【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年9月29日(2011.9.29)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記のステップを含む、ＰＣＶ２のオープンリーディングフレーム２によって発現される組換えタンパク質を回収する方法：
Ａ）  ＰＣＶ２由来の該組換えオープンリーディングフレーム２をトランスファーベクターにクローニングする；
Ｂ）  該トランスファーベクターの該組換えオープンリーディングフレーム２を含む部分をウイルスにトランスフェクトする；
Ｃ）  細胞を培地中で該ウイルスに感染させる；
Ｄ）  該ウイルスに該オープンリーディングフレーム２に由来するタンパク質の発現を引き起こす；
Ｅ）  細胞を上清から分離する；及び
Ｆ）  該上清中に発現される該オープンリーディングフレーム２タンパク質を、該ウイルスで細胞を感染してから、少なくとも５日後以降に、該上清中で回収する。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、該方法が、ＰＣＶ２の株に由来する該オープンリーディングフレーム２を該トランスファーベクターにクローニングする前に、該オープンリーディングフレーム２を増幅するステップをさらに含む方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の方法であって、該組換えオープンリーディングフレーム２が、５’コザック配列、３’ＥｃｏＲＩ認識部位、及びそれらの組合せ、からなる群から選ばれる配列をさらに含む方法。
【請求項４】
前記５’コザック配列が配列番号１を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記３’ＥｃｏＲＩ認識部位が配列番号２を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記ＰＣＶ２オープンリーディングフレームが配列番号４を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記組換えタンパク質が配列番号６を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記培地が無血清昆虫細胞培地を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれかに記載の方法であって、次のステップをさらに含む方法：
ｉ）      ステップＡの前に、該増幅されたオープンリーディングフレーム２を第１のベクターにクローニングする；
ｉｉ）    該オープンリーディングフレーム２を該第１のベクターから切り出す；
ｉｉｉ）  該切り出されたオープンリーディングフレーム２を、ステップＡで使用する。
【請求項１０】
前記細胞がＳＦ＋細胞を含む、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記ウイルスがバキュロウイルスを含む、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記トランスフェクトされる部分が配列番号４を含む、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記発現された組換えオープンリーディングフレーム２タンパク質が、該周囲の成長媒体中に細胞によって分泌され、そして該オープンリーディングフレーム２タンパク質は、細胞の内部からよりむしろ、該上清中で回収される請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
ＰＣＶ２に対する免疫応答を引き起こすための組成物を調製する方法であって、該方法が次のステップを含む方法：
ｉ）      ＰＣＶ２のオープンリーディングフレーム２に由来する組換えＤＮＡを含むコンストラクトを、ウイルスにトランスフェクトする；
ｉｉ）    該トランスフェクトされたウイルスで、培地中の細胞を感染する；
ｉｉｉ）  該ウイルスに、該オープンリーディングフレーム２に由来する組換えタンパク質を発現させる；
ｉｖ）    該発現されたオープンリーディングフレーム２タンパク質を、該ウイルスで該細胞を感染してから少なくとも５日後から上清中で回収する；及び
ｖ）      該回収されたタンパク質を、適切なアジュバント又は薬学的に許容できる担体又は賦形剤と組み合わせる。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、該方法が、トランスファーベクターから該コンストラクトを得るステップをさらに含む方法。
【請求項１６】
請求項１４または１５に記載の方法であって、該方法が、ＰＣＶ２の株に由来する該オープンリーディングフレーム２を該トランスファーベクターにクローニングする前に、該オープンリーディングフレーム２を増幅するステップをさらに含む方法。
【請求項１７】
請求項１４〜１６のいずれかに記載の方法であって、該組換えオープンリーディングフレーム２が、５’コザック配列、３’ＥｃｏＲＩ認識部位、及びそれらの組合せからなる群から選ばれる配列を含む方法。
【請求項１８】
前記５’コザック配列が配列番号１を含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記３’ＥｃｏＲＩ認識部位が配列番号２を含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＰＣＶ２オープンリーディングフレーム２が配列番号４を含む、請求項１４〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記組換えタンパク質が配列番号６を含む、請求項１４〜２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
前記培地が無血清昆虫細胞培地を含む、請求項１４〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
請求項１６〜２２のいずれかに記載の方法であって、次のステップをさらに含む方法；
ｉ）      該増幅されたオープンリーディングフレーム２を第１のベクターにクローニングする；
ｉｉ）    該オープンリーディングフレーム２を該第１のベクターから切り出す；及び
ｉｉｉ）  該切り出されたオープンリーディングフレーム２を該運搬ベクターにクローニングするために利用する。
【請求項２４】
前記細胞がＳＦ＋細胞を含む、請求項１４〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記ウイルスがバキュロウイルスを含む、請求項１４〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記トランスフェクトされたコンストラクトが配列番号４を含む、請求項１４〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
請求項１４〜２６のいずれかに記載の方法であって、該回収ステップが、該培地を該細胞と細胞片から分ける分離ステップをさらに含む方法。
【請求項２８】
前記分離ステップが、該細胞、細胞片、及び培地を、０．４５μｍから１．０μｍの範囲のサイズのポアをもつフィルターを通してろ過するステップを含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
請求項１４−２８のいずれかに記載の方法であって、該方法が、該組換えタンパク質を適切なアジュバントと混合する前に、該ウイルスを不活化するステップをさらに含む方法。
【請求項３０】
前記発現された組換えオープンリーディングフレーム２タンパク質が、該周囲の成長培地中に細胞によって分泌され、そして該オープンリーディングフレーム２タンパク質は、細胞の内部からよりむしろ、該上清中で回収される請求項１４〜２８のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
ＰＣＶ２に由来するオープンリーディングフレーム２によって発現されるタンパク質を回収する方法であって、次のステップを含む方法：
ｉ）      培地中の細胞を、該オープンリーディングフレーム２を含む組換えウイルスベクターで感染する；
ｉｉ）    該ベクターに該タンパク質を少なくとも５日間発現させる；及び
ｉｉｉ）  該発現された上清中のタンパク質を回収する。
【請求項３２】
前記回収が、該ウイルスベクターで細胞を感染してから少なくとも５日後から行われる、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記発現された組換えオープンリーディングフレーム２タンパク質が、該周囲の成長培地中に細胞によって分泌され、そして該オープンリーディングフレーム２タンパク質は、細胞の内部からよりむしろ、該上清中で回収される請求項３１または３２に記載の方法。
【請求項３４】
下記のステップを含む、ＰＣＶ２のオープンリーディングフレーム２によって発現する組換えタンパク質を回収する方法：
Ａ）  該ＰＣＶ２由来組換えオープンリーディングフレーム２を運搬ベクターにクローニングする；
Ｂ）  該組換えオープンリーディングフレーム２を含む該運搬ベクターの部分をウイルスにトランスフェクトする；
Ｃ）  培地中の細胞を該ウイルスで感染する；
Ｄ）  該ウイルスに該オープンリーディングフレーム２からのタンパク質を少なくとも５日間発現させる；
Ｅ）  細胞を該上清から分離する；及び
Ｆ）  該発現されたオープンリーディングフレーム２タンパク質を該上清中で回収する。
【請求項３５】
前記ステップＤ）で、発現された組換えオープンリーディングフレーム２  タンパク質が、細胞により、周囲の成長培地中に分泌される請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
ＰＣＶ２に対する免疫応答を引き起こすための組成物を調製する方法であって、次のステップを含む方法：
ｉ）      ＰＣＶ２のオープンリーディングフレーム２由来の組換えＤＮＡを含むコンストラクトをウイルスにトランスフェクトする；
ｉｉ）    培地中にある細胞を該トランスフェクトされたウイルスで感染する
ｉｉｉ）  該ウイルスに該オープンリーディングフレーム２由来の組換えタンパク質を少なくとも５日間発現させる；
ｉｖ）    該発現された上清中のオープンリーディングフレーム２タンパク質を回収する；及び
ｖ）      該回収されたタンパク質を適切なアジュバント又は他の薬学的に許容できる担体又は賦形剤と混合する。
【請求項３７】
前記ステップｉｉｉ）で、発現された組換えオープンリーディングフレーム２  タンパク質が、細胞により、周囲の成長培地中に分泌される、及び前記ステップｉｖ）で、該発現されたオープンリーディングフレーム２タンパク質は細胞培養液の上清中で回収される請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
ＰＣＶ２に由来するオープンリーディングフレーム２により発現された蛋白質を回収する方法で、次のステップを含む方法：
ｉ）      成長培地中の細胞を、該オープンリーディングフレーム２を含む組換えウイルスベクターで感染する；
ｉｉ）    該ベクターに、少なくとも５日間発現させる該蛋白質を発現させるようにし、ここで該組換えオープンリーディングフレーム２蛋白質は、周囲の成長培地中に細胞によって分泌される、及び
ｉｉｉ）  該細胞培養液の上清中に発現された該蛋白質を回収する。
【請求項３９】
請求項１、１４、３２、３４、３６及び３８のいずれかに記載の方法によって得られる組成物。
【請求項４０】
請求項３９に記載の組成物の医薬品としての使用。
【請求項４１】
請求項３９に記載の組成物の、ＰＣＶ２感染を防ぐための医薬品を調製するための使用、またはＰＣＶ２感染に伴う臨床症状の重篤性を軽減するための医薬品を調製するための使用。
【請求項４２】
次のステップを含む、ＰＣＶ２感染を診断するためのキットを製造する方法：
ｉ）      請求項１〜３３、または３４〜３８のいずれかに記載されるように組換えタンパク質を製造する；及び
ｉｉ）    該組換えタンパク質を適切な容器にパッケージングする。
【請求項４３】
請求項４２に記載の方法であって、組換えタンパク質をパッケージングする入れ物に、取扱い説明書を同梱するステップをさらに含む方法。
【請求項４４】
請求項３９に記載の組成物の少なくとも１用量を有する少なくとも１つの容器を含むキットであって、前記組成物は、免疫を生じるものであり、かつ２μｇ以上のＰＣＶ２オープンリーディングフレーム２タンパク質を含む。
【請求項４５】
ｉ）請求項３４に記載の組成物の少なくとも１用量を有する容器、及び
ii）ＰＲＲＳ抗原を含む免疫原性組成物を有する容器、を備えるキット。
【請求項４６】
前記ＰＲＲＳ抗原が、ＩｎｇｅｌＶａｃ  ＰＲＲＳ  ＭＬＶである請求項４５に記載のキット。
【請求項４７】
ＰＣＶ２感染に関係する臨床症状の重篤さを軽減するための免疫原性組成物であって、該組成物は、ＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質を含み、かつ、１回投与されるものである。
【請求項４８】
前記ＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質が次のいずれかである、請求項４７に記載の免疫原性組成物：
ｉ）      配列番号５、配列番号６、配列番号９、配列番号１０又は配列番号１１の配列を含むポリペプチド；または、配列相同性において配列番号５から最大６〜１０％
変化しているいずれかの蛋白質、
ｉｉ）    配列番号３又は配列番号４の配列を含むＤＮＡによってコードされるポリペプチド。
【請求項４９】
前記ＯＲＦ２タンパク質が、配列番号５のポリペプチドである請求項４７または４８に記載の免疫原性組成物。
【請求項５０】
前記組成物が不活化ウイルスベクター及び細胞培養上清をさらに含む、請求項４７〜４９のいずれかに記載の免疫原性組成物。
【請求項５１】
前記不活化ウイルスベクターがＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質をコードする組換えバキュロウイルスである、請求項５０に記載の免疫原性組成物。
【請求項５２】
前記組成物がＢＥＩを含む請求項５０または５１に記載の免疫原性組成物。
【請求項５３】
前記組成物がチオ硫酸ナトリウムを含む請求項５２に記載の免疫原性組成物。
【請求項５４】
前記組成物が、担体、アジュバント、培地、ウイルス不活化剤、希釈剤、浸透圧調節剤、免疫改変剤、抗生物質、及びこれらの組合せから選ばれる追加成分を含む請求項４８〜５３のいずれかに記載の免疫原性組成物。
【請求項５５】
前記組成物が、アジュバント、好ましくはカーボポールを含む、請求項５４に記載の免疫原性組成物。
【請求項５６】
請求項５５に記載の組成物であって、該組成物が薬学的に許容できる塩、好ましくは食塩を含む免疫原性組成物。
【請求項５７】
前記組成物が少なくとも０．２ｍｃｇ／ｍｌのＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質を含む、請求項４７〜５６のいずれかに記載の免疫原性組成物。
【請求項５８】
前記組成物が少なくとも２μｇのＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質を含む、請求項４５〜５６のいずれかに記載の免疫原性組成物。
【請求項５９】
請求項４７〜５７のいずれかに記載の免疫原性組成物の少なくとも１用量を含む容器であって、１用量が少なくとも２μｇのＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質を含む容器。
【請求項６０】
請求項４７〜５７のいずれかに記載の免疫原性組成物の１０から２５０用量を含む容器であって、１用量が少なくとも２μｇのＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質を含む容器。
【請求項６１】
請求項５９または６０に記載の容器であって、該容器が抗微生物活性薬剤をさらに含む容器。
【請求項６２】
請求項５９〜６１のいずれかに記載の容器及び、ＰＣＶ２感染に関係する臨床症状の重篤さを軽減するために、少なくとも１用量の免疫原性組成物をブタに筋肉内投与するための情報を含む取扱い説明書を含むキット。
【請求項６３】
前記取扱い説明書が、少なくとも１用量の免疫原性組成物の２回目又は３回目以上の投与に関する、２回目の投与又は３回目以降のどの投与も、前回の投与から少なくとも１４日以降であるという情報を含む、請求項６２に記載のキット。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４２】
ＰＣＶ２  ＯＲＦ２  ＤＮＡ及びタンパク質は、組成物の調製のためにここで使われるように、及び、また、ここで規定されるプロセスの中で使われるように、ＰＣＶ２単離物の中に高度に保存されたドメインであり、そして、それにより、ここで使われるように、いかなるＰＣＶ２  ＯＲＦ２もＰＣＶ２  ＯＲＦ２  ＤＮＡ及び／又はポリペプチドのソースとして有効である。好ましいＰＣＶ２  ＯＲＦ２タンパク質は、配列番号１１のそれである。好ましいＰＣＶ２  ＯＲＦ２ポリペプチドはここに配列番号５として与えられるが、この配列は配列相同性にして最大で６〜１０％変化でき、そして、免疫原性組成物中で有用性を与える抗原性を変わらず保持することは、当業者によって理解される。免疫原性組成物の抗原性は、例えば、実施例４によって提供されるようなチャレンジ実験によって評価されうる。