【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年6月16日(2011.6.16)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含む軽鎖相補性決定領域（Ｌ−ＣＤＲ）；ならびにＨ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含む重鎖相補性決定領域（Ｈ−ＣＤＲ）を含むヒト化ＣＣ４９抗−ＴＡＧ−７２抗体であって、
Ｌ−ＣＤＲ３、Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体由来であって（当該Ｌ−ＣＤＲ３は配列番号：３に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ１は配列番号：４に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ２は配列番号：５に示されるアミノ酸配列であり、そして当該Ｈ−ＣＤＲ３は配列番号：６に示されるアミノ酸配列である）、（ｉ）Ｌ−ＣＤＲ１がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来し（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：７に示されるアミノ酸配列である）、Ｌ−ＣＤＲ２がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体に由来するか（当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：２に示されるアミノ酸配列である）、（ｉｉ）Ｌ−ＣＤＲ１がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体に由来し（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：１に示されるアミノ酸配列である）、Ｌ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来するか（当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：８に示されるアミノ酸配列である）、あるいは（ｉｉｉ）Ｌ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来する（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：７に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：８に示されるアミノ酸配列である）、抗体。
【請求項２】
Ｌ−ＣＤＲ１がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来し、Ｌ−ＣＤＲ２がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体に由来する、請求項１記載のヒト化抗体。
【請求項３】
Ｌ−ＣＤＲ１がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体に由来し、Ｌ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来する、請求項１記載のヒト化抗体。
【請求項４】
Ｌ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来するヒト抗体配列である、請求項１記載のヒト化抗体。
【請求項５】
Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含む軽鎖相補性決定領域（Ｌ−ＣＤＲ）；ならびにＨ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含む重鎖相補性決定領域（Ｈ−ＣＤＲ）を含むヒト化ＣＣ４９抗−ＴＡＧ−７２抗体であって、
Ｌ−ＣＤＲ３、Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体由来であって（当該Ｌ−ＣＤＲ３は配列番号：３に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ１は配列番号：４に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ２は配列番号：５に示されるアミノ酸配列であり、そして当該Ｈ−ＣＤＲ３は配列番号：６に示されるアミノ酸配列である）、Ｌ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２の両方がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体に由来するか（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：１に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：２に示されるアミノ酸配列である）、またはＬ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２の両方がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来するものであって（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：７に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：８に示されるアミノ酸配列である）、
Kabat番号付けを用いてＨ−ＣＤＲ２中の位置６０、６１、６２、または６４の少なくとも１つのアミノ酸がヒトモノクローナル２１／２８’ＣＬ抗体由来のＨ−ＣＤＲ２（配列番号：１１）の対応アミノ酸で置換されている、抗体。
【請求項６】
Kabat番号付けを用いてＬ−ＣＤＲ３の位置９７のアミノ酸がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮ由来のＬ−ＣＤＲ３（配列番号：９）の対応アミノ酸で置換されている、請求項５記載のヒト化抗体。
【請求項７】
Ｌ−ＣＤＲ１がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来する、請求項５記載のヒト化抗体。
【請求項８】
Ｌ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来する、請求項５記載のヒト化抗体。
【請求項９】
Ｌ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来する、請求項５記載のヒト化抗体。
【請求項１０】
Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含む軽鎖相補性決定領域（Ｌ−ＣＤＲ）；ならびにＨ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含む重鎖相補性決定領域（Ｈ−ＣＤＲ）を含むヒト化ＣＣ４９抗−ＴＡＧ−７２抗体であって、
Ｌ−ＣＤＲ３、Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体由来であって（当該Ｌ−ＣＤＲ３は配列番号：３に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ１は配列番号：４に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ２は配列番号：５に示されるアミノ酸配列であり、そして当該Ｈ−ＣＤＲ３は配列番号：６に示されるアミノ酸配列である）、Ｌ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２の両方がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体に由来するか（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：１に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：２に示されるアミノ酸配列である）、またはＬ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２の両方がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来するものであって（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：７に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：８に示されるアミノ酸配列である）、
Kabat番号付けを用いてＬ−ＣＤＲ３の位置９７のアミノ酸がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮ由来のＬ−ＣＤＲ３（配列番号：９）の対応アミノ酸で置換されている、抗体。
【請求項１１】
Kabat番号付けを用いてＨ−ＣＤＲ２中の位置６０、６１、６２、または６４の少なくとも１つのアミノ酸がヒトモノクローナル２１／２８’ＣＬ抗体由来のＨ−ＣＤＲ２（配列番号：１１）の対応アミノ酸で置換されている、請求項１０記載のヒト化抗体。
【請求項１２】
Ｌ−ＣＤＲ１がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来する、請求項１０記載のヒト化抗体。
【請求項１３】
Ｌ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来する、請求項１０記載のヒト化抗体。
【請求項１４】
Ｌ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来するヒト抗体配列に由来するものである、請求項１０記載のヒト化抗体。
【請求項１５】
Ｌ−ＣＤＲ１、Ｌ−ＣＤＲ２およびＬ−ＣＤＲ３を含む軽鎖相補性決定領域（Ｌ−ＣＤＲ）；ならびにＨ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３を含む重鎖相補性決定領域（Ｈ−ＣＤＲ）を含むヒト化ＣＣ４９抗−ＴＡＧ−７２抗体であって、
Ｌ−ＣＤＲ３、Ｈ−ＣＤＲ１、Ｈ−ＣＤＲ２およびＨ−ＣＤＲ３がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体由来であって（当該Ｌ−ＣＤＲ３は配列番号：３に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ１は配列番号：４に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｈ−ＣＤＲ２は配列番号：５に示されるアミノ酸配列であり、そして当該Ｈ−ＣＤＲ３は配列番号：６に示されるアミノ酸配列である）、Ｌ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２の両方がネズミモノクローナルＣＣ４９抗体に由来するか（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：１に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：２に示されるアミノ酸配列である）、またはＬ−ＣＤＲ１およびＬ−ＣＤＲ２の両方がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮに由来するものであって（当該Ｌ−ＣＤＲ１は配列番号：７に示されるアミノ酸配列であり、当該Ｌ−ＣＤＲ２は配列番号：８に示されるアミノ酸配列である）、
Kabat番号付けを用いてＬ−ＣＤＲ３中の位置９４の残基がヒトモノクローナル抗体ＬＥＮ由来のＬ−ＣＤＲ３（配列番号：９）の対応アミノ酸で置換されている、抗体。
【請求項１６】
請求項１、５、１０または１５のいずれか１項記載のヒト化抗体を発現する核酸。
【請求項１７】
請求項１、５、１０または１５のいずれか１項記載のヒト化抗体を発現するベクター。
【請求項１８】
請求項１、５、１０または１５のいずれか１項記載のヒト化抗体を含有する、癌治療のための組成物。
【請求項１９】
請求項１、５、１０または１５のいずれか１項記載のヒト化抗体を含有する、癌細胞を検出するための組成物。
【請求項２０】
ＴＡＧ−７２に特異的に結合できるポリペプチドを含有し、該ポリペプチドが請求項１、５、１０または１５のいずれか１項記載のヒト化抗体の機能的フラグメントを含むものである、癌細胞を検出するための組成物。
【請求項２１】
ポリペプチドがＦｖ、Ｆａｂ、およびＦ(ａｂ’)2からなる群より選択されるフラグメントを含むものである、請求項２０記載の組成物。
【請求項２２】
請求項１、５、１０または１５のいずれか１項記載のヒト化抗体に、対象から得た細胞を接触させることを含む、癌細胞の検出方法。
【請求項２３】
ヒト化抗体が標識されている、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
標識二次抗体を用いてヒト化抗体が検出される、請求項２２記載の方法。
【請求項２５】
ＴＡＧ−７２に特異的に結合できるポリペプチドを含有し、該ポリペプチドが請求項１、５、１０または１５のいずれか１項記載のヒト化抗体の機能的フラグメントを含むものである組成物に、対象から得た細胞を接触させることを含む、癌細胞の検出方法。
【請求項２６】
ポリペプチドがＦｖ、Ｆａｂ、およびＦ(ａｂ’)2からなる群より選択されるフラグメントを含むものである、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
ヒト化ＣＣ４９抗−ＴＡＧ−７２抗体が、親のＨｕＣＣ４９抗体と比較して、ＴＡＧ−７２に対する結合親和性を保持している、請求項１〜１５のいずれか１項記載のヒト化抗体。
【請求項２８】
ヒト化ＣＣ４９抗−ＴＡＧ−７２抗体が、親のＨｕＣＣ４９抗体と比較して、低下した免疫原性を示すものである、請求項１〜１５のいずれか１項記載のヒト化抗体。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１２】
他の適当な変種は、ＣＣ４９由来のＬ−ＣＤＲ１および／またはＬ−ＣＤＲ２がヒト抗体由来の対応ＣＤＲに置換されていること以外に軽鎖の位置９７において対応ヒト残基を含んでいる。もう１つの具体例において、変種は、ＣＣ４９由来のＬ−ＣＤＲ１および／またはＬ−ＣＤＲ２がヒト抗体由来の対応ＣＤＲに置換されている以外に軽鎖の位置９７において置換されており、重鎖の位置６０、６１、６２および６４における置換と組み合わされている。もう１つの具体例において、変種は、重鎖の位置６０、６１、６２および６４における置換と組み合わされた軽鎖の位置９７における置換を含む。
配列表
添付の配列表に記載される核酸およびアミノ酸配列は、ヌクレオチド塩基に関する一般的な文字略号およびアミノ酸に関する三文字表記を用いて表される。添付の配列表において、
配列番号：１は、ネズミ抗体ＣＣ４９およびヒト化抗体ＨｕＣＣ４９の軽鎖に由来するＣＤＲ１のアミノ酸配列を表す。
配列番号：２は、ネズミ抗体ＣＣ４９およびヒト化抗体ＨｕＣＣ４９の軽鎖に由来するＣＤＲ２のアミノ酸配列を表す。
配列番号：３は、ネズミ抗体ＣＣ４９およびヒト化抗体ＨｕＣＣ４９の軽鎖に由来するＣＤＲ３のアミノ酸配列を表す。
配列番号：４は、ネズミ抗体ＣＣ４９およびヒト化抗体ＨｕＣＣ４９の重鎖に由来するＣＤＲ１のアミノ酸配列を表す。
配列番号：５は、ネズミ抗体ＣＣ４９およびヒト化抗体ＨｕＣＣ４９の重鎖に由来するＣＤＲ２のアミノ酸配列を表す。
配列番号：６は、ネズミ抗体ＣＣ４９およびヒト化抗体ＨｕＣＣ４９の重鎖に由来するＣＤＲ３のアミノ酸配列を表す。
配列番号：７は、ヒト抗体ＬＥＮの軽鎖に由来するＣＤＲ１のアミノ酸配列を表す。
配列番号：８は、ヒト抗体ＬＥＮの軽鎖に由来するＣＤＲ２のアミノ酸配列を表す。
配列番号：９は、ヒト抗体ＬＥＮの軽鎖に由来するＣＤＲ３のアミノ酸配列を表す。
配列番号：１０は、ヒト抗体２１／２８’ＣＬの重鎖に由来するＣＤＲ１のアミノ酸配列を表す。
配列番号：１１は、ヒト抗体２１／２８’ＣＬの重鎖に由来するＣＤＲ２のアミノ酸配列を表す。
配列番号：１２は、ヒト抗体２１／２８’ＣＬの重鎖に由来するＣＤＲ３のアミノ酸配列を表す。
配列番号：１３は、ヒト化ネズミ抗体ＨｕＣＣ４９のＶＬ領域のアミノ酸配列を表す。
配列番号：１４は、ヒト化ネズミ抗体ＨｕＣＣ４９のＶＨ領域のアミノ酸配列を表す。
配列番号：３３〜３６は、ヒト抗体ＬＥＮのＶＬ領域のフレームワークの連続部分のアミノ酸配列を表す。
配列番号：３７〜４０は、ヒト抗体２１／２８’ＣＬのＶＨ領域のフレームワークの連続部分のアミノ酸配列を表す。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４３】
ＶＨ変種を得るためのオリゴマーの製造
Kashmiri et al., (1995) Hybridoma 14: 461-473により記載された重複伸長ＰＣＲ法を用いて３種の変種ＶＨ遺伝子の合成を行った。１２４〜１３７塩基対の長さの４種の重複オリゴヌクレオチド（それらの鎖を互い違いにすると、それらは一緒になってＶＨ遺伝子の配列全体を含む）を用いて変種ＶＨ遺伝子を得た（図１２Ｂ）。オリゴマーはMidland Certified Reagent Co., Midland, TXから得た。鋳型ＤＮＡのかわりに、ＰＣＲ混合物は２ピコモルの４種のオリゴヌクレオチドを含有していた。９４℃で１分の変性、５５℃で２分のプライマーアニーリング、次いで７０℃で２分の伸長工程からなるサイクルを３サイクル行い、その後、変性（９４℃、１分）、プライマー伸長（５５℃２分）、次いで伸長（７２℃、１分）からなるサイクルを１７サイクル行うことによりＰＣＲを行った。１００μＭの各ｄＮＴＰ、５ユニットのＴａｑ ＤＮＡポリメラーゼ（Boehringer Mannheim）および２０ｐｍｏｌの各末端プライマーを含有する最終体積１００μｌのＰＣＲバッファー中ですべてのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行った。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図面の簡単な説明
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図面の簡単な説明】
【図１】  図１は基本的な免疫グロブリン構造を示す。
【図２】  図２は、ネズミＭＡｂ ＣＣ４９およびヒト化ＭＡｂ  ＨｕＣＣ４９のＣＤＲ配列と、ヒトＭＡｂ ＬＥＮおよび２１／２８’ＣＬの対応ＣＤＲ配列を比較したものである。下線を付した番号は特異性決定残基（ＳＤＲ）を示す。ＨｕＣＣ４９およびＣＣ４９の軽鎖内のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は、それぞれ配列番号：１〜３に対応する。ＨｕＣＣ４９およびＣＣ４９の重鎖内のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は、それぞれ配列番号：４〜６に対応する。ヒト抗体ＬＥＮの軽鎖内のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は、それぞれ配列番号：７〜９に対応する。ヒト抗体２１／２８’ＣＬの重鎖内のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３は、それぞれ配列番号：１０〜１２に対応する。
【図３】  図３は、ＨｕＣＣ４９のヒト化重（Ｂ）鎖の真核発現構築物を図式的に示す。細線は原核ベクターｐＢＲ３２２、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ、またはｐＣＲＩＩ由来の配列を示す。太線はヒトγ不変領域を示す。縦線、横線、または交差した線の入ったボックスはネオマイシン、ミコフェノリックアシッド、またはヒグロマイシン耐性遺伝子を示す。細い矢印はそれらの転写方向を示す。空のボックスはレトロウイルスＬＴＲであり、太い矢印はＨＣＭＶプロモーターおよびその転写方向を示す。重要な制限酵素部位のみを示す。Ａ：ＡｐａＩ；Ｂ：ＢａｍＨＩ；Ｃ：ＣｌａＩ；Ｈｄ：ＨｉｎｄＩＩＩ；Ｈｐ：ＨｐａＩ；Ｎ：ＮｈｅＩ；Ｒ：ＥｃｏＲＩ；およびＳ：ＳａｃＩＩ。
【図４】  図４は、ＨｕＣＣ４９のヒト化軽鎖の真核発現構築物を図式的に示す。図３と同様に、細線は原核ベクターｐＢＲ３２２、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ、またはｐＣＲＩＩ由来の配列を示す。太線はヒトκ不変領域を示す。縦線、横線、または交差した線の入ったボックスはネオマイシン、ミコフェノリックアシッド、またはヒグロマイシン耐性遺伝子を示す。細い矢印はそれらの転写方向を示す。空のボックスはレトロウイルスＬＴＲであり、太い矢印はＨＣＭＶプロモーターおよびその転写方向を示す。重要な制限酵素部位のみを示す。Ａ：ＡｐａＩ；Ｂ：ＢａｍＨＩ；Ｃ：ＣｌａＩ；Ｈｄ：ＨｉｎｄＩＩＩ；Ｈｐ：ＨｐａＩ；Ｎ：ＮｈｅＩ；Ｒ：ＥｃｏＲＩ；およびＳ：ＳａｃＩＩ。
【図５】  図５は、バキュロウイルスベクターｐＡｃＵＷ５１由来の変種重（Ｈ）鎖および軽（Ｌ）鎖遺伝子の二重発現構築物を図式的に示す。Ｐ１０およびｐｏｌｈはｐ１０プロモーターおよびポリヘドリンプロモーターを示し、矢印はそれらの転写方向を示す。ＯｒｉおよびＦ１はＳＶ４０およびＦ１複製開始点である。ＡｍｐＲはアンピシリン耐性遺伝子を示す。
【図６】  図６は、精製されたＭＡｂ ＨｕＣＣ４９およびその変種のＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を示す。すべての試料を還元条件下において示す。レーン１：分子量マーカー（Gibco Brl）；レーン２〜８：変種Ｌ−１、Ｌ−２、Ｌ−３Ｌ−１，２、Ｈ−１、Ｈ−２およびＨ−３；レーン９：ＨｕＣＣ４９。
【図７】  図７は、競合ＲＩＡにおけるＨｕＣＣ４９の親形態および変種形態の分析を示す。軽鎖（Ａ）および重鎖（Ｂ）ＣＤＲ変種の抗原結合を、１２５Ｉ−標識 ＨｕＣＣ４９を用いて評価した。パネルＡにおいて、競合物質は：ＨｕＣＣ４９、Ｌ−１、Ｌ−２、Ｌ−３、Ｌ−１，２である。パネルＢにおいて、競合物質は：Ｈ−１、Ｈ−２およびＨ−３である。
【図８】  図８は、抗−イディオタイプＭＡｂの結合に対する軽鎖ＣＤＲの影響を示す。１２５Ｉ−ＨｕＣＣ４９およびＣＣ４９抗−イディオタイプＭＡｂ ＡＩ４９−３（パネルＡ）、ＡＩ４９−１（パネルＢ）およびＡＩ４９−８（パネルＣ）を用いる競合ＲＩＡにおいてＨｕＣＣ４９ ＣＤＲ変種を特徴づけた。競合物質は：ＨｕＣＣ４９、Ｌ−１、Ｌ−２、Ｌ−３、Ｌ−１，２である。
【図９】  図９は、抗−イディオタイプＭＡｂの結合に対する重鎖ＣＤＲの影響を示す。１２５Ｉ−ＣＣ４９およびＣＣ４９抗−イディオタイプＭＡｂ ＡＩ４９−３（パネルＡ）、ＡＩ４９−１（パネルＢ）およびＡＩ４９−８（パネルＣ）を用いる競合ＲＩＡにおいてＨｕＣＣ４９ ＣＤＲ変種を特徴づけた。競合物質は：ＨｕＣＣ４９、Ｈ−１、Ｈ−２、Ｈ−３である。
【図１０】  図１０は、ＨＰＬＣ法による競合ＲＩＡを用いるＨｕＣＣ４９変種に対するヒト抗−イディオタイプ抗体の分析を示す。精製された親ＨｕＣＣ４９およびＣＤＲ変種を１２５Ｉ−ＨｕＣＣ４９との競合物質として用いて、ＣＣ４９に対する患者の抗−イディオタイプ応答を特徴づけた。変種が患者の血清と１２５Ｉ−ＨｕＣＣ４９との複合体形成を阻害できないことは、変種から置換されたＣＤＲが免疫原性であったことを示す。パネルＡにおいて、競合物質は：ＨｕＣＣ４９、Ｌ−１、Ｌ−２、Ｌ−３、Ｌ−１，２である。パネルＢにおいて、競合物質は：Ｈ−１、Ｈ−２およびＨ−３である。
【図１１】  図１１は、ヒトＭＡｂ ＬＥＮのＶＬフレームワーク（配列番号：３３〜３６）およびＣＣ４９のヒト化ＶＬ（ＨｕＣＣ４９）（配列番号：１３）のアミノ酸配列をパネルＡに示す。パネルＢはヒトＭＡｂ ２１／２８’ＣＬのＶＨフレームワーク（配列番号：３７〜４０）およびＣＣ４９のヒト化ＶＨ（ＨｕＣＣ４９）（配列番号：１４）のアミノ酸配列を示す。ＣＣ４９の結合部位構造の維持に重要であると思われるフレームワーク残基をアステリスクでマークしてある。
【図１２】  図１２は、ＨｕＣＣ４９可変部軽鎖（ＶＬ）および可変部重鎖（ＶＨ）領域のヌクレオチド配列をそれぞれパネルＡおよびＢに示す。可変領域ドメインをコードしない隣接オリゴマーまたはそれらのリーダーペプチドの配列を小文字で示す。ＶＬ領域（Ａ）は位置７４から４１２までのヌクレオチドによりコードされており、位置７０から４１５までのヌクレオチド（Ｂ）はＶＨ領域を含む。
【図１３】  図１３はＨｕＣＣ４９の変種を用いる競合アッセイの結果のグラフである。
【図１４】  図１４は、ＨｕＣＣ４９の変種に対する親の反応性に関するＨＰＬＣ分析の結果を示す。競合物質は反応あたり５μｇであった。値は、サイズ排除クロマトグラフィーにより分離された複合体、高分子種のパーセント値である。複合体形成は、親抗体により認識されるエピトープの除去を示す。複合体形成の阻害は、免疫原性エピトープがＨｕＣＣ４９変種中にまだ存在していることを示す。
【図１５】  図１５は、ＨｕＣＣ４９およびその種々の変種と親との反応性の比較を示すグラフである。
【図１６】  図１６は変種９７Ｌ１，２／６０−６２，６４Ｈの免疫反応性を示すグラフである。
【図１７】  図１７はＨｕＣＣ４９およびその変種の血漿における維持に関する薬剤動態を示すグラフである。
【図１８】  図１８は、ＬＳ−１７４Ｔヒト結腸癌腫異種移植片を有する胸腺切除マウスに静脈内投与された放射性標識ＨｕＣＣ４９および変種の体内分布を示す表である。ＬＳ−１７４Ｔヒト結腸癌腫異種移植片（皮下移植）を有する胸腺除去マウスに１．４μＣｉの１３１Ｉ−ＨｕＣＣ４９および４．４μＣｉの１２５Ｉ−変種を同時注射した。示された時点でマウスを殺し、器官を集め、湿重量を測定し、γシンチレーションカウンターにおいて放射活性を検出した。各組織に関して１グラムあたりの注射用量に対する重量パーセントを計算した。平均値の標準偏差も計算したところ、０．０６％ＩＤ／ｇまたはそれ未満であった。
【図１９】  図１９は１７７Ｌｕ−ＣＣ４９を静脈内注射した後の患者のＨＡＭＡに関するＨＰＬＣ分析である。
【図２０】  図２０はＭＡｂ ＣＣ４９の可変領域に対する患者の体液性応答に関するＨＰＬＣ分析である。（実線）患者ＤＳ（〇）、ＬＷ（□）、ＪＪ（△）、ＤＧ（●）、ＬＪ（四角）、ＴＤ（黒三角）；（点線）ＪＧ（〇）、ＲＷ（□）、ＪＭ（△）、ＥＡ（●）、ＣＰ（四角）、ＬＱ（黒三角）に関して複合体形成パーセント値を時間に対してプロットした。
【図２１】  図２１はネズミＣＣ４９に対する抗−イディオタイプ抗体応答の検出である。
【図２２】  患者ＬＱのＣＤＲ特異性を示すＨＰＬＣ分析である。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】配列表
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【配列表】
2002528127000001.app
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図１２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図１２】
2002528127.tif 000001