【手続補正書】
【提出日】平成23年5月20日(2011.5.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヌクレオシド輸送経路を発現する細胞を、抱合体と、輸送が行われるのに適した条件の下で接触させる段階; および
該抱合体がヌクレオシド輸送経路により該細胞に輸送されるかどうかを判定する段階
を含む、ヌクレオシド輸送経路による輸送について抱合体をスクリーニングする方法。
【請求項２】
ヌクレオシド輸送経路が拡散型ヌクレオシド輸送体または濃縮型ヌクレオシド輸送体を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
拡散型ヌクレオシド輸送体が低濃度のニトロベンジルメルカプトプリンリボシド(NBMBR)に対して非感受性である、請求項２記載の方法。
【請求項４】
拡散型ヌクレオシド輸送体が、ENT1、ENT2、ENT3およびENT4からなる群より選択される、請求項２記載の方法。
【請求項５】
拡散型ヌクレオシド輸送体がENT2輸送体である、請求項２記載の方法。
【請求項６】
細胞が、ENT2輸送体をコードするDNAでトランスフェクトされる、請求項５記載の方法。
【請求項７】
判定する段階が、ENT2をコードするDNAでトランスフェクトされた細胞に輸送される抱合体の量を、ENT2でトランスフェクトされていない対照細胞に輸送される抱合体の量と比較する段階を含み、該対照細胞と比べてトランスフェクトされた細胞の抱合体輸送の増大が、輸送がENT2輸送体によるものであることを示す、請求項６記載の方法。
【請求項８】
抱合体の輸送が低濃度のNBMPRの存在下において行われる、請求項１記載の方法。
【請求項９】
抱合体が検出可能な標識を含む、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
基質が抗体である場合、モノクローナル抗体3E10またはその断片ではないという条件で、ヌクレオシド輸送経路によって輸送されることができる基質と、該基質に連結された活性薬剤とを含む、がんを処置するための抱合体であって、
ヌクレオシド輸送経路によって輸送される前記抱合体。
【請求項１１】
ヌクレオシド輸送経路が拡散型ヌクレオシド輸送体または濃縮型ヌクレオシド輸送体を含む、請求項１０記載の抱合体。
【請求項１２】
拡散型ヌクレオシド輸送体が低濃度のニトロベンジルメルカプトプリンリボシド(NBMBR)に対して非感受性である、請求項１１記載の抱合体。
【請求項１３】
拡散型ヌクレオシド輸送体が、ENT1、ENT2、ENT3およびENT4からなる群より選択される、請求項１１記載の抱合体。
【請求項１４】
基質が、ヌクレオシド、核酸塩基、ヌクレオチド、ヌクレオシド類似体、オリゴヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、抗体、抗体断片からなる群より選択される、請求項１０記載の抱合体。
【請求項１５】
基質が抗体またはその断片である、請求項１０記載の抱合体。
【請求項１６】
抗体またはその断片が核酸に結合する、請求項１５記載の抱合体。
【請求項１７】
活性薬剤が、核酸、無機分子、有機分子、有機小分子、薬物化合物、ペプチド、ポリペプチド、抗体、抗体断片、ペプチド模倣薬、DNA、RNA、リボザイム、ヘアピンRNA、siRNA、miRNA、アンタゴmir、PNA、LNAからなる群より選択される、請求項１０記載の抱合体。
【請求項１８】
拡散型ヌクレオシド輸送体によってがん性細胞に輸送されることができる基質と、がんを処置するための、該基質に連結された活性薬剤とを含む抱合体含む、がんを処置するための薬学的組成物。
【請求項１９】
活性薬剤が腫瘍抑制遺伝子または腫瘍抑制タンパク質である、請求項１８記載の薬学的組成物。
【請求項２０】
基質が、ヌクレオシド、核酸塩基、ヌクレオチド、ヌクレオシド類似体、オリゴヌクレオチド、ペプチド、抗体、および抗体断片からなる群より選択される、請求項１８記載の薬学的組成物。
【請求項２１】
基質が抗体またはその断片である、請求項１８記載の薬学的組成物。
【請求項２２】
抗体またはその断片が核酸に結合する、請求項２１記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
抗体またはその断片が、ATCCアクセッション番号PTA 2439を有するハイブリドーマによって産生される抗体の結合特異性を有する抗体、その変種、またはその機能断片である、請求項２２記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
請求項１０記載の抱合体および組織中のENT2発現を促進する薬剤を含む薬学的組成物。
【請求項２５】
組織中のENT2発現を促進する薬剤が、低酸素症を処置もしくは抑制する薬剤またはHIF-1αを阻害する薬剤である、請求項２４記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
組織が低酸素状態である、請求項２４記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
低酸素状態である組織が低酸素腫瘍、不十分な血管系を有する組織、潰瘍、脳卒中による虚血領域、または心血管疾患による虚血領域である、請求項２６記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
HIF-1αを処理するまたは阻害する薬剤がトポテカン、NSC644221、PX-478、YC-1、17-AAG、ベバシズマブ、またはHIF-1α発現を低減するsiRNA、RNAi構築体、ヘアピンRNA、もしくはmiRNAである、請求項２５記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
低酸素症を処置または抑制する薬剤が、腫瘍血管系を正常化する薬剤、または組織の酸化還元状態を変える薬剤である、請求項２５記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
低酸素症を処置または抑制する薬剤が、過剰酸素、TSC、アルミトリン、ATP、またはATP生成系である、請求項２５記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
トポテカン、NSC 644221、PX-478、YC-1、17-AAG、ベバシズマブ、およびHIF-1α発現を低減するsiRNA、RNAi構築体、ヘアピンRNA、またはmiRNAからなる群から選択される剤をさらに含む、請求項１８記載の薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
さらに、本明細書において、a) ENT2発現および/または活性を促進する薬剤を投与する段階、ならびにb) 本明細書において開示される抱合体の一つを投与する段階を含む、ENT-2欠損組織を処置する方法が提供される。
[請求項1001]
基質が抗体である場合、モノクローナル抗体3E10またはその断片ではないという条件で、ヌクレオシド輸送経路によって輸送されることができる基質と該基質に連結された活性薬剤とを含む抱合体であって、
ヌクレオシド輸送経路によって輸送される前記抱合体。
[請求項1002]
ヌクレオシド輸送経路が拡散型ヌクレオシド輸送体または濃縮型ヌクレオシド輸送体を含む、請求項1001記載の抱合体。
[請求項1003]
拡散型ヌクレオシド輸送体が低濃度のニトロベンジルメルカプトプリンリボシド(NBMBR)に対して非感受性である、請求項1002記載の抱合体。
[請求項1004]
拡散型ヌクレオシド輸送体が、ENT1、ENT2、ENT3およびENT4からなる群より選択される、請求項1002記載の抱合体。
[請求項1005]
基質が、ヌクレオシド、核酸塩基、ヌクレオチド、ヌクレオシド類似体、オリゴヌクレオチド、ペプチド、ポリペプチド、抗体、抗体断片からなる群より選択される、請求項1001記載の抱合体。
[請求項1006]
基質が抗体またはその断片である、請求項1001記載の抱合体。
[請求項1007]
抗体またはその断片が核酸に結合する、請求項1004記載の抱合体。
[請求項1008]
活性薬剤が、核酸、無機分子、有機分子、有機小分子、薬物化合物、ペプチド、ポリペプチド、抗体、抗体断片、ペプチド模倣薬、DNA、RNA、リボザイム、ヘアピンRNA、siRNA、miRNA、アンタゴmir、PNA、LNAからなる群より選択される、請求項1001記載の抱合体。
[請求項1009]
薬物化合物が、α-グルコシダーゼ、α-L-イズロニダーゼ、α-ガラクトシダーゼA、アリールスルファターゼ、N-アセチルガラクトサミン-6-スルファターゼもしくはβ-ガラクトシダーゼ、イズロン酸2-スルファターゼ、セラミダーゼ、ガラクトセレブロシダーゼ、β-グルクロニダーゼ、ヘパランN-スルファターゼ、N-アセチル-α-グルコサミニダーゼ、アセチルCoA-α-グルコサミニドN-アセチルトランスフェラーゼ、N-アセチル-グルコサミン-6スルファターゼ、ガラクトース6-スルファターゼ、アリールスルファターゼA、BもしくはC、アリールスルファターゼAセレブロシド、ガングリオシド、酸性β-ガラクトシダーゼGMIガングリシオド(Gaiglioside)、酸性β-ガラクトシダーゼ、ヘキソサミニダーゼA、ヘキソサミニダーゼB、α-フコシダーゼ、α-N-アセチルガラクトサミニダーゼ、糖タンパク質ノイラミニダーゼ、アスパルチルグルコサミンアミダーゼ、酸性リパーゼ、酸性セラミダーゼ、リソソームスフィンゴミエリナーゼ、他のスフィンゴミエリナーゼ、ジストロフィン、ジストロフィン-糖タンパク質複合体の成分、ラミニンα2鎖、フクチン関連タンパク質、LARGE、フクチン、EMD、LMNA、DMPK、ZNF9およびPABPN1、グリコーゲンシンターゼ、グルコース-6-ホスファターゼ、脱分岐酵素、トランスグルコシダーゼ、筋ホスホリラーゼ、ホスホリラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、酸性マルターゼ欠損、カルニチンパルミチルトランスフェラーゼ、ホスホグリセリン酸キナーゼ、またはホスホグリセリン酸ムターゼからなる群より選択される、請求項1008記載の抱合体。
[請求項1010]
ヌクレオシド輸送経路を発現する標的細胞を、
基質が抗体である場合、モノクローナル抗体3E10またはその断片ではないという条件で、ヌクレオシド輸送経路によって輸送されることができる基質と、該基質に連結された活性薬剤とを含む、ヌクレオシド輸送経路によって輸送される抱合体に接触させ、
それにより標的細胞へ抱合体を輸送する段階を含む、
ヌクレオシド輸送経路を発現する標的細胞に抱合体を送達する方法。
[請求項1011]
ヌクレオシド輸送経路が拡散型ヌクレオシド輸送体または濃縮型ヌクレオシド輸送体を含む、請求項1009記載の方法。
[請求項1012]
拡散型ヌクレオシド輸送体が低濃度のニトロベンジルメルカプトプリンリボシド(NBMBR)による阻害に対して非感受性である、請求項1010記載の方法。
[請求項1013]
拡散型ヌクレオシド輸送体が、ENT1、ENT2、ENT3およびENT4からなる群より選択される、請求項1010記載の方法。
[請求項1014]
基質が、クレオシド、核酸塩基、ヌクレオチド、ヌクレオシド類似体、オリゴヌクレオチド、ペプチド、抗体、および抗体断片からなる群より選択される、請求項1010記載の方法。
[請求項1015]
基質が抗体またはその断片である、請求項1010記載の方法。
[請求項1016]
抗体またはその断片が核酸に結合する、請求項1015記載の方法。
[請求項1017]
活性薬剤が、核酸、無機分子、有機分子、有機小分子、薬物化合物、ペプチド、ポリペプチド、抗体、抗体断片、ペプチド模倣薬、脂質、DNA、RNA、リボザイム、ヘアピンRNA、siRNA、miRNA、アンタゴmir、PNA、LNAからなる群より選択される、請求項1010記載の方法。
[請求項1018]
薬物化合物が、α-グルコシダーゼ、α-L-イズロニダーゼ、α-ガラクトシダーゼA、アリールスルファターゼ、N-アセチルガラクトサミン-6-スルファターゼもしくはβ-ガラクトシダーゼ、イズロン酸2-スルファターゼ、セラミダーゼ、ガラクトセレブロシダーゼ、β-グルクロニダーゼ、ヘパランN-スルファターゼ、N-アセチル-α-グルコサミニダーゼ、アセチルCoA-α-グルコサミニドN-アセチルトランスフェラーゼ、N-アセチル-グルコサミン-6スルファターゼ、ガラクトース6-スルファターゼ、アリールスルファターゼA、BもしくはC、アリールスルファターゼAセレブロシド、ガングリオシド、酸性β-ガラクトシダーゼGMIガングリシオド(Gaiglioside)、酸性β-ガラクトシダーゼ、ヘキソサミニダーゼA、ヘキソサミニダーゼB、α-フコシダーゼ、α-N-アセチルガラクトサミニダーゼ、糖タンパク質ノイラミニダーゼ、アスパルチルグルコサミンアミダーゼ、酸性リパーゼ、酸性セラミダーゼ、リソソームスフィンゴミエリナーゼ、他のスフィンゴミエリナーゼ、ジストロフィン、ジストロフィン-糖タンパク質複合体の成分、ラミニンα2鎖、フクチン関連タンパク質、LARGE、フクチン、EMD、LMNA、DMPK、ZNF9およびPABPN1、グリコーゲンシンターゼ、グルコース-6-ホスファターゼ、脱分岐酵素、トランスグルコシダーゼ、筋ホスホリラーゼ、ホスホリラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、酸性マルターゼ欠損、カルニチンパルミチルトランスフェラーゼ、ホスホグリセリン酸キナーゼ、またはホスホグリセリン酸ムターゼからなる群より選択される、請求項1017記載の方法。
[請求項1019]
標的細胞が、筋肉、骨格筋、心筋、血管内皮、心臓、脳、胎盤、胸腺、膵臓、前立腺、腎臓、血液、皮膚、およびENT2発現がん細胞からなる群より選択される組織由来である、請求項1010記載の方法。
[請求項1020]
ヌクレオシド輸送経路を発現する細胞を、抱合体と、輸送が行われるのに適した条件の下で接触させる段階; および
該抱合体がヌクレオシド輸送経路により該細胞に輸送されるかどうかを判定する段階
を含む、ヌクレオシド輸送経路による輸送について抱合体をスクリーニングする方法。
[請求項1021]
ヌクレオシド輸送経路が拡散型ヌクレオシド輸送体または濃縮型ヌクレオシド輸送体を含む、請求項1020記載の方法。
[請求項1022]
拡散型ヌクレオシド輸送体が低濃度のニトロベンジルメルカプトプリンリボシド(NBMBR)に対して非感受性である、請求項1021記載の方法。
[請求項1023]
拡散型ヌクレオシド輸送体が、ENT1、ENT2、ENT3およびENT4からなる群より選択される、請求項1021記載の方法。
[請求項1024]
拡散型ヌクレオシド輸送体がENT2輸送体である、請求項1021記載の方法。
[請求項1025]
細胞が、ENT2輸送体をコードするDNAでトランスフェクトされる、請求項1024記載の方法。
[請求項1026]
判定する段階が、ENT2をコードするDNAでトランスフェクトされた細胞に輸送される抱合体の量を、ENT2でトランスフェクトされていない対照細胞に輸送される抱合体の量と比較する段階を含み、該対照細胞と比べてトランスフェクトされた細胞の抱合体輸送の増大が、輸送がENT2輸送体によるものであることを示す、請求項1025記載の方法。
[請求項1027]
抱合体の輸送が低濃度のNBMPRの存在下において行われる、請求項1020記載の方法。
[請求項1028]
抱合体が検出可能な標識を含む、請求項1020記載の方法。
[請求項1029]
拡散型ヌクレオシド輸送体によって輸送されることができる基質と骨格筋障害を処置するための活性薬剤とを含む抱合体を、骨格筋障害を抱える患者に投与する段階を含む、骨格筋障害を処置する方法であって、
該活性薬剤が基質に連結され、かつさらに該抱合体が拡散型ヌクレオシド輸送体によって輸送され、それにより該抱合体が骨格筋細胞に輸送され、その結果、該活性薬剤が送達される、前記方法。
[請求項1030]
骨格筋障害が、ベッカー型筋ジストロフィー(BMD)、先天型筋ジストロフィー、デュシェンヌ型筋ジストロフィー(DMD)、遠位型筋ジストロフィー、エメリ・ドレフュス型筋ジストロフィー、顔面肩甲上腕筋ジストロフィー(FSHD)、肢帯筋ジストロフィー(LGMD)、筋緊張性筋ジストロフィー、眼球咽頭型筋ジストロフィー、ポンペ病、フルラー症候群、ファブリー病、マロトー・ラミー症候群、モルキオ症候群、ハンター症候群、ファーバー病、クラッベ病、スライ症候群、サンフィリポ症候群(A、B、およびD型を含む)、モルキオA、多発性スルファターゼ欠損症、異染性白質萎縮症、ムコ脂質症IV型、G.sub.MIガングリオシドーシス、ガラクトシアリドーシス、テイサックス病およびテイサックス病の変種、サンドホフ病、フコシドーシス(Fucsidosis)、シンドラー病、シアリドーシス、アスパルチルグルコサミン尿症、ウォルマン病、ファーバー脂肪性肉芽腫症、ニーマン・ピック病、ホスホリラーゼ欠損、酸性マルターゼ欠損、ミトコンドリア性筋障害、カルニチンパルミチルトランスフェラーゼ欠損、ホスホグリセリン酸キナーゼ欠損、ならびにホスホグリセリン酸ムターゼ欠損からなる群より選択される、請求項1029記載の方法。
[請求項1031]
拡散型ヌクレオシド輸送体によって輸送されることができる基質と、遺伝的障害を処置するための活性薬剤とを含む抱合体を、遺伝的障害を抱える患者に投与する段階を含む、遺伝的障害を処置する方法であって、
該活性薬剤が該基質に連結され、かつさらに該抱合体が該拡散型ヌクレオシド輸送体によって輸送され、それにより該抱合体が細胞に輸送され、その結果該活性薬剤が送達される、前記方法。
[請求項1032]
活性薬剤が、遺伝的疾患を抱える患者において欠損している遺伝子またはタンパク質である、請求項1031記載の方法。
[請求項1033]
拡散型ヌクレオシド輸送体によって輸送されることができる基質と、がんを処置するための活性薬剤とを含む抱合体を、がんを抱える患者に投与する段階を含む、がんを処置する方法であって、
該活性薬剤が該基質に連結され、かつさらに該抱合体が拡散型ヌクレオシド輸送体によって輸送され、それにより該抱合体ががん性細胞に輸送され、その結果、該活性薬剤が送達される、前記方法。
[請求項1034]
活性薬剤が腫瘍抑制遺伝子または腫瘍抑制タンパク質である、請求項1033記載の方法。
[請求項1035]
基質が、ヌクレオシド、核酸塩基、ヌクレオチド、ヌクレオシド類似体、オリゴヌクレオチド、ペプチド、抗体、および抗体断片からなる群より選択される、請求項1029、1031、または1033記載の方法。
[請求項1036]
基質が抗体またはその断片である、請求項1029、1031、または1033記載の方法。
[請求項1037]
抗体またはその断片が核酸に結合する、請求項1036記載の方法。
[請求項1038]
抗体またはその断片が、ATCCアクセッション番号PTA 2439を有するハイブリドーマによって産生される抗体の結合特異性を有する抗体、その変種、またはその機能断片である、請求項1037記載の方法。
[請求項1039]
活性薬剤が、α-グルコシダーゼ、α-L-イズロニダーゼ、α-ガラクトシダーゼA、アリールスルファターゼ、N-アセチルガラクトサミン-6-スルファターゼもしくはβ-ガラクトシダーゼ、イズロン酸2-スルファターゼ、セラミダーゼ、ガラクトセレブロシダーゼ、β-グルクロニダーゼ、ヘパランN-スルファターゼ、N-アセチル-α-グルコサミニダーゼ、アセチルCoA-α-グルコサミニドN-アセチルトランスフェラーゼ、N-アセチル-グルコサミン-6スルファターゼ、ガラクトース6-スルファターゼ、アリールスルファターゼA、BもしくはC、アリールスルファターゼAセレブロシド、ガングリオシド、酸性β-ガラクトシダーゼGMIガングリシオド(Gaiglioside)、酸性β-ガラクトシダーゼ、ヘキソサミニダーゼA、ヘキソサミニダーゼB、α-フコシダーゼ、α-N-アセチルガラクトサミニダーゼ、糖タンパク質ノイラミニダーゼ、アスパルチルグルコサミンアミダーゼ、酸性リパーゼ、酸性セラミダーゼ、リソソームスフィンゴミエリナーゼ、他のスフィンゴミエリナーゼ、ジストロフィン、ジストロフィン-糖タンパク質複合体の成分、ラミニンα2鎖、フクチン関連タンパク質、LARGE、フクチン、EMD、LMNA、DMPK、ZNF9およびPABPN1、グリコーゲンシンターゼ、グルコース-6-ホスファターゼ、脱分岐酵素、トランスグルコシダーゼ、筋ホスホリラーゼ、ホスホリラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、酸性マルターゼ欠損、カルニチンパルミチルトランスフェラーゼ、ホスホグリセリン酸キナーゼ、またはホスホグリセリン酸ムターゼからなる群より選択される、請求項1029、1031、または1033記載の方法。
[請求項1040]
ENT2輸送体による輸送を阻害する化合物を、自己免疫障害を抱える患者に投与する段階を含む、自己免疫障害を処置する方法。
[請求項1041]
請求項1001記載の抱合体および組織中のENT2発現を促進する薬剤を含む薬学的組成物。
[請求項1042]
組織中のENT2発現を促進する薬剤が、低酸素症を処置もしくは抑制する薬剤またはHIF-1αを阻害する薬剤である、請求項1041記載の薬学的組成物。
[請求項1043]
組織が低酸素状態である、請求項1041記載の薬学的組成物。
[請求項1044]
低酸素状態である組織が低酸素腫瘍、不十分な血管系を有する組織、潰瘍、脳卒中による虚血領域、または心血管疾患による虚血領域である、請求項1044記載の薬学的組成物。
[請求項1045]
HIF-1αを処理するまたは阻害する薬剤がトポテカン、NSC644221、PX-478、YC-1、17-AAG、ベバシズマブ、またはHIF-1α発現を低減するsiRNA、RNAi構築体、ヘアピンRNA、もしくはmiRNAである、請求項1042記載の薬学的組成物。
[請求項1046]
低酸素症を処置または抑制する薬剤が、腫瘍血管系を正常化する薬剤、または組織の酸化還元状態を変える薬剤である、請求項1042記載の薬学的組成物。
[請求項1047]
低酸素症を処置または抑制する薬剤が、過剰酸素、TSC、アルミトリン、ATP、またはATP生成系である、請求項1042記載の薬学的組成物。
[請求項1048]
a) ENT2発現および/または活性を促進する薬剤を投与する段階、ならびに
b) 請求項1001記載の抱合体を投与する段階
を含む、ENT-2欠損組織を処置する方法。