(57)【要約】  一般式（Ｉ）：    【化１】2019088016.tif 000051［式中、２つのＲは、それぞれ独立にＣ１−３アルキル基を示す、または、互いに結合してＣ２−５アルキレン基を形成している基を示し、Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基を示す］で表される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
2019088016.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
2019088016.tif 000049
［式中、
２つのＲは、それぞれ独立にＣ１−３アルキル基を示す、または、互いに結合してＣ２−５アルキレン基を形成している基を示し、
Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基を示す］
で表される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
【請求項２】
一般式（ＩＩ）：
【化２】
2019088016.tif 000050
［式中、
Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基を示す］
で表される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
【請求項３】
Ｎ−（２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
６，６−ジメチル−Ｎ−（ｏ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（５−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２，５−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−ブロモ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−フルオロ−３，６−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、および
Ｎ−（６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド
からなる化合物群から選択される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれか一項に記載の化合物またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する組成物、および、免疫療法剤を有効成分として含有する組成物が、同時にまたは異なる時間に投与されることを特徴とする、医薬組成物。
【請求項５】
請求項１乃至３のいずれか一項に記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、免疫療法剤を有効成分として含有する、医薬組成物。
【請求項６】
免疫療法剤が、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＶＩＳＴＡおよびＢＴＬＡからなる群より選択される免疫チェックポイントを阻害する薬剤、またはＯＸ４０、ＩＬ−１０Ｒ、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７およびＩＣＯＳからなる群より選択される免疫を活性化する薬剤である、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
免疫療法剤が、イピリムマブ、トレメリムマブ、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＪＮＪ−６３７２３２８３、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＬＹ３３０００５４、ＦＡＺ０５３、および、ＭＰＤＬ３２８０Ａからなる群より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
免疫療法剤が、ＡＭ００１０、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、ＭＥＤＩ０５６２、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３、バルリルマブ、ウレルマブ、ウトミルマブ、および、ＭＥＤＩ−５７０からなる群より選択される、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
免疫療法剤が、抗体である、請求項１乃至５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
抗体が、抗ＣＴＬＡ−４抗体または抗ＰＤ−１抗体である、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
抗ＰＤ−１抗体が、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピディリズマブである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
腫瘍を治療または予防するための、請求項１乃至１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、置換ジヒドロピロロピラゾール化合物またはその薬理上許容される塩、および、免疫療法剤が、組み合わせて投与される医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＣＤＫ（サイクリン依存性キナーゼ）は、細胞周期のＤＮＡ合成（Ｓ期）への導入及び分裂期（Ｍ期）等に関与する細胞増殖の制御因子であり、多くの種類が知られている。また、ＣＤＫは、その３次元構造における活性ループ（Ｔループ）のスレオニン残基がリン酸化または脱リン酸化されることにより、その活性化が多段階で制御されている。ＣＤＫの特定のスレオニン残基がリン酸化されると、特定のサイクリンとの複合体を形成し、活性化される。細胞周期制御に重要な本複合体は、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２／サイクリンＡ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ１〜Ｂ３およびＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６／サイクリンＤ１〜Ｄ３、ＣＤＫ２／サイクリンＥを含み、各々、細胞周期の特定の時期に関与している。またＣＤＫ７は、後生動物において、サイクリンＨおよびＭＡＴ１とともにＣＤＫ活性化キナーゼ（ＣＡＫ：ＣＤＫ−ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｋｉｎａｓｅ）を形成しており、細胞周期の進行に必要なＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６）のリン酸化に関与している（非特許文献１参照）。【０００３】
ＣＤＫの異常な活性化による細胞の過増殖は多くのがんに共通する特徴であり、これはがん細胞の細胞周期制御に関わるチェックポイント機能の喪失と関連することが知られている（非特許文献２参照）。また、ＣＤＫは細胞周期制御以外にも機能をもつことが知られており、ＣＤＫ７はＲＮＡポリメラーゼＩＩ（ＲＮＡＰＩＩ）のＣＯＯＨ−ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｄｏｍａｉｎのセリンをリン酸化してＲＮＡＰＩＩのＤＮＡへの結合とｅｌｏｎｏｇａｔｉｏｎを促し転写を正にコントロールすることが知られている（非特許文献３参照）。【０００４】
ＣＤＫ７阻害剤は、種々のがん細胞の細胞増殖試験やマウス担がんモデルに対して効果を示しており、その阻害は抗がん剤として有用であると期待される（特許文献１、非特許文献４、５参照）。【０００５】
癌の特徴である遺伝子的なおよびエピジェネティックな変化は、免疫系が認識し、腫瘍細胞とその健全な同等物を区別するために使用できる抗原をもたらす。原則的に、これは、免疫系が腫瘍を制御するための強力な武器となることができることを意味する。しかし、現実には、免疫系は、通常、腫瘍細胞に対する強力な応答を提供しない。Ｔ細胞の活性化は、細胞膜上に発現する抗原レセプター（ＴＣＲ）を介した刺激と、共役刺激分子群を介した補助刺激により、正や負に制御されている。活性化したＴ細胞は負のフィードバックとして働くＣＴＬＡ−４やＰＤ−１などの分子によって抑制されるが、このしくみを癌細胞が利用し、活性化したＴ細胞を抑制することで、癌細胞は免疫監視機構から逃避し、増殖をし続ける。【０００６】
そのため、癌細胞によるＴ細胞の抑制を回避する方法として、Ｔ細胞上の抑制性共役刺激分子に対する阻害抗体で処理することより、Ｔ細胞活性化を誘導することが癌治療に有効であると考えられ、非特許文献６には、癌治療における新たな標的として、Ｔ細胞の抑制に関わるＰＤ−１（Ｔ細胞上に発現）、ＰＤ−Ｌ１、またはＰＤ−Ｌ２（癌細胞上に発現）に注目し、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、またはＰＤ−Ｌ２を阻害する物質による免疫機能の回復、さらには賦活機構を介した癌細胞の増殖抑制に基づいた抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＰＤ−Ｌ２抗体を含有する免疫療法剤に関する技術が開示されている。【０００７】
免疫療法剤については、近年高い治療効果が認められているが、効果の得られない症例や、十分な効果が認められていない症例もあり（非特許文献７参照）、これらの症例で効果を上げるための新しい方法の開発が課題となっている。【０００８】
上記課題解決の方法の一つとして、様々な併用療法（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ）が実施されている（非特許文献８参照）。ここで、特許文献１には免疫チェックポイント阻害剤とＣＤＫ７阻害剤との組み合わせについて開示されているものの、実際に免疫療法剤とＣＤＫ７阻害剤の併用療法が実施された例はまだ報告されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２０１６／２０４１５３号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２００５，１１８（２０），５１７１−５１８０．
【非特許文献２】Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００９，９，１５３−１６６．
【非特許文献３】Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ  ２００４，１６７７，６４−７３．
【非特許文献４】Ｎａｔｕｒｅ  ２０１４，５１１，６１６−６２０．
【非特許文献５】Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００９，６９，６２０８−６２１５．
【非特許文献６】Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２０１２，３６６，２４４３−２４５４．
【非特許文献７】Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ２０１６，１２６（９），３３４７−３４５２．
【非特許文献８】Ｃｅｌｌ  ２０１７，１６８（４），７０７−７２３．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明者等は、ＣＤＫ７阻害活性を有する置換ジヒドロピロロピラゾール化合物もしくはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする医薬組成物が、腫瘍の治療薬および／または予防薬（好ましくは、治療薬）として有用であることを見出し、本発明を完成させた。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、置換ジヒドロピロロピラゾール化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物（好適には、腫瘍の治療もしくは予防のための医薬組成物）；
腫瘍の治療もしくは予防（好適には、治療）のための医薬組成物を製造するための置換ジヒドロピロロピラゾール化合物またはその薬理上許容される塩、および、免疫療法剤を組み合わせての使用；および
置換ジヒドロピロロピラゾール化合物またはその薬理上許容される塩、および、免疫療法剤の薬剤的な有効量が、組み合わせて温血動物（好適には、ヒト）に投与されることによる、腫瘍の治療もしくは予防（好適には、治療）のための方法を提供する。
上記腫瘍としては、例えば、膀胱癌、乳癌、大腸癌（例えば、結腸直腸癌、例えば結腸腺癌、結腸腺腫）、腎臓癌、表皮癌、肝臓癌、肺癌（例えば、腺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌）、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌（例えば、膵外分泌腫瘍）、胃癌、子宮頚癌、子宮内膜癌、甲状腺癌、鼻の癌、頭頚部癌、前立腺癌、皮膚癌（例えば、扁平上皮癌）、リンパ系の造血器腫瘍（例えば、白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫（例えば、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫）、Ｔ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫）、骨髄系の造血器腫瘍（例えば、急性または慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、前骨髄球性白血病）、甲状腺濾胞癌、間葉系由来の腫瘍（例えば、線維肉腫、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫）、中枢または末端神経系の腫瘍（例えば、星状細胞腫、神経芽腫、神経膠腫、脳腫瘍、シュワン腫）、黒色腫、精上皮腫、奇形腫、骨肉腫、色素性乾皮症、角化棘細胞腫、甲状腺濾胞癌、カポジ肉腫が挙げられる。【００１３】
本発明は、一つの側面から以下の［１］〜［１６］を提供する。
［１］一般式（Ｉ）：
【化１】
2019088016.tif 000003
［式中、
２つのＲは、それぞれ独立にＣ１−３アルキル基を示す、または、互いに結合してＣ２−５アルキレン基を形成している基を示し、
Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基を示す］
で表される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２］一般式（ＩＩ）：
【化２】
2019088016.tif 000004
［式中、
Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基を示す］
で表される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［３］Ｎ−（２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
６，６−ジメチル−Ｎ−（ｏ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（５−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２，５−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−ブロモ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−フルオロ−３，６−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド、および
Ｎ−（６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド
からなる化合物群から選択される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［４］［１］乃至［３］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する組成物、および、免疫療法剤を有効成分として含有する組成物が、同時にまたは異なる時間に投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［５］［１］乃至［３］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、免疫療法剤を有効成分として含有する、医薬組成物。
［６］免疫療法剤が、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＶＩＳＴＡおよびＢＴＬＡからなる群より選択される免疫チェックポイントを阻害する薬剤、またはＯＸ４０、ＩＬ−１０Ｒ、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７およびＩＣＯＳからなる群より選択される免疫を活性化する薬剤である、［１］乃至［５］のいずれかに記載の医薬組成物。
［７］免疫療法剤が、イピリムマブ、トレメリムマブ、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＪＮＪ−６３７２３２８３、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＬＹ３３０００５４、ＦＡＺ０５３、および、ＭＰＤＬ３２８０Ａからなる群より選択される、［１］乃至［５］のいずれかに記載の医薬組成物。
［８］免疫療法剤が、ＡＭ００１０、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、ＭＥＤＩ０５６２、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３、バルリルマブ、ウレルマブ、ウトミルマブ、および、ＭＥＤＩ−５７０からなる群より選択される、［１］乃至［５］のいずれかに記載の医薬組成物。
［９］免疫療法剤が、抗体である、［１］乃至［５］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１０］抗体が、抗ＣＴＬＡ−４抗体または抗ＰＤ−１抗体である、［９］に記載の医薬組成物。
［１１］抗ＰＤ−１抗体が、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピディリズマブである、［１０］に記載の医薬組成物。
［１２］腫瘍を治療または予防するための、［１］乃至［１１］のいずれかに記載の医薬組成物。
［１３］［１］乃至［３］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤を組み合わせて、それを必要とする対象に投与することを含む、腫瘍の治療または予防方法。
［１４］腫瘍の治療剤または予防剤である医薬組成物の製造のための、［１］乃至［３］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤を組み合わせての使用。
［１５］腫瘍を治療または予防するための、［１］乃至［３］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤を組み合わせての使用。
［１６］腫瘍の治療または予防に使用するための、［１］乃至［３］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤の組み合わせ。【００１４】
本発明は、別の側面から以下の［１７］〜［４０］を提供する。
［１７］Ｎ−（２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［１８］６，６−ジメチル−Ｎ−（ｏ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［１９］Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２０］Ｎ−（５−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２１］Ｎ−（２，５−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２２］Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２３］Ｎ−（２−ブロモ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２４］Ｎ−（２−フルオロ−３，６−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２５］Ｎ−（６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２６］Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２７］Ｎ−（６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミドまたはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、
免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２８］［１７］乃至［２７］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する組成物、および、免疫療法剤を有効成分として含有する組成物が、同時にまたは異なる時間に投与されることを特徴とする、医薬組成物。
［２９］［１７］乃至［２７］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、免疫療法剤を有効成分として含有する、医薬組成物。
［３０］免疫療法剤が、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＶＩＳＴＡおよびＢＴＬＡからなる群より選択される免疫チェックポイントを阻害する薬剤、またはＯＸ４０、ＩＬ−１０Ｒ、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７およびＩＣＯＳからなる群より選択される免疫を活性化する薬剤である、［１７］乃至［２９］のいずれかに記載の医薬組成物。
［３１］免疫療法剤が、イピリムマブ、トレメリムマブ、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ、ＪＮＪ−６３７２３２８３、デュルバルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、ＬＹ３３０００５４、ＦＡＺ０５３、および、ＭＰＤＬ３２８０Ａからなる群より選択される、［１７］乃至［２９］のいずれかに記載の医薬組成物。
［３２］免疫療法剤が、ＡＭ００１０、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、ＭＥＤＩ０５６２、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３、バルリルマブ、ウレルマブ、ウトミルマブ、および、ＭＥＤＩ−５７０からなる群より選択される、［１７］乃至［２９］のいずれかに記載の医薬組成物。
［３３］免疫療法剤が、抗体である、［１７］乃至［２９］のいずれかに記載の医薬組成物。
［３４］抗体が、抗ＣＴＬＡ−４抗体または抗ＰＤ−１抗体である、［３３］に記載の医薬組成物。
［３５］抗ＰＤ−１抗体が、ニボルマブ、ペンブロリズマブまたはピディリズマブである、［３４］に記載の医薬組成物。
［３６］腫瘍を治療または予防するための、［１］乃至［１１］のいずれかに記載の医薬組成物。
［３７］［１７］乃至［２７］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤を組み合わせて、それを必要とする対象に投与することを含む、腫瘍の治療または予防方法。
［３８］腫瘍の治療剤または予防剤である医薬組成物の製造のための、［１７］乃至［２７］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤を組み合わせての使用。
［３９］腫瘍を治療または予防するための、［１７］乃至［２７］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤を組み合わせての使用。
［４０］腫瘍の治療または予防に使用するための、［１７］乃至［２７］のいずれかに記載の化合物またはその薬理上許容される塩、および、１以上の免疫療法剤の組み合わせ。【００１５】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物としては、例えば、下記の一般式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、および、（ＩＶ）：
【化３】
2019088016.tif 000005
［式中、Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基を示す］
で表される化合物が挙げられる。これらの中でも、一般式（ＩＩ）で表される化合物が好ましい。【００１６】
本発明の一般式（ＩＩ）で表される化合物の具体例としては、例えば、下記表１乃至１２に示すような化合物を挙げることができる。なお、下記表１乃至表１２中、Ｄは重水素を示し、Ｂｒは臭素原子を示し、Ｃｌは塩素原子を示し、Ｆはフッ素原子を示し、Ｍｅはメチル基を示し、Ｅｔはエチル基を示し、ｎＰｒはｎ−プロピル基を示し、ｉＰｒはイソプロピル基を示し、ｃＰｒはシクロプロピル基を示し、ｔＢｕはｔｅｒｔ−ブチル基を示し、Ｐｈはフェニル基を示し、ＭｅＯはメトキシ基を示す。具体的な例としては、「ＣＦ３」とは、トリフルオロメチル基を示し、「ＣＨＦ２Ｏ」とは、ジフルオロメトキシ基を示し、「ＣＤ３」とは、メチル基を構成する３つの水素原子が重水素原子で置換された基を示し、「１，１−ｄｉＦ−Ｅｔ」とは、エチル基の１位にフッ素原子が２個置換している基、つまり、１，１，−ジフルオロエチル基を意味し、「２，６−ｄｉＦ−Ｐｈ」とは、フェニル基の２位と６位にフッ素原子がそれぞれ置換している基、つまり、２，６−ジフルオロフェニル基を意味し、「２，４−ｄｉＣｌ−６−Ｍｅ−Ｐｈ」とは、フェニル基の２位と４位に塩素原子がそれぞれ置換し、６位にメチル基が置換している基、つまり、２，４−ジクロロ−６−メチルフェニル基を意味し、「ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２」とは、２つのＲが互いに結合して形成される１，４−ブチレン基を意味する。【００１７】
【表１】
2019088016.tif 000006
【００１８】
【表２】
2019088016.tif 000007
【００１９】
【表３】
2019088016.tif 000008
【００２０】
【表４】
2019088016.tif 000009
【００２１】
【表５】
2019088016.tif 000010
【００２２】
【表６】
2019088016.tif 000011
【００２３】
【表７】
2019088016.tif 000012
【００２４】
【表８】
2019088016.tif 000013
【００２５】
【表９】
2019088016.tif 000014
【００２６】
【表１０】
2019088016.tif 000015
【００２７】
【表１１】
2019088016.tif 000016
【００２８】
【表１２】
2019088016.tif 000017
【発明の効果】
【００２９】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬理上許容される塩を含む医薬組成物であって、免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする医薬組成物は、腫瘍の治療薬および／または予防薬として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本発明の一実施形態について、以下に説明する。なお、本明細書中、「一般式（Ｉ）で表される化合物」等を便宜上、それぞれ「化合物（Ｉ）」等ともいう。以下に定義または例示される各種の置換基は、任意に選択して組み合わせることができる。なお、本明細書中において、「置換ジヒドロピロロピラゾール化合物」を「置換ジヒドロピロロピラゾール誘導体」ともいう。
【００３１】
本発明の一実施形態は、一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学上許容される塩含む医薬組成物であって、免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする、医薬組成物である。
【００３２】
＜１．一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学上許容される塩＞
【化４】
2019088016.tif 000018
［式中、
２つのＲは、それぞれ独立にＣ１−３アルキル基を示す、または、互いに結合してＣ２−５アルキレン基を形成している基を示し、
Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基を示す。
【００３３】
本明細書中、「置換されていてもよい」との語は、当該基が無置換のものであってもよく、置換基でさらに置換されたものであってもよいことを意味する。
【００３４】
上記置換基は、１価の基を意味し、例えば、直鎖もしくは分岐Ｃ１−６アルキル基、Ｃ３−６シクロアルキル基、直鎖もしくは分岐Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ３−６シクロアルケニル基、直鎖もしくは分岐Ｃ２−６アルキニル基、Ｃ１−６アルコキシ基、ハロゲン原子、水酸基、シアノ基、オキソ基（＝Ｏ）、アミノ基、Ｃ１−６アルキルアミノ基、ニトロ基、カルボキシ基（−ＣＯＯＨ）、カルバモイル基（−ＣＯＮＨ２）、Ｎ−モノＣ１−６アルキルカルバモイル基、Ｎ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルカルバモイル基（２つのアルキル基は異なっていてもよい）、Ｃ１−６アルカノイルオキシ基（−ＯＣＯＲ４、Ｒ４はＣ１−３アルキル基）、Ｃ６−１０アリール基、および、複素環基が挙げられる。上記置換基は、さらにハロゲン原子、水酸基、アミノ基、シアノ基、オキソ基（＝Ｏ）、直鎖もしくは分岐Ｃ１−６アルキル基、Ｃ１−６アルコキシ基、Ｃ６−１０アリール基、複素環基等で置換されていてもよい。置換基がアミノ基またはカルボキシ基の場合には、その塩の形態であってもよい。
【００３５】
当該基が置換基を２つ以上有する場合には、２つの置換基が互いに結合して環状構造を形成してもよい。２つの置換基が互いに結合して環状構造を形成する場合としては、例えば、シクロプロピル基、メチレンジオキシ基、オキシエチレン基が挙げられる。具体的には、ベンゼン環にメチレンジオキシ基が結合した場合、当該置換基は１，３−ベンゾジオキソール基となり、ベンゼン環にオキシエチレン基が結合した場合、当該置換基は２，３−ジヒドロベンゾフラニル基となる。
【００３６】
本明細書記載の直鎖もしくは分岐Ｃ１−６アルキル基とは、炭素数１乃至６の直鎖もしくは分岐アルキル基を意味する。直鎖もしくは分岐Ｃ１−６アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、１−エチルプロピル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基、ヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、または、２，３−ジメチルブチル基のようなＣ１−６アルキル基が挙げられる、上記置換基は、好ましくは、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基である。
【００３７】
ハロゲン原子で置換されたＣ１−６アルキル基としては、例えば、クロロメチル基、ブロモメチル基、ヨードメチル基、ジフルオロメチル基、ジクロロメチル基、ジブロモメチル基、ジヨードメチル基、トリフルオロメチル基、トリクロロメチル基、１−フルオロエチル基、２−フルオロエチル基、２−クロロエチル基、２−ブロモエチル基、２，２−ジフルオロエチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、ペンタフルオロエチル基、２，２−ジクロロエチル基、２，２，２−トリクロロエチル基、１−フルオロプロピル基、２−フルオロプロピル基、３−フルオロプロピル基、３，３，３−トリフルオロプロピル基、パーフルオロプロピル基、１−フルオロメチルエチル基、１−ジフルオロメチルエチル基、１−トリフルオロメチルエチル基、１−フルオロ−１−メチルエチル基、４−フルオロブチル基、パーフルオロブチル基、５−フルオロペンチル基、パーフルオロペンチル基、６−フルオロヘキシル基、または、パーフルオロヘキシル基が挙げられる。
【００３８】
アリール基で置換されたＣ１−６アルキル基は、例えばＣ７―１１アラルキル基であってもよい。Ｃ７―１１アラルキル基は、合計炭素数７〜１１の、アリール基を有するアルキル基を意味し、例えば、ベンジル基、フェニルエチル基およびナフチルメチル基が挙げられる。
【００３９】
本明細書記載のＣ３−６シクロアルキル基とは、炭素数３乃至６の環状アルキル基を意味する。Ｃ３−６シクロアルキル基としては、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等の単環；ビシクロ［３．１．０］ヘキシル基等の縮合環；スピロ［２．３］ヘキシル基等のスピロ環が挙げられる。上記置換基は、好ましくは、シクロプロピル基、シクロブチル基である。
【００４０】
本明細書記載の直鎖もしくは分岐Ｃ２−６アルケニル基とは、炭素数２乃至６の直鎖もしくは分岐アルケニル基を意味する。直鎖もしくは分岐Ｃ２−６アルケニル基としては、例えば、ビニル基、プロペン−１−イル基、プロペン−２−イル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、１−メチル−１−プロペニル基、２−メチル−１−プロペニル基、１−ペンテニル基、２−ペンテニル基、３−ペンテニル基、４−ペンテニル基、５−ペンテニル基、１−メチル−１−ブテニル基、２−メチル−１−ブテニル基、３−メチル−１−ブテニル基、４−メチル−１−ブテニル基、１−メチル−２−ブテニル基、２−メチル−２−ブテニル基、３−メチル−２−ブテニル基、４−メチル−２−ブテニル基、１−メチル−３−ブテニル基、２−メチル−３−ブテニル基、３−メチル−３−ブテニル基、４−メチル−３−ブテニル基、１，２−ジメチル−１−プロペニル基、１−ヘキセニル基、２−ヘキセニル基、３−ヘキセニル基、４−ヘキセニル基、５−ヘキセニル基、６−ヘキセニル基およびこれらの構造異性体のようなアルケニル基が挙げられる。
【００４１】
本明細書記載のＣ３−６シクロアルケニル基とは、炭素数３乃至６のシクロアルケニル基を意味する。Ｃ３−６シクロアルケニル基としては、例えば、シクロプロペニル基、シクロブテニル基、シクロペンテニル基およびシクロヘキセニル基が挙げられる。
【００４２】
本明細書記載のＣ２−６アルキニル基とは、炭素数２乃至６のアルキニル基を意味する。Ｃ２−６アルキニル基としては、例えば、エチニル基、プロパルギル基、ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基が挙げられる。
【００４３】
本明細書記載のＣ１−６アルコキシ基とは、オキシ基（−Ｏ−）と、当該オキシ基に結合した直鎖もしくは分岐Ｃ１−６アルキル基、または、Ｃ３−６シクロアルキル基からなる基を意味する。Ｃ１−６アルコキシ基としては、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、シクロプロピルオキシ基、ブトキシ基、シクロブチルオキシ基、ペンチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基が挙げられる。
【００４４】
本明細書記載のＣ１−６アルキルアミノ基とは、１個もしくは独立して選択される２個の上記直鎖もしくは分岐Ｃ１−６アルキル基、または、Ｃ３−６シクロアルキル基で置換されたアミノ基を意味する。Ｃ１−６アルキルアミノ基としては、例えば、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、シクロプロピルアミノ基、ブチルアミノ基、シクロブチルアミノ基、ペンチルアミノ基、シクロペンチルアミノ基、ヘキシルアミノ基、シクロヘキシルアミノ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、エチル（メチル）アミノ基、イソプロピル（メチル）アミノ基、シクロプロピル（メチル）アミノ基が挙げられる
【００４５】
本明細書記載のハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、または、ヨウ素原子を意味する。
【００４６】
本明細書記載のＣ６−１０アリール基とは、炭素数６乃至１０のアリール基を意味する。Ｃ６−１０アリール基としては、例えば、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。
【００４７】
本明細書記載の複素環基とは、窒素原子、酸素原子または硫黄原子を少なくとも１つ有する環状基を意味し、芳香族複素環基であってもよく、非芳香族複素環基であってもよい。芳香族複素環基としては、例えば、ピリジン基、ピリミジン基、ピリダジン基、ピラジン基、トリアジン基、ピロール基、イミダゾール基、ピラゾール基、インドール基、インダゾール基、フラン基、ベンゾフラン基、チオフェン基、ベンゾチオフェン基、チアゾール基、イソチアゾール基、オキサゾール基、イソキサゾール基およびオキサジアゾール基が挙げられる。非芳香族複素環基としては、例えば、ピロリジニル基、ピペリジニル基、ピペラジニル基、モルホリニル基およびチオモルホリニル基が挙げられる。
【００４８】
２つのＲが互いに結合してＣ２−５アルキレン基を形成している基とは、上記Ｃ１−６アルキル基のうち、炭素数２乃至５のものに相当するＣ２−５アルキル基から、さらに１つの水素原子を除いてなる２価の基を意味する。Ｃ２−５アルキレン基としては、１，２−エチレン基、１，２−プロピレン基、１，３−プロピレン基、１，２−ブチレン基、１，３−ブチレン基、１，４−ブチレン基、２，３−ブチレン基、１，２−ペンチレン基、１，３−ペンチレン基、１，４−ペンチレン基、１，５−ペンチレン基、２，３−ペンチレン基、２，４−ペンチレン基が挙げられる。
【００４９】
Ｒ１、Ｒ２またはＲ３としての直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基は、炭素数１乃至４の直鎖もしくは分岐アルキル基であり、上記Ｃ１−６アルキル基のうち、炭素数１乃至４のものに相当する。
【００５０】
Ｒ４としてのＣ１−３アルキル基は、炭素数１乃至３のアルキル基であり、上記Ｃ１−６アルキル基のうち、炭素数１乃至３のものに相当する。Ｃ１−３アルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基が挙げられる。
【００５１】
Ａとしてのヘテロアリール基は、上記複素環基のうち、芳香族複素環基に相当する。
【００５２】
本実施形態に係る化合物は、一般式（ＩＩ）、一般式（ＩＩＩ）、または、一般式（ＩＶ）のいずれかの化学式で表される化合物であってもよい。
【００５３】
【化５】
2019088016.tif 000019
一般式（ＩＩ）、一般式（ＩＩＩ）、および、一般式（ＩＶ）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、および、Ａは、一般式（Ｉ）における定義と同じである。
【００５４】
一般式（Ｉ）において、２つのＲは、それぞれ独立にＣ１−３アルキル基であってもよく、互いに結合してＣ２−５アルキレン基を形成している基であってもよい。
【００５５】
一般式（Ｉ）、一般式（ＩＩ）、一般式（ＩＩＩ）、および、一般式（ＩＶ）において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖もしくは分岐Ｃ１−４アルキル基であってもよい。
【００５６】
一般式（Ｉ）、一般式（ＩＩ）、一般式（ＩＩＩ）、および、一般式（ＩＶ）において、Ａは、置換されていてもよいＣ６−１０アリール基、または、置換されていてもよいヘテロアリール基であってもよい。
【００５７】
化合物（Ｉ）としては、化合物（ＩＩ）で表される化合物が好ましい。また、化合物（ＩＩ）の中でも、以下に示す化合物群から選択される化合物が好ましい。
６，６−ジメチル−Ｎ−フェニル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１）
６，６−ジメチル−Ｎ−（ｐ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２５）
Ｎ−（４−メトキシフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−７９）
Ｎ−（４−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−７）
６，６−ジメチル−Ｎ−（ピリジン−３−イル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０１９）
Ｎ−（２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３）
６，６−ジメチル−Ｎ−（ｏ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２１）
６，６−ジメチル−Ｎ−（ｍ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２３）
Ｎ−（［１，１’−ビフェニル］−３−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−７１）
Ｎ−（３−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−５）
Ｎ−（３−クロロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１１）
Ｎ−（２−メトキシフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−７５）
Ｎ−（２−クロロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−９）
Ｎ−（［１，１’−ビフェニル］−２−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６９）
６，６−ジメチル−Ｎ−（ピリジン−２−イル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１００７）
Ｎ−（２−エチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２７）
Ｎ−（２，６−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３８１）
Ｎ−（２，３−ジフルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−９９）
Ｎ−（２，３−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３７５）
Ｎ−（２−フルオロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１２９）
Ｎ−［２−（ジフルオロメトキシ）フェニル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−８７）
Ｎ−（２−エトキシフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−８１）
６，６−ジメチル−Ｎ−（２−（トリフルオロメトキシ）フェニル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−９３）
Ｎ−（２−フルオロ−４−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１２５）
Ｎ−（２，６−ジフルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０５）
Ｎ−［２−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−５７）
６，６−ジメチル−Ｎ−（２−（トリフルオロメチル）フェニル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−５１）
Ｎ−（３−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３５７）
Ｎ−（２−シアノフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６３）
Ｎ−（４−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３５９）
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２１５）
Ｎ−（２−フルオロ−３−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１２３）
Ｎ−（２−フルオロ−５−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１２７）
Ｎ−（５−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３６１）
Ｎ−（２，４−ジフルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０１）
Ｎ−（２，５−ジフルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０３）
Ｎ−（２，５−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３７９）
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１１３）
Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３７７）
３−［１−（エチルジメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−Ｎ−（２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−４）
６，６−ジメチル−Ｎ−（３−メチルイソチアゾール−４−イル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０３５）
６，６−ジメチル−Ｎ−（チオフェン−２−イル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０４３）
６，６−ジメチル−Ｎ−（チオフェン−３−イル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−２，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０４５）
Ｎ−（２，６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６１５）
Ｎ−（２−フルオロ−６−メトキシフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１６１）
Ｎ−［２−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）フェニル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１５３）
Ｎ−（５−クロロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３６７）
Ｎ−（２，５−ジクロロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１９７）
Ｎ−（２−シクロプロピルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３９）
Ｎ−（２，６−ジクロロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１９９）
６，６−ジメチル−Ｎ−（２，４，６−トリフルオロフェニル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−５９９）
Ｎ−（２−エチル−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３８９）
Ｎ−（２−ブロモフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１５）
Ｎ−（２−クロロ−５−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１９１）
Ｎ−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１１１）
６，６−ジメチル−Ｎ−（２，３，６−トリフルオロフェニル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−５９７）
Ｎ−（２−クロロ−６−メトキシフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２４７）
Ｎ−［２−（１，１−ジフルオロエチル）フェニル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−４５）
Ｎ−（６−クロロ−２−フルオロ−３−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６２９）
Ｎ−［２−フルオロ−６−（メトキシ−ｄ３）フェニル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１７７）
Ｎ−［２−クロロ−６−（トリフルオロメチル）フェニル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２３９）
Ｎ−（２−フルオロ−６−メトキシ−３−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６８９）
Ｎ−（２，６−ジフルオロ−３−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６０９）
Ｎ−［２−（ジフルオロメトキシ）−６−フルオロフェニル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１６９）
Ｎ−（２−ブロモ−６−クロロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２０７）
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロ−３−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−７０３）
Ｎ−（２−エチル−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１３７）
Ｎ−（２−ブロモ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１２１）
Ｎ−（２−ブロモ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２９９）
Ｎ−（２−クロロ−５−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２１３）
Ｎ−（６−フルオロ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−９９７）
Ｎ−（２−シアノ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１８５）
Ｎ−（２−クロロ−６−シクロプロピルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２３１）
Ｎ−（２−フルオロ−３，６−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６６９）
Ｎ−（６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０４９）
Ｎ−（２−クロロ−３−フルオロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−７４７）
Ｎ−（２，６−ジクロロ−４−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−７０９）
Ｎ−（２−クロロ−５−メトキシフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２４５）
Ｎ−（６−フルオロ−３−メチルベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０６１）
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０６３）
Ｎ−（６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０５９）
【００５８】
化合物（ＩＩ）の中でも、以下に示す化合物群から選択される化合物がより好ましい。
Ｎ−（２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３）
６，６−ジメチル−Ｎ−（ｏ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２１）
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２１５）
Ｎ−（５−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３６１）
Ｎ−（２，５−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３７９）
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１１３）
Ｎ−（２−ブロモ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２９９）
Ｎ−（２−フルオロ−３，６−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６６９）
Ｎ−（６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０４９）
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０６３）
Ｎ−（６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０５９）
【００５９】
化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩は、単一の光学活性体であってもよく、複数の光学活性体の混合物であってもよい。
【００６０】
化合物（Ｉ）に幾何異性体又は回転異性体が存在する場合、それらの異性体も本発明の範囲に含まれ、また、プロトン互変異性が存在する場合には、それらの互変異性体も本発明に包含される。
【００６１】
本実施形態に係る「薬理上許容される塩」とは、医薬として許容される塩であれば、特に制限はなく、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸との塩；酢酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、クエン酸、酒石酸、アジピン酸、乳酸、トリフルオロ酢酸等の有機カルボン酸との塩；メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸等の有機スルホン酸との塩；リチウム、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩；カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩；アンモニア、モルホリン、グルコサミン、エチレンジアミン、グアニジン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等との四級アンモニウム塩等が挙げられる。
【００６２】
化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩は、水和物、または、溶媒和物を形成することができ、その各々またはそれらの混合物は、本発明に包含される。
【００６３】
化合物（Ｉ）は、構成する原子の一つまたは複数で非天然の比率の原子同位体を含むこともある。原子同位体としては、例えば、重水素（２Ｈ）、トリチウム（３Ｈ）、炭素−１１（１１Ｃ）、炭素−１４（１４Ｃ）、フッ素−１８（１８Ｆ）、硫黄−３５（３５Ｓ）、または、ヨウ素−１２５（１２５Ｉ）などが挙げられる。これらの化合物は、治療または予防剤、研究試薬、例えば、アッセイ試薬、及び診断剤、例えば、インビボ画像診断剤として有用である。化合物（Ｉ）のすべての同位体変種は、放射性であるかどうかにかかわらず、本発明に包含される。
【００６４】
化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩は、例えば、国際公開第２０１６／２０４１５３号に記載された方法によって製造することができる。
【００６５】
＜２．免疫療法剤＞
本実施形態に係る医薬組成物における「免疫療法剤」は、腫瘍の免疫療法において現在用いられている薬剤、または将来用いられ得る薬剤であれば特に限定されない。本明細書中、「免疫療法」とは免疫応答の活性化や免疫応答細胞の増加等を介した免疫賦活療法を意味する。免疫療法剤としては、例えば、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ等の免疫チェックポイントを阻害ずる薬剤（免疫チェックポイント阻害剤）；ＯＸ４０、ＩＬ−１０Ｒ、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ等を刺激し免疫を活性化する薬剤（免疫活性化剤）が挙げられる。
【００６６】
上記免疫チェックポイント阻害剤の具体例としては、例えば、イピリムマブ（ｉｐｉｌｉｍｕｍａｂ）、トレメリムマブ（ｔｒｅｍｅｌｉｍｕｍａｂ）、ニボルマブ（ｎｉｖｏｌｕｍａｂ）、ペンブロリズマブ（ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、ピディリズマブ（ｐｉｄｉｌｉｚｕｍａｂ）、ＪＮＪ−６３７２３２８３、デュルバルマブ（ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ；ＭＥＤＩ４７３６）、アテゾリズマブ（ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ；ＲＧ７４４６）、アベルマブ（ａｖｅｌｕｍａｂ；ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）、ＢＭＳ−９３６５５９、ＬＹ３３０００５４、ＦＡＺ０５３、ＭＰＤＬ３２８０Ａが挙げられる。
【００６７】
上記免疫活性化剤の具体例としては、例えば、ＡＭ００１０、ＧＳＫ３１７４９９８、ＭＯＸＲ０９１６、ＰＦ−０４５１８６００、ＭＥＤＩ０５６２、ＴＲＸ５１８、ＭＥＤＩ１８７３、バルリルマブ（ｖａｒｌｉｌｕｍａｂ）、ウレルマブ（ｕｒｅｌｕｍａｂ）、ウトミルマブ（ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ）、ＭＥＤＩ−５７０が挙げられる。
【００６８】
本実施形態に係る医薬組成物における「免疫療法剤」は、抗体であってもよい。このような抗体としては、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＰＤ−１抗体が好ましく、抗ＰＤ−１抗体（例えば、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ピディリズマブ）がより好ましい。
【００６９】
本実施形態に係る医薬組成物における「免疫療法剤」は、１種単独を用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００７０】
＜３．一般式（Ｉ）で表される化合物またはその薬学上許容される塩を含む医薬組成物であって、免疫療法剤と組み合わせて投与されることを特徴とする医薬組成物＞
本実施形態に係る医薬組成物は、具体的には、
（ｉ）化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する組成物、および、免疫療法剤を有効成分として含有する組成物が、同時にまたは異なる時間に投与されることを特徴とする医薬組成物であってもよく、または、
（ｉｉ）化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩、および、免疫療法剤を有効成分として含有する医薬組成物であってもよい。
【００７１】
上記（ｉ）の医薬組成物において、化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する組成物、および、免疫療法剤を有効成分として含有する組成物の投与時期に限定はなく、上記各組成物は、同時に、または異なる時間に投与され得る。上記（ｉ）の医薬組成物において、化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する組成物、および免疫療法剤を有効成分として含有する組成物の一方を投与してから他方を投与するまでの期間に限定はないが、一方の薬理効果が残存する一定期間（例えば、１週間、好適には、２または３日間、より好適には、１日間、さらに好適には、２から６時間、さらにより好適には、１時間）内に他方を投与するのが好ましい。
【００７２】
化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩、および免疫療法剤は、必要に応じて、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、コーティング剤、安定化剤、等張化剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、可溶化剤、増粘剤、保存剤、抗酸化剤、甘味料、着色剤、香料等を添加して、医薬組成物として使用することができる。本実施形態に係る医薬組成物は、例えば、第十六改正日本薬局方  製剤総則等に記載の公知の方法により、目的に合わせて適宜調製することができる。
【００７３】
本実施形態に係る医薬組成物における、化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩の含有量、および免疫療法剤の含有量は、適宜調整することができる。
【００７４】
本実施形態に係る医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の経口投与用製剤、注射剤（例えば、静脈内投与、皮下投与、筋肉内投与、腹腔内投与）、点眼剤、点鼻剤、座剤、軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、スプレー剤、貼付剤、吸入剤、経皮吸収製剤等の非経口投与用製剤、およびこれらの組み合わせ等、第十六改正日本薬局方  製剤総則に記載の剤形とすることができる。
【００７５】
本実施形態に係る医薬組成物において、化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩、および免疫療法剤は、それぞれ別異の製剤に有効成分として含有されてもよく、また、双方が、単一の製剤（配合剤）に有効成分として含有されてもよい。
【００７６】
賦形剤としては、例えば、乳糖、マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸、炭酸カルシウムおよびリン酸水素カルシウムが挙げられ、滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクが挙げられる。結合剤としては、例えば、デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびポリビニルピロリドンが挙げられ、崩壊剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびクエン酸カルシウムが挙げられる。コーティング剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、マクロゴールおよびシリコーン樹脂が挙げられ、安定化剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸エチルおよびベンジルアルコールが挙げられる。
【００７７】
等張化剤としては、例えば、グリセリン、プロピレングリコール、塩化ナトリウム、塩化カリウム、ソルビトール、マンニトール等が挙げられ、緩衝剤としては、ホウ酸、ホウ酸塩、リン酸、リン酸塩、クエン酸、クエン酸塩、酢酸、酢酸塩、ε−アミノカプロン酸、トロメタモール等が挙げられ、ｐＨ調節剤としては、例えば、塩酸、クエン酸、リン酸、氷酢酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等が挙げられる。また、可溶化剤としては、例えば、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、マクロゴール４０００、精製大豆レシチン、ポリオキシエチレン（１６０）ポリオキシプロピレン（３０）グリコール等が挙げられ、増粘剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等のセルロース系高分子、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。安定化剤としては、例えば、エデト酸、エデト酸ナトリウム等が挙げられ、保存剤としては、例えば、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸プロピル、クロロブタノール等が挙げられる。
【００７８】
軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤、および、スプレー剤等の経皮投与用医薬組成物が含んでいてもよい成分としては、例えば、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、サリチル酸エチレングリコール、ピロチオデカン等の吸収促進剤；アジピン酸ジイソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、セバシン酸ジエチル、ラルリン酸ヘキシル、イソオクタン酸セチル等の脂肪酸エステル；セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ヘキサデシルアルコール、ベヘニルアルコール等の脂肪族アルコール；プロピレングリコール、プロピレンジオール、ポリエチレングリコール、ジプロピレングリコール等のグリコール類；ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油等の界面活性剤等が挙げられる。
【００７９】
化合物（Ｉ）またはその薬理上許容される塩の投与量、および免疫療法剤の投与経路、ならびに投与量は、症状、年齢、剤型等により適宜調整することができる。例えば、経口投与の場合、それぞれの有効成分を、通常１日当たり０．０１乃至２０００ｍｇ、好ましくは１乃至５００ｍｇを１回又は数回に分けて投与することができる。
【００８０】
軟膏剤、ローション剤、クリーム剤、または、ゲル剤であれば、それぞれの有効成分が、通常０．００００１％（ｗ／ｖ）乃至１０％（ｗ／ｖ）、好ましくは０．００１％（ｗ／ｖ）乃至５％（ｗ／ｖ）の濃度になるように調整したものを１回又は数回に分けて投与することができる。
【００８１】
本実施形態に係る医薬組成物は、腫瘍を治療または予防するために好適に用いられる。上記腫瘍の例としては、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病、血液腫瘍、血液悪性疾患、小児白血病、小児リンパ腫、ホジキン病、リンパ球性リンパ腫、皮膚性リンパ腫、急性白血病、慢性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄球性白血病、慢性骨髄球性白血病、形質細胞新生物、リンパ球様新生物、エイズ関連癌等の血液がん；膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌、肝臓癌、肺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、頭部および頸部の癌、食道癌、胆嚢癌、卵巣癌、膵臓癌、胃癌、子宮頚癌、甲状腺癌、前立腺癌、扁平上皮癌を含む皮膚の癌、線維肉腫、横紋筋肉腫、星状細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫および神経鞘腫、黒色腫、精上皮腫、奇形癌、骨肉腫、色素性乾皮症、角化棘細胞腫、甲状腺濾胞状癌、カポジ肉腫等の固形癌が挙げられる。
【実施例】
【００８２】
以下に、本実施形態に係る化合物またはその薬学上許容される塩について、製造例（製造例１乃至１１）、参考例（参考例１乃至１５）、および、試験例（試験例１乃至４）を示して本発明を更に詳細に説明するが、これらの例示は本発明をよりよく理解するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。【００８３】
分取カラムクロマトグラフィーによる精製には、以下の装置を使用した。
装置１：ＥＰＣＬＣ−Ｗ−Ｐｒｅｐ  ２ＸＹ  Ａ−Ｔｙｐｅ（ＹＡＭＡＺＥＮ社製、商品名）
装置２：Ｐｕｒｉｆ（登録商標）−ｃｏｍｐａｃｔ（Ｍｏｒｉｔｅｘ社製、商品名）
装置３：Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  分取システム（島津製作所社製、商品名）【００８４】
また、分取カラムクロマトグラフィーによる精製で使用した、固定相は以下のものである。
ＤＩＯＬシリカゲル：ＣＨＲＯＭＡＴＯＲＥＸ（商品名）ＤＩＯＬ  ＭＢ  １００−４０／７５（富士シリシア化学社製）
ＤＮＨシリカゲル：ＣＨＲＯＭＡＴＯＲＥＸ（商品名）ＤＮＨ  ＭＢ  １００−４０／７５（富士シリシア化学社製）
ＯＤＳシリカゲル：ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  Ｐｒｅｐ（商品名）、粒子径：５μｍ，ＯＢＤ，サイズ：１９×１５０ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ社製）
ＣＳＨ  ＯＤＳシリカゲル：ＸＳｅｌｅｃｔ  ＣＳＨ  Ｃ１８  Ｐｒｅｐ（商品名）、粒子径：５μｍ，ＯＢＤ，サイズ：１９×１５０ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ社製）
Ｆｌｕｏｒｏ−ｐｈｅｎｙｌシリカゲル：ＸＳｅｌｅｃｔ  ＣＳＨ  Ｐｒｅｐ  Ｆｌｕｏｒｏ−ｐｈｅｎｙｌ（商品名）、粒子径：５μｍ，ＯＢＤ，サイズ：１９×１５０ｍｍ（Ｗａｔｅｒｓ社製）【００８５】
同位体の存在によりマススペクトルの値が複数観測される場合は、ｍ／ｚが最小のもののみ記載した。マススペクトルのイオン化モードのＤＵＩＳとは、ＥＳＩとＡＰＣＩのミックスモードである。【００８６】
１Ｈ−ＮＭＲは、特記しない限り、テトラメチルシランを内部標準（０ｐｐｍ）とする化学シフト（δ）で表示され、カップリング定数（Ｊ値）はＨｚ単位で表記する。また、各ピークの分裂パターンの略号は、次のとおりの意味である。ｓ：シングレット、ｄ：ダブレット、ｔ：トリプレット、ｑ：カルテット、ｂｒ  ｓ：ブロードシングレット、ｍ：マルチプレット。【００８７】
製造例、参考例及び試験例中に記載される略号は、通常、有機化学、薬学の分野で一般的に使用される意味で使用される。各略号は、具体的には、以下のように当業者に理解されるものである。
ＡＴＰ：アデノシン三リン酸
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｃｂｚ：ベンジルオキシカルボニル
ＣＩ：化学イオン化
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＡ：ジフェニルフォスフォニルアジド
ＤＴＴ：ジチオスレイトール
ＤＵＩＳ：デュアルイオンソース
Ｅｔ：エチル
ＦＢＳ：ウシ胎児血清
ＨＥＰＥＳ：Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸
ＭＢＰ：ミエリン塩基タンパク
ＮＡＤＰＨ：ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸
ＰＢＭＣ：末梢血単核球
ＰＢＳ：リン酸緩衝塩化ナトリウム水溶液
ＴＢＳ：ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
Ｔｒｉｓ：トリスヒドロキシメチルアミノメタン【００８８】
（製造例１）
Ｎ−（２−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３）
【化６】
2019088016.tif 000020
参考例４と同様にして合成したエチル  ５−（クロロカルボニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート１１８ｍｇ（０．２６７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン２ｍｌ溶液に、窒素雰囲気下、ＤＩＰＥＡ０．１５ｍｌ（０．８６ｍｍｏｌ）、２−フルオロアニリン０．０８０ｍｌ（０．８３ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら９０℃で９時間反応させた。次いで、反応液を室温まで冷却し、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．１５ｍｌ（１．４ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で２．５時間反応させた。
反応終了後、反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸水素カリウム水溶液で洗浄した。有機層と水層を分液した後、水層を酢酸エチルで２回抽出した。得られた全有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置２，ＤＩＯＬシリカゲル、溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝７０：３０→５０：５０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を酢酸エチルに溶解させた後、ｎ−ヘキサンを加えて析出させた固体を濾取し、ｎ−ヘキサンで洗浄してから減圧乾燥することにより、標記化合物６２．２ｍｇ（収率５３％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４４４［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.27 & 11.85 (br s, total 1H), 9.80 - 9.50 (m, 1H), 7.91 - 7.69 (m, 1H), 7.68 - 7.47 (m, 1H), 7.24 - 7.03 (m, 3H), 4.74 - 4.51 (m, 2H), 2.56 - 2.39 (m, 2H), 2.28 - 2.13 (m, 2H), 1.93 - 1.74 (m, 2H), 1.72 - 1.57 (m, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００８９】
（製造例２）
６，６−ジメチル−Ｎ−（ｏ−トリル）−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２１）
【化７】
2019088016.tif 000021
参考例４と同様にして合成したエチル  ５−（クロロカルボニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート１１７ｍｇ（０．２６５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン２ｍｌ溶液に、窒素雰囲気下、ＤＩＰＥＡ０．１５ｍｌ（０．８６ｍｍｏｌ）、ｏ−トルイジン０．０９０ｍｌ（０．８４ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら９０℃で５時間反応させた。次いで、反応液を室温まで冷却し、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．１５ｍｌ（１．４ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で１．５時間反応させた。
反応終了後、反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸水素カリウム水溶液で洗浄した。有機層と水層を分液した後、水層を酢酸エチルで２回抽出した。得られた全有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濾過し、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置２，ＤＩＯＬシリカゲル、溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝７０：３０→５０：５０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を酢酸エチルに溶解させた後、ｎ−ヘキサンを加えて析出させた固体を濾取し、ｎ−ヘキサンで洗浄してから減圧乾燥することにより、標記化合物９７．７ｍｇ（収率８４％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４４０［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.26 & 11.83 (br s, total 1H), 9.73 - 9.49 (m, 1H), 7.76 - 7.54 (m, 1H), 7.34 - 7.21 (m, 1H), 7.19 - 7.07 (m, 2H), 7.02 (dt, J = 1.2, 7.4 Hz, 1H), 4.71 - 4.52 (m, 2H), 2.54 - 2.40 (m, 2H), 2.27 - 2.12 (m, 5H), 1.93 - 1.73 (m, 2H), 1.72 - 1.54 (m, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００９０】
（製造例３）
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２１５）
【化８】
2019088016.tif 000022
参考例４と同様にして合成したエチル  ５−（クロロカルボニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート２００ｍｇ（０．４５４ｍｍｏｌ［純度を１００％とした場合の計算値］）の１，４−ジオキサン３ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、ＤＩＰＥＡ０．３９ｍｌ（２．３ｍｍｏｌ）、２−クロロ−６−メチルアニリン０．１６ｍｌ（１．４ｍｍｏｌ）を室温で加え、マイクロウェーブ反応装置にて１２０℃で０．５時間反応させた後、１５０℃で２時間反応させた。次いで、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．２１ｍｌ（２．３ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で２時間反応させた。
反応終了後、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた全有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝７０：３０→５０：５０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，溶出溶媒；１，２−ジクロロエタン：メタノール＝９９：１→９２：８（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置３，ＯＤＳシリカゲル，溶出溶媒；アセトニトリル：１ｍＭリン酸二水素カリウム水溶液＝５０：５０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮してアセトニトリルを留去した。得られた濃縮液を酢酸エチルで抽出し、次いで全有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣に酢酸エチルを加えて溶解した後、ｎ−ヘキサンを加えて析出させた固体を濾取し、減圧乾燥することにより、標記化合物２３．６ｍｇ（収率１１％［原料の純度を１００％とした場合の計算値］）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４７４［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.26 & 11.73 (br s, total 1H), 9.58 (s, 1H), 7.81 (br s, 1H), 7.30 (dd, J = 1.3, 7.8 Hz, 1H), 7.23 - 7.11 (m, 2H), 4.61 (br s, 2H), 2.56 - 2.41 (m, 2H), 2.27 - 2.12 (m, 5H), 1.90 - 1.73 (m, 2H), 1.64 (s, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００９１】
（製造例４）
Ｎ−（５−フルオロ−２−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３６１）
【化９】
2019088016.tif 000023
参考例３と同様にして合成したエチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート１０３ｍｇ（０．２７３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン２ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、５−フルオロ−２−メチルフェニルイソシアナート０．０８５ｍｌ（０．６６ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で１時間反応させた。次いで、反応液を氷冷し、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．１４０ｍｌ（１．２９ｍｍｏｌ）を加えた後、撹拌しながら０℃で１６時間反応させた。
反応終了後、反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸水素カリウム水溶液で洗浄した。有機層と水層を分液した後、水層を酢酸エチルで２回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１００：０→５０：５０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置３，ＯＤＳシリカゲル，溶出溶媒；アセトニトリル：１ｍＭリン酸二水素カリウム水溶液＝４０：６０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分に酢酸エチルを加えて抽出した。得られた有機層を水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣にメタノールを加えて溶解させた後、水を加えて析出させた固体を濾取し、減圧乾燥することにより、標記化合物４２．７ｍｇ（収率３４％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４５８［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.28 & 11.78 (br s, total 1H), 9.60 (br s, 1H), 7.79 - 7.50 (m, 1H), 7.38 - 7.11 (m, 2H), 6.83 (dt, J = 2.8, 8.4 Hz, 1H), 4.63 (br s, 2H), 2.58 - 2.39 (m, 2H), 2.27 - 2.12 (m, 5H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.66 (s, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００９２】
（製造例５）
Ｎ−（２，５−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−３７９）
【化１０】
2019088016.tif 000024
参考例３と同様にして合成したエチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート１０３ｍｇ（０．２７３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン３ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、２，５−ジメチルフェニルイソシアナート０．０６０ｍｌ（０．４３ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で０．５時間反応させた。次いで、反応液にＮ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．１５０ｍｌ（１．３８ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に５％硫酸水素カリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた全有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置２，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９０：１０→６０：４０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置３，ＯＤＳシリカゲル，溶出溶媒；アセトニトリル：１ｍＭリン酸水素二カリウム水溶液＝６５：３５（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた後、酢酸エチルで抽出した。得られた全有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥して、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣にジクロロメタンを加えて溶解させた後、ｎ−ヘキサンを加えて析出させた固体を濾取し、減圧乾燥することにより、標記化合物６０．２ｍｇ（収率４９％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４５４［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.25 & 11.78 (br s, total 1H), 9.67 - 9.49 (m, 1H), 7.67 - 7.45 (m, 1H), 7.19 - 7.06 (m, 1H), 7.03 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 1.3, 7.6 Hz, 1H), 4.67 - 4.50 (m, 2H), 2.57- 2.38 (m, 2H), 2.27 - 2.09 (m, 8H), 1.91 - 1.72 (m, 2H), 1.65 (br s, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００９３】
（製造例６）
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１１３）
【化１１】
2019088016.tif 000025
参考例４と同様にして合成したエチル  ５−（クロロカルボニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート３９２ｍｇ（０．８９０ｍｍｏｌ［純度を１００％とした場合の計算値］）の１，４−ジオキサン２．５ｍｌ溶液に、窒素雰囲気下、ＤＩＰＥＡ０．６０ｍｌ（３．４ｍｍｏｌ）、２−クロロ−６−フルオロアニリン８０７ｍｇ（５．５４ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら１００℃で１時間反応させた後、マイクロウェーブ反応装置にて１３０℃で０．５時間、更に１５０℃で２時間反応させた。次いで、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．５０ｍｌ（４．６ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で１．５時間反応させた。
反応終了後、反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸水素カリウム水溶液で洗浄した。有機層と水層を分液した後、水層を酢酸エチルで２回抽出した。得られた全有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置２，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝８０：２０→６５：３５→５０：５０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置２，シリカゲル，溶出溶媒；ジクロロメタン：メタノール＝１００：０→９９：１→９８：２→９７：３（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮し、白色固体（約７０ｍｇ）を得た。得られた固体を分取カラムクロマトグラフィー（装置３，ＯＤＳシリカゲル，溶出溶媒；アセトニトリル：１ｍＭリン酸水素二カリウム水溶液＝５０：５０→８０：２０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮してアセトニトリルを留去した。得られた濃縮残渣を酢酸エチルで３回抽出し、次いで全有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を酢酸エチルに溶解させた後、ｎ−ヘキサンを加えて析出させた固体を濾取し、ｎ−ヘキサンで洗浄してから減圧乾燥することにより、標記化合物５７．１ｍｇ（収率１３％［原料の純度を１００％とした場合の計算値］）を白色固体として得た。マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４７８［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.27 & 11.69 (br s, total 1H), 9.64 - 9.54 (m, 1H), 8.09 - 7.89 (m, 1H), 7.38 - 7.19 (m, 3H), 4.69 - 4.52 (m, 2H), 2.56 - 2.39 (m, 2H), 2.28 - 2.13 (m, 2H), 1.93 - 1.73 (m, 2H), 1.70 - 1.54 (m, 6H), 0.15 - 0.04 (m, 9H)。【００９４】
（製造例７）
Ｎ−（２−ブロモ−６−メチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−２９９）
【化１２】
2019088016.tif 000026
２−ブロモ−６−メチル安息香酸３４０ｍｇ（１．５８ｍｍｏｌ）の脱水トルエン２ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、ＤＩＰＥＡ０．３００ｍｌ（１．７２ｍｍｏｌ）、ＤＰＰＡ０．３４０ｍｌ（１．５８ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で０．５時間、次いで１００℃で１時間反応させた。反応液を冷ました後、参考例３と同様にして合成したエチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート５００ｍｇ（１．３２ｍｍｏｌ）の脱水トルエン２ｍｌ溶液を室温で加え、撹拌しながら室温で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１００：０〜６０：４０（Ｖ／Ｖ））に付し、エチル  ５−［（２−ブロモ−６−メチルフェニル）カルバモイル］−６,６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラートを含む画分を減圧濃縮した。
アルゴン雰囲気下、得られた濃縮残渣の脱水ジクロロメタン２ｍｌ溶液にＮ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．３４０ｍｌ（３．１２ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で０．５時間反応させた。
反応終了後、反応液に５％硫酸水素カリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。得られた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１００：０〜６０：４０（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を含水アセトニトリルに溶解させ、凍結乾燥することにより、標記化合物５０７ｍｇ（収率７４％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：５１８［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.25 & 11.75 (br s, total 1H), 9.57 (s, 1H), 7.82 (br s, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 1H), 4.61 (br s, 2H), 2.56 - 2.41 (m, 2H), 2.27 - 2.13 (m, 5H), 1.89 - 1.74 (m, 2H), 1.64 (s, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００９５】
（製造例８）
Ｎ−（２−フルオロ−３，６−ジメチルフェニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−６６９）
【化１３】
2019088016.tif 000027
参考例８と同様にして合成した２−フルオロ−３，６−ジメチル安息香酸２６７ｍｇ（１．５９ｍｍｏｌ）のトルエン８ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、ＤＩＰＥＡ０．３１３ｍｌ（１．８０ｍｍｏｌ）、ＤＰＰＡ０．３５３ｍｌ（１．６４ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で０．５時間、次いで１００℃で１時間反応させた。反応液を冷ました後、参考例３と同様にして合成したエチル ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート４００ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ）のトルエン２ｍｌ溶液を０℃で加え、撹拌しながら０℃で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９０：１０〜７０：３０（ｖ／ｖ））に付し、エチル  ５−［（２−フルオロ−３，６−ジメチルフェニル）カルバモイル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラートを含む画分を減圧濃縮した。
得られた濃縮残渣の１，４−ジオキサン５ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．４９４ｍｌ（５．２８ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に５％硫酸水素カリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝６０：４０〜４０：６０（ｖ／ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥した。得られた濃縮残渣を含水アセトニトリルに溶解させ、凍結乾燥することにより、標記化合物２８３ｍｇ（収率５７％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４７２［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.25 & 11.73 (br s, total 1H), 9.56 (s, 1H), 7.75 - 7.55 (m, 1H), 7.04 - 6.96 (m, 1H), 6.91 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.68 - 4.49 (m, 2H), 2.55 - 2.40 (m, 2H), 2.26 - 2.12 (m, 8H), 1.91 - 1.74 (m, 2H), 1.69 - 1.55 (m, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００９６】
（製造例９）
Ｎ−（６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０４９）
【化１４】
2019088016.tif 000028
参考例５と同様にして合成した６−フルオロベンゾフラン−７−カルボン酸２８７ｍｇ（１．５９ｍｍｏｌ）の脱水トルエン４ｍｌ懸濁液に、アルゴン雰囲気下、ＤＩＰＥＡ０．３６０ｍｌ（２．１１ｍｍｏｌ）、ＤＰＰＡ０．３４０ｍｌ（１．５８ｍｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン１ｍｌを室温で加え、撹拌しながら室温で１時間、次いで９０℃で１時間反応させた。反応液を冷ました後、脱水ジクロロメタン２ｍｌを加えた溶液を、参考例３と同様にして合成したエチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート４０３ｍｇ（１．０６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン４ｍｌ溶液に０℃で滴下し、撹拌しながら０℃で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に５％硫酸水素カリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。得られた全有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝５９：４１〜３９：６１（Ｖ／Ｖ））に付し、エチル  ５−［（６−フルオロベンゾフラン−７−イル）カルバモイル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラートを含む画分を減圧濃縮した。
アルゴン雰囲気下、得られた濃縮残渣の脱水テトラヒドロフラン３ｍｌ溶液にＮ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．５４０ｍｌ（４．９６ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で４５分間反応させた。
反応終了後、反応液に５％硫酸水素カリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。得られた全有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４９：５１〜２８：７２（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を含水アセトニトリルに溶解させ、凍結乾燥することにより、標記化合物３９６ｍｇ（収率７７％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４８４［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.27 & 11.71 (s, total 1H), 9.58 (s, 1H), 8.23 - 8.04 (m, 1H), 8.00 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.48 (dd, J = 4.8, 8.6 Hz, 1H), 7.14 (dd, J = 8.6, 10.4 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.76 - 4.55 (m, 2H), 2.55 - 2.40 (m, 2H), 2.28 - 2.12 (m, 2H), 1.94 - 1.74 (m, 2H), 1.72 - 1.55 (m, 6H), 0.09 (s, 9H)。【００９７】
（製造例１０）
Ｎ−（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０６３）
【化１５】
2019088016.tif 000029
参考例１２で合成したエチル  ５−［（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）カルバモイル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート２１０ｍｇ（０．３５６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ５ｍｌ溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．１２ｍｌ（１．１ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸水素カリウム水溶液で洗浄した。分液して得られた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝５０：５０→２８：７２（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を含水アセトニトリルに溶解させ、凍結乾燥することにより、標記化合物１６４ｍｇ（収率８９％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：５１８［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.28 & 11.78 (br s, total 1H), 9.61 (br s, 1H), 8.34 - 8.10 (m, 1H), 7.44 (dd, J = 4.8, 8.6 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 8.6, 10.7 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.72 - 4.57 (m, 2H), 2.58 - 2.41 (m, 2H), 2.28 - 2.13 (m, 2H), 1.92 - 1.73 (m, 2H), 1.66 (br s, 6H), 0.10 (s, 9H)。【００９８】
（製造例１１）
Ｎ−（６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−イル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−４，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−５（１Ｈ）−カルボキサミド（化合物番号ＩＩ−１０５９）
【化１６】
2019088016.tif 000030
参考例１５で合成した６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−カルボン酸１４４ｍｇ（０．７４２ｍｍｏｌ）にトルエン２ｍｌを加えた後で減圧下、共沸脱水を行った。得られた残渣の脱水トルエン２ｍｌ懸濁液に、アルゴン雰囲気下、トリエチルアミン０．１７０ｍｌ（１．２２ｍｍｏｌ）、ＤＰＰＡ０．２００ｍｌ（０．９２９ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で３５分間、次いで８５℃で１．５時間反応させた。反応液を冷ました後、参考例３と同様にして合成したエチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート２３２ｍｇ（０．６１３ｍｍｏｌ）の脱水トルエン３ｍｌ溶液に０℃で分割添加し、撹拌しながら０℃で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に水と酢酸エチルを加え分液した後、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝６３：３７→４２：５８（Ｖ／Ｖ））に付し、エチル  ５−［（６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−イル）カルバモイル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラートを含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥した。
得られた濃縮残渣のＴＨＦ５ｍｌ溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタン−１，２−ジアミン０．２２ｍｌ（２．０ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に酢酸エチルを加え、５％硫酸水素カリウム水溶液で洗浄した。分液して得られた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，ＤＩＯＬシリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４６：５４→２５：７５（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を含水アセトニトリルに溶解させ、凍結乾燥することにより、標記化合物２３０ｍｇ（収率７５％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４９８［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：12.27 & 11.81 (br s, total 1H), 9.69 - 9.49 (m, 1H), 8.16 - 7.97 (m, 1H), 7.33 (dd, J = 5.0, 8.5 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 8.5, 10.6 Hz, 1H), 6.60 - 6.55 (m, 1H), 4.64 (br s, 2H), 2.55 - 2.40 (m, 5H), 2.26 - 2.14 (m, 2H), 1.89 - 1.75 (m, 2H), 1.65 (br s, 6H), 0.10 (s, 9H)。【００９９】
（参考例１）
１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボン酸
【化１７】
2019088016.tif 000031
アルゴン雰囲気下、ＴＨＦ２００ｍｌに２Ｍリチウムジイソプロピルアミド／ＴＨＦ溶液２１４ｍｌ（４２８ｍｍｏｌ）を加えた後、氷水冷却下で撹拌しながら、シクロブタンカルボン酸１０．１ｍｌ（１０７ｍｍｏｌ）を滴下し、成り行きで室温まで昇温させながら４時間反応させた。次いで、ヘキサメチルリン酸トリアミド２０ｍｌ（１１６ｍｍｏｌ）を加え、ドライアイス／アセトン冷媒冷却下、内温−６０℃以下を保ちながらクロロトリメチルシラン５１ｍｌ（４９０ｍｍｏｌ）を撹拌下に滴下した後、撹拌しながら−７８℃で１６．５時間反応させた。
反応終了後、反応液にメタノール６７ｍｌを加え、０℃まで昇温した後、冷水１３４ｍｌを加えた。２Ｎ塩酸を加えｐＨ２．１とし、ジエチルエーテル２６８ｍｌを加えて分液し、有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液２６８ｍｌで洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣に２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液５０ｍｌ、ｎ−ヘキサン２６７ｍｌを加えて分液した。次いで水層に１Ｎ塩酸を加えｐＨ２．７とし、この溶液に酢酸エチル２６７ｍｌを加えて分液した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣にｎ−ヘキサンを加え、氷水浴中で冷却した。生じた固体を濾過し、冷却したｎ−ヘキサンで洗浄後、減圧乾燥することにより標記化合物６．２４ｇ（収率３４％）を白色固体として得た。さらに、濾液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒；１，２−ジクロロエタン：メタノール＝１００：０→９５：５（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物４．３３ｇ（収率２３％）を白色固体として取得した。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：１７３［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：11.64 br s, 1H), 2.45 - 2.34 (m, 2H), 2.17 - 2.06 (m, 2H), 1.91 - 1.70 (m, 2H), 0.06 (s, 9H)。【０１００】
（参考例２）
５−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−エチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］ピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２，５（４Ｈ，６Ｈ）−ジカルボキシラート
【化１８】
2019088016.tif 000032
参考例１と同様にして合成した１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボン酸１３．９ｇ（８０．４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１０５ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下で塩化オキサリル６．９６ｍｌ（８１．２ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ０．３２ｍｌ（４．１４ｍｍｏｌ）を−２５℃〜−１０℃の間で順次滴下し、その後０℃に昇温して撹拌しながら２時間反応させた。本反応液を、５−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−エチル  ３−アミノ−６，６−ジメチルピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２，５（４Ｈ，６Ｈ）−ジカルボキシラート［Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２０１２，５５（１０），４７２８−４７３９．に記載の方法に準じて合成］８．７４ｇ（２６．９ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ２３．５ｍｌ（１３５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１２２ｍｌ溶液中に、アルゴン雰囲気下、０℃で滴下し、撹拌しながら０℃で１６時間反応させた。
反応終了後、反応液に５％硫酸水素カリウム水溶液４８６ｍｌを加えて分液した後、水層をジクロロメタン２００ｍｌで２回抽出した。得られた全有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝８６：１４→５３：４７（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物８．３０ｇ（収率６４％）を白色泡状物として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：４７９［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：9.98 & 9.72 & 9.71 (s, total 1H), 4.50 - 4.37 (m, 4H), 2.53 - 2.43 (m, 2H), 2.32 - 2.07 (m, 2H), 2.02 - 1.72 (m, 2H), 1.65 - 1.55 (m, 6H), 1.51 - 1.42 (m, 9H), 1.38 - 1.31 (m, 3H), 0.10 & 0.06 & 0.01 (s, total 9H)。【０１０１】
（参考例３）
エチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート
【化１９】
2019088016.tif 000033
参考例２と同様にして合成した５−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−エチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］ピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２，５（４Ｈ，６Ｈ）−ジカルボキシラート４３．２ｇ（９０．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン４３０ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、撹拌しながら２，６−ジメチルピリジン３０ｍｌ（２５９ｍｍｏｌ）、トリメチルシリル  トリフルオロメタンスルホナート４６ｍｌ（２５５ｍｍｏｌ）を０℃で順次滴下し、撹拌しながら０℃で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液２６０ｍｌ、ジクロロメタン２６０ｍｌを加えた後、分液した。水層をジクロロメタン２６０ｍｌで２回抽出した後、得られた全有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液２６０ｍｌ、飽和食塩水２６０ｍｌで順次洗浄し、次いで無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣に、トルエンを加え減圧濃縮する操作を繰り返し、標記化合物３９．７ｇを淡黄色固体として得た。
また標記化合物は、次のようにしても合成した。
参考例２と同様にして合成した５−ｔｅｒｔ−ブチル  ２−エチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］ピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２，５（４Ｈ，６Ｈ）−ジカルボキシラート５７．１ｇ（１１９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン５００ｍｌ溶液に、窒素雰囲気下、２，６−ジメチルピリジン２８．０ｍｌ（２４２ｍｍｏｌ）、トリメチルシリル  トリフルオロメタンスルホナート４３．０ｍｌ（２３８ｍｍｏｌ）を０℃で順次滴下し、撹拌しながら０℃で２時間反応させた。
反応終了後、反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液１０００ｍｌに注ぎ入れた後、室温で撹拌し、次いで分液した。水層を酢酸エチル５００ｍｌで２回抽出した後、得られた全有機層を飽和食塩水で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣に、トルエンを加え減圧濃縮する操作を３回行った後、得られた褐色油状物を一晩冷蔵保存し、次いでジエチルエーテル５０ｍｌ及びｎ−ヘキサン１００ｍｌを加え、室温で０．５時間撹拌した。析出した固体を濾取し、ｎ−ヘキサンで洗浄した後、減圧乾燥することにより、標記化合物１７．０ｇ（収率３８％）を白色固体して得た。
マススペクトル（ＤＵＩＳ，ｍ／ｚ）：３７９［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：9.86 (s, 1H), 4.52 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.23 (s, 2H), 2.64 - 2.52 (m, 2H), 2.38 - 2.27 (m, 2H), 2.03 - 1.89 (m, 2H), 1.53 - 1.42 (m, 9H), 0.14 (s, 9H)。【０１０２】
（参考例４）
エチル  ５−（クロロカルボニル）−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート
【化２０】
2019088016.tif 000034
参考例３と同様にして合成したエチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート４．９０ｇ（１１．１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン５０ｍｌ溶液に、窒素雰囲気下、ＤＩＰＥＡ６．８０ｍｌ（３９．０ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、ビス（トリクロロメチル）カルボナート２．３４ｇ（７．８９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１０ｍｌ溶液を−７８℃で滴下し、撹拌しながら−７８℃で２時間反応させた。
反応終了後、反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液８０ｍｌを加え、５分間撹拌した。ジクロロメタンを加えた後、室温まで昇温させながら撹拌した。反応液を分液後、水層をジクロロメタンで２回抽出した。得られた全有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置２，シリカゲル、溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９０：１０→８５：１５→７５：２５（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣にｎ−ヘキサンを加え、析出した固体を濾取し、ｎ−ヘキサンで洗浄してから減圧乾燥することにより、標記化合物２．００ｇ（収率４１％）を白色固体として得た。また、得られた濾液を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、不純物を含む表記化合物２．５０ｇ（収率５１％［純度を１００％とした場合の計算値］）を薄黄色泡状物として得た。
マススペクトル（ＤＵＩＳ，ｍ／ｚ）：４４１［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：9.94 (s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.55 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.64 - 2.53 (m, 2H), 2.39 - 2.30 (m, 2H), 2.05 - 1.93 (m, 2H), 1.78 (s, 6H), 1.48 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.16 (s, 9H)。【０１０３】
（参考例５）
６−フルオロベンゾフラン−７−カルボン酸
【化２１】
2019088016.tif 000035
窒素雰囲気下、７−ブロモ−６−フルオロベンゾフラン［ＥＰ１２０４６５４，ｐａｇｅ１４−１６．に記載の方法に準じて合成］３．７６ｇ（１７．５ｍｍｏｌ）の脱水ＴＨＦ５０ｍｌ溶液に、１．５７Ｍ  ｎ−ブチルリチウム／ｎ−ヘキサン溶液１２．３ｍｌ（１９．３ｍｍｏｌ）を−７８℃で滴下し、撹拌しながら−７８℃で１時間反応させた。ドライアイス３６．４ｇ（８２７ｍｍｏｌ）を−７８℃で分割添加し、撹拌しながら−７８℃で１時間、次いで成り行きで室温まで昇温させながら６．５時間反応させた。
反応終了後、反応液に水を加えた後、減圧濃縮してＴＨＦを留去した。得られた濃縮残渣に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、トルエンで２回洗浄した。得られた水層に６Ｎ塩酸を加えてｐＨ２とし、酢酸エチルで３回抽出した。得られた全有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物２．９１ｇ（収率９２％）を薄橙色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：１８１［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.78 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 4.8, 8.6 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 8.6, 11.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 2.2 Hz, 1H)。【０１０４】
（参考例６）
メチル  ６−クロロ−２−フルオロ−３−メチルベンゾアート
【化２２】
2019088016.tif 000036
６−クロロ−２−フルオロ−３−メチル安息香酸３．００ｇ（１５．９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ８０ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、炭酸セシウム７．２６ｇ（２２．３ｍｍｏｌ）、メチルヨージド１．１９ｍｌ（１９．１ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で２時間反応させた。
反応終了後、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１００：０〜９５：５（ｖ／ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮することにより、標記化合物２．８１ｇ（収率８７％）を無色油状物として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：２０３［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.22 - 7.15 (m, 1H), 7.14 - 7.07 (m, 1H), 3.97 (s, 3H), 2.30 - 2.24 (m, 3H)。【０１０５】
（参考例７）
メチル  ２−フルオロ−３，６−ジメチルベンゾアート
【化２３】
2019088016.tif 000037
参考例６と同様にして合成したメチル  ６−クロロ−２−フルオロ−３−メチルベンゾアート１．００ｇ（４．９４ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン２０ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、トリメチルボロキシン２．０７ｍｌ（１４．８ｍｍｏｌ）、無水炭酸カリウム２．７３ｇ（１９．８ｍｍｏｌ）、（１，３−ジイソプロピルイミダゾール−２−イリデン）（３−クロロピリジル）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド３３６ｍｇ（０．４９３ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら１００℃で２時間反応させた。
反応終了後、反応液を酢酸エチルで希釈し、メンブレンフィルターで濾過した。濾液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１００：０〜９５：５（ｖ／ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮することにより、標記化合物８４９ｍｇ（収率９４％）を無色油状物として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：１８３［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.12 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.27 - 2.22 (m, 3H)。【０１０６】
（参考例８）
２−フルオロ−３，６−ジメチル安息香酸
【化２４】
2019088016.tif 000038
参考例７と同様にして合成したメチル  ２−フルオロ−３，６−ジメチルベンゾアート８４３ｍｇ（４．６３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ５ｍｌ／水１０ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、水酸化リチウム３３２ｍｇ（１３．９ｍｍｏｌ）を室温で加え、撹拌しながら室温で１５時間、８０℃で８時間反応させた。
反応終了後、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝５０：５０〜３０：７０（ｖ／ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮することにより、標記化合物５６５ｍｇ（収率７３％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：１６９［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：13.42 (br s, 1H), 7.23 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.22 - 2.18 (m, 3H)。【０１０７】
（参考例９）
ｔｅｒｔ−ブチル  ６−フルオロベンゾフラン−７−カルボキシラート
【化２５】
2019088016.tif 000039
参考例５で合成した６−フルオロベンゾフラン−７−カルボン酸５００ｍｇ（２．７８ｍｍｏｌ)のピリジン５ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、ｐ−トルエンスルホニルクロライド１１６７ｍｇ（６．１２ｍｍｏｌ)を０℃で分割添加した後、撹拌しながら０℃で１５分間撹拌した。次いで、ｔｅｒｔ−ブタノール０．２６０ｍｌ（２．７４ｍｍｏｌ）を０℃で加えた後、室温に昇温して１．５時間撹拌した。更に、ｔｅｒｔ−ブタノール０．２７０ｍｌ（２．８４ｍｍｏｌ）を加えた後、室温で１６時間反応させた。
反応終了後、反応液を減圧濃縮し、得られた濃縮残渣に水２０ｍｌを加えた後、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ８に調整した。酢酸エチル４０ｍｌ加えて分液後、有機層を５％硫酸水素カリウム水溶液１０ｍｌで３回、飽和塩化ナトリウム水溶液１０ｍｌで１回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、ろ液を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物６３２ｍｇ（収率９６％）褐色油状物として得た。
マススペクトル（ＥＩ，ｍ／ｚ）：２３６［Ｍ］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.71 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 4.9, 8.5 Hz, 1H), 7.05 (dd, J = 8.5, 10.8 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 1.65 (s, 9H)。【０１０８】
（参考例１０）
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−カルボキシラート
【化２６】
2019088016.tif 000040
参考例９で合成したｔｅｒｔ−ブチル  ６−フルオロベンゾフラン−７−カルボキシラート６３２ｍｇ（２．６７ｍｍｏｌ）の脱水ＤＭＦ５ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、撹拌しながらＮ−クロロスクシンイミド５０５ｍｇ（３．７８ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で１時間、５０℃で６時間、さらに室温で１５．５時間反応させた。
反応終了後、反応液にトルエンと水を加えて分液した後、水層をトルエンで１回抽出した。得られた全有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、５％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９９：１→９７：３（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物０．２０ｇ（収率２８％）を無色油状物として得た。
マススペクトル（ＥＩ，ｍ／ｚ）：２７０［Ｍ］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.51 (dd, J = 4.8, 8.6 Hz, 1H), 7.05 (dd, J = 8.6, 10.9 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 1.65 (s, 9H)。【０１０９】
（参考例１１）
２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−カルボン酸
【化２７】
2019088016.tif 000041
参考例１０で合成したｔｅｒｔ−ブチル  ２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−カルボキシラート２００ｍｇ（０．７３９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン１．５ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、トリフルオロ酢酸０．１４１ｍｌ（１．８４ｍｍｏｌ)を室温で加えた後、撹拌しながら室温で２０時間反応させた。
反応終了後、反応液に窒素ガスをパージして溶媒を留去した。得られた濃縮残渣にジイソプロピルエーテル／ｎ−ヘキサン＝１／１（Ｖ／Ｖ）を加えた後、超音波処理して得られた固体を濾取した。得られた固体をｎ−ヘキサンで洗浄後、３０℃で減圧乾燥することにより、標記化合物１２０ｍｇ（収率７６％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：２１５［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.63 (dd, J = 4.8, 8.7 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 8.7, 11.0 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H)。【０１１０】
（参考例１２）
エチル  ５−［（２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−イル）カルバモイル］−６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート
【化２８】
2019088016.tif 000042
参考例１１で合成した２−クロロ−６−フルオロベンゾフラン−７−カルボン酸１１６ｍｇ（０．５４１ｍｍｏｌ）にトルエン２ｍｌを加えた後で減圧下、共沸脱水を行った。得られた残渣の脱水トルエン２ｍｌ懸濁液に、アルゴン雰囲気下、トリエチルアミン０．１４０ｍｌ（１．００ｍｍｏｌ）、ＤＰＰＡ０．１５５ｍｌ（０．７２０ｍｍｏｌ）、更にジクロロメタン０．５ｍｌを室温で加えた後、撹拌しながら室温で４０分間、次いで８５℃で１．５時間反応させた。反応液を冷ました後、参考例３と同様にして合成したエチル  ６，６−ジメチル−３−［１−（トリメチルシリル）シクロブタンカルボキサミド］−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピラゾール−２（４Ｈ）−カルボキシラート１８２ｍｇ（０．４８１ｍｍｏｌ）の脱水トルエン３ｍｌ溶液に０℃で分割添加し、撹拌しながら０℃で１時間反応させた。
反応終了後、反応液に水と酢酸エチルを加え分液した後、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝７０：３０→４５：５５（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物２１０ｍｇ（収率７４％）を白色泡状物として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：５９０［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：9.78 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.44 (dd, J = 4.8, 8.6 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 8.6, 10.7 Hz, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.43 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.57 - 2.42 (m, 2H), 2.31 - 2.20 (m, 2H), 1.95 - 1.84 (m, 2H), 1.66 (s, 6H), 1.35 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.12 (s, 9H)。【０１１１】
（参考例１３）
ｔｅｒｔ−ブチル  ２−ブロモ−６−フルオロベンゾフラン−７−カルボキシラート
【化２９】
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参考例９と同様にして合成したｔｅｒｔ−ブチル  ６−フルオロベンゾフラン−７−カルボキシラート２．２６ｇ（９．５７ｍｍｏｌ）のアセトニトリル３０ｍｌ／脱水ＤＭＦ１０ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、Ｎ−ブロモスクシンイミド１．８７ｇ（１０．５ｍｍｏｌ）を５０℃で加えた後、撹拌しながら５０℃で１時間反応させた。次いで、Ｎ−ブロモスクシンイミド１．８１ｇ（１０．２ｍｍｏｌ）を追加した後、５０℃で０．５時間反応させた。
反応終了後、反応液に酢酸エチルと水を加えて分液した。得られた有機層を５％チオ硫酸ナトリウム水溶液で１回、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９９：１→９７：３（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を再度分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９９：１→９８：２（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物８６１ｍｇ（収率２９％）を微黄色油状物として得た。
マススペクトル（ＥＩ，ｍ／ｚ）：３１４［Ｍ］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.52 (dd, J = 4.8, 8.7 Hz, 1H), 7.05 (dd, J = 8.7, 10.8 Hz, 1H), 6.73 (s, 1H), 1.65 (s, 9H)。【０１１２】
（参考例１４）
ｔｅｒｔ−ブチル  ６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−カルボキシラート
【化３０】
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参考例１３と同様にして合成したｔｅｒｔ−ブチル  ２−ブロモ−６−フルオロベンゾフラン−７−カルボキシラート５００ｍｇ（１．５９ｍｍｏｌ）のトルエン２２ｍｌ／水１．３２ｍｌの不均一溶液に、無水リン酸カリウム１．５０ｇ（７．０７ｍｍｏｌ）、メチルボロン酸２９０ｍｇ（４．８４ｍｍｏｌ）を加えた後、ドライアイス／アセトンバスで冷却しながら、減圧下でアルゴン雰囲気へと置換した。次いで、酢酸パラジウム（ＩＩ）１０．７ｍｇ（０．０４８ｍｍｏｌ）、ブチル  ジ−１−アダマンチルホスフィン３５．０ｍｇ（０．０９８ｍｍｏｌ）を加えた後、撹拌しながら１００℃で２時間反応させた。
反応終了後、冷却した反応液にセライト５ｇを加え１０分間撹拌した後に濾過を行い、固体残渣を酢酸エチルで洗浄した。得られた濾液に水を加えて分液後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、濾過、減圧濃縮した。得られた濃縮残渣を分取カラムクロマトグラフィー（装置１，シリカゲル，ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９９：１→９６：４（Ｖ／Ｖ））に付し、目的物を含む画分を減圧濃縮、減圧乾燥することにより、標記化合物２４０ｍｇ（収率６０％）を淡黄色油状物として得た。
マススペクトル（ＥＩ，ｍ／ｚ）：２５０［Ｍ］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：7.46 (dd, J = 4.9, 8.5 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.5, 10.9 Hz, 1H), 6.35 (q, J = 1.0 Hz, 1H), 2.49 - 2.47 (m, 3H), 1.65 (s, 9H)。【０１１３】
（参考例１５）
６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−カルボン酸 
【化３１】
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参考例１４で合成したｔｅｒｔ−ブチル  ６−フルオロ−２−メチルベンゾフラン−７−カルボキシラート２３７ｍｇ（０．９４７ｍｍｏｌ）の脱水ジクロロメタン１．５ｍｌ溶液に、アルゴン雰囲気下、トリフルオロ酢酸０．１８１ｍｌ（２．３７ｍｍｏｌ）を室温で加えた後、撹拌しながら室温で４時間反応させた。次いで、脱水ジクロロメタン１．０ｍｌ、トリフルオロ酢酸０．１８１ｍｌ（２．３７ｍｍｏｌ）を追加した後、更に１３．５時間反応させた。
反応終了後、反応液を減圧濃縮した。得られた濃縮残渣にジイソプロピルエーテル／ｎ−ヘキサン＝１／１(Ｖ／Ｖ)を加えた後、超音波処理して得られた固体を濾取し、ｎ−ヘキサンで洗浄後、４０℃で減圧乾燥することにより、標記化合物１４７ｍｇ（収率８０％）を白色固体として得た。
マススペクトル（ＣＩ，ｍ／ｚ）：１９５［Ｍ＋１］＋。
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：7.68 (dd, J = 5.2, 8.6 Hz, 1H), 7.15 (dd, J = 8.6, 11.1 Hz, 1H), 6.67 - 6.62 (m, 1H), 2.46 - 2.45 (m, 3H)。【０１１４】
［試験例１］
ＣＤＫ７酵素阻害試験
緩衝液の調製は、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸緩衝液（ＨＥＰＥＳ緩衝液）（ｐＨ７．４）、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、トリトンＸ−１００（ＴｒｉｔｏｎＸ−１００）、塩化マグネシウム（ＭｇＣｌ２）を混和して行った。５００μＭ［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ溶液は、１０ｍＭ  ＡＴＰ溶液と市販の［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ溶液［Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ社  Ｃｏｄｅ  Ｎｏ．ＮＥＧ−３０２Ｈ］を緩衝液で希釈して用いた。ＣＤＫ７溶液は、市販のＣＤＫ７［Ｃａｒｎａ  ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃａｔａｌｏｇ  Ｎｏ．０４−１０８］を緩衝液で希釈して用いた。基質溶液は、Ｍｙｅｌｉｎ  Ｂａｓｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ（ＭＢＰ）を緩衝液で希釈して用いた。反応溶液の調製は、４℃にて緩衝液、ＣＤＫ７溶液、基質溶液を混和して反応溶液とした。
ＣＤＫ７酵素反応は、１．５ｍＬマイクロチューブに、４℃にて１０％ＤＭＳＯ／９０％注射用蒸留水で調製した被験化合物溶液５μＬ、および、反応溶液４０μＬを加え、マイクロチューブをウォーターバスインキュベーターにて２５℃で６０分間ｐｒｅｉｎｃｕｂａｔｉｏｎを行った。その後、５００μＭ［γ−３３Ｐ］ＡＴＰ溶液５μＬを加え、３０℃で２０分間反応を行った。反応後４℃に冷却しながら、各マイクロチューブに１０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）水溶液を加えて、ｖｏｒｔｅｘ  ｍｉｘｅｒで混和し反応を停止した。４℃にて１０分静置後、遠心分離し、上清を廃棄した。次に２％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）水溶液を加えｖｏｒｔｅｘ  ｍｉｘｅｒで混合後、遠心分離し上清を廃棄した。この洗浄操作を２回行った。洗浄後、沈殿を１Ｎ水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）水溶液で溶解し、液体シンチレーションカウンターにより、反応生成物のエネルギー量（放射活性）を測定した。
ＣＤＫ７に対する被験化合物の阻害活性の算出は、ＭＢＰに結合する３３Ｐの量を５０％阻害する被験化合物濃度をＩＣ５０として、ＥＸＳＵＳ（バージョン８．１．０、ＣＡＣエクシケア社製）を用いて行った。
Ｋｉ値の算出は、以下の計算式に従って行った。式中、Ｓは反応溶液中に含まれるＡＴＰ濃度を、ＫｍはＭｉｃｈａｅｌｉｓ−Ｍｅｎｔｅｎ定数を表す。
Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋Ｓ／Ｋｍ）【０１１５】
本試験において本発明の化合物は、優れたＣＤＫ７阻害活性を示した。例えば、化合物番号ＩＩ−３、ＩＩ−２１、ＩＩ−１１３、ＩＩ−２１５、ＩＩ−２９９、ＩＩ−３６１、ＩＩ−３７９、ＩＩ−６６９、ＩＩ−１０４９、ＩＩ−１０６３、および、ＩＩ−１０５９で表される化合物のＫｉ値は５０ｎＭ以下であった。【０１１６】
［試験例２］
ヒト大腸がん（ＨＣＴ−１１６）細胞増殖抑制試験
ヒト大腸がん細胞増殖抑制作用の測定は、Ｓｉｍａｋらの方法（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６９，６２０８（２００９））を改変して実施した。
ヒト大腸がん細胞株（ＨＣＴ−１１６、ＤＳファーマバイオメディカル株式会社から入手）を、１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン／アンホテリシン（ａｍｐｈｏｔｅｒｃｉｎ）Ｂ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）含有のＭｃＣｏｙ’ｓ  ５Ａ培地（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）で培養し、９６穴プレートに０．５〜２．０×１０３ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌずつ播種した。炭酸ガスインキュベーターで一晩培養し、更に被験化合物ＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯ終濃度  ０．１％）を加えた培地で３日間培養後、Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ  Ｓｕｌｆｏｒｈｏｄａｍｉｎｅ  Ｂ  ｂａｓｅｄ（ＳＩＧＭＡ社製）を用いて、その吸光度を測定した。
被験化合物濃度とＳｕｌｆｏｒｈｏｄａｍｉｎｅ  Ｂの吸光度から各濃度の細胞増殖抑制率を算出し、細胞増殖を５０％抑制するのに必要な被験化合物の濃度（ＧＩ５０値）を、ＥＸＳＵＳ（バージョン８．１．０、ＣＡＣエクシケア社製）を用いて算出した。【０１１７】
本試験において本発明の化合物は優れたＨＣＴ−１１６細胞増殖抑制活性を示した。例えば、化合物番号ＩＩ−３、ＩＩ−２１、ＩＩ−１１３、ＩＩ−２１５、ＩＩ−２９９、ＩＩ−３６１、ＩＩ−３７９、ＩＩ−６６９、ＩＩ−１０４９、ＩＩ−１０６３、および、ＩＩ−１０５９で表される化合物のＧＩ５０値は１００ｎＭ以下であった。【０１１８】
［試験例３］
マウスメラノーマ（Ｂ１６Ｆ１０）細胞増殖抑制試験
マウスメラノーマ細胞（Ｂ１６Ｆ１０）（東北大学加齢医学研究所医薬細胞資源センター  Ｃａｔ．Ｎｏ．ＴＫＧ０３４８）を、１０％ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１００８２−１４７）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン／アンホテルシンＢ（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１５２４０−０９６）、１ｍＭピルビン酸ナトリウム（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１１３６０−０７０）含有のＤＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１１９６５−０９２）で培養し、９６ウェルプレートに０．５〜２．０×１０３ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌずつ播種した。炭酸ガスインキュベーターで一晩培養し、更に被験化合物ＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯ終濃度  ０．１％）入りの培地で３日間培養後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製）を用いてＡＴＰ量を測定した。
被験化合物濃度とＡＴＰ量から各濃度の細胞増殖抑制率を算出し、細胞増殖を５０％抑制するのに必要な被験化合物の濃度（ＧＩ５０値）を、ＥＸＳＵＳ（バージョン８．１．０、ＣＡＣクロア社製）を用いて算出した。【０１１９】
本試験において本発明の化合物は優れたＢ１６Ｆ１０細胞増殖抑制活性を示した。例えば、化合物番号ＩＩ−２１、ＩＩ−１１３、ＩＩ−２１５、ＩＩ−２９９、ＩＩ−３６１、ＩＩ−３７９、ＩＩ−６６９、ＩＩ−１０４９、ＩＩ−１０６３、および、ＩＩ−１０５９で表される化合物のＧＩ５０値は２μＭ以下であった。【０１２０】
［試験例４］
マウスメラノーマ細胞（Ｂ１６Ｆ１０）皮下移植マウスにおけるｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍増殖抑制試験
マウスメラノーマ細胞（Ｂ１６Ｆ１０）（東北大学加齢医学研究所医薬細胞資源センター  Ｃａｔ．Ｎｏ．ＴＫＧ０３４８）を、１０％ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１００８２−１４７）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン／アンホテルシンＢ（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１５２４０−０９６）、１ｍＭピルビン酸ナトリウム（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１１３６０−０７０）含有のＤＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１１９６５−０９２）で培養し、ＰＢＳ（ＧＩＢＣＯ社製  ＲＥＦ．１００１０−０３１）で１．０×１０７ｃｅｌｌｓ／ｍＬに調製した。調製した細胞懸濁液をＣ５７ＢＬ／６マウス（雌、日本ＳＬＣ社供給）の右側腹部皮下に１匹あたり０．１ｍＬ注入した。一定期間飼育後、腫瘍の長径（ｍｍ）及び短径（ｍｍ）を電子ノギス（ミツトヨ社製  Ｃａｔ．５００−７１２−１０）で測定し、腫瘍体積を次式より算出した。
腫瘍体積（ｍｍ３）＝（長径）×（短径）×（短径）×０．５
腫瘍体積が５０〜２００ｍｍ３範囲内の個体を選抜し、腫瘍体積がほぼ同等となるよう群分けした後、抗ＰＤ−１抗体（ＢｉｏＸｃｅｌｌ社製）２５０μｇ／匹、またはＲａｔ  ＩｇＧ２ａ（ＢｉｏＸｃｅｌｌ社製）を２５０μｇ／匹を腹腔内投与し、さらにそれぞれの群に被験化合物（２５ｍｇ／ｋｇもしくは１００ｍｇ／ｋｇ）または溶媒のみを経口投与した。投与開始初日を０日目とし、抗ＰＤ−１抗体またはＲａｔ  ＩｇＧ２ａについては、０日目と３日目に腹腔内投与し、被験化合物または溶媒のみについては０日目から６日目まで１日１回経口投与した。７日目に腫瘍の長径および短径を測定し、腫瘍体積を算出した。Ｒａｔ  ＩｇＧ２ａおよび溶媒投与群の０日目からの腫瘍体積増殖率を１００％として各群の腫瘍体積増殖抑制率を算出した。
結果を表１３〜１５に示す。なお、表１３〜１５における各群の腫瘍体積増殖抑制率について、１０％以上３０％未満をＤ、３０％以上５０％未満をＣ、５０％以上７０％未満をＢ、７０％以上９０％未満をＡとそれぞれ表記した。【０１２１】
【表１３】
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【０１２２】
【表１４】
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【０１２３】
【表１５】
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【０１２４】
本試験において本発明の化合物は抗ＰＤ−１抗体との併用において優れた腫瘍体積増殖抑制活性を示し、例えば、化合物番号ＩＩ−２１５、ＩＩ−３７９、および、ＩＩ−１０６３は抗ＰＤ−１抗体と併用すると、表１３〜１５に示すように、優れた腫瘍体積増殖抑制率を示した。
【国際調査報告】
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