(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生コーヒー豆抽出物を配合してなるジカフェオイルキナ酸類含有飲料であって、
次の成分（Ａ）及び（Ｂ）；
（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類：０．０２〜０．１５質量％、及び
（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩
を含み、
（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類が３，４−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸及び４，５−ジカフェオイルキナ酸であり、かつ
成分（Ａ）と成分（Ｂ）との含有質量比［（Ｂ）／（Ａ）］が１〜１５である、
ジカフェオイルキナ酸類含有飲料。
【請求項２】
成分（Ｂ）の含有量が０．０３〜１質量％である、請求項１記載のジカフェオイルキナ酸類含有飲料。
【請求項３】
カフェインの含有量が０．０７質量％以下である、請求項１又は２記載のジカフェオイルキナ酸類含有飲料。
【請求項４】
（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類と、（Ｄ）カリウムとの含有質量比［（Ｄ）／（Ａ）］が０．５以下である、請求項１〜３のいずれか１項に記載のクロロゲン酸類含有飲料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジカフェオイルキナ酸類含有飲料に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、健康志向の高揚により、クロロゲン酸類による抗酸化作用や血圧降下作用といった生理作用が注目されている（特許文献１）。クロロゲン酸類を含有する代表的な飲料として、例えば、焙煎コーヒー飲料がある。焙煎コーヒー飲料は、焙煎コーヒー豆由来の香ばしい芳香、コク、適度な渋味などを有しており、嗜好性の高いものであるが、苦味が強いため、継続して摂取する上で障害となりやすい。
【０００３】
そこで、焙煎コーヒー飲料の苦味を低減する技術として、例えば、Ｌ−オルニチン塩酸塩、Ｄ，Ｌ−アラニン、Ｌ−バリン、グリシンから選択される１種以上のアミノ酸を添加する方法が提案されている（特許文献２）。
また、イソクロロゲン酸は金属のような収斂味のある後味があり、マンノースを主体としたオリゴ糖類でその後味が改善されることが報告されている（特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００２−８７９７７号公報
【特許文献２】特開２０１０−１４８４５３号公報
【特許文献３】特開２００９−１６５４９８号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Molecular  Pharmacology  October  1996  Vol.50  no.4  P. 846-855
【非特許文献２】Kaffee und Tee Markt, 1982, 32(21), P. 3-6
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ところで、クロロゲン酸類の生理効果は、クロロゲン酸類中のジカフェオイルキナ酸類により高められることが知られている（非特許文献１）。ジカフェオイルキナ酸類は、生コーヒー豆に豊富に含まれているが、生コーヒー豆を焙煎すると分解してしまう（非特許文献２）。したがって、クロロゲン酸類の生理効果をより有効に発現するには、生コーヒー豆の抽出物を利用することが有利である。
そこで、本発明者らは、生コーヒー豆抽出物を利用してジカフェオイルキナ酸類を豊富に含む飲料を開発すべく検討したところ、ジカフェオイルキナ酸類由来の渋味が強いという、焙煎コーヒー豆抽出物には存在しない新たな課題が生ずることを見出した。
【０００７】
したがって、本発明の課題は、ジカフェオイルキナ酸類を豊富に含み、渋味の抑制されたジカフェオイルキナ酸類含有飲料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、ジカフェオイルキナ酸類に特定のアミノ酸を含有せしめ、飲料中のジカフェオイルキナ酸類濃度と、当該ジカフェオイルキナ酸類に対する特定のアミノ酸の含有割合を特定範囲内に制御することで、上記課題が解決されることを見出した。
【０００９】
すなわち、本発明は、次の成分（Ａ）及び（Ｂ）；
（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類：０．０２〜０．２５質量％、及び
（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩
を含み、
成分（Ａ）と成分（Ｂ）との含有質量比［（Ｂ）／（Ａ）］が１〜１５である、ジカフェオイルキナ酸類含有飲料を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、渋味の抑制されたジカフェオイルキナ酸類含有飲料を提供することができる。本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、生理作用発現に有効なジカフェオイルキナ酸類を豊富に含み、風味が良好で継続して摂取することが可能であるから、ジカフェオイルキナ酸類による生理作用を十分に期待することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類を０．０２〜０．２５質量％という高濃度で含有するが、渋味抑制の観点から、上限は０．２質量％、更に０．１５質量％、更に０．１２質量％であることが好ましく、他方生理活性の観点から、下限は０．０３質量％、更に０．０４質量％、更に０．０５質量％であることが好ましい。渋味抑制と生理効果の両方の観点から、飲料中の（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類の含有量は、０．０３〜０．２質量％であることが好ましく、０．０４〜０．１５質量％であることがより好ましく、０．０５〜０．１２質量％であることがさらに好ましい。
なお、市販のコーヒー飲料にはジカフェオイルキナ酸類が含まれているが、前述の高濃度でジカフェオイルキナ酸類を含有するコーヒー飲料は存在しない。ここで、本明細書において「ジカフェオイルキナ酸類」とは、３，４−ジカフェオイルキナ酸、３，５−ジカフェオイルキナ酸及び４，５−ジカフェオイルキナ酸を併せての総称であり、ジカフェオイルキナ酸類含有量は上記３種の合計量に基づいて定義される。
【００１２】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、ジカフェオイルキナ酸類以外のポリフェノール類を含有していてもよく、例えば、モノカフェオイルキナ酸類、モノフェルロイルキナ酸類を挙げることができる。モノカフェオイルキナ酸類としては、３−カフェオイルキナ酸、４−カフェオイルキナ酸及び５−カフェオイルキナ酸が挙げられ、またモノフェルロイルキナ酸類としては、３−フェルロイルキナ酸、４−フェルロイルキナ酸及び５−フェルロイルキナ酸が挙げられる。ここで、本明細書において、上記３種のジカフェオイルキナ酸類と、上記３種のモノカフェオイルキナ酸類と、上記３種のモノフェルロイルキナ酸類を併せて『クロロゲン酸類』と称する。「ジカフェオイルキナ酸類」の含有量の測定は、後掲の実施例に記載の「クロロゲン酸類の分析」にしたがうものとする。
【００１３】
また、本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩を含有するが、渋味を抑制するために、（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類に対する（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩の含有割合を特定範囲内に制御する。具体的には、飲料中の（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類と（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩との含有質量比［（Ｂ）／（Ａ）］は１〜１５であるが、Ｌ−オルニチン塩酸塩由来の不快臭抑制の観点から、１４以下、更に１３以下、更に１２以下であることが好ましく、ジカフェオイルキナ酸類の渋味抑制の観点から、下限は２、更に３、更に４であることが好ましい。Ｌ−オルニチン塩酸塩由来の不快臭抑制及びジカフェオイルキナ酸類の渋味抑制の両方の観点から、飲料中の質量比［（Ｂ）／（Ａ）］は、２〜１４であることが好ましく、３〜１３であることがより好ましく、４〜１２であることがさらに好ましい。
【００１４】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料中の（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩の含有量は、上記の質量比［（Ｂ）／（Ａ）］を満たす量であれば特に限定されないが、Ｌ−オルニチン塩酸塩に独特の風味があるため、飲み易さの観点から、３質量％以下、更に２質量％以下、更に１質量％以下であることが好ましい。なお、当該飲料中の（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩の含有量の下限は、ジカフェオイルキナ酸類の渋味抑制の観点から、０．０３質量％、更に０．１５質量％、更に０．２質量％であることが好ましい。飲み易さ及びジカフェオイルキナ酸類の渋味抑制の両方の観点から、飲料中の（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩の含有量は、０．０３〜３質量％であることが好ましく、０．１５〜２質量％であることがより好ましく、０．２〜１質量％であることがさらに好ましい。なお、Ｌ−オルニチン塩酸塩量の測定は、後掲の実施例に記載の「遊離オルニチンの分析」にしたがい、遊離オルニチン量からＬ−オルニチン塩酸塩量に換算するものとする。
【００１５】
Ｌ−オルニチン塩酸塩は、天然由来品でも、化学合成品でもよく、更に市販品であってもよい。天然由来品としては、例えば、シジミからの抽出物が挙げられ、また化学合成品としては、例えば、発酵法により製造したものが挙げられる。これらは、必要によりカラムクロマトグラフィ等により精製してもよい。
本発明で使用するＬ−オルニチン塩酸塩は、結晶又は結晶性の粉末であることが好ましく、純度は９８％以上、乾燥減量は０．２質量％以下であることが好ましい。なお、Ｌ−オルニチン塩酸塩の粒度分布は特に限定されない。このような市販品として、例えば、協和発酵バイオ社、プロテインケミカル社のＬ−オルニチン塩酸塩を挙げることができる。
【００１６】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、（Ｃ）カフェインを含有していてもよく、苦味抑制の観点から、当該飲料中の（Ｃ）カフェインの含有量は０．０７質量％以下、更に０．０６質量％以下、更に０．０５質量％以下、更に０．０２質量％以下であることが好ましい。なお、（Ｃ）カフェインの含有量の下限値は特に限定されず、０質量％であってもよいが、製造効率の観点から、０．００００５質量％、更に０．０００１質量％、０．０００１５質量％であることが好ましい。苦味抑制及び製造効率の両方の観点から、飲料中のカフェイン含有量は、０．００００５〜０．０７質量％であることが好ましく、０．０００１〜０．０６質量％であることがより好ましく、０．０００１５〜０．０５質量％であることがさらに好ましく、０．０００１５〜０．０２質量％であることがよりさらに好ましい。
【００１７】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、カリウムを含んでも含まなくてもよいが、青臭み抑制の観点から、当該飲料中の（Ｄ）カリウムの含有量は０．００００１〜０．０６質量％であることが好ましく、更に０．０００１〜０．０３質量％、更に０．００１〜０．０２質量％であることが好ましい。また、青臭みを抑制するために、（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類に対する（Ｄ）カリウムの含有割合が特定値以下であることが好ましい。具体的には、飲料中の（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類と、（Ｄ）カリウムとの含有質量比［（Ｄ）／（Ａ）］が０．５以下であることが好ましく、更に０．４以下、更に０．３以下、殊更に０．２以下であることが好ましい。なお、下限は０であってもよいが、生産効率の観点から、０．０００５、更に０．００５、更に０．０１５であることが好ましい。青臭み抑制及び生産効率の両方の観点から、飲料中の質量比［（Ｄ）／（Ａ）］は、０．０００５〜０．５、更に０．０００５〜０．４、０．００５〜０．３、更に０．０１５〜０．２であることが好ましい。
【００１８】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料には、必要により、甘味料、苦味抑制剤、酸化防止剤、香料、無機塩類、色素類、乳化剤、保存料、調味料、品質安定剤等の添加剤の１種又は２種以上を配合してもよい。なお、これら添加剤の配合量は、本発明の目的を阻害しない範囲内で適宜決定することが可能である。
【００１９】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類と（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩とを配合し、ジカフェオイルキナ酸類濃度と、質量比［（Ｂ）／（Ａ）］を上記範囲内に調整することで製造することができる。
【００２０】
本発明においては、（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類として、ジカフェオイルキナ酸類製剤を使用することが可能である。ジカフェオイルキナ酸類製剤としては、例えば、試薬、ジカフェオイルキナ酸類を含む植物の抽出物等が挙げられ、ジカフェオイルキナ酸類が含まれていれば特に限定されるものではない。
【００２１】
原料ジカフェオイルキナ酸類製剤としては、ジカフェオイルキナ酸類が含まれていれば特に限定されないが、ジカフェオイルキナ酸類を含む植物の抽出物を使用することができる。このような植物抽出物としては、例えば、ヒマワリ種子、リンゴ未熟果、生コーヒー豆、シモン葉、マツ科植物の球果、マツ科植物の種子殻、サトウキビ、南天の葉、ゴボウ、ナスの皮、ウメの果実、フキタンポポ、ブドウ科植物等から抽出されたものから選ばれる１種又は２種以上が挙げられる。中でも、ジカフェオイルキナ酸類含量等の点から、コーヒー豆の抽出物が好ましい。また、抽出に使用するコーヒー豆は、ジカフェオイルキナ酸類含量等の点から、生コーヒー豆及び浅焙煎コーヒー豆から選ばれる１種又は２種が好ましい。浅焙煎コーヒー豆のＬ値は、ジカフェオイルキナ酸類含有の点から２７以上、更に２９以上が好ましく、他方Ｌ値の上限は風味の点から６２未満、更に６０以下、更に５５以下が好ましい。ここで、本明細書において「Ｌ値」とは、黒をＬ値０とし、また白をＬ値１００として、焙煎コーヒー豆の明度を色差計で測定したものである。生コーヒー豆抽出物として市販品を使用してもよく、例えば、長谷川香料（株）の「フレーバーホルダーＦＨ１０４１」、オリザ油化（株）の「生コーヒー豆エキスＰ」、東洋発酵(株)の「ＯＸＣＨ１００」等が挙げられる。なお、ジカフェオイルキナ酸類製剤の形態には、液体、固体、溶液、スラリー等の種々のものがある。
抽出に使用するコーヒー豆の種類としては、アラビカ種、ロブスタ種、リベリカ種及びアラブスタ種のいずれでもよい。なお、抽出方法及び抽出条件は特に限定されないが、例えば、特開昭５８−１３８３４７号公報、特開昭５９−５１７６３号公報、特開昭６２−１１１６７１号公報、特開平５−２３６９１８号公報等に記載の方法を採用することができる。
【００２２】
また、ジカフェオイルキナ酸類製剤として、精製工程において予め特定の処理を施したものを使用することもできる。例えば、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤を有機溶媒と水との混合溶液に溶解し、カチオン交換樹脂と接触させて得られた精製ジカフェオイルキナ酸類製剤を、必要によりｐＨ調整して使用することができる。ｐＨ調整には、有機酸類、有機酸塩類、無機酸類、無機酸塩類等を使用することが可能である。
【００２３】
有機溶媒と水の混合溶液の調製に使用する有機溶媒としては、例えば、エタノール、メタノール等のアルコール、アセトン等のケトン、酢酸エチル等のエステルが挙げられる。中でも、アルコール、ケトン等の親水性有機溶媒が好ましく、食品への使用を考慮すると、アルコールがより好ましく、エタノールが更に好ましい。
【００２４】
混合溶液中の有機溶媒と水の質量比は９／１〜１／９が好ましく、精製効率の観点から、より好ましくは９／１〜５／５、更に好ましくは８／２〜６／４である。
【００２５】
原料ジカフェオイルキナ酸類製剤を混合溶液に溶解する方法は特に制限されず、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤と予め濃度調整された混合溶液とを有機溶媒と水の質量比が上記範囲内となるように任意の順序で配合してもよい。また、原料クロロゲン酸類製剤を水に溶解後、有機溶媒を添加して有機溶媒と水の質量比を上記範囲内に調整しても、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤を有機溶媒に懸濁させた後、徐々に水を添加して有機溶媒と水の質量比を上記範囲内に調整してもよい。
【００２６】
原料ジカフェオイルキナ酸類製剤と混合溶液との配合量は、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤を混合溶液１００質量部に対して３０〜７０質量部、更に４０〜６０質量部とすることが、精製効率の観点から好ましい。
【００２７】
カチオン交換樹脂としては、プロトン（Ｈ）型のカチオン交換樹脂を用いることが好ましい。これにより、カリウム等の金属イオンの除去とｐＨ調整を同時に行うことができる。カチオン交換樹脂としては、具体的には、アンバーライト２００ＣＴ、ＩＲ１２０Ｂ、ＩＲ１２４、ＩＲ１１８（以上、オルガノ社製）、ダイヤイオンＳＫ１Ｂ、ＳＫ１ＢＨ、ＳＫ１０２、ＰＫ２０８、ＰＫ２１２（以上、三菱化学社製）等を用いることができる。
【００２８】
カチオン交換樹脂との接触は、例えば、バッチ方式、カラム方式等を採用することができる。
バッチ方式を採用する場合、カチオン交換樹脂と、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤との接触時間は適宜決定することが可能であるが、０．５〜１０時間、更に１〜５時間であることが好ましい。
一方、カラム方式を採用する場合、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤の溶液の通液条件は、空塔速度（ＳＶ）１〜６０／ｈｒ、更に３〜３０／ｈｒであることが好ましい。
【００２９】
カチオン交換樹脂の使用量は、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤の溶液１００質量部に対して１〜１５質量部、更に１〜１０質量部、更に１〜８質量部、更に１．５〜７．５質量部、更に２〜７質量部であることが、カリウム含有量を低減させる点から好ましい。
【００３０】
また、本発明においては、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤をカチオン交換樹脂と接触させる前に、吸着剤を用いて接触処理をしてもよい。風味向上の点から、吸着剤として活性炭と接触させることが好ましい。また、カフェインを低減させる点から、吸着剤として活性白土又は酸性白土と接触させることが好ましい。
活性炭を用いる場合には、一般に工業的に使用されているものであれば特に制限されず、例えば、ＺＮ−５０（北越炭素社製）、クラレコールＧＬＣ、クラレコールＰＫ−Ｄ、クラレコールＰＷ−Ｄ（クラレケミカル社製）、白鷲ＡＷ５０、白鷲Ａ、白鷲Ｍ、白鷲Ｃ、白鷺ＷＨ２Ｃ（日本エンバイロケミカルズ社製）等の市販品を用いることができる。
【００３１】
活性炭の細孔容積は、０．０１〜０．８ｍＬ／ｇが好ましく、更に０．１〜０．７ｍＬ／ｇが好ましい。また、活性炭の比表面積は、８００〜１３００ｍ2／ｇ、更に９００〜１２００ｍ2／ｇであることが、精製効率、風味向上の観点から好ましい。なお、これらの物性値は窒素吸着法に基づく値である。
【００３２】
活性炭は、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤の溶液１００質量部に対して０．５〜１０質量部、更に０．５〜８質量部、更に０．５〜５質量部、更に０．５〜３質量部添加することが、精製効率、風味向上の観点から好ましい。
【００３３】
酸性白土及び活性白土は、ともに一般的な化学成分として、ＳｉＯ2、Ａｌ2Ｏ3、Ｆｅ2Ｏ3、ＣａＯ、ＭｇＯ等を含有するものであるが、ＳｉＯ2／Ａｌ2Ｏ3質量比が３〜１２、更に４〜９であるものが、精製効率、カフェイン低減の観点から好ましい。また、Ｆｅ2Ｏ3を２〜５質量％、ＣａＯを０〜１．５質量％、ＭｇＯを１〜７質量％含有する組成のものが、精製効率、カフェイン低減の観点から好ましい。
活性白土は天然に産出する酸性白土（モンモリロナイト系粘土）を硫酸などの鉱酸で処理したものであり、大きい比表面積と吸着能を有する多孔質構造をもった化合物である。
【００３４】
酸性白土及び活性白土の比表面積は、酸処理の程度等により異なるが、５０〜３５０ｍ2／ｇであることが好ましく、ｐＨ（５％サスペンジョン、２０℃）は２．５〜８、更に３．６〜７であることが、精製効率、カフェイン低減の観点から好ましい。例えば、酸性白土として、ミズカエース＃６００（水澤化学社製）等の市販品を用いることができる。
【００３５】
酸性白土又は活性白土は、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤の固形分１００質量部に対して４０〜８０質量部、更に４５〜７０質量部添加することが、精製効率、カフェイン低減の観点から好ましい。
【００３６】
また、活性炭と、酸性白土又は活性白土とを併用する場合、活性炭と、酸性白土又は活性白土の割合は、活性炭１質量部に対して酸性白土又は活性白土が１〜１０質量部、更に１〜６質量部であることが、精製効率、カフェイン低減の観点から好ましい。
【００３７】
吸着剤を用いた接触処理は公知の方法を採用することができるが、例えば、バッチ方式、カラムによる連続方式が挙げられる。
バッチ方式を採用する場合、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤と、吸着剤の接触時間は適宜決定することが可能であるが、０．５〜１０時間、更に１〜５時間であることが、精製効率、カフェイン低減の観点から好ましい。
一方、カラム方式を採用する場合、原料ジカフェオイルキナ酸類製剤の溶液の通液条件は、空塔速度（ＳＶ）１〜６０／ｈｒ、更に３〜３０／ｈｒであることが、精製効率の観点から好ましい。
【００３８】
吸着剤を用いて接触処理した後、処理液を固液分離し、ジカフェオイルキナ酸類製剤の清澄液を得る。固液分離の方法としては、例えば、遠心分離、精密濾過、又は珪藻土濾過が挙げられる。
【００３９】
遠心分離に用いる遠心分離機としては、分離板型、円筒型、デカンター型などの一般的な機器が好ましい。遠心分離条件としては、析出した濁り成分の除去の点から、温度が５〜７０℃、更に１０〜４０℃であることが好ましく、回転数と時間は、例えば、分離板型の場合、３，０００〜１０，０００ｒ／ｍｉｎ、更に５，０００〜９，０００ｒ／ｍｉｎ、更に６，０００〜８，０００ｒ／ｍｉｎの回転数で、０．２〜３０分、更に０．３〜２０分、更に０．４〜１５分であることが好ましい。
【００４０】
精密濾過膜による処理条件としては、析出した濁り成分の除去の点から、一般的な濾過条件で処理することができ、孔径は０．１〜３０μｍが好ましい。
【００４１】
本発明のジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、ポリエチレンテレフタレートを主成分とする成形容器（いわゆるＰＥＴボトル）、金属缶、金属箔やプラスチックフィルムと複合された紙容器、瓶等の通常の包装容器に充填して提供することができる。
また、ジカフェオイルキナ酸類含有飲料は、例えば、金属缶のような容器に充填後、加熱殺菌できる場合にあっては適用されるべき法規（日本にあっては食品衛生法）に定められた殺菌条件で製造できる。ＰＥＴボトル、紙容器のようにレトルト殺菌できないものについては、あらかじめ上記と同等の殺菌条件、例えばプレート式熱交換器などで高温短時間殺菌後、一定の温度迄冷却して容器に充填する等の方法が採用できる。
【実施例】
【００４２】
（クロロゲン酸類の分析）
クロロゲン酸類の分析法は次の通りである。分析機器はＨＰＬＣを使用した。
装置の構成ユニットの型番は次の通り。
ＵＶ−ＶＩＳ検出器：Ｌ−２４２０（（株）日立ハイテクノロジーズ）、
カラムオーブン：Ｌ−２３００（（株）日立ハイテクノロジーズ）、
ポンプ：Ｌ−２１３０（（株）日立ハイテクノロジーズ）、
オートサンプラー：Ｌ−２２００（（株）日立ハイテクノロジーズ）、
カラム：Ｃａｄｅｎｚａ ＣＤ−Ｃ１８ 内径４．６ｍｍ×長さ１５０ｍｍ、粒子径３μｍ（インタクト（株））。
【００４３】
分析条件は次の通りである。
サンプル注入量：１０μＬ、
流量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ、
ＵＶ−ＶＩＳ検出器設定波長：３２５ｎｍ、
カラムオーブン設定温度：３５℃、
溶離液Ａ：０．０５Ｍ 酢酸、０．１ｍＭ １−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸、１０ｍＭ 酢酸ナトリウム、５（Ｖ／Ｖ）％アセトニトリル溶液、
溶離液Ｂ：アセトニトリル。
【００４４】
濃度勾配条件
時間            溶離液Ａ        溶離液Ｂ
０．０分        １００％            ０％
１０．０分        １００％            ０％
１５．０分          ９５％            ５％
２０．０分          ９５％            ５％
２２．０分          ９２％            ８％
５０．０分          ９２％            ８％
５２．０分          １０％          ９０％
６０．０分          １０％          ９０％
６０．１分        １００％            ０％
７０．０分        １００％            ０％
【００４５】
ＨＰＬＣでは、試料１ｇを精秤後、溶離液Ａにて１０ｍＬにメスアップし、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク２５Ａ，孔径０．４５μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過後、分析に供した。
クロロゲン酸類の保持時間（単位：分）９種のクロロゲン酸類
ジカフェオイルキナ酸：３６．６、３７．４、４４．２の計３点。
モノカフェオイルキナ酸：５．３、８．８、１１．６の計３点
モノフェルロイルキナ酸：１３．０、１９．９、２１．０の計３点
ここで求めた９種のクロロゲン酸類の面積値から５−カフェオイルキナ酸を標準物質とし、質量％を求めた。
【００４６】
（カフェインの分析方法）
カフェインの分析は、ＵＶ−ＶＩＳ検出器設定波長：２７０ｎｍ、カフェインを標準物質とした以外はクロロゲン酸類と同様に実施した。カフェインの保持時間は１８．９分。
【００４７】
（遊離オルニチンの分析）
アミノ酸自動分析計操作条件
機種：ＪＬＣ−５００／Ｖ（日本電子株式会社）
カラム：ＬＣＲ−６，φ４ｍｍ×１２０ｍｍ（日本電子株式会社）
移動相：クエン酸リチウム緩衝液（Ｐ−１２〜Ｐ−１５，Ｐ−２１）（日本電子株式会社）
反応液：日本電子用ニンヒドリン発色液キット−II（和光純薬工業株式会社）
流量：移動相０．５０ｍＬ／ｍｉｎ，反応液０．３０ｍＬ／ｍｉｎ
測定波長：５７０ｎｍ
【００４８】
アミノ酸自動分析では、試料０．５ｇを精秤後、１０ｗ/ｖ％スルホルサリチル酸溶液２５ｍＬを加え、さらに、３mol/L水酸化ナトリウム溶液を加え混和する。その後、クエン酸ナトリウム緩衝液でｐＨ２．２に調製し、１００ｍＬに定容したものを、メンブレンフィルター（ＧＬクロマトディスク１３Ａ，孔径０．２μｍ，ジーエルサイエンス（株））にて濾過後、分析に供した。
【００４９】
（カリウムの分析）
カリウムの含有量は、原子吸光光度計（Ｚ−６１００形日立偏光ゼーマン原子吸光光度計）により測定した。
【００５０】
（官能試験）
各飲料の渋味について、パネラー４名が下記の基準に基づいて評価し、その後協議により最終スコアを決定した。
【００５１】
渋味の評価基準
５：渋味をほとんど感じない。
４：渋味をあまり感じない。
３：渋味を感じる。
２：渋味をやや感じる。
１：渋味を強く感じる
【００５２】
Ｌ−オルニチン塩酸塩由来の不快臭の評価基準
Ａ：不快臭を感じない。
Ｂ：ビニール臭のような不快臭を感じる。
【００５３】
製造例１
実施例で使用したジカフェオイルキナ酸類製剤は、以下の手法で調製した。
生コーヒー豆エキスパウダー（固形分２．０ｇ）を２０ｖ／ｖ％含水メタノールに溶解させ、中圧ＯＤＳカラムクロマト（ＵＬＴＲＡ  ＰＡＣＫ  ＯＤＳ−Ａ−４０Ｄ、５０ｍｍ×３００ｍｍ、山善株式会社製）に展開した。流速１０ｍＬ／ｍｉｎで１００分間２０ｖ／ｖ％含水メタノールを通液させたのち、５００分間でメタノール濃度を２０ｖ／ｖ％から１００ｖ／ｖ％へと上げ、クロロゲン酸類を溶出させた。３２５ｎｍのＵＶ検出で認められたクロマトを指標に分画を行った結果、４つ目のピークを分画した画分であるＦｒ．４に、ジカフェオイルキナ酸類が分画されていることを確認した。本画分を凍結乾燥しジカフェオイルキナ酸類製剤を得た。製剤中のジカフェオイルキナ酸類含有量は７５質量％、カフェイン濃度は０．２７質量％であった。カリウム含有量は検出限界以下であった。
なお、生コーヒー豆エキスパウダーは、インドネシア産ロブスタ種のコーヒー生豆から９５℃の熱水抽出後、スプレードライ方式で乾燥することにより調製したものである。
【００５４】
実施例１〜６及び比較例１〜４
表１に示す割合で各成分を配合して飲料を調製した。なお、Ｌ−オルニチン塩酸塩は協和発酵バイオ社製の商品を用いた。得られた飲料の分析及び官能評価を行った。その結果を表１に示す。
【００５５】
【表１】
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【００５６】
表１から、飲料中の（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類濃度と、（Ａ）ジカフェオイルキナ酸類と（Ｂ）Ｌ−オルニチン塩酸塩との含有質量比を特定範囲内に制御することで、渋味の抑制されたジカフェオイルキナ酸類含有飲料が得られることが確認された。