【手続補正書】
【提出日】平成22年10月7日(2010.10.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的生体分子を含有するとみられる試料を提供し、
シグナル伝達発色団と共役し、標的生体分子と相互作用できるセンサを提供し、
化１からなる群から選択される共役ポリマーであって、センサと静電的に相互作用し、励起時に、センサシグナル伝達発色団にエネルギを移動できるポリマーを提供し、
標的生体分子が存在する場合に、この標的生体分子にセンサが結合可能な条件下で、溶液中にて試料をセンサおよび多発色団に接触させ、
多発色団を励起可能な光源を試料に適用し、
シグナル伝達発色団から光が放出されたか否かを検出すること、
を含むアッセイ方法。
【請求項２】
Ｒ基がスルホネートである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
センサが生体分子である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
生体分子が抗体である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
センサが、複数のシグナル伝達発色団と共役する複数のセンサを含み、複数の発色団のうちの少なくとも２つが、多発色団からのエネルギ移動時に波長の異なる光を放出する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
センサ生体分子、バイオコンジュゲートおよび標的生体分子からなる群から選択される少なくとも１つの生体分子に結合される多発色団であって、シグナル伝達発色団にさらに結合され、構造化２（式中、ＣＰ１、ＣＰ２、ＣＰ３およびＣＰ４は、互いに同一または異なる、置換されていてもよい共役ポリマーセグメントまたはオリゴマー構造である）を含む多発色団を備える、
多発色団複合体。
【請求項７】
共役ポリマーがカチオン性共役ポリマーである、請求項６に記載の多発色団。
【請求項８】
共役ポリマーがアニオン性共役ポリマーである、請求項６に記載の多発色団。
【請求項９】
共役ポリマーが電荷中性共役ポリマーである、請求項６に記載の多発色団。
【請求項１０】
ＣＰ１、ＣＰ２、ＣＰ３およびＣＰ４が、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、フルオレン、チオフェン、フラン、ピリジンおよびオキサジアゾールからなる群から選択される芳香族繰り返し単位であり、各々置換されていてもよく、ＣＰ３およびＣＰ４が、リンカーによって連結された、１つまたは複数の独特なバイオコンジュゲーション部位を含み得る、請求項６に記載の多発色団。
【請求項１１】
マレイミド、チオール、スクシミジルエステル（ＮＨＳエステル）、アミン、アジド化学、カルボキシ／ＥＤＣ（１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩、スルホ−ＳＭＣＣ（スルホスクシンイミジル４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシレート）、アミン／ＢＭＰＨ（Ｎ−［β−マレイミドプロピオン酸］ヒドラジド・ＴＦＡ）およびスルホ−ＳＢＥＤスルホスクシンイミジル［２−６−（ビオチンアミド）−２−（ｐ−アジドベンズアミド）−ヘキサノアミド］−エチル−１，３’−ジチオプロピオネートからなる群から選択されるバイオコンジュゲーション部位をさらに含む、請求項６に記載の多発色団。
【請求項１２】
多発色団が、構造化３を含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項６に記載の多発色団。
【請求項１３】
多発色団が、構造化４を含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項６に記載の多発色団。
【請求項１４】
１および２が、構造化５を有するａ〜ｇの連結基からなる群から選択され、３が、構造化６を有する基ｈである、請求項１２または１３に記載の多発色団。
【請求項１５】
構造化７をさらに含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項１２または１３に記載の多発色団。
【請求項１６】
構造化８をさらに含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項１２または１３に記載の多発色団。
【請求項１７】
構造化９をさらに含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩を含む可溶化基である、請求項１２または１３に記載の多発色団。
【請求項１８】
多発色団と、
多発色団と共有結合的に連結されたセンサ生体分子と、
多発色団と共有結合的に連結されたシグナル伝達発色団と、を含み、シグナル伝達発色団が、多発色団の励起時に多発色団からのエネルギを受け取ることができ、センサ生体分子が、標的生体分子と相互作用できる、
標的生体分子を同定するための多発色団複合体。
【請求項１９】
シグナル伝達発色団とセンサ生体分子の両方が、複数のリンカーを介して、多発色団に共有結合的に連結される、請求項１８に記載の多発色団複合体。
【請求項２０】
シグナル伝達発色団とセンサ生体分子の両方が、多発色団、シグナル伝達発色団およびセンサ生体分子を共有結合的に結合する三官能性リンカーを介して、多発色団に共有結合的に連結される、請求項１８に記載の多発色団複合体。
【請求項２１】
リンカーが、マレイミド／チオール、スクシミジルエステル（ＮＨＳエステル）／アミン、アジド化学、カルボキシ／ＥＤＣ（１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩）／アミン、アミン／スルホ−ＳＭＣＣ（スルホスクシンイミジル４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシレート）／チオールおよびアミン／ＢＭＰＨ（Ｎ−［β−マレイミドプロピオン酸］ヒドラジド・ＴＦＡ）／チオールからなる群から選択される連結化学を含む、請求項１８に記載の多発色団複合体。
【請求項２２】
多発色団が共役ポリマーである、請求項１８に記載の多発色団複合体。
【請求項２３】
共役ポリマーがポリカチオン性共役ポリマーである、請求項１８に記載の多発色団複合体。
【請求項２４】
標的生体分子を含有するとみられる試料を提供し、
多発色団と、共有結合的に連結されるシグナル伝達発色団と、共有結合的に連結されるセンサ生体分子と、を含み、シグナル伝達発色団が、多発色団の励起時に多発色団からのエネルギを受け取ることができ、センサ生体分子が、標的生体分子と相互作用できる、多発色団複合体を提供し、
標的生体分子が存在する場合に、この標的生体分子にセンサ生体分子が結合可能な条件下で、溶液中にて試料を多発色団複合体に接触させ、
多発色団を励起可能な光源を試料に適用し、
シグナル伝達発色団から光が放出されたか否かを検出する、
アッセイ方法。
【請求項２５】
多発色団が共役ポリマーである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
共役ポリマーがポリカチオン性共役ポリマーである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
標的生体分子を含有するとみられる試料を提供し、
シグナル伝達発色団と共役し、標的生体分子と相互作用できる第１のバイオコンジュゲートを提供し、
構造化１０（式中、ＣＰ１、ＣＰ２、ＣＰ３およびＣＰ４は、互いに同一または異なる、置換されていてもよい共役ポリマーセグメントまたはオリゴマー構造であり、第２のバイオコンジュゲートが、第１のバイオコンジュゲートと結合可能であり、そのような結合時に、多発色団の励起がシグナル伝達発色団にエネルギを移動できる）を含む多発色団と共役する第２のバイオコンジュゲートを提供し、
標的生体分子が存在する場合に、この標的生体分子に第１のバイオコンジュゲートが結合可能な条件下で、溶液中にて試料を第１のバイオコンジュゲートに接触させ、
溶液を第２のバイオコンジュゲートに接触させ、
多発色団を励起可能な光源を試料に適用し、
シグナル伝達発色団から光が放出されたか否かを検出すること、
を含むアッセイ方法。
【請求項２８】
共役ポリマーがカチオン性共役ポリマーである、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項２９】
共役ポリマーがアニオン性共役ポリマーである、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項３０】
共役ポリマーが電荷中性共役ポリマーである、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項３１】
ＣＰ１、ＣＰ２、ＣＰ３およびＣＰ４が、ベンゼン、ナフタレン、アントラセン、フルオレン、チオフェン、フラン、ピリジンおよびオキサジアゾールからなる群から選択される芳香族繰り返し単位であり、各々置換されていてもよく、ＣＰ３およびＣＰ４が、リンカーによって連結された、１つまたは複数の独特なバイオコンジュゲーション部位を含み得る、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項３２】
マレイミド、チオール、スクシミジルエステル（ＮＨＳエステル）、アミン、アジド化学、カルボキシ／ＥＤＣ（１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩、スルホ−ＳＭＣＣ（スルホスクシンイミジル４−［Ｎ−マレイミドメチル］シクロヘキサン−１−カルボキシレート）、アミン／ＢＭＰＨ（Ｎ−［β−マレイミドプロピオン酸］ヒドラジド・ＴＦＡ）およびスルホ−ＳＢＥＤスルホスクシンイミジル［２−６−（ビオチンアミド）−２−（ｐ−アジドベンズアミド）−ヘキサノアミド］−エチル−１，３’−ジチオプロピオネートからなる群から選択されるバイオコンジュゲーション部位をさらに含む、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項３３】
多発色団が、構造化１１を含み、
式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項３４】
多発色団が、構造化１２を含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項３５】
１および２が、構造化１３を有するａ〜ｇの連結基からなる群から選択され、３が、構造化１４を有する基ｈである、請求項３３または３４に記載の多発色団。
【請求項３６】
構造化１５をさらに含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項３３または３４に記載の多発色団。
【請求項３７】
構造化１６をさらに含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項３３または３４に記載の多発色団。
【請求項３８】
構造化１７をさらに含み、式中、Ｒ１は、エチレングリコールオリゴマー、エチレングリコールポリマー、ω−アンモニウムアルコキシ塩およびω−スルホネートアルコキシ塩からなる群から選択される可溶化基である、請求項３３または３４に記載の多発色団。
【請求項３９】
共役ポリマーがポリカチオン性共役ポリマーである、請求項２７に記載の方法。
【請求項４０】
共役ポリマーがアニオン性共役ポリマーである、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項４１】
共役ポリマーが電荷中性共役ポリマーである、請求項２７に記載の多発色団。
【請求項４２】
第１および第２のバイオコンジュゲートのうちの少なくとも１つが抗体である、請求項２７に記載の方法。
【請求項４３】
第１および第２のバイオコンジュゲートが抗体である、請求項２７に記載の方法。
【請求項４４】
標的生体分子を含有するとみられる試料を提供し、
共有結合的に連結された第１のバイオコンジュゲートを含む多発色団を提供し、
標的分子と相互作用できるセンサ生体分子と、シグナル伝達発色団と、第１のバイオコンジュゲートに結合でき、そのような結合時に、多発色団の励起がシグナル伝達発色団にエネルギを移動できる、共有結合的に連結された第２のバイオコンジュゲートと、を有するセンサ生体分子複合体を提供し、
標的生体分子が存在する場合に、この標的生体分子にセンサ生体分子が結合可能な条件下で、溶液中にて試料をセンサ生体分子複合体に接触させ、
溶液を多発色団に接触させ、
多発色団を励起可能な光源を試料に適用し、
シグナル伝達発色団から光が放出されたか否かを検出すること、
を含むアッセイ方法。
【請求項４５】
多発色団が共役ポリマーである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
共役ポリマーがポリカチオン性共役ポリマーである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
第１および第２のバイオコンジュゲートが、タンパク質、抗体および核酸からなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
第１のバイオコンジュゲートがストレプトアビジンまたはビオチンであり、センサ生体分子が抗体であり、第２のバイオコンジュゲートが、第１のバイオコンジュゲートがストレプトアビジンであればビオチンであり、第１のバイオコンジュゲートがビオチンであればストレプトアビジンである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４９】
第１のバイオコンジュゲートがストレプトアビジンまたはビオチンであり、センサ生体分子が核酸であり、第２のバイオコンジュゲートが、第１のバイオコンジュゲートがストレプトアビジンであればビオチンであり、第１のバイオコンジュゲートがビオチンであればストレプトアビジンである、請求項４４に記載の方法。
【請求項５０】
バイオコンジュゲートと、
バイオコンジュゲートと共有結合的に連結されたシグナル伝達発色団と、
バイオコンジュゲートと共有結合的に連結された多発色団と、を含み、多発色団の励起がシグナル伝達発色団にエネルギを移動できる、
生体分子を同定するための生体認識複合体。
【請求項５１】
バイオコンジュゲートが抗体である、請求項５０に記載の生体認識複合体。
【請求項５２】
バイオコンジュゲートがストレプトアビジンである、請求項５０に記載の生体認識複合体。
【請求項５３】
多発色団が共役ポリマーである、請求項５０に記載の方法。
【請求項５４】
共役ポリマーがポリカチオン性共役ポリマーである、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
標的生体分子を含有するとみられる試料を提供し、
バイオコンジュゲートと、バイオコンジュゲートと共有結合的に連結されたシグナル伝達発色団と、バイオコンジュゲートと共有結合的に連結された多発色団と、を含み、多発色団の励起がシグナル伝達発色団にエネルギを移動できる、生体認識複合体を提供し、
標的生体分子または標的関連生体分子が存在する場合に、この標的生体分子または標的関連生体分子にバイオコンジュゲートが結合可能な条件下で、溶液中にて試料を生体認識複合体に接触させ、
多発色団を励起可能な光源を溶液に適用し、
シグナル伝達発色団から光が放出されたか否かを検出すること、
を含むアッセイ方法。
【請求項５６】
多発色団が共役ポリマーである、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
共役ポリマーがポリカチオン性共役ポリマーである、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
バイオコンジュゲートと、
バイオコンジュゲートと共有結合的に連結された多発色団と、
多発色団と共有結合的に連結されたシグナル伝達発色団と、を含み、多発色団の励起がシグナル伝達発色団にエネルギを移動できる、
標的生体分子を同定するための生体認識複合体。