(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下式（１）の化合物、その鏡像異性体、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、プロドラッグまたは薬学上許容可能な塩（ここで、前記プロドラックは、式（１）の化合物におけるアミノ基がアシル化、アルキル化もしくはリン酸化された化合物、式（１）の化合物におけるヒドロキシル基がアシル化、アルキル化、リン酸化されるかもしくはボレートに転換された化合物、または、式（１）の化合物におけるカルボニル基がエステル化もしくはアミド化された化合物からなる群より選択されるものである）：
【化１】
0005986633.tif 000044
［式中、
Ｒは、ＣＯＯＲ６、ＣＯＮＲ７Ｒ８、テトラゾリル、ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、Ｃ１−６アルキル、ＳＯ２−Ｃ１−６アルキルおよびＨからなる群から選択され、Ｒ６は、ＨまたはＣ１−６アルキルからなる群から独立して選択され、Ｒ７およびＲ８は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキレン−Ｒ９、ＳＯ２−Ｃ１−６アルキル（式中、Ｒ９は、ＣＯＯＨ、ＯＨおよびＳＯ３Ｈからなる群から選択される）からなる群から互いに独立して選択され、
Ａは、フェニル、ピリジル、ピリミジル、ピラゾリル、インドリル、チエニル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾトリアゾリル、フラニル、ベンゾチアゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリルであって、それぞれ必要に応じてＯＨ、Ｏ−Ｃ１−６アルキル、Ｏ−ハロ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、ハロ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルおよびハロゲンからなる群から独立して選択される１または２個の基で置換されているものからなる群から選択され、
Ｑは、フェニル、ピリジル、チアゾリル、チオフェニル、ピリミジルであって、それぞれ必要に応じてＣ１−６アルキル、ハロ−Ｃ１−６アルキル、ハロゲンおよびＣＦ３からなる群から独立して選択される１または２個の基で置換されているものからなる群から選択され、
Ｙは、ＮまたはＣＨから選択され、
Ｚは、
【化２】
0005986633.tif 000045
（式中、
Ｘ＝ＣＨ、Ｎ、ＮＯ、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−３アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ４−５アルキルシクロアルキルからなる群から選択され、ここで、Ｃ１−３アルキルは、必要に応じてハロゲン、ヒドロキシまたはＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｒ２およびＲ３は、水素、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびハロゲンからなる群から独立して選択される）
から選択される］。
【請求項２】
Ｒ−Ａが、
【化３】
0005986633.tif 000046
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｑが、
【化４】
0005986633.tif 000047
である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｚが、
【化５】
0005986633.tif 000048
である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
下記から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物：
【化６】
0005986633.tif 000049
【化７】
0005986633.tif 000050
【化８】
0005986633.tif 000051
【化９】
0005986633.tif 000052
またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項６】
下記の構造を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物：
【化１０】
0005986633.tif 000053
またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項７】
下記の構造を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物：
【化１１】
0005986633.tif 000054
またはその薬学上許容可能な塩。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学上許容可能な塩を含んでなる、医薬組成物。
【請求項９】
少なくとも１種の賦形剤をさらに含んでなる、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ＦＸＲによって伝達される疾患の予防および／または治療に使用するための、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
疾患が、
慢性の肝臓内または肝臓外胆汁鬱滞性疾患の幾つかの形態、
肝線維症、
肝臓の閉塞性または慢性の炎症性疾患、
肝硬変、
脂肪肝および関連症候群、アルコールによって誘発される肝硬変またはウイルス性形態の肝炎に関連した胆汁鬱滞性または線維症性の症状、
主要肝切除(major liver resection)後の肝不全または肝虚血、
化学療法随伴脂肪性肝炎（ＣＡＳＨ）、
急性肝不全、および／または
炎症性腸疾患
から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
疾患が、
脂質およびリポタンパク質疾患、
糖尿病性腎症、糖尿病性ニューロパシー、糖尿病性網膜症、および臨床的に顕在的な長期糖尿病の他の観察された症状などのＩＩ型糖尿病およびＩ型およびＩＩ型糖尿病の臨床合併症、
非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のような、強制的脂質および具体的にはトリグリセリド蓄積およびその後の線維症促進経路の活性化による臓器の慢性的脂肪性および線維性変性に起因する疾患および状態、および
肥満または代謝症候群（脂質代謝異常、糖尿病または異常に高い肥満度指数の複合疾患）、および／または
慢性の閉塞性アテローム性動脈硬化症の終点として起こる急性心筋梗塞、急性発作または血栓症
から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
疾患が、
非悪性の過剰増殖性障害および悪性の過剰増殖性障害、具体的には、肝細胞癌、結腸腺腫およびポリープ症、結腸腺腫、乳癌、膵臓腺腫、バレット食道または胃腸管および肝臓の他の形態の腫瘍性疾患
から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ＦＸＲによって伝達される疾患の予防および／または治療用の薬剤の調製のための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１５】
疾患が、
慢性の肝臓内または肝臓外胆汁鬱滞性疾患の幾つかの形態、
肝線維症、
閉塞性または慢性の肝炎症性疾患、
肝硬変、
アルコールによって誘発される肝硬変またはウイルス性形態の肝炎に関連の脂肪肝および関連症候群、胆汁鬱滞性または線維症性症状、
主要肝切除後の肝不全または肝虚血、
化学療法随伴脂肪性肝炎（ＣＡＳＨ）、
急性肝不全、および／または
炎症性腸疾患
から選択される、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
疾患が、
脂質およびリポタンパク質疾患、
糖尿病性腎症、糖尿病性ニューロパシー、糖尿病性網膜症および臨床的に明らかな長期糖尿病の他の観察された症状などのＩＩ型糖尿病およびＩ型およびＩＩ型糖尿病の臨床合併症、
非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のような、強制的脂質および具体的にはトリグリセリド蓄積およびその後の線維症促進経路の活性化による臓器の慢性的脂肪性および線維性変性に起因する疾患および状態、
肥満または代謝症候群（脂質代謝異常、糖尿病または異常に高い肥満度指数の複合疾患）、および／または
慢性の閉塞性アテローム性動脈硬化症の終点として起こる急性心筋梗塞、急性発作または血栓症
から選択される、請求項１４に記載の使用。
【請求項１７】
疾患が、
非悪性の過剰増殖性障害疾患および悪性の過剰増殖性障害、具体的には、肝細胞癌、結腸腺腫およびポリープ症、結腸腺腫、乳癌、膵臓腺腫、バレット食道または胃腸管および肝臓の他の形態の腫瘍性疾患
から選択される、請求項１４に記載の使用。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＮＲ１Ｈ４レセプター（ＦＸＲ）に結合し、ＦＸＲの作動薬または調節因子として作用する化合物に関する。本発明は、更に前記化合物による前記核レセプターの結合を介する疾患および／または状態の治療および／または予防を目的とする化合物の使用にも関する。 
【背景技術】
【０００２】
多細胞生物は、細胞と体区画(body compartments)との間の高度な情報移動機構に依存している。伝達される情報は極めて複雑である可能性があり、細胞分化、増殖または再生に関わる遺伝子プログラムの変更を生じる可能性がある。シグナルやホルモンは、多くの場合にペプチド、脂肪酸またはコレステロール誘導体のような低分子量分子である。
【０００３】
これらのシグナルの多くは、特異遺伝子の転写を最後に変化させることによってそれらの効果を生じる。様々なシグナルに対する細胞応答を伝達するタンパク質の十分に研究された一群は、核レセプター（以後、「ＮＲ」と呼ぶことが多い）として知られる転写因子のファミリーである。この群のメンバーとしては、ステロイドホルモン、ビタミンＤ、エクジソン、シスおよびトランスレチノイン酸、甲状腺ホルモン、胆汁酸、コレステロール誘導体、脂肪酸（および他のペルオキシソーム増殖因子）のレセプター、並びにいわゆるオーファンレセプター、この群の他のメンバーに構造的に類似しているがそれに対するリガンドが知られていないタンパク質が挙げられる。オーファンレセプターは、細胞における未知のシグナル経路を指示することがあり、またはリガンド活性化なしで機能する核レセプターであることがある。これらのオーファンレセプターのあるものによる転写の活性化は、外来性リガンドの非存在下でおよび／または細胞表面に由来するシグナル形質導入経路を介して起こることがある (D. J. Mangelsdorf et al., Cell 1995, 83, 835; R. M. Evans, Mol. Endocrinol. 2005, 19, 1429)。
【０００４】
一般に、３個の機能性ドメインが、ＮＲに画定されている。アミノ末端ドメインは、幾らかの調節機能を有すると思われる。その後に、通常は２個のジンクフィンガー要素を含んでなり、応答性遺伝子のプロモーター内に特異的ホルモン応答性要素（以後、「ＨＲＥ」と呼ぶ）を認識するＤＮＡ結合ドメイン（以後、「ＤＢＤ」と呼ぶ）が続く。「ＤＢＤ」における特異的アミノ酸残基は、ＤＮＡ配列結合特異性を付与することが示されている(M. Schena and K. R. Yamamoto, Science 1988, 241, 965)。リガンド結合ドメイン（以後、「ＬＢＤ」と呼ぶ）は、既知のＮＲのカルボキシ末端領域にある。
【０００５】
ホルモンの非存在下では、ＬＢＤは、ＤＢＤとそのＨＲＥとの相互作用を妨げると思われる。ホルモン結合は、ＮＲにコンホメーション変化を生じると思われ、このようにしてこの妨害を除く(A. M. Brzozowski et al., Nature 1997, 389,753)。ＬＢＤのないＮＲは、構成的にではあるが低レベルで転写を活性化する。
【０００６】
コアクチベーターまたは転写アクチベーターは、配列特異的転写因子、基礎転写機構間に架橋し、更に標的細胞のクロマチン構造を支配することが提案されている。ＳＲＣ−１、ＡＣＴＲおよびＧｒｉｐ１のような幾つかのタンパク質は、リガンド増進的にＮＲと相互作用する(D. M. Heery et al., Nature 1997, 387, 733; T. Heinzel et al., Nature 1997, 387, 43; K. W. Nettles and G. L. Greene, Annu. Rev. Physiol. 2005, 67, 309)。
【０００７】
ステロイドホルモンのような核レセプター調節因子は、細胞内レセプターに結合して、核レセプター−リガンド複合体を形成することによって特定の細胞の成長および機能に影響を及ぼす。核レセプター−ホルモン複合体は、次いで特異的遺伝子の制御領域においてＨＲＥと相互作用し、特異的遺伝子発現を変更する(A. Aranda and A. Pascual, Physiol. Rev. 2001, 81, 1269)。
【０００８】
ファルネソイドＸレセプターα（Farnesoid X Receptor alpha）（以後、ヒトレセプターを指すときにはＮＲ１Ｈ４と呼ぶことも多い）は、レチノイドＸレセプターとヘテロ二量体方式で標的遺伝子のプロモーター領域へ結合するときに遺伝子を活性化するプロトタイプの２型核レセプターである(B. M. Forman et al., Cell 1995, 81, 687)。ＮＲ１Ｈ４に関連する生理学的リガンドは、胆汁酸である(D. J. Parks et al., Science 1999, 284, 1365; M. Makishima et al., Science 1999, 284, 1362)。最強のものは、ケノデオキシコール酸（ＣＤＣＡ）であり、胆汁酸ホメオスタシスに関与する幾つかの遺伝子の発現を調節する。共にファルネソイドと呼ばれるファルネソールおよび誘導体は、当初はラットオルソログを高濃度で活性化することが記載されているが、それらはヒトまたはマウスのレセプターを活性化しない。ＦＸＲは、肝臓、および食道、胃、十二指腸、小腸、結腸、卵巣、副腎および腎臓を含む全胃腸管中で発現する。細胞内遺伝子発現の制御以上に、ＦＸＲは、サイトカイン線維芽細胞成長因子１５（齧歯類）または１９（サル、ヒト）の発現をアップレギュレーションすることによってパラ分泌および内分泌シグナル表示にも関与していると思われる(J. A. Holt et al., Genes Dev. 2003, 17, 1581; T. Inagaki et al., Cell Metab. 2005, 2, 217)。
【０００９】
ＦＸＲ調節因子として作用する小分子化合物は、下記の公表文献ＷＯ  ２０００／０３７０７７号公報、ＷＯ  ２００３／０１５７７１号公報、ＷＯ  ２００４／０４８３４９号公報、ＷＯ  ２００７／０７６２６０号公報、ＷＯ  ２００７／０９２７５１号公報、ＷＯ  ２００７／１４０１７４号公報、ＷＯ  ２００７／１４０１８３号公報、ＷＯ  ２００８／０５１９４２号公報、ＷＯ  ２００８／１５７２７０号公報、ＷＯ  ２００９／００５９９８号公報、ＷＯ  ２００９／０１２１２５号公報、ＷＯ  ２００８／０２５５３９号公報、およびＷＯ  ２００８／０２５５４０号公報に開示されている。更なる小分子であるＦＸＲ調節因子が、最近概説されている(M. L. Crawley, Expert Opin Ther. Pat. 2010, 20,1047; D. Merk et al., Future Med. Chem. 2012, 4, 1015)。
【００１０】
ＷＯ  ２０１１／０２０６１５号公報において、本発明者らは、下記の一般式
【化１】
0005986633.tif 000002
（上記式中、可変基は、本出願明細書におけるのと同様に定義される）
のキラルシクロプロピリデン化合物を開示した。
【発明の概要】
【００１１】
本発明に内在する問題点は、一般的には向上した物理化学的特性、特にＷＯ  ２０１１／０２０６１５号公報に記載の化合物と比較して低下した疎水性、向上した水溶解度および一層良好な膜透過性を有するＦＸＲ−作動薬を生成することである。
【００１２】
前記の問題点は、下式（１）による化合物、その鏡像異性体、ジアステレオマー、互変異性体、溶媒和物、プロドラッグまたは薬学上許容可能な塩によって解決した：
【００１３】
【化２】
0005986633.tif 000003
［式中、
Ｒは、ＣＯＯＲ６、ＣＯＮＲ７Ｒ８、テトラゾリル、ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８、Ｃ１−６アルキル、ＳＯ２−Ｃ１−６アルキルおよびＨからなる群から選択され、Ｒ６は、ＨまたはＣ１−６アルキルからなる群から独立して選択され、Ｒ７およびＲ８は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、ハロ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキレン−Ｒ９、ＳＯ２−Ｃ１−６アルキル（式中、Ｒ９は、ＣＯＯＨ、ＯＨおよびＳＯ３Ｈからなる群から選択される）からなる群から互いに独立して選択され、
Ａは、フェニル、ピリジル、ピリミジル、ピラゾリル、インドリル、チエニル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾトリアゾリル、フラニル、ベンゾチアゾリル、チアゾリル、オキサジアゾリルであって、それぞれ必要に応じてＯＨ、Ｏ−Ｃ１−６アルキル、Ｏ−ハロ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、ハロ−Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルおよびハロゲンからなる群から独立して選択される１または２個の基で置換されているものからなる群から選択され、
Ｑは、フェニル、ピリジル、チアゾリル、チオフェニル、ピリミジルであって、それぞれ必要に応じてＣ１−６アルキル、ハロ−Ｃ１−６アルキル、ハロゲンおよびＣＦ３からなる群から独立して選択される１または２個の基で置換されているものからなる群から選択され、
Ｙは、ＮまたはＣＨから選択され、
【００１４】
Ｚは、
【化３】
0005986633.tif 000004
（式中、
Ｘ＝ＣＨ、Ｎ、ＮＯ、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−３アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ４−５アルキルシクロアルキルからなる群から選択され、ここで、Ｃ１−３アルキルは、必要に応じてハロゲン、ヒドロキシまたはＣ１−４アルコキシから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されており、
Ｒ２およびＲ３は、水素、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３ハロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３ハロアルコキシおよびハロゲンからなる群から独立して選択される）
から選択される］。
【００１５】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、式（１）による化合物におけるＲ−Ａは、
【化４】
0005986633.tif 000005
から選択される。
【００１６】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、式（１）による化合物におけるＱは、
【化５】
0005986633.tif 000006
である。
【００１７】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、式（１）による化合物におけるＺは、
【化６】
0005986633.tif 000007
である。
【００１８】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、式（１）による化合物は、下記のものから選択される：
【００１９】
【化７】
0005986633.tif 000008
【化８】
0005986633.tif 000009
【００２０】
【化９】
0005986633.tif 000010
【化１０】
0005986633.tif 000011
。
【００２１】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、式（１）による化合物は、
【化１１】
0005986633.tif 000012
（上記式中、Ｒは、ＣＯ２Ｈ、ＣＯＮＨＳＯ２Ｍｅおよびテトラゾリルからなる群から選択される）
である。
【００２２】
もう一つの態様では、本発明は、薬剤として使用するための式（１）による化合物に関するものである。
【００２３】
もう一つの態様では、本発明は、ＦＸＲによって伝達される疾患の予防および／または治療に使用するための式（１）による化合物に関するものである。
【００２４】
もう一つの態様では、本発明は、ＦＸＲによって伝達される疾患の予防および／または治療用の薬剤の調製のための式（１）による化合物の使用に関するものである。
【００２５】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、疾患は、慢性の肝臓内または肝臓外胆汁鬱滞性疾患の幾つかの形態、肝線維症、肝臓の閉塞性または慢性の炎症性疾患、肝硬変、脂肪肝および関連症候群、アルコールによって誘発される肝硬変またはウイルス性形態の肝炎に関連した胆汁鬱滞性または線維症性の症状、主要肝切除(major liver resection)後の肝不全または肝虚血、化学療法随伴脂肪性肝炎（ＣＡＳＨ）、急性肝不全、および／または炎症性腸疾患から選択される。
【００２６】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、疾患は、脂質およびリポタンパク質疾患、糖尿病性腎症、糖尿病性ニューロパシー、糖尿病性網膜症、および臨床的に顕在的な長期糖尿病の他の観察された症状などのＩＩ型糖尿病およびＩ型およびＩＩ型糖尿病の臨床合併症、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のような、強制的脂質および具体的にはトリグリセリド蓄積およびその後の線維症促進経路の活性化による臓器の慢性的脂肪性および線維性変性に起因する疾患および状態、および肥満または代謝症候群（脂質代謝異常、糖尿病または異常に高い肥満度指数の複合疾患）、および／または慢性の閉塞性アテローム性動脈硬化症の終点として起こる急性心筋梗塞、急性発作または血栓症から選択される。
【００２７】
上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの態様では、疾患は、非悪性の過剰増殖性障害および悪性の過剰増殖性障害、具体的には、肝細胞癌、結腸腺腫およびポリープ症、結腸腺腫、乳癌、膵臓腺腫、バレット食道または胃腸管および肝臓の他の形態の腫瘍性疾患から選択される。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
物理化学的特性の向上は、前の１，２−シクロプロピリデン環に代えて１，３−シクロブチリデンまたは１，３−アゼチジニリデン基上に極性ヒドロキシル基を導入することによって達成された。
【００２９】
【化１２】
0005986633.tif 000013
【００３０】
驚くべきことには、生成する化合物は、ＦＸＲレセプターに対するそれらの活性を保持したが、一層高い水溶解度および／または膜透過性のような向上した物理化学的特性を示した。
【００３１】
本発明の化合物は、請求項１における式（１）による共通の化学構造を共有している。
【００３２】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、本発明は、式（１）による化合物の鏡像異性体、ジアステレオマーまたは薬学上許容可能な塩に関するものである。
【００３３】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、式（１）におけるＲは、ＣＯＯＲ６，ＣＯＮＲ７Ｒ８、ＳＯ２ＮＲ７Ｒ８およびＳＯ２−Ｃ１−６アルキルからなる群から選択される。
【００３４】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、式（１）におけるＲ６は、Ｈである。
【００３５】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、式（１）におけるＲ７およびＲ８は、ＨおよびＳＯ２−Ｃ１−６アルキルからなる群から互いに独立して選択される。
【００３６】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、式（１）におけるＲ７は、Ｈである。
【００３７】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、式（１）におけるＲ８は、ＳＯ２−Ｃ１−６アルキルである。
【００３８】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ａは、フェニル、ピリジル、ピリミジル、ピラゾリル、インダゾリルおよびオキサジアゾリルからなる群から選択される。
【００３９】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ａは、Ｃ１−６アルキル、更に好ましくは、Ｃ１−３アルキルから独立して選択される１または２個の基で置換されている。上記または下記の態様のいずれかと組合せたもう一つの好ましい態様では、Ａは、未置換である。
【００４０】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ｑはフェニルである。
【００４１】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ｑはハロゲンから独立して選択される１または２個の基、更に好ましくはハロゲンから選択される１個の基、特にＣｌ、で置換されている。
【００４２】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ｚは、
【化１３】
0005986633.tif 000014
である。
【００４３】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ｘ＝ＣＨである。
【００４４】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ｒ１は、Ｃ３−６シクロアルキル、特にシクロプロピルである。
【００４５】
上記または下記の態様のいずれかと組合せた好ましい態様では、Ｒ２およびＲ３は、ハロゲン、特にＣｌから独立して選択される。
【００４６】
本発明の化合物は、プロドラッグ化合物の形態であることができる。「プロドラッグ化合物」とは、生体中において生理学的条件下で酵素、胃酸などと反応させることによって、例えば、酸化、還元、加水分解などそれらのそれぞれが酵素学的に行われるものによって、本発明による化合物に転換される誘導体を意味する。プロドラッグの例は、本発明の化合物におけるアミノ基がアシル化、アルキル化またはリン酸化され、例えば、エイコサノイルアミノ、アラニルアミノ、ピバロイルオキシメチルアミノを形成するか、またはヒドロキシル基がアシル化、アルキル化、リン酸化されるかまたはボレートに転換され、例えば、アセチルオキシ、パルミトイルオキシ、ピバロイルオキシ、スクシニルオキシ、フマリルオキシ、アラニルオキシとなるか、またはカルボニル基がエステル化またはアミド化される化合物である。これらの化合物は、周知の方法によって本発明の化合物から製造することができる。プロドラッグの他の例は、本発明の化合物におけるカルボキシレートが、例えば、アルキル−、アリール−、コリン−、アミノ、アシルオキシメチルエステル、リノレノイルエステルに転換される化合物である。
【００４７】
本発明の化合物の代謝物も、本発明の範囲内にある。
【００４８】
本発明の化合物またはそれらのプロドラッグの、例えば、ケト−エノール互変異性のような互変異性が起こることがある場合には、例えば、ケトおよびエノール型のような個々の形態、並びに任意の比率のそれらの混合物は、それぞれ本発明の範囲内にある。同じことは、例えば、鏡像異性体、シス／トランス異性体、コンフォーマーなどの立体異性体に当てはまる。
【００４９】
所望ならば、異性体を、当該技術分野で周知の方法によって、例えば、液体クロマトグラフィーによって分離することができる。同じことは、キラル固定相を用いることによって鏡像異性体にも当てはまる。更に、鏡像異性体は、それらをジアステレオマーに転換することによって、すなわち鏡像異性的に純粋な補助化合物とカップリングした後、生成するジアステレオマーを分離し、補助残基を開裂することによって単離することができる。あるいは、本発明の化合物の任意の鏡像異性体は、光学的に純粋な出発材料を用いる立体選択的合成によって得ることができる。ラセミ混合物から純粋な鏡像異性体を得るためのもう一つの方法は、キラル対イオンを用いるエナンチオ選択的結晶化を使用することであろう。
【００５０】
本発明の化合物は、薬学上許容可能な塩または溶媒和物の形態であることができる。「薬学上許容可能な塩」という用語は、無機塩基または酸および有機塩基または酸などの薬学上許容可能な毒性のない塩基または酸から調製される塩を指す。本発明の化合物が１個以上の酸性または塩基性基を含む場合には、本発明は、それらの対応する薬学上または毒物学上許容可能な塩、特にそれらの薬学上利用可能な塩も含んでなる。従って、酸性基を含む本発明の化合物は、これらの群上に存在することができ、本発明に従って、例えば、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩またはアンモニウム塩として用いることができる。このような塩の更に精確な例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、またはアンモニアまたは有機アミン、例えば、エチルアミン、エタノールアミン、トリエタノールアミンまたはアミノ酸との塩が挙げられる。１個以上の塩基性基、すなわち、プロトン化可能な基を含む本発明の化合物が、存在することができかつ無機または有機酸とのそれらの付加塩の形態で本発明に従って用いることができる。適当な酸の例としては、塩化水素、臭化水素、リン酸、硫酸、硝酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、シュウ酸、酢酸、酒石酸、乳酸、サリチル酸、安息香酸、ギ酸、プロピオン酸、ピバル酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、スルファミン酸、フェニルプロピオン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、イソニコチン酸、クエン酸、アジピン酸、および当業者に知られている他の酸が挙げられる。本発明の化合物がその分子に酸性および塩基性基を同時に含む場合には、本発明は、言及した塩形態に加えて、分子内塩またはベタイン（双性イオン）も包含する。それぞれの塩は、当業者に知られている通常の方法によって、例えば、これらを溶媒または分散剤中で有機または無機酸または塩基と接触させることによって、または他の塩とのアニオン交換またはカチオン交換によって得ることができる。本発明は、生理学的適合性が低いため、医薬で使用するには直接には適当でないが、例えば、化学反応または薬学上許容可能な塩の調製のための中間体として用いることができる本発明の化合物のあらゆる塩も包含する。
【００５１】
更に、本発明の化合物は、溶媒和物として水を含むもののような溶媒和物、またはアルコール、特にエタノールのような薬学上許容可能な溶媒和物の形態で存在することがある。
【００５２】
更に、本発明は、少なくとも１種類の本発明の化合物またはそれらのプロドラッグ化合物、または活性成分としてそれらの薬学上許容可能な塩または溶媒和物を薬学上許容可能なキャリヤーと共に含んでなる医薬組成物を提供する。
【００５３】
「医薬組成物」とは、１種類以上の活性成分、およびキャリヤーを構成する１種類以上の不活性成分、並びに任意の２種類以上の成分の結合、錯体形成または集合から、または１種類以上の成分の解離から、または１種類以上の成分の他の型の反応または相互作用から直接的または間接的に生成する任意の生成物を意味する。従って、本発明の医薬組成物は、少なくとも１個の本発明の化合物と薬学上許容可能なキャリヤーを混合することによって作製される任意の組成物を包含する。
【００５４】
本発明の医薬組成物は、更にプロドラッグ化合物または他の核レセプター調節因子のような活性成分として１種類以上の他の化合物を含んでなることもある。
【００５５】
これらの組成物は、経口、直腸、局所、非経口（皮下、筋肉内および静脈内など）、目（眼)、肺（鼻またはバッカル吸入）または鼻内投与に適当であるが、任意の所定の症例における最も適当な経路は、治療を行う疾患の性質および重篤度、および活性成分の性質に依存する。それらは、単位投薬形態で好都合に提供されかつ薬剤学の分野で周知の方法のいずれかによって調製されることがある。
【００５６】
本発明の化合物は、スキームＩ〜ＩＩＩに記載の方法の組合せによって調製することができる。スキームＩに表したように、３位において置換基Ａで置換された４員環状ケトンは、金属化した芳香族またはヘテロ芳香族環Ｍ−Ｑ−Ｏ−ＣＨ２Ｚ （Ｍ＝金属、例えば、Ｌｉ）と非プロトン性溶媒中で、好ましくは低温で反応して、置換基ＡおよびＱを有するヒドロキシル置換した４員環を形成することができる。ＹがＣＨである場合には、２種類の異性体が形成できる（ＡおよびＱは、互いに渡環(transannular)シスまたはトランスである）。最適化条件下では、２種類の異性体の主として一方を形成させることができる。２種類の異性体は、例えば、シリカゲルクロマトグラフィーまたは分取ＲＰ−ＨＰＬＣのような当該技術分野で知られている適当な方法によって分離することができる。
【００５７】
スキームＩ
【化１４】
0005986633.tif 000015
【００５８】
スキームIIには、本発明の化合物の合成に必要な４員環状ケトンを調製するのに用いられる方法が要約されている。オプションａ）では、例えば、対応するハロゲン含有出発材料Ｒ−Ａ−Ｘ（Ｘ＝ハロゲン）のビニル化によって調製したビニルを有する中間体は、イン・シテューで形成したα，α−ジクロロケトンと反応して、２，２−ジクロロシクロブタノンを形成することができる。酢酸中還流下でＺｎを用いる脱ハロゲン化の後に所望の３−置換シクロブタノンが得られる。あるいは、ビニル中間体が、イン・シテューで生成した未置換ケテンと反応して、１段階で所望のシクロブタノン中間体を生成することができる。オプションｂ）では、３−メチレンシクロブタンカルボニトリルが出発材料として用いられる。 置換ヘテロ環は、当業者に知られている方法によってシアノ基から数段階で構築することができる。所望のシクロブタノンは、当業者に知られている条件および試薬を用いる環外二重結合の酸化的開裂によって、例えば、ＯｓＯ４、オゾンまたはＲｈＣｌ３／ＮａＩＯ４を酸化剤として用いることによって得ることができる。オプションｃ）は、置換アゼチジノンを調製するために用いた方法を示している。３−ヒドロキシ−アゼチジンとハロ−芳香族またはハロ−ヘテロ芳香族環との間のＣｕ−またはＰｄ−によって触媒されるＣ−Ｎクロスカップリングにより、対応するＮ−置換３−ヒドロキシ−アゼチジンが得られ、これは酸化によって所望のアゼチジノンに転換することができる。
【００５９】
スキームＩＩ
【化１５】
0005986633.tif 000016
【００６０】
スキームＩＩＩには、４員のヒドロキシを有する環の形成後に基Ａの置換基の改質を行う幾つかの可能性が例示されている。例えば、脱離基Ｘ（例えば、臭化物）は、遷移金属によって触媒されるクロスカップリング反応によってシアノ基、カルボン酸エステル、メチルスルホニルまたはチオエステルで置換することができる。得られた誘導体は、当業者に知られている方法によって更に他の誘導体に転換することかできる。例えば、シアノおよびエステル基は、塩基性条件下で加水分解してカルボン酸を生成することができ、これは次いでアシル−スルホンアミドに転換することができる。ベンジルチオエーテルを塩素化してクロロスルホニル中間体を得ることができ、これはアンモニアと反応して、対応するスルホンアミドとなる。
【００６１】
スキームＩＩＩ
【化１６】
0005986633.tif 000017
【００６２】
結果として、本発明は、ＦＸＲに結合しＦＸＲの作動薬または調節因子として作用する一般式（１）による化合物に関する。
【００６３】
本発明は、更に前記化合物による前記核レセプターの結合を介する疾患および／または状態の治療および／または予防を目的とする前記化合物の使用にも関する。更に、本発明は、前記化合物による前記核レセプターの結合を介する疾患および／または状態の治療および／または予防のための薬剤の調製を目的とする前記化合物の使用にも関する。具体的には、本発明は、慢性の肝臓内疾患または肝外胆汁鬱滞性疾患の幾つかの形態、胆線維症、急性の肝臓内胆汁鬱滞性疾患、異常な胆汁組成から起こる閉塞性または慢性の炎症性障害、食物脂肪および脂溶性食物ビタミンの摂取減少を伴う胃腸障害、炎症性腸疾患、脂質およびリポタンパク質障害、ＩＩ型糖尿病およびＩ型およびＩＩ型糖尿病の臨床合併症、強制的脂質および具体的にはトリグリセリド蓄積およびその後の線維症促進経路の活性化による臓器の慢性的脂肪性および線維性変性に起因する疾患および状態、肥満および代謝症候群（脂質代謝異常、糖尿病および異常に高い肥満度指数の複合疾患）、慢性の閉塞性アテローム性動脈硬化症の終点として起こる急性心筋梗塞、急性発作、血栓症、細胞内細菌または寄生性原生動物による持続的感染症、非悪性の過剰増殖性障害、悪性の過剰増殖性障害、結腸腺腫および肝細胞癌、特に脂肪肝および関連症候群、慢性の肝疾患または外科的肝切除の結果としての肝不全または肝機能不全、Ｂ型肝炎感染、Ｃ型肝炎感染、および／またはアルコールによって誘発される肝硬変またはウイルス性形態の肝炎に関連した胆汁鬱滞性または線維症性の症状の予防および／または治療のための薬剤の調製における式（１）による化合物の使用に関する。
【００６４】
本明細書において表される薬剤は、本発明による化合物と薬学上許容可能なキャリヤーの組合せを包含する通常の方法によって調製することができる。
【００６５】
ＦＸＲを核胆汁酸センサーとすることが試みられている。結果として、それは、肝における合成産出量および（胆汁酸結合タンパク質を調節することによって）腸におけるそれらの再循環の両方を調節する。しかし、胆汁酸生理学の範囲を超えると、ＦＸＲは、コレステロール胆石、ＩＩ型糖尿病、脂質代謝異常または肥満のような代謝障害、炎症性腸疾患のような慢性の炎症性疾患または胆汁鬱滞および多くの他の疾患の慢性的肝臓内形態など様々な疾患の病因に関連しかつ治療のための多くの多種多様な生理学的過程の調節に関係していると思われる(T. Claudel et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2005, 25, 2020; Y. D. Wang et al., Cell Res. 2008, 18, 1087)。
【００６６】
ＦＸＲは、肝および胃腸管における応答遺伝子の複雑なパターンを調節する。この遺伝子生成物は、様々な生理学的過程に影響を与える。ＦＸＲの機能分析の過程で、分析された最初の調節ネットワークは胆汁酸合成の調節であった。ＬＸＲは、コレステロールの胆汁酸への転換の重要な酵素であるＣｙｐ７Ａ１を調節核レセプターＬＲＨ−１の誘導によって誘発するが、ＦＸＲはＬＲＨ−１に対する主要な抑制因子であるもう一つの核レセプターであるＳＨＰをコードするｍＲＮＡのアップレギュレーションによってＣｙｐ７Ａ１の誘発を抑制する。ＦＸＲはこの経路の最終生成物であるコール酸（ＣＡ）またはＣＤＣＡのような一次胆汁酸を結合するので、これは遺伝子発現レベルに対するフィードバック阻害の一例と考えることができる(B. Goodwin et al., Mol. Cell 2000, 6, 517; T. T. Lu et al., Mol. Cell 2000, 6, 507)。ＳＨＰのよる胆汁酸合成の抑制と平行して、ＦＸＲは、肝細胞サイトゾルから胆汁が生成する小胆管分岐である小管への有毒な胆汁酸の輸出に関与するいわゆるＡＢＣ（ＡＴＰ結合カセット）トランスポーターの範囲を誘発する。ＦＸＲのこの肝保護機能は、肝における幾つかのＡＢＣ−トランスポーターの過小または過剰発現が示されたＦＸＲノックアウトマウスの分析によって最初に明らかになった(C. J. Sinal et al., Cell 2000, 102, 731)。更に詳細な分析により、主要な胆汁塩排出ポンプＢＳＥＰまたはＡＢＣＢ１１(M. Ananthanarayanan et al., J. Biol. Chem. 2001, 276, 28857; J. R. Plass et al., Hepatology 2002, 35, 589)並びにリポタンパク質からリン脂質への脂質移動を仲介するキータンパク質であるＰＬＴＰ(N. L. Urizar et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 39313)、およびリン脂質に対する二種類の重要な小管膜トランスポーターＭＲＰ−２（ＡＢＣＣ４）(H. R. Kast et al., J. Biol. Chem. 2002, 277, 2908)およびＭＤＲ−３（ＡＢＣＢ４）(L. Huang et al., J. Biol. Chem. 2003,２７8, 51085)が、ＦＸＲによるリガンド指定転写活性化の直接的標的であることが明らかにされた(M. Miyata, J. Pharmacol. Exp. Ther. 2005, 312, 759; G. Rizzo et al., Curr. Drug Targets Immune Endocr. Metabol. Disord. 2005, 5, 289に要約されている)。
【００６７】
ＦＸＲが胆汁酸の合成、輸出および再循環の主要な代謝物センサーであると思われる事実は、胆汁流を誘発し、胆汁酸組成を更に親水性組成に変化させる目的でのＦＸＲリガンドの使用を示唆した。ツール化合物としての最初の合成ＦＸＲリガンドＧＷ４０６４(P. R. Maloney et al., J. Med. Chem. 2000, 43, 2971; T. M. Willson et al., Med. Res. Rev. 2001, 21, 513)および半合成的人工胆汁酸リガンド６−α−エチル−ＣＤＣＡの開発により、有効な作動薬によるＦＸＲの超刺激(superstimulation)の効果を分析することができた。両リガンドは、胆管結紮動物での胆汁流を誘発することが示された。更に、胆汁分泌促進効果に加えて、肝保護効果を明らかにすることができた(R. Pellicciari et al., J. Med. Chem. 2002, 45, 3569; Y. Liu et al., J.Ｃｌin. Invest. 2003, 112, 1678)。この肝保護効果は、更に、マトリックス−メタロプロテアーゼＴＩＭＰ−１および２組織阻害薬の抑制、肝星細胞におけるコラーゲン付着物分解マトリックス−メタロプロテアーゼ２の誘発、およびいずれも線維化促進(pro-fibrotic)因子であるα−コラーゲンｍＲＮＡおよび形質転換成長因子β（ＴＧＦ−β）ｍＲＮＡのＦＸＲ作動薬によるその後の減少から生じる抗線維化効果に限定された(S. Fiorucci et al., Gastroenterology 2004, 127, 1497; S. Fiorucci et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2005, 314, 584)。更に、抗胆汁鬱滞性活性は、胆管結紮動物モデル並びにエストロゲンによって誘発される胆汁鬱滞の動物モデルで明らかにされた(S. Fiorucci et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2005, 313, 604)。
【００６８】
遺伝子研究は、胆汁鬱滞の遺伝形式（進行性家族性肝内胆汁鬱滞＝ＰＦＩＣ、Ｉ−ＩＶ型）では、ＦＸＲ自身の核内分布はＦＩＣ１遺伝子における突然変異の結果として減少するか（ＰＦＩＣのＩ型では、バイラー病とも呼ばれる）(F. Chen et al., Gastroenterology 2004, 126,７５6; L. Alvarez et al., Hum. Mol. Genet. 2004, 13, 2451)、またはＭＤＲ−３リン脂質輸出ポンプをコードするＦＸＲ標的遺伝子のレベルが減少する（ＰＦＩＣのIII型）ことを明らかにしている。まとめると、ＦＸＲ結合化合物は、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）または原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）のような慢性の胆汁鬱滞性疾患の最適治療計画において実質的な臨床的有用性を示すことの多くの証拠がある（G. Rizzo et al., Curr. Drug Targets Immune Endocr. Metabol. Disord. 2005, 5, 289; G. Zollner et al., Mol. Pharm. 2006, 3, 231; S. Y. Cai et al., Expert Opin. Ther. Targets 2006, 10, 409に概説されている）。
【００６９】
ＦＸＲ活性化が胆汁酸代謝および排泄に対して有する大きな影響は、胆汁鬱滞性症候群のみならず、胆石形成に対する療法に一層直接的に関係している。コレステロール胆石は、肝細胞から小管の管腔へ活発に送出されるコレステロールの溶解性が低いために生じる。混合ミセルの形成、従って、胆汁中の遊離コレステロールの見掛けの溶解度を決定するのは、３種類の主要成分である胆汁酸、リン脂質および遊離コレステロールの含量の相対比である。ＦＸＲ多形は、胆石疾患の一因としての定量的形質座としてマップする(H. Wittenburg, Gastroenterology 2003, 125, 868)。合成ＦＸＲツール化合物ＧＷ４０６４を用いると、ＦＸＲの活性化により、コレステロール飽和指数（ＣＳＩ）が向上し、かつＣ５７Ｌ胆石感受性マウスでの胆石形成が廃止されるが、ＦＸＲノックアウトマウスでの薬剤投与は胆石形成に何ら効果を示さないことを明らかにすることができた(A. Moschetta et al., Nature Medicine 2004, 10, 1352)。
【００７０】
これらの結果は、コレステロール胆石形成の防止または外科的除去または衝撃波砕石術後に胆石の再形成の防止に用いることができる低分子作動薬の開発の良好な標的としてＦＸＲを認めるものである(S. A. Doggrell, Curr. Opin. Investig. Drugs 2006, 7, 344で検討されている)。
【００７１】
従って、本発明の一つの態様では、式（１）による化合物および前記化合物を含んでなる医薬組成物は、コレステロール胆石としても知られている胆石症のような異常な胆汁組成から生じる閉塞性または慢性の炎症性障害の予防および／または治療に用いられる。
【００７２】
ＦＸＲが肝において小分子に対して刺激された活性化を示すその強力な肝保護および胆汁分泌促進並びに抗線維化効果の他に、ＦＸＲは、腫瘍性形質転換および消化管におけるポリープの発生およびそれらの腺腫への転移から腸を保護する役割を有すると思われる(S. Modica et al., Cancer Res. 2008, 68, 9589 and R. R. Maran et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2009, 328, 469)。腸における状況と同様に、ＦＸＲが存在しないと、最も有名な形態の肝癌である肝細胞癌（ＨＣＣ）の形成が著しく増加する(I. Kim et al., Carcinogenesis 2007, 28, 940 and F. Yang et al., Cancer Res. 2007, 67, 863)。機能性ＦＸＲは、結腸腺腫および肝細胞癌の形成を防止するが、ＦＸＲ活性化は肝切除後に肝再生を誘発する(W. Huang et al., Science 2006, 312, 233)。
【００７３】
ＦＸＲ活性化に伴う肝保護、抗悪性および肝再生の組合せ効果は、重篤な肝疾患の治療におけるＦＸＲ作動薬の使用の目的で治療に利用することができる。一つの態様では、本発明による化合物および前記化合物を含んでなる医薬組成物は、ＨＣＣのような肝疾患の治療、肝再増殖の刺激、および主要肝切除、病因から独立した肝硬変および肝移植または主要肝手術の経過中における肝虚血の防止または治療に伴う副作用の緩和に用いられる。
【００７４】
最初の合成ＦＸＲ作動薬の発見とそれの齧歯類への投与以来、ＦＸＲは is a key regulator of血清トリグリセリドの重要な調節因子であることが明らかになった(P. Maloney et al., J. Med. Chem. 2000, 43, 2971; T. Willson et al., Med. Res. Rev. 2001, 21, 513)。過去６年間にわたって、合成作動薬によるＦＸＲの活性化により、主として還元型ＶＬＤＬの形態での血清トリグリセリドが有意に減少するが、総血清コレステロールも減少するという多くの証拠が公表されてきた(H. R. Kast et al., Mol. Endocrinol. 2001, 15, 1720; N. L. Urizar et al., Science 2002, 296, 1703; G. Lambert et al., J. Biol. Chem. 2003, 278, 2563; M. Watanabe et al., J.Ｃｌin. Invest. 2004, 113, 1408; A. Figge et al., J. Biol. Chem. 2004, 279, 2790; S. Bilz et al., Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2006, 290, E716)。
【００７５】
しかし、血清トリグリセリドの低下は、他に例を見ない効果というものではない。ｄｂ／ｄｂまたはｏｂ／ｏｂマウスに合成ＦＸＲ作動薬ＧＷ４０６４を投与すると、血清トリグリセリド、総コレステロール、遊離脂肪酸、３−ＯＨブチレートのようなケトン体が著しくかつ組み合わせて減少した。更に、ＦＸＲ活性化により、肝細胞における細胞内インスリンシグナル伝達経路と連動して、肝グルコース新生からのグルコースの産出が減少するが、同時に肝グリコーゲンが増加する。インスリン感受性並びに糖耐性は、ＦＸＲ投与によって肯定的に影響を受ける(K. R. Stayrook et al., Endocrinology 2005, 146, 984; Y. Zhang et al., PNAS 2006, 103, 1006; B. Cariou et al., J. Biol. Chem. 2006, 281, 11039; K. Ma et al., J. Clin. Invest. 2006, 116, 1102; D. Duran-Sandoval et al., Biochimie 2005, 87, 93)。体重の減少に対する効果も、最近、高脂質食餌を過剰投与したマウスで観察された(C. Lihong et al., American Diabetes Association (ADA) 66th annual scientific sessions, June 2006, Abstract Number 856-P)。この体重損失効果は、体重損失と筋骨型表現型を生じることが知られている線維芽細胞増殖因子であるＦＧＦ−１９ のＦＸＲの誘発から生じることがある(J. Holt et al., Genes Dev. 2003, 17, 1581; E. Tomlinson et al., Endocrinology 2002, 143, 1741)。最近の特許出願明細書では、ＦＸＲ作動薬の of体重減少に対する効果が明らかにされた（ＷＯ  ２００４／０８７０７８号公報、ＷＯ  ２００３／０８０８０３号公報）。
【００７６】
まとめると、これらのＦＸＲ作動薬の薬理効果を、様々な治療方法に利用することができ、ＦＸＲ結合化合物は、それらのインスリン感受性、グリコーゲン生成および脂質低下効果によりＩＩ型糖尿病の治療の良好な候補であると考えられる。
【００７７】
一つの態様では、本発明による化合物および前記化合物を含んでなる医薬組成物は、ＦＸＲによって伝達される全身的インスリン感受性および肝における細胞内インスリンシグナル伝達のアップレギュレーション、末梢グルコース摂取および代謝の増加、肝におけるグリコーゲン貯蔵の増加、肝で生成したグルコース新生から血清へのグルコースの産出量の減少によって克服することができるＩＩ型糖尿病の予防および／または治療に用いられる。
【００７８】
もう一つの態様では、前記化合物および医薬組成物は、ＰＢＣ、ＰＳＣ、進行性家族性胆汁鬱滞（ＰＦＩＣ）、アルコールによって誘発される肝硬変および関連の胆汁鬱滞のような慢性の肝臓内疾患、および肝外胆汁鬱滞性疾患の幾つかの形態または胆線維症の予防および／または治療に用いられる。
【００７９】
本発明は、胆汁酸およびリン脂質の腸内レベルを増加することによって克服することができる食物脂肪および脂溶性食物ビタミンの摂取減少を伴う胃腸疾患の予防および／または治療のための、式（１）の化合物または前記化合物を含んでなる医薬組成物にも関する。
【００８０】
もう一つの態様では、前記化合物または医薬組成物は、総血漿コレステロールの低下、血清トリグリセリドの低下、肝コレステロールの胆汁酸への転換増加、およびＶＬＤＬおよび肝における他のリポタンパク質のクリアランスおよび代謝変換の増加に対するＦＸＲの好都合な効果によって緩和することができる臨床上明らかな疾患としての高コレステロール血症、高トリグリセリド血症およびアテローム性動脈硬化症のような脂質およびリポタンパク質障害からなる群から選択される疾患の予防および／または治療に用いられる。
【００８１】
もう一つの態様では、前記化合物および医薬組成物は、疾患の予防および／または治療であって、ＦＸＲを標的とする薬剤の脂質低下、抗胆汁鬱滞性および抗線維化の組合せ効果を、脂肪肝およびＮＡＳＨのような関連症候群の治療、またはアルコールによって誘発される肝硬変またはウイルス性形態の肝炎に関連した胆汁鬱滞性または線維症性の症状の治療に利用することができる。
【００８２】
脂質低下効果と合わせて、機能性ＦＸＲの損失により、ＡｐｏＥノックアウトマウスにおけるアテローム性動脈硬化症が増加することも示された(E. A. Hanniman et al., J. Lipid Res. 2005, 46, 2595)。従って、ＦＸＲ作動薬は、抗アテローム性動脈硬化症および心臓保護薬として臨床的有用性を有することがある。脈管の平滑筋細胞におけるエンドセリン−１のダウンレギュレーションも、このような有益な治療効果に寄与することがある(F. He et al., Circ. Res. 2006, 98, 192)。
【００８３】
本発明は、急性心筋梗塞、急性発作、または慢性の閉塞性アテローム性動脈硬化症の終点として起こる血栓症のような心臓血管障害の予防および外傷後治療のための式（１）による化合物または前記化合物を含んでなる医薬組成物にも関する。
【００８４】
腸および結腸のポリープ形成を制御することの他に、ＦＸＲは、乳癌組織および細胞系で発現するが健康な乳房組織では発現しないと思われ、ＥＲ陽性の乳癌細胞においてエストロゲンレセプターと相互作用すると思われる(K. E. Swales et al., Cancer Res. 2006, 66, 10120 and F. Journe et al., Breast Cancer Res. Treat. 2009, 115, 523)。
【００８５】
これは、ＦＸＲを、増殖性疾患、特にＦＸＲの小分子応答性形態を発現する転移性癌形態の治療の潜在的標的と考えることもできるであろう。
【００８６】
もう一つの態様では、前記化合物および医薬組成物は、様々な形態の癌、特にある形態の乳癌、肝癌または結腸癌であって、ＦＸＲリガンドの干渉が有益な影響を有するような悪性の過剰増殖性障害の予防および／または治療に用いられる。
【００８７】
最後に、ＦＸＲは、腸における抗菌防御の制御に関わっていると思われるが(T. Inagaki et al., PNAS. 2006, 103, 3920)、正確な機構は提供されていない。しかしながら、これらの公表データから、ＦＸＲ作動薬を用いる治療は炎症性腸障害（ＩＢＤ）、特に腸の上部（回腸）が冒されている形態（例えば、回腸クローン病）の治療に有益な影響を与える可能性があり、これは、細菌増殖に対するＦＸＲ制御の作用部位であると思われるからである。ＩＢＤでは、適応免疫応答の脱感作は、腸の免疫系では幾分損なわれる。細菌の異常増殖は、次いで慢性の炎症性反応の確立を引き起こす引き金となることがある。従って、ＦＸＲ性機構による細菌増殖の低下は、急性の炎症性症状の発現を防止するための重要な機構であることがある。
【００８８】
従って、本発明は、クローン病または潰瘍性大腸炎のような炎症性腸疾患に関連した疾患を予防および／または治療するための式（１）による化合物または前記化合物を含んでなる医薬組成物にも関する。腸バリヤー機能のＦＸＲによる回復および非偏共性(non-commensal)細菌負荷の減少は、細菌性抗原が腸免疫系に暴露されるのを減少させる上で有用であると思われ、従って、炎症性反応を減少させることができる。
【００８９】
本発明は、血清トリグリセリド、血糖およびインスリン感受性増加のＦＸＲによる低下およびＦＸＲによる体重損失によって克服することができる肥満および代謝症候群（脂質代謝異常、糖尿病および異常に高い肥満度指数の複合疾患）のような関連障害の予防および／または治療を目的とする化合物または医薬組成物にも関する。
【００９０】
もう一つの態様では、本発明の化合物または医薬組成物は、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病の臨床合併症の予防および／または治療に有用である。このような合併症の例としては、糖尿病性腎障害、糖尿病性網膜症、 糖尿病性神経障害、または末梢動脈閉塞性疾患（ＰＡＯＤ）が挙げられる。糖尿病の他の臨床合併症も、本発明に包含される。
【００９１】
更に、脂質および特にトリグリセリドの強制的蓄積およびその後の線維症促進経路の活性化による臓器の慢性の脂肪過多および線維症性変性から生じる状態および疾患は、本発明の化合物または医薬組成物を適用することによって予防および／または治療することもできる。このような状態および疾患は、肝のＮＡＳＨおよび慢性の胆汁鬱滞性状態、腎臓の糸球体硬化症および糖尿病性腎障害、眼の黄斑変性および糖尿病性網膜症および脳のアルツハイマー病のような神経変性疾患、または末梢神経系における糖尿病性神経障害を包含する。
【００９２】
実際的使用では、本発明の化合物は、通常の薬学的調合手法に従って緊密な混合物における活性成分として薬学キャリヤーと組み合わせることができる。キャリヤーは、投与に所望な製剤の形態、例えば、経口または非経口（静脈内を含む）によって多種多様な形態を採ることがある。経口投与形態の組成物の調製では、通常の薬学媒体、例えば、経口液状製剤、例えば、懸濁液、エリキシルおよび溶液の場合には、水、グリコール、油、アルコール、香味料、防腐剤、着色剤など、または経口固形製剤、例えば、粉末、硬質および軟質カプセル、および錠剤の場合には、澱粉、糖、微晶質セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などのキャリヤーのいずれかを用いることができるが、固形経口製剤が液状製剤より好ましい。
【００９３】
投与が容易であるため、錠剤およびカプセルが最も好都合な経口投薬単位形態であり、この場合には、固形薬学キャリヤーが明らかに用いられている。所望ならば、錠剤を標準的な水性または非水性手法によってコーティングすることができる。このような組成物および製剤は、活性化合物を少なくとも０．１％含むものとする。これらの組成物における活性化合物の割合は、変化することがあることはもちろんであり、好都合には単位の重量の約２％〜約６０％であることがある。このような治療上有用な組成物における活性化合物の量は、有効な用量が得られるような量である。活性化合物は、例えば、液状ドロップまたはスプレーとして鼻内投与することもできる。
【００９４】
錠剤、丸剤、カプセルなどは、トラガカントゴム、アラビアゴム、トウモロコシ澱粉またはゼラチンのような結合剤、リン酸二カルシウムのような賦形剤、トウモロコシ澱粉、ジャガイモ澱粉、アルギン酸のような崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、およびスクロース、ラクトースまたはサッカリンのような甘味料を含むこともある。投薬単位形態がカプセルであるときには、それは、上記種類の材料の他に、脂肪油のような液状キャリヤーを含むことがある。
【００９５】
様々な他の材料が、コーティングとしてまたは投薬単位の物理形態を変更する目的で含まれることがある。例えば、錠剤は、シェラック、糖または両者でコーティングすることがある。シロップまたはエリキシルは、活性成分の他に、甘味料としてスクロース、防腐剤としてメチルおよびプロピルパラベン、色素、およびサクランボまたはオレンジ香味のような香味料を含むことがある。
【００９６】
本発明の化合物は、主としてカルボン酸または同様なそのアニオン性アイソスターを表すので、またイオン性薬剤化合物の塩形態は薬剤化合物のバイオアベイラビリティーに実質的に影響する可能性があることは周知であるので、本発明の化合物は、様々な対カチオンとの塩として用いて経口利用可能な薬剤処方を得ることもできる。このような薬学上許容可能なカチオンは、とりわけ、アンモニウム、アルカリ金属ナトリウムまたはカリウムまたはアルカリ土類金属マグネシウムまたはカルシウムのような一価または二価イオン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、エチレンジアミン、ジエチルアミン、ピペラジンなどの薬学上許容可能なアミン、またはリジンまたはアルギニンのようなある種のカチオン性アミノ酸であることがある。
【００９７】
本発明の化合物は、非経口に投与してもよい。これらの活性化合物の溶液または懸濁液は、ヒドロキシ−プロピルセルロースのような界面活性剤と適当に混合した水で調製することができる。分散液は、グリセロール、液状ポリエチレングリコールおよびそれらの油中混合物で調製することもできる。通常の補完および使用条件下では、これらの製剤は微生物の増殖を防止するために防腐剤を含む。
【００９８】
注射用の用途に適する剤型としては、滅菌した水性溶液または分散液および滅菌した注射用溶液または分散液の即座の調剤のための滅菌した粉末が挙げられる。総ての場合に、形態は滅菌していなくてはならずかつ注射器が容易に使用できる程度まで流動性でなければならない。それは製造および保管の条件下では安定でなければならず、かつ細菌や真菌のような微生物の汚染作用から保護されなければならない。キャリヤーは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液状ポリエチレングリコール）、それらの適当な混合物、および植物油を含む溶媒または分散媒であることができる。
【００９９】
任意の適当な投与経路を用いて、哺乳類、特にヒトに本発明の化合物の有効用量を供給することができる。例えば、経口、直腸、局所、非経口、目、肺、鼻などを用いることができる。投薬形態としては、錠剤、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、カプセル、クリーム、軟膏、エアゾールなどを用いることができる。好ましくは、本発明の化合物は、経口投与される。
【０１００】
用いられる活性成分の有効用量は、用いられる特定の化合物、投与方式、治療を行う状態および治療を行う状態の重篤度によって変化することがある。このような投薬量は、当業者が容易に確かめることができる。
【０１０１】
本発明の化合物が必要なＦＸＲによる状態を治療または防止するときには、本発明の化合物を動物体重１ｋｇあたり約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇの一日用量を、好ましくは単回一日用量としてまたは１日２〜６回の分割用量で、または徐放性形態で投与するときに一般に満足な結果が得られる。大部分の大型哺乳類に対しては、総一日用量は約１．０ｍｇ〜約１０００ｍｇであり、好ましくは約 １ｍｇ〜約５０ｍｇである。７０ｋｇの成人の場合には、総一日用量は一般に約７ｍｇ〜約３５０ｍｇである。この投薬計画は、最適の治療応答を提供するために調整することができる。
【０１０２】
本発明の化合物は、適当な材料を用いて下記のスキームおよび実施例の手順に従って調製することができ、下記の具体例によって更に例示される。更に、当該技術分野における通常の技術と合わせて本明細書に記載の手順を利用することによって、本明細書に記載の本発明の追加化合物を容易に調製することができる。しかしながら、実施例に例示した化合物は、本発明と考えられる唯一の種類を形成するものと解釈すべきではない。実施例は、更に本発明の化合物の調製の詳細を例示する。当業者であれば、下記の調製手順の条件および過程の既知の変化を用いて、これらの化合物を調製することができることを容易に理解するであろう。本発明の化合物は、一般に上記したようなそれらの薬学上許容可能な塩の形態で単離される。
【０１０３】
単離塩に対応するアミン不含塩基は、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウム水溶液のような適当な塩基を用いる中和、および遊離したアミン不含塩基の有機溶媒への抽出の後、蒸発によって生成させることができる。この方法で単離したアミン不含塩基は、更に、有機溶媒に溶解した後、適当な酸を加え、次いで蒸発、沈澱または結晶化によって別の薬学上許容可能な塩に転換することができる。単離した塩に対応するカルボキシル不含酸は、塩酸、硫酸水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム水溶液のような適当な酸を用いる中和、および遊離したカルボキシル不含酸の有機溶媒への抽出の後、蒸発によって生成させることができる。この方法で単離したカルボン酸は、更に、有機溶媒に溶解した後、適当な塩基を加え、次いで蒸発、沈澱または結晶化によって別の薬学上許容可能な塩に転換することができる。
【０１０４】
本発明の化合物の調製の実例を、下記に示す。スキームに示されない限り、変数は上記と同じ意味を有する。下記に示される実施例は、本発明の特定の実施態様を示すものと解釈される。下記のような合成に用いられる適当な出発材料、成分および試薬は、例えば、Sigma-AldrichまたはAcros Organicsから市販されているか、または文献、例えば、「マーチの最新有機化学：反応、機構および構造 (March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structuire)」、第５版、John Wiley & Sons、またはT. Eicher, S. Hauptmann著 「複素環化合物の化学：構造、反応、合成および応用 (The Chemistry of Heterocycles; Structures, Reactions, Synthesis and Application)」、第２版、Wiley-VCH 2003、Fieser et al. 「ファイザーの有機合成のための試薬(Fiesers’Reagents for Organic Synthesis)」、John Wiley & Sons 2000に記載の手順によって日常的に調製することができる。
【実施例】
【０１０５】
実施例１：  メチル＝３−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）ベンゾエート（１）
【０１０６】
【化１７】
0005986633.tif 000018
【０１０７】
段階１：  ４−（（４−ブロモ−３−クロロフェノキシ）メチル）−５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）−イソキサゾール （１ａ）
（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メタノール（１３ｇ，４５．８ミリモル）をＣＨ２ＣＨ２（ＤＣＭ）（２００ｍｌ）に溶解したものに、ＳＯＣｌ２（４０ｍｌ，３３６ミリモル）を滴下した。生成する混合物を室温で２時間撹拌し、溶媒を減圧下で留去した。残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（２００ｍｌ）に溶解し、４−ブロモ−３−クロロフェノール（９．７ｇ，４７ミリモル）、Ｋ２ＣＯ３（４０ｇ，２９０ミリモル）およびＮａＩ（１２ｇ，８０ミリモル）をこの溶液に加えた。混合物を６０℃で一晩撹拌した後、室温まで冷却し、水（１０００ｍｌ）で希釈し、酢酸エチル（ＥＡ）（５００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機相を塩水（５００ｍｌ×３）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残渣をシリカゲル（ＣＣ）上でフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、標題化合物１ａ（１９ｇ，８８％）を白色固形物として得た。
【０１０８】
段階１：  メチル＝３−（２，２−ジクロロ−３−オキソシクロブチル）ベンゾエート（１ｂ）
窒素雰囲気下で冷却器、オーバーヘッド攪拌機および圧力を均等にした滴下漏斗を備えた三つ口丸底フラスコに、メチル＝３−ビニルベンゾエート（５ｇ，３１ミリモル）を乾燥Ｅｔ２Ｏ（１５０ｍｌ)に溶解した。このフラスコに、亜鉛末 （６ｇ，３当量）を加え、反応を３０分間音波処理した。その後、トリクロロアセチルクロリド（８．７ｍｌ,２．５当量）を乾燥Ｅｔ２Ｏ（５０ml）に溶解したものを、更に３０分間音波処理を継続しながら滴加した。この工程中に、反応混合物を３５℃に加熱した。音波処理を還流温度で２．５時間継続したところ、反応は１Ｈ ＮＭＲ分析によれば完結したと思われた。 反応を室温まで放冷し、水（約５０ｍｌ)で反応停止した。これは、遅延発熱反応が起こるので、数分間だけ間隔を置いて滴加法で行った。水中で２０分間撹拌した後、反応混合物をセライトのパッドで濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄した。有機層を、小分けした水（２ｘ２５０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２ｘ２５０ｍｌ）および塩水（１ｘ２５０ｍｌ)で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物１ｂを暗黄色の粘稠な油状生成物として得た（粗生成物８．７ｇ）。
【０１０９】
段階２：  メチル＝３−（３−オキソシクロブチル）ベンゾエート （１ｃ）
粗製化合物 １ｂ （８．７ｇ）を、丸底フラスコ中で窒素雰囲気下にて氷酢酸（５５ｍｌ)に溶解した。このフラスコに、亜鉛末（４．６ｇ，２．２当量）を加え、反応を撹拌し、１２０℃まで３時間加熱した。室温まで冷却した後、混合物をセライトのパッドで濾過し、これを何回かに分けたＥＡで洗浄した。合わせた溶液を減圧濃縮した後、ＥＡ（５００ｍｌ)に溶解し、塩水（１５０ｍｌ×２）で洗浄し、次いで硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過して、再度濃縮した。粗製混合物をクロロホルム（２５０ｍｌ）中で５分間撹拌し、焼結漏斗で濾過した。濾液を濃縮し、粗生成物を淡黄色油状生成物として得た。粗生成物をＣＣにより（ＰＥ／ＥＡ＝９：１，ＰＥ＝石油エーテル）で精製し、所望の生成物１ｃ（２．５ｇ，二段階に対して３８％）を淡黄色油状生成物として得た。
【０１１０】
段階３：  メチル＝３−（３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）ベンゾエート（１）
化合物１ａ (１．６７ｇ，３．５ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（３０ｍｌ)に撹拌溶解したものに、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ，１．２当量，１．６９ｍｌ)を窒素雰囲気下にて−７８℃で１０分間かけて滴加した。これを、この温度で１時間撹拌した後、化合物１ｃ（０．７２ｇ，１当量）を乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ)に溶解したものを滴加し、この温度で１時間撹拌した。反応混合物を室温まで徐々に加温し、一晩撹拌した。反応を、飽和塩化アンモニウム （５０ｍｌ）とＥＡ（２５０ｍｌ)の溶液で反応停止した。有機層を分離し、水性層ＥＡ（２ｘ１００ｍｌ)で洗浄した。合わせた有機抽出物を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過して、濃縮し、粗生成物を褐色油状生成物として得た。生成物をＰＥ/ＥＡ（１９：１〜３：１）を用いるＣＣによって分離した。反応および精製を同じ規模で２回繰り返し、合わせた生成物（３．１５ｇ）を同じ条件下で再精製し、最終生成物１（１．７ｇ，１９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）： ７．９３（ｍ，１Ｈ），７．９０−７．８５（ｍ，１Ｈ），７．５０−７．３０（ｍ，５Ｈ），６．８８（ｓ，１Ｈ），６．７５−６．７２（ｍ，１Ｈ），４．８０（ｓ，２Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．２０−３．１０（ｍ，１Ｈ），３．００−２．９１（ｍ，２Ｈ），２．６０−２．４９（ｍ，２Ｈ），２．１５−２．０８（ｍ，１Ｈ），１．３０−１．２５（ｍ，２Ｈ），１．１５−１．１０（ｍ，２Ｈ）。
【０１１１】
実施例２：  ３−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）安息香酸（２）
【０１１２】
【化１８】
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【０１１３】
化合物１（１．７ｇ，２．８４ミリモル）を、ＴＨＦ（１００ｍｌ)に室温で溶解した。ＬｉＯＨ（２８５ｍｇ，４．２当量）を水（２０ｍｌ)に溶解したものを加え、溶液を撹拌して、３５℃に３日間加温した。その後、ＴＨＦを減圧下で留去した。残っている水性溶液を水（２５ｍｌ)で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（２ｘ５０ｍｌ)で洗浄した。次いで、水性層を丸底フラスコに移し、１Ｎ ＨＣｌを用いて酸性にしてｐＨ６とした。形成した白色沈澱を濾別し、減圧下５０℃で乾燥し、標題化合物２（１．３ｇ，７８％，単一異性体、１Ｈ−ＮＭＲおよびＬＣ−ＭＳによる)を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ） δ：７．９８（ｓ，１Ｈ），７．８６ （ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５８−７．４８（ｍ，５Ｈ），７．４１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），３．２９−３．２５（ｍ，２Ｈ），２．９６（ｍ，１Ｈ），２．５５−２．４９（ｍ，２Ｈ），２．３７（ｍ，１Ｈ），１．２４−１．２２（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ−）ｍ／ｚ：５８４（５８２）［Ｍ−１］−。
【０１１４】
関連の強いＮＯＥ（ＲＯＥＳＹスペクトルからえられる。下記矢印）は、２つの芳香族残基が、実施例２では１，３−トランスに配向していることを示している。
【０１１５】
【化１９】
0005986633.tif 000020
【０１１６】
実施例２への代替経路
段階１：  ３−（３−ブロモフェニル)シクロブタノン（２ａ）
Ｎ，Ｎ−ジメチルアセタミド（９．０ｇ，１０３ミリモル）を、１，２−ジクロロエタン（２００ｍｌ)に溶解した。溶液を０℃に冷却した後、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（６３ｇ，２２３ミリモル）を加えた。反応を、０℃で更に６０分間撹拌した。次いで、１−ブロモ−３−ビニルベンゼン（１５ｇ，８１．９ミリモル）と２，４，６−コリジン（１０．５ｇ，８６．６ミリモル）を加えた。反応を、還流温度で一晩加熱し、水（３００ｍｌ)を加えて反応停止し、室温で２時間撹拌した。混合物をＤＣＭ（３００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。ＣＣ（ＥＡ／ＰＥ＝１：２０）によって精製し、標題化合物２ａ（５．０ｇ，２７％）を淡黄色固形物として得た。
【０１１７】
段階２：  ３−（３−ブロモフェニル）−１−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル）シクロブタノール（２ｂ）
化合物１ａ（１４ｇ，２９．６ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（５００ｍｌ）に−７８℃で溶解したものに、ｎ−ＢｕＬｉ（１８．５ｍｌ，ヘキサン中１．６Ｍ，２９．６ミリモル）を滴加した。混合物を−７８℃で更に１時間撹拌し、化合物２ａ（６．５ｇ，２８．９ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（５０ｍｌ)に溶解したものを滴加した。生成混合物を−７８℃で１時間撹拌した後、室温まで加温し、飽和のＮＨ４Ｃｌ水溶液（５００ｍｌ)で反応停止した。混合物をＥＡ（５００ｍｌ×２）で抽出し、合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、真空濃縮した。残渣をＣＣ（ＥＡ／ＰＥ＝１：５）によって精製し、標題化合物２ｂ（６．５ｇ，３７％）を白色固形物として得た。
【０１１８】
段階３：  ３−（３−シアノフェニル）−１−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル）シクロブタノール（２ｃ）
化合物２ｂ（３．１ｇ，５ミリモル）をＤＭＦ（５０ｍｌ)に溶解したものに、アルゴン雰囲気下にてＺｎ（ＣＮ）２（５００ｍｇ，４．３ミリモル）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（３００ｍｇ，０．３３ミリモル）およびキサントホス（１５０ｍｇ，０．３１ミリモル）を加えた。混合物を、マイクロ波照射下にて１１５℃で１０時間撹拌した。室温まで冷却した後、反応混合物を水（２５０ｍｌ)で希釈し、ＥＡ（２５０ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機層を塩水（１００ｍｌ×３）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。残渣をＣＣ（ＥＡ/ＰＥ）によって精製し、標題化合物２ｃ（１．２ｇ，４２％）を淡黄色固形物として得た。
【０１１９】
段階４：  ３−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）安息香酸（２）
化合物２ｃ（１５ｇ，２４．２ミリモル）をＥｔＯＨ（７５０ｍｌ)に溶解したものに、ＮａＯＨ水溶液（４０ｇ／水１００ｍｌ）を加えた。生成混合物を還流温度に一晩加熱した後、室温まで冷却した。反応を真空濃縮して揮発性溶媒を留去し、水（１０００ｍｌ）で希釈して、ＨＣｌ水溶液（１Ｎ）でｐＨを２に調整した。形成した沈澱を濾過によって集め、粗生成物を黄色固形物（１３．８ｇ）として得た。分取用逆相ＨＰＬＣ(ＲＰ−ＨＰＬＣ)によって精製し、標題化合物２（８．０ｇ，５６％，単一異性体、１Ｈ−ＮＭＲによる)を白色固形物として得た。
【０１２０】
調製実施例３
【０１２１】
【化２０】
0005986633.tif 000021
【０１２２】
段階１：メチル＝３−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）ベンゾエート（３ａ）
メチル＝３−ヨード安息香酸（４．５ｇ，１７．２ミリモル）をＤＭＳＯ（３０ｍｌ)に溶解したものに、３−アゼチジン−３−オール塩酸塩（１．３ｇ，１１．８ミリモル）、Ｃｓ２ＣＯ３（９．５ｇ，２９．２ミリモル）、ＣｕＩ（４４６ｍｇ，２．３ミリモル）およびＬ−プロリン（５４０ｍｇ，４．７ミリモル）を加えた後、混合物をアルゴン雰囲気下にて９０℃で１８時間加熱した。溶液をＥＡと水で希釈し、有機層を塩水で３回洗浄し、減圧下にて濃縮し、ＣＣ（ＰＥ／ＥＡ＝２：1）によって精製し、化合物３ａ（１．６ｇ，６６％）を黄色固形物として得た。
【０１２３】
段階２：メチル＝３−（３−オキソアゼチジン−１−イル）ベンゾエート（３）
化合物３ａ（１．６０ｇ，７．７ミリモル）を乾燥ＤＣＭ（３０ｍｌ）に溶解したものに、デス−マーチン・ペリオジナン（６．５ｇ，１５．４ミリモル）を０℃で加え、混合物をＮ２雰囲気下にて室温で２時間撹拌した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で反応停止し、ＥＡで希釈した。有機部分を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、減圧下にて濃縮し、ＣＣ（ＰＥ／ＥＡ＝４：１）によって精製し、化合物３（１．２ｇ，７５％）を白色固形物として得た。
【０１２４】
実施例４：  ３−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−Ｎ−（メチルスルホニル）ベンズアミド（４）
【０１２５】
【化２１】
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【０１２６】
化合物２（１００ｍｇ，０．１７ミリモル）をＤＣＭ（５ｍｌ）に溶解したものに、ＥＤＣＩ・ＨＣｌ（１００ｍｇ，０．５２ミリモル）、ＤＭＡＰ（１００ｍｇ，０．８１ミリモル）およびＭｅＳＯ２ＮＨ２（４０ｍｇ，０．４２ミリモル）を加えた。混合物を３０℃で一晩撹拌した後、ＥＡで希釈して、Ｈ２Ｏ、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。真空濃縮および分取ＴＬＣによる精製を行い、粗製の標的化合物を明黄色固形物として得た。ＲＰ−ＨＰＬＣ精製の結果、標題化合物４（３８ｍｇ，３３％）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ） δ：７．８７（ｓ，１Ｈ），７．７4（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６１−７．５３（ｍ，４Ｈ）,７．５０−７．４６（ｍ，２Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｓ，２Ｈ），３．３８（ｓ，３Ｈ），３．３０−３．２８（ｍ，２Ｈ），３．０１（ｍ，１Ｈ），２．５７−２．５１（ｍ，２Ｈ），２．３７（ｍ，１Ｈ），１．２５−１．２３（ｍ，４Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ-)ｍ／ｚ：６５９［Ｍ−１］-。
【０１２７】
実施例５：  ３−（３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）ベンゼンスルホンアミド（５）
【０１２８】
【化２２】
0005986633.tif 000023
【０１２９】
段階１：３−（３−（ベンジルチオ）フェニル）−１−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル）シクロブタノール（５ａ）
化合物２ｂ（６１９ｍｇ，１ミリモル）をアルゴン雰囲気下にてトルエン（２０ｍｌ)に溶解したものに、Ｋ２ＣＯ３（２７６ｍｇ，２ミリモル）、フェニルメタンチオール（１２５ｍｇ，１ミリモル）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２００ｍｇ，０．２２ミリモル）およびキサントホス（７５ｍｇ，０．１６ミリモル）を加えた。次いで、混合物を１１５℃で４時間撹拌した。室温まで冷却した後、反応を水（１００ｍｌ)で希釈し、ＥＡ（１００ｍｌ×２)で抽出した。合わせた有機層を塩水（１００ｍｌ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濃縮乾固した。ＣＣによる精製の結果、化合物５ａ（２００ｍｇ，３０％）を淡黄色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３) δ：７．３６−７．３２（ｍ，３Ｈ），７．２８−７．０７（ｍ，９Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．８２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．６６（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），４．０４（ｓ，２Ｈ），３．０６−３．００（ｍ，２Ｈ），２．８４−２．７８（ｍ，２Ｈ），２．４４−２．３８（ｍ，３Ｈ），２．０９（ｍ，１Ｈ），１．２４−１．１８（ｍ，２Ｈ），１．１１−１．０８（ｍ，２Ｈ）。 ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ：６６２［Ｍ＋１］＋。
【０１３０】
段階２：３−（３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）ベンゼン−１−スルホニルクロリド（５ｂ）
化合物５ａ（３４ｍｇ，０．０５ミリモル）をＣＨ３ＣＮ／ＨＯＡｃ／Ｈ２Ｏ（１ｍｌ／３７μｌ／２５μｌ）に溶解したものに、２，４−ジクロロ−５，５−ジメチルヒダントイン（２０ｍｇ，０．１ミリモル）を加えた。混合物を、０−５℃で２時間撹拌した。反応を水で希釈し、ＣＨ２ＣＨ２で抽出した。合わせた有機層を５％ ＮａＨＣＯ３溶液、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。 濃縮乾固の結果、粗生成物５ｂ（３０ｍｇ）を無色油状生成物として得て、これを直接次の段階に用いた。
【０１３１】
段階３：３−（３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）ベンゼンスルホンアミド（５）
化合物５ｂ（３０ｍｇ）をＣＨ３ＣＮ（２ｍｌ)に溶解したものに、ＮＨ４ＯＨ（０．３ｍｌ)を加えた。混合物を室温で１時間撹拌した。濃縮乾固および分取ＲＰ−ＨＰＬＣの結果、標題化合物５（３．５ｍｇ，二段階に対して１０％）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３) δ：７．８５（ｓ，１Ｈ），７．７7（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５４−７．４１（ｍ，５Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｓ，１Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ｓ，２Ｈ），４．７７（ｓ，ｂｒｏａｄ，２Ｈ），３．２０（ｔ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｍ，１Ｈ），２．５８（ｔ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，２Ｈ），２．１７（ｍ，１Ｈ），１．３１−１．３０（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．１６（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ-)ｍ／ｚ：６１７［Ｍ-１］-。
【０１３２】
実施例６：  １−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−（３−(メチルスルホニル）フェニル）シクロブタノール（６）
【０１３３】
【化２３】
0005986633.tif 000024
【０１３４】
化合物２ｂ（２００ｍｇ，０．３２ミリモル）をＤＭＳＯに溶解したものに、メタンスルフィン酸ナトリウム（５０ｍｇ，０．４６ミリモル）、ＣｕＩ（２０ｍｇ，０．１ミリモル）、Ｌ−プロリン（３７ｍｇ，０．３２ミリモル）およびジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）（４１ｍｇ，０．３２ミリモル）を加えた。混合物を９５℃で一晩撹拌した後、水で希釈し、ＥＡで抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。減圧下にて濃縮乾固および分取ＲＰ−ＨＰＬＣによる精製の結果、標題化合物６を白色固形物（３５ｍｇ，２１％，単一異性体、１Ｈ ＮＭＲおよびＬＣ−ＭＳによる)として得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３) δ：７．８４（ｓ，１Ｈ），７．７9（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４４−７．４１（ｍ，３Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），６．７５（ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ｓ，２Ｈ），３．２４−３．１９（ｍ，２Ｈ），３．０８−３．０４（ｍ，４Ｈ），２．６２−２．５６（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｍ，１Ｈ），１．３１−１．２９（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．１６（ｍ，２Ｈ）。 ＭＳ（ＥＳＩ+)ｍ／ｚ：６１８（６２０）［Ｍ＋１］＋，６００（６０２）［Ｍ-Ｈ２Ｏ＋１］＋。
【０１３５】
実施例７：  メチル＝５−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（７）
【０１３６】
【化２４】
0005986633.tif 000025
【０１３７】
段階１：メチル＝ １−イソプロピル-5-ビニル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（７ａ）
メチルトリフェニルホスホニウムブロミド（２．８９ｇ，７．５２ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（４０ｍｌ)に懸濁したものを−７８℃に冷却し、ｎ−ブチルリチウム（１．６Ｍヘキサン溶液，３．７ｍｌ，５．９１ミリモル）を滴加した。黄橙色懸濁液を−７８℃で５０分間撹拌した後、メチル＝５−ホルミル−１−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（ＷＯ  ２０１１／０２０６１５号公報に記載の方法で調製、１．０５ｇ，５．３７ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ)に溶解したものを滴加した。混合物を−７８℃で１．７５時間撹拌し、冷却槽を外し、混合物（灰白色懸濁液）を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物を、希ＮａＨＣＯ３水溶液（１５０ｍｌ)とＥＡ（１５０ｍｌ)との間に分配した。水性層をＥＡ（それぞれ、５０ｍｌ）で２回抽出し、合わせた有機層を水（それぞれ、５０ｍｌ）で２回洗浄し、乾燥なしで濃縮し、２．７４ｇの黄色油状生成物を得て、これは徐々に結晶化した。粗生成物をＣＣ（ＣＨ２ＣＨ２で前吸着、ヘキサン／ＥＡ４：１）によって精製し、アルケン７ａ（５９０ｍｇ，５７％）を無色油状生成物として得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．０２（ｓ，１Ｈ），６．８７（ｄｄ，Ｊ＝１７．３，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄｄ，Ｊ＝１７．３，１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．４５（ｄｄ，Ｊ＝１１．２，１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．８０ (sept，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ)，３．７９（ｓ，３Ｈ），１．３８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）。Ｃ１０Ｈ１４Ｎ２Ｏ２（１９４．２３）。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ)：１９５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３８】
段階２：メチル＝ １−イソプロピル−５−（３−オキソシクロブチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（７ｂ）
反応を、２本の乾燥封管（等量の２バッチ）で行った。バッチを精密検査および精製のために合わせた。単一バッチ手順：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセタミド（０．２２ｍｌ，２．３４ミリモル）を窒素下にて−１５〜−２０℃で１，２−ジクロロエタン（１２ｍｌ)に溶解したものに、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（０．４３ｍｌ，２．５７ミリモル）を加え、不透明懸濁液を形成した。混合物を−１５℃で１０分間撹拌し、アルケン７ａ（１５１ｍｇ，０．７８ミリモル）および ｓｙｍ−コリジン（０．４２ｍｌ，３．１２ミリモル）を１，２−ジクロロエタン（３ｍｌ)に溶解したものを滴加した（黄色溶液が形成）。添加が完了したならば、冷却槽を外し、混合物を室温まで加温し（橙色の濁った溶液)、管を封じた。次いで、混合物を９０℃で１５時間撹拌した（褐色混合物）。水（５ｍｌ）を室温で加え、混合物を１００℃で２時間撹拌した（濁った２相溶液）。室温まで冷却した後、混合物を合わせて、希ＮａＨＣＯ３水溶液とＣＨ２ＣＨ２の間に分配し、水性層をＣＨ２ＣＨ２で３回（それぞれ３０ｍｌ）抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過して、濃縮し、褐色油状生成物（２．２ｇ）を得た。ＣＣ（６×１３ｃｍ，ＣＨ２ＣＨ２で前吸着，トルエン/ＥＡ３：１）によって精製し、シクロブタノン７ｂ（１１５．５ｍｇ，３１％）を黄色油状生成物として得た。 １Ｈ ＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ６) δ：６．８１（ｓ，１Ｈ），４．５８（sept, Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７8（ｓ，３Ｈ），３．８５−３．７３（ｍ，１Ｈ），３．５９−３．４５（ｍ，２Ｈ），３．３７−３．２４（ｍ，２Ｈ，水シグナルが部分的に重複），１．３９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，６Ｈ）。Ｃ１２Ｈ１６Ｎ２Ｏ３（２３６．２７）。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ)：２３７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３９】
段階３： メチル＝５−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（７）
ブロミド１ａ（３６８ｍｇ，０．７８ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（６ｍｌ)に溶解したものを−７８℃に冷却し、１．６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムのヘキサン（０．４８ｍｌ，０．７６ミリモル）溶液を滴加した。混合物を−７８℃で２０分間撹拌し、シクロブタノン７ｂ（１６４ｍｇ，０．６９ミリモル）を乾燥ＴＨＦ（４ｍｌ)に溶解したものを滴加した。混合物を−７８℃で２．５時間撹拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１ｍｌ)をこの温度で滴加した。冷却槽を外し、混合物を室温まで加温し、室温で０．５時間撹拌した。次いで、混合物を希ＮＨ４Ｃｌ水溶液に加え、ＥＡで３回抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過して、濃縮し、ほぼ無色の油状生成物５１６ｍｇを得た。ＣＣ（４．５×２３ｃｍ，ＣＨ２ＣＨ２で前吸着，溶離剤  ヘキサン／アセトン＝２：１）によって精製し、回収シクロブタノン７ｂ（３１．３ｍｇ，１９％，微黄色油状生成物）と不純な生成物（３３３ｍｇ）を得た。ＣＣ（４×２２ｃｍ，ヘキサン／ＥＡ＝１：１）または分取ＴＬＣによって再精製し、純粋な生成物７（２1０ｍｇ，４８％）を白色フォームとして得た。１Ｈ ＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ６) δ：７．６５（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ， １Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．５９−７．４８（ｍ，２Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．６６（ｓ，１Ｈ），５．４９（ｓ，１Ｈ），４．９２（ｓ，２Ｈ），４．４２ （ｑｕｉｎｔ様ｍ，Ｊ＝６．５Ｈｚ， １Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．２４−３．１１（ｍ，２Ｈ，水シグナルが部分的に重複），３．０４−２．９０（ｍ，１Ｈ），２．５４−２．３３（ｍ，３Ｈ，ＤＭＳＯシグナルが部分的に重複），１．３２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ），１．２６−１．０８（ｍ，４Ｈ）。Ｃ３１Ｈ３０Ｃｌ３Ｎ３Ｏ５（６３０．９５）。ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ)：６３０，６３２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４０】
実施例８：  ５−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（８）
【０１４１】
【化２５】
0005986633.tif 000026
【０１４２】
エステル７（９８．３ｍｇ，０．１５６ミリモル）を、ＴＨＦ（７．５ｍｌ)、ＭｅＯＨ（２．５ｍｌ)および水（２．５ｍｌ)の混合物に溶解し、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（６５ｍｇ，１．５６ミリモル）を室温で加えた。混合物を室温で１８時間撹拌した。混合物を希ＮＨ４Ｃｌ水溶液とＥＡの間に分配し、有機層を水で１回洗浄した。合わせた水性層を、ＥＡで２回抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過して、濃縮し、ほぼ白色の固形物１０３ｍｇを得た。生成物をＣＣ（３×３．５ｃｍ，ＥＡ/ＥｔＯＨ＝１０：１−１：４）によって精製し、８（９４．８ｍｇ，９９％）を白色固形物として得た。１Ｈ ＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ６) δ：７．６６−７．６０（ｍ，１Ｈ），７．６２（ｓ，１Ｈ），７．５９−７．４９（ｍ，２Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ， １Ｈ），６．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３８（ｓ，１Ｈ），５．５1 (s，１Ｈ，Ｄ２Ｏと交換可能)，４．９２（ｓ，２Ｈ），４．３１（ｑｕｉｎｔ様ｍ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），３．２５−３．０８（ｍ，２Ｈ，水シグナルが部分的に重複），２．９３−２．７７（ｍ，１Ｈ），２．５７−２．４３（ｍ，１Ｈ，ＤＭＳＯシグナルによって隠されている），２．４３−２．２９（ｍ，２Ｈ，ＤＭＳＯシグナルが部分的に重複），１．２９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，６Ｈ），１．２６−１．０８（ｍ，４Ｈ）。ＣＯ２Ｈシグナルは、このスペクトルには現れない。Ｃ３０Ｈ２８Ｃｌ３Ｎ３Ｏ５（６１６．９２）。ＬＣ-ＭＳ（ＥＳＩ)：６１６，６１８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１４３】
実施例８への代替経路
段階１：１−（３−メチレンシクロブチル）エタノン（８ａ）
メチレンシクロブタンカルボニトリル（５．０ｇ，５３．７ミリモル）を乾燥ジエチルエーテル（２５ｍｌ)に溶解し、氷浴で冷却し、ＭｅＭｇＢｒ（２６．８ｍｌ，８０．５ミリモル，３Ｍ、エーテル中)を滴加した。混合物を室温で一晩撹拌し、０℃に冷却し、１５％ＮａＨＳＯ４水溶液（１００ｍｌ)で慎重に反応停止した。混合物を室温で３０分間撹拌し、層を分離した。水性相をペンタン（５０ｍｌ)とジエチルエーテル（５０ｍｌ)で抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を室温で真空留去し、粗生成物を帯黄色液状生成物として得た。
【０１４４】
段階２：エチル＝４−（３−メチレンシクロブチル）−２，４−ジオキソブタノエート（８ｂ）
ナトリウム（１．１５ｇ，４９．９ミリモル）を、乾燥ＥｔＯＨ（３０ｍｌ,５％ジエチルエーテルで変性)に溶解した。化合物８ａ（５．５ｇ，４９．９ミリモル，粗製)を乾燥ＥｔＯＨ（４５ｍｌ)に溶解し、上記で調製したナトリウムエトキシド溶液を加えた。この混合物を室温で１５分間攪拌した後、シュウ酸ジエチル（６．８ｍｌ，４９．９ミリモル）を滴加した。反応混合物を予備加熱（６７℃）した油浴に入れ、この温度で４．５時間撹拌した。混合物を室温で一晩放置した。溶媒を留去し、ＥＡ（１００ｍｌ)と１Ｍ  ＨＣｌ（７０ｍｌ)を加え、有機相を分離した。水性相を、ＥＡ（５０ｍｌ)で再抽出した。合わせた有機相を水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を減圧留去し、残渣を、ヘキサン／ＭＴＢＥ９：１を溶離剤として用いてシリカ上で精製し、純粋な生成物８ｂを得た。収率：６．２９ｇ，二段階に対して５６％。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），δ（ｐｐｍ）：６．３６（ｓ，１Ｈ），４．８５−４．８０（ｍ，２Ｈ），４．３４（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．３５−３．２５（ｍ，１Ｈ），３．０５−２．８５（ｍ，４Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４５】
段階３：エチル＝１−イソプロピル−５−（３−メチレンシクロブチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（８ｃ）
化合物８ｂ（６．２９ｇ，２９．９ミリモル）を乾燥ＥｔＯＨ（６５ｍｌ，５％ＭｅＯＨで変性）に溶解し、イソプロピルヒドラジン塩酸塩（３．９７ｇ，３５．９ミリモル）を加えた。反応混合物を、室温で３時間撹拌した。溶媒を留去し、油状残渣にＥＡ（１００ｍｌ)、水（５０ｍｌ)および飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍｌ）を順次に加えた。層を分離し、水性相をＥＡ（５０ｍｌ)で再抽出した。合わせた有機相を塩水（７０ｍｌ)で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒を真空で留去し、残渣を減圧下で乾燥した。収率：７．２３ｇ（ＮＭＲによれば、ＥｔＯＡｃを３．４％ふくむ。再計算した純粋な収率：６．９８ｇ，９４％）。粗生成物８ｃは、ＨＰＬＣおよびＮＭＲによれば、９８％純度である。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），δ（ｐｐｍ）：６．６２（ｓ，１Ｈ），４．８８−４．８２（ｍ，２Ｈ），４．４２−４．３２（ｍ，３Ｈ），３．５６−３．４５（ｍ，１Ｈ），３．１７−３．０７（ｍ，２Ｈ），２．８８−２．７９（ｍ，２Ｈ），１．４９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ），１．３７（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４６】
段階４：エチル１−イソプロピル−５−（３−オキソシクロブチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（８ｄ）
化合物８ｃ（６．４５ｇ，２６．０ミリモル）を、ＭｅＣＮ（７７ｍｌ）と水（１３ｍｌ）の混合物に溶解し、氷浴中で冷却した。この溶液に、ＲｕＣｌ３×Ｈ２Ｏ（０．１９ｇ，０．８６ミリモル）を加えた後、ＮａＩＯ４（１９．３５ｇ，９０．９ミリモル）を少しずつ加えた。この添加中に、発熱が見られた。得られた粘稠なスラリーを、室温で４５分間撹拌した。反応混合物を、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（１０％，２６０ｍｌ）、水（５０ｍｌ)およびＤＣＭ（１００ｍｌ)で希釈した。相を分離し、水性相をＤＣＭ（２×７０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２Ｓ２Ｏ３水溶液（１０％，５０ｍｌ）、水（１００ｍｌ）、塩水（１００ｍｌ)で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。粗生成物（６．５ｇ）をシリカ上で精製し、ヘキサン／ＭＴＢＥで溶出し、純粋な生成物を油状生成物として得て、これは−２０℃で保管すると固化した。収率：５．８ｇ（二段階に対して７８％）。１Ｈ−ＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ６), δ（ｐｐｍ）：６．７８（ｓ，１Ｈ）， 4．５７（ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．２６（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８５−３．７５（ｍ，１Ｈ），３．５８−３．４５（ｍ，２Ｈ），３．３５−３．２５（ｍ，２Ｈ），１．３９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ），１．２８（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４７】
段階５：４−（（４−ブロモ−３−クロロフェノキシ）メチル）−５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール（８ｅ）
３−クロロ−４−ブロモフェノール（３．８ｇ，１８．３ミリモル）を（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メタノール（３．４７ｇ，１２．２ミリモル）およびトリフェニルホスフィン（６．４１ｇ，２４．４ミリモル）とトルエン（１５０ｍｌ)中で混合した。混合物を氷浴中で冷却し、ＤＩＡＤ（４．８ｍｌ，２４．４ミリモル）をトルエン（１０ｍｌ)溶液として滴加した。反応を室温で２１時間撹拌し、溶媒をロータバップ上で留去し、黄色油状残渣が残った。これをＤＣＭ（２００ｍｌ)に溶解し、シリカ（約２０ｇ）を加え、混合物を蒸発乾固した。この材料をシリカカラムの最上部に載せ、ヘキサン／ＭＴＢＥ９：１で溶出して精製した。生成物を含む画分をプールし、溶媒を減圧下にて留去し、純粋な生成物８ｅが無色の油状生成物として残り、これは、一晩真空乾燥したところ結晶化した。収率：５．０７ｇ（８８％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），δ（ｐｐｍ）：７．４５−７．３０（ｍ，４Ｈ），６．９０（ｓ，１Ｈ），６．６０−６．５５（ｍ，１Ｈ），２．１５−２．０７（ｍ，１Ｈ），１．３２−１．２５（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．１１（ｍ，２Ｈ）。
【０１４８】
段階６：エチル＝５−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（８ｆ）
ＬｉＣｌ（０．６８４ｇ，１６．１５ミリモル）を室温でＴＨＦ（２０ｍｌ)に溶解し、ｉＰｒＭｇＣｌ（２．０ＭのＴＨＦ溶液，８．１ｍｌ，１６．１５ミリモル）を加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、氷浴中で冷却し、化合物８ｅ（２．５５ｇ，５．３８ミリモル）のＴＨＦ（２０ｍｌ)溶液を５分間かけて加えた。冷却槽を外し、混合物を室温で４時間撹拌した。混合物を−１０℃まで冷却し、化合物８ｄ（１．４８ｇ，５．９２ミリモル）のＴＨＦ（１６ｍｌ)溶液を素早く加えた。混合物を室温で９０分間撹拌した後、０．５Ｍ  ＮａＨＳＯ４水溶液（３５ｍｌ)とＥＡ（５０ｍｌ)を加えた。生成混合物を１０分間撹拌し、層を分離し、水性層をＥＡ（３０ｍｌ)で抽出した。合わせた有機相をＮａＨＣＯ３水溶液（５０ｍｌ)、塩水（５０ｍｌ)で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥した。溶媒の留去後に、粗生成物 (３．７９ｇ）を白色フォームとして得た。この粗生成物３．６ｇをシリカカラム上でヘキサン/ＥＡ３：２で溶出して精製し、純粋な生成物８ｆを白色フォームとして得た。収率：１．６２ｇ（４９％）。１Ｈ−ＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ６), δ（ｐｐｍ）：７．６５−７．４７（ｍ，４Ｈ），６．９３−６．９１（ｍ，１Ｈ），６．７９−６．７２（ｍ，１Ｈ），６．６５（ｓ，１Ｈ），５．４８（ｓ，１Ｈ），４．９２（ｓ，２Ｈ），４．４２（ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．２６（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．３２（ｓ，２Ｈ），３．２２−３．１４（ｍ，２Ｈ），３．０５−２．９０（ｍ，１Ｈ），２．４５−２．３５（ｍ，２Ｈ），１．３５−１．１０（ｍ，１４Ｈ）。
【０１４９】
段階７：５−（（１ｓ，３ｓ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（８）
化合物８ｆ（１．６０ｇ，２．４８ミリモル）をＴＨＦ（１００ｍｌ)に溶解した後、ＭｅＯＨ（５０ｍｌ)、水（５０ｍｌ)およびＬｉＯＨ×Ｈ２Ｏ（１．０４ｇ，２４．８ミリモル）を順次に加えた。混合物を室温で４．５時間撹拌した後、減圧濃縮して、ＭｅＯＨおよびＴＨＦを留去した。残っている水溶液を、１Ｍ  ＨＣｌ水溶液（２４ｍｌ）を加えて酸性にし、ｐＨが４．０５に達するようにした（ｐＨ電極コントロール）。既にｐＨが約７で沈澱が形成し始めた。形成した固形物を濾別し、フィルター上で水で洗浄し、室温で真空乾燥して、生成物８を白色粉末として得た。収率：１．４０ｇ（９２％）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），δ（ｐｐｍ）：７．４４−７．３２（ｍ，４Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），６．７５（ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．８３（ｓ，２Ｈ），４．３５−４．２０（ｍ，１Ｈ），３．２５−３．１４（ｍ，２Ｈ），３．０４−２．９０（ｍ，１Ｈ），２．６２−２．５４（ｍ，２Ｈ），２．２１−２．１１（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ），１．３４−１．２８（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．１４（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），δ（ｐｐｍ）：１７２．７，１６４．８，１５９．２，１５８．４，１４７．３，１４１．３，１３５．８，１３４．１，１３２．８，１３１．３，１２８．１，１２７．６，１２７．３，１１７．７，１１３．３，１１０．０，１０６．３，７３．１，５９．８，５１．１，４１．７，２２．６，２２．０，８．５，７．８。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ：６１６．４［Ｍ＋１］＋。
【０１５０】
実施例８Ａ：  ５−（（１ｒ，３ｒ）−３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレート（８Ａ）
【０１５１】
【化２６】
0005986633.tif 000027
【０１５２】
実施例８Ａは、８について記載した通り粗生成物８ｆをエステル加水分解しかつ少量異性体(minor isomer)としての粗生成物８から分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって単離することによって調製することかできる。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），δ（ｐｐｍ）：７．４２−７．３０（ｍ，２Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７５−６．６５（ｍ，１Ｈ），６．５７（ｓ，１Ｈ），４．７９（ｓ，２Ｈ），４．５０−４．４１（ｍ，１Ｈ），３．９６−３．８５（ｍ，１Ｈ），２．９８−２．９０（ｍ，２Ｈ），２．６７−２．５７（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．０９（ｍ，１Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ），１．３２−１．１４（ｍ，４Ｈ）。 １３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３），δ（ｐｐｍ）：１７２．６，１６６．２，１５９．２，１５８．４，１４７．４，１４１．２，１３５．７，１３４．６，１３２．８，１３１．３，１２８．１，１２７．７，１２７．５，１１６．８，１１３．５，１１０．０，１０５．８，７５．１，５９．８，５１．２，４１．８，２５．４，２２．６，８．５，７．８。ＭＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ：６１６．３［Ｍ＋１］＋。
【０１５３】
主異性体（化合物８）および少量異性体（化合物８Ａ）の渡環配置は、ＮＯＥ実験によって確かめた。プロトン間のＮＯＥを示している検出結果を、二重矢印によって下図に示す。
【０１５４】
【化２７】
0005986633.tif 000028
芳香族残基の１，３−トランス渡環配置を有する実施例８について検出されたＮＯＥ
【０１５５】
【化２８】
0005986633.tif 000029
芳香族残基の１，３−シス渡環配置を有する実施例８Ａについて検出されたＮＯＥ
【０１５６】
実施例９：  メチル＝ ６−（３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート（９）
【０１５７】
【化２９】
0005986633.tif 000030
【０１５８】
段階１：メチル＝１−メチル−６−ビニル−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート（９ａ）
メチル＝６−ブロモ−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート（６０ｍｇ，０．２２ミリモル）をＤＭＦ（１０ｍｌ)に溶解したものに、トリブチル（ビニル）スズ（９９μｌ，０．３４ミリモル）、Ｐｄ（Ｐｈ３）４（１１ｍｇ，９μモル）を加えた。転化を完了した後、混合物を９０℃で４時間Ａｒ下にて撹拌した。次いで、溶媒を減圧留去した。ＣＣによって精製し、化合物９ａ（５２ｍｇ，８８％）を得た。
【０１５９】
段階２：メチル＝ １−メチル−６−（３−オキソシクロブチル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート（９ｂ）
実施例７／段階２に記載の手順に従って、化合物９ｂを９ａから５７％の収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３) δ：８．１４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１３（ｓ，３Ｈ），３．９９（ｓ，３Ｈ），３．８７−３．７９（ｍ，１Ｈ），３．５８−３．５1（ｍ，２Ｈ），３．３３−３．２６（ｍ，２Ｈ）。ｍ／ｚ：２５９［Ｍ＋１］＋。
【０１６０】
段階３：メチル＝ ６−（３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−カルボキシレート（９）
実施例７／段階３に記載の手順に従って、化合物９を９ｂから４０％の収率で得た。
【０１６１】
実施例１０：  ６−（３−（２−クロロ−４−（（５−シクロプロピル−３−（２，６−ジクロロフェニル）イソキサゾール−４−イル）メトキシ）フェニル)−３−ヒドロキシシクロブチル）−１−メチル−１Ｈ−インダゾール−３−カルボン酸（１０)
【０１６２】
【化３０】
0005986633.tif 000031
【０１６３】
実施例８に記載の手順に従って、化合物１０を化合物９から白色固形物として４５％の収率で得た。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３) δ：８．１４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４３−７．３２（ｍ，４Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ），６．９２（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．８４（ｓ，２Ｈ），４．１８（ｓ，３Ｈ），３．４５−３．４０（ｍ，１Ｈ），３．２８−３．２３（ｍ，２Ｈ），３．１９−３．１０（ｍ，１Ｈ），２．６８−２．６３（ｍ，２Ｈ），２．２１−２．１４（ｍ，１Ｈ），１．３３−１．２９（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．１５（ｍ，２Ｈ）。ｍ／ｚ：６３８［Ｍ＋１］＋。
【０１６４】
調製実施例１１
【０１６５】
【化３１】
0005986633.tif 000032
【０１６６】
段階１：メチル＝５−（３−ヒドロキシアゼチジン−１−イル）ニコチネート（１１ａ）
メチル＝５−ブロモニコチネート（２.００ｇ，９．２６ミリモル）、アゼチジン−３−オール（１．０１ｇ，９．２６ミリモル）、Ｃｓ２ＣＯ３（９．０６ｇ，２７．８ミリモル）、ＢＩＮＡＰ（１．１５ｇ，１．８５ミリモル）およびＰｄ（ＯＡｃ）２（０．４４ｇ，１．８５ミリモル）を乾燥ジオキサン（１１５ｍｌ)中で混合したものを、Ｎ２雰囲気下にて８５℃で一晩加熱した。生成混合物を濾過し、減圧濃縮し、分取ＨＰＬＣによって精製し、化合物１１ａ（２５０ｍｇ，１３％）を黄色固形物として得た。
【０１６７】
段階２：メチル＝５−（３−オキソアゼチジン−１−イル）ニコチネート（１１）
化合物１１ａ（２５０ｍｇ，１．２０ミリモル）を乾燥ＤＣＭ（１５ｍｌ)に溶解したものに、デス−マーチン・ペリオジナン（１．０１４ｇ， ２．４０ミリモル）をＮ２雰囲気下にて０℃で加え、溶液を室温で２時間撹拌した。生成溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で反応停止し、ＥＡで希釈した。有機部分を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、減圧濃縮し、ＣＣ（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１５０：１）によって精製し、化合物１１（１４０ｍｇ，５７％）を黄色固形物として得た。
【０１６８】
調製実施例１２
【０１６９】
調製実施例１１に記載したのと同様の手順を用いて、下記の化合物を調製した。
【０１７０】
【化３２】
0005986633.tif 000033
【０１７１】
実施例１３／１−１３／９
下表は、上記の調製実施例および実施例に従って調製した更なる例を示している。総ての表記した化合物は、単一異性体として調製した。
【０１７２】
【表１】
0005986633.tif 000034
【表２】
0005986633.tif 000035

【０１７３】
実施例１４／１および１４／２
実施例１−１３および上記のスキームに記載したのと同様の手順を用いて、適当な成分を用いることによって、下記の化合物を得た。
【０１７４】
【表３】
0005986633.tif 000036
【０１７５】
下記の化合物は、上記したのと同様の手順を用いることによって同じ方法で調製することができる。
【０１７６】
【化３３】
0005986633.tif 000037
【０１７７】
分析
ＦＲＥＴ活性分析
核レセプターＦＸＲへ結合するリガンドを定量するためのリガンドが介在したコファクターペプチド相互作用の測定は、次のようにして行った：ヒトＦＸＲαリガンド結合ドメインの調製：ヒトＦＸＲαＬＢＤを、Ｎ−末端のＧＳＴタグ付き融合タンパク質として大腸菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）で発現させた。ＦＸＲリガンド結合ドメインをコードするＤＮＡを、ベクターｐＤＥＳＴ１５(Invitrogen) にクローニングした。発現を、ＩＰＴＧ誘導性Ｔ７プロモーターによって制御した。リガンド結合ドメインのアミノ酸境界は、データベース見出しＮＭ＿００５１２３（ＲｅｆＳｅｑ）のアミノ酸１８７−４７２であった。ＦＸＲ-ＬＢＤの発現および精製：形質転換した大腸菌株の一晩前培養したものをＬＢ−アンピシリン培地で１：２０に希釈し、ＯＤ６００＝０．４〜０．６の光学濃度まで３０℃で成長させた。次いで、０．５ｍＭ  ＩＰＴＧを添加して、遺伝子発現を誘導した。細胞を、３０℃、１８０ｒｐｍで更に６時間インキュベーションした。細胞を、遠心分離（７０００×ｇ，７分間，室温）によって集めた。最初の細胞培養物１リットルに、細胞を１０ｍｌリーシス緩衝液（５０ｍＭグルコース、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．９、１ｍＭ ＥＤＴＡおよび ４ｍｇ／ｍｌリゾチーム）に再懸濁し、氷上に３０分間放置した。次いで、細胞に音波処理を施し、細胞破片を遠心分離（２２０００×ｇ，３０分間，４℃）によって除去した。上清１０ｍｌに、前洗浄したグルタチオン４Ｂセファローススラリー(Qiagen)０．５ｍｌを加え、懸濁液を４℃で１時間緩やかに回転させ続けた。グルタチオン４Ｂセファロースビーズを遠心分離（２０００×ｇ，１５秒間，４℃）によってペレット化させ、洗浄緩衝液（２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ，５０ｍＭ  ＫＣｌ，４ｍＭ ＭｇＣｌ２および１Ｍ  ＮａＣｌ)で２回洗浄した。ペレットを、最初の培養物１リットル当たり３ｍｌの溶出緩衝液に再懸濁した（溶出緩衝液：２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，６０ｍＭ  ＫＣｌ，５ｍＭ  ＭｇＣｌ２および８０ｍＭ  粉末として使用直前に添加したグルタチオン）。懸濁液を４℃で１５分間回転させ、ビーズをペレット化し、最初の時の半分の容量の溶出緩衝液で再度溶出した。溶出液をプールし、６０ｍＭ  ＫＣｌ，５ｍＭ  ＭｇＣｌ２並びに１ｍＭジチオトレイトールおよび１０％（ｖ／ｖ）グリセロールを含む２０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ緩衝液（ｐＨ７．５）中で一晩透析した。タンパク質を、ＳＤＳ−Ｐａｇｅによって分析した。
【０１７８】
この方法は、精製細菌で発現したＦＸＲリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ)とＳＲＣ−１の残基６７６−７００（ＬＣＤ２，６７６−７００）に基づく合成ビオチン化ペプチドとの相互作用を調節する推定リガンドの能力を測定する。用いたペプチドの配列は、Ｂ−ＣＰＳＳＨＳＳＬＴＥＲＨＫＩＬＨＲＬＬＱＥＧＳＰＳ−ＣＯＯＨであって、Ｎ−末端はビオチン化（Ｂ）されていた。ＦＸＲのリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）は、ベクターｐＤＥＳＴ１５を用いてＢＬ−２１細胞におけるＧＳＴとの融合タンパク質として発現した。細胞を、音波処理によってリーシスし、融合タンパク質をグルタチオンセファロース(Pharmacia)上で製造業者の指示に従って精製した。ＦＸＲ−ペプチド相互作用に対するそれらの影響をスクリーニングするため、Ｐｅｒｋｉｎ  ＥｌｍｅｒのＬＡＮＣＥ手法を応用した。この方法は、ドナーからアクセプターである目的の結合パートナーに付着した蛍光団への結合依存性エネルギー移動に依存している。取扱いを容易にしかつ化合物蛍光からのバックグラウンドを減少させるため、ＬＡＮＣＥ手法は一般的な蛍光団ラベルを用い、時間分解検出分析は、２０−６０ｎｇ／ウェルのＧＳＴに融合した組換え発現ＦＸＲ-ＬＢＤ、ＳＲＣ１アミノ酸６７６−７００を表す２００−６００ｎＭのＮ−末端がビオチン化したペプチド、２００ｎｇ／ウェルのストレプトアビジン−ｘｌＡＰＣ接合体（プロザイム）および６−１０ｎｇ／ウェルのＥｕ  Ｗ１０２４−抗ＧＳＴ(Perkin Elmer)を含むＴｒｉｓを基剤とする緩衝液（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ ７．５；６０ｍＭ  ＫＣｌ，５ｍＭ  ＭｇＣｌ２；３５ｎｇ／μｌ  ＢＳＡ）中で、３８４ウェル／プレートで２５μｌの最終容積で行った。試料のＤＭＳＯ含量は、１％に保った。分析混合物の生成および潜在的ＦＸＲ調節リガンドの希釈の後、分析物をＦＩＡ−プレートブラック３８４ウェル(Greiner)中で、室温にて暗所で１時間平衡にした。ＬＡＮＣＥシグナルは、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＶＩＣＴＯＲ２ＶＴＭマルチラベルカウンターによって検出した。結果を、６６５および６１５ｎｍにおける放射光間の比率をプロットすることによって可視化した。ＦＸＲ-ペプチド形成の基底レベルは、添加リガンドの非存在下にて観察された。複合体形成を促進するリガンドは、時間分解蛍光シグナルにおける濃度依存性増加を誘導する。モノマー性ＦＸＲおよびＦＸＲ−ペプチド複合体のいずれにも等しく良好に結合する化合物は、シグナルが変化しないことが予想されるが、モノマー性レセプターに優先的に結合するリガンドは、観察されるシグナルが濃度依存的減少を誘導することが予想される。 
【０１７９】
化合物の抑制的潜在性を評価するため、ＥＣ５０値を、例えば、下記の表１に示す化合物について測定した（Ａ＝ＥＣ５０＜２５ｎＭ；Ｂ＝２５≦ＥＣ５０＜１００ｎｍ；Ｃ＝ＥＣ５０ ≧１００ｎＭ）。
【０１８０】
【表４】
0005986633.tif 000038
【０１８１】
哺乳類ワンハイブリッド（Ｍ１Ｈ）分析
ＦＸＲのリガンド結合介在活性化を定量するためのリガンドが介在したＧａｌ４プロモーター被動トランス活性化の測定は、下記のようにして行った：ＦＸＲリガンド結合ドメインをコードするｃＤＮＡ部分を、ＣＭＶプロモーターの制御下で酵母ＧＡＬ４  ＤＮＡ結合ドメインへの融合体としてのｐＣＭＶ−ＢＤ(Stratagene)へクローニングした。リガンド結合ドメインのアミノ酸境界は、データベース見出しＮＭ＿００５１２３（ＲｅｆＳｅｑ）のアミノ酸１８７−４７２であった。プラスミドｐＦＲ−Ｌｕｃ(Stratagene)を、酵母ＧＡＬ４結合部位の５つのタンデム配列を有する剛性プロモーターを含み、レポーター遺伝子としてのフォティナス・ピラリス（Photinus pyralis；アメリカホタル）ルシフェラーゼ遺伝子を発現させるレポータープラスミドとして用いた。実験場の正確性を向上させるため、プラスミドｐＲＬ−ＣＭＶ(Promega)を同時形質導入した。ｐＲＬ−ＣＭＶは、構成的ＣＭＶプロモーターを含み、レニラ・レニフォルミス(Renilla reniformis)ルシフェラーゼの発現を制御する。 総てのＧａｌ４レポーター遺伝子分析は、Ｌ−グルタミン、および１０％胎児ウシ血清、０．１ｍＭ非必須アミノ酸、１ｍＭピルビン酸ナトリウムおよび１００単位のペニシリンし／ストレプトアビジン／ｍｌを補足したイーグルＢＳＳを含むを含むＭＥＭ中で５％ＣＯ２にて３７℃で増殖させたＨＥＫ２９３細胞（ＤＳＭＺから取得、ブラウンシュバイク、ドイツ）で行った。培地および補足物は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎから得た。分析のため、９６ウェルプレートでウェル当たり５×１０５個の細胞を、フェノールレッドおよびＬ−グルタミンを含まず、１０％木炭／デキストラン処理したＦＢＳ（HyClone，サウスローガン，ユタ）、０．１ｍＭ非必須アミノ酸、２ｍＭグルタミン、１ｍＭピルビン酸ナトリウムおよび１００単位／ｍｌのペニシリン／ストレプトアビジンを補足したイーグルＢＳＳを含み、５％ＣＯ２にて３７℃でインキュベーションした１００μｌ／ウェルのＭＥＭに播種した。翌日、細胞は、＞９０％コンフルエンスであった。培地を除去し、細胞を、前記の３種類のプラスミドを包含するＯｐｔｉＭＥＭ−ポリエチレンイミンを基剤としたトランスフェクション試薬（ＯｐｔｉＭＥＭ， Invitrogen；ポリエチレンイミン，Aldrich Cat No. 40,827-7）２０μｌ／ウェルを用いて一時的にトランスフェクションした。細胞の播種に用いたのと同じ組成を有するＭＥＭを、トランスフェクション混合物の添加の２−４時間後に加えた。次いで、ＭＥＭで前希釈した化合物ストックを加えた（最終的ビヒクル濃度は、０．１％を超過しない）。細胞を更に１６時間インキュベーションした後、ホタルおよびレニラルシフェラーゼ活性を、デュアル・ライト・ルシフェラーゼ・アッセイ系(Dyer et al., Anal. Biochem. 2000, 282, 158&#8211;161)を用いて同じ細胞抽出物で順次測定した。総ての実験は、３回ずつ行った。
【０１８２】
実施例の化合物のＦＸＲ作動薬能力を評価するため、能力範囲を下記の表２に示したようにＭ１Ｈ分析で測定した（Ａ＝ＥＣ５０＜２５ｎＭ；Ｂ＝２５≦ＥＣ５０＜１００ｎｍ；Ｃ＝ＥＣ５０ ≧１００ｎＭ）。
【０１８３】
【表５】
0005986633.tif 000039
【０１８４】
水溶解度分析
ＰＢＳ，ｐＨ７．４における水溶解度を、下記のようにして測定した。１０ｍＭ化合物貯蔵溶液／ＤＭＳＯを、ＰＢＳ（ｐＨ７．４）に加えて、２００μＭの理論最終濃度に到達させた。生成溶液／懸濁液を１２５０ｒｐｍで１時間振盪した後、室温で暗所に２３時間保管した。この時点で、総ての沈澱を、３９００ｒｐｍで３０分か遠心分離することによって溶液から分離する。水溶解度は、有機溶媒（メタノール／水６０：４０，ｖ／ｖ）での較正標準（２００μＭ）における基準ピークのピーク面積を緩衝液試料における対応するピークのピーク面積と比較することによって測定した。検出方法としては、２３０ｎｍでのＨＰＬＣ−ＵＶ／ＶＩＳを用いた。
【０１８５】
平行人工膜透過分析（ＰＡＭＰＡ）
ＰＡＭＰＡのために、試験項目の５ｍＭ貯蔵溶液をＤＭＳＯで調製した。参照項目の５ｍＭ貯蔵溶液を、それぞれ、ＥｔＯＨ（カルバマゼピン、グアナベンツ）またはＥｔＯＨ：Ｈ２Ｏ １：１（ｖ／ｖ）セフトリアキソンで調製した。化合物をＰＢＳ（ｐＨ７．４）で希釈し、各有機溶媒の５％と２５０μＭ参照化合物または１０μＭ試験項目をそれぞれ含む出発溶液を得た。分析のため、Kansy et al.に記載のＰＡＭＰＡ(Kansy et al. J. Med. Chem. 1998, 41, 1007)の変更手順を用いた。低（セフトリアキソン）、中（グアナベンツ）および高透過（カルバマゼピン）に対する参照化合物を、内部コントロールとして包含した。
【０１８６】
透過実験は、９６ウェル・マルチスクリーン・イモビロン（アクセプター）によって被覆されたマルチスクリーン９６ウェルトレイ（ドナー）中で行った。イモビロンプレートの疎水性フィルター材料を７０％エタノールでプレウエットし、脂質溶液（ドデカンに溶解したレシチン）で処理した。ドナープレートを試験化合物および参照化合物で満たし、両プレートを互いに挿入し、オービタル・シェーカー上に１００ｒｐｍで１５分間置いた。輸送研究を、試験および参照化合物を含む１５０μｌＰＢＳ緩衝液をドナープレートに加えることによって開始した。室温で１５−１６時間拡散させた後、アクセプターおよびドナープレートの内容物を集め、ＬＣ／ＭＳ検出（試験項目）を用いて、またはＳｐｅｃｔｒａｍａｘ  Ｐｌｕｓ３８４(Molecular Devices)（参照項目）を用いるＵＶ分光学によって定量した。参照項目であるセフトリアキソン、グアナベンツおよびカルバマゼピンに対する吸収極大は、それぞれ２４０ｎｍ、２７０ｎｍおよび２８６ｎｍであった。回収試料は、透過分析試料について記載した方法で調製し、同じ条件下で透過期間中典型的なバイアル中でインキュベーションした。
【０１８７】
試験項目のＬＣ／ＭＳ分析のため、１００μｌのインキュベートをアクセプターおよびドナー区画から取り出し、下記のようにアセトニトリル（ＡＣＮ）沈澱のために処理した。更に、脂質層からの試験項目試料は、それぞれのウェルを１５０μｌＥＡで洗浄することによって抽出した。溶液を１．５ｍｌ反応管に集め、溶媒を蒸発させた。乾燥した残渣を、アクセプターおよびドナー試料の組成を反映してＰＢＳ／ＤＭＳＯ／ＡＣＮ混合物に再懸濁した（すなわち、５％ＤＭＳＯ、２００μｌ  ＡＣＮ＋ＩＳＴＤを補足した１００μｌ緩衝液）。それぞれの試料の最終的溶媒含量は、６６％ＡＣＮであった。
【０１８８】
ドナーおよびアクセプター区画からの試料および較正標準を、それぞれ２００μｌＡＣＮ／ＩＳＴＤまたは４００μｌＡＣＮ／ＩＳＴＤを添加によって沈澱させた。激しい振盪（１０秒間）および遠心分離（４８００×ｇで室温にて５分間）の後、粒子を含まない上清にＬＣ−ＭＳ／ＭＳを施した。膜区画は、上記のようにして抽出した。再構成の後、試料を激しく振盪し（１０秒間）、遠心沈澱した（４８００×ｇで室温にて５分間）。粒子を含まない上清にＬＣ−ＭＳ／ＭＳを施した。
【０１８９】
本発明の化合物の分析のため、ＨＰＬＣ装置は、Ａｃｃｅｌａ  Ｕ−ＨＰＬＣ ポンプとＡｃｃｅｌａオートサンプラー（Thermo Fisher Scientific, 米国）からなっていた。質量分析法は、標準的ソフトウェアＸｃａｌｉｂｕｒ  ２．１を実行するＰＣに接続した加熱エレクトロスプレー（Ｈ−ＥＳＩ２）インターフェース（Thermo Fisher Scientific, 米国）を備えたＥｘａｃｔｉｖｅ質量分析機（精密質量のオービトラップ手法）で行った。
【０１９０】
ＬＣは、グラディエント方式（表３）で、ＡＣＮ／０．１％ギ酸を有機相（Ａ）とし、１０ｍＭギ酸アンモニウム／０．１％ギ酸を水性相（Ｂ）として用いて行い、ポンプ流量を５００μｌ／分に設定した。分離は、プレカラム（Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ６−Ｐｈｅｎｙｌ，３μｍ，４×２．０ｍｍ）を備えたＧｅｍｉｎｉ  Ｃ６−Ｐｈｅｎｙｌ，３μｍ，５０×２．０ｍｍ（Phenomenex, ドイツ）上で行った。
【０１９１】
【表６】
0005986633.tif 000040
【０１９２】
ＭＳチューンファイルとしては、一般的なチューンファイルを陽または陰イオンモードを応用して総ての分析物に用いた。内部質量較正のためのロック質量としては、溶媒系に偏在するフタル酸ジイソオクチル（ｍ／ｚ  ３９１．２８４２９）の［Ｍ＋Ｈ］＋イオンを用いた。
【０１９３】
分析物は、モノアイソトピック［Ｍ＋Ｈ］＋または［Ｍ-Ｈ］-イオンの予想質量付近の±トムソンを掃引することによって得た。Ｏｒｂｉｔｒａｐの質量分機能を、５０，０００に設定した。それぞれの分析物の精密質量を、ピーク積分に用いた。更なる機器設定は、下記の通りであった：ＨＣＤ−Ｇａｓオフ、ＡＧＣ高ダイナミックレンジ、最大トラップ注入時間 １００ｍｓ、シースガス３０、補助ガス８、掃引ガス２、スプレー電圧４ｋＶ、キャピラリー温度２５０℃、ＥＳＩ  ２ヒーター温度２５０℃。
【０１９４】
本発明の目的は、ＷＯ  ２０１１／０２０６１５号公報に記載の化合物と比較して物理化学的特性が向上したＦＸＲ-作動薬を生成することであった。これは、前者の１，２−シクロプロピリデン環に代えて１，３−シクロブチリデンまたは１，３−アゼチジニリデン基上に極性ヒドロキシル基を導入することによって達成された。
【０１９５】
【化３４】
0005986633.tif 000041
【０１９６】
驚くべきことには、生成化合物は、ＦＸＲレセプターに対して活性を保持したが、一層高い水溶解度および／または膜透過性のような向上した物理化学特性を示した。２つのシリーズの対応する化合物の直接比較を、表４に示す。
【０１９７】
【表７】
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【０１９８】
【表８】
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【０１９９】
それぞれの場合に、水溶解度またはＰＡＭＰＡ膜透過性のいずれかまたは両方は、ヒドロキシ−シクロブチルまたはヒドロキシ−アゼチジニル残基の導入によって有意に向上する。大部分の核レセプター活性分子として、ＦＸＲ作動薬は一般的に極めて親油性が高い(M. L. Crawley, Expert Opin. Ther. Patents 2010, 20, 1047)。従って、一層良好な水溶解度および膜透過性は、経口バイオアベイラビリティーと、一般に薬剤としてのこれらの化合物の臨床開発の適合性が一層良好になると思われる (L. Huang, J. Dong, S. Karki in Evaluation of drug candidates for preclinical development (Eds. C. Han, C. B. Davis, B. Wanｇ），Wiley & Sons, Hoboken 2010, 187-217)。