(57)【要約】  Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に対して特異的なチロシンキナーゼ阻害活性を有し、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）特異的チロシンキナーゼ阻害剤、耐性変異ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がん等の予防および／または治療剤等として有用である化合物を提供すること。  式（Ｉ）：2018181777.tif 000042［式中、  Ｘは、ＯまたはＮＨを示し、  Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し；  Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し、  Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して、置換されていてもよい炭化水素基を示す。］で表される化合物（但し、以下の化合物：2018181777.tif 000043を除く。）またはその塩。
2018181777.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2018181777.tif 000039
［式中、
Ｘは、ＯまたはＮＨを示し、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し、
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して、置換されていてもよい炭化水素基を示す。］
で表される化合物（但し、以下の化合物：
【化２】
2018181777.tif 000040
を除く。）またはその塩。
【請求項２】
式（Ｉ）：
【化３】
2018181777.tif 000041
［式中、
Ｘは、ＯまたはＮＨを示し、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し、
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して、置換されていてもよい炭化水素基を示す。］
で表される化合物またはその塩を含有する、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ特異的チロシンキナーゼ阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害活性を有する化合物および当該化合物を含有するＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
肺がんの８０％は非小細胞肺がんであり、その非小細胞肺がんの２０〜３０％に、上皮成長因子受容体（Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ：ＥＧＦＲ）の遺伝子変異が認められる。主要な変異はＥＧＦＲキナーゼドメインのＬ８５８Ｒ変異もしくはｅｘｏｎ１９欠損である。この変異によりＥＧＦＲから核への細胞増殖シグナルの伝達が恒常的に活性化し、細胞ががん化する。このような活性化変異ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒもしくはｅｘｏｎ１９欠損）を持つ非小細胞肺がんに対しては、Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ（１）やＥｒｌｏｔｉｎｉｂ（２）のようなチロシンキナーゼ阻害剤（第一世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩ）が顕著な抗腫瘍効果を示す。一方、これらの薬剤を継続使用すると、多くの場合１年程度で、ＥＧＦＲに二次的な耐性変異（Ｔ７９０Ｍ）が起こり、がんが再燃する（非特許文献１）。この耐性変異に対処するため、Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ（１）の骨格にマイケル受容体を組み込んだ非可逆型阻害剤Ａｆａｔｉｎｉｂ（３）（第二世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩ）が開発された（非特許文献２）。しかしながら、この薬剤は、Ｔ７９０Ｍ二次耐性変異ＥＧＦＲのみならず、正常細胞にも存在する野生型ＥＧＦＲ（ＷＴ）も強く阻害するため、薬剤の血中濃度を十分に高めることができず、耐性変異ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がんに対しては、十分な治療効果を示すには至っていない（非特許文献３）。【０００３】
【化１】
2018181777.tif 000003
【０００４】
一方、Ｔ７９０Ｍ二次耐性変異ＥＧＦＲに対する選択的阻害活性を持つ第三世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩとして、ピリミジン骨格を持つ非可逆型阻害剤ＷＺ４００２（４）（非特許文献４）、Ｒｏｃｉｌｅｔｉｎｉｂ（ＣＯ−１６８６）（５）（非特許文献５）、Ｏｓｉｍｅｒｔｉｎｉｂ（ＡＺＤ９２９１）（６）（非特許文献６）が最近開発された。これらのうち、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ社で開発された６については、米国ＦＤＡにより画期的治療薬として迅速審査の対象となり、２０１５年１１月にＥＧＦＲ−Ｔ７９０Ｍ陽性変異非小細胞肺がん治療薬として認可された（非特許文献７）。国内でも２０１６年５月より６の臨床使用が可能となっている。【０００５】
【化２】
2018181777.tif 000004
【０００６】
しかしながら、６の治験の段階で、第三世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩに対しても耐性を示す新たなＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲが報告された（非特許文献８）。Ｔ７９０Ｍ二次耐性変異ＥＧＦＲを標的とした第三世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩはいずれも非可逆型阻害剤であり、ＥＧＦＲキナーゼドメインに存在するＣｙｓ７９７の側鎖チオール基と阻害剤のアクリルアミド部位が共有結合を形成することにより、強い抗腫瘍活性を示す。したがって、Ｃｙｓ７９７から反応性の低い側鎖ヒドロキシ基を持つＳｅｒ７９７への変異は、非可逆型阻害剤にとっては致命的である。実際、Ｃ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がんに対しては、非可逆型阻害剤のみならず、既存のＥＧＦＲ−ＴＫＩが全て無効となる（非特許文献９）。今後、第三世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩの臨床使用により、Ｃ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がんが顕在化してくることは明らかであり、この変異体に有効な第四世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩの開発は喫緊の課題と考えられる（非特許文献１０）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】V. Sharma, et al. Epidermal growth factor receptor mutations in lung cancer, Nature Reviews, 7, 169-181 (2007)
【非特許文献２】D. Li, et al. BIBW2992, an irreversible EGFR/HER2 inhibitor highly effective in preclinical lung cancer models, Oncogene, 27, 4702-4711 (2008)
【非特許文献３】Y. Kim, et al. The EGFR T790M Mutation in Acquired Resistance to an Irreversible Second-Generation EGFR Inhibitors, Molecular Cancer Therapeutics, 11, 784-791 (2012)
【非特許文献４】W. Zhou, et al. Novel mutant-selective EGFR kinase inhibitors against EGFR T790M, Nature, 462, 1070-1074 (2009)
【非特許文献５】A. O. Walter, et al. Discovery of a Mutant-Selective Covalent Inhibitor of EGFR that Overcomes T790M-Mediated Resistance in NSCLC, Cancer Discovery, 1404-1415 (2013)
【非特許文献６】D. A. E. Cross, et al. AZD9291, an Irreversible EGFR TKI, Overcomes T790M-Mediated Resistance to EGFR Inhibitors in Lung Cancer, Cancer Discovery, 1047-1061 (2014)
【非特許文献７】FDA News Release, FDA approves new pill to treat certain patients with non-small cell lung cancer, November 13, 2015
【非特許文献８】K. S. Thress, et al. Acquired EGFR C797S mutation mediates resistance to AZD9291 in non-small cell lung cancer harboring EGFR T790M, Nature Medicine, 21, 560-564 (2015)
【非特許文献９】D. Ercan, et al. EGFR Mutations and Resistance to Irreversible Pyrimidine-Based Inhibitors, Clinical Cancer Research, 21, 3913-3923 (2015)
【非特許文献１０】Y. Jia, et al. Overcoming EGFR(T790M) and EGFR(C797S) resistance with mutant-selective allosteric inhibitors, Nature, 534, 129-132 (2016)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に有効な第四世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、下式（Ｉ）で表される化合物が、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に対して特異的なチロシンキナーゼ阻害活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
具体的には、本発明者らは、海洋天然物ラメラリンを構造モチーフとする抗がん剤開発研究の一環として、がん関連キナーゼに対するラメラリン類の活性評価を実施した。その結果、ラメラリンＮ（７）が耐性変異ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）に対して阻害活性を示すことを見出した。ラメラリンＮ（７）は、可逆型阻害剤であり、活性発現をＣｙｓ７９７との共有結合形成に依存しないため、Ｃ７９７Ｓ変異に有効なＥＧＦＲ−ＴＫＩ創出のためのヒット化合物と考えられた。そこで、ヒット化合物の活性向上を目指し、ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）キナーゼドメインに対するラメラリンＮ（７）のドッキングシミュレーションを行った（図１）。その結果、キナーゼのＡＴＰ結合ポケットの開口部に配向したラメラリンＮ（７）のＡ環部置換基とその近傍の存在するＰｈｅ７９５、Ａｓｐ８００、Ｇｌｕ８０４との相互作用強化が活性向上に繋がると予想された。そこで、ラメラリンＮ（７）のＡ環部の酸素官能基部分（ＯＨ、ＯＭｅ）に種々の置換基を導入した新規ラメラリンＮ誘導体を合成し評価した。また、ラメラリンＮ（７）のＢ環部ラクトン環をラクタム環に置換したアザラメラリンＮ（８）についても同様の構造展開を行った。【００１０】
【化３】
2018181777.tif 000005
【００１１】
すなわち、本発明は以下の通りである。
［１］式（Ｉ）：【００１２】
【化４】
2018181777.tif 000006
【００１３】
［式中、
Ｘは、ＯまたはＮＨを示し、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し、
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して、置換されていてもよい炭化水素基を示す。］
で表される化合物（但し、以下の化合物：【００１４】
【化５】
2018181777.tif 000007
【００１５】
を除く。）またはその塩（本明細書中、「化合物（Ｉ）」と略記する場合がある）。
［２］式（Ｉ）：【００１６】
【化６】
2018181777.tif 000008
【００１７】
［式中、
Ｘは、ＯまたはＮＨを示し、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し；
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよい炭化水素基を示し、
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して、置換されていてもよい炭化水素基を示す。］
で表される化合物またはその塩を含有する、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ特異的チロシンキナーゼ阻害剤。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の化合物は、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に対して特異的なチロシンキナーゼ阻害活性を有し、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）特異的チロシンキナーゼ阻害剤、耐性変異ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がん等の予防および／または治療剤等として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）キナーゼドメインに対するラメラリンＮ（７）のドッキングシミュレーションを示す。
【図２】試験例４における化合物２６ｄによるＥＧＦＲシグナルの阻害を示す。
【図３】試験例５における化合物２６ｄのマウスゼノグラフトモデルにおける抗腫瘍効果を示す。
【図４】試験例５における化合物２６ｄ投与期間中のヌードマウス体重の推移を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下に、本発明を詳細に説明する。
以下、本明細書中で用いられる各置換基の定義について詳述する。特記しない限り各置換基は以下の定義を有する。
本明細書中、「ハロゲン原子」としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素が挙げられる。
本明細書中、「炭化水素基」としては、例えば、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ３−１０シクロアルキル基、Ｃ３−１０シクロアルケニル基、Ｃ６−１４アリール基、Ｃ７−１６アラルキル基が挙げられる。
本明細書中、「Ｃ１−６アルキル基」としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ２−６アルケニル基」としては、例えば、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、３−メチル−２−ブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、４−メチル−３−ペンテニル、１−ヘキセニル、３−ヘキセニル、５−ヘキセニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ２−６アルキニル基」としては、例えば、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、５−ヘキシニル、４−メチル−２−ペンチニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ３−１０シクロアルキル基」としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、アダマンチルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ３−１０シクロアルケニル基」としては、例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ６−１４アリール基」としては、例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントリル、２−アントリル、９−アントリルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ７−１６アラルキル基」としては、例えば、ベンジル、フェネチル、ナフチルメチル、フェニルプロピルが挙げられる。
【００２１】
本明細書中、「置換されていてもよい炭化水素基」の置換基としては、例えば、ハロゲン原子、ヒドロキシ基、シアノ基、ニトロ基、カルボキシ基、Ｃ１−６アルキル基でモノ−またはジ−置換されていてもよいアミノ基、グアニジノ基が挙げられる。置換基の数は、例えば、１〜５個であり、好ましくは、１〜３個である。置換基が複数存在する場合、各置換基は、同一でも異なっていてもよい。
【００２２】
以下に、式（Ｉ）中の各記号の定義について詳述する。
Ｘは、ＯまたはＮＨを示す。
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよい炭化水素基を示す。
Ｒ１およびＲ２で示される「置換されていてもよい炭化水素基」の「炭化水素基」としては、Ｃ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）が好ましい。
Ｒ１およびＲ２は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）であり、より好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、またはＣ１−６アルキル基でモノ−またはジ−置換されていてもよいアミノ基（例、ジメチルアミノ）およびグアニジノ基から選ばれる１〜３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）であり、さらに好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、またはＣ１−６アルキル基でジ−置換されたアミノ基（例、ジメチルアミノ）で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）である。
【００２３】
Ｒ３およびＲ４は、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよい炭化水素基を示す。
Ｒ３およびＲ４で示される「置換されていてもよい炭化水素基」の「炭化水素基」としては、Ｃ１−６アルキル基（例、メチル）が好ましい。
Ｒ３およびＲ４は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル）であり、より好ましくは、それぞれ独立して、水素原子またはハロゲン原子であり、さらに好ましくは、それぞれ水素原子である。
【００２４】
Ｒ５およびＲ６は、それぞれ独立して、置換されていてもよい炭化水素基を示す。
Ｒ５およびＲ５で示される「置換されていてもよい炭化水素基」の「炭化水素基」としては、Ｃ１−６アルキル基（例、メチル）が好ましい。
Ｒ５およびＲ６は、好ましくは、それぞれ独立して、置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル）であり、より好ましくは、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基（例、メチル）である。
【００２５】
化合物（Ｉ）の好適な例としては、以下の化合物が挙げられる。
［化合物Ｉ−１］
Ｘが、ＯまたはＮＨであり；
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ独立して、水素原子または置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）であり；
Ｒ３およびＲ４が、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子または置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル）であり；
Ｒ５およびＲ６が、それぞれ独立して、置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル）である；
化合物（Ｉ）。
【００２６】
［化合物Ｉ−２］
Ｘが、ＯまたはＮＨであり；
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ独立して、水素原子、またはＣ１−６アルキル基でモノ−またはジ−置換されていてもよいアミノ基（例、ジメチルアミノ）およびグアニジノ基から選ばれる１〜３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）であり；
Ｒ３およびＲ４が、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子またはＣ１−６アルキル基（例、メチル）であり；
Ｒ５およびＲ６が、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基（例、メチル）である；
化合物（Ｉ）。
【００２７】
［化合物Ｉ−３］
Ｘが、ＯまたはＮＨであり；
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ独立して、水素原子、またはＣ１−６アルキル基でモノ−またはジ−置換されていてもよいアミノ基（例、ジメチルアミノ）およびグアニジノ基から選ばれる１〜３個の置換基で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）であり；
Ｒ３およびＲ４が、それぞれ独立して、水素原子またはハロゲン原子であり；
Ｒ５およびＲ６が、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基（例、メチル）である；
化合物（Ｉ）。
【００２８】
［化合物Ｉ−４］
Ｘが、ＯまたはＮＨであり；
Ｒ１およびＲ２が、それぞれ独立して、水素原子、またはＣ１−６アルキル基でジ−置換されたアミノ基（例、ジメチルアミノ）で置換されていてもよいＣ１−６アルキル基（例、メチル、エチル、ｎ−プロピル）であり；
Ｒ３およびＲ４が、それぞれ水素原子であり；
Ｒ５およびＲ６が、それぞれ独立して、Ｃ１−６アルキル基（例、メチル）である；
化合物（Ｉ）。
【００２９】
化合物（Ｉ）が塩である場合、このような塩としては、例えば、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などが挙げられる。
【００３０】
無機塩基との塩の好適な例としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩；アンモニウム塩が挙げられる。
【００３１】
有機塩基との塩の好適な例としては、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン］、ｔｅｒｔ−ブチルアミン、シクロヘキシルアミン、ベンジルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミンとの塩が挙げられる。
【００３２】
無機酸との塩の好適な例としては、塩化水素、臭化水素、硝酸、硫酸、リン酸との塩が挙げられる。
【００３３】
有機酸との塩の好適な例としては、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸との塩が挙げられる。
【００３４】
塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、アルギニン、リジン、オルニチンとの塩が挙げられる。
【００３５】
酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸との塩が挙げられる。
【００３６】
これらの塩のなかでも、薬学的に許容し得る塩が好ましい。薬学的に許容し得る塩としては、化合物内に塩基性官能基を有する場合には、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩；または酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸との塩が挙げられる。また、化合物内に酸性官能基を有する場合には、アルカリ金属塩（例、ナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例、カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩等）等の無機塩；アンモニウム塩等が挙げられる。
【００３７】
また、化合物（Ｉ）は、同位元素（例、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１８Ｆ、３５Ｓ、１２５Ｉ）等で標識されていてもよい。
さらに、化合物（Ｉ）は、水和物であっても、非水和物であっても、無溶媒和物であっても、溶媒和物であってもよい。
さらに、１Ｈを２Ｈ（Ｄ）に変換した重水素変換体も、化合物（Ｉ）に包含される。
【００３８】
化合物（Ｉ）が不斉中心を有する場合、エナンチオマーあるいはジアステレオマーなどの異性体が存在し得る。このような異性体およびそれらの混合物はすべて本発明の範囲内に包含される。また、コンホメーションあるいは互変異性による異性体が生成する場合があるが、このような異性体あるいはその混合物も本発明の化合物（Ｉ）に含まれる。さらに、アトロプ異性体が生成する場合（具体的には、式（Ｉ）においてＲ３およびＲ４のいずれかまたは両方が水素原子以外の場合）があるが、このような異性体あるいはその混合物も本発明の化合物（Ｉ）に含まれる。
【００３９】
次に、本発明の化合物（Ｉ）の製造方法について説明する。
本発明の化合物（Ｉ）は、例えば、J. Org. Chem. 2014, 79, 529-537に記載のラメラリン類のモジュラー合成法またはこれに準じた方法等により合成することができる。一例として、Ｒ５およびＲ６がメチルである化合物（Ｉ）の合成スキームを以下に示す。
【００４０】
【化７】
2018181777.tif 000009
【００４１】
（式中、ＰＧ１およびＰＧ２は、ヒドロキシ基の保護基を示し、その他の記号は、上記で定義した通りである。）
市販のピロールから合成可能な化合物９を出発物質として２段階で三環性化合物１０を合成することができる。本化合物１０と、アリールボロン酸１１またはアリールボロネート１２とを、鈴木−宮浦カップリングさせることにより、ラメラリン誘導体１３およびアザラメラリン誘導体１４を合成することができる。さらにラメラリン誘導体１３およびアザラメラリン誘導体１４のＡ環部酸素上の保護基（ＰＧ１、ＰＧ２）を選択的に脱保護し、得られたフェノール誘導体をさらに官能化することにより、本発明の化合物（Ｉ）（ラメラリンＮ誘導体（Ｘ＝Ｏ）およびアザラメラリンＮ誘導体（Ｘ＝ＮＨ）を合成することができる。
【００４２】
本発明の化合物（Ｉ）は、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に対して特異的なチロシンキナーゼ阻害活性を有し、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）特異的チロシンキナーゼ阻害剤、耐性変異ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がん等の予防および／または治療剤等として有用であり得る。
本発明の化合物（Ｉ）は、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に対して特異的なチロシンキナーゼ阻害活性を示し、かつ、本発明の化合物（Ｉ）は薬効発現、薬物動態（例、吸収性、分布、代謝、排泄）、溶解性（例、水溶性）、他の医薬品との相互作用（例、薬物代謝酵素阻害作用）、安全性（例、急性毒性、慢性毒性、遺伝毒性、生殖毒性、心臓毒性、癌原性、中枢毒性）、安定性（例、化学的安定性、酵素に対する安定性）の点でも優れているので、医薬として有用であり得る。
従って、本発明の化合物（Ｉ）は、哺乳動物（例、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、サル、ヒト）に対して、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に対して特異的なチロシンキナーゼ作用を阻害するために用いることができる。
【００４３】
本発明の化合物（Ｉ）は、そのままあるいは薬理学的に許容される担体を配合し、医薬として、哺乳動物（好ましくは、ヒト）に経口的または非経口的に投与され得る。
以下、本発明の化合物（Ｉ）を含有してなる医薬（「本発明の医薬」と略記する場合がある）について詳述する。本発明の医薬の剤形としては、例えば、錠剤（例、糖衣錠、フィルムコーティング錠、舌下錠、バッカル錠、口腔内速崩錠）、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤（例、ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤）、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、フィルム剤（例、口腔内崩壊フィルム、口腔粘膜貼付フィルム）等の経口剤が挙げられる。また、本発明の医薬の剤形としては、例えば、注射剤、点滴剤、経皮剤（例、イオントフォレシス経皮剤）、坐剤、軟膏剤、経鼻剤、経肺剤、点眼剤等の非経口剤も挙げられる。また、本発明の医薬は、速放性製剤、徐放性製剤（例、徐放性マイクロカプセル）などの放出制御製剤であってもよい。
【００４４】
本発明の医薬は、製剤技術分野で一般的に用いられている公知の製造方法（例、日本薬局方に記載の方法）により製造され得る。また、本発明の医薬には、必要に応じて、製剤分野において通常用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤、着色剤、保存剤、芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤等の添加剤を適宜、適量含有させることができる。
前記した薬理学的に許容される担体としては、これらの添加剤が挙げられる。
【００４５】
例えば、錠剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を用いて製造され得、丸剤及び顆粒剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤を用いて製造され得る。また、散剤及びカプセル剤は賦形剤等を、シロップ剤は甘味剤等を、乳剤または懸濁剤は懸濁化剤、界面活性剤、乳化剤等を用いて製造され得る。
【００４６】
賦形剤の例としては、乳糖、白糖、ブドウ糖、デンプン、蔗糖、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウムが挙げられる。
結合剤の例としては、５ないし１０重量％デンプンのり液、１０ないし２０重量％アラビアゴム液またはゼラチン液、１ないし５重量％トラガント液、カルボキシメチルセルロース液、アルギン酸ナトリウム液、グリセリンが挙げられる。
崩壊剤の例としては、デンプン、炭酸カルシウムが挙げられる。
滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、精製タルクが挙げられる。
甘味剤の例としては、ブドウ糖、果糖、転化糖、ソルビトール、キシリトール、グリセリン、単シロップが挙げられる。
界面活性剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ソルビタンモノ脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシル４０が挙げられる。
懸濁化剤の例としては、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ベントナイトが挙げられる。
乳化剤の例としては、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ポリソルベート８０が挙げられる。
【００４７】
例えば、本発明の医薬が錠剤である場合、該錠剤は、自体公知の方法に従い、本発明の化合物（Ｉ）に、例えば、賦形剤（例、乳糖、白糖、デンプン）、崩壊剤（例、デンプン、炭酸カルシウム）、結合剤（例、デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース）または滑沢剤（例、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６０００）を添加して圧縮成形し、次いで必要により、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性の目的のため自体公知の方法でコーティングすることにより製造され得る。コーティングに用いられるコーティング剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリオキシエチレングリコール、ツイーン８０、プルロニックＦ６８、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシメチルセルロースアセテートサクシネート、オイドラギット（ローム社製、ドイツ、メタアクリル酸・アクリル酸共重合体）および色素（例、ベンガラ、二酸化チタン）が用いられ得る。
【００４８】
前記注射剤としては、静脈注射剤のほか、皮下注射剤、皮内注射剤、筋肉注射剤、腹腔内注射剤、点滴注射剤等が含まれる。
【００４９】
かかる注射剤は、自体公知の方法、すなわち、本発明の化合物（Ｉ）を無菌の水性液もしくは油性液に溶解、懸濁または乳化することによって調製される。水性液としては、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウム）等が挙げられる。該水性液は適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例、エタノール）、ポリアルコール（例、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（例、ポリソルベート８０、ＨＣＯ−５０）を含んでいてもよい。油性液としては、ゴマ油、大豆油等が挙げられる。該油性液は適当な溶解補助剤を含んでいてもよい。該溶解補助剤としては、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等が挙げられる。また、該注射剤には緩衝剤（例、リン酸緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカイン）、安定剤（例、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコール）、保存剤（例、ベンジルアルコール、フェノール）等を配合してもよい。調製された注射液は、通常、アンプルに充填され得る。
【００５０】
本発明の医薬中の本発明の化合物（Ｉ）の含有量は、製剤の形態に応じて相違するが、通常、製剤全体に対して約０．０１ないし約１００重量％、好ましくは約２ないし約８５重量％、さらに好ましくは約５ないし約７０重量％である。
【００５１】
本発明の医薬中の添加剤の含有量は、製剤の形態に応じて相違するが、通常、製剤全体に対して約１ないし約９９．９重量％、好ましくは約１０ないし約９０重量％である。
【００５２】
本発明の化合物（Ｉ）は、安定かつ低毒性で安全に使用し得る。本発明の化合物（Ｉ）の１日の投与量は患者の状態や体重、化合物の種類、投与経路等によって異なるが、例えば、癌の治療目的で患者に経口投与する場合には、成人（体重約６０ｋｇ）１日当りの投与量は、本発明の化合物（Ｉ）として約１ないし約１０００ｍｇ、好ましくは約３ないし約３００ｍｇ、さらに好ましくは約１０ないし約２００ｍｇであり、これらを１回または２ないし３回に分けて投与し得る。
【００５３】
本発明の化合物（Ｉ）を非経口的に投与する場合は、通常、液剤（例、注射剤）の形で投与する。本発明の化合物（Ｉ）の１回投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法等によっても異なるが、例えば、通常体重１ｋｇあたり約０．０１ないし約１００ｍｇ、好ましくは約０．０１ないし約５０ｍｇ、より好ましくは約０．０１ないし約２０ｍｇの本発明の化合物（Ｉ）を静脈注射により投与することが好ましい。
【実施例】
【００５４】
以下、実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例によって制限を受けるものではなく、上記・下記の趣旨に適合し得る範囲で適当に変更を加えて実施することも勿論可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に包含される。【００５５】
本明細書中、以下のスキームにおいて使用する略号は以下を意味する。
−Ｍｅ：メチル基
−Ｅｔ：エチル基
−ＯＭｅ：メトキシ基
−Ｏｉ−Ｐｒ：イソプロポキシ基
−ＣＯ２Ｍｅ：メトキシカルボニル基
−ＮＭｅ２：ジメチルアミノ基
−ＭＯＭ：メトキシメチル基
−ＯＭＯＭ：メトキシメトキシ基
−ＯＢｎ：ベンジルオキシ基
−Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基
−ＮＨＢｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ基【００５６】
［ラメラリンＮ誘導体の合成法］【００５７】
【化８】
2018181777.tif 000010
【００５８】
化合物９は、J. Org. Chem. 2014, 79, 529-537に記載の方法またはこれに準じた方法により合成することができる。【００５９】
工程（ａ）：化合物１５の合成
アルゴン雰囲気下、化合物９（2.66 g, 5.00 mmol）、２−ブロモ−１，１−ジメトキシエタン（3.72 mL, 31.5 mmol）、炭酸セシウム（11.7 g, 35.8 mmol）、および乾燥ジメチルホルムアミド（60 mL）からなる混合物を１１０℃で１６時間撹拌した。放冷後、水を加え、ヘキサン／酢酸エチル混合溶媒（１：１）で抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、化合物１５を白色の半固体（2.83 g）として得た。収率91％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.21 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.23 (s, 6H), 3.67 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 4.27 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.41-4.46 (m, 3H), 4.50 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.66 (s, 1H), 6.72-6.76 (m, 3H), 6.76 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.3 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C30H38BrNO8(M+): 619.1781. Found: 619.1782.【００６０】
工程（ｂ）：化合物１０の合成
アルゴン雰囲気下、０℃にて化合物１５（1.84 g, 2.97 mmol）のジクロロメタン（110 mL）溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（270 μL, 1.49 mmol）を加えた。０℃にて１．５時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、混合物を室温に昇温した後、同温にて３０分撹拌した。水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製し、化合物１０を白色固体（1.50 g）として得た。収率91％。融点165-166℃（ジエチルエーテル／ヘキサン混合溶媒)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.38 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.42 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.41 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 4.53 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.66 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 1.9 and 8.2 Hz, 1H), 7.02 (s, 1H), 7.05 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 9.28 (d, J = 7.6 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C28H31BrNO6[(M+H)+]: 556.13347. Found: 556.13474.【００６１】
【化９】
2018181777.tif 000011
【００６２】
工程（ａ）：化合物１１ａの合成
アルゴン雰囲気下、−７８℃にて、市販のあるいは自体公知あるいはそれに準じた方法により合成した化合物１７ａ（13.8 g, 39.1 mmol）のテトラヒドロフラン（120 mL）溶液に、ｔｅｒｔ−ブチルリチウムペンタン溶液（1.35 M, 60.9 mL, 82.2 mmol）を滴下し、同温度にて１時間撹拌した。−７８℃にてホウ酸トリメチル（6.54 mL, 58.7 mmol）を滴下した後、同温度にて１時間撹拌し、室温に昇温し、同温にて１時間撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、溶媒を減圧留去した。残渣に酢酸を少しずつ加え、pH=3とした。その後、ジクロロメタンで抽出し、抽出液を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ジクロロメタンを減圧留去した後、残渣をヘキサンにて洗浄し、化合物１１ａを淡黄色固体（12.3 g）として得た。収率99％。【００６３】
【化１０】
2018181777.tif 000012
【００６４】
工程（ａ）：化合物１９の合成
アルゴン雰囲気下、市販のあるいは自体公知あるいはそれに準じた方法により合成した化合物１８（5.01 g, 36.2 mmol）の乾燥ジメチルホルムアミド（30 mL）溶液に、炭酸カリウム（5.00 g, 36.2 mmol）、ヨウ化カリウム（6.02 g, 36.3 mmol）および２−ブロモプロパン（4.42 mL, 47.1 mmol）を順次加えた。混合物を４０℃で２１時間撹拌した。放冷後、２Ｍ塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、酢酸エチルを減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１〜１：１）で精製し、化合物１９を白色固体（4.25 g）として得た。収率65％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.42 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 4.74 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 5.94 (br s, 1H), 6.96 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 2.0 and 8.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 9.83 (s, 1H).【００６５】
工程（ｂ）：化合物２０の合成
アルゴン雰囲気下、化合物１９（3.89 g, 21.6 mmol）の乾燥アセトン（40 mL）溶液に、炭酸カリウム（3.87 g, 36.2 mmol）および臭化ベンジル（3.33 mL, 28.0 mmol）を順次加えた。混合物を２１時間加熱還流した。放冷後、２Ｍ塩酸を加え、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、酢酸エチルを減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）で精製し、化合物２０を白色固体（5.71 g）として得た。収率98％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.41 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 4.68 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H), 7.00 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.29-7.47 (m, 7H), 9.80 (s, 1H).【００６６】
工程（ｃ）：化合物２１の合成
アルゴン雰囲気下、０℃にて化合物２０（1.02 g, 3.79 mmol）のジクロロメタン（12 mL）溶液に、ｍ−クロロ過安息香酸（水 約30％含有, 1.31 g）を加えた。０℃にて１８時間撹拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、室温に昇温し、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、酢酸エチルを減圧留去した。アルゴン雰囲気下、残渣、炭酸カリウム（1.27 g, 4.28 mmol）、およびメタノール（13 mL）の混合物を室温にて３０分撹拌した後、メタノールを減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、ジクロロメタンを減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１〜１：１〜酢酸エチル）で精製し、化合物２１を黄色油状物（785 mg）として得た。収率80％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.29 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 4.34 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 5.01 (s, 2H), 5.13 (br s, 1H), 6.31 (dd, J = 2.8 and 8.6 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.80 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.27-7.41 (m, 5H).【００６７】
工程（ｄ）：化合物２２の合成
アルゴン雰囲気下、０℃にて化合物２１（785 mg, 3.04 mmol）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（1.06 mL, 6.08 mmol）のジクロロメタン（11.5 mL）溶液にクロロジメチルエーテル（0.35 mL, 4.56 mmol）を加え、同温にて１時間撹拌した。室温に昇温し、同温にて１８時間撹拌した後、28％アンモニア水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、ジクロロメタンを減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１〜１：１〜酢酸エチル）で精製し、化合物２２を淡黄色油状物（856 mg）として得た。収率93％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.31 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 3.45 (s, 3H), 4.38 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 5.08 (s, 2H), 5.09 (s, 2H), 6.57 (dd, J = 2.9, 8.7 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.86 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.28-7.45 (m, 5H).【００６８】
工程（ｅ）：化合物１７ｂの合成
アルゴン雰囲気下、０℃にて化合物２２（201 mg, 0.663 mmol）の乾燥ジメチルホルムアミド（3.3 mL）溶液に、Ｎ−ブロモコハク酸イミド（119 mg, 0.668 mmol）を加えた。０℃にて２時間撹拌した後、水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、化合物１７ｂを淡黄色油状物（232 mg）として得た。収率92％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.32 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.48 (s, 3H), 4.40 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 5.09 (s, 2H), 5.10 (s, 2H), 6.83 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.28-7.43 (m, 5H).【００６９】
工程（ｆ）：化合物１１ｂの合成
アルゴン雰囲気下、−１００℃にて化合物１７ｂ（574 mg, 1.51 mmol）のテトラヒドロフラン（9.5 mL）溶液に、ｎ−ブチルリチウムヘキサン溶液（1.50 M, 1.1 mL, 1.66 mmol）を滴下し、同温度にて２０分撹拌した。−１００℃にてホウ酸トリメチル（0.30 mL, 2.67 mmol）を滴下した後、室温に昇温し、同温にて１時間撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、溶媒を減圧留去した。残渣に酢酸を少しずつ加え、pH=3とした。その後、ジクロロメタンで抽出し、抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ジクロロメタンを減圧留去した後、残渣をヘキサンにて洗浄し、化合物１１ｂを白色固体（379 mg）として得た。収率73％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.32 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 3.46 (s, 3H), 4.45 (sep, 1H, 6.1 Hz), 5.15 (s, 2H), 5.16 (s, 2H), 6.32 (br s, 2H), 6.81 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.29-7.45 (m, 5H).【００７０】
【化１１】
2018181777.tif 000013
【００７１】
工程（ａ）：化合物１７ｃの合成
アルゴン雰囲気下、０℃にて化合物２３（1.20 mg, 3.43 mmol）の乾燥ジメチルホルムアミド（20 mL）溶液に、Ｎ−ブロモコハク酸イミド（0.64 g, 3.60 mmol）を加えた。０℃にて２時間撹拌した後、水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝７：１）で精製し、化合物１７ｃを白色固体（1.23 g）として得た。収率83％。【００７２】
工程（ｂ）：化合物１１ｃの合成
アルゴン雰囲気下、−７８℃にて化合物１７ｃ（1.22 g, 2.87 mmol）のテトラヒドロフラン（50 mL）溶液に、ｎ−ブチルリチウムヘキサン溶液（1.54 M, 2.05 mL, 3.16 mmol）を滴下し、同温度にて１時間撹拌した。−７８℃にてホウ酸トリメチル（0.48 mL, 4.31 mmol）を滴下した後、室温に昇温し、同温にて１時間撹拌した。反応溶液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、溶媒を減圧留去した。残渣に酢酸を少しずつ加え、pH=3とした。その後、ジクロロメタンで抽出し、抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ジクロロメタンを減圧留去した後、残渣をヘキサンにて洗浄し、化合物１１ｃを淡黄色固体（905 mg）として得た。収率89％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 3.46 (s, 3H), 5.12 (s, 2H), 5.16 (s, 2H), 5.18 (s, 2H), 5.93 (s, 2H), 6.83 (s, 1H), 7.25-7.37 (s, 6H), 7.42-7.46 (m, 5H).【００７３】
【化１２】
2018181777.tif 000014
【００７４】
工程（ａ）：化合物１６ａの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１０（290 mg, 0.521 mmol）、化合物１１ａ（497 mg, 1.56 mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（30.0 mg, 52.1 μmol）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（28.9 mg, 52.1 μmol）、Ｎａ２ＣＯ３（365 mg, 3.44 mmol）、１，２−ジメトキシエタン（12 mL）、および脱気した水（1.0 mL）からなる混合物を２４時間加熱還流した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、化合物１６ａを淡褐色固体（302 mg）として得た。収率77％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 0.98-1.33 (m, 6H), 1.40-1.48 (m, 6H), 3.22 (br s, 3H), 3.43 (br s, 3H), 3.61 (br s, 6H), 3.84 (br s, 3H), 4.20-4.43 (m, 1H), 4.63-4.95 (m, 3H), 5.06-5.16 (m, 2H), 6.48-7.50 (m, 13H), 9.27 (d, J = 7.5 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C44H48NO10[(M+H)+]: 750.32782. Found: 750.32788.【００７５】
工程（ａ）：化合物１６ｂの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１０（186 mg, 0.334 mmol）、化合物１１ｂ（173 mg, 0.500 mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（19.6 mg, 34.1 μmol）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（18.3 mg, 33.0 μmol）、Ｎａ２ＣＯ３（233 mg, 2.20 mmol）、１，２−ジメトキシエタン（15 mL）、および脱気した水（1 mL）からなる混合物を２４時間加熱還流した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、化合物１６ｂを淡褐色固体（55.3 mg）として得た。収率94％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 1.02-1.31 (m, 12H), 1.42 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.23 (br s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 4.14-4.42 (m, 2H), 4.66 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.69-4.93 (m, 2H), 5.02-5.13 (m, 2H), 6.57 (br s, 0.5H), 6.66 (br s, 0.5H), 6.75-6.90 (m, 3.5H), 6.91 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.96-7.02 (m, 0.5H), 7.04 (s, 1H), 7.20-7.33 (m, 2H), 7.34-7.39 (m, 2H), 7.42-7.47 (m, 2H), 9.28 (d, J = 7.6 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C46H52NO10[(M+H)+]: 778.35912. Found: 778.35688.【００７６】
工程（ａ）：化合物１６ｃの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１０（1.23 g, 2.21 mmol）、化合物１１ｃ（1.31 mg, 3.32 mmol）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（123 mg, 0.213 mmol）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（132 mg, 0.237 mmol）、Ｎａ２ＣＯ３（1.55 g, 14.6 mmol）、１，２−ジメトキシエタン（80 mL）、および脱気した水（6 mL）からなる混合物を２４時間加熱還流した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）で精製し、化合物１６ｃを淡黄色固体（1.83 g）として得た。収率100％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 1.03-1.30 (m, 6H), 1.42 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.23 (br s, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.56 (br s, 3H), 3.82 (s, 3H), 4.23-4.40 (m, 1H), 4.66 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.79-4.93 (m, 4H), 5.04-5.14 (m, 2H), 6.63 (br s, 0.5H), 6.71-6.90 (m, 4.5H), 6.91 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.20-7.38 (m, 9H), 7.40-7.45 (m, 2H), 9.27 (d, J = 7.6 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C50H52NO10[(M+H)+]: 826.35912. Found: 826.36040.【００７７】
【化１３】
2018181777.tif 000015
【００７８】
工程（ａ）：化合物１３ａの合成
アルゴン雰囲気下、封管にて化合物１６ａ（30.0 mg, 40.0 μmol）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（30.4 mg, 0.160 mmol）、メタノール（1.5 mL）からなる混合物を６５℃にて１８時間加熱撹拌した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、化合物１３ａを淡黄色固体（25.0 mg）として得た。収率93％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.37 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.45 (s, 3H), 3.49 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 4.55 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.69 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H), 6.76 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 7.01 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.14 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.20 (dd, J = 1.8 and 8.2 Hz, 1H), 7.27-7.33 (m, 1H), 7.33-7.40 (m, 2H), 7.40-7.45 (m, 2H), 9.19 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C41H40NO8[(M+H)+]: 674.27539. Found: 674.27820.【００７９】
工程（ａ）：化合物１３ｂの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１６ｂ（202 mg, 0.260 mmol）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（198 mg, 1.04 mmol）、メタノール（10 mL）からなる混合物を１８時間加熱還流した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、化合物１３ｂを淡黄色固体（161 mg）として得た。収率88％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.19 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.20 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.36 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.44 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 4.02 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.54 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.69 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 5.15 (s, 2H), 6.77 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.00 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.11-7.16 (m, 3H), 7.17 (s, 1H), 7.27-7.33 (m, 1H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.40-7.45 (m, 2H), 9.18 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C43H44NO8[(M+H)+]: 702.30669. Found: 702.30518.【００８０】
工程（ａ）：化合物１３ｃの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１６ｃ（1.77 g, 2.14 mmol）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（1.63 g, 8.57 mmol）、メタノール（60 mL）からなる混合物を１８時間加熱還流した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をジクロロメタン−ヘキサンから再結晶し、化合物１３ｃを白色固体（1.35 g）として得た。収率84％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.37 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 3.44 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 4.54 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.69 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 5.19 (s, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 7.00 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.13-7.16 (m, 2H), 7.23-7.39 (m, 8H), 7.43-7.46 (m, 2H), 9.20 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C47H44NO8[(M+H)+]: 750.30669. Found: 750.30535.【００８１】
【化１４】
2018181777.tif 000016
【００８２】
工程（ａ）：化合物２４ａの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１３ａ（405 mg, 0.601 mmol）、酢酸エチル（15 mL）およびエタノール（15 mL）からなる溶液にパラジウム炭素（Ｐｄ：10%, 80.8 mg）およびギ酸アンモニウム（1.14 g, 18.0 mmol）を順次加え、１時間、加熱還流した。放冷後、反応混合物をセライトで濾過した。濾液を濃縮し、残渣を残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で精製し、化合物２４ａを淡黄色固体（328 mg）として得た。収率93％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.36 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.37 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 3.45 (s, 3H), 3.51 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 4.57 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 4.70 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 5.95 (br s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.99 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.08 (s, 1H), 7.15 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.19 (dd, J = 1.7 and 8.1 Hz, 1H), 9.18 (d, J = 7.3 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C34H34NO8［(M+H)+］: 584.22844. Found: 584.22588.【００８３】
工程（ａ）：化合物２４ｂの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１３ｂ（84.9 mg, 0.121 mmol）、酢酸エチル（5 mL）およびエタノール（5 mL）からなる溶液にパラジウム炭素（Ｐｄ：10%, 17 mg）およびギ酸アンモニウム（233 mg, 3.70 mmol）を順次加え、３０分間、加熱還流した。放冷後、反応混合物をセライトで濾過した。濾液を濃縮し、残渣を残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（アセトン）で精製し、化合物２４ｂを淡黄色固体（71.2 mg）として得た。収率97％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.19 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.35 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.36 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.44 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 3.45 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 4.01 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 4.55 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 4.70 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.99 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.12-7.17 (m, 3H), 7.17 (s, 1H), 9.18 (d, J = 7.3 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C36H38NO8［(M+H)+］: 612.25974. Found: 612.26035.【００８４】
工程（ａ）：化合物２４ｃの合成
アルゴン雰囲気下、化合物１３ｃ（200 mg, 0.267 mmol）、酢酸エチル（10 mL）およびエタノール（10 mL）からなる溶液にパラジウム炭素（Ｐｄ：10%, 40 mg）およびギ酸アンモニウム（505 mg, 8.01 mmol）を順次加え、１時間、加熱還流した。放冷後、反応混合物をセライトで濾過した。濾液を濃縮し、残渣を残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（アセトン）で精製し、化合物２４ｃを淡黄色固体（146 mg）として得た。収率96％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1.21 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.31 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 3.33 (s, 3H), 3.89 (s, 3H), 4.58 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 4.74 (sep, J = 6.0 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.90 (s, 1H), 7.08-7.12 (m, 2H), 7.26 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 9.04 (br s, 1H), 9.08 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 9.76 (br s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C33H32NO8［(M+H)+］: 570.21279. Found: 570.21008.【００８５】
【化１５】
2018181777.tif 000017
【００８６】
工程（ａ）：化合物２５ａの合成
アルゴン雰囲気下、化合物２４ａ（150 mg, 0.257 mmol）の乾燥アセトン（7 mL）溶液に、３−（ジメチルアミノ）プロピルクロリド塩酸塩（48.7 mg, 0.308 mmol）、炭酸カリウム（178 mg, 1.29 mmol）を順次加えた後、混合物を２４時間、加熱還流した。放冷後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、混合物を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、ジクロロメタンを減圧留去した。残渣をクロマトレックスNH-DM1020カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）で精製し、化合物２５ａを淡黄色固体（120 mg）として得た。収率70％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.36 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.36 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 2.01 (quin, J = 7.0 Hz, 2H), 2.25 (s, 6H), 2.44 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.47 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 4.07 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 4.56 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.69 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.00 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.16 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.21 (dd, J = 1.8 and 8.2 Hz, 1H), 9.18 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C39H45N2O8[(M+H)+]: 669.31759. Found: 669.31472.【００８７】
【化１６】
2018181777.tif 000018
【００８８】
工程（ａ）：化合物２５ｂの合成
アルゴン雰囲気下、化合物２４ｂ（30.0 mg, 49.0 μmol）の乾燥アセトン（2 mL）溶液に、３−（ジメチルアミノ）プロピルクロリド塩酸塩（9.3 mg, 58.8 μmol）、炭酸カリウム（40.6 mg, 0.294 mmol）を順次加えた後、混合物を２１時間、加熱還流した。放冷後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、混合物を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、ジクロロメタンを減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１〜ジクロロメタン：メタノール＝１：１）で精製し、化合物２５ｂを淡黄色固体（11.6 mg）として得た。収率34％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.17 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 2.00 (quin, J = 6.8 Hz, 2H), 2.25 (s, 6H), 2.47 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.44 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.97 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.53 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.70 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 7.02 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.14 (s, 2H), 7.17 (s, 1H), 9.22 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C41H49N2O8[(M+H)+]: 697.34889. Found: 697.35000.【００８９】
【化１７】
2018181777.tif 000019
【００９０】
工程（ａ）：化合物２５ｃの合成
アルゴン雰囲気下、化合物２４ｃ（40.3 mg, 70.8 μmol）の乾燥アセトン（10 mL）溶液に、２−（ジメチルアミノ）エチルクロリド塩酸塩（51.0 mg, 0.354 mmol）、ヨウ化ナトリウム（10.0 mg, 66.7 μmol）、炭酸カリウム（147 mg, 1.06 mmol）を順次加えた後、混合物を１０時間、加熱還流した。一旦放冷後、２−（ジメチルアミノ）エチルクロリド塩酸塩（51.0 mg, 0.354 mmol）および炭酸カリウム（147 mg, 1.06 mmol）を追加し、更に混合物を１２時間、加熱還流した。放冷後、ジクロロメタンで希釈し、セライトで濾過した。濾液を減圧下濃縮した後、残渣をクロマトレックスNH-DM1020カラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：２〜酢酸エチル）で精製し、化合物２５ｃを淡黄色固体（27.0 mg）として得た。収率54％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 2.28 (s, 6H), 2.34 (s, 6H), 2.55-2.65 (m, 2H), 2.78 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.44 (s, 3H), 3.67 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.12 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 4.53 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.70 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.76 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 7.02 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.11 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 1.8 and 8.1 Hz, 1H), 9.22 (d, J = 7.4 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C41H50N3O8[(M+H)+]: 712.35979. Found: 712.36040.【００９１】
【化１８】
2018181777.tif 000020
【００９２】
工程（ａ）：化合物２５ｄの合成
アルゴン雰囲気下、化合物２４ｃ（146 mg, 0.256 mmol）の乾燥アセトン（25 mL）溶液に、３−（ジメチルアミノ）プロピルクロリド塩酸塩（194 mg, 1.23 mmol）、炭酸カリウム（708 mg, 5.12 mmol）を順次加えた後、混合物を４８時間、加熱還流した。放冷後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、混合物を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、ジクロロメタンを減圧留去した。残渣をジクロロメタン−ヘキサンから再結晶し、化合物２５ｄを淡褐色固体（134 mg）として得た。収率71％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 1.81 (quin, J = 6.9 Hz, 2H), 2.00 (quin, J = 6.8 Hz, 2H), 2.23 (s, 6H), 2.25 (s, 6H), 2.31-2.41 (m, 2H), 2.47 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 3.44 (s, 3H), 3.62 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 4.08 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.53 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.70 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 7.01 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.11 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 1.8 and 8.1 Hz, 1H), 9.22 (d, J = 7.3 Hz, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C43H54N3O8[(M+H)+]: 740.39109. Found: 740.39380.【００９３】
【化１９】
2018181777.tif 000021
【００９４】
工程（ｂ）：化合物２６ａの合成
アルゴン雰囲気下、室温にて化合物２５ａ（60.0 mg, 89.7 μmol）の乾燥ジクロロメタン（4.0 mL）溶液に、塩化アルミニウム−ニトロベンゼン溶液（1.0 M, 540 μL, 0.540 mmol）を滴下し、同温度にて１８時間撹拌した。反応溶液に、炭酸水素ナトリウム（200 mg, 2.38 mmol）、ロッシェル塩（440 mg, 1.56 mmol）および水（7.0 mL）からなる混合溶液を加え、１時間激しく撹拌した後、ジクロロメタンおよび水を減圧留去した。残渣に水を加え、減圧下、ニトロベンゼンを共沸除去した。残渣に水を加え、十分に懸濁させた後、固体を吸引濾取した。減圧乾燥後、脱保護体を淡灰色固体（47.5 mg）として得た。収率91％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1.85 (quin, J = 6.8 Hz, 2H), 2.14 (s, 6H), 2.34 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.40 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 4.04 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 6.78 (s, 1H), 7.00-7.04 (m, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.22 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 9.00 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 9.39 (br s, 1H).
脱保護体（20.0 mg, 34.2 μmol）のジクロロメタン（1.0 mL）懸濁液にトリフルオロ酢酸（1.0 mL）を加え、室温にて３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去した後、カラムクロマトグラフィー（Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０，０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有メタノール）で精製し、化合物２６ａを褐色固体（21.6 mg）として得た。収率90％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.13 (quin, J = 6.9 Hz, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 3.21 (quin, J = 5.1 Hz, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.40 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 4.13 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 6.81 (s, 1H), 7.00-7.04 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.25 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 9.01 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 9.43 (br s, 2H), 9.98 (br s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C33H33N2O8[(M-CF3COO)+]: 585.22369. Found: 585.22208.【００９５】
【化２０】
2018181777.tif 000022
【００９６】
工程（ｂ）：化合物２６ｂの合成
アルゴン雰囲気下、室温にて化合物２５ｂ（20.0 mg, 28.7 μmol）の乾燥ジクロロメタン（5.0 mL）溶液に、塩化アルミニウム−ニトロベンゼン溶液（1.0 M, 218 μL, 0.218 mmol）を滴下し、同温度にて４８時間撹拌した。反応溶液に、炭酸水素ナトリウム（55.0 mg, 0.654 mmol）、ロッシェル塩（185 mg, 0.654 mmol）および水（3.3 mL）からなる混合溶液を加え、１時間激しく撹拌した後、ジクロロメタンおよび水を減圧留去した。残渣に水を加え、減圧下、ニトロベンゼンを共沸除去したのち、減圧乾燥した。残渣にジクロロメタン（2.0 mL）およびトリフルオロ酢酸（2.0 mL）を加えたのち、溶媒を減圧留去した。カラムクロマトグラフィー（Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０，０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有水〜０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有  水：メタノール＝１：１〜０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有メタノール）で精製し、化合物２６ｂを褐色固体（19.3 mg）として得た。収率98％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.12 (quin, J = 5.5 Hz, 2H), 2.82 (s, 6H), 3.28 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 4.12 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 6.81 (s, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.94 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 2.0 and 8.0 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.21 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 9.03 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 9.04 (br s, 1H), 9.41 (br s, 1H), 9.53 (br s, 1H), 9.98 (br s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C32H31N2O8[(M-CF3COO)+]: 571.20804. Found: 571.20608.【００９７】
【化２１】
2018181777.tif 000023
【００９８】
工程（ｂ）：化合物２６ｃの合成
アルゴン雰囲気下、室温にて化合物２５ｃ（13.4 mg, 18.8 μmol）の乾燥ジクロロメタン（1.0 mL）溶液に、塩化アルミニウム−ニトロベンゼン溶液（1.0 M, 120 μL, 0.120 mmol）を滴下し、同温度にて４８時間撹拌した。反応溶液に、炭酸水素ナトリウム（30.3 mg, 0.361 mmol）、ロッシェル塩（102 mg, 0.361 mmol）および水（0.7 mL）からなる混合溶液を加え、１時間激しく撹拌した後、ジクロロメタンおよび水を減圧留去した。残渣に水を加え、減圧下、ニトロベンゼンを共沸除去した。残渣に水を加え、十分に懸濁させた後、固体を吸引濾取した。得られた固体のジクロロメタン（1.0 mL）懸濁液にトリフルオロ酢酸（1.0 mL）を加え、溶媒を減圧留去した。カラムクロマトグラフィー（Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０，０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有メタノール）で精製し、化合物２６ｃを褐色固体（15.0 mg）として得た。収率93％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.82 (s, 6H), 2.88 (s, 6H), 3.40 (s, 3H), 3.54 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.90-3.98 (m, 2H), 4.44 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 6.87 (s, 1H), 7.01 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.03 (dd, J = 2.1 and 8.1 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.25 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 9.02 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 9.48 (br s, 1H), 10.04 (br s, 3H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C35H38N3O8[(M-2CF3COO-H)+]: 628.26589. Found: 628.26746.【００９９】
【化２２】
2018181777.tif 000024
【０１００】
工程（ｂ）：化合物２６ｄの合成
アルゴン雰囲気下、室温にて化合物２５ｄ（90.2 mg, 0.122 mmol）の乾燥ジクロロメタン（19.5 mL）溶液に、塩化アルミニウム−ニトロベンゼン溶液（1.0 M, 780 μL, 0.780 mmol）を滴下し、同温度にて84.5時間撹拌した。反応溶液に、炭酸水素ナトリウム（166 mg, 1.97 mmol）、ロッシェル塩（557 mg, 1.97 mmol）および水（3.9 mL）からなる混合溶液を加え、１時間激しく撹拌した後、ジクロロメタンおよび水を減圧留去した。残渣に水を加え、減圧下、ニトロベンゼンを共沸除去した。残渣に水を加え、十分に懸濁させた後、固体を吸引濾取した。減圧乾燥後、脱保護体を褐色固体（80.0 mg）として得た。収率100％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1.63-1.70 (m, 2H), 1.82-1.89 (m, 2H), 2.14 (s, 6H), 2.17 (s, 6H), 2.23-2.30 (m, 2H), 2.36-2.43 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.53-3.60 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 4.01-4.08 (m, 2H), 6.76 (s, 1H), 6.97-7.02 (m, 2H), 7.07 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.20-7.24 (m, 2H), 8.99 (d, J = 7.3 Hz, 1H).
脱保護体（78.3 mg, 0.106 mmol）のジクロロメタン（3.0 mL）懸濁液にトリフルオロ酢酸（3.0 mL）を加え、室温にて３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去した後、カラムクロマトグラフィー（Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０，０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有メタノール）で精製し、化合物２６ｄを褐色固体（94.2 mg）として得た。収率100％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1.92-2.00 (m, 2H), 2.09-2.17 (m, 2H), 2.81 (s, 6H), 2.83 (s, 6H), 3.06-3.13 (m, 2H), 3.21 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.59-3.70 (m, 2H), 3.90 (s, 3H), 4.13 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 6.79 (s, 1H), 7.01 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 2.0 and 8.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.25 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 9.00 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 9.50 (br s, 1H), 9.84 (br s, 1H), 9.87 (br s, 1H), 10.05 (br s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C37H42N3O8[(M-2CF3COO-H)+]: 656.29719. Found: 656.29442.【０１０１】
［アザラメラリンＮ誘導体の合成法］【０１０２】
【化２３】
2018181777.tif 000025
【０１０３】
【化２４】
2018181777.tif 000026
【０１０４】
工程（ａ）：化合物２９ａの合成
アルゴン雰囲気下、室温にて、市販のあるいは自体公知あるいはそれに準じた方法により合成した化合物２８ａ（4.33 g, 28.3 mmol）の乾燥テトラヒドロフラン（120 mL）溶液に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（7.20 mL, 31.2 mmol）を滴下し、２時間、加熱還流した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣をエーテルから再結晶し、化合物２９ａを淡褐色固体（6.68 g）として得た。収率93％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.51 (s, 9H), 3.84 (s, 3H), 3.87 (s, 3H), 6.47 (br s, 1H), 6.72 (dd, J = 2.2 and 8.6 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.18 (br,1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C13H20NO4[(M+H)+]: 254.1392. Found: 254.1399.【０１０５】
工程（ａ）：化合物２９ｂの合成
化合物２８ａの合成で記載した手法に従い、市販のあるいは自体公知あるいはそれに準じた方法により合成した化合物２８ｂ（6.87 g, 30.0 mmol）を反応させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製後、化合物２９ｂを淡褐色固体（3.10 g）として得た。収率31％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.50 (s, 9H), 3.83 (s, 3H), 5.12 (s, 2H), 6.37 (br s, 1H), 6.81 (s, 2H), 7.12 (br s, 1H), 7.27-7.32 (m, 1H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.42-7.47 (m, 2H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C19H23BrNO4(M+): 329.1627. Found: 329.1639.【０１０６】
工程（ｂ）：化合物３０ａの合成
アルゴン雰囲気下、０℃にて化合物２９ａ（333 mg, 1.31 mmol）の乾燥テトラヒドロフラン（5 mL）溶液に、Ｎ−ブロモコハク酸イミド（254 mg, 1.43 mmol）を加えた。０℃にて1時間撹拌した後、水を加え、室温まで昇温した。ジクロロメタンで抽出した後、抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１０：１）で精製し、化合物３０ａを淡黄色固体（377 mg）として得た。収率87％。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1.53 (s, 9H), 3.84 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 6.79 (br s, 1H), 6.97 (s, 1H), 7.81 (br s,1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C13H18BrNO4(M+): 331.0419. Found: 331.0425.【０１０７】
工程（ｂ）：化合物３０ｂの合成
化合物３０ａの合成で記載した手法に従い、化合物２９ｂ（3.00 g, 9.11 mmol）を反応させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製後、化合物３０ｂを淡黄色固体（3.38 g）として得た。収率91％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.53 (s, 9H), 3.82 (s, 3H), 5.13 (s, 2H), 6.75 (br s, 1H), 6.99 (s, 1H), 7.28-7.33 (m, 1H), 7.34-7.39 (m, 2H), 7.45-7.50 (m, 2H),7.90 (br s,1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C19H22BrNO4(M+): 407.0732. Found: 409.0743.【０１０８】
工程（ｃ）：化合物１２ａの合成
アルゴン雰囲気下、室温にて、化合物３０ａ（377 mg, 1.13 mmol）、［１，１'−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン付加物（46.9 mg, 57.4 μmol）および１，４−ジオキサン（6.0 mL）からなる溶液に、トリエチルアミン（640 μL, 4.54 mmol）およびピナコールボラン（490 μL, 3.40 mmol）を順次加え、２．５時間、加熱還流した。放冷後、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、溶媒を留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５０：１）で精製し、化合物１２ａを淡黄色固体（282 mg）として得た。収率65％。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.35 (s, 12H), 1.52 (s, 9H), 3.88 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 7.15 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 8.67 (br s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C19H30BNO6(M+): 379.2166. Found: 379.2169.【０１０９】
工程（ｃ）：化合物１２ｂの合成
化合物１２ａの合成で記載した手法に従い、化合物３０ｂ（3.38 g, 8.28 mmol）を反応させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）で精製後、化合物１２ｂを淡黄色固体（2.72 g）として得た。収率72％。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1.35 (s, 12H), 1.52 (s, 9H), 3.86 (s, 3H), 5.19 (s, 2H), 7.18 (s, 1H), 7.27-7.32 (m, 1H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.47-7.51 (m, 2H), 8.02 (br s, 1H), 8.63 (br s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C25H34BNO6(M+): 455.2479. Found: 455.2485.【０１１０】
【化２５】
2018181777.tif 000027
【０１１１】
工程（ａ）：化合物２７ａの合成
アルゴン雰囲気下、封管にて化合物１０（100 mg, 0.180 mmol）、化合物１２ａ（114 mg, 0.301 mmol）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（23.2 mg, 20.1 μmol）、Ｎａ２ＣＯ３（141 mg, 1.32 mmol）、１，２−ジメトキシエタン（5.0 mL）、および脱気した水（0.5 mL）からなる混合物を８５℃にて２４時間加熱撹拌した。放冷後、溶媒を減圧留去した。残渣に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水および飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ジクロロメタンを減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１〜２：１〜１：１〜酢酸エチル）で精製し、化合物２７ａを淡黄色半固体（115 mg）として得た。収率88％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1.02 (d, J = 6.1 Hz, 1.72H), 1.09 (d, J = 6.1 Hz, 1.72H), 1.11 (d, J = 6.1 Hz, 1.28H), 1.16 (d, J = 6.1 Hz, 1.28H), 1.30 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 1.37 (s, 9H), 3.29 (s, 1.28H), 3.29 (s, 1.72H), 3.48 (s, 1.72H), 3.53 (s, 1.28H), 3.53 (s, 1.72H), 3.56 (s, 1.28H), 3.69 (s, 1.72H), 3.70 (s, 1.28H), 3.71 (s, 1.28H), 3.74 (s, 1.72H), 4.26 (sep, J = 6.1 Hz, 0.57H), 4.43 (sep, J = 6.1 Hz, 0.43H), 4.70 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.52 (s, 0.57H), 6.71 (s, 0.43H), 6.85-7.17 (m, 4H), 7.18 (d, J = 7.6 Hz, 0.57H), 7.18 (d, J = 7.6 Hz, 0.43H), 7.34 (s, 1H), 7.35 (br s, 0.43H), 7.44 (br s, 0.57H), 7.60 (br s, 0.43H), 7.85 (br s, 0.57H), 9.20 (d, J = 7.6 Hz, 0.57H), 9.23 (d, J = 7.6 Hz, 0.43H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C41H49N2O10[(M+H)+]: 729.3387. Found: 729.3358.【０１１２】
工程（ａ）：化合物２７ｂの合成
化合物２７ａの合成で記載した手法に従い、化合物１０（100 mg, 0.180 mmol）および化合物１２ｂ（137 mg, 0.302 mmol）を反応させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝３：１〜２：１〜１：１〜１：２）で精製後、化合物２７ｂを淡黄色半固体（131 mg）として得た。収率91％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1.02 (d, J = 6.1 Hz, 1.67H), 1.10 (d, J = 6.1 Hz, 1.67H), 1.13 (d, J = 6.1 Hz, 1.33H), 1.17 (d, J = 6.1 Hz, 1.33H), 1.30 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 1.37 (s, 9H), 3.29 (s, 1.33H), 3.30 (s, 1.67H), 3.49 (s, 1.67H), 3.53 (s, 1.33H), 3.54 (s, 1.67H), 3.57 (s, 1.33H), 3.72 (s, 1.33H), 3.74 (s, 1.67H), 4.28 (sep, J = 6.1 Hz, 0.56H), 4.44 (sep, J = 6.1 Hz, 0.44H), 4.71 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.92-5.01 (m, 2H), 6.56 (s, 0.56H), 6.75 (s, 0.44H), 6.86-7.10 (m, 4H), 7.18 (d, J = 7.6 Hz, 0.56H), 7.19 (d, J = 7.6 Hz, 0.44H), 7.23-7.47 (m, 7H), 7.64 (br s, 0.44H), 7.89 (br s, 0.56H), 9.21 (d, J = 7.6 Hz, 0.56H), 9.23 (d, J = 7.6 Hz, 0.44H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C47H53N2O10[(M+H)+]: 805.3700. Found: 805.3715.【０１１３】
【化２６】
2018181777.tif 000028
【０１１４】
工程（ａ）：化合物１４ａの合成
アルゴン雰囲気下、封管にて化合物２７ａ（50.0 mg, 68.6 μmol）およびテトラヒドロフラン（3.0 mL）溶液に、テトラブチルアンモニウムフルオリドテトラヒドロフラン溶液（1.0 M, 343 μL, 0.343 mmol）を滴下した後、８５℃にて１９時間加熱撹拌した。放冷後、水を加え溶媒を留去した。析出した固体を吸引濾過し、回収された固体を水およびメタノールで順次洗浄し、真空乾燥することで化合物１４ａを淡褐色固体（33.6 mg）として得た。収率82％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H),3.45 (s, 3H), 3.47 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 4.54 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.69 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.90 (s, 1H), 6.94 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.94 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 7.16 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.22 (dd, J = 1.7 and 8.1 Hz, 1H), 9.59 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 10.588 (s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C35H37N2O7[(M+H)+]: 597.2601. Found: 597.2612.【０１１５】
工程（ａ）：化合物１４ｂの合成
化合物１４ａの合成で記載した手法に従い、化合物２７ｂ（100 mg, 0.180 mmol）を反応させた。その結果、化合物１４ｂを淡褐色固体（78.2 mg）として得た。収率85％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.44 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 3.42 (s, 3H), 3.46 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 4.53 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.68 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 5.22 (s, 2H), 6.76-6.88 (m, 2H), 7.00-7.30 (m, 9H), 7.43-7.47 (m, 2H), 9.44 (br s, 1H), 11.05 (br s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C41H41N2O7[(M+H)+]: 673.2914. Found: 673.2939.【０１１６】
【化２７】
2018181777.tif 000029
【０１１７】
工程（ａ）：化合物８ａの合成
アルゴン雰囲気下、−７８℃にて化合物１４ａ（20.0 mg, 33.5 μmol）の乾燥ジクロロメタン（12 mL）溶液に、三塩化ホウ素ヘプタン溶液（1.0 M, 235 μL, 0.235 mmol）を滴下し、同温度にて３０分間撹拌した。その後室温に昇温し、同温度にて３時間撹拌した。反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、溶媒を減圧留去した。析出した固体を吸引濾過し、回収された固体を水で洗浄し、真空乾燥した。得られた固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（アセトン）で精製し、化合物８ａを淡褐色固体（14.2 mg）として得た。収率71％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 3.34 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 6.87 (s, 1H), 6.98-7.02 (m, 3H), 7.04 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 9.34 (s, 1H), 9.38 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 9.73 (br s, 1H), 11.34 (s, 1H).
HRFABMS m/z. Calcd for C29H25N2O7［(M+H)+］: 513.1662. Found: 513.1676.【０１１８】
工程（ａ）：化合物８の合成
化合物８ａの合成で記載した手法に従い、化合物１４ｂ（30.0 mg, 44.6 μmol）および三塩化ホウ素ヘプタン溶液（1.0 M, 445 μL, 0.445 mmol）を反応させた。得られた粗生成物の固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（アセトン）で精製し、化合物８を淡褐色固体（18.6 mg）として得た。収率84％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 3.36 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.86 (s, 3H),6.84 (s, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.98-7.03 (m, 3H), 7.13 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 9.33 (s, 1H), 9.37 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 9.49 (s, 1H), 9.71 (s, 1H), 11.27 (s, 1H).
HRDARTMS m/z. Calcd for C28H23N2O7[(M+H)+]: 499.1505. Found: 499.1502.【０１１９】
【化２８】
2018181777.tif 000030
【０１２０】
工程（ａ）：化合物３１の合成
アルゴン雰囲気下、化合物１４ｂ（300 mg, 0.446 mmol）、酢酸エチル（45 mL）およびエタノール（45 mL）からなる溶液に、パラジウム炭素（Ｐｄ：10%, 60.0 mg）およびギ酸アンモニウム（844 mg, 13.4 mmol）を順次加え、３０分間、加熱還流した。放冷後、反応混合物をセライトで濾過した。濾液を濃縮し、残渣を残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（アセトン）で精製し、化合物３１を淡黄色固体（258 mg）として得た。収率99％。
1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.36 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 3.44 (s, 3H), 3.50 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 4.55 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.69 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 5.84 (br s, 1H), 6.87 (s, 2H), 6.94 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.14-7.24 (m, 4H), 9.34 (br s, 1H), 9.53 (d, J = 7.4 Hz, 1H).【０１２１】
【化２９】
2018181777.tif 000031
【０１２２】
工程（ａ）：化合物３２の合成
アルゴン雰囲気下、化合物３１（70.0 mg, 0.120 mmol）の乾燥アセトン（15 mL）溶液に、３−（ジメチルアミノ）プロピルクロリド塩酸塩（22.8 mg, 0.144 mmol）、炭酸カリウム（83.0 mg, 0.601 mmol）を順次加えた後、混合物を１８時間、加熱還流した。一旦放冷後、３−（ジメチルアミノ）プロピルクロリド塩酸塩（22.8 mg, 0.144 mmol）および炭酸カリウム（83.0 mg, 0.601 mmol）を追加し、更に混合物を５時間、加熱還流した。放冷後、アセトンで希釈し、セライトで濾過した。濾液を減圧下濃縮した後、残渣をクロマトレックスＤｉｏｌカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル〜ジクロロメタン：メタノール＝１０：１）およびクロマトレックスで精製し、化合物３２を淡黄色固体（39.7 mg）として得た。収率50％。
1H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 6H), 2.08 (quin, J = 6.9 Hz, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.51 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 3.45 (s, 6H), 3.96 (s, 3H), 4.17 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 4.54 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 4.68 (sep, J = 6.1 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.93 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.14 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.21 (dd, J = 1.7 and 8.2 Hz, 1H), 9.59 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 10.58 (br s, 1H).【０１２３】
【化３０】
2018181777.tif 000032
【０１２４】
工程（ｂ）：化合物３３の合成
アルゴン雰囲気下、室温にて化合物３２（15.2 mg, 22.8 μmol）の乾燥ジクロロメタン（5.0 mL）溶液に、塩化アルミニウム−ニトロベンゼン溶液（1.0 M, 145 μL, 0.145 mmol）を滴下し、同温度にて７２時間撹拌した。反応溶液に、炭酸水素ナトリウム（36.7 mg, 0.437 mmol）、ロッシェル塩（123 mg, 0.437 mmol）および水（2.1 mL）からなる混合溶液を加え、１時間激しく撹拌した後、ジクロロメタンおよび水を減圧留去した。残渣に水を加え、減圧下、ニトロベンゼンを共沸除去したのち、減圧乾燥した。残渣にジクロロメタン（1.0 mL）およびトリフルオロ酢酸（1.0 mL）を加えたのち、溶媒を減圧留去した。カラムクロマトグラフィー（Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０，０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有水〜０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有  水：メタノール＝１：１〜０．１％v/vトリフルオロ酢酸含有メタノール）で精製し、化合物３３を褐色固体（15.8 mg）として得た。収率100％。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 2.11-2.18 (m, 2H), 2.82 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 3.20-3.26 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.86 (s, 3H), 4.05 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 6.90 (s, 1H), 6.98-7.02 (m, 3H), 7.05 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.23 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 9.37 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 9.60 (br s, 1H), 9.75 (br s, 2H), 11.37 (br s, 1H).【０１２５】
試験例１  ＥＧＦＲ遺伝子導入ＢａＦ３細胞を用いた増殖抑制活性の評価
薬剤の酵素レベルの活性は、その薬剤の細胞膜透過性やオフターゲット阻害等により、必ずしも細胞レベルの活性には直結しない。そこで、キナーゼ阻害剤の細胞レベルでの評価法として有効性が確立している形質導入ＢａＦ３細胞を用いたＥＧＦＲ阻害活性評価を行った。ＢａＦ３細胞（マウス前リンパ球細胞）は、ＩＬ−３（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−３）の存在下でのみ増殖可能である。一方、ＥＧＦＲ遺伝子を形質導入したＢａＦ３細胞は、ＩＬ−３が存在しなくてもＥＧＦＲ依存的に増殖が可能となる。そこにＥＧＦＲ阻害剤を加えると、ＢａＦ３細胞は増殖できなくなるが、ＩＬ−３を加えるとＥＧＦＲ阻害剤が存在しても増殖は可能となる。このような性質を利用してＥＧＦＲ阻害剤の活性や特異性の評価が可能となる。
今回、二重変異ＥＧＦＲ遺伝子を形質導入したＢａＦ３（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）、ＢａＦ３（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ）ならびに三重変異ＥＧＦＲ遺伝子を形質導入したＢａＦ３（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）、ＢａＦ３（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）に対する、ラメラリン類（化合物２６ａ、２６ｂ、２６ｃ、２６ｄ）およびアザラメラリン類（化合物８、８ａ、３３）の増殖阻害活性評価を行った。ポジティブコントロールとしては、第一世代阻害剤ゲフィチニブ、第二世代阻害剤アファチニブおよび第三世代阻害剤オシメルチニブを用いた。具体的な試験方法は以下の通りである。
ＢａＦ３細胞２×１０６細胞に対して、２μｇの各種ｐＢＡＢＥ−ＥＧＦＲプラスミドを、ＮＥＯＮエレクトロポレーションシステム（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）を用いて導入し、１０ｎｇ／ｍＬ ＩＬ−３、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、及び１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０培地で５％二酸化炭素／９５％空気雰囲気下、３７℃にて培養した。2日後、１μｇ／ｍＬピューロマイシンを添加し、４日間培養した。細胞をＰＢＳにて洗浄後、ＩＬ−３非含有培地で培養し、ＩＬ−３非依存的に増殖する細胞を用いた。この細胞を９６穴マイクロプレート（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）に３０００細胞/ウェルとなるよう播種し、各種濃度の試験化合物を加え、１５０μLの培地中で４日間培養した。１５μＬの５ｍｇ／ｍＬ ＭＴＴ（チアゾリルブルーテトラゾリウムブロミド）溶液をウェルに添加し、３７℃で４時間インキュベート後、１００μＬの２０％ ＳＤＳを添加して、一晩さらにインキュベートした。５７０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（ベックマン・コールター株式会社）にて測定し、５０％細胞増殖阻害濃度（ＩＣ５０）を算出した。結果を以下の表に示す。【０１２６】
【表１】
2018181777.tif 000033
【０１２７】
【表２】
2018181777.tif 000034
【０１２８】
【表３】
2018181777.tif 000035
【０１２９】
【表４】
2018181777.tif 000036
【０１３０】
試験例１により、以下のことが明らかになった。
（１）二重変異ＥＧＦＲを持つＢａＦ３（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ）に対して、ラメラリン類はアファチニブと同程度の活性を、またアザラメラリン類はオシメルチニブに匹敵する活性を示した。しかしながら、両者ともに治療濃度域（この場合、−ＩＬ３と＋ＩＬ３の差と定義する）が狭く、アファチニブやオシメルチニブに対する優位性は認められなかった。
（２）二重変異ＥＧＦＲを持つＢａＦ３（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ）に対して、ラメラリン類はアファチニブと同程度の活性を示した。しかしながら、両者ともに治療濃度域が狭く、アファチニブやオシメルチニブに対する優位性は認められなかった。
（３）一方、三重変異ＥＧＦＲを持つＢａＦ３（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）、ＢａＦ３（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）に対しては、アファチニブやオシメルチニブの活性は大幅に減弱した（特にオシメルチニブ）。しかしながら、可逆型阻害剤であるラメラリン類やアザラメラリン類ではそのような減弱は認められず、むしろ活性の向上が認められた。その活性は、アファチニブやオシメルチニブの活性を凌ぐものであった。また、各化合物で有意な治療濃度域の広がりが認められ、細胞増殖抑制にＥＧＦＲ阻害が関与していることが明確に示された。【０１３１】
試験例２  化合物２６ｄによる野生型ＥＧＦＲ遺伝子導入ＢａＦ３細胞の増殖抑制活性の評価
活性型変異をもつＥＧＦＲに対する化合物２６ｄの選択性を、活性型変異を持たない野生型ＥＧＦＲを発現するＢａＦ３細胞を用いて検討した。ＢａＦ３細胞２×１０６細胞に対して、２μｇのｐＢＡＢＥ−ＥＧＦＲ野生型を、ＮＥＯＮエレクトロポレーションシステム（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）を用いて導入し、１０ｎｇ／ｍｌ  ＩＬ−３、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、及び１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０培地で５％二酸化炭素／９５％空気雰囲気下、３７℃にて培養した。２日後、１μｇ／ｍＬ  ピューロマイシンを添加し、耐性細胞を選択した。この細胞を、ＰＢＳにて２回洗浄後、９６穴マイクロプレート（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）に３００００細胞／ウェルとなるように播種し、１０ｎｇ／ｍＬ  ＥＧＦまたはＩＬ−３および、各種濃度の化合物２６ｄを加え、１５０μＬの培地中で４日間培養した。１５μＬの５ｍｇ／ｍＬ  ＭＴＴ（チアゾリルブルーテトラゾリウムブロミド）溶液をウェルに添加し、３７℃で４時間インキュベート後、１００μＬの２０％  ＳＤＳを添加して、一晩さらにインキュベートした。５７０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（ベックマン・コールター株式会社）にて測定し、５０％細胞増殖阻害濃度（ＩＣ５０）を算出した。結果を以下の表に示す。【０１３２】
【表５】
2018181777.tif 000037
【０１３３】
活性型変異を持つＢａＦ３（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）に対して、野生型ＥＧＦＲを発現するＢａＦ３細胞では化合物２６ｄの効果は低く、ＩＬ−３存在下での増殖抑制活性と同程度であった。したがって、化合物２６ｄは三重変異を有するＥＧＦＲに対して選択的であることが示された。【０１３４】
試験例３  ＥＧＦＲ遺伝子導入肺線がん細胞を用いた増殖抑制活性の評価
肺腺がん細胞株における化合物２６ｄの増殖抑制活性を検討した。ＥＧＦＲ遺伝子にエキソン１９欠損（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９）を有する肺腺がん細胞株ＰＣ−９に、２μｇのｐＢＡＢＥ−ＥＧＦＲを、Ｖｉａｆｅｃｔトランスフェクション試薬（プロメガ株式会社）を用いて導入し、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、及び１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０培地で５％二酸化炭素／９５％空気雰囲気下、３７℃にて培養した。２日後、２μｇ／ｍＬピューロマイシンを添加し、耐性細胞を選択した。これらの細胞および、野生型ＥＧＦＲを発現するＡ５４９細胞を、９６穴マイクロプレート（サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社）に３０００細胞／ウェル、７５００細胞／ウェルとなるようにそれぞれ播種し、各種濃度の試験化合物を加え、１５０μＬの培地中で４日間培養した。１５μＬの５ｍｇ／ｍＬ  ＭＴＴ（チアゾリルブルーテトラゾリウムブロミド）溶液をウェルに添加し、３７℃で４時間インキュベート後、１００μＬの２０％  ＳＤＳを添加して、一晩さらにインキュベートした。５７０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（ベックマン・コールター株式会社）にて測定し、５０％細胞増殖阻害濃度（ＩＣ５０）を算出した。結果を以下の表に示す。【０１３５】
【表６】
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【０１３６】
ＰＣ−９に活性型変異を持つＥＧＦＲ遺伝子を導入し、肺腺がん細胞株に対する化合物２６ｄの増殖抑制活性を検討した結果、化合物２６ｄは耐性変異（Ｔ７９０Ｍ、Ｃ７９７Ｓ変異）の有無にかかわらず、ほぼ同程度の濃度で増殖を抑制した。
変異を持たない野生型ＥＧＦＲを発現する肺腺がん細胞株Ａ５４９に対しては、活性型変異を有するＰＣ−９細胞よりも高い濃度で増殖を抑制した。したがって、化合物２６ｄは、活性型変異を有するＥＧＦＲに対して選択的であることが示された。【０１３７】
試験例４  化合物２６ｄによるＥＧFＲシグナルの阻害の評価
ＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤は、ＥＧＦＲの自己リン酸化並びに下流のシグナルを阻害する。そこで、化合物２６ｄが、細胞レベルでＥＧＦＲ(ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ)の自己リン酸化並びに下流のシグナルを阻害するかについて検討した。肺腺がん細胞ＰＣ−９およびＥＧＦＲ  (ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ)、ＥＧＦＲ(ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ)をそれぞれ発現するＰＣ−９細胞を、６穴プレートに１０００００細胞／ウェルとなるように播種し、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、及び１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０培地で５％二酸化炭素／９５％空気雰囲気下、３７℃にて培養した。翌日、オシメルチニブまたは化合物２６ｄを添加して４時間培養した。氷冷ＰＢＳにて洗浄後、１００μＬの５ｍＭ  バナジン酸ナトリウム、５ｍＭ  フッ化ナトリウム、Ｐｒｏｔｅａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｃｏｃｋｔａｉｌ（Ｒｏｃｈｅ株式会社）含有ＲＩＰＡバッファー（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ  ｐＨ７．５、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１％ＮＰ４０、１％デオキシコール酸ナトリウム、０．１％ＳＤＳ）に懸濁し、氷上で３０分インキュベートし、１５０００回転で３０分間遠心し、上清を細胞抽出液とした。細胞抽出液を、ＳＤＳポリアクリルアミドゲルにより分離し、ＰＶＤＦ膜に転写した。ＰＶＤＦ膜は、５％スキムミルクにより３０分間ブロッキングし、抗リン酸化ＥＧＦＲ抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗リン酸化ＡＫＴ抗体、抗ＡＫＴ抗体、抗リン酸化ＥＲＫ抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ株式会社）、抗ＥＲＫ抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ）、抗アクチン抗体（Ｓｉｇｍａ株式会社）、セイヨウワサビパーオキシダーゼ結合抗マウスＩｇＧ、セイヨウワサビパーオキシダーゼ結合抗ウサギＩｇＧを用いてウエスタンブロットを行った。検出には、ＥＣＬ  Ｐｒｉｍｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔ、ＬＡＳ３０００（ＧＥヘルスケア株式会社）を用いた。結果を図２に示す。【０１３８】
化合物２６ｄは、ＰＣ−９細胞のＥＧＦＲのリン酸化、ＥＧＦＲシグナルの下流に存在するＥＲＫのリン酸化を抑制した。一方、ＥＧＦＲシグナルの下流のＡＫＴのリン酸化の抑制は見られなかった。これらのタンパク質のリン酸化は、耐性変異（Ｔ７９０Ｍ、Ｃ７９７Ｓ変異）の有無にかかわらず、ほぼ同程度の濃度で抑制された。したがって、化合物２６ｄは既存の薬剤耐性変異細胞のＥＧＦＲシグナルを抑制することが示された。【０１３９】
試験例５  化合物２６ｄのマウスゼノグラフとモデルにおける抗腫瘍効果の評価
化合物２６ｄの動物レベルでの治療効果を調べるために、マウスゼノグラフトモデルを用いて検討した。ＥＧＦＲ（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）を発現するＰＣ−９を  ５×１０７細胞となるように調製し、マトリゲル（ベクトン・ディッキンソン株式会社）と１：１となるように混合した。これをＢａｌｂ／ｃ  ヌードマウス（日本チャールスリバー株式会社）の皮下に、１００μＬ注射した。腫瘍の形成が見られてから、化合物２６ｄを０．２ｍｇ連日腹腔内投与し、腫瘍径を測定した。腫瘍体積は、長軸（ｍｍ）×短軸（ｍｍ）２／２で算出した。結果を図３および４に示す。【０１４０】
化合物２６ｄは、ヌードマウス皮下に移植したＥＧＦＲ（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）遺伝子を発現するＰＣ−９細胞の腫瘍の増大を抑制した。したがって、化合物２６ｄは動物レベルで、ゲフィチニブ、オシメルチニブに耐性となったヒト肺がん移植腫瘍の増大を抑制することが示された。投与期間中、体重減少は観察されなかったため、化合物２６ｄは顕著な毒性は示さないと考えられる。【０１４１】
以上のように、構造に基づく薬剤設計（Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ｂａｓｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ）に基づき創出された本発明の化合物は、ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）やＥＧＦＲ（ｄｅｌ  ｅｘｏｎ１９／Ｔ７９０Ｍ／Ｃ７９７Ｓ）を細胞レベルで強力に阻害することが明らかになった。その活性は、認可された既存のＥＧＦＲ−ＴＫＩ（ゲフィチニブ、アファチニブ、オシメルチニブ）に比較して格段に強く、現在治療法のない三重変異ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がん治療薬（第四世代ＥＧＦＲ−ＴＫＩ）開発のためのリード化合物として有用であると考えられる。
【産業上の利用可能性】
【０１４２】
本発明の化合物は、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）に対して特異的なチロシンキナーゼ阻害活性を有し、Ｃ７９７Ｓ変異型耐性ＥＧＦＲ（特にＣ７９７Ｓ変異型三次耐性ＥＧＦＲ）チロシンキナーゼ阻害剤、耐性変異ＥＧＦＲを持つ非小細胞肺がん等の予防および／または治療剤等として有用である。【０１４３】
本出願は、日本で出願された特願２０１７−０６４８６６を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含されるものである。
【図１】
2018181777.tif 000044
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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