(57)【要約】この発明は、穀類植物の種子又はその発芽幼種子を酵素処理することで得られる不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質、並びに、該物質を含有する、かつ過敏性腸症候群に対して抑制的な作用を有する、飲食品及び医薬品を提供する。
2010071225.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下のステップ：
（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；
（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；
（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び
（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップ
を含む処理により製造される穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含む、過敏性腸症候群抑制用物質。
【請求項２】
穀類植物はイネ科植物であることを特徴とする請求項１記載の物質。
【請求項３】
イネ科植物は、米、大麦、ライ麦又は小麦であることを特徴とする請求項２記載の物質。
【請求項４】
ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理をアミラーゼ又はグルコアミラーゼを用いた酵素処理により実施することを特徴とする請求項１記載の物質。
【請求項５】
ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を加熱による糊化処理により実施することを特徴とする請求項１記載の物質。
【請求項６】
ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を物理的破壊処理により実施することを特徴とする請求項１記載の物質。
【請求項７】
物理的破壊処理をホモジナイザーにより実施することを特徴とする請求項６記載の物質。
【請求項８】
ステップ（ｂ）において、澱粉除去画分をさらに圧扁剥離処理に供することを特徴とする、請求項１記載の物質。
【請求項９】
前記澱粉除去処理に供する原料物質は米糠、小麦麦芽又は大麦麦芽であることを特徴とする請求項１記載の物質。
【請求項１０】
前記澱粉除去処理に供する原料物質は脱脂米糠であることを特徴とする請求項１記載の物質。
【請求項１１】
前記澱粉除去処理に供する原料物質は小麦ふすま又は大麦搗精粕であることを特徴とする請求項８記載の物質。
【請求項１２】
前記澱粉除去画分はビール仕込み粕であることを特徴とする請求項８記載の物質。
【請求項１３】
ヘミセルラーゼ活性を有する酵素がキシラナーゼであることを特徴とする請求項１〜１２のいずれか１項記載の物質。
【請求項１４】
ステップ（ｃ）において、さらにプロテアーゼを併用することを特徴とする請求項１〜１３のいずれか１項記載の物質。
【請求項１５】
ステップ（ｃ）後に脱脂処理をさらに含むことを特徴とする請求項１〜１４のいずれか１項記載の物質。
【請求項１６】
ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に、５〜２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする請求項１〜１５のいずれか１項記載の物質。
【請求項１７】
ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする請求項１６記載の物質。
【請求項１８】
タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上であることを特徴とする請求項１〜１７のいずれか１項記載の物質。
【請求項１９】
不溶性食物繊維はアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている、請求項１〜１８のいずれか１項記載の物質。
【請求項２０】
以下の特徴：
（ｉ）実質的に５〜２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなる；
（ｉｉ）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上である；及び
（ｉｉｉ）不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている
を有する、穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質。
【請求項２１】
実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなることを特徴とする請求項２０記載の物質。
【請求項２２】
請求項１〜２１のいずれか１項記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用飲食品。
【請求項２３】
請求項１〜２１のいずれか１項記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用医薬組成物。
【請求項２４】
過敏性腸症候群を抑制するための飲食品又は医薬品を製造するための、請求項１〜２１のいずれか１項記載の物質の使用。
【請求項２５】
以下のステップ：
（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；
（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；
（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び
（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップ
を含む、穀類食物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質の製造方法。
【請求項２６】
以下のステップ：
（ａ１）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；
（ｂ１）原料物質を物理的破壊によって澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；
（ｃ１）ステップ（ｂ１）で調製した画分から５〜２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない不溶性画分を回収するステップ
を含む、請求項２０記載の物質の製造方法。
【請求項２７】
請求項２５又は２６記載の方法によって製造されるものである、請求項２０又は２１記載の過敏性腸症候群抑制用物質。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物の種子及びその発芽幼種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質とその製造方法に関する。本発明はまた、上記物質を有効成分とする飲食品及び医薬品に関する。
【背景技術】
【０００２】
過敏性腸症候群（以下、ＩＢＳとも称する）は腸管の機能的な過敏性を特徴とするもので、腸管の運動機能、分泌機能などの亢進の結果、便秘や下痢などの便通異常、腹痛、不定愁訴などの胃腸症状を呈する症候群である。器質的疾患がなく、その症状の発現や増悪には、心理的な要因も寄与しているとされている。診断基準は世界的にはＲＯＭＥ  ＩＩＩが標準とされており、腹部症状、その病悩期間、症状発現の頻度、排便との関連などがそのパラメータとされている。正確な患者数は不明であるが、アメリカでの罹患率は１０〜２０％、日本では１５％前後とされている（過敏性腸症候群  脳と腸の対話を求めて  佐々木大輔著、中山書店、東京、日本）。
治療法は、器質的な異常が除外されたあとで、その症状により決定される。まずは食事指導と生活習慣指導を行い、症状に応じて消化管運動調節薬、高分子重合体（コロネル）、乳酸菌製剤、下剤などを組み合わせて処方する。食事療法としては、カプサイシンなどを含む香辛料や刺激物の回避、食物繊維の摂取、アレルギーが疑われる場合はアレルゲン除去食の提案などが第一選択として行われる。ＩＢＳはその特性上腸内細菌の変化とも密接な関係にあることが報告され、プロバイオティクスやプレバイオティクスの臨床評価も進んでいるが、病因がしっかり確定していない中で、いまだ決定的な治療法や食事療法がなく、基本的には対症療法が基本である。
そのような観点からも腸内環境改善に焦点を絞ったプレバイオティクスの提供は、患者にとって副作用が少なく、臨床症状の改善を目指すうえで福音となると考えられる。
食品成分であって、尚且つ腸内環境改善に有効な素材としては、木材のチップをヘミセルラーゼ処理することで得られる酸性キシロオリゴ糖（特開２００７−２３０９９８）、ガラクトマンナン及びアラビノガラクタン（特再  ＷＯ０５／０５６０２２）、植物由来プロアントシアニジン（特開２００７−７７１２２）、イネ科植物の発芽種子由来タンパク質及び不溶性食物センイ（特開２００５−２３２１７８）が挙げられる。また、穀物をヘミセルラーゼ処理し、その不溶性残査画分に食品としての機能性付加した報告としては、ふすまをヘミセルラーゼ処理した抗潰瘍剤（特開２００６−１２４３７０）、小麦ふすまをヘミセルラーゼ処理した腎臓病患者用食物繊維素材（特開平０６−７０７２０）、穀物ふすまを酵素処理及び湿式粉砕して得られた果皮画分とアロイロン画分からなる精製ふすまからアロイロンタンパク質に富む画分を得る方法、及び食品や飼料への該画分の使用（特表２００４−５２００５８）等が報告されているが、ＩＢＳ抑制作用についての報告例はない。
【発明の開示】
【０００３】
そこで本発明は、ＩＢＳに対して抑制的な作用を有する安全な素材を提供することを目的とする。また、本発明はかかる素材を含むＩＢＳ抑制用飲食品及びＩＢＳ抑制剤を提供することを目的とする。
本発明者らは、前記課題を解決すべく検討を重ねた結果、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子から澱粉を除去し、残存した果皮・種皮等にヘミセルラーゼ処理を施した後の不溶性食物繊維を含有する不溶性画分が、ＩＢＳ抑制作用を有することを見出し、本発明を完成した。本発明の要旨は、以下の通りである。
（１）以下のステップ：（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップを含む処理により製造される穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含む、過敏性腸症候群抑制用物質。
（２）穀類植物はイネ科植物であることを特徴とする上記（１）記載の物質。
（３）イネ科植物は、米、大麦、ライ麦又は小麦であることを特徴とする上記（２）記載の物質。
（４）ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理をアミラーゼ又はグルコアミラーゼを用いた酵素処理により実施することを特徴とする上記（１）記載の物質。
（５）ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を加熱による糊化処理により実施することを特徴とする上記（１）記載の物質。
（６）ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を物理的破壊処理により実施することを特徴とする上記（１）記載の物質。
（７）物理的破壊処理をホモジナイザーにより実施することを特徴とする上記（６）記載の物質。
（８）ステップ（ｂ）において、澱粉除去画分をさらに圧扁剥離処理に供することを特徴とする、上記（１）記載の物質。
（９）前記澱粉除去処理に供する原料物質は米糠、小麦麦芽又は大麦麦芽であることを特徴とする上記（１）記載の物質。
（１０）前記澱粉除去処理に供する原料物質は脱脂米糠であることを特徴とする上記（１）記載の物質。
（１１）前記澱粉除去処理に供する原料物質は小麦ふすま又は大麦搗精粕であることを特徴とする上記（８）記載の物質。
（１２）前記澱粉除去画分はビール仕込み粕であることを特徴とする上記（８）記載の物質。
（１３）ヘミセルラーゼ活性を有する酵素がキシラナーゼであることを特徴とする上記（１）〜（１２）のいずれか記載の物質。
（１４）ステップ（ｃ）において、さらにプロテアーゼを併用することを特徴とする上記（１）〜（１３）のいずれか記載の物質。
（１５）ステップ（ｃ）後に脱脂処理をさらに含むことを特徴とする上記（１）〜（１４）のいずれか記載の物質。
（１６）ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に、５〜２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする上記（１）〜（１５）のいずれか記載の物質。
（１７）ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする上記（１６）記載の物質。
（１８）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上であることを特徴とする上記（１）〜（１７）のいずれか記載の物質。
（１９）不溶性食物繊維はアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている、上記（１）〜（１８）のいずれか記載の物質。
（２０）以下の特徴：
（ｉ）実質的に５〜２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなる；
（ｉｉ）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上である；及び
（ｉｉｉ）不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されているを有する、穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質。
（２１）実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなることを特徴とする上記（２０）記載の物質。
（２２）上記（１）〜（２１）のいずれか記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用飲食品。
（２３）上記（１）〜（２１）のいずれか記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用医薬組成物。
（２４）過敏性腸症候群を抑制するための飲食品又は医薬品を製造するための、上記（１）〜（２１）のいずれか記載の物質の使用。
（２５）以下のステップ：（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップを含む、穀類食物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質の製造方法。
（２６）以下のステップ：（ａ１）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ１）原料物質を物理的破壊によって澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ１）ステップ（ｂ１）で調製した画分から５〜２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない不溶性画分を回収するステップを含む、上記（２０）記載の物質の製造方法。
（２７）上記（２５）又は（２６）記載の方法によって製造されるものである、上記（２０）又は（２１）記載の過敏性腸症候群抑制用物質。
本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願２００８−３２１４９６号の明細書および／または図面に記載される内容を包含する。
【図面の簡単な説明】
【０００４】
図１は、調製試料１に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図２は、調製試料２に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図３は、調製試料３に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図４は、調製例３において、アミラーゼを６５℃で作用させず冷水で澱粉のみを除去した場合のアロイロン層部分の写真図を示す。
図５は、調製試料４に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図６は、調製試料５に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図７は、調製試料６に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図８は、調製試料１４に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図９は、調製試料１５に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図１０は、拘束ストレスモデルにおける、実験群及び比較群間の糞便排泄量の比較を示す。図中、星印は有意差（Ｐ＜０．０５）を示している。
図１１は、拘束ストレスモデルにおける、実験群及び比較群間のバロスタット法による痛覚閾値をＣＲＤ（ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ）の圧力で示した比較を示す。図中、星印は有意差（Ｐ＜０．０５）を示している。痛覚閾値はＡＷＲ（ａｂｄｏｒｍｉｎａｌ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ  ｒｅｆｌｅｘ；Ａｌ−Ｃｈａｅｒ  ＥＤ，Ｋａｗａｓａｋｉ  Ｍ，Ｐａｓｒｉｃｈａ  ＰＪ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０００  Ｎｏｖ；１１９（５）：１２７６−８５）により判定した。
図１２は、拘束ストレスモデルにおける、実験群及び比較群間の大腸粘膜のセロトニン含量の比較を示す。図中、星印は有意差（Ｐ＜０．０５）を示している。
図１３は、調製試料２１に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図１４は、調製試料２２に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図１５は、調製試料２３に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
図１６は、調製試料２１、２２を酵素で再分解した際の回収率を示す。
図１７は、調製試料２１、２２を酵素で再分解した際の遊離の糖量を示す。
図１８は、調製例１６に従って調製した不溶性食物繊維含有物質を摂取した過敏性腸症候群ヒト患者における臨床所見改善効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００５】
本発明のＩＢＳ抑制用物質は、穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する不溶性画分（以下、「不溶性食物繊維含有物質」とも称する）が、ＩＢＳ抑制作用を有するという知見に基づいている。
以下、本発明の不溶性食物含有物質及びその製造方法、並びに該物質を有効成分とするＩＢＳ抑制用の飲食品及び医薬品について説明する。
本発明の不溶性食物繊維含有物質は、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有することを特徴とする。
本発明に使用することができるイネ科植物として、植物分類表において、イネ科に分類される全ての植物が挙げられる。具体的には米、大麦、小麦、ライ麦、あわ、ひえ、とうもろこし等が例示されるが、これに限定されるものではない。このうち、米、大麦、ライ麦及び小麦などを使用することが好ましい。
本発明の不溶性食物繊維含有物質は、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子を原料にして、澱粉等を除去した澱粉除去画分を酵素処理することにより生じる不溶性画分を回収することにより製造することができる。
具体的には、（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精により生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップを含む処理により製造することができる。
ステップ（ａ）は、粉砕及び／又は搗精により、穀類植物の種子から本発明の不溶性食物繊維含有物質の原料物質を得るステップである。粉砕は、例えばロールミル、ディスクミル、ハンマーミル等によって行うことができる。また搗精は、穀類植物の種子から果皮、種皮、胚芽等を除去・分離することを意味し、これは例えば、精米機または石臼のように表面を削り取る原理を有している機器によって行うことができる。搗精を行う場合には、この処理により生じる果皮、種皮、胚芽を含む種子外側画分をステップ（ｂ）の原料物質とすることができる。このステップは、穀類植物の種子を粉砕及び／又は搗精の他、種子が穀皮を含むものである場合には脱穀処理を含んでもよい。また使用する穀類植物の種子は発芽又は未発芽のものいずれを用いてもよい。
ステップ（ａ）は、実質的に同等の処理が施されている材料を原料物質として使用する場合には、省略することができる。かかる材料の非限定的な例としては、小麦粉を製造した際に副次的に生成されるふすま、精米後に副次的に生成される米糠などが挙げられる。このような材料の使用は、既に穀類植物種子中の大部分の澱粉が除去されていること、及びステップの簡略化の観点から好ましい。原料物質として米糠を使用する場合には、米糠に脱脂処理を施した後に生じる脱脂米糠を使用することが好ましい。脱脂米糠は、米糠よりも安価な材料であり、香味的にも優れているからである。また等量の米糠を用いる場合に比較して、より多くの不溶性食物繊維含有物質を得ることができるという利点も有する。
ステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）で調製した原料物質から澱粉を除去し、澱粉除去画分を調製するステップである。この澱粉除去処理は、原料物質から澱粉を除去できる方法であればどのような方法を用いてもよく、例えば酵素による澱粉分解処理、加熱による糊化と糊化後の篩いによる除去、物理的破壊による澱粉除去処理などにより行うことができる。
澱粉除去処理を酵素による糖化処理により行う場合には、非限定的にアミラーゼ又はグルコアミラーゼを用いることにより行うことができる。本発明に使用することができるアミラーゼ及びグルコアミラーゼとして、これに限定されるものではないが、例えば商品名オリエンターゼ（エイチビィアイ社製）、商品名コクゲン（大和化成社製）、商品名スミチーム（新日本化学工業社製）、商品名ターマミル（ノボザイムズ社製）、商品名グルクザイム（天野エンザイム社製）などの市販の酵素製剤や、トリコデルマ属、テルモミセス属、オウレオバシヂウム属、ストレプトミセス属、アスペルギルス属、クロストリジウム属、バチルス属、テルモトガ属、テルモアスクス属、カルドセラム属、テルモモノスポラ属、フミコーラ属、リゾップス属、ペニシリウム属などの微生物により生産されるアミラーゼ、グルコアミラーゼが挙げられる。本発明で使用する上記酵素は、酵素活性を保持する限り、精製酵素、粗製酵素、固定化酵素などの任意の形態とすることができる。固定化酵素は、ポリマー、多糖類、無機物質などの担体に結合された酵素である。粗製酵素は、例えば酵素含有微生物からの酵素含有抽出物、乾燥物などの処理物を含む。また糖化処理は、一般的には、１０〜９０℃、好ましくは３０〜６０℃の温度、３〜１０、好ましくは５〜７のｐＨで行うが、使用するアミラーゼ、グルコアミラーゼの至適温度又は至適ｐＨ近位の値にて行うことが好ましい。また酵素処理時間は、３０分〜一晩、例えば３時間とすることができる。なお、酵素の添加量は、調製した原料物質の量に応じて当業者が設定することができる。
加熱による糊化は、澱粉を水中に懸濁し加熱することにより、澱粉粒が吸水して次第に膨張して最終的には粒子が崩壊し、溶解する現象を利用することによって行うことができる。その後、糊化した澱粉は篩いにより固液分離することによって除去することができる。
物理的破壊による澱粉除去処理は、例えばホモジナイザー、高速ミキサー、ホモミキサー、ホモジスターラーなどを用いた処理によって行うことができる。これらの物理的破壊による澱粉除去処理によって、澱粉の除去だけでなく、アロイロン層の一部除去を行うこともできる。
穀類植物の種子として発芽形態のものを使用する場合は、アミラーゼ又はグルコアミラーゼを外的に添加することなく、単に加熱することをもって澱粉除去処理を行うことができる。この場合には、発芽種子自身がアミラーゼを産生しているからである。
本発明の製造方法において、実質的にステップ（ａ）〜（ｂ）と同等の処理が施されている材料を澱粉除去画分として以降のステップに使用してもよい。かかる材料の非限定的な例としては、ビールを製造した際に生じる大麦麦芽であるビール仕込み粕を挙げることができる。このような材料の使用は、既に大部分の澱粉が除去されていること、及びステップの簡略化の観点からも好ましい。
ステップ（ｂ）により調製される澱粉除去画分には、アロイロン層、果皮、種皮の主要成分の他、穀皮、胚芽、その他タンパク質、脂質等が含まれていてもよい。麦芽のアロイロン層、果皮、種皮などの植物組織は、Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  Ｗ．ＭａｃＧｒｅｇｏｒら編集のＢａｒｌｅｙ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｐ４６  Ｆｉｇ．８に示されている。またＪｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｒｅａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３６（２００２）２６１−２８４において、これらがイネ科植物の種子に共通して存在していることが示されている。
ステップ（ｂ）は、澱粉除去画分の圧扁剥離処理をさらに含むことができる。圧扁剥離処理とは、二つのロールの回転速度が微妙に異なるロールミルの適切な隙間に多層からなる組成物を通すことで、圧扁面に平行した力が加わり層の一部を剥離させる処理を指す。圧扁剥離処理には被処理原料に圧縮力を与える構造の粉砕機であればいかなる物でも使用可能である。例えば、圧扁剥離処理には、回転速度の異なるロールミル以外にも、隙間と回転速度が制御された臼状の圧扁処理装置なども使用することができる。特にロールミルを使用することが望ましい。その際、ロール間の間隙は０．１５〜０．０１ｍｍ、好ましくは０．０８〜０．０２ｍｍであるものとするが、剥離させる多層物に効率的な物理的破砕が施されるサイズを選択する。これにより、澱粉除去画分中に含まれるアロイロン層が露出し、ステップ（ｃ）のヘミセルラーゼ酵素処理によるアロイロン層の除去処理をより効率的なものとすることができる。圧扁剥離処理の有無は、使用する原料物質、澱粉除去画分の種類や状態に応じて当業者が適宜選択することができる。例えば、原料物質、澱粉除去画分として小麦ふすま、大麦搗精粕及びビール仕込み粕を使用する場合に圧扁剥離処理を行うこととし、米糠、脱脂米糠、小麦麦芽及び大麦麦芽を使用する場合に圧扁剥離処理を行わないこととすることができる。また、穀類植物種子として発芽種子を使用する場合にも、かかる圧扁剥離処理を省略できるとの示唆も存在する。
ステップ（ｂ）は、澱粉除去画分の水の存在下での篩い分け処理をさらに含むことができる。この篩い分け処理は、穀皮やその他澱粉除去画分中に大量に含まれる非標的物質を除去し、アロイロン層、果皮及び種皮を主成分とする画分（以下、果皮・種皮画分とも称する）を粗分画することを目的とするものである。この篩い分け処理は、例えば、澱粉除去画分を適切な篩い目のサイズを有するメッシュを通過させ、メッシュ上に残った画分を除去することによって行うことができる。この篩い分け処理にて使用するメッシュの篩い目のサイズは、使用する原料物質、澱粉除去画分に応じて変化する場合があるが、典型的には、ＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いの５〜２５メッシュ、例えば１２メッシュ、１６メッシュ、２０メッシュを使用する。この処理は、大量の非標的物質を除去することができるため、以降の操作のハンドリングの観点からも好ましい。
ステップ（ｂ）において、上記圧扁剥離処理と篩い分け処理とを併用することが好ましい。この場合、好ましくは、この処理の組合せを２〜５回繰り返して行う。これにより、アロイロン層、果皮及び種皮を主成分とする画分をより効率的に得ることができるからである。
上記したように、使用する穀類植物種子の種類及びその発芽状態並びに原料物質の種類などに応じて、圧扁剥離処理等の前処理の有無を決めることができる。すなわち、上記ステップ（ａ）〜（ｂ）は、ステップ（ｃ）のヘミセルラーゼ酵素処理によるアロイロン層の分解をより効率的に行うための前処理ステップとして規定することができる。したがって、ステップ（ｃ）に供する澱粉除去画分に関し、ステップ（ｃ）の前に、ステップ（ａ）〜（ｂ）による前処理が最適になされているかを確認し、必要に応じて、圧扁剥離処理等の前処理を追加又は反復することが好ましいであろう。その際、例えばステップ（ａ）〜（ｂ）により調製した澱粉除去処理画分中の組織の顕微鏡観察等又はヨウ素澱粉反応を利用した分析により、前処理が最適になされているかを判断することが考えられる。
ステップ（ｃ）は、上記の通り、ステップ（ｂ）で調製した澱粉除去画分又は果皮・種皮画分に含まれるアロイロン層を除去するステップである。このステップは、ヘミセルラーゼ酵素活性を有する酵素による澱粉除去画分又は果皮・種皮画分の酵素処理を含む。このステップで使用することができるヘミセルラーゼ酵素活性を有する酵素として、これに限定されるものではないが、例えばβ−グルコシダーゼ、セルラーゼ、キシロシダーゼ、キシラナーゼ、マンノシダーゼ、マンナナーゼ、アラビノシダーゼ、アラバナーゼ、ペクチナーゼ、グルカナーゼなどを挙げることができる。特にキシラナーゼを含むキシラン分解酵素を使用することが好ましい。具体的に、本発明に使用することができるヘミセルラーセとして、これに限定されるものではないが、例えば、商品名セルロシン（エイチビィアイ社製）、商品名マルチフェクト７２０（ジェンコア協和社製）、商品名スミチーム（新日本化学工業社製）、商品名ペントパン（ノボザイムズ社製）、商品名ヘミセルラーゼ「アマノ」９０（天野エンザイム社製）などの市販の酵素製剤や、トリコデルマ属、テルモミセス属、オウレオバシヂウム属、ストレプトミセス属、アスペルギルス属、クロストリジウム属、バチルス属、テルモトガ属、テルモアスクス属、カルドセラム属、テルモモノスポラ属、フミコーラ属、リゾップス属、ペニシリウム属などの微生物により生産されるキシラナーゼを挙げることができる。
本発明で使用する上記酵素は、酵素活性を保持する限り、精製酵素、粗製酵素、固定化酵素などの任意の形態とすることができる。固定化酵素は、ポリマー、多糖類、無機物質などの担体に結合された酵素である。粗製酵素は、例えば酵素含有微生物からの酵素含有抽出物、乾燥物などの処理物を含む。ヘミセルラーゼ酵素処理は、一般的には、１０〜９０℃、好ましくは３０〜６０℃の温度、３〜１０、好ましくは５〜７のｐＨで行うが、使用するヘミセルラーゼ酵素の至適温度又は至適ｐＨ近位の値にて行うことが好ましい。また酵素処理時間は、３０分〜一晩とすることができる。なお、酵素の添加量は、調製した澱粉除去画分又は果皮・種皮画分の量に応じて当業者が設定することができる。ヘミセルラーゼ酵素処理後、澱粉除去画分又は果皮・種皮画分中のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されていることを蛍光顕微鏡又は電子顕微鏡などで視覚的に確認することが好ましい。蛍光顕微鏡での分析法としては、「ＰＬＡＮＴ  ＭＩＣＲＯＴＥＣＨＮＩＱＵＥ  ＡＮＤ  ＭＩＣＲＯＳＣＯＰＹ」ＳＴＥＶＥＮ  Ｅ．ＲＵＺＥＮ著  Ｃｈａｐｔｅｒ７（ｐ８７〜１１９）に記載されているような当業者に一般的な方法で確認することができる。また、電子顕微鏡での分析法としても、当業者が一般的に用いる方法で確認することができる。
ステップ（ｃ）の酵素処理において、プロテアーゼ処理を併用することが好ましい。これにより、アロイロン層を分解するために使用するヘミセルラーゼ酵素活性を有する酵素の量を、該酵素を単独で使用するよりも１／５〜１／１０倍量まで減らすことができ、コスト面で有利である。
ステップ（ｃ）は、ヘミセルラーゼ処理後の脱脂処理を含むことが好ましい。これにより、本発明の不溶性食物繊維含有物質の味質を改善及び品質を向上することができる。脱脂の方法は、特に限定されないが、例えばエタノール、アセトン、ヘキサンなどを用いた脱脂処理により行うことができる。これらの技術は当業者に自明である。なお、上記澱粉除去処理に供する原料物質として脱脂米糠を使用する場合には、かかる脱脂処理を行わなくても上記利点が得られる点に留意する。
ステップ（ｄ）は、ステップ（ｃ）の酵素処理液中の不溶性画分を回収するステップである。好ましくは、このステップで５〜２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格の篩いを通過しない不溶性画分が回収される。
具体的に、この篩い分け処理は、２段階方式により行うことができる。即ち、ヘミセルラーゼ処理液を第１のメッシュにて篩い分けし、篩いを通過した画分を第１のメッシュよりも篩い目の細かい第２のメッシュにて篩い分けし、篩い上に残った不溶性食物繊維に富む不溶性画分（すなわち、不溶性食物繊維含有物質）を回収する。この篩い分け処理にて使用する第１のメッシュと第２のメッシュの篩い目のサイズは、上記粒度を有する画分を回収できるような組合せであれば特に制限されない。例えば、第１のメッシュとしてＡＳＴＭ規格篩いの５〜２５メッシュ、例えば１２メッシュ、１６メッシュ、好ましくは２０〜２５メッシュを選択し、第２のメッシュとしてＡＳＴＭ規格篩いの５０〜５００メッシュを選択することができる。この篩い分け処理により、酵素処理液中の目的の画分を得ることができる。
或いは、ステップ（ｄ）で回収される不溶性画分は、第２のメッシュとして５０〜２００メッシュのＡＳＴＭ規格の篩いを用いることで、２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分として回収してもよい。
なお、ステップ（ｂ）において、既に果皮・種皮画分を粗分画している場合には、必ずしもステップ（ｄ）を２段階方式にて行う必要はなく、上記第２のメッシュを用いた篩い分け処理により、篩い上に残った画分を回収すればよい。
ステップ（ｄ）で取得した不溶性画分は、通常、凍結乾燥等により乾燥し、好ましくは微粉砕等の更なる加工を施すことなく、本発明の不溶性食物繊維含有物質として使用することができる。
このようにして製造される本発明の不溶性食物繊維含有物質は、ステップ（ｄ）の篩い分け処理に基づき、好ましくは実質的に５〜２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなる。本明細書で使用する「実質的に」とは、上記粒度範囲外の成分がわずかながら混入している不溶性食物繊維含有物質も本発明の範囲に含まれることを意図すべく使用される。したがって、実質的に５〜２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなる本発明の不溶性食物繊維含有物質は、上記粒度の画分を少なくとも９０％以上、好ましくは９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％、最も好ましくは１００％含んでいる。
また、上記の製法によって得られるような本発明の不溶性食物繊維含有物質は、タンパク質の含量が、好ましくは２０重量％以下、例えば１５重量％以下、１０重量％以下などであり、不溶性食物繊維の含量が、好ましくは５５重量％以上、より好ましくは６０重量％以上、さらに好ましくは７０重量％以上、例えば７５重量％以上、８０重量％以上などであるという性質を有する。ここでいうタンパク質の含量とは、ケルダール法を用いて得られた窒素量に、タンパク質換算係数として６．２５を乗じて得た数値から求めたものである。また、食物繊維の含量は、ＡＯＡＣ法に基づいて求めたものである。
また本発明の不溶性食物繊維含有物質に含まれる不溶性食物繊維は、アロイロン層が部分的に又は完全に除去されている。ここでいう「部分的に」とは、不溶性食物繊維のアロイロン層の７０％以上、好ましくは８０％以上、より好ましくは９０％以上、より好ましくは９５％以上、最も好ましくは９９％以上が除去されていることをいう。前記不溶性食物繊維のアロイロン層は完全に除去されていることが好ましい。
不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されていることは、上記のように蛍光顕微鏡又は電子顕微鏡などで視覚的に確認することによる他、例えば、本発明の不溶性食物繊維含有物質をヘミセルラーゼ酵素処理に供し、当該処理後の回収率を評価することによって確認することができる。本発明の不溶性食物繊維含有物質は上記の通りアロイロン層の大部分が除去されている画分であるため、再度のヘミセルラーゼ酵素処理に供しても当該処理後の回収率が非常に高いものである。具体的に、本発明の不溶性食物繊維含有物質は、５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）４．０％ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）で一晩の再度のヘミセルラーゼ酵素処理に供した際に、少なくとも約７０％以上、好ましくは少なくとも約８０％以上の回収率を有することによって特徴付けることができる。なお、ここでいう「回収率」とは、取得された不溶性食物繊維含有物質の重量を１００％として、これに再度酵素処理（４．０％ヘミセルラーゼ、ｐＨ４．５、５０℃、一晩）を行った後に、凍結乾燥により得られた物質重量の相対的な値をいう。
本発明の不溶性食物繊維含有物質が有するその他の特徴として、膨潤能を挙げることができる。ここで膨潤能とは、不溶性食物繊維含有物質内（植物組織の間）に水分子を取り込み、粒子が膨らんで大きくなる特性をいう。本発明の不溶性食物繊維含有物質が膨潤能を有することは、例えば、不溶性食物繊維含有物質を一定量メスシリンダーに計り取り、それに一定量の水を入れて一定時間置き、メスシリンダーの目盛りにより膨らみを定量することによって確認することができる。本発明の不溶性食物繊維含有物質の膨潤能は、１ｇ当たり２０ｍｌ〜３５ｍｌの容積にまで膨らむことで特徴付けることができる。
以下、澱粉除去画分としてビール仕込み粕を、原料物質として小麦ふすま、米糠を使用した場合の本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造について具体的に説明する。
本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造は、上記の通り、ビールを製造した際に生じる大麦麦芽であるビール仕込み粕、小麦粉を製造した際に副次的に生成されるふすま、精米後に副次的に生成される米糠など利用することが経済的に好ましい。
本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造にビール仕込み粕を使用する場合、本発明の不溶性食物繊維含有物質を得る具体的な方法の例として、特公平４−３１６６６号公報に記載された方法を用いることができる。すなわち、湿体状態にあるビール仕込み粕を圧扁粉砕処理し、得られた圧扁粉砕処理物を水の存在下において、篩い分け処理にて果皮・種皮及びアロイロン層を大量に含む画分を調製し、それをヘミセルラーゼにて処理すればよい。
より具体的には、大麦特有の穀皮を除去するために、湿体状態のビール仕込み粕を圧扁剥離処理する。ビール仕込み粕の圧扁剥離処理には被処理原料に圧縮力を与える構造の粉砕機であればいかなる物でも使用可能であるが、特にロールミルの使用が望ましい。ロール間の間隙は０．１５〜０．０１ｍｍ、好ましくは０．０８〜０．０２ｍｍであるものとするが、剥離させる多層物が効率的に物理的破砕が行われるサイズを選択する。ビール仕込み粕を圧扁剥離処理する際に、ビール仕込み粕中の水分を６５％以上に調整することが望ましい。次に、得られた圧扁剥離処理物を水の存在下において篩い分け処理する。この篩い分け処理により、穀皮画分が篩い上に残り、アロイロン層に富む果皮・種皮画分が篩いを通過する。篩い目の寸法はＡＳＴＭ規格篩いの５〜２０メッシュ、好ましくは１６〜２０メッシュとする。以上の作業により、大麦特有の穀皮を多量に含む画分を除去することができる。また、果皮・種皮画分を効率よく得るためには、更に、先の篩いより目の細かい篩いを用いて篩い分けを行う。その際に、果皮・種皮画分は篩いの上に残り、果皮・種皮画分を調製することができる。後者の篩い目の寸法は、ＡＳＴＭ規格篩いの５０〜２００メッシュとする。前記の圧扁剥離処理とこの篩い分け処理とを２〜５回繰り返して行うのが好ましい。上記のようにして得られた果皮・種皮画分にヘミセルラーゼ処理を行い、再度ＡＳＴＭ規格篩いの５０〜２００メッシュにて篩い分けし、ヘミセルラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った不溶性画分が、目的の不溶性食物繊維含有物質である。こうして取得した不溶性食物繊維含有物質は、通常、乾燥させてから用いる。乾燥方法は特に限定されないが具体例としては、凍結乾燥による方法などが挙げられる。
本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造に小麦ふすまを使用する場合、まず澱粉を除去するために、乾燥状態の小麦ふすまをアミラーゼ又はグルコアミラーゼを含んだ溶液に懸濁することにより、澱粉を分解させる処理を施す。長時間（例えば３０分〜一晩）アミラーゼ反応を施した後、ヘミセルラーゼ酵素処理の効率化のために、例えばロールミルによる圧扁剥離処理を行う。ロール間の間隙は、０．１５〜０．０１ｍｍ、好ましくは０．０８〜０．０２ｍｍであるものとするが、剥離させる多層物が効率的に物理的破砕が行われるサイズを選択する。次に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０〜２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、アミラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った果皮・種皮画分を回収する。次に、本画分をヘミセルラーゼを含んだ溶液に懸濁し、長時間（例えば３０分〜一晩）反応後、同様に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０〜２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、ヘミセルラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った不溶性画分を回収することにより、本発明の不溶性食物繊維含有物質を得ることができる。こうして取得した不溶性食物繊維含有物質は、通常、乾燥させてから用いられる。乾燥方法は特に限定されないが具体例としては、凍結乾燥による方法などが挙げられる。
本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造に米糠を使用する場合、まず澱粉を除去するために、乾燥状態の米糠をアミラーゼ又はグルコアミラーゼを含んだ溶液に懸濁することにより、澱粉を分解させる処理を施す。長時間（例えば３０分〜一晩）アミラーゼ反応を施した後に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０〜２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、アミラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った果皮・種皮画分を回収する。次に、本画分をヘミセルラーゼを含んだ溶液に懸濁し、長時間（例えば３０分〜一晩）反応後、同様に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０〜２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、ヘミセルラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った画分を回収することにより本発明の不溶性食物繊維含有物質を得ることができる。こうして取得したこの不溶性食物含有物質は、通常、乾燥させてから用いられる。乾燥方法は特に限定されないが、凍結乾燥による方法などが挙げられる。
以上、本発明の不溶性食物繊維含有物質及びその製造方法を説明してきたが、本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造方法は上記方法に限定されるものではない。すなわち、穀類植物の種子から、以下の特徴（ｉ）〜（ｉｉｉ）を有する不溶性食物繊維含有物質を製造することができるものであれば、他の製造方法を採用してもよい：（ｉ）実質的に、５〜２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなり；（ｉｉ）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上であり；かつ（ｉｉｉ）不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている。
上記特徴を有する本発明の不溶性食物繊維含有物質の代替的な製造方法の例として、以下のステップ：（ａ１）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ１）原料物質を物理的破壊を含む澱粉除去処理に供するステップ；（ｃ１）ステップ（ｂ１）で調製した画分から５〜２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない不溶性画分を回収するステップを含む方法が挙げられる。
この方法は、物理的破壊を含む澱粉除去処理に供する点、及びヘミセルラーゼ活性を有する酵素による酵素処理ステップを含まない点を除き、上記方法と同様にして行うことができる。
この方法において、物理的破壊による澱粉除去処理は、例えばホモジナイザー、高速ミキサー、ホモミキサー、ホモジスターラーなどを用いた処理によって行うことができる。これにより澱粉除去処理に併せてアロイロン層の除去を行うことができる。
上記澱粉除去処理は、上記方法のステップ（ｂ）で説明した篩い分け処理を併用して複数回、例えば２〜５回実施することが好ましい。これにより澱粉除去処理とこれに伴うアロイロン層の除去をより効率的に行うことができる。
上記澱粉除去処理は、物理的破壊以外の他の澱粉除去処理、例えば酵素による澱粉分解処理、加熱による糊化、糊化後の篩いによる除去を併用してもよい。
上記のようにして製造した本発明の不溶性食物繊維含有物質は、ＩＢＳ抑制のために摂取・投与されるものであることを特徴とする。ＩＢＳは、過敏性大腸症候群とも称され、主として大腸の運動及び内臓知覚の異常の結果として生じる疾患の総称である。ＩＢＳにおいては、炎症や潰瘍など目に見える異常は認められないが、下痢や便秘などの便通の異常や、ガス過多による下腹部の張りなどの症状が認められる。症状の現れ方によって、不安定型、慢性下痢型、分泌型、ガス型の４種に分けることができるが、本発明の不溶性食物繊維含有物質はいずれのＩＢＳ型に対して使用してもよい。本明細書で使用する「ＩＢＳを抑制する」という用語は、ＩＢＳに関連する症状の１つ以上を改善又は予防すること、及びＩＢＳに関連するパラメータ値の１つ以上を改善又は維持することをいう。前記症状としては、便秘、下痢、腹痛、腹部膨満感、便意切迫感、残便感などが挙げられ、「症状を改善する」とはそれら症状の重症度、病悩期間、発現頻度を改善することをいう。また、前記パラメータ値としては、大腸粘膜のセロトニン含量、大腸での痛覚閾値、ストレス負荷時の糞便排泄量などが挙げられ、「パラメータ値を改善する」とは、それらのパラメータ値をストレス負荷の有無で同等の状態にまで回復させることをいう。
本発明の不溶性食物繊維含有物質は、ＩＢＳ抑制用物質としてそのまま又は飲食品若しくは医薬中の有効成分として摂取・投与することで、ＩＢＳを抑制することができる。また、日常的に摂取・投与することによりＩＢＳに罹ることを予防することができる。この目的のために、本発明の不溶性食物繊維含有物質を１日あたり１ｇ以上、２ｇ以上、３ｇ以上、４ｇ以上、５ｇ以上、６ｇ以上、７ｇ以上、８ｇ以上、９ｇ以上、好ましくは１０ｇ以上、１２ｇ以上、１４ｇ以上、１６ｇ以上、１８ｇ以上、２０ｇ以上、３０ｇ以上摂取・投与することが望ましい。
本発明の不溶性食物繊維含有物質は、穀類植物の種子から食品用酵素により処理して得られた成分であるので、日常の食生活に取り入れることができる。また、投与ないしは摂取の時期は、食前、食間及び食後のいずれの時期でもよい。
本発明の不溶性食物繊維含有物質を飲食品に配合してＩＢＳ抑制用飲食品を提供する場合、あらゆる食品形態に加工することが可能である。本発明の不溶性食物繊維含有物質を配合することのできる飲食品としては、天然物及びその加工品を含む飲食物等を挙げることができる。またその配合量は、飲食品の形態に応じて異なるが、１００ｇに対し、本発明の不溶性食物繊維含有物質を０．１〜９０ｇ、好ましくは１〜５０ｇ程度配合することができる。
飲食品の例としては、これに限定されるものではないが、錠剤形、粉末状、顆粒状、カプセル状、ゼリー状等の機能性食品、パン類、菓子類、クッキー、ビスケット等の穀類加工品、牛乳、ヨーグルト、アイスクリーム等の乳製品類、炭酸飲料、清涼飲料、果汁入り飲料、薬系ドリンク等の飲料、惣菜や加工食品等が挙げられる。
本発明の不溶性食物繊維含有物質を医薬品（医薬組成物）中の有効成分として配合する場合には、ＩＢＳ抑制剤として製剤化することができる。製剤の投与形態は特に限定されないが、例えば投与経路として、経口投与、経腸投与等を挙げることができる。経口投与又は経腸投与の場合、本発明のＩＢＳ抑制用物質をそのまま投与してもよいが、医薬的に許容できる賦形剤とともに、液剤、懸濁剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの形態で投与してもよい。
医薬的に許容できる賦形剤としては、これに限定されるものではないが、乳糖、ショ糖、ブドウ糖などの糖類、デンプン、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム等の無機物、結晶セルロース、蒸留水、精製水、ゴマ油、ダイズ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油等の一般に使用されているものを例示することができる。また賦形剤の他、結合剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤などの添加剤を使用することができる。他の医薬品と混合、或いは併用することも可能である。なお、上記の製剤は殺菌処理を行なってもよい。
本発明の医薬を適用する対象は特に限定されず、健常者、ＩＢＳ患者、ＩＢＳの治療中の患者、ＩＢＳの予防を検討している健常者等のいずれであってもよい。またその対象はヒトに限らず、ヒト以外の動物に適用してもよい。
本発明の医薬品の投与量は、被験者の年齢、体重、性別、肥満の程度など、様々な要因に応じて変化するが、典型的には、本発明の不溶性食物含有物質を１日あたり、１ｇ以上、２ｇ以上、３ｇ以上、４ｇ以上、５ｇ以上、６ｇ以上、７ｇ以上、８ｇ以上、９ｇ以上、好ましくは１０ｇ以上、１２ｇ以上、１４ｇ以上、１６ｇ以上、１８ｇ以上、２０ｇ以上、３０ｇ以上投与する量とし、投与間隔は特に制限されない。
本発明の不溶性食物繊維含有物質は、効率的にＩＢＳを抑制することができ、かつ、穀類植物の種子から食品用酵素により処理して得られた成分であるので、安全性が高く、飲食品又は医薬における使用に有用である。
さらに、本発明の不溶性食物繊維含有物質は、米糠や小麦ふすまといった、比較的安価な原料から製造することが可能であるため、コスト面にも優れている。
飲食品又は医薬品組成物に、本発明の不溶性食物繊維含有物質が含まれている場合は、以下の方法で検出することができる。すなわち、最初に飲食品又は医薬品組成物を水に懸濁した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、不溶性画分を回収する。そして、ナイルブルー又はその他の疎水性物質の染色等に適した染色試薬で前記不溶性画分を染色し、蛍光顕微鏡などで観察することにより、本発明の不溶性食物繊維含有物質を検出することができる。その際、本発明の不溶性食物繊維含有物質は、染色される層と染色されない層が重なっているという特徴により、他の不溶性組成物と区別することができる。染色に適したその他の試薬としては、ズダン  ＩＩＩ、ズダンブラック、オイルレッド、フルオロルイエロー０８８などが挙げられる。
【実施例】
【０００６】
以下の調製例及び試験例により、本発明をさらに具体的に説明する。但し、本発明の範囲はこれらの具体例により限定されるものではない。調製例及び試験例中、特に断らない限り、％表示は重量基準によるものとする。また、分析により求める各成分値について、粗タンパク質はケルダール法を（窒素のタンパク質換算係数は６．２５とした。）用いて、粗脂肪はジエチルエーテルを抽出溶媒としたソックスレー抽出法を用いて測定した。食物繊維の含量は、ＡＯＡＣ法に基づいて求めた。
〔調製例１〕（ビール仕込み粕⇒ロールミル）
湿体状態のビール仕込み粕（水分：７７．６重量％）をロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で１６メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．１８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに５０メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．３００ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１とした。この分析値は下記表１に示すとおりである。また、調製試料１に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１に示す。
〔調製例２〕（ビール仕込み粕⇒ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
湿体状態のビール仕込み粕（水分：７７．６重量％）をロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で１６メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．１８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに５０メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．３００ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分にヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社（日本）製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、水中で２００メッシュ（篩い目開き：０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２とした。この分析値は下記表１に示すとおりである。また、調製試料２に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図２に示す。
【表１】
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〔調製例３〕（裸麦芽⇒澱粉分解）
発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料３とした。この分析値は下記表２に示すとおりである。また、調製試料３に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図３に示す。ちなみにアミラーゼを６５℃で作用させず冷水で澱粉のみを除去した場合のアロイロン層は、図４のような状態となる。
〔調製例４〕（裸麦芽⇒澱粉分解＋ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、回収した画分を湿体状態でロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収し、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した。再度、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料４とした。この分析値は下記表２に示すとおりである。また、調製試料４に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図５に示す。
【表２】
2010071225.tif 000004
〔調製例５〕（裸大麦⇒澱粉分解）
未発芽の裸大麦（裸大麦）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数８００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、裸大麦中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料５とした。この分析値は下記表３に示すとおりである。また、調製試料５に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図６に示す。
〔調製例６〕（裸大麦⇒澱粉分解＋ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
未発芽の裸大麦（裸大麦）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数８００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、裸大麦中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分を湿体状態でロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、回収した画分にヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した。再度、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料６とした。この分析値は下記表３に示すとおりである。また、調製試料６に含まれるアロイロン層部分走査型電子顕微鏡写真像を図７に示す。
【表３】
2010071225.tif 000005
〔調製例７〕（裸麦芽⇒澱粉分解＋ロールミル）
発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分を湿体状態でロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料７とした。この分析値は下記表４に示すとおりである。
〔調製例８〕（（裸麦芽⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料８とした。この分析値は下記表４に示すとおりである。
〔調製例９〕（裸麦芽⇒澱粉分解＋ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
再度、調製例４と同様の処理を行い、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料９とした。この分析値は下記表４に示すとおりである。
【表４】
2010071225.tif 000006
〔調製例１０〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１０とした。この分析値は下記表５に示すとおりである。
【表５】
2010071225.tif 000007
〔調製例１１〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
再度、調製例１０と同様の処理を行い、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１１とした。この分析値は下記表６に示すとおりである。
〔調製例１２〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒脱脂処理）
米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分をエタノールにより脱脂処理を行い、凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１２とした。この分析値は下記表６に示すとおりである。
【表６】
2010071225.tif 000008
〔調製例１３〕（ふすま⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
ふすまを原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、ふすま中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１３とした。この分析値は下記表７に示すとおりである。
【表７】
2010071225.tif 000009
〔調製例１４〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１４とした。この分析値は下記表８に示すとおりである。また、調製試料１４に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図８に示す。
〔調製例１５〕（米糠⇒ホモジナイズ攪拌による澱粉除去）
米糠を原料として水に懸濁し、特殊機化工業株式会社製（現プライミクス株式会社）攪拌機Ｔ．ｋ．ロボミックスに常温で供した後（１０，０００ＲＰＭ、約２０分）、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収することにより澱粉を除去した。この操作を２回繰り返し、澱粉の除去効率を高めた。また、２回目の操作時には、８０℃加温という殺菌工程を組み入れた。最後に、２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、回収した通過しない画分を凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１５とした。この分析値は下記表８に示すとおりである。また、調製試料１５に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図９に示す。
〔調製例１６〕（脱脂米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
脱脂米糠（築野食品工業株式会社製）を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１６とした。この分析値は下記表８に示すとおりである。
【表８】
2010071225.tif 000010
〔調製例１７〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒２００メッシュを通過しない画分）
米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥して、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１７とした。この分析値は下記表９に示すとおりである。
〔調製例１８〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒２００〜５００メッシュ画分）
米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過する画分を回収してそれをさらに５００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０２５ｍｍ）篩を用いて篩分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥して、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１８とした。この分析値は下記表９に示すとおりである。
【表９】
2010071225.tif 000011
〔調製例１９〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒２００メッシュを通過しない画分）
脱脂米糠（築野食品工業株式会社製）を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１９とした。この分析値は下記表１０に示すとおりである。
〔調製例２０〕（調製例１９⇒微粉砕⇒５００メッシュを通過画分）
調製例１９において得られた不溶性食物繊維含有物質を微粉砕化（マイクロフーズジャパン株式会社加工）した後に、水に懸濁させ、水中で５００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過する画分を回収後、凍結乾燥して不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２０とした。この分析値は下記表１０に示すとおりである。
【表１０】
2010071225.tif 000012
〔試験例１〕  上記調製例１６に従って調製した不溶性食物繊維含有物質を用いてＩＢＳに関連する症状又はパラメータ値を改善できるかについて試験した。
下記試験に使用した対照飼料、実験飼料の組成は表１１に示す通りである。
【表１１】
2010071225.tif 000013
実験動物に対照飼料、実験飼料を投与し、順化したのちに、広くＩＢＳモデル作成に使用されている方法のうち、ＩＢＳ治療薬の動物評価にも使用されている拘束ストレス法（Ｍｉｙａｔａ  Ｋ，Ｋａｍａｔｏ  Ｔ，Ｎｉｓｈｉｄａ  Ａ，Ｉｔｏ  Ｈ，Ｙｕｋｉ  Ｈ，Ｙａｍａｎｏ  Ｍ，Ｔｓｕｔｓｕｍｉ  Ｒ，Ｋａｔｓｕｙａｍａ  Ｙ，Ｈｏｎｄａ  Ｋ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．１９９２；２６１：２９７−３０３．）を用いて本発明の不溶性食物繊維含有物質のＩＢＳ抑制作用について評価した。具体的には、拘束ケージを用いて動物に拘束ストレスを１日４時間、連続３日与えて、ストレス負荷時の糞便排泄量、大腸での痛覚閾値、及び大腸粘膜のセロトニン含量を評価した。
〔糞便排泄量評価〕
本試験では、５週令の雄のＳＤラットを各群１０匹用い、群は対照群、実験群の２群とした。１週間環境順化後に、体重で組分けした。その後１０日間各飼料で飼育し、各群半分の５匹をストレス負荷あり、残り半分をストレス負荷なしとした。１０日の飼育後に連続３日の拘束ストレス負荷を行い、１回のストレスは４時間とし、連続３日の負荷とした。詳細は宮田らの方法（前掲）を参考にした。簡潔に説明すると、夏目製作所（日本）のラット用拘束ケージにラットを４時間保定した。その後解放して通常の飼育ケージにもどした。なお、ストレス負荷をしない個体はそのままの飼育を継続した。
本試験ではストレス負荷開始時から終了時まで、すべての個体から採便し、乾燥重量を測定し、３日分の平均値を４時間当たりの糞便排泄量とした。結果を図１０に示す。
図１０に示すように、拘束ストレスを負荷すると、対照群では糞便排泄が有意に増加するが、実験群ではその増加を抑制し、抗ストレス作用が確認された。
〔大腸における痛覚閾値評価〕
試験例２では、５週令の雄のＳＤラットを各群１０匹用い、群は対照群、実験群、陽性対照としてのコロネルの３群とした。１週間環境順化後に、体重で組分けする。その後１０日間各飼料で飼育し、各群半分の５匹をストレス負荷あり、残り半分をストレス負荷なしとした。１０日の飼育後に連続３日の拘束ストレス負荷を行い、１回のストレスは４時間とし、連続３日の負荷とした。３日目のストレス負荷終了直後にバロスタット法により痛覚閾値の測定を行った。痛覚閾値はＡＷＲ（ａｂｄｏｒｍｉｎａｌ  ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ  ｒｅｆｌｅｘ；Ａｌ−Ｃｈａｅｒ  ＥＤ，Ｋａｗａｓａｋｉ  Ｍ，Ｐａｓｒｉｃｈａ  ＰＪ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０００  Ｎｏｖ；１１９（５）：１２７６−８５）により判定した。ストレス負荷をしない個体は別の日に痛覚閾値測定を実施した。結果を図１１に示す。
図１１に示すように、拘束ストレスを負荷すると、対照群ではＣＲＤ（大腸の拡張による痛覚閾値）の有意な低下が確認されたが、実験群、および陽性対照のコロネルではその有意な低下が生じず、ＩＢＳで確認されている痛覚閾値の低下が抑制された。
〔大腸粘膜のセロトニン含量の評価〕
本試験では、上記と同じように飼育、ストレス負荷を行い、３日目のストレス負荷終了直後に麻酔下で解剖に供し、大腸を摘出し、大腸粘膜中のセロトニン含量を市販のＥＬＩＳＡキット（Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ  ＥＩＡ，Ｌａｂｏｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｋａ  Ｎｏｒｄ  ＧｍｂＨ）で測定した。結果を図１２に示す。
図１２に示すように、拘束ストレスを負荷すると、対照群では大腸粘膜では消化管運動に関係するセロトニンの急激な放出が生じる。対照群ではストレスの負荷により有意な上昇が認められるが、実験群、コロネルではその上昇は有意なものではなく、抗ストレス作用が確認された。
〔調製例２１〕（脱脂米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
脱脂米糠を原料とし、調製例１６と同様にして不溶性食物繊維含有物質を調製した。すなわち、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）１．０％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、６５℃）、３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）０．５％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、５０℃）、１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を分解した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２１とした。この分析値は下記表１２に示すとおりである。
また、調製試料２１に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１３に示す。
〔調製例２２〕（脱脂米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ、酵素量を調製例２１より低減化）
脱脂米糠を原料として、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）０．５％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、６５℃）、３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）０．２％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、５０℃）、１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を分解した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。
これを調製試料２２とした。この分析値は下記表１２に示すとおりである。また、調製試料２２に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１４に示す。
【表１２】
2010071225.tif 000014
〔調製例２３〕（調製試料の再ヘミセルラーゼ処理）
再度、調製試料２２をヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％、乳酸を添加してｐＨを調整後（ｐＨ４．５、５０℃）、１晩反応させ、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供し、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２３とした。調製試料２３の分析値は下記表１３に示すとおりである。また、調製試料２３に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１５に示す。
【表１３】
2010071225.tif 000015
〔試験例２〕
調製試料２１、２２を、再度、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）４．０％で、５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させ、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、回収率を算出した。また、ヘミセルラーゼ処理の際にアロイロン層を構成する主だった糖として、アラビノース、キシロースの遊離量も調査した。
〔試験例２の結果〕
調製試料２１をヘミセルラーゼで再分解した際の回収率は７８％であり、調製試料２２を同様に分解した際の回収率は６９％であった（図１６）。また、各試料を分解した際の遊離のアラビノース、キシロース量を調査した結果、いずれも調製試料２２を分解した場合の方が遊離のアラビノース、キシロースが多いことが判明した（図１７）。アラビノース、キシロースは、アロイロン層を構成する主要な糖であり、ヘミセルラーゼ処理によりこれらの糖が遊離しているということは、ヘミセルラーゼ処理により、アロイロン層が分解されていると推察できる。
調製試料２１は、試験例１において実際にそのＩＢＳ抑制効果が立証された調製例１６と同様にして調製されたものである。上記結果から、当該試験例と同様の条件下でのヘミセルラーゼ処理による再分解に供した際に、回収率が少なくとも約７０％以上、好ましくは約８０％以上である調製試料にはＩＢＳ抑制効果が認められると推認できる。また、この指標をもって、アロイロン層の分解度合いを表現することができる。
〔試験例３〕（過敏性腸症候群患者における臨床所見改善効果）
患者選択基準としてＲｏｍｅ  ＩＩＩ基準に準拠したＩＢＳ患者のうち、下痢型の患者とし、１６〜７４歳の男女で、医師により試験参加が判断した通院患者で、上記調製例１６に従って調製した不溶性食物繊維含有物質の摂取を受けることに対して十分な説明を受けた後に承諾し、摂取試験に協力する事に同意する者を対象とした。（除外基準としては、他の合併症を有する症例のうち、薬効に影響すると考えられる薬剤の摂取を必要とする症例、癌或いはｄｙｓｐｌａｓｉａを合併している症例、妊娠している可能性のある婦人、妊婦、胃腸管切除歴のある症例、腸管の閉塞症状が認められる症例、米に対してアレルギー症状を有する症例、その他、医師が摂取試験の対象として不適切と判断した症例とした。）当該不溶性食物繊維含有物質を１日１０〜１５ｇ、４週間摂取して、摂取後の臨床所見、患者の生活印象などを以下の項目にしたがって評価した。試験参加者は男性４、女性１（平均年齢３１歳）が試験に参加し、全員がＩＢＳ治療薬の摂取を受けているが、抵抗性を有する症例であった。評価方法は表１４のとおりＡｍ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ１０１；１５８１−１５９０，２００６に記載の方法に準じて行った。
【表１４】
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各項目について１：著明改善、２：中等度改善、３：軽度改善、４：不変、５：悪化、６：判定不能の６段階で判定した。また、臨床所見総合改善度は上記指標に安全性に関する結果も踏まえ、総合的に勘案して試験を担当する医師が同じく６段階で評価した。結果を図１８に示す。
図１８に示すように、当該不溶性食物繊維含有物質の摂取を４週間継続（平均１２ｇ／日の摂取量であった）することで、全般改善度、ならびに臨床所見総合評価が改善することが確認された。さらに、この試験においては、当該不溶性食物繊維含有物質の摂取との関連性を示す有害事象は認められず、過敏性腸症候群患者においても安全性に問題となる懸念はないと考えられた。
【産業上の利用可能性】
【０００７】
本発明によれば、ＩＢＳを抑制するための新規な物質（以下、ＩＢＳ抑制用物質とも称する）が提供される。
本発明のＩＢＳ抑制用物質は、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子由来の不溶性食物繊維を豊富に含み、副作用がないという利点を有するため、ＩＢＳ抑制用の飲食品又は医薬における使用に有用である。
本発明の穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する物質は、ＩＢＳ抑制効果、例えばストレス負荷時の急激な糞便排泄や痛覚閾値低下などのＩＢＳに関連する症状の１つ以上を有効に軽減することができるＩＢＳ抑制用物質として提供される。
本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。
【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【国際調査報告】
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