【手続補正書】
【提出日】平成23年8月24日(2011.8.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１個以上の遊離システインアミノ酸および以下
【表４−１】
2011504460.tif 000001
から選択される配列を含む、システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項２】
前記システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体は、ＴＥＮＢ２ポリペプチドに結合する、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項３】
親抗ＴＥＮＢ２抗体の１個以上のアミノ酸残基を、システインで置換する工程を包含するプロセスによって調製される、請求項１または請求項２に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項４】
前記１個以上の遊離システインアミノ酸残基は、軽鎖に位置する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項５】
以下から選択される１つ以上の配列を含む、請求項４に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体：
【表３】
2011504460.tif 000002
【請求項６】
前記１個以上の遊離システインアミノ酸残基は、重鎖に位置する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項７】
以下から選択される１つ以上の配列を含む、請求項６に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体：
【表４】
2011504460.tif 000003
【請求項８】
以下：
【化３２】
2011504460.tif 000004
を含む重鎖配列を含むか、および／または
以下
【化３３】
2011504460.tif 000005
を含む軽鎖配列を含む、
請求項１〜７のいずれか１項に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項９】
細菌またはＣＨＯ細胞において生成される、請求項１〜８のいずれか１項に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項１０】
前記抗体は、オーリスタチン薬物部分に共有結合され、それによって、抗体薬物結合体化合物が形成される、請求項１〜９のいずれか１項に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
【請求項１１】
システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体（Ａｂ）、およびオーリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む請求項１０に記載の抗体薬物結合体化合物であって、ここで、該システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体は、１個以上の遊離システインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合されており；該化合物は、式Ｉ：
【化３４】
2011504460.tif 000006
を有し、ここでｐは、１、３、４、もしくは好ましくは２である、
抗体薬物結合体化合物。
【請求項１２】
Ｌは、以下の式：
【化３５】
2011504460.tif 000007
を有し、
ここで
Ａは、前記システイン操作抗体（Ａｂ）のシステインチオールに共有結合される伸長因子ユニットであり；
ａは、０もしくは１であり；
各Ｗは、独立してアミノ酸ユニットであり；
ｗは、０〜１２の範囲の整数であり；
Ｙは、前記薬物部分に共有結合されるスペーサーユニットであり；そして
ｙは、０、１もしくは２である、
請求項１１に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項１３】
以下の式を有する、請求項１２に記載の抗体薬物結合体化合物：
【化３６】
2011504460.tif 000008
ここでＰＡＢは、パラアミノベンジルカルバモイルであり、Ｒ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル、Ｏ−（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−から選択される二価ラジカルであり；ここでＲｂは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、フェニル、もしくはベンジルであり；そしてｒは、独立して、１〜１０の範囲の整数である。
【請求項１４】
Ｗｗは、バリン−シトルリンである、請求項１２に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項１５】
以下の式を有する、請求項１２に記載の抗体薬物結合体化合物：
【化３７】
2011504460.tif 000009
【請求項１６】
Ｒ１７は、（ＣＨ２）５もしくは（ＣＨ２）２である、請求項１３または１５のいずれかに記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項１７】
以下の式を有する、請求項１２に記載の抗体薬物結合体化合物：
【化３８】
2011504460.tif 000010
【請求項１８】
Ｌは、ＳＭＣＣもしくはＢＭＰＥＯである、請求項１２に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項１９】
Ｄは、
ＭＭＡＥであり、好ましくは以下の構造：
【化３９】
2011504460.tif 000011
を有し、
ここで波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示すか；または
ＭＭＡＦであり、好ましくは以下の構造：
【化４０】
2011504460.tif 000012
を有し、
ここで波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示すか
のいずれかである、請求項１２に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項２０】
親抗ＴＥＮＢ２抗体は、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体、およびヒト化抗体から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体または請求項１０〜１９のいずれか１項に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項２１】
親抗ＴＥＮＢ２抗体は、抗体フラグメントであり、好ましくはＦａｂフラグメントである、請求項１〜９のいずれか１項に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体または請求項１０〜１９のいずれか１項に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項２２】
Ｌは、ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢもしくはＭＣ、ＳＭＣＣ、ＳＰＰ、もしくはＢＭＰＥＯである、請求項１０に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項２３】
以下の構造：
【化４１】
2011504460.tif 000013
【化４２】
2011504460.tif 000014
から選択され、ここでＶａｌはバリンであり；Ｃｉｔはシトルリンであり；ｐは、１、２、３、もしくは４であり；そしてＡｂは、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体である、
抗体薬物結合体化合物。
【請求項２４】
Ａｂは、配列番号１および／または配列番号２を含む、請求項２３に記載の抗体薬物結合体化合物。
【請求項２５】
請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体または請求項１０に記載の抗体薬物結合体化合物、および薬学的に受容可能な希釈剤、キャリアもしくは賦形剤を含む、薬学的処方物。
【請求項２６】
レトロゾール、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ラパチニブ、カペシタビン、ロイコボリン、エルロチニブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、およびゲムシタビンから選択される化学療法剤の治療上有効な量をさらに含む、請求項２５に記載の抗体薬物結合体化合物を含む薬学的処方物。
【請求項２７】
製造物品であって、
請求項２５に記載の抗体薬物結合体化合物を含む薬学的処方物；
容器；および
前記化合物を使用して、ＴＥＮＢ２ポリペプチドの過剰発現によって特徴づけられる癌を処置することができることを示す、パッケージ挿入物もしくは表示、
を含み、ここで、該癌は、好ましくは、卵巣癌、前立腺癌、尿路の癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、もしくは結腸癌から選択される、製造物品。
【請求項２８】
ＴＥＮＢ２タンパク質を含むと推測されるサンプル中のＴＥＮＢ２タンパク質の存在を決定するための方法であって、該方法は、該サンプルを、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体に曝す工程、および該サンプル中の該ＴＥＮＢ２タンパク質への該抗体の結合を決定する工程を含み、ここで該タンパク質への該抗体の結合は、該サンプル中の該タンパク質の存在を示し、該抗体は、必要に応じて蛍光色素、放射性同位体、ビオチン、もしくは金属錯化配位子から選択される標識に共有結合されている、方法。
【請求項２９】
前記サンプルは、前記ＴＥＮＢ２タンパク質を発現すると推測される細胞を含み、ここで該細胞は、好ましくは、前立腺癌細胞、卵巣癌細胞、乳癌細胞、肺癌細胞、もしくは膵臓癌細胞である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
癌細胞を検出するためのアッセイであって、該アッセイは、
（ａ）細胞を、請求項１０に記載の抗体薬物結合体化合物に曝す工程；および
（ｂ）該細胞への該抗体薬物結合体化合物の結合の程度を決定する工程、
を包含し、ここで、該細胞は、好ましくは、前立腺腫瘍細胞、膵臓腫瘍細胞、肺腫瘍細胞、乳房腫瘍細胞、結腸腫瘍細胞もしくは卵巣腫瘍細胞である、アッセイ。
【請求項３１】
細胞増殖を阻害する方法であって、該方法は、細胞培養培地中の哺乳動物腫瘍細胞を、請求項１０に記載の抗体薬物結合体化合物で処理し、それによって、該腫瘍細胞の増殖を阻害する工程、を包含し、ここで、該哺乳動物腫瘍細胞は、好ましくは、卵巣腫瘍細胞である、方法。
【請求項３２】
癌を処置する方法において使用するための請求項２５に記載の薬学的処方物であって、該方法は、該薬学的処方物を患者に投与する工程を包含し、ここで、好ましくは該癌は、前立腺癌、尿路の癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、結腸癌および卵巣癌からなる群より選択される、薬学的処方物。
【請求項３３】
前記方法は、前記抗体薬物結合体化合物と組み合わせて化学療法剤を前記患者に投与する工程を包含し、ここで該化学療法剤は、レトロゾール、シスプラチン、カルボプラチン、タキソール、パクリタキセル、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ロイコボリン、エルロチニブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、ラパチニブ、およびゲムシタビンから選択される、請求項３２に記載の薬学的処方物。
【請求項３４】
請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体（Ａｂ）およびオーリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む、抗体薬物結合体化合物を作製するための方法であって、ここで該システイン操作抗体は、１個以上の操作されたシステインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；該化合物は、式Ｉ：
【化４３】
2011504460.tif 000015
を有し、ここでｐは、１、２、３、もしくは４であり；
該方法は、
（ａ）該システイン操作抗体の操作されたシステイン基と、リンカー試薬とを反応させて、抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成する工程；および
（ｂ）Ａｂ−Ｌと、活性化された薬物部分Ｄとを反応させ；それによって、該抗体薬物結合体化合物が形成される、工程；
を包含するか、または
（ｃ）薬物部分の求核性基と、リンカー試薬とを反応させて、薬物−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成する工程；および
（ｄ）Ｄ−Ｌと、該システイン操作抗体の操作されたシステイン基とを反応させ；それによって、該抗体薬物結合体化合物が形成される、工程、
を包含し、ここで該方法は、該システイン操作抗体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において発現させる工程を必要に応じて包含する、方法。
【請求項３５】
前記発現されたシステイン操作抗体を、還元剤で処理する工程をさらに包含し、ここで該還元剤は好ましくはＴＣＥＰおよびＤＴＴから選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記発現されたシステイン操作抗体を、前記還元剤で処理する工程の後に、酸化剤で処理する工程をさらに包含し、ここで該酸化剤は、好ましくは硫酸銅、デヒドロアスコルビン酸、および空気から選択される、請求項３５に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
本発明の一局面は、式Ｉの抗体薬物結合体化合物を作製するための方法であり、上記方法は、（ａ）上記システイン操作抗体の操作システイン基と、リンカー試薬とを反応させて、抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成する工程；および（ｂ）Ａｂ−Ｌと、活性化された薬物部分Ｄとを反応させる工程を包含し、それによって、上記抗体薬物結合体が形成されるか；または（ｃ）薬物部分の求核性基と、リンカー試薬とを反応させて、薬物−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成する工程；および（ｄ）Ｄ−Ｌと、上記システイン操作抗体の操作システイン基とを反応させる工程を包含し、それによって上記抗体薬物結合体が形成される。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される：
（請求項１）
１個以上の遊離システインアミノ酸および配列番号８〜２３から選択される配列を含む、システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項２）
前記システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体は、ＴＥＮＢ２ポリペプチドに結合する、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項３）
親抗ＴＥＮＢ２抗体の１個以上のアミノ酸残基を、システインで置換する工程を包含するプロセスによって調製される、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項４）
前記１個以上の遊離システインアミノ酸残基は、軽鎖に位置する、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項５）
以下から選択される１つ以上の配列を含む、請求項４に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体：
【表３】
2011504460.tif 000016
（請求項６）
前記１個以上の遊離システインアミノ酸残基は、重鎖に位置する、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項７）
以下から選択される１つ以上の配列を含む、請求項６に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体：
【表４】
2011504460.tif 000017
（請求項８）
以下を含む重鎖配列を含む、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体：
【化３２】
2011504460.tif 000018
（請求項９）
以下を含む軽鎖配列を含む、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体：
【化３３】
2011504460.tif 000019
（請求項１０）
前記親抗ＴＥＮＢ２抗体は、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体、およびヒト化抗体から選択される、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項１１）
抗体フラグメントである、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項１２）
前記抗体フラグメントは、Ｆａｂフラグメントである、請求項１１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項１３）
キメラ抗体、ヒト抗体、もしくはヒト化抗体から選択される、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項１４）
細菌において生成される、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項１５）
ＣＨＯ細胞において生成される、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項１６）
ＴＥＮＢ２タンパク質を含むと推測されるサンプル中のＴＥＮＢ２タンパク質の存在を決定するための方法であって、該方法は、該サンプルを、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体に曝す工程、および該サンプル中の該ＴＥＮＢ２タンパク質への該抗体の結合を決定する工程を含み、ここで該タンパク質への該抗体の結合は、該サンプル中の該タンパク質の存在を示す、方法。
（請求項１７）
前記サンプルは、前記ＴＥＮＢ２タンパク質を発現すると推測される細胞を含む、請求項１６に記載の方法。
（請求項１８）
前記細胞は、前立腺癌細胞、卵巣癌細胞、乳癌細胞、肺癌細胞、もしくは膵臓癌細胞である、請求項１６に記載の方法。
（請求項１９）
前記抗体は、蛍光色素、放射性同位体、ビオチン、もしくは金属錯化配位子から選択される標識に共有結合されている、請求項１６に記載の方法。
（請求項２０）
請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体、および薬学的に受容可能な希釈剤、キャリアもしくは賦形剤を含む、薬学的処方物。
（請求項２１）
前記抗体は、オーリスタチン薬物部分に共有結合され、それによって、抗体薬物結合体が形成される、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体。
（請求項２２）
システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体（Ａｂ）、およびオーリスタチン薬物部分（Ｄ）を含み、ここで、該システイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体は、１個以上の遊離システインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合されており；該化合物は、式Ｉ：
【化３４】
2011504460.tif 000020
を有し、ここでｐは、１、２、３、もしくは４である、
請求項２１に記載の抗体薬物結合体。
（請求項２３）
ｐは２である、請求項２２に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項２４）
Ｌは、以下の式：
【化３５】
2011504460.tif 000021
を有し、
ここで
Ａは、前記システイン操作抗体（Ａｂ）のシステインチオールに共有結合される伸長因子ユニットであり；
ａは、０もしくは１であり；
各Ｗは、独立してアミノ酸ユニットであり；
ｗは、０〜１２の範囲の整数であり；
Ｙは、前記薬物部分に共有結合されるスペーサーユニットであり；そして
ｙは、０、１もしくは２である、
請求項２２に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項２５）
以下の式を有する、請求項２４に記載の抗体薬物結合体化合物：
【化３６】
2011504460.tif 000022
ここでＰＡＢは、パラアミノベンジルカルバモイルであり、Ｒ１７は、（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル、Ｏ−（ＣＨ２）ｒ、アリーレン、（ＣＨ２）ｒ−アリーレン、−アリーレン−（ＣＨ２）ｒ−、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）、（Ｃ３−Ｃ８カルボシクリル）−（ＣＨ２）ｒ、Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル、（ＣＨ２）ｒ−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）、−（Ｃ３−Ｃ８ヘテロシクリル）−（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒ−ＣＨ２−、および−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｒＣ（Ｏ）ＮＲｂ（ＣＨ２）ｒ−か
ら選択される二価ラジカルであり；ここでＲｂは、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、フェニル、もしくはベンジルであり；そしてｒは、独立して、１〜１０の範囲の整数である。
（請求項２６）
Ｗｗは、バリン−シトルリンである、請求項２４に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項２７）
Ｒ１７は、（ＣＨ２）５もしくは（ＣＨ２）２である、請求項２４に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項２８）
以下の式を有する、請求項２４に記載の抗体薬物結合体化合物：
【化３７】
2011504460.tif 000023
（請求項２９）
Ｒ１７は、（ＣＨ２）５もしくは（ＣＨ２）２である、請求項２８に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項３０）
以下の式を有する、請求項２４に記載の抗体薬物結合体化合物：
【化３８】
2011504460.tif 000024
（請求項３１）
Ｌは、ＳＭＣＣもしくはＢＭＰＥＯである、請求項２２に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項３２）
Ｄは、ＭＭＡＥであり、以下の構造：
【化３９】
2011504460.tif 000025
を有し、
ここで波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示す、請求項２２に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項３３）
Ｄは、ＭＭＡＦであり、以下の構造：
【化４０】
2011504460.tif 000026
を有し、
ここで波線は、前記リンカーＬへの結合部位を示す、請求項２２に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項３４）
親抗ＴＥＮＢ２抗体は、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト抗体、およびヒト化抗体から選択される、請求項２１に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項３５）
親抗ＴＥＮＢ２抗体は、抗体フラグメントである、請求項２１に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項３６）
前記抗体フラグメントは、Ｆａｂフラグメントである、請求項３５に記載の抗体薬物結合体化合物。
（請求項３７）
前記オーリスタチンは、ＭＭＡＥもしくはＭＭＡＦである、請求項２１に記載の抗体薬物結合体。
（請求項３８）
Ｌは、ＭＣ−ｖａｌ−ｃｉｔ−ＰＡＢもしくはＭＣである、請求項２１に記載の抗体薬物結合体。
（請求項３９）
Ｌは、ＳＭＣＣ、ＳＰＰ、もしくはＢＭＰＥＯである、請求項２１に記載の抗体薬物結合体。
（請求項４０）
以下の構造：
【化４１】
2011504460.tif 000027
【化４２】
2011504460.tif 000028
から選択され、ここでＶａｌはバリンであり；Ｃｉｔはシトルリンであり；ｐは、１、２、３、もしくは４であり；そしてＡｂは、請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体である、
抗体薬物結合体化合物。
（請求項４１）
Ａｂは、配列番号１を含む、請求項４０に記載の抗体薬物結合体。
（請求項４２）
Ａｂは、配列番号２を含む、請求項４０に記載の抗体薬物結合体。
（請求項４３）
Ａｂは、配列番号１および配列番号２を含む、請求項４０に記載の抗体薬物結合体。
（請求項４４）
癌細胞を検出するためのアッセイであって、該アッセイは、
（ａ）細胞を、請求項２１に記載の抗体薬物結合体化合物に曝す工程；および
（ｂ）該細胞への該抗体薬物結合体化合物の結合の程度を決定する工程、
を包含する、アッセイ。
（請求項４５）
前記細胞は、前立腺腫瘍細胞、膵臓腫瘍細胞、肺腫瘍細胞、乳房腫瘍細胞、結腸腫瘍細胞もしくは卵巣腫瘍細胞である、請求項４４に記載のアッセイ。
（請求項４６）
細胞増殖を阻害するための方法であって、該方法は、細胞培養培地中の哺乳動物腫瘍細胞を、請求項２１に記載の抗体薬物結合体化合物で処理し、それによって、該腫瘍細胞の増殖を阻害する工程、を包含する、方法。
（請求項４７）
前記哺乳動物腫瘍細胞は、卵巣腫瘍細胞である、請求項４６に記載の方法。
（請求項４８）
請求項２１に記載の抗体薬物結合体、および薬学的に受容可能な希釈剤、キャリアもしくは賦形剤を含む、薬学的処方物。
（請求項４９）
レトロゾール、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ラパチニブ、カペシタビン、ロイコボリン、エルロチニブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、およびゲムシタビンから選択される化学療法剤の治療上有効な量をさらに含む、請求項４８に記載の薬学的処方物。
（請求項５０）
請求項４８に記載の薬学的処方物を患者に投与する工程を包含する、癌を処置するための方法。
（請求項５１）
前記癌は、前立腺癌、尿路の癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、結腸癌および卵巣癌からなる群より選択される、請求項５０に記載の方法。
（請求項５２）
前記患者は、前記抗体薬物結合体化合物と組み合わせて化学療法剤を投与され、ここで該化学療法剤は、レトロゾール、シスプラチン、カルボプラチン、タキソール、パクリタキセル、オキサリプラチン、ドセタキセル、５−ＦＵ、ロイコボリン、エルロチニブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、ラパチニブ、およびゲムシタビンから選択される、請求項５０に記載の方法。
（請求項５３）
製造物品であって、
請求項４８に記載の薬学的処方物；
容器；および
前記化合物を使用して、ＴＥＮＢ２ポリペプチドの過剰発現によって特徴づけられる癌を処置することができることを示す、パッケージ挿入物もしくは表示、
を含む、製造物品。
（請求項５４）
前記癌は、卵巣癌、前立腺癌、尿路の癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、もしくは結腸癌である、請求項５３に記載の製造物品。
（請求項５５）
請求項１に記載のシステイン操作抗ＴＥＮＢ２抗体（Ａｂ）およびオーリスタチン薬物部分（Ｄ）を含む、抗体薬物結合体化合物を作製するための方法であって、ここで該システイン操作抗体は、１個以上の操作されたシステインアミノ酸を介してリンカー部分（Ｌ）によってＤに結合され；該化合物は、式Ｉ：
【化４３】
2011504460.tif 000029
を有し、ここでｐは、１、２、３、もしくは４であり；
該方法は、
（ａ）該システイン操作抗体の操作されたシステイン基と、リンカー試薬とを反応させて、抗体−リンカー中間体Ａｂ−Ｌを形成する工程；および
（ｂ）Ａｂ−Ｌと、活性化された薬物部分Ｄとを反応させ；それによって、該抗体薬物結合体が形成される、工程；
を包含するか、または
（ｃ）薬物部分の求核性基と、リンカー試薬とを反応させて、薬物−リンカー中間体Ｄ−Ｌを形成する工程；および
（ｄ）Ｄ−Ｌと、該システイン操作抗体の操作されたシステイン基とを反応させ；それによって、該抗体薬物結合体が形成される、工程、
を包含する、方法。
（請求項５６）
前記システイン操作抗体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において発現させる工程をさらに包含する、請求項５５に記載の方法。
（請求項５７）
前記発現されたシステイン操作抗体を、還元剤で処理する工程をさらに包含する、請求項５６に記載の方法。
（請求項５８）
前記還元剤は、ＴＣＥＰおよびＤＴＴから選択される、請求項５７に記載の方法。
（請求項５９）
前記発現されたシステイン操作抗体を、前記還元剤で処理する工程の後に、酸化剤で処理する工程をさらに包含する、請求項５７に記載の方法。
（請求項６０）
前記酸化剤は、硫酸銅、デヒドロアスコルビン酸、および空気から選択される、請求項５９に記載の方法。