【事件の表示】
　特願２００４−３１９９３９「異種移植用豚細胞、その選抜方法及び異種移植用豚」拒絶査定不服審判事件〔平成１８年　５月２５日出願公開、特開２００６−１２９７３６〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
１．手続の経緯・本願発明
　本願は，平成１６年１１月２日の出願であって，平成１９年１０月３１日付で拒絶査定がなされたところ，平成１９年１２月１３日に審判請求がなされ，その後，平成２２年１０月２２日付で，拒絶理由が通知され，これに対し，平成２３年１月１７日に意見書が提出されるとともに手続補正がなされたものである。
　
　そして，その特許請求の範囲の請求項４に係る発明（以下，「本願発明」という。）は，平成２３年１月１７日に提出された手続補正書により補正された明細書及び図面の記載からみて，次のとおりのものと認められる。
　
「【請求項４】
　GTを発現していないと共にヒト補体制御因子又はヒト補体制御因子とヒトGnT-IIIを発現している豚細胞を有する異種移植用豚。」
　ここで，GTは，α-1,3-ガラクトース転移酵素のことであり，GnT-IIIは，N-アセチルグルコサミン転移酵素IIIのことである。
　
２．当審の拒絶理由 
 　平成２２年１０月２２日付の拒絶理由の概要は，本願発明は，本願出願前に頒布されたJ. Reprod. Dev., 2004.8, vol. 50, suppl., p. j65（以下，「引用例１」という。），日本畜産学会　第103回大会　講演要旨, 2004.3.20, p. 104 (VI29-6)（以下，「引用例２」という。），Science (2003) vol. 299, p. 411-414（以下，「引用例３」という。），Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2004.5, vol. 101, p. 7335-7340（以下，「引用例４」という。），Transplantation Proceedings, 2003, vol. 35, p. 516-517（以下，「引用例５」という。），特開平１１−２３９４３０号公報（以下，「引用例６」という。）及び特開２００２−２９１３７２号公報（以下，「引用例７」という。）に記載された発明に基いて，その出願前にその発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者が容易に発明をすることができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない，というものである。
　
３．引用例
　引用例１は，「α１，３ガラクトース転移酵素遺伝子ノックアウトブタの作成」の表題の抄録であり，
「【目的】我々は移植用臓器・組織を提供するためのブタの開発を進めている。ブタからヒトへの異種移植では，ヒトの自然抗体がブタのGal-α1,3Galを主体とする糖鎖抗原に反応し，さらに補体が活性化されることで，短時間で移植片が傷害を受ける。この拒絶反応を克服するため，我々はヒトの補体制御因子DAFと糖鎖を修飾する酵素であるアセチルガラクトサミン転移酵素III(GnT-III)を発現するトランスジェニックブタ(Tgブタ)を作成した。さらに，このDAFとGnT-IIIの両遺伝子を発現するTgブタの細胞より，Galエピトープの産生に必要なα1,3ガラクトース転移酵素遺伝子(GT)をノックアウト(KO)することを成功し，核移植により胎仔を獲得した（高萩ら，2004日本畜産学会）。今回我々は，このGT-KOブタ胎仔の細胞を用いた核移植により，GT（シングル）KOブタの作成に成功したので報告する。【方法】屠場由来の卵巣より採取した卵子を体外成熟培養し，レシピエント卵子として用いた。卵子は除核した後，ドナー細胞と電気的に融合させた。ドナー細胞にはGal-KOクローンブタ胎仔から分離した繊維芽細胞を使用した。融合胚は，電気刺激により活性化処理を行った後，発情周期を同期化したレシピエントブタに移植した。産子よりゲノムＤＮＡを抽出し, PCR法およびサザンブロッティング法を用いて遺伝子解析を行った。【結果】再構築胚633個を6頭のレシピエントに移植した結果，１頭のレシピエントから２頭の産子が得られた。産子のゲノムＤＮＡを解析した結果，DAFおよびGnT-III遺伝子を保有していると共に，α1,3ガラクトース転位酵素遺伝子をヘテロで欠損していた。」と記載されている。
　
　引用例２は，「hDAF/GnT-IIIダブルTgブタ細胞を用いたα１，３ガラクトース転移酵素遺伝子ノックアウトブタの作製」の表題の抄録であり，
「【目的】我々は異種移植用ブタの開発に取り組んでおり，これまでにhDAFおよびN-アセチルグルコサミン転移酵素III(GnT-III)の両方を発現するダブルTgブタ(D/Gブタ）を作製した。このブタは異種糖鎖抗原量を半減しているが，拒絶反応を更に軽減するためにはブタα1,3ガラクトース転移酵素(GT)遺伝子をノックアウト(KO)する必要がある。そこで，Ｄ/Ｇブタ由来細胞を用いて，GT-KOブタの作製を試みた。【方法】Ｄ/Gブタ胎仔から採取した細胞にGT-KOベクターを遺伝子導入し，ＫＯ細胞を，薬剤耐性を指標に選択し，ＰＣＲ及びサザンブロットで同定した。またＫＯ細胞から核移植により初期胚を再構築し，性周期を同期化した雌ブタに移植した。【結果】(1)薬剤耐性細胞コロニー3062個からheterozygousにＧＴ遺伝子がＫＯされた細胞コロニー17個を得た。（2）核移植胚964個を8頭の受胚雌に移植した。妊娠中に５頭を開腹したところ，1頭の受胚雌から5頭の胎仔が回収できた。ＤＮＡ解析からそのうちの4頭がGT-KOブタであり，核型解析から1頭が正常な核型を示すことを確認した。残りの1頭は単為発生胚に由来していた。【結論】hDAF/GnT-IIIダブルTgブタ胎仔由来細胞を用いてGT-KO細胞を作製し，核移植によりＧＴ−ＫＯブタ胎仔を得た。」と記載されている。
　
　引用例３には，
　「酵素α1,3-ガラクトシルトランスフェラーゼ(α1,3GTあるいはGGTA1)は，豚から人間への異種間臓器移植での超急性拒絶を引き起こす主な異種抗原である，α1,3ガラクトース(α1,3Gal)エピトープ(Galα1,3Galβ1,4GlcNAc-R)を合成する。豚器官からのα1,3Galの完全な除去は，異種間臓器移植の成功への重大なステップである。我々は，クローン豚の中のα1,3GT遺伝子の1つの対立遺伝子のターゲット化した破壊を以前に報告した。 細菌毒素に基づいた選抜手法は，遺伝子の第2の対立遺伝子がノックアウトされた細胞を選択するために使用された。配列分析は，α1,3GT遺伝子の第2の対立遺伝子のノックアウトは，エクソン9の２番目の塩基でTからGへの単一の点変異によって引き起こされ，その結果，α1,3GTタンパク質が不活性化することを，実証した。健康な4匹のα1，3GTのダブルノックアウトの雌の子豚は，クローニングの3つの連続するラウンドによって生産された。α1,3GT遺伝子に点変異を保持する子豚は，抗生物質抵抗性遺伝子がないα13,Galの欠失した豚を生産するものとして，人間への使用のためにより安全な製品を作る可能性を持つものとして，重要な価値がある。」（要約）と記載されている。
　
　引用例４には，
　「旧世界霊長類のレシピエントによる豚の器官の超急性拒絶は，豚細胞表面に発現されたガラクトシル-α-1,3-ガラクトース(Galα-1,3Gal)エピトープに対する前もって形成された抗体によって影響される。以前に，我々は，遺伝子ターゲットされた繊維芽細胞の核移植(NT)によってα-1,3-ガラクトシルトランスフェラーゼ部位(GGTA1)の対立遺伝子の無い生来のミニチュア豚を生成した。GGTA1の無い豚の産出を手早く行うために，我々はNTの別のラウンドでの使用のために，ヘテロ接合動物の繊維芽細胞株から自発的に生じる無変異細胞を選んだ。GGTA1機能の自発的な欠損の期待以上の高い割合は，WT対立遺伝子の欠失に起因する無細胞の大部分となって観察された。遺伝子ターゲットされた対立遺伝子に関しての半接合体及びホモ接合体である健康な子豚は，欠失的と交差/遺伝子転換の出来事を受けた繊維芽細胞を使用して，NTによってそれぞれ生産された。Galα-1,3-Gal・エピトープの欠失に加えて，同じ近交系からのこれらの無い子豚とWT子豚の間の明白な表現型の差はなかった。実際，ヘテロ接合のNT動物で観察された先天的な異常は，連続的に生成された欠失動物の中で再現されなかった。」（要約）と記載されている。
　
　引用例５には，表題にあるように，ヒトのDecay-accelerating factor とN-アセチルグルコサミン転移酵素IIIをともに発現するトランスジェニック豚が記載されている。
　
　引用例６には，
　「ヒトの補体制御因子（DAF/CD55）の遺伝子を有し，当該ヒトの補体制御因子を臓器・組織に発現しているヒト以外のトランスジェニック哺乳動物」（請求項１）が記載され，
　段落００１６には，トランスジェニック哺乳動物（ブタ）の作成について記載されている。
　
　引用例７には，
　「超急性拒絶の生じる局所の細胞で機能している調節遺伝子とヒトのN-アセチルグルコサミン転移酵素IIIの遺伝子からなる導入遺伝子を有するヒト以外のトランスジェニック哺乳動物，及び，超急性拒絶の生じる局所の細胞で機能している調節遺伝子及びヒトのN-アセチルグルコサミン転移酵素IIIの遺伝子，並びに，ヒトの補体活性制御因子の遺伝子を有するヒト以外のトランスジェニック哺乳動物」（請求項１及び２）が記載され，
　実施例３には，サイトメガロウイスのエンハンサー，鶏βアクチンのプロモーター及びGnT-IIIのcDNAから成る導入用遺伝子を用いて作製したトランスジェニックブタが，実施例５には，GnT-IIIとDAFの両遺伝子を有するトランスジェニックブタが，それぞれ記載されている。
　
４．対比
　上記引用例１に移植用臓器・組織を提供するために開発を進め，作成されたと記載される豚は，ヒトの補体制御因子DAFと糖鎖を修飾する酵素であるアセチルグルコサミン転移酵素III(GnT-III)を発現するトランスジェニック豚のα1,3ガラクトース転位酵素遺伝子をヘテロで欠損したものである。
　なお，引用例１には，アセチルガラクトサミン転移酵素IIIと記載されているが，そこで引用されている（高萩ら，2004日本畜産学会）は，引用例２のことであり，これが本来，アセチルグルコサミン転移酵素IIIであるところを，アセチルガラクトサミン転移酵素IIIと誤って記載したものであることは明らかであり，上記のように認定できるものである。
　そこで，本願発明と引用例１に記載されるトランスジェニック豚を対比すると，両者は「ヒト補体制御因子又はヒト補体制御因子とヒトGnT-IIIを発現している豚細胞を有する異種移植用豚」である点で一致しているが，以下の点で相違している。
　
相違点：
　本願発明は，GTを発現していないものであるのに対し，引用例１にはα1,3ガラクトース転位酵素遺伝子をヘテロで欠損したものが記載されるだけで，GTを発現しないように，GT遺伝子をホモに欠損したものが記載されていない点。
　
５．判断
　引用例３，４には，豚・ヒト間の異種移植における超急性拒絶反応を抑制するために，ガラクトシル-α-1,3-ガラクトースエピトープを完全に除去した豚とするために，GT遺伝子をダブルノックアウトさせたことが記載されているのであるから，引用例１に接した当業者であれば，当然に，そこに記載されるGT遺伝子をヘテロで欠損した豚について，これをさらにダブルノックアウトさせ，ガラクトシル-α-1,3-ガラクトースエピトープを完全に除去したものにした，超急性拒絶反応を抑制した豚を作製してみようという課題に想到するものである。
　このとき，当業者であれば，まずは，引用例１に記載されると同様に，ヒト補体制御因子又はヒト補体制御因子とヒトGnT-IIIを発現し，GT遺伝子をヘテロで欠損した豚を作成し，これを用いてGT遺伝子をホモに欠損させようとするものである。引用例１及び２は，抄録であって詳細な方法は記載されてはいないが，引用例３及び４に記載されるＧＴ遺伝子のノックアウト方法や，引用例５に記載されるヒト補体制御因子及びヒトGnT-IIIを発現している豚の製造方法，引用例５に記載される参考文献や引用例６及び７に記載されるヒト補体制御因子を発現している豚やヒトGnT-IIIを発現している豚の製造方法を参考にすると，ＧＴ遺伝子がヘテロにノックアウトされ，ヒト補体制御因子及びヒトGnT-IIIを発現している豚は当業者が容易に作成できるものである。
　そして，形質を固定するのに，自然繁殖により掛け合わせ，育種することは周知の技術であって，ＧＴ遺伝子がダブルノックアウトされていると共にヒト補体制御因子及びヒトGnT-IIIを発現している豚を複数頭作成し，これを掛け合わせせれば，容易に本願発明の豚を得ることができるものである。
　
　また，当業者であれば，引用例３にはGT遺伝子をダブルノックアウトさせることが記載されているのであるから，引用例１に記載されると同様に，ヒト補体制御因子又はヒト補体制御因子とヒトGnT-IIIを発現し，GT遺伝子をヘテロで欠損した豚を作成し，これに引用例３に記載される方法を適用し，GT遺伝子をダブルノックアウトさせることは，当業者が容易になしえることである。
　
　さらに，引用例１に接し，そこに記載されるGT遺伝子をヘテロで欠損した豚について，これをさらにダブルノックアウトさせたものを作成しようとしたときに，引用例３及び４にGT遺伝子がダブルノックアウトされている豚が記載されているのであるから，これをもとにして，引用例５，引用例６及び７の記載を参考に，ヒト補体制御因子やヒトGnT-IIIを発現させようとすることも，当業者が容易になしえることであって，容易に本願発明の豚を得ることができる。
　
　そして，本願明細書の記載を見ても，ヒト補体制御因子及びヒトGnT-IIIを発現している豚について，GT遺伝子をダブルノックアウトさせたことにより，引用例１〜７の記載から予測できない格別顕著な効果があるものとも認められない。
　したがって，本願発明は，引用例１〜７に記載された発明に基づいて，当業者が容易に発明できたものである。
　
　なお，請求人は，（１）交配法は、極めて確率の低い方法であり、核移植法が確立した技術的背景を考慮すると、当業者が交配法で本願発明の豚を作成することは考えられないこと，（２）仮に当業者が引用例１及び２に基づいて、交配法により本願発明の豚を作成することを想起したとしても、まずGT遺伝子がシングルノックアウトされていると共にヒト補体制御因子及びヒトGnT-IIIを発現している豚を作成し、性成熟を待って交配法によりそれからＧＴ遺伝子がダブルノックアウトされていると共にヒト補体制御因子及びヒトGnT-IIIを発現している豚を作成し、それが目的とする豚であることを確認（即ち、発明の完成の確認）することは、本願出願日前には時間的に不可能なこと，（３）確かにToxin A法によってもGT遺伝子のダブルノックアウトした豚細胞を作成することはできるが、効率が低いので当該豚細胞を多量に産生するには適しておらず、更に得られた豚細胞が細胞傷害を受けている可能性が高く、正常な豚細胞を得るには適していないことを主張するので検討する。
　
　（１）の点について，豚は多胎であり，確率が多少低くても，当業者が交配法を避けるほどのものではない。引用例３の４１１頁右欄５〜１０行にも記載されるように，多少の期間は要するが，実施可能な方法と当業者が認識しているものである。また，「移植」, ４２巻３号, (平成１９年６月１０日) p.295に，本願発明者らが，交配法によりダブルノックアウト豚を作成したことが記載されていることからも，核移植法が確立した技術的背景を考慮しても、当業者が交配法で本願発明の豚を作成することは考えられないというものではないことは明らかである。
　
　（２）の点について，ダブルノックアウトした豚が容易に作製でき，臓器で抗原性の低下したものであることが，当業者が予測できるのであるから，単に時間の制約からダブルノックアウト豚が作製されなくとも，ダブルノックアウト豚の発明，すなわち技術思想としてのダブルノックアウト豚は，容易に発明できたものである。
　
　（３）の点について，引用例３には，Toxin A法によってGT遺伝子をダブルノックアウトした豚細胞を作成し，健康な子豚を作成したことが記載されているのであるから，当業者が実施できないほど困難な方法とは認められないし，また仮に引用例３に記載された方法が困難であるとしても，引用例３の著者から，GT遺伝子をダブルノックアウトした豚細胞を入手するとか，引用例４に記載された方法によりGT遺伝子をダブルノックアウトした豚を作成し，これに引用例５，引用例６及び７の記載を参考に，ヒト補体制御因子やヒトGnT-IIIを発現させ，容易に本願発明の豚を得ることができるのである。
　
６．むすび
　以上のとおり，本願発明は，引用例１〜７に記載された発明に基づいて当業者が容易に発明をすることができたものであるから，特許法第２９条第２項の規定により特許を受けることができない。
　したがって，本出願に係る他の請求項について検討するまでもなく，本出願は拒絶すべきものである。
　
　よって，結論のとおり審決する。