【手続補正書】
【提出日】平成23年4月1日(2011.4.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アセトヒドロキシ酸合成酵素大サブユニット(AHASL1)遺伝子の第一の対立遺伝子及び該AHASL1遺伝子の第二の対立遺伝子を含む除草剤耐性ヒマワリ植物であって、該第一対立遺伝子が配列番号２０の７位に対応するアミノ酸位置にアラニンからスレオニンへの置換を含む第一AHASL1タンパク質をコードし、該第二対立遺伝子が配列番号２０の９０位に対応するアミノ酸位置にアラニンからバリンへの置換または配列番号２０の８２位に対応するアミノ酸位置にプロリンからロイシンへの置換を含む第二AHASL1タンパク質をコードし、該除草剤耐性ヒマワリ植物が少なくとも１種のAHAS阻害性除草剤に対して耐性をもつ、前記ヒマワリ植物。
【請求項２】
前記AHAS阻害性除草剤が、イミダゾリノン除草剤、スルホニル尿素除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤及びスルホニルアミノ-カルボニルトリアゾリノン除草剤からなる群より選択される、請求項１に記載のヒマワリ植物。
【請求項３】
請求項１に記載のヒマワリ植物のまたは該ヒマワリ植物に生育する種子。
【請求項４】
前記ヒマワリ植物が、少なくとも８５％のオレイン酸を含む抽出種子油を含む種子を生産する、請求項１に記載のヒマワリ植物。
【請求項５】
雑種ヒマワリ植物の生産方法であって、該方法は第一ヒマワリ植物を第二ヒマワリ植物に交配させることを含み、ここで該第一ヒマワリ植物がAHASL1遺伝子の第一対立遺伝子を含み、該第二ヒマワリ植物は、AHASL1遺伝子の第二対立遺伝子を含み、該第一対立遺伝子は配列番号２０の７位に対応するアミノ酸位置にアラニンからスレオニンへの置換を含む第一AHASL1タンパク質をコードし、該第二対立遺伝子は、配列番号２０の９０位に対応するアミノ酸位置にアラニンからバリンへの置換または配列番号２０の８２位に対応するアミノ酸位置にプロリンからロイシンへの置換を含む第二AHASL1タンパク質をコードする、前記方法。
【請求項６】
前記交配から生じる種子を収穫することをさらに含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記第一ヒマワリは前記第一対立遺伝子についてホモ接合型であり、前記第二ヒマワリ植物は前記第二対立遺伝子についてホモ接合型である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
ゲノム中に前記第一及び第二の対立遺伝子を含む、該交配由来の少なくとも１種の子孫ヒマワリ植物を選抜することをさらに含む、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
ヒマワリ植物の近傍の雑草を防除する方法であって、該方法は有効量のAHAS阻害性除草剤を雑草及びヒマワリ植物に散布することを含み、該ヒマワリ植物が請求項１に記載のヒマワリ植物である、前記方法。
【請求項１０】
前記AHAS阻害性除草剤が、イミダゾリノン除草剤、スルホニル尿素除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤、スルホニルアミノ-カルボニルトリアゾリノン除草剤又はそれらの混合物からなる群より選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記イミダゾリノン除草剤が： 2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミジアゾリン-2-イル)-ニコチン酸、2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-3-キノリンカルボン酸、5-エチル-2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-ニコチン酸、2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-5-(メトキシメチル)-ニコチン酸、2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-5-メチルニコチン酸、及び6-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-m-トルイル酸メチルと2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-p-トルイル酸メチルの混合物、並びにそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記スルホニル尿素除草剤が、クロルスルフロン、メトスルフロンメチル、スルホメツロンメチル、クロリムロンエチル、チフェンスルフロンメチル、トリベヌロンメチル、ベンスルフロンメチル、ニコスルフロン、エタメトスルフロンメチル、リムスルフロン、トリフルスルフロンメチル、トリアスルフロン、ピリミスルフロンメチル、シノスルフロン、アミドスルフロン、フルザスルフロン、イマゾスルフロン、ピラゾスルフロンエチル、ハロスルフロン及びそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
AHAS阻害性除草剤で処理される、請求項４に記載の種子。
【請求項１４】
前記AHAS阻害性除草剤が、イミダゾリノン除草剤、スルホニル尿素除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤、スルホニルアミノ-カルボニルトリアゾリノン除草剤又はそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１３に記載の種子。
【請求項１５】
播種前及び/又は発芽後の請求項４に記載の種子に有効量のAHAS阻害性除草剤を接触させることを含む、好ましくない植生を防止する方法。
【請求項１６】
前記AHAS阻害性除草剤が、イミダゾリノン除草剤、スルホニル尿素除草剤、トリアゾロピリミジン除草剤、スルホニルアミノ-カルボニルトリアゾリノン除草剤又はそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ヒマワリ植物に付いて生育するハマウツボを防除するための方法であって、該方法は有効量のイミダゾリノン除草剤をハマウツボ及びヒマワリ植物に散布することを含み、該ヒマワリ植物が請求項１に記載のヒマワリ植物である、前記方法。
【請求項１８】
前記ハマウツボが、オロバンケ・クマナ(Orobanche cumana)及びオロバンケ・ケルヌア(Orobanche cernua)からなる群より選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記イミダゾリノン除草剤が、2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミジアゾリン-2-イル)-ニコチン酸、2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-3-キノリンカルボン酸、5-エチル-2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-ニコチン酸、2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-5-(メトキシメチル)-ニコチン酸、2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-5-メチルニコチン酸、及び6-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-m-トルイル酸メチルと2-(4-イソプロピル-4-メチル-5-オキソ-2-イミダゾリン-2-イル)-p-トルイル酸メチルの混合物、並びにそれらの混合物からなる群より選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記イミダゾリノン除草剤がイマザピルである、請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
前記イミダゾリノン除草剤を成長期R1で散布する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
少なくとも１コピーのAHASL1 A122T対立遺伝子、及び少なくとも約85%のオレイン酸を含む抽出種子油を含むヒマワリ種子。
【請求項２３】
前記種子はヒマワリ系統GM40のヒマワリ植物の後代であり、該系統の代表となる種子がATCC特許寄託整理番号PTA-6716で寄託される、請求項２２に記載のヒマワリ種子。
【請求項２４】
前記種子はヒマワリ系統GM1606のヒマワリ植物の後代であり、該系統の代表となる種子がATCC特許寄託整理番号PTA-7606で寄託される、請求項２２に記載のヒマワリ種子。
【請求項２５】
請求項２２に記載の種子を生育することによって生産するヒマワリ植物。
【請求項２６】
ヒマワリAHASL1の遺伝子型を決定する方法であって、該方法は工程：
(a)ヒマワリ植物由来のゲノムDNAを採取すること;
(b)前記DNA、ポリメラーゼ、デオキシリボヌクレオチド三リン酸、順方向AHASL1プライマー及び逆方向野生型AHASL1プライマーを含む第一のポリメラーゼ連鎖反応(PCR)増幅のための鋳型としての前記DNAを使用すること、その際、該逆方向野生型AHASL1プライマーは、配列番号１３に記載のヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列にアニールし、該逆方向野生型AHASL1プライマーの3’末端ヌクレオチドにあるヌクレオチドは、配列番号１３に記載のヌクレオチド配列の１位におけるヌクレオチドの相補体である;
(c)前記DNA、ポリメラーゼ、デオキシリボヌクレオチド三リン酸、該順方向AHASL1プライマー及び突然変異型逆方向AHASL1プライマーを含む第二のPCR増幅のための鋳型としての前記DNAを使用すること、その際、該逆方向突然変異型AHASL1プライマーは配列番号１４に記載のヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列にアニールし、該逆方向突然変異型AHASL1プライマーの3’末端ヌクレオチドにあるヌクレオチドは、配列番号１４に記載のヌクレオチド配列の１位におけるヌクレオチドの相補体である;及び
(d)前記第一及び第二のPCR増幅の産物を検出すること；
を含み、前記順方向AHASL1プライマーは(ACC)n領域の5’であるヒマワリAHASL1遺伝子の領域に対応するヌクレオチド配列を含む、前記方法。 
【請求項２７】
前記逆方向野生型AHASL1プライマーが配列番号４に記載のヌクレオチド配列を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記逆方向突然変異型AHASL1プライマーが配列番号５に記載のヌクレオチド配列を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２９】
前記順方向AHASL1プライマーが配列番号１２に記載のヌクレオチド配列の相補体を含むヌクレオチド配列にアニールする、請求項２６に記載の方法。
【請求項３０】
前記順方向AHASL1プライマーが配列番号３に記載のヌクレオチド配列を含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項３１】
ヒマワリAHASL1の遺伝子型を決定するためのキットであって、該キットが
(a)(ACC)n領域の5’であるヒマワリAHASL1遺伝子の領域に対応するヌクレオチド配列を含む順方向AHASL1プライマー；
(b)逆方向野生型AHASL1プライマー、ここで該逆方向野生型AHASL1プライマーは配列番号１３に記載のヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列にアニールし、該逆方向野生型AHASL1プライマーの3’末端ヌクレオチドにおけるヌクレオチドは、配列番号１３に記載のヌクレオチド配列の１位におけるヌクレオチドの相補体である；及び
(c)逆方向突然変異型AHASL1プライマー、ここで該逆方向突然変異型AHASL1プライマーは配列番号１４に記載のヌクレオチド配列を含むヌクレオチド配列にアニールし、該逆方向突然変異型AHASL1プライマーの3’末端ヌクレオチドにおけるヌクレオチドは、配列番号１４に記載のヌクレオチド配列の１位におけるヌクレオチドの相補体である、
を含む、前記キット。
【請求項３２】
ヒマワリAHASL遺伝子の第一断片及びヒマワリAHASL1遺伝子の第二断片のPCR増幅を触媒することができるポリメラーゼ酵素をさらに含み、第一断片はヒマワリAHASL1遺伝子において前記順方向AHASL1プライマーの前記アニーリングサイトと前記逆方向野生型AHASL1プライマーの前記アニーリングサイトとの間にあり、第二断片はヒマワリAHASL1遺伝子において前記順方向AHASL1プライマーの前記アニーリングサイトと前記逆方向突然変異型AHASL1プライマーの前記アニーリングサイトとの間にある、請求項３１に記載のキット。
【請求項３３】
前記順方向AHASL1プライマーが配列番号１２に記載のヌクレオチド配列の相補体を含むヌクレオチド配列にアニールする、請求項３１に記載のキット。
【請求項３４】
前記順方向AHASL1プライマーが配列番号３に記載のヌクレオチド配列を含む、請求項３１に記載のキット。
【請求項３５】
前記逆方向野生型AHASL1プライマーが配列番号４に記載のヌクレオチド配列を含む、請求項３１に記載のキット。
【請求項３６】
前記逆方向変異型AHASL1プライマーが配列番号５に記載のヌクレオチド配列を含む、請求項３１に記載のキット。