【手続補正書】
【提出日】平成23年1月20日(2011.1.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的試験サンプル中の１つ以上の標的型の標的分子の存在を試験するために、バッファとともに使用するための試験システムであって、
（ａ）第１の組の検出分子であって、
各々、１つ以上の生体認識分子（ＢＲＭ）フルオロフォアに対して固定化された１つ以上の生体認識分子（ＢＲＭ）を含み、各々の前記ＢＲＭは、前記試験サンプル中に存在する場合、前記ＢＲＭおよび前記標的分子の複合体を形成するように前記標的型のうちの１つに特異的であり、前記複合体は１つ以上の複合体型を含み、各々は前記標的型のうちの特定の１つと結合している前記検出分子のうちの異なる１つに対応する、第１の組の検出分子と、
（ｂ）マイクロ流体チップであって、
（ｉ）マイクロ流体チップ内の１つ以上の細長いサンプルチャンネルであって、前記複合体の流路が通過することを可能にするようにサイズ決定された、前記細長いサンプルチャネルと、
（ｉｉ）バッファの動作可能な流路が通過するための、マイクロ流体チップ内の１つ以上の流れ集束チャネルであって、前記１つ以上の流れ集束チャネルは、前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続し、前記流れ集束チャネルから出る前記バッファが前記サンプルチャネルのうちの少なくとも１つを通じて、縦一列の流れの前記複合体を動作可能に方向付ける、１つ以上の流れ集束チャネルと、
を画定するように成形されたチップ基板部を備える、マイクロ流体チップと、
（ｃ）前記縦一列の流れにおける前記複合体による吸収のために、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つに沿った照射位置において、電磁波（ＥＭＦ）放射線を動作可能に送達する照射装置であって、前記複合体は、前記ＥＭＦ放射線の吸収後に蛍光を放出し、前記複合体の前記蛍光は、各々前記複合体型の１つに対する独特の蛍光スペクトルを含む、照射装置と、
（ｄ）前記縦一列の流れを前記複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する検出装置であって、各々の前記複合体型の１つの前記弁別的な蛍光スペクトルに関して監視することによって、前記複合体の存在を同定する、検出装置と、
を備え、
それによって、前記試験サンプル中の前記標的分子の存在を同定する、
試験システム。
【請求項２】
各々の前記検出分子は、前記ＢＲＭおよび前記ＢＲＭフルオロフォアに対して固定化された、かつ前記ＢＲＭと前記ＢＲＭフルオロフォアとの間に実質的に配置された、マイクロビーズをさらに含み、前記ＢＲＭフルオロフォアは、前記ＥＭＦ放射線の吸収後に、前記弁別的な蛍光スペクトルの前記蛍光の少なくともＢＲＭ部分を放出する、請求項１に記載の試験システム。
【請求項３】
ＢＲＭフルオロフォアは、１つ以上の量子ドット型の１つ以上の量子ドットを含み、前記量子ドットはともに、前記ＥＭＦ放射線の吸収後に、前記弁別的な蛍光スペクトルの前記蛍光の少なくとも前記ＢＲＭ部分を放出する、請求項２に記載の試験システム。
【請求項４】
量子ドットが前記量子ドット型のうちの２つ以上を含む、請求項３に記載の試験システム。
【請求項５】
ＢＲＭフルオロフォアは、１つ以上の蛍光色素型の１つ以上の蛍光色素を含み、前記蛍光色素はＥＭＦ放射線の吸収後に、弁別的な蛍光スペクトルの蛍光の少なくともＢＲＭ部分を放出する、請求項２に記載の試験システム。
【請求項６】
複合体が約１０マイクロメートル（μｍ）未満のサイズである、請求項１から５のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項７】
複合体が約５μｍ未満のサイズである、請求項６に記載の試験システム。
【請求項８】
複合体が約１μｍ未満のサイズである、請求項７に記載の試験システム。
【請求項９】
各々の複合体が標的分子のそれぞれ１つに結合した標的マーカーフルオロフォアをさらに含み、前記標的マーカーフルオロフォアがＥＭＦ放射線の吸収後に、弁別的な蛍光スペクトルの蛍光の標的部分を放出する、請求項１から８のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項１０】
各々の検出分子が、前記ＢＲＭおよび前記ＢＲＭフルオロフォアに対して固定化された、かつ前記ＢＲＭと前記ＢＲＭフルオロフォアとの間に実質的に配置されたマイクロビーズをさらに含み、各々の前記複合体は、前記標的分子のそれぞれに結合した標的マーカーフルオロフォアをさらに含み、各々の前記複合体に対して、ＥＭＦ放射線の吸収後に、ＢＲＭフルオロフォアが弁別的な蛍光スペクトルの蛍光のＢＲＭ部分を放出し、前記標的マーカーフルオロフォアは、弁別的な蛍光スペクトルの蛍光の標的部分を放出し、これによって前記ＢＲＭフルオロフォアおよび前記標的マーカーフルオロフォアがともに、前記ＥＭＦ放射線の吸収後に前記弁別的な蛍光スペクトルの蛍光を放出する、請求項１に記載の試験システム。
【請求項１１】
検出装置は、前記縦一列の流れを前記複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する、少なくとも２つのアバランシェ光検出器（ＡＰＤ）を備え、第１の前記ＡＰＤの１つは、前記各々の複合体に対する前記独特の蛍光スペクトルの前記蛍光の前記ＢＲＭ部分の存在を受信および同定するように適合され、第２の前記ＡＰＤの１つは、前記各々の複合体に対する前記独特の蛍光スペクトルの前記蛍光の前記標的部分の存在を受信および同定するように適合される、請求項１０に記載の試験システム。
【請求項１２】
標的部分が各々の複合体に対する弁別的な蛍光スペクトルの蛍光の前記ＢＲＭ部分よりも低い強度を有し、前記第２のＡＰＤの１つが前記第１のＡＰＤの１つを上回る感度を有する、請求項１１に記載の試験システム。
【請求項１３】
生物学的試験サンプル中の１つ以上の標的型の標的分子の存在に対して試験するための試験システムであって、
バッファと、
第１の組の検出分子であって、各々の前記検出分子は、１つ以上のＢＲＭフルオロフォアに対して固定化された１つ以上の生体認識分子（ＢＲＭ）を備え、各々の前記ＢＲＭは、前記試験サンプル中に存在する場合、前記ＢＲＭおよび前記標的分子の複合体を形成するように、前記標的型のうちの１つに特異的であり、前記複合体は、１つ以上の複合体型を含み、各々は、前記標的型のうちのその特定の１つと結合している前記検出分子のうちの異なる１つに対応する、前記検出分子は電磁波（ＥＭＦ）放射線を吸収後に蛍光を放出する第１の組の検出分子とともに使用され、
（ａ）マイクロ流体チップであって、
（ｉ）試験分子が通過することを可能にするようにサイズ決定された１つ以上の細長いサンプルチャネルと、
（ｉｉ）バッファの動作可能な流路が通過するための１つ以上の流れ集束チャネルであって、前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続し、前記流れ集束チャネルから出る前記バッファが前記サンプルチャネルのうちの少なくとも１つを通じて縦一列の流れの前記複合体を動作可能に方向付ける、１つ以上の流れ集束チャネルと、
を画定するように成形されたチップ基板部を備える、マイクロ流体チップと、
（ｂ）前記縦一列の流れにおける前記複合体による吸収のために、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つに沿った照射位置において前記ＥＭＦ放射線を動作可能に送達する照射装置であって、前記複合体の蛍光が各々前記複合体型の１つに対する弁別的な蛍光スペクトルを含む、照射装置と、
（ｃ）前記縦一列の流れを前記複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する検出装置であって、各々の前記複合体型の１つの前記弁別的な蛍光スペクトルについて監視することによって、前記複合体の存在を同定する、検出装置と、
を備え、
それによって、前記試験サンプル中の前記標的分子の存在を同定する、試験システム。
【請求項１４】
サンプルチャネルのうちの少なくとも１つがチップ基板部の１つ以上の細長いチャネル壁によって画定され、前記チャネル壁は、２つの対向する側面チャネル部を備え、流れ集束チャネルから出るバッファが、少なくとも前記２つの対向する側面チャネル部から離間した関係にあるサンプル経路に沿って、前記縦一列の流れの複合体を動作可能に方向付ける、請求項１から１０および１３のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項１５】
マイクロ流体チップが、チップ基板部を下に置くスライドガラスをさらに備え、前記スライドガラスは、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つの底部チャネル部を画定し、前記チャネル壁が頂部チャネル部をさらに備え、前記サンプル経路が、動作可能に、前記底部チャネル部および前記頂部チャネル部の両方から前記離間した関係におかれる、請求項１４に記載の試験システム。
【請求項１６】
サンプルチャネルのうちの少なくとも１つがサンプル集束チャネルを備え、前記サンプルチャネルは、前記サンプル集束チャネルと流体連通しているサンプル供給チャネルをさらに備え、前記サンプル集束チャネルは前記流れ集束チャネルの下流にあり、前記流れ集束チャネルから出るバッファおよび縦一列の流れの複合体が、前記サンプル集束チャネルを通じて動作可能に流動する、請求項１から１０および１３から１５のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項１７】
サンプル集束チャネルにおけるバッファのバッファ流速が前記縦一列の流れにおける前記複合体の試験流速よりも高い、請求項１６に記載の試験システム。
【請求項１８】
流れ集束チャネルが少なくとも２つの流れ集束チャネルを備え、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つの上流にある前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続し、前記２つの流れ集束チャネルは、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つの反対側から、前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項１から１０および１３から１７のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項１９】
２つの流れ集束チャネルが、共通交差部において前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項１８に記載の試験システム。
【請求項２０】
流れ集束チャネルから出る前記バッファが、共通交差部の約１０マイクロメートル（μｍ）未満下流において、複合体を縦一列の流れに動作可能に集束する、請求項１９に記載の試験システム。
【請求項２１】
各々の１つ以上の流れ集束チャネルが、約９０度の接続角度で前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項１から１０および１３から２０のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項２２】
各々の１つ以上の流れ集束チャネルが、約４５度の接続角度で前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項１から１０および１３から２０のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項２３】
チップ基板部がポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）から製造される、請求項１から１０および１３から２２のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項２４】
サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つを通じた前記複合体の流路が動電学的流動によって促進される、請求項１から１０および１３から２３のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項２５】
流れ集束チャネルがサンプルチャネルと流体連通し、チップ基板部が前記流れ集束チャネルの各々１つずつのバッファ開始点に接続したバッファウェルと、前記流れ集束チャネルの上流にある前記サンプルチャネルのサンプル開始点に接続したサンプルウェルと、前記流れ集束チャネルの下流にある前記サンプルチャネルのうちの少なくとも１つの終点に接続した末端ウェルとを画定するようにさらに成形され、前記サンプルウェルに動作可能に配設されるサンプルウェル電極と、各前記バッファウェルに動作可能に配設されるバッファウェル電極と、前記末端ウェルに動作可能に配設される末端ウェル電極とをさらに備え、前記サンプルウェル電極は第１の極性の第１の電位を動作可能に供給され、前記末端ウェル電極は反対の第２の極性の第２の電位を動作可能に供給され、各前記バッファウェル電極は前記第１の極性の第３の電位を動作可能に供給される、請求項２４に記載の試験システム。
【請求項２６】
第３の電位が第１の電位よりも高い、請求項２５に記載の試験システム。
【請求項２７】
第１の電位に対する第３の電位の比率が約１．８：１である、請求項２６に記載の試験システム。
【請求項２８】
縦一列の流れにおける複合体の試験流速が毎分少なくとも約３０個の複合体である、請求項１から１０、１３から１６、および１８から２７のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項２９】
試験流速は、毎分少なくとも約６０個の複合体である、請求項２８に記載の試験システム。
【請求項３０】
試験流速が毎分約５００個の複合体である、請求項２９に記載の試験システム。
【請求項３１】
生物学的試験サンプル中の１つ以上の標的型の標的分子の存在に対して試験するための試験システムであって、
第１の組の検出分子であって、各々、１つ以上のＢＲＭフルオロフォアに対して固定化された１つ以上の生体認識分子（ＢＲＭ）を含み、各々前記ＢＲＭは、前記試験サンプル中に存在する場合、前記ＢＲＭおよび前記標的分子の複合体を形成するように、前記標的型のうちの１つに特異的であり、前記複合体は、１つ以上の複合体型を含み、各々が前記標的型のうちの特定の１つと結合している前記検出分子のうちの異なる１つに対応し、前記複合体は、電磁波（ＥＭＦ）放射線の吸収後に蛍光を放出する、第１の組の検出分子と、
前記複合体の流路が通過することを可能にするようにサイズ決定された１つ以上の細長いサンプルチャネルを画定するように成形されるチップ基板部を含み、縦一列の流れの前記複合体が前記サンプルチャネルのうちの少なくとも１つを通過するマイクロ流体チップと、
ともに使用され、
（ａ）前記縦一列の流れにおける前記複合体による吸収のために、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つに沿った照射位置において、前記ＥＭＦ放射線を動作可能に送達する照射装置であって、前記複合体は前記ＥＭＦ放射線の吸収後に蛍光を放出し、前記複合体の前記蛍光は、前記複合体型のそれぞれに対する弁別的な蛍光スペクトルを含む、照射装置と、
（ｂ）前記縦一列の流れを前記複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する検出装置であって、前記複合体型のそれぞれの前記弁別的な蛍光スペクトルについて監視することによって、前記複合体の存在を同定する、検出装置と、
を備え、
それによって、前記試験サンプル中の前記標的分子の存在を同定する、
試験システム。
【請求項３２】
照射装置が、縦一列の流れにおける前記複合体による吸収のために、ＥＭＦ放射線を動作可能に放出する発光ダイオード（ＬＥＤ）を備える、請求項１から１０および１３から３１のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項３３】
照射装置が、縦一列の流れにおける前記複合体による吸収のために、ＥＭＦ放射線を動作可能に放出するレーザーを備える、請求項１から１０および１３から３１のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項３４】
レーザーが約２ミリワット（mＷ）から約５０ミリワット（mＷ）の間の動作電力を有する、請求項３３に記載の試験システム。
【請求項３５】
レーザーの動作電力が約２０ミリワット（mＷ）から約２５ミリワット（mＷ）の間である、請求項３４に記載の試験システム。
【請求項３６】
照射装置によって動作可能に送達される前記ＥＭＦ放射線が、約４８８ｎｍのＥＭＦ波長を有する、請求項１から１０および１３から３５のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項３７】
検出装置が、縦一列の流れを複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する３つ以上のアバランシェ光検出器（ＡＰＤ）を備え、各々の前記ＡＰＤが前記複合体によって放出される前記蛍光における異なる波長範囲の存在を受信および同定するように適合される、請求項１から１０および１３から３６のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項３８】
第１の前記ＡＰＤの１つが緑色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第２の前記ＡＰＤの１つが黄色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第３の前記ＡＰＤの１つは、赤色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合される、請求項３７に記載の試験システム。
【請求項３９】
第１の前記ＡＰＤの１つが緑色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第２の前記ＡＰＤの１つが黄色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第３の前記ＡＰＤの１つがオレンジ色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第４の前記ＡＰＤの１つが赤色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合される、請求項３７に記載の試験システム。
【請求項４０】
第１の前記ＡＰＤの１つが青色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第２の前記ＡＰＤの１つが緑色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第３の前記ＡＰＤの１つが黄色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、第４の前記ＡＰＤの１つが赤色の波長範囲の存在を受信および同定するように適合される、請求項３７に記載の試験システム。
【請求項４１】
検出装置が、複合体によって放出される前記蛍光に対して前記縦一列の流れを監視する電荷結合素子を備える、請求項１から１０および１３から３６のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項４２】
検出装置が、縦一列の流れを複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する、少なくとも２つのアバランシェ光検出器（ＡＰＤ）を備え、各々の前記ＡＰＤは、前記複合体によって放出される前記蛍光において異なる波長範囲の存在を受信および同定するように適合され、前記検出装置が、前記縦一列の流れを前記複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する電荷結合素子をさらに備え、前記検出装置が、前記ＡＰＤまたは前記電荷結合素子のいずれかを使用した前記縦一列の流れの監視を切り替えるための切り替え手段をさらに備える、請求項１から１０および１３から３６のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項４３】
検出装置が、縦一列の流れを複合体によって放出される前記蛍光に関して監視する、少なくとも１つのトリップセンサを備え、各前記トリップセンサは、前記蛍光の強度に対応するデジタル信号を生成する、請求項１から１０および１３から３６のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項４４】
各トリップセンサが、蛍光の強度が最小強度を超えた場合のみ前記デジタル信号を生成し、各前記トリップセンサが異なる所定の前記最小強度を有する、請求項４３に記載の試験システム。
【請求項４５】
光ファイバーケーブルをさらに備え、前記光ファイバーケーブルが、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つに沿って、前記照射位置の実質的に近傍から前記検出装置に前記蛍光を動作可能に送達する、請求項１から４４のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項４６】
照射装置および検出装置を包納する筐体をさらに備え、前記筐体は、可搬用および臨床現場診断用途のためにサイズ決定および適合される、請求項１から４５のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項４７】
筐体が携帯型用途のためにサイズ決定および適合される、請求項４６に記載の試験システム。
【請求項４８】
生物学的試験サンプル中の１つ以上の標的型の標的分子の存在に対して試験するための試験システムであって、
バッファと、
第１の組の検出分子であって、各々、１つ以上の生体認識分子（ＢＲＭ）フルオロフォアに対して固定化された１つ以上のＢＲＭを備え、前記ＢＲＭのそれぞれは、前記試験サンプル中に存在する場合、前記ＢＲＭおよび前記標的分子の複合体を形成するように、前記標的型のうちの１つに特異的であり、前記複合体は、１つ以上の複合体型を含み、各々、前記標的型のうちのその特定の１つと結合している前記検出分子のうちの異なる１つに対応する、第１の組の検出分子と、
前記複合体による吸収のために電磁波（ＥＭＦ）放射線を送達することができる照射および検出装置であって、前記複合体が前記ＥＭＦ放射線の吸収後に蛍光を放出し、前記複合体の前記蛍光が各々前記複合体型の１つに対する弁別的な蛍光スペクトルを含み、各々の前記複合体型に対する前記弁別的なスペクトルの存在によって前記複合体を監視および同定することができる照射および検出装置と、
ともに使用され、
（ａ）前記複合体の流路が通過することを可能にするようにサイズ決定された、その中の１つ以上の細長いサンプルチャネルと、
（ｂ）前記バッファの流路が動作可能に通過するための１つ以上の流れ集束チャネルであって、前記１つ以上の流れ集束チャネルは前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続し、前記流れ集束チャネルから出る前記バッファが前記サンプルチャネルのうちの少なくとも１つを通じて、縦一列の流れの前記複合体を動作可能に方向付ける、１つ以上の流れ集束チャネルと、
を画定するように成形されたチップ基板部を備える、マイクロ流体チップを備え、
前記マイクロ流体チップは、前記縦一列の流れにおける前記複合体による吸収のために、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つに沿った照射位置において、前記照射および検出装置から前記ＥＭＦ放射線を動作可能に受信するように適合され、
前記マイクロ流体チップは、前記照射および検出装置が、前記縦一列の流れを前記複合体によって放出される前記蛍光に関して監視することを可能にするように適合され、
それによって、前記複合体が前記複合体型のそれぞれに対する前記弁別的な蛍光スペクトルの存在によって動作可能に同定可能であり、前記試験サンプル中の前記標的分子の存在が、前記試験システムによって動作可能に同定可能である、
試験システム。
【請求項４９】
サンプルチャネルの少なくとも１つが前記チップ基板部の１つ以上の細長いチャネル壁によって画定され、前記チャネル壁が２つの対向する側面チャネル部を備え、前記流れ集束チャネルから出る前記バッファが少なくとも前記２つの対向する側面チャネル部から離間した関係にあるサンプル経路に沿って前記縦一列の流れの前記複合体を動作可能に方向付ける、請求項４８に記載の試験システム。
【請求項５０】
マイクロ流体チップが前記チップ基板部の下に置くスライドガラスをさらに備え、前記スライドガラスは、サンプルチャネルのうちの少なくとも１つの底部チャネル部を画定し記チャネル壁は、頂部チャネル部をさらに備え、サンプル経路が動作可能に前記底部チャネル部および前記頂部チャネル部の両方から離間した関係にされる、請求項４９に記載の試験システム。
【請求項５１】
サンプルチャネルのうちの少なくとも１つがサンプル集束チャネルを備え、前記サンプルチャネルは前記サンプル集束チャネルと流体連通しているサンプル供給チャネルをさらに備え、前記サンプル集束チャネルは前記流れ集束チャネルの下流にあり、前記流れ集束チャネルから出るバッファおよび縦一列の流れの複合体がサンプル集束チャネルを通じて動作可能に流動する、請求項４８から５０のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項５２】
流れ集束チャネルが少なくとも２つの流れ集束チャネルを備え、サンプルチャネルのうちの少なくとも１つの上流にある１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続し、前記２つの流れ集束チャネルが、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つの反対側から、前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項４８から５１のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項５３】
前記２つの流れ集束チャネルが共通交差部において前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項５２に記載の試験システム。
【請求項５４】
流れ集束チャネルから出るバッファが、前記共通交差部の下流約１０マイクロメートル（μｍ）未満において、複合体を縦一列の流れに動作可能に集束する、請求項５３に記載の試験システム。
【請求項５５】
１つ以上の流れ集束チャネルの各々が約９０度の接続角度で前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項４８から５４のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項５６】
１つ以上の流れ集束チャネルの各々が約４５度の接続角度で前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、請求項４８から５４のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項５７】
チップ基板部がポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）から製造される、請求項４８から５６のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項５８】
サンプルチャネルのうちの少なくとも１つを通じた複合体の流路が動電学的流動によって促進される、請求項４８から５７のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項５９】
流れ集束チャネルがサンプルチャネルと流体連通し、チップ基板部が流れ集束チャネルのそれぞれのバッファ開始点に接続したバッファウェルと、前記流れ集束チャネルの上流にある前記サンプルチャネルのサンプル開始点に接続したサンプルウェルと、前記流れ集束チャネルの下流にある前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つの終点に接続した末端ウェルとを画定するようにさらに成形され、試験システムが、前記サンプルウェルに動作可能に配設されるサンプルウェル電極と、各前記バッファウェルに動作可能に配設されるバッファウェル電極と、前記末端ウェルに動作可能に配設される末端ウェル電極とをさらに備え、前記サンプルウェル電極は第１の極性の第１の電位を動作可能に供給され、前記末端ウェル電極は反対の第２の極性の第２の電位を動作可能に供給され、各前記バッファウェル電極は前記第１の極性の第３の電位を動作可能に供給される、請求項５８に記載の試験システム。
【請求項６０】
第３の電位が第１の電位よりも高い、請求項５９に記載の試験システム。
【請求項６１】
第１の電位に対する前記第３の電位の比率が約１．８：１である、請求項６０に記載の試験システム。
【請求項６２】
縦一列の流れにおける複合体の試験流速が毎分少なくとも約３０個の複合体である、請求項６１に記載の試験システム。
【請求項６３】
試験流速が毎分少なくとも約６０個の複合体である、請求項６２に記載の試験システム。
【請求項６４】
試験流速が毎分約５００個の複合体である、請求項６３に記載の試験システム。
【請求項６５】
サンプル集束チャネルにおけるバッファのバッファ流速が縦一列の流れにおける複合体の試験流速よりも高い、請求項１から３０および４８から６１のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項６６】
血液、尿、唾液、および血清から成る群から選択される１つ以上の生物学的試験サンプルでの使用に特に適合される、請求項１から６５のいずれか１項に記載の試験システム。
【請求項６７】
細菌性疾病状態、ウイルス性疾病状態、真菌性疾病状態、およびベクター誘導性疾病状態から成る群から選択される疾病状態の診断のための、請求項１から６６のいずれか１項に記載の試験システムの使用。
【請求項６８】
１つ以上の感染性疾病の診断のための、請求項１から６６のいずれか１項に記載の試験システムの使用。
【請求項６９】
ＨＩＶ、ＨＢＶ、およびＨＣＶから成る群から選択される症状の診断のための、請求項１から６６のいずれか１項に記載の試験システムの使用。
【請求項７０】
ＨＩＶ、ＨＢＶ、およびＨＣＶから成る群から選択される症状のうちの２つ以上の同時診断のための、請求項１から６６のいずれか１項に記載の試験システムの使用。
【請求項７１】
生物学的試験サンプル中の１つ以上の標的型の標的分子の存在に対する試験を容易にする方法であって、
マイクロ流体チップのチップ基板部に形成される１つ以上の細長いサンプルチャネルを通じて検出分子を通過させる、サンプル流動ステップであって、
前記検出分子のそれぞれは、１つ以上のＢＲＭフルオロフォアに対して固定化された１つ以上の生体認識分子（ＢＲＭ）を含み、各々の前記ＢＲＭのそれぞれは、前記試験サンプル中に存在する場合、前記ＢＲＭおよび前記標的分子の複合体を形成するように、前記標的型のうちの１つに特異的であり、前記複合体は、１つ以上の複合体型を含み、各々、前記標的型のうちのその特定の１つと結合している前記検出分子のうちの異なる１つに対応する、サンプル流動ステップと、
前記マイクロ流体チップの前記チップ基板部に形成される１つ以上の流れ集束チャネルを通じてバッファを通過させる、バッファ流動ステップであって、前記流れ集束チャネルは、前記１つ以上の細長いサンプルチャネルに接続する、バッファ流動ステップと、
前記バッファ流動ステップ後に、前記流れ集束チャネルから前記１つ以上の細長いサンプルチャネルへ前記バッファを通過させることによって、前記サンプルチャネルのうちの少なくとも１つを通じて、縦一列の流れの前記複合体を方向付ける、サンプル集束ステップと、
を含む、方法。
【請求項７２】
サンプル流動ステップの前に、
ＢＲＭを試験サンプル中に導入することによって複合体を形成し、前記試験サンプル中に存在する場合、前記ＢＲＭおよび前記標的分子の前記複合体を形成する、複合体形成ステップをさらに含む、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
複合体形成ステップにおいて、複合体が約１０マイクロメートル（μｍ）未満のサイズである、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
複合体形成ステップにおいて、複合体が約５マイクロメートル（μｍ）未満のサイズである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
複合体形成ステップにおいて、複合体が約１マイクロメートル（μｍ）未満のサイズである、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
複合体形成ステップにおいて、標的型のうちの１つ以上と結合可能な標的マーカーフルオロフォアが導入され、前記標的マーカーフルオロフォアが、前記複合体に対して固定化される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７７】
サンプル集束ステップにおいて、縦一列の流れの前記複合体がサンプルチャネルのうちの少なくとも１つの少なくとも２つの対向する側面チャネル部から離間した関係でサンプル経路に沿って方向付けられる、請求項７１から７６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７８】
サンプル集束ステップにおいて、縦一列の流れの前記複合体がサンプルチャネルのうちの少なくとも１つの少なくとも頂部および底部チャネル部から離間した関係にあるサンプル経路に沿って方向付けられる、請求項７１から７６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７９】
サンプル集束ステップにおいて、バッファが縦一列の流れの複合体の試験流速よりも高いバッファ流速でサンプルチャネルのうちの少なくとも１つに流入する、請求項７１から７８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８０】
サンプル集束ステップにおいて、前記流れ集束チャネルのうちの少なくとも２つが、サンプルチャネルのうちの少なくとも１つの上流において、その反対側から前記サンプルチャネルに接続する、請求項７１から７９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８１】
サンプル集束ステップにおいて、２つの流れ集束チャネルが共通交差部において前記サンプルチャネルに接続する、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
サンプル集束ステップにおいて、それぞれ１つ以上の流れ集束チャネルが約９０度の接続角度で前記サンプルチャネルに接続する、請求項７１から７９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８３】
サンプル集束ステップにおいて、前記それぞれ１つ以上の流れ集束チャネルが約４５度の接続角度で前記サンプルチャネルに接続する、請求項７１から７９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８４】
サンプル集束ステップにおいて、前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つを通じた前記縦一列の流れの複合体の流路が動電学的流動によって促進される、請求項７１から７９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８５】
サンプル集束ステップの前に、（ｉ）前記流れ集束チャネルの上流において、前記サンプルチャネルに第１の極性の第１の電位と、（ｉｉ）前記流れ集束チャネルの下流において前記サンプルチャネルのうちの前記少なくとも１つに反対の第２の極性の第２の電位と、（ｉｉｉ）前記流れ集束チャネルのそれぞれに前記第１の極性の第３の電位とを供給する、動電学的ステップをさらに含む、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
動電学的ステップにおいて、第３の電位が第１の電位よりも高い、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
動電学的ステップにおいて、第１の電位に対する第３の電位の比率が約１．８：１である、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
サンプル集束ステップ後に、縦一列の流れにおける前記複合体に電磁波（ＥＭＦ）放射線を送達する、照射ステップと、
前記照射ステップ後に、前記縦一列の流れを前記複合体によって放出される蛍光に関して監視する、蛍光検出ステップであって、前記複合体のそれぞれが前記ＥＭＦ放射線の吸収後に前記複合体型のそれぞれに対する弁別的な蛍光スペクトルの蛍光を放出する、蛍光検出ステップと、
前記試験サンプル中の前記標的分子の存在を同定するように、前記照射ステップ後に、前記複合体型のそれぞれの前記弁別的な蛍光スペクトルについて監視する、複合体同定ステップと、
をさらに含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項８９】
複合体形成ステップにおいて、標的マーカーフルオロフォアは、標的分子のそれぞれと結合し、蛍光検出ステップにおいて、前記標的マーカーフルオロフォアが、複合体型のそれぞれに対する異なる蛍光スペクトルの標的部分を放出し、前記ＢＲＭフルオロフォアが、前記複合体型のそれぞれに対する異なる蛍光スペクトルのＢＲＭ部分を放出する、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
蛍光検出ステップにおいて、複合体によって放出される蛍光が少なくとも２つのアバランシェ光検出器（ＡＰＤ）によって受信され、第１の前記ＡＰＤの１つが各々の複合体に対する異なる蛍光スペクトルの蛍光のＢＲＭ部分の存在を受信および同定し、第２のＡＰＤの１つが各々の複合体に対する弁別的な蛍光スペクトルの蛍光の標的部分の存在を受信および同定する、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
照射ステップにおいて、約２ミリワット（mＷ）から約５０ミリワット（mＷ）の間の動作電力を有するレーザーが、前記縦一列の流れにおける前記複合体に前記ＥＭＦ放射線を送達する、請求項８８から９０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９２】
照射ステップにおいて、動作電力が約２０ミリワット（mＷ）から約２５ミリワット（mＷ）の間である、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
照射ステップにおいて、ＥＭＦ放射線が約４８８ｎｍのＥＭＦ波長を有する、請求項８８から９２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９４】
蛍光検出ステップにおいて、複合体によって放出される前記蛍光が電荷結合素子によって受信される、請求項８８から９３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９５】
蛍光検出ステップにおいて、複合体によって放出される前記蛍光が電荷結合素子および１つ以上のアバランシェ光検出器（ＡＰＤ）のうちの少なくとも１つによって選択的に受信される、請求項８８記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
本発明の好適な一実施形態の態様によると、照射装置は、縦一列の流れにおける試験分子による吸収のために、ＥＭＦ放射線を動作可能に放出するＬＥＤを含む。
本発明の別の好適な実施形態の態様によると、照射装置は、縦一列の流れにおける試験分子による吸収のために、ＥＭＦ放射線を動作可能に放出するレーザーを含む。
本発明の好適な一実施形態の態様によると、レーザーは、約２ミリワット（mＷ）から約５０ミリワット（mＷ）の間、より好ましくは約２０ミリワット（mＷ）から約２５メガワット（ＭＷ）の間の動作電力を有する。
本発明の好適な一実施形態の態様によると、照射装置によって動作可能に送達されるＥＭＦ放射線は、約４８８ｎｍのＥＭＦ波長を有する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３４】
本発明の好適な一実施形態の態様によると、蛍光検出ステップにおいて、複合体によって放出される蛍光は、少なくとも２つのアバランシェ光検出器（ＡＰＤ）によって受信される。第１のＡＰＤの１つは、前記各々の複合体に対する弁別的な蛍光スペクトルの蛍光のＢＲＭ部分の存在を受信および同定し、第２のＡＰＤの１つは、前記各々の複合体に対する弁別的な蛍光スペクトルの蛍光の標的部分の存在を受信および同定する。
本発明の好適な一実施形態の態様によると、照射ステップにおいて、約２ミリワット（mＷ）から約５０ミリワット（mＷ）の間の動作電力を有するレーザーは、縦一列の流れにおける試験分子にＥＭＦ放射線を送達する。より好ましくは、動作電力は、約２０ミリワット（mＷ）から約２５ミリワット（mＷ）の間である。
本発明の好適な一実施形態の態様によると、照射ステップにおいて、ＥＭＦ放射線は、約４８８ｎｍのＥＭＦ波長を有する。
本発明の好適な一実施形態の態様によると、蛍光検出ステップにおいて、複合体によって放出される蛍光は、電荷結合素子によって受信される。
本発明の好適な一実施形態の態様によると、蛍光検出ステップにおいて、複合体によって放出される蛍光は、電荷結合素子および１つ以上のアバランシェ光検出器（ＡＰＤ）のうちの少なくとも１つによって選択的に受信される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
【図１Ａ】本発明に従った第１の複合体の図解である。
【図１Ｂ】本発明に従った第２の複合体の図解である。
【図１Ｃ】本発明に従った第３の複合体の図解である。
【図２Ａ】本発明に従ったマイクロ流体チップの斜視図である。
【図２Ｂ】本発明に従った代替のマイクロ流体チップの斜視図である。
【図２Ｃ】図２Ｂのマイクロ流体チップの交差点の拡大上面図である。
【図３Ａ】本発明に従った試験システムの概略図である。
【図３Ｂ】図３Ａの照射装置の概略図である。
【図３Ｃ】図３Ａの検出装置の概略図である。
【図４Ａ】システム筐体の斜視図である。
【図４Ｂ】筐体が取り外されたシステムの斜視図である。
【図４Ｃ】サンプルハッチが閉じているマイクロチッププラットフォームおよび照射装置の斜視図である。
【図４Ｄ】サンプルハッチが開いているマイクロチッププラットフォームの上面図である。
【図４Ｅ】レンズ、モーター、およびマイクロチッププラットフォームの側面図である。
【図４Ｆ】図４Ｅの線４Ｆ−４Ｆに沿った、レンズおよびマイクロ流体チッププラットフォームの断面概略図である。
【図４Ｇ】図４Ｆの指示された箇所および図２Ｃの線４Ｇ−４Ｇに沿った断面の拡大概略図である。
【図５Ａ】蛍光性量子ドットの図解である。
【図５Ｂ】蛍光性量子ドットの図解である。
【図６Ａ】本明細書に記載する実験で使用する量子ドットおよびバンドパスフィルタのスペクトルである。
【図６Ｂ】図５Ｂの量子ドットのスペクトルである。
【図７Ａ】図１ＡのＢＲＭ複合体に対する生および近似された蛍光放出波長データのグラフである。
【図７Ｂ】図１ＢのＢＲＭ複合体に対する生および近似された蛍光放出波長データのグラフである。
【図７Ｃ】図１ＣのＢＲＭ複合体に対する生および近似された蛍光放出波長データのグラフである。
【図８Ａ】図１ＡのＢＲＭ複合体に対する強度対時間の測定のグラフである。
【図８Ｂ】図１ＢのＢＲＭ複合体に対する強度対時間の測定のグラフである。
【図８Ｃ】図１ＣのＢＲＭ複合体に対する強度対時間の測定のグラフである。
【図９】図８Ａの指示された箇所の拡大図である。
【図１０Ａ】図１ＡのＢＲＭ複合体に対する強度対濃度の測定のグラフである。
【図１０Ｂ】図１ＡのＢＲＭ複合体に対する強度対濃度の測定のグラフである。
【図１０Ｃ】図１ＡのＢＲＭ複合体に対する強度対濃度の測定のグラフである。
【図１１Ａ】図１ＡのＢＲＭ複合体に対するＲ／Ｙ信号比のヒストグラムである。
【図１１Ｂ】図１ＢのＢＲＭ複合体に対するＲ／Ｙ信号比のヒストグラムである。
【図１１Ｃ】図１ＣのＢＲＭ複合体に対するＲ／Ｙ信号比のヒストグラムである。
【図１１Ｄ】図１１Ａ、１１Ｂ、および１１Ｃの統合ヒストグラムである。
【図１２】使用する実験サンプルの表である。
【図１３Ａ】２病原体多重結果のグラフである。
【図１３Ｂ】３病原体多重結果のグラフである。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
システムについて
好ましくは、第１の組の試験分子１０２は、(i)検出分子１０６ａ、１０６ｂ、１０６ｃ（１０６ａ〜ｃ）と、（ｉｉ）試験サンプル４０中に存在する場合、検出分子１０６ａ〜ｃおよび標的分子４６ａ〜ｃの複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃとを含み得る。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
図１Ａから図１Ｃに最もよく見られるように、検出分子１０６ａ〜ｃは、１つ以上の検出分子型である。各々の検出分子型は、それぞれの標的型の１つと結合可能である。各々の検出分子１０６ａ〜ｃは、好ましくは、好ましくは、カルボン酸１１８によってマイクロビーズ１０８の表面に結合した１つ以上の、好ましくは複数の生体認識分子１１６（ＢＲＭ１１６）を含む。ＢＲＭ１１６のそれぞれは、標的分子４６ａ〜ｃの標的型のうちの１つに特異的である。各々のマイクロビーズ１０８は、好ましくは複数のＢＲＭ１１６に結合している。マイクロビーズ１０８に結合した複数のＢＲＭ１１６は、２つ以上の標的型と集合的に複合体化可能であり得るが、好ましくは、標的型のうちの１つのみと集合的に複合体化可能である。各々のマイクロビーズ１０８は、好ましくは、マイクロビーズ１０８と結合した１つ以上のＢＲＭフルオロフォア１１２ａ〜ｂで標識されるマイクロビーズ１０８を含む。ＢＲＭフルオロフォア１１２ａ〜ｂは、好ましくは、１つ以上の量子ドット型の、１つ以上の量子ドット１１２ａ、１１２ｂを含む。場合によっては、また図１Ｃに最もよく見られるように、量子ドット１１２ａ、１１２ｂは、例えば、赤色量子ドット１１２ｂおよび黄色量子ドット１１２ａ等の、２つ以上の量子ドット型であってもよい。あるいは、ＢＲＭフルオロフォア１１２ａ〜ｂは、１つ以上の蛍光色素型の１つ以上の蛍光色素（図示せず）を含み得る。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
図１Ａから図１Ｃに最もよく見られるように、複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃは、１つ以上の複合体型であり、各々の複合体型は対応する標的型と結合している検出分子型のうちの異なる１つに対応する。複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃは、好ましくは、約１０マイクロメートル（μｍ）未満のサイズである。一部の実施形態においては、複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃは、約５μｍ未満、または約１μｍ未満のサイズでさえあってもよい。好ましくは、また図１Ａから図１Ｃに最もよく見られるように、各々の複合体のそれぞれ１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃはまた、標的分子４６ａ、４６ｂ、４６ｃの１つにそれぞれに結合した標的マーカーフルオロフォア１３０を含む。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
図３Ａおよび図３Ｂに最もよく見られるように、照射装置３００は、縦一列の流れ１４０における試験分子１０２による吸収のために、サンプル集束チャネル２０８に沿った照射位置２１０（図２Ａおよび図２Ｂに最もよく見られる通り）において、電磁波（ＥＭＦ）放射線３０２を動作可能に送達する。照射装置３００は、ＥＭＦ放射線３０２を動作可能に放出するための、ＬＥＤ３１２（図４Ｅおよび図４Ｆに最もよく見られる通り）および／またはレーザー３１０（図３Ａおよび図３Ｂに最もよく見られる通り）を含み得る。好ましくは、レーザー３１０は、約２ミリワット（mＷ）から約５０mＷの間、より好ましくは、約２０mＷから約２５mＷの間の動作電力を有する。好ましくは、ＥＭＦ放射線３０２は、約４８８ｎｍのＥＭＦ波長を有し得る。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４９】
図３Ａから図３Ｃに最もよく見られるように、試験分子１０２は、ＥＭＦ放射線３０２の吸収後に、蛍光３０４を放出する。試験分子１０２の蛍光３０４は、各々の複合体型に対する弁別的な蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃ（図７Ａから図７Ｃに最もよく見られる通り）を含む。好ましくは、また図６Ａから図７Ｃに最もよく見られるように、ＥＭＦ放射線３０２の吸収後に、量子ドット１１２ａ、１１２ｂであるかまたは蛍光色素（図示せず）であるかにかかわらず、ＢＲＭフルオロフォア１１２ａ〜ｂは、弁別的な蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃの蛍光３０４の少なくともＢＲＭ部分６０４ａ、６０４ｂ、６０４ｃを放出し、標的マーカーフルオロフォア１３０は、ＥＭＦ放射線３０２の吸収後に、弁別的な蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃの蛍光３０４の標的部分６０４ｄを放出する。（標的部分６０４ｄは、各々の複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃに対する独自の蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃの蛍光３０４のＢＲＭ部分６０４ａ、６０４ｂ、６０４ｃよりも低い強度を有し得る。）ＢＲＭフルオロフォア１１２ａ、１１２ｂおよび標的マーカーフルオロフォア１３０はともに、ＥＭＦ放射線３０２の吸収後に、弁別的な蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃの蛍光３０４を放出する。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５７】
方法について
本発明によると、特に、生物学的試験サンプル４０中の１つ以上の標的型の標的分子４６ａ、４６ｂ、４６ｃの存在に対する試験を容易にするために、とりわけ、分子を集束する方法が開示される。該方法は、好ましくは、
検出分子形成ステップ、
検出分子形成ステップ後の複合体形成ステップ、
動電学的ステップ、
複合体形成ステップ後のサンプル流動ステップ、
バッファ流動ステップ、
動電学的ステップおよびバッファ流動ステップ後のサンプル集束ステップ、
サンプル集束ステップ後の照射ステップ、
照射ステップ後の蛍光検出ステップ、および／または
照射ステップ後の複合体同定ステップ、
を含む。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
検出分子形成ステップにおいて、マイクロビーズ１０８は、マイクロビーズ１０８と結合した１つ以上のＢＲＭフルオロフォア１１２ａ、１１２ｂで標識される。複合体形成ステップにおいて、複合体１２６ａ〜ｃは、好ましくは、生物学的試験サンプル中に標的マーカーフルオロフォア１３０および（１つ以上の検出分子型の）検出分子１０６ａ〜ｃを導入することによって形成される。各々の検出分子型は、それぞれ１つの標的型と結合可能であり、標的マーカーフルオロフォア１３０は、好ましくは、標的型のうちの１つ以上の（および／またはすべて）と抱合可能／結合可能である。したがって、標的分子４６ａ、４６ｂ、４６ｃが試験サンプル中に存在する場合、試験分子１０２は、好ましくは検出分子１０６ａ〜ｃの複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃ、標的マーカーフルオロフォア１３０、および標的分子４６ａ、４６ｂ、４６ｃを含み得る。好ましくは、複合体形成ステップにおいて形成される複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃは、約１０マイクロメートル（μｍ）未満のサイズである。一部の実施形態においては、形成される複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃは、約５μｍ未満、または約１μｍ未満のサイズでさえあってもよい。そのように形成される複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃは、１つ以上の複合体型であり、各々の複合体型は対応する標的型と結合している検出分子型のうちの異なる１つに対応する。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
動電学的ステップにおいて、（ｉ）第１の極性の第１の電位は、サンプル供給チャネル２０６、すなわち、流れ集束チャネル２２０ａ、２２０ｂの上流（すなわち、矢印「Ａ」に概して反対方向）に供給され、（ｉｉ）反対の第２の極性の第２の電位は、サンプル集束チャネル２０８、すなわち、流れ集束チャネル２２０ａ、２２０ｂの「Ａ」方向の下流に供給され、（ｉｉｉ）第１の極性の第３の電位は、流れ集束チャネル２２０ａ、２２０ｂのそれぞれに供給される。第３の電位は、好ましくは、第１の電位よりも高い。第１の電位に対する第３の電位の比率は、好ましくは、約１．８：１（すなわち約９：５）である。サンプル流動ステップにおいて、試験分子１０２は、サンプル供給チャネル２０６を通過する。バッファ流動ステップにおいて、バッファ５０は、サンプルチャネル２０４に接続した流れ集束チャネル２２０ａ、２２０ｂを通過する。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
ＥＭＦ放射線３０２の吸収後に、各々の複合体１２６ａ、１２６ｂ、１２６ｃ（すなわち、各複合体型の）は、弁別的な蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃの蛍光３０４を放出する。標的マーカーフルオロフォア１３０は、各複合体型に対する弁別的な蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃの標的部分６０４ｄを放出し、ＢＲＭフルオロフォア１１２ａ、１１２ｂは、各複合体型に対する弁別的な蛍光スペクトル７２６ａ、７２６ｂ、７２６ｃのＢＲＭ部分６０４ａ、６０４ｂ、６０４ｃを放出する。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
試験システム１００は、サンプルを提供した宿主における種々の症状および感染性疾病に対して、生物学的試験サンプル（すなわち、血液、唾液、血清、尿等）を試験するように設計されている。試験された感染性疾病は、細菌性疾病状態、ウイルス性疾病状態、真菌性疾病状態、ベクター誘導性疾病状態、およびそれらの組み合わせを含むことができるが、それらに限定されない。試験は、試験サンプル４０を形成するために、検出分子１０６ａ〜ｃを生物学的サンプルと混合することによって実行される。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
試験分子１０２は、好ましくは、図１Ａ、図１Ｂ、および図１Ｃに図示されるような複合体１２６ａ〜ｃを含み得る。各々の複合体１２６ａ〜ｃは、好ましくは検出分子１０６ａ〜ｃを含む。検出分子１０６ａ〜ｃは好ましくは、各検出分子１０６ａ〜ｃに関連する固有のスペクトルパターンまたは「バーコード」を生成する量子ドット１１２ａ〜ｃ等の埋め込みＢＲＭフルオロフォアを有する、ポリママイクロビーズ１０８を含む。検出分子１０６ａ〜ｃは好ましくは、カルボン酸１１８によってマイクロビーズ１０８の表面に結合したBRM１１６をさらに含む。したがって、その標的マーカーフルオロフォア１３０を有する標的分子４６ａ〜ｃは、複合体１２６ａ〜ｃを形成するために、ＢＲＭ１１６を通じてマイクロビーズ１０８の外側に結合する。
【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６８】
より具体的には、図１Ａを参照すると、マイクロビーズ１０８は、黄色量子ドット１１２ａとして示される埋め込みＢＲＭフルオロフォアを有する。図１Ｂおよび図１Ｃは、赤色（１１２ｂ）、赤色（１１２ｂ）、および黄色（１１２ａ）の別の種々の組み合わせを示す。また、図５Ａおよび図５Ｂに参照のために示すように、オレンジ色（１１２ｃ）、緑色（１１２ｄ）、および青色（１１２ｅ）量子ドットも使用されることができる。蛍光色素等の代替のフルオロフォアは、量子ドットの代わりに使用されることができる。各ＢＲＭフルオロフォアは、例えば、赤色量子ドットに対する弁別的な蛍光スペクトル６０４ｂ等の図６Ａに示すような、弁別的な蛍光スペクトルを生成する。標的型４６ａは、標的マーカーフルオロフォア１３０と共に複合体１２６ａを形成するために、検出分子１０６ａに抱合される。同様に、図１Ｂおよび図１Ｃにおいて、標的型４６ｂおよび４６ｃは、的マーカーフルオロフォア１３０と共に複合体１２６ｂおよび１２６ｃのそれぞれを形成するために、検出分子１０６ｂおよび１０６ｃに抱合される。
【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７４】
マイクロ流体チップ２００は、図４Ｅおよび図４Ｆに詳細に最もよく示されるようなプラットフォーム２７０上に取り付けられる。サンプル４０およびバッファ５０に対する動電学的駆動力は、ウェルのそれぞれに挿入される電極によって提供される。したがって、示されるチップ２００に対して、サンプルウェル電極２６２と、２つのバッファウェル電極２６４ａおよび２６４ｂと、末端ウェル電極２６６とがある。それらのそれぞれのチャネルに沿ってサンプル４０およびバッファ５０を搬送する動電学的駆動力を生成するために、電圧差が電極を介して印加される。
【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８２】
分割された蛍光信号のもう一方の部分は、一連のバンドパスフィルタ４４０ａ〜ｄを通過する検出チャネル４５０に沿って方向付けられる。各フィルタ４４０ａ〜ｄは、試験分子１０２における各々のＢＲＭのフルオロフォア１１２ａ〜ｂおよび標的マーカーフルオロフォア１３０によって放出される蛍光信号３０４に対応する特定の波長を対象とする。フィルタリングされた信号４４２ａ〜ｄは各々、検出チャネル４５２ａ〜ｄに沿って、蛍光信号を電気信号に変換し、その後その電気信号を分析のために信号プロセッサ４９０に出力する、ＡＰＤ（アバランシェ光検出器）４１０ａ〜ｄに方向付けられる。
【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８３】
１つの信号を一例として挙げると、緑色の波長バンドパスフィルタ４４０ａを使用して、蛍光信号３０４のフィルタリングされた部分４４２ａを検出チャネル４５２ａ方向に方向転換する。このフィルタリングされた信号４４２ａは、ＡＰＤ４１０ａを打撃し、結果は、分析のための緑色の波長出力信号である。同様のプロセスが、黄色のバンドパスフィルタ４４０ｂ、オレンジ色のバンドパスフィルタ４４０ｃ、および赤色のバンドパスフィルタ４４０ｄを用いて行われ、対応するＡＰＤ４１０ｂ〜ｄは、黄色、オレンジ色、および赤色の波長に対する出力信号を生成する。組み合わされた信号は、蛍光を発している試験分子１０２の同定を決定するために解釈されるスペクトルを集合的に生成する。
【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８６】
操作
使用に際して、生物学的試験サンプル（血液、唾液、血清、尿等）は、マイクロ流体チップ２００のサンプルウェル２４２への挿入のために調製される。生物学的試験サンプルは、試験の性質によって決定される、１つ以上の標的型の標的分子４６の存在に関して、システムによって試験される試験サンプル４０を形成するために、第１の組の検出分子と組み合わされる。１つ以上の検出分子型の検出分子１０６は標的分子のうちの１つと個々に結合可能である。検出分子および標的分子の異なる複合体は、異なる検出分子および標的分子に対応する。
【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８７】
非抱合サンプル分子等の分子の第２の組もまた、サンプル中に存在し得、第２の組の分子は、第１の組の試験分子（および検出分子）を有するサンプル流動内に移動するかもしれない。分子の第２の組は、別途の検出分子の多重試験、もしくはキャリブレーションおよびエラーチェック等のシステム試験に使用することができるか、または無関係として無視され得る。
【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９０】
次いで、試験分子１０２は、照射装置３００によって照射位置２１０において照射される。好ましくは、レーザー３１０またはＬＥＤ等の固定波長のＥＭＦ放射装置が使用される。次いで、試験分子は、それらの検出分子型および／または複合体型に応じて蛍光を放出し、各々、弁別的な蛍光スペクトルを有する。
【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９３】
量子ドット合成
従来技術の有機金属法を使用して、ＣｄＳｅのコアでＺｎＳでキャップされた量子ドット（「Ｑｄｏｔ」）を合成した。簡潔に、１２〜２０ｇのトリ−ｎ−オクチルホスフィンオキシド（ＴＯＰＯ、９８％純粋、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）を、三つ口フラスコ内で、Ａｒガス下で１５０℃まで加熱した。１６０μＬのジメチルカドミウム（９７％、Ｓｔｒｅｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｎｅｗｂｕｒｙｐｏｒｔ、ＭＡ）を注入し、約１５分間加熱したＴＯＰＯと混合した。真空下での３回のパージ後、三つ口フラスコの内容物を３５０℃まで加熱した。次いで、セレン（Ｓｅ粉末、９９．５％、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）およびトリ−ｎ−オクチルホスフィン（ＴＯＰ、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）の２モルの前駆体溶液を三つ口フラスコに注入し、温度を３００℃まで急速に低下させた。１．５：１から２．５：１の範囲のＣｄ：Ｓｅ比を使用した。蛍光光度計（ＦｌｕｏｒｏＭａｘ３、Ｊｏｂｉｎ  Ｙｖｏｎ  Ｈｏｒｉｂａ、Ｅｄｉｓｏｎ、ＮＪ）を使用して、三つ口フラスコ内の溶液の一定分量の放出プロファイルを測定することによって、増殖期の間、Ｑｄｏｔ放出を追跡記録した。望ましいピーク放出波長に到達すると、ジエチル亜鉛（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）、ヘキサメチルジシラチアン（ＴＭＳ２（Ｓ）、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ）、およびＴＯＰから成るキャッピング前駆体溶液を、約１ｍＬ／分の速度で三つ口フラスコに滴下添加した。
【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９６】
抗原サンプル調製
次いで、Ｎ−ジメチルアミノプロピル−Ｎ’−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）補助架橋結合を使用して、病原体抗原（ＢＲＭ１１６の例示的な型）をマイクロビーズ表面に共有結合した。使用した抗原は、ＨＢＶ、ＨＣＶ、およびＨＩＶのそれぞれに対して、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、非構造タンパク質４（ＮＳＰ4）、および糖タンパク質４１（ｇｐ４１）であった。
【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０５】
マイクロチップ製造
上記に説明したように、マイクロチャネル製造は、標準的なソフトリソグラフィ技術（例えばＹ．Ｘｉａ，Ｇ．Ｍ．Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．，２８，１５３（１９９８）、Ｄ．Ｃ．Ｄｕｆｆｙ，Ｊ．Ｃ．ＭｃＤｏｎａｌｄ，Ｏ．Ｊ．Ａ．Ｓｃｈｕｅｌｌｅｒ，Ｇ．Ｍ．Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ，Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，７０，４９７４（１９９８）、Ｍ．Ａ．Ｕｎｇｅｒ，Ｈ．Ｃｈｏｕ，Ｔ．Ｔｈｏｒｓｅｎ，Ａ．Ｓｃｈｅｒｅｒ，Ｓ．Ｒ．Ｑｕａｋｅ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８８，１１３（２０００）に記載されたように）に従った。
【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１３】
典型的な実験を１５分間実施し、約３０ＭＢのデータおよび約１０００の検出事象の収集を可能にした。実験後、サンプルチャネル中に残っているＱｄｏｔＢ複合体を収集し、細胞計数器（Ｖｉ−Ｃｅｌｌ  ＸＲ、Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ、Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ、ＣＡ）を使用して計数したが、マイクロチャネルは破棄した。サンプルウェル中のＱｄｏｔＢ複合体濃度は、典型的な実験の間、１．５×１０7／ｍＬ（９×１０6標準偏差）であった。
【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３５】
これで、本発明の現時点で好適な実施形態の説明を終了する。
【手続補正２８】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２Ｃ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２Ｃ】
2010513876.tif 000001
【手続補正２９】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図４Ｅ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図４Ｅ】
2010513876.tif 000002
【手続補正３０】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図４Ｆ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図４Ｆ】
2010513876.tif 000003