(57)【要約】本発明は、簡便で、短時間でかつ高い放射化学的収率で標識化できる方法で、そして、標識化後、直ちに製剤化を行えるような方法で、放射標識されたアリール化合物を製造することを目的とする。  本発明は、アリールボロン酸化合物（ＩＩ）を、アルカリ金属ヨウ化物、アルカリ金属臭化物、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される酸化剤の存在下、水中で、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉおよび１３１Ｉから選択される放射性核種と反応させることを特徴とする、放射標識されたアリール化合物（Ｉ）の製造方法に関する。2019027059.tif 000022［式中、各記号は本明細書中で定義した通りである。］で表される。
2019027059.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＩ）：
【化１】
2019027059.tif 000016
［式中、
Ａｒは、置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基を示し、
Ｙは、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）またはそのエステル基を示す。］
で表されるアリールボロン酸化合物またはその塩を、アルカリ金属ヨウ化物、アルカリ金属臭化物、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される酸化剤の存在下、水中で、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉおよび１３１Ｉから選択される放射性核種と反応させることを特徴とする、式（Ｉ）：
【化２】
2019027059.tif 000017
［式中、
Ａｒは、前記と同義であり、
Ｘは、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉを示す。］
で表される放射標識されたアリール化合物またはその塩の製造方法。
【請求項２】
反応が有機溶媒を含まない系で行われる、請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
反応が室温で行われる、請求項１または２記載の製造方法。
【請求項４】
放射性核種が２１１Ａｔまたは２１０Ａｔであり、かつ酸化剤がヨウ化ナトリウム、臭化ナトリウム、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
放射性核種が１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉであり、かつ酸化剤がＮ−ブロモスクシンイミドおよびＮ−クロロスクシンイミドから選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項６】
Ｙが、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）である、請求項１〜５のいずれかに記載の製造方法。
【請求項７】
Ａｒで示される置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基における置換基が、標的分子に対して特異的に結合可能な基である、請求項１〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項８】
標的分子が、がん細胞に特異的にまたは過剰に発現している抗原、トランスポーター、受容体、酵素または遺伝子である、請求項７記載の製造方法。
【請求項９】
Ａｒが、式：
【化３】
2019027059.tif 000018
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基、または式：
【化４】
2019027059.tif 000019
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である、請求項１〜８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１０】
Ａｒが、式：
【化５】
2019027059.tif 000020
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基、または式：
【化６】
2019027059.tif 000021
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である、請求項１〜８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１１】
式（ＩＩ）で表されるアリールボロン酸化合物が、４−ボロノフェニルアラニン、４−ボロノ−２−フルオロフェニルアラニンまたは３−ボロノフェニルアラニンであり、かつ式（Ｉ）で表される放射標識されたアリール化合物が、４−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、４−アスタト（２１１Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニンまたは３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニンである、請求項１〜８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１２】
３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニンまたはその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、がんのＲＩ内用療法や診断に使用可能な放射標識されたアリール化合物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
α線、β線、γ線等を放出する放射性核種を利用したがんのＲＩ内用療法や診断は、放射性核種で標識された薬剤が、標的分子、即ち、がん細胞に特異的または過剰発現している分子に対して特異的に結合することを利用したものであり、既に臨床適用されている。例えば、Ｎａ１３１Ｉが甲状腺がんの治療に、また２２３ＲａＣｌ２が前立腺がん骨転移の治療に適用されている。
放射性核種の１種である２１１Ａｔの適用は、新たながんのＲＩ内用療法として期待されている（例えば、４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニン（非特許文献１）、Ｎａ２１１Ａｔ等）。２１１Ａｔは、サイクロトロン等の加速器を用いて製造される放射性核種であり、半減期が７．２時間と短い。従って、２１１Ａｔの製造、薬剤の２１１Ａｔによる標識化、製剤化、がん患者への投与、ＲＩ内用療法までを迅速に行う必要がある。特に、標識化および次の製剤化は、簡便で短時間で行うことが要求されるので、標識化後、直ちに製剤化を行うことが望ましい。標識化された薬剤は、静脈投与のために注射剤に製剤化されるので、標識化後、直ちに製剤化できる点から、標識化を、有機溶媒を使用せずに水のみの溶媒で行うこと、有毒な試薬を使用しないこと、等が望ましい。診断用の１２３Ｉも半減期が１３．２３時間と比較的短く、２１１Ａｔと同様に標識化および次の製剤化は、簡便で短時間で行うことが要求される。【０００３】
非特許文献１には、４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニンが、脳腫瘍のＲＩ内用療法に使用できること、および前駆体であるＮ−Ｂｏｃ−４−トリブチルスタニル−Ｌ−フェニルアラニンを、非特許文献２に記載の方法で求電子脱スタニル化して、放射化学的収率３５−５０％で製造されること、の記載がある。しかし、前駆体がＮ−Ｂｏｃ体であるため、水のみの溶媒では前駆体を溶解できず、有機溶媒の使用はその留去が必要となり、また、求電子脱スタニル化後に脱Ｂｏｃ工程が必要となる。加えて、非特許文献２にはそのような方法は具体的には記載がなく、ＣｕＳＯ４、ＳｎＳＯ４および酸存在下、１２０℃、６０分で、４−ヨード−Ｌ−フェニルアラニンをハロゲン交換反応により２１１Ａｔで標識化することが具体的に記載されているのみである。当該方法では、有毒なＣｕやＳｎの除去が必要となり、１２０℃、６０分の反応は簡便で短時間な方法ではない。このように上記の方法による標識化は望ましい方法ではなく、標識化および次の製剤化を、簡便で短時間で行うことができない。また、放射化学的収率は低く、全く満足できるものではない。【０００４】
非特許文献３には、アリールボロン酸またはそのエステルを、水／メタノール中、Ｃｕ２Ｏ、Ｃｕ（ＯＣＯＣＦ３）２等のＣｕ触媒および１，１０−フェナントロリンの存在下、８０℃で求電子置換反応によりＮａ１２３Ｉで標識化することが記載されている。当該方法は、メタノールおよびＣｕ触媒の使用、高温での反応の点から、望ましい方法ではない。また、放射化学的収率も高々８７％と決して満足できるものではない。また、当該文献には、アリールボロン酸またはそのエステルを、水／テトラヒドロフラン中、クロラミン−Ｔ存在下、求電子置換反応によりＮａ１２３Ｉで標識化することも記載されている。当該方法は、テトラヒドロフランの使用の点から、望ましい方法ではなく、また、電子欠損アレーンには適用できない。【０００５】
特許文献１〜４には、アリールトリアルキル錫を求電子脱スタニル反応によりＮａ１２３Ｉ、Ｎａ２１１Ａｔ等で標識化することが記載されているが、いずれも有機溶媒を使用しており、また、有毒なＳｎを使用していることから、望ましい方法ではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】ＵＳ４８２６６７２
【特許文献２】ＵＳ５０７７０３５
【特許文献３】特表２００１−５０３４１２号公報
【特許文献４】特表２００９−５２１４６９号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｎｕｋｌｅａｒｍｅｄｉｚｉｎ，２０１３，ｖｏｌ．５２，ｐｐ．２１２−２１
【非特許文献２】Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｓｏｔｏｐｅｓ，２０１０，ｖｏｌ．６８，ｐｐ．１０６０−１０６５
【非特許文献３】Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２０１６，ｖｏｌ．５２，ｐｐ．１３２７７−１３２８０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、簡便で、短時間でかつ高い放射化学的収率で標識化できる方法で、そして、標識化後、直ちに製剤化を行えるような方法で、放射標識されたアリール化合物を製造することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を行い、以下に述べる方法が、簡便で、短時間でかつ高い放射化学的収率で放射標識されたアリール化合物を製造することができ、そして、標識化後、直ちに製剤化を行えることを見出し、本発明を完成するに至った。【００１０】
すなわち、本発明は以下の通りである。
［１］  式（ＩＩ）：【００１１】
【化１】
2019027059.tif 000003
【００１２】
［式中、
Ａｒは、置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基を示し、
Ｙは、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）またはそのエステル基を示す。］
で表されるアリールボロン酸化合物またはその塩（以下、アリールボロン酸化合物（ＩＩ）ともいう）を、アルカリ金属ヨウ化物、アルカリ金属臭化物、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される酸化剤の存在下、水中で、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉおよび１３１Ｉから選択される放射性核種と反応させることを特徴とする、式（Ｉ）：【００１３】
【化２】
2019027059.tif 000004
【００１４】
［式中、
Ａｒは、前記と同義であり、
Ｘは、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉを示す。］
で表される放射標識されたアリール化合物またはその塩（以下、放射標識されたアリール化合物（Ｉ）ともいう）の製造方法。
［２］  反応が有機溶媒を含まない系で行われる、上記［１］記載の製造方法。
［３］  反応が室温で行われる、上記［１］または［２］記載の製造方法。
［４］  放射性核種が２１１Ａｔまたは２１０Ａｔであり、かつ酸化剤がヨウ化ナトリウム、臭化ナトリウム、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される、上記［１］〜［３］のいずれかに記載の製造方法。
［５］  放射性核種が１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉであり、かつ酸化剤がＮ−ブロモスクシンイミドおよびＮ−クロロスクシンイミドから選択される上記［１］〜［３］のいずれかに記載の製造方法。
［６］  Ｙが、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）である、上記［１］〜［５］のいずれかに記載の製造方法。
［７］  Ａｒで示される置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基における置換基が、標的分子に対して特異的に結合可能な基である、上記［１］〜［６］のいずれかに記載の製造方法。
［８］  標的分子が、がん細胞に特異的にまたは過剰に発現している抗原、トランスポーター、受容体、酵素または遺伝子である、上記［７］記載の製造方法。
［９］  Ａｒが、式：【００１５】
【化３】
2019027059.tif 000005
【００１６】
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基、または式：【００１７】
【化４】
2019027059.tif 000006
【００１８】
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の製造方法。
［１０］  Ａｒが、式：【００１９】
【化５】
2019027059.tif 000007
【００２０】
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基、または式：【００２１】
【化６】
2019027059.tif 000008
【００２２】
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の製造方法。【００２３】
［１１］  式（ＩＩ）で表されるアリールボロン酸化合物が、４−ボロノフェニルアラニン、４−ボロノ−２−フルオロフェニルアラニンまたは３−ボロノフェニルアラニンであり、かつ式（Ｉ）で表される放射標識されたアリール化合物が、４−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、４−アスタト（２１１Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニンまたは３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニンである、上記［１］〜［８］のいずれかに記載の製造方法。
［１２］  ３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニンまたはその塩。
【発明の効果】
【００２４】
本発明の製造方法によれば、簡便で、短時間でかつ高い放射化学的収率で放射標識されたアリール化合物（Ｉ）を製造することができ、そして、標識化後、直ちに製剤化を行うことができる。従って、標識化および製剤化を簡便で短時間で行えるので、放射性核種の調製からがんのＲＩ内用療法または診断までを迅速に行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】図１は、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示す。
【図２】図２は、実施例１の反応液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示す。
【図３】図３は、実施例２の反応液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示す。
【図４】図４は、実施例３の反応液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示す。
【図５】図５は、実施例４の反応液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示す。
【図６】図６ａは、Ｎａ１２３Ｉ水溶液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示し、図６ｂは、実施例５の反応液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示す。
【図７】図７は、実施例６の反応液のセルロースアセテート膜電気泳動を示す。
【図８】図８は、実施例７の反応液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を示す。
【図９】図９は、実施例１０における、４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅおよび３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅのラット由来Ｃ６グリオーマ細胞取り込み比較を示す。
【図１０】図１０は、実施例１１における、４−２１１Ａｔ−ＰｈｅのＣ６グリオーマ移植ラットＳＰＥＣＴイメージング（投与後３０分および３時間点）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、本発明を詳細に説明する。
本明細書中、「Ｃ６−１４アリール基」としては、例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントリル、２−アントリル、９−アントリルが挙げられる。
本明細書中、「ハロゲン原子」としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。
本明細書中、「Ｃ１−６アルキル基」としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチルが挙げられる。
【００２７】
式（Ｉ）および（ＩＩ）中の各記号を以下に説明する。
式（Ｉ）および（ＩＩ）において、Ａｒは、置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基を示す。
Ａｒで示される「置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基」における「Ｃ６−１４アリール基」としては、フェニルが好ましい。
Ａｒで示される「置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基」における「置換基」としては、標的分子に対して特異的に結合可能な基が挙げられる。ここで、標的分子としては、がん細胞に特異的にまたは過剰に発現している抗原、トランスポーター、受容体、酵素、遺伝子等が挙げられる。このような「置換基」としては、例えば、カルボキシ基およびアミノ基で置換されたＣ１−６アルキル基（好ましくは、メチル、エチル）；カルボキシ基；アミノ基；グアニジノ基；トロパン骨格を有する基；脂肪酸残基（脂肪酸から任意の１個の水素原子を除いた基）；ペプチド、タンパク、抗体、核酸等の生体関連物質の残基（生体関連物質から任意の１個の水素原子を除いた基）；等が挙げられる。
【００２８】
Ａｒは、好ましくは、置換基を有するＣ６−１４アリール基であり、より好ましくは、置換基を有するフェニル基であり、さらに好ましくは、フェニル基を有するアミノ酸由来の残基またはフェニル基を有するペプチド由来の残基である。
ここで、上記「フェニル基を有するアミノ酸由来の残基」とは、フェニル基を有するアミノ酸（例、ハロゲン原子等で置換されていてもよいフェニルアラニンまたはフェニルグリシン等）からフェニル基上の１個の水素原子を除いた基を意味する。
好適な具体例としては、式：
【００２９】
【化７】
2019027059.tif 000009
【００３０】
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基である。
より好ましくは、式：
【００３１】
【化８】
2019027059.tif 000010
【００３２】
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基である。
別の実施態様として、より好ましくは、式：
【００３３】
【化９】
2019027059.tif 000011
【００３４】
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基である。
【００３５】
上記「フェニル基を有するペプチド由来の残基」とは、フェニル基を有するペプチド（例、ハロゲン原子等で置換されていてもよいフェニルアラニンまたはフェニルグリシン等を含むペプチド）からフェニル基上の１個の水素原子を除いた基を意味する。
好適な具体例としては、式：
【００３６】
【化１０】
2019027059.tif 000012
【００３７】
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である。
より好ましくは、式：
【００３８】
【化１１】
2019027059.tif 000013
【００３９】
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である。
別の実施態様として、より好ましくは、式：
【００４０】
【化１２】
2019027059.tif 000014
【００４１】
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である。
【００４２】
Ｒ２またはＲ３で示される「ハロゲン原子」としては、フッ素原子が好ましい。
Ｒ２は、好ましくは、フッ素原子である。
ｎは、好ましくは、０または１である。
Ｒ３は、好ましくは、水素原子またはフッ素原子である。
ｍは、好ましくは、１である。
【００４３】
式（ＩＩ）において、Ｙは、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）またはそのエステル基を示す。
Ｙで示される「ボロノ基のエステル基」としては、以下のエステル基が挙げられる。
【００４４】
【化１３】
2019027059.tif 000015
【００４５】
［式中、Ｒ１は、Ｃ１−６アルキル基を示す。］
Ｙは、好ましくは、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）である。
【００４６】
式（Ｉ）において、Ｘは、放射性核種である２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉを示す。
【００４７】
放射標識されたアリール化合物（Ｉ）またはアリールボロン酸化合物（ＩＩ）が塩である場合、このような塩としては、例えば、金属塩（例、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩などのアルカリ土類金属塩）、アンモニウム塩、有機塩基（例、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、２，６−ルチジン）との塩、無機酸（例、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸）との塩、有機酸（例、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸）との塩などが挙げられる。
【００４８】
本発明では、アリールボロン酸化合物（ＩＩ）を、アルカリ金属ヨウ化物、アルカリ金属臭化物、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される酸化剤の存在下、水中で、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉおよび１３１Ｉから選択される放射性核種と反応させて、放射標識されたアリール化合物（Ｉ）を製造する。
【００４９】
アリールボロン酸化合物（ＩＩ）は、好ましくは、ボロノ置換フェニル基を有するアミノ酸、または当該アミノ酸を含むペプチドであり、より好ましくは、ボロノ置換フェニル基を有するアミノ酸である。ボロノ置換フェニル基は更にハロゲン等の置換基を有していてもよい。
【００５０】
アリールボロン酸化合物（ＩＩ）は、より好ましくは、４−ボロノフェニルアラニン、４−ボロノ−２−フルオロフェニルアラニン、４−ボロノフェニルグリシンまたは４−ボロノ−２−フルオロフェニルグリシンであり、特に好ましくは、４−ボロノフェニルアラニンまたは４−ボロノ−２−フルオロフェニルアラニンである。
【００５１】
別の実施態様として、アリールボロン酸化合物（ＩＩ）は、より好ましくは、４−ボロノフェニルアラニン、４−ボロノ−２−フルオロフェニルアラニン、４−ボロノフェニルグリシン、４−ボロノ−２−フルオロフェニルグリシン、３−ボロノフェニルアラニン、３−ボロノフェニルグリシンであり、特に好ましくは、３−ボロノフェニルアラニン、４−ボロノ−２−フルオロフェニルアラニンまたは３−ボロノフェニルアラニンである。
【００５２】
アリールボロン酸化合物（ＩＩ）は上記に例示された化合物に限らず、本発明のアリール化合物の放射標識化方法は、種々のアリールボロン酸化合物、例えば、ボロノヒドロキシベンゼン、ボロノカルボキシベンゼン（カルボキシフェニルボロン酸）にも適用できる。
【００５３】
アリールボロン酸化合物（ＩＩ）が、上記ボロノ置換フェニル基を有するアミノ酸の場合、通常、水溶液の状態で使用され、好ましくは、炭酸水素ナトリウム水溶液等のアルカリ水溶液に溶解した溶液の状態で使用される。
【００５４】
アルカリ金属ヨウ化物としては、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリウム等が挙げられ、中でも、ヨウ化ナトリウムが好ましい。
アルカリ金属臭化物としては、臭化ナトリウム、臭化カリウム等が挙げられ、中でも、臭化ナトリウムが好ましい。
【００５５】
放射性核種と酸化剤の好適な組み合わせとしては、
（１）放射性核種が２１１Ａｔまたは２１０Ａｔであり、かつ酸化剤がヨウ化ナトリウム、臭化ナトリウム、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される組み合わせ；
（２）放射性核種が１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉであり、かつ酸化剤がＮ−ブロモスクシンイミドおよびＮ−クロロスクシンイミドから選択される組み合わせ；
が挙げられる。酸化剤は、単独でも２種以上を併用してもよい。酸化剤は、通常、水溶液の状態で使用される。
【００５６】
酸化剤は、放射性核種を酸化できる量を使用すればよく、放射性核種に対して、通常大過剰に使用されるが、反応効率及び経済効率の点から、好ましくは０．０００１〜０．２ｍｏｌ／Ｌ、より好ましくは０．００１〜０．１ｍｏｌ／Ｌの濃度で使用される。
【００５７】
放射性核種は、通常、水溶液の状態で反応に使用されるが、安定化の点から、好ましくは、炭酸水素ナトリウム水溶液等のアルカリ水溶液に溶解した溶液の状態で使用される。
放射性核種が２１１Ａｔの場合、サイクロトロンで２８ＭｅＶに加速したヘリウム粒子をビスマスに照射し、２０９Ｂｉ（α，２ｎ）２１１Ａｔの核反応により２１１Ａｔを製造後、ターゲット物質の２０９Ｂｉは加熱溶解し、２１１Ａｔを蒸散させて液体窒素トラップに捕集し、これを水に溶解させることにより、２１１Ａｔ原液を調製し、２１１Ａｔの安定化の目的で炭酸水素ナトリウム水溶液等のアルカリ水溶液を加えて、２１１Ａｔアルカリ水溶液を調製する。
放射性核種が２１０Ａｔの場合、サイクロトロンで２９ＭｅＶ以上に加速したヘリウム粒子をビスマスに照射し、２０９Ｂｉ（α，３ｎ）２１０Ａｔの核反応により２１０Ａｔを製造後、上記と同様の操作を行うことにより、２１０Ａｔ水溶液を調製する。
放射性核種が１２３Ｉの場合、Ｎａ１２３Ｉ水溶液として入手可能である。
放射性核種が１２４Ｉの場合、サイクロトロンで加速したプロトン粒子をテルルに照射し、１２４Ｔｅ（ｐ，ｎ）１２４Ｉの核反応により１２４Ｉを製造後、ターゲット物質の１２４Ｔｅを溶解し、１２４Ｉの水酸化ナトリウム溶液を調製する。
放射性核種が１２５Ｉの場合、Ｎａ１２５Ｉ水溶液として入手可能である。
放射性核種が１３１Ｉの場合、Ｎａ１３１Ｉ水溶液として入手可能である。
２１１Ａｔは半減期が７．２時間、２１０Ａｔは半減期が８．３時間、１２３Ｉは半減期が１３．２時間と短いので、放射性核種は、調製後、直ちに反応に使用する必要がある。一方、１２４Ｉは半減期が４．２日、１２５Ｉは半減期が５９．４日、１３１Ｉは半減期が８．０４日と比較的長い半減期を有するが、これらの放射性核種も、調製後、速やかに反応に使用することが好ましい。
【００５８】
アリールボロン酸化合物（ＩＩ）は、放射性核種に対して、通常大過剰に使用されるが、反応効率及び経済効率の点から、放射性核種１Ｂｑ〜１，０００ＧＢｑに対して、好ましくは０．０００１ｍｏｌ／ｌ〜０．５ｍｏｌ／ｌ、より好ましくは０．００１ｍｏｌ／ｌ〜０．２ｍｏｌ／ｌの濃度で使用される。
【００５９】
上記反応は、アリールボロン酸化合物（ＩＩ）、酸化剤および放射性核種を混合することにより行われ、これらの混合順序に特に制限はない。好ましくは、アリールボロン酸化合物（ＩＩ）水溶液（好ましくは、炭酸水素ナトリウム水溶液）に、放射性核種アルカリ水溶液、次いで酸化剤水溶液を添加する方法、またはアリールボロン酸化合物（ＩＩ）水溶液（好ましくは、炭酸水素ナトリウム水溶液）に、酸化剤水溶液、次いで放射性核種アルカリ水溶液を添加する方法であり、より好ましくは、アリールボロン酸化合物（ＩＩ）水溶液（好ましくは、炭酸水素ナトリウム水溶液）に、放射性核種アルカリ水溶液、次いで酸化剤水溶液を添加する方法である。
【００６０】
上記反応は、水中で行われ、即ち、有機溶媒を含まない系で行われる。
上記反応は、室温下で行われ、具体的には、０℃〜４０℃、好ましくは、１０℃〜３５℃で行われる。本発明の製造方法では、室温下であっても迅速に反応が進行し、短時間で、例えば１分〜３時間、特に１分〜３０分で反応が終了する。
反応の終了は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）分析により、遊離の放射性核種の消失により確認される。
【００６１】
本発明の製造方法では、放射標識されたアリール化合物（Ｉ）は、７５％以上、特に８０％以上、とりわけ９０％以上の高い放射化学的収率で放射標識されたアリール化合物（Ｉ）を得ることができる。
反応終了後、反応液は、有機溶媒や有毒な試薬を含んでいないため、放射標識されたアリール化合物（Ｉ）を単離することなく、直ちに注射剤等に製剤化することができる。
【００６２】
このように、本発明の製造方法では、標識化を簡便で、短時間でかつ高い放射化学的収率で行うことができ、また、有機溶媒や有毒な試薬を使用することがないので、放射性核種の調製から、がんのＲＩ内用療法や診断までを迅速に行うことができる。
【００６３】
このように方法で製造される放射標識されたアリール化合物（Ｉ）は、好ましくは、
４−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、
３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、
４−アスタト（２１１Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−アスタト（２１０Ａｔ）フェニルアラニン、
３−アスタト（２１０Ａｔ）フェニルアラニン、
４−アスタト（２１０Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１２３Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１２３Ｉ）フェニルアラニン、
４−ヨード（１２３Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１２４Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１２４Ｉ）フェニルアラニン、
４−ヨード（１２４Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１２５Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１２５Ｉ）フェニルアラニン、
４−ヨード（１２５Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１３１Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１３１Ｉ）フェニルアラニン、
４−ヨード（１３１Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルグリシン、
３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルグリシン、
４−アスタト（２１１Ａｔ）−２−フルオロフェニルグリシン、
４−アスタト（２１０Ａｔ）フェニルグリシン、
３−アスタト（２１０Ａｔ）フェニルグリシン、
４−アスタト（２１０Ａｔ）−２−フルオロフェニルグリシン、
４−ヨード（１２３Ｉ）フェニルグリシン、
３−ヨード（１２３Ｉ）フェニルグリシン、
４−ヨード（１２３Ｉ）−２−フルオロフェニルグリシン、
４−ヨード（１２４Ｉ）フェニルグリシン、
３−ヨード（１２４Ｉ）フェニルグリシン、
４−ヨード（１２４Ｉ）−２−フルオロフェニルグリシン、
４−ヨード（１２５Ｉ）フェニルグリシン、
３−ヨード（１２５Ｉ）フェニルグリシン、
４−ヨード（１２５Ｉ）−２−フルオロフェニルグリシン、
４−ヨード（１３１Ｉ）フェニルグリシン、
３−ヨード（１３１Ｉ）フェニルグリシン、または
４−ヨード（１３１Ｉ）−２−フルオロフェニルグリシン
であり、より好ましくは、
４−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、
３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、
４−アスタト（２１１Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−アスタト（２１０Ａｔ）フェニルアラニン、
３−アスタト（２１０Ａｔ）フェニルアラニン、
４−アスタト（２１０Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１２３Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１２３Ｉ）フェニルアラニン、
４−ヨード（１２３Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１２４Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１２４Ｉ）フェニルアラニン、
４−ヨード（１２４Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１２５Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１２５Ｉ）フェニルアラニン、
４−ヨード（１２５Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン、
４−ヨード（１３１Ｉ）フェニルアラニン、
３−ヨード（１３１Ｉ）フェニルアラニン、または
４−ヨード（１３１Ｉ）−２−フルオロフェニルアラニン
であり、特に好ましくは、
４−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、
３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、または
４−アスタト（２１１Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニン
である。
【００６４】
放射標識されたアリール化合物（Ｉ）のうち、３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニンは新規な化合物である。当該化合物は、がん細胞における取り込み量が非常に高いので、がんのＲＩ内用療法への適用を特に期待できる。
【実施例】
【００６５】
本発明は、更に以下の実施例によって詳しく説明されるが、これらは単なる例であり、本発明を限定するものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で改変し得る。
以下の実施例、参考例中、放射化学的収率は、以下の式により算出した。
放射化学的収率（％）＝（薄層板又は電気泳動膜上の目的化合物の放射能／薄層板又は電気泳動膜上の全放射能）×１００
薄層板及び電気泳動膜は、ＢＡＳイメージングプレート（ＧＥヘルスケア社製）に載せて露光したのち、このＢＡＳイメージングプレートを画像解析装置（Ｔｙｈｏｏｎ  ＦＬＡ７０００，ＧＥヘルスケア社製）を用いて測定した。データ処理は、ＩｍａｇｅＱｕａｎｔＴＬ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｔｏｏｌｂｏｘ（ＧＥヘルスケア社製）を利用した。【００６６】
参考例１ ２１１Ａｔ水溶液の調製
２１１Ａｔは、サイクロトロンで加速したヘリウム粒子（２８ＭｅＶ）をビスマスに照射し、２０９Ｂｉ（α，２ｎ）２１１Ａｔの核反応により製造した。照射後、ターゲット物質の２０９Ｂｉは加熱溶解し、２１１Ａｔを蒸散させて液体窒素トラップに捕集し、少量の水で溶解した。この２１１Ａｔ原液に７％炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて放射能濃度が約５ＭＢｑ／ｍｌ（製造直後）の２１１Ａｔ水溶液を調製した。２１１Ａｔ水溶液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を図１に示す（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））。２１１ＡｔのスポットはＲｆ＝１．０（８０％）及び０．８９（８％）に検出された。【００６７】
実施例１  ４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニンの合成（酸化剤ＮＣＳ）
４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｂｐａ）を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１０ｍｇ／ｍｌに調製した溶液０．２ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．２ｍｌを加えた後、Ｎ−クロロスクシンイミド（ＮＣＳ）水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）０．０４ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後に薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した（図２）。４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｒｆ＝０．７３）の放射化学的収率は９５％であった。【００６８】
実施例２  ４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニンの合成（酸化剤ＮＢＳ）
４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｂｐａ）を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１０ｍｇ／ｍｌに調製した溶液０．２ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．２ｍｌを加えた後、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）０．０４ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後に薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した（図３）。４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｒｆ＝０．６８）の放射化学的収率は７５．３％であった。【００６９】
実施例３  ４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニンの合成（酸化剤ＮａＩ）
４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｂｐａ）を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１０ｍｇ／ｍｌに調製した溶液０．２ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．２ｍｌを加えた後、ヨウ化ナトリウム（ＮａＩ）水溶液（１０ｍｇ／ｍｌ）０．１ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後に薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した（図４）。４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｒｆ＝０．７９）の放射化学的収率は９０％であった。【００７０】
実施例４  ４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニンの合成（酸化剤ＮａＢｒ）
４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｂｐａ）を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１０ｍｇ／ｍｌに調製した溶液０．２ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．２ｍｌを加えた後、臭化ナトリウム（ＮａＢｒ）水溶液（１０ｍｇ／ｍｌ）０．１ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後に薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した（図５）。４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｒｆ＝０．６３）の放射化学的収率は８４．７％であった。【００７１】
実施例５  ４−１２３Ｉ−Ｌ−フェニルアラニンの合成（酸化剤ＮＢＳ）
４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｂｐａ）を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１０ｍｇ／ｍｌに調製した溶液０．２ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、Ｎａ１２３Ｉ水溶液（７４ＭＢｑ／ｍｌ，５ｍｍｏｌ／ｌ  ＮａＯＨ水溶液）０．２ｍｌを加えた後、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）０．０４ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後に薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した（図６ｂ）。４−１２３Ｉ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｒｆ＝０．７０）の放射化学的収率は９３％であった。Ｎａ１２３Ｉ水溶液の薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を図６ａに示す（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））。【００７２】
参考例２  非放射性ヨウ素を用いる４−ヨード−Ｌ−フェニルアラニンの合成
４−ボロノ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｂｐａ）を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１０ｍｇ／ｍｌに調製した溶液０．３ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、ＮａＩ水溶液（１０ｍｇ／ｍｌ）０．３ｍｌを加えた後、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）水溶液（１０ｍｇ／ｍｌ）０．３ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後に反応液を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：Ｇ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））で分析した結果、Ｒｆ＝０．７に単一のスポットを検出した（紫外光及びヨードバスによる発色）。次にこの反応液を水で１，０００倍希釈し、市販の４−ヨード−Ｌ−フェニルアラニンを対照試料としてアミノ酸分析用ＬＣ−ＭＳで測定した。その結果、生成物は対照試料４−ヨード−Ｌ−フェニルアラニンと同一のリテンションタイムに検出され、Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｍａｓｓも同一であった（理論質量＝２９０．９７５６，Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｍａｓｓ＝２９１．９８３５）。生成物の純度は９８．９％であった。不純物はＬ−フェニルアラニン（１．１％）のみで、４−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン等は検出されなかった。【００７３】
実施例６  ４−２１１Ａｔ−２−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニンの合成（酸化剤ＮＢＳ）
４−ボロノ−２−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニン（ＦＢｐａ）を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して５ｍｇ／ｍｌに調製した溶液０．２ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．１ｍｌを加えた後、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）０．０４ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。１５分後にセルロースアセテート膜電気泳動法により分析した（図７）。４−２１１Ａｔ−２−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニン（Ｒｆ＝０．６８）の放射化学的収率は９２．２％であった。【００７４】
実施例７  ３−２１１Ａｔ−Ｄ，Ｌ−フェニルアラニンの合成
３−ボロノ−Ｄ，Ｌ−フェニルアラニン（３−Ｂｐａ）を１．４％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１０ｍｇ／ｍｌに調整した溶液０．２ｍｌを小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．２ｍｌを加えたのち、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）０．０４ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後にこの反応液を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：シリカゲルＧ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した（図８）。生成した３−２１１Ａｔ−Ｄ，Ｌ−フェニルアラニン（Ｒｆ＝０．７６）の放射化学的収率は９３．３％であった。【００７５】
実施例８  １−２１１Ａｔ−２−ヒドロキシベンゼン
２−ボロノヒドロキシベンゼンを７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して５ｍｇ／ｍｌの濃度に調整した水溶液を小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．２ｍｌを加えたのち、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）０．０４ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後にこの反応液にアスコルビン酸水溶液（３ｍｇ／ｍｌ）を０．０３ｍｌ加えて反応を停止させた。この反応液を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：シリカゲルＧ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した。生成した１−２１１Ａｔ−２−ヒドロキシベンゼン（Ｒｆ＝０．９１）の放射化学的収率は９８．１％であった。従って、本発明のアリール化合物の放射標識化方法が、ボロノフェニルアラニンだけでなく、ボロノヒドロキシベンゼンにも適用できることが示された。【００７６】
実施例９  １−２１１Ａｔ−４−カルボキシベンゼン
４−カルボキシフェニルボロン酸を７％炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解して１６ｍｇ／ｍｌの濃度に調整した水溶液を小ガラスバイアルに注ぎ、参考例１で調製した２１１Ａｔ水溶液（５ＭＢｑ／ｍｌ）０．２ｍｌを加えたのち、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）水溶液（４ｍｇ／ｍｌ）０．０４ｍｌを室温下でゆっくり滴下した。３０分後にこの反応液にアスコルビン酸水溶液（３ｍｇ／ｍｌ）を０．０３ｍｌ加えて反応を停止させた。この反応液を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）（薄層板：シリカゲルＧ６０（メルク社製）、展開溶媒：ＡＣＮ：水：ＴＦＡ（６６：３３：１））により分析した。生成した１−２１１Ａｔ−４−カルボキシベンゼン（Ｒｆ＝０．８１）の放射化学的収率は８７．５％であった。従って、本発明のアリール化合物の放射標識化方法が、ボロノフェニルアラニンだけでなく、ボロノカルボキシベンゼン（カルボキシフェニルボロン酸）にも適用できることが示された。【００７７】
実施例１０  グリオーマ細胞取り込み実験
実施例２で調製した４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニン（４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅ）溶液および実施例７で調製した３−２１１Ａｔ−Ｄ，Ｌ−フェニルアラニン（３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅ）溶液をそれぞれ５ＭＢｑ／２ｍｇ・ｍｌの濃度に調製した。２４ウェルプレートの各ウェルにラット由来Ｃ６グリオーマ細胞を５×１０５個／ｗｅｌｌで播種し、翌日実験に使用した（細胞数：約１×１０６個／ｗｅｌｌ）。実験前にアミノ酸不含のＨＢＳＳ培地（０．５ｍｌ／ｗｅｌｌ）に置換し、このウェルに４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅまたは３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅを各１０μｌ分注し、阻害剤なし群、１％Ｐｈｅ添加群（競合阻害剤）および１００ｍＭ  ＢＣＨ添加群（ＬＡＴ１阻害剤）の３群に分け、３７℃で３０分または６０分間インキュベーションした。インキュベーション終了後に、培養液を除去、ＰＢＳで洗浄の後、細胞を溶解し、細胞内に取り込まれた放射能量を測定した。結果を図９に示す。４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅおよび３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅはいずれも細胞に取り込まれたが、３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅは４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅより細胞取り込みがやや高い傾向を示した。また３０分後に比べて６０分後に細胞取り込みの減少が認められた。競合阻害剤（Ｐｈｅ）は、４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅおよび３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅの細胞取り込みを１／２〜１／３に減少させ、またＬＡＴ１阻害剤（ＢＣＨ）は４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅおよび３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅの細胞取り込みを１／４〜１／８に減少させた。すなわち、４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅおよび３−２１１Ａｔ−ＰｈｅはいずれもＬＡＴ１を介して特異的に細胞に取り込まれていることが示された。従って、４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅおよび３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅは、がんのＲＩ内用療法への適用が期待できることが示された。特に、３−２１１Ａｔ−Ｐｈｅは４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅよりも細胞取り込みが多いので、上記の適用は特に期待できる。【００７８】
実施例１１  ４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニンのＣ６グリオーマ移植ラットＳＰＥＣＴイメージング
実施例２で調製した４−２１１Ａｔ−Ｌ−フェニルアラニン（４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅ）各１ＭＢｑをＣ６グリオーマ移植ラットの尾静脈内に投与しＳＰＥＣＴカメラ（Ｅ−ｃａｍ，シーメンス）で撮像した。本剤投与後３０分および３時間点のＳＰＥＣＴ画像を図１０に示す。いずれの時間点においても、４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅの腫瘍（両脇腹、図中矢頭）への集積が確認された。従って、４−２１１Ａｔ−Ｐｈｅは、がんのＲＩ内用療法や診断への適用が期待できることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００７９】
本発明の製造方法によれば、簡便で、短時間でかつ高い放射化学的収率で放射標識されたアリール化合物（Ｉ）を製造することができ、そして、標識化後、直ちに製剤化を行うことができる。従って、標識化および製剤化を簡便で短時間で行えるので、放射性核種の調製からがんのＲＩ内用療法または診断までを迅速に行うことができる。【００８０】
本出願は、日本で２０１７年８月４日に出願された特願２０１７−１５１６３２号を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含される。
【図１】
2019027059.tif 000023
【図２】
2019027059.tif 000024
【図３】
2019027059.tif 000025
【図４】
2019027059.tif 000026
【図５】
2019027059.tif 000027
【図６】
2019027059.tif 000028
【図７】
2019027059.tif 000029
【図８】
2019027059.tif 000030
【図９】
2019027059.tif 000031
【図１０】
2019027059.tif 000032
【手続補正書】
【提出日】平成30年12月7日(2018.12.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＩ）：
【化１】
2019027059.tif 000033
［式中、
Ａｒは、置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基を示し、
Ｙは、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）またはそのエステル基を示す。］
で表されるアリールボロン酸化合物またはその塩を、アルカリ金属ヨウ化物、アルカリ金属臭化物、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される酸化剤の存在下、水中で、有機溶媒を含まない系で、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉおよび１３１Ｉから選択される放射性核種と反応させることを特徴とする、式（Ｉ）：
【化２】
2019027059.tif 000034
［式中、
Ａｒは、前記と同義であり、
Ｘは、２１１Ａｔ、２１０Ａｔ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉを示す。］
で表される放射標識されたアリール化合物またはその塩の製造方法。
【請求項２】
（削除）
【請求項３】
反応が室温で行われる、請求項１記載の製造方法。
【請求項４】
放射性核種が２１１Ａｔまたは２１０Ａｔであり、かつ酸化剤がヨウ化ナトリウム、臭化ナトリウム、Ｎ−ブロモスクシンイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドおよび過酸化水素から選択される、請求項１または３に記載の製造方法。
【請求項５】
放射性核種が１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉまたは１３１Ｉであり、かつ酸化剤がＮ−ブロモスクシンイミドおよびＮ−クロロスクシンイミドから選択される、請求項１または３に記載の製造方法。
【請求項６】
Ｙが、ボロノ基（−Ｂ（ＯＨ）２）である、請求項１および３〜５のいずれかに記載の製造方法。
【請求項７】
Ａｒで示される置換基を有していてもよいＣ６−１４アリール基における置換基が、標的分子に対して特異的に結合可能な基である、請求項１および３〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項８】
標的分子が、がん細胞に特異的にまたは過剰に発現している抗原、トランスポーター、受容体、酵素または遺伝子である、請求項７記載の製造方法。
【請求項９】
Ａｒが、式：
【化３】
2019027059.tif 000035
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基、または式：
【化４】
2019027059.tif 000036
［式中、
Ｒ２は、ハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
ｎは、０または１〜４の整数を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である、請求項１および３〜８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１０】
Ａｒが、式：
【化５】
2019027059.tif 000037
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される基、または式：
【化６】
2019027059.tif 000038
［式中、
Ｒ３は、水素原子またはハロゲン原子を示し、
ｍは、０または１を示し、
＊は、ＸまたはＹとの結合部位を示す。］
で表される部分構造を有するペプチド由来の基である、請求項１および３〜８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１１】
式（ＩＩ）で表されるアリールボロン酸化合物が、４−ボロノフェニルアラニン、４−ボロノ−２−フルオロフェニルアラニンまたは３−ボロノフェニルアラニンであり、かつ式（Ｉ）で表される放射標識されたアリール化合物が、４−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニン、４−アスタト（２１１Ａｔ）−２−フルオロフェニルアラニンまたは３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニンである、請求項１および３〜８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１２】
３−アスタト（２１１Ａｔ）フェニルアラニンまたはその塩。
【国際調査報告】
2019027059.tif 000039
2019027059.tif 000040
2019027059.tif 000041
2019027059.tif 000042