(57)【要約】  効果的な貝類の浄化方法または浄化システムを提供する。  貝類の浄化方法は、紫外線を照射して清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備すること、前記海水を貝類に接触させた状態で前記貯留部に維持すること、前記海水を前記貯留部から導出することを含み、前記気泡は、直径１００ｎｍ未満の超微細気泡を含み、前記超微細気泡が貝類に蓄積されたウイルス等を選択的吸着脱離することを特徴とする。貝類の浄化システムは、海水を紫外線により清浄化する清浄化部と、海水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を発生させる超微細気泡生成部と、海水を紫外線により清浄化する清浄化部と前記超微細気泡生成部に接続され、前記海水を貯留する貯留部とを備え、前記貯留部は貝類を保持することを特徴とする。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備すること、
前記海水を貝類に接触させることを含み、
前記気泡は、直径１００ｎｍ未満の超微細気泡を有し、
前記超微細気泡が貝類に蓄積されたウイルス等を選択的吸着脱離することを特徴とする、貝類の浄化方法。
【請求項２】
前記海水を貝類に接触させることは、少なくとも１８時間の接触を含む、請求項１に記載の貝類の浄化方法。
【請求項３】
さらに、前記貝類に接触した前記海水を清浄化した後に再び前記貝類に接触させることを含む、請求項１または２に記載の貝類の浄化方法。
【請求項４】
さらに、前記貝類に接触した前記海水をかけ流しで海域へ放出することを含む、請求項１または２のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項５】
前記海水を海域へ放出することは、放出前に前記海水を清浄化することを含む、請求項４に記載の貝類の浄化方法。
【請求項６】
さらに、前記超微細気泡は、前記海水に超音波が照射されて気泡が圧壊されることにより発生される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項７】
清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備することは、紫外線を前記海水に照射することにより前記海水を清浄化することを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項８】
清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備することは、殺菌料を前記海水に投入することにより前記海水を清浄化することを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項９】
海水を紫外線により清浄化する清浄化部と、
海水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を発生させる超微細気泡生成部と、
前記清浄化部と前記超微細気泡生成部とに接続され、前記海水を貯留する貯留部とを備え、
前記貯留部は貝類を保持することを特徴とする、貝類の浄化システム。
【請求項１０】
海水を殺菌料により清浄化する清浄化部と、
海水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を発生させる超微細気泡生成部と、
前記清浄化部と前記超微細気泡生成部とに接続され、前記海水を貯留する貯留部とを備え、
前記貯留部は貝類を保持することを特徴とする、貝類の浄化システム。
【請求項１１】
さらに、前記清浄化部と前記超微細気泡生成部と前記貯留部とは、循環経路に組み込まれ、前記海水が循環する、請求項９または１０に記載の貝類の浄化システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、貝類の浄化方法および貝類の浄化システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
魚介類には食用に養殖されるものがある。例えば、食用の牡蠣の養殖では、牡蠣が、海中で育成された後に収穫され、市場に出荷される。この養殖工程では、市場に出荷される前に、洗浄機によって泥や殻に付着した付着物が取り除かれた後に、清浄な海水中に一定時間保持され、浄化される。【０００３】
ところで、牡蠣に代表される貝類では、ウイルスによる食中毒が問題となることがある。例えば、ノロウイルスは、育成の過程で牡蠣の中腸腺に蓄積され、人の体内に侵入して食中毒を引き起こす。この食中毒の問題を解消するには、ウイルスを不活化させることが有効な対策となるため、貝類の食中毒を防止する目的で、ウイルスの不活化について非常に多くの研究がされている。【０００４】
そのような研究の１つとして、例えば、非特許文献１には、牡蠣等の貝類を生食することで起こる食中毒の原因となるノロウイルスに対して、紫外線によって不活化する方法が記載されている。この方法によれば、ウイルスを中腸腺に取り込んだ牡蠣を水槽に沈め、水槽に紫外線を照射した水を還流させることでウイルスの数が減少し、不活化することが確認されている。【０００５】
また、他の研究として、マイクロバブルやウルトラファインバブルと呼ばれる微細な気泡の殺菌作用を利用することが検討されている。例えば、非特許文献２には、オゾンのマイクロバブルの殺菌効果によって、海水中のノロウイルスを不活化するできることが記載されている。この方法は、オゾンバブルをウイルスに直接作用させ、オゾンとマイクロバブルと両方の殺菌作用によりウイルスを不活化しようとするものである。【０００６】
さらに、特許文献１には、ウルトラファインバブルを利用して牡蠣を養殖する方法が記載されている。この方法では、オゾンガスをウルトラファインバブル化した海水により牡蠣を洗浄することで、オゾンとウルトラファインバブルと両方の不活化効果によりノロウイルスを死滅させ不活化させることも考案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１２−９６２１６号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】福田美和他、「養殖カキのウイルス浄化試験」、三重県科学技術振興センター保健環境研究部、国立公衆衛生院、東京都立衛生研究所、鈴鹿国際大学短気大学部、平成１５年２月２０日、感染症学雑誌、第７７巻、第２号、ｐ．９５−１０２
【非特許文献２】高橋正好、「ノロウイルスの不活化に成功」、ＡＩＳＴ  Ｔｏｄａｙ、独立行政法人産業技術総合研究所、２００４年３月、第４巻、第３号、ｐ．１８−２０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかし、非特許文献１に記載の浄化方法は、牡蠣を沈めた海水を環流させ、環流する海水に対して環流の途中で紫外線によりウイルスを死滅させるもので、単純に海水を環流させるだけでは貝類の中腸腺内に入り込んだウイルスを全て海水に排出させることはできず、また、紫外線は貝類の体内まで届かないため、貝類の体内に蓄積されたウイルスを不活化させることはできないという根本的な問題があった。【００１０】
また、非特許文献２および特許文献１に記載の殺菌方法は、オゾンガスのバブルでウイルスを不活化しようとするものであるが、生きている貝類にオゾンを適用すると、貝類が海水の吸引を拒絶するため牡蠣への海水取込量が減少し浄化が進まなくなったり、濃度が高くなるとウイルスとともに貝類を死滅させかねないという問題があった。なお、この現象はオゾン特有のものではなく、海水や淡水に殺菌料を添加して浄化させる生体適用の水浄化法に共通する課題である。【００１１】
さらに、マイクロバブル、ウルトラファインバブルの殺菌作用だけでは、ウイルスの不活化に十分でないとの研究報告もされている。【００１２】
本発明はこのような問題に鑑みてなされたものであり、超微細気泡を用いた効果的な貝類の浄化方法または浄化システムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
（１）本発明に係る貝類の浄化方法は、清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備すること、前記海水を貝類に接触させることを含み、前記気泡は、直径１００ｎｍ未満の超微細気泡を有し、前記超微細気泡が貝類に蓄積されたウイルス等を選択的吸着脱離することを特徴とする。【００１４】
この貝類の浄化方法によれば、清浄化された海水に貝類を沈めて作用させることにより、海水に含有された直径１００ｎｍ未満の気泡（以下、「超微細気泡」という。）が貝類の体内、特に、中腸腺内の盲嚢に侵入し、貝類の体内のウイルス等を選択的吸着脱離して、体外に排出させること、すなわち浄化することができる。【００１５】
さらに、超微細気泡は、酸素ガスであるため、これを含有する海水を取り込んだ貝類を活性化させ、貝類が海水を取り込む量が増加する。これにより、貝類が吸入および排出する海水の循環が早まり、貝類を効率的に浄化することができる。【００１６】
（２）本発明に係る貝類の浄化方法において、前記海水を貝類に接触させることは、少なくとも１８時間の維持を含むとよい。そのような貝類の浄化方法によれば、従来からの浄化方法にのっとって、かつ選択的吸着脱離により貝類の体内に存在するウイルス等を十分に体外に排出させることができる。【００１７】
（３）本発明に係る貝類の浄化方法は、さらに、前記貝類に接触した前記海水を清浄化した後に再び前記貝類に接触させることを含んでいてもよい。そのような貝類の浄化方法によれば、海水を循環させることにより、選択的吸着脱離により貝類から排出されたウイルス等を含む海水を清浄化して再び貝類に作用させることができる。これにより、一度排出されたウイルス等を再び貝類が吸収することを防止できる。【００１８】
（４）本発明に係る貝類の浄化方法は、さらに、前記貝類に接触した前記海水をかけ流しで海域へ放出することを含んでいてもよい。そのような貝類の浄化方法によれば、清浄化された海水をかけ流しで貝類に作用させることにより、選択的吸着脱離により貝類から排出されたウイルス等を再び貝類が吸収することを防止できる。【００１９】
（５）本発明に係る貝類の浄化方法において、前記海水を海域へ排出することは、排出前に前記海水を清浄化することを含んでいてもよい。そのような貝類の浄化方法によれば、海域へ排出される海水は清浄化された状態となることより、環境への負荷が抑制される。【００２０】
（６）さらに、前記気泡は、前記海水に超音波を照射されて圧壊されることにより発生されてもよい。この貝類の浄化方法によれば、選択的吸着脱離され、貝類の体内から排出されたウイルスを含む海水が超音波を照射されることにより、選択的吸着脱離目的の超微細気泡を発生されるとともに、超音波の不活化効果によりウイルスが不活化される。したがって、浄化された貝類が再度ウイルス等に汚染されるのを抑止することができる。【００２１】
（７）清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備することは、紫外線を前記海水に照射することにより前記海水を清浄化することを含んでいてもよい。この貝類の浄化方法によれば、貝類の体内に侵入する海水が事前に紫外線により確実に清浄化され、貝類をウイルス等により汚染してしまうことを防止できる。【００２２】
（８）清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備することは、殺菌料を前記海水に投入することにより前記海水を清浄化することを含んでいてもよい。この貝類の浄化方法によれば、貝類の体内に侵入する海水が事前に殺菌料により確実に清浄化され、貝類をウイルス等により汚染してしまうことを防止できる。【００２３】
（９）本発明に係る貝類の浄化システムは、海水を紫外線により清浄化する清浄化部と、海水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を発生させる超微細気泡生成部と、前記清浄化部と前記超微細気泡生成部とに接続され、前記海水を貯留する貯留部とを備え、前記貯留部は貝類を保持することを特徴とする。【００２４】
この貝類の浄化システムによれば、清浄化部と超微細気泡生成部とにより、紫外線により清浄化され、直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を含む海水が生成され、当該海水に貝類を沈めることにより、海水に含有された超微細気泡が貝類の体内、特に、中腸腺内の盲嚢に超微細気泡が侵入し、貝類の体内のウイルス等を選択的吸着脱離して、体外に排出させること、すなわち浄化することができる。【００２５】
さらに、超微細気泡は、酸素ガスであるため、これを含有する海水を取り込んだ貝類を活性化させ、貝類が海水を取り込む量が増加する。これにより、貝類が吸入および排出する海水の循環が早まり、貝類を効率的に浄化することができる。【００２６】
（１０）本発明に係る貝類の浄化システムは、海水を殺菌料により清浄化する清浄化部と、海水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を発生させる超微細気泡生成部と、前記清浄化部と前記超微細気泡生成部とに接続され、前記海水を貯留する貯留部とを備え、前記貯留部は貝類を保持することを特徴とする。【００２７】
この貝類の浄化システムによれば、清浄化部と超微細気泡生成部とにより、殺菌料により清浄化され、直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を含む海水が生成され、当該海水に貝類を沈めることにより、海水に含有された超微細気泡が貝類の体内、特に、中腸腺内の盲嚢に超微細気泡が侵入し、貝類の体内のウイルス等を選択的吸着脱離して、体外に排出させること、すなわち浄化することができる。【００２８】
さらに、超微細気泡は、酸素ガスであるため、これを含有する海水を取り込んだ貝類を活性化させ、貝類が海水を取り込む量が増加する。これにより、貝類が吸入および排出する海水の循環が早まり、貝類を効率的に浄化することができる。【００２９】
（１１）本発明に係る貝類の浄化システムにおいて、さらに、前記清浄化部と前記超微細気泡生成部と前記貯留部とは、循環経路に組み込まれ、前記海水が循環するようにしてもよい。そのような貝類の浄化システムによれば、清浄化された海水を循環させて貝類に作用させることにより、貝類から排出されたウイルス等を含む海水を清浄化して再び貝類に作用させることができる。これにより、一度浄化されたウイルス等を再び貝類が吸収することを防止できる。【００３０】
（１２）水を清浄化する清浄化部と、水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を発生させる超微細気泡生成部と、前記清浄化部と前記超微細気泡生成部とに接続され、前記水を貯留する貯留部とを備え、前記貯留部は魚介類を保持することを特徴とする。【００３１】
この魚介類の浄化システムによれば、清浄化部と超微細気泡生成部とにより、直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を含み清浄化された海水が生成され、当該海水に魚介類を保持させることにより、海水に含有された超微細気泡が魚介類の体内に超微細気泡が侵入し、魚介類の体内のウイルス等を選択的吸着脱離して、体外に排出させること、すなわち浄化することができる。【００３２】
さらに、超微細気泡は、酸素ガスであるため、これを含有する海水を取り込んだ魚介類を活性化させ、魚介類が海水を取り込む量が増加する。これにより、魚介類が吸入および排出する海水の循環が早まり、魚介類を効率的に浄化することができる。
【発明の効果】
【００３３】
本発明によれば、超微細気泡を利用して貝類を効果的に浄化する浄化方法または浄化システムを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】本発明の一実施形態に係る貝類の浄化システムの機能ブロックを示す図である。
【図２】図１に示す貯留部の概略図である。
【図３】牡蠣と気泡の関係を説明する図であり、（Ａ）は牡蠣の殻を取った状態、（Ｂ）は中腸腺における超微細気泡との関係の模式図、（Ｃ）は中腸腺における微細気泡との関係の模式図を示す。
【図４】牡蠣の中腸腺内の盲嚢の模式図を示す。
【図５】選択的吸着脱離を説明するための超微細気泡とウイルス等の関係を示す模式図を示す。
【図６】超微細気泡をＰＬＬ−ｍｉｃａ基板を用いて観察した結果を示す図であり、（Ａ）は観察写真、（Ｂ）は（Ａ）の白線上の高さのグラフである。
【図７】超微細気泡をＰＬＬ−ｍｉｃａ基板を用いて観察した結果を示す図であり、（Ａ）は観察写真、（Ｂ）は（Ａ）の白線上の高さのグラフである。
【図８】超微細気泡をＡＰＴＥＳ−ｍｉｃａ基板を用いて観察した結果を示す図であり、（Ａ）は観察写真、（Ｂ）は（Ａ）の白線上の高さのグラフである。
【図９】超微細気泡をＡＰＴＥＳ−ｍｉｃａ基板を用いて観察した結果を示す図であり、（Ａ）は観察写真、（Ｂ）は（Ａ）の白線上の高さのグラフである。
【図１０】海水の清浄化試験の結果を示す図表であり、(Ａ)は、各サンプルの感染価を示し、（Ｂ）は、（Ａ）に示す結果に基づいた各サンプルの感染価対数減少値を示す。
【図１１】図１０の結果に基づいて各処理の感染価の減少を示すグラフである。
【図１２】牡蠣のウイルス取込試験について示す図表であり、（Ａ）は、牡蠣に作用させる海水の感染価の変化を示し、（Ｂ）は、ウイルスを取り込んだ牡蠣の感染価を示す。
【図１３】図１２に示す結果に基づいてウイルスを取り込んだ牡蠣の感染価を示すグラフである。
【図１４】マガキの浄化試験について示す図表である。
【図１５】図１４に示す結果に基づいてマガキの浄化結果を示すグラフである。
【図１６】イワガキの浄化試験について示す図表である。
【図１７】図１６に示す結果に基づいてイワガキの浄化結果を示すグラフである。
【図１８】牡蠣を保持した貯留部において、ＵＦＢ処理しない場合とＵＦＢ処理をした場合との貯留部の水面を比較する写真であり、（Ａ）はＵＦＢ処理しない場合、（Ｂ）はＵＦＢ処理をした場合を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
［貝類の浄化システムの実施形態］
本発明の一実施形態に係る貝類の浄化システムについて図面を参照しながら説明する。浄化システム１０は、貝類を浄化するものである。本実施形態では、貝類として牡蠣を適用した場合について説明する。
【００３６】
図１は、貝類の浄化システム１０の機能ブロック図を示す。浄化システム１０は、海水を貯留し、また貯留した海水に牡蠣を沈めるための貯留部１２と、海水を清浄化する第１の清浄化部１３と、海水に酸素ガスの微細気泡を発生する微細気泡生成部１４と、微細気泡を圧壊させる超音波圧壊部１６と、第１のポンプ１８とを備える。
【００３７】
貯留部１２と第１の清浄化部１３との間には、第１のポンプ１８が配置され、貯留部１２から第１の清浄化部１３に海水を供給する。貯留部１２と、第１の清浄化部１３と、微細気泡生成部１４と、超音波圧壊部１６とは、接続されて、海水を循環させる循環経路１０２を形成している。
【００３８】
また、浄化システム１０は、海域Ｓから海水を汲み上げる第２のポンプ２８と、第２のポンプ２８と貯留部１２とに介在し、貯留部１２に汲み上げられる海水を清浄化する第２の清浄化部２３とを備える。貯留部１２と第２の清浄化部２３との間にはバルブ２２が設けられ、海域Ｓから貯留部１２に導入される海水の導入量を調整することができる。
【００３９】
また、浄化システム１０は、貯留部１２から海域Ｓに排出される海水を紫外線により清浄化する第３の清浄化部３３を備える。貯留部１２と第３の清浄化部３３との間には、バルブ３２が設けられ、貯留部１２から海域Ｓへ排出される海水の導出量を調整することができる。
【００４０】
貯留部１２、第１の清浄化部１３、微細気泡生成部１４、超音波圧壊部１６、第１のポンプ１８、第２の清浄化部２３、第２のポンプ２８、第３の清浄化部３３およびバルブ２２、３２は、浄化システム１０を集中管理する制御部１１により管理される。図１では、制御部１１と、制御部１１により管理される各部との接続を破線で示している。制御部１１は、外部の制御装置等と連携して、浄化システム１０を制御してもよい。また、浄化システム１０の各部は、他の制御装置等により制御されてもよい。
【００４１】
第１の清浄化部１３は、第１のポンプ１８と微細気泡生成部１４との間に介在し、ポンプ１８から微細気泡生成部１４に海水を通過させ、通過する海水に紫外線を照射してウイルス等を不活化する。第１の清浄化部１３は、従来よく知られるように、液体が通過する配管内に沿って紫外線ランプを配置し、紫外線ランプから照射される紫外線によってウイルスを不活化し、細菌等を殺菌し、海水を清浄化する紫外線照射装置である。
【００４２】
すなわち、第１の清浄化部１３は、通過する海水を清浄化できる。第１の清浄化部１３は、通過する海水の流量等に応じた不活化性能を有するものを適宜選択できる。また、第１の清浄化部１３から照射される紫外線は、波長２００ｎｍ〜３５０ｎｍの深紫外線を含む。
【００４３】
微細気泡生成部１４は、第１の清浄化部１３の下流に設けられ、第１の清浄化部１３を通過した海水を導入される。微細気泡生成部１４は、例えば、特開２００９−１８９９８４に示すループ流式バブル発生ノズルである。このようなループ流式バブル発生ノズルは、第１の清浄化部１３を介してポンプ１８により加圧された海水を液体供給孔から気液ループ流式撹拌混合室に供給されるとともに、気体導入源（図示なし）から気体流入孔を介して気液ループ流式撹拌混合室に酸素ガスを供給される。
【００４４】
気液ループ流式撹拌混合室では、海水と酸素ガスが気液ループ流式撹拌混合室の周囲に沿って乱流を発生しながら混合され、ループ状の高速循環経路流を形成する。また、酸素ガスは、気液ループ流式撹拌混合室に気体流入孔から微細経路を通って流入するため、微細気泡となって海水と混合される。
【００４５】
さらに、気液ループ流式撹拌混合室は、内周に凹凸形状が形成されているので、高速循環経路流により気液混合体が凹凸形状に衝突することによって、気液ループ流式撹拌混合室内の酸素の微細気泡を更に微細化することができる。また。このようなループ流式バブル発生ノズルは、酸素ガスを気液混合室に導入する微細経路を螺旋状に形成することにより、ループ状の高速循環経路流をスクリュー状に形成するようにしてもよい。
【００４６】
微細気泡生成部は、このようなノズル型に限らず、超音波圧壊部１６で圧壊される微細気泡を生成できれば他の構成であってもよい。例えば、従来よく知られる旋回流方式のバブル生成装置（特開２００６−１１７３６５号公報を参照）、加圧剪断方式のバブル生成装置（特開２００６−２７２２３２号公報を参照）等をバブル生成器１２５として利用することができる。しかし、海水のように不純物を多く含む液体においては、ノズル型の微細気泡生成部を用いることが望ましい。
【００４７】
超音波圧壊部１６は、微細気泡生成部１４に接続され、微細気泡生成部１４で微細気泡を含有した海水を通過させ、通過する海水に超音波を照射して圧壊し、超微細気泡を生成する。超音波圧壊部１６は、例えば、特許第６１２３０１３号に記載のバブル圧壊部を適用することができる。
【００４８】
本発明の実施形態に係る超音波圧壊部１６は、超音波圧壊場を形成し、海水の含有する微細気泡を圧壊して超微細気泡に変換する。また、超音波圧壊場は、連続的に超音波を照射されて形成されており、超音波圧壊場には、いわゆるソノルミネセンス現象により紫外線が発生する。そのため、超音波圧壊場を通過する海水に対して紫外線による清浄化効果が得られる。
【００４９】
さらに、超音波圧壊部１６では、超音波圧壊場を形成する超音波が海水に照射されることにより、液中でキャビテーションにより無数の真空気泡が生じる。この真空気泡が圧縮と膨張を繰り返して崩壊する際に、超高温高圧の反応場が形成される。この反応場では、真空気泡が破裂することにより細菌の細胞壁を破壊し、一般生菌やレジオネラ菌、大腸菌等に加えノロウイルスのようなウイルス等を不活化し、細菌を死滅させる効果を得られる。
【００５０】
第１および第２のポンプは従来よく知られる海水用のポンプで耐腐食性に優れる。第２および第３の清浄化部２３、３３は、紫外線を照射して海水を清浄化する第１の清浄化部１３と同様の構成であるため、具体的な構成の説明は省略する。なお、清浄化は、ウイルスを不活性化することの他に、細菌等を殺菌することを含んでもよい。
【００５１】
第２の清浄化部２３は、海域Ｓから汲み上げられて貯留部１２に導入される海水Ｔを紫外線により清浄化する。したがって、海域Ｓから貯留部１２に導出された海水は、紫外線が照射され、ウイルス等を死滅させているため、ウイルス等の存在しない清浄化された海水を貯留部１２に供給される。バルブ２２は、第２の清浄化部２３と貯留部１２との間で必要に応じて開度を調整され、海水Ｔの導入量を調整する。海水の導入を行わない場合には、バルブ２２は閉じた状態とする。
【００５２】
第３の清浄化部３３は、貯留部１２から導出されて海域へ排出される海水Ｔを紫外線により清浄化する。したがって、排出された海水は、紫外線が照射され、雑菌やウイルス等を死滅させているため、海域Ｓの環境への負荷、悪影響を抑止することができる。バルブ３２は、第３の清浄化部３３と貯留部１２との間で必要に応じて開度を調整され、海水の導出量を調整する。海水の導出を行わない場合には、バルブ３２は閉じた状態とする。
【００５３】
［貯留部］
図２は、図１に示す貯留部１２の概略図を示す。貯留部１２は、海水Ｔおよび牡蠣１００を保持する容器である。牡蠣１００は、海洋で養殖され、十分に成長したものであり、市場に出荷する前のものである。貯留部１２はどのような形状であってもよく、例えば中空の円柱形とすることができるが、本実施形態では中空の直方体（四角柱）とする。
【００５４】
貯留部１２には、海水導入管１２０と、再帰導入管１２２と、再帰導出管１２４と、海水排出管１２６とが設けられている。海水導入管１２０は第２の清浄化部２３を介して海域Ｓに接続されている。再帰導入管１２２および再帰導出管１２４は循環経路１０２に含まれる。貯留部１２の内部下方には、網棚１２８が水平に配置されている。牡蠣１００は、網棚１２８の上に配置されるとともに、ひも１００ｂによって海水Ｔ中に吊り下げられる。本実施形態において、貯留部１２は、プールのような水槽を利用されてもよい。
【００５５】
海水導入管１２０は、第２の清浄化部２３に接続され、紫外線により清浄化された海水Ｔを貯留部１２に導入する。また、海水導入管１２０は、貯留部１２の内部に配置された端部がＬ字形状に折り曲げられており、水平方向に海水Ｔを吐出する。海水Ｔは、水平方向に吐出圧を受け、撹拌される。しかし、海水Ｔは、上下方向に吐出圧を受けることがないため、粒径の小さい気泡が貯留部１２の下方で高濃度化することを妨げない。
【００５６】
再帰導入管１２２は、超音波圧壊部１６に接続され、超微細気泡を含有する海水Ｔを導入する。再帰導入管１２２は、主に円筒のパイプからなり、貯留部１２の上方から底部方向に延在する。貯留部１２の内部における再帰導入管１２２の端部は、貯留部１２の底部から２／３の高さ位置に配置される。海水Ｔは、定常状態において、水面が貯留部１２のほぼ上端に位置する量に維持される。
【００５７】
海水Ｔに含有される気泡は、粒径が小さいほど下方に拡散する傾向がある。そのため、貯留部１２の底部には、ウルトラファインバブルの存在が支配的なＵＦＢ領域が形成され、その上側にはウルトラファインバブルとマイクロバブルが混在するＵＦＢ＋ＭＢ領域が形成され、さらにその上側にはマイクロバブルの存在が支配的なＭＢ領域が形成される。貯留部１２の底部に形成されるＵＦＢ領域でも、底部に近いほど気泡の粒径が小さく、網棚１２８の上に配置される牡蠣１００が存在する底部近傍では超微細気泡が支配的となる。
【００５８】
貯留部１２内における各領域の高さ、位置は、海水Ｔの貯留量や微細気泡生成部、超音波圧壊部等の動作状況によって変動する。ここで、「マイクロバブル：ＭＢ」とは、１μｍ以上１００μｍ未満の粒径を有する気泡をいい、「ウルトラファインバブル：ＵＦＢ」とは、１μｍ未満の粒径を有する気泡をいう（ＩＳＯ ２０４８０−１、２０１７を参照）。また、超微細気泡とは、ＵＦＢの内の直径が１００ｎｍ未満のものをいう。
【００５９】
再帰導入管１２２は、貯留部１２の内部に配置された端部がＬ字形状に折り曲げられており、水平方向に海水Ｔを吐出する。これにより、超微細気泡を含有する海水Ｔは、水平方向に吐出圧を受け、撹拌される。しかし、海水Ｔは、上下方向に吐出圧を受けることがないため、粒径の小さい気泡が貯留部１２の下方で高濃度化することを妨げない。
【００６０】
再帰導出管１２４は、第１のポンプ１８を介して微細気泡生成部１４に接続されており、微細気泡生成部１４に海水Ｔを導出する。再帰導出管１２４は、主に円筒のパイプからなり、貯留部１２の底部から上方に向けて延在する。貯留部１２の内部における再帰導出管１２４の端部は、貯留部１２の底部から１／４の高さ位置に配置される。
【００６１】
再帰導出管１２４は、貯留部１２の底部から１／４高さ位置の海水Ｔを、第１のポンプ１８を介して微細気泡生成部１４に導出する。再帰導出管１２４は、貯留部１２の内部に配置された端部がＬ字形状に折り曲げられており、水平方向に海水Ｔを吸引する。これにより、超微細気泡を含有する海水Ｔは、水平方向に吸引圧を受け、貯留部１２内で撹拌される。しかし、海水Ｔは、上下方向に吸引圧を受けることがないため、粒径の小さい気泡が貯留部１２の下方で高濃度化することを妨げない。
【００６２】
海水排出管１２６は、底弁として機能し、バルブ３２を介して第３の清浄化部３３に接続されており、第３の清浄化部３３に海水Ｔを導出する。海水排出管１２６は、主に円筒のパイプからなり、貯留部１２の底部から貯留部１２の下面まで延在し、海水Ｔを牡蠣１００の排泄物等とともに貯留部１２の底から取り出すこと、および海水Ｔを貯留部１２の底から供給することができる。
【００６３】
網棚１２８は、牡蠣１００よりも小さな網目を有する。牡蠣１００の排泄物は網棚１２８の下に落下するため、牡蠣１００が排泄物を再吸入することを抑制することができる。本発明の実施形態において、牡蠣１００は、網棚１２８の上に配置されて保持さるとともに、ひも１００ｂによって海水Ｔ中に吊り下げられて保持されているが、貯留部１２に貯留された海水Ｔに沈めることができれば、網棚１２８の上に配置されるだけでもよいし、ひも１００ｂによって海水Ｔ中に吊り下げられるだけでもよく、他の方法で貯留部１２に貯留された海水Ｔに沈められて保持されてもよい。
【００６４】
［循環経路］
本実施形態に係る貝類の浄化システム１０において、貯留部１２、第１の清浄化部１３、微細気泡生成部１４、超音波圧壊部１６および第１のポンプ１８は循環経路１０２に組み込まれ、貯留部１２から再帰導出管１２４を介して導出された海水は第１のポンプ１８により加圧されて、第１の清浄化部１３を通過して、微細気泡生成部１４に導入され、超音波圧壊部１６を通過して再帰導入管１２２を介して貯留部１２に戻るように循環する。
【００６５】
微細気泡生成部１４と超音波圧壊部１６とは、超微細気泡生成部として機能する。しかし、超微細気泡生成部は、１００ｎｍ未満の粒径の超微細気泡を生成できれば、他の構成であってもよい。超微細気泡生成部は、例えば、特開２０１１−２０００５号公報に記載のナノバブル発生装置のように過振圧壊により超微細気泡を生成するものや、旋回式微細気泡発生装置であってもよく、循環経路１０２に組み込まれる。
【００６６】
循環経路１０２は、海域Ｓから第２のポンプ２８、第２の清浄化部２３およびバルブ２２を介して貯留部１２に導入された海水Ｔが、微細気泡生成部１４、および超音波圧壊部１６を介して再び貯留部１２に再帰するように形成されている。これにより、超微細気泡を含有する海水Ｔが再帰するため、全ての海水を海域Ｓから新たに導入する場合と比べて貯留部１２に保持される海水の超微細気泡の含有量を高く維持することができる。
【００６７】
浄化システム１０において、海域Ｓから第２の清浄化部を介して清浄化された海水を貯留部１２に導入し、所定量の海水が貯留された状態で、貯留された海水を循環経路１０２により循環させながら超微細気泡生成部により超微細気泡を生成する。これにより、清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備することができる。
【００６８】
準備された海水は、貯留部に保持された貝類に接触されながら、循環経路１０２を循環し続ける。ここで、所定量の海水が貯留部１２に貯留されたときに、海域Ｓからの海水の導入は停止される。したがって、貯留部１２に貯留された海水は、第１の清浄化部で清浄化され続けながら循環し、貝類を浄化する。
【００６９】
または、準備された海水は、貯留部に保持された貝類に接触されながら、所定量の海水が貯留部１２に貯留されたときに、海域Ｓからの海水の導入を継続し、同量の海水を海域Ｓに排出するようにしてもよい。これにより、いわゆるかけ流しにより、貝類を浄化することができる。このとき、海水は循環経路１０２を循環し続けていてもよい。
【００７０】
浄化システム１０は、超微細気泡を生成する超微細気泡生成部と、海域Ｓからの海水を清浄化する第２清浄化部２３とが、異なる経路に設けられている。しかし、第２の清浄化部２３と貯留部１２との間、または第２の清浄化部２３と海域Ｓとの間のいずれかに超微細気泡生成部を設けてもよい。その場合は、循環経路１０２を設けなくともよい。すなわち、超微細気泡生成部と清浄化部とが同一経路に直列に設けられて、清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備するようにしてもよい。
【００７１】
本実施形態に係る浄化システムで製造された海水は、マイクロバブル、ウルトラファインバブルおよび超微細気泡を含有している。超微細気泡は、数ヶ月という長期にわたって海水内に残存する。そのため、本実施形態に係る浄化システムで製造された海水は、残存した超微細気泡によって細菌の増殖を抑制し、かつ長期にわたって浄化効果を得ることができる。
【００７２】
［貝類の浄化方法の実施例］
次に、本発明の実施形態に係る貝類の浄化方法について説明する。この浄化方法では、浄化システム１０を利用して貝類の浄化を行う。しかし、この貝類の浄化方法に利用される浄化システムは、超微細気泡を海水に生成して、貝類に作用させ、ウイルス等を選択的吸着脱離できれば、他の構成であってもよい。
【００７３】
本発明の実施形態に係る貝類の浄化方法では、浄化システム１０の貯留部１２に保持された海水Ｔ中に、牡蠣１００が保持される。海水Ｔは、浄化システム１０の微細気泡生成部１４および超音波圧壊部１６の動作により、酸素ガスの超微細気泡を含有し、超微細気泡は、直径１００ｎｍ未満の気泡である。特に、超微細気泡は、２０ｎｍ〜７０ｎｍ程度の直径を有するとよい。
【００７４】
本発明にかかる浄化方法では、まず、貯留部に海水Ｔを準備する。具体的には、ポンプ２８が動作し、海域の海水Ｔが、第２の清浄化部２３を介して貯留部１２に導入される。このとき、第２の清浄化部２３が動作することにより、海域から汲み上げられる海水中の雑菌やウイルスが死滅される。
【００７５】
次に、貯留部１２に貯留された海水Ｔに貝類を沈める。具体的には、海水Ｔを貯留された貯留部１２に開放した上方から牡蠣１００が沈められる。ただし、先に牡蠣１００が貯留部１２に準備され、後から海水を供給することにより海水Ｔに牡蠣１００が沈められてもよい。
【００７６】
次に、貯留部１２に貯留された海水Ｔに酸素ガスの気泡を含有させる。具体的には、貯留部１２に貯留された海水Ｔが、第１のポンプ１８の動作により微細気泡生成部１４に供給され、微細気泡生成部１４で酸素ガスの微細気泡を発生された海水Ｔが超音波圧壊部１６に供給され、超音波圧壊部１６で微細気泡を超微細気泡に変換された海水Ｔが、貯留部１２に再帰される。
【００７７】
したがって、循環経路１０２を経由して貯留部１２に貯留された海水は、粒径が１００ｎｍ未満の酸素ガスの気泡を含有する。これにより、紫外線を照射して清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備することができる。
【００７８】
本発明の実施形態に係る貝類の浄化方法で浄化される牡蠣１００は、海洋で養殖され、成長したものである。そのため、本発明の実施形態に係る貝類の浄化方法は、「浜上げ畜養浄化方法」とも称する。牡蠣１００は、海洋での養殖中に殻に付着した汚れや小型の貝類等の付着物が除去された上で、貯留部１２の海水Ｔ中に、ひも１００ｂによって吊り下げられること、または網棚１２８の上に配置されることにより保持される。
【００７９】
なお、本発明の実施形態に係る貝類の浄化方法では、牡蠣１００は、各自治体の指導する牡蠣の浄化方法にのっとって、海水Ｔ中に１８時間以上の時間保持される。これにより、海水を貝類に接触させた状態で前記貯留部に維持することができる。
【００８０】
また、牡蠣１００を貯留部１２に保持して海水に作用させた状態で、海水を貯留部１２から導出し、循環経路１０２により海水を循環させることにより、貯留部から導出された海水を清浄化して前記貯留部に再帰させることができる。
【００８１】
図３は、気泡による浄化作用を説明する図であり、（Ａ）は牡蠣の殻を取った状態、（Ｂ）は中腸腺における超微細気泡の模式図、（Ｃ）は中腸腺におけるマイクロバブルの模式図を示す。牡蠣１００は、体内にノロウイルス等のウイルスが蓄積されていることがある。例えば、食中毒を引き起こすノロウイルスは、牡蠣１００の体内において、図３（Ａ）に示す位置にある中腸腺に蓄積される。そのため、牡蠣１００は、養殖により成長した後、市場に出荷される前に、洗浄され、浄化される。
【００８２】
図３（Ｂ）に示すように、超微細気泡は、粒径が極めて小さいため、中腸腺１００ａの内部の隅々まで届く。中腸腺の内部の腸内消化壁に到達した超微細気泡３４は、負の電荷を有し、両極性電解質の性質を持つウイルス等に選択的に吸着して体内から脱離させ、体外に排出させることができる。すなわち牡蠣１００の浄化をすることができる。
【００８３】
一方、図３（Ｃ）に示すように、マイクロバブルは中腸腺１００ａの内部の隅々まで届かない。また、ＵＦＢであっても直径が１００ｎｍ以上のものでは、牡蠣の鰓毛に吸着して中腸腺に到達することが容易でない。そのため、マイクロバブルや直径が１００ｎｍ以上のＵＦＢでは、ウイルス等の吸着を十分に行うことができない。
【００８４】
さらに、中腸腺内の消化盲嚢について図４を用いて説明する。図４は、中腸腺の終端部の消化盲嚢内の餌料の流れを示す。消化盲嚢は終端が閉塞された盲管状となっており、餌料プランクトン等は消化盲嚢内に侵入し牡蠣に吸収される。このとき、海水中のウイルス等も消化盲嚢に吸収され蓄積される。
【００８５】
ところで、盲管状の消化盲嚢には粒径の大きい粒子は入っていくことはできないが、１００ｎｍ未満の粒径の超微細気泡であれば消化盲嚢に容易に侵入することができ、蓄積されたウイルスを吸着脱離し、ウイルス等を浄化することができる。しかし、消化盲嚢に侵入した超微細気泡そのものは、ウイルス等に対して十分な不活化効果を有さず、ウイルス等を吸着して中腸線から脱離させるのみである。
【００８６】
ウイルスの吸着脱離の原理については、図５に示すように、ウイルス等の表面が両極性電解質の性質を有しており、マイナス電荷の超微細気泡がウイルス等の官能基に吸着し、バブル表面への濃縮が進行して洗浄対象物（中腸腺内の消化盲嚢）が脱離洗浄される。
【００８７】
また、粒径・濃度制御された超微細気泡は、牡蠣の鰓を通過して中腸腺に取り込まれる。粒径が１００ｎｍ未満の酸素の超微細気泡により、牡蠣の生態活性力の向上により海水取込量を通常より２０％程度以上増加でき、これが、中腸腺からの浄化作用を加速させる。これらの原理を総称して選択的吸着脱離浄化技術と称し、超微細気泡がウイルス等に吸着して脱離することを選択的吸着脱離と称する。この技術の活用は、清浄化・不活化作用にｐＨ依存性がない。
【００８８】
この選択的吸着脱離浄化技術により、本発明の実施形態に係る貝類の浄化システム１０および浄化方法では、貝類の体内に蓄積されたウイルスを超微細気泡により選択的吸着脱離し、貝類の体内から排出、すなわち浄化する。そして、排出されたウイルスを第１または第３の清浄化部１３、３３により死滅させる。
【００８９】
従来の次亜塩素酸等による化学的な不活化では、海水に薬液等を混入させることで雑菌やウイルスを死滅させることはできるが、同時に貝類にも悪影響を与えてしまっていた。しかし、本発明の実施形態に係る貝類の浄化システム１０のように、紫外線による物理的な不活化であれば、貝類に影響を与えることがない。
【００９０】
一方、従来の紫外線による不活化では、牡蠣の中腸腺内のウイルス等を不活化することはできなかったが、本発明の実施形態に係る貝類の浄化システム１０は、超微細気泡の選択的吸着脱離によりウイルス等を牡蠣から浄化し、牡蠣から排出されたウイルスに紫外線を照射するため、牡蠣の体内に蓄積されたウイルス等を不活化することができる。
【００９１】
［超微細気泡の観察結果］
次に、本発明の実施形態に係る超音波圧壊部により発生された超微細気泡を観察した結果について説明する。超微細気泡の観察には、高速原子力顕微鏡（高速ＡＦＭ）を利用した。
【００９２】
観察条件は以下のとおりである。
装置：高速原子力間顕微鏡  ＮａｎｏＥｘｐｌｏｒｅｒ
観察環境：室温（２１℃）
カンチレバー：ＢＬ−ＡＣ１０ＤＳ−Ａ２（Ｏｌｙｍｐｕｓ，Ｊａｐａｎ）
解像度：２００×２００ピクセル
観察イメージ：液中ＡＣモード形状像
なお、ＵＦＢは、一般に負電荷を持つことが知られており、正電荷を持つ基板（ＰＬＬ−ｍｉｃａ基板およびＡＰＴＥＳ−ｍｉｃａ基板）を利用して観察を行った。
【００９３】
図６および図７は、ＰＬＬ−ｍｉｃａ基板を用いて観察した超微細気泡の観察結果を示し、各図（Ａ）は観察写真を示し、各図（Ｂ）は（Ａ）中の白線上の高さのグラフを示す。各図の（Ａ）に示す白線上の三角形のマークの位置は、（Ｂ）のグラフ上の三角形のマークの位置に対応する。ここで、ＰＬＬ（Ｐｏｌｙ−Ｌ−Ｌｙｓｉｎｅ）はアミノ酸であるリジン重合体である。リジンはアミノ基を持ち、正電荷を有する。したがって、負に帯電するｍｉｃａ（雲母）をＰＬＬで覆うことにより、ｍｉｃａ表面に正電荷を持たせることができる。
【００９４】
図６（Ａ）は走査範囲を５００ｎｍとした条件の観察写真を示し、図７（Ａ）は走査範囲を２００ｎｍとした条件の観察写真を示す。図６（Ｂ）によれば、図６（Ａ）は、高さが２０．９ｎｍ、白線方向の長さが７５．４ｎｍの粒子が観察されたことを示し、図７（Ｂ）によれば図７（Ａ）は、高さが２３．０ｎｍ、白線方向の長さが５９．５ｎｍの粒子が観察されたことを示す。ＰＬＬ−ｍｉｃａ基板を用いた本観察では、粒子の高さが粒径と考えられ、全体として、粒径約２０ｎｍの粒子が、５００ｎｍ×５００ｎｍの範囲に１個程度観察された。
【００９５】
図８および図９は、ＡＰＴＥＳ−ｍｉｃａ基板を用いて観察した超微細気泡の観察結果を示し、各図（Ａ）は観察写真を示し、各図（Ｂ）は（Ａ）中の白線上の高さのグラフを示す。各図の（Ａ）に示す白線上の三角形のマークの位置は、（Ｂ）のグラフ上の三角形のマークの位置に対応する。ここで、ＡＰＴＥＳ（３−ａｍｉｎоｐｒоｐｙｌ  ｔｒｉｅｔｈоｘｙ  ｓｉｌａｎｅ）はエトキシ基がｍｉｃａ上の水酸基と結合することで、基板表面にアミノ基を露出させる。これにより、ｍｉｃａ表面に正電荷を持たせることができる。
【００９６】
図８（Ａ）および図９（Ａ）は走査範囲を５００ｎｍとした条件の観察写真を示す。図８（Ｂ）によれば、図８（Ａ）は、高さが１５．７ｎｍ、白線方向の長さが７５．４ｎｍの粒子が観察されたことを示し、図９（Ｂ）によれば、図９（Ａ）は、高さが８．５７ｎｍの粒子および高さが４．５３ｎｍの粒子が観察されたことを示す。ＡＰＴＥＳ−ｍｉｃａ基板を用いた本観察では、粒子の高さが粒径と考えられ、全体として、粒径が２０ｎｍ以下で粒径の異なる粒子が、５００ｎｍ×５００ｎｍの範囲に複数個観察された。
【００９７】
以上の観察結果から、粒径が数ｎｍ〜数十ｎｍの粒子が観察された。これらと同様の正電荷の基板では、過去にもＵＦＢが観察されていることから、観察された粒子は、ＵＦＢであると考えられ、本発明の実施形態に係る浄化システムでは、少なくともナノメートルオーダーのＵＦＢが海水中に生成されていることがわかる。
【００９８】
［ウイルスの不活化試験］
【００９９】
次に、ウイルスの不活化試験を行った結果を示す。ウイルス不活化試験では、まず、海水清浄化試験として、ウイルス液を海水に添加した後、海水に超微細気泡を含有させ、または海水に紫外線を照射することにより、超微細気泡の弱い不活化能力および紫外線の強い不活化能力が確認された。
【０１００】
次に、ウイルス取込試験として、ウイルス液を添加した海水に牡蠣を投入し、牡蠣へウイルスが取り込まれるか検証したところ、牡蠣にウイルスが取り込まれることが確認された。さらに、牡蠣の浄化試験として、ウイルスを取り込んだ牡蠣を用いて海水に超微細気泡を含有させることにより、牡蠣に取り込まれたウイルスが超微細気泡により選択的吸着脱離され、牡蠣の中腸線から排出されることが確認された。
【０１０１】
ウイルスの不活化試験に関して、ウイルスにはネコカリシウイルスを適用し、ウイルスの感染価はプラーク法により測定した。なお、ウイルスの感染価の測定は、一般財団法人北里環境科学センターにおいて行った。
【０１０２】
以下の試験において、ＵＦＢ処理とは、浄化システム１０を用いて、海水を循環経路１０２に循環させ、超微細気泡生成部により超微細気泡を生成し、超微細気泡を含有する当該海水を試験対象物に２０時間作用させることをいう。また、ＵＶ処理とは、浄化システム１０を用いて、海水を循環経路１０２の第１の清浄化部１３により不活化し、当該海水を試験対象物に２０時間作用させることをいう。
【０１０３】
また、本明細書において、標記の便宜上、べき乗の表記に「＾」または「Ｅ」を用いた。例えば、１０の２乗は「１０＾２」または「１.０Ｅ＋０２」というように表記する。
【０１０４】
［海水の清浄化試験］
【０１０５】
牡蠣の浄化試験を行う前提として、牡蠣を沈める海水に対する不活化試験を行った。図１０および図１１に海水の清浄化試験の結果を示す。図１０（Ａ）は、海水の感染価を示し、図１０（Ｂ）は、図１０（Ａ）の結果に基づいて感染価の減少を対数（Ｌｏｇ１０）にて示す。また、図１１は縦軸に感染価(ＰＦＵ／ｍＬ)を示し、横軸に各処理前後のサンプルを示す。
【０１０６】
海水の清浄化試験では、まず、浄化システム１０を用い、貯留部１２に所定量（例えば、６００Ｌ）の海水を貯留し、海水に所定量のウイルス液（７５０ｍＬ）を加え撹拌して３つの基準サンプルＲａ、Ｒｂ、Ｒｃを作成した。各基準サンプルの感染価は、図１０（Ａ）に示すようにＲａ：８．４×１０＾４(ＰＦＵ／ｍＬ)、Ｒｂ：６．６×１０＾４(ＰＦＵ／ｍＬ)、Ｒｃ：１．１×１０＾５(ＰＦＵ／ｍＬ)であった。なお、貯留部１２に投入したウイルス液の感染価は４．０×１０＾８(ＰＦＵ／ｍＬ)であった。
【０１０７】
次に、基準サンプルＲａを２０時間放置し（処理なし）、評価サンプルＨａとした。また、基準サンプルＲｂをＵＦＢ処理し、評価サンプルＨｂとした。さらに、基準サンプルＲｃをＵＶ処理し、評価サンプルＨｃとした。各評価サンプルの感染価は、図１０（Ａ）に示すようにＲａ：５．９×１０＾３(ＰＦＵ／ｍＬ)、Ｒｂ：１．６×１０＾３(ＰＦＵ／ｍＬ)、Ｒｃ：１０(ＰＦＵ／ｍＬ)以下であった。
【０１０８】
感染価対数減少値（ＬＲＶ）においては、図１０（Ｂ）示すように、基準サンプルＲと評価サンプルＨの比較より（Ｌｏｇ１０［Ｒの感染価／Ｈの感染価］）、処理なしの実測の減少値は、１．１となった。これは、自然減衰によるものである。すなわち、従来知られるように、海水は、なんらの処理をしない場合であっても自然減衰により感染価が減衰する。
【０１０９】
また、ＵＦＢ処理の実測の感染価対数減少値は、１．６となった。これは、超微細気泡の不活化効果と自然減衰とにより感染価が減衰したものである。さらに、ＵＶ処理の実測の感染価対数減少値は、４．０となった。これは、紫外線の不活化効果と自然減衰とにより感染価が減衰したものである。
【０１１０】
さらに、各サンプルの感染価対数減少値において、自然減衰による感染価対数減少値（処理なしの実測減少値１．１）を減じた「正味の感染価対数減少値」として、処理なしの正味の感染価対数減少値は０、ＵＦＢ処理の正味の感染価対数減少値は、０．５、ＵＶ処理の正味の感染価対数減少値は、２．９となった。
【０１１１】
図１１は、図１０の値に基づき、処理なし、ＵＦＢ処理、ＵＶ処理ごとの処理前後の感染価を示す。これらの結果から、ＵＦＢ処理、すなわち超微細気泡には、わずかながら不活化効果が確認され、ＵＶ処理、すなわち紫外線には大きな不活化効果が確認された。
【０１１２】
［牡蠣のウイルス取込試験］
【０１１３】
次に、牡蠣の浄化試験を行う前提として、牡蠣のウイルス取込試験を行った。図１２および図１３に牡蠣のウイルス取込試験の結果を示す。図１２（Ａ）は、牡蠣に作用させる海水の感染価を示し、図１２（Ｂ）は、ウイルスを取り込んだ牡蠣の感染価を示す。また、図１３は、は縦軸に感染価(ＰＦＵ／ｍＬ)を示し、横軸にマガキまたはイワガキのサンプルを示す。なお、感染価の測定において、牡蠣から取り出された中腸腺のサンプルはＰＥＧ沈殿法により濃縮調製し、感染価の測定に用いた。
【０１１４】
牡蠣のウイルス取込試験では、まず、浄化システム１０を用い、貯留部１２に所定量（例えば、６００Ｌ）の海水を貯留し、海水に所定量のウイルス液（７５０ｍＬ）を加え撹拌して試験用海水Ｔ１を作成した。この試験用海水Ｔ１の感染価は、図１２（Ａ）に示すように、８．８×１０＾４(ＰＦＵ／ｍＬ)であった。なお、ウイルス液は海水の清浄化試験と同様に作成した。
【０１１５】
次に、この試験用海水Ｔ１に５つのマガキＭ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５および５つのイワガキＩ１、Ｉ２、Ｉ３、Ｉ４、Ｉ５の合計１０個の牡蠣を１０時間沈めて試験用海水Ｔ１を作用させ、ウイルスを取り込ませた。牡蠣を沈めて１０時間後の試験用海水Ｔ１の感染価は、２．３×１０^４(ＰＦＵ／ｍＬ)であった。この感染価の減少は、自然減衰と牡蠣への取り込みによる減少である。このことから、試験用海水Ｔ１は、牡蠣投入時と牡蠣を投入して１０時間後の感染価の比較より（Ｌｏｇ１０［投入時の感染価／１０時間後の感染価］）、自然減衰および取り込みによるウイルスの感染価対数減少値は、０．５であった。
【０１１６】
次に、試験用海水Ｔ１に１０時間沈めた後のマガキＭ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５およびイワガキＩ１、Ｉ２、Ｉ３、Ｉ４、Ｉ５から中腸線を取出し、ウイルスを回収した。調整した中腸線のサンプルは、ＰＥＧ沈殿により濃縮し、プラーク法により感染価を測定した。牡蠣に取り込まれたウイルスの感染価(ＰＥＧ沈殿後による濃縮後の感染価)を図１２（Ｂ）および図１３に示す。
【０１１７】
牡蠣のウイルス取込試験において、牡蠣ごとに感染の程度は異なるものの、平均として、マガキは、２．１×１０＾４、イワガキは、９．５×１０＾３の感染価であった。この結果より、ウイルス液を加えた海水に牡蠣を１０時間沈めることで牡蠣の中腸線にウイルスが取り込まれることが確認された。
【０１１８】
［牡蠣の浄化試験］
【０１１９】
ＵＦＢ処理とＵＶ処理による牡蠣の浄化試験を行った。図１４〜図１７に牡蠣の浄化試験の結果を示す。図１４および図１５は、マガキの浄化試験の結果を示し、図１６および図１７はイワガキの浄化試験の結果を示す。なお、感染価の測定において、牡蠣から取り出された中腸腺のサンプルはＰＢＳで１０％の乳剤を調製し、感染価を測定した。
【０１２０】
前記した牡蠣のウイルス取込試験と同様に、浄化システム１０を用い、貯留部１２に所定量（例えば、６００Ｌ）の海水を貯留し、海水に所定量のウイルス液（７５０ｍＬ）を加え撹拌して試験用海水Ｔ２を作成し、試験用海水Ｔ２に１０時間沈めて牡蠣にウイルスを取り込ませた。なお、ウイルス液は海水の清浄化試験、牡蠣のウイルス取込試験と同様に作成した。
【０１２１】
次に、貯留部１２内の海水を入れ替えて、新たな海水に牡蠣を沈めた状態とし、新たな海水にＵＦＢ処理およびＵＶ処理を同時に２０時間施したＵＦＢ・ＵＶ浄化試験と、ＵＦＢ処理を行わずＵＶ処理のみを２０時間施したＵＶ浄化試験とを行った。
【０１２２】
図１４に２０個のマガキを用いたＵＦＢ・ＵＶ浄化試験とＵＶ浄化試験との比較結果を示す。
【０１２３】
ＵＦＢ・ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、ウイルスを感染させたウイルス取り込み後の５個のマガキの中腸線から検出された感染価の平均値は１．２×１０＾５であったのに対し、浄化処試験後の５個のマガキでは、感染価の平均値は４．４×１０＾１以下となった。また、浄化試験後の５個のマガキ全てにおいて、感染価は検出限界値未満であった。
【０１２４】
一方、ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、ウイルスを感染させたウイルス取り込み後の５個のマガキの中腸線から検出された感染価の平均値は４．５×１０＾４であったのに対し、浄化試験後の５個のマガキでは感染価の平均値は３．７×１０＾２となった。図１５には、これらの結果をグラフ化した図を示す。
【０１２５】
図１６に２０個のイワガキを用いたＵＦＢ・ＵＶ浄化試験とＵＶ浄化試験との比較結果を示す。ＵＦＢ・ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、ウイルスを感染させたウイルス取り込み後の５個のイワガキの中腸線から検出された感染価の平均値は５．６×１０＾４であったのに対し、浄化試験後の５個のイワガキでは、感染価の平均値は４．４×１０＾１以下となった。また、浄化試験後の５個中４個のイワガキで、感染価は検出限界値未満となった。
【０１２６】
一方、ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、牡蠣にウイルスを感染させたウイルス取り込み後は、イワガキの中腸線から検出された感染価の平均値は１．５×１０^４であったのに対し、浄化試験後は、感染価が７．８×１０^２となった。なお、ＵＶ浄化試験前の５個のイワガキおよびＵＶ浄化試験後の５個のイワガキの内、１個のイワガキは感染価が検出限界値未満となった。図１７には、これらの結果をグラフ化した図を示す。
【０１２７】
牡蠣の浄化試験から、マガキとイワガキとの両方において、ＵＦＢ・ＵＶ浄化試験では、ウイルスの感染価がほぼすべてのサンプルにおいて、検出限界以下となった。一方、ＵＶ浄化試験では、感染価の減少はみられるものの検出限界以下まで減少することはなかった。
【０１２８】
このことから、ＵＦＢ・ＵＶ浄化試験は、ＵＶ浄化試験に比較して不活化効果が高いことがわかる。特に、ＵＦＢ・ＵＶ浄化試験では、ほぼすべての牡蠣について感染価が検出限界以下となった。従って、ＵＦＢ・ＵＶ浄化を行うことで、ウイルスが人体に影響を及ぼさない程度の量まで牡蠣からウイルスを浄化できているといえる。
【０１２９】
以上の試験結果から、ＵＦＢ処理による超微細気泡が牡蠣の中腸線内に侵入し、ウイルスを選択的吸着脱離し、ＵＶ処理による紫外線で選択的吸着脱離されたウイルスが不活化されていることがわかる。
【０１３０】
なお、このような試験を行った背景として、ノロウイルスは人体の腸管で増殖し、人体から排泄されて、河川、下水等を介して海域に到達し、カキ等２枚貝の中腸線に蓄積されることが知られている。また、ノロウイルスの蓄積されたカキ等２枚貝を生食または十分に加熱処理（中心温度８５℃以上で９０秒以上の加熱）しないで食するとノロウイルス感染症を発症する危険の有ることが知られている。
【０１３１】
２枚貝の中で、生食されることの多いカキはノロウイルス感染症発症原因の主要因とされる。日本では生食用と加熱用で区別されて市販されている。生食用は保健所にて定点観測されている海域での海水中の大腸菌等が一定の基準値以下で養殖された牡蠣で、しかも１８時間以上の紫外線により清浄化処理された海水で洗浄されたものを限定として出荷されている。しかしながら、生食用といえどもノロウイルスがいないわけではなく、感染価を有するノロウイルスが一定基準（感染価を有するものが１桁以上いる）いるとノロウイルス感染症を発症するとされている。そのため、ノロウイルスを牡蠣等の２枚貝から浄化することが従来からの課題としてあった。
【０１３２】
上記に示すウイルスの不活化試験では、この点に着目してアメリカＦＤＡ（米国医薬品食品局）でノロウイルスの代替菌として認定されている人には感染しないネコカリシウイルスを用いて、紫外線による不活化処理のみと紫外線による不活化処理に加え、超微細気泡による浄化処理との効果の違いを証明したものである。本浄化方法は従来技術では不可能であったカキ等２枚貝の中腸線に蓄積された感染価を有するノロウイルスを検出限界以下とすることを可能とするものである。
【０１３３】
本浄化方法の実施されたカキを生食やレヤー状態（十分に過熱していない状態）で食してもノロウイルス感染症を発症しない安全なカキにできる手法であり、本技術は魚介類の浄化のみならず、食肉、野菜・根菜類の洗浄殺菌や浄化にも応用可能な技術といえる。
【０１３４】
さらに、牡蠣を保持した貯留部において、ＵＦＢ処理しない場合とＵＦＢ処理をした場合との貯留部の水面を比較する試験を行った。図１８は、その試験結果を示し、（Ａ）は牡蠣を保持した貯留部においてＵＦＢ処理しない場合、（Ｂ）は牡蠣を保持した貯留部においてＵＦＢ処理をした場合の貯留部水面の写真を示す。
【０１３５】
図１８（Ａ）の写真では、水面に目立った浮遊物が存在しないのに対し、図１８（Ｂ）の写真では、水面に浮遊物が存在する。これは、ＵＦＢ処理をしない場合は、牡蠣からの排出物が極めて少ないのに対して、ＵＦＢ処理をした場合は、たんぱく質等の物質が牡蠣から選択吸着脱離されて排出され、浮遊物として観察されたものと考えられる。また、浮遊物には、ウイルス、細菌等が含まれていると考えられる。これにより、ＵＦＢ処理による選択吸着脱離が視覚的に確認された。
【０１３６】
［浄化システムの変形例］
【０１３７】
本実施形態に係る貝類の浄化システムは、海域Ｓを導入する経路において海域Ｓと貯留部１２との間に超微細気泡生成部を備えていてもよい。そのようにすれば、循環経路１０２によって海水を循環させなくとも、紫外線を照射して清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部１２に準備することができる。
【０１３８】
例えば、第２の清浄化部２３と貯留部１２との間に超微細気泡生成部を設けることにより、紫外線を照射して清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備できる。さらに、そのように導入された海水を海水排出管１２６から導出し、海域Ｓに排出することにより、いわゆる、かけ流しにより、紫外線を照射して清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貝類に作用させることができる。
【０１３９】
本発明の実施形態に係る貝類の浄化システム１０は、貯留部１２から微細気泡生成部１４および超音波圧壊部１６を経由して貯留部１２に再帰する循環経路１０２が設けられている。これに加えて、微細気泡生成部１４を経由せずに、貯留部１２から超音波圧壊部１６を経由して貯留部１２に再帰する他の循環経路が設けられていてもよい。循環経路１０２と他の循環経路とのいずれの経路で海水Ｔを循環させるかを切り替え可能としてもよい。
【０１４０】
また、微細気泡生成部１４および超音波圧壊部１６のそれぞれが、貯留部１２に貯留された海水Ｔを循環させる循環経路に個別に組み込まれていてもよい。このとき、各循環経路を同時に循環させてもよいし、別々に循環させてもよい。例えば、微細気泡生成部１４を組み込まれた循環経路を循環させ、微細気泡を含有する海水Ｔを貯留部１２に貯留した後に、超音波圧壊部１６を組み込まれた循環経路を循環させ、海水Ｔの含有する微細気泡を超微細気泡に変換させ、超微細気泡を含有する海水Ｔを貯留部１２に貯留するようにしてもよい。
【０１４１】
本発明の実施形態に係る貝類の浄化システム１０では、超微細気泡を含有する海水に牡蠣１００が沈められることにより、超微細気泡が牡蠣１００体内に侵入してウイルスを選択的吸着脱離することで、牡蠣１００からウイルスが海水に排出、すなわち浄化される。
【０１４２】
また、本発明の実施形態に係る貝類の浄化システムおよび浄化方法では、酸素ガスの気泡による生理活性化によって、牡蠣１００の海水取り込み量が大幅に向上する。その結果、牡蠣１００が吸入および排出する海水の循環が早まり、牡蠣に対する浄化効果が増大する。
【０１４３】
また、本発明の実施形態に係る貝類の浄化方法において、酸素ガスの超微細気泡は、以下の条件が好ましい。
海水の溶存酸素濃度：５ｐｐｍ〜２０ｐｐｍ    
バブル粒径：１００ｎｍ未満
特に、中腸腺に蓄積されたノロウイルスをより効果的に選択的吸着脱離洗浄するには、超微細気泡が中腸腺の盲嚢内に達する必要があり、かつウイルスと同程度のバブル粒径が必要である。また、溶存酸素濃度は、５ｐｐｍを下回れば、貝類が十分に活性化せず、一方、溶存酸素濃度が２０ｐｐｍを上回っても、貝類は活性化しなくなる。
【０１４４】
また、酸素ガスの他に、オゾンガスのような不活化効果の高い他の気体をバブル化することもできるが、そのように不活化効果の高いガスでは貝類が拒絶反応を示し、低濃度でも貝類の活性が低下し、高濃度になれば貝類が死滅してしまうことさえある。
【０１４５】
また、本発明の実施形態において、第１〜第３の清浄化部は、紫外線を照射することにより、海水を清浄化、すなわち、殺菌等している。しかし、清浄化部は、濃度０．１ｐｐｍ〜０．３ｐｐｍの次亜塩素酸水、微酸性電解次亜水等の殺菌料を海水に投入することにより、海水を清浄化するものであってもよい。また、殺菌料は、０．１ｐｐｍ〜０．３ｐｐｍの電解次亜水、または濃度０．１ｐｐｍ〜０．３ｐｐｍの二酸化塩素等であってもよく、同等の殺菌性能を有する低濃度オゾン水であってもよい。さらに、殺菌料による清浄化の場合に、貝類を貯留して超微細気泡を作用させる時間は５時間程度であってもよい。
【０１４６】
本発明の実施形態において、貝類に蓄積されるノロウイルスまたはネコカリシウイルスのウイルスを超微細気泡による選択的吸着脱離の対象として説明してきた。しかし、選択的吸着脱離は、真珠貝の赤変病・黒変病対策にも利用でき、また、イリドウイルスのような他のウイルス、大腸菌、サルモネラ菌、腸炎ビブリオやカンピロバクター等の細菌を対象とすることもできる。また、しかし、選択吸着脱離される対象のサイズを勘案すると、ウイルス等が超微細気泡による選択的吸着脱離では最も効果を奏する。
【０１４７】
本発明の実施形態において、海水を清浄化する対象として説明してきた。しかし、清浄化する対象は、海水に限らず、地下水、水道水等の淡水であってもよい。また、本発明の実施形態において、牡蠣に浄化システムおよび浄化方法を適用する場合について説明してきた。しかし、浄化システムおよび浄化方法は、牡蠣以外の貝類、さらには魚介類等に適用されてもよい。
【０１４８】
以上、本発明の具体的な態様の例を、上記の実施形態、実施例により説明したが、本発明は、当該実施形態および実施例に限定されるものではない。
【産業上の利用可能性】
【０１４９】
本発明の貝類等の浄化方法および浄化システムは、貝類等の浄化において産業上有用である。
【符号の説明】
【０１５０】
Ｓ        海域
Ｔ        海水
１０      浄化システム
１１      制御部                         
１２      貯留部
１３      第１の清浄化部
１４      微細気泡生成部
１６      超音波圧壊部
１８      ポンプ
２２      バルブ
２３      第２の清浄化部
２８      ポンプ
３２      バルブ
３３      第３の清浄化部
３４      超微細気泡
１００    牡蠣
１００ａ  中腸腺
１０２    循環経路
１２０    海水導入管
１２２    再帰導入管
１２４    再帰導出管
１２５    バブル生成器
１２６    海水排出管
１２８    網棚
【図１】
2019138590.tif 000003
【図２】
2019138590.tif 000004
【図３】
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【図４】
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【図５】
2019138590.tif 000007
【図６】
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【図７】
2019138590.tif 000009
【図８】
2019138590.tif 000010
【図９】
2019138590.tif 000011
【図１０】
2019138590.tif 000012
【図１１】
2019138590.tif 000013
【図１２】
2019138590.tif 000014
【図１３】
2019138590.tif 000015
【図１４】
2019138590.tif 000016
【図１５】
2019138590.tif 000017
【図１６】
2019138590.tif 000018
【図１７】
2019138590.tif 000019
【図１８】
2019138590.tif 000020
【手続補正書】
【提出日】平成30年7月27日(2018.7.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備すること、
前記海水を貝類に接触させることを含み、
前記気泡は、直径１００ｎｍ未満の超微細気泡を有し、
前記超微細気泡がウイルスに吸着して脱離する選択的吸着脱離により、前記超微細気泡を含有する前記海水が前記貝類に蓄積されたウイルスを排出することを特徴とする、貝類の浄化方法。
【請求項２】
さらに、前記超微細気泡は、前記海水に超音波が照射されて気泡が圧壊されることにより発生され、
前記超音波により前記海水のウイルスを不活化する、請求項１に記載の貝類の浄化方法。
【請求項３】
前記超微細気泡は、ウイルスのサイズと同程度の２０ｎｍ〜７０ｎｍ程度の直径を有する、請求項１または２に記載の貝類の浄化方法。
【請求項４】
さらに、前記貝類に接触した前記海水を清浄化した後に再び前記貝類に接触させることを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項５】
さらに、前記貝類に接触した前記海水をかけ流しで海域へ放出することを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項６】
前記海水を海域へ放出することは、放出前に前記海水を清浄化することを含む、請求項５に記載の貝類の浄化方法。
【請求項７】
前記貝類は、前記貯留部の下方に配置され、
前記貝類に接触する海水は、高濃度の前記超微細気泡を有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項８】
清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備することは、紫外線を前記海水に照射することにより前記海水を清浄化することを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の貝類の浄化方法。
【請求項９】
海水を紫外線により清浄化する清浄化部と、
海水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの超微細気泡を発生させる超微細気泡生成部と、
前記清浄化部と前記超微細気泡生成部とに接続され、前記海水を貯留する貯留部とを備え、
前記貯留部は貝類を保持することを含み、
前記超微細気泡がウイルスに吸着して脱離する選択的吸着脱離により、前記超微細気泡を含有する前記海水が前記貝類に蓄積されたウイルスを排出させることを特徴とする、貝類の浄化システム。
【請求項１０】
海水を殺菌料により清浄化する清浄化部と、
海水中に直径１００ｎｍ未満の酸素ガスの超微細気泡を発生させる超微細気泡生成部と、
前記清浄化部と前記超微細気泡生成部とに接続され、前記海水を貯留する貯留部とを備え、
前記貯留部は貝類を保持することを含み
前記超微細気泡がウイルスに吸着して脱離する選択的吸着脱離により、前記超微細気泡を含有する前記海水が前記貝類に蓄積されたウイルスを排出させることを特徴とする、貝類の浄化システム。
【請求項１１】
さらに、前記清浄化部と前記超微細気泡生成部と前記貯留部とは、循環経路に組み込まれ、前記海水を循環させ、
前記超微細気泡生成部は、循環する前記海水に超音波を照射して気泡を圧壊することにより、前記超微細気泡を繰り返し生成する、請求項９または１０に記載の貝類の浄化システム。
【手続補正書】
【提出日】平成30年12月6日(2018.12.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
清浄化され、かつ酸素ガスの気泡を含有させた海水を貯留部に準備すること、
前記海水を貝類に接触させることを含み、
前記気泡は、直径１００ｎｍ未満の超微細気泡を有し、
前記超微細気泡がウイルスに吸着して脱離する選択的吸着脱離により、前記超微細気泡を含有する前記海水が前記貝類に蓄積されたウイルスを排出することを特徴とし、
さらに、前記超微細気泡は、前記海水に超音波が照射されて気泡が圧壊されることにより発生され、
前記超音波により前記海水のウイルスを不活化する、貝類の浄化方法。
【請求項２】
前記超微細気泡は、ウイルスのサイズと同程度の２０ｎｍ〜７０ｎｍ程度の直径を有する、請求項１に記載の貝類の浄化方法。
【請求項３】
さらに、前記貝類に接触した前記海水を清浄化した後に再び前記貝類に接触させることを含む、請求項１または２に記載の貝類の浄化方法。
【請求項４】
さらに、前記貝類に接触した前記海水をかけ流しで海域へ放出することを含む、請求項１または２に記載の貝類の浄化方法。
【請求項５】
前記海水を海域へ放出することは、放出前に前記海水を清浄化することを含む、請求項４に記載の貝類の浄化方法。
【手続補正書】
【提出日】平成30年12月7日(2018.12.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８５】
ところで、盲管状の消化盲嚢には粒径の大きい粒子は入っていくことはできないが、１００ｎｍ未満の粒径の超微細気泡であれば消化盲嚢に容易に侵入することができ、蓄積されたウイルスを吸着脱離し、ウイルス等を浄化することができる。しかし、消化盲嚢に侵入した超微細気泡そのものは、ウイルス等に対して十分な不活化効果を有さず、ウイルス等を吸着して中腸腺から脱離させるのみである。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１００】
次に、ウイルス取込試験として、ウイルス液を添加した海水に牡蠣を投入し、牡蠣へウイルスが取り込まれるか検証したところ、牡蠣にウイルスが取り込まれることが確認された。さらに、牡蠣の浄化試験として、ウイルスを取り込んだ牡蠣を用いて海水に超微細気泡を含有させることにより、牡蠣に取り込まれたウイルスが超微細気泡により選択的吸着脱離され、牡蠣の中腸腺から排出されることが確認された。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１６】
次に、試験用海水Ｔ１に１０時間沈めた後のマガキＭ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、Ｍ５およびイワガキＩ１、Ｉ２、Ｉ３、Ｉ４、Ｉ５から中腸腺を取出し、ウイルスを回収した。調整した中腸腺のサンプルは、ＰＥＧ沈殿により濃縮し、プラーク法により感染価を測定した。牡蠣に取り込まれたウイルスの感染価(ＰＥＧ沈殿後による濃縮後の感染価)を図１２（Ｂ）および図１３に示す。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１７】
牡蠣のウイルス取込試験において、牡蠣ごとに感染の程度は異なるものの、平均として、マガキは、２．１×１０＾４、イワガキは、９．５×１０＾３の感染価であった。この結果より、ウイルス液を加えた海水に牡蠣を１０時間沈めることで牡蠣の中腸腺にウイルスが取り込まれることが確認された。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２３】
ＵＦＢ・ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、ウイルスを感染させたウイルス取り込み後の５個のマガキの中腸腺から検出された感染価の平均値は１．２×１０＾５であったのに対し、浄化処試験後の５個のマガキでは、感染価の平均値は４．４×１０＾１以下となった。また、浄化試験後の５個のマガキ全てにおいて、感染価は検出限界値未満であった。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２４】
一方、ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、ウイルスを感染させたウイルス取り込み後の５個のマガキの中腸腺から検出された感染価の平均値は４．５×１０＾４であったのに対し、浄化試験後の５個のマガキでは感染価の平均値は３．７×１０＾２となった。図１５には、これらの結果をグラフ化した図を示す。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２５】
図１６に２０個のイワガキを用いたＵＦＢ・ＵＶ浄化試験とＵＶ浄化試験との比較結果を示す。ＵＦＢ・ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、ウイルスを感染させたウイルス取り込み後の５個のイワガキの中腸腺から検出された感染価の平均値は５．６×１０＾４であったのに対し、浄化試験後の５個のイワガキでは、感染価の平均値は４．４×１０＾１以下となった。また、浄化試験後の５個中４個のイワガキで、感染価は検出限界値未満となった。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２６】
一方、ＵＶ浄化試験では、牡蠣を試験用海水Ｔ２に沈め、牡蠣にウイルスを感染させたウイルス取り込み後は、イワガキの中腸腺から検出された感染価の平均値は１．５×１０^４であったのに対し、浄化試験後は、感染価が７．８×１０^２となった。なお、ＵＶ浄化試験前の５個のイワガキおよびＵＶ浄化試験後の５個のイワガキの内、１個のイワガキは感染価が検出限界値未満となった。図１７には、これらの結果をグラフ化した図を示す。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２９】
以上の試験結果から、ＵＦＢ処理による超微細気泡が牡蠣の中腸腺内に侵入し、ウイルスを選択的吸着脱離し、ＵＶ処理による紫外線で選択的吸着脱離されたウイルスが不活化されていることがわかる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３０】
なお、このような試験を行った背景として、ノロウイルスは人体の腸管で増殖し、人体から排泄されて、河川、下水等を介して海域に到達し、カキ等２枚貝の中腸腺に蓄積されることが知られている。また、ノロウイルスの蓄積されたカキ等２枚貝を生食または十分に加熱処理（中心温度８５℃以上で９０秒以上の加熱）しないで食するとノロウイルス感染症を発症する危険の有ることが知られている。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３２】
上記に示すウイルスの不活化試験では、この点に着目してアメリカＦＤＡ（米国医薬品食品局）でノロウイルスの代替菌として認定されている人には感染しないネコカリシウイルスを用いて、紫外線による不活化処理のみと紫外線による不活化処理に加え、超微細気泡による浄化処理との効果の違いを証明したものである。本浄化方法は従来技術では不可能であったカキ等２枚貝の中腸腺に蓄積された感染価を有するノロウイルスを検出限界以下とすることを可能とするものである。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３】
2019138590.tif 000021
【手続補正１３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１３】
2019138590.tif 000022
【国際調査報告】
2019138590.tif 000023
2019138590.tif 000024