(57)【要約】オートサンプラは、サンプリングニードルの先端から分析用液を吸引する前に、サンプリングニードルの先端側から洗浄液を吸引してサンプリング流路内に洗浄液を保持させておき、分析用液の分注が終わった後でサンプリングニードルの先端から洗浄液を吐出することにより、サンプリングニードル内やサンプリング流路内の洗浄を行なう。
2019043907.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプリングニードルと、
前記サンプリングニードルを移動させるニードル移動機構と、
先端が前記サンプリングニードルに接続されたサンプリング流路と、
液の吸引と吐出を行なう計量ポンプと、
洗浄液を収容する洗浄液収容部と、
分析カラムを有する分析流路が接続される分析ポート、前記分析流路へ移動相を供給するための移動相供給流路が接続される移動相供給ポート、前記サンプリング流路の基端が接続されたサンプリングポート、前記計量ポンプに通じるポンプ流路が接続されたポンプポート、及び前記サンプリングニードルを先端から挿入させて前記サンプリング流路を接続するための注入ポートを有し、前記分析ポートと前記移動相供給ポートとの間、及び前記サンプリングポートと前記ポンプポートとの間を連通させるロード状態と、前記移動相供給ポートと前記サンプリングポートとの間、及び前記注入ポートと前記分析ポートとの間を連通させるインジェクト状態とに切り替えることができるように構成された流路切替部と、
前記ニードル移動機構、前記計量ポンプ、及び前記流路切替部の動作を制御するように構成された制御部と、を備え、
前記制御部は、
前記サンプリングニードルの先端から分析に用いられる分析用液を吸引する分析用液吸引行程を実行する前に、前記流路切替部を前記ロード状態にして、前記計量ポンプによって前記サンプリングニードルの先端側から前記サンプリング流路内に前記洗浄液収容部内の洗浄液を吸引する洗浄液吸引行程を実行するように構成された洗浄液吸引行程実行部と、
前記分析用液吸引行程で吸引した分析用液を前記サンプリングニードルの先端から吐出する分析用液吐出行程を実行した後で、前記洗浄液吸引行程で吸引した洗浄液を前記サンプリングニードルの先端から吐出する洗浄液吐出行程を実行するように構成された洗浄液吐出行程実行部と、を備えている、オートサンプラ。
【請求項２】
前記流路切替部は、前記洗浄液収容部に通じる流路が接続された洗浄液ポートを備え、前記ロード状態のときに前記注入ポートと前記洗浄液ポートとの間を連通させることができるように構成され、
洗浄液吸引行程実行部は、前記洗浄液吸引行程において、前記流路切替部を前記ロード状態にするとともに前記サンプリングニードルの先端を前記注入ポートに挿入し、前記計量ポンプと前記洗浄液収容部との間を前記サンプリング流路を介して連通させて、前記計量ポンプによって前記サンプリングニードルの先端側から前記サンプリング流路内に前記洗浄液収容部内の洗浄液を吸引するように構成されている、請求項１に記載のオートサンプラ。
【請求項３】
前記流路切替部は、互いの１つのポート間が流路を介して接続された第１切替バルブと第２切替バルブからなり、
前記第１切替バルブは、前記分析ポート、前記移動相供給ポート、前記サンプリングポート、前記ポンプポート、前記注入ポート、及び前記第２切替バルブに通じるポートを有し、
前記第２切替バルブは、前記洗浄液ポート、及び前記第１切替バルブに通じるポートを有し、前記ロード状態のときに前記洗浄液ポートと前記第１切替バルブに通じるポートとの間を連通させることができるように構成されている、請求項２に記載のオートサンプラ。
【請求項４】
前記洗浄液吸引行程実行部は、前記洗浄液吸引行程において当該洗浄液吸引行程の直後に実行される前記分析用液吸引行程での分析用液の吸引量の少なくとも３倍の洗浄液を吸引するように構成されている、請求項１から３のいずれか一項に記載のオートサンプラ。
【請求項５】
前記制御部は、前記洗浄液吸引行程の後、前記分析用液吸引行程を実行する前に所定量のエアーを前記サンプリングニードルの先端から吸引するエアー吸引行程を実行するように構成されたエアー吸引行程実行部をさらに備えている、請求項１から４のいずれか一項に記載のオートサンプラ。
【請求項６】
移動相の流れる分析流路と、
前記分析流路中に試料を注入するための請求項１から５のいずれか一項に記載のオートサンプラと、
前記分析流路上における前記オートサンプラよりも下流に設けられ、前記オートサンプラにより前記分析流路中に注入された試料を分離する分析カラムと、
前記分析流路上における前記分析カラムよりも下流に設けられ、前記分析カラムにおいて分離された試料成分を検出するための検出器と、を備えた液体クロマトグラフ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体クロマトグラフの分析流路中に分析対象の試料を自動的に注入するオートサンプラと、そのオートサンプラを備えた液体クロマトグラフに関するものである。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフ用オートサンプラは、先端が水平方向や鉛直方向へ移動可能なサンプリングニードルに接続されたサンプリング流路、液の吸引と吐出を行なう計量ポンプ、流路構成の切替えを行なうためのロータリー式の切替バルブなどを備えている。このようなオートサンプラでは、切替バルブによって計量ポンプとサンプリングニードルとの間を連通させた状態にして、サンプリングニードルの先端から試料を吸引し、サンプリング流路内にその試料を滞留させた後、切替バルブを切り替えて、移動相を送液する送液ポンプと分析カラムとの間にサンプリング流路を介挿し、送液ポンプからの移動相によってサンプリング流路内の試料を分析カラムへ導入するようになっている。【０００３】
このようなオートサンプラの中には、分析対象の試料に試薬や希釈液などの各液を混ぜ合わせる前処理行程を実行することができるものが存在する。前処理行程では、サンプリングニードルによって対象の液が収容されたバイアルから所定量だけ吸引し、予め指定されたバイアルへ吸引した液を吐出する分注という動作を、試薬、希釈、試料などの各液について繰り返し行なうことが一般的である。【０００４】
上記の前処理行程では、各液を混ぜ合わせるためのバイアルへ液を吐出した後のサンプリングニードル内やサンプリング流路内に液が残存していると、コンタミネーションが発生する虞がある。そのため、液を吐出した後のサンプリングニードル内やサンプリング流路内を洗浄することが望ましい。【０００５】
また、上記の前処理工程の事前に切替バルブを切り替えて、移動相がサンプリング流路内に流れないようにして前処理工程を行えるようにする必要がある。【０００６】
特許文献１には、移動相がサンプリング流路内に流れないように切替バルブを切り替えた状態であっても、サンプリングニードルやサンプリング流路を介さずに、計量ポンプ（シリンジポンプ）を洗浄液ボトルに接続することができる流路構成をもつオートサンプラが開示されている。このような流路構成では、サンプリングニードルやサンプリング流路を介さずに洗浄液を吸引することができるので、計量ポンプによって吸引した洗浄液をサンプリング流路の基端側からサンプリングニードルの先端側へ流すことができ、コンタミネーションの原因となる液が系内に残存することを防止することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１６−２１７８６７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ところで、オートサンプラに用いられるロータリー式の切替バルブの製造コストは、ポートの配置やポート数、ロータに設けられる溝の形状が単純なものほど低くなり、逆にポートの配置や溝形状が複雑なものや溝形状の種類が多いものほど高くなる。【０００９】
特許文献１に開示されたオートサンプラの低圧バルブは、同一円周上に設けられた複数のポートとそれらのポートの中心に設けられた１つの中心ポートを有している。さらにこの低圧バルブのロータには、円周上のポートのうちのいずれか２つのポート間を接続するための円弧状の溝のほかに、中心ポートを円周上のポートのいずれかに接続するための直線上の溝が設けられている。このような切替バルブは、同一円周上にのみポートを有する一般的な多ポートバルブに比べて構造が複雑になり、製造コストが高くなる。【００１０】
特許文献１のように、移動相がサンプリング流路内に流れないように切替バルブを切り替えた状態であっても、サンプリングニードルやサンプリング流路を介さずに、計量ポンプを洗浄液ボトルに接続することができるようにするには、上記のような複雑な構造の切替バルブを用いるほかなく、オートサンプラのコストの増大に繋がっていた。【００１１】
そこで、本発明は、複雑な構造の切替バルブを用いることなく、コンタミネーションを抑制することができるようにすることを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の対象となるオートサンプラは、サンプリングニードル、ニードル移動機構、サンプリング流路、計量ポンプ、洗浄液収容部、流路切替部、及び制御部を備えたものである。ニードル移動機構は、前記サンプリングニードルを移動させる。サンプリング流路は、先端が前記サンプリングニードルに接続されている。計量ポンプは、液の吸入と吐出を行なうものである。洗浄液収容部には洗浄液が収容されている。流路切替部は、分析カラムを有する分析流路が接続される分析ポート、前記分析流路へ移動相を供給するための移動相供給流路が接続される移動相供給ポート、前記サンプリング流路の基端が接続されたサンプリングポート、前記計量ポンプに通じるポンプ流路が接続されたポンプポート、及び前記サンプリングニードルを先端から挿入させて前記サンプリング流路を接続するための注入ポートを有する。流路切替部は、前記分析ポートと前記移動相供給ポートとの間、及び前記サンプリングポートと前記ポンプポートとの間を連通させるロード状態と、前記移動相供給ポートと前記サンプリングポートとの間、及び前記注入ポートと前記分析ポートとの間を連通させるインジェクト状態とに切り替えることができるように構成されたものである。制御部は、前記ニードル移動機構、前記計量ポンプ、及び前記流路切替部の動作を制御するように構成されたものである。【００１３】
本発明のオートサンプラの前記制御部は洗浄液吸引行程実行部と洗浄液吐出行程実行部を備えている。前記洗浄液吸引行程実行部は、前記サンプリングニードルの先端から分析に用いられる分析用液を吸引する分析用液吸引行程を実行する前に、前記流路切替部を前記ロード状態にして、前記計量ポンプによって前記サンプリングニードルの先端側から前記サンプリング流路内に前記洗浄液収容部内の洗浄液を吸引する洗浄液吸引行程を実行するように構成されている。前記洗浄液吐出行程実行部は、前記分析用液吸引行程で吸引した分析用液を前記サンプリングニードルの先端から吐出する分析用液吐出行程を実行した後で、前記洗浄液吸引行程で吸引した洗浄液を前記サンプリングニードルの先端から吐出する洗浄液吐出行程を実行するように構成されている。【００１４】
すなわち、本発明のオートサンプラでは、サンプリングニードルの先端から分析用液を吸引する前に、サンプリングニードルの先端側から洗浄液を吸引してサンプリング流路内に洗浄液を保持させておき、分析用液の前記分注が終わった後でサンプリングニードルの先端から洗浄液を吐出することにより、サンプリングニードル内やサンプリング流路内の洗浄を行なう。これにより、前期流路切替部が前記ロード状態のときにサンプリングニードルやサンプリング流路を介さずに計量ポンプを洗浄液収容部に接続することを可能にする流路構成にしなくても、サンプリングニードル内やサンプリング流路内を洗浄してコンタミネーションを抑制することが可能となる。したがって、本発明のオートサンプラでは、前記流路切替部として、複雑な構造をもつ切替バルブを用いる必要がなく、コストの増大を抑制することができる。【００１５】
前記流路切替部は、前記洗浄液収容部に通じる流路が接続された洗浄液ポートを備え、前記ロード状態のときに前記注入ポートと前記洗浄液ポートとの間を連通させることができるように構成されていることが好ましい。この場合、洗浄液吸引行程実行部は、前記洗浄液吸引行程において、前記流路切替部を前記ロード状態にするとともに前記サンプリングニードルの先端を前記注入ポートに挿入し、前記計量ポンプと前記洗浄液収容部との間を前記サンプリング流路を介して連通させて、前記計量ポンプによって前記サンプリングニードルの先端側から前記サンプリング流路内に前記洗浄液収容部内の洗浄液を吸引するように構成されている。【００１６】
前記流路切替部は、具体的には、互いの１つのポート間が流路を介して接続された第１切替バルブと第２切替バルブからなるものであってもよい。その場合、前記第１切替バルブは、前記分析ポート、前記移動相供給ポート、前記サンプリングポート、前記ポンプポート、前記注入ポート、及び前記第２切替バルブに通じるポートを有し、前記第２切替バルブは、前記洗浄液ポート、及び前記第１切替バルブに通じるポートを有する。そして、前記第２切替バルブは、前記ロード状態のときに前記洗浄液ポートと前記第１切替バルブに通じるポートとの間を連通させることができるように構成されている。【００１７】
前記洗浄液吸引行程実行部は、前記洗浄液吸引行程において当該洗浄液吸引行程の直後に実行される前記分析用液吸引行程での分析用液の吸引量の少なくとも３倍の洗浄液を吸引するように構成されていることが好ましい。そうすれば、サンプリングニードル内やサンプリング流路内の高い洗浄効果が得られ、コンタミネーションを高効率に抑制することができる。【００１８】
前記制御部は、前記洗浄液吸引行程の後、前記分析用液吸引行程を実行する前に所定量のエアーを前記サンプリングニードルの先端から吸引するエアー吸引行程を実行するように構成されたエアー吸引行程実行部をさらに備えていることが好ましい。分析用液吸引行程を実行する前に所定量のエアーをサンプリングニードルの先端から吸引しておくことで、サンプリング流路内において先に吸引された洗浄液と後に吸引された分析用液との間に空気層が形成されるので、分析用液が洗浄液によって希釈されることが防止されるとともに、洗浄液が分析用液でコンタミネーションされるのが防止される。【００１９】
本発明に係る液体クロマトグラフは、移動相の流れる分析流路と、前記分析流路中に試料を注入するための上述のいずれかの実施態様をもつオートサンプラと、前記分析流路上における前記オートサンプラよりも下流に設けられ、前記オートサンプラにより前記分析流路中に注入された試料を分離する分析カラムと、前記分析流路上における前記分析カラムよりも下流に設けられ、前記分析カラムにおいて分離された試料成分を検出するための検出器と、を備えている。
【発明の効果】
【００２０】
本発明に係るオートサンプラでは、サンプリングニードルの先端から分析用液を吸引する前にサンプリング流路内に保持させておいた洗浄液を、分析用液の前記分注が終わった後でサンプリングニードルの先端から洗浄液を吐出してサンプリングニードル内やサンプリング流路内の洗浄を行なうので、複雑な構造をもつ切替バルブを用いなくても系内にコンタミネーションの原因となる液を残存させずにサンプリングニードル内やサンプリング流路内を洗浄することが可能となり、コンタミネーションが抑制される。複雑な構造の切替バルブを使用しなければ、安価に装置を構築することも可能となる。【００２１】
本発明に係る液体クロマトグラフは、上記のオートサンプラを用いるので、安価にコンタミネーションが抑制できる。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】液体クロマトグラフの一実施例を示す概略構成図である。
【図２】同実施例のオートサンプラの待機状態時の流路構成を示す図である。
【図３】同実施例のオートサンプラの洗浄液吸引行程時の流路構成を示す図である。
【図４】同実施例のオートサンプラのエアー引行程時の流路構成を示す図である。
【図５】同実施例のオートサンプラの分析用液吸引行程時の流路構成を示す図である。
【図６】同実施例のオートサンプラの分析用液吐出行程時の流路構成を示す図である。
【図７】同実施例のオートサンプラの洗浄液吐出行程時の流路構成を示す図である。
【図８】同実施例のオートサンプラによる分析用液の分注の一連の動作を説明するためのフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下、本発明に係るオートサンプラ及び液体クロマトグラフの一実施例について、図面を参照しながら説明する。
【００２４】
オートサンプラを含む液体クロマトグラフの一実施例の構成について、図１を用いて説明する。
【００２５】
この実施例の液体クロマトグラフは、分析流路２、分析流路２に移動相を供給するための移動相供給流路１２、及び分析流路２へ試料を自動的に注入するように構成されたオートサンプラ１４を備えている。分析流路２上には、上流側から分析カラム４及び検出器６が設けられている。移動相供給流路１２は、ミキサ１０にて混合された送液ポンプ８ａ，８ｂからの溶媒を移動相として送液するための流路である。
【００２６】
オートサンプラ１４は、サンプリングニードル１６、サンプリング流路１８、ニードル移動機構２２、計量ポンプ２４、流路切替部２６、洗浄液収容部４０、及び制御部５４を備えている。
【００２７】
この実施例では、流路構成を切り替えるための流路切替部２６が２つのロータリー式の切替バルブ２８、３０によって構成されている。
【００２８】
切替バルブ２８は（１）〜（６）の６つのポートを備えている。切替バルブ２８のポート（１）〜（６）は同一円周上において反時計回りに均等に配置されている。切替バルブ２８は、ポート（１）−（２）間、（３）−（４）間、（５）−（６）間を連通させた状態と、ポート（１）−（６）間、（２）−（３）間、（４）−（５）間を連通させた状態のいずれか一方の状態に切り替えることができる。
【００２９】
以下において、切替バルブ２８のポート（５）−（６）間が連通した状態、すなわち分析流路２と移動相供給流路１２とが最短で接続された状態（図１、図３、図４、図５、図６、及び図７の状態）を「ロード状態」と称する。他方、切替バルブ２８のポート（１）−（６）間、（２）−（３）間、（４）−（５）間が連通した状態（図２の状態）を「インジェクト状態」と称する。
【００３０】
サンプリングニードル１６は先端に液を吸引又は吐出するための吸引・吐出口を有する。サンプリングニードル１６は、ニードル移動機構によって、先端が鉛直下方を向いた状態で水平方向と鉛直方向へ移動させられる。
【００３１】
サンプリング流路１８は、先端がサンプリングニードル１６の上端に接続されており、基端が切替バルブ２８のポート（１）に接続されている。すなわち、切替バルブ２８のポート（１）はサンプリングポートをなしている。サンプリング流路１８上にはサンプリングニードル１６の先端から吸引された液を滞留させるためのサンプルループ２０が設けられている。
【００３２】
計量ポンプ２４は液の吸引と吐出を行なうための２つの吸引・吐出口を有する。計量ポンプ２４の一方の吸引・吐出口は切替バルブ２８のポート（２）に接続され、他方の吸引・吐出口は切替バルブ３０のポート（１）に接続されている。すなわち、切替バルブ２８のポート（２）はポンプポートをなしている。
【００３３】
切替バルブ２８のポート（４）は、サンプリングニードル１６の先端を挿入させてサンプリング流路１８を接続するための注入ポートである。切替バルブ２８のポート（５）には分析流路２が接続され、切替バルブ２８のポート（６）には移動相供給流路１２が接続されている。すなわち、切替バルブ２８のポート（５）は分析ポートをなし、切替バルブ２８のポート（６）は移動相供給ポートをなしている。
【００３４】
切替バルブ３０は（１）〜（５）の５つのポートを備えている。切替バルブ３０のポート（１）〜（５）は同一円周上において反時計回りに配置されている。切替バルブ３０は、ポート（４）−（５）間を接続した状態、ポート（１）−（２）間を接続した状態、ロータの溝の中心がポート（１）と（５）に合わせた、どのポートにも接続されていない状態に切り替えることができる。
【００３５】
切替バルブ２８のポート（３）と切替バルブ３０のポート（５）は流路３４を介して互いに接続されている。切替バルブ３０のポート（４）には、洗浄液収容部としての洗浄液ボトル４０へ通じる流路３８が接続されている。すなわち、切替バルブ３０のポート（４）は洗浄液ポートをなしている。洗浄液としては、メタノールやアセトニトリルなどを用いることができる。
【００３６】
オートサンプラ１４はさらに、洗浄液を内部に貯留し、サンプリングニードル１６を上方から挿入することによってサンプリングニードル１６の外周面と内周面を洗浄するためのニードル洗浄部４４と、サンプリングニードル１６の先端から吐出された液を廃液するためのドレインポート５２を備えている。また、オートサンプラ１４内には、試料や試薬、希釈液といった分析用液が収容された分析用液バイアル４６、４８、それらの分析用液を混合するための混合用バイアル５０が設けられている。なお、図では、２つの分析用液バイアル４６、４８と１つの混合用バイアル５０が示されているが、分析用液バイアルと混合用バイアルの数に制限はない。
【００３７】
制御部５４は、ニードル駆動機構２２、計量ポンプ２４、及び流路切替部２６の動作を制御するように構成されたものである。制御部５４は、洗浄液吸引行程実行部５６、洗浄液吐出行程実行部５８、及びエアー吸引行程実行部６０を備えている。制御部５４、洗浄液吸引行程実行部５６、洗浄液吐出行程実行部５８、及びエアー吸引行程実行部６０は、マイクロコンピュータなどの演算素子が所定のプログラムを実行することによって得られる機能であっても良いし、専用のコンピュータまたはパーソナルコンピュータによって実現されるものであっても良い。
【００３８】
オートサンプラ１４による一般的な動作の行程として、サンプリングニードル１６の先端から所望の分析用液を吸引してその分析用液をサンプルループ２０に滞留させる分析用液吸引行程、及びサンプルループ２０に滞留させた分析用液を混合用バイアル５０へ吐出する分析用液吐出行程がある。
【００３９】
洗浄液吸引行程実行部５６は、上記の分析用液吸引行程を実行する前に、サンプリングニードル１６の先端側から洗浄液収容部４０の洗浄液を吸引してサンプルループ２０に滞留させる洗浄液吸引行程を実行するように構成されている。
【００４０】
洗浄液吐出行程実行部５８は、上記の分析用液吐出行程を実行した後で、サンプルループ２０に滞留した洗浄液をサンプリングニードル１６の先端から吐出する洗浄液吐出行程を実行するように構成されている。
【００４１】
エアー吸引行程実行部６０は、上記の洗浄液吸引行程を実行した後、分析用液吸引行程を実行する前に、所定量のエアーをサンプリングニードル１６の先端から吸引するエアー吸引行程を実行するように構成されている。
【００４２】
洗浄液吸引行程実行部５６、洗浄液吐出行程実行部５８、及びエアー吸引行程実行部６０を備える制御部５４によって実現される分析用液の分注の一連の動作を、図２から図７の各状態の流路構成図と図８のフローチャートを用いて説明する。
【００４３】
図２は分注動作が開始される前の待機状態を示している。この待機状態において、サンプリングニードル１６の先端は切替バルブ２８の注入ポート（４）に挿入され、切替バルブ２８がインジェクト状態となっている。これにより、移動相供給流路１２と分析流路２との間がサンプリング流路１８、サンプリングニードル１６、切替バルブ２８のインジェクションポート（４）を介して連通している。
【００４４】
分析用液の分注動作が開始されると、洗浄液吸引行程実行部５６の機能によって、洗浄液吸引行程が実行される（ステップＳ１）。洗浄液吸引行程では、図３に示されているように、切替バルブ２８をロード状態に切り替え、切替バルブ３０をポート（４）−（５）間が連通する状態に切り替える。これにより、計量ポンプ２４と洗浄液ボトル４０との間が、サンプリング流路１８、サンプリングニードル１６を介して接続される。この状態で計量ポンプ２４を吸引方向へ駆動し、所定量の洗浄液をサンプリングニードル１６の先端側から吸引して、サンプルループ２０に洗浄液を滞留させる。サンプルループ２０に滞留させる洗浄液量は、当該洗浄液吸引行程の直後に実行される分析用液吸引行程での分析用液の吸引量に応じて決定されることが好ましい。
【００４５】
洗浄液吸引行程が完了した後、エアー吸引行程実行部６０によってエアー吸引行程が実行される（ステップＳ２）。エアー吸引行程では、図４に示されているように、切替バルブ２８をロード状態のままにし、また切替バルブ３０をどのポートにも接続されていない状態にして、サンプリングニードル１６を切替バルブ２８の注入ポート（４）から引き抜き、計量ポンプ２４をさらに吸引側へ駆動してサンプリングニードル１６の先端から所定量のエアーを吸引する。
【００４６】
制御部５４は、上記のエアー吸引行程が完了した後、分析用液吸引行程を実行する（ステップＳ３）。分析用液吸引行程では、図５に示されているように、切替バルブ２８をロード状態のままにし、また切替バルブ３０をどのポートにも接続されていない状態にしたままにして、サンプリングニードル１６を所望の分析用液バイアル４６（又は４８）の位置へ移動させてサンプリングニードル１６の先端をその分析用液バイアル４６（又は４８）内の分析用液に浸漬させ、計量ポンプ２４をさらに吸引側へ駆動してサンプリングニードル１６の先端から所定量の分析用液を吸引する。この分析用液吸引行程の前にエアー吸引行程が実行されているため、サンプリング流路１８内の洗浄液と分析用液との間に空気層が介在し、分析用液が洗浄液によって希釈されることが防止されるとともに、洗浄液が分析用液でコンタミネーションされることが防止される。
【００４７】
制御部５４は、上記の分析用液吸引行程が完了した後、分析用液吐出行程を実行する（ステップＳ４）。分析用液吐出行程では、図６に示されているように、切替バルブ２８をロード状態のままにし、また切替バルブ３０をどのポートにも接続されていない状態にしたままにして、サンプリングニードル１６を所定の分注先（図では混合用バイアル５０）の位置へ移動させ、計量ポンプ２４を吐出方向へ駆動してサンプリングニードル１６の先端から所定量の分析用液を吐出する。
【００４８】
上記の分析用液吐出行程が完了した後、洗浄液吐出行程実行部５８によって洗浄液吐出行程が実行される（ステップＳ５）。洗浄液吐出行程では、図７に示されているように、切替バルブ２８をロード状態のままにし、また切替バルブ３０をどのポートにも接続されていない状態にしたままにして、サンプリングニードル１６をドレインポート５２の位置へ移動させ、計量ポンプ２４を吐出方向へ駆動してサンプリングニードル１６の先端から洗浄液を吐出する。これにより、サンプリングニードル１６内やサンプリング流路１８内に残留した分析用液が洗浄液とともにドレインポート５２へ排出され、コンタミネーションが抑制される。
【００４９】
本発明者らは、上記の洗浄液吸引行程、及び洗浄液吐出行程を実行することによるコンタミネーションの抑制効果についての検証を実施した。この検証では、カフェインを２００ｐｐｍの濃度で含む水を試料として、純水を希釈液、メタノールと純水を容量比で７０：３０とした混合溶液を洗浄液として用いた。前処理工程としては、試料のカフェイン水を９０μＬと希釈液の純粋を９０μＬ、それぞれ混合バイアルに分注して２倍希釈のサンプル液を１８０μＬ作成するようにし、そのサンプル液は装置内に取り込まずに分析を行い、流路内に残ったコンタミネーション分のみを検出するようにした。また、この時の装置のサンプルループ２０の容量は１００μＬであった。
【００５０】
後述する検証動作の効果を比較するために、従来動作として、サンプリングニードル１６の先端から希釈液を９０μＬ吸引して混合用バイアル５０へ吐出する分注動作を行ない、次にサンプルニードル１６を洗浄ポートの洗浄液に浸漬したあと、サンプリングニードル１６の先端から試料を９０μＬ吸引して混合用バイアル５０へ吐出する分注動作を行なった。次にサンプルを混ぜるために混合バイアル内で吸引吐出を行うミキシング動作と呼ばれる動作を３回行ったのち、切替バルブ２８をインジェクト側に切り替えて分析を行い、分析結果のピーク面積を得ることで、サンプリングニードル１６内及びサンプリング流路２０内に残存する試料に由来するコンタミネーション率を求めた。なお、コンタミネーション率はコンタミネーションピーク面積／既知濃度ピーク面積によって求めることができる。
【００５１】
検証動作では、前半部の動作としてサンプリングニードル１６の先端側から７３μＬの洗浄液を吸引する。次にサンプリングニードル１６の先端から６μＬのエアーを吸引する。次にサンプリングニードル１６の先端から希釈液を２０μＬ吸引して混合用バイアル５０へ吐出する分注動作を行う。次にドレインポート５２で７３μＬの洗浄液と６μＬのエアー分を吐出する。次にサンプルニードル１６を洗浄ポートの洗浄液に浸漬する。ここまでの一連の前半部の動作を５回繰り返す。ただし、５回目の繰り返し動作の希釈液吸引量は１０μＬとし、合計の希釈液分注量を９０μＬになるようにする。後半部の動作としてサンプリングニードル１６の先端側から７３μＬの洗浄液を吸引する。次にサンプリングニードル１６の先端から６μＬのエアーを吸引する。次にサンプリングニードル１６の先端から試料を２０μＬ吸引して混合用バイアル５０へ吐出する分注動作を行う。次にドレインポート５２で７３μＬの洗浄液と６μＬのエアー分を吐出する。次にサンプルニードル１６を洗浄ポートの洗浄液に浸漬する。ここまでの一連の後半部の動作を５回繰り返す。ただし、５回目の繰り返し動作の試料吸引量は１０μＬとし、合計の試料分注量を９０μＬになるようにする。次に混合バイアル内でミキシング動作を３回行ったのち、切替バルブ２８をインジェクト側に切り替えて分析を行い、分析結果のピーク面積を得ることで、サンプリングニードル１６内及びサンプリング流路２０内に残存する試料に由来するコンタミネーション率を求めた。
【００５２】
上記の検証の結果、従来動作のコンタミネーション率が１５．２２％であったのに対し、検証動作のコンタミネーション率が０．３１％であった。このことから、分析用液の分注前に洗浄液を吸引し、分析用液の分注後に洗浄液を吐出することで、コンタミネーション率を大幅に改善できることがわかる。
【００５３】
また、この検証では、分析用液の分注量の約３．５倍の洗浄液の吸引・吐出を行ない、コンタミネーション率が５０分の１程度に改善することがわかった。このことから、洗浄液吸引行程において、その後に実施される分析用液吸引行程での分析用液の吸引量の少なくとも３倍以上の洗浄液を吸引しておくことで、十分なコンタミネーション抑制効果が得られることがわかった。
【００５４】
なお、上記の実施例では記載されていないが、洗浄液吸引行程において、サンプリングニードル１６をニードル洗浄部４４へ移動させ、ニードル洗浄部４４に貯留された洗浄液をサンプリングニードル１６の先端から吸引するようにしてもよい。ただし、この方法はニードル洗浄部４４に貯留された洗浄液が汚れていないことが前提であるため、分析後の洗浄液置換量が多くなるなどの弊害がある。
【符号の説明】
【００５５】
２      分析流路
４      分析カラム
６      検出器
８ａ，８ｂ      送液ポンプ
１０      ミキサ
１２      移動相供給流路
１４      オートサンプラ
１６      サンプリングニードル
１８      サンプリング流路
２０      サンプルループ
２２      ニードル移動機構
２４      計量ポンプ
２６      流路切替部
２８，３０      切替バルブ
３２，３４，３６，３８，４２      流路
４０      洗浄液ボトル（洗浄液収容部）
４４      ニードル洗浄部
４６，４８      分析用液バイアル
５０      混合用バイアル
５２      ドレインポート
５４      制御部
５６      洗浄液吸引行程実行部
５８      洗浄液吐出行程実行部
６０      エアー吸引行程実行部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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