(57)【要約】本発明により、内部と外部との境界の少なくとも一部に多孔質膜を含む免疫隔離膜を有し、上記多孔質膜がポリマーを含み、かつ孔径が最小となる層状の緻密部位を膜内に有し、上記緻密部位から上記多孔質膜の一方の表面Ａおよび他方の表面Ｂの双方に向かって厚み方向で孔径が連続的に増加しており、上記表面Ｂ付近の空孔率は６５％以上であり、上記表面Ｂの平均孔径は上記表面Ａの平均孔径より大きく、上記表面Ｂは上記内部側に配置され、上記表面Ｂ同士が対向して上記多孔質膜同士が接合している接合部を有する移植用チャンバー、ならびに上記移植用チャンバーに生物学的構成物が内包されている移植用デバイスが提供される。本発明の移植用チャンバーは、物質透過性の低下が生じにくく、免疫隔離膜同士の接合部の強度が高い。
2019004378.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
移植用チャンバーであって、
内部と外部との境界の少なくとも一部に免疫隔離膜を有し、
前記免疫隔離膜が多孔質膜を含み、
前記多孔質膜がポリマーを含み、
前記多孔質膜が、孔径が最小となる層状の緻密部位を膜内に有し、
前記緻密部位から前記多孔質膜の一方の表面Ａおよび他方の表面Ｂの双方に向かって厚み方向で孔径が連続的に増加しており、
前記表面Ｂ付近の空孔率は６５％以上であり、
前記表面Ｂの平均孔径は前記表面Ａの平均孔径より大きく、
前記表面Ｂは前記内部側に配置されており、
前記表面Ｂ同士が対向して前記多孔質膜同士が接合している接合部を有する
前記移植用チャンバー。
【請求項２】
前記接合が前記ポリマーより低い融点の熱可塑性樹脂を介した融着を用いた接合である請求項１に記載の移植用チャンバー。
【請求項３】
前記熱可塑性樹脂がポリエチレンである請求項２に記載の移植用チャンバー。
【請求項４】
前記緻密部位の平均孔径が０．０２μｍ〜１．５μｍである請求項１〜３のいずれか一項に記載の移植用チャンバー。
【請求項５】
前記表面Ｂの平均孔径が３．０μｍ〜２０μｍである請求項１〜４のいずれか一項に記載の移植用チャンバー。
【請求項６】
前記表面Ａの平均孔径が１．０μｍ〜２．５μｍである請求項１〜５のいずれか一項に記載の移植用チャンバー。
【請求項７】
前記緻密部位が前記多孔質膜の前記表面Ａから前記多孔質膜の厚みの１５％以上５０％未満の距離にある請求項１〜６のいずれか一項に記載の移植用チャンバー。
【請求項８】
前記緻密部位の厚みが０．５μｍ〜３０μｍである請求項１〜７のいずれか一項に記載の移植用チャンバー。
【請求項９】
前記多孔質膜の厚みが１０μｍ〜５０μｍである請求項１〜８のいずれか一項に記載の移植用チャンバー。
【請求項１０】
前記多孔質膜がポリスルホンまたはポリエーテルスルホンと少なくとも１種の親水性ポリマーとを含む請求項１〜９のいずれか一項に記載の移植用チャンバー。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の移植用チャンバーに生物学的構成物が内包されている移植用デバイス。
【請求項１２】
前記生物学的構成物が生理活性物質を放出する請求項１１に記載の移植用デバイス。
【請求項１３】
前記生理活性物質がインスリンである請求項１２に記載の移植用デバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、免疫隔離膜を含む移植用チャンバーおよび上記移植用チャンバーを含む移植用デバイスに関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫隔離は、細胞、組織、器官などの生物学的構成物の移植の際にレシピエントにおける免疫反応を防止する方法の１つであり、免疫隔離膜は、水、酸素およびグルコース等は透過させる一方で、免疫拒絶反応に関与する免疫細胞等の透過を阻止することにより免疫隔離を行なう選択透過性の膜である。例えば、生理活性物質を分泌する細胞の移植にその生理活性物質を透過させる免疫隔離膜を利用した移植用デバイスにより、免疫拒絶反応を防止しながら移植の目的を達成することができる。【０００３】
非特許文献１では、孔径０．４５μｍの細胞保持性の膜と孔径５μｍのポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）の外側膜との積層膜である多孔質膜を用いて形成された市販の移植用チャンバー（ＴｈｅｒａＣｙｔｅ（登録商標）)を用いて移植を行ったことが記載されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Transplantation , 67, 665(1995)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
非特許文献１に記載の移植用チャンバーでは上記積層膜の小さい孔径の細胞保持性の膜の面が内部空間側となる。このように、免疫隔離に必要な最小孔径が免疫隔離膜の表面にある構成は、タンパク質等の吸着に基づく物質透過性の低下が生じやすい。また、移植用チャンバー形成のために免疫隔離膜同士を接合する際、小さい孔径の表面同士を接合することになるが、大きい孔径の表面同士を接合する場合と比較して、接合部の強度が低くなる傾向がある。
本発明は、物質透過性の低下が生じにくく、免疫隔離膜同士の接合部の強度が高い移植用チャンバーおよび移植用デバイスを提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題の解決のために鋭意検討し、物質透過性の低下が生じにくい免疫隔離膜の微細構造を見出し、これを利用して移植用チャンバーを作製して、本発明を完成させた。【０００７】
すなわち、本発明は以下の＜１＞〜＜１３＞を提供するものである。
＜１＞移植用チャンバーであって、
内部と外部との境界の少なくとも一部に免疫隔離膜を有し、
上記免疫隔離膜が多孔質膜を含み、
上記多孔質膜がポリマーを含み、
上記多孔質膜が、孔径が最小となる層状の緻密部位を膜内に有し、
上記緻密部位から上記多孔質膜の一方の表面Ａおよび他方の表面Ｂの双方に向かって厚み方向で孔径が連続的に増加しており、
上記表面Ｂ付近の空孔率は６５％以上であり、
上記表面Ｂの平均孔径は上記表面Ａの平均孔径より大きく、
上記表面Ｂは上記内部側に配置されており、
上記表面Ｂ同士が対向して上記多孔質膜同士が接合している接合部を有する
上記移植用チャンバー。
＜２＞上記接合が上記ポリマーより低い融点の熱可塑性樹脂を介した融着を用いた接合である＜１＞に記載の移植用チャンバー。
＜３＞上記熱可塑性樹脂がポリエチレンである＜２＞に記載の移植用チャンバー。
＜４＞上記緻密部位の平均孔径が０．０２μｍ〜１．５μｍである＜１＞〜＜３＞のいずれかに記載の移植用チャンバー。【０００８】
＜５＞上記表面Ｂの平均孔径が３．０μｍ〜２０μｍである＜１＞〜＜４＞のいずれかに記載の移植用チャンバー。
＜６＞上記表面Ａの平均孔径が１．０μｍ〜２．５μｍである＜１＞〜＜５＞のいずれかに記載の移植用チャンバー。
＜７＞上記緻密部位が上記多孔質膜の上記表面Ａから上記多孔質膜の厚みの１５％以上５０％未満の距離にある＜１＞〜＜６＞のいずれかに記載の移植用チャンバー。
＜８＞上記緻密部位の厚みが０．５μｍ〜３０μｍである＜１＞〜＜７＞のいずれかに記載の移植用チャンバー。
＜９＞上記多孔質膜の厚みが１０μｍ〜５０μｍである＜１＞〜＜８＞のいずれかに記載の移植用チャンバー。
＜１０＞上記多孔質膜がポリスルホンまたはポリエーテルスルホンと少なくとも１種の親水性ポリマーとを含む＜１＞〜＜９＞のいずれかに記載の移植用チャンバー。
＜１１＞＜１＞〜＜１０＞のいずれかに記載の移植用チャンバーに生物学的構成物が内包されている移植用デバイス。
＜１２＞上記生物学的構成物が生理活性物質を放出する＜１１＞に記載の移植用デバイス。
＜１３＞上記生理活性物質がインスリンである＜１２＞に記載の移植用デバイス。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、物質透過性の低下が生じにくく、免疫隔離膜同士の接合部の強度が高い移植用チャンバーを提供することができる。本発明の移植用チャンバーに生物学的構成物を内包した移植用デバイスは、強度が高く長期の使用が可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実施例１、４および比較例１の多孔質膜の孔径分布を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本発明を詳細に説明する。
本明細書において「〜」とはその前後に記載される数値を下限値および上限値として含む意味で使用される。
【００１２】
＜＜移植用チャンバー＞＞
移植用チャンバーは、生物学的構成物をレシピエントに移植するための容器である。移植用チャンバーは、その内部に生物学的構成物を内包することができる。
本発明の移植用チャンバーは内部と外部との境界（移植用チャンバー内部と外部とを隔てる境界）に免疫隔離膜を有する。免疫隔離膜はポリマーを含む多孔質膜を含む。
【００１３】
＜免疫隔離膜＞
本明細書において、免疫隔離膜は免疫隔離のために用いられる膜を意味する。
免疫隔離は移植の際のレシピエントの免疫拒絶反応を防止する方法の一つである。ここで、免疫拒絶反応は、移植される生物学的構成物に対するレシピエントの拒絶反応である。免疫隔離により、レシピエントの免疫拒絶反応から生物学的構成物が隔離される。免疫拒絶反応としては、細胞性免疫応答に基づくものおよび液性免疫応答に基づくものが挙げられる。
【００１４】
免疫隔離膜は酸素、水、グルコース等の栄養分は透過させ、免疫拒絶反応に関与する免疫細胞等の透過を阻止する選択透過性の膜である。免疫細胞としては、マクロファージ、樹状細胞、好中球、好酸球、好塩基球、ナチュラルキラー細胞、各種Ｔ細胞、Ｂ細胞、その他リンパ球が挙げられる。
免疫隔離膜は、用途に応じ、免疫グロブリン（ＩｇＭまたはＩｇＧ等）および補体のような高分子量タンパク質の透過を阻止することが好ましく、インスリンなどの比較的低分子量の生理活性物質を透過させることが好ましい。
【００１５】
免疫隔離膜の選択透過性は用途に応じて調整すればよい。免疫隔離膜は、例えば、分子量５００ｋＤａ以上、１００ｋＤａ以上、８０ｋＤａ以上、または５０ｋＤａ以上などの物質を遮断する選択透過性の膜であればよい。例えば、免疫隔離膜は、抗体の中で最も小さいＩｇＧ（分子量約１６０ｋＤａ）の透過を阻止できることが好ましい。また、免疫隔離膜は、球体としてのサイズとして直径５００ｎｍ以上、１００ｎｍ以上、５０ｎｍ以上、または１０ｎｍ以上などの物質を遮断する選択透過性の膜であればよい。
【００１６】
本発明の移植用チャンバーは、内部と外部との境界に１つ以上の免疫隔離膜を含む。免疫隔離膜は多孔質膜のみからなっていてもよく、またはハイドロゲル膜などの他の層を含んでいてもよい。免疫隔離膜の少なくとも１つの表面は多孔質膜であることが好ましく、免疫隔離膜が多孔質膜からなることも好ましい。
免疫隔離膜の厚みは、特に限定されないが１０μｍ以上であることが好ましい。また、５００μｍ以下であればよく、３００μｍ以下であることが好ましく、２００μｍ以下であることがより好ましく、１００μｍ以下が更に好ましく、５０μｍ以下が特に好ましい。
【００１７】
［多孔質膜］
（多孔質膜の構造）
多孔質膜は複数の孔を有する膜をいう。孔は例えば膜断面の走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）撮影画像または透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）撮影画像で確認することができる。
多孔質膜の厚みは、特に限定されないが、１０μｍ以上であることが好ましい。また、２５０μｍ以下であればよく、２００μｍ以下であることが好ましく、１００μｍ以下であることがより好ましく、５０μｍ以下であることがさらに好ましい。多孔質膜の厚みを１０μｍ以上とすることにより移植用チャンバーがレシピエント内で破損しない膜強度とすることができる。また、多孔質膜の厚みを２５０μｍ以下とすることでレシピエントに不快感を与えない程度の剛性の移植用チャンバーとすることができる。
【００１８】
本発明の移植用チャンバーにおいて、多孔質膜は、孔径が最小となる層状の緻密部位を膜内に有する。また、この緻密部位から多孔質膜の一方の表面Ａおよび他方の表面Ｂの双方に向かって厚み方向で孔径が連続的に増加している。本明細書では、多孔質膜において移植用チャンバーの外部側となる表面を表面Ａ、内部側となる表面を表面Ｂとする。孔径は、後述する膜断面の分割線の平均孔径で判断するものとする。
膜の表面とは主表面（膜の面積を示すおもて面または裏面）を意味し、膜の端の厚み方向の面を意味するものではない。多孔質膜の表面は他の層との界面であってもよい。なお、免疫隔離膜において、多孔質膜は孔径または孔径分布（厚み方向での孔径の差異）などについて膜内方向（膜表面に平行な方向）で一様の構造を有していることが好ましい。
【００１９】
多孔質膜が厚み方向で孔径分布を有することにより、本発明の移植用チャンバーは、寿命を向上させることができる。実質的に異なる孔径の複数の膜を用いて多段階の濾過を行なったような効果が得られ、膜の劣化を防止することができるからである。
【００２０】
孔径は電子顕微鏡によって得られた膜断面の写真から測定すればよい。多孔質膜はミクロトーム等により切断し、断面が観察できる薄膜の切片として、多孔質膜断面の写真を得ることができる。
【００２１】
本明細書において、膜の厚み方向の孔径の比較は、膜断面のＳＥＭ撮影写真を膜の厚み方向に２０分割したときの１９本の分割線における孔径の比較により行なうものとする。分割線と交差するまたは接する孔を連続して５０個以上選択し、それぞれの孔径を測定し、平均値を算出して平均孔径とする。ここで、孔径は、選択された孔が分割線と交差する部分の長さではなく、膜断面のＳＥＭ撮影写真から孔の面積を画像処理により算出し、得られた面積を真円の面積として算出される直径を用いる。このとき、孔が大きく、５０個以上選択できない分割線については、膜断面を得るＳＥＭ撮影写真の視野を広げて５０個測定するものとする。得られた平均孔径を分割線ごとで比較することにより膜の厚み方向の孔径の比較を行なう。
【００２２】
孔径が最小となる層状の緻密部位は、上記膜断面写真における分割線のうちで平均孔径が最小となる分割線を含む多孔質膜の層状の部位をいう。緻密部位は２つ以上の分割線を含んでいてもよい。例えば、最小平均孔径の１．１倍以内の平均孔径を有する連続する分割線が２つ以上連続しているとき、緻密部位はこの連続する２つ以上の分割線を含むものとする。本明細書において、緻密部位の厚みは、緻密部位が含む分割線の数と膜の厚みの２０分の１との積とする。
【００２３】
本明細書において、緻密部位の平均孔径を多孔質膜の最小孔径とする。多孔質膜の最小孔径は０．０２μｍ〜１．５μｍであることが好ましく、０．０２μｍ〜１．３μｍであることがより好ましい。このような多孔質膜の最小孔径で少なくとも通常の細胞の透過を阻止することができるからである。ここで、緻密部位の平均孔径はＡＳＴＭ  Ｆ３１６−８０により測定したものとする。
【００２４】
多孔質膜は、緻密部位を膜内に有する。膜内とは膜の表面に接していないことを意味し、「緻密部位を膜内に有する」とは、緻密部位が、膜のいずれかの表面にもっとも近い上記分割線を含む部位ではないことを意味する。緻密部位を膜内に有する構造の多孔質膜を用いることにより、緻密部位を表面に接して有する多孔質膜を用いた場合よりも、透過させることが意図された物質の透過性が低下しにくい。いかなる理論にも拘泥するものではないが、緻密部位が膜内にあることによりタンパク質の吸着が起こりにくくなるためと考えられる。
【００２５】
緻密部位は、多孔質膜の厚みの中央部位よりもいずれか一方の表面側に偏っていることが好ましい。具体的には、緻密部位は多孔質膜の表面Ａから多孔質膜の厚みの５０％未満の距離にあればよく、４０％以下の距離にあることが好ましく、３５％以下の距離にあることがより好ましい。また、緻密部位は多孔質膜の表面Ａから多孔質膜の厚みの１０％以上の距離にあればよく、１３％以上の距離にあることが好ましく、１５％以上の距離にあることがより好ましく、１５％超の距離にあることがさらに好ましく、２０％以上の距離にあることが特に好ましい。この距離は上述の膜断面写真において判断すればよい。本明細書において、緻密部位がより近い側の多孔質膜の表面を「表面Ｘ」という。表面Ｘは、移植用チャンバーにおいて内部側となる表面にあることが好ましいが、移植用チャンバーにおいて外部側となる表面（表面Ａ）となっていてもよい。
【００２６】
本発明の移植用チャンバーの多孔質膜においては緻密部位から表面Ａおよび表面Ｂの双方に向かって厚み方向で孔径が連続的に増加している。「厚み方向で孔径が連続的に増加」とは、厚み方向に隣り合う上述の分割線の間の平均孔径の差異が、最大平均孔径（最大孔径）と最小平均孔径（最小孔径）の差異の５０％以下、好ましくは４０％以下、より好ましくは３０％以下となるように増加していることをいう。「連続的に増加」は、本質的には、減少がなく一律に増加することを意味するものであるが、減少している部位が偶発的に生じていてもよい。例えば、上記の膜の厚み方向の孔径の比較に用いられる膜断面のＳＥＭ撮影写真の分割線を表面から２つずつ組み合わせたときに、組み合わせた分割線の平均孔径の平均値が、一律に増加（表面から緻密部位に向かう場合は一律に減少）している場合は、「緻密部位から膜の表面に向かって厚み方向で孔径が連続的に増加している」と判断できる。
厚み方向で孔径が連続的に増加する多孔質膜の構造は、例えば後述する製造方法により実現することができる。
【００２７】
本明細書において、上記の膜の厚み方向の孔径の比較に用いられる膜断面のＳＥＭ撮影写真において、多孔質膜の表面Ａに最も近い分割線における上記平均孔径を表面Ａの平均孔径といい、また、表面Ｂに最も近い分割線における上記平均孔径を表面Ｂの平均孔径という。本発明の移植用チャンバーにおいては、表面Ｂの平均孔径は表面Ａの平均孔径より大きい。表面Ｂ、すなわち、移植用チャンバーの内部側となる表面においてより大きい孔径を有することにより、内包される生物学的構成物の吸着などがさらに生じにくくなる。また、大きい孔径を有する表面Ｂ同士を接合することとなるため、多孔質膜同士の接合を強くすることが可能となる。大きい孔径を有する表面を接合すると、接合部材となる接着剤、または融着のために設けられる熱可塑性樹脂が孔の内部に侵入しやすくなるとともに、接合部における接合部材の体積率を高くすることができるため、接合強度が増加するからである。
【００２８】
表面Ｂの平均孔径は、０．１５μｍ〜１００μｍであればよく、１．０μｍ〜５０μｍであることが好ましく、３．０μｍ〜２０μｍであることがより好ましい。表面Ａの平均孔径は、０．０５μｍ〜１０μｍであればよく、０．３μｍ〜５．０μｍであることが好ましく、１．０μｍ〜２．５μｍであることがより好ましい。また、表面Ｂの平均孔径は表面Ａの平均孔径の１．１倍以上であることが好ましく、１．５倍以上であることがより好ましく、２倍以上であることがさらに好ましい。また、８倍以下であることが好ましく、５倍以下であることがより好ましく、３倍以下であることがさらに好ましい。
【００２９】
本明細書において、上記分割線のうちで平均孔径が最大となる分割線のその平均孔径を多孔質膜の最大孔径とする。多孔質膜の最大孔径は０．１５μｍ以上１００μｍ以下であることが好ましく、１．０μｍ〜５０μｍであることがより好ましく、２．０μｍ〜２１μｍであることがさらに好ましい。本発明の移植用チャンバーの多孔質膜においては表面Ｂに最大孔径があることが好ましい。
【００３０】
緻密部位の平均孔径と多孔質膜の最大孔径との比（多孔質膜の最小孔径と最大孔径との比であって最大孔径を最小孔径で割った値、本明細書において「異方性比」ということもある。）は、３以上が好ましく、４以上がより好ましく、５以上がさらに好ましい。緻密部位以外の平均孔径を大きくし、多孔質膜の物質透過性を高くするためである。また、異方性比は、２５以下であることが好ましく、２０以下であることがより好ましい。上記の多段濾過のような効果が、異方性比が２５以下の範囲で効率よく得られるためである。
【００３１】
本発明の移植用チャンバーにおいて、表面Ｂ付近の空孔率は６５％以上である。このような空孔率を有することにより、多孔質膜同士が接合しやすくなる。本明細書において、表面Ｂ付近とは、表面Ｂから多孔質膜の厚みの５分の１の厚みの部分を示す。空孔率は表面Ｂ付近の密度から求めればよく、具体的には、実施例に記載の手順で求められる値である。表面Ｂ付近の空孔率は６７％以上であることが好ましく、７０％以上であることがより好ましい。表面Ｂ付近の空孔率は通常９０％以下である。空孔率を９０％以下とすることで必要な多孔質膜の強度を維持し、レシピエント内で移植用チャンバーが破損したり、孔が大きく変形して血管新生の誘導や選択透過性の低下の原因となったりすることを防止することができる。
【００３２】
（多孔質膜の元素分布）
多孔質膜は、少なくとも一方の表面において、式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たすことが好ましい。
Ｂ／Ａ  ≦  ０．７  （Ｉ）
Ａ  ≧  ０．０１５  （ＩＩ）
式中、Ａは膜の表面におけるＣ元素（炭素原子）に対するＮ元素（窒素原子）の比率を示し、Ｂは同じ表面から３０ｎｍの深さにおけるＣ元素に対するＮ元素の比率を示す。
式（ＩＩ）は多孔質膜の少なくとも一方の表面に一定量以上のＮ元素が存在することを示すものであり、式（Ｉ）は多孔質膜中のＮ元素が表面３０ｎｍ未満に偏在していることを示しているものである。
【００３３】
表面が式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たすことにより、多孔質膜の生体親和性、特に、特に、式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たす表面側の生体親和性が高くなる。
多孔質膜は、いずれか一方のみの表面が、式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たしていてもよく、または両表面が式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たしていてもよいが、両表面が式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たしていることが好ましい。いずれか一方のみの表面が式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たす場合、その表面は、後述の移植用チャンバーにおいて、内側であっても、または外側であってもよいが、内側であることが好ましい。また、いずれか一方のみの表面が式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たす場合であって、多孔質膜が上述の表面Ｘを有しているとき、式（Ｉ）および式（ＩＩ）を満たす表面は表面Ｘであることが好ましい。
【００３４】
本明細書において、膜表面のＣ元素に対するＮ元素の比率（Ａ値）および表面から３０ｎｍの深さにおけるＣ元素に対するＮ元素の比率（Ｂ値）は、ＸＰＳ測定結果を用いて算出したものとする。ＸＰＳ測定はＸ線光電子分光法であり、膜表面にＸ線を照射し、膜表面から放出される光電子の運動エネルギーを計測することで、膜表面を構成する元素の組成を分析する方法である。実施例に記載する単色化Ａｌ−Ｋα線を用いた条件で、スパッタ開始時の結果からＡ値を計算し、スパッタレートから測定した膜の表面から３０ｎｍであると計算される時間の結果からＢ値を計算するものとする。
【００３５】
Ｂ／Ａは０．０２以上であればよく、０．０３以上であることが好ましく、０．０５以上であることがより好ましい。
Ａは０．０５０以上であることが好ましく、０．０８０以上であることがより好ましい。また、Ａは０．２０以下であればよく、０．１５以下であることが好ましく、０．１０以下であることがより好ましい。
Ｂは０．００１〜０．１０であればよく、０．００２〜０．０８であることが好ましく、０．００３〜０．０７であることがより好ましい。
【００３６】
多孔質膜の元素分布、特にＮ元素の分布は、後述する多孔質膜の製造方法において、調温湿風中に含まれる水分濃度、調温湿風を当てる時間、凝固液の温度、浸漬時間、洗浄のためのジエチレングリコール浴の温度、洗浄のためのジエチレングリコール浴への浸漬時間、多孔質製造ラインの速度等によって制御することができる。なお、Ｎ元素の分布は、製膜原液中の含有水分量によっても制御することができる。
【００３７】
（多孔質膜の組成）
多孔質膜はポリマーを含む。多孔質膜は本質的にポリマーから構成されていることが好ましい。
多孔質膜を形成するポリマーは生体適合性であることが好ましい。ここで、「生体適合性」とは、無毒性、非アレルギー誘発性を含む意味であるが、ポリマーが生体内において被包化される性質を含むものではない。
ポリマーは数平均分子量（Ｍｎ）が１，０００〜１０，０００，０００であるものが好ましく、５，０００〜１，０００，０００であるものがより好ましい。
【００３８】
ポリマーの例としては、熱可塑性または熱硬化性のポリマーが挙げられ、熱可塑性のポリマーが好ましい。ポリマーの具体的な例としては、ポリスルホン、酢酸セルロース等のセルロースアシレート、ニトロセルロース、スルホン化ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、ポリフッ化ビニリデン、ポリアクリロニトリル、スチレン−アクリロニトリルコポリマー、スチレン−ブタジエンコポリマー、エチレン−酢酸ビニルコポリマーのケン化物、ポリビニルアルコール、ポリカーボネート、オルガノシロキサン−ポリカーボネートコポリマー、ポリエステルカーボネート、オルガノポリシロキサン、ポリフェニレンオキシド、ポリアミド、ポリイミド、ポリアミドイミド、ポリベンズイミダゾール、エチレンビニルアルコール共重合体、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）等を挙げることができる。これらは、溶解性、光学的物性、電気的物性、強度、弾性等の観点から、ホモポリマーであってもよいし、コポリマーやポリマーブレンド、ポリマーアロイとしてもよい。
これらのうち、ポリスルホン、ポリエーテルスルホン、セルロースアシレートが好ましく、ポリスルホンがより好ましい。
【００３９】
ポリマーとしてポリスルホンまたはポリエーテルスルホンを用いる場合、多孔質膜は、さらに親水性ポリマーを含むことが好ましい。親水性ポリマーの例としては、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等を挙げることができ、これらのうち、ポリビニルピロリドンが好ましい。疎水性であるポリスルホンまたはポリエーテルスルホンを親水性ポリマーと組み合わせることにより、生体適合性を向上させることができる。
【００４０】
多孔質膜は上記成分以外の他の成分を添加剤として含んでいてもよい。
上記添加剤としては、塩化ナトリウム、塩化リチウム、硝酸ナトリウム、硝酸カリウム、硫酸ナトリウム、塩化亜鉛等の無機酸の金属塩、酢酸ナトリウム、ギ酸ナトリウム等の有機酸の金属塩、ポリエチレングリコール等のその他の高分子、ポリスチレンスルホン酸ナトリウム、ポリビニルベンジルトリメチルアンモニウムクロライド等の高分子電解質、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、アルキルメチルタウリン酸ナトリウム等のイオン系界面活性剤等を挙げることができる。添加剤は多孔質構造のための膨潤剤として作用していてもよい。添加剤としては、金属塩を用いることが好ましい。ポリスルホンまたはポリエーテルスルホンを含む多孔質膜は、塩化リチウムを含むことが好ましい。
【００４１】
多孔質膜は単一の層として１つの組成物から形成された膜であることが好ましく、複数層の積層構造ではないことが好ましい。多孔質膜を単一の層として１つの組成物から形成することにより、単純な手順で安価に移植用チャンバーを製造することが可能である。
【００４２】
（多孔質膜の製造方法）
多孔質膜の製造方法は、上述の構造の多孔質膜が形成できる限り、特に限定されず、通常のポリマー膜形成方法をいずれも用いることができる。ポリマー膜形成方法としては延伸法および流延法などが挙げられ、流延法が好ましい。
例えば、流延法においては、製膜原液に用いる溶媒の種類および量や流延後の乾燥方法を調節することにより上述の構造を有する多孔質膜を作製することができる。
【００４３】
流延法を用いた多孔質膜の製造は、例えば以下（１）〜（４）をこの順で含む方法で行なうことができる。
（１）ポリマー、必要に応じて添加剤、および必要に応じて溶媒を含む製膜原液を溶解状態で支持体上に流延する。
（２）流延された液膜の表面に調温湿風を当てる。
（３）調温湿風を当てた後に得られる膜を凝固液に浸漬する。
（４）必要に応じて支持体を剥離する。
【００４４】
調温湿風の温度は、４℃〜６０℃、好ましくは１０℃〜４０℃であればよい。調温湿風の相対湿度は、１５％〜１００％、好ましくは２５％〜９５％であればよい。調温湿風は、０.１ｍ／秒〜１０ｍ／秒の風速で０.１秒間〜３０秒間、好ましくは１秒間〜１０秒間、当てていればよい。 調温湿風は、０.１ｍ／秒〜１０ｍ／秒の風速で０.１秒間〜３０秒間、好ましくは１秒間〜１０秒間、当てていればよい。
緻密部位の平均孔径および位置は、調温湿風中に含まれる水分濃度、調温湿風を当てる時間によって制御することができる。なお、緻密部位の平均孔径は、製膜原液中の含有水分量によっても制御することができる。
【００４５】
上記のように液膜の表面に調温湿風を当てることによって、溶媒の蒸発の制御を行い、液膜の表面から膜内に向かってコアセルベーションを起こすことができる。この状態でポリマーの溶解性が低いがポリマーの溶媒に相溶性を有する溶媒を収容する凝固液に浸漬することによって、上記のコアセルベーション相を微細孔として固定させ微細孔以外の細孔も形成することができる。
【００４６】
上記の凝固液に浸漬する過程において凝固液の温度は−１０℃〜８０℃であればよい。この間で温度を変化させることによって、緻密部位より支持体面側におけるコアセルベーション相の形成から凝固に至るまでの時間を調節し、支持体面側に至るまでの孔径の大きさを制御することが可能である。凝固液の温度を高くすると、コアセルベーション相の形成が早くなり凝固に至るまでの時間が長くなるため、支持体面側へ向かう孔径は大きくなりやすい。一方、凝固液の温度を低くすると、コアセルベーション相の形成が遅くなり凝固に至るまでの時間が短くなるため、支持体面側へ向かう孔径は大きくなりにくい。
【００４７】
支持体としては、プラスチックフィルムまたはガラス板を用いればよい。プラスチックフィルムの材料の例としては、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）などのポリエステル、ポリカーボネート、アクリル樹脂、エポキシ樹脂、ポリウレタン、ポリアミド、ポリオレフィン、セルロース誘導体、シリコーンなどが挙げられる。支持体としてはガラス板またはＰＥＴが好ましく、ＰＥＴがより好ましい。
【００４８】
製膜原液は溶媒を含んでいてもよい。溶媒は使用するポリマーに応じて、使用するポリマーの溶解性が高い溶媒（以下、「良溶媒」ということがある）を用いればよい。良溶媒は、溶媒は凝固液に浸漬した場合速やかに凝固液と置換されるものが好ましい。溶媒の例としては、ポリマーがポリスルホン等の場合、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドあるいはこれらの混合溶媒が挙げられ、ポリマーがポリアクリロニトリル等の場合、ジオキサン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシドあるいはこれらの混合溶媒が挙げられ、ポリマーがポリアミド等の場合にはジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミドあるいはこれらの混合溶媒が挙げられ、ポリマーがセルロースアセテート等の場合はアセトン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、Ｎ−メチル−２−ピロリドンあるいはこれらの混合溶媒が挙げられる。これらのうち、Ｎ−メチル−２−ピロリドンを用いることが好ましい。
【００４９】
製膜原液は良溶媒に加えて、ポリマーの溶解性が低いがポリマーの溶媒に相溶性を有する溶媒（以下、「非溶媒」ということがある）を用いることが好ましい。非溶媒としては、水、セルソルブ類、メタノール、エタノール、プロパノール、アセトン、テトラヒドロフラン、ポリエチレングリコール、グリセリン等が挙げられる。これらのうち、水を用いることが好ましい。
【００５０】
製膜原液としてのポリマー濃度は、５質量％以上３５質量％以下、好ましくは１０質量％以上３０質量％以下であればよい。３５質量％以下であることにより、得られる多孔質膜に十分な透過性（例えば水の透過性）を与えることができ、５質量％以上とすることにより選択的に物質を透過する多孔質膜の形成を担保することができる。添加剤の添加量は添加によって製膜原液の均一性が失われることが無い限り特に制限は無いが、通常溶媒に対して０．５容量％以上１０容量％以下である。製膜原液が非溶媒と良溶媒とを含む場合、非溶媒の良溶媒に対する割合は、混合液が均一状態を保てる範囲であれば特に制限はないが、１．０質量％〜５０質量％が好ましく、２．０質量％〜３０質量％がより好ましく、３．０質量％〜１０質量％がさらに好ましい。
【００５１】
また、ポリスルホンおよびポリエーテルスルホンからなる群より選択されるポリマーとポリビニルピロリドンとを含む多孔質膜を製造するための製膜原液においては、ポリビニルピロリドンは、ポリスルホンおよびポリエーテルスルホンの総質量に対し、５０質量％〜１２０質量％で含まれていることが好ましく、８０質量％〜１１０質量％で含まれていることがより好ましい。さらに、製膜原液が添加剤として塩化リチウムを含むとき、塩化リチウムは、ポリスルホンおよびポリエーテルスルホンの総質量に対し、５質量％〜２０質量％で含まれていることが好ましく、１０質量％〜１５質量％で含まれていることがより好ましい。
【００５２】
凝固液としては、用いられるポリマーの溶解度が低い溶媒を用いることが好ましい。このような溶媒の例としては、水、メタノール、エタノール、ブタノールなどのアルコール類；エチレングリコール、ジエチレングリコールなどのグリコール類；エーテル、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン等の脂肪族炭化水素類；グリセリン等のグリセロール類などが挙げられる。好ましい凝固液の例としては、水、アルコール類またはこれらの２種以上の混合物が挙げられる。これらのうち、水を用いることが好ましい。
【００５３】
凝固液への浸漬の後、使用した凝固液とは異なる溶媒で洗浄を行なうことも好ましい。洗浄は、溶媒に浸漬することにより行なうことができる。洗浄溶媒としてはジエチレングリコールが好ましい。洗浄溶媒としてジエチレングリコールを用い、フィルムを浸漬するジエチレングリコールの温度および浸漬時間のいずれか一方または双方を調節することにより、多孔質膜中のＮ元素の分布を調節できる。特に、多孔質膜の製膜原液にポリビニルピロリドンを用いる場合において、ポリビニルピロリドンの膜への残量を制御することができる。ジエチレングリコールでの洗浄の後さらに、水で洗浄してもよい。
【００５４】
多孔質膜の製造方法については、特開平４−３４９９２７号公報、特公平４−６８９６６号公報、特開平４−３５１６４５号公報、特開２０１０−２３５８０８号公報等を参照することができる。
【００５５】
［他の層］
免疫隔離膜は多孔質膜以外の他の層を含んでいてもよい。
他の層としては、ハイドロゲル膜が挙げられる。ハイドロゲル膜は、生体適合性であるものが好ましく、例としては、アルギン酸ゲル膜、アガロースゲル膜、ポリイソプロピルアクリルアミド膜、セルロースを含む膜、セルロース誘導体（例えばメチルセルロース）を含む膜、ポリビニルアルコール膜などが挙げられる。ハイドロゲル膜としては、アルギン酸ゲル膜が好ましい。アルギン酸ゲル膜の具体例としては、アルギン酸−ポリ−Ｌ−リジン−アルギン酸のポリイオンコンプレックス膜を挙げることができる。
【００５６】
＜移植用チャンバーの構造等＞
免疫隔離膜は移植用チャンバーの内部と外部との境界の少なくとも一部に配置される。このように配置することにより、移植用チャンバーに内包される生物学的構成物を外部に存在する免疫細胞等から保護しつつ、水、酸素、グルコース等の栄養分を移植用チャンバーの外部から内部に取り込むことができる。
【００５７】
免疫隔離膜は移植用チャンバーの内部と外部とを形成する境界の全面に配置されていてもよく、全面に対し、例えば、１〜９９％、５〜９０％、１０〜８０％、２０〜７０％、３０〜６０％、４０〜５０％等の面積に相当する一部に配置されていてもよい。免疫隔離膜は移植用チャンバーの内部と外部との境界の実質的に全面に配置されていることが好ましい。免疫隔離膜が配置される面は１つの連続した部分であってもよく、２つ以上の部分に分かれていてもよい。
免疫隔離膜が移植用チャンバーの内部と外部とを形成する境界の全面に配置されていないとき、残りの部分は、例えば、細胞等に加えて酸素、水、グルコース等の栄養分も透過させない不透過性の膜などの材料で形成されていればよい。
【００５８】
移植用チャンバーは、表面Ｂ同士が対向して多孔質膜同士が接合している接合部を有する。この接合部において、免疫隔離膜同士が接合している。接合している免疫隔離膜の部分は特に限定されないが、免疫隔離膜の端部であることが好ましい。特に、端部同士が接合されていることが好ましい。なお、本明細書において、膜について「端部」というとき、膜の厚みからなる側面（エッジ）に実質的に接する一定幅の外周部分またはその一部を意味する。免疫隔離膜同士は、後述の注入口などを除く外周全てが接合されていることが好ましい。例えば、移植用チャンバーは、２つの免疫隔離膜を対向させてその外周を接合した構成、または、線対称構造の１つの免疫隔離膜が２つ折りにされ、対面した外周を接合した構造であることも好ましい。
【００５９】
接合は接着剤を利用した接着または融着等を用いて行なうことができる。
例えば、表面Ｂ同士を対向させ、硬化性接着剤を用いて接着させることができる。より大きい孔径の表面同士が対向するため、接着剤が孔径の内部に侵入しやすく、接合部における接合部材の体積率が高くなり接合の強度を向上させやすい。接着剤としては、エポキシ系、シリコン系、アクリル系、ウレタン系などの公知の接着剤が挙げられる。
【００６０】
また、表面Ｂ同士を対向させ、多孔質膜の間に熱可塑性の樹脂を挟み、その部分を加熱することにより、両者を接合してもよい。このとき、熱可塑性の樹脂として、多孔質膜に含まれるポリマー（最も多く含まれるポリマー）よりも低い融点の樹脂を用いることが好ましい。接合時に、より低い融点の樹脂を先に融解させ、多孔質膜の孔に侵入させることができるからである。より大きい孔径の表面同士が対向するため、多くの樹脂を孔に侵入させ、接合部における接合部材の体積率を高くすることができる。熱可塑性の樹脂の例として、具体的にはポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリカーボネートなどが挙げられる。中でもポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニル、ポリテトラフルオロエチレンが好ましく、ポリエチレン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニルがより好ましい。
【００６１】
さらに、免疫隔離膜中の多孔質膜同士は両者の間に他の材料を挟まずに、表面Ｂ同士が直接接した状態で融着してもよい。このような融着によっては、挟み込む樹脂などに由来する問題がない移植用チャンバーを得ることができる。また、大きい孔径を有する表面Ｂ同士が直接接した状態で融着することで、接合する深さをより大きくすることができる。ポリスルホンおよびポリエーテルスルホンからなる群より選択されるポリマーを含む多孔質膜を用いる場合、上記ポリマーの融点未満かつガラス転移温度以上の温度に加熱することによって、多孔質膜同士が融着して一体化することができる。融着のための加熱は具体的には、１９０℃以上３４０℃未満であればよく、２３０℃以上３４０℃未満が好ましい。
【００６２】
移植用チャンバーの形態は限定されず、袋、バッグ、チューブ、マイクロカプセル、太鼓などの形態であればよい。例えば、太鼓形態の移植用チャンバーはシリコーンリングの上下に免疫隔離膜を接合させて形成することができる。移植用チャンバーの形状は、後述する移植用デバイスとしての使用の際に、レシピエント内における移植用チャンバーの移動を防止できる形状であることが好ましい。移植用チャンバーの形状の具体例としては、円筒状、円盤状、矩形、卵型、星形、円形などが挙げられる。移植用チャンバーは、シート状、ストランド状、らせん状などであってもよい。移植用チャンバーは、生物学的構成物を内包し、後述の移植用デバイスとした際に初めて上記の形状となるものであってもよい。
【００６３】
移植用チャンバーは、容器としての形状や強度を維持するための生体適合性プラスチック等を含んでいてもよい。例えば、移植用チャンバーの内部と外部との境界が多孔質膜および生体適合性プラスチックからなっていてもよい。または実質的に内部と外部との境界の全面に多孔質膜が配置されている移植用チャンバーは、強度の観点からさらに内部と外部との境界の外側に網状構造の生体適合性プラスチックが配置されていてもよい。
【００６４】
＜注入口＞
移植用チャンバーには、移植用チャンバー内部に生物学的構成物等を注入するための注入口などが設けられていることも好ましい。注入口として、移植用チャンバーの内部に通じるチューブが設けられていてもよい。
チューブは例えば熱可塑性の樹脂を含むものであればよい。熱可塑性の樹脂は多孔質膜のポリマー材料よりも融点が低いものであることが好ましい。
【００６５】
チューブに用いられる熱可塑性の樹脂として、具体的にはポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリカーボネートなどが挙げられる。中でもポリエチレン、ポリプロピレン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニル、ポリテトラフルオロエチレンが好ましく、ポリエチレン、ポリウレタン、ポリ塩化ビニルが特に好ましい。
【００６６】
チューブは、例えば多孔質膜の一部に接するように免疫隔離膜に挟んだ後、上記一部と接合される。接合は熱融着または接着剤を用いた接着等により行うことができる。このうち、熱融着を行うことが好ましい。
熱融着を行う場合、チューブは多孔質膜のポリマー材料よりも融点が低い熱可塑性の樹脂を含むことが好ましい。融点がより低い熱可塑性の樹脂を含むチューブを多孔質膜と熱融着するとき、加熱時にまずチューブ材が溶けて多孔質膜の孔に入り込むことができると考えられるからである。
【００６７】
接着を行う場合、接着剤としては、エポキシ系、シリコン系、アクリル系、ウレタン系などの接着剤を用いることができる。例えば、多孔質膜のポリマー材料よりも融点が低い樹脂材料を含むチューブを用いる場合に、接着による接合を行うことができる。
【００６８】
＜移植用チャンバーの用途＞
移植用チャンバーは生物学的構成物を内包して、生物学的構成物をレシピエントに移植するために用いられる。移植用チャンバーの利用により、移植される生物学的構成物に対するレシピエントの免疫拒絶反応を防止することができる。すなわち、免疫隔離膜はレシピエントの免疫系からの生物学的構成物の保護のために用いることができる。なお、本明細書において、レシピエントは移植を受ける生体を意味する。レシピエントは哺乳動物であることが好ましく、ヒトであることがより好ましい。
【００６９】
［生物学的構成物］
生物学的構成物は、生体由来の構造物を意味する。生体としては、ウイルス、細菌、酵母、真菌細胞、昆虫、植物、および哺乳動物などが挙げられる。生体は通常哺乳動物であることが好ましい。哺乳動物としては、ウシ、ブタ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ヒト等が挙げられる。生物学的構成物は哺乳動物のいずれか由来の構造物であることが好ましい。
【００７０】
生物学的構成物としては、器官、組織、細胞などが挙げられる。生物学的構成物としては、これらのうち、細胞が好ましい。細胞は１つであっても複数であってもよいが複数であることが好ましい。複数の細胞は、互いに分離したものであってもよく、集合体であってもよい。
【００７１】
生物学的構成物は、生体から直接取得したものであってもよい。また、特に生物学的構成物が細胞である場合、生物学的構成物は生体から直接取得したものであってもよく、胚性幹細胞（ＥＳ細胞）、誘導多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）、間葉系幹細胞等の細胞を分化誘導したものであってもよい。細胞は、前駆細胞であってもよい。
【００７２】
生物学的構成物としては、一態様として、生理活性物質を放出するものが好ましい。生理活性物質の例としては、各種ホルモン、各種サイトカイン、各種酵素、その他各種生体内因子が挙げられる。より具体的な例としては、インスリン、ドーパミン、第VIII因子等が挙げられる。
【００７３】
ここで、インスリンとは、２１アミノ酸残基のＡ鎖と３０アミノ酸残基のＢ鎖がジスルフィド結合を介してつながったポリペプチド（分子量約６０００）である。ほ乳類の生体内においてインスリンは、膵臓のランゲルハンス島にあるβ細胞から分泌されている。本発明において生物学的構成物としてインスリン分泌細胞を用いる場合、分泌するインスリンは、ヒト型のインスリンでもよく、その他のほ乳類型（例えばブタ型）のインスリンでもよい。インスリンは遺伝子組み換えの方法により作製されたインスリンでもよい。遺伝子組み換えインスリンの取得方法としては、例えば、門脇孝編：糖尿病ナビゲーター（２７０〜２７１頁、田尾健、岡芳和「現在と将来のインスリン製剤」、メディカルレビュー社、２００２年参照）の記載を参照できる。各種、インスリン類似体（例えば、Ｈ．Ｃ．Ｌｅｅ，Ｊ．Ｗ．Ｙｏｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ、第４０８巻、４８３〜４８８頁、２０００年参照）を用いてもよい。
【００７４】
生物学的構成物はインスリン分泌細胞であることが好ましい。インスリン分泌細胞とは、血糖値変化に応答してインスリンを分泌できる細胞をいう。インスリン分泌細胞としては、特に限定されるものではなく、例えば、膵臓のランゲルハンス島に存在する膵β細胞を挙げることができる。膵β細胞としては、ヒトの膵β細胞でもよく、ブタ、マウスなどの膵β細胞であってもよい。ブタからの膵β細胞の抽出方法は特開２００７−１９５５７３号公報の記載を参考にすることができる。また、インスリン分泌細胞としては、ヒト幹細胞から誘導された細胞（例えば、宮崎純一、再生医療、第１巻、第２号、５７〜６１頁、２００２年参照）、または小腸上皮幹細胞から誘導された細胞（例えば、藤宮峯子ら、再生医療、第１巻、第２号、６３〜６８頁、２００２年参照）であってもよく、インスリンをコードする遺伝子を組み込んだ、インスリン分泌性の細胞であってもよい（例えば、Ｈ．Ｃ．Ｌｅｅ，Ｊ．Ｗ．Ｙｏｏｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ、第４０８巻、４８３〜４８８頁、２０００年参照）。さらに、膵臓のランゲルハンス島であってもよい（例えば、堀洋、井上一知、再生医療、第１巻、第２号、６９〜７７頁、２００２年参照）。
【００７５】
＜＜移植用デバイス＞＞
移植用デバイスは、少なくとも、移植用チャンバーおよび生物学的構成物を含む複合体である。移植用デバイスにおいては、移植用チャンバーに生物学的構成物が内包されている。
移植用デバイスにおいて、移植用チャンバーには、生物学的構成物のみが内包されていてもよく、または、生物学的構成物および生物学的構成物以外の他の構成物または成分が内包されていてもよい。例えば、生物学的構成物はハイドロゲルとともに、好ましくはハイドロゲルに内包された状態で、移植用チャンバーに内包されていてもよい。または、移植用デバイスは、ｐＨ緩衝剤、無機塩、有機溶媒、アルブミンなどのタンパク質、ペプチドを含んでいてもよい。
移植用デバイスにおいて、生物学的構成物は１種のみ含まれていてもよく、２種以上含まれていてもよい。例えば、移植の目的の生理活性物質を放出するか、またはその他の移植の目的の機能を果たす生物学的構成物のみが含まれていてもよく、これらの生物学的構成物の機能を補助する生物学的構成物がさらに含まれていてもよい。
【００７６】
移植用デバイスは例えば腹腔内または皮下などに移植されるものであればよい。または、移植用デバイスは血管接続デバイスであってもよい。例えば、生物学的構成物としてインスリン分泌細胞を用いる場合、血液と膜を直接接するように移植することによって、血糖値変化に対応したインスリン分泌が可能となる。
【００７７】
移植用デバイスおよび移植用チャンバーについては、蛋白質核酸酵素、第４５巻、２３０７〜２３１２頁、（大河原久子、２０００年）、特表２００９−５２２２６９号公報、特表平６−５０７４１２号公報等の記載を参照できる。
【実施例】
【００７８】
以下に実施例と比較例を挙げて本発明の特徴をさらに具体的に説明する。以下の実施例に示す材料、使用量、割合、処理内容、処理手順等は、本発明の趣旨を逸脱しない限り適宜変更することができる。従って、本発明の範囲は以下に示す具体例により限定的に解釈されるべきものではない。【００７９】
＜多孔質膜および移植用チャンバーの作製＞
（実施例１〜７）
ポリスルホン（ソルベイ社製  Ｐ３５００、融点３４０℃）１８質量部、ポリビニルピロリドン（Ｋ−３０）１２質量部、塩化リチウム０．５質量部、水１．０質量部をＮ−メチル−２−ピロリドン６８．５質量部に溶解して製膜原液を得た。この製膜原液を、製品厚みが４５μｍになるように、ＰＥＴフィルム表面に流延した。上記流延した液膜表面に２５℃、相対湿度４０%ＲＨに調節した空気を１ｍ／ｓｅｃの速度で５秒間当てた。その後直ちに３０℃の水を満たした凝固液槽に浸漬した。ＰＥＴを剥離して多孔質膜を得た。その後、２５℃のジエチレングリコール浴に１２０秒間つけ、その後純水でよく洗浄、乾燥し実施例１のポリスルホン（ＰＳＦ）多孔質膜を得た。【００８０】
また、流延する製膜原液の厚み、流延後の調温湿風の温度および相対湿度の調節、および凝固浴温度の調節により、孔径および多孔質膜の厚みを表１に記載の値にそれぞれ制御して同様に膜を作製し、実施例２〜７の多孔質膜を得た。【００８１】
平均孔径がより大きい側の表面が対向するように各多孔質膜を２つに折りたたみ、をポリエチレンフィルム（東洋紡社製 リックス（登録商標）フィルム、５０μｍ）を外縁部のみに挟んで１２０℃で熱融着させ、実施例１〜７の移植用チャンバーを作製した。ここで、表面の平均孔径は後述する分割線のうちの表面に最も近い分割線で判断した。
なお、実施例および比較例において、移植用チャンバーとしたときに外側となる多孔質膜の表面を「表面Ａ」その反対側の表面を「表面Ｂ」とする。【００８２】
（実施例８）
−ポリテトラフルオロエチレンフィルムの作製−
結晶性ポリマーとして数平均分子量が６２０万のポリテトラフルオロエチレンファインパウダー（ダイキン工業株式会社製、「ポリフロン・ファインパウダーＦ１０４Ｕ」、融点３２７℃）１００質量部に、押出助剤として炭化水素油（エッソ石油株式会社製、「アイソパーＭ」）２０質量部を加え、丸棒状になるようにペースト押出しを行った。これを、６０℃に加熱したカレンダーロールにより５０ｍ／分の速度でカレンダー掛けして、ポリテトラフルオロエチレンフィルムを作製した。得られたフィルムを２５０℃の熱風乾燥炉に通して押出助剤を乾燥除去し、平均厚さ１００μｍ、平均幅１５０ｍｍ、比重１．５５のロール状のポリテトラフルオロエチレンフィルムを作製した。【００８３】
−半加熱フィルムの作製−
得られたポリテトラフルオロエチレンフィルムを、５０℃のロール（表面材質ＳＵＳ３１６）上で、タングステンフィラメント内蔵のハロゲンヒーターで近赤外線によりフィルム表面温度が一方の面で３６０℃となる条件を事前に設定した。続いて、１０℃の冷却風を５００Ｌ／分の流量で送風しながら、同条件の近赤外線照射を１分間行い（非対称加熱処理）、半加熱フィルムを作製した。この処理中、フィルムの表面温度は５０℃に保たれていた。【００８４】
−ポリテトラフルオロエチレン多孔質膜の作製−
得られた半加熱フィルムを２７０℃にて長手方向に１２．５倍にロール間延伸し、一旦巻き取りロールに巻き取った。その後、フィルムを３０５℃に予備加熱した後、両端をクリップで挟み、２７０℃で幅方向に３０倍に延伸した。その後、３８０℃で熱固定を行った。得られた延伸フィルムの面積延伸倍率は、伸長面積倍率で２６０倍であった。以上により、実施例８の、膜内に緻密部位を有するポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）多孔質膜を得た。【００８５】
ポリテトラフルオロエチレン多孔質膜を、孔径がより大きい表面を対向させて２つに折りたたみ、その間にポリエチレンフィルム（東洋紡社製 リックス（登録商標）ＬＩＸ−２Ｌ６１０２、５０μｍ、融点１１０℃）を外縁部のみに挟んで外縁部を２００℃で熱融着することで実施例８の移植用チャンバーを作製した。【００８６】
（比較例１）
ポリスルホン（ソルベイ社製  Ｐ３５００）１２質量部、ポリビニルピロリドン（Ｋ−３０）１２質量部、グリセリン１３質量部をＮ−メチル−２−ピロリドン６３質量部に溶解して製膜原液を得た。この製膜原液を、製品厚みが５０μｍになるようにＰＥＴフィルム表面流延した。その後直ちに３０℃の水を満たした凝固液槽に浸漬した。ＰＥＴを剥離して多孔質膜を得た。その後、２５℃のジエチレングリコール浴に１２０秒間つけ、その後純水で良く洗浄、乾燥して、比較例１の、一方の面から孔径が漸増するポリスルホン多孔質膜を得た。
ポリスルホン多孔質膜の孔径がより小さい表面を対向させて２つに折りたたみ、ポリエチレンフィルム（東洋紡社製 リックス（登録商標）フィルム、５０μｍ）を外縁部のみに挟んで１２０℃で熱融着させ比較例１の移植用チャンバーを作製した。【００８７】
（比較例２）
比較例１のポリスルホン多孔質膜２枚を、平均孔径がより小さい表面同士が対向するように積層し、貼り合せにより膜内に緻密部位を有するポリスルホン多孔質膜を得た。
積層したポリスルホン多孔質膜を２つに折りたたみ、外縁部同士を２２０℃で直接熱融着することで比較例２の移植用チャンバーを作製した。【００８８】
＜多孔質膜の構造解析＞
（平均孔径の測定）
得られた各多孔質膜にメタノールを含浸させ、液体窒素中で凍結させた。凍結させた多孔質膜からミクロトーム（Ｌｅｉｃａ社製、ＥＭ  ＵＣ６）で断面観察用の切片を切り出し、ＳＥＭ撮影（日立ハイテクノロジーズ社製、ＳＵ８０３０型ＦＥ−ＳＥＭ）を行なった。ＳＥＭ撮影は３０００倍で行った。それぞれの多孔質膜の断面のＳＥＭ撮影写真を上側から厚み方向に２０分割する分割線を１９本引き、各分割線と交差または接する孔（閉孔）をデジタイザーでなぞり、連続する５０個の孔の平均孔径を求めた。ただし孔が大きく、ＳＥＭ写真の１視野で５０個測定できない場合については、複数の視野を準備して５０個測定した。求めた各分割線の平均孔径を、一方の表面から他方の表面までで順番にプロットし、膜の厚み方向の平均孔径の分布を求めた。実施例１、４および比較例１の多孔質膜の孔径分布を図１に示す。平均孔径が最小の区分を緻密部位とし、この部位の平均孔径は別途ＡＳＴＭ  Ｆ３１６−８０法により測定した。緻密部位の厚みは、最小平均孔径の１．１倍以内の平均孔径を有する分割線の数と膜の厚みの２０分の１との積とした。また、緻密部位の位置を表面Ａからの距離として確認した。この距離は多孔質膜の厚みに対する割合として表１に示した。【００８９】
（空孔率の測定）
得られた各多孔質膜にメタノールを含浸させ、液体窒素中で凍結させた。凍結させた多孔質膜から滑走ミクロトーム（Ｔｈｅｒｍｏ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ社製、ＨＭ４５０）で各多孔質膜の表面に平行に空孔率測定用の切片を切り出した。切片としては、各多孔質膜の、表面Ａから多孔質膜の厚みの５分の１の厚みを切り出した。切り出した切片の質量を電子天秤で測定した。測定された質量、膜厚、面積より、切片の嵩密度を計算した。空孔率は下式で算出した。
空孔率（％）＝（１−嵩密度／真密度）×１００ 
ここで、真密度とは、空孔を有さない多孔質膜を構成する材料の密度を示す。【００９０】
＜多孔質膜の評価＞
（接合部強度（剥離強度））
各多孔質膜の表面Ｂ同士をポリエチレンフィルム（東洋紡社製 リックス（登録商標）フィルム、５０μｍ）を挟んで１２０℃で熱融着させた。熱融着した各多孔質膜（接合部）から２５ｍｍ幅の試料を切り出し、引張り試験機（エー・アンド・ディ社製、テンシロンＲＴＦ２４１０）を用いてＪＩＳ−Ｋ６８５４−３（１９９９）（Ｔ型１８０°剥離試験、移動速度１００ｍｍ／分）に準じて剥離強度を測定した。各多孔質膜について以下の基準で剥離強度を評価した。
Ａ：１０Ｎ／２５ｍｍ以上
Ｂ：５Ｎ／２５ｍｍ以上１０Ｎ／２５ｍｍ未満
Ｃ：５Ｎ／２５ｍｍ未満【００９１】
（老廃物透過性）
老廃物に見立てたポリスチレンラテックス分散液（Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ社製、Ｐｏｌｙｂｅａｄ Ｐｏｌｙｓｔｙｒｅｎ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ）を固形分が０．１質量％、各多孔質膜の緻密部位の平均孔径の４０〜５０％の粒径となるよう調整した液をそれぞれ準備した。各多孔質膜の表面Ｂから、分散液を差圧１０ｋＰａ、１００ｍｌ／ｃｍ２で３回濾過した際の分散液透過性（各回の液透過時間）を測定した。各多孔質膜について以下の基準で評価した。ここで、ｔは（１回目の濾過に要した時間／３回目の濾過に要した時間）を表わす。
Ａ：０．９５＜ｔ≦１
Ｂ：０．９＜ｔ≦０．９５
Ｃ：ｔ≦０．９【００９２】
（血管新生化）
作製した各移植用チャンバーをラット腹腔内に移植し、４週間後に開腹してチャンバーを取り除き、チャンバーと接していたラット表皮内面とチャンバーに隣接するラット表皮内面（対照部位）の血管を観察してそれぞれの血管数を目視で計測した。各移植用チャンバーについて、血管新生化の程度を以下の基準で評価した。
Ａ：対照部位の１．５倍以上の血管数が観察できる
Ｂ：対照部位より血管数は多いが、１．５倍未満
Ｃ：対照部位と有意差なし【００９３】
（層間の剥離試験）
各多孔質膜から幅２０ｍｍ、長さ１００ｍｍの試料を切り出し、Ｕ字折り返し試験機（ユアサシステム機器社製、ＤＬＤＬＭＳ−４Ｕ、半径３ｍｍ、ストローク１０ｍｍ、３Ｈｚ、１００００回、３５℃、８０％ＲＨ）を用いてＪＩＳ−Ｃ５０１６（１９９４）のフレキシブルプリント配線板の耐屈曲性試験法に準じて、繰返し曲げ試験を実施して多孔質膜の界面剥離の有無を観察した。各多孔質膜について以下の基準で評価した。
Ａ：界面の剥離が観察されない
Ｂ：界面の剥離が観察される
以上の構造解析と評価の結果を表１に示す。【００９４】
【表１】
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【図１】
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【国際調査報告】
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