(57)【要約】  医薬品の原薬としての利用可能性を有する、式（Ｉ）で表される化合物の結晶を提供する。    【化１】2018207715.tif 000010
2018207715.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で表される２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの結晶。
【化１】
2018207715.tif 000009
【請求項２】
請求項１記載の結晶であって、
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．８°に回折ピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の１型結晶。
【請求項３】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°、１０．８°および３０．４°に回折ピークを有する、請求項２記載の結晶。
【請求項４】
請求項１記載の結晶であって、
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６５．８ｐｐｍ、１０７．２ｐｐｍ、１１３．４ｐｐｍ、１２６．４ｐｐｍ、１４５．１ｐｐｍおよび１６０．１ｐｐｍにピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の１型結晶。
【請求項５】
請求項１記載の結晶であって、
図１で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の１型結晶。
【請求項６】
請求項１記載の結晶であって、
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）２４．４°に回折ピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の３型結晶。
【請求項７】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１５．８°、１８．４°および２４．４°に回折ピークを有する、請求項６記載の結晶。
【請求項８】
請求項１記載の結晶であって、
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６４．３ｐｐｍ、１１０．４ｐｐｍ、１２２．７ｐｐｍおよび１２７．１ｐｐｍにピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の３型結晶。
【請求項９】
請求項１記載の結晶であって、
図３で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の３型結晶。
【請求項１０】
請求項１記載の結晶であって、
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．５°に回折ピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの水和物の結晶。
【請求項１１】
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．５°、１４．０°および２７．２°に回折ピークを有する、請求項１０記載の結晶。
【請求項１２】
請求項１記載の結晶であって、
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６３．７ｐｐｍ、１００．４ｐｐｍ、１０９．６ｐｐｍ、１１７．２ｐｐｍ、１２９．１ｐｐｍ、１４７．３ｐｐｍおよび１５６．３ｐｐｍにピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの水和物の結晶。
【請求項１３】
請求項１記載の結晶であって、
図５で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの水和物の結晶。
【請求項１４】
請求項１−１３のいずれか一項に記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソキサゾールプロピオン酸（ＡＭＰＡ）受容体阻害作用を有するピラノジピリジン化合物の結晶に関する。
【背景技術】
【０００２】
中枢神経系において興奮性の情報伝達はシナプス前部から放出されるグルタミン酸が重要な役割を果たすことが知られている。この作用はシナプス後部に存在するグルタミン酸受容体に結合することで引き起こされる。グルタミン酸受容体は、イオンチャネル型受容体とＧタンパク質結合型受容体に分類され、前者はさらにα−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソキサゾールプロピオン酸（ＡＭＰＡ）受容体、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体、カイニン酸受容体等に分類される。この中でＡＭＰＡ受容体は脳内で広範に発現する受容体であり、早い興奮性シナプス伝達やシナプス可塑性の調節において中心的な役割を果たす。
このようにＡＭＰＡ受容体は生理的に重要な役割を果たすため、その機能異常はＡＭＰＡ受容体が存在する神経を異常に興奮させる等して、様々な疾患に関与することが知られている。例えば、てんかん、各種痛み（末梢神経性疼痛、中枢神経性疼痛、侵害受容性疼痛（それぞれ慢性、急性または間歇性疼痛を含む））、多発性硬化症等の各種脱髄性疾患、パーキンソン病・アルツハイマー病・筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）・ハンチントン舞踏病・ＡＩＤＳ性神経障害等各種神経変性疾患、不安、鬱病、双極性気分障害、依存、薬物乱用、統合失調症等各種精神性疾患、脳虚血、頭部外傷、脳脊髄損傷、振戦、ジストニア、ジスキネジア等運動機能障害、自閉症等発達障害などへの関与が知られている。したがってＡＭＰＡ受容体の阻害剤（ＡＭＰＡ阻害剤）はこれら疾患の治療につながることが期待されるが、特にてんかん治療における有用性はよく知られている（非特許文献１）。
てんかんは最も頻度の高い中枢神経疾患の１つであり、全世界で約５，０００万人以上の患者がいる。世界保健機関の定義では「種々の病因によってもたらされる慢性の脳疾患であり、大脳ニューロンの過剰な放電から由来する反復性の発作（てんかん発作）を主徴とし、それに変異に富んだ臨床ならびに検査所見の表出が伴う」とされる。
てんかんの発作としては、例えば、単純部分発作、複雑部分発作および二次性全般化発作等の部分発作、欠神発作、ミオクロニ一発作、間代発作、強直発作、強直間代発作、脱力発作、結節性硬化症、ドラベ症候群、進行性ミオクローヌス、ラフォラ病、ウンフェルリヒト・ルントボルク病、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症、脆弱Ｘ症候群、Ｗｅｓｔ症候群およびＬｅｎｎｏｘ−Ｇａｓｔａｕｔ症候群等が知られている。てんかんの治療は、抗てんかん薬による薬物療法が中心である。てんかん治療の目標はてんかん発作の消失と治療に伴う副作用を発現させないことである。抗てんかん薬物を用いた治療は原則として単剤よりはじめられる。単剤治療は通常２−３種類の異なる薬剤で順次行い、それでも奏功しない場合には、多剤併用治療を行う。新たに発病したてんかん患者の約７０％は抗てんかん薬治療で発作の寛解が期待できる。しかしながら、残りの約３０％の患者では多剤併用療法を含む薬物治療によっても、てんかん発作は抑制され難いことが知られている。
てんかん発作は神経の一部の異常興奮が集団全体の異常な同期発火に発展することで引き起こされると考えられているが、その発生および伝播にはグルタミン酸神経、特にＡＭＰＡ受容体が中心的な役割を果たすことが多数報告されている。例えばラットビククリン誘発痙攣モデルにおいて、ＡＭＰＡ阻害剤が痙攣の発生と伝播を抑制することが報告されている他（非特許文献２、非特許文献３）、幅広い痙攣モデルにおいてＡＭＰＡ阻害剤が強力な抗痙攣作用を示すことがよく知られている（非特許文献４、非特許文献５）さらに、極めて重度かつ持続的な痙攣を引き起こすてんかん重積症モデルにおいても発作停止作用を持つことが知られていることから、てんかん重積症への応用も期待されている（非特許文献６）。
ヒトにおいてもてんかん患者から採取したてんかん焦点を含む海馬神経細胞においてＡＭＰＡ受容体の発現が上昇していることが報告されている（非特許文献７）。さらにＡＭＰＡ受容体阻害剤がヒトで抗痙攣作用を有することが報告されていることから、ＡＭＰＡ受容体阻害剤は特にてんかん治療剤としての有効性が期待されている（非特許文献５）。
上記の通りＡＭＰＡ阻害剤はてんかんを初めとする様々な中枢疾患治療薬になり得ると期待されるが、主薬効とほぼ同等、またはより低い用量から鎮静や協調運動失調等中枢抑制作用を引き起こすことが知られている（非特許文献８）。ヒトでは用量を漸増させていくことで、中枢抑制作用が低減されることが報告されているが（非特許文献９）、中〜高用量では中枢抑制作用が認められるため長期服用を必要とするてんかん患者の生活の質を低下させると共に、用量の制限につながる課題となっている。【０００３】
ＡＭＰＡ受容体阻害作用を有する化合物として、以下の化合物が知られている（特許文献１）。
【化１】
2018207715.tif 000003
［式中、Ａ１、Ａ２およびＡ３はそれぞれ独立に、Ｃ６−１４芳香族炭化水素環式基や５−１４員芳香族複素環式基でもよく、Ｘ１、Ｘ２およびＸ３はそれぞれ独立に単結合でよく、Ｑは酸素原子でもよく、Ｚは炭素原子でもよく、Ｒ１およびＲ２はＣＲ２−ＺＲ１がＣ＝Ｃで表される炭素炭素二重結合を形成するようにＲ１とＲ２どうし結合してもよく、Ｒ３はＡ３上のいずれかの原子と結合して当該原子とともに置換されていてもよい５乃至８員複素環を形成してもよい。］
特に特許文献１には実施例９として、下記式
【化２】
2018207715.tif 000004
で表される三環系骨格を持つ化合物が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第０２／２２５８７号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｄａｎｉｅｌａ  Ｃａｔａｒｚｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２，ｐｐ．２３９−２７８，  ２００７
【非特許文献２】Ｒｏｇａｗｓｋｉ  ＭＡ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｓｃａｎｄ  Ｓｕｐｐｌ．  ２０１３；（１９７）：９−１８
【非特許文献３】Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｔｏｒｔｏｒｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．  ＪＰＥＴ  ２８０：１４０１−１４０５，  １９９７
【非特許文献４】Ｄｅ  Ｓａｒｒｏ  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｕｒｒ  Ｔｏｐ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．  ２００５；５（１）：３１−４２
【非特許文献５】Ｒｕｓｓｏ  Ｅ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ．  ２０１２  Ｓｅｐ；２１（９）：１３７１−８９．
【非特許文献６】Ｂｒｉｔａ  Ｆｒｉｔｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ，  ５１（１）：１０８−１１７，  ２０１０
【非特許文献７】Ｈｏｓｆｏｒｄ  ＤＡ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  １９９１；  １１：  ４２８−４３４
【非特許文献８】Ｓｈｕｎ−ｉｃｈｉ  Ｙａｍａｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．  Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  １５  （１９９３）  １７９−１８４
【非特許文献９】Ｈａｎａｄａ  Ｔ．  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  ２０１４  Ｆｅｂ  ２４，９（４）：４４９−４５８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
下記式（Ｉ）で表わされる化合物（２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリル、以下「化合物（Ｉ）」ともいう。）は、ＡＭＰＡ受容体阻害作用を有し、かつ中枢抑制作用を低減した、てんかん治療剤としての利用可能性を有している。
【化３】
2018207715.tif 000005
【０００７】
一般に、医薬品として用いられる化合物及びその結晶の物性は、薬物のバイオアベイラビリティー、原薬の純度、製剤の処方などに大きな影響を与える。したがって、本発明の目的は、化合物（Ｉ）の結晶を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、化合物（Ｉ）について、上記事情に鑑み鋭意研究を重ねた結果、化合物（Ｉ）の結晶を見出し、本発明を完成した。【０００９】
すなわち、本発明は以下の＜１＞から＜１８＞に関する。
＜１＞式（Ｉ）で表される２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの結晶。
【化４】
2018207715.tif 000006
＜２＞＜１＞記載の結晶であって、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．８°に回折ピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の１型結晶（１型無水物結晶）。
＜３＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°、１０．８°および３０．４°に回折ピークを有する、＜２＞記載の結晶。
＜３．１＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°、１０．８°、１６．８°、２６．２°および３０．４°に回折ピークを有する、＜２＞記載の結晶。
＜３．２＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°、１０．８°、１６．８°、１８．７°、２３．４°、２４．９°、２６．２°、２７．１°、２８．１°および３０．４°に回折ピークを有する、＜２＞記載の結晶。
＜４＞＜１＞記載の結晶であって、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６５．８ｐｐｍ、１０７．２ｐｐｍ、１１３．４ｐｐｍ、１２６．４ｐｐｍ、１４５．１ｐｐｍおよび１６０．１ｐｐｍにピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の１型結晶。
＜５＞＜１＞記載の結晶であって、図１で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の１型結晶。
＜６＞＜１＞記載の結晶であって、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）２４．４°に回折ピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の３型結晶（３型無水物結晶）。
＜７＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１５．８°、１８．４°および２４．４°に回折ピークを有する、＜６＞記載の結晶。
＜７．１＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１３．７°、１５．８°、１８．４°および２４．４°に回折ピークを有する、＜６＞記載の結晶。
＜７．２＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１１．８°、１３．７°、１５．８°、１７．５°、１８．４°、１９．３°、２１．１°、２３．６°、２４．４°および２６．０°に回折ピークを有する、＜６＞記載の結晶。
＜８＞＜１＞記載の結晶であって、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６４．３ｐｐｍ、１１０．４ｐｐｍ、１２２．７ｐｐｍおよび１２７．１ｐｐｍにピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の３型結晶。
＜９＞＜１＞記載の結晶であって、図３で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの無水物の３型結晶。
＜１０＞＜１＞記載の結晶であって、粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．５°に回折ピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの水和物の結晶（水和物結晶）。
＜１１＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．５°、１４．０°および２７．２°に回折ピークを有する、＜１０＞記載の結晶。
＜１１．１＞粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．５°、８．５°、１４．０°、１５．４°、１６．１°、１７．０°、２２．６°、２６．５°および２７．２°に回折ピークを有する、＜１０＞記載の結晶。
＜１２＞＜１＞記載の結晶であって、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６３．７ｐｐｍ、１００．４ｐｐｍ、１０９．６ｐｐｍ、１１７．２ｐｐｍ、１２９．１ｐｐｍ、１４７．３ｐｐｍおよび１５６．３ｐｐｍにピークを有する、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの水和物の結晶。
＜１３＞＜１＞記載の結晶であって、図５で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す、２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの水和物の結晶。
＜１４＞＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の結晶を有効成分として含有する医薬組成物。
＜１５＞ＡＭＰＡ受容体阻害剤である＜１４＞記載の医薬組成物。
＜１６＞てんかんの治療のための＜１４＞記載の医薬組成物。
＜１７＞＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の結晶を含有してなるてんかんの治療剤。
＜１８＞＜１＞〜＜１３＞のいずれか記載の結晶を患者に投与する、てんかんの治療方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、医薬品の原薬としての利用可能性が期待される、良好な物性を有する化合物（Ｉ）の結晶を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、実施例１で得られた化合物（Ｉ）の１型無水物結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図２】図２は実施例１で得られた化合物（Ｉ）の１型無水物結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルである。横軸は化学シフト（δ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図３】図３は、実施例２で得られた化合物（Ｉ）の３型無水物結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図４】図４は実施例２で得られた化合物（Ｉ）の３型無水物結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルである。横軸は化学シフト（δ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図５】図５は、実施例３で得られた化合物（Ｉ）の水和物結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図６】図６は、実施例３で得られた化合物（Ｉ）の水和物結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルである。横軸は化学シフト（δ）、縦軸はピーク強度を示す。
【図７】図７は、実施例３で得られた化合物（Ｉ）の水和物結晶の熱分析ＴＧ−ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の化合物（Ｉ）の結晶及びその製造方法について詳細に説明する。
【００１３】
本明細書において「結晶」とは、化合物（Ｉ）の無水物または水和物の結晶を意味する。
【００１４】
本明細書において、好ましい化合物（Ｉ）の結晶としては、
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．８°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（１型無水物結晶）；
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°、１０．８°および３０．４°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（１型無水物結晶）；
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１０．２°、１０．８°、１６．８°、２６．２°および３０．４°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（１型無水物結晶）；
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６５．８ｐｐｍ、１０７．２ｐｐｍ、１１３．４ｐｐｍ、１２６．４ｐｐｍ、１４５．１ｐｐｍおよび１６０．１ｐｐｍにピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（１型無水物結晶）；
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）２４．４°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（３型無水物結晶）；
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１５．８°、１８．４°および２４．４°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（３型無水物結晶）；
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１３．７°、１５．８°、１８．４°および２４．４°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（３型無水物結晶）；
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６４．３ｐｐｍ、１１０．４ｐｐｍ、１２２．７ｐｐｍおよび１２７．１ｐｐｍにピークを有する、化合物（Ｉ）の無水物の結晶（３型無水物結晶）；
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．５°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の水和物の結晶（水和物結晶）；
粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．５°、１４．０°および２７．２°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の水和物の結晶（水和物結晶）；
１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６３．７ｐｐｍ、１００．４ｐｐｍ、１０９．６ｐｐｍ、１１７．２ｐｐｍ、１２９．１ｐｐｍ、１４７．３ｐｐｍおよび１５６．３ｐｐｍにピークを有する化合物（Ｉ）の水和物の結晶（水和物結晶）などを挙げることができる。
【００１５】
上記記載の粉末Ｘ線回折における回折ピークおよび１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトは、化合物（Ｉ）の１型無水物結晶、化合物（Ｉ）の３型無水物結晶および化合物（Ｉ）の水和物結晶にそれぞれ特有なものであり、当該結晶に特徴的なピークである。
【００１６】
一般に、粉末Ｘ線回折における回折角度（２θ）は±０．２°の範囲内で誤差が生じ得るため、上記の回折角度の値は±０．２°程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、特定の化合物において、粉末Ｘ線回折におけるピークの回折角度が完全に一致する結晶だけでなく、ピークの回折角度が±０．２°程度の誤差で一致する結晶も同一であり、本発明に含まれる。
【００１７】
本明細書において、例えば、「回折角度（２θ±０．２°）１０．８°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）１０．６°〜１１．０°に回折ピークを有する」ということを意味し、その他の回折角度の場合も同様である。
【００１８】
また、一般に、粉末Ｘ線回折における回折角度（２θ）のピーク強度または半値幅は、結晶形が同一であっても、測定条件の違いや測定試料として用いる粉末結晶の各粒子の大きさや形状のばらつきにより、測定ごとに異なり、必ずしも一定のピーク強度または半値幅が常に示されるとは限らない。そのため、粉末Ｘ線回折パターンの比較において、同じ回折角度（２θ）で、そのピーク強度または半値幅に違いがあっても、その違いは、異なる結晶形に由来することを意味するものではない。したがって、本発明の特定の結晶に特徴的な回折ピークに対して、そのような違いを有する粉末Ｘ線回折パターンの当該結晶は、本発明の結晶と同一の結晶形であることを意味する。また、本明細書において「図１の粉末Ｘ線回折パターンを有する」とは、特徴的な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折パターンが、図１で表される粉末Ｘ線回折パターンに完全に一致する場合だけでなく、特徴的な回折角度が一致するもののピーク強度または半値幅が異なる粉末Ｘ線回折パターンの場合であっても、図１で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す結晶はすべて、本発明の結晶と同一の結晶であることを意味する。
【００１９】
本明細書において、「化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６５．８ｐｐｍ、１０７．２ｐｐｍ、１１３．４ｐｐｍ、１２６．４ｐｐｍ、１４５．１ｐｐｍおよび１６０．１ｐｐｍ」とは、「通常の測定条件または本明細書と実質的に同一の条件にて１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトル測定を行い、それぞれ、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６５．８ｐｐｍ、１０７．２ｐｐｍ、１１３．４ｐｐｍ、１２６．４ｐｐｍ、１４５．１ｐｐｍおよび１６０．１ｐｐｍと実質的に同等なピークを有すること」を意味する。
【００２０】
「実質的に同等なピークを有する」か否かの判断に際して、一般に、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトδは、±０．５ｐｐｍの範囲内で誤差が生じ得るため、上記の化学シフトの値は、±０．５ｐｐｍ程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトが完全に一致する結晶だけでなく、化学シフトが±０．５ｐｐｍ程度の誤差で一致する結晶も本発明に含まれる。それ故に、本明細書において、例えば「化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）６５．８ｐｐｍにピークを有する」とは、化学シフト（δ）６５．３ｐｐｍ〜６６．３ｐｐｍの範囲にピークを有することを意味し、その他の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトの場合も同様である。
【００２１】
以下に、本発明の一実施形態である化合物（Ｉ）の結晶等の製造方法について説明する。
【００２２】
化合物（Ｉ）の製造方法
化合物（Ｉ）は、当業者に周知な方法により製造されたものであってもよい。例えば、化合物（Ｉ）は、後述する参考例に記載の方法で合成することができる。
【００２３】
化合物（Ｉ）の結晶の製造方法
以下に化合物（Ｉ）の結晶の製造方法について説明する。化合物（Ｉ）の結晶は、化合物（Ｉ）を、溶媒中で加熱溶解し、攪拌下冷却して晶析することにより製造することもできる。例えば、化合物（Ｉ）の無水物の１型結晶及び３型結晶、並びに化合物（Ｉ）の水和物の結晶は、実施例に記載の方法を適宜変更して製造することもできる。
【００２４】
晶析に使用する化合物（Ｉ）は、どのような形態であってもよく、溶媒和物、水和物または無水物でもよく、非晶質でも結晶質（複数の結晶多形からなるものを含む）でもよく、これらの混合物でもよい。
【００２５】
晶析に使用する溶媒は、例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール、１−プロパノール、１−ブタノール等のアルコール系溶媒；アセトニトリル；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド系溶媒；酢酸エチル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ヘプタン等の飽和炭化水素系溶媒；アセトン、２−ブタノン等のケトン系溶媒；ｔ−ブチルメチルエーテル等のエーテル系溶媒または水を挙げることができる。また、これらの溶媒は単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。エタノールと水の混合溶媒等の含水溶媒を用いて晶析すると、化合物（Ｉ）の水和物の結晶が得られる。
【００２６】
溶媒の使用量は、化合物（Ｉ）が加熱により溶解する量または懸濁液が攪拌可能となる量を下限とし、結晶の収量が著しく低下しない量を上限として適宜選択することができる。
【００２７】
晶析において、所望の化合物（Ｉ）の結晶を種結晶として加えてもよい。種結晶を加える際の溶液の温度は、特に限定されないが、好ましくは０〜８０℃である。
【００２８】
化合物（Ｉ）を加熱して溶解する場合の温度は、溶媒に応じて化合物（Ｉ）が溶解する温度を適宜選択すればよく、好ましくは５０℃から溶媒が還流を開始する温度の範囲であり、より好ましくは５５〜８０℃である。
【００２９】
晶析時の冷却は、急冷すると態様の異なる結晶（多形）を含むものを与えうるので、結晶の品質や粒度等への影響を考慮して適宜冷却速度を調整して実施することが好ましい。好ましい冷却速度は、例えば５〜４０℃／時間である。
【００３０】
また、最終的な晶析温度は、結晶の収量と品質等から適宜選択することができるが、好ましくは−２５〜３０℃である。
【００３１】
晶析した結晶を通常のろ過操作で分離し、目的の結晶を得ることができる。必要に応じてろ別した結晶を溶媒で洗浄し、さらにこれを乾燥してもよい。結晶の洗浄に使用する溶媒には、晶析溶媒と同様のものを使用できる。好ましくは、例えば、エタノール、アセトン、２−ブタノン、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ｔ−ブチルメチルエーテル、ヘキサン等を挙げることができる。また、これらの溶媒は単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。
【００３２】
ろ過操作で分離した結晶は、適宜、大気下または窒素気流下に放置することにより、または加熱によって乾燥することができる。
【００３３】
乾燥時間は、残留溶媒が所定の量を下回るまでの時間を製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。また、乾燥は通風下でも減圧下でも行うことができる。減圧度は、製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。得られた結晶は、乾燥後、必要に応じて大気中に放置することもできる。
【００３４】
以上に説明した製造方法によって得られる化合物（Ｉ）の結晶は、後述の薬理試験例における活性データに示されているように、ＡＭＰＡ受容体阻害作用を有することにより、てんかんの治療剤としての利用可能性を有している。
【００３５】
［医薬組成物］
本発明の他の実施形態は、化合物（Ｉ）の結晶及び薬剤学的に許容される添加物を含有する医薬組成物である。医薬組成物は、薬剤学的に許容される添加物を化合物（Ｉ）の結晶と混和することにより製造することができる。本発明に係る医薬組成物は例えば第十六改正日本薬局方の製剤総則に記載の方法など既知の方法に従って製造することができる。
本実施形態に係る医薬組成物は、その剤形に応じて適切に患者に投与することができる。
【００３６】
本発明に係る化合物（Ｉ）の投与量は、症状の程度、年齢、性別、体重、投与形態・塩の種類、疾患の具体的な種類等に応じて異なるが、通常、成人の場合は１日あたり経口投与で約３０μｇ〜１０ｇ、好ましくは１００μｇ〜５ｇ、さらに好ましくは１００μｇ〜１ｇを、注射投与で約３０μｇ〜１ｇ、好ましくは１００μｇ〜５００ｍｇ、さらに好ましくは１００μｇ〜３００ｍｇをそれぞれ１回または数回に分けて投与する。
【実施例】
【００３７】
本発明の化合物（Ｉ）の結晶は、例えば、以下の実施例に記載した方法により製造することができ、また、当該化合物が奏する効果は、以下の試験例に記載した方法により確認することができる。ただし、これらは例示的なものであって、本発明は、如何なる場合も以下の具体例に制限されるものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。【００３８】
以下の実施例において製造された結晶の粉末Ｘ線結晶回折は、得られた結晶を、粉末Ｘ線回折装置の試料台に載せ、下記の条件で分析した。
（測定条件）
サンプルホルダー：アルミニウム製ホルダー
ターゲット：銅
検出器：シンチレーションカウンター
管電圧：５０ｋＶ
管電流：３００ｍＡ
スリット：発散スリット０．５ｍｍ、散乱スリット開放、受光スリット開放
走査速度：５°／分
サンプリング間隔：０．０２°
走査範囲：５〜３５°【００３９】
結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルは、以下の条件で測定した。
（測定条件）
使用装置：Ａｖａｎｃｅ４００ＭＨｚ（ＢＲＵＫＥＲ社製）７ｍｍ−ＣＰＭＡＳプローブ（ＢＲＵＫＥＲ社製）
測定核：１３Ｃ（１００．６２４８４２５ＭＨｚ）
測定温度：室温（２２℃）
パルスモード：ＣＰＴＯＳＳ測定（スピニングサイドバンド消去法）
回転数：５０００Ｈｚ
パルス繰り返し時間：６０ｓｅｃ
コンタクトタイム：１ｍｓｅｃ
積算回数：２４００回
基準物質：グリシン（外部基準：１７６．０３ｐｐｍ）【００４０】
文献名等が記載されている化合物は、その文献等に従って製造したことを示す。【００４１】
また、本明細書に使用される略号は当業者に周知の慣用的な略号である。本明細書においては下記の略号を使用する。
（Ａｔａｐｈｏｓ）２ＰｄＣｌ２：ビス（ジ−ｔ−ブチル（４−ジメチルアミノフェニル）ホスフィン）ジクロロパラジウム（ＩＩ）
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ｎ−：ノルマル
ＮＢＳ：Ｎ−ブロモスクシンイミド
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
１Ｈ−ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴スペクトルメトリー
ＭＳ：マススペクトルメトリー【００４２】
以下の実施例および参考例中の「室温」は通常約１０℃から約３５℃を示す。％は特記しない限り重量パーセントを示す。【００４３】
プロトン核磁気共鳴スペクトルの化学シフトは、テトラメチルシランに対するδ単位（ｐｐｍ）で記録され、カップリング定数はヘルツ（Ｈｚ）で記録されている。分裂パターンの略号は以下の通りである。
ｓ：シングレット、ｄ：ダブレット、ｔ：トリプレット、ｑ：カルテット、ｍ：マルチプレット、ｂｒ．ｓ：ブロードシングレット。【００４４】
参考例においてマイクロウェーブ反応装置を用いた反応は、Ｂｉｏｔａｇｅ社製ｉｎｉｔｉａｔｏｒＴＭまたはｉｎｉｔｉａｔｏｒ＋ＴＭを用いた。【００４５】
クロマトグラフィーに関して、シリカゲルは、Ｍｅｒｃｋ社製Ｓｉｌｉｃａ  Ｇｅｌ６０（７０−２３０ｍｅｓｈ  ＡＳＴＭ）または富士シリシア化学社製ＰＳＱ６０Ｂを用いるか、プレパックカラム｛カラム：ＹＡＭＡＺＥＮ社製  Ｈｉ−ＦｌａｓｈＴＭ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ）、サイズ：Ｓ（１６×６０ｍｍ）、Ｍ（２０×７５ｍｍ）、Ｌ（２６×１００ｍｍ）、２Ｌ（２６×１５０ｍｍ）、３Ｌ（４６×１３０ｍｍ）のいずれか、またはＢｉｏｔａｇｅ社製ＢｉｏｔａｇｅＴＭＳＮＡＰ  Ｕｌｔｒａ  Ｓｉｌｉｃａ  Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ、サイズ：１０ｇ、２５ｇ、５０ｇのいずれか｝を用いた。
ＮＨシリカゲルは、富士シリシア化学（株）製ＣＨＲＯＭＡＴＯＲＥＸ  ＮＨ−ＤＭ２０３５を用いるか、プレパックカラム｛カラム：ＹＡＭＡＺＥＮ社製  Ｈｉ−ＦｌａｓｈＴＭ  Ｃｏｌｕｍｎ（Ａｍｉｎｏ）、サイズ：Ｓ（１６×６０ｍｍ）、Ｍ（２０×７５ｍｍ）、Ｌ（２６×１００ｍｍ）、２Ｌ（２６×１５０ｍｍ）、３Ｌ（４６×１３０ｍｍ）のいずれか、もしくは和光純薬工業社製  プレセップＴＭ（ルアーロック）ＮＨ２（ＨＣ）、サイズ：タイプＭ（１４ｇ／２５ｍＬ）、タイプＬ（３４ｇ／７０ｍＬ）、タイプ２Ｌ（５０ｇ／１００ｍＬ）、タイプ３Ｌ（１１０ｇ／２００ｍＬ）のいずれか｝を用いた。
中性アルミナはＡｌｕｍｉｎｉｕｍ  ｏｘｉｄｅ  ９０  ａｃｔｉｖｅ  ｎｅｕｔｒａｌ，７０−２３０ｍｅｓｈ，Ｍｅｒｃｋ，Ｅ６ＮＸＸを用いた。【００４６】
以下に示す化合物の命名は、一般的に用いられる試薬を除き、「Ｅ−ノートブック」バージョン１２（パーキンエルマー社）で表示されたものを用いた。【００４７】
参考例１
２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの合成
【化５】
2018207715.tif 000007
【００４８】
（１）３−ブロモ−６−メトキシ−２−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジンの合成
（３−ブロモ−６−メトキシピリジン−２−イル）メタノール（ＣＡＳ  Ｎｏ．６２３９４２−８４−７）（２．１５ｇ，９．８６ｍｍｏｌ，１当量）、クロロメチル  メチル  エーテル（２．２５ｍＬ、２９．６ｍｍｏｌ、３当量）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．６１ｍＬ、４９．３ｍｍｏｌ、５当量）の混合物をＤＣＭ（４５ｍＬ）溶液中、室温にて１５時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカゲル、０％−５％酢酸エチル／ｎ−ヘプタン）で精製して標記化合物（収量：２．２２ｇ）を得た。
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２６２【００４９】
（２）（６−メトキシ−２−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジン−３−イル）ボロン酸の合成
３−ブロモ−６−メトキシ−２−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジン（１．０９ｇ、４．１６ｍｍｏｌ、１当量）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を−７８℃に冷却し、ｎ−ブチルリチウム（２．６９Ｍ  ｎ−ヘキサン溶液、１．７０ｍＬ、４．５８ｍｍｏｌ、１．１当量）を加えた。反応液を同温度で１時間攪拌した後、ホウ酸トリメチル（０．６９６ｍＬ、６．２４ｍｍｏｌ、１．５当量）を加えた。反応液を室温まで昇温させながら１２時間攪拌した後、減圧下濃縮した。残渣に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、ＤＣＭで抽出した。有機層を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％−１００％酢酸エチル／ｎ−ヘプタン）で精製して標記化合物（収量：５７０ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：３．４２（ｓ，３Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），４．７９（ｓ，２Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２２８【００５０】
（３）３，５−ジフルオロ−６’−メトキシ−２’−（（メトキシメトキシ）メチル）−２，３’−ビピリジンの合成
（６−メトキシ−２−（（メトキシメトキシ）メチル）ピリジン−３−イル）ボロン酸（５７０ｍｇ、２．５１ｍｍｏｌ、１当量）、２−ブロモ−３，５−ジフルオロピリジン（ＣＡＳ  Ｎｏ．６６０４２５−１６−１）（５６０ｍｇ、２．８９ｍｍｏｌ、１．１５当量）、フッ化カリウム（４３８ｍｇ、７．５３ｍｍｏｌ、３当量）、（Ａｔａｐｈｏｓ）２ＰｄＣｌ２（８９ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ、０．０５当量）、１，４−ジオキサン（１２ｍＬ）および水（３ｍＬ）の混合物を、マイクロウェーブ反応装置中１３０℃にて４時間反応させた。反応液を室温まで冷却した後、そのままシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカゲルの上にシリカゲル、５％−３５％酢酸エチル／ｎ−ヘプタン）で精製して標記化合物（収量：６４８ｍｇ）を得た。
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２９７【００５１】
（４）３，５−ジフルオロ−２’−（ヒドロキシメチル）−［２，３’−ビピリジン］−６’−オールの合成
３，５−ジフルオロ−６’−メトキシ−２’−（（メトキシメトキシ）メチル）−２，３’−ビピリジン（６４８ｍｇ、２．１９ｍｍｏｌ、１当量）および４８％臭化水素酸水溶液（１．９８ｍＬ、１７．５ｍｍｏｌ、８当量）の混合物をＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液中、５５℃にて８時間攪拌した。反応液を室温まで冷却した後、減圧下濃縮した。残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびＤＣＭを加えた。その混合物を室温にて１時間攪拌した後、生じた沈殿をろ取した。得られた固体を水で洗浄し、標記化合物（収量：３４９ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：４．３３（ｓ，２Ｈ），６．３５（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄｄ，Ｊ＝９．３，１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０４（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．１，８．９，２．５Ｈｚ，１Ｈ），８．５７（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２３９【００５２】
（５）３−フルオロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−８（７Ｈ）−オンの合成
３，５−ジフルオロ−２’−（ヒドロキシメチル）−［２，３’−ビピリジン］−６’−オール（３２９ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ、１当量）および炭酸カリウム（５７３ｍｇ、４．１４ｍｍｏｌ、３当量）の混合物をＤＭＦ（７ｍＬ）溶液中、１００℃にて５時間攪拌した。反応液を室温まで冷却した後、塩化アンモニウム水溶液を加えた。その混合物を室温にて３０分攪拌した後、生じた沈殿をろ取した。得られた固体を水およびｎ−ヘプタンで洗浄し、標記化合物（収量：２５１ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ（ｐｐｍ）：５．２０（ｓ，２Ｈ），６．４６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝９．７，２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２１９【００５３】
（６）３−フルオロ−７−（ピリジン−３−イル）−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−８（７Ｈ）−オンの合成
３−フルオロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−８（７Ｈ）−オン（２５０ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、１当量）、炭酸銀（４７４ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ、１．５当量）、ヨウ化銅（Ｉ）（１３１ｍｇ、０．６８７ｍｍｏｌ、０．６当量）およびピリジン（０．９２７ｍＬ、１１．５ｍｍｏｌ、１０当量）の混合物をＤＭＦ（７ｍＬ）およびＤＭＳＯ（９ｍＬ）の混合溶媒中、８０℃にて２０分攪拌した。反応液にピリジン−３−ボロン酸１，３−プロパンジオールサイクリックエステル（ＣＡＳ  Ｎｏ．１３１５３４−６５−１）（３７３ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ、２当量）のＤＭＦ（４ｍＬ）およびＤＭＳＯ（１ｍＬ）の混合溶液をゆっくり加えた。反応液を８０℃にて２０時間攪拌した後、シリカゲルパッド（ＮＨシリカゲルとシリカゲル）に供し、酢酸エチルで溶出した。得られた溶液を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲルの上にＮＨシリカゲル、１０％−１００％酢酸エチル／ｎ−ヘプタン、１０％メタノール／酢酸エチル）で精製して標記化合物（収量：４３．５ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：４．６４−４．７３（ｍ，１Ｈ），４．７７−４．８６（ｍ，１Ｈ），６．７８（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｄｄ，Ｊ＝８．９，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５１−７．５８（ｍ，１Ｈ），７．６５−７．７２（ｍ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２９（ｄ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．７９（ｄｄ，Ｊ＝４．８，１．５Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝２９６【００５４】
（７）９−ブロモ−３−フルオロ−７−（ピリジン−３−イル）−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−８（７Ｈ）−オンの合成
３−フルオロ−７−（ピリジン−３−イル）−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−８（７Ｈ）−オン（４３．５ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、１当量）およびＮＢＳ（３１．５ｍｇ、０．１７７ｍｍｏｌ、１．２当量）の混合物をアセトニトリル（３ｍＬ）溶液中、室温にて１５時間攪拌した。反応液をそのままシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲルの上にＮＨシリカゲル、１０％−１００％酢酸エチル／ｎ−ヘプタン）で精製して標記化合物（収量：３３ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：４．６０−４．７０（ｍ，１Ｈ），４．７４−４．８３（ｍ，１Ｈ），６．９５（ｄｄ，Ｊ＝８．６，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝８．１，４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６５−７．７２（ｍ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．５３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．７１（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｄｄ，Ｊ＝４．９，１．６Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ［Ｍ＋Ｎａ］＋＝３９６【００５５】
（８）２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの合成
９−ブロモ−３−フルオロ−７−（ピリジン−３−イル）−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−８（７Ｈ）−オン（１６．５ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ、１当量）、２−シアノ−３−フルオロフェニルボロン酸ピナコールエステル（ＣＡＳ  Ｎｏ．７６５９１６−９１−４）（１４．２ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ、１．３当量）、（Ａｔａｐｈｏｓ）２ＰｄＣｌ２（１．５６ｍｇ、２．２１μｍｏｌ、０．０５当量）、トリエチルアミン（０．０２５ｍＬ、０．１７６ｍｍｏｌ、４当量）、１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）および水（０．１５ｍＬ）の混合物を、マイクロウェーブ反応装置中１３０℃にて２．５時間反応させた。反応液をそのままシリカゲルカラムクロマトグラフィー（シリカゲルの上にＮＨシリカゲル、５％−９０％酢酸エチル／ｎ−ヘプタン）で精製して標記化合物（収量：１１．０ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：４．７１−４．８０（ｍ，１Ｈ），４．８６−４．９５（ｍ，１Ｈ），６．９７（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２０−７．２８（ｍ，１Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．６３（ｔｄ，Ｊ＝８．２，５．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７７（ｄｄｄ，Ｊ＝８．１，２．６，１．６Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．８１（ｄｄ，Ｊ＝４．９，１．６Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４１５【００５６】
＜実施例１＞
２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの１型無水物結晶の調製【００５７】
参考例１記載の２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリル３．２ｇをナスフラスコに量り取り、１６０ｍＬの１−ブタノールを加え、スターラーにて攪拌し懸濁させた。その後、室温で２日間攪拌した。固体をろ取して、標記化合物の無水物の１型結晶（収量：２．８ｇ）を得た。ただし、本実施例の１型無水物結晶は、実施例２の３型無水物結晶から出発すると得られない。
粉末Ｘ線回折  回折角度（２θ±０．２°）：５．１、８．７、１０．２、１０．８、１１．６、１５．４、１６．８、１８．７、１９．６、２１．１、２３．４、２４．９、２６．２、２７．１、２８．１、３０．４、３１．０
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ｓｏｌｉｄ  ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：６５．８、１０３．５、１０７．２、１１３．４、１１４．７、１２３．９、１２４．７、１２６．４、１３１．６、１３３．９、１３５．６、１４２．４、１４５．１、１４８．７、１５２．９、１５７．２、１６０．１、１６１．９【００５８】
得られた粉末Ｘ線回折パターンを図１に、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを図２に示す。【００５９】
＜実施例２＞
２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの３型無水物結晶の調製【００６０】
参考例１記載の２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリル２．２ｇをナスフラスコに量り取り、４４ｍＬの１−ブタノールを加え、スターラーにて攪拌し懸濁させた。その後、４０℃で２日間攪拌した後、室温で３日間攪拌した。固体をろ取して、標記化合物の無水物の３型結晶（収量：２．１ｇ）を得た。
粉末Ｘ線回折  回折角度（２θ±０．２°）：１１．８、１３．７、１５．８、１７．５、１８．４、１９．３、２１．１、２２．２、２３．６、２４．４、２５．５、２６．０、２７．０、３３．０
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ｓｏｌｉｄ  ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：６４．３、１０３．１、１１０．４、１１１．９、１１４．７、１２２．７、１２７．１、１３１．５、１３５．６、１４２．０、１４９．０、１５０．５、１５２．５、１５７．３、１５９．０、１６１．５【００６１】
得られた粉末Ｘ線回折パターンを図３に、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを図４に示す。【００６２】
＜実施例３＞
２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリルの水和物結晶の調製【００６３】
参考例１記載の２−フルオロ−６−（３−フルオロ−８−オキソ−７−（ピリジン−３−イル）−７，８−ジヒドロ−６Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ：５，４−ｂ’］ジピリジン−９−イル）ベンゾニトリル３９ｍｇを試験管に量り取り、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液を加え、スターラーにて攪拌し懸濁させた。その後、室温で１０日間攪拌した。固体をろ取して、標記化合物を得た。
粉末Ｘ線回折  回折角度（２θ±０．２°）：５．５、６．４、８．５、１４．０、１５．４、１６．１、１７．０、２２．６、２５．８、２６．５、２７．２
１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ｓｏｌｉｄ  ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：６３．７、１００．４、１０３．５、１０９．６、１１１．８、１１７．２、１２５．３、１２９．１、１３４．０、１３６．２、１４２．４、１４３．３、１４６．１、１４７．３、１４９．５、１５１．０、１５３．０、１５６．３、１５９．３、１６０．８、１６１．７、１６４．１【００６４】
得られた粉末Ｘ線回折パターンを図５に、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルを図６に示す。【００６５】
＜熱分析ＴＧ−ＤＴＡの測定＞
実施例３で得られた結晶（水和物結晶）をアルミニウム製試料パンに精密に秤取し、以下の条件で測定した。この水和物結晶は加熱により水を放出して１型結晶および３型結晶とは異なる無水物の結晶に変換したが、室温に戻すと、再び吸水して元の水和物結晶に戻った。
（測定条件）
雰囲気：４０ｍＬ／ｍｉｎ窒素ガス気流下
対照：空のアルミニウム製試料パン
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
サンプリング間隔：０．１ｓｅｃ
測定温度範囲：室温〜２３０℃【００６６】
得られた結果を図７に示す。【００６７】
＜薬理試験例＞
化合物（Ｉ）のＡＭＰＡ受容体阻害作用はＡＭＰＡ誘発による神経細胞へのカルシウム流入抑制作用をラット胎児大脳皮質神経細胞初代培養系により検討した。【００６８】
ＡＭＰＡ誘発神経細胞内カルシウム流入抑制作用
（培養条件）
イソフルラン麻酔した胎生１８日のウィスター系ラット（日本チャールス・リバー）の子宮より全胎仔を摘出した。全胎仔の全脳を摘出し，Ｌｅｉｂｏｖｉｔｚ’ｓ  Ｌ−１５培地または２０％ウシ胎児血清入りハンクス平衡塩溶液中で大脳皮質を分離した。トリプシン／ＤＮａｓｅ溶液で３７℃、４５〜６０分間処理した。トリプシン反応停止のため血清を加えた後、１２００〜１５００ｒｐｍ、３〜５分間遠心した。上清を除去後、Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（２％Ｂ−２７  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ等を含む。以下、「Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地」という。）を添加し、静かにピペッティングを行い、細胞が単一になるように分散させた。細胞懸濁液を軽く撹拌した後、ナイロンメッシュフィルターでろ過した。生存細胞を血算盤を用いて計数し、８〜１０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるようにＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地で希釈した。９６ウェルプレートに１００μＬずつ細胞を播種しＣＯ２インキュベーター（５％ＣＯ２、３７℃）で培養した。２４時間培養した後、培地を交換し、７〜２１日間培養した神経細胞を以下の薬理試験に使用した。【００６９】
薬理試験の当日、培地を５〜１０μｍｏｌ／Ｌ  Ｆｕｒａ２−ＡＭを含むカルシウム測定溶液（１４０ｍｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム、５ｍｍｏｌ／Ｌ塩化カリウム、２ｍｍｏｌ／Ｌ塩化マグネシウム、３ｍｍｏｌ／Ｌ塩化カルシウム、２４ｍｍｏｌ／Ｌ  Ｄ（＋）−グルコース、１０ｍｍｏｌ／Ｌ  ＨＥＰＥＳ、１μｍｏｌ／Ｌ  ＭＫ−８０１、ｐＨ７．４）に置き換え、ＣＯ２  インキュベーター（５％ＣＯ２、３７℃）で１〜２時間処置した。その後、Ｆｕｒａ２−ＡＭ溶液を含むカルシウム測定溶液を除去し、各ウェルの神経細胞をカルシウム測定溶液で２回洗浄後、５０μＬカルシウム測定溶液を各ウェルに添加した。その後、終濃度よりも３倍高い濃度で調製した試験化合物または媒体を５０μＬ添加し、約１５分間、前処置した。その後、ウェルプレートをＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｄｒｕｇ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ  ６０００（浜松ホトニクス社製）にセットした。刺激は、カルシウム測定用溶液で３．３μｍｏｌ／Ｌに調製したＡＭＰＡ刺激溶液を５０μＬで各ウェルに添加することにより行った。カルシウム濃度変化は励起波長３４０ｎｍおよび３８０ｎｍ（測定波長５４０ｎｍ）での蛍光強度の変化として測定した。細胞内カルシウム濃度変化率は以下の式で算出した。
細胞内カルシウム濃度上昇率（％コントロール）＝（Ｔｐｏｓｔ−Ｔｐｒｅ）／（Ｃｐｏｓｔ−Ｃｐｒｅ）×１００
Ｔｐｏｓｔ：刺激後の検体ウェルの蛍光強度、Ｔｐｒｅ：刺激前の検体ウェルの蛍光強度、Ｃｐｏｓｔ：刺激後のコントロールウェルの蛍光強度、Ｃｐｒｅ：刺激前のコントロールウェルの蛍光強度
また、試験化合物のＡＭＰＡ阻害に対するＩＣ５０値は、種々の濃度における細胞内カルシウム濃度上昇率より求めた。【００７０】
結果を表１に示す。この結果から、化合物（Ｉ）は充分なＡＭＰＡ受容体阻害作用を有することが明らかとなった。【００７１】
【表１】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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