(57)【要約】  主薬としてタクロリムスを含有し、主薬安定性及び経皮吸収性が高く、刺激性が低く、使用感の良い外用剤を提供することを課題とする。  本発明は、（i）タクロリムス、その製剤学的に許容される塩、又はその製剤学的に許容される溶媒和物、及び（ii）少なくとも一種のケトンを含有し、エタノールを実質的に含まないことを特徴とする液状外用剤に関する。前記液状外用剤は、さらに少なくとも一種の脂肪酸エステル及び液状パラフィンを含有し、水を実質的に含まないことが好ましい。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（i）タクロリムス、その製剤学的に許容される塩、又はその製剤学的に許容される溶媒和物、及び（ii）少なくとも一種のケトンを含有し、エタノールを実質的に含まないことを特徴とする、液状外用剤。
【請求項２】
前記少なくとも一種のケトンが、メチルエチルケトン及びメチルイソブチルケトンからなる群より選択される、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項３】
前記少なくとも一種のケトンが、アセトン以外のケトンから選択される、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項４】
前記少なくとも一種のケトンが、メチルエチルケトンである、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項５】
水を実質的に含まない、請求項１〜４のいずれか１項に記載の液状外用剤。
【請求項６】
さらに、少なくとも一種の脂肪酸エステルを含有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の液状外用剤。
【請求項７】
前記少なくとも一種の脂肪酸エステルが、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸ヘキサデシル、パルミチン酸イソプロピル、2-エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドからなる群より選択される、一種又は複数の脂肪酸エステルである、請求項６に記載の液状外用剤。
【請求項８】
さらに、少なくとも一種の液状パラフィンを含有する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の液状外用剤。
【請求項９】
（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％の少なくとも一種のケトン、（iii）15〜50重量％の少なくとも一種の脂肪酸エステル、及び（iv）45〜80重量％の少なくとも一種の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項１０】
（i）タクロリムス水和物、（ii）メチルエチルケトン、（iii）イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、セバシン酸ジエチル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドから選択される２種又は３種の脂肪酸エステル、及び（iv）液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項１１】
（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％のメチルエチルケトン、（iii）合計で15〜50重量％の、イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドから選択される２種又は３種の脂肪酸エステル、及び（iv）45〜80重量％の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項１２】
（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％のメチルエチルケトン、（iii）5〜10重量％のイソステアリン酸ヘキサデシル、15〜20重量％のミリスチン酸オクチルドデシル、及び0〜20重量％の中鎖脂肪酸トリグリセリド、及び（iv）45〜75重量％の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項１３】
皮膚のアレルギー疾患(例えば、アトピー性皮膚炎)を治療するための皮膚塗布用製剤である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の液状外用剤。
【請求項１４】
アセトンを実質的に含んでいない、請求項１３に記載の液状外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タクロリムスを含有する液状外用剤に関し、より詳しくは、アトピー性皮膚炎等を治療するための皮膚用の液状外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
タクロリムス含有外用剤は、アトピー性皮膚炎に優れた治療効果を有することが知られており、現在、油性基剤を用いた油性軟膏剤としてプロトピック(登録商標)軟膏0.1％及びプロトピック(登録商標)軟膏0.03％小児用が臨床で使用されている。しかし、油性軟膏剤は、皮膚保護作用に優れる等のメリットを有する反面、皮膚塗布時に塗り広げにくく、且つべたつきがあって使用感が悪いため、患者や医療関係者からは、より使用感の良い外用剤が求められている。【０００３】
これに対し、タクロリムスを含有する液状外用剤(Tacroz Forte 0.1% Lotion)が、一部の国で上市されているが、プロトピック(登録商標)軟膏に匹敵する経皮吸収性は確認されていない。【０００４】
その他、特許文献１の実施例には、ゲル製剤が開示されており、特許文献２及び３では、ローション剤やクリーム状の医薬組成物の調製が試みられている。また、本件出願人も、以前にタクロリムスを含有するクリーム状医薬組成物の出願を行っている(特許文献４及び５参照)。しかし、今なお、使用感が良く、刺激性が少なく、製剤中の主薬安定性及び経皮吸収性の高い組成物を開発することが望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開2012-149097号公報
【特許文献２】WO 1994/028894
【特許文献３】WO 1998/036747
【特許文献４】WO 2012/011566
【特許文献５】WO 2013/111817
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、本発明は、使用感の良い外用剤であって、刺激性が少なく、製剤中のタクロリムスの安定性(主薬残存率)が高く、さらにプロトピック(登録商標)軟膏に匹敵する経皮吸収性を達成できる、タクロリムス含有医薬組成物(皮膚用外用剤)を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決するために検討を重ねた結果、タクロリムスの溶解剤としてケトンを使用し、且つ、エタノールを使用することなく液状組成物を調製することによって、前記課題を解決できることを見出し、本発明を完成した。【０００８】
すなわち、本発明は、液状外用剤であって、
（i）タクロリムス、その製剤学的に許容される塩、又はその製剤学的に許容される溶媒和物(以下、これらを代表してタクロリムスと称する)、及び（ii）少なくとも一種のケトンを含有し、実質的にエタノールを含まないことを特徴とする。【０００９】
本発明に係る外用剤は、タクロリムスの可溶化剤としてケトンを用いることにより、エタノールを使用せずとも高い経皮吸収性を確保でき、品質・安全性にも優れている。また、本発明に係る外用剤は液状であるため、軟膏と比べて使用感が良い。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、製剤中のタクロリムスを安定に保つことができ、優れた薬効を発揮できるとともに、刺激性が少なく、使用感のよい(塗り広げやすく、べたつきが少ない)外用組成物を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ローション１とプロトピック(登録商標)軟膏0.03％について、タクロリムスのin vitro皮膚透過性試験の結果を示すグラフである。
【図２】ローション５とプロトピック(登録商標)軟膏0.1％について、タクロリムスのin vitro皮膚透過性試験の結果を示すグラフである。
【図３】ローション６とプロトピック(登録商標)軟膏0.1％について、タクロリムスのin vitro皮膚透過性試験の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明に係る外用剤は、主薬(API＝active pharmaceutical ingredient)としてタクロリムスを含む。タクロリムスの含有率は、0.01〜0.3重量％であることが好ましい。タクロリムスの含有率が0.01重量％を下回ると、有効性が乏しくなり、0.3重量％を越えると安全性が損なわれるおそれがある。なお、本明細書に記載される各成分の重量％は、外用剤(すなわち、製剤全量) の重量を100とした場合の、各成分の重量の割合を意味する。
タクロリムスの製剤学的に許容される塩としては、無毒の、医薬として許容される慣用の塩を用いることができる。このような塩として、例えばアルカリ金属塩(ナトリウム塩、カリウム塩等)、アルカリ土類金属塩(カルシウム塩、マグネシウム塩等)、アンモニウム塩、アミン塩(トリエチルアミン塩、N-ベンジル-N-メチルアミン塩等)のような無機又は有機塩基との塩が挙げられる。
タクロリムスの製剤学的に許容される溶媒和物としては、水和物及びエタノレートが挙げられる。
本発明の外用剤は、タクロリムス水和物(特に、以下に示す一水和物)を含むことが好ましい。タクロリムス一水和物は、アトピー性皮膚炎の治療薬として知られているプロトピック(登録商標)軟膏の主薬として周知である。
【００１３】
【化１】
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【００１４】
本発明に係る外用剤では、タクロリムスの可溶化剤として、一種又は複数のケトンが使用される。ケトンは、タクロリムスの可溶化剤として使用した際、高い製剤−皮膚間の分配係数Ｋを示し、それゆえタクロリムスの経皮吸収性に優れた外用剤を提供することができる。また、可溶化剤としてケトンを用いることにより、外用剤中のタクロリムスを安定に保つことができる。
【００１５】
前記ケトンの好ましい例として、式：R−(C=O)−R'で表した場合、R及びR'がそれぞれ炭素数1〜4のアルキル基であるケトンが挙げられる。前記アルキル基は直鎖であっても分岐鎖であってもよい。特に、R又はR'のどちらか一方がメチル基であるケトンがより好ましい。より好ましいケトンは、メチルエチルケトン、アセトン及びメチルイソブチルケトンからなる群より選択されるケトンであり、特に好ましいケトンは、メチルエチルケトン及びメチルイソブチルケトンからなる群より選択されるケトンであり、最も好ましいケトンはメチルエチルケトンである。前記ケトンは、アセトン以外のケトンであってもよい。前記ケトンは、ポリエチレンピロールケトンなどの粘度増加剤として使用されるケトンではないことが好ましい。
【００１６】
外用剤におけるケトンの含有率は、合計で3〜15重量％であることが好ましい。3重量％を下回った場合は、タクロリムスの安定性と吸収性が損なわれる。より好ましい含有率は、4〜12重量％であり、特に好ましい含有率は4.5〜11重量％であり、さらに好ましい含有率は5〜10重量％である。
【００１７】
本発明の外用剤は、エタノールを実質的に含まない。実質的にエタノールを含まないとは、製造工程で意図的にエタノールを添加していないことを意味する。従って本発明の外用剤のエタノール含有率は通常0重量％であり、ごくわずかにエタノールが混入するとしても、エタノール含有率は1重量％未満(より好ましくは0.5重量％未満)である。タクロリムスはエタノールに溶けやすく、且つエタノールは高いタクロリムスの分配係数Ｋを示すが、エタノールには皮膚刺激性があることが知られている。タクロリムス含有外用剤が、アトピー性皮膚炎の治療のために用いられる(すなわちバリア機能が低下した皮膚に塗布される)ことを考えると、皮膚刺激性のあるエタノールは含まないことが好ましい。本発明の外用剤は、エタノールを実質的に含有しないため、皮膚への刺激性が低く、アトピー性皮膚炎を治療するのに適している。
また、本発明は、エタノール以外の低級一価アルコール(炭素数1〜3の一価アルコール、例えばイソプロパノール)も実質的に含まないことが好ましい。
【００１８】
本発明の外用剤は、非水性であること、すなわち、実質的に水を含まないことが好ましい。実質的に水を含まないとは、製造工程で意図的に水を添加していないことを意味する。従って本発明に係る外用剤が非水性である場合、その含水率は通常1重量％未満（より好ましくは0.5重量％未満、特に好ましくは0重量％）である。
【００１９】
また、本発明の外用剤は、親水性高分子(カルボキシビニルポリマーなど)を実質的に含んでいなくてもよい。また、本発明の外用剤は、界面活性剤を実質的に含んでいなくてもよい。また、本発明の外用剤は、多価アルコール(例えば、グリセリン、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール)を実質的に含んでいなくてもよい。また、本発明の外用剤は、水性成分(水、及び、多価アルコール・低級一価アルコールなどの水と混ざる成分)を実質的に含まない油性製剤、例えば、油性ローション剤であってもよい。また、本発明の外用剤は、アセトンを実質的に含んでいなくてもよい。実質的に含まないとは、その成分の含有率が、1重量％未満（より好ましくは0.5重量％未満、特に好ましくは0重量％）であることを意味する。
【００２０】
本発明の外用剤は、少なくとも一種の脂肪酸エステルをさらに含むことが好ましい。ケトンと脂肪酸エステルを併用することにより、タクロリムスの安定性を維持したまま、経皮吸収性を向上させることができる。
【００２１】
本発明で使用される脂肪酸エステルとしては、脂肪酸モノエステル、脂肪酸ジエステル、グリセリン脂肪酸エステルが挙げられる。
このような脂肪酸エステルの例として、炭素数6〜22(好ましくは8〜20、より好ましくは8〜18)の飽和又は不飽和脂肪酸(例えば、カプロン酸、カプリル酸、2-エチルヘキサン酸、イソオクタン酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、ベヘン酸、イソステアリン酸)と、炭素数1〜22(好ましくは3〜20)のアルコール(例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、グリセロール、1-デカノール、1-ドデカノール、1-テトラデカノール、セタノール、1-ヘキサデカノール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、セトステアリルアルコール、オクチルドデシルアルコール、ベヘニルアルコール)とのエステルが挙げられる。
【００２２】
前記脂肪酸エステルの好ましい例として、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸ヘキサデシル、パルミチン酸イソプロピル、2-エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、中鎖脂肪酸トリグリセリド(例えば、トリイソオクタン酸グリセリン及びトリ(カプリル・カプリン酸)グリセリンなど)からなる群より選択される、一種又は複数の脂肪酸エステルが挙げられる。
【００２３】
前記脂肪酸エステルは、一種のみを使用しても、複数種を使用してもよい。本発明の好ましい外用剤の例として、イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、セバシン酸ジエチル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドからなる群より選択される脂肪酸エステルを２種又は３種含む外用剤が挙げられる。特に好ましい例として、イソステアリン酸ヘキサデシル及びミリスチン酸オクチルドデシルを含む外用剤、又は、イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル及び中鎖脂肪酸トリグリセリドを含む外用剤が挙げられる。
【００２４】
本発明の外用剤における少なくとも一種の脂肪酸エステルの含有率は、合計で15〜50重量％であることが好ましく、20〜45重量％であることがより好ましく、23〜42重量％が特に好ましく、25〜40重量％であることがさらに好ましい。
【００２５】
本発明の外用剤は、さらに軽質流動パラフィン及び流動パラフィンなどの液状パラフィンを少なくとも一種含むことが好ましい。本発明の外用剤における液状パラフィンの含有率は、45〜80重量％であることが好ましく、50〜75重量％であることがより好ましく、52〜72重量％であることが特に好ましく、53〜70重量％であることがさらに好ましい。
【００２６】
また、本発明の外用剤において、前記少なくとも一種のケトンと、前記少なくとも一種の脂肪酸エステルの割合は、ケトンの総重量を１としたとき、脂肪酸エステルの総重量が2.5〜10の範囲であることが好ましく、2.8〜9の範囲であることがより好ましく、3〜8の範囲であることが特に好ましい。
特に、前記ケトンがメチルエチルケトンのみであり、前記脂肪酸エステルがイソステアリン酸ヘキサデシルとミリスチン酸オクチルドデシルの２種類である場合は、メチルエチルケトンの重量１に対して、イソステアリン酸ヘキサデシルとミリスチン酸オクチルドデシルの総重量が3〜8であることが好ましく、4〜6であることがより好ましい。
【００２７】
また、本発明の外用剤において、前記少なくとも一種のケトンと、前記液状パラフィンの割合は、ケトンの総重量を１としたとき、液状パラフィンの総重量が5〜15の範囲であることが好ましい。
【００２８】
本発明に係る外用剤は液状(例えば、ローション状)であり、その粘度は一般に2000 mPa・s以下であることが好ましく、1000 mPa・s以下であることがより好ましく、200 mPa・s以下であることが特に好ましい。本発明において、粘度とは、コーンプレート型粘度計(MCR302、治具CP50-1)にて、測定温度25℃、回転数5rpmで45秒間測定した際の粘度を意味する。
【００２９】
本発明に係る外用剤は、上記成分の他に、保存剤等を含むことができる。
【００３０】
上記保存剤の例としては、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、安息香酸ナトリウム、フェノキシエタノールなどが挙げられる。上記保存剤は、一種のみを用いてもよく、複数を併用してもよい。外用剤における保存剤の含有率は、0.01〜2重量％の範囲とすることが好ましく、0.1〜1.0重量％の範囲とすることがより好ましい。2重量％を越えた場合は、製剤としての安全性が危惧されるおそれがある。
【００３１】
本発明の外用剤の好ましい一例として、（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％の少なくとも一種のケトン、（iii）15〜50重量％の少なくとも一種の脂肪酸エステル、及び（iv）45〜80重量％の少なくとも一種の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない液剤が挙げられる。
【００３２】
また、本発明の外用剤の好ましい一例として、（i）タクロリムス水和物、（ii）メチルエチルケトン、（iii）イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、セバシン酸ジエチル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドから選択される２種又は３種の脂肪酸エステル、及び（iv）液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない液剤が挙げられる。
【００３３】
また、本発明の外用剤のより好ましい例として、（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％(より好ましくは4〜12重量％)のメチルエチルケトン、（iii）合計で15〜50重量％(より好ましくは20〜45重量％) の、イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドから選択される２種又は３種の脂肪酸エステル、及び（iv）45〜80重量％(より好ましくは50〜75重量％)の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない液剤が挙げられる。
【００３４】
また、本発明の外用剤の特に好ましい例として、（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％(より好ましくは4〜12重量％)のメチルエチルケトン、（iii）5〜10重量％のイソステアリン酸ヘキサデシル、15〜20重量％のミリスチン酸オクチルドデシル、及び0〜20重量％の中鎖脂肪酸トリグリセリド、及び（iv）45〜75重量％(より好ましくは50〜73重量％)の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない液剤が挙げられる。
【００３５】
本発明の外用剤において、上記（i）〜（iv）以外の成分の総含有率は、10重量％以下であることが好ましく、5重量％以下であることがより好ましく、3重量％以下であることが特に好ましい。
【００３６】
本発明の外用剤は、アトピー性皮膚炎等の皮膚のアレルギー疾患の治療に有用である。
本発明に係る外用剤の皮膚への塗布量・塗布頻度は、皮膚の症状、外用剤中のタクロリムスの濃度、患者の年齢等に応じて適宜調節すればよい。通常、一日1〜2回の塗布が適切である。本発明の外用剤は、眼部（特に、眼部前段および眼部表面）には使用されないことが好ましい。
【００３７】
なお、先行する段落において、本発明の外用剤に使用される必須成分及び任意成分の好ましい化合物名を記載してきたが、本発明の外用剤には、これらを任意に組み合わせて得られる外用剤が含まれ、且つ、各成分について記載した濃度範囲を任意に組み合わせて得られる外用剤も含まれる。また、先行する段落において記載した濃度、粘度値等の数値範囲も任意に組み合わせ可能であり、数値範囲が複数記載されている場合、各数値範囲の上限値又は下限値も任意に組み合わせ可能である。
【００３８】
以下、実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明は実施例により限定されるものではない。実施例で使用したタクロリムスは、全てタクロリムス一水和物(アステラス製薬株式会社から入手)であり、以下の実施例においては、単にタクロリムス又はタクロリムス水和物と称する。
【実施例】
【００３９】
［実施例１］In vitro ヘアレスマウス皮膚透過性試験
表１に記載の各溶解剤に、タクロリムス水和物を溶解して得た製剤(液剤)を用いて、皮膚透過性実験を行った。
まず、室温下で自然解凍したヘアレスマウス皮膚の厚み(製剤適用部位の厚み)を測定した。フランツ垂直型透過セルにヘアレスマウス皮膚をセットし、各製剤1 mLを適用した。In vitro経皮吸収自動サンプリングシステムを使用して、規定したサンプリング時点にフランツ垂直型透過セルのレセプター液を採取した。採取したレセプター液中のタクロリムス濃度は液体クロマトグラフィータンデム型質量分析装置（LC/MS/MS）を用いて測定した。その結果に基づき、製剤−皮膚間の分配係数Ｋを、皮膚中タクロリムス濃度の指標として算出した。分配係数Ｋの算出式は下記の通りである(式中のラグタイム(lag time)は、皮膚透過速度が定常状態に達するまでの時間である)。
【数１】
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結果を表１に示す。分配係数Ｋが大きいほど、タクロリムスの皮膚中濃度は高くなる(すなわち、分配係数Ｋの値が大きい溶剤ほど、タクロリムスが溶剤から皮膚へ移行しやすい)。【００４０】
［実施例２］安定性試験
調製した製剤を所定の条件下で一定期間保管し、タクロリムス水和物含量を「第17改正日本薬局方 一般試験法 液体クロマトグラフィー＜2.01＞」に従って測定し、下記の式により、液状組成物中のタクロリムス水和物の残存率を算出し、組成物中の主薬安定性を評価した。
【数２】
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【００４１】
結果を表１に示す。
【表１】
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【００４２】
表１から明らかなように、メチルエチルケトン(No.1)は、他の溶剤(No.2〜No.15)と比べて、タクロリムスを皮膚へ分配する能力が極めて高いことが分かった。また、メチルエチルケトン(No.1)は、高い主薬(タクロリムス)残存率を示した。他方、エタノールは、メチルエチルケトンよりもはるかに高い分配係数を示した。しかし、タクロリムスがアトピー性皮膚炎の治療に用いられることを考えると、エタノールの皮膚刺激性は、バリア機能の低下した患者の皮膚に悪影響を及ぼすと予測されることから、エタノールを使用することなく、経皮吸収性の高い製剤の開発を目指した。【００４３】
［実施例３］In vitro ヘアレスマウス皮膚透過性試験及び安定性試験
次に、メチルエチルケトン(MEK)と組み合わせて使用することによって、タクロリムスの安定性を維持したまま、経皮吸収性を向上させることができる溶剤について検討した。その結果、表２に示すように、メチルエチルケトンと脂肪酸エステル類を併用することにより、タクロリムスの皮膚への分配性をより高め、且つ、製剤中のタクロリムスの安定性を維持できることが分かった。結果を表２に示す。表２の溶剤の％は重量％を意味する。分配係数Ｋと主薬残存率はそれぞれ、実施例１及び２と同じ方法を用いて求めた。【００４４】
【表２】
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【００４５】
［実施例４］In vitro ヘアレスマウス皮膚透過性試験
特許文献１(特開2012-149097)に開示されているタクロリムスの溶解剤(トリアセチン)を含む製剤と、メチルエチルケトンを含む製剤の分配係数Ｋを比較するため、特許文献１の製剤例３を参考に、以下の組成物を製造し、実施例１と同じ方法で分配係数Ｋを求めた。【００４６】
結果を表３に示す。表３の各成分の数値は重量％である。
【表３】
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表３に示すように、メチルエチルケトンを含む組成物No.1は、トリアセチンを含む組成物No.2と比べてはるかに高い分配係数を示すため、メチルエチルケトン含有製剤は、トリアセチン含有製剤と比べて、タクロリムスの経皮吸収性に優れると予測できる。また、現在インドで上市されているタクロリムス含有液状外用剤「Tacroz Forte 0.1% Lotion」についても、同じ方法で分配係数Ｋを求めたところ、16.28×10-3であった。このため、組成物No.1は、Tacroz Forte 0.1% Lotionと比べても、タクロリムスの経皮吸収性に優れると予測できる。【００４７】
［実施例５］処方例
メチルエチルケトン及び他の成分について、吸収性、品質及び安全性を考慮として、表４及び５に示す外用剤を調製した。各外用剤は、タクロリムス水和物をメチルエチルケトンに溶解させた後、他の成分を加えて均一に混和することにより調製した。【００４８】
［実施例６］In vitro ヘアレスマウス皮膚透過性試験及び安定性試験
表４及び表５に示す各外用剤について、経皮吸収性(16時間後及び24時間後)及び安定性(60℃・2週間)を確認した。
経皮吸収性(16時間後又は17時間後及び24時間後)試験は、実施例１と同様の方法を用いて行った。より具体的には、表４・５の各ローション及びプロトピック(登録商標)軟膏0.03％・0.1％のそれぞれについて、タクロリムスの累積透過量を算出した後、タクロリムス一水和物を0.031％含む製剤については、プロトピック(登録商標)軟膏0.03％の累積透過量に対する比率として、タクロリムス一水和物を0.102％含む製剤については、プロトピック(登録商標)軟膏0.1％の累積透過量に対する比率として経皮吸収性を表した。
また、安定性試験は、実施例２と同様の方法を用いて行った。【００４９】
結果を表４及び５に示す。表４及び５の各成分の数値は重量％である。なお、ローション１の粘度を測定したところ(コーンプレート型粘度計(MCR302、治具CP50-1)、測定温度25℃、回転数5rpmで45秒間測定)、約50 mPa・sであった。
【表４】
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【表５】
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【００５０】
表４及び表５に示すように、ローション１〜１１はいずれも、高い経皮吸収性及び主薬残存率を示した。特に、ローション１，２，５，６及び８は、プロトピック(登録商標)軟膏に近似した経皮吸収性(100±25％以内)を示した。【００５１】
［実施例７］透過プロファイル
本発明の外用剤の皮膚透過プロファイルを、すでに臨床で使用実績のあるプロトピック(登録商標)軟膏の透過プロファイルと比較した。より具体的には、表４のローション１、５及び６と、プロトピック(登録商標)軟膏0.03％及び0.1％について、上記と同様にインビトロヘアレスマウス皮膚透過性試験を行い、４時間ごとにタクロリムスの経皮吸収性(タクロリムスの累積透過量)を測定し、比較した。結果を図１〜３に示す。【００５２】
図１に示すように、ローション１はプロトピック(登録商標)軟膏0.03％に近似した透過プロファイルを示し、ローション５及び６はプロトピック(登録商標)軟膏0.1％に近似した透過プロファイルを示した。よって、これらのローション剤とプロトピック(登録商標)軟膏の間に同等性の成立が見込まれる。【００５３】
［実施例８］安定性試験
表４に示すローション１、５及び６、並びに以下の表６に示すクリーム１をそれぞれ、容器（ガラスバイアル又はアルミチューブ又はプラスチック製ボトル）に充填し、過酷条件(40℃／75％RH)で所定の期間保存した。【００５４】
所定の時点で、各製剤から測定用試料を採取し、液体クロマトグラフィーを用いて、タクロリムスのピーク、タクロリムスに対する相対保持時間約0.7のピーク(類縁物質A) 、タクロリムスに対する相対保持時間約0.8のピーク(類縁物質B)、タクロリムスに対する相対保持時間約0.85のピーク(類縁物質C)のピーク面積Aiを自動分析法により測定し、類縁物質(タクロリムスの分解により生じる物質)の比率を求めた。液体クロマトグラフフィーの操作条件は以下の通りである。【００５５】
操作条件
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：225 nm）
カラム：内径4.6 mm、長さ25 cmのステンレス管に、5μmの液体クロマトグラフィー用ジヒドロプロピルシリル化シリカゲルを充てんしたものを2本連結する。
移動相：ヘキサン/塩化n-ブチル/アセトニトリル混液（7：2：1）
カラム温度：28℃付近の一定温度
流量：タクロリムスの保持時間が約15分になるように調整する。（約1.5 mL/min）【００５６】
表６に比較製剤(クリーム製剤)の組成を、表７に安定性試験の結果を示す。表６の各成分の値は重量％である。
【表６】
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【表７】
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【００５７】
表７に示す通り、本発明に係るローション製剤は、タクロリムスの分解により生じる類縁物質が、クリーム製剤と比べて著しく低く、室温保存でも、製剤中のタクロリムスの安定性が高いことを実証した。なお、クリーム１においてタクロリムスの安定性が低いのは、クリーム剤に含まれている水が原因である可能性が高いため、本発明の液状外用剤は、水を含まないことが好ましい。【００５８】
［実施例８］皮膚刺激性試験
前記ローション１、２、５、６及びそれぞれのプラセボ(プラセボ１、２、５、６)について、皮膚累積刺激性を雌性ウサギ(Kbl:NZW)を用いて検討した(ローション１，２及びそれらのプラセボについてはn＝3、ローション５，６及びそれらのプラセボについてはn＝4)。除毛したウサギの背部皮膚に一匹当たり2.5×2.5 cmの投与部位(損傷皮膚)を4ヶ所設け、上記ローションを0.05mL/siteにて1日約23時間、14日間連続で開放投与した。皮膚反応の判定は、Draize,J.H.(Appraisal of the safety of chemicals in foods, drugs and cosmetics, The Association of Food and Drug Officials of the United States, Topeka,Kansas, 46-59, 1965)の基準に従って実施した。より具体的には、紅斑と痂皮形成、浮腫形成についてそれぞれを評点0〜4でスコア化し、以下の判定基準に基づいて皮膚累積刺激性の程度を評価した。【００５９】
結果を表８に示す。
【表８】
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【００６０】
表８から分かるように、ローション１，２，５及び６、並びにプラセボ１，２，５及び６は、いずれも平均スコアが0又は0.1であり、最も刺激の程度の低いカテゴリー(弱い刺激物)に分類された。【００６１】
上記実施例１〜８の結果から、本発明の外用剤は、すでに臨床で使用実績のあるプロトピック(登録商標)軟膏に近似したタクロリムスの透過プロファイルを示し、且つ、製剤中のタクロリムスの安定性が高く、刺激性が少ないことが分かった。また、本発明の外用剤は液状であるため、軟膏と比べて皮膚に塗り広げやすく、べたつき・てかりが少ない。そのため、本発明によれば、使用感が良く、高い主薬吸収性を有し、品質及び安定性に優れたタクロリムス含有製剤の提供が可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年2月14日(2020.2.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（i）タクロリムス、その製剤学的に許容される塩、又はその製剤学的に許容される溶媒和物、及び
（ii）メチルエチルケトン
を含有し、エタノールを実質的に含まないことを特徴とする、液状外用剤。
【請求項２】
水を実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項３】
さらに、少なくとも一種の脂肪酸エステルを含有する、請求項１又は２に記載の液状外用剤。
【請求項４】
前記少なくとも一種の脂肪酸エステルが、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸ヘキサデシル、パルミチン酸イソプロピル、2-エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドからなる群より選択される、一種又は複数の脂肪酸エステルである、請求項３に記載の液状外用剤。
【請求項５】
さらに、少なくとも一種の液状パラフィンを含有する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の液状外用剤。
【請求項６】
（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％のメチルエチルケトン、（iii）15〜50重量％の少なくとも一種の脂肪酸エステル、及び（iv）45〜80重量％の少なくとも一種の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項７】
（i）タクロリムス水和物、（ii）メチルエチルケトン、（iii）イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、セバシン酸ジエチル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドから選択される２種又は３種の脂肪酸エステル、及び（iv）液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項８】
（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％のメチルエチルケトン、（iii）合計で15〜50重量％の、イソステアリン酸ヘキサデシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドから選択される２種又は３種の脂肪酸エステル、及び（iv）45〜80重量％の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項９】
（i）タクロリムス水和物、（ii）3〜15重量％のメチルエチルケトン、（iii）5〜10重量％のイソステアリン酸ヘキサデシル、15〜20重量％のミリスチン酸オクチルドデシル、及び0〜20重量％の中鎖脂肪酸トリグリセリド、及び（iv）45〜75重量％の液状パラフィンを含み、水及びエタノールを実質的に含まない、請求項１に記載の液状外用剤。
【請求項１０】
皮膚のアレルギー疾患(例えば、アトピー性皮膚炎)を治療するための皮膚塗布用製剤である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の液状外用剤。
【国際調査報告】
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