【手続補正書】
【提出日】平成23年8月1日(2011.8.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
候補化合物がGタンパク質共役受容体（GPCR）の長時間作用性アゴニストであるかどうかを決定するための方法であって、以下の工程を含む方法:
（a）RG形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;
（b）RG形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定する工程;
（c）R0形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;および
（d）R0形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定し、（i）RG形態のGPCRに対して、GPCRに対する内因性アゴニストの少なくとも10％の親和性を有する化合物、および（ii）R0形態のGPCRに対して前記内因性アゴニストよりも高い親和性を有する化合物を、GPCRの長時間作用性アゴニストとして同定する工程。
【請求項２】
（e）候補化合物を非ヒト動物に投与する工程、および
（f）前記化合物に対する前記動物の少なくとも1つの生理的応答を測定する工程
をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項３】
受容体がヒト受容体である、請求項1記載の方法。
【請求項４】
GPCRがセクレチンファミリーの受容体である、請求項1記載の方法。
【請求項５】
受容体がPTH/PTHrP受容体である、請求項4記載の方法。
【請求項６】
PTH/PTHrP受容体がヒト受容体である、請求項5記載の方法。
【請求項７】
測定する工程（b）を、細胞内または血中カルシウムレベルを測定することによって実施する、請求項5記載の方法。
【請求項８】
測定する工程（b）または工程（d）を、競合結合アッセイを用いて実施する、請求項1記載の方法。
【請求項９】
競合結合アッセイが、RG形態のGPCRに特異的であるかまたはR0形態のGPCRに特異的であるリガンドを使用する、請求項8記載の方法。
【請求項１０】
測定する工程（b）を遅延型（delayed）cAMPアッセイを用いて実施する、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
R0形態のGPCRを、非加水分解性ヌクレオチド類似体を用いて富化する、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
ヌクレオチド類似体がGTPγSである、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
RG形態のGPCRを、ドミナントネガティブGタンパク質を用いて富化する、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
受容体が細胞上または膜内に存在する、請求項1記載の方法。
【請求項１５】
候補化合物がペプチドを含む、請求項1記載の方法。
【請求項１６】
候補化合物が化学物質ライブラリーまたは天然産物ライブラリー由来である、請求項1記載の方法。
【請求項１７】
候補化合物がGタンパク質共役受容体（GPCR）の短時間作用性アゴニストであるかどうかを決定するための方法であって、以下の工程を含む方法:
（a）RG形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;
（b）RG形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定する工程;
（c）R0形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;および
（d）R0形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定し、（i）RG形態のGPCRに対して、GPCRに対する内因性アゴニストの少なくとも10％の親和性を有し、且つ（ii）R0形態のGPCRに対して前記内因性アゴニストよりも低い親和性を有する化合物を、GPCRの短時間作用性アゴニストとして同定する工程。
【請求項１８】
受容体がヒト受容体である、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
（e）候補化合物を非ヒト動物に投与する工程、および
（f）前記化合物に対する前記動物の少なくとも1つの生理的応答を測定する工程
をさらに含む、請求項17記載の方法。
【請求項２０】
GPCRがセクレチンファミリーの受容体である、請求項16記載の方法。
【請求項２１】
受容体がPTH/PTHrP受容体である、請求項20記載の方法。
【請求項２２】
PTH/PTHrP受容体がヒト受容体である、請求項21記載の方法。
【請求項２３】
測定する工程（b）を、細胞内または血中カルシウムレベルを測定することによって実施する、請求項21記載の方法。
【請求項２４】
測定する工程（b）または工程（d）を、競合結合アッセイを用いて実施する、請求項17記載の方法。
【請求項２５】
競合結合アッセイが、RG形態のGPCRに特異的であるまたはR0形態のGPCRに特異的であるリガンドを使用する、請求項23記載の方法。
【請求項２６】
測定する工程（b）を遅延型cAMPアッセイを用いて実施する、請求項17記載の方法。
【請求項２７】
R0形態のGPCRを、非加水分解性ヌクレオチド類似体を用いて富化する、請求項17記載の方法。
【請求項２８】
ヌクレオチド類似体がGTPγSである、請求項11記載の方法。
【請求項２９】
RG形態のGPCRを、ドミナントネガティブGタンパク質を用いて富化する、請求項17記載の方法。
【請求項３０】
受容体が細胞上または膜内に存在する、請求項17記載の方法。
【請求項３１】
候補化合物がペプチドを含む、請求項17記載の方法。
【請求項３２】
候補化合物が化学物質ライブラリーまたは天然産物ライブラリー由来である、請求項17記載の方法。
【請求項３３】
PTH RGに対して親和性を有し、且つPTH R0に対して低い親和性を有するポリペプチド。
【請求項３４】
野生型PTHまたはPTHrP配列と比較して1またはそれ以上のアミノ酸の置換、欠失、および/または付加によって修飾されたアミノ酸配列を有する、請求項33記載のポリペプチド。
【請求項３５】
アミノ酸が、5位にヒスチジンを有するまたは23位にアラニンを有する、請求項34記載のポリペプチド。
【請求項３６】
以下の式Ala23PTH、His5-PTH、およびHis5-PTHrPによって表されるペプチド、またはそのフラグメント中に、野生型配列と比較して少なくとも1つのアミノ酸置換を有する、請求項33記載のポリペプチド。
【請求項３７】
アミノ酸配列が、野生型PTHと比較してPTHRのアミノ末端細胞外ドメインに対してより低い親和性を有する、請求項34記載のポリペプチド。
【請求項３８】
アミノ酸配列が、PTHまたはPTHrP配列の20位のアラニン、23位のアラニン、24位のアラニン、および28位のアラニンからなる群より選択される少なくとも1つの置換を含む、請求項37記載のポリペプチド。
【請求項３９】
図26Bの表においてRG選択的と同定されるもののいずれかからなる群より選択される、請求項33記載のポリペプチド。
【請求項４０】
式中、
X1が、Ser、Ala、Gly、もしくはAibであり;
X2が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X3が、Ala、Asn、Glu、Val、Asp、もしくはGlnであり;
X4が、Leu、Val、Ala、Trp、Ile、Met、Lys、Arg、もしくはHarであり;
X5が、Gly、His、Arg、Ala、もしくはAibであり;
X6が、Lys、Gln、Leu、His、Trp、Ala、Arg、もしくはAibであり;且つ
X7が、His、Arg、Leu、Phe、Trp、もしくはAibである、アミノ酸配列:
2010536327.tif 000001
またはアミノ酸1〜10、1〜11、1〜12、もしくは1〜13を含むそのフラグメントを含む、請求項34もしくは37記載のポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項４１】
20アミノ酸長より短いアミノ酸配列を有する、請求項40記載のポリペプチド。
【請求項４２】
アミノ酸配列が10〜14アミノ酸長である、請求項41記載のポリペプチド。
【請求項４３】
本質的に前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項40記載のポリペプチド。
【請求項４４】
前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項43記載のポリペプチド。
【請求項４５】
式中、
X1が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X2が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X3が、IleもしくはHisであり;
X4が、Asn、Glu、Val、Asp、Glu、もしくはGlnであり;
X5が、Leu、Val、Ala、Trp、Ile、Met、Lys、Arg、もしくはHarであり;
X6が、Gly、His、Arg、もしくはAlaであり;
X7が、Lys、Gln、Leu、His、Trp、Ala、もしくはArgであり;
X8が、His、Arg、Leu、Phe、もしくはTrpであり;
X9が、ArgもしくはAlaであり;
X10が、Trp、Phe、もしくはAlaであり;
X11が、LeuもしくはAlaであり;且つ
X12が、LeuもしくはAlaである、アミノ酸配列:
2010536327.tif 000002
または該アミノ酸配列のアミノ酸1〜24、1〜25、1〜26、もしくは1〜27を含むそのフラグメントを含むポリペプチドであって、該アミノ酸配列が、X3位のHis、X9位のAla、X10位のAla、X11位のAla、およびX12位のAlaからなる群より選択されるアミノ酸の少なくとも1つを含む、請求項33記載のポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項４６】
50アミノ酸長より短い、請求項45記載のポリペプチド。
【請求項４７】
24〜28アミノ酸長である、請求項46記載のポリペプチド。
【請求項４８】
本質的に前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項45記載のポリペプチド。
【請求項４９】
前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項48記載のポリペプチド。
【請求項５０】
X9、X10、X11、またはX12の少なくとも1つがアラニンである、請求項45〜49記載のポリペプチド。
【請求項５１】
請求項33〜50記載のポリペプチドおよび薬学的に許容される担体を含む、組成物。
【請求項５２】
請求項33〜51のいずれか一項記載のポリペプチドまたは組成物を含む、骨粗しょう症を治療するための薬学的組成物。
【請求項５３】
請求項33〜51のいずれか一項記載のポリペプチドを含む、骨折修復、骨軟化症、関節炎、血小板減少症、副甲状腺機能低下症もしくは高リン血症を治療するまたは幹細胞動員を高めるための薬学的組成物。
【請求項５４】
投与経路が、皮下的、静脈内、鼻腔内、経肺的、経皮的、および経口的からなる群より選択される、請求項52または53記載の薬学的組成物。
【請求項５５】
PTH受容体に結合し、且つR0形態のPTH受容体に高い親和性を有する、ポリペプチド。
【請求項５６】
野生型PTHまたはPTHrP配列と比較して1またはそれ以上のアミノ酸の置換、欠失および/または付加によって修飾されたアミノ酸配列を有する、請求項55記載のポリペプチド。
【請求項５７】
7.9nM未満のIC50を有する図26Bのペプチドのいずれか、
2010536327.tif 000003
からなる群より選択される、請求項55記載のポリペプチド。
【請求項５８】
アミノ酸配列が、野生型PTHと比較してPTHRのアミノ末端細胞外ドメインに対してより高い親和性を有する、請求項55記載のポリペプチド。
【請求項５９】
アミノ酸配列が、19位にアルギニンまたは5位にイソロイシンを含む、請求項55または58記載のポリペプチド。
【請求項６０】
式中、
X1が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X2が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X3が、Asn、Glu、Val、Asp、Glu、もしくはGlnであり;
X4が、Leu、Val、Ala、Trp、Ile、Met、Lys、もしくはArgであり;
X5が、Gly、His、Arg、もしくはAlaであり;
X6が、Lys、Gln、Leu、His、Trp、Ala、もしくはArgであり;且つ
X7が、His、Arg、Leu、Phe、もしくはTrpである、
2010536327.tif 000004
のアミノ酸配列、または該アミノ酸配列のアミノ酸1〜24、1〜25、1〜26、もしくは1〜27を含有するそのフラグメントを含む、請求項55〜59記載のポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項６１】
50アミノ酸長より短い、請求項60記載のポリペプチド。
【請求項６２】
24〜28アミノ酸長である、請求項61記載のポリペプチド。
【請求項６３】
本質的に前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項60記載のポリペプチド。
【請求項６４】
請求項60〜63記載のポリペプチドおよび薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物。
【請求項６５】
請求項55〜57のいずれか一項記載のポリペプチドを含む、副甲状腺機能低下症、高リン血症、腫瘍状石灰沈着症、および骨粗しょう症からなる群より選択される疾患または状態を治療するための薬学的組成物。
【請求項６６】
請求項55〜57のいずれか一項記載のポリペプチドを含む、骨折を修復する、骨軟化症、関節炎、血小板減少症を治療する、または幹細胞を動員するための薬学的組成物。
【請求項６７】
投与経路が、皮下的、静脈内、鼻腔内、経肺的、経皮的、および経口的からなる群より選択される、請求項65または66記載の薬学的組成物。
【請求項６８】
式中、
Xlが、Leu、Ala、Ser、Met、Phe、もしくはGluであり;
X2が、Phe、Ala、Ser、Leu、Asn、Trp、Glu、もしくはLysであり;
X3が、His、Leu、Arg、Lys、Trp、Ile、もしくはPheであり;
X4が、His、Ala、Ser、Asn、Lys、もしくはArgであり;
X5が、Ala、Gly、Ser、Asn、Gln、Trp、Glu、もしくはLysであり;
X6が、Glu、Gly、Ser、Leu、Asn、Asp、Lys、もしくはAlaであり;
X7が、Ile、Leu、Val、Lys、もしくはAlaであり;
X8が、His、もしくはAlaであり;
X9が、Thr、Asn、もしくはAlaであり;且つ
X10が、Ala もしくはPheである、アミノ酸配列:
2010536327.tif 000005
または該アミノ酸配列のアミノ酸1〜24、1〜25、1〜26、1〜27、1〜28、1〜29、1〜30、1〜31、1〜32、1〜33、1〜34、もしくは1〜35を含有するそのフラグメントを含み、対応する野生型PTHrP配列またはそのフラグメントと比較して少なくとも1つのアミノ酸の置換を含む、ポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
【請求項６９】
50アミノ酸長より短い、請求項68記載のポリペプチド。
【請求項７０】
ポリペプチドもしくはそのフラグメントが28〜36アミノ酸長である、請求項69記載のポリペプチド。
【請求項７１】
XlがAlaまたはGluである、X2がAlaである、X3がLeuである、およびX4がLysであるアミノ酸置換からなる群より選択される少なくとも1つのアミノ酸置換を有する、請求項68〜70記載のポリペプチド。
【請求項７２】
表1に示すアミノ酸配列を含む、請求項68〜70記載のポリペプチド。
【請求項７３】
アミノ酸配列
2010536327.tif 000006
を含む、請求項71または72記載のポリペプチド。
【請求項７４】
アミノ酸配列
2010536327.tif 000007
からなる、請求項73記載のポリペプチド。
【請求項７５】
ヒドロキシル基を有するかまたはそのC末端でアミド化されている、請求項68〜70記載のポリペプチド。
【請求項７６】
本質的に前記アミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、請求項68〜75記載のポリペプチド。
【請求項７７】
RG選択的であるかまたはR0形態のPTH受容体に低い結合親和性を有する、請求項68〜76記載のポリペプチド。
【請求項７８】
請求項68〜77記載のポリペプチドのいずれかおよび薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項７９】
請求項68〜78のいずれか一項記載のポリペプチドまたは組成物を含む、骨粗しょう症を治療するための薬学的組成物。
【請求項８０】
請求項68〜78のいずれか一項記載のポリペプチドを含む、骨折修復、骨軟化症、関節炎、血小板減少症、副甲状腺機能低下症もしくは高リン血症を治療する、または幹細胞動員を高めるための薬学的組成物。
【請求項８１】
投与経路が、皮下的、静脈内、鼻腔内、経肺的、経皮的、および経口的からなる群より選択される、請求項79または80記載の薬学的組成物。
【請求項８２】
請求項33〜50、55〜63、および68〜77のいずれか一項記載のポリペプチドをコードする配列を含む、核酸。
【請求項８３】
プロモーターに機能的に連結される、請求項82記載の核酸。
【請求項８４】
請求項83記載の核酸を含む、ベクター。
【請求項８５】
請求項84記載のベクターを含む、細胞。
【請求項８６】
ポリペプチドを作製する方法であって、該ポリペプチドが発現される条件下で請求項85記載の細胞を増殖させる工程を含む、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
本発明の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明、図面、および特許請求の範囲から明らかである。
[請求項1001]
候補化合物がGタンパク質共役受容体（GPCR）の長時間作用性アゴニストであるかどうかを決定するための方法であって、以下の工程を含む方法:
（a）RG形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;
（b）RG形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定する工程;
（c）R0形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;および
（d）R0形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定し、（i）RG形態のGPCRに対して、GPCRに対する内因性アゴニストの少なくとも10％の親和性を有する化合物、および（ii）R0形態のGPCRに対して前記内因性アゴニストよりも高い親和性を有する化合物を、GPCRの長時間作用性アゴニストとして同定する工程。
[請求項1002]
（e）候補化合物を動物に投与する工程、および
（f）前記化合物に対する前記動物の少なくとも1つの生理的応答を測定する工程
をさらに含む、請求項1001記載の方法。
[請求項1003]
受容体がヒト受容体である、請求項1001記載の方法。
[請求項1004]
GPCRがセクレチンファミリーの受容体である、請求項1001記載の方法。
[請求項1005]
受容体がPTH/PTHrP受容体である、請求項1004記載の方法。
[請求項1006]
PTH/PTHrP受容体がヒト受容体である、請求項1005記載の方法。
[請求項1007]
測定する工程（b）を、細胞内または血中カルシウムレベルを測定することによって実施する、請求項1005記載の方法。
[請求項1008]
測定する工程（b）または工程（d）を、競合結合アッセイを用いて実施する、請求項1001記載の方法。
[請求項1009]
競合結合アッセイが、RG形態のGPCRに特異的であるかまたはR0形態のGPCRに特異的であるリガンドを使用する、請求項1008記載の方法。
[請求項1010]
測定する工程（b）を遅延型（delayed）cAMPアッセイを用いて実施する、請求項1001記載の方法。
[請求項1011]
R0形態のGPCRを、非加水分解性ヌクレオチド類似体を用いて富化する、請求項1001記載の方法。
[請求項1012]
ヌクレオチド類似体がGTPγSである、請求項1011記載の方法。
[請求項1013]
RG形態のGPCRを、ドミナントネガティブGタンパク質を用いて富化する、請求項1001記載の方法。
[請求項1014]
受容体が細胞上または膜内に存在する、請求項1001記載の方法。
[請求項1015]
候補化合物がペプチドを含む、請求項1001記載の方法。
[請求項1016]
候補化合物が化学物質ライブラリーまたは天然産物ライブラリー由来である、請求項1001記載の方法。
[請求項1017]
候補化合物がGタンパク質共役受容体（GPCR）の短時間作用性アゴニストであるかどうかを決定するための方法であって、以下の工程を含む方法:
（a）RG形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;
（b）RG形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定する工程;
（c）R0形態であるGPCRを前記化合物と接触させる工程;および
（d）R0形態のGPCRに対する前記化合物の親和性を測定し、（i）RG形態のGPCRに対して、GPCRに対する内因性アゴニストの少なくとも10％の親和性を有し、且つ（ii）R0形態のGPCRに対して前記内因性アゴニストよりも低い親和性を有する化合物を、GPCRの短時間作用性アゴニストとして同定する工程。
[請求項1018]
受容体がヒト受容体である、請求項1017記載の方法。
[請求項1019]
（e）候補化合物を動物に投与する工程、および
（f）前記化合物に対する前記動物の少なくとも1つの生理的応答を測定する工程
をさらに含む、請求項1017記載の方法。
[請求項1020]
GPCRがセクレチンファミリーの受容体である、請求項1016記載の方法。
[請求項1021]
受容体がPTH/PTHrP受容体である、請求項1020記載の方法。
[請求項1022]
PTH/PTHrP受容体がヒト受容体である、請求項1021記載の方法。
[請求項1023]
測定する工程（b）を、細胞内または血中カルシウムレベルを測定することによって実施する、請求項1021記載の方法。
[請求項1024]
測定する工程（b）または工程（d）を、競合結合アッセイを用いて実施する、請求項1017記載の方法。
[請求項1025]
競合結合アッセイが、RG形態のGPCRに特異的であるまたはR0形態のGPCRに特異的であるリガンドを使用する、請求項1023記載の方法。
[請求項1026]
測定する工程（b）を遅延型cAMPアッセイを用いて実施する、請求項1017記載の方法。
[請求項1027]
R0形態のGPCRを、非加水分解性ヌクレオチド類似体を用いて富化する、請求項1017記載の方法。
[請求項1028]
ヌクレオチド類似体がGTPγSである、請求項1011記載の方法。
[請求項1029]
RG形態のGPCRを、ドミナントネガティブGタンパク質を用いて富化する、請求項1017記載の方法。
[請求項1030]
受容体が細胞上または膜内に存在する、請求項1017記載の方法。
[請求項1031]
候補化合物がペプチドを含む、請求項1017記載の方法。
[請求項1032]
候補化合物が化学物質ライブラリーまたは天然産物ライブラリー由来である、請求項1017記載の方法。
[請求項1033]
PTH RGに対して親和性を有し、且つPTH R0に対して低い親和性を有するポリペプチド。
[請求項1034]
野生型PTHまたはPTHrP配列と比較して1またはそれ以上のアミノ酸の置換、欠失、および/または付加によって修飾されたアミノ酸配列を有する、請求項1033記載のポリペプチド。
[請求項1035]
アミノ酸が、5位にヒスチジンを有するまたは23位にアラニンを有する、請求項1034記載のポリペプチド。
[請求項1036]
以下の式Ala23PTH、His5-PTH、およびHis5-PTHrPによって表されるペプチド、またはそのフラグメント中に、野生型配列と比較して少なくとも1つのアミノ酸置換を有する、請求項1033記載のポリペプチド。
[請求項1037]
アミノ酸配列が、野生型PTHと比較してPTHRのアミノ末端細胞外ドメインに対してより低い親和性を有する、請求項1034記載のポリペプチド。
[請求項1038]
アミノ酸配列が、PTHまたはPTHrP配列の20位のアラニン、23位のアラニン、24位のアラニン、および28位のアラニンからなる群より選択される少なくとも1つの置換を含む、請求項1037記載のポリペプチド。
[請求項1039]
図26Bの表においてRG選択的と同定されるもののいずれかからなる群より選択される、請求項1033記載のポリペプチド。
[請求項1040]
式中、
X1が、Ser、Ala、Gly、もしくはAibであり;
X2が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X3が、Ala、Asn、Glu、Val、Asp、もしくはGlnであり;
X4が、Leu、Val、Ala、Trp、Ile、Met、Lys、Arg、もしくはHarであり;
X5が、Gly、His、Arg、Ala、もしくはAibであり;
X6が、Lys、Gln、Leu、His、Trp、Ala、Arg、もしくはAibであり;且つ
X7が、His、Arg、Leu、Phe、Trp、もしくはAibである、アミノ酸配列:
2010536327.tif 000008
またはアミノ酸1〜10、1〜11、1〜12、もしくは1〜13を含むそのフラグメントを含む、請求項1034もしくは1037記載のポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
[請求項1041]
20アミノ酸長より短いアミノ酸配列を有する、請求項1040記載のポリペプチド。
[請求項1042]
アミノ酸配列が10〜14アミノ酸長である、請求項1041記載のポリペプチド。
[請求項1043]
本質的に前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項1040記載のポリペプチド。
[請求項1044]
前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項1043記載のポリペプチド。
[請求項1045]
式中、
X1が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X2が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X3が、IleもしくはHisであり;
X4が、Asn、Glu、Val、Asp、Glu、もしくはGlnであり;
X5が、Leu、Val、Ala、Trp、Ile、Met、Lys、Arg、もしくはHarであり;
X6が、Gly、His、Arg、もしくはAlaであり;
X7が、Lys、Gln、Leu、His、Trp、Ala、もしくはArgであり;
X8が、His、Arg、Leu、Phe、もしくはTrpであり;
X9が、ArgもしくはAlaであり;
X10が、Trp、Phe、もしくはAlaであり;
X11が、LeuもしくはAlaであり;且つ
X12が、LeuもしくはAlaである、アミノ酸配列:
2010536327.tif 000009
または該アミノ酸配列のアミノ酸1〜24、1〜25、1〜26、もしくは1〜27を含むそのフラグメントを含むポリペプチドであって、該アミノ酸配列が、X3位のHis、X9位のAla、X10位のAla、X11位のAla、およびX12位のAlaからなる群より選択されるアミノ酸の少なくとも1つを含む、請求項1033記載のポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
[請求項1046]
50アミノ酸長より短い、請求項1045記載のポリペプチド。
[請求項1047]
24〜28アミノ酸長である、請求項1046記載のポリペプチド。
[請求項1048]
本質的に前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項1045記載のポリペプチド。
[請求項1049]
前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項1048記載のポリペプチド。
[請求項1050]
X9、X10、X11、またはX12の少なくとも1つがアラニンである、請求項1045〜1049記載のポリペプチド。
[請求項1051]
請求項1033〜1050記載のポリペプチドおよび薬学的に許容される担体を含む、組成物。
[請求項1052]
請求項1033〜1051のいずれか一項記載のポリペプチドまたは組成物を、骨粗しょう症を治療するのに十分な量で、その必要のある対象に投与する工程を含む、対象において骨粗しょう症を治療するための方法。
[請求項1053]
対象において骨折修復、骨軟化症、関節炎、血小板減少症、副甲状腺機能低下症もしくは高リン血症を治療するまたは幹細胞動員を高めるための方法であって、請求項1033〜1051のいずれか一項記載のポリペプチドを、前記疾患を治療するまたは幹細胞動員を高めるのに十分な量で前記対象に投与する工程を含む、方法。
[請求項1054]
投与経路が、皮下的、静脈内、鼻腔内、経肺的、経皮的、および経口的からなる群より選択される、請求項1052または1053記載の方法。
[請求項1055]
PTH受容体に結合し、且つR0形態のPTH受容体に高い親和性を有する、ポリペプチド。
[請求項1056]
野生型PTHまたはPTHrP配列と比較して1またはそれ以上のアミノ酸の置換、欠失および/または付加によって修飾されたアミノ酸配列を有する、請求項1055記載のポリペプチド。
[請求項1057]
7.9nM未満のIC50を有する図26Bのペプチドのいずれか、
2010536327.tif 000010
からなる群より選択される、請求項1055記載のポリペプチド。
[請求項1058]
アミノ酸配列が、野生型PTHと比較してPTHRのアミノ末端細胞外ドメインに対してより高い親和性を有する、請求項1055記載のポリペプチド。
[請求項1059]
アミノ酸配列が、19位にアルギニンまたは5位にイソロイシンを含む、請求項1055または1058記載のポリペプチド。
[請求項1060]
式中、
X1が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X2が、Ser、Ala、もしくはAibであり;
X3が、Asn、Glu、Val、Asp、Glu、もしくはGlnであり;
X4が、Leu、Val、Ala、Trp、Ile、Met、Lys、もしくはArgであり;
X5が、Gly、His、Arg、もしくはAlaであり;
X6が、Lys、Gln、Leu、His、Trp、Ala、もしくはArgであり;且つ
X7が、His、Arg、Leu、Phe、もしくはTrpである、
2010536327.tif 000011
のアミノ酸配列、または該アミノ酸配列のアミノ酸1〜24、1〜25、1〜26、もしくは1〜27を含有するそのフラグメントを含む、請求項1055〜1059記載のポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
[請求項1061]
50アミノ酸長より短い、請求項1060記載のポリペプチド。
[請求項1062]
24〜28アミノ酸長である、請求項1061記載のポリペプチド。
[請求項1063]
本質的に前記アミノ酸配列、またはそのフラグメントからなる、請求項1060記載のポリペプチド。
[請求項1064]
請求項1060〜1063記載のポリペプチドおよび薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物。
[請求項1065]
対象において副甲状腺機能低下症、高リン血症、腫瘍状石灰沈着症、および骨粗しょう症からなる群より選択される疾患または状態を治療するための方法であって、請求項1055〜1057のいずれか一項記載のポリペプチドを、前記疾患または状態を治療するのに十分な量で、その必要のある対象に投与する工程を含む、方法。
[請求項1066]
骨折修復を必要とする、または骨軟化症、関節炎、血小板減少症を有する、または幹細胞動員を必要とする対象を治療するための方法であって、請求項1055〜1057のいずれか一項記載のポリペプチドを、前記骨折を修復する、前記疾患を治療する、または幹細胞を動員するのに十分な量で、前記対象に投与する工程を含む、方法。
[請求項1067]
投与経路が、皮下的、静脈内、鼻腔内、経肺的、経皮的、および経口的からなる群より選択される、請求項1065または1066記載の方法。
[請求項1068]
式中、
Xlが、Leu、Ala、Ser、Met、Phe、もしくはGluであり;
X2が、Phe、Ala、Ser、Leu、Asn、Trp、Glu、もしくはLysであり;
X3が、His、Leu、Arg、Lys、Trp、Ile、もしくはPheであり;
X4が、His、Ala、Ser、Asn、Lys、もしくはArgであり;
X5が、Ala、Gly、Ser、Asn、Gln、Trp、Glu、もしくはLysであり;
X6が、Glu、Gly、Ser、Leu、Asn、Asp、Lys、もしくはAlaであり;
X7が、Ile、Leu、Val、Lys、もしくはAlaであり;
X8が、His、もしくはAlaであり;
X9が、Thr、Asn、もしくはAlaであり;且つ
X10が、Ala もしくはPheである、アミノ酸配列:
2010536327.tif 000012
または該アミノ酸配列のアミノ酸1〜24、1〜25、1〜26、1〜27、1〜28、1〜29、1〜30、1〜31、1〜32、1〜33、1〜34、もしくは1〜35を含有するそのフラグメントを含み、対応する野生型PTHrP配列またはそのフラグメントと比較して少なくとも1つのアミノ酸の置換を含む、ポリペプチド、または薬学的に許容されるその塩。
[請求項1069]
50アミノ酸長より短い、請求項1068記載のポリペプチド。
[請求項1070]
ポリペプチドもしくはそのフラグメントが28〜36アミノ酸長である、請求項1069記載のポリペプチド。
[請求項1071]
XlがAlaまたはGluである、X2がAlaである、X3がLeuである、およびX4がLysであるアミノ酸置換からなる群より選択される少なくとも1つのアミノ酸置換を有する、請求項1068〜1070記載のポリペプチド。
[請求項1072]
表1に示すアミノ酸配列を含む、請求項1068〜1070記載のポリペプチド。
[請求項1073]
アミノ酸配列
2010536327.tif 000013
を含む、請求項1071または1072記載のポリペプチド。
[請求項1074]
アミノ酸配列
2010536327.tif 000014
からなる、請求項1073記載のポリペプチド。
[請求項1075]
ヒドロキシル基を有するかまたはそのC末端でアミド化されている、請求項1068〜1070記載のポリペプチド。
[請求項1076]
本質的に前記アミノ酸配列またはそのフラグメントからなる、請求項1068〜1075記載のポリペプチド。
[請求項1077]
RG選択的であるかまたはR0形態のPTH受容体に低い結合親和性を有する、請求項1068〜1076記載のポリペプチド。
[請求項1078]
請求項1068〜1077記載のポリペプチドのいずれかおよび薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
[請求項1079]
請求項1068〜1078のいずれか一項記載のポリペプチドまたは組成物を、骨粗しょう症を治療するのに十分な量で、その必要のある対象に投与する工程を含む、対象において骨粗しょう症を治療するための方法。
[請求項1080]
対象において骨折修復、骨軟化症、関節炎、血小板減少症、副甲状腺機能低下症もしくは高リン血症を治療する、または幹細胞動員を高めるための方法であって、請求項1068〜1078のいずれか一項記載のポリペプチドを、前記疾患を治療するまたは幹細胞動員を高めるのに十分な量で、前記対象に投与する工程を含む、方法。
[請求項1081]
投与経路が、皮下的、静脈内、鼻腔内、経肺的、経皮的、および経口的からなる群より選択される、請求項1079または1080記載の方法。
[請求項1082]
請求項1033〜1050、1055〜1063、および1068〜1077のいずれか一項記載のポリペプチドをコードする配列を含む、核酸。
[請求項1083]
プロモーターに機能的に連結される、請求項1082記載の核酸。
[請求項1084]
請求項1083記載の核酸を含む、ベクター。
[請求項1085]
請求項1084記載のベクターを含む、細胞。
[請求項1086]
ポリペプチドを作製する方法であって、該ポリペプチドが発現される条件下で請求項1085記載の細胞を増殖させる工程を含む、方法。