【手続補正書】
【提出日】平成23年5月26日(2011.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理的環境下でリゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）に結合する単離された抗体、または抗原に結合可能な抗体フラグメントであって、
前記抗体または抗体フラグメントは、（ｉ）少なくとも一つの重鎖可変ドメイン、および少なくとも一つの軽鎖可変ドメインを有し、かつ、（ｉｉ）約１×１０−７Ｍ以下、任意に１×１０−８Ｍまたは１×１０−９Ｍ以下の親和性でＬＰＡに結合する、ことを特徴とする抗体または抗体フラグメント。
【請求項２】
下記ａ．に示す二つの重鎖可変ドメイン、および下記ｂ．に示す二つの軽鎖可変ドメインを有する、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメント：
ａ．各重鎖可変ドメインは、複数の重鎖フレームワーク領域に配された第１、第２および第３の重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）を含み、ここで：
（ｉ）前記第１の重鎖ＣＤＲは、配列番号５６、６９、８１、９３、および１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列、または、配列番号５６、６９、８１、９３、および１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％の配列同一性を備えるアミノ酸配列を有し；
（ｉｉ）前記第２の重鎖ＣＤＲは、配列番号５７、７０、８２、９４、および１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列、または、配列番号５７、７０、８２、９４、および１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％の配列同一性を備えるアミノ酸配列を有し；かつ
（ｉｉｉ）前記第３の重鎖ＣＤＲは、配列番号５８、７１、８３、９５、および１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列、または、配列番号５８、７１、８３、９５、および１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％の配列同一性を備えるアミノ酸配列を有する；そして、
ｂ．前記二つの軽鎖可変ドメインは前記重鎖可変ドメインと機能的に関連しており、各軽鎖可変ドメインは、複数の軽鎖フレームワーク領域に配された第１、第２および第３の軽鎖ＣＤＲを含み、ここで：
（ｉ）前記第１の軽鎖ＣＤＲは、配列番号５９、７２、８４、９６、および１０８からなる群から選択されるアミノ酸配列、または、配列番号５９、７２、８４、９６、および１０８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％の配列同一性を備えるアミノ酸配列を有し；
（ｉｉ）前記第２の軽鎖ＣＤＲは、配列番号６０、７３、８５、９７、および１０９からなる群から選択されるアミノ酸配列、または、配列番号６０、７３、８５、９７、および１０９からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％の配列同一性を備えるアミノ酸配列を有し；かつ
（ｉｉｉ）前記第３の軽鎖ＣＤＲは、配列番号６１、７４、８６、９８、および１１０からなる群から選択されるアミノ酸配列、または、配列番号６１、７４、８６、９８、および１１０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％の配列同一性を備えるアミノ酸配列を有する。
【請求項３】
下記ａ．に示す重鎖可変ドメイン、および下記ｂ．に示す軽鎖可変ドメインを有する、請求項２に記載の抗体または抗体フラグメント：
ａ．重鎖可変ドメインは、（ｉ）配列番号５６、６９、８１、９３、および１０５からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する第１の重鎖ＣＤＲ、（ｉｉ）配列番号５７、７０、８２、９４、および１０６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する第２の重鎖ＣＤＲ、かつ、（ｉｉｉ）配列番号５８、７１、８３、９５、および１０７からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する第３の重鎖ＣＤＲ、を含み；そして、
ｂ．軽鎖可変ドメインは、（ｉ）配列番号５９、７２、８４、９６、および１０８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する第１の軽鎖ＣＤＲ、（ｉｉ）配列番号６０、７３、８５、９７、および１０９からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する第２の軽鎖ＣＤＲ、かつ、（ｉｉｉ）配列番号６１、７４、８６、９８、および１１０からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する第３の軽鎖ＣＤＲ、を含む。
【請求項４】
前記抗体または抗体フラグメントは、抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、全長抗体、親和性成熟抗体、抗体誘導体、および抗体フラグメントからなる群から選択される、請求項３に記載の抗体または抗体フラグメント。
【請求項５】
担体、任意に薬学的に許容される担体、および、請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントを含有する、ことを特徴とする組成物。
【請求項６】
望ましくない、過剰なまたは異常なレベルのＬＰＡに関連した疾病、疾患または状態に対する薬剤を調製するための請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗体または抗体フラグメントの使用であって、
前記疾病または疾患は、任意に、癌を含む過剰増殖性疾患；自己免疫疾患・他移植片拒絶・移植片対宿主病を含む免疫関連疾患；神経変性疾患；肥満；２型糖尿病；黄斑変性症を含む眼疾患；疼痛；異常な血管形成または新血管新生に関連する疾患；アポトーシス；強皮症・肺線維症・腎線維症・皮膚線維症・心筋線維症・肝線維症を含む線維形成または線維症；創傷の修復および治癒；およびクモ咬傷からなる群から選択される、抗体または抗体フラグメントの使用。
【請求項７】
下記ａ．単離核酸分子、ｂ．単離核酸分子、ｃ．ベクター、ｄ．宿主細胞、またはｅ．誘導体化リゾホスファチジン酸の少なくともいずれか一つを含有する組成物：
ａ．単離核酸分子は、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメントの重鎖または軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含み、当該重鎖または軽鎖可変ドメインは、サカナ、トリ、哺乳類、任意に霊長類、任意にヒトの免疫グロブリン重鎖または軽鎖に由来する；
ｂ．単離核酸分子は、請求項１に記載の抗体または抗体フラグメントの重鎖または軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含み、当該重鎖または軽鎖可変ドメインは、第１、第２および第３のＣＤＲペプチドを含み、当該第１、第２および第３のＣＤＲペプチドは、配列番号５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６９、７０、７１、７２、７３、７４、８１、８２、８３、８４、８５、８６、９３、９４、９５、９６、９７、９８、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、および１１１からなる群から各々独立して選択されるアミノ酸配列をそれぞれ有し、前記重鎖または軽鎖可変ドメインは、サカナ、トリ、哺乳類、任意に霊長類、任意にヒトの免疫グロブリン重鎖または軽鎖に由来する；
ｃ．ベクターは、上記ａ．またはｂ．に記載の核酸分子を含む核酸分子を備える；
ｄ．宿主細胞は、（ｉ）上記ａ．またはｂ．に記載の核酸分子を含む核酸分子、あるいは、（ｉｉ）上記ｃ．に記載のベクターでトランスフェクションされたものである；
ｅ．誘導体化リゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）は、極性頭基および少なくとも１つの炭化水素鎖を含み、前記炭化水素鎖の少なくとも一つの炭素原子が、任意に保護されたペンダント反応基によって誘導体化され、当該ペンダント反応基は、任意に、スルフヒドリル（チオール）基、カルボン酸基、シアノ基、エステル、ヒドロキシ基、アルケン、アルキン、酸塩化物基、またはハロゲン原子のいずれかであり、前記誘導体化リゾホスファチジン酸は、任意に、（ｉ）固体支持体に共有結合して、固体支持体に担持さている、または、（ｉｉ）任意にポリエチレングリコール、コロイド金、アジュバント、ケイ素樹脂ビーズまたはタンパク質よりなる担体と結合しており、当該タンパク質は、任意にキーホール・リンペット・ヘモシアニン、アルブミン、ウシ・サイログロブリン、または大豆トリプシン阻害剤であり、前記担体は、任意に固体支持体に付着している。
【請求項８】
試料中のリゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）またはその代謝物を検出する方法であって、
抗体または抗体フラグメントがＬＰＡに結合可能な条件下で、試料中のＬＰＡまたはその代謝物と請求項１に記載の抗体または抗体フラグメントとの結合を検出し、ここで：
ａ．前記試料は、任意にバイオプシー試料である組織試料、または、任意に全血、血漿、血清、尿、精液、胆汁、房水、硝子体液、粘液、気管支肺胞上皮洗浄液、および痰からなる群から選択される体液試料である；および／または
ｂ．当該方法は、さらに下記（ｉ）〜（ｉｉｉ）の少なくとも一つを任意に含む：
（ｉ）線維症マーカーの少なくとも１つの検出；
（ｉｉ）前記試料中のＬＰＡレベルと同種の健常動物から得たＬＰＡの基準レベルとの比較、ここで、基準レベルよりも相対的に高いＬＰＡレベルが、病気の存在と相関している；
（ｉｉｉ）前記試料中のＬＰＡレベルと望ましいＬＰＡレベルとの比較、そして、必要に応じて治療を変更する。
【請求項９】
試料中のリゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）を検出するために用いられるＥＬＩＳＡキットであって、
当該キットは、診断試薬を含有し、
当該診断試薬は、請求項７のｅ．に記載の誘導体化リゾホスファチジン酸と、生理的環境下でＬＰＡに結合する抗体または抗体フラグメントとを含み、
当該抗体または抗体フラグメントは、（ｉ）少なくとも一つの重鎖可変ドメイン、および少なくとも一つの軽鎖可変ドメインを有し、かつ、（ｉｉ）約１×１０−７Ｍ以下の親和性でＬＰＡに結合し、
前記診断試薬は、ウシ血清アルブミンまたはキーホール・リンペット・ヘモシアニンと結合したチオール化ＬＰＡを任意に含む、ことを特徴とするＥＬＩＳＡキット。