(57)【要約】  本発明は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物の提供、並びに、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための、医薬組成物及び飲食品組成物の提供を課題とし、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物、並びに、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための、医薬組成物及び飲食品組成物で、該課題を解決する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物。
【請求項２】
前記粘膜細胞が、大腸上皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、又は歯茎の粘膜細胞である、請求項１に記載の吸着抑制用組成物。
【請求項３】
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項１又は２に記載の吸着抑制用組成物。
【請求項４】
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項３記載の吸着抑制用組成物。
【請求項５】
前記ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項３又は４に記載の吸着抑制用組成物。
【請求項６】
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７である、請求項３〜５のいずれか１項に記載の吸着抑制用組成物。
【請求項７】
ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための医薬組成物。
【請求項８】
前記粘膜細胞の炎症が、フゾバクテリウム属細菌が関与する粘膜細胞の炎症である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項７又は８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項９記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項９又は１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７である、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための飲食品組成物。
【請求項１４】
前記粘膜細胞の炎症が、フゾバクテリウム属細菌が関与する粘膜細胞の炎症である、請求項１３に記載の飲食品組成物。
【請求項１５】
前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項１３又は１４に記載の飲食品組成物。
【請求項１６】
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項１５記載の飲食品組成物。
【請求項１７】
前記ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１から成る群から選択される一又は複数の細菌である、請求項１５又は１６に記載の飲食品組成物。
【請求項１８】
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７である、請求項１５〜１７のいずれか１項に記載の飲食品組成物。
【請求項１９】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２。
【請求項２０】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３。
【請求項２１】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４。
【請求項２２】
ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０。
【請求項２３】
ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物に関する。また、本発明は、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための、医薬組成物及び飲食品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ビフィドバクテリウム属に属する細菌には、ヒトの疾患や症状の予防、治療、改善等に有効なものが存在することが知られている。
例えば、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＧ９−１が、５−フルオロウラシル誘発性腸疾患の予防又は治療に有効であることが知られている（特許文献１）。
また、ビフィドバクテリウム・ブレーベに属する細菌やビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌等が、関節炎の予防、改善に有効であることが知られている（特許文献２）。
しかし、ビフィドバクテリウム属細菌が、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、歯周病等の疾患又は症状の予防又は治療に有効であることは知られていない。
このような背景から、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、歯周病等の疾患又は症状の予防又は治療に有効な成分が求められている。【０００３】
一方、フゾバクテリウム属細菌はヒト中咽頭の常在菌であり、歯周病の発症と関係していることが知られている（特許文献３）。さらに、近年では、フゾバクテリウム属細菌が潰瘍性大腸炎や大腸がん、食道がん、早産と関連していることが指摘されている。
フゾバクテリウム属細菌は、潰瘍性大腸炎や大腸がんの患者の大腸内に多数生息し、大腸粘膜上皮への吸着能や侵入能を有することが報告されている（非特許文献１）。
また、ヒト大腸がん細胞は糖鎖Gal-GalNAcを発現しており、フゾバクテリウム属細菌は自身のGal-GalNAc結合性レクチンであるFap2を介して該Gal-GalNAcに吸着することが報告されている（非特許文献２）。
また、325例の食道がん組織においてフソバクテリウムの存在を確認したところ、74例の症例でフソバクテリウム属細菌の存在が確認され、食道がんの予後が不良であることが報告されている（非特許文献３）。
また、フゾバクテリウム属細菌が有するFap2は、早産に関与する、ガラクトース阻害性接着因子であることが報告されている（非特許文献４）。
このような背景から、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物の開発が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１７−０８８５４０号公報
【特許文献２】特開２０１２−１５８５６８号公報
【特許文献３】特開２０１６−１９２９５０号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】腸内細菌学雑誌，27, 169-179 (2013)
【非特許文献２】Cell Host Microbe, 20, 215-225 (2016)
【非特許文献３】Clin. Cancer Res., 22(22) (2016)
【非特許文献４】Infect. Immun., 83(3), 1104-13, (2015)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物の提供を課題とする。また、本発明は、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための、医薬組成物及び飲食品組成物の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、ビフィドバクテリウム属細菌が、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着を抑制することを見出して、また、ビフィドバクテリウム属細菌が、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療に有効であることを見出して、本発明を完成するに至った。【０００８】
本発明は、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物である。
前記吸着抑制用組成物は、前記粘膜細胞が、大腸上皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、又は歯茎の粘膜細胞であることを好ましい形態としている。
前記吸着抑制用組成物は、前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記吸着抑制用組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記吸着抑制用組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記吸着抑制用組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７であることを好ましい形態としている。【０００９】
また、本発明は、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための医薬組成物を提供する。
前記医薬組成物は、前記粘膜細胞の炎症が、フゾバクテリウム属細菌が関与する粘膜細胞の炎症であることを好ましい形態としている。
前記医薬組成物は、前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記医薬組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記医薬組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記医薬組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７であることを好ましい形態としている。【００１０】
また、本発明は、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための飲食品組成物を提供する。
前記飲食品組成物は、前記粘膜細胞の炎症が、フゾバクテリウム属細菌が関与する粘膜細胞の炎症であることを好ましい形態としている。
前記飲食品組成物は、前記ビフィドバクテリウム属細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記飲食品組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記飲食品組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１から成る群から選択される一又は複数の細菌であることを好ましい形態としている。
前記飲食品組成物は、前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７であることを好ましい形態としている。【００１１】
また、本発明は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４、並びにビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０及びＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１を提供する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物が提供できる。また、本発明によれば、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための、医薬組成物及び飲食品組成物が提供できる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の組成物は、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分として含む。
また、本発明の組成物は、下記の態様１及び２を含む。
態様１：ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物。
態様２：ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための組成物。
前記態様２に係る組成物としては、例えば、医薬組成物、飲食品組成物等が挙げられる。
【００１４】
ビフィドバクテリウム属細菌は様々な生理機能を発揮し、その機能は、腸内での該細菌の増殖や、該細菌が腸内で産生する物質（例えば、酢酸等）によるものであると報告されている。従って、本発明によれば、幅広い年齢層において、一般的に云われているビフィドバクテリウム属細菌による安全性の高い効能を期待することができ、その効能は幅広い用途（飲食品用、医薬用、飼料用等）で実現することが可能である。
また、本発明のビフィドバクテリウム属細菌は、プロバイオティクス効果を期待することができるので、健康増進、食生活改善、腸内環境改善、腸内感染の予防又は治療、免疫力の回復又は向上等の目的に使用することも可能である。
【００１５】
ビフィドバクテリウム属細菌は、グラム陽性の偏性嫌気性桿菌である。
ビフィドバクテリウム属細菌としては特に制限されないが、例えば、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌が挙げられる。
尚、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムは、単にビフィドバクテリウム・ロンガムと表記される場合がある。また、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスは、単にビフィドバクテリウム・インファンティスと表記される場合がある。
【００１６】
具体的には、例えば、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＡＴＣＣ  ＢＡＡ−９９９、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７、及びそれらの変異体菌体が挙げられる。
【００１７】
前記ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４はいずれも、２０１７年１１月１３日に独立行政法人製品評価技術基盤機構（ＮＩＴＥ） 特許微生物寄託センター（〒292-0818  千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８  １２２号室）にブダペスト条約に基づく国際寄託がなされている（受託番号はそれぞれ、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４である。）。
【００１８】
また、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＡＴＣＣ  ＢＡＡ−９９９は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる。
【００１９】
また、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２は、２０１２年２月２３日に、独立行政法人製品評価技術基盤機構（ＮＩＴＥ）特許微生物寄託センター（〒292-0818  千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８  １２２号室）に、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている（受託番号は、ＮＩＴＥ  ＢＰ−１２５２である。）。
【００２０】
また、ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１はいずれも、２０１７年１１月１３日に独立行政法人製品評価技術基盤機構（ＮＩＴＥ）特許微生物寄託センター（〒292-0818  千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８  １２２号室）にブダペスト条約に基づく国際寄託がなされている（受託番号はそれぞれ、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１である。）。
【００２１】
また、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスＡＴＣＣ  １５６９７は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる。
【００２２】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２は、上記菌に制限されず、上記菌と実質的に同等の細菌であってもよい。上記菌と実質的に同等の細菌とは、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに分類される細菌であって、前記態様１及び２の用途を実現でき、さらにその１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列が、上記菌の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列に対して、好ましくは９８％以上、さらに好ましくは９９％以上、より好ましくは１００％の相同性を有し、且つ、好ましくは上記菌と同一の菌学的性質を有する細菌である。また、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに分類される細菌には、同細菌を親株とする変異株及び遺伝子組換え株も含まれる。
このことは、上記の他菌体にも同様に適用される。
また、本発明において、ビフィドバクテリウム属細菌は１種以上用いることが必要であり、２種以上を用いてもよい。
【００２３】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７２、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７３、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７４の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列は、それぞれ配列番号１、２、３で表される。各菌体は、DNAデータベース（BLAST）上で最も近縁の種であるビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＪＣＭ  １２１７と、1535 bpの配列長を用いた比較で、それぞれ99.8 %、99.6 %、99.8 %の相同性を有する。そのため、各菌体は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに分類される細菌であると判断した。
【００２４】
ビフィドバクテリウム・ビフィダムＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７０、ＮＩＴＥ  ＢＰ−０２５７１の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列は、それぞれ配列番号４、５で表される。各菌体は、DNAデータベース（BLAST）上で最も近縁の種であるビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ  １２５５と、1422 bpの配列長を用いた比較で、いずれも99.9 %の相同性を有する。そのため、各菌体は、ビフィドバクテリウム・ビフィダムに分類される細菌であると判断した。
【００２５】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムＪＣＭ  １２１７、及びビフィドバクテリウム・ビフィダムＪＣＭ  １２５５は、Japan Collection of Microorganisms（国立研究開発法人理化学研究所バイオリソースセンター微生物材料開発室、郵便番号：305-0074、住所：茨城県つくば市高野台3-1-1）から入手することができる。
【００２６】
本発明に用いられるビフィドバクテリウム属細菌は、前記態様１では、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制作用を有する。また、前記態様２では、ビフィドバクテリウム属細菌は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制作用を有することが好ましい。
フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制作用とは、対象における粘膜細胞に吸着するフゾバクテリウム属細菌の数を減少させる作用を意味し、対象がビフィドバクテリウム属細菌を摂取した（「投与された」場合を含む。）ときに、摂取しない（「投与しない」場合を含む。）ときよりも、粘膜細胞に吸着するフゾバクテリウム属細菌の数が少ないことを意味する。
【００２７】
ビフィドバクテリウム属細菌は、同細菌を培養することにより容易に増殖させることができる。培養する方法は、前記細菌が増殖できる限り特に限定されず、ビフィドバクテリウム属細菌（ビフィズス菌）の培養に通常用いられる方法を必要により適宜修正して用いることができる。例えば、培養温度は２５〜５０℃でよく、３０〜４０℃であることが好ましい。また、培養は好ましくは嫌気条件下で行われ、例えば、炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら培養することができる。また、液体静置培養等の微好気条件下で培養してもよい。
【００２８】
培養に用いる培地としては、特に限定されず、ビフィドバクテリウム属細菌の培養に通常用いられる培地を必要により適宜修正して用いることができる。すなわち、炭素源としては、例えば、ガラクトース、グルコース、フルクトース、マンノース、セロビオース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デンプン、デンプン加水分解物、廃糖蜜等の糖類を資化性に応じて使用できる。窒素源としては、例えば、アンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩類や硝酸塩類を使用できる。また、無機塩類としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、塩化マンガン、硫酸第一鉄等を用いることができる。また、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粕、肉エキス、酵母エキス等の有機成分を用いてもよい。また、調製済みの培地としては、例えばＭＲＳ培地を好適に用いることができる。
【００２９】
ビフィドバクテリウム属細菌は、培養後、得られた培養物をそのまま用いてもよく、希釈又は濃縮して用いてもよく、培養物から回収した菌体を用いてもよい。また、本発明の効果を損なわない限り、培養後に加熱、及び凍結乾燥等の種々の追加操作を行うことができる。尚、ビフィドバクテリウム属細菌は、生菌であっても死菌であってもよい。死菌としては、加熱等により殺菌された死菌が挙げられる。
【００３０】
次に、本発明におけるフゾバクテリウム属細菌は、嫌気性のグラム陰性桿菌で、腸内発酵により代謝産物として高濃度の酪酸を産生する細菌である。本発明におけるフゾバクテリウム属細菌は、前記態様１では、粘膜細胞に吸着するものであれば特に制限されず、前記態様２では、粘膜細胞の炎症に関与するものが好ましい。粘膜細胞の炎症に関与するとは、例えば、粘膜細胞に吸着して該粘膜細胞の炎症を起こすことなどが挙げられる。
例えば、フゾバクテリウム・ヌクレアタム（Fusobacterium nucleatum）に属する細菌、フゾバクテリウム・ゴニディアフォーマンス（Fusobacterium gonidiaformans）に属する細菌、フゾバクテリウム・ナヴィフォールム（Fusobacterium naviforme）に属する細菌、フゾバクテリウム・ペリオドンティカム（Fusobacterium periodonticum）に属する細菌、フゾバクテリウム・ネクロフォーラム（Fusobacterium necrophorum）に属する細菌、フゾバクテリウム・ヴァリウム（Fusobacterium varium）に属する細菌、フソバクテリウム・カニフェリナム（Fusobacterium canifelinum）に属する細菌、フソバクテリウム・エクイヌム（Fusobacterium equinum）に属する細菌、フソバクテリウム・ガストロスイス（Fusobacterium gastrosuis）に属する細菌、フソバクテリウム・ワーソキー（Fusobacterium hwasookii）に属する細菌、マイコバクテリウム・マッシリエンス（Fusobacterium massiliense）に属する細菌、フソバクテリウム・モルティフェラム（Fusobacterium mortiferum）に属する細菌、フソバクテリウム・ネクロゲネス（Fusobacterium necrogenes）に属する細菌、フソバクテリウム・ペルフェテンス（Fusobacterium perfoetens）に属する細菌、フソバクテリウム・ルッシイ（Fusobacterium russii）に属する細菌、フソバクテリウム・シミアエ（Fusobacterium simiae）に属する細菌、フソバクテリウム・ウルセランス（Fusobacterium ulcerans）に属する細菌等が挙げられる。
【００３１】
具体的には、フゾバクテリウム・ヌクレアタム・サブスピーシーズ・ヌクレアタムＡＴＣＣ  ２３７２６、フゾバクテリウム・ゴニディアフォーマンスＡＴＣＣ  ２５５６３、フゾバクテリウム・ナヴィフォールムＡＴＣＣ  ２５８３２、フゾバクテリウム・ペリオドンティカムＡＴＣＣ  ３３６９３、フゾバクテリウム・ネクロフォーラムＡＴＣＣ  ２５２８６、フゾバクテリウム・ヴァリウムＡＴＣＣ  ８５０１、フソバクテリウム・カニフェリナムＡＴＣＣ  ＢＡＡ−６８９、フソバクテリウム・モルティフェラムＡＴＣＣ  ２５５５７、フソバクテリウム・ネクロゲネスＡＴＣＣ  ２５５５６、フソバクテリウム・ペルフェテンスＡＴＣＣ  ２９２５０、フソバクテリウム・ルッシイＡＴＣＣ  ２５５３３、フソバクテリウム・シミアエＡＴＣＣ  ３３５６８、フソバクテリウム・ウルセランスＡＴＣＣ  ４９１８５、及びそれらの変異株菌体が挙げられる。
【００３２】
いずれの菌体も、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301  Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, United States of America）から入手することができる。
【００３３】
フゾバクテリウム・ヌクレアタム・サブスピーシーズ・ヌクレアタムＡＴＣＣ  ２３７２６は、上記菌に制限されず、上記菌と実質的に同等の細菌であってもよい。上記菌と実質的に同等の細菌とは、フゾバクテリウム・ヌクレアタム・サブスピーシーズ・ヌクレアタムに分類される細菌であって、前記態様１では粘膜細胞に吸着することができる細菌であり、前記態様２では粘膜細胞の炎症に関与する細菌であることが好ましく、さらにその１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列が、上記菌の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列に対して、好ましくは９８％以上、さらに好ましくは９９％以上、より好ましくは１００％の相同性を有し、且つ、好ましくは上記菌と同一の菌学的性質を有する細菌である。粘膜細胞の炎症に関与するとは、例えば、粘膜細胞に吸着して該粘膜細胞の炎症を起こすことなどが挙げられる。また、フゾバクテリウム・ヌクレアタム・サブスピーシーズ・ヌクレアタムに分類される細菌には、同細菌を親株とする変異株及び遺伝子組換え株も含まれる。
このことは、上記の他菌体にも同様に適用される。
また、本発明において、フゾバクテリウム属細菌は１種以上用いることが必要であり、２種以上を用いてもよい。
【００３４】
本発明における粘膜細胞は、未処理、すなわちビフィドバクテリウム属細菌による処理を経ない場合、例えば、ビフィドバクテリウム属細菌との反応（共存）を経ない場合に、前記態様１ではフゾバクテリウム属細菌が吸着する細胞であれば特に制限されず、前記態様２では特に制限されないが、フゾバクテリウム属細菌が吸着することで炎症を起こす細胞であることが好ましい。いずれの態様においても、例えば、大腸上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、歯茎の粘膜細胞が挙げられる。
【００３５】
本発明のビフィドバクテリウム属細菌によるフゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制効果の確認は、例えば、実施例に記載する下記の方法で確認できる。
大腸がん細胞株HCT116とビフィドバクテリウム属細菌とを反応（共存）させた後、該HCT116を、FITC（フルオレセイン・イソチオシアネート）標識したフゾバクテリウム・ヌクレアタムＡＴＣＣ  ２３７２６と反応（共存）させる。FITC陽性細胞をFITC標識したATCC 23726が吸着している細胞と見なして、ビフィドバクテリウム属細菌と反応（共存）させていないHCT116とATCC 23726とを反応（共存）させた場合のFITC陽性率をコントロール（100 %）とし、陽性細胞の割合（FITC陽性率）が減少していることによって確認する。
【００３６】
本発明の組成物は、混合物を含む概念であり、組成物の成分が均一であるか不均一であるかを問わない。
【００３７】
本発明の前記態様１に係る、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物は、吸着抑制用飲食品組成物又は吸着抑制用医薬組成物として利用できる。
また、前記態様１に係る組成物は、フゾバクテリウム属細菌が関与する疾患又は症状の予防又は治療のための飲食品組成物又は医薬組成物として利用できる。また、前記態様１に係る飲食品組成物は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制作用を有しているため、好ましくは、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着が抑制されることによって予防又は治療され得る疾患又は症状の予防又は治療に使用することができる。「治療」には、改善も含まれる。その適用として具体的には、例えば、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、歯周病等の疾患又は症状の予防又は治療が挙げられる。尚、本明細書では、「早産」を「症状」の１つとして定義する。
【００３８】
前記態様２に係る、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための組成物は、前記の通り、飲食品組成物として利用できる。前記粘膜細胞の炎症は、フゾバクテリウム属細菌が関与する粘膜細胞の炎症であることが好ましく、フゾバクテリウム属細菌が粘膜細胞へ吸着することに起因する粘膜細胞の炎症であることがより好ましい。
【００３９】
本発明の飲食品組成物は、ビフィドバクテリウム属細菌を含有する。飲食品組成物としては、液状、ペースト状、ゲル状固体、粉末等の形態を問わず、飲食品であってもよく、錠菓、流動食等のほか、例えば、パン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等の小麦粉製品；即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品、その他の即席食品等の即席食品類；農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）等の農産加工品；水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等の水産加工品；畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品；加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリーム、その他の乳製品等の乳・乳製品；バター、マーガリン類、植物油等の油脂類；しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等の基礎調味料；調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その他の複合調味料等の複合調味料・食品類；素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等の冷凍食品；キャラメル、キャンディー、グミ、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子、ゼリー、その他の菓子などの菓子類；炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料、その他の嗜好飲料等の嗜好飲料類、ベビーフード、ふりかけ、お茶漬けのり等のその他の市販食品等；育児用調製粉乳；経腸栄養食；特別用途食品、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品）；栄養補助食品等が挙げられる。
また、飲食品組成物は、サプリメントであってもよく、例えばタブレット状のサプリメントであってもよい。サプリメントである場合には、一日当りの食事量及び摂取カロリーについて他の食品に影響されることなく、ビフィドバクテリウム属細菌を摂取できる。
【００４０】
本発明の飲食品組成物は、通常の飲食品の原料にビフィドバクテリウム属細菌を添加することにより製造することができ、ビフィドバクテリウム属細菌を添加すること以外は、通常の飲食品と同様にして製造することができる。ビフィドバクテリウム属細菌の添加は、飲食品組成物の製造工程のいずれの段階で行ってもよい。また、添加したビフィドバクテリウム属細菌による発酵工程を経て、飲食品組成物が製造されてもよい。そのような飲食品組成物としては、ビフィズス菌飲料、及び発酵乳等が挙げられる。
飲食品組成物の原料としては、通常の飲食品に用いられている原料を使用することができる。製造された飲食品組成物は、経口的に摂取することが可能である。
【００４１】
本発明の飲食品組成物には、飲食品組成物製造のための原料、及び食品添加物等、飲食品組成物の製造工程又は製造後に飲食品組成物に添加されるものも含まれる。例えば、本発明におけるビフィドバクテリウム属細菌は、発酵乳製造用スターターとして使用することができる。また、本発明におけるビフィドバクテリウム属細菌を、製造された発酵乳に後から添加することもできる。
【００４２】
また、本発明の飲食品組成物には、本発明の効果を損なわない限り、公知の又は将来的に見出されるプロバイオティクス効果を有する成分又はプロバイオティクス効果を補助する成分を使用することができる。例えば、本発明の飲食品組成物は、ホエイタンパク質、カゼインタンパク質、大豆タンパク質、若しくはエンドウ豆タンパク質（ピープロテイン）等の各種タンパク質若しくはその混合物、分解物；ロイシン、バリン、イソロイシン若しくはグルタミン等のアミノ酸；ビタミンＢ６若しくはビタミンＣ等のビタミン類；クレアチン；クエン酸；又はフィッシュオイル等の成分と、本発明のビフィドバクテリウム属細菌とを配合して製造することができる。
【００４３】
本発明の飲食品組成物におけるビフィドバクテリウム属細菌の含有量は、飲食品組成物の態様によって適宜設定されるが、通常、飲食品組成物中に、１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｇまたは１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇまたは１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることがより好ましい。「ｃｆｕ」は、colony forming unit（コロニー形成単位）を表す。ビフィドバクテリウム属細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍｌは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍｌと置き換えることができる。
【００４４】
本発明の飲食品組成物は、単独で摂取してもよいし、他の飲食品組成物又は飲食品、例えば、前記態様１では、フゾバクテリウム属細菌が関与する他の疾患又は症状の予防又は治療のための飲食品組成物又は飲食品等と共に摂取してもよい。また、前記態様２では、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための食品組成物又は飲食品等と共に摂取してもよい。
【００４５】
本発明の飲食品組成物は、前記態様１では、フゾバクテリウム属細菌が関与する疾患又は症状の予防用又は治療用との用途が表示された飲食品組成物又は飲食品として販売することができる。また、「フゾバクテリウム属細菌が関与する疾患又は症状の予防用又は治療用」等の表示をした飲食品組成物又は飲食品とすることができる。また、これ以外でも、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制によって二次的に生じる効果を表す文言であれば、使用できることはいうまでもない。
前記態様２では、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防用又は治療用との用途が表示された飲食品組成物又は飲食品として販売することができる。また、「粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防用又は治療用」等の表示をした飲食品組成物又は飲食品とすることができる。また、これ以外でも、粘膜細胞の炎症へのフゾバクテリウム属細菌の関与抑制、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制、又は該吸着抑制による粘膜細胞の炎症の抑制によって二次的に生じる効果を表す文言であれば、使用できることはいうまでもない。
【００４６】
また、本発明の飲食品組成物は、プロバイオティクス等の用途（保健用途を含む）が表示された飲食品組成物又は飲食品として提供・販売されることが可能である。また、飲食品組成物又は飲食品の摂取対象として、「ビフィズス菌と暮らす生活を望む方」、「腸内環境を改善したい方」、「お腹の調子を整えたい方」、「良好な腸内環境を形成したい方」等と表示して提供・販売されることが可能である。
【００４７】
前記「表示」とは、需要者に対して上記用途を知らしめるための全ての行為を意味し、上記用途を想起・類推させうるような表示であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物及び媒体等の如何に拘わらず、すべて本発明の「表示」に該当する。しかしながら、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により表示することが好ましい。
具体的には、本発明の飲食品組成物又は飲食品に係る商品又は商品の包装に上記用途を記載する行為、商品又は商品の包装に上記用途を記載したものを譲渡し、引渡し、譲渡若しくは引渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が例示でき、特に包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等への表示が好ましい。
【００４８】
また、表示としては、行政等によって許可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示）であることが好ましい。例えば、保健機能食品など、より具体的には保健機能食品、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、栄養機能食品、医薬用部外品等としての表示を例示することができ、その他消費者庁によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、これに類似する制度にて認可される表示を例示できる。後者の例としては、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク低減表示、科学的根拠に基づいた機能性の表示等を例示することができる。さらに詳細には、健康増進法に規定する特別用途表示の許可等に関する内閣府令（平成二十一年八月三十一日内閣府令第五十七号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）、及びこれに類する表示等を例示することができる。
【００４９】
さらに本発明の飲食品組成物の一例として、乳児用ミルク（例えば、乳児用調製粉乳等）が挙げられる。当該「乳児用ミルク」は、好ましくは生後０〜３６ヶ月、より好ましくは生後０〜１２ヶ月の乳児が母乳の代わりとして飲むことができるように意図された、それだけで乳児の栄養的要求を満たす食品をいう。当該「乳児用ミルク」は、例えば、１以上のプロバイオティクスとしてのビフィドバクテリウム属細菌；ヒトミルクオリゴ糖、フルクトオリゴ糖及びガラクトオリゴ糖などのプレバイオティクス；カゼイン、大豆、ホエー又はスキムミルク由来のタンパク質；ラクトース、サッカロース、マルトデキストリン、デンプンまたはそれらの混合物などの炭水化物；脂質（例えば、パームオレイン、ヒマワリ油、ヒマワリ油）；及び、日常の食物に不可欠なビタミン類及びミネラル等を含有することができ、また、これらの群から選択される１種又は２種以上を含有することができる。
【００５０】
本発明の医薬組成物は、ビフィドバクテリウム属細菌を含有する。本発明の医薬組成物としては、ビフィドバクテリウム属細菌をそのまま使用してもよく、生理的に許容される液体又は固体の製剤担体を配合し製剤化して使用してもよい。
【００５１】
本発明の医薬組成物の剤形は特に制限されず、具体的には、錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、坐剤、注射剤、軟膏剤、貼付剤、点眼剤、及び点鼻剤等を例示できる。また、製剤化にあたっては、製剤担体として通常使用される賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、又は注射剤用溶剤等の添加剤を使用することができる。
【００５２】
また、前記製剤担体としては、剤形に応じて、各種有機又は無機の担体を用いることができる。固形製剤の場合の担体としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
【００５３】
賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニット、ソルビット等の糖誘導体；トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、α‐デンプン、デキストリン、カルボキシメチルデンプン等のデンプン誘導体；結晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム等のセルロース誘導体；アラビアゴム；デキストラン；プルラン；軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム等の珪酸塩誘導体；リン酸カルシウム等のリン酸塩誘導体；炭酸カルシウム等の炭酸塩誘導体；硫酸カルシウム等の硫酸塩誘導体等が挙げられる。
【００５４】
結合剤としては、例えば、上記賦形剤の他、ゼラチン；ポリビニルピロリドン；マクロゴール等が挙げられる。
【００５５】
崩壊剤としては、例えば、上記賦形剤の他、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等の化学修飾されたデンプン又はセルロース誘導体等が挙げられる。
【００５６】
滑沢剤としては、例えば、タルク；ステアリン酸；ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム等のステアリン酸金属塩；コロイドシリカ；ピーガム、ゲイロウ等のワックス類；硼酸；グリコール；フマル酸、アジピン酸等のカルボン酸類；安息香酸ナトリウム等のカルボン酸ナトリウム塩；硫酸ナトリウム等の硫酸塩類；ロイシン；ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム等のラウリル硫酸塩；無水珪酸、珪酸水和物等の珪酸類；デンプン誘導体等が挙げられる。
【００５７】
安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール等のアルコール類；塩化ベンザルコニウム；無水酢酸；ソルビン酸等が挙げられる。
【００５８】
矯味矯臭剤としては、例えば、甘味料、酸味料、香料等が挙げられる。
なお、経口投与用の液剤の場合に使用する担体としては、水等の溶剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
【００５９】
本発明の医薬組成物におけるビフィドバクテリウム属細菌の含有量は、剤形、用法、対象の年齢、性別、疾患の種類、疾患の程度、及びその他の条件等により適宜設定されるが、通常、１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｇまたは１×１０4〜１×１０13ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇまたは１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることがより好ましい。ビフィドバクテリウム属細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍｌは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍｌと置き換えることができる。
【００６０】
本発明の医薬組成物の投与時期は特に限定されず、対象となる疾患又は症状の治療方法に従って、適宜投与時期を選択することが可能である。また、予防的に投与してもよく、維持療法に用いてもよい。また、投与形態は製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、患者の症状の程度等に応じて決定されることが好ましい。なお、本発明の医薬組成物は、いずれの場合も１日１回又は複数回に分けて投与することができ、また、数日又は数週間に１回の投与としてもよい。対象としては、ヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、イヌ、ネコ、ウマ等が挙げられる。
【００６１】
前記態様１に係る医薬組成物は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制作用を有しているため、好ましくは、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着が抑制されることによって予防又は治療され得る疾患又は症状の予防又は治療に使用することができる。「治療」には、改善も含まれる。その適用として具体的には、例えば、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、歯周病等の疾患又は症状の予防又は治療が挙げられる。尚、本明細書では、「早産」を「症状」の１つとして定義する。
前記態様２に係る、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための組成物は、前記の通り、医薬組成物として利用できる。前記粘膜細胞の炎症は、フゾバクテリウム属細菌が関与する粘膜細胞の炎症であることが好ましく、フゾバクテリウム属細菌が粘膜細胞へ吸着することに起因する粘膜細胞の炎症であることがより好ましい。
【００６２】
本発明の医薬組成物は、単独で投与してもよいし、他の医薬組成物又は医薬、例えば、前記態様１では、フゾバクテリウム属細菌が関与する他の疾患又は症状の予防又は治療のための医薬組成物又は医薬、大腸がんや食道がんに対する医薬組成物又は医薬（例えば、抗がん剤等）、胃腸薬、下剤、鎮痛剤；潰瘍性大腸炎に対する医薬組成物又は医薬、歯周病に対する医薬組成物又は医薬等と併用してもよい。また、前記態様２では、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための医薬組成物又は医薬等と併用してもよい。
【００６３】
本発明の他の態様は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物の製造における、ビフィドバクテリウム属細菌の使用である。
また、本発明の他の態様は、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用に用いられるビフィドバクテリウム属細菌である。
また、本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム属細菌を適用対象に投与する段階又は本発明のフゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物を適用対象に投与する段階を含む、フゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着を抑制する方法である。
また、本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム属細菌を適用対象に投与する段階又は本発明のフゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制用組成物を適用対象に投与する段階を含む、フゾバクテリウム属細菌が関与する疾患又は症状の予防方法又は治療方法である。
また、本発明の他の態様は、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のための医薬組成物又は飲食品組成物の製造における、ビフィドバクテリウム属細菌の使用である。
また、本発明の他の態様は、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防又は治療のために用いられるビフィドバクテリウム属細菌である。
また、本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム属細菌を適用対象に投与する段階又は本発明の医薬組成物若しくは飲食品組成物を適用対象に投与する段階を含む、粘膜細胞の炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防方法又は治療方法である。
また、本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム属細菌を有効成分とする、粘膜細胞炎症に起因する、潰瘍性大腸炎、大腸がん、食道がん、早産、及び歯周病からなる群から選択される疾患又は症状の予防に関する機能の表示を付した、医薬組成物又は飲食品組成物である。当該機能の表示は特に限定されないが、例えば、「潰瘍性大腸炎を予防する」、「潰瘍性大腸炎の発病リスクを下げる」、「潰瘍性大腸炎の発症リスクを下げる」、「大腸がんを予防する」、「大腸がんの発病リスクを下げる」、「大腸がんの発症リスクを下げる」、「食道がんを予防する」、「食道がんの発病リスクを下げる」、「食道がんの発症リスクを下げる」、「早産を予防する」、「早産のリスクを下げる」、「歯周病を予防する」、「歯周病の発病リスクを下げる」、「歯周病の発症リスクを下げる」等が挙げられる。本明細書において、当該機能の表示は、組成物自体に付されてもよいし、組成物の容器又は包装に付されてもよい。
【実施例】
【００６４】
以下に、実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。【００６５】
〔試験例１〕ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌によるフゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制効果
大腸がん細胞株HCT116細胞5×105個をPBS 0.1 mlに懸濁した。別途、GAM培地（GAMブイヨン「ニッスイ」、日水製薬株式会社製）で、それぞれ37℃、16時間培養したBifidobacterium breve ATCC 15700、Bifidobacterium longum subsp. longum NITE BP-02572、NITE BP-02573、NITE BP-02574の各菌培養液の660 nmの吸光度から菌数を算出し、HCT116細胞5×105個に対してMOI 500に相当する2.5×108CFUの各菌体をPBS 0.1 mlに溶解した。その後、HCT116細胞5×105個と各菌体2.5×108 CFUを50 ｍMのリン酸バッファー（pH 5.0）中で37℃、3時間反応（共存）させた後、1％ BSAを含むPBS 1 mlで3回洗浄した。さらに、別途、GAM培地（GAMブイヨン「ニッスイ」、日水製薬株式会社製）で37℃、16時間培養したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726) 1×1010 CFUをFITC isomer (sigma F7250)を用いてFITC標識後、PBSでの洗浄を4回繰り返したのち、MOI 50に相当する2.5×107CFUの菌体をPBS 0.02 mlに溶解した。前述の各菌体と反応（共存）させたHCT116細胞に、2.5×107CFUのFITC標識したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726)を室温、1時間で反応（共存）させた後、1％BSAを含むPBSでの洗浄を3回繰り返した。その後、Flowcytometer (BD FACSCanto、ベクトン・ディッキンソン社製)を用いて、FITC陽性細胞をFITC標識したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726)が吸着している細胞と見なし、各菌体で処理したHCT116細胞におけるFITC陽性細胞の割合を算出した。その結果を表１に示す。
下記結果に示すように、菌体で処理していないHCT116細胞のFITC陽性細胞率が9.89 %であるのに対し、Bifidobacterium breve ATCC 15700で処理した細胞では8.36 %とFITC陽性細胞率にほとんど変化はなかったが、Bifidobacterium longum subsp. longum NITE BP-02572、NITE BP-02573、NITE BP-02574で処理した細胞では、それぞれ1.19 %、2.04 %、0. 60 %とFITC陽性細胞率が減少した。【００６６】
【表１】
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【００６７】
〔試験例２〕ビフィドバクテリウム・ビフィダムに属する細菌によるフゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制効果
大腸がん細胞株HCT116細胞5×105個をPBS 0.1 mlに懸濁した。別途、GAM培地（GAMブイヨン「ニッスイ」、日水製薬株式会社製）で、それぞれ37℃、16時間培養したBifidobacterium breve ATCC 15700、Bifidobacterium bifidum NITE BP-1252、NITE BP-02570、NITE BP-02571の各菌培養液の660 nmの吸光度から菌数を算出し、HCT116細胞5×105個に対してMOI 300に相当する1.5×108 CFUの各菌体をPBS 0.1 mlに溶解した。その後、HCT116細胞5×105個と各菌体2.5×108 CFUを50 ｍMのリン酸バッファー（pH 5.0）中で37℃、3時間反応（共存）させた後、1％ BSAを含むPBS 1 mlで3回洗浄した。さらに、別途、GAM培地（GAMブイヨン「ニッスイ」、日水製薬株式会社製）で37℃、16時間培養したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726) 1×1010 CFUをFITC isomer (sigma F7250)を用いてFITC標識後、PBSでの洗浄を4回繰り返したのち、MOI 50に相当する2.5×107CFUの菌体をPBS 0.02 mlに溶解した。前述の各菌体と反応（共存）させたHCT116細胞に、2.5×107CFUのFITC標識したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726)を室温、1時間で反応（共存）させた後、1％BSAを含むPBSでの洗浄を3回繰り返した。その後、Flowcytometer (BD FACSCanto、ベクトン・ディッキンソン社製)を用いて、FITC陽性細胞をFITC標識したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726)が吸着している細胞と見なし、各菌体で処理したHCT116細胞におけるFITC陽性細胞の割合を算出した。その結果を表２に示す。
下記結果に示すように、菌体で処理していないHCT116細胞のFITC陽性細胞率が7.09 %であるのに対し、Bifidobacterium breve ATCC 15700で処理した細胞では7.67 %とFITC陽性細胞率にほとんど変化はなかったが、Bifidobacterium bifidum NITE BP-1252、NITE BP-02570、NITE BP-02571で処理した細胞では、それぞれ3.03 %、2.17 %、2.85 %とFITC陽性細胞率が減少した。【００６８】
【表２】
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【００６９】
〔試験例３〕ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌によるフゾバクテリウム属細菌の粘膜細胞への吸着抑制効果
大腸がん細胞株HCT116細胞5×105個をPBS 0.1 mlに懸濁した。別途、GAM培地（GAMブイヨン「ニッスイ」、日水製薬株式会社製）で、それぞれ37℃、16時間培養したBifidobacterium breve ATCC 15700、Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697の各菌培養液の660 nmの吸光度から菌数を算出し、HCT116細胞5×105個に対してMOI 50に相当する2.5×107CFUの各菌体をPBS 0.1 mlに溶解した。その後、HCT116細胞5×105個と各菌体2.5×107 CFUを50 ｍMのリン酸バッファー（pH 5.0）中で37℃、2時間反応（共存）させた後、1％ BSAを含むPBS 1 mlで3回洗浄した。さらに、別途、GAM培地（GAMブイヨン「ニッスイ」、日水製薬株式会社製）で37℃、16時間培養したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726) 1×1010 CFUをFITC isomer (sigma F7250)を用いてFITC標識後、PBSでの洗浄を4回繰り返したのち、MOI 10に相当する5×106 CFUの菌体をPBS 0.02 mlに溶解した。前述の各菌体と反応（共存）させたHCT116細胞に、5×106 CFUのFITC標識したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726)を室温、1時間で反応（共存）させた後、1％BSAを含むPBSでの洗浄を3回繰り返した。その後、Flowcytometer (BD FACSCanto、ベクトン・ディッキンソン社製)を用いて、FITC陽性細胞をFITC標識したFusobacterium nucleatum (ATCC 23726)が吸着している細胞と見なし、各菌体で処理したHCT116細胞におけるFITC陽性細胞の割合を算出した。その結果を表３に示す。
下記結果に示すように、菌体で処理していないHCT116細胞のFITC陽性細胞率が7.93 %であるのに対し、Bifidobacterium breve ATCC 15700で処理した細胞では8.61 %とFITC陽性細胞率にほとんど変化はなかったが、Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697で処理した細胞では、3.52 %とFITC陽性細胞率が減少した。【００７０】
【表３】
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【００７１】
〔製造例１〕
Bifidobacterium longum subsp. longum NITE BP-02572、NITE BP-02573、NITE BP-02574、Bifidobacterium bifidum NITE BP-1252、NITE BP-02570、NITE BP-02571、Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697を、それぞれMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養後、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、各細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。各菌末と、ホエイタンパク質濃縮物（Whey protein concentrate； WPC）とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物20 gを200 gの水に溶かし、吸着抑制用組成物を得る。これを経口投与することにより、フゾバクテリウム属細菌の大腸上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、歯茎の粘膜細胞への吸着抑制効果が期待できる。【００７２】
〔製造例２〕
Bifidobacterium longum subsp. longum NITE BP-02572、NITE BP-02573、NITE BP-02574、Bifidobacterium bifidum NITE BP-1252、NITE BP-02570、NITE BP-02571、Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697を、それぞれMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養後、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、各細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。各菌末と、乳タンパク質濃縮物の乾燥粉末（MPC480、フォンテラ社製、タンパク質含量80質量％、カゼインタンパク質：ホエイタンパク質＝約８：２）とを均一に混合して、組成物を得る。当該組成物20 gを200 gの水に溶かし、吸着抑制用組成物を得る。これを経口投与することにより、フゾバクテリウム属細菌の大腸上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、歯茎の粘膜細胞への吸着抑制効果が期待できる。【００７３】
〔製造例３〕
Bifidobacterium longum subsp. longum NITE BP-02572、NITE BP-02573、NITE BP-02574、Bifidobacterium bifidum NITE BP-1252、NITE BP-02570、NITE BP-02571、Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697を、それぞれMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養後、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、各細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。次に、結晶セルロースを撹拌造粒機に投入し混合する。その後、精製水を加え造粒、造粒物を乾燥し、各細菌の抽出成分を含有し、賦形剤を含有してなる造粒物を得る。当該組成物を経口投与することにより、フゾバクテリウム属細菌の大腸上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、歯茎の粘膜細胞への吸着抑制効果が期待できる。【００７４】
〔製造例４〕
Bifidobacterium longum subsp. longum NITE BP-02572、NITE BP-02573、NITE BP-02574から少なくとも１種又は２種をMRS液体培地3 mLに添加し、37℃で16時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。該菌末と、オリゴ糖とを均一に混合して組成物を得る。当該組成物を、高齢者用流動食として高齢者に提供する。ビフィドバクテリウム属細菌の摂取量が１×１０８〜１×１０１０ＣＦＵ／ｋｇ体重／日になるようにし、１週間毎日朝食で提供する。ビフィドバクテリウム属細菌が死菌の場合、ＣＦＵ／ｋｇ体重／日は、個細胞／ｋｇ体重／日と置き換えることができる。なお、発酵乳等の飲食物と混合してもよい。オリゴ糖としてはイソマルトオリゴ糖、ラクチュロース、ラフィノース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖、大豆オリゴ糖、ヒトミルクオリゴ糖（HMO）が使用出来る。
ヒトミルクオリゴ糖としては、シアル酸、２’−フコシルラクトース、３−フコシルラクトース、２’，３−ジフコシルラクトース、３’−シアリルラクトース、６’−シアリルラクトース、３−フコシル−３’−シアリルラクトース、ラクト−Ｎ−テトラオース、ラクト−Ｎ−ネオテトラオース、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩ、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩＩ、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＩＩＩ、ラクト−Ｎ−フコペンタオースＶ、ラクト−Ｎ−ジフコシルヘキサオースＩ、ラクト−Ｎ−ジフコシルヘキサオースＩＩ、並びに、ラクト−Ｎ−シアリルペンタオース、ＬＳＴａ、ＬＳＴｂ及びＬＳＴｃ等が挙げられる。
当該組成物を経口投与することにより、フゾバクテリウム属細菌の大腸上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、歯茎の粘膜細胞への吸着抑制効果が期待できる。【００７５】
〔製造例５〕
Bifidobacterium bifidum NITE BP-1252、NITE BP-02570、NITE BP-02571から少なくとも１種又は２種を用いること以外は、製造例４と同様に組成物を得ることができる。【００７６】
〔製造例６〕
Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697を用いること以外は、製造例４と同様に組成物を得ることができる。【００７７】
〔製造例７〕
Bifidobacterium longum subsp. longum NITE BP-02572、NITE BP-02573、NITE BP-02574、Bifidobacterium bifidum NITE BP-1252、NITE BP-02570、NITE BP-02571、Bifidobacterium longum subsp. infantis ATCC 15697をそれぞれ添加した発酵乳の製造法を下記に示す。
まず、乳原料、および必要に応じた水、その他の成分等を混合し、好ましくは均質化処理を行い、加熱殺菌処理する。均質化処理および加熱殺菌処理は常法により行うことができる。加熱殺菌された殺菌調乳液に乳酸菌スターターを添加（接種）し、所定の発酵温度に保持して発酵させ、発酵物を得る。発酵によりカードが形成される。
乳酸菌スターターとしては、例えば、ラクトバチルス・ブルガリクス（Lactobacillus bulgaricus）、ラクトコッカス・ラクチス（Lactococcus lactis）、ストレプトコッカス・サーモフィラス（Streptococcus thermophilus）等のヨーグルト製造に通常用いられている乳酸菌を用いることができる。ｐＨが目標の値に達したら、形成されたカードを撹拌により破砕し、１０℃以下に冷却して発酵物を得る。１０℃以下に冷却することにより、乳酸菌の活性を低下させて酸の生成を抑制することができる。
次いで、発酵工程で得られた発酵物を加熱処理して加熱後発酵物（加熱処理後の発酵物）を得る。発酵物を適度に加熱することにより、加熱後発酵物中の乳酸菌による酸の生成を抑えることができる。これによって、その後の製造工程中および／またはビフィズス菌入り濃縮発酵乳の保存中のｐＨの低下を抑えることができ、その結果、ビフィズス菌の生残性を向上させることができる。
次いで、加熱処理工程で得られた加熱後発酵物に、本発明のビフィドバクテリウム属細菌を添加する。ビフィドバクテリウム属細菌の添加量は、加熱後発酵物に対して１×１０７〜１×１０１１ＣＦＵ／ｍｌが好ましく、１×１０８〜１×１０１０ＣＦＵ／ｍｌがより好ましい。ビフィドバクテリウム属細菌が死菌の場合、ＣＦＵ／ｍｌは、個細胞／ｍｌと置き換えることができる。
加熱後発酵物にビフィドバクテリウム属細菌を添加した後、濃縮を行う。濃縮工程は公知の濃縮方法を適宜用いて行うことができる。例えば遠心分離法または膜分離法を用いることができる。
遠心分離法では、被濃縮物（ビフィズス菌が添加された加熱後発酵物）中のホエーが除去されて、固形分濃度が高められたビフィズス菌入り濃縮発酵乳が得られる。
上述のようにして得られた発酵乳を摂取することにより、フゾバクテリウム属細菌の大腸上皮細胞、子宮の血管内皮細胞、食道の粘膜上皮細胞、歯茎の粘膜細胞への吸着抑制効果が期待できる。
【配列表】
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【国際調査報告】
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