(57)【要約】（ｉ）下式（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）で示される薬物リンカーと抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲート、（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、及び、（ｉｖ）界面活性剤、を含む医薬組成物、並びに該医薬組成物の凍結乾燥方法。2019039483.tif 000039
2019039483.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）界面活性剤、
を含む、医薬組成物；
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式
【化１】
2019039483.tif 000038
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである）。
【請求項２】
界面活性剤がポリソルベート８０又はポリソルベート２０である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）３〜８０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）２４〜３２０ｍｇのスクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）０．０５〜１．６ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０〜４０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース又は１００ｍｇのトレハロース水和物、及び、
（ｉｖ）０．２〜０．４ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、請求項１から３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０又は２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、請求項１から４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが４．０〜７．０である、請求項１から５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＨＥＲ３抗体、抗ＴＲＯＰ２抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又は抗ＧＰＲ２０抗体である、請求項１から６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ２抗体である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
抗ＨＥＲ２抗体が、配列番号１においてアミノ酸番号１乃至４４９に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２においてアミノ酸番号１乃至２１４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、請求項８又は９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．５である、請求項８から１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８９ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．０４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、請求項８から１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．４５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、請求項８から１０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ３抗体である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
抗ＨＥＲ３抗体が、配列番号３に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、請求項１４又は１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート２０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．４である、請求項１４から１６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８１ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．１４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、請求項１４から１６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．０６ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．７ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、請求項１４から１６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＴＲＯＰ２抗体である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
抗ＴＲＯＰ２抗体が、配列番号５においてアミノ酸番号２０乃至４７０に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号６においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が３から５個の範囲である、請求項２０又は２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが６．０である、請求項２０から２２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．７８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．０５ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、請求項２０から２２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．８８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び５．２６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、請求項２０から２２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗Ｂ７−Ｈ３抗体である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
抗Ｂ７−Ｈ３抗体が、配列番号７においてアミノ酸番号２０乃至４７１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号８においてアミノ酸番号２１乃至２３３に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が３から５個の範囲である、請求項２６又は２７に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート２０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．９である、請求項２６から２８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．６５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．２２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、請求項２６から２８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．２３ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び６．１２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、請求項２６から２８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＧＰＲ２０抗体である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
抗ＧＰＲ２０抗体が、配列番号９に記載のアミノ酸番号２０乃至４７２に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号１０においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、請求項３２又は３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．４である、請求項３２から３４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．３２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．６６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、請求項３２から３４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１．６２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び８．２９ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、請求項３２から３４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
注射剤である、請求項１から３７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
水性注射剤である、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
凍結された、請求項３９又は４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
凍結乾燥注射剤である、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
褐色バイアルに格納された、請求項４２に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
がんの治療用である、請求項１から４３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
（１）所定量の、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）界面活性剤、
を含む水溶液を調製する工程、
（２）必要に応じて、水溶液のｐＨを所定の値に調整する工程、次いで、
（３）水溶液を凍結乾燥する工程、
を含む、請求項４２に記載の医薬組成物の製造方法。
【請求項４６】
水溶液を凍結乾燥する工程が、水溶液の共融点付近の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、請求項４５に記載の製造方法；
（ここで、共融点付近とは、共融点よりも１．５℃低い温度から、共融点よりも１．５℃高い温度の範囲を示す）。
【請求項４７】
共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、１次乾燥するプロセスの時間が短縮されることを特徴とする、請求項４６に記載の製造方法。
【請求項４８】
共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、よりシュリンクが少ない凍結乾燥ケーキが得られることを特徴とする、請求項４６又は４７に記載の製造方法。
【請求項４９】
水溶液を凍結乾燥する工程が、−４〜−１℃の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、請求項４５に記載の製造方法。
【請求項５０】
水溶液を凍結乾燥する工程が、−５〜５℃の棚温度かつ５〜１５Ｐａの真空下で１次乾燥するプロセスをさらに含む、請求項４９に記載の製造方法。
【請求項５１】
水溶液を凍結乾燥する工程が、４０〜５０℃の棚温度かつ５〜１５Ｐａの真空下で２次乾燥するプロセスをさらに含む、請求項５０に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の抗体−薬物コンジュゲートの製剤及びその凍結乾燥方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
がん細胞表面に発現し、かつ細胞に内在化できる抗原に結合する抗体に、細胞毒性を有する薬物を結合させた抗体−薬物コンジュゲート（Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅ；  ＡＤＣ）は、がん細胞に選択的に薬物を送達できることによって、がん細胞内に薬物を蓄積させ、がん細胞を死滅させることが期待できる（非特許文献１〜５）。【０００３】
抗体−薬物コンジュゲートの一つとして、抗体とトポイソメラーゼＩ阻害剤であるエキサテカンを構成要素とする抗体−薬物コンジュゲートが知られている（特許文献１〜８、非特許文献６、７）。これらの抗体−薬物コンジュゲートは、優れた抗腫瘍効果と安全性を有することから、現在、臨床試験が進行中である。【０００４】
抗体−薬物コンジュゲートの製剤としては、メイタンシノイドを構成要素とする抗体−薬物コンジュゲートの製剤（特許文献９〜１２）、モノメチルオーリスタチンＥを構成要素とする抗体−薬物コンジュゲートの製剤（特許文献１３〜１５）、及びＳＮ−３８を構成要素とする抗体−薬物コンジュゲートの製剤（特許文献１６）等が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２０１４／０５７６８７号
【特許文献２】国際公開第２０１４／０６１２７７号
【特許文献３】国際公開第２０１５／０９８０９９号
【特許文献４】国際公開第２０１５／１１５０９１号
【特許文献５】国際公開第２０１５／１４６１３２号
【特許文献６】国際公開第２０１５／１５５９７６号
【特許文献７】国際公開第２０１５／１５５９９８号
【特許文献８】国際公開第２０１８／１３５５０１号
【特許文献９】国際公開第２００４／００４６３９号
【特許文献１０】国際公開第２００４／１１０４９８号
【特許文献１１】国際公開第２００７／０１９２３２号
【特許文献１２】国際公開第２０１５／０５９１４７号
【特許文献１３】国際公開第２０１０／０８１００４号
【特許文献１４】国際公開第２０１４／１４３７６５号
【特許文献１５】国際公開第２０１５／１５７２８６号
【特許文献１６】国際公開第２０１４／０９２８０４号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5-13.
【非特許文献２】Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529-537.
【非特許文献３】Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445-1452.
【非特許文献４】Senter P. D., et al., Nature Biotechnology (2012) 30, 631-637.
【非特許文献５】Howard A. et al., J Clin Oncol 29: 398-405.
【非特許文献６】Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research (2016) 22(20), 5097-5108.
【非特許文献７】Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039-1046.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
抗体製剤における凝集体の形成及び分解物の生成は、該製剤の投与を受ける患者に免疫原性や静脈障害を与える要因になる等、医療上、望ましくない影響を及ぼす。従って、抗体の製剤化にあたっては、凝集体の形成及び分解物の生成を抑制することが求められており、種々の医薬組成物（例えば、水性注射剤及び凍結乾燥注射剤等）が検討されている。
しかし、抗体−薬物コンジュゲートの製剤化にあたっては、抗体部分のみならず薬物リンカー部分特有の物性も考慮しなければならず、より複雑な検討が必要とされる。
また、スクロースやトレハロースを含有する水溶液から凍結乾燥注射剤を調製する場合には、（１）１次乾燥するプロセスが長時間となる、（２）凍結乾燥ケーキにシュリンクが生じやすくなる、などの問題点がある。
本発明は、特定の抗体−薬物コンジュゲートにおいて、凝集体の形成及び分解物の生成を抑制した医薬組成物（特に水性注射剤及び凍結乾燥注射剤）、並びに水溶液から凍結乾燥注射剤への効率的な凍結乾燥方法を提供することが主な課題である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、特定の抗体−薬物コンジュゲートにおいて、凝集体の形成及び分解物の生成を抑制した医薬組成物（特に水性注射剤及び凍結乾燥注射剤）を見出した。また、水溶液から凍結乾燥注射剤への効率的な凍結乾燥方法を見出した。【０００９】
すなわち、本発明は、
［１］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）界面活性剤、
を含む、医薬組成物；
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式【００１０】
【化１】
2019039483.tif 000003
【００１１】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである）。
［２］
界面活性剤がポリソルベート８０又はポリソルベート２０である、［１］に記載の医薬組成物。
［３］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）３〜８０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）２４〜３２０ｍｇのスクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）０．０５〜１．６ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、［１］又は［２］に記載の医薬組成物。
［４］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０〜４０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース又は１００ｍｇのトレハロース水和物、及び、
（ｉｖ）０．２〜０．４ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、［１］から［３］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［５］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース、及び、
（ｉｖ）ポリソルベート８０又はポリソルベート２０
を含む、［１］又は［２］に記載の医薬組成物。【００１２】
［６］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）３〜８０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）２４〜３２０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．０５〜１．６ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、［１］、［２］又は［５］に記載の医薬組成物。
［７］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０〜４０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２〜０．４ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、［１］、［２］、［５］又は［６］に記載の医薬組成物。
［８］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０又は２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、［１］から［７］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［９］
抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが４．０〜７．０である、［１］から［８］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［１０］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が２から８個の範囲である、［１］から［９］のいずれか１項に記載の医薬組成物。【００１３】
［１１］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＨＥＲ３抗体、抗ＴＲＯＰ２抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、又は抗ＧＰＲ２０抗体である、［１］から［１０］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［１２］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ２抗体である、［１１］に記載の医薬組成物。
［１３］
抗ＨＥＲ２抗体が、配列番号１においてアミノ酸番号１乃至４４９に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２においてアミノ酸番号１乃至２１４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、［１２］に記載の医薬組成物。
［１４］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、［１２］又は［１３］に記載の医薬組成物。
［１５］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．５である、［１２］から［１４］のいずれか１項に記載の医薬組成物。【００１４】
［１６］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８９ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．０４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、［１２］から［１４］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［１７］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．４５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、［１２］から［１４］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［１８］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ３抗体である、［１１］に記載の医薬組成物。
［１９］
抗ＨＥＲ３抗体が、配列番号３に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、［１８］に記載の医薬組成物。
［２０］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、［１８］又は［１９］に記載の医薬組成物。【００１５】
［２１］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート２０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．４である、［１８］から［２０］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［２２］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８１ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．１４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、［１８］から［２０］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［２３］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．０６ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．７ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、［１８］から［２０］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［２４］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＴＲＯＰ２抗体である、［１１］に記載の医薬組成物。
［２５］
抗ＴＲＯＰ２抗体が、配列番号５においてアミノ酸番号２０乃至４７０に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号６においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、［２４］に記載の医薬組成物。【００１６】
［２６］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が３から５個の範囲である、［２４］又は［２５］に記載の医薬組成物。
［２７］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが６．０である、［２４］から［２６］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［２８］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．７８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．０５ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、［２４］から［２６］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［２９］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．８８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び５．２６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、［２４］から［２６］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［３０］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗Ｂ７−Ｈ３抗体である、［１１］に記載の医薬組成物。【００１７】
［３１］
抗Ｂ７−Ｈ３抗体が、配列番号７においてアミノ酸番号２０乃至４７１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号８においてアミノ酸番号２１乃至２３３に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、［３０］に記載の医薬組成物。
［３２］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が３から５個の範囲である、［３０］又は［３１］に記載の医薬組成物。
［３３］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート２０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．９である、［３０］から［３２］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［３４］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．６５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．２２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、［３０］から［３２］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［３５］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．２３ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び６．１２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、［３０］から［３２］のいずれか１項に記載の医薬組成物。【００１８】
［３６］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＧＰＲ２０抗体である、［１１］に記載の医薬組成物。
［３７］
抗ＧＰＲ２０抗体が、配列番号９に記載のアミノ酸番号２０乃至４７２に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号１０においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である、［３６］に記載の医薬組成物。
［３８］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、［３６］又は［３７］に記載の医薬組成物。
［３９］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含み、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが５．４である、［３６］から［３８］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［４０］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．３２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．６６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、［３６］から［３８］のいずれか１項に記載の医薬組成物。【００１９】
［４１］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１．６２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び８．２９ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、［３６］から［３８］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［４２］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８９ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．０４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物；
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式【００２０】
【化２】
2019039483.tif 000004
【００２１】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである）。
［４３］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．４５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、［４２］に記載の医薬組成物。
［４４］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、［４２］又は［４３］に記載の医薬組成物。
［４５］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ２抗体である、［４２］から［４４］のいずれか１項に記載の医薬組成物。【００２２】
［４６］
抗ＨＥＲ２抗体が、配列番号１においてアミノ酸番号１乃至４４９に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２においてアミノ酸番号１乃至２１４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、［４５］に記載の医薬組成物。
［４７］
抗ＨＥＲ２抗体が、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、［４５］に記載の医薬組成物。
［４８］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８１ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．１４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、医薬組成物；
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式【００２３】
【化３】
2019039483.tif 000005
【００２４】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである）。
［４９］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．０６ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．７ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、［４８］に記載の医薬組成物。
［５０］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、［４８］又は［４９］に記載の医薬組成物。【００２５】
［５１］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ３抗体である、［４８］から［５０］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［５２］
抗ＨＥＲ３抗体が、配列番号３に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、［５１］に記載の医薬組成物。
［５３］
抗ＨＥＲ３抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している、［５２］に記載の医薬組成物。
［５４］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．７８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．０５ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物；
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式【００２６】
【化４】
2019039483.tif 000006
【００２７】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである）。
［５５］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．８８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び５．２６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、［５４］に記載の医薬組成物。
［５６］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が３から５個の範囲である、［５４］又は［５５］に記載の医薬組成物。
［５７］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＴＲＯＰ２抗体である、［５４］から［５６］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［５８］
抗ＴＲＯＰ２抗体が、配列番号５においてアミノ酸番号２０乃至４７０に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号６においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、［５７］に記載の医薬組成物。
［５９］
抗ＴＲＯＰ２抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している、［５８］に記載の医薬組成物。
［６０］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．６５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．２２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、医薬組成物；
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式【００２８】
【化５】
2019039483.tif 000007
【００２９】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである）。
［６１］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．２３ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び６．１２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、［６０］に記載の医薬組成物。
［６２］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が３から５個の範囲である、［６０］又は［６１］に記載の医薬組成物。
［６３］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗Ｂ７−Ｈ３抗体である、［６０］から［６２］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［６４］
抗Ｂ７−Ｈ３抗体が、配列番号７においてアミノ酸番号２０乃至４７１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号８においてアミノ酸番号２１乃至２３３に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、［６３］に記載の医薬組成物。
［６５］
抗Ｂ７−Ｈ３抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している、［６４］に記載の医薬組成物。
［６６］
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．３２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．６６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物；
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式【００３０】
【化６】
2019039483.tif 000008
【００３１】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである）。
［６７］
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１．６２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び８．２９ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、［６６］に記載の医薬組成物。
［６８］
抗体−薬物コンジュゲートにおける１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数が７から８個の範囲である、［６６］又は［６７］に記載の医薬組成物。
［６９］
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＧＰＲ２０抗体である、［６６］から［６８］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［７０］
抗ＧＰＲ２０抗体が、配列番号９に記載のアミノ酸番号２０乃至４７２に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号１０においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である、［６９］に記載の医薬組成物。【００３２】
［７１］
抗ＧＰＲ２０抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している、［７０］に記載の医薬組成物。
［７２］
注射剤である、［１］から［７１］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［７３］
水性注射剤である、［７２］に記載の医薬組成物。
［７４］
抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである、［７３］に記載の医薬組成物。
［７５］
凍結された、［７３］又は［７４］に記載の医薬組成物。【００３３】
［７６］
凍結乾燥注射剤である、［７２］に記載の医薬組成物。
［７７］
褐色バイアルに格納された、［７６］に記載の医薬組成物。
［７８］
がんの治療用である、［１］から［７７］のいずれか１項に記載の医薬組成物。
［７９］
（１）所定量の、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）界面活性剤、
を含む水溶液を調製する工程、
（２）必要に応じて、水溶液のｐＨを所定の値に調整する工程、次いで、
（３）水溶液を凍結乾燥する工程、
を含む、［７６］に記載の医薬組成物の製造方法。
［８０］
水溶液を凍結乾燥する工程が、水溶液の共融点付近の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、［７９］に記載の製造方法；
（ここで、共融点付近とは、共融点よりも１．５℃低い温度から、共融点よりも１．５℃高い温度の範囲を示す）。【００３４】
［８１］
水溶液を凍結乾燥する工程が、水溶液の共融点と同じ棚温度でアニーリングするプロセスを含む、［８０］に記載の製造方法。
［８２］
共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、１次乾燥するプロセスの時間が短縮されることを特徴とする、［８０］又は［８１］に記載の製造方法。
［８３］
共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、よりシュリンクが少ない凍結乾燥ケーキが得られることを特徴とする、［８０］から［８２］のいずれか１項に記載の製造方法。
［８４］
水溶液を凍結乾燥する工程が、−４〜−１℃の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、［７９］に記載の製造方法。
［８５］
水溶液を凍結乾燥する工程が、−４〜−２℃の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、［７９］に記載の製造方法。【００３５】
［８６］
水溶液を凍結乾燥する工程が、−２．５℃の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、［７９］に記載の製造方法。
［８７］
水溶液を凍結乾燥する工程が、−５〜５℃の棚温度かつ５〜１５Ｐａの真空下で１次乾燥するプロセスをさらに含む、［８４］から［８６］のいずれか１項に記載の製造方法。
［８８］
水溶液を凍結乾燥する工程が、０℃の棚温度かつ１０Ｐａの真空下で１次乾燥するプロセスをさらに含む、［８４］から［８６］のいずれか１項に記載の製造方法。
［８９］
水溶液を凍結乾燥する工程が、４０〜５０℃の棚温度かつ５〜１５Ｐａの真空下で２次乾燥するプロセスをさらに含む、［８７］又は［８８］に記載の製造方法。
［９０］
水溶液を凍結乾燥する工程が、４５℃の棚温度かつ１０Ｐａの真空下で２次乾燥するプロセスをさらに含む、［８７］又は［８８］に記載の製造方法。【００３６】
［９１］
［４２］又は［４３］の医薬組成物と、注射用水を含む、キット。
［９２］
注射用水がアンプルに格納されている、［９１］に記載のキット。
［９３］
スクロース又はトレハロースを含有する水溶液の共融点付近の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、凍結乾燥注射剤の製造方法；（ここで、共融点付近とは、共融点よりも１．５℃低い温度から、共融点よりも１．５℃高い温度の範囲を示す）。
［９４］
スクロース又はトレハロースを含有する水溶液の共融点と同じ棚温度でアニーリングするプロセスを含む、凍結乾燥注射剤の製造方法。
に関する。
【発明の効果】
【００３７】
本発明により、特定の抗体−薬物コンジュゲートにおいて、凝集体の形成及び分解物の生成を抑制した医薬組成物（特に水性注射剤及び凍結乾燥注射剤）、並びに、水溶液から凍結乾燥注射剤への効率的な凍結乾燥方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】抗ＨＥＲ２抗体重鎖のアミノ酸配列（配列番号１）を示した図である。
【図２】抗ＨＥＲ２抗体軽鎖のアミノ酸配列（配列番号２）を示した図である。
【図３】賦形剤スクリーニングに関する図である。横軸に各処方での時間推移、縦軸に凝集体の含有率を示している。
【図４】緩衝剤スクリーニングに関する図である。横軸に各処方での時間推移、縦軸に凝集体の含有率を示している。
【図５】ｐＨスクリーニングに関する図である。横軸に各処方での時間推移、縦軸に凝集体の含有率を示している。
【図６】ｐＨスクリーニングに関する図である。横軸に各処方での時間推移、縦軸にＮＰＩの含有率を示している。
【図７】界面活性剤スクリーニングに関する図である。横軸に各処方での時間推移、縦軸に１０ｍｍ未満の不溶性微粒子数の含有率を示している。ここで、「ＰＳ」はポリソルベートを意味し、「ＰＳ２０」はポリソルベート２０を意味し、「ＰＳ８０」はポリソルベート８０を意味する。
【図８】バイアル検討に関する図である。横軸に光照射量、縦軸に凝集体の含有率を示している。
【図９】バイアル検討に関する図である。横軸に光照射量、縦軸にＩｏＰの含有率を示している。
【図１０】１次乾燥プロセスにおける棚温度と庫内真空度を変動させた時の水溶液（１）の製品温度の等高線図である。
【００３９】
【図１１】１次乾燥プロセスにおける棚温度と庫内真空度を変動させた時の水溶液（１）の乾燥時間の等高線図である。
【図１２】棚温度を−７℃から０．５℃の範囲でアニーリングを実施し凍結乾燥した場合の製品温度（アニーリング時）と凍結乾燥ケーキの形状を示した図である。
【図１３】キャピラリー示差走査熱量計による、抗体−薬物コンジュゲート（１）の熱変性を示した図である。
【図１４】抗ＨＥＲ３抗体重鎖のアミノ酸配列（配列番号３）を示した図である。
【図１５】抗ＨＥＲ３抗体軽鎖のアミノ酸配列（配列番号４）を示した図である。
【図１６】抗ＴＲＯＰ２抗体重鎖のアミノ酸配列（配列番号５）を示した図である。
【図１７】抗ＴＲＯＰ２抗体軽鎖のアミノ酸配列（配列番号６）を示した図である。
【図１８】抗Ｂ７−Ｈ３抗体重鎖のアミノ酸配列（配列番号７）を示した図である。
【図１９】抗Ｂ７−Ｈ３抗体軽鎖のアミノ酸配列（配列番号８）を示した図である。
【図２０】抗ＧＰＲ２０抗体重鎖のアミノ酸配列（配列番号９）を示した図である。
【図２１】抗ＧＰＲ２０抗体軽鎖のアミノ酸配列（配列番号１０）を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
以下、本発明を実施するための好適な形態について図面を参照しながら説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本発明の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これによって本発明の範囲が狭く解釈されることはない。
【００４１】
［抗体−薬物コンジュゲート］
本発明において使用される抗体−薬物コンジュゲートは、次式
【００４２】
【化７】
2019039483.tif 000009
【００４３】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである。
【００４４】
本発明においては、抗体−薬物コンジュゲートのうち、リンカー及び薬物からなる部分構造を「薬物リンカー」と称する。この薬物リンカーは抗体の鎖間のジスルフィド結合部位（２箇所の重鎖−重鎖間、及び２箇所の重鎖−軽鎖間）において生じたチオール基（言い換えれば、システイン残基の硫黄原子）に結合している。
【００４５】
本発明の薬物リンカーは、トポイソメラーゼＩ阻害剤であるエキサテカン（ＩＵＰＡＣ名：（１Ｓ，９Ｓ）−１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−１，２，３，９，１２，１５−ヘキサヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１０Ｈ，１３Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−１０，１３−ジオン、（化学名：（１Ｓ，９Ｓ）−１−アミノ−９−エチル−５−フルオロ−２，３−ジヒドロ−９−ヒドロキシ−４−メチル−１Ｈ，１２Ｈ−ベンゾ［ｄｅ］ピラノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−１０，１３（９Ｈ，１５Ｈ）−ジオンとして表すこともできる））を構成要素としている。エキサテカンは、次式
【００４６】
【化８】
2019039483.tif 000010
【００４７】
で示される、抗腫瘍効果を有するカンプトテシン誘導体である。
【００４８】
本発明において使用される抗体−薬物コンジュゲートは、次式で示すこともできる。
【００４９】
【化９】
2019039483.tif 000011
【００５０】
ここで、薬物リンカーは抗体とチオエーテル結合によって結合している。また、ｎはいわゆる平均薬物結合数（ＤＡＲ；  Ｄｒｕｇ−ｔｏ−Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｒａｔｉｏ）と同義であり、１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数を示す。
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートは、がん細胞内に移行した後に、次式
【００５１】
【化１０】
2019039483.tif 000012
【００５２】
で表されるトポイソメラーゼＩ阻害作用を有する化合物（以下、「化合物（１）」と称する。）を放出することにより、抗腫瘍効果を発揮する。
化合物（１）は、本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートのリンカー部分が切断されることにより生じると考えられる、次式
【００５３】
【化１１】
2019039483.tif 000013
【００５４】
で表される化合物のアミナール構造が分解することにより生じると考えられる。
【００５５】
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートは、バイスタンダー効果を有することも知られている(Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039-1046)。
このバイスタンダー効果は、本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートが、標的発現がん細胞に内在化した後、放出された化合物（１）が、標的を発現していない近傍のがん細胞に対しても抗腫瘍効果を及ぼすことにより発揮される。
【００５６】
［抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体］
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体は、いずれの種に由来してもよいが、好適には、ヒト、ラット、マウス、及びウサギに由来する抗体である。抗体がヒト以外の種に由来する場合は、周知の技術を用いて、キメラ化又はヒト化することが好ましい。本発明の抗体は、ポリクローナル抗体であっても、モノクローナル抗体であってもよいが、モノクローナル抗体が好ましい。
【００５７】
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体は、好適にはがん細胞を標的にできる性質を有するものであり、がん細胞を認識できる特性、がん細胞に結合できる特性、がん細胞内に取り込まれて内在化する特性、及び／又はがん細胞に対する殺細胞活性等を備えているものが好ましい。
【００５８】
抗体のがん細胞への結合性は、フローサイトメトリーを用いて確認できる。がん細胞内への抗体の取り込みは、（１）治療抗体に結合する二次抗体（蛍光標識）を用いて細胞内に取り込まれた抗体を蛍光顕微鏡で可視化するアッセイ(Cell Death and Differentiation (2008) 15, 751-761)、（２）治療抗体に結合する二次抗体（蛍光標識）を用いて細胞内に取り込まれた蛍光量を測定するアッセイ(Molecular Biology of the Cell Vol. 15, 5268-5282, December 2004)、又は（３）治療抗体に結合するイムノトキシンを用いて、細胞内に取り込まれると毒素が放出されて細胞増殖が抑制されるというＭａｂ−ＺＡＰアッセイ(Bio Techniques 28:162-165, January 2000)を用いて確認できる。イムノトキシンとしては、ジフテテリア毒素の触媒領域とプロテインＧとのリコンビナント複合蛋白質も使用可能である。
【００５９】
抗体の抗腫瘍活性は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでは、細胞の増殖の抑制活性を測定することで確認できる。例えば、抗体の標的蛋白質を過剰発現しているがん細胞株を培養し、培養系に種々の濃度で抗体を添加し、フォーカス形成、コロニー形成及びスフェロイド増殖に対する抑制活性を測定することができる。ｉｎ  ｖｉｖｏでは、例えば、標的蛋白質を高発現しているがん細胞株を移植したヌードマウスに抗体を投与し、がん細胞の変化を測定することによって、抗腫瘍活性を確認できる。
【００６０】
抗体自体が抗腫瘍効果を有することは、好ましいが、抗体−薬物コンジュゲートは抗腫瘍効果を発揮する化合物を結合させてあるので、抗体自体の抗腫瘍効果は必須ではない。抗腫瘍性化合物の細胞障害性をがん細胞において特異的・選択的に発揮させる目的からは、抗体が内在化してがん細胞内に移行する性質のあることが重要であり、好ましい。
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体は、公知の手段によって取得することができる。例えば、この分野で通常実施される方法を用いて、抗原となるポリペプチドを動物に免疫し、生体内に産生される抗体を採取、精製することによって得ることができる。抗原の由来はヒトに限定されず、マウス、ラット等のヒト以外の動物に由来する抗原を動物に免疫することもできる。この場合には、取得された異種抗原に結合する抗体とヒト抗原との交差性を試験することによって、ヒトの疾患に適用可能な抗体を選別できる。
【００６１】
また、公知の方法（例えば、Kohler and Milstein, Nature (1975) 256, p.495-497;Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p.365-367, Plenum Press, N.Y.(1980)）に従って、抗原に対する抗体を産生する抗体産生細胞とミエローマ細胞とを融合させることによってハイブリドーマを樹立し、モノクローナル抗体を得ることもできる。
【００６２】
なお、抗原は抗原蛋白質をコードする遺伝子を遺伝子操作によって宿主細胞に産生させることによって得ることができる。具体的には、抗原遺伝子を発現可能なベクターを作製し、これを宿主細胞に導入して該遺伝子を発現させ、発現した抗原を精製すればよい。上記の遺伝子操作による抗原発現細胞、或は抗原を発現している細胞株、を動物に免疫する方法を用いることによっても抗体を取得できる。
【００６３】
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体は、ヒトに対する異種抗原性を低下させること等を目的として人為的に改変した遺伝子組換え型抗体、例えば、キメラ（Ｃｈｉｍｅｒｉｃ）抗体、ヒト化（Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ）抗体であることが好ましく、又はヒト由来の抗体の遺伝子配列のみを有する抗体、すなわちヒト抗体であることが好ましい。これらの抗体は、既知の方法を用いて製造することができる。
【００６４】
キメラ抗体としては、抗体の可変領域と定常領域が互いに異種である抗体、例えばマウス又はラット由来抗体の可変領域をヒト由来の定常領域に接合したキメラ抗体を挙げることができる(Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 81, 6851-6855,(1984))。
【００６５】
ヒト化抗体としては、異種抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ；ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  ｒｅｇｉｏｎ）のみをヒト由来の抗体に組み込んだ抗体(Nature(1986) 321, p.522-525)、ＣＤＲ移植法によって、異種抗体のＣＤＲの配列に加えて、異種抗体の一部のフレームワークのアミノ酸残基もヒト抗体に移植した抗体（国際公開第９０／０７８６１号）、遺伝子変換突然変異誘発（ｇｅｎｅ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ）ストラテジーを用いてヒト化した抗体（米国特許第５８２１３３７号）を挙げることができる。
【００６６】
ヒト抗体としては、ヒト抗体の重鎖と軽鎖の遺伝子を含むヒト染色体断片を有するヒト抗体産生マウスを用いて作成した抗体（Tomizuka, K. et al., Nature Genetics(1997) 16, p.133-143;Kuroiwa, Y. et. al., Nucl. Acids Res.(1998) 26, p.3447-3448;Yoshida, H. et. al., Animal Cell Technology:Basic and Applied Aspects vol.10, p.69-73(Kitagawa, Y., Matsuda, T. and Iijima, S. eds.), Kluwer Academic Publishers, 1999;Tomizuka, K. et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA(2000) 97, p.722-727等を参照。）を挙げることができる。或いは、ヒト抗体ライブラリーより選別したファージディスプレイにより取得した抗体（Wormstone, I. M. et. al, Investigative Ophthalmology & Visual Science. (2002)43 (7), p.2301-2308;Carmen, S. et. al., Briefings in Functional Genomics and Proteomics(2002), 1(2), p.189-203;Siriwardena, D. et. al., Ophthalmology(2002) 109(3), p.427-431等参照。）も挙げることができる。
【００６７】
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体には、抗体の修飾体も含まれる。当該修飾体とは、本発明に係る抗体に化学的又は生物学的な修飾が施されてなるものを意味する。化学的な修飾体には、アミノ酸骨格への化学部分の結合、Ｎ−結合又はＯ−結合炭水化物鎖への化学部分の結合を有する化学修飾体等が含まれる。生物学的な修飾体には、翻訳後修飾（例えば、Ｎ−結合又はＯ−結合型糖鎖の付加、Ｎ末端又はＣ末端のプロセッシング、脱アミド化、アスパラギン酸の異性化、メチオニンの酸化等）されたもの、原核生物宿主細胞を用いて発現させることによってＮ末にメチオニン残基が付加されたもの等が含まれる。また、本発明に係る抗体又は抗原の検出又は単離を可能にするために標識されたもの、例えば、酵素標識体、蛍光標識体、アフィニティ標識体もかかる修飾体の意味に含まれる。この様な本発明に係る抗体の修飾体は、抗体の安定性及び血中滞留性の改善、抗原性の低減、抗体又は抗原の検出又は単離等に有用である。
【００６８】
また、本発明に係る抗体に結合している糖鎖修飾を調節すること（グリコシル化、脱フコース化等）によって、抗体依存性細胞傷害活性を増強することが可能である。抗体の糖鎖修飾の調節技術としては、国際公開第９９／５４３４２号、国際公開第００／６１７３９号、国際公開第０２／３１１４０号等が知られているが、これらに限定されるものではない。本発明に係る抗体には当該糖鎖修飾が調節された抗体も含まれる。
【００６９】
なお、哺乳類培養細胞で生産される抗体では、その重鎖のカルボキシル末端のリシン残基が欠失することが知られており(Journal of Chromatography A, 705: 129-134(1995))、また、同じく重鎖カルボキシル末端のグリシン、リシンの２アミノ酸残基が欠失し、新たにカルボキシル末端に位置するプロリン残基がアミド化されることが知られている(Analytical Biochemistry, 360: 75-83(2007))。しかし、これらの重鎖配列の欠失及び修飾は、抗体の抗原結合能及びエフェクター機能（補体の活性化や抗体依存性細胞障害作用等）には影響を及ぼさない。したがって、本発明に係る抗体には、当該修飾を受けた抗体及び当該抗体の機能性断片も含まれ、重鎖カルボキシル末端において１又は２のアミノ酸が欠失した欠失体、及びアミド化された当該欠失体（例えば、カルボキシル末端部位のプロリン残基がアミド化された重鎖）等も包含される。但し、抗原結合能及びエフェクター機能が保たれている限り、本発明に係る抗体の重鎖のカルボキシル末端の欠失体は上記の種類に限定されない。本発明に係る抗体を構成する２本の重鎖は、完全長及び上記の欠失体からなる群から選択される重鎖のいずれか一種であってもよいし、いずれか二種を組み合わせたものであってもよい。各欠失体の量比は本発明に係る抗体を産生する哺乳類培養細胞の種類及び培養条件に影響を受け得るが、本発明に係る抗体は、好ましくは２本の重鎖の双方でカルボキシル末端のひとつのアミノ酸残基が欠失しているものを挙げることができる。
【００７０】
本発明に係る抗体のアイソタイプとしては、例えばＩｇＧ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）等を挙げることができるが、好ましくはＩｇＧ１又はＩｇＧ２を挙げることができる。
【００７１】
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体は、特に制限はないが、例えば、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＨＥＲ３抗体、抗ＴＲＯＰ２抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ３０抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ３７抗体、抗ＣＤ５６抗体、抗ＣＤ９８抗体、抗ＤＲ５抗体、抗ＥＧＦＲ抗体、抗ＥＰＨＡ２抗体、抗ＦＧＦＲ２抗体、抗ＦＧＦＲ４抗体、抗ＦＯＬＲ１抗体、抗ＶＥＧＦ抗体、及び抗ＧＰＲ２０抗体を挙げることができ、好適には、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＨＥＲ３抗体、抗ＴＲＯＰ２抗体、抗Ｂ７−Ｈ３、及び抗ＧＰＲ２０抗体を挙げることができる。
【００７２】
本発明において、「抗ＨＥＲ２抗体」とは、ＨＥＲ２（Ｈｕｍａｎ  Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  ＦａｃｔｏｒＲｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔｙｐｅ  ２；  ＥｒｂＢ−２）に特異的に結合し、好ましくは、ＨＥＲ２と結合することによってＨＥＲ２発現細胞に内在化する活性を有する抗体を示す。
【００７３】
抗ＨＥＲ２抗体としては、例えば、トラスツズマブ（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）（米国特許第５８２１３３７号）、及び、ペルツズマブ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）（国際公開第０１／００２４５号）を挙げることができ、好適にはトラスツズマブを挙げることができる。
【００７４】
本発明において、「トラスツズマブ」は、配列番号１（図１）においてアミノ酸番号１乃至４４９に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２（図２）においてアミノ酸番号１乃至２１４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなるヒト化抗ＨＥＲ２モノクローナル抗体である。
【００７５】
本発明において、「抗ＨＥＲ３抗体」とは、ＨＥＲ３（Ｈｕｍａｎ  Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  ＦａｃｔｏｒＲｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔｙｐｅ  ３；  ＥｒｂＢ−３）に特異的に結合し、好適には、ＨＥＲ３発現細胞表面上のＨＥＲ３と結合して該ＨＥＲ３発現細胞に内在化する活性を有する抗体を示す。
【００７６】
抗ＨＥＲ３抗体としては、例えば、パトリツマブ（Ｐａｔｒｉｔｕｍａｂ；  Ｕ３−１２８７）、Ｕ１−５９（国際公開第２００７／０７７０２８号）、ＭＭ−１２１（ｓｅｒｉｂａｎｔｕｍａｂ）、国際公開２００８／１００６２４号記載の抗ＥＲＢＢ３抗体、ＲＧ−７１１６（Ｌｕｍｒｅｔｕｚｕｍａｂ）、及びＬＪＭ−７１６（Ｅｌｇｅｍｔｕｍａｂ）を挙げることができ、好適には、パトリツマブ、及びＵ１−５９を挙げることができる。
【００７７】
本発明において、「抗ＴＲＯＰ２抗体」とは、ＴＲＯＰ２（ＴＡＣＳＴＤ２：Ｔｕｍｏｒ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｃａｌｃｉｕｍ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ  ２；  ＥＧＰ−１）に特異的に結合し、好ましくは、ＴＲＯＰ２と結合することによってＴＲＯＰ２発現細胞に内在化する活性を有する抗体を示す。
【００７８】
抗ＴＲＯＰ２抗体としては、例えば、ｈＴＩＮＡ１−Ｈ１Ｌ１（国際公開第２０１５／０９８０９９号）を挙げることができる。
【００７９】
本発明において、「抗Ｂ７−Ｈ３抗体」とは、Ｂ７−Ｈ３（Ｂ  ｃｅｌｌ  ａｎｔｉｇｅｎ  ＃７  ｈｏｍｏｌｏｇ  ３；  ＰＤ−Ｌ３；  ＣＤ２７６）に特異的に結合し、好ましくは、Ｂ７−Ｈ３と結合することによってＢ７−Ｈ３発現細胞に内在化する活性を有する抗体を示す。
【００８０】
抗Ｂ７−Ｈ３抗体としては、例えば、Ｍ３０−Ｈ１−Ｌ４（国際公開第２０１４／０５７６８７号）を挙げることができる。
【００８１】
本発明において、「抗ＧＰＲ２０抗体」とは、ＧＰＲ２０（Ｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ２０）に特異的に結合し、好ましくは、ＧＰＲ２０と結合することによってＧＰＲ２０発現細胞に内在化する活性を有する抗体を示す。
抗ＧＰＲ２０抗体としては、例えば、ｈ０４６−Ｈ４ｅ／Ｌ７（国際公開第２０１８／１３５５０１号）を挙げることができる。
【００８２】
［抗体−薬物コンジュゲートの製造に使用される薬物リンカー中間体］
本発明の抗体−薬物コンジュゲートの製造に使用される薬物リンカー中間体は、次式で示される。
【００８３】
【化１２】
2019039483.tif 000014
【００８４】
上記の薬物リンカー中間体は、国際公開第２０１４／０５７６８７号、国際公開第２０１５／０９８０９９号、国際公開第２０１５／１１５０９１号、及び国際公開第２０１５／１５５９９８号等の記載を参考に製造することができる。
【００８５】
［抗体と薬物リンカー中間体のコンジュゲーション］
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートは、前述の薬物リンカー中間体と、チオール基（又はスルフヒドリル基とも言う）を有する抗体を反応させることによって製造することができる。
【００８６】
スルフヒドリル基を有する抗体は、当業者周知の方法で得ることができる(Hermanson, G. T, Bioconjugate Techniques, pp.56-136, pp.456-493, Academic Press(1996))。例えば、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン塩酸塩（ＴＣＥＰ）等の還元剤を、抗体内鎖間ジスルフィド１個当たりに対して０．３乃至３モル当量用い、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）等のキレート剤を含む緩衝液中で、抗体と反応させることで、抗体内鎖間ジスルフィドが部分的若しくは完全に還元されたスルフヒドリル基を有する抗体を得ることができる。
【００８７】
さらに、スルフヒドリル基を有する抗体１個あたり、２乃至２０モル当量の薬物リンカー中間体を使用して、抗体１個当たり２個乃至８個の薬物が結合した抗体―薬物コンジュゲートを製造することができる。
【００８８】
製造した抗体−薬物コンジュゲートの抗体一分子あたりの平均薬物結合数の算出は、例えば、２８０ｎｍ及び３７０ｎｍの二波長における抗体−薬物コンジュゲートとそのコンジュゲーション前駆体のＵＶ吸光度を測定することにより算出する方法（ＵＶ法）や、抗体−薬物コンジュゲートを還元剤で処理し得られた各フラグメントをＨＰＬＣ測定により定量し算出する方法（ＨＰＬＣ法）により行うことができる。
【００８９】
抗体と薬物リンカー中間体のコンジュゲーション、及び抗体−薬物コンジュゲートの抗体一分子あたりの平均薬物結合数の算出は、国際公開第２０１４／０５７６８７号、国際公開第２０１５／０９８０９９号、国際公開第２０１５／１１５０９１号、国際公開第２０１５／１５５９９８号、及び国際公開第２０１８／１３５５０１号等の記載を参考に実施することができる。
【００９０】
本発明において、「抗ＨＥＲ２抗体−薬物コンジュゲート」とは、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が抗ＨＥＲ２抗体である抗体−薬物コンジュゲートを示す。
【００９１】
抗ＨＥＲ２抗体は、好適には、配列番号１においてアミノ酸番号１乃至４４９に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２においてアミノ酸番号１乃至２１４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体である。
【００９２】
本発明において使用される抗ＨＥＲ２抗体−薬物コンジュゲートの１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数は、好適には２から８であり、より好適には３から８であり、更により好適には７から８であり、更により好適には７．５から８であり、更により好適には約８である。
【００９３】
本発明において使用される抗ＨＥＲ２抗体−薬物コンジュゲートは、国際公開第２０１５／１１５０９１号等の記載を参考に製造することができる。
【００９４】
本発明において、「抗ＨＥＲ３抗体−薬物コンジュゲート」とは、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が抗ＨＥＲ３抗体である抗体−薬物コンジュゲートを示す。
【００９５】
抗ＨＥＲ３抗体は、好適には、配列番号３に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である。
【００９６】
本発明において使用される抗ＨＥＲ３抗体−薬物コンジュゲートの１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数は、好適には２から８であり、より好適には３から８であり、更により好適には７から８であり、更により好適には７．５から８であり、更により好適には約８である。
【００９７】
本発明において使用される抗ＨＥＲ３抗体−薬物コンジュゲートは、国際公開第２０１５／１５５９９８号等の記載を参考に製造することができる。
【００９８】
本発明において、「抗ＴＲＯＰ２抗体−薬物コンジュゲート」とは、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が抗ＴＲＯＰ２抗体である抗体−薬物コンジュゲートを示す。
【００９９】
抗ＴＲＯＰ２抗体は、好適には、配列番号５においてアミノ酸番号２０乃至４７０に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号６においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である。
【０１００】
本発明において使用される抗ＴＲＯＰ２抗体−薬物コンジュゲートの１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数は、好適には２から８であり、より好適には３から５であり、更により好適には３．５から４．５であり、更により好適には約４である。
【０１０１】
本発明において使用される抗ＴＲＯＰ２抗体−薬物コンジュゲートは、国際公開第２０１５／０９８０９９号等の記載を参考に製造することができる。
【０１０２】
本発明において、「抗Ｂ７−Ｈ３抗体−薬物コンジュゲート」とは、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が抗Ｂ７−Ｈ３抗体である抗体−薬物コンジュゲートを示す。
【０１０３】
抗Ｂ７−Ｈ３抗体は、好適には、配列番号７においてアミノ酸番号２０乃至４７１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号８においてアミノ酸番号２１乃至２３３に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である。
【０１０４】
本発明において使用される抗Ｂ７−Ｈ３抗体−薬物コンジュゲートの１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数は、好適には２から８であり、より好適には３から５であり、更により好適には３．５から４．５であり、更により好適には約４である。
【０１０５】
本発明において使用される抗Ｂ７−Ｈ３抗体−薬物コンジュゲートは、国際公開第２０１４／０５７６８７号等の記載を参考に製造することができる。
【０１０６】
本発明において、「抗ＧＰＲ２０抗体−薬物コンジュゲート」とは、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が抗ＧＰＲ２０抗体である抗体−薬物コンジュゲートを示す。
【０１０７】
抗ＧＰＲ２０抗体は、好適には、配列番号９においてアミノ酸番号２０乃至４７２に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号１０においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体である。
【０１０８】
本発明において使用される抗ＧＰＲ２０抗体−薬物コンジュゲートの１抗体あたりの薬物リンカーの平均結合数は、好適には２から８であり、より好適には３から８であり、更により好適には７から８であり、更により好適には７．５から８であり、更により好適には約８である。
【０１０９】
本発明において使用される抗ＧＰＲ２０抗体−薬物コンジュゲートは、国際公開第２０１８／１３５５０１号等の記載を参考に製造することができる。
【０１１０】
［医薬組成物］
以下、本発明の医薬組成物について説明する。
本発明の医薬組成物は、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）界面活性剤、
を含む、医薬組成物である。
（ここで、該抗体−薬物コンジュゲートは、次式
【０１１１】
【化１３】
2019039483.tif 000015
【０１１２】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲートである。）
本発明において「ヒスチジン緩衝剤」とは、ヒスチジンとヒスチジンの塩（酸付加物）との混合物であり、好適には、Ｌ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩（及び／又はその水和物）との混合物である。本発明におけるヒスチジン緩衝剤が溶解している水は、ヒスチジン緩衝液と同義である。
【０１１３】
ヒスチジン緩衝剤の量は、好適には、抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに３〜８０ｍｍｏｌであり、より好適には、抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、１０〜８０ｍｍｏｌであり、更により好適には、抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、１０〜４０ｍｍｏｌであり、更により好適には、抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに１０〜２５ｍｍｏｌであり、更により好適には、抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに１０又は２５ｍｍｏｌである。
【０１１４】
なお、本発明の医薬組成物が水に溶解している状態でのｐＨは、ヒスチジン緩衝液におけるヒスチジンとヒスチジンの塩の含有率に依存する。言い換えれば、ヒスチジンとヒスチジンの塩の含有率を調整することにより、水に溶解している状態で所望のｐＨを示す医薬組成物を提供することができる。
【０１１５】
本発明の医薬組成物は、抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態でのｐＨが、好適には４．０〜７．０であり、より好適には、５．０〜６．０である。また、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体の種類に応じて、より好適なｐＨを選定することができる。
スクロース又はトレハロースの量は、好適には、抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに２４〜３２０ｍｇである。スクロースの場合、その量は、より好適には、９０ｍｇである。トレハロースの場合は、トレハロース水和物として計算すると、その量は、より好適には、１００ｍｇである。また、本発明の医薬組成物は、スクロース及びトレハロースのうち、スクロースをより好適に用いることができる。
本発明において「界面活性剤」とは、親水性基と疎水性基を有し、医薬品製剤の構成成分の一つとして使用される物質を示す。本発明における界面活性剤は、好適には、ポリソルベート（ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０）、及びポリソルベート６０（Ｔｗｅｅｎ６０）を含む）、ポリオキシエチレン（１６０）ポリオキシプロピレン（３０）グリコール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ポリオキシエチレンヒマシ油、又はラウリル硫酸ナトリウムであり、より好適には、ポリソルベート８０、又はポリソルベート２０である。
【０１１６】
ポリソルベート８０又はポリソルベート２０の量は、好適には、抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに０．０５〜１．６ｍｇであり、より好適には、０．１〜１．６ｍｇであり、更により好適には、０．２〜０．４ｍｇであり、更により好適には、０．２〜０．３ｍｇであり、更により好適には、０．２又は０．３ｍｇである。
以上を総合的に考慮すると、本発明の医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）３〜８０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）２４〜３２０ｍｇのスクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）０．０５〜１．６ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、医薬組成物であり、
より好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０〜４０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース又は１００ｍｇのトレハロース水和物、及び、
（ｉｖ）０．２〜０．４ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、医薬組成物であり、
更により好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０又は２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０又はポリソルベート２０、
を含む、医薬組成物である。
上記の医薬組成物は、抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである水溶液として表すと、以下のように言い換えることもできる。
【０１１７】
即ち、本発明の医薬組成物は、好適には、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、
（ｉｖ）界面活性剤、及び、
（ｖ）水
を含む、医薬組成物であり、
より好適には、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３〜８０ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）２．４〜３２％のスクロース又はトレハロース、
（ｉｖ）０．００５〜０．１６％のポリソルベート８０又はポリソルベート２０、及び、
（ｖ）水
を含む、医薬組成物であり、
更により好適には、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１０〜４０ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９％のスクロース又は１０％のトレハロース水和物、
（ｉｖ）０．０２〜０．０４％のポリソルベート８０又はポリソルベート２０、及び、
（ｖ）水
を含む、医薬組成物であり、
更により好適には、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１０又は２５ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９％のスクロース、及び、
（ｉｖ）０．０２又は０．０３％のポリソルベート８０又はポリソルベート２０、及び、
（ｖ）水
を含む、医薬組成物である。
【０１１８】
なお、本発明において、スクロース及びトレハロースの含量における「％」は、水１ｍＬに対する重量％を示す。従って、例えば、「９％のスクロース」は、水１ｍＬに対して９０ｍｇのスクロースが含まれていることを意味し、「１０％のトレハロース水和物」は、水１ｍＬに対して１００ｍｇのトレハロース水和物が含まれていることを意味する。
【０１１９】
同様に、本発明において、ポリソルベート８０及びポリソルベート２０の含量における「％」も、水１ｍＬに対する重量％を示す。従って、例えば、「０．０３％のポリソルベート８０」は、水１ｍＬに対して０．３ｍｇのポリソルベート８０が含まれていることを意味し、「０．０３％のポリソルベート２０」は、水１ｍＬに対して０．３ｍｇのポリソルベート２０が含まれていることを意味する。
【０１２０】
本発明の医薬組成物は、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体の種類に応じて、より好適な処方を選定することができる。
【０１２１】
例えば、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ２抗体（好適には、配列番号１においてアミノ酸番号１乃至４４９に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２においてアミノ酸番号１乃至２１４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、配列番号１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号２に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体）である場合は、本発明の医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含む、医薬組成物である。
さらに、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態での上記医薬組成物のｐＨは、好適には５．３〜５．７であり、より好適には５．４〜５．６であり、更により好適には５．５である。
【０１２２】
また、ヒスチジン緩衝剤を、Ｌ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩の含有量として表すと、ｐＨが５．５であるときの上記医薬組成物は、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８９ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．０４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１２３】
さらに、抗体−薬物コンジュゲートを１００ｍｇ含有する単位製剤として表すと、ｐＨが５．５であるときの上記医薬組成物は、
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．４５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１２４】
あるいは、抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである水溶液として表すと、上記医薬組成物は、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）２５ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９％のスクロース、及び、
（ｉｖ）０．０３％のポリソルベート８０、及び、
（ｖ）水
を含み、ｐＨが５．５である、医薬組成物として表すことができる。
【０１２５】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＨＥＲ３抗体（好適には、配列番号３に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体）である場合は、本発明の医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）２５ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート２０、
を含む、医薬組成物である。
さらに、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態での上記医薬組成物のｐＨは、好適には５．２〜５．６であり、より好適には５．３〜５．５であり、更により好適には５．４である。
【０１２６】
また、ヒスチジン緩衝剤を、Ｌ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩の含有量として表すと、ｐＨが５．４であるときの上記医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．８１ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び４．１４ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１２７】
さらに、抗体−薬物コンジュゲートを１００ｍｇ含有する単位製剤として表すと、ｐＨが５．４であるときの上記医薬組成物は、
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）４．０６ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び２０．７ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１２８】
あるいは、抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである水溶液として表すと、上記医薬組成物は、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）２５ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９％のスクロース、及び、
（ｉｖ）０．０３％のポリソルベート２０、及び、
（ｖ）水
を含み、ｐＨが５．４である、医薬組成物として表すことができる。
【０１２９】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＴＲＯＰ２抗体（好適には、配列番号５においてアミノ酸番号２０乃至４７０に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号６においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体）である場合は、本発明の医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含む、医薬組成物である。
さらに、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態での上記医薬組成物のｐＨは、好適には５．８〜６．２であり、より好適には５．９〜６．１であり、更により好適には６．０である。
【０１３０】
また、ヒスチジン緩衝剤を、Ｌ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩の含有量として表すと、ｐＨが６．０であるときの上記医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．７８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．０５ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１３１】
抗体−薬物コンジュゲートを１００ｍｇ含有する単位製剤として表すと、ｐＨが６．０であるときの上記医薬組成物は、
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．８８ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び５．２６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１３２】
あるいは、抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである水溶液として表すと、上記医薬組成物は、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１０ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９％のスクロース、及び、
（ｉｖ）０．０２又は０．０３％のポリソルベート８０、及び、
（ｖ）水
を含み、ｐＨが６．０である、医薬組成物として表すことができる。
【０１３３】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗Ｂ７−Ｈ３抗体（好適には、配列番号７においてアミノ酸番号２０乃至４７１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号８においてアミノ酸番号２１乃至２３３に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体）である場合は、本発明の医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート２０、
を含む、医薬組成物である。
さらに、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態での上記医薬組成物のｐＨは、好適には５．７〜６．１であり、より好適には５．８〜６．０であり、更により好適には５．９である。
【０１３４】
また、ヒスチジン緩衝剤を、Ｌ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩の含有量として表すと、ｐＨが５．９であるときの上記医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．６５ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．２２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．２又は０．３ｍｇのポリソルベート２０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１３５】
さらに、抗体−薬物コンジュゲートを１００ｍｇ含有する単位製剤として表すと、ｐＨが５．９であるときの上記医薬組成物は、
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）３．２３ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び６．１２ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．０又は１．５ｍｇのポリソルベート２０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１３６】
あるいは、抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである水溶液として表すと、上記医薬組成物は、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１０ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９％のスクロース、及び、
（ｉｖ）０．０２又は０．０３％のポリソルベート２０、及び、
（ｖ）水
を含み、ｐＨが５．９である、医薬組成物として表すことができる。
【０１３７】
抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体が、抗ＧＰＲ２０抗体（好適には、配列番号９に記載のアミノ酸番号２０乃至４７２に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号１０においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体、又は、該抗体の重鎖カルボキシル末端のリシン残基が欠失している抗体）である場合は、本発明の医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）１０ｍｍｏｌのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、及び、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０、
を含む、医薬組成物である。
さらに、該抗体−薬物コンジュゲートが水に２０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解している状態での上記医薬組成物のｐＨは、好適には５．２〜５．６であり、より好適には５．３〜５．５であり、更により好適には５．４である。
【０１３８】
また、ヒスチジン緩衝剤を、Ｌ−ヒスチジンとＬ−ヒスチジン塩酸塩の含有量として表すと、ｐＨが５．４であるときの上記医薬組成物は、好適には、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート２０ｍｇ当たりに、
（ｉｉ）０．３２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び１．６６ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）９０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）０．３ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１３９】
さらに、抗体−薬物コンジュゲートを１００ｍｇ含有する単位製剤として表すと、ｐＨが５．４であるときの上記医薬組成物は、
（ｉ）１００ｍｇの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１．６２ｍｇのＬ−ヒスチジン、及び８．２９ｍｇのＬ−ヒスチジン塩酸塩水和物、
（ｉｉｉ）４５０ｍｇのスクロース、並びに、
（ｉｖ）１．５ｍｇのポリソルベート８０を含む、医薬組成物として表すことができる。
【０１４０】
あるいは、抗体−薬物コンジュゲートの濃度が２０ｍｇ／ｍＬである水溶液として表すと、上記医薬組成物は、
（ｉ）２０ｍｇ／ｍＬの抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）１０ｍＭのヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）９％のスクロース、及び、
（ｉｖ）０．０３％のポリソルベート８０、及び、
（ｖ）水
を含み、ｐＨが５．４である、医薬組成物として表すことができる。
【０１４１】
本発明の医薬組成物は、好適には、注射剤であり、より好適には、水性注射剤、又は凍結乾燥注射剤であり、更により好適には、凍結乾燥注射剤である。
【０１４２】
本発明において「注射剤」とは、注射針を用いて、生体組織（例えば、静脈内、皮内、皮下、筋肉内、及び腹腔内等）に投与するための医薬組成物を示す。本発明の注射剤には、液状の注射剤だけでなく、用時溶解し液状にして用いるための固形状の注射剤も含まれる。液状の注射剤の場合、溶媒は水であっても良いし、水以外の溶媒であっても良いし、水と水以外の溶媒の混合溶媒であっても良い。
【０１４３】
本発明において「水性注射剤」とは、液状の注射剤であって、溶媒が水（好適には注射用水）である医薬組成物のことを示す。
本発明において「凍結乾燥注射剤」とは、水（好適には注射用水）で用時溶解して用いることができる固形状の注射剤であって、所定量の医薬成分を含む水溶液を凍結乾燥することにより得られる医薬組成物のことを示す。
本発明の医薬組成物が、水性注射剤である場合、抗体−薬物コンジュゲートの濃度は、好適には、５〜６０ｍｇ／ｍＬであり、より好適には、１５〜４０ｍｇ／ｍＬであり、更により好適には、２０ｍｇ／ｍＬである。
本発明の医薬組成物が、水性注射剤である場合、本発明の医薬組成物は、好適には凍結された状態で保存することができる。
【０１４４】
本発明の医薬組成物が、凍結乾燥注射剤である場合、本発明の医薬組成物は、好適には褐色バイアルに格納された状態で保存することができる。
【０１４５】
本発明の医薬組成物が、凍結乾燥注射剤である場合、本発明の医薬組成物と注射用水を含むキットを、好適に使用することができる。ここで、該注射用水は、好適には、アンプルに格納された状態で保存することができる。
【０１４６】
本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートの含量が２０ｍｇである場合の凍結乾燥注射剤は、注射用水１ｍＬを用いて再溶解することにより、好適に使用することができる。また、本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートの含量が１００ｍｇである場合の凍結乾燥注射剤は、注射用水５ｍＬを用いて再溶解することにより、好適に使用することができる。
【０１４７】
本発明の医薬組成物が、凍結乾燥注射剤である場合、本発明の医薬組成物の製造方法は、好適には、
（１）所定量の、
（ｉ）抗体−薬物コンジュゲート、
（ｉｉ）ヒスチジン緩衝剤、
（ｉｉｉ）スクロース又はトレハロース、及び、
（ｉｖ）界面活性剤、
を含む水溶液を調製する工程、
（２）必要に応じて、水溶液のｐＨを所定の値に調整する工程、次いで、
（３）水溶液を凍結乾燥する工程、
を含む、製造方法である。
水溶液を凍結乾燥する工程は、好適には、水溶液の共融点付近の棚温度でアニーリングするプロセスを含む。ここで、共融点付近とは、共融点よりも１．５℃低い温度から、共融点よりも１．５℃高い温度の範囲を示す。
本発明において「アニーリング」とは、凍結ガラス転移点（Ｔｇ’）以上の製品温度で凍結体中の氷晶を成長させる工程を意味する。氷晶が大きくなることにより、乾燥時に昇華する水（水蒸気）の通り道が大きくなる。これにより、昇華抵抗が減り、凍結乾燥ケーキの形状の改善及び乾燥時間の短縮が期待できる。
本発明において「棚温度」とは、凍結乾燥を行う装置内（系内）の温度を意味する。
本発明において「製品温度」とは、凍結乾燥を行う対象物（製品）の温度を意味する。
本発明において「凍結乾燥ケーキ」とは、一連の凍結乾燥プロセスによって得られた凍結乾燥体（多孔性構造を有する固体）を意味する。
アニーリングは、前述の通り、水溶液の共融点よりも１．５℃低い温度から、共融点よりも１．５℃高い温度の範囲で好適に行うことができ、より好適には、水溶液の共融点と同じ棚温度で行うことができる。
これらの製造方法は、好適には、共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、１次乾燥するプロセスの時間が短縮されることを特徴とする。また、好適には、共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、よりシュリンクが少ない凍結乾燥ケーキが得られることを特徴とする。
【０１４８】
本発明の医薬組成物の場合、共融点は約−３℃〜約−１℃の範囲となるため、アニーリングは、好適には、−４．５℃〜０．５℃の棚温度で行うことができ、より好適には、−４〜−１℃の棚温度で行うことができ、更により好適には、−４〜−２℃の棚温度で行うことができ、更により好適には、−３〜−２℃の棚温度で行うことができ、更により好適には、−２．５℃の棚温度で行うことができる。
【０１４９】
アニーリングを行った後は、本発明の医薬組成物は、１次乾燥プロセス及び２次乾燥プロセスを経て、凍結乾燥注射剤として製造される。
【０１５０】
本発明において「１次乾燥プロセス」とは、凍結乾燥注射剤の製造工程の一つであり、凍結体中の自由水を昇華するための工程を意味する。
本発明において「２次乾燥プロセス」とは、凍結乾燥注射剤の製造工程の一つであり、溶質に結合した水（結合水）を昇華するための工程を意味する。
【０１５１】
１次乾燥プロセスは、好適には、−５〜５℃の棚温度かつ５〜１５Ｐａの真空下で行うことができ、より好適には、−４〜４℃の棚温度かつ７〜１３のＰａの真空下で行うことができ、更により好適には、−３〜３℃の棚温度かつ８〜１２のＰａの真空下で行うことができ、更により好適には、−２〜２℃の棚温度かつ９〜１１のＰａの真空下で行うことができ、更により好適には、−１〜１℃の棚温度かつ９〜１１のＰａの真空下で行うことができ、更により好適には、０℃の棚温度かつ約１０Ｐａの真空下で行うことができる。
【０１５２】
２次乾燥プロセスは、好適には、４０〜５０℃の棚温度かつ５〜１５Ｐａの真空下又は真空なしで行うことができ、より好適には、４２〜４８℃の棚温度かつ７〜１３Ｐａの真空下で行うことができ、更により好適には、４４〜４６℃の棚温度かつ９〜１１Ｐａの真空下で行うことができ、更により好適には、４５℃の棚温度かつ１０Ｐａの真空下で行うことができる。
【０１５３】
本発明の医薬組成物の品質は、例えば、５０℃下、４０℃／７５％ＲＨ下、２５℃／６０％ＲＨ下、又は５℃下のような環境下において、１ヵ月間、３ヵ月間、６ヵ月間、１２ヵ月間、１８ヵ月間、２４ヵ月間、又は３６ヵ月間での保存安定性を、タンパク質濃度、水分、不溶性微粒子、ＤＡＲ、単量体・凝集体・断片体の比率、ＮＰＩ、ＩｏＰ、電荷異性体、及びｐＨを指標に評価することにより確認することができる。また、抗体−薬物コンジュゲートにおける抗体の種類に応じて、抗原に対するＢｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙやＰｏｔｅｎｃｙ（Ｂｉｏａｓｓａｙ）等を指標に品質評価を行うこともできる。さらに、Ｄｒｕｇ  ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎやｒＣＥ−ＳＤＳを指標にした品質評価や、性状（外観）観察による品質評価を行うこともできる。水性注射剤の場合は、浸透圧比を指標とした品質評価を行うこともでき、凍結乾燥注射剤の場合は、再溶解時間を指標とした品質評価を行うこともできる。これらの品質評価により、既存の医薬組成物に対する優位性を確認することもできる。
また、本発明の凍結乾燥方法は、本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートを含む医薬組成物のみならず、スクロース又はトレハロースを含有する水溶液への一般的な適用が期待される。
従って、スクロース又はトレハロースを含有する水溶液の共融点付近の棚温度でアニーリングするプロセスを含む、凍結乾燥注射剤の製造方法（ここで、共融点付近とは、共融点よりも１．５℃低い温度から、共融点よりも１．５℃高い温度の範囲を示す。）も、本発明の範囲に含まれる。
また、アニーリングは、好適には、スクロース又はトレハロースを含有する水溶液の共融点と同じ棚温度で行うことができる。
これらの製造方法は、好適には、共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、１次乾燥するプロセスの時間が短縮されることを特徴とする。
【０１５４】
また、これらの製造方法は、好適には、共融点よりも５℃低い棚温度でアニーリングを行った場合と比較し、よりシュリンクが少ない凍結乾燥ケーキが得られることを特徴とする。
【０１５５】
［医薬組成物の使用］
本発明の医薬組成物は、患者に対しては全身療法として適用する他、がん組織に局所的に適用して治療効果を期待することができる。
【０１５６】
本発明の医薬組成物は、哺乳動物に対して好適に使用することができるが、より好適にはヒトに対して使用することができる。
【０１５７】
本発明の医薬組成物を投与するために使用され得る導入経路としては、例えば、静脈内、皮内、皮下、筋肉内、及び腹腔内の経路を挙げることができるが、好適には、静脈内である。
【０１５８】
本発明の医薬組成物が水性注射剤である場合、好適には、適切な希釈液で希釈した後、静脈内に点滴投与することができる。希釈液としては、例えば、ブドウ糖溶液（好適には５％ブドウ糖溶液）や、生理食塩液を挙げることができる。
【０１５９】
本発明の医薬組成物が凍結乾燥注射剤である場合、水（好適には、注射用水）により溶解した後、必要量を適切な希釈液で希釈した後、静脈内に点滴投与することができる。希釈液としては、例えば、ブドウ糖溶液（好適には５％ブドウ糖溶液）や、生理食塩液を挙げることができる。
【０１６０】
本発明の医薬組成物は、本発明の抗体−薬物コンジュゲートの抗原に対する親和性、すなわち、抗原に対する解離定数（Ｋｄ値）の点において、親和性が高い（Ｋｄ値が低い）ほど、少量の投与量であっても薬効を発揮させことができる。したがって、本発明の医薬組成物の投与量は、抗原との親和性の状況に基づいて設定することもできる。本発明の医薬組成物をヒトに対して投与する際には、例えば、抗体−薬物コンジュゲートとして、約０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇ（ここで、「ｍｇ／ｋｇ」とは、ヒトの体重１ｋｇあたりの抗体−薬物コンジュゲートの投与量を意味する）を１回或は１〜１８０日間に１回の間隔で複数回投与すればよいが、例えば、本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートが抗ＨＥＲ２抗体−薬物コンジュゲートである場合、好適には、０．８ｍｇ／ｋｇ〜８ｍｇ／ｋｇを３週に１回投与する方法を挙げることができ、より好適には、０．８ｍｇ／ｋｇ、１．６ｍｇ／ｋｇ、３．２ｍｇ／ｋｇ、５．４ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、７．４ｍｇ／ｋｇ、又は８ｍｇ／ｋｇを３週に１回投与する方法を挙げることができ、更により好適には、５．４ｍｇ／ｋｇ、６．４ｍｇ／ｋｇ、７．４ｍｇ／ｋｇ、又は８ｍｇ／ｋｇを３週に１回投与する方法を挙げることができ、更により好適には、５．４ｍｇ／ｋｇ、又は６．４ｍｇ／ｋｇを３週に１回投与する方法を挙げることができる。
【０１６１】
本発明の医薬組成物は、がんの治療のために使用することができ、好適には、乳がん、胃がん（胃腺がんと呼ぶこともある）、大腸がん（結腸直腸がんと呼ぶこともあり、結腸がん及び直腸がんを含む）、肺がん（小細胞肺がん及び非小細胞肺がんを含む）、食道がん、唾液腺がん、胃食道接合部腺がん、胆管がん、ページェット病、膵臓がん、卵巣がん、子宮がん肉腫、尿路上皮がん、前立腺がん、膀胱がん、胃腸間質腫瘍、消化管間質腫瘍、子宮頸がん、扁平上皮がん、腹膜がん、肝臓がん、肝細胞がん、結腸がん、直腸がん、子宮内膜がん、子宮がん、腎臓がん、外陰部がん、甲状腺がん、陰茎がん、白血病、悪性リンパ腫、形質細胞腫、骨髄腫、神経上皮組織性腫瘍、神経鞘性腫瘍、頭頸部がん、皮膚がん、咽頭がん、胆のうがん、胆管がん、中皮腫、及び肉腫からなる群より選択される少なくとも一つのがんの治療のために使用することができる。例えば、本発明で使用される抗体−薬物コンジュゲートが抗ＥＲ２抗体−薬物コンジュゲートである場合、より好適には、乳がん、胃がん、大腸がん、非小細胞肺がん、食道がん、唾液腺がん、胃食道接合部腺がん、胆管がん、ページェット病、膵臓がん、卵巣がん、及び子宮がん肉腫からなる群より選択される少なくとも一つのがんの治療のために使用することができ、より好適には、乳がん、胃がん、大腸がん、非小細胞肺がん、食道がん、唾液腺がん、胃食道接合部腺がん、胆管がん、及びページェット病からなる群より選択される少なくとも一つのがんの治療のために使用することができ、さらにより好適には、乳がん、胃がん、大腸がん、又は非小細胞肺がんの治療のために使用することができる。
【０１６２】
本発明の医薬組成物は、がん治療の主要な治療法である薬物療法のための薬剤として選択して使用することができ、その結果として、がん細胞の成長を遅らせ、増殖を抑え、さらにはがん細胞を破壊することができる。これらの作用によって、がん患者において、がんによる症状からの解放や、ＱＯＬの改善を達成でき、がん患者の生命を保って治療効果が達成される。がん細胞の破壊には至らない場合であっても、がん細胞の増殖の抑制やコントロールによってがん患者においてより高いＱＯＬを達成しつつより長期の生存を達成させることができる。
【０１６３】
このような薬物療法においての薬物単独での使用の他、本発明の医薬組成物は、アジュバント療法において他の療法と組み合わせて使用することもでき、外科手術や、放射線療法、ホルモン療法等と組み合わせることができる。さらにはネオアジュバント療法における薬物療法として使用することもできる。
【０１６４】
以上のような治療的使用の他、本発明の医薬組成物は、微細な転移がん細胞の増殖を押さえ、さらには破壊するといった予防効果も期待することができる。例えば、転移過程で体液中にあるがん細胞を抑制し破壊する効果や、いずれかの組織に着床した直後の微細ながん細胞に対する抑制、破壊等の効果が期待できる。したがって、特に外科的ながんの除去後においてのがん転移の抑制、予防効果が期待できる。
【０１６５】
本発明の医薬組成物は、他のがん治療剤と併用して投与することもでき、これによって抗腫瘍効果を増強させることができる。この様な目的で使用される他のがん治療剤として、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ペルツズマブ（Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、トラスツズマブ（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）、パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、カルボプラチン（Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、ゲムシタビン（Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）、カペシタビン（Ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）、イリノテカン（Ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）（ＣＰＴ−１１）、ドセタキセル（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）、ペメトレキセド（Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ）、ソラフェニブ（Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、ビンブラスチン（Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎ）、ビノレルビン（Ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）、エベロリムス（Ｅｖｅｒｏｌｉｍｓ）、タネスピマイシン（Ｔａｎｅｓｐｉｍｙｃｉｎ）、ベバシズマブ（Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、オキサリプラチン（Ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）、ラパチニブ（Ｌａｐａｔｉｎｉｂ）、トラスツズマブエムタンシン（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ  ｅｍｔａｎｓｉｎｅ）（Ｔ−ＤＭ１）又は国際公開第２００３／０３８０４３号に記載の薬剤、更にＬＨ−ＲＨアナログ（リュープロレリン（Ｌｅｕｐｒｏｒｅｌｉｎ）、ゴセレリン（Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）等）、エストラムスチン・フォスフェイト（Ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、エストロジェン拮抗薬（タモキシフェン（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）、ラロキシフェン（Ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ）等）、アロマターゼ阻害剤（アナストロゾール（Ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ）、レトロゾール（Ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）、エキセメスタン（Ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）等）等を挙げることができるが、抗腫瘍活性を有する薬剤であれば限定されることはない。
【実施例】
【０１６６】
以下に示す例によって本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。また、これらはいかなる意味においても限定的に解釈されるものではない。【０１６７】
［実施例１：抗体−薬物コンジュゲート（１）の製造］
国際公開第２０１５／１１５０９１号に記載の製造方法を参考に、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体（トラスツズマブ）を用いて、式【０１６８】
【化１４】
2019039483.tif 000016
【０１６９】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗ＨＥＲ２抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲート（以下、「抗体−薬物コンジュゲート（１）」と称する）を製造した。抗体−薬物コンジュゲート（１）のＤＡＲは、７．８であった。【０１７０】
［実施例２：抗体−薬物コンジュゲート（１）の製剤の調製］
製剤の調製法（１）
抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、１１．１％トレハロース水和物、及び０．０２％ポリソルベート２０を含む水溶液（ｐＨ５．８）を透析カセット（透析膜、Ｓｌｉｄｅ−Ａ−ｌｙｚｅｒ，  ＭＷＣＯ  ２０，０００）に注入し、透析カセットに注入した試料量の５０倍以上の目的処方の賦形剤を含有する緩衝液で透析を行った。透析は５°Ｃで５時間以上を２回行った。透析後のタンパク質濃度が約２０ｍｇ／ｍＬになるように濃縮または希釈を適宜実施した。この溶液を０．２２μｍフィルターを用いてろ過した。ろ過した液を１ｍＬずつガラスバイアルに充填し、ゴム栓を半打栓し、表１の条件で凍結乾燥を行った。凍結乾燥後、ゴム栓が打栓されたバイアルにキャップを巻締めた。ろ過と充填操作はクリーンベンチ内にて実施した。【０１７１】
【表１】
2019039483.tif 000017
【０１７２】
製剤の調製法（２）
抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、１１．１％トレハロース水和物、及び０．０２％ポリソルベート２０を含む水溶液（ｐＨ５．８）をＵＦ膜キット（ＡＭＩＣＯＮ  ＵＬＴＲＡ−１５、３０ｋＤａ）に分注して３０００ｒｐｍ、５℃設定で遠心を行い約２倍に濃縮した。この濃縮液に含有するポリソルベート２０を疎水性吸着剤（アンバーライト  ＸＡＤ７ＨＰ）に吸着させ除去した。このポリソルベート２０を除去した薬液を透析カセット（透析膜、Ｓｌｉｄｅ−Ａ−ｌｙｚｅｒ，  ＭＷＣＯ  ２０，０００）に注入し、透析カセットに注入した試料量の５０倍以上の目的処方の賦形剤を含有する緩衝液で透析を行った。透析は５℃で５時間以上を２回行った。透析後のタンパク質濃度が約２０ｍｇ／ｍＬになるように濃縮または希釈を適宜実施した後、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０を添加して混合した。この溶液を０．２２μｍフィルターを用いてろ過した。ろ過した液を１ｍＬずつガラスバイアルに充填し、ゴム栓を半打栓し、表２の条件で凍結乾燥を行った。凍結乾燥後、ゴム栓が打栓されたバイアルにキャップを巻締めた。ろ過と充填操作はクリーンベンチ内にて実施した。【０１７３】
【表２】
2019039483.tif 000018
【０１７４】
［実施例３：安定性試験］
凍結乾燥注射剤を４０℃／７５％ＲＨで３ヵ月間保存した。タンパク質濃度（ＵＶ法にて測定）、水分（カールフィッシャー法にて測定）、不溶性微粒子（Ｍｉｃｒｏ  Ｆｌｏｗ  Ｉｍａｇｉｎｇにて測定）、Ｄｒｕｇ  Ａｎｔｉｂａｄｙ  Ｒａｔｉｏ（ＤＡＲ）（ＨＰＬＣ法にて測定）、単量体・凝集体・断片体の比率（ＳＥ−ＨＰＬＣ（ＳＥＣ）にて測定）、Ｎｏｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎｏｕｓ  Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  （ＮＰＩ）（ＨＰＬＣ法にて測定）、Ｉｍｐｕｒｉｔｙ  ｏｆ  Ｐａｙｌｏａｄ  （ＩｏＰ）（ＨＰＬＣ法にて測定）、電荷異性体（ＣＺＥにて測定）、ｐＨ、及びＨＥＲ２  ｂｉｎｄｉｎｇ  ａｃｔｉｖｉｔｙ（ＥＬＩＳＡ法にて測定）を指標に、安定性を比較評価した。【０１７５】
［実施例４：賦形剤スクリーニング］
凍結乾燥注射剤の賦形剤はバイオ医薬品で使用実績があり、浸透圧がほぼ等張となる濃度である１０％トレハロース水和物、９％スクロース、５％ソルビトールから選定した。その他の成分は共通で抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、４０ｍＭヒスチジン緩衝剤、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．８とした。【０１７６】
結果を表３に示す。５％ソルビトールよりも９％スクロース又は１０％トレハロース水和物を使用した場合に凝集体の生成が少ないことが判明した。特に９％スクロースを使用した場合に凝集体の生成が最も少ないことが判明した（図３）。【０１７７】
【表３】
2019039483.tif 000019
【０１７８】
［実施例５：緩衝剤スクリーニング］
凍結乾燥注射剤の緩衝剤はバイオ医薬品で使用実績があり、ｐＨ４からｐＨ７付近の緩衝能を持つヒスチジン、クエン酸、リン酸、コハク酸、及びグルタミン酸から選定した。これらの緩衝剤の濃度は一律２５ｍＭとした。その他の成分は共通で抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、１０％トレハロース水和物、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．８とした。【０１７９】
結果を表４に示す。緩衝剤として、ヒスチジンを使用した場合に、凝集体の生成が最も少ないことが判明した（図４）。【０１８０】
【表４】
2019039483.tif 000020
【０１８１】
［実施例６：ｐＨスクリーニング］
凍結乾燥注射剤の再溶解後のｐＨは緩衝剤スクリーニングで選定したヒスチジン緩衝剤を用い、点滴静注した場合に生体適合性や刺激性等の安全性を考慮しｐＨ４からｐＨ７の範囲から選定した。その他の成分は共通で抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、２５ｍＭヒスチジン緩衝剤、０．０２％ポリソルベート２０とした。試料作製は製剤の調製法（１）で実施した。【０１８２】
結果を表５に示す。ｐＨが高くなることにより凝集体が増加し（図５）、ｐＨが低くなることによりＮＰＩが増加することが判明した（図６）。従って、ｐＨ５．５にて凝集体の増加とＮＰＩの増加をバランスよく抑制できることが判明した。【０１８３】
【表５】
2019039483.tif 000021
【０１８４】
［実施例７：緩衝剤濃度スクリーニング］
凍結乾燥注射剤の緩衝剤として選定したヒスチジン緩衝剤の濃度は、１０ｍＭから４０ｍＭの範囲から選定した。その他の成分は共通で抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、０．０２％ポリソルベート２０、ｐＨ５．５とした。試料作製は製剤の調製法（１）で実施した。【０１８５】
結果を表６に示す。ヒスチジン緩衝剤濃度が、１０ｍＭから４０ｍＭの場合において、いずれも同等の安定性を示した。【０１８６】
【表６】
2019039483.tif 000022
【０１８７】
［実施例８：界面活性剤スクリーニング］
凍結乾燥注射剤の場合、界面活性剤は凍結時のタンパク質濃縮層の界面保護剤や凍結乾燥体の再溶解時に発生する微細な気泡に対する界面保護剤としての役割が期待されることから、界面活性剤として、０．０２％から０．０４％のポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０）及び、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０）について検討した。その他の成分は共通で抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、２５ｍＭヒスチジン緩衝剤、ｐＨ５．５とした。試料作製は製剤の調製法（２）で実施した。【０１８８】
結果を表７及び表８に示す（ここで、「ＰＳ」はポリソルベートを意味し、「ＰＳ２０」はポリソルベート２０を意味し、「ＰＳ８０」はポリソルベート８０を意味する）。０．０２％から０．０４％のポリソルベート２０又は８０を使用することで微粒子数の抑制が認められ、特に０．０２％から０．０４％のポリソルベート８０を使用した場合に、微粒子数を抑制できることが判明した（図７）。【０１８９】
【表７】
2019039483.tif 000023
【０１９０】
【表８】
2019039483.tif 000024
【０１９１】
［実施例９：バイアル検討］
褐色ガラスバイアル、及び透明ガラスバイアルのそれぞれに、凍結乾燥注射剤を充填し、１，０００ｌｘの白色蛍光灯下に光暴露した時の品質変化を比較検討した。凍結乾燥注射剤の成分は、抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、２５ｍＭヒスチジン緩衝剤、０．０２％ポリソルベート２０（ｐＨ５．５）とし、試料作製は製剤の調製法（１）で実施した。
結果を表９に示す。透明ガラスバイアルよりも、褐色ガラスバイアルを使用した場合に、凝集体（図８）及びＩｏＰ（図９）の生成を抑制できることが判明した。【０１９２】
【表９】
2019039483.tif 000025
【０１９３】
［実施例１０：凍結乾燥方法の設定］
注射剤の凍結乾燥方法を設定する上で指標となる重要な物性は、凍結乾燥する薬物含有水溶液の凍結ガラス転移点（Ｔｇ’）、凍結乾燥中に生成する多孔性構造を有するケーキの崩壊温度（Ｔｃ）であり、このＴｇ’またはＴｃ以下となる製品温度で乾燥することによってケーキ状の多孔性構造を有する凍結乾燥体が得られる。乾燥プロセスは、一般的に凍結体中の自由水を昇華するための１次乾燥プロセスと溶質に結合した水（結合水）を昇華するための２次乾燥プロセスで構成され、１次乾燥プロセス中の自由水はＴｇ’以下の製品温度で昇華することが適当であり、Ｔｃ以下の製品温度で昇華することも可能である。
抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、２５ｍＭヒスチジン緩衝剤、０．０３％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが５．５である水溶液（以下、「水溶液（１）」という。）の、Ｔｇ’は−３１℃、Ｔｃは−２７℃である。
水溶液（１）５．２〜５．５ｍＬを容量が約１０ｍＬのガラスバイアルに充填して凍結乾燥方法の検討を実施した。【０１９４】
（１）１次乾燥プロセスパラメータ検討
１次乾燥プロセスで最も重要なパラメータは棚温度及び、庫内真空度である。凍結乾燥ケーキの形状（安定性）や再溶解性、乾燥時間は前述のパラメータの影響を大きく受けることから、棚温度を−２０℃から０℃の範囲及び、庫内真空度を５Ｐａから１５Ｐａの範囲で実験計画法を用いて検討した。凍結乾燥は表９のパラメータで実施した（アニーリングの棚温度は−７℃）。【０１９５】
【表１０】
2019039483.tif 000026
【０１９６】
図１０は１次乾燥プロセスにおける棚温度と庫内真空度を変動させた時の水溶液（１）の製品温度の等高線図である。棚温度が低く庫内真空度が高い条件で１次乾燥中の製品温度は低くなり、その逆の棚温度が高く庫内真空度が低い条件で製品温度は高くなる、一般的な製品温度挙動を示した。棚温度が−２０℃から０℃の範囲及び、庫内真空度が５Ｐａから１５Ｐａの範囲の製品温度はＴｃ以下を示したものの、三角で囲んだ部分以外のパラメータでは凍結乾燥ケーキの多孔性構造に部分的な崩壊が生じ、凍結乾燥ケーキが縮んだ状態の外観（シュリンク）となることが明らかとなった。
図１１は１次乾燥プロセスにおける棚温度と庫内真空度を変動させた時の水溶液（１）の乾燥時間の等高線図である。棚温度が低く庫内真空度が高い条件で１次乾燥時間は長くなり、その逆の棚温度が高く庫内真空度が低い条件で乾燥時間は短くなる、一般的な乾燥速度挙動を示し、製品温度との相関が認められた。製品温度等高線図の三角で囲んだ部分のパラメータ領域では、良好な形状の凍結乾燥ケーキが得られるが、長時間の１次乾燥プロセスが必要になることが明らかとなった。
凍結乾燥ケーキの形状は外観品質の観点ではシュリンクのない状態が望まれるため、本検討の結果から１次乾燥プロセスは少なくとも５８時間必要であることが明らかとなった。そのため、総凍結乾燥時間は、凍結プロセスに１１時間、２次乾燥・出庫プロセスに１２時間は必要であることから、８１時間となる。つまり凍結乾燥のプロセス期間は３日間以上となり、これに凍結乾燥開始日と終了日を加えると製造期間は５日間と見積もられた。
一方、凍結乾燥は生産効率及び、生産コストの観点で短時間（短期間）のプロセスが望ましいため、長時間の凍結乾燥プロセスが必要になることが課題となった。
この課題を解決するため１次乾燥プロセス時間を短縮してもシュリンクが少ない凍結乾燥ケーキを得るために、凍結乾燥ケーキの多孔性構造の改善が期待できるアニーリングステップに着目し、アニーリングパラメータの検討を実施した。【０１９７】
（２）アニーリングパラメータ設定
アニーリングプロセスで重要なパラメータは棚温度であり、棚温度を変動することによって凍結体の製品温度を調節することができる。
本検討では凍結乾燥ケーキの多孔性構造は氷晶の氷が昇華することによって作られるため、アニーリングの棚温度の最適化を実施した。アニーリングの棚温度は共融点から安全マージンをとった温度に設定することが一般的であることから、共融点が−２．５℃である水溶液（１）では−７℃で実施していたが、凍結体中の氷晶を成長させて氷の昇華抵抗を減らし、乾燥がスムーズに進むことで凍結乾燥ケーキにシュリンクが生じ難い比表面積の小さな多孔性構造とするため−７℃よりも高い棚温度を試みた。アニーリングの棚温度の範囲は−７℃から０．５℃までとし、比表面積の小さな多孔性構造を作ることで凍結乾燥ケーキの外観品質の改善を検討した。本検討の凍結乾燥は表１１のパラメータで実施し、１次乾燥時間は合計約４２時間とした。【０１９８】
【表１１】
2019039483.tif 000027
【０１９９】
棚温度−７℃から０．５℃の範囲でアニーリングを実施し凍結乾燥した場合の製品温度（アニーリング時）と凍結乾燥ケーキの形状を図１２に示す。アニーリング時の製品温度が−７．０℃から−４．６℃の範囲ではバイアル底部から側面下部にかけて凍結乾燥ケーキに顕著なシュリンクが認められ、−４．２℃から−３．４℃の製品温度範囲では僅かなシュリンクが認められたものの、−２．６℃から−１．５℃の製品温度範囲ではシュリンクのない凍結乾燥ケーキが得られた。これらの結果から共融点に近い棚温度でアニーリングするほどシュリンクは減少し、共融点付近ではシュリンクが起きなくなる事が判明した。また、製品温度が共融点以上の−１．５℃まで上昇したとしても固体状態が維持され正常な形状の凍結乾燥ケーキが得られることが明らかとなった。
アニーリングはこれまで共融点よりも５℃程度低い棚温度で実施されることが一般的であったが、本検討によって、共融点付近でアニーリングした方がより優れた外観の凍結乾燥ケーキが得られることが見出された。アニーリングの棚温度は、本検討結果をもとに共融点付近の−４℃から−２℃に設定した。
また、本検討から、共融点付近でアニーリングすることによって、１次乾燥プロセスの時間を４０時間程度短縮できることが判明した。図１０及び、図１１の結果をもとに、棚温度−５℃、庫内真空度７Ｐａに設定することにより製品温度が比較的低い状態で乾燥が可能で且つ乾燥時間を１８時間程度短縮が見込まれる条件であると考えられたことから１次乾燥パラメータとして設定した。【０２００】
（３）２次乾燥プロセスパラメータ設定
２次乾燥プロセスは溶質に結合した水（結合水）を乾燥するためのプロセスであり、２次乾燥後の乾燥度が凍結乾燥注射剤の保存安定性に大きく影響を及ぼすことが一般的に知られている。結合水は高い温度で乾燥するほど低くすることができるが、抗体−薬物コンジュゲートの抗体部分は熱に不安定なことが一般的であるため、キャピラリー示差走査熱量計でタンパク質の熱変性Ｏｎｓｅｔを測定した。図１３に示すのとおり抗体−薬物コンジュゲート（１）の熱変性Ｏｎｓｅｔは５２℃から５３℃であったことから２次乾燥の棚温度は５０℃以下で乾燥度（残存水分）を評価した。
２次乾燥の棚温度は３０℃から５０℃の範囲とし、乾燥度の評価を実施した。本検討の凍結乾燥は表１２のパラメータで実施した。【０２０１】
【表１２】
2019039483.tif 000028
【０２０２】
各２次乾燥の棚温度と凍結乾燥注射剤中の残存水分の結果を表１３に示す。凍結乾燥注射剤中の残存水分は５％まで安定性が維持されることを確認しているが、安定性のより高いレベルを目標とするため、残存水分を１％以下に設定した。残存水分は１次乾燥条件の影響を多少受けるものの、２次乾燥の棚温度が４０℃から５０℃の範囲で残存水分量が１％以下となることが確認された。熱変性Ｏｎｓｅｔと本検討結果をもとに４０℃から５０℃の中間の４５℃を２次乾燥の棚温度に設定した。【０２０３】
【表１３】
2019039483.tif 000029
【０２０４】
（４）まとめ
バイオ医薬品（タンパク質医薬品）の凍結乾燥注射剤の賦形剤は、タンパク質の凍結保護作用を持ち、保存中のメイラード反応リスクがないスクロースやトレハロースといった非還元二糖類を製剤処方に選定することが一般的である。これらの糖は他の糖類よりもＴｇ’やＴｃが低いため棚温度を低くして製品温度がＴｇ’やＴｃを超えないように乾燥する必要があり、凍結乾燥プロセスが長くなる課題や凍結乾燥ケーキにシュリンクが生じ易いといった課題を持つ。水溶液（１）についても例外ではなかったことから、これらの課題を解決するため１次乾燥、アニーリングプロセス及び１次乾燥プロセスの検討を実施し、その結果をもとに表１４のとおり水溶液（１）の凍結乾燥方法を設定した。この凍結乾燥方法の特徴はアニーリングパラメータであり、共融点付近でアニーリングすることによってシュリンクを顕著に低減した凍結乾燥ケーキを短時間で製造できることが見出された。【０２０５】
【表１４】
2019039483.tif 000030
【０２０６】
本凍結乾燥方法で製造した凍結乾燥注射剤について、５０℃下１ヵ月間、４０℃／７５％ＲＨ下３ヵ月間、２５℃／６０％ＲＨ下３ヵ月間、５℃下３ヵ月間での保存安定性を、タンパク質濃度、水分、不溶性微粒子、ＤＡＲ、単量体・凝集体・断片体の比率、ＮＰＩ、ＩｏＰ、電荷異性体、及びｐＨを指標に評価した結果、顕著な品質変化は認められないことが判明した。【０２０７】
［実施例１１：長期保存安定性の評価］
実施例１０で製造した凍結乾燥注射剤について、さらに、４０℃／７５％ＲＨ下６ヵ月間、２５℃／６０％ＲＨ下１２ヵ月間、５℃下１８ヵ月間での保存安定性を、タンパク質濃度、水分、不溶性微粒子、ＤＡＲ、単量体・凝集体・断片体の比率、ＮＰＩ、ＩｏＰ、電荷異性体、及びｐＨを指標に評価した。その結果、顕著な品質変化は認められないことが判明した。【０２０８】
［実施例１２：凍結乾燥方法の更なる検討］
（１）アニーリングパラメータ設定
水溶液（１）の凍結乾燥方法として、凍結体中の氷晶を成長させるため、棚温度−２．５℃を１２０分間保持してアニーリングを行う方法を採用していたが、１２０分では凍結体の上層部の温度が−２．５℃まで上昇しておらず氷晶成長が不十分なため僅かながら凍結乾燥ケーキにシュリンクが起きることが判明した。アニーリング時間を２４０分間まで延長すると凍結体の上層部の温度が−２．５℃に到達することが判明したためアニーリング時間を４時間に変更することとした。４時間に変更することによって氷晶が十分に成長することで水の昇華速度が速くなり一次乾燥時間が短縮することが判明した。【０２０９】
（２）一次乾燥プロセスパラメータ設定
−２．５℃で４時間アニーリングを行い、一次乾燥プロセスパラメータについて棚温度を−１０℃から１５℃の範囲及び、庫内真空度を４Ｐａから３０Ｐａの範囲で検討した。凍結乾燥は表１５のパラメータで実施した。【０２１０】
【表１５】
2019039483.tif 000031
【０２１１】
棚温度が−１０℃から１０℃の範囲及び、庫内真空度が４Ｐａから３０Ｐａの範囲の製品温度はＴｃ以下を示し、凍乾ケーキが外観はシュリンクやコラプスのないケーキ形状であった。【０２１２】
このうち、棚温度が−５℃から５℃であり、且つ、庫内真空度が５Ｐａから１５Ｐａである場合が特に安全な範囲と考えられ、さらに乾燥時間を勘案し、この範囲の中心条件である棚温度が０℃であり、且つ、庫内真空度が１０Ｐａである場合を好適な条件として設定した。【０２１３】
（３）まとめ
上記の結果をもとに表１６のとおり水溶液（１）の凍結乾燥方法を設定した。【０２１４】
【表１６】
2019039483.tif 000032
【０２１５】
本凍結乾燥方法で製造した凍結乾燥注射剤について、４０℃／７５％ＲＨ下３ヵ月間の保存安定性を、タンパク質濃度、水分、不溶性微粒子、ＤＡＲ、単量体・凝集体・断片体の比率、ＮＰＩ、ＩｏＰ、電荷異性体、及びｐＨを指標に評価した。開始時点からの顕著な品質変化は認められていない。【０２１６】
［実施例１３：他の処方と凍結乾燥条件の検討］
（１）製剤の調製
原薬（抗体−薬物コンジュゲート（１）（２０ｍｇ／ｍＬ）、２５ｍＭヒスチジン、９％スクロース、ｐＨ５．５）をＵＦ膜キット（ＡＭＩＣＯＮ  ＵＬＴＲＡ−１５、３０ｋＤａ）に分注して３０００ｒｐｍ、５℃設定で遠心を行い約３倍に濃縮した。この濃縮原薬を透析カセット（透析膜、Ｓｌｉｄｅ−Ａ−ｌｙｚｅｒ，  ＭＷＣＯ  ２０，０００）に注入し、透析カセットに注入した試料量の５０倍以上の目的処方の緩衝液で透析を行った。透析は５°Ｃで５時間以上を２回行った。透析後のタンパク質濃度が約５ｍｇ／ｍＬまたは約５０ｍｇ／ｍＬになるように濃縮または希釈を適宜実施した後、ポリソルベート８０を添加して混合し、抗体−薬物コンジュゲート（１）（５ｍｇ／ｍＬ）、８％スクロース、２０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０４％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが４．０である水溶液（以下、「水溶液（２）」という。）、抗体−薬物コンジュゲート（１）（５０ｍｇ／ｍＬ）、６％スクロース、４０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０４％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが７．０である水溶液（以下、「水溶液（３）」という。）、抗体−薬物コンジュゲート（１）（５ｍｇ／ｍＬ）、８％トレハロース水和物、２０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０４％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが４．０である水溶液（以下、「水溶液（４）」という。）、並びに、抗体−薬物コンジュゲート（１）（５０ｍｇ／ｍＬ）、６％トレハロース水和物、４０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０４％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが７．０である水溶液（以下、「水溶液（５）」という。）を調製した。
なお、抗体−薬物コンジュゲート（１）２０ｍｇ当たりの量で換算すると、水溶液（２）は、３２０ｍｇのスクロース、８０ｍＭのヒスチジン緩衝剤、及び１．６ｍｇのポリソルベート８０を含み、水溶液（３）は、２４ｍｇのスクロース、１６ｍＭのヒスチジン緩衝剤、及び０．１６ｍｇのポリソルベート８０を含み、水溶液（４）は、３２０ｍｇのトレハロース水和物、８０ｍＭのヒスチジン緩衝剤、及び１．６ｍｇのポリソルベート８０を含み、水溶液（５）は、２４ｍｇのトレハロース水和物、１６ｍＭのヒスチジン緩衝剤、及び０．１６ｍｇのポリソルベート８０を含んでいる。
これらの溶液を０．２２μｍフィルターを用いてろ過した。ろ過した液を５ｍＬずつ褐色ガラスバイアルに充填し、凍結乾燥製剤の場合はゴム栓を半打栓し、表１７の条件で凍結乾燥を行った。凍結乾燥後、ゴム栓が打栓されたバイアルにキャップを巻締めた。【０２１７】
【表１７】
2019039483.tif 000033
【０２１８】
（２）安定性試験
本凍結乾燥方法で製造した凍結乾燥注射剤について、４０℃／７５％ＲＨ下の保存安定性を、タンパク質濃度、水分、不溶性微粒子、ＤＡＲ、単量体・凝集体・断片体の比率、ＮＰＩ、ＩｏＰ、電荷異性体、及びｐＨを指標に評価した。【０２１９】
［実施例１４：抗体−薬物コンジュゲート（２）の製造と処方の検討］
国際公開第２０１５／１５５９９８号に記載の製造方法を参考に、抗ＨＥＲ３抗体（配列番号３に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体）を用いて、式【０２２０】
【化１５】
2019039483.tif 000034
【０２２１】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗ＨＥＲ３抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲート（以下、「抗体−薬物コンジュゲート（２）」と称する）を製造した。抗体−薬物コンジュゲート（２）のＤＡＲは、７．７であった。【０２２２】
抗体−薬物コンジュゲート（２）について、実施例２〜８の方法と同様な方法で処方のスクリーニング（抗体−薬物コンジュゲート（２）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、２５ｍＭヒスチジン緩衝剤、ポリソルベート２０（０．０１〜０．１％）、ｐＨ４．９〜５．９）を行った。その結果、抗体−薬物コンジュゲート（２）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、２５ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０３％ポリソルベート２０、を含み、ｐＨが５．４である水溶液（以下、「水溶液（６）」という。）が好適な処方であることが判明した。【０２２３】
［実施例１５：抗体−薬物コンジュゲート（３）の製造と処方の検討］
国際公開第２０１５／０９８０９９号に記載の製造方法を参考に、抗ＴＲＯＰ２抗体（配列番号５においてアミノ酸番号２０乃至４７０に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号６においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体）を用いて、式【０２２４】
【化１６】
2019039483.tif 000035
【０２２５】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗ＴＲＯＰ２抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲート（以下、「抗体−薬物コンジュゲート（３）」と称する）を製造した。抗体−薬物コンジュゲート（３）のＤＡＲは、４．３であった。【０２２６】
抗体−薬物コンジュゲート（３）について、実施例２〜８の方法と同様な方法で処方のスクリーニング（抗体−薬物コンジュゲート（３）（２０ｍｇ／ｍＬ）、スクロース（３〜９％）、ヒスチジン緩衝剤（３〜１５ｍＭ）、ポリソルベート２０若しくはポリソルベート８０（０．０１〜０．１％）、ｐＨ５〜７、あるいは抗体−薬物コンジュゲート（３）（１５〜４０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、０．０２％ポリソルベート８０、ｐＨ６．０）を行った。その結果、抗体−薬物コンジュゲート（３）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０２％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが６．０である水溶液（以下、「水溶液（７）」という。）、並びに、抗体−薬物コンジュゲート（３）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０３％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが６．０である水溶液（以下、「水溶液（８）」という。）が好適な処方であることが判明した。【０２２７】
［実施例１６：抗体−薬物コンジュゲート（４）の製造と処方の検討］
国際公開第２０１４／０５７６８７号に記載の製造方法を参考に、抗Ｂ７−Ｈ３抗体（配列番号７においてアミノ酸番号２０乃至４７１に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号８においてアミノ酸番号２１乃至２３３に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体）を用いて、式【０２２８】
【化１７】
2019039483.tif 000036
【０２２９】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗Ｂ７−Ｈ３抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲート（以下、「抗体−薬物コンジュゲート（４）」と称する）を製造した。抗体−薬物コンジュゲート（４）のＤＡＲは、４．６であった。【０２３０】
抗体−薬物コンジュゲート（４）について、実施例２〜８の方法と同様な方法で処方のスクリーニング（抗体−薬物コンジュゲート（４）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース若しくは１０％トレハロース水和物、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤若しくは１０ｍＭコハク酸緩衝剤、ポリソルベート２０若しくはポリソルベート８０（０．００５〜０．０４％）、ｐＨ５．２〜６．２、あるいは抗体−薬物コンジュゲート（４）（２０〜６０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、ポリソルベート２０（０．００５〜０．０４％）、ｐＨ５．２〜６．２）を行った。その結果、抗体−薬物コンジュゲート（４）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０２％ポリソルベート２０、を含み、ｐＨが５．９である水溶液（以下、「水溶液（９）」という。）、並びに、抗体−薬物コンジュゲート（４）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０３％ポリソルベート２０、を含み、ｐＨが５．９である水溶液（以下、「水溶液（１０）」という。）が好適な処方であることが判明した。【０２３１】
［実施例１７：抗体−薬物コンジュゲート（５）の製造と処方の検討］
国際公開第２０１８／１３５５０１号に記載の製造方法を参考に、抗ＧＰＲ２０抗体（配列番号９に記載のアミノ酸番号２０乃至４７２に記載のアミノ酸配列からなる重鎖及び配列番号１０においてアミノ酸番号２１乃至２３４に記載のアミノ酸配列からなる軽鎖を含んでなる抗体）を用いて、式【０２３２】
【化１８】
2019039483.tif 000037
【０２３３】
（式中、Ａは抗体との結合位置を示す）
で示される薬物リンカーと、抗ＧＰＲ２０抗体とがチオエーテル結合によって結合した抗体−薬物コンジュゲート（以下、「抗体−薬物コンジュゲート（５）」と称する）を製造した。抗体−薬物コンジュゲート（５）のＤＡＲは、７．８であった。【０２３４】
抗体−薬物コンジュゲート（５）について、実施例２〜８の方法と同様な方法で処方のスクリーニング（抗体−薬物コンジュゲート（５）（２０〜６０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、ポリソルベート８０（０．０１〜０．１％）、ｐＨ５．０〜６．５）を行った。その結果、抗体−薬物コンジュゲート（５）（２０ｍｇ／ｍＬ）、９％スクロース、１０ｍＭヒスチジン緩衝剤、及び０．０３％ポリソルベート８０、を含み、ｐＨが５．４である水溶液（以下、「水溶液（１１）」という。）が好適な処方であることが判明した。【０２３５】
［実施例１８：凍結乾燥注射剤の製造と安定性試験］
実施例１４〜１７にて調整した水溶液（６）〜（１１）を、実施例１０及び１２に記載の方法と同様な方法で、それぞれ凍結乾燥し、凍結乾燥注射剤を製造した。
これらの凍結乾燥注射剤について、４０℃／７５％ＲＨで１ヶ月間及び３ヵ月間の保存安定性を、タンパク質濃度、水分、不溶性微粒子、ＤＡＲ、単量体・凝集体・断片体の比率、ＮＰＩ、ＩｏＰ、電荷異性体、及びｐＨを指標に評価した。開始時点からの顕著な品質変化は認められていない。
【配列表フリーテキスト】
【０２３６】
配列番号１：抗ＨＥＲ２抗体重鎖のアミノ酸配列
配列番号２：抗ＨＥＲ２抗体軽鎖のアミノ酸配列
配列番号３：抗ＨＥＲ３抗体の重鎖のアミノ酸配列
配列番号４：抗ＨＥＲ３抗体の軽鎖のアミノ酸配列
配列番号５：抗ＴＲＯＰ２抗体重鎖のアミノ酸配列
配列番号６：抗ＴＲＯＰ２抗体軽鎖のアミノ酸配列
配列番号７：抗Ｂ７−Ｈ３抗体重鎖のアミノ酸配列
配列番号８：抗Ｂ７−Ｈ３抗体軽鎖のアミノ酸配列
配列番号９：抗ＧＰＲ２０抗体重鎖のアミノ酸配列
配列番号１０：抗ＧＰＲ２０抗体軽鎖のアミノ酸配列
【図１】
2019039483.tif 000040
【図２】
2019039483.tif 000041
【図３】
2019039483.tif 000042
【図４】
2019039483.tif 000043
【図５】
2019039483.tif 000044
【図６】
2019039483.tif 000045
【図７】
2019039483.tif 000046
【図８】
2019039483.tif 000047
【図９】
2019039483.tif 000048
【図１０】
2019039483.tif 000049
【図１１】
2019039483.tif 000050
【図１２】
2019039483.tif 000051
【図１３】
2019039483.tif 000052
【図１４】
2019039483.tif 000053
【図１５】
2019039483.tif 000054
【図１６】
2019039483.tif 000055
【図１７】
2019039483.tif 000056
【図１８】
2019039483.tif 000057
【図１９】
2019039483.tif 000058
【図２０】
2019039483.tif 000059
【図２１】
2019039483.tif 000060
【配列表】
2019039483000001.app
【国際調査報告】
2019039483.tif 000061
2019039483.tif 000062
2019039483.tif 000063
2019039483.tif 000064