(57)【要約】  本発明の目的は、主として、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸及び／又はその医薬上許容される塩を含有する医薬組成物であって、微生物により生じる皮膚炎症に対して抗炎症作用を有することを特徴とする医薬組成物を提供することにある。  本発明としては、例えば、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸及び／又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、微生物により生じる皮膚炎症に対して抗炎症作用を有することを特徴とする医薬組成物を挙げることができる。【選択図】なし
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸及び／又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、微生物によって生じる皮膚炎症に対して抗炎症作用を有することを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
微生物によって生じる皮膚炎症が、表在性皮膚感染症及び／又は化膿性炎症を伴うざ瘡において生じるものである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
表在性皮膚感染症が、毛包炎、毛瘡、化膿性汗孔周囲炎及び/又は伝染性膿痂疹である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
化膿性炎症を伴うざ瘡が、尋常性ざ瘡、新生児ざ瘡及び／又は集簇性ざ瘡である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項５】
微生物によって生じる皮膚炎症が、グラム陽性菌及び／又はグラム陰性菌によって生じるものである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸（以下、「化合物Ａ」という）及び／又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、微生物により生じる皮膚炎症に対して抗炎症作用を有することを特徴とする医薬組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ヒト皮膚には細菌や真菌等の様々な微生物が存在することが知られている。
細菌のうち、グラム陽性菌としては、例えば、プロピオニバクテリウム・アクネス、スタフィロコッカス・エピデルミデス、スタフィロコッカス・アウレウス又はストレプトコッカス・ピオゲネス等が挙げられ、グラム陰性菌としては、エッシェリヒア・コリ、クレブジエラ・ニューモニエ、プロテウス・ミラビリス、セラチア・マルセッセンス又はシュードモーナス・エルギノーザ等が挙げられる。
これらの細菌は、ざ瘡や皮膚感染症等の原因菌として知られ、主な治療法として、軽度から中等度ではナジフロキサシン、クリンダマイシン等の外用抗菌剤、中等度から重度ではミノサイクリン、ロキシスロマイシン等の経口抗菌剤が繁用されている。
真菌としては、例えば、カンジダ・アルビカンス、トリコフィトン・メンタグロファイテス、トリコフィトン・ルブルム、トリコフィトン・トンシュランス、ミクロスポリウム・カニス、ミクロスポリウム・ジプセウム、エピデルモフィトン・フロコッサム、マラセチア・レストリクタ、マラセチア・グロボーサ、マラセチア・フルフル等が挙げられる。
真菌が引き起こす皮膚疾患に対しては、例えば、アモロルフィン塩酸塩、ケトコナゾール、ミコナゾール、イトラコナゾール、エフィナコナゾール、ルリコナゾール又はテルビナフィン塩酸塩等の抗真菌薬もよく使われる。
また、外用抗菌剤に関しては、新たな抗菌剤として、化合物Ａを有効成分として含有する外用剤が開発されている（例えば、特許文献１、特許文献２を参照）。【０００３】
化合物Ａは優れた抗菌作用を有することが知られており（例えば、非特許文献１）、化合物Ａを有効成分とする外用抗菌剤は、表在性皮膚感染症患者や化膿性炎症を伴うざ瘡患者に対して高い治療効果を発揮することが知られている（例えば、非特許文献２、非特許文献３）。しかしながら、これまで、化合物Ａが抗炎症作用を有することは知られていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】ＷＯ９９／５１５８８
【特許文献２】ＷＯ２００７／０１５４５３
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｙａｍａｋａｗａ Ｔ，ｅｔ ａｌ．Ｊ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ. ２００２  Ｍａｒ；４９（３）：４５５−４６５
【非特許文献２】川島 眞ほか：臨床医薬３１（３）２７９（２０１５）
【非特許文献３】川島 眞ほか：臨床医薬３１（２）１５５（２０１５）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、主として、化合物Ａを含有する医薬組成物であって、微生物により生じるヒトの皮膚炎症に対して抗炎症作用を有することを特徴とする医薬組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、鋭意検討した結果、化合物Ａを有効成分として用いることにより、上記の課題が解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。【０００８】
本発明としては、例えば、以下のものを挙げることができる。
（１）１−シクロプロピル−８−メチル−７−［５−メチル−６−（メチルアミノ）−３−ピリジル］−４−オキソ−１，４−ジヒドロ−３−キノリンカルボン酸及び／又はその医薬上許容される塩を有効成分として含有する、微生物によって生じる皮膚炎症に対して抗炎症作用を有することを特徴とする医薬組成物。
（２）微生物によって生じる皮膚炎症が、表在性皮膚感染症及び／又は化膿性炎症を伴うざ瘡において生じるものである、上記（１）に記載の医薬組成物。
（３）表在性皮膚感染症が、毛包炎、毛瘡、化膿性汗孔周囲炎及び/又は伝染性膿痂疹である、上記（２）に記載の医薬組成物。
（４）化膿性炎症を伴うざ瘡が、尋常性ざ瘡、新生児ざ瘡及び／又は集簇性ざ瘡である、上記（２）に記載の医薬組成物。
（５）微生物によって生じる皮膚炎症が、グラム陽性菌及び／又はグラム陰性菌によって生じるものである、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の医薬組成物。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、正常ヒト表皮角化細胞のＩＬ−６産生に対する各種抗菌薬の抑制効果を表す。  縦軸はコントロール群に対するＩＬ−６濃度（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を、横軸は各種抗菌薬の濃度（μｇ／ｍＬ）を表す。●は化合物Ａ処置群を、△はナジフロキサシン処置群を、□はクリンダマイシン処置群を、それぞれ表す。
【図２】図２は、正常ヒト表皮角化細胞のＩＬ−８産生に対する各種抗菌薬の抑制効果を表す。  縦軸はコントロール群に対するＩＬ−８濃度（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を、横軸は各種抗菌薬の濃度（μｇ／ｍＬ）を表す。●は化合物Ａ処置群を、△はナジフロキサシン処置群を、□はクリンダマイシン処置群を、それぞれ表す。
【図３】図３は、ヒト単球株化細胞のＩＬ−１β産生に対する各種抗菌薬の抑制効果を表す。  縦軸はコントロール群に対するＩＬ−１β濃度（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を、横軸は各種抗菌薬の濃度（μｇ／ｍＬ）を表す。●は化合物Ａ処置群を、△はナジフロキサシン処置群を、□はクリンダマイシン処置群を、それぞれ表す。
【図４】図４は、ヒト単球株化細胞のＩＬ−６産生に対する各種抗菌薬の抑制効果を表す。  縦軸はコントロール群に対するＩＬ−６濃度（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を、横軸は各種抗菌薬の濃度（μｇ／ｍＬ）を表す。●は化合物Ａ処置群を、△はナジフロキサシン処置群を、□はクリンダマイシン処置群を、それぞれ表す。
【図５】図５は、ヒト単球株化細胞のＩＬ−８産生に対する各種抗菌薬の抑制効果を表す。  縦軸はコントロール群に対するＩＬ−８濃度（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を、横軸は各種抗菌薬の濃度（μｇ／ｍＬ）を表す。●は化合物Ａ処置群を、△はナジフロキサシン処置群を、□はクリンダマイシン処置群を、それぞれ表す。
【図６】図６は、ヒト単球株化細胞のＴＮＦ−α産生に対する各種抗菌薬の抑制効果を表す。  縦軸はコントロール群に対するＴＮＦ−α濃度（％ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ）を、横軸は各種抗菌薬の濃度（μｇ／ｍＬ）を表す。●は化合物Ａ処置群を、△はナジフロキサシン処置群を、□はクリンダマイシン処置群を、それぞれ表す。
【図７】図７は、各種試験薬液のラット耳介炎症抑制効果を表す。  縦軸はラットの耳介の厚さ（ｍｍ）を、横軸は試験薬液の濃度（μｇ／μＬ）を表す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
化合物Ａは、キノロン系合成抗菌化合物に分類され、細菌のＤＮＡ複製に関与するＤＮＡジャイレース及びトポイソメラーゼＩＶを阻害して抗菌作用を発揮する。
また、化合物Ａは、グラム陽性菌、グラム陰性菌、嫌気性菌、クラミジア及び薬剤耐性グラム陽性菌に対して幅広い抗菌スペクトルと強い抗菌活性を有している。
【００１１】
化合物Ａは、例えば、ＷＯ９９／５１５８８に記載の方法により合成することができる。
【００１２】
化合物Ａの医薬上許容される塩としては、通常知られているアミノ基等の塩基性基又はヒドロキシル基若しくはカルボキシル基等の酸性基における塩を挙げることができる。
【００１３】
塩基性基における塩としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸等の鉱酸との塩；酒石酸、ギ酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、クエン酸等の有機カルボン酸との塩；並びにメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メシチレンスルホン酸及びナフタレンスルホン酸等のスルホン酸との塩を挙げることができる。
【００１４】
酸性基における塩としては、例えば、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩；カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩；アンモニウム塩；並びにリジン、アルギニン、オルニチン等のアミノ酸、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−ベンジル−β−フェネチルアミン、１−エフェナミン並びにＮ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン等の含窒素有機塩基との塩を挙げることができる。
【００１５】
本発明組成物は、微生物によって生じる皮膚炎症に対して抗炎症作用を有するものであり、微生物によって生じる皮膚炎症を伴う疾患であれば特に限定されないが、例えば、表在性皮膚感染症、ざ瘡、皮膚糸状菌症（水虫）、皮膚カンジダ症又は癜風等を挙げることができる。
【００１６】
微生物とは、肉眼では観察できない微小な生物の総称であり、細菌や真菌、ウィルス等が含まれると定義されるが、ここでは細菌及び真菌のことを言う。
【００１７】
細菌によって引き起こされる皮膚疾患の原因菌には様々なものが知られており、これらの菌は、例えば、グラム染色法によって分類することができる。グラム染色で紫色に染まる細菌はグラム陽性菌、紫色に染まらず赤く見える細菌はグラム陰性菌と分類される。
【００１８】
グラム陽性菌としては、例えば、スタフィロコッカス属、プロピオニバクテリウム属、エンテロコッカス属、バチラス属、コリネバクテリウム属、マイクロコッカス属、ペプトストレプトコッカス属、フィネゴルディア属、ビフィドバクテリウム属、クロストリジウム属等が挙げられる。
【００１９】
グラム陰性菌としては、例えば、サルモネラ属、ナイセリア属、モラクセラ属、ヘモフィルス属、エシェリヒア属、サイトロバクター属、エンテロバクター属、クレブシエラ属、プロテウス属、モーガネラ属、プロビデンシア属、セラチア属、シュードモナス属、ステノトロホモナス属、アシネトバクター属、アルカリゲネス属、ガードネレラ属、ポルフィロモナス属、プレボテーラ属、バクテロイデス属、フソバクテリウム属等が挙げられる。
【００２０】
表在性皮膚感染症の原因菌には様々なものが知られているが、例えば、スタフィロコッカス属やストレプトコッカス属、エッシェリヒア属を挙げることができる。
【００２１】
スタフィロコッカス属としては、例えば、スタフィロコッカス・アウレウス、スタフィロコッカス・エピデルミデス、スタフィロコッカス・ヘモリティカス、スタフィロコッカス・ホミニス、スタフィロコッカス・サプロフィティカス、スタフィロコッカス・ラグジュネシス、スタフィロコッカス・キャピティス、又はスタフィロコッカス・ワーネリ等を挙げることができる。それらの中で、特にスタフィロコッカス・アウレウスが好ましい。
【００２２】
ざ瘡の原因菌には様々なものが知られているが、例えば、プロピオニバクテリウム属を挙げることができる。
【００２３】
プロピオニバクテリウム属としては、例えば、プロピオニバクテリウム・アクネス、プロピオニバクテリウム・アビダム、プロピオニバクテリウム・リンフォフィラム、プロピオニバクテリウム・グラヌローサム、プロピオニバクテリウム・ソエニイ又はプロピオニバクテリウム・プロピオニカムを挙げることができる。それらの中で、特にプロピオニバクテリウム・アクネスが好ましい。
【００２４】
表在性皮膚感染症は、附属器関連感染症と非附属器関連感染症に分けることができる。
附属器関連感染症としては、例えば、毛包炎、毛瘡、化膿性汗孔周囲炎を挙げることができる。
非附属器関連感染症としては、例えば、伝染性膿痂疹を挙げることができる。
【００２５】
化膿性炎症を伴うざ瘡としては、例えば、尋常性ざ瘡、新生児ざ瘡、集簇性ざ瘡を挙げることができる。それらの中で、特に尋常性ざ瘡が好ましい。
【００２６】
真菌によって引き起こされる皮膚疾患には様々なものが知られているが、例えば、皮膚糸状菌症（水虫）、皮膚カンジダ症又は癜風等を挙げることができる。
【００２７】
皮膚糸状菌症の原因菌としては、例えば、トリコフィトン・メンタグロファイテス、トリコフィトン・ルブルム、トリコフィトン・トンシュランス、ミクロスポリウム・カニス、ミクロスポリウム・ジプセウム又はエピデルモフィトン・フロコッサムが挙げられる。
【００２８】
皮膚カンジダ症の原因菌としては、例えば、カンジダ・アルビカンスが挙げられる。
【００２９】
癜風の原因菌としては、例えば、マラセチア・フルフルが挙げられる。
【００３０】
炎症とは、微生物感染、化学的作用、又は物理的作用等による組織の傷害に反応して、身体の一部に発赤、腫脹、疼痛及び/又は発熱等を起こすこと及びその症状のことであり、異物の侵入又は異物化した組織を排除しようとする生体の防御反応と定義される。
本発明に係る「抗炎症作用」とは、この炎症を抑える作用を意味し、化合物Ａは微生物によって引き起こされる皮膚疾患の炎症を特に抑えることができる。
【００３１】
皮膚で生じた炎症は、紅斑（赤み）や丘疹（皮膚面から隆起する針頭大から米粒大ぐらいの局限性の発疹）、膿疱（膿のある水ぶくれ）といった症状として表れる。
【００３２】
このような微生物により生じる炎症性皮疹の形成には、微生物に対する自然免疫反応が関わっている。微生物が自然免疫を誘導するメカニズムは、ペプチドグリカンやリポテイコ酸等の細胞壁成分が、免疫担当細胞に発現するトール様受容体（ＴＬＲ）を活性化することによると考えられている。ＴＬＲは、病原体の持つ共通した分子構造を認識し、病原体排除に必要な生体防御機構を誘導するパターン認識受容体の１つとして知られる。
【００３３】
微生物は、皮膚の単球や角化細胞のＴＬＲの活性化を介して、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−８をはじめとするサイトカインやマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）と呼ばれるタンパク分解酵素の産生を亢進し、さらに好中球の遊走やリソソームの放出、Ｔ細胞の活性化を誘導することで、さらなる炎症を引き起こすことが知られている。      
そのため、微生物によって引き起こされる皮膚炎症に対しては、抗菌作用だけでなく、抗炎症作用が重要である。
【００３４】
本発明組成物の剤型は、特に限定されないが、例えば、軟膏剤、ゲル剤、クリーム剤、乳剤、粘着テープ剤、ローション剤を挙げることができる。
【００３５】
本発明組成物は、当業者に自明な方法により、構成成分を適宜混合し調製することができる。
【００３６】
本発明組成物における、化合物Ａ及び／又はその医薬上許容される塩の含有量は、治療効果を発揮する量であれば特に限定されないが、例えば、製剤中に０．０１〜２０重量％の範囲内が適当であり、０．１〜５重量％の範囲内が好ましい。
【００３７】
本発明組成物の投与量は、患者の年齢、体重及び症状に応じて適宜選択されるが、通常、薬効を発揮し得る量として、外用剤として投与される場合には、１日３０〜２０００ｍｇを経皮投与すればよい。
【実施例】
【００３８】
以下に、試験例を掲げて、本発明を更に詳しく説明するが、本発明は実施例に示される範囲に限定されるものではない。【００３９】
［試験例１］正常ヒト表皮角化細胞のＩＬ−６及びＩＬ−８産生に対する各種抗菌薬の抑制効果
１）試験物質
本試験では、以下の抗菌薬を試験物質として用いた。
・化合物Ａ（力価：９９．７％）
・ナジフロキサシン（力価：９９．９％）
・クリンダマイシン（力価：９９．０％）
２）使用菌株
２０１３年に尋常性ざ瘡患者より分離したプロピオニバクテリウム・アクネスを用いた。
３）正常ヒト表皮角化細胞
正常ヒト表皮角化細胞（サーモフィッシャー・サイエンティフィック株式会社製）はＨｕｍｅｄｉａ−ＫＢ２（倉敷紡績株式会社製）を使用して培養した。試験時は正常ヒト表皮角化細胞の培養液に上記試験物質（いずれも終濃度１〜３０μｇ／ｍＬ）を添加し、続けて、加熱処理したプロピオニバクテリウム・アクネス（１０９ＣＦＵ／ｍＬ）懸濁液を添加した。薬効評価に必要なサイトカイン産生量が認められることから、正常ヒト角化細胞の刺激に用いるプロピオニバクテリウム・アクネスは１０９ＣＦＵ／ｍＬとした。
４）試験薬液の調製
各試験物質を適量の０．１Ｎ・水酸化ナトリウム水溶液に溶解させた後、Ｈｕｍｅｄｉａ−ＫＢ２で希釈した。
５）各種炎症性メディエーター抑制効果の評価指標
上記正常ヒト角化細胞を２４時間培養後、上清を回収し、上清中のＩＬ−６及びＩＬ−８濃度をＥＬＩＳＡ法にて測定した。測定には市販のＥＬＩＳＡキット（アールアンドディーシステムズ株式会社製）を使用した。ＩＬ−６及びＩＬ−８の阻害率は、コントロール（試験薬液非添加）群の産生量を１００％とした時の変化率で算出した。
６）結果
化合物Ａ及びナジフロキサシンのみが、ＩＬ−６及びＩＬ−８の産生を抑制した。さらに、ナジフロキサシンがＩＬ−６に対しては３μｇ／ｍＬ、ＩＬ−８に対しては１０μｇ／ｍＬ以上で産生抑制効果を示したのに対し、化合物Ａでは１μｇ／ｍＬから濃度依存的にＩＬ−６及びＩＬ−８に対する産生抑制効果を示し、化合物Ａが極めて優れた抗炎症効果を有することが明らかとなった。
【００４０】
［試験例２］ヒト単球株化細胞のＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−８及びＴＮＦ−α産生に対する各種抗菌薬の分泌抑制効果
１）試験物質、使用菌株、試験薬液
本試験で用いた試験物質、使用菌株及び試験薬液は、試験１に準ずる方法で得た。
２）ヒト単球株化細胞
ヒト単球株化細胞ＴＨＰ−１（以下、ＴＨＰ−１）（ＥＣＡＣＣ細胞株）はＲＰＭＩ１６４０（サーモフィッシャー・サイエンティフィック株式会社製）を使用して培養した。試験時はヒト単球株化細胞の培養液に上記試験物質（いずれも終濃度１〜３０μｇ／ｍＬ）を添加し、続けて加熱処理したプロピオニバクテリウム・アクネス（１０８ＣＦＵ／ｍＬ）懸濁液を添加した。薬効評価に必要なサイトカイン産生量が認められることから、ヒト単球株化細胞の刺激に用いるプロピニバクテリウム・アクネスは１０８ＣＦＵ／ｍＬとした。
３）各種炎症性メディエーター抑制効果の評価指標
上記正常ヒト角化細胞を２４時間培養後、上清を回収し、上清中のＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−α濃度をＥＬＩＳＡ法にて測定した。測定にはＥＬＩＳＡキット（アールアンドディーシステムズ株式会社製）を使用した。また、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−８及びＴＮＦ−αの阻害率は、コントロール（試験薬液非添加）群の産生量を１００％とした時の変化率で算出した。
４）結果
化合物Ａは１μｇ／ｍＬから濃度依存的にＩＬ−６、ＩＬ−８及びＴＮＦ−αの産生抑制作用を示し、化合物Ａが極めて優れた抗炎症効果を有することが明らかとなった。
【００４１】
［試験例３］各種試験薬液のラットの耳介炎症抑制効果
１）試験物質、使用菌株
本試験で用いた試験物質、使用菌株は、試験１に準ずる方法で得た。
２）ラットの耳介炎症モデル
雄性ＳＤ（Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙ）ラット（７週齢、日本チャールス・リバー株式会社製）の右耳介内側に、プロピオニバクテリウム・アクネスの死菌２５ｍｇ含有懸濁液を５０ μＬ皮内投与し、炎症を惹起した。
３）プロピオニバクテリウム・アクネスの死菌含有懸濁液
プロピオニバクテリウム・アクネスの死菌２５ｍｇを生理食塩水に加え、プロピオニバクテリウム・アクネスの死菌含有懸濁液（５０μＬ）とした。

４）試験薬液の調製
以下の組成の試験薬液を調製した。
・コントロール群：アセトン（和光純薬工業株式会社）。
・アセトン群：アセトン（和光純薬工業株式会社）。
・ステロイド群：０．１％ベタメタゾン（シグマ  アルドリッチ社製）をアセトンに溶解。
・基剤群：化合物Ａ２％含有ローションの基剤。基剤は、ヒドロキシエチルセルロース、１，３−ブチレングリコール、エタノール、エデト酸ナトリウム水和物、チオ硫酸ナトリウム水和物、ｐH調節剤から成る。
・化合物Ａ２％含有ローション群：化合物A及び上記基剤から成る。）
５）炎症抑制効果の評価
上記試験薬液を３０μＬ塗布した直後のラットの右耳介内側に、コントロール群には生理食塩水を、それ以外の群にはプロピオニバクテリウム・アクネスの死菌含有懸濁液５０μＬを皮内投与した。皮内投与２時間後に、ラット耳介の厚さをデジタルシックネスゲージ（株式会社ミツトヨ製）で測定した。
６）結果
コントロール群と比較して、アセトン群では有意に耳介厚が増加した（Ｐ＜０．００１  ｖｓ  コントロール群，Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ）。アセトン群と基剤群では同程度の耳介肥厚が認められた。この耳介肥厚は化合物A２％含有ローション又はステロイド群で有意に抑制された（化合物A２％含有ローション群：Ｐ＜０．００１  ｖｓ  基剤群，Ａｓｐｉｒｉｎ−Ｗｅｌｃｈ  ｔ−ｔｅｓｔ，ステロイド群：Ｐ＜０．００１  ｖｓ  アセトン群，Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ  ｔ−ｔｅｓｔ）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
2019131929.tif 000005
【図４】
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【図５】
2019131929.tif 000007
【図６】
2019131929.tif 000008
【図７】
2019131929.tif 000009
【国際調査報告】
2019131929.tif 000010
2019131929.tif 000011
2019131929.tif 000012
2019131929.tif 000013