(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の（１）〜（３）の特徴をすべて有するβ−１，３−１，６−Ｄ−グルコース誘導体。
（１）アイヌワカメ（Ａｌａｒｉａ  ｐｒａｅｌｏｎｇａ  Ｋｊｅｌｌｍａｎ）に由来する。
（２）１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液を溶媒とする溶液の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルが４．７ｐｐｍ及び４．５ｐｐｍの２つのシグナルを有し、その面積比が７：１〜１１：１である。
（３）Ｄ−マンニトールが結合しており、該Ｄ−マンニトールの含有量は、該グルコース誘導体の全量に対して０．１〜１０重量％である。
【請求項２】
下記一般式で表されるβ−１，３−１，６−Ｄ−グルコース誘導体。
（化１）
0005968643.tif 000009
ここで、β−１，３結合／β−１，６結合の比は、７〜１１であり、該グルコース誘導体のマンニトールの含有量は、０．１〜１０重量％である。ただし、〔〕の配列は、順不同である。
【請求項３】
請求項１又は２記載のβ−１，３−１，６−Ｄ−グルコース誘導体を含有することを特徴とする、メラノサイトの分化異常に伴う色素異常症の治療用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えば、幹細胞からメラノサイトへの分化誘導抑制剤及び当該分化誘導抑制剤を含有する美白剤又は皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般にシミ、ソバカス、日焼け等に見られる皮膚の色素沈着は、ホルモンの異常や紫外線の刺激により、皮膚内に存在するメラノサイトがメラニン色素を過剰に生成し、これが皮膚内に沈着することが原因と考えられている。このような色素沈着を防ぐ方法の一つに、メラニンの過剰な生成を抑制する方法が知られている。
一方、メラノサイトには様々な分化段階（神経堤細胞、色素幹細胞、メラノブラスト等）が存在しており、その分化異常により様々な色素異常症やシミが引き起こされる。よって、このメラノサイトの分化自体を制御する因子の同定が根本的な色素異常症及びシミの解決のために重要である。しかしながら、従来においては、メラノサイト制御因子の探索には、主にメラノ−マ細胞（メラノサイトの癌化により生じる）、最終分化後のメラノサイト及びマッシュル−ム由来チロシナ−ゼ等を用いて行うスクリ−ニング系が用いられていた（特許文献１、特許文献２）。そのため、メラノサイトの分化を制御する因子の探索は従来においてほとんど行われていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００９−２６３２８２号公報
【特許文献２】特開２０１１−６４６２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上述のように、メラノサイトの分化自体を制御する因子の同定が根本的な色素異常症及びシミの解決のために重要である。
そこで、本発明は、上述した実情に鑑み、幹細胞からメラノサイトへの分化抑制活性を有する素材を見出し、これまでにない根本的な美白剤及び皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記課題を解決するため鋭意検討を行った結果、幹細胞からメラノサイトへの分化誘導系を用いることにより、メラノサイトの発生、分化、増殖及びメラニン合成の全てを試験管内（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で再現できることを見出した。さらに本誘導系をスクリ−ニング系として用いることにより、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体がメラノサイトの分化を抑制する優れた効果を有し、美白剤として優れていることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、下記の（１）〜（３）の特徴をすべて有するβ−１，３−１，６−Ｄ−グルコ−ス誘導体を含有することを特徴とする、メラノサイト分化誘導抑制剤である。
（１）アイヌワカメ（Ａｌａｒｉａ  ｐｒａｅｌｏｎｇａ  Ｋｊｅｌｌｍａｎ）に由来する。
（２）１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液を溶媒とする溶液の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルが４．７ｐｐｍ及び４．５ｐｐｍの２つのシグナルを有し、その面積比が７：１〜１１：１である。
（３）Ｄ−マンニト−ルが結合しており、該Ｄ−マンニト−ルの含有量は、該グルコース誘導体の全量に対して０．１〜１０重量％である。
【０００７】
さらに、上記の物質は、下記一般式で表される。
（化１）
0005968643.tif 000002
ここで、β−１，３結合／β−１，６結合の比は、７〜１１であり、該グルコース誘導体のマンニトールの含有量は、０．１〜１０重量％である。ただし、〔〕の配列は、順不同である。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のメラノサイト分化誘導抑制剤によれば、幹細胞からメラノサイトへの分化誘導を顕著に抑制することができ、色素異常症及びシミにおいて、根本的に治療・予防することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明に用いるアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体は、アイヌワカメ（Ａｌａｒｉａ  ｐｒａｅｌｏｎｇａ  Ｋｊｅｌｌｍａｎ）より抽出・単離精製できる。アイヌワカメは、北海道東部で天然に成育し、大量採取可能な海藻である。
【００１０】
抽出に使用する溶媒としては、例えば、水（熱水）、低級アルコ−ル類（メタノ−ル、エタノ−ル、１−プロパノ−ル、２−プロパノ−ル、１−ブタノ−ル、２−ブタノ−ル等）、液状多価アルコ−ル（１，３−ブチレングリコ−ル、プロピレングリコ−ル、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）などが好ましい。これらの溶媒は単独で、又は２種以上を混合して用いても良い。また、これら溶媒に酸やアルカリを添加してｐＨ調整を行うこともできる。０．０１〜１Ｎ、特に０．１Ｎの塩酸で抽出することが最も好ましい。
【００１１】
上述の溶媒を用いて、アイヌワカメを溶媒抽出する。溶媒抽出方法は、特に限定されないが、加熱による抽出が好ましい。例えば、アイヌワカメ乾燥物に水を加え、９５〜１００℃における熱水抽出を行うことで、アイヌワカメ抽出物を得ることができる。あるいは、アイヌワカメ乾燥物に無機酸（例えば、塩酸）を加え、４℃程度で抽出を行うことで、アイヌワカメ抽出物を得ることができる。
【００１２】
本発明で用いるアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体は、ゲルろ過、陰イオン交換等によるカラムクロマトグラフィ−や分取高速液体クロマトグラフィ−等を用いることにより、上記抽出物から精製することができる。本発明で用いるアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体は、精製品や粗精製品でもよく、また、溶媒を含む状態でもよい。
【００１３】
本発明で用いるアイヌワカメ由来のグルコ−ス誘導体の構造解析は、阿武らの方法（糖化学の基礎、１９８４年、講談社、阿武喜美子、瀬野信子著）などの方法に従って行うことができる。具体的には、ＧＣ−ＭＳを用いた構成糖分析、赤外吸収スペクトル分析、ＨＰＬＣを用いた分子量分析、メチル化分析、１Ｈ−ＮＭＲ分析などの方法を用いることができる。
【００１４】
（１）構成成分（構成糖）分析
クロマトグラフィーなどにより得られた本発明のグルコース誘導体を加水分解し、還元後、ＧＣ−ＭＳにて測定することにより、グルコース誘導体を構成する糖の同定を行うことができる。
該グルコース誘導体の構成糖は、グルコースとマンニトールであり、グルコースの含量は、グルコース誘導体全量の８０〜９５重量％であることが好ましく、８５〜９０重量％であることが最も好ましい。また、マンニトールの含量は、０．１〜１０重量％であることが好ましく、１〜４重量％であることが最も好ましい。
【００１５】
（２）赤外吸収スペクトル分析
赤外吸収スペクトル分析（ＫＢｒ法）を行うことで、α結合かβ結合かのアノマー配置を決定することができる。８４４ｃｍ−１付近の吸収は、α結合の存在を表し、８９１ｃｍ−１付近の吸収は、β結合の存在を表す。
【００１６】
（３）分子量分析
ゲルろ過クロマトグラフィー法により、分子量を求めることができる。標準物質（分子量マーカー）として、プルランを用いることができる。
【００１７】
（４）メチル化分析
本発明のグルコース誘導体を徹底メチル化した後、加水分解して得られた部分メチル化糖を分析し、メチル化されていない水酸基がどの位置に存在するかを知ることにより、糖の１，３結合や１，６結合の確認ができる。
【００１８】
（５）１Ｈ−ＮＭＲ分析
１Ｈ−ＮＭＲを測定することにより、β−１，３結合とβ−１，６結合の比を求めることができる。本発明のグルコース誘導体を用い、１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液に溶解して測定した場合、それぞれ約４．７ｐｐｍ、約４．５ｐｐｍにシグナルが認められる。ＮＭＲの測定値は条件の微妙な変化によって変化し、また、誤差を伴うことは周知の事実であることから、「約４．７ｐｐｍ」や「約４．５ｐｐｍ」は、通常予測される範囲の測定値の変動幅（例えば±０．２ｐｐｍ）を含む数値を意味する。本発明で用いるアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体のβ−１，３結合／β−１，６結合の比は、７〜１１であることが好ましく、８〜１０であることが最も好ましい。
【００１９】
上記（１）〜（５）の構造解析により、本発明で用いるアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体は、下記一般式で表すことができる。
（化１）
0005968643.tif 000003
β−１，３結合／β−１，６結合の比が７〜１１であり、該グルコース誘導体のマンニトールの含有量は、０．１〜１０重量％である。この化１において、〔〕内の結合様式を有するグルコース（３β−Ｄ−Ｇｌｃ１、３β−Ｄ６−Ｇｌｃ１の６位にβ−Ｄ−Ｇｌｃが結合したもの、３β−Ｄ６−Ｇｌｃ１の６位にβ−Ｄ−Ｇｌｃ２モルが結合したもの、６β−Ｄ−Ｇｌｃ１）又はマンニトールなどがアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の分子量を化学量論的に満たす範囲内で複数個分子内に存在していることを表している。
また、〔〕内の上記グルコースやマンニトールなどの配列は特定されないことを意味する。これを〔〕の配列は、順不同と記載することができる。
【００２０】
このようにして得られたアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を本発明に係るメラノサイト分化誘導抑制剤の有効成分とする。本発明のメラノサイト分化誘導抑制剤は、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体をそのまま使用しても良く、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の効果を損なわない範囲内で、外用剤、注射剤、内用剤などに用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、滑沢剤、分散剤、保存料、溶解補助剤、溶剤等の成分を配合することができる。
【００２１】
本発明のメラノサイト分化誘導抑制剤は、化粧品、医薬部外品、医薬品のいずれにも用いることができ、その剤型としては、例えば、化粧水、クリ−ム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデ−ション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤等の皮膚に適用されるものや、経口用に用いる場合は、散剤、顆粒剤、錠剤、糖衣錠剤、カプセル剤、シロップ剤、丸剤、懸濁剤、液剤、乳剤などが挙げられる。また、注射液、座薬などが挙げられる。
【００２２】
本発明に用いるアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の配合量は、本発明の分化誘導抑制剤全量に対し、固形物に換算して０．００００１重量％以上、好ましくは０．０００１〜１０重量％が良い。０．００００１重量％未満では十分な効果は望みにくい。１０重量％を越えて配合した場合、効果の増強は認められにくく不経済である。また、添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【実施例】
【００２３】
次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いるアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の製造例、処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を、％とは重量％を示す。
【００２４】
製造例１  アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の精製
アイヌワカメの乾燥物２０ｇに０．１Ｎ塩酸８００ｍｌを加え、４℃で７日間抽出を行った。抽出後、抽出液を濾過し、得られた濾液を濃縮及び凍結乾燥することで、アイヌワカメのＨＣｌ抽出物を３．１ｇ得た。この抽出物をゲルろ過カラムクロマトグラフィ−（カラム：セファデックスＧ−５０，２×１００ｃｍ）にて分子量約５００〜約１０，０００の画分を集めた。陰イオン交換カラムクロマトグラフィ−（カラム：Ｅｃｔｅｏｌａ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，３×５０ｃｍ）にて非吸着画分を集め、さらに、分取高速液体クロマトグラフィ−（カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  １００Ｄｉｏｌ，８×３０ｃｍ）にて精製物（アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体）を１０ｍｇ得た。
【００２５】
実験例１
上記精製物の分析
（１）構成成分（構成糖）分析
精製物に２Ｎ−トリフルオロ酢酸を添加し、１００℃にて４時間、加水分解を行った。水素化ホウ素ナトリウムを反応させることにより加水分解物を還元し、さらに無水酢酸を反応させることにより、アルジト−ルアセテ−トを得た。本試料について、ＧＣ−ＭＳ分析を実施した。解析の結果、主成分はグルコ−スであり、マンニト−ルを少量含んでいることが分かった（表１）。
【表１】
0005968643.tif 000004
【００２６】
（２）赤外吸収スペクトル分析
赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ）を測定した結果、８９１ｃｍ−１付近に現れるβ−アノマーに特徴的な吸収が認められた。また、α−アノマーに特徴的な８４４ｃｍ−１付近の吸収は、認められなかった。本結果と上記の構成成分の結果により、本精製物は、β−グルコ−スであることが分かった（図１）。
【００２７】
（３）分子量分析
高速液体クロマトグラフィ−（カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  １００Ｄｉｏｌ，８×３０ｃｍ）にて測定したところ、１，７００〜９，５００の分子量分布を示した。ピークトップは４，５００であった。標準物質（分子量マーカー）として、プルランを使用した。
【００２８】
（４）メチル化分析
精製物をヨウ化メチルにて完全メチル化を行った。メチル化物に２Ｎ−トリフルオロ酢酸を添加し、１００℃にて４時間、加水分解を行った。水素化ホウ素ナトリウムを反応させることにより加水分解物を還元し、さらに無水酢酸を反応させることにより、アルジト−ルアセテ−トを得た。本試料について、ＧＣ−ＭＳ分析を実施した。解析の結果、β−１，３結合グルコ−スが主鎖となり、このうち一部のグルコースの６位に側鎖としてグルコースの１位が結合している構造を有し、さらに、１位と６位に結合を有するグルコースが少量分子内に結合している構造であることが示唆された（表２）。
【表２】
0005968643.tif 000005
【００２９】
（５）１Ｈ−ＮＭＲ分析
精製物を２％となるように１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液に溶解し、１Ｈ−ＮＭＲ分析を行った。その結果、約４．７ｐｐｍ及び約４．５ｐｐｍの２つのシグナル結果より、β−１，３結合／β−１，６結合の比が９．４２であることが分かった（図２）。
【００３０】
上記（１）〜（５）の分析の結果、精製物は、下記に示す構造であることが推測された。
（化２）
0005968643.tif 000006
ここで、β−１，３結合／β−１，６結合の比は９．４２であり、該グルコース誘導体のマンニトールの含有量は、約３重量％である。ただし、〔〕の配列は、順不同である。
【００３１】
処方例１  化粧水
処方                                                              配合量（部）
１．アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体（製造例１）                  ０．１
２．１，３−ブチレングリコ−ル                                    ８．０
３．グリセリン                                                    ２．０
４．キサンタンガム                                                ０．０２
５．クエン酸                                                      ０．０１
６．クエン酸ナトリウム                                            ０．１
７．エタノ−ル                                                    ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．）                ０．１
１０．香料                                                          適量
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜６及び１１と、成分７〜１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。
【００３２】
比較例１  従来の化粧水
処方例１において、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を精製水に置き換えたものを従来の化粧水とした。
【００３３】
処方例２  クリ−ム
処方                                                              配合量（部）
１．アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体（製造例１）                  ０．０５
２．スクワラン                                                    ５．５
３．オリ−ブ油                                                    ３．０
４．ステアリン酸                                                  ２．０
５．ミツロウ                                                      ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル                                  ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエ−テル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０
８．ベヘニルアルコ−ル                                            １．５
９．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．５
１０．香料                                                          ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２
１２．パラオキシ安息香酸エチル                                      ０．０５
１３．１，３−ブチレングリコ−ル                                    ８．５
１４．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１４を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。
【００３４】
比較例２  従来のクリ−ム
処方例２において、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を精製水に置き換えたものを従来のクリ−ムとした。
【００３５】
処方例３  錠剤
処方                                                              配合量（部）
１．アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体（製造例１）                  ５．０
２．乾燥コ−ンスタ−チ                                          ２５．０
３．カルボキシメチルセルロ−スカルシウム                        ２０．０
４．微結晶セルロ−ス                                            ４０．０
５．ポリビニルピロリドン                                          ７．０
６．タルク                                                        ３．０
［製造方法］成分１〜４を混合し、次いで成分５の水溶液を結合剤として加えて顆粒成型する。成型した顆粒に成分６を加えて打錠する。１錠０．５２ｇとする。
【００３６】
処方例４  飲料
処方                                                              配合量（部）
１．アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体（製造例１）                  ０．０５
２．ステビア                                                      ０．０５
３．リンゴ酸                                                      ５．０
４．香料                                                          ０．１
５．精製水にて全量を１００とする。
［製造方法］成分２及び３を少量の水に溶解する。次いで、成分１、４及び５を加えて混合する。
【００３７】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００３８】
実験例２  アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の幹細胞からメラノサイトへの分化誘導抑制によるメラニン合成抑制効果の評価
本実験例では、これまでに山根らが報告しているマウス胚性幹細胞（ＥＳ  ｃｅｌｌ：ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ）を用いた幹細胞からメラノサイトへの分化誘導系（Ｙａｍａｎｅ  Ｔ．，  Ｈａｙａｓｈｉ  Ｓ．，  Ｍｉｚｏｇｕｃｈｉ  Ｍ．，  Ｙａｍａｚａｋｉ  Ｈ．，  Ｋｕｎｉｓａｄａ  Ｔ．，  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ  Ｄｙｎａｍｉｃｓ，  １９９９ｎｅｎ，  Ｖｏｌ．  ２１６，  Ｉｓｓｕｅ  ４−５，  ｐｐ．  ４５０−４５８）を用いて、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体のメラノサイトへの分化誘導抑制効果とそれに伴うメラニン合成の抑制効果について検討した。なお、本実験において、これまでメラニン合成抑制効果が確認されているアルブチンについても同様な実験系を用いて評価した。以下に詳細を説明する。
【００３９】
６ｃｍプラスチックディッシュにマイトマイシンＣ処理を施したＭＥＦ細胞（Ｍｏｕｓｅ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）を培養し、その上にマウスＥＳ細胞を１０×１０４〜２０×１０４個播種し、３７℃において５％ＣＯ２インキュベ−タ−にて前培養した。使用した培地は、ＤＭＥＭにＥＳ細胞用添加因子（Ｌ−グルタミン液、２−メルカプトエタノ−ル液、ヌクレオシド液、非必須アミノ酸液及びＥＳＧＲＯ、いずれもｃｈｅｍｉｃｏｎ社製）を推奨濃度で添加した後、ＦＢＳを１５％添加したものを用いた。
次いで、ＳＴ２細胞を２４ｗｅｌｌプレ−ト上でコンフルエントになるまで培養し、そこにＭＥＦ細胞から分離した上述の培養ＥＳ細胞を２５０〜５００個播種した。当該培養物を、分化誘導培地（α−ＭＥＭに１０％ウシ胎児血清、１００ｎＭ  デキサメタゾン、２０ｐＭ  塩基性線維芽細胞増殖因子、１０ｐＭ  コレラトキシン及び１００ｎｇ／ｍＬ  エンドセリン３を添加したもの）で培養し、ＥＳ細胞をメラノサイトへ分化誘導した。分化誘導後２４日間で、メラノサイトが出現し、メラニン合成を行う様子が観察された。
本誘導系において、上述の分化誘導培地に各濃度（１２．５、２５、５０μｇ／ｍＬ）でアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を継続して添加し、２４日間の分化誘導を行った。また、アルブチンについても同様に実験を行った。その後、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｉｎｇ  Ｋｉｔ−８を用いて相対細胞数を定量し、さらに、細胞をＰＢＳ（−）で３回洗浄した後、２Ｎ  ＮａＯＨを用いて６０℃で２時間溶解した。溶解物について４７５ｎｍの吸光度を測定し、メラニン合成量を定量した。その結果、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を添加することにより、メラノサイトへの分化が抑制され、かつ細胞数当たりのメラニン合成量が濃度依存的に有意に減少した。
【００４０】
これらの試験結果を表３に示した。アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体（製造例１）に、顕著なメラノサイト分化誘導抑制効果が認められた。以上より、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体が極めて優れた幹細胞からのメラノサイト分化誘導抑制効果及びメラニン合成抑制効果を有することが明らかとなり、アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体のメラノサイト分化誘導抑制剤及びメラニン合成抑制剤（美白剤）としての効果が認められた。なお、従来の美白作用が確認されているアルブチンは、今回の試験系においてメラノサイト分化誘導抑制効果を示さなかった。
【表３】
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【００４１】
実験例３  使用試験
処方例１の化粧水、処方例２のクリ−ム、比較例１の従来の化粧水及び比較例２の従来のクリ−ムを用いて、女性２０人（２２〜５１才）を対象に３カ月間の使用試験を行った。使用後、肌のシミ、くすみの改善効果をアンケ−トにより判定した。
【００４２】
これらの試験結果を表４に示した。その結果、本発明のアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を含有する皮膚外用剤は優れたシミ、くすみの改善作用を示した。なお、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。また、処方成分の劣化についても問題なかった。
【表４】
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【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明のメラノサイト分化誘導抑制剤によれば、色素異常症及びシミを治療、予防及び改善することができる。例えば、本発明において見出されたアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を用いることにより、根本からの色素異常症及びシミの解決に繋がる。本発明で見出されたアイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体を経口投与、皮膚への直接注入、塗布、貼付等により導入することで、組織に存在する未分化細胞のメラノサイトへの分化を抑制することができる。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の赤外吸収スペクトルチャートである。
【図２】アイヌワカメ由来グルコ−ス誘導体の１Ｈ−ＮＭＲチャートである。
【図１】
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【図２】
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