【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年1月27日(2011.1.27)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】特許請求の範囲
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｂ７−４を発現する細胞またはＰＤ−１を発現する免疫細胞を、Ｂ７−４とＰＤ−１との相互作用をモジュレーションする作用剤であって、配列番号：２または４のアミノ酸配列に対して全長にわたり少なくとも９０％アミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質であるＢ７−４、Ｂ７−４の細胞外ドメインを含むタンパク質、ＰＤ−１、抗Ｂ７−４抗体、および抗ＰＤ−１抗体からなる群から選択される作用剤とインビトロで接触させて、そのことにより免疫応答をモジュレーションすることを特徴とする、免疫応答をモジュレーションする方法。
【請求項２】
免疫応答をモジュレーションするための医薬の調製のための、配列番号：２または４のアミノ酸配列に対して全長にわたり少なくとも９０％アミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質であるＢ７−４、Ｂ７−４の細胞外ドメインを含むタンパク質、ＰＤ−１、抗Ｂ７−４抗体、および抗ＰＤ−１抗体からなる群から選択される作用剤の治療上有効量の使用であって、該作用剤が、Ｂ７−４を発現する細胞またはＰＤ−１を発現する免疫細胞と接触させるとＢ７−４とＰＤ−１との相互作用をモジュレーションするところの、使用。
【請求項３】
免疫応答がダウンレギュレーションされる請求項１の方法または請求項２の使用。
【請求項４】
ＢＤ７−４を用いてＰＤ−１を介するシグナリングが刺激される請求項１の方法。
【請求項５】
免疫細胞がＴ細胞、Ｂ細胞、および骨髄細胞からなる群より選択されるものである請求項１の方法または請求項２の使用。
【請求項６】
免疫細胞においてアネルギーが誘導される請求項３の方法。
【請求項７】
免疫応答をダウンレギュレーションするさらなる作用剤に免疫細胞を接触させることをさらに特徴とする請求項３の方法。
【請求項８】
免疫応答がアップレギュレーションされる請求項１の方法または請求項２の使用。
【請求項９】
ＰＤ−１を認識するブロッキング抗体、非活性化形態のＢ７−４、Ｂ７−４を認識する抗体、および可溶性形態のＰＤ−１からなる群より選択される作用剤を用いてＰＤ−１を介するシグナリングが阻害される請求項１の方法または請求項２の使用。
【請求項１０】
配列番号：２または４のアミノ酸配列に対して全長にわたり少なくとも９０％アミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質であるＢ７−４、Ｂ７−４の細胞外ドメインを含むタンパク質、ＰＤ−１、抗Ｂ７−４抗体、および抗ＰＤ−１抗体からなる群より選択される作用剤にＢ７−４を発現する抗原提示細胞をインビトロで接触させて、Ｂ７−４と免疫細胞上のＰＤ−１との相互作用がモジュレーションされるようにすることを特徴とする、Ｂ７−４と免疫細胞上のＰＤ−１との相互作用をモジュレーションする方法。
【請求項１１】
Ｂ７−４と免疫細胞上のＰＤ−１との相互作用をモジュレーションするための医薬の調製のための、配列番号：２または４のアミノ酸配列に対して全長にわたり少なくとも９０％アミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質であるＢ７−４、Ｂ７−４の細胞外ドメインを含むタンパク質、ＰＤ−１、抗Ｂ７−４抗体、および抗ＰＤ−１抗体からなる群から選択される作用剤の治療上有効量の使用であって、該作用剤が、Ｂ７−４を発現する抗原提示細胞と接触させるとＢ７−４とＰＤ−１との相互作用をモジュレーションするところの、使用。
【請求項１２】
免疫応答をモジュレーションするさらなる作用剤に免疫細胞または抗原提示細胞を接触させることをさらに含む請求項１０の方法または請求項１１の使用。
【請求項１３】
免疫細胞がＴ細胞、Ｂ細胞、および骨髄細胞からなる群より選択されるものである請求項１０の方法または請求項１１の使用。
【請求項１４】
Ｂ７−４と免疫細胞上のＰＤ−１との相互作用が、ＰＤ−１を認識するブロッキング抗体、可溶性形態のＢ７−４、Ｂ７−４を認識する抗体、および可溶性形態のＰＤ−１からなる群から選択される作用剤を用いてモジュレーションされる、請求項１０の方法または請求項１１の使用。
【請求項１５】
免疫応答のアップレギュレーションから利益を受けるであろう症状を有する対象を治療するための医薬組成物の調製のための、配列番号：２または４のアミノ酸配列に対して全長にわたり少なくとも９０％アミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質であるＢ７−４、Ｂ７−４の細胞外ドメインを含むタンパク質、ＰＤ−１、抗Ｂ７−４抗体、および抗ＰＤ−１抗体からなる群から選択される作用剤の使用。
【請求項１６】
該作用剤が、ＰＤ−１を認識するブロッキング抗体、可溶性形態のＢ７−４、Ｂ７−４を認識する抗体および可溶性形態のＰＤ−１からなる群から選択される請求項１５の使用。
【請求項１７】
免疫応答をアップレギュレーションする第２の作用剤を対象に投与することをさらに特徴とする請求項１５の使用。
【請求項１８】
症状が腫瘍、神経学的疾患または免疫抑制性疾患からなる群より選択されるものである請求項１５の使用。
【請求項１９】
免疫応答のダウンレギュレーションから利益を受けるであろう症状を有する対象を治療するための医薬組成物の調製のための、配列番号：２または４のアミノ酸配列に対して全長にわたり少なくとも９０％アミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を含むタンパク質であるＢ７−４、Ｂ７−４の細胞外ドメインを含むタンパク質、ＰＤ−１、抗Ｂ７−４抗体、および抗ＰＤ−１抗体からなる群から選択される作用剤の使用。
【請求項２０】
免疫応答をダウンレギュレーションする第二の作用剤を対象に投与することをさらに特徴とする請求項１９の使用。
【請求項２１】
症状が移植、アレルギー、および自己免疫疾患からなる群より選択されるものである請求項１９の使用。
【請求項２２】
可溶性形態のＢ７−４が、配列番号：２または４の細胞外ドメインを含むポリペプチド、あるいは配列番号：２または４の細胞外ドメインに対して全長にわたり少なくとも９０％アミノ酸同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドである、請求項９、１４、または１６のいずれか１項記載の方法または使用。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２５３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２５３】
これらのＥＳＴから配列５'−ＣＡＧＣＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＣＧＡＣＴＡＣＡＡ−３'（配列番号５）および５'−ＡＧＧＴＧＣＴＡＧＧＧＧＡＣＡＧＴＧＴＴＡＧＡＣＡ−３'（配列番号６）をもつオリゴヌクレオチドを合成した。これらのオリゴヌクレオチドを用いることにより、濾胞性リンパ腫の症例の脾臓、活性化Ｂ細胞、ＩＮＦ−γ活性化ケラチノサイト、正常な脾臓および胎盤からのｍＲＮＡの逆転写により調製されたｃＤＮＡを鋳型として用いてＰＣＲ反応をプライミングした。条件は、９４℃で１分、９４℃で３０秒、５６℃で３０秒、６８℃で１分を３５サイクル；６８℃で３分、４℃保持であった。鋳型は全て３８９bpの予測されたサイズのバンドを与えた。ＩＮＦ−γ活性化ケラチノサイトのＰＣＲからの３８９bp産物を、アガロースゲル電気泳動により精製し、０.０５ミリモルのビオチン−２１−ｄＵＴＰおよび上記プライマーを含むＰＣＲ反応において０.１２ngを鋳型として使用した。条件は、９４℃で１分、９４℃で３０秒、５６℃で３０秒、６８℃で２分を２０サイクル；６８℃で５分、４℃保持であった。ビオチニル化ＰＣＲ産物をヌクレオスピンカラム（クロンテク）で精製し、クロンキャプチャーｃＤＮＡ選別方法（クロンテク）においてプローブとして使用した。６０ngの変性ビオチニル化ＰＣＲ産物を、３０μlの最終体積中２ミリモルのＣｏＣｌ２、１×ＲｅｃＡ緩衝液、１μgのＲｅｃＡ蛋白、１×ＡＴＰとインキュベーションした。反応物を３７℃で１５分インキュベーションした。その混合物に、０.７μgの活性化ケラチノサイトｃＤＮＡライブラリーのプラスミドＤＮＡおよび０.４μgのヒト胎盤ｃＤＮＡライブラリーを加え、インキュベーションを２０分間続行した。５０ngのＥｃｏＲＶ消化ラムダＤＮＡを反応物に加え、５分間インキュベーションした。０.６μlの１０％ＳＤＳおよび５.６μgのプロテイナーゼＫを加え、３７℃で１０分間インキュベーションした。１μgの０.１モルＰＭＳＦを加えることにより、プロテイナーゼＫを不活化した。ストレプトアビジン磁気ビーズを１０分間剪断したサケ精子ＤＮＡ５μgとプレインキュベーションし、ビーズを磁石で捕捉し、上清を除去し、ビーズを３０μlの結合緩衝液（１ミリモルのＥＤＴＡ、１モルのＮａＣｌ、１０ミリモルのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７.５）に再懸濁した。ビーズを反応物に加え、反応物を室温で穏やかに混合しながら３０分間インキュベーションした。ビーズを磁石で捕捉し、上清を除去した。ビーズを１mlの洗浄緩衝液（１ミリモルのＥＤＴＡ、２モルのＮａＣｌ、１０ミリモルのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７.５）で洗浄し、ビーズを磁石で捕捉し、上清を除去した。洗浄手順を３回反復した。１mlの滅菌Ｈ２Ｏを洗浄したビーズに加え、３７℃で５分間インキュベーションし、ビーズを磁石で捕捉し、上清を除去した。０.１mlの溶離緩衝液（１ミリモルのＥＤＴＡ、０.１ＮのＮａＯＨ）を加え、室温で５分間インキュベーションすることにより捕捉されたＤＮＡを溶離し、ビーズを磁石で捕捉し、上清を除去し、新しいチューブに取っておいた。担体およびｐＨ中和剤を含む沈澱混合物２２.５μlを２.５倍量のエタノールと一緒に加えた。プラスミドＤＮＡを遠心分離により濃縮し、Ｈ２Ｏに再溶解した。プラスミドＤ���Ａを電気穿孔によりエシェリシア・コリ（E.coli）ＤＨ１０Ｂ／Ｐ３へ再導入し、７.５μg／mlのテトラサイクリンおよび２５μg／mlのアンピシリンを含むＬＢ−寒天プレートで選別した。コロニーをナイトラン（nytran）フィルターに取り上げ、５'−ＣＡＧＣＴＡＴＧＧＴＧＧＴＧＣＣＧＡＣＴＡＣＡＡ−３'（配列番号７）、５'−ＡＧＧＴＧＣＴＡＧＧＧＧＡＣＡＧＴＧＴＴＡＧＡＣＡ−３'（配列番号８）および５'−ＴＣＧＣＴＴＧＴＡＧＴＣＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＴＡ−３'（配列番号９）の配列をもつ３２Ｐ標識オリゴヌクレオチドとハイブリダイズさせた。オリゴは全てＡＡ２９２２０１配列からである。最終洗浄条件は、２×ＳＳＣ、０.１％ＳＤＳ、５５℃で２０分間であった。２つのハイブリダイズしているコロニーを採取し、ｃＤＮＡインサートの配列を決定した。