【手続補正書】
【提出日】平成23年4月28日(2011.4.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト又は哺乳類の間葉幹細胞又は骨芽細胞をイン  ビトロ培養して、培養培地中に均一に分布した対応する細胞凝集物を形成する方法であって、該間葉幹細胞又は骨芽細胞を、アルキル化、ヒドロキシ−アルキル化、及びアルキル化／ヒドロキシ−アルキル化セルロースから選ばれる水溶性セルロース誘導体又はそれらの混合物、及び必須元素を含む塩、モノ−及びジ−サッカリド、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、及びホルモンから選ばれる細胞成長促進若しくは支持剤を含む培養培地と、１日から１若しくは２週間、特に1〜３日間、接触させることを含み、ここで該細胞凝集物は線維芽細胞形態を有する細胞を、該水溶性セルロース誘導体の不在下で得られる対応する含量に比べて減少した含量、特に２０％又はそれ以上、更に好ましくは５０％又はそれ以上、最も好ましくは７０％又はそれ以上減少した含量で有する方法。
【請求項２】
上記セルロース誘導体が、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチル−メチルセルロース、ヒドロキシエチル−エチルセルロース、特にヒドロキシプロピル−メチルセルロース（HPMC）である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ヒト又は哺乳類の間葉幹細胞又は骨芽細胞をイン  ビトロ又はイン  ビボ培養して、水溶性セルロース誘導体の不在下で得られる対応する含量に比べて線維芽細胞形態を有する細胞を減少した含量、特に、２０％又はそれ以上、更に好ましくは５０％又はそれ以上、最も好ましくは７０％又はそれ以上減少した含量、で有する対応する細胞凝集物を形成するための、水溶性セルロース誘導体を含む細胞培養培地の使用。
【請求項４】
上記培養培地が、必須元素を含む塩、モノ−及びジ−サッカリド、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、及びホルモンから選ばれる細胞成長促進若しくは支持剤を含み、そして場合によっては薬品、特に抗生物質を含む、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
上記セルロース誘導体が、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチル−メチルセルロース、ヒドロキシエチル−エチルセルロース、特にヒドロキシプロピル−メチルセルロース（HPMC）から選ばれる、請求項３又は４に記載の使用。
【請求項６】
歯科用骨組織再生における請求項３又は４に記載の使用。
【請求項７】
上記培養培地が歯周組織再生のためにタンパク性エナメルマトリックス誘導体、特にアメロゲニン（ａｍｅｌｏｇｅｎｉｎ）、を含む請求項６に記載の使用。
【請求項８】
整形外科骨組織再生における請求項３〜５のいずれか1項に記載の使用。
【請求項９】
上記培養培地がカルシウム源及びリン酸源を含む、請求項６又は８のいずれか1項に記載の使用。
【請求項１０】
上記カルシウム源が、カルシウム塩、特に一リン酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、ピロリン酸カルシウム、クエン酸カルシウムから成る群から選ばれるカルシウム塩を含む、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
リンの源が、リン酸塩、特に一リン酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、ピロリン酸カルシウムから選ばれるリン酸塩である、請求項９又は１０に記載の使用。
【請求項１２】
上記培地が、カルシウムヒドロキシアパタイト、実質的に水不溶性のリン酸カルシウム、及び骨粉から成る群から選ばれる実質的に水不溶性の粒状材料を含む、請求項９〜１１のいずれか1項に記載の使用。
【請求項１３】
上記粒状材料の粒子の９５重量％又はそれ以上が２μｍ〜５０μｍの直径である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
上記粒状材料の粒子の９５重量％又はそれ以上が２μｍ〜１５μｍの直径である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
（ａ）ヒト又は哺乳類の間葉幹細胞又は骨芽細胞をイン  ビトロ又はイン  ビボ培養するための、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチル−メチルセルロース、ヒドロキシエチル−エチルセルロース、ヒドロキシプロピル−メチルセルロースから選ばれる水溶性セルロース誘導体、（ｂ）必須元素の塩、モノ−及びジ−サッカリド、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、及びホルモンから成る群から選ばれる細胞成長促進若しくは支持剤の１種又はそれ以上、（ｃ）任意に薬品、特に抗生物質、（ｄ）カルシウム源及びリン酸源、を含む培養培地。
【請求項１６】
上記カルシウム源が、カルシウム塩、特に一リン酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、ピロリン酸カルシウム、クエン酸カルシウムから成る群から選ばれるカルシウム塩を含む、請求項１５に記載の培養培地。
【請求項１７】
リンの源が、リン酸塩、特に一リン酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、ピロリン酸カルシウムから選ばれるリン酸塩を含む、請求項１５又は１６に記載の培養培地。
【請求項１８】
上記培養培地が、カルシウムヒドロキシアパタイト、実質的に水不溶性のリン酸カルシウム、及び骨粉から成る群から選ばれる実質的に水不溶性の粒状材料を含む、請求項１５〜１７のいずれか1項に記載の培養培地。
【請求項１９】
上記粒状材料の粒子の９５重量％又はそれ以上の直径が２μｍ〜１５μｍである、請求項１８に記載の培養培地。
【請求項２０】
上記培養培地が歯周組織再生のためにタンパク性エナメルマトリックス誘導体、特にアメロゲニン（ａｍｅｌｏｇｅｎｉｎ）、を含む請求項１５〜１９のいずれか1項に記載の培養培地。
【請求項２１】
請求項１５〜２０のいずれか1項に記載の培養培地又はそれから製造された生成物の、崩壊した生きた骨を接着するための使用。
【請求項２２】
請求項１５〜１９のいずれか1項に記載の培養培地又はそれから製造された生成物の、生きた骨に生体適合性材料を固定するための使用。
【請求項２３】
上記生体適合性材料がチタン、ハフニウム及びセラミックから成る群から選ばれる、請求項２２に記載の使用。
【請求項２４】
上記生体適合性材料がポリマー材料、例えばポリウレタン、ポリ（ウレタン尿素）、ポリアセテート、ポリグリコレート、ポリ（ラクテート、グリコレート）のようなポリマー材料である、請求項２２に記載の使用。
【請求項２５】
骨粗しょう症治療のための薬学的組成物であって、アルキル化、ヒドロキシ−アルキル化、又はアルキル化／ヒドロキシ−アルキル化セルロース又はそれらの混合物、特にＨＰＭＣ、から選ばれる水溶性セルロース誘導体の存在下で１日から１週間若しくは２週間の期間培養したヒト又は哺乳類の間葉幹細胞凝集物又は骨芽細胞凝集物を含み、該凝集物は線維芽細胞形態を有する細胞を減少した含量で有し、該組成物は、場合によっては、生理的食塩水又は他の浸透圧制御剤、必須元素を含む塩、モノ−及びジ−サッカリド、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、及びホルモンから成る群から選ばれる該ゲルに溶解した細胞成長促進若しくは支持剤から成る群から選ばれる１種又は数種の薬剤を含む、上記薬学的組成物。
【請求項２６】
上記線維芽細胞形態を有する細胞の減少した含量が、上記水溶性セルロース誘導体の不在下で得られる対応する含量に比べて、２０％又はそれ以上、更に好ましくは５０％又はそれ以上、最も好ましくは７０％又はそれ以上減少した含量である、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
骨に固定するための医学器具であって、水溶性セルロース誘導体のゲル又は乾燥ゲル、又は請求項１５〜２０のいずれか1項記載の培養培地、又は請求項２１〜１６のいずれか1項記載の薬学的組成物で覆った金属製固定表面領域を含む上記医学器具。
【請求項２８】
上記金属が、チタン、タンタル及びそれらの合金から選ばれる、請求項２７に記載の医学器具。
【請求項２９】
上記固定表面が、プレート、糸（ｔｈｒｅａｄ）、ねじ、又は他の骨固定要素の表面である、請求項２８に記載の医学器具。
【請求項３０】
上記セルロース誘導体が、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチル−メチルセルロース、ヒドロキシエチル−エチルセルロース、特にヒドロキシプロピル−メチルセルロースから選ばれる、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３１】
水溶性セルロース誘導体の不在下で得られる対応する含量に比べて線維芽細胞形態を有する細胞を減少した含量、特に２０％又はそれ以上、更に好ましくは５０％又はそれ以上、最も好ましくは７０％又はそれ以上減少した含量、で有する間葉幹細胞凝集物及び骨芽細胞凝集物から選ばれる細胞凝集物であって、ヒト骨芽細胞を、水溶性セルロース誘導体、並びに生理的食塩水又はその他の浸透圧制御剤、及び必須元素を含む塩、モノ−及びジ−サッカリド、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、及びホルモンから選ばれるゲルに溶解した細胞成長促進若しくは支持剤から成る群から選ばれる１種若しくはそれ以上を含む水性培地中で、１日から１週間若しくは２週間イン  ビトロ培養することにより得られる上記細胞凝集物。
【請求項３２】
上記セルロース誘導体が、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチル−メチルセルロース、ヒドロキシエチル−エチルセルロース、特にヒドロキシプロピル−メチルセルロースから選ばれる、請求項３１に記載の細胞凝集物。
【請求項３３】
請求項３１又は３２の細胞凝集物の、骨再生への使用。
【請求項３４】
ヒト間葉幹細胞（ＭＳＣ）又は骨芽細胞の患者への伝達における水溶性セルロース誘導体の使用。
【請求項３５】
骨修復のような、必要とする患者へ伝達するための、薬学的に許容される水性担体及び水溶性セルロース誘導体を含む、ヒト一次間葉幹細胞（ＭＳＣ）凝集物又は骨芽細胞凝集物の注入可能な組成物。
【請求項３６】
上記セルロース誘導体が、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチル−メチルセルロース、ヒドロキシエチル−エチルセルロース、特にヒドロキシプロピル−メチルセルロースから選ばれる、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
上記水溶性セルロース誘導体の含量が０．２重量％〜５重量％の量、特に０．２重量％〜２重量％である、請求項３５又は３６に記載の組成物。
【請求項３８】
上記間葉幹細胞が自系である、請求項３５〜３７のいずれか1項に記載の組成物。
【請求項３９】
骨欠損を有する患者の骨の再生方法であって、該患者からヒト間葉幹細胞（ＭＳＣ）を入手し、該細胞を、水溶性セルロース誘導体を含む培養培地中で拡大し、拡大した細胞を採取し、該拡大した細胞を該患者の該骨欠損に注入することを含む、上記の方法。
【請求項４０】
上記間葉幹細胞を、上記水溶性セルロース誘導体を含む水性注入媒体に懸濁して患者に注入する、請求項３９に記載の方法。