【手続補正書】
【提出日】平成22年9月8日(2010.9.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
別の態様では、本開示は、対象における骨髄から末梢血へのＣＤ３４＋幹細胞の動員を刺激する方法であって、対象に本開示の抗体またはその抗原結合部分を骨髄から末梢血へのＣＤ３４＋幹細胞の動員が刺激されるように投与するステップを含む、方法に関する。本方法は、例えば自家幹細胞移植での使用においては末梢血からＣＤ３４＋幹細胞を回収するステップをさらに含みうる。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
細胞表面上に発現される天然ヒトＣＸＣＲ４に結合する単離ヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
（項目２）
前記抗体がＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を阻害する、項目１に記載の抗体。
（項目３）
前記抗体がＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を阻害しない、項目１に記載の抗体。
（項目４）
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのＳＤＦ−１誘発性のカルシウム流束を阻害する、項目１に記載の抗体。
（項目５）
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞のＳＤＦ−１誘発性の遊走を阻害する、項目１に記載の抗体。
（項目６）
ヒト臍静脈内皮細胞による毛細管形成を阻害する、項目１に記載の抗体。
（項目７）
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのアポトーシスを誘発する、項目１に記載の抗体。
（項目８）
インビボでＣＸＣＲ４＋腫瘍細胞の成長を阻害するかまたはアポトーシスを誘発する、項目１に記載の抗体。
（項目９）
前記抗体がヒトＣＸＣＲ４に１×１０−７Ｍ以下のＫＤで結合する、項目１に記載の抗体。
（項目１０）
前記抗体がヒトＣＸＣＲ４に５×１０−８Ｍ以下のＫＤで結合する、項目９に記載の抗体。
（項目１１）
（ａ）細胞表面上に発現される天然ヒトＣＸＣＲ４に結合し、
（ｂ）ＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を阻害し、
（ｃ）ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのＳＤＦ−１誘発性のカルシウム流束を阻害し、
（ｄ）ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞のＳＤＦ−１誘発性の遊走を阻害し、および
（ｅ）ヒト臍静脈内皮細胞による毛細管形成を阻害する、
単離ヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
（項目１２）
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのアポトーシスを誘発する、項目１１に記載の抗体。
（項目１３）
インビボでＣＸＣＲ４＋腫瘍細胞の成長を阻害するかまたはアポトーシスを誘発する、項目１１に記載の抗体。
（項目１４）
ＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を５０ｎＭ以下のＥＣ５０で阻害する、項目１１に記載の抗体。
（項目１５）
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのＳＤＦ−１誘発性のカルシウム流束を３ｎＭ以下のＥＣ５０で阻害する、項目１１に記載の抗体。
（項目１６）
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞のＳＤＦ−１誘発性の遊走を５０ｎＭ以下のＥＣ５０で阻害する、項目１１に記載の抗体。
（項目１７）
ＣＸＣＲ４への結合に対し、
（ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または
（ｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または
（ｃ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または
（ｄ）配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む参照抗体と交差競合する、単離ヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
（項目１８）
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、ヒトＶＨ３−４８遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される重鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
（項目１９）
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、ヒトＶＫＬ１５遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される軽鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
（項目２０）
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、ヒトＶＨ３−４８遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される重鎖可変領域およびヒトＶＫＬ１５遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される軽鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
（項目２１）
（ａ）配列番号１を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号５を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号９を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１３を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号１７を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２１を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、項目１に記載の抗体。
（項目２２）
（ａ）配列番号２を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号６を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号１０を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１４を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号１８を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２２を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、項目１に記載の抗体。
（項目２３）
（ａ）配列番号３を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号７を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号１１を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１５を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号１９を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２３を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、項目１に記載の抗体。
（項目２４）
（ａ）配列番号４を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号８を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号１２を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１６を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号２０を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２４を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、項目１に記載の抗体。
（項目２５）
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、
（ａ）配列番号２５〜２８および４１〜４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号２９〜３２および４５〜４８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
（項目２６）
（ａ）配列番号２５または４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号２９または４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、項目２５に記載の抗体。
（項目２７）
（ａ）配列番号２６または４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号３０または４６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、項目２５に記載の抗体。
（項目２８）
（ａ）配列番号２７または４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号３１または４７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、項目２５に記載の抗体。
（項目２９）
（ａ）配列番号２８または４４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号３２または４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、項目２５に記載の抗体。
（項目３０）
項目１に記載の抗体またはその抗原結合部分および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
（項目３１）
治療物質に連結された、項目１に記載の抗体またはその抗原結合部分を含む免疫複合体。
（項目３２）
項目３１に記載の免疫複合体および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
（項目３３）
前記治療物質が細胞毒素である、項目３１に記載の免疫複合体。
（項目３４）
項目３３に記載の免疫複合体および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
（項目３５）
前記治療物質が放射性同位体である、項目３１に記載の免疫複合体。
（項目３６）
項目３５に記載の免疫複合体および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
（項目３７）
項目１に記載の抗体またはその抗原結合部分をコードする単離核酸分子。
（項目３８）
項目３７に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
（項目３９）
項目３８に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目４０）
抗ＣＸＣＲ４抗体を調製するための方法であって、項目３９に記載の宿主細胞内で前記抗体を発現するステップと、前記宿主細胞から前記抗体を単離するステップと、を含む方法。
（項目４１）
細胞内でＣＸＣＲ４活性を調節する方法であって、前記細胞を項目１に記載の抗体またはその抗原結合部分と前記細胞内でのＣＸＣＲ４活性が調節されるように接触させるステップを含む方法。
（項目４２）
ＣＸＣＲ４活性がインビトロで前記細胞を前記抗体またはその抗原結合部分とともに培養することにより調節される、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
対象におけるＣＸＣＲ４活性がインビボで前記対象に前記抗体またはその抗原結合部分を投与することにより調節される、項目４１に記載の方法。
（項目４４）
前記細胞がＣＸＣＲ４を発現する腫瘍細胞であり、かつ前記方法が前記腫瘍細胞の成長の阻害または前記腫瘍細胞の転移の阻害をもたらす、項目４１に記載の方法。
（項目４５）
前記細胞がＣＸＣＲ４を発現するＴ細胞であり、かつ前記方法がＨＩＶの前記細胞への侵入の阻害をもたらす、項目４１に記載の方法。
（項目４６）
前記細胞が炎症性疾患におけるリンパ球であり、かつ前記方法が炎症の阻害をもたらす、項目４１に記載の方法。
（項目４７）
前記細胞が血管新生に関与し、かつ前記方法が血管新生の調節をもたらす、項目４１に記載の方法。
（項目４８）
対象における骨髄から末梢血へのＣＤ３４＋幹細胞の動員を刺激する方法であって、前記対象に項目１に記載の抗体またはその抗原結合部分を骨髄から末梢血へのＣＤ３４＋幹細胞の動員が刺激されるように投与するステップを含む方法。
（項目４９）
前記ＣＤ３４＋幹細胞を前記末梢血から採取するステップをさらに含む、項目４８に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞表面上に発現される天然ヒトＣＸＣＲ４に結合する単離ヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２】
前記抗体または抗原結合部分がＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を阻害する、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項３】
前記抗体または抗原結合部分がＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を阻害しない、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項４】
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのＳＤＦ−１誘発性のカルシウム流束を阻害する、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項５】
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞のＳＤＦ−１誘発性の遊走を阻害する、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項６】
ヒト臍静脈内皮細胞による毛細管形成を阻害する、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項７】
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのアポトーシスを誘発する、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項８】
インビボでＣＸＣＲ４＋腫瘍細胞の成長を阻害するかまたはアポトーシスを誘発する、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項９】
前記抗体または抗原結合部分がヒトＣＸＣＲ４に１×１０−７Ｍ以下のＫＤで結合する、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項１０】
前記抗体または抗原結合部分がヒトＣＸＣＲ４に５×１０−８Ｍ以下のＫＤで結合する、請求項９に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項１１】
（ａ）細胞表面上に発現される天然ヒトＣＸＣＲ４に結合し、
（ｂ）ＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を阻害し、
（ｃ）ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのＳＤＦ−１誘発性のカルシウム流束を阻害し、
（ｄ）ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞のＳＤＦ−１誘発性の遊走を阻害し、および
（ｅ）ヒト臍静脈内皮細胞による毛細管形成を阻害する、
単離ヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１２】
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのアポトーシスを誘発する、請求項１１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項１３】
インビボでＣＸＣＲ４＋腫瘍細胞の成長を阻害するかまたはアポトーシスを誘発する、請求項１１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項１４】
ＳＤＦ−１のヒトＣＸＣＲ４への結合を５０ｎＭ以下のＥＣ５０で阻害する、請求項１１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項１５】
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞内でのＳＤＦ−１誘発性のカルシウム流束を３ｎＭ以下のＥＣ５０で阻害する、請求項１１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項１６】
ヒトＣＸＣＲ４を発現する細胞のＳＤＦ−１誘発性の遊走を５０ｎＭ以下のＥＣ５０で阻害する、請求項１１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項１７】
ＣＸＣＲ４への結合に対し、
（ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または
（ｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または
（ｃ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、または
（ｄ）配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む参照抗体と交差競合する、単離ヒトモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１８】
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、ヒトＶＨ３−４８遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される重鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１９】
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、ヒトＶＫＬ１５遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される軽鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２０】
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、ヒトＶＨ３−４８遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される重鎖可変領域およびヒトＶＫＬ１５遺伝子の産物であるかまたはそれから誘導される軽鎖可変領域を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２１】
（ａ）配列番号１を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号５を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号９を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１３を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号１７を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２１を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項２２】
（ａ）配列番号２を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号６を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号１０を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１４を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号１８を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２２を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項２３】
（ａ）配列番号３を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号７を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号１１を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１５を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号１９を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２３を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項２４】
（ａ）配列番号４を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｂ）配列番号８を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、
（ｃ）配列番号１２を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号１６を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、
（ｅ）配列番号２０を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、および
（ｆ）配列番号２４を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、請求項１に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項２５】
ヒトＣＸＣＲ４に特異的に結合する、
（ａ）配列番号２５〜２８および４１〜４４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号２９〜３２および４５〜４８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、単離モノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２６】
（ａ）配列番号２５または４１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号２９または４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項２５に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項２７】
（ａ）配列番号２６または４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号３０または４６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項２５に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項２８】
（ａ）配列番号２７または４３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号３１または４７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項２５に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項２９】
（ａ）配列番号２８または４４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
（ｂ）配列番号３２または４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む、請求項２５に記載の抗体または抗原結合部分。
【請求項３０】
請求項１に記載の抗体またはその抗原結合部分および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
【請求項３１】
治療物質に連結された、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合部分を含む免疫複合体。
【請求項３２】
請求項３１に記載の免疫複合体および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
【請求項３３】
前記治療物質が細胞毒素である、請求項３１に記載の免疫複合体。
【請求項３４】
請求項３３に記載の免疫複合体および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
【請求項３５】
前記治療物質が放射性同位体である、請求項３１に記載の免疫複合体。
【請求項３６】
請求項３５に記載の免疫複合体および医薬的に許容できる担体を含む組成物。
【請求項３７】
請求項１に記載の抗体またはその抗原結合部分をコードする単離核酸分子。
【請求項３８】
請求項３７に記載の核酸分子を含む発現ベクター。
【請求項３９】
請求項３８に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項４０】
抗ＣＸＣＲ４抗体を調製するための方法であって、請求項３９に記載の宿主細胞内で前記抗体を発現するステップと、前記宿主細胞から前記抗体または抗原結合部分を単離するステップと、を含む方法。
【請求項４１】
細胞内でＣＸＣＲ４活性を調節するための組成物であって、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合部分を含む組成物。
【請求項４２】
ＣＸＣＲ４活性がインビトロで前記細胞を前記組成物とともに培養することにより調節されるように細胞培養物に投与されることを特徴とする、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
対象に投与されることを特徴とする、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４４】
前記細胞がＣＸＣＲ４を発現する腫瘍細胞であり、かつ前記調節が前記腫瘍細胞の成長の阻害をもたらす、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４５】
前記細胞がＣＸＣＲ４を発現するＴ細胞であり、かつ前記調節がＨＩＶの前記細胞への侵入の阻害をもたらす、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４６】
前記細胞が炎症性疾患に罹患する対象より得られるリンパ球である、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４７】
前記細胞が血管新生に関与する、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４８】
対象における骨髄から末梢血へのＣＤ３４＋幹細胞の動員を刺激するための医薬の調製のための、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合部分の使用。
【請求項４９】
請求項１に記載の抗体またはその抗原結合部分を含む、対象における骨髄から末梢血へのＣＤ３４＋幹細胞の動員を刺激するための組成物。