(57)【要約】  本発明の課題はアレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果を、精度よく判定する方法等を提供することである。アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法開始前後において、ＳＴ２＋のＣＤ４＋Ｔ細胞の細胞数の変動と、ＣＤ２７−、ＣＤ１６１＋、ＩＬ−５＋、及びＩＬ−１３＋からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４＋Ｔ細胞の細胞数の変動を解析し、共に減少している場合、アレルゲンを用いた免疫療法は、アレルギー性鼻炎患者に対して有効であると判定できる。
2018135561.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程（ａ）及び（ｂ）を備えたことを特徴とする、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定方法。
（ａ）アレルゲン免疫療法開始後のアレルギー性鼻炎患者から得られた末梢血単核球含有試料、又は該末梢血単核球含有試料をアレルゲン存在下で培養して得られたＴ細胞含有試料中に含まれる以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）及びＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）の細胞数を測定する工程；
（i）ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ii）ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ｂ）前記ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）の細胞数と、前記ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）の細胞数とを、それぞれのコントロール値と比較する工程であって、両者がそれぞれのコントロール値よりも低い場合、前記アレルゲンを用いた免疫療法は、前記アレルギー性鼻炎患者に有効である可能性が高いことを示す、前記工程（ｂ）；
【請求項２】
工程（ａ）において、Ｔ細胞含有試料中に含まれるＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）及びＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）の細胞数を測定することを特徴とする請求項１に記載の判定方法。
【請求項３】
アレルギー性鼻炎が、ダニアレルギー性鼻炎であり、アレルゲン免疫療法が、ダニ抗原を用いたアレルゲン免疫療法であることを特徴とする請求項１又は２に記載の判定方法。
【請求項４】
ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性であることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の判定方法。
【請求項５】
ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞であることを特徴とする請求項４に記載の判定方法。
【請求項６】
以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）に特異的に結合する抗体、及び以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）に特異的に結合する抗体、又はそれらの標識物を含むことを特徴とする、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定用キット。
（i）ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ii）ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞
【請求項７】
アレルギー性鼻炎が、ダニアレルギー性鼻炎であり、アレルゲン免疫療法が、ダニ抗原を用いたアレルゲン免疫療法であることを特徴とする請求項６に記載のキット。
【請求項８】
ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性であることを特徴とする請求項６又は７に記載のキット。
【請求項９】
ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞であることを特徴とする請求項８に記載のキット。
【請求項１０】
以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）及びＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）からなることを特徴とする、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定用バイオマーカー。
（i）ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ii）ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞
【請求項１１】
アレルギー性鼻炎が、ダニアレルギー性鼻炎であり、アレルゲン免疫療法が、ダニ抗原を用いたアレルゲン免疫療法であることを特徴とする請求項１０に記載のバイオマーカー。
【請求項１２】
ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性であることを特徴とする請求項１０又は１１に記載のバイオマーカー。
【請求項１３】
ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞であることを特徴とする請求項１２に記載のバイオマーカー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定方法、判定用キット、及び判定用バイオマーカーに関する。
【背景技術】
【０００２】
アレルギー性鼻炎は、本来無害であるはずの外来抗原に対して、免疫系が過剰に反応することにより生じる、くしゃみ、鼻みず、鼻づまり等の鼻粘膜におけるアレルギー性疾患である。ここ数十年来、生活様式や生活環境の変化に伴い、アレルギー性鼻炎を罹患する患者が急増し、患者におけるＱＯＬ（Quality Of Life）の低下や医療費負担の増大が問題となっている。特に、ダニ等のハウスダストが原因で生じるアレルギー性鼻炎患者は、スギ花粉症等の花粉症患者と同様に、年々増加の一途をたどっている。【０００３】
舌下免疫療法は、アレルギー性鼻炎に対する根治が望める治療法として注目を集めている。舌下免疫療法による治療効果は、通常、アレルギー性鼻炎患者の自覚症状に基づくアンケートに基づき判定されるが、自覚症状にはプラセボ効果も含まれると考えられ、客観性に乏しいことが問題とされていた。【０００４】
アレルギー性鼻炎を治療すると、Ｔ細胞のバランスが変動することが知られている。例えば、Ｔ細胞の卵白アルブミン（ＯＶＡ）により誘発したアレルギー性気道疾患モデルマウスに対して、アレルゲン免疫療法を行うと、ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞数が減少することが報告されている（非特許文献１）。また、草花粉患者に対して舌下免疫療法を行うと、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞の割合は、コントロールのプラセボを投与した場合と比べ、違いが認められたことが報告されている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１２／１４８５４９号パンフレット
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Mucosal Immunol. 2014 Mar;7(2):379-90.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果を、精度よく判定する方法等を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を続けている。その過程において、アレルゲン免疫療法後のアレルギー性鼻炎患者由来の末梢血単核球含有試料を、アレルゲン存在下で培養することにより、アレルゲン特異的Ｔ細胞を含むＴ細胞含有試料を調製し、ＣＤ４陽性（＋）Ｔ細胞群中に含まれる２種類の細胞、すなわち、ＳＴ２＋のＣＤ４＋Ｔ細胞（i）と、ＣＤ２７陰性（−）、ＣＤ１６１＋、ＩＬ−５＋、及びＩＬ−１３＋からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４＋Ｔ細胞（ii）とを検出し、治療前後におけるＣＤ４＋Ｔ細胞の細胞数の変動を解析したところ、上記ＣＤ４＋Ｔ細胞（i）及びＣＤ４＋Ｔ細胞（ii）の細胞数が共に減少する場合、アレルゲンを用いた免疫療法は、アレルギー性鼻炎患者に対して有効であると精度よく判定できることを見いだし、本発明を完成するに至った。【０００９】
すなわち、本発明は以下のとおりである。
〔１〕以下の工程（ａ）及び（ｂ）を備えたことを特徴とする、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定方法（以下、「本件判定方法」ということがある）。
（ａ）アレルゲン免疫療法開始後のアレルギー性鼻炎患者から得られた末梢血単核球含有試料、又は該末梢血単核球含有試料をアレルゲン存在下で培養して得られたＴ細胞含有試料中に含まれる以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）及びＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）の細胞数を測定する工程；
（i）ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ii）ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ｂ）前記ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）の細胞数と、前記ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）の細胞数とを、それぞれのコントロール値と比較する工程であって、両者がそれぞれのコントロール値よりも低い場合、前記アレルゲンを用いた免疫療法は、前記アレルギー性鼻炎患者に有効である可能性が高いことを示す、前記工程（ｂ）；
〔２〕工程（ａ）において、Ｔ細胞含有試料中に含まれるＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）及びＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）の細胞数を測定することを特徴とする上記〔１〕に記載の判定方法。
〔３〕アレルギー性鼻炎が、ダニアレルギー性鼻炎であり、アレルゲン免疫療法が、ダニ抗原を用いたアレルゲン免疫療法であることを特徴とする上記〔１〕又は〔２〕に記載の判定方法。
〔４〕ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性であることを特徴とする上記〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の判定方法。
〔５〕ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞であることを特徴とする上記〔４〕に記載の判定方法。
〔６〕以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）に特異的に結合する抗体、及び以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）に特異的に結合する抗体、又はそれらの標識物を含むことを特徴とする、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定用キット（以下、「本件判定用キット」ということがある）。
（i）ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ii）ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞
〔７〕アレルギー性鼻炎が、ダニアレルギー性鼻炎であり、アレルゲン免疫療法が、ダニ抗原を用いたアレルゲン免疫療法であることを特徴とする上記〔６〕に記載のキット。
〔８〕ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性であることを特徴とする上記〔６〕又は〔７〕に記載のキット。
〔９〕ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞であることを特徴とする上記〔８〕に記載のキット。
〔１０〕以下のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）及びＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）からなることを特徴とする、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定用バイオマーカー（以下、「本件判定用バイオマーカー」ということがある）。
（i）ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞
（ii）ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞
〔１１〕アレルギー性鼻炎が、ダニアレルギー性鼻炎であり、アレルゲン免疫療法が、ダニ抗原を用いたアレルゲン免疫療法であることを特徴とする上記〔１０〕に記載のバイオマーカー。
〔１２〕ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性であることを特徴とする上記〔１０〕又は〔１１〕に記載のバイオマーカー。
〔１３〕ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）が、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞であることを特徴とする上記〔１２〕に記載のバイオマーカー。【００１０】
本発明の実施の他の形態として、上記工程（ａ）及び（ｂ）を備えたことを特徴とする、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の診断方法や、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定に用いるための上記ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）及びＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）を挙げることができる。
【発明の効果】
【００１１】
本発明を用いることにより、舌下免疫療法等のアレルゲン免疫療法の有効性を客観的かつ精度よく評価することができ、また、早期の効果予測が可能となるため、アレルゲン免疫治療患者の負担軽減や医療費削減等の効果が期待される。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１Ａは、舌下免疫療法による治療前後での実薬群（ｎ＝３６）及びプラセボ群（ｎ＝４０）のＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量を測定した結果を示す図である。図１Ｂは、舌下免疫療法による治療前後での実薬群（ｎ＝３８）及びプラセボ群（ｎ＝３５）のＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量を測定した結果を示す図である。図中の●及び■は、各群のダニアレルギー患者一人ひとりを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本件判定方法としては、アレルゲン免疫療法開始後、治療中又は治療後のアレルギー性鼻炎患者から得られた末梢血単核球含有試料（末梢血単核球画分）、又はかかる末梢血単核球含有試料をアレルゲン存在下で培養して得られたＴ細胞含有試料（アレルゲン特異的Ｔ細胞を含有する試料）中に含まれるＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）（以下、「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」ということがある）の細胞数と、前記末梢血単核球含有試料又はＴ細胞含有試料中に含まれるＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）（以下、「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」ということがある）の細胞数とを測定する工程（ａ）；及び前記「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」の細胞数を、コントロール値（以下、「コントロール値（i）」ということがある）と比較し、かつ、前記「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数を、コントロール値（以下、「コントロール値（ii）」ということがある）と比較する工程（ｂ）であって、「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」の細胞数が「コントロール値（i）」よりも低く、かつ「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数が、「コントロール値（ii）」よりも低い場合、前記アレルゲンを用いた免疫療法は、前記アレルギー性鼻炎患者に有効である可能性が高いことを示す、前記工程（ｂ）；の工程（ａ）及び（ｂ）を順次備えた方法であれば特に制限されず、工程（ａ）の前に、アレルゲン免疫療法後のアレルギー性鼻炎患者から採取された血液試料（血液、血清、血漿等）から、末梢血単核球画分を調製する工程（ｐ）をさらに備えた方法であってもよい。
【００１４】
また、本件判定用キットとしては、ＳＴ２陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）（以下、単に「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」ということがある）に特異的に結合する抗体（以下、「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）抗体」ということがある）、及び、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性、及びＩＬ−１３陽性からなる群から選択される１種又は２種以上のＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）（以下、単に「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」ということがある）に特異的に結合する抗体（以下、「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）抗体」ということがある）、並びに／又は、「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）抗体」の標識物、及び「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）抗体」の標識物を含む、アレルゲン免疫療法の治療効果の判定に用いるためのキットであれば特に制限されず、本件判定用キットは、アレルゲン免疫療法の治療効果を判定（診断）するためのキットに関する用途発明であり、これらキットには、一般にこの種の判定キットに用いられる成分、例えば担体、ｐＨ緩衝剤、安定剤の他、取扱説明書、アレルゲン免疫療法の治療効果を判定するための説明書等の添付文書が通常含まれる。
【００１５】
また、本件判定用バイオマーカーとしては、「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」及び「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」からなる、アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法の治療効果の判定（診断）用バイオマーカーであれば特に制限されない。
【００１６】
本明細書において、「アレルギー性鼻炎」とは、ある種の外因性物質の摂取又は接触により生体内に抗体が作られ、同じ外因性物質（アレルゲン［抗原］）の再摂取又は再接触により抗原抗体反応が生じて、アレルギー性鼻炎の症状（鼻閉、発作性反復性のくしゃみ、及び／又は水性鼻漏）が現れる、鼻粘膜におけるＩ型アレルギー性（ＩｇＥ抗体によるアレルギー性）の炎症を意味する。
【００１７】
本明細書において、「アレルギー性鼻炎に対するアレルゲン免疫療法」とは、アレルギー性鼻炎患者に、アレルギー性鼻炎の原因物質であるアレルゲンを投与することにより、アレルゲンに曝露された場合に引き起こされるアレルギー性鼻炎の症状を軽減（改善）する治療法を意味する。アレルゲン免疫療法におけるアレルゲンの投与形態としては、特に制限されず、経口投与、静脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、舌下投与、点眼投与、吸入投与、経皮投与、経鼻投与等を挙げることができ、舌下投与が好ましい。
【００１８】
本明細書において、アレルゲンとしては、具体的に、ハウスダスト（例えば、カビ、真菌の胞子、織物の繊維、動物の鱗屑、ダニ［チリダニ、ツメダニ、コナダニ等］、昆虫の死骸）抗原や、花粉（例えば、スギ花粉、ヒノキ花粉、ブタクサ花粉、イネ花粉、ケヤキ花粉、カモガヤ花粉、シラカバ花粉、コナラ花粉、ハンノキ花粉、マツ属花粉）などを挙げることができる。
【００１９】
上記アレルギー性鼻炎は、始発時期から通年性のアレルギー性鼻炎と、季節性のアレルギー性鼻炎とに分類される。かかる通年性のアレルギー性鼻炎は、上記ハウスダスト抗原等が原因で、年間を通じて発症し得るものである。一方、上記季節性のアレルギー性鼻炎は、上記花粉等のアレルゲンが原因で、一年の特定の時期に発症し得るものである。
【００２０】
上記アレルギー性鼻炎やアレルゲン免疫療法としては、ダニが原因で生じるアレルギー性鼻炎（ダニアレルギー性鼻炎）や、ダニ抗原を用いたアレルゲン免疫療法が好ましい。
【００２１】
本明細書において、「ＣＤ４陽性」、「ＳＴ２陽性」及び「ＣＤ１６１陽性」とは、ＣＤ（cluster of differentiation）４抗原、ＳＴ２抗原及びＣＤ１６１抗原をＴ細胞表面上に発現することを意味する。また、本明細書において、「ＣＤ２７陰性」とは、ＣＤ２７抗原をＴ細胞表面上に発現しないことを意味する。また、本明細書において、「ＩＬ−５陽性」及び「ＩＬ−１３陽性」とは、ＩＬ（Interleukin）−５、及びＩＬ−１３をＴ細胞内に発現することを意味する。
【００２２】
上記「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」としては、具体的には、ＣＤ２７陰性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ１６１陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＩＬ−５陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ２７陰性で、かつＣＤ１６１陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ２７陰性で、かつＩＬ−５陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ２７陰性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ１６１陽性で、かつＩＬ−５陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ１６１陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性で、かつＩＬ−５陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞；ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞を挙げることができ、ＣＤ２７陰性のＣＤ４陽性Ｔ細胞が好ましく、ＣＤ２７陰性、ＣＤ１６１陽性、ＩＬ−５陽性で、かつＩＬ−１３陽性のＣＤ４陽性Ｔ細胞がより好ましい。
【００２３】
上記末梢血単核球含有試料としては、アレルゲン免疫療法後のアレルギー性鼻炎患者から調製された、末梢血単核球（単核細胞）を含む試料であればよく、ここで末梢血単核球含有試料中の末梢血単核球の純度は、通常少なくとも５０％であり、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも８５％、さらに好ましくは少なくとも９０％、さらにより好ましくは少なくとも９５％である。末梢血単核球含有試料は、アレルゲン免疫療法後のアレルギー性鼻炎患者から採取された血液試料（血液、血清、血漿等）から、公知の方法、例えば、密度勾配遠心分離法により調製することができる。上記アレルゲン免疫療法開始後の期間としては、特に制限されず、例えば、開始後２カ月〜３年（６０〜約１０００日）の範囲内、好ましくは、１８０〜７００日、より好ましくは３００〜４００日である。
【００２４】
本件判定方法の工程（ａ）において、測定対象の試料としては、「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」及び「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の検出感度を高める観点から、Ｔ細胞含有試料が好ましい。Ｔ細胞含有試料に含まれる細胞全体に対するＴ細胞の割合としては、特に制限されず、例えば２０〜６０％の範囲内であり、好ましくは３０〜４０％である。
【００２５】
本明細書において、Ｔ細胞含有試料は、末梢血単核球含有試料を、アレルゲン（好ましくは、アレルゲン免疫療法に用いるアレルゲンと由来が同じもの）存在下で培養し、「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」や「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」を含むアレルゲン特異的Ｔ細胞を増殖させることにより調製できる。末梢血単核球含有試料の培養期間としては、特に制限されず、例えば１〜１０日間、好ましくは４〜８日間である。また、末梢血単核球含有試料の培養に用いる培養液としては、特に制限されず、例えば、５〜２０％のウシ胎児血清（Fetal bovine serum；ＦＢＳ）を含む動物細胞培養用基礎培養液（ＤＭＥＭ、ＥＭＥＭ、ＲＰＭＩ−１６４０、α−ＭＥＭ、Ｆ−１２、Ｆ−１０、Ｍ−１９９、ＡＩＭ−Ｖ等）を挙げることができる。また、末梢血単核球含有試料の培養に用いる培養液には、必要に応じて、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−３３等のサイトカインや、抗ＣＤ３抗体、ＰＭＡ（Phorbol 12-Myristate 13-Acetate）、イオノマイシン等のＴ細胞増殖刺激物質、ストレプトマイシン、ペニシリン等の抗生物質などを添加することもできる。添加したサイトカインの培養液中の濃度（終濃度）としては、サイトカインの種類に応じて適宜至適濃度を選択することができ、例えば、サイトカインがＩＬ−２の場合、例えば、３〜６０（ＪＩＵ／ｍＬ）の範囲内であり、好ましくは１０〜２０（ＪＩＵ／ｍＬ）である。また、サイトカインがＩＬ−３３の場合、例えば、１０〜６００（ｎｇ／ｍＬ）の範囲内であり、好ましくは５０〜２００（ｎｇ／ｍＬ）である。また、培養液中のアレルゲンの濃度としては、アレルゲン特異的Ｔ細胞を増殖できる濃度であれば特に制限されず、通常０．１〜５０μｇ／ｍＬの範囲内であり、好ましくは１〜１０μｇ／ｍＬである。培養温度は、通常３０〜４０℃の範囲内であり、好ましくは約３７℃である。培養時のＣＯ２濃度は、通常約１〜１０％の範囲内であり、好ましくは約５％である。また、培養時の湿度は、通常約７０〜１００％の範囲内であり、好ましくは約９５〜１００％の範囲内である。
【００２６】
本件判定方法の工程（ａ）において、「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」及び「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数を測定する方法としては、「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」及び「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」、又はそれらの由来成分（例えばＣＤ４、ＳＴ２、ＣＤ１６１、ＣＤ２７、ＩＬ−５、及び／又はＩＬ−１３タンパク質や、ＣＤ４、ＳＴ２、ＣＤ１６１、ＣＤ２７、ＩＬ−５、及び／又はＩＬ−１３遺伝子のｍＲＮＡ）を特異的に検出し、「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」及び「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数の増減を測定できる方法であれば特に制限されず、例えば、「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）抗体」及び「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）抗体」を用いて、Ｔ細胞におけるＣＤ４、ＳＴ２、ＣＤ１６１、ＣＤ２７、ＩＬ−５、及び／又はＩＬ−１３タンパク質の発現を解析する方法、具体的には、ウエスタンブロッティング法、フローサイトメトリー、ＥＬＩＳＡ法、ＥＩＡ法、ＲＩＡ法等の方法や、Ｔ細胞におけるＣＤ４、ＳＴ２、ＣＤ１６１、ＣＤ２７、ＩＬ−５、及び／又はＩＬ−１３遺伝子のｍＲＮＡの発現を解析する方法、具体的には、定量ＲＴ−ＰＣＲ（Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction）法、ＲＴ−ＰＣＲ法、サザンブロティング法等の方法を挙げることができる。「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」におけるＣＤ４及びＳＴ２や、「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」におけるＣＤ４、ＣＤ１６１、及びＣＤ２７は、細胞表面受容体であることから、簡便性を考慮すると、フローサイトメトリーを用いることが好ましい。
【００２７】
本件判定方法において、「コントロール値（i）」としては、「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」の細胞数が、アレルゲン免疫療法を受けたことにより減少しているか否かを判定（判断）するための指標（対照）値であれば特に制限されず、例えば、アレルゲン免疫療法開始前のアレルギー性鼻炎患者（好ましくは、判定対象と同一の患者）から得られた末梢血単核球含有試料、又はかかる末梢血単核球含有試料をアレルゲン存在下で培養して得られたＴ細胞含有試料中に含まれる「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」（以下、「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」ということがある）の細胞数や、「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」及び「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」の細胞数に基づき、統計解析ソフトウェアを用いたＲＯＣ（Receiver Operating Characteristic）曲線等を用いて算出された閾値（カットオフ値）を挙げることができる。コントロール値として用いる「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」の細胞数は、本件判定方法を実施する際、その都度測定したものを用いてもよいし、予め測定したものを用いてもよい。
【００２８】
また、本件判定方法において、「コントロール値（ii）」としては、「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数が、アレルゲン免疫療法を受けたことにより減少しているか否かを判定（判断）するための指標（対照）値であれば特に制限されず、例えば、アレルゲン免疫療法開始前のアレルギー性鼻炎患者（好ましくは、判定対象と同一の患者）から得られた末梢血単核球含有試料、又はかかる末梢血単核球含有試料をアレルゲン存在下で培養して得られたＴ細胞含有試料中に含まれる「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」（以下、「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」ということがある）の細胞数や、「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」及び「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数に基づき、統計解析ソフトウェアを用いたＲＯＣ曲線等を用いて算出された閾値（カットオフ値）を挙げることができる。コントロール値として用いる「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数は、本件判定方法を実施する際、その都度測定したものを用いてもよいし、予め測定したものを用いてもよい。
【００２９】
本件判定方法の工程（ａ）において、Ｔ細胞含有試料を用いて細胞数を測定する場合、ＣＤ４陽性Ｔ細胞全体の細胞数に対する「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」の細胞数の割合（比率）（以下、「治療後比率（i）」ということがある）；及びＣＤ４陽性Ｔ細胞全体の細胞数に対する「治療後ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数の比率（以下、「治療後比率（ii）」ということがある）；をそれぞれ算出し、本件判定方法の工程（ｂ）において、「治療後比率（i）」及び「治療後比率（ii）」が、それぞれＣＤ４陽性Ｔ細胞全体の細胞数に対する「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」の細胞数の比率；及びＣＤ４陽性Ｔ細胞全体の細胞数に対する「治療前ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」の細胞数の比率；よりも減少しているか否かを比較することが好ましい。
【００３０】
本件判定用キットにおける「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）抗体」としては、上記末梢血単核球画分に含まれる「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）」由来の物質（通常はタンパク質）をエピトープとして特異的に結合する抗体であれば特に制限されず、具体的には、抗ＳＴ２抗体及び抗ＣＤ４抗体から選択される１種又は２種の抗体を挙げることができる。また、本件判定用キットにおける「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）抗体」としては、上記末梢血単核球画分に含まれる「ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）」由来の物質（通常はタンパク質）をエピトープとして特異的に結合する抗体であれば特に制限されず、具体的には、抗ＣＤ２７抗体、抗ＣＤ１６１抗体、抗ＩＬ−５抗体、抗ＩＬ−１３抗体、及び抗ＣＤ４抗体からなる群から選択される１種又は２種以上の抗体を挙げることができる。
【００３１】
上記「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）抗体」及び「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）抗体」の由来、種類、クラス、形態等は特に制限されず、「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（i）抗体」及び「抗ＣＤ４陽性Ｔ細胞（ii）抗体」には、例えば、ヒト由来の抗体；マウス、ラット等の非ヒト動物由来の抗体；ポリクローナル抗体、オリゴクローナル抗体（数種〜数十種の抗体の混合物）、モノクローナル抗体；抗体の一部領域（例えば、定常領域）を異なる生物種由来の領域に置換したキメラ抗体又はヒト化抗体、モノクローナル抗体をペプシンで消化して得られるＦ（ａｂ′）２抗体フラグメント、Ｆ（ａｂ′）２抗体フラグメントを還元して得られるＦａｂ′抗体フラグメント、モノクローナル抗体をパパインで消化して得られるＦａｂ等の抗体フラグメント、抗体重（Ｈ）鎖可変領域と抗体軽（Ｈ）鎖可変領域とを、アミノ酸架橋によって連結させたｓｃＦｖ等の組換え抗体；などが含まれる。
【００３２】
本件判定用キットの標識物における標識物質としては、ペルオキシダーゼ（例えば、horseradish peroxidase）、アルカリフォスファターゼ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼ、グルコースオキシダーゼ、グルコ−ス−６−ホスフェートデヒドロゲナーゼ、アルコール脱水素酵素、リンゴ酸脱水素酵素、ペニシリナーゼ、カタラーゼ、アポグルコースオキシダーゼ、ウレアーゼ、ルシフェラーゼ若しくはアセチルコリンエステラーゼ等の酵素；ＡＰＣ、ＰＥ、ＦＩＴＣ、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ４８８、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ７００、ＰＥ−Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ、ＰＥ−Ｃｙ５、ＰＥ−Ｃｙ７等の蛍光物質；緑色蛍光タンパク質（Green Fluorescence Protein；ＧＦＰ）、シアン蛍光タンパク質（Cyan Fluorescence Protein；ＣＦＰ）、青色蛍光タンパク質（Blue Fluorescence Protein；ＢＦＰ）、黄色蛍光タンパク質（Yellow Fluorescence Protein；ＹＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（Red Fluorescence Protein；ＲＦＰ）、ルシフェラーゼ（luciferase）等の蛍光タンパク質；３Ｈ 、１４Ｃ、１２５Ｉ若しくは１３１Ｉ等の放射性同位体；ビオチン、アビジン等を挙げることができる。
【００３３】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【実施例】
【００３４】
［ダニアレルギー性鼻炎患者由来の末梢血単核球画分の調製］
ダニアレルギー性鼻炎患者（表１参照）に対して、ダニ舌下錠（Stallergenes社製）を用いた舌下免疫療法（実薬群）と、コントロールとしてプラセボ（Stallergenes社製）を用いた舌下免疫療法（プラセボ群）を、二重盲検比較試験にて行った。当該治療前及び治療後１年間における実薬群及びプラセボ群の患者から、末梢血を採取し、定法にしたがって末梢血単核球画分を調製し、−８０℃で凍結保存した。【００３５】
【表１】
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【００３６】
［ダニ抗原特異的な末梢血単核球の調製１］
上記［ダニアレルギー性鼻炎患者由来の末梢血単核球画分の調製］の項目に記載の方法にしたがって調製した末梢血単核球画分を解凍し、培養液（ＲＰＭＩ−１６４０、WAKO製）中で、３７℃、５％ＣＯ２条件下で４時間培養した後、Cell Trace細胞増殖アッセイ用試薬（Thermo Fisher Scientific社製）で染色し、培養液を、６．５μｇ／ｍＬのダニ抗原（INDOOR biotechnologies社製）、２０ＪＩＵ／ｍＬのヒトＩＬ−２（イムネース［シオノギ製薬社製］）、及び１００ｎｇ／ｍＬのヒトＩＬ−３３（R&D Systems社製）を含む培養液と交換し、３７℃、５％ＣＯ２条件下で７日間培養した。【００３７】
［ダニ抗原特異的な末梢血単核球の調製２］
上記［ダニアレルギー性鼻炎患者由来の末梢血単核球画分の調製］の項目に記載の方法にしたがって調製した末梢血単核球画分を解凍し、培養液（ＲＰＭＩ−１６４０、WAKO社製）中で、３７℃、５％ＣＯ２条件下で４時間培養した後、Cell Trace細胞増殖アッセイ用試薬（Thermo Fisher Scientific社製）で染色し、培養液を、６．５μｇ／ｍＬのダニ抗原（INDOOR biotechnologies社製）及び２０ＪＩＵ／ｍＬのヒトＩＬ−２（イムネース［シオノギ製薬社製］）を含む培養液と交換し、３７℃、５％ＣＯ２条件下で７日間培養した。その後、培養液を５０ｎｇ／ｍＬのＰＭＡ（Phorbol 12-Myristate 13-Acetate）（SIGMA社製）及び１μＭのイオノマイシン（Calbiochem社製）を含む培養液と交換し、３７℃、５％ＣＯ２条件下で４時間培養した。【００３８】
［セルソーティング及びフローサイトメトリー解析１］
上記［ダニ抗原特異的な末梢血単核球の調製１］の項目に記載の方法にしたがって調製した単核球（単核細胞）を、蛍光物質で標識した２種類の細胞表面マーカー（ＣＤ４及びＳＴ２）に対する抗体（表２参照）を用いて３０分間、４℃条件下で抗原抗体反応を行った。その後、ＣＤ４＋Ｔ細胞群と、ＳＴ２＋のＣＤ４＋Ｔ細胞群とを、フローサイトメーター（FACSCantII、BD Biosciences社製）を用いて解析し、ＣＤ４＋Ｔ細胞に対するＳＴ２＋のＣＤ４＋Ｔ細胞の割合（ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率）を測定した。また、舌下免疫療法による治療前後でのＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量を、式（「舌下免疫療法による治療後におけるＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率」−「舌下免疫療法による治療前におけるＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率」＝「ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量」）を基に算出した（図１Ａ参照）。【００３９】
［セルソーティング及びフローサイトメトリー解析２］
上記［ダニ抗原特異的な末梢血単核球の調製２］の項目に記載の方法にしたがって調製した単核細胞を、蛍光物質で標識した３種類の細胞表面マーカー（ＣＤ４、ＣＤ２７、及びＣＤ１６１）に対する抗体（表２参照）を用いて３０分間、４℃条件下で抗原抗体反応を行った。次いで、細胞内に存在する２種類のマーカー（ＩＬ−５及びＩＬ−１３）を検出するために、単核細胞を、蛍光物質で標識した２種類の細胞内マーカー（ＩＬ−５及びＩＬ−１３）に対する抗体（表３参照）と、細胞内染色キット（Transcription Buffer set、BD Pharmingen社製）を用いて製品添付のプロトコールにしたがって免疫蛍光染色法を行った。その後、ＣＤ４＋Ｔ細胞群と、ＣＤ２７−、ＣＤ１６１＋、ＩＬ−５＋（産生）、及びＩＬ−１３＋（産生）のＣＤ４＋Ｔ細胞群とを、フローサイトメーター（FACSCantII、BD Biosciences社製）を用いて解析し、ＣＤ４＋Ｔ細胞に対するＣＤ２７−、ＣＤ１６１＋、ＩＬ−５＋で、かつＩＬ−１３＋のＣＤ４＋Ｔ細胞の割合（ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率）を測定し、舌下免疫療法による治療前後でのＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量を、式（「舌下免疫療法による治療後におけるＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率」−「舌下免疫療法による治療前におけるＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率」＝「ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量」）を基に算出した（図１Ｂ参照）。【００４０】
【表２】
2018135561.tif 000004
【００４１】
【表３】
2018135561.tif 000005
【００４２】
［結果］
ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量は、プラセボ群では減少しなかった（１．１±０．９５）のに対して、実薬群では−５．０±０．８２と減少していた（図１Ａ参照）。また、ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量についても同様に、プラセボ群では減少しなかった（０．１５±０．２２）のに対して、実薬群では−１．２±０．２８と減少していた（図１Ｂ参照）。【００４３】
そこで、ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量の閾値（カットオフ値）を０に設定し、実薬群の中で上記変化量が減少する（０未満になる）真陽性患者の割合（感度）と、プラセボ群の中で上記変化量が減少しない（０超になる）真陰性患者の割合（特異度）と、実薬群及びプラセボ群全体に対する上記真陽性患者及び真陰性患者合計の割合（正診率）とを算出した。その結果、ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少を指標にすると、舌下免疫療法における実薬群及びプラセボ群を、高い精度（感度、特異度、及び正診率）で判定できることが示された（表４の「ＳＴ２＋」参照）。【００４４】
また、ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量のカットオフ値も同様に０に設定し、実薬群の中で上記変化量が減少する（０未満になる）真陽性患者の割合（感度）と、プラセボ群の中で上記変化量が減少しない（０超になる）真陰性患者の割合（特異度）と、実薬群及びプラセボ群全体に対する上記真陽性患者及び真陰性患者合計の割合（正診率）とを算出した。その結果、ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少を指標にすると、舌下免疫療法における実薬群及びプラセボ群を、高い精度で判定できることが示された（表４の「ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋」参照）。【００４５】
さらに、上記２種類の変化量を組み合わせた場合の感度、特異度、及び正診率を算出した。すなわち、実薬群の中でＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量が減少し（０未満になり）、かつＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量が減少する（０未満になる）真陽性患者の割合（感度）と、プラセボ群の中でＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量が減少しない（０超になる）か、或いはＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量が減少しない（０超になる）かのいずれか一方又は両方を示す真陰性患者の割合（特異度）と、実薬群及びプラセボ群全体に対する上記真陽性患者並びに真陰性患者合計の割合（正診率）とを算出すると、上記２種類の変化量を単独で用いた場合と比べ、舌下免疫療法における実薬群及びプラセボ群をより高い精度で判定できることが示された（表４の「ＳＴ２＋及びＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋」参照）。かかる判定精度は、従来の平均調整症状スコア（ＡＡＳＳ；Average Adjusted Symptom Score）（文献「Allergy. 2016 Jul 29. doi: 10.1111/all.12996.」参照）変化率減少（−３０％未満）を基にした判定精度（表５の「ＡＡＳＳ」参照）や、上記２種類以外の単独の変化量、すなわち、ＩＬ−５＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表５の「ＩＬ−５＋」参照）や、ＣＤ２７−／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表５の「ＣＤ２７−」参照）や、ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表５の「ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋」参照）や、ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表５の「ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋」参照）を基にした判定精度と比べても、優れていることが示された。【００４６】
【表４】
2018135561.tif 000006
【００４７】
【表５】
2018135561.tif 000007
【００４８】
一般に、症状変化率が、−３０％以上（症状改善率が３０％以下）の場合、プラセボ効果が区別できず、有効と判定しないとされている（文献「J. Allergy Clin. Immunol. 2010 126. 969-75」参照）。そこで、実薬群において、ＡＡＳＳ変化率のカットオフ値を−３０％に設定し、ＡＡＳＳ変化率が−３０％未満の症状改善を示す有効（Responder；Ｒ）群と、ＡＡＳＳ変化率が−３０％以上の症状改善を示さない無効（Non-responder；ＮＲ）群とを判定できるか調べたところ、ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（−２．５未満）と、ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（−０．７４未満）とを組み合わせて判定すると（表６の「ＳＴ２＋及びＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋」参照）、単独の変化量減少、すなわち、ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表６の「ＳＴ２＋」参照）、ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表６の「ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋ＩＬ−５＋．ＩＬ−１３＋」参照）、ＩＬ−５＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表７の「ＩＬ５＋」参照）、ＣＤ２７−／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表７の「ＣＤ２７−」参照）、又はＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（表７の「ＣＤ２７−．ＣＤ１６１＋」参照）を用いた場合と比べ、Ｒ群及びＮＲ群を精度（感度、特異度、及び正診率）よく判定できることが示された。また、ＳＴ２＋／ＣＤ４＋比率の変化量減少（−２．５未満）と、ＣＤ２７−／ＣＤ４＋比率の変化量減少（１未満）とを組み合わせた場合でも、Ｒ群及びＮＲ群を精度よく判定できることが示された（表７の「ＳＴ２＋及びＣＤ２７−」参照）。
以上の結果は、アレルゲンを用いた免疫療法開始前後のＣＤ４＋Ｔ細胞全体に占めるＳＴ２＋／ＣＤ４＋Ｔ細胞数と、ＣＤ２７−、ＣＤ１６１＋、ＩＬ−５＋、又はＩＬ−１３＋のＣＤ４＋Ｔ細胞数とを測定し、両者が減少している場合、アレルゲンを用いた免疫療法は、アレルギー性鼻炎患者に対して有効であると精度よく判定できることを示している。【００４９】
【表６】
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【００５０】
【表７】
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【産業上の利用可能性】
【００５１】
本発明は、舌下免疫療法等のアレルゲン免疫療法の早期効果予測や、アレルゲン免疫治療患者の負担軽減、医療費削減等に資するものである。
【図１】
2018135561.tif 000010
【国際調査報告】
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