(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）で表わされる化合物を有効成分として含有することを特徴とする美白剤（前記式（Ｉ）で表わされる化合物が有色素米の糠の抽出物に含まれる場合を除く）。
【化１】
0005946698.tif 000007
【請求項２】
有色素米の糠を、ｐＨ４．５〜１．５の酸性水１０容量部と炭素数２〜５の多価アルコール１０〜９０容量部との混合溶媒で抽出して得られる抽出物を有効成分として含有することを特徴とする美白剤。
【請求項３】
下記式（Ｉ）で表わされる化合物を配合したことを特徴とする皮膚化粧料（前記式（Ｉ）で表わされる化合物が有色素米の糠の抽出物に含まれる場合を除く）。
【化２】
0005946698.tif 000008
【請求項４】
有色素米の糠を、ｐＨ４．５〜１．５の酸性水１０容量部と炭素数２〜５の多価アルコール１０〜９０容量部との混合溶媒で抽出して得られる抽出物を配合したことを特徴とする美白用皮膚化粧料。
【請求項５】
美白用途に用いられることを特徴とする請求項３に記載の皮膚化粧料（前記式（Ｉ）で表わされる化合物が有色素米の糠の抽出物に含まれる場合を除く）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、美白剤及び皮膚化粧料に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚においてメラニンは、紫外線から生体を保護する役目も果たしているが、過剰生成や不均一な蓄積は、皮膚の黒化やシミの原因となる。一般にメラニンは、色素細胞の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、ついで５，６−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成されるものとされている。したがって、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）、シミ、ソバカス等を予防、治療又は改善するためには、メラニンの生成を抑制することが考えられる。
【０００３】
従来、皮膚色素沈着症、シミ、ソバカス等の予防、治療又は改善には、ハイドロキノン等の化学合成品を有効成分とする美白剤を外用する処置が行われてきた。しかしながら、ハイドロキノン等の化学合成品は、皮膚刺激、アレルギー等の副作用のおそれがある。そこで、安全性の高い天然原料を有効成分とする美白剤の開発が望まれており、メラニン生成抑制作用を有するものとしては、例えば、トウゴマ根部からの抽出物（特許文献１参照）、サウスウレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物（特許文献２参照）等が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−２１３７５７号公報
【特許文献２】特開２００２−２０１１２２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、安全性の高い天然物の中から美白作用を有するものを見出し、それを有効成分とする美白剤、及び美白作用を有する天然物を配合した皮膚化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記課題を解決するために、本発明の美白剤は、下記式（Ｉ）で表わされる化合物、及び／又は、有色素米の糠を酸性溶媒で抽出して得られる抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【０００７】
【化１】
0005946698.tif 000002
【０００８】
また、本発明の皮膚化粧料は、上記式（Ｉ）で表わされる化合物、及び／又は、有色素米の糠を酸性溶媒で抽出して得られる抽出物を配合したことを特徴とする。本発明の皮膚化粧料は、美白用途に用いられることが好ましい。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、優れた美白作用を有し、かつ安全性の高い美白剤及び皮膚化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
〔美白剤〕
本実施形態の美白剤は、下記式（Ｉ）で表わされる化合物、及び／又は、有色素米の糠を酸性溶媒で抽出して得られる抽出物を有効成分として含有するものである。
【００１１】
【化２】
0005946698.tif 000003
【００１２】
本実施形態においては、上記式（Ｉ）で表わされる化合物を「フラボノイドＡ」と称する。また、有色素米の糠を酸性溶媒で抽出して得られる抽出物を、単に「有色素米糠酸性抽出物」と称することがある。
【００１３】
本実施形態における「有色素米の糠を酸性溶媒で抽出して得られる抽出物」には、抽出原料として有色素米の糠を用い、酸性溶媒で抽出して得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１４】
ここで、「有色素米」とは、イネ科に属するイネ（Oryza sativa）のうち、糠層（搗精する際に糠となって剥落する部分）に色素（例えば、タンニン系の赤色の色素、アントシアニン系の紫色の色素）を有するものであり、糠層に色素を有するものであれば、ジャポニカ種（Oryza sativa subsp. Japonica）、インディカ種（Oryza sativa subsp. Indica）などの亜種の別は特に限定されない。また、「有色素米の糠」とは、有色素米を搗精する際に生ずる、果皮・種皮・外胚乳等の粉状の混合物を意味する。
【００１５】
有色素米の糠層には、上述のように、タンニン系の赤色の色素、アントシアニン系の紫色の色素等が含まれているので、糠層を有する状態の有色素米（例えば玄米）は、淡赤色〜紫黒色を呈し、褐色を呈する一般的な白米の玄米とは外観によって容易に識別が可能である。また、有色素米を搗精する際に生じる糠も、一般的な白米の糠とは外観によって容易に識別が可能である。
【００１６】
有色素米には、赤米、紅米、紫米、黒米等の種類があり、それぞれ様々な品種や産地が存在する。本実施形態の美白剤においては、いずれの種類、品種、産地等の有色素米またはその糠を抽出原料として使用してもよいが、中でも赤米の糠を用いることが好ましい。
【００１７】
本実施形態において使用し得る赤米の栽培品種としては、特に限定されるものではないが、紅染めもち、西海糯１９７号、ひみこもち、は系赤１２４、ベニロマン、夕やけもち、総社赤米、対馬赤米、種子島赤米、冷水、赤室、トウコン、つくし赤もち、紅更紗、紅香、紅衣、西海観２４６号等を好適に用いることができる。
【００１８】
また、本実施形態において用いられる「酸性溶媒」とは、水をｐＨ６．５以下、好ましくは４．５〜１．５に調整した酸性水、又は当該酸性水と親水性有機溶媒との混合溶媒を意味する。
【００１９】
ここで、上記酸性水の調製に使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、後述するｐＨ調整のほか、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、有機酸緩衝液、有機酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２０】
本実施形態においては、上記水のｐＨを調整した酸性水を用いる。酸性水としては、塩酸、硫酸、燐酸などの無機酸；酢酸、乳酸、リンゴ酸、クエン酸などの有機酸などの酸を水に添加してｐＨを調整したものを用いてもよく、また上記水の電気分解により生じる陽極水を用いても良い。
【００２１】
酸性水との混合に使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられ、これらを混合して用いても良い。
【００２２】
酸性水と親水性有機溶媒との混合溶媒を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、酸性水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、酸性水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、酸性水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、酸性水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、酸性水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、酸性水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２３】
以上述べた有色素米の糠の酸性溶媒による抽出方法は特に限定されず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料である有色素米糠を乾燥した後、酸性溶媒による抽出に供する。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、有色素米の糠の酸性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００２４】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させる。抽出温度は、室温又は溶媒の沸点以下の温度であることが好ましい。このようにして得られた可溶性成分を濾過して抽出残渣を除去することにより、抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００２５】
以上のようにして得られる有色素米糠酸性抽出物は、優れた美白作用を有しているため、美白剤の有効成分として用いることができる。
【００２６】
一方、本実施形態に係るフラボノイドＡも、優れた美白作用を有しているため、美白剤の有効成分として用いることができる。フラボノイドＡは、例えば、赤米等の有色素米の糠から単離することができるが、糠層（果皮・種皮・外胚乳等）が含まれていればよく、搗精する前の有色素米の玄米を用いても良い。また、有機色素米フラボノイドは、有色素米の他の構成部位や、有色素米以外のイネ、さらにはその他の植物にも存在する可能性がある。したがって、フラボノイドＡの単離源は、有色素米の糠に限定されるものではなく、フラボノイドＡを含有するいずれの植物を用いてもよい。
【００２７】
フラボノイドＡは、例えば、フラボノイドＡを含有する植物の抽出物に、液−液分配抽出、各種クロマトグラフィー、膜分離、再結晶などのフラボノイド化合物を単離するのに有効な精製処理を施した後、固定相としてオクタデシルシリル化シリカゲル（ＯＤＳ）等を用いた液体クロマトグラフィー処理を行うことにより得ることができる。
【００２８】
フラボノイドＡを含有する植物としては、有色素米を例示することができ、中でも赤米が好ましい。有色素米からフラボノイドＡを単離する場合、抽出原料となる有色素米には糠層が含まれることが好ましい。これらの植物から抽出物を得るための抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。ここで、抽出溶媒として水又は水と親水性有機溶媒との混合液を使用する場合、当該水の液性は特に限定されないが、中性又は酸性であることが好ましい。すなわち、上記有色素米糠酸性抽出物は、フラボノイドＡを単離するための抽出物として好適なもののひとつである。
【００２９】
抽出溶媒として水を使用する場合、使用し得る水としては、上述した酸性水の調製に使用する水と同様のものを例示することができ、また親水性有機溶媒としても、上述した酸性水との混合溶媒に使用し得る親水性有機溶媒と同様のものを例示することができる。水と親水性有機溶媒との混合溶媒を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は、上述した酸性水と親水性有機溶媒との混合比と同様に、適宜調整すればよい。
【００３０】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、上述した有色素米糠酸性抽出物と同様に、フラボノイドＡが含まれる植物を乾燥し、必要に応じて脱脂等の前処理を行い、抽出原料を得る。得られた抽出原料を５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。かかる抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００３１】
このようにして得られた抽出物からフラボノイドＡを精製する方法としては、液−液分配抽出、各種クロマトグラフィー、膜分離、再結晶などを例示することができる。中でも、合成吸着剤を充填したカラムを用いた吸着クロマトグラフィーと、多孔性担体を充填したカラムを用いたゲル濾過クロマトグラフィーとを併用することが好ましい。
【００３２】
最後に、上記精製処理により得られた精製物又は精製画分から、液体クロマトグラフィーにより、フラボノイドＡを単離する。液体クロマトグラフィーによる分画方法は特に制限されないが、例えば、固定相としてオクタデシルシリル化シリカゲル（ＯＤＳ）等を用いた逆相クロマトグラフィー、固定相にシリカゲル等を用いた順相クロマトグラフィー、固定相に多孔質ポリマー等を用いたサイズ排除クロマトグラフィー等を単独で又は組み合わせて用いることができる。
【００３３】
本実施形態に係る美白剤は、上記有色素米糠酸性抽出物及び／又はフラボノイドＡを有効成分として含有する。本実施形態の美白剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品等の幅広い用途に使用することができる。ここで、フラボノイドＡは、有色素米糠酸性抽出物と比較してより強い美白作用を示すため、美白剤の有効成分として特に好ましい。
【００３４】
なお、本実施形態においては、フラボノイドＡ又は有色素米糠酸性抽出物のうちのいずれか一つを上記有効成分として用いてもよいし、これらを混合して上記有効成分として用いてもよい。フラボノイドＡ又は有色素米糠酸性抽出物を混合して上記有効成分として用いる場合、その配合比は、フラボノイドＡ又は有色素米糠酸性抽出物が有する美白作用の程度等により適宜調整すればよい。
【００３５】
本実施形態の美白剤は、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物のみからなるものでもよいし、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物を製剤化したものでもよい。
【００３６】
本実施形態の美白剤は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等を用いることができる。美白剤は、他の組成物（例えば、皮膚外用剤、美容用飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００３７】
本実施形態の美白剤を製剤化した場合、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物の含有量は、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定することができる。
【００３８】
なお、本実施形態の美白剤は、必要に応じて、美白作用を有する他の天然抽出物等を、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００３９】
本実施形態の美白剤の患者に対する投与方法としては、経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本実施形態の美白剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００４０】
本実施形態の美白剤は、フラボノイドＡ又は有色素米糠酸性抽出物が有するメラニン生成抑制作用を通じて、色素細胞におけるメラニンの生成を抑制し、シミ、ソバカス、皮膚色素沈着症等を予防又は改善することができ、美白効果を得ることができる。ただし、本実施形態の美白剤は、これらの用途以外にもメラニン生成抑制作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００４１】
また、本実施形態の美白剤は、優れた美白作用を有するため、例えば、皮膚外用剤に配合するのに好適である。この場合に、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物をそのまま配合してもよいし、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物から製剤化した美白剤を配合してもよい。
【００４２】
ここで、皮膚外用剤としては、その区分に制限はなく、後述する皮膚化粧料のほか、経皮的に使用される医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００４３】
また、本実施形態の美白剤は、優れた美白作用を有するので、例えば色素細胞におけるメラニン生成機構に関連する研究のための試薬としても好適に利用することができる。
【００４４】
〔皮膚化粧料〕
フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物及びこれらの混合物は、優れた美白作用を有しているため、皮膚化粧料に配合するのに好適である。この場合、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物をそのまま配合してもよいし、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物から製剤化した美白剤を配合してもよい。フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物若しくはこれらの混合物又は上記美白剤を皮膚化粧料に配合することによって、皮膚化粧料に美白作用を付与することができる。
【００４５】
フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物若しくはこれらの混合物又は上記美白剤を配合し得る皮膚化粧料としては、特に限定されるものではなく、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ファンデーション、リップクリーム、入浴剤、ヘアートニック、ヘアーローション、石鹸、ボディシャンプー等が挙げられる。
【００４６】
フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物又はこれらの混合物を皮膚化粧料に配合する場合、その配合量は、皮膚化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、好適な配合率は約０．０００１〜１０質量％であり、特に好適な配合率は約０．００１〜１質量％である。
【００４７】
本実施形態の皮膚化粧料は、フラボノイドＡ、有色素米糠酸性抽出物及びこれらの混合物が有する美白作用を妨げない限り、通常の皮膚化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された他の有効成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた効果をもたらすことがある。
【００４８】
本実施形態の皮膚化粧料は、フラボノイドＡ又は有色素米糠酸性抽出物が有するメラニン生成抑制作用を通じて、色素細胞におけるメラニンの生成を抑制し、シミ、ソバカス、皮膚色素沈着症等を予防又は改善することができ、美白効果を得ることができる。
【００４９】
なお、本実施形態の美白剤及び皮膚化粧料は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば，マウス，ラット，ハムスター，イヌ，ネコ，ウシ，ブタ，サル等）に対して適用することもできる。
【実施例】
【００５０】
以下、製造例及び試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００５１】
〔実施例１〕赤米脱脂糠酸性エキスの調製
赤米（紅染めもち，平成２２年度，愛媛県産，あぐり社製）１２ｋｇを精米機（ＢＲ−ＥＡ３５，ＺＯＪＩＲＵＳＨＩ社製）で精米後に得られた赤米糠１．２ｋｇを、ｎ−ヘキサン（ナカライテスク社製）４Ｌに０．５時間浸漬した後、二重ガーゼで濾過し、ヘキサン可溶性画分を除去した。ｎ−ヘキサンによる脱脂を計５回行い、最後の１回は１５分間の超音波処理を行った。ヘキサン可溶性画分を除いた残渣をドラフト内で風乾してｎ−ヘキサンを除去し、赤米脱脂糠８８５ｇを得た。
【００５２】
ＢＧ（１，３−ブチレングリコール，ハイシュガーケインＢＧ，高級アルコール工業社製）とｐＨ３．１の酸性水（パナソニック社製アルカリイオン整水器にて製造）とを等量混合し、５０％（v/v）酸性ＢＧを調製した。上記の赤米脱脂糠２０ｇに５０％（v/v）酸性ＢＧ  ２００ｍＬを混合し、一昼夜浸漬した。メッシュ濾過後、遠心分離（１５０００ｒｐｍ，１０分，４℃）にて上清を回収し、赤米脱脂糠酸性エキスを得た（１２４ｇ）。
【００５３】
〔実施例２〕赤米脱脂糠からのフラボノイドの調製
実施例１の調製過程で得られた赤米脱脂糠４４７ｇを用い、５０％（v/v）エタノール３Ｌに０．５時間浸漬した後、二重ガーゼで濾過し、抽出液を得た。濾過した残渣についてさらに５０％（v/v）エタノールにより同様に抽出し、計３回の抽出操作により得られた抽出液をセライト（Ｎｏ．５４５，和光純薬工業社製）にて濾過し、濾液をロータリーエバポレーター（Ｒ−２００，柴田科学社製）で濃縮した。
【００５４】
濃縮した赤米脱脂糠５０％（v/v）エタノール抽出液を、分離精製用樹脂カラム（ダイヤイオンＨＰ２０，１．５Ｌ，三菱化学社製）に供し、蒸留水、１０％（v/v）メタノール、２０％（v/v）メタノール、３０％（v/v）メタノール、５０％（v/v）メタノール、及びメタノール各４．５Ｌで順次溶出し、各画分を濃縮した後、フリーズドライヤ（ＤＣ−４１Ｂ，ヤマト科学社製）にて凍結乾燥した。
【００５５】
１０％（v/v）メタノール画分（１．３７ｇ）を少量（４〜５ｍＬ）の蒸留水に溶解し、ゲル濾過用樹脂カラム（ＴＯＹＯＰＥＲＬ  ＨＷ−４０Ｃ，東ソー社製）に供し、同様に蒸留水、１０％（v/v）メタノール、２０％（v/v）メタノール、３０％（v/v）メタノール、５０％（v/v）メタノール、及びメタノールで順次溶出し、フラクションコレクター（ＤＣ−１０００，ＥＹＥＬＡ社製）で集めた。ＨＰＬＣ装置（Ｌａ  Ｃｈｒｏｍ  Ｅｌｉｔｅ，日立ハイテク社製）を用い、下記に示す条件にて、ピークを確認しながら注入サンプル（フラクション）を順次切り替え、高速液体クロマトグラフィーにより分画した。同様なピーク形毎に溶出液を集め、濃縮し、凍結乾燥した。
【００５６】
＜高速液体クロマトグラフィー条件＞
固定相：ＩｎｅｒｔＳｕｓｔａｉｎＣ１８（ジーエルサイエンス社製）
カラム径：４．６ｍｍ
カラム長：１５０ｍｍ
カラムオーブン：４０℃
移動相：１０ｍＭ リン酸緩衝液：アセトニトリル＝９２：８
流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
検出：２８０ｎｍ
【００５７】
同様なピーク形であったｆｒ．８１−１００（０．０１８５ｇ）画分及びｆｒ．１０１−１２０（０．０１２４ｇ）画分を合わせ、シリカ系充填剤カラム（ＹＭＣ−ｇｅｌ  ＯＤＳ−ＡＱ１２Ｓ５０，ф１．８ｃｍ×１８ｃｍ，ワイエムシィ社製）に供し、同様に蒸留水、１０％（v/v）メタノール、２０％（v/v）メタノール、３０％（v/v）メタノール、５０％（v/v）メタノール、及びメタノールで溶出し、フラクションコレクターで集めた。上記と同様のＨＰＬＣ条件にて、ピークを確認しながら注入サンプル（フラクション）を切り替えて分画し、精製物（０．００３１ｇ）を単離した。
【００５８】
上述のようにして得られた精製物について、マススペクトル解析（ｍｉｃｒＯＴＯＦ−Ｑ，ＢＲＵＫＥＲ社製）及びＮＭＲ（核磁気共鳴分光法）スペクトル解析（ＡＶＡＮＣＥ５００，ＢＲＵＫＥＲ社製）を行った。結果を下記に示す。
【００５９】
＜マススペクトル（ＥＳＩ−ＭＳ）＞
［Ｍ−Ｈ］−  m/z 315.0489（理論値：Ｃ１６Ｈ１２Ｏ７−Ｈ＝315.0510）
【００６０】
＜１Ｈ−ＮＭＲケミカルシフトδ＞
7.06 (1H, s), 6.64 (1H, s), 5.87 (1H, d, J=2.0 Hz), 5.69 (1H, d, J=2.0 Hz), 5.02 (1H, dd, J=2.0, 2.5 Hz), 4.25 (1H, dd, J=2.0, 2.5 Hz), 3.87 (2H, m)
【００６１】
以上の結果から、赤米糠抽出物から単離された化合物が、分子式Ｃ１６Ｈ１２Ｏ７であり、下記式（Ｉ）で表わされるフラボノイドであることが確認された。
【００６２】
【化３】
0005946698.tif 000004
【００６３】
〔比較例１〕普通米脱脂糠酸性エキスの調製
抽出原料として赤米に代えて普通米（キヌヒカリ，平成２２年度，愛媛県産，のうみん社製）を用いた他は実施例１と同様に調製し、普通米脱脂糠酸性エキスを得た（１３２．６ｇ）。
【００６４】
〔比較例２〕赤米脱脂糠中性エキスの調製
抽出溶媒として、５０％（v/v）酸性ＢＧに代えて、ＢＧ（１，３−ブチレングリコール，ハイシュガーケインＢＧ，高級アルコール工業社製）とｐＨ７．３の中性水（ミリポア社製超純水製造装置にて製造）とを等量混合して調製した５０％（v/v）中性ＢＧを用いた他は実施例１と同様に調製し、赤米脱脂糠中性エキスを得た（１４４．６ｇ）。
【００６５】
〔試験例１〕メラニン生成抑制作用試験−１
上述のようにして得られた赤米脱脂糠酸性エキス（実施例１）、普通米脱脂糠酸性エキス（比較例１）及び赤米脱脂糠中性エキス（比較例２）について、以下のようにしてメラニン生成抑制作用を試験した。
【００６６】
Ｂ１６メラノーマ４Ａ５細胞を、１０％ＦＢＳ（Fetal Bovine Serum，ギブコ社製）を含むＤＭＥＭ（Dulbecco’s modified minimum essential medium，ギブコ社製）培地を用いて３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で培養し、０．２５％トリプシン（シグマ社製）処理により細胞を集めた。回収した細胞を３×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度になるよう１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地で希釈した後、Ｔ２５フラスコ（住友ベークライト社製）に５ｍＬずつ播種した。３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で２時間培養後、被験試料（実施例１、比較例１及び２、試料濃度は下記表１を参照）を培地に添加し、４日間培養した。培養終了後、０．２５％トリプシン処理により細胞を１０ｍＬ滅菌スピッツに集め、遠心分離（１５００ｒｐｍ，１０分）によりペレットを作製し、下記に示すペレット判定基準に従い、メラニン生成抑制作用を判定した。結果を表１に示す。
【００６７】
＝ペレット判定基準＝
―：未処理コントロールと同様
±：わずかな淡色化（還元）作用
＋：顕著な淡色化（還元）作用
【００６８】
【表１】
0005946698.tif 000005
【００６９】
表１に示すように、赤米脱脂糠酸性エキス（実施例１）は、普通米脱脂糠酸性エキス（比較例１）のみならず、赤米脱脂糠中性エキス（比較例２）と比較しても、優れたメラニン生成抑制作用を有することが確認された。
【００７０】
〔試験例２〕メラニン生成抑制作用試験−２
上述のようにして得られたフラボノイドＡ（実施例２，試料濃度は下記表２を参照）について、試験例１と同様の方法により、メラニン生成抑制作用を試験した。なお、比較例としてコウジ酸（比較例３，ナカライテスク社製，試料濃度は下記表２を参照）を用いた。結果を表２に示す。
【００７１】
【表２】
0005946698.tif 000006
【００７２】
表２に示すように、フラボノイドＡ（実施例２）は、メラニン生成抑制作用を有することが知られているコウジ酸（比較例３）と比較して、同等以上の優れたメラニン生成抑制作用を有することが確認された。
【００７３】
〔配合例１〕
下記組成に従い、乳液を常法により製造した。
フラボノイドＡ（実施例２）                                ０．０１ｇ
ホホバオイル                                              ４．００ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ３．００ｇ
アルブチン                                                ３．００ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.）                ２．５０ｇ
オリーブオイル                                            ２．００ｇ
スクワラン                                                ２．００ｇ
セタノール                                                ２．００ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ２．００ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）          ２．００ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  ０．１５ｇ
グリチルリチン酸ステアリル                                ０．１０ｇ
黄杞エキス                                                ０．１０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１０ｇ
イチョウ葉エキス                                          ０．１０ｇ
コンキオリン                                              ０．１０ｇ
オウバクエキス                                            ０．１０ｇ
カミツレエキス                                            ０．１０ｇ
香料                                                      ０．０５ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００７４】
〔配合例２〕
下記組成のクリームを常法により製造した。
赤米脱脂糠酸性エキス（実施例１）                          ０．０５ｇ
クジンエキス                                              ０．１ｇ
オウゴンエキス                                            ０．１ｇ
流動パラフィン                                            ５．０ｇ
サラシミツロウ                                            ４．０ｇ
スクワラン                                              １０．０ｇ
セタノール                                                ３．０ｇ
ラノリン                                                  ２．０ｇ
ステアリン酸                                              １．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）          １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ３．０ｇ
油溶性甘草エキス                                          ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ６．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  １．５ｇ
香料                                                      ０．１ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００７５】
〔配合例３〕
下記組成の美容液を常法により製造した。
フラボノイドＡ（実施例２）                                ０．０１ｇ
カミツレエキス                                            ０．１ｇ
ニンジンエキス                                            ０．１ｇ
キサンタンガム                                            ０．３ｇ
ヒドロキシエチルセルロース                                ０．１ｇ
カルボキシビニルポリマー                                  ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ４．０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１ｇ
グリセリン                                                ２．０ｇ
水酸化カリウム                                            ０．２５ｇ
香料                                                      ０．０１ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                        ０．１５ｇ
エタノール                                                ２．０ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【産業上の利用可能性】
【００７６】
本発明の美白剤及び皮膚化粧料は、その優れたメラニン生成抑制作用により、シミ、ソバカス、皮膚色素沈着症等を予防又は改善に大きく貢献できる。