【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年3月24日(2011.3.24)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞内のヒトＪＣウイルスゲノムの発現を抑制するための二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）であって、前記ｄｓＲＮＡは一緒になって３０塩基対未満の長さの相補領域を形成するセンス鎖およびアンチセンス鎖を含み、前記センス鎖に相補的な前記アンチセンス鎖の一部は、５’−ＵＧＵＵＧＡＡＵＧＵＵＧＧＧＵＵＣＣＵ−３’（配列番号９３５）に相補的な少なくとも１５の連続したヌクレオチドを含み、前記ｄｓＲＮＡは、ＪＣウイルスを発現している細胞と接触させると、ＪＣウイルスゲノムの発現を抑制する、ｄｓＲＮＡ。
【請求項２】
少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、請求項１に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項３】
前記修飾ヌクレオチドは、２’‐Ｏ‐メチル修飾ヌクレオチド、５’‐ホスホロチオエート基を含むヌクレオチド、およびコレステリル誘導体またはドデカン酸ビスデシルアミド基に連結された末端ヌクレオチドからなる群から選択される、請求項２に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項４】
前記修飾ヌクレオチドは、２’‐デオキシ‐２’‐フルオロ修飾ヌクレオチド、２’‐デオキシ修飾ヌクレオチド、ロックされたヌクレオチド、脱塩基ヌクレオチド、２’‐アミノ修飾ヌクレオチド、２’‐アルキル修飾ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ホスホロアミデート、および非天然の塩基を含むヌクレオチド、なる群から選択される、請求項２に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項５】
請求項１に記載のｄｓＲＮＡを含む細胞。
【請求項６】
請求項１に記載のｄｓＲＮＡと、薬学的に許容可能な担体とを含む、生物体におけるＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制するための医薬組成物。
【請求項７】
請求項１に記載のｄｓＲＮＡを含む、細胞内のＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制するための組成物。
【請求項８】
患者におけるＪＣウイルスの複製を抑制するための組成物であって、ＪＣウイルスの複製を抑制するのに有効な量の請求項１に記載のｄｓＲＮＡを含む、組成物。
【請求項９】
細胞内のＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制するためのベクターであって、前記ベクターは、
（ａ）２つの相補領域を含む単一のＲＮＡ分子として、請求項１に記載のｄｓＲＮＡを発現することができるか、または代替的に、
（ｂ）別個のプロモーターの制御下で、請求項１に記載のｄｓＲＮＡの各々の鎖を発現することができる、
ベクター。
【請求項１０】
請求項９に記載のベクターを含む細胞。
【請求項１１】
前記アンチセンス鎖は、配列番号１３２の少なくとも１５の連続したヌクレオチドを含む、請求項１に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項１２】
前記センス鎖は配列番号１３１の少なくとも１５の連続したヌクレオチドを含み、かつ前記アンチセンス鎖は配列番号１３２の少なくとも１５の連続したヌクレオチドを含む、請求項１に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項１３】
前記センス鎖は配列番号１３１からなり、かつ前記アンチセンス鎖は配列番号１３２からなる、請求項１に記載のｄｓＲＮＡ。
【請求項１４】
複数のベクターを含む組成物であって、１つのベクターが請求項１に記載のセンス鎖をコードするヌクレオチド配列に作用可能に連結された調節配列を含み、別のベクターが請求項１に記載のアンチセンス鎖をコードするヌクレオチド配列に作用可能に連結された調節配列を含む、組成物。
【請求項１５】
請求項１４に記載の組成物を含む細胞。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
別の実施形態では、本発明は、細胞でのＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制するためのベクターを含む細胞を提供する。該ベクターは、本発明のｄｓＲＮＡのうち１つの少なくとも一方の鎖をコードするヌクレオチド配列に連係して作用する調節配列を有する。
本発明はまた、以下の項目を提供する。
（項目１）
細胞内のヒトＪＣウイルスゲノムの発現を抑制するための二本鎖リボ核酸（ｄｓＲＮＡ）であって、上記ｄｓＲＮＡは互いに相補的な少なくとも２つの配列を有し、センス鎖は第１の配列を有し、アンチセンス鎖はＪＣウイルスをコードするｍＲＮＡの少なくとも一部にほぼ相補的な相補領域を含む第２の配列を有し、上記相補領域の長さは３０ヌクレオチド未満であり、上記ｄｓＲＮＡは、ＪＣウイルスを発現している細胞と接触させると、ＪＣウイルスゲノムの発現を抑制する、ｄｓＲＮＡ。
（項目２）
上記第１の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択され、上記第２の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択される、項目１に記載のｄｓＲＮＡ。
（項目３）
少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、項目１に記載のｄｓＲＮＡ。
（項目４）
少なくとも１つの修飾ヌクレオチドを含む、項目２に記載のｄｓＲＮＡ。
（項目５）
上記修飾ヌクレオチドは、２’‐Ｏ‐メチル修飾ヌクレオチド、５’‐ホスホロチオエート基を含むヌクレオチド、およびコレステリル誘導体またはドデカン酸ビスデシルアミド基に連結された末端ヌクレオチドからなる群から選択される、項目３または４に記載のｄｓＲＮＡ。
（項目６）
上記修飾ヌクレオチドは、２’‐デオキシ‐２’‐フルオロ修飾ヌクレオチド、２’‐デオキシ修飾ヌクレオチド、ロックされたヌクレオチド、脱塩基ヌクレオチド、２’‐アミノ修飾ヌクレオチド、２’‐Ｏ‐アルキル修飾ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ホスホロアミデート、および非天然の塩基を含むヌクレオチド、なる群から選択される、項目３または４に記載のｄｓＲＮＡ。
（項目７）
上記第１の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択され、上記第２の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択される、項目３または４に記載のｄｓＲＮＡ。
（項目８）
上記第１の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択され、上記第２の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択される、項目６または７に記載のｄｓＲＮＡ。
（項目９）
項目１に記載のｄｓＲＮＡを含む細胞。
（項目１０）
ｄｓＲＮＡと、薬学的に許容可能な担体とを含む、生物体におけるＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制するための医薬組成物であって、上記ｄｓＲＮＡは互いに相補的な少なくとも２つの配列を有し、センス鎖は第１の配列を有し、アンチセンス鎖はＪＣウイルスをコードするｍＲＮＡの少なくとも一部にほぼ相補的な相補領域を含む第２の配列を有し、上記相補領域の長さは３０ヌクレオチド未満であり、上記ｄｓＲＮＡは、ＪＣウイルスを発現している細胞と接触させると、ＪＣウイルスゲノムの発現を抑制する、医薬組成物。
（項目１１）
上記ｄｓＲＮＡの上記第１の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択され、上記ｄｓＲＮＡの上記第２の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択される、項目１０に記載の医薬組成物。
（項目１２）
上記ｄｓＲＮＡの上記第１の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択され、上記ｄｓＲＮＡの上記第２の配列は表１ａおよび１ｂからなる群から選択される、項目１０に記載の医薬組成物。
（項目１３）
細胞内のＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制する方法であって、
（ａ）細胞内に、二本鎖構造のリボ核酸（ｄｓＲＮＡ）を導入する工程であって、該ｄｓＲＮＡは、互いに相補的な少なくとも２つの配列を有し、センス鎖は第１の配列を有し、アンチセンス鎖はＪＣウイルスをコードするｍＲＮＡの少なくとも一部にほぼ相補的な相補領域を含む第２の配列を有し、該相補領域の長さは３０ヌクレオチド未満であり、上記ｄｓＲＮＡは、ＪＣウイルスを発現している細胞と接触させると、ＪＣウイルスゲノムの発現を抑制する工程、および
（ｂ）工程（ａ）で生成された細胞を、ＪＣウイルス遺伝子のｍＲＮＡ転写物を分解させるのに十分な時間維持することによって、細胞内のＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制する工程
を含む方法。
（項目１４）
ＪＣウイルスの発現により媒介される病理過程を治療、予防、または管理する方法であって、そのような治療、予防または管理を必要とする患者に、治療上または予防上有効な量のｄｓＲＮＡを投与する工程からなり、該ｄｓＲＮＡは、互いに相補的な少なくとも２つの配列を有し、センス鎖は第１の配列を有し、アンチセンス鎖はＪＣウイルスをコードするｍＲＮＡの少なくとも一部にほぼ相補的な相補領域を含む第２の配列を有し、該相補領域の長さは３０ヌクレオチド未満であり、上記ｄｓＲＮＡは、ＪＣウイルスを発現している細胞と接触させると、ＪＣウイルスゲノムの発現を抑制する、方法。
（項目１５）
細胞内のＪＣウイルス遺伝子の発現を抑制するためのベクターであって、上記ベクターは、ｄｓＲＮＡの１つの少なくとも一方の鎖をコードするヌクレオチド配列に連係して作用する調節配列を有し、上記ｄｓＲＮＡの鎖のうち一方は、ＪＣウイルスをコードするｍＲＮＡの少なくとも一部にほぼ相補的であり、上記ｄｓＲＮＡの長さは３０塩基対未満であり、上記ｄｓＲＮＡは、ＪＣウイルスを発現している細胞と接触させると、ＪＣウイルスゲノムの発現を抑制する、ベクター。
（項目１６）
項目１５に記載のベクターを含む細胞。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１５２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１５２】
一般に、ｄｓＲＮＡ分子を発現できる組換えベクターは、下記のようにターゲット細胞に送達され、そこにとどまる。あるいは、ｄｓＲＮＡ分子を一過性に発現させるウイルスベクターを使用することもできる。そのようなベクターは、必要に応じて繰り返し投与することができる。ｄｓＲＮＡは、一旦発現されると、ターゲットＲＮＡに結合して、その機能または発現を調節する。ｄｓＲＮＡ発現ベクターの送達は、例えば、静脈内または筋肉内投与などにより全身投与するか、患者から取り出したターゲット細胞に投与した後で患者に再導入するか、または所望のターゲット細胞内への導入を可能にする任意の他の手段を用いて投与することができる。
ｄｓＲＮＡを発現するＤＮＡプラスミドは、通常、カチオン性脂質担体（例えばオリゴフェクタミン）または非カチオン性の脂質ベース担体（例えばＴｒａｎｓｉｔ−ＴＫＯＴＭ）との複合体として、ターゲット細胞にトランスフェクトされる。本発明では、一週間またはそれ以上の期間にわたる、単一のＪＣウイルスゲノムまたは複数のＪＣウイルスゲノムの異なる領域をターゲットとするｄｓＲＮＡを介したノックダウンのための多重脂質トランスフェクションも企図される。本発明のベクターが宿主細胞内に首尾よく導入されたかどうかは、さまざまな公知方法を用いてモニターすることができる。例えば、一過性トランスフェクションは、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を一例とする蛍光マーカーなどのリポーターを用いて示すことができる。ｅｘ  ｖｉｖｏ細胞の安定トランスフェクションは、トランスフェクトされた細胞に、ヒグロマイシンＢ耐性などの特定の環境要因（例えば抗生物質および薬物）に対する耐性を付与するマーカーを使用して確認することができる。
ＪＣウイルス特異的ｄｓＲＮＡ分子をベクターに挿入し、ヒト患者用の遺伝子治療用ベクターとして使用することもできる。遺伝子治療用ベクターは、例えば、静脈注射、局所投与（U.S. Patent 5,328,470参照）、または定位注射（例えば、Chen et al. (1994) Proc. Natl.Acad. Sci. USA 91:3054-3057を参照）によって、対象に送達することができる。遺伝子治療用ベクター製剤は、許容される希釈剤中に遺伝子治療用ベクターを含むものであってもよいし、遺伝子導入ビヒクルが埋め込まれた遅延放出マトリックスからなるものであってもよい。あるいは、組換え細胞からそのまま完全な遺伝子導入ベクター、例えばレトロウイルスベクターが得られる場合、製剤は、この遺伝子導入系を産生する１個以上の細胞を含んでいてもよい。
【数１】
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【数２】
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【数３】
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【数４】
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【数５】
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【数６】
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【数７】
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【数８】
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【数９】
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【数１０】
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【数１１】
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【数１２】
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【数１３】
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【数１４】
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【数１５】
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【数１６】
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【数１７】
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【数１８】
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【数１９】
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【数２０】
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【数２１】
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