(57)【要約】  皮膚および毛髪への吸着性を有し、様々な有効成分を内包可能な、化粧品に配合するのに適したベシクル組成物を提供する。  ２-メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンと特定のカチオンモノマーの重合体からなるカチオン化ポリマーでカチオン化させたカチオン化ベシクル、又はカチオン化ベシクルに化粧品有効成分が保持された有効成分内包カチオン化ベシクル、並びにこれらを含有する化粧料。【特許請求の範囲】
【請求項１】
２-メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンとカチオンモノマーを含むカチオン化ポリマーでカチオン化させた、化粧品に添加して使用するためのカチオン化ベシクルであって、カチオン化ポリマー中のカチオンモノマーの割合が50%以上である、カチオン化ベシクル。
【請求項２】
単層ベシクルまたは多層ベシクルである、請求項１に記載のカチオン化ベシクル。
【請求項３】
カチオンモノマーが、
（２-ヒドロキシ-３-メタクリロイルオキシプロピル)トリメチルアンモニウムクロライド、又は
２-（メタクリロイルオキシ）エチルトリメチルアンモニウムコロライド、又は
Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチルアクリレート塩化ベンジル４級塩
である、請求項１又は２に記載のカチオン化ベシクル。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載のカチオン化ベシクルに化粧品有効成分が保持された、有効成分内包カチオン化ベシクル。
【請求項５】
前記有効成分がミネラルである、請求項４に記載の有効成分内包カチオン化ベシクル。
【請求項６】
前記有効成分がビタミンCまたはビタミンC誘導体である、請求項４に記載の有効成分内包カチオン化ベシクル。
【請求項７】
Ζ電位が+20mV以上である、請求項１〜３のいずれかに記載のカチオン化ベシクル、又は請求項４〜６のいずれかに記載の有効成分内包カチオン化ベシクル。
【請求項８】
凍結乾燥された、請求項１〜３のいずれかに記載のカチオン化ベシクル、又は請求項４〜６のいずれかに記載の有効成分内包カチオン化ベシクル。
【請求項９】
カチオン化ベシクルを含有する化粧料であって、該カチオン化ベシクルが請求項１〜３のいずれかに記載のカチオン化ベシクル、又は請求項４〜６のいずれかに記載の有効成分内包カチオン化ベシクル、又は請求項８に記載の凍結乾燥されたカチオン化ベシクル若しくは有効成分内包カチオン化ベシクルである、化粧料。
【請求項１０】
皮膚および毛髪への吸着性を有し、局所的に塗布される、請求項９に記載の化粧料。
【請求項１１】
請求項９に記載の化粧料を皮膚又は毛髪に塗布することを含む、美容施術方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なカチオン化物質を用いてカチオン化させた、カチオン化ベシクル及びその製造方法に関する。特に、本発明は、カチオン化ベシクルの化粧料としての利用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ベシクルとは、両親媒性分子の自己会合により形成される二重膜で包まれた小胞であり、特に細胞膜と同様のリン脂質二重膜からできたものはリポソームと呼ばれる。ベシクル（リポソーム）には各種物質を封入することができる。リポソームは、内部に封入した物質の細胞内への送達に利用可能であり、医薬品のデリバリー技術（ＤＤＳ：薬物送達システム）におけるキャリアとして研究開発が行われている。【０００３】
リポソームを用いたＤＤＳに類似した技術を用いた化粧品は、ナノコスメ、ナノカプセルなどの呼称で宣伝されている。特許第５６２３０７６号（特許文献１）には、リゾリン脂質を利用したベシクル組成物および該ベシクル分散組成物からなる皮膚外用剤が記載されている。特開２０１２−２０６９４８（特許文献２）には、酸性領域においても安定なリポソーム組成物および該組成物を含有する化粧料及び皮膚外用剤が記載されている。特開２００７−１７６８２０および特開２００７−１７６８２１（特許文献３および４）には、水性媒体に分散させて安定したリポソームを得ることができる粉末状リン脂質組成物を用いて化粧料を作ることが記載されている。【０００４】
化粧品のように局所的に塗布して使用される組成物において、有効成分の細胞内への浸透を向上させるための工夫が行われている。【０００５】
カチオン化とは、物質をプラスに帯電させることである。皮膚はマイナスに帯電しているのでプラスの物質が吸着しやすい。【０００６】
特許第４９５０４１９号および特許第５２２０５４６号（特許文献５および６）には、化粧品への利用を目的として、皮膚または毛髪の細胞中への、物質の細胞内浸透を促進するように成分が工夫されたリポソームが記載されている。【０００７】
特開２００６−３５０３６（特許文献７）には、水溶性固体マトリックス中に油性薬剤が油滴として分指された状態で包含され、さらに水中でカチオン性を示す乳化物質を含む、油性薬剤含有粒子が記載されている。【０００８】
特開２０１６-１０８２８５（特許文献８）には、化粧品の有効成分としてのミネラルを内包したカチオン化ベシクルが記載されている。カチオン化させるための物質としては、皮膚および毛髪への吸着性に優れたカチオン化ヒアルロン酸が好ましいとされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特許第５６２３０７６号「ベシクル組成物、及び皮膚外用剤」
【特許文献２】特開２０１２−２０６９４８「リポソーム組成物、並びにそれを用いた化粧料、皮膚外用剤及びその製造方法」
【特許文献３】特開２００７−１７６８２０「粉末状リン脂質組成物」
【特許文献４】特開２００７−１７６８２１「粉末状リン脂質組成物」
【特許文献５】特許第４９５０４１９号「細胞内浸透を促進するカチオン性ポリマーを含むリポソーム」
【特許文献６】特許第５２２０５４６号「細胞内浸透を促進する脂肪族モノアミン又はカチオン性ポリマーを含む、水和ラメラ相又はリポソーム、及び、これを含む化粧組成物又は医薬組成物」
【特許文献７】特開２００６−３５０３６「油性薬剤含有粒子」
【特許文献８】特開２０１６−１０８２８５「カチオン化ベシクル及びその組成物」
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
カチオン化ベシクルは皮膚に吸着しやすく、化粧品有効成分を内包させて使用すると、当該成分を皮膚に効率よく送達できるので、化粧品素材として優れた組成物である。安定性が高く、さらに、ミネラルだけでなく他の様々な化粧品有効成分を内包可能なカチオン化ベシクルを提供することが、本発明の課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、ベシクルをカチオン化するカチオン化ポリマーの組成について研究を重ねた。そして、従来のカチオン化ポリマーの組成を変更した新規カチオン化ポリマーを用いることにより、カチオン化ベシクルの安定性の向上、内包物の種類の多様化、および内包物の高濃度化を実現し、本発明を完成した。【００１２】
すなわち、本発明は、化粧品に添加して使用するためのカチオン化ベシクルであって、新規カチオン化ポリマーでカチオン化させたカチオン化ベシクルに関する。本発明は、また、新規カチオン化ポリマーを用いたベシクルのカチオン化方法に関する。本発明は、また、新規カチオン化ポリマーを用いたカチオン化ベシクルの製造方法に関する。本発明は、また、新規カチオン化ポリマーに関する。【００１３】
カチオン化ポリマーは、２-メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリンとカチオンモノマーを含み、該カチオン化ポリマーにおいてカチオンモノマーの割合が50%以上であることが好ましい。【００１４】
前記カチオンモノマーは、（２-ヒドロキシ-３-メタクリロイルオキシプロピル)トリメチルアンモニウムクロライド、又は２-（メタクリロイルオキシ）エチルトリメチルアンモニウムコロライド、又はＮ，Ｎ−ジメチルアミノエチルアクリレート塩化ベンジル４級塩であることが好ましい。【００１５】
前記カチオン化ベシクルは、単層ベシクルまたは多層ベシクルのいずれでもよい。【００１６】
本発明は、また、前記カチオン化ベシクルに化粧品有効成分が保持された、有効成分内包カチオン化ベシクルに関する。【００１７】
前記有効成分は、マイナスに帯電している物質であることが好ましく、例としては、ミネラル類、アミノ酸類、陰イオン界面活性剤、ビタミン類（例えば、ビタミンCとその誘導体）等が挙げられる。【００１８】
本発明は、また、Ζ電位が+20mV以上である前記カチオン化ベシクルに関する。【００１９】
本発明は、また、Ζ電位が+20mV以上である前記有効成分内包カチオン化ベシクルに関する。【００２０】
本発明は、また、凍結乾燥された前記カチオン化ベシクルに関する。【００２１】
本発明は、また、凍結乾燥された、前記有効成分内包カチオン化ベシクルに関する。【００２２】
本発明は、また、前記カチオン化ベシクル、又は前記有効成分内包カチオン化ベシクル、又は前記凍結乾燥されたカチオン化ベシクル若しくは有効成分内包カチオン化ベシクルを含有する化粧料に関する。【００２３】
前記化粧料は、さらに天然物由来の物質を含んでいてもよい。【００２４】
本発明は、また、皮膚および毛髪への吸着性を有する、局所的に塗布される化粧料であって、前記カチオン化ベシクル、又は前記有効成分内包カチオン化ベシクル、又は前記凍結乾燥されたカチオン化ベシクル若しくは有効成分内包カチオン化ベシクルを含有することを特徴とする化粧料に関する。【００２５】
本発明は、また、前記カチオン化ベシクル、又は前記有効成分内包カチオン化ベシクル、又は前記凍結乾燥されたカチオン化ベシクル若しくは有効成分内包カチオン化ベシクルを含有する化粧料を皮膚又は毛髪に塗布することを含む、美容施術方法に関する。【００２６】
前記美容施術方法は、サロンで行っても、家庭で行ってもよい。
【発明の効果】
【００２７】
本発明のカチオン化ベシクルは、優れた皮膚浸透性・皮膚透過性を有し、皮膚刺激性が低いことから、機能性化粧品に配合するために好適である。また、本発明のカチオン化ベシクルは、従来公知の物と比べて安定性が向上し、内包できる物質（例えば、ミネラル等の有効成分）の濃度が高くなっており、さらに内包できる物質が多様化している。【００２８】
本発明により、吸着・浸透・持続力に優れた化粧品の提供に資することができる。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
１．ベシクル
ベシクル(vesicle)は、両親媒性分子の水中での自発的な会合により、疎水性尾部を内側に、親水性頭部を外側に向けた二重層膜が閉じた球状の構造体として形成される。
【００３０】
シングル・ラメラ・ベシクル（ＳＬＶ）は、「単層ベシクル」とも呼ばれ、１つの脂質二重層膜から構成される球体状のベシクルである。
【００３１】
二重膜が多重に積層した構造を形成したベシクルは、マルチ・ラメラ・ベシクル（ＭＬＶ）と呼ばれる。ＭＬＶは、「多層ベシクル」とも呼称され、同心円状に配置された、複数の脂質二重層膜から構成される。
【００３２】
ベシクルを形成可能な両親媒性分子は多数存在するが、特にリン脂質からできたものはリポソームと呼ばれる。ベシクルはリン脂質や界面活性剤からなる小胞の総称である。リポソームは、皮膚の細胞と同じ膜を持つカプセルのようなものであり、生体適合性に優れている。
【００３３】
リン脂質の膜は、卵黄やダイズ由来のリン脂質やグリセロリン脂質、あるいは環状ホスファチジン酸からなり、元来はマイナスに帯電している。また、リン脂質は、合成されたものであっても、市販のものであってもよい。
【００３４】
さらに、リン脂質からなる脂質二分子膜の硬さや透過性を調製する目的でコレステロールとリン脂質とを組み合わせることもできる。
【００３５】
ベシクルは、リポソームの製造方法として一般に知られている従来の製造方法によって調製することができる。
【００３６】
リポソームの製造方法として、公知の技術としては、Bangham（J.Mol. Biol., 13, 238 (1965)）らの方法又はその変法、超音波処理法（Biochem. Biophys. Res. Commun., 94, 1367 (1980))、エタノール注入法（J. Cell. Biol., 66, 621 (1975)）、フレンチプレス法（FEBS Lett., 99, 210 (1979)）、エーテル注入法（N. Y. Acad. Sci., 308, 250 (1978))、コール酸（界面活性剤）法（Biochim. Biophys. Acta, 455, 322 (1976))、カルシウム融合法（Biochim. Biophys. Acta, 394, 483 (1978))、凍結融解法（Arch.Biochem. Biophys., 212, 186 (1981)）、逆相蒸発法（Proc. N. A. S. USA, 75, 4194 (1978))、ガラスフィルターを用いた方法（ThirdUS-Japan Symposium on Drug Delivery System (1995)）、コートソーム（登録商標）などの市販のキットを用いた方法などが挙げられる。
【００３７】
２．カチオン化
カチオン化とは、物質をプラスに帯電させることである。カチオン化させたベシクルはプラスに帯電しているので、カチオン化されてないベシクルと比べて皮膚に吸着・浸透しやすくなることが期待される。本発明では、このような効果を得られる程度にベシクルをカチオン化させることが望ましい。具体的には、カチオン化されたベシクルのΖ（ゼータ）電位が+20mv以上、さらに好ましくは+30mV以上あると良い。カチオン化ベシクルのΖ電位は、保存のために賦形剤を加えて凍結乾燥し、その後に水性溶媒に再溶解した場合においても安定に保たれることが望ましい。本明細書では、ＭＬＶおよびＳＬＶの両方を特に区別せずに、本発明の「カチオン化ベシクル」と称する。また、カチオン化ＭＬＶを「ＣＭＬＶ」、カチオン化ＳＬＶを「ＣＳＬＶ」と略称することもある。
【００３８】
ベシクルをカチオン化させるために、カチオン化分子が用いられる。一般的には、カチオン化分子として、カチオン化ポリマーを用いる。カチオン化ベシクルは、カチオン化分子（カチオン化ポリマー）をベシクル作成時に添加し、ベシクルをカチオン化させることにより得られる。カチオン化ポリマーとは、カチオン性の基が導入されてカチオン化された高分子物質である。カチオン化ポリマーは、それ自体が生体適合性のあることが必要であり、加えて、皮膚や毛髪の保湿効果を有するものであることが好ましい。
【００３９】
本発明においては、２-メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン（略称：MPC）と特定のカチオンモノマーとの重合体からなるカチオン化ポリマーが使用される。MPCは、細胞膜と同じ構造並びに重合可能な構造を併せ持ち、生体への親和性が極めて高い画期的な生体適合性素材である。
【００４０】
カチオンモノマーの例としては、
ブレンマー（登録商標）QA：  （２-ヒドロキシ-３-メタクリロイルオキシプロピル)トリメチルアンモニウムクロライド；
MOETAC：  ２−（メタクリロイルオキシ）エチルトリメチルアンモニウムクロライド；
DMAEA（登録商標）-BQ：  Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチルアクリレート塩化ベンジル４級塩
などが挙げられる。
【００４１】
本発明でベシクルをカチオン化するために使用されるカチオン化ポリマーの一態様は、MPC−ブレンマーQAコポリマーである。これはMPCとブレンマー（登録商標）QAからなる合成ポリマーであり、成分名（表示名称）は「ポリクオタニウム−６４（Polyquaternium-64）」である。市販の典型的なポリクオタニウム-64は、MPC30%、カチオンモノマー70%からなる。
【００４２】
また、本発明では、実施例で製造された新規な組成のカチオン化ポリマーも好適に使用される。そのようなカチオン化ポリマーの一態様は、MPCおよびブレンマー（登録商標）QAからなるカチオン化ポリマーである。別の態様は、MPCおよびMOETACからなるカチオン化ポリマーである。さらに別の態様は、MPCおよびDMAEQ（登録商標）-BQからなるカチオン化ポリマーである。カチオン化ポリマー中のMPCとカチオンモノマーの比率、およびカチオン化ポリマーの分子量は様々に変化させることが可能である。本発明において、カチオン化ポリマー中のカチオンモノマーの割合は好ましくは50%以上であり、より好ましくは55%以上である。本発明者らは、カチオンモノマーの割合を82％まで増量しても、カチオン化ベシクルが製造できることを確認している。また、カチオン化ポリマーの分子量は60万以上であることが好ましい。本発明者らは、分子量200万でもカチオン化ベシクルができることを確認している。
【００４３】
３．カチオン化ベシクルの化粧料における使用
化粧品有効成分を内包させたカチオン化ベシクルを、ローション、美容液、乳液、クリーム、シャンプーなどの化粧料に添加して使用すると、当該成分を皮膚に効率よく送達できる。
【００４４】
ＳＬＶは透明のためローションや美容液などに適しており、ＭＬＶは乳白色のため乳液やクリームなどに適している。
【００４５】
カチオン化ベシクルが内包する物質は、化粧料の用途により適宜選択される。
【００４６】
マイナスに帯電している物質は、ベシクルおよびカチオン化ベシクルに内包する事が一般的に困難である。本発明のカチオン化ベシクルには、マイナスに帯電している物質を、化粧品成分として内包させることができる。そのような内包させる化粧品成分の例として、ミネラル類、アミノ酸類、陰イオン界面活性剤、ビタミンCとその誘導体などのマイナスイオンを帯びた成分が挙げられる。化粧品有効成分が保持されたカチオン化ベシクルを、本明細書では、「有効成分内包カチオン化ベシクル」と呼ぶ。
【００４７】
ミネラルとしては、例えば、特開2007-217356に記載された海洋深層水濃縮組成物、又は特開2000-290159号に記載された海洋深層水、又は特許3967357号に記載された湯の花抽出物が挙げられる。海洋深層水濃縮組成物若しくは海洋深層水又はこれらの乾燥物である海水乾燥物、又は湯の花抽出物が封入されたカチオン化ベシクルを、本明細書では、「ミネラル内包カチオン化ベシクル」と呼ぶ。
【００４８】
例えば、海洋深層水濃縮物は、以下の工程(1)及び(2)を含む製造方法により得られるNF膜透過水濃縮物である：
(1) 硫酸イオンを90%以上除去し得るナノフィルター膜で海洋深層水を処理して、Brixが2.8〜3.6、Mgイオン濃度が300〜900mg/L、Caイオン濃度が200〜600mg/L、及びSO4イオン濃度が0〜300mg/LであるNF膜透過水を得る工程；及び
(2) 工程(1)で得たNF膜透過水を濃縮して、Brixが30.0〜55.0、Mgイオン濃度が10,000〜100,000mg/L、Caイオン濃度が4,000〜40,000mg/L、及びSO4イオン濃度が0〜1,000mg/L、並びにCaイオン濃度:Mgイオン濃度 = 1:0.25〜1:4である、NF膜透過水濃縮物を得る工程。
【００４９】
上記のNF膜透過水の濃縮において、濃縮が14〜50倍であり、かつ、NF膜透過水濃縮物が析出物のない水溶液状であることが好ましい。さらに、例えば、上記のナノフィルター膜の孔径は0.1〜1 nmであり、かつ膜にかかる圧力は0.3〜2.0 MPaであることが好ましい。
【００５０】
また、例えば、湯の花抽出物は、以下の工程(1)〜(3)を含む製造方法により得られる、湯の花のオゾン酸化処理物を含む組成物である：
(1) 温泉の噴気を、青粘土上で、一定温度及び一定湿度で結晶化させて湯の花を得て、
(2) 湯の花を水性溶媒に溶解し、そして
(3) 溶解物をオゾン酸化処理して、オゾン酸化処理物を得る。
【００５１】
上記の湯の花抽出物は、(1) 硫酸イオン25〜40,000mg/L；（2) 3価の鉄イオン5.0〜8,000mg/L；及び(3) アルミニウムイオンを含み；2価の鉄イオン：3価の鉄イオンの比が4,900:2,000以下であることが好ましい。ここで、3価の鉄イオン1に対し、2価の鉄イオンが0.5以下であることも好ましい。
【００５２】
本明細書では海洋深層水濃縮組成物、海洋深層水、海水乾燥物、湯の花抽出物を、単に「ミネラル」と呼ぶ場合もある。
【００５３】
本発明のカチオン化ベシクルは、内包可能なミネラルの濃度が、従来のものよりも向上している。ベシクルの全重量に対する重量％で、ミネラルの濃度は約0.0001％〜約5％、例えば、約0.1％〜約5％、約2％〜約5％、約3％〜約5％を内包させることが出来る。
【００５４】
また、本発明のカチオン化ベシクルは、多様な物質を内包可能である。内包させる化粧品成分の例として上記ミネラルに加えて、ビタミンC誘導体（例えばアスコルビルリン酸ナトリウム）などが挙げられる。ベシクルの全重量に対する重量％で、ビタミンC誘導体の濃度は約0.1％〜約5％を内包させることが出来る。  有効成分内包カチオン化ベシクルは、約８０℃程度（例えば７５〜８５℃）の温度で、内包させる有効成分（例えば、ミネラル類、アミノ酸類、陰イオン界面活性剤、ビタミンCとその誘導体等）、カチオン化ポリマー、リン脂質、界面活性剤、及び所望によりその他の化粧品成分と、水性溶媒（精製水または海水）とを攪拌混合した後、徐々に室温〜約３５℃程度まで冷却する方法で製造することができる。その他、前述のリポソームの製造方法として公知の技術を適宜用いて製造することができる。冷却された組成物は、さらに、高圧（例えば220MPa X 5Pass）で乳化し、フィルター濾過（例えば1.0μmフィルターで濾過）してもよい。
【００５５】
前記その他の化粧品成分には、保湿成分、生薬エキス、チロシナーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、リパーゼのような酵素、レチノール、アスコルビン酸、トコフェロール、ピリドキサール、リボフラビンのようなビタミンやその誘導体、β−カロチン、クロロフィルのような有機系色素、グリセリン、ソルビトール、尿素、乳酸、プロピレングリコール、ポリチレングリコールおよび共重合体、グルコース誘導体等のようなモイスチャー成分、パラフイン、ステアリルアルコール、セチルアルコール、スクワラン、シリコーンオイル、ステアリス等のようなエモリエント成分、トリートメント成分、フケ抑制成分、養毛、育毛成分、紫外線吸収剤、酸化防止剤、香料、防腐剤等を挙げることができる。これらは必要に応じて２種以上を組合せて用いてもよい。
【００５６】
本発明の化粧料は、通常のローション、美容液、乳液、クリーム、シャンプーなどの処方に、1種またはそれ以上の有効成分内包カチオン化ベシクルを添加することにより製造することができる。化粧料としての形態は特に限定されるものではないが、皮膚又は毛髪に塗布して使用されるものが好ましい。局所的に塗布して使用することは、皮膚又は毛髪に塗布した後に洗い流すことも含む。例えばスキンケア化粧品として洗顔料、クレンジング料、化粧水、美容液、パック、マッサージクリーム、乳液、モイスチャークリーム、リップクリーム等、メーキャップ化粧品としてファンデーション、白粉、口紅、ほほ紅、アイシャドウ等、ボディケア化粧品として石鹸、液体洗浄料、入浴剤等、ヘアケア化粧品としてシャンプー、リンス、ヘアトリートメント、整髪料、ヘアトニック、育毛剤、スキャルプトリートメント等とすることができる。上記化粧料には、所望の効果を損なわない範囲で、一般に化粧品に用いられている各種化粧品成分（油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、アミノ酸類、ビタミン類、界面活性剤、pH調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、抗炎症剤、抗しわ剤、肌荒れ改善剤、ニキビ用薬剤、アルカリ類、キレート剤、金属封鎖剤、等）を適宜配合することができる。
【００５７】
また、後述の実施例に示されるように、本発明の化粧料には、天然物由来の物質を含んでいてもよい。そのような物質の例として以下のものが挙げられる。特許第4795475号に記載されたウメ抽出物、例えば、ウメ根抽出物やウメ果実蒸留水。特許第2526362号に記載されたウメ果汁醗酵液。特開2012-116761号に記載された植物由来水蒸気蒸留水、例えば、パッションフルーツ、シマミカン、バナナ、アテモヤ、ウメ、タンカン、レモンライム、ジンジャーから選択される１種又は２種以上の植物の水蒸気蒸留水。特許第3544505号に記載されたトウキ抽出物。特開2009-029788号に記載された海水由来酵母培養物。
【実施例】
【００５８】
以下、本発明を実施例によって具体的に説明する。なお、これらの実施例は、本発明を説明するためのものであって、本発明の範囲を限定するものではない。【００５９】
[実施例１：カチオン化ポリマーの調製]
MPC;16.6g、ブレンマー（登録商標）QA;33.4gを水;200gに溶解し４つ口フラスコに入れ、30分間窒素を吹き込んだ後、75℃で重合開始剤(VA-061、和光純薬工業製、0.55g)を加えて10時間重合反応させた。重合液を5リットルのジエチルエーテル中に攪拌しながら滴下し、析出した沈殿をろ過し、48時間室温で真空乾燥を行って、カチオン化ポリマー粉末30.1gを得た。これにより、分子量70万、MPC45%とブレンマー（登録商標）QA55%（MPC/カチオン＝45/55）からなるカチオン化ポリマー（ポリクオタニウム-64）を得た。また、同様の方法で、分子量およびMPCとブレンマーQAの割合の違うカチオン化ポリマーおよび、MPCとMOETACもしくはDMAEQ-BQからなるカチオンモノマーの違うカチオン化ポリマーを得た。【００６０】
［実施例２：ミネラル内包カチオン化ベシクルの作製および安定性の評価］
ミネラル内包カチオン化ベシクルを、以下の物質から作製した。
水添環状リゾフォスファチジン酸Na/水添レシチン/コレステロール：1%；
内包物（表１で「ミネラル」と表示）と内包物を溶解させるキレート剤；
実施例１で作製した各種カチオン化ポリマー：3%；
防腐剤としてココイルアルギニンエチルPCA：0.02%
マイナスイオンに帯電している原料の例として、ミネラル（湯の花抽出物）を内包物として用いた。0.01%〜1%のミネラル（湯の花抽出物）を、キレート剤を用いて内包させた、各種カチオン化ポリマーからなるミネラル内包カチオン化ベシクルについて安定性を評価した。ポリクオタニウム-64によるカチオン化物質の有無におけるZ電位変動を測定した。凝集・沈澱は目視で判定した。結果を表１に示す。粒径については、Z平均もしくは散乱強度第1ピークが200nm以上だと粒径が大きめである（粒径大）と判断した。【００６１】
通常のベシクル（EXTRASOME CP-7M、表中の13及び127）は、Z電位がマイナスである。既知のカチオン化ベシクル（Lipidure C、表中の17）では0.01%のミネラルを内包させると安定性が著しく損なわれ、沈澱および凝集を生じた。カチオン割合50%以上、分子量60万以上のカチオン化ポリマーでZ電位+20mV以上で数日以上安定なミネラル内包カチオン化ベシクルが得られた。【００６２】
【表１】
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【００６３】
［実施例３：ミネラル内包カチオン化ベシクルの凍結乾燥による保存方法］
実施例２で作製したミネラル内包カチオン化ベシクルに10%クラスターデキストリン（登録商標）（高度分岐環状デキストリン）、精製水を１：３：６の割合で混合し、攪拌した。その後、-20℃以下で凍結し、凍結乾燥を行った。【００６４】
粒径は、ミネラル内包カチオン化ベシクルの原液と、凍結乾燥用に10%クラスターデキストリン（登録商標）を混合した凍結前の状態と、凍結乾燥後に精製水で再溶解した状態の両方で、Ζ電位は安定的に保持されていた。（データは示さない。）【００６５】
［実施例４：有用性試験］
内包物の代替として蛍光色素を用いて、皮膚浸透性・透過性試験を実施した。0.01%カルセインおよび0.01%カルセインを内包したSLV、MLV、CSLV、CMLVを、12 well plateにPBS2mLを入れてセットしたEpiSkinTM-Large Model (EpiSkin)の角層側から300 μL作用させ、37℃にて6時間および24時間まで培養した。作用後、精製水でリンスし、ステンレスビーズおよび精製水1mLとともに皮膚をチューブに移し、TissueLyserにて皮膚を粉砕した。遠心分離で上清を取得し、蛍光強度（Ex/Em=494/520nm）を測定して、皮膚中のカルセイン量を算出し、皮膚浸透効果を評価した。また、12 well plateのPBSも同様に蛍光強度（Ex/Em=494/520nm）を測定して、皮膚透過効果を評価した。【００６６】
結果を表２に示す。SLVおよびMLVと比較して、それぞれCSLVおよびCMLVは皮膚浸透効果、皮膚透過効果が高かった。【００６７】
【表２】
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【００６８】
［実施例５：電子顕微鏡観察］
SLV、MLV、CSLV、CMLVについて、透過型電子顕微鏡で観察を行った。SLV、CSLVは単層、MLV、CMLVは多層構造を有している事が確認された。【００６９】
［実施例６：パッチテスト］
カチオン化ポリマー、CSLV、CMLVを塗布したパッチテープを用いて、日本人20名で24時間閉塞パッチテストを行った。陰性対象として、ワセリン、生理食塩水、精製水を用いて、パッチテープを剥がした1時間後に、紅斑の状態を陰性対象および以下の判定基準に照らして判定を行い、次式を用いて皮膚刺激指数を算出した。検体の分類は、皮膚刺激指数からを以下の表を元に行った。【００７０】
皮膚刺激指数＝評点総和／被験者数×100【００７１】
【表３】
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結果を以下の表４に示す。【００７２】
【表４】
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【００７３】
3検体すべて、『安全品』分類であった。      【００７４】
［有効成分内包カチオン化ベシクル（前処理）の製造例］【００７５】
ミネラル内包カチオン化ベシクル1【００７６】
【表５】
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製造方法
水相Aを75℃まで加熱し、乳化機で乳化する。
35℃まで冷却後し、高圧処理（220ＭＰａ×5pass）し、ミネラル内包カチオン化ベシクル1を得る。【００７７】
ミネラル内包カチオン化ベシクル2【００７８】
【表６】
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製造方法
水相Aを75℃まで加熱し、乳化機で乳化する。
35℃まで冷却後し、高圧処理（220ＭＰａ×5pass）し、ミネラル内包カチオン化ベシクル2を得る。【００７９】
ビタミンC誘導体内包カチオン化ベシクル【００８０】
【表７】
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製造方法
水相Aを75℃まで加熱し、乳化機で乳化する。
35℃まで冷却後し、高圧処理（220ＭＰａ×5pass）し、ビタミン内包カチオン化ベシクルを得る。【００８１】
［化粧料の製造例］【００８２】
クリーム【００８３】
【表８】
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製造方法
水相Ａを75℃まで加熱し、攪拌溶解する。
油相Bを85℃まで加熱し、攪拌溶解する。
水相Ａにクリーム、油相Bを加え、80℃まで加熱し、乳化機で乳化する。
45℃まで冷却し、水相Cを加えて中和する。
35℃まで冷却し、クリームを得る。【００８４】
ローション【００８５】
【表９】
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製造方法
水相Ａを75℃まで加熱し、攪拌溶解する。
水相Aを40℃まで冷却し、前処理Bを加え、攪拌する。
さらに水相Cを加えて中和する。
35℃まで冷却し、ローションを得る。【００８６】
美容液【００８７】
【表１０】
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製造方法
水相Ａを80℃まで加熱し、攪拌溶解する。
40℃まで冷却後、水相Bを加える。
美容液前処理Cを加える。
35℃まで冷却後し、美容液を得る。【００８８】
ミネラルクリーム【００８９】
【表１１】
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製造方法
水相Ａを80℃まで加熱し、攪拌溶解する。
前処理B、Cを加え、80℃まで加熱し、攪拌溶解する。
油相Eを90℃まで加熱し、攪拌溶解する。
水相Ａに油相Eを加え、80℃まで加熱し、乳化機で乳化する。
45℃まで冷却し、水相Fを加えて中和する。
35℃まで冷却し、クリームを得る。【００９０】
ミネラルローション【００９１】
【表１２】
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製造方法
水相Ａを80℃まで加熱し、攪拌溶解する。
40℃まで冷却し、前処理B、Cを加え、攪拌する。
水相Dを加えて中和する。
35℃まで冷却し、ミネラルローションを得る。【００９２】
シャンプー【００９３】
【表１３】
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製造方法
水相Ａを80℃まで加熱し、攪拌溶解する。
水相Bを75℃まで加熱し、攪拌溶解して加える。
水相Cを60℃まで加熱し、攪拌溶解して加える。
40℃まで冷却後、水相Dを加える。
35℃まで冷却し、シャンプーを得る。【００９４】
ボディミルク【００９５】
【表１４】
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製造方法
水相Ａを70℃まで加熱し、攪拌溶解する。
油相Bを80℃まで加熱し、攪拌溶解する。
水相Ａにクリーム前処理B、油相Bを加え、75℃まで加熱し乳化機で乳化する。
水相Cを加えて中和する。
40℃まで冷却し、水相Dを加える。
35℃まで冷却し、ボディミルクを得る。
【手続補正書】
【提出日】平成30年6月25日(2018.6.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
が使用される。ＭＰＣは、細胞膜と同じ構造並びに重合可能な構造を併せ持ち、生体への親和性が極めて高い画期的な生体適合性素材である。
［００４０］
カチオンモノマーの例としては、
ブレンマー（登録商標）ＱＡ：  （２−ヒドロキシ−３−メタクリロイルオキシプロピル）トリメチルアンモニウムクロライド；
ＭＯＥＴＡＣ：  ２−（メタクリロイルオキシ）エチルトリメチルアンモニウムクロライド；
ＤＭＡＥＡ（登録商標）−ＢＱ：  Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチルアクリレート塩化ベンジル４級塩
などが挙げられる。
［００４１］
本発明でベシクルをカチオン化するために使用されるカチオン化ポリマーの一態様は、ＭＰＣ−ブレンマーＱＡコポリマーである。これはＭＰＣとブレンマー（登録商標）ＱＡからなる合成ポリマーであり、成分名（表示名称）は「ポリクオタニウム−６４（Ｐｏｌｙｑｕａｔｅｒｎｉｕｍ−６４）」である。市販の典型的なポリクオタニウム−６４は、ＭＰＣ７０％、カチオンモノマー３０％からなる。
［００４２］
また、本発明では、実施例で製造された新規な組成のカチオン化ポリマーも好適に使用される。そのようなカチオン化ポリマーの一態様は、ＭＰＣおよびブレンマー（登録商標）ＱＡからなるカチオン化ポリマーである。別の態様は、ＭＰＣおよびＭＯＥＴＡＣからなるカチオン化ポリマーである。さらに別の態様は、ＭＰＣおよびＤＭＡＥＱ（登録商標）−ＢＱからなるカチオン化ポリマーである。カチオン化ポリマー中のＭＰＣとカチオンモノマーの比率、およびカチオン化ポリマーの分子量は様々に変化させることが可能である。本発明において、カチオン化ポリマー中のカチオンモノマーの割合は好ましくは５０％以上であり、より好ましくは５５％以上である。本発明者らは、カチオンモノマーの割合を８２％まで増量しても、カチオン化ベシクルが製造できることを確認している。また、カチオン化ポリマーの分子量は６０万以上であることが好ましい。本発明者らは、分子量２００万でもカチオン化ベシクルができることを確認している。
［００４３］
３．カチオン化ベシクルの化粧料における使用
【国際調査報告】
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