(57)【要約】  プラズマローゲン含有動物組織由来のプラズマローゲン量が著しく低下することなく、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造することができる方法を提供する。  （Ａ）プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮すること、及び（Ｂ）前記（Ａ）で得られた濃縮物を希釈した後、冷蔵静置することを含む、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造する方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮すること、及び
（Ｂ）前記（Ａ）で得られた濃縮物を希釈した後、冷蔵静置すること
を含む、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造する方法。
【請求項２】
前記（Ｂ）における冷蔵静置が、２〜１５℃で行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記（Ｂ）における冷蔵静置が、１〜７日間行われる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
プラズマローゲン含有動物組織が乾燥されたものである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記乾燥が、２５〜５９℃の風を前記動物組織に当てることによって行われる、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
動物組織が、水産無脊椎動物由来である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
水産無脊椎動物が、脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物が、Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物が、マボヤ又はアカボヤである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
動物組織由来のプラズマローゲンが、ドコサヘキサエン酸又はエイコサペンタエン酸の脂肪族炭化水素部分に相当する基を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
組成物が食品組成物又は医薬組成物である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
組成物が食品組成物である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
食品組成物が、機能性表示食品若しくは特定保健用食品、又はこれら以外の健康食品である、請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、プラズマローゲンを含有する組成物を製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
プラズマローゲンは、脳のシグナル伝達への関与や、脳内における抗酸化物質としての機能について、数多く報告されている。また、アルツハイマー病患者の脳は、健常者の脳に比べてプラズマローゲン量が３０％近く減少していることも報告されている。また最近では、プラズマローゲンを含有する組成物を用いることにより、中枢神経系炎症に関連する疾患や神経変性に関連する疾患などを改善又は予防できる可能性が示唆されている（特許文献１、２）。【０００３】
プラズマローゲン又はこれを含有する組成物の製造方法としては、プラズマローゲンを含有する動物組織（以下、「プラズマローゲン含有動物組織」ともいう。）から、プラズマローゲンをアルコール抽出する方法が知られている。例えば、特許文献１には、プラズマローゲン含有動物組織のエタノール抽出液を濃縮し、得られた濃縮物にアセトンを加えて遠心処理し、そして、得られた沈殿に溶媒を加えて希釈した後に、遠心することにより、プラズマローゲンを得る方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２０１１／０８３８２７号公報
【特許文献２】国際公開第２０１２／０３９４７２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明者は、プラズマローゲン又はこれを含有する組成物を工業的規模で製造することを見据え、プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮し、得られた濃縮物に溶媒を加えて希釈した後に、常温静置することにより、動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造することを試みたところ、常温静置してしまうと、得られるプラズマローゲン量が著しく低下することを見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
したがって、本発明者は、上記課題に鑑み、鋭意検討を重ねたところ、プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮し、得られた濃縮物を希釈した後に、常温静置せずに冷蔵静置すると、得られるプラズマローゲン量が著しく低下することなく、動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造することができることを見出し、本発明を完成するに至った。【０００７】
よって、本発明は、要旨、以下のものを提供する。
〔１〕  （Ａ）プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮すること、及び
（Ｂ）前記（Ａ）で得られた濃縮物を希釈した後、冷蔵静置すること
を含む、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造する方法。
〔２〕  前記（Ｂ）における冷蔵静置が、２〜１５℃で行われる、〔１〕に記載の方法。
〔３〕  前記（Ｂ）における冷蔵静置が、１〜７日間行われる、〔１〕又は〔２〕に記載の方法。
〔４〕  プラズマローゲン含有動物組織が乾燥されたものである、〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の方法。
〔５〕  前記乾燥が、２５〜５９℃の風を前記動物組織に当てることによって行われる、〔４〕に記載の方法。
〔６〕  動物組織が、水産無脊椎動物由来である、〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の方法。
〔７〕  水産無脊椎動物が、脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物である、〔６〕に記載の方法。
〔８〕  脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物が、Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物である、〔７〕に記載の方法。
〔９〕  Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物が、マボヤ又はアカボヤである、〔８〕に記載の方法。
〔１０〕  動物組織由来のプラズマローゲンが、ドコサヘキサエン酸又はエイコサペンタエン酸の脂肪族炭化水素部分に相当する基を含む、〔１〕〜〔９〕のいずれかに記載の方法。
〔１１〕  組成物が食品組成物又は医薬組成物である、〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の方法。
〔１２〕  組成物が食品組成物である、〔１１〕に記載の方法。
〔１３〕  食品組成物が、機能性表示食品若しくは特定保健用食品、又はこれら以外の健康食品である、〔１２〕に記載の方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、アルコール抽出を用いるプラズマローゲンの製造方法において、得られるプラズマローゲン量を著しく低下させることなく、動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の一実施態様では、
（Ａ）プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮すること、及び
（Ｂ）前記（Ａ）で得られた濃縮物を希釈した後、冷蔵静置すること
を含む、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造する方法
を提供する。
【００１０】
「プラズマローゲン」は、通常、グリセロール骨格の１位（ｓｎ−１位）にビニルエーテル結合を介した長鎖アルケニル基をもつグリセロリン脂質であり、例えば、以下の一般式で示すことができる。
【００１１】
【化１】
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【００１２】
Ｒ１は、脂肪族炭化水素基であって、通常炭素数１〜２０の脂肪族炭化水素基である。Ｒ１としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ドデシル基、テトラデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、イコサニル基などが挙げられる。
Ｒ２は、脂肪族炭化水素基であって、通常脂肪酸の脂肪族炭化水素部分に相当する基である。Ｒ２としては、これらに限定されるものではないが、例えば、オクタデカジエン酸、オクタデカトリエン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサテトラエン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などの脂肪酸の脂肪族炭化水素部分に相当する基が挙げられる。
Ｘは、極性基を示し、これらに限定されるものではないが、例えば、−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋Ｈ３、−ＣＨ２ＣＨ２Ｎ＋（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯＯＨなどが挙げられる。
【００１３】
本明細書中で用いられる「プラズマローゲン含有動物組織」とは、プラズマローゲンを含有する動物組織である限り、特段限定されるものではなく、動物の個体全体であってもよいし、動物の筋肉組織、脂肪組織、神経組織、内臓組織、皮膚組織、卵、外殻、血液など動物から単離された組織であってもよいし、個体全体と単離組織との組み合わせ又は複数の単離組織の混合物であってもよい。プラズマローゲン含有動物組織としては、例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ニワトリ、カモなどの陸産脊椎動物（但し、ヒトを除く）；クロマグロ、サケ、サンマ、カツオ、イワシ、タラなどの水産脊椎動物；マボヤ、アカボヤ、キヒトデ、イトマキヒトデ、キタムラサキウニ、バフンウニ、ナマコ、ミドリイソギンチャク、ヨロイイソギンチャク、ホタテ、ヒザラガイ、レイシガイ、チヂミボラ、クボガイ、サルアワビ、ムラサキイガイ、ムラサキインコガイ、マガキ、タコ、イカ、カニ、エビなどの水産無脊椎動物などに由来するものが挙げられ、これらは、個体全体を用いてもよいし、単離組織を用いてもよいし、１種を単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００１４】
上記（Ａ）における「プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液」とは、プラズマローゲン含有動物組織をアルコールを含有する溶媒で抽出した液である限り、特段限定されるものではない。
「アルコールを含有する溶媒」としては、アルコールのみからなる溶媒であってもよいし、アルコールとその他の溶媒との混合溶媒であってもよい。
抽出に用いられる「アルコール」としては、これらに限定されるものではないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、１−ブタノールなどの第一級アルコール；イソプロパノール、２−ブタノールなどの第二級アルコール；ｔｅｒｔ−ブタノールなどの第三級アルコールなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。なかでも、食品組成物又は医薬組成物に適していることから、アルコールとしては、エタノールが好ましい。
アルコールと組み合わせて用いられる「その他の溶媒」としては、これらに限定されるものではないが、例えば、水（例えば、常水、天然水、水道水、硬水、軟水、イオン交換水、精製水、滅菌水などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい）；酢酸、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、オレイン酸などの脂肪酸又はそのエステル；これら以外のアセトンなどの親水性有機溶媒；クロロホルム、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン、石油エーテルなどの疎水性有機溶媒；などが挙げられ、これらは単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。なかでも、食品組成物又は医薬組成物に適していることから、アルコールと組み合わせて用いるその他の溶媒としては、水が好ましい。
【００１５】
アルコールとその他の溶媒との混合溶媒を用いる場合、アルコールとその他の溶媒との混合比は、本発明の目的が達成できる限り特段限定されるものではない。例えば、アルコール：その他の溶媒の比は、容量％で、通常９９．９：０．１〜０．１：９９．９、好ましくは９９：１〜５０：５０、より好ましくは９９：１〜６０：４０、更により好ましくは９９：１〜９０：１０である。
【００１６】
抽出液を得る際に使用するアルコールを含有する溶媒の量は、本発明の目的が達成できる限り特段限定されるものではないが、例えば、プラズマローゲン含有動物組織１ｋｇに対して、約１〜１００Ｌであることが好ましく、約３〜５０Ｌであることがより好ましく、約５〜２０Ｌであることがより更に好ましく、約５〜１０Ｌであることがなお更により好ましい。
【００１７】
上記（Ａ）における「プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液」を得る方法は、特段限定されるものではないが、例えば、以下に記載するようにして得ることができる。
プラズマローゲン含有動物組織を、アルコールを含有する溶媒中、約１〜５０℃、好ましくは約２０〜５０℃、より好ましくは約４０〜５０℃で、約０．５〜２４時間、好ましくは約１〜１０時間、より好ましくは約２〜６時間、静置、混和又は撹拌などをすることより抽出処理をする。固液を、ストレーナーなどを用いて、固相１と液相１とに分離する。液相１を吸引濾過などの方法により濾過することで、固形物を取り除いて、液相２を得、これをアルコール抽出液として用いることができる。
或いは、抽出効率を高めるために、上記で分離した固相１に、アルコールを含有する溶媒を更に加え、約１〜５０℃、好ましくは約２０〜５０℃、より好ましくは約４０〜５０℃で、約０．５〜２４時間、好ましくは約１〜１０時間、より好ましくは約２〜６時間、浸漬した後に、固液を、ストレーナーなどを用いて、固相２と液相３とに分離する。液相３を吸引濾過などの方法により濾過することで、固形物を取り除いて、液相４を得る。液相２と液相４を合わせたものをアルコール抽出液として用いることができる。
或いは、固相からのアルコールを含有する溶媒を用いた再抽出を更に繰り返すことで得られる１つ以上の液相と、上記の液相２及び４とを合わせたものを、アルコール抽出液として用いることができる。
【００１８】
上記（Ａ）におけるアルコール抽出液の濃縮は、特段限定されるものではなく、開放系で行っても、密閉系で行ってもよいが、密閉系で行うことが好ましい。この濃縮は、例えば、減圧による濃縮、加熱による濃縮、凍結による濃縮、膜を用いた濃縮などによって行うことができ、なかでも、減圧による濃縮が好ましい。また、この濃縮は、酸化を防止するために、窒素、アルゴンなどの不活性気体のバブリング下で実施することが好ましい。減圧による濃縮を行う場合、通常約１０〜５５℃、好ましくは約２５〜５０℃、より好ましくは約４０〜５０℃の温度で、通常約１〜７２時間、好ましくは約６〜４８時間、より好ましくは約１２〜３６時間実施することが好ましい。減圧度としては、例えば、６０ｍｍＨｇ程度が挙げられる。
【００１９】
上記（Ｂ）において、上記（Ａ）で得られた濃縮物の希釈に用いる溶媒は、本発明の目的が達成できる限り特段限定されるものではないが、例えば、水（例えば、常水、天然水、水道水、硬水、軟水、イオン交換水、精製水、滅菌水などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい）；メタノール、エタノール、プロパノール、１−ブタノール、イソプロパノール、２−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール；酢酸、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、オレイン酸などの脂肪酸又はそのエステル；これら以外のアセトンなどの親水性有機溶媒；クロロホルム、ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン、石油エーテルなどの疎水性有機溶媒；などが挙げられ、これらは単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。なかでも、食品組成物又は医薬組成物に適していることから、希釈に用いる溶媒は、水又はアルコールが好ましく、水又はエタノールがより好ましく、水が更により好ましい。
【００２０】
希釈に水を用いる場合には、必要に応じて、ｐＨ調整剤を用いて水のｐＨを調整してもよい。
水のｐＨの調整に使用するｐＨ調整剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、酢酸、乳酸、酒石酸、シュウ酸、グリコール酸、リンゴ酸、クエン酸、コハク酸、フマル酸、リン酸、塩酸、シュウ酸、硫酸、硝酸、及びこれらの塩、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウムなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００２１】
希釈する際に用いる溶媒の量としては、本発明の目的が達成できる限り特段限定されるものではないが、例えば、上記（Ａ）で得られた濃縮物１ｋｇに対して、約１〜１００Ｌであることが好ましく、約１０〜８０Ｌであることがより好ましく、約２０〜６０Ｌであることがより更に好ましい。
【００２２】
上記（Ｂ）における冷蔵静置は、約２〜１５℃で行うことが好ましく、約２〜１０℃で行うことがより好ましく、約２〜５℃で行うことが更により好ましい。冷蔵静置の温度が２℃未満であると液相が凍ってしまうおそれがあり、１５℃超であると得られるプラズマローゲン量が著しく低下する場合がある。
【００２３】
上記（Ｂ）における冷蔵静置は、約１〜７日行うことが好ましく、約２〜６日間行うことがより好ましく、約３〜５日間行うことが更により好ましく、約３日間行うことがなお更により好ましい。
【００２４】
上記（Ａ）で得られた濃縮物を、上記（Ｂ）において希釈する前に、一旦、静置又は保管しておいてもよい。ここでの静置又は保管は、約２〜１５℃、好ましくは約２〜１０℃、より好ましくは約２〜５℃で、約１〜１４日間行うことが好ましく、開放系で行ってもよいし、密閉系で行ってもよいが、密閉系で行うことが好ましい。また、ここでの静置又は保存は、得られた濃縮物の酸化を防止するために、窒素、アルゴンなどの不活性気体のバブリング下で行うことが好ましい。
【００２５】
また、上記（Ａ）で得られた濃縮物を、上記（Ｂ）で希釈する前に、必要に応じて、溶媒抽出などの方法により精製し、減圧濾過などの方法により更に濃縮したものを、上記（Ｂ）における「濃縮物」として用いてもよい。
【００２６】
本発明の好ましい実施態様では、プラズマローゲン含有動物組織は、乾燥されたものである。ここでの乾燥は、特段限定されるものではないが、例えば、風を当てる乾燥、除湿による乾燥、真空乾燥、凍結乾燥などの公知の方法を用いることができる。なかでも、風を当てる乾燥が好ましい。
【００２７】
上記風を当てる乾燥としては、通常約２５〜５９℃、好ましくは約３５〜５５℃、より好ましくは約４０〜５０℃の風を、プラズマローゲン含有動物組織に当てる乾燥が好ましい。上記風を当てる乾燥は、開放系で行っても、閉鎖系で行ってもよく、開放系の場合には、周囲温度は、通常約２０〜５５℃、好ましくは約３０〜４５℃、より好ましくは約３５〜４０℃であり、閉鎖系の場合には、周囲温度は、通常、プラズマローゲン含有動物組織に当てる風の温度とおおよそ同じであることが好ましい。
【００２８】
上記風を当てる乾燥は、通常約０．５〜９６時間、好ましくは約１〜７２時間、より好ましくは約６〜４８時間、更により好ましくは約１２〜３６時間行うことができる。
【００２９】
乾燥されたプラズマローゲン含有動物組織の水分含有量は、プラズマローゲン含有動物組織の全量に対して、通常約１〜４０質量％、好ましくは約５〜３０質量％、より好ましくは約１０〜２５質量％であってもよい。
【００３０】
プラズマローゲン含有動物組織は、上記乾燥の効率やアルコール抽出の効率を高めるために、２つ以上の部分に分割しておいてもよい。
【００３１】
本発明の好ましい実施態様では、動物組織は、水産無脊椎動物由来のものであり、好ましくは、脊索動物門尾索動物亜門の水産無脊椎動物である。
脊索動物門尾索動物亜門の水産無脊椎動物としては、例えば、脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱、脊索動物門尾索動物亜門タリア綱、脊索動物門尾索動物亜門オタマボヤ綱などの水産無脊椎動物が挙げられる。
【００３２】
本発明の更に好ましい実施態様では、上記水産無脊椎動物は、脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物である。
【００３３】
本発明のなお更に好ましい実施態様では、上記脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物は、Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物である。好ましいＨａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物は、マボヤ又はアカボヤである。
【００３４】
本発明により得られる動物組織由来のプラズマローゲンは、記憶力の向上などに効果があるとされているドコサヘキサエン酸又はエイコサペンタエン酸の脂肪族炭化水素に相当する基を含むことが好ましい。マボヤ又はアカボヤ由来のプラズマローゲンは、ドコサヘキサエン酸やエイコサペンタエン酸の脂肪族炭化水素部分に相当する基を含むため、特に有用である。
【００３５】
上記（Ｂ）の処理の後に、例えば約２〜１５℃でデカント処理をして不要な画分を除去することで、プラズマローゲン含有動物組織由来のプラズマローゲンを含有する画分のみを得ることができる。プラズマローゲンを含有する画分は、希釈する際に用いる溶媒の種類などに応じて、上層、下層又はそれ以外の中間層となる場合がある。一般的な溶媒では、プラズマローゲンを含有する画分は、下層（好ましくは、下層にある液相）となる。
【００３６】
上記（Ｂ）の処理の後に得られる組成物を、動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物としてそのまま用いてもよいし、不要な画分を除去したものを動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物として用いてもよいし、適宜、溶媒に溶解、分散又は懸濁させたものを動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物として用いてもよい。或いは、溶媒を加えたものを、更に、濃縮、精製などの処理をすることにより得られるものを、動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物として用いてもよい。ここでの濃縮は、特段限定されるものではなく、開放系で行っても、密閉系で行ってもよいが、密閉系で行うことが好ましい。この濃縮は、例えば、減圧による濃縮、加熱による濃縮、凍結による濃縮、膜を用いた濃縮などによって行うことができ、なかでも、減圧による濃縮が好ましい。また、この濃縮は、組成物の酸化を防止するために、窒素、アルゴンなどの不活性気体のバブリング下で実施することが好ましい。減圧による濃縮を行う場合、通常約１０〜５５℃、好ましくは約２５〜５０℃、より好ましくは約４０〜５０℃の温度で、通常約１〜７２時間、好ましくは約６〜４８時間、より好ましくは約１２〜３６時間実施することができる。減圧度としては、例えば、６０ｍｍＨｇ程度が挙げられる。ここでの精製としては、これらに限定されるものではないが、例えば、溶媒抽出；薄層クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーなどが挙げられる。
【００３７】
上記（Ａ）若しくは（Ｂ）の処理又はこれら以外の処理において或いは得られる組成物中に、必要に応じて、所望の添加剤を加えてもよく、添加剤を加える目的は特段限定されるものではない。例えば、プラズマローゲン含有動物組織由来のプラズマローゲンの酸化防止目的での酸化防止剤の添加、動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物の防腐目的での防腐剤の添加、動物組織由来のプラズマローゲンの均一化を目的とした分散剤の添加などが挙げられる。使用されうる添加剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、アスコルビン酸、トコフェロール、エリソルビン酸、亜硫酸ナトリウム、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、カテキンなどの酸化防止剤；ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸カルシウム、安息香酸、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸、プロピオン酸ナトリウム、プロピオン酸カルシウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、ナタマイシン、ピマリシン、ポリリジン、ナイシン、パラオキシ安息香酸イソプロピル、パラハイドロキシ安息香酸イソプロピル、イソプロピルパラベンなどの保存剤；ポリソルベート類、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、レシチンなどの分散剤；などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００３８】
本発明により得られるプラズマローゲンを含有する組成物は、食品組成物又は医薬組成物であることが好ましく、食品組成物であることが特に好ましい。食品組成物としては、機能性表示食品若しくは特定保健用食品、又はこれら以外の健康食品であることが好ましい。
【００３９】
また、プラズマローゲンは、中枢神経系炎症に関連する疾患や神経変性に関連する疾患などを改善又は予防できることが示唆されていることから、本発明により得られるプラズマローゲンを含有する組成物は、中枢神経系炎症に関連する疾患や神経変性に関連する疾患などを改善若しくは予防するための食品組成物又は医薬組成物とすることもできる。
【００４０】
中枢神経系炎症に関連する疾患としては、これらに限定されるものではないが、例えば、脳炎、髄膜炎などが挙げられる。神経変性に関連する疾患としては、これらに限定されるものではないが、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、認知症、統合失調症、うつ病などが挙げられる。
【００４１】
本発明により得られるプラズマローゲンを含有する組成物は、公知又は周知の方法により、例えば、錠剤、被覆錠剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、ハードカプセル剤、ソフトカプセル剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、ゼリー剤、チュアブル剤、ソフト錠剤などに製剤化することができる。これらは、経口剤であってもよいし、非経口剤であってもよい。製剤は、プラズマローゲンだけではなく、その目的に応じて、有益な他の成分（例えば、健康上又は治療上有益な他の成分）を含有するものであってもよい。
【００４２】
上記製剤化に際し、本発明により得られる組成物に、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、着色剤、界面活性剤、可溶化剤、溶解補助剤、保存剤、ｐＨ調整剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、酸化防止剤などを加えてもよい。
【００４３】
賦形剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、Ｄ−マンニトール、乳糖水和物、結晶セルロース、ブドウ糖、デンプン、ショ糖、白糖などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００４４】
結合剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００４５】
崩壊剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、カルボキシメチルスターチナトリウムなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００４６】
滑沢剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、軽質無水ケイ酸、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、タルクなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００４７】
甘味剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ショ糖、フルクトース、キシリトール、ソルビトール、アスパルテーム、アセスルファカリウム、スクラロースなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００４８】
着色剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、黄色三二酸化鉄、黒色酸化鉄、食用黄色４号、食用赤色３号、タール色素、カラメル、カカオ色素、酸化チタン、リボフラビン類などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００４９】
界面活性剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ポリソルベート８０、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５０】
可溶化剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、セスキオレイン酸ソルビタン、ラウリン酸ソルビタン、パルミチン酸ソルビタン、オレイン酸グリセリル、ミリスチン酸グリセリル、ポリオキシエチレンラウリルエーテル、ポリオキシエチレンノニルフェニルエーテル、グリセリンなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５１】
溶解補助剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ポリエチレングリコール；プロピレングリコール；シクロデキストリン；マンニトールなどの糖アルコール；安息香酸ベンジル；トリスアミノメタン；コレステロール；トリエタノールアミン；炭酸ナトリウム；クエン酸ナトリウム；メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノールなどのアルコール；酢酸、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、ミリスチン酸、ステアリン酸、オレイン酸などの単一の脂肪酸又はそのエステル；ゴマ油、ピーナッツ油、ヤシ油、パーム油、大豆油、オリーブ油、ココナッツ油、コーン油、綿実油、ヒマシ油、ナタネ油、ヒマワリ油などの植物性油；などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５２】
保存剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸カルシウム、安息香酸、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸、プロピオン酸ナトリウム、プロピオン酸カルシウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、ナタマイシン、ピマリシン、ポリリジン、ナイシン、パラオキシ安息香酸イソプロピル、パラハイドロキシ安息香酸イソプロピル、イソプロピルパラベンなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５３】
ｐＨ調整剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、酢酸、乳酸、酒石酸、シュウ酸、グリコール酸、リンゴ酸、クエン酸、コハク酸、フマル酸、リン酸、塩酸、硫酸、硝酸、及びこれらの塩、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウムなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５４】
懸濁化剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５５】
等張化剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、塩化ナトリウム、グリセリン、マンニトールなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５６】
緩衝剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、及びこれらを含有する緩衝液などが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５７】
無痛化剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ベンジルアルコールなどが挙げられる。
【００５８】
酸化防止剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、アスコルビン酸、トコフェロール、エリソルビン酸、亜硫酸ナトリウム、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、カテキンなどが挙げられ、これらは、単独で用いても、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００５９】
上記製剤中のプラズマローゲンの含有量は、所望の効果が発揮される限り特段限定されるものではなく、一日当たりに摂取することが好ましいプラズマローゲンの量に応じて適宜設定することができ、該製剤の全量に対して、例えば、０．０５〜９９．９質量％とすることが好ましく、０．１〜８０質量％とすることがより好ましく、０．１５〜４０質量％とすることがより更に好ましい。
【実施例】
【００６０】
以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、これら実施例は、本発明の範囲を何ら限定するものではない。【００６１】
［実施例１、比較例１〜３］
殻つきのマボヤを２等分し、冷風乾燥機内で、約４５℃の風を約２４時間当てて乾燥させた（冷風乾燥機内の温度（周囲温度）は、約４５℃になる）。乾燥させたものにエタノールと水の混液（９５容量％：５容量％）を加え、約４０℃で約２時間、撹拌抽出した。固液をステンレスストレーナー（２００メッシュ）により、固相１と液相１とに分離した。液相１を吸引濾過して、固形物を取り除いて、液相２を得た。固相１にはエタノールと水との混液（９５容量％：５容量％）を加え、室温で約１０時間、浸漬した後に、固液をステンレスストレーナー（２００メッシュ）により、固相２と液相３とに分離した。液相３を吸引濾過して、固形物を取り除いて、液相４を得た。液相２と液相４を合わせ、約４５℃で約２４時間、減圧濃縮した。濃縮したものを、約５℃で約８日間、窒素バブリング下で、密閉状態にて保管した。その後、水を加えて希釈し、以下に示す温度で、約３日間、静置した。その後、約４℃でデカント処理をすることで上清を除去して液相５を回収し、液相５中のプラズマローゲン含量を、高速液体クロマトグラフィーにて測定した。【００６２】
【表１】
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【００６３】
実施例１、比較例１〜３の結果から、静置温度が２〜５℃である場合、それ以外の温度の場合と比較して、液相中のプラズマローゲン含有動物組織由来のプラズマローゲン含量が高いことが分かる。
したがって、実施例１の製造方法は、プラズマローゲン含有動物組織由来のプラズマローゲン量が著しく低下することなく、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造することができるものである。【００６４】
［実施例２、比較例４〜６］
殻つきのマボヤを２等分し、冷風乾燥機内で、以下の表に示す温度の風を約２４時間当てて乾燥させた（冷風乾燥機内の温度（周囲温度）は、各実施例又は比較例における風の温度とほぼ同じになる）。乾燥させたものにエタノールと水の混液（９５容量％：５容量％）を加え、約４０℃で約２時間、撹拌抽出した。固液をステンレスストレーナー（２００メッシュ）により、固相１と液相１とに分離した。液相１を吸引濾過して、固形物を取り除いて、液相２を得た。固相１にはエタノールと水の混液（９５容量％：５容量％）を加え、室温で約１０時間、浸漬した後に、固液をステンレスストレーナー（２００メッシュ）により、固相２と液相３とに分離した。液相３を吸引濾過して、固形物を取り除いて、液相４を得た。液相２と液相４を合わせた後、合わせた液相中のプラズマローゲン含量を、高速液体クロマトグラフィーにて測定した。【００６５】
【表２】
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【００６６】
実施例２、比較例４〜６の結果から、４０〜５０℃の風を動物組織に当てて乾燥させた場合、それ以外の条件の場合と比較して、アルコール抽出液中のプラズマローゲン含有動物組織由来のプラズマローゲン含量が高いことが分かる。
したがって、実施例２の製造方法は、該動物組織由来のプラズマローゲンをより高濃度に含有する組成物を製造することができるものである。【００６７】
以上の実施例の結果で示されたように、本発明によれば、プラズマローゲン含有動物組織由来のプラズマローゲン量が著しく低下することなく、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造することができる。
【手続補正書】
【提出日】令和1年7月29日(2019.7.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮すること、及び
（Ｂ）前記（Ａ）で得られた濃縮物を希釈した後、１〜７日間冷蔵静置すること
を含む、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造する方法。
【請求項２】
前記（Ｂ）における冷蔵静置が、２〜１５℃で行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
プラズマローゲン含有動物組織が乾燥されたものである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記乾燥が、２５〜５９℃の風を前記動物組織に当てることによって行われる、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
動物組織が、水産無脊椎動物由来である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
水産無脊椎動物が、脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物が、Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物が、マボヤ又はアカボヤである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
動物組織由来のプラズマローゲンが、ドコサヘキサエン酸又はエイコサペンタエン酸の脂肪族炭化水素部分に相当する基を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
組成物が食品組成物又は医薬組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
組成物が食品組成物である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
食品組成物が、機能性表示食品若しくは特定保健用食品、又はこれら以外の健康食品である、請求項１１に記載の方法。
【手続補正書】
【提出日】令和1年9月11日(2019.9.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）プラズマローゲン含有動物組織のアルコール抽出液を濃縮すること、及び
（Ｂ）前記（Ａ）で得られた濃縮物を、水又は水を含む溶媒で希釈した後、１〜７日間冷蔵静置すること
を含む、該動物組織由来のプラズマローゲンを含有する組成物を製造する方法。
【請求項２】
前記（Ｂ）における冷蔵静置が、２〜１５℃で行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
プラズマローゲン含有動物組織が乾燥されたものである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記乾燥が、２５〜５９℃の風を前記動物組織に当てることによって行われる、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
動物組織が、水産無脊椎動物由来である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
水産無脊椎動物が、脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
脊索動物門尾索動物亜門ホヤ綱の水産無脊椎動物が、Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
Ｈａｌｏｃｙｎｔｈｉａ属の水産無脊椎動物が、マボヤ又はアカボヤである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
動物組織由来のプラズマローゲンが、ドコサヘキサエン酸又はエイコサペンタエン酸の脂肪族炭化水素部分に相当する基を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
組成物が食品組成物又は医薬組成物である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
組成物が食品組成物である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
食品組成物が、機能性表示食品若しくは特定保健用食品、又はこれら以外の健康食品である、請求項１１に記載の方法。
【国際調査報告】
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