(57)【要約】【課題】  インスリン抵抗性の悪化を効果的に予防またはインスリン抵抗性を改善できる物質および方法、ならびに、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を治療する方法およびそれら疾患を予防する方法を提供する。【解決手段】  １−ケストースを有効成分とするインスリン抵抗性の悪化予防または改善剤。本発明によれば、副作用や安全性をほとんど懸念することなく、簡便かつ効果的に、ヒトや動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善することができる。また、本発明によれば、ヒトや動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善することにより、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の予防ないし治療をすることができる。
2018179441.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１−ケストースを有効成分とするインスリン抵抗性の悪化予防または改善剤。
【請求項２】
糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の予防または治療に用いられることを特徴とする、請求項１に記載のインスリン抵抗性の悪化予防または改善剤。
【請求項３】
１−ケストースを有効成分とするインスリン抵抗性の悪化予防または改善用食品組成物。
【請求項４】
ヒトまたは動物に１−ケストースを摂取させることにより、前記ヒトまたは動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善する工程を有する、インスリン抵抗性の悪化予防または改善方法。
【請求項５】
糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を罹患しているヒトもしくは動物に、１−ケストースを摂取させることにより、前記ヒトまたは動物におけるインスリン抵抗性を改善する工程を有する、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の治療方法。
【請求項６】
糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を罹患する可能性があるヒトもしくは動物に、１−ケストースを摂取させることにより、前記ヒトまたは動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防する工程を有する、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の予防方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善するための剤、インスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善するための食品組成物、インスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善する方法、ならびに、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を治療する方法およびそれら疾患を予防する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
インスリンは、膵臓のランゲルハンス島のβ細胞より分泌されるペプチドホルモンである。インスリンの生理作用は、主として血糖を降下させることである。体内でのグルコースは、エネルギー源として重要である反面、高濃度のグルコースはそのアルデヒド基の反応性の高さのため生体内のタンパク質と反応して糖化反応を起こし、生体に有害な作用（グルコース毒性）をもたらすため、インスリンによりその濃度が常に一定範囲に保たれている。【０００３】
一方、インスリン抵抗性とは、インスリンに対する感受性が低下して、インスリン濃度に見合ったインスリン作用が得られていない状態を指す概念である。インスリン抵抗性が亢進すると、体内のインスリンの量に比して血糖降下作用が弱くなる。血糖を正常範囲に維持するためにはより多くのインスリンが必要となるため、インスリン抵抗性初期には、血液中のインスリン濃度が高い「高インスリン血症」が現れる。【０００４】
係るインスリン抵抗性や高インスリン血症は、糖尿病や高血圧、冠動脈疾患といった疾病の要因となることが報告されている（非特許文献１）。そこで、インスリン抵抗性を改善する物質が研究開発されており、例えば、特許文献１には、レモン果実の抽出物をスチレン系吸着樹脂に吸着させ、エタノール水溶液を用いて溶出させたものを有効成分とするインスリン抵抗性改善剤が、特許文献２には、α，α−トレハロースを有効成分とするインスリン抵抗性の予防および／または改善剤が、それぞれ開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第５５６３１８１号公報
【特許文献２】特許第５８６９８８２号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】GERALD M. REAVEN, DIABETES, VOL.37, 1988, pp.1595-1607
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、特許文献１や２に記載の物質をもってしても、インスリン抵抗性の悪化を効果的に予防またはインスリン抵抗性を改善できる物質や方法は未だ十分に提供されておらず、そのような物質や方法の開発が求められていた。本発明は、このような課題を解決するためになされたものであって、インスリン抵抗性の悪化を効果的に予防またはインスリン抵抗性を改善できるインスリン抵抗性の悪化予防または改善剤、インスリン抵抗性の悪化予防または改善用食品組成物、インスリン抵抗性の悪化予防または改善方法、ならびに、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の治療方法およびそれら疾患の予防方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、鋭意研究の結果、健常者モデル、肥満モデルおよび２型糖尿病モデルのいずれのラットにおいても、１−ケストースがインスリンに対する感受性を増強して、インスリン抵抗性の悪化を予防ないしインスリン抵抗性を改善することを見出した。そこで、これらの知見に基づいて、下記の各発明を完成した。【０００９】
（１）本発明に係るインスリン抵抗性の悪化予防または改善剤は、１−ケストースを有効成分とする。【００１０】
（２）本発明に係るインスリン抵抗性の悪化予防または改善剤は、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の予防または治療に用いることができる。【００１１】
（３）本発明に係るインスリン抵抗性の悪化予防または改善用食品組成物は、１−ケストースを有効成分とする。【００１２】
（４）本発明に係るインスリン抵抗性の悪化予防または改善方法は、ヒトまたは動物に１−ケストースを摂取させることにより、前記ヒトまたは動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善する工程を有する。【００１３】
（５）本発明に係る糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の治療方法は、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を罹患しているヒトもしくは動物に、１−ケストースを摂取させることにより、前記ヒトまたは動物におけるインスリン抵抗性を改善する工程を有する。【００１４】
（６）本発明に係る糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の予防方法は、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を罹患する可能性があるヒトもしくは動物に、１−ケストースを摂取させることにより、前記ヒトまたは動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防する工程を有する。
【発明の効果】
【００１５】
１−ケストースは、オリゴ糖の一種であり、タマネギやニンニク、大麦、ライ麦などの野菜や穀物にも含まれていて、古来より食経験を有する物質である。また、１−ケストースは、変異原性試験、急性毒性試験、亜慢性毒性試験および慢性毒性試験のいずれにおいても毒性が認められていない。これらのことから、１−ケストースの安全性は極めて高いといえる（食品と開発、Ｖｏｌ．４９、Ｎｏ．１２、第９頁、２０１４年）。また、１−ケストースは、水溶性が高く、砂糖に似た良好な甘味質を有するため、そのまま、あるいは甘味料等として、日常的に簡便に摂取することができるほか、様々な食品や医薬品等に容易に配合することができる。【００１６】
したがって、本発明によれば、副作用や安全性をほとんど懸念することなく、簡便かつ効果的に、ヒトや動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善することができる。また、本発明によれば、ヒトや動物におけるインスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善することにより、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の予防または治療をすることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】０〜２．７１ｇ／ｋｇ体重の摂取量で１−ケストースを摂取させたラット（Ａ〜Ｅ群）における、血清インスリン濃度を示す棒グラフである。
【図２】０〜２．７１ｇ／ｋｇ体重の摂取量で１−ケストースを摂取させたラット（Ａ〜Ｅ群）における、血糖値を示す棒グラフである。
【図３】高脂肪食を摂取したラットとそれを摂取していないラット、および、１−ケストースを摂取したラットとそれを摂取していないラットにおける、飼育期間中の体重を示す折れ線グラフである。
【図４】高脂肪食を摂取したラットとそれを摂取していないラット、および、１−ケストースを摂取したラットとそれを摂取していないラットにおける、血漿インスリン濃度を示す棒グラフである。
【図５】高脂肪食を摂取したラットとそれを摂取していないラット、および、１−ケストースを摂取したラットとそれを摂取していないラットにおける、血糖値を示す棒グラフである。
【図６】糖尿病モデルラットとそのコントロールラット、および、１−ケストースを摂取したラットとそれを摂取していないラットにおける、血漿インスリン濃度を示す棒グラフである。
【図７】糖尿病モデルラットとそのコントロールラット、および、１−ケストースを摂取したラットとそれを摂取していないラットにおける、血糖値を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明に係るインスリン抵抗性の悪化予防または改善剤、インスリン抵抗性の悪化予防または改善用食品組成物、インスリン抵抗性の悪化予防または改善方法、ならびに、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群の治療方法およびそれら疾患の予防方法について詳細に説明する。
【００１９】
「１−ケストース」は、１分子のグルコースと２分子のフルクトースからなる三糖類のオリゴ糖である。１−ケストースは、スクロースを基質として、特開昭５８−２０１９８０号公報に開示されているような酵素による酵素反応を行うことにより得ることができる。具体的には、まず、β−フルクトフラノシダーゼをスクロース溶液に添加し、３７℃〜５０℃で２０時間程度静置することにより酵素反応を行って、１−ケストース含有反応液を得る。この１−ケストース含有反応液を、特開２０００−２３２８７８号公報で開示されているようなクロマト分離法に供することよって、１−ケストースと他の糖（ブドウ糖、果糖、ショ糖、４糖以上のオリゴ糖）とを分離して精製し、高純度１−ケストース溶液を得る。続いて、この高純度１−ケストース溶液を濃縮した後、特公平６−７００７５号公報に開示されているような結晶化法で結晶化することにより、１−ケストースを結晶として得ることができる。
【００２０】
また、１−ケストースは市販のフラクトオリゴ糖に含まれているため、これをそのまま、あるいは、フラクトオリゴ糖から上述の方法により１−ケストースを分離精製して用いてもよい。すなわち、本発明の１−ケストースとして、１−ケストースを含有するオリゴ糖などの１−ケストース含有組成物を用いてもよい。１−ケストース含有組成物を用いる場合、１−ケストースの純度は８０質量％以上であることが好ましく、８５質量％以上であることがより好ましく、９０質量％以上であることがさらに好ましい。なお、本発明において、１−ケストースの「純度」とは、糖の総量を１００％とした場合の、１−ケストースの質量％をいう。
【００２１】
１−ケストースは、ヒトや動物に摂取させることにより用いる。摂取方法としては、例えば、１−ケストースを、そのまま、あるいは飲食物や医薬品の形態で、ヒトまたは動物に経口摂取させる方法を挙げることができる。１−ケストースの摂取量（投与量）としては、例えば、１日あたり０．０４ｇ／ｋｇ体重以上を挙げることができる。係る摂取量は、１日１回に限らず、複数回に分割して摂取してもよい。後述する実施例に示すように、当該摂取量の１−ケストースをヒトまたは動物に摂取させることにより、当該ヒトまたは動物のインスリンの感受性を増強して、インスリン抵抗性の悪化を予防またはインスリン抵抗性を改善することができる。
【００２２】
本発明において、「インスリン抵抗性が悪化する」とは、インスリン抵抗性が増大することをいう。また、「インスリン抵抗性の悪化を予防する」とは、インスリン抵抗性の増大を抑制することをいう。また、「インスリン抵抗性を改善する」とは、インスリン抵抗性を減少させることをいう。
【００２３】
ヒトのインスリン抵抗性の定量的測定は、下記（ｉ）〜（ｖｉｉ）に例示するような、当業者に公知の方法により行うことができる。
（ｉ）グルコースクランプ法（Ｄｅｆｒｏｎｚｏ  ＲＡら、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、第２３７巻、Ｅ２１４−Ｅ２２３、１９７９年）、
（ｉｉ）ｓｔｅａｄｙ  ｓｔａｔｅ  ｐｌａｓｍａ  ｇｌｕｃｏｓｅ法（Ｈａｒａｎｏ  Ｙら、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｌｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ  第４５巻、第１１２４−１１２７頁、１９７７年）、
（ｉｉｉ）ｍｉｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌ法（Ｂｅｒｇｍａｎ  ＲＮら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ、第３８巻、第１５１２−１５２７頁、１９８９年）、
（ｉｖ）ＨＯＭＡ法（Ｍａｔｔｈｅｗｓ  ＤＲら、Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ、第２８巻、第４１２−４１９頁、１９８５年）、
（ｖ）空腹時血糖値、
（ｖｉ）空腹時血中インスリン濃度、
（ｖｉｉ）経口ブドウ糖負荷試験時の血漿インスリン濃度（老松  寛ら、糖尿病、第４３巻  第３号、第２０５−２１２頁、２０００年）。
【００２４】
上記測定方法のうち、（ｉｖ）のＨＯＭＡ法であれば、まず、被検者の空腹時における血中インスリン濃度および血糖値を測定し、下記の式１によりＨＯＭＡ−ＩＲを算出する。
式１：ＨＯＭＡ−ＩＲ＝（空腹時血中インスリン濃度（μＵ／ｍＬ）×空腹時血糖値（ｍｇ／ｄＬ））／４０５
同一被検者におけるＨＯＭＡ−ＩＲの増大はインスリン抵抗性の増大を意味し、ＨＯＭＡ−ＩＲの減少はインスリン抵抗性の減少を意味する。よって、１−ケストースを摂取することによりＨＯＭＡ−ＩＲの増大を抑制できれば、本発明によりインスリン抵抗性の悪化を予防できたと判断することができる。また、１−ケストースを摂取することにより、摂取前よりＨＯＭＡ−ＩＲを低い値とすることができれば、本発明によりインスリン抵抗性を改善できたと判断することができる。
【００２５】
また、一般に、ＨＯＭＡ−ＩＲが１．６以下であれば「インスリン抵抗性が陰性」、１．６超２．５未満であれば「インスリン抵抗性陽性の疑い」、２．５以上であれば「インスリン抵抗性が陽性」と判断できる（総医研クリニック  西谷真人，SOIKEN 臨床試験事情  代謝・内分泌領域  糖代謝・インスリン抵抗性，[online]，［平成２９年３月３０日検索］，インターネット＜URL：http://www.soiken.info/clinical/area02/content01.html＞）。よって、ＨＯＭＡ−ＩＲが１．６以下のヒトが、１−ケストースを摂取することによりＨＯＭＡ−ＩＲを１．６以下に維持できれば、本発明によりインスリン抵抗性を予防できたと判断することができる。また、ＨＯＭＡ−ＩＲが１．６超のヒトが、１−ケストースを摂取することにより、摂取前よりＨＯＭＡ−ＩＲを低い値とすることができれば、本発明によりインスリン抵抗性を改善できたと判断することができる。
【００２６】
また、上記測定方法のうち、（ｖｉ）の空腹時血中インスリン濃度であれば、同一被検者における空腹時血中インスリン濃度の増大はインスリン抵抗性の増大を意味し、ＨＯＭＡ−ＩＲの減少はインスリン抵抗性の減少を意味すると解釈することができる。よって、１−ケストースを摂取することにより空腹時血中インスリン濃度の増大を抑制できれば、本発明によりインスリン抵抗性の悪化を予防できたと判断することができる。また、１−ケストースを摂取することにより、摂取前より空腹時血中インスリン濃度を低い値とすることができれば、本発明によりインスリン抵抗性を改善できたと判断することができる。
【００２７】
また、一般に、空腹時血中インスリン濃度が２〜１０μＵ／ｍＬであれば「インスリン抵抗性が陰性」、１０μＵ／ｍＬ超１５μＵ／ｍＬ未満であれば「インスリン抵抗性陽性の疑い」、１５μＵ／ｍＬ以上であれば「インスリン抵抗性が陽性」と判断できる（総医研クリニック  西谷真人，SOIKEN 臨床試験事情  代謝・内分泌領域  糖代謝・インスリン抵抗性，[online]，［平成２９年３月３０日検索］，インターネット＜URL：http://www.soiken.info/clinical/area02/content01.html＞）。よって、空腹時血中インスリン濃度が２〜１０μＵ／ｍＬのヒトが、１−ケストースを摂取することにより空腹時インスリン値を２〜１０μＵ／ｍＬに維持できれば、本発明によりインスリン抵抗性を予防できたと判断することができる。また、空腹時血中インスリン濃度が１０μＵ／ｍＬ超のヒトが、１−ケストースを摂取することにより、摂取前より空腹時血中インスリン濃度を低い値とすることができれば、本発明によりインスリン抵抗性を改善できたと判断することができる。
【００２８】
なお、血糖値は、グルコースオキシダーゼ法など当業者に公知の方法により測定することができる。簡便には、「アントセンスＩＩＩ（堀場製作所）」や「フリースタイルライト（アボットジャパン社）」、「ケアファスト（ニプロ社）」などの当該測定原理を利用した市販の血糖測定器を用いて測定することができる。
【００２９】
インスリン濃度もまた、ＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ）法など当業者に公知の方法により測定することができる。簡便には、「Mercodia Human Insulin ELISA Kit（Mercodia社）」、「レビス  インスリン−ラット（シバヤナギ社）」、「ＹＫ０６０  Ｉｎｓｕｌｉｎ  ＥＬＩＳＡ（矢内原研究所）」 などの当該測定原理を利用した市販のインスリン測定キットを用いて測定することができる。
【００３０】
本発明のインスリン抵抗性の予防または改善剤の具体的な態様としては、例えば、医薬品や医薬部外品、食品添加物、サプリメントなどの健康食品などを挙げることができる。
【００３１】
１−ケストースを含有する医薬品や医薬部外品、サプリメントの剤型は特に限定されず、投与方法に適した剤型を適宜選択することができる。例えば、経口投与の場合には、散剤、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、顆粒剤、ドライシロップ剤、液剤、シロップ剤、ドロップ剤、ドリンク剤等の固形または液状の剤型にすることができる。
【００３２】
上記各剤型の医薬品や医薬部外品、サプリメントは、当業者に公知の方法で製造することができる。例えば、散剤であれば、１−ケストース８００ｇおよび乳糖２００ｇをよく混合した後、９０％エタノール３００ｍＬを添加して湿潤させる。続いて、湿潤粉末を造粒した後、６０℃で１６時間通風乾燥し、その後、整粒して、適当な細かさの散剤１０００ｇ（１−ケストース含有量８００ｍｇ／１ｇ）を得ることができる。また、錠剤であれば、１−ケストース３００ｇ、粉末還元水飴３８０ｇ、コメデンプン１８０ｇおよびデキストリン１００ｇをよく混合した後、９０％エタノール３００ｍＬを添加して湿潤させる。続いて、湿潤粉末を押し出し造粒した後、６０℃で１６時間通風乾燥して顆粒を得る。その後、この顆粒を８５０μｍの篩を用いて整粒し、続いて顆粒４７０ｇにショ糖脂肪酸エステル５０ｇを添加して混合した後、ロータリー打錠機（６Ｂ−２、菊水製作所製）を用いて打錠し、直径８ｍｍ、重量２００ｍｇの錠剤５０００錠（１−ケストース含有量６０ｍｇ／１錠）を得ることができる。
【００３３】
本発明のインスリン抵抗性の予防または改善用食品組成物の具体的な態様としては、例えば、飲料、乳製品、食用に供する顆粒、ペースト、調味料、レトルト食品、ベビーフード、発酵食品、保存食、水産加工品、食肉加工品、穀物加工品などの加工食品、食品添加物、健康食品、動物飼料などを挙げることができる。
【００３４】
１−ケストースは、各種の飲食品や食品添加物、動物飼料の通常の製造過程で、添加して用いることができる。１−ケストースの甘味度は３０で、その味質・物性・加工性はショ糖に近いことから、各種飲食物の製造過程において、砂糖の一部または全部を１−ケストースに置き換えるなどして、砂糖と同様に扱って各種の飲食品や食品添加物、動物飼料を製造することができる。
【００３５】
インスリン抵抗性は、糖尿病や高血圧、冠動脈疾患といった疾病の要因となることが報告されている（非特許文献１）。また、インスリン抵抗性は、耐糖能異常、肥満症（特に内臓肥満）、高脂血症、低ＨＤＬコレステロール血症の患者に多くみられる。このことから、インスリン抵抗性は、血糖値だけでなく血圧やコレステロール、中性脂肪の代謝にも影響すると考えられている。内臓脂肪型肥満（内臓肥満・腹部肥満）に高血糖・高血圧・脂質異常症のうち２つ以上の症状が一度に出ている状態はメタボリック症候群と呼ばれ、インスリン抵抗性によりさまざまな異常が同時に起きているといえる。
【００３６】
そして、インスリン増感剤であるピオグリタゾンは、遺伝性肥満・糖尿病マウス（イエローＫＫマウス）に投与すると、高血糖、脂質異常（高脂血症）、高インスリン血症および耐糖能異常が顕著に改善すること、インスリン抵抗性が陽性である老齢の肥満ビーグルドッグに投与すると、空腹時血糖値および空腹時血中脂質の値が減少し、食後の血中トリグリセリド濃度の上昇も抑えられることが報告されている（Ｉｋｅｄａ  Ｈら、Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ．、第４０巻、第１５６−１６２頁、１９９０年）。
【００３７】
さらに、１０％フルクトース溶液の継続的飲水により、インスリン抵抗性ならびに高脂血、高インスリン血症および高血圧が誘発されたラットに、１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の投与量でピオグリタゾンを４週間投与すると、いずれの症状も改善することが報告されている（Ｍａｓａｍｉ  Ｓ．ら、Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、第７４巻、第２９７−３０２頁、１９９７年）。また、インスリン増感剤であるピオグリタゾンまたはインスリン分泌促進剤であるグリメピリドを、２型糖尿病および冠動脈疾患の患者に投与し、動脈硬化の進行抑制についての効果を比較したところ、ピオグリタゾンに当該進行抑制効果が確認されたことが報告されている（Ｎｉｓｓｅｎ  ＳＥら，ＪＡＭＡ，第２９９巻、第１５６１−１５７３頁、２００８年）。
【００３８】
すなわち、これらのピオグリタゾンに関する報告に基づけば、インスリン感受性を増強してインスリン抵抗性の悪化を予防ないし改善することにより、糖尿病、耐糖能異常、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患およびメタボリック症候群の予防ないし治療をすることができると考えられる。
【００３９】
以上のことから、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を罹患しているヒトや動物に１−ケストースを摂取させて、インスリン抵抗性を改善することにより、当該罹患している疾患を治療することができる。また、１−ケストースは、上記疾患の治療用医薬品を製造するために使用することができる。
【００４０】
同様に、糖尿病、耐糖能異常、肥満症、高脂血症、動脈硬化、高血圧症、心疾患またはメタボリック症候群を罹患する可能性があるヒトや動物に１−ケストースを摂取させて、インスリン抵抗性を予防することにより、当該罹患する可能性がある疾患を予防することができる。また、１−ケストースは、上記疾患の予防用医薬品を製造するために使用することができる。
【００４１】
以下、本発明について、各実施例に基づいて説明する。なお、本発明の技術的範囲は、これらの実施例によって示される特徴に限定されない。また、本実施例においては、「１−ケストース」として、純度９９質量％で１−ケストースを含有する組成物（物産フードサイエンス社）を用いた。
【実施例】
【００４２】
＜実施例１＞普通食を摂取させたラット（健常者モデル）における１−ケストースの効果
（１）ラットの飼育
１−ケストースを０、０．５、１、２．５および５質量％となるように配合した飼料を日本クレア社に委託して調製した。飼料の組成を下記に示す。
《飼料の組成》（単位は質量％）
コーンスターチ：３９．７４８６、ミルクカゼイン：２０、アルファ化コーンスターチ：１３．２、グラニュー糖またはグラニュー糖および１−ケストース：１０、精製大豆油：７、セルロースパウダー：５、ミネラルミックス：３．５、ビタミンミックス：１、Ｌ−シスチン：０．３、重酒石酸コリン：０．２５、第３ブチルヒドロキノン：０．００１４。【００４３】
４０匹のＳＤラット（日本エスエルシー社）を８匹ずつ５つの群に分け、Ａ〜Ｅ群とした。Ａ群には１−ケストースを配合しない飼料を、Ｂ〜Ｅ群には１−ケストースを配合した飼料をそれぞれ自由摂取させながら、３０日間飼育した。飼育条件は温度２３±１℃、明期１２時間（８：００〜２０：００）および暗期１２時間（２０：００〜８：００）とした。【００４４】
なお、ラットにおける薬物の摂取量は、下記の式１により、ヒト成人における摂取量に換算できることが報告されている（特開２０１４−５２６５２１号公報の段落［００６５］、Ｓｈａｎｎｏｎ Ｒｅａｇａｎ−Ｓｈａｗら、Ｔｈｅ ＦＡＳＥＢ Ｊｏｕｒｎａｌ、Ｖｏｌ．２２、２００７年３月、第６５９〜６６１頁）。
《式１》ヒト成人における１日の１−ケストース摂取量（ｇ／ｋｇ体重）＝ラットにおける１日の１−ケストースの摂取量（ｇ／ｋｇ体重）×６／３７
そこで、式１により、ラットにおける１日の１−ケストース摂取量を、ヒト成人におけるものに換算した。その結果を表１に示す。【００４５】
（２）血清インスリン濃度および血糖値の測定
本実施例１（１）の各群のラットの下大静脈から血液を採取し、１００００×ｇにて遠心分離して血清を得た。得られた血清について、ＥＬＩＳＡ法によりインスリンの濃度を、グルコースオキシダーゼ法によりグルコースの濃度をそれぞれ測定し、各群毎に平均値および標準偏差を算出した。その結果を表１に示す。また、血清インスリン濃度については図１に、血糖値については図２に、それぞれ棒グラフを示す。【００４６】
【表１】
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【００４７】
表１および図１に示すように、血清インスリン濃度は、Ａ群と比較してＢ、Ｃ、ＤおよびＥ群で有意に小さかった。また、血清インスリン濃度の大きさを各群間で比較すると、Ａ群＞Ｂ群≒Ｃ群＞Ｄ群＞Ｅ群の順であった。すなわち、１−ケストースを摂取したラットでは、１−ケストースを摂取しないラットと比較して、血清インスリン濃度が小さかった。また、１−ケストースの摂取量（飼料における１−ケストースの配合量）が大きいほど、血清インスリン濃度が小さい傾向であった。【００４８】
一方、表１および図２に示すように、血糖値は、Ａ〜Ｅ群で同等であった。すなわち、１−ケストースを摂取したラットと、１−ケストースを摂取しないラットとは、血糖値が同等であった。また、１−ケストースの摂取量の大小にかかわらず、血糖値は同等であった。【００４９】
すなわち、１−ケストースを摂取したラットと、１−ケストースを摂取しないラットとは、血糖値が同等であるにもかかわらず、前者は血清インスリン濃度が小さかった。このことから、１−ケストースを摂取したラットでは、インスリンの感受性が増強されたことが明らかになった。よって、これらの結果から、１−ケストースを摂取することにより、インスリン抵抗性の悪化（インスリン抵抗性の増大）を予防できることが明らかになった。【００５０】
＜実施例２＞高脂肪食を摂食させたラット（肥満モデル）における１−ケストースの効果
（１）ラットの飼育
ＳＤラット（日本エスエルシー社）を６〜８匹ずつ４つの群に分け、Ａ〜Ｄ群とした。飼育期間中、Ａ群およびＣ群には、水道水を自由飲水させた。一方、Ｂ群およびＤ群には、精製水に２質量％となるように１−ケストースを溶解した溶液を自由飲水させることにより、１−ケストースを摂取させた。また、Ａ群およびＢ群には、「普通食」としてＤ１２４９２Ｊ（リサーチダイエット社）を、Ｃ群およびＤ群には「高脂肪食」としてＤ１２４９２（リサーチダイエット社）をそれぞれ自由摂取させた。その他の飼育条件は実施例１（１）と同様にして、１３５日間飼育した。飼料の組成を下記に示す。【００５１】
《普通食の飼料（Ｄ１２４９２Ｊ）の組成》（単位は質量％）
カゼイン：２００、Ｌ−シスチン：３、コーンスターチ：５０６．２、マルトデキストリン  １０：１２５、スクロース：６８．８、セルロース  ＢＷ２００：５０、精製大豆油：２５、ラード：２０、ミネラルミックス  Ｓ１００２６：１０、リン酸二カルシウム：１３，炭酸カルシウム：５．５、クエン酸カリウム１水和物：１６．５、ビタミンミックス  Ｖ１０００１：１０、重酒石酸コリン：２、黄色合成着色料（ＦＤ＆Ｃ  Ｙｅｌｌｏｗ  Ｄｙｅ＃１）：０．０４、青色合成着色料（ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｄｙｅ＃１）：０．０１。
《高脂肪食の飼料（Ｄ１２４９２）の組成》（単位は質量％）
カゼイン：２００、Ｌ−シスチン：３、マルトデキストリン  １０：１２５、スクロース：６８．８、セルロース  ＢＷ２００：５０、精製大豆油：２５、ラード：２４５、ミネラルミックス  Ｓ１００２６：１０、リン酸二カルシウム：１３，炭酸カルシウム：５．５、クエン酸カリウム１水和物：１６．５、ビタミンミックス  Ｖ１０００１：１０、重酒石酸コリン：２、青色合成着色料（ＦＤ＆Ｃ  Ｂｌｕｅ  Ｄｙｅ＃１）：０．０５。【００５２】
なお、ラットの１日当たりの平均摂水量は約２２ｍＬ／匹であったことから、Ｂ群およびＤ群では、１日当たり約０．４４ｇ／匹の１−ケストースを摂取したと考えられる。【００５３】
（２）体重、血漿インスリン濃度および血糖値の測定
本実施例２（１）の各群のラットについて、飼育期間中の１週間経過毎に体重を測定して各群毎に平均値を算出し、折れ線グラフに表した。その結果を図３に示す。なお、飼育期間開始時の各群の体重（ｇ）は、Ａ群が２７２±５、Ｂ群が２６８±６、Ｃ群が２７２±３、Ｄ群が２６９±３であった。【００５４】
また、実施例１（２）に記載の方法により血漿インスリン濃度および血糖値を測定して各群毎に平均値および標準偏差を算出した。その結果を表２に示す。表２には、飼育期間終了時（１９週間経過時）における体重の平均値および標準偏差も併せて示す。また、インスリン濃度については図４に、グルコース濃度については図５に、それぞれ棒グラフを示す。【００５５】
【表２】
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【００５６】
表２および図３に示すように、飼育期間終了時の体重は、Ａ群およびＢ群と比較して、Ｃ群およびＤ群で大きかった。すなわち、普通食を摂取したラットと比較して、高脂肪食を摂取したラットでは体重が大きかったことから、高脂肪食の摂取により肥満が生じたと考えられた。【００５７】
一方、表２および図４に示すように、血漿インスリン濃度は、Ａ群、Ｂ群およびＤ群はいずれも同等であり、これらの群と比較してＣ群で顕著に大きかった。すなわち、高脂肪食を摂取し、かつ１−ケストースを摂取しなかったラットでは、普通食を摂取したラットと比較して、血漿インスリン濃度が顕著に大きかった。これに対して、高脂肪食を摂取し、かつ１−ケストースを摂取したラットでは、普通食を摂取したラットと同等の血漿インスリン濃度であった。【００５８】
また、表２および図５に示すように、血糖値は、Ａ〜Ｄ群で同等であった。すなわち、普通食を摂取したラットと高脂肪食を摂取したラットとは、１−ケストースの摂取の有無にかかわらず、血糖値は同等であった。【００５９】
すなわち、高脂肪食を摂取し、かつ１−ケストースを摂取しなかったラットでは、肥満の状態が生じるともに、インスリン抵抗性が増大した。これに対して、高脂肪食を摂取し、かつ１−ケストースを摂取したラットでは、肥満の状態が生じたにもかかわらず、インスリン抵抗性が増大しなかった。よって、これらの結果から、１−ケストースを摂取することにより、肥満や肥満症等の疾患において見られるインスリン抵抗性の悪化（インスリン抵抗性の増大）を予防できることが明らかになった。【００６０】
＜実施例３＞２型糖尿病モデルにおける１−ケストースの効果
（１）ラットの飼育
２型糖尿病の病態を呈するモデル動物であるＯＬＥＴＦ（Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty）ラット（日本エスエルシー社）と、そのコントロールであるＬＥＴＯ（Long-Evans Tokushima Otsuka）ラット（日本エスエルシー社）とを用意した。ＬＥＴＯラットを５匹ずつ２つの群に分け、Ａ群およびＢ群とした。また、ＯＬＥＴＦラットを８匹ずつ３つの群に分け、Ｃ群、Ｄ群およびＥ群とした。飼育期間中、Ａ群およびＣ群には実施例１（１）の「１−ケストースを配合しない飼料」を、Ｂ群およびＥ群には「１−ケストースを５質量％となるように配合した飼料」を、Ｄ群には「１−ケストースを１質量％となるように配合した飼料」を、それぞれ自由摂取させた。その他の飼育条件は実施例１（１）と同様にして、１４日間飼育した。【００６１】
（２）血漿インスリン濃度および血糖値の測定
本実施例３（１）の各群のラットについて、実施例１（２）に記載の方法により血漿インスリン濃度および血糖値を測定して各群毎に平均値および標準偏差を算出した。その結果を表３に示す。また、血漿インスリン濃度については図６に、血糖値については図７に、それぞれ棒グラフを示す。【００６２】
【表３】
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【００６３】
表３および図６に示すように、血漿インスリン濃度は、Ａ群およびＢ群と比較して、Ｃ群、Ｄ群およびＥ群で大きかった。すなわち、ＬＥＴＯラットと比較して、ＯＬＥＴＦラットでは血漿インスリン濃度が大きかった。
また、ＬＥＴＯラットの間で比較すると、血漿インスリン濃度は、Ａ群と比較してＢ群で小さかった。すなわち、１−ケストースを摂取したＬＥＴＯラットでは、１−ケストースを摂取しないＬＥＴＯラットと比較して、血漿インスリン濃度が小さかった。
また、ＯＬＥＴＦラットの間で比較すると、血漿インスリン濃度の大きさは、Ｃ群＞Ｄ群＞Ｅ群の順であった。すなわち、１−ケストースを摂取したＯＬＥＴＦラットでは、１−ケストースを摂取しないＯＬＥＴＦラットと比較して血漿インスリン濃度が小さく、１−ケストースの摂取量が大きいほど、血漿インスリン濃度が小さかった。【００６４】
一方、表３および図７に示すように、血糖値はＡ〜Ｅ群で同等であった。すなわち、ＬＥＴＯラットとＯＬＥＴＦラットとは、１−ケストースの摂取の有無にかかわらず、血糖値は同等であった。【００６５】
すなわち、ＯＬＥＴＦラットでは、ＬＥＴＯラットと比較して血糖値が同等であった一方で血漿インスリン濃度が高かったことから、インスリン抵抗性が増大していた。そして、１−ケストースを摂取したＯＬＥＴＦラットと１−ケストースを摂取しないＯＬＥＴＦラットとは、血糖値が同等であるにもかかわらず、前者は血漿インスリン濃度が小さかった。このことから、１−ケストースを摂取したＯＬＥＴＦラットでは、インスリンの感受性が増強されて、インスリン抵抗性が改善したことが明らかになった。よって、これらの結果から、１−ケストースを摂取することにより、２型糖尿病等の疾患において見られるインスリン抵抗性を改善できることが明らかになった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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