【事件の表示】
　特願２００２−２７７９５４「マイクロ流路利用反応方法」拒絶査定不服審判事件〔平成１６年　４月１５日出願公開、特開２００４−１１３８７４〕について、次のとおり審決する。
【結　論】
　本件審判の請求は、成り立たない。
【理　由】
第１　手続の経緯  
　本願は、平成１４年９月２４日の出願であって、平成１９年１１月１日付けで明細書についての手続補正がされ、同年１１月２９日付けで拒絶理由が通知され、平成２０年５月３０日付けでこの拒絶理由によって拒絶査定がされたものであり、本件審判は、この査定を不服として、同年７月４日に請求されたものであり、同年８月１日付けで明細書についての手続補正がされ、平成２２年５月２７日付けで前置報告に基づく審尋がされ、同年７月２２日付けで回答書が提出されたものである。  
　　  
第２　本願発明 
　本願に係る発明は、平成２０年８月１日付けの手続補正によって補正された明細書の特許請求の範囲の請求項１に記載された次のとおりのものと認められる。
　 
　「酵素反応を行わせるに当り、マイクロ流路に酵素分子を担持させた流体とその他の反応体分子を担持させた流体とを送液し、マイクロ流路の有する酵素分子と反応体分子のいずれか一方若しくは両方の形状又は配向状態を変化させる作用を利用して酵素反応を促進させることを特徴とする方法。」（以下、「本願発明」という。） 
　  
第３　原審の拒絶査定の理由 
　原審の拒絶査定の理由は、本願は、特許請求の範囲の記載が特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていない、というものであり、具体的には、「マイクロ流路の作用を利用して、その反応体分子の形状又は分子の配向状態を変化させることにより、効率よく反応を行わせる」との発明特定事項が、発明の詳細な説明に記載されていない、というものである。 
　 
第４　当審の判断  
ア　本願明細書の発明の詳細な説明には、本願発明に係るマイクロ流を用いた酵素反応に関して、以下の記載がされている。 
　 
（ａ）「【０００４】 
　他方、最近に至り、マイクロ流路を用いて種々の反応を行わせる方法が開発され、例えば、極細の管状の流路では壁面との接触比表面積が大きいことから、これを利用して、壁面に酵素を固定化し、高効率で酵素反応を行わせる方法（非特許文献１参照）、複数の溶液を同時に供給して層流を形成させ、溶液間の界面で反応させることにより、ナノサイズレベルの均一な粒子を製造する方法（非特許文献２参照）などが提案されている。」 
　 
（ｂ）「【０００６】 
　　【発明が解決しようとする課題】 
　本発明は、流体に担持された酵素分子に対して示すマイクロ流路特有の作用すなわち酵素分子の形状や配向状態を変化させる作用を利用して酵素反応を効率よく行わせることを目的としてなされたものである。 
【０００７】 
　　【課題を解決するための手段】 
　本発明者らは、マイクロ流路の特有な作用について種々研究を行い、マイクロ流路が分子の形状や分子の配向状態を変化させる作用、例えば、からまった状態にある化合物分子をストレート状態に伸長させる作用を有すること、この作用を利用すれば、隠れていた反応部位を露出させることができ、これまでの方法では進行しにくかった酵素反応が効率よく進行することを見出し、この知見に基づいて本発明をなすに至った。 
【０００８】 
　すなわち、本発明は、酵素反応を行わせるに当り、マイクロ流路に酵素分子を担持させた流体とその他の反応体分子を担持させた流体とを送液し、マイクロ流路の有する酵素分子と反応体分子のいずれか一方若しくは両方の形状又は配向状態を変化させる作用を利用して酵素反応を促進させることを特徴とする方法を提供するものである。」 
　 
（ｃ）「【００１５】 
　本発明方法においては、マイクロ流路を流れる溶液の状態の上記特殊性によってもたらされる酵素分子又は反応体分子あるいはその両方の形状の変化により、酵素反応の高性能化をはかったものである。例えば、ＤＮＡ分子やその他の長直鎖高分子は、溶液中では通常、凝縮状態、すなわち丸まった状態にあるが、マイクロ流路内を流れているときには、ほつれて直線状に伸びる。このような高分子の形状の変化により、隠れていた反応部位を溶液中に露出させることができ、従来法よりもはるかに大きい反応速度で反応を進行させたり、特定反応部位への反応の高選択性化を行うことができ、また、不可能であった化学反応や分子認識をもととしたセンシングデバイスへの応用を可能にすることができる。」 
　 
（ｄ）「【００１７】 
　さらに、この際、マイクロ流路を流れる酵素分子や反応体分子は、その流れ状態の特殊性によって、一定方向に向きが揃う配向状態となる。このような配向状態は、酵素分子や反応体分子が完全な真球状をとらない限り必然的にもたらされ、マイクロ流体中における酵素反応において、この配向によって反応部位をたがいに揃えることができ、酵素反応を高効率に行うことが可能となる。」 
　 
（ｅ）「【００２０】 
　本発明は、化学反応一般に適用可能であるが、少量多品種・高純度が高度に要求される酵素反応に対して特に有用である。」 
　 
（ｆ）「【００２２】 
参考例１ 
　蛍光性色素ＤＡＰＩ（４´，６‐ｄｉａｍｉｎｏ‐２‐ｐｈｅｎｙｌｉｎｄｏｌｅ）で染色したＤＮＡ（Ｔ４ＧＴ７　ＤＮＡ）溶液を、内径５００μｍのガラス製キャピラリーに送液し、内部を流れるＤＮＡの形状を蛍光顕微鏡で観察した。この溶液としては、１０μｍｏｌ／ｌ　ＤＮＡ（塩基対換算）、５０μｍｏｌ／ｌ　ＤＡＰＩ、４％（体積比）２‐メルカプトエタノールを含む水溶液を用いる。キャピラリーチューブを下から観察し、内壁下端から１０μｍの高さの位置に顕微鏡の焦点を合わせ、ＤＮＡの形状を撮影した。 
図１（ａ）ないし（ｇ）は異なった流速におけるＤＮＡの形状を示す写真である。これらの図において、（ａ）は流れの停止時、（ｂ）、（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）及び（ｇ）は、それぞれ送液速度は、２，５，１０，２０，５０及び１００μｌ／ｍｉｎのものである。 
【００２３】 
　これらの図において、白く写っているものがＤＮＡである。この一連の図から分るように、キャピラリーチューブ内において、流れを止めているときから徐々に流速を上げていくと、凝縮状態であったＤＮＡが直鎖状に伸びていく状態と、それが流れ方向に配向されている状態が観察される。 
　この結果から、マイクロ流路を流れる溶液の流れ状態の特殊性によって、分子の構造の変化がもたらされること、さらにはその分子は、一方向に配向することが分った。」 
　また、図１は、参考例１の結果を示す顕微鏡写真である。 
　 
（ｇ）「【００２４】 
参考例２ 
　５０μｍｏｌ／ｌフルオレセインを含む水溶液と純水とを、マイクロ流路に層流を形成させながら流し、その状態を共焦点レーザー走査型顕微鏡で観察した。 
　図３は、共焦点レーザー走査型顕微鏡により流路断面を観察したものである。フルオレセインを含む水溶液と含まない純水が互いに混ざり合うことなく層流を形成して流れているが、その両者の接する付近に、周囲よりも特に明るく写っている部分がある。つまりここにはより多くのフルオレセインが存在していると言うことであり、マイクロ流路を流れる溶液の流れの特殊性によって、流路中央部付近に、溶質分子が局在化される現象が確認された。」 
　また、図３は、参考例２の結果を示す共焦点レーザー走査型顕微鏡写真である。 
　 
（ｈ）「【００２５】 
実施例 
　Ｌ‐乳酸デヒドロゲナーゼにより、ピルビン酸をＬ‐乳酸へ還元する反応を、バッチ式反応器とマイクロ流路を用いて行い、性能を比較した。すなわち、３３μｍｏｌ／ｌ　ピルビン酸、２μｍｏｌ／ｌ　Ｌ‐乳酸デヒドロゲナーゼ、ｐＨ７．４リン酸緩衝液の条件で４分間反応を行い、反応前のＬ‐乳酸デヒドロゲナーゼの最大吸収波長３４０ｎｍにおける吸光度の減少から収率を求めた。 
【００２６】　図２は、上記酵素反応を、バッチ式反応器とマイクロ流路で行った場合の収率を比較したものである。マイクロ流路を用いた場合における収率は、バッチ式のそれと比べ大幅な収率の改善が認められた。 
　この結果から、マイクロ流路を利用した化学反応は、従来法の主流であるバッチ式に比べ、大幅な性能の向上を実現できることが分った。」 
　また、図２は、実施例の結果を示す棒グラフである。 
　　 
（ｉ）「【００２７】 
　　【発明の効果】 
　本発明方法によると、マイクロ流路を流れる溶液の流れ状態の特殊性が特に酵素分子の構造や配向などの状態の変化をもたらし、それによって酵素反応を高効率で行うことができる。それはただ単に反応速度や収率の向上にとどまらず、反応部位が高次構造の中に隠れているという理由などで、従来法のバッチ式ではほとんど進行しなかった反応を進行可能にする。しかも、本発明方法によると、物質や化合物の合成だけでなく、特定物質の分析や分離などを行うこともできる。」 
　 
イ　以上の発明の詳細な説明の記載によると、（ａ）には、マイクロ流路を用いる酵素反応について、従来は、マイクロ流路の壁面に酵素が固定化することにより、高効率となるとされていたことが記載され、（ｂ）には、マイクロ流路が分子の形状や分子の配向状態を変化させる作用を有すること、この作用を利用すれば、隠れていた反応部位を露出させることができ、酵素反応の高効率化に特に有用であるとの知見を得て、本願発明をなすに至ったことが記載されている。 
　 
ウ　そして、上記の知見の基となったマイクロ流路の作用について、（ｂ）には、「例えば、からまった状態にある化合物分子をストレート状態に伸長させる作用を有する」、（ｃ）には、「例えば、ＤＮＡ分子やその他の長直鎖高分子は、溶液中では通常、凝縮状態、すなわち丸まった状態にあるが、マイクロ流路内を流れているときには、ほつれて直線状に伸びる」と、長直鎖高分子を例示して記載されており、また、（ｄ）には、「マイクロ流路を流れる酵素分子や反応体分子は、その流れ状態の特殊性によって、一定方向に向きが揃う配向状態となる」、（ｉ）には、「マイクロ流路を流れる溶液の流れ状態の特殊性が特に酵素分子の構造や配向などの状態の変化をもたらし」と、酵素分子や反応体分子を例示して構造や配向状態が変化すると記載されており、（ｅ）には、当該作用について、「化学反応一般に適用可能である」と記載されている。 
　 
エ　ところが、上記のマイクロ流路の作用に関して、（ｆ）には、参考例１として、からまった状態にあるＤＮＡ分子がマイクロ流路内で直線上になり、一方向に配向することについて、実証する記載があり、また、（ｇ）には、参考例２として、フルオレセイン分子（蛍光色素の一種）を溶質とする水溶液と純水とをマイクロ流路に送液すると、層流となって溶質分子が中央部付近に局在化することについて、実証する記載がされているものの、特定の立体構造を取ることによって基質（反応体分子）の反応を触媒するタンパク質である酵素分子と基質のいずれか一方もしくは両方が、マイクロ流路内でからまった状態からほつれて直線上になる形状変化をして一方向に配向したり、酵素分子を溶質とする流体と基質を溶質とする流体とを送液した場合に、酵素分子と基質のいずれか一方若しくは両方の形状（構造）や配向状態が変化したりする作用を実証する記載は見当たらないから、参考例１や参考例２として記載された当該作用が、化学反応一般に適用可能であるとする根拠は、発明の詳細な説明に示されていない。 
　また、（ｈ）には、Ｌ‐乳式酸デヒドロゲナーゼ（酵素分子）とピルビン酸（反応体分子）とを含む溶液をマイクロ流路に送液した場合に、バッチ式反応器で反応を行う場合より酵素反応が促進されたことを実証する記載が認められるが、この酵素反応の促進が、（ａ）に記載の従来例と同様の「マイクロ流路の壁面に酵素が固定化する」作用によるものではなく、「反応体分子の形状又は分子の配向状態を変化させる」作用によるとする根拠についても、発明の詳細な説明に記載されているとは認められない。 
　 
オ　以上によると、発明の詳細な説明には、マイクロ流路が長直鎖高分子の形状を変化させ、一方向に配向させたり、特定の溶質分子を流路中に局在化させる作用を有することが記載されており、この作用を利用すれば、分子の隠れていた反応部位を露出させることができ、化学反応が高効率に行える可能性までは示唆されているといえる。しかし、このマイクロ流路の作用による反応促進が、化学反応一般に適用可能であり、ＤＮＡや特定の蛍光色素とは分子の立体構造がまったく異なる酵素分子の関わる酵素反応においても、反応の高効率化に有用であるとする知見を裏付ける記載は見当たらない。また、マイクロ流路を利用する酵素反応において、何らかの作用により酵素反応が促進されることは記載されているが、その作用が、「酵素分子と反応体分子のいずれか一方若しくは両方の形状又は配向状態を変化させる」ものであることを裏付ける記載も見当たらない。 
　 
カ　これに対して、本願発明は、特許請求の範囲の請求項１に記載された「マイクロ流路の有する酵素分子と反応体分子のいずれか一方若しくは両方の形状又は配向状態を変化させる作用を利用して酵素反応を促進させる」ことを特定事項とするものである。 
　 
キ　したがって、本願発明は、発明の詳細な説明に記載されたものでない。 
　 
第５　むすび  
　以上のとおりであるから、本願が特許請求の範囲の記載が特許法第３６条第６項第１号に規定する要件を満たしていないとする原査定の拒絶理由は妥当である。 
　したがって、本願は、拒絶すべきでものである。  
　よって、結論のとおり審決する。