(57)【要約】  本発明は、液相ペプチド合成法であって、担体（Ｔａｇ）を用いたＦｍｏｃ法において、Ｔａｇ−ペプチド成分の固液分離（濃縮、固液分離、及び乾燥操作）を行わずに不純物を除去することにより、工程時間の短縮及びＴａｇ−ペプチド成分の固形化のための貧溶媒の使用を削減することを目的とする。以下の工程ａ〜ｄ：ａ．有機溶媒又は有機溶媒の混合液中で、担体保護されたアミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドと、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとを縮合して、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドを得る工程、ｂ．縮合反応後の反応液に水溶性アミンを添加する工程、ｃ．水溶性アミンの存在下で保護されたアミノ基からＦｍｏｃを脱保護する工程、及びｄ．反応液に酸を添加して中和し、さらに酸性水溶液を添加して洗浄した後、分液し、水層を除去し、有機層を得る工程、を含むペプチド合成方法が提供された。【特許請求の範囲】
【請求項１】
液相ペプチド合成方法であって、以下の工程ａ〜ｄ：
ａ．有機溶媒又は有機溶媒の混合液中で、液相ペプチド合成用担体で保護された（担体保護）アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドと、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基でアミノ基が保護された（Ｎ−Ｆｍｏｃ保護）アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとを縮合して、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドを得る工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に水溶性アミンを添加する工程、
ｃ．水溶性アミンの存在下で保護されたアミノ基からＦｍｏｃ基を脱保護する工程、及び
ｄ．反応液に酸を添加して中和し、さらに酸性水溶液を添加して洗浄した後、分液し、水層を除去し、有機層を得る工程
を含むペプチド合成方法、
ここで、
前記液相ペプチド合成用担体は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接又はリンカーを介して結合して、それらを水に不溶性にする化合物であって分子量３００以上の化合物であり、
前記担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが有する一又は複数個のアミノ基、一又は複数個のカルボキシル基、一又は複数個のチオール基、及び一又は複数個の水酸基からなる群より選ばれるいずれか一つの基に、直接又はリンカーを介して該担体が結合しているアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドであり、かつ、
工程ｂ及び工程ｃにおける水溶性アミンは、同じでも異なってもよい。
【請求項２】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化１】
2019198833.tif 000193
（式中、Ｒ1及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、炭素数が８〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＸは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化２】
2019198833.tif 000194
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物：
【化３】
2019198833.tif 000195
（式中、Ｒ2、Ｒ4及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化４】
2019198833.tif 000196
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、及び
下記の構造を有する化合物：
【化５】
2019198833.tif 000197
（式中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2及びＲ4は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＺは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化６】
2019198833.tif 000198
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である、請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項３】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化７】
2019198833.tif 000199
（式中、Ｘは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ２ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、ハロゲノメチル基、アジ化メチル基、ホルミル基、又はオキシムを示し、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基であり；Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5のうち少なくとも一つは、以下の式：
−Ｏ−Ｒ6−Ｘａ−Ａ
で表される基を示し、残余の基は、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；Ｒ6は、炭素数１から１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｘａは、Ｏ又はＣＯＮＲｃ（ここで、Ｒｃは、水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示す）を示し、
Ａは、式（１）〜式（１１）のいずれかを表し、
【化８】
2019198833.tif 000200
（ここで、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、又は置換基を有してもよいアリール基を示し、Ｒ10は、単結合又は炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示す。）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項４】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｖ）
【化９】
2019198833.tif 000201
［式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基、クロロ基であり；Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基、水素原子又は電子吸引性基を示し、かつＲａ、Ｒｂ及びＲｃの少なくとも１つは脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；環Ａ、Ｂ及びＣは独立してそれぞれ電子吸引性基を有していてもよい］、又は
一般式（Ｖ’）：
【化１０】
2019198833.tif 000202
[式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基又はクロロ基であり；ｎは１〜１９の整数を表し；Ｒｃ’は脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基であり；環Ａ，Ｂ及びＣは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基及び電子吸引性基から選ばれる１種以上を有してもよく；環Ａが複数存在する場合の各環Ａはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｙが複数存在する場合の各Ｙはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｒｃ’が複数存在する場合の各Ｒｃ’はそれぞれ同一でも異なっていてもよい、
ここで、脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基は、式（ａ）：
【化１１】
2019198833.tif 000203
（式中、Ｘａは存在しないか、又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−あるいは−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒｄは炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；ｋ1は１〜１０の整数を示し；Ｒｄが複数存在する場合の各Ｒｄはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｘａが複数存在する場合の各Ｘａはそれぞれ同一でも異なっていてもよい）で表される基であり、
脂肪族炭化水素基を有する有機基は、フルオレン化合物の２位及び／又は７位に存在する、式（ｂ）：
【化１２】
2019198833.tif 000204
（式中、＊は結合位置を示し；Ｘ1が−Ｏ−であり；Ｒ1が炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；ｍ1が１である）で表される基、
式（ｃ）：
【化１３】
2019198833.tif 000205
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ2、Ｘ2’、Ｘ2’’及びＸ2’’’が−Ｏ−であり；Ｒ２及びＲ４は独立してそれぞれ炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；Ｒ３は炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4が１であり；ｍ2が１である）で表される基、及び
式（ｄ）：
【化１４】
2019198833.tif 000206
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ8が−Ｏ−を示し；ｍ3が２又は３であり；ｎ5が１であり；ｎ6が３であり；Ｘ7が−Ｏ−であり；ｍ3個のＲ12が独立してそれぞれ炭素数４〜３０のアルキル基である）で表される基からなる群より選ばれる１種以上の基である］
で表されるフルオレン化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチドの合成方法。
【請求項５】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｗ）
【化１５】
2019198833.tif 000207
［式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；Ｒaは、
式（ａ）：
【化１６】
2019198833.tif 000208
［式中、＊は、結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又はＣＯＮＨ−を示し；Ｒ1及びｍ1個のＲ2は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示し；かつＲ3は、水素原子、又は式（Ｗ’）：
【化１７】
2019198833.tif 000209
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す）で表される基である。］で表される基；
式（ｂ）：
【化１８】
2019198833.tif 000210
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１又は２を示し；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ4及びｍ2個のＲ6は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ5は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基；
式（ｃ）：
【化１９】
2019198833.tif 000211
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；ｍ3個のＸ3は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；かつｍ3個のＲ7は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；及び
式（ｄ）：
【化２０】
2019198833.tif 000212
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ7個のＸ4は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−，−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ8は、２価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7個のＲ9は、独立してそれぞれ、１価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7は、１〜５の整数を示し；かつＡｒは、アリーレン基を示す。）で表される基からなる群より選ばれる脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、当該有機基中の総炭素数が３０以上であり；ｎ個のＲｂは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す。］
で表されるベンジル化合物、
（なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチドの合成方法。
【請求項６】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｘ）
【化２１】
2019198833.tif 000213
［式中、Ｙは、ヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；ｋ及びｌは、独立してそれぞれ、０〜５の整数を示し、ただし、ｋ＋ｌは０ではなく；ｋ個のＲa及びｌ個のＲbは、独立してそれぞれ、
式（ａ）：
【化２２】
2019198833.tif 000214
（式中、*は結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ1個のＲ1は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基、
式（ｂ）：
【化２３】
2019198833.tif 000215
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１〜２の整数を示し；ｍ2個のｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’、ｍ2個のＸ2’’’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ2及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ3は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）
で表される基、及び
式（ｅ）：
【化２４】
2019198833.tif 000216
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；Ｘ2は存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＸ7は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＲ12は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基
からなる群より選ばれる炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、ここで、ｋ＋ｌ個の脂肪族炭化水素基を有する有機基における、全脂肪族炭化水素基の合計の炭素数が１６以上であり；環ＡはＲaに加えてさらに置換基を有していてもよく；環ＢはＲbに加えてさらに置換基を有していてもよい。］
で表されるジフェニルメチル化合物；
又は、
一般式（Y）
【化２５】
2019198833.tif 000217
[式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；環Ａは、Ｒ1，ｋ個のＱＲa、及びＣ（Ｘ）（Ｙ）Ｚに加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：
【化２６】
2019198833.tif 000218
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよい）で表される基を示し；
前記Ｒa及びＲbにおける分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基が、式（ｂ）：
【化２７】
2019198833.tif 000219
（式中、＊は、隣接原子との結合位置を示し；Ｒ3及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基をしめし；Ｘ1は、単結合、Ｃ１−４アルキレン基又は酸素原子を示す。但し、Ｒ3及びＲ4がともに水素原子であることはない。）で表される同一又は異なる２価の基を３以上有する基である。］
で表される分岐鎖含有芳香族化合物；
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項７】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化２８】
2019198833.tif 000220
（式中、Ｘはハロゲンであり、Ｙは８〜１２の整数であり、Ｚは１７〜２９の整数である。）、
【化２９】
2019198833.tif 000221
（式中、Ｘは、それぞれ独立に７〜２１の整数である。）、
【化３０】
2019198833.tif 000222
（式中、Ｘは、それぞれ独立に１１〜２９の整数である。）、及び
【化３１】
2019198833.tif 000223
［式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ−Ｏ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、下記式（Ｚ）：
【化３２】
2019198833.tif 000224
［式中、＊はＱとの結合位置を示し；ｎ0は２〜４０の整数を示し；ｎ0個のＲ5及びＲ6は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基（但し同時に水素原子になることは無く）を示し；ｎ0個のＸ２は、独立してそれぞれ、単結合又はＣ１−４アルキレン基を示し；かつＲ7は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し；Ｒ8は、Ｃ１−４アルキル基を示す］で表される基であり；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつ
Ｚは、水素原子又は式（ａ）：
【化３３】
2019198833.tif 000225
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、上記式（Ｚ）である基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらに１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい）で表される基である］で表される分岐鎖含有芳香族化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項８】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化３４】
2019198833.tif 000226
（式中、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１８〜２２のアルコキシ基であり、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化３５】
2019198833.tif 000227
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基を表す））、
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項９】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化３６】
2019198833.tif 000228
（３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアルコール）、
【化３７】
2019198833.tif 000229
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、
【化３８】
2019198833.tif 000230
（２，４−ジドコシルオキシベンズアルデヒド）、
【化３９】
2019198833.tif 000231
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、
【化４０】
2019198833.tif 000232
（Ｎ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、
【化４１】
2019198833.tif 000233
（３，５−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、
【化４２】
2019198833.tif 000234
（２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）
【化４３】
2019198833.tif 000235
（２，４−ジ（１１’−t−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）
【化４４】
2019198833.tif 000236
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである。）
【化４５】
2019198833.tif 000237
（２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジル）−４−メトキシベンジルアルコール）、
【化４６】
2019198833.tif 000238
（ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、
【化４７】
2019198833.tif 000239
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、
【化４８】
2019198833.tif 000240
（３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、
【化４９】
2019198833.tif 000241
（ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）、
及び
【化５０】
2019198833.tif 000242
（Ｎ−エチル−ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１０】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化５１】
2019198833.tif 000243
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである）、
【化５２】
2019198833.tif 000244
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、
【化５３】
2019198833.tif 000245
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、
【化５４】
2019198833.tif 000246
（Ｎ−エチル−２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジルオキシ）−４−メトキシベンジルアミン）、
【化５５】
2019198833.tif 000247
（Ｎ−エチル−ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、
【化５６】
2019198833.tif 000248
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）、及び
【化５７】
2019198833.tif 000249
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）
（なお、上記各式は、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基に結合する前の状態で示している）
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１１】
前記有機溶媒又は有機溶媒の混合液が、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、2−メチルＴＨＦ、４−メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ−メチルピロリドン及びＤＣＭからなる群より選ばれる少なくとも一つの有機溶媒又それらの２以上の混合液である、請求項１〜１０のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１２】
前記水溶性アミンが、１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミンである、請求項１〜１１のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１３】
前記水溶性アミンが、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１−エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン及びピペラジンからなる群より選ばれる、請求項１２に記載のペプチド合成方法。
【請求項１４】
工程ｂにおける水溶性アミンのアミン当量が、工程ａの縮合反応後に理論上残存するアミノ酸当量に対して１〜１０当量の量である、請求項１〜１３のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１５】
工程ｃにおける水溶性アミンのアミン当量が、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、５〜３０当量である、請求項１〜１４のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１６】
工程ｄの酸性水溶液のｐＨが、１〜５である、請求項１〜１５のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１７】
前記工程より得られた担体保護ペプチドを用いて、前記工程の繰り返しを１回以上行うことを含む、請求項１〜１６のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１８】
前記工程をワンポットで行う、請求項１〜１７のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１９】
以下の配列：Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ―ＯＨのペプチドを合成するための、請求項１〜１８のいずれか一つに記載のペプチド合成方法の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液相ペプチド合成において、縮合反応時に残存するアミノ酸活性エステル及びＦｍｏｃ（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）基の脱保護反応時に発生するジベンゾフルベン（ＤＢＦ）の除去を効率的に行う方法などに関する。
【背景技術】
【０００２】
ペプチド合成技術には、固相ペプチド合成法（ＳＰＰＳ法）と液相ペプチド合成法（ＬＰＰＳ法）がある。固相ペプチド合成法は、原理的に、アミノ酸伸長反応の各段階で精製することができない。また、合成コストが高く、そのため、少量生産に向いている。一方、液相ペプチド合成法は、大量生産に汎用されているが、ペプチド鎖が長くなると、ペプチド伸長反応が難しくなり、長鎖のペプチド合成に課題がある。
そこで、溶解状態と不溶化（結晶化）状態を可逆的に繰り返すことができる担体を用いてペプチド合成を行うことが提案されている。溶解状態と不溶化状態を可逆的に繰り返すことができる担体として、様々な化合物が提案されている。例えば、本発明者らにより提案されている長鎖脂肪酸を導入したベンジル化合物（特許文献１〜４：（１）特開２００３−１８３２９８号公報、（２）特開２００４−０５９５０９号公報、（３）ＷＯ２００７／０３４８１２号公報、（４）ＷＯ２００７／１２２８４７号公報）、又は、さらに長鎖脂肪酸の末端にケイ素を導入し有機溶媒への溶解性を向上させたベンジル化合物（特許文献５：ＷＯ２０１７／０３８６５０号公報）、あるいは、長鎖脂肪酸を導入したフルオレン化合物（特許文献６：ＷＯ２０１０／１０４１６９号公報）、長鎖脂肪酸を導入したジフェニルメタン化合物（特許文献７：ＷＯ２０１０／１１３９３９号公報）、ベンジル型の化合物（特許文献８：ＷＯ２０１１／０７８２９５号公報）、分岐型の化合物（特許文献９：ＷＯ２０１２／０２９７９４号公報）がある。【０００３】
ペプチド合成では、ペプチド伸長反応においてアミノ酸残基の欠落が起こるという問題があり、上記の担体を用いた場合においても問題となっている。アミノ酸残基の欠落の解決策として、アミノ酸及び縮合剤の当量を増やすということが行われている。しかしながら、その結果として、アミノ酸縮合反応時に、本質的にアミノ酸活性エステルが残存するという問題が生じる。反応液中に残存した過剰のアミノ酸活性エステルは、Ｎ末端の脱保護時にダブルヒットを引き起こすという問題が生じる。ダブルヒットとは、目的のペプチドにさらにアミノ酸残基が一つ以上余分に挿入されることを意味する。ダブルヒットの結果、不純物ペプチドの副生を招き、目的のペプチドの純度が低くなるという問題を生じる。また、ダブルヒットの結果生じた不純物ペプチドを除去して、目的のペプチドのみを単離・精製することは、一般に困難で煩雑な工程となる。その結果、目的のペプチドの収率が落ちるという問題がある。【０００４】
上記のアミノ酸活性エステルの問題を解決するために、アミノ酸縮合反応後、脱保護前に、ペプチドを担体とともに結晶化し、固液分離により不純物を除くという方法が行われている（例えば、特許文献１〜５）。しかし、固液分離は、結晶化工程を含むため工程が煩雑で時間がかかり、さらに、洗浄工程で大量の洗浄溶媒を必要とするという問題がある。さらに、担体を結晶化するための晶析操作では、活性エステルを洗浄で完全に除去できない場合がある。また、特許文献１〜５に記載の方法は、脱Ｆｍｏｃ後においても、固液分離を行っている。【０００５】
脱保護前に洗浄によりアミノ酸活性エステルを反応系から取り除く他の方法として、保護基としてベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ又はＺ）又はｔ−ブチルオキシカルボニル基（Ｂｏｃ）を用いた液相ペプチド合成法において、反応系中に残存する活性エステルを除去するために、β−アラニン−ＯＢｚなどのアニオン成分をもつアミンをスカベンジャーとして添加する方法が提案されている（特許文献１０：特開２００３−５５３９６号公報）。しかしながら、保護基としてＣｂｚを用いた場合は、ペプチド配列にＭｅｔやＣｙｓがあると、脱保護触媒が失活してしまい適用できない。また、この方法では、保護基としてＦｍｏｃを用いる方法（以下、単にＦｍｏｃ法という場合がある）で発生するジベンゾフルベン（ＤＢＦ）の除去が困難であるため、Ｆｍｏｃ法に適用することが困難である。【０００６】
保護基としてＢｏｃを用いた液相ペプチド合成法において、反応系中に残存するアミノ酸活性エステルを除去するために、アルカリ水（例えば、５％炭酸ナトリウム水溶液）で活性エステルを加水分解しながら液−液抽出でアミノ酸成分を取り除く方法が提案されている（特許文献１１：ＷＯ２００７／０９９６５６号公報）。しかしこの方法でのｐＨ＝１１以上のアルカリが強い条件では、エピマー化が起こる恐れがあり、また、アルカリ加水分解での活性エステルの不活化は、活性エステル種によっては困難でダブルヒットの可能性が残る。そのため、この方法では、高純度合成が困難になる。加えて、この方法ではＦｍｏｃ法で発生するＤＢＦの除去が困難であるため、Ｆｍｏｃ法に適用が困難である。【０００７】
また、本発明者らにより、縮合反応後の反応系に、スカベンジャーとして、第一級又は第二級の炭素数が１〜１４であるアルキルアミン又は芳香族アミン、あるいはヒドロキシルアミンを添加してアミノ酸活性エステルをクエンチする方法が提案されている（特許文献１２：ＷＯ２０１６／１４０２３２号公報）。【０００８】
Ｆｍｏｃを用いたペプチド合成反応においては、Ｆｍｏｃ基を脱保護する反応時に、ＤＢＦが生じる。Ｆｍｏｃの除去試薬（例えば、ピペリジンやＤＢＵその他のアミン）とスカベンジャーを用いた場合は、ＤＢＦ誘導体として、ＤＢＦとピペリジン、又はＤＢＦとＤＢＦスカベンジャーの結合体（ＤＢＦ−捕捉体）が生じる。反応系にＤＢＦが残ると、後に続くペプチド合成で副反応が発生するため、それらを効率的に除くことが望まれている。【０００９】
脱Ｆｍｏｃ時に、アルキルチオール又は固相チオールを共存させて、ＤＢＦをスカベンジし、次いで、エーテルを用いて晶析したペプチド成分を固液分離することにより、不純物であるＤＢＦやＤＢＦ誘導体を取り除く方法が報告されている（非特許文献１：James E. Sheppeck II ら, Tetrahedorn Letters 41(28):5329-5333 (2000)）。しかし、この方法は、脱Ｆｍｏｃ時に発生するＤＢＦを除去するための方法に限定されており、連続ペプチド合成にはそのままでは適応できない。【００１０】
また、脱Ｆｍｏｃ後に得られる反応混合物を二酸化炭素と接触させることにより、ピペリジンによって生じたＤＢＦ−ピペリジンスカベンジ体を炭酸塩とした後、除去する方法が報告されている（特許文献１３：ＷＯ２０１０／０１６５５１号公報）。しかし、ろ過等の工程が必要となり、ワンポット合成には不適である。【００１１】
さらに、固形化しない担体（Ｔａｇ）を用いたＦｍｏｃ法において、アミノ酸活性エステルをチオールシリカでスカベンジ、又はアルカリ水で分解後、脱Ｆｍｏｃ反応時にω−チオールカルボン酸を共存させ、それにＤＢＦをスカベンジさせ、アルカリ水溶化することで、アルカリ水洗浄で不要物を除去する方法が報告されている（特許文献１４：ＷＯ２０１３／０８９２４１号公報）。しかしこの方法においては、アミノ酸活性エステルをアルカリ加水分解する場合は特許文献１１と同様の問題が起きる。また、チオールで活性エステルをスカベンジすると、スカベンジ体のチオールエステルが一種の活性エステルであるため脱Ｆｍｏｃ後に発生するアミノ基を攻撃しダブルヒット体を形成する可能性がある。さらにアルカリ性分液では、脂溶性側鎖保護基を有するアミノ酸スカベンジ体の溶解性が悪く、除去が困難であり、ダブルヒット体、アミノ酸のω−チオールカルボン酸スカベンジ体の縮合物等の不純物が発生する可能性がある。【００１２】
脱Ｆｍｏｃ後に中和を行い、そのままでアミノ酸の縮合を行い、固液分離によって不要物を除去する方法が報告されている（特許文献１５：ＷＯ２０１２／１６５５４６号公報）。この方法においては、縮合反応後に不要物を固液分離で除去する必要がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】特開２００３−１８３２９８号公報
【特許文献２】特開２００４−０５９５０９号公報
【特許文献３】ＷＯ２００７／０３４８１２号公報
【特許文献４】ＷＯ２００７／１２２８４７号公報
【特許文献５】ＷＯ２０１７／０３８６５０号公報
【特許文献６】ＷＯ２０１０／１０４１６９号公報
【特許文献７】ＷＯ２０１１／０７８２９５号公報
【特許文献８】ＷＯ２０１２／０２９７９４号公報
【特許文献９】ＷＯ２０１０／１１３９３９号公報
【特許文献１０】特開２００３−５５３９６号公報
【特許文献１１】ＷＯ２００７／０９９６５６号公報
【特許文献１２】ＷＯ２０１６／１４０２３２号公報
【特許文献１３】ＷＯ２０１０／０１６５５１号公報
【特許文献１４】ＷＯ２０１３／０８９２４１号公報
【特許文献１５】ＷＯ２０１２／１６５５４６号公報
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】James E. Sheppeck II ら, Tetrahedorn Letters 41(28):5329-5333 (2000)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、液相ペプチド合成法であって、担体（Ｔａｇ）を用いたＦｍｏｃ法において、Ｔａｇ−ペプチド成分の固液分離（濃縮、固液分離、及び乾燥操作）を行わずに不純物を除去することにより、工程時間の短縮及びＴａｇ−ペプチド成分の固形化のための貧溶媒の使用を削減することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明者らは、上記課題に鑑み、鋭意検討を行った結果、特定のスカベンジャーを用いることにより、縮合反応時に発生するアミノ酸活性エステルを不活性化して脱Ｆｍｏｃ時にアミノ酸のダブルヒットを防げるとともに、脱Ｆｍｏｃ時に生じるＤＢＦを捕捉し、それらの不純物（不活性化した活性エステル及び捕捉したＤＢＦ）を、固液分離操作を用いることなく、反応系から除去できることを見いだし、本発明を完成した。本発明は以下のものを含む。【００１７】
［１］液相ペプチド合成方法であって、以下の工程ａ〜ｄ：
ａ．有機溶媒又は有機溶媒の混合液中で、液相ペプチド合成用担体で保護された（以下、「担体保護」という）アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドと、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基でアミノ基が保護された（以下、「Ｎ−Ｆｍｏｃ保護」という）アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとを縮合して、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドを得る工程（以下、本発明の縮合反応工程という場合がある）、
ｂ．縮合反応後の反応液に水溶性アミンを添加する工程（以下、本発明のスカベンジ反応工程という場合がある）、
ｃ．水溶性アミンの存在下で保護されたアミノ基からＦｍｏｃ基を脱保護する工程（以下、本発明の脱Ｆｍｏｃ反応工程という場合がある）、及び
ｄ．反応液に酸を添加して中和し、さらに酸性水溶液を添加して洗浄した後、分液し、水層を除去し、有機層を得る工程（以下、本発明の酸性水溶液洗浄工程という場合がある）
を含むペプチド合成方法、
ここで、
前記液相ペプチド合成用担体は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接又はリンカーを介して結合して、それらを水に不溶性にする化合物であって分子量３００以上の化合物であり、
前記担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが有する一又は複数個のアミノ基、一又は複数個のカルボキシル基、一又は複数個のチオール基、及び一又は複数個の水酸基からなる群より選ばれるいずれか一つの基に、直接又はリンカーを介して該担体が結合しているアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドであり、かつ、
工程ｂ及び工程ｃにおける水溶性アミンは、同じでも異なってもよい。
［２］前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「Ｋａ」という場合がある）：【００１８】
【化１】
2019198833.tif 000002
（式中、Ｒ1及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、炭素数が８〜３０、好ましくは１２〜２２のアルコキシ基である。また、式中、ＲＸは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、【００１９】
【化２】
2019198833.tif 000003
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「Ｋｂ」という場合がある）：【００２０】
【化３】
2019198833.tif 000004
（式中、Ｒ2、Ｒ4及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１２〜３０、好ましくは１８〜２２のアルコキシ基である。また、式中、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、【００２１】
【化４】
2019198833.tif 000005
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、及び
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「Ｋｃ」という場合がある）：【００２２】
【化５】
2019198833.tif 000006
（式中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2及びＲ4は、炭素数が１２〜３０、好ましくは１８〜２２のアルコキシ基である。また、式中、ＲＺは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、【００２３】
【化６】
2019198833.tif 000007
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である、
上記［１］に記載のペプチド合成方法。【００２４】
［３］前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「ＫＳ」という場合がある）：【００２５】
【化７】
2019198833.tif 000008
（式中、Ｘは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ2ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、ハロゲノメチル基、アジ化メチル基、ホルミル基、又はオキシムを示し、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基であり；Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5のうち少なくとも一つは、以下の式：
−Ｏ−Ｒ6−Ｘａ−Ａ
で表される基を示し、残余の基は、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；Ｒ6は、炭素数１から１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｘａは、Ｏ又はＣＯＮＲｃ（ここで、Ｒｃは、水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示す）を示し、
Ａは、式（１）〜式（１１）のいずれかを表し、【００２６】
【化８】
2019198833.tif 000009
（ここで、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、又は置換基を有してもよいアリール基を示し、Ｒ10は、単結合又は炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である、
上記［１］に記載のペプチド合成方法。
［４］ 前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｖ）【００２７】
【化９】
2019198833.tif 000010
［式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基、クロロ基であり；Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基、水素原子又は電子吸引性基を示し、かつＲａ、Ｒｂ及びＲｃの少なくとも１つは脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；環Ａ、Ｂ及びＣは独立してそれぞれ電子吸引性基を有していてもよい］、又は
一般式（Ｖ’）：【００２８】
【化１０】
2019198833.tif 000011
[式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基又はクロロ基であり；ｎは１〜１９の整数を表し；Ｒｃ’は脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基であり；環Ａ，Ｂ及びＣは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基及び電子吸引性基から選ばれる１種以上を有してもよく；環Ａが複数存在する場合の各環Ａはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｙが複数存在する場合の各Ｙはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｒｃ’が複数存在する場合の各Ｒｃ’はそれぞれ同一でも異なっていてもよい]、
ここで、脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基は、式（ａ）：【００２９】
【化１１】
2019198833.tif 000012
（式中、Ｘａは存在しないか、又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−あるいは−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒｄは炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；ｋ1は１〜１０の整数を示し；Ｒｄが複数存在する場合の各Ｒｄはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｘａが複数存在する場合の各Ｘａはそれぞれ同一でも異なっていてもよい）で表される基であり、
脂肪族炭化水素基を有する有機基は、フルオレン化合物の２位及び／又は７位に存在する、式（ｂ）：【００３０】
【化１２】
2019198833.tif 000013
（式中、＊は結合位置を示し；Ｘ1が−Ｏ−であり；Ｒ1が炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；ｍ1が１である）で表される基、
式（ｃ）：【００３１】
【化１３】
2019198833.tif 000014
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ2、Ｘ2’、Ｘ2’’及びＸ2’’’が−Ｏ−であり；Ｒ2及びＲ4は独立してそれぞれ炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；Ｒ3は炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4が１であり；ｍ2が１である）で表される基、及び
式（ｄ）：【００３２】
【化１４】
2019198833.tif 000015
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ8が−Ｏ−を示し；ｍ3が２又は３であり；ｎ5が１であり；ｎ6が３であり；Ｘ7が−Ｏ−であり；ｍ3個のＲ12が独立してそれぞれ炭素数４〜３０のアルキル基である）で表される基からなる群より選ばれる１種以上の基である］
で表されるフルオレン化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である上記［１］に記載のペプチド合成方法。【００３３】
［５］ 前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｗ）【００３４】
【化１５】
2019198833.tif 000016
［式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；Ｒaは、
式（ａ）：【００３５】
【化１６】
2019198833.tif 000017
［式中、＊は、結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ1及びｍ1個のＲ2は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示し；かつＲ3は、水素原子、又は式（Ｗ’）：【００３６】
【化１７】
2019198833.tif 000018
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す）で表される基である。］で表される基；
式（ｂ）：【００３７】
【化１８】
2019198833.tif 000019
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１又は２を示し；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ4及びｍ2個のＲ6は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ5は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基；
式（ｃ）：【００３８】
【化１９】
2019198833.tif 000020
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；ｍ3個のＸ3は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；かつｍ3個のＲ7は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；及び
式（ｄ）：【００３９】
【化２０】
2019198833.tif 000021
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ7個のＸ4は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−，−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ8は、２価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7個のＲ9は、独立してそれぞれ、１価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7は、１〜５の整数を示し；かつＡｒは、アリーレン基を示す。）で表される基からなる群より選ばれる脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、当該有機基中の総炭素数が３０以上であり；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す。］
で表されるベンジル化合物、
（なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である上記［１］に記載のペプチド合成方法。【００４０】
［６］前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｘ）【００４１】
【化２１】
2019198833.tif 000022
［式中、Ｙは、ヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；ｋ及びｌは、独立してそれぞれ、０〜５の整数を示し、ただし、ｋ＋ｌは０ではなく；ｋ個のＲa及びｌ個のＲbは、独立してそれぞれ、
式（ａ）：【００４２】
【化２２】
2019198833.tif 000023
（式中、*は結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ1個のＲ1は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基、
式（ｂ）：【００４３】
【化２３】
2019198833.tif 000024
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１〜２の整数を示し；ｍ2個のｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’、ｍ2個のＸ2’’’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ2及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ3は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）
で表される基、及び
式（ｅ）：【００４４】
【化２４】
2019198833.tif 000025
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；Ｘ2は存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＸ7は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＲ12は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基からなる群より選ばれる炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、ここで、ｋ＋ｌ個の脂肪族炭化水素基を有する有機基における、全脂肪族炭化水素基の合計の炭素数が１６以上であり；環ＡはＲaに加えてさらに置換基を有していてもよく；環ＢはＲbに加えてさらに置換基を有していてもよい。］
で表されるジフェニルメチル化合物；
又は、
一般式（Y）【００４５】
【化２５】
2019198833.tif 000026
[式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；環Ａは、Ｒ1，ｋ個のＱＲa、及びＣ（Ｘ）（Ｙ）Ｚに加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：【００４６】
【化２６】
2019198833.tif 000027
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよい）で表される基を示し；
前記Ｒa及びＲbにおける分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基が、式（ｂ）：【００４７】
【化２７】
2019198833.tif 000028
（式中、＊は、隣接原子との結合位置を示し；Ｒ3及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し；Ｘ1は、単結合、Ｃ１−４アルキレン基又は酸素原子を示す。但し、Ｒ3及びＲ4がともに水素原子であることはない。）で表される同一又は異なる２価の基を３以上有する基である。］
で表される分岐鎖含有芳香族化合物；
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である上記［１］に記載のペプチド合成方法。【００４８】
［７］前記液相ペプチド合成用担体が、【００４９】
【化２８】
2019198833.tif 000029
（式中、Ｘはハロゲンであり、Ｙは８〜１２の整数であり、Ｚは１７〜２９の整数である）、【００５０】
【化２９】
2019198833.tif 000030
（式中、Ｘは、それぞれ独立に７〜２１の整数である）、【００５１】
【化３０】
2019198833.tif 000031
（式中、Ｘは、それぞれ独立に１１〜２９の整数である）、及び【００５２】
【化３１】
2019198833.tif 000032
［式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ−Ｏ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、下記式（Ｚ）：【００５３】
【化３２】
2019198833.tif 000033
［式中、＊はＱとの結合位置を示し；ｎ0は２〜４０の整数を示し；ｎ0個のＲ5及びＲ6は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基（但し同時に水素原子になることは無く）を示し；ｎ0個のＸ2は、独立してそれぞれ、単結合又はＣ１−４アルキレン基を示し；かつＲ7は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し；Ｒ8は、Ｃ１−４アルキル基を示す］で表される基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつ
Ｚは、水素原子又は式（ａ）：【００５４】
【化３３】
2019198833.tif 000034
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、上記式（Ｚ）である基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらに１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい）で表される基を示す。］で表される分岐鎖含有芳香族化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である上記［１］に記載のペプチド合成方法。【００５５】
［８］前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：【００５６】
【化３４】
2019198833.tif 000035
（式中、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１８〜２２のアルコキシ基であり、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、【００５７】
【化３５】
2019198833.tif 000036
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基を表す）、
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である上記［１］に記載のペプチド合成方法。
［９］前記液相ペプチド合成用担体が、【００５８】
【化３６】
2019198833.tif 000037
（３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアルコール）、【００５９】
【化３７】
2019198833.tif 000038
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、【００６０】
【化３８】
2019198833.tif 000039
（２，４−ジドコシルオキシベンズアルデヒド）、【００６１】
【化３９】
2019198833.tif 000040
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、【００６２】
【化４０】
2019198833.tif 000041
（Ｎ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、【００６３】
【化４１】
2019198833.tif 000042
（３，５−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、【００６４】
【化４２】
2019198833.tif 000043
（２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）、【００６５】
【化４３】
2019198833.tif 000044
（２，４−ジ（１１’−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）、【００６６】
【化４４】
2019198833.tif 000045
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである）、【００６７】
【化４５】
2019198833.tif 000046
（２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジル）−４−メトキシベンジルアルコール）、【００６８】
【化４６】
2019198833.tif 000047
（ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、【００６９】
【化４７】
2019198833.tif 000048
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、【００７０】
【化４８】
2019198833.tif 000049
（３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、【００７１】
【化４９】
2019198833.tif 000050
（ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）、及び【００７２】
【化５０】
2019198833.tif 000051
（Ｎ−エチル−ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である上記［１］に記載のペプチド合成方法。
［１０］前記液相ペプチド合成用担体が、【００７３】
【化５１】
2019198833.tif 000052
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである）、【００７４】
【化５２】
2019198833.tif 000053
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、【００７５】
【化５３】
2019198833.tif 000054
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、【００７６】
【化５４】
2019198833.tif 000055
（Ｎ−エチル−２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジルオキシ）−４−メトキシベンジルアミン）、【００７７】
【化５５】
2019198833.tif 000056
（Ｎ−エチル−ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、【００７８】
【化５６】
2019198833.tif 000057
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）、及び【００７９】
【化５７】
2019198833.tif 000058
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）、
（なお、上記各式は、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基に結合する前の状態で示している）
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である、上記［１］に記載のペプチド合成方法。【００８０】
［１１］前記有機溶媒又は有機溶媒の混合液が、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、2−メチルＴＨＦ、４−メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、ＤＣＭ、及びＮ−メチルピロリドンからなる群より選ばれる少なくとも一つの有機溶媒又それらの２以上の混合液である、［１］〜［１０］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
［１２］前記水溶性アミンが、１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミンであり、好ましくは、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１−エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン及びピペラジン、より好ましくは、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、及びジエチレントリアミン、さらに好ましくは、１−メチルピペラジンからなる群より選ばれる、上記［１］〜［１１］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
［１３］工程ｂにおける水溶性アミンのアミン当量が、工程ａの縮合反応後に理論上残存するアミノ酸当量に対して１〜１０当量（好ましくは１〜６当量、より好ましくは１〜４当量）の量である、上記［１］〜［１２］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
［１４］工程ｃにおける水溶性アミンのアミン当量が、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、５〜３０当量（好ましくは５〜２０当量、より好ましくは１０〜２０当量）である、上記［１］〜［１３］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
［１５］工程ｄの酸性水溶液のｐＨが、１〜５（好ましくは１〜４、さらに好ましくは１〜３）である、上記［１］〜［１４］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
［１６］前記工程より得られた担体保護ペプチドを用いて、前記工程の繰り返しを１回以上行うことを含む、上記［１］〜［１５］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
［１７］前記工程をワンポットで行う、上記［１］〜［１６］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
［１８］以下の配列：Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ―ＯＨ（配列番号１）のペプチドを合成するための、上記［１］〜［１７］のいずれか一つに記載のペプチド合成方法の使用。
【発明の効果】
【００８１】
本発明のペプチド合成方法は、簡便な手段で、反応系中に存在するアミノ酸活性エステルの問題とＤＢＦの問題を同時に解決するとともに、固液分離操作を削減することができる。本発明によれば、ペプチド合成の工程時間を短縮することができ、また、固液分離操作を削減することにより、溶媒の使用を削減できる。
【発明を実施するための形態】
【００８２】
以下、本発明を、例示的な実施態様を例として、本発明の実施において使用することができる好ましい方法及び材料とともに説明する。
なお、文中で特に断らない限り、本明細書で用いるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されるのと同じ意味をもつ。また、本明細書に記載されたものと同等又は同様の任意の材料及び方法は、本発明の実施において同様に使用することができる。
また、本明細書に記載された発明に関連して本明細書中で引用されるすべての刊行物及び特許は、例えば、本発明で使用できる方法や材料その他を示すものとして、本明細書の一部を構成するものである。
【００８３】
本明細書中で、「Ｘ〜Ｙ」という表現を用いた場合は、下限としてＸを、上限としてＹを含む意味で用いる。本明細書において「約」とは、±１０％を許容する意味で用いる。
【００８４】
本発明の方法で合成されるペプチドの構成単位となるアミノ酸は、天然のアミノ酸又は非天然のアミノ酸のいずれもよく、Ｌ型又はＤ型のいずれのアミノ酸でもよく、また、それらのアミノ酸が混合したものでもよい。非天然アミノ酸としては、特に制限されず、公知の非天然の任意のアミノ酸、又は、公知の技術を参照して任意の修飾を加えたアミノ酸を用いてもよい。
公知の非天然アミノ酸としては、これに限定されないが、例えば、Ｎ−メチル修飾アミノ酸、Ｎ−２，４−ジメトキシベンジル修飾アミノ酸、α―メチルアラニン、Ｄ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、及び、Ｌ−オクタヒドロインドリン−２−カルボン酸を挙げることができる。
また、天然の又は非天然のアミノ酸に、任意の修飾を加えたアミノ酸も本発明の方法において用いることができる。任意の修飾としては、特に制限されず、アミノ酸合成に関わる技術分野において、公知又は慣用の技術を用いてアミノ酸に付加できる修飾であれば制限なく用いることができる。例えば、低分子の有機化合物の付加、リン酸化、ビオチン化、ＰＥＧ化、糖鎖修飾、蛍光修飾を挙げることができる。
【００８５】
本発明の一つの態様において、本発明は、特定の液相ペプチド合成用担体で保護されたアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドと、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸又はペプチドを縮合する工程、縮合反応後残存する活性エステルをクエンチする工程、縮合したＮ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドからＦｍｏｃ基を脱保護する工程、並びに、反応液を酸で中和し次いで酸性水溶液で洗浄する工程を含むペプチドの合成方法において、縮合工程の後及びＦｍｏｃ基を脱保護する工程において水溶性アミンを用いることを特徴とするペプチド合成方法である。
本発明の別の態様において、本発明は、上記のペプチド合成方法をワンポットで行うペプチド合成方法である。
本発明のまた別の態様において、本発明は、上記ペプチド合成方法を連続して行うペプチド合成方法である。
本発明のその他の態様において、本発明は、上記ペプチド合成方法において、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基と結合し得る反応基としてアミノ基を含む反応基を有する担体を用いることにより、カルボキシル基末端がアミド化されたペプチドを得るためのペプチド合成方法である。
【００８６】
本発明のペプチド合成方法を以下に説明する。
１．Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸及びペプチド
９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基でアミノ基が保護されたアミノ酸（Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸）又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとは、アミノ酸又はペプチドのアミノ基がＦｍｏｃ基で保護されており、一方、カルボキシル基は保護されておらず反応性であるアミノ酸又はペプチドを意味する。アミノ酸又はペプチドが１以上のアミノ基を有する場合は、少なくとも一つのアミノ基がＦｍｏｃ基で保護されていれば良い。
なお、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸又はペプチドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後の任意の時点で、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ−ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
【００８７】
２．担体保護アミノ酸、ペプチド及びアミノ酸アミド
液相ペプチド合成用担体で保護されたアミノ酸（担体保護アミノ酸）又は担体保護ペプチドとは、アミノ酸又はペプチドの反応基の一つが以下に記載の液相ペプチド合成用担体により直接又はリンカーを介して保護されており、少なくとも一つのアミノ基が反応性の状態であるアミノ酸又はペプチドをいう。好ましくは、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基が以下に記載の液相ペプチド合成用担体で保護され、一方、アミノ基は保護されておらず反応性である。
担体保護アミノ酸アミドとは、アミノ酸アミドの少なくとも一つのアミド基が以下に記載の液相ペプチド合成用担体により直接又はリンカーを介して保護され、少なくとも一つのアミノ基は保護されておらず反応性であるアミノ酸アミドをいう。
なお、担体保護アミノ酸、担体保護ペプチド、又は担体保護アミノ酸アミドが、水酸基、アミノ基、グアニジル基、カルボキシル基、チオール基、インドール基、イミダゾール基等の反応性に富む官能基を有する場合、これらの官能基にペプチド合成で用いられる一般的な保護基が導入されていてもよく、反応終了後に、必要に応じて保護基を除去することで目的化合物を得ることができる。
水酸基の保護基としてはｔＢｕ基、Ｔｒｔ基、Ｂｚ基、アセチル基、シリル基等が挙げられ、アミノ基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｆｍｏｃ基、Ｃｂｚ基、Ｔｒｔ基、Ｍｍｔ基、ｉｖＤｄｅ基等が挙げられ、グアニジル基の保護基としては、Ｐｂｆ基、Ｐｍｃ基、ニトロ基等が挙げられ、カルボキシル基の保護基としてはｔＢｕ基、メチル基、エチル基、Ｂｚ基等が挙げられ、チオール基の保護基としては、Ｔｒｔ基、Ａｃｍ基、ｔＢｕ基、Ｓ−ｔＢｕ基等が挙げられ、インドール基の保護基としては、Ｂｏｃ基等が挙げられ、イミダゾール基の保護基としては、Ｂｏｃ基、Ｂｏｍ基、Ｂｕｍ基、Ｔｒｔ基等を挙げることができる。
【００８８】
３．液相ペプチド合成用担体
本発明で用いる液相ペプチド合成用担体とは、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接又はリンカーを介して結合して、それらを水に不溶性にする化合物であって分子量３００以上の化合物である。本発明で用いる担体は、これに限定されないが、好ましくは、担体が溶解している溶媒の組成変化により、溶解状態と不溶化（結晶化又はオイル化）状態とが可逆的に変化する特性を有する化合物である。なお、本発明のペプチド合成方法の実施態様において、担体が不溶化することは必要ではなく、また、担体が不溶化するような溶媒の組成変化を行うことも必要ではない。
これに限定されないが、本発明のペプチド合成方法に用いる担体保護アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドを調製する工程において、担体を固体化（例えば、結晶化）してもよいし、また、本発明のペプチド合成方法により得られた有機層（有機溶媒又は有機溶媒の混合物の層）に溶解した担体保護ペプチドを回収する工程において、担体を固体化（例えば、結晶化）してもよい。
本発明で用いる液相ペプチド合成用担体は、好ましくは、以下に記載の担体化合物から由来する担体である。以下、本発明で用いることができる担体の構造を、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で説明する。
【００８９】
３−１．担体化合物Ａ
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「Ｋａ」という場合がある）：
【００９０】
【化５８】
2019198833.tif 000059
（式中、Ｒ1及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、炭素数が８〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＸは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【００９１】
【化５９】
2019198833.tif 000060
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す））。
上記式中、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、より好ましくは炭素数が８〜２２、さらに好ましくは炭素数が１２〜１８のアルコキシ基である。
上記式中、ＲＸは、好ましくはヒドロキシメチル基、アミノメチル基、メルカプトメチル基であり、より好ましくはヒドロキシメチル基である。
上記式に含まれる化合物で、好ましいものは３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアルコール、３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアミン、３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルチオールであり、より好ましいものは３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアルコール、３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアミンであり、よりさらに好ましいものは下記式で表される３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアルコールである。
【００９２】
【化６０】
2019198833.tif 000061
【００９３】
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーへの上記化合物（Ｋａ）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＤＩＰＣＩを用いたエステル化により行うことができる。
【００９４】
３−２．担体化合物Ｂ
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「Ｋｂ」という場合がある）：
【００９５】
【化６１】
2019198833.tif 000062
（式中、Ｒ2、Ｒ4及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【００９６】
【化６２】
2019198833.tif 000063
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す））。
上記式中、Ｒ1及びＲ3は、好ましくは炭素数が１８〜２２のアルコキシ基である。
上記式中、ＲＹは、好ましくはヒドロキシメチル基、アミノメチル基、メルカプトメチル基であり、より好ましくはヒドロキシメチル基又はアミノメチル基である。
上記式中、他の好ましいものは、下記の構造を有する化合物：
【００９７】
【化６３】
2019198833.tif 000064
（式中、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１８〜２２のアルコキシ基であり、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【００９８】
【化６４】
2019198833.tif 000065
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６、好ましくは炭素数１〜３のアルキル基を表す））である。
上記式に含まれる具体的化合物で、好ましいものは２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール、２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン、２，４−ジドコシルオキシベンジルチオール、Ｎ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミンであり、より好ましいものは下記式で表される２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール、
【００９９】
【化６５】
2019198833.tif 000066
又は、下記式で表される２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン、
【０１００】
【化６６】
2019198833.tif 000067
又は、下記式で表されるＮ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミンである。
【０１０１】
【化６７】
2019198833.tif 000068
【０１０２】
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーへの上記化合物（Ｋｂ）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＤＩＰＣＩを用いたエステル化により行うことができる。
【０１０３】
３−３．担体化合物Ｃ
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「Ｋｃ」という場合がある）：
【０１０４】
【化６８】
2019198833.tif 000069
（式中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2及びＲ4は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＺは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【０１０５】
【化６９】
2019198833.tif 000070
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す））。
上記式中、Ｒ2及びＲ4は、好ましくは炭素数が１８〜２２のアルコキシ基である。
上記式中、ＲＺは、好ましくはヒドロキシメチル基、アミノメチル基、メルカプトメチル基であり、より好ましくはヒドロキシメチル基である。
上記式に含まれる化合物で好ましいものは、３，５−ジドコシルオキシベンジルアルコール、３，５−ジドコシルオキシベンジルアミン、３，５−ジドコシルオキシベンジルチオールであり、より好ましいものは３，５−ジドコシルオキシベンジルアルコール、３，５−ジドコシルオキシベンジルアミンであり、よりさらに好ましいものは下記式で表される３，５−ジドコシルオキシベンジルアルコールである。
【０１０６】
【化７０】
2019198833.tif 000071
【０１０７】
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーへの上記化合物（Ｋｃ）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＤＩＰＣＩを用いたエステル化により行うことができる。
【０１０８】
３−４．担体化合物Ｄ
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「ＫＳ」という場合がある）：
【０１０９】
【化７１】
2019198833.tif 000072
（式中、Ｘは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ2ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、ハロゲノメチル基、アジ化メチル基、ホルミル基、又はオキシムを示し、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基であり；Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5のうち少なくとも一つは、以下の式：
−Ｏ−Ｒ6−Ｘａ−Ａ
で表される基を示し、残余の基は、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；Ｒ6は、炭素数１〜１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｘａは、Ｏ又はＣＯＮＲｃ（ここで、Ｒｃは、水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示す）を示し；
Ａは、式（１）〜式（１１）のいずれかを表し、
【０１１０】
【化７２】
2019198833.tif 000073
（ここで、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、又は置換基を有してもよいアリール基を示し、Ｒ10は、単結合又は炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示す。）。
上記式中、Ｘは、好ましくは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ2ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、又はハロゲノメチル基である。
上記式中、Ｒ6は、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数が６〜１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基である。
上記式に含まれる化合物で、好ましいものは、下記式で示される２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール、２，４−ジ（１１’−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール、Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン、又はＮ−エチル−２，４−ジ（１１’−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミンである。
【０１１１】
【化７３】
2019198833.tif 000074
【０１１２】
【化７４】
2019198833.tif 000075
【０１１３】
【化７５】
2019198833.tif 000076
【０１１４】
【化７６】
2019198833.tif 000077
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーへの上記化合物（ＫＳ）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＤＩＰＣＩを用いたエステル化により行うことができる。
【０１１５】
３−５．担体化合物Ｅ
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「ＫＪ１」という場合がある）：
一般式（Ｖ）：
【０１１６】
【化７７】
2019198833.tif 000078
［式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基、クロロ基であり；Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基、水素原子又は電子吸引性基を示し、かつＲａ、Ｒｂ及びＲｃの少なくとも１つは脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；環Ａ、Ｂ及びＣは独立してそれぞれ電子吸引性基を有していてもよい］、又は
一般式（Ｖ’）：
【０１１７】
【化７８】
2019198833.tif 000079
[式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基又はクロロ基であり；ｎは１〜１９の整数を表し；Ｒｃ’は脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基であり；環Ａ，Ｂ及びＣは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基及び電子吸引性基から選ばれる１種以上を有してもよく；環Ａが複数存在する場合の各環Ａはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｙが複数存在する場合の各Ｙはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｒｃ’が複数存在する場合の各Ｒｃ’はそれぞれ同一でも異なっていてもよい]、
ここで脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基は、
式（ａ）：
【０１１８】
【化７９】
2019198833.tif 000080
（式中、Ｘａは存在しないか、又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−あるいは−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒｄは炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；ｋ1は１〜１０の整数を示し；Ｒｄが複数存在する場合の各Ｒｄはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｘａが複数存在する場合の各Ｘａはそれぞれ同一でも異なっていてもよい）で表される基であり、
脂肪族炭化水素基を有する有機基は、フルオレン化合物の２位及び／又は７位に存在する、
式（ｂ）：
【０１１９】
【化８０】
2019198833.tif 000081
（式中、＊は結合位置を示し；Ｘ1が−Ｏ−であり；Ｒ1が炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；ｍ1が１である）で表される基、
式（ｃ）：
【０１２０】
【化８１】
2019198833.tif 000082
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ2、Ｘ2’、Ｘ2’’及びＸ2’’’が−Ｏ−であり；Ｒ2及びＲ4は独立してそれぞれ炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；Ｒ3は炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4が１であり；ｍ2が１である）で表される基、及び
式（ｄ）：
【０１２１】
【化８２】
2019198833.tif 000083
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ8が−Ｏ−を示し；ｍ3が２又は３であり；ｎ5が１であり；ｎ6が３であり；Ｘ7が−Ｏ−であり；ｍ3個のＲ12が独立してそれぞれ炭素数４〜３０のアルキル基である）で表される基、
からなる群より選ばれる１種以上の基である］
で表されるフルオレン化合物。
上記式に含まれる化合物で、好ましいものは、下記式で表される。
【０１２２】
【化８３】
2019198833.tif 000084
（式中、Ｘはハロゲンであり、Ｙは８〜１２の整数であり、Ｚは１７〜２９の整数である）、又は、
【０１２３】
【化８４】
2019198833.tif 000085
（式中、Ｘはハロゲンであり、Ｙは１８〜２２の整数である）。
上記式中、Ｘは、好ましくはＦ又はＣｌであり、より好ましくはＦである。
最も好ましいものは下記式で表される。
【０１２４】
【化８５】
2019198833.tif 000086
（式中、ＸはＦ又はＣｌである）、又は、
【０１２５】
【化８６】
2019198833.tif 000087
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである）。
【０１２６】
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーへの上記化合物（ＫＪ１）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、塩基触媒によるエステル化により行うことができる。
【０１２７】
３−５．担体化合物F
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「ＫＪ２」という場合がある）：
【０１２８】
【化８７】
2019198833.tif 000088
［式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；Ｒaは、
式（ａ）：
【０１２９】
【化８８】
2019198833.tif 000089
［式中、＊は、結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ1及びｍ1個のＲ2は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示し；かつＲ3は、水素原子、又は式（Ｗ’）：
【０１３０】
【化８９】
2019198833.tif 000090
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す）で表される基である。］で表される基；、
式（ｂ）：
【０１３１】
【化９０】
2019198833.tif 000091
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１又は２を示し；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ4及びｍ2個のＲ6は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ5は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；
式（ｃ）：
【０１３２】
【化９１】
2019198833.tif 000092
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；ｍ3個のＸ3は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；かつｍ3個のＲ7は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；及び
式（ｄ）：
【０１３３】
【化９２】
2019198833.tif 000093
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ7個のＸ4は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−，−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ8は、２価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7個のＲ9は、独立してそれぞれ、１価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7は、１〜５の整数を示し；かつＡｒは、アリーレン基を示す）で表される基からなる群より選ばれる脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、当該有機基中の総炭素数が３０以上であり；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す］で表されるベンジル化合物。
上記式に含まれる化合物で、好ましいものは、下記式で表される。
【０１３４】
【化９３】
2019198833.tif 000094
（式中、Ｘは、独立してそれぞれ７〜２１の整数であり、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示す）を示す）。
最も好ましいものは下記式で表される、２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジル）−４−メトキシベンジルアルコール、又はＮ−エチル−２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジルオキシ）−４−メトキシベンジルアミンである。
【０１３５】
【化９４】
2019198833.tif 000095
【０１３６】
【化９５】
2019198833.tif 000096
【０１３７】
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーへの上記化合物（ＫＪ２）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＤＩＰＣＩによるエステル化により行うことができる。
【０１３８】
３−６．担体化合物G
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「ＫＪ３」という場合がある）：
【０１３９】
【化９６】
2019198833.tif 000097
［式中、Ｙは、ヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；ｋ及びｌは、独立してそれぞれ、０〜５の整数を示し、ただし、ｋ＋ｌは０ではなく；ｋ個のＲa及びｌ個のＲbは、独立してそれぞれ、
式（ａ）：
【０１４０】
【化９７】
2019198833.tif 000098
（式中、*は結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ1個のＲ1は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基、
式（ｂ）：
【０１４１】
【化９８】
2019198833.tif 000099
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１〜２の整数を示し；ｍ2個のｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’、ｍ2個のＸ2’’’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ2及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ3は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）
で表される基、及び
式（ｅ）：
【０１４２】
【化９９】
2019198833.tif 000100
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；Ｘ2は存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＸ7は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＲ12は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基
からなる群より選ばれる炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、ここで、ｋ＋ｌ個の脂肪族炭化水素基を有する有機基における、全脂肪族炭化水素基の合計の炭素数が１６以上であり；環ＡはＲaに加えてさらに置換基を有していてもよく；環ＢはＲbに加えてさらに置換基を有していてもよい。］
で表されるジフェニルメチル化合物。
上記式に含まれる化合物で、好ましいものは、下記式で表される。
【０１４３】
【化１００】
2019198833.tif 000101
（式中、Ｘは、それぞれ独立に１１〜２９の整数であり、Ｙは−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示す）。
最も好ましいものは下記式で表される、ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン、又はＮ−エチル−ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミンである。
【０１４４】
【化１０１】
2019198833.tif 000102
【０１４５】
【化１０２】
2019198833.tif 000103
【０１４６】
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基への上記化合物（ＫＪ３）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＤＩＰＣＩ／ＨＯＢｔによるアミド化により行うことができる。
【０１４７】
３−７．担体化合物Ｈ
下記の構造を有する化合物（本願明細書中では「ＫＪ４」という場合がある）：
【０１４８】
【化１０３】
2019198833.tif 000104
[式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；環Ａは、Ｒ1，ｋ個のＱＲa、及びＣ（Ｘ）（Ｙ）Ｚに加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：
【０１４９】
【化１０４】
2019198833.tif 000105
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよい）で表される基を示し；
前記Ｒa及びＲbにおける分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基が、式（ｂ）：
【０１５０】
【化１０５】
2019198833.tif 000106
（式中、＊は、隣接原子との結合位置を示し；Ｒ3及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し；Ｘ1は、単結合、Ｃ１−４アルキレン基又は酸素原子を示す。但し、Ｒ3及びＲ4がともに水素原子であることはない）で表される同一又は異なる２価の基を３以上有する基である］であらわされる分岐鎖含有芳香族化合物。
上記式に含まれる化合物で、好ましいものは、下記式で表される。
【０１５１】
【化１０６】
2019198833.tif 000107
［式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ−Ｏ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、下記式（Ｚ）：
【０１５２】
【化１０７】
2019198833.tif 000108
［式中、＊はＱとの結合位置を示し；ｎ0は２〜４０の整数を示し；ｎ0個のＲ5及びＲ6は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基（但し同時に水素原子になることは無く）を示し；ｎ0個のＸ2は、独立してそれぞれ、単結合又はＣ１−４アルキレン基を示し；かつＲ7は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し；Ｒ8は、Ｃ１−４アルキル基を示す］で表される基を示し；
ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：
【０１５３】
【化１０８】
2019198833.tif 000109
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、上記式（Ｚ）である基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらに１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい）で表される基を示す。］で表される分岐鎖含有芳香族化合物。
上記式に含まれる化合物で、さらに好ましいものは、下記式で表される２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール、
【０１５４】
【化１０９】
2019198833.tif 000110
、又は、下記式で表される３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール、
【０１５５】
【化１１０】
2019198833.tif 000111
、又は、下記式で表される２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン、
【０１５６】
【化１１１】
2019198833.tif 000112
、又は、下記式で表されるＮ−エチル−２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン、
【０１５７】
【化１１２】
2019198833.tif 000113
、又は、下記式で表されるビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン、
【０１５８】
【化１１３】
2019198833.tif 000114
、又は、下記式で表されるＮ−エチル−ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミンである。
【０１５９】
【化１１４】
2019198833.tif 000115
【０１６０】
アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基への上記化合物（ＫＪ４）の結合は、ペプチド合成において一般的に用いられる方法を本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＤＩＰＣＩ／ＨＯＢｔによるアミド化により行うことができる。
【０１６１】
４．リンカー
本発明で用いる担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが有するアミノ基、カルボキシル基、チオール基又は水酸基に、直接又はリンカーを介して上記担体が結合している。
ここでいうリンカーとは、リンカーの一方が、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが有する一又は複数個のアミノ基、一又は複数個のカルボキシル基、一又は複数個のチオール基、及び一又は複数個の水酸基からなる群より選ばれるいずれか一つの基と結合し、他方が担体と結合する２つの反応基をもつ有機基である。好ましくは、本発明で用いることができるリンカーは、分子量が約２０００以下（好ましくは約１５００以下、より好ましくは約１０００以下）の有機基であって、反応基として、同じでも異なってもよく、アミノ基、カルボキシル基、及びハロメチル基からなる群より選ばれる少なくとも２つの基を分子内にもつ化合物である。これらに限定されないが、例えば、以下の化合物を挙げることができる。
【０１６２】
【化１１５】
2019198833.tif 000116
【０１６３】
【化１１６】
2019198833.tif 000117
（式中、Ｙは１〜６、好ましくは１〜４の整数である）。
【０１６４】
【化１１７】
2019198833.tif 000118
（式中、Ｘはハロゲン原子、好ましくは、塩素又は臭素である）。
【０１６５】
【化１１８】
2019198833.tif 000119
（式中、Ｚは２〜４０、好ましくは２〜３５、より好ましくは、２〜２８の整数である）。
（上記リンカーの構造式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基に結合する前の状態かつ担体と結合する前の状態を示す）。
【０１６６】
上記リンカーを含む担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドの調製は、リンカーへの結合の順番は特に限定されず、上記リンカーの一方をアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに結合した後に他方を担体に結合しても良く、あるいは、上記リンカーの一方を担体に結合した後に他方をアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに結合してもよい。
上記リンカーの一方とアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドとの結合は、互いに結合するリンカーの基及びアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドの基に応じて、公知の方法を適宜参照して行うことができる。例えば、これに限定されないが、ＤＩＰＣＩ／ＨＯＢｔによるアミド化を挙げることができる。
上記リンカーの一方と担体との結合は、互いに結合するリンカーの基及び担体の基に応じて、公知の方法を適宜参照して行うことができる。例えば、これに限定されないが、ＤＩＰＣＩによるエステル化を挙げることができる。
【０１６７】
５．溶媒
本発明の方法において用いる溶媒は、特に制限されず、液相ペプチド合成において用いられる溶媒を用いることができる。溶媒としては、これに限定されないが、例えば、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、2−メチルＴＨＦ、４−メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ−メチルピロリドンを挙げることができ、好ましくは、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、2−メチルＴＨＦ、４−メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ−メチルピロリドンである。さらに、上記溶媒の２種以上の混合溶媒でもよい。
【０１６８】
本発明のペプチド合成方法に用いる出発物質の調製のために、又は、本発明のペプチド合成方法を用いて合成したペプチドを回収するために、担体を固体化（結晶化）する場合は、極性溶媒を用いる。用いる極性溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、プロピオニトリル、ＤＭＦ、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、水等、ならびにこれら２種以上の混合溶媒が挙げられる。中でも、メタノール又はアセトニトリルが好適に使用される。
【０１６９】
６．ペプチドの合成方法
本発明のペプチド合成方法は、縮合反応工程、Ｆｍｏｃ基の脱保護工程、及び担体保護ペプチドの回収工程までの一連の工程を、固液分離操作を行うことなく連続して行うことができる、さらに、合成工程で発生する不純物を分液分離により軽減又は除去することができる。そのため、連続ペプチド合成方法として適している。
本発明のペプチド合成方法によるペプチドの合成は以下の工程を含む。
（ｉ）縮合反応工程
有機溶媒又は有機溶媒の混合液中で、縮合剤の存在下、担体保護アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドと、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとを縮合して、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドを得る工程、
（ｉｉ）スカベンジ反応工程
縮合反応後の反応液に、水溶性アミン（以下、アミンスカベンジャーと呼ぶ場合がある）を添加して、アミノ酸活性エステルのスカベンジ体を形成する工程、
（ｉｉｉ）脱Ｆｍｏｃ工程
水溶性アミンの存在下で保護されたＮ末端からＦｍｏｃ基を脱保護する工程、及び
（ｉｖ）酸性水溶液洗浄工程
反応液に酸を添加して中和し、さらに酸性水溶液を添加し洗浄した後、分液し、水層を除去する工程。
【０１７０】
上記工程は、担体保護アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミド、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドの固形化（結晶化）を伴う固液分離操作を必要としないので、ワンポットで行うことができる。
さらに、上記工程を行うことにより、合成反応の開始時に比べアミノ酸又はペプチドが付加された担体保護ペプチドが有機層に溶解された状態で回収できる。また、担体保護ペプチドが溶解した有機層からは不純物が軽減又は除去されているので、そのままの状態で、次のペプチド合成反応を続けて行うことができる。
よって、本発明のペプチド合成方法の一つの態様として、上記工程（ｉ）〜（ｉｖ）の工程を必要回数繰り返す工程からなる、ペプチド合成方法を挙げることができる。本発明の方法を用いることにより、連続するペプチド合成をワンポットで行うことができる。
【０１７１】
本発明のペプチド合成方法の工程（ｉ）における担体保護アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドは、用いる担体に応じ、ペプチド合成において用いられる公知の方法を適宜参照して作製することができる。以下、担体保護アミノ酸を例にして説明する。例えば、担体は、アミノ酸のカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基に、直接又はリンカーを介して結合させることができる。これに限定されないが、例えば、担体化合物をＴＨＦ等の溶媒に溶解し、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸、及び縮合剤、例えば、ＤＩＰＣＩを添加して縮合を行い、アミノ酸のカルボキシル基に担体が結合した中間体であるＮ−Ｆｍｏｃ−担体保護アミノ酸を作製できる。又は、担体化合物をＴＨＦ等の溶媒に溶解し、Ｂｏｃ保護アミノ酸、及び縮合剤、例えば、ＤＩＰＣＩを添加して縮合を行い、アミノ酸のカルボキシル基に担体が結合した中間体であるＮ−Ｂｏｃ−担体保護アミノ酸を作製できる。
【０１７２】
作製されたＮ−Ｆｍｏｃ−担体保護アミノ酸又はＮ−Ｂｏｃ−担体保護アミノ酸は、好ましくは、固形化（結晶化）させて回収することにより、高純度で得ることができる。例えば、これに限定されないが、Ｎ−Ｆｍｏｃ／Ｂｏｃ−担体保護アミノ酸を含んだ反応液を、減圧下で留去し、次いで、残渣に、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護アミノ酸又はＮ−Ｂｏｃ−担体保護アミノ酸が固形化（結晶化）する溶媒、例えば、メタノールやアセトニトリルを添加して析出させ、沈殿物をろ過した後、溶媒で懸洗を行い、得られた固形物を乾燥してＮ−Ｆｍｏｃ／Ｂｏｃ−担体保護アミノ酸として得ることができる。
【０１７３】
このようにして得られたＮ−Ｆｍｏｃ−担体保護アミノ酸、又はＮ−Ｂｏｃ−担体保護アミノ酸はペプチド合成において用いられる、公知の方法を適宜参照してＮ末端保護基を除去することで、担体保護アミノ酸を作製することができる。例えば、これに限定されないが、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護アミノ酸はＴＨＦ等の溶媒に溶解し、ＤＢＵ、ピペラジン等の脱Ｆｍｏｃ試薬を添加して脱Ｆｍｏｃ反応を行い、作製できる。又はＮ−Ｂｏｃ−担体保護アミノ酸はＣＰＭＥ等の溶媒に溶解し、ＴＦＡ等の脱Ｂｏｃ試薬を添加して脱Ｂｏｃ反応を行い、担体保護アミノ酸が作製できる。
【０１７４】
もう一つの態様として、アミノ酸のアミノ基に担体を結合させる方法として、これに限定されないが、担体化合物をＴＨＦ等の溶媒に溶解し、あらかじめカルボキシル基を保護したアミノ酸、及び還元剤、例えば、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウムを添加して還元的アミノ化反応を行い、アミノ酸のアミノ基に担体が結合した担体保護アミノ酸を作製できる。
【０１７５】
このようにして得られた担体保護アミノ酸は、溶液状態で調製できるので、そのままの状態で、本発明の工程（ｉｖ）と同様の酸性水溶液洗浄工程に供することが可能であり、酸性水溶液洗浄を行った後の担体保護アミノ酸を、本発明の方法の工程（ｉ）の原料として本発明の方法に用いることができる。かかる場合は、担体保護アミノ酸の調製工程も含めて、ワンポットでのペプチド合成が可能である。
【０１７６】
また得られた担体保護アミノ酸は、固形化（結晶化）させて回収することもでき、それにより、高純度で得ることができる。例えば、これに限定されないが、担体保護アミノ酸を含んだ反応液を、減圧下で留去し、次いで、残渣に、担体が固形化（結晶化）する溶媒、例えば、メタノールやアセトニトリルを添加して析出させ、沈殿物をろ過した後、溶媒で懸洗を行い、得られた固形物を乾燥して担体保護アミノ酸として得ることができる。
【０１７７】
このようにして得た担体保護アミノ酸を出発物質として、本発明のペプチド合成方法に用いることができる。
よって、本発明のペプチド合成方法の一つの態様として、上記工程（ｉ）〜（ｉｖ）の前に、担体保護アミノ酸の調製工程をさらに含むペプチド合成方法を挙げることができる。
【０１７８】
本発明のペプチド合成方法を用いて得た担体保護ペプチドは、ペプチド合成分野で用いられている公知の方法を用いて回収できる。例えば、結晶化させることにより溶媒中から回収できる。例えば、これに限定されないが、得られた担体保護ペプチドを含んだ有機層を、減圧下で溶媒留去し、次いで、残渣に、貧溶媒、例えば冷アセトニトリルを添加して析出させ、沈殿物をろ過した後、溶媒で懸洗を行い、得られた固形物を乾燥して合成した担体保護ペプチドを得ることができる。
よって、本発明のペプチド合成方法の一つの態様として、上記工程（ｉ）〜（ｉｖ）の後に、担体保護ペプチドを晶析・分離する工程を含むペプチド合成方法を挙げることができる。
【０１７９】
以下、それぞれの工程について説明する。なお、以下の説明においては、担体保護ペプチドとＮ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸を例として記載しているが、担体保護ペプチドは、本発明において用いることができる担体保護アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドの例示であり、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸は、本発明において用いることができるＮ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドの例示である。
【０１８０】
６−１．縮合反応工程
本工程では、溶媒中において、担体保護ペプチドと、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸と、縮合剤（好ましくは縮合剤及び活性化剤）とを混合することによって、アミノ酸残基数が伸長したＮ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドが得られる。
各成分の添加の方法や順序は、特に制限なく行うことができ、ペプチド合成における縮合工程において通常用いられている方法を用いることができる。
【０１８１】
担体保護ペプチドに対する、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸の使用量は、担体保護ペプチドに対して、通常１．０１〜４当量、好ましくは１．０３〜３当量、より好ましくは１．０５〜２当量、さらに好ましくは１．１〜１．５当量である。この範囲より少ないと、未反応の担体保護ペプチドが残りやすく、アミノ酸の欠落を起こし易くなる。本発明のペプチド合成方法では、未反応のアミノ酸の活性エステルをその後に添加する水溶性アミンでスカベンジして（捕獲して）不活性化することができる。そのため、より多くのＮ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸を用いても、従来の方法に比べ残存の問題が生じない。
【０１８２】
縮合剤としては、ペプチド合成において一般的に用いられる縮合剤が、本発明においても制限なく用いることができ、これに限定されないが、例えば、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホニウムクロリド（ＤＭＴ−ＭＭ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、Ｏ−（６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ（６−Ｃｌ））、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、Ｏ−（６−クロロベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ）、（１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ−モルホリノ−カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＣＯＭＵ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＩ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、及び１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＷＳＣ）を挙げることができ、好ましくは、ＤＭＴ−ＭＭ、ＨＢＴＵ、ＨＡＴＵ、又はＣＯＭＵである。縮合剤の使用量は、担体保護ペプチドに対して、通常１〜４当量、好ましくは１〜２当量、より好ましくは１．０５〜１．３当量である。
【０１８３】
縮合工程において、反応を促進し、ラセミ化などの副反応を抑制するために、好ましくは、活性化剤が添加される。ここで活性化剤とは、縮合剤との共存化で、アミノ酸を、対応する活性エステル、対称酸無水物などに導いて、ペプチド結合（アミド結合）を形成させやすくする試薬である。活性化剤としては、ペプチド合成において一般的に用いられる活性化剤が、本発明においても制限なく用いることができ、例えば、ＨＯＢｔ、ＨＯＣｔ、ＨＯＡｔ、ＨＯＯＢｔ、ＨＯＳｕ、ＨＯＰｈｔ、ＨＯＮｂ、ペンタフルオロフェノール、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル（Ｏｘｙｍａ）等を挙げることができ、好ましくは、ＨＯＢｔ、ＨＯＯＢｔ、ＨＯＣｔ、ＨＯＡｔ、ＨＯＮｂ、ＨＯＳｕ、Ｏｘｙｍａである。活性化剤の使用量は、担体保護ペプチドに対して、通常１〜４当量、好ましくは１〜２当量、より好ましくは１．０５〜１．３当量である。
縮合工程で使用する溶媒は、ペプチド合成において一般的に用いられる溶媒が、本発明においても制限なく用いることができ、これに限定されないが、例えば、前記した溶媒が例示される。溶媒の使用量は、担体保護ペプチド等を溶解した濃度が、通常０．１ｍＭ〜１Ｍとなる量であり、好ましくは１ｍＭ〜０．５Ｍとなる量である。
【０１８４】
反応温度は、ペプチド合成において一般的に用いられる温度が、本発明においても用いられ、例えば、通常−２０〜４０℃、好ましくは０〜３０℃の範囲内である。反応時間（１サイクルの時間）は、通常０．５〜３０時間である。
【０１８５】
６−２．スカベンジ反応工程
本発明のペプチド合成方法は、アミノ酸の縮合反応工程の後に、水溶性アミンを反応系に添加して、未反応のアミノ酸活性エステルをスカベンジ（捕獲）することを特徴とする。水溶性アミンはアミノ酸活性エステルと結合してスカベンジ体を形成し、活性エステルを不活性化する。本明細書においては、本発明で用いる水溶性アミンを、アミンスカベンジャーと称する場合がある。
本発明において用いることができるスカベンジャーとしての水溶性アミンは、好ましくは、１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミンであり、例えば、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１−エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン、ピペラジンを挙げることができ、好ましくは、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミンであり、より好ましくは、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、ジエチレントリアミンであり、さらに好ましくは、１−メチルピペラジンである。
工程（ｉｉ）における水溶性アミンの添加量は、理論上残存するアミノ酸当量に対して、通常１〜１０当量、好ましくは１〜６当量、より好ましくは１〜４当量である。アミンの添加量がこの範囲より少ないと、アミノ酸活性エステルのスカベンジ（捕獲）が不充分となり、残存したアミノ酸活性エステルと次工程（ｉｉｉ）の際に再生したアミノ基が反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させ、一方、この範囲より多いと、同時に脱Ｆｍｏｃ反応が進行し、残存しているアミノ酸活性エステルが再生したアミノ基と反応するダブルヒットが起こり、純度、収率を低下させる。
本発明のペプチド合成方法においては、次の工程であるＮ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドからのＦｍｏｃ基の除去を、反応系中のアミノ酸活性エステルをアミンスカベンジャーによりスカベンジ（捕獲）してスカベンジ体を形成させた後に行う。これにより、脱Ｆｍｏｃ反応時においては、反応液中のアミノ酸活性エステルが不活性化されており、それらを反応系から取り除かなくても脱保護時にアミノ酸のダブルヒットを防ぐことができる。また、水溶性アミンに捕捉されたアミノ酸活性エステルは、後の洗浄工程において容易に除去できる。
【０１８６】
６−３．脱Ｆｍｏｃ工程
本発明のペプチド合成方法においては、水溶性アミンの存在下で、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドからのＦｍｏｃ基の除去を行う。本工程においては、水溶性アミンを反応系に追加で添加する。本工程において用いることができる水溶性アミンは、好ましくは、１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミンであり、例えば、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１−エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン、ピペラジンを挙げることができ、好ましくは、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミンであり、より好ましくは、１−メチルピペラジンである。本工程における水溶性アミンは、工程(ｉｉ)（スカベンジ反応工程）で添加した水溶性アミンと同じでも異なってもよい。
本工程（ｉｉｉ）において添加する水溶性アミンの当量は、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、５〜３０当量、好ましくは５〜２０当量、より好ましくは１０〜２０当量である。アミンの添加量がこの範囲より少ないと、脱Ｆｍｏｃ反応により生じるＤＢＦのスカベンジ（捕獲）が不充分となり、不純物を後の酸性水溶液洗浄工程で除去しにくくなり、一方、この範囲より多いと、中和に要する酸の量が増大し、それに伴う中和工程によって副反応（分解、ラセミ化）が起き、純度低下、収率減少の原因となる。
本工程は水溶性アミンの存在下で脱Ｆｍｏｃ反応を行うが、系に存在する水溶性アミンが脱Ｆｍｏｃ試薬としての機能を有する場合は、他の脱Ｆｍｏｃ試薬を系に添加しなくてもよい。一方、効率よく脱Ｆｍｏｃ反応を行うために他の脱Ｆｍｏｃ試薬を系に添加してもよい。脱Ｆｍｏｃ試薬としての機能を有する水溶性アミンとして、例えば、上記で例示した水溶性アミンを挙げることができる。好ましくは、本工程では、水溶性アミンとともに脱Ｆｍｏｃ試薬が添加される。
本工程において水溶性アミンとともに脱Ｆｍｏｃ試薬を反応系に添加する場合は、水溶性アミンと脱Ｆｍｏｃ試薬の添加は、同時に系に添加してもよく、あるいは、水溶性アミンを系に添加した後、脱Ｆｍｏｃ試薬を添加してもよい。ここでいう、同時とは、本技術分野における反応において同時と考えられる範囲内で前後して添加することを含む意味である。なお、水溶性アミンを系に添加した後に脱Ｆｍｏｃ試薬を添加する場合、添加間隔の時間は、操作やその他の要因を考慮して、適宜調整できる。
Ｎ末端からのＦｍｏｃ基の除去は、ペプチド合成において一般的に用いられる除去方法が、必要に応じて適宜変更して本発明において用いることができる。本発明において用いることができる脱Ｆｍｏｃ試薬としては、これに限定されないが、例えば、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン（ＤＢＵ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］−５−ノネン（ＤＢＮ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］−オクタン（ＤＡＢＣＯ）、トリエチルアミン、トリブチルアミンを挙げることができ、好ましくは、ＤＢＵである。
脱Ｆｍｏｃ反応時には、ＤＢＦが生じるが、本工程で添加した水溶性アミンは、これらの不純物をスカベンジ（捕捉）することができる。水溶性アミンに捕捉されたＤＢＦは、後の酸性水溶液洗浄工程において容易に除去できる。
【０１８７】
６−４．酸性水溶液洗浄工程
工程（ｉｖ）の中和工程により、系に存在する過剰な塩基、スカベンジ体を塩に変え、それらの水溶性を向上させることができる。中和に使用する酸としては、反応液中の塩基を中和できるものであれば特に限定されないが、例えば、塩化水素、リン酸、酢酸、硫酸等の水溶液が挙げられる。例えば、塩酸を用いる場合は、これに限定されないが、１Ｎ〜１２Ｎ、好ましくは２Ｎ〜１２Ｎ、より好ましくは５Ｎ〜１２Ｎの塩酸を添加する。
ここでいう中和とは、反応液が中性のｐＨになれば良く、ｐＨが７．０以下になってもよい。
工程（ｉｖ）においては、酸で中和した反応中和液に、さらに、酸性水溶液を加え、洗浄し、次いで、分液して、水層を廃棄し、有機層を回収する。これにより、酸性水溶液に溶解性の不純物を除くことができる。
用いる酸性水溶液は、特に限定されないが、例えば、塩酸水、希硫酸、リン酸水溶液、酢酸水溶液が挙げられ、好ましくは、塩酸水である。酸性水溶液のｐＨは、１〜５、好ましくは１〜４、より好ましくは１〜３である。
洗浄に用いる酸性水溶液は、添加量は洗浄効果を示す限り特に制限がないが、反応液に対して、０．１〜３倍量、好ましくは０．５〜２倍量、より好ましくは０．８〜１．５倍量で用いることができる。
洗浄、分液、水層の廃棄工程は、回数に制限なく、１回でもよくまた複数回行ってもよい。回数は、反応系中の化合物の種類や不純物の量、及び目的に応じて、適宜選択される。
【０１８８】
本発明においては、工程（ｉｖ）の酸性水溶液の洗浄により不純物を除くことができる。酸性水溶液の分液操作により、例えば、Ｈ2Ｎ−ＡＡｘ−アミン（スカベンジャー）結合体、縮合剤分解物、ｐＨ調整塩基、ＤＢＦ−アミン（スカベンジャー）結合体、アミン（スカベンジャー）、脱Ｆｍｏｃ試薬などの不純物を除去することができ、不純物が軽減又は除去された反応系に溶解した担体保護ペプチドを得ることができる。
また、水溶液を用いた分液操作は、簡便であり、工程時間の短縮に寄与する。更には、固液分離操作が必要でなく担体保護ペプチドの固形化のための貧溶媒の使用を削減できる。
なお、本発明の方法を用いた連続するペプチド合成では、最後のサイクルにおいて、脱Ｆｍｏｃ工程後に、酸で中和した後、担体保護ペプチドを固形化（結晶化）して、固液分離操作を用いて担体保護ペプチドを回収してもよいが、不純物のより完全な除去の観点より、酸性水溶液による洗浄を行うのが好ましい。
【０１８９】
本発明のペプチド合成方法は、縮合工程及び脱Ｆｍｏｃ工程において生じる不純物を軽減又は除去するための酸性水溶液での洗浄工程を含むが、担体保護ペプチドを有機溶媒中に溶解された状態で回収することを妨げない限り、他の洗浄工程を追加してもよい。例えば、弱塩基性水溶液での洗浄や食塩水での洗浄を挙げることができる。また、食塩水での洗浄に代えて無水硫酸ナトリウム等の脱水剤を加えて脱水することもできる。弱塩基性水溶液での洗浄は、例えば、ｐＨ８〜１２（好ましくは８〜１０）の炭酸水素ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、又は炭酸カリウム水溶液での洗浄を挙げることができる。
【０１９０】
７．担体保護ペプチドの晶析・分離工程
本発明の方法で合成した担体保護ペプチドは、工程（ｉｖ）の酸による中和後、好ましくは工程（ｉｖ）の酸性水溶液による分液操作の後に、不溶化して（例えば、結晶化又はオイル化させて）分離することができる。又は、本発明の方法を用い、工程（ｉ）〜（ｉｖ）を必要回数繰り返して合成した担体保護ペプチドは、工程（ｉ）の後、Ｎ末端を脱保護しない場合は工程（ｉｉｉ）を行わず、工程（ｉ）以降の任意の工程後に不溶化して分離することができる。不溶化は、担体保護ペプチドが溶解している溶媒の組成変化により溶解状態と不溶化（結晶化又はオイル化）状態とが可逆的に変化する特性を有する担体を用いるペプチド合成分野において公知の方法を適宜参考にして行うことができ、例えば、担体保護ペプチドが溶解している溶液の組成を変化させることにより行うことができる。不溶化させるための条件は、用いる担体の種類や合成された担体保護ペプチドの種類や長さに応じて、適宜選択できる。例えば、これに限定されないが、以下のような溶媒組成変化手段を挙げることができる。
【０１９１】
溶液組成を変化させる手段としては、担体保護ペプチドが溶解している溶液の組成を変化させることのできる手段であれば、特に制限されるものではない。溶液組成を変化させる好ましい手段としては、例えば、担体保護ペプチドが溶解している溶液にそのまま、又は溶液の溶媒を濃縮した後、貧溶媒を加えて晶析する手段が挙げられる。ここで、濃縮とは、溶媒の一部又は全部を留去、例えば減圧下で溶媒留去することをいう。その後、析出した結晶を、例えばろ過や遠心分離により分離することができる。分離した結晶は、好ましくは有機溶媒で洗浄することにより、場合により結晶と一緒に分離された不純物等を結晶化した担体保護ペプチドから完全に除去できる。本発明の方法で合成した担体保護ペプチドは不純物が十分に除去されているが、さらにこれらの操作をすることにより完全に不純物を除去できる。
本発明における貧溶媒は、担体保護ペプチドが貧溶、すなわち、担体保護ペプチドが溶解しにくい、又は溶解しない溶媒をいう。担体保護ペプチドが溶解しにくい、又は溶解しないとは、担体保護ペプチドの溶解度が２５℃において１質量％未満となる常温で液状の溶媒であればよく、アセトニトリル、任意割合の含水アセトニトリル、メタノール、任意割合の含水メタノール、水であることが好ましい。
本発明の方法を用いた連続ペプチド合成の最後のサイクルにおいては、工程（ｉｖ）の酸による中和後、好ましくは工程（ｉｖ）の酸性水溶液による分液操作の後に、本晶析・分離工程を行うことにより、より純度が高い合成した担体保護ペプチドを回収できる。
【０１９２】
８．担体脱保護工程
担体脱保護は、本発明の方法で合成した担体保護ペプチドにおいて、ペプチドに直接又はリンカーを介して結合した担体を、切り離すことにより行う。
担体が直接、ペプチドに結合している場合は、担体脱保護は、合成したペプチドのカルボキシル基、アミノ基、アミド基又は水酸基に結合した担体を除去（脱保護）することによって行うことができる。
担体の除去の方法は特に限定はなく、公知の脱保護法を使用すればよいが、好ましくは酸処理により行われる。例えば、ＴＦＡを用いた脱保護法を用いることができ、より具体的には、Ｋａを用いた場合は５０〜１００％トリフルオロ酢酸で、Ｋｂを用いた場合は１〜１００％トリフルオロ酢酸で、Ｋｃを用いた場合は９５〜１００％トリフルオロ酢酸で、担体Ｄを用いた場合は、１〜１００％トリフルオロ酢酸で、担体Ｅ及び担体Ｆを用いた場合は１〜１００％トリフルオロ酢酸で、担体Ｇを用いた場合は９５〜１００％トリフルオロ酢酸で、担体Ｈを用いた場合は１〜１００％トリフルオロ酢酸で脱保護するのが好ましい。
本発明の方法において、担体がリンカーを介してペプチドに結合している場合は、担体の脱保護は、（ｉ）リンカーとペプチドの間の結合を切断することにより行う、又は、（ｉｉ）リンカーと担体の間の結合を切断することにより行う、のいずれでもよい。後者の場合は、ペプチドはリンカーをもった状態で担体から切り離され、末端又は側鎖がリンカーにより修飾されたペプチドを得ることができる。
（ｉ）の場合における担体脱保護は、これに限定されないが、例えば、エステル結合又はアミド結合によりリンカーとペプチドが結合している場合は、ＴＦＡを用いた脱保護法により行うことができる。
（ｉｉ）の場合における担体脱保護は、上記の直接結合した場合における脱保護法を用いることができる。
【０１９３】
９．Ｃ末端修飾ペプチドの合成
Ｃ末端のアミド化は、生物活性があるペプチドで頻繁に見られる修飾であり、例えば、カルシトニン、カストリン、セクレチン、ホルモン放出因子などを挙げることができる。本発明のペプチド合成方法を用いて、アミノ基を含む反応基を有する担体を使用することにより、Ｃ末端がアミド化されたペプチドを効率良く合成することができる。
例えば、本発明の方法において、任意のアミノ酸又はペプチドのカルボキシル基末端に、カルボキシル基と結合するアミノ基を反応性基として持つリンカーを介して担体が結合、又は直接、保護担体として以下の何れかの担体（以下、アミド担体という場合がある）が結合した担体保護アミノ酸又はペプチドを用いることにより、Ｃ末端がアミド化された、例えば、アミノ基やアミノアルキル基で修飾されたペプチドを得ることができる。
【０１９４】
アミド担体としては、上記した担体において、反応基にアミノ基又はアルキルアミノ基を有する担体を挙げることができる。
これに限定されないが、例えば、以下の担体を挙げることができる。
９−１．担体化合物Ａ、Ｂ又はＣ
上記担体化合物であるＡ（Ｋａ）、Ｂ（Ｋｂ）、又はＣ（Ｋｃ）において、反応基が以下で表される担体を挙げることができる。
【０１９５】
【化１１９】
2019198833.tif 000120
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６、好ましくは１〜３のアルキル基を表し、Ｒ6は水素原子を表す）。
【０１９６】
９−２．担体化合物Ｄ
上記担体化合物であるＤ（ＫＳ）において、反応基が以下で表される担体を挙げることができる。
―ＣＨ2ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６、好ましくは１〜３の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）。
【０１９７】
９−３．担体化合物Ｇ
上記担体化合物であるＧ（ＫＪ３）において、反応基が以下で表される担体を挙げることができる。
Ｙが−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）。
【０１９８】
９−４．担体化合物Ｈ
上記担体化合物であるＨ（ＫＪ４）において、反応基が以下で表される担体を挙げることができる。
Ｙが−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）。
【０１９９】
上記の何れかの担体を用いた本発明の方法により、アミノ基又はアルキルアミノ基でＣ末端が修飾されたペプチドを得ることができる。これに限定されないが、例えば、Ｃ末端のプロリンがアミノエチル化されたペプチドを得ることができる。Ｃ末端のアミド化は、生物活性があるペプチドで頻繁に見られる修飾であるので、本発明の一態様として、アミド担体を用いた本発明の方法は、それらのペプチドの合成において有用である。
【０２００】
本発明のペプチド合成方法を用いて得られたペプチドは、ペプチド合成で常用される方法に従って、単離精製することができる。例えば、反応混合物を抽出洗浄、晶析、クロマトグラフィーなどによって、目的物であるペプチドを単離精製することができる。
【０２０１】
本発明のペプチド合成方法により製造されるペプチドの種類は特に限定されないが、ペプチドのアミノ酸残基数が、例えば、数十以下程度であることが好ましい。本発明のペプチド合成方法によって得られるペプチドは、既存の又は未知の合成ペプチドや天然ペプチドと同様に、様々な分野、例えばこれに限定されないが、医薬、食品、化粧品、電子材料等の分野に利用できる。
【実施例】
【０２０２】
以下、下記に示された配列のペプチドを例として合成方法を示すが、本発明はこれらに限定されるものではない。
（ペプチドＡ）Ｈ−Ｐｙｒ−Ｈｉｓ―Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号２）
（ペプチドＢ）Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ―ＯＨ（配列番号１）【０２０３】
本明細書中及び以下の実施例においては、下記の略号を用いた。
ＡＡｓ：１以上の任意のアミノ酸残基
ＡＡｘ：任意のアミノ酸残基
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＣＯＭＵ：（１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ−モルホリノ−カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩
ＣＰＭＥ：シクロペンチルメチルエーテル
ｄＡｒｇ：Ｄ−アルギニン
Ｄ−Ａｒｇ：Ｄ−アルギニン
ｄＬｅｕ：Ｄ−ロイシン
ｄＴｉｃ：Ｄ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸
Ｄ−Ｔｉｃ：Ｄ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＰＣＩ：ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ：Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＴ−ＭＭ：４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホニウム  クロリド
ＤＴＴ：ジチオトレイトール
Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ：Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＡｔ：１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
Ｈｙｐ：ｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン
Ｋａ：３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジル
Ｋｂ：２，４−ジドコシルオキシベンジル
Ｋｃ：３，５−ジドコシルオキシベンジル
Ｍｅ：メチル
ＭＴＢＥ：メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリドン
Ｏｉｃ：Ｌ−オクタヒドロインドリン−２−カルボン酸
Ｏｘｙｍａ：シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル
Ｐｙｒ：ピログルタミン酸
Ｓｕ：スクシンイミジル
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＦＥ：２，２，２−トリフルオロエタノール
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＨＰ：テトラヒドロピラン
Ｔｈｉ：β―（２−チエニル）−Ｌ−アラニン
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
Ｔｒｔ：トリフェニルメチル【０２０４】
以下に本実施例で用いた脱Ｆｍｏｃ一般合成法を示す。担体化合物としてＫｂを用いた場合を例として記載するが、本発明の方法で用いることができる担体化合物は、Ｋｂに限定されない。また、各試薬の添加量も、一例を示しているに過ぎず、これに限定されるものではない。
（１）脱Ｆｍｏｃ一般合成法【０２０５】
【化１２０】
2019198833.tif 000121
出発原料をＴＨＦ：ＤＭＦ（９／１）の混合液に１８ｖ／ｗになるよう溶解し、ピペリジン（１．５ｅｑｕｉｖ）及びＤＢＵ（１．０ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１０分間攪拌した。氷冷しながら６Ｎ塩酸（３．５０ｅｑｕｉｖ）を加えて減圧下溶媒を留去した。残渣にアセトニトリルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセトニトリル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、脱Ｆｍｏｃ体を得た。【０２０６】
以下に本発明の方法で用いた縮合脱保護法を示す。担体化合物としてＫｂを用いた場合を例として記載するが、本発明の方法で用いることができる担体化合物は、Ｋｂに限定されない。また、各試薬の添加量も、一例を示しているに過ぎず、これに限定されるものではない。
（２）アミンスカベンジャー（水溶性アミン）を用いた１ｐｏｔ縮合脱保護法【０２０７】
【化１２１】
2019198833.tif 000122
出発原料をＴＨＦ：ＤＭＦ（９／１）の混合液に１８ｖ／ｗになるように溶解し、Ｆｍｏｃ−ＡＡｘ−ＯＨ（１．３０ｅｑｕｉｖ）、ＣＯＭＵ（１．２５ｅｑｕｉｖ）、及びＤＩＰＥＡ（２．３０ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で３０分間攪拌した。水溶性アミンとして、１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で３０分間撹拌した。１−メチルピペラジン（２０．０ｅｑｕｉｖ）及びＤＢＵ（７．０ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１０分間撹拌した。６Ｎ塩酸（４９．５０ｅｑｕｉｖ）を加えた反応液に、ＴＨＦ（０．８ｖ／ｗ）、０．１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。さらに、０．５Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄し、アミノ酸縮合物を溶液で得た。【０２０８】
以下に本発明の方法で用いた担体をペプチドから脱保護する（切り離す）方法を示す。担体化合物としてＫｂを用いた場合を例として記載するが、本発明の方法で用いることができる担体化合物は、Ｋｂに限定されない。また、各試薬の添加量も、一例を示しているに過ぎず、これに限定されるものではない。
（３）Ｋｂ保護基一般脱保護法【０２０９】
【化１２２】
2019198833.tif 000123
（ここでＲは水素原子又はアミノ基を保護するために常用される保護基を示す）
原料をＤＣＭ：ＴＦＥ：ＴＦＡ（９０／９／１）の混合液に１９．７５ｖ／ｗになるよう溶解し、室温で３０分間攪拌した。沈殿物をろ過し、ろ液にＤＩＰＥＡをＴＦＡの１．０ｅｑｕｉｖになるように加え、０．０１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層にジイソプロピルエーテルを加え減圧下留去した。残渣にジイソプロピルエーテルを加えて析出した沈殿物を懸洗し、得られた固形物を減圧乾燥し、脱Ｋｂ保護体を得た。【０２１０】
以下、本発明の方法を用いたペプチド合成を示す。
以下の明細書の記載における「ｖ／ｗ」なる表現は、一連のペプチド合成反応において、出発原料を基準にした場合の添加する溶媒の量を示している。
実施例１：Ｋｂ−ＯＨを用いた、Ｈ−Ｐｙｒ−Ｈｉｓ―Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号２）の合成
化合物１（Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ）の合成【０２１１】
【化１２３】
2019198833.tif 000124
２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール（「Ｋｂ−ＯＨ」と表記する）（１０．０ｇ，１３．２０ｍｍｏｌ）を脱水ＴＨＦ（１３２ｍＬ）に溶解し、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ  （１２．８５ｇ，１９．８０ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＣＩ  （３．０６ｍｌ，１９．８０ｍｍｏｌ，１．５ｅｑｕｉｖ）、及びＤＭＡＰ（８０．７ｍｇ，０．６６ｍｍｏｌ，０．０５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で３０分間攪拌した。反応液を減圧下留去した。残渣にメタノールを加えて析出した沈殿物をろ過し、メタノール懸洗を行い、さらにアセトニトリル懸洗を２回行った。得られた固形物を減圧乾燥し、化合物１（１８．３３ｇ，  ｑｕａｎｔ）を得た。【０２１２】
化合物２（ＨＣｌ・Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ）の合成【０２１３】
【化１２４】
2019198833.tif 000125
化合物１に対し脱Ｆｍｏｃ一般合成法を行い、化合物２（１９．８５ｇ，ｑｕａｎｔ）を得た。【０２１４】
化合物３（Ｈ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ（配列番号３））の合成【０２１５】
【化１２５】
2019198833.tif 000126
化合物２に対し、以下のアミノ酸を、アミンスカベンジャー（水溶性アミン）を用いた１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返す方法で導入し、化合物３を溶液で得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−ｄＬｅｕ−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
４残基目：Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
５残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ
６残基目：Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ【０２１６】
化合物４（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ（配列番号４））の合成【０２１７】
【化１２６】
2019198833.tif 000127
得られた化合物３溶液にＤＭＦを理論収量に対し１．８ｖ／ｗになるように加えた。Ｈ−Ｐｙｒ−ＯＨ（３．３０ｇ，２５．５５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（７．０ｇ，１６．２６ｍｍｏｌ，１．２５ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＥＡ（５．１０ｍｌ，２９．２８ｍｍｏｌ，２．２５ｅｑｕｉｖ）を加えた。得られた混合液を室温で３０分間攪拌した。得られた反応液に１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で５分間撹拌した。０．０１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣にアセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物４（２８．７８ｇ，  ８７．５０％）を得た。【０２１８】
化合物５（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ（配列番号５））の合成【０２１９】
【化１２７】
2019198833.tif 000128
化合物４（２０．０ｇ，７．９０ｍｍｏｌ）に対しＫｂ保護基一般脱保護法に供し、化合物５（１４．３９ｇ，ｑｕａｎｔ）を得た。【０２２０】
化合物６（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号６））の合成【０２２１】
【化１２８】
2019198833.tif 000129
化合物５（６．２０ｇ，３．４５ｍｍｏｌ）をＴＨＦに１６．２ｖ／ｗになるように溶解し、ＤＭＦ１．８ｖ／ｗに溶解させたＨ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ・ＨＣｌ（０．８０ｇ，４．５ｍｍｏｌ，１．３ｅｑｕｉｖ）を加えた。ＤＭＴ−ＭＭ・２Ｈ2Ｏ（１．８４ｇ，６．０５ｍｍｏｌ，１．７５ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＥＡ  （２．４１ｍｌ，１３．８３ｍｍｏｌ，４．０ｅｑｕｉｖ）を加えた。得られた混合液を氷冷しながら６０分間攪拌した。得られた反応液にシクロヘキサン（１８ｖ／ｗ）、０．０１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣にジイソプロピルエーテルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにジイソプロピルエーテルで懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物６（５．３３ｇ，  ８０．５１％）を得た。【０２２２】
化合物７（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号２））の合成【０２２３】
【化１２９】
2019198833.tif 000130
化合物６（５．３３ｇ，２．７８ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液９２ｍｌに溶解し、ＤＴＴ（３．７０ｇ，４０ｍｇ／ｍｌ）を加え、３時間室温で撹拌した。反応液を、セライ卜を用いてろ過し、ろ過残渣をメタノールで洗浄、ろ過し、得られたろ液にトルエン（混合液量）を加え、減圧下で溶媒留去した。残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにＭＴＢＥ懸洗、ヘキサン懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物７（４．２１ｇ，  ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度７６．２８％）を得た。【０２２４】
実施例２．（ペプチドＢ）Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ―ＯＨ（配列番号１）の合成
化合物１（Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ）の合成【０２２５】
【化１３０】
2019198833.tif 000131
２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール（「Ｋｂ−ＯＨ」と表記する）（１．５ｇ，１．９８ｍｍｏｌ）を脱水ＴＨＦ（２０ｍＬ）に溶解し、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ（１．９３ｇ，２．９７ｍｍｏｌ，１．５ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＣＩ（０．４６ｍｌ，２．９７ｍｍｏｌ，１．５ｅｑｕｉｖ）、及びＤＭＡＰ（１２ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ，０．０５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で３０分間攪拌した。反応液を減圧下留去した。残渣にメタノールを加えて析出した沈殿物をろ過し、メタノール懸洗を行い、さらにアセトニトリル懸洗を２回行った。得られた固形物を減圧乾燥し、化合物１（２．７５ｇ，ｑｕａｎｔ．）を得た。【０２２６】
化合物８（Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ）の合成【０２２７】
【化１３１】
2019198833.tif 000132
化合物１に対し、ピペリジンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて、脱Ｆｍｏｃ一般合成法を行い、塩酸水、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して化合物８の溶液を得た。【０２２８】
化合物９（Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ（配列番号７））の合成【０２２９】
【化１３２】
2019198833.tif 000133
化合物８に対し、以下のアミノ酸を順次縮合させ、その都度アミンスカベンジャーを加えてから脱保護操作を行い、塩酸水、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄を行う１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返すことにより、化合物９の溶液を得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ｏｉｃ−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−ｄＴｉｃ−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
４残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｈｉ−ＯＨ
５残基目：Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ
６残基目：Ｆｍｏｃ−Ｈｙｐ−ＯＨ
７残基目：Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ
８残基目：Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ【０２３０】
化合物１０（Ｂｏｃ−ｄＡｒｇ（Ｐｂｆ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫｂ（配列番号８））の合成【０２３１】
【化１３３】
2019198833.tif 000134
化合物９の溶液にＢｏｃ−ｄＡｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ（１．３６ｇ，２．５７ｍｍｏｌ，１．３０ｅｑｕｉｖ．）、ＣＯＭＵ（１．０６ｇ，２．４８ｍｍｏｌ，１．２５ｅｑｕｉｖ．）、ＤＩＰＥＡ  （０．７８ｍｌ，４．４５ｍｍｏｌ，２．２５ｅｑｕｉｖ．）を加えた。得られた混合液を室温で３０分間攪拌した。得られた反応液に１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ．）を加えて室温で５分間撹拌した。０．１Ｎ塩酸水（４２ｍｌ）、続いて０．５Ｎ  炭酸水素ナトリウム水溶液（４２ｍｌ）でそれぞれ洗浄、分液操作を行い、得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣にアセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物１０（４．７７ｇ，  ８１．４％）を得た。【０２３２】
化合物１１（４ＴＦＡ・Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ−ＯＨ（配列番号１））の合成
化合物１０（３．００ｇ，１．０１ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液５０ｍｌに溶解し、４時間室温で撹拌した。反応液をセライ卜でろ過し、酢酸洗浄液とあわせて減圧下で溶媒留去した。残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過して取得した後、ＭＴＢＥ懸洗、続いてヘキサン懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物１１（１．６１ｇ，９０．４％、ＨＰＬＣ純度８４．９３％）を得た。【０２３３】
実施例３：Ｋｂ−ＮＨＥｔ担体を用いた、Ｈ−Ｐｙｒ−Ｈｉｓ―Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号１）の合成
化合物１２の合成【０２３４】
【化１３４】
2019198833.tif 000135
Ｎ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン（「ＥｔＮＫｂ」と表記する）（１２．５ｇ，１５．２３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／ＤＭＦ（９／１）に１８ｖ／ｗとなるように溶解し、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ／Ｈ2Ｏ（７．０４ｇ，１９．８０ｍｍｏｌ，１．３０ｅｑｕｉｖ）、ＣＯＭＵ（８．１５ｇ，１９．０４ｍｍｏｌ，１．２５ｅｑｕｉｖ）、及びＤＩＰＥＡ（８．６２ｍｌ，４９．４９ｍｍｏｌ，３．３０ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１５分間攪拌した。１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１０分間撹拌した。１−メチルピペラジン（２０．０ｅｑｕｉｖ）及びＤＢＵ（７．０ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１０分間攪拌した。氷冷しながら６Ｎ塩酸（５０．７０ｅｑｕｉｖ）を加えた反応液にシクロヘキサン（４．５ｖ／ｗ）、０．１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。さらに０．５Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄し、化合物１２を溶液で得た。【０２３５】
化合物１３（Ｈ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−ＥｔＮＫｂ（配列番号９））の合成【０２３６】
【化１３５】
2019198833.tif 000136
化合物１２溶液に対し、以下のアミノ酸を、アミンスカベンジャー（水溶性アミン）を用いた１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返す方法で導入し、化合物１３を溶液で得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−ｄＬｅｕ−ＯＨ
４残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
５残基目：Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
６残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ
７残基目：Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ【０２３７】
化合物１４（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−ＥｔＮＫｂ（配列番号１０））の合成【０２３８】
【化１３６】
2019198833.tif 000137
得られた化合物１３溶液にＨ−Ｐｙｒ−ＯＨ（２．９５ｇ，２２．８４ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑｕｉｖ）、ＣＯＭＵ（９．４６ｇ，２２．０８ｍｍｏｌ，１．４５ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＥＡ（６．５０ｍｌ，３７．３１ｍｍｏｌ，２．５０ｅｑｕｉｖ）を加えた。得られた混合液を室温で１５分間攪拌した。得られた反応液に１−メチルピペラジン（０．６５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１０分間撹拌した。氷冷しながら６Ｎ塩酸（３．１０ｅｑｕｉｖ）を加えて中和し、次いで、０．１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。さらに０．５Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣に冷アセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物１４（３６．９３ｇ，９０．８３％）を得た。【０２３９】
化合物７（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号２））の合成【０２４０】
【化１３７】
2019198833.tif 000138
化合物１４（５．００ｇ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液９３．６ｍｌに溶解し、ＤＴＴ（１．８７ｇ，２０ｍｇ／ｍｌ）を加え、３時間室温で撹拌した。反応液をセライ卜でろ過し、ろ過残渣をメタノールで洗浄、ろ過し、得られたろ液の濃縮残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにＭＴＢＥ懸洗を２回、ヘキサン懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物７（２．４５ｇ，９３．０％，ＨＰＬＣ純度９５．１８％）を得た。【０２４１】
比較例１：脱Ｆｍｏｃ反応後に担体を固体化する固液分離法を用いて、以下のペプチドを合成した。
（ペプチドＢ）Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ―ＯＨ（配列番号１）の合成
化合物１０１（Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ）の合成
国際特許公開公報ＷＯ２００７／０３４８１２の記載に従い、化合物１０１を合成した。【０２４２】
【化１３８】
2019198833.tif 000139
Ｋａ−ＯＨ  ５０．０ｇ（５４．７  ｍｍｏｌ，１．０  ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ  ５３．３ｇ（８２．１ｍｍｏｌ，１．５  ｅｑ．）を用い、化合物１０１  ８３．５ｇを得た。収率９８．８％【０２４３】
化合物１０２（ＨＣｌ・Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ）の合成
国際特許公開公報ＷＯ２００７／０３４８１２の記載に従い、化合物１０１から１０２を合成した。【０２４４】
【化１３９】
2019198833.tif 000140
Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０２）８１．６ｇから化合物１０２  ７３．０ｇを得た。収率ｑｕａｎｔ．【０２４５】
化合物１０３（ＨＣｌ・Ｈ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ）の合成【０２４６】
【化１４０】
2019198833.tif 000141
予め洗浄乾燥した３Ｌ  ４つ口フラスコにＴＨＦ／ＤＭＦ（９／１）（１３ｖ／ｗ）及びＨＣｌ・Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０２）７１．０ｇ（５２．３  ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ．）、及びＦｍｏｃ−Ｏｉｃ−ＯＨ（１．５０ｅｑ）を加えて溶解した。得られた溶液に、内温３０℃以下でＤＭＴ−ＭＭ（１．４５ｅｑ）を添加した。さらにＤＩＰＥＡ（５．００ｅｑ）を添加し、３０分撹拌し、反応させた。ＴＬＣで反応終了を確認したのち、得られた反応液にプロピルアミン（１．８０ｅｑ）を添加し、３０分撹拌した。得られた反応液にピペリジン（１．５ｅｑ．），ＤＢＵ（７．０ｅｑ．）を加え，室温にて１０分間撹拌後，ＴＬＣで原料消失を確認した。得られた反応液を０〜１０℃冷却下，６Ｎ  ＨＣｌ（１５．３ｅｑ．）を加えた。得られた溶液にＴＨＦ（５．０ｖ／ｗ）を加えた。さらに、０．０１Ｎ−ＨＣｌ（１０．０ｖ／ｗ）、酢酸エチル（５．０ｖ／ｗ）を添加し、１０分間撹拌し、５分間静置し、下層を排出した。得られた上層に水：飽和食塩水＝９：１溶液（１０．０ｖ／ｗ）を加え１０分撹拌し、撹拌を止め５分静置し下層を排出した。この操作をさらにもう一度行った。得られた有機層に硫酸マグネシウム（１．０ｗ／ｗ）を加え、３０分撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、残渣をＴＨＦ（５．０ｖ／ｗ）で２回洗浄した。得られた濾液にＤＭＦ（１．１ｖ／ｗ）を添加し、留去液が１６．１ｖ／ｗになるまで４０℃で減圧濃縮した。予め洗浄乾燥した２Ｌ容器に得られた残渣にＴＨＦ（２．００ｖ／ｗ）を用いて移送した。得られた溶液にアセトニトリル（１０．９  ｖ／ｗ）を添加し、３０分撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、ケーキをアセトニトリル（３．００ｖ／ｗ）で２回洗浄した。予め洗浄した反応器に得られたケーキを移送し、アセトニトリル（１０．９ｖ／ｗ）を添加し、３０分撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、得られたケーキをアセトニトリル（３．００ｖ／ｗ）で２回洗浄した。得られたケーキを４０℃で１３時間減圧乾燥を行い、化合物１０３  ７５．８ｇを得た。収率９６．１％【０２４７】
化合物１０４（ＨＣｌ・Ｈ−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１１））の合成【０２４８】
【化１４１】
2019198833.tif 000142
ＨＣｌ・Ｈ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０３）７３．５  ｇ（４８．７ｍｍｏｌ，１．０  ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ｄ−Ｔｉｃ−ＯＨ  ２９．２ｇ（７８．４ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１０４    ７８．８ｇを得た。収率９６．９％。【０２４９】
化合物１０５（ＨＣｌ・Ｈ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１２））の合成【０２５０】
【化１４２】
2019198833.tif 000143
ＨＣｌ・Ｈ−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０４）７８．５  ｇ  （４７．０ｍｍｏｌ，１．０  ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ  ２７．１ｇ（７０．６ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１０５  ８３．１ｇを得た。収率９７．５％【０２５１】
化合物１０６（ＨＣｌ・Ｈ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１３））の合成【０２５２】
【化１４３】
2019198833.tif 000144
ＨＣｌ・Ｈ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０５）８２．５  ｇ（４５．５  ｍｍｏｌ，１．０  ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ｔｈｉ−ＯＨ  ２６．９ｇ（６８．３ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１０６  ８７．７ｇを得た。収率９８．１％【０２５３】
化合物１０７（ＨＣｌ・Ｈ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１４））の合成【０２５４】
【化１４４】
2019198833.tif 000145
ＨＣｌ・Ｈ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０６）８７．５ｇ（４４．６  ｍｍｏｌ，１．０  ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ  ２６．９ｇ（６６．９ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１０７  ８７．３ｇを得た。収率９６．９％【０２５５】
化合物１０８（ＨＣｌ・Ｈ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１５））の合成【０２５６】
【化１４５】
2019198833.tif 000146
ＨＣｌ・Ｈ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０７）８７．０ｇ（４３．０  ｍｍｏｌ，１．０  ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ｈｙｐ−ＯＨ  ２２．８ｇ（６４．５ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１０８  ８９．４ｇを得た。収率９７．２％【０２５７】
化合物１０９（ＨＣｌ・Ｈ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１６））の合成【０２５８】
【化１４６】
2019198833.tif 000147
ＨＣｌ・Ｈ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０８）８９．０ｇ（４１．７  ｍｍｏｌ，１．０  ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ  ２１．１ｇ（６２．５ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１０９  ８９．９ｇを得た。収率９６．６％【０２５９】
化合物１１０（ＨＣｌ・Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１７））の合成【０２６０】
【化１４７】
2019198833.tif 000148
ＨＣｌ・Ｈ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１０９）８９．５ｇ（４０．１  ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ  ３９．０ｇ（６０．１ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１１０  １０１．９ｇを得た。収率９６．３％【０２６１】
化合物１１１（ＨＣｌ・Ｈ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（配列番号１８））の合成【０２６２】
【化１４８】
2019198833.tif 000149
ＨＣｌ・Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１１０）１０１ｇ（３８．４  ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ．）及びＦｍｏｃ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ  ３７．４ｇ（５７．６ｍｍｏｌ，１．５０ｅｑ）を用い、化合物１０３の合成と同様にして、化合物１１１  １１２．１ｇを得た。収率９６．０％【０２６３】
化合物１１（４ＴＦＡ・Ｈ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ−ＯＨ（配列番号１））の合成【０２６４】
【化１４９】
2019198833.tif 000150
予め洗浄乾燥した２Ｌ  ４つ口フラスコにＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ2Ｏ＝９０／１／９混合溶液  ５５０  ｍＬ（１０ｖ／ｗ）を添加し、ＨＣｌ・Ｈ−Ｄ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＫａ（化合物１１１）５５ｇ（１８．０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ．）を加え、ＴＦＡ／ＴＩＳ／Ｈ2Ｏ＝９０／１／９混合溶液  ５０ｍＬ（０．９１ｖ／ｗ）で洗いこんだ。得られた溶液を、内温２３．５〜３１．５℃で４時間撹拌し、反応させた。得られた反応液にハイフロスーパーセル５５ｇ（１．００ｗ／ｗ）を加え、撹拌し懸濁させた。ハイフロスーパーセル５５．０ｇ（１．００ｗ／ｗ）を１５０φ桐山ロートにプレコートさせ、反応液を濾過した。濾過残渣を酢酸  １９３ｍＬ（３．５ｖ／ｗ）で洗浄した。さらに濾過残渣を酢酸１１０ｍＬで２回洗浄し、濃縮した。濾液、及び洗浄液を合わせ、さらに酢酸１３．８ｍＬ（０．２５ｖ／ｗ）で洗いこみ、０℃に冷却した。得られた溶液に−２０℃に冷却した  ＭＴＢＥ  ３４４０ｍＬ（６２．５ｖ／ｗ）を１０分かけて添加し、３５分撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、得られたケーキを、ＭＴＢＥ  １１０ｍＬ（２．０ｖ／ｗ）で洗浄した。得られたケーキをビーカーに移し、ＭＴＢＥ  １３８０ｍＬ（２５．０ｖ／ｗ）を加え、１０分間撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、得られたケーキを、ＭＴＢＥ  １１０ｍＬ（２．０ｖ／ｗ）で洗浄した。得られたケーキをビーカーに移し、ｎ−Ｈｅｘａｎｅ  １０３０ｍＬ（１８．８ｖ／ｗ）を加え、５分間撹拌した。得られた懸濁液を濾過し、得られたケーキを、ｎ−Ｈｅｘａｎｅ  ５５ｍＬ（２．０ｖ／ｗ）で洗浄した。得られたケーキを室温で１５時間減圧乾燥を行い、４ＴＦＡ・Ｈ−Ｄ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−Ｄ−Ｔｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ−ＯＨ（配列番号２）  ２３．２ｇを得た。収率７３．２％。純度  （ＨＰＬＣ）  ８５．９％。
比較例においては、担体保護ペプチドを固形化し、ろ過、乾燥をいう工程が必要となり、操作が煩雑な上、多量の有機溶媒を必要とし、更には、乾燥工程のために工程時間が長くなる。【０２６５】
各種塩基によるＫｂ−ＮＨＥｔ担体を用いた、化合物１６（Ｈ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号１９））の合成
実施例４：化合物１５（Ｈ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号２０））の１−Ｍｅｔｈｙｌｐｉｐｅｒａｚｉｎｅによる合成【０２６６】
【化１５０】
2019198833.tif 000151
ＨＣｌ・Ｈ−ＥｔＮＫｂ（１．７６ｇ, ２．００ｍｍｏｌ）を用い、実施例３と同様にして、以下のアミノ酸を導入し、化合物１５を溶液で得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
得られた溶液に０．５Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。次いで、０．０１Ｎ塩酸水（８ｖ／ｗ）を加え、さらに６Ｎ塩酸水でｐＨ＝３に調整後、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣に冷アセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物１５（２．９５ｇ，ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度９６．２９％）を得た。【０２６７】
実施例５：化合物１６（Ｈ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ（配列番号１９））の合成【０２６８】
【化１５１】
2019198833.tif 000152
化合物１５（２．９７ｇ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液７５．６ｍｌに溶解し、ＤＴＴ（１．５１ｇ，２０ｍｇ／ｍｌ）を加え、３時間室温で撹拌した。反応液をセライ卜でろ過し、ろ過残渣をメタノールで洗浄、ろ過し、得られたろ液の濃縮残渣に冷ＭＴＢＥを加えた。析出した沈殿物をろ過し、さらにＭＴＢＥ懸洗を２回行い、得られた固形物を水に溶解し、未溶解物を濾別した。さらに未溶解物を水で洗浄、濾別した。得られたろ液を合わせて減圧乾燥し、化合物１６（１．０２ｇ，９３．５％，ＨＰＬＣ純度９３．８９％）を得た。【０２６９】
実施例６：化合物１６のＤｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｒｉａｍｉｎｅによる合成【０２７０】
【化１５２】
2019198833.tif 000153
ＨＣｌ・Ｈ−ＥｔＮＫｂ（１．７６ｇ, ２．００ｍｍｏｌ）より、実施例４と同様に（但し、使用塩基を１−ＭｅｔｈｙｌｐｉｐｅｒａｚｉｎｅからＤｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｒｉａｍｉｎｅに変更）して、化合物１５（１．８５ｇ，６３．６％，ＨＰＬＣ純度９５．５４％）を得た。さらに、得られた化合物１５（２．２４ｇ）を用いて実施例５同様にして、化合物１６（１．０５ｇ，ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度８６．６０％）を得た。【０２７１】
実施例７：化合物１６のＮ，Ｎ−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅによる合成【０２７２】
【化１５３】
2019198833.tif 000154
ＨＣｌ・Ｈ−ＥｔＮＫｂ（１．７６ｇ, ２．００ｍｍｏｌ）より、実施例４と同様に（但し、使用塩基を１−ＭｅｔｈｙｌｐｉｐｅｒａｚｉｎｅからＮ，Ｎ−Ｄｉｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅに変更）して、化合物１５（２．５５ｇ，８７．６％, ＨＰＬＣ純度９５．３８％）を得た。さらに、得られた化合物１５（２．３９ｇ）を用いて実施例５と同様にして、化合物１６（１．２１ｇ，ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度８１．２２％）を得た。【０２７３】
実施例８：化合物１６の４−Ａｍｉｎｏｐｙｐｅｒｉｄｉｎｅによる合成【０２７４】
【化１５４】
2019198833.tif 000155
ＨＣｌ・Ｈ−ＥｔＮＫｂ（１．７６ｇ, ２．００ｍｍｏｌ）より、実施例４と同様に（但し、使用塩基を１−Ｍｅｔｈｙｌｐｉｐｅｒａｚｉｎｅから４−Ａｍｉｎｏｐｙｐｅｒｉｄｉｎｅに変更）して、化合物１５（２．７２ｇ，９３．５％, ＨＰＬＣ純度９６．６３％）を得た。さらに、得られた化合物１５（２．６３ｇ）を用いて実施例５と同様にして、化合物１６（０．９６ｇ，９７．０％，ＨＰＬＣ純度９２．７５％）を得た。【０２７５】
実施例９：化合物１６のＥｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅによる合成【０２７６】
【化１５５】
2019198833.tif 000156
ＨＣｌ・Ｈ−ＥｔＮＫｂ（１．７６ｇ, ２．００ｍｍｏｌ）より、実施例４と同様に（但し、使用塩基を１−ＭｅｔｈｙｌｐｉｐｅｒａｚｉｎｅからＥｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅに変更）して、化合物１５（２．４３g，８３．５％, ＨＰＬＣ純度９４．８５％）を得た。さらに、得られた化合物１５（２．２２ｇ）を用いて実施例５と同様にして、化合物１６（０．９３ｇ，ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度８９．９３％）を得た。
塩基種による違いを以下の表にまとめた。【０２７７】
【表１】
2019198833.tif 000157
【０２７８】
２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコールを用いた化合物２３（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＯＨ（配列番号２１））の合成【０２７９】
実施例１０：化合物１７（１−ブロモ−１１−トリイソプロピルシリルオキシウンデカン）の合成【０２８０】
【化１５６】
2019198833.tif 000158
１−ブロモウンデカノール（２．５１ｇ, １０ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６１１６７８２号実施例（１−ａ）と同様に行い、化合物１７（４．０７ｇ, ９．９９ｍｍｏｌ,   ９９．９％）を得た。【０２８１】
実施例１１：化合物１８（２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシ）ベンズアルデヒドの合成【０２８２】
【化１５７】
2019198833.tif 000159
２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（０．３４ｇ, ２．４６ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６１１６７８２号実施例（１−ｂ）と同様に行い、化合物１８（１．７８ｇ,  ２．２５ｍｍｏｌ， ９１．５％）を得た。【０２８３】
実施例１２：化合物１９（２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール（「２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジル基」を、以下「ＫＳ１」と称することもある）の合成【０２８４】
【化１５８】
2019198833.tif 000160
２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシベンズアルデヒド（１．７６ｇ, ２．２２ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６１１６７８２号実施例（１−ｃ）と同様に行い、化合物１９（１．６５ｇ,  ２．０８ｍｍｏｌ， ９３．７％）を得た。【０２８５】
実施例１３：化合物２０（Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−ＫＳ１）の合成【０２８６】
【化１５９】
2019198833.tif 000161
２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシベンジルアルコール（１．００ｇ, １．２６ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６１１６７８２号実施例（１−ｃ）と同様（但し、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨの代わりに、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨを用いて）に行い、化合物２０溶液を得た。得られた溶液を減圧濃縮、乾固し、化合物２０（１．５１５ｇ,  １．２６ｍｍｏｌ， Ｑｕａｎｔ）を得た。【０２８７】
実施例１４：化合物２１（Ｈ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−ＫＳ１（配列番号２２））の合成【０２８８】
【化１６０】
2019198833.tif 000162
実施例１３で得られた化合物２０に対し、以下のアミノ酸を、アミンスカベンジャー（水溶性アミン）を用いた１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返す方法で導入し、化合物２１を溶液で得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−ｄＬｅｕ−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
４残基目：Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
５残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ
６残基目：Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ【０２８９】
実施例１５：化合物２２（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−ＫＳ１（配列番号２３））の合成【０２９０】
【化１６１】
2019198833.tif 000163
得られた化合物２１溶液にＤＭＦを理論収量に対し１．８ｖ／ｗになるように加えた。Ｈ−Ｐｙｒ−ＯＨ（０．２１３ｇ，１．６４ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（０．６７５ｇ，１．５８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．５０５ｍｌ，２．９０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を室温で３０分間攪拌した。得られた反応液に１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で５分間撹拌した。６Ｎ塩酸を加え中和し、さらに０．１Ｎ塩酸を理論収量の１８ｖ／ｗになるように加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層に０．１Ｎ塩酸と同量の０．５Ｎ重曹水溶液を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去し、化合物２２（１．０９ｇ，  ３３．７％）を得た。【０２９１】
実施例１６：化合物２３（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＯＨ）（配列番号２１）の合成【０２９２】
【化１６２】
2019198833.tif 000164
化合物２２（１．００ｇ，２．７８ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液９２ｍｌに溶解し、ＤＴＴ（３．７０ｇ，４０ｍｇ／ｍｌ）を加え、３時間室温で撹拌した。反応液を、セライ卜を用いてろ過し、ろ過残渣をメタノールで洗浄、ろ過した。得られたろ液にトルエン（混合液量）を加え、減圧下で溶媒留去した。残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにＭＴＢＥ懸洗、ヘキサン懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物２３（４．２１ｇ，  ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度７６．２８％）を得た。【０２９３】
２，７−ジドコシルオキシ−９−（３−フルオロフェニル）−９−ブロモフルオレンを用いた化合物２３（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＯＨ）（配列番号２１）の合成【０２９４】
実施例１７：化合物２４（２，７−ジドコシルオキシ−９−フルオレノン）の合成【０２９５】
【化１６３】
2019198833.tif 000165
２，７−ジヒドロキシ−９−フルオレノン（１．００ｇ, ４．７１ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６０９２５１３号実施例２の２−１と同様に行い、化合物２４（４．２５ｇ、  ドコシルブロミド混合物）を得た。【０２９６】
実施例１８：化合物２５（２，７−ジドコシルオキシ−９−（３−フルオロフェニル）−９−フルオレノール）の合成【０２９７】
【化１６４】
2019198833.tif 000166
実施例１７で得られた化合物２４（１．８０ｇ, ２．００ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６０９２５１３号実施例１の１−２と同様（但し４−クロロフェニルマグネシウムブロマイドの代わりに、３−フルオロフェニルマグネシウムブルマイドを用いて）に行い、化合物２５（１．５５ｇ， １．６８ｍｍｏｌ， ８３．８％）を得た。【０２９８】
実施例１９：化合物２６（２，７−ジドコシルオキシ−９−（３−フルオロフェニル）−９−ブロモフルオレン（「２，７−ジドコシルオキシ−９−（３−フルオロフェニル）−９−ブロモフルオレニル基」を、以下「Ｆｌ基」と称することもある））の合成【０２９９】
【化１６５】
2019198833.tif 000167
２−ドコシロキシ−９−（４−クロロフェニル）−９−フルオレノールの代わりに実施例１８で得られた化合物２５（１．８０ｇ, ２．００ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６０９２５１３号実施例１の１−３と同様にして、化合物２６（１．５５ｇ， １．６８ｍｍｏｌ， ８３．８％）を得た。【０３００】
実施例２０：化合物２７（Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｆｌ）の合成【０３０１】
【化１６６】
2019198833.tif 000168
２，７−ジドコシルオキシ−９−（３−フルオロフェニル）−９−ブロモフルオレン（０．９０ｇ, ０．９１ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６０９２５１３号実施例６と同様（但しＺ−Ａｌａ−ＯＨの代わりに、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨを用いた。）に行い、化合物２７（１．０３ｇ,  ０．６６３ｍｍｏｌ， ７３．０％）を得た。【０３０２】
実施例２１：化合物２８（Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−Ｆｌ）の合成【０３０３】
【化１６７】
2019198833.tif 000169
化合物２７（０．９００ｇ， ０．５７８ｍｍｏｌ）に対し、ピペリジンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて、上記した脱Ｆｍｏｃ一般合成法を行い、次いで、塩酸水、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して化合物２８の溶液を得た。
【０３０４】
実施例２２：化合物２９（Ｈ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−Ｆｌ（配列番号２４））の合成【０３０５】
【化１６８】
2019198833.tif 000170
化合物２８対し、以下のアミノ酸を、アミンスカベンジャー（水溶性アミン）を用いた１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返す方法で導入し、化合物２９を溶液で得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−ｄＬｅｕ−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
４残基目：Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
５残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ
６残基目：Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ【０３０６】
実施例２３：化合物３０（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−Ｆｌ（配列番号２５））の合成【０３０７】
【化１６９】
2019198833.tif 000171
得られた化合物２９溶液にＤＭＦを理論収量に対し１．８ｖ／ｗになるように加えた。Ｈ−Ｐｙｒ−ＯＨ（０．０９７ｇ，０．７５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（０．３１０ｇ，０．７２３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．２３２ｍｌ，１．３３ｍｍｏｌ）を加えた。得られた混合液を室温で３０分間攪拌した。得られた反応液に１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で５分間撹拌した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣にアセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物３０（０．９９９ｇ， ０．３７ｍｍｏｌ，  ６４．６％）を得た。【０３０８】
実施例２４：化合物２３（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＯＨ）（配列番号２１）の合成【０３０９】
【化１７０】
2019198833.tif 000172
化合物３０（５．３３ｇ，２．７８ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液９２ｍｌに溶解し、ＤＴＴ（３．７０ｇ，４０ｍｇ／ｍｌ）を加え、３時間室温で撹拌した。反応液を、セライ卜を用いてろ過し、ろ過残渣をメタノールで洗浄、ろ過した。得られたろ液にトルエン（混合液量）を加え、減圧下で溶媒留去した。残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにＭＴＢＥ懸洗、ヘキサン懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物２３（４．２１ｇ，  ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度７６．２８％）を得た。
【０３１０】
２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコールを用いた化合物２３（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＯＨ）（配列番号２１）の合成【０３１１】
実施例２５：化合物３１（２，３−ジヒドロフィトール（「２，３−ジヒドロフィチル基」を、以下「Ｐｈｙ」と称することがある）の合成【０３１２】
【化１７１】
2019198833.tif 000173
フィトール（１０ｇ, ３３．７ｍｍｏｌ）をメタノールに溶解させ、Ｐｔ／Ｃ（２％，  １．００ｇ）を懸濁させて水素雰囲気下で一晩撹拌した。反応終了後、濾過してＰｔ／Ｃを除去し、ろ液を濃縮して化合物３１を得た。これは精製することなく次の反応に用いた。【０３１３】
実施例２６：化合物３２（２，３−ジヒドロフィチルブロミド）の合成【０３１４】
【化１７２】
2019198833.tif 000174
化合物３１（３３．７ｍｍｏｌ）を４８％臭化水素酸（１００ｍｌ）に懸濁し、濃硫酸（０．１７ｍＬ）を滴下して１００℃で一晩撹拌した。反応混合液を室温に冷却後ヘキサン（２００ｍＬ）で抽出し、５％炭酸水素ナトリウム水溶液（７０ｍＬ）で２回、２０％食塩水（２５ｍＬ）で１回洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ液の溶媒を留去して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ショートカラム、ヘキサンのみ）で精製し、化合物３２（１０．４１ｇ, ２８．８ｍｍｏｌ,   ８５％  ｖｓ．  フィトール）を得た。【０３１５】
実施例２７：化合物３３（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチル）ベンジルアルコール（「２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチル）ベンジル基」を、以下「ＫＪ１」と称することがある））の合成【０３１６】
【化１７３】
2019198833.tif 000175
２，４−ジヒドロキシベンズアルデヒド（２３７ｍｇ, １．７１６ｍｍｏｌ）を用いて、特許第５９２９７５６号の実施例１と同様にして、化合物３３（１．１６ｇ,  １．６６ｍｍｏｌ， ９６．９％）を得た。【０３１７】
実施例２８：化合物３４（Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−ＫＪ１）の合成【０３１８】
【化１７４】
2019198833.tif 000176
２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシベンジルアルコール（１．７６ｇ, ２．２２ｍｍｏｌ）を用いて特許第５９２９７５６号の実施例２３と同様にして、ただし、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨを用いて化合物３４溶液を得た。得られた溶液を濃縮し、化合物３４（１．６５ｇ,  ２．０８ｍｍｏｌ， ９３．７％）を得た。【０３１９】
実施例２９：化合物３５（Ｈ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−ＫＪ１）の合成【０３２０】
【化１７５】
2019198833.tif 000177
化合物３４に対し、ピペリジンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて、上記した脱Ｆｍｏｃ一般合成法を行い、次いで、塩酸水、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して化合物３５の溶液を得た。
【０３２１】
実施例３０：化合物３６（Ｈ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−ＫＪ１（配列番号２６））の合成【０３２２】
【化１７６】
2019198833.tif 000178
化合物３５対し、以下のアミノ酸を、アミンスカベンジャー（水溶性アミン）を用いた１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返す方法で導入し、化合物３６を溶液で得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−ｄＬｅｕ−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
４残基目：Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
５残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ
６残基目：Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ【０３２３】
実施例３１：化合物３７（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｏ−ＫＪ１（配列番号２７））の合成【０３２４】
【化１７７】
2019198833.tif 000179
得られた化合物３６溶液にＤＭＦを理論収量に対し１．８ｖ／ｗになるように加えた。Ｈ−Ｐｙｒ−ＯＨ（３．３０ｇ，２５．５５ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（７．０ｇ，１６．２６ｍｍｏｌ，１．２５ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＥＡ（５．１０ｍｌ，２９．２８ｍｍｏｌ，２．２５ｅｑｕｉｖ）を加えた。得られた混合液を室温で３０分間攪拌した。得られた反応液に１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で５分間撹拌した。０．０１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣にアセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物３７（２８．７８ｇ，  ８７．５０％）を得た。【０３２５】
実施例３２：化合物２３（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−ＯＨ）（配列番号２１）の合成【０３２６】
【化１７８】
2019198833.tif 000180
化合物３７（５．３３ｇ，２．７８ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液９２ｍｌに溶解し、ＤＴＴ（３．７０ｇ，４０ｍｇ／ｍｌ）を加え、３時間室温で撹拌した。反応液を、セライ卜を用いてろ過し、ろ過残渣をメタノールで洗浄、ろ過した。得られたろ液にトルエン（混合液量）を加え、減圧下で溶媒留去した。残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにＭＴＢＥ懸洗、ヘキサン懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物２３（４．２１ｇ，  ｑｕａｎｔ，ＨＰＬＣ純度７６．２８％）を得た。【０３２７】
（Ｎ−エチル−（Ｂｉｓ（４−ドコシルオキシフェニル））メチルアミンを用いた化合物７（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ）（配列番号２）の合成【０３２８】
実施例３３：化合物３８（４，４’−ジドコシルオキシベンゾフェノン）の合成【０３２９】
【化１７９】
2019198833.tif 000181
４，４’−ジヒドロキシベンゾフェノン（２．１４ｇ, １０ｍｍｏｌ）を用いて、特許第５７６８７１２号実施例４の４−１と同様にして、化合物３８（７．９１ｇ、  ９５．２％）を得た。【０３３０】
実施例３４：化合物３９（４，４’−ジドコシルオキシフェニルベンゾヒドロール）の合成【０３３１】
【化１８０】
2019198833.tif 000182
化合物３８（７．９１ｇ, ９．５２ｍｍｏｌ）を用いて、特許第５７６８７１２号の実施例４の４−２と同様にして、化合物３９（７．７２ｇ， ９．２６ｍｍｏｌ， ９７．３％）を得た。【０３３２】
実施例３５：化合物４０（Ｎ−エチル−（Ｂｉｓ（４−ドコシルオキシフェニル））メチルアミン（Ｎ−エチル−（Ｂｉｓ（４−ドコシルオキシフェニル））メチルアミノ基を以下ＮＥｔ−ＫＪ３と称することもある））の合成【０３３３】
【化１８１】
2019198833.tif 000183
ＴＩＰＳ４−Ｄｐｍ−ＯＨ（Ｃ10−ＣＯＮＨ−ＣＨ（ＣＨ2）2）の代わりに化合物３９（０．８３３ｇ, １．００ｍｍｏｌ）、さらにプロピルアミンの代わりにエチルアミン塩酸塩（５ｍｍｏｌ）、さらにＤＩＰＥＡ（８ｍｍｏｌ）を用いて、特許第６２８３７７４号実施例９の（１）及び（２）と同様にして、化合物４０（０．８２９ｇ、  ９６．６％）を得た。【０３３４】
実施例３６：化合物４１（Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＮＥｔ−Ｋｊ３）の合成【０３３５】
【化１８２】
2019198833.tif 000184
Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ（０．３５４ｇ, １．０５ｍｍｏｌ）をトルエン１４ｍＬに溶解し、ＤＭＦ（１０．８μＬ, ０．１４ｍｍｏｌ）、次いで塩化チオニル（９１μＬ, １．２６ｍｍｏｌ）を加え、４０℃に加温し、２時間撹拌した。さらに塩化チオニル（４５．５μＬ, ０．６３ｍｍｏｌ）を加え１時間撹拌した。得られた反応液を減圧濃縮した。残渣にトルエン７ｍＬを加え減圧濃縮することを２回繰り返した。得られた残渣を室温に冷却後、ジクロロメタン１４ｍＬを加え溶解させ、ＤＩＰＥＡ(２４４μＬ, １．４ｍｍｏｌ)を加え溶解させた。得られた混合液に実施例３５で得られた化合物４０（０．６０１ｇ, ０．７ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌した。得られた反応液を減圧濃縮し、アセトニトリル２０ｍＬを加え、得られたスラリー液を濾過し、粗化合物４１を得た。得られた粗化合物４１をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（移動相ジクロロメタン）に供し、目的物分画を集め濃縮し、化合物４１（０．５８ｇ,  ０．５３ｍｍｏｌ， ７５．１％）を得た。【０３３６】
実施例３７：化合物４２（Ｈ−Ｐｒｏ−ＮＥｔ−ＫＪ３）の合成【０３３７】
【化１８３】
2019198833.tif 000185
化合物４１（０．５００ｇ, ０．４２４ｍｍｏｌ）に対し、ピペリジンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて、上記した脱Ｆｍｏｃ一般合成法を行い、次いで、塩酸水、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して化合物ＥＥの溶液を得た。
【０３３８】
実施例３８：化合物４３（Ｈ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−ＮＥｔ−ＫＪ３（配列番号２８））の合成【０３３９】
【化１８４】
2019198833.tif 000186
化合物４２対し、以下のアミノ酸を、アミンスカベンジャー（水溶性アミン）を用いた１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返す方法で導入し、化合物４３を溶液で得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
３残基目：Ｆｍｏｃ−ｄＬｅｕ−ＯＨ
４残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
５残基目：Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ
６残基目：Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ
７残基目：Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ【０３４０】
実施例３９：化合物４４（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−ＮＥｔ−ＫＪ３（配列番号２９））の合成【０３４１】
【化１８５】
2019198833.tif 000187
得られた化合物４３溶液にＤＭＦを理論収量に対し１．８ｖ／ｗになるように加えた。Ｈ−Ｐｙｒ−ＯＨ（５３ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ，  １．４５ｅｑ）、ＣＯＭＵ（１７１ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ，１．４０ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＥＡ（０．１２ｍｌ，０．６９ｍｍｏｌ，２．５ｅｑｕｉｖ）を加えた。得られた混合液を室温で３０分間攪拌した。得られた反応液に１−メチルピペラジン（０．６ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で５分間撹拌した。０．１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣にアセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物４４（０．９９８ｇ，  ６４．６％，ＨＰＬＣ純度８６．１０％）を得た。【０３４２】
実施例４０：化合物７（Ｐｙｒ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ｄＬｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＮＨＥｔ）（配列番号２）の合成【０３４３】
【化１８６】
2019198833.tif 000188
化合物４４（０．１０ｇ，０．０３７ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９０／１／９）の混合液１．２３ｍｌに溶解し、ＤＴＴ（２５ｍｇ，２０ｍｇ／ｍｌ）を加え、３時間室温で撹拌した。反応液を、セライ卜を用いてろ過し、ろ過残渣をメタノールで洗浄、ろ過した。得られたろ液にトルエン（混合液量）を加え、減圧下で溶媒留去した。残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにＭＴＢＥ懸洗、ヘキサン懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物７（１９ｍｇ，  ４７．５％，ＨＰＬＣ純度９４．９３％）を得た。【０３４４】
実施例４１：化合物４９（ＴＦＡ・Ｈ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＯＨ（配列番号３０））の合成【０３４５】
化合物４５（Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＫｂ）の合成【０３４６】
【化１８７】
2019198833.tif 000189
２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール（「Ｋｂ−ＯＨ」と表記する）（１．０ｇ，１．３２ｍｍｏｌ）を脱水ＴＨＦ（１３ｍＬ）に溶解し、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ（１．２１ｇ，１．９８ｍｍｏｌ，１．５ｅｑｕｉｖ）、ＤＩＰＣＩ（０．３０７ｍｌ，１．９８ｍｍｏｌ，１．５ｅｑｕｉｖ）、及びＤＭＡＰ（８．３ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ，０．０５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で３０分間攪拌した。反応液を減圧下留去した。残渣にメタノールを加えて析出した沈殿物をろ過し、メタノール懸洗を行い、さらにアセトニトリル懸洗を２回行った。得られた固形物を減圧乾燥し、化合物４５（１．７７ｇ， ９９．５％）を得た。【０３４７】
化合物４６（Ｈ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＫｂ）の合成【０３４８】
【化１８８】
2019198833.tif 000190
化合物４５に対し、ＤＭＦの代わりにＮＭＰ、ピペリジンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて、上記した脱Ｆｍｏｃ一般合成法を行い、次いで、塩酸水、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄して化合物４６の溶液を得た。【０３４９】
化合物４７（Ｈ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＫｂ（配列番号３１））の合成【０３５０】
【化１８９】
2019198833.tif 000191
化合物４６に対し、以下のアミノ酸を順次縮合させ、その都度アミンスカベンジャーを加えてから脱保護操作を行い、塩酸水、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄を行う１ｐｏｔ縮合脱保護法を繰り返すことにより、化合物４７の溶液を得た。
１残基目：Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ
２残基目：Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ【０３５１】
化合物４８（Ｂｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＫｂ（配列番号３２））の合成【０３５２】
【化１９０】
2019198833.tif 000192
化合物４７の溶液にＢｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（０．４４５ｇ，１．７０ｍｍｏｌ，１．３０ｅｑｕｉｖ．）、ＣＯＭＵ（０．７０２ｇ，１．６４ｍｍｏｌ，１．２５ｅｑｕｉｖ．）、ＤＩＰＥＡ  （０．５７１ｍｌ，３．３ｍｍｏｌ，２．５ｅｑｕｉｖ．）を加えた。得られた混合液を室温で３０分間攪拌した。０．１Ｎ塩酸水（１０ｍｌ）、続いて０．５Ｎ  炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍｌ）でそれぞれ洗浄、分液操作を行い、得られた有機層を減圧下で溶媒留去した。残渣にアセ卜ニ卜リルを加えて析出した沈殿物をろ過し、さらにアセ卜ニ卜リル懸洗を行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物４８（１．８３ｇ，  ８８．４％）を得た。【０３５３】
化合物４９（ＴＦＡ・Ｈ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ−ＯＨ（配列番号３０））の合成
化合物４８（０．５０ｇ，０．３２ｍｍｏｌ）をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９５／２．５／２．５）の混合液１５．８ｍｌに溶解し、３時間室温で撹拌した。反応液をセライ卜でろ過し、残渣をＴＦＡで洗浄し、ろ液と洗浄液とあわせて減圧下で溶媒留去した。残渣に冷ＭＴＢＥを加えて析出した沈殿物をろ過して取得した後、ＭＴＢＥ懸洗を2回行い、得られた固形物を減圧乾燥し、化合物４９（０．１４ｇ，７８．３％、ＨＰＬＣ純度８４．９３％）を得た。【０３５４】
上記の詳細な記載は、本発明の目的及び対象を単に説明するものであり、添付の特許請求の範囲を限定するものではない。添付の特許請求の範囲から離れることなしに、記載された実施態様に対しての、種々の変更及び置換は、本明細書に記載された教示より当業者にとって明らかである。
【産業上の利用可能性】
【０３５５】
本発明のペプチド合成方法は、簡便な手段で、反応系中に存在するアミノ酸活性エステルの問題とＤＢＦの問題を同時に解決するとともに、固液分離操作を削減することができる。本発明によれば、ペプチド合成の工程時間を短縮することができ、また、固液分離操作を削減することにより、溶媒の使用を削減できる。また、本発明により合成されたペプチドはアミノ酸の欠落やダブルヒットの問題が少なく、本発明の方法によれば高収率・高品質のペプチドを合成できる。
【配列表】
2019198833000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和1年9月3日(2019.9.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液相ペプチド合成方法であって、以下の工程ａ〜ｄ：
ａ．有機溶媒又は有機溶媒の混合液中で、液相ペプチド合成用担体で保護された（担体保護）アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドと、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基でアミノ基が保護された（Ｎ−Ｆｍｏｃ保護）アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとを縮合して、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドを得る工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に２価以上の水溶性アミンを添加する工程、
ｃ．２価以上の水溶性アミンの存在下で保護されたアミノ基からＦｍｏｃ基を脱保護する工程、及び
ｄ．反応液に酸を添加して中和し、さらに酸性水溶液を添加して洗浄した後、分液し、水層を除去し、有機層を得る工程、
を含むペプチド合成方法、
ここで、
前記液相ペプチド合成用担体は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接又はリンカーを介して結合して、それらを水に不溶性にする化合物であって分子量３００以上の化合物であり、
前記担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが有する一又は複数個のアミノ基、一又は複数個のカルボキシル基、一又は複数個のチオール基、及び一又は複数個の水酸基からなる群より選ばれるいずれか一つの基に、直接又はリンカーを介して該担体が結合しているアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドであり、かつ、
工程ｂ及び工程ｃにおける２価以上の水溶性アミンは、同じでも異なってもよい。
【請求項２】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物Ａ：
【化１】
2019198833.tif 000250
（式中、Ｒ1及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、炭素数が８〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＸは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化２】
2019198833.tif 000251
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物Ｂ：
【化３】
2019198833.tif 000252
（式中、Ｒ2、Ｒ4及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化４】
2019198833.tif 000253
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物Ｃ：
【化５】
2019198833.tif 000254
（式中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2及びＲ4は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＺは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化６】
2019198833.tif 000255
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物Ｄ：
【化７】
2019198833.tif 000256
（式中、Ｘは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ２ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、ハロゲノメチル基、アジ化メチル基、ホルミル基、又はオキシムを示し、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基であり；Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5のうち少なくとも一つは、以下の式：
−Ｏ−Ｒ6−Ｘａ−Ａ
で表される基を示し、残余の基は、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；Ｒ6は、炭素数１から１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｘａは、Ｏ又はＣＯＮＲｃ（ここで、Ｒｃは、水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示す）を示し、
Ａは、式（１）〜式（１１）のいずれかを表し、
【化８】
2019198833.tif 000257
（ここで、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、又は置換基を有してもよいアリール基を示し、Ｒ10は、単結合又は炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示す。）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の一般式（Ｖ）で表される化合物Ｅ１又は下記の一般式（Ｖ’）で表される化合物Ｅ２：Ｅ１：
【化９】
2019198833.tif 000258
［式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基、クロロ基であり；Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基、水素原子又は電子吸引性基を示し、かつＲａ、Ｒｂ及びＲｃの少なくとも１つは脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；環Ａ、Ｂ及びＣは独立してそれぞれ電子吸引性基を有していてもよい］、
又はＥ２：
【化１０】
2019198833.tif 000259
[式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基又はクロロ基であり；ｎは１〜１９の整数を表し；Ｒｃ’は脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基であり；環Ａ，Ｂ及びＣは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基及び電子吸引性基から選ばれる１種以上を有してもよく；環Ａが複数存在する場合の各環Ａはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｙが複数存在する場合の各Ｙはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｒｃ’が複数存在する場合の各Ｒｃ’はそれぞれ同一でも異なっていてもよい]、
（ここで、脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基は、式（ａ）：
【化１１】
2019198833.tif 000260
（式中、Ｘａは存在しないか、又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−あるいは−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒｄは炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；ｋ1は１〜１０の整数を示し；Ｒｄが複数存在する場合の各Ｒｄはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｘａが複数存在する場合の各Ｘａはそれぞれ同一でも異なっていてもよい）で表される基であり、
脂肪族炭化水素基を有する有機基は、フルオレン化合物の２位及び／又は７位に存在する、式（ｂ）：
【化１２】
2019198833.tif 000261
（式中、＊は結合位置を示し；Ｘ1が−Ｏ−であり；Ｒ1が炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；ｍ1が１である）で表される基、
式（ｃ）：
【化１３】
2019198833.tif 000262
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ2、Ｘ2’、Ｘ2’’及びＸ2’’’が−Ｏ−であり；Ｒ２及びＲ４は独立してそれぞれ炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；Ｒ３は炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4が１であり；ｍ2が１である）で表される基、及び
式（ｄ）：
【化１４】
2019198833.tif 000263
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ8が−Ｏ−を示し；ｍ3が２又は３であり；ｎ5が１であり；ｎ6が３であり；Ｘ7が−Ｏ−であり；ｍ3個のＲ12が独立してそれぞれ炭素数４〜３０のアルキル基である）で表される基からなる群より選ばれる１種以上の基である）、
で表されるフルオレン化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の一般式（Ｗ）で表される化合物Ｆ：
【化１５】
2019198833.tif 000264
［式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；Ｒaは、
式（ａ）：
【化１６】
2019198833.tif 000265
［式中、＊は、結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又はＣＯＮＨ−を示し；Ｒ1及びｍ1個のＲ2は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示し；かつＲ3は、水素原子、又は式（Ｗ’）：
【化１７】
2019198833.tif 000266
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す）で表される基である。］で表される基；
式（ｂ）：
【化１８】
2019198833.tif 000267
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１又は２を示し；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ4及びｍ2個のＲ6は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ5は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基；
式（ｃ）：
【化１９】
2019198833.tif 000268
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；ｍ3個のＸ3は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；かつｍ3個のＲ7は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；及び
式（ｄ）：
【化２０】
2019198833.tif 000269
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ7個のＸ4は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−，−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ8は、２価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7個のＲ9は、独立してそれぞれ、１価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7は、１〜５の整数を示し；かつＡｒは、アリーレン基を示す。）で表される基からなる群より選ばれる脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、当該有機基中の総炭素数が３０以上であり；ｎ個のＲｂは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す。］
で表されるベンジル化合物、
（なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の一般式（Ｘ）で表される化合物Ｇ：
【化２１】
2019198833.tif 000270
［式中、Ｙは、ヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；ｋ及びｌは、独立してそれぞれ、０〜５の整数を示し、ただし、ｋ＋ｌは０ではなく；ｋ個のＲa及びｌ個のＲbは、独立してそれぞれ、
式（ａ）：
【化２２】
2019198833.tif 000271
（式中、*は結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ1個のＲ1は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基、
式（ｂ）：
【化２３】
2019198833.tif 000272
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１〜２の整数を示し；ｍ2個のｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’、ｍ2個のＸ2’’’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ2及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ3は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）
で表される基、及び
式（ｅ）：
【化２４】
2019198833.tif 000273
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；Ｘ2は存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＸ7は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＲ12は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基
からなる群より選ばれる炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、ここで、ｋ＋ｌ個の脂肪族炭化水素基を有する有機基における、全脂肪族炭化水素基の合計の炭素数が１６以上であり；環ＡはＲaに加えてさらに置換基を有していてもよく；環ＢはＲbに加えてさらに置換基を有していてもよい。］、
下記の一般式（Y）で表される化合物Ｈ：
【化２５】
2019198833.tif 000274
[式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；環Ａは、Ｒ1，ｋ個のＱＲa、及びＣ（Ｘ）（Ｙ）Ｚに加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：
【化２６】
2019198833.tif 000275
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよい）で表される基を示し；
前記Ｒa及びＲbにおける分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基が、式（ｂ）：
【化２７】
2019198833.tif 000276
（式中、＊は、隣接原子との結合位置を示し；Ｒ3及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基をしめし；Ｘ1は、単結合、Ｃ１−４アルキレン基又は酸素原子を示す。但し、Ｒ3及びＲ4がともに水素原子であることはない。）で表される同一又は異なる２価の基を３以上有する基である。］
で表される分岐鎖含有芳香族化合物；
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項３】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化２８】
2019198833.tif 000277
（式中、Ｒ1及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、炭素数が８〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＸは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化２９】
2019198833.tif 000278
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物：
【化３０】
2019198833.tif 000279
（式中、Ｒ2、Ｒ4及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化３１】
2019198833.tif 000280
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、及び
下記の構造を有する化合物：
【化３２】
2019198833.tif 000281
（式中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2及びＲ4は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＺは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化３３】
2019198833.tif 000282
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である、請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項４】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化３４】
2019198833.tif 000283
（式中、Ｘは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ２ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、ハロゲノメチル基、アジ化メチル基、ホルミル基、又はオキシムを示し、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基であり；Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5のうち少なくとも一つは、以下の式：
−Ｏ−Ｒ6−Ｘａ−Ａ
で表される基を示し、残余の基は、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；Ｒ6は、炭素数１から１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｘａは、Ｏ又はＣＯＮＲｃ（ここで、Ｒｃは、水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示す）を示し、
Ａは、式（１）〜式（１１）のいずれかを表し、
【化３５】
2019198833.tif 000284
（ここで、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、又は置換基を有してもよいアリール基を示し、Ｒ10は、単結合又は炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示す。）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項５】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｖ）
【化３６】
2019198833.tif 000285
［式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基、クロロ基であり；Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基、水素原子又は電子吸引性基を示し、かつＲａ、Ｒｂ及びＲｃの少なくとも１つは脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；環Ａ、Ｂ及びＣは独立してそれぞれ電子吸引性基を有していてもよい］、又は
一般式（Ｖ’）：
【化３７】
2019198833.tif 000286
[式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基又はクロロ基であり；ｎは１〜１９の整数を表し；Ｒｃ’は脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基であり；環Ａ，Ｂ及びＣは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基及び電子吸引性基から選ばれる１種以上を有してもよく；環Ａが複数存在する場合の各環Ａはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｙが複数存在する場合の各Ｙはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｒｃ’が複数存在する場合の各Ｒｃ’はそれぞれ同一でも異なっていてもよい］、
ここで、脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基は、式（ａ）：
【化３８】
2019198833.tif 000287
（式中、Ｘａは存在しないか、又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−あるいは−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒｄは炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；ｋ1は１〜１０の整数を示し；Ｒｄが複数存在する場合の各Ｒｄはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｘａが複数存在する場合の各Ｘａはそれぞれ同一でも異なっていてもよい）で表される基であり、
脂肪族炭化水素基を有する有機基は、フルオレン化合物の２位及び／又は７位に存在する、式（ｂ）：
【化３９】
2019198833.tif 000288
（式中、＊は結合位置を示し；Ｘ1が−Ｏ−であり；Ｒ1が炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；ｍ1が１である）で表される基、
式（ｃ）：
【化４０】
2019198833.tif 000289
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ2、Ｘ2’、Ｘ2’’及びＸ2’’’が−Ｏ−であり；Ｒ２及びＲ４は独立してそれぞれ炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；Ｒ３は炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4が１であり；ｍ2が１である）で表される基、及び
式（ｄ）：
【化４１】
2019198833.tif 000290
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ8が−Ｏ−を示し；ｍ3が２又は３であり；ｎ5が１であり；ｎ6が３であり；Ｘ7が−Ｏ−であり；ｍ3個のＲ12が独立してそれぞれ炭素数４〜３０のアルキル基である）で表される基からなる群より選ばれる１種以上の基である、
で表されるフルオレン化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチドの合成方法。
【請求項６】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｗ）
【化４２】
2019198833.tif 000291
［式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；Ｒaは、
式（ａ）：
【化４３】
2019198833.tif 000292
［式中、＊は、結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又はＣＯＮＨ−を示し；Ｒ1及びｍ1個のＲ2は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示し；かつＲ3は、水素原子、又は式（Ｗ’）：
【化４４】
2019198833.tif 000293
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す）で表される基である。］で表される基；
式（ｂ）：
【化４５】
2019198833.tif 000294
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１又は２を示し；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ4及びｍ2個のＲ6は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ5は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基；
式（ｃ）：
【化４６】
2019198833.tif 000295
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；ｍ3個のＸ3は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；かつｍ3個のＲ7は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；及び
式（ｄ）：
【化４７】
2019198833.tif 000296
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ7個のＸ4は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−，−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ8は、２価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7個のＲ9は、独立してそれぞれ、１価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7は、１〜５の整数を示し；かつＡｒは、アリーレン基を示す。）で表される基からなる群より選ばれる脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、当該有機基中の総炭素数が３０以上であり；ｎ個のＲｂは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す。］
で表されるベンジル化合物、
（なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチドの合成方法。
【請求項７】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｘ）
【化４８】
2019198833.tif 000297
［式中、Ｙは、ヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；ｋ及びｌは、独立してそれぞれ、０〜５の整数を示し、ただし、ｋ＋ｌは０ではなく；ｋ個のＲa及びｌ個のＲbは、独立してそれぞれ、
式（ａ）：
【化４９】
2019198833.tif 000298
（式中、*は結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ1個のＲ1は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基、
式（ｂ）：
【化５０】
2019198833.tif 000299
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１〜２の整数を示し；ｍ2個のｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’、ｍ2個のＸ2’’’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ2及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ3は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）
で表される基、及び
式（ｅ）：
【化５１】
2019198833.tif 000300
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；Ｘ2は存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＸ7は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＲ12は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基
からなる群より選ばれる炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、ここで、ｋ＋ｌ個の脂肪族炭化水素基を有する有機基における、全脂肪族炭化水素基の合計の炭素数が１６以上であり；環ＡはＲaに加えてさらに置換基を有していてもよく；環ＢはＲbに加えてさらに置換基を有していてもよい。］
で表されるジフェニルメチル化合物；
又は、
一般式（Y）
【化５２】
2019198833.tif 000301
[式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；環Ａは、Ｒ1，ｋ個のＱＲa、及びＣ（Ｘ）（Ｙ）Ｚに加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：
【化５３】
2019198833.tif 000302
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよい）で表される基を示し；
前記Ｒa及びＲbにおける分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基が、式（ｂ）：
【化５４】
2019198833.tif 000303
（式中、＊は、隣接原子との結合位置を示し；Ｒ3及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基をしめし；Ｘ1は、単結合、Ｃ１−４アルキレン基又は酸素原子を示す。但し、Ｒ3及びＲ4がともに水素原子であることはない。）で表される同一又は異なる２価の基を３以上有する基である。］
で表される分岐鎖含有芳香族化合物；
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項８】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化５５】
2019198833.tif 000304
（式中、Ｘはハロゲンであり、Ｙは８〜１２の整数であり、Ｚは１７〜２９の整数である。）、
【化５６】
2019198833.tif 000305
（式中、Ｘは、それぞれ独立に７〜２１の整数である。）、
【化５７】
2019198833.tif 000306
（式中、Ｘは、それぞれ独立に１１〜２９の整数である。）、及び
【化５８】
2019198833.tif 000307
［式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ−Ｏ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、下記式（Ｚ）：
【化５９】
2019198833.tif 000308
［式中、＊はＱとの結合位置を示し；ｎ0は２〜４０の整数を示し；ｎ0個のＲ5及びＲ6は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基（但し同時に水素原子になることは無く）を示し；ｎ0個のＸ２は、独立してそれぞれ、単結合又はＣ１−４アルキレン基を示し；かつＲ7は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し；Ｒ8は、Ｃ１−４アルキル基を示す］で表される基であり；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつ
Ｚは、水素原子又は式（ａ）：
【化６０】
2019198833.tif 000309
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、前記と同意義を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、上記式（Ｚ）である基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらに１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい）で表される基である］で表される分岐鎖含有芳香族化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項９】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化６１】
2019198833.tif 000310
（式中、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１８〜２２のアルコキシ基であり、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化６２】
2019198833.tif 000311
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基を表す））、
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１０】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化６３】
2019198833.tif 000312
（３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアルコール）、
【化６４】
2019198833.tif 000313
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、
【化６５】
2019198833.tif 000314
（２，４−ジドコシルオキシベンズアルデヒド）、
【化６６】
2019198833.tif 000315
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、
【化６７】
2019198833.tif 000316
（Ｎ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、
【化６８】
2019198833.tif 000317
（３，５−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、
【化６９】
2019198833.tif 000318
（２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）
【化７０】
2019198833.tif 000319
（２，４−ジ（１１’−t−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）
【化７１】
2019198833.tif 000320
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである。）
【化７２】
2019198833.tif 000321
（２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジル）−４−メトキシベンジルアルコール）、
【化７３】
2019198833.tif 000322
（ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、
【化７４】
2019198833.tif 000323
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、
【化７５】
2019198833.tif 000324
（３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、
【化７６】
2019198833.tif 000325
（ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）、
及び
【化７７】
2019198833.tif 000326
（Ｎ−エチル−ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１１】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化７８】
2019198833.tif 000327
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである）、
【化７９】
2019198833.tif 000328
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、
【化８０】
2019198833.tif 000329
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、
【化８１】
2019198833.tif 000330
（Ｎ−エチル−２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジルオキシ）−４−メトキシベンジルアミン）、
【化８２】
2019198833.tif 000331
（Ｎ−エチル−ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、
【化８３】
2019198833.tif 000332
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）、及び
【化８４】
2019198833.tif 000333
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）
（なお、上記各式は、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基に結合する前の状態で示している）
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１２】
前記有機溶媒又は有機溶媒の混合液が少なくとも一つの水溶性有機溶媒を含む、請求項１〜１１のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１３】
前記有機溶媒又は有機溶媒の混合液が、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、2−メチルＴＨＦ、４−メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ−メチルピロリドン及びＤＣＭからなる群より選ばれる少なくとも一つの有機溶媒又それらの２以上の混合液である、請求項１〜１２のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１４】
前記２価以上の水溶性アミンが、１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミンである、請求項１〜１３のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１５】
前記２価以上の水溶性アミンが、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１−エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン及びピペラジンからなる群より選ばれる、請求項１４に記載のペプチド合成方法。
【請求項１６】
工程ｂにおける２価以上の水溶性アミンのアミン当量が、工程ａの縮合反応後に理論上残存するアミノ酸当量に対して１〜１０当量の量である、請求項１〜１５のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１７】
工程ｃにおける２価以上の水溶性アミンのアミン当量が、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、５〜３０当量である、請求項１〜１６のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１８】
工程ｄの酸性水溶液のｐＨが、１〜５である、請求項１〜１７のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１９】
前記工程より得られた担体保護ペプチドを用いて、前記工程の繰り返しを１回以上行うことを含む、請求項１〜１８のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項２０】
前記工程をワンポットで行う、請求項１〜１９のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項２１】
以下の配列：Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ―ＯＨのペプチドを合成するための、請求項１〜２０のいずれか一つに記載のペプチド合成方法の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３４】
【化１３４】
2019198833.tif 000334
Ｎ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン（「ＥｔＮＫｂ」と表記する）（１２．５ｇ，１５．２３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／ＤＭＦ（９／１）に１８ｖ／ｗとなるように溶解し、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ／Ｈ2Ｏ（７．０４ｇ，１９．８０ｍｍｏｌ，１．３０ｅｑｕｉｖ）、ＣＯＭＵ（８．１５ｇ，１９．０４ｍｍｏｌ，１．２５ｅｑｕｉｖ）、及びＤＩＰＥＡ（８．６２ｍｌ，４９．４９ｍｍｏｌ，３．３０ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１５分間攪拌した。１−メチルピペラジン（０．４５ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１０分間撹拌した。１−メチルピペラジン（２０．０ｅｑｕｉｖ）及びＤＢＵ（７．０ｅｑｕｉｖ）を加えて室温で１０分間攪拌した。氷冷しながら６Ｎ塩酸（５０．７０ｅｑｕｉｖ）を加えた反応液にシクロヘキサン（４．５ｖ／ｗ）、０．１Ｎ塩酸（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄した。さらに０．５Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶液（１８ｖ／ｗ）を加え、洗浄、分液し、水層を廃棄し、化合物１２を溶液で得た。
【手続補正書】
【提出日】令和1年12月26日(2019.12.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液相ペプチド合成方法であって、以下の工程ａ〜ｄ：
ａ．有機溶媒又は有機溶媒の混合液中で、液相ペプチド合成用担体で保護された（担体保護）アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドと、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）基でアミノ基が保護された（Ｎ−Ｆｍｏｃ保護）アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとを縮合して、Ｎ−Ｆｍｏｃ−担体保護ペプチドを得る工程、
ｂ．縮合反応後の反応液に２価以上の水溶性アミンを添加してアミノ酸活性エステルをスカベンジする工程、
ｃ．２価以上の水溶性アミンの存在下で脱Ｆｍｏｃ試薬を添加し保護されたアミノ基からＦｍｏｃ基を脱保護する工程、及び
ｄ．反応液に酸を添加して中和し、さらに酸性水溶液を添加して洗浄した後、分液し、水層を除去し、有機層を得る工程、
を含むペプチド合成方法、
ここで、
前記液相ペプチド合成用担体は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドに直接又はリンカーを介して結合して、それらを水に不溶性にする化合物であって分子量３００以上の化合物であり、
前記担体保護アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドは、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドが有する一又は複数個のアミノ基、一又は複数個のカルボキシル基、一又は複数個のチオール基、及び一又は複数個の水酸基からなる群より選ばれるいずれか一つの基に、直接又はリンカーを介して該担体が結合しているアミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドであり、かつ、
工程ｂ及び工程ｃにおける２価以上の水溶性アミンは、同じでも異なってもよい。
【請求項２】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物Ａ：
【化１】
2019198833.tif 000335
（式中、Ｒ1及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、炭素数が８〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＸは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化２】
2019198833.tif 000336
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物Ｂ：
【化３】
2019198833.tif 000337
（式中、Ｒ2、Ｒ4及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化４】
2019198833.tif 000338
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物Ｃ：
【化５】
2019198833.tif 000339
（式中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2及びＲ4は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＺは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化６】
2019198833.tif 000340
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物Ｄ：
【化７】
2019198833.tif 000341
（式中、Ｘは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ２ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、ハロゲノメチル基、アジ化メチル基、ホルミル基、又はオキシムを示し、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基であり；Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5のうち少なくとも一つは、以下の式：
−Ｏ−Ｒ6−Ｘａ−Ａ
で表される基を示し、残余の基は、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；Ｒ6は、炭素数１から１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｘａは、Ｏ又はＣＯＮＲｃ（ここで、Ｒｃは、水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示す）を示し、
Ａは、式（１）〜式（１１）のいずれかを表し、
【化８】
2019198833.tif 000342
（ここで、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、又は置換基を有してもよいアリール基を示し、Ｒ10は、単結合又は炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示す。）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の一般式（Ｖ）で表される化合物Ｅ１又は下記の一般式（Ｖ’）で表される化合物Ｅ２：Ｅ１：
【化９】
2019198833.tif 000343
［式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基、クロロ基であり；Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基、水素原子又は電子吸引性基を示し、かつＲａ、Ｒｂ及びＲｃの少なくとも１つは脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；環Ａ、Ｂ及びＣは独立してそれぞれ電子吸引性基を有していてもよい］、
又はＥ２：
【化１０】
2019198833.tif 000344
[式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基又はクロロ基であり；ｎは１〜１９の整数を表し；Ｒｃ’は脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基であり；環Ａ，Ｂ及びＣは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基及び電子吸引性基から選ばれる１種以上を有してもよく；環Ａが複数存在する場合の各環Ａはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｙが複数存在する場合の各Ｙはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｒｃ’が複数存在する場合の各Ｒｃ’はそれぞれ同一でも異なっていてもよい]、
（ここで、脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基は、式（ａ）：
【化１１】
2019198833.tif 000345
（式中、Ｘａは存在しないか、又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−あるいは−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒｄは炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；ｋ1は１〜１０の整数を示し；Ｒｄが複数存在する場合の各Ｒｄはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｘａが複数存在する場合の各Ｘａはそれぞれ同一でも異なっていてもよい）で表される基であり、
脂肪族炭化水素基を有する有機基は、フルオレン化合物の２位及び／又は７位に存在する、式（ｂ）：
【化１２】
2019198833.tif 000346
（式中、＊は結合位置を示し；Ｘ1が−Ｏ−であり；Ｒ1が炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；ｍ1が１である）で表される基、
式（ｃ）：
【化１３】
2019198833.tif 000347
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ2、Ｘ2’、Ｘ2’’及びＸ2’’’が−Ｏ−であり；Ｒ２及びＲ４は独立してそれぞれ炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；Ｒ３は炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4が１であり；ｍ2が１である）で表される基、及び
式（ｄ）：
【化１４】
2019198833.tif 000348
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ8が−Ｏ−を示し；ｍ3が２又は３であり；ｎ5が１であり；ｎ6が３であり；Ｘ7が−Ｏ−であり；ｍ3個のＲ12が独立してそれぞれ炭素数４〜３０のアルキル基である）で表される基からなる群より選ばれる１種以上の基である）、
で表されるフルオレン化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の一般式（Ｗ）で表される化合物Ｆ：
【化１５】
2019198833.tif 000349
［式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；Ｒaは、
式（ａ）：
【化１６】
2019198833.tif 000350
［式中、＊は、結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又はＣＯＮＨ−を示し；Ｒ1及びｍ1個のＲ2は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示し；かつＲ3は、水素原子、又は式（Ｗ’）：
【化１７】
2019198833.tif 000351
（式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；＊は、結合位置を示し；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す）で表される基である。］で表される基；
式（ｂ）：
【化１８】
2019198833.tif 000352
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１又は２を示し；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ4及びｍ2個のＲ6は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ5は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基；
式（ｃ）：
【化１９】
2019198833.tif 000353
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；ｍ3個のＸ3は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；かつｍ3個のＲ7は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；及び
式（ｄ）：
【化２０】
2019198833.tif 000354
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ7個のＸ4は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−，−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ8は、２価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7個のＲ9は、独立してそれぞれ、１価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7は、１〜５の整数を示し；かつＡｒは、アリーレン基を示す。）で表される基からなる群より選ばれる脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、当該有機基中の総炭素数が３０以上であり；ｎ個のＲｂは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す。］
で表されるベンジル化合物、
（なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の一般式（Ｘ）で表される化合物Ｇ：
【化２１】
2019198833.tif 000355
［式中、Ｙは、ヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；ｋ及びｌは、独立してそれぞれ、０〜５の整数を示し、ただし、ｋ＋ｌは０ではなく；ｋ個のＲa及びｌ個のＲbは、独立してそれぞれ、
式（ａ）：
【化２２】
2019198833.tif 000356
（式中、*は結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ1個のＲ1は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基、
式（ｂ）：
【化２３】
2019198833.tif 000357
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１〜２の整数を示し；ｍ2個のｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’、ｍ2個のＸ2’’’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ2及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ3は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）
で表される基、及び
式（ｅ）：
【化２４】
2019198833.tif 000358
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；Ｘ2は存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＸ7は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＲ12は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基
からなる群より選ばれる炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、ここで、ｋ＋ｌ個の脂肪族炭化水素基を有する有機基における、全脂肪族炭化水素基の合計の炭素数が１６以上であり；環ＡはＲaに加えてさらに置換基を有していてもよく；環ＢはＲbに加えてさらに置換基を有していてもよい。］、
下記の一般式（Y）で表される化合物Ｈ：
【化２５】
2019198833.tif 000359
[式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；環Ａは、Ｒ1，ｋ個のＱＲa、及びＣ（Ｘ）（Ｙ）Ｚに加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：
【化２６】
2019198833.tif 000360
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよい）で表される基を示し；
前記Ｒa及びＲbにおける分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基が、式（ｂ）：
【化２７】
2019198833.tif 000361
（式中、＊は、隣接原子との結合位置を示し；Ｒ3及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基をしめし；Ｘ1は、単結合、Ｃ１−４アルキレン基又は酸素原子を示す。但し、Ｒ3及びＲ4がともに水素原子であることはない。）で表される同一又は異なる２価の基を３以上有する基である。］
で表される分岐鎖含有芳香族化合物；
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項３】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化２８】
2019198833.tif 000362
（式中、Ｒ1及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、炭素数が８〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＸは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化２９】
2019198833.tif 000363
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
下記の構造を有する化合物：
【化３０】
2019198833.tif 000364
（式中、Ｒ2、Ｒ4及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化３１】
2019198833.tif 000365
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、及び
下記の構造を有する化合物：
【化３２】
2019198833.tif 000366
（式中、Ｒ1、Ｒ3及びＲ5は、水素原子であり、Ｒ2及びＲ4は、炭素数が１２〜３０のアルコキシ基である。また、式中、ＲＺは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化３３】
2019198833.tif 000367
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基、ベンジル基、又はアルコキシ置換ベンジル基を表し、Ｒ6は水素原子、フェニル基、又はアルコキシ置換フェニル基を表す）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である、請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項４】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化３４】
2019198833.tif 000368
（式中、Ｘは、−ＣＨ2ＯＲａ（ここで、Ｒａは、水素原子、ハロゲノカルボニル基又は活性エステル型保護基を示す）、―ＣＨ２ＮＨＲｂ（ここで、Ｒｂは、水素原子、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基、又はアラルキル基を示す）、ハロゲノメチル基、アジ化メチル基、ホルミル基、又はオキシムを示し、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基であり；Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、及びＲ5のうち少なくとも一つは、以下の式：
−Ｏ−Ｒ6−Ｘａ−Ａ
で表される基を示し、残余の基は、水素原子、ハロゲン原子、炭素数１〜４のアルキル基又は炭素数１〜４のアルコキシ基を示し；Ｒ6は、炭素数１から１６の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｘａは、Ｏ又はＣＯＮＲｃ（ここで、Ｒｃは、水素原子又は炭素数１〜４のアルキル基を示す）を示し、
Ａは、式（１）〜式（１１）のいずれかを表し、
【化３５】
2019198833.tif 000369
（ここで、Ｒ7、Ｒ8及びＲ9は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜６の直鎖又は分岐鎖のアルキル基、又は置換基を有してもよいアリール基を示し、Ｒ10は、単結合又は炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示し、Ｒ11、Ｒ12及びＲ13は、同じでも異なってもよく、炭素数１〜３の直鎖又は分岐鎖のアルキレン基を示す。）
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項５】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｖ）
【化３６】
2019198833.tif 000370
［式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基、クロロ基であり；Ｒａ、Ｒｂ及びＲｃは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基、水素原子又は電子吸引性基を示し、かつＲａ、Ｒｂ及びＲｃの少なくとも１つは脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；環Ａ、Ｂ及びＣは独立してそれぞれ電子吸引性基を有していてもよい］、又は
一般式（Ｖ’）：
【化３７】
2019198833.tif 000371
[式中、環Ａは芳香族環を示し；Ｙはヒドロキシル基、ブロモ基又はクロロ基であり；ｎは１〜１９の整数を表し；Ｒｃ’は脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基であり；環Ａ，Ｂ及びＣは独立してそれぞれ脂肪族炭化水素基を有する有機基及び電子吸引性基から選ばれる１種以上を有してもよく；環Ａが複数存在する場合の各環Ａはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｙが複数存在する場合の各Ｙはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｒｃ’が複数存在する場合の各Ｒｃ’はそれぞれ同一でも異なっていてもよい］、
ここで、脂肪族炭化水素基を有する２価の有機基は、式（ａ）：
【化３８】
2019198833.tif 000372
（式中、Ｘａは存在しないか、又は−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−あるいは−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒｄは炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；ｋ1は１〜１０の整数を示し；Ｒｄが複数存在する場合の各Ｒｄはそれぞれ同一でも異なっていてもよく；Ｘａが複数存在する場合の各Ｘａはそれぞれ同一でも異なっていてもよい）で表される基であり、
脂肪族炭化水素基を有する有機基は、フルオレン化合物の２位及び／又は７位に存在する、式（ｂ）：
【化３９】
2019198833.tif 000373
（式中、＊は結合位置を示し；Ｘ1が−Ｏ−であり；Ｒ1が炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；ｍ1が１である）で表される基、
式（ｃ）：
【化４０】
2019198833.tif 000374
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ2、Ｘ2’、Ｘ2’’及びＸ2’’’が−Ｏ−であり；Ｒ２及びＲ４は独立してそれぞれ炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基であり；Ｒ３は炭素数５〜６０の脂肪族炭化水素基を有する有機基であり；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4が１であり；ｍ2が１である）で表される基、及び
式（ｄ）：
【化４１】
2019198833.tif 000375
（式中、*は結合位置を示し；Ｘ8が−Ｏ−を示し；ｍ3が２又は３であり；ｎ5が１であり；ｎ6が３であり；Ｘ7が−Ｏ−であり；ｍ3個のＲ12が独立してそれぞれ炭素数４〜３０のアルキル基である）で表される基からなる群より選ばれる１種以上の基である、
で表されるフルオレン化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチドの合成方法。
【請求項６】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｗ）
【化４２】
2019198833.tif 000376
［式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；Ｒaは、
式（ａ）：
【化４３】
2019198833.tif 000377
［式中、＊は、結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又はＣＯＮＨ−を示し；Ｒ1及びｍ1個のＲ2は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示し；かつＲ3は、水素原子、又は式（Ｗ’）：
【化４４】
2019198833.tif 000378
（式中、Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；＊は、結合位置を示し；ｎ個のＲbは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す）で表される基である。］で表される基；
式（ｂ）：
【化４５】
2019198833.tif 000379
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１又は２を示し；ｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ4及びｍ2個のＲ6は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ5は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基；
式（ｃ）：
【化４６】
2019198833.tif 000380
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；ｍ3個のＸ3は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；かつｍ3個のＲ7は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基；及び
式（ｄ）：
【化４７】
2019198833.tif 000381
（式中、＊は、結合位置を示し；ｎ7個のＸ4は、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−，−Ｓ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；Ｒ8は、２価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7個のＲ9は、独立してそれぞれ、１価の脂肪族炭化水素基を示し；ｎ7は、１〜５の整数を示し；かつＡｒは、アリーレン基を示す。）で表される基からなる群より選ばれる脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、当該有機基中の総炭素数が３０以上であり；ｎ個のＲｂは、独立してそれぞれ、炭素数１〜６のアルコキシ基、ハロゲン原子、又は１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい炭素数１〜６のアルキル基を示し；かつｎは、０〜４の整数を示す。］
で表されるベンジル化合物、
（なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチドの合成方法。
【請求項７】
前記液相ペプチド合成用担体が、
一般式（Ｘ）
【化４８】
2019198833.tif 000382
［式中、Ｙは、ヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；ｋ及びｌは、独立してそれぞれ、０〜５の整数を示し、ただし、ｋ＋ｌは０ではなく；ｋ個のＲa及びｌ個のＲbは、独立してそれぞれ、
式（ａ）：
【化４９】
2019198833.tif 000383
（式中、*は結合位置を示し；ｍ1は、１〜１０の整数を示し；ｍ1個のＸ1は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ1個のＲ1は、独立してそれぞれ、炭素数５以上の２価の脂肪族炭化水素基を示す。）で表される基、
式（ｂ）：
【化５０】
2019198833.tif 000384
（式中、*は結合位置を示し；ｍ2は、１〜２の整数を示し；ｍ2個のｎ1、ｎ2、ｎ3及びｎ4は、独立してそれぞれ、０〜２の整数を示し；ｍ2個のＸ2、ｍ2個のＸ2’、ｍ2個のＸ2’’’及びｍ2個のＸ2’’は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ2個のＲ2及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示し；Ｒ3は、炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す。）
で表される基、及び
式（ｅ）：
【化５１】
2019198833.tif 000385
（式中、*は結合位置を示し；ｍ3は、０〜１５の整数を示し；ｎ5は０〜１１の整数を示し；ｎ6は０〜５の整数を示し；Ｘ2は存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨＣＯ−若しくは−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＸ7は、独立してそれぞれ、存在しないか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−，−ＣＯＯ−，−ＯＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−又は−ＣＯＮＨ−を示し；ｍ3個のＲ12は、独立してそれぞれ、水素原子、メチル基又は炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を示す）で表される基
からなる群より選ばれる炭素数５以上の脂肪族炭化水素基を有する有機基を示し、ここで、ｋ＋ｌ個の脂肪族炭化水素基を有する有機基における、全脂肪族炭化水素基の合計の炭素数が１６以上であり；環ＡはＲaに加えてさらに置換基を有していてもよく；環ＢはＲbに加えてさらに置換基を有していてもよい。］
で表されるジフェニルメチル化合物；
又は、
一般式（Y）
【化５２】
2019198833.tif 000386
[式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；環Ａは、Ｒ1，ｋ個のＱＲa、及びＣ（Ｘ）（Ｙ）Ｚに加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつＺは、水素原子又は式（ａ）：
【化５３】
2019198833.tif 000387
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、独立してそれぞれ、単結合を示すか、あるいは−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−，−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−又は−ＮＨ−を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらにハロゲン原子、１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルキル基、及び１個以上のハロゲン原子により置換されていてもよいＣ１−６アルコキシ基からなる群より選ばれる１以上の置換基を有していてもよい）で表される基を示し；
前記Ｒa及びＲbにおける分岐鎖を１以上有する脂肪族炭化水素基を少なくとも１つ有し、総分岐鎖数が３以上であって、かつ総炭素数１４以上３００以下である有機基が、式（ｂ）：
【化５４】
2019198833.tif 000388
（式中、＊は、隣接原子との結合位置を示し；Ｒ3及びＲ4は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基をしめし；Ｘ1は、単結合、Ｃ１−４アルキレン基又は酸素原子を示す。但し、Ｒ3及びＲ4がともに水素原子であることはない。）で表される同一又は異なる２価の基を３以上有する基である。］
で表される分岐鎖含有芳香族化合物；
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項８】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化５５】
2019198833.tif 000389
（式中、Ｘはハロゲンであり、Ｙは８〜１２の整数であり、Ｚは１７〜２９の整数である。）、
【化５６】
2019198833.tif 000390
（式中、Ｘは、それぞれ独立に７〜２１の整数である。）、
【化５７】
2019198833.tif 000391
（式中、Ｘは、それぞれ独立に１１〜２９の整数である。）、及び
【化５８】
2019198833.tif 000392
［式中、ｋ個のＱは、独立してそれぞれ−Ｏ−を示し；ｋ個のＲaは、独立してそれぞれ、下記式（Ｚ）：
【化５９】
2019198833.tif 000393
［式中、＊はＱとの結合位置を示し；ｎ0は２〜４０の整数を示し；ｎ0個のＲ5及びＲ6は、独立してそれぞれ、水素原子又はＣ１−４アルキル基（但し同時に水素原子になることは無く）を示し；ｎ0個のＸ２は、独立してそれぞれ、単結合又はＣ１−４アルキレン基を示し；かつＲ7は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し；Ｒ8は、Ｃ１−４アルキル基を示す］で表される基であり；ｋは、１〜４の整数を示し；Ｒ1は、水素原子であるか、あるいはＺが下記式（ａ）で表される基である場合には、Ｒ2と一緒になって単結合を示して、環Ｂとともにフルオレン環を形成していてもよく；Ｘは、水素原子又はフェニル基を示し；Ｙはヒドロキシル基又は−ＮＨＲ基（Ｒは水素原子、アルキル基又はアラルキル基を示す）を示し；かつ
Ｚは、水素原子又は式（ａ）：
【化６０】
2019198833.tif 000394
（式中、＊は結合位置を示し；ｍは、０〜４の整数を示し；ｍ個のＱは、独立してそれぞれ−Ｏ−を示し；ｍ個のＲbは、独立してそれぞれ、上記式（Ｚ）である基を示し；Ｒ2は、水素原子を示すか、又はＲ1と一緒になって単結合を示して、環Ａと共にフルオレン環を形成してもよく；かつ環Ｂは、ｍ個のＱＲb、及びＲ2に加えて、さらに１個以上のハロゲン原子で置換されていてもよい）で表される基である］で表される分岐鎖含有芳香族化合物、
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項９】
前記液相ペプチド合成用担体が、
下記の構造を有する化合物：
【化６１】
2019198833.tif 000395
（式中、Ｒ1及びＲ3は、炭素数が１８〜２２のアルコキシ基であり、ＲＹは、下記式で表され、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する基である、
【化６２】
2019198833.tif 000396
（ここでＲ7は水素原子、炭素数１〜６のアルキル基を表す））、
なお、上記式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
で表される化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１０】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化６３】
2019198833.tif 000397
（３，４，５−トリオクタデシルオキシベンジルアルコール）、
【化６４】
2019198833.tif 000398
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、
【化６５】
2019198833.tif 000399
（２，４−ジドコシルオキシベンズアルデヒド）、
【化６６】
2019198833.tif 000400
（２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、
【化６７】
2019198833.tif 000401
（Ｎ−エチル−２，４−ジドコシルオキシベンジルアミン）、
【化６８】
2019198833.tif 000402
（３，５−ジドコシルオキシベンジルアルコール）、
【化６９】
2019198833.tif 000403
（２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）
【化７０】
2019198833.tif 000404
（２，４−ジ（１１’−t−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアルコール）
【化７１】
2019198833.tif 000405
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである。）
【化７２】
2019198833.tif 000406
（２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジル）−４−メトキシベンジルアルコール）、
【化７３】
2019198833.tif 000407
（ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、
【化７４】
2019198833.tif 000408
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、
【化７５】
2019198833.tif 000409
（３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアルコール）、
【化７６】
2019198833.tif 000410
（ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）、
及び
【化７７】
2019198833.tif 000411
（Ｎ−エチル−ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチルアミン）
（なお、上記各式は、アミノ酸、ペプチド又はアミノ酸アミドのカルボキシル基、アミノ基、チオール基又は水酸基、あるいはリンカーに結合する前の状態で示している）、
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１１】
前記液相ペプチド合成用担体が、
【化７８】
2019198833.tif 000412
（式中、Ｘは、Ｆ又はＣｌである）、
【化７９】
2019198833.tif 000413
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−トリイソプロピルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、
【化８０】
2019198833.tif 000414
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（１１’−ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシウンデシルオキシ）ベンジルアミン）、
【化８１】
2019198833.tif 000415
（Ｎ−エチル−２−（３’，４’，５’−トリオクタデシルオキシベンジルオキシ）−４−メトキシベンジルアミン）、
【化８２】
2019198833.tif 000416
（Ｎ−エチル−ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミン）、
【化８３】
2019198833.tif 000417
（２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）、及び
【化８４】
2019198833.tif 000418
（Ｎ−エチル−２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミン）
（なお、上記各式は、アミノ酸又はペプチドのカルボキシル基に結合する前の状態で示している）
からなる群より選ばれる化合物に由来する担体である請求項１に記載のペプチド合成方法。
【請求項１２】
工程ａにおいて、担体保護アミノ酸、担体保護ペプチド又は担体保護アミノ酸アミドと、Ｎ−Ｆｍｏｃ保護アミノ酸又はＮ−Ｆｍｏｃ保護ペプチドとの縮合を縮合剤の存在下で行う、請求項１〜１１のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１３】
前記有機溶媒又は有機溶媒の混合液が少なくとも一つの水溶性有機溶媒を含む、請求項１〜１２のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１４】
前記有機溶媒又は有機溶媒の混合液が、ＴＨＦ、ＤＭＦ、シクロヘキサン、ＣＰＭＥ，ＭＴＢＥ、2−メチルＴＨＦ、４−メチルＴＨＰ、酢酸イソプロピル、Ｎ−メチルピロリドン及びＤＣＭからなる群より選ばれる少なくとも一つの有機溶媒又それらの２以上の混合液である、請求項１〜１３のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１５】
前記２価以上の水溶性アミンが、１級又は２級のアミノ基を少なくとも１つ持つ２価以上の水溶性アミンである、請求項１〜１４のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１６】
前記２価以上の水溶性アミンが、１−メチルピペラジン、４−アミノピペリジン、ジエチレントリアミン、トリアミノエチルアミン、１−エチルピペラジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン、エチレンジアミン及びピペラジンからなる群より選ばれる、請求項１５に記載のペプチド合成方法。
【請求項１７】
工程ｂにおける２価以上の水溶性アミンのアミン当量が、工程ａの縮合反応後に理論上残存するアミノ酸当量に対して１〜１０当量の量である、請求項１〜１６のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１８】
工程ｃにおける２価以上の水溶性アミンのアミン当量が、系に存在するＦｍｏｃ基の量に対して、５〜３０当量である、請求項１〜１７のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項１９】
工程ｄの酸性水溶液のｐＨが、１〜５である、請求項１〜１８のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項２０】
前記工程より得られた担体保護ペプチドを用いて、前記工程の繰り返しを１回以上行うことを含む、請求項１〜１９のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項２１】
前記工程をワンポットで行う、請求項１〜２０のいずれか一つに記載のペプチド合成方法。
【請求項２２】
以下の配列：Ｈ−ｄＡｒｇ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｔｈｉ−Ｓｅｒ−ｄＴｉｃ−Ｏｉｃ−Ａｒｇ―ＯＨのペプチドを合成するための、請求項１〜２１のいずれか一つに記載のペプチド合成方法の使用。
【国際調査報告】
2019198833.tif 000419
2019198833.tif 000420