(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体活性ガラスと固体酸性粒子を含み、
前記生体活性ガラスが、原料としてＳｉＯ２、ＣａＯ、Ｎａ２Ｏ、およびＰ２Ｏ５を含み、
以下の配合を調製し、最後にｐＨを８．０±０．３に調節してなるｐＨ緩衝生体活性ガラスであって、
以下の配合において、含有量は質量部であることを特徴とするｐＨ緩衝生体活性ガラス。
ＳｉＯ２  ４０〜６０              ＣａＯ  １５〜３０
Ｎａ２Ｏ  １５〜３０              Ｐ２Ｏ５  ２〜８
固体酸性粒子  ３〜７
【請求項２】
錠剤、カプセル剤、または懸濁液剤であることを特徴とする請求項１に記載のｐＨ緩衝生体活性ガラス。
【請求項３】
前記固体酸性粒子が、固体クエン酸粒子であることを特徴とする請求項１または２に記載のｐＨ緩衝生体活性ガラス。
【請求項４】
錠剤、またはカプセル剤であることを特徴とする請求項３に記載のｐＨ緩衝生体活性ガラス。
【請求項５】
１）前記配合比の原料を高温で溶融して、生体活性ガラスを形成する工程と、
２）前記得られる生体活性ガラスを、前記配合比の固体酸性粒子で均一に混合して、前記ｐＨ緩衝生体活性ガラスを得る工程と、
を有する請求項１〜４のいずれか１項に記載のｐＨ緩衝生体活性ガラスの製造方法。
【請求項６】
胃・十二指腸潰瘍の予防・治療および／または胃・十二指腸潰瘍の再発防止の薬物を製造するための、請求項１〜４のいずれか１項に記載のｐＨ緩衝生体活性ガラスの使用。
【請求項７】
前記胃・十二指腸潰瘍が、胃潰瘍である請求項６に記載の使用。
【請求項８】
前記胃・十二指腸潰瘍が、ストレス性胃潰瘍、または慢性胃潰瘍である請求項７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ｐＨ緩衝生体活性ガラス、およびその製造方法と使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
中国、引いては全世界において、胃病を患う患者は全人口の１０％を占め、統計データからすれば、全世界で患者数が最も多い三大疾病の一つである。胃・十二指腸潰瘍の治癒後の再発率が非常に高く、自然な病気の経過は８〜１０年にも及び、薬物維持療法は重要な措置である。現在、慣用の薬物は、制酸剤、粘膜保護剤、抗生物質の三大種類の数十種もある。しかしながら、医薬物市場には、軟組織細胞の成長を促進でき、胃粘膜組織の損傷である潰瘍の修復癒合に直接かつ根本的な治療効果を有する薬物はまだない。実際に、現在の薬物では、胃粘膜潰瘍の損傷を完全に癒合させることができず、保護および良好な環境を維持する働きをするに過ぎず、潰瘍は患者自身の癒合能力で癒合するしかない。そのため、癒合が遅くなり、また、患者自身の癒合能力が弱い場合、潰瘍が完全に癒合できないため、再発率が高く、病気の経過が長くなってしまう。特許文献１には、生体活性ガラスが粘膜の上皮細胞の成長を促進し、粘膜組織の損傷である潰瘍に対して直接修復・癒合の作用を持ち、胃と十二指腸潰瘍を根本的に治癒する効果を奏すると共に、液体環境で比較的早くｐＨを高め、酸性環境を中和することができ、胃潰瘍の癒合に良好な環境を形成できることが報告されている。このような特徴は、現在の胃潰瘍薬のいずれもが備えていないものである。これにより、薬物治療の有効性が大きく向上し、患者の治療期間が短縮され、潰瘍の再発率が低下することになる。ところが、特許文献１には、最も安全で効果的な生体活性ガラス組成物製剤について詳しく記載されていない。
【０００３】
なお、生体活性ガラスは、液体中で急速にｐＨを１２に上昇させる。このような強アルカリ性ｐＨでは、新薬として安全でなく、人体組織と器官に悪影響を及ぼすおそれがある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】中国特許ＣＮ１２７９９２４Ｃ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明者がさらに実験により鋭意検討した結果、生体活性ガラスの組成がその安全性および治療の有効性に大きな影響を及ぼすことを見出し、胃・十二指腸潰瘍の治療に最も安全で効果的な生体活性ガラスの最適組成について検討し、本発明に至った。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は上記課題を解決するために、生体活性ガラス組成物製剤のｐＨを調節でき、かつ治療効果に優れ、投薬量が少ないｐＨ緩衝生体活性ガラスを提供する。
【０００７】
本発明の形態は下記の通りである。
生体活性ガラスと固体酸性粒子を含む組成Ａ、または生体活性ガラスとＴｒｉｓ緩衝液を含む組成Ｂからなり、
前記生体活性ガラスが、原料としてＳｉＯ２、ＣａＯ、Ｎａ２Ｏ、およびＰ２Ｏ５を含み、前記組成Ａ、組成Ｂを以下の配合で調製し、最後にｐＨを８．０±０．３に調節してなるｐＨ緩衝生体活性ガラスであって、
前記組成Ａにおける含有量は質量部であり、前記組成Ｂにおける含有量はＴｒｉｓ  １００ｍｌに含有する原料のグラム数であることを特徴とするｐＨ緩衝生体活性ガラス。
組成Ａ：
ＳｉＯ２  ４０〜６０           ＣａＯ  １５〜３０
Ｎａ２Ｏ  １５〜３０           Ｐ２Ｏ５  ２〜８
固体酸性粒子  ３〜７
組成Ｂ：
ＳｉＯ２  ０．０００３〜２２．５ｇ     ＣａＯ  ０．０００１〜１２．２５ｇ
Ｎａ２Ｏ  ０．０００１〜１２．２５ｇ   Ｐ２Ｏ５  ０．００００４〜３ｇ
Ｔｒｉｓ緩衝液ベース  １００ｍｌ
【０００８】
本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスは、純粋な生体活性ガラス（ＳｉＯ２、ＣａＯ、Ｎａ２Ｏ、Ｐ２Ｏ５、Ｂ２Ｏ３）粒子の表面反応による局所的なｐＨの急上昇（１２になる）を緩衝して、治療効果と投薬の安全性を実現する。また、本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスは、慢性胃潰瘍の５０％有効量ＥＤ５０が僅か０．４ｍｇ／ｋｇ／ｄであり、現在の最も優れた薬物であるオメプラゾールよりも３倍程度少なくなっている（オメプラゾールのＥＤ５０は１．３ｍｇ／ｋｇ／ｄである）。
【０００９】
本願のｐＨ緩衝生体活性ガラスは、ストレス性胃潰瘍の予防（予防的投与）において、現在の代表的な薬物（ヒドロタルサイト）に相当し、慢性胃潰瘍の治療（治療的投与）および慢性胃潰瘍の再発予防において、他の薬物と比べて薬効が顕著であり、効果も大きい（少ない投与量でも最適効果を奏し得る）。このことも、本願のｐＨ緩衝生体活性ガラスの潰瘍に対する修復癒合作用の表れである。
【００１０】
本発明は、さらに、
１）前記配合比の原料を高温で溶融して、生体活性ガラスを形成する工程と、
２）前記得られる生体活性ガラスを、前記配合比の固体酸性粒子（組成Ａ）またはＴｒｉｓ緩衝液（組成Ｂ）で均一に混合して、前記ｐＨ緩衝生体活性ガラスを得る工程と、
を有するｐＨ緩衝生体活性ガラスの製造方法に関する。
【００１１】
本発明は、さらに、胃と十二指腸潰瘍の予防・治療および再発防止の薬物の製造のための、ｐＨ緩衝生体活性ガラスの使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は効果例２におけるｐＨ緩衝生体活性ガラスの効果（ｐＨとストレス性胃潰瘍の抑制効果実験）を示す図である。
【図２】図２は効果例２におけるｐＨ緩衝生体活性ガラスの効果（ｐＨとストレス性胃潰瘍の抑制効果実験）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、実例を参照して本発明を実施するための形態について詳しく説明する。特に断りがない限り、本願の含有量割合または含有率はいずれも質量基準である。例外としては、組成ＢのｐＨ緩衝生体活性ガラスの含有率は、Ｔｒｉｓ  １００ｍｌに含有する原料のグラム数である。後述する「胃倍生」とは、本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスのことである。
【００１４】
生体活性ガラスは、上皮細胞の成長や軟組織の成長癒合を促進できる上、粘膜組織の損傷である潰瘍に対して直接修復・癒合の作用を持ち、胃と十二指腸潰瘍を根本的に治療する効果を奏すると報告されている。生体活性ガラスの粉剤が胃粘膜の表面に吸着するとともに、生体活性ガラスの分解イオンが胃粘膜の表面に吸着して粘膜の上皮細胞の成長を促進し、潰瘍を直接修復し癒合させる。
【００１５】
特許請求の範囲に記載の発明を用いた本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスは、純粋な生体活性ガラス（ＳｉＯ２、ＣａＯ、Ｎａ２Ｏ、Ｐ２Ｏ５、Ｂ２Ｏ３）粒子の表面反応による局所的なｐＨの急上昇（１２になる）を緩衝して、治療効果と投薬の安全性を実現する。また、本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスは、慢性胃潰瘍の５０％有効量ＥＤ５０が僅か０．４ｍｇ／ｋｇ／ｄであり、現在の最も優れた薬物であるオメプラゾールよりも３倍程度少なくなっている（オメプラゾールのＥＤ５０は１．３ｍｇ／ｋｇ／ｄである）。なお、本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスの慢性胃潰瘍に対する治療効果は予想を遥かに超えている（ＥＤ５０が０．４ｍｇ／ｋｇ／ｄであり、３ｍｇ／ｋｇ／ｄで治療効果が最大になる）。
【００１６】
本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスにおいて、前記固体酸性粒子は慣用の毒副作用のない固体酸性粒子であればよく、この組成が胃・十二指腸潰瘍に適用されるため、固体クエン酸粒子（Ｃ６Ｈ８Ｏ７）または酸化チタン系固体酸粒子（ＳＯ４２−／ＴｉＯ２）が好ましく、固体クエン酸粒子が最も好ましい。
【００１７】
本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスにおいて、前記Ｔｒｉｓ緩衝液は当業界の慣用の方法を用いて製造することができる。例えば、前記Ｔｒｉｓ緩衝液は、脱イオン水７００ｍｌに、Ｔｒｉｓ粉６．０６９ｇ、ＨＣｌ（１Ｎ）３５ｍｌを加え、脱イオン水を添加し１０００ｍｌに定容することによって製造され、ｐＨは７．２３である。上記方法の配合比に比例して増加または減少して、Ｔｒｉｓ緩衝液を製造することができる。
【００１８】
本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスにおいて、組成Ａと組成Ｂは液体中のｐＨが８程度（８．０±０．３）である。組成ＡのｐＨは固体酸性粒子より調節される。組成ＢのｐＨは、Ｔｒｉｓ緩衝液とｐＨ調整剤の組み合わせにより調節される。このｐＨ調整剤は、当業界の慣用のｐＨ調整剤、例えば、塩酸を使用でき、具体的に、例えば、１Ｎ塩酸で本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスの組成ＢのｐＨを８．０±０．３に調節することができる。
【実施例】
【００１９】
（製造実施例）
下記の表１に示される含有量の上から４番目までの４つの成分を高温で溶融し、さらに下記の表１に示される含有量の固体酸性粒子または下記の表２に示される含有量のＴｒｉｓ緩衝液で均一に混合して、本発明のｐＨ緩衝生体活性ガラスが得られる。表１に示される含有量は質量部である。
【００２０】
【表１】
0006040247.tif 000002
【００２１】
【表２】
0006040247.tif 000003
【００２２】
（効果例１）ｐＨと急性毒性実験（製造例１１のｐＨ緩衝生体活性ガラスを用いた）
試験の目的：１４日間に亘って、生体活性ガラス粒子（ＳｉＯ２、ＣａＯ、Ｎａ２Ｏ、Ｐ２Ｏ５を規定の含有量で含む生体活性ガラスの粒子−製造例１。以下、単に「粒子」と言う。）（２０ｇ／ｋｇ）を単回で胃に投与したマウスに対し、死亡の場合を含めて急性毒性反応を観察した。
試験用薬物：１組目の実験では、粒子を生理食塩水で（使用直前に）懸濁液（０．５ｇ／ｍｌ、ｐＨは１２．８６）に調製した。２組目の実験では、粒子をＴｒｉｓ緩衝液（ｐＨ７．２３）で（使用直前に）懸濁液（０．５ｇ／ｍｌ）に調製し（製造例１１）、ＨＣｌ（１Ｎ）を加えてｐＨを８．０に調節した。
試験用動物：清潔級の雄昆明種マウス４０匹とし、体重は２３〜２７ｇである。購入後、試験動物室に入れて７日間飼養した。
方法：４０匹のマウスを２組に分かれ、投薬前に１２時間断食させ（ただし、水は提供）、投薬後にさらに３〜４時間断食させた。１組目には、生理食塩水で調製した懸濁液（０．５ｇ／ｍｌ、ｐＨ  １２．８６）を胃に投与し、２組目には、Ｔｒｉｓ緩衝液で調製された懸濁液（０．５ｇ／ｍｌ、ｐＨ  ７．２５）を投与した。２組の投薬量はいずれも２０ｇ／ｋｇであり、投薬容積は０．４ｍｌ／１０ｇマウス体重であった。１４日間に亘って、中毒症状、発症・発展過程、死亡前症状の特徴、死亡時間などを含めて、動物毒性反応状況および死亡状況を観察した。
結果：１組目では、投薬後、マウスは元気がなくなり、動きが鈍くなり、うち１匹が０．５時間おくびし続けた。投薬から約１８時間後に、マウス１匹の死亡が発見され、病理解剖の結果、胃の中は白い内容物で満たされ、鼓脹症が深刻であり、他には明らかな異常は見られなかった。投薬から３日後に、マウス２匹の死亡が発見され、病理解剖の結果、いずれも鼓脹症が深刻であり、うち１匹に肝脾腫大症が見られ、他には明らかな異常は見られなかった。投薬から４日後に、マウス１匹の死亡が発見され、病理解剖の結果、肝脾腫大症が見られ、他には明らかな異常は見られなかった。投薬から１２日後に、マウス２匹の死亡が発見されたが、発見が遅れたため、死んだ直後に病理解剖することはできなかった。１４日間の間で、計６匹のマウスが死亡し、死亡率は３０％であった。他のマウスには明らかな異常は見られなかった。
２組目では、投薬後、マウスはまあまあ元気で、自由に動きまわり、呼吸は安定で、おくび、嘔吐、けいれん、失禁などの明らかな異常は見られず、死亡のものはなかった。このように、ｐＨ緩衝の薬物懸濁液（ｐＨ８）を調製すれば、マウスに明らかな急性毒性反応または死亡が発生しない。薬剤のｐＨが８である場合は毒性が最も小さく安全である。
【００２３】
（効果例２）ｐＨとストレス性胃潰瘍抑制効果実験
生体活性ガラスは急性胃潰瘍を保護する作用があり、また、その薬効がｐＨとの関連性があり、考察したｐＨの範囲が２、４、６、８、１０および１２である場合、ｐＨ８は生体活性ガラスが最も胃潰瘍抑制作用を果たす最適のｐＨであることは既に証明されている。考察したｐＨの範囲が広かったため、さらなる研究実験において、ｐＨの範囲を絞り、生体活性ガラスによる抑制作用が最も強い拘束水浸ストレス性胃潰瘍モデルについて、生体活性ガラスの最適のｐＨをさらに考察した。
マウスを４組に分けて、それぞれ、脱イオン水（対照組）、ｐＨが７、８、９で投薬量が１ｇ／ｋｇである３種類の胃倍生（実験組）を胃に投与し、２時間後に２１±１℃の水中で１５時間ストレスを与え、ストレス付加終了の２時間前にもう一回投薬し、その後実験動物を死亡させ、病理解剖した。具体的には、まず幽門部を結紮し、次に噴門部を結紮して、胃を遊離させた後、１％の中性ホルマリン溶液１ｍｌを幽門部から胃に注射し、さらに胃を１０％の中性ホルマリン溶液で３０分固定した後、胃の大弯に沿って切り開き、０．９％の塩化ナトリウム溶液で内容物を洗い流し、平らに広げた後に胃粘膜の病変状況を検査して、以下の方法で潰瘍を評価（等級評定）し、潰瘍抑制率を算出する。
（１）０級：粘膜は完全であり、病変なし。（２）点状潰瘍（粘膜の欠損部が１ｍｍ未満又は出血性びらんの点）の評価または等級評定では、点状出血１〜５箇所を１級、６〜１０箇所を２級、１０箇所以上を３級とする。（３）線状出血では、１〜５本を４級、６〜１０本を５級、１０本以上を６級とする。（４）大きい潰瘍（＞３ｍｍ）では、１箇所を４級、２箇所以上を５級、穿孔性潰瘍を６級とする。
潰瘍抑制率＝（対照組の平均等級−実験組の平均等級）／対照組の平均等級×１００％
図１に示すように、ｐＨが７、８、９で投薬量がいずれも１ｇ／ｋｇである３種類の胃倍生の条件で、ｐＨ７ではストレス性胃潰瘍に対して抑制作用がなく（溶剤対照組と比べて、ｐ＞０．０５）、ｐＨ８と９のいずれでも顕著な抑制作用を奏し（溶剤対照組と比べて、ｐ＜０．０５）、抑制率はそれぞれ６４およびと４７％である。
図２に示すように、さらにｐＨ値を７．５、８、８．５に絞ると、３種類の製剤のストレス性胃潰瘍に対する抑制率はそれぞれ１９％、４８％および３５％であり、溶剤対照組と比べて、いずれも有意である（ｐ＜０．０５）。
図１と図２において、各試験のデータの相対的な結果は一致している。
結論：ｐＨ８は、生体活性ガラスが急性胃潰瘍を抑制するのに最適のｐＨである。
【００２４】
（効果例３）ｐＨ緩衝生体活性ガラスによるラット酢酸慢性胃潰瘍の治療
研究実験では、ラット酢酸慢性胃潰瘍モデルを用い、ヒドロタルサイトとオメプラゾールを陽性薬として、試験用薬物の生体活性ガラスについて線量効果関係を研究することにより、慢性胃潰瘍に対する生体活性ガラスの治療効果を評価した。その結果、慢性胃潰瘍に対するｐＨ緩衝生体活性ガラスの治療効果は、オメプラゾールに相当し（＞６０％）、ヒドロタルサイト（３８％）より優れていることが分かった。慢性胃潰瘍を治療する３種類の薬物のＥＤ５０から見ると、生体活性ガラスは必要投薬量が最も少なく、ＥＤ５０（半数有効量）が僅か０．４ｍｇ／ｋｇであり（製造例９）、オメプラゾールのＥＤ５０は１．３ｍｇ／ｋｇであり、ヒドロタルサイトのＥＤ５０は１．０ｍｇ／ｋｇであった。
結論：本願の生体活性ガラスは、ラット酢酸慢性胃潰瘍に対して比較的強い治療効果がある。
【００２５】
表３に、本願の生体活性ガラス、オメプラゾールおよびヒドロタルサイトがラット酢酸慢性胃潰瘍を抑制するＥＤ５０と最大抑制率Ｅｍａｘを示す。
【表３】
0006040247.tif 000004
【００２６】
備考：ラット酢酸慢性胃潰瘍モデル
ラットを２４時間断食させた後、麻酔し、通常消毒し、剣状突起から下に向けて腹部のセンターラインに沿って約２ｃｍ切り開いて、胃を腹腔から取り出し、微量注射器で１００％の氷酢酸５μｌを胃前庭部の前壁漿膜下の筋層付近に注射し、直径約３ｍｍの半透明な白斑が現れた後、胃を腹腔に戻し、大網膜で被覆し、腹膜、筋層および皮膚をこの順で縫合する。
上述の投薬方法で行い、各薬物を、モデル組、薬物の投薬量が異なる組（４つの投薬量組）の５組に分けた。各組を６〜８匹にし、手術の３日後から治療を始め、１日に１回、胃に投与し、７日間継続した。モデル組は、同体積の生理食塩水で代替した。各組薬物の投薬量は、胃倍生が０、０．１、０．３、１、３ｍｇ／ｋｇ、オメプラゾールが０、０．３、１、３、１０ｍｇ／ｋｇ、ヒドロタルサイトが０、１、３、１０、３０ｍｇ／ｋｇであった。下記のインデックスを測定した。
（１）潰瘍指数：バーニヤカリパスで潰瘍面の最大長径および最大長径と直交する最大幅径を測定し、２つの値を掛け合わせた積を潰瘍指数とする。
（２）潰瘍抑制率：潰瘍指数に対する薬物の抑制効果を反映するものである。算出式：潰瘍抑制率＝（モデル組の潰瘍指数の平均値−投薬組の潰瘍指数の平均値／モデル組の潰瘍指数の平均値）×１００％
【００２７】
（効果例４）ｐＨ緩衝生体活性ガラスによるラット酢酸慢性胃潰瘍の再発予防
本研究実験では、ＩＬ−１β誘導のラット酢酸慢性胃潰瘍再発モデルを用いて、オメプラゾールを対照薬として、慢性胃潰瘍再発に対する試験用薬物の生体活性ガラスの予防効果を評価した。その結果、３ｍｇ／ｋｇ（製造例１０）の生体活性ガラスは、１０ｍｇ／ｋｇのオメプラゾールによる慢性胃潰瘍再発の予防効果に相当し、いずれも５０％であることが分かった。
結論：生体活性ガラスは、ＩＬ−１β誘導のラット酢酸慢性胃潰瘍の再発に対して優れた予防効果を有し、オメプラゾールの予防効果に相当し、抑制率はいずれも５０％である。
備考：ラット酢酸慢性胃潰瘍再発モデル
まず、慢性酢酸胃潰瘍モデルをコピーする。すなわち、ラットを２４時間断食させた後、麻酔し、通常消毒し、剣状突起から下に向けて腹部のセンターラインに沿って約２ｃｍ切り開いて、胃を腹腔から取り出し、微量注射器で１００％の氷酢酸５μｌを胃前庭部の前壁漿膜下の筋層付近に注射し、直径約３ｍｍの半透明な白斑が現れた後、胃を腹腔に戻し、大網膜で被覆し、腹膜、筋層および皮膚をこの順で縫合する。酢酸を注射してから９０日後、Ｗａｔａｎａｂｅ  Ｔ，  Ａｒａｋａｗａ  Ｔ，  Ｆｕｋｕｄａ  Ｔ，  Ｈｉｇｕｃｈｉ  Ｋ，  Ｋｏｂａｙａｓｈｉ  Ｋ．（１９９７）Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ  ｉｎ  ａ  ｒａｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｕｌｃｅｒ  ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１  ｂｅｔａ．  Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ、１５０：９７１−９７９の方法で、腹腔に１μｇ／ｋｇのＩＬ−１βを注射して、胃潰瘍再発モデルをコピーする。モデル非再発組は、腹腔に同体積の生理食塩水を注射する。４８時間後に動物を死亡させる（死亡前は２４時間断食させる）。
組分けと投薬：酢酸注射後の慢性胃潰瘍ラットを無作為に、モデル非再発組、モデル再発組、オメプラゾール組、および試験用薬物生体活性ガラス組の４組に分けた。各組を８匹にし、通常飼養し、酢酸を注射してから８１日後に投薬を始め、オメプラゾール組（１０ｍｇ／ｋｇ／ｄ）と生体活性ガラス（３ｍｇ／ｋｇ／ｄ）（製造例１０）組は、１日に１回、対応する薬物懸濁液を胃に投与し、モデル非再発組とモデル再発組は等量の生理食塩水（ｐＨ８．０）で代替し、７日間継続した。投薬終了後、モデル非再発組は腹腔に同体積の生理食塩水を注射し、それ以外の組は腹腔に１μｇ／ｋｇのＩＬ−１βを注射し、潰瘍の再発を誘導した。４８時間後、動物を死亡させ（死亡前は２４時間断食させる）、胃を取り出し、観察した。
【００２８】
（効果例５）ストレス性胃潰瘍に対するｐＨ緩衝生体活性ガラスの抑制効果と代表的な薬物との比較実験
試験は効果例２と同様に行なった。マウスに、異なる投薬量のオメプラゾール（０、３、１０、３０、１００ｍｇ／ｋｇ）、ヒドロタルサイト（０、０．１、０．３、１、３ｇ／ｋｇ）、胃倍生（０、０．０５、０．１５、０．５、１．５ｇ／ｋｇ）を胃に投与した２時間後、２１±１℃の水で１５時間ストレスを与え（胃倍生組は、ストレス付加終了の２時間前にもう一回投薬する）、その後動物を死亡させて、病理検査した。その結果、各溶剤対照組の潰瘍発生率はいずれも１００％であり、潰瘍は主に点状出血として現れ、少数の動物には線状出血があった。通常、マウスの胃粘膜は均一で滑らかであり、色は乳白色であるが、溶剤組は通常のマウスと比べて、胃粘膜があまり滑らかではなく、胃壁に炎症腫脹があり、かつ胃壁が明らかに厚くなっていた。オメプラゾール、ヒドロタルサイトおよび胃倍生は、いずれも潰瘍の発生を抑制でき、かつ投薬量に依存性がある。胃を全体的に観察したところ（胃粘膜の滑らかさ、胃壁の色、および炎症の状況）、胃倍生は各陽性薬と明らかな差異がない。抑制率の観点から、マウスのストレス性胃潰瘍に対する胃倍生の抑制効果は、ヒドロタルサイトより若干優れているが、オメプラゾールに劣っている。各組は、等級評定により潰瘍指数を算出した後、マウスのストレス性胃潰瘍に対する各薬物の抑制効果である最大抑制率Ｅｍａｘを算出して、下記の表４に示す。
【００２９】
【表４】
0006040247.tif 000005
【００３０】
以上の効果例２および効果例５に用いられた生体活性ガラス（「胃倍生」とも言う）は、製造例１とＴｒｉｓ緩衝液を配合して得られたものであり、効果例に用いられた投薬量は、マウスの体重と摂食量により決定した。
【図１】
0006040247.tif 000006
【図２】
0006040247.tif 000007