(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
全自動分析装置における臨床化学パラメータの分析及び免疫診断パラメータの分析を含む試料（ｐ）の分析方法であり、前記分析装置が、ピペット装置、分析の実施に必要な成分を含む試薬カートリッジ（ＲＰ）の少なくとも１つのホルダ、測定キュベット（Ｍ）の固定具、それぞれの前記試薬カートリッジ（ＲＰ）に１つの測定キュベット（Ｍ）が割り当てられているような少なくとも１つの測定キュベット（Ｍ）、前記試料（ｐ）を含む試料容器（Ｐ）の固定具、並びに測光又は分光測定装置を含み、
それぞれ特定する臨床化学パラメータ又は免疫診断パラメータについて、独自の試薬カートリッジ（ＲＰ）が前記分析装置の試薬カートリッジ（ＲＰ）用固定具の中にセットされ、それぞれの前記試薬カートリッジ（ＲＰ）の窪み（１２、１３、１４）の中には、それぞれのテストに必要な検出試薬（Ｒ１、Ｒ２、Ｋ、Ｓ）が含まれている、方法であって、
前記方法が、
ａ）実施する分析用の前記試薬カートリッジ（ＲＰ）を前記固定具（ＫＡ）にセットし、
ｂ）前記試料（ｐ）を含む前記試料容器（Ｐ）を試料装置にセットし、
ｃ）それぞれの臨床化学パラメータ分析を実施するために設けられている前記試薬カートリッジ（ＲＰ）に割り当てられている前記測定キュベット（Ｍ）を用いて、臨床化学パラメータを特定し、及び、
ｄ）それぞれの免疫診断パラメータ分析を実施するために設けられている前記試薬カートリッジ（ＲＰ）に割り当てられている前記測定キュベット（Ｍ）を用いて、免疫診断パラメータを特定し、
ｅ）使用した前記測定キュベット（Ｍ）を洗浄するか、又は取り外し、
ｆ）使用した前記試薬カートリッジ（ＲＰ）及び前記試料容器（Ｐ）を取り外す
という工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
１つの試料（ｐ）によって複数の異なる臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータが特定されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
臨床化学パラメータの分析に用いられる前記試薬カートリッジ（ＲＰ）が少なくとも１つの検出試薬（Ｒ１、Ｒ２）を含み、免疫診断パラメータの分析に用いられる前記試薬カートリッジ（ＲＰ）が酵素複合体（Ｋ）を含む溶液を備える第１の窪み（１２）、基質溶液（Ｓ）を備える第２の窪み（１３）及び固相（２０）を含むことを特徴とする、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
臨床化学パラメータの特定が、
ａ）前記ピペット装置を使って、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）から１つの検出試薬（Ｒ１）を取り出し、また前記試料（ｐ）を取り出し、
ｂ）前記検出試薬（Ｒ１）及び前記試料（ｐ）を前記ピペット装置から、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）に割り当てられている前記測定キュベット（Ｍ）の中に加え、
ｃ）前記検出試薬（Ｒ１）と前記試料（ｐ）とを培養し、その際、前記検出試薬（Ｒ１）は、前記試料（ｐ）の中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応して、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｄ）前記測定装置を使って、前記測定キュベット（Ｍ）内の前記生成物の濃度を測光的に特定する
という工程を含むことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
臨床化学パラメータの特定が、
ａ）前記ピペット装置を使って、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）の第１の窪み（１２）から第１の検出試薬（Ｒ１）を取り出し、また前記試料（ｐ）を取り出し、
ｂ）前記検出試薬（Ｒ１）及び前記試料（ｐ）を前記ピペット装置から、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）に割り当てられている前記測定キュベット（Ｍ）の中に加え、
ｃ）前記ピペット装置を使って、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）のもう１つの窪み（１３、１４）から第２の検出試薬（Ｒ２）を取り出し、
ｄ）前記ピペット装置から前記第２の検出試薬（Ｒ２）を前記測定キュベット（Ｍ）に加え、
ｅ）前記検出試薬（Ｒ１、Ｒ２）と前記試料（ｐ）とを培養し、その際、前記検出試薬（Ｒ１、Ｒ２）は、前記試料（ｐ）の中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応して、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｆ）前記測定装置を使って、前記測定キュベット（Ｍ）内の前記生成物の濃度を測光的に特定する
という工程を有することを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
臨床化学パラメータの特定が、
ａ）前記ピペット装置を使って、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）の第１の窪み（１２、１３、１４）から第１の検出試薬（Ｒ１）を取り出し、また前記試料（ｐ）を取り出し、
ｂ）前記検出試薬（Ｒ１）及び前記試料（ｐ）を前記ピペット装置から、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）に割り当てられている前記測定キュベット（Ｍ）の中に加え、
ｃ）前記ピペット装置を使って、前記試薬カートリッジ（ＲＰ）のもう１つの窪み（１２、１３、１４）から第２の検出試薬（Ｒ２）を取り出し、
ｄ）前記ピペット装置から前記第２の検出試薬（Ｒ２）を前記測定キュベット（Ｍ）に加え、
ｅ）少なくとももう１つの検出試薬を前記試薬カートリッジ（ＲＰ）のもう１つの窪み（１２、１３、１４）から、又は追加の試薬カートリッジ（ＲＰ）の窪み（１２、１３、１４）から取り出し、前記もう１つの又はその他の検出試薬を前記測定キュベット（Ｍ）の中に加え、
ｆ）前記検出試薬（Ｒ１、Ｒ２）と前記試料（ｐ）とを培養し、その際、前記検出試薬（Ｒ１、Ｒ２）は、前記試料（ｐ）の中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応して、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｇ）前記測定装置を使って、前記測定キュベット（Ｍ）内の前記生成物の濃度を測光的に特定する
という工程を含むことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
検出反応の前記生成物の濃度の測光的特定が、
・前記測定装置を使って、前記測定キュベット（Ｍ）内で第１の測光を実施し、
・前記測定キュベット（Ｍ）において、前記第１及び前記第２の検出試薬及び試料からなる混合物を培養し、
・前記測定装置を使って、前記測定キュベットＭ（内）で第２の測光を実施する
という工程を含むことを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
免疫診断パラメータの特定が、
ａ）前記ピペット装置によって、免疫診断分析を実施するために設けられている前記試薬カートリッジ（ＲＰ）の第１の窪み（１２、１３、１４）から前記酵素複合体（Ｋ）を含む溶液を取り出し、前記試料（ｐ）を取り出し、
ｂ）前記複合体（Ｋ）と前記試料（ｐ）とを前記ピペット装置から前記試薬カートリッジ（ＲＰ）の前記固相（２０）に加え、
ｃ）前記複合体（Ｋ）と前記試料（ｐ）とが入った前記固相（２０）を培養し、
ｄ）前記固相（２０）を洗浄することによって余分な前記複合体（Ｋ）と前記試料（ｐ）とを除去し、
ｅ）免疫診断分析を実施するために設けられた前記試薬カートリッジ（ＲＰ）の第２の窪み（１２、１３、１４）から前記ピペット装置によって前記基質溶液（Ｓ）を取り出し、
ｆ）前記基質溶液（Ｓ）を前記ピペット装置から前記固相（２０）に加え、
ｇ）前記固相（２０）の前記基質溶液（Ｓ）を培養し、
ｈ）前記ピペット装置によって、前記変換された基質溶液（Ｓ’）を取り出し、
ｉ）前記変換された基質溶液（Ｓ’）を前記ピペット装置から前記測定キュベット（Ｍ）に加え、
ｊ）前記測定装置を用いて、前記基質溶液（Ｓ’）内の前記変換された基質の濃度を測定する
という工程を含んでいることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
前記方法が２７℃〜３９℃の温度で実施されることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記方法が３７℃の温度で実施されることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記検出試薬（Ｒ１、Ｒ２）、前記試料（ｐ）、前記酵素複合体（Ｋ）を含む溶液又は前記基質溶液（Ｓ）を分配した後にそれぞれ前記ピペット装置の先端を交換するか、又は洗浄ステーションで洗浄することを特徴とする、請求項３又は８に記載の方法。
【請求項１２】
前記酵素複合体（Ｋ）を含む溶液及び前記試料（ｐ）は、前記固相（２０）に加えた後で混合されることを特徴とする、請求項３又は８又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
濃度の測定が様々な波長における光学密度の特定によって行われることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記試料（ｐ）が、工程ａ）において前記ピペット装置によって取り出される前に、独立した希釈カートリッジの中で希釈されることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、請求項１の前提部分に基づく試料の分析方法に関する。
医学的試料における臨床化学パラメータを特定するための分析方法及び免疫診断パラメータを特定するための分析方法が一般的に知られている。この場合、通常、最初のプロセスにおいて臨床化学パラメータが特定され、次のプロセスにおいて免疫診断パラメータが特定され、その際、それぞれのプロセスについて、個別の分析装置（少なくとも１つの全自動装置）が使用される。
【０００２】
特に比較的小規模の実験室又は診療所にとって、このことは少なくとも２台の自動分析装置を購入し、維持しなければならないとう欠点がある。すなわち、第１の装置は臨床化学テストを実施するためであり、これは、通常、体温（すなわち、３７℃）で行われ、第２の装置は免疫診断の特定を実施するために用いられ、通常、室温（すなわち、２１℃）で行われる。しかし、このことにより、購入の値段が高くなるばかりでなく、２台の装置のメンテナンスも常に要求されることになる。２台の装置を必要とする原因は、臨床化学パラメータと免疫診断パラメータを検出する特定方法が異なっていることである。
【０００３】
従って、本発明の課題は、１つの試料から、臨床化学パラメータと免疫診断パラメータの両方を、１台の同じ自動分析装置で特定可能にする方法を提供することである。本方法は、できるだけ低コストに、かつ簡単に実施できなければならない。
【０００４】
本発明の主な特徴は、請求項１及び１２の特徴部分に示されている。実施形態は、請求項２〜１１及び１３〜１５の事項である。
全自動分析装置における臨床化学パラメータの分析及び免疫診断パラメータの分析を含む試料の分析方法の場合、この分析装置がピペット装置、分析の実施に必要な成分を含む試薬カートリッジの少なくとも１つのホルダ、測定キュベットの固定具、それぞれの試薬カートリッジに１つの測定キュベットが割り当てられているような少なくとも１つの測定キュベット、試料を含む試料容器用固定具、並びに側光又は分光測定装置を含み、本発明は、本方法が以下の工程を含むように設けられている：
ａ）実施する分析用の試薬カートリッジを固定具にセットし、
ｂ）試料を含む試料容器を試料装置にセットし、
ｃ）それぞれの臨床化学パラメータ分析を実施するために設けられている試薬カートリッジに割り当てられている測定キュベットを用いて、臨床化学パラメータを特定し、及び／または、
ｄ）それぞれの免疫診断パラメータ分析を実施するために設けられている試薬カートリッジに割り当てられている測定キュベットを用いて、免疫診断パラメータを特定し、
ｅ）使用した測定キュベットを洗浄するか、又は取り外し、
ｆ）使用した試薬カートリッジ及び試料容器を取り外す。
【０００５】
すなわち、本発明に基づくこの方法は、主に以下の３つの段階から成ることが分かる：
・分析装置の準備
・希望する臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータの特定
・データの出力又は分析装置の洗浄
この場合、分析装置の準備段階は上記の方法の工程ａ）及びｂ）、希望する臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータの特定段階は工程ｃ）及びｄ）、データの出力又は分析装置の洗浄段階は工程ｅ）及びｆ）を含んでいる。
【０００６】
本方法の特別な利点が、１つ及び同一の方法で、試料の臨床化学パラメータと免疫学的成分の両方を特定できることにあるのは明らかである。特に、本方法は、１つ及び同一の分析装置で実施することができる。従って、臨床化学パラメータと免疫診断パラメータとを分析するために、異なる装置を調達する必要はなくなる。このことは、特に、比較的小規模の診療所にとっては、莫大なコストの節約になる。この特別な利点は、臨床化学パラメータも免疫診断パラメータも１つの測定キュベットを用いて特定されることから生じる。これとは逆に、従来の方法の場合はどれも、臨床化学パラメータだけが測定キュベットで測定され、これに対して免疫診断パラメータはマイクロタイタープレートの１つのウェルで測定される。
【０００７】
本発明に基づく方法のもう１つの利点は、臨床化学パラメータと免疫診断パラメータの両方を分析するのに、分析装置内に、唯一の測光ユニットだけがあればよいことにある。同時に、本発明に基づく方法により、１つ及び同一の試料分析装置の中で、複数の異なる臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータを特定することが可能である。従って、医師は、例えば診断を以下のような手順で行うことができる。まず、医師は、検査する体液の試料を患者から採取する。次に、どのパラメータを特定したいかに応じて、様々な試薬カートリッジを選択する。それぞれのパラメータに対して、医師は、該当する試薬カートリッジを分析装置の中にセットし、それによって本発明に基づく方法を開始する。この方法により、上述したように唯一のプロセスで、希望する様々な臨床化学パラメータ及び免疫診断パラメータが得られ、これらのパラメータに基づいて、医師は診断を下すことができる。
【０００８】
特定する臨床化学パラメータ又は免疫診断パラメータそれぞれについて、独自の試薬カートリッジが分析装置の試薬カートリッジ用固定具の中にセットされる場合は有利であることが分かる。この場合、それぞれの試薬カートリッジの窪みの中には、それぞれのテストに必要な検出試薬が含まれている。従って、本発明に基づく方法を用いることにより、適切な形で、１つの試料から複数の異なる臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータが特定される。このとき、それぞれ特定する臨床化学パラメータ又は免疫診断パラメータについて、独自の試薬カートリッジが分析装置の試薬カートリッジ用固定具の中にセットされ、それぞれの試薬カートリッジの窪みの中には、それぞれのテストに必要な検出試薬が含まれているのが妥当である。
【０００９】
臨床化学パラメータの分析に用いる試薬カートリッジが少なくとも１つの検出試薬を含み、免疫診断パラメータの分析に用いる試薬カートリッジが複合体を備える第１の窪み、基質溶液を備える第２の窪み、及び固相を含んでいる場合は有利である。
【００１０】
本発明に基づき、臨床化学パラメータの特定は、以下の工程を含む：
ａ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジから検出試薬を取り出し、また試料を取り出し、
ｂ）検出試薬及び試料をピペット装置から、試薬カートリッジに割り当てられている測定キュベットの中に加え、
ｃ）検出試薬と試料とを培養し、その際、検出試薬は、試料の中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応し、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｄ）測定装置を使って、測定キュベット内の生成物濃度を測光的に特定する。
【００１１】
代替の方法として、臨床化学パラメータの特定は、以下の工程を含んでもよい：
ａ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジの第１の窪みから第１の検出試薬を取り出し、また試料を取り出し、
ｂ）検出試薬及び試料をピペット装置から、試薬カートリッジに割り当てられている測定キュベットの中に加え、
ｃ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジのもう１つの窪みから第２の検出試薬を取り出し、
ｄ）ピペット装置から第２の検出試薬を測定キュベットに加え、
ｅ）検出試薬と試料とを培養し、その際、検出試薬は、試料の中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応し、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｆ）測定装置を使って、測定キュベット内の生成物濃度を測光的に特定する。
【００１２】
この第２の変更例は、特に、具体的な臨床化学パラメータの特定のために２つ以上の試薬が必要な場合に実施される。
また、臨床化学パラメータの特定が、以下の工程を含むことも考えられる：
ａ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジの第１の窪みから第１の検出試薬を取り出し、また試料を取り出し、
ｂ）検出試薬及び試料をピペット装置から、試薬カートリッジに割り当てられている測定キュベットの中に加え、
ｃ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジのもう１つの窪みから第２の検出試薬を取り出し、
ｄ）ピペット装置から第２の検出試薬を測定キュベットに加え、
ｅ）少なくとももう１つの検出試薬を試薬カートリッジのもう１つの窪みから、又は追加の試薬カートリッジの窪みから取り出し、もう１つの又はその他の検出試薬を測定キュベットの中に加え、
ｆ）それらの検出試薬と試料とを培養し、その際、検出試薬は、試料の中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応し、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｇ）測定装置を使って、測定キュベット内の生成物濃度を測光的に特定する。
【００１３】
間違った結果を出来る限り少なくするため、検出反応の生成物濃度の測光的特定が以下の工程を含む場合は有利である：
・測定装置を使って、測定キュベット内で第１の測光を実施し、
・測定キュベットにおいて、第１及び／又は第２の検出試薬及び試料からなる混合物を培養し、
・測定装置を使って、測定キュベット内で第２の測光を実施する。
【００１４】
これにより、特に、第１の測定時点で反応が完全に終わっていなかった場合に生じるおそれのある測定不良が防止される。
本発明に基づき、免疫診断パラメータの特定は、以下の工程を含む：
ａ）ピペット装置によって、免疫診断分析を実施するために設けられている試薬カートリッジの第１の窪みから複合体を取り出し、また試料を取り出し、
ｂ）複合体と試料とをピペット装置から試薬カートリッジの固相に加え、
ｃ）複合体と試料の入った固相を培養し、
ｄ）固相を洗浄することによって余分な複合体及び試料を除去し、
ｅ）ピペット装置によって、免疫診断分析を実施するために設けられた試薬カートリッジの第２の窪みから基質溶液を取り出し、
ｆ）基質溶液をピペット装置から固相に加え、
ｇ）固相の基質溶液を培養し、
ｈ）ピペット装置によって、変換された基質溶液を取り出し、
ｉ）変換された基質溶液をピペット装置から測定キュベットに加え、
ｊ）測定装置を用いて、基質溶液内の変換された基質の濃度を測定する。
【００１５】
この場合、工程ａ）〜ｇ）は、一般的に普及しているＥＬＩＳＡ法の実施工程に該当する。このことは、複合体と試料とを固相に同時に加える場合に、検出する免疫学的パラメータ、例えば特定のペプチド、抗体又はその他のたんぱく質が、固相に連結されている結合パートナー、すなわち該当する抗体、適合抗原などに結合することを意味している。この複合体は、適合する酵素複合体を含み、この酵素複合体は結合パートナーと、この結合パートナーに連結している酵素とからなる。この結合パートナーは、同様に、検出するパラメータにも結合する。この方法で、パラメータ、結合パートナー及び酵素からなる全複合体が固相に固定化される。余分な複合体と余分な試料とは、次の工程で取り除かれるか、又は洗い流される。次に加えられる基質溶液は、そのように固相に固定化された酵素に特異的な基質を有している。この基質は酵素との反応によって変換され、それによって変色が生じることから、特定の波長において光学密度の一定の変化が生じる。
【００１６】
本発明に基づく方法の特別な利点は、酵素基質反応が、変換された基質と変換されていない基質との両方を含む基質溶液全体が固相から取り出され、分析のためにピペットによって測定キュベットに移されることによって終了することにある。この方法により、試薬カートリッジと測定キュベットとを常に同じ配置にして、とりわけ免疫診断パラメータと臨床化学パラメータの多数の異なるパラメータを特定することが可能である。該当するパラメータの濃度は、常に同じ手順で、測定キュベットと唯一の測光ユニットとを使って特定可能となる。
【００１７】
本方法のもう１つの特別な利点は、この関連において、追加の成分として停止液を準備する必要がないことであり、この停止液は、通常、酵素基質反応を限定的に終了するために用いられる。この終了は、本発明の場合、部分的に変換された基質溶液の取出しとピペットによる測定キュベットへの移行によって、むしろ単純に行われる。固相に固定化された酵素は、この時、固相に残ったままで測定キュベットには一緒に運ばれないため、溶液が固相から取り出されたら、基質の変換はそれ以上行われない。
【００１８】
本発明に基づく方法のもう１つの利点は、この方法が２７℃〜３９℃の温度で、好ましくは３７℃の温度で実施されることである。ＥＬＩＳＡ試験の温度条件を、本発明に基づき特別に調整することにより、分析に使用する装置の温度を毎回変更する必要なしに、臨床化学パラメータと免疫診断パラメータとを任意の順番で連続して特定することが可能となる。もしそうでない場合、このことは、長い加熱段階又は冷却段階及び相応の待ち時間を伴うと考えられる。
【００１９】
ピペット装置の先端の汚染及びそれによる分析結果の間違いを防止するため、検出試薬、試料、複合体又は気質溶液を分配した後にそれぞれピペット装置の先端を交換するか、又は洗浄ステーションで洗浄する場合は有利である。
【００２０】
本発明が、その他にも全自動分析装置におけるＥＬＩＳＡ法による免疫診断パラメータの特定方法を設けていることは有利であり、この分析装置は、ピペット装置、分析の実施に必要な成分を含む試薬カートリッジの少なくとも１つのホルダ、測定キュベットの固定具、それぞれの試薬カートリッジに１つの測定キュベットが割り当てられているような少なくとも１つの測定キュベット、試料容器用固定具、並びに側光又は分光測定装置を含み、本方法は以下の工程を含んでいる：
ａ）ピペット装置によって複合体と試料とを取り出し、
ｂ）複合体と試料とをピペット装置から固相に加え、
ｃ）複合体と試料の入った固相を培養し、
ｄ）固相を洗浄することによって余分な複合体及び試料を除去し、
ｈ）ピペット装置によって基質溶液を取り出し、
ｆ）基質溶液をピペット装置から固相に加え、
ｇ）固相の基質溶液を培養し、
ｈ）ピペット装置によって、変換された基質溶液を取り出し、
ｉ）変換された基質溶液をピペット装置から測定キュベットに加え、
ｊ）測定装置を用いて、基質溶液内の変換された基質の濃度を測定する。
【００２１】
この場合、複合体及び試料は、固相に加えた後で混合される場合は有利である。濃度の測定が様々な波長における光学密度の特定によって行われる場合、及び工程ａ）においてピペット装置によって試料を取り出す前に、独立した希釈カートリッジで試料が希釈される場合も有利である。
【００２２】
本発明のさらなる特徴、詳細及び利点は、請求項の文面及び以下の実施例の説明、並びに図に示されている。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１ａ】本発明に基づく方法を実施するための全自動装置において複数の因子を特定するための、複数の選択された試薬カートリッジ及び測定キュベットの配置である。
【図１ｂ】本発明に基づく方法を実施するために使用される試薬カートリッジの図である。
【図２】本発明に基づく方法の実行中に、臨床化学パラメータを特定するために行うテスト手順である。
【図３】本発明に基づく方法の実行中に、免疫診断パラメータを特定するために行うテスト手順である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本方法に基づく方法は、すでに上述したように、主として次の３つの工程を含んでいる：
・分析装置の準備
・希望する臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータの特定
・データの出力又は分析装置の洗浄
この方法の前に、通常、試料採取が行われる。さらに、ユーザーは、採取した試料ｐでどのパラメータを測定するのか、すなわちどのパラメータを検査したいのかを決定しなければならない。これが行われたら、分析装置の準備を開始する。
【００２５】
このプロセス工程は、分析装置への、適切に選択された試薬カートリッジＲＰのセット、並びに必要に応じ、測定キュベットＭのセット及び試料Ｐのセットを含んでいる。試薬カートリッジＲＰは、この場合、どのパラメータを特定しなければならないかによって選択される。測定キュベットＭは、分析装置内に固定して組み込むことも、使い捨てキュベットを使用することもできる。本方法が、試薬カートリッジＲＰと測定キュベットＭとは別個に試料ｐが装置の中にセットされる装置を使って実施される場合は特に有利である。
【００２６】
図１ａは、試薬カートリッジＲＰと測定キュベットＭとがどのように分析装置のカルーセルＫＡに連続してセットさられているかを示している。各試薬カートリッジＲＰには測定キュベットＭが割り当てられている。
【００２７】
この場合、試薬カートリッジＲＰは、図１ｂで分かるように、それぞれ、３つの窪み１２、１３、１４が形成されているハウジング１１から成る。これらの窪み１２、１３、１４には、特定するパラメータに応じて、それぞれのテストを実施するための該当する試薬又は溶液が含まれている。
【００２８】
ハウジング１５には、その他に凹部１５が形成されており、この中に固相（Ｆｅｓｔ  ｐｈａｓｅ）２０がセットされている。試薬カートリッジＲＰが免疫診断テストを実施するために設けられている場合、該当する抗原又は抗体Ａをこの固相２０に連結させることができる。この場合、本方法が、試料ｐ又は試料容器Ｐを含み、試薬カートリッジＲＰと測定キュベットＭとは別個に試料ｐが装置の中にセットされる装置を使って実施される場合は特に有利である。
【００２９】
この分析装置は、ユーザーが該当する試薬カートリッジを装置にセットした順番及びそれによって特定するパラメータの順番を装置の制御コンピュータに入力できるように準備されている。しかし、例えば試薬カートリッジＲＰにバーコードなどを備え、それによって装置が測定するパラメータを自動的に認識できるようにすることも考えられる。
【００３０】
この装置は、分析装置の準備に続いて、次の工程、すなわち希望する臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータの特定において、自動的に希望する臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータの特定を実施する。この場合、まず、第１の試薬カートリッジＲＰが制御され、これを用いて臨床化学パラメータを特定するのか、又は免疫診断パラメータを特定するのかが決定される。次に、該当するテストによって、希望するパラメータが以下に説明されるような形で検出される。
【００３１】
特定するパラメータが臨床化学因子である場合、図２に図式的に示された、以下で説明するテスト手順が実施される。この手順を開始する前に、試料ｐはすでに試料容器Ｐの中にある。試薬カートリッジＲＰは、必要に応じて、窪み１２、１３、１４の中に１つ又は複数の検出試薬Ｒ１、Ｒ２を含んでいる。
【００３２】
第１の工程Ａ１では、（図示されていない）ピペット装置によって、第１の検出試薬Ｒ１及び該当する量の試料ｐが取り出される。
そのために、まず、試薬カートリッジＲＰの窪み１２、１３、１４の中に準備されている検出試薬Ｒ１が吸引される。次に、一方では試薬容器Ｐの中にある試薬ｐの汚染を防止するため、他方では次の工程まで検出試薬Ｒ１と試料ｐとの直接混合を回避するために、気泡が取り出される。最後に、試薬ｐが取り出される。
【００３３】
第２の工程Ａ２では、取り出された検出試薬Ｒ１と試薬ｐとが分析装置の測定キュベットの中に加えられる。次に、ここで、検出試薬Ｒ１と試薬ｐとが混合される。例えばピペットの吸引／排出などによってアクティブに混合を支援することももちろん可能である。
【００３４】
選択したテストのためにもう１つの検出試薬Ｒ２が必要な場合、その試薬は第３の工程Ａ３において試薬カートリッジＲＰのもう１つの窪み１２、１３、１４から取り出され、第４の工程Ａ４において同様に測定キュベットＭの中に加えられる。既存の液体との混合が、また行われる。
【００３５】
工程Ａ３及びＡ４は、必要に応じて、全ての必要な成分が測定キュベットＭの中に揃うまで繰り返される。
テストを評価する前に、測定キュベットＭの中で混合された成分Ｒ１、Ｒ２、ｐは、次の工程Ａ５において規定時間培養される。この場合、培養時間はその都度テスト中に進行する反応に左右され、あらかじめプログラムミングするか、又はユーザーによって入力することができる。
【００３６】
最後の工程６では、測光によって評価が行われる。この場合、光学密度は、培養直後に一定の波長ｈｖ（例えば４２０ｎｍ）の光を用いて測定キュベットＭを透視することによって特定される。これに続いて、もう１つの規定された培養時間の次に、第２の測定が続けられる。テスト結果を示す実際の値は、これらの両方の測定値と、プログラミングされた参照値又はユーザーによって個々に決定された参照値との比較によって特定される。
【００３７】
特定するパラメータが免疫診断パラメータの場合、図３に示されている本発明に基づくテスト手順、すなわちＥＬＩＳＡ法が以下のように実施される。
第１の工程Ｂ１では、試薬カートリッジＲＰの中に含まれている、酵素複合体を含む溶液（短縮して複合体Ｋと呼ぶ）が、該当する量の試料ｐと一緒に取り出される。試料ｐは、あらかじめ試料容器Ｐに準備されている。取出しは工程Ａ１と同様に行われる。すなわち、まず、複合体Ｋが試薬カートリッジＲＰの該当する窪み１２から取り出され、次に気泡、最後に試料ｐが試料容器Ｐから取り出される。
【００３８】
第２の工程Ｂ２では、複合体Ｋと試料ｐとが試薬カートリッジＲＰの固相２０に加えられ、そこで一定時間培養される。固相２０には、検出するパラメータに適合する抗原又は抗体Ａがリンクされている。
【００３９】
培養時間のあいだに、検出するパラメータは、固相２０に連結されている抗原又は抗体Ａにリンクし、同時に複合体Ｋに含まれる（図示されていない）結合パートナーに結合する。この結合パートナーは、また酵素とリンクされている。この方法で、複合物が試薬カートリッジＲＰの固相２０に固定化される。この複合物は、結合パートナーと結合している抗原又は抗体Ａの他に、検出するパラメータ、及び特異的な基質を変換することのできる酵素を含んでいる。
【００４０】
第３の工程Ｂ３では、次に、余分な複合体Ｋと余分な試料ｐとが固相２０を洗浄することによって取り除かれる。
次に、工程Ｂ４において、基質溶液Ｓが試薬カートリッジＲＰのもう１つの窪み１３から取り出される。この基質溶液Ｓは、複合体Ｋに含まれている酵素に適合した、あらかじめ規定された濃度の基質を含んでいる。例えばＴＭＢ（その他も考えられる）などの基質が酵素によって変換されると、検出可能な特殊な色変化が生じる。
【００４１】
基質溶液Ｓは、工程Ｂ５において固相２０に加えられる。次に、この溶液中に含まれる基質は、あらかじめ固相２０に固定化された酵素によって変換することができる。この場合、溶液中の変換された基質と、変換されない基質とは両方とも移動することができるが、これに対して酵素複合体は固相２０に結合されたままである。そのようにして発生した変換基質溶液Ｓ’は、次に、固相２０に固定化されている酵素の量に応じて、変換された基質と、変換されない基質とを相当量含んでいる。
【００４２】
この反応は、本発明に基づき工程Ｂ６で終了し、その際、変換基質溶液Ｓ’が固相２０から取り出され、工程Ｂ７において測定キュベットＭの中に加えられる。このピペットによる移行プロセスの際、固相２０にリンクしている酵素はあとに残される。反対に、変換された基質は溶液と一緒に取り出される。まだ溶液の中に基質が含まれていても、その基質はそれ以上変換されることはない。なぜなら、測定キュベットＭには今は酵素がないからである。
【００４３】
すでに臨床化学パラメータで説明したように、次に、測定キュベットで酵素‐基質反応の量的評価が行われる。この場合、基質溶液の光学密度は、３つの異なる波長で特定される。これらの値は、装置に保存されている参照値又はユーザーによって規定されている参照値と比較される。
【００４４】
この場合、時間、変換量及び反応温度の間には、当業者には周知の関係が存在する。時間及び反応温度は周知であるか、又は規定されているため、続いて、変換された基質の量から現存する固定化された酵素量を推量することができ、それによって試料ｐ内の特定するパラメータ濃度を割り出すことができる。
【００４５】
第１の因子の特定が終了すると、次の試薬カートリッジが作動する。まず、これを用いて臨床化学パラメータを特定するのか、又は免疫診断パラメータを特定するのかどうかが再度決定される。次に、すでに説明した両方のテスト方法のそれぞれ該当する方法が再び実施される。
【００４６】
各パラメータ特定の最後に、得られたデータは、その都度データ出力ユニット、例えばプリンタ、データファイル又はモニタに転送されるため、ユーザーはそのデータを判定し、評価することができる。
【００４７】
希望する全てのパラメータが特定されたら、ユーザーは、使用した試薬カートリッジＲＰを取り出して、後は洗浄だけしなければならない。もちろん、試薬カートリッジＲＰを自動取出しする装置も考えられる。
【００４８】
本方法を実施する際に、使い捨てキュベットを使用した場合は、このことも省略される。代替の方法として、装置内に残っている測定キュベットＭのために自動的に実行される洗浄プログラムを分析装置に装備することもできる。
【００４９】
本発明は、説明された実施形態のいずれかに限定されるものではなく、様々な方法に変更することができる。
請求項、明細書及び図から生じる特徴及び利点の全ては、構造的な詳細、空間的配置及び工程を含み、それ自体でも、様々な組合せにおいても本発明の要素であり得る。
【００５０】
全自動分析装置における臨床化学パラメータの分析及び免疫診断パラメータの分析を含む試料pの分析方法においては、この分析装置がピペット装置、分析の実施に必要な成分を含む試薬カートリッジＲＰの少なくとも１つのホルダ、測定キュベットＭの固定具、それぞれの試薬カートリッジＲＰに１つの測定キュベットＭが割り当てられているような少なくとも１つの測定キュベットＭ、試料ｐを含む試料容器Ｐの固定具、並びに側光又は分光測定装置を含み、本方法が、以下の工程を含む場合は特に有利であることが分かる：
ａ）実施する分析用の試薬カートリッジＲＰを固定具にセットし、
ｂ）試料ｐを含む試料容器Ｐを試料装置にセットし、
ｃ）それぞれの臨床化学パラメータ分析を実施するために設けられている試薬カートリッジＲＰに割り当てられている測定キュベットＭを用いて、臨床化学パラメータを特定し、及び／または、
ｄ）それぞれの免疫診断パラメータ分析を実施するために設けられている試薬カートリッジＲＰに割り当てられている測定キュベットＭを用いて、免疫診断パラメータを特定し、
ｅ）使用した測定キュベットＭを洗浄するか、又は取り外し、
ｆ）使用した試薬カートリッジＲＰ及び試料容器Ｐを取り外す。
【００５１】
このとき、１つの試料ｐによって複数の様々な臨床化学パラメータ及び／又は免疫診断パラメータが特定される場合は有利である。そのために、それぞれ特定する臨床化学パラメータ又は免疫診断パラメータについて、独自の試薬カートリッジＲＰが分析装置の試薬カートリッジＲＰ用固定具の中にセットされ、それぞれの試薬カートリッジＲＰの窪み１２、１３、１４の中には、それぞれのテストに必要な検出試薬Ｒ１、Ｒ２、Ｋ、Ｓが含まれている場合は有利である。
【００５２】
さらに、臨床化学パラメータの分析に用いられる試薬カートリッジＲＰが少なくとも検出試薬Ｒ１、Ｒ２を含み、免疫診断パラメータの分析に用いられる試薬カートリッジＲＰが複合体Ｋを備える第１の窪み１２、基質Ｓを備える第２の窪み１３及び固相２０を含む場合、及び臨床化学パラメータの特定が、以下の工程を含む場合は有利であることが分かる：
ａ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジＲＰから検出試薬Ｒ１を取り出し、また試料ｐを取り出し、
ｇ）検出試薬Ｒ１及び試料ｐをピペット装置から、試薬カートリッジＲＰに割り当てられている測定キュベットＭの中に加え、
ｈ）検出試薬Ｒ１と試料ｐとを培養し、その際、検出試薬Ｒ１は、試料ｐの中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応して、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｉ）測定装置を使って、測定キュベットＭ内の生成物濃度を測光的に特定する。
【００５３】
また、臨床化学パラメータの特定が、以下の工程を含む場合も有利である：
ａ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジＲＰの第１の窪み１２から第１の検出試薬Ｒ１を取り出し、また試料ｐを取り出し、
ｂ）検出試薬Ｒ１及び試料ｐをピペット装置から、試薬カートリッジＲＰに割り当てられている測定キュベットＭの中に加え、
ｃ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジＲＰのもう１つの窪み１３、１４から第２の検出試薬Ｒ２を取り出し、
ｄ）ピペット装置から第２の検出試薬Ｒ２を測定キュベットＭに加え、
ｅ）検出試薬Ｒ１、Ｒ２と試料ｐとを培養し、その際、検出試薬Ｒ１、Ｒ２は、試料ｐの中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応して、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｆ）測定装置を使って、測定キュベットＭ内の生成物濃度を測光的に特定する。
【００５４】
希望する用途に応じて、臨床化学パラメータの特定が以下の工程を含む場合はさらに有利である：
ａ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジＲＰの第１の窪み１２、１３、１４から第１の検出試薬Ｒ１を取り出し、また試料ｐを取り出し、
ｂ）検出試薬Ｒ１及び試料ｐをピペット装置から、試薬カートリッジＲＰに割り当てられている測定キュベットＭの中に加え、
ｃ）ピペット装置を使って、試薬カートリッジＲＰのもう１つの窪み１２、１３、１４から第２の検出試薬Ｒ２を取り出し、
ｄ）ピペット装置から第２の検出試薬Ｒ２を測定キュベットＭに加え、
ｅ）少なくとももう１つの検出試薬を試薬カートリッジＲＰのもう１つの窪み１２、１３、１４から、又は追加の試薬カートリッジＲＰの窪み１２、１３、１４から取り出し、もう１つの又はその他の検出試薬を測定キュベットＭの中に加え、
ｆ）検出試薬Ｒ１、Ｒ２と試料ｐとを培養し、その際、検出試薬Ｒ１、Ｒ２は、試料ｐの中に存在する、証明しなければならない臨床化学パラメータと反応して、測光的に証明可能な生成物を発生し、
ｇ）測定装置を使って、測定キュベットＭ内の生成物濃度を測光的に特定する。
【００５５】
それぞれのケースにおいて、検出反応の生成物濃度の測光的特定が以下の工程を含む場合は有利である：
・測定装置を使って、測定キュベットＭ内で第１の測光を実施し、
・測定キュベットＭにおいて第１及び／又は第２の検出試薬及び試料からなる混合物を培養し、
・測定装置を使って、測定キュベットＭ内で第２の測光を実施する。
【００５６】
さらに、本発明に基づく方法の特別な利点は、免疫診断パラメータの特定が以下の工程を含むことによって生じることが分かる：
ａ）ピペット装置によって、免疫診断分析を実施するために設けられている試薬カートリッジＲＰの第１の窪み１２、１３、１４から複合体Ｋを取り出し、試料ｐを取り出し、
ｂ）複合体Ｋと試料ｐとをピペット装置から試薬カートリッジＲＰの固相２０に加え、
ｃ）複合体Ｋと試料ｐとが入った固相２０を培養し、
ｄ）固相２０を洗浄することによって余分な複合体Ｋと試料ｐとを除去し、
ｅ）免疫診断分析を実施するために設けられた試薬カートリッジＲＰの第２の窪み１２、１３、１４からピペット装置によって基質溶液Ｓを取り出し、
ｆ）基質溶液Ｓをピペット装置から固相２０に加え、
ｇ）固相２０の基質溶液Sを培養し、
ｈ）ピペット装置によって、変換された基質溶液Ｓ’を取り出し、
ｉ）変換された基質溶液Ｓ’をピペット装置から測定キュベットＭに加え、
ｊ）測定装置を用いて、基質溶液Ｓ’内の変換された基質の濃度を測定する。
【００５７】
この場合、全体として、本方法が２７℃から３９℃、好ましくは３７℃の温度で実施される場合、及び検出試薬Ｒ１、Ｒ２、試料ｐ、複合体Ｋ又は基質溶液Ｓを分配した後にそれぞれピペット装置の先端を交換するか、又は洗浄ステーションで洗浄する場合は有利である。
【００５８】
本発明のもう１つの極めて特別な利点は、全自動分析装置におけるＥＬＩＳＡ法による試料ｐの免疫診断パラメータの特定方法にあり、この分析装置は、ピペット装置、分析の実施に必要な成分を含み、抗原又は抗体Ａと連結された固相２０を含む試薬カートリッジＲＰの少なくとも１つのホルダ、測定キュベットＭの固定具、それぞれの試薬カートリッジＲＰに１つの測定キュベットＭが割り当てられているような少なくとも１つの測定キュベットＭ、試料ｐを含む試料容器Ｐの固定具、並びに側光又は分光測定装置を含み、本方法は、以下の工程を含んでいる：
ａ）ピペット装置によって複合体Ｋと試料ｐとを取り出し、
ｂ）複合体Ｋと試料ｐとをピペット装置から固相２０に加え、
ｃ）複合体Ｋと試料ｐとが入った固相２０を培養し、
ｄ）固相２０を洗浄することによって余分な複合体Ｋと試料ｐとを除去し、
ｅ）ピペット装置によって基質溶液Ｓを取り出し、
ｆ）基質溶液Ｓをピペット装置から固相２０に加え、
ｇ）固相２０の基質溶液Sを培養し、
ｈ）ピペット装置によって、変換された基質溶液Ｓ’を取り出し、
ｉ）変換された基質溶液Ｓ’をピペット装置から測定キュベットＭに加え、
ｊ）測定装置を用いて、基質溶液Ｓ’内の変換された基質の濃度を測定する。
【００５９】
このとき、複合体Ｋ及び試料ｐが固相２０の中に加えられた後に混合される場合、濃度の測定が様々な波長での光学密度の特定によって行われる場合、及び／又は工程ａ）において試料ｐがピペット装置によって取り出される前に、独立した希釈カートリッジの中で希釈される場合は有利である。
符号の説明
Ａ  抗原又は抗体
Ｋ  複合体
ＫＡ  カルーセル
Ｍ  測定キュベット
Ｐ  試料容器
ｐ  試料
ＲＰ  試薬カートリッジ
Ｒ１  検出試薬
Ｒ２  検出試薬
Ｓ  基質溶液
Ｓ’  基質溶液
１１  ハウジング
１２  窪み
１３  窪み
１４  窪み
１５  凹部
２０  固相
【図１ａ】
0006047093.tif 000002
【図１ｂ】
0006047093.tif 000003
【図２】
0006047093.tif 000004
【図３】
0006047093.tif 000005