(57)【要約】本発明は、１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格での６位に相当する１−（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）−５−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−３Ｈ−ｂｅｎｚｏ［ｅ］ｉｎｄｏｌ骨格の７位に官能基を有し、高い細胞毒性を示す新規なＤｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ誘導体を提供することを目的としている。本発明は、下式に代表されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を提供する。2019004413.tif 000040
2019004413.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
【化１】
2019004413.tif 000039
［式中、Ｘは、−ＣＯ２Ｍｅ、−ＣＯ２Ｅｔ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２を表し、Ｙは、一個の水素原子がＮＨ２で置換されたフェニル基を表し、Ｒ１は、水素原子又はメトキシ基を表し、Ｒ２は、メチル基、エチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２を表す。］
【請求項２】
Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２であり、Ｒ２は、メチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２である、請求項１記載のインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１は、水素原子である、請求項１又は２記載のインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２であり、Ｙは、４−アミノフェニル基である、請求項１〜３のいずれか一項記載のインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項記載のインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する細胞毒性剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インドリン誘導体及びそれを含む細胞毒性剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ及びその誘導体は、ＤＮＡのアルキル化による極めて強力な細胞毒性を有する天然物の一つであり、これまでに多くの誘導体が報告されている（非特許文献１）。【０００３】
報告されている誘導体の中でも１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格あるいはその前駆体となる１−（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）−５−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−３Ｈ−ｂｅｎｚｏ［ｅ］ｉｎｄｏｌ骨格を有する化合物は、強力な細胞毒性を維持したまま、天然物が有する骨格よりも合成が容易であることに加えて化学的な安定性に優れることが知られている（非特許文献１）。【０００４】
Ｄｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ誘導体は、ＤＮＡをアルキル化する構造とＤＮＡと相互作用することでアルキル化を促進する構造を有しており、例えば、上記誘導体が有する１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格は、シクロプロパン構造を介してＤＮＡをアルキル化する構造である。【０００５】
これまでに、１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格上の置換基としては、３位、５位及び７位の置換基を中心にした報告が為されており、７位の置換基が細胞毒性に大きな影響を有することが知られている。その理由として、７位の置換基の構造によりシクロプロパン構造がＤＮＡと近接し、ＤＮＡのアルキル化に適した位置を取りうることが報告されており、その場合、７位の置換基としてはニトリル基とメトキシ基が好ましいことが知られている（非特許文献１）。一方で、１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格の６位に置換基を有する誘導体の報告はこれまでになく、その前駆体であり上記骨格での６位に相当する１−（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）−５−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−３Ｈ−ｂｅｎｚｏ［ｅ］ｉｎｄｏｌ骨格の７位にトリメチルシリルエチルエステル基を有する誘導体のみが報告されている（非特許文献２）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｇｈｏｓｈら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｔｏｐｉｃｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００９年、第９巻、ｐ．１４９４−１５２４
【非特許文献２】Ｔｉｅｔｚｅら、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｉｅｎｃｅ、２００８年、第９巻、ｐ．８２１−８３７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、上記のように１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格での６位に相当する１−（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）−５−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−３Ｈ−ｂｅｎｚｏ［ｅ］ｉｎｄｏｌ骨格の７位にトリメチルシリルエチルエステル基以外の置換基を有し、高い細胞毒性を示すＤｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ誘導体は、これまでに報告されていない。【０００８】
１−（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）−５−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−３Ｈ−ｂｅｎｚｏ［ｅ］ｉｎｄｏｌ骨格の７位にトリメチルシリルエチルエステル基以外の置換基を有し、高い細胞毒性を示す新規なＤｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ誘導体は、１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格の６位の置換基が、細胞毒性に与える影響を検証するために有用であり、新たな細胞毒性剤の創出に繋がる。【０００９】
そこで本発明は、１，２，９，９ａ−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａ［ｃ］ｂｅｎｚ［ｅ］ｉｎｄｏｌ−４−ｏｎｅ骨格での６位に相当する１−（ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌ）−５−ｈｙｄｒｏｘｙ−１，２−ｄｉｈｙｄｒｏ−３Ｈ−ｂｅｎｚｏ［ｅ］ｉｎｄｏｌ骨格の７位に官能基を有し、高い細胞毒性を示す新規なＤｕｏｃａｒｍｙｃｉｎ誘導体を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討した結果、特定の官能基を有する新規なインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩が、高い細胞毒性を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。【００１１】
すなわち、本発明は以下の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を提供する。
【化１】
2019004413.tif 000003
［式中、Ｘは、−ＣＯ２Ｍｅ、−ＣＯ２Ｅｔ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２を表し、Ｙは、一個の水素原子がＮＨ２で置換されたフェニル基を表し、Ｒ１は、水素原子又はメトキシ基を表し、Ｒ２は、メチル基、エチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２を表す。］【００１２】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｒ１は、水素原子であることが好ましい。【００１３】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｒ２は、メチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２であることが好ましく、−ＣＨ２ＮＨ２であることがより好ましい。【００１４】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２であることが好ましく、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２であることがより好ましい。【００１５】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｙは、４−アミノフェニル基であることが好ましい。【００１６】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２であり、Ｒ２は、メチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２であることが好ましい。【００１７】
この場合、高い細胞毒性が期待できる。【００１８】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２であり、Ｙは、一個の水素原子がＮＨ２で置換されたフェニル基であり、Ｒ１は、水素原子又はメトキシ基であり、Ｒ２は、メチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２であることが好ましい。【００１９】
この場合、高い細胞毒性が期待できる。【００２０】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−ＣＯ２Ｍｅ、−ＣＯ２Ｅｔ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２であり、Ｙは、一個の水素原子がＮＨ２で置換されたフェニル基であり、Ｒ１は、水素原子であり、Ｒ２は、メチル基、エチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２であることが好ましい。【００２１】
この場合、高い細胞毒性が期待できる。【００２２】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２であり、Ｒ１は、水素原子であり、Ｒ２は、メチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２であることが好ましい。【００２３】
この場合、高い細胞毒性が期待できる。【００２４】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２であり、Ｙは、４−アミノフェニル基であることが好ましい。【００２５】
この場合、高い細胞毒性が期待できる。【００２６】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２であり、Ｙは、４−アミノフェニル基であり、Ｒ１は、水素原子又はメトキシ基であることが好ましい。【００２７】
この場合、高い細胞毒性が期待できる。【００２８】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩において、Ｘは、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＮＨ２であり、Ｙは、４−アミノフェニル基であり、Ｒ１は、水素原子であることが好ましい。【００２９】
この場合、高い細胞毒性が期待できる。【００３０】
また、本発明は、上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する細胞毒性剤を提供する。
【発明の効果】
【００３１】
本発明のインドリン誘導体又はその薬理学的に許容される塩は、がん細胞に対し高い細胞毒性を有するため、細胞毒性剤として使用できる。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
本発明のインドリン誘導体は、以下の一般式（Ｉ）で示されることを特徴としている。
【化２】
2019004413.tif 000004
［式中、Ｘは、−ＣＯ２Ｍｅ、−ＣＯ２Ｅｔ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ２を表し、Ｙは、一個の水素原子がＮＨ２で置換されたフェニル基を表し、Ｒ１は、水素原子又はメトキシ基を表し、Ｒ２は、メチル基、エチル基又は−ＣＨ２ＮＨ２を表す。］
【００３３】
本明細書で使用する次の用語は、特に断りがない限り、下記の定義のとおりである。
【００３４】
Ｍｅは、メチル基を意味し、Ｅｔは、エチル基を意味する。
【００３５】
「一個の水素原子がＮＨ２で置換されたフェニル基」とは、２−アミノフェニル基、３−アミノフェニル基又は４−アミノフェニル基を意味する。
【００３６】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体の好ましい化合物の具体例を表１に示すが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００３７】
【表１】
2019004413.tif 000005
【００３８】
表１に記載される化合物は、その薬理学的に許容される塩も包含する。
【００３９】
上記の一般式（Ｉ）で示されるインドリン誘導体（以下、インドリン誘導体（Ｉ））が、配座異性体、回転異性体、互変異性体、光学異性体、ジアステレオマー又はエピマー等を含有する場合には、いずれか一方の異性体も混合物もインドリン誘導体（Ｉ）に包含される。さらに、インドリン誘導体（Ｉ）に光学異性体が存在する場合には、ラセミ体から分割された光学異性体もインドリン誘導体（Ｉ）に包含される。
【００４０】
また、本発明のインドリン誘導体（Ｉ）には、インドリン誘導体（Ｉ）のプロドラッグ又はその薬理学的に許容される塩が含まれる。インドリン誘導体（Ｉ）のプロドラッグとは、生体内で酵素的又は化学的に、インドリン誘導体（Ｉ）に変換される化合物である。インドリン誘導体（Ｉ）のプロドラッグの活性本体は、インドリン誘導体（Ｉ）であるが、インドリン誘導体（Ｉ）のプロドラッグそのものが活性を有していてもよい。
【００４１】
インドリン誘導体（Ｉ）のプロドラッグとしては、例えば、インドリン誘導体（Ｉ）のヒドロキシ基が、エステル化、カルボネート化、カルバメート化、アルキル化、リン酸化又はホウ酸化された化合物が挙げられる。これらの化合物は、公知の方法に従って、インドリン誘導体（Ｉ）又はその合成中間体から合成することができる。
【００４２】
インドリン誘導体（Ｉ）のプロドラッグとしては、例えば、インドリン誘導体（Ｉ）のアミノ基が、カルバメート化又はアミド化された化合物が挙げられる。これらの化合物は、公知の方法に従って、インドリン誘導体（Ｉ）又はその合成中間体から合成することができる。
【００４３】
また、インドリン誘導体（Ｉ）のプロドラッグは、公知文献（「医薬品の開発」、広川書店、１９９０年、第７巻、ｐ．１６３〜１９８及びＰｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第５巻、１９８５年、ｐ．２１５７〜２１６１）に記載の生理的条件で、インドリン誘導体（Ｉ）に変化するものであってもよい。
【００４４】
インドリン誘導体（Ｉ）は、同位元素で標識されていてもよく、標識される同位元素としては、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ及び／又は１２５Ｉが挙げられる。
【００４５】
インドリン誘導体（Ｉ）の「薬理学的に許容される塩」としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩若しくはリン酸塩等の無機酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、グルコン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、グルタル酸塩、マンデル酸塩、フタル酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩若しくはケイ皮酸塩等の有機酸塩、トリエチルアミン塩、ジイソプロピルエチルアミン塩、エタノールアミン塩、モルホリン塩、ピペリジン塩若しくはジシクロヘキシルアミン塩等の有機塩基との塩、アルギニン若しくはリジン等の塩基性アミノ酸との塩又はリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩若しくは亜鉛塩等の無機塩基との塩が挙げられる。
【００４６】
インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、無水物であってもよいし、水和物等の溶媒和物を形成していても構わない。ここで溶媒和物としては、薬理学的に許容される溶媒和物が好ましい。薬理学的に許容される溶媒和物は、水和物又は非水和物のいずれであっても構わないが、水和物が好ましい。溶媒和物を構成する溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール若しくはｎ−プロパノール等のアルコール系溶媒、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド又は水が挙げられる。
【００４７】
インドリン誘導体（Ｉ）は、その基本骨格や置換基の種類に由来する特徴に基づいた適切な方法で製造することができる。なお、これらの化合物の製造に使用する出発物質と試薬は一般に購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法で製造することができる。
【００４８】
インドリン誘導体（Ｉ）並びにその製造に使用する中間体及び出発物質は、公知の手段によって単離精製することができる。単離精製のための公知の手段としては、例えば、溶媒抽出、再結晶又はクロマトグラフィーが挙げられる。
【００４９】
インドリン誘導体（Ｉ）が、光学異性体又は立体異性体を含有する場合には、公知の方法により、それぞれの異性体を単一化合物として得ることができる。公知の方法としては、例えば、結晶化、酵素分割又はキラルクロマトグラフィーが挙げられる。
【００５０】
以下に記載する製造方法の各反応において、原料化合物がヒドロキシ基、アミノ基又はカルボキシル基を有する場合、これらの基に保護基が導入されていてもよく、反応後に必要に応じて保護基を脱保護することにより目的化合物を得ることができる。
【００５１】
ヒドロキシ基の保護基としては、例えば、トリチル基、テトラヒドロピラニル基、炭素数７〜１０のアラルキル基（例えば、ベンジル基）又は置換シリル基（例えば、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基又はｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基）が挙げられる。
【００５２】
アミノ基の保護基としては、例えば、炭素数２〜６のアルキルカルボニル基（例えば、アセチル基）、トリフルオロアセチル基、ベンゾイル基、炭素数２〜８のアルキルオキシカルボニル基（例えば、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基）、炭素数７〜１０のアラルキル基（例えば、ベンジル基）又はフタロイル基が挙げられる。
【００５３】
カルボキシル基の保護基としては、例えば、炭素数１〜６のアルキル基（例えば、メチル基、エチル基又はｔｅｒｔ−ブチル基）又は炭素数７〜１０アラルキル基（例えば、ベンジル基）が挙げられる。
【００５４】
保護基の脱保護は、保護基の種類によって異なるが、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
【００５５】
インドリン誘導体（Ｉ−ａ）は、例えば、スキーム１に示すように、ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＩＩ）の脱ベンジル化反応により得ることができる。
【化３】
2019004413.tif 000006
［式中、Ａは、−ＣＯ２Ｍｅ、−ＣＯ２Ｅｔ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ２）２Ｙ、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｍｅ又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｅｔを表し、Ｍｅは、メチル基を表し、Ｅｔは、エチル基を表し、Ｂｎは、ベンジル基を表し、それ以外の各記号は、上記定義に同じである。］
【００５６】
脱ベンジル化反応は、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
【００５７】
インドリン誘導体（Ｉ−ｂ）は、例えば、スキーム２に示すように、ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＩＩ−ａ）の脱ベンジル化反応と続くＰｒｏの脱保護反応により得ることができる。
【化４】
2019004413.tif 000007
［式中、Ｐｒｏは、ベンジル基以外の保護基を表し、それ以外の各記号は、上記定義に同じである。］
【００５８】
脱ベンジル化反応及びＰｒｏの脱保護反応は、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
【００５９】
ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＩＩ−ａ）は、例えば、スキーム３に示すように、アニリン誘導体（ＩＩＩ）の求電子反応により得ることができる。
【化５】
2019004413.tif 000008
［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
【００６０】
求電子反応に用いる求電子剤は、例えば、アミノ基がＰｒｏで保護されたグリシンの酸塩化物又は混合酸無水物が挙げられ、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシンの混合酸無水物が好ましい。
【００６１】
求電子反応に用いる求電子剤の量は、アニリン誘導体（ＩＩＩ）に対して０．５〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましい。
【００６２】
求電子反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
【００６３】
求電子反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
【００６４】
求電子反応に用いる塩基の量は、アニリン誘導体（ＩＩＩ）に対して０．５〜２０当量が好ましく、１〜５当量がより好ましい。
【００６５】
求電子反応の反応温度は、−４０℃〜２００℃が好ましく、−２０℃〜１５０℃がより好ましい。
【００６６】
求電子反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間〜３０時間が好ましい。
【００６７】
求電子反応に用いるアニリン誘導体（ＩＩＩ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ〜１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
【００６８】
求電子剤は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
【００６９】
ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＩＩ−ｂ）は、例えば、スキーム４に示すように、カルボン酸誘導体（ＩＶ）とアミン誘導体（Ｖ）との縮合反応により得ることができる。
【化６】
2019004413.tif 000009
［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
【００７０】
縮合反応に用いるアミン誘導体（Ｖ）の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましい。
【００７１】
縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２−メチル−６−ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム又はヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムが好ましい。
【００７２】
縮合反応に用いる縮合剤の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．１〜１００当量が好ましく、０．３〜３０当量がより好ましい。
【００７３】
縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
【００７４】
縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
【００７５】
縮合反応に用いる塩基の量は、カルボン酸誘導体（ＩＶ）に対して０．５〜２０当量が好ましく、１〜５当量がより好ましい。
【００７６】
縮合反応の反応温度は、−４０℃〜２００℃が好ましく、−２０℃〜１５０℃がより好ましい。
【００７７】
縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間〜３０時間が好ましい。
【００７８】
縮合反応に用いるカルボン酸誘導体（ＩＶ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ〜１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
【００７９】
アミン誘導体（Ｖ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
【００８０】
アニリン誘導体（ＩＩＩ）は、例えば、スキーム５に示すように、ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＶＩ）の加水分解反応により得ることができる。
【化７】
2019004413.tif 000010
［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
【００８１】
加水分解反応は、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
【００８２】
カルボン酸誘導体（ＩＶ）は、例えば、スキーム６に示すように、ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＩＩ−ｃ）の加水分解反応により、それぞれ得ることができる。
【化８】
2019004413.tif 000011
［式中、Ｂは、−ＣＯ２Ｍｅ又は−ＣＯ２Ｅｔを表し、それ以外の各記号は、上記定義に同じである。］
【００８３】
加水分解反応は、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
【００８４】
ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＩＩ−ｄ／ＶＩ）は、例えば、スキーム７に示すように、保護されたインドリン誘導体（ＶＩＩ）のＰｒｏの脱保護反応と続くインドール誘導体（ＶＩＩＩ）との縮合反応により得ることができる。
【化９】
2019004413.tif 000012
［式中、Ｒ３は、メチル基、エチル基又はトリフルオロメチル基を表し、それ以外の各記号は、上記定義に同じである。］
【００８５】
Ｐｒｏの脱保護反応は、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
【００８６】
縮合反応に用いるインドール誘導体（ＶＩＩＩ）の量は、保護されたインドリン誘導体（ＶＩＩ）に対して０．５〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましい。
【００８７】
縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２−メチル−６−ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム又はヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムが好ましい。
【００８８】
縮合反応に用いる縮合剤の量は、インドール誘導体（ＶＩＩＩ）に対して０．１〜１００当量が好ましく、０．３〜３０当量がより好ましい。
【００８９】
縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
【００９０】
縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
【００９１】
縮合反応に用いる塩基の量は、保護されたインドリン誘導体（ＶＩＩ）に対して０．５〜２０当量が好ましく、１〜５当量がより好ましい。
【００９２】
縮合反応の反応温度は、−４０℃〜２００℃が好ましく、−２０℃〜１５０℃がより好ましい。
【００９３】
縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間〜３０時間が好ましい。
【００９４】
縮合反応に用いる保護されたインドリン誘導体（ＶＩＩ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ〜１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
【００９５】
ベンジル保護されたインドリン誘導体（ＩＩ−ｃ）は、例えば、スキーム８に示すように、保護されたインドリン誘導体（ＩＸ）のＰｒｏの脱保護反応と続くインドール誘導体（ＶＩＩＩ）との縮合反応により得ることができる。
【化１０】
2019004413.tif 000013
［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
【００９６】
Ｐｒｏの脱保護反応は、公知の方法（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社）又はそれに準ずる方法に従って行うことができる。
【００９７】
縮合反応に用いるインドール誘導体（ＶＩＩＩ）の量は、保護されたインドリン誘導体（ＩＸ）に対して０．５〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましい。
【００９８】
縮合反応に用いる縮合剤としては、例えば、クロロギ酸エチル、オキサリルクロライド、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート、１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスファート又は２−メチル−６−ニトロ安息香酸無水物が挙げられるが、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ヘキサフルオロリン酸２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム又はヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウムが好ましい。
【００９９】
縮合反応に用いる縮合剤の量は、インドール誘導体（ＶＩＩＩ）に対して０．１〜１００当量が好ましく、０．３〜３０当量がより好ましい。
【０１００】
縮合反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
【０１０１】
縮合反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
【０１０２】
縮合反応に用いる塩基の量は、保護されたインドリン誘導体（ＩＸ）に対して０．５〜２０当量が好ましく、１〜５当量がより好ましい。
【０１０３】
縮合反応の反応温度は、−４０℃〜２００℃が好ましく、−２０℃〜１５０℃がより好ましい。
【０１０４】
縮合反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間〜３０時間が好ましい。
【０１０５】
縮合反応に用いる保護されたインドリン誘導体（ＩＸ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ〜１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
【０１０６】
保護されたインドリン誘導体（ＩＸ）は、後述の実施例に示した方法、公知の方法又はそれらに準ずる方法により合成することができる。
【０１０７】
インドール誘導体（ＶＩＩＩ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
【０１０８】
保護されたインドリン誘導体（ＶＩＩ）は、例えば、スキーム９に示すように、アニリン誘導体（Ｘ）の求電子反応により得ることができる。
【化１１】
2019004413.tif 000014
［式中、各記号は、上記定義に同じである。］
【０１０９】
求電子反応に用いる求電子剤は、無水酢酸、塩化アセチル、無水プロピオン酸、塩化プロピオニル、無水トリフルオロ酢酸又は塩化トリフルオロアセチルが挙げられる。
【０１１０】
求電子反応に用いる求電子剤の量は、アニリン誘導体（Ｘ）に対して０．５〜１０当量が好ましく、１〜３当量がより好ましい。
【０１１１】
求電子反応に用いる反応溶媒としては、用いる試薬の種類に応じて適宜選択されるが、反応を阻害しないものであれば特に限定されず、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン若しくは１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチル若しくは酢酸プロピル等のエステル系溶媒、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒、アセトニトリル若しくはプロピオニトリル等のニトリル系溶媒又はそれらの混合溶媒が挙げられるが、ジクロロメタン、クロロホルム若しくは１，２−ジクロロエタン等の塩素系溶媒又はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリドン若しくはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好ましい。
【０１１２】
求電子反応は、所望により塩基を用いてもよい。用いる塩基としては、例えば、水素化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム若しくは炭酸カリウム等の無機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が挙げられるが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン若しくはピリジン等の有機塩基又はそれらの混合物が好ましい。
【０１１３】
求電子反応に用いる塩基の量は、アニリン誘導体（Ｘ）に対して０．５〜２０当量が好ましく、１〜５当量がより好ましい。
【０１１４】
求電子反応の反応温度は、−４０℃〜２００℃が好ましく、−２０℃〜１５０℃がより好ましい。
【０１１５】
求電子反応の反応時間は、反応温度等の条件に応じて適宜選択されるが、３０分間〜３０時間が好ましい。
【０１１６】
求電子反応に用いるアニリン誘導体（Ｘ）の反応開始時の濃度は、１ｍｍｏｌ／Ｌ〜１ｍｏｌ／Ｌが好ましい。
【０１１７】
求電子反応に用いる求電子剤は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
【０１１８】
アニリン誘導体（Ｘ）は、購入することができるか又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法により合成することができる。
【０１１９】
また、本発明の細胞毒性剤は、インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴としている。
【０１２０】
「細胞毒性剤」とは、細胞機能を障害する若しくは細胞増殖を阻害することによって細胞死を引き起こす化合物又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する組成物を意味する。インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、ＤＮＡの複製による細胞分裂機構に作用すると考えられるため、該機構を有する細胞であれば特に限定はないが、例えば、がん細胞、免疫細胞、細菌、真菌、病原性原虫、酵母又はウィルスに対する細胞毒性剤として好適に用いられる。
【０１２１】
インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、サル、ウシ、ヒツジ又はヒト）、特にヒトに対して投与した場合に、有用な細胞毒性剤として用いることができる。
【０１２２】
インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、そのままあるいは薬理学的に許容される担体を配合し、細胞毒性剤として上記の哺乳動物に経口的又は非経口的に投与することができる。
【０１２３】
「非経口的な投与」としては、例えば、注射投与、経鼻投与、経肺投与、経皮投与、舌下投与又は直腸投与が挙げられ、注射投与が好ましい。
【０１２４】
「注射投与」とは、注射又は点滴によって細胞毒性剤を全身又は局部的に投与することであり、投与する部位としては、例えば、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下が挙げられる。
【０１２５】
インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩を有効成分とする細胞毒性剤は、製剤技術分野で一般的に用いられている公知の方法（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ｌａｔｅｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍａｒｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  Ｅａｓｔｏｎ，  Ｕ．Ｓ．Ａ）により製造することができる。また、上記の細胞毒性剤は、必要に応じて、製剤分野において通常用いられている賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤、着色剤、保存剤、芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤、緩衝剤、等張化剤、流動性促進剤等の添加剤を適宜、適量含有させることができる。薬理学的に許容される担体としては、これらの添加剤が挙げられる。
【０１２６】
インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩を有効成分とする細胞毒性剤は、当該作用メカニズムに基づき病態の改善又は症状の寛解が期待できる疾患、例えば、がん、自己免疫疾患又は感染症に対する治療薬として利用できる。
【０１２７】
「がん」とは、制御されない異常な増殖を行なう細胞集団によって引き起こされる疾患であり、例えば、咽頭癌、喉頭癌、舌癌、非小細胞肺癌、乳癌、食道癌、胃癌、大腸癌、子宮癌、子宮内膜癌、卵巣癌、肝臓癌、膵臓癌、胆嚢癌、胆管癌、腎臓癌、腎盂尿管癌、膀胱癌、前立腺癌、悪性黒色腫、甲状腺癌、神経骨肉腫、軟骨肉腫、横紋筋肉腫、血管肉腫、繊維肉腫、神経膠腫、白血病、悪性リンパ腫、神経芽細胞種、骨髄腫又は脳腫瘍が挙げられる。
【０１２８】
「がん細胞」とは、がんの原因となる細胞であり、例えば、咽頭癌の細胞、喉頭癌の細胞、舌癌の細胞、非小細胞肺癌の細胞、乳癌の細胞、食道癌の細胞、胃癌の細胞、大腸癌の細胞、子宮癌の細胞、子宮内膜癌の細胞、卵巣癌の細胞、肝臓癌の細胞、膵臓癌の細胞、胆嚢癌の細胞、胆管癌の細胞、腎臓癌の細胞、腎盂尿管癌の細胞、膀胱癌の細胞、前立腺癌の細胞、悪性黒色腫の細胞、甲状腺癌の細胞、神経骨肉腫の細胞、軟骨肉腫の細胞、横紋筋肉腫の細胞、血管肉腫の細胞、繊維肉腫の細胞、神経膠腫の細胞、白血病の細胞、悪性リンパ腫の細胞、神経芽細胞種の細胞、骨髄腫の細胞又は脳腫瘍の細胞が挙げられる。
【０１２９】
「免疫細胞」とは、自己免疫疾患の原因となる細胞であり、例えば、Ｂ細胞、Ｔ細胞、樹状細胞、マクロファージ、ＮＫ細胞、好中球、好酸球又は好塩基球が挙げられる。
【０１３０】
「自己免疫疾患」とは、生体内の物質又は細胞に対する異常な免疫応答によって引き起こされる疾患であり、例えば、活動性慢性肝炎、アディソン病、強直性脊椎炎、抗リン脂質症候群、関節炎、アトピー性アレルギー、ベーチェット病、心筋症、セリアック病、コーガン症候群、寒冷凝血素症、クローン病、クッシング症候群、皮膚筋炎、円板状エリテマトーデス、紅斑、線維筋痛、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、移植片対宿主病、グレーブス病、ギラン−バレー症候群、橋本病、特発性副腎萎縮、特発性肺線維症、ＩｇＡ腎症、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、若年性関節炎、Ｌａｍｂｅｒｔ−Ｅａｔｏｎ筋無力症候群、扁平苔癬、ルポイド肝炎、狼瘡、リンパ球減少症、メニエール病、混合結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症、悪性貧血、多内分泌腺機能低下症候群、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、乾癬性関節炎、レイノー現象、ライター症候群、関節リウマチ、シュミット症候群、強皮症、シェーグレン症候群、スティフマン症候群、交感性眼炎、全身性エリテマトーデス、高安動脈炎、側頭動脈炎、甲状腺亢進、Ｂ型インスリン抵抗性、Ｉ型糖尿病、潰瘍性大腸炎、ブドウ膜炎、白斑又はウェゲナー肉芽腫症が挙げられる。
【０１３１】
「感染症」とは、細菌、真菌、病原性原虫、酵母又はウィルス等による感染によって引き起こされる疾患であり、上記感染症の原因となる、細菌、真菌、病原性原虫、酵母又はウィルスとしては、例えば、ブドウ球菌、レンサ球菌、腸球菌、コリネバクテリウム、バシラス、リステリア、ペプトコッカス、ペプトストレプトコッカス、クロストリジウム、ユーバクテリウム、プロピオニバクテリウム、乳酸桿菌、ナイセリア、ブランハメラ、ヘモフィルス、ボルデテラ、大腸菌、シトロバクター、サルモネラ、赤痢菌、クレブシエラ菌、エンテロバクター、セラチア、ハフニア、プロテウス、モルガネラ、プロビデンシア、エルシニア、キャンピロバクター、ビブリオ、エロモナス、シュードモナス、キサントモナス、アシネトバクター、フラボバクテリウム、ブルセラ、レジオネラ、ベイロネラ、バクテロイデス、フゾバクテリウム、マイコプラズマ、リケッチア、クラミジア、アスペルギルス、ワリプトコッカス、カンジダ、ムコール、スポロトリクム、皮膚糸状菌、マラリア原虫、赤痢アメーバ、膣トリコモナス、ニューモチスカリニ、エキノコックス、肺炎双球菌、インフルエンザ菌、結核菌、破傷風菌、アデノウィルス、ヘルペスウィルス、パピローマウィルス、エイズウィルス、フィロウィルス、日本脳炎ウィルス、狂犬病ウィルス、ポリオウィルス、ライノウィルス、インフルエンザウィルス、Ｂ型肝炎ウィルス又はＣ型肝炎ウィルスが挙げられる。
【０１３２】
インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩が細胞毒性を有することは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験を用いて評価することができる。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験としては、例えば、化合物処置後の死細胞数又は生存細胞数を測定する、トリパンブルー色素排除法、乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）活性法、［３Ｈ］チミジン取り込み法、プロピジウムイオダイド核染色法、ＭＴＴ，ＭＴＳ及びＷＳＴ等の色素を用いる方法（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌ  ｉｎ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２０００年，２．６．１−２．６．２７）又はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏｗ（Ｐｒｏｍｅｇａ社製品）等を用いてＡＴＰ量を測定する方法等が挙げられるが、化合物処置後の生存細胞数をＭＴＳ法を用いて測定し、その時の細胞毒性の値を５０％作用濃度（ＥＣ５０）によって求める方法が好ましい。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験には、マウスリンパ球性白血病由来のＬ１２１０細胞等が用いられる。
【実施例】
【０１３３】
以下、実施例及び参考例を用いて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【０１３４】
なお、実施例化合物の合成に使用される化合物で合成法の記載のないものについては、市販又は公知の方法若しくはそれに準ずる方法で合成した化合物を使用した。ＮＭＲデータ中に示される溶媒名は、測定に使用した溶媒を示す。また、４００ＭＨｚＮＭＲスペクトルは、ＪＮＭ−ＡＬ４００型核磁気共鳴装置（日本電子社製）又はＪＮＭ−ＥＣＳ４００型核磁気共鳴装置（日本電子社製）を用いて測定した。ケミカルシフトは、テトラメチルシランを基準として、δ（単位：ｐｐｍ）で表し、シグナルはそれぞれｓ（一重線）、ｄ（二重線）、ｔ（三重線）、ｑ（四重線）、ｍ（多重線）、ｂｒ（幅広）、ｄｄ（二重二重線）、ｄｔ（二重三重線）、ｄｄｄ（二重二重二重線）、ｄｑ（二重四重線）又はｔｔ（三重三重線）で表した。プロトンＮＭＲスペクトルで、ＯＨやＮＨプロトン等ブロードで確認できないものについてはデータに記載していない。分子量は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １２００  Ｓｅｒｉｅｓ、６１３０Ａ（アジレント・テクノロジー社製）（以下、ＬＣ／ＭＳ−１）又はＡｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  ＩＩ  Ｓｅｒｉｅｓ、６１３０Ｂ（アジレント・テクノロジー社製）（以下、ＬＣ／ＭＳ−２）を用いて、エレクトロスプレーイオン化（以下、ＥＳＩ）法により測定した。ＬＣ／ＭＳ−１及びＬＣ／ＭＳ−２の分析条件は後段に記す。以下の実施例及び参考例の記載中、以下の略号を用いる。
Ａｃ：アセチル基；Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基；Ｂｎ：ベンジル基；Ｍｅ：メチル基；
４−（ベンジルオキシ）−６−ブロモナフタレン誘導体：
【化１２】
2019004413.tif 000015
；
８−（ベンジルオキシ）−２−ナフトエ酸メチル誘導体：
【化１３】
2019004413.tif 000016
【０１３５】
（参考例１）４−（ベンジルオキシ）−６−ブロモナフタレン誘導体の合成：
【化１４】
2019004413.tif 000017
アルゴン雰囲気下、（４−（ベンジルオキシ）−６−ブロモナフタレン−２−イル）カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチル（１００ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦ）溶液（１．０ｍＬ）に４−ジメチルアミノピリジン（以下、ＤＭＡＰ）（２８ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（以下、Ｂｏｃ２Ｏ）（１２５ｍｇ，０．５８ｍｍｏｌ）を加え、６０℃で３時間撹拌した。反応液を濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／６）により精製し、表題化合物（以下、参考例１の化合物）を無色固体として得た（１０５ｍｇ，収率８６％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．３９（１８Ｈ，ｓ），５．２３（２Ｈ，ｓ），６．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ），７．３８−７．５１（５Ｈ，ｍ），７．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．６Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２８［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１３６】
（参考例２）８−（ベンジルオキシ）−２−ナフトエ酸メチル誘導体の合成：
【化１５】
2019004413.tif 000018
アルゴン雰囲気下、参考例１の化合物（１．１９ｇ，２．２５ｍｍｏｌ）の脱水ＤＭＦ溶液（２０ｍＬ）にＮ−ホルミルサッカリン（１．４３ｇ，６．７５ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（１５ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（５８ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ）、フッ化カリウム（６５４ｍｇ，１１．３ｍｍｏｌ）を加え、簡易脱気（反応系を真空ポンプで吸引し、泡出たせ、アルゴンガスを吹き込む操作を３回繰り返す操作）し、８０℃で終夜撹拌した。さらにトリエチルアミン（０．４７ｍＬ，３．３８ｍｍｏｌ）、脱水メタノール（１．０ｍＬ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液をセライトろ過し、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／１０）により精製し、表題化合物（以下、参考例２の化合物）を無色アモルファスとして得た（４１８ｍｇ，収率３７％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．３８（１８Ｈ，ｓ），３．９８（３Ｈ，ｓ），５．２９（２Ｈ，ｓ），６．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．１９−７．２５（１Ｈ，ｍ），７．３１−７．３７（１Ｈ，ｍ），７．４２（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．５１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．０Ｈｚ），９．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５０８［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１３７】
（参考例３）８−（ベンジルオキシ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２−ナフトエ酸メチルの合成： 
【化１６】
2019004413.tif 000019
アルゴン雰囲気下、参考例２の化合物（７２２ｍｇ，１．４２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１０ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（以下、ＴＦＡ）（０．２１８ｍＬ，２．８４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣を再沈殿法（クロロホルム／ｎ−ヘキサン）により精製し、表題化合物（以下、参考例３の化合物）を無色固体として得た（４８０ｍｇ，収率８３％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５５（９Ｈ，ｓ），３．９５（３Ｈ，ｓ），５．２８（２Ｈ，ｓ），６．６７（１Ｈ，ｓ），７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．３６−７．４６（４Ｈ，ｍ），７．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），８．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４，１．６Ｈｚ），８．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：４０８［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１３８】
（参考例４）８−（ベンジルオキシ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−５−ヨード−２−ナフトエ酸メチルの合成：
【化１７】
2019004413.tif 000020
アルゴン雰囲気下、参考例３の化合物（４８０ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（以下、ＴＨＦ）−メタノール混合溶液（５．０ｍＬ／５．０ｍＬ）にＮ−ヨードスクシンイミド（３９８ｍｇ，１．７７ｍｍｏｌ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１１２ｍｇ，０．５９ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、１時間撹拌し、さらに０℃で３時間撹拌した。反応液に飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／ｎ−ヘキサン＝１／２）により精製し、表題化合物（以下、参考例４の化合物）を無色固体として得た（５７６ｍｇ，収率９２％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５８（９Ｈ，ｓ），３．９６（３Ｈ，ｓ），５．３２（２Ｈ，ｓ），７．３７−７．５８（４Ｈ，ｍ），７．５７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），８．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．１０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．０Ｈｚ），８．１５（１Ｈ，ｂｒｓ），８．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３４［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１３９】
（参考例５）８−（ベンジルオキシ）−６−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（３−クロロアリル）アミノ）−５−ヨード−２−ナフトエ酸メチルの合成：
【化１８】
2019004413.tif 000021
アルゴン雰囲気下、参考例４の化合物（５７６ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）の脱水ＤＭＦ溶液（３．０ｍＬ）にヨウ化テトラブチルアンモニウム（２０ｍｇ，０．０５４ｍｍｏｌ）、水素化ナトリウム（５５重量％鉱油分散物）（１１８ｍｇ，２．７０ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１時間撹拌した。さらに１，３−ジクロロプロペン（０．２６６ｍＬ，３．２４ｍｍｏｌ）を加え、０℃で３時間撹拌した。さらに室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／ｎ−ヘキサン＝１／１）により精製し、表題化合物（以下、参考例５の化合物）を黄色アモルファスとして得た（５８９ｍｇ，収率９０％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．３０（９Ｈ，ｓ），３．７５−３．８１（１Ｈ，ｍ），４．００（３Ｈ，ｓ），４．４５−４．６２（１Ｈ，ｍ），５．２３−５．３４（２Ｈ，ｍ），５．９３−６．１０（２Ｈ，ｍ），７．３５−７．５２（６Ｈ，ｍ），８．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．８Ｈｚ），９．０２−９．０８（１Ｈ，ｍ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：６０８［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４０】
（参考例６）３−（ｔｅｒｔ−ブチル）  ７−メチル−５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３，７−ジカルボキシラートの合成：
【化１９】
2019004413.tif 000022
参考例５の化合物（１４０ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）の脱水ベンゼン溶液（５．０ｍＬ）をアルゴンガスで３０分間バブリングした。この溶液にトリストリメチルシラン（０．０７２ｍＬ，０．２１ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（以下、ＡＩＢＮ）（９ｍｇ，０．０５２ｍｍｏｌ）を加え、３時間加熱還流した。反応液を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／ｎ−ヘキサン＝１／１）により精製し、表題化合物（以下、参考例６の化合物）を黄色アモルファスとして得た（９６ｍｇ，収率８３％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５８（９Ｈ，ｓ），３．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ），３．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．８，２．４Ｈｚ），３．９５（３Ｈ，ｓ），３．９２−３．９９（１Ｈ，ｍ），４．１１−４．１８（１Ｈ，ｍ），４．２４−４．３０（１Ｈ，ｍ），５．２９（２Ｈ，ｓ），７．３５−７．５０（５Ｈ，ｍ），７．５２−７．５８（１Ｈ，ｍ），７．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ），８．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，１．６Ｈｚ），９．００−９．０５（１Ｈ，ｍ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８２［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４１】
（参考例７）５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−カルボン酸メチルの合成：
【化２０】
2019004413.tif 000023
アルゴン雰囲気下、参考例６の化合物（９６ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）に４Ｎ塩化水素−ジオキサン溶液（３．０ｍＬ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液を濃縮し、得られた残渣にＤＭＦ（３．０ｍＬ）、５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸（６６ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（以下、ＥＤＣＩ）（１１５ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／ｎ−ヘキサン＝１／１）により精製し、表題化合物（以下、参考例７の化合物）を黄色アモルファスとして得た（８０ｍｇ，収率６８％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：３．４８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ），３．６３−３．６８（１Ｈ，ｍ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９７（３Ｈ，ｓ），４．０８−４．１６（１Ｈ，ｍ），４．６２−４．７０（１Ｈ，ｍ），４．７６−４．８１（１Ｈ，ｍ），５．９２（２Ｈ，ｓ），６．８５（１Ｈ，ｓ），７．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），７．０９（１Ｈ，ｓ），７．３２−７．４５（３Ｈ，ｍ），７．５５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．０Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｓ），９．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），９．５２（１Ｈ，ｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５８５［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４２】
（実施例１）１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−５−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−カルボン酸メチルの合成：
【化２１】
2019004413.tif 000024
アルゴン雰囲気下、参考例７の化合物（３１ｍｇ，０．０５３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ−メタノール混合溶液（６．０ｍＬ／２．０ｍＬ）に１０重量％パラジウム／カーボン（３１ｍｇ、５０重量％含水）、２５重量％ギ酸アンモニウム水溶液（０．４００ｍＬ）を加え、室温で７０分間撹拌した。反応液をセライトろ過し、水を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝１／１００→１／５０）により精製し、表題化合物（以下、実施例１の化合物）を黄色固体として得た（８ｍｇ，収率３０％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．７９（３Ｈ，ｓ），３．８１（３Ｈ，ｓ），３．８４−３．９０（１Ｈ，ｍ），３．９１（３Ｈ，ｓ），４．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，２．８Ｈｚ），４．２２−４．２８（１Ｈ，ｍ），４．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，２．０Ｈｚ），４．８０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），６．９６（１Ｈ，ｓ），７．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｓ），７．９３−７．９７（２Ｈ，ｍ），８．０７（１Ｈ，ｓ），８．８１（１Ｈ，ｓ），１０．９０（１Ｈ，ｂｒｓ），１１．５２（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９５［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４３】
（参考例８）５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−カルボン酸の合成：
【化２２】
2019004413.tif 000025
アルゴン雰囲気下、参考例７の化合物（３６ｍｇ，０．０６２ｍｍｏｌ）のメタノール懸濁液（４．０ｍＬ）に、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（１．０ｍＬ）を加え、６０℃で２日間撹拌した。反応液に１Ｎ塩酸を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝１／５０）により精製し、表題化合物（以下、参考例８の化合物）を黄色アモルファスとして得た（１４ｍｇ，収率３７％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：３．４９−３．５８（２Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９５（３Ｈ，ｓ），４．１１−４．１８（２Ｈ，ｍ），５．０２−５．０６（２Ｈ，ｍ），５．３０−５．３９（２Ｈ，ｍ），６．８７（１Ｈ，ｓ），７．００−７．１４（２Ｈ，ｍ），７．３４−７．６０（５Ｈ，ｍ），８．０９−８．２３（２Ｈ，ｍ），８．９４（１Ｈ，ｓ），９．１０（１Ｈ，ｓ），９．５９（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５６９［Ｍ−Ｈ］−．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４４】
（参考例９）Ｎ−（４−アミノフェネチル）−５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−カルボキサミドの合成：
【化２３】
2019004413.tif 000026
アルゴン雰囲気下、参考例８の化合物（１２ｍｇ，０．０２１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１．０ｍＬ）に、４−（２−アミノエチル）アニリン（４ｍｇ，０．０３２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．００５ｍＬ，０．０３２ｍｍｏｌ）、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス(ジメチルアミノ)ホスホニウム（１４ｍｇ，０．０３２ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール／クロロホルム＝１／５０）により精製し、表題化合物（以下、参考例９の化合物）を茶色アモルファスとして得た（１１ｍｇ，収率４８％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．８４（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．４７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．５８（２Ｈ，ｂｒｓ），３．６５−３．７０（２Ｈ，ｍ），３．９２（３Ｈ，ｓ），３．９５（３Ｈ，ｓ），４．０８−４．１５（１Ｈ，ｍ），４．６５−４．７１（１Ｈ，ｍ），４．７７−４．８２（１Ｈ，ｍ），５．２７−５．３６（２Ｈ，ｍ），６．２９−６．３４（１Ｈ，ｍ），６．５７−６．６１（２Ｈ，ｍ），６．８７（１Ｈ，ｓ），６．９２−７．０５（４Ｈ，ｍ），７．１０（１Ｈ，ｓ），７．３６−７．４７（３Ｈ，ｍ），７．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．６Ｈｚ），８．６０（１Ｈ，ｓ），９．４０（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：６８９［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４５】
（実施例２）Ｎ−（４−アミノフェネチル）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−５−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−カルボキサミドの合成：
【化２４】
2019004413.tif 000027
参考例７の化合物の代わりに、参考例９の化合物（７ｍｇ，０．０１０ｍｍｏｌ）を用いて、それ以外は実施例１と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例２の化合物）を白色固体（５ｍｇ，収率７３％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．６３−２．６９（２Ｈ，ｍ），３．３８−３．４８（２Ｈ，ｍ），３．６４−３．６９（１Ｈ，ｍ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．８４（３Ｈ，ｓ），３．８０−３．８６（１Ｈ，ｍ），３．９８−４．０３（１Ｈ，ｍ），４．２２（１Ｈ，ｂｒｓ），４．５１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），４．７５−４．８５（２Ｈ，ｍ），６．４５−６．４９（２Ｈ，ｍ），６．８６−７．１１（５Ｈ，ｍ），７．８４−７．９１（２Ｈ，ｍ），８．００（１Ｈ，ｓ），８．６３−８．６８（２Ｈ，ｍ），１０．６９（１Ｈ，ｓ），１１．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５９９［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４６】
（参考例１０）７−アセトアミド−５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルの合成：
【化２５】
2019004413.tif 000028
アルゴン雰囲気下、７−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチル（１０６ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３．０ｍＬ）に、１Ｍのフッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム（以下、ＴＢＡＦ）−ＴＨＦ溶液（０．２４７ｍＬ，０．２５ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）により粗精製し、得られた茶色アモルファスにジクロロメタン（２．０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．０２７ｍＬ，０．１９ｍｍｏｌ）、無水酢酸（０．０１８ｍＬ，０．１９ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／４→１／２）により精製し、表題化合物（以下、参考例１０の化合物）を茶色アモルファスとして得た（４２ｍｇ，収率８５％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．６０（９Ｈ，ｓ），２，２１（３Ｈ，ｓ），３．４３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．８８−３．９８（２Ｈ，ｍ），４．０９−４．１５（１Ｈ，ｍ），４．２０−４．２７（１Ｈ，ｍ），５．２３（２Ｈ，ｓ），７．３５−７．６１（７Ｈ，ｍ），７．８６−８．０４（３Ｈ，ｍ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：４８１［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４７】
（参考例１１）Ｎ−（５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−イル）アセトアミドの合成：
【化２６】
2019004413.tif 000029
参考例６の化合物の代わりに、参考例１０の化合物（４２ｍｇ，０．０８６ｍｍｏｌ）を用いて、それ以外は参考例７と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１１の化合物）を白色固体（９ｍｇ，収率１９％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．２４（３Ｈ，ｓ），３．４８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．９８（６Ｈ，ｓ），３．９８−４．０２（１Ｈ，ｍ），４．１０−４．１７（１Ｈ，ｍ），４．６６−４．７４（１Ｈ，ｍ），４．７８−４．８２（１Ｈ，ｍ），５．２６−５．３５（２Ｈ，ｍ），６．９１（１Ｈ，ｓ），７．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．１３（１Ｈ，ｓ），７．３７−７．４８（４Ｈ，ｍ），７．５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．７０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），８．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１．６Ｈｚ），８．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），８．１９（１Ｈ，ｓ），９．３１−９．３５（１Ｈ，ｍ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５８４［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４８】
（実施例３）（Ｎ−（１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−５−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−イル）アセトアミドの合成：
【化２７】
2019004413.tif 000030
参考例７の化合物の代わりに、参考例１１の化合物（９ｍｇ，０．０１６ｍｍｏｌ）を用いて、反応時間を３０分間として、それ以外は実施例１と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、実施例３の化合物）を白色固体（６ｍｇ，収率７１％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２．１３（３Ｈ，ｓ），３．８２（３Ｈ，ｓ），３．８４（３Ｈ，ｓ），３．８４−３．９０（１Ｈ，ｍ），４．０６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．８，２．８Ｈｚ），４．２２（１Ｈ，ｍ），４．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ），４．７８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），７．００（１Ｈ，ｓ），７．０９（１Ｈ，ｓ），７．１８（１Ｈ，ｓ），７．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．０Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．９９（１Ｈ，ｓ），８．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），１０．１２（１Ｈ，ｂｒｓ），１０．３８（１Ｈ，ｂｒｓ），１１．４９（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：４９４［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１４９】
（参考例１２）５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−７−（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルの合成：
【化２８】
2019004413.tif 000031
アルゴン雰囲気下、７−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチル（７０２ｍｇ，１．０６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（３．０ｍＬ）に、１ＭのＴＢＡＦ−ＴＨＦ溶液（１．５９ｍＬ，１．５９ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣にジクロロメタン（３．０ｍＬ）、ピリジン（０．０９４ｍＬ，１．１７ｍｍｏｌ）、無水トリフルオロ酢酸（０．２２４ｍＬ，１．５９ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝２／３）により精製し、表題化合物（以下、参考例１２の化合物）を茶色アモルファスとして得た（５０４ｍｇ，収率８９％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．６０（９Ｈ，ｓ），３．４５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．８６−３．９８（２Ｈ，ｍ），４．１０−４．２４（２Ｈ，ｍ），５．３４（２Ｈ，ｓ），７．３６−７．５３（５Ｈ，ｍ），７．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．８８−７．９２（２Ｈ，ｍ），８．１１−８．２２（２Ｈ，ｍ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５３５［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１５０】
（参考例１３）Ｎ−（５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−イル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミドの合成：
【化２９】
2019004413.tif 000032
参考例６の化合物の代わりに、参考例１２の化合物（２６２ｍｇ，０．４９ｍｍｏｌ）を用いて、それ以外は参考例７と同様の方法にて合成を行い、表題化合物（以下、参考例１３の化合物）を黄色固体（２１５ｍｇ，収率６９％）として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：３．４８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｍ），３．７８（１Ｈ，ｍ），３．８７（３Ｈ，ｓ），３．９１（３Ｈ，ｓ），４．６４−４．７０（１Ｈ，ｍ），４．７４−４．８２（１Ｈ，ｍ），５．２３−５．３３（２Ｈ，ｍ），６．８７（１Ｈ，ｓ），７．０３−７．１１（２Ｈ，ｍ），７．３６−７．５５（５Ｈ，ｍ），７．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），７．９６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．０Ｈｚ），８．１８−８．２９（３Ｈ，ｍ），９．３９（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：６３８［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１５１】
（参考例１４）（７−アミノ−５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イル）（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−イル）メタノンの合成：
【化３０】
2019004413.tif 000033
アルゴン雰囲気下、参考例１３の化合物（１５ｍｇ，０．０２４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ／メタノール／水混合溶液（１．０ｍＬ／１．０ｍＬ／１．０ｍＬ）に、水酸化リチウム一水和物（１１ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／１）により精製し、表題化合物（以下、参考例１４の化合物）を黄色固体として得た（１０ｍｇ，収率９２％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．７８（３Ｈ，ｓ），３．７９（３Ｈ，ｓ），３．７９−３．８２（１Ｈ，ｍ），４．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，２．８Ｈｚ），４．１０−４．１６（１Ｈ，ｍ），４．４６−４．５３（１Ｈ，ｍ），４．６３−４．７１（１Ｈ，ｍ），５．２１（２Ｈ，ｂｒｓ），５．４０（２Ｈ，ｓ），６．９２（１Ｈ，ｓ），６．９６−７．０１（２Ｈ，ｍ），７．１２（１Ｈ，ｓ），７．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），７．３２−７．４４（３Ｈ，ｍ），７．５２−７．６４（３Ｈ，ｍ），７．９９（１Ｈ，ｂｒｓ），１１．４３（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５４２［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−１）【０１５２】
（参考例１５）（２−（（５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−イル）アミノ）−２−オキソエチル）カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルの合成：
【化３１】
2019004413.tif 000034
アルゴン雰囲気下、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（２３ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（３．０ｍＬ）にクロロギ酸エチル（０．０１２ｍＬ，０．１３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．０１８ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を濃縮することにより得られた残渣にジクロロメタン（３．０ｍＬ）、参考例１４の化合物（２０ｍｇ，０．０４４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．０１８ｍＬ，０．１３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（６ｍｇ，０．０４４ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣を分取薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／クロロホルム＝１／４）により精製し、表題化合物（以下、参考例１５の化合物）を黄色アモルファスとして得た（１１ｍｇ，収率３５％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５１（９Ｈ，ｓ），３．３０−３．４０（１Ｈ，ｍ），３．７６−３．８８（１Ｈ，ｍ），３．９４（３Ｈ，ｓ），３．９５（３Ｈ，ｓ），３．９５−４．０７（３Ｈ，ｍ），４．６４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，２．０Ｈｚ），５．１５（２Ｈ，ｓ），５．３０−５．３６（１Ｈ，ｍ），６．９２（１Ｈ，ｓ），７．０１（１Ｈ，ｓ），７．１０（１Ｈ，ｓ），７．３５−７．４９（３Ｈ，ｍ），７．４９−７．５５（２Ｈ，ｍ），７．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．０Ｈｚ），８．０２−８．１０（２Ｈ，ｍ），８．３８（１Ｈ，ｂｒｓ），９．５２（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：６９９［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−２）【０１５３】
（実施例４）２−アミノ−Ｎ−（１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−５−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−イル）アセトアミド塩酸塩の合成：
【化３２】
2019004413.tif 000035
参考例７の化合物の代わりに、参考例１５の化合物（１１ｍｇ，０．０１５ｍｍｏｌ）を用いて、反応時間を４０分間として、それ以外は実施例１と同様の方法にて合成を行い、脱ベンジル体を白色固体として得た。得られた固体に４Ｎ塩化水素／ジオキサン溶液（１．０ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を濃縮することにより、表題化合物（以下、実施例４の化合物）を白色固体として得た（５ｍｇ，収率６６％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．４０−３．４８（１Ｈ，ｍ），３．６４−３．６９（１Ｈ，ｍ），３．７６（３Ｈ，ｓ），３．７８（３Ｈ，ｓ），３．７８−３．８３（１Ｈ，ｍ），４．０２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，３．２Ｈｚ），４．１３−４．２０（１Ｈ，ｍ），４．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，２．０Ｈｚ），４．７０−４．８０（１Ｈ，ｍ），６．９３（１Ｈ，ｓ），７．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．１２（１Ｈ，ｓ），７．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．２，２．４Ｈｚ），７．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），７．９６（１Ｈ，ｓ），８．１９（３Ｈ，ｂｒｓ），８．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ），１０．４２（１Ｈ，ｂｒｓ），１０．７１（１Ｈ，ｂｒｓ），１１．４４（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５０９［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−２）【０１５４】
（参考例１６）（２−（５−（ベンジルオキシ）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−カルボキサミド）エチル）カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルの合成：
【化３３】
2019004413.tif 000036
アルゴン雰囲気下、参考例８の化合物（７ｍｇ，０．０１２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（２．０ｍＬ）に（２−アミノエチル）カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチル（０．００３ｍＬ，０．０１８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．００６ｍＬ，０．０４０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（４ｍｇ，０．０１８ｍｍｏｌ）を加え、室温で終夜撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過、続いて濃縮することにより得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝２／１→１／０）により精製し、表題化合物（以下、参考例１６の化合物）を黄色アモルファスとして得た（４ｍｇ，収率５１％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４１（９Ｈ，ｓ），３．４１−３．４８（４Ｈ，ｍ），３．５７−３．６４（２Ｈ，ｍ），３．９２（３Ｈ，ｓ），３．９５（３Ｈ，ｓ），４．０７−４．１５（１Ｈ，ｍ），４．６３−４．６９（１Ｈ，ｍ），４．７５−４．８０（１Ｈ，ｍ），５．０１−５．１０（１Ｈ，ｍ），５．２８−５．３７（２Ｈ，ｍ），６．８６（１Ｈ，ｓ），７．０２（１Ｈ，ｓ），７．１０（１Ｈ，ｓ），７．３３−７．３７（１Ｈ，ｍ），７．４０−７．４６（３Ｈ，ｍ），７．５４−７．５８（２Ｈ，ｍ），７．６６−７．７３（１Ｈ，ｍ），７．９０−７．９８（１Ｈ，ｍ），８．２０（１Ｈ，ｓ），８．７７（１Ｈ，ｓ），９．３６（１Ｈ，ｓ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：７１３［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−２）【０１５５】
（参考例１７）Ｎ−（２−アミノエチル）−１−（クロロメチル）−３−（５，６−ジメトキシ−１Ｈ−インドール−２−カルボニル）−５−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−７−カルボキサミド塩酸塩の合成：
【化３４】
2019004413.tif 000037
参考例７の化合物の代わりに、参考例１６の化合物（４ｍｇ，０．００６ｍｍｏｌ）を用いて、反応時間を４０分として、それ以外は実施例１と同様の方法にて合成を行い、脱ベンジル体を白色固体として得た。得られた脱ベンジル体に４Ｎ塩化水素／ジオキサン溶液（２．０ｍＬ）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を濃縮することにより、表題化合物（以下、参考例１７の化合物）を無色固体として得た（３ｍｇ，収率９２％）。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：３．２２−３．４８（６Ｈ，ｍ），３．５５（３Ｈ，ｓ），３．５７（３Ｈ，ｓ），３．６３−３．６７（１Ｈ，ｍ），３．７５−３．８０（１Ｈ，ｍ），３．９５−４．０４（１Ｈ，ｍ），４．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．８，２．０Ｈｚ），４．４１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），４．５３−４．６０（１Ｈ，ｍ），６．７３（１Ｈ，ｓ），６．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），６．９１（１Ｈ，ｓ），７．４２−７．６９（１Ｈ，ｍ），７．６９−７．７４（２Ｈ，ｍ），７．８２（１Ｈ，ｓ），８．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），８．５０−８．５８（１Ｈ，ｍ），１１．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）．
ＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：５２３［Ｍ＋Ｈ］＋．（ＬＣ／ＭＳ−２）【０１５６】
ＬＣ／ＭＳ−１の分析条件は以下の通りである。
（ＬＣ／ＭＳ−１）
液体クロマトグラフシステム：ＬＣ１２００（アジレント・テクノロジー社製）
質量分析計：６１３０Ａ（アジレント・テクノロジー社製）
分析条件
カラム：ラピッドレゾリューションＨＴカートリッジ
移動相Ａ：０．１体積％ギ酸−蒸留水、ＨＰＬＣ用
移動相Ｂ：０．１体積％ギ酸−アセトニトリル、ＨＰＬＣ用
グラジエント条件：移動層Ｂ体積％
０−１．５  ｍｉｎ：２０％−９５％
１．５−３．０  ｍｉｎ：９５％
流速：０．５  ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：２．０μＬ
カラム温度：４０℃【０１５７】
ＬＣ／ＭＳ−２の分析条件は以下の通りである。
（ＬＣ／ＭＳ−２）
液体クロマトグラフシステム：ＬＣ１２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙ  ＩＩ（アジレント・テクノロジー社製）
質量分析計：６１３０Ｂ（アジレント・テクノロジー社製）
分析条件
カラム：ラピッドレゾリューションＨＴカートリッジ
移動相Ａ：０．１体積％ギ酸−蒸留水、ＨＰＬＣ用
移動相Ｂ：０．１体積％ギ酸−アセトニトリル、ＨＰＬＣ用
グラジエント条件：移動層Ｂ体積％
０−１．５  ｍｉｎ：２０％−９５％
１．５−３．０  ｍｉｎ：９５％
流速：０．５  ｍＬ／ｍｉｎ
注入量：２．０μＬ
カラム温度：４０℃【０１５８】
（実施例５）インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞毒性評価：
実施例１〜４の化合物及び参考例１７の化合物を被験物質として、Ｌ１２１０細胞に対する細胞毒性をＭＴＳ法を用いて測定した。【０１５９】
各被験物質のＬ１２１０細胞に対する細胞毒性を表２に示す。表２中、ＥＣ５０は、５０％効果濃度を意味し、薬物が示す薬理作用の最低値からの最大反応の５０％を示す濃度を表し、Ｌ１２１０は、Ｌ１２１０細胞を表す。【０１６０】
【表２】
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【０１６１】
表２の結果から明らかな通り、インドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、がん細胞に対して高い細胞毒性を有することが示された。
【産業上の利用可能性】
【０１６２】
本発明のインドリン誘導体（Ｉ）又はその薬理学的に許容される塩は、高い細胞毒性を有するため、細胞毒性剤として利用できる。
【国際調査報告】
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