【手続補正書】
【提出日】平成22年11月29日(2010.11.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）のｓｉＲＮＡ複合体であって：
Ａ−Ｒ１−（Ｒ２）ｅ−Ｒ３
ここで、
Ａがキャップ基またはＲ'３−（Ｒ'２）ｅ'−であり；
Ｒ１が実質的に非抗原性の水溶性ポリマーであり；
Ｒ２およびＲ'２が独立して選択される遊離可能なリンカーまたは永続的リンカー、もしくはその組合せであり；
Ｒ３およびＲ'３が、同一のまたは異なるｓｉＲＮＡ含有部分であり；
（ｅ）および（ｅ'）が、同一のまたは異なる正の整数である、
ｓｉＲＮＡ複合体。
【請求項２】
Ｒ２がｓｉＲＮＡ含有部分のセンス鎖に結合していることを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項３】
ＡがＨ、ＮＨ２、ＯＨ、ＣＯ２Ｈ、Ｃ１−６アルコキシおよびＣ１−６アルキルから成る群より選択されることを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項４】
式：
Ｒ'３−（Ｒ'２）ｅ'−Ｒ１−（Ｒ２）ｅ−Ｒ３
を有する、請求項１の複合体。
【請求項５】
Ｒ２およびＲ'２が、ベンジル脱離系のリンカー、トリアルキルロック系のリンカー、ビシン系のリンカー、酸不安定性リンカー、リソソームで切断可能なペプチドおよびカプテプシン（capthepsin）Ｂ切断可能ペプチドから成る群より独立して選択されることを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項６】
Ｒ２およびＲ'２が、
【化１−１】
2010510810.tif 000001
【化１−２】
2010510810.tif 000002
から成る群より独立して選択され、
ここで、
Ｙ１１−１９は独立してＯ、ＳまたはＮＲ４８であり；
Ｒ３１−４８、Ｒ５０−５１およびＡ５１は独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−１２分枝アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−６置換アルキル、Ｃ３−８置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、Ｃ１−６ヘテロアルキル、置換Ｃ１−６ヘテロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、フェノキシおよびＣ１−６ヘテロアルコキシから成る群より選択され；
Ａｒはアリールまたはヘテロアリール部分であり；
Ｌ１１−１５は独立して選択される二官能性スペーサーであり；
ＪおよびＪ’は独立して、標的細胞内へ能動輸送される部分または
【化２】
2010510810.tif 000003
であり、
ここで、
Ｌ３は二官能性リンカーであり；
Ｙ４はＯ、ＳまたはＮＲ１１であり；
Ｒ１１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−１２分枝アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−６置換アルキル、Ｃ３−８置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、Ｃ１−６ヘテロアルキル、置換Ｃ１−６ヘテロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、フェノキシおよびＣ１−６ヘテロアルコキシから成る群より選択され；
（ｃ１１）、（ｈ１１）、（ｋ１１）、（ｌ１１）、（ｍ１１）および（ｎ１１）は独立して選択される正の整数であり；
（ａ１１）、（ｅ１１）、（ｇ１１）、（ｊ１１）、（ｏ１１）および（ｑ１１）は独立して、ゼロまたは正の整数であり；
（ｂ１１）、（ｘ１１）、（ｘ’１１）、（ｆ１１）、（ｉ１１）および（ｐ１１）は独立してゼロまたは１である
ことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項７】
Ｒ２およびＲ'２が、
【化３−１】
2010510810.tif 000004
【化３−２】
2010510810.tif 000005
から成る群より独立して選択され、
ここで、
Ｒ２１−２９は独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−１２分枝アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−６置換アルキル、Ｃ３−８置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、アラルキル、Ｃ１−６ヘテロアルキル、置換Ｃ１−６ヘテロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、フェノキシおよびＣ１−６ヘテロアルコキシから成る群より選択され；
（ｔ）および（ｔ’）は独立して、ゼロまたは正の整数であり；
（ｖ）および（ｖ’）は独立してゼロまたは１である
ことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項８】
Ｒ２およびＲ'２が、独立して選択されるアミノ酸またはアミノ酸誘導体であることを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項９】
Ｒ２およびＲ'２が、
【化４】
2010510810.tif 000006
から成る群より独立して選択されることを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項１０】
（ｅ）および（ｅ'）が独立して１または２であることを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項１１】
Ｒ１が、直鎖、末端分枝またはマルチアームのポリアルキレンオキサイドを含むことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項１２】
前記ポリアルキレンオキサイドが、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールから成る群より選択されることを特徴とする、請求項１１の複合体。
【請求項１３】
前記ポリアルキレンオキサイドが、
【化５】
2010510810.tif 000007
から成る群より選択され、
ここで、
Ｙ７１およびＹ７３が独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ７３または結合であり；
Ｙ７２がＯ、Ｓ、またはＮＲ７４であり；
Ｒ７１−７４が、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−１９分枝アルキル、Ｃ３−８シクロアルキル、Ｃ１−６置換アルキル、Ｃ２−６置換アルケニル、Ｃ２−６置換アルキニル、Ｃ３−８置換シクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ１−６ヘテロアルキル、置換Ｃ１−６ヘテロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、アリールオキシ、Ｃ１−６ヘテロアルコキシ、ヘテロアリールオキシ、Ｃ２−６アルカノイル、アリールカルボニル、Ｃ２−６アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、Ｃ２−６アルカノイルオキシ、アリールカルボニルオキシ、Ｃ２−６置換アルカノイル、置換アリールカルボニル、Ｃ２−６置換アルカノイルオキシ、置換アリールオキシカルボニル、Ｃ２−６置換アルカノイルオキシおよび置換アリールカルボニルオキシから成る群より独立して選択され；
（ａ２）および（ｂ２）が独立してゼロまたは正の整数であり；
（ｎ）が約１０〜約２３００の整数である
ことを特徴とする、請求項１１の複合体。
【請求項１４】
前記ポリアルキレンオキサイドが式−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−のポリエチレングリコールであり、
ここで、（ｎ）が約１０〜約２，３００の整数である
ことを特徴とする、請求項１１の複合体。
【請求項１５】
Ｒ１が約２，０００〜約１００，０００の平均分子量を有することを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項１６】
Ｒ１が約５，０００〜約６０，０００の平均分子量を有することを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項１７】
Ｒ１が約２０，０００〜約４５，０００の平均分子量を有することを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項１８】
前記ｓｉＲＮＡ含有部分のアンチセンス鎖が、標的遺伝子と相補的な約１８から約２８ヌクレオチドを含むことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項１９】
前記ｓｉＲＮＡ含有部分のアンチセンス鎖が、配列番号：１の核酸配列と相補的な約１８から約２８ヌクレオチドを含むことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項２０】
前記ｓｉＲＮＡ含有部分のアンチセンス鎖が、配列番号：３の核酸配列を含むことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項２１】
【化６−１】
2010510810.tif 000008
【化６−２】
2010510810.tif 000009
から成る群より選択され、
前記ｓｉＲＮＡ含有部分のセンス鎖が、前記ポリマーと複合体化されている
ことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項２２】
【化７】
2010510810.tif 000010
から成る群より選択され、
ここで、
ｓｉＲＮＡが配列番号：２または３の核酸配列を含み；
前記ｓｉＲＮＡのセンス鎖の５'末端がＰＥＧリンカーと複合体化するため、Ｃ６−アミノ尾部へと修飾されている
ことを特徴とする、請求項１の複合体。
【請求項２３】
前記酸不安定性リンカーが、ジスルフィドリンカー、ヒドラゾン含有リンカーおよびチオプロピオネート含有リンカーから成る群より選択されることを特徴とする、請求項５の複合体。
【請求項２４】
ヒト細胞または組織を、請求項１の複合体と接触させる工程を有してなる、ヒト細胞または組織における遺伝子発現を阻害する方法。
【請求項２５】
前記細胞または組織が、がん細胞または組織であることを特徴とする、請求項２４の方法。
【請求項２６】
前記細胞または組織を化学療法剤と接触させる工程をさらに有してなる、請求項２５の方法。
【請求項２７】
ＢＣＬ２の発現が阻害されることを特徴とする、請求項２４の方法。
【請求項２８】
前記ｓｉＲＮＡ含有部分のアンチセンス鎖が配列番号：１の核酸配列と相補的な約１８から約２８ヌクレオチドを含むことを特徴とする、請求項２７の方法。
【請求項２９】
前記複合体が、
【化８】
2010510810.tif 000011
から成る群より選択されることを特徴とする、請求項２７の方法。
【請求項３０】
がん細胞に請求項１の複合体を導入する工程を有してなる、がん細胞の成長または増殖を阻害する方法。
【請求項３１】
前記ｓｉＲＮＡ含有部分のアンチセンス鎖が配列番号：１の核酸配列と相補的な約１８から約２８ヌクレオチドを含むことを特徴とする、請求項３０の方法。
【請求項３２】
前記、複合体が
【化９】
2010510810.tif 000012
から成る群より選択されることを特徴とする、請求項３０の方法。