(57)【要約】  リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体、および核酸を含む、核酸含有脂質ナノ粒子を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体、および核酸を含む、核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項２】
前記グリセロールの脂肪酸エステル類縁体が、グリセロリン脂質類縁体である、請求項1に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項３】
リパーゼが、ホスホリパーゼA2である請求項1または2に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項４】
前記グリセロールの脂肪酸エステル類縁体が、以下の式(1)もしくは式(2)で表される脂質である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【化１】
2019027055.tif 000155
（式(1)中、Rx1およびRx2は、同一または異なって、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルであり、
Rx3は、陰電荷、水素原子、または以下の基；
【化２】
2019027055.tif 000156
のいずれかである。）
【化３】
2019027055.tif 000157
（式(2)中、Rx4は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニルもしくはRx41-CO-であり、
Rx41は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルであり、
Rx5は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
Rx6は、陰電荷、水素原子、または以下の基；
【化４】
2019027055.tif 000158
のいずれかである。）
【請求項５】
前記グリセロールの脂肪酸エステル類縁体の含有量が、総脂質のモル数に対して0.001倍モル量以上である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項６】
カチオン性脂質をさらに含む、請求項1〜5のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項７】
カチオン性脂質が、脂質A；以下の式(I)〜式(IV)、式(V’),式(V’’)の少なくとも1つ、および／または、脂質B；式(CL-I)〜(CL-XIX)の少なくとも1つである請求項6に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
式(I)
【化５】
2019027055.tif 000159
（式中、
R1〜R3は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L1〜L3は同一または異なって存在しないか、-Z1-(CY1Y2)p1-または-Z2-(CY3Y4)p2-Z3-(CY5Y6)p3-（式中、Y1〜Y6は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z1〜Z3は同一または異なって、-O-、-NY7A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY7B-、-NY7C-CO-または-NY7D-CO-0-であり（式中、Y7A〜Y7Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p1〜p3は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
X1は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、
A1は薬学的に許容される陰イオンである）、
式(II)
【化６】
2019027055.tif 000160
（式中、
R4〜R6は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L4〜L6は同一または異なって存在しないか、-Z4-(CY8Y9)p4-または-Z5-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-（式中、Y8〜Y13は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z4〜Z6は同一または異なって、-O-、-NY14A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY14B-、-NY14C-CO-または-NY14D-CO-0-であり（式中、Y14A〜Y14Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p4は0〜5の整数であり、p5は1〜5の整数であり、p6は0〜5の整数である）であり、
L7は存在しないか、-(CY15Y16)p7-、-(CY17Y18)p8-Z7-(CY19Y20)p9-または-(CY21Y22)p10-Z8-(CY23Y24)p11-Z9-(CY25Y26)p12-（式中、Y15〜Y26は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z7〜Z9は同一または異なって、-O-、-NY27A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY27B-、-NY27C-CO-または-NY27D-CO-0-であり（式中、Y27A〜Y27Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p7は1〜5の整数であり、p8は0〜5の整数であり、p9は1〜5の整数であり、p10は0〜5の整数であり、p11は1〜5の整数であり、p12は1〜5の整数である）であり、
B1は、
【化７】
2019027055.tif 000161
（式中、X2およびX3は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X4は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、X5およびX6は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X7は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y28〜Y37は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z10およびZ11は同一または異なって-O-、-NY38A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY38B-、-NY38C-CO-または-NY38D-CO-0-であり（式中、Y38A〜Y38Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p13は0〜5の整数であり、p14〜p17は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
A2は薬学的に許容される陰イオンである）、
式(III)
【化８】
2019027055.tif 000162
（式中、
R7〜R9は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L8〜L10は同一または異なって存在しないか、-Z12-(CY39Y40)p18-または-Z13-(CY41Y42)p19-Z14-(CY43Y44)p20-（式中、Y39〜Y44は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z12〜Z14は同一または異なって、-O-、-NY45A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY45B-、-NY45C-CO-、-NY45D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y45A〜Y45Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、
p18は0〜5の整数であり、p19は1〜5の整数であり、p20は0〜5の整数である）であり、
L11は存在しないか、-(CY46Y47)p21-、-(CY48Y49)p22-Z15-(CY50Y51)p23-または-(CY52Y53)p24-Z16-(CY54Y55)p25-Z17-(CY56Y57)p26-（式中、Y46〜Y57は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z15〜Z17は同一または異なって、-O-、-NY58A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY58B-、-NY58C-CO-、-NY58D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y58A〜Y58Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p21は1〜5の整数であり、p22は0〜5の整数であり、p23は1〜5の整数であり、p24は0〜5の整数であり、p25は1〜5の整数であり、p26は1〜5の整数である）であり、
L12は存在しないか、-(CY59Y60)p27-、-(CY61Y62)p28-Z18-(CY63Y64)p29-または-(CY65Y66)p30-Z19-(CY67Y68)p31-Z20-(CY69Y70)p32-（式中、Y59〜Y70は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z18〜Z20は同一または異なって、-O-、-NY71A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY71B-、-NY71C-CO-、-NY71D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y71A〜Y71Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p27は1〜5の整数であり、p28は0〜5の整数であり、p29は0〜5の整数であり、p30は0〜5の整数であり、p31は1〜5の整数であり、p32は0〜5の整数である）
であり、
J1およびJ2は同一または異なってCY72またはN(式中、Y72は水素原子、ヒドロキシ、置換されていても良いC1-C4アルキル、置換されていても良いC1-C4アルコキシ、または置換されていても良いC1-C4アシルオキシである)であり、
B2は、
【化９】
2019027055.tif 000163
（式中、X8およびX9は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X10は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、X11およびX12は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X13は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y73〜Y82は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z21およびZ22は同一または異なって-O-、-NY83A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY83B-、-NY83C-CO-または-NY83D-CO-0-であり（式中、Y83A〜Y83Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p33は0〜5の整数であり、p34〜p37は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
A3は薬学的に許容される陰イオンである）、
式(IV)
【化１０】
2019027055.tif 000164
（式中、
R10〜R12は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L13は存在しないか、-Z23-(CY83Y84)p38-または-Z24-(CY85Y86)p39-Z25-(CY87Y88)p40-（式中、Y83〜Y88は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z23〜Z25は同一または異なって、-O-、-NY89A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY89B-、-NY89C-CO-または-NY89D-CO-0-であり（式中、Y89A〜Y89Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p38〜p40は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
L14およびL15は同一または異なって存在しないか、-Z26-(CY90Y91)p41-または-Z27-(CY92Y93)p42-Z28-(CY94Y95)p43-（式中、Y90〜Y95は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z26〜Z28は同一または異なって、-O-、-NY96A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY96B-、-NY96C-CO-、-NY96D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y96A〜Y96Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p41は0〜5の整数であり、p42は1〜5の整数であり、p43は0〜5の整数である）であり、
L16は存在しないか、-(CY97Y98)p44-、-(CY99Y100)p45-Z29-(CY101Y102)p46-または-(CY103Y104)p47-Z30-(CY105Y106)p48-Z31-(CY107Y108)p49-（式中、Y97〜Y108は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z29〜Z31は同一または異なって、-O-、-NY109A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY109B-、-NY109C-CO-、-NY109D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y109A〜Y109Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p44は1〜5の整数であり、p45は0〜5の整数であり、p46は1〜5の整数であり、p47は0〜5の整数であり、p48は1〜5の整数であり、p49は1〜5の整数である）であり、
J3はCY110またはN(式中、Y110は水素原子、ヒドロキシ、置換されていても良いC1-C4アルキル、置換されていても良いC1-C4アルコキシ、または置換されていても良いC1-C4アシルオキシである)であり、
X14およびX15は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、
A4は薬学的に許容される陰イオンである）、
式(V’)もしくは式(V’’)
【化１１】
2019027055.tif 000165
（式中、
R13〜R18は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
Y111〜Y114は同一または異なって水素原子、ヒドロキシまたは置換されていても良いC1-C4アルキルであり、
L17〜L19およびL22〜L24は同一または異なって存在しないか、-Z32-(CY115Y116)p51-または-Z33-(CY117Y118)p52-Z34-(CY119Y120)p53-（式中、Y115〜Y120は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z32〜Z34は同一または異なって、-O-、-NY121A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY121B-、-NY121C-CO-、-NY121D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y121A〜Y121Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p51は0〜5の整数であり、p52は1〜5の整数であり、p53は0〜5の整数である）であり、
L20およびL25は同一または異なって存在しないか、-(CY122Y123)p54-、-(CY124Y125)p5
5-Z35-(CY126Y127)p56-または-(CY128Y129)p57-Z36-(CY130Y131)p58-Z37-(CY132Y133)p59-（式中、Y122〜Y133は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z35〜Z37は同一または異なって、-O-、-NY134A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY134B-、-NY134C-CO-、-NY134D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y134A〜Y134Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p54は1〜5の整数であり、p55は0〜5の整数であり、p56は1〜5の整数であり、p57は0〜5の整数であり、p58は1〜5の整数であり、p59は1〜5の整数である）であり、
L21およびL26は同一または異なって存在しないか、-(CY135Y136)p60-、-(CY137Y138)p61-Z38-(CY139Y140)p62-または-(CY141Y142)p63-Z39-(CY143Y144)p64-Z40-(CY145Y146)p65-（式中、Y135〜Y146は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z38〜Z40は同一または異なって、-O-、-NY147A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-N
Y147B-、-NR147C-CO-、-NY147D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y147A〜Y147Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p60は1〜5の整数であり、p61は0〜5の整数であり、p62は0〜5の整数であり、p63は0〜5の整数であり、p64は1〜5の整数であり、p65は0〜5の整数である）であり、
B3およびB4は同一または異なって、
【化１２】
2019027055.tif 000166
（式中、X16およびX17は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X18は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、X19およびX20は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X21は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y148〜Y157は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z41およびZ42は同一または異なって-O-、-NY158A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY158B-、-NY158C-CO-または-NY158D-CO-0-であり（式中、Y158A〜Y158Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p66は0〜5の整数であり、p67〜p70は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
A5およびA6は同一または異なって薬学的に許容される陰イオンである）
式(CL-I)
【化１３】
2019027055.tif 000167
(式中、
R101およびR102は同一または異なって直鎖状または分岐状のC10-C24アルキル、C10-C24アルケニルもしくはC10-C24アルキニルであり、
L101およびL102は水素原子であるか、または一緒になって単結合もしくはC2-C8アルキレンを形成し、
L103は単結合、-CO-または-CO-O-であり、
L103が単結合である場合には、
X101は水素原子、C1-C6アルキル、C3-C6アルケニル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、
L103が-CO-または-CO-O-である場合には、
X101はピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、該置換基の少なくとも1つは、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ピロリジニル、ピペリジルまたはモルホリニルである)、
式(CL-II)
【化１４】
2019027055.tif 000168
(式中、
R103およびR104は同一または異なって直鎖状または分岐状のC12-C24アルキル、C12-C24アルケニルもしくはC12-C24アルキニルであり、
p101およびp102は同一または異なって0〜3の整数であり、
L106およびL107は水素原子であるか、または一緒になって単結合もしくはC2-C8アルキレンを形成し、
L104およびL105は同一または異なって-O-、-CO-O-または-O-CO-であり、
L108は単結合、-CO-または-CO-O-であり、
L108が単結合である場合には、
X102は水素原子、C1-C6アルキル、C3-C6アルケニル、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、
L108が-CO-または-CO-O-である場合には、
X102はピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、該置換基の少なくとも1つは、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ピロリジニル、ピペリジルまたはモルホリニルである)、
式(CL-III)
【化１５】
2019027055.tif 000169
(式中、
R105は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R106は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチルもしくはC8-C24アルキニルオキシプロピルであり、
X103およびX104は同一または異なってC1-C3アルキルであるか、または一緒になってC2-C8アルキレンを形成するか、またはX103はL111と一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
L111は水素原子、C1-C6アルキル、C3-C6アルケニル、アミノ、モノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイルもしくはジアルキルカルバモイルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであるか、またはX103と一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
L109はC1-C6アルキレンであり、
L110は単結合であるか、またはC1-C6アルキレンであり、ただし、L109とL110の炭素数の和は7以下であり、L111が、水素原子の場合、L110は単結合であり、L111がX103と一緒になってC2-C6アルキレンを形成する場合、L110は単結合であるか、またはメチレンもしくはエチレンである)、
式(CL-IV)
【化１６】
2019027055.tif 000170
(式中、
R107は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R108は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチル、C8-C24アルキニルオキシプロピル、C8-C24アルキルオキシエトキシエチル、C8-C24アルケニルオキシエトキシエチルもしくはC8-C24アルキニルオキシエトキシエチルであり、
X105は水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである)、
式(CL-V)
【化１７】
2019027055.tif 000171
(式中、
R109は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R110は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチルもしくはC8-C24アルキニルオキシプロピルであり、
L112はC1-C3アルキレンであり、
X105’は水素原子またはC1-C3アルキルである)、
式(CL-VI)
【化１８】
2019027055.tif 000172
(式中、
R111およびR112は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
X106およびX107は同一または異なってC1-C3アルキルであるか、または一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
p103、p104およびp105は同一または異なって0または1であり、ただしp103, p104およびp105は同時には0ではなく、
L113およびL114は同一または異なってO、SまたはNHである)、
式(CL-VII)
【化１９】
2019027055.tif 000173
(式中、
R113およびR114は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R115は水素原子、ヒドロキシ、置換されていても良いC1-C4アルキル、C1-C4アルコキシまたはC1-C4アシルオキシであり、
X109およびX110は同一または異なってC1-C3アルキルであるか、または一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
L115は-CO-O-、-O-CO-、-NHCO-または-CONH-であり、
p106は0〜3の整数であり、
p107は1〜4の整数である）、
式(CL-VIII)
【化２０】
2019027055.tif 000174
（式中、
R116およびR117は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C7-C20アルキルオキシC1-C3アルキル、C7-C20アルケニルオキシC1-C3アルキルもしくはC7-C20アルキニルオキシC1-C3アルキルであり、
B100は、水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、C1-C3ジアルキルアミノC2-C4アルキル、式(A)
【化２１】
2019027055.tif 000175
(式中、X111およびX112は同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX111およびX112が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p110は2〜6の整数である)、または式(B)
【化２２】
2019027055.tif 000176
(式中、X113およびX114は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX113およびX114が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p111は1〜6の整数である)であり、
P108は0〜4の整数であり、P109は1〜4の整数であり(但し、P108が0であり、P109が1である場合を除く)、
L116は結合する炭素ごとに同一または異なって水素原子またはC1-C3アルキルであり、
L117は結合する炭素ごとに同一または異なって水素原子またはC1-C3アルキルである）、
式(CL-IX)
【化２３】
2019027055.tif 000177
（式中、
X115およびX116は同一または異なって水素原子またはC1-C3アルキルであり、
L118およびＬ119は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキレンもしくはC8-C24アルケニレンであり、
M101およびM102は同一または異なって-C=C-、-OC(O)-、-C(O)O-、-SC(O)-、-C(O)S-、-OC(S)-、-C(S)O-、-SS-、-C(R’’)=N-、-N=C(R’’)-、-C(R’’)=N-O-、-O-N=C(R’’)-、-N(R’’)C(O)-、-C(O)N(R’’)-、-N(R’’)C(S)-、-C(S)N(R’’)-、-N(R’’)C(O)N(R’’’)-、-N(R’’)C(O)O-、-OC(O)N(R’’)-および-OC(O)O-からなる群から選ばれ、
R’’およびR’’’は、同一または異なって、水素原子またはC1-C3アルキルであり、
R118およびR119は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC1-C16アルキルもしくはC2-C16アルケニルである）、
式(CL-X)
【化２４】
2019027055.tif 000178
（式中
X117およびX118は同一または異なって水素原子、置換されていても良いC1-C6アルキル、ヘテロシクリルまたはポリアミンであるか、またはX117およびX118はそれらが結合している窒素と一緒に、該窒素に加えて、N、OおよびSから選択される1または2個のさらなるヘテロ原子を含有していてもよい4〜7員の単環式ヘテロ環を形成してもよく、
R120およびR121は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC4-C24アルキルもしくはC4-C24アルケニルである）、
式(CL-XI)
【化２５】
2019027055.tif 000179
(式中、
X119およびX120は同一または異なって水素原子、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC1-C20アルキル、C1-C20アルケニル、C1-C20アルキニルもしくはC6-C20アシルであり、
R122およびR123は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC1-C30アルキル、C2-C30アルケニルもしくはC2-C30アルキニルであり、
p112、p113およびp114は同一または異なって0であるか、任意の正の整数である）、
式(CL-XII)
【化２６】
2019027055.tif 000180
（式中、
X121およびX122は同一または異なって水素原子、C1-C6アルキル、シクロアルキル、シクロアルケニルであるか、またはX121およびX122はそれらが結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、
L120およびＬ121は同一または異なって-O-、-OC(O)-または-(O)CO-であり、
R124およびR125は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルである）、
式(CL-XIII)
【化２７】
2019027055.tif 000181
（式中、
R126およびR127は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24ヘテロアルキル、C8-C24ヘテロアルケニルもしくはC8-C24ヘテロアルキニルであり、
X123は水素原子または置換されていても良いC1-C6アルキルであり、
X124はC1-C6アルキル、-NR4aR4bで置換される置換C1-C6アルキルまたは置換されていても良いC3-C7ヘテロシクリルであり、
R4aおよびR4bは同一または異なって水素原子、C(=NH)NH2または置換されていても良いC1-C6アルキルであるか、またはR4aおよびR4bは、置換されていても良いC3-C7ヘテロシクリルを形成してもよく、
X123およびX124はそれらが結合する窒素原子と一緒になって置換されていても良いC3-C7ヘテロシクリルを形成してもよく、
ただし、X123およびX124はイミダゾリル、ベンズイミダゾリル、またはスクシンイミジルを形成せず、および１つだけの１級アミンがX123およびX124のいずれか一方の上に存在することができ、またはいかなる１級アミンもX123およびX124のいずれか一方の上に存在せず、X123およびX124は置換されたアミドではなく、
R126およびR127がC11アルキルまたはC15アルキルであるとき、X123は水素原子ではなく、
R126およびR127がC16アルキルまたはC17アルキルであるとき、R126およびR127はOHと置換されず、
R126およびR127がC17アルキルであるとき、X123およびX124はOHと置換されず、
R126およびR127がC18アルキルであるとき、X124は置換されていても良いイミダゾリルと置換されない）、
式(CL-XIV)
【化２８】
2019027055.tif 000182
（式中、
X125およびX126は同一または異なって水素原子、置換されていても良いC1-C6アルキル、ヘテロシクリルまたはポリアミンであるか、またはX125およびX126はそれらが結合している窒素と一緒に、該窒素に加えて、N、OおよびSから選択される1または2個のさらなるヘテロ原子を含有していてもよい4〜7員の単環式ヘテロ環を形成してもよく、
Ｒ130は水素原子またはC1-C6アルキルであり、
R128およびR129は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC4-C24アルキルもしくはC4-C24アルケニルである）、
式(CL-XV)
【化２９】
2019027055.tif 000183
（式中、
X127およびX128はそれぞれ独立して、C1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルであるか、
X127およびX128は、それらが結合している窒素原子と一体になって、1から2個の窒素原子を有する複素環を形成し、
L122は−C(O)O−、−OC(O）−、−C(O)N(X130)−、−N（X130）C(O)−、−OC(O)O−、−OC(O)N(X130)−、−N(X130)C(O)N(X130)−、または−N(X130)C(O)O−であり、
X130の各存在は独立して、水素原子またはC1-C3アルキルであり、
ａは1、2、3、4、5、または6であり、
bは0、1、2、または3であり、
X129は存在しないか、水素またはC1-C3アルキルであり、
R131およびR132のそれぞれは独立して、１つ以上の生分解性基を有する炭素数12〜24のアルキル、炭素数12〜24のアルケニル、または炭素数12〜24のアルコキシであり、各生分解性基は独立して、上記の炭素数12〜24のアルキル基、アルケニル基、またはアルコキシ基に割り込んでいるか、炭素数12〜24のアルキル基、アルケニル基、またはアルコキシ基の末端で置換されており（上記生分解性基は、割り込んでいるものは、‐C(O)O-、‐OC（O）−、−C(O)N(X130)−、または‐N(X130)C(O)−であり、末端のものは、‐C(O)O‐C1-C4アルキル、−OC(O)−C1-C4アルキル、−C(O)N(X130)−C1-C4アルキル、または−N(X130)C(O)−C1-C4アルキルである）、
R131およびR132は、上記生分解性基とアスタリスク（＊）の付された第３級炭素原子との間に少なくとも4つの炭素原子を有する）、
式(CL-XVI)
【化３０】
2019027055.tif 000184
（式中、
R133およびR134は同一または異なり、それぞれ直鎖状または分岐状のC1-C9アルキル、C2-C11アルケニルもしくはC2-C11アルキニルであり、
L123およびL124は同一または異なり、それぞれ直鎖状のC5-C18アルキレンもしくは直鎖状のC5-C18アルケニレンであるか、またはNと複素環を形成しており、
L125は、単結合であるか、または-CO-O-であり、それによって-L124-CO-OR134が形成されており、
L127はSまたはOであり、
Ｌ126は単結合であるか、または直鎖状もしくは分岐状のC1-C6アルキレンであるか、またはNと複素環を形成しており、
L128は直鎖状または分岐状のC1-C6アルキレンであり、そして
X131およびX132は同一または異なり、それぞれ水素または直鎖状もしくは分岐状のC1-C6アルキルである）
式(CL-XVII)
【化３１】
2019027055.tif 000185
（式中、
L131はC2-C4アルキレンまたは-CH2-S-CH2CH2-であり、
L129およびL130は同一または異なって、それぞれC1-C6アルキルであり、
R135およびR136は同一または異なって、C10-C30アルキル、C10-C30アルケニルであり、
X133およびX134は同一または異なって、水素、C1-C6アルキルまたは-CH2CH2OHである。）、
式（CL-XVIII）
【化３２】
2019027055.tif 000186
(式中、
R137およびR138は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、もしくはC8-C24アルキニルチオエチルであり、
X135は、水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｃ）
【化３３】
2019027055.tif 000187
(式中、X136およびX137は、同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX136およびX137が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L132はSまたはOであり、p115は2〜4の整数である)、式(Ｄ)
【化３４】
2019027055.tif 000188
(式中、X138およびX139は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX138およびX139が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p116は1〜4の整数である)、または式（Ｅ）
【化３５】
2019027055.tif 000189
(式中、X140およびX141は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX140およびX141が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p117は1〜4の整数である)である。）、および、
式（CL-XIX）
【化３６】
2019027055.tif 000190
(式中、
R139およびR140は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L133は、SまたはOであり、
X142は水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｆ）
【化３７】
2019027055.tif 000191
(式中、X143およびX144は同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX143およびX144が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L134はSまたはOであり、p118は2〜4の整数である)、または式（Ｇ）
【化３８】
2019027055.tif 000192
(式中、X145およびX146は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX145およびX146が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p119は1〜4の整数である)である。）
【請求項８】
カチオン性脂質が、前記脂質Bである、請求項7に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項９】
水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体をさらに含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項１０】
水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体における水溶性高分子部分が、ポリエチレングリコール、ポリグリセリン、ポリエチレンイミン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸およびポリアクリルアミドからなる群より選ばれる、請求項9に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項１１】
中性脂質をさらに含む、請求項1〜10のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項１２】
中性脂質が、リン脂質、ステロール、グリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂質およびスフィンゴイドからなる群より選ばれる、請求項11に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項１３】
核酸が、RNA干渉(RNAi)を利用した標的遺伝子の発現抑制作用を有する核酸である、請求項1〜12のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項１４】
標的遺伝子が、腫瘍または炎症に関連する遺伝子である、請求項13に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【請求項１５】
リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体を使用する、核酸含有脂質ナノ粒子を安定化する方法。
【請求項１６】
請求項1〜14のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を用いる、核酸を細胞内に導入する方法。
【請求項１７】
細胞が、ほ乳類の腫瘍または炎症部位にある細胞である、請求項16に記載の方法。
【請求項１８】
細胞が、ほ乳類の肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓または脾臓にある細胞である、請求項16または17に記載の方法。
【請求項１９】
細胞内に導入する方法が、静脈内投与または皮下投与によって細胞内に導入する方法である、請求項16〜18のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
請求項1〜14のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を、ほ乳動物に投与することを含む、癌または炎症疾患の治療方法。
【請求項２１】
投与が、静脈内投与または皮下投与である、請求項20に記載の治療方法。
【請求項２２】
請求項1〜14のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を含む、医薬。
【請求項２３】
静脈内投与用または皮下投与用である、請求項22に記載の医薬。
【請求項２４】
請求項1〜14のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を含む、癌または炎症疾患の治療剤。
【請求項２５】
静脈内投与用または皮下投与用である、請求項24に記載の治療剤。
【請求項２６】
式（CL-XVIII）
【化３９】
2019027055.tif 000193
(式中、
R137およびR138は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、もしくはC8-C24アルキニルチオエチルであり、
X135は、水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｃ）
【化４０】
2019027055.tif 000194
(式中、X136およびX137は、同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX136およびX137が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L132はSまたはOであり、p115は2〜4の整数である)、式(Ｄ)
【化４１】
2019027055.tif 000195
(式中、X138およびX139は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX138およびX139が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p116は1〜4の整数である)、または式（Ｅ）
【化４２】
2019027055.tif 000196
(式中、X140およびX141は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX140およびX141が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p117は1〜4の整数である)である。）
で表される化合物、またはその製薬上許容し得る塩。
【請求項２７】
式（CL-XIX）
【化４３】
2019027055.tif 000197
(式中、
R139およびR140は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L133は、SまたはOであり、
X142は水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｆ）
【化４４】
2019027055.tif 000198
(式中、X143およびX144は同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX143およびX144が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L134はSまたはOであり、p118は2〜4の整数である)、または式（Ｇ）
【化４５】
2019027055.tif 000199
(式中、X145およびX146は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX145およびX146が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p119は1〜4の整数である)である。）
で表される化合物、またはその製薬上許容し得る塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、核酸含有脂質ナノ粒子等に関する。
【背景技術】
【０００２】
遺伝子治療を実現する上で、プラスミドDNA(pDNA)、アンチセンスオリゴデオキシ核酸(ODN)およびshort interfering RNA (siRNA)等の核酸をin vivoにおいて標的細胞まで効率的に送達するためのキャリアー開発が行われている。その手段として、生体内ヌクレアーゼ等から核酸を保護するため、核酸を脂質粒子内に内包させ、その複合体を投与する方法が知られている。【０００３】
特許文献1および非特許文献1では、核酸等を含有するリポソームの製造方法として、例えば、乾燥させたカチオン性脂質と、siRNAのクエン酸ナトリウム水溶液および中性脂質と、ポリエチレングリコール化リン脂質とを、ヘペス緩衝生理食塩水(HEPES [N-(2-Hydroxyethyl)piperazine-N'-(2-ethanesulfonic acid)] Bufferd Saline, 以下、「HBS」)およびエタノールに溶解させた溶液をジエチルエーテルに加えて、油中水型(W/O)エマルジョンを形成させた後、溶液を混和させ、逆相蒸発法で処理してsiRNA内包リポソームを製造する方法が報告されている。【０００４】
特許文献2および非特許文献2では、ODNを、pH3.8のクエン酸水溶液に溶解し、脂質のエタノール溶液を加え、エタノール濃度を20v/v%まで下げてODN内包リポソームを調製し、サイジング膜でろ過し、透析によって過剰のエタノールを除去した後、試料をさらにpH7.5にて透析してリポソーム表面に付着したODNを除去し、ODN内包リポソームを製造する方法が報告されている。【０００５】
また、特許文献3では、例えば、pDNAをクエン酸水溶液に溶解した溶液と、脂質をエタノール中に溶解した溶液とを、T字ミキサーで混和し、エタノール濃度を45v/v%まで下げた後、さらにクエン酸緩衝剤溶液を加えて20v/v%までエタノール濃度を下げることでpDNA内包リポソームを調製し、陰イオン交換樹脂で余ったpDNAを除き、限外ろ過によって、過剰のエタノールを除去してpDNA内包リポソームを製造する方法が報告されている。【０００６】
さらに、特許文献4では、水を含む有機溶媒中において、pDNAをカチオン性脂質とミセルとして複合体化させ、さらに脂質を追加した後に、透析によって有機溶媒を除去することによってpDNA内包リポソームを製造する方法が報告されている。【０００７】
特許文献5では、界面活性剤の水溶液中において、pDNAをカチオン性脂質とミセルとして複合体化させ、さらに脂質を追加した後に、透析によって界面活性剤を除去することによってpDNA内包リポソームを製造する方法が報告されている。【０００８】
一方、非特許文献3では、ドキソルビシンを内包した脂質ナノ粒子を用いた試験でホスホリパーゼA2（以下、「PLA2」とも記載する。）によりリン脂質のsn-2位のエステル結合が加水分解されることで、効率的に内包物を放出することを報告している。すなわち、生体内では脂質ナノ粒子の構成成分であるリン脂質がホスホリパーゼA2により代謝を受けると薬物を保持する粒子の安定性が低下することを意味する。薬物が低分子医薬品の場合、粒子の安定性が低下することで薬物の円滑な放出が促されることで活性を示す。一方、内包物が核酸の場合は放出されても細胞内への取り込みが乏しく、また酵素分解を受け活性の消失につながる。上述した核酸を内包したナノ粒子は、通常PLA2の基質になる脂質が汎用され、高い安定性を有する脂質粒子を調製することは困難であった。【０００９】
さらに特許文献6には、生物活性のある薬剤を経口投与し、輸送するための組成物に、1,2-di-O-hexadecyl-sn-glycero-3-phosphocholineを使用することが開示されており、かかる組成物は酸に安定であるとされている。しかしながら、核酸の輸送のために、この組成物を使用したことは記載されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許出願公開第2013/0149374号公報
【特許文献２】特表2002-501511号公報
【特許文献３】国際公開第2004/002453号パンフレット
【特許文献４】国際公開第96/40964号パンフレット
【特許文献５】米国特許出願公開第2010/0041152号公報
【特許文献６】国際公開第2014/143806号パンフレット
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】バイオキミカ  エト  バイオフィジカ  アクタ（Biochimica et Biophysica Acta）， 2012年, 第1818巻, 1633-1641頁
【非特許文献２】バイオキミカ  エト  バイオフィジカ  アクタ（Biochimica et Biophysica Acta）, 2001年， 第1510巻, 152-166頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の目的は、医薬として有用で、従来の粒子に比して、安定な核酸含有脂質ナノ粒子を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、以下に関する。
［1］
リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体、および核酸を含む、核酸含有脂質ナノ粒子。
［2］
前記グリセロールの脂肪酸エステル類縁体が、グリセロリン脂質類縁体である、［1］に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［3］
リパーゼが、ホスホリパーゼA2である［1］または［2］に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［4］
前記グリセロールの脂肪酸エステル類縁体が、以下の式(1)もしくは式(2)で表される脂質である、［1］〜［3］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
【化１】
2019027055.tif 000002
（式(1)中、Rx1およびRx2は、同一または異なって、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルであり、
Rx3は、陰電荷、水素原子、または以下の基；
【化２】
2019027055.tif 000003
のいずれかである。）
【化３】
2019027055.tif 000004
（式(2)中、Rx4は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニルもしくはRx41-CO-であり、
Rx41は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルであり、
Rx5は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
Rx6は、陰電荷、水素原子、または以下の基；
【化４】
2019027055.tif 000005
のいずれかである。）
［5］
前記グリセロールの脂肪酸エステル類縁体の含有量が、総脂質のモル数に対して0.001倍モル量以上である、［1］〜［4］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［6］
カチオン性脂質をさらに含む、［1］〜［5］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［7］
カチオン性脂質が、脂質A；以下の式(I)、式(II)、式(III)、式(IV)、式(V’)および式(V’’)の少なくとも1つ、および／または、脂質B；式(CL-I)、式(CL-II)、式(CL-III)、式(CL-IV)、式(CL-V)、式(CL-VI)、式(CL-VII)、式(CL-VIII)、式(CL-IX)、式(CL-X)、式(CL-XI)、式(CL-XII)、式(CL-XIII)、式(CL-XIV)、式(CL-XV)、式(CL-XVI)、式(CL-XVII)、式(CL-XVIII)および式(CL-XIX)の少なくとも1つである［6］に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。（ここで、式(I)、式(II)、式(III)、式(IV)、式(V’)および式(V’’)は、後述する発明を実施するための形態に記載された構造で表される。また、式(CL-I)、式(CL-II)、式(CL-III)、式(CL-IV)、式(CL-V)、式(CL-VI)、式(CL-VII)、式(CL-VIII)、式(CL-IX)、式(CL-X)、式(CL-XI)、式(CL-XII)、式(CL-XIII)、式(CL-XIV)、式(CL-XV)、式(CL-XVI)、式(CL-XVII)、式(CL-XVIII)および式(CL-XIX)は、後述する発明を実施するための形態に記載された構造で表される。以下、同様である。）
［8］
カチオン性脂質が、前記脂質Bである、［7］に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［9］
水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体をさらに含む、［1］〜［8］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［10］
水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体における水溶性高分子部分が、ポリエチレングリコール、ポリグリセリン、ポリエチレンイミン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸およびポリアクリルアミドからなる群より選ばれる、［9］に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［11］
中性脂質をさらに含む、［1］〜［10］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［12］
中性脂質が、リン脂質、ステロール、グリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂質およびスフィンゴイドからなる群より選ばれる、［11］に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［13］
核酸が、RNA干渉(RNAi)を利用した標的遺伝子の発現抑制作用を有する核酸である、［1］〜［12］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［14］
標的遺伝子が、腫瘍または炎症に関連する遺伝子である、［13］に記載の核酸含有脂質ナノ粒子。
［15］
リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体を使用する、核酸含有脂質ナノ粒子を安定化する方法。ここで、当該グリセロールの脂肪酸エステル類縁体としては、上記[1]〜[5]に記載される類縁体であってもよく、当該核酸含有脂質ナノ粒子としては、上記[1]〜[14]に記載される核酸含有脂質ナノ粒子であってもよい。
［16］
［1］〜［14］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を用いる、核酸を細胞内に導入する方法。
［17］
細胞が、ほ乳類の腫瘍または炎症部位にある細胞である、［16］に記載の方法。
［18］
細胞が、ほ乳類の肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓または脾臓にある細胞である、［16］または［17］に記載の方法。
［19］
細胞内に導入する方法が、静脈内投与または皮下投与によって細胞内に導入する方法である、［16］〜［18］のいずれか１項に記載の方法。
［20］
［1］〜［14］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を、ほ乳動物に投与することを含む、癌または炎症疾患の治療方法。
［21］
投与が、静脈内投与または皮下投与である、［20］に記載の治療方法。
［22］
［1］〜［14］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を含む、医薬。
［23］
静脈内投与用または皮下投与用である、［22］に記載の医薬。
［24］
［1］〜［14］のいずれか1項に記載の核酸含有脂質ナノ粒子を含む、癌または炎症疾患の治療剤。
［25］
静脈内投与用または皮下投与用である、［24］に記載の治療剤。
［26］
式（CL-XVIII）
【化５】
2019027055.tif 000006
(式中、
R137およびR138は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、もしくはC8-C24アルキニルチオエチルであり、
X135は、水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｃ）
【化６】
2019027055.tif 000007
(式中、X136およびX137は、同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX136およびX137が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L132はSまたはOであり、p115は2〜4の整数である)、式(Ｄ)
【化７】
2019027055.tif 000008
(式中、X138およびX139は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX138およびX139が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p116は1〜4の整数である)、または式（Ｅ）
【化８】
2019027055.tif 000009
(式中、X140およびX141は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX140およびX141が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p117は1〜4の整数である)である。）
で表される化合物、またはその製薬上許容し得る塩（カチオン性脂質）。
［27］
式（CL-XIX）
【化９】
2019027055.tif 000010
(式中、
R139およびR140は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L133は、SまたはOであり、
X142は水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｆ）
【化１０】
2019027055.tif 000011
(式中、X143およびX144は同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX143およびX144が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L134はSまたはOであり、p118は2〜4の整数である)、または式（Ｇ）
【化１１】
2019027055.tif 000012
(式中、X145およびX146は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX145およびX146が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p119は1〜4の整数である)である。）
で表される化合物、またはその製薬上許容し得る塩（カチオン性脂質）。
【発明の効果】
【００１４】
本発明により、医薬として有用で、従来の粒子に比して、安定な核酸含有脂質ナノ粒子を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】各製剤の脂質残存量を表すグラフを示す図である。グラフの縦軸はPLA2未処理群の残存脂質量を1としたときの脂質残存量（％）を示し、横軸は各製剤である。
【図２】各製剤の脂質残存量を表すグラフを示す図である。グラフの縦軸はPLA2未処理群の残存脂質量を1としたときの脂質残存量（％）を示し、横軸は各製剤である。
【図３】各製剤の脂質残存量を表すグラフを示す図である。グラフの縦軸はPLA2未処理群の残存脂質量を1としたときの脂質残存量（％）を示し、横軸は各製剤である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明を実施する形態について詳細に説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本発明を限定するものではない。
【００１７】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体、および核酸を含む。
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、リパーゼと接触があったとしても、該粒子中の脂質が分解されにくいため、安定に存在することができる。
【００１８】
グリセロールの脂肪酸エステル構造を有する脂質（以下、天然型グリセロール脂質ともいう。）は、グリセロールの少なくとも一つの水酸基と、脂肪酸とが、エステル結合を形成しており、リパーゼが作用して上記エステル結合が加水分解される。
本発明におけるグリセロールの脂肪酸エステル類縁体は、上記天然型グリセロール脂質中の一部の構造が改変された構造を有する脂質であり、リパーゼによって加水分解されない。
【００１９】
本発明において、「リパーゼによって加水分解されない」とは、リパーゼと本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を接触させたときに、核酸含有脂質ナノ粒子に存在するグリセロールの脂肪酸エステル類縁体全量に対して、通常30%以上が加水分解されなければよく、好ましくは50%以上が加水分解されないこと、より好ましくは70%以上が加水分解されないこと、さらに好ましくは90%以上が加水分解されないこと、よりさらに好ましくは99%以上が加水分解されないことを意味する。
リパーゼと上記類縁体との接触は、通常30〜45℃、好ましくは35〜42℃、より好ましくは37℃で、通常0分〜48時間、好ましくは1分〜36時間、より好ましくは1分〜24時間の条件である。
【００２０】
本発明におけるグリセロールの脂肪酸エステル類縁体は、以下の式(NL1)で表される天然型グリセロール脂質におけるグリセロール骨格のsn-2位の炭素原子から、好ましくは10Å(オングストローム；10-10m)以下、より好ましくは8Å以下、さらに好ましくは6Å以下の範囲において、構造改変されていることが好ましい。構造改変がsn-2位の炭素原子から10Å以下の範囲であることにより、リパーゼの加水分解作用を受けにくい傾向にあり、核酸含有脂質ナノ粒子が安定化する。
構造改変がされる範囲の下限値は、0Å以上であれば特に制限されない。sn-2位の炭素原子からの範囲が0Åとは、sn-2位の炭素原子を指す。
【００２１】
ここで構造改変とは、天然型グリセロール脂質のグリセロール骨格付近の構造を変えることを意味し、リパーゼの活性部位への相互作用を低下させる構造改変であれば特に制限されず、例えば、天然型グリセロール脂質における不斉中心を反転させること、すなわち、L体をD体とすること；グリセロール骨格と脂肪酸とのエステル結合を、エーテル結合（―Ｏ―）、チオエーテル結合（―Ｓ―）、アミノ結合（―Ｎ（Ｒｐ）―；Ｒｐは、水素原子、または有機基である）、アミド結合（―ＮＨＣＯ−）等の結合に置換すること；sn-1位, sn-2位, sn-3位のいずれか1つ以上の水素を、有機基に置換すること；後述のアシル基のα位、β位、γ位、δ位に有機基を導入すること；等が挙げられる。
上記有機基としては、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちアルコキシおよびアルコキシカルボニルにおけるアルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル等のC1-C4アルキルである。
【００２２】
【化１２】
2019027055.tif 000013
【００２３】
aおよびbは、独立して下記アシル基であり、cは、アシル基；リン酸基；糖；等である。ただし、aおよびcが共にアシル基である場合、炭素数等が相違し、構造に違いがあり、同一ではない。
【００２４】
【化１３】
2019027055.tif 000014
【００２５】
上記アシル基におけるR’xxは、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニル等が挙げられる。
【００２６】
本発明におけるグリセロールの脂肪酸エステル類縁体、すなわち、式(NL1)で表される天然型グリセロール脂質の類縁体は、グリセロリン脂質類縁体であることが好ましい。
【００２７】
グリセロリン脂質は、例えば、以下の式（NL2）で表すことができ、グリセロリン脂質類縁体は、以下の式（NL2）で表される脂質の構造改変体である。
【００２８】
【化１４】
2019027055.tif 000015
【００２９】
式(NL2)中、Rxx1およびRxx2は、同一または異なって、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルであり、Rxx3は、水素原子、または以下の基等が挙げられる。
【００３０】
【化１５】
2019027055.tif 000016
【００３１】
式（NL1）および式（NL2）における、直鎖状または分岐状のC7-C23アルキルとしては、例えばヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、2,6,10-トリメチルウンデシル、ペンタデシル、3,7,11-トリメチルドデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル、ノナデシル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデシル、イコシル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシル、テトラコシル等が挙げられる。
【００３２】
式（NL1）および式（NL2）における、直鎖状または分岐状のC7-C23アルケニルとしては、1〜3つの2重結合を含む直鎖状または分岐状のC7-C23アルケニルであればよく、例えば(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【００３３】
式（NL1）および式（NL2）における、直鎖状または分岐状のC7-C23アルキニルとしては、1〜3つの3重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルキニルであればよく、例えばドデカ-11-イニル、トリデカ-12-イニル、ペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、好ましくはペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、より好ましくはヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられる。
【００３４】
式（NL1）および式（NL2）における、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルまたはC7-C23アルキニルにおける置換基としては、例えばヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちアルコキシおよびアルコキシカルボニルにおけるアルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル等のC1-C4アルキルである。
【００３５】
式（NL2）で表されるグリセロリン脂質は、例えばホスファチジルコリン(PC)(具体的には大豆ホスファチジルコリン、卵黄ホスファチジルコリン(EPC)、ジステアロイルホスファチジルコリン、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)、ジパルミトイルホスファチジルコリン、1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DPPC)、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン(POPC)、ジミリストイルホスファチジルコリン(DMPC)、ジオレオイルホスファチジルコリン(DOPC)等)、ホスファチジルエタノールアミン(具体的にはジステアロイルホスファチジルエタノールアミン(DSPE)、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン(DPPE)、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン(DOPE)、ジミリストイルホスホエタノールアミン(DMPE)、16-0-モノメチルPE、16-0-ジメチルPE、18-1-トランスPE、パルミトイルオレオイル-ホスファチジルエタノールアミン(POPE)、1-ステアロイル-2-オレオイル-ホスファチジルエタノールアミン(SOPE)等)、グリセロリン脂質(具体的にはホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、パルミトイルオレオイルホスファチジルグリセロール(POPG)、リゾホスファチジルコリン等)、スフィンゴリン脂質(具体的にはスフィンゴミエリン、セラミドホスホエタノールアミン、セラミドホスホグリセロール、セラミドホスホグリセロリン酸等)、グリセロホスホノ脂質、スフィンゴホスホノ脂質、天然レシチン(具体的には卵黄レシチン、大豆レシチン等)、水素添加リン脂質(具体的には水素添加大豆ホスファチジルコリン等)等の天然または合成のリン脂質が挙げられるがこれらに限定されない。
【００３６】
本発明におけるリパーゼとしては、式(NL1)で表される天然型グリセロール脂質に含まれる脂肪酸エステルを加水分解する酵素であれば特に制限されない。また、リパーゼとしては、ホスホリパーゼが挙げられ、ホスホリパーゼとしては、具体的には、ホスホリパーゼA1、ホスホリパーゼA2、ホスホリパーゼB、リゾホスホリパーゼ、ホスホリパーゼC、ホスホリパーゼD等が挙げられる。
本発明におけるグリセロールの脂肪酸エステル類縁体は、好ましくは、ホスホリパーゼA2によって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体である。
【００３７】
グリセロリン脂質類縁体は、上記の式(NL2)で表されるグリセロリン脂質の一部構造が改変された構造を有する。グリセロリン脂質類縁体は、具体的には、以下の式(1)または式(2)で表される脂質であることが好ましい。
【００３８】
【化１６】
2019027055.tif 000017
【００３９】
（式(1)中、Rx1およびRx2は、同一または異なって、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルであり、
Rx3は、陰電荷、水素原子、または以下の基；
【化１７】
2019027055.tif 000018
のいずれかである。）
【００４０】
【化１８】
2019027055.tif 000019
【００４１】
（式(2)中、Rx4は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニルもしくはRx41-CO-であり、
Rx41は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルであり、
Rx5は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
Rx6は、陰電荷、水素原子、または以下の基；
【化１９】
2019027055.tif 000020
のいずれかである。）
【００４２】
式(1)および式(2)における直鎖状または分岐状のC7-C23アルキル、C7-C23アルケニル、C7-C23アルケニルとしては、式(NL2)におけるC7-C23アルキル、C7-C23アルケニル、C7-C23アルケニルと同様の例示をすることができる。
【００４３】
直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルとしては、例えば、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、2,6,10-トリメチルウンデシル、ペンタデシル、3,7,11-トリメチルドデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル、ノナデシル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデシル、イコシル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシル、テトラコシル等が挙げられる。
【００４４】
直鎖状または分岐状のC8-C24アルケニルとしては、1〜3つの2重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルケニルであればよく、例えば(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【００４５】
直鎖状または分岐状のC8-C24アルキニルとしては、1〜3つの3重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルキニルであればよく、例えばドデカ-11-イニル、トリデカ-12-イニル、ペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、好ましくはペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、より好ましくはヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられる。
【００４６】
式(1)および式(2)における直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C7-C23アルキル、C7-C23アルケニル、C7-C23アルキニルにおける置換基としては、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちアルコキシおよびアルコキシカルボニルにおけるアルキル部分は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル等のC1-C4アルキルである。
【００４７】
本発明におけるグリセロールの脂肪酸エステル類縁体は塩であってもよい。グリセロールの脂肪酸エステル類縁体が塩である場合、かかる塩は、薬学的に許容される塩であれば特に制限されない。例えば、式(1)および式(2)におけるRx3およびRx6が水素原子、
【００４８】
【化２０】
2019027055.tif 000021
であるとき、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、あるいはアンモニウム塩（ＮＨ４＋塩）であることが好ましい。
Rx3およびRx6は、陰電荷であってもよい。Rx3およびRx6が陰電荷であるとは、Rx3およびRx6に当たる水素が脱プロトン化することを指す。すなわち、陰電荷であるとは、式(1)および式(2)におけるリン酸エステル基が、-PO42-となっていてもよいことを指す。
【００４９】
式(2)で表される脂質は、立体配置が示されていない不斉炭素についての光学異性体のいずれか１種の単一物であっても、これらが任意の割合で含まれる混合物であってもよい。
【００５０】
式(NL2)、式(1)および式(2)のRxx3、Rx3およびRx6におけるイノシトール骨格は、具体的には、以下のイノシトールに由来する。以下のイノシトール構造中、リン酸と結合を形成する水酸基は特に制限されない。
【００５１】
【化２１】
2019027055.tif 000022
【００５２】
Rxx3、Rx3およびRx6が、イノシトール骨格であるとき、好ましくは以下の式で表される。
【００５３】
【化２２】
2019027055.tif 000023
【００５４】
式(1)および式(2)における各基；C7-C23アルキル、C7-C23アルケニル、C7-C23アルキニル、C8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニルは、式（NL1）および式（NL2）における各基と同様の例示をすることができ、同様の好ましい基を挙げることができる。
また、式(1)、式(2)、式（NL1）および式（NL2）における各基は、各基として記載の任意の組み合わせであってもよく、好ましい基同士の組み合わせであってもよい。
【００５５】
本発明の核酸含有ナノ粒子におけるリパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体としては、具体的には、以下の化合物を挙げることができる。
【００５６】
【化２３】
2019027055.tif 000024
【００５７】
本発明におけるグリセロールの脂肪酸エステル類縁体は、市販のものを使用することもでき、有機合成手法を用いることにより合成することもできる。
【００５８】
例えば、式(1)で表される脂質は、以下のとおり製造することができるが、製造方法は特に制限されない。
【００５９】
【化２４】
2019027055.tif 000025
【００６０】
（式中、PGは保護基を表す。Rx1, Rx2, Rx3は、式(1)におけるRx1, Rx2, Rx3と同義である。）
【００６１】
具体的には、マンニトール等の糖から得られる公知のアセタールX1のヒドロキシ基を保護基(PG基)で保護し、イソプロピリデン基を加水分解してジオールX3とする。また、ジオールX3は、(S)-3-(ベンジルオキシ)プロパン-1,2-ジオール等の市販品としても入手することができる。次に、ジオールX3を、Rx1-CO-ClおよびRx2-CO-Cl等で表される酸クロライドと反応させ、化合物X4を得る。さらに、保護基（PG基）を除去し、生じた水酸基に対し、トリエチルアミン等の塩基存在下、オキシ塩化りん(V)を反応させ、さらに、Rx3-OHで表される化合物を反応させて、式(1)で表される脂質を得ることができる。
なお、ジオールX3からX4の変換においては、一級アルコール、二級アルコールのいずれかを保護基で保護して反応を行ってもよい。
式(1)で表される脂質の合成において使用される保護基は、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第3版(Protective Groups in Organic Synthesis, third edition)、グリーン(T.W.Greene)著、John Wiley＆Sons Inc.(1999年)を参考に、反応条件や基質に基づき選択すればよい。
【００６２】
例えば、式(2)で表される脂質は、以下のとおり製造することができるが、製造方法は特に制限されない。
【００６３】
【化２５】
2019027055.tif 000026
【００６４】
（式中、PGは保護基を表す。また、Rx0は、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC7-C23アルキル、C7-C23アルケニルもしくはC7-C23アルキニルを表す。さらにまた、Xは、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子、OMs,またはOTsを表す。
Rx4, Rx5, Rx6, Rx41は、式(2)におけるRx4, Rx5, Rx6, Rx41と同義である。）
【００６５】
具体的には、マンニトール等の糖から得られる公知のアセタールX6のヒドロキシ基を保護基(PG基)で保護し、イソプロピリデン基を加水分解してジオールX8とする。次に、ジオールX8を、例えば、Rx0-CH2-Xで表される求電子剤と反応させることにより（ウィリアムソンエーテル化の反応条件を参照し、適用することができる）、ジエーテルであるX9を得ることができる。また、例えば、ジオールX8を、Rx42-CO-Cl等で表される酸クロライドと反応させ、次にRx0-CH2-Xで表される求電子剤と反応させることにより、化合物X9を得ることができる。さらに、保護基（PG基）を除去し、生じた水酸基に対し、トリエチルアミン等の塩基存在下、オキシ塩化りん(V)を反応させ、さらに、Rx3-OHで表される化合物を反応させて、式(2)で表される脂質を得ることができる。
なお、ジオールX3からX4の変換においては、一級アルコール、二級アルコールのいずれかを保護基で保護して反応を行ってもよい。
式(2)で表される脂質(2)の合成において使用される保護基は、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第3版(Protective Groups in Organic Synthesis, third edition)、グリーン(T.W.Greene)著、John Wiley＆Sons Inc.(1999年)を参考に、反応条件や基質に基づき選択すればよい。
【００６６】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、カチオン性脂質をさらに含むことが好ましい。
カチオン性脂質としては、１以上の置換されていても良い炭化水素基を含む脂質親和性領域と、少なくとも1つの1級アミノ基、2級アミノ基、3級アミノ基および／または4級アンモニウム基を含むカチオン性の親水性領域を有する両親媒性分子であれば特に限定されないが、1つの4級アンモニウム基を有する親水部および置換されていても良い独立した3つの炭化水素基を有する脂質(脂質A)、置換されていても良い1つのアミノ基または1つの4級アンモニウム基を有する親水部および置換されていても良い独立した2つの炭化水素基を有する疎水部を有する脂質(脂質B)を挙げることができる。
【００６７】
本発明においては、1つの4級アンモニウム基を有する親水部および置換されていても良い独立した3つの炭化水素基を有する脂質(脂質A)を用いて、水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体、および核酸とともに、核酸含有脂質ナノ粒子とすることで、物理化学的安定性および生理活性においてより優れた核酸含有脂質ナノ粒子を得ることができる。
【００６８】
本発明における、1つの4級アンモニウム基を有する親水部および置換されていても良い独立した3つの炭化水素基を有する脂質(脂質A)としては、分子内に親水部として1つの4級アンモニウム基を有し、かつ置換されていても良い独立した3つの炭化水素基を有する分子であれば特に制限されないが、例えば、下記構造式（A）〜（C）で表される。下記構造式(A)〜（C）において、「親水部（Hydrophilic Unit）」は、1つの4級アンモニウム基を有する親水部を表し、3つの「疎水部(Hydrophobic Unit)」は、置換されていても良い独立した3つの炭化水素基を表す。
【００６９】
「親水部（Hydrophilic Unit）」を構成する4級アンモニウム基は、その4つの結合手のうちの0〜3個が、「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基のいずれか0〜3個と結合しており、残りの結合手が、置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基等と結合している。「親水部（Hydrophilic Unit）」を構成する置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基としては、炭素原子と水素原子とからなる基であればいずれでも良いが、炭素数1〜10のものが好ましく、炭素数1〜6のものがより好ましく、炭素数1〜3のものがさらに好ましい。
【００７０】
また、「親水部（Hydrophilic Unit）」は、これを構成する置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基等中の炭素原子を介して、１以上のエーテル、エステル、アミド等を有していてもよい。さらに、置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基等における置換基としては、カルバマート、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、もしくはブロモ等が挙げられる。
【００７１】
また、「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基としては、8〜24個の炭素原子と水素原子とからなる基であればいずれでも良い。炭化水素基は、トポロジーの観点から分類することができ、例えば、直鎖状の炭化水素基、分岐状の炭化水素基または環状の炭化水素基（例えば、コレステリル基等）が挙げられるが、直鎖状または分岐状の炭化水素基が好ましい。また、炭化水素基は、不飽和結合（２重結合または３重結合）の有無で分類することもでき、不飽和結合を有する炭化水素基は、芳香族性の有無で分類することもできるが、飽和結合のみからなる炭化水素基（アルキル）または不飽和結合を有しかつ芳香族性の無い炭化水素基（例えば、アルケニルまたはアルキニル等）が好ましい。脂質Aにおける炭化水素基としては、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニルが好ましい。
【００７２】
「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基は、それぞれ「親水部（Hydrophilic Unit）」の4級アンモニウム基と直接結合しても良いし、エーテル、エステル、アミド等の結合および「親水部」を構成する置換基を有していてもよい鎖状ならびに／もしくは環状炭化水素基等を介して4級アンモニウム基と結合しても良い。また、構造式(B)や(C)で示されるように、2個または3個の「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基が、炭素原子を介して結合し、その炭素原子が「親水部（Hydrophilic Unit）」の4級アンモニウム基と直接または、エーテル、エステル、アミド等の結合および「親水部」を構成する置換基を有していてもよい鎖状ならびに／もしくは環状炭化水素基等を介して4級アンモニウム基と結合しても良い。
【００７３】
【化２６】
2019027055.tif 000027
【００７４】
脂質Aとしては、例えば、以下の以下の式(I)〜式(IV)、式(V’)および式(V’’)で表される脂質を挙げることができる。
【００７５】
式(I)
【００７６】
【化２７】
2019027055.tif 000028
（式中、
R1〜R3は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L1〜L3は同一または異なって存在しないか、-Z1-(CY1Y2)p1-または-Z2-(CY3Y4)p2-Z3-(CY5Y6)p3-（式中、Y1〜Y6は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z1〜Z3は同一または異なって、-O-、-NY7A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY7B-、-NY7C-CO-または-NY7D-CO-0-であり（式中、Y7A〜Y7Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p1〜p3は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
X1は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、
A1は薬学的に許容される陰イオンである）、
式(II)
【００７７】
【化２８】
2019027055.tif 000029
（式中、
R4〜R6は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L4〜L6は同一または異なって存在しないか、-Z4-(CY8Y9)p4-または-Z5-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-（式中、Y8〜Y13は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z4〜Z6は同一または異なって、-O-、-NY14A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY14B-、-NY14C-CO-または-NY14D-CO-0-であり（式中、Y14A〜Y14Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p4は0〜5の整数であり、p5は1〜5の整数であり、p6は0〜5の整数である）であり、
L7は存在しないか、-(CY15Y16)p7-、-(CY17Y18)p8-Z7-(CY19Y20)p9-または-(CY21Y22)p10-Z8-(CY23Y24)p11-Z9-(CY25Y26)p12-（式中、Y15〜Y26は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z7〜Z9は同一または異なって、-O-、-NY27A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY27B-、-NY27C-CO-または-NY27D-CO-0-であり（式中、Y27A〜Y27Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p7は1〜5の整数であり、p8は0〜5の整数であり、p9は1〜5の整数であり、p10は0〜5の整数であり、p11は1〜5の整数であり、p12は1〜5の整数である）であり、
B1は、
【化２９】
2019027055.tif 000030
（式中、X2およびX3は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X4は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、X5およびX6は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X7は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y28〜Y37は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z10およびZ11は同一または異なって-O-、-NY38A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY38B-、-NY38C-CO-または-NY38D-CO-0-であり（式中、Y38A〜Y38Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p13は0〜5の整数であり、p14〜p17は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
A2は薬学的に許容される陰イオンである）、
式(III)
【００７８】
【化３０】
2019027055.tif 000031
（式中、
R7〜R9は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L8〜L10は同一または異なって存在しないか、-Z12-(CY39Y40)p18-または-Z13-(CY41Y42)p19-Z14-(CY43Y44)p20-（式中、Y39〜Y44は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z12〜Z14は同一または異なって、-O-、-NY45A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY45B-、-NY45C-CO-、-NY45D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y45A〜Y45Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p18は0〜5の整数であり、p19は1〜5の整数であり、p20は0〜5の整数である）であり、
L11は存在しないか、-(CY46Y47)p21-、-(CY48Y49)p22-Z15-(CY50Y51)p23-または-(CY52Y53)p24-Z16-(CY54Y55)p25-Z17-(CY56Y57)p26-（式中、Y46〜Y57は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z15〜Z17は同一または異なって、-O-、-NY58A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY58B-、-NY58C-CO-、-NY58D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y58A〜Y58Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p21は1〜5の整数であり、p22は0〜5の整数であり、p23は1〜5の整数であり、p24は0〜5の整数であり、p25は1〜5の整数であり、p26は1〜5の整数である）であり、
L12は存在しないか、-(CY59Y60)p27-、-(CY61Y62)p28-Z18-(CY63Y64)p29-または-(CY65Y66)p30-Z19-(CY67Y68)p31-Z20-(CY69Y70)p32-（式中、Y59〜Y70は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z18〜Z20は同一または異なって、-O-、-NY71A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY71B-、-NY71C-CO-、-NY71D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y71A〜Y71Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p27は1〜5の整数であり、p28は0〜5の整数であり、p29は0〜5の整数であり、p30は0〜5の整数であり、p31は1〜5の整数であり、p32は0〜5の整数である）であり、
J1およびJ2は同一または異なってCY72またはN(式中、Y72は水素原子、ヒドロキシ、置換されていても良いC1-C4アルキル、置換されていても良いC1-C4アルコキシ、または置換されていても良いC1-C4アシルオキシである)であり、
B2は、
【化３１】
2019027055.tif 000032
（式中、X8およびX9は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X10は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、X11およびX12は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X13は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y73〜Y82は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z21およびZ22は同一または異なって-O-、-NY83A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY83B-、-NY83C-CO-または-NY83D-CO-0-であり（式中、Y83A〜Y83Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p33は0〜5の整数であり、p34〜p37は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
A3は薬学的に許容される陰イオンである）、
式(IV)
【００７９】
【化３２】
2019027055.tif 000033
（式中、
R10〜R12は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L13は存在しないか、-Z23-(CY84Y85)p38-または-Z24-(CY86Y87)p39-Z25-(CY88Y89)p40-（式中、Y84〜Y89は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z23〜Z25は同一または異なって、-O-、-NY90A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY90B-、-NY90C-CO-または-NY90D-CO-0-であり（式中、Y90A〜Y90Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p38〜p40は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
L14およびL15は同一または異なって存在しないか、-Z26-(CY91Y92)p41-または-Z27-(CY93Y94)p42-Z28-(CY95Y96)p43-（式中、Y91〜Y96は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z26〜Z28は同一または異なって、-O-、-NY97A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY97B-、-NY97C-CO-、-NY97D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y97A〜Y97Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p41は0〜5の整数であり、p42は1〜5の整数であり、p43は0〜5の整数である）であり、
L16は存在しないか、-(CY98Y99)p44-、-(CY100Y101)p45-Z29-(CY102Y103)p46-または-(CY104Y105)p47-Z30-(CY106Y107)p48-Z31-(CY108Y109)p49-（式中、Y98〜Y109は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z29〜Z31は同一または異なって、-O-、-NY110A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY110B-、-NY110C-CO-、-NY110D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y110A〜Y110Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p44は1〜5の整数であり、p45は0〜5の整数であり、p46は1〜5の整数であり、p47は0〜5の整数であり、p48は1〜5の整数であり、p49は1〜5の整数である）であり、
J3はCY111またはN(式中、Y111は水素原子、ヒドロキシ、置換されていても良いC1-C4アルキル、置換されていても良いC1-C4アルコキシ、または置換されていても良いC1-C4アシルオキシである)であり、
X14およびX15は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、
A4は薬学的に許容される陰イオンである）、または
式(V’)もしくは式(V’’)
【００８０】
【化３３】
2019027055.tif 000034
（式中、
R13〜R18は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
Y112〜Y115は同一または異なって水素原子、ヒドロキシまたは置換されていても良いC1-C4アルキルであり、
L17〜L19およびL22〜L24は同一または異なって存在しないか、-Z32-(CY116Y117)p51-または-Z33-(CY118Y119)p52-Z34-(CY120Y121)p53-（式中、Y116〜Y121は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z32〜Z34は同一または異なって、-O-、-NY122A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY122B-、-NY122C-CO-、-NY122D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y122A〜Y122Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p51は0〜5の整数であり、p52は1〜5の整数であり、p53は0〜5の整数である）であり、
L20およびL25は同一または異なって存在しないか、-(CY123Y124)p54-、-(CY125Y126)p55-Z35-(CY127Y128)p56-または-(CY129Y130)p57-Z36-(CY131Y132)p58-Z37-(CY133Y134)p59-（式中、Y123〜Y134は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z35〜Z37は同一または異なって、-O-、-NY135A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY135B-、-NY135C-CO-、-NY135D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y135A〜Y135Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p54は1〜5の整数であり、p55は0〜5の整数であり、p56は1〜5の整数であり、p57は0〜5の整数であり、p58は1〜5の整数であり、p59は1〜5の整数である）であり、
L21およびL26は同一または異なって存在しないか、-(CY136Y137)p60-、-(CY138Y139)p61-Z38-(CY140Y141)p62-または-(CY142Y143)p63-Z39-(CY144Y145)p64-Z40-(CY146Y147)p65-（式中、Y136〜Y147は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z38〜Z40は同一または異なって、-O-、-NY148A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY148B-、-NR148C-CO-、-NY148D-CO-0-または-CO-であり（式中、Y148A〜Y148Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p60は1〜5の整数であり、p61は0〜5の整数であり、p62は0〜5の整数であり、p63は0〜5の整数であり、p64は1〜5の整数であり、p65は0〜5の整数である）であり、
B3およびB4は同一または異なって、
【化３４】
2019027055.tif 000035
（式中、X16およびX17は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X18は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、X19およびX20は同一または異なって置換されていても良いC1-C4アルキルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成し、X21は置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y149〜Y158は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Z41およびZ42は同一または異なって-O-、-NY159A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY159B-、-NY159C-CO-または-NY159D-CO-0-であり（式中、Y159A〜Y159Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである）、p66は0〜5の整数であり、p67〜p70は同一または異なって1〜5の整数である）であり、
A5およびA6は同一または異なって薬学的に許容される陰イオンである）
で表される化合物が挙げられる。
【００８１】
以下、式(I)〜（IV）、（V’）および（V’’）で表される化合物をそれぞれ化合物(I)〜（IV）、（V’）および（V’’）ということもある。他の式番号の化合物についても同様である。
【００８２】
式(I)〜(V’’)の各基の定義について、以下、説明する。
直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルとしては、例えばオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、2,6,10-トリメチルウンデシル、ペンタデシル、3,7,11-トリメチルドデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル、ノナデシル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデシル、イコシル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシル、テトラコシル等が挙げられ、好ましくはノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル等が挙げられ、より好ましくはウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル等が挙げられる。
【００８３】
直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルとしては、例えばノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、2,6,10-トリメチルウンデシル、ペンタデシル、3,7,11-トリメチルドデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル等が挙げられ、好ましくはノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル等が挙げられ、より好ましくはウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル等が挙げられる。
【００８４】
直鎖状または分岐状のC8-C24アルケニルとしては、1〜3つの2重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルケニルであればよく、例えば(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【００８５】
直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルとしては、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【００８６】
また、本発明においては、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルケニルの二重結合にメチレンビラジカルが形式的に付加したシクロプロパン環を有する基もC8-C24アルケニルに包含される。例えば、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニルに対応する以下のシクロプロパン環を有する基
【００８７】
【化３５】
2019027055.tif 000036
【００８８】
【化３６】
2019027055.tif 000037
および
【００８９】
【化３７】
2019027055.tif 000038
等が挙げられる。
【００９０】
直鎖状または分岐状のC8-C24アルキニルとしては、1〜3つの3重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルキニルであればよく、例えばドデカ-11-イニル、トリデカ-12-イニル、ペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、好ましくはペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、より好ましくはヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられる。
【００９１】
C1-C4アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル等が挙げられ、好ましくはメチル、エチル等が挙げられ、より好ましくはメチルが挙げられる。
【００９２】
置換されていても良いC1-C4アルコキシのアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。
【００９３】
直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルにおける置換基としては、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちアルコキシおよびアルコキシカルボニルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。
【００９４】
置換されていても良いC1-C4アルキルにおける置換基としては、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノおよびジアルキルカルバモイルにおける2つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【００９５】
本発明において、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イルおよびモルホリン-3-イルは、それぞれ、環中の窒素原子にメチルやエチル等のC1-C3アルキルが結合したものを包含する。
C1-C3アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル等が挙げられ、好ましくはメチル、エチル等が挙げられ、より好ましくはメチル等が挙げられる。
【００９６】
X2およびX3が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成するC4-C6ヘテロ環としては、例えばピロリジン、ピペリジン、モルホリン、アゼパン等が挙げられ、好ましくはピロリジン、ピペリジン等が挙げられる。X2およびX3が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成する置換されても良いC4-C6ヘテロ環における置換基としては、置換されていても良いC1-C4アルキル(前記と同義)、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノおよびジアルキルカルバモイルにおける2つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【００９７】
X5およびX6が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成する置換されていても良いC4-C6ヘテロ環の、ヘテロ環部分および置換基部分は、それぞれ前記と同義である。
【００９８】
X8およびX9が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成する置換されていても良いC4-C6ヘテロ環の、ヘテロ環部分および置換基部分は、それぞれ前記と同義である。
【００９９】
X11およびX12が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成する置換されていても良いC4-C6ヘテロ環の、ヘテロ環部分および置換基部分は、それぞれ前記と同義である。
【０１００】
X14およびX15が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成する置換されていても良いC4-C6ヘテロ環の、ヘテロ環部分および置換基部分は、それぞれ前記と同義である。
【０１０１】
X16およびX17が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成する置換されていても良いC4-C6ヘテロ環の、ヘテロ環部分および置換基部分は、それぞれ前記と同義である。
【０１０２】
X19およびX20が一緒になって隣接する窒素原子とともに形成する置換されていても良いC4-C6ヘテロ環の、ヘテロ環部分および置換基部分は、それぞれ前記と同義である。
【０１０３】
C1-C4アシルオキシにおけるアシルとしては、例えばホルミル、アセチル、プロパノイル、2-メチルプロパノイル、シクロプロパノイル、ブタノイル等が挙げられ、好ましくはアセチル等が挙げられる。
【０１０４】
置換されていても良いC1-C4アシルオキシにおける置換基としては、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノおよびジアルキルカルバモイルにおける2つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【０１０５】
4級アンモニウム基とは、4つの炭素原子との間で4本の共有結合を有する窒素原子を有する基を意味する。4級アンモニウム基は、1〜3級アミンに水素原子が付加したものとは異なり、周囲のpHに関わらず常に正の電荷を有している。
【０１０６】
薬学的に許容される陰イオンとしては、例えば、塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオン、リン酸イオン等の無機イオン、酢酸イオン、シュウ酸イオン、マレイン酸イオン、フマル酸イオン、クエン酸イオン、安息香酸イオン、メタンスルホン酸イオン等の有機酸イオン等が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１０７】
式(I)において、R1〜R3は、同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであることが好ましく、同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることがより好ましく、同一に直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、または同一に直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであることがさらに好ましく、同一に直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または同一に直鎖状のC9-C18アルキルであることが最も好ましい。
【０１０８】
L1〜L3は、同一または異なって存在しないか、-Z1-(CY1Y2)p1-または-Z2-(CY3Y4)p2-Z3-(CY5Y6)p3-であり、-Z1-(CY1Y2)p1-であることが好ましい。Y1〜Y6は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y1〜Y6としては水素原子であることが好ましい。Z1〜Z3は同一または異なって、-O-、-NY7A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY7B-、-NY7C-CO-または-NY7D-CO-0-であり、-O-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY7B-、-NY7C-CO-が好ましい。Y7A〜Y7Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、水素原子またはメチルであることが好ましい。p1〜p3は同一または異なって1〜5の整数であり、1または2であることが好ましい。
【０１０９】
L1〜L3としては、同一または異なって-O-(CY1Y2)p1-、-CO-O-(CY1Y2)p1-、-O-CO-(CY1Y2)p1-、-CO-NY7B-(CY1Y2)p1-または-NY7C-CO-(CY1Y2)p1-であることが好ましく、同一または異なって-CO-O-(CY1Y2)p1-または-O-CO-(CY1Y2)p1-であることがより好ましく、同一に-CO-O-(CH2)2-であることがさらに好ましい。
【０１１０】
式(I)において、L1〜L3のうち1つ以上が同一または異なって-CO-O-(CY1Y2)p1-もしくは-O-CO-(CY1Y2)p1-であり、R1〜R3が同一に直鎖のC15-C20アルケニルであるか、または同一に直鎖のC9-C18アルキルであることが好ましい。
【０１１１】
L1〜L3の少なくとも1つが、存在しないか、-O-(CY1Y2)p1-、-O-CO-(CY1Y2)p1-または-NY7C-CO-(CY1Y2)p1-である場合には、正電荷を有する窒素原子(N+)、-O-(CY1Y2)p1-、-O-CO-(CY1Y2)p1-または-NR6-CO-(CY1Y2)p1-に結合するR1〜R3は同一または異なって、それぞれオクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等であることがより好ましく、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１１２】
L1〜L3の少なくとも1つが、-CO-O-(CY1Y2)p1-または-CO-NY7B-(CY1Y2)p1-である場合には、-CO-O-(CY1Y2)p1-または-CO-NY7B-(CY1Y2)p1-に結合するR1〜R3は、同一または異なって、それぞれノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、ノナデシル、ヘニコシル、トリコシル、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニル等であることがより好ましく、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、 (Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１１３】
X1は、メチル、ヒドロキシプロピルまたはヒドロキシエチルであることが好ましく、メチルであることがより好ましい。
【０１１４】
式(II)において、R4〜R6は、同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであることが好ましく、同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることがより好ましく、同一に直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、または同一に直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであることがさらに好ましく、同一に直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または同一に直鎖状のC9-C18アルキルであることが最も好ましい。
【０１１５】
L4〜L6は、同一または異なって存在しないか、-Z4-(CY8Y9)p4-または-Z5-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-であり、-Z4-(CY8Y9)p4-または-Z5-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-であることが好ましく、-Z4-(CY8Y9)p4-であることがより好ましい。Y8〜Y13は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y8〜Y13としては水素原子であることが好ましい。Z4〜Z6は同一または異なって、-O-、-NY14A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY14B-、-NY14C-CO-または-NY14D-CO-0-であり、-O-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY14B-、-NY14C-CO-が好ましい。Y27A〜Y27Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、水素原子またはメチルであることが好ましい。p4は0〜5の整数であり、p5は1〜5の整数であり、p6は0〜5の整数であり、いずれも1または2であることが好ましい。
【０１１６】
L4〜L6としては、同一または異なって-O-(CY8Y9)p4-、-CO-O-(CY8Y9)p4-、-O-CO-(CY8Y9)p4-、-CO-NY14B-(CY8Y9)p4-、-NY14C-CO-(CY8Y9)p4-、-NY14D-CO-O-(CY8Y9)p4-または-O-CO-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-であることが好ましく、同一または異なって-CO-O-(CY8Y9)p4-、-O-CO-(CY8Y9)p4-または-O-CO-(CY10Y11)p5-O-(CY12Y13)p6-であることがより好ましく、同一に-CO-O-CH2-であることがさらに好ましい。
【０１１７】
式(II)において、L4〜L6のうち1つ以上が同一または異なって-CO-O-(CY8Y9)p4-、-O-CO-(CY8Y9)p4-、または-O-CO-(CY10Y11)p5-O-(CY12Y13)p6-であり、R4〜R6が同一に直鎖のC15-C20アルケニルであるか、または同一に直鎖のC9-C18アルキルであることが好ましい。
【０１１８】
L4〜L6の少なくとも1つが、存在しないか、-O-(CY8Y9)p4-、-O-CO-(CY8Y9)p4-、-NY14C-CO-(CY8Y9)p4-、-NY14D-CO-0-または-O-CO-(CY10Y11)p5-(CY12Y13)p6-である場合には、L7に隣接する炭素原子、-O-(CY8Y9)p4-、-O-CO-(CY8Y9)p4-、-NY14C-CO-(CY8Y9)p4-、-NY14D-CO-0-または-O-CO-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-に結合するR7〜R9は、同一または異なって、それぞれオクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等であることが好ましく、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１１９】
L4〜L6の少なくとも1つが、-CO-O-(CY8Y9)p4-または-CO-NY14B-(CY8Y9)p4-である場合には、-CO-O-(CY8Y9)p4-または-CO-NY14B-(CY8Y9)p4-に結合するR4〜R6は、同一または異なって、それぞれノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、ノナデシル、ヘニコシル、トリコシル、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニル等であることが好ましく、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１２０】
L7は、存在しないか、-(CY15Y16)p7-、-(CY17Y18)p8-O-CO-(CY19Y20)p9-または-(CY17Y18)p8-NY27C-CO-(CY19Y20)p9-であることが好ましく、存在しないか、-(CY15Y16)p7-であることがより好ましい。この場合、B1は、
【化３８】
2019027055.tif 000039
であることが好ましく、-N+(CH3)3であることがより好ましい。
【０１２１】
L7が-(CY15Y16)p7-である場合、p7は1〜3であることが好ましく、1〜2であることがより好ましく、1であることがさらに好ましく、またY15〜Y16はそれぞれ水素原子であることが好ましい。B1としては、-N+(CH3)3であることが好ましい。
【０１２２】
L7が-(CY17Y18)p8-O-CO-(CY19Y20)p9-または-(CY17Y18)p8-NY27C-CO-(CY19Y20)p9-である場合、p8は0〜3であり、p9が1〜3であることが好ましく、p8が0〜1であり、p9が1〜3であることがより好ましくまたY17〜Y20はそれぞれ水素原子であり、Y27Cは水素原子またはメチルであることが好ましい。B1としては、-N+(CH3)3であることが好ましい。
【０１２３】
X2およびX3は、同一または異なってメチルもしくはエチルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともに置換されていても良いC4-C6ヘテロ環を形成することが好ましく、同一にメチルであるか、または一緒になって隣接する窒素原子とともにピロリジンもしくはピペリジンを形成することがより好ましく、同一にメチルであることがさらに好ましい。
【０１２４】
X4は、メチル、エチル、ヒドロキシプロピルまたはヒドロキシエチル等であることが好ましく、メチルであることがさらに好ましい。
X2およびX3は、同一または異なってメチルもしくはエチルであり、X4は、メチル、エチル、ヒドロキシプロピルまたはヒドロキシエチル等であることが好ましく、X2〜X4は、メチルであることがさらに好ましい。
【０１２５】
B1が、
【化３９】
2019027055.tif 000040
であり、L7が存在しないか、-(CY15Y16)p7-、-(CY17Y18)p8-O-CO-(CY19Y20)p9-または-(CY17Y18)p8-NY27C-CO-(CY19Y20)p9-であることも本発明の好ましい形態のひとつである。この場合、B1が、
【化４０】
2019027055.tif 000041
であり、L7が存在しないか、-NH-CO-(CH2)p9-、-O-CO-(CH2)p9-、-CH2-NH-CO-(CH2)p9-または-CH2-O-CO-(CH2)p9-であることがより好ましい。
【０１２６】
式(III)において、R7は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることが好ましく、直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであることがより好ましく、同一に直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または同一に直鎖状のC9-C18アルキルであることが最も好ましい。R8およびR9は、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、かつ同一であることが好ましく、直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであり、かつ同一であることがより好ましく、直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状のC9-C18アルキルであり、かつ同一であることが最も好ましい。
【０１２７】
L8は、存在しないか、-Z12-(CY39Y40)p18-または-Z13-(CY41Y42)p19-Z14-(CY43Y44)p20-であり、存在しないかまたは-Z12-(CY39Y40)p18-であることが好ましい。L9およびL10は、同一または異なって存在しないか、-Z12-(CY39Y40)p18-または-Z13-(CY41Y42)p19-Z14-(CY43Y44)p20-であり、同一または異なって存在しないかまたは-Z12-(CY39Y40)p18-であることが好ましい。Y39〜Y44は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y39〜Y44としては水素原子であることが好ましい。Z12〜Z14は同一または異なって、-O-、-NY45A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY45B-、-NY45C-CO-、-NY45D-CO-0-または-CO-であり、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY45B-、-NY45C-CO-または-CO-であることが好ましい。Y45A〜Y45Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、水素原子またはメチルであることが好ましい。p18は0〜5の整数であり、0または1であることが好ましい。p19は1〜5の整数であり、1または2であることが好ましい。p20は0〜5の整数であり、0または1であることが好ましい。
【０１２８】
L8〜L10のうち1つが-CO-O-(CY39Y40)p18-または-O-CO-(CY39Y40)p18-であるか、L8〜L10のうち2つ以上が同一または異なって-CO-O-(CY39Y40)p18または-O-CO-(CY39Y40)p18-であり、R7〜R9が直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであることが好ましく、R8〜R9が同一であることが好ましい。
【０１２９】
L8としては、存在しないか、-CO-O-(CY39Y40)p18-、-O-CO-(CY39Y40)p18-、-CO-NY45B-(CY39Y40)p18-または-NY45C-CO-(CY39Y40)p18-であることが好ましく、存在しないか、-CO-O-(CY39Y40)p18-、-O-CO-(CY39Y40)p18-または-CO-NY45B-(CY39Y40)p18-であることがより好ましく、存在しないか、-CO-O-(CH2)p18-、-O-CO-(CH2)p18-または-CO-NH-(CH2)p18-であることがさらに好ましい。
L9およびL10としては、同一または異なって存在しないか、-CO-O-(CY39Y40)p18-、-O-CO-(CY39Y40)p18-、-CO-NY45B-(CY39Y40)p18-または-NY45C-CO-(CY39Y40)p18-であることが好ましく、同一または異なって存在しないか、-CO-O-(CY39Y40)p18-または-O-CO-(CY39Y40)p18-であることがより好ましく、同一または異なって存在しないかまたは-CO-O-(CH2)p18-であることがさらに好ましく、同一に存在しないかまたは-CO-O-(CH2)p18-であることが最も好ましい。
【０１３０】
式(III)において、L8〜L10のうち1つが存在しないか、-CO-O-(CY39Y40)p18-、-O-CO-(CY39Y40)p18-、-CO-NY45B-(CY39Y40)p18-または-NY45C-CO-(CY39Y40)p18-であるか、L8〜L10のうち2つ以上が同一または異なって存在しないか、-CO-O-(CY39Y40)p18-、-O-CO-(CY39Y40)p18-、-CO-NY45B-(CY39Y40)p18-または-NY45C-CO-(CY39Y40)p18-であり、R7〜R9が直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであることが好ましく、R8〜R9が同一であることが好ましい。
【０１３１】
L8〜L10の少なくとも1つが、存在しないか、-O-(CY39Y40)p18-、-O-CO-(CY39Y40)p18-、-NY45C-CO-(CY39Y40)p18-または-NY45D-CO-0-(CY39Y40)p18-である場合には、J1もしくはJ2、-O-(CY39Y40)p18-、-O-CO-(CY39Y40)p18-、-NY45C-CO-(CY39Y40)p18-または-NY45D-CO-0-(CY39Y40)p18-に結合するR7〜R9は、同一または異なって、それぞれオクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等であることが好ましく、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１３２】
L8〜L10の少なくとも1つが、-CO-O-(CY39Y40)p18-、-CO-NY45B-(CY39Y40)p18-または-CO-(CY39Y40)p18である場合には、-CO-O-(CY39Y40)p18-、-CO-NY45B-(CY39Y40)p18-または-CO-(CY39Y40)p18に結合するR7〜R9は、同一または異なって、それぞれノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、ノナデシル、ヘニコシル、トリコシル、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニルであることが好ましく、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１３３】
L11は、存在しないか、-(CY46Y47)p21-、-(CY48Y49)p22-Z15-(CY50Y51)p23-または-(CY52Y53)p24-Z16-(CY54Y55)p25-Z17-(CY56Y57)p26-であり、存在しないか、-(CY46Y47)p21-または-(CY48Y49)p22-Z15-(CY50Y51)p23-であることが好ましい。Y46〜Y57は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y46〜Y57としては水素原子であることが好ましい。Z15〜Z17は同一または異なって、-O-、-NY58A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY58B-、-NY58C-CO-、-NY58D-CO-0-または-CO-であり、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY58B-、-NY58C-CO-または-CO-が好ましく、-O-CO-または-NY58C-CO-がより好ましい。p21は1〜5の整数であり、1〜3であることが好ましい。p22は0〜5の整数であり、0〜3であることが好ましい。p23は1〜5の整数であり、1または2であることが好ましい。
【０１３４】
L11としては存在しないか、-(CY46Y47)p21-、-(CY48Y49)p22-O-CO-(CY50Y51)p23-、または-(CY48Y49)p22-NY58C-CO-(CY50Y51)p23-であることが好ましく、存在しないかまたは-(CY46Y47)p21-であることがより好ましく、存在しないかまたは-(CH2)p2-であることがさらに好ましい。
【０１３５】
L12は、存在しないかまたは-(CY59Y60)p27-であることが好ましく、存在しないかまたは-(CH2)p27-であることが好ましく、存在しないか、-CH2-または-(CH2)2-であることがより好ましい。
【０１３６】
J1およびJ2は同一または異なってCY72またはNであり、J1およびJ2は同一または異なってCH、C(OH)またはNが好ましい。
【０１３７】
L11が存在しないとき、J1はCHが好ましい。
【０１３８】
L9およびL10は存在せず、L12が-CO-(CH2)p29-であり、J1がCHであり、J2がNであることも本発明の好ましい形態のひとつである。このとき、L8が-CO-NY45B-(CH2)p18-であり、L11が存在しないかまたは-(CH2)p21-であることが好ましい。
【０１３９】
L9およびL10は存在せず、L12が-O-CO-(CH2)p29-であり、J1およびJ2がCHであることも本発明の好ましい形態のひとつである。このとき、L8が-O-CO-(CH2)p18-であり、L11が存在しないことが好ましい。
【０１４０】
B2は、
【化４１】
2019027055.tif 000042
であることが好ましく、-N+(CH3)3であることがより好ましい。
【０１４１】
X8〜X10は、それぞれ前記X2〜X4と同義である。
【０１４２】
式(IV)において、R10は、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることが好ましく、直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであることがより好ましく、直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状のC9-C18アルキルであることが最も好ましい。R11およびR12は、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、かつ同一であることが好ましく、直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであり、かつ同一であることがより好ましく、直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状のC9-C18アルキルであり、かつ同一であることが最も好ましい。
【０１４３】
L13は、存在しないか、-Z23-(CY84Y85)p38-または-Z24-(CY86Y87)p39-Z25-(CY88Y89)p40-であり、存在しないか、または-Z23-(CY84Y85)p38-であることが好ましい。Y84〜Y89は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y84〜Y89としては水素原子であることが好ましい。Z23〜Z25は同一または異なって、-O-、-NY90A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY90B-、-NY90C-CO-または-NY90D-CO-0-であり、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY90B-または-NY90C-CO-であることが好ましく、-CO-NY90B-であることがより好ましい。Y90A〜Y90Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、水素原子またはメチルであることが好ましい。p38〜p40は同一または異なって1〜5の整数であり、1または2であることが好ましい。
【０１４４】
L13としては、存在しないか、-CO-O-(CY84Y85)p38-、-O-CO-(CY84Y85)p38-、-CO-NY90B-(CY84Y85)p38-、または-NY90C-CO-(CY84Y85)p38-であることが好ましく、存在しないか、-CO-O-(CH2)p38-、-O-CO-(CH2)p38-または-CO-NCH3-(CH2)p38-であることがより好ましく、存在しないか、-CO-NCH3-(CH2)p38-であることがさらに好ましい。
【０１４５】
L14およびL15は、同一または異なって存在しないか、-Z26-(CY91Y92)p41-または-Z27-(CY93Y94)p42-Z28-(CY95Y96)p43-であり、存在しないか、または-Z26-(CY91Y92)p41-であることが好ましい。Y91〜Y96は同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、Y91〜Y96としては水素原子であることが好ましい。Z26〜Z28は同一または異なって、-O-、-NY97A-、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY97B-、-NY97C-CO-、-NY97D-CO-0-または-CO-であり、-CO-O-、-O-CO-、-CO-NY97B-、-NY97C-CO-、または-CO-であることが好ましい。Y97A〜Y97Dは同一または異なって水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルであり、水素原子またはメチルであることが好ましい。p41は0〜5の整数であり、0〜2が好ましい。p42は1〜5の整数であり、1または2が好ましい。p43は0〜5の整数であり、0〜2が好ましい。
【０１４６】
L14およびL15としては、同一または異なって、存在しないか、-CO-O-(CY91Y92)p41-、-O-CO-(CY91Y92)p41-、-CO-NY97B-(CY91Y92)p41-、-NY97C-CO-(CY91Y92)p41-、-CO-(CY91Y92)p41-であることが好ましく、同一または異なって、存在しないか、-CO-O-(CY91Y92)p41-、-O-CO-(CY91Y92)p41-または-CO-(CY91Y92)p41-であることがより好ましく、同一または異なって、存在しないか、-CO-O-(CH2)p41-、-O-CO-(CH2)p41-または-CO-であることがさらに好ましい。
【０１４７】
式(IV)において、L13が-CO-O-(CY84Y85)p38-、-O-CO-(CY84Y85)p38-または-CO-NY90B-(CY84Y85)p38-であるか、L14およびL15のうち1つが-CO-O-(CY91Y92)p41-または-O-CO-(CY91Y92)p41-であるか、L13が-CO-O-(CY84Y85)p38-、-O-CO-(CY84Y85)p38-または-CO-NY89B-(CY84Y85)p38-であり、L14およびL15のうち1つが-CO-O-(CY91Y92)p41-または-O-CO-(CY91Y92)p41-であるか、L14およびL15が同一または異なって-CO-O-(CY91Y92)p41-または-O-CO-(CY91Y92)p41-であるか、L13が-CO-O-(CY84Y85)p38-、-O-CO-(CY84Y85)p38-または-CO-NY89B-(CY84Y85)p38-であり、L14およびL15が同一または異なって-CO-O-(CY91Y92)p41-または-O-CO-(CY91Y92)p41-であり、R10〜R12が直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルもしくはC9-C18アルキルであることがより好ましい。R11およびR12は同一であることが好ましい。
【０１４８】
L13が、存在しないか、-O-(CY84Y85)p38-、-NY90A-(CY84Y85)p38-、-O-CO-(CY84Y85)p38-、-NY90C-CO-(CY84Y85)p38-または-NY90D-CO-0-(CY84Y85)p38-である場合には、R10はオクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニルまたは3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニルであることが好ましく、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがより好ましい。
【０１４９】
L13が、-CO-O-(CY84Y85)p38-または-CO-NY90B-(CY84Y85)p38-である場合には、R10はノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、ノナデシル、ヘニコシル、トリコシル、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニルまたは2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニルであることがより好ましく、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニルまたは(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０１５０】
また、L14およびL15の少なくとも1つが、存在しないか、-O-(CY91Y92)p41-、-NY97A-(CY91Y92)p41-、-O-CO-(CY91Y92)p41-、-NY97C-CO-(CY91Y92)p41-または-NY97D-CO-0-(CY91Y92)p41-である場合には、J3、-O-(CY91Y92)p41-、-NY97A-(CY91Y92)p41-、-O-CO-(CY91Y92)p41-、-NY97C-CO-(CY91Y92)p41-または-NY97D-CO-0-(CY91Y92)p41-に結合するR11およびR12は、同一または異なって、それぞれオクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニルまたは3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニルであることがより好ましく、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０１５１】
L14およびL15の少なくとも1つが、-CO-O-(CY91Y92)p41-または-CO-NY97B(CY91Y92)p41-である場合には、-CO-O-(CY91Y92)p41-または-CO-NY97B(CY91Y92)p41-に結合するR11およびR12は、同一または異なって、それぞれノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、ノナデシル、ヘニコシル、トリコシル、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニルまたは2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニルであることがより好ましく、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニルまたは(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０１５２】
L16は存在しないか、-(CY98Y99)p44-、-(CY100Y101)p45-Z29-(CY102Y103)p46-または-(CY104Y105)p47-Z30-(CY106Y107)p48-Z31-(CY108Y109)p49-であり、存在しないか、-(CY98Y99)p44-または-(CY100Y101)p45-Z29-(CY102Y103)p46-であることが好ましく、存在しないか、-(CY98Y99)p44-、-(CY100Y101)p45-O-CO-(CY102Y103)p46-、-(CY100Y101)p45-NY109C-CO-(CY102Y103)p46-または-CO-(CY102Y103)p46-であることがより好ましく、存在しないか、-(CH2)p44-または-CO-(CH2)p46-であることがさらに好ましい。
【０１５３】
J3はCY111またはNであり、CHまたはNが好ましい。また、J3がNであるとき、L14が存在せず、L15が-CO-であり、L16は存在しないか、もしくは-(CY98Y99)p44-であるか、またはL14が存在せず、L15が存在せず、L16は-CO-(CY102Y103)p46-であることがより好ましい。
【０１５４】
X14およびX15は、それぞれ前記X2およびX3と同義である。
【０１５５】
式(V’)において、R13は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることが好ましく、直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであることがより好ましく、直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状のC9-C18アルキルであることが最も好ましい。R14およびR15は、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、かつ同一であることが好ましく、直鎖状または分岐状のC15-C20アルケニルであるか、直鎖状または分岐状のC9-C18アルキルであり、かつ同一であることがより好ましく、直鎖状のC15-C20アルケニルであるか、または直鎖状のC9-C18アルキルであり、かつ同一であることが最も好ましい。
【０１５６】
L17〜L19は、同一または異なって存在しないか、-Z32-(CY116Y117)p51-または-Z33-(CY118Y119)p52-Z34-(CY120Y121)p53-であり、-Z32-(CY116Y117)p51-であることが好ましく、-O-(CY116Y117)p51-または-CO-O-(CY116Y117)p51-であることがより好ましく、-O-または-CO-O-であることがさらに好ましい。
【０１５７】
式(V’)において、L17〜L19が同一または異なって-O-または-CO-O-であり、R13〜R15が直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであることが好ましい。この時、L17〜L19が同一に-O-または-CO-O-であり、R13〜R15が同一に直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであることが好ましい。
【０１５８】
L17〜L19の少なくとも1つが、存在しないか、-O-(CY116Y117)p51-、-O-CO-(CY116Y117)p51-、-NY122C-CO-(CY116Y117)p518-または-NY122D-CO-0-(CY116Y117)p51-である場合には、フラノース環もしくはL20に隣接する炭素、-O-(CY116Y117)p51-、-O-CO-(CY116Y117)p51-、-NY122C-CO-(CY116Y117)p518-または-NY122D-CO-0-(CY116Y117)p51-に結合するR13〜R15は、同一または異なって、それぞれオクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等であることが好ましく、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１５９】
L17〜L19の少なくとも1つが、-CO-O-(CY116Y117)p51-、-CO-NY122B-(CY116Y117)p51-または-CO-(CY116Y117)p51-である場合には、-CO-O-(CY116Y117)p51-、-CO-NY122B-(CY116Y117)p51-または-CO-(CY116Y117)p51-に結合するR13〜R15は、同一または異なって、それぞれノニル、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、ノナデシル、ヘニコシル、トリコシル、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニルであることが好ましく、ウンデシル、トリデシル、ペンタデシル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０１６０】
L20は、存在しないか、-(CY123Y124)p54-、-(CY125Y126)p55-Z35-(CY127Y128)p56-または-(CY129Y130)p57-Z36-(CY131Y132)p58-Z37-(CY133Y134)p59-であり、-(CY123Y124)p54-であることが好ましく、-(CH2)p54-であることがより好ましく、-CH2-であることがさらに好ましい。
【０１６１】
L21は、存在しないか、-(CY136Y137)p60-、-(CY138Y139)p61-Z38-(CY140Y141)p62-または-(CY142Y143)p63-Z39-(CY144Y145)p64-Z40-(CY146Y147)p65-であり、存在しないかまたは-(CY136Y137)p60-であること好ましく、存在しないかまたは-(CH2)p60-であることがより好ましく、存在しないことがさらに好ましい。
【０１６２】
B3は、
【化４２】
2019027055.tif 000043
であることが好ましく、-N+(CH3)3であることがより好ましい。
【０１６３】
Y112およびY113は、同一または異なって水素原子、ヒドロキシまたは置換されていても良いC1-C4アルキルであり、同一または異なって水素原子またはヒドロキシが好ましく、同一に水素原子がさらに好ましい。
【０１６４】
式(V’’)において、R16〜R18、L22〜L26、B4、Y114〜Y115およびA6は、それぞれR13〜R15、L17〜L21、B3、Y112〜Y113およびA5と同義である。
【０１６５】
式(V’)において、Y112が水素原子であるとき、ピラン環上の4つの置換基はそれぞれピラン環上の異なる炭素原子上で置換していることが好ましい。そして、式(V’)としては、
【化４３】
2019027055.tif 000044
であることがより好ましい。このとき、L17〜L19が同一または異なって-O-または-CO-O-であり、R13〜R15が直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであることがさらに好ましく、L17〜L19が同一または異なって-O-または-CO-O-であり、R13〜R15が直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであり、L17およびL21が存在せず、Y113が水素原子またはヒドロキシであることが最も好ましい。
【０１６６】
式(V’’)において、フラン環上の4つの置換基はそれぞれフラン環上の異なる炭素原子上で置換していることが好ましい。そして、式(V’’)としては、
【化４４】
2019027055.tif 000045
であることがより好ましい。このとき、L22〜L24が同一または異なって-O-または-CO-O-であり、R16〜R18が直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであることがさらに好ましく、L22〜L24が同一または異なって-O-または-CO-O-であり、R16〜R18が直鎖のC15-C20アルケニルまたはC9-C18アルキルであり、L22およびL26が存在せず、Y114が水素原子またはヒドロキシであることが最も好ましい。
【０１６７】
なお、式B1、B2、B3およびB4の定義における、
【化４５】
2019027055.tif 000046
の各式の定義において、p13、p33およびp66が0である場合には、N+はそれぞれZ10、Z21およびZ41に隣接する炭素と結合する。
【０１６８】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、脂質Aの中でも式(II)で表される脂質を含むことが好ましい。
【０１６９】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子には、1つの4級アンモニウム基を有する親水部および置換されていても良い独立した3つの炭化水素基を有する脂質(脂質A)以外のカチオン性脂質が含まれていても良い。本発明で用いられる脂質A以外のカチオン性脂質は、１以上の置換されていても良い炭化水素基を含む脂質親和性領域と、少なくとも1つの1級アミノ基、2級アミノ基、3級アミノ基および／または4級アンモニウム基を含むカチオン性の親水性領域を有する両親媒性分子であれば特に限定されないが（脂質Aを除く）、置換されていても良い1つのアミノ基または1つの4級アンモニウム基を有する親水部および置換されていても良い独立した2つの炭化水素基を有する疎水部を有する脂質(脂質B)が好ましい。
【０１７０】
本発明における、置換されていても良い1つのアミノ基または1つの4級アンモニウム基を有する親水部および置換されていても良い独立した2つの炭化水素基を有する疎水部を同一分子内に含む脂質(脂質B)としては、分子内に親水部として置換されていても良い1つのアミノ基または1つの4級アンモニウム基を有し、かつ置換されていても良い独立した2つの炭化水素基を有する分子であれば特に制限されないが、例えば、下記構造式（D）および（E）で表される。
下記構造式（D）および（E）において、「親水部（Hydrophilic Unit）」は、置換されていても良い1つのアミノ基または1つの4級アンモニウム基を有する親水部を表し、「疎水部(Hydrophobic Unit)」は、置換されていても良い独立した炭化水素基を表す。
【０１７１】
「親水部（Hydrophilic Unit）」を構成するアミノ基は、その3つの結合手のうちの0〜2個が、「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基のいずれか0〜2個と結合しており、残りの結合手が、水素、もしくは、置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基等と結合している。
また、「親水部（Hydrophilic Unit）」を構成する4級アンモニウム基は、その4つの結合手のうちの0〜2個が、「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基のいずれか0〜2個と結合しており、残りの結合手が、水素、もしくは、置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基等と結合している。
「親水部（Hydrophilic Unit）」を構成する置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基としては、炭素原子と水素原子とからなる基であればいずれでも良いが、炭素数1〜10のものが好ましく、炭素数1〜6のものがより好ましく、炭素数1〜3のものがさらに好ましい。
【０１７２】
また、「親水部（Hydrophilic Unit）」は、これを構成する置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基等中の炭素原子を介して、１以上のエーテル、エステル、アミド等を有していてもよい。さらに、置換されていても良い鎖状および／または環状炭化水素基等における置換基としては、カルバマート、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、もしくはブロモ等が挙げられる。
【０１７３】
また、「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基としては、8〜24個の炭素原子と水素原子とからなる基であればいずれでも良い。炭化水素基は、トポロジーの観点から分類することができ、例えば、直鎖の炭化水素基、分岐状の炭化水素基または環状の炭化水素基（例えば、コレステリル基等）が挙げられるが、直鎖状または分岐状の炭化水素基が好ましい。また、炭化水素基は、不飽和結合（２重結合または３重結合）の有無で分類することもでき、不飽和結合を有する炭化水素基は、芳香族性の有無で分類することもできる。炭化水素基としては、飽和結合のみからなる炭化水素基（アルキル）または不飽和結合を有しかつ芳香族性の無い炭化水素基（例えば、アルケニルまたはアルキニル等）が好ましい。脂質Aにおける炭化水素基としては、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニルが好ましい。
【０１７４】
「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基は、それぞれ「親水部（Hydrophilic Unit）」のアミノ基または4級アンモニウム基と直接結合しても良いし、エーテル、エステル、アミド等の結合および「親水部」を構成する置換基を有していてもよい鎖状ならびに／もしくは環状炭化水素基等を介してアミノ基または4級アンモニウム基と結合しても良い。また、構造式(E)で示されるように、2個の「疎水部(Hydrophobic Unit)」を形成する炭化水素基が、炭素原子を介して結合し、その炭素原子が「親水部（Hydrophilic Unit）」のアミノ基または4級アンモニウム基と直接または、エーテル、エステル、アミド等の結合および「親水部」を構成する置換基を有していてもよい鎖状ならびに／もしくは環状炭化水素基等を介してアミノ基または4級アンモニウム基と結合しても良い。
【０１７５】
【化４６】
2019027055.tif 000047
【０１７６】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子におけるカチオン性脂質は、脂質A単独、脂質B単独であってもよいが、好ましくは脂質Aおよび脂質Bをともに含むことが好ましい。
【０１７７】
本発明で用いられる脂質A以外のカチオン性脂質としては、例えば、国際公開第2013/089151号、国際公開第2011/136368号、国際公開第2014/007398号、国際公開第2010/042877号または国際公開第2010/054401号に記載のカチオン性脂質等が挙げられる。
【０１７８】
本発明で用いられる脂質Bとしては、例えば、以下の式(CL-I)〜式(CL-XIX)で表される脂質を挙げることができる。
【０１７９】
式(CL-I)
【０１８０】
【化４７】
2019027055.tif 000048
(式中、
R101およびR102は同一または異なって直鎖状または分岐状のC10-C24アルキル、C10-C24アルケニルもしくはC10-C24アルキニルであり、
L101およびL102は水素原子であるか、または一緒になって単結合もしくはC1-C3アルキレンを形成し、
L103は単結合、-CO-または-CO-O-であり、
L103が単結合である場合には、
X101は水素原子、C1-C6アルキル、C3-C6アルケニル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、
L103が-CO-または-CO-O-である場合には、
X101はピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、該置換基の少なくとも1つは、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ピロリジニル、ピペリジルまたはモルホリニルである)、
式(CL-II)
【０１８１】
【化４８】
2019027055.tif 000049
(式中、
R103およびR104は同一または異なって直鎖状または分岐状のC12-C24アルキル、C12-C24アルケニルもしくはC12-C24アルキニルであり、
p101およびp102は同一または異なって0〜3の整数であり、
L106およびL107は水素原子であるか、または一緒になって単結合もしくはC2-C8アルキレンを形成し、
L104およびL105は同一または異なって-O-、-CO-O-または-O-CO-であり、
L108は単結合、-CO-または-CO-O-であり、
L108が単結合である場合には、
X102は水素原子、C1-C6アルキル、C3-C6アルケニル、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、
L108が-CO-または-CO-O-である場合には、
X102はピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、該置換基の少なくとも1つは、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ピロリジニル、ピペリジルまたはモルホリニルである)、
式(CL-III)
【０１８２】
【化４９】
2019027055.tif 000050
(式中、
R105は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R106は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチルもしくはC8-C24アルキニルオキシプロピルであり、
X103およびX104は同一または異なってC1-C3アルキルであるか、または一緒になってC2-C8アルキレンを形成するか、またはX103はL111と一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
L111は水素原子、C1-C6アルキル、C3-C6アルケニル、アミノ、モノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイルもしくはジアルキルカルバモイルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであるか、またはX103と一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
L109はC1-C6アルキレンであり、
L110は単結合であるか、またはC1-C6アルキレンであり、ただし、L109とL110の炭素数の和は7以下であり、L111が、水素原子の場合、L110は単結合であり、L111がX103と一緒になってC2-C6アルキレンを形成する場合、L110は単結合であるか、またはメチレンもしくはエチレンである)、
式(CL-IV)
【０１８３】
【化５０】
2019027055.tif 000051
(式中、
R107は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R108は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチル、C8-C24アルキニルオキシプロピル、C8-C24アルキルオキシエトキシエチル、C8-C24アルケニルオキシエトキシエチルもしくはC8-C24アルキニルオキシエトキシエチルであり、
X105は水素原子、置換されていても良いC1-C4アルキルまたは-CO-(CH2)n-NY1Y2であり、
nは1〜4の整数を表し、
Y1およびY2は同一または異なってC1-C3アルキルであるか、または一緒になってC2-C8アルキレンを形成する)、
式(CL-V)
【０１８４】
【化５１】
2019027055.tif 000052
(式中、
R109は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R110は直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチルもしくはC8-C24アルキニルオキシプロピルであり、
L112はC1-C3アルキレンであり、
X105’は水素原子またはC1-C3アルキルである)、
式(CL-VI)
【０１８５】
【化５２】
2019027055.tif 000053
(式中、
R111およびR112は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
X106およびX107は同一または異なってC1-C3アルキルであるか、または一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
p103、p104およびp105は同一または異なって0または1であり、ただしp103, p104およびp105は同時には0ではなく、
L113およびL114は同一または異なってO、SまたはNHである)、
式(CL-VII)
【０１８６】
【化５３】
2019027055.tif 000054
(式中、
R113およびR114は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
R115は水素原子、ヒドロキシ、置換されていても良いC1-C4アルキル、C1-C4アルコキシまたはC1-C4アシルオキシであり、
X109およびX110は同一または異なってC1-C3アルキルであるか、または一緒になってC2-C8アルキレンを形成し、
L115は-CO-O-、-O-CO-、-NHCO-または-CONH-であり、
p106は0〜3の整数であり、
p107は1〜4の整数である）、
式(CL-VIII)
【０１８７】
【化５４】
2019027055.tif 000055
（式中、
R116およびR117は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C7-C20アルキルオキシC1-C3アルキル、C7-C20アルケニルオキシC1-C3アルキルまたはC7-C20アルキニルオキシC1-C3アルキルであるか、
生分解性基が組み込まれている前記C8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニル、または、生分解性基が末端に存在するC8-C24アルキル基、C8-C24アルケニル基もしくはC8-C24アルキニル基であり、
前記生分解性基は、組み込まれているものは、-C(O)O-または‐OC(O)-であり、末端に存在するものは、-C(O)O-C1-C4アルキルまたは-OC(O)-C1-C4アルキルであり、
B100は、水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、C1-C3ジアルキルアミノC2-C4アルキル、式(A)
【化５５】
2019027055.tif 000056
(式中、X111およびX112は同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX111およびX112が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p110は2〜6の整数である)、または式(B)
【化５６】
2019027055.tif 000057
(式中、X113およびX114は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX113およびX114が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p111は1〜6の整数である)であり、
p108は0〜4の整数であり、p109は1〜4の整数であり(但し、p108が0であり、p109が1である場合を除く)、
L116は結合する炭素ごとに同一または異なって水素原子またはC1-C3アルキルであり、
L117は結合する炭素ごとに同一または異なって水素原子またはC1-C3アルキルである）、
式(CL-IX)
【０１８８】
【化５７】
2019027055.tif 000058
（式中、
X115およびX116は同一または異なって水素原子またはC1-C3アルキルであり、
L118およびＬ119は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキレンもしくはC8-C24アルケニレンであり、
M101およびM102は同一または異なって-C=C-、-OC(O)-、-C(O)O-、-SC(O)-、-C(O)S-、-OC(S)-、-C(S)O-、-SS-、-C(R’’)=N-、-N=C(R’’)-、-C(R’’)=N-O-、-O-N=C(R’’)-、-N(R’’)C(O)-、-C(O)N(R’’)-、-N(R’’)C(S)-、-C(S)N(R’’)-、-N(R’’)C(O)N(R’’’)-、-N(R’’)C(O)O-、-OC(O)N(R’’)-および-OC(O)O-からなる群から選ばれ、
R’’およびR’’’は、同一または異なって、水素原子またはC1-C3アルキルであり、
R118およびR119は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC1-C16アルキルもしくはC2-C16アルケニルである）、
式(CL-X)
【０１８９】
【化５８】
2019027055.tif 000059
（式中、
X117およびX118は同一または異なって水素原子、置換されていても良いC1-C6アルキル、ヘテロシクリルまたはポリアミンであるか、またはX117およびX118はそれらが結合している窒素と一緒に、該窒素に加えて、N、OおよびSから選択される1または2個のさらなるヘテロ原子を含有していてもよい4〜7員の単環式ヘテロ環を形成してもよく、
R120およびR121は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC4-C24アルキルもしくはC4-C24アルケニルである）、
式(CL-XI)
【０１９０】
【化５９】
2019027055.tif 000060
(式中、
X119およびX120は同一または異なって水素原子、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC1-C20アルキル、C1-C20アルケニル、C1-C20アルキニルもしくはC6-C20アシルであり、
R122およびR123は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC1-C30アルキル、C2-C30アルケニルもしくはC2-C30アルキニルであり、
p112、p113およびp114は同一または異なって0であるか、任意の正の整数である。）、
式(CL-XII)
【０１９１】
【化６０】
2019027055.tif 000061
（式中、
X121およびX122は同一または異なって水素原子、C1-C6アルキル、シクロアルキル、シクロアルケニルであるか、またはX121およびX122はそれらが結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、
L120およびＬ121は同一または異なって-O-、-OC(O)-または-(O)CO-であり、
R124およびR125は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルである）、
式(CL-XIII)
【０１９２】
【化６１】
2019027055.tif 000062
（式中、
R126およびR127は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24ヘテロアルキル、C8-C24ヘテロアルケニルもしくはC8-C24ヘテロアルキニルであり、
X123は水素原子または置換されていても良いC1-C6アルキルであり、
X124は、C1-C6アルキル、-NR4aR4bで置換される置換C1-C6アルキルまたは置換されていても良いC3-C7ヘテロシクリルであり、
R4aおよびR4bは同一または異なって水素原子、-C(=NH)NH2または置換されていても良いC1-C6アルキルであるか、またはR4aおよびR4bは、それらが結合する窒素原子と一緒になって置換されていても良いC3-C7ヘテロシクリルを形成してもよく、
X123およびX124はそれらが結合する窒素原子と一緒になって置換されていても良いC3-C7ヘテロシクリルを形成してもよく、
ただし、X123およびX124はイミダゾリル、ベンズイミダゾリル、またはたスクシンイミジルを形成せず、および１つだけの１級アミンがX123およびX124のいずれか一方の上に存在することができ、またはいかなる１級アミンもX123およびX124のいずれか一方の上に存在せず、X123およびX124は置換されたアミドではなく、
R126およびR127がC11アルキルまたはC15アルキルであるとき、X123は水素原子ではなく、
R126およびR127がC16アルキルまたはC17アルキルであるとき、R126およびR127はOHと置換されず、
R126およびR127がC17アルキルであるとき、X123およびX124はOHと置換されず、
R126およびR127がC18アルキルであるとき、X124は置換されていても良いイミダゾリルと置換されない）
式(CL-XIV)
【０１９３】
【化６２】
2019027055.tif 000063
（式中、
X125およびX126は同一または異なって水素原子、置換されていても良いC1-C6アルキル、ヘテロシクリルまたはポリアミンであるか、またはX125およびX126はそれらが結合している窒素と一緒に、該窒素に加えて、N、OおよびSから選択される1または2個のさらなるヘテロ原子を含有していてもよい4〜7員の単環式ヘテロ環を形成してもよく、
R130は水素原子またはC1-C6アルキルであり、
R128およびR129は同一または異なって直鎖状または分岐状の置換されていても良いC4-C24アルキルもしくはC4-C24アルケニルであり、
Y3およびY4は同一または異なって酸素原子またはCH2であり、
p115は0〜2の整数である。）、
式(CL-XV)
【０１９４】
【化６３】
2019027055.tif 000064
（式中、
X127およびX128は同一または異なってC1-C6アルキル、C2-C6アルケニル、C2-C6アルキニルであるか、
X127およびX128は、それらが結合している窒素原子と一体になって、1から2個の窒素原子を有する複素環を形成し、
L122は-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)N(X130)-、-N（X130）C(O)-、-OC(O)O-、-OC(O)N(X130)-、-N(X130)C(O)N(X130)-、または-N(X130)C(O)O-であり、
X130の各存在は独立して、水素原子またはC1-C3アルキルであり、
ａは1、2、3、4、5、または6であり、
bは0、1、2、または3であり、
X129は存在しないか、水素またはC1-C3アルキルであり、
R131およびR132は同一または異なって、１つ以上の生分解性基を有する炭素数12〜24のアルキル、炭素数12〜24のアルケニル、または炭素数12〜24のアルコキシであり、前記生分解性基は独立して、前記炭素数12〜24のアルキル基、炭素数12〜24のアルケニル基、または炭素数12〜24のアルコキシ基に組み込まれているか、炭素数12〜24のアルキル基、炭素数12〜24のアルケニル基、または炭素数12〜24のアルコキシ基の末端に存在しており、
前記生分解性基は、組み込まれているものは、-C(O)O-、-OC（O）-、-C(O)N(X130)-、または-N(X130)C(O)-であり、末端に存在するものは、-C(O)O‐C1-C4アルキル、−OC(O)-C1-C4アルキル、-C(O)N(X130)-C1-C4アルキル、または-N(X130)C(O)-C1-C4アルキルであり、
R131およびR132は、上記生分解性基とアスタリスク（＊）の付された第３級炭素原子との間に少なくとも4つの炭素原子を有する）、
式(CL-XVI)
【０１９５】
【化６４】
2019027055.tif 000065
（式中、
R133およびR134は同一または異なって、直鎖状または分岐状のC1-C9アルキル、C2-C11アルケニルもしくはC2-C11アルキニルであり、
L123およびL124は同一または異なって、直鎖状のC5-C18アルキレンもしくは直鎖状のC5-C18アルケニレンであるか、または結合しているNと複素環を形成しており、
L125は、単結合であるか、または-C(O)-O-であり、
L125が-C(O)O-であるとき、-L124-CO-OR134が形成されており、
L127はSまたはOであり、
L126は単結合であるか、または直鎖状もしくは分岐状のC1-C6アルキレンであるか、または-C(O)-を介して結合しているNと複素環を形成しており、
L128は直鎖状または分岐状のC1-C6アルキレンであり、そして
X131およびX132は同一または異なって、それぞれ水素または直鎖状もしくは分岐状のC1-C6アルキルである）、
式(CL-XVII)
【０１９６】
【化６５】
2019027055.tif 000066
（式中、
L131はC2-C4アルキレンまたは-CH2-S-CH2CH2-であり、
L129およびL130は同一または異なって、それぞれC1-C6アルキルであり、
R135およびR136は同一または異なって、C10-C30アルキル、C10-C30アルケニルであり、
X133およびX134は同一または異なって、水素、C1-C6アルキルまたは-CH2CH2OHである。）、
式（CL-XVIII）
【０１９７】
【化６６】
2019027055.tif 000067
【０１９８】
(式中、
R137およびR138は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、もしくはC8-C24アルキニルチオエチルであり、
X135は、水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｃ）
【化６７】
2019027055.tif 000068
(式中、X136およびX137は、同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX136およびX137が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L132はSまたはOであり、p115は2〜4の整数である)、式(Ｄ)
【化６８】
2019027055.tif 000069
(式中、X138およびX139は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX138およびX139が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p116は1〜4の整数である)、または式（Ｅ）
【化６９】
2019027055.tif 000070
(式中、X140およびX141は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX140およびX141が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p117は1〜4の整数である)である。）
式（CL-XIX）
【０１９９】
【化７０】
2019027055.tif 000071
【０２００】
(式中、
R139およびR140は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、
L133は、SまたはOであり、
X142は水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式（Ｆ）
【化７１】
2019027055.tif 000072
(式中、X143およびX144は同一または異なって水素原子もしくはC1-C3アルキルであるか、またはX143およびX144が結合する窒素原子と一緒になってC2-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、L134はSまたはOであり、p118は2〜4の整数である)、または式（Ｇ）
【化７２】
2019027055.tif 000073
(式中、X145およびX146は同一または異なって水素原子もしくはC1〜C3アルキルであるか、またはX145およびX146が結合する窒素原子と一緒になってC3-C6含窒素ヘテロ環を形成してもよく、p119は1〜4の整数である)である。）
【０２０１】
本発明の一つは、式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）で表される化合物、またはその製薬上許容し得る塩である。
本発明の式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）で表される化合物において、構造中の窒素原子上の孤立電子対に水素イオンが配位してもよく、その場合には、製薬上許容し得る陰イオンと塩を形成していてもよく、本発明においては、式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）で表される化合物で表される化合物、またはその製薬上許容し得る塩として、構造中の窒素原子上の孤立電子対に水素イオンが配位したカチオン性脂質も包含される。
本発明において、製薬上許容し得る陰イオンとしては、例えば塩化物イオン、臭化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオンおよびリン酸イオン等の無機イオンならびに酢酸イオン、シュウ酸イオン、マレイン酸イオン、フマル酸イオン、クエン酸イオン、安息香酸イオンおよびメタンスルホン酸イオン等の有機酸イオン等が挙げられる。
本発明の式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）で表される化合物の製薬上許容し得る塩としては、例えば塩酸塩、臭酸塩、硝酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩およびメタンスルホン酸塩等が挙げられる。
本発明の式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）で表される化合物の中には、幾何異性体もしくは光学異性体等の立体異性体または互変異性体等が存在し得るものもあるが、本発明の化合物(I)は、これらを含め、全ての可能な異性体およびそれらの混合物を包含する。
本発明の式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）中の各原子の一部またはすべては、それぞれ対応する同位体原子で置き換わっていてもよく、式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）で表される化合物は、これら同位体原子で置き換わった化合物も包含する。例えば、化合物(I)中の水素原子の一部またはすべては、原子量2の水素原子(重水素原子)であってもよい。
本発明の式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）中の各原子の一部またはすべてが、それぞれ対応する同位体原子で置き換わった化合物は、市販のビルディングブロックを用いて、上記各製造法と同様な方法で製造することができる。また、式（CL-XVIII）または式（CL-XIX）中の水素原子の一部またはすべてが重水素原子で置き換わった化合物は、例えば、イリジウム錯体を触媒として用い、重水を重水素源として用いてアルコール、カルボン酸等を重水素化する方法[ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイアティ(J.Am.Chem.Soc.), Vol.124,No.10,2092(2002)参照]等を用いて製造することができる。
【０２０２】
式(CL-I)の各基の定義において、直鎖状または分岐状のC10-C24アルキルとしては、例えばデシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、6,10-ジメチルウンデカ-2-イル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル、ノナデシル、イコシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシル、またはテトラコシル等が挙げられ、好ましくはデシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、またはオクタデシル等が挙げられ、より好ましくはトリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシルまたはオクタデシル等が挙げられる。
【０２０３】
直鎖状または分岐状のC10-C24アルケニルとしては、1〜3つの2重結合を含む直鎖状または分岐状のC10-C24アルケニルであればよく、例えば、(Z)-ドデカ-7-エニル、(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-4-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニル、(E)-ヘキサデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニル、(7Z,10Z,13Z)-ヘキサデカ-7,10,13-トリエニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ドデカ-7-エニル、(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-4-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニル、(E)-ヘキサデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニル、(7Z,10Z,13Z)-ヘキサデカ-7,10,13-トリエニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【０２０４】
直鎖状または分岐状のC10-C24アルキニルとしては、1〜3つの3重結合を含む直鎖状または分岐状のC10-C24アルキニルであればよく、例えば、デカ-9-イニル、ドデカ-4-イニル、ドデカ-11-イニル、テトラデカ-5-イニル、テトラデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ヘキサデカ-3,5-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニルまたはオクタデカ-9-イニル等が挙げられ、好ましくはヘキサデカ-7-イニルまたはオクタデカ-9-イニル等が挙げられ、より好ましくはオクタデカ-9-イニル等が挙げられる。
【０２０５】
なお、式(CL-I)において、R101およびR103は、同一の直鎖状または分岐状のC10-C24アルキル、C10-C24アルケニルもしくはC10-C24アルキニルであることが好ましく、同一に直鎖状または分岐状のC10-C24アルキルまたはC10-C24アルケニルであることがより好ましく、同一に直鎖状のC10-C24アルケニルであることがさらに好ましい。
【０２０６】
C1-C3アルキレンとしては、例えばメチレン、エチレン、またはプロピレン等が挙げられ、好ましくはメチレンまたはエチレンが挙げられ、より好ましくはメチレンが挙げられる。
【０２０７】
C1-C6アルキルとしては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル、ペンチル、イソペンチル、sec-ペンチル、ネオペンチル、tert-ペンチル、シクロペンチル、ヘキシルまたはシクロヘキシル等が挙げられ、好ましくはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、sec-ペンチル、tert-ペンチル、ネオペンチルまたはヘキシル等が挙げられ、より好ましくはメチル、エチルまたはプロピル等が挙げられる。
【０２０８】
C3-C6アルケニルとしては、例えば、アリル、1-プロペニル、ブテニル、ペンテニルまたはヘキセニル等が挙げられ、好ましくはアリル等が挙げられる。
【０２０９】
モノアルキルアミノおよびジアルキルアミノとしては、それぞれ1つ、または同一もしく異なる2つの、C1-C6アルキル(前記と同義)、またはアミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキル(前記と同義)で置換されたアミノであればよく、例えばメチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ブチルアミノ、ペンチルアミノ、ヘキシルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、エチルメチルアミノ、メチルプロピルアミノ、ブチルメチルアミノ、メチルペンチルアミノ、ヘキシルメチルアミノ、アミノエチルアミノ、アミノプロピルアミノ、(アミノエチル)メチルアミノまたはビス(アミノエチル)アミノ等が挙げられ、好ましくはメチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、アミノプロピルアミノまたはビス(アミノエチル)アミノ等が挙げられ、より好ましくはメチルアミノまたはジメチルアミノ等が挙げられる。
【０２１０】
トリアルキルアンモニオとしては、同一または異なって3つの、C1-C6アルキル(前記と同義)、またはアミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキル(前記と同義)で置換されたアンモニオであればよく、例えばトリメチルアンモニオ、エチルジメチルアンモニオ、ジエチルメチルアンモニオ、トリエチルアンモニオ、トリプロピルアンモニオ、トリブチルアンモニオ、トリペンチルアンモニオ、トリヘキシルアンモニオ、トリス(アミノエチル)アンモニオ、(アミノエチル)ジメチルアンモニオまたはビス(アミノエチル)メチルアンモニオ等が挙げられ、好ましくはトリメチルアンモニオ、トリエチルアンモニオ、トリス(アミノエチル)アンモニオ、(アミノエチル)ジメチルアンモニオまたはビス(アミノエチル)メチルアンモニオ等が挙げられ、より好ましくはトリメチルアンモニオ等が挙げられる。
【０２１１】
化合物(CL-I)において、トリアルキルアンモニオは、薬学的に許容される陰イオン(前記と同義)と塩を形成していてもよい。
【０２１２】
アルコキシとしては、C1-C6アルキル(前記と同義)または、アミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキル(前記と同義)で置換されたヒドロキシであればよく、例えばメトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、アミノエトキシまたはメチルアミノエトキシ等が挙げられ、好ましくはメトキシ、エトキシ、アミノエトキシまたはメチルアミノエトキシ等が挙げられ、より好ましくはメトキシ等が挙げられる。
【０２１３】
モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルとしては、それぞれ1つ、または同一もしく異なる2つの、C1-C6アルキル(前記と同義)、またはアミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキル(前記と同義)で置換されたカルバモイルであればよく、例えば、メチルカルバモイル、エチルカルバモイル、プロピルカルバモイル、ブチルカルバモイル、ペンチルカルバモイル、ヘキシルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル、エチルメチルカルバモイル、メチルプロピルカルバモイル、ブチルメチルカルバモイル、メチルペンチルカルバモイル、ヘキシルメチルカルバモイル、アミノエチルカルバモイル、アミノプロピルカルバモイル、(アミノエチル)メチルカルバモイル、またはビス(アミノエチル)カルバモイル等が挙げられ、好ましくはメチルカルバモイル、エチルカルバモイルまたはジメチルカルバモイル等が挙げられ、より好ましくはメチルカルバモイル、またはジメチルカルバモイル等が挙げられる。
【０２１４】
L101およびL102は、水素原子であることがより好ましい。この場合には、R101およびR102は、同一または異なって、ドデシル、テトラデシル、(Z)-ドデカ-7-エニル、(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-4-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニル、(E)-ヘキサデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニル、(7Z,10Z,13Z)-ヘキサデカ-7,10,13-トリエニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることが好ましく、(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニル、または(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがより好ましく、同一に(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニルまたは(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがさらに好ましい。
なお、L101およびL102が、水素原子である場合には、X101が水素原子、メチル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることがより好ましく、水素原子、メチル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、ヒドロキシもしくはカルバモイルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることがさらに好ましく、水素原子、またはメチル等であることがさらに好ましい。
【０２１５】
L101およびL102が、一緒になって単結合またはC1-C3アルキレンを形成する場合には、R101およびR102は、同一または異なってテトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、または(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルであることが好ましく、(Z)-オクタデカ-9-エニル、または(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがより好ましく、同一に(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０２１６】
L101およびL102が、一緒になって単結合またはC1-C3アルキレンを形成する場合には、X101が水素原子、メチル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることがより好ましく、水素原子、メチル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、ヒドロキシもしくはカルバモイルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることがさらに好ましく、水素原子またはメチル等であることが最も好ましい。
【０２１７】
L101およびL102が、一緒になって単結合を形成する場合に、L103が-CO-または-CO-O-、好ましくは-CO-であることも、本発明のより好ましい形態の1つである。この場合には、X101がアミノメチル、1,2-ジアミノエチル、2-アミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、1,4-ジアミノブチル、1,5-ジアミノペンチル、3-アミノプロピル、4-アミノブチルまたは5-アミノペンチル等がであることが好ましく、1,2-ジアミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、1,4-ジアミノブチルまたは1,5-ジアミノペンチルであることがさらに好ましい。R101およびR102は、同一または異なって、テトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニルまたは(Z)-イコサ-11-エニルまたは(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルであることが好ましく、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがより好ましく、同一に(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０２１８】
L103は単結合であることがより好ましい。
【０２１９】
L103が単結合の場合には、X101は水素原子、メチル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニル等であることがより好ましく、水素原子、メチル、ヒドロキシメチル、2-ヒドロキシエチル、2,3-ジヒドロキシプロピル、2-ヒドロキシプロピル、3-ヒドロキシプロピル、2-ヒドロキシ-3-メトキシプロピル、アミノメチル、2-アミノエチル、3-アミノプロピル、4-アミノブチル、5-アミノペンチル、2-(N,N-ジメチルアミノ)エチル、3-(N,N-ジメチルアミノ)プロピル、2-カルバモイルエチル、2-ジメチルカルバモイルエチル、または1-メチルピペリジン-4-イル等であることがさらに好ましく、水素原子またはメチルであることが最も好ましい。
【０２２０】
L103が-CO-または-CO-O-の場合には、X101はピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであり、該置換基の少なくとも1つは、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ピロリジニル、ピペリジルまたはモルホリニル等であることがより好ましく、R3はアミノメチル、1,2-ジアミノエチル、2-アミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、3-アミノプロピル、1,4-ジアミノブチル、4-アミノブチル、1,5-ジアミノペンチル、5-アミノペンチル、(N,N-ジメチルアミノ)メチル、2-(N,N-ジメチルアミノ)エチル、3-(N,N-ジメチルアミノ)プロピル、1-ヒドロキシ-2-アミノエチルまたは1-アミノ-2-ヒドロキシエチル等であることがさらに好ましく、1,2-ジアミノエチル、2-アミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、3-アミノプロピル、1,4-ジアミノブチル、4-アミノブチル、1,5-ジアミノペンチルまたは5-アミノペンチル等であることが最も好ましい。
【０２２１】
L103が単結合で、X101が水素原子であることも、本発明のより好ましい形態の1つである。この場合には、R101およびR102は、同一または異なって、ドデシル、テトラデシル、(Z)-ドデカ-7-エニル、(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-4-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニル、(E)-ヘキサデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニル、(7Z,10Z,13Z)-ヘキサデカ-7,10,13-トリエニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることが好ましく、同一または異なって、(Z)-テトラデカ-7-エニルまたは(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニルであることがより好ましく、同一に(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニルまたは(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０２２２】
L103が単結合で、X101がメチルであることも、本発明のより好ましい形態の1つである。この場合には、R101およびR102は、同一または異なって、ドデシル、テトラデシル、(Z)-ドデカ-7-エニル、(Z)-テトラデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-4-エニル、(Z)-ヘキサデカ-7-エニル、(E)-ヘキサデカ-7-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニル、(7Z,10Z,13Z)-ヘキサデカ-7,10,13-トリエニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることが好ましく、同一または異なって、(Z)-テトラデカ-7-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがより好ましく、同一に(Z)-テトラデカ-7-エニル、(7Z,10Z)-ヘキサデカ-7,10-ジエニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０２２３】
式(CL-II)の各基の定義において、直鎖状または分岐状のC12-C24アルキルとしては、例えばドデシル、トリデシル、テトラデシル、2,6,10-トリメチルウンデシル、ペンタデシル、3,7,11-トリメチルドデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル、ノナデシル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデシル、イコシル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシルまたはテトラコシル等が挙げられ、好ましくはドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシルまたはイコシル等が挙げられ、より好ましくはドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシルまたはオクタデシル等が挙げられる。
【０２２４】
直鎖状または分岐状のC12-C24アルケニルとしては、1〜3つの2重結合を含む直鎖状または分岐状のC12-C24アルケニルであればよく、例えば、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニルまたは3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【０２２５】
直鎖状または分岐状のC12-C24アルキニルとしては、1〜3つの3重結合を含む直鎖状または分岐状のC12-C24アルキニルであればよく、例えばドデカ-11-イニル、トリデカ-12-イニル、ペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニルまたはオクタデカ-9-イニル等が挙げられ、好ましくはペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニルまたはオクタデカ-9-イニル等が挙げられ、より好ましくはヘプタデカ-8-イニルまたはオクタデカ-9-イニル等が挙げられる。
【０２２６】
式(CL-II)の各基の定義におけるC1-C3アルキレン、C1-C6アルキルおよびC3-C6アルケニルは、それぞれ前記式(CL-I)におけるものと同義である。
【０２２７】
モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、アルコキシ、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルは、それぞれ前記式(CL-I)におけるものと同義である。
【０２２８】
R103およびR104は、同一の直鎖状または分岐状のC12-C24アルキル、C12-C24アルケニルもしくはC12-C24アルキニルであることが好ましく、同一の直鎖状または分岐状のC12-C24アルキルもしくはC12-C24アルケニルであることがより好ましい。
【０２２９】
L104およびL105は、同一の-O-、-CO-O-または-O-CO-であることがより好ましい。
【０２３０】
L104およびL105の少なくとも1つが-O-または-O-CO-である場合には、R103およびR104は、同一または異なって、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニルまたは3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニルであることがより好ましく、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０２３１】
L104およびL105の少なくとも1つが-CO-O-である場合には、R103およびR104はそれぞれトリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、ノナデシル、ヘニコシル、トリコシル、(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニルまたは2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニルであることがより好ましく、トリデシル、ペンタデシル、ヘプタデシル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニルまたは(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニルであることがさらに好ましい。
【０２３２】
p101およびp102は、同時に0または1であることがより好ましい。
【０２３３】
L106およびL107は、一緒になって単結合またはC1-C3アルキレンを形成することがより好ましい。L106およびL107が、一緒になって単結合またはC1-C3アルキレンを形成する場合には、X102が水素原子、メチル、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることがより好ましく、水素原子、メチル、または同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシもしくはカルバモイルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることがさらに好ましく、水素原子、メチル、2,3-ジヒドロキシプロピル、3-ヒドロキシプロピル、アミノメチル、1,2-ジアミノエチル、2-アミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、1,4-ジアミノブチル、1,5-ジアミノペンチル、3-アミノプロピル、4-アミノブチル、5-アミノペンチルまたは2-カルバモイルエチルであることが最も好ましい。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、アルコキシ、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオおよびジアルキルカルバモイルにおける2または3つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【０２３４】
L106およびL107が、一緒になって単結合を形成する場合に、L108が-CO-または-CO-O-、好ましくは-CO-であることが好ましい。
【０２３５】
L106およびL107が、一緒になって単結合を形成する場合に、p101およびp102は、同一または異なって1〜3であることが好ましい。
【０２３６】
L106およびL107が、水素原子である場合には、X102は水素原子、メチル、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イルまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6のアルケニルであることが好ましく、水素原子、メチルまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシもしくはカルバモイルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることがより好ましく、水素原子、メチル、2,3-ジヒドロキシプロピル、3-ヒドロキシプロピル、アミノメチル、1,2-ジアミノエチル、2-アミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、1,4-ジアミノブチル、1,5-ジアミノペンチル、3-アミノプロピル、4-アミノブチル、5-アミノペンチルまたは2-カルバモイルエチル等であることがさらに好ましい。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、アルコキシ、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、およびジアルキルカルバモイルにおける2または3つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【０２３７】
L108は単結合であることが好ましい。なお、L108が単結合の場合には、L104およびL105は-O-であることが好ましい。
【０２３８】
L108が単結合の場合には、X102は水素原子、メチル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イルまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニル等であることが好ましく、水素原子、メチル、ヒドロキシメチル、2-ヒドロキシエチル、2,3-ジヒドロキシプロピル、2-ヒドロキシプロピル、3-ヒドロキシプロピル、2-ヒドロキシ-3-メトキシプロピル、アミノメチル、2-アミノエチル、3-アミノプロピル、4-アミノブチル、5-アミノペンチル、2-(N,N-ジメチルアミノ)エチル、3-(N,N-ジメチルアミノ)プロピル、2-カルバモイルエチル、2-ジメチルカルバモイルエチルまたは1-メチルピペリジン-4-イル等であることがより好ましく、水素原子、メチル、2,3-ジヒドロキシプロピル、3-ヒドロキシプロピル、2-アミノエチル、3-アミノプロピル、4-アミノブチル、5-アミノペンチルまたは2-カルバモイルエチル等であることがさらに好ましい。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、アルコキシ、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、およびジアルキルカルバモイルにおける2または3つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【０２３９】
L104およびL105は-O-であることがより好ましい。ただし、L108が単結合で、X102が水素原子の場合には、L104およびL105が同一の-CO-O-または-O-CO-であることが好ましく、-CO-O-であることがより好ましい。
【０２４０】
L108が-CO-または-CO-O-の場合には、L104およびL105は同一の-CO-O-または-O-CO-であることが好ましく、-CO-O-であることがより好ましい。
【０２４１】
L108が-CO-または-CO-O-の場合には、X102はピロリジン-3-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イルまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ヒドロキシ、アルコキシ、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルで置換されたC1-C6アルキルもしくはC3-C6アルケニルであることが好ましく、該置換基の少なくとも1つは、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、ピロリジニル、ピペリジルもしくはモルホリニルであることが好ましく、X102はアミノメチル、1,2-ジアミノエチル、2-アミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、3-アミノプロピル、1,4-ジアミノブチル、4-アミノブチル、1,5-ジアミノペンチル、5-アミノペンチル、(N,N-ジメチルアミノ)メチル、2-(N,N-ジメチルアミノ)エチル、3-(N,N-ジメチルアミノ)プロピルまたは1-アミノ-2-ヒドロキシエチル等であることがより好ましく、アミノメチル、1,2-ジアミノエチル、2-アミノエチル、1,3-ジアミノプロピル、3-アミノプロピル、1,4-ジアミノブチル、4-アミノブチル、1,5-ジアミノペンチルまたは5-アミノペンチル等であることがさらに好ましい。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオ、アルコキシ、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C6アルキルと同義である。ジアルキルアミノ、トリアルキルアンモニオおよびジアルキルカルバモイルにおける2または3つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【０２４２】
L104およびL105は同一の-CO-O-または-O-CO-であることが好ましく、-CO-O-であることがより好ましい。
【０２４３】
式(CL-III)、(CL-IV)および(CL-V)の各基の定義において、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルおよびC8-C24アルキニルは、それぞれ前記式(I)〜(IV)におけるものと同義であり、同様の基が好ましい。
【０２４４】
式(CL-III)、(CL-IV)および(CL-V)の各基の定義において、C8-C24アルキルオキシエチルおよびC8-C24アルキルオキシプロピルにおけるアルキル部分としては、例えば前記直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルで例示したもの等が挙げられる。
【０２４５】
アルキニルオキシエチルおよびアルキニルオキシプロピルにおけるアルキニル部分としては、例えば、前記直鎖状または分岐状のC8-C24アルキニルの例示したももの等が挙げられる。
【０２４６】
R105およびR106は、同一または異なって直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることが好ましく、同一または異なって直鎖状または分岐状のC8-C24アルケニルであることがより好ましく、同一または異なって直鎖状のC8-C24アルケニルであることがさらに好ましい。また、R105およびR106は、同一であることがより好ましく、その場合には、直鎖状または分岐状のC12-C24アルキル、C12-C24アルケニルもしくはC12-C24アルキニルであることが好ましく、直鎖状のC12-C24アルケニルであることがより好ましい。直鎖状または分岐状のC12-C24アルキル、C12-C24アルケニル、およびC12-C24アルキニルは、それぞれ前記式(CL-II)におけるものと同義である。
【０２４７】
R105およびR106は、同一または異なって直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることが好ましく、同一または異なって直鎖状または分岐状のC8-C24アルケニルであることがより好ましく、同一または異なって直鎖状のC8-C24アルケニルであることがさらに好ましい。また、R105およびR106は、同一であることがより好ましく、その場合には、直鎖状または分岐状のC15-C20アルキル、C15-C20アルケニルもしくはC15-C20アルキニルであることが好ましく、直鎖状のC15-C20アルケニルであることがより好ましい。直鎖状または分岐状のC15-C20アルキル、C15-C20アルケニル、およびC15-C20アルキニルは、それぞれ前記式(I)〜(IV)におけるものと同義であり、同様の基が好ましい。
【０２４８】
R105およびR106が、異なる場合には、R105が直鎖状または分岐状のC15-C20アルキル、C15-C20アルケニルもしくはC15-C20アルキニルであり、R106が直鎖状または分岐状のC8-C12アルキルであることが好ましい。ここで、直鎖状または分岐状のC8-C12アルキルとしては、例えばオクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、またはドデシルが挙げられ、好ましくはオクチル、デシルまたはドデシルが挙げられる。
【０２４９】
R105が直鎖状のC15-C20アルケニルであり、R106が直鎖状のC8-C12アルキルであることがより好ましく、R105が(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであり、R106がオクチル、デシルまたはドデシルであることがさらに好ましい。
【０２５０】
R105およびR106が、異なる場合には、R105が、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、R106がC8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチルまたはC8-C24アルキニルオキシプロピルであることも好ましい。この場合、R105が、直鎖状のC8-C24アルケニルであり、R106が、C8-C24アルケニルオキシエチルであることがより好ましく、R105が、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルまたは(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルであり、R106が、(Z)-オクタデカ-9-エニルオキシエチル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシエチルまたは(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルオキシエチルであることがさらに好ましく、R105が、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであり、R106が、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシエチルであることが最も好ましい。
【０２５１】
R105およびR106が、同一または異なって直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルである場合には、同一または異なってテトラデシル、ヘキサデシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルまたは(Z)-ドコサ-13-エニルであることが好ましく、同一または異なってヘキサデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(Z)-イコサ-11-エニルまたは(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルであることがより好ましく、同一または異なって(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルまたは(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルであることがさらに好ましく、同一に(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることが最も好ましい。
【０２５２】
R107は、前記R105と同義であり、R107はR105と同様の基が好ましい。R108は直鎖状のC8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルキルオキシプロピル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシプロピル、C8-C24アルキニルオキシエチル、C8-C24アルキニルオキシプロピル、C8-C24アルキルオキシエトキシエチル、C8-C24アルケニルオキシエトキシエチルまたはC8-C24アルキニルオキシエトキシエチルが好ましく、直鎖状のC8-C24アルキルオキシエチル、C8-C24アルケニルオキシエチル、C8-C24アルキニルオキシエチルがより好ましい。R107が直鎖状のC15-C20アルケニルであり、R108がC8-C24アルケニルオキシエチルであることが最も好ましい。
【０２５３】
R109およびR110は、それぞれ前記R105およびR106と同義であり、前記R109およびR110と同様の基が好ましい。ただし、R109およびR110は、同一に直鎖状または分岐状のC15-C20アルキル、C15-C20アルケニルもしくはC15-C20アルキニルであることが好ましく、同一に(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルであることがより好ましい。
【０２５４】
X103およびX104における、C1-C3アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピルまたはシクロプロピルが挙げられ、好ましくはメチルまたはエチルが挙げられ、さらに好ましくはメチルが挙げられる。
【０２５５】
X103とX104が一緒になって形成する、C2-C8アルキレンとしては、例えばエチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレンまたはオクチレン等が挙げられ、好ましくはブチレン、ペンチレンまたはヘキシレン等が挙げられ、より好ましくはヘキシレン等が挙げられる。
【０２５６】
X103がL111と一緒になって形成する、C2-C8アルキレンとしては、例えばエチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレンまたはオクチレン等が挙げられ、好ましくはプロピレン、ブチレンまたはペンチレン等が挙げられ、より好ましくはプロピレンまたはブチレン等が挙げられ、さらに好ましくはプロピレンが挙げられる。
【０２５７】
X103およびX104は、同一または異なってメチルもしくはエチルであるか、一緒になってブチレン、ペンチレンもしくはヘキシレンを形成するか、またはX103がL111と一緒になってエチレン、プロピレンもしくはブチレンを形成することが好ましい。またX103およびX104は、同一または異なってメチルもしくはエチルであるか、または一緒になってブチレン、ペンチレンもしくはヘキシレンを形成することが好ましく、X103がL111と一緒になってエチレン、プロピレンもしくはブチレンを形成し、X104はメチルまたはエチルであることも好ましい。そしてX103およびX104は、同一にメチルであるか、または一緒になってヘキシレンを形成することがさらに好ましく、X103がL111と一緒になってプロピレンまたはブチレンを形成し、X104はメチルであることもさらに好ましい。
【０２５８】
L111における、C1-C6アルキル、C3-C6アルケニル、モノアルキルアミノ、アルコキシ、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルは、それぞれ前記式(CL-I)におけるものと同義である。
【０２５９】
L111は、水素原子、C1-C6アルキル、アミノ、モノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノ、モノアルキルアミノ、またはヒドロキシもしくはアルコキシで置換されたC1-C6アルキルであるか、またはX103と一緒になってC2-C6アルキレンを形成することが好ましく、水素原子、メチル、アミノ、メチルアミノ、ヒドロキシ、メ卜キシまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノもしくはヒドロキシで置換されたメチルであるか、またはX103と一緒になってエチレン、プロピレンもしくはブチレンを形成することがより好ましく、水素原子、C1-C3アルキル、またはヒドロキシであるか、またはX103と一緒になってプロピレンまたはブチレンを形成することがさらに好ましく、水素原子またはX103と一緒になってプロピレンを形成することが最も好ましい。
【０２６０】
L109およびL110における、C1-C6アルキレンとしては、例えばメチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレンまたはヘキシレン等が挙げられ、好ましくはメチレンまたはエチレン等が挙げられる。
【０２６１】
L109は、メチレン、エチレンまたはプロピレン等であることが好ましく、メチレンまたはエチレン等であることがより好ましく、L110は、単結合、メチレンまたはエチレン等であることが好ましく、単結合またはメチレン等であることがより好ましい。L109とL110の炭素数の和は、1〜3が好ましく、2がさらに好ましい。これらいずれの場合にも、X103およびX104は、同一または異なってメチルもしくはエチル等であり、L111は、水素原子、メチル、アミノ、メチルアミノ、ヒドロキシ、メ卜キシまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノもしくはヒドロキシで置換されたメチル等であるか、X103とX104は一緒になってペンチレン、ヘキシレンもしくはヘプチレン等を形成し、L111は、水素原子、メチル、アミノ、メチルアミノ、ヒドロキシ、メ卜キシまたは同一もしくは異なって1〜3つのアミノもしくはヒドロキシで置換されたメチル等であるか、またはX103とL111は一緒になってプロピレン、ブチレンもしくはペンチレン等を形成し、X104はメチルまたはエチル等であることが好ましく、X103およびX104はメチルであり、L111は水素原子であるか、X103とX104は一緒になってペンチレンまたはヘキシレンを形成し、L111は水素原子であるか、またはX103とL111は一緒になってプロピレンを形成し、X104はメチル等であることがより好ましい。
X105におけるC1-C4アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、シクロブチル等が挙げられ、好ましくはメチルが挙げられる。なお、X105としては水素原子がさらに好ましい。
【０２６２】
式(CL-V)の各基の定義において、X105’における、C1-C3アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピルまたはシクロプロピル等が挙げられ、好ましくはメチル、エチルまたはイソプロピル等が挙げられ、より好ましくはメチルまたはエチル等が挙げられる。なお、X105’としては、水素原子またはメチル等がさらに好ましく、水素原子が最も好ましい。
【０２６３】
L112における、C1-C3アルキレンとしては、例えば、メチレン、エチレンまたはプロピレン等が挙げられ、好ましくはメチレンまたはエチレン等が挙げられる。
【０２６４】
式(CL-VI)および式(CL-VII)の各基の定義において、直鎖状または分岐状の置換されていても良いC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルおよびC8-C24アルキニルは、それぞれ前記式(I)〜(V’’)におけるものと同義である。
【０２６５】
式(CL-VII)のR115における、置換されていても良いC1-C4アルキルにおけるC1-C4アルキルとしては、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル等が挙げられ、好ましくはメチル、エチル等が挙げられ、より好ましくはメチルが挙げられる。
置換されていても良いC1-C4アルコキシのアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。
置換されていても良いC1-C4アルキルにおける置換基としては、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノおよびジアルキルカルバモイルにおける2つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【０２６６】
置換されていても良いC1-C4アシルオキシにおけるアシルとしては、例えば、ホルミル、アセチル、プロパノイル、2-メチルプロパノイル、シクロプロパノイル、ブタノイル等が挙げられ、好ましくはアセチル等が挙げられる。
置換されていても良いC1-C4アシルオキシにおける置換基としては、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、ピロリジン-2-イル、ピロリジン-3-イル、ピペリジン-2-イル、ピペリジン-3-イル、ピペリジン-4-イル、モルホリン-2-イル、モルホリン-3-イル、ヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、ヒドロキシカルボニル、カルバモイル、モノアルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、ニトロ、シアノ、フルオロ、クロロ、ブロモ等が挙げられる。これらの置換基のうちモノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルコキシ、アルコキシカルボニル、モノアルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイルにおけるアルキル部分は、前記C1-C4アルキルと同義である。ジアルキルアミノおよびジアルキルカルバモイルにおける2つのアルキルは、それぞれ同一でも異なっていてもよい。
【０２６７】
式(CL-VI)において、R111およびR112は同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであることが好ましく、同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることがより好ましい。
【０２６８】
R111およびR112は、同一または異なってオクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、オクタデシル、イコシル、ドコシル、テトラコシル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニルまたは3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等であることが好ましく、同一または異なってドデシル、テトラデシル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等であることがより好ましく、同一に(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニルまたは(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等であることがさらに好ましい。
【０２６９】
X106とX107は、同一または異なってメチルまたはエチルであることが好ましく、同一にメチルであることがより好ましい。
【０２７０】
X106とX107が一緒になって形成する、C2-C8アルキレンとしては、例えばエチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレンまたはオクチレン等が挙げられ、好ましくはブチレン、ペンチレンまたはヘキシレン等が挙げられ、より好ましくはブチレンまたはペンチレン等が挙げられる。
【０２７１】
X106およびX107は、同一にメチルであるか、または一緒になってブチレン、ペンチレンまたはヘキシレンを形成することが好ましい。
【０２７２】
p103および104は同時に0であることが好ましく、p105は1であることが好ましい。
【０２７３】
L113およびL114は同時にOであることが好ましい。
【０２７４】
式(CL-VII)において、R113およびR114は、同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであることが好ましく、同一の直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであることがより好ましい。
【０２７５】
X109およびX110におけるC1-C3アルキルおよびC2-C8アルキレンは、それぞれ前記式(CL-VI)におけるものと同義である。
【０２７６】
R115は、水素原子、ヒドロキシ、メチルまたはメトキシ等であることが好ましく、水素原子またはヒドロキシ等であることがより好ましく、水素原子であることがさらに好ましい。
【０２７７】
L115は、-O-CO-または-NH-CO-であることが好ましい。この場合、p106が0または1であり、p107が1〜3の整数であることが好ましく、p106が0であり、p107が1または3であることがより好ましい。
【０２７８】
L115が、-CO-O-である場合、p106が0であり、p107が2〜4の整数であることが好ましく、p106が0であり、p107が3であることがより好ましい。
【０２７９】
L115が、-CO-NH-である場合、p106が0であり、p107が2〜4の整数であることが好ましく、p106が0であり、p107が3であることがより好ましい。
【０２８０】
式(CL-VIII)〜式（CL-XIX）の各基の定義においては、式（I）〜（V’’）におけるものと同義であってもよく、式（CL-I）〜式（CL-VIII）におけるものと同義であってもよい。
【０２８１】
式（CL-XVIII）中のR137およびR138は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニル、C8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、C8-C24アルキニルチオエチルである。
【０２８２】
R137およびR138における、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルとしては、例えば、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、2,6,10-トリメチルウンデシル、ペンタデシル、3,7,11-トリメチルドデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル、ノナデシル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデシル、イコシル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシル、テトラコシル等が挙げられる。
【０２８３】
R137およびR138における、直鎖状または分岐状のC8-C24アルケニルとしては、1〜3つの2重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルケニルであればよく、例えば(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【０２８４】
R137およびR138における、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキニルとしては、1〜3つの3重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルキニルであればよく、例えばドデカ-11-イニル、トリデカ-12-イニル、ペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、好ましくはペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、より好ましくはヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられる。
【０２８５】
R137およびR138における、C8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、C8-C24アルキニルチオエチルに含まれる、C8-C24アルキル、C8-24アルケニル、C8-C24アルキニルとしては、それぞれ上述したC8-C24アルキル、C8-24アルケニル、C8-C24アルキニルと同様の基を挙げることができる。
【０２８６】
X135におけるC1-C3アルキルとしては、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピルが挙げられる。
X135におけるヒドロキシC2-C4アルキルとしては、例えば、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ヒドロキシブチルが挙げられる。ヒドロキシ基の置換位置は任意である。
【０２８７】
X136、X137、X138、X139、X140およびX141におけるC1〜C3アルキルとしては、例えば、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピルが挙げられる。
X136およびX137、X138およびX139、X140およびX141がそれぞれ形成しうるC3-C6含窒素ヘテロ環としては、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、アゼパン等が挙げられる。
【０２８８】
式（CL-XIX）中のR139およびR140は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルである。
【０２８９】
R139およびR140における、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルとしては、例えば、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、2,6,10-トリメチルウンデシル、ペンタデシル、3,7,11-トリメチルドデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、6,10,14-トリメチルペンタデカン-2-イル、ノナデシル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデシル、イコシル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデシル、ヘニコシル、ドコシル、トリコシル、テトラコシル等が挙げられる。
【０２９０】
R139およびR140における、直鎖状または分岐状のC8-C24アルケニルとしては、1〜3つの2重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルケニルであればよく、例えば(Z)-トリデカ-8-エニル、(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-ヘプタデカ-8-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-10-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(8Z,11Z,14Z)-オクタデカ-8,11,14-トリエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-ノナデカ-10-エニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(10Z,13Z)-ノナデカ-10,13-ジエニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル、2,6,10-トリメチルウンデカ-1,5,9-トリエニル、3,7,11-トリメチルドデカ-2,6,10-トリエニル、2,6,10,14-テトラメチルペンタデカ-1-エニル、3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカ-2-エニル等が挙げられ、好ましくは(Z)-ペンタデカ-8-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-ヘプタデカ-5-エニル、(Z)-オクタデカ-6-エニル、(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられ、より好ましくは(Z)-ヘプタデカ-8-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(8Z,11Z)-ヘプタデカ-8,11-ジエニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル等が挙げられる。
【０２９１】
R139およびR140における、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキニルとしては、1〜3つの3重結合を含む直鎖状または分岐状のC8-24アルキニルであればよく、例えばドデカ-11-イニル、トリデカ-12-イニル、ペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、好ましくはペンタデカ-6-イニル、ヘキサデカ-7-イニル、ペンタデカ-4,6-ジイニル、ヘキサデカ-5,7-ジイニル、ヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられ、より好ましくはヘプタデカ-8-イニル、オクタデカ-9-イニル等が挙げられる。
【０２９２】
X146におけるC1-C3アルキルとしては、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピルが挙げられる。
X146におけるヒドロキシC2-C4アルキルとしては、例えば、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、ヒドロキシブチルが挙げられる。ヒドロキシ基の置換位置は任意である。
【０２９３】
X143、X144、X145およびX146におけるC1〜C3アルキルとしては、例えば、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピルが挙げられる。
X143およびX144、X145およびX146が、それぞれ形成しうるC3-C6含窒素ヘテロ環としては、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、アゼパン等が挙げられる。
【０２９４】
また、式(CL-VIII)における各基は国際公開第2016/002753号に、式(CL-X)における各基は国際公開第2009/129385号に、式(CL-XI)における各基は国際公開第2013/149140号に、式(CL-XII)における各基は国際公開第2009/129395号に、式(CL-XIII)における各基は国際公開第2013/059496号に、式(CL-XIV)における各基は国際公開第2011/149733号に、式(CL-XV)における各基は国際公開第2011/153493号に、式(CL-XVI)における各基は国際公開第2015/074085号に、式(CL-XVII)における各基は国際公開第2013/064911おいて、それぞれ対応して記載される各基における好ましい態様であってもよい。
【０２９５】
式（CL-IX）におけるL118およびL119は同一または異なって、好ましくは直鎖状または分岐状のC8-C24アルキレンもしくはC8-C24アルケニレンであり、より好ましくは直鎖状または分岐状のC8-C20アルキレンもしくはC8-C20アルケニレンである。
【０２９６】
式（CL-X）におけるX117およびX118のC1-C6アルキル、ヘテロシクリルまたはポリアミンは、ハロゲン原子、R’、OR’、SR’、CN、CO2R’またはCONR’2から選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよい。
式（CL-X）におけるX117およびX118が、それらが結合している窒素と一緒に、該窒素に加えて、N、OおよびSから選択される1または2個のさらなるヘテロ原子を含有していてもよい4〜7員の単環式ヘテロ環を形成する場合には、該単環式ヘテロ環はハロゲン原子、R’、OR’、SR’、CN、CO2R’またはCONR’2から選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよい。
ここで、R’は水素原子またはC1-C6アルキルであり、R’としてのC1-C6アルキルは、ハロゲン原子またはOHで置換されていてもよい。
【０２９７】
式（CL-X）におけるR120およびR121は同一または異なって好ましくは直鎖状または分岐状のC4-C24アルキルもしくはC4-C24アルケニルであり、より好ましくは直鎖状または分岐状のC4-C20アルキルもしくはC4-C20アルケニルである。
C4-C24アルキルまたはC4-C24アルケニルは、ハロゲン原子、R’、OR’、SR’、CN、CO2R’またはCONR’2から選択される1個以上の置換基で置換されていてもよい。
ここで、R’は水素原子またはC1-C6アルキルであり、R’としてのC1-C6アルキルは、ハロゲン原子またはOHで置換されていてもよい。
【０２９８】
式(CL-XI)におけるX119およびX120が直鎖状または分岐状の置換されていてもよいC6-C20アシルである場合、C6-C20アシルにおけるカルボニル基以外の構造として、C5-C19アルキル、C5-C19アルケニルまたはC5-C19アルキニルであり得る。
【０２９９】
式(CL-XII)におけるR124およびR125は同一または異なって、好ましくは直鎖状または分岐状のC8-C24アルキルもしくはC8-C24アルケニルであり、より好ましくは直鎖状または分岐状のC14-C20アルキルもしくはC14-C20アルケニルである。
【０３００】
式（CL-XIV）におけるX125およびX126のC1-C6アルキル、ヘテロシクリルまたはポリアミンは、ハロゲン原子、R’、OR’、SR’、CN、CO2R’またはCONR’2から選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよい。
式（CL-XIV）におけるX125およびX126がそれらが結合している窒素と一緒に、該窒素に加えて、N、OおよびSから選択される1または2個のさらなるヘテロ原子を含有していてもよい4〜7員の単環式ヘテロ環を形成する場合には、該単環式ヘテロ環はハロゲン原子、R’、OR’、SR’、CN、CO2R’またはCONR’2から選択される1〜3個の置換基で置換されていてもよい。
ここで、R’は水素原子またはC1-C6アルキルであり、R’としてのC1-C6アルキルは、ハロゲン原子またはOHで置換されていてもよい。
【０３０１】
式（CL-XIV）におけるR128およびR129は同一または異なって好ましくは直鎖状または分岐状のC4-C24アルキルもしくはC4-C24アルケニルであり、より好ましくは直鎖状または分岐状のC4-C20アルキルもしくはC4-C20アルケニルである。
C4-C24アルキルまたはC4-C24アルケニルは、ハロゲン原子、R’、OR’、SR’、CN、CO2R’またはCONR’2から選択される1個以上の置換基で置換されていてもよい。
ここで、R’は水素原子またはC1-C6アルキルであり、R’としてのC1-C6アルキルは、ハロゲン原子またはOHで置換されていてもよい。
【０３０２】
式（CL-XVIII）におけるR137およびR138は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニル、C8-C24アルキニルC8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、C8-C24アルキニルチオエチルであり、好ましくは同一または異なって、直鎖状のC8-C24アルケニルである。
X135は、水素原子、C1-C3アルキル、またはヒドロキシC2-C4アルキルであり、式(C)、式(D)または式(E)であり、好ましくは水素原子または式(C)または式(D)であり、より好ましくは水素原子または式(E)であり、さらに好ましくは水素原子である。
【０３０３】
式（CL-XIX）におけるR139およびR140は、同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキル、C8-C24アルケニルもしくはC8-C24アルキニルであり、好ましくは同一または異なって、直鎖状のC8-C24アルケニルである。
L133は、SまたはOであり、好ましくはSである。
X142は水素原子、C1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式(F)、または式(G)であり、好ましくはC1-C3アルキルであり、さらに好ましくはメチルである。
【０３０４】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、脂質Bの中でも式(CL-I)で表される脂質、および式(CL-II)で表される脂質が好ましく、式(CL-I)で表される脂質がより好ましい。
【０３０５】
本発明で用いられる脂質Bの具体例を以下の表1〜15に示すが、本発明において用いられる脂質Bはこれらに限定されるものではない。
【０３０６】
【表１】
2019027055.tif 000074
【０３０７】
【表２】
2019027055.tif 000075
【０３０８】
【表３】
2019027055.tif 000076
【０３０９】
【表４】
2019027055.tif 000077
【０３１０】
【表５】
2019027055.tif 000078
【０３１１】
【表６】
2019027055.tif 000079
【０３１２】
【表７】
2019027055.tif 000080
【０３１３】
【表８】
2019027055.tif 000081
【０３１４】
【表９】
2019027055.tif 000082
【０３１５】
【表１０】
2019027055.tif 000083
【０３１６】
【表１１】
2019027055.tif 000084
【０３１７】
【表１２】
2019027055.tif 000085
【０３１８】
【表１３】
2019027055.tif 000086
【０３１９】
【表１４】
2019027055.tif 000087
【０３２０】
【表１５】
2019027055.tif 000088
【０３２１】
次に本発明において用いられる脂質Aの製造方法について説明する。なお、以下に示す製造法において、定義した基が該製造法の条件下で変化するかまたは該製造法を実施するのに不適切な場合、有機合成化学で常用される保護基の導入および除去方法[例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第3版(Protective Groups in Organic Synthesis, third edition)、グリーン(T.W.Greene)著、John Wiley＆Sons Inc.(1999年)等に記載の方法]等を用いることにより、目的化合物を得ることができる。また、必要に応じて置換基導入等の反応工程の順序を変えることもできる。
【０３２２】
また、以下に示す製造法において記載されているエーテル化（第4版実験化学講座20  有機化合物の合成II」、第4版、p.187、丸善(1992年)等）、アミノ化（第4版実験化学講座20  有機化合物の合成II」、第4版、p.279、丸善(1992年)等）、エステル化（第4版実験化学講座22  有機化合物の合成IV」、第4版、p.43、丸善(1992年)等）、アミド化（第4版実験化学講座22  有機化合物の合成IV」、第4版、p.137、丸善(1992年)等）等の一般的な単位反応は、それぞれ既存の文献に記載されている一般的な反応条件を用いても行うことができる。
【０３２３】
以下、合成経路1または2のいずれかの方法、あるいはこれらの方法に準じた方法等で化合物(I)を得ることができる。
【０３２４】
化合物(I)は、アンモニアから合成経路1に従い得ることができる。
【０３２５】
【化７３】
2019027055.tif 000089
（式中、Msはメタンスルホニル基を表し、その他の各基は前記と同義である）
【０３２６】
アンモニアと化合物1とを溶媒（例えば、テトラヒドロフランやメタノール等の極性溶媒等）中、高温（例えば、80℃以上）で反応させることにより化合物2を得ることができる。
【０３２７】
化合物2と化合物3とを、塩基（例えば、水酸化ナトリウム等の無機塩基等）の存在下、高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物4が得られる。溶媒は特に必要無いが、場合により高沸点の溶媒（例えば、エチレングリコール等の極性溶媒等）を用いることもできる。
【０３２８】
化合物4と化合物5とを塩基（例えば、水酸化ナトリウム等の無機塩基等）の存在下、高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物6が得られる。溶媒は特に必要無いが、場合により高沸点の溶媒（例えば、エチレングリコール等の極性溶媒等）を用いることもできる。
【０３２９】
上記3つの各加熱反応ではマイクロ波反応装置を好適に用いることも出来る。また、化合物1, 化合物3および化合物5の代わりにこれらに対応する臭化物またはヨウ化物等のハロゲン化物を用いることもできる。
【０３３０】
R1-L1とR2-L2とが同じである化合物4は、アンモニアから過剰量の化合物1を用いることでも得られる。また、R2-L2とR3-L3とが同じである化合物6は、化合物2から過剰量の化合物3を用いることでも得られる。さらにR1-L2、R2-L2およびR3-L3が同じである化合物6は、アンモニアからさらに過剰量の化合物1を用いることでも得られる。
【０３３１】
化合物6と化合物7とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、室温または高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物(I)が得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(I)を処理することにより、化合物(I)の陰イオンA1を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３３２】
化合物1, 化合物3, 化合物5および化合物7等の反応に使用する化合物は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法（例えば、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年)等に記載の方法）もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０３３３】
また化合物1は、対応するR1-L1-OHを無水メシル酸またはメシル酸クロリドで処理することによっても得ることができる。
【０３３４】
さらに化合物R1-L1-OHのうち、L1が-Z1-(CY1Y2)p1- (各基は前記と同義)であるものは、R1-OMs、R1-OH、R1-NY7A-H (Y7Aは前記と同義)またはR1-CO2Hのいずれかひとつと、HO-(CY1Y2)p1-O-PRO1、MsO-(CY1Y2)p1-O-PRO1、HO2C-(CY1Y2)p1-O-PRO1またはH-NY7A-(CY1Y2)p1-O-PRO1(式中、PRO1はシリル系保護基(例えば、トリエチルシリル(TES)、tert-ブチルジメチルシリル(TBS)、tert-ブチルジフェニルシリル(TBDPS)等))のいずれかひとつとを、（例えば水素化ナトリウム等の強塩基を用いた）エーテル化、（例えば置換反応等の）アミノ化、（例えば、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩または等の縮合剤を用いた）エステル化、または（例えば、同様の縮合剤を用いた）アミド化のいずれかの反応を行った後に、脱保護することにより得ることができる。
また、化合物R1-L1-OHのうち、L1が-Z2-(CY3Y4)p2-Z3-(CY5Y6)p3- (各基は前記と同義)であるものも、同様に目的とする化合物に対応した反応基質を用い、公知の反応を１〜複数回適用することにより得ることができる。
【０３３５】
化合物3および5は、化合物1と同様の手法により調製することができる。
【０３３６】
化合物(Ia)は、化合物8から合成経路2に従い得ることができる。
【０３３７】
【化７４】
2019027055.tif 000090
（式中、M1〜M3は同一または異なって-(CY1Y2)p1-または-(CY3Y4)p2-Z3-(CY5Y6)p3- （式中、各基は前記と同義である）であり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である）
【０３３８】
化合物8と化合物9とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン等の有機塩基等）、縮合剤（例えば、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩またはO-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロフォスフェート等の縮合剤）および活性化剤（N,N-ジメチルアミノピリジン等の活性化剤）で処理することにより化合物10が得られる。
【０３３９】
化合物10と化合物11とを上記と同様の方法でエステル化することにより化合物12が得られる。
【０３４０】
さらに、化合物12と化合物13とを上記と同様の方法でエステル化することにより化合物14が得られる。
【０３４１】
R1とR2とが同じである化合物12は、化合物8から過剰量の化合物9を用いることでも得られる。また、R2とR3とが同じである化合物14は、化合物10から過剰量の化合物11を用いることでも得られる。さらにR1、R2およびR3とが同じである化合物14は、化合物8からさらに過剰量の化合物9を用いることでも得られる。
【０３４２】
化合物14と化合物15とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、室温または高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物(Ia)が得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(Ia)を処理することにより、化合物(Ia)の陰イオンA1を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３４３】
化合物8, 化合物9, 化合物11, 化合物14および化合物15等の反応に使用する化合物は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法(例えば、「第5版実験化学講座14  有機化合物の合成II」、第5版、p.1、丸善(2005年)、「第4版実験化学講座22  有機化合物の合成IV」、第4版、p.1、丸善(1992年)等に記載の方法)もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０３４４】
以下、合成経路3〜16のいずれかの方法、あるいはこれらの方法に準じた方法等で化合物(II)を得ることができる。
【０３４５】
化合物(IIa)は、化合物15から合成経路3に従い得ることができる。
【０３４６】
【化７５】
2019027055.tif 000091
（式中、M7は存在せずM4は-(CY8Y9)p4-であるか、M7は存在せずM4は-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-であるか、またはM7は-Z5-(CY10Y11)p5-でありM4は-(CY12Y13)p6-である（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）。また、M8は存在せずM5は-(CY8Y9)p4-であるか、M8は存在せずM5は-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-であるか、またはM8は-Z5-(CY10Y11)p5-でありM5は-(CY12Y13)p6-である。さらに、M9は存在せずM6は-(CY8Y9)p4-であるか、M9は存在せずM6は-(CY10Y11)p5-Z6-(CY12Y13)p6-であるか、またはM9は-Z5-(CY10Y11)p5-でありM6は-(CY12Y13)p6-である。その他の各基はそれぞれ前記と同義である。）
【０３４７】
化合物22は、化合物16と、化合物17, 化合物19および化合物21とを、合成経路2における化合物8と化合物9とのエステル化反応と同様の反応条件を適用して順に反応させることにより得られる。
【０３４８】
化合物(IIa)は化合物22と化合物23とから、合成経路2における化合物14と化合物15との反応により化合物(Ia)を合成する際の反応条件と同様の条件を適用して反応させるすることにより得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(IIa)を処理することにより、化合物(IIa)の陰イオンA2を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３４９】
化合物16, 化合物17, 化合物19, 化合物21および化合物23等の反応に使用する化合物は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法(例えば、「第5版実験化学講座14  有機化合物の合成II」、第5版、p.1、丸善(2005年)、「第4版実験化学講座22  有機化合物の合成IV」、第4版、p.1、丸善(1992年)等に記載の方法)もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０３５０】
化合物16は後述の合成経路11〜15の方法でも得ることができる。
【０３５１】
化合物17のうち、M7が-Z5-(CY10Y11)p5-であるものは、R4-OMs、R4-OH、R4-NY14A-H (Y14Aは前記と同義)またはR4-CO2Hのいずれかひとつと、HO-(CY10Y11)p5-CO-O-PRO2、MsO-(CY10Y11)p5-CO-O-PRO2、HO2C-(CY10Y11)p5-CO-O-PRO2またはH-NY14A-(CY10Y11)p5-CO-O-PRO2(式中、PRO2はカルボン酸のための保護基(例えば、メチル、tert-ブチル、ベンジル等))のいずれかひとつとを、（例えば水素化ナトリウム等の強塩基を用いた）エーテル化、（例えば置換反応等の）アミノ化、（例えば、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩等の縮合剤を用いた）エステル化、または（例えば、同様の縮合剤を用いた）アミド化のいずれかの反応を行った後に、脱保護することにより得ることができる。
【０３５２】
化合物19および21は、化合物17と同様の手法により調製することができる。
【０３５３】
合成経路3中、X4の導入を最初に行うこともできる。すなわち、まず化合物16に化合物23を作用させた後に、次いで化合物17, 19および21と順にエステル化を行うことでも化合物(IIa)を得ることができる。
【０３５４】
化合物(IIb)は、化合物16から合成経路4に従い得ることができる。
【０３５５】
【化７６】
2019027055.tif 000092
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０３５６】
化合物16と化合物24とを溶媒（例えば、テトラヒドロフランまたはトルエン等の非プロトン性溶媒等）中、塩基（例えば、水素化ナトリウム等の無機塩基等）の存在下、高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物25を得ることができる。
【０３５７】
化合物25と化合物26とを、上記と同様の方法でエーテル化すると、化合物27が得られる。
【０３５８】
化合物27と化合物28とを、上記と同様の方法でエーテル化すると、化合物29が得られる。
【０３５９】
上記３つの各加熱反応ではマイクロ波反応装置を好適に用いることも出来る。また、化合物24, 化合物26および化合物28の代わりにこれらに対応する臭化物またはヨウ化物等を用いることもできる。
【０３６０】
R4-M7とR5-M8とが同じである化合物27は、化合物16から過剰量の化合物24を用いることでも得られる。また、R5-M8とR6-M9とが同じである化合物29は、化合物25から過剰量の化合物26を用いることでも得られる。さらにR4-M7、R5-M8およびR6-M9とが同じである化合物29は、化合物16からさらに過剰量の化合物24を用いることでも得られる。
【０３６１】
化合物29と化合物23とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、室温または高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物(IIb)が得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(IIb)を処理することにより、化合物(IIb)の陰イオンA2を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３６２】
化合物16, 化合物24, 化合物26, 化合物28および化合物23等の反応に使用する化合物は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法（例えば、「第5版実験化学講座14  有機化合物の合成II」、第5版、p.1、丸善(2005年)、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年)等に記載の方法）もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０３６３】
また化合物24は、対応するR4-M7-OHを無水メシル酸またはメシル酸クロリドで処理することによっても得ることができる。
【０３６４】
さらに化合物R4-M7-OHのうち、M7が-Z5-(CY10Y11)p5- (各基は前記と同義)であるものは、R4-OMs、R4-OH、R4-NY14A-H (Y14Aは前記と同義)またはR4-CO2Hのいずれかひとつと、HO-(CY10Y11)p5-O-PRO1、MsO-(CY10Y11)p5-O-PRO1、HO2C-(CY10Y11)p5-O-PRO1またはH-NY14A-(CY10Y11)p5-O-PRO1(各基は前記と同義)のいずれかひとつとを、エーテル化、アミノ化、エステル化、またはアミド化のいずれかの反応を行った後に、脱保護することにより得ることができる。
【０３６５】
化合物26および28は、化合物24と同様の手法により調製することができる
【０３６６】
合成経路5に示すように、化合物(IIc)は、合成経路4で得られる化合物25から、合成経路3におけるエステル化等の各反応を適宜組み合わせることで得ることができる。さらに合成経路5に示すように、化合物(IId)は、合成経路4で得られる化合物27から、合成経路3におけるエステル化等の各反応を適宜組み合わせることで得ることができる。
【０３６７】
【化７７】
2019027055.tif 000093
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０３６８】
化合物(IIe)は、化合物30から合成経路6に従い得ることができる。
【０３６９】
【化７８】
2019027055.tif 000094
（式中、M10, M11およびM12はそれぞれ独立してOまたはNY14Aであり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である）
【０３７０】
化合物33は、化合物30と、化合物17, 化合物19および化合物21とを、順にエステル化またはアミド化反応させることにより得られる。
【０３７１】
化合物(IIe)は化合物33と化合物23とから、合成経路2における化合物14と化合物15との反応により化合物(Ia)を合成する際の反応条件と同様の条件を適用して反応させるすることにより得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(IIe)を処理することにより、化合物(IIe)の陰イオンA2を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３７２】
化合物30は後述の合成経路11〜15の方法でも得ることができる。
【０３７３】
化合物(IIf)は、化合物34から合成経路7に従い得ることができる。
【０３７４】
【化７９】
2019027055.tif 000095
（式中、各基は前記と同義である）
【０３７５】
化合物35は、化合物34を適切な保護基で保護することにより得られる。
【０３７６】
化合物36は、化合物35と、化合物23とを、合成経路2における化合物14と化合物15との反応により化合物(Ia)を合成する際の反応条件と同様の条件を適用して反応させたのちに、適切な条件で脱保護することにより得られる。
【０３７７】
化合物(IIf)は、化合物36と、化合物37, 化合物39および化合物41とを、順にエステル化またはアミド化反応させることにより得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で化合物(IIf)を処理することにより、化合物(IIf)の陰イオンA2を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３７８】
化合物34、35および36は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０３７９】
化合物37のうち、M10がNY14Aであるものは、R4-M7-OMs (化合物24)とY14ANH2とを反応させることでも得ることができる。
化合物37および39は、化合物35と同様の手法により調製することができる。
【０３８０】
なお、化合物(IIf)は、合成経路8に記載のように、化合物24と、化合物37, 39および41とで順にエステル化／アミド化を行い、最後に化合物23を作用させてX4を導入することでも得ることができる。
【０３８１】
【化８０】
2019027055.tif 000096
（式中、各基は前記と同義である）
【０３８２】
化合物(IIg)は、シアノ酢酸エチルから合成経路9に従い得ることができる。
【０３８３】
【化８１】
2019027055.tif 000097
（式中、Etはエチル基を表し、LAHは水素化アルミニウムリチウムであり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である）
【０３８４】
シアノ酢酸エチルと化合物24とを、溶媒（例えば、テトラヒドロフラン等の非プロトン性溶媒等）中、塩基（例えば、水素化ナトリウム等の無機塩基等）および、場合によっては添加剤（例えば、ヨウ化テトラブチルアンモニウム等の添加剤）の存在下、高温（例えば、60℃以上）で反応させることにより化合物42を得ることができる。
【０３８５】
化合物42と化合物26とを、溶媒（例えば、テトラヒドロフラン等の非プロトン性溶媒等）中、塩基（例えば、水素化ナトリウム等の無機塩基等）および、場合によっては添加剤（例えば、ヨウ化テトラブチルアンモニウム等の添加剤）の存在下、高温（例えば、60℃以上）で反応させることにより43を得ることができる。
【０３８６】
R4とR5とが同じである化合物43は、シアノ酢酸エチルから過剰量の化合物24を用いることでも得ることができる。
【０３８７】
化合物43を溶媒（例えば、テトラヒドロフラン等の非プロトン性溶媒等）中、過剰量の水素化アルミニウムリチウム(LAH)で還元することにより化合物44を得ることができる。
【０３８８】
溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、化合物44に対して化合物45, 化合物46および化合物23を順次作用させることにより、化合物47を得ることができる。X2、X3およびX4が同一である化合物47は、44から過剰量の化合物45を用いることでも得ることができる。
【０３８９】
化合物(IIg)は、化合物47と化合物21とから、合成経路2における化合物8と化合物9とのエステル化反応と同様の反応条件を適用して反応させることにより得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(IIg)を処理することにより、化合物(IIg)の陰イオンA2を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３９０】
化合物45および46は、化合物23と同様である。
【０３９１】
化合物(IIh)は、マロン酸ジメチルから合成経路10に従い得ることができる。
【０３９２】
【化８２】
2019027055.tif 000098
（式中、Meはメチル基を表し、LAHは水素化アルミニウムリチウムであり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である）
【０３９３】
マロン酸ジメチルと化合物24とを、溶媒（例えば、アセトニトリル等の非プロトン性溶媒等）中、塩基（例えば、炭酸セシウム等の無機塩基等）および、場合によっては添加剤（例えば、ヨウ化テトラブチルアンモニウム等の添加剤）の存在下、加温（例えば、50℃）下で反応させることにより化合物48を得ることができる。
【０３９４】
化合物48と化合物49とを、溶媒（例えば、アセトニトリル等の非プロトン性溶媒等）中、無水酢酸および塩基（例えば、水素化ナトリウム等の無機塩基等）の存在下で反応させることにより化合物50を得ることができる。
【０３９５】
化合物50を溶媒（例えば、テトラヒドロフラン等の非プロトン性溶媒等）中、過剰量の水素化アルミニウムリチウム(LAH)で還元することにより化合物51を得ることができる。
【０３９６】
化合物52は、化合物51と、化合物19および化合物21とを、合成経路2における化合物8と化合物9とのエステル化と同様の反応条件を適用して反応させることにより得られる。
【０３９７】
化合物52と化合物53とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、室温または高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物(IIh)が得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(IIh)を処理することにより、化合物(IIh)の陰イオンA2を別の陰イオンに変換することもできる。
【０３９８】
化合物49は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知（例えば、「ヘルベティカ・キミカ・アクタ（Helvetica Chimica Acta）、92巻、8号、1644-1656頁、2009年」等に記載の方法）の方法もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０３９９】
化合物54および56は、合成経路11に従い得ることができる。
【０４００】
【化８３】
2019027055.tif 000099
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０４０１】
化合物54は、化合物53のヒドロキシを保護することにより得ることができる。
また、化合物53は市販品として得ることができる。
【０４０２】
化合物55は、化合物54に、化合物45および化合物46を作用させることにより得ることができる。
【０４０３】
化合物56は、化合物55を脱保護することにより得ることができる。
【０４０４】
化合物58〜65は、合成経路12に従い得ることができる。
【０４０５】
【化８４】
2019027055.tif 000100
（式中、Halは塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子であり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である）
【０４０６】
化合物58は、化合物57のヒドロキシを保護することにより得ることができる。
また、化合物57は市販品として得ることができる。
【０４０７】
化合物59は、化合物58に、ハロゲン化試薬（例えば、塩素、臭素、ヨウ素、塩化ヨウ素等）を作用させることにより得ることができる。
【０４０８】
化合物60は、化合物59とアンモニアを反応させることにより得られる。また、化合物61は、化合物60に化合物45を作用させることにより得られる。さらに、化合物63は、化合物61に化合物46を作用させることにより得られる。
また、化合物63は、化合物59と化合物62を反応させることによっても得られる。
【０４０９】
化合物63は、化合物62を脱保護することにより得られる。
【０４１０】
化合物64は、化合物58を適切な酸化剤（例えば過マンガン酸カリウムや、ジョーンズ試薬等）で酸化することにより得られる。
【０４１１】
化合物67〜73は、合成経路13に従い得ることができる。
【０４１２】
【化８５】
2019027055.tif 000101
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０４１３】
化合物66は、化合物59にシアン化物（例えば、シアン化ナトリウム、シアン化カリウム、シアン化リチウム等）を作用させることにより得られる。
【０４１４】
化合物67は、化合物66を水素化アルミニウムリチウム等で還元することにより得られる。
【０４１５】
化合物68は、化合物67に化合物45を作用させることにより得られる。また、化合物69は、化合物68に化合物46を作用させることにより得られる。
【０４１６】
化合物70は、化合物69を脱保護することにより得られる。
【０４１７】
化合物71は、化合物66を塩基（例えば水酸化ナトリウム等）で加水分解することにより得られる。
【０４１８】
化合物72は、化合物71を還元（例えばボラン等）で還元することにより得られる。
【０４１９】
化合物73は、化合物72に、ハロゲン化試薬（例えば、塩素、臭素、ヨウ素、塩化ヨウ素等）を作用させることにより得ることができる。
【０４２０】
化合物73に対して、合成経路13における化合物59からの各反応を順次行うことにより、化合物67、68、69、71、72および73の、各官能基（アミノ基、モノアルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、カルボン酸、ヒドロキシおよびハロゲン）と4級炭素との間のアルキレン鎖がさらに延長した化合物を得ることができる。またこれを繰り返すことにより各官能基と4級炭素との間のアルキレン鎖は自由に延長することができる。
【０４２１】
化合物76は、合成経路14に従い合成できる。
【０４２２】
【化８６】
2019027055.tif 000102
（式中、M13は-(CH2)p201-であり、M15は-(CH2)p202-であり（式中、p201〜p202は1〜5の整数である）、M14は-O-、-CO-O-または-NY27A-であり、PRO4はM14に合わせて、ヒドロキシのための保護基PRO1、カルボン酸のための保護基PRO2、またはアミンのための保護基PRO3（例えばtert-ブトキシカルボニル等のカルバマート系保護基、またはベンジル等）のいずれかを表す）
【０４２３】
化合物74は、合成経路11〜13に記載の方法、またはそれらに準じた方法により得られる。
【０４２４】
化合物75は、化合物74を適切に保護・脱保護することにより得られる。
【０４２５】
化合物76は、化合物75を原料として、合成経路11〜13に記載の方法、またはそれらに準じた方法により得られる。
【０４２６】
化合物77〜79は、合成経路15に記載のように、化合物76を原料とし、保護ならびに脱保護、および合成経路14に準じた方法を順次行うことにより得ることができる。
【０４２７】
【化８７】
2019027055.tif 000103
（式中、M16およびM17は、それぞれ-(CH2)p203-および-(CH2)p204-をあらわし（式中、p203〜p204は1〜5の整数である）、その他の各基は前記と同義である）
【０４２８】
化合物82、84、87、89、92および95は、合成経路16に従い合成できる。
【０４２９】
【化８８】
2019027055.tif 000104
（式中、M18は-(CY19Y20)p9-または-(CY23Y24)p11-Z9-(CY25Y26)p12-である。また、b1は
【化８９】
2019027055.tif 000105
であり、Arはp-ニトロフェニル基であり、Halは塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン原子であり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である。なお、p13が0である場合には、Nは直接Z10に隣接する炭素原子と結合する。）
【０４３０】
化合物82は、化合物80と化合物81とをエステル化で縮合した後に、脱保護することにより得られる。
【０４３１】
化合物84は、化合物83と化合物81とをアミド化で縮合した後に、脱保護することにより得られる。
【０４３２】
化合物87は、化合物85と化合物86とをエステル化で縮合した後に、脱保護することにより得られる。
【０４３３】
化合物89は、化合物85と化合物88とをアミド化で縮合した後に、脱保護することにより得られる。
【０４３４】
化合物92は、化合物90と化合物91とを求核置換反応後に、脱保護することにより得られる。
【０４３５】
化合物95は、化合物93と化合物94とをエステル交換反応後に、脱保護することにより得られる。
【０４３６】
80、83、85、90および93は、合成経路12〜15またはこれらに準じた方法により得ることができる。
【０４３７】
化合物81、86、88、91および94のうち、M18が-(CY19Y20)p9-であるものは、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは市販品の官能基を定法に従って変換することで得ることできる。
この場合、b1が
【化９０】
2019027055.tif 000106
である化合物については、それぞれ
【化９１】
2019027055.tif 000107
（式中、M37は、-OH、-CO2HまたはNY38である（ただし、Y38は、水素原子または置換されていても良いC1-C4アルキルである））に、それぞれに対応する適切なフラグメントをエーテル化、アミノ化、エステル化、アミド化等で縮合することにより得ることができる。
【０４３８】
また、化合物81、86、88、91および94のうち、M18が-(CY23Y24)p11-Z9-(CY25Y26)p12-であるものは、化合物81、86、88、91および94のうち、M18が-(CY19Y20)p9-であるものと同様の化合物に、それぞれに対応する適切なフラグメントをエーテル化、アミノ化、エステル化、アミド化等で縮合することにより得ることができる。
【０４３９】
以下、合成経路17〜21の方法、あるいはこれらの方法に準じた方法等で化合物(III)を得ることができる。
【０４４０】
化合物(IIIa)は、化合物96から合成経路17に従い得ることができる。
【０４４１】
【化９２】
2019027055.tif 000108
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０４４２】
化合物96と化合物97とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、室温または高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物(IIIa)が得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(IIIa)を処理することにより、化合物(IIIa)の陰イオンA3を別の陰イオンに変換することもできる。
【０４４３】
化合物96は、実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、または文献（米国特許出願公開第2012/0172411号明細書）記載の方法もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４４４】
化合物97等の反応に使用する化合物は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４４５】
化合物(IIIb)は、グリオキシル酸エチルから合成経路18に従い得ることができる。
【０４４６】
【化９３】
2019027055.tif 000109
（式中、M19は-(CY50Y51)p23-または-(CY54Y55)p25-Z17-(CY56Y57)p26-（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）であり、b2は
【化９４】
2019027055.tif 000110
であり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である。なお、p33が0である場合には、Nは直接Z21に隣接する炭素原子と結合する。）
【０４４７】
溶媒(例えば、テトラヒドロフラン等のエーテル系溶媒等)中、グリオキシル酸エチルと、グリニャール試薬98、99および100とを順次反応させることにより、化合物101が得られる。なお、R7、R8およびR9が同一の化合物101は、グリオキシル酸エチルに過剰量の化合物98を作用させることによっても得られる。
【０４４８】
化合物101と化合物102とを溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン等の有機塩基等）、縮合剤（例えば、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩等の縮合剤）および活性化剤（N,N-ジメチルアミノピリジン等の活性化剤）で処理することにより化合物103が得られる。
【０４４９】
化合物103と化合物97、104または105とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、室温または高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物(IIIb)が得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で化合物(IIIb)を処理することにより、化合物(IIIb)の陰イオンA3を別の陰イオンに変換することもできる。
【０４５０】
化合物98は、R7-OH（市販品、実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で得られる）にメシル化試薬（メシル酸無水物またはメシル酸クロリド等）、臭化物塩（臭化マグネシウムまたは臭化リチウム等）、および金属マグネシウムを順次作用させることにより得られる。化合物99および100は化合物98と同様である。
【０４５１】
化合物104および105は、化合物23と同様である。
化合物102は、化合物54と同様である。
【０４５２】
化合物108、109、および112は、それぞれアンモニア、蟻酸エチル、および化合物99から合成経路19に従い得ることができる。
【０４５３】
【化９５】
2019027055.tif 000111
（式中、M21は-OHでありM22はHO-CO-でありM25は-O-CO-であるか、M21は-NY45C-HでありM22はHO-CO-でありM25は-NY45C-CO-であるか、M21は-CO-OHでありM22はHO-でありM25は-CO-O-であるか、またはM21は-CO-OHでありM22はH-NY14B-でありM25は-CO-NY14B-である。また、M20は存在せずM23は-(CY39Y40)p18-であるか、M20は存在せずM23は-(CY41Y42)p19-Z14-(CY43Y44)p20-であるか、または、M20は-Z13-(CY41Y42)p19-でありM23は-(CY43Y44)p20-である。さらにM24は-(CY63Y64)p29-、または-(CY67Y68)p31-Z20-(CY69Y70)p32-であり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である。）
【０４５４】
化合物108は、アンモニア、化合物106および化合物107とを、合成経路1におけるアンモニアから化合物4を合成するのと同様の反応条件を適用して反応させることにより得られる。
【０４５５】
化合物109は、蟻酸エチル、化合物99および化合物100とを、合成経路18におけるグリオキシル酸エチルから化合物101を合成するのと同様の反応条件を適用して反応させることにより得られる。
【０４５６】
化合物112は、化合物110と化合物111とをエステル化またはアミド化で縮合させた後に、脱保護することにより得ることができる。
【０４５７】
化合物106および107は、化合物1と同様である。
化合物110のうちM21が-OHであるものは、合成経路1記載のR1-L1-OHと同様である。また、化合物110のうちM21が-NY45C-Hであるものは、化合物37と同様である。さらに、化合物110のうちM21が-CO-OHであるものは、化合物17と同様である。
【０４５８】
化合物111は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法(例えば、第4版実験化学講座20  有機化合物の合成II」、第4版、p.187、丸善(1992年)等に記載の方法)もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４５９】
化合物(IIIc)および(IIId)は、それぞれ化合物108および112、ならびに化合物109および112から合成経路20に従い得ることができる。
【０４６０】
【化９６】
2019027055.tif 000112
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０４６１】
化合物(IIIc)は、化合物108と112とをアミド化で縮合した後、化合物114、1115、または116を作用させることにより得られる。
【０４６２】
化合物(IIId)は、化合物109と112とをエステル化で縮合した後、化合物114、1115、または116を作用させることにより得られる。
【０４６３】
なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で化合物(IIIc)または(IIId)を処理することにより、化合物(IIIc)または(IIId)の陰イオンA3を別の陰イオンに変換することもできる。
【０４６４】
反応に用いる各化合物は前述のとおりである。
【０４６５】
以下、合成経路11〜12の方法、あるいはこれらの方法に準じた方法等で化合物(IV)を得ることができる。
【０４６６】
化合物127は、合成経路21に従い得ることができる。
【０４６７】
【化９７】
2019027055.tif 000113
(式中、M26およびM27は同一または異なって-(CY91Y92)p41-であり、M28およびM29は同一または異なって-O-CO-(CY91Y92)p41-または-CO-O-(CY91Y92)p41-であり、M30およびM31は同一または異なって存在しないか、-O-CO-(CY91Y92)p41-または-CO-O-(CY91Y92)p41-であり、その他の各基はそれぞれ前記と同義である)
【０４６８】
化合物118と、化合物119および化合物120とをエステル化反応で順次縮合させるか、または化合物122と、化合物123および化合物124とエステル化反応で順次縮合させることにより化合物121を得ることができる。
【０４６９】
化合物125は、化合物121に、溶媒（例えば、テトラヒドロフラン等のエーテル系溶媒等）中、脱保護試薬（例えば、フッ化テトラn-ブチルアンモニウム等の脱保護試薬）を作用させるか、または蟻酸エチルに、溶媒（例えば、テトラヒドロフラン等のエーテル系溶媒等）中、化合物126および化合物127を順次付加反応させることにより得ることができる。
【０４７０】
化合物125に、溶媒（例えば、クロロホルム等の非プロトン性溶媒等）中、酸化剤（例えば、デス-マーチン(Dess-Martin)試薬等の有機系酸化剤またはクロロクロム酸ピリジニウム等の無機系酸化剤）を作用させることにより化合物128を得ることができる。
【０４７１】
化合物118、化合物119、化合物120、化合物122、化合物123、化合物124、化合物126および化合物127等の反応に使用する化合物は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法(「第4版実験化学講座22  有機化合物の合成IV」、第4版、p.1、丸善(1992年)、「第4版実験化学講座20  有機化合物の合成II」、第4版、p.1、丸善(1992年)、および「第4版実験化学講座25  有機化合物の合成VII」、第4版、p.59、丸善(1991年)等)もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４７２】
化合物(IVa)は、化合物128から、合成経路22に従い得ることができる。
【０４７３】
【化９８】
2019027055.tif 000114
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０４７４】
化合物128と化合物129とを、溶媒（例えば、1,2-ジククロエタン等のハロゲン系溶媒等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシボロヒドリド等のヒドリド化合物等）と、場合によっては添加剤（例えば、酢酸等の酸）の存在下で反応させることにより、化合物130を得ることができる。
【０４７５】
化合物130と化合物131とを、塩基（例えば、水酸化ナトリウム等の無機塩基等）の存在下、高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物132が得られる。溶媒は特に必要無いが、場合により例えば、エチレングリコール等の溶媒を用いることもできる。
【０４７６】
化合物132と化合物133とを、溶媒（例えば、クロロホルム等のハロゲン系溶媒等）の存在下または非存在下、室温または高温（例えば、100℃以上）で反応させることにより化合物(IVa)が得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(IVa)を処理することにより、化合物(IVa)の陰イオンA4を別の陰イオンに変換することもできる。
【０４７７】
化合物129、化合物131および化合物133等の反応に使用する化合物は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法(例えば、国際公開第2010/042877号、国際公開第2010/054401号、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年)等に記載の方法)もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４７８】
化合物(IVb)は、合成経路23に従い得ることができる。
【０４７９】
【化９９】
2019027055.tif 000115
（式中、M32は存在しないか、または-Z27-(CY93Y94)p42-であり、Nsはo-ニトロベンゼンスルホニル基を表し、その他の各基はそれぞれ前記と同義である） 
【０４８０】
化合物134、化合物135、トリフェニルホスフィン、およびアゾジカルボン酸ジエチルを反応させたのち、得られた縮合物にチオール（例えば、ドデカン-1-チオールやチオフェノール等）を作用させて脱Ns化することで化合物136が得られる。
【０４８１】
化合物136と137をアミド化すると化合物138が得られる。
【０４８２】
化合物(IVb)は、化合物138に139を作用させると得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で化合物(IVb)を処理することにより、化合物(IVb)の陰イオンA4を別の陰イオンに変換することもできる。
【０４８３】
化合物134はR11-L14-NH2に塩化o-ニトロベンゼンスルホニルを作用させることにより得られる。R11-L14-NH2は、市販品として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法（例えば、「第4版実験化学講座20  有機化合物の合成II」、第4版、p.279、丸善(1992年)等に記載の方法）もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４８４】
化合物135、137および139等の反応に使用する化合物は、前述のいずれかの方法により得られる。
【０４８５】
化合物(V’a)は、合成経路24に従い得ることができる。
【０４８６】
【化１００】
2019027055.tif 000116
（式中、DMTrは2’,2’’-ジメトキシトリチル基をあらわし、M33は、-(CY123R124)p54-、-(CY125Y126)p55-Z35-(CY127R128)p56-または-(CY129R130)p57-Z36-(CY131Y132)p58-Z37-(CY133Y134)p59-をあわらし、M34、M35、およびM36はそれぞれ独立に-O-または-CO-O-であり、その他の各基はそれぞれ前記と同様である）
【０４８７】
化合物141は、化合物140に塩化2’,2’’-ジメトキシトリチルを作用させることにより得られる。
【０４８８】
化合物142は、化合物141に３段階のエーテル化、またはエステル化を行うことにより得られる。
【０４８９】
化合物143は、化合物142を酸で処理することにより得られる。
【０４９０】
化合物144は、化合物143をハロゲン化試薬で活性化したのちに、対応するアミン化合物で処理することにより得られる。
【０４９１】
化合物(V’a)は、化合物144に化合物145を作用させることにより得られる。なお、例えば、適切な陰イオン交換樹脂で(V’a)を処理することにより、化合物(V’a)の陰イオンA5を別の陰イオンに変換することもできる。
【０４９２】
化合物140は、市販品として、天然物として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法（例えば、「（ジ・オーガニック・ケミストリー・オブ・シュガー（The Organic Chemistry of Sugars）、ダニエル・Ｅ・レビー（Daniel E. Levy）他編、タイラー＆フランシス（Taylor & Francis）社、2005年等に記載の方法）もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４９３】
化合物(V’’a)は、化合物146を原料として、合成経路25と同様の方法により得ることができる。
【０４９４】
【化１０１】
2019027055.tif 000117
（式中、各基はそれぞれ前記と同義である）
【０４９５】
化合物146は、市販品として、天然物として、または実施例に記載の方法もしくはそれに準じた方法で、もしくは文献により既知の方法（例えば、「（ジ・オーガニック・ケミストリー・オブ・シュガー（The Organic Chemistry of Sugars）、ダニエル・Ｅ・レビー（Daniel E. Levy）他編、タイラー＆フランシス（Taylor & Francis）社、2005年等に記載の方法）もしくはそれに準じた方法で入手することができる。
【０４９６】
以上の合成経路1〜25のいずれかの方法、あるいはこれらの方法に準じた方法等を適宜組み合わせることにより、化合物(I)〜(V’’)を得ることができる。
【０４９７】
化合物(CL-I)で表される脂質は国際公開第2013/089151号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０４９８】
化合物(CL-II)で表される脂質は国際公開第2011/136368号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０４９９】
化合物(CL-III)、化合物(CL-IV)および化合物(CL-V)で表される脂質は国際公開第2014/007398号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５００】
化合物(CL-VI)で表される脂質は国際公開第2010/042877号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５０１】
化合物(CL-VII)は国際公開第2010/054401号に記載の方法、国際公開第2013/059496号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５０２】
化合物(CL-VIII)は国際公開第2016/002753号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５０３】
化合物(CL-IX)は以下に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５０４】
本発明の化合物の製造法について説明する。なお、以下に示す製造法において、定義した基が該製造法の条件下で変化するかまたは該製造法を実施するのに不適切な場合、有機合成化学で常用される保護基の導入および除去方法[例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第3版(Protective Groups in Organic Synthesis, third edition)、グリーン(T.W.Greene)著、John Wiley＆Sons Inc.(1999年)等に記載の方法]等を用いることにより、目的化合物を製造することができる。また、必要に応じて置換基導入等の反応工程の順序を変えることもできる。
【０５０５】
製造法1
化合物(CL-IX)のうち、X115およびX116が共に水素原子である化合物(CL-IXa)、およびX115およびX116が同一である化合物(CL-IXb)は以下の方法によって製造することができる。
【０５０６】
【化１０２】
2019027055.tif 000118
【０５０７】
(式中、R118、R119、M101、M102、L118およびL119はそれぞれ前記と同義であり、IX-IIIaおよびIX-IIIbにおけるXは同一または異なって、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、メタンスルホニルオキシ、ベンゼンスルホニルオキシ、p-トルエンスルホニルオキシ等の脱離基を表し、R141は水素原子、メチルまたはエチルであり、R142は水素原子またはメチルであるか、またはR141とR142は隣接する炭素と一緒になってシクロプロピル環を形成する（ただし、R141が水素原子またはエチルであるとき、R142はメチルでない)）
【０５０８】
工程26および工程27
化合物(IX-IIa)は、2-アミノ-2-メチル-1,3-プロパンジオールと化合物(IX-IIIa)を、無溶媒でまたは溶媒中、1〜10当量の塩基の存在下、室温と200℃の間の温度で、5分間〜100時間反応させることにより製造することができる。さらに、化合物(CL-IXa)は、化合物(IX-IIa)と化合物(IX-IIIb)を、無溶媒でまたは溶媒中、1〜10当量の塩基の存在下、室温と200℃の間の温度で、5分間〜100時間反応させることにより製造することができる。
【０５０９】
溶媒としては、例えばジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン、トルエン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、ピリジン等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いることができる。
【０５１０】
塩基としては、例えばナトリウムメトキシド、カリウム  tert-ブトキシド、水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、ヘキサメチルジシラザンリチウム、ヘキサメチルジシラザンナトリウム、n-ブチルリチウム等が挙げられる。
【０５１１】
化合物(IX-IIIa)および化合物(IX-IIIb)は、市販品としてまたは公知の方法(例えば、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年))もしくはそれに準じた方法で得ることもできる。
【０５１２】
R118-M101-L118およびR119-M102-L119が同一の場合の化合物(CL-IXa)は、工程26において、2当量以上の化合物(IX-IIIa)を用いることで得ることができる。
【０５１３】
2-アミノ-2-メチル-1,3-プロパンジオールは市販品として得ることができる。
【０５１４】
工程28
化合物(CL-IXb)は、化合物(CL-IXa)を2〜20当量の化合物(IX-IV)と、溶媒中、好ましくは1当量〜大過剰量の還元剤および必要により好ましくは1〜10当量の酸の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより製造することができる。
【０５１５】
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、tert-ブチルアルコール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、水等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いられる。
【０５１６】
還元剤としては、例えばトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等が挙げられる。
【０５１７】
酸としては、例えば塩酸、酢酸等が挙げられる。
【０５１８】
化合物(IX-IV)は、市販品として得ることができる。
【０５１９】
製造法2
化合物(CL-IX)のうち、X115およびX116が異なる化合物(CL-IXc)および(CL-IXd)は以下の方法によって製造することができる。
【０５２０】
【化１０３】
2019027055.tif 000119
【０５２１】
(式中、R118、R119、M101、M102、L118、L119、R141、R142およびXはそれぞれ前記と同義であり、R143はX115と同義であり、PGは保護基を表わす。)
【０５２２】
工程29
化合物(IX-IIb)は、化合物(CL-IXa)を有機合成化学で常用される保護基[例えば、プロテクティブ  グループス  イン  オーガニック  シンセシス第3版(Protective Groups in Organic Synthesis, third edition)、グリーン(T.W.Greene)著、John Wiley＆Sons Inc.(1999年)等に記載の保護基]で保護することで製造することができる。
【０５２３】
工程30
化合物(IX-IIc)は、化合物(IX-IIb)と化合物(IX-IIIc)を、無溶媒でまたは溶媒中、1〜10当量の塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより製造することができる。
【０５２４】
溶媒としては、例えばジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン、トルエン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、ピリジン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いることができる。
【０５２５】
塩基としては、例えばナトリウムメトキシド、カリウム  tert-ブトキシド、水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、ヘキサメチルジシラザンリチウム、ヘキサメチルジシラザンナトリウム、n-ブチルリチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウウ、トリエチルアミン等が挙げられる。
【０５２６】
化合物(IX-IIIc)は、市販品として得ることができる。
【０５２７】
工程31
化合物(CL-IXc)は、化合物(IX-IIc)の保護基PGを適切な方法で除去することによって得られる。保護基の除去方法としては、有機合成化学で常用される保護基の除去方法[例えば、プロテクティブ  グループス  イン  オーガニック  シンセシス第3版(Protective Groups in Organic Synthesis, third edition)、グリーン(T.W.Greene)著、John Wiley＆Sons Inc.(1999年)等に記載の除去方法]を用いることができ、これにより目的とする化合物を製造することができる。
【０５２８】
工程32
化合物(CL-IXd)は、化合物(CL-IXc)を1〜10当量の化合物(IX-IV)と、溶媒中、好ましくは1当量〜大過剰量の還元剤および必要により好ましくは1〜10当量の酸の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより製造することができる。
【０５２９】
溶媒、還元剤、酸としては、それぞれ工程28で例示したものが挙げられる。
【０５３０】
製造法3
化合物(CL-IX)のうち、M101およびM102がそれぞれ-OC(O)-である化合物（CL-IXc’）および(CL-IXd’)は以下の方法によっても製造することができる。
【０５３１】
【化１０４】
2019027055.tif 000120
【０５３２】
(式中、R118、R119、M101、M102、L118、L119、R141、R142、R143およびPGはそれぞれ前記と同義であり、BおよびB’は直鎖状または分岐状のC1-C16アルキルまたはC2-C16アルケニルである。)
【０５３３】
工程33
化合物(IX-IId)は、化合物(IX-IIc’)と酸化剤を溶媒中、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより製造することができる。
【０５３４】
酸化剤としては、オゾン、四酸化オスミウム/過ヨウ素酸ナトリウム、四酸化オスミウム/四酢酸鉛等が挙げられる。
【０５３５】
溶媒としては、工程28で例示したものが挙げられる。
【０５３６】
化合物(IX-IIc’)は製造法2に記載の方法で製造することができる。
【０５３７】
工程34
化合物(IX-IIe)は、化合物(IX-IId)と酸化剤を、溶媒中-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより製造することができる。
【０５３８】
酸化剤としては、ジョーンズ試薬、二クロム酸ピリジニウム、四酸化ルテニウム、亜塩素酸ナトリウム等が挙げられる。
【０５３９】
溶媒としては、tert-ブチルアルコール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトン、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、水等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いることができる。
【０５４０】
工程35および工程36
化合物(IX-IIf)は化合物(IX-IIe)と化合物(IX-Va)を、無溶媒でまたは溶媒中、1〜10当量の縮合剤と1〜10当量の塩基の存在下、室温と200℃の間の温度で、5分間〜100時間反応させることにより製造することができる。さらに、化合物(IX-IIc’’)は、化合物(IX-IIf)と化合物(IX-Vb)を、無溶媒でまたは溶媒中、1〜10当量の縮合剤と1〜10当量の塩基の存在下、室温と200℃の間の温度で、5分間〜100時間反応させることにより製造することができる。
【０５４１】
溶媒としては、例えばジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、ピリジン等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いることができる。
【０５４２】
縮合剤としては、例えば塩酸1-エチル-3-（3-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド、4-（4,6-ジメトキシ-1,3,5-トリアジン-2- イル）-4-メチルモルホリニウムクロリドn水和物、1H-ベンゾトリアゾール-1-イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロりん酸塩、O-（7-アザベンゾトリアゾール-1-イル）-N,N,N',N',-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロりん酸塩等が挙げられる。
【０５４３】
塩基としては例えば炭酸カリウム、炭酸セシウム、トリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン、N-メチルモルホリン、ピリジン等が挙げられる。
【０５４４】
化合物(IX-Va)および化合物(IX-Vb)は市販品として得ることができる。
【０５４５】
R118およびR119が同一の場合の化合物(IX-IIc’’)は、工程35において、2当量以上の化合物(IX-Va)を用いることで得ることができる。
【０５４６】
工程37
化合物(CL-IXc’)は、化合物(IX-IIc’’)の保護基PGを適切な方法で除去することによって得られる。保護基の除去方法としては、有機合成化学で常用される保護基の除去方法[例えば、プロテクティブ  グループス  イン  オーガニック  シンセシス第3版(Protective Groups in Organic Synthesis, third edition)、グリーン(T.W.Greene)著、John Wiley＆Sons Inc.(1999年)等に記載の除去方法]を用いることができ、これにより目的とする化合物を製造することができる。
【０５４７】
工程38
化合物(CL-IXd’)は、化合物(CL-IXc’)を1〜10当量の化合物(IX-IV)と、溶媒中、好ましくは1当量〜大過剰量の還元剤および必要により好ましくは1〜10当量の酸の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより製造することができる。
【０５４８】
溶媒、酸としては、それぞれ工程28で例示したものが挙げられる。
【０５４９】
なお、化合物(CL-IX)のうち、前記化合物(CL-IXa)〜(CL-IXd)以外の化合物は、目的とする化合物の構造に適した原料や試薬等を採用することにより、上記の製造法に準じて、あるいは有機合成化学で常用される一般的な製造方法を適用することによって製造することができる。
【０５５０】
上記各製造法における中間体および目的化合物は、有機合成化学で常用される分離精製法、例えば、ろ過、抽出、洗浄、乾燥、濃縮、再結晶各種クロマトグラフィー等に付して単離精製することができる。また、中間体においては特に精製することなく次の反応に供することも可能である。
【０５５１】
R115およびR116は同一または異なって、水素原子またはC1-C3アルキルである。
R115およびR116は同一または異なって、好ましくは水素原子、メチル、エチル、プロピルであり、より好ましくは水素原子、メチルである。
（R115,R116）の組み合わせとしては、好ましくは（水素原子，水素原子）、（水素原子，メチル）、（メチル，メチル）であり、より好ましくは（水素原子，メチル）、（メチル，メチル）である。
【０５５２】
L118およびL119は同一または異なって、直鎖状または分岐状のC8-C24アルキレンもしくはC8-C24アルケニレンである。
L118およびL119は同一または異なって、アルキレンである場合、好ましくは直鎖状のC8-C24アルキレンであり、より好ましくは直鎖状のC8-C20アルキレンであり、さらに好ましくは直鎖状のC8-C12アルキレンである。
L118およびL119は同一または異なって、好ましくはオクチレン、ノニレン、ウンデシレン、トリデシレン、ペンタデシレンであり、より好ましくはオクチレン、ノニレン、ウンデシレンである。
L118およびL119は同一または異なって、アルケニレンである場合、好ましくは直鎖状のC8-C24アルケニレンであり、より好ましくは直鎖状のC10-C20アルケニレンであり、さらに好ましくは直鎖状のC10-C12アルケニレンである。
L118およびL119は同一または異なって、好ましくは(Z）-ウンデカ-9-エニレン、(Z)-トリデカ-11-エニレン、(Z)-テトラデカ-9-エニレン、(Z)-ヘキサデカ-9-エニレン、(Z)-オクタデカ-9-エニレン、(Z)-オクタデカ-11-エニレン、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニレンである。
L118およびL119は同一であることが好ましい。
【０５５３】
M101およびM102は同一または異なって、-C=C-、-OC(O)-、-C(O)O-、-SC(O)-、-C(O)S-、-OC(S)-、-C(S)O-、-SS-、-C(R’’)=N-、-N=C(R’’)-、-C(R’’)=N-O-、-O-N=C(R’’)-、-N(R’’)C(O)-、-C(O)N(R’’)-、-N(R’’)C(S)-、-C(S)N(R’’)-、-N(R’’)C(O)N(R’’’)-、-N(R3)C(O)O-、-OC(O)N(R’’)-および-OC(O)O-である。
M101およびM102は同一または異なって、好ましくは-C=C-、-OC(O)-、-C(O)O-、-C(O)(NR’’)-、-N(R’’)C(O)-、-N(R’’)C(O)-、-N(R’’)C(O)N(R’’’)-、-N(R’’)C(O)O-、-OC(O)N(R’’)-、-OC(O)O-であり、より好ましくは-C=C-、-OC(O)-、-C(O)O-である。
M101およびM102の各構造の結合については、-OC(O)-を例にして説明すると、R118-OC(O)-L118という構造であることを意味する。
M101およびM102は同一であることが好ましい。
【０５５４】
M101およびM102におけるR’’およびR’’’は、同一または異なって、水素原子またはC1-C3アルキルである。
R’’およびR’’’は、好ましくは水素原子、メチル、エチル、プロピルであり、より好ましくは水素原子、メチルであり、さらに好ましくは水素原子である。
【０５５５】
R118およびR119は同一または異なって、直鎖状または分岐状のC1-C16アルキルまたはC2-C16アルケニルである。
R118およびR119は同一または異なって、アルキルである場合、好ましくは直鎖状のC1-C16アルキルであり、より好ましくは直鎖状のC2-C9アルキルである。
R118およびR119は同一または異なって、好ましくはペンチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシルである。
R118およびR119は同一または異なって、アルケニルである場合、好ましくは直鎖状のC2-C16アルケニルであり、より好ましくは直鎖状のC3-C9アルケニルである。
R118およびR119は同一または異なって、好ましくは(Z)-ヘプタ-2-エン、（Z）−オクタ-2-エン、(Z)-ノナ-2-エン、(Z)-ノナ-3-エン、ノナ-8-エン、(Z)-ドデカ-2-エン、(Z)-トリデカ-2-エンである。
R118およびR119は同一であることが好ましい。
【０５５６】
R118-M101-L118およびR119-M102-L119は同一または異なって、R118およびR119、M101およびM102、L118およびL119としては、各基について説明した構造からの組み合わせであってよい。
R118-M101-L118およびR119-M102-L119は同一であることが好ましい。
R118-M101-L118およびR119-M102-L119は同一または異なって、好ましくは(Z)-テトラデカ-9-エニル、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(E)-オクタデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-11-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル、(9Z,12Z,15Z)-オクタデカ-9,12,15-トリエニル、(Z)-イコサ-11-エニル、(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルおよび(Z)-ドコサ-13-エニルからなる群から選ばれ、より好ましくは(Z)-ヘキサデカ-9-エニル、(Z)-オクタデカ-9-エニル、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルおよび(11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニルからなる群から選ばれる。
R118-M101-L118およびR119-M102-L119は同一または異なって、好ましくは以下の構造（1）〜（5）であり、より好ましくは同一に以下の構造（1）〜（5）である。
【０５５７】
【化１０５】
2019027055.tif 000121
[式中、nは1-4の整数である]
【０５５８】
化合物(CL-X)で表される脂質は国際公開第2009/129385号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５５９】
化合物(CL-XI)で表される脂質は国際公開第2013/1491401号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５６０】
化合物(CL-XII)で表される脂質は国際公開第2009/129395号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５６１】
化合物(CL-XIII)で表される脂質は国際公開第2013/059496号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５６２】
化合物(CL-XIV)で表される脂質は国際公開第2011/149733号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５６３】
式(CL-XV)で表される脂質は国際公開第2011/153493号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５６４】
式(CL-XVI)で表される脂質は国際公開第2015/074085号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５６５】
式(CL-XVII)で表される脂質は国際公開第2012/170952号に記載の方法、またはそれに準じた方法で得ることができる。
【０５６６】
式(CL-XVIII)で表される脂質は、以下の方法にしたがって合成することができる。
式(CL-XVIII)で表される脂質の合成方法としては、例えば、以下の式(CL-XVIII)の合成法I及び式(CL-XVIII)の合成法IIが挙げられる。
（式(CL-XVIII)の合成法I）
【０５６７】
【化１０６】
2019027055.tif 000122
【０５６８】
(式中、R137、R138およびX135はそれぞれ前記と同義であり、化合物(XVIII-a)及び化合物(XVIII-c)におけるMsはメタンスルホニル基を表し、X”はハロゲン原子を表す。）
【０５６９】
工程39
化合物(XVIII-b)は、化合物(XVIII-a)と2-メルカプトエタノールとを、無溶媒でまたは溶媒中で、1〜10当量の塩基の存在下、5分間〜100時間、チオエーテル化反応させ、アルコール化合物を得た後、アルコールをハロゲン化反応することにより得ることができる。ハロゲン化の反応としては、クロロ化が好ましく、例えば、無溶媒でまたは溶媒中で、1〜10当量の塩基の存在下、5分間〜100時間、メタンスルホニルクロリドを反応させる方法を挙げることができる。
【０５７０】
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、tert-ブチルアルコール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、水等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いられる。
【０５７１】
塩基としては、例えば、炭酸セシウム、トリエチルアミン、ナトリウムメトキシド、カリウム  tert-ブトキシド、水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、ヘキサメチルジシラザンリチウム、ヘキサメチルジシラザンナトリウム、n-ブチルリチウム等が挙げられる。
【０５７２】
化合物(XVIII-a)は、市販品としてまたは公知の方法(例えば、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年))もしくはそれに準じた方法で得ることもできる。
【０５７３】
工程40
化合物(XVIII-d)は、化合物(XVIII-c)とN-(ターシャリーブトキシカルボニル)-2-ニトロベンゼンスルフォンアミドとを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより、カルバメート中間体を得たのち、酸と、無溶媒でまたは溶媒中で、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより製造することができる。
化合物(XVIII-c)とN-(ターシャリーブトキシカルボニル)-2-ニトロベンゼンスルフォンアミドとを反応させる段階では、テトラブチルアンモニウムヨージド等の相間移動触媒も用いてもよい。
【０５７４】
溶媒としては、工程39と同様の溶媒が挙げられる。
塩基としては、工程39と同様の塩基が挙げられる。
【０５７５】
酸としては、例えば、塩酸、酢酸、トリフルオロ酢酸等が挙げられる。
【０５７６】
化合物(XVIII-c)は、市販品としてまたは公知の方法(例えば、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年))もしくはそれに準じた方法で得ることもできる。
【０５７７】
工程41
化合物(XVIII-b)と化合物(XVIII-d)とを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより、式(CL-XVIII)で表される脂質（式中のX135が水素原子である）を得ることができる。
化合物(XVIII-b)と化合物(XVIII-d)との反応では、テトラブチルアンモニウムヨージド等の相間移動触媒も用いてもよい。
【０５７８】
工程42
公知の方法(例えば、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年))もしくはそれに準じた方法を使用して、N-アルキル化、N-カルボニル化、N-アシル化、N-スルホニル化反応を行うことにより、式(CL-XVIII)で表される脂質（式中のX135がC1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式(C)、式(D)、式(E)のいずれかである）を得ることができる。
【０５７９】
（式(CL-XVIII)の合成法II）
式(CL-XVIII)で表される脂質は、当該式中のR138がC8-C24アルキニルC8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、C8-C24アルキニルチオエチルであるとき、式(CL-XVIII)の合成法IIにより好適に製造することができる。
【０５８０】
【化１０７】
2019027055.tif 000123
【０５８１】
(式中、R137、X135はそれぞれ前記と同義であり、R138は、C8-C24アルキニルC8-C24アルキルチオエチル、C8-24アルケニルチオエチル、C8-C24アルキニルチオエチルであり、化合物(XVIII-a)及び化合物(XVIII-g)におけるMsはメタンスルホニル基を表し、Bocはベンジルオキシカルボニル基を表す。）
【０５８２】
工程43
化合物(XVIII-e)は、化合物(XVIII-a)に対し、チオ酢酸S-カリウムを、無溶媒でまたは溶媒中で、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより得ることができる。
【０５８３】
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、tert-ブチルアルコール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、水等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いられる。
【０５８４】
工程44
化合物(XVIII-g)は、化合物(XVIII-f)とメタンスルホニルクロリドとを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させることにより得ることができる。
【０５８５】
溶媒としては、工程43と同様の溶媒が挙げられる。
【０５８６】
塩基としては、例えば、炭酸セシウム、トリエチルアミン、ナトリウムメトキシド、カリウム  tert-ブトキシド、水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、ヘキサメチルジシラザンリチウム、ヘキサメチルジシラザンナトリウム、n-ブチルリチウム等が挙げられる。
【０５８７】
工程45
化合物(XVIII-e)と化合物(XVIII-g)とを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させチオエーテルを得たのち、無溶媒でまたは溶媒中で、酸の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させてBoc基を脱離させることにより、式(CL-XVIII)で表される脂質（式中のX135が水素原子である）を得ることができる。
【０５８８】
溶媒としては、工程43と同様の溶媒が挙げられる。
塩基としては、工程43と同様の塩基が挙げられる。
【０５８９】
酸としては、例えば、塩酸、酢酸、トリフルオロ酢酸等が挙げられる。
【０５９０】
工程46
工程46は、前記工程42と同様に行うことができる。
【０５９１】
式(CL-XIX)で表される脂質は、以下の方法にしたがって合成することができる。
式(CL-XIX)で表される脂質の合成方法としては、例えば、以下の式(CL-XIX)の合成法I及び式(CL-XIX)の合成法IIが挙げられる。
【０５９２】
（式(CL-XIX)の合成法I）
式(CL-XIX)の合成法Iは、式(CL-XIX)中のL133がSであるときに好適である。
【０５９３】
【化１０８】
2019027055.tif 000124
【０５９４】
(式中、R139、R140、X142はそれぞれ前記と同義であり、化合物(XIX-b)におけるBocはベンジルオキシカルボニル基を表す。）
【０５９５】
工程47
アゼチジン-3,3-ジイルジメタノール（XIX-a）におけるNを常法にしたがってBoc基で保護した後、メタンスルホニルクロリドを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間作用させることによりジメシル体を得る。さらに、ジメシル体に対し、チオ酢酸 S-カリウムを、無溶媒でまたは溶媒中で、5分間〜72時間反応させることにより、化合物（XIX-b）を得ることができる。
【０５９６】
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、tert-ブチルアルコール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、水等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いられる。
【０５９７】
塩基としては、例えば、炭酸セシウム、トリエチルアミン、ナトリウムメトキシド、カリウム  tert-ブトキシド、水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、ヘキサメチルジシラザンリチウム、ヘキサメチルジシラザンナトリウム、n-ブチルリチウム等が挙げられる。
【０５９８】
工程48
化合物（XIX-b）と、R139-OMsおよびR140-OMs（Msは、メタンスルホニル基である）とを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間作用させることにより、チオエーテル体を得ることができる。
さらに、得られたチオエーテル体に対し、無溶媒でまたは溶媒中で、酸の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させてBoc基を脱離させることにより、式(CL-XIX)で表される脂質（式中のX142が水素原子である）を得ることができる。
【０５９９】
塩基としては、工程47と同様の塩基が挙げられる。
溶媒としては、工程47と同様の溶媒が挙げられる。
酸としては、例えば、塩酸、酢酸、トリフルオロ酢酸等が挙げられる。
【０６００】
工程49
公知の方法(例えば、「第5版実験化学講座13  有機化合物の合成I」、第5版、p.374、丸善(2005年))もしくはそれに準じた方法を使用して、N-アルキル化、N-カルボニル化、N-アシル化反応を行うことにより、式(CL-XIX)で表される脂質（式中のX142がC1-C3アルキル、ヒドロキシC2-C4アルキル、式(F)、式(G)のいずれかである）を得ることができる。
【０６０１】
（式(CL-XIX)の合成法II）
式(CL-XIX)の合成法IIは、式(CL-XIX)中のL133がOであるときに好適である。
【０６０２】
【化１０９】
2019027055.tif 000125
【０６０３】
工程50
アゼチジン-3,3-ジイルジメタノール（XIX-a）におけるNを常法にしたがってBoc基で保護した後、R140-OMsを無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間作用させることにより、化合物(XIX-c)を得る。
【０６０４】
塩基としては、例えば、炭酸セシウム、トリエチルアミン、ナトリウムメトキシド、カリウム  tert-ブトキシド、水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、ヘキサメチルジシラザンリチウム、ヘキサメチルジシラザンナトリウム、n-ブチルリチウム等が挙げられる。
【０６０５】
溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、tert-ブチルアルコール、ジクロロメタン、クロロホルム、1,2-ジクロロエタン、トルエン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1,2-ジメトキシエタン、1,4-ジオキサン、N,N-ジメチルホルムアミド、N,N-ジメチルアセトアミド、N-メチルピロリドン、水等が挙げられ、これらは単独でまたは混合して用いられる。
【０６０６】
工程51
化合物(XIX-c)に対し、メタンスルホニルクロリドを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間作用させることによりメシル体を得る。さらに、メシル体に対し、チオ酢酸 S-カリウムを、無溶媒でまたは溶媒中で、5分間〜72時間反応させることにより、化合物（XIX-d）を得ることができる。
【０６０７】
塩基としては、工程50と同様の塩基が挙げられる。
溶媒としては、工程50と同様の溶媒が挙げられる。
【０６０８】
工程52
化合物（XIX-d）と、R139-OMs（Msは、メタンスルホニル基である）とを、無溶媒でまたは溶媒中で、塩基の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間作用させることにより、チオエーテル体を得ることができる。
さらに、得られたチオエーテル体に対し、無溶媒でまたは溶媒中で、酸の存在下、-20℃と150℃の間の温度で、5分間〜72時間反応させてBoc基を脱離させることにより、式(CL-XIX)で表される脂質（式中のX142が水素原子である）を得ることができる。
【０６０９】
塩基としては、工程50と同様の塩基が挙げられる。
溶媒としては、工程50と同様の溶媒が挙げられる。
酸としては、例えば、塩酸、酢酸、トリフルオロ酢酸等が挙げられる。
【０６１０】
工程53
工程53は、前記工程49と同様に行うことができる。
【０６１１】
本発明における脂質Aの具体例を表16〜表31に示すが、脂質Aはこれらに限定されるものではない。
【０６１２】
【表１６】
2019027055.tif 000126
【０６１３】
【表１７】
2019027055.tif 000127
【０６１４】
【表１８】
2019027055.tif 000128
【０６１５】
【表１９】
2019027055.tif 000129
【０６１６】
【表２０】
2019027055.tif 000130
【０６１７】
【表２１】
2019027055.tif 000131
【０６１８】
【表２２】
2019027055.tif 000132
【０６１９】
【表２３】
2019027055.tif 000133
【０６２０】
【表２４】
2019027055.tif 000134
【０６２１】
【表２５】
2019027055.tif 000135
【０６２２】
【表２６】
2019027055.tif 000136
【０６２３】
【表２７】
2019027055.tif 000137
【０６２４】
【表２８】
2019027055.tif 000138
【０６２５】
【表２９】
2019027055.tif 000139
【０６２６】
【表３０】
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【０６２７】
【表３１】
2019027055.tif 000141
【０６２８】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子における脂質Aは、式(I)、式（II）、式(III)、式(IV)、式（V’）、および式(V”)で表される脂質の中でも、好ましくは式（II）、式（V’）、および式(V”)で表される脂質であり、より好ましくは式（II）および式（V’）で表される脂質である。
また、式（II）で表される脂質の中でも、好ましくは、式（II）中のR4〜R6の少なくとも一つが直鎖状のC8-C24アルキルである脂質であり、より好ましくは、式（II）中のR4〜R6の2つが直鎖状のC8-C24アルキルである脂質であり、さらに好ましくは、式（II）中のR4〜R6がすべて直鎖状のC8-C24アルキルである脂質である。
式（II）、式（V’）、および式(V”)からなる群より選択される脂質と組み合わせる脂質Bとしては、好ましくは、式(CL-I)、式(CL-II)、式(CL-III)、式(CL-IV)、式(CL-V)、式(CL-VI)、式(CL-VII)、式(CL-VIII)、式(CL-IX)、式(CL-XII)、式(CL-XIV)、式(CL-XVIII)および式(CL-XIX)で表される脂質であり、より好ましくは式(CL-XVIII)および式(CL-XIX)で表される脂質である。
また、式(CL-II)で表される脂質の中でも、好ましくは、式(CL-II)中のL106およびL107が一緒になって単結合またはC2-C8アルキレンを形成し、かつp101およびp102が1〜3の整数である脂質であり、より好ましくは、式(CL-II)中のL106およびL107が一緒になって単結合を形成し、かつp101およびp102が1である脂質である。
脂質Aと脂質Bの組み合わせとしては、より好ましくは、脂質Aとして式(II)で表される脂質と、脂質Bとして式(CL-XVIII)および／または式(CL-XIX)で表される脂質との組み合わせである。
【０６２９】
本発明で用いられる核酸としては、例えば、ヌクレオチドおよび／またはヌクレオチドと同等の機能を有する分子が重合した分子であれば、いかなる分子であってもよく、例えば、リボヌクレオチドの重合体であるリボ核酸(RNA)、デオキシリボヌクレオチドの重合体であるデオキシリボ核酸(DNA)、RNAとDNAとからなるキメラ核酸、およびこれらの核酸の少なくとも一つのヌクレオチドが該ヌクレオチドと同等の機能を有する分子で置換されたヌクレオチド重合体等が挙げられる。また、ヌクレオチドおよび／またはヌクレオチドと同等の機能を有する分子が重合した分子の構造を少なくとも一部に含む誘導体も、本発明の核酸に含まれる。なお、本発明において、ウラシルUと、チミンTとは、それぞれ読み替えることができる。
【０６３０】
ヌクレオチドと同等の機能を有する分子としては、例えば、ヌクレオチド誘導体等が挙げられる。
【０６３１】
ヌクレオチド誘導体としては、例えば、ヌクレオチドに修飾を施した分子であればいかなる分子であってもよいが、例えば、RNAまたはDNAと比較して、ヌクレアーゼ耐性を向上させるかもしくはその他の分解因子から安定化させるため、相補鎖核酸とのアフィニティーをあげるため、細胞透過性をあげるため、または可視化させるために、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドに修飾を施した分子等が好適に用いられる。
【０６３２】
ヌクレオチド誘導体としては、例えば、糖部修飾ヌクレオチド、リン酸ジエステル結合修飾ヌクレオチド、塩基修飾ヌクレオチド等が挙げられる。
【０６３３】
糖部修飾ヌクレオチドとしては、例えば、ヌクレオチドの糖の化学構造の一部あるいは全てに対し、任意の置換基で修飾もしくは置換したもの、または任意の原子で置換したものであればいかなるものでもよいが、2’-修飾ヌクレオチドが好ましく用いられる。
【０６３４】
糖部修飾ヌクレオチドにおける修飾基としては、例えば、2’-シアノ、2’-アルキル、2’-置換アルキル、2’-アルケニル、2’-置換アルケニル、2’-ハロゲン、2’-O-シアノ、2’-O-アルキル、2’-O-置換アルキル、2’-O-アルケニル、2’-O-置換アルケニル、2’-S-アルキル、2’-S-置換アルキル、2’-S-アルケニル、2’-S-置換アルケニル、2’-アミノ、2’-NH-アルキル、2’-NH-置換アルキル、2’-NH-アルケニル、2’-NH-置換アルケニル、2’-SO-アルキル、2’-SO-置換アルキル、2’-カルボキシ、2’-CO-アルキル、2’-CO-置換アルキル、2’-Se-アルキル、2’-Se-置換アルキル、2’-SiH2-アルキル、2’-SiH2-置換アルキル、2’-ONO2、2’-NO2、2’-N3、2’-アミノ酸残基(アミノ酸のカルボン酸からヒドロキシが除去されたもの)、2’-O-アミノ酸残基(前記アミノ酸残基と同義)等が挙げられる。
【０６３５】
糖部修飾ヌクレオチドとして、例えば、2’位の修飾基が4’位の炭素原子に架橋した構造を有する架橋構造型人工核酸(Bridged Nucleic Acid)(BNA)、より具体的には、2’位の酸素原子と4’位の炭素原子がメチレンを介して架橋したロックト人工核酸(Locked Nucleic Acid)(LNA)、およびエチレン架橋構造型人工核酸(Ethylene bridged nucleic acid)(ENA)[Nucleic Acid Research, 32, e175(2004)]等も挙げられ、これらは2’-修飾ヌクレオチドに含まれる。
【０６３６】
糖部修飾ヌクレオチドとして、ペプチド核酸(PNA)[Acc. Chem. Res., 32, 624(1999)]、オキシペプチド核酸(OPNA)[J. Am. Chem. Soc., 123, 4653(2001)]、ペプチドリボ核酸(PRNA)[J. Am. Chem. Soc., 122, 6900(2000)]等も挙げられる。
【０６３７】
糖部修飾ヌクレオチドにおける修飾基として、2’-シアノ、2’-ハロゲン、2’-O-シアノ、2’-アルキル、2’-置換アルキル、2’-O-アルキル、2’-O-置換アルキル、2’-O-アルケニル、2’-O-置換アルケニル、2’-Se-アルキルまたは2’-Se-置換アルキル等が好ましく、2’-シアノ、2’-フルオロ、2’-クロロ、2’-ブロモ、2’-トリフルオロメチル、2’-O-メチル、2’-O-エチル、2’-O-イソプロピル、2’-O-トリフルオロメチル、2'-O-[2-(メトキシ)エチル]、2'-O-(3-アミノプロピル)、2'-O-[2-(N,N-ジメチルアミノオキシ)エチル]、2'-O-[3-(N,N-ジメチルアミノ)プロピル]、2'-O-{2-[2-(N,N-ジメチルアミノ)エトキシ]エチル}、2'-O-[2-(メチルアミノ)-2-オキソエチル]または2’-Se-メチル等がより好ましく、2’-O-メチル、2’-O-エチル、2’-フルオロ等がさらに好ましく、2’-O-メチルまたは2’-O-エチルが最も好ましい。
【０６３８】
糖部修飾ヌクレオチドにおける修飾基は、その大きさから好ましい範囲を定義することもでき、フルオロの大きさから-O-ブチルの大きさに相当するものが好ましく、-O-メチルの大きさから-O-エチルの大きさに相当するものがより好ましい。
【０６３９】
糖部修飾ヌクレオチドにおける修飾基におけるアルキルとしては、例えば、C1-C6アルキルが挙げられ、より具体的にはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチルまたはヘキシル等のC1-C6アルキルが挙げられる。
【０６４０】
糖部修飾ヌクレオチドにおける修飾基におけるアルケニルとしては、例えば、C3-C6アルケニルが挙げられ、より具体的にはアリル、1-プロペニル、ブテニル、ペンテニルまたはヘキセニル等のC3-C6アルケニルが挙げられる。
【０６４１】
糖部修飾ヌクレオチドにおける修飾基におけるハロゲンとしては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子等が挙げられる。
【０６４２】
アミノ酸残基におけるアミノ酸としては、例えば、脂肪族アミノ酸(具体的には、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン等)、ヒドロキシアミノ酸(具体的には、セリン、トレオニン等)、酸性アミノ酸(具体的には、アスパラギン酸、グルタミン酸等)、酸性アミノ酸アミド(具体的には、アスパラギン、グルタミン等)、塩基性アミノ酸(具体的には、リジン、ヒドロキシリジン、アルギニン、オルニチン等)、含硫アミノ酸(具体的には、システイン、シスチン、メチオニン等)またはイミノ酸(具体的には、プロリン、4-ヒドロキシプロリン等)等が挙げられる。
【０６４３】
糖部修飾ヌクレオチドにおける修飾基における置換アルキルおよび置換アルケニルにおける置換基としては、例えば、ハロゲン(前記と同義)、ヒドロキシ、スルファニル、アミノ、オキソ、-O-アルキル(該-O-アルキルのアルキル部分は前記修飾基におけるC1-C6アルキルと同義)、-S-アルキル(該-S-アルキルのアルキル部分は前記修飾基におけるC1-C6アルキルと同義)、-NH-アルキル(該-NH-アルキルのアルキル部分は前記修飾基におけるC1-C6アルキルと同義)、ジアルキルアミノオキシ(該ジアルキルアミノオキシの2つのアルキル部分は同一または異なって前記修飾基におけるC1-C6アルキルと同義)、ジアルキルアミノ(該ジアルキルアミノの2つのアルキル部分は同一または異なって前記修飾基におけるC1-C6アルキルと同義)またはジアルキルアミノアルキルオキシ(該ジアルキルアミノアルキルオキシの2つのアルキル部分は同一または異なって前記修飾基におけるC1-C6アルキルと同義であり、アルキレン部分は前記修飾基におけるC1-C6アルキルから水素原子が1つ除かれたものを意味する)等が挙げられ、置換数は好ましくは1〜3である。
【０６４４】
リン酸ジエステル結合修飾ヌクレオチドとしては、ヌクレオチドのリン酸ジエステル結合の化学構造の一部あるいは全てに対し、任意の置換基で修飾もしくは置換したもの、または任意の原子で置換したものであればいかなるものでもよく、例えば、リン酸ジエステル結合がホスホロチオエート結合に置換されたヌクレオチド、リン酸ジエステル結合がホスホロジチオエート結合に置換されたヌクレオチド、リン酸ジエステル結合がアルキルホスホネート結合に置換されたヌクレオチドまたはリン酸ジエステル結合がホスホロアミデート結合に置換されたヌクレオチド等が挙げられる。
【０６４５】
塩基修飾ヌクレオチドとしては、ヌクレオチドの塩基の化学構造の一部あるいは全てに対し、任意の置換基で修飾もしくは置換したもの、または任意の原子で置換したものであればいかなるものでもよく、例えば、塩基内の酸素原子が硫黄原子で置換されたもの、水素原子がC1-C6アルキル基で置換されたもの、メチル基が水素原子もしくはC2-C6アルキル基で置換されたもの、アミノ基がC1-C6アルキル基、C1-C6アルカノイル基等の保護基で保護されたもの等が挙げられる。
【０６４６】
さらに、ヌクレオチド誘導体として、ヌクレオチドまたは糖部、リン酸ジエステル結合もしくは塩基の少なくとも一つが修飾されたヌクレオチド誘導体に脂質、リン脂質、フェナジン、フォレート、フェナントリジン、アントラキノン、アクリジン、フルオレセイン、ローダミン、クマリンおよび色素等、別の化学物質を付加したものも挙げられ、具体的には、5’-ポリアミン付加ヌクレオチド誘導体、コレステロール付加ヌクレオチド誘導体、ステロイド付加ヌクレオチド誘導体、胆汁酸付加ヌクレオチド誘導体、ビタミン付加ヌクレオチド誘導体、緑色蛍光色素(Cy3)付加ヌクレオチド誘導体、赤色蛍光色素(Cy5)付加ヌクレオチド誘導体、フルオロセイン(6-FAM)付加ヌクレオチド誘導体、およびビオチン付加ヌクレオチド誘導体等が挙げられる。
【０６４７】
本発明で用いられる核酸においては、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体が、該核酸内の他のヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体とアルキレン構造、ペプチド構造、ヌクレオチド構造、エーテル構造、エステル構造およびこれらの少なくとも一つを組み合わせた構造等の架橋構造を形成してもよい。
【０６４８】
本発明で用いられる核酸としては、分子量が1,000 kDa以下のものが好ましく、100 kDa以下のものがより好ましく、30 kDa以下のものがさらに好ましい。また、本発明で用いられる核酸としては、好ましくは標的遺伝子の発現を抑制する核酸が挙げられ、より好ましくはRNA干渉(RNAi)を利用した標的遺伝子の発現抑制作用を有する核酸が挙げられる。
【０６４９】
本発明における標的遺伝子としては、mRNAを産生して発現する遺伝子であれば特に限定されないが、例えば、腫瘍または炎症に関連する遺伝子が好ましく、例えば、血管内皮増殖因子(vascular endothelial growth factor、以下VEGFと略す)、血管内皮増殖因子受容体(vascular endothelial growth factor receptor、以下VEGFRと略す)、線維芽細胞増殖因子、線維芽細胞増殖因子受容体、血小板由来増殖因子、血小板由来増殖因子受容体、肝細胞増殖因子、肝細胞増殖因子受容体、クルッペル様因子(Kruppel-like factor、以下KLFと略す)、エクスプレスドシーケンスタグ(Ets)転写因子、核因子、低酸素誘導因子、細胞周期関連因子、染色体複製関連因子、染色体修復関連因子、微小管関連因子、増殖シグナル経路関連因子、増殖関連転写因子またはアポトーシス関連因子等のタンパク質をコードする遺伝子等が挙げられ、具体的にはVEGF遺伝子、VEGFR遺伝子、線維芽細胞増殖因子遺伝子、線維芽細胞増殖因子受容体遺伝子、血小板由来増殖因子遺伝子、血小板由来増殖因子受容体遺伝子、肝細胞増殖因子遺伝子、肝細胞増殖因子受容体遺伝子、KLF遺伝子、Ets転写因子遺伝子、核因子遺伝子、低酸素誘導因子遺伝子、細胞周期関連因子遺伝子、染色体複製関連因子遺伝子、染色体修復関連因子遺伝子、微小管関連因子遺伝子(例えば、CKAP5遺伝子等)、増殖シグナル経路関連因子遺伝子(例えば、KRAS遺伝子等)、増殖関連転写因子遺伝子またはアポトーシス関連因子(例えば、BCL-2遺伝子等)等が挙げられる。
【０６５０】
本発明における標的遺伝子としては、例えば、肝臓、肺、腎臓または脾臓において発現する遺伝子が好ましく、肝臓において発現する遺伝子がより好ましく、例えば、前記の腫瘍または炎症に関連する遺伝子、B型肝炎ウイルスゲノム、C型肝炎ウイルスゲノム、アポリポタンパク質(APO)、ヒドロキシメチルグルタリル(HMG)CoA還元酵素、ケキシン 9 型セリンプロテアーゼ(PCSK9)、第12因子、グルカゴン受容体、グルココルチコイド受容体、ロイコトリエン受容体、トロンボキサンA2受容体、ヒスタミンH1受容体、炭酸脱水酵素、アンギオテンシン変換酵素、レニン、p53、チロシンホスファターゼ(PTP)、ナトリウム依存性グルコース輸送担体、腫瘍壊死因子、インターロイキン、ヘプシジン、トランスサイレン、アンチトロンビン、プロテインCまたはマトリプターゼ酵素(例えば、TMPRSS6遺伝子等)等のタンパク質をコードする遺伝子等が挙げられる。
【０６５１】
標的遺伝子の発現を抑制する核酸としては、例えば、蛋白質等をコードする遺伝子(標的遺伝子)のmRNAの一部の塩基配列に対して相補的な塩基配列を含み、かつ標的遺伝子の発現を抑制する核酸であれば、例えば、siRNA(short interference RNA)、miRNA(micro RNA)等の二本鎖核酸、shRNA(short hairpin RNA)、アンチセンス核酸、リボザイム等の一本鎖核酸等、いずれの核酸を用いてもよいが、二本鎖核酸が好ましい。
【０６５２】
標的遺伝子のmRNAの一部の塩基配列に対して相補的な塩基配列を含む核酸をアンチセンス鎖核酸といい、アンチセンス鎖核酸の塩基配列に対して相補的な塩基配列を含む核酸をセンス鎖核酸ともいう。センス鎖核酸は、標的遺伝子の一部の塩基配列からなる核酸そのもの等、アンチセンス鎖核酸と対合して二重鎖形成部ができる核酸をいう。
【０６５３】
二本鎖核酸とは、二本の鎖が対合し二重鎖形成部を有する核酸をいう。二重鎖形成部とは、二本鎖核酸を構成するヌクレオチドまたはその誘導体が塩基対を構成して二重鎖を形成している部分をいう。二重鎖形成部を構成する塩基対は、通常15〜27塩基対であり、15〜25塩基対が好ましく、15〜23塩基対がより好ましく、15〜21塩基対がさらに好ましく、15〜19塩基対が特に好ましい。
【０６５４】
二重鎖形成部のアンチセンス鎖核酸としては、例えば、標的遺伝子のmRNAの一部配列からなる核酸、または該核酸において1〜3塩基、好ましくは1〜2塩基、より好ましくは1塩基が置換、欠失もしくは付加され、かつ標的蛋白質の発現抑制活性を有する核酸が好適に用いられる。二本鎖核酸を構成する一本鎖の核酸は、通常15〜30塩基(ヌクレオシド)の連なりからなるが、15〜29塩基が好ましく、15〜27塩基がより好ましく、15〜25塩基がさらに好ましく、17〜23塩基が特に好ましく、19〜21塩基が最も好ましい。
【０６５５】
二本鎖核酸を構成するアンチセンス鎖、センス鎖のいずれか一方、または両方の核酸は、二重鎖形成部に続く3’側または5’側に二重鎖を形成しない追加の核酸を有してもよい。この二重鎖を形成しない部分を突出部(オーバーハング)ともいう。
【０６５６】
突出部を有する二本鎖核酸としては、例えば、少なくとも一方の鎖の3’末端または5’末端に1〜4塩基、通常は1〜3塩基からなる突出部を有するものが用いられるが、2塩基からなる突出部を有するものが好ましく用いられ、dTdTまたはUUからなる突出部を有するものがより好ましく用いられる。突出部は、アンチセンス鎖のみ、センス鎖のみ、およびアンチセンス鎖とセンス鎖の両方に有することができるが、アンチセンス鎖とセンス鎖の両方に突出部を有する二本鎖核酸が好ましく用いられる。
【０６５７】
二重鎖形成部に続いて標的遺伝子のmRNAの塩基配列と一部または全てが一致する配列、または、二重鎖形成部に続いて標的遺伝子のmRNAの相補鎖の塩基配列と一部または全てが一致する配列を用いてもよい。さらに、標的遺伝子の発現を抑制する核酸としては、例えば、Dicer等のリボヌクレアーゼの作用により前記の二本鎖核酸を生成する核酸分子(国際公開第2005/089287号)や、3’末端や5’末端の突出部を有していない二本鎖核酸等を用いることもできる。
【０６５８】
前記の二本鎖核酸がsiRNAである場合、好ましくはアンチセンス鎖は、5’末端側から3’末端側に向って少なくとも1〜17番目の塩基(ヌクレオシド)の配列が、標的遺伝子のmRNAの連続する17塩基の配列と相補的な塩基の配列であり、より好ましくは、該アンチセンス鎖は、5’末端側から3’末端側に向って1〜19番目の塩基の配列が、標的遺伝子のmRNAの連続する19塩基の配列と相補的な塩基の配列であるか、1〜21番目の塩基の配列が、標的遺伝子のmRNAの連続する21塩基の配列と相補的な塩基の配列であるか、1〜25番目の塩基の配列が、標的遺伝子のmRNAの連続する25塩基の配列と相補的な塩基の配列である。
【０６５９】
さらに、本発明で用いられる核酸がsiRNAである場合、好ましくは該核酸中の糖の10〜70%、より好ましくは15〜60%、さらに好ましくは20〜50%が、2’位において修飾基で置換されたリボースである。本発明における2’位において修飾基で置換されたリボースとは、リボースの2’位のヒドロキシが修飾基に置換されているものを意味し、リボースの2’位のヒドロキシと立体配置が同じであっても異なっていてもよいが、好ましくはリボースの2’位のヒドロキシと立体配置が同じである。2’位において修飾基で置換されたリボースにおける修飾基としては、糖部修飾ヌクレオチドにおける2’-修飾ヌクレオチドにおける修飾基の定義で例示したものおよび水素原子が挙げられ、2’-シアノ、2’-ハロゲン、2’-O-シアノ、2’-アルキル、2’-置換アルキル、2’-O-アルキル、2’-O-置換アルキル、2’-O-アルケニル、2’-O-置換アルケニル、2’-Se-アルキル、2’-Se-置換アルキル等が好ましく、2’-シアノ、2’-フルオロ、2’-クロロ、2’-ブロモ、2’-トリフルオロメチル、2’-O-メチル、2’-O-エチル、2’-O-イソプロピル、2’-O-トリフルオロメチル、2'-O-[2-(メトキシ)エチル]、2'-O-(3-アミノプロピル)、2'-O-[2-(N,N-ジメチル)アミノオキシ]エチル、2'-O-[3-(N,N-ジメチルアミノ)プロピル]、2'-O-{2-[2-(N,N-ジメチルアミノ)エトキシ]エチル}、2'-O-[2-(メチルアミノ)-2-オキソエチル]、2’-Se-メチル、水素原子等がより好ましく、2’-O-メチル、2’-O-エチル、2’-フルオロ、水素原子等がさらに好ましく、2’-O-メチル、2’-O-フルオロが最も好ましい。
【０６６０】
本発明で用いられる核酸は、核酸の構造中のリン酸部、エステル部等に含まれる酸素原子等が、例えば、硫黄原子等の他の原子に置換された誘導体を包含する。
【０６６１】
アンチセンス鎖およびセンス鎖の5’末端の塩基に結合する糖は、それぞれ5’位のヒドロキシが、リン酸基もしくは前記の修飾基、または生体内の核酸分解酵素等でリン酸基もしくは前記の修飾基に変換される基によって修飾されていてもよい。
【０６６２】
アンチセンス鎖およびセンス鎖の3’末端の塩基に結合する糖は、それぞれ3’位のヒドロキシが、リン酸基もしくは前記の修飾基、または生体内の核酸分解酵素等でリン酸基もしくは前記の修飾基に変換される基によって修飾されていてもよい。
【０６６３】
一本鎖の核酸としては、例えば、標的遺伝子の連続する15〜27塩基(ヌクレオシド)、好ましくは15〜25塩基、より好ましくは15〜23塩基、さらに好ましくは15〜21塩基、特に好ましくは15〜19塩基からなる配列の相補配列からなる核酸、または該核酸において1〜3塩基、好ましくは1〜2塩基、より好ましくは1塩基が置換、欠失もしくは付加され、かつ標的蛋白質の発現抑制活性を有する核酸であればいずれでもよい。該一本鎖の核酸は、10〜30塩基(ヌクレオシド)の連なりからなることが好ましく、より好ましくは10〜27塩基、さらに好ましくは10〜25塩基、特に好ましくは10〜23塩基の一本鎖核酸が好適に用いられる。
【０６６４】
一本鎖核酸として、上記の二本鎖核酸を構成するアンチセンス鎖およびセンス鎖を、スペーサー配列(スペーサーオリゴヌクレオチド)を介して連結したものを用いてもよい。スペーサーオリゴヌクレオチドとしては6〜12塩基の一本鎖核酸分子が好ましく、その5’末端側の配列は2個のUであるのが好ましい。スペーサーオリゴヌクレオチドの例として、UUCAAGAGAの配列からなる核酸が挙げられる。スペーサーオリゴヌクレオチドによってつながれるアンチセンス鎖およびセンス鎖の順番はどちらが5’側になってもよい。該一本鎖核酸としては、例えば、ステムループ構造によって二重鎖形成部を有するshRNA等の一本鎖核酸であることが好ましい。shRNA等の一本鎖核酸は、通常50〜70塩基長である。
【０６６５】
リボヌクレアーゼ等の作用により、上記の一本鎖核酸または二本鎖核酸を生成するように設計した、70塩基長以下、好ましくは50塩基長以下、さらに好ましくは30塩基長以下の核酸を用いてもよい。
【０６６６】
なお、本発明で用いられる核酸は、既知のRNAまたはDNA合成法、およびRNAまたはDNA修飾法を用いて得ることができる。
【０６６７】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、1種または2種以上の脂質Aを含有していてもよい。
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、1種または2種以上の脂質Bを含有していてもよい。
また、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、中性脂質および／または水溶性高分子の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体を含有していてもよい。
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、1種または2種以上の脂質A、および1種または2種以上の脂質Bを含有していてもよい。
【０６６８】
なお、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、核酸だけでなく、核酸と化学的に近似した化合物（アニオン性ペプチド等のアニオン性高分子等）も含有することもできる。
【０６６９】
本発明において、核酸は、カチオン性脂質と、必要に応じてその他の脂質(水溶性高分子の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体、中性脂質)とともに、水に混和可能な有機溶媒に溶解される（第1の脂質溶液）。第1の脂質溶液の調製においては、核酸を水または緩衝剤水溶液に溶解し、脂質の有機溶媒溶液に加えても良く、また、核酸の水または緩衝剤水溶液に脂質の有機溶媒溶液を加えてもよい。さらに、凍結乾燥された核酸に、脂質の有機溶媒溶液を加えてもよい。
【０６７０】
核酸と、カチオン性脂質と、必要に応じてその他の脂質(水溶性高分子の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体、中性脂質)とで一度有機溶媒溶液（第1の脂質溶液）を作製した後に、リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体、および必要に応じて水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体を添加した有機溶媒溶液（第2の脂質溶液）を加えて第3の脂質溶液を調製してもよい。
【０６７１】
本発明において、第1または第3の脂質溶液は、水または緩衝剤水溶液と混合される。この際、有機溶媒濃度を速やかに低下させることで、凝集することなく、サイズの小さい脂質ナノ粒子が得られる。
第1または第3の脂質溶液と水または緩衝剤水溶液の混合においては、前者を後者に加えても良く、後者を前者に加えてもよい。また、撹拌しながら容器に同時に前者と後者を加えてもよい。さらに、インラインにおいて前者と後者を混合することもできる。この場合、インライン混合デバイスとしては、例えば、T-コネクタ等を用いることができる。
【０６７２】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子の平均粒子径は、用いる核酸、ならびにカチオン性脂質およびその他の脂質によっても影響されるが、製造プロセスにおける各種のパラメーターにより自由に制御可能である。当業者であれば、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子の平均粒子径を制御するのに必要な製造プロセスにおける各種のパラメーターを適宜変更して粒子サンプルを調製し、得られたサンプルの平均粒子径を測定することで決定することができる。平均粒子径の制御に必要なパラメーターとして、有機溶媒溶液における核酸濃度、各脂質の濃度、温度、有機溶媒の組成等が挙げられる。また、平均粒子径の制御に必要なパラメーターとして、核酸および脂質有機溶媒溶液の水または緩衝剤水溶液による希釈操作時における、温度、水または緩衝剤水溶液の量、各液の添加速度等も挙げられる。
【０６７３】
ホスファチジルコリン(PC)およびコレステロール(Chol)を含有しない場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中のカチオン性脂質の濃度は特に限定されないが、1〜2000μMが好ましく、5〜400μMがより好ましく、10〜200μMがさらに好ましく、20〜100μMが最も好ましい。
【０６７４】
PCおよびCholを含有しない場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中の核酸の濃度は特に限定されないが、0.03〜15μMが好ましく、0.15〜3.0μMがより好ましく、0.3〜1.5μMがさらに好ましい。
【０６７５】
PCおよびCholを含有しない場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中の水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体の濃度は特に限定されないが、0.5〜200μMが好ましく、2.5〜40μMがより好ましく、5〜20μMがさらに好ましい。
【０６７６】
PCおよびCholを含有しない場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中のすべての脂質を合わせた濃度は特に限定されないが、5〜2000μMが好ましく、25〜400μMがより好ましく、50〜200μMがさらに好ましい。
【０６７７】
PCおよびCholを含有する場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中の親水部として1つの4級アンモニウム基を有し、かつ置換されていても良い独立した3つの炭化水素基を有する脂質(脂質A)の濃度は、0.2〜1800μMが好ましく、1〜360μMがより好ましく、2〜180μMがさらに好ましく、5〜100 μMが最も好ましい。
【０６７８】
PCおよびCholを含有する場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中の核酸の濃度は、0.02〜45μMが好ましく、0.1〜10μMがより好ましく、0.2〜5μMがさらに好ましく、0.3〜3μMが最も好ましい。
【０６７９】
PCおよびCholを含有する場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中の水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体の濃度は、0.3〜1000μMが好ましく、1.5〜200μMがより好ましく、3〜100μMがさらに好ましく、5〜50μMが最も好ましい。
【０６８０】
PCおよびCholを含有する場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中のカチオン性脂質の濃度は、2.5〜4200μMが好ましく、12.5〜840μMがより好ましく、25〜420μMがさらに好ましく、50〜210μMが最も好ましい。
【０６８１】
PCおよびCholを含有する場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中の中性脂質の濃度は、2.5〜5000μMが好ましく、12.5〜1000μMがより好ましく、25〜500μMがさらに好ましく、50〜250 μMが最も好ましい。
【０６８２】
PCおよびCholを含有する場合における水または緩衝剤水溶液と混合される前の有機溶媒溶液中のすべての脂質を合わせた濃度は、10〜8000μMが好ましく、50〜1600μMがより好ましく、100〜800μMがさらに好ましく、150〜400μMが最も好ましい。
【０６８３】
核酸および脂質を含有する有機溶媒溶液を調製する際の温度は核酸および脂質が溶解する限りにおいて特に限定されないが、10〜60℃が好ましく、20〜50℃がより好ましく、20〜30℃がさらに好ましい。なお、30℃以上に加温する場合は、核酸および脂質の溶解度が増し、より少ない溶媒量で脂質ナノ粒子の製造を行うことができる。
【０６８４】
核酸および脂質を含有する有機溶媒溶液における有機溶媒としては特に限定されないが、0〜50%(v/v)の水を含むメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のC1-C6アルコール類またはこれらの混合物が好ましく、0〜50%(v/v)の水を含むエタノールまたはプロパノールがより好ましく、0〜50%(v/v)の水を含むエタノールがさらに好ましい。ここで「%(v/v)」とは、溶液全体の体積に占める溶質の体積百分率を示し、以下同様である。
【０６８５】
核酸および脂質を含有する有機溶媒溶液における溶媒に、塩酸、酢酸、リン酸等の無機酸、またはこれらの酸の塩等を加えることもできる。この場合の溶媒のpHは、1〜7とするのが好ましく、1〜5とするのがより好ましく、2〜4とするのがさらに好ましい。
【０６８６】
核酸および脂質を含有する有機溶媒溶液に、水または緩衝剤水溶液を添加する操作において、用いる水または緩衝剤水溶液の容量は特に限定されないが、核酸および脂質の有機溶媒溶液の容量に対して、0.5〜100倍が好ましく、1.5〜20倍がより好ましく、2.0〜10倍がさらに好ましい。
【０６８７】
この場合、水または緩衝剤水溶液を添加した後の有機溶媒濃度は特に限定されないが、得られた溶液に対して50%(v/v)以下が好ましく、40%(v/v)以下がより好ましく、30%(v/v)以下がさらに好ましく、20%(v/v)以下が最も好ましい。また、緩衝剤水溶液としては、緩衝作用を有するものであれば特に限定されるものではないが、例えば、リン酸緩衝水溶液、クエン酸緩衝水溶液、酢酸緩衝水溶液等が挙げられる。
【０６８８】
上記添加操作を行う際の温度は特に限定されないが、10〜60℃が好ましく、20〜50℃がより好ましく、20〜30℃がさらに好ましい。
【０６８９】
上記添加操作において、有機溶媒溶液を速やかに低下させることが重要である。具体的には、有機溶媒濃度を70%(v/v)以上から50%(v/v)以下まで、1分以内に変化させることが好ましく、0.5分以内に変化させることがより好ましく、0.1分以内に変化させることがさらに好ましく、0.05分以内に変化させるのが最も好ましい。
【０６９０】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子において脂質Aを含有する場合、脂質Aの分子の総数は特に限定されないが、脂質A中の4級アンモニウム基のモル数が、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を構成する核酸のリン原子のモル数に対して0.01倍モル量以上であるのが好ましく、0.1〜10倍モル量であるのがより好ましく、0.1〜4倍モル量であるのがさらに好ましく、0.1〜2倍モル量であるのがさらにより好ましく、0.1〜1倍モル量であるのが最も好ましい。
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子において脂質Bを含有する場合、脂質Bの分子の総数は特に限定されないが、脂質Bのモル数が、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を構成する核酸のリン原子のモル数に対して0.1〜10倍モル量であるのが好ましく、0.5〜9倍モル量であるのがより好ましく、1〜8倍モル量であるのがさらに好ましく、1.5〜6倍モル量であるのが最も好ましい。
【０６９１】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子において脂質Aおよび脂質Bを含有する場合、脂質Aのモル数と脂質Bのモル数の比率（脂質Aのモル数／脂質Bのモル数）は、0.001以上であるのが好ましく、0.003〜10であるのがより好ましく、0.005〜5であるのがさらに好ましく、0.01〜3であるのがさらにより好ましく、0.01〜2であるのが最も好ましい。
【０６９２】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子において、総脂質のモル数と核酸のモル数の比率(総脂質のモル数／核酸のモル数）が50以上であるのが好ましく、100〜1000であるのがより好ましく、120〜800であるのがさらに好ましく、140〜600であるのがよりさらに好ましく、200〜500であるのが最も好ましい。
【０６９３】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子が、脂質Bを含有する場合には、核酸含有脂質ナノ粒子における脂質Bの分子の総数は特に限定されないが、総脂質のモル数に対して0.1倍モル量以上であるのが好ましく、0.15倍モル量以上であるのがより好ましく、0.2倍モル量以上であるのがさらに好ましく、0.25倍モル量以上であるのがさらにより好ましい。また、核酸含有脂質ナノ粒子における脂質Bの分子の総数は特に限定されないが、総脂質のモル数に対して0.7倍モル量以下であるのが好ましく、0.65倍モル量以下であるのがより好ましく、0.6倍モル量以下であるのがさらに好ましい。
核酸含有脂質ナノ粒子における脂質Bの分子の総数は、上記の上限下限の好ましい範囲の組合せの中で、総脂質のモル数に対して0.10〜0.70倍モル量であるのが好ましく、0.15〜0.65倍モル量であるのがより好ましく、0.20〜0.65倍モル量であるのがさらにより好ましく、0.25〜0.60倍モル量であるのが最も好ましい。
【０６９４】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、さらに中性脂質を含むことが好ましい。
中性脂質としては、単純脂質、複合脂質または誘導脂質のいかなるものであってもよく、例えば、リン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴ糖脂質、スフィンゴイドまたはステロール等が挙げられるがこれらに限定されない。また、中性脂質は1種また2種以上を組み合わせて使用してもよい。
なお、ここでいう中性脂質とは、リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体以外の中性脂質を指す。
【０６９５】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子において中性脂質を含有する場合には、中性脂質の分子の総数は特に限定されないが、総脂質（総脂質には、リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体を含む）のモル数に対して0.10〜0.75倍モル量であるのが好ましく、0.20〜0.70倍モル量であるのがより好ましく、0.20〜0.65倍モル量であるのがさらに好ましく、0.30〜0.60倍モル量であるのが最も好ましい。
【０６９６】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子における、リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体は、総脂質（総脂質には、リパーゼによって加水分解されない、グリセロールの脂肪酸エステル類縁体を含む）のモル数に対して、0.001倍モル量以上であることが好ましく、0.001〜0.75倍モル量であるのがより好ましく、0.05〜0.70倍モル量であるのがさらに好ましく、0.10〜0.65倍モル量であるのがよりさらに好ましく、0.12〜0.60倍モル量であるのが最も好ましい。
【０６９７】
中性脂質におけるリン脂質としては、例えば、ホスファチジルコリン(PC)(具体的には大豆ホスファチジルコリン、卵黄ホスファチジルコリン(EPC)、ジステアロイルホスファチジルコリン、1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DSPC)、ジパルミトイルホスファチジルコリン、1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホコリン(DPPC)、パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン(POPC)、ジミリストイルホスファチジルコリン(DMPC)、ジオレオイルホスファチジルコリン(DOPC)等)、ホスファチジルエタノールアミン(具体的にはジステアロイルホスファチジルエタノールアミン(DSPE)、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン(DPPE)、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン(DOPE)、ジミリストイルホスホエタノールアミン(DMPE)、16-0-モノメチルPE、16-0-ジメチルPE、18-1-トランスPE、パルミトイルオレオイル-ホスファチジルエタノールアミン(POPE)、1 -ステアロイル-2-オレオイル-ホスファチジルエタノールアミン(SOPE)等)、グリセロリン脂質(具体的にはホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、パルミトイルオレオイルホスファチジルグリセロール(POPG)、リゾホスファチジルコリン等)、スフィンゴリン脂質(具体的にはスフィンゴミエリン、セラミドホスホエタノールアミン、セラミドホスホグリセロール、セラミドホスホグリセロリン酸等)、グリセロホスホノ脂質、スフィンゴホスホノ脂質、天然レシチン(具体的には卵黄レシチン、大豆レシチン等)または水素添加リン脂質(具体的には水素添加大豆ホスファチジルコリン等)等の天然または合成のリン脂質が挙げられるがこれらに限定されない。
【０６９８】
中性脂質におけるグリセロ糖脂質としては、例えば、スルホキシリボシルグリセリド、ジグリコシルジグリセリド、ジガラクトシルジグリセリド、ガラクトシルジグリセリドまたはグリコシルジグリセリド等が挙げられるがこれらに限定されない。
【０６９９】
中性脂質におけるスフィンゴ糖脂質としては、例えば、ガラクトシルセレブロシド、ラクトシルセレブロシドまたはガングリオシド等が挙げられるがこれらに限定されない。
【０７００】
中性脂質におけるスフィンゴイドとしては、例えば、スフィンガン、イコサスフィンガン、スフィンゴシンまたはそれらの誘導体等が挙げられるがこれらに限定されない。。誘導体としては、例えば、スフィンガン、イコサスフィンガンまたはスフィンゴシン等の-NH2を-NHCO(CH2)xCH3(式中、xは0〜18の整数であり、中でも6、12または18が好ましい)に変換したもの等が挙げられるがこれらに限定されない。
【０７０１】
中性脂質におけるステロールとしては、例えば、コレステロール(Chol)、ジヒドロコレステロール、ラノステロール、β-シトステロール、カンペステロール、スチグマステロール、ブラシカステロール、エルゴカステロール、フコステロールまたは3β-[N-(N',N'-ジメチルアミノエチル)カルバモイル]コレステロール(DC-Chol)等が挙げられるがこれらに限定されない。
【０７０２】
高分子としては、例えば、タンパク質、アルブミン、デキストラン、ポリフェクト(polyfect)、キトサン、デキストラン硫酸、例えば、ポリ-L-リジン、ポリエチレンイミン、ポリアスパラギン酸、スチレンマレイン酸共重合体、イソプロピルアクリルアミド-アクリルピロリドン共重合体、ポリエチレングリコール修飾デンドリマー、ポリ乳酸、ポリ乳酸ポリグリコール酸またはポリエチレングリコール化ポリ乳酸等の高分子またはそれらの塩の1以上からなるミセル等が挙げられるがこれらに限定されない。
【０７０３】
ここで、高分子の塩は、例えば、金属塩、アンモニウム基塩、酸付加塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩等を包含する。金属塩としては、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩または亜鉛塩等が挙げられるがこれらに限定されない。アンモニウム基塩としては、例えば、アンモニウム基またはテトラメチルアンモニウム基等の塩が挙げられるがこれらに限定されない。酸付加塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩またはリン酸塩等の無機酸塩、および酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩またはクエン酸塩等の有機酸塩が挙げられるがこれらに限定されない。。有機アミン付加塩としては、例えば、モルホリンまたはピペリジン等の付加塩が挙げられるがこれらに限定されない。。アミノ酸付加塩としては、例えば、グリシン、フェニルアラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸またはリジン等の付加塩が挙げられるがこれらに限定されない。
【０７０４】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子はいずれも、例えば、糖、ペプチド、核酸および水溶性高分子から選ばれる1以上の物質の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体、または界面活性剤等を含有しても良い。
【０７０５】
糖、ペプチド、核酸および水溶性高分子から選ばれる1以上の物質の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体、または界面活性剤としては、好ましくは、糖脂質、または水溶性高分子の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体が挙げられ、より好ましくは、水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体が挙げられる。糖、ペプチド、核酸および水溶性高分子から選ばれる1以上の物質の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体、または界面活性剤は、分子の一部が組成物の他の構成成分と例えば、疎水性親和力、静電的相互作用等で結合する性質をもち、他の部分が組成物の製造時の溶媒と例えば、親水性親和力、静電的相互作用等で結合する性質をもつ、2面性をもつ物質であるのが好ましい。
【０７０６】
糖、ペプチドまたは核酸の脂質誘導体または脂肪酸誘導体としては、例えば、ショ糖、ソルビトール、乳糖等の糖、例えば、カゼイン由来ペプチド、卵白由来ペプチド、大豆由来ペプチド、グルタチオン等のペプチド、または例えば、DNA、RNA、プラスミド、siRNA、ODN等の核酸と、前記組成物の定義の中で挙げた中性脂質または例えば、ステアリン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸、ラウリン酸等の脂肪酸とが結合してなるもの等が挙げられる。
【０７０７】
糖の脂質誘導体または脂肪酸誘導体としては、例えば、前記組成物の定義の中で挙げたグリセロ糖脂質またはスフィンゴ糖脂質等も含まれる。
【０７０８】
水溶性高分子の脂質誘導体または脂肪酸誘導体としては、例えば、ポリエチレングリコール、ポリグリセリン、ポリエチレンイミン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポリアクリルアミド、オリゴ糖、デキストリン、水溶性セルロース、デキストラン、コンドロイチン硫酸、ポリグリセリン、キトサン、ポリビニルピロリドン、ポリアスパラギン酸アミド、ポリ-L-リジン、マンナン、プルラン、オリゴグリセロール等またはそれらの誘導体と、前記組成物の定義の中で挙げた中性脂質または例えば、ステアリン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸またはラウリン酸等の脂肪酸とが結合してなるもの、それらの塩等が挙げられ、より好ましくは、ポリエチレングリコールまたはポリグリセリン等の脂質誘導体または脂肪酸誘導体およびそれらの塩が挙げられ、さらに好ましくは、ポリエチレングリコールの脂質誘導体または脂肪酸誘導体およびそれらの塩が挙げられる。
【０７０９】
ポリエチレングリコールの脂質誘導体または脂肪酸誘導体としては、例えば、ポリエチレングリコール化脂質[具体的にはポリエチレングリコール-ホスファチジルエタノールアミン(より具体的には1,2-ジステアロイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[メトキシ(ポリエチレングリコール)-2000](PEG-DSPE)、1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[メトキシ(ポリエチレングリコール)-2000](PEG-DPPE)、1,2-ジミリストイル-sn-グリセロ-3-ホスホエタノールアミン-N-[メトキシ(ポリエチレングリコール)-2000](PEG-DMPE)等)、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60、クレモフォアイーエル(CREMOPHOR EL)等]、ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル類(具体的にはモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン等)またはポリエチレングリコール脂肪酸エステル類等が挙げられ、より好ましくは、ポリエチレングリコール化脂質が挙げられる。
【０７１０】
ポリグリセリンの脂質誘導体または脂肪酸誘導体としては、例えば、ポリグリセリン化脂質(具体的にはポリグリセリン-ホスファチジルエタノールアミン等)またはポリグリセリン脂肪酸エステル類等が挙げられ、より好ましくは、ポリグリセリン化脂質が挙げられる。
【０７１１】
界面活性剤としては、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン(具体的にはポリソルベート80等)、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール(具体的にはプルロニックF68等)、ソルビタン脂肪酸エステル(具体的にはソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエート等)、ポリオキシエチレン誘導体(具体的にはポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60、ポリオキシエチレンラウリルアルコール等)、グリセリン脂肪酸エステルまたはポリエチレングリコールアルキルエーテル等が挙げられ、好ましくは、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステルまたはポリエチレングリコールアルキルエーテル等が挙げられる。
【０７１２】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子において、核酸含有脂質ナノ粒子における水溶性高分子の脂質誘導体および脂肪酸誘導体の分子の総数は特に限定されないが、総脂質のモル数に対して0.005倍モル量以上であるのが好ましく、0.01〜0.30倍モル量であるのがより好ましく、0.02〜0.25倍モル量であるのがさらに好ましく、0.03〜0.20倍モル量であるのがさらにより好ましく、0.04〜0.15倍モル量であるのがさらにより好ましく、0.04〜0.12倍モル量であるのが最も好ましい。
本発明においては、総脂質とは、脂質Aおよび水溶性高分子の脂質誘導体および脂肪酸誘導体を含み、場合により、脂質Bおよび中性脂質を含む。すなわち、脂質Aのモル数は、総脂質のモル数を1とした場合の倍モル量として、水溶性高分子の脂質誘導体および脂肪酸誘導体の倍モル量、場合により、脂質Bの倍モル量および中性脂質の倍モル量の総和を1から減じた倍モル量となる。
【０７１３】
また、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子には、例えば、水溶性高分子等による表面改質も任意に行うことができる[ラジック(D.D.Lasic)、マーティン(F.Martin)編,“ステルス・リポソームズ(Stealth Liposomes)”(米国),シーアールシー・プレス・インク(CRC Press Inc),1995年,p.93-102参照]。表面改質に使用し得る水溶性高分子としては、例えば、ポリエチレングリコール、ポリグリセリン、ポリエチレンイミン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸、ポリアクリルアミド、オリゴ糖、デキストリン、水溶性セルロース、デキストラン、コンドロイチン硫酸、ポリグリセリン、キトサン、ポリビニルピロリドン、ポリアスパラギン酸アミド、ポリ-L-リジン、マンナン、プルラン、オリゴグリセロール等が挙げられ、好ましくはポリエチレングリコール、ポリグリセリン、ポリエチレンイミン、ポリビニルアルコール、ポリアクリル酸およびポリアクリルアミド等が挙げられ、より好ましくはポリエチレングリコールおよびポリグリセリン等が挙げられるがこれらに限定されない。また、表面改質には、糖、ペプチド、核酸および水溶性高分子から選ばれる1以上の物質の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体(前記と同義)、または界面活性剤等を用いることができる。該表面改質は、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子中に糖、ペプチド、核酸および水溶性高分子から選ばれる1以上の物質の脂質誘導体もしくは脂肪酸誘導体、または界面活性剤を含有させる方法の1つである。
【０７１４】
標的化リガンドを、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子の脂質成分の極性ヘッド残基に共有結合することにより本発明の核酸含有脂質ナノ粒子の表面に直接結合させることも任意に行うことができる(国際公開第2006/116107号参照)。
【０７１５】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子の平均粒子径は、脂質ナノ粒子の調製後にさらに調節することもできる。平均粒子径を調節する方法としては、例えば、エクストルージョン法、大きな多重膜リポソーム(MLV)等を機械的に粉砕(具体的にはマントンゴウリン、マイクロフルイダイザー等を使用)する方法[ミュラー(R.H.Muller)、ベニタ(S.Benita)、ボーム(B.Bohm)編著,“エマルジョン・アンド・ナノサスペンジョンズ・フォー・ザ・フォーミュレーション・オブ・ポアリー・ソラブル・ドラッグズ(Emulsion and Nanosuspensions for the Formulation of Poorly Soluble Drugs)”,ドイツ,サイエンティフィック・パブリッシャーズ・スチュットガルト(Scientific Publishers Stuttgart),1998年,p.267-294参照]等が挙げられる。
【０７１６】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子の大きさは、好ましくは1.00〜2000ｎｍであり、より好ましくは10.0〜500ｎｍであり、さらに好ましくは20.0〜300ｎｍであり、最も好ましくは20.0〜150ｎｍである。
【０７１７】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子の大きさは、例えば、動的光散乱法で測定することができる。
【０７１８】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を、ほ乳類の細胞に導入することで、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子中の核酸を細胞内に導入することができる。
【０７１９】
インビボにおける本発明の核酸含有脂質ナノ粒子のほ乳類の細胞への導入は、インビボにおいて行うことのできる公知のトランスフェクションの手順に従って行えばよい。例えば、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を、人を含む哺乳動物に静脈内投与することで、例えば、腫瘍または炎症の生じた臓器または部位へ送達され、送達臓器または部位の細胞内に本発明の核酸含有脂質ナノ粒子中の核酸を導入することができる。腫瘍または炎症の生じた臓器または部位としては、特に限定されないが、例えば、胃、大腸、肝臓、肺、脾臓、膵臓、腎臓、膀胱、皮膚、血管、眼球等が挙げられる。また、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を、人を含む哺乳動物に静脈内投与することで、例えば、肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓および／または脾臓へ送達され、送達臓器または部位の細胞内に本発明の核酸含有脂質ナノ粒子中の核酸を導入することができる。肝臓、肺、脾臓および／または腎臓の細胞は、正常細胞、腫瘍もしくは炎症に関連した細胞またはその他の疾患に関連した細胞のいずれでもよい。
【０７２０】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子中の核酸が、RNA干渉(RNAi)を利用した標的遺伝子の発現抑制作用を有する核酸であれば、インビボでほ乳類の細胞内に、標的遺伝子の発現を抑制する該核酸等を導入することができ、標的遺伝子の発現の抑制ができる。投与対象は、人であることが好ましい。
【０７２１】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子中の標的遺伝子が、例えば、肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓および／または脾臓において発現する遺伝子、好ましくは肝臓において発現する遺伝子であれば、本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を、肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓または脾臓に関連する疾患の治療剤または予防剤、好ましくは肝臓に関連する疾患の治療剤または予防剤として使用することができる。即ち、本発明は、上記説明した本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を哺乳動物に投与する肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓または脾臓に関連する疾患等の治療方法も提供する。投与対象は、人であることが好ましく、肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓または脾臓に関連する疾患等に罹患している人がより好ましい。
【０７２２】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、肝臓、胃、肺、腎臓、膵臓または脾臓に関連する疾患等の治療剤または予防剤に関するインビボの薬効評価モデルにおいて、標的遺伝子を抑制することの有効性を検証するためのツールとして使用することもできる。
【０７２３】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子は、例えば、血液成分等の生体成分(例えば、血液、消化管等)中での前記核酸の安定化、副作用の低減または標的遺伝子の発現部位を含む組織または臓器への薬剤集積性の増大等を目的とする製剤としても使用できる。
【０７２４】
本発明の核酸含有脂質ナノ粒子を、医薬品の肝臓、肺、腎臓または脾臓に関連する疾患等の治療剤または予防剤として使用する場合、投与経路としては、治療に際し最も効果的な投与経路を使用するのが望ましく、例えば、口腔内、気道内、直腸内、皮下、筋肉内または静脈内等の非経口投与または経口投与を挙げることができ、好ましくは静脈内投与、皮下投与または筋肉内投与を挙げることができ、より好ましくは静脈内投与が挙げられる。
【０７２５】
投与量は、投与対象の病状や年齢、投与経路等によって異なるが、例えば、核酸に換算した1日投与量が約0.1μg〜1000mgとなるように投与すればよい。
【０７２６】
静脈内投与または筋肉内投与に適当な製剤としては、例えば、注射剤が挙げられ、上述の方法により調製した組成物の分散液をそのまま例えば、注射剤等の形態として用いることも可能であるが、該分散液から例えば、濾過、遠心分離等によって溶媒を除去して使用することも、該分散液を凍結乾燥して使用する、および／または例えば、マンニトール、ラクトース、トレハロース、マルトースもしくはグリシン等の賦形剤を加えた分散液を凍結乾燥して使用することもできる。
【０７２７】
注射剤の場合、前記の組成物の分散液または前記の溶媒を除去または凍結乾燥した組成物に、例えば、水、酸、アルカリ、種々の緩衝液、生理食塩水またはアミノ酸輸液等を混合して注射剤を調製することが好ましい。また、例えば、クエン酸、アスコルビン酸、システインもしくはEDTA等の抗酸化剤またはグリセリン、ブドウ糖もしくは塩化ナトリウム等の等張化剤等を添加して注射剤を調製することも可能である。また、例えば、グリセリン等の凍結保存剤を加えて凍結保存することもできる。
【実施例】
【０７２８】
次に、実施例、参考例、比較例および試験例により、本発明を具体的に説明する。ただし、本発明はこれら実施例、参考例、比較例および試験例に限定されるものではない。
なお、実施例および参考例に示されたプロトン核磁気共鳴スペクトル(1H NMR)は、270MHz、300MHzまたは400MHzで測定されたものであり、化合物および測定条件によっては交換性プロトンが明瞭には観測されないことがある。なお、シグナルの多重度の表記としては通常用いられるものを用いているが、brとは見かけ上幅広いシグナルであることを表す。【０７２９】
(カチオン性脂質の合成)
以下参考例A1〜A71に、脂質Aの合成方法を示す。【０７３０】
参考例A1
N-メチル-2-(オレオイルオキシ)-N,N-ビス(2-(オレオイルオキシ)エチル)エタンアミニウム クロリド (化合物I-1)
工程1
トリエタノールアミン (シグマアルドリッチ(Sigma-Aldrich)社製, 0.115 g, 0.771 mmol)のクロロホルム (5 mL)溶液にオレイン酸 (東京化成工業社製, 0.784 g, 2.78 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (東京化成工業社製, 0.591 g, 3.08 mmol)、トリエチルアミン (0.430 mL, 3.08 mmol)およびN,N-ジメチルアミノピリジン (ナカライテスク社製, 0.024 g, 0.19 mmol)を加えて室温で終夜攪拌した。反応液に水を加えてクロロホルムで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/ヘキサン = 50/50〜100/0)で精製して2,2’,2’’-ニトリロトリス(エタン-2,1-ジイル) トリオレアート (0.439 g, 0.466 mmol, 収率60%)を得た。
ESI-MS m/z: 943 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.23-1.36 (m, 60H), 1.58-1.63 (m, 6H), 1.98-2.04 (m, 12H), 2.29 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 2.83 (t, J = 6.1 Hz, 6H), 4.11 (t, J = 6.1 Hz, 6H), 5.31-5.38 (m, 6H).
工程2
工程1で得られた2,2’,2’’-ニトリロトリス(エタン-2,1-ジイル) トリオレアート (0.439 g, 0.466 mmol)にヨウ化メチル (東京化成工業社製, 3 mL)を加え、室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1)に溶解してイオン交換樹脂 (ダウ・ケミカル(Dow Chemical)製, Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄)にロードし、メタノール-クロロホルム (1:1)で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 100/0〜88/12)で精製して標記の化合物 (0.342 g, 0.344 mmol, 収率74%)を得た。
ESI-MS m/z: 957 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.25-1.35 (m, 60H), 1.59-1.63 (m, 6H), 1.99-2.03 (m, 12H), 2.35 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 3.56 (s, 3H), 4.21 (t, J= 4.9 Hz, 6H), 4.61 (t, J = 4.9 Hz, 6H), 5.30-5.38 (m, 6H).【０７３１】
参考例A2
N-メチル-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)-N,N-ビス(2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)エチル)エタンアミニウム クロリド (化合物I-2)
参考例A1と同様の方法で、オレイン酸の代わりに(9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (Sigma-Aldrich社製, 0.704 g, 2.51 mmol)を用い、標記の化合物(0.100 g、通し収率22%)を得た。
ESI-MS m/z: 950 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.25-1.40 (m,42H), 1.55-1.66 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.9 Hz, 12H), 2.35 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 6H), 3.54 (s, 3H), 4.21 (t, J = 5.1 Hz, 6H), 4.59 (br s, 6H), 5.28-5.43 (m, 12H).【０７３２】
参考例A3
(9Z,12Z)-N-メチル-N,N-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物I-3)
工程１
アンモニア (東京化成工業社製, 約7 mol/Lメタノール溶液、8.00 mL、56.0 mmol)に (9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (ニューチェック・プレップ・インク (Nu-Chek Prep,Inc)社製, 3.55 g, 10.1 mmol) を加え、マイクロ波反応装置を用いて130℃で3時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで5回抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮することで (9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミンの粗生成物を得た。
得られた粗生成物に(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (2.78 g, 8.07 mmol) および50%水酸化ナトリウム水溶液 (2.00 mL, 50.0 mmol) を加え、油浴上110℃で60分間攪拌した。室温まで冷却後、反応液を酢酸エチルで希釈し、水、ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 100/0〜90/10)で精製することにより、(9Z,12Z)-トリ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミン (1.09 g, 1.43 mmol, 収率18%)を得た。
ESI-MS m/z: 763 (M + H)+.
工程2
参考例A1工程2と同様の方法で、2,2’,2’’-ニトリロトリス(エタン-2,1-ジイル)トリオレアートの代わりに工程1で得られた(9Z,12Z)-トリ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミン (1.05 g, 1.38 mol)を用い、標記の化合物 (1.06 g, 1.30 mol, 収率94%)を得た。
ESI-MS m/z: 777 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.1 Hz, 9H), 1.22-1.45 (m, 48H), 1.61-1.69 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.5 Hz, 6H),  3.35 (s, 3H), 3.44-3.50 (m, 6H), 5.29-5.42 (m, 12H).【０７３３】
参考例A4
(Z)-N-メチル-N,N-ジ((Z)-オクタデカ-9-エニル)オクタデカ-9-エン-1-アミニウム クロリド (化合物I-4)
参考例A3と同様の方法で、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナートの代わりに (Z)-オクタデカ-9-エニル メタンスルホナート (Nu-Chek Prep,Inc.製) を用い、標記の化合物 (0.410 g, 0.501 mmol, 通し収率24%) を得た。
ESI-MS m/z: 783 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.22-1.44 (m, 66H), 1.62-1.69 (m, 6H), 1.98-2.04 (m, 12H), 3.35 (s, 3H), 3.45-3.51 (m, 6H), 5.30-5.39 (m, 6H).【０７３４】
参考例A5
(11Z,14Z)-N,N-ジ((11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル)-N-メチルイコサ-11,14-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物I-5)
参考例A3と同様の方法で、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナートの代わりに (11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエニル メタンスルホナート (Nu-Chek Prep,Inc.製) を用い、標記の化合物 (0.323 g, 0.360 mmol, 通し収率25%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.24-1.43 (m, 63H), 1.61-1.69 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.6 Hz, 6H), 3.35 (s, 3H), 3.45-3.50 (m, 6H), 5.30-5.42 (m, 12H).【０７３５】
参考例A6
(9Z,12Z)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-N,N-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物I-6)
参考例A3の工程1で得られるトリ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミン(0.199 g, 0.261 mmol)のクロロホルム (0.3 mL)溶液に3-ヨードプロパン-1-オール (和光純薬工業社製, 0.194 g, 1.04 mmol)を加え、マイクロ波反応装置で130℃、40分間反応させた。反応液を少量のエタノールに溶解してイオン交換樹脂(Sigma-Aldirch社製, Amberlite(R) IRA-400, Cl型, 約20倍量, 水およびエタノールでプレ洗浄)にロードし、エタノールで溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 100/0〜88/12)で精製して標記の化合物 (0.146 g, 0.170 mmol, 収率65%)を得た。
ESI-MS m/z: 821 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.27-1.39 (m, 49H), 1.67-1.74 (m, 6H), 1.93-1.99 (m, 2H), 2.05 (q, J = 6.9 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.2 Hz, 6H), 3.14-3.19 (m, 6H), 3.70-3.74 (m, 2H), 3.79 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 5.29-5.42 (m, 12H).【０７３６】
参考例A7
(9Z,12Z)-N-(2-ヒドロキシエチル)-N,N-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物I-7)
参考例A6と同様の方法で、3-ヨードプロパン-1-オールの代わりに2-ヨードエタン-1-オール (東京化成工業社製)を用い、標記の化合物(0.211 g, 0.250 mmol, 収率85%)を得た。
ESI-MS m/z: 807 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.27-1.40 (m, 49H), 1.64-1.71 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 6H), 3.36-3.41 (m, 6H), 3.53-3.56 (m, 2H), 4.08-4.12 (m, 2H), 5.29-5.42 (m, 12H).【０７３７】
参考例A8
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-2-アミニウム クロリド (化合物II-1)
工程1
2-(ジメチルアミノ)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (ザイレクサファーマ (Zylexa Pharma)社製, 0.252 g, 1.69 mmol) のクロロホルム (10 mL)溶液に(9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (2.37 g, 8.45 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (１.62 g, 8.45 mmol)および N,N-ジメチルアミノピリジン(0.206 g, 1.69 mmol)を加えて60℃で終夜攪拌した。室温まで冷却後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 100/0) で精製して(9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(ジメチルアミノ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (0.334 g, 0.356 mmol, 収率21%)を得た。
ESI-MS m/z: 937 (M + H)+. 
工程2
工程1で得られた(9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(ジメチルアミノ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデク-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオクタデク-9,12-ジエノアート (0.324 g, 0.346 mmol)のクロロホルム (3 mL)溶液にヨウ化メチル (0.216 mL)を加え、室温で5時間撹拌した。反応液にヨウ化メチル (0.216 mL)を加え、室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム(1:1)に溶解してイオン交換樹脂 (Dow Chemical製, Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄)にロードし、メタノール-クロロホルム(1:1)で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=100/0〜90/10)で精製して標記の化合物 (0.161 g, 0.164 mmol, 収率47%)を得た。
ESI-MS m/z: 951 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.86 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.22-1.36 (m, 42H), 1.54-1.61 (m, 6H), 2.02 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.34 (t, J = 7.7 Hz, 6H), 2.74 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 3.69 (s, 9H), 4.57 (s, 6H), 5.26-5.39 (m, 12H).【０７３８】
参考例A9
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス((Z)-テトラデカ-9-エノイルオキシ)-2-(((Z)-テトラデカ-9-エノイルオキシ)メチル)プロパン-2-アミニウム クロリド (化合物II-2)
参考例A8と同様の方法で、(9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸の代わりにcis-9-テトラデセン酸 (Nu-Chek Prep,Inc社製) を用い、標記の化合物 (0.0854 g, 0.104 mmol, 通し収率16%)を得た。
ESI-MS m/z: 789 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.1 Hz, 9H), 1.27-1.36 (m, 36H), 1.58-1.64 (m, 6H), 2.02 (q, J = 6.5 Hz, 12H), 2.37 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.72 (s, 9H), 4.55 (s, 6H), 5.30-5.38 (m, 6H).【０７３９】
参考例A10
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス(オレオイルオキシ)-2-(オレオイルオキシメチル)プロパン-2-アミニウム クロリド (化合物II-3)
参考例A8と同様の方法で、(9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸の代わりにオレイン酸を用い、標記の化合物 (1.14 g, 1.15 mmol, 通し収率34%)を得た。
ESI-MS m/z: 957 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.83 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.17-1.32 (m, 60H), 1.51-1.59 (m, 6H), 1.96 (t, J = 5.5 Hz, 12H), 2.32 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.70 (s, 9H), 4.56 (s, 6H), 5.25-5.34 (m, 6H).【０７４０】
参考例A11
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス(ステアロイルオキシ)-2-(ステアロイルオキシメチル)プロパン-2-アミニウム クロリド (化合物II-4)
工程1
2-(ジメチルアミノ)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (0.100g, 0.670 mmol)にトルエン (10 mL)、ステアリン酸 (東京化成工業社製, 0.763 g, 2.68 mmol)、p-トルエンスルホン酸一水和物 (0.191 g, 1.01 mmol)を順に加え、加熱還流条件下で終夜攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム)で精製して、2-(ジメチルアミノ)-2-((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジステアラート (0.120 g, 0.127 mmol, 収率19%)を得た。
ESI-MS m/z: 948 (M + H)+
工程2
工程1で得られた、2-(ジメチルアミノ)-2-((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジステアラート(0.120 g, 0.127 mmol)を用いて、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物(0.0260 g, 0.0260 mmol, 収率21%)を得た。
ESI-MS m/z: 963 (M)+； 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.36 (m, 84H), 1.56-1.65 (m, 6H), 2.37 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.72 (s, 9H), 4.56 (s, 6H).【０７４１】
参考例A12
1,3-ビス((Z)-ヘキサデカ-9-エノイルオキシ)-2-(((Z)-ヘキサデカ-9-エノイルオキシ)メチル)-N,N,N-トリメチルプロパン-2-アミニウム クロリド (化合物II-5)
参考例A8と同様の方法で、(9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸の代わりにcis-9-ヘキサデセン酸を用い、標記の化合物 (0.680 g, 0.748 mmol, 通し収率63%)を得た。
ESI-MS m/z: 873 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.24-1.36 (m, 48H), 1.56-1.67 (m, 13H), 1.98-2.05 (m, 12H), 2.37 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 3.75 (s, 9H), 4.53 (s, 6H), 5.29-5.40 (m, 6H).【０７４２】
参考例A13
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-2-アミニウム クロリド (化合物II-6)
工程1
2-ジメチルアミノ-2-ヒドロキシメチルプロパン-1,3-ジオール (Zylexa Pharma 社製, 0.115 g, 0.768 mmol) のトルエン (5 mL) 溶液に水素化ナトリウム (ナカライテスク社製, 油性, 60%, 0.154 g, 3.84 mmol) および (9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル  メタンスルホナート (1.32 g, 3.84 mmol) を加えて加熱還流下で終夜攪拌した。室温まで冷却後、反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてヘキサンで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 100/0〜95/5) で精製して N,N-ジメチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-2-アミン (0.195 g, 0.217 mmol, 収率28%) を得た。
ESI-MS m/z: 895 (M + H)+.
工程2
工程1で得られた N,N-ジメチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-2-アミン (0.0849 g, 0.0949 mmol) のクロロホルム (1 mL)溶液にヨウ化メチル (0.119 mL)を加え、室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1)に溶解してイオン交換樹脂 (Dow Chemical製, Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄)にロードし、メタノール-クロロホルム(1:1)で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 100/0〜90/10)で精製して標記の化合物 (0.0646 g, 0.0684 mmol, 収率72%)を得た。
ESI-MS m/z: 909 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.25-1.40 (m, 48H), 1.55-1.63 (m, 6H), 2.02-2.09 (m, 12H), 2.77 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 3.44 (t, J = 6.6 Hz, 6H), 3.62 (s, 9H), 3.82 (s, 6H), 5.29-5.42 (m, 12H).【０７４３】
参考例A14
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス((Z)-テトラデカ-9-エニルオキシ)-2-(((Z)-テトラデカ-9-エニルオキシ)メチル)プロパン-2-アミニウム クロリド (化合物II-7)
参考例A13と同様の方法で、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナートの代わりにミリストレイル メタンスルホナート(Nu-Chek Prep,Inc製) を用い、標記の化合物(0.0729 g, 0.0931 mmol, 通し収率12%)を得た。
ESI-MS m/z: 747 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.90 (t, J = 7.1 Hz, 9H), 1.27-1.37 (m, 42H), 1.54-1.61 (m, 6H), 2.02 (q, J = 6.5 Hz, 12H), 3.43 (t, J = 6.6 Hz, 6H), 3.64 (s, 8H), 3.81 (s, 6H), 5.31-5.39 (m, 6H).【０７４４】
参考例A15
1,3-ビス((Z)-ヘキサデカ-9-エニルオキシ)-2-(((Z)-ヘキサデカ-9-エニルオキシ)メチル)-N,N,N-トリメチルプロパンー2-アミニウム クロリド (化合物II-8)
参考例A13と同様の方法で、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナートの代わりにパルミトレイル メタンスルホナート(Nu-Chek Prep,Inc製)を用い、標記の化合物(0.466 g, 0.538 mmol, 通し収率71%)を得た。
ESI-MS m/z: 831 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.23-1.37 (m, 54H), 1.53-1.61 (m, 14H), 2.02 (q, J = 5.8 Hz, 12H), 3.43 (t, J = 6.5 Hz, 6H), 3.65 (s, 9H), 3.81 (s, 6H), 5.30-5.40 (m, 6H).【０７４５】
参考例A16
(6Z,9Z,40Z,43Z)-N,N,N-トリメチル-25-((3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-3-オキソプロポキシ)メチル)-20,30-ジオキソ-19,23,27,31-テトラオキサノナテトラコンタ-6,9,40,43-テトラエン-25-アミニウム クロリド (化合物II-9)
工程1
“ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー(J.Org.Chem.)”,2002年, 第67巻, p.1411-1413に記載の方法に準じた方法で合成したジ-tert-ブチル 3,3'-((2-アミノ-2-((3-(tert-ブトキシ)-3-オキソプロポキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル)ビス(オキシ))ジプロパノエート (0.500 g, 0.989 mmol)をジクロロメタン(5 mL)に溶解させ、ヨウ化メチル(1.40 g, 9.89 mmol)を加えて、室温で終夜攪拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1)に溶解してイオン交換樹脂 (Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄)にロードし、メタノールで溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 97/3〜80/20)で精製して9-((3-(tert-ブトキシ)-3-オキソプロポキシ)メチル)-N,N,N,2,2,16,16-ヘプタメチル-4,14-ジオキソ-3,7,11,15-テトラオキサヘプタデカン-9-アミニウム クロリド (0.144 g, 0.246 mmol, 収率25%)を得た。
ESI-MS m/z: 548 (M + H)+.
工程2
工程1で得られた9-((3-(tert-ブトキシ)-3-オキソプロポキシ)メチル)-N,N,N,2,2,16,16-ヘプタメチル-4,14-ジオキソ-3,7,11,15-テトラオキサヘプタデカン-9-アミニウム クロリド (0.350 g, 0.246 mmol)をジクロロメタン (2 mL)に溶解させ、トリフルオロ酢酸 (0.380 mL, 4.92 mmol)を加えて、室温で3時間攪拌した。反応液にトルエンを加えて、減圧下濃縮することで、1,3-ビス(2-カルボキシエトキシ)-2-((2-カルボキシエトキシ)メチル)-N,N,N-トリメチルプロパン-2-アミニウム クロリド  トリフルオロ酢酸塩の粗生成物 (0.102 g, 0.246 mmol, 粗収率100%)を得た。
ESI-MS m/z: 422 (M + H)+
工程3
工程2で得られた1,3-ビス(2-カルボキシエトキシ)-2-((2-カルボキシエトキシ)メチル)-N,N,N-トリメチルプロパン-2-アミニウム クロリド トリフルオロ酢酸塩の粗生成物 (0.055 g, 0.13 mmol)をジクロロメタン (2 mL)に溶解させ、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロフォスフェート (和光純薬工業社製, 0.20 g, 0.53 mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン (0.23 mL, 1.3 mmol)、および(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-オール(東京化成工業社製, 0.141 g, 0.53 mmol)を加え、室温で終夜攪拌した。反応液に水を加えて、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 90/10〜80/20)で精製して標記の化合物 (8.0 mg, 6.9 mmol, 収率5%)を得た。
ESI-MS m/z: 1125 (MH)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.25-1.39 (m, 48H), 1.58-1.66 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.9 Hz, 12H), 2.59 (t, J = 5.7 Hz, 6H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 6H), 3.42 (s, 9H), 3.74 (t, J = 5.7 Hz, 6H), 4.00 (s, 6H), 4.07 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 5.29-5.40 (m, 12H).【０７４６】
参考例A17
(7Z,38Z)-23-((3-((Z)-ヘキサデカ-9-エニルオキシ)-3-オキソプロポキシ)メチル)-N,N,N-トリメチル-18,28-ジオキソ-17,21,25,29-テトラオキサペンタテトラコンタ-7,38-ジエン-23-アミニウム クロリド (化合物II-10)
参考例A16と同様の方法で、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-オールの代わりに(Z)-ヘキサデカ-9-エン-1-オール (Nu-Chek Prep,Inc社製)を用い、標記の化合物(0.145 g, 0.134 mmol, 通し収率17%)を得た。
ESI-MS m/z: 1047 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.24-1.38 (m, 54H), 1.58-1.66 (m, 6H), 1.98-2.05 (m, 12H), 2.58 (t, J = 5.7 Hz, 6H), 3.47 (s, 9H), 3.74 (t, J = 5.7 Hz, 6H), 4.02 (s, 6H), 4.07 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 5.30-5.40 (m, 6H).【０７４７】
参考例A18
(5Z,36Z)-N,N,N-トリメチル-16,26-ジオキソ-21-((3-オキソ-3-((Z)-テトラデカ-9-エニルオキシ)プロポキシ)メチル)-15,19,23,27-テトラオキサヘンテトラコンタ-5,36-ジエン-21-アミニウム クロリド (化合物II-11)
参考例A16と同様の方法で、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-オールの代わりに(Z)-テトラデカ-9-エン-1-オール (Nu-Chek Prep,Inc社製)を用い、標記の化合物(0.189 g, 0.189 mmol, 通し収率24%)を得た。
ESI-MS m/z: 963 (M)+；1H-NMR (CDCl3) δ: 0.87-0.92 (m, 9H), 1.25-1.38 (m, 42H), 1.55-1.66 (m, 6H), 1.98-2.05 (m, 12H), 2.58 (t, J = 5.7 Hz, 6H), 3.47 (s, 9H), 3.75 (t, J = 5.7 Hz, 6H), 4.01 (s, 6H), 4.07 (t, J= 6.8 Hz, 6H), 5.30-5.41 (m, 6H).【０７４８】
参考例A19
(11Z,14Z)-N,N,N-トリメチル-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)イコサ-11,14-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物II-12)
工程１
シアノ酢酸エチル (東京化成工業社製, 1.00 g, 8,84 mmol)と(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (7.62 g, 22.1 mmol) をテトラヒドロフラン (30 mL)に溶解させ、氷冷下水素化ナトリウム (油性, 60%, 1.06 g, 26.5 mmol)、およびヨウ化テトラ-n-ブチルアンモニウム (ナカライテスク社製, 3.27 g, 8.84 mmol)を加えた。発泡が収まった後、60℃で3時間攪拌した。反応液に水を加えて、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮することで、(11Z,14Z)-エチル 2-シアノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノエートの粗生成物 (3.50 g, 5.74 mmol, 粗収率65%)を得た。
工程2
工程1で得られた(11Z,14Z)-エチル 2-シアノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノエートの粗生成物 1.50 g, 2.46 mmol)をテトラヒドロフラン(10 mL)に溶解し、氷冷下水素化アルミニウムリチウム (純正化学社製, 0.467 g, 12.3 mmol)を加え、30分間攪拌した。反応液に水 (0.5 mL), 15%水酸化ナトリウム水溶液 (0.5 mL), 水 (1.5 mL)、硫酸マグネシウムを順に加え、しばらく攪拌した後ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 99/1〜85/15)で精製して(11Z,14Z)-2-(アミノエチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール (1.00 g, 2.46 mmol, 収率71%)を得た。
ESI-MS m/z: 573 (M + H)+.
工程3
工程2で得られた(11Z,14Z)-2-(アミノエチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール (0.350 g, 0.612 mmol)をアセトニトリル (2 mL)とテトラヒドロフラン (2 mL)に溶解し、 38%ホルムアルデヒド水溶液 (和光純薬工業社製, 0.145 mL, 1.84 mmol)、酢酸 (0.035 mL, 0.612 mmol)、およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (Acros Organics(アクロスオーガニクス)社製, 0.389 g, 1.84 mmol) を加えて、室温で終夜攪拌した。反応液に水を加えて、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 99/1〜85/15)で精製して(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(0.252 g, 0.420 mmol, 収率69 %)を得た。
ESI-MS m/z: 600 (M + H)+ 
工程4
工程3で得られた(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(0.252 g, 0.420 mmol)のジクロロメタン (4 mL)溶液に、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (0.141 g, 0.504 mmol)、 O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロフォスフェート (0.192 mmol, 0.504 mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.147 mL, 0.840 mmol)を順に加えて、室温で4時間攪拌した。反応液に水を加えてヘキサンで抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル= 95/5〜85/15)で精製することで、(9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート (0.307 g, 0.356 mmol, 収率85 %)を得た。
ESI-MS m/z: 863 (M + H)+ 
工程5
工程4で得られた(9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート (0.307 g, 0.356 mmol)を用いて、参考例A1工程2と同様にして標記化合物 (0.260 g, 0.285 mmol, 収率80%)を得た。
ESI-MS m/z: 877 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ:0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.48 (m, 54H), 1.60-1.66 (m, 2H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.77 (t, J= 6.3 Hz, 6H), 3.50 (s, 2H), 3.60 (s, 9H), 4.13 (s, 2H), 5.27-5.44 (m, 12H).【０７４９】
参考例A20
N,N,N-トリメチル-3-((11Z,14Z)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)イコサ-11,14-ジエニルカルバモイルオキシ)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-13)
工程1
参考例A19工程2で得られた(11Z,14Z)-2-(アミノエチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール (0.918 g, 1.61 mmol)をテトラヒドロフラン(20 mL)に溶解させ、トリエチルアミン (0.671 mL, 4.81 mmol)、および二炭酸 ジ-tert-ブチル (国産化学社製, 0.373 mL, 1.61 mmol)を加えて、室温で終夜攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 95/5〜50/50)で精製することで、tert-ブチル ((11Z,14Z)-2-(ヒドロキシメチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル)カルバマート (0.918 g, 1.37 mmol, 収率85%)を得た。
ESI-MS m/z: 672 (M + H)+.
工程2
工程1で得られたtert-ブチル ((11Z,14Z)-2-(ヒドロキシメチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル)カルバマート (0.357 g, 0.531 mmol)をジクロロメタン (5 mL)に溶解させ、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (0.223 g, 0.797 mmol)、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロフォスフェート (0.303 mmol, 0.797 mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン (0.186 mL, 1.06 mmol)、およびN,N-ジメチルアミノピリジン (0.0650 g, 0.531 mmol)を加えて、室温で終夜攪拌した。反応液に水を加えてクロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 99/1〜90/10)で精製することで、 (9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-(((tert-ブトキシカルボニルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート(0.395 g, 0.423 mmol, 収率80%)を得た。
ESI-MS m/z: 935(M + H)+.
工程3
工程2で得られた(9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-(((tert-ブトキシカルボニルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート (0.395 g, 0.423 mmol)をジクロロメタン(3 mL)に溶解させ、氷冷下トリフルオロ酢酸 (1.00 mL, 4.92 mmol)を加えて、0℃で2時間攪拌した。反応液に1,2-ジクロロエタンを加えて、減圧下濃縮することで、(9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-(アミノエチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート トリフルオロ酢酸塩の粗生成物 (0.394 g, 0.423 mmol, 粗収率100%)を得た。
ESI-MS m/z: 834 (M + H)+.
工程4
工程3で得られた(9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-(アミノエチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート トリフルオロ酢酸塩の粗生成物 (0.200 g, 0.215 mmol)をアセトニトリル(2 mL)に溶解させ、“ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティー(J.Am.Chem.Soc.)”,1981年,第103巻,p.4194-4199記載の方法に準じた方法で合成した3-(ジメチルアミノ)プロピル 4-ニトロフェニル カルボナート塩酸塩 (0.279 g、1.07 mmol)、トリエチルアミン (0.299 mL, 2.15 mmol)、およびN,N-ジメチルアミノピリジン (0.0520 g, 0.429 mmol)を加え、60℃で2時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 99/1〜60/40)で精製することで、 (9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-((((3-(ジメチルアミノ)プロポキシ)カルボニル)アミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-dien-1-yl)イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート (0.0800 g, 0.0830 mmol, 収率39%)を得た。
ESI-MS m/z: 964 (M + H)+.
工程5
工程4で得られた(9Z,12Z)-(11Z,14Z)-2-((((3-(ジメチルアミノ)プロポキシ)カルボニル)アミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル オクタデカ-9,12-ジエノアート (0.053 g, 0.055 mmol)を用いて、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.025 g, 0.025 mmol, 収率45%)を得た。
ESI-MS m/z: 978 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.17-1.40 (m, 54H), 1.56-1.66 (m, 2H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.09-2.17 (m, 2H), 2.33 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.2 Hz, 6H), 3.05 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 3.44 (s, 9H), 3.73-3.79 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 4.16 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 5.27-5.44 (m, 12H), 5.72 (t, J = 6.5 Hz, 1H).【０７５０】
参考例A21
(12Z,15Z)-3-ヒドロキシ-N,N,N-トリメチル-2,2-ジ((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)ヘニコサ-12,15-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物II-14)
工程1
参考例A19工程2で得られた(11Z,14Z)-2-(アミノエチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(1.35 g, 2.36 mmol)をテトラヒドロフラン(10 mL)に溶解させ、38%ホルムアルデヒド水溶液 (和光純薬工業社製0.559 mL, 7.08 mmol)、酢酸 (0.135 mL, 2.36 mmol)、およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (1.50 g, 7.08 mmol)を加え、室温で1時間攪拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 99/1〜85/15)で精製することで、 (11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエン-1-オール (0.610 g, 1.02 mmol, 収率43%)を得た。
ESI-MS m/z: 600 (M + H)+.
工程2
工程1で得られた(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエン-1-オール (0.300 g, 0.500 mmol)をジクロロメタン (3 mL)に溶解させ、デス-マーチン試薬 (東京化成工業社製、0.233 g, 0.550 mmol)を加えて、室温で1時間攪拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 95/5〜70/30)で精製することで、(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエナール(0.160 g, 0.268 mmol, 収率54%)を得た。
ESI-MS m/z: 598 (M + H)+.
工程3
マグネシウム (Sigma-Ardrich社製, 0.0140 g, 0.562 mmol)にジエチルエーテル (1 mL)、およびヨウ素(ひとかけら)を加え、室温で5分間攪拌した。そこに、国際公開第2010/42877号に記載の方法に準じた方法で合成した(6Z,9Z)-18-ブロモオクタデカ-6,9-ジエン (0.176 g, 0.535 mmol)のジエチルエーテル溶液 (1 mL)を加え、加熱還流下攪拌した。ヨウ素の色が消えたことを確認した後、工程2で得られた(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエナール (0.160 g, 0.268 mmol)のジエチルエーテル溶液 (1 mL)を加え、室温で1時間攪拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 99/1〜85/15)で精製することで、(6Z,9Z,29Z,32Z)-20-((ジメチルアミノ)メチル)-20-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オクタトリアコンタ-6,9,29,32-テトラエン-19-オール (0.0470 g, 0.0550 mmol, 収率21%)を得た。
ESI-MS m/z: 848 (M + H)+.
工程4
工程3で得られた(6Z,9Z,29Z,32Z)-20-((ジメチルアミノ)メチル)-20-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オクタトリアコンタ-6,9,29,32-テトラエン-19-オール (0.047 g, 0.055 mmol)を用いて、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.0012 g, 0.0013 mmol, 収率2%)を得た。
ESI-MS m/z: 863 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ:0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.17-1.40 (m, 58H), 1.54-1.65 (m, 2H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.5 Hz, 6H), 3.29 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 3.51 (s, 9H), 3.56 (d, J= 14.2 Hz, 1H), 3.62-3.70 (m, 1H), 5.29-5.42 (m, 12H).【０７５１】
参考例A22
(11Z,14Z)-N,N,N-トリメチル-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)-2-(((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)カルボニル)イコサ-11,14-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物II-15)
工程1
参考例A20の工程1で得られたるtert-ブチル ((11Z,14Z)-2-(ヒドロキシメチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-イル)カルバマート (0.300 g, 0.448 mmol)をアセトン (2 mL)に溶解させ、氷冷下ジョーンズ試薬 (Sigma-Ardrich社製, 2 mol/L, 0.224 mL, 0.448 mmol)を加えた後、室温で1時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 95/5〜50/50)で精製することで、(11Z,14Z)-2-(((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエン酸 (0.136 g, 0.198 mmol, 収率44%)を得た。
ESI-MS m/z: 684 (M - H)-.
工程2
工程1で得られた(11Z,14Z)-2-(((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) イコサ-11,14-ジエン酸 (0.120 g, 0.175 mmol)と(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-オール (Nu-Chek Prep,Inc社製, 0.0930 g, 0.350 mmol)を用いて、参考例A20の工程2と同様の方法で(11Z,14Z)-(9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル 2-((( tert-ブトキシカルボニル)アミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノアート (0.123 g, 0.132 mmol, 収率75%)を得た。
ESI-MS m/z: 935 (M + H)+.
工程3
工程2で得られた(11Z,14Z)-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル 2-((( tert-ブトキシカルボニル)アミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノアート (0.123 g, 0.132 mmol)をジクロロメタン(1 mL)に溶解させ、氷冷下トリフルオロ酢酸 (0.300 mL, 3.89 mmol)を加え、1時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 99/1〜80/20)で精製することで、(11Z,14Z)-(9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル 2-(アミノメチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノアート (0.110 g, 0.132 mmol, 収率100%)を得た。
ESI-MS m/z: 835 (M + H)+.
工程4
工程3で得られた(11Z,14Z)-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル 2-(アミノメチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノアート (0.110 g, 0.132 mmol)を用いて、参考例A21工程1と同様の方法で(11Z,14Z)-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル2-((ジメチルアミノメチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノアート (0.0720 g, 0.0830 mmol, 収率63%)を得た。
ESI-MS m/z: 862 (M + H)+.
工程5
工程4で得られた(11Z,14Z)-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル2-((ジメチルアミノメチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノアート (0.072 g, 0.083 mmol)を用いて、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.052 g, 0.057 mmol, 収率68%)を得た。
ESI-MS m/z: 877 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ:0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.09-1.42 (m, 52H), 1.52-1.81 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.6 Hz, 6H), 3.46 (s, 9H), 3.79 (s, 2H), 4.14 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 5.28-5.43 (m, 12H).【０７５２】
参考例A23
(11Z,14Z)-N,N,N-トリメチル-2,2-ビス(((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)イコサ-11,14-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物II-16)
工程1
マロン酸ジメチル (東京化成工業社製,1.00 g, 7.57 mmol)をアセトニトリル (20 mL)に溶解させ、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル  メタンスルホナート (2.61g,7.57 mmol)、炭酸セシウム (和光純薬工業社製, 4.93 g, 15.1 mmol)およびヨウ化テトラ-n-ブチルアンモニウム (2.80 g, 7.57 mmol)を加え、50℃で終夜攪拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 90/10〜70/30)で精製することで、ジメチル 2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)マロナート (1.22 g, 3.21 mmol, 収率42%)を得た。
ESI-MS m/z: 381 (M + H)+.
工程2
工程1で得られたジメチル 2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)マロナート (0.200 g, 0.526 mmol)をアセトニトリル(3 mL)に溶解させ、N,N,N',N'-テトラメチルジアミノメタン (東京化成工業社製, 0.0860 mL, 0.631 mmol)および無水酢酸 (0.0600 mL, 0.631 mmol)を加えた。その後、氷冷下水素化ナトリウム (油性, 60%, 0.0320 g, 0.788 mmol)を加え、室温で3時間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 100/0〜60/40)で精製することで、ジメチル 2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)マロナート (0.0660 g, 0.151 mmol, 収率29%)を得た。
ESI-MS m/z: 438 (M + H)+.
工程3
工程2で得られたジメチル 2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)マロナート (0.066 g, 0.15 mmol)を用いて、参考例A19工程2と同様の方法にて、2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)プロパン-1,3-ジオール (0.013 g, 0.034 mmol, 収率23%)を得た。
ESI-MS m/z: 382 (M + H)+.
工程4
工程3で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)プロパン-1,3-ジオール (0.013 g, 0.034 mmol)を用いて、参考例A20工程2と同様の方法にて、(9Z,9'Z,12Z,12')-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)プロパン-1,3-ジイル  ビス(オクタデカ-9,12-ジエノアート (0.017 g, 0.019 mmol, 収率56%)を得た。
ESI-MS m/z: 906 (M + H)+.
工程5
工程4で得られた(9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)- オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル) プロパン-1,3-ジイル ビス(オクタデカ-9,12-ジエノアート (0.017 g, 0.019 mmol)を用いて、参考例A1工程2と同様の方法にて、標記化合物 (5.5 mg, 0.0058 mmol, 収率31%)を得た。
ESI-MS m/z: 921 (M)+.1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.23-1.40 (m, 48H), 1.53-1.65 (m, 4H), 2.05 (q, J = 6.9 Hz, 12H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 4H), 2.77 (t, J= 6.6 Hz, 6H), 3.59 (s, 9H), 3.72 (s, 2H), 4.20 (dd, J = 22.1, 12.2 Hz, 4H), 5.28-5.44 (m, 12H).【０７５３】
参考例A24
N,N,N-トリメチル-3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-17)
工程1
2-(ブロモメチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール(0.200 g, 1.01 mmol)にジメチルアミン (Sigma-Aldrich社製, 2.0 mol/L テトラヒドロフラン溶液, 5.02 mL, 10.1 mmol)を加え、マイクロウェーブ照射下で120℃で15時間攪拌した。反応液に水酸化リチウム一水和物 (0.0290 g, 1.21 mmol)を加え、生じた沈殿をろ別した。ろ液を減圧下濃縮することで、2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオールの粗生成物(0.200g, 1.23 mmol, 定量的)を得た。
ESI-MS m/z: 164 (M + H)+.
工程2
工程1で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオールの粗生成物 (0.200 g, 1.23 mmol)を用い、参考例A8と同様の方法にて、標題の化合物 (0.0470 g, 0.047 mmol 通し収率4.4%)を得た。
ESI-MS m/z: 965 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ:0.85-0.94 (m, 9H), 1.24-1.40 (m, 42H), 1.53-1.63 (m, 6H), 2.00-2.10 (m, 12H), 2.38 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 2.77 (t, J = 6.5 Hz, 6H), 3.64 (s, 9H), 3.95 (s, 2H), 4.30 (s, 6H), 5.27-5.43 (m, 12H).【０７５４】
参考例A25
N,N,N-トリメチル-3-(オレオイルオキシ)-2,2-ビス(オレオイルオキシメチル)プロパン-1-アミニウム  クロリド (化合物II-18)
参考例A8の工程1における(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸の代わりにオレイン酸を用い、参考例A8と同様の方法により標記の化合物 (0.663 g, 0.658 mmol, 通し収率28%) を得た。
ESI-MS m/z: 971 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.22-1.38 (m, 60H), 1.55-1.65 (m, 6H), 2.01 (q, J = 5.9 Hz, 12H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.64 (s, 9H), 3.98 (s, 2H), 4.29 (s, 6H), 5.29-5.39 (m, 6H).【０７５５】
参考例A26
N,N,N-トリメチル-3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド (化合物II-19)
工程1
ジメチルアミン (約2 mol/Lテトラヒドロフラン溶液、15.0 mL、30.0 mmol) に2-(ブロモメチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (1.52 g, 7.56 mmol) を加え、マイクロ波反応装置を用いて120℃で15時間加熱撹拌した。室温まで冷却後、反応液に水酸化リチウム (0.217 g, 9.07 mmol) を加え、ろ過し、減圧下濃縮することで2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオールの粗生成物を得た。
得られた粗生成物に トルエン (30 mL)、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル  メタンスルホナート (6.51 g, 18.9 mmol)および水素化ナトリウム (油性, 60%, 0.756 g, 18.9 mmol) を加え、加熱還流下で終夜撹拌した。室温まで冷却後、反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてヘキサンで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 100/0〜90/10) で精製して、N,N-ジメチル-3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-アミン (0.196 g, 0.216 mmol, 3%) と 3-(ジメチルアミノ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-オール (1.80 g, 2.73 mmol, 収率36%) を得た。
N,N-ジメチル-3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-アミン
ESI-MS m/z: 909 (M + H)+.
3-(ジメチルアミノ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-オール
ESI-MS m/z: 661 (M + H)+. 
工程2
工程1で得られた N,N-ジメチル-3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-アミン (0.120 g, 0.132 mmol) のクロロホルム (1 mL) 溶液にヨウ化メチル (0.500 mL) を加え、室温で3時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1) に溶解してイオン交換樹脂 (Amberlite(R) IRA-400, Cl型, 約20倍量, 水およびエタノールでプレ洗浄)にロードし、メタノール-クロロホルム (1:1) で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 100/0〜90/10)で精製して標記の化合物 (0.0654 g, 0.0682 mmol, 収率57%) を得た。
ESI-MS m/z: 923 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.22-1.40 (m, 1H), 1.49-1.59 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.9 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 6H), 3.37 (t, J= 6.6 Hz, 6H), 3.45 (s, 6H), 3.55 (s, 9H), 3.58 (s, 2H), 5.28-5.42 (m, 12H).【０７５６】
参考例A27
N,N,N-トリメチル-3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド (化合物II-20)
参考例A26工程1で得られた 3-(ジメチルアミノ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロパン-1-オール (0.265 g, 0.401mmol) の1,2-ジロロエタン (4 mL) 溶液に (9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (0.169 g, 0.602 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (0.154 g, 0.802 mmol) および N,N-ジメチルアミノピリジン (0.0250 g, 0.201 mmol) を加えて室温で終夜攪拌した。減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 95/5〜90/10)で精製して (9Z,12Z)-3-(ジメチルアミノ)-2,2-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)メチル)プロピル  オクタデカ-9,12-ジエノアートの粗生成物を得た。
得られた粗生成物にクロロホルム (2 mL) およびヨウ化メチル (東京化成工業社製, 1.00 mL) を加え、室温で5時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1) に溶解してイオン交換樹脂 (Sigma-Aldirch社製, Amberlite(R) IRA-400, Cl型, 約20倍量, 水およびエタノールでプレ洗浄) にロードし、メタノール-クロロホルム (1:1) で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 100/0〜90/10)で精製して標記の化合物 (0.220 g, 0.226 mmol, 収率56%) を得た。
ESI-MS m/z: 937 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.41 (m, 51H), 1.50-1.66 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.9 Hz, 12H), 2.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.1 Hz, 6H), 3.39 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 3.44-3.48 (m, 2H), 3.54-3.58 (m, 11H), 3.73 (s, 2H), 4.18 (s, 2H), 5.28-5.43 (m, 11H).【０７５７】
参考例A28
N,N,N-トリメチル-4-(2-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエンアミド-3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロポキシ)-4-オキシブタン-1-アミニウム クロリド (化合物II-21)
工程1
tert-ブチル (1,3-ジヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-2-イル)カルバマート (キーオーガニクス (Key Organics) 社製, 0.505 g, 2.28 mmol) のジクロロメタン (15 mL) 溶液に (9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (3.23 g, 11.4 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (2.19 g, 11.4 mmol) および N,N-ジメチルアミノピリジン (0.279 g, 2.28 mmol) を加えて室温で1時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/クロロホルム = 100/0〜95/5) で精製して(9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (2.08 g, 2.06 mmol, 収率90%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.7 Hz, 9H), 1.23-1.40 (m, 9H), 1.43 (s, 9H), 1.57-1.66 (m, 14H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 12H), 2.32 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 2.77 (t, J = 6.5 Hz, 6H), 4.34 (s, 6H), 4.81 (br s, 1H), 5.28-5.43 (m, 12H).
工程2
工程1で得られた (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(tert-ブトキシカルボニルアミノ-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル  ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (2.05 g, 2.03 mmol, 90%) のジクロロメタン (10 mL) 溶液にトリフルオロ酢酸 (2 mL, 26.0 mmol) を加えて室温で1時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 100/0〜95/5)で精製して (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(ヒドロキシメチル)-2-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエンアミドプロパン-1,3-ジイル  ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (1.70 g, 1.84 mmol, 収率91%) を得た。
ESI-MS m/z: 909 (M + H)+. 
工程3
工程2で得られた (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(ヒドロキシメチル)-2-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエンアミドプロパン-1,3-ジイル ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (0.8933 g, 0.983 mmol) のジクロロメタン (9 mL) 溶液に (9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (Sigma-Aldrich社製, 2.37 g, 8.45 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (１.62 g, 8.45 mmol) および N,N-ジメチルアミノピリジン(0.206 g, 1.69 mmol) を加えて室温で2時間攪拌した。減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 90/10〜75/25) で精製して (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-((4-(ジメチルアミノ)ブタノイルオキシ)メチル)-2-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエンアミドプロパン-1,3-ジイル  ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (0.900 g, 0.881 mmol, 収率90%) を得た。
ESI-MS m/z: 1022 (M + H)+.
工程4
工程3で得られた (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-((4-(ジメチルアミノ)ブタノイルオキシ)メチル)-2-(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエンアミドプロパン-1,3-ジイル ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (0.805 g, 0.788 mmol) のクロロホルム (4 mL) 溶液にヨウ化メチル (0.493 mL) を加え、室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1) に溶解してイオン交換樹脂 (Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄) にロードし、メタノール-クロロホルム (1:1) で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 90/10〜80/20)で精製して標記の化合物 (0.740 g, 0.690 mmol, 収率88%)を得た。
ESI-MS m/z: 1036 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.4 Hz, 9H), 1.21-1.40 (m, 45H), 1.54-1.65 (m, 6H), 2.01-2.08 (m, 12H), 2.09-2.19 (m, 2H), 2.24 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.32 (t, J= 7.5 Hz, 4H), 2.57 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 6H), 3.41 (s, 9H), 3.84 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 4.37-4.50 (m, 6H), 5.28-5.43 (m, 12H), 6.72 (br s, 1H).【０７５８】
参考例A29
4-(1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-2-イルアミノ)-N,N,N-トリメチル-4-オキソブタン-1-アミニウム クロリド (化合物II-22)
工程1
2-アミノ-2-(ヒロドキシメチル)-1,3-プロパンジオール (和光純薬工業社製, 7.41 g, 61.2 mmol) のジクロロメタン (60 mL) 溶液にtert-ブチルジメチルシリル  クロリド (Sigma-Aldrich社製, 9.43 g, 60.7 mmol) およびイミダゾール (ナカライテスク社製, 5.51 g, 80.9 mmol) を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和食塩水を加えてクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 100/0〜95/5) で精製して 6-((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)-2,2,3,3,9,9,10,10-オクタメチル-4,8-ジオキサ-3,9-ジシラウンデカン-6-アミン (3.80 g, 8.19 mmol, 収率40%) を得た。
ESI-MS m/z: 464 (M + H)+.
工程2
工程1で得られた 6-((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)-2,2,3,3,9,9,10,10-オクタメチル-4,8-ジオキサ-3,9-ジシラウンデカン-6-アミン(1.28 g, 2.76 mmol) のジクロロメタン (10 mL) 溶液に 4-(ジメチルアミノ)酪酸塩酸塩 (Sigma-Aldrich社製, 0.708 g, 4.14 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (0.810 g, 4.14 mmol)、N,N-ジメチルアミノピリジン (0.0170 g, 0.138 mmol) および N,N‐ジイソプロピルエチルアミン (1.45 mL, 8.31 mmol) を加えて室温で終夜攪拌した。減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 95/5〜90/10) で精製して N-(6-((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)-2,2,3,3,9,9,10,10-オクタメチル-4,8-ジオキサ-3,9-ジシラウンデカン-6-イル)-4-(ジメチルアミノ)ブタンアミド (1.22 g, 2.11 mmol, 収率76%) を得た。
ESI-MS m/z: 578 (M + H)+.
工程3
工程2で得られた N-(6-((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)-2,2,3,3,9,9,10,10-オクタメチル-4,8-ジオキサ-3,9-ジシラウンデカン-6-イル)-4-(ジメチルアミノ)ブタンアミド (1.08 g, 1.87 mmol) のテトラヒドロフラン (10 mL) 溶液にテトラブチルアンモニウム フルオリド (東京化成工業社製, 約 1 mol/L テトラヒドロフラン溶液、7.49 mL、7.49 mmol) を加え、室温で2時間攪拌した。反応液に (9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (2.05 g, 7.31 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (１.44 g, 7.51 mmol) および N,N-ジメチルアミノピリジン (0.0340 g, 0.278 mmol) を加えて室温で終夜攪拌した。減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 60/40〜50/50) で精製して (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(4-(ジメチルアミノ)ブタンアミド)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (0.405 g, 0.396 mmol, 収率21%) を得た。
ESI-MS m/z: 1022 (M + H)+.
工程4
工程3で得られた (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(4-(ジメチルアミノ)ブタンアミド)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオクタデカ-9,12-ジエノアート (0.335 g, 0.328 mmol) の クロロホルム (3 mL) 溶液にヨウ化メチル (東京化成工業社製, 0.200 mL) を加え、室温で2時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1) に溶解してイオン交換樹脂 (Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄) にロードし、メタノール-クロロホルム (1:1) で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 90/10〜80/20) で精製して標記の化合物 (0.324 g, 0.302 mmol, 収率92%)を得た。
ESI-MS m/z: 1036 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.23-1.40 (m, 45H), 1.55-1.64 (m, 6H), 2.01-2.12 (m, 14H), 2.34 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 2.43 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.6 Hz, 6H), 3.37 (s, 9H), 3.77-3.83 (m, 2H), 4.43 (s, 6H), 5.28-5.42 (m, 12H), 6.62 (br s, 1H).【０７５９】
参考例A30
2-(1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-2-イルアミノ)-N,N,N-トリメチル-2-オキソエタンアミニウム クロリド (化合物II-23)
参考例A29と同様の方法で、4-(ジメチルアミノ)酪酸 塩酸塩の代わりに N,N-ジメチルグリシン (東京化成工業社製) を用い、標記の化合物 (0.356 g, 0.341 mmol, 通し収率17%)を得た。
ESI-MS m/z: 1008 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.23-1.40 (m, 44H), 1.54-1.64 (m, 26H), 2.01-2.08 (m, 12H), 2.35 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 2.77 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 3.40 (s, 9H), 4.46 (s, 6H), 4.70 (s, 2H), 5.28-5.42 (m, 12H), 9.54 (br s, 1H).【０７６０】
参考例A31
4-((6Z,9Z,29Z,32Z)-20-ヒドロキシ-20-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタトリアコンタ-6,9,29,32-テトラエン-19-イルオキシ)-N,N,N-トリメチル-4-オキソブタン-1-アミニウム クロリド (化合物III-1)
米国特許出願公開第2012/0172411号明細書に記載の方法に準じた方法で得られた(6Z,9Z,29Z,32Z)-20-ヒドロキシ-20-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタトリアコンタ-6,9,29,32-テトラエン-19-イル 4-(ジメチルアミノ)ブタノアート (0.144 g, 0.156 mmol)を用いて、参考例A1の工程2と同様の方法で標記の化合物 (0.146 g, 0.150 mmol, 収率96%) を得た。
ESI-MS m/z: 935 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.16-1.79 (m, 60H), 1.98-2.17 (m, 15H), 2.52-2.59 (m, 2H), 2.77 (t, J = 6.6 Hz, 6H), 3.44 (s, 9H), 3.69-3.81 (m, 2H), 4.94-4.98 (m, 1H), 5.29-5.42 (m, 12H).【０７６１】
参考例A32
(6Z,9Z,28Z,31Z)-N,N-ジメチル-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-アミニウム クロリド (化合物IV-1)
工程1
国際公開第2010/042877号に記載の方法に準じた方法で得られた(6Z,9Z,28Z,31Z)-ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-オン (0.194 g, 0.368 mmol)の1,2-ジクロロエタン (2 mL)溶液にメチルアミン (東京化成工業社製, 約40%メタノール溶液, 0.110 mL, 1.1 mmol)と酢酸 (0.063 mL, 1.1 mmol)を加えた。さらにナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (0.117 g, 0.552 mmol)を添加した後、室温で2時間撹拌した。反応液にメチルアミン (約40%メタノール溶液, 0.110 mL, 1.1 mmol)、酢酸 (0.063 mL, 1.1 mmol)、およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (0.117 g, 0.552 mmol)を加え、2時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてヘキサンで2回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 100/0〜90/10) で精製して(6Z,9Z,28Z,31Z)-N-メチルヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-アミン (0.121 g, 0.223 mmol, 収率61%)を得た。
ESI-MS m/z: 543 (M + H)+.
工程2
工程1で得られた(6Z,9Z,28Z,31Z)-N-メチルヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-アミン (0.121 g, 0.223 mmol)に(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (0.154 g, 0.446 mmol) および50%水酸化ナトリウム水溶液 (0.107 g, 1.34 mmol) を加え、油浴上135℃で2時間攪拌した。反応液を室温まで冷却し、飽和食塩水を加え、ヘキサンで洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 100/0〜85/15)で精製することにより、(6Z,9Z,28Z,31Z)-N-メチル-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-アミン (0.139 g, 0.175 mmol, 収率79%)を得た。
ESI-MS m/z: 792 (M + H)+.
工程3
工程2で得られた(6Z,9Z,28Z,31Z)-N-メチル-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-アミン (0.139 g, 0.175 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.114 g, 0.135 mmol, 収率77%)を得た。
ESI-MS m/z: 806 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.26-1.56 (m, 54H), 1.65-1.73 (m, 2H), 1.80-1.88 (m, 2H), 2.05 (q, J = 7.0 Hz, 12H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 6H), 3.22-3.27 (m, 1H), 3.31 (s, 6H), 3.58-3.62 (m, 2H), 5.29-5.42 (m, 12H).【０７６２】
参考例A33
N,N,N-トリメチル-3-(パルミトイルオキシ)-2,2-ビス((パルミトイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-24)
工程1
参考例A24の工程1で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (0.420 g,2.57 mmol)の1,2-ジクロロエタン (5 mL)溶液に、ピリジン (3.12 mL, 38.6 mmol)を加えた後、室温にてパルミトイル クロリド (東京化成工業社製, 6.22 mL, 20.6 mmol)を加え、70℃で2時間攪拌した。反応液を室温まで冷却し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム)で精製することにより、2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((パルミトイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジパルミタート (0.650 g, 0.740 mmol, 収率29%)を得た。
ESI-MS m/z: 879 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((パルミトイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジパルミタート (0.65 g, 0.74 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.056 g, 0.060 mmol, 収率8%)を得た。
ESI-MS m/z: 893 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J= 7.0 Hz, 9H), 1.21-1.34 (m, 72H), 1.54-1.64 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.62 (s, 9H), 3.95 (s, 2H), 4.29 (s, 6H).【０７６３】
参考例A34
N,N,N-トリメチル-3-(テトラデカノイルオキシ)-2,2-ビス((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-25)
参考例A33と同様の方法で、パルミトイル クロリドの代わりにミリストイル クロリド (和光純薬工業) を用い、標記の化合物 (0.045 g, 0.053 mmol, 通し収率4%)を得た。
ESI-MS m/z: 809 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 9H), 1.21-1.34 (m, 60H), 1.54-1.64 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.64 (s, 9H), 3.96 (s, 2H), 4.29 (s, 6H).【０７６４】
参考例A35
3-(ドデカノイルオキシ)-2,2-ビス((ドデカノイルオキシ)メチル)-N,N,N-トリメチルプロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-26)
参考例A33と同様の方法で、パルミトイル クロリドの代わりにラウロイル クロリド(東京化成工業社製) を用い、標記の化合物 (0.085 g, 0.112 mmol, 通し収率9%) を得た。
ESI-MS m/z: 725 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 9H), 1.19-1.34 (m, 48H), 1.54-1.64 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.66 (s, 9H), 3.97 (s, 2H), 4.30 (s, 6H).【０７６５】
参考例A36
(Z)-N,N,N-トリメチル-3,3-ビス((オレオイロキシ)メチル)ヘニコサ-12-エン-1-アミニウム クロリド(化合物II-27)
工程1
マロン酸ジメチル (1.00 g, 7.57 mmol)をアセトニトリル (25 mL)に溶解させ、(Z)-オクタ-9-エン-1-イル メタンスルホナート(3.15g, 9.08 mmol)、炭酸セシウム (4.93 g, 15.1 mmol)およびヨウ化テトラブチルアンモニウム (3.35 g, 9.08 mmol)を加え、60℃で1時間攪拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 90/10〜70/30)で精製することで、(Z)-ジメチル 2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)マロナート (2.54 g, 6.64 mmol, 収率88%)を得た。
ESI-MS m/z: 383 (M + H)+
工程2
工程1で得られた(Z)-ジメチル 2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)マロナート (0.500 g, 1.31 mmol)をトルエン (6 mL)に溶解させ、氷冷下水素化ナトリウム (油性, 60%, 0.209 g, 5.23 mmol)を加え、発泡が無くなるまで撹拌した。次いで2-クロロ-N,N-ジメチルエタンアミン 塩酸塩 (東京化成工業社製, 0.377 g, 2.61 mmol)を加え、100℃で2時間攪拌した。氷冷下反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 99/1〜90/10)で精製することで、(Z)-ジメチル 2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)マロナート (0.258 g, 0.569 mmol, 収率44%)を得た。
ESI-MS m/z: 454 (M + H)+
工程3
参考例A19の工程2と同様の方法で、工程2で得られた(Z)-ジメチル 2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)マロナート (0.250 g, 0.551 mmol)を用い、(Z)-2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)プロパン-1,3-ジオール (0.220 g, 0.553mmol, 定量的)を得た。
ESI-MS m/z: 398 (M + H)+
工程4
工程3で得られた(Z)-2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)プロパン-1,3-ジオール (0.220 g, 0.553mmol)をジクロロメタン(2 mL)に溶解し、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.386 mL, 2.21 mmol)を加え、氷冷下オレオイルクロリド (Sigma-aldrich社製, 0.457 mL, 1.38 mmol)を加え、室温で10分間撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 90/10〜50/50)で精製することで、(Z)-2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.280 g, 0.302 mmol, 収率55%)を得た。
ESI-MS m/z: 927 (M + H)+
工程5
工程4で得られた(Z)-2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.280 g, 0.302 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.199 g, 0.204 mmol, 収率67%)を得た。
ESI-MS m/z: 941 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.39 (m, 66H), 1.55-1.65 (m, 4H), 1.70-1.78 (m, 2H), 1.98-2.06 (m, 12H), 2.33 (t, J= 7.6 Hz, 4H), 3.46 (s, 9H), 3.58-3.65 (m, 2H), 3.93-4.03 (m, 4H), 5.29-5.39 (m, 6H).【０７６６】
参考例A37
(Z)-N,N,N-トリメチル-4,4-ビス((オレオイルオキシ)メチル)ドコサ-13-エン-1-アミニウム クロリド(化合物II-28)
工程1
参考例A36の工程2と同様の方法で、2-クロロ-N,N-ジメチルエタンアミン 塩酸塩の代わりに3-クロロ-N,N-ジメチルプロパン-1-アミン 塩酸塩(東京化成工業社製)を用い、(Z)-ジメチル 2-(3-(ジメチルアミノ)プロピル)-2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)マロナート (0.210 g, 0.449 mmol, 収率34%)を得た。
ESI-MS m/z: 468 (M + H)+
工程2
参考例A36の工程3、4、5と同様の方法で、(Z)-ジメチル 2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)マロナートの代わりに工程1で得られた(Z)-ジメチル2-(3-(ジメチルアミノ)プロピル)-2-(オクタデカ-9-エン-1-イル)マロナート (0.210 g, 0.449 mmol)を用い、標記化合物 (0.042 g, 0.042 mmol, 通し収率9%)を得た。
ESI-MS m/z: 955 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.22-1.36 (m, 68H), 1.56-1.64 (m, 4H), 1.72-1.82 (m, 2H),1.96-2.07 (m, 12H), 2.32 (t, J= 7.5 Hz, 4H), 3.38 (s, 9H), 3.39-3.46 (m, 2H), 3.93 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 3.99 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 5.28-5.40 (m, 6H).【０７６７】
参考例A38
N,N,N-トリメチル-3-(ステアロイルオキシ)-2,2-ビス((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-29)
参考例A33と同様の方法で、パルミトイル クロリドの代わりにステアロイル クロリド(東京化成工業社製) を用い、標記の化合物 (0.085 g, 0.112 mmol, 通し収率6%) を得た。
ESI-MS m/z: 977 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 9H), 1.21-1.37 (m, 84H), 1.54-1.64 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.65 (s, 9H), 3.96 (s, 2H), 4.30 (s, 6H).【０７６８】
参考例A39
N,N,N-トリメチル-3-オレアミド-2,2-ビス((オレオイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-30)
工程1
参考例A24の工程1で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (0.410 g,2.51 mmol)をジクロロメタン (5 mL)、ピリジン (5.08 mL, 62.8 mmol)の混合溶媒に溶解した。氷冷下、オレオイル クロリド (1.25 mL, 3.77 mmol)を加えた。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=99/1〜90/10)で精製することにより、(Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.190 g, 0.275 mmol, 収率11%)を得た。
ESI-MS m/z: 693 (M + H)+
工程2
工程1で得られた(Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.190 g,2.51 mmol)をトルエン (2 mL)に溶解し、室温でジフェニルリン酸アジド (東京化成工業社製, 0.118 mL, 0.549 mmol)と1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]-7-ウンデセン(0.0830 mL,0.549 mmol)を加え、1時間撹拌した。反応の進行が不十分であったので、ジフェニルリン酸アジド (0.118 mL, 0.549 mmol)を追加し、80℃で3時間加熱撹拌した。反応液を室温まで冷却し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=95/5〜60/40)で精製することにより、(Z)-2-(アジドメチル)-2-((ジメチルアミノ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.135 g, 0.188 mmol, 収率69%)を得た。
ESI-MS m/z: 718 (M + H)+
工程3
工程2で得られた(Z)-2-(アジドメチル)-2-((ジメチルアミノ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.135 g,2.51 mmol)をテトラヒドロフラン (1 mL)と水(0.1 mL)の混合溶液に溶解し、トリフェニルホスフィン (純正化学工業社製, 0.0740 g, 0.282 mmol)を加え、3時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮することにより、(Z)-2-(アミノエチル)-2-((ジメチルアミノ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアートの粗生成物 (0.130 g, 0.188 mmol, 収率100%)を得た。
ESI-MS m/z: 691 (M + H)+
工程4
工程3で得られた(Z)-2-(アミノエチル)-2-((ジメチルアミノ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.130 g,0.188 mmol)のジクロロメタン (2 mL)溶液に、N,N-ジイソプロピルエチルアミン (0.0990 mL, 0.564 mmol)を加え、氷冷下オレオイルクロリド (0.0850 g, 0.282 mmol)を加えて、室温で1時間撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=97/3〜60/40)で精製することにより、(Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(オレアミドメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.105 g, 0.110 mmol, 収率58%)を得た。
ESI-MS m/z: 956 (M + H)+
工程5
工程4で得られた(Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(オレアミドメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.105 g, 0.110 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物(0.0480 g, 0.0480 mmol, 収率43%)を得た。
ESI-MS m/z: 970 (M)+;1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.21-1.37 (m, 60H), 1.56-1.65 (m, 6H), 1.96-2.05 (m, 12H), 2.36 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 3.51 (s, 9H), 3.51-3.56 (m, 2H), 4.02 (s, 2H), 4.20 (d, J= 12.2 Hz, 2H), 4.30 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 5.27-5.40 (m, 6H), 8.11-8.20 (m, 1H).【０７６９】
参考例A40
N,N,N-トリメチル-4-(オレオイルオキシ)-3,3-ビス(オレオイルオキシメチル)ブタン-1-アミニウム クロリド (化合物II-31)
工程1
2-(ブロモメチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (東京化成工業社製, 1.00 g, 5.02 mmol) のテトラヒドロフラン (10 mL) 溶液に、tert -ブチルジメチルクロロシラン (東京化成工業社製, 3.79 g, 25.1 mmol)、イミダゾール (ナカライテスク社製, 3.42 g, 50.2 mmol)、N,N-ジメチルアミノピリジン (0.061 g, 0.502 mmol) を加えて、室温にて終夜攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてヘキサンで2回抽出した。有機層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン) で精製することにより6-(ブロモメチル)-6-((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)-2,2,3,3,9,9,10,10-オクタメチル-4,8-ジオキサ-3,9-ジシラウンデカン (2.50 g, 4.61 mmol, 92%)を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.04 (s, 18H), 0.89 (s, 27H), 3.41 (s, 2H), 3.49 (s, 6H).
工程2
工程1で得られた6-(ブロモメチル)-6-((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)-2,2,3,3,9,9,10,10-オクタメチル-4,8-ジオキサ-3,9-ジシラウンデカン (1.849 g, 3.41 mmol) のジメチルスルホキシド (10 mL) 溶液に、シアン化ナトリウム (ナカライテスク社製, 0.529 g, 10.8 mmol) を加えて、85℃にて3日間攪拌した。室温まで冷却後、反応液をヘキサンで希釈し、水、ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 90/10)で精製することにより、4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3,3-ビス((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ブタンニトリル (1.35 g, 2.77 mmol, 収率81%)を得た。
ESI-MS m/z: 489 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.05 (s, 18H), 0.89 (s, 27H), 2.34 (s, 2H), 3.51 (s, 6H).
工程3
工程2で得られた 4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3,3-ビス((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ブタンニトリル (1.34 g, 2.75 mmol) のテトラヒドロフラン (10 mL) 溶液に、氷冷下、水素化アルミニウムリチウム (0.104 g, 2.75 mmol) を加え、室温にて2時間攪拌した。反応液に水 (0.495 mL, 27.5 mmol) とフッ化ナトリウム (3.46 g, 82.0 mmol) を加え、室温にて終夜攪拌した。不溶物をセライト濾過にて除去し、濾液を濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル) で精製することにより、4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3,3-ビス((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ブタン-1-アミン (0.435 g, 0.884 mmol, 収率32%) を得た。
ESI-MS m/z: 493 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.02 (s, 18H), 0.88 (s, 27H), 1.38-1.43 (m, 2H), 2.71-2.75 (m, 2H), 3.40 (s, 6H). 
工程4
工程3で得られた 4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3,3-ビス((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)ブタン-1-アミン (0.200 g, 0.407 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (3 mL) 溶液に、38%ホルムアルデヒド水溶液 (0.295 mL)、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (0.431 g, 2.03 mmol)を加え、室温で終夜攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、クロロホルムで2回抽出した。有機層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 90/10) で精製することで、4-(tert-ブチルジメチルシリルオキシ)-3,3-ビス((tert-ブチルジメチルシリルオキシ)メチル)-N,N-ジメチルブタン-1-アミンの粗生成物を得た。
得られた粗生成物にテトラヒドロフラン (2 mL) および テトラブチルアンモニウム  フルオリド (東京化成工業社製, 約 1 mol/L テトラヒドロフラン溶液, 2.06 mL, 2.06 mmol) を加え、室温で5時間攪拌した後、60℃て終夜攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、クロロホルムで2回洗浄した。水層を減圧下濃縮した。得られた残渣にアセトン (2 mL)、水酸化ナトリウム (和光純薬工業社製, 2 mol/L 水溶液, 3 mL, 6 mmol)、オレオイル クロリド ( 0.681 mL, 2.06 mmol) を加え、室温にて3時間攪拌した。反応液にオレオイル クロリド (0.681 mL, 2.06 mmol) を加え、60℃にて終夜攪拌した。室温まで冷却後、反応液に水を加え、クロロホルムで2回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 90/10)で精製することで、(Z)-2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オレイルオキシメチル)プロパン-1,3-ジイルジオレートの粗生成物を得た。得られた粗生成物を少量のメタノール-クロロホルム (9:1) に溶解してイオン交換樹脂 (ウォーターズ (Waters) 製, PoraPack Rxn CX, メタノールでプレ洗浄) にロードし、アンモニア (Sigma-Aldirch社製, 2 mol/L メタノール溶液) で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、(Z)-2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オレイルオキシメチル)プロパン-1,3-ジイルジオレート (0.387 g, 0.399 mmol, 収率98%) を得た。
ESI-MS m/z: 971 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.21-1.38 (m, 62H), 1.54-1.65 (m, 6H), 1.97-2.04 (m, 12H), 2.20 (s, 6H), 2.25-2.32 (m, 8H), 4.04 (s, 6H), 5.29-5.39 (m, 6H).
工程5
参考例A1工程2と同様な方法により、2,2’,2’’-ニトリロトリス(エタン-2,1-ジイル)  トリオレアートの代わりに工程4で得られた (Z)-2-(2-(ジメチルアミノ)エチル)-2-(オレイルオキシメチル)プロパン-1,3-ジイルジオレート(0.109 g, 0.112 mol)を用い、標記の化合物 (0.0642 g, 0.0630 mol, 収率56%)を得た。
ESI-MS m/z: 986 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.23-1.37 (m, 74H), 1.55-1.64 (m, 65H), 1.78-1.84 (m, 2H), 1.95-2.06 (m, 13H), 2.35 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.42 (s, 8H), 3.70-3.77 (m, 2H), 4.08 (s, 6H), 5.29-5.39 (m, 6H).【０７７０】
参考例A41
N,N,N-トリメチル-2-(3-(オレオイルオキシ)-2,2-ビス((オレオイルオキシ)メチル)プロポキシ)-2-オキシエタン-1-アミニウム クロリド(化合物II-32)
工程1
米国登録特許8816099号明細書に記載の方法で合成した2,2-(ジメチル-1,3-ジオキサン-5,5-ジイル)ジメタノール (0.200 g, 1.14 mmol)のテトラヒドロフラン (5 mL)溶液にトリエチルアミン (0.475 mL, 3.40 mmol)を加えた後、氷冷下にてオレオイル クロリド(0.854 g, 2.84 mmol)を加え、そのまま氷冷下にて1時間撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=95/5)で精製することにより、(2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-5,5-ジイル)ビス(メチレン) ジオレアート (0.500 g, 0.709 mmol, 収率63%)を得た。
ESI-MS m/z: 705 (M + H)+
工程2
工程1で得られた(2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-5,5-ジイル)ビス(メチレン) ジオレアート(0.500 g, 0.709 mmol)のジクロロメタン (5 mL)溶液に、氷冷下トリフルオロ酢酸 (2.00 mL, 26.0 mmol)を2回に分けて加え、そのまま氷冷下にて1時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=90/10〜50/50)で精製することにより、2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.207 g, 0.311 mmol, 収率44%)を得た。
ESI-MS m/z: 665 (M + H)+
工程3
N,N-ジメチルグリシン (東京化成工業社製, 0.049 g, 0.474 mmol)に塩化チオニル (1 mL, 13.7 mmol)を加え、70℃で30分加熱撹拌した。反応液を室温まで冷却した後、減圧下で濃縮することでN,N-ジメチルグリシノイルクロリドの粗生成物を得た。工程2で得られた2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.207 g, 0.311 mmol)のジクロロメタン (5 mL)溶液に、氷冷下N,N-ジイソプロピルエチルアミン (0.110 mL, 0.632 mmol)、上記N,N-ジメチルグリシノイルクロリドの粗生成物を加え、室温で1時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=90/10〜40/60)で精製することにより、2-(((ジメチルグリシル)オキシ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.077 g, 0.103 mmol, 収率33%)を得た。
ESI-MS m/z: 751 (M + H)+
工程4
工程3で得られた2-(((ジメチルグリシル)オキシ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.0770 g, 0.103 mmol)のジクロロメタン (3 mL)溶液にピリジン (0.0330 mL, 0.411 mmol)を加えた後、氷冷下オレオイル クロリド (0.0620 g, 0.205 mmol)を加え、室温で30分撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサン/酢酸エチル=1/1の混合溶媒で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=95/5)で精製することにより、2-(((ジメチルグリシル)オキシ)メチル)-2-((オレオイル)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.122 g, 0.0600 mmol, 収率59%)を得た。
ESI-MS m/z: 1015 (M + H)+
工程5
工程4で得られた2-(((ジメチルグリシル)オキシ)メチル)-2-((オレオイル)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.122 g, 0.060 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.017 g, 0.016 mmol, 収率27%)を得た。
ESI-MS m/z: 1029 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.19-1.38 (m, 58H), 1.54-1.66 (m, 6H), 1.98-2.04 (m, 12H), 2.28-2.35 (m, 6H), 3.60 (s, 9H), 4.11 (d, J = 1.8 Hz, 6H), 4.20 (s, 2H), 5.08 (s, 2H), 5.29-5.41 (m, 6H).【０７７１】
参考例A42
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス(テトラデカノイルオキシ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-2-アミニウム クロリド(化合物II-33)
工程1
2-(ジメチルアミノ)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (1.50 g,10.1 mmol)をテトラヒドロフラン (10 mL)にピリジン (4.07 mL, 50.3 mmol)、次いでテトラデカノイルクロリド (4.09 mL, 15.1 mmol)を加え、60℃で2時間加熱撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=99/1〜90/10)で精製することにより、2-(ジメチルアミノ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (1.50 g, 1.92 mmol, 収率19%)、2-(ジメチルアミノ)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.750 g, １.32 mmol, 収率13%)、および2-(ジメチルアミノ)-3-ヒドロキシ-2-(ミドロキシメチル)プロピル テトラデカノアート (0.220 g, 0.612 mmol, 収率6%)をそれぞれ得た。
ESI-MS m/z: 781 (M + H)+
ESI-MS m/z: 570 (M + H)+
ESI-MS m/z: 360 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-(ジメチルアミノ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (1.50 g, 1.92 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物(0.530 g, 0.638 mmol, 収率33%)を得た。
ESI-MS m/z: 795 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.21-1.33 (m, 60H), 1.55-1.65 (m, 6H), 2.37 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.71 (s, 9H), 4.59 (s, 6H).【０７７２】
参考例A43
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス(オレオイルオキシ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-2-アミニウム クロリド(化合物II-34)
工程1
参考例A42の工程1で得られた2-(ジメチルアミノ)-3-ヒドロキシ-2-(ミドロキシメチル)プロピル テトラデカノアート (0.220 g, 0.612 mmol)の1,2-ジクロロエタン (3 mL)溶液にピリジン (0.297 mL, 3.67 mmol)、次いでオレオイル クロリド (0.552 g, 1.84 mmol)を加え、60℃で1時間加熱撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=98/2〜85/15)で精製することにより、2-(ジメチルアミノ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.250 g, 0.281 mmol, 収率46%)を得た。
ESI-MS m/z: 889 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-(ジメチルアミノ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオレアート (0.250 g, 0.281 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.065 g, 0.069 mmol, 収率25%)を得た。
ESI-MS m/z: 903 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.38 (m, 60H), 1.56-1.66 (m, 6H), 1.97-2.05 (m, 8H), 2.39 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 3.72 (s, 9H), 4.58 (s, 6H), 5.28-5.40 (m, 4H).【０７７３】
参考例A44
N,N,N-トリメチル-1-(オレイルオキシ)-3-(テトラデカノイルオキシ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-2-アミニウム クロリド(化合物II-35)
工程1
参考例A42の工程1で得られた2-(ジメチルアミノ)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート(0.750 g, １.32 mmol)の1,2-ジクロロエタン (3 mL)溶液にピリジン (0.532 mL, 6.58 mmol)、次いでオレオイル クロリド (0.792 g, 1.84 mmol)を加え、60℃で1時間加熱撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=95/5)で精製することにより、2-(ジメチルアミノ)-2-((オレイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.750 g, 0.899 mmol, 収率68%)を得た。
ESI-MS m/z: 835 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-(ジメチルアミノ)-2-((オレイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.750 g, 0.899 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.092 g, 0.104 mmol, 収率12%)を得た。
ESI-MS m/z: 849 (M)+;  1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.19-1.38 (m, 60H), 1.56-1.65 (m, 6H), 1.98-2.06 (m, 4H), 2.39 (t, J= 7.6 Hz, 6H), 3.72 (s, 9H), 4.59 (s, 6H), 5.30-5.39 (m, 2H).【０７７４】
参考例A45
N,N,N-トリメチル-3-(テトラデカノイルオキシ)-2-((テトラデカオイルオキシ)メチル)-2-(((テトラデシルカルバモイル)オキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム  クロリド(化合物II-36)
工程1
参考例A24の工程1で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (0.820 g, 5.02 mmol)のテトラヒドロフラン (7 mL)溶液に、ピリジン (2.03 mL, 38.6 mmol)を加えた後、氷冷下にてテトラデカノイル クロリド (0.930 mL, 3.77 mmol)を加え、60℃で2時間攪拌した。反応液を室温まで冷却し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=95/5〜70/30)で精製することにより、2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.150 g, 0.257 mmol, 収率5%)を得た。
ESI-MS m/z: 584 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.060 g, 0.103 mmol)のジクロロメタン (3 mL)溶液にトリエチルアミン (0.017 mL, 0.123 mmol)を加え、氷冷下にて4-ニトロフェニルクロロフォルメート (東京化成工業社製, 0.025 g, 0.123 mmol)、次いでテトラデシルアミン (東京化成工業社製, 0.022 g, 0.103 mmol)を加えて、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=95/5〜70/30)で精製することにより、2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(((テトラデシルカルバモイル)オキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.052 g, 0.063 mmol, 収率62%)を得た。
ESI-MS m/z: 824 (M + H)+
工程3
工程2で得られた2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(((テトラデシルカルバモイル)オキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.052 g, 0.063 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.012 g, 0.014 mmol, 収率21%)を得た。
ESI-MS m/z: 838 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.33 (m, 62H), 1.51-1.61 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 4H), 3.13 (dd, J = 14.2, 5.8 Hz, 2H), 3.59 (s, 9H), 4.12 (s, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.21 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 4.25 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 6.72 (t, J = 5.8 Hz, 1H).【０７７５】
参考例A46
N,N,N-トリメチル-3-((オクタデシルカルバモイル)オキシ)-2,2-ビス((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-37)
工程1
参考例A45と同様の方法で、テトラデシルアミンの代わりにステアリルアミン (東京化成工業社製) を用い、標記の化合物 (0.015 g, 0.016 mmol, 通し収率0.5%) を得た。
ESI-MS m/z: 894 (M)+;1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.21-1.34 (m, 70H), 1.51-1.62 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 4H), 3.13 (dd, J = 14.3, 5.8 Hz, 2H), 3.60 (s, 9H), 4.12 (s, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.21 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 4.25 (d, J = 12.2 Hz, 2H), 6.69 (t, J = 5.8 Hz, 1H).【０７７６】
参考例A47
N,N,N-トリメチル-3-(ステアロイルオキシ)-2,2-ビス((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド (化合物II-37)
工程1
“アンゲバンテ・ケミー・インターナショナルエディション (Angewandte Chemie International Edition) ”, 2009年, 第48巻, p.2126 - 2130記載の方法で合成した(5-(ブロモメチル)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-5-イル)メタノール (1.00 g, 4.18mmol)のピリジン (10 mL)溶液に、ステアロイルクロリド (2.53 g, 8.36 mmol)を加え、室温で30分撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=90/10)で精製することにより、(5-(ブロモメチル)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-5-イル)メチル ステアラート(0.95 g, 1.879 mmol, 収率45 %)を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.23-1.40 (m, 44H), 1.54-1.64 (m, 26H), 2.01-2.08 (m, 12H), 2.35 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 2.77 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 3.40 (s, 9H), 4.46 (s, 6H), 4.70 (s, 2H), 28-5.42 (m, 12H), 9.54 (br s, 1H).
工程2
工程1で得られた(5-(ブロモメチル)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-5-イル)メチル ステアラート (0.95 g, 1.879 mmol)のN,N-ジメチルアホルムアミド (10 mL)溶液に、ジメチルアミン (2.0 mol/L テトラヒドロフラン溶液, 5.64 mL, 11.3 mmol)を加え、マイクロウェーブ照射下、120℃で13時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=99/1〜90/10)で精製することにより、(5-((ジメチルアミノ)メチル)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-5-イル)メチル ステアラート(0.14 g, 0.298 mmol, 収率16 %) を得た。
ESI-MS m/z: 470 (M + H)+
工程3
参考例A41の工程2と同様の方法で、工程1で得られた(5-((ジメチルアミノ)メチル)-2,2-ジメチル-1,3-ジオキサン-5-イル)メチル ステアラート (0.140 g, 0.298 mmol)を用い、3-(ジメチアミノ)-2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロピル ステアラート (0.12g, 0.279 mmol, 収率94 %)を得た。
ESI-MS m/z: 430 (M + H)+
工程4
工程3で得られた3-(ジメチアミノ)-2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロピル ステアラート (0.12 g, 0.279 mmol)のジクロロメタン (2 mL)溶液に、ピリジン (0.122 mL, 1.51 mmol)を加えた後、氷冷下にてテトラデカノイルクロリド (0.224 g, 0.98 mmol)を加え、室温で1時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル=95/5)で精製することにより、2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.150 g, 0.176 mmol, 収率63%)を得た。
ESI-MS m/z: 851 (M + H)+
工程5
工程4で得られた-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.150 g, 0.176 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物(0.032 g, 0.056 mmol, 収率32%)を得た。
ESI-MS m/z: 865 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.19-1.33 (m, 68H), 1.54-1.65 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.63 (s, 9H), 3.95 (s, 2H), 4.29 (s, 6H).【０７７７】
参考例A48
N,N,N-トリメチル-3-(((Z)-テトラデカ-9-エンオイル)オキシ)-2,2-ビス((((Z)-テトラデカ-9-エンオイル)オキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-39)
工程1
ミリストレイン酸 (Nu-Chek Prep,Inc社製, 2.50 g, 11.0 mmol)のジクロロメタン(20 mL)溶液に塩化チオニル (1.61 mL, 22.1 mmol)とN,N-ジメチルホルムアミド (8.55 mL, 0.110 mmol)を加えて、室温で1時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮することで、ミリストレイル クロリドの粗生成物(2.70 g, 11.04 mmol, 収率100%)を得た。
工程2
参考例A33と同様の方法で、パルミトイルクロリドの代わりに工程1で得られたミリストレイル クロリド (1.88 g, 7.66 mmol) を用い、標記の化合物 (0.350 g, 0.417 mmol, 通し収率27%) を得た。
ESI-MS m/z:803 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.86-0.94 (m, 9H), 1.26-1.39 (m, 36H), 1.53-1.64 (m, 6H), 1.97-2.07 (m, 12H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.67 (s, 9H), 3.99 (s, 2H), 4.30 (s, 6H), 5.29-5.39 (m, 6H).【０７７８】
参考例A49
2-((4-((1,3-ビス(テトラデカノイルオキシ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-2-イル)アミノ)-4-オキソブタノイル)オキシ)-N,N,N-トリメチルエタン-1-アミニウム クロリド(化合物II-40)
工程1
“オーストラリアン・ジャーナル・オブ・ケミストリー(Australian Journal of Chemistry) ”, 2013年, 第66巻, p.23 - 29記載の方法に準じた方法で合成した4-((1,3-ビス(テトラデカノイルオキシ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-2-イル)アミノ)-4-オキソブタン酸 (0.250 g, 0.293 mmol)のジクロロメタン (3 mL)溶液に1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド (0.084 g, 0.440 mmol)、2-(ジメチルアミノ)エタン-1-オール (東京化成工業社製, 0.039 g, 0.440 mmol), 4-ジメチルアミノピリジン (0.036 g, 0.293 mmol)を順番に加えて、室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=99/1〜90/10)で精製することにより、2-(4-(2-(ジメチルアミノ)エトキシ)-4-オキソブタンアミド)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.200 g, 0.217 mmol, 収率74%)を得た。
ESI-MS m/z: 924 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-(4-(2-(ジメチルアミノ)エトキシ)-4-オキソブタンアミド)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.200 g, 0.217 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.150 g, 0.154 mmol, 収率71%)を得た。
ESI-MS m/z: 938 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.20-1.34 (m, 60H), 1.56-1.65 (m, 6H), 2.34 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 2.54 (br s, 4H), 3.48 (s, 9H), 4.13-4.21 (m, 2H), 4.40 (s, 6H), 4.57-4.65 (m, 2H), 6.22 (s, 1H).【０７７９】
参考例A50
3-((4-((1,3-ビス(テトラデカノイルオキシ)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-2-イル)アミノ)-4-オキソブタノイル)オキシ)-1-メチルキヌクリジン-1-ニウム クロリド(化合物II-41)
参考例A49と同様の方法で、2-(ジメチルアミノ)エタン-1-オールの代わりにクヌクリジン-3-オール (東京化成工業社製)を用い、標記の化合物 (0.350 g, 0.417 mmol, 通し収率46%) を得た。
ESI-MS m/z: 976 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.18-1.35 (m, 66H), 1.55-1.66 (m, 6H), 1.97-2.10 (m, 1H), 2.14-2.26 (m, 2H), 2.45-2.70 (m, 6H), 3.34 (s, 3H), 3.61-4.07 (m, 6H), 4.41 (s, 6H), 5.03-5.10 (m, 1H), 6.50 (s, 1H).【０７８０】
参考例A51
N,N,N-トリメチル-16,22-ジオキソ-19-(((テトラデシルカルバモイル)オキシ)メチル)-17,21-ジオキサ-15,23-ジアザヘプタトリアコンタン-19-アミニウム クロリド (化合物II-42)
工程1
2-(ジメチルアミノ)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (0.15 g,1.01 mmol)にトルエン (4 mL)、トリエチルアミン (0.280 mL, 2.01 mmol)、1-テトラデカンイソシアナート (1.66 mL, 6.03 mmol)を順に加え、マイクロ波反応装置で100℃、 4時間反応させた。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=99/1〜90/10)で精製することにより、2-(ジメチルアミノ)-2-(((テトラデシルカルバモイル)オキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ビス(テトラデシルカルバマート) (0.872 g, 1.01 mmol, 収率100%)を得た。
ESI-MS m/z: 868 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-(ジメチルアミノ)-2-(((テトラデシルカルバモイル)オキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ビス(テトラデシルカルバマート) (0.872 g, 1.01 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.761 g, 0.829 mmol, 収率82%)を得た。
ESI-MS m/z: 882 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.32 (m, 66H), 1.47-1.56 (m, 6H), 3.13 (td, J = 14.3, 6.0 Hz, 6H), 3.58 (s, 9H), 4.52 (s, 6H), 6.69 (t, J = 6.0 Hz, 3H).【０７８１】
参考例A52
N,N,N-トリメチル-1,3-ビス(3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカノイルオキシ)-2-((3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカノイル)メチル)プロパン-2-アミニウム  クロリド (化合物II-43)
2-ジメチルアミノ-2-ヒドロキシメチルプロパン-1,3-ジオール (0.0170 g, 0.112 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (1 mL) 溶液に3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカン酸 (0.1826 g, 0.561 mmol)、((((1-シアノ-2-エトキシ-2-オキソエチリデン)アミノ)オキシ) -4-モルホリノメチレン)ジメチルアンモニウムヘキサフルオロりん酸塩 (Sigma-Aldirch社製, 0.240 g, 0.561 mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン (0.098 mL, 0.561 mmol)を加えて、60℃で終夜攪拌した。室温まで冷却後、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 95/5) で精製して2-(ジメチルアミノ)-2-((3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイルジイル ビス(3,7,11,15-テトラメチルヘキサデカノアート)の粗生成物を得た。得られた粗生成物にヨウ化メチル (1.00 mL, 16.0 mmol) を加え、室温で終夜撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1)に溶解してイオン交換樹脂 (Dow Chemical製, Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄) にロードし、メタノール-クロロホルム(1:1)で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 90/10) で精製して標記の化合物 (0.0766 g, 0.071 mmol, 収率63%)を得た。
ESI-MS m/z: 1043 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.81-0.87 (m, 36H), 0.92 (d, J = 6.7 Hz, 9H), 0.97-1.42 (m, 60H), 1.51 (tt, J= 19.8, 6.7 Hz, 3H), 1.84-1.97 (m, 3H), 2.16 (ddd, J = 15.5, 8.4, 2.3 Hz, 3H), 2.38 (ddd, J = 15.5, 5.6, 1.6 Hz, 3H), 3.72 (s, 9H), 4.55 (s, 6H).【０７８２】
参考例A53
N,N,N-トリメチル-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)-2-テトラデシルヘキサデカン-1-アミニウム クロリド(化合物II-44)
参考例A19と同様の方法で、参考例A19工程1で用いる(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナートと工程4で用いる(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸の代わりにそれぞれ1-ブロモテトラデカン(東京化成工業社製)、ミリスチン酸(東京化成工業社製)を用い、標記の化合物 (0.292 g, 0.39 mmol, 通し収率22%)を得た。
ESI-MS m/z: 721 (M)+; 1H-NMR (CD3OD) δ: 0.90 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.28-1.32 (m, 70H), 1.49 (br s, 2H), 1.63-1.66 (m, 2H), 2.42 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.26 (s, 9H), 3.43 (s, 2H), 4.18 (s, 2H). 【０７８３】
参考例A54
2-ヘキサデシル-N,N,N-トリメチル-2-((パルミトイルオキシ)メチル)オクタデカン-1-アミニウム クロリド (化合物II-45)
参考例A19と同様の方法で、参考例A19工程1で用いる(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナートと工程4で用いる(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸の代わりに、それぞれ1-ブロモヘキサデカン (東京化成工業社製)、パルミチン酸 (東京化成工業社製)を用い、標記の化合物 (0.195 g, 0.23 mmol, 通し収率5%)を得た。
ESI-MS m/z: 805 (M)+; 1H-NMR (CD3OD) δ: 0.90 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.28-1.33 (m, 82H), 1.49 (br s, 2H), 1.63-1.67 (m, 2H), 2.43 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.26 (s, 9H), 3.43 (s, 2H), 4.18 (s, 2H).【０７８４】
参考例A55
N,N,N-トリメチル-2-((ステアロイルオキシ)メチル)-2-テトラデシルヘキサデカ-1-アミニウム クロリド (化合物II-46)
参考例A19と同様の方法で、参考例A19工程1で用いる(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル  メタンスルホナートと工程4で用いる(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸の代わりに、それぞれ1-ブロモテトラデカン (東京化成工業社製)、ステアリン酸 (東京化成工業社製)を用い、標記の化合物 (0.421 g, 0.52 mmol, 通し収率20%)を得た。
ESI-MS m/z: 777 (M)+; 1H-NMR (CD3OD) δ: 0.90 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.29-1.33 (m, 78H), 1.49 (br s, 2H),1.63-1.67 (m, 2H), 2.43 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 3.27(s, 9H), 3.44 (s, 2H), 4.18 (s, 2H).【０７８５】
参考例A56
3-(ドデカノイルオキシ)-N,N,N-トリメチル-2,2-ビス((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド (化合物II-47)
参考例A46と同様の方法で、参考例A46工程1で用いるステアロイルクロリドと工程4で用いるテトラデカノイルクロリドの代わりに、それぞれラウロイルクロリド (東京化成工業社製)、ステアロイルクロリド (東京化成工業社製)を用い、標記の化合物 (0.200 g, 0.417 mmol, 通し収率0.3%)を得た。
ESI-MS m/z: 893 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.21-1.32(m, 72H), 1.57-1.64 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.63 (s, 9H), 3.99 (s, 2H), 4.29 (s, 6H).【０７８６】
参考例A57
3-(ドデカノイルオキシ)-N,N,N-トリメチル-2,2-ビス((パルミトイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-48)
参考例A47と同様の方法で、参考例A47工程1で用いるステアロイルクロリドと工程4で用いるテトラデカノイルクロリドの代わりに、それぞれラウロイルクロリド (東京化成工業社製)、パルミトイルクロリド (和光純薬工業社製)を用い、標記の化合物 (0.350 g, 0.40 mmol, 通し収率0.6%)を得た。
ESI-MS m/z: 837 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.21-1.33(m, 64H), 1.56-1.64 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.66 (s, 9H), 3.98 (s, 2H), 4.29 (s, 6H).【０７８７】
参考例A58
3-(ドデカノイルオキシ)-2-((ドデカノイルオキシ)メチル)-N,N,N-トリメチル-2-((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-49)
参考例A47と同様の方法で、参考例A47工程4で用いるテトラデカノイルクロリドの代わりにラウロイルクロリド (東京化成工業社製)を用い、標記の化合物 (0.210 g, 0.249 mmol, 通し収率0.3%)を得た。
ESI-MS m/z: 809 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.23-1.34(m, 60H), 1.53-1.65 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.63 (s, 9H), 3.97 (s, 2H), 4.29 (s, 6H).【０７８８】
参考例A59
N,N,N-トリメチル-3-(パルミトイルオキシ)-2-((パルミトイルオキシ)メチル)-2-((ステアロイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-50)
参考例A47と同様の方法で、参考例A47工程4で用いるテトラデカノイルクロリドの代わりに、パルミトイルクロリド (東京化成工業社製)を用い、標記の化合物 (0.420 g, 0.44 mmol, 通し収率0.5%)を得た。
ESI-MS m/z: 921 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.9 Hz, 9H), 1.21-1.32(m, 76H), 1.55-1.65 (m, 6H), 2.38 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 3.67 (s, 9H), 399 (s, 2H), 4.29 (s, 6H).【０７８９】
参考例A60
3-(イコサノイルオキシ)-N,N,N-トリメチル-2,2-ビス((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-51)
参考例A47と同様の方法で、参考例A47工程1で用いるステアロイルクロリドの代わりに、エイコサノイル クロリド (Nu-Chek Prep,Inc.社製)を用い、標記の化合物を得る。【０７９０】
参考例A61
3-(ドデカノイルオキシ)-2-((ドデカノイルオキシ)メチル)-2-((イコサノイルオキシ)メチル)-N,N,N-トリメチルプロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-52)
参考例A47と同様の方法で、参考例A47工程1で用いるステアロイル クロリドと工程4で用いるテトラデカノイル クロリドの代わりに、それぞれエイコサノイル クロリド (Nu-Chek Prep,Inc.社製)、ラウロイル クロリド (和光純薬工業社製)を用い、標記の化合物を得る。【０７９１】
参考例A62
N,N,N-トリメチル-3-(メチル(3-(テトラデカノイルオキシ)-2,2-ビス((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロピル)アミノ)プロパン-1-アミニウム クロリド(化合物II-53)
工程1
2-(ブロモメチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (0.15 g, 0.754 mmol)のN,N-ジメチルアセトアミド(1 mL)溶液に、N,N,N’-トリメチルプロパン-1,3-ジアミン (0.263 g, 2.26 mmol)を加え、マイクロ波反応装置で100℃、 2時間反応させた。その後、氷冷下でN,N-ジイソプロピルエチルアミン (0.395 mL, 2.26 mmol)、次いでテトラデカノイル クロリド(1.12 g, 4.52 mmol)を加え、室温で2時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=99/1〜90/10)で精製することにより、2-(((3-(ジメチルアミノ)プロピル)(メチル)アミノ)メチル)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.040 g, 0.046 mmol, 収率6%)を得た。
ESI-MS m/z: 866 (M + H)+
工程2
工程1で得られた2-(((3-(ジメチルアミノ)プロピル)(メチル)アミノ)メチル)-2-((テトラデカノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジテトラデカノアート (0.040 g, 0.046 mmol)を用い、参考例A1工程2と同様にして、標記化合物 (0.015 g, 0.016 mmol, 収率35%)を得た。
ESI-MS m/z: 880 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.20-1.35 (m, 62H), 1.54-1.65 (m, 6H), 1.87-2.03 (m, 2H), 2.21-2.31 (m, 2H), 2.31 (t, J = 7.6 Hz, 6H), 2.49 (br s, 3H), 3.40 (s, 9H), 3.52-3.63 (m, 2H), 4.05 (s, 6H).【０７９２】
参考例A63
(S)-6-(ジ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミノ)-N,N,N-トリメチル-5-オレアミド-6-オキソヘキサン-1-アミニウム クロリド (化合物III-2)
工程1
アンモニア (約2 mol/Lメタノール溶液、18.0 mL、36.0 mmol)に、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (1.55 g, 4.50 mmol) を加え、マイクロ波反応装置を用いて130℃で3時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで5回抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮することで(Z)-オクタデカ-9-エニルアミンの粗生成物を得た。
得られた粗生成物に(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (1.24 g, 3.60 mmol) および50%水酸化ナトリウム水溶液 (1.44 g、18.0 mmol)を加え、油浴上110℃で60分間攪拌した。室温まで冷却後、反応液を酢酸エチルで希釈し、水、ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール=100/0〜95/5)で精製することにより、(9Z,12Z)-ジ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミン (0.838 g, 1.631 mmol, 収率36%)を得た。
ESI-MS m/z: 515 (M + H)+; 1H-NMR(CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 1.26-1.38 (m, 32H), 1.45-1.54 (m, 4H), 2.05 (q, J = 6.6 Hz, 8H), 2.60 (t, J = 7.1 Hz, 4H), 2.77 (t, J = 5.9 Hz, 4H), 5.29-5.43 (m, 8H).
工程2
(S)-2-アミノ-6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)ヘキサン酸 (1.94 g, 7.88 mmol) のアセトン(5 mL) 溶液に、水酸化ナトリウム (2 mol/L 水溶液, 5 mL)、オレオイル クロリド (2.09 g, 6.89 mmol) を加え、室温にて終夜攪拌した。反応液に塩酸水溶液 (6 mol/L) を加えてクロロホルムで2回抽出した。有機層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール= 90/10〜80/20) で精製することにより (S)-6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-2-オレアミドヘキサン酸 (2.50 g, 4.89 mmol, 収率71%) を得た。
ESI-MS m/z: 510 (M - H)-; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.87 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.20-1.54 (m, 33H), 1.57-1.68 (m, 2H), 1.71-1.93 (m, 2H), 1.96-2.05 (m, 4H), 2.18-2.29 (m, 2H), 3.07-3.16 (m, 2H), 4.50-4.60 (m, 1H), 4.63-4.76 (m, 1H), 5.28-5.39 (m, 2H), 6.49-6.57 (m, 1H). 
工程3
工程2で得られた (S)-6-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-2-オレアミドヘキサン酸 (0.291 g, 0.570 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (4 mL) 溶液に、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロフォスフェート ( 0.433 g, 1.14 mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.498 mL, 2.85 mmol)、工程1で得られた (9Z,12Z)-ジ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミン (0.293 g, 0.570 mmol) を加え、室温にて4時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで2回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 80/20) で精製することにより tert-ブチル(S)-6-(ジ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミノ)-5-オレアミド-6-オキソヘキシルカルバマート (0.489 g, 0.486 mmol, 収率85%) を得た。
ESI-MS m/z: 1008 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.85-0.92 (m, 9H), 1.20-1.72 (m, 73H), 1.97-2.08 (m, 12H), 2.18 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.74-2.80 (m, 4H), 3.02-3.34 (m, 5H), 3.44-3.53 (m, 1H), 4.55-4.63 (m, 1H), 4.88 (td, J = 8.2, 4.6 Hz, 1H), 5.28-5.43 (m, 10H), 6.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H).
工程4
工程3で得られた tert-ブチル (S)-6-(ジ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミノ)-5-オレアミド-6-オキソヘキシルカルバマート (0.459 g, 0.456 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (2 mL) 溶液にトリフルオロ酢酸 (0.500 mL, 6.49 mmol) を加え、室温にて1時間攪拌した。反応液を減圧濃縮した後、残渣にクロロホルムと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで2回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 90/10〜80/20) で精製することにより N-((S)-6-アミノ-1-(ジ ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アミノ)-1-オキソヘキサン-2-イル)オレアミド (0.259 g, 0.286 mmol, 収率63%) を得た。 
ESI-MS m/z: 907 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.86-0.91 (m, 9H), 1.20-1.71 (m, 64H), 1.96-2.09 (m, 12H), 2.21 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.73-2.88 (m, 6H), 3.08-3.47 (m, 4H), 4.81-4.88 (m, 1H), 5.28-5.43 (m, 10H), 6.67 (br s, 1H). 
工程5
工程4で得られた N-((S)-6-アミノ-1-(ジ ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アミノ)-1-オキソヘキサン-2-イル)オレアミド (0.137 g, 0.151 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (1 mL) 溶液に、38%ホルムアルデヒド水溶液 (0.300 mL)、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (0.096 g, 0.453 mmol)を加え、室温で終夜攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、クロロホルムで2回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 50/50) で精製することで、N-((S)-1-(ジ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミノ)-6-(ジメチルアミノ)-1-オキソヘキサン-2-イル)オレアミド (0.122 g, 0.130 mmol, 収率86%) を得た。
ESI-MS m/z: 936 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.83-0.93 (m, 9H), 1.12-1.77 (m, 64H), 1.95-2.25 (m, 22H), 2.73-2.80 (m, 4H), 3.04-3.15 (m, 1H), 3.20-3.34 (m, 2H), 3.44-3.54 (m, 1H), 4.85-4.91 (m, 1H), 5.28-5.43 (m, 10H), 6.28 (d, J= 8.6 Hz, 1H).
工程6
参考例A8工程2と同様な方法で、(9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(ジメチルアミノ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデク-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル ジオクタデク-9,12-ジエノアートの代わりに工程5で得られた N-((S)-1-(ジ(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミノ)-6-(ジメチルアミノ)-1-オキソヘキサン-2-イル)オレアミド  (0.104 g, 0.111 mol)を用いて標記の化合物 (0.0707 g, 0.0718 mol, 65%)を得た。
ESI-MS m/z: 950 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.85-0.91 (m, 9H), 1.21-1.83 (m, 64H), 1.97-2.08 (m, 12H), 2.19 (t, J= 7.7 Hz, 2H), 2.74-2.80 (m, 4H), 3.05-3.84 (m, 15H), 4.82-4.90 (m, 1H), 5.28-5.43 (m, 10H), 6.41-6.46 (m, 1H).【０７９３】
参考例A64
(S)-N,N,N-トリメチル-5-(ノナコサン-15-イルオキシ)-1,5-ジオキソ-1-(テトラデシロキシ)ペンタン-2-アミニウム クロリド (化合物III-3)
工程1
ぎ酸エチル (ナカライテスク社製, 2.4 mL, 29.7 mmol) のテトラヒドロフラン (9 mL) 溶液にテトラデシルマグネシウム クロリド (Sigma-Aldrich社製, 1.0 mol/L テトラヒドロフラン溶液, 59.4 mL, 59.4 mmol) を加え、60℃で2時間攪拌した。反応液を氷冷し、水と硫酸 (ナカライテスク社製, 2.0 mol/L水溶液) を加えた。沈殿物を濾取し、ノナコサン-15-オール (6.90 g, 16.2 mmol, 収率55%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 1.22-1.34 (m, 48H), 1.37-1.49 (m, 2H), 3.54-3.64 (m, 1H).
工程2
1-tert-ブチル 2-アミノペンタンジオアート 塩酸塩 (渡辺化学工業社製, 10.0 g, 30.3 mmol) のエタノール (150 mL) 溶液にパラホルムアルデヒド (Sigma-Aldrich社製, 5.50 g, 183 mmol)、シアノ水素化ホウ素ナトリウム (5.70 g, 90.7 mmol) を加え、室温で終夜攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで2回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 35/65) で精製することで、(S)-5-ベンジル 1-tert-ブチル2-(ジメチルアミノ)ペンタンジオアート(8.20 g, 25.5 mmol, 収率84%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 1.48 (s, 9H), 1.95-2.00 (m, 2H), 2.32 (s, 6H), 2.43 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.04 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.12 (s, 6H), 7.29-7.40 (m, 5H).
実工程3
(S)-5-ベンジル 1-tert-ブチル2-(ジメチルアミノ)ペンタンジオアート(8.20 g, 25.5 mmol) のエタノール (200 mL) 溶液に、パラジウム-炭素 (東京化成工業社製, パラジウム10%, 約55%水湿潤品, 820 mg)を加え、水素雰囲気下、室温で7時間攪拌した。不溶物をセライトろ過にて除去し、ろ液を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ジクロロメタン/メタノール= 85/15) で精製することで、(S)-5-tert-ブトキシ-4-(ジメチルアミノ)-5-オキソペンタン酸の粗生成物を得た。 (4.83 g, 20.9 mmol, 粗収率82%) を得た。
得られた(S)-5-tert-ブトキシ-4-(ジメチルアミノ)-5-オキソペンタン酸 (4.83 g, 20.9 mmol) の粗生成物に、1.2-ジクロロエタン (200 mL)、工程1で得られたノナコサン-15-オール (9.75 g, 23.0 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (8.01 g, 41.8 mmol)、N,N-ジメチルアミノピリジン (255 mg, 2.09 mmol) を加え、50 ℃で3時間攪拌した。反応液に水を加え、ジクロロメタンで2回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 85/15) で精製することで、(S)-1-tert-ブチル5-ノナコサン-15-イル 2-(ジメチルアミノ)ペンタンジオアート (8.13 g, 12.7 mmol, 収率61%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 1.20-1.38 (m, 48H), 1.46-1.57 (m, 4H), 1.91-2.00 (m, 2H), 2.33-2.41 (m, 8H), 3.05 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 4.82-4.93 (m, 1H).
工程4
工程3で得られた(S)-1-tert-ブチル5-ノナコサン-15-イル 2-(ジメチルアミノ)ペンタンジオアート (8.13 g, 12.7 mmol) のジクロロメタン (40 mL) 溶液に、トリフルオロ酢酸 (20 mL) を加え、40℃で終夜攪拌した。反応液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ジクロロメタン/メタノール = 85/15) で精製することで、(S)-2-(ジメチルアミノ)-5-(ノナコサン-15-イルオキシ)-5-オキソペンタン酸 (6.70 g, 11.5 mmol, 収率90%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.18-1.37 (m, 48H), 1.44-1.60 (m, 4H), 2.00-2.13 (m, 2H), 2.52-2.74 (m, 2H), 2.87 (s, 6H), 3.62-3.73 (m, 1H), 4.80-4.89 (m, 1H).
工程5
工程4で得られた(S)-2-(ジメチルアミノ)-5-(ノナコサン-15-イルオキシ)-5-オキソペンタン酸 (100 mg, 0.172 mmol) の1,2-ジクロロエタン溶液 (2.0 mL) に、(1-シアノ-2-エトキシ-2-オキソエチリデンアミノオキシ)ジメチルアミノ-モルホリノ-カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩 (96.0 mg, 0.224 mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(0.060 mL, 0.344 mmol)をテトラデカン-1-オール () を加え、室温で終夜攪拌した。反応液に水を加えてジクロロメタンで抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル= 95/5〜85/15)で精製することで、(S)-5-ノナコサン-15-イル 1-テトラデシル 2-(ジメチルアミノ)ペンタンジオアート (64.0 mg, 0.0822 mmol, 収率48%) を得た。1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 9H), 1.12-1.39 (m, 70H), 1.45-1.69 (m, 6H), 1.93-2.03 (m, 2H), 2.29-2.38 (m, 8H), 3.16 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.03-4.17 (m, 2H), 4.80-4.91 (m, 1H).
工程6
参考例A8工程2と同様な方法で、(9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(ジメチルアミノ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデク-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル  ジオクタデク-9,12-ジエノアートの代わりに工程5で得られる (S)-5-ノナコサン-15-イル 1-テトラデシル 2-(ジメチルアミノ)ペンタンジオアートを用いて標記化合物を得る。【０７９４】
参考例A65
(S)-1-(ドデシルオキシ)-N,N,N-トリメチル-5-(ノナコサン-15-イルオキシ)-1,5-ジオキソペンタン-2-アミニウム クロリド (化合物III-4)
参考例A64と同様な方法で、参考例A64工程5のテトラデカン-1-オールの代わりにドデカン-1-オールを用いて標記の化合物を得る。【０７９５】
参考例A66
(S)-1-(ヘキサデシルオキシ)-N,N,N-トリメチル-5-(ノナコサン-15-イルオキシ)-1,5-ジオキソペンタン-2-アミニウム  クロリド (化合物III-5)
参考例A64と同様な方法で、参考例A64工程5のテトラデカン-1-オールの代わりにヘキサデカン-1-オールを用いて標記の化合物を得る。【０７９６】
参考例A67
(S)-N,N,N-トリメチル-5-(ノナコサン-15-イルオキシ)-1-(オクタデシルオキシ)-1,5-ジオキソペンタン-2-アミニウム クロリド (化合物III-6)
参考例A64と同様な方法で、参考例A64工程5のテトラデカン-1-オールの代わりにオクタデカン-1-オールを用いて標記の化合物を得る。【０７９７】
参考例A68
(S,Z)-N,N,N-トリエチル-5-(ノナコサン-15-イルオキシ)-1-(オクタデカ-9-エニルオキシ)-1,5-ジオキソペンタン-2-アミニウム クロリド (化合物III-7)
参考例A64と同様な方法で、参考例A64工程5のテトラデカン-1-オールの代わりに(Z)-オクタデカ-9-エン-1-オールを用いて標記の化合物を得る。【０７９８】
参考例A69
(6Z,9Z,28Z,31Z)-N,N-ジメチル-N-(2-(N-メチルステアルアミド)エチル)ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-アミニウム クロリド (化合物IV-2)
工程1
国際公開第2010/042877号に記載の方法に準じた方法で得られた(6Z,9Z,28Z,31Z)-ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-オン (0.50 g, 0.256 mmol)の1,2-ジクロロエタン (2 mL)溶液に、メタノール (2 mL)、N1,N2-ジメチルエタン-1,2-ジアミン (東京化成工業社製, 0.085 mL, 0.767 mmol)、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (0.325 g, 1.53 mmol) を加え、50℃で5時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで2回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 90/10〜80/20) で精製して N1-((6Z,9Z,28Z,31Z)-ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-イル)-N1,N2-ジメチルエタン-1,2-ジアミン (0.0303 g, 0.0506 mmol, 収率20%) を得た。
ESI-MS m/z: 600 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 1.13-1.45 (m, 40H), 2.01-2.09 (m, 8H), 2.14 (s, 3H), 2.28-2.40 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.52-2.60 (m, 4H), 2.75-2.80 (m, 4H), 5.29-5.42 (m, 8H). 
工程2
工程1で得られた N1-((6Z,9Z,28Z,31Z)-ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-イル)-N1,N2-ジメチルエタン-1,2-ジアミン (0.0258 g, 0.0431 mmol) の1,2-ジクロロエタン (1 mL) 溶液に、ステアロイル クロリド (0.039 0g, 0.129 mmol)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン (0.038 mL, 0.215 mmol)を加えて、室温で1時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで2回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 90/10) で精製して N-(2-((6Z,9Z,28Z,31Z)-ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-イル(メチル)アミノ)エチル)-N-メチルステアルアミドの粗生成物を得た。
得られた粗生成物にヨウ化メチル (1.00 mL, 16.0 mmol) を加え、50℃で1時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1) に溶解してイオン交換樹脂 (Dow Chemical製, Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄) にロードし、メタノール-クロロホルム (1:1) で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 80/20) で精製して標記の化合物 (0.0149 g, 0.0163 mmol, 収率38%)を得た。
ESI-MS m/z: 881 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.84-0.92 (m, 9H), 1.20-2.09 (m, 78H), 2.27-2.38 (m, 2H), 2.74-2.80 (m, 4H), 3.14-3.45 (m, 9H), 3.77-4.09 (m, 5H), 5.28-5.43 (m, 8H).【０７９９】
参考例A70
(9Z,12Z)-N,N-ジメチル-N-(3-((9Z,12Z)-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタデカ-9,12-ジエンアミド)プロピル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミニウム クロリド (化合物IV-3)
工程1
(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル  メタンスルホナート (0.838 g, 2.43 mmol) に3-アミノプロパン-1-オール (1.66 g, 21.9 mmol) を加えて、90℃にて3時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をアミノシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル) で精製して 3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミノ)プロパン-1-オール (0.722 g, 2.23 mmol, 収率92%) を得た。
ESI-MS m/z: 325 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.26-1.39 (m, 17H), 1.46 (tt, J = 7.1, 6.9 Hz, 3H), 1.69 (tt, J = 5.7, 5.4 Hz, 2H), 2.02-2.08 (m, 4H), 2.60 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.75-2.80 (m, 2H), 2.88 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 3.81 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 5.30-5.42 (m, 4H). 
工程2
参考例A63工程5と同様な方法により、N-((S)-6-アミノ-1-(ジ ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アミノ)-1-オキソヘキサン-2-イル)オレアミドの代わりに工程1で得られた 3-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルアミノ)プロパン-1-オール (0.233 g, 0.722 mol) を用い、3-(メチル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミノ)プロパン-1-オール (0.220 g, 0.652 mol, 収率90%)を得た。
ESI-MS m/z: 338 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.24-1.40 (m, 16H), 1.47 (tt, J = 7.6, 7.0 Hz, 2H), 1.69 (tt, J = 5.7, 5.2 Hz, 2H), 2.01-2.08 (m, 4H), 2.23 (s, 3H), 2.34 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.59 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.75-2.80 (m, 2H), 3.80 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 5.29-5.42 (m, 4H).
工程3 
(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (2.85 g, 8.27 mmol) のアセトニトリル(30 mL) 溶液に、炭酸セシウム (6.74 g, 20.7 mmol)、よう化テトラ‐ｎ‐ブチルアンモニウム (3.05 g, 8.27 mmol)および N-(tert-ブトキシカルボニル)-2-ニトロベンゼンスルホンアミド (2.50 g, 8.27 mmol) を加えて、加熱還流下3時間攪拌した。反応液を室温まで冷却し、水を加えて酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 70/30) で精製して tert-ブチル 2-ニトロフェニルスルホニル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)カルバマート (3.21 g, 5.83 mmol) を得た。
得られた tert-ブチル 2-ニトロフェニルスルホニル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)カルバマート (3.21 g, 5.83 mmol) のジクロロメタン (23 mL) 溶液にトリフルオロ酢酸 (9.63 mL, 126 mmol) を加えて、室温で0.5時間攪拌した。反応液をジクロロメタンで希釈し、水酸化ナトリウム水溶液 (1 mol/L) と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 95/5) で精製して2-ニトロ-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)ベンゼンスルホンアミド (2.48 g, 5.50 mmol, 収率67 %) を得た。
ESI-MS m/z: 338 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.22-1.39 (m, 16H), 1.52 (m, 2H), 2.01-2.05 (m, 4H), 2.77 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.09 (q, J = 6.7 Hz, 2H), 5.23 (m, 1H), 5.31-5.42 (m, 4H), 7.71-7.76 (m, 2H), 7.78-7.87 (1H), 813-8.15 (m, 1H).
工程4
工程2で得られた 3-(メチル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミノ)プロパン-1-オール (0.220 g, 0.652 mol) のテトラヒドロフラン (4 mL) 溶液に、工程3で得られた 2-ニトロ-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)ベンゼンスルホンアミド (0.441 g, 0.978 mmol)、トリフェニルホスフィン (0.257 g, 0.978 mmol)、アゾジカルボン酸ジエチル (ナカライテスク社製、40%トルエン溶液, 0.387 mL, 0.851 mmol) を加えて、50℃にて2時間攪拌した。反応液を室温まで冷却し、飽和食塩水を加えてヘキサンで2回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 80/20) で精製してN-(3-(メチル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミノ)プロピル)-2-ニトロ-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)ベンゼンスルホンアミドの粗生成物を得た。
得られたN-(3-(メチル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミノ)プロピル)-2-ニトロ-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)ベンゼンスルホンアミドの粗生成物のアセトニトリル (5 mL) 溶液に、ドデカン-1-チオール (0.409 mL, 1.63 mmol) と 1,8-ジアザビシクロ [5.4.0]-7-ウンデセン (0.246 mL, 1.630 mmol) を加えて、60℃で2時間攪拌した。反応液に水を加えてヘキサンで2回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 75/25) で精製して N1-メチル-N1,N3-ジ ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)プロパン-1,3-ジアミン(0.212 g, 0.363 mmol, 収率56%) を得た。
ESI-MS m/z: 586 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.22-1.51 (m, 36H), 1.66 (tt, J = 7.2, 7.1 Hz, 2H), 2.01-2.08 (m, 8H), 2.20 (s, 3H), 2.29 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.36 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.58 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.62 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.75-2.80 (m, 4H), 5.29-5.43 (m, 8H).
工程5
工程4で得られた N1-メチル-N1,N3-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)プロパン-1,3-ジアミン (0.108 g, 0.185 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (1 mL) 溶液に、(9Z, 12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン酸 (0.104 g, 0.370 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (0.106 g, 0.555 mmol)、N,N-ジメチルアミノピリジン (0.0023 g, 0.0188 mmol)を加えて室温で1時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 85/15) で精製して (9Z,12Z)-N-(3-(メチル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミノ)プロピル)-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタデカ-9,12-ジエナミド(0.146 g, 0.172 mmol, 収率93%) を得た。
ESI-MS m/z: 848 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.21-1.74 (m, 54H), 2.01-2.08 (m, 12H), 2.18 (s, 3H), 2.24-2.33 (m, 6H), 2.74-2.80 (m, 6H), 3.18-3.35 (m, 4H), 5.29-5.42 (m, 12H).
工程6
参考例A8工程2と同様な方法で、(9Z,9'Z,12Z,12'Z)-2-(ジメチルアミノ)-2-(((9Z,12Z)-オクタデク-9,12-ジエノイルオキシ)メチル)プロパン-1,3-ジイル  ジオクタデク-9,12-ジエノアートの代わりに工程5で得られた (9Z,12Z)-N-(3-(メチル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミノ)プロピル)-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)オクタデカ-9,12-ジエナミド (0.100 g, 0.118 mmol)を用いて標記の化合物 (0.0804 g, 0.0895 mol, 収率76%)を得た。
ESI-MS m/z: 862 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.22-1.41 (m, 46H), 1.49-1.78 (m, 6H), 1.93-2.10 (m, 14H), 2.30 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.74-2.79 (m, 6H), 3.24-3.35 (m, 8H), 3.36-3.47 (m, 4H), 3.59-3.67 (m, 2H), 5.28-5.42 (m, 12H).【０８００】
参考例A71
(R)-2-((2R,3R,4S)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)テトラヒドロフラン-2-イル)-N,N,N-トリメチル-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)エタンアミニウム クロリド (化合物V’-1)
工程1
(2R,3R,4S)-2-((R)-1,2-ジヒドロキシエチル)テトラヒドロフラン-3,4-ジオール(Sigma-Aldrich社製, 0.315 g, 1.92 mmol) のピリジン (和光純薬工業社製, 10 mL) 溶液に、4,4'-ジメトキシトリチル クロリド (0.704 g, 2.02 mmol)、N,N-ジメチルアミノピリジン(0.047 g, 0.384 mmol) を加えて50℃で終夜攪拌した。室温まで冷却後、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 90/10) で精製して (2R,3R,4S)-2-((R)-2-(ビス(4-メトキシフェニル)フェニル)メトキシ)-1-ヒドロキシエチル)テトラヒドロフラン-3,4-ジオール(0.465 g, 0.997 mmol, 収率52%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 1.67-1.74 (m, 1H), 2.73-2.77 (m, 1H), 3.31 (dd, J = 9.8, 6.2 Hz, 1H), 3.41-3.50 (m, 2H), 3.70 (dd, J = 9.6, 1.3 Hz, 1H), 3.79 (s, 6H), 3.94 (dd, J = 6.2, 3.5 Hz, 1H), 4.10-4.24 (m, 3H), 4.26-4.30 (m, 1H), 6.81-6.86 (m, 4H), 7.20-7.36 (m, 7H), 7.41-7.45 (m, 2H).
工程2
工程1で得られた (2R,3R,4S)-2-((R)-2-(ビス(4-メトキシフェニル)フェニル)メトキシ)-1-ヒドロキシエチル)テトラヒドロフラン-3,4-ジオール(0.0669 g, 0.143 mmol) のテトラヒドロフラン (1 mL) 溶液に、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (0.247 g, 0.717 mmol)、水素化ナトリウム (油性, 60%, 0.0459 g, 1.15 mmol) を加え、加熱還流下で終夜撹拌した。室温まで冷却後、反応液に飽和食塩水を加えてヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 90/10) で精製して(2R,3R,4S)-2-((R)-2-(ビス(4-メトキシフェニル)(フェニル)メトキシ)-1-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)エチル)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)テトラヒドロフランの粗生成物を得た。
得られた(2R,3R,4S)-2-((R)-2-(ビス(4-メトキシフェニル)(フェニル)メトキシ)-1-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)エチル)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)テトラヒドロフランの粗生成物に、ジクロロメタン (1 mL)、トリフルオロ酢酸 (0.0500 mL, 0.649 mmol) を加え、室温で5分攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 70/30) で精製して(R)-2-((2R,3R,4S)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)テトラヒドロフラン-2-イル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)エタノール(0.0531 g, 0.0584 mmol, 収率41%) を得た。
1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 9H), 1.23-1.43 (m, 48H), 1.50-1.62 (m, 6H), 2.01-2.09 (m, 12H), 2.32 (dd, J = 8.2, 4.2 Hz, 1H), 2.74-2.80 (m, 6H), 3.37-3.50 (m, 4H), 3.54-3.69 (m, 3H), 3.69-3.77 (m, 2H), 3.80-3.87 (m, 2H), 3.88-3.95 (m, 2H), 4.06 (dd, J = 9.8, 4.7 Hz, 1H), 5.28-5.42 (m, 12H).
工程3
工程2で得られた (R)-2-((2R,3R,4S)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)テトラヒドロフラン-2-イル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)エタノール(0.0491 g, 0.0540 mmol) のジクロロメタン (1 mL) 溶液に、メタンスルホニルクロリド (純正化学社製, 0.0500 mL, 0.642 mmol)、トリエチルアミン (0.150 mL, 1.08 mmol) を加えて、室温で1時間攪拌した。反応液にメタンスルホニルクロリド (0.0500 mL, 0.642 mmol)、トリエチルアミン (0.150 mL, 1.08 mmol) を加えて、室温で1時間攪拌した。反応液にクロロホルム (1 mL) を加えて、室温にて1時間攪拌した。反応液にメタンスルホニルクロリド (0.0500 mL, 0.642 mmol)、トリエチルアミン (0.150 mL, 1.08 mmol) を加えて、40℃で2時間攪拌した後、加熱還流下2時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えてクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣に、テトラヒドロフラン (1 mL)、ジメチルアミン (2.0 mol/L テトラヒドロフラン溶液, 2 mL, 2.00 mmol) を加え、マイクロ波反応装置を用いて130℃で5時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 95/5) で精製して (R)-2-((2R,3R,4S)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)テトラヒドロフラン-2-イル)-N,N-ジメチル-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)エタンアミンの粗生成物を得た。得られた(R)-2-((2R,3R,4S)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)テトラヒドロフラン-2-イル)-N,N-ジメチル-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)エタンアミンの粗生成物にクロロホルム (0.5 mL)、ヨウ化メチル (1.00 mL, 16.0 mmol) を加え、室温で2時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣を少量のメタノール-クロロホルム (1:1) に溶解してイオン交換樹脂 (Dow Chemical製, Dowex(TM) 1x-2 100 mesh, Cl型, 約20倍量, 水およびメタノールでプレ洗浄) にロードし、メタノール-クロロホルム (1:1) で溶出した。溶出液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 90/10) で精製して標記の化合物 (0.0130 g, 0.0132 mmol, 収率24%)を得た。
ESI-MS m/z: 951 (M)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J= 7.0 Hz, 9H), 1.23-1.40 (m, 48H), 1.51-1.61 (m, 6H), 2.01-2.09 (m, 12H), 2.74-2.80 (m, 6H), 3.34-3.68 (m, 17H), 3.70-3.74 (m, 1H), 3.81-3.84 (m, 1H), 3.93-4.02 (m, 3H), 4.07-4.12 (m, 1H), 5.28-5.43 (m, 12H).【０８０１】
以下に脂質Bの製造方法を示す。【０８０２】
参考例B1
N,N-ジメチル-2,3-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロパン-1-アミン(化合物CL-1)
CL-１は、“ジャ-ナル  オプ  コントロールド  放出（J. Control. Release.)”，2005年，第107巻，p.276-287に記載の方法で合成した。【０８０３】
参考例B2
N-メチル-N,N-ビス(2-((Z)-ヘキサデカ-9-エニルオキシ)エチル)アミン(化合物CL-2)
水素化ナトリウム(油性, 60%, 222 mg, 5.55 mmol)のトルエン(2 mL)懸濁液に、N-メチルジエタノールアミン(東京化成工業社製、82.6 mg, 0.693 mmol)のトルエン (2 mL)溶液を撹拌しながら添加した後、(Z)-ヘキサデカ-9-エニル メタンスルホナート(530 mg, 1.66 mmol)のトルエン(2 mL)溶液を滴下した。得られた混合物を加熱還流下2時間撹拌した。室温まで冷却後、反応を水で停止させた。得られた混合物に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール＝100/0〜98/2)で精製することにより標記の化合物 (199 mg, 0.353 mmol, 収率51%)を得た。
ESI-MS m/z: 565 (M + H)+;【０８０４】
参考例B3
trans-1-メチル-3,4-ビス((((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)メチル)ピロリジン (化合物CL-3)
CL-3は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８０５】
参考例B4
trans-1-メチルピロリジン-3,4-ジイル)ビス(メチレン) (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-ビス(オクタデカ-9,12-ジエノアート)(化合物CL-4)
CL-4は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８０６】
参考例B5
(6Z,9Z,28Z,31Z)-ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-イル 4-(ジメチルアミノ)ブタノアート (化合物CL-5)
CL-5は、国際公開第2010/054401号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 642【０８０７】
参考例B6
3-(ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アミノ)プロパン-1-オール(化合物CL-6)
CL-6は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８０８】
参考例B7
(9Z,12Z)-N-(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン (化合物CL-7)
CL-7は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８０９】
参考例B8
1-メチル-3,3-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アゼチジン (化合物CL-8)
CL-8は、国際公開第2016/002753号に記載の方法で合成した。【０８１０】
参考例B9
N,2-ジメチル-1,3-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロパン-2-アミン (化合物CL-9)
工程1
2-アミノ-2-メチルプロパン-1,3-ジオール (東京化成工業社製, 0.300 g, 4.76 mmol)をテトラヒドロフラン (3 mL)に溶解させ、水素化ナトリウム (油性60%, 0.171 g, 7.13  mmol)を室温で加えた。発泡が収まった後、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル  メタンスルホナート (Nu-Chek Prep,Inc社製, 2.458 g, 7.13 mmol)を加え、加熱環流下2時間撹拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール=100/0〜90/10)で精製することで、2-メチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルオキシ)プロパン-2-アミン (0.280 g, 収率16%)を得た。
ESI-MS m/z: 602 (M + H)+
工程2
工程1で得られる2-メチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルオキシ)プロパン-2-アミン (0.500 g, 0.831 mmol)をジクロロメタン (3 mL)に溶解させ、氷冷下トリエチルアミン (和光純薬工業社製, 2.55 mL, 18.3 mmol)および2-ニトロベンゼン-1-スルホニル クロリド (Sigma-Aldrich社製, 0.368 g, 1.66 mmol)加え、室温に戻した後1時間撹拌した。反応混合物に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=99/1〜85/15)で精製することで、N-(2-メチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルオキシ)プロパン-2-イル)-2-ニトロベンゼンスルホンアミド (0.400 g, 収率61%)を得た。
ESI-MS m/z: 787(M + H)+
工程3
工程2で得られたN-(2-メチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルオキシ)プロパン-2-イル)-2-ニトロベンゼンスルホンアミド (0.200 g, 0.274 mmol)をテトラヒドロフラン (3 mL)に溶解させ、炭酸セシウム (和光純薬工業社製, 0.248 g, 0.726 mmol)およびヨウ化メチル (東京化成工業社製, 0.048 mL, 0.762 mmol)を加え、マイクロ波反応装置を用いて70℃で1時間攪拌した。反応混合物に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、粗生成物としてN-メチル-N-(2-メチル-1,3-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロパン-2-イル)-2-ニトロベンゼンスルホンアミド (0.200 g, 収率91%)を得た。
ESI-MS m/z: 801(M + H)+
工程4
工程3で得られたN-メチル- N-(2-メチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルオキシ)プロパン-2-イル)-2-ニトロベンゼンスルホンアミド (0.200 g, 0.250 mmol)をアセトニトリル (2 mL)に溶解させ、1-ドデカンチオール (東京化成工業社製, 0.149 mL, 0.624 mmol)、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]-7-ウンデセン (ナカライテスク社製, 0.0940 mL, 0.624 mmol)を加え、80℃で1時間撹拌した。反応混合物に水を加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=90/10〜75/25)で精製することにより、化合物CL-9 (0.070 g, 収率46%)を得た。
ESI-MS m/z: 616(M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 1.02 (s, 3H), 1.25-1.40 (m, 32H), 1.50-1.59 (m, 4H), 2.05 (q, J= 6.8 Hz, 8H), 2.32 (s, 3H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 4H), 3.26 (s, 4H), 3.40 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 5.28-5.43 (m, 8H).【０８１１】
参考例B10
メチルジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミン(化合物CL-10)
メチルアミン(Sigma-Aldrich社製, 約2 mol/Lテトラヒドロフラン溶液、10.5 mL、21.0 mmol)に(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート(1.03 g, 3.00 mmol)を加え、マイクロ波反応装置を用いて150℃で90分間加熱撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、2 mol/L水酸化ナトリウム水溶液、ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧下濃縮することでメチル((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル)アミンの粗生成物を得た。
得られた粗生成物に(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート(0.93 g, 2.70 mmol)および50%水酸化ナトリウム水溶液(0.960 g, 12.0 mmol)を加え、油浴上135℃で60分間加熱撹拌した。室温まで冷却後、反応液を酢酸エチルで希釈し、水、ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 100/0〜97/3)で精製することにより化合物CL-10 (1.07 g, 2.03 mmol, 通し収率67 %)を得た。
ESI-MS m/z: 529 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.7 Hz, 6H), 1.29 (br s, 32H), 1.40-1.51 (m, 4H), 1.97-2.06 (m, 8H), 2.20 (s, 3H), 2.30 (t, J = 7.6 Hz, 4H), 2.77 (t, J = 5.8 Hz, 4H), 5.28-5.43 (m, 8H).【０８１２】
参考例B11
N-メチル-2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)-N-(2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)エチル)エタン-1-アミン (化合物CL-11)
CL-11は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８１３】
参考例B12
(3R,4R)-3,4-ビス(((Z)-ヘキサデカ-9-エン-1-イル)オキシ)-1-メチルピロリジン (化合物CL-12)
CL-12は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８１４】
参考例B13
2-(ジメチルアミノ)-N-((6Z,9Z,28Z,31Z)-ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-イル)アセトアミド (化合物CL-13)
CL-13は、国際公開第2013/059496号に記載の方法で合成した。【０８１５】
参考例B14
3-(ジメチルアミノ)プロパン-1,2-ジイル (9Z,9'Z,12Z,12'Z)-ビス(オクタデカ-9,12-ジエノアート) (化合物CL-14)
CL-14は、“バイオケミストリー（BioChemistry)”，1994年，第33巻，p.12573-12580に記載の方法で合成した。【０８１６】
参考例B15
(9Z,12Z)-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アミン (化合物CL-15)
CL-15は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８１７】
参考例B16
ビス(2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)エチル)アミン (化合物CL-16)
CL-16は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８１８】
参考例B17
(9Z,12Z)-N-メチル-N-(2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン (化合物CL-17)
2-(メチルアミノ)エタノール (東京化成工業社製, 0.125 g, 1.66 mmol )をトルエン (2.5 mL)に溶解させ、水素化ナトリウム(油性, 60%, 0.333 g, 8.32 mmol)、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル メタンスルホナート (Nu-Chek Prep,Inc製, 1.32 g, 3.83 mmol)のトルエン (2.5 mL)溶液を順に加え、加熱環流下2時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、エタノール、水を加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール=100/0〜97/3)で精製することにより、化合物CL-17 (0.211 g, 収率22%)を得た。
ESI-MS m/z: 572(M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 1.24-1.38 (m, 32H), 1.43-1.49 (m, 2H), 1.53-1.59 (m, 2H), 2.05 (q, J = 7.2 Hz, 8H), 2.27 (s, 3H), 2.37 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 2.57 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.78 (t, J = 6.8 Hz, 4H), 3.42 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.52 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 5.30-5.41 (m, 8H).【０８１９】
参考例B18
(9Z,12Z)-N-(3-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロピル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン  (化合物CL-18)
CL-18は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 572【０８２０】
参考例B19
(1-メチルピペリジン-3-イル)メチル ジ((11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエン-1-イル)カルバマート (化合物CL-19)
CL-19は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８２１】
参考例B20
(13Z,16Z)-N,N-ジメチル-4-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)ドコサ-3,13,16-トリエン-1-アミン (化合物CL-20)
工程1
国際公開第2009/132131に記載の方法で合成したヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-オン (0.353 g, 0.186 mmol)のテトラヒドロフラン (0.882 mL)溶液に、アルゴン雰囲気下、無水セリウム(III)クロリド (東京化成工業社製, 0.174 g, 0.706 mmol)を加えた。その後、氷冷下にてシクロプロピルマグネシウム ブロミド(Sigma-Aldrich社製, 0.5 mmol/L. 1.06 mL, 0.529 mmol)を加え、5分撹拌した後、室温で1時間撹拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=97/3〜94/6)で精製することにより、(6Z,9Z,28Z,31Z)-19-シクロプロピルヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-オール (0.141 g, 収率70%)を得た。
ESI-MS m/z: 569
工程2
工程1で得られた(6Z,9Z,28Z,31Z)-19-シクロプロピルヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-オール (0.141 g, 0.248 mmol)のジクロロメタン (2 mL)溶液に 室温にて臭化リチウム (Sigma-Aldrich社製, 0.108 g, 1.24 mmol)とクロロトリメチルシラン (東京化成工業社製, 0.135 g, 1.24 mmol)を加えて1時間撹拌した。その後、臭化リチウム (Sigma-Aldrich社製, 0.108 g, 1.24 mmol)とクロロトリメチルシラン (東京化成工業社製, 0.135 g, 1.24 mmol)を追加で加えて1時間撹拌した。
反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、水層をヘキサンで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=100/0〜90/10で精製することにより、(6Z,9Z,28Z,31Z)-19-(3-ブロモプロピリデン)ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン (0.074 g, 収率47%)を得た。
ESI-MS m/z: 632
工程3
工程2で得られた(6Z,9Z,28Z,31Z)-19-(3-ブロモプロピリデン)ヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン (0.074 g, 0.117 mmol)にジメチルアミン (Sigma-Aldrich社製, 2.0 mmol/L テトラヒドロフラン溶液, 1.5 mL,3.0 mmol)を加え、マイクロウェーブ照射下にて90分130℃で加熱撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、水層をヘキサンで抽出した。有機層を飽和食塩水にて洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=97/3〜88/12で精製することにより、CL-20 (0.062 g, 収率69%)を得た。
ESI-MS m/z: 596【０８２２】
参考例B21
(S)-2-アミノ-3-ヒドロキシ-N,N-ビス(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)プロパンアミド (化合物CL-21)
CL-21は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８２３】
参考例B22
(3R,4R)-3,4-ビス(((11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエン-1-イル)オキシ)ピロリジン (化合物CL-22)
CL-22は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８２４】
参考例B23
trans-3,4-ビス((((11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエン-1-イル)オキシ)メチル)-1-メチルピロリジン (化合物CL-23)
CL-23は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８２５】
参考例B24
1-((S)-2,3-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロピル)ピロリジン (化合物CL-24)
CL-24は、国際公開第2009/129395号に記載の方法で合成した。【０８２６】
参考例B25
2-(2,2-ジ((9Z,12Z)-オクタエカ-9,12-ジエン-1-イル)-1,3-ジオキソラン-4-イル)-N,N-ジメチルエタン-1-アミン (化合物CL-25)
CL-25は、国際公開第2010/042877号に記載の方法で合成した。【０８２７】
参考例B26
3-(ジメチルアミノ)プロピル ジ((9Z,12Z)-オキサデカ-9,12-ジエン-1-イル)カルバマート (化合物CL-26)
CL-26は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８２８】
参考例B27
4-(ジメチルアミノ)ブチル ジ((9Z,12Z)-オキサデカ-9,12-ジエン-1-イル)カルバマート (化合物CL-27)
CL-27は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８２９】
参考例B28
2-(ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アミノ)エタン-1-オール (化合物CL-28)
CL-28は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８３０】
参考例B29
2-(ジメチルアミノ)-3-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)-2-((((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)メチル)プロパン-1-オール (化合物CL-29)
CL-29は、国際公開第2011/149733号に記載の方法で合成した。【０８３１】
参考例B30
(6Z,9Z,28Z,31Z)-N,N-ジメチルヘプタトリアコンタ-6,9,28,31-テトラエン-19-アミン (化合物CL-30)
CL-30は、国際公開第2010/054405号に記載の方法で合成した。【０８３２】
参考例B31
N,N,2-トリメチル-1,3-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロパン-2-アミン (化合物CL-31)
参考例B9の工程1で得られた2-メチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルオキシ)プロパン-2-アミン (0.240 g, 0.399 mmol)を1,2-ジクロロエタン (1 mL)とメタノール (1 mL)の混合溶媒に溶解させ、ホルムアルデヒド (和光純薬工業社製, 37%水溶液, 0.144 mL, 1.99 mmol)、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (東京化成工業社製, 0.211 g, 0.997 mmol)を加え、室温で一晩撹拌した。反応混合物に水を加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をNHシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル=99/1〜80/20)で精製することにより、化合物2 (0.191 g, 収率76%)を得た。
ESI-MS m/z: 630(M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 0.95 (s, 3H), 1.26-1.39 (m, 32H), 1.53-1.58 (m, 4H), 2.05 (q, J= 6.9 Hz, 8H), 2.31 (s, 6H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 4H), 3.33-3.42 (m, 8H), 5.27-5.43 (m, 8H).【０８３３】
参考例B32
N-メチル-2-(((Z)-オクタデカ-6-エン-1-イル)オキシ)-N-(2-(((Z)-オクタデカ-6-エン-1-イル)オキシ)エチル)エタン-1-アミン (化合物CL-32)
CL-32は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８３４】
参考例B33
(3R,4R)-3-(ジメチルアミノ)プロピル 3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)ピロリジン-1-カルボキシラート (化合物CL-33)
工程1
水素化ナトリウム(油性, 60%, 5.80 g, 145 mmol)のトルエン(100 mL)懸濁液に、(3R,4R)-1-ベンジルピロリジン-3,4-ジオール(Diverchim S.A.社製、3.50 g, 18.1 mmol)のトルエン (70 mL)溶液を撹拌しながら添加した後、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート(15.6 g, 45.3 mmol)のトルエン(30 mL)溶液を滴下した。得られた混合物を加熱還流下終夜撹拌した。室温まで冷却後、反応を飽和塩化アンモニウム基水溶液で停止した。得られた混合物に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで2回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(メタノール/クロロホルム=0/100〜2/98)で精製することにより(3R,4R)-1-ベンジル-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)ピロリジン(6.96 g, 10.1 mmol, 収率56%)を得た。
ESI-MS m/z: 691 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 1.26-1.38 (m, 30H), 1.52-1.62 (m, 6H), 2.05 (q, J = 6.3 Hz, 8H), 2.50 (dd, J = 9.9, 4.3 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 5.8 Hz, 4H), 2.85 (dd, J = 9.6, 5.9 Hz, 2H), 3.37-3.45 (m, 4H), 3.52-3.66 (m, 2H), 3.83 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 5.28-5.43 (m, 8H), 7.23-7.33 (m, 5H).
工程2
工程1で得られた(3R,4R)-1-ベンジル-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)ピロリジン (6.96 g, 10.1 mmol))を1,2-ジクロロエタン (100mL)に溶解させ、クロロぎ酸1-クロロエチル(3.30 mL, 30.3 mmol)を加え130℃で1時間撹拌した。反応溶液にメタノール(100 mL)を加え、130℃でさらに1時間撹拌した。室温まで冷却後、減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール=100/0〜92/8)で精製した。得られた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、次いで飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧下濃縮することで(3R,4R)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)ピロリジン(5.56 g, 9.27 mmol, 収率92%)を得た。
ESI-MS m/z: 601 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 1.29-1.41 (m, 30H), 1.49-1.60 (m, 4H), 1.67 (br s, 3H), 2.05 (q, J = 6.5 Hz, 8H), 2.75-2.85 (m, 6H), 3.09 (dd, J = 12.4, 5.1 Hz, 2H), 3.37-3.49 (m, 4H), 3.76 (dd, J= 5.0, 3.3 Hz, 2H), 5.28-5.43 (m, 8H).
工程3
参考例B4の工程2と同様の方法で、ジ((Z)-オクタデカ-9-エニル)アミンの代わりに工程2で得られた(3R,4R)-3,4-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニルオキシ)ピロリジン(0.111 g, 0.185 mmol)を用いて、標記の化合物 (0.101 g, 0.139 mmol, 75%) を得た。
ESI-MS m/z: 730 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.9 Hz, 6H), 1.24-1.40 (m, 32H), 1.50-1.57 (m, 4H), 1.77-1.83 (m, 2H), 2.02-2.08 (m, 8H), 2.23 (s, 6H), 2.34 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.8 Hz, 4H), 3.38-3.56 (m, 8H), 3.83-3.86 (m, 2H), 4.11 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 5.30-5.42 (m, 8H).【０８３５】
参考例B34
(9Z,12Z)-N-(2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン(化合物CL-34)
CL-34は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８３６】
参考例B35
(9Z,12Z)-N-(2-(((Z)-ヘキサデカ-9-エン-1-イル) オキシ)エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン (化合物CL-35)
CL-35は、国際公開第2014/007398号に記載の方法で合成した。【０８３７】
参考例B36
N,N-ジメチル-1,3-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロパン-2-アミン (化合物CL-36)
CL-36は、国際公開第2009/129385号に記載の方法で合成した。【０８３８】
参考例B37
3-(ジメチルミノ)プロピル ジ((Z)-オクタデカ-9-エニル)カルバマート(化合物CL-37)
工程1
アンモニア(東京化成工業社製, 約2 mol/Lメタノール溶液、12.0 mL、24.0 mmol)に、(Z)-オクタデカ-9-エニル メタンスルホナート(1.04 g, 3.00 mmol)を加え、マイクロ波反応装置を用いて130℃で3時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えてクロロホルムで5回抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮することで(Z)-オクタデカ-9-エニルアミンの粗生成物を得た。
得られた粗生成物に(Z)-オクタデカ-9-エニル メタンスルホナート(0.832 g, 2.40 mmol)および50%水酸化ナトリウム水溶液(0.960 g、12.0 mmol)を加え、油浴上110℃で60分間攪拌した。室温まで冷却後、反応液を酢酸エチルで希釈し、水、ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール=100/0〜95/5)で精製することにより、ジ((Z)-オクタデカ-9-エニル)アミン (0.562 g, 1.085 mmol, 収率36%)を得た。
ESI-MS m/z: 519(M + H)+; 1H-NMR(CDCl3) δ: 0.88(t, J = 6.7 Hz, 6H), 1.29(br s, 45H), 1.41-1.52(m, 4H), 1.97-2.05(m, 8H), 2.58(t, J = 7.2 Hz, 4H), 5.28-5.40(m, 4H).
工程2
工程1で得られるジ((Z)-オクタデカ-9-エニル)アミン (0.156 g、0.301 mmol)をクロロホルム(3 mL)に溶解させ、“ジャーナル・オブ・アメリカン・ケミカル・ソサイエティー(J.Am.Chem.Soc.)”,1981年,第103巻,p.4194-4199記載の方法に準じた方法で合成した3-(ジメチルアミノ)プロピル 4-ニトロフェニル カルボナート塩酸塩 (0.138 g、0.452 mmol)およびトリエチルアミン(0.168 mL, 1.21 mmol)を加え、マイクロ波反応装置を用いて110℃で60分間攪拌した。反応液に3-(ジメチルアミノ)プロピル 4-ニトロフェニル カルボナート塩酸塩 (22.9 mg、0.0753 mmol)を加え、マイクロ波反応装置を用いて110℃で20分間攪拌した。反応液に3-(ジメチルアミノ)プロピル 4-ニトロフェニル カルボナート塩酸塩 (22.9 mg、0.0753 mmol)を加え、マイクロ波反応装置を用いて110℃で20分間攪拌した。反応液に3-(ジメチルアミノ)プロピル 4-ニトロフェニル カルボナート塩酸塩 (22.9 mg、0.0753 mmol)を加え、マイクロ波反応装置を用いて110℃で20分間攪拌した。反応液をクロロホルムで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、ついで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣を少量のn-ヘキサン/酢酸エチル(1/4)に溶解してアミノ修飾シリカゲルのパッドに吸着させ、n-ヘキサン/酢酸エチル(1/4)で溶出し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール=100/0〜95/5)で精製することで標記の化合物 (0.173 g, 0.267 mmol, 収率89%)を得た。
ESI-MS m/z: 648(M + H)+; 1H-NMR(CDCl3) δ: 0.88(t, J= 6.6 Hz, 6H), 1.28(br s, 44H), 1.45-1.55(m, 4H), 1.75-1.85(m, 2H), 1.97-2.04(m, 8H), 2.23(s, 6H), 2.34(t, J= 7.6 Hz, 2H), 3.13-3.24(m, 4H), 4.10(t, J=6.4 Hz, 2H), 5.28-5.40(m, 4H).【０８３９】
参考例B38
(11Z,14Z)-N-(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)イコサ-11,14-ジエン-1-アミン  (化合物CL-38)
CL-38は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 588【０８４０】
参考例B39
(9Z,12Z)-N-(2-(((Z)-イコサ-11-エン-1-イル)オキシ)エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン  (化合物CL-39)
CL-39は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 588【０８４１】
参考例B40
(11Z,14Z)-N-(2-(((Z)-イコサ-11-エン-1-イル)オキシ)エチルイコサ-11,14-ジエン-1-アミン  (化合物CL-40)
CL-40は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 616【０８４２】
参考例B41
(Z)-N-(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)オクタデカ-9-エン-1-アミン  (化合物CL-41)
CL-41は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 562【０８４３】
参考例B42
ビス(2-(((11Z,14Z)-イコサ-11,14-ジエン-1-イル)オキシ)エチル)アミン (化合物CL-42)
CL-42は、国際公開第2011/136368号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 658【０８４４】
参考例B43
(Z)-N-(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)ヘキサデカ-9-エン-1-アミン  (化合物CL-43)
CL-43は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z:534 【０８４５】
参考例B44
(Z)-N-(2-(オクタデカ-9-エン-1-イルオキシ)エチル)オクタデカン-1-アミン  (化合物CL-44)
CL-44は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 564【０８４６】
参考例B45
(Z)-N-(2-(オクタデカ-9-エン-1-イルオキシ)エチル)テトラデカン-1-アミン (化合物CL-45)
CL-45は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 508【０８４７】
参考例B46
3-((3R,4R)-3,4-ビス(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)ピロリジン-1-イル)プロパン-1,2-ジオール (化合物CL-46)
CL-46は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８４８】
参考例B47
ビス(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)アミン (化合物CL-47)
CL-47は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８４９】
参考例B48
3-(ビス(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)アミノ)プロパン-1,2-ジオール (化合物CL-48)
CL-48は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８５０】
参考例B49
3-(ビス(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)アミノ)プロパンアミド(化合物CL-49)
CL-49は、国際公開第2011/136368号に記載の方法で合成した。【０８５１】
参考例B50
(9Z,12Z)-N-(2-(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エトキシ)エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン (化合物CL-50)
CL-50は、国際公開第2014/007398号に記載の方法に準ずる方法で合成した。
ESI-MS m/z: 604【０８５２】
参考例B51
ジ((Z)-ノナ-2-エン-1-イル) 9-((4-(ジメチルアミノ)ブタノイル)オキシ)ヘプタデカンジオアート(化合物CL-51)
CL-51は、国際公開第2011/153493に記載の方法で合成した。【０８５３】
参考例B52
ジ((Z)-ノナ-2-エン-1-イル) 8,8'-((((2-(ジメチルアミノ)エチル)チオ)カルボニル)アザンジイル)ジオクタノアート(化合物CL-52)
CL-52は、国際公開第2017/023817に記載の方法で合成した。【０８５４】
参考例B53
2-(ジメチルアミノ)-N-(2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)-N-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アセトアミド(化合物CL-53)
CL-53は、国際公開第2014/007398に記載の方法に準ずる方法で合成した。【０８５５】
参考例B54
3-((2-(((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)オキシ)エチル)((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アミノ)プロパン-1-オール(化合物CL-54)
CL-54は、国際公開第2014/007398に記載の方法に準ずる方法で合成した。【０８５６】
参考例B55
1-メチル-3,3-ビス((((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)メチル)アゼチジン(化合物CL-55)
CL-55は、国際公開第2012/108397に記載の方法で合成した。【０８５７】
参考例B56
1-メチル-3,3-ビス(2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)エチル)アゼチジン (化合物CL-56)
CL-56は、国際公開第2016/002753に記載の方法で合成した。【０８５８】
参考例B57
1-メチル-3,3-ビス(2-(((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)プロピル)アゼチジン (化合物CL-57)
CL-57は、国際公開第2016/002753に記載の方法で合成した。【０８５９】
参考例B58
2-(3,3-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アゼチジン-1-イル)エタン-1-オール (化合物CL-58)
CL-58は、国際公開第2016/002753に記載の方法で合成した。【０８６０】
参考例B59
2-(3,3-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アゼチジン-1-イル)プロパン-1-オール(化合物CL-59)
CL-59は、国際公開第2016/002753に記載の方法で合成した。【０８６１】
参考例B60
3-(ジメチルアミノ)プロピル 3,3-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)アゼチジン-1-カルボキシラート(化合物CL-60)
CL-60は、国際公開第2016/002753に記載の方法で合成した。【０８６２】
参考例B61
2-(ジ((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)アミノ)エタン-1-オール(化合物CL-61)
CL-61は、国際公開第2014/007398に記載の方法で合成した。【０８６３】
参考例B62
3-(ジ((Z)-オクタデカ-9-エン-1-イル)アミノ)プロパン-1-オール(化合物CL-62)
CL-62は、国際公開第2014/007398に記載の方法で合成した。【０８６４】
参考例B63
(11Z,14Z)-2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(化合物CL-63)
工程1
(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルメタンスルホネート(7.62 g, 22.1 mmol)のテトラヒドロフラン(30.0 mL) 溶液に、エチル2-シアノアセテート(0.943 mL, 8.84 mmol)、水素化ナトリウム(1.06 g, 26.5 mmol)、テトラブチルアンモニウムヨージド(3.27 g, 8.84 mmol)を加え、60℃で2時間攪拌した。反応液に水を加え、ヘプタンで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘプタン/酢酸エチル = 99/1〜85/15)で精製してエチル(11Z,14Z)-2-シアノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノエイト (3.50 g, 5.74 mmol, 収率64.9%)を得た。
エチル(11Z,14Z)-2-シアノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエノエイト(1.50 g, 2.46 mmol)のテトラヒドロフラン(10.0 mL) 溶液に水素化アルミニウムリチウム(0.467 g, 12.3 mmol)を加え、氷冷下で30分間撹拌した。反応液に水、水酸化ナトリウム、水を1:1:3の割合で加え、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 90/10)で精製して(11Z,14Z)-2-(アミノメチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール (1.00 g, 1.75 mmol, 収率71.1%)を得た。
ESI-MS m/z: 573 (M + H)+.
工程2
(11Z,14Z)-2-(アミノメチル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(0.200 g, 0.350 mmol)のジクロロエタン(2.00 mL) 溶液にパラホルムアルデヒド溶液(0.276 g, 3.50 mmol, 37%メタノール溶液)、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム（1.48 g, 6.99 mmol）を加え、室温で3時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムを用いて抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 99/1〜85/15)で精製して標記化合物(0.0280 g, 0.0470 mmol, 収率13.3%)を得た。
ESI-MS m/z: 601 (M)+； 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 6H), 1.23-1.29 (m, 40H), 2.05 (q, J= 6.8 Hz, 8H), 2.32 (s, 6H), 2.40 (s, 2H), 2.77 (dd, J = 9.8, 3.4 Hz, 4H), 3.53 (s, 2H), 5.29-5.42 (m, 8H).【０８６５】
参考例B64
(11Z,14Z)-2-(ジメチルアミノ)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-yl)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(化合物CL-64)
工程1
水素化ナトリウム (1.21 g, 30.3 mmol) の THF (30.0 mL) 溶液にマロン酸 tert-ブチルエチル (東京化成工業社製, 2.00 mL, 10.1 mmol)、よう化テトラ‐ｎ‐ブチルアンモニウム (ナカライテスク社製, 0.746 g, 2.02 mmol)、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエニル メタンスルホナート (ニューチェック・プレップ・インク(Nu-Chek Prep,Inc)社製, 8.70 g, 25.2 mmol) を加えて、加熱還流下、2時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 95/5) で精製して、1-tert-ブチル 3-エチル 2,2-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)マロン酸 (5.52 g, 80.0%) を得た。
工程2
1-tert-ブチル 3-エチル 2,2-ジ((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)マロン酸 (5.52 g, 8.06 mmol) のジクロロメタン (30.0 mL) 溶液にトリフルオロ酢酸 (5.00 mL, 64.9 mmol) を加えて、室温にて30分攪拌した。反応液を減圧下濃縮した。残渣をクロロホルムと飽和重曹水で分液した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 95/5) で精製して (11Z,14Z)-2-(エトキシカルボニル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン酸 (4.04 g, 6.42 mmol, 80.0%) を得た。
工程3
(11Z,14Z)-2-(エトキシカルボニル)-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン酸 (0.284 g, 0.452 mmol) のトルエン (3.00 mL) 溶液に、トリエチルアミン (0.315 mL, 2.26 mmol)、ジフェニルホスホリルアジド (東京化成工業社製, 0.121 mL, 0.542 mmol) を加えて、室温にて1時間攪拌した。反応液に水 (0.0200 mL, 1.11 mmol) を加えて、加熱還流下5時間攪拌した。反応液に水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 80/20) で精製して、 (11Z,14Z)-2-アミノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン酸エチル (0.0457 g, 0.0762 mmol, 17.0%) を得た。
ESI-MS m/z: 601 (M + H)+ . 
工程4
(11Z,14Z)-2-アミノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン酸エチル (0.299 g, 0.498 mmol) のTHF (3.00 mL) 溶液に、水素化リチウムアルミニウム (純正化学社製, 0.0190 g, 0.498 mmol) を加えて、室温で30分攪拌した。反応液に水、水酸化ナトリウム水溶液を加えて、不溶物をセライト濾過で除き、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン/酢酸エチル = 50/50) で精製して (11Z,14Z)-2-アミノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(0.0667 g, 0.120 mmol, 24.0%) を得た。
ESI-MS m/z: 559 (M + H)+ .
工程5
(11Z,14Z)-2-アミノ-2-((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)イコサ-11,14-ジエン-1-オール(0.0664 g, 0.119 mmol) のジクロロエタン (1.00 mL) 溶液に、ホルムアルデヒド (0.500 mL, 6.72 mmol)、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリド (東京化成工業社製, 0.101 g, 0.476 mmol) を加えて、室温にて終夜撹拌した。反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム/メタノール = 80/20) で精製して標記化合物 (0.0474 g, 0.0809 mmol, 68.0%)を得た。
ESI-MS m/z: 587 (M + H)+; 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.24-1.39 (m, 40H), 2.05 (q, J= 6.8 Hz, 8H), 2.38 (s, 6H), 2.77 (t, J= 6.7 Hz, 4H), 5.29-5.42 (m, 8H).【０８６６】
参考例B65
3-(ジメチルアミノ)-2,2-ビス((((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル)オキシ)メチル)プロパン-1-オール(化合物CL-65)
2-(ブロモメチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール(1.52 g, 7.56 mmol)にジメチルアミン溶液(15.0 mL, 30.0 mmol, 2M in THF)を加え、マイクロウェーブ照射下で120℃、15時間攪拌した。反応液に水酸化リチウムを加え、ろ過した。ろ液を減圧下濃縮し、2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール (1.23 g, 定量的)を得た。
2-((ジメチルアミノ)メチル)-2-(ヒドロキシメチル)プロパン-1,3-ジオール(1.23 g, 7.56 mmol)のトルエン(30.0 mL) 溶液に水素化ナトリウム(0.756 g, 18.9 mmol)、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルメタンスルホネート(6.51 g, 18.9 mmol)を加え、加熱還流下で終夜撹拌した。反応液に飽和食塩水を加え、ヘキサンを用いて抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 90/10)、アミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン/酢酸エチル = 90/10)で精製して標記化合物(1.80 g, 2.73 mmol, 収率36.1%)を得た。
ESI-MS m/z: 661 (M)+； 1H-NMR (CDCl3) δ: 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H), 1.24-1.39 (m, 32H), 1.50-1.56 (m, 4H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 8H), 2.30 (s, 6H), 2.53 (s, 2H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 4H), 3.30-3.41 (m, 8H), 3.71 (s, 2H), 5.29-5.42 (m, 8H).【０８６７】
参考例B66
((2-((2-(ジメチルアミノ)エチル)チオ)アセチル)アザンジイル)ビス(エタン-2,1-ジイル) ジテトラデカノアート(化合物CL-66)
CL-66は、国際公開第2012/170952に記載の方法で合成した。【０８６８】
実施例C1
(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン(化合物CL-67)
工程1
(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル メタンスルフォネート（2.00 g, 5.77 mmol）をアセトニトリル（10.0 mL）に溶解させ、炭酸セシウム（3.76 g, 11.5 mmol）、2-メルカプトエタノール（0.615 mL, 8.66 mmol）を加えて、室温で終夜攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮して(Z)-2-(オクタデック-9-エン-1-イルチオ)エタン-1-オール（2.35 g、定量的）を得た。
(Z)-2-(オクタデック-9-エン-1-イルチオ)エタン-1-オール（1.50 g, 4.56 mmol）をジクロロメタン（10.0 mL）に溶解させ、トリエチルアミン（1.91 mL, 13.7 mmol）、メタンスルホニルクロリド（0.889 mL, 11.4 mmol）を0℃で加え、室温で2.5時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜90/10）で精製して(Z)-(2-クロロエチル)(オクタデック-9-エン-1-イル)スルファン（0.630 g, 収率39.8%）を得た。
1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ: 5.36-5.33 (m, 2H), 3.64-3.60 (m, 2H), 2.87-2.83 (m, 2H), 2.56 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.03-2.00 (m, 4H), 1.61-1.56 (m, 2H), 1.37-1.29 (m, 22H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
工程2
(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル メタンスルフォネート（6.00 g, 17.4 mmol）をアセトニトリル（40.0 mL）に溶解させ、炭酸セシウム（14.2 g, 43.5 mmol)、テトラブチルアンモニウムヨージド（8.36 g, 22.6 mmol）、N-(tert-ブトキシカルボニル)-2-ニトロベンゼンスルフォンアミド（6.84 g, 22.6 mmol）を加え、60℃で終夜撹拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜70/30)で精製してtert-ブチル [(2-ニトロフェニル)スルフォニル][(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]カルバメート（7.80 g, 収率81.0%)を得た。
tert-ブチル [(2-ニトロフェニル)スルフォニル][(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]カルバメート（7.80 g, 14.2 mmol）をジクロロメタン（25.0 mL）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（21.8 mL, 283 mmol）を加え、室温で3時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜70/30）で精製して2-ニトロ-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]ベンゼンスルフォンアミド（5.10 g, 収率80.0%）を得た。1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 8.15-8.13 (m, 1H), 7.88-7.85 (m, 1H), 7.77-7.71 (m, 2H), 5.37-5.33 (m, 4H), 5.23 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 3.09 (td, J = 7.1, 5.8 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.07-2.01 (m, 4H), 1.55-1.50 (m, 2H), 1.39-1.23 (m, 16H), 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
工程3
工程2で得られた2-ニトロ-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]ベンゼンスルフォンアミド（0.200 g, 0.444 mmol）をアセトニトリル（4.00 mL）に溶解させ、炭酸セシウム（0.289 g, 0.888 mmol）、テトラブチルアンモニウムヨージド（0.164 g, 0.444 mmol）、工程1で得られた(Z)-(2-クロロエチル)(オクタデック-9-エン-1-イル)スルファン（0.162 g, 0.466 mmol）を加え、80℃で4時間撹拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜85/15）で精製して2-ニトロ-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]ベンゼンスルフォンアミド（0.277 g, 収率82.0%）を得た。
2-ニトロ-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]ベンゼンスルフォンアミド（0.277 g, 0.364 mmol）をアセトニトリル（4.00 mL）に溶解させ、ジアザビシクロウンデセン（0.137 mL, 0.909 mmol）、1-ドデカンチオール（0.217 mL, 0.909 mmol）を加え、70℃で3時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜70/30)、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜50/50)で精製して(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン（0.0525 g, 収率25.1%）を得た。
ESI-MS m/z: 576 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.30 (m, 6H), 2.82-2.76 (m, 4H), 2.67 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.60 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.51 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.05-2.01 (m, 8H), 1.59-1.48 (m, 4H), 1.39-1.27 (m, 38H), 0.89-0.88 (m, 6H).【０８６９】
実施例C2
(9Z,12Z)-N-メチル-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン(化合物CL-68)
工程1
参考例B31と同様の手法で、2-メチル-1,3-ビス((9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イルオキシ)プロパン-2-アミンの代わりに、(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミンを用い、(9Z,12Z)-N-メチル-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン (0.0200 g, 37.2%) を得た。
ESI-MS m/z: 590 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 5.42-5.29 (m, 6H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.64-2.55 (m, 4H), 2.52 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.35 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.06-2.00 (m, 8H), 1.62-1.56 (m, 2H), 1.47-1.45 (m, 2H), 1.36-1.30 (m, 38H), 0.91-0.86 (m, 6H).【０８７０】
実施例C3
2-(ジメチルアミノ)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]アセトアミド(化合物CL-69)
工程1
実施例C1工程3で得られた(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン（1.54 g, 2.66 mmol）をジクロロメタン（10.0 mL）に溶解させ、N,N-ジイソプロピルエチルアミン（1.16 mL, 6.66 mmol）、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジニウム3-オキシドヘキサフルオロホスファート（2.53 g, 6.66 mmol）、ジメチルグリシン（0.550 g, 5.33 mmol）を加えて、室温で2時間撹拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜80/20）、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/メタノール = 100/0〜90/10）で精製して2-(ジメチルアミノ)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]アセトアミド（1.41 g, 収率80.0%）を得た。
ESI-MS m/z: 661 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.29 (m, 6H), 3.57 (dt, J = 15.7, 7.9 Hz, 1H), 3.47 (dt, J = 15.7, 7.9 Hz, 1H), 3.36 (dt, J = 15.7, 7.9 Hz, 1H), 3.29 (dt, J = 15.7, 7.9 Hz, 1H), 3.10 (d, J = 16.7 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.69-2.65 (m, 2H), 2.57-2.54 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.05-1.99 (m, 8H), 1.60-1.56 (m, 4H), 1.39-1.27 (m, 38H), 0.89-0.88 (m, 6H).【０８７１】
実施例C4
ビス(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)アミン(化合物CL-70)
工程1
実施例C1の工程2と同様の手法で、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル メタンスルフォネートの代わりに、実施例C1の工程1で得られた(Z)-(2-クロロエチル)(オクタデック-9-エン-1-イル)スルファンを用い、(Z)-2-ニトロ-N-[2-(オクタデック-9-エン-1-イルチオ)エチル]ベンゼンスルフォンアミド（0.270 g, 定量的)を得た。
工程2 
実施例C1の工程3と同様の手法で、2-ニトロ-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]ベンゼンスルフォンアミドの代わりに、(Z)-2-ニトロ-N-[2-(オクタデック-9-エン-1-イルチオ)エチル]ベンゼンスルフォンアミドを用い、ビス(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)アミン（0.0470 g, 57.2%)を得た。
ESI-MS m/z: 638 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.39-5.31 (m, 4H), 2.82 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 2.68 (t, J = 6.5 Hz, 4H), 2.51 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 2.01 (q, J = 6.4 Hz, 8H), 1.59-1.55 (m, 4H), 1.39-1.27 (m, 44H), 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H). 【０８７２】
実施例C5
2-(ジメチルアミノ)-N,N-ビス(2-{[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}エチル)アセトアミド(化合物CL-71)
工程1 
実施例C3工程1と同様の手法で、(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミンの代わりに、実施例C4と同様の手法で得られたビス(2-{[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}エチル)アミンを用い、2-(ジメチルアミノ)-N,N-ビス(2-{[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}エチル)アセトアミド（0.0493 g, 収率87.0%）を得た。
ESI-MS m/z: 719 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.30 (m, 8H), 3.62 (dt, J = 15.0, 7.5 Hz, 2H), 3.48 (dt, J = 15.0, 7.5 Hz, 2H), 3.14 (s, 2H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 2.69 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 2.55 (dt, J = 12.8, 7.6 Hz, 4H), 2.28 (s, 6H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 8H), 1.60-1.58 (m, 4H), 1.39-1.26 (m, 32H), 0.89 (t, J= 7.0 Hz, 6H).【０８７３】
実施例C6
2-(ジメチルアミノ)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]エタン-1-スルフォンアミド(化合物CL-72)
工程1 
実施例C1工程3で得られた(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン（0.183 g, 0.318 mmol）をジクロロメタン（3.00 mL）に溶解させ、トリエチルアミン（0.260 mL, 1.87 mmol)、2-クロロメタンスルフォニルクロリド（0.140 mL, 1.33 mmol）を0℃で加え、室温で終夜撹拌した。反応液に0.01N塩酸を加え、蒸留水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜86/14)で精製してN-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]エタンスルフォンアミド（0.160 g, 収率61.0%)を得た。
N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]エタンスルフォンアミド（0.113 g, 0.169 mmol）をテトラヒドロフラン（0.500 mL）に溶解させ、ジメチルアミン溶液（1.08 mL, 2.16 mmol, 2M in THF）を加え、加熱還流下で3時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をアミノシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/メタノール = 100/0〜96/4）で精製して2-(ジメチルアミノ)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)-N-[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]エタン-1-スルフォンアミド（0.113 g, 収率94.0%）を得た。
ESI-MS m/z: 712 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.30 (m, 6H), 3.36 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.20 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 3.17-3.11 (m, 2H), 2.80-2.68 (m, 6H), 2.54 (t, J= 7.3 Hz, 2H), 2.27 (s, 6H), 2.09-1.93 (m, 8H), 1.63-1.53 (m, 4H), 1.41-1.22 (m, 38H), 0.92-0.85 (m, 6H).【０８７４】
実施例C7
2-(ジメチルアミノ)エチル(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]カルバメート(化合物CL-73)
工程1
実施例C1工程3で得られた(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミン（0.127 g, 0.220 mmol）をジクロロメタン（1.10 mL）に溶解させ、トリフォスゲン（0.0406 g, 0.410 mmol)を加え、室温で30分間撹拌した。反応液にトリエチルアミン（0.150 mL, 1.08 mmol）、2-ジメチルアミノエタノール（0.100 mL, 0.998 mmol）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和重曹水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム/メタノール = 100/0〜90/10)で精製して2-(ジメチルアミノ)エチル(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]カルバメート（0.140 g, 収率92.0%)を得た。
ESI-MS m/z: 692 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.30 (m, 6H), 4.18 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.43-3.32 (m, 2H), 3.28-3.18 (m, 2H), 2.77 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.70-2.60 (m, 2H), 2.60-2.49 (m, 4H), 2.28 (s, 6H), 2.09-1.93 (m, 8H), 1.61-1.47 (m, 4H), 1.42-1.19 (m, 38H), 0.91-0.86 (m, 6H).【０８７５】
実施例C8
1-メチル-3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン (化合物CL-77)
工程1
アゼチジン-3,3-ジイルジメタノール（0.315 g, 2.96 mmol）をメタノール（5.00 mL）に溶解させ、二炭酸ジ-tert-ブチル（0.936 mL, 4.03 mmol）、トリエチルアミン（0.750 mL, 5.38 mmol）を加えて、室温で終夜攪拌した。反応液を減圧下濃縮してtert-ブチル 3,3-ビス(ヒドロキシメチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.584 g, 定量的）を得た。
tert-ブチル 3,3-ビス(ヒドロキシメチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.584 g, 2.69 mmol）をジクロロメタン（10.0 mL）に溶解させ、メタンスルホニルクロリド（0.524 mL, 6.73 mmol）、トリエチルアミン（1.13 mL, 8.07 mmol）を0℃で加えて、室温で2時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮してtert-ブチル 3,3-ビス{[(メチルスルフォニル)オキシ]メチル}アゼチジン-1-カルボキシレート（1.01 g, 定量的）を得た。
tert-ブチル 3,3-ビス{[(メチルスルフォニル)オキシ]メチル}アゼチジン-1-カルボキシレート（0.900 g, 2.41 mmol）をジメチルホルムアミド（15.0 mL）に溶解させ、チオ酢酸 S-カリウム（0.963 g, 8.44 mmol）を加えて、55℃で終夜攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜34/66）で精製してtert-ブチル 3,3-ビス[(アセチルチオ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレート（0.742 g, 収率92.0%）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 3.61 (s, 4H), 3.20 (s, 4H), 2.38 (s, 6H), 1.44 (s, 9H).
工程2 
tert-ブチル 3,3-ビス[(アセチルチオ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレート（0.342 g, 1.03 mmol）をテトラヒドロフラン（6.00 mL）に溶解させ、(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル メタンスルフォネート（1.07 g, 3.08 mmol）、28%ナトリウムメトキシド-メタノール溶液（0.615 mL, 3.08 mmol）を加えて、室温で4時間攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜90/10）で精製してtert-ブチル 3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.487 g, 収率63.3%）を得た。
tert-ブチル 3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.487 g, 0.649 mmol）をジクロロメタン（3.00 mL）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（1.00 mL, 13.0 mmol）を加えて、室温で2時間攪拌した。反応液に飽和重曹水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜25/75、クロロホルム/メタノール = 100/0〜95/5）で精製して3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン（0.310 g, 収率73.5%）を得た。
ESI-MS m/z: 650 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.39-5.31 (m, 4H), 3.47 (s, 4H), 2.95 (s, 4H), 2.56 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 2.01 (q, J= 6.4 Hz, 8H), 1.63-1.56 (m, 4H), 1.37-1.29 (m, 44H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 6H).
工程3
参考例B31と同様の手法で、ビス(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)アミンの代わりに、 3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジンを用い、1-メチル-3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン（0.0925 g, 収率88.0%）を得た。
ESI-MS m/z: 664 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.36-5.33 (m, 4H), 3.07 (s, 4H), 2.92 (s, 4H), 2.54 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 2.33 (s, 3H), 2.01 (q, J = 6.4 Hz, 8H), 1.62-1.55 (m, 4H), 1.36-1.29 (m, 44H), 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 6H).【０８７６】
実施例C9
1-[3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-イル]-2-(ジメチルアミノ)エタン-1-オン(化合物CL-75)
工程1 
実施例C3の工程1と同様の手法で、(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミンの代わりに、実施例C8の工程2で得られた3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジンを用いて、1-[3,3-ビス({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-イル]-2-(ジメチルアミノ)エタン-1-オン（0.0815 g, 72.1%）を得た。
ESI-MS m/z: 735 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.39-5.31 (m, 4H), 3.97 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 2.96 (s, 2H), 2.89 (s, 4H), 2.56 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 2.28 (s, 6H), 2.01 (q, J = 6.4 Hz, 8H), 1.63-1.55 (m, 4H), 1.36-1.29 (m, 44H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 6H).【０８７７】
実施例C10
1-メチル-3,3-ビス({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン(化合物CL-76)
工程1
実施例C8の工程2と同様の手法で、(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル メタンスルフォネートの代わりに、(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル メタンスルフォネートを用い、3,3-ビス({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン（0.338 g, 56.6%）を得た。
ESI-MS m/z: 646 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.29 (m, 8H), 3.47 (s, 4H), 2.95 (s, 4H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 2.56 (t, J = 7.4 Hz, 4H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 8H), 1.63-1.56 (m, 4H), 1.39-1.24 (m, 32H), 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 6H).
工程2 
参考例B31と同様の手法で、ビス(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)アミンの代わりに、 3,3-ビス({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジンを用い、1-メチル-3,3-ビス({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン（0.0680 g, 収率63.4%）を得た。
ESI-MS m/z: 660 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.29 (m, 8H), 3.07 (s, 4H), 2.92 (s, 4H), 2.77 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 2.54 (t, J= 7.5 Hz, 4H), 2.33 (s, 3H), 2.05 (q, J= 6.9 Hz, 8H), 1.62-1.55 (m, 4H), 1.39-1.25 (m, 32H), 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 6H).【０８７８】
実施例C11
1-[3,3-ビス({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-イル]-2-(ジメチルアミノ)エタン-1-オン(化合物CL-74)
工程1 
実施例C3の工程1と同様の手法で、(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミンの代わりに、実施例C10の工程1で得られた3,3-ビス({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジンを用いて、1-[3,3-ビス({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-イル]-2-(ジメチルアミノ)エタン-1-オン（0.0692 g, 61.1%）を得た。
ESI-MS m/z: 731 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.42-5.29 (m, 8H), 3.97 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 2.98 (s, 2H), 2.89 (s, 4H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 2.56 (t, J= 7.5 Hz, 4H), 2.29 (s, 6H), 2.05 (q, J= 6.8 Hz, 8H), 1.63-1.55 (m, 4H), 1.39-1.24 (m, 32H), 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H).【０８７９】
実施例C12
1-メチル-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン(化合物CL-81)
工程1
アゼチジン-3,3-ジイルジメタノール（0.315 g, 2.96 mmol）をメタノール（5.00 mL）に溶解させ、二炭酸ジ-tert-ブチル（0.936 mL, 4.03 mmol）、トリエチルアミン（0.750 mL, 5.38 mmol）を加えて、室温で終夜攪拌した。反応液を減圧下濃縮してtert-ブチル 3,3-ビス(ヒドロキシメチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.584 g, 定量的）を得た。
tert-ブチル 3,3-ビス(ヒドロキシメチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.292 g, 1.35 mmol）をトルエン（6.00 mL）に溶解させ、水素化ナトリウム（0.0810 g, 2.02 mmol）、(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル メタンスルフォネート（0.559 g, 1.61 mmol）を加えて、100℃で5時間攪拌した。反応液に蒸留水、飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム/メタノール = 100/0〜95/5）で精製してtert-ブチル (Z)-3-(ヒドロキシメチル)-3-[(オクタデック-9-エン-1-イルオキシ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレート（0.296 g, 収率47.1%）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.35-5.34 (m, 2H), 3.81 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.72 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.63 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.53 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 2.01 (q, J = 6.4 Hz, 4H), 1.60-1.52 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.34-1.28 (m, 22H), 0.88 (t, J= 6.8 Hz, 3H).
工程2 
tert-ブチル (Z)-3-(ヒドロキシメチル)-3-[(オクタデック-9-エン-1-イルオキシ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレート（0.296 g, 0.633 mmol）をジクロロメタン（5.00 mL）に溶解させ、メタンスルホニルクロリド（0.0640 mL, 0.823 mmol）、トリエチルアミン（0.132 mL, 0.949 mmol）を加えて、室温で2時間半攪拌した。反応液に飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮してtert-ブチル (Z)-3- {[(メチルスルフォニル)オキシ]メチル}-3-[(オクタデック-9-エン-1-イルオキシ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレート（0.345 g, 定量的）を得た。
tert-ブチル (Z)-3- {[(メチルスルフォニル)オキシ]メチル}-3-[(オクタデック-9-エン-1-イルオキシ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレートをジメチルホルムアミド（8.00 mL）に溶解させ、チオ酢酸 S-カリウム（0.130 g, 1.14 mmol）を加えて、55℃で終夜攪拌した。反応液に蒸留水、飽和食塩水を加えて、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘプタン/酢酸エチル = 100/0〜80/20）で精製してtert-ブチル (Z)-3-[(アセチルチオ)メチル]-3-[(オクタデック-9-エン-1-イルオキシ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレート（0.250 g, 収率75.0%）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 5.36-5.33 (m, 2H), 3.67 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.60 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.43-3.41 (m, 4H), 3.24 (s, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.01 (q, J = 6.3 Hz, 4H), 1.58-1.53 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.29-1.27 (m, 22H), 0.88 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
工程3
実施例C8の工程2と同様の手法で、tert-ブチル 3,3-ビス[(アセチルチオ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレートの代わりにtert-ブチル (Z)-3-[(アセチルチオ)メチル]-3-[(オクタデック-9-エン-1-イルオキシ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレートを用いて、3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン（0.187 g, 収率62.6%）を得た。
ESI-MS m/z: 634 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 5.35-5.34 (m, 4H), 3.57 (s, 2H), 3.46-3.40 (m, 6H), 2.88 (s, 2H), 2.52 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.01 (q, J = 6.4 Hz, 8H), 1.59-1.56 (m, 4H), 1.34-1.27 (m, 44H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 6H).
工程4
参考例B31と同様の手法で、ビス(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)アミンの代わりに、 3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジンを用い、1-メチル-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン（0.0760 g, 収率91.0%）を得た。
ESI-MS m/z: 648 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 5.39-5.31 (m, 4H), 3.53 (s, 2H), 3.44 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.21-3.14 (m, 4H), 2.88 (s, 2H), 2.52 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.01 (q, J = 6.8 Hz, 8H), 1.62-1.53 (m, 4H), 1.34-1.27 (m, 44H), 0.88 (t, J= 7.0 Hz, 6H).【０８８０】
実施例C13
2-(ジメチルアミノ)-1-(3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-イル)エタン-1-オン(化合物CL-80)
工程1 
実施例C3の工程1と同様の手法で、(9Z,12Z)-N-(2-{[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}エチル)オクタデカ-9,12-ジエン-1-アミンの代わりに、実施例C12の工程3で得られた3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジンを用いて、2-(ジメチルアミノ)-1-(3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン-1-イル)エタン-1-オン（0.0360 g, 34.1%）を得た。
ESI-MS m/z: 719 (M + H)+；1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 5.36-5.33 (m, 4H), 3.98 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 3.82 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.74 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.44 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.95 (s, 2H), 2.84 (s, 2H), 2.53 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 2.28 (s, 6H), 2.01 (q, J= 6.3 Hz, 8H), 1.59-1.54 (m, 4H), 1.31-1.28 (m, 44H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 6H).【０８８１】
実施例C14
1-メチル-3-({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]オキシ}メチル)-3-({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]チオ}メチル)アゼチジン(化合物CL-79)
工程1 
実施例C12の工程1と同様の手法で、(Z)-オクタデック-9-エン-1-イル メタンスルフォネートの代わりに(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル メタンスルフォネートを用い、tert-ブチル 3-(ヒドロキシメチル)-3-({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]オキシ}メチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.166 g, 収率26.6%）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 5.42-5.29 (m, 4H), 3.81 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 3.72 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.63 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.77 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.53 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 4H), 1.57-1.43 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.39-1.25 (m, 16H), 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
工程2 
実施例C12の工程2と同様の手法で、tert-ブチル (Z)-3-(ヒドロキシメチル)-3-[(オクタデック-9-エン-1-イルオキシ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレートの代わりにtert-ブチル 3-(ヒドロキシメチル)-3-({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]オキシ}メチル)アゼチジン-1-カルボキシレートを用いて、tert-ブチル 3-[(アセチルチオ)メチル]-3-({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]オキシ}メチル)アゼチジン-1-カルボキシレート（0.0560 g, 29.9%）を得た。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3)δ: 5.42-5.30 (m, 4H), 3.67 (d, J= 8.6 Hz, 2H), 3.60 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.43-3.41 (m, 4H), 3.24 (s, 2H), 2.77 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.05 (q, J = 6.8 Hz, 4H), 1.56-1.52 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.33-1.29 (m, 16H), 0.89 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
工程3 
実施例C8の工程2と同様の手法で、tert-ブチル 3,3-ビス[(アセチルチオ)メチル]アゼチジン-1-カルボキシレートの代わりにtert-ブチル 3-[(アセチルチオ)メチル]-3-({[(9Z,12Z)-オクタデカ-9,12-ジエン-1-イル]オキシ}メチル)アゼチジン-1-カルボキシレートを用いて、3-笨⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫苣궂苣綷菣膃菣⦫㌭⠭孻㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪菣膃菣⦫苣벂菣뢂菣袼⸰㌰㔳朠‬迥螎㠶ㄮ覼苣鞾臣芀戼㹲䔊䥓䴭⁓⽭㩺㘠〳⠠⁍‫⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰볯㲛畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰱猯灵䠾中前⠠〴‰䡍ⱺ䌠䍄㱬畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾듎›⸵㈴㔭㌮‰洨‬䠸Ⱙ㌠㜮‷搨‬㵊㤠㤮䠠ⱺ㈠⥈‬⸳㈷⠠Ɽ䨠㴠㤠㤮䠠ⱺ㈠⥈‬⸳㐵⠠ⱳ㈠⥈‬⸳㠴⠠ⱴ䨠‽⸶‸穈‬䠲Ⱙ㈠㤮‰猨‬䠲Ⱙ㈠㜮‷搨‬㵊㘠㘮䠠ⱺ㐠⥈‬⸲㐵⠠ⱴ䨠㴠㜠㔮䠠ⱺ㈠⥈‬⸲㔰⠠ⱱ䨠㴠㘠㠮䠠ⱺ㠠⥈‬⸱㈶ㄭ㔮‴洨‬䠴Ⱙㄠ㌮ⴹ⸱㐲⠠Ɑ㌠䠲Ⱙ〠㠮‹琨‬⁊‽⸷‰穈‬䠶⸩戼㹲ꖷ꣧㒋㰠牢ਾ†迥莀뻤䊋ㄳ臣貐꟦꺁触閳臣膀菣릂㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃꊂ菣뎃臣ꎻ苣誂臣膀ⴳ笨⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫苣궂苣綷菣膃菣⦫㌭⠭孻㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪菣膃菣⦫苣벂菣뢂菣銂铧蒁胣ㆁꆃ菣ꮃ㌭⠭孻㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃꪂ苣랂ꆃ菣ꮃ⴩ⴳ笨⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꆃ菣ꮃꊂ苣膃苣뎃볯よ〮㈱‵Ⱨ躏軧㞇⸶┰볯銂뻥龁胣㲂牢ਾ卅ⵉ卍洠稯›㐶‴䴨⬠䠠㰩畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰫猯灵鮼猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ⼼畳㹰ⵈ䵎⁒㐨〰䴠穈‬䑃汃猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢츩㪴㔠㐮ⴲ⸵〳⠠Ɑ㠠⥈‬⸳㈵⠠ⱳ㈠⥈‬⸳㐴⠠ⱴ䨠㴠㘠㜮䠠ⱺ㈠⥈‬⸳㌲⠠ⱳ㐠⥈‬⸲㠸⠠ⱳ㈠⥈‬⸲㜷⠠ⱴ䨠㴠㘠㘮䠠ⱺ㐠⥈‬⸲㌵⠠ⱴ䨠㴠㜠㐮䠠ⱺ㈠⥈‬⸲〴⠠ⱳ㌠⥈‬⸲㔰⠠ⱱ䨠㴠㘠㠮䠠ⱺ㠠⥈‬⸱㤵ㄭ㔮‷洨‬䠴Ⱙㄠ㌮ⴹ⸱㔲⠠Ɑ㌠䠲Ⱙ〠㠮‹琨‬㵊㜠〮䠠ⱺ㘠⥈㰮䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖龮雦设ㅃ㰵牢ਾ†ⴲ뢂菣膃菣ꊂ菣躃⴩ⴱ㍛⠭孻㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃꪂ苣랂ꆃ菣ꮃ⴩ⴳ笨⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꆃ菣ꮃꊂ苣膃苣뎃ㄭꒂ菣嶫苣뾂菣ⶳⴱ苣뎃隌郥ꦉ䱃㜭⤸戼㹲ꖷ꣧ㆋ㰠牢ਾ†껥붖뻤䎋꺁럥讨ꢁ郥颧臣讉돦ꞁ胣⢁娹ㄬ娲⴩ⵎ㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣龃菣꺁믤辂苣ꮁ胣龮雦设ㅃ꺁럥讨ꞁ뻥覂苣龁ⴳ笨⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫苣궂苣綷菣膃菣⦫㌭⠭孻㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪菣膃菣⦫苣벂菣뢂菣銂铧蒁臣膀ⴲ뢂菣膃菣ꊂ菣躃⴩ⴱ㍛⠭孻㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃꪂ苣랂ꆃ菣ꮃ⴩ⴳ笨⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꆃ菣ꮃꊂ苣膃苣뎃��ꒂ菣嶫苣뾂菣ⶳⴱ苣뎃볯よ〮㠰〳朠‬㌴〮覼苣鞾臣芀戼㹲䔊䥓䴭⁓⽭㩺㜠㔱⠠⁍‫⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰볯㲛畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰱猯灵䠾中前⠠〴‰䡍ⱺ䌠䍄㱬畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾듎›⸵㈴㔭㌮‰洨‬䠸Ⱙ㌠㤮‸搨‬⁊‽⸹‱穈‬䠱Ⱙ㌠㤮′搨‬⁊‽⸹‱穈‬䠱Ⱙ㌠㠮′搨‬⁊‽⸹‶穈‬䠱Ⱙ㌠㜮‴搨‬⁊‽⸹‶穈‬䠱Ⱙ㌠㔮‱猨‬䠲Ⱙ㌠㐮‴琨‬⁊‽⸶‶穈‬䠲Ⱙ㈠㤮‶猨‬䠲Ⱙ㈠㠮‴猨‬䠲Ⱙ㈠㜮‷琨‬㵊㘠㜮䠠ⱺ㐠⥈‬⸲㌵⠠ⱴ䨠㴠㜠㔮䠠ⱺ㈠⥈‬⸲㠲⠠ⱳ㘠⥈‬⸲㔰⠠ⱱ䨠‽⸶‸穈‬䠸Ⱙㄠ㘮ⴰ⸱㠵⠠Ɑ㐠⥈‬⸱㤳ㄭ㈮‶洨‬㈳⥈‬⸰㤸⠠ⱴ䨠㴠㜠〮䠠ⱺ㘠⥈㰮䥄㹖胣邼볯颼볯醀⼼䥄㹖龮雦设ㅃ㰶牢ਾⴳ⡛ⴲ孻娨⴩苣꾂苣螃菣꾂㤭ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪苣膃菣⦫⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫苣龃菣嶎菣궃菣뎃ㄭꪂ菣ꮃ隌郥ꦉ䱃㠭⤲戼㹲ꖷ꣧ㆋ戼㹲 ⠠娹ㄬ娲⴩ⵎ㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣龃菣袼⸰㔱‰Ⱨ〠㈮〶洠潭覼苣뢂菣膃菣鮃菣ꂃ苣龃菣袼⸱〰洠覼臣뚺꟨閁臣膀苧뢅苣랂苣ꂃ볯よ㈮㔵朠‬⸰㠷‱浭汯볯膀㌨隃菣ꊃ菣궃菣궂苣⦷琨牥⵴菣膃菣⦫苣ꆃ菣ꮃ苣ꦃ菣袼⸰㈱‱䱭‬⸰㈵‱浭汯볯銂諥袁臣膀菣ꒂ苣궃苣Ꞃ菣隃藧蒰룤ꞁ〸蓢ꞁ芙雩ꪔ详鞁臣芀迥鲿뛦ꮁꏩ貒ꏩꦡ냦銂諥袁臣膀菣궂苣뎃臣붊蟥鞁臣芀鳦龩뇥銂蓧뒰ꇧ뢅菣낂菣랂苣ꂃ臣뺹蟧貾胣趂臩鞁胣鮸鳥许뿦꺸臣龁胣鞾苣貂臣议룦銂苣ꪃ苣늂菣ꮂ菣ꂃ苣궃菣袃苣ꦃ菣ꎂ菣袼菣鞃苣뎃ꊅ藩ꢂ菣ꮃ㴠㠠⼰〲볯ꞁ닧붣臣ꚁ㤨ⱚ㈱⥚中笭ⴳ⡛整瑲隃菣ꮃ苣ꆃ菣ꮃ苣ꪃ菣⦫苣궂苣嶷菣궃菣ꮃ⵽ⵎ㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣龃菣袼⸰ㄱ‴Ⱨ躏軧㖇⸸┵볯銂뻥龁胣㲂牢ਾ†㤨ⱚ㈱⥚中笭ⴳ⡛整瑲隃菣ꮃ苣ꆃ菣ꮃ苣ꪃ菣⦫苣궂苣嶷菣궃菣ꮃ⵽ⵎ㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣龃菣袼⸰醼볯枔‬⸰㔱′浭汯볯銂菣袃菣銃菣궃菣ꦃ菣袼⸱〰洠覼臣뚺꟨閁臣膀菣袃菣隃菣ꮃ苣뎃菣讃苣ꂃ菣ꮃ苣ꪃ菣袼⸰㈲‸䱭‬⸰㈲‸浭汯볯銂諥袁臣膀껥ꦸ臣㊧駦鎖铦貋臣龁胣趏뿥늶臣붣鋥龣ꇥ뒰苣ꂊ臣ꚁ胣ꊅ藩ꢂ菣ꮃ臣붊蟥鞁臣芀鳦龩뇥銂蓧뒰ꇧ뢅菣낂菣랂苣ꂃ臣뺹蟧貾胣趂臩鞁胣鮸鳥许뿦꺸臣龁胣鞾苣貂臣议룦銂苣ꪃ苣늂菣ꮂ菣ꂃ苣궃菣袃苣ꦃ菣ꎂ菣袼菣鞃苣뎃ꊅ藩ꢂ菣ꮃ㴠ㄠ〰〯胣㢜⼰〲볯膀볯꾂菣궃菣ꮃ菣⾠菣뾂菣벃菣₫‽〱⼰鲀〸㈯覼臣뺲ꏨ鞁臣㎦嬭㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃ嬩㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃꊂ菣躃鞃菣醃菣ⶳⴱ苣벃菣袼⸰㘰〴朠‬迥螎㘶㌮覼苣鞾臣芀戼㹲䔊䥓䴭��⽭㩺㘠㔳⠠⁍‫⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰볯㲛畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰱猯灵䠾中前⠠〴‰䡍ⱺ䌠䍄㱬畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾듎›⸵㈴㔭㌮‰洨‬䠶Ⱙ㌠㜮‹琨‬⁊‽⸵′穈‬䠲Ⱙ㈠㜮‸琨‬⁊‽⸶‷穈‬䠲Ⱙ㈠㘮ⴸ⸲〶⠠Ɑ㘠⥈‬⸲㈵⠠ⱴ䨠㴠㜠㐮䠠ⱺ㈠⥈‬⸲㐴⠠ⱴ䨠㴠㜠㘮䠠ⱺ㈠⥈‬⸲㠰ㄭ㤮‶洨‬䠸Ⱙㄠ㜮ⴱ⸱㘶⠠Ɑ㈠⥈‬⸱㈶ㄭ㔮‴洨‬䠲Ⱙㄠ㔮ⴰ⸱㘴⠠Ɑ㈠⥈‬⸱㤳ㄭ㈮‷洨‬㠳⥈‬⸰〹〭㠮‸洨‬䠶⸩䐼噉邀볯颼볯钼胣㲑䐯噉ਾ껥붖뻤䎋㜱戼㹲㌊⠭苣ꆃ菣ꮃ苣龃菣⦎菣궃菣ꮃ㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃ嬩㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃꮂ菣邃菣벃菣⢈賥袐觧䎩ⵌ㌸㰩牢ਾ럥讨‱戼㹲 㐠讃菣궃菣Ꞃ菣ꮃ苣ꮃ菣躃苣궃菣螃菣袃볯㖈ㄮ‶Ⱨ㈠⸵‱浭汯볯銂苣ꢂ菣ꮃ苣벃菣ꮃ볯ㆈ〵洠覼臣뚺꟨閁臣膀ⴳ뢂菣膃菣ꊂ菣躃鞃菣醃菣ⶳⴱ苣벃菣袼⸳〰洠ⱌ㈠⸵‱浭汯볯銂諥袁臣膀껥ꦸ臣㊧駦鎖鋦貋臣龁胣趏뿥늶臣ꢂ苣躃菣ꮃ苣ꂊ臣膀苣躁臣讂臣ꢁ臣㎧⠭苣ꆃ菣ꮃ苣龃菣⦎菣궃菣ꮃ㐨讃菣궃菣Ꞃ菣ꮃꮂ菣鲃菣벃菣较苣覃菣꾂菣ꪃ菣袼⸵㤴朠‬ㄷ㠮覼苣鞾臣芀戼㹲 龮雦设ㅃ럥讨ꞁ뻥覂苣龁㤨ⱚ㈱⥚中⠭ⴲ孻娨⴩苣꾂苣螃菣꾂㤭ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪苣膃菣⦫苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꊂ菣뎃볯よㄮ㐰朠‬⸰㠱‱浭汯볯銂苣궃菣鮃菣ꂃ볯㊈〮‰䱭볯ꮁ뫦ꎧ臣鮁胣袃菣ꢂ菣ꮃ苣龃菣袼⸰〱‱䱭‬⸰㈷′浭汯볯膀ⴳ뢂菣膃菣ꊂ菣躃鞃菣钃菣⢫ⴴ菣袃菣閃苣讃菣⦫苣벃菣趃菣袃菣ꒂ菣궃苣궃菣覃볯よㄮ〱朠‬⸰㘳‱浭汯볯銂諥袁臣膀ㄱ莄臣㊧駦鎖鋦貋臣龁胣趏뿥늶臣붣鋥龣ꇥ뒰苣ꂊ臣ꚁ胣꾂菣궃菣ꮃ菣ꞁ諦몇臣龁胣覜ꧦ꒱苣ꆄ냦ꮡ藩麃苣趃苣Ꚃ菣ꞁ매ꖇ뻥膀苣躁臣膀룦Ꞝ룤莿룧鞁臣芀뻥覂苣龁껦ꎸ苣ꊂ菣躃苣ꪃ苣늂菣ꮂ菣ꂃ苣궃菣袃苣ꦃ菣ꎂ菣袼菣鞃苣뎃ꊅ藩ꢂ菣ꮃ㴠ㄠ〰〯胣㢜⼰〲볯膀苣ꪃ苣늂菣ꮂ菣ꂃ苣궃菣袃苣ꦃ菣ꎂ菣袼苣궃菣鮃菣ꂃꆃ苣躃菣ꮃ㴠ㄠ〰〯胣㢜⼰〲볯ꞁ닧붣臣ꚁⴳ뢂菣膃菣ꊂ菣躃鞃菣钃菣⢫ⴲ孻娨⴩苣꾂苣螃菣꾂㤭ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪苣膃菣⦫⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫苣ꮃ菣ꆃ菣袃볯よ〮ㄵ‰Ⱨ躏軧㒇⸰┱볯銂뻥龁胣㲂牢ਾ卅ⵉ卍洠稯›〷‶䴨⬠䠠㰩畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰫猯灵鮼猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰ㄾ⼼畳㹰ⵈ䵎⁒㐨〰䴠穈‬䑃汃猼扵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰㌾⼼畳㹢 듎›⸵㈴㔭㈮‹洨‬䠶Ⱙ㐠ㄮ′琨‬⁊‽⸶‵穈‬䠲Ⱙ㌠㌮‸琨‬⁊‽⸶‷穈‬䠲Ⱙ㌠㈮′琨‬⁊‽⸶″穈‬䠲Ⱙ㈠㜮‷琨‬⁊‽⸶‷穈‬䠲Ⱙ㈠㘮‵琨‬⁊‽⸶‶穈‬䠲Ⱙ㈠㔮‴琨‬⁊‽⸶‸穈‬䠲Ⱙ㈠㌮‵琨‬⁊‽⸷‵穈‬䠲Ⱙ㈠㈮″猨‬䠶Ⱙ㈠〮ⴶ⸲〰⠠Ɑ㠠⥈‬⸱㐸ㄭ㜮‷洨‬䠲Ⱙㄠ㘮ⴰ⸱ㄵ⠠Ɑ㐠⥈‬⸱㘳ㄭ㌮‰洨‬㠳⥈‬⸰ㄹ〭㠮‶洨‬䠶⸩䐼噉��邀볯颼볯閼胣㲑䐯噉ਾ껥붖뻤䎋㠱戼㹲㈊⠭苣ꢂ菣ꮃ苣龃菣⦎中⠭ⴲ孻娨⴩苣꾂苣螃菣꾂㤭ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪苣膃菣⦫中嬭㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃꊂ苣袃苣龃菣⢉賥袐觧䎩ⵌ㐸㰩牢ਾ럥讨㰱牢ਾ†껥붖뻤䎋ꖷ꣧ㆋ臣貐꟦꺁触閳臣膀苣ꆃ菣ꮃ苣ꪃ苣뎃臣ꎻ苣誂臣膀ⱎⵎ苣ꢂ菣ꮃ苣ꪃ苣뎃苣ꢔ臣膀ⴲ뢂苣膃菣ꊂ菣躃⴩ⵎ㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃ⴩ⵎ⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫苣뮂菣ꊂ菣覃볯よㄮ㠰朠‬迥螎㘸〮覼苣鞾臣芀戼㹲䔊䥓䴭⁓⽭㩺㘠〹⠠⁍‫⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰볯㲛畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰱猯灵䠾中前⠠〴‰䡍ⱺ䌠䍄㱬畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾츠㪴㔠㐮ⴲ⸵〳⠠Ɑ㘠⥈‬⸳〶⠠ⱴ䨠㴠㜠㠮䠠ⱺㄠ⥈‬⸳㠴㌭㐮‷洨‬䠲Ⱙ㌠㈮‸琨‬⁊‽⸷‵穈‬䠱Ⱙ㌠㈮‵搨‬⁊‽㔱㔮䠠ⱺ㈠⥈‬⸲㜷⠠ⱴ䨠㴠㘠㈮䠠ⱺ㈠⥈‬⸲㈷㈭㘮‴洨‬䠲Ⱙ㈠㘮ⴱ⸲ㄵ⠠Ɑ㘠⥈‬⸲㤰ㄭ㤮″洨‬䠸Ⱙㄠ㘮ⴳ⸱㠴⠠Ɑ㐠⥈‬⸱㈴ㄭ㈮‰洨‬㠳⥈‬⸱㌰⠠ⱴ䨠㴠㜠ㄮ䠠ⱺ㘠⥈‬⸰㈹〭㠮‴洨‬䠶⸩䐼噉邀볯颼볯隼胣㲑䐯噉ਾ껥붖뻤䎋㤱戼㹲㌊⠭苣ꆃ菣ꮃ苣龃菣⦎中⠭ⴲ孻娨⴩苣꾂苣螃菣꾂㤭ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ膃苣綪苣膃菣⦫中嬭㤨ⱚ㈱⥚ꪂ苣뾂菣ꮂ㤭ㄬⴲ苣ꢂ菣ⶳⴱ苣ꮃ鞃菣醃菣ꊂ菣覃⠠賥袐觧䎩ⵌ㔸㰩牢ਾ럥讨㰱牢ਾ†껥붖뻤䎋ꖷ꣧ㆋ臣貐꟦꺁触閳臣膀苣ꆃ菣ꮃ苣ꪃ苣뎃臣ꎻ苣誂臣膀ⴳ뢂菣膃菣ꊂ菣躃鞃菣醃菣ꒂ菣꾂苣랂菣覃苣ꢔ臣膀ⴳ뢂菣膃菣ꊂ菣躃⴩ⵎ㈨笭⡛⥚ꪂ苣뾂菣莃苣⶯ⴹ苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣ꪂꢂ菣ꮃ⴩ⵎ⡛娹ㄬ娲⴩苣꾂苣螃苣ⶫⰹ㈱뢂苣뎃ㄭꒂ菣嶫菣궃菣뎃苣龃菣袼⸰㔰㜳朠‬迥螎㌸〮覼苣鞾臣芀戼㹲䔊䥓䴭⁓⽭㩺㘠㘷⠠⁍‫⥈猼灵砠汭獮樺㵰栢瑴㩰⼯睷⹷灪⹯潧樮≰⬾⼼畳㹰볯㲛畳⁰浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰱猯灵䠾中前⠠〴‰䡍ⱺ䌠䍄㱬畳⁢浸湬㩳灪∽瑨灴⼺眯睷樮潰朮⹯灪㸢㰳猯扵⤾츠㪴㔠㐮ⴲ⸵〳⠠Ɑ㘠⥈‬⸳〵㌭㐮‱洨‬䠲Ⱙ㌠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