【手続補正書】
【提出日】平成23年11月7日(2011.11.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト幹細胞集団の状態を分析するための方法であって、末端非還元性の末端オリゴ糖配列である、
１）α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃであって、ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、前記配列が好ましくはＮｅｕ５Ｇｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃである、α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃと、
２）ＳＡがシアリン酸、好ましくはＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、ｎが０又は１である、ＳＡα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃと、
３）Ｎｅｕ５Ａｃα６ＧａｌＮＡｃと、
に結合する結合試薬と細胞を接触させるステップを含み、好ましくは前記細胞に対する外因性物質及び／細胞培養条件の効果の分析のための方法であり、前記結合試薬がモノクローナル抗体であることを特徴とする方法。
【請求項２】
ヒトモノクローナル抗体であって、末端非還元性の末端オリゴ糖配列である、
１）α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃであって、ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、前記配列が好ましくはＮｅｕ５Ｇｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃである、α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃと、
２）ＳＡがシアリン酸、好ましくはＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃである、ＳＡα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃと、
３）Ｎｅｕ５Ａｃα６ＧａｌＮＡｃと、
に結合することを特徴とするヒトモノクローナル抗体。
【請求項３】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体がα３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列であるＮｅｕ５Ｇｃα３α３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃ及びＮｅｕ５Ａｃα３α３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃの双方に結合し、前記抗体が末端非還元性の末端エピトープであるシアリルＴｎ配列Ｎｅｕ５Ａｃα６ＧａｌＮＡｃαに結合し、前記抗体がＮｅｕ５Ａｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃとＮｅｕ５Ｇｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃとを含む、α６でシアリル化された２型のＮ−アセチルラクトサミンの双方に結合し、前記抗体がＮｅｕ５Ｇｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃより高親和性を有する末端非還元性の末端エピトープＮｅｕ５Ａｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃに結合し、及び／又は、Ｎｅｕ５Ａｃα３α３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃよりＮｅｕ５Ｇｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃにより有効に結合し、及び／又は、Ｎｅｕ５Ｇｃα６ＧａｌＮＡｃαに結合しないことを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項４】
細胞結合型の抗体、好ましくはヒト抗体の分析方法であって、当該方法が、請求項２に規定されたようなシアリル化されたオリゴ糖及び単糖の配列に対する前記抗体の特異性を測定するステップを含み、前記方法が請求項２に記載の特異性を有する抗体の選択ステップを更に含むことを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体がα３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃに結合し、ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、より有効にはＮｅｕ５Ｇｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃであることが好ましく、及び／又は、前記抗体がＮｅｕ５Ｇｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃとＮｅｕ５Ａｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃとの双方に結合することを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項６】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体が式ＳＡα６Ｇａｌ（ＮＡｃ）ｎに従うα６でシアリル化された末端非還元性の末端エピトープに結合し、ＳＡがシアリン酸、好ましくはＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであることを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項７】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体が末端非還元性の末端エピトープＮｅｕ５Ａｃα６ＧａｌＮＡｃ、好ましくはシアリルＴｎ配列Ｎｅｕ５Ａｃα６ＧａｌＮＡｃαに結合することを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項８】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体がＮｅｕ５Ａｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃと、Ｎｅｕ５Ｇｃα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃとを含む、双方のα６でシアリル化された２型のＮ−アセチルラクトサミンに結合することを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項９】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体が末端異種抗原性の非還元性末端の単一末端であるＮｅｕＧｃα−単糖残基に結合するが、非還元性末端の単一末端であるＮｅｕＡｃα−単糖残基に結合しないことを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項１０】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体がＳＡα３Ｇａｌβ４Ｇｌｃ（ＮＡｃ）ｎに従うオリゴ糖配列に結合せず、ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、ｎが０又は１であることを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項１１】
請求項２に記載のモノクローナル抗体において、当該抗体が（ａ）免疫グロブリン分子全体と、（ｂ）ｓｃＦｖと、（ｃ）キメラ抗体と、（ｄ）Ｆａｂフラグメントと、（ｅ）Ｆａｂ’フラグメントと、（ｆ）Ｆ（ａｂ’）２と、（ｇ）Ｆｖと、（ｈ）ジスルフィド結合されたＦｖとからなる群から選択されることを特徴とするモノクローナル抗体。
【請求項１２】
単離されたＤＮＡ分子であって、請求項２に記載のモノクローナル抗体をコード化することを特徴とする、単離されたＤＮＡ分子。
【請求項１３】
請求項２に記載のモノクローナル抗体を調製する方法であって、
請求項２に記載のモノクローナル抗体をコード化するＤＮＡ分子を含む宿主細胞を培養するステップであって、前記宿主細胞が少なくとも１の抗体鎖を発現できるステップと、
前記抗体を回復するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
ファージ又は微生物細胞であって、請求項１１に記載の抗体フラグメントを表面タンパク質を有する融合タンパク質として呈示することを特徴とするファージ又は微生物細胞。
【請求項１５】
請求項２に記載の抗体を選択する方法であって、請求項１４に記載のファージ又は細胞を含む抗体フラグメントのディスプレイライブラリから前記抗体を選択するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１５に記載の方法において、非還元性末端の単一末端であるＮｅｕＡｃα複合体に結合しない第１の抗体が選択され、次いで、非還元性末端の単一末端であるＮｅｕＧｃα複合体に結合する抗体が残りの抗体から選択されるように、前記抗体が抗体フラグメントのディスプレイライブラリから選択されることを特徴とする方法。
【請求項１７】
請求項１５又は１６に記載のプロセスによって得られうる抗体。
【請求項１８】
サンプル中の酸性の糖類及び／又はＮｅｕＧｃを検出する方法であって、
前記サンプルを得るステップと、
前記サンプルを請求項２、３又は５ないし１０のいずれか１項に記載のモノクローナル抗体と接触させることによって前記糖類を検出するステップと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１９】
試験キットであって、運搬及び保存用に好適な容器中に請求項２又は３に記載の抗体を含むことを特徴とする試験キット。
【請求項２０】
免疫診断で用いるための請求項２又は３に記載のモノクローナル抗体。
【請求項２１】
免疫療法で用いるための請求項２又は３に記載のモノクローナル抗体。
【請求項２２】
ヒトモノクローナル抗体であって、末端非還元性の末端オリゴ糖配列である、
１）α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃであって、ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、前記配列が好ましくはＮｅｕ５Ｇｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃである、α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃと、
２）ＳＡがシアリン酸、好ましくはＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、ｎが０又は１である、ＳＡα６Ｇａｌ（ＮＡｃ）ｎと、
に結合し、
３）ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、ｎが０又は１である、ＳＡα３Ｇａｌβ４Ｇｌｃ（ＮＡｃ）ｎに従うオリゴ糖配列、
に結合しないことを特徴とするヒトモノクローナル抗体。
【請求項２３】
ヒト幹細胞集団の状態を分析するための方法であって、請求項１又は２２に規定されたような結合試薬と細胞を接触させるステップを含み、前記細胞に対する外因性物質及び／細胞培養条件の効果の分析のための方法であり、前記結合試薬がモノクローナル抗体であることを特徴とする方法。
【請求項２４】
請求項２３に記載の方法において、グリカン構造の無傷細胞集団上での表面発現が分析されることを特徴とする方法。
【請求項２５】
請求項２４に記載の方法において、抗体によるラベリングが非ヒト外因性物質の存在下で細胞培養条件と関連し、及び／又は、前記ラベリングの欠如がヒト等価物質の存在下で細胞培養条件と関連することを特徴とする方法。
【請求項２６】
請求項２４又は２５に記載の方法において、幹細胞はヒト血液由来の間葉系幹細胞であり、より好ましくは臍帯血又は骨髄由来の間葉系幹細胞であることを特徴とする方法。
【請求項２７】
天然型のヒトモノクローナル抗体であって、末端非還元性の末端オリゴ糖配列である、
１）α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃであって、ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、前記配列が好ましくはＮｅｕ５Ｇｃα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃである、α３でシアリル化された１型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα３Ｇａｌβ３ＧｌｃＮＡｃと、
及び／又は、
２）ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃである、α６でシアリル化された２型のＮ−アセチルラクトサミン配列ＳＡα６Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃと、
及び／又は、
３）シアリル化された非還元性末端の末端Ｎｅｕ５Ａｃα６ＧａｌＮＡｃ構造、好ましくはシアリルＴｎ配列Ｎｅｕ５Ａｃα６ＧａｌＮＡｃαと、
及び／又は、末端非還元性の末端単糖残基である、
４）異種抗原性非還元性末端の単一末端であるＮｅｕＧｃα−単糖残基と、
に結合するが、非還元性末端の単一末端であるＮｅｕＡｃα−単糖残基に結合せず、好ましくは、
５）ＳＡがＮｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕ５Ａｃであり、ｎが０又は１である、ＳＡα３Ｇａｌβ４Ｇｌｃ（ＮＡｃ）ｎに従うオリゴ糖配列、
に結合せず、前記天然型のヒト抗体がヒトにおいて非天然な構造を含まず、ヒト化された構造ではないことを特徴とする抗体。