(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分としてレゴラフェニブ、レゴラフェニブの水和物、溶媒和物もしくは医薬上許容される塩、またはその多形体、および少なくとも１つの医薬上許容し得るビヒクルを含む局所眼用医薬組成物であって、
ここで、該組成物は、適用可能な医薬上許容し得るビヒクルに懸濁された有効成分を含有する懸濁液であり、医薬上許容し得るビヒクルが、液体パラフィン、軽質流動パラフィン、オレオイルポリエチレングリコールグリセリドまたはそれらの混合物よりなる群から選択される、前記局所眼用医薬組成物。
【請求項２】
有効成分としてレゴラフェニブ・一水和物を含有する、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
有効成分が固体形態である、請求項１〜２のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項４】
有効成分が結晶形態である、請求項１〜３のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項５】
有効成分が微細結晶形態である、請求項１〜４のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項６】
医薬組成物中の該有効成分の濃度が、組成物全量の０.０１〜１０重量％である、請求項１〜５のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項７】
安定剤のような医薬上許容し得る賦形剤、界面活性剤、ゲル化剤のようなポリマーを基にした担体、有機共溶媒、ｐＨ活性成分、浸透性の有効成分および保存剤をさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項８】
安定剤が疎水性シリカである、請求項７記載の医薬組成物。
【請求項９】
疎水性シリカが、組成物全量の０.１〜１０重量％で含まれている、請求項８記載の医薬組成物。
【請求項１０】
有効成分が、適用可能な非水性の医薬上許容し得るビヒクル中、所望によりさらなる１以上の医薬上許容し得る賦形剤の存在下で懸濁され、該懸濁液が均質化される、請求項１〜８のいずれか一項記載の医薬組成物の製造方法。
【請求項１１】
加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、脈絡膜新生血管膜（ＣＮＶＭ）、類嚢胞黄斑浮腫（ＣＭＥ）、網膜上膜（ＥＲＭ）および黄斑円孔、近視関連脈絡膜血管新生、血管線状、網膜剥離、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜色素上皮(ＲＰＥ)の萎縮変化、網膜色素上皮(ＲＰＥ)の異常肥大変化、網膜静脈閉塞、脈絡膜網膜静脈閉塞、黄斑浮腫、網膜静脈閉塞を理由とする黄斑浮腫、網膜色素変性症、シュタルガルト疾患、緑内障、炎症症状、白内障、屈折異常(refractory anomalies)、未熟児の網膜症、眼の前部の血管形成、角膜炎、角膜移植または角膜形成術後の角膜血管形成、低酸素を理由とする角膜血管形成(コンタクトレンズ過剰装着)、翼状片結膜、網膜下浮腫および網膜内浮腫を含む群から選択される、眼障害の処置または予防における使用のための、
請求項１〜８のいずれか一項記載の医薬組成物。
【請求項１２】
ドライ型ＡＭＤ、ウェット型ＡＭＤまたは脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、を含む群から選択される、眼障害の処置または予防における使用のための、請求項１１に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、レゴラフェニブ(Regorafenib)、その水和物、溶媒和物またはその医薬上許容し得る塩、またはその多形体を含有する眼科用局所医薬組成物、およびその製造方法および眼疾患を処置するためのその使用に関する。
【０００２】
４{４-[３-(４-クロロ-３-トリフルオロメチルフェニル）-ウレイド]-３-フルオロフェノキシ}-ピリジン-２-カルボン酸メチルアミドであるレゴラフェニブ、即ち式(Ｉ)の化合物：
【化１】
0005998213.tif 000002
(Ｉ)
は、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ｒａｆ、p３８、および／またはｆｌｔ−３キナーゼシグナル伝達分子に対する阻害活性を含む様々な活性を有する強力な抗癌剤および抗血管新生剤であり、それは過剰増殖性障害のような様々な疾患および症状、例えばＷＯ２００５/００９９６１に記載されている癌、腫瘍、リンパ腫、肉腫および白血病を処置する際に使用され得る。さらに、式（Ｉ）の化合物の塩、例えば、その塩酸塩、メシル酸塩およびフェニルスルホニル酸塩が、ＷＯ０５/００９９６１に記述されている。式（Ｉ）の化合物の一水和物は、ＷＯ０８/０４３４４６において言及されている。
【背景技術】
【０００３】
加齢黄斑変性症(ＡＭＤ）は、高齢者の失明の主な原因であり、ドライ型およびウェット型ＡＭＤとして認識されている(Expert Opin．Ther．Patents(2010), 20(1), 103-11）。ドライ型または非滲出型は、網膜色素上皮(ＲＰＥ）に関する萎縮および異常肥大双方の変化を含む。ドライ型は、網膜を歪めて、最終的に急速な視力損失をもたらす死細胞ならび代謝生成物を含有する色素沈着領域である黄斑ドルーゼンを特徴とする。非滲出型ＡＭＤ(ドライ型）患者は、ウェット型または滲出型または血管新生ＡＭＤに進行する可能性があり、ＡＭＤにおけるこの病理学的な脈絡膜新血管膜(ＣＮＶＭ）は、網膜下で進行して、液体および血液を漏出させ、これを処置せず放置すれば、最終的には比較的短期間で中心視力障害性の円板状瘢痕を引き起こす。脈絡膜血管新生(ＣＮＶ）、即ち脈絡膜毛細血管ネットワークからの新生血管の成長は、神経網膜へとブルッフ膜/ＲＰＥ界面を横切り、網膜剥離、網膜下および網膜内浮腫ならびに瘢痕を引き起こす。
【０００４】
強膜および網膜の間にある脈絡膜へのアクセスは、血管を媒介する以外では困難である。眼は、お互いの生理学的干渉作用を制限している３つの主な解剖学的コンパートメント、即ち前眼房、後眼房、および硝子体腔から構成される。網膜は、硝子体腔の後部に位置しており、白色で、頑丈な、遮水性の眼の壁である強膜により外側から保護されている。脈絡膜血流は、脈絡膜へ物質を運搬する通常の方法であって、例えば薬剤の経口または静脈内投与を必要とする。殆どの薬剤を、点眼薬によるか、または眼に近接するデポーにより脈絡膜へ送達することは不可能である。幾つかの薬剤は、眼の硝子体腔内への注射により、網膜へ、即ち脈絡膜へと送達されている。点眼薬のような容易に適用可能な眼科用局所製剤による後部の疾患（眼の後部）の処置は、依然として未解決の課題である。
【０００５】
ＶＥＧＦ(血管内皮成長因子）は、正常な血管の発生ならびに異常な血管形成が進行している腫瘍および他の組織における血管の発生に重要なサイトカインであり、ＣＮＶ形成の病原論における中心的役割を担っていることが判っている(Expert Opin．Ther．Patents(2010).20(1),103-118、Expert Opin．Ther．Patents(2009), 18(10), 1573-1580、J．Clin．Invest．(2010), 120(9), 3033-3041、J．Cell．Physiol.(2008), 216, 29-37、New Engl．J．Med．2006, 355, 1474-1485、WO 2010/127029、WO 2007/064752）。ＶＥＧＦの効果を遮断する薬物は、ウェット型ＡＭＤを処置するために記述されており、例えば、ペガプタニブ(New Engl．J．Med．2004, 351, 2805-2816）のようなアプタマー、またはラニビズマブ(New Engl．J．Med．2006, 355, 1419-1431）またはベバシズマブ(Ophthalmology, 2006, 113, 363-372）のようなＶＥＧＦ抗体である。しかしながら、前記薬剤は、注射により眼へ硝子体中に投与されねばならない。ソラフェニブなどのＶＥＧＦ阻害剤は、経口投与によるＣＮＶの処置用として記述されている(Clinical and Experimental Ophthalmology, 2010, 38, 718-726）。パゾパニブなどのＶＥＧＦ阻害剤は、パゾパニブ水溶液を含有する点眼薬の局所投与によるＡＭＤの処置用として記述されている(ＷＯ２０１１/００９０１６）。ＷＯ２００６/１３３４１１は、リポソーマル製剤の局所投与によるＣＮＶの処置用の化合物を記述している。ＷＯ２００７/０７６３５８、ＵＳ２００６２５７４８７は、局所投与のための水性の眼科用製剤を記述している。ＷＯ２００８／２７３４１は、眼への局所投与のためのエマルジョンを記述している。
【０００６】
局所用点眼薬は通常、後部眼疾患を処置するために眼の後部にて存在する治療レベルの薬物分子を標的組織に送達しないことは、一般的な技術常識である(U. B. KompellaおよびH.F. Edelhauser, “Drug Product Development for the Back of the Eye”, aapspress Springer, 2011, page 449)。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
当該分野において記述された進歩にも拘わらず、依然としてＡＭＤのような眼疾患を処置するための改良された医薬に対する必要性が存在する。特に、点眼薬のように、容易に投与でき、それ故に患者の服薬遵守を高めるような眼科用局所医薬組成物に対する必要性が残っている。さらに、例えば、単純溶液、エマルジョン、複合体（complex）またはリポソーム製剤へと製剤できない低溶解度を有する化合物について、適用可能な局所眼用医薬組成物の必要性が依然として存在する。眼科用局所医薬組成物は、有効な治療に十分な眼内の有効成分濃度を提供せねばならなない。これは、有効成分の溶解度および放出挙動に依存する。液体製剤の場合には、溶媒特性および有効成分の化学安定性が重要である。高い服薬遵守をサポートするために、眼科用局所医薬組成物を、１日に５回以上受容させるべきではなく、少ない回数が望ましい。医薬組成物の製造方法と関連して賦形剤のタイプおよび量は、放出特性、眼内、特に眼の後部(例えば、網膜の領域、ブルッフ膜および脈絡膜）の有効成分のバイオアベイラビリティーにとって、眼科用局所医薬組成物に対する製造方法の安定性、相溶性、効果および産業利用性にとって重要である。
【０００８】
本発明により解決すべき課題は、静脈内投与または経口投与、あるいは眼または眼周辺への注射(例えば、硝子体内またはその他の注射）を避けて、十分な効果にて眼疾患を治療するために、十分な安定性および相溶性を有し、かつ眼内（特に、眼の後部において）のレゴラフェニブの有効濃度を達成する有効成分としてレゴラフェニブを含む眼科用局所医薬組成物を提供することである。
【０００９】
本発明により解決すべき別の課題は、後眼の眼疾患の処置のための局所眼用医薬組成物を提供することである。
【００１０】
レゴラフェニブ・一水和物は、制限ある溶解度のプロファイルを有する。様々な溶媒中でのレゴラフェニブ・一水和物の熱力学的溶解度を表１に示す：
表１：
【表１】
0005998213.tif 000003
【発明の効果】
【００１１】
驚くべきことに、本発明の医薬組成物は、眼疾患を処置するために有効である十分な量の有効成分を眼内への局所投与により提供する。特に、本発明の医薬組成物は、十分な量で有効成分を眼の後部に提供する。即ち、本発明の医薬組成物は、眼の前部から眼の後部への有効成分の輸送に効果的である。さらに、本発明の医薬組成物は、有効成分のなんら有意な分解がなく十分な安定性を有し、かつ眼との相溶性がある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、レゴラフェニブ、即ち式(Ｉ)の化合物、またはレゴラフェニブの水和物、溶媒和物もしくは医薬上許容し得る塩、もしくはその多形体、および少なくとも１つの医薬上許容し得る賦形剤を含む眼科用局所医薬組成物に関連する。
【化２】
0005998213.tif 000004
(Ｉ)
【００１３】
好ましいものは、有効成分としてレゴラフェニブ、レゴラフェニブの水和物、溶媒和物または医薬上許容される塩もしくはその多形体、および少なくとも１つの医薬上許容し得るビヒクルおよび所望により少なくとも１つの医薬上許容し得る賦形剤を含む局所眼用医薬組成物であって、ここで該組成物は、適用可能な医薬上許容し得るビヒクルに懸濁された該有効成分を含む懸濁液である。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】２１日目のビヒクル（オレオイルポリエチレングリコールグリセリド（Labrafil）、製剤ａ）およびレゴラフェニブ（実施例１、製剤ｂ）処置動物の血管造影スコア。
【図２】２１日目のビヒクル（パラフィン、製剤ｃ）およびレゴラフェニブ（実施例２、製剤ｄ）で処置した動物の血管造影スコア。
【図３】２１日目のビヒクル（水を基にした製剤ｅ）およびレゴラフェニブ（実施例３、製剤ｆ）で処置した動物の血管造影スコア。
【図４】２３日目のビヒクル（オレオイルポリエチレングリコールグリセリド（Labrafil）、製剤ａ）およびレゴラフェニブ（実施例１、製剤ｂ）で処置した動物の血管新生領域。
【図５】２３日目のビヒクル（パラフィン、製剤ｃ）およびレゴラフェニブ（実施例２、製剤ｄ）で処置した動物の血管新生領域。
【図６】２３日目のビヒクル（水を基にした製剤ｅ）およびレゴラフェニブ（実施例３、製剤ｆ）で処置した動物の血管新生領域。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
医薬上許容し得るビヒクルまたは賦形剤とは、ビヒクルまたは賦形剤に起因し得るあらゆる副作用が有効成分の価値のある効果を無効にしないように、有効成分の有効活性に一致した濃度で患者に対して比較無毒かつ無毒である、あらゆるビヒクルまたは賦形剤である。
【００１６】
用語“式(Ｉ)の化合物”または“レゴラフェニブ”は、式(Ｉ)で表される４-{４-[({[４-クロロ-３-(トリフルオロメチル)フェニル]アミノ}カルボニル)アミノ]-３-フルオロフェノキシ}-Ｎ-メチルピリジン-２-カルボキサミドをいう。
【００１７】
用語“本発明の化合物”または“有効成分”は、レゴラフェニブ、またはレゴラフェニブの水和物、溶媒和物、医薬上許容し得る塩またはその多形体をいう。
【００１８】
本発明の目的上、溶媒和物とは、溶媒分子が固体状態で錯体を形成しており、かつこれに限定しないが例えばエタノールおよびメタノールなどを含む化合物またはその塩の形態である。
【００１９】
水和物は、溶媒分子が水である溶媒和物の特別な形態である。本発明の化合物またはその塩の水和物は、水と化合物または塩との化学量論的組成物であり、例えば、半、一または二水和物である。好ましいものとして、レゴラフェニブの一水和物を示す。
【００２０】
本発明の目的上、塩とは、好ましくは本発明の化合物の医薬上許容し得る塩である。好適な医薬上許容し得る塩は、当業者には周知であって、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸（トシル酸塩）、１−ナフタレンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸、サリチル酸、フェニル酢酸およびマンデル酸などの無機および有機酸の塩を含む。加えて、医薬上許容し得る塩には、無機塩基の塩、例えばアルカリ陽イオン（例えば、Ｌｉ＋、Ｎａ＋またはＫ＋）、アルカリ土類陽イオン（例えば、Ｍｇ＋２、Ｃａ＋２またはＢａ＋２）、アンモニウム陽イオンを含有する塩、並びに、脂肪族および芳香族置換アンモニウムおよび第４級アンモニウム陽イオンを含む有機塩基の酸塩、例えば、トリエチルアミン、Ｎ,Ｎ−ジエチルアミン、Ｎ,Ｎ−ジシクロヘキシルアミン、リジン、ピリジン、Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、１,４−ジアザビシクロ［２.２.２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）、１,５−ジアザビシクロ［４.３.０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）および１,８−ジアザビシクロ［５.４.０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）のプロトン付加または過アルキル化から生じるものが含まれる。好ましいものとは、レゴラフェニブの塩酸塩、メシル酸塩、またはフェニルスルホン酸塩である。
【００２１】
好ましいものは、レゴラフェニブおよびレゴラフェニブの一水和物であり、最も好ましいものは本発明の化合物としてレゴラフェニブ・一水和物である。
【００２２】
レゴラフェニブの溶解度が低いために、特にレゴラフェニブ・一水和物標準液（表１を参照されたい）は適用できない。また、乳化剤、可溶化剤、賦形剤形成錯体などの耐容量を含有する溶液は、例えばレゴラフェニブの十分な安定性を提供するために利用できない。
【００２３】
本発明の眼科用局所医薬組成物は、固体形態、好ましくは結晶形態、より好ましくは微晶質結晶形態にて、本発明の化合物、好ましくはレゴラフェニブ、より好ましくはレゴラフェニブ・一水和物、固体形態、より好ましくは結晶形態の、さらに好ましくは微晶質形態のレゴラフェニブ・一水和物を含む。
【００２４】
微粉化は、標準的な粉末化（milling）方法、好ましくは当業者に知られているエアジェット粉末化により達成され得る。微晶質形態は、０.５ないし１０μｍ、好ましくは１ないし６μｍ、より好ましくは１ないし３μｍの平均粒径を有し得る。示した粒径は、当業者に知られているレーザー回折により測定される粒径分布の平均である（測定装置: HELOS, Sympatec）。
【００２５】
眼科用局所医薬組成物中の本発明の化合物、好ましくはレゴラフェニブ、より好ましくはレゴラフェニブ・一水和物の最小濃度は、組成物全重量の０.０１重量％、好ましくは０.２重量％である。眼科用局所医薬組成物中の本発明の化合物、好ましくはレゴラフェニブ、より好ましくはレゴラフェニブ・一水和物の最大濃度は、組成物全重量の１０重量％、好ましくは５重量％、より好ましくは４重量％である。
【００２６】
好ましいものは、医薬組成物中、０.１〜１００mg/ml、好ましくは１〜５０mg/ml、より好ましくは２〜４０mg/mlの本発明の化合物の濃度である。
【００２７】
特に好ましいものは、医薬組成物中、０.１〜１００mg/ml、好ましくは１〜５０mg/ml、より好ましくは２〜４０mg/mlのレゴラフェニブ濃度である。
【００２８】
特に好ましいものは、０.１〜１００ mg/ml、好ましくは１〜５０mg/ml、より好ましくは２〜４０mg/mlの量でレゴラフェニブ・一水和物の添加により得られる医薬組成物である。
【００２９】
本発明の眼科用局所医薬組成物は、点眼薬、ゲル、軟膏、分散剤、または懸濁液を含むが、これに限定するものではない。
【００３０】
好ましいものは、懸濁液である本発明の眼科用局所医薬組成物である。
【００３１】
本発明の化合物、好ましくはレゴラフェニブ、より好ましくはレゴラフェニブ・一水和物は、好ましくは、微粉化形態で使用される。
【００３２】
微粉化は、標準的な粉末化（milling）方法、好ましくは当業者に知られているエアジェット粉末化により達成され得る。微粉化形態は、０.５ないし１０μｍ、好ましくは１ないし６μｍ、より好ましくは２ないし３μｍの平均粒径を有し得る。示した粒径は、当業者に知られているレーザー回折により測定される粒径分布の平均である（測定装置: HELOS, Sympatec）。
【００３３】
本発明の一実施形態は、適用可能な医薬上許容し得るビヒクルに懸濁された固体形態、好ましくは結晶形態、より好ましくは超微粒子結晶形態にて、本発明の化合物、好ましくはレゴラフェニブ、より好ましくはレゴラフェニブ・一水和物を含み、所望により１以上の医薬上許容し得る賦形剤を含む懸濁液である眼科用局所医薬組成物である。
【００３４】
好ましいものは、非水性ビヒクルを基にした懸濁液、より好ましくは疎水性ビヒクルを基にした懸濁液を示す。
【００３５】
本発明の好適な医薬上許容し得るビヒクルは、オレオイルポリエチレングリコールグリセリド、リノレオイルポリエチレングリコールグリセリド、ラウロイルポリエチレングリコールグリセリド、液体パラフィン様炭化水素賦形剤、軽質流動パラフィン、軟パラフィン(ワセリン)、硬パラフィン、植物性脂肪油（ヒマシ油、落花生油またはゴマ油など）、合成脂肪油［中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ、飽和脂肪酸とのトリグリセリド、好ましくはオクタン酸およびデカノン酸）など］、イソプロピルミリステート、カプリロカプロイルマクロゴール-８ グリセリド、カプリロカプロイルポリオキシル-８-グリセリド、羊毛アルコール（セチルステアリルアルコールなど）、羊毛脂、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)、水（等浸透圧の塩化ナトリウム水溶液など）またはその混合物を包含するが、これに限定しない。
【００３６】
好ましいものは、非水性医薬上許容し得るビヒクルであり、次のものを包含するが、これらに限定しない：中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ、飽和脂肪酸、好ましくはオクタン酸およびデカン酸とのトリグリセリド）、イソプロピルミリステート、カプリロカプロイルマクロゴール-８ グリセリド、カプリロカプロイルポリオキシル-８-グリセリド、オレオイルポリエチレングリコールグリセリド、オレオイルマクロゴール-６-グリセリド（Labrafil M 1944 CS）、リノレノイルマクロゴール-６ グリセリド（Labrafil M2125 CS = リノレノイルポリオキシル-６ グリセリド）、ラウロイル マクロゴール-６ グリセリド（Labrafil M 2130 CS = ラウロイルポリオキシル-６ グリセリド）、炭化水素ビヒクル、ヒマシ油の様な脂肪油またはその混合物。最も好ましくい疎水性ビヒクルは、炭化水素ビヒクル（液体パラフィンなどまたは軽質流動パラフィンまたはその混合物を包含するが、これに限定しない）などが使用される。
【００３７】
非常に驚くべきことに、液体または軽質流動パラフィンのような親油性ビヒクルを含有する本発明の医薬組成物は、親油性ビヒクル中のレゴラフェニブ・一水和物の溶解度が非常に低いにもかかわらず、局所投与により眼障害を処置するために有効な十分量の有効成分を眼に提供する。
【００３８】
医薬上許容し得るビヒクルは、本発明の眼科用局所医薬組成物の基礎材料であり、組成物中に、組成物全量の７５％、好ましくは８０％、より好ましくは８５％の最小濃度、および９９.９％、好ましくは９９％、より好ましくは９８重量％の最大濃度で存在する。
【００３９】
本発明の医薬組成物は、様々な粘度を有する、つまり基本的には低粘度系からペースト状までの範囲が考えられる。好ましいものは、それらが依然としてそれら自体の重量より下で浮遊する限り低粘度および高粘度の系を包含する液体系である。
【００４０】
本発明の眼科用局所医薬組成物に使用される好適な別の医薬上許容し得る賦形剤は、界面活性剤、ゲル化剤のようなポリマーベースの担体、有機共溶媒、ｐＨ活性成分、浸透活性成分および保存剤を含むが、これに限定しない。
【００４１】
本発明の局所眼用医薬組成物に使用される好適な安定剤は、コロイド状シリカ、親水性および疎水性シリカを包含するが、これらに限定されない。
【００４２】
好ましいものは、水により含水しないシリカである疎水性シリカである；これは、それらが水表面上に浮いていることを意味する。同じように好適なものは、シリコンジオキシドおよび酸化アルミニウムの疎水性化混合オキシドであるが、疎水性純粋シリカが好ましい。それらは、親水性シリカとシラン（ハロシラン、アルコキシシラン、シラザン、シロキサン）を混合することにより提供される。これは、アルキル基によりアルキル化されたシラノール基、好ましくは１〜１８個までの炭素原子を有する、特に好ましくは１〜８個までの炭素原子を有する、さらに特別好ましくは、１〜４個までの炭素原子、特にメチル基を有するシラノール基を有する。疎水性シリカの製造において使用されるシランの例示は、ヘキサメチルジシラザン、または好ましくはジメチルジクロロシランである。好適な疎水性シリカは、沈殿性、コロイド状、予備圧縮性または発熱性シリカから得られ、発熱性シリカが好まれる。例えば、親水性シリカとジメチルジクロロシランとの反応により、商標名Aerosil(登録商標)972を有する疎水性Aerosilとなる。；これは、６６％〜７５％のメチル化度を有する(残存するシラノール基の滴定により決定される）。
【００４３】
疎水性シリカを、通常、全組成物の重量の０.１〜１０重量％、好ましくは０.５〜５％、例えば２％の割合にて該製剤に用いた。本発明の眼用局所医薬組成物に使用されるさらなる好適な安定化剤および/またはゲル化剤は次のものを含むが、これに限定するものではない：プロピレングリコール モノパルミトステアレート、グリセリルモノステアレート、グリセリルジベヘネート、グリセリルジステアレート、硬脂質、ポリビニルピロリドン、ポリエチレン、グリセリン、ポリオキシエチレンステアレート、ソルビタン脂肪酸エステル、コレステロール、マクロゴール-２０-グリセリンモノステアレート、ポリオキサマー 124、イソプロピルミリステート、イソプロピルパルミテート、コロイド状シリカ、疎水性コロイド状シリカ、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸アルミニウム、ラノリンアルコール、有機粘土、ペトロラタム、ポリオキシル ６ ステアレート。
【００４４】
本発明の眼科用局所医薬組成物に使用される好適な界面活性剤は、脂質、例えばリン脂質、ホスファチジルコリン、レシチン、カルジオリピン、脂肪酸、ホスファチジルエタノールアミン、フォスファチド、チロキサポール、ポリエチレングリコール、ならびにＰＥＧ ４００、ＰＥＧ １５００、ＰＥＧ ２０００、ポリオキサマー ４０７、ポリオキサマー １８８、Ｐｏｌｉｓｏｒｂａｔｅ ８０、Ｐｏｌｉｓｏｒｂａｔｅ ２０、ソルビタンラウレート、ソルビタンステアレート、ソルビタンパルミテートのような誘導体またはその混合物、好ましくはＰｏｌｉｓｏｒｂａｔｅ ８０を包含する。
【００４５】
本発明の眼科用局所医薬組成物に使用されるゲル化剤のような好適なポリマーベースの担体は、セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース(ＨＰＭＣ)、ヒドロキシプロピルセルロース(ＨＰＣ)、カルボキシメチルセルロース(ＣＭＣ)、メチルセルロース(ＭＣ)、ヒドロキシエチルセルロース(ＨＥＣ)、アミラーゼおよび誘導体類、アミロペクチンおよび誘導体類、デキストランおよび誘導体類、ポリビニルピロリドン(ＰＶＰ)、ポリビニルアルコール(ＰＶＡ)、およびアクリルポリマー、例えば、ポリアクリルまたはポリメタクリル酸の誘導体（ＨＥＭＡ、カルボポールなど）および上記誘導体またはその混合物を含むが、これに限定しない。
【００４６】
本発明の医薬組成物に使用される好適な有機共溶媒は、エチレングリコール、プロピレングリコール、Ｎ-メチルピロリドン、２-ピロリドン、３-ピロリジノール、１,４-ブタンジオール、ジメチルグリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ソルケタール、グリセロール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールを包含するが、これに限定しない。
【００４７】
好適なｐＨ活性成分、例えば、本発明の医薬組成物で使用される緩衝剤またはｐＨ調節剤は、リン酸二ナトリウム、リン酸一ナトリウム、ホウ酸、ホウ酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、塩酸、水酸化ナトリウムを包含するが、これに限定しない。
【００４８】
ｐＨ活性成分は、一般的にｐＨ４〜９の範囲である組成物の標的ｐＨを基に選択される。
【００４９】
本発明の医薬組成物に使用される好適な浸透活性成分は、塩化ナトリウム、マンニトール、グリセリンを包含するが、これに限定しない。
【００５０】
本発明の医薬組成物に使用される保存剤は、ベンザルコニウム塩化物、アルキルジメチルベンジルアンモニウム塩化物、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、ベンゾドデシニウム臭化物、ベンゼトニウム塩化物、チオマーサル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、ソルビン酸、メチルおよびプロピルパラベン、グルコン酸クロルヘキシジン、ＥＤＴＡまたはその混合物を包含するが、これに限定しない。
【００５１】
ゲル化剤、ｐＨ活性成分および浸透活性成分は、好ましくは水性医薬上許容し得るビヒクルの場合に使用される。
【００５２】
本発明の懸濁液中の好適な別の医薬上許容し得る賦形剤の量は、懸濁液の全重量％の０.１〜１５％、好ましくは０.５〜１０％、より好ましくは１〜５％である。
【００５３】
好ましい本発明の懸濁液中のヒドロキシプロピルメチルセルロースの量は、懸濁液の全重量％の０.０５〜１５％、好ましくは０.１〜１０％、より好ましくは１〜５％である。
【００５４】
本発明の懸濁液のPolisorbate ８０の好ましい量は、懸濁液中の全重量％の０.０５〜１０％、好ましくは０.１〜７％、より好ましくは０.５〜４％である。
【００５５】
好ましいものとして、液体パラフィン、軽質流動パラフィンまたはその混合物からなる群から選択される医薬上許容し得るビヒクル中に、例えば、組成物全量の０.０１〜１０％、より好ましくは０.２〜５重量％の濃度で懸濁した結晶性レゴラフェニブ・一水和物、より好ましくは微結晶性レゴラフェニブ・一水和物を含有し、所望により０.１％〜１０％、好ましくは０.５〜５％、例えば全組成物の２重量％の量で安定剤として疎水性シリカを含有する、局所眼用医薬組成物を提供する。
【００５６】
また、好ましいものとして、医薬上許容し得るビヒクルとしてオレオイルポリエチレングリコールグリセリド中に、例えば、組成物全量の０.１〜１０％、より好ましくは０.２〜５重量％の濃度で懸濁した結晶性レゴラフェニブ・一水和物、より好ましくは微結晶性レゴラフェニブ・一水和物を含有し、所望により全組成物の０.１％〜１０重量％、好ましくは０.５〜５重量％、例えば２重量％の量で安定剤として疎水性シリカを含有する、、局所眼用医薬組成物を提供する。
【００５７】
局所経路を介して、本発明の医薬組成物を用いる眼に投与される有効成分の全量は、投与あたり、および眼あたり、一般的には、約０.０１〜５０ mg、好ましくは０.０２〜１０ mg、より好ましくは０.０５〜５ mg/の範囲である。哺乳動物における上記症状の処置を決定するための標準的医薬アッセイにより、およびこれらの症状を処置するために使用される既知の医薬品の結果とこれらの結果を比較することによる、眼疾患の処置に有用な化合物を評価するために既知の標準的試験技術に基づいて、当業者は、本発明の医薬組成物の有効量を容易に決定できる。投与した有効成分の量は、特定の化合物および用いた投薬単位、投与様式および投与時間、処置期間、年齢、性別、および処置される患者の全般的状態、処置される症状の性質および程度、薬剤代謝および排泄速度、薬剤組合せの可能性および薬剤-薬剤の相互作用などの考慮事項により、幅広く変動し得る。
【００５８】
本発明の医薬組成物は、１日あたり、１回以上、好ましくは５回まで、より好ましくは３回まで投与される。
【００５９】
本発明の医薬組成物の通常の投与方法は、眼への局所送達である。
【００６０】
しかし、幾つかの場合には、有効成分に対する個体の応答によって、製剤のタイプおよび投与を実施する時間または間隔に応じて、特定された量から逸脱するのが有利な場合があり得る。例えば、上述の最小量より少なくて十分な場合があり得、一方で特定された上限を超えなければならない場合もある。比較的大量に投与する場合、これらを１日にわたる数個の個別用量に分割するのが望ましいことがある。
【００６１】
この医薬組成物を用いて、所望の薬理効果を達成するために、好ましくはそれが必要な患者への眼の局所投与により用いられ、哺乳動物における薬剤の放出、バイオアベイラビリティーおよび／または服薬遵守に関して有利な特性を有する。本発明の目的上、患者は特定の症状または疾患の処置を必要とするヒトを含む哺乳動物である。
【００６２】
本発明の医薬組成物は、１８ヶ月、好ましくは２４ヶ月以上化学的に安定である。本発明の化学的安定とは、貯蔵期間中有意に（＜１％）分解されないことを意味する。
【００６３】
この関連で、本発明の局所眼用医薬組成物は、４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）ピリジン-２-カルボン酸メチルアミド（IUPAC：４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）-Ｎ-メチルピリジン-２-カルボキシアミド）(AFP-PMA)を、式（Ｉ）の化合物の量を基準に、０.０５％に等しいか、または０.０５％未満の量で（０.００１％〜最大０.０５％を意味する）、好ましくは０.０２５％に等しいか、または０.０２５％未満の量で（０.００１％〜最大０.０２５％を意味する）、最も好ましくは０.０１％に等しいか、または０.０１％未満で（０.００１％〜最大０.０１重量％を意味する）含有する。
【００６４】
製造方法
様々な方法は、本発明の眼科用医薬組成物を製造するために使用できる。最初に、医薬上許容し得るビヒクルを、適用可能なビヒクルまたは賦形剤の混合物を、医薬上許容し得る賦形剤と混合することにより製造する。その後、有効成分を、混合物に、分散または懸濁する。また、この過程は、滅菌、例えば滅菌沈殿、γ照射、滅菌濾過、加熱滅菌、無菌充填、またはそのような任意のステップの組合せを包含してもよい。
【００６５】
本発明は、本発明の眼科用局所医薬組成物の製造方法に関し、ここで本発明の該化合物は、適用可能な医薬上許容し得るビヒクル中に、所望によりさらなる１以上の医薬上許容し得る賦形剤の存在下において懸濁され、そして該懸濁液を均質化される。
【００６６】
好ましいものとして、本発明の眼科用局所医薬組成物の製造方法を提供し、ここで、
ａ）医薬上許容し得るビヒクルまたは適用可能な医薬上許容し得るビヒクルの混合物を、所望により別の１以上の医薬上許容し得る賦形剤の存在下で、前記ビヒクルを混合して調製する、
ｂ）本発明の化合物、好ましくはレゴラフェニブ、より好ましくはレゴラフェニブ・一水和物を、前記適用可能な医薬上許容し得るビヒクルまたは混合物に、例えば室温で、所望によりさらなる１以上の医薬上許容し得る賦形剤の存在下にて懸濁する、
ｃ）該懸濁液を、室温で、攪拌、振湯またはボルテックス、好ましくは攪拌により均質化する、
ｄ）該懸濁液を、一単位に細分化し、適用可能なバイアル、容器、チューブ、フラスコ、点滴器および／またはシリンジに充填した。
【００６７】
所望によりステップａ)において、さらなる１以上の医薬上許容し得る賦形剤を、高温、例えば４０〜７０℃で、医薬上許容し得るビヒクルに添加した。
【００６８】
眼疾患の処置方法
本発明は、眼疾患を処置または予防するための本発明の医薬組成物の使用に関する。
【００６９】
さらに、本発明は、医薬上有効量の本発明の有効成分を含有する医薬組成物を投与することを含む眼障害を処置または予防するための方法に関する。
【００７０】
本発明の眼疾患の例示には、次のものを包含するがこれらに限定するものではない：加齢黄斑変性(ＡＭＤ)、脈絡膜血管新生(ＣＮＶ)、脈絡膜新生血管膜（ＣＮＶＭ）、類嚢胞黄斑浮腫（ＣＭＥ）、網膜上膜（ＥＲＭ）および黄斑円孔、近視関連脈絡膜血管新生(myopia-associated choroidal neovascularisation)、血管線状(vascular streaks)、網膜剥離、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫(ＤＭＥ)、網膜色素上皮(ＲＰＥ)の萎縮変化、網膜色素上皮(ＲＰＥ)の異常肥大変化、網膜静脈閉塞、脈絡膜網膜静脈閉塞、黄斑浮腫、網膜静脈閉塞を理由とする黄斑浮腫、網膜色素変性症、シュタルガルト疾患、緑内障、眼の炎症性症状、例えば、ブドウ膜炎、強膜炎または眼内炎、白内障、屈折異常(refractory anomalies)、例えば、近視、遠視または乱視および円錐角膜(ceratoconus)および未熟児の網膜症。さらに、例示には、次のもの包含するがこれらに限定するものではない：眼の前部の血管形成（例えば、角膜炎、角膜移植または角膜形成術の後の角膜血管形成など）、低酸素(コンタクトレンズ過剰装着)を理由とする角膜血管形成、翼状片結膜、網膜下浮腫および網膜内浮腫。加齢黄斑変性(ＡＭＤ)の例には、ドライ型または非滲出型ＡＭＤ、またはウェット型または滲出性または新生血管ＡＭＤを含むが、これに限定しない。
【００７１】
好ましいものとしては、ドライ型ＡＭＤ、ウェット型ＡＭＤまたは脈絡膜血管新生(ＣＮＶ)のような加齢黄斑変性(ＡＭＤ)を示す。
【００７２】
別の実施形態または本発明は、後部眼疾患の処置または予防のための局所眼用医薬組成物であり、ここで該組成物が、適用可能な医薬上許容し得るビヒクルに懸濁した後部眼疾患の適応可能な処置または予防のための有効成分を含む懸濁液である。
【００７３】
好ましいものとしては、非水性ビヒクルを基にした懸濁液、より好ましくは疎水性ビヒクルを基にした懸濁液である。
【００７４】
後部眼疾患の例示は、次のものを包含するが、これらに限定するものではない：加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）、脈絡膜新生血管膜（ＣＮＶＭ）、類嚢胞黄斑浮腫（ＣＭＥ）、網膜上膜（ＥＲＭ）および黄斑円孔、近視関連脈絡膜血管新生、血管線状、網膜剥離、糖尿病性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜色素上皮(ＲＰＥ)の萎縮変化、網膜色素上皮(ＲＰＥ)の異常肥大変化、網膜静脈閉塞、脈絡膜網膜静脈閉塞、黄斑浮腫、網膜静脈閉塞を理由とする黄斑浮腫、網膜色素変性症、シュタルガルト疾患および未熟児の網膜症。
【００７５】
好ましい後部眼疾患は、ドライ型ＡＭＤ、ウェット型ＡＭＤまたは脈絡膜血管新生（ＣＮＶ）のような加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）を包含する。
【００７６】
加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）の例示は、ドライ型または非漏出性ＡＭＤまたはウェット型または滲出性または血管新生ＡＭＤを包含するが、これに限定するものではない。
【００７７】
本発明の後部眼疾患の処置または予防のために適応可能な有効成分は、次のものを包含するが、これに限定するものではない：例えば、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよびその各リガンドのドメインファミリーの受容体キナーゼを標的とするシグナル伝達阻害剤、またはＶＥＧＦ-Ｔｒａｐ（アフリベルセプト）、ペガプタニブ、ラニビズマブ、パゾパニブ、ベバシラニブ、ＫＨ-９０２、メカミラミン、ＰＦ-０４５２３６５５、Ｅ-１００３０、ＡＣＵ-４４２９、ボロシキシマブ、シロリスムス、フェンレチニド、ジスルフィラム、ソネプシツマブおよび／またはタンドスピロンなどの他の経路の阻害剤。これらの薬剤は、抗体、例えばアバスチン(ベバシズマブ)を含むが、これに限定するものではない。これらの薬剤は、小分子阻害剤、例えばＳＴＩ-５７１/グリベック(Zvelebil, Curr．Opin．Oncol., Endocr．Metab．Invest．Drugs 2000, 2(1), 74-82)、ＰＴＫ-７８７(Wood et al., Cancer Res．2000, 60(8), 2178-2189)、ＳＵ-１１２４８(Demetri et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology 2004, 23, abstract 3001)、ＺＤ-６４７４(Hennequin et al., 92nd AACR Meeting, New Orleans, 3month 24-28, 2001, abstract 3152)、ＡＧ-１３７３６(Herbst et al., Clin．Cancer Res．2003, 9, 16(suppl 1), abstract C253)、ＫＲＮ-９５１(Taguchi et al., 95th AACR Meeting, Orlando, FL, 2004, abstract 2575)、ＣＰ-５４７,６３２(Beebe et al., Cancer Res．2003, 63, 7301-7309)、ＣＰ-６７３,４５１(Roberts et al., Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004, 45, abstract 3989)、ＣＨＩＲ-２５８(Lee et al., Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004, 45, abstract 2130)、ＭＬＮ-５１８(Shen et al., Blood 2003, 102, 11, abstract 476)、およびＡＺＤ-２１７１(Hennequin et al., Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004, 45, abstract 4539)、ＰＫＣ４１２、ネパフェナクを含むが、これらに限定するものではない。
【００７８】
好ましいものは、レゴラフェニブ、ベバシズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、ラニビズマブ、パゾパニブおよび／またはベバシラニブである。
【００７９】
本発明の好適な医薬上許容し得るビヒクルは、オレオイルポリエチレングリコールグリセリド、リノレイルポリエチレングリコールグリセリド、ラウロイルポリエチレングリコールグリセリド、液体パラフィン様炭化水素賦形剤（パラフィン油、鉱油）、軽質流動パラフィン（低粘度パラフィン、パラフィン様石油、軽油）、軟パラフィン（ワセリン）、硬パラフィン、植物性脂肪油（ヒマシ油、落花生油またはゴマ油など）、中鎖トリグリセリドのような合成脂肪油（ＭＣＴ、飽和脂肪酸、好ましくはオクタン酸およびデカン酸とのトリグリセリド）、イソプロピルミリステート、カプリロカプロイルマクロゴール-8 グリセリド、カプリロカプロイル ポリオキシl-8 グリセリド、セチルステアリルアルコールのような羊毛アルコール、羊毛脂、グリセリン、プロピレングリコール、カプリル/カプリン酸のプロピレングリコールジエステル、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはその混合物を包含するが、これに限定しない。
【００８０】
好ましいものは、非水性医薬上許容し得るビヒクルを包含し、これには中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ、飽和脂肪酸、好ましくはオクタン酸およびデカン酸とのトリグリセリド、イソプロピルミリステート、カプリロカプロイル マクロゴール-８ グリセリド、カプリロカプロイルポリオキシル-８ グリセリド、オレオイルポリエチレングリコールグリセリド、オレオイルマクロゴール-６ グリセリド（Labrafil M 1944 CS）、リノレイルマクロゴール-６ グリセリド（Labrafil M2125 CS = リノレイルポリオキシル-６ グリセリド）、ラウロイル マクロゴール-6 グリセリド（Labrafil M 2130 CS = ラウロイル ポリオキシル-６ グリセリド））、炭化水素ビヒクル、ヒマシ油のような脂肪油またはその混合物を包含するが、これに限定しない。最も好ましい疎水性ビヒクルは、炭化水素ビヒクル様のものが使用され、これは液体パラフィンまたは軽質流動パラフィンまたはその混合物を包含するが、これに限定しない。
【００８１】
非常に驚くべきことに、液体または軽質流動パラフィンのような親油性ビヒクルを含有する本発明の懸濁液は、後部眼疾患を処置するために有効な十分量の有効成分を後眼部に局所投与により提供する。
【００８２】
本発明の局所眼用医薬組成物に使用される医薬上許容し得る好適なさらなる賦形剤は、安定剤、界面活性剤、ゲル化剤のようなポリマーを基にした担体、有機共溶媒、ｐＨ活性成分、浸透圧有効成分および保存剤を包含するが、これに限定するものではない。
【００８３】
本発明の局所眼用医薬組成物に使用される好適な安定剤は、コロイド状シリカ、親水性および疎水性シリカを包含するが、これに限定するものではない。
【００８４】
好ましいものは、疎水性シリカである。
医薬上許容し得るビヒクルは、本発明の局所眼用医薬組成物の基材であり、組成物全量の７５％、好ましくは８０％、より好ましくは８５％の最小濃度、および９９.９％、好ましくは９９％、より好ましくは９８重量％の最大濃度で組成物中に存在する。局所眼用医薬組成物に使用される有効成分は、好ましくは微粉化形態で使用される。
【００８５】
微粉化は、標準的な粉末化方法、好ましくは当業者に知られているエアジェット粉末化により達成され得る。微粉化形態は、０.５ないし１０μｍ、好ましくは１ないし６μｍ、より好ましくは２ないし３μｍの平均粒径を有し得る。提示した粒径は、当業者に知られているレーザー回折により測定された粒径分布の平均である（測定装置: HELOS, Sympatec）。
【００８６】
医薬組成物中の有効成分の濃度は、０.１〜１００ mg/ml、好ましくは１〜５０ mg/ml、より好ましくは２〜４０ mg/mlである。
【００８７】
本発明の医薬組成物を、単独の医薬組成物として、または１以上の他の医薬組成物または有効成分と組み合わせて投与できる、この場合に該組合せは、許容できない副作用を生じない。
【００８８】
本発明の目的上、“組み合わせ”とは、全ての有効成分を含有する投薬形態(いわゆる、固定の組み合わせ)、そして各々分けて有効成分を含有する組み合わせパックのみならず、同じ疾患の予防または処置に用いられる限り、同時または連続的に投与される有効成分をも意味する。
【００８９】
本発明の組合せは十分容認され、低投薬量であっても有効性が高いので、幅広い範囲の製剤の変形が可能である。そのため、一つの可能性は、本発明の組合せの個々の有効成分を別々に製剤化することである。この場合、個々の有効成分を同時に摂取することは絶対必要というわけではない；それどころか、連続的摂取は、最適な結果を達成するために有利であり得る。そのような別個の投与では、個々の有効成分の製剤を、適当な一次包装中に一緒にまとめるのが好適である。有効成分は、別々の容器中にて、一次包装内に、例えばチューブ、ボトルまたはブリスターパック中に存在してもよい。このように合わさった一次包装内の該成分の個別包装物を、キットとも呼ぶ。
【００９０】
一実施形態において、本発明の医薬組成物を、他の眼科用薬剤と組み合せることできる。かかる薬剤の例は、カロテノイド類、リコピン、ルテイン、ゼアキサンチン、フィトエン、フィトフルエン、カルノシン酸、およびその誘導体、例えばカルノソール、６,７-デヒドロカルノシン酸、７-ケトカルノシン酸、亜鉛源（酸化亜鉛のようなもの）または亜鉛塩（塩化塩、酢酸塩、グルコン酸塩、炭酸塩、硫酸塩、ホウ酸塩、硝酸塩またはケイ酸塩のようなもの）、酸化銅、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥおよび／またはβ-カロテンを含むが、これに限定しない。
【００９１】
別の実施形態において、本発明の医薬組成物を、例えばＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＦＧＦＲおよびその各リガンドのドメインファミリーの受容体キナーゼを標的とするシグナル伝達経路阻害剤、あるいはＶＥＧＦ-Ｔｒａｐ(アフリベルセプト)、ペガプタニブ、ラニビズマブ、パゾパニブ、ベバシラニブ、ＫＨ-９０２、メカミラミン、ＰＦ-０４５２３６５５、Ｅ-１００３０、ＡＣＵ-４４２９、ボロシキシマブ、シロリスムス、フェンレチニド、ジスルフィラム、ソネプシツマブおよび／またはタンドスピロンなどの他の経路の阻害剤と組み合わせることができる。これらの薬剤は、抗体、例えばアバスチン(ベバシズマブ)を含むが、これに限定するものではない。これらの薬剤は、小分子阻害剤、例えばＳＴＩ-５７１/グリベック(Zvelebil, Curr．Opin．Oncol., Endocr．Metab．Invest．Drugs 2000, 2(1), 74-82)、ＰＴＫ-７８７(Wood et al., Cancer Res．2000, 60(8), 2178-2189)、ＳＵ-１１２４８(Demetri et al., Proceedings of the American Society for Clinical Oncology 2004, 23, abstract 3001)、ＺＤ-６４７４(Hennequin et al., 92nd AACR Meeting, New Orleans, 3month 24-28, 2001, abstract 3152)、ＡＧ-１３７３６(Herbst et al., Clin．Cancer Res．2003, 9, 16(suppl 1), abstract C253)、ＫＲＮ-９５１(Taguchi et al., 95th AACR Meeting, Orlando, FL, 2004, abstract 2575)、ＣＰ-５４７,６３２(Beebe et al., Cancer Res．2003, 63, 7301-7309)、ＣＰ-６７３,４５１(Roberts et al., Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004, 45, abstract 3989)、ＣＨＩＲ-２５８(Lee et al., Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004, 45, abstract 2130)、ＭＬＮ-５１８(Shen et al., Blood 2003, 102, 11, abstract 476)、およびＡＺＤ-２１７１(Hennequin et al., Proceedings of the American Association of Cancer Research 2004, 45, abstract 4539)、ＰＫＣ４１２、ネパフェナクを含むが、これらに限定するものではない。
【００９２】
好ましいものは、ベバシズマブ、アフリベルセプト、ペガプタニブ、ラニビズマブ、パゾパニブおよび／またはベバシラニブとの組合せを示す。
【００９３】
一般的に、本発明の医薬組成物と組み合わせる別の眼科用薬剤の使用は、下記に役立つ：
(１) いずれかの薬剤を単独で投与するのと比較して、良好な効力を生じる、
(２) より少ない量での投薬剤の投与を提供する、
(３) 哺乳動物、特にヒトにおいて、より幅広い範囲の処置を提供する、
(４) 処置される患者の間に、より高い応答率を提供する、
(５) 他の薬剤の組み合わせが拮抗作用を奏する既知の例と比較して、単独で使用される薬剤のものと少なくとも同程度に良好な効力および耐容性の結果を達成する。
先の情報および当分野で利用できる情報を用いて、当業者は、本発明をその完全な範囲まで利用できる。
【００９４】
変更および修飾が、本発明の精神または範囲を逸脱せずに本発明に対して為されることは当業者には明確に理解されるであろう。
【００９５】
全ての公報および上記および下記に引用した特許は、参照により本明細書に組み込まれる。
重量データは、別段の記載がなければ、重量パーセントであり、部とは重量部である。
【実施例】
【００９６】
実施例：
ＨＰＬＣ方法：
２つの別々のＨＰＬＣ方法を、医薬製剤中の、レゴラフェニブ含量、未同定分解生成物および未同定第二の成分、ならびに特異的な分解生成物の４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）ピリジン-２-カルボン酸 メチルアミド（AFP-PMA）を各々決定するために開発した。
【００９７】
１）レゴラフェニブ含量、未同定第二の成分、および未同定分解生成物の決定のためのＨＰＬＣ方法：試料を、１００μg/mlのレゴラフェニブ終濃度までの記載した製剤アリコートの希釈物を水/アセトニトリル（２５/７５）を用いて調製した。各試料(１０μｌ)をAgilent 1100 HPLC 系（Agilent, Waldbronn, Germany）に注入して、試料を、１ｍｌ/分の流速を適用して加熱済（４０℃）Symmetry C18 column（150 x 4.6mm - 3.5μm 粒子サイズ、Waters, Eschborn, Germany）上に流した。移動相は、リン酸カリウム塩緩衝液ｐＨ２.４（Ａ）およびアセトニトリル/エタノール（６/４）（Ｂ）の混合物から構成される。以下の勾配を適用した：０分：Ａ、６０％/Ｂ、４０％；１２分：Ａ、２０％/Ｂ、８０％；１６分：Ａ、２０％/Ｂ、８０％；１６.５分：Ａ、６０％/Ｂ、４０％；２０分：Ａ、６０％/Ｂ、４０％。レゴラフェニブ、未同定第二成分および未同定分解生成物を、２６５ｎｍ波長でＤＡＤ検出器を用いて定量した。製剤内のレゴラフェニブ含量（以下の表中のカラム３）を、外部２点校正の直線を用いて定量した。未同定第二成分および未同定分解生成物（以下の表でカラム５-７）を、合わせた試料-関連ピーク面積の％として記述した。システムの精度を、１００％レゴラフェニブ標準（例えば、１００μg/ml）の６回の注入による各試料組の運転を用いて決定して、これら６回の注入から得られるピーク面積の変化の係数は常に２％以下であった。２点（例えば、５０μg/ml、１００μg/ml）校正直線の相対Ｙ軸のインターセプトは、常に３％（１００％ レゴラフェニブ標準を参照して）以下であった。レゴラフェニブピークは、１１.５分で出現する。
【００９８】
あるいは（実施例３-５）、レゴラフェニブおよびその分解生成物の含量を、100 mm x 4.6 mm 逆相カラム（YMC Pack Pro RS C18, 3 μm 粒子サイズ）を用いて、異なるが類似したＨＰＬＣ方法により決定した。０.１６ mg/mlの僅かな量を含む５μｌの試料を注射して、トリフルオロ酢酸（2 ml/リットルの水）（Ａ）およびアセトニトリル（Ｂ）からなる移動相勾配により１.０ ml/分の流速で溶出した。以下の勾配条件を適用した：０-１分間 ７５％Ａ/２５％Ｂ；３.５分まで、５０％Ａ/５０％Ｂに変更；１１．５分まで、４３％Ａ/５７％Ｂに変更；１３分まで、１５％Ａ/８５％Ｂに変更、および１５％Ａ/８５ ％Ｂで１６分まで保持、その後７５％Ａ/２５％Ｂに再平衡化。カラム温度は、４０℃であり、検出波長は、２６０nｍ（ダイオードアレイ検出を用いる）であった。レゴラフェニブの定量を、３点校正を用いる外部標準により行った。分解生成物を、レゴラフェニブ参照標準を用いて得た同じ校正関数を用いて定量した。このＨＰＬＣ方法は、レゴラフェニブを含有する固体の経口投薬量に対して完全に妥当であり、選択性、精度、直線性およびロバスト性に関する全ての要件を満たす。レゴラフェニブピークの溶出時間は、上記方法に対する時間とほぼ同一であった。
【００９９】
２）特異的な分解生成物 ４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）ピリジン-２-カルボン酸メチルアミド（IUPAC：４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）-Ｎ-メチルピリジン-２-カルボキシアミド）（AFP-PMA）を決定するためのＨＰＬＣ方法
試料を、３０００μｇ/ｍｌのレゴラフェニブ終濃度までのアセトンによる記載した製剤アリコートの希釈物により製造した。各試料(15μl)を、Agilent 1100 HPLC 系（Agilent, Waldbronn, Germany）に注射して、試料を１０°で保持した。オートサンプラーを、Symmetry C18 column（150 x 4.6mm - 3.5μm 粒子サイズ、Waters, Eschborn, Germany）上で始動させて、流速１ml/分を用いて２０℃で保持した。移動相は、リン酸カリウム緩衝液ｐＨ２.４（Ａ）およびアセトニトリル/エタノール（６/４）（Ｂ）の混合物からなる。以下の勾配を適用した：０分：Ａ、６２％/Ｂ、３８％；５分：Ａ、４４％/Ｂ、５６％；５.０１分：Ａ、１５％/Ｂ、８５％；９分：Ａ、１５％/Ｂ、８５％；９.０１分：Ａ、６２％/Ｂ、３８％；１２分：Ａ、６２％/Ｂ、３８％。４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）ピリジン-２-カルボン酸メチルアミド（以下の表におけるカラム４）を、外部３点（例えば、０.０４ μg/ml、０.１μg/ml、１μg/ml）校正直線を参照して、２３２nm波長でＤＡＤ検出器を用いて定量した。４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）ピリジン-２-カルボン酸メチルアミドピークは３.９分で出現する。４-（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）ピリジン-２-カルボン酸メチルアミドの検出限界（ＬＯＤ）および定量限界（ＬＯＱ）を、２つの異なるマトリクス（水およびパラフィン）について決定し、以下のとおりであった：ＬＯＤ：４ｐｐｍ=０.０００４％（水）、１３ｐｐｍ = ０.００１３％（パラフィン）；ＬＯＱ：１３ｐｐｍ=０.００１３％（水）および４３ｐｐｍ=０.００４３％（パラフィン）。
【０１００】
実施例１：オレオイルポリエチレングリコールグリセリド（20 mg/ml）中のレゴラフェニブ・一水和物を含有する眼用懸濁液
微粉化したレゴラフェニブ・一水和物(200 mg)を、オレオイル ポリエチレングリコールグリセリド（10 ml）に懸濁した。該懸濁液を、室温で１５分間攪拌して均質化した。
【０１０１】
オレオイルポリエチレングリコールグリセリド中の３ mg/mlの濃度のレゴラフェニブの安定性を、４週間、２５℃で６０％相対湿度（r.h.）および４０℃で７５％相対湿度にて試験した。レゴラフェニブ含量は、理論的濃度範囲の９５.０〜１０１％であり、最大の未同定分解生成物は０.３〜０.７％の範囲であった。４−（４-アミノ-３-フルオロフェノキシ）ピリジン-２-カルボン酸メチルアミド（ＡＦＰ-ＰＭＡ）含量は、＜１３ｐｐｍ＝０.００１３％（＜ パラフィンを基にした製剤に対して決定したＬＯＤ、表２）以下であった。分析の詳細については、上記ＨＰＬＣ方法の章を参照されたい。
【０１０２】
表２．オレオイルポリエチレングリコールグリセリドを基にした製剤中のレゴラフェニブの含量および安定性：
【表２】
0005998213.tif 000005
【０１０３】
実施例２：液体パラフィン中のレゴラフェニブ・一水和物を含む眼用懸濁液（20 mg/ml）
微粉化したレゴラフェニブ・一水和物(400 mg)を、軽質流動パラフィン(20 ml)に懸濁した。懸濁液を、１５分間室温で攪拌して均質化した。
【０１０４】
該懸濁液の安定性を、２０mg/mlの濃度で、１３週間、２５℃で６０％相対湿度（r.h.）および４０℃で７５％r.h．により試験した。レゴラフェニブ含量は、理論値濃度の７４.８-９９.６％であった。この観察された変動は、該懸濁液の手動振湯後の試料の非均一性を理由としておこり易い。クロマトグラムにおいて観察された未同定分解生成物はなかった。ＡＦＰ−ＰＭＡ含量は、＜４３ppm＝０.００４３％（パラフィンを基にした製剤について決定された＜ＬＯＱ、表３）以下であった。分析の詳細については、上記分析の章を参照されたい。
【０１０５】
表３．パラフィンを基にした製剤中のレゴラフェニブの含量および安定性
【０１０６】
【表３】
0005998213.tif 000006
【０１０７】
実施例３：液体パラフィン中のレゴラフェニブ・一水和物および０.５％疎水性コロイド状シリカを含む眼用懸濁液（20 mg/ml）
室温で攪拌することにより疎水性コロイド状シリカ（Aerosil(登録商標) R972）(0.25 g)を軽質流動パラフィン（50 ml）に分散させて、懸濁ビヒクル（軽質流動パラフィン中0.5%（w/v）疎水性コロイド状シリカ）を製造した。レゴラフェニブ・一水和物(200 mg)を、該懸濁ビヒクルのアリコート（10 ml）に添加し、該懸濁液を、９.１ s-1の振動数の振動ミルを用いて４５分間均質化した。
【０１０８】
その後、該懸濁液を、ガラスバイアル（おおよそ6 ml/バイアル）に充填して、バイアルを、ラバーストッパーで閉じて、アルミニウムクリップキャップで密封した。
【０１０９】
懸濁液の安定性を、４℃、室温（およそ２５℃）および４０℃/７５％相対湿度（表４を参照されたい）で４週間にわたり試験した。公称含量(１００〜１２５％の間）に関する変動および明白な高濃度は、分析用試料調製中の中間生成物を理由とする可能性が高い。シリカ含有懸濁液の試料調製の形態は、実施例４ｂ）に記述したとおりにその後に至適化される。
【０１１０】
表４．実施例３の製剤中のレゴラフェニブ含量および安定性
【表４】
0005998213.tif 000007
1 無水薬剤成分に基づく
【０１１１】
実施例４：液体パラフィン中にレゴラフェニブ・一水和物および２％疎水性コロイド状シリカを含む眼用懸濁液（20 mg/ml）
ａ）疎水性コロイド状シリカ（Aerosil(登録商標) R972）(１g)を、室温で攪拌して軽質流動パラフィン（50 mL）に分散させて、懸濁化ビヒクル[2%（w/v）疎水性コロイド状シリカを調製するために]を製造した。レゴラフェニブ・一水和物(200 mg)を、該懸濁ビヒクルのアリコート（10 mL）に添加し、該懸濁液を９.１ s-1の頻度で変動ミルを用いて４５分間均質化した。
【０１１２】
その後、懸濁液を、ガラスバイアル（おおよそ6 mL/バイアル）に充填して、バイアルをラバーストッパーで閉じて、アルミニウムクリップキャップで密閉した。
【０１１３】
懸濁液の安定性を、４℃、室温（およそ２５℃）および４０℃/７５％ 相対湿度（表５を参照されたい）で４週間にわたり試験した。公称含量（１０４および１１８％）に関する変動および明白な高濃度は、分析用試料調製物中の中間体を理由とする可能性が高い。シリカ含有懸濁液の試料調製の形態は、実施例４ｂに記述したとおりにその後至適化される。
【０１１４】
表５．実施例４ａ）製剤中のレゴラフェニブ含量および安定性
ａ）
【表５】
0005998213.tif 000008
1 無水薬剤成分に基づく
【０１１５】
ｂ）
疎水性コロイド状シリカ（Aerosil(登録商標) R972）(10 g)を、高せん断混合器（10230 rpm）を用いて、室温で１５分軽質流動パラフィン（500 mL）に分散させて、該懸濁ビヒクル（軽質流動パラフィン中の２％（w/v）疎水性コロイド状シリカ）を製造した。レゴラフェニブ・一水和物(9 g)を、該懸濁ビヒクルのアリコート（450 mL）に添加して、該懸濁液を、高せん断混合器（10230 rpm）を用いて４５分間均質化した。
【０１１６】
該懸濁液を、ガラスバイアル（5 mL/バイアル）に充填して、該バイアルをラバーストッパーで閉じて、アルミニウムクリップキャップで密封した。その後、バイアルを、２７.９ ｋＧｙの実効線量でγ線照射した。
【０１１７】
照射した懸濁液の安定性を、４週間、４０℃/７５％相対湿度（表６を参照されたい）にわたり試験した。シリカ含有懸濁液の試料調製の形態を、この時点で至適化した。レゴラフェニブ含量は、公称含量の９８〜１０３％の範囲であった。ＡＦＰ-ＰＭＡ含量は、０.００５％（５０ppm）以下であった。
【０１１８】
表６．実施例４ｂ）製剤中のレゴラフェニブ含量および安定性
【表６】
0005998213.tif 000009
1 無水薬剤成分に基づく
【０１１９】
実施例５：液体パラフィン中に５％疎水性コロイド状シリカおよびレゴラフェニブ・一水和物を含む眼用懸濁液（20 mg/ml）
疎水性コロイド状シリカ（Aerosil（登録商標）R972）(2.5 g)を、室温で攪拌して、軽質流動パラフィン（50 mL）に懸濁させて、該懸濁ビヒクル（軽質流動パラフィン中、5%（w/v）疎水性コロイド状シリカ）を調製した。レゴラフェニブ・一水和物(200 mg)を、該懸濁ビヒクルのアリコート（10 mL）に添加して、該懸濁液を、９.１ s-1の頻度で変動ミルを用いて４５分間均質化した。
【０１２０】
その後、該懸濁液を、ガラスバイアル（おおよそ６ mL/バイアル）に充填し、該バイアルを、ラバーストッパーで閉じて、アルミニウムクリップキャップで密閉した。
【０１２１】
懸濁液の安定性を、４℃、室温（およそ２５℃）および４０℃/７５％ 相対湿度（表７を参照されたい）で４週間にわたり試験した。この含量の変動（９９〜９７％）は、分析用試料調製の際の中間生成物を理由とする可能性が高い。シリカ含有懸濁液の試料調製の形態は、実施例４ｂ）に記載したとおりにその後至適化される。
【０１２２】
表７．実施例５製剤中のレゴラフェニブ含量および安定性
【表７】
0005998213.tif 000010
1 無水薬剤成分に基づく
【０１２３】
実施例６：水を基にしたビヒクル中のレゴラフェニブ・一水和物（20 mg/ml）を含有する眼用懸濁液
ヒドロキシプロピルメチルセルロース１５ｃｐ（ＨＰＭＣ）(1.7 g)を、７０℃で等張塩化ナトリウム溶液（48 g、水中0.9% NaCl）中に分散させた。該混合物を、攪拌しながら室温まで冷却した。室温で、蒸留水、次にポリソルベート80（0.5 g）を添加して、穏やかな攪拌下で溶解させた。レゴラフェニブ・一水和物(518 mg)を、該製造したビヒクル（24.5g）のアリコートに添加して、該懸濁液を、１５分間室温で穏やかに攪拌して均質化した。
【０１２４】
該懸濁液の安定性を、１０ mg/mlの濃度で、２５℃で６０％の相対湿度（r.h.）および４０℃で７５％r.h.で、１３週間にわたり試験した。レゴラフェニブ含量は、理論値濃度の１０３〜１１２％であった。観察した変動は、該懸濁液の手動振湯後の試料の不均質性を理由とする可能性が高い。最大の未同定分解生成物は、合計した試料に関するピーク面積の試料の＜０.１％であった。ＡＦＰ-ＰＭＡの量を、貯蔵９週間直後に決定した。
【０１２５】
表８．水を基にした製剤中のレゴラフェニブ含量および安定性
【表８】
0005998213.tif 000011
【０１２６】
表２、３および８において、上記カラム５は、製剤中の同じ未同定第二の成分の％量を記述するカラム６の値と比較した、ＨＰＬＣ方法に使用した標準物中の最大の未同定第二の成分の％量を記述する。カラム７は、ＡＦＰ-ＰＭＡではない該製剤中の最大の未同定分解生成物の％量を記述する。前記分解生成物は、標準物中では検出できないが、製剤中で形成される。
【０１２７】
実施例７：中鎖トリグリセリド（MCT, miglyol）中のレゴラフェニブ・一水和物を含有する眼用懸濁液(20 mg/ml)
実施例７を実施例１に従って製造した。
【０１２８】
表９．ＭＣＴを基にした製剤中のレゴラフェニブ含量および安定性
【表９】
0005998213.tif 000012
【０１２９】
実施例８：オキュレンタム・シンプレックス(oculentum simplex)中にレゴラフェニブ・一水和物を含有する眼用懸濁液（20 mg/g）
１００ｍｇの微粉化したレゴラフェニブ・一水和物を、４９００ｍｇのoculentum simplex（組成：コレステロール１％、液体パラフィン４２.５％、軟パラフィン５６.５重量％）に懸濁した。該懸濁液を、瑪瑙乳鉢内でおおよそ１分間室温にて攪拌して均質化した。
【０１３０】
実施例９：レーザー誘導性脈絡膜血管新生(ＣＮＶ)モデルにおけるレゴラフェニブ含有組成物の局所効力
この試験は、本発明の眼科用局所医薬組成物の１日２回の局所投与(点眼薬)が、レーザー誘導性脈絡膜新血管形成モデル(Dobi et al, Arch．Ophthalmol．1989, 107(2), 264-269 または Frank et al, Curr． Eye Res．1989 Mar, 8(3), 239-247)において、血管漏出量および／または脈絡膜血管新生の低下をもたすかどうかを決定することを目的とする。
【０１３１】
この目的のために、明らかな眼の異常症候のない色素沈着したブラウン・ノーリー・ラットの全数１３３匹を選択し、６〜８匹の動物の８つのグループに各々無作為に分配した。０日目に、動物を腹腔内注射により麻酔した(15 mg/kg キシラジンおよび80 mg/kg ケタミン(5 mg/ml クロロブタノール・半水和物およびプロピレングリコールを含有する水に溶解した)。瞳孔を拡張させるために、０.５％ アトロピン(塩化ベンザルコニウムを含有する０.９％生理食塩水に溶解した)の一滴を滴下した後に、脈絡膜新血管形成を、動物当たり単眼の網膜中に６つの穴(ブルッフ膜の破壊)を、５３２ｎｍ アルゴンレーザーを用いる燃焼により誘発させた(損傷サイズ：50 μm、レーザー強度：150 mW；刺激持続時間：100 ms)。
【０１３２】
以下の製剤を含む：
ａ）実施例１（ビヒクルコントロール）(ｎ=８)に使用されたような１００％オレオイルポリエチレングリコールグリセリド
ｂ）実施例１（20 mg/ml、懸濁液）(ｎ=８)
ｃ）実施例２（ビヒクルコントロール）(ｎ=８)に使用されたような１００％軽質流動パラフィン
ｄ）実施例２（20 mg/ml、懸濁液）(ｎ=８)
ｅ）水を基にしたビヒクル（ヒドロキシプロピルメチルセルロース１５ ｃｐ ３.５％、ポリソベート８０ ０.５％、実施例６（ビヒクルコントロール）で使用されたような等張ＮａＣｌ溶液９６％（ｎ=６）
ｆ）実施例６（20 mg/ml、懸濁液）(ｎ=６)
ｇ）実施例３で使用されたような液体パラフィン中の０.５％ 疎水性コロイド状シリカ（ビヒクルコントロール）(ｎ=１０)
ｈ）実施例３（20 mg/ml、懸濁液）(ｎ=１０)
ｉ）実施例４で使用されたような液体パラフィン中の２.０％疎水性コロイド状シリカ（ビヒクルコントロール）(ｎ=１０)
ｊ）実施例４（20 mg/ml、懸濁液）(ｎ=１０)
ｋ）実施例５で使用されたような液体パラフィン中の５.０％ 疎水性コロイド状シリカ（ビヒクルコントロール）(ｎ=１０)
ｌ）実施例５（20 mg/ml、懸濁液）(ｎ=１０)
ｍ）実施例７（ビヒクルコントロール）で使用されたような１００％ Miglyol(ｎ=８)
ｎ）実施例７（20 mg/ml、懸濁液）(ｎ=７)
ｏ）実施例８（ビヒクルコントロール）に使用されたような１００％ oculentum simplex（ｎ=８）
ｐ）実施例８（20 mg/g、懸濁液）(ｎ=６)。
【０１３３】
各製剤(本発明の実施例を含む製剤、および有効成分を含まないビヒクル製剤)の１０ μlを、２３日間の全観察期間中、１日２回、１０：１４時間の間隔で、罹患した眼に適用した。全動物の体重を、開始前および試験中に１日１回記録した。血管造影を、蛍光眼底カメラ(Kowe Genesis Df, Japan)を用いて２１日に実施した。ここで、麻酔および瞳孔拡張の後、１０％ ナトリウムフルオレセイン(染料、水に溶解した)を、皮下注射して、写真を染料注射後の約２分に記録した。血管造影図でのフルオレセインの血管漏出量を、グループの割り当てを知らない(blinded)３人の異なる試験官により評価した(実施例１〜３ 対 各ビヒクル)。各病変を、０(漏出なし)〜３(強く染色された)にて評点し、全ての６つの病変からの平均値を各動物に対する値として用いた。２３日目に、動物を屠殺し、眼を採取し、４％パラホルムアルデヒド溶液に１時間室温で固定した。洗浄後、網膜を慎重に剥離して、この強膜-脈絡膜複合体を、洗浄し、ブロッキング(blocked)して、脈管構造を可視化するためにＦＩＴＣ-イソレクチンＢ４抗体で染色した。次いで、強膜-脈絡膜を、平らに埋め込み、４８８ｎｍ励起波長での蛍光顕微鏡(Keyence Biozero)下で観察した。脈絡膜血管新生の領域(μｍ2)を、ImageTool softwareを用いて測定した。
【０１３４】
結果：
Ａ）血管漏出に関する効果（２１日目の血管造影スコア）：
図１：２１日目のビヒクル（オレオイルポリエチレングリコールグリセリド（ラブラフィル：Labrafil）、製剤ａ）およびレゴラフェニブ（実施例１、製剤ｂ）処置動物の血管造影スコア。データを、平均±ＳＤ、ｔ検定に従うｐ値を示した。Ｎ=８/群。
【０１３５】
表１０：図１に描画したヒストグラムの生データ。
一つの値は、処置に関する割り当てを知らない３人の異なる試験官からの平均を表す。
【表１０】
0005998213.tif 000013
【０１３６】
図２：２１日目、ビヒクル（パラフィン、製剤ｃ）およびレゴラフェニブ（実施例２、製剤ｄ）で処置した動物の血管造影スコア。データを、平均±ＳＤ、ｔ検定に従うｐ値として示す。Ｎ=８/群。
【０１３７】
表１１：図２に描画したヒストグラムの生データ。一つの値は、処置に関する割り当てを知らない３人の異なる試験官からの平均を示す。
【０１３８】
【表１１】
0005998213.tif 000014
【０１３９】
図３：２１日目のビヒクル（水を基にした製剤ｅ）およびレゴラフェニブ（実施例３、製剤ｆ）で処置した動物の血管造影スコア。データを、平均±ＳＤ、ｔ検定に従うｐ値として表す。Ｎ=６/群。
【０１４０】
表１２：図３に描画したヒストグラムの生データ
一つの値は、処置に関する割り当てを知らない３人の異なる試験官からの平均を表す。
【表１２】
0005998213.tif 000015
【０１４１】
Ｂ）新血管形成（２３日目、血管新生領域）に関する効力：
図４：２３日目のビヒクル（オレオイルポリエチレングリコールグリセリド（Labrafil）、製剤ａ）およびレゴラフェニブ（実施例１、製剤ｂ）で処置した動物の血管新生領域。データを、平均±ＳＤ、ｔ検定に従うｐ値として表す。Ｎ=８/群。
【０１４２】
表１３：図４に描画したヒストグラムの生データ
一つの値は、６つの全て創傷からの平均を表す。
【０１４３】
【表１３】
0005998213.tif 000016
【０１４４】
図５：２３日目のビヒクル（パラフィン、製剤ｃ）およびレゴラフェニブ（実施例２、製剤ｄ）で処置した動物の血管新生領域。データを、平均±ＳＤ、ｔ検定に従うｐ値として表す。Ｎ=８/群。
【０１４５】
表１４：図５に描画したヒストグラムの生データ
一つの値は、６つの全ての病変からの平均を表す。
【０１４６】
【表１４】
0005998213.tif 000017
【０１４７】
図６：２３日目のビヒクル（水を基にした製剤ｅ）およびレゴラフェニブ（実施例３、製剤ｆ）で処置した動物の血管新生領域。データは、平均±ＳＤ、ｔ検定に従うｐ値として表す。Ｎ=８/群。
【０１４８】
表１５：図６に描画したヒストグラムの生データ
一つの値は、６つの全ての病変からの平均を表す。
【表１５】
0005998213.tif 000018
【０１４９】
双方の群において、夫々一つの平らな埋め込み調製物を、組織品質が悪かった為に評価しなかった。
【０１５０】
実施例１に対する結果：
表１６（ｎ=８/群）
【表１６】
0005998213.tif 000019
【０１５１】
実施例２に対する結果：
表１７（ｎ=８/群）
【表１７】
0005998213.tif 000020
【０１５２】
実施例６に対する結果：
表１８（漏出についてｎ=６/群、新血管形成についてｎ=５/群）
【表１８】
0005998213.tif 000021
【０１５３】
実施例７にたいする結果：
表１９（ビヒクルについてｎ=８、レゴラフェニブについてｎ=７）
【表１９】
0005998213.tif 000022
【０１５４】
実施例８に対する結果：
表２０（ビヒクルについてｎ=８、レゴラフェニブについてｎ=６）
【表２０】
0005998213.tif 000023
【０１５５】
実施例３、４および実施例５に対する結果：
表２１（ｎ=８-１０/群）
【表２１】
0005998213.tif 000024
【０１５６】
実施例１０：眼の薬物動態：
Ａ）
実験日に、様々なビヒクル中の懸濁液として試験化合物（レゴラフェニブ・一水和物 20mg/ml）の規定用量を、エッペンドルフ・ピペットを使用いて各眼に適用した。滴用２４〜９６時間後の間に、一連の動物（８〜１２時）を、屠殺して、これらの動物（ラット）の両眼を得た。これらの両眼を、少なくとも２回生理食塩水溶液(1 ml)にて洗い流して、その後紙片（paper flies）により乾燥させた。眼内の試験化合物の全濃度を決定するために、規定量の生理食塩水溶液にホモジネートし、このホモジネートのアリコートを、アセトニトリルと混合して、該溶液中のタンパク質を沈殿させた。遠心分離後、上清中、試験化合物およびその起こり得る既知の分解生成物を、適切なＬＣ/ＭＳ-ＭＳ方法で定量した。試験化合物またはその起こり得る既知の分解生成物の濃度は、眼の幾つかの規定した区分で決定され、この眼を適切な区分に切除して、各区分をホモジネートして、処理し、上記のように測定した。
【０１５７】
このようにして、濃度-時間曲線を決定した；次に標準薬物動態パラメーターを計算するためにこれを使用して、ある特定の製剤の定量（最大濃度および半減期）を評価する。試験化合物またはその放出された活性医薬成分の計算した標準薬物動態パラメーターは、次のとおりであった：ＡＵＣｎｏｒｍ、Ｃｍａｘ、およびＭＲＴ（平均滞留時間）。
【０１５８】
様々な製剤を用いるが等用量についての眼の濃度-時間曲線から計算したレゴラフェニブに関する薬物動態パラメーターを、以下の表に示す。
【０１５９】
表２２：
【表２２】
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【０１６０】
Ｂ）
三匹の非麻酔雌ウサギに、パラフィン中の規定量（30 μL）の懸濁液を各眼の下方部涙嚢内に投与した。ガラス毛細管を用いて６０分間かけて、幾つかの重量制御した試料（ｎ=８）を収集した。この液体中の化合物濃度の決定および薬物動態パラメーターの評価は、上記したものと同じであった。
【０１６１】
表２３：
【表２３】
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【０１６２】
この結果は、涙中および角膜内での有効成分の驚くべき高い滞留時間を示す。
【０１６３】
本発明は特定の実施形態を参照して開示されているが、本発明の精神と範囲を逸脱せずに、当業者によって本発明の他の実施形態および変更を考案し得るものことは明らかであろう。特許請求の範囲は、このようなあらゆる実施形態および等価な変更を包含するものであると理解されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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