【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年3月29日(2011.3.29)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００９】
移植または他の医学的目的のための、例えば心臓、肝臓、膵臓、肺、および腎臓のようなドナー組織を必要とする、必要な臓器の不足は、なおも機能的である臓器の限られた入手可能性による。現在、移植を予定される臓器は、心臓がまだ拍動している脳死のドナーから回収される。心臓が停止した場合、血液循環は停止し（虚血）、組織の酸素付加を妨げ（低酸素）、その結果、非常に短時間内に臓器は虚血性の損傷を受け、結果的に、そのような臓器は移植された際に機能しないというほとんど確かな可能性に至る。一般に、心停止後には臓器は使用されず、経験的に、心停止または不全収縮時から30分以上たったものは使用されない。現在、病院における死亡例の1〜2％のみが脳死-心拍動基準に合致する。しかし、多大なかつまだ利用されていない移植のための臓器源は、損傷現場で死亡する、または外傷後の生存時間が短い、事故犠牲者から多数利用可能である。虚血性損傷により、これらの事故犠牲者は臓器ドナーとしては使用されていない。肝臓、脳および心臓のような臓器は、とりわけ著しく虚血感受性の高い組織である。例えば、心停止による低酸素性および虚血性の脳傷害は、およそ4分後に脳および関連する神経組織への損傷に帰結する。心臓は心停止後4時間まで損なわれずに残存できる。肝臓は1時間未満であれば機能的に機能性を存続でき、好ましくは温式虚血への曝露後最初の35分以内に、心拍動のないドナー（NHBD）からの移植を実施することが推奨される（参照として組み入れられる、Ong HS, Soo KC, Joseph VT, Tan SY, Jeyaraj PRによる論文の抄録を参照のこと。「延長された温式虚血後の、移植のための肝臓移植片の生存率（The viability of liver grafts for transplantation after prolonged warm ischemia.）」Ann Acad Med Singapore 1999 Jan;28(1):25〜30；Hong HQ, Yin HR, Zhu SL, Lin YT「選択した心拍動のない死体ドナー由来の移植肝臓の結末（The results of transplant livers from selected non-heat-beating cadaver donors.）」Hiroshima J Med Sci 1991 Sep;40(3):87〜91）。現在の医学的規制の下では、潜在的に移植可能な臓器を取り出すことができる以前の時間が通常遅延する。これは、潜在的なドナーが最初に病院または霊安室に運ばれてこなければならないことから生じる。家族がその後臓器提供書に署名しなければならない。臓器提供の手順を完了して初めて、外科チームが臓器を採集するための死体への接触を許される。多くの場合において、これらの手順により経過した時間のために、臓器は既に不可逆的に損傷を受けている、またはもはや生存可能ではない。したがって、先行技術では、ドナー臓器を虚血性の損傷から防護するための多数の方法および過程を提供する。例えば、多くの中でとりわけ、参照として本明細書に組み入れられる、米国特許第5,702,881号；同第5,660,976号；同第5,752,929号；同第5,863,296号；同第5,855,617号；同第5,843,024号；同第5,827,222号；同第5,723,282号；同第5,514,536号；および同第4,723,939号を参照のこと。ドナー臓器を機能性の喪失から防護する方法を意図した先行技術の参照の多数に関わらず、不可逆的な時点を過ぎた、心停止した死体の使用については、先行技術は言及していない。3つの米国特許（第5,843,024号；同第5,702,881号；同第4,723,939号）のみが、心拍が停止しているドナーを扱っているように見える。本先行技術は、「修復不能の」臓器��ら前駆細胞を単離するための、これらの臓器の使用については開示しない。肝臓先駆細胞の単離法は当技術分野において既知のものである（例えば、参照として本明細書に組み入れられる、米国特許第5,576,207号および同第5,789,246号を参照のこと。）が、本発明が実施されるまでは、先駆肝細胞が、先行技術において「無用な」臓器と考えられていたものから単離できることは知られていなかった。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４５】
方向付けられた（committed）前駆細胞：肝細胞に方向付けられた前駆細胞（肝細胞を生じる）または胆管に方向付けられた前駆細胞（胆管を生じる）のような、単一の運命を有する未成熟細胞。方向付けの過程は、分子レベルでは理解されていない。むしろ、細胞の運命が先祖の運命より狭くなっている場合にごく経験的に起こると認識されている。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４８】
幹細胞：本明細書において用いられるように、「幹細胞」という用語は、一つを超える運命を有する娘細胞を生じることができる未成熟な細胞を意味する。いくつかの娘細胞は親と同一であり、いくつかは特定の運命に「方向付け」される。全能性幹細胞は、自己再生（自己維持）能を有するのに対し、決定された幹細胞は自己再生能に問題がある。幹細胞は、再生増殖過程のあいだに再生することができる。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４９】
肝前駆細胞：これらの細胞は、肝実質細胞と胆管細胞とを生じる。肝前駆細胞には3つの亜集団が含まれる：「肝幹細胞」、「方向付けされた肝実質細胞前駆細胞」、および「方向付けされた胆管前駆細胞」、最後の2つは、肝幹細胞の子孫であり、単一の運命を有する肝実質細胞または胆管細胞のいずれかであるが、双方ではない、未成熟細胞である。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２１８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２１８】
6.18  前駆細胞の調製
この実施例は、方向付けられたおよび方向付けられていない肝臓前駆細胞の単離の段階を提供する。種々の技術が当技術分野で公知であるが、好ましい態様の1つを、他の調製技術も、それらが所望の目標に一致し得る限り等しく適切であるという理解のもとに詳細に開示する。好ましく非制限的な技術の例については、本明細書に参考として取込んだような、米国特許第5,807,686号、第5,916,743号、第5,672,346号、第5,681,559号、第5,665,557号、第5,672,346号および第5,663,051号参照。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２１９】
多能性または方向付けられた肝低密度肝細胞は、パーコールまたは他の適切な密度勾配、例えばヒストパークを使用して予め単離でき、遠心分離後、2回培地で洗浄し、10mlの水簸培地に再懸濁する。対流水簸のために、洗浄した低密度単核細胞を、サンプリング部位カプラーを介して、JE-5ローターおよび標準的なチャンバーを装備したベックマンJ6M/E遠心管の内流に注射する。しかし、密度をベースとした分離を容易にするチャンバー手段を含む、使い捨てのプラスチック差込物を好ましくは使用した、多くの市販の連続流遠心機および水簸選別機のいずれか、例えばIL州ディアフィールド所在バクスター・インターナショナル社の販売する「FenwalモデルCS3000」および「オートフェレーシスC」；CO州レイクウッド所在コーベ・マニュファクチュアリングの販売する「IBMモデル2997」などを使用できる。装置の選択は、当業者に任せられている。蠕動ポンプ（IL州シカゴ所在クール・パルマー・インストルメンツ）は、連続的な水簸培地の流れを提供し、これは、pHを7.2に調整した、100mg/dlのD-グルコース、0.3mMエチレンジアミンテトラ酢酸二ナトリウム（EDTA）および50mg/dlのウシ血清アルブミンを有する0.9％正常食塩水溶液である。培地は使用前に滅菌する。細胞を、全流速15ml/分、回転速度900gおよび室温で送達する。100mlの溶出液を回収した後、流速を25ml/分まで増加する。回転速度を一定に維持しながら、流速は連続的に29ml/分、33ml/分、および37ml/分まで増加させ、各々増加する毎に200ml回収する。チャンバーに残る細胞を、回転を止め、チャンバーに100mlの水簸培地を流すことにより捕獲する。各細胞分画を洗浄し、300gで10分間遠心分離する。適切な分画を回収し、生存度を、トリパンブルー色素排除法により決定し、細胞回復率を、細胞計測機（FL州ハイアリーア所在コールター・エレクトロニックス）で決定する。