【誤訳訂正書】
【提出日】平成22年12月9日(2010.12.9)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者への移植のための、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞の集団を作る方法であって、
a)初代ヒトOEG細胞のサンプルを提供すること、
b)1つの発癌遺伝子または発癌遺伝子の組合せを含む除去可能なDNAセグメントを含むDNA構築物で前記OEG細胞を形質転換することによってOEG細胞を不死化させて、不死化OEG細胞を生成すること、
c)前記不死化OEG細胞を増殖させること、
d)成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する特性を維持するこれらの不死化OEGクローン細胞系を選択すること、および
e)前記不死化OEG細胞から前記1つの発癌遺伝子または発癌遺伝子の組合せを除去し、該除去により、前記患者への移植のための、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、ヒトOEG細胞の集団を生成することを含む方法。
【請求項２】
前記1つの発癌遺伝子または発癌遺伝子の組合せが、それをリコンビナーゼ標的部位に隣接させることによって除去可能になり、該除去が、発現されると該リコンビナーゼ標的部位を特異的に認識するリコンビナーゼを生成する遺伝子を前記不死化細胞の中に導入することによって成し遂げられる、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前記リコンビナーゼがCreリコンビナーゼであり、前記リコンビナーゼ標的部位がloxP部位である、請求項2に記載の方法。
【請求項４】
前記発癌遺伝子が、SV40ラージT抗原をコードする遺伝子、テロメラーゼ触媒サブユニットをコードする遺伝子、Bmi-1タンパク質をコードする遺伝子、または前記発癌遺伝子のいずれかの組合せである、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
前記除去可能なDNAセグメントが自殺遺伝子をさらに含み、該自殺遺伝子は、前記除去可能なDNAセグメントが前記細胞から除去されない場合、外来性の物質による前記不死化細胞の破壊を可能にする遺伝子産物をコードする、請求項1に記載の方法。
【請求項６】
前記自殺遺伝子が、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼをコードする遺伝子であり、前記細胞は、前記除去可能なDNAセグメントが細胞から除去されない場合、ガンシクロビルへの曝露によって破壊される、請求項5に記載の方法。
【請求項７】
請求項5に記載の方法によって生成される、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞の集団。
【請求項８】
神経損傷の処置のための医薬の調製における、請求項1から6のいずれか一項に記載の方法によって生成できる、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞の集団の使用であって、前記医薬が、患者のニューロン損傷領域におけるニューロン再生の促進を提供するために、該患者に移植するための請求項7に記載のヒトOEG細胞の十分量を含む使用。
【請求項９】
患者に移植するための、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞の集団を作る方法であって、
a)初代ヒトOEG細胞のサンプルを提供すること、
b)1つの発癌遺伝子または発癌遺伝子の組合せと、選択可能マーカー遺伝子と、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼをコードする遺伝子とを、前記遺伝子がともにその両側でloxP部位に隣接した状態で含む除去可能なDNAセグメントを含むDNA構築物で前記OEG細胞を形質転換することによってOEG細胞を不死化させること、
c)不死化ヒトOEG細胞を増殖させること、
d)成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する特性を維持する不死化OEGクローン細胞系を選択すること、および
e)前記DNAセグメントを前記不死化OEG細胞から除去することによって該ヒトOEG細胞の不死化を逆行させ、該除去は、loxP部位でのDNAセグメントの切除をもたらすために、Creリコンビナーゼをコードする遺伝子を前記不死化OEG細胞に導入することによって成し遂げられ、該切除により、患者への移植のための、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、ヒトOEG細胞の集団が生成されることを含む方法。
【請求項１０】
前記発癌遺伝子が、SV40ラージT抗原をコードする遺伝子、テロメラーゼ触媒サブユニットをコードする遺伝子、Bmi-1タンパク質をコードする遺伝子、またはこれらの発癌遺伝子のいずれかの組合せである、請求項9に記載の方法。
【請求項１１】
請求項9に記載の方法によって生成される、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞の集団。
【請求項１２】
神経損傷の処置のための医薬の調製における、請求項9または10に記載の方法によって生成できる、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞の集団の使用であって、前記医薬が、患者のニューロン損傷領域におけるニューロン再生の促進を提供するために、該患者に移植するための請求項11に記載のOEG細胞の十分量を含む使用。
【請求項１３】
可逆的に不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞内で、DNA構築物を、リコンビナーゼ標的部位での切断によって1つの発癌遺伝子または発癌遺伝子の組合せを切除するリコンビナーゼに曝露することによって生成される、患者への移植の際に成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞。
【請求項１４】
ニューロン損傷の処置のための医薬の調製における、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞の集団の使用であって、前記医薬が、患者のニューロン損傷領域におけるニューロン再生の促進を提供するために、該患者に移植するための請求項13に記載の逆不死化されたヒトOEG細胞の十分量を含む使用。
【請求項１５】
請求項1から6または9から10のいずれか一項に記載の方法にしたがって調製された逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞のコレクションを含む細胞ライブラリー。
【請求項１６】
不死化をOEG細胞に授ける1つの発癌遺伝子または発癌遺伝子の組合せに隣接する2つのリコンビナーゼ標的部位を含むDNA構築物で形質転換された初代ヒトOEG細胞を含み、該不死化が、前記標的部位が該標的部位を特異的に認識するリコンビナーゼに曝露されたときに、該リコンビナーゼ標的部位で切断されることによる前記発癌遺伝子の切除によって可逆的である、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア(OEG)細胞系。
【請求項１７】
治療の方法に使用するための、請求項16に記載のヒト細胞系を含む医薬組成物。
【請求項１８】
ニューロン再生の促進に使用するための、請求項16に記載のヒト細胞系を含む医薬組成物。
【請求項１９】
請求項16から18のいずれか一項に記載のヒト細胞系と、製薬的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項２０】
ニューロン損傷を処置するための医薬の調製における、請求項7、11、13または16に記載の、成体CNSニューロンからの軸索再生を促進する能力を有する、逆不死化されたヒト嗅神経鞘グリア細胞の使用。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２２】
本発明のもう1つの態様は、患者に移植するための機能性OEG細胞の集団を作る方法であって、(a)初代OEG細胞のサンプルを提供すること、(b)1つの発癌遺伝子(または発癌遺伝子の組合せ)をコードする遺伝子と、選択可能マーカー遺伝子と、単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼをコードする遺伝子とを、遺伝子がともにその両側でloxP部位に隣接した状態で含む除去可能なDNA構築物を含むベクターでOEG細胞を形質転換することによってOEG細胞を不死化させること、(c)不死化OEG細胞を増殖させること、(d)親OEG細胞の機能特性を維持する不死化OEGクローン細胞系を選択すること、および(e)DNA構築物を不死化OEG細胞から除去することによってOEG細胞の不死化を逆行させ、除去は、loxP部位でのDNA構築物の切除をもたらすために、Creリコンビナーゼをコードする遺伝子を不死化OEG細胞に導入することによって成し遂げられ、切除は、患者への移植のための機能性OEG細胞の集団の生成という結果になることを含む方法を提供する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３４】
用語「可逆的不死化」は、細胞が、後にそれらが非不死化状態に戻されることを可能にする手段によって不死化されるプロセスを意味する。