【手続補正書】
【提出日】平成23年10月17日(2011.10.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
移動相が、第1の液体Aおよび第2の液体Bを含む2つ以上の液体を含み、液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化する、ホルモテロールを分析するためのHPLC法。
【請求項２】
第1の液体Aが
(i) 水性ベースであり、及び／または
(ii) 水、またはバッファー水溶液を含む、
請求項1に記載のHPLC法。
【請求項３】
バッファーが、
(i) 酸、または有機塩もしくは無機塩であり、及び／または
(ii) リン酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、またはトリフルオロ酢酸であり、及び／または
(iii) アンモニウム塩であり、及び／または
(iv) 酢酸アンモニウムであり、及び／または
(v) 0.001Mから0.1Mの濃度で存在し、及び／または
(vi) 0.001Mから0.01Mの濃度で存在し、及び／または
(vii) 0.005Mから0.01Mの濃度で存在し、及び／または
(viii) 約0.007Mの濃度で存在し、及び／または
(ix) 0.001Mから0.01Mの濃度で存在する酢酸アンモニウムであり、及び／または
(x)約0.007Mの濃度で存在する酢酸アンモニウムであり、及び／または
(xi)約2から6のpHを有し、及び／または
(xii) 3.8と5.8の間のpHを有し、及び／または
(xiii) 約4.8のpHを有する、
請求項2の(ii)の規定に従うHPLC法。
【請求項４】
第2の液体Bが、
(i) 有機溶媒であり、及び／または
(ii) 実質的に水混和性の溶媒であり、及び／または
(iii) 酢酸、メタノール、エタノール、n-プロパノール、もしくはイソプロパノールなどの極性プロトン性溶媒、またはアセトン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、DMF、DMSO、1,4-ジオキサン、ピリジン、もしくはTHFなどの双極性非プロトン性溶媒であり、及び／または
(iv) メタノール、エタノール、アセトニトリル、プロパノール、イソプロパノール、またはこれらの混合物から選択され、及び／または
(v) アセトニトリルである、
請求項1から３のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項５】
第1の液体Aが酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルである、請求項1から4のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項６】
(i) 0.01ml/分と10ml/分の間の移動相の流速が用いられ、及び／または
(ii) 約1ml/分の移動相の流速が用いられ、及び／または
(iii) 液体AおよびBの相対濃度が、10分から180分にわたって、または30分から120分にわたって、または30分から60分にわたって操作して、99.5%A:0.5%Bから0.5%A:99.5%Bの間の勾配に従って変化するような勾配のプログラミングを含み、及び／または
(iv) 第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、及び／または
(v) 第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、かつ勾配が以下：
【表１】
2011501204.tif 000001
の通りである、
請求項1から5のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項７】
(i) 固定相がキラルであり、及び／または
(ii) 移動相がキラルセレクターをさらに含み、及び／または
(iii) 固定相が逆相であり、及び／または
(iv) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲル、オクチルシリルシリカゲル、フェニルアルキルシリカゲル、シアノプロピルシリカゲル、アミノプロピルシリカゲル、またはアルキルジオールシリカゲルであり、及び／または
(v) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、及び／または
(vi) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、かつ固定相がYMC Pack pro C18(250mm×4.6mm)、5μカラムを含み、及び／または
(vii) 固定相の粒子サイズが0.1μmと100μmの間であり、及び／または
(viii) 固定相の粒子サイズが約5μmであり、及び／または
(ix) 固定相のポアサイズが1nmと100nmの間であり、及び／または
(x) 固定相のポアサイズが約12nmであり、及び／または
(xi) クロマトグラフィーが約15℃から40℃の間の温度で行われ、及び／または
(xii) クロマトグラフィーが長さ10mmと5000mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xiii) クロマトグラフィーが長さ約250mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xiv) クロマトグラフィーが内径0.01mmと100mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xv) クロマトグラフィーが内径約4.6mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xvi) 溶出液が、UVもしくは可視分光光度計、蛍光分光光度計、示差屈折計、電気化学検出器、質量分析機、光散乱検出器、または放射能検出器などの検出器によって分析され、及び／または
(xvii) ホルモテロールがフマル酸ホルモテロール二水和物の形態である、
請求項1から6のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項８】
(i) 1回の操作において、以下の不純物の1つまたは複数:
N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノ]アセトフェノン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;および/または
4-ベンジルオキシ-3-ホルミルアミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコール
を検出し、場合により定量化し、及び／または
(ii)   1回の操作において、以下の化合物:
N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノ]アセトフェノン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;
4-ベンジルオキシ-3-ホルミルアミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコール
から選択されるものを含む不純物を全て検出し、定量化する、
請求項1から7のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項９】
移動相が、酢酸アンモニウム水溶液を含む第1の液体A、および双極性非プロトン性溶媒を含む第2の液体Bを含む2つ以上の液体を含む、ホルモテロールを分析するためのHPLC法。
【請求項１０】
酢酸アンモニウム水溶液が、
(i) 0.001Mから0.1Mの濃度を有し、及び／または
(ii) 0.001Mから0.01Mの濃度を有し、及び／または
(iii) 0.005Mから0.01Mの濃度を有し、及び／または
(iv) 約0.007Mの濃度を有し、及び／または
(v) 約2から6のpHを有し、及び／または
(vi) 3.8と5.8の間のpHを有し、及び／または
(vii) 約4.8のpHを有する、
請求項9に記載のHPLC法。
【請求項１１】
第2の液体Bが、
(i) 実質的に水混和性の溶媒であり、及び／または
(ii) アセトン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、DMF、DMSO、1,4-ジオキサン、ピリジン、またはTHFから選択され、及び／または
(iii) アセトニトリルである、
請求項9または10に記載のHPLC法。
【請求項１２】
(i) 0.01ml/分と10ml/分の間の移動相の流速が用いられ、及び／または
(ii) 約1ml/分の移動相の流速が用いられる、
請求項9から11のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項１３】
(i) HPLC法が定組成法であり、及び／または
(ii) HPLC法が定組成法であり、かつ液体AおよびBの相対濃度が99.5%A:0.5%Bから0.5%A:99.5%Bの間に設定され、及び／または
(iii) HPLC法が定組成法であり、かつ液体AおよびBの相対濃度が約40%A:60%Bである、
請求項9から12のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項１４】
(i) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、及び／または
(ii) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ液体AおよびBの相対濃度が、10分から180分にわたって、または30分から120分にわたって、または30分から60分にわたって操作して、99.5%A:0.5%Bから0.5%A:99.5%Bの間の勾配に従って変化するような勾配のプログラミングを含み、及び／または
(iii) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、及び／または
(iv) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、かつ勾配が以下：
【表２】
2011501204.tif 000002
の通りである、
請求項9から12のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項１５】
(i) 固定相がキラルであり、及び／または
(ii) 移動相がキラルセレクターをさらに含み、及び／または
(iii) 固定相が逆相であり、及び／または
(iv) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲル、オクチルシリルシリカゲル、フェニルアルキルシリカゲル、シアノプロピルシリカゲル、アミノプロピルシリカゲル、またはアルキルジオールシリカゲルであり、及び／または
(v) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、及び／または
(vi) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、かつ固定相がYMC Pack pro C18(250mm×4.6mm)、5μカラムを含み、及び／または
(vii) 固定相の粒子サイズが0.1μmと100μmの間であり、及び／または
(viii) 固定相の粒子サイズが約5μmであり、及び／または
(ix) 固定相のポアサイズが1nmと100nmの間であり、及び／または
(x) 固定相のポアサイズが約12nmであり、及び／または
(xi) クロマトグラフィーが約15℃から40℃の間の温度で行われ、及び／または
(xii) クロマトグラフィーが長さ10mmと5000mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xiii) クロマトグラフィーが長さ約250mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xiv) クロマトグラフィーが内径0.01mmと100mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xv) クロマトグラフィーが内径約4.6mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xvi) 溶出液が、UVもしくは可視分光光度計、蛍光分光光度計、示差屈折計、電気化学検出器、質量分析機、光散乱検出器、または放射能検出器などの検出器によって分析され、及び／または
(xvii) ホルモテロールがフマル酸ホルモテロール二水和物の形態である、
請求項9から14のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項１６】
1回の操作において、以下の不純物の1つまたは複数:
N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノ]アセトフェノン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;および/または
4-ベンジルオキシ-3-ホルミルアミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコール
を検出し、場合により定量化する、請求項9から15のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項１７】
移動相が、濃度0.001Mから0.025Mの酢酸アンモニウム水溶液を含む第1の液体A、および第2の液体Bを含む2つ以上の液体を含む、ホルモテロールを分析するためのHPLC法。
【請求項１８】
酢酸アンモニウム水溶液が
(i) 0.001Mから0.01Mの濃度を有し、及び／または
(ii) 0.005Mから0.01Mの濃度を有し、及び／または
(iii) 約0.007Mの濃度を有し、及び／または
(iv) 約2から6のpHを有し、及び／または
(v) 3.8と5.8の間のpHを有し、及び／または
(vi) 約4.8のpHを有する、
請求項17に記載のHPLC法。
【請求項１９】
第2の液体Bが、
(i) 有機溶媒であり、及び／または
(ii) 実質的に水混和性の溶媒であり、及び／または
(iii) 酢酸、メタノール、エタノール、n-プロパノール、もしくはイソプロパノールなどの極性プロトン性溶媒、またはアセトン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、DMF、DMSO、1,4-ジオキサン、ピリジン、もしくはTHFなどの双極性非プロトン性溶媒であり、及び／または
(iv) メタノール、エタノール、アセトニトリル、n-プロパノール、イソプロパノール、またはこれらの混合物から選択され、及び／または
(v) アセトニトリルである、
請求項17または18に記載のHPLC法。
【請求項２０】
(i) 0.01ml/分と10ml/分の間の移動相の流速が用いられ、及び／または
(ii) 約1ml/分の移動相の流速が用いられる、
請求項17から19のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項２１】
(i) HPLC法が定組成法であり、及び／または
(ii) HPLC法が定組成法であり、かつ液体AおよびBの相対濃度が99.5%A:0.5%Bから0.5%A:99.5%Bの間に設定され、及び／または
(iii) HPLC法が定組成法であり、かつ液体AおよびBの相対濃度が約40%A:60%Bである、
請求項17から20のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項２２】
(i) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、及び／または
(ii) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ液体AおよびBの相対濃度が、10分から180分にわたって、または30分から120分にわたって、または30分から60分にわたって操作して、99.5%A:0.5%Bから0.5%A:99.5%Bの間の勾配に従って変化するような勾配のプログラミングを含み、及び／または
(iii) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、及び／または
(iv) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、かつ勾配が以下：
【表３】
2011501204.tif 000003
の通りである、
請求項17から20のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項２３】
(i) 固定相がキラルであり、及び／または
(ii) 移動相がキラルセレクターをさらに含み、及び／または
(iii) 固定相が逆相であり、及び／または
(iv) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲル、オクチルシリルシリカゲル、フェニルアルキルシリカゲル、シアノプロピルシリカゲル、アミノプロピルシリカゲル、またはアルキルジオールシリカゲルであり、及び／または
(v) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、及び／または
(vi) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、かつ固定相がYMC Pack pro C18(250mm×4.6mm)、5μカラムを含み、及び／または
(vii) 固定相の粒子サイズが0.1μmと100μmの間であり、及び／または
(viii) 固定相の粒子サイズが約5μmであり、及び／または
(ix) 固定相のポアサイズが1nmと100nmの間であり、及び／または
(x) 固定相のポアサイズが約12nmであり、及び／または
(xi) クロマトグラフィーが約15℃から40℃の間の温度で行われ、及び／または
(xii) クロマトグラフィーが長さ10mmと5000mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xiii) クロマトグラフィーが長さ約250mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xiv) クロマトグラフィーが内径0.01mmと100mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xv) クロマトグラフィーが内径4.6mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xvi) 溶出液が、UVもしくは可視分光光度計、蛍光分光光度計、示差屈折計、電気化学検出器、質量分析機、光散乱検出器、または放射能検出器などの検出器によって分析され、及び／または
(xvii) ホルモテロールがフマル酸ホルモテロール二水和物の形態である、
請求項17から22のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項２４】
1回の操作において、以下の不純物の1つまたは複数:
N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノ]アセトフェノン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;および/または
4-ベンジルオキシ-3-ホルミルアミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコール
を検出し、場合により定量化する、請求項17から23のいずれか一項に記載のHPLC法。
【請求項２５】
N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノ]アセトフェノン;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-ニトロ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-I;
4-ベンジルオキシ-3-アミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコールジアステレオマー-II;および/または
4-ベンジルオキシ-3-ホルミルアミノ-α-[N-ベンジル-N-(1-メチル-2-p-メトキシフェニルエチル)アミノメチル]ベンジルアルコール
から選択される1つまたは複数の不純物を検出し、場合により定量化することを含む、物質を分析するための方法。
【請求項２６】
物質が
(i) 薬理学的有効成分であり、及び／または
(ii) ホルモテロールであり、及び／または
(iii) フマル酸ホルモテロール二水和物であり、及び／または
(iv) 25重量%未満の1つまたは複数の不純物を含む、
請求項25に記載の方法。
【請求項２７】
HPLCの使用を含む、請求項25または26に記載の方法。
【請求項２８】
移動相が、第1の液体Aおよび第2の液体Bを含む2つ以上の液体を含む、請求項27に記載の方法。
【請求項２９】
第1の液体Aが
(i) 水性ベースであり、及び／または
(ii) 水、またはバッファー水溶液を含む、
請求項28に記載の方法。
【請求項３０】
バッファーが、
(i) 酸、または有機塩もしくは無機塩であり、及び／または
(ii) リン酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、またはトリフルオロ酢酸であり、及び／または
(iii) アンモニウム塩であり、及び／または
(iv) 酢酸アンモニウムであり、及び／または
(v) 0.001Mから0.1Mの濃度で存在し、及び／または
(vi) 0.001Mから0.01Mの濃度で存在し、及び／または
(vii) 0.005Mから0.01Mの濃度で存在し、及び／または
(viii) 約0.007Mの濃度で存在し、及び／または
(ix) 約2から6のpHを有し、及び／または
(x) 3.8と5.8の間のpHを有し、及び／または
(xi) 約4.8のpHを有する、
請求項29の(ii)の規定に従う方法。
【請求項３１】
第2の液体Bが
(i) 有機溶媒であり、及び／または
(ii) 実質的に水混和性の溶媒であり、及び／または
(iii) 酢酸、メタノール、エタノール、n-プロパノール、もしくはイソプロパノールなどの極性プロトン性溶媒、またはアセトン、アセトニトリル、ジメトキシエタン、DMF、DMSO、1,4-ジオキサン、ピリジン、もしくはTHFなどの双極性非プロトン性溶媒であり、及び／または
(iv) メタノール、エタノール、アセトニトリル、n-プロパノール、イソプロパノール、またはこれらの混合物から選択され、及び／または
(v) アセトニトリルである、
請求項28から30のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
第1の液体Aが酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルである、請求項28から31のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
(i) 0.01ml/分と10ml/分の間の移動相の流速が用いられ、及び／または
(ii) 約1ml/分の移動相の流速が用いられる、
請求項28から32のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
(i) 定組成HPLC法であり、及び／または
(ii) 定組成HPLC法であり、かつ液体AおよびBの相対濃度が99.5%A:0.5%Bと0.5%A:99.5%Bの間に設定され、及び／または
(iii) 定組成HPLC法であり、かつ液体AおよびBの相対濃度が約40%A:60%Bである、
請求項28から33のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
(i) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、及び／または
(ii) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ液体AおよびBの相対濃度が、10分から180分にわたって、または30分から120分にわたって、または30分から60分にわたって操作して、99.5%A:0.5%Bから0.5%A:99.5%Bの間の勾配に従って変化するような勾配のプログラミングを含み、及び／または
(iii) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、及び／または
(iv) 移動相の液体の相対濃度が所定の勾配に従って変化し、かつ第1の液体Aが0.007M酢酸アンモニウム水溶液であり、第2の液体Bがアセトニトリルであり、かつ勾配が以下：
【表４】
2011501204.tif 000004
の通りである、
請求項28から33のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
(i) 固定相がキラルであり、及び／または
(ii) 移動相がキラルセレクターをさらに含み、及び／または
(iii) 固定相が逆相であり、及び／または
(iv) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲル、オクチルシリルシリカゲル、フェニルアルキルシリカゲル、シアノプロピルシリカゲル、アミノプロピルシリカゲル、またはアルキルジオールシリカゲルであり、及び／または
(v) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、及び／または
(vi) 固定相が逆相であり、かつ用いられる固定相が、オクタデシルシリルシリカゲルまたはオクチルシリルシリカゲルであり、かつ固定相がYMC Pack pro C18(250mm×4.6mm)、5μカラムを含み、及び／または
(vii) 固定相の粒子サイズが0.1μmと100μmの間であり、及び／または
(viii) 固定相の粒子サイズが約5μmであり、及び／または
(ix) 固定相のポアサイズが1nmと100nmの間であり、及び／または
(x) 固定相のポアサイズが約12nmであり、及び／または
(xi) クロマトグラフィーが約15℃から40℃の間の温度で行われ、及び／または
(xii) クロマトグラフィーが長さ10mmと5000mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xiii) クロマトグラフィーが長さ約250mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xiv) クロマトグラフィーが内径0.01mmと100mmの間のカラムにおいて行われ、及び／または
(xv) クロマトグラフィーが内径約4.6mmのカラムにおいて行われ、及び／または
(xvi) 溶出液が、UVもしくは可視分光光度計、蛍光分光光度計、示差屈折計、電気化学検出器、質量分析機、光散乱検出器、または放射能検出器などの検出器によって分析される、
請求項28から35のいずれか一項に記載の方法。