【手続補正書】
【提出日】平成23年3月7日(2011.3.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含んだ酵母細胞と発酵培地とを接触させる段階を含む、発酵培地中のH2Sレベルを低減するための方法であって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではない、方法。
【請求項２】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項1記載の方法。
【請求項３】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項1記載の方法。
【請求項４】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項1記載の方法。
【請求項５】
検出可能なレベルのH2Sを有さない発酵産物が産生される、請求項1記載の方法。
【請求項６】
発酵産物が飲料である、請求項5記載の方法。
【請求項７】
発酵産物がワイン、ビール、シャンパン、ポルトおよびマディラからなる群より選択される、請求項6記載の方法。
【請求項８】
酵母細胞がサッカロマイセス・セレビシェ(Saccharomyces cerevisiae)細胞である、請求項1記載の方法。
【請求項９】
酵母細胞が、プリーズ・ド・ムース(Prise de Mousse)、プルミエ・キュヴェ(Premier Cuvee)、フレンチ・レッド(French Red)、モンラッシェ(Montrachet)、ラレマンK1(Lallemand K1)、ボルドー(Bordeaux)、UCD522、UCD940、Ba25、Ba126、Ba137、Ba220、Bb23、Bb25、Ba30、Bb32、Bb19、およびBb22からなる群より選択されるワイン酵母株である、請求項8記載の方法。
【請求項１０】
発酵培地が飲料である、請求項1記載の方法。
【請求項１１】
発酵培地が、果汁、マストおよび麦汁からなる群より選択される、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
発酵培地がブドウ果汁マストである、請求項11記載の方法。
【請求項１３】
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含んだ発現ベクターであって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、かつ該ポリヌクレオチドが発現制御配列に機能的に連結された、発現ベクター。
【請求項１４】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項13記載の発現ベクター。
【請求項１５】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項13記載の発現ベクター。
【請求項１６】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項13記載の発現ベクター。
【請求項１７】
請求項13記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項１８】
酵母細胞である、請求項17記載の宿主細胞。
【請求項１９】
サッカロマイセス・セレビシェ細胞である、請求項17記載の宿主細胞。
【請求項２０】
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードする外因性ポリヌクレオチドを含む、硫化水素を産生しない改良された酵母細胞であって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、該改良された酵母細胞の親細胞が硫化水素を産生する、改良された酵母細胞。
【請求項２１】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項20記載の酵母細胞。
【請求項２２】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項20記載の酵母細胞。
【請求項２３】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項20記載の酵母細胞。
【請求項２４】
サッカロマイセス・セレビシェ細胞である、請求項20記載の酵母細胞。
【請求項２５】
プリーズ・ド・ムース、プルミエ・キュヴェ、フレンチ・レッド、モンラッシェ、ラレマンK1、ボルドー、UCD522、UCD940、Ba25、Ba126、Ba137、Ba220、Bb23、Bb25、Ba30、Bb32、Bb19、およびBb22からなる群より選択されるワイン酵母株である、請求項24記載の酵母細胞。
【請求項２６】
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードする外因性ポリヌクレオチドを含んだ酵母細胞の集団を含む、低減したレベルの硫化水素を産生する改良された酵母細胞培養物であって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、該改良された酵母細胞培養物が、親細胞の培養物と比較して低減した硫化水素を産生する、改良された酵母細胞培養物。
【請求項２７】
検出可能なレベルの硫化水素を産生しない、請求項26記載の酵母細胞培養物。
【請求項２８】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項26記載の酵母細胞培養物。
【請求項２９】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項26記載の酵母細胞培養物。
【請求項３０】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項26記載の酵母細胞培養物。
【請求項３１】
酵母細胞の集団がサッカロマイセス・セレビシェ細胞を含む、請求項26記載の酵母細胞培養物。
【請求項３２】
酵母細胞の集団が、プリーズ・ド・ムース、プルミエ・キュヴェ、フレンチ・レッド、モンラッシェ、ラレマンK1、ボルドー、UCD522、UCD940、Ba25、Ba126、Ba137、Ba220、Bb23、Bb25、Ba30、Bb32、Bb19、およびBb22からなる群より選択されるワイン酵母株由来である、請求項26記載の酵母細胞培養物。
【請求項３３】
請求項20記載の酵母細胞または請求項26記載の酵母細胞培養物を含む、発酵培地。
【請求項３４】
飲料である、請求項33記載の発酵培地。
【請求項３５】
果汁、マスト、麦汁からなる群より選択される、請求項34記載の発酵培地。
【請求項３６】
ブドウ果汁マストである、請求項35記載の発酵培地。
【請求項３７】
請求項20記載の酵母細胞または請求項26記載の酵母細胞培養物を含む、発酵産物。
【請求項３８】
飲料である、請求項37記載の発酵産物。
【請求項３９】
ワイン、ビール、シャンパン、ポルトおよびマディラからなる群より選択される、請求項38記載の発酵産物。
【請求項４０】
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しない硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを酵母細胞の親細胞に導入することにより、硫化物活性のMET10ポリペプチドをコードする内因性ポリヌクレオチドを、硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドと置き換える段階を含む、低減したレベルの硫化水素を産生する改良された酵母細胞を産生する方法であって、該硫化物不活性のMET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、該改良された酵母細胞の親細胞が硫化水素を産生する、方法。
【請求項４１】
硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが組換えにより導入される、請求項40記載の方法。
【請求項４２】
硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが戻し交雑により導入される、請求項40記載の方法。
【請求項４３】
改良された酵母細胞が検出可能なレベルの硫化水素を産生しない、請求項40記載の方法。
【請求項４４】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項40記載の方法。
【請求項４５】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項40記載の方法。
【請求項４６】
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1を含む、請求項40記載の方法。
【請求項４７】
SEQ ID NO:1に示される配列またはその相補体と野生型MET10をコードする核酸とを識別できる、単離ポリヌクレオチド。
【請求項４８】
発現制御配列に機能的に連結された請求項47記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
【請求項４９】
請求項48記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項５０】
サッカロマイセス・セレビシェ細胞である、請求項49記載の宿主細胞。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本発明の別の態様では、SEQ ID NO:2において、404位のC → A、514位のG → A、1278位のG → A、ならびに1532位のT → C、1768位のA → G、および1985位のC → Aからなる群より選択される一つまたは複数の置換(例えば、少なくとも二つ、三つ、四つ、またはそれ以上の置換)を含む単離ポリヌクレオチド、発現制御配列に機能的に連結された該ポリヌクレオチドを含む発現ベクター、および該発現ベクターを含む宿主細胞(例えば、サッカロマイセス・セレビシェ細胞)を提供する。
[請求項1001]
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含んだ酵母細胞と発酵培地とを接触させる段階を含む、発酵培地中のH2Sレベルを低減するための方法であって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではない、方法。
[請求項1002]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項1001記載の方法。
[請求項1003]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項1001記載の方法。
[請求項1004]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項1001記載の方法。
[請求項1005]
検出可能なレベルのH2Sを有さない発酵産物が産生される方法であって、該発酵産物がワイン、ビール、およびシャンパンからなる群より選択される、請求項1001記載の方法。
[請求項1006]
酵母細胞がサッカロマイセス・セレビシェ(Saccharomyces cerevisiae)細胞である、請求項1001記載の方法。
[請求項1007]
酵母細胞が、プリーズ・ド・ムース(Prise de Mousse)、プルミエ・キュヴェ(Premier Cuvee)、フレンチ・レッド(French Red)、モンラッシェ(Montachet)、ラレマンK1(Lallemand K1)、ボルドー(Bordeaux)、UCD522、UCD940、Ba25、Ba126、Ba137、Ba220、Bb23、Bb25、Ba30、Bb32、Bb19、およびBb22からなる群より選択されるワイン酵母株である、請求項1006記載の方法。
[請求項1008]
発酵培地が、マストおよび麦汁からなる群より選択される、請求項1001記載の方法。
[請求項1009]
発酵培地がブドウ果汁マストである、請求項1001記載の方法。
[請求項1010]
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含んだ発現ベクターであって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、かつ該ポリヌクレオチドが発現制御配列に機能的に連結された、発現ベクター。
[請求項1011]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項1010記載の発現ベクター。
[請求項1012]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項1010記載の発現ベクター。
[請求項1013]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項1010記載の発現ベクター。
[請求項1014]
請求項1010記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
[請求項1015]
酵母細胞である、請求項1014記載の宿主細胞。
[請求項1016]
サッカロマイセス・セレビシェ細胞である、請求項1014記載の宿主細胞。
[請求項1017]
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードする外因性ポリヌクレオチドを含む、硫化水素を産生しない改良された酵母細胞であって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、該改良された酵母細胞の親細胞が硫化水素を産生する、改良された酵母細胞。
[請求項1018]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項1017記載の酵母細胞。
[請求項1019]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項1017記載の酵母細胞。
[請求項1020]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項1017記載の酵母細胞。
[請求項1021]
サッカロマイセス・セレビシェ細胞である、請求項1017記載の酵母細胞。
[請求項1022]
プリーズ・ド・ムース、プルミエ・キュヴェ、フレンチ・レッド、モンラッシェ、ラレマンK1、ボルドー、UCD522、UCD940、Ba25、Ba126、Ba137、Ba220、Bb23、Bb25、Ba30、Bb32、Bb19、およびBb22からなる群より選択されるワイン酵母株である、請求項1021記載の酵母細胞。
[請求項1023]
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しないMET10ポリペプチドをコードする外因性ポリヌクレオチドを含んだ酵母細胞の集団を含む、低減したレベルの硫化水素を産生する改良された酵母細胞培養物であって、該MET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、該改良された酵母細胞培養物が、親細胞の培養物と比較して低減した硫化水素を産生する、改良された酵母細胞培養物。
[請求項1024]
検出可能なレベルの硫化水素を産生しない、請求項1023記載の酵母細胞培養物。
[請求項1025]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項1023記載の酵母細胞培養物。
[請求項1026]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項1023記載の酵母細胞培養物。
[請求項1027]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1の核酸配列と少なくとも95%の配列同一性を共有する、請求項1023記載の酵母細胞培養物。
[請求項1028]
酵母細胞の集団がサッカロマイセス・セレビシェ細胞を含む、請求項1023記載の酵母細胞培養物。
[請求項1029]
酵母細胞の集団が、プリーズ・ド・ムース、プルミエ・キュヴェ、フレンチ・レッド、モンラッシェ、ラレマンK1、ボルドー、UCD522、UCD940、Ba25、Ba126、Ba137、Ba220、Bb23、Bb25、Ba30、Bb32、Bb19、およびBb22からなる群より選択されるワイン酵母株由来である、請求項1023記載の酵母細胞培養物。
[請求項1030]
亜硫酸の硫化物への変換を触媒しない硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを酵母細胞の親細胞に導入することにより、硫化物活性のMET10ポリペプチドをコードする内因性ポリヌクレオチドを、硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドと置き換える段階を含む、低減したレベルの硫化水素を産生する改良された酵母細胞を産生する方法であって、該硫化物不活性のMET10ポリペプチドの662位のアミノ酸がトレオニンではなく、該改良された酵母細胞の親細胞が硫化水素を産生する、方法。
[請求項1031]
硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが組換えにより導入される、請求項1030記載の方法。
[請求項1032]
硫化物不活性のMET10ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドが戻し交雑により導入される、請求項1030記載の方法。
[請求項1033]
改良された酵母細胞が検出可能なレベルの硫化水素を産生しない、請求項1030記載の方法。
[請求項1034]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがトレオニンではない、請求項1030記載の方法。
[請求項1035]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:3のMET10ポリペプチドをコードし、662位のXがリジンである、請求項1030記載の方法。
[請求項1036]
ポリヌクレオチドがSEQ ID NO:1を含む、請求項1030記載の方法。
[請求項1037]
SEQ ID NO:1に示される配列またはその相補体と野生型MET10をコードする核酸とを識別できる、単離ポリヌクレオチド。
[請求項1038]
発現制御配列に機能的に連結された請求項1037記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
[請求項1039]
請求項1038記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
[請求項1040]
サッカロマイセス・セレビシェ細胞である、請求項1039記載の宿主細胞。