【誤訳訂正書】
【提出日】平成23年8月29日(2011.8.29)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトのHMGB-1高親和性結合ドメインBox-A(HMGB1 Box-A)のポリペプチド変異体、またはHMGB1 Box-Aの生物学的に活性な断片のポリペプチド変異体であって、前記ポリペプチド変異体が、配列番号33、35、37から39、42から45、47から49、52、55、57、59、62、64、67、69および104からなる群より選択されるアミノ酸配列により規定されることを特徴とするポリペプチド変異体。
【請求項２】
前記ポリペプチド変異体が、野生型HMGB1 Box-Aまたは野生型HMGB1 Box-Aの生物学的に活性な断片よりも向上したプロテアーゼのタンパク質分解活性に対する抵抗性を示すことを特徴とする請求項1に記載のポリペプチド変異体。
【請求項３】
タンパク質分解に対する抵抗性の向上が、キモトリプシン、トリプシン、エンドプロテアーゼ、エンドペプチダーゼまたはそれらの組合せを含む群から選択される少なくとも1種のプロテアーゼに対するものであることを特徴とする請求項1または2に記載のポリペプチド変異体。
【請求項４】
タンパク質分解に対する抵抗性が、野生型HMGB1 Box-Aに比べ、少なくとも10%向上していることを特徴とする請求項1から3のいずれか一項に記載のポリペプチド変異体。
【請求項５】
ポリペプチド変異体が、野生型HMGB1 Box-Aまたは野生型HMGB1 Box-Aの生物学的に活性な断片よりも長い半減期を体液中で示すことを特徴とする請求項1から4のいずれか一項に記載のポリペプチド変異体。
【請求項６】
半減期が、野生型HMGB1 Box-Aに比べ、少なくとも10分延長されていることを特徴とする請求項5に記載のポリペプチド変異体。
【請求項７】
請求項1から6のいずれか一項で定義されているポリペプチド変異体をコードすることを特徴とする核酸分子。
【請求項８】
請求項7に記載の核酸分子を含むことを特徴とするベクター。
【請求項９】
請求項1から6のいずれか一項に記載のポリペプチド変異体を製造する方法であって、
(i)請求項7に記載の核酸分子を、宿主に導入するステップと、
(ii)前記細胞を、コードされたポリペプチド変異体が発現される状態下で培養するステップと
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１０】
ペプチドの化学合成法を使用することを特徴とする請求項1から6のいずれか一項に記載のポリペプチド変異体を製造する方法。
【請求項１１】
医薬品中の活性剤として使用することを特徴とする請求項1から6のいずれか一項に記載のポリペプチド変異体。
【請求項１２】
HMGB1に関連する病態を予防または治療するための医薬品の製造を目的とすることを特徴とする請求項1から6のいずれか一項に記載のポリペプチド変異体の使用。
【請求項１３】
HMGB1に関連する病態が、炎症性サイトカインカスケードの活性化によって仲介される病的状態であることを特徴とする請求項12に記載の使用。
【請求項１４】
前記病的状態が、炎症性疾患、自己免疫疾患、全身性炎症反応症候群、臓器移植後の再灌流障害、心血管病、産婦人科系疾患、(ウイルス性および細菌性)感染症、アレルギー性およびアトピー性疾患、固形腫瘍および液性腫瘍の病態、移植拒絶反応、先天性疾患、皮膚疾患、神経疾患、悪液質、腎疾患、医原性中毒状態、代謝疾患および特発性疾患、ならびに眼科疾患からなる群から選択されることを特徴とする請求項12または13に記載の使用。
【請求項１５】
炎症性サイトカインカスケードの初期のメディエーターを阻害することができる別の薬剤と組み合わせることを特徴とする請求項12から14のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１６】
前記別の薬剤が、TNF、IL-1α、IL-1β、IL-Ra、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、IL-18、IFN-γ、MIP-1α、MIF-1β、MIP-2、MIFおよびPAFからなる群から選択されるサイトカインに対する拮抗薬または阻害剤であることを特徴とする請求項15に記載の使用。
【請求項１７】
前記別の薬剤が、RAGEに対する抗体、アンチセンス分子、リボザイムまたはRNA干渉分子等のRAGEの発現を阻害することができる核酸または核酸類似体、RAGEまたは可溶性RAGE(sRAGE)とのHMGB1相互作用に対する合成小分子拮抗薬であることを特徴とする請求項15に記載の使用。
【請求項１８】
前記別の薬剤が、トール様受容体(TLR)のHMGB1との相互作用の阻害剤であることを特徴とする請求項15に記載の使用。
【請求項１９】
前記トール様受容体(TLR)が、TLR2、TLR4、TLR7、TLR8およびTLR9のうち一つ以上である、請求項18に記載の使用。
【請求項２０】
前記阻害剤が、TLRの発現を阻害することができる、モノクローナルもしくはポリクローナル抗体、リボザイムもしくはRNA干渉分子、核酸もしくは核酸類似体、または1000ダルトン未満のサイズの合成分子である、請求項18または19に記載の使用。
【請求項２１】
前記核酸もしくは核酸類似体が、アンチセンス分子である、請求項20に記載の使用。
【請求項２２】
前記別の薬剤が、野生型または変異型トロンボモジュリンのN-末端レクチン様ドメイン(D1)であることを特徴とする請求項15に記載の使用。
【請求項２３】
前記別の薬剤が、屈曲または十字形のDNA、PNAまたはDNA/PNAのキメラもしくはハイブリッドから選択される、屈曲形構造を有する合成二本鎖の核酸または核酸類似体分子であることを特徴とする請求項15に記載の使用。
【請求項２４】
前記別の薬剤が、K-252aまたは/およびその塩もしくは誘導体、あるいはK-252aまたは/およびその誘導体のポリマー複合体であることを特徴とする請求項15に記載の使用。
【請求項２５】
活性剤として、請求項1から6のいずれか一項に記載の少なくとも1種のポリペプチド変異体の有効量と、場合により、薬学的に許容される担体とを含むことを特徴とする薬学的組成物。
【請求項２６】
少なくとも1種のポリペプチド変異体が、請求項16から24のいずれか一項に記載の少なくとも1種の別の薬剤と組み合わされていることを特徴とする請求項25に記載の組成物。
【請求項２７】
診断に応用することを特徴とする請求項25または26に記載の組成物。
【請求項２８】
治療に応用することを特徴とする請求項25または26に記載の組成物。
【請求項２９】
HMGB1による炎症性サイトカインカスケードの活性化を特徴とする患者の状態を治療するための、請求項25から28のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３０】
請求項1から6のいずれか一項に記載の少なくとも1種のポリペプチド変異体の使用であって、前記分子が、医療用具の表面上に可逆的に固定されていることを特徴とする使用。
【請求項３１】
前記医療用具が、手術具、インプラント、カテーテルまたはステントであることを特徴とする請求項30に記載の使用。
【請求項３２】
請求項1から6のいずれか一項に記載の少なくとも1種のポリペプチド変異体を用いて可逆的に被覆されていることを特徴とする医療用具。
【請求項３３】
前記医療用具が、手術具、インプラント、カテーテルまたはステントから選択されることを特徴とする請求項32に記載の医療用具。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００７】
直鎖状の二本鎖DNAであるB型に対するHMGB1の結合は、配列非特異的で、決して強力ではない。一方、HMGB1は、核の内部において、高次コイル、ならびに十字形または、バルジおよび屈曲のような特殊な構造に対して強い親和力で結合する(Ferrariら、1992; Pontiggiaら、1993、出願第号PCT/EP2005/007198、出願人Creabilis Therapeutics)。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００８】
核に存在し、転写因子レギュレーターとして働く以外に、HMGB1は、細胞外環境でも認められている。免疫系の活性化された細胞単核球およびマクロファージによって能動的に放出されたり、あるいは損傷細胞または壊死細胞から受動的に放出されたりする(Anderssonら、2002; Scaffidiら、2002; Bonaldiら、2002; Taniguchiら、2003; Friedmanら、2003; Palumboら、2004)。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００９】
細胞外に放出されたHMGB1は、強力なサイトカインとして、かつ極めて強力なマクロファージ刺激因子として作用する。HMGB1は、細胞膜に結合することによって直接的に作用し、ケモカイン様機能により、シグナル伝達および化学走性を惹起する(Yangら、2001)。さらに、HMGB1は、炎症促進性サイトカインの発現および分泌を上方制御することによって間接的にも作用する。したがって、細胞外タンパク質は、強力な化学走性および免疫調節性タンパク質であり、効果的な炎症免疫応答を促進することができる。さらに、DNAを屈曲させることができる、HMGタンパク質のファミリーに属するその他のタンパク質も、HMGB1と共に、細胞外環境に放出される。これらのタンパク質は、特に、HMGB2、HMGB3、HMG-1L10、HMG-4LおよびSP100-HMGである。これらは、HMGB1と相同性の高いアミノ酸配列を有している。HMGB1と同様、これらは、同一の受容体に相互作用し、炎症性病態を惹起維持し、その後の下流の相互作用の経路も同一である。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１０】
健康な細胞では、HMGB1は、受動輸送および能動輸送の両方によって、細胞質へ移動する。しかし、全ての培養細胞と休止単核球は、ほとんど大部分のHMGB1を核に含有しており、このことは、ベースライン状態では移入が搬出に比べてはるかに効果的であることを示している。細胞は、HMGB1に豊富に存在するリジン残基をアセチル化することによって、HMGB1を核外に輸送していると思われる。アセチル化によって、リジン残基の塩基性の電荷が中和され、それらの残基は核局在化シグナルとして機能できないようになる。核のHMGB1が過剰アセチル化されると、このタンパク質が、(例えば、線維芽細胞においては)核から細胞質へ再配置されたり、あるいは(例えば、活性化された単核球およびマクロファージにおいては)分泌性のエンドリソソームに蓄積したりするようになる。これに続いて、非古典的小胞仲介分泌経路を介した放出へと方向が変わる。ここで、すでに活性化されている単核球によるHMGB1の分泌が、生理活性を有するリゾホスファチジルコリン(LPC)によって惹起される。この物質は、その後炎症部位において、単核球が活性化の数時間後に産出する分泌性ホスホリパーゼsPLA2の作用によって、ホスファチジルコリンから生ずる。したがって、HMGB1の分泌は、2種のシグナルによって惹起され(Bonaldiら、2003)、以下の3段階を経過するものと思われる。最初に、炎症シグナルが、HMGB1のアセチル化および核から細胞質への再配置を促進し(第1段階)、さらに、細胞質の分泌性小胞での貯蔵を促進する(第2段階)。続いて、分泌シグナル(細胞外ATPまたはリゾホスファチジルコリン)が、開口放出(エキソサイトーシス)を促進する(第3段階)(Anderssonら、2002;Scaffidiら、2002;Gardellaら、2002;Bonaldiら、2003;Friedmanら、2003)。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１１】
放出されたHMGB1は、RAGE受容体に結合するリガンドの1つであると同定されている。この受容体は、大部分の細胞型で発現しており、主に、内皮細胞、血管平滑筋細胞、単核球およびマクロファージ、ならびに単核貪食細胞中で高発現している。認識には、HMGB1のC-末端が関与する。HMGB1とRAGEが相互作用すると、RAGEの上方制御および受容体依存性シグナル伝達によって仲介される、持続性の細胞の活性化が惹起される。特に、HMGB1とRAGEとの相互作用は、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ(MAPK)、Cdc-42、p21ras、Rac、および炎症過程に古典的に結合する転写因子である核転写因子κB(NF-κB)をはじめとする数種の細胞内シグナル伝達経路を活性化する(Schmidtら、2001)。