(57)【要約】  本発明は、抗炎症作用を有する組成物を提供することを目的とする。  本発明の抗炎症用組成物は、式１で表される化合物を有効成分として含有する。式１において、Ｒ１は水素又はヒドロキシ基であり、Ａは水酸基又はメチル基により置換されていてもよいフェニル基、或いは、水酸基及びメチレン基により置換されたシクロヘキセニル基である。2018207910.tif 000028
2018207910.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１
【化１】
2018207910.tif 000018
（式１中、
Ｒ１は水素又はヒドロキシ基であり、
Ａは
式２
【化２】
2018207910.tif 000019
又は
式３
【化３】
2018207910.tif 000020
で表される基であり、
Ｒ２は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ３は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ４はメチル、水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つはヒドロキシ基である）
で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、抗炎症用組成物。
【請求項２】
式１
【化４】
2018207910.tif 000021
（式１中、
Ｒ１は水素又はヒドロキシ基であり、
Ａは
式２
【化５】
2018207910.tif 000022
又は
式３
【化６】
2018207910.tif 000023
で表される基であり、
Ｒ２は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ３は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ４はメチル、水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つはヒドロキシ基である）
で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、プロスタグランジンＥ２産生抑制用組成物。
【請求項３】
式１
【化７】
2018207910.tif 000024
（式１中、
Ｒ１は水素又はヒドロキシ基であり、
Ａは
式２
【化８】
2018207910.tif 000025
又は
式３
【化９】
2018207910.tif 000026
で表される基であり、
Ｒ２は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ３は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ４はメチル、水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つはヒドロキシ基である）
で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、一酸化窒素産生抑制用組成物。
【請求項４】
式４
【化１０】
2018207910.tif 000027
で表される化合物又はその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、飲食品又は医薬品として有用な、抗炎症用組成物、プロスタグランジンＥ２産生抑制用組成物及び一酸化窒素産生抑制用組成物に関する。【０００２】
本発明はまたプロスタグランジンＥ２産生抑制活性及び一酸化窒素産生抑制活性を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００３】
プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）は、白血球（マクロファージ）、肥満細胞、内皮細胞および血小板などで産生される。細胞膜リン脂質の構成成分として存在するアラキドン酸が、ホスホリパーゼによって切り出され、シクロオキシゲナーゼ経路を経て、ＰＧＥ２が合成される。炎症の過程において同経路が活性化し、ＰＧＥ２の産生が増加する。【０００４】
特定の細胞から放出されたＰＧＥ２は近傍の標的細胞に作用し、標的細胞における炎症反応を誘導する。ＰＧＥ２は、炎症部位において炎症反応を増幅させるための化学的メディエーターのひとつであり、炎症部位における炎症反応を活性化する。【０００５】
一酸化窒素（ＮＯ）は、炎症の過程において、炎症性サイトカインや細菌エンドトキシンにより誘導された白血球（マクロファージ）のＩＩ型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）により産生される（非特許文献１）。過剰に産生されたＮＯは、ペルオキシ亜硝酸に変換された後、ＤＮＡの障害やＬＤＬの酸化などの細胞障害作用を示す（非特許文献２）ので、炎症で生じる過剰なＮＯを抑制することが重要である。またＮＯは、ＮＦ−κＢ経路などの炎症を促進する細胞内シグナル経路を活性化する（非特許文献３）ことから、ＮＯ産生を抑制することは抗炎症作用を発揮する上でも重要である（特許文献１）。【０００６】
炎症は感染症、外傷、異物などの刺激因子によって惹起され、刺激因子そのものとともに、刺激因子によって壊死した自己の細胞・組織を排除しようとする防御反応である。炎症反応は、感染をはじめとする有害刺激の除去を助ける。一方で炎症は、正常組織を損傷することもできるので、逆に生体に損害をもたらすことがあり、過剰な炎症反応を抑制することが必要である。【０００７】
天然化合物を有効成分として含むＰＧＥ２産生抑制剤及び抗炎症剤としては、例えば、特許文献２に記載されたものがある。また、特許文献１では、光照射処理及び／又は加熱処理により活性化された、大豆種子又はその抽出物とクロロフィルとの混合物が、ＮＯ産生を抑制する活性を有し、抗炎症剤として有用であることが記載されている。【０００８】
一方、ウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ）には、多数のセスキテルペン化合物が含まれており、ウコン由来のセスキテルペン化合物として、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａ、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂ等の多数のビサボラン化合物が知られている（非特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開ＷＯ２０１２／１７７９６９
【特許文献２】特開２０１２−０５６９５２号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】ロビンスの病理学（第８版）２章  ｐ．５８−５９
【非特許文献２】Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００３；５４（４）：４６９−８７．
【非特許文献３】Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｉｎｆｌａｍｍ  Ａｌｌｅｒｇｙ．２００５；４（４）：４７１−９．
【非特許文献４】Ｓ．Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｒｏｐｓ，２０１１，２，２８−５４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、抗炎症用組成物、ＰＧＥ２産生抑制用組成物又はＮＯ産生抑制用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、以下の発明を包含する。
（１）式１【００１３】
【化１】
2018207910.tif 000003
【００１４】
（式１中、
Ｒ１は水素又はヒドロキシ基であり、
Ａは
式２【００１５】
【化２】
2018207910.tif 000004
【００１６】
又は
式３【００１７】
【化３】
2018207910.tif 000005
【００１８】
で表される基であり、
Ｒ２は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ３は水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ４はメチル、水素又はヒドロキシ基であり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つはヒドロキシ基である）
で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、抗炎症用組成物。
（２）前記式１で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、プロスタグランジンＥ２産生抑制用組成物。
（３）前記式１で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、一酸化窒素産生抑制用組成物。
（４）式４【００１９】
【化４】
2018207910.tif 000006
【００２０】
で表される化合物又はその塩。
（５）前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することを含む、炎症を治療又は予防する方法。
（６）ヒト等の対象における炎症の治療又は予防に使用するための、前記式１で表される化合物又はその塩。
（７）ヒト等の対象における炎症の治療又は予防のための医薬組成物の製造のための、前記式１で表される化合物又はその塩の使用。
（８）炎症を治療又は予防するための飲食品組成物における、前記式１で表される化合物又はその塩の非医療的使用。
（９）前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することを含む、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制する方法。
（１０）ヒト等の対象における、プロスタグランジンＥ２の産生の抑制に使用するための、前記式１で表される化合物又はその塩。
（１１）ヒト等の対象における、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制するための医薬組成物の製造のための、前記式１で表される化合物又はその塩の使用。
（１２）プロスタグランジンＥ２の産生を抑制するための飲食品組成物における、前記式１で表される化合物又はその塩の非医療的使用。
（１３）前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することを含む、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制することで改善又は予防される疾患を治療又は予防する方法。
（１４）ヒト等の対象における、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制することで改善又は予防される疾患の治療又は予防に使用するための、前記式１で表される化合物又はその塩。
（１５）ヒト等の対象における、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制することで改善又は予防される疾患の治療又は予防のための医薬組成物の製造のための、前記式１で表される化合物又はその塩の使用。
（１６）プロスタグランジンＥ２の産生を抑制することで改善又は予防される疾患を治療又は予防するための飲食品組成物における、前記式１で表される化合物又はその塩の非医療的使用。
（１７）前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することを含む、一酸化窒素の産生を抑制する方法。
（１８）ヒト等の対象における、一酸化窒素の産生の抑制に使用するための、前記式１で表される化合物又はその塩。
（１９）ヒト等の対象における、一酸化窒素の産生を抑制するための医薬組成物の製造のための、前記式１で表される化合物又はその塩の使用。
（２０）一酸化窒素の産生を抑制するための飲食品組成物における、前記式１で表される化合物又はその塩の非医療的使用。
（２１）前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することを含む、一酸化窒素の産生を抑制することで改善又は予防される疾患を治療又は予防する方法。
（２２）ヒト等の対象における、一酸化窒素の産生を抑制することで改善又は予防される疾患の治療又は予防に使用するための、前記式１で表される化合物又はその塩。
（２３）ヒト等の対象における、一酸化窒素の産生を抑制することで改善又は予防される疾患の治療又は予防のための医薬組成物の製造のための、前記式１で表される化合物又はその塩の使用。
（２４）一酸化窒素の産生を抑制することで改善又は予防される疾患を治療又は予防するための飲食品組成物における、前記式１で表される化合物又はその塩の非医療的使用。
（２５）前記式４で表される化合物又はその塩と、飲食品として許容される他の成分とを含む、飲食品組成物。前記式４で表される化合物又はその塩の含有量は、前記飲食品組成物をヒトが経口摂取した時に、ヒトの体内において、抗炎症作用、プロスタグランジンＥ２産生抑制作用、及び、一酸化窒素産生抑制作用のうち１以上の作用が生じる有効量であることが好ましく、より好ましくは、前記飲食品組成物の全量に対して０．０００１重量％以上、０．００１重量％以上、０．０１重量％以上、０．１重量％以上又は１重量％以上である。
（２６）前記式４で表される化合物又はその塩と、医薬品として許容される他の成分とを含む、医薬品組成物。前記式４で表される化合物又はその塩の含有量は、前記医薬品組成物をヒト等の対象に投与した時に、前記対象の体内において、抗炎症作用、プロスタグランジンＥ２産生抑制作用、及び、一酸化窒素産生抑制作用のうち１以上の作用が生じる有効量であることが好ましく、より好ましくは、前記飲食品組成物の全量に対して０．０００１重量％以上、０．００１重量％以上、０．０１重量％以上、０．１重量％以上又は１重量％以上である。【００２１】
本明細書は本願の優先権の基礎となる日本国特許出願番号２０１７−０９５７１３号の開示内容を包含する。
【発明の効果】
【００２２】
本発明の組成物は、抗炎症剤、ＰＧＥ２産生抑制剤、又は、ＮＯ産生抑制剤として有用である。【００２３】
本発明の化合物は、抗炎症活性、ＰＧＥ２産生抑制活性又はＮＯ産生抑制活性を有する。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】図１は、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を示す。
【図２】図２は、２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を示す。
【図３】図３は、４−メチレン−５−ヒドロキシビサボラ−２,１０−ジエン−９−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を示す。
【図４】図４は、成分Ｄ−ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を示す。
【図５】図５は、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を示す。
【図６】図６は、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を示す。
【図７】図７は、２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を示す。
【図８】図８は、４−メチレン−５−ヒドロキシビサボラ−２,１０−ジエン−９−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を示す。
【図９】図９は、成分Ｄ−ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を示す。
【図１０】図１０は、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度示す。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
＜活性化合物＞
本発明の組成物は、抗炎症活性、ＰＧＥ２産生抑制活性及びＮＯ産生抑制活性を有する有効成分として、前記の式１で表される化合物又はその塩を含有する。以下の説明では、式１で表される化合物又はその塩を「活性化合物」と称する場合がある。
【００２６】
式１で表される化合物は、式１で示す平面構造を有する化合物であればよく、立体配置は特に限定されず、複数種の立体配置の化合物の混合物であってもよい。なお式２及び式３において、波線で中断された結合は、式１において、Ａが結合する炭素への結合を示す。
【００２７】
Ａが式２で表される基である場合の式１の化合物の、より好ましい態様について説明する。
【００２８】
式２において、好ましくはＲ４がメチル又はヒドロキシ基である。式２において、好ましくは、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうち１つのみがヒドロキシ基であり、より好ましくは、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のうち１つのみがヒドロキシ基であり且つＲ４がメチル又はヒドロキシ基である。
【００２９】
Ａが式２で表される基である場合の式１の化合物は、より好ましくは、以下の平面構造のいずれかを有する化合物である。
【００３０】
【化５】
2018207910.tif 000007
【００３１】
【化６】
2018207910.tif 000008
【００３２】
【化７】
2018207910.tif 000009
【００３３】
【化８】
2018207910.tif 000010
【００３４】
このうち、成分Ｄ−ｂは、本発明者らがウコン抽出物から分離し同定した新規化合物である。成分Ｄ−ｂは、２−メチル−５−ヒドロキシ−６−（３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル）−２−ヘプテン−４−オンと命名することができる。
【００３５】
なお、ウコン抽出物から分離される天然物において、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａ、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂ、及び、２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オンは、２−メチル−２−ヘプテン−４−オンの部分構造における６位炭素の立体配置がＳ体であることが公知である。しかし、式１の化合物の、上記のより好ましい例では、上記の平面構造を有していればよく、立体構造は特に限定されない。
【００３６】
Ａが式３で表される基である場合の式１の化合物の、より好ましい態様について説明する。
【００３７】
式３で表される基は、より好ましくは次式３−１
【００３８】
【化９】
2018207910.tif 000011
【００３９】
で表される基である。式３又は式３−１で表される基は、式３又は式３−１で示す平面構造を有する基であればよく、立体配置は特に限定されず、複数種の立体配置の基を含んでいてもよい。
【００４０】
Ａが式３で表される基である場合の式１の化合物は、より好ましくは、次の平面構造を有する化合物である。
【００４１】
【化１０】
2018207910.tif 000012
【００４２】
式１で表される化合物の塩としては、薬学的に許容される塩であればよく特に限定されないが、例えばナトリウム塩（フェノール性水酸基のナトリウム塩）が挙げられる。
＜活性化合物の製造方法＞
本発明で用いる活性化合物は植物に由来するものであってもよいし、人為的に合成されたものであってもよい。例えば光学活性の（＋）−Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａは、Ｂｉｏｓｃｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  １９９３；５７（７）：１１３７−４０に記載の方法により合成することできる。
【００４３】
本発明で用いる活性化合物はより好ましくは植物原料に由来するものであり、より好ましくは、ショウガ科ウコン属植物に由来するものである。ショウガ科ウコン属植物としては、Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ（ウコン）、Ｃｕｒｃｕｍａ ａｒｏｍａｔｉｃａ、Ｃｕｒｃｕｍａ ｚｅｄｏａｒｉａ、Ｃｕｒｃｕｍａ ｐｈａｅｏｃａｕｌｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ ｋｗａｎｇｓｉｅｎｓｉｓ、Ｃｕｒｃｕｍａ ｗｅｎｙｕｊｉｎ、Ｃｕｒｃｕｍａ ｘａｎｔｈｏｒｒｈｉｚａが挙げられ、特に好ましくは、Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ（ウコン）である。ショウガ科ウコン属の植物の根茎等の部位から活性化合物を得ることができる。根茎は土中から採取したものを使用してよく、根茎の適当な部位を原型のまま、あるいは適当な寸法又は形状にカットしたもの、あるいは粉砕物の形態にしたものを使用することができる。植物原料は適宜乾燥されたものであってよい。
【００４４】
活性化合物は、活性化合物を含む植物原料から抽出することができる。抽出溶媒としては極性有機溶媒（メタノール、エタノール等）、水、非極性有機溶媒（酢酸エチル等）を用いることができる。特に、植物原料から水抽出により得た水抽出物や、該水抽出物を更にメタノール／水混合溶媒により抽出することで得たメタノール／水抽出物や、該メタノール／水抽出物が、活性化合物を含む植物抽出物として好適である。水は９５℃以上の熱水を用いることが好ましい。植物抽出物は、必要に応じて抽出溶媒を揮発除去して用いる。活性化合物を含む植物抽出物をそのままの形態で本発明の組成物に配合してもよい。
【００４５】
また、活性化合物を含む植物抽出物から、活性化合物を高純度化した画分を本発明の組成物に配合してもよい。例えば、活性化合物を含む植物抽出物を酢酸エチル／水の液液分配に供し、酢酸エチル画分に活性化合物を高純度化することができる。また、活性化合物を含む植物抽出物又はその画分を、クロマトグラフィによる精製処理に供して、高純度化した活性化合物を得ることもできる。クロマトグラフィとしては、逆相カラムクロマトグラフィ、順相薄層クロマトグラフィ等を使用することができる。
【００４６】
活性化合物を含む植物抽出物又はその画分は、常法により、乾燥、粉末化、顆粒化、溶液化等の加工を施したものであってもよい。
【００４７】
活性化合物は好ましくは精製されたものである。
＜本発明の組成物及びその用途＞
本発明の組成物は、前記の活性化合物自体であってもよいし、活性化合物と、少なくとも１種の他の成分とを含む組成物であってもよい。本発明の組成物が、活性化合物と、少なくとも１種の他の成分とを含む場合、活性化合物と、少なくとも１種の他の成分とを混合した組成物であってもよいし、活性化合物と、少なくとも１種の他の成分とを適当な手段で製剤化した組成物であってもよいし、活性化合物と、少なくとも１種の他の成分との製剤化した組成物を、更に他の成分と混合した組成物であってもよい。ここで、活性化合物は、前記の、活性化合物を含む、植物抽出物又はその画分の形態であってもよい。本発明における、活性化合物を含む組成物の形状は、特に限定されず、例えば、液体状、流動状、ゲル状、半固形状、又は固形状などの何れの形状であってもよい。
【００４８】
前記の、少なくとも１種の他の成分としては、特に限定されないが、好ましくは、飲食品、医薬品等の最終的な形態において許容される成分であり、より好ましくは、経口摂取可能な成分である。
【００４９】
このような他の成分としては例えば、甘味料、酸味料、ビタミン類、ミネラル類、増粘剤、乳化剤、酸化防止剤、水等が挙げられる。また、必要により、色素、香料、保存料、防腐剤、防かび剤、更なる生理活性物質等を添加してもよい。
【００５０】
甘味料としては、ブドウ糖、果糖、ショ糖、乳糖、麦芽糖、パラチノース、トレハロース、キシロース等の単糖や二糖、異性化糖（ブドウ糖果糖液糖、果糖ブドウ糖液糖、砂糖混合異性化糖等）、糖アルコール（エリスリトール、キシリトール、ラクチトール、パラチニット、ソルビトール、還元水飴等）、はちみつ、高甘味度甘味料（スクラロース、アセスルファムカリウム、ソーマチン、ステビア、アスパルテーム等）等が挙げられる。
【００５１】
酸味料としては、クエン酸、リンゴ酸、グルコン酸、酒石酸、乳酸、リン酸、又はこれらの塩等があり、これらのうちの１種又は２種以上を利用することができる。
【００５２】
ビタミン類としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＥ、ナイアシン、イノシトール等が挙げられる。
【００５３】
ミネラル類としては、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、鉄等が挙げられる。
【００５４】
増粘剤としては、カラギーナン、ジェランガム、キサンタンガム、アラビアガム、タマリンドガム、グアーガム、ローカストビーンガム、カラヤガム、寒天、ゼラチン、ペクチン、大豆多糖類、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）等が挙げられる。
【００５５】
乳化剤としては、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、レシチン、植物性ステロール、サポニン等が挙げられる。
【００５６】
酸化防止剤としては、ビタミンＣ、トコフェロール（ビタミンＥ）、酵素処理ルチン、カテキン等が挙げられる。
【００５７】
前記他の成分は、それぞれ当業者が飲食品、医薬品等の組成物に通常採用する範囲内の量で適宜配合することができる。
【００５８】
活性化合物と、少なくとも１種の他の成分とを適当な手段で製剤化した組成物の形態は、粉末、顆粒、カプセル剤、錠剤（糖衣錠等のコーティング錠又は多層錠、口中崩壊剤、チュアブル錠等を含む）等の固形組成物の形態であってもよいし、溶液剤等の液体組成物の形態であってもよい。
【００５９】
本発明の組成物は、それ自体が飲食品又は医薬品であることが好ましく、飲食品であることがより好ましい。ここで飲食品とは食品添加物や、他の食品素材と組み合わせて飲食品の製造に用いられる飲食品原料の形態も包含する。活性化合物を有効成分として含む組成物が飲食品である場合、或いは、他の食品素材と組み合わせて飲食品の製造に用いられる飲食品原料である場合において、「飲食品」は、好ましくは機能性表示食品、特定保健用食品、栄養補給のためのサプリメント等の形態である。
【００６０】
前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することで、前記対象において炎症を治療又は予防することができる。ここで、前記式１で表される化合物又はその塩は、炎症を治療又は予防するための有効量で投与される。投与経路としては経口又は経鼻投与が好ましく、経口投与が特に好ましい。このため、前記式１で表される化合物又はその塩を含む本発明の組成物は、抗炎症用組成物として有用である。抗炎症用組成物は医薬品組成物であってもよいし、飲食品組成物等の非医療用途の組成物であってもよい。
【００６１】
前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することで、前記対象において、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制することができる。ここで、前記式１で表される化合物又はその塩は、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制するための有効量で投与される。投与経路としては経口又は経鼻投与が好ましく、経口投与が特に好ましい。前記式１で表される化合物又はその塩の投与を受けた対象では、白血球（マクロファージ）、肥満細胞、内皮細胞、血小板等の細胞におけるプロスタグランジンＥ２の産生が抑制される。このため、前記式１で表される化合物又はその塩を含む本発明の組成物は、プロスタグランジンＥ２産生抑制用組成物として有用である。プロスタグランジンＥ２産生抑制用組成物は医薬品組成物であってもよいし、飲食品組成物等の非医療用途の組成物であってもよい。
【００６２】
前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することで、前記対象において、プロスタグランジンＥ２の産生を抑制することで改善又は予防される疾患を治療又は予防することができる。ここで、前記式１で表される化合物又はその塩は、前記疾患を治療又は予防するための有効量で投与される。投与経路としては経口又は経鼻投与が好ましく、経口投与が特に好ましい。前記式１で表される化合物又はその塩の投与を受けた対象では、白血球（マクロファージ）、肥満細胞、内皮細胞、血小板等の細胞におけるプロスタグランジンＥ２の産生が抑制され、それによって、前記疾患を治療又は予防することができる。
【００６３】
前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することで、前記対象において、一酸化窒素の産生を抑制することができる。ここで、前記式１で表される化合物又はその塩は、一酸化窒素の産生を抑制するための有効量で投与される。投与経路としては経口又は経鼻投与が好ましく、経口投与が特に好ましい。前記式１で表される化合物又はその塩の投与を受けた対象では、白血球（マクロファージ）等の細胞における一酸化窒素の産生が抑制される。このため、前記式１で表される化合物又はその塩を含む本発明の組成物は、一酸化窒素産生抑制用組成物として有用である。一酸化窒素産生抑制用組成物は医薬品組成物であってもよいし、飲食品組成物等の非医療用途の組成物であってもよい。
【００６４】
前記式１で表される化合物又はその塩を、ヒト等の対象に投与することで、前記対象において、一酸化窒素の産生を抑制することで改善又は予防される疾患を治療又は予防することができる。ここで、前記式１で表される化合物又はその塩は、前記疾患を治療又は予防するための有効量で投与される。投与経路としては経口又は経鼻投与が好ましく、経口投与が特に好ましい。前記式１で表される化合物又はその塩の投与を受けた対象では、白血球（マクロファージ）等の細胞における一酸化窒素の産生が抑制され、それによって、前記疾患を治療又は予防することができる。
【実施例】
【００６５】
１．調製方法
Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ（ウコン）の根茎から熱水抽出し、熱水抽出物を得た。次に熱水抽出物から９０％メタノール（メタノール／水＝９０／１０（ｖ／ｖ））で抽出し、９０％メタノール抽出物を得た。次に９０％メタノール抽出物を酢酸エチル／水の液液分配に供し、酢酸エチル画分を得た。Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａと４−メチレン−５−ヒドロキシビサボラ−２,１０−ジエン−９−オンは、前記酢酸エチル画分から逆相カラムクロマトグラフィで精製した後、ジメチルスルホキシドに溶解して試験に用いた。２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オンと成分Ｄ−ｂは、前記酢酸エチル画分から逆相カラムクロマトグラフィと順相薄層クロマトグラフィで精製した後、ジメチルスルホキシドに溶解して試験に用いた。【００６６】
Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂは、長良サイエンス株式会社の市販品を購入し、ジメチルスルホキシドに溶解して試験に用いた。
２．各成分の特定
単離された各成分の構造は、１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、ＬＣＭＳ等の機器分析の結果及び公知の情報に基づき特定した。【００６７】
Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａ及びＴｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  ＢはＡｇｒｉｃ．Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．，１９９０；５４（９）：２３６７−７１に記載されている。【００６８】
２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オンはＣｈｅｍ．  Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，２００７；５５（６）：９４０−３に記載されている。【００６９】
４−メチレン−５−ヒドロキシビサボラ−２，１０−ジエン−９−オンは、Ｊ．Ａｓｉａｎ  Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．Ｒｅｓ．，２００９，１１，５６９−５７５に記載されている。【００７０】
成分Ｄ−ｂは、次の１Ｈ  ＮＭＲ及び１３Ｃ  ＮＭＲによる化学シフト値を示した。
1H NMR (500 MHz, メタノール-d3) δppm: 1.16 (d, J=6.87 Hz, 3 H), 1.85 (d, J=1.15 Hz, 3 H), 2.07 (d, J=1.00 Hz, 3 H), 2.11 (s, 3 H), 2.95 (m, J=6.87, 5.73 Hz, 1 H), 4.10 (d, J=5.73 Hz, 1 H), 6.13 - 6.15 (m, 1 H), 6.63 (dd, J=7.45, 1.72 Hz, 1 H), 6.66 (d, J=1.72 Hz, 1 H), 6.93 (d, J=7.45 Hz, 1 H).
13C NMR (126 MHz, メタノール-d3) δppm: 14.47, 14.50, 19.79, 26.48, 42.86, 47.14, 47.32, 47.49, 47.66, 47.83, 48.00, 48.16, 81.26, 113.89, 118.65, 120.52, 122.27, 130.14, 142.13, 154.95, 157.59, 201.74.
更に、成分Ｄ−ｂについて、高分解能ＬＣＭＳにより高分解能マススペクトル（ＨＲＭＳ）を取得し、次の精密質量値を得た。
HRMS (ESI) Calcd for C15H21O3: 249.1485 [M+H]+, Found: 249.1480 [M+H]+。【００７１】
これらの結果から、成分Ｄ−ｂは、新規化合物２−メチル−５−ヒドロキシ−６−（３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル）−２−ヘプテン−４−オンと特定された。【００７２】
各化合物の平面構造を以下に示す。【００７３】
【化１１】
2018207910.tif 000013
【００７４】
【化１２】
2018207910.tif 000014
【００７５】
【化１３】
2018207910.tif 000015
【００７６】
【化１４】
2018207910.tif 000016
【００７７】
【化１５】
2018207910.tif 000017
【００７８】
３．抗炎症作用の評価
実験にはマウスマクロファージ細胞株ＲＡＷ２６４．７を用い、ＤＭＥＭ（１０％ＦＢＳ）培地で９６穴プレートに１．５×１０５セル数になるように播種して２４時間ＣＯ２インキュベーターでコンフルエントになるまで培養した。９６穴プレートで培養したマウスマクロファージ細胞株ＲＡＷ２６４．７を、所定濃度（１．７μｇ／ｍＬ、３．２μｇ／ｍＬ、６．３μｇ／ｍＬ、１２．５μｇ／ｍＬ、及び、２５μｇ／ｍＬから選択される複数の濃度）の、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａ、２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オン、４−メチレン−５−ヒドロキシビサボラ−２,１０−ジエン−９−オン、成分Ｄ−ｂ、又は、Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂで、１時間前処理した後、２０ｎｇ／ｍＬのリポポリサッカリド（ＬＰＳ、炎症誘導因子）を添加し、１２時間培養した。その後、上清を回収し、競合ＥＬＩＳＡ法で上清に放出されたプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）量を測定した。また、上清に放出されたＮＯ２−量（ＮＯの酸化物で、ＮＯ量を反映）をＧｒｉｅｓｓ法で測定した。なお、各成分による処理の際は１０％ＦＢＳを含まないＤＭＥＭを使用した。細胞をウコン由来成分で処理しない以外は同じ操作を行う試験区をコントロール／ＬＰＳ（＋）とし、１２時間培養時の培地中にＬＰＳを添加しない以外はコントロール／ＬＰＳ（＋）と同じ操作を行う試験区をコントロール／ＬＰＳ（−）とした。
４．結果
Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を図１に示す。【００７９】
２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を図２に示す。【００８０】
４−メチレン−５−ヒドロキシビサボラ−２,１０−ジエン−９−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を図３に示す。【００８１】
成分Ｄ−ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を図４に示す。【００８２】
Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＰＧＥ２濃度を図５に示す。【００８３】
Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ａにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を図６に示す。【００８４】
２−メチル−６−（４−ヒドロキシフェニル）−２−ヘプテン−４−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を図７に示す。【００８５】
４−メチレン−５−ヒドロキシビサボラ−２,１０−ジエン−９−オンにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を図８に示す。【００８６】
成分Ｄ−ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を図９に示す。【００８７】
Ｔｕｒｍｅｒｏｎｏｌ  Ｂにより処理したＲＡＷ２６４．７の培養上清中のＮＯ２−濃度を図１０に示す。【００８８】
図１〜１０において「＋」は１２時間培養時の培地中に２０ｎｇ／ｍＬのＬＰＳを添加したことを指し、「−」はＬＰＳを添加しなかったことを指す。
【産業上の利用可能性】
【００８９】
本発明の組成物及び化合物は、飲食品又は医薬品の分野において有用である。【００９０】
本明細書で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願はそのまま引用により本明細書に組み入れられるものとする。
【図１】
2018207910.tif 000029
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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