【事件の表示】
　特許第３１９５４４４号「健康飲料およびその製造方法」の請求項１〜７に係る特許に対する特許異議の申立てについて、次のとおり決定する。
【結　論】
　訂正を認める。
　特許第３１９５４４４号の請求項１〜７に係る特許を維持する。
【理　由】
１．手続きの経緯
　本件特許第３１９５４４４号の請求項１〜７に係る発明は、平成４年１１月６日に特許出願（特願平４−２９７４５３号）され、平成１３年６月１日に特許権の設定登録がされた。その後、特許異議申立人・株式会社ジェー・ビー・ビーにより、特許異議の申し立てがなされた。平成１４年５月１７日付（差出日：同年５月１６日）で特許権者から上申書が提出され、特許取消理由が通知された後、意見書提出の指定期間内である平成１４年６月１１日に明細書の訂正の請求がなされた。
　
２．訂正請求について
（１）訂正の内容
（イ）訂正事項イ
　本件特許明細書、第【０００４】段落の
「特願平３−１９３３０１号」
を、
「特願平３−１９３３０１号（特公平７−１３０２１号として出願公告され、特許第１９８４０１８号として特許されている）」
に訂正する
（ロ）訂正事項ロ
　本件特許明細書、第【００２６】段落の
「得られた液剤」
を
「なお、上記先願発明で得られた液剤」
に訂正する。
　
（２）訂正の可否について
（イ）訂正事項イ
　訂正事項イは、本件特許出願時に出願番号しか知ることができなかった先願発明について、その公告番号及び特許番号を明らかにするものであるので、明りょうでない記載の釈明を目的とする訂正である。
（ロ）訂正事項ロ
　訂正事項ロは、本件明細書に記載されていた「液剤」の分析結果及び急性毒性試験が、本件明細書第【０００４】段落において言及している液剤（先願発明の液剤）によることを明らかにするものであり、明りょうでない記載の釈明を目的とする訂正である。なお、斯かる分析結果及び急性毒性試験が先願発明のものであることは、先願発明の公告公報（特公平７−１３０２１号公報）の第【００２１】段落に示されている社団法人日本食品衛生協会第０１−４６５１号、第０１−６５５９号の試験結果、及び同第【００２５】段落以下に示されている社団法人日本食品衛生協会第０１−４６５１号の２号の試験結果の記載からも明らかである。
　
　そして、上記訂正事項イ〜ロは、いずれも、実質上特許請求の範囲を拡張し、または変更するものではない。
　
（３）むすび
　したがって、本件訂正は、特許法第１２０条の４第２項並びに同条第３項で準用する同法第１２６条第２項及び第３項の規定に適合するので、訂正を認める。
　
３．特許異議申立についての判断
（１）異議申立の理由の概要
　特許異議申立人・株式会社ジェー・ビー・ビーは、特許第３１９５４４４号の請求項１〜請求項７に係る発明は、甲第１号証に記載された先願発明と同一であり、また、甲第１号証〜甲第５号証に記載された発明から当業者が容易に発明できたものであるので、本件特許は特許法第１１３条第１項第２号に該当し、取り消されるべきものである旨を主張する。
　
（２）本件発明
  上記２．に示したように、本件訂正は認められるから、本件特許の請求項１〜請求項７に係る発明は、訂正明細書の特許請求の範囲の請求項１〜請求項７に記載された次のとおりのものである。
「【請求項１】　ステビア茎部の抽出液の濃縮液と高麗人参の混合物を熟成させたことを特徴とする健康飲料。
　【請求項２】　前記茎部の抽出液の濃縮液が成熟ステビアの茎部の抽出液を濃縮したものである請求項１記載の健康飲料。
　【請求項３】　前記茎部の抽出液の濃縮液が糖度２０ないし２５である請求項１または２記載の健康飲料。
　【請求項４】　高麗人参が６年根である請求項１ないし３のいずれか１記載の健康飲料。
　【請求項５】　ステビア茎部の濃縮液に高麗人参を添加混合する工程と、該混合物を熟成させる工程を含むことを特徴とする健康飲料の製造方法。
　【請求項６】　ステビア抽出液が成熟ステビア茎部の抽出液の濃縮液である請求項５記載の健康飲料の製造方法。
　【請求項７】　熟成工程が、混合物を１０ないし２５℃で９０日ないし３６０日行われる請求項５または６記載の健康飲料の製造方法。」
　
（３）刊行物に記載された発明
　特許異議申立人・株式会社ジェー・ビー・ビーが甲第１号証〜甲第５号証として提出した刊行物には、それぞれ以下の事項が記載されている。
　
（イ）甲第１号証：特公平７−１３０２１号公報
（ａ）「ステビア茎部から抽出した醗酵濃縮液を有効成分とする消化器系疾患治療用内服薬剤。」（【特許請求の範囲】、【請求項１】）
　
（ロ）甲第２号証：漢方薬医学双書−別巻２　薬用人参
（ａ）人参は、播種から収穫まで６年もの年月を必要とすること。（第２０頁第９行〜第１０行）
（ｂ）人参の薬理効果として、鎮静作用と抗疲労作用（興奮作用）という相反する作用を持っていたこと。（第１５８頁末行〜第１５９頁第１行）
　
（ハ）甲第３号証：特開平３−１５１３２１号公報
（ａ）「ステビア濃縮醗酵液を有効成分とすることを特徴とする浴用剤。」（特許請求の範囲第１項）
（ｂ）ステビア濃縮醗酵液の製造方法に関し、ステビア茎粉末（０．６μｍ以上、１０．０μ以下に粉砕したもの）１ｋｇに対して、６リットルの水を入れて煮詰め、その濃縮液から分離した残渣に、更に４リットルの水を加えて煮詰め、両濃縮液を混合して加熱下に煮詰め、混合濃縮液が約１リットル程度になったところで濃縮工程を終了すること。；１５〜３０℃、好ましくは２０〜２５℃の条件下に、９０〜３６０日間の長期醗酵を行うこと。（第２頁左下欄第１行〜右下欄第１０行）
（ｃ）「皮膚に対する美肌効果ならびに血行促進効果」があること（第２頁右下欄第１７行〜第１８行）
　
（ニ）甲第４号証：特開平３−１２７９５９号公報
（ａ）「成熟したステビア葉を乾燥後、粉砕して平均粒径１０μ以下の粉末とし、これを煮沸してステビア濃縮液を得、さらに、これを熟成させることを特徴とするステビア甘味濃縮液の製造方法」（特許請求の範囲第１項）
（ｂ）ステビア濃縮醗酵液の製造方法に関し、ステビア葉粉末（１０μ以下に粉砕したもの）１ｋｇに対して、６リットルの水を入れて煮詰め、その濃縮液から分離した残渣に、更に４リットルの水を加えて煮詰め、両濃縮液を混合して加熱下に煮詰め、混合濃縮液が約１リットル程度になったところで濃縮工程を終了すること。；１５〜３０℃、好ましくは２０〜２５℃の条件下に、９０〜３６０日間の長期醗酵を行うこと。（第２頁左下欄第３行〜第３頁左上欄第３行）。
　
（ホ）甲第５号証：特開平４−６６５３５号公報
（ａ）「ステビア茎部の醗酵濃縮液を有効成分とする皮膚病治療剤ないし血行促進剤。」（特許請求の範囲第１項）
（ｂ）ステビア茎部の醗酵濃縮液の製造方法に関し、ステビア茎粉末（１５μ以下に粉砕したもの）１ｋｇに対して、６リットルの水を入れて煮詰め、その濃縮液から分離した残渣に、更に４リットルの水を加えて煮詰め、両濃縮液を混合して加熱下に煮詰め、混合濃縮液が約１リットル程度になったところで濃縮工程を終了すること。；１５〜３０℃、好ましくは１５〜２５℃の条件下に、９０〜３６０日間の長期醗酵を行うこと。（第２頁左下欄第６行〜第３頁左上第２行）
　
（４）対比・判断
（イ）特許法第３９条第１項について
　甲第１号証は、平成７年７月２８日に登録査定がなされ、同年８月２８日に登録料が納付されており（特許第１９８４０１８号）、先願としての地位が確定している。
　甲第１号証に記載の発明は、「ステビア茎部から抽出した醗酵濃縮液を有効成分とする消化器系疾患治療用内服薬剤。」であるのに対して、本件特許の請求項１に係る発明（以下、本件第１発明とする）は、「ステビア茎部の抽出液の濃縮液と高麗人参の混合物を熟成させたことを特徴とする健康飲料」であり、本件第１発明が甲第１号証に記載された先願発明と同一であるとすることができない。
　本件特許の請求項２〜請求項４に係る発明は、本件第１発明を更に特定したものであるので、上記と同様の理由により、甲第１号証に記載された先願発明と同一であるとすることができない。
　そして、本件特許の請求項５〜請求項７に係る発明は、「ステビア茎部の濃縮液に高麗人参を添加混合する工程と、該混合物を熟成させる工程を含むことを特徴とする健康飲料の製造方法。」であるから、上記と同様に、甲第１号証に記載された先願発明と同一であるとすることができない。
　
（ロ）特許法第２９条第２項について
　甲第３号証及び甲第５号証には、ステビア茎部濃縮醗酵液についての記載（上記の（２）（ハ）（ｂ）及び（２）（ホ）（ｂ）参照）はあるが、そのような濃縮醗酵液を製造する濃縮液に、高麗人参を加えて醗酵させることについては、記載も示唆もない。
　また甲第４号証には、ステビア葉部を用いた濃縮醗酵液についての記載（上記の（２）（ニ）（ａ）及び（ｂ）参照）はあるが、ステビア茎部を用いること、そして、ステビア茎部からの濃縮液に、高麗人参を加えて醗酵させることについては、記載も示唆もない。
　これに対して本件第１発明は、ステビア茎部の抽出液の濃縮液と高麗人参の混合物を熟成させた健康飲料に係るものであり、甲第１号証〜甲第５号証から当業者が容易に発明できたものと認めることができない。
　本件特許の請求項２〜請求項４に係る発明は、本件第１発明を更に特定したものであるので、上記と同様の理由により、甲第１号証〜甲第５号証から当業者が容易に発明できたものと認めることができない。
　そして、本件特許の請求項５〜請求項７に係る発明は、「ステビア茎部の濃縮液に高麗人参を添加混合する工程と、該混合物を熟成させる工程を含むことを特徴とする健康飲料の製造方法。」であるから、上記と同様に、甲第１号証〜甲第５号証から当業者が容易に発明できたものと認めることができない。
　
４．むすび
　以上のとおりであるから、特許異議申立の理由及び証拠によっては、本件特許の請求項１〜請求項７に係る発明についての特許を取り消すことができない。
　また、他に本件特許の請求項１〜請求項７に係る発明についての特許を取り消すべき理由を発見しない。
　よって、結論のとおり決定する。
【異議決定日】
平成１４年６月１７日（２００２．６．１７）
【訂正の要旨】
（１）訂正事項１
　明りょうでない記載の釈明を目的として、
本件特許明細書、第【０００４】段落の
「特願平３−１９３３０１号」
を、
「特願平３−１９３３０１号（特公平７−１３０２１号として出願公告され、特許第１９８４０１８号として特許されている）」
に訂正する
（２）訂正事項２
　明りょうでない記載の釈明を目的として、
本件特許明細書、第【００２６】段落の
「得られた液剤」
を
「なお、上記先願発明で得られた液剤」
に訂正する。
（５４）【発明の名称】
健康飲料およびその製造方法
（５７）【特許請求の範囲】
　【請求項１】　ステビア茎部の抽出液の濃縮液と高麗人参の混合物を熟成させたことを特徴とする健康飲料。
　【請求項２】　前記茎部の抽出液の濃縮液が成熟ステビアの茎部の抽出液を濃縮したものである請求項１記載の健康飲料。
　【請求項３】　前記茎部の抽出液の濃縮液が塘度２０ないし２５である請求項１または２記載の健康飲料。
　【請求項４】　高麗人参が６年根である請求項１ないし３のいずれか１記載の健康飲料。
　【請求項５】　ステビア茎部の濃縮液に高麗人参を添加混合する工程と、該混合物を熟成させる工程を含むことを特徴とする健康飲料の製造方法。
　【請求項６】　ステビア抽出液が成熟ステビア茎部の抽出液の濃縮液である請求項５記載の健康飲料の製造方法。
　【請求項７】　熟成工程が、混合物を１０ないし２５℃で９０日ないし３６０日行われる請求項５または６記載の健康飲料の製造方法。
【発明の詳細な説明】
　【０００１】
　【産業上の利用分野】
　本発明は天然植物を原料とした健康飲料およびその製造方法に関するものであって、より詳しくは、ステビア茎部からの抽出液を濃縮したものに高麗人参を混合し、これを熟成させて得られる健康飲料およびその製造方法に関するものである。
　【０００２】
　【従来の技術およびその問題点】
　天然植物を原料として、該植物の抽出液から医薬品、飲食物などの各種の有用なものを製造することは古くから行われていた。そして、天然植物としてステビアに着目し、該植物から甘味料、医薬品、浴用剤あるいは園芸用肥料等を製造する技術はすでに知られている。
　【０００３】
　例えば、本願出願人によって開発された技術として、特開平３−１２７９５９号公報には、ステビアの甘葉からの抽出液を濃縮し、熟成させて甘味料を製造する技術が開示されているのをはじめとして、特開平４−６５３８０号公報、特開平４−６６５３５号公報、特開平３−１５１３２１号公報および特開平３−２３０６３２号公報には、それぞれステビア植物を原料とした園芸用肥料、浴用剤、皮膚用外用剤、畜産用内服液を製造する技術を提案している。
　【０００４】
　また、本発明者は、すでにステビアを原料とした内服液を開発し、特願平３−１９３３０１号
（この出願は、特公平７−１３０２１号として出願公告され、特許第１９８４０１８号として特許されている）
　即ち、前記先願発明のステビア抽出液を有効成分とする内服液は優れた作用を与えるものであるが、本発明の健康飲料は、飲用しても、皮膚に塗布しても、各種の疾病に有効に作用するものであり、この効果は、特定のステビア抽出液の濃縮液と高麗人参を混合して、これを熟成することによって初めて得られるものである。
　【０００５】
　【発明の目的】
　そこで本発明の目的は、合成品を含まず、天然品だけを原料として製造され優れた作用を有する健康飲料およびその製造方法を提供することにある。
　【０００６】
　【問題点を解決するための手段】
　すなわち、本発明によれば、ステビア茎部の抽出液の濃縮液と高麗人参の混合物を熟成させたことを特徴とする健康飲料が提供される。
　【０００７】
　また、本発明によれば、前記茎部の抽出液の濃縮液が成熟ステビアの茎部の抽出液を濃縮し、糖度が２０ないし２５のものである上記健康飲料が提供される。
　【０００８】
　また、本発明によれば、高麗人参が６年根である上記健康飲料が提供される。
　【０００９】
　また、本発明によれば、ステビア茎部の濃縮液に高麗人参を添加混合する工程と、該混合物を熟成させる工程を含むことを特徴とする健康飲料の製造方法が提供される。
　【００１０】
　また、本発明によれば、ステビア抽出液が成熟ステビア茎部の抽出液の濃縮液である上記健康飲料の製造方法が提供される。
　【００１１】
　また、本発明によれば、前記熟成工程が、混合物を１０ないし２５℃で９０日ないし３６０日行われる上記健康飲料の製造方法が提供される。
　【００１２】
　【発明の具体的な説明】
　以下、本発明を具体的に説明する。
〈
ステビア抽出液の濃縮液の調製
　本発明の原料の一つであるステビア植物は、南米パラグアイおよびブラジルを原産とするキク科の多年生植物で、学名をステビア、レバウディアナ、ベルトニー（Ｓｔｅｖｉａ、Ｒｅｂａｕｄｉａｎａ、Ｂｅｒｔｏｎｉ　）といわれるものである。通常、４月から５月にかけて、株苗あるいは挿し木苗を定植し、育てるものである。
　【００１３】
　そのステビア植物を十分に成熟させ、１０月から１１月頃に収穫する。本発明の健康飲料を製造するには、その成熟したステビア植物の茎部分のものをとくに選別し、抽出用の原料とすることが重要である。
　ステビア植物の茎以外の部分あるいは成熟していないステビア植物を原料とすると優れた作用を有する健康飲料を製造することはできない。
　【００１４】
　成熟したステビア植物の茎部から収穫した抽出用原料は、まず乾燥工程にて乾燥することが好ましい。通常、約７０ないし８０℃で２４時間程度乾燥する。次いで、乾燥処理したステビアを１５μ以下、好ましくは１ないし８μ程度に粉砕する。
　【００１５】
　この粉砕物を抽出工程にて抽出処理する。通常抽出処理は粉砕物を水に浸し、加熱することにより行われる。本発明においては、健康飲料を製造可能である範囲において、水に他の溶媒を併用することができる。
　抽出温度は、通常水を沸騰させる温度が好適である。ステビア原料と水との量割合は、原料粉末１ｋｇに対して、水５ないし７リットルがよい。
　抽出時間はステビア植物の成熟の程度、含水量などにより異なるものであるが、３０分ないし２時間程度が好適である。
　なお、ステビア原料を１回抽出処理したら廃棄してもよいが、数回抽出処理することも可能である。
　【００１６】
　抽出工程にて得られた抽出液を濃縮工程にて濃縮する。抽出液の濃縮は、釜などの容器に抽出液を入れ、加熱する方法、あるいは減圧状態にて加熱する方法などにより行われる。
　濃縮液の糖度が２０ないし２５度になったところで、濃縮を中止することが好ましい。
　【００１７】
〈
高麗人参熟成液の調製
　本発明のもう一方の原料である高麗人参は、学名をＰａｎａｘ　ｓｃｈｉｎｅｎｇ．Ｎといい、ウコギ科の多年生植物で、肉質の、直生し分岐した根を有することを特徴とする。古来からその根は薬として重宝がられているものである。本発明ではこの高麗人参の根を、４年以上６年未満高麗人参の根を使用することが好適である。
　高麗人参は６年以上のものでもよいが、価格的に高価になるため、経済的に不利である。
　この高麗人参の根を、前記ステビア抽出液に加え熟成させることが、本発明においては重要である。この際、高麗人参を適切な大きさに調整してステビア抽出液に加えることが好ましい。また、ステビア抽出液として、前記ステビア濃縮液を用いるととくに優れた健康飲料を得ることができる。
　【００１８】
　高麗人参の根の使用量は、ステビア抽出液１０リットルに対して、通常、生の場合には０．５ないし２ｋｇ，乾燥人参の場合には１００ｇないし３００ｇとすることが好ましい。
　【００１９】
　ステビア抽出液と高麗人参との混合液を熟成する際には、該混合液を、通常、１０ないし３０℃、好ましくは１０ないし２５℃にて９０ないし７２０日、好ましくは、１８０ないし３６０日にわたって保持する。
　【００２０】
　なお、本発明における熟成とは、前記混合液を一定条件下にて放置することを意味するものであり、その混合液の中に微生物が存在する場合と存在しない場合との二つの場合が有り得る。
　ステビア植物から、酵母菌の１）Ｃａｎｄｉｄａ　ｋｒｕｓｅｉおよび２）Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ　ｐｅｎｉｃｉｌｌａｔｕｍが見出されているので、前記ステビア抽出液と高麗人参との混合液の熟成工程中において、該混合液内に酵母菌が存在するとその酵母菌により発酵されることもありうるのであって、このような場合には、本発明の熟成はいわゆる発酵と呼ぶことができる。
　なお、熟成工程に入る前に先立ち、予め培養した該酵母菌を濃縮液に加え、次いで熟成工程に入ることもできることは当然のことである。
　【００２１】
　かくして得られた熟成液を、熟成液原液のまま、あるいは水にて５ないし１５倍好ましくは１０ないし１５倍に希釈し、健康飲料とする。
　【００２２】
　【発明の効果】
　本発明の健康飲料は、ステビア植物の茎部に存在する薬効成分に加えて高麗人参の有する薬効成分が相まって、格別に優れた作用をもたらすものである。すなわち、該健康飲料を飲用すると、生体内にて血行が促進されるとともに、前記薬効成分が微妙な効果を及ぼし、弱体化した生体を健康な体に戻す作用を有するものと推察されるのである。
　したがって、本発明の健康飲料の適応症状としては、滋養強壮、虚弱体質、肉体疲労、胃腸病、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃アトニー、胃炎、胃酸過多、胃部不快感、胃重、胃痛、むかつき、タバコ吸いすぎ、アルコール中毒、食欲不振、消化不良、腹部膨張感、消化促進、目の疲労、便秘症状、下痢、軟化便、冷え性、頭痛、肝臓病、肺炎、糖尿病、腫瘍、口内炎、腫肉炎、歯槽膿漏、二日酔い、やけど、皮膚病等が挙げられるが、とくに、疲労回復、消化器系疾患の症状改善に優れている。
　【００２３】
　以下、実施例を挙げて、本発明をより具体的に説明するが、本発明はこの実施例に限られるものでないことはいうまでもない。
　
実施例
　成熟したステビア植物を１１月上旬に収穫し、面積６．６ｍのたばこ乾燥機を使用して、７５±３℃にて２４時間、風量３０ｍ／分乾燥した。次にこれを棒で軽くたステビアの茎、葉、小枝等の今日雑物に分離し、茎のみを集めた。この茎をカッターで３ないし５ｃｍ程度の小片に切断し、次いで粉砕機（日立製作所製）を用いて粉砕し微粉末を得た。平均粒径は５ミクロンであった。
　【００２４】
　鉄製の釜に６リットルの水を入れて沸騰するまで加熱する。一度加熱を中断し、攪拌下に前記ステビア茎部の微粉末１ｋｇを静かに投入し、再度沸騰させ、１時間攪拌しながら加熱する。
　これを搾り機にかけ、ステビア液と搾り滓に分離した。かくしてステビア抽出液約４リットルを得た。
　前記鉄製の釜に４リットルの水を入れて沸騰するまで加熱する。一度加熱を中断し、前記搾り滓を静かに投入し、再度沸騰させ、１時間攪拌しながら加熱する。
　これを搾り機にかけ、ステビア液と搾り滓に分離した。かくしてステビア抽出液約３リットルを得た。
　この抽出液と前記抽出液とを合一し、釜にいれ約４時間加熱沸騰させ、糖度が２３の時に作業を中止し、約１リットルの濃縮液を得た。この濃縮液を濾別後、濾液をステンレススチール製の貯蔵タンクに入れる。
　【００２５】
　次に、これに高麗人参６年根を１００ｇ加え、２５℃で３６０日熟成させる。糖度が３１度で甘い芳香を有するきわめて低い粘度の液体原液が得られた。
　かくして得られた熟成液に、水を加え１０倍に希釈して健康飲料とした。
　【００２６】
　
なお、上記先願発明で得られた
　【００２７】
１．
成分分析
　エネルギー　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４７Ｋｃａｌ
　水分　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　８４．２ｇ
　たんぱく質　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　３．６ｇ
　脂質　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．４ｇ
　炭水化物（糖質）　　　　　　　　　　　　　　　　　７．３ｇ
　　　　　（繊維）　　　　　　　　　　　　　　　　　φ
　灰分　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　４．５ｇ
　カルシウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　１２０ｍｇ
　鉄　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　１．３ｍｇ
　ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２２ｍｇ
　カリウム（原子吸光光度法）　　　　　　　　　２２００ｍｇ
　リン（モリブデンブルー法）　　　　　　　　　　２００ｍｇ
　レチノール　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０
　β−カロチン　　　　　　　　　　　　　　　　　　２３μｇ
　ビタミンＡ効力　　　　　　　　　　　　　　　　　１３ＩＵ
　ビタミンＢ１　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０
　ビタミンＢ２　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０．２１ｍｇ
　ビタミンＣ（高速液体クロマトグラフィー）　　　　　０
　ナイアシン（微生物学的定量法）試料１００ｇ当たり　２．４ｍｇ
　ヒ素（Ａｓ２Ｏ３）として　　　　　　　　　　検出せず（検出限界０．１ｐｐｍ）
　　　　（日本薬学会編衛生試験法注解・グットツァイト法）
　重金属（Ｐｂとして）　　　　　　　　　　　　　　１０ｐｐｍ
　　　　（第５版食品添加物公定書重金属試験法）
　【００２８】
２．急性毒性試験（ＬＤ５０）
（１）使用動物
　　　　　マウス　　ｄｄｙ系統　５週令　雄　１群１０匹　　３群
（２）試験方法
　投　　与：健康なマウスを選択し、１８時間絶食させマーゲンゾンデを用いて、試験液（原液）を強制経口投与した。
　投与量　：１０匹を１群として、各群毎に試験液を１ｍｌ／２０ｇ，０．７５ｍｌ／２０ｇ，０．５ｍｌ／２０ｇになるように投与した。
　飼育条件：恒温恒湿の条件で投与日を０として７日間、水と餌料は自由に与えて飼育した。
　【００２９】
（３）観察経過
　最大投与量１ｍｌ／２０ｇ群では、全匹に投与直後から３０分程度自発運動の低下、呼吸抑制などが見られたが、以後３０分以内に全匹回復した。
　また、０．７５ｍｌ／２０ｇでは、投与直後わずかに自発運動の低下が見られたが、投与後２０分程度で回復した。
　【００３０】
（４）試験結果
　上気飼育条件により毎日体重の測定を行い一般症状を観察したが、期間中、体重は正常に増加し、７日間特筆すべき所見は認められなかった。
　以上の結果から、本ステビア濃縮液のＬＫ５０は、５０ｍｌ／ｋｇ以上であり、急性毒性は極めて低いものと推察される。