【手続補正書】
【提出日】平成23年3月17日(2011.3.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リンホトキシン−βレセプター（ＬＴ−β−Ｒ）−Ｉｇ−融合タンパク質の集団を含む組成物であって、該組成物は、長さが１９３アミノ酸もしくは１９４アミノ酸の改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび長さが２２７アミノ酸の改変Ｉｇ部分を含み、ここで該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号２１に示される野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のＮ末端からわずか５アミノ酸だけを失っており、そして該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質は、Ｎ末端のピログルタミン酸を欠いている、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８７】
一実施形態において、上記ヒトは、ＤＭＡＲＤ不十分応答者である。
本発明はまた、以下の項目を提供する。
（項目１）
リンホトキシン−βレセプター（ＬＴ−β−Ｒ）−Ｉｇ−融合タンパク質の集団を含む組成物であって、該組成物は、長さが１９３アミノ酸もしくは１９４アミノ酸の改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび長さが２２７アミノ酸の改変Ｉｇ部分を含み、ここで該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号２１に示される野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のＮ末端からわずか５アミノ酸だけを失っており、そして該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質は、Ｎ末端のピログルタミン酸を欠いている、組成物。
（項目２）
上記改変ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質のＮ末端アミノ酸は、非極性アミノ酸である、項目１に記載の組成物。
（項目３）
上記非極性アミノ酸は、バリン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸６）もしくはアラニン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸５）のいずれかである、項目２に記載の組成物。
（項目４）
上記ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９５％のＮ末端アミノ酸は、バリン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸６）もしくはアラニン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸５）のいずれかである、項目１に記載の組成物。
（項目５）
哺乳動物細胞において、配列番号４に示されるＬＴＢＲの細胞外ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現することによって作製される、項目１、３もしくは４のいずれか１項に記載の組成物。
（項目６）
上記核酸分子は、配列番号３に示される配列を含む、項目５に記載の組成物。
（項目７）
改変Ｉｇ部分は、ＩｇＧ１アイソタイプのＦｃ領域を含む、項目５に記載の組成物。
（項目８）
上記改変Ｉｇ部分は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む、項目５に記載の組成物。
（項目９）
上記Ｉｇ部分は、グリコシル化されていない、項目５に記載の組成物。
（項目１０）
哺乳動物細胞において、配列番号５に示されるＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質をコードする核酸分子を発現することによって作製される、項目５に記載の組成物。
（項目１１）
上記核酸分子は、配列番号７に示される配列を含む、項目１０に記載の組成物。
（項目１２）
上記発現する工程は、製造スケールにおいて行われる、項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび改変Ｉｇ部分を含むリンホトキシン−βレセプター−免疫グロブリン（ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ）−融合タンパク質の集団を含む組成物であって、ここで該改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインはグリコシル化されていない、組成物。
（項目１４）
上記ＬＴＢＲのグリコシル化されていない細胞外ドメインは、配列番号１０のアミノ酸１〜１９４を含む、項目１３に記載の組成物。
（項目１５）
リンホトキシン−βレセプター−免疫グロブリン（ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ）−融合タンパク質の集団を含む組成物であって、該融合タンパク質は、長さが１９３アミノ酸もしくは１９４アミノ酸の改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび改変Ｉｇ部分を含み、ここで該集団は、野生型ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質と比較して、低下したＮ末端ピログルタミン酸形成および低下したＣ末端不均一性を有する、組成物。
（項目１６）
上記ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号４もしくは配列番号２３のアミノ酸配列を示す改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインを含む、項目１５に記載の組成物。
（項目１７）
上記改変Ｉｇ部分は、ヒンジ領域において変異を含む、項目１５に記載の組成物。
（項目１９）
長さが１９３アミノ酸もしくは１９４アミノ酸の改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび長さが２２７アミノ酸の改変Ｉｇ部分を含むリンホトキシン−βレセプター（ＬＴ−β−Ｒ）−Ｉｇ−融合タンパク質の集団、および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物であって、ここで該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号２１に示される野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のＮ末端からわずか５アミノ酸だけ失っており、そして該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質は、Ｎ末端ピログルタミン酸を欠いている、組成物。
（項目２０）
上記改変ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質のＮ末端アミノ酸は、非極性アミノ酸である、項目１９に記載の組成物。
（項目２１）
上記非極性アミノ酸は、バリン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸６）もしくはアラニン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸５）のいずれかである、項目２０に記載の組成物。
（項目２２）
上記ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９５％のＮ末端アミノ酸は、バリン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸６）もしくはアラニン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸５）のいずれかである、項目１９に記載の組成物。
（項目２３）
哺乳動物細胞において、配列番号４に示されるＬＴＢＲの細胞外ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現することによって作製される、項目１９、２１もしくは２２のいずれかに記載の組成物。
（項目２４）
項目２３に記載の薬学的組成物を、被験体に投与する工程を包含する、自己免疫障害を処置するための方法。
（項目２５）
上記自己免疫障害は、関節リウマチ、クローン病、もしくは全身エリテマトーデス（ＳＬＥ）からなる群より選択される、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
リンホトキシン−βレセプター−免疫グロブリン（ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ）−融合タンパク質の集団および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物であって、該融合タンパク質は、長さが１９３アミノ酸もしくは１９４アミノ酸の改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび改変Ｉｇ部分を含み、ここで該集団は、野生型ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質と比較して、低下したＮ末端ピログルタミン酸形成および低下したＣ末端不均一性を有する、薬学的組成物。
（項目２７）
上記ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号４もしくは配列番号２３のアミノ酸配列を示す改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインを含む、項目２６に記載の薬学的組成物。
（項目２８）
上記改変Ｉｇ部分は、ヒンジ領域における変異を含む、項目２６に記載の薬学的組成物。
（項目２９）
配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む、薬学的組成物。
（項目３０）
項目２９に記載の薬学的組成物を被験体に投与する工程を包含する、自己免疫障害を処置する方法。
（項目３１）
上記自己免疫障害は、関節リウマチ、クローン病、もしくは全身エリテマトーデス（ＳＬＥ）からなる群より選択される、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
上記自己免疫障害は関節リウマチである、項目３０に記載の方法。
（項目３３）
上記薬学的組成物は、２週間に１回、約０．６〜３ｍｇ／ｋｇの用量において上記被験体に投与される、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
上記薬学的組成物は、皮下投与される、項目３０に記載の方法。
（項目３５）
長さが１９３アミノ酸もしくは１９４アミノ酸の改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび長さが２２７アミノ酸の改変Ｉｇ部分を含む単離されたポリペプチドであって、ここで該ポリペプチドは、配列番号２１に示される野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のＮ末端からわずか５アミノ酸だけ失っており、該ポリペプチドは、Ｎ末端ピログルタミン酸を欠いている、単離されたポリペプチド。
（項目３６）
上記Ｎ末端アミノ酸は、非極性アミノ酸である、項目３５に記載の単離されたポリペプチド。
（項目３７）
上記非極性アミノ酸は、バリン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸６）もしくはアラニン（配列番号２１の野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のアミノ酸５）のいずれかである、項目３６に記載の単離されたポリペプチド。
（項目３８）
哺乳動物細胞において、配列番号４に示されるＬＴＢＲの細胞外ドメインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を発現することによって作製される、項目３５に記載の単離されたポリペプチド。
（項目３９）
項目３５〜３９のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードする、単離された核酸分子。
（項目４０）
上記核酸分子は、配列番号７に示されるヌクレオチド配列から構成される、項目３９に記載の単離された核酸分子。
（項目４１）
項目４０に記載の核酸分子を含む、ベクター。
（項目４２）
項目４１に記載のベクターを発現する、宿主細胞。
（項目４３）
上記細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、項目４２に記載の細胞。
（項目４４）
改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび改変Ｉｇ部分を含むリンホトキシン−βレセプター（ＬＴ−β−Ｒ）−Ｉｇ−融合タンパク質の集団を含む組成物を作製するためのプロセスであって、ここで該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号２１に示される野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のＮ末端からわずか５アミノ酸だけ失っており、該プロセスは、哺乳動物細胞において、配列番号８に示されるＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質をコードする核酸分子を発現する工程、該集団を、該培養上清から得る工程、および必要に応じて、該上清を精製して、それによって、改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインおよび改変Ｉｇ部分を含むリンホトキシン−βレセプター（ＬＴ−Β−Ｒ）−Ｉｇ−融合タンパク質の集団を含む組成物を得る工程を包含し、ここで該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号２１に示される野生型ＬＴ−β−Ｒ部分の成熟形態のＮ末端からわずか５アミノ酸だけ失っている、プロセス。
（項目４５）
上記核酸分子は、配列番号７に示されるヌクレオチド配列を含む、項目４４に記載のプロセス。
（項目４６）
上記核酸分子は、配列番号７に示されるヌクレオチド配列からなる、項目４４に記載のプロセス。
（項目４７）
ヒト被験体における関節リウマチを処置するための方法であって、該方法は、該被験体にある用量のＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質を投与する工程を包含し、ここで該用量は、該被験体の血清において約０．１４μｇ／ｍｌ〜約３．５μｇ／ｍｌの平均濃度を維持するために十分である、方法。
（項目４８）
ヒト被験体における関節リウマチを処置するための方法であって、該方法は、該被験体にある用量のＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質を投与する工程を包含し、ここで該用量は、該被験体の血清において約０．６μｇ／ｍｌの最小平均濃度を維持するために十分である、方法。
（項目４９）
上記ＬＴＢＲ−Ｉｇ融合タンパク質は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
上記濃度は、７〜６０日毎に１回、ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質を約０．０１〜約５ｍｇ／ｋｇの用量において投与することによって達成される、項目４８に記載の方法。
（項目５１）
ヒト被験体における関節リウマチを処置するための方法であって、該方法は、該被験体に、７〜３０日ごとに多くて２回、約０．６〜３ｍｇ／ｋｇの用量のＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質を投与する工程を包含する、方法。
（項目５２）
７〜１４日ごとに１回、約０．６〜３ｍｇ／ｋｇの用量のＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質を投与する工程を包含する、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
投与は、１４〜３０日ごとに１回である、項目５１に記載の方法。
（項目５４）
投与は、２８〜６０日ごとに１回である、項目５１に記載の方法。
（項目５５）
投与は、７〜３０日ごとに１回である、項目５１に記載の方法。
（項目５６）
ヒト被験体における自己免疫障害を処置するための方法であって、該方法は、該被験体に、長さが１９３アミノ酸もしくは１９４アミノ酸の改変ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインを含むＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質の集団を含むある用量の薬学的組成物を投与する工程を包含し、ここで該ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ−融合タンパク質のうちの少なくとも９０％は、配列番号２１に示される野生型ＬＴ−β−Ｒ細胞外ドメインの成熟形態のＮ末端からわずか５アミノ酸だけ失っており、該用量は、該被験体の血清において約０．６μｇ／ｍｌの最小平均濃度を維持するために十分である、方法。
（項目５７）
上記ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質は、改変Ｉｇ部分をさらに含む、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
上記自己免疫障害は、関節リウマチ、クローン病、もしくは全身エリテマトーデス（ＳＬＥ）からなる群より選択される、項目５６に記載の方法。
（項目５９）
上記薬学的組成物は、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む、項目５６に記載の方法。
（項目６０）
投与は１ヶ月に２回である、項目５９に記載の方法。
（項目６１）
投与は１ヶ月に１回である、項目５９に記載の方法。
（項目６２）
投与は皮下である、項目５９に記載の方法。
（項目６３）
上記用量は約１ｍｇ／ｋｇである、項目５９に記載の方法。
（項目６４）
上記用量は約３ｍｇ／ｋｇである、項目５９に記載の方法。
（項目６５）
上記用量は、約７〜２０日ごとに約１ｍｇ／ｋｇ投与される、項目５９に記載の方法。
（項目６６）
上記用量は、約１４〜３０日ごとに約３ｍｇ／ｋｇ投与される、項目５９に記載の方法。
（項目６７）
上記用量は、約１４日ごとに約１ｍｇ／ｋｇ投与される、項目５９に記載の方法。
（項目６８）
上記自己免疫障害は関節リウマチであり、上記被験体は、関節リウマチと診断された後でかつ上記ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇ融合タンパク質の投与前に、関節リウマチ用薬物で処置されている、項目５９に記載の方法。
（項目６９）
上記関節リウマチ用薬物は、ＤＭＡＲＤ、ＮＳＡＩＤ、およびコルチコステロイドからなる群より選択される、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
上記ヒトは、ＤＭＡＲＤ不十分応答者である、項目６８に記載の方法。
（項目７１）
上記関節リウマチ用薬物は、ＴＮＦインヒビターである、項目６８に記載の方法。
（項目７２）
上記関節リウマチ用薬物は、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ（登録商標））、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））、もしくはインフリキシマブ（Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標））である、項目６８に記載の方法。
（項目７３）
ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇは、上記関節リウマチ用薬物と組み合わせて投与される、項目６８に記載の方法。
（項目７４）
上記ヒトは、上記関節リウマチ用薬物に対する応答がＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇの投与前に不十分であるか否かを決定するために評価される、項目６８に記載の方法。
（項目７５）
上記ヒトは、上記関節リウマチ用薬物に対する不十分な応答を有することが決定され、次いで、該ヒトは、ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇを投与される、項目７４に記載の方法。
（項目７６）
上記ヒトは、関節リウマチの第１の発現に関して無症候性であり、そして関節リウマチの第２の発現に関して症候性である、項目６８に記載の方法。
（項目７７）
ＬＴ−β−Ｒ−Ｉｇは、上記関節リウマチ用薬物の代わりに投与される、項目６８に記載の方法。
（項目７８）
投与は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）インヒビターとの組み合わせにおいてである、項目６８に記載の方法。
（項目７９）
上記ＴＮＦインヒビターは、アダリムマブ（Ｈｕｍｉｒａ（登録商標））、エタネルセプト（Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標））、もしくはインフリキシマブ  （Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標））である、項目７８に記載の方法。
（項目８０）
上記ヒトは、抗ＴＮＦ不十分応答者である、項目６８に記載の方法。
（項目８１）
投与は、非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、コルチコステロイド、もしくは疾患改変抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤ）との組み合わせにおいてである、項目６８に記載の方法。
（項目８２）
投与は、メトトレキサートとの組み合わせにおいてである、項目６８に記載の方法。
（項目８３）
上記ヒトは、ＤＭＡＲＤ不十分応答者である、項目８１に記載の方法。