(57)【要約】  本発明の標識化合物は、下記式（１）【化１】
2011002096.tif 000054
（式中、Ｘ１は、１１ＣＨ３、ＣＨ２１８Ｆ、ＣＦ２１８Ｆ、１８Ｆ、７６Ｂｒまたは１２４Ｉであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、【化２】
2011002096.tif 000055
で表される基の何れか一つである）で表される構造、あるいは下記式（２）【化３】
2011002096.tif 000056
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｒは上記式（１）と同義である）で表される構造を有する。このため、高い精度でアロマテースを定量することができるＰＥＴ用標識化合物を実現する。
2011002096.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）
【化１】
2011002096.tif 000044
（式中、Ｘ１は、１１ＣＨ３、ＣＨ２１８Ｆ、ＣＦ２１８Ｆ、１８Ｆ、７６Ｂｒまたは１２４Ｉであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、
【化２】
2011002096.tif 000045
で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（２）
【化３】
2011002096.tif 000046
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する、化合物。
【請求項２】
式（１）で表される化合物であって、
Ｘ１が１１ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式（２）で表される化合物であって、
Ｘ３がＣＨ３またはＢｒである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
下記式（１’）
【化４】
2011002096.tif 000047
（式中、Ｘ１’は、ＣＨ３またはＣＨ２Ｆである）
で表される構造を有する、化合物。
【請求項５】
請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物を含んでいる、診断用組成物。
【請求項６】
下記式（１’’）
【化５】
2011002096.tif 000048
（式中、Ｘ１’’は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、
【化６】
2011002096.tif 000049
で表される基の何れか一つである）
で表される構造を有する化合物をさらに含んでいる、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項５または６に記載の組成物。
【請求項８】
請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物、あるいは請求項５または６に記載の組成物をＰＥＴに用いる工程を包含する、診断方法。
【請求項９】
適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
下記式（３）
【化７】
2011002096.tif 000050
（式中、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｘ４は、−ＣＨ２Ｘ５、−ＣＦ２Ｘ５、−ＳｎＲ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＢＦ３・Ｋ、−Ｂ（ＯＲ２）（ＯＲ３）または
【化８】
2011002096.tif 000051
（式中、Ａは２価の炭化水素基である）
であり、Ｘ５は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＳＯ２ＣＨ３、−ＯＳＯ２Ｃ６Ｈ４（４−ＣＨ３）および−ＯＳＯ２ＣＦ３から選択される脱離基であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、炭素数が１〜６のアルキル基であり、Ｒは、
【化９】
2011002096.tif 000052
で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（４）
【化１０】
2011002096.tif 000053
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ６は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３から選択される脱離基であり、Ｒは上記式（３）と同義である）
で表される構造を有する、化合物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の化合物を備えている、ＰＥＴ用標識化合物を製造するためのキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＥＴ用の標識化合物、および当該化合物を含む診断用組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、生体内情報を得るために種々の研究がなされており、とりわけ、目的の分子挙動を調べることができる「分子イメージング」技術が注目されている。分子イメージングは、種々の疾患の早期発見や、有効かつ副作用の少ない医薬の短期間での開発に有用であると考えられる。【０００３】
生体内情報を得るための分子イメージングとしては、陽電子放射断層画像撮影法（ＰＥＴ）がよく知られている。ＰＥＴは、陽電子が電子と衝突することによって放射されるγ線を用いて断層画像を撮影する技術であり、放射性のポジトロン放出核種で標識した目的の分子（いわゆる、分子プローブ）を生体に投与し、標識されている放射性核種が別の原子核に崩壊していく際に放出する陽電子と、その近傍に存在する電子との衝突によって放出されるγ線を検出する。これによって、目的の分子の存在部位を定量的に調べることができる。このようなＰＥＴは、臨床的な分子イメージング技術として広く利用されている。【０００４】
乳癌等において発現していることが知られているアロマテース（aromatase）は、男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であり、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等に関わることも知られている。このため、アロマテースの定量を高い精度で行うことができれば、これらの疾患の診断、原因解明、治療法の究明等に役立つと考えられる。【０００５】
ＰＥＴによるアロマテースのイメージング技術として、１１Ｃで標識された（S）−6-［（4-chlorophenyl）（1,2,4-triazol-1-yl）methyl］-1-[11C]methylbenzotriazole（[11C]vorozole）をＰＥＴ用標識化合物として用いた技術が報告されている（例えば、非特許文献１，２参照）。【０００６】
【化１】
2011002096.tif 000003
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Lidstrom，P.；Bonasera，T. A.；Kirilovas，D.；Lindblom，B.；Lu，L.；Bergstrom，E.；Bergstrom，M.；Westlin，J.-E.；Langstrom，B. Nucl. Med. Biol. 1998，25，497-501.
【非特許文献２】Takahashi，K.；Bergstrom，M.；Frandberg，P.；Vesstrom，E.-L.；Watanabe，Y.；Langstrom，B. Nucl. Med. Biol. 2006，33，599-605.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
上述したように、ＰＥＴによるイメージングを用いてアロマテースを可視化することが実際に行われている。しかしながら、上記非特許文献１，２に記載の化合物では、プローブにおけるＮ−１１ＣＨ３部位が代謝により脱落し、その代謝物が脳内へ再取り込みされている可能性があるため、定量性に劣るという問題があった。生体内分子をＰＥＴによって定量するには、優れた分子プローブの開発が必要である。【０００９】
本発明は、上記の問題点に鑑みてなされたものであり、その目的は、アロマテースを高い精度で定量することができるＰＥＴ用標識化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明に係る化合物は、上記課題を解決するために、下記式（１）【００１１】
【化２】
2011002096.tif 000004
（式中、Ｘ１は、１１ＣＨ３、ＣＨ２１８Ｆ、ＣＦ２１８Ｆ、１８Ｆ、７６Ｂｒまたは１２４Ｉであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、【００１２】
【化３】
2011002096.tif 000005
で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（２）【００１３】
【化４】
2011002096.tif 000006
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｒは、上記式（１）と同義である）
で表される構造を有することを特徴としている。【００１４】
上記構成によれば、Ｘ１部位および１１ＣＮ部位が代謝により脱落し難い。このため、アロマテースに対して選択的な親和性を示すだけでなく、ＰＥＴ用標識化合物として用いた際にアロマテースを高い精度で定量することができる。その結果、種々の疾患の診断を容易にするとともに、アロマテースを標的とする医薬品候補化合物のスクリーニングに活用することができる。また、例えば、アロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニングにも活用することができる。【００１５】
本発明に係る化合物は、下記式（１’）【００１６】
【化５】
2011002096.tif 000007
（式中、Ｘ１’は、ＣＨ３またはＣＨ２Ｆである）
で表される構造を有する。【００１７】
上記化合物は、放射標識されていないこと以外は、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物と同じ構造を有するため、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いる際のコントロール（いわゆるコールド標品）として用いることができる。【００１８】
本発明に係る診断用組成物は、本発明に係る、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物を含むことを特徴としている。【００１９】
上記構成によれば、アロマテースを高い精度で定量することができるので、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）を診断し得るとともに、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等の診断（原因解明、治療法の究明を含む）が可能になる。さらには、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患の診断が可能になる。すなわち、本発明に係る診断用組成物は、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等を適用対象とする。また、本発明に係る診断用組成物は、アロマテースを標的とする医薬品候補化合物のスクリーニングに活用することもできる。また、例えば、アロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニングにも活用することができる。【００２０】
本発明に係る診断方法は、本発明に係る、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物、あるいは本発明に係る上記診断用組成物をＰＥＴに用いる工程を包含する。上記診断方法は、診断を補助するためのデータ収集方法でもあり得る。【００２１】
アロマテースは男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であり、性ステロイドの合成に重要である。一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いることにより、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）の診断を補助するためのデータを高い精度で収集することができる。さらに、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等の診断に有用なデータを高い精度で収集し得る。【００２２】
また、本発明に係る化合物は、下記式（３）【００２３】
【化６】
2011002096.tif 000008
（式中、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｘ４は、−ＣＨ２Ｘ５、−ＣＦ２Ｘ５、−ＳｎＲ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＢＦ３・Ｋ、−Ｂ（ＯＲ２）（ＯＲ３）または【００２４】
【化７】
2011002096.tif 000009
（式中、Ａは２価の炭化水素基である）
であり、Ｘ５は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＳＯ２ＣＨ３、−ＯＳＯ２Ｃ６Ｈ４（４−ＣＨ３）および−ＯＳＯ２ＣＦ３から選択される脱離基であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、炭素数が１〜６のアルキル基であり、Ｒは、【００２５】
【化８】
2011002096.tif 000010
で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（４）【００２６】
【化９】
2011002096.tif 000011
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ６は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３から選択される脱離基であり、Ｒは、上記式（３）と同義である）
で表される構造を有する。【００２７】
上記構成によれば、例えば、式（３）の化合物については、標識ヨウ化メチル等または標識フッ化カリウム等と反応させるか、または、あらかじめ置換基Ｘ１をベンゼン環上に有するベンジルハライド等を用いて、例えば、非特許文献３（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T. Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）または、非特許文献４（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y. Chem. Pharm. Bull. 1996，45，333-337）に記載の方法を用いることにより、式（１）で表される上記化合物を得ることができる。【００２８】
また、式（４）の化合物については、標識シアン化水素または標識シアン化銅（Ｉ）等と反応させることにより、式（２）で表される上記化合物を得ることができる。【００２９】
さらには、本発明に係る、ＰＥＴ用標識化合物を製造するためのキットは、式（３）または式（４）で表される上記化合物を備えている。【００３０】
上記構成によれば、簡便に、ＰＥＴ用標識化合物を製造することができる。
【発明の効果】
【００３１】
本発明に係る化合物は、以上のように、式（１）または式（２）で表される構造を有することを特徴としている。このため、アロマテースをより高い精度で定量することができるＰＥＴ用標識化合物を提供することができ、種々の疾患の診断を容易にするとともに、アロマテースを標的とする医薬品候補化合物のスクリーニングに活用することができる。また、アロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニングにも活用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】本発明に係る化合物（１０）のＨＰＬＣ分取結果を示す図面である。
【図２】本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における扁桃体の結合能画像をそれぞれ示す図面である。
【図３】本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における側坐核の結合能画像をそれぞれ示す図面である。
【図４】本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における、小脳、扁桃体、視床下部、側坐核のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。
【図５】本発明に係る化合物（１０）による置換実験における結合能画像を示す図面である。
【図６】図５に示す結合画像の結果を数値化したグラフである。
【図７】本発明に係る化合物（１０）の結合実験の結果を示すグラフである。
【図８】本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における、血液中の親化合物の含有率の時間経過に対する変化を示すグラフである。
【図９】本発明に係る標識化合物と従来技術に係る標識化合物とを用いた場合における、脳内の標識された代謝物の含有率の時間経過に対する変化を示すグラフである。
【図１０】本発明に係る別の標識化合物を用いた場合における扁桃体の結合能画像をそれぞれ示す図面である。
【図１１】本発明に係る化合物（２２）を用いた場合における、扁桃体、視床下部、側坐核、小脳のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。
【図１２】本発明に係る化合物（３３）を用いた場合における、扁桃体、視床下部、側坐核、小脳のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。
【図１３】本発明に係る化合物（３９）を用いた場合における、扁桃体、視床下部、側坐核、小脳のＰＥＴ測定での時間経過によるＳＵＶの変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明の実施の一形態について説明すれば、以下の通りである。
【００３４】
本実施の形態に係る化合物は、下記式（１）
【００３５】
【化１０】
2011002096.tif 000012
（式中、Ｘ１は、１１ＣＨ３、ＣＨ２１８Ｆ、ＣＦ２１８Ｆ、１８Ｆ、７６Ｂｒまたは１２４Ｉであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、
【００３６】
【化１１】
2011002096.tif 000013
で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（２）
【００３７】
【化１２】
2011002096.tif 000014
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する。
【００３８】
このような化合物は、男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であるアロマテースに対して選択的な親和性を示す。また、上記化合物は、代謝に対して安定な部位に短寿命放射核種を有する。このため、アロマテースの分布を可視化するだけでなく、定量性の高いＰＥＴ画像を提供し得る。
【００３９】
ここで、Ｘ１としては、１１ＣＨ３またはＣＨ２１８Ｆが好ましく、被験者の被曝を少なくする観点、並びに他のＰＥＴ用分子プローブによる検査を連続的に行うことができる観点から、半減期が比較的短い１１ＣＨ３であることがより好ましい。また、Ｘ２としては、ＣＮが好ましく、Ｘ３としては、ＣＨ３またはＢｒが好ましい。
【００４０】
上記Ｘ１およびＸ３の置換位置は、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよいが、パラ位であることが好ましい。
【００４１】
また、本実施の形態に係る化合物は、下記式（１’’）
【００４２】
【化１３】
2011002096.tif 000015
（式中、Ｘ１’’は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する。
【００４３】
上記化合物は、放射標識されていないこと以外は、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物と同じ構造を有する。このため、一般式（１）または一般式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いる際のコールド標品として好適に用いることができる。
【００４４】
式（１’’）で表される上記化合物は、下記式（１’）
【００４５】
【化１４】
2011002096.tif 000016
（式中、Ｘ１’は、ＣＨ３またはＣＨ２Ｆである）
で表される構造を有することが好ましい。
【００４６】
また、上記式（１’）におけるＸ１’としては、ＣＨ３であることがより好ましい。
【００４７】
なお、式（１''）におけるＸ１’’の置換位置、および式（１'）におけるＸ１’の置換位置は、対応する、式（１）または式（２）で表される化合物におけるＸ１またはＸ３の位置と同じ位置であればよく、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよい。
【００４８】
式（１）で表される上記化合物は、下記式（３）
【００４９】
【化１５】
2011002096.tif 000017
（式中、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｘ４は、−ＣＨ２Ｘ５、−ＣＦ２Ｘ５、−ＳｎＲ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＢＦ３・Ｋ、−Ｂ（ＯＲ２）（ＯＲ３）または
【００５０】
【化１６】
2011002096.tif 000018
（式中、Ａは２価の炭化水素基である）
であり、Ｘ５は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＳＯ２ＣＨ３、−ＯＳＯ２Ｃ６Ｈ４（４−ＣＨ３）または−ＯＳＯ２ＣＦ３等の脱離基であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、炭素数が１〜６のアルキル基であり、Ｒは一般式（１）と同義である）
で表される構造を有する化合物から合成することができる。
【００５１】
具体的には、Ｘ４が、−ＳｎＲ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＢＦ３・Ｋ、−Ｂ（ＯＲ２）（ＯＲ３）または式（ｉ）の置換基である場合、式（３）で表される化合物を、標識ヨウ化メチル（１１ＣＨ３Ｉ）、標識フッ化ヨウ化メチル（１８ＦＣＨ２Ｉ）（以下、両者を総称して、単に、「標識ヨウ化メチル等」と略する場合がある）と反応させることにより、Ｘ１が、１１ＣＨ３、ＣＨ２１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物を得ることができる。
【００５２】
Ｘ４が−ＳｎＲ１３である場合における、上記反応は、例えば、非特許文献５（Suzuki，M.；Doi，H.；Bjorkman，M.；Andersson，Y.；Langstrom，B.；Watanabe，Y.；Noyori，R. Chem. Eur. J. 1997，12，2039-2042）に記載されている、有機スズ化合物とヨウ化メチルとをパラジウム錯体存在下に反応させメチル基を導入する方法に準じて行うことができる。具体的には、例えば、式（３）で表される化合物を、標識ヨウ化メチル等と、パラジウム（０）錯体、配位子、炭酸塩、任意にハロゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金属の存在下に短時間で反応させることにより、式（１）で表される化合物を得ることができる。
【００５３】
また、ホウ素化合物からの[１１C]メチル化と[１８Ｆ]フルオロメチル化についても、例えば、非特許文献６（Doi，H.；Ban，I.；Nonoyama，A.；Sumi，K.；Kuang，C.；Hosoya，T.；Tsukada，H.；Suzuki，M. Chem. Eur. J. 2009，15，4165-4171）や国際公開ＷＯ２００８／０２３７８０に記載の方法に準じて行うことができる。
【００５４】
また、Ｘ４が−ＣＨ２Ｘ５である場合には、標識フッ化カリウム（Ｋ１８Ｆ）等と反応させることにより、Ｘ１がＣＨ２１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物を得ることができる。
【００５５】
Ｘ１がＣＦ２１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物は、例えば、非特許文献７（Prabhakaran，J.；Underwood，M. D.；Parsey，R. V.；Arango，V.；Majo，V. J.；Simpson，N. R.；Heertum，R. V.；Mann，J. J.；Kumar，J. S. D. Bioorg. Med. Chem. 2007，15，1802-1807）や、非特許文献８（Angelini，G.；Speranza，M.；Shiue，C.-Y.；Wolf，A. P. J. Chem. Soc.，Chem. Commun. 1986，924-925）に記載の方法に準じて、Ｘ４が−ＣＦ２Ｂｒまたは−ＣＦ２Ｃｌである、式（３）で表される化合物に対して、１８Ｆで標識された[１８Ｆ]フッ素アニオンを用いた求核置換反応により得ることができる。
【００５６】
Ｘ１が１８Ｆである、式（１）で表される上記化合物は、Ｘ４が−ＳｎＲ１３である、式（３）で表される化合物に対して、１８Ｆで標識された[１８Ｆ]フッ素ガスあるいは[１８Ｆ]アセチルハイポフルオライト等を反応させることにより得ることができる。
【００５７】
Ｘ１が７６Ｂｒまたは１２４Ｉである、式（１）で表される上記化合物は、Ｘ４が−ＳｎＲ１３である、式（３）で表される化合物に対して、７６Ｂｒで標識された[７６Ｂｒ]臭素アニオンあるいは１２４Ｉで標識された[１２４Ｉ]ヨウ素アニオンを、クロラミンＴ等の酸化剤存在下で反応させることにより得ることができる。
【００５８】
上記Ａは、２価の炭化水素基であり、
【００５９】
【化１７】
2011002096.tif 000019
で表される基の何れか１つであることが好ましい。
【００６０】
式（３）において、Ｘ４が−ＣＦ２Ｘ５である場合、Ｘ５としては、ＣｌまたはＢｒであることが好ましい。
【００６１】
上記Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、炭素数が１〜６のアルキル基であり、炭素数４〜６のアルキル基であることが好ましい。上記Ｒ１として具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、シクロプロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、sec−ブチル基、tert−ブチル基、シクロプロピルメチル基、シクロブチル基、ｎ−ペンチル基、ｉ−ペンチル基、sec−ペンチル基、tert−ペンチル基、２−メチルブチル基、シクロブチルメチル基、シクロペンチル基、ｎ−ヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，１−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１−エチル−１−メチルプロピル基、シクロペンチルメチル基、およびシクロヘキシル基等が挙げられる。
【００６２】
上記パラジウム（０）錯体としては、式（１）で表される化合物と、標識ヨウ化メチル等とのカップリング反応を触媒するものであれば特には限定されない。例えば、Ｐｄ２（ｄｂａ）３、Ｐｄ２（ｄｂａ）３ＣＨＣｌ３、Ｐｄ［Ｐ（ｏ−ＣＨ３Ｃ６Ｈ４）３］２、Ｐｄ［Ｐ（tert−Ｃ４Ｈ９）３］２等が挙げられる。
【００６３】
また、上記配位子としては特には限定されず、例えば、パラジウム（０）錯体がＰｄ２（ｄｂａ）３である場合、Ｐ（ｏ−ＣＨ３Ｃ６Ｈ４）３等が挙げられる。
【００６４】
上記ハロゲン化銅としては、ＣｕＣｌ、ＣｕＢｒ等が挙げられる。また、当該ハロゲン化銅の量は、上記パラジウム（０）錯体に含まれるパラジウム原子に対して、例えば２当量以上で用いることができる。
【００６５】
上記ハロゲン化アルカリ金属としては、ＣｓＦ等が挙げられる。当該ハロゲン化アルカリ金属の量は、上記パラジウム（０）錯体に含まれるパラジウム原子に対して、例えば２当量以上で用いることができる。
【００６６】
上記炭酸塩としては、炭酸カリウム、炭酸セシウム等が挙げられ、炭酸カリウムが好ましい。当該炭酸塩の量は、上記パラジウム（０）錯体に含まれるパラジウム原子に対して、例えば２当量以上で用いることができる。
【００６７】
また、式（１）で表される化合物を得るための上記反応では溶剤を用いてもよい。このような溶剤としては、例えば、ＤＭＦ、ＤＭＦと水との混合物等が挙げられる。
【００６８】
また、式（２）で表される上記化合物は、下記式（４）
【００６９】
【化１８】
2011002096.tif 000020
（式中、Ｘ３は、一般式（２）と同義であり、Ｘ６は、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＯＳＯ２ＣＦ３等の脱離基であり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する化合物を、標識シアン化水素（Ｈ１１ＣＮ）または標識シアン化銅（Ｉ）（Ｃｕ１１ＣＮ）等と反応させることにより得ることができる。
【００７０】
より具体的には、例えば、標識シアン化銅（Ｉ）と反応させる場合には、ＤＭＦ中で１８０℃程度に加熱すれば得られ、標識シアン化水素と反応させる場合には、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ等のパラジウム触媒存在下で加熱することにより得ることができる。
【００７１】
なお、式（４）におけるＸ３の置換位置は、対応する、式（２）で表される化合物におけるＸ３の位置と同じ位置であればよく、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよい。
【００７２】
式（３）で表される上記化合物は、例えば、下記式（５）
【００７３】
【化１９】
2011002096.tif 000021
（式中、Ｘ２は、式（３）と同義であり、Ｘ７は、Ｃｌ、Ｂｒ、ＩまたはＯＳＯ２ＣＦ３等の脱離基であり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する化合物から製造することができる。
【００７４】
なお、式（５）におけるＸ７の置換位置は、対応する、式（３）で表される化合物におけるＸ４の位置と同じ位置であればよく、オルト位、メタ位、パラ位の何れであってもよい。
【００７５】
式（３）におけるＸ４がＳｎＲ１３である場合、式（５）で表される上記化合物を、例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４存在下で、（ＳｎＲ１３）２と反応させることにより製造することができる。
【００７６】
また、式（３）におけるＸ４が、−Ｂ（ＯＲ２）（ＯＲ３）や式（ｉ）で表される基である場合には、例えば、非特許文献９（Ishiyama，T.；Murata，M.；Miyaura，N. J. Org. Chem. 1995，60，7508-7510）に記載されているように、式（３）で表される上記化合物を、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）、および酢酸カリウムの存在下で、式（ｉ）で表される基を供与し得るアルコキシジボロンと反応させることにより製造することができる。
【００７７】
式（３）におけるＸ４が、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＢＦ３・Ｋである場合には、例えば、非特許文献１０（Murphy，J. M.；Tzschucke，C. C.；Hartwig，J. F. Org. Lett. 2007，9，757-760）に記載の方法によりピナコールボロン酸エステルから合成することができる。
【００７８】
式（３）におけるＸ４がＣＨ２Ｘ５である場合には、式（５）で表される上記化合物のＸ５がＯＨ（水酸基）である化合物を、例えば、トリエチルアミン等の塩基存在下、適当なスルホニルクロリドと反応させるかまたは、三ハロゲン化リンと反応させること等により製造することができる。
【００７９】
また、式（３）におけるＸ４がＣＦ２Ｘ５である場合には、式（３）で表される上記化合物のＸ５がＨ（水素）である化合物を、例えば、塩素または臭素、あるいはＮ-ブロモコハク酸イミドと反応させること等により製造することができる。Ｘ５がＩ、−ＯＳＯ２ＣＨ３、−ＯＳＯ２ＣＦ３である場合も、上記方法に準じて製造することができる。
【００８０】
式（５）で表される上記化合物は、あらかじめ置換基Ｘ７をベンゼン環上に有するベンジルハライド等を用いて、例えば、非特許文献３（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T. Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）または非特許文献４（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y. Chem. Pharm. Bull. 1996，45，333-337）に記載の方法により、合成することができる。式（４）で表される上記化合物も、これらの方法に準じて合成することができる。
【００８１】
なお、式（１’’）で表される上記化合物は、例えば、上記非特許文献３または非特許文献４に記載の方法により、４−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イルアミノ）ベンゾニトリル（実施例の化合物（３）参照）、１−ニトロ−４−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾール−４−イルアミノ）ベンゼン、４−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルアミノ）ベンゾニトリル、または、１−ニトロ−４−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イルアミノ）ベンゼンに、炭酸カリウム等の塩基存在下、メチルベンジルハライド、フッ化メチルベンジルハライド、三フッ化メチルベンジルハライド、フッ化ベンジルハライド、塩化ベンジルハライド、臭化ベンジルハライド、ヨウ化ベンジルハライド等をそれぞれ反応させることにより得ることができる。また、上述した式（１）または式（２）で表される化合物の製造方法において、標識化ヨウ化メチル等の代わりに標識化されていないヨウ化メチル等（ＣＨ３Ｉ、ＦＣＨ２Ｉ）、または、標識化シアン化水素または標識化シアン化銅（I）等の代わりに標識化されていないシアン化水素またはシアン化銅（I）等を用いることによっても同様に得ることができる。
【００８２】
また、原理的には、式（１）および式（２）で表される化合物は、上述した上記非特許文献３または非特許文献４に記載の方法において、あらかじめポジトロン放出核種でラベル化された各種ベンジルハライドや、あらかじめポジトロン放出核種でラベル化された各種ベンゾニトリルを用いることによっても得ることができる。
【００８３】
分子プローブ中の放射能の低下を抑制することができれば、より少ない投与量にてＰＥＴを行うことができる。本発明者らはこれまでに、非常に短時間で完了するメチル化反応を開発している。これにより、寿命が非常に短い放射線核種を用いて製造した化合物であっても、ＰＥＴ用分子プローブとして有効に利用し得る。すなわち、本発明の好ましい実施形態において、式（１）で表される上記化合物は、上記メチル化反応を適用し得るものであり得る。また、このような化合物は、上記メチル化反応を用いて製造されることが好ましい。
【００８４】
上記キットとしては、式（３）で表される上記化合物を含有する場合には、または式（３）で表される上記化合物の他に、上述した、標識ヨウ化メチル等、パラジウム（０）錯体、配位子、および炭酸塩からなる群から選択される少なくとも１つを更に備えていてもよく、更に任意に、ハロゲン化銅またはハロゲン化アルカリ金属や、上述した反応に用い得る他の試薬、溶媒、触媒を備えていてもよい。
【００８５】
また、上記キットとして式（４）で表される上記化合物を含有する場合には、式（４）で表される上記化合物の他に、上述した、標識シアン化水素（Ｈ１１ＣＮ）または標識シアン化銅（Ｉ）（Ｃｕ１１ＣＮ）を更に備えていてもよく、更に任意に、反応に用い得る溶媒や触媒を備えていてもよい。
【００８６】
なお、本明細書中において使用される場合、用語「キット」は、特定の材料を内包する容器（例えば、ボトル、プレート、チューブ、ディッシュ等）を備えた包装が意図される。好ましくは各材料を使用するための指示書を備える。本明細書中においてキットの局面において使用される場合、「備えた（備えている）」は、キットを構成する個々の容器の何れかの中に内包されている状態が意図される。また、本実施の形態に係るキットは、複数の異なる組成物を１つに梱包した包装であり得る。「指示書」は、紙またはその他の媒体に書かれていても印刷されていてもよく、あるいは磁気テープ、コンピューター読み取り可能ディスクまたはテープ、ＣＤ−ＲＯＭなどのような電子媒体に付されてもよい。
【００８７】
本実施の形態に係るキットはまた、希釈剤、溶媒、洗浄液またはその他の試薬を内包した容器を備え得る。さらに、本実施の形態に係るキットは、用途に応じて必要な器具をあわせて備えていてもよい。
【００８８】
また、アロマテースは、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等において発現することが知られているため、式（１）または式（２）で表される上記化合物を標識化合物として用いてＰＥＴを行えばこれらの疾患を診断することや、これらの疾患の診断を補助するためのデータ収集をすることや、治療薬（アロマテース阻害薬）の開発を補助することができる。つまり、本実施の形態では、式（１）または式（２）で表される上記化合物をＰＥＴに用いる工程を包含する、疾患の診断方法、疾患の診断を補助するためのデータ収集方法、またはアロマテースを標的とする医薬品候補化合物、あるいはアロマテースと結合することで副作用を発現するような、アロマテース以外の分子を標的とした医薬品候補化合物のスクリーニング方法を提供する。
【００８９】
さらには、アロマテースは、精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等に関わることが知られているため、式（１）または式（２）で表される上記化合物をＰＥＴ用標識化合物として用いて脳内アロマテースの定量を行うことは、これらの疾患の原因解明や治療法の究明に役立つ。
【００９０】
本発明に係る化合物は、一実施形態において、組成物形態で提供され得る。本実施形態に係る組成物は、ＰＥＴによりアロマテースをイメージングするために用いられるだけでなく、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患（例えば、乳癌、乳腺症、子宮体癌、子宮内膜症、子宮筋腫等）を診断するために、あるいは精神障害、更年期障害、慢性疲労症候群等の診断を目的として、使用される。本実施形態に係る組成物は、溶液または懸濁液のいずれかの形態にて調製されていても、液体（例えば、緩衝液）に溶解もしくは懸濁するために適切な固体形態として調製されていてもよい。
【００９１】
また、本実施形態に係る組成物は、式（１’’）で表される上記化合物をさらに含み得る。
【００９２】
なお、本実施形態に係る組成物は、キットとして提供されてもよい。「組成物」は各種成分が一物質中に含有されている形態であり、「キット」は各種成分の少なくとも１つが別物質中に含有されている形態であるが、本明細書中にて用いられる場合、「主成分を含有している組成物」は「主成分を備えているキット」を包含する。組成物中に含まれ得る他の成分は、主成分である化合物の機能を阻害しないものであれば特に限定されない。
【００９３】
なお、本実施の形態に係る化合物を生体に適用する場合の投与は、種々の経路による注入により行うことが好ましいが、これに限定されない。また、投与量も、必要に応じて当業者によって適宜設計され得る。
【００９４】
なお、上述したように、本発明に係る化合物は、式（１）で表される化合物であって、Ｘ１が１１ＣＨ３であることが好ましい。
【００９５】
上記構成によれば、１１ＣＨ３は半減期が比較的短いため、被験者の被曝を少なくすることができ、さらには他のＰＥＴ用標識化合物による検査を連続的に行うことができる。
【００９６】
本発明に係る化合物は、式（２）で表される化合物であって、Ｘ３がＣＨ３またはＢｒであることが好ましい。
【００９７】
また、本発明に係る診断用組成物では、下記式（１’’）
【００９８】
【化２０】
2011002096.tif 000022
（式中、Ｘ１’’は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、
【００９９】
【化２１】
2011002096.tif 000023
で表される基の何れか一つである）
で表される構造を有する化合物をさらに含んでいることが好ましい。
【０１００】
さらには、本発明に係る診断用組成物では、適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択されることが好ましい。
【０１０１】
また、本発明に係る診断方法では、適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択されることが好ましい。
【実施例】
【０１０２】
以下、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。【０１０３】
なお、以下に示す実験操作において、TLC（thin-layer chromatography）は、シリカゲル０．２５ｍｍがプレコートされたプレート（Merck Chemicals，Silica Gel 60 F254，Cat. No. 1.05715）を用いて行った。【０１０４】
カラムクロマトグラフィは、シリカゲル（関東化学（株），Silica Gel 60N，spherical neutral，粒径40-50 μｍ，Cat. No. 37563-85または粒径63-210 μｍ，Cat. No. 37565-85）を用いて行った。【０１０５】
融点（Mp）は、YANACO MP-J3 instrumentにより測定し、補正は行っていない。【０１０６】
1Hおよび13C NMRは、Varian MERCURY 300 spectrometerを用い、それぞれ３００ＭＨｚおよび７５．５ＭＨｚで測定を行った。またはJEOL JNM-EX270 spectrometerを用い、 それぞれ２７０ＭＨｚおよび６７．８ＭＨｚで測定を行った。ＮＭＲスペクトル用の溶媒としては、CDCl3 （CIL，Cat. No. DLM-7TB）およびDMSO-d6 （CIL,Cat. No. DLM-10）を用いた。また、化学シフト（δ）は、（CH3）4Si （CDCl3の場合、δ 0.00（1H NMR）若しくは上記溶媒ピーク（DMSO-d6の場合、δ 2.49（1H NMR）およびδ 39.5（13C NMR）、並びにCDCl3の場合、δ 77.0（13C NMR））を内部基準として、結合定数（Ｈｚ）と共に、ｐｐｍで与えられる。さらには、略記”s”，”d”，”t”，”m”，および”br”は、それぞれ”singlet”，”doublet”，”triplet”，”multiplet”，および”broad”をそれぞれ意味する。【０１０７】
ＩＲスペクトルは、「DRS-8000A」を装着した「SHIMADZU IR Prestige-21 spectrometer」を用い、拡散反射法により測定した。【０１０８】
元素分析は、「YANACO CHN CORDER MT-5」により行った。【０１０９】
高分解能質量スペクトル（HRMS）は、「JEOL JMS-700 mass spectrometer」により、ポジティブ高速原子衝突（FAB+）条件下で測定した。または、「Bruker micrOTOF mass spectrometer」により、ポジティブエレクトロスプレーイオン化（ESI+）条件下で測定した。【０１１０】
なお、本実施例では、化合物（１）（4-fluorobenzonitrile）（Cat. No. 329-70013）、化合物（２）（4-amino-4H-1,2,4-triazole）（Cat. No. 326-41573）、tert−ブトキシカリウム（Cat. No. 161-08421）、４−メチルベンジルブロミド（Cat. No. 021-03131）、４−ブロモベンジルブロミド（Cat. No. 325-36072）、炭酸カリウム（Cat. No. 162-03495）、化合物（５）（4-bromobenzyl alcohol）（Cat. No. 320-77123）、トリブチルスズ（IV）クロリド（Cat. No. 202-08981）、メタンスルホニルクロリド（Cat. No. 131-01583）、トリエチルアミン（Cat. No. 202-02646）、ビス（ピナコラート）ジボロン（Cat. No. 329-56970）、ｍ−ブロモベンジルブロミド（Cat. No. 32-6642）、p-フルオロニトロベンゼン（Cat. No. 064-02081）、化合物（１８）（３−ブロモベンジルアルコール）（Cat. No. 326-21852）、臭化ナトリウム（Cat. No. 193-01505）、化合物（２６）（ｐ−キシレン−α，α’-ジオール）（Cat. No. 248-00562）、および四臭化炭素（Cat. No. 038-16555）は和光純薬工業（株）からそれぞれ購入した。PdCl2（dppf）・CH2Cl2（Cat. No. B2064）は東京化成工業（株）から購入した。【０１１１】
また、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（Cat. No. 216666）および（n-Bu3Sn）２（Cat. No. 251127）、化合物（１３）（４−ヨードベンジルアルコール）（Cat. No. 523496）、３−メチルベンジルブロミド（Cat. No. B83509）、および（ジエチルアミノ）サルファートリフルオリド（Cat. No. 235253）はシグマアルドリッチジャパン（株）からそれぞれ購入した。ｎ−ブチルリチウムのｎ−ヘキサン溶液（Cat. No. 04937-25）および臭化カリウム（Cat. No. 32319-30）、酢酸カリウム（32299-30）およびトリフェニルホスフィン（Cat. No. 40950-25）は関東化学（株）からそれぞれ購入した。【０１１２】
他の全ての化学試薬は、市販されている等級のものをそのまま使用した。【０１１３】
また、化合物（３）（4-（4H-1,2,4-Triazol-4-ylamino）benzonitrile）は、非特許文献３（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T.，Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）に記載の方法により、ＤＭＳＯ中、tert−ブトキシカリウム存在下で化合物（１）と化合物（２）とを反応させることにより合成した。化合物（９）、化合物（３１）および化合物（３７）も非特許文献３に記載の方法によって合成した。【０１１４】
〔化合物の合成〕
（Ｉ）化合物（４）（4-［（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）｛4-（tributylstannyl）benzyl｝amino ］benzonitrile）の合成
＜方法Ａ＞
化合物（４）は、以下のスキームに従って合成した。【０１１５】
【化２２】
2011002096.tif 000024
ここで、化合物（８）は、以下のスキームに従って合成した。【０１１６】
【化２３】
2011002096.tif 000025
以下に、各化合物についての合成方法について具体的に説明する。【０１１７】
（ｉ）化合物（６）（4-（Tributylstannyl）benzyl alcohol）の合成（非特許文献１１（Huang, Y.; Hammond, P. S.; Wu, L.; Mach, R. H., J. Med. Chem. 2001, 44, 4404-4415）、非特許文献１２（Kopka, K.; Faust, A.; Keul, P.; Wagner, S.; Breyholz, H.-J.; Holtke, C.; Schober, O.; Schafers, M.; Levkau, B..J. Med. Chem. 2006, 49, 6704-6715）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（５）（４．１５ｇ，２２．２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に、ｎ−ブチルリチウム（１．６３Ｍ，３０．０ｍＬ，４８．９ｍｍｏｌ）のｎ−ヘキサン溶液を−７８℃でゆっくりと加えた。上記混合物を同温度下で５０分間攪拌した後、当該混合物に、トリブチルスズ（IV）クロリド（１３．３ｍＬ，４８．９ｍｍｏｌ）を−７８℃で加え、混合物を室温まで昇温した。１．５時間攪拌した後、上記反応混合物を減圧下で濃縮した。【０１１８】
その残留物に水（２００ｍＬ）を加え、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１５０ｍＬ×３）、食塩水（１５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。【０１１９】
その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２００ｇ，n-hexane/EtOAc = 8/1）により精製し、化合物（６）（無色油状物，７．１４ｇ，８１．０％）を得た。【０１２０】
TLC Rf = 0.44 （n-hexane/EtOAc = 4/1），Rf= 0.50（n-hexane/CH2Cl2/EtOAc = 4/1/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH3）,0.93-1.16 （m，6H，3CH2），1.26-1.39 （m，6H，3CH2），1.43-1.67 （m，6H，3CH2），4.68 （d，2H，J = 5.8 Hz,benzylic CH2），7.30-7.37 （AA’BB’，2H，aromatic），7.39-7.56 （AA’BB’，2H，3J（119/117Sn-1H） = 37.4 Hz,aromatic）
13C NMR （75.5 MHz，CDCl3） δ 9.3 （3C，1J（119Sn-13C） = 339.2 Hz，1J（117Sn-13C） = 324.5 Hz）,13.5 （3C），27.2 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 54.7 Hz），28.9 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 19.7 Hz），64.2，126.5 （2C，3J（119/117Sn-13C） = 41.3 Hz），136.2 （2C，2J（119/117Sn-13C） = 31.4 Hz），140.2，140.5
IR （KBr，cm-1）514，598，621，662，689，743，791，833，864，961，1015，1069，1207，1290，1375，1393，1418，1462，2851，2870，2924，2955，3296
Anal. Calcd. for C19H34Sn: C，57.46；H，8.63. Found: C，57.29；H，8.88
HRMS （FAB+/NBA+NaI） m/z 421.1536 （［M+Na］+，C19H34O120SnNa requires 421.1529）。【０１２１】
（ii）化合物（７）（4-（Tributylstannyl）benzyl methanesulfonate）の合成（非特許文献１２参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（６）（６．９０ｇ，１７．４ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）溶液に、０℃でトリエチルアミン（３．６３ｍＬ，２６．０ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１．６１ｍＬ，２０．８ｍｍｏｌ）を順次加え、混合物を同温度下で３５分間攪拌した。【０１２２】
これに、水（２００ｍＬ）を加え、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、食塩水（１５０ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、濾過し、減圧下で濃縮した。その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２００ｇ，n-hexane/EtOAc = 4/1）で精製し、化合物（７）（無色油状物，７．１７ｇ，８６．８％）を得た。【０１２３】
TLC Rf = 0.45（n-hexane/EtOAc = 4/1），Rf = 0.57（n-hexane/CH2Cl2/EtOAc = 4/1/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH3），0.94-1.19 （m，6H，3CH2），1.23-1.41 （m，6H，3CH2），1.42-1.67 （m，6H，3CH2），2.90 （s，3H，CH3），5.23 （s，2H，benzylic CH2），7.33-7.41 （AA’BB’，2H，aromatic），7.43-7.60 （AA’BB’，2H，3J（119/117Sn-1H） = 36.5 Hz，aromatic）
13C NMR （75.5 MHz，CDCl3） δ 7.0 （3C，1J（119Sn-13C） = 340.7 Hz，1J（117Sn-13C） = 325.5 Hz），13.3 （3C），26.9 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 55.4 Hz），28.7 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 20.0 Hz），37.3，71.4，127.8 （2C，3J（119/117Sn-13C） = 40.3 Hz），132.9，136.4 （2C，2J（119/117Sn-13C） = 30.8 Hz），143.1
IR （KBr，cm-1）513，529，664，691，816，862，932，1069，1175，1356，1396，1416，1464，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C20H36O3SSn: C，50.54；H，7.63. Found: C，50.32；H，7.80
HRMS （FAB+/NBA+NaI） m/z 499.1301 （［M+H］+，C20H36O3S120SnNa requires 499.1305）。【０１２４】
（iii）化合物（８）（4-（Tributylstannyl）benzyl bromide）の合成（非特許文献１３（Patel, H. K.; Kilburn, J. D.; Langley, G. J.; Edwards, P. D.; Mitchell, T.; Southgate, R.， Tetrahedron Lett. 1994, 35, 481-484）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（７）（６．９１ｇ，１４．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液に、臭化カリウム（３．４６ｇ，２９．１ｍｍｏｌ）を室温下で加え、混合物を同温度下で１２時間攪拌した。【０１２５】
これに、水（１００ｍＬ）を加え、混合物をＥｔ２Ｏ（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１５０ｍＬ×３）、食塩水（１５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２００ｇ，n-hexane/Et2O= 49/1）により精製し、化合物（８）（無色油状物，６．４３ｇ，９６．１％）を得た。【０１２６】
TLC Rf = 0.39（n-hexane）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH3），0.92-1.18 （m，6H，3CH2），1.25-1.40 （m，6H，3CH2），1.42-1.64 （m，6H，3CH2），4.49 （s，2H，benzylic CH2），7.30-7.39 （AA’BB’，2H，aromatic），7.39-7.54 （AA’BB’，2H，3J（119/117Sn-1H） = 36.6 Hz，aromatic）
13C NMR （75.5 MHz，CDCl3） δ 7.3 （3C，1J（119Sn-13C） = 340.0 Hz，1J（117Sn-13C） = 324.8 Hz），13.6 （3C），27.3 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 55.4 Hz），29.0 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 19.3 Hz），33.4，128.2 （2C，3J（119/117Sn-13C） = 41.2 Hz），136.6 （2C，2J（119/117Sn-13C） = 30.5 Hz），137.2，142.2
IR （KBr，cm-1）627，669，777，797，839，937，1011，1086，1113，1406，1462，1485，2857，2884，2928，2953
Anal. Calcd. for C19H33BrSn: C，49.60；H，7.23. Found: C，49.44；H，7.41。【０１２７】
（iv）化合物（４）（4-［（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）｛4-（tributylstannyl）benzyl｝amino ］benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（１．１７ｇ，６．３３ｍｍｏｌ）、化合物（８）（３．４９ｇ，７．５９ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（１．７６ｇ，１２．７ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（５０ｍＬ）溶液を室温下で８時間攪拌した。これに、水（１００ｍＬ）を加え、上記混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ×３）により抽出した。有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×１）、食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。【０１２８】
その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１１０ｇ、CH2Cl2/CH3OH = 20/1）により精製し、化合物（４）（無色固体，２．６２ｇ，７３．５％）を得た。ｎ−ヘキサンによって再結晶することによって無色板状晶が得られた（２．２６ｇ，６３．４％）。【０１２９】
TLC Rf = 0.57 （CH2Cl2/CH3OH = 9/1）
Mp 93-94 ℃
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH3），0.93-1.18 （m，6H，3CH2），1.23-1.41 （m，6H，3CH2），1.44-1.58 （m，6H，3CH2），4.88 （s，2H，benzylic CH2），6.62-6.70 （AA’BB’，2H，aromatic），7.09-7.19 （AA’BB’，2H，aromatic），7.36-7.53（AA’BB’，2H，3J（119/117Sn-1H） = 36.0 Hz，aromatic），7.55-7.62 （AA’BB’，2H，aromatic），8.12 （br s，2H，triazole）
13C NMR （75.5 MHz，DMSO-d6） δ 9.1 （3C，1J（119Sn-13C） = 338.8 Hz，1J（117Sn-13C） = 324.2 Hz），13.6 （3C），26.7 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 53.7 Hz），28.6 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 20.3 Hz），57.3，102.8，113.6 （2C），119.1，127.9 （2C，3J（119/117Sn-13C） = 40.9 Hz），133.9 （2C），134.7，136.4 （2C，2J（119/117Sn-13C） = 31.9 Hz），141.0，143.3 （2C），151.5
IR （KBr，cm-1）669，826，1065，1179，1292，1335，1395，1462，1508，1605，2222，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C28H39N5Sn: C，59.59；H，6.97；N，12.41. Found: C，59.47；H，6.65；N，12.44
HRMS （FAB+/NBA） m/z 566.2318 （［M+H］+，C28H40N5120Sn requires 566.2306）。【０１３０】
＜方法Ｂ＞
また、化合物（４）は以下のスキームに示す別の方法によっても合成した。【０１３１】
【化２４】
2011002096.tif 000026
具体的には、以下のように合成した。【０１３２】
なお、化合物（９）（4-｛（4-Bromobenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino｝benzonitrile（YM511）は、文献１（Okada，M.；Yoden，T.；Kawaminami，E.；Shimada，Y.；Kudoh，M.；Isomura，Y.；Shikama，H.；Fujikura，T.，Chem. Pharm. Bull. 1996，44，1871-1879）に記載の方法により、アセトニトリル中、炭酸カリウム存在下で化合物（３）と４−ブロモベンジルブロミドとを反応させることにより合成した。【０１３３】
まず、アルゴン雰囲気下、化合物（９）（６８５ｍｇ，１．９３ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２０ｍＬ）溶液に、（Ｐｈ３Ｐ）４Ｐｄ（６６．９ｍｇ，５７．９μｍｏｌ）および（ｎ−Ｂｕ３Ｓｎ）２（２．５０ｍＬ，２．９３ｍｍｏｌ）を順次加え、混合物を１００℃で２０時間還流させた。【０１３４】
混合物を室温に冷却後、混合物に、飽和フッ化カリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、生じた沈殿物を濾過により除去した。濾液を酢酸エチル（１００ｍＬ×２）で抽出し、有機相を全て混合した。それを飽和フッ化カリウム水溶液（１００ｍＬ×１）、水（１００ｍＬ×１）、食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。【０１３５】
その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル５０ｇ，CH2Cl2/EtOAc = 9/1）により精製し、化合物（４）（無色固体，５５１ｍｇ，５０．５％）を得た。【０１３６】
（II）化合物（１０）（4-｛（4-[11C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino｝benzonitrile，[11C]cetrozole）の合成
化合物（１０）は以下のように合成した。【０１３７】
【化２５】
2011002096.tif 000027
まず、トリスジベンジリデンアセトンジパラジウム（１．８ｍｇ、１．６μｍｏｌ）およびトリ−ｏ−トリルホスフィン（２．０ｍｇ、６．３μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．３ｍＬ）を反応容器（Ａ）中に準備し、室温下に置いた。反応容器（Ａ）中の溶液は、［１１Ｃ］ヨウ化メチルを吹き込む１０〜２０分前に準備した。【０１３８】
一方、合成した化合物（４）（４．０ｍｇ、１３μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ、２０μｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２．４ｍｇ、１８μｍｏｌ）を反応容器（Ｂ）に準備し、室温下に置いた。【０１３９】
続いて、反応容器（Ａ）に［１１Ｃ］ヨウ化メチルを吹き込み、その後１分間静置した。得られた溶液を反応容器（Ｂ）に添加した。【０１４０】
反応溶液（Ｂ）中の混合溶液を７０℃で５分間加熱した後、ＨＰＬＣ（high-performance liquid chromatography）を用いて下記条件下で分離および精製を行なった。【０１４１】
分離精製条件：ガードカラム Pd pack，AR-II 10 x 50 mm，分取カラム Cholester Waters 10 x 250 mm，UV検出波長 254nm，溶離液  CH3CN:30mM酢酸アンモニウム=40:60，流速5.0 mL/min，保持時間約14分，目的化合物（１０）のHPLC分析収率91%以上（HPLC放射線スペクトルの面積比より算出），単離した（１０）の総放射能2.3 ＧＢｑ；分析条件（純度測定、比放射能測定）：AR-II 4.6 x 100 mm，UV検出波長254 nm，溶離液CH3CN:30mM酢酸アンモニウム=40:60，流速1.0 mL/min，保持時間約4.5分，放射化学純度99%，化学純度96-99%，比放射能72 ＧＢｑ/μｍｏｌ
希釈用溶液：生理食塩水5.0 mL，プロピレングリコール0.5 mL，Tween 80界面活性剤0.08 mL。【０１４２】
１１Ｃ−標識化合物（１０）のＨＰＬＣ分取結果を図１に示す。なお、図１中、ベースラインが下側にあるピークはＲＩ検出によるものであり、ベースラインが上側にあるピークはＵＶ検出によるものである。【０１４３】
ＨＰＬＣによる分離後、目的の１１Ｃ−標識化合物（１０）を含むフラクションを減圧下、エバポレーターにより濃縮し、希釈用溶液を加えてサル臨床研究用の投与溶液とした。【０１４４】
また、化合物（１０）は、以下の方法によっても合成した。【０１４５】
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、１４Ｎ（ｐ，α）１１Ｃ反応によって、[11C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[11C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [11C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[11C]メチル化反応に用いた。【０１４６】
[11C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２．０ｍｇ，１．８μｍｏｌ）およびＰ（o-tolyl）３（３．２ｍｇ，１０．１μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（４）（２．５ｍｇ，４．４μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２．５ｍｇ，１９μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。【０１４７】
反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。【０１４８】
得られた混合物を７０℃で５分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ３ＣＮ：３０ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（３５：６５）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。【０１４９】
一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，ＣＨ３ＣＮ：３０ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（３５：６５）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，１０ｍｍ×２５０ｍｍ，５ｍｍ；ガードカラム，Sumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，６ｍＬ／分；ＵＶ検出波長，２５４ｎｍ；化合物（１０）の保持時間，１３．５分）へ注入した。【０１５０】
所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。所望の１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール （０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。【０１５１】
ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３８分であった。【０１５２】
投与のために作製された化合物（１０）の放射能は、１．５〜２．３ＧＢｑであり、比放射能は５０〜１２０ＧＢｑ／μｍｏｌであった。【０１５３】
化合物（１０）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（１１）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，ＣＨ３ＣＮ：３０ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（４０：６０）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，４．６ｍｍ×１００ｍｍ；流速，１ｍＬ／分；ＵＶ検出波長，２５４ｎｍ；化合物（１０）の保持時間，４．５分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。【０１５４】
（III）化合物（１１）（4-{（4-Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile （cetrozole））の合成
化合物（１０）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（１１）を以下のスキームに従って合成した。【０１５５】
【化２６】
2011002096.tif 000028
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（２．００ｇ，１０．８ｍｍｏｌ）、４−メチルベンジルブロミド（Cat. No. 021-03131、和光純薬工業（株）から購入）（２．００ｇ，１０．８ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（２．９９ｇ，２１．６ｍｍｏｌ）の混合物のアセトニトリル（８０ｍＬ）溶液を室温下で２時間攪拌した。これに、水（２００ｍＬ）を加え、上記混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ×３）により抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×２）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。【０１５６】
その残留物をカラムクロマトグラフィ（シリカゲル  ２００ｇ、CH2Cl2/EtOAc = 1/1から1/4）により精製し、化合物（１１）（無色固体，１．６０ｇ，５１．２％）を得た。酢酸エチル（６４ｍL）からの再結晶により、無色板状結晶（１．２７ｇ，４０．６％）が得られた。【０１５７】
TLC Rf= 0.30 （CH2Cl2/EtOAc = 1/1）
Mp 201-202℃
1H NMR （300 MHz，DMSO-d6） δ 2.25 （s，3H，CH3），4.99 （s，2H，benzylic CH2），6.70-6.78 （AA’BB’，2H，aromatic），7.06-7.14 （AA’BB’，2H，aromatic），7.14-7.22 （AA’BB’，2H，aromatic），7.70-7.79 （AA’BB’，2H，aromatic），8.76 （br s，2H，triazole）
13C NMR （75.5 MHz，DMSO-d6） δ 20.7，56.9，102.8，113.7 （2C），119.1，128.5 （2C），129.3 （2C），131.2，133.9 （2C），137.4，143.4 （2C），151.6；IR （KBr，cm-1） 548，606，667，741，814，833，858，870，1069，1180，1207，1234，1265，1287，1302，1389，1456，1501，1512，1605，2220，2340，2359，3121
Anal. Calcd. for C17H15N5: C，70.57；H，5.23；N，24.21. Found: C，70.41；H，5.10；N，24.48
HRMS （FAB+/NBA+NaI） m/z 312.1220 （[M+Na]+，C17H15N5Na requires 312.1225）。【０１５８】
（IV）化合物（１２）（4-[{4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl}（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino]benzonitrile）の合成
＜方法Ａ＞
化合物（１２）は、以下のスキームに従って合成した。【０１５９】
【化２７】
2011002096.tif 000029
ここで、化合物（１６）は、以下のスキームに従って合成した。【０１６０】
【化２８】
2011002096.tif 000030
（ｉ）化合物（１４）（4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl alcohol）の合成（非特許文献１４（Filippis, A.; Morin, C.; Thimon, C., Synth. Commun. 2002, 32, 2669-2676）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１３）（２．３４ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（３０ｍＬ）溶液に、室温でＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）・ＣＨ２Ｃｌ２（２４５ｍｇ，３００μｍｏｌ），酢酸カリウム（２．９４ｇ，３０．０ｍｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（２．７９ｇ，１１．０ｍｍｏｌ）を順次加え、当該混合物を８５℃で１８時間攪拌した。【０１６１】
当該混合物を室温に冷却後、水（２５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。【０１６２】
有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）および食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１６３】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 5/1）で精製することによって、化合物（１４）を無色固体として得た。【０１６４】
TLC Rf = 0.41 （n-hexane/EtOAc = 2/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 1.35 （s，12H，4CH3），4.72 （s，2H，benzylic CH2），7.34-7.41 （AA’BB’，2H，aromatic），7.78-7.84 （AA’BB’，2H，aromatic）。【０１６５】
（ii）化合物（１５）（4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl methanesulfonate）の合成（非特許文献１４参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１４）（３．４８ｇ，１４．９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍＬ）溶液に、０℃で、トリエチルアミン（３．１５ｍＬ，２２．６ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１．４０ｍＬ，１８．１ｍｍｏｌ）を順次加え、当該混合物を０℃で２時間攪拌した。この混合物に対して、水（１５０ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（７０ｍＬ×３）および食塩水（７０ｍＬ×３）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１６６】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１１０ｇ，n-hexane/EtOAc = 3/1）で精製することによって、化合物（１５）を無色固体として得た。化合物（１５）は、これ以上精製を行わずに次工程に用いた。
TLC 0.41 （n-hexane/EtOAc = 2/1）。【０１６７】
（iii）化合物（１６）（4-（4,4,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl）benzyl bromide）の合成（非特許文献１４参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１５）（３．５５ｇ，１１．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液に、臭化カリウム（２．０３ｇ，１７．１ｍｍｏｌ）を室温で加え、その混合物を室温で１９時間攪拌した。この混合物に対して、水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１６８】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１００ｇ，n-hexane/EtOAc = 9/1）で精製することによって、化合物（１６）を無色固体として得た。【０１６９】
TLC Rf = 0.73 （n-hexane/EtOAc = 3/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 1.34 （s，12H，4CH3），4.49 （s，2H，benzylic CH2），7.36-7.43 （AA’BB’，2H，aromatic），7.75-7.83 （AA’BB’，2H，aromatic）。【０１７０】
（iv）化合物（１２）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（１．３６ｇ，７．３３ｍｍｏｌ）、化合物（１６））（２．６１ｇ，８．７９ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２．０３ｇ，１４．７ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（５０ｍＬ）溶液を室温で５時間攪拌した。この混合物に対して、水（１５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１７１】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１１０ｇ，CH2Cl2/CH3OH = 40/1）で精製することによって、化合物（１２）（無色固体，２．０２ｇ，６８．５％）を得た。【０１７２】
TLC Rf = 0.57 （CH2Cl2/CH3OH = 9/1）
Mp 193-194 ℃
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 1.34 （s，12H，4CH3），4.91 （s，2H，benzylic CH2），6.63-6.70 （AA’BB’，2H，aromatic），7.18-7.25 （AA’BB’，2H，aromatic），7.55-7.63 （AA’BB’，2H，aromatic），7.75-7.83 （AA’BB’，2H，aromatic），8.11 （s，2H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，CDCl3） δ 24.7 （4C），58.2，83.9 （2C），104.8，113.3 （2C），118.5，127.2 （2C），133.9 （2C），135.5 （2C），136.3，142.5 （2C），150.4 （the carbon adjacent to boron was not observed）
IR （KBr，cm-1） 546，656，671，733，826，858，912，962，1020，1065，1088，1142，1179，1213，1271，1325，1360，1398，1508，1603，2222，2978，3115，3401
HRMS （ESI+） m/z 424.1912 （[M+Na]+，C22H24BN5NaO2+requires 424.1915）。【０１７３】
＜方法Ｂ＞
また、化合物（１２）は以下のスキームに示す別の方法によっても合成した。【０１７４】
【化２９】
2011002096.tif 000031
具体的には、以下のように合成した。【０１７５】
アルゴン雰囲気下、化合物（９）（３２４ｍｇ，９１５μｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５．５ｍＬ）溶液に、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）・ＣＨ２Ｃｌ２（２２．５ｍｇ，２７．５μｍｏｌ）、酢酸カリウム（２７０ｍｇ，２．７５ｍｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（２５６ｍｇ，１．０１ｍｍｏｌ）を室温で順次加え、当該混合物を８０℃で２時間攪拌した。当該混合物を室温に冷却後、水（８０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×３）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１７６】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH2Cl2/CH3OH = 20/1）で精製することによって、化合物（１２）（薄灰色固体，３３０ｍｇ，８９．９％）を得た。【０１７７】
（Ｖ）化合物（１２）から化合物（１０）の合成【０１７８】
【化３０】
2011002096.tif 000032
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、１４Ｎ（ｐ，α）１１Ｃ反応によって、[11C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[11C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた[11C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[11C]メチル化反応に用いた。【０１７９】
[11C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温で、化合物（１２）（４．０ｍｇ，１０μｍｏｌ），Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２．９ｍｇ，２．５μｍｏｌ），P（o-tolyl）3（４．０ｍｇ，１２．６μｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（４．０ｍｇ，３０μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液へ移送した。【０１８０】
得られた混合物を６５℃で２分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ３ＣＮ：３０ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（３５：６５）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。【０１８１】
一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （35:65）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm ×250 mm；ガードカラム，Sumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，6 ｍＬ/min；ＵＶ検出波長，254 nm；化合物（１０）の保持時間，13.5分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。所望の１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール（０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。【０１８２】
ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３０分であった。投与のために作製された化合物（１０）の放射能は、２．６〜６．２ＧＢｑであり、比放射能は９０〜１１０ＧＢｑ／μｍｏｌであった。【０１８３】
化合物（１０）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（１１）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm ×100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（１０）の保持時間，4.5分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。【０１８４】
（VI）化合物（２２）（4-{（3-[11C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
化合物（２２）は、以下のスキームに従って合成した。【０１８５】
【化３１】
2011002096.tif 000033
（ｉ）化合物（１９）（3-（Tributylstannyl）benzyl alcohol）の合成（非特許文献１５（Efange, S. M. N.; Michelson, R. H.; Khare, A. B.; Thomas, J. R., J. Med. Chem. 1993, 36, 1754-1760）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（１８）（２．６６ｍＬ，２２．２ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）溶液に、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（１．６３Ｍ，３０．０ｍＬ，４８．９ｍｍｏｌ）ｎ−ヘキサン溶液をゆっくりと加えた。反応混合物を−７８℃で３０分間攪拌後、−７８℃でトリブチルスズ（IV）クロリド（１３．５ｍＬ，４９．８ｍｍｏｌ）を加え、室温まで暖めた。１時間攪拌後、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物に対して、水（２００ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ×３）で抽出した。【０１８６】
有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）および食塩水（１００ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２２０ｇ，n-hexane/EtOAc = 10/1）で精製することによって、化合物（１９）（無色油状物，７．４７ｇ，８４．８％）を得た。【０１８７】
TLC Rf = 0.52 （n-hexane/EtOAc = 4/1），Rf = 0.52 （n-hexane/CH2Cl2/EtOAc = 5/2/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.86 （t，9H，J = 7.4 Hz，3CH3），0.93-1.18 （m，6H，3CH2），1.22-1.44 （m，6H，3CH2），1.45-1.63 （m，6H，3CH2），4.67 （s，2H，benzylic CH2），7.26-7.54 （m，4H，aromatic）。【０１８８】
（ii）化合物（２０）（3-（Tributylstannyl）benzyl methanesulfonate）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（１９）（７．１２ｇ，１７．９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（３５ｍＬ）溶液に対して、０℃でトリエチルアミン（３．８０ｍＬ，２７．３ｍｍｏｌ）およびメタンスルホニルクロリド（１．６６ｍＬ，２１．５ｍｍｏｌ）を順次加え、当該混合物を０℃で３時間攪拌した。これに、水（１００ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１８９】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２２０ｇ，n-hexane/EtOAc = 9/1）で精製することによって、化合物（２０）（無色油状物，４．８５ｇ，５６．９％）を得た。【０１９０】
TLC 0.48 （n-hexane/EtOAc = 4/1），Rf= 0.65 （n-hexane/CH2Cl2/EtOAc = 5/2/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.89 （t，9H，J = 7.3 Hz，3CH3），0.94-1.20 （m，6H，3CH2），1.26-1.40 （m，6H，3CH2），1.46-1.59 （m，6H，3CH2），2.88 （s，3H，CH3），5.24 （s，2H，benzylic CH2），7.29-7.58 （m，4H，aromatic）
13C NMR （75.5 MHz，CDCl3） δ 9.5 （3C，1J（119Sn-13C） = 366.8 Hz，1J（117Sn-13C） = 341.7 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 56.0 Hz），28.9 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 20.2 Hz），38.2，72.0，128.2 （3J（119/117Sn-13C） = 39.5 Hz），128.6，132.5 （3J（119/117Sn-13C） = 38.9 Hz），136.8 （2J（119/117Sn-13C） = 30.8 Hz），137.4 （2J（119/117Sn-13C） = 28.7 Hz），143.1
IR （KBr，cm-1） 507，529，700，783，829，918，935，1175，1356，1464，2851，2870，2926，2957
Anal. Calcd. for C20H36O3SSn: C，50.54；H，7.63. Found: C，50.32；H，7.28
HRMS （FAB+/NBA+NaI） m/z 499.1322 （M+H，C20H36O3S120SnNa requires 499.1305）。【０１９１】
（iii）化合物（２１）（3-（Tributylstannyl）benzyl bromide）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（２０）（２．６６ｍＬ，２２．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）溶液に対して、臭化ナトリウム（１．９３ｇ，１８．８ｍｍｏｌ）を室温で加え、当該混合物を室温で１６時間攪拌した。この混合物に、水（２００ｍＬ）を加え、ジエチルエーテル（８０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×３）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１９２】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル１００ｇ，n-hexane/Et2O = 20/1）で精製することによって、化合物（２１）（無色油状物，４．０３ｇ，９３．３％）を得た。【０１９３】
TLC Rf = 0.68 （n-hexane）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.89 （t，9H，J = 7.4 Hz，3CH3），0.93-1.19 （m，6H，3CH2），1.25-1.41 （m，6H，3CH2），1.43-1.67 （m，6H，3CH2），4.50 （s，2H，benzylic CH2），7.26-7.53 （m，4H，aromatic）
13C NMR （75.5 MHz，CDCl3） δ 9.5 （3C，1J（119Sn-13C） = 340.8 Hz，1J（117Sn-13C） = 325.7 Hz），13.6 （3C），27.3 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 56.3 Hz），29.0 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 20.1 Hz），33.9，128.1 （3J（119/117Sn-13C） = 40.3 Hz），128.6，136.4 （2J（119/117Sn-13C） = 29.6 Hz），136.8，137.1 （3J（119/117Sn-13C） = 38.8 Hz），142.8
IR （KBr，cm-1） 664，700，1125，1462，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C19H33BrSn: C，49.60；H，7.23. Found: C，49.66；H，6.84。【０１９４】
（iv）化合物（１７）（4-[（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）{3-（tributylstannyl）benzyl}amino]benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（５００ｍｇ，２．７０ｍｍｏｌ）、化合物（２１）（１．４９ｇ，３．２４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（７４６ｍｇ，５．４０ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（３０ｍＬ）溶液を室温で２１時間攪拌した。当該混合物を減圧下で濃縮した。残留物に水（１００ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（７０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０１９５】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，CH2Cl2 to CH2Cl2/CH3OH = 40/1）で精製することによって、化合物（１７）（無色固体，１．４６ｇ，９５．８％）を得た。ｎ−ヘキサンによって再結晶することによって無色板状晶が得られた（１．１３ｇ，７４．２％）。【０１９６】
TLC Rf = 0.63 （CH2Cl2/EtOAc = 9/1）
Mp 116-117 ℃
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.87 （t，9H，J = 7.3 Hz，3CH3），0.92-1.16 （m，6H，3CH2），1.23-1.37 （m，6H，3CH2），1.42-1.56 （m，6H，3CH2），4.89 （s，2H，benzylic CH2），6.63-6.71 （AA’BB’，2H，aromatic），7.09 （d，1H，J = 7.1 Hz，aromatic），7.19-7.35 （m，2H，aromotic），7.36-7.53 （d，1H，J = 7.1 Hz，3J（119/117Sn-1H） = 36.1 Hz，aromatic），7.55-7.63 （AA’BB’，2H，aromatic），8.08 （s，2H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，CDCl3） δ 9.5 （3C，1J（119Sn-13C） = 342.1 Hz，1J（117Sn-13C） = 326.8 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 56.0 Hz），28.9 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 20.2 Hz），58.2，104.7，113.2 （2C），118.5，127.5，128.5 （3J（119/117Sn-13C） = 38.7 Hz），132.8 （3J（119/117Sn-13C） = 38.0 Hz），133.9 （2C），135.6 （2J（119/117Sn-13C） = 30.0 Hz），137.0 （2J（119/117Sn-13C） = 28.5 Hz），142.5 （2C），143.9，150.5
IR （KBr，cm-1） 704，837，874，1069，1179，1269，1379，1462，1508，1605，2224，2851，2870，2924，2957
Anal. Calcd. for C28H39N5Sn: C，59.59；H，6.97；N，12.41. Found: C，59.55；H，6.81；N，12.38。【０１９７】
（ｖ）化合物（２２）（4-{（3-[11C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、１４Ｎ（ｐ，α）１１Ｃ反応によって、[11C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[11C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [11C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[11C]メチル化反応に用いた。【０１９８】
[11C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２．７ｍｇ，２．４μｍｏｌ）およびP（o-tolyl）3（３．０ｍｇ，９．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（１７）（３．０ｍｇ，５．３ｍｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２．４ｍｇ，１８μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。【０１９９】
得られた混合物を７０℃で５分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ３ＣＮ：３０ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（４０：６０）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。【０２００】
一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm × 250 mm；ガードカラム，Nacalai COSMOSIL Cholester 若しくはSumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，5 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（２２）の保持時間，12分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。【０２０１】
所望の１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール（０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。【０２０２】
ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３８分であった。【０２０３】
投与のために作製された化合物（２２）の放射能は、０．４〜４．５ＧＢｑであり、比放射能は３０〜６０ＧＢｑ／μｍｏｌであった。【０２０４】
化合物（２２）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（２３）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm ×100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（２２）の保持時間，4.6分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。【０２０５】
（VII）化合物（２３）（4-{（3-Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
化合物（２２）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（２３）を以下のスキームに従って合成した。【０２０６】
【化３２】
2011002096.tif 000034
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、３−メチルベンジルブロミド（２６５μＬ，１．９６ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で５時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２０７】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH2Cl2/CH3OH = 9/1）で精製することによって、化合物（２３）（無色固体，３７３ｍｇ，７９．６％）を得た。酢酸エチルによって再結晶することによって無色板状晶が得られた（２９３ｍｇ，６２．５％）。【０２０８】
TLC Rf = 0.41 （CH2Cl2/CH3OH = 9/1）
Mp 185-186 ℃
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 2.32 （s，3H，CH3），4.86 （s，2H，benzylic CH2），6.63-6.72 （AA’BB’，2H，aromatic），6.95-7.15 （m，2H，aromatic），7.17 （d，1H，J = 7.5 Hz，aromatic），7.23 （d，1H，J = 7.5 Hz，aromatic），7.55-7.64 （AA’BB’，2H，aromatic），8.10 （s，2H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，DMSO-d6） δ 20.9，57.2，102.7，113.6 （2C），119.1，125.4，128.5，128.7，128.8，133.9 （2C），134.7，137.9，143.4 （2C），151.6
IR （KBr，cm-1） 513，546，615，648，669，704，737，766，791，827，860，949，1007，1040，1069，1140，1182，1213，1300，1321，1391，1425，1460，1510，1605，1692，2218，2868，2918，3011，3051，3100，3121
Anal. Calcd. for C17H15N5: C，70.57；H，5.23；N，24.21. Found: C，70.33；H，5.30；N，23.94。【０２０９】
（VIII）化合物（２４）（4-{（3-Bromobenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成（非特許文献３参照）【０２１０】
【化３３】
2011002096.tif 000035
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、３−ブロモベンジルブロミド（４８５ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で５時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２０ｇ，CH2Cl2/CH3OH = 40/1）で精製することによって、化合物（２４）（無色固体，５１１ｍｇ，８９．３％）を得た。酢酸エチル（１３ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（７ｍＬ）によって再結晶することによって無色板状晶が得られた（３８０ｍｇ，６６．４％）。【０２１１】
TLC Rf = 0.53 （CH2Cl2/CH3OH = 9/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 4.88 （s，2H，benzylic CH2），6.62-6.70 （AA’BB’，2H，aromatic），7.14 （d，1H，J = 7.9 Hz，aromatic），7.23 （dd，1H，J = 7.9，7.9 Hz，aromotic），7.43 （s，1H，aromatic），7.51 （d，1H，J = 7.9 Hz，aromotic），7.57-7.65 （AA’BB’，2H，aromatic），8.18 （s，2H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，DMSO-d6） δ 56.6，103.0，113.7 （2C），119.0，121.9，127.4，130.8，131.0，131.1，133.9 （2C），137.6，143.3 （2C），151.3
IR （KBr，cm-1） 546，615，664，700，735，787，826，997，1067，1138，1179，1206，1273，1298，1331，1395，1429，1474，1508，1572，1605，2222，3117
Anal. Calcd. for C16H12N5Br: C，54.25；H，3.41；N，19.77. Found: C，54.25；H，3.51；N，19.84。【０２１２】
（IX）化合物（２５）（4-{（4-Fluoromethylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成【０２１３】
【化３４】
2011002096.tif 000036
尚、化合物（２８）は、以下のスキームに従って合成した。【０２１４】
【化３５】
2011002096.tif 000037
（ｉ）化合物（２７）（4-Bromomethylbenzyl alcohol）の合成（非特許文献１６（Vassiliou, S,; Xeilari, M.; Yiotakis, A,; Grembecka, J.; Pawelczak, M.; Kafarskib, P.; Muchab, A., Bioorg. Med. Chem. 2007, 15, 3187-3200）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（２６）（５．００ｇ，３６．２ｍｍｏｌ）および四臭化炭素（１８．０ｇ，５４．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液へ、トリフェニルホスフィン（１４．２ｇ，５４．３ｍｍｏｌ）を０℃で加え、室温まで暖めた。１時間攪拌後、当該混合物に水（３００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（１００ｍＬ×３）および食塩水（１００ｍＬ×３）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２１５】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル２２０ｇ，n-hexane/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（２７）（無色固体，３．２８ｇ，４５．１％）を得た。【０２１６】
TLC Rf = 0.25 （n-hexane/EtOAc = 3/1）
1H NMR （270 MHz，CDCl3） δ 1.78 （br s，1H，OH），4.50 （s，2H，benzylic CH2），4.69 （s，2H，benzylic CH2），7.30-7.36 （AA’BB’，2H，aromatic），7.37-7.45 （AA’BB’，2H，aromatic）。【０２１７】
（ii）化合物（２８）（4-Fluoromethylbenzyl bromide）の合成（非特許文献１７（Ichikawa, J.; Sugimoto, K.; Sonoda, T.; Kobayashi, H., Chem. Lett. 1987, 10, 1985-1988）参照）
アルゴン雰囲気下、化合物（２７）（５００ｍｇ，２．４９ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）溶液に、（ジエチルアミノ）サルファートリフルオリド（ＤＡＳＴ）（６６０μＬ，５．０４ｍｍｏｌ）を０℃で加え、０℃で１時間攪拌した。当該混合物にＮａＨＣＯ３飽和水溶液を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×３）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２１８】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，n-hexane/Et2O = 50/1）で精製することによって、化合物（２８）（黄白色固体，３５２ｍｇ，６９．７％）を得た。【０２１９】
TLC Rf = 0.52 （n-hexane/EtOAc = 6/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 4.50 （s，2H，benzylic CH2），5.38 （d，2H，JH-F = 47.6 Hz，benzylic CH2），7.33-7.40 （AA’BB’，2H，aromatic），7.41-7.47 （AA’BB’，2H，aromatic）。【０２２０】
（iii）化合物（２５）（4-{（4-Fluoromethylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３）（１９１ｍｇ，１．０３ｍｍｏｌ），化合物（２８）（２５１ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ），および炭酸カリウム（２８５ｍｇ，２．０６ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１０ｍＬ）溶液を室温で４時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２２１】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH2Cl2/CH3OH = 50/1）で精製することによって、化合物（２５）（淡黄色固体，２６４ｍｇ，８３．３％）を得た。【０２２２】
TLC Rf = 0.54 （CH2Cl2/CH3OH = 9/1）
Mp 158-159 ℃
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 4.92 （s，2H，benzylic CH2），5.38 （d，2H，JH-F = 47.4 Hz，benzylic CH2），6.63-6.73 （AA’BB’，2H，aromatic），7.20-7.30 （AA’BB’，2H，aromatic），7.33-7.43 （AA’BB’，2H，aromatic），7.55-7.65 （AA’BB’，2H，aromatic），8.13 （s，2H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，DMSO-d6） δ 57.0，83.8 （d，1JC-F = 162.0 Hz），102.9，113.7 （2C），119.0，128.1 （2C，d，3JC-F = 5.6 Hz），128.6 （2C），133.9 （2C），135.3 （d，5JC-F = 3.3 Hz），136.0 （d，2JC-F = 16.2 Hz），143.3 （2C），151.5
19F NMR （282 MHz，CDCl3） δ-47.9 （t，JF-H = 47.4 Hz）
IR （KBr，cm-1） 546，669，735，826，951，1001，1067，1179，1219，1298，1333，1379，1423，1460，1510，1603，2222，3117
Anal. Calcd. for C17H14N5F: C，66.44；H，4.59；N，22.79. Found: C，66.51；H，4.79；N，22.69。【０２２３】
（Ｘ）化合物３３（4-{（4-[11C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成【０２２４】
【化３６】
2011002096.tif 000038
（ｉ）化合物３２（4-[（4H-1,2,4-Triazol-4-yl）{4-（tributylstannyl）benzyl}amino]nitrobenzene）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３１）（４４９ｍｇ，２．１９ｍｍｏｌ）、化合物（８）（１．２１ｇ，２．６３ｍｍｏｌ），および炭酸カリウム（６０５ｍｇ，４．３８ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（２０ｍＬ）溶液を室温で１８時間攪拌した。当該混合物に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。【０２２５】
有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２２６】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 1/1）で精製することによって、化合物（３２）（薄茶色固体，７１８ｍｇ，５６．１％）を得た。酢酸エチル（３ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）での再結晶によって淡黄色板状晶が得られた（５３４ｍｇ，４１．８％）。【０２２７】
TLC Rf = 0.43 （n-hexane/EtOAc = 1/1）
Mp 112-113 ℃
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.88 （t，9H，J = 7.2 Hz，3CH3），0.94-1.19 （m，6H，3CH2），1.24-1.40 （m，6H，3CH2），1.41-1.63 （m，6H，3CH2），4.94 （s，2H，benzylic CH2），6.61-6.72 （AA’BB’，2H，aromatic），7.11-7.21 （AA’BB’，2H，aromatic），7.36-7.55 （AA’BB’，2H，3J（119/117Sn-1H） = 36.0 Hz，aromatic），8.14 （s，2H，triazole），8.16-8.22 （AA’BB’，2H，aromatic）
13C NMR （67.8 MHz，CDCl3） δ 9.6 （3C，1J（119Sn-13C） = 341.9 Hz，1J（117Sn-13C） = 327.4 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 56.5 Hz），28.9 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 20.1 Hz），58.3，112.3 （2C），126.0 （2C），127.2 （2C，3J（119/117Sn-13C） = 39.1 Hz），132.8，137.3 （2C，2J（119/117Sn-13C） = 30.8 Hz），141.7，142.6 （2C），143.8，151.9
IR （KBr，cm-1） 596，617，637，665，691，750，837，860，997，1016，1065，1123，1132，1196，1221，1263，1339，1375，1395，1460，1501，1595，2851，2924，3117
Anal. Calcd. for C27H39N5O2Sn: C，55.50；H，6.73；N，11.99. Found: C，55.48；H，6.36；N，11.95。【０２２８】
（ii）化合物３３（4-{（4-[11C]Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、１４Ｎ（ｐ，α）１１Ｃ反応によって、[11C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[11C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [11C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[11C]メチル化反応に用いた。【０２２９】
[11C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２．０ｍｇ，１．８μｍｏｌ）およびP（o-tolyl）3（３．０ｍｇ，９．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（３２）（３．０ｍｇ，５．１μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２．４ｍｇ，１８μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。【０２３０】
得られた混合物を７０℃で５分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ３ＣＮ：３０ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（４０：６０）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。【０２３１】
一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm × 250 mm；ガードカラム，Nacalai COSMOSIL Cholester 若しくはSumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，6 ｍＬ/min；UV検出波長，225 nm；化合物（３３）の保持時間，１２分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。【０２３２】
所望の１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール（０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。【０２３３】
ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３８分であった。投与のために作製された化合物（３３）の放射能は、０．５〜２．６ＧＢｑであり、比放射能は２０〜４４ＧＢｑ／μｍｏｌであった。【０２３４】
化合物（３３）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（３４）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （40:60）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm ×100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（３３）の保持時間，6.1分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。【０２３５】
（XI）化合物（３４）（4-{（4-Methylbenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成（非特許文献３参照）
化合物（３３）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（３４）を以下のスキームに従って合成した。【０２３６】
【化３７】
2011002096.tif 000039
アルゴン雰囲気下、化合物（３１）（５００ｍｇ，２．４４ｍｍｏｌ），４−メチルベンジルブロミド（５４２ｍｇ，２．９３ｍｍｏｌ），および炭酸カリウム（６７４ｍｇ，４．８８ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２２時間攪拌した。当該混合物に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２３７】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 1/2）で精製することによって、化合物（３４）（薄茶色固体，３４０ｍｇ，４５．１％）を得た。酢酸エチル（６０ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）によって再結晶することによって淡黄色板状晶が得られた（２５４ｍｇ，３３．７％）。【０２３８】
TLC Rf = 0.48 （n-hexane/EtOAc = 1/4）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 2.35 （s，3H，CH3），4.91 （s，2H，benzylic CH2），6.63-6.73 （AA’BB’，2H，aromatic），7.05-7.12 （AA’BB’，2H，aromatic），7.13-7.20 （AA’BB’，2H，aromatic），8.10 （s，2H，triazole），8.15-8.20 （AA’BB’，2H，aromatic）
13C NMR （75.5 MHz，DMSO-d6） δ 20.7，57.0，113.0 （2C），125.8 （2C），128.5 （2C），129.3 （2C），131.4，137.4，140.6，143.3 （2C），153.1
IR （KBr，cm-1） 665，748，818，835，851，870，1063，1111，1188，1211，1223，1288，1335，1395，1495，1595，3067，3123
Anal. Calcd. for C16H15N5O2: C，62.13；H，4.89；N，22.64. Found: C，62.21；H，4.88；N，22.68。【０２３９】
（XII）化合物３５（4-{（4-Bromobenzyl）（4H-1,2,4-triazol-4-yl）amino}nitrobenzene）の合成【０２４０】
【化３８】
2011002096.tif 000040
アルゴン雰囲気下、化合物（３１）（５００ｍｇ，２．４４ｍｍｏｌ）、４−ブロモベンジルブロミド（７３２ｍｇ，２．９３ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（６７４ｍｇ，４．８８ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２２時間攪拌した。当該混合物に水（１００ｍＬ）を加え、酢酸エチル（８０ｍＬ×３）で抽出した。【０２４１】
有機層を全て混合し、水（５０ｍＬ×１）および食塩水（５０ｍＬ×１）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２４２】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，n-hexane/EtOAc = 1/2）で精製することによって、化合物（３５）（茶色固体，１６０ｍｇ，１７．５％）を得た。酢酸エチル（３０ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（１５ｍＬ）によって再結晶することによって茶色板状晶が得られた（８５．５ｍｇ，９．４％）。【０２４３】
TLC Rf = 0.32 （n-hexane/EtOAc = 1/4）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 4.91 （s，2H，benzylic CH2），6.63-6.71 （AA’BB’，2H，aromatic），7.07-7.15 （AA’BB’，2H，aromatic），7.48-7.55 （AA’BB’，2H，aromatic），8.15 （s，2H，triazole），8.17-8.25 （AA’BB’，2H，aromatic）
13C NMR （67.8 MHz，DMSO-d6） δ 56.6，113.0 （2C），121.4，125.8 （2C），130.6 （2C），131.6 （2C），134.0，140.7，143.3 （2C），152.9
IR （KBr，cm-1） 600，665，735，750，818，849，885，908，1015，1063，1111，1223，1277，1341，1503，1591，3125，3429
Anal. Calcd. for C15H12N5BrO2: C，48.15；H，3.23；N，18.72. Found: C，48.24；H，3.35；N，18.56。【０２４４】
（XIII）化合物（３９）（4-{（4-[11C]Methylbenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成【０２４５】
【化３９】
2011002096.tif 000041
（ｉ）化合物３８（4-[（1H-1,2,4-Triazol-1-yl）{4-（tributylstannyl）benzyl}amino]benzonitrile）の合成
アルゴン雰囲気下、化合物（３７）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、化合物（８）（８９３ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２１時間攪拌した。当該混合物に水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２４６】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，CH2Cl2 to CH2Cl2/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（３８）（無色油状物，８９１ｍｇ，９７．５％）を得た。【０２４７】
TLC Rf = 0.63 （CH2Cl2/EtOAc = 9/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 0.88 （t，9H，J = 7.3 Hz，3CH3），0.92-1.18 （m，6H，3CH2），1.23-1.39 （m，6H，3CH2），1.45-1.56 （m，6H，3CH2），4.89 （s，2H，benzylic CH2），6.64-6.72 （AA’BB’，2H，aromatic），7.16-7.23 （AA’BB’，2H，aromatic），7.33-7.51 （AA’BB’，2H，3J（119/117Sn-1H） = 36.9 Hz，aromatic），7.52-7.61 （AA’BB’，2H，aromatic），7.86 （s，1H，triazole），8.03 （s，1H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，CDCl3） δ 9.5 （3C，1J（119Sn-13C） = 341.4 Hz，1J（117Sn-13C） = 326.3 Hz），13.6 （3C），27.2 （3C，3J（119/117Sn-13C） = 55.8 Hz），28.9 （3C，2J（119/117Sn-13C） = 20.6 Hz），58.2，105.2，114.7 （2C），118.7，127.5 （2C，3J（119/117Sn-13C） = 39.6 Hz），133.5，133.6 （2C），136.9 （2C，2J（119/117Sn-13C） = 30.2 Hz），142.8，143.9，151.3，151.4
IR （KBr，cm-1） 669，826，986，1130，1279，1273，1375，1454，1508，1605，2224，2851，2870，2924，2955
Anal. Calcd. for C28H39N5Sn: C，59.59；H，6.97；N，12.41. Found: C，59.41；H，6.86；N，12.38。【０２４８】
（ii）化合物３９（4-{（4-[11C]Methylbenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成
サイクロトロン（製品名；住友CYPRIS HM-12Sサイクロトロン、住友重機械工業社製）を用いて、１４Ｎ（ｐ，α）１１Ｃ反応によって、[11C]二酸化炭素を合成し、その後、標識用合成装置（RIKEN original automated radiolabeling system）によって、水素化アルミニウムリチウム、ヨウ化水素酸をこの順で加える処理を行い、[11C]ヨウ化メチルへ変換させた。得られた [11C]ヨウ化メチルは、以下に示す、パラジウム（０）触媒を用いた高速Ｃ-[11C]メチル化反応に用いた。【０２４９】
[11C]ヨウ化メチルを、Ｈｅガス流（３０ｍＬ／分）によって、室温の反応容器（Ａ）中の、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（２．７ｍｇ，２．４μｍｏｌ）およびP（o-tolyl）3（３．０ｍｇ，９．５μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．３ｍＬ）溶液へ移送した。当該混合物を、化合物（３８）（３．０ｍｇ，５．３μｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（２．０ｍｇ，２０μｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２．４ｍｇ，１８μｍｏｌ）を含む反応容器（Ｂ）へ移送した。反応容器（Ａ）の内部をＤＭＦ（０．５ｍＬ）でリンスし、その溶液を反応溶液（Ｂ）へ続けて移送した。【０２５０】
得られた混合物を７０℃で５分間加熱した。反応混合物における塩およびパラジウム残留物を、固相抽出、ＣＨ３ＣＮ：３０ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＮＨ４（５０：５０）溶液１ｍＬで洗浄することによって除去した。【０２５１】
一体化した溶出液を、γ検出器を備えた分取ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （50:50）；カラム，Nacalai COSMOSIL AR-II C18，10 mm × 250 mm；ガードカラム，Nacalai COSMOSIL Cholester 若しくはSumika SUMIPAK Filter PG-ODS；流速，5 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（３９）の保持時間，13.２分）へ注入した。所望のフラクションをフラスコに取り、減圧下で有機溶媒を除去した。【０２５２】
所望の１１Ｃでラベル化した化合物を、ポリソルベート８０（０．０５ｍＬ）、プロピレングリコール（０．３ｍＬ）、および生理食塩水（４ｍＬ）の混合物に溶解させた。【０２５３】
ＨＰＬＣ精製および静脈内投与のための放射性医薬品処方を含めた全ての合成時間は３８分であった。投与のために作製された化合物（３９）の放射能は、０．６〜２．８ＧＢｑであり、比放射能は５０〜１１６ＧＢｑ／μｍｏｌであった。【０２５４】
化合物（３９）の同定は、ラベル化していないオーセンティックサンプルである化合物（３８）を、γ検出器を備えた分析用ＨＰＬＣ（移動相，CH3CN:30 mM CH3COONH4 （５０：５０）；カラム，Nacalai COSMOSIL，AR-II C18，4.6 mm × 100 mm；流速，1 ｍＬ/min；UV検出波長，254 nm；化合物（３９）の保持時間，4.5分）へ共注入することによって確認した。化学純度および放射化学純度は９５％以上であった。【０２５５】
（XIV）化合物４０（4-{（4-Methylbenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成（非特許文献４参照）
化合物（３９）のコントロールとして、放射標識されていない化合物（４０）を以下のスキームに従って合成した。【０２５６】
【化４０】
2011002096.tif 000042
アルゴン雰囲気下、化合物（３７）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、４−メチルベンジルブロミド（３５９ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２０時間攪拌した。当該混合物を減圧下で濃縮した後、水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２５７】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル３０ｇ，CH2Cl2 to CH2Cl2/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（４０）（無色固体，４４８ｍｇ，９５．６％）を得た。酢酸エチル（８ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３２ｍＬ）での再結晶によって無色板状晶が得られた（３９５ｍｇ，８４．３％）。【０２５８】
TLC Rf = 0.46 （CH2Cl2/CH3OH = 9/1）
1H NMR （270 MHz，DMSO-d6） δ 2.25 （s，3H，CH3），4.96 （s，2H，benzylic CH2），6.68-6.81 （AA’BB’，2H，aromatic），7.04-7.16 （AA’BB’，2H，aromatic），7.17-7.27 （AA’BB’，2H，aromatic），7.66-7.81 （AA’BB’，2H，aromatic），8.14 （s，1H，triazole），8.58 （s，1H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，DMSO-d6） δ 20.7，56.7，103.3，114.6 （2C），119.0，128.4 （2C），129.1 （2C），131.7，133.7 （2C），137.2，145.0，151.0，151.4
IR （KBr，cm-1） 548，617，669，719，827，943，988，1022，1130，1179，1204，1229，1275，1304，1333，1350，1368，1420，1450，1510，1605，2222，2864，2920，3049，3123
Anal. Calcd. for C17H15N5: C，70.57；H，5.23；N，24.21. Found: C，70.76；H，5.20；N，24.29。【０２５９】
（XV）化合物４１（4-{（4-Bromobenzyl）（1H-1,2,4-triazol-1-yl）amino}benzonitrile）の合成（非特許文献４参照）【０２６０】
【化４１】
2011002096.tif 000043
アルゴン雰囲気下、化合物（３７）（３００ｍｇ，１．６２ｍｍｏｌ）、４−ブロモベンジルブロミド（４８５ｍｇ，１．９４ｍｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４８ｍｇ，３．２４ｍｍｏｌ）の混合物のアセトン（１５ｍＬ）溶液を室温で２０．５時間攪拌した。当該混合物を減圧下で濃縮した後、水（５０ｍＬ）を加え、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を全て混合し、水（３０ｍＬ×１）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。【０２６１】
残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（シリカゲル６０ｇ，CH2Cl2 to CH2Cl2/EtOAc = 4/1）で精製することによって、化合物（４１）（無色固体，５７５ｍｇ，quant.）を得た。酢酸エチル（１０ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（３０ｍＬ）での再結晶によって無色板状晶が得られた（４５８ｍｇ，７９．８％）。【０２６２】
TLC Rf = 0.48 （CH2Cl2/EtOAc = 9/1）
1H NMR （300 MHz，CDCl3） δ 4.87 （s，2H，benzylic CH2），6.64-6.75 （AA’BB’，2H，aromatic），7.09-7.22 （AA’BB’，2H，aromatic），7.41-7.52 （AA’BB’，2H，aromatic），7.53-7.65 （AA’BB’，2H，aromatic），7.87 （s，1H，triazole），8.03 （s，1H，triazole）
13C NMR （67.8 MHz，DMSO-d6） δ 56.2，103.5，114.6 （2C），119.0，121.1，130.7 （2C），131.4 （2C），133.8 （2C），134.4，145.0，151.1，151.2
IR （KBr，cm-1） 509，548，615，669，735，827，943，986，1013，1070，1130，1179，1204，1227，1275，1333，1373，1406，1445，1508，1605，1767，2222，3121
Anal. Calcd. for C16H12N5Br: C，54.25；H，3.41；N，19.77. Found: C，54.28；H，3.40；N，19.96。【０２６３】
〔化合物の評価〕
（Ｉ）ＰＥＴ測定
（ｉ）化合物（１０）について
オスのアカゲザルを用いてＰＥＴ測定を行った。具体的には、アカゲザルをケタラール（１０ｍｇ／ｋｇ）で沈静させ、脚部にＲＩ投与用の静脈カテーテルを設置した。その後、プロポフォール（１０ｍｇ／ｋｇ／ｈ）で持続麻酔を行い、ＰＥＴスキャナに保定した。【０２６４】
ＰＥＴ測定では、３０分間のトランスミッションスキャン後、化合物（１０）（３３ＭＢｑ／ｋｇ）を静脈より注入し９０分間スキャンを行った。画像再構成後、小脳を参照領域として結合能（Binding Potential:BP）の画像が構成された。この場合の結合能とは、結合速度定数を解離速度定数で割った値である。【０２６５】
なお、比較のために、化合物（１０）の代わりに、[11C]vorozole（〔背景技術〕における非特許文献１，２参照）を用いて上記と同様の操作を別途行った。これらの結果を図２〜４に示す。【０２６６】
なお、図２および図３において、「coronal」は、前額（冠状）断面を意味し、「transaxial」は水平断面を意味する。【０２６７】
図２は、本発明に係る化合物（１０）と、従来技術に係る[11C]vorozole（ＶＯＲ）とを用いた場合における扁桃体の結合能（ＢＰ）画像をそれぞれ示す図面である。なお、図２における矢印は扁桃体を示す。【０２６８】
図２から明らかなように、本発明に係る化合物（１０）を用いた場合では、従来技術に係る[11C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合と同様に、扁桃体において特異的な結合を示した。しかも、本発明に係る化合物（１０）を用いた場合では、従来技術に係る[11C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合と比べて標識化合物の大脳皮質等への非特異的結合が抑制されていた。【０２６９】
図３は、本発明に係る化合物（１０）と、従来技術に係る標識化合物（ＶＯＲ）とを用いた場合における側坐核の結合能（ＢＰ）画像をそれぞれ示す図面である。なお、図３における矢印は側坐核を示す。【０２７０】
図３から明らかなように、側坐核においても同様の挙動を示した。【０２７１】
また、図４は、小脳、扁桃体、視床下部、側坐核のＰＥＴ測定における、時間経過によるＳＵＶ（standardized uptake value）の変化を示すグラフであり、（ａ）は従来技術に係る[11C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合を示し、（ｂ）は本発明に係る化合物（１０）を用いた場合を示す。ＳＵＶは、組織１ｍｌあたりの放射能濃度を体重１ｇあたりの放射能濃度で割った値、つまり、
ＳＵＶ ＝ 組織１ｍｌあたりの放射能濃度／体重１ｇあたりの放射能濃度
で表される値である。【０２７２】
なお、図４中、小脳、扁桃体、視床下部、および側坐核は、それぞれ「ＣＲＢ」、「Ａｍｙ」、「ＨＴ」、および「Ａｃｂ」と示す。図４に示すように、従来技術に係る[11C]vorozole（ＶＯＲ）を用いた場合では、スキャンの後半において、時間の経過と共にＳＵＶの値はフラット若しくは若干増加しており、代謝物の脳内への再取り込みが起こっている可能性を示唆している。【０２７３】
一方、本発明に係る化合物（１０）を用いた場合では、スキャンの後半において、時間の経過と共にＳＵＶが減少しており、代謝物の再取り込みの可能性は低いと考えられる。従って、本発明に係る化合物（１０）を用いれば、より高い精度で脳内アロマテースを定量することができると考えられる。【０２７４】
標識された代謝物の再取り込みについて確認するために、イソフルレン麻酔下のオスラットに化合物（１０）を尾静脈より注射し、その５、１０、２０分後にそれぞれ血液を腹部大静脈よりサンプリングした後、脳を取り出しホモジナイズした。血液と脳ホモジネートにアセトニトリルを加え遠心し、抽出物をＨＰＬＣにかけて標識された代謝物を測定した。【０２７５】
血液中における親化合物の含有率を図８に、脳内における標識された代謝物の含有率を図９にそれぞれ示す。【０２７６】
尚、図８におけるＭｏｎｋｅｙのデータは、ＰＥＴ撮像と並行して静脈血をサンプリングして遠心をかけ、血漿にアセトニトリルを加え遠心し、抽出物をＨＰＬＣにかけて血漿中の親化合物を測定することによって求めた。【０２７７】
その結果、図９に示すように、ＶＯＲは、標識された代謝物が脳内に再取り込みされていたが、本発明に係る化合物（１０）ではその現象は認められなかった。【０２７８】
（ii）化合物（２２）、化合物（３３）、化合物（３９）について
化合物（１０）の代わりに、化合物（２２）、化合物（３３）、および化合物（３９）をそれぞれ用いたこと以外は、上記と同様にＰＥＴ測定を行った。これらの結果を図１０〜１３に示す。【０２７９】
図１０から明らかなように、本発明に係る化合物（２２）（３３）（３９）を用いた場合では、化合物（１０）を用いた場合と同様に、扁桃体において特異的な結合を示した。【０２８０】
また、図１１〜１３に示すように、化合物（１０）を用いた場合と同様に、スキャンの後半において、時間の経過と共にＳＵＶが減少しており、代謝物の再取り込みの可能性は低いと考えられる。従って、本発明に係る化合物（２２）（３３）（３９）を用いても、より高い精度で脳内アロマテースを定量することができると考えられる。【０２８１】
また、本発明に係る化合物（２２）（３３）（３９）の何れを用いた場合も化合物（１０）と同じ分布様相を呈したが、その結合能には差が見られた。化合物（２２）は結合能が比較的低く、化合物（３９）は比較的高い結果となった。【０２８２】
このように、本発明を用いれば、男性ステロイドを女性ステロイドに変換する酵素であるアロマテースの分布を可視化し、かつ精度よく定量し得る。本発明によって、従来のＰＥＴプローブよりも非特異的結合が有意に減少し、精度のより高いアロマテース定量が可能になった。【０２８３】
（II）本発明に係る化合物（１０）による置換実験
化合物（１０）の投与５分前に非標識vorozole（ＶＯＲ）（１００μｇ／ｋｇ）を投与して、アカゲザルの脳の結合能（ＢＰ）画像を観察した。【０２８４】
図５における、上段（全結合）に、化合物（１０）のみを投与した場合の結合能画像を示し、下段（置換した結合）に、非標識ＶＯＲ（１００μｇ／ｋｇ）を投与した５分後に化合物（１０）を投与した場合の結合能（ＢＰ）画像を示す。【０２８５】
なお、図５においても、「coronal」は、前額（冠状）断面を意味し、「transaxial」は水平断面を意味する。【０２８６】
また、図６に、図５に示す結合画像の結果を数値化したグラフを、ＶＯＲで同様の実験を行った結果と共に、視床下部（ＨＴ）および側坐核（Ａｃｂ）における結果と併せて示す。【０２８７】
図５に示すように、非標識ＶＯＲを投与した５分後に、化合物（１０）を投与した場合では、化合物（１０）のみを投与した場合には確認されていた扁桃体への取り込みが見えなかった。これは、非標識ＶＯＲにより化合物（１０）の結合が阻害されていると考えられる。視床下部、側坐核においても同様の結果が得られた。【０２８８】
また、図６に示すように、本発明に係る化合物（１０）は、ＶＯＲと比較して置換した結合が少ない。置換した結合は非特異的結合であると考えられるため、本発明によって、従来のＰＥＴプローブよりも非特異的結合が有意に減少し、精度のより高いアロマテース定量を提供し得ることが確認できた。【０２８９】
（III）本発明に係る化合物（１０）の結合実験
インビトロ実験で、化合物（１０）の結合試験を行った。【０２９０】
具体的には、メスのラットに対しジエチルエーテルで深く麻酔をかけ、０．０１Ｍリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ，ｐＨ７．４）で、経心臓的にかん流させた。これらの卵巣を直ぐに取り除き、０．３２Ｍスクロース溶液１ｍＬ中でホモジナイズした。【０２９１】
リガンド飽和実験のため、ホモジナイズした組織を、２連で、化合物（１０）の濃度を上げながら（０．０３、０．０５、０．１、０．３、１．０、および２．０ｎＭ）、室温で３０分間インキュベートした。非特異性結合は、化合物（１０）を添加する直前に１μＭの非標識ＶＯＲを添加し、サンプルとインキュベートすることにより得られた。濾過およびγカウンターによるカウントを行い、ＫＤの平均は、Scatchard plot analysisにより計算した。【０２９２】
図７に、上記結合試験の結果の一例を示す。（ａ）には、参照として、ラットの扁桃体でのＶＯＲの結果を示し、（ｂ）には、化合物（１０）の上記実験結果を示す。【０２９３】
その結果、結合能を示す解離定数（ＫＤ）は、化合物（１０）で０．３０ｎＭであり、vorozole（ＶＯＲ）で０．６０ｎＭであり、本発明に係る化合物（１０）の方が、ＶＯＲよりも親和性が約２倍高いことが確認できた。【０２９４】
なお、本発明は上述した各実施形態に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。
【産業上の利用可能性】
【０２９５】
本発明の化合物は、アロマテースの分布を可視化し、定量するためのＰＥＴ用分子プローブに好適に用いることができる。
【図１】
2011002096.tif 000057
【図４】
2011002096.tif 000058
【図６】
2011002096.tif 000059
【図７】
2011002096.tif 000060
【図８】
2011002096.tif 000061
【図９】
2011002096.tif 000062
【図１１】
2011002096.tif 000063
【図１２】
2011002096.tif 000064
【図１３】
2011002096.tif 000065
【図２】
2011002096.tif 000066
【図３】
2011002096.tif 000067
【図５】
2011002096.tif 000068
【図１０】
2011002096.tif 000069
【手続補正書】
【提出日】平成24年1月24日(2012.1.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）
【化１】
2011002096.tif 000070
（式中、Ｘ１は、１１ＣＨ３、ＣＨ２１８Ｆ、ＣＦ２１８Ｆ、１８Ｆ、７６Ｂｒまたは１２４Ｉであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、
【化２】
2011002096.tif 000071
で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（２）
【化３】
2011002096.tif 000072
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｒは上記式（１）と同義である）
で表される構造を有する、化合物。
【請求項２】
式（１）で表される化合物であって、
Ｘ１が１１ＣＨ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式（２）で表される化合物であって、
Ｘ３がＣＨ３またはＢｒである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
下記式（１’）
【化４】
2011002096.tif 000073
（式中、Ｘ１’は、ＣＨ３またはＣＨ２Ｆである）
で表される構造を有する、化合物。
【請求項５】
請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物を含んでいる、診断用組成物。
【請求項６】
下記式（１’’）
【化５】
2011002096.tif 000074
（式中、Ｘ１’’は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｒは、
【化６】
2011002096.tif 000075
で表される基の何れか一つである）
で表される構造を有する化合物をさらに含んでいる、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項５または６に記載の組成物。
【請求項８】
ＰＥＴに用いて診断するための、請求項５〜７の何れか１項に記載の組成物。
【請求項９】
適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項５〜８の何れか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
下記式（３）
【化７】
2011002096.tif 000076
（式中、Ｘ２は、ＣＮまたはＮＯ２であり、Ｘ４は、−ＣＨ２Ｘ５、−ＣＦ２Ｘ５、−ＳｎＲ１３、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＢＦ３・Ｋ、−Ｂ（ＯＲ２）（ＯＲ３）または
【化８】
2011002096.tif 000077
（式中、Ａは２価の炭化水素基である）
であり、Ｘ５は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＳＯ２ＣＨ３、−ＯＳＯ２Ｃ６Ｈ４（４−ＣＨ３）および−ＯＳＯ２ＣＦ３から選択される脱離基であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、炭素数が１〜６のアルキル基であり、Ｒは、
【化９】
2011002096.tif 000078
で表される基の何れか一つである）
で表される構造、あるいは
下記式（４）
【化１０】
2011002096.tif 000079
（式中、Ｘ３は、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＦ３、Ｆ、ＢｒまたはＩであり、Ｘ６は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉまたは−ＯＳＯ２ＣＦ３から選択される脱離基であり、Ｒは上記式（３）と同義である）
で表される構造を有する、化合物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の化合物を備えている、ＰＥＴ用標識化合物を製造するためのキット。
【請求項１２】
前記ＰＥＴ用標識化合物が診断に用いられる、請求項１１に記載のキット。
【請求項１３】
前記診断の適用対象が、アロマテースまたは性ステロイドの関与が疑われる疾患、アロマテースの誘導を伴う炎症性疾患、精神障害、更年期障害、および慢性疲労症候群からなる群より選択される、請求項１２に記載のキット。
【国際調査報告】
2011002096.tif 000080
2011002096.tif 000081
2011002096.tif 000082
2011002096.tif 000083
2011002096.tif 000084
2011002096.tif 000085