【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年9月12日(2011.9.12)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
β−１，３−グルカンの製造方法において、スクレログルカン含有マトリックスを、溶剤としての水の中で攪拌し、引き続き１５〜６０℃の温度および４．０〜１０．０のｐＨ値でβ（１，３）−グルカナーゼ活性を有するプロテインを用いて処理することを特徴とするβ−１，３−グルカンの製造方法。
【請求項２】
β−１，３−グルカンがβ−１，６−グルコース側鎖を有する請求項１記載の方法。
【請求項３】
プロテインがβ（１，３）−グルカナーゼである請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
プロテインがβ（１，４）−グルカナーゼ活性を有する請求項１から３までのいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
β（１，３）−グルカナーゼ活性を有するプロテインの濃度がそれぞれ反応混合物に対して０．００１〜３．０質量％である請求項１から４までのいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
前記β（１，３）−グルカナーゼ活性を有するプロテインの濃度がそれぞれ反応混合物に対して０．０１〜１．０質量％である請求項５記載の方法。
【請求項７】
前記β（１，３）−グルカナーゼ活性を有するプロテインの濃度がそれぞれ反応混合物に対して０．１〜０．５質量％である請求項５または６記載の方法。
【請求項８】
２０〜４０℃の温度で実施する請求項１から７までのいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
スクレログルカン含有マトリックスが、それぞれ固体含量に対して２０〜９９．９質量％の溶剤割合を有する発酵ブイヨン、培養基、懸濁液または菌糸体、ヒドロコロイド、または粉末組成物である請求項１から８までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
前記スクレログルカン含有マトリックスが、それぞれ固体含量に対して５０〜９９質量％の溶剤割合を有する発酵ブイヨン、培養基、懸濁液または菌糸体、ヒドロコロイド、または粉末組成物である請求項９記載の方法。
【請求項１１】
前記スクレログルカン含有マトリックスが、溶解しない固体、細胞成分および／または細胞断片を含有する発酵ブイヨンまたは培養基である請求項１から１０までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記溶剤としての水の中において菌糸体、ヒドロコロイドまたは粉末組成物を使用する請求項１から１１までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
スクレログルカン含有マトリックスが、溶剤としての水を含有する請求項１から１２までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
スクレログルカン含有マトリックスのｐＨ値が５．０〜７．０である請求項１から１３までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
酵素による処理の時間が１５分〜２４時間である請求項１から１４までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
前記酵素による処理の時間が１〜６時間である請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
連続的に実施する請求項１から１６までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１８】
スクレログルカン含有マトリックスを酵素処理の後に７０〜１５０℃の温度で熱処理する請求項１から１７までのいずれか１項記載の方法。
【請求項１９】
スクレログルカン含有マトリックスを酵素処理の後に８０〜１４０℃の温度で熱処理する請求項１８項記載の方法。
【請求項２０】
熱処理を１〜６０分実施する請求項１８または１９記載の方法。
【請求項２１】
前記熱処理を２〜３０分実施する請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
スクレログルカン含有マトリックスを引続き濾過および／または遠心分離する請求項１から２１までのいずれか１項記載の方法。
【請求項２３】
得られたβ−１，３−グルカンを分離する請求項１から２２までのいずれか１項記載の方法。
【請求項２４】
前記分離を蒸発、凍結乾燥または沈殿により行う請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
請求項１から２４までのいずれか１項記載の方法により製造されたβ−１，３−グルカン。
【請求項２６】
改良された冷水溶解性および／または溶解しない成分の減少した割合および／または増加した粘度および／または水溶液中の減少した不透明度および／または改良された濾過能力を有する請求項２５記載のβ−１，３−グルカン。
【請求項２７】
少なくとも未処理β−１，３−グルカン９０〜９９．９質量％、β（１，３）−グルカナーゼ活性を有するプロテイン０．００５〜０．１質量％および少なくとも１つの他の内容物質０〜１０質量％を含有する固体組成物。
【請求項２８】
前記少なくとも１つの他の内容物質が、充填剤、不活性希釈剤および菌糸体から成る群から選択される請求項２７記載の固体組成物。
【請求項２９】
化粧用途での、請求項１から２４までのいずれか１項記載の方法により製造されたβ−１，３−グルカンまたは請求項２５または２６記載のβ−１，３−グルカンの使用。
【請求項３０】
身体の手入れまたは健康用手入れでの、請求項１から２４までのいずれか１項記載の方法により製造されたβ−１，３−グルカンまたは請求項２５または２６記載のβ−１，３−グルカンの使用。
【請求項３１】
栄養および食品産業での、請求項１から２４までのいずれか１項記載の方法により製造されたβ−１，３−グルカンまたは請求項２５または２６記載のβ−１，３−グルカンの使用。
【請求項３２】
石油搬送での、請求項１から２４までのいずれか１項記載の方法により製造されたβ−１，３−グルカンまたは請求項２５または２６記載のβ−１，３−グルカンの使用。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１５】
米国特許第６０９０６１５号は菌糸体を含有する培養基からβ−１，３−グルカナーゼを用いてβ−グルカン含有抽出物を製造する方法を記載する。しかしこの場合にグルカナーゼは単独でおよびキチナーゼおよびセルラーゼと組み合わせて使用され、菌糸体から出発物質として菌糸体に含まれる内容物質が溶解により遊離する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２２】
意想外にも、この方法を使用して、溶解しない形で菌糸体に結合したグルカン分子が酵素活性により水中又は水性媒体中で遊離できることが判明した。課題の設定に相当してこの方法を使用してグルカン含有溶液の粘度が増加し、付加的に溶解しない成分の割合が減少し、グルカンの冷水溶解性が明らかに改良することが達成される。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
本発明の範囲で有利なグルカン含有マトリックスとして発酵ブイヨン、培養基および懸濁液を使用し、固体含量に対して２０〜９９.９質量％、特に５０〜９９質量％の溶剤割合を有する菌糸体、ヒドロコロイドまたは粉末組成物も使用する。例えば固体組成物の形の水不溶性およびグルカン含有マトリックスを酵素錯体で処理することができ、その際この固体の組成物は一工程反応で反応できるとして特に有利である。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２８】
前記の方法のために本発明は溶解しない固体、細胞成分および／または細胞断片を含有する発酵ブイヨンまたは培養基の有利な使用を考慮する。しかし水又は水性媒体における菌糸体、ヒドロコロイドまたは粉末組成物も一様に特に適している。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３０】
本発明の方法は、一般的に、酵素活性を有するプロテインをポリサッカリドを含有するマトリックスに付加的に溶解しない成分を含有する水溶液の形で添加し、引続きこの混合物を放置することにより実施し、その際この溶液を攪拌するかどうかは重要でない。反応の時間と結果に関する１つの決定的な基準は、菌糸体に結合したポリサッカリドが溶液に酵素に起因して遊離するために必要な時間である。水溶液がポリサッカリド０．０３〜３．０質量％を含有する場合は一般に完全に十分である。酵素活性を有する使用されるプロテインの濃度は常に直接グルカン濃度およびこれに含まれる細胞成分の量に依存する。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３１】
すでに示したように、使用されるマトリックスは菌糸体、ヒドロコロイドまたは粉末組成物の形で所定の溶剤割合を有するかまたは水又は水性媒体において使用することができ、その際本発明によりマトリックスの溶剤として特に水が該当する。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３９】
本発明の対象は更に未処理β−１，３−グルカン少なくとも９０〜９９．９％およびβ（１，３）−グルカナーゼ活性を有するプロテイン０．００５〜０．１質量％および充填剤、不活性希釈剤または菌糸体のような少なくとも１つの他の内容物質を含有する固体組成物である。その際使用されるβ−１，３−グルカンは再びβ（１，６）−グルコース側鎖を有し、使用されるプロテインは付加的にβ（１，４）−グルカナーゼ活性を示す。この組成物は固体の形で直接水または他の水性媒体に導入することができ、その際組成物は酵素およびポリサッカリドを別々に添加しなくてもよいという利点を有する。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４１】
要約すると、本発明がβ−１，３−グルカンを製造する改良された方法を提供し、その際収率が明らかに高くなり、これにより得られるグルカンおよび特にスクレログルカンの特性が未処理の発酵ブイヨンまたはグルカン粉末の酵素処理により改良することが保持される。更にこの方法を使用して酵素処理により溶解しない菌糸体成分を菌糸体結合したポリサッカリドの遊離により液化することが可能であり、これによりポリサッカリド含有溶液の高い粘度が生じる。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４８】
例３：溶解しない菌糸体の酵素による処理
蒸留水１００ｍｌにスクレログルカン（ＡｃｔｉｇｕｍＣＳ６、Ｄｅｇｕｓｓａ社）１ｇを入れ、スクリュー攪拌器を使用して２０℃で２４時間攪拌した。引続き１５００ｒｃｆで３０分間遠心分離し、溶液を分離し、沈殿物に蒸留水５００ｍｌを添加した。これから得られる懸濁液を磁気攪拌器で３０分攪拌し、前記工程（遠心分離、上澄み液の除去、再取り入れ、および懸濁液の攪拌）を５回繰り返した。最後の遠心分離工程の後に溶液を除去し、残留物を−２０℃で凍結した。引続き凍結した残留物を０．０１ｈＰａで２４時間凍結乾燥し、引続きこのうち５０ｍｇを蒸留水１０ｍｌ中で懸濁した。この懸濁液に１，３−β−グルカナーゼ（Ｇｌｕｃａｎｅｘ、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）の蒸留水２ｍｌ／ｍｌを含有する酵素溶液１ｍｌを添加し、得られた溶液をサーモハーケ粘度計（ＲｏｔｏｖｉｓｃｏＣ１）に３７℃およびせん断速度１０／秒で入れた。引続き測定を開始した。
高い粘度の値が達成された。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４９】
図３は本発明により酵素処理した菌糸体懸濁液が１０倍より大きい粘度の増加を示し、これは酵素処理の間にポリサッカリドが溶解しない菌糸体から分離し、水に溶解したことを示す。同時に溶解しない菌糸体粒子の減少が観察できた。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５２】
処理時間２〜４時間以内でポリサッカリドが溶解しない菌糸体から分離し、溶解し、溶液の粘度は増加し、匹敵する条件下で製造したが、酵素を添加しない参考試料より４０％
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５５】
【図１】本発明のスクレログルカン含有溶液の粘度の増加を示す図である。
【図２】本発明により変性したスクレログルカンの粘度の増加を示す図である。
【図３】本発明の酵素で処理した菌糸体懸濁液の粘度の増加を示す図である。
【図４】本発明の発酵ブイヨンの酵素による処理の結果を示す図である。
【図５】本発明の酵素で処理した試料と処理しない参考試料の特性の相違を示す図である。