【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年6月10日(2011.6.10)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２９】
従って、本発明の第一の側面は、105〜1012CFU/gのバチルス芽胞細胞を含むバチルス組成物に関し、ここで、そのバチルス組成物が：
(ｉ)：前記バチルス芽胞が、4mM及び6mMの胆汁酸塩を含む胆汁酸塩培地の存在下で、芽胞から栄養細胞への迅速な発芽及び菌体形成を呈し、当該菌体形成が、前記バチルス芽胞がそれぞれ18時間及び19時間以内に0.4OD630の栄養細胞増殖点(vegetative cell growth point)に達することで定義付けられ、ここで、前記栄養細胞増殖点とは、増殖曲線上で、ODの値が持続的な形で増大(栄養細胞の増殖により)し始め、OD630が0.4に達した点であり；
(I)：ここで、前記胆汁酸塩培地は、実施例1の標準的な公知の非選択的子牛滲出培養液（Veal Infusion Broth; VIB)に、共役胆汁酸塩タウロデオキシコレート及びグリコデオキシコレート、並びに脱共役(deconjugated)胆汁酸塩デオキシコレートを、タウロデオキシコレートが60％、グリコデオキシコレートが30％、及びデオキシコレートが10％となる比率で含む胆汁酸塩混合物を添加したものであり；続いて、
(II):前記ODアッセイ解析は、以下の工程により実施される：
(a)：マイクロタイタープレートのウェルに1mlあたり108のバチルス芽胞を含む胆汁酸塩培地を0.150ml注入し(これをゼロ時間とする)；続いて
(b)：大気条件下、37℃で、前記プレートをインキュベートし、その後、分光光度計を使用してOD630値を測定して(各読取り前に攪拌を行う)、代表的な経時増殖曲線を取得する；
並びに
(ii)：前記バチルス栄養細胞が、参照バチルス細胞DSM19467の少なくとも1.25倍の量のフィターゼを生産しており、ここでフィターゼの生産量が、本明細書中の実施例2に記載の標準的な公知の非選択的心臓滲出培養液(Heart Infusion Broth(HIB))培地中で、37℃で4時間増殖後に行う、実施例2に記載の標準的なフィターゼアッセイにより測定され；ここでフィターゼアッセイの解析は、以下の工程により実施される：
(a)：富栄養培養培地中でバチルス栄養細胞を一昼夜培養し；続いて
(b)：前記一昼夜培養から1％の接種材料(inoculum)をHIB培地に移し(これをゼロ時間とする)、フィターゼ活性を測定するまで37℃でインキュベートする
ことを特徴とする。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０８】
共役胆汁酸塩は、タウロデオキシコレート(Sigma T-0875, U.S.)及びグリコデオキシコレート(Sigma G-9910, U.S.)であり、脱共役(deconjugated)胆汁酸塩は、デオキシコレート(Sigma D-5670 U.S.)であり、最終濃度8mMの胆汁酸塩溶液には、タウロデオキシコレートが60％、グリコデオキシコレートが30％、デオキシコレートが10％含まれる。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
105〜1012CFU/gのバチルス芽胞細胞を含むバチルス(bacillus)組成物であり、：
(ｉ)：前記バチルス芽胞が、4mMの胆汁酸塩を含む胆汁酸塩培地の存在下で、及び6mMの胆汁酸塩を含む胆汁酸塩培地の存在下で、芽胞から栄養細胞（vegetative cell)への迅速な発芽及び菌体形成(outgrouth)を呈し、当該菌体形成が、前記バチルス芽胞がそれぞれ18時間及び19時間以内に0.4OD630の栄養細胞増殖点(vegetative cell growth point)に達することで定義付けられ、ここで、前記栄養細胞増殖点とは、増殖曲線上で、ODの値が持続的な形で(栄養細胞の増殖により)増大し始め、OD630が0.4に達した点であり；
(I)：ここで、前記胆汁酸塩培地は、実施例1の非選択的子牛滲出培養液（Veal Infusion Broth; VIB)に、共役胆汁酸塩タウロデオキシコレート及びグリコデオキシコレート、並びに脱共役(deconjugated)胆汁酸塩デオキシコレートを、タウロデオキシコレートが60％、グリコデオキシコレートが30％、及びデオキシコレートが10％となる比率で含む胆汁酸塩混合物を添加したものであり；続いて、
(II)：前記ODアッセイ解析は、以下の工程により実施される：
(a)：マイクロタイタープレートのウェルに1mlあたり108のバチルス芽胞を含む胆汁酸塩培地を0.150ml注入し(これをゼロ時間とする)；続いて
(b)：大気条件下、37℃で、前記プレートをインキュベートし、その後、分光光度計を使用してOD630値を測定して(各読取り前に攪拌を行う)、代表的な経時増殖曲線を取得する；
並びに
(ii)：前記バチルス栄養細胞が、参照バチルス細胞DSM19467の少なくとも1.25倍の量のフィターゼを生産しており、ここでフィターゼの生産量が、本明細書中の実施例2の非選択的心臓滲出培養液(Heart Infusion Broth(HIB))培地中で、37℃で4時間増殖後に行う、実施例2のフィターゼアッセイにより測定され；ここでフィターゼアッセイの解析は、以下の工程により実施される：
(a)：富栄養培養培地中でバチルス栄養細胞を一昼夜培養し；続いて
(b)：前記一昼夜培養から1％の接種材料(inoculum)をHIB培地に移し(これをゼロ時間とする)、フィターゼ活性を測定するまで37℃でインキュベートする
ことを特徴とする、前記バチルス組成物。
【請求項２】
前記組成物のバチルス芽胞細胞が、乾燥（例えば噴霧乾燥)芽胞細胞として存在する、請求項1に記載のバチルス組成物。
【請求項３】
前記バチルス細胞が、バチルス・スブチリス（B. subtilis)細胞である、請求項1又は2に記載のバチルス組成物。
【請求項４】
前記バチルス芽胞が、請求項1の項目(ｉ)の条件下で、DSM17231として供託されている参照バチルス・スブチリス(Bacillus subtilis)芽胞細胞(「GalliPro（登録商標）」)よりも少なくとも3時間以上早く栄養細胞増殖点に達する、請求項1〜3のいずれか1項に記載のバチルス組成物。
【請求項５】
前記バチルス栄養細胞が、請求項1の項目(ii)の条件下で、DSM19467の参照バチルス細胞よりも少なくとも1.5倍の量のフィターゼを生産している、請求項1〜4のいずれか1項に記載のバチルス組成物。
【請求項６】
動物への給餌方法であり、請求項１〜５のいずれか1項に記載のバチルス組成物を、他の動物飼料含有物と併せて動物に投与することを含む、前記方法。
【請求項７】
前記動物が、家禽、反芻動物(ruminant)、子牛(calf)、ブタ、ウサギ、ウマ、魚類、及びペットからなる群から選択される動物である、請求項6に記載の動物への給餌方法。
【請求項８】
新規バチルス芽胞細胞をスクリーニング及び単離する方法であり、以下の工程：
(a)：請求項１の項目(ｉ)の条件下で、18時間及び19時間以内に栄養細胞増殖点に達する程度の速さで発芽及び菌体形成することが可能な新たなバチルス芽胞細胞の個々のバチルス芽胞細胞のプールから選択及び単離し；
(b)：工程(a)の単離された芽胞細胞から栄養バチルス細胞を作製し、続いて当該新たに選択及び単離された細胞を突然変異させ、新たな個々のバチルス栄養細胞群のプールを得て；
(c)：工程(b)の新たな個々のバチルス栄養細胞群のプールから、請求項１の項目(ii)の条件下で、DSM登録番号19467として供託される参照バチルス細胞よりも少なくとも1.25倍の量のフィターゼを生産することが可能な新たなバチルス栄養細胞を選択及び単離し；更に
(d)：工程(c)の高生産性栄養バチルス細胞を解析して、それが工程(a)の迅速な発芽及び菌体形成を維持していることを確認し、選択したバチルス細胞を単離する、
ことを含む、前記方法。
【請求項９】
前記バチルス細胞が、バチルス・スブチリス（B. subtilis)細胞である、請求項8の新規バチルス細胞をスクリーニング及び単離する方法。
【請求項１０】
バチルス細胞であり：
(a)：登録番号DSM19467のバチルス・スブチリス(Bacillus subtilis)細胞；
(b)：登録番号DSM19489のバチルス・スブチリス(Bacillus subtilis)細胞；及び
(c)：登録番号DSM19466のバチルス・スブチリス(Bacillus subtilis)細胞；又は
それらの突然変異株
からなる群から選択され、当該突然変異株が、開始材料として前記供託株の一種を使用することにより収得され、そして当該突然変異株が、前記供託株の本質的特徴を保持しており、ここで、(a)のバチルス・スブチリス(Bacillus subtilis)細胞の突然変異の場合、前記本質的特徴は：
(i)：請求項１の項目(ｉ)の迅速な発芽及び菌体形成であり；
そして、(b)及び(c)のバチルス・スブチリス(Bacillus subtilis)細胞の突然変異の場合、前記本質的特徴は：
(i)：請求項１の項目(ｉ)の迅速な発芽及び菌体形成；及び
(ii)：請求項１の項目(ii)の量のフィターゼ生産である；
前記細胞。