【手続補正書】
【提出日】平成23年3月24日(2011.3.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１または配列番号５または配列番号９または配列番号１３または配列番号１７または配列番号２１または配列番号３３に少なくとも８０％同一なアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチドであって、ＭＥＫ活性を調節するポリペプチド。
【請求項２】
ａ）配列番号３７のアミノ酸残基２１８および／または２２２に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２１３〜２２５に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｂ）配列番号３７のアミノ酸残基２１８および／または２２２に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２１１〜２２７に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｃ）配列番号３７のアミノ酸残基２１８および／または２２２に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２０８〜２２９に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｄ）配列番号３７のアミノ酸残基２１８および／または２２２に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２１０〜２３１に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｅ）配列番号３７のアミノ酸残基２９８および／または３００に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２９３〜３０５に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｆ）配列番号３７のアミノ酸残基２９８および／または３００に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２９１〜３０８に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｇ）配列番号３７のアミノ酸残基２９８および／または３００に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２９０〜３０９に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；および
ｈ）配列番号３７のアミノ酸残基２９８および／または３００に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３７のアミノ酸残基２８９〜３１０に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチドからなる群より選択されるペプチドの少なくとも１コピーを含む、ＭＥＫのポリペプチド阻害物質。
【請求項３】
ａ）配列番号３８のアミノ酸残基２０２および／または２０４に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３８のアミノ酸残基１９９〜２１０に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｂ）配列番号３８のアミノ酸残基２０２および／または２０４に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３８のアミノ酸残基１９８〜２１７に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｃ）配列番号３８のアミノ酸残基２０２および／または２０４に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３８のアミノ酸残基１８７〜２１１に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；および
ｄ）配列番号３８のアミノ酸残基２０２および／または２０４に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３８のアミノ酸残基１９１〜２１１に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチドからなる群より選択されるペプチドの少なくとも１コピーを含む、ＭＥＫのポリペプチド阻害物質。
【請求項４】
ａ）配列番号３９のアミノ酸残基１８５および／または１８７に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３９のアミノ酸残基１７０〜１９４に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｂ）配列番号３９のアミノ酸残基１８５および／または１８７に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３９のアミノ酸残基１７４〜１９８に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；
ｃ）配列番号３９のアミノ酸残基１８５および／または１８７に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３９のアミノ酸残基１７６〜１９７に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチド；および
ｄ）配列番号３９のアミノ酸残基１８５および／または１８７に相当するアミノ酸残基がセリン、チロシン、またはスレオニン以外のアミノ酸残基へ変異している、配列番号３９のアミノ酸残基１７９〜１９３に相当するアミノ酸残基を含むペプチドに少なくとも８０％同一なペプチドからなる群より選択されるペプチドの少なくとも１コピーを含む、ＭＥＫのポリペプチド阻害物質。
【請求項５】
細胞内局在シグナル、レポーター、および／またはエピトープタグへ連結される、請求項１〜４のいずれか１項に記載のポリペプチド。
【請求項６】
少なくとも２の単量体リガンドを含む組成物であって、前記リガンドそれぞれの少なくとも１部分がＭＥＫにより認識可能であり、かつ前記リガンドの少なくとも１がＭＥＫによりリン酸化可能なアミノ酸を含まない組成物。
【請求項７】
前記組成物がホモ重合体リガンドである、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
少なくとも２の前記単量体リガンドの間にスペーサーアミノ酸をさらに含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
局在シグナル、レポーター、および／またはエピトープタグをさらに含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物がヘテロ重合体リガンドである、請求項６に記載の組成物。
【請求項１１】
少なくとも２の前記単量体リガンドの間にスペーサーアミノ酸をさらに含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
局在シグナル、レポーター、および／またはエピトープタグをさらに含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載のポリペプチドをコードする、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１４】
請求項１３に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項１５】
請求項１４に記載のベクターを含む組み換えホスト細胞。
【請求項１６】
細胞内でＭＥＫを阻害する方法であって、請求項１４に記載のベクターをホスト細胞内へトランスフェクトすること、および前記ポリペプチドの少なくとも１コピーを産生するための適切な条件下で前記トランスフェクトされたホスト細胞を培養することを含む方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載のポリペプチドのそれぞれをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリヌクレオチドの１末端に第１の制限酵素によって切断可能な配列が隣接し、かつ前記ポリヌクレオチドのもう１つの末端に第２の制限酵素によって切断可能な配列が隣接し、かつ第１および第２の制限酵素が非互換性の付着末端を生じるポリヌクレオチド。
【請求項１８】
請求項１６に記載のポリペプチドのそれぞれをコードする単離されたポリヌクレオチドであって、前記ポリヌクレオチドの１末端にＮｇｏＭ  ＩＶによって切断可能な配列が隣接し、かつ前記ポリヌクレオチドのもう１つの末端にＸｍａＩおよびＣｌａＩによって切断可能な配列が隣接するポリヌクレオチド。