【手続補正書】
【提出日】平成23年9月16日(2011.9.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
上記基質を上記生成物に還元するためのこの方法のいくつかの実施形態において、１ｇ／Ｌの基質の少なくとも約１０〜２０％は、約１０ｇ／Ｌの上記ポリペプチドを用いて、約２４時間未満で上記生成物に変換され、ここで、そのポリペプチドは、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９０、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１１または１１２に対応するアミノ酸配列を含む。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
配列番号４のポリペプチドの速度の少なくとも１．５倍の速度で基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに変換することができるケトレダクターゼポリペプチド。
（項目２）
少なくとも約９５％の立体異性体過剰率で前記基質を前記生成物に変換することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３）
少なくとも約９９％の立体異性体過剰率で前記基質を前記生成物に変換することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目４）
以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基がプロリンである、およびＸ２０２に対応する残基がトリプトファンである；を有するが、但し、前記ケトレダクターゼポリペプチドは、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列と少なくとも約８５％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目５）
以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基がプロリンである；Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンである；およびＸ２０２に対応する残基がトリプトファンである；を有するが、但し、前記ケトレダクターゼポリペプチドは、該Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、Ｘ１９５に対応する残基が塩基性、酸性、非極性または極性残基であり；且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列と少なくとも約８５％同一であるアミノ酸配列を含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目６）
前記Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、且つ、前記Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、項目４に記載のポリペプチド。
（項目７）
Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、項目５に記載のポリペプチド。
（項目８）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２５に対応する残基が、極性または酸性残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ４１に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ５３に対応する残基が、極性、非極性または酸性残基である；
Ｘ５７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ６８に対応する残基が、極性、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ７２に対応する残基が、塩基性残基である；
Ｘ７６に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９５に対応する残基が、脂肪族、非極性または酸性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９７に対応する残基が、塩基性、拘束または極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１０８に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１１１に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１３９に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１４５に対応する残基が、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４８に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５１に対応する残基が、拘束、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１６３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１６５に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７３に対応する残基が、酸性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７９に対応する残基が、芳香族、塩基性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９７に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１０に対応する残基が、極性または塩基性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１２に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
Ｘ２２３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２２６に対応する残基が、非極性または極性残基である；
Ｘ２３３に対応する残基が、極性または酸性である；
Ｘ２３５に対応する残基が、極性または芳香族残基である；
Ｘ２４８に対応する残基が、非極性または芳香族残基である；
Ｘ２４９に対応する残基が、芳香族残基である；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４から７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
（項目９）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ２５に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；
Ｘ４１に対応する残基が、セリンまたはアラニンである；
Ｘ５３に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ５７に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ６８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ７２に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ７６に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンまたはバリンである；
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインまたはグリシンである；
Ｘ９５に対応する残基が、ロイシンまたはグルタミン酸である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシンまたはトレオニンである；
Ｘ９７に対応する残基が、ヒスチジンまたはセリンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１０８に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１１１に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ１３９に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４５に対応する残基が、グルタミンまたはロイシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１５１に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ１５２に対応する残基が、セリンである；
Ｘ１６３に対応する残基が、イソロイシンである；
Ｘ１６５に対応する残基が、アスパラギンである；
Ｘ１７３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１７９に対応する残基が、フェニルアラニン、リシンまたはロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミン、セリンまたはロイシンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９７に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸またはグルタミンである；
Ｘ２１０に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリン、ロイシン、トレオニンまたはイソロイシンである；
Ｘ２１２に対応する残基が、セリンまたはバリンである；
Ｘ２１６に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２２３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ２２６に対応する残基が、トレオニンである；
Ｘ２３３に対応する残基が、アスパラギンまたはアスパラギン酸である；
Ｘ２３５に対応する残基が、トリプトファンである；
Ｘ２４８に対応する残基が、グリシンまたはトリプトファンである；
Ｘ２４９に対応する残基が、トリプトファンである；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４から７のいずれか１項に記載のポリペプチド。
（項目１０）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である、および
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１１）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である、
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１２）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１３）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１４）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；；のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１５）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１６）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１７）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１８）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ６６に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
のうちの１つ以上または少なくともすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目１９）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、拘束または非極性残基である；
Ｘ１７に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ８０に対応する残基が、脂肪族、非極性または極性残基である；
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
Ｘ２１６に対応する残基が、拘束または塩基性残基である；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目２０）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ２７に対応する残基が、芳香族残基である；
Ｘ６４に対応する残基が、チロシンである；
Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインである；
Ｘ９６に対応する残基が、バリン、ロイシンまたはイソロイシンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリンである；
Ｘ２１６に対応する残基が、アルギニンである；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、項目４に記載のポリペプチド。
（項目２１）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；Ｘ９６に対応する残基が、トレオニンである；Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；およびＸ１９６に対応する残基が、ロイシンである、を有する、項目８に記載のポリペプチド。
（項目２２）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；Ｘ９４に対応する残基が、システインである；Ｘ９６に対応する残基が、ロイシンである；およびＸ２１１に対応する残基が、バリンである、をさらに有する、項目２１に記載のポリペプチド。
（項目２３）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；およびＸ１００に対応する残基が、リシンである、をさらに有する、項目２２に記載のポリペプチド。
（項目２４）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンである；Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；およびＸ２１６に対応する残基が、アルギニンである、をさらに有する、項目２２に記載のポリペプチド。
（項目２５）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、さらなる以下の特徴：Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンである；Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；およびＸ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である、を有する、項目２２に記載のポリペプチド。
（項目２６）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミンである；Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸である；およびＸ２１６に対応する残基が、アルギニンである、をさらに有する、項目２３に記載のポリペプチド。
（項目２７）
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；Ｘ６６に対応する残基が、アスパラギン酸である；Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンである；Ｘ９６に対応する残基が、イソロイシンまたはロイシンである；およびＸ１００に対応する残基が、リシンである、をさらに有する、項目２４に記載のポリペプチド。
（項目２８）
前記ケトレダクターゼポリペプチドが、以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基が、プロリンである、およびＸ２０２に対応する残基が、トリプトファンである；を有するが、但し、ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基が芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列の残基９０から２１１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を有する領域またはドメインを含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目２９）
前記ケトレダクターゼポリペプチドが、以下の特徴：Ｘ１９０に対応する残基が、プロリンである；Ｘ１９５に対応する残基が、アルギニンである；およびＸ２０２に対応する残基が、トリプトファンである；を有するが、但し、ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基が拘束残基であり、Ｘ１９５に対応する残基が塩基性、酸性、非極性または極性残基であり；且つ、Ｘ２０２に対応する残基が、芳香族残基である、アミノ酸配列を有することを条件とする、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列の残基９０から２１１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を有する領域またはドメインを含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３０）
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、項目２８に記載のポリペプチド。
（項目３１）
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、Ｘ１９０に対応する残基がプロリンであり、Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、アミノ酸配列を含む、項目２９に記載のポリペプチド。
（項目３２）
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９５に対応する残基が、脂肪族、非極性または酸性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９７に対応する残基が、塩基性、拘束または極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１０８に対応する残基が、塩基性または拘束残基である；
Ｘ１１１に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１３９に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１４５に対応する残基が、酸性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４８に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５１に対応する残基が、拘束、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１５２に対応する残基が、極性、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１６３に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１６５に対応する残基が、極性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７３に対応する残基が、酸性、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１７９に対応する残基が、芳香族、塩基性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９７に対応する残基が、酸性残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１０に対応する残基が、極性または塩基性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、項目２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
（項目３３）
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインまたはグリシンである；
Ｘ９５に対応する残基が、ロイシンまたはグルタミン酸である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシンまたはトレオニンである；
Ｘ９７に対応する残基が、ヒスチジンまたはセリンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１０８に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１１１に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ１３９に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４５に対応する残基が、グルタミンまたはロイシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１５１に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ１５２に対応する残基が、セリンである；
Ｘ１６３に対応する残基が、イソロイシンである；
Ｘ１６５に対応する残基が、アスパラギンである；
Ｘ１７３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１７９に対応する残基が、フェニルアラニン、リシンまたはロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミン、セリンまたはロイシンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９７に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸またはグルタミンである；
Ｘ２１０に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリン、ロイシン、アルギニン、トレオニンまたはイソロイシンである；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、項目２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
（項目３４）
前記ケトレダクターゼドメインまたは領域が、以下の特徴：
Ｘ９３に対応する残基が、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９４に対応する残基が、システイン、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１００に対応する残基が、塩基性、酸性、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１４７に対応する残基が、芳香族、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９４に対応する残基が、拘束、極性、脂肪族または非極性残基である；
Ｘ１９６に対応する残基が、非極性または脂肪族残基である；
Ｘ１９８に対応する残基が、酸性または極性残基である；
Ｘ２１１に対応する残基が、塩基性、脂肪族、非極性、酸性または極性残基である；
のすべてをさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して残基９０〜２１１に対応するドメイン内の他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の相違を場合によっては有し得る、項目２８から３１のいずれか１項に記載のポリペプチド。
（項目３５）
前記ケトレダクターゼが、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９２、９４、９６、９８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含む、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３６）
前記ケトレダクターゼが、前記参照ポリペプチドよりも少なくとも１〜５０倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３７）
前記ケトレダクターゼが、配列番号４２、４４、４６、４８、８６、８８、９２、９４、９６、１００または１０２に対応するアミノ酸配列を含む、項目３６に記載のポリペプチド。
（項目３８）
前記ケトレダクターゼが、前記参照ポリペプチドよりも少なくとも５０〜２５０倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目３９）
配列番号１０、３２、３４、３６、５０、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、９８、１０４、１０６および１０８に対応するアミノ酸配列を含む、項目３８に記載のポリペプチド。
（項目４０）
前記参照ポリペプチドよりも少なくとも２５０〜１０００倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目４１）
配列番号１２、１８、２２、２４、２６、２８、３０、３８、４０、５２、５４、５６、５８、６０、６２および１１０に対応するアミノ酸配列を含む、項目４０に記載のポリペプチド。
（項目４２）
前記参照ポリペプチドよりも少なくとも１０００倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目４３）
配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、項目４２に記載のポリペプチド。
（項目４４）
約１００ｇ／Ｌを超える基質および約５ｇ／Ｌ未満の前記ポリペプチドを用いて行われるとき、約２４時間未満で該基質の少なくとも約９５％を前記生成物に変換することができる、項目１に記載のポリペプチド。
（項目４５）
配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、項目４４に記載のポリペプチド。
（項目４６）
前記参照ポリペプチドと比較して、前記基質の前記生成物への変換に対する競合的インヒビターとしてのアセトンに対して改善された抵抗性を有する、項目１に記載のポリペプチド。
（項目４７）
前記ケトレダクターゼが、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９８、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含む、項目４６に記載のポリペプチド。
（項目４８）
項目１〜４６のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
（項目４９）
配列番号に対応する配列から選択される、項目４８に記載のポリヌクレオチド。
（項目５０）
宿主細胞における発現の指図に適する制御配列に作動可能に連結された項目４８に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
（項目５１）
前記制御配列が、プロモーターを含む、項目５０に記載の発現ベクター。
（項目５２）
前記プロモーターが、Ｅ．ｃｏｌｉプロモーターを含む、項目５１に記載の発現ベクター。
（項目５３）
項目５０に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
（項目５４）
Ｅ．ｃｏｌｉである、項目５３に記載の宿主細胞。
（項目５５）
前記ポリペプチドをコードする発現ベクターのコドンが、前記宿主細胞における発現のために最適化されている、項目５３に記載の宿主細胞。
（項目５６）
項目１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼ、および構造式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステル；構造式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエート；構造式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノール；または構造式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールを含む、組成物。
（項目５７）
前記基質が、構造式（Ｉ）の基質であり、そして前記組成物が、構造式（ＩＩ）の生成物をさらに含む、項目５６に記載の組成物。
（項目５８）
前記基質が、構造式（ＩＩ）の基質であり、そして前記組成物が、構造式（ＩＶ）の生成物をさらに含む、項目５６に記載の組成物。
（項目５９）
補因子再生系をさらに含む、項目５６に記載の組成物。
（項目６０）
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、項目５９に記載の組成物。
（項目６１）
式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するための方法であって、式（Ｉ）の該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、該基質と項目１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
（項目６２）
前記生成物が、約９９％より高い立体異性体過剰率で存在する、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
前記基質の少なくとも約９５％が、約２４時間未満で前記生成物に還元され、ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、約５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、項目６３に記載の方法。
（項目６４）
前記ケトレダクターゼ酵素を発現する全細胞またはそのような細胞の抽出物もしくは溶解産物を用いて行われる、項目６１に記載の方法。
（項目６５）
前記ケトレダクターゼが、単離され、そして／または精製され、そして前記還元反応が、該ケトレダクターゼのための補因子および場合によっては該補因子のための再生系の存在下において行われる、項目６１に記載の方法。
（項目６６）
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、項目６５に記載の方法。
（項目６７）
前記第二級アルコールデヒドロゲナーゼが、前記ケトレダクターゼである、項目６６に記載の方法。
（項目６８）
式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するための方法であって、式（ＩＩＩ）の該基質を式（ＩＶ）の生成物に還元するのに適する反応条件下で、該基質と項目１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
（項目６９）
前記生成物が、約９９％を超える立体異性体過剰率で存在する、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
前記基質の少なくとも約９５％が、約２４時間未満で前記生成物に還元され、ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、約５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、項目６８に記載の方法。
（項目７１）
前記ケトレダクターゼ酵素を発現する全細胞またはそのような細胞の抽出物もしくは溶解産物を用いて行われる、項目６８に記載の方法。
（項目７２）
前記ケトレダクターゼが、単離され、そして／または精製され、そして前記還元反応が、該ケトレダクターゼのための補因子および場合によっては該補因子のための再生系の存在下において行われる、項目６８に記載の方法。
（項目７３）
前記補因子再生系が、グルコースデヒドロゲナーゼおよびグルコース；ギ酸デヒドロゲナーゼおよびホルマート；またはイソプロパノールおよび第二級アルコールデヒドロゲナーゼを含む、項目７２に記載の方法。
（項目７４）
前記第二級アルコールデヒドロゲナーゼが、前記ケトレダクターゼである、項目７３に記載の方法。
（項目７５）
式（ＸＸ）：
【化２１】
2010539948.tif 000001
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：（ａ）式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の該基質と項目１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸ）の形成に適する条件下で、式（ＩＩ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含する、方法。
（項目７６）
前記アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、項目７５に記載の方法。
（項目７７）
式（ＸＸＩ）：
【化２２】
2010539948.tif 000002
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：
（ａ）式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と項目１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸＩ）の形成に適する条件下で、式（ＩＶ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含する、方法。
（項目７８）
前記アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、項目７５に記載の方法。
（項目７９）
化合物（Ｖ）
【化２３】
2010539948.tif 000003
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、
該方法における工程は、式（Ｉ）の基質２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の該基質と項目１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。
（項目８０）
化合物（Ｖ）
【化２４】
2010539948.tif 000004
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、該方法における工程は、式（ＩＩＩ）の基質２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と項目１〜４６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号４のポリペプチドの速度の少なくとも１．５倍の速度で基質である２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを生成物（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに変換することができるケトレダクターゼポリペプチドであって、該ポリペプチドは、配列番号２、４または１１４に基づく参照配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含み、該参照配列は、以下の特徴：
Ｘ１９０に対応する残基がプロリンである；
Ｘ１９５に対応する残基がアルギニンである；および
Ｘ２０２に対応する残基がトリプトファンである、
を有し、ここで、Ｘ１９０に対応する該ケトレダクターゼポリペプチド中の該残基がプロリンであり、Ｘ１９５に対応する該残基がアルギニンであり、且つ、Ｘ２０２に対応する該残基がトリプトファンである、ポリペプチド。
【請求項２】
ｉ）少なくとも９５％；または
ｉｉ）少なくとも９９％
の立体異性体過剰率で前記基質を前記生成物に変換することができる、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記ケトレダクターゼアミノ酸配列が、以下の特徴：
Ｘ７に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１７に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ２５に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ２７に対応する残基が、チロシンである；
Ｘ４１に対応する残基が、セリンまたはアラニンである；
Ｘ５３に対応する残基が、アスパラギン酸である；
Ｘ５７に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６４に対応する残基が、バリンである；
Ｘ６６に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ６８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ７２に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ７６に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ８０に対応する残基が、トレオニンまたはバリンである；
Ｘ９３に対応する残基が、セリンである；
Ｘ９４に対応する残基が、システインまたはグリシンである；
Ｘ９５に対応する残基が、ロイシンまたはグルタミン酸である；
Ｘ９６に対応する残基が、システイン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシンまたはトレオニンである；
Ｘ９７に対応する残基が、ヒスチジンまたはセリンである；
Ｘ１００に対応する残基が、リシンである；
Ｘ１０８に対応する残基が、ヒスチジンである；
Ｘ１１１に対応する残基が、メチオニンである；
Ｘ１３９に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４５に対応する残基が、グルタミンまたはロイシンである；
Ｘ１４７に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１４８に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１５１に対応する残基が、アラニンである；
Ｘ１５２に対応する残基が、セリンである；
Ｘ１６３に対応する残基が、イソロイシンである；
Ｘ１６５に対応する残基が、アスパラギンである；
Ｘ１７３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ１７９に対応する残基が、フェニルアラニン、リシンまたはロイシンである；
Ｘ１９４に対応する残基が、グルタミン、セリンまたはロイシンである；
Ｘ１９６に対応する残基が、ロイシンである；
Ｘ１９７に対応する残基が、グルタミン酸である；
Ｘ１９８に対応する残基が、グルタミン酸またはグルタミンである；
Ｘ２１０に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２１１に対応する残基が、バリン、ロイシン、トレオニンまたはイソロイシンである；
Ｘ２１２に対応する残基が、セリンまたはバリンである；
Ｘ２１６に対応する残基が、アルギニンである；
Ｘ２２３に対応する残基が、バリンである；
Ｘ２２６に対応する残基が、トレオニンである；
Ｘ２３３に対応する残基が、アスパラギンまたはアスパラギン酸である；
Ｘ２３５に対応する残基が、トリプトファンである；
Ｘ２４８に対応する残基が、グリシンまたはトリプトファンである；
Ｘ２４９に対応する残基が、トリプトファンである；
のうちの１つ以上をさらに有し、ここで、該アミノ酸配列は、前記参照配列と比較して他のアミノ酸残基の位置に１つ以上の残基の相違を場合によっては有する、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項４】
請求項１に記載のポリペプチドであって、前記ケトレダクターゼは、
ｉ）配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９６、９８、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含むか；あるいは
ｉｉ）前記参照ポリペプチドよりも少なくとも１〜５０倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができ、ここで、該ケトレダクターゼは、配列番号８６、８８、または９６に対応するアミノ酸配列を場合により含むか；あるいは
ｉｉｉ）該参照ポリペプチドよりも少なくとも５０〜２５０倍速い速度で該基質を該生成物に変換することができ、ここで、該ケトレダクターゼは、配列番号１０、３２、３４、３６、５０、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、９８、１０４、１０６および１０８に対応するアミノ酸配列を場合により含む、ポリペプチド。
【請求項５】
請求項１に記載のポリペプチドであって、前記ケトレダクターゼは、
ｉ）前記参照ポリペプチドよりも少なくとも２５０〜１０００倍速い速度で前記基質を前記生成物に変換することができ、ここで、該ケトレダクターゼは、配列番号１２、１８、２２、２４、２６、２８、３０、３８、４０、５２、５４、５６、５８、６０、６２および１１０に対応するアミノ酸配列を場合により含むか；あるいは
ｉｉ）該参照ポリペプチドよりも少なくとも１０００倍速い速度で該基質を該生成物に変換することができ、ここで、該ケトレダクターゼは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を場合により含むか；あるいは
ｉｉｉ）１００ｇ／Ｌを超える基質および５ｇ／Ｌ未満の該ポリペプチドを用いて行われるとき、２４時間未満で該基質の少なくとも９５％を該生成物に変換することができ、こで、該ケトレダクターゼは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を場合により含む、ポリペプチド。
【請求項６】
前記参照ポリペプチドと比較して、前記基質の前記生成物への変換に対する競合的インヒビターとしてのアセトンに対して改善された抵抗性を有し、前記ケトレダクターゼが、配列番号６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、５０、５２、５４、５６、５８、６０、６２、６４、６６、６８、７０、７２、７４、７６、７８、８０、８２、８４、８６、８８、９８、１０４、１０６、１０８および１１０から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドであって、該ポリヌクレオチドは、配列番号５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４９、５１、５３、５５、５７、５９、６１、６３、６５、６７、６９、７１、７３、７５、７７、７９、８１、８３、８５、８７、８９、９５、９７、１０３、１０５、１０７、および１０９から選択される配列を場合により含む、ポリヌクレオチド。
【請求項８】
宿主細胞における発現の指図に適する制御配列に作動可能に連結された請求項７に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項９】
請求項８に記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼ、および構造式（Ｉ）の基質である２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステル；構造式（ＩＩ）の生成物である（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエート；構造式（ＩＩＩ）の基質である２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノール；または構造式（ＩＶ）の生成物である（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールを含む、組成物。
【請求項１１】
ｉ）前記基質が、構造式（Ｉ）の基質であり、そして前記組成物が、構造式（ＩＩ）の生成物をさらに含むか；または
ｉｉ）該基質が、構造式（ＩＩ）の基質であり、そして該組成物が、構造式（ＩＶ）の生成物をさらに含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
式（Ｉ）の基質である２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物である（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するための方法であって、式（Ｉ）の該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、該基質と請求項１〜６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項１３】
ｉ）前記生成物が、９９％より高い立体異性体過剰率で存在するか；または
ｉｉ）前記基質の少なくとも９５％が、２４時間未満で該生成物に還元され、
ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
式（ＩＩＩ）の基質である２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを生成物である（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するための方法であって、式（ＩＩＩ）の該基質を式（ＩＶ）の生成物に還元するのに適する反応条件下で、該基質と請求項１〜６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させる工程を包含する、方法。
【請求項１５】
ｉ）前記生成物が、９９％を超える立体異性体過剰率で存在するか；または
ｉｉ）前記基質の少なくとも９５％が、２４時間未満で前記生成物に還元され、
ここで、該基質の濃度は、少なくとも１００ｇ／Ｌであり、且つ、前記ポリペプチドの濃度は、５ｇ／Ｌ未満であり、そして該ポリペプチドは、配列番号６、８、１４、１６および２０に対応するアミノ酸配列を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
式（ＸＸ）：
【化２１】
2010539948.tif 000005
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：（ａ）式（Ｉ）の基質である２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物である（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の該基質と請求項１〜６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸ）の形成に適する条件下で、式（ＩＩ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含し、該アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、方法。
【請求項１７】
式（ＸＸＩ）：
【化２２】
2010539948.tif 000006
の化合物を合成するための方法であって、
ここで、Ｒ１は、アルキルスルホニルまたはアリールスルホニルであり、該方法は：
（ａ）式（ＩＩＩ）の基質である２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物である（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と請求項１〜６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程；および（ｂ）化合物（ＸＸＩ）の形成に適する条件下で、式（ＩＶ）の化合物とアルキルスルホニルハロゲン化物またはアリールスルホニルハロゲン化物とを反応させる工程を包含し、該アルキルスルホニルハロゲン化物が、塩化メチルスルホニルである、方法。
【請求項１８】
化合物（Ｖ）
【化２３】
2010539948.tif 000007
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、
該方法における工程は、式（Ｉ）の基質である２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］安息香酸メチルエステルを式（ＩＩ）の生成物である（Ｓ，Ｅ）−メチル２−（３−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−ヒドロキシプロピル）ベンゾエートに還元するか、または変換するのに適する反応条件下で、式（Ｉ）の基質と請求項１〜６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＩ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。
【請求項１９】
化合物（Ｖ）
【化２４】
2010539948.tif 000008
またはその塩、水和物もしくは溶媒和化合物を合成するための方法であって、ここで、該方法における工程は、式（ＩＩＩ）の基質である２−［２−［３−［３−［２−（７−クロロ−２−キノリニル）エテニル］フェニル］−３−オキソプロピル］フェニル］−２−プロパノールを式（ＩＶ）の生成物である（Ｓ，Ｅ）−１−（３−（２−（７−クロロキノリン−２−イル）ビニル）フェニル）−３−（２−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）フェニル）プロパン−１−オールに還元するのに適する反応条件下で、式（ＩＩＩ）の該基質と請求項１〜６のいずれか１項に記載のケトレダクターゼポリペプチドとを接触させることによって該基質を式（ＩＶ）の該生成物に還元する工程を包含する、方法。