【手続補正書】
【提出日】平成22年12月22日(2010.12.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
担体タンパク質に共有結合しているストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートを製造するための方法であって、
（ａ）精製血清型３多糖を弱酸と反応させて加水分解された血清型３多糖にすること、
（ｂ）加水分解された血清型３多糖を、二価カチオンの存在下で酸化剤と反応させて活性化血清型３多糖にすること、
（ｃ）活性化血清型３多糖を担体タンパク質と混ぜ合わせること、
（ｄ）混ぜ合わせた活性化血清型３多糖および担体タンパク質を還元剤と反応させて血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲートにすること、および
（ｅ）血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲート中の未反応アルデヒドをキャッピングして、担体タンパク質に共有結合しているストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートにすることを含む方法。
【請求項２】
多糖−タンパク質コンジュゲートを含む多価免疫原性組成物を製造するための方法であって、コンジュゲートのそれぞれが、担体タンパク質にコンジュゲートしているストレプトコッカス・ニューモニアエの異なる血清型由来の莢膜多糖を含有し、莢膜多糖が血清型３および少なくとも１種類の追加血清型から調製され、各莢膜多糖が別々に担体タンパク質にコンジュゲートしており、
（ａ）精製血清型３多糖を弱酸と反応させて加水分解された血清型３多糖にすること、
（ｂ）加水分解された血清型３多糖を、二価カチオンの存在下で酸化剤と反応させて活性化血清型３多糖にすること、
（ｃ）活性化血清型３多糖を担体タンパク質と混ぜ合わせること、
（ｄ）混ぜ合わせた活性化血清型３多糖および担体タンパク質を還元剤と反応させて血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲートにすること、
（ｅ）血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲート中の未反応アルデヒドをキャッピングして、担体タンパク質に共有結合しているストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートにすること、および
（ｆ）ストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートおよび追加ストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型多糖を含む少なくとも１種類の免疫原性コンジュゲートを混ぜ合わせて多価免疫原性組成物にすることを含む方法。
【請求項３】
莢膜多糖が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆから調製される請求項２に記載の方法。
【請求項４】
担体タンパク質と混ぜ合わせる前に、活性化血清型３多糖を精製することをさらに含む請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
還元剤と反応させる前に、混ぜ合わせた活性化血清型３多糖および担体タンパク質を共凍結乾燥することをさらに含む請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
免疫原性コンジュゲートを精製することをさらに含む請求項１に記載の方法。
【請求項７】
弱酸が酢酸である請求項１または２に記載の方法。
【請求項８】
酸化剤が過ヨウ素酸であり、二価カチオンがＭｇ２＋である請求項１または２に記載の方法。
【請求項９】
担体タンパク質がＣＲＭ１９７である請求項１または２に記載の方法。
【請求項１０】
還元剤がシアノ水素化ホウ素ナトリウムである請求項１または２に記載の方法。
【請求項１１】
未反応アルデヒドをキャッピングすることが、血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲートを水素化ホウ素ナトリウムと反応させることを含む請求項１または２に記載の方法。
【請求項１２】
担体タンパク質に共有結合しているストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートを製造するための方法であって、
（ａ）精製血清型３多糖を酢酸と反応させて加水分解された血清型３多糖にすること、
（ｂ）加水分解された血清型３多糖を、ＭｇＣｌ２の存在下で過ヨウ素酸と反応させて活性化血清型３多糖にすること、
（ｃ）活性化血清型３多糖を精製すること、
（ｄ）活性化血清型３多糖を担体タンパク質と混ぜ合わせること、
（ｅ）混ぜ合わせた活性化血清型３多糖および担体タンパク質を共凍結乾燥すること、
（ｆ）共凍結乾燥した活性化血清型３多糖および担体タンパク質をシアノ水素化ホウ素ナトリウムと反応させて血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲートにすること、および
（ｇ）血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲート中の未反応アルデヒドを水素化ホウ素ナトリウムでキャッピングして、担体タンパク質に共有結合しているストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートにすることを含む方法。
【請求項１３】
多糖−タンパク質コンジュゲートを含む多価免疫原性組成物を製造するための方法であって、コンジュゲートのそれぞれが、担体タンパク質にコンジュゲートしているストレプトコッカス・ニューモニアエの異なる血清型由来の莢膜多糖を含有し、莢膜多糖が血清型３および少なくとも１種類の追加血清型から調製され、各莢膜多糖が別々に担体タンパク質にコンジュゲートしており、
（ａ）精製血清型３多糖を酢酸と反応させて加水分解された血清型３多糖にすること、
（ｂ）加水分解された血清型３多糖を、ＭｇＣｌ２の存在下で過ヨウ素酸と反応させて活性化血清型３多糖にすること、
（ｃ）活性化血清型３多糖を精製すること、
（ｄ）活性化血清型３多糖を担体タンパク質と混ぜ合わせること、
（ｅ）混ぜ合わせた活性化血清型３多糖および担体タンパク質を共凍結乾燥すること、
（ｆ）共凍結乾燥した活性化血清型３多糖および担体タンパク質をシアノ水素化ホウ素ナトリウムと反応させて血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲートにすること、
（ｇ）血清型３多糖：担体タンパク質コンジュゲート中の未反応アルデヒドを水素化ホウ素ナトリウムでキャッピングして、担体タンパク質に共有結合しているストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートにすること、および
（ｉ）ストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲートおよび追加ストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型多糖を含む少なくとも１種類の免疫原性コンジュゲートを混ぜ合わせて多価免疫原性組成物にすることを含む方法。
【請求項１４】
莢膜多糖が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆから調製される請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
免疫原性コンジュゲートを精製することをさらに含む請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
担体タンパク質がＣＲＭ１９７である請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１７】
活性化されたストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を製造するための方法であって、
（ａ）精製血清型３多糖を弱酸と反応させて加水分解された血清型３多糖にすること、および
（ｂ）加水分解された血清型３多糖を、２価カチオンの存在下で酸化剤と反応させて活性化血清型３多糖にすることを含む方法。
【請求項１８】
酸化の後に、活性化血清型３多糖を精製することをさらに含む請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
弱酸が酢酸である請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
酸化剤が過ヨウ素酸であり、二価カチオンがＭｇ２＋である請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
請求項１、４〜１２、１５および１６のいずれか１項に記載の方法によって製造される、担体タンパク質に共有結合しているストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖を含む免疫原性コンジュゲート。
【請求項２２】
請求項１７〜２０のいずれか１項に記載の方法によって製造される活性化されたストレプトコッカス・ニューモニアエ血清型３多糖。
【請求項２３】
生理学的に許容できるビヒクルと一緒に１３種類の異なる多糖−タンパク質コンジュゲートを含む多価免疫原性組成物であって、コンジュゲートのそれぞれが、ＣＲＭ１９７担体タンパク質にコンジュゲートしているストレプトコッカス・ニューモニアエの異なる血清型由来の莢膜多糖を含有し、莢膜多糖が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆから調製され、各莢膜多糖が別々にＣＲＭ１９７担体タンパク質にコンジュゲートしており、血清型３多糖が請求項１、４〜１２、１５および１６のいずれか１項に記載の方法に従ってＣＲＭ１９７担体タンパク質に共有結合している多価免疫原性組成物。
【請求項２４】
生理学的に許容できるビヒクルと一緒に多糖−タンパク質コンジュゲートを含む多価免疫原性組成物であって、コンジュゲートのそれぞれが、ＣＲＭ１９７担体タンパク質にコンジュゲートしているストレプトコッカス・ニューモニアエの異なる血清型由来の莢膜多糖を含有し、莢膜多糖が血清型３および少なくとも１種類の追加血清型から調製され、各莢膜多糖が別々にＣＲＭ１９７担体タンパク質にコンジュゲートしており、血清型３多糖が請求項１、４〜１２、１５および１６のいずれか１項に記載の方法に従ってＣＲＭ１９７担体タンパク質に共有結合している多価免疫原性組成物。