン／トレハロースは、ＮａＣｌ単独よりも強い安定化効果を有した。
【０８２８】
１３６抗体の安定性は、リジンを含有する製剤中でも確認された。４０℃で１ヶ月インキュベーション後に、製剤２（１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）および１５０ｍＭ  ＮａＣｌ）、ならびに製剤４（１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）、１００ｍＭリジン−ＨＣｌ、および４％トレハロース）から回収した１３６抗体を、ＨＰ−ＳＥＣで分析した。代表的な溶出プロファイルを図１０に示す。製剤４から回収した１３６の溶出プロファイルにおける主要な単量体ピークは、顕著な肩を示している。アルギニンを含有する製剤から回収した１３６抗体の主要な単量体ピークも、同じ肩を示している。肩の存在は、リジンおよびアルギニンを含有する製剤中の単量体／二量体混合物の形成を示している。このような肩は、製剤２から回収された１３６抗体の溶出プロファイルには検出されていない。
【０８２９】
１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）、８０ｍＭ  ＮａＣｌ、４％トレハロース、および０％、０．０２％、もしくは０．０５％のポリソルベートを含む製剤を、さらなる安定性研究のために選択した。５℃、２℃、または４０℃で保存後のこれらの製剤中の１３６の凝集および断片化プロファイルを、本明細書に記載される方法を使用して決定した。これらの実験からの代表的な結果を、図１１〜１５に示す。示されるデータは、１００ｍｇ／ｍＬ、１０ｍＭヒスチジン（ｐＨ６．０）、８０ｍＭ  ＮａＣｌ、４％トレハロース、および０．０２％ポリソルベート８０を含む製剤が、高度に安定な液体製剤であることを証明している。
【０８３０】
６．３．プレフィルドシリンジ中の製剤の安定性
１００ｍｇ／ｍＬの抗体、１０ｍＭヒスチジン、８０ｍＭ  ＮａＣｌ、４％トレハロース、および０．０２％  ＰＳ−８０をｐＨ６．０で含む製剤の安定性を、プレフィルドシリンジ中で試験することができる。安定性試験は、１ｍＬの製剤をシリンジに装填し、この製剤を充填したシリンジを５℃、２５℃、または４０℃で長期間保存することによって実施する。製剤の安定性を、本明細書に記載される分析方法を使用して分析する。プレフィルドシリンジ中の製剤の安定性の主要な決定因子である粒子形成を、目視検査によって評価する。タンパク質凝集および／または断片化を、シリンジから回収した製剤を当業者に知られている分析方法（例えば、ＳＥＣ）に供して評価する。
【０８３１】
６．４．ＩＣＯＳを担持するＴ細胞の枯渇は強皮症のＧｖＨモデルにおいて疾病を防止する
本研究では、強皮症（ＳＳｃ）の移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）マウスモデルの病変形性におけるＩＣＯＳの機能を、増強した抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を有する糖鎖改変した抗マウスＩＣＯＳ  ＭＡｂを使用して調査した。マウスＩＣＯＳのリガンド結合ドメインを対象としたアフコシル化したラット抗マウスＩＣＯＳモノクローナル抗体（ＩｇＧ２ａ）を、フコシルトランスフェラーゼ８を欠損したＣｈｉｎｅｓｅ  Ｈａｍｓｔｅｒ  Ｏｖａｒｙ（ＣＨＯ）産生細胞株（ＢｉｏＷａ  Ｐｏｔｅｌｌｉｇｅｎｔ（登録商標）Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）中で産生した。アフコシル化した抗マウスＩＣＯＳ  ＭＡｂの活性を、炎症、線維症、および脈管障害を含むヒトＳＳｃの主要な側面を概括する、マウスＧｖＨＤモデルにおいて評価した。
【０８３２】
抗ＩＣＯＳ−ａＦｕｃ  Ｍａｂの投薬は、アイソタイプ対照ＭＡｂおよび対照同系移植片と比較すると、皮膚病変の重症度および発生率を減少させた。平均臨床スコアは、早くも移植後１１日に（３．４倍、ｐ＜０．０５）、およびその後、移植後４週間（８．１倍、ｐ＜０．００５）、アイソタイプ対照ＭＡｂ処置マウスと比較して、抗ＩＣＯＳ処置群において有意に減少した。また、抗ＩＣＯＳ−ａＦｕｃ  ＭＡｂは、ＴＦＨ細胞の疾病関連の蓄積、ならびに胚中心Ｂ細胞および免疫グロブリンを分泌するＢ細胞の関連増殖も防止した。研究の間、動物におけるＩＣＯＳ  ＭＡｂに関連する臨床的兆候または体重の変化はなかった。
【０８３３】
結果は、ＩＣＯＳ＋Ｔ細胞の枯渇が全体的な臨床的疾病スコアを減少させたため、ＩＣＯＳがマウスＧｖＨＤ−ＳＳｃの皮膚病理学において重要な役割を果たすことを示している。ＧｖＨＤ−ＳＳｃ中のＩＣＯＳ＋ＴＦＨ細胞の異常調節の同定は、二次リンパ組織内での病原性Ｂ細胞の胚中心Ｂ細胞への生成の駆動、および皮膚内で免疫グロブリンを分泌するＢ細胞の分化におけるそれらの極めて重要な機能を強調している。重要なことには、抗マウスＩＣＯＳ−ａＦｕｃ  ＭＡｂでの処置が、疾病の臨床的兆候の有意な減少をもたらした。
【０８３４】
フコシル化したおよびアフコシル化した抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂのマウスＦｃｇＲＩＶへのＢＩＡｃｏｒｅ結合親和性を、図１５Ａに示す。ＩＣＯＳ  ＭＡｂ  Ｆｃのエフェクター細胞上に発現したＦｃｇＲＩＶへの結合の増強は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を増加させることが予期された。図１５Ｂは、ナイーブ脾臓およびヘルパーメモリーＴ細胞（中枢およびエフェクター）上のＩＣＯＳ発現の定常状態における、免疫表現型の特徴付けを示す。ナイーブＢａｌｂ／ｃマウスから単離された脾細胞を加工し、示されるマーカーで染色し、ヘルパーＴ細胞亜集団上のＩＣＯＳの発現プロファイルを同定した。フコースなしの抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ（ＩｇＧ２ａ−ａＦｕｃ）は、ＩＣＯＳを担持するＴ細胞の枯渇をより効果的に媒介した（図１５Ｃ）。脾臓ヘルパーの中枢およびエフェクターメモリーＩＣＯＳ担持Ｔ細胞の薬力学的分析を、示される抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂをナイーブＢａｌｂ／ｃマウスへ単回腹腔内注射（２５０μｇ／動物）し、決定した。
【０８３５】
本研究で使用されたＧｖＨモデルは、Ｚｈｏｕ  Ｌ．，Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ，２００６，１２６（２）：３０５−１４に記載されていた。Ｂａｌｂ／ｃ宿主に、Ｂ１０Ｄ２ドナーからのＴ細胞を移植した。対照動物には、同質遺伝子的Ｂａｌｂ／ｃ  Ｔ細胞を移植した。抗体を、移植後７、１４、および２１日目に投与した。抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ（ＩｇＧ２ａ−ａＦｕｃ）の投与によって、移植片対宿主強皮症の臨床スコアが減少した（図１６）。臨床的疾病の平均スコアを、抗マウスＩＣＯＳ  ＩＧ２ａ−ａＦｕｃまたはアイソタイプ対照ＭＡｂ（ｎ＝１０）での隔週の処置（開始時間：８日目）後に評価した。ベースライン皮膚スコア測定を、研究６日目、および隔週にて研究２６日目まで行い、ここで動物を組織収集のために安楽死させた。皮膚を以下のようにスコア化した：０＝正常、１＝病変＜１ｃｍ２、２＝病変１〜２ｃｍ２、３＝病変＞２ｃｍ２。鱗状に見える四肢（耳、尾、足）には、０．３のスコアを与え、動物当たりの最大総スコアは３．９とした（＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．００５）。
【０８３６】
抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂは、ＩＣＯＳを持つＴＦＨの効果的な除去を媒介し、胚中心Ｂ細胞の増殖を抑制した。図１７は、Ｂａｌｂ／ｃ対照マウス、および抗ＩＣＯＳまたはアイソタイプ対照ＭＡｂのいずれかで処置したｒａｇ２欠損マウスから単離された、脾臓、リンパ節、ならびに末梢血ＴｈメモリーおよびＴｈメモリーＩＣＯＳ＋細胞（図１Ｃに示されるようにゲートした）の免疫表現型分析を示す。抗ＩＣＯＳ治療は、ＴＦＨ細胞の増殖を防止する（図１７Ｄ）。抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂは、総脾臓Ｂ細胞（ＣＤ１９＋）の全体数を変化させないが（図１７Ｅ）、胚中心Ｂ細胞のＴＦＨ媒介増殖を有意に抑制した（図１７Ｆ）。ＩＣＯＳを担持するＴ細胞の枯渇は、全体的なＣＤ４＋（図１７Ｇ）およびＣＤ８＋（図１７Ｈ）Ｔ細胞コンパートメントを撹乱させなかった。
【０８３７】
アイソタイプ対照ＭＡｂ処置動物および抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ処置動物からのＲＡＧ２−／−脾臓および腎臓の組織学を図１８に示す。高拡大率（２００倍）の脾臓は、アイソタイプと比較して、抗ＩＣＯＳ処置動物における胚中心形成の欠如を証明している。腎臓では、リンパ球がより少ない血漿細胞と混合した（Ｆ、挿入図）、中程度の血管周囲への細胞浸潤（Ｅ）があった。元の拡大率、１００倍、挿入図、１０００倍。
【０８３８】
抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂでの処置は、ＧｖＨＤ−ＳＳｃ皮膚病変の発達を有意に抑制した。Ｂａｌｂ／ｃ、またはアイソタイプ対照ＭＡｂ群および抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ処置群から４週目に脾細胞を移植したＲＡＧ２−／−マウスのいずれかからの背部皮膚の組織学を、図１９に示す。アイソタイプ群ＭＡｂの２／１０動物に相当する皮膚のヘマトキシリンおよびエオシン染色（図１９Ａ、Ｃ、およびＥ）は、リンパ球の浸潤、好中球の分散、および増大したコラーゲンマトリックス内のマクロファージを伴う、著しい深部皮膚炎症を証明している。散在的に、表皮が、個々の基底細胞および毛嚢の内毛根鞘内のアポトーシスおよび壊死で肥厚している。マッソン３色染色法（図１９Ｂ、Ｄ、およびＦ）は、アイソタイプ群の真皮内の未熟なコラーゲンの増加を証明している。抗ＩＣＯＳ  ＭＡｂ処置動物には、皮膚炎症が最小限であるか、または全くなかった。元の拡大率、２００倍。
【０８３９】
ＩＣＯＳ  ＭＡｂ処置は、ＴヘルパーおよびＴＦＨに関連する遺伝子ならびに皮膚における自己免疫性遺伝子のフィンガープリントの発現に影響を与えた。全ＲＮＡを皮膚生検およびｃＤＮＡのプレ増幅から抽出し、ＴａｑＭａｎ  ＰｒｅＡｍｐ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ  Ｋｉｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用してリアルタイムＰＣＲを調製した。Ｂａｌｂ／ｃ対照マウスから、および抗ＩＣＯＳまたはアイソタイプ対照ＭＡｂで処置したＲａｇ２ノックアウトマウスから収集した皮膚ＲＮＡ試料を、ＢｉｏＭａｒｋ  ４８．４８  Ｄｙｎａｍｉｃ  ＡｒｒａｙチップのＴａｑＭａｎ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ａｓｓａｙｓ（Ｆｌｕｉｄｉｇｍ  Ｃｏｒｐ）を使用して、三重に実行した。デルタ−デルタＣｔ（ΔΔＣｔ）を、３つの参照遺伝子（ＧＡＰＤＨ、１８Ｓ、ＡＣＴＢ）の平均および較正用試料を使用して計算し、２−ΔΔＣｔの式によって、発現変化倍数に変換した。結果を図２０に示す。
【０８４０】
６．５．１３６抗ＩＣＯＳ抗体の可逆的な自己会合
１３６抗ＩＣＯＳ抗体に実施した超遠心分析法による分析は、典型的なＩｇＧについて認められたものよりも広い主ピークを示した。ＰＢＳ中２５℃での０．１ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、および２．０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度で、サイズ分布分析は、タンパク質濃度の上昇と共に、自己会合を示す、ピークの拡大およびより高いＳ（沈降係数、スベドベリ）値への推移を示した。沈降平衡実験は、自己会合の化学量論が、２．５×１０８Ｍ−２の会合定数で、単量体−三量体平衡モデルに最良に適合することを示した。
【０８４１】
動的光散乱（ＤＬＳ）を使用して、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の自己会合を研究し、自己会合を防止するか、または最小限に抑える条件／賦形剤についてスクリーニングした。ＤＬＳ系は、先ず、流体中に懸濁した粒子の無作為運動である、ブラウン運動を測定することによって粒径を測定する。干渉性かつ単色の光線がコロイド分散体を通過すると、粒子は光を散乱させ、ブラウン運動のために散乱強度の時間依存性の変動をもたらす。強度変動の時間依存性の分析によって、粒径に依存する粒子の拡散係数を得ることができる。次いで、粒子の流体力学半径を、ストークス・アインシュタインの方程式によって、その拡散係数から計算する。
【０８４２】
６．５．１．方法
動的光散乱：タンパク質サイズ分布およびしたがって分子サイズは、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ  ＺＳ（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｍａｌｖｅｒｎ，ＰＡ）を使用して、動的光散乱（ＤＬＳ）によって監視した。この機器は、０．６ｎｍ〜６μｍの範囲でタンパク質サイズを測定することができる、非侵襲的後方散乱光学を組み込んでいる。ＤＬＳは、タンパク質分子のブラウン運動から、散乱光の強度の時間依存性変動を測定する。これらの強度変動の分析によって、粒子の拡散係数の決定が可能になり、ストークス・アインシュタインの関係を使用して、等価球の平均的見かけの流体力学直径に数学的に変換した。拡散係数は、時間相関関数から計算した。タンパク質の可逆的な自己会合を理解するために、光電流の時間依存性自己相関関数を１０秒ごとに得て、各実行で１５〜１８個を取得した。試料溶液を、６３３ｎｍのレーザーを使用して照射し、散乱光の強度を１７３度の角度で測定した。粘度、屈折率、および吸光度を補正後、ＤＬＳ測定値は、流体力学直径およびそのガウス分布の両方の正確な推定値を提供し、可能性のある自己会合挙動を監視するために使用した。
【０８４３】
単量体および三量体分画率（％）を計算するためのデータ分析：沈降平衡実験は、自己会合の化学量論が、単量体−三量体平衡モデルに最良に適合することを示した。様々な条件下でＤＬＳによって得られた流体力学的サイズを単量体−三量体平衡に当てはめて、会合定数を導出し、そこから自己会合した種のモル％を様々な条件下で計算した。ＤＬＳ測定値の見かけのサイズを、単量体（９．０ｎｍ）および三量体（３５．６ｎｍ）のものの加重平均としてとらえ、それらのそれぞれの分画の存在で乗じた（溶液濃度に依存して０〜１）。総濃度は既知であるため、単量体の濃度は、以下に等しい。
【数１】
0005933975.tif 000005
【０８４４】
すると、三量体の濃度は、以下になる。
【数２】
0005933975.tif 000006
【０８４５】
そして、会合定数（Ｍ−２）は、以下である。
【数３】
0005933975.tif 000007
【０８４６】
式中、ＰＴｏｔａｌは、Ｍでの１３６抗ＩＣＯＳ抗体濃度であり、ＲＨ−Ｏｂｓは、ｎｍでの認められた流体力学直径であり、ＲＨ−Ｍｏｎｏｍｅｒは、単量体の流体力学直径であり、ＲＨ−Ｔｒｉｍｅｒは、三量体の流体力学直径である。
【０８４７】
６．５．２．データおよび考察
タンパク質の可逆的な自己会合（ＲＳＡ）は、通常電荷および疎水性相互作用である、比較的弱い非共有結合性のタンパク質相互作用に起因し得る。この系は可逆的であるため、単量体とより高次の形態との間が平衡となり、この平衡は、溶液条件に依存して推移し得る。以下の項では、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の自己会合に対するタンパク質濃度、ｐＨ、イオン強度、および温度の変化の効果について記載する。
【０８４８】
６．５．２．１．１３６抗ＩＣＯＳ抗体におけるＲＳＡを研究するための効果的なツールとしてのＤＬＳの開発
ＤＬＳとＡＵＣとの間の相関
モノクローナル抗体（分子量約１５０ｋＤａ）は、典型的には、９〜１２ｎｍの流体力学直径および約３ｎｍのガウス分布を有する。より大きな流体力学直径およびより広いガウス分布は、それぞれ自己会合を示し得る。したがって、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の自己会合挙動を測定するために、流体力学直径を様々な溶液条件下で監視した。ＤＬＳを使用して、１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＲＳＡに対する様々な溶液条件の効果を研究する前に、ＤＬＳと、ＡＵＣのような（ＲＳＡを研究するための）十分に確立された直交法との間に相関を確立した。
【０８４９】
６．５．２．２．様々な条件下での１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学的サイズ
濃度の効果
１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＡＵＣ分析は、タンパク質濃度の上昇と共に、ピークの拡大およびより高いＳ（沈降係数、スベドベリ）値への推移を示していた。これらの知見を確認し、また同様の自己会合がＤＬＳによっても引き出され得るかを確認するために、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学直径を、様々なタンパク質濃度で測定した。ＡＵＣと同様（加重平均沈降係数の増加）、有意な自己会合が存在する場合、より高いタンパク質濃度での流体力学直径の増加が予期される。図２１は、広範な濃度にわたる１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学直径を示す。広範な研究において、流体力学直径の濃度依存的な増加が認められた。これは、１３６抗ＩＣＯＳ抗体が高いタンパク質濃度でＲＳＡを起こしていることを強く示している。一方、同様のサイズの対照非干渉モノクローナル抗体は、同一濃度で流体力学直径に変化を示さなかった。
【０８５０】
ｐＨおよびイオン強度の効果
１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＲＳＡは、イオン強度の上昇（ＮａＣｌ濃度の上昇）およびｐＨの上昇に感受性があり、電荷相互作用の重要性を示唆している。図２２は、ＮａＣｌ濃度を上昇させた、固定濃度（１０ｍｇ／ｍＬ）での１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学的サイズを示す。
【０８５１】
様々なｐＨでの１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＤＬＳ測定によって、自己会合の程度もｐＨと共に増加することが明らかになった（図２３）。ｐＨおよびイオン強度の双方の有意な影響は、１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＲＳＡにおける電荷相互作用の重要性を示唆している。
【０８５２】
温度の効果
１３６抗ＩＣＯＳ抗体のＲＳＡに対する温度の効果を理解するために、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学的サイズを様々な温度下で測定した。図２４は、ｐＨ６およびｐＨ７．２での、様々な温度での１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学的サイズを、対照抗体（ｍＡｂＢ）と共に示す。
【０８５３】
温度によって誘発される解離の動態
１３６抗ＩＣＯＳ抗体の希釈または温度によって誘発される解離の動態を、２つの方法：静的光散乱による急速希釈、およびＤＬＳによる温度推移を用いて測定した。単一角度光散乱検出を用いた急速希釈実験は、解離速度が迅速で、０．１秒の検出限界より１．５倍低いことを示した。ＤＬＳによって測定される、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の自己会合（１０ｍｇ／ｍＬ、ＰＢＳ中）の温度によって誘発される解離の動態を、示す。２５℃〜３７℃への温度の増加によって、流体力学直径における有意な減少が、最初の測定可能な時点である１分内に認められた。流体力学直径における同様の減少が、４℃〜３７℃へ温度を増加すると、最初の測定可能な時点である３分以内に認められた。これらの結果は、温度によって誘発された解離が迅速であることを示した。
【０８５４】
６．５．２．３．様々な溶液条件下での１３６抗ＩＣＯＳ抗体の自己会合のレベル
動的光散乱研究は、より高い濃度、より低い温度、より高いｐＨ、および上昇した塩濃度で、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学的サイズにおける増加（自己会合を示す）を示した。また、超遠心分析データによって、単量体−三量体の平衡が示唆された。したがって、様々な条件下で得られた１３６抗ＩＣＯＳ抗体の流体力学的サイズを単量体−三量体の平衡に当てはめ、会合定数を導出し、そこから自己会合した種のモル％を様々な条件下で計算した。タンパク質濃度の関数として、ＤＬＳによって導出された会合の結合親和性から、自己会合した１３６抗ＩＣＯＳ抗体のモル％を決定するためのモデリングを使用した。
【表２】
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【０８５５】
結論として、超遠心分析法による分析で認められた１３６抗ＩＣＯＳ抗体の可逆的な自己会合は、タンパク質の濃度および温度に依存した。動態研究は、希釈時および上昇した温度で迅速な解離が生じたことを示した。可逆的な自己会合は、凝集体の形成を誘発しなかった。急速希釈実験およびモデリング計算に基づいて、最も高い臨床的用量（３ｍｇ）を皮下注射すると、急速希釈および３７℃（体温）への温度平衡によって、１３６抗ＩＣＯＳ抗体の主として単量体型がもたらされる。
【０８５６】
本開示の特定の実施形態を説明の目的で上述したが、当業者には、添付の特許請求の範囲に記載される本開示から逸脱することなく、詳細の多くの変形形態を作製可能であることが理解されよう。
【０８５７】
本明細書で言及されるすべての刊行物、特許、および特許出願は、ここで、それぞれ個々の刊行物、特許、および特許出願が、具体的かつ個々に、参照によって本明細書に組み込まれると示されているのと同程度において、参照によって本明細書に組み込まれる。さらに、２００８年５月７日に出願された米国特許出願第１２／１１６，５１２号、２００８年１１月１２日に出願された米国特許仮出願第６１／１１３，７９６号、および２００９年１０月７日に出願された米国特許出願第６１／２４９，３６５号は、あらゆる目的で、参照によってそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１６】
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【図１７−１】
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【図１７−２】
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【図１７−３】
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【図１７−４】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０−１】
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【図２０−２】
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【図２０−３】
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【図２０−４】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【配列表】
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