(57)【要約】  メラニン生成抑制活性を有する新規化合物などを提供する。下記一般式（Ｉ）2010110353.tif 000048〔式中の記号の定義は、明細書に記載の通りである〕で表される化合物又はその塩、及び該化合物又はその塩を含有する美白剤。
2010110353.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）
【化１】
2010110353.tif 000036
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、共有結合、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｙは、共有結合又は式
【化２】
2010110353.tif 000037
で表される２価の基を示す。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合でＺが結合した炭素原子に不斉中心がある場合、その立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。
Ａｒは、下記式（ＩＩ）
【化３】
2010110353.tif 000038
（式中、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示す。＊はＹに結合する部位を示す。）又は
下記式（ＩＩＩ）
【化４】
2010110353.tif 000039
（式中、Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ８とＲ９は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。＊はＹに結合する部位を示す。）で表される置換基を示す。〕で表される化合物
（但し、（１）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水酸基、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物、（２）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が水素原子のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、Ｒ３とＲ４が水酸基、又はＲ３が水酸基でＲ４がメトキシ基である化合物、（３）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６がメトキシ基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、又はＲ３とＲ４が水素原子である化合物、（４）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘが共有結合、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水素原子、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物、（５）Ａｒが式（ＩＩＩ）で表される置換基であり、Ｙがエチレン基であり、Ｒ８とＲ９の何れか又は両方が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
【請求項２】
下記一般式（ＩＶ）
【化５】
2010110353.tif 000040
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合、Ｚが結合した炭素原子の立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。〕で表される化合物
（但し、（１）Ｘがビニレン基、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水酸基、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物、（２）Ｘがビニレン基、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が水素原子のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、Ｒ３とＲ４が水酸基、又はＲ３が水酸基でＲ４がメトキシ基である化合物、（３）Ｘがビニレン基、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６がメトキシ基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、又はＲ３とＲ４が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
【請求項３】
下記一般式（Ｖ）
【化６】
2010110353.tif 000041
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｚは水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合、Ｚが結合した炭素原子の立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。〕で表される化合物
（但し、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水素原子、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
【請求項４】
下記一般式（ＶＩ）
【化７】
2010110353.tif 000042
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、共有結合、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｙは、共有結合又は式
【化８】
2010110353.tif 000043
で表される２価の基を示す。
Ｚは水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合でＺが結合した炭素原子に不斉中心がある場合、その立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ８とＲ９は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。〕で表される化合物
（但し、Ｙがエチレン基であり、Ｒ８とＲ９の何れか又は両方が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
【請求項５】
下記一般式（Ｉ’）
【化９】
2010110353.tif 000044
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、共有結合、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｙは、共有結合又は式
【化１０】
2010110353.tif 000045
で表される２価の基を示す。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合でＺが結合した炭素原子に不斉中心がある場合、その立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。
Ａｒは、下記式（ＩＩ）
【化１１】
2010110353.tif 000046
（式中、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示す。＊はＹに結合する部位を示す。）又は
下記式（ＩＩＩ）
【化１２】
2010110353.tif 000047
（式中、Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ８とＲ９は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。＊はＹに結合する部位を示す。）で表される置換基を示す。〕で表される化合物
（但し、（１）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、又はＲ３とＲ４が水酸基である化合物、（２）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が水素原子のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基である化合物、（３）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘが共有結合、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、又はＲ３とＲ４が水素原子である化合物、（４）Ａｒが式（ＩＩＩ）で表される置換基であり、Ｙがエチレン基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ８が水素原子であり、Ｒ３、Ｒ４及びＲ９が水酸基である化合物を除く。）又はその塩を含有する美白剤。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物又はその塩を含有する美白剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メラニン生成抑制活性を有する新規化合物に関し、化粧品の分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
ハイドロキノングリコシド（アルブチン）は、美白効果、チロシナーゼ阻害活性、活性酸素抑制等さまざまな効果を有することが知られており（非特許文献１）、美白化粧料の原料として用いられている。また、コウジ酸またはその誘導体及び４−ｎ−ブチルレゾルシノール（ルシノール（登録商標））も美白成分として知られ（非特許文献２〜４）、当該成分を配合した美白化粧料が市販されている。近年、紫外線による日焼けを防止し、肌を白く美しく保つことへの関心が高まっており、さらなる美白成分の開発が望まれている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Funayama, M., Arakawa, H., Yamamoto, R., Nishino, T., Shin, T. and Murao, S.: Effect of α- and β-arubutin onactivity of tyrosinases from mushroom, and mouse melanoma. Biosci. Biotech. Biochem., 59, 143-144 (1995).
【非特許文献２】宮崎幸司、西田由美子、市岡稔、Ｂ１６マウスメラノーマ培養細胞の樹状突起形成に及ぼすメラニン生成抑制剤の影響、香粧会誌、Ｖｏｌ．２２、Ｎｏ．３、１８２−１８６（１９９８）.
【非特許文献３】杉山清治、新規美白剤の評価−ルシノールについて、皮膚と美容、Ｖｏｌ．３０、Ｎｏ．３、２−６（１９９８）．
【非特許文献４】Dong-Seok KIM, So-Young KIM, Seo-Hyoung PARK, Yeong-Gon CHOI, Sun-Bang KWON, Myo-Kyoung KIM, Jung-Im Na, Sang-Woong YOUN, and Kyoung-Chan PARK,: Inhibitory Effects of 4-n-Butylresorcinol on Tyrosinase Activity and Melanin Synthesis. Biol. Pharm. Bull., 28(12), 2216-2219 (2005).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明が解決しようとする課題は、メラニン生成抑制活性を有する新規化合物などを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、下記構造を有する化合物がメラニン生成抑制活性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。【０００６】
すなわち、本発明は以下のとおりである。
〔１〕  下記一般式（Ｉ）【０００７】
【化１】
2010110353.tif 000003
【０００８】
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、共有結合、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｙは、共有結合又は式【０００９】
【化２】
2010110353.tif 000004
【００１０】
で表される２価の基を示す。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合でＺが結合した炭素原子に不斉中心がある場合、その立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。
Ａｒは、下記式（ＩＩ）【００１１】
【化３】
2010110353.tif 000005
【００１２】
（式中、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示す。＊はＹに結合する部位を示す。）又は
下記式（ＩＩＩ）【００１３】
【化４】
2010110353.tif 000006
【００１４】
（式中、Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ８とＲ９は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。＊はＹに結合する部位を示す。）で表される置換基を示す。〕で表される化合物
（但し、（１）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水酸基、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物、（２）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が水素原子のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、Ｒ３とＲ４が水酸基、又はＲ３が水酸基でＲ４がメトキシ基である化合物、（３）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６がメトキシ基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、又はＲ３とＲ４が水素原子である化合物、（４）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘが共有結合、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水素原子、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物、（５）Ａｒが式（ＩＩＩ）で表される置換基であり、Ｙがエチレン基であり、Ｒ８とＲ９の何れか又は両方が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
〔２〕  下記一般式（ＩＶ）【００１５】
【化５】
2010110353.tif 000007
【００１６】
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合、Ｚが結合した炭素原子の立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。〕で表される化合物
（但し、（１）Ｘがビニレン基、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水酸基、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物、（２）Ｘがビニレン基、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が水素原子のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、Ｒ３とＲ４が水酸基、又はＲ３が水酸基でＲ４がメトキシ基である化合物、（３）Ｘがビニレン基、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６がメトキシ基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３がメトキシ基でＲ４が水素原子、又はＲ３とＲ４が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
〔３〕  下記一般式（Ｖ）【００１７】
【化６】
2010110353.tif 000008
【００１８】
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合、Ｚが結合した炭素原子の立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。〕で表される化合物
（但し、Ｚが水素原子で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、Ｒ３とＲ４が水素原子、又はＲ３がメトキシ基でＲ４が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
〔４〕  下記一般式（ＶＩ）【００１９】
【化７】
2010110353.tif 000009
【００２０】
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、共有結合、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｙは、共有結合又は式【００２１】
【化８】
2010110353.tif 000010
【００２２】
で表される２価の基を示す。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合でＺが結合した炭素原子に不斉中心がある場合、その立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ８とＲ９は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。〕で表される化合物
（但し、Ｙがエチレン基であり、Ｒ８とＲ９の何れか又は両方が水素原子である化合物を除く。）又はその塩。
〔５〕  下記一般式（Ｉ’）【００２３】
【化９】
2010110353.tif 000011
【００２４】
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
Ｘは、共有結合、メチレン基、エチレン基又はビニレン基を示す。
Ｙは、共有結合又は式【００２５】
【化１０】
2010110353.tif 000012
【００２６】
で表される２価の基を示す。
Ｚは、水素原子、ヒドロキシカルボニル基又は炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基を示し、Ｚが水素原子以外の場合でＺが結合した炭素原子に不斉中心がある場合、その立体化学は（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い。
Ａｒは、下記式（ＩＩ）【００２７】
【化１１】
2010110353.tif 000013
【００２８】
（式中、Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示す。＊はＹに結合する部位を示す。）又は
下記式（ＩＩＩ）【００２９】
【化１２】
2010110353.tif 000014
【００３０】
（式中、Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜３のアルキル基、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基を示し、あるいはＲ８とＲ９は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。＊はＹに結合する部位を示す。）で表される置換基を示す。〕で表される化合物
（但し、（１）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３が水酸基でＲ４が水素原子、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、又はＲ３とＲ４が水酸基である化合物、（２）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘがビニレン基、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ６及びＲ７が水素原子のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基である化合物、（３）Ａｒが式（ＩＩ）で表される置換基であり、Ｘが共有結合、Ｙがエチレン基、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ７が水素原子、Ｒ６が水酸基のとき、Ｒ３とＲ４が水酸基、Ｒ３が水酸基でＲ４がメトキシ基、又はＲ３とＲ４が水素原子である化合物、（４）Ａｒが式（ＩＩＩ）で表される置換基であり、Ｙがエチレン基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５及びＲ８が水素原子であり、Ｒ３、Ｒ４及びＲ９が水酸基である化合物を除く。）又はその塩を含有する美白剤。
〔６〕  前記〔１〕〜〔４〕のいずれかに記載の化合物又はその塩を含有する美白剤。
【発明の効果】
【００３１】
本発明の化合物は、メラニン生成抑制活性を通じて美白作用を発揮することが期待され、単独で、あるいは他の美白成分と組み合わせて美白剤として利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】試験例１の結果を示すグラフである。グラフ中、横軸の数値の単位は、μＭである。
【図２】試験例１の結果を示すグラフである。グラフ中、横軸の数値の単位は、μＭである。
【図３】試験例１の結果を示すグラフである。グラフ中、横軸の数値の単位は、μＭである。
【図４】試験例１の結果を示すグラフである。グラフ中、横軸の数値の単位は、μＭである。
【図５】試験例１の結果を示すグラフである。グラフ中、横軸の数値の単位は、μＭである。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本明細書において使用する各式中の記号の定義を説明する。
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９で示される炭素数１〜３のアルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基が挙げられる。中でもメチル基が好ましい。
【００３４】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９で示される炭素数１〜３のアルコキシ基としては、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基が挙げられる。中でもメトキシ基又はエトキシ基が好ましく、メトキシ基がより好ましい。
【００３５】
炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基とは、アルコキシ部分の炭素数が１〜３のアルコキシカルボニル基を意味する。Ｚで示される炭素数１〜３のアルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基が挙げられる。中でもメトキシカルボニル基が好ましい。
【００３６】
「立体化学が（Ｓ）、（Ｒ）又は（ＳＲ）の何れでも良い」とは、（Ｓ）体、（Ｒ）体又は（Ｓ）体と（Ｒ）体の等量混合物であるラセミ体の何れでも良いことを意味する。
【００３７】
Ｘは、好ましくは、共有結合、エチレン基又はビニレン基である。
Ｙは、好ましくは、式
【００３８】
【化１３】
2010110353.tif 000015
【００３９】
［式中、Ｚは前述の通り。］で表される２価の基であり、より好ましくは、式
【００４０】
【化１４】
2010110353.tif 000016
【００４１】
［式中、Ｚは前述の通り。］で表される２価の基であり、さらに好ましくは、エチレン基である。
【００４２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基であり、あるいはＲ１とＲ２又はＲ２とＲ３は、一緒になってメチレンジオキシ基を形成しても良い。
【００４３】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５のうち少なくとも１個（好ましくは１〜３個、より好ましくは１又は２個）が水酸基であることが好ましく、Ｒ３が水酸基であることがより好ましい。また一方で、Ｘが共有結合である場合においては、Ｒ１およびＲ５が水酸基であることが好ましい。
【００４４】
Ｒ６及びＲ７は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基である。より好ましくは、Ｒ６が水素原子、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基であり、Ｒ７が水素原子である。さらに好ましくは、Ｒ６が水酸基であり、Ｒ７が水素原子である。
【００４５】
Ｒ８及びＲ９は、好ましくは、それぞれ独立して、水素原子、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基である。より好ましくは、Ｒ８及びＲ９が、それぞれ独立して、水酸基又は炭素数１〜３のアルコキシ基である。
【００４６】
一般式（Ｉ’）で表される化合物の好適な例としては、後記の実施例１〜３６の化合物が挙げられる。また、一般式（Ｉ）で表される化合物の好適な例としては、後記の実施例１、４、５、６〜１０、１４〜２３、２５〜３６の化合物が挙げられる。
【００４７】
一般式（Ｉ）、（Ｉ’）、（ＩＶ）、（Ｖ）又は（ＶＩ）で表される化合物の塩としては、無機酸との塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩など）；有機酸との塩（例えば、ギ酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩など）；酸性又は塩基性アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、リジン、オルニチンなど）との塩；無機塩基との塩［例えば、金属（カリウム、ナトリウムなどのアルカリ金属；カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属；アルミニウム）との塩、アンモニウム塩など］；有機塩基（例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなど）との塩が挙げられる。上記の塩としては、薬理学的に許容可能な塩を用いることが好ましい。
【００４８】
下記一般式（Ｉ）で表される本発明の化合物は、アミン成分とカルボン酸成分またはその酸塩化物を反応させることによって得られる。以下に、一般式（Ｉ）で表される化合物（以下、化合物（Ｉ）ともいう。）の製造方法について説明する。
【００４９】
【化１５】
2010110353.tif 000017
【００５０】
［式中、Ｒ１〜Ｒ５、Ａｒ、Ｘ及びＹは前述の通り。］
【００５１】
［化合物（Ｉ）の製造方法］
一般式（Ｉ）で表される化合物は（ｉ）アミン成分（ＶＩＩ）とカルボン酸成分（ＶＩＩＩ）とを脱水縮合剤を用いる縮合反応に付すか、あるいは（ｉｉ）カルボン酸成分（ＶＩＩＩ）を一旦酸塩化物（ＩＸ）に変換した後に、これとアミン成分（ＶＩＩ）とを塩基の存在下に縮合反応に付すことによって製造することができる。その際、必要に応じて、水酸基などを保護基で保護したり、その保護基を縮合反応の後に脱保護することによって、化合物（Ｉ）を製造することができる。
【００５２】
【化１６】
2010110353.tif 000018
【００５３】
［式中、Ａｒ及びＹは前述の通り。］
【００５４】
【化１７】
2010110353.tif 000019
【００５５】
［式中、Ｒ１〜Ｒ５及びＸは前述の通り。］
【００５６】
【化１８】
2010110353.tif 000020
【００５７】
［式中、Ｒ１〜Ｒ５及びＸは前述の通り。］
【００５８】
以下に、（ｉ）の製造方法について詳細に説明するが、製造方法はこれに限定されるものではない。
アミン成分（ＶＩＩ）は塩酸塩、p-トルエンスルホン酸塩などの塩でもよく、カルボン酸成分（ＶＩＩＩ）はジシクロヘキシルアミン塩などの塩でもよい。アミン成分（ＶＩＩ）が塩の場合、縮合反応の際にトリエチルアミンなどの塩基を添加して反応を行えばよい。使用するアミン成分（ＶＩＩ）とカルボン酸成分（ＶＩＩＩ）との比率に制限はないが、収率良く反応させるためには、アミン成分（ＶＩＩ）１当量に対してカルボン酸成分（ＶＩＩＩ）を０．８〜１．２当量用いればよい。
【００５９】
使用する溶媒は、アミン成分（ＶＩＩ）やカルボン酸成分（ＶＩＩＩ）と反応するものでなければ特に限定はなく、例えばジクロロメタン(DCM)、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、クロロホルム、ジメチルスルホキシド(DMSO)、N-メチルピロリドン(NMP)、あるいはこれらの混合溶媒を用いることができる。中でもジクロロメタンとN,N-ジメチルホルムアミドが好ましい。溶媒量はアミン成分（ＶＩＩ）に対して１０〜５００倍重量、好ましくは１５〜１００倍重量である。
【００６０】
脱水縮合剤としては、ペプチド合成などで使用される一般的な縮合剤を用いればよく、例えば、N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド 塩酸塩(EDCI・HCl)、2-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート(HBTU)などが用いられる。その際、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)などの縮合促進剤が用いられる。脱水縮合剤の使用量はアミン成分（ＶＩＩ）に対して１．０〜２．０当量、好ましくは１．０５〜１．２０当量である。縮合促進剤の使用量はアミン成分（ＶＩＩ）に対して０．５〜３．０当量、好ましくは１．０〜１．５当量である。
【００６１】
反応時間はおおよそ３〜２４時間が好ましく、これは反応温度に依存し、その範囲は５〜３５℃が好ましい。
【００６２】
得られる化合物（Ｉ）は、常法により単離精製することができる。例えば、結晶化によって精製する場合は、溶媒として、酢酸エチル、エタノール、メタノール、ジエチルエーテル、クロロホルム、ジクロロメタン、n-ヘキサンあるいはこれらの混合溶媒を用いることができる。クロマトグラフによる精製法として、分取薄層クロマトグラフィー（PTLC）或いはシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いることができる。その際の展開溶媒としては、先に結晶化の溶媒として挙げた溶媒を用いることができる。
【００６３】
（ｉｉ）の製造方法で使用する酸塩化物（ＩＸ）は、カルボン酸成分（ＶＩＩＩ）を常法により、塩化オキサリル又は塩化チオニルと反応させることにより得ることができる。酸塩化物（ＩＸ）をアミン成分（ＶＩＩ）と反応させるには、トリエチルアミンや水酸化ナトリウムなどの塩基の存在下に反応させればよい。アミン成分（ＶＩＩ）と酸塩化物（ＩＸ）との比率に制限はないが、収率良く反応させるためには、アミン成分（ＶＩＩ）１当量に対して酸塩化物（ＩＸ）を０．８〜１．２当量用いればよい。塩基の使用量はアミン成分（ＶＩＩ）に対して０．８〜３．０当量、好ましくは１．０〜１．５当量である。使用する溶媒としては、前記（ｉ）の製造方法で使用する溶媒として挙げた溶媒を用いることができる。反応時間及び反応温度は（ｉ）の製造方法と同様である。
【００６４】
このようにして得られた本発明の化合物又はその塩は、美白剤として提供される。本発明の美白剤は、本発明の化合物又はその塩を含有するものであり、単独で、あるいは他の美白成分と組み合わせて美白化粧料に配合することができる。本発明の美白剤と組合せ可能な他の美白成分としては、特に限定されるものではなく、美白作用と関係があるといわれるチロシナーゼ活性阻害作用、抗炎症作用、抗酸化作用（スーパーオキシドディスムターゼ様作用を含む）、代謝促進作用の少なくともいずれかを有するものが挙げられる。
【００６５】
本発明の美白剤を美白化粧料に配合する場合、化粧料原料として通常用いられる成分、例えば、香料、防腐剤、キレート化合物、ポリオール、植物抽出物（生薬抽出物）などと組み合わせて用いることができる。
【実施例】
【００６６】
以下、実施例等を挙げて、本発明の有用性を具体的に説明する。しかしながら、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。なお、以下の製造例において、合成された化合物の構造は核磁気共鳴スペクトル（Bruker AVANCE 400）によって同定した。【００６７】
実施例１
セロトニン 塩酸塩(300 mg、1.41 mmol)とtrans-ケイ皮酸(208 mg、1.41 mmol)をジクロロメタン(6 ml)とN,N-ジメチルホルムアミド(6 ml)の混合溶媒に溶解し、溶液を0℃に保った。この溶液にトリエチルアミン(216 μl、1.55 mmol)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール 水和物(HOBt・H2O、237 mg、1.55 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド 塩酸塩(EDCI・HCl、297 mg、1.55 mmol)を加え、徐々に昇温して室温で16時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣に水(10 ml)を加え、酢酸エチル(10 ml)で2回抽出した。酢酸エチル層を5% クエン酸水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回、5% 炭酸水素ナトリウム水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムをろ過して除き、濾液を減圧濃縮し、分取薄層クロマトグラフィー(PTLC、展開溶媒は酢酸エチル)で精製して、N-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)エチル]-3-フェニル-2-プロペンアミド(217 mg、収率50.0%)を粘性の油状物として得た。【００６８】
実施例４
セロトニン 塩酸塩(300 mg、1.41 mmol)とtrans-2,4-ジヒドロキシケイ皮酸(253 mg、1.41 mmol)をジクロロメタン(6 ml)とN,N-ジメチルホルムアミド(6 ml)の混合溶媒に溶解し、溶液を0℃に保った。この溶液にトリエチルアミン(216 μl、1.55 mmol)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール 水和物(HOBt・H2O、237 mg、1.55 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド 塩酸塩(EDCI・HCl、297 mg、1.55 mmol)を加え、徐々に昇温して室温で16時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣に水(10 ml)を加え、酢酸エチル(10 ml)で2回抽出した。酢酸エチル層を5% クエン酸水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回、5% 炭酸水素ナトリウム水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムをろ過して除き、濾液を減圧濃縮し、分取薄層クロマトグラフィー(PTLC、展開溶媒は酢酸エチル - n-ヘキサン = 2:1、0.01% ギ酸)で精製して、N-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)エチル]-3-(2,4-ジヒドロキシフェニル)-2-プロペンアミド(243 mg、収率51.0%)を粘性の油状物として得た。【００６９】
実施例１７
3-メチル-4-ヒドロキシベンズアルデヒド(794 mg、5.83 mmol)、マロン酸(911 mg、8.75 mmol)及びピペリジン(144 μl)をピリジン(5 ml)に加え、アルゴン雰囲気下に60℃で22時間攪拌した。反応液を室温にして水(20 ml)を加えた後に6N 塩酸を加えて固体を析出させた。析出した固体を濾過して集め、水で洗浄し、減圧乾燥した。得られた固体をジエチルエーテル - n-ヘキサンから再結晶して、3-メチル-4-ヒドロキシケイ皮酸(872 mg、収率84.0%)を結晶として得た。
1H NMR (DMSO, 400MHz) δ 9.95 (OH), 7.45 (d, J=15.9Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.32 (d, J=8.3Hz, 1H), 6.79 (d, J=8.3Hz, 1H), 6.26 (d, J=15.9Hz, 1H), 2.13 (s, 3H). 【００７０】
セロトニン 塩酸塩(300 mg、1.41 mmol)と上記で得た3-メチル-4-ヒドロキシケイ皮酸(251 mg、1.41 mmol)をジクロロメタン(10 ml)とN,N-ジメチルホルムアミド(5 ml)の混合溶媒に溶解し、溶液を0℃に保った。この溶液にトリエチルアミン(216 μl、1.55 mmol)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール 水和物(HOBt・H2O、237 mg、1.55 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド 塩酸塩(EDCI・HCl、297 mg、1.55 mmol)を加え、徐々に昇温して室温で16時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣に水(10 ml)を加え、酢酸エチル(10 ml)で2回抽出した。酢酸エチル層を5% クエン酸水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回、5% 炭酸水素ナトリウム水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムをろ過して除き、濾液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル - エタノール - クロロホルムから再結晶して、N-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)エチル]-3-(3-メチル-4-ヒドロキシフェニル)-2-プロペンアミド(307 mg、収率65.0%)を結晶として得た。【００７１】
実施例１８
メタノール(5 ml)を0℃に保ち、アルゴン雰囲気下にチオニルクロリド(2.4 ml)を滴下した。この溶液に5-ヒドロキシ-L-トリプトファン(2.0 g)を加え、0℃から徐々に昇温し、室温で一夜攪拌した。反応液を減圧下に濃縮し、残渣をエタノールとエーテルの混合溶媒から結晶化して5-ヒドロキシ-L-トリプトファン メチルエステル 塩酸塩(1.8 g、収率74%)を結晶として得た。
上記、5-ヒドロキシ-L-トリプトファン メチルエステル 塩酸塩(350 mg、1.29 mmol)とフェルラ酸(251 mg、1.29 mmol)をジクロロメタン(6 ml)とN,N-ジメチルホルムアミド(6 ml)の混合溶媒に溶解し、溶液の温度を0℃に保った。この溶液にトリエチルアミン(198 μl、1.4 mmol)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール 水和物(HOBt・H2O、217 mg、1.4 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDCI・HCl、217 mg、1.4 mmol)を加え、液温を0℃から徐々に昇温して室温で16時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣に水(20 ml)を加え、酢酸エチル(20 ml)で2回抽出した。酢酸エチル層を5% クエン酸水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回、5% 炭酸水素ナトリウム水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムをろ過して除き、濾液を減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(展開溶媒はクロロホルム：メタノール＝3:1)で精製して、3-(3-メトキシ-4-ヒドロキシフェニル)-N-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)-1-メトキシカルボニルエチル]-2-プロペンアミド(413 mg、収率78.0%)を粉末物質として得た。【００７２】
実施例２０
実施例１８と同様にして5-ヒドロキシ-L-トリプトファン メチルエステル 塩酸塩(704 mg, 2.6 mmol)から合成した3-(3-メトキシ-4-ヒドロキシフェニル)-N-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)-1-メトキシカルボニルエチル]-2-プロペンアミドを精製することなく水(11.8 ml)、2.5N NaOH水溶液(11.8 ml)およびN,N-ジメチルホルムアミド(23.6 ml)の混合溶媒に溶解し、室温で一夜攪拌した。反応溶媒を減圧濃縮し、0℃に冷却して、6N HCl水溶液でpHを1〜2に調整した。溶液を酢酸エチル(30 ml)で3回抽出し、有機層を3N HCl(20 ml)で洗浄した後に無水硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムをろ過して除き、濾液を減圧濃縮し、分取薄層クロマトグラフィー(PTLC、展開溶媒はクロロホルム：メタノール＝3:1)で精製して、3-(3-メトキシ-4-ヒドロキシフェニル)-N-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)-1-ヒドロキシカルボニルエチル]-2-プロペンアミド(147 mg、収率15.4%)を粉末物質として得た。【００７３】
実施例３５
セロトニン 塩酸塩(430 mg、2 mmol)と2,6-ジヒドロキシ安息香酸(312 mg、2 mmol)をN,N-ジメチルホルムアミド(25 ml)に溶解し、溶液の温度を0℃に保った。この溶液にトリエチルアミン(310 μl、2.1 mmol)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール 水和物(HOBt・H2O、346 mg、2.1 mmol)及び1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド(EDCI・HCl、429 mg、2.1 mmol)を加え、液温を0℃から徐々に昇温して室温で16時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣に水(20 ml)を加え、酢酸エチル(20 ml)で2回抽出した。酢酸エチル層を5% クエン酸水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回、5% 炭酸水素ナトリウム水溶液(5 ml)で2回、飽和食塩水(5 ml)で1回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。硫酸マグネシウムをろ過して除き、濾液を減圧濃縮し、分取薄層クロマトグラフィー(PTLC、展開溶媒は酢酸エチル：ヘキサン＝3:1)で精製して、2,6-ジヒドロキシ-N-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)エチル]-ベンズアミド(93 mg、収率14.9%)を粉末物質として得た。【００７４】
以下の表１に示すその他の実施例の化合物も実施例１、４、１７、１８、２０及び３５と同様にして合成した。また、カルボキシル基を有する化合物は、対応するメトキシカルボニル基のエステル結合をアルカリ加水分解することによって得た。なお、以下の表１に示す参考例１及び２の化合物も実施例１、４、１７、１８、２０及び３５と同様にして合成した。【００７５】
【表１−１】
2010110353.tif 000021
【表１−２】
2010110353.tif 000022
【表１−３】
2010110353.tif 000023
【表１−４】
2010110353.tif 000024
【表１−５】
2010110353.tif 000025
【表１−６】
2010110353.tif 000026
【表１−７】
2010110353.tif 000027
【表１−８】
2010110353.tif 000028
【表１−９】
2010110353.tif 000029
【表１−１０】
2010110353.tif 000030
【表１−１１】
2010110353.tif 000031
【表１−１２】
2010110353.tif 000032
【表１−１３】
2010110353.tif 000033
【表１−１４】
2010110353.tif 000034
【００７６】
試験例１
黒色メラニン産生抑制試験
Ｂ１６メラノーマ（大日本住友製薬株式会社から購入）をＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ）（高グルコース、血清１０％含有）にて培養した。コンフルエントになった細胞を、トリプシンにて剥がし、９６ウェルプレートに播種した。翌日、細胞がプレートに接着後、各評価サンプル（コントロール（サンプル添加なし）、各製造例のサンプル）を所定評価濃度（１００μＭからサンプルに応じて希釈）で添加したＤＭＥＭと培地交換し、３日間培養した。プレートシェーカーにて９６ウェルプレートを５分間震蕩し、４５０ｎｍにおける吸光度をマイクロプレートリーダー（Ｂｅｎｃｈｍａｒｋマイクロプレートリーダー、ＢＩＯＲＡＤ社製）にて測定し、各ウェルの培地中のメラニンの量を比較した。コントロール（サンプル添加なし）の測定値（吸光度）を１００％と規定した場合の、各サンプルを所定濃度添加３日後の吸光度を相対％で示した。比較例として、コウジ酸（ＫｏＡ）、４−ヘキシルレソルシノール、ＣＳ(N-(p-クマロイル)セロトニン又はN-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)エチル]-3-(4-ヒドロキシフェニル）-2-プロペンアミド)及びＦＳ（N-フェルロイルクマロイルセロトニン又はN-[2-(5-ヒドロキシ-1H-インドール-3-イル)エチル]-3-(4-ヒドロキシ-3-メトキシフェニル-2-プロペンアミド)を用いて同様の試験を行った。結果を図１〜５に示す。コントロール中の黒色メラニン量を１００％とした場合の、各サンプルにおける黒色メラニン産生を５０％抑制するために必要な濃度を、５０％メラニン産生抑制濃度ＩＣ５０（μＭ）として算出した。結果を表２に示す。この結果、本発明の化合物は、いずれの化合物も黒色メラニン量を抑制する傾向を示した。したがって、本発明の化合物は美白剤として有用であることが示された。
なお、コウジ酸（ＫｏＡ）はシグマ アルドリッチ ジャパン株式会社から、4-n-Hexylresorcinolは、東京化成工業株式会社から購入したものを用い、ＣＳ及びＦＳは、味の素（株）にて合成したものを用いた。【００７７】
【表２】
2010110353.tif 000035
【００７８】
試験例２
細胞毒性試験（ニュートラルレッド法）
試験例１の黒色メラニン産生抑制試験にて吸光度を測定した後、プレートから評価サンプル溶液を取り除き、各ウェルを２００μｌのＤＭＥＭ（高グルコース、血清１０％含有）を用いてリンスした。ＮＲ（ニュートラルレッド）入り培地を２００μｌ／ｗｅｌｌで滴下し、２時間、３７℃、５％ＣＯ２、飽和蒸気下で静置した。培地を捨て、洗浄固定液（２ｗｔ％塩化カルシウム溶液及び２ｗｔ％ホルマリン溶液を等量で混合）を２００μｌ／ｗｅｌｌ添加し、１分間静置後、洗浄固定液を取り除いた。ＮＲ抽出液（酢酸酸性エタノール）２００μｌ／ｗｅｌｌを添加し、プレートシェイカーにて１５分間震蕩した。生細胞へのＮＲの取り込みは、マイクロプレートリーダー（Ｂｅｎｃｈｍａｒｋマイクロプレートリーダー、ＢＩＯＲＡＤ社製）でＮＲ抽出液の５４０ｎｍの吸光度を測定することにより調べた。コントロール（サンプルなし）のＮＲ抽出液の測定値（吸光度）を１００％と規定した場合の、所定濃度の各サンプル添加細胞のＮＲ抽出液の吸光度を相対％にすることにより、各サンプルの細胞毒性を算出した。
その結果、実施例３２及び実施例３３の化合物については細胞毒性が見られたが、その他の実施例化合物は細胞毒性を示さなかった。したがって、本発明の化合物は、美白化粧料の原料として有望であることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００７９】
本発明によれば、メラニン生成抑制活性を有する化合物が提供され、美白化粧料の原料として有用である。【００８０】
本出願は、日本で出願された特願２００９−０７５００６を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含される。また、本明細書で引用した特許文献および非特許文献は、引用したことによってその内容の全てが開示されたと同程度に本明細書中に組み込まれるものである。
【図１】
2010110353.tif 000049
【図２】
2010110353.tif 000050
【図３】
2010110353.tif 000051
【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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