(57)【要約】  安全性が高い天然由来の化合物を有効成分とし、歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を有する薬剤または飲食品を提供する。  アデノシンまたはＡＭＰといったアデニン系核酸化合物単独またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有する薬剤または飲食品。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有することを特徴とする歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導剤。
【請求項２】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有することを特徴とする歯周組織または歯槽骨の再生促進剤。
【請求項３】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有することを特徴とする抗歯周病剤。
【請求項４】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有する口腔衛生剤。
【請求項５】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分とし、歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を発揮できる量を含有する飲食品。
【請求項６】
アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の薬剤または飲食品。
【請求項７】
ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の薬剤または飲食品。
【請求項８】
歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。
【請求項９】
歯周組織または歯槽骨の再生促進剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。
【請求項１０】
歯周病予防治療剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。
【請求項１１】
口腔衛生剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。
【請求項１２】
歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を発揮する食品を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。
【請求項１３】
アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、請求項８〜１２のいずれか１項に記載のいずれか記載の使用。
【請求項１４】
ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１５】
歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
【請求項１６】
歯周組織または歯槽骨の再生促進のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
【請求項１７】
歯周病予防治療のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
【請求項１８】
口腔衛生のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
【請求項１９】
食品形態で歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を発揮するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
【請求項２０】
アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の化合物または組成物。
【請求項２１】
ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の化合物または組成物。
【請求項２２】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導方法。
【請求項２３】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、歯周組織または歯槽骨の再生促進方法。
【請求項２４】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、歯周病予防治療方法。
【請求項２５】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、口腔衛生方法。
【請求項２６】
アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を経口投与することを特徴とする、歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する方法。
【請求項２７】
アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、請求項２２〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、請求項２２〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗歯周病効果を有する薬剤、飲食品または口腔用組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
歯周病は、歯面に沈着したプラーク中に存在する細菌等の刺激が引き金となり、歯肉と歯の支持組織に発生する慢性炎症疾患の総称である。主な原因菌は病巣から頻繁に検出されるＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ、Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ、およびＰｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ  等とされている。これら嫌気性グラム陰性菌はプラーク中での増殖にともない悪臭の発生やプロテアーゼ等の酵素の分泌をひきおこす。この酵素が歯肉組織を分解し、歯根と歯肉の間に歯周ポケットと呼ばれる隙間を形成する。菌の増殖に伴い、炎症が誘発され、その炎症による歯槽骨の破壊（骨吸収）がひきおこされる。また、歯周病リスクの因子としては、歯周組織の血流量の低下などが知られている（非特許文献１）。【０００３】
歯周ポケットは、歯ブラシ等が入りにくく、食物が詰まったりプラークが溜まりやすい部位であるため、ここで歯周病原因菌はさらに増殖する。その結果、出血や歯肉減退、化膿、さらには歯の動揺や移動が起こる。歯周病の罹患率は高齢化の進行とともに増加していることに加え、他の病気との関連も明らかになりつつあり、これを治療、予防することは全身の健康に貢献すると期待されている。【０００４】
一般に、歯周病の改善には、その原因とされる細菌の増殖を抑制することが有効とされており、歯の表面につくプラーク、すなわち歯垢（細菌が巣食う塊）を除去するための日々の歯磨きの重要性が従来から唱えられているが、プラーク除去が適切に行われずに歯周病となる事例が多いのが現状である。これらのことから歯周病予防薬や歯磨剤として、生薬の抽出物など歯周病菌に対して殺菌性または抗菌性のある物質を含有するものが数多く提案されている。【０００５】
しかしながら、このような歯周病予防薬は、歯周病におけるＰｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓなどの細菌への殺菌または抗菌作用により治療を行なうものであり、歯周組織および歯槽骨を損なわれ始めた段階の症状に対しては歯周組織および歯槽骨損傷の進行を抑制するだけで、歯周組織および歯槽骨の再生を促進し、治癒を促すものではない。【０００６】
このため、歯周病の発症から進行に対して様々な予防法や外科的治療法が研究されており、退縮または溶解してしまった歯周組織や歯槽骨を再生させるため、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂａｓｉｃ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ：ｂＦＧＦ）を用いた歯周組織再生療法も報告されている（非特許文献２）。【０００７】
一方、口腔用組成物においてアデノシンやＡＭＰを配合することは知られていたが、これらの化合物を配合する目的は、抗菌活性であったり（ただし、アデノシンには弱い抗菌活性しか報告されていない：特許文献１）、たとえばＡＭＰと抗酸化剤とを併用することで、抗酸化剤の抗酸化作用を高め、歯周病原因菌の感染時の生体からの活性酸素の産生を抑制するためであった（特許文献２）。【０００８】
また、口腔用組成物にポリリン酸を配合することも以前より知られており、ポリリン酸配合の目的は、リン酸カルシウム等を含有する歯石の沈着を防いだり（特許文献３）、変色を抑制したりするためであった（特許文献４）。
【特許文献１】特開昭６１−１７１４２３号公報
【特許文献２】特開平１１−１２４３２２号公報
【特許文献３】特開昭６１−１５１１１３号公報
【特許文献４】特開昭６２−４１８号公報
【非特許文献１】デンタルハイジーン「歯周病のリスクファクター（３）喫煙」、Ｖｏｌ．２３  Ｎｏ．４  Ｐａｇｅ．３２１−３３４（２００３）
【非特許文献２】先端医療技術研究所「歯周病  新しい治療を求めて」、第２章第２節Ｐ５６−６４「線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）による歯周組織再生療法」
【非特許文献３】Ｃａｒｄ．Ｐｒａｃｔ．，ＪＳＴ，Ｖｏｌ．１７，Ｎｏ．３，Ｐａｇｅ．３１５−３１７（２００６）
【非特許文献４】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２７８，Ｎｏ．２９，Ｐａｇｅ．２６７８８−２６７９２（２００３）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上述したｂＦＧＦを用いた歯周組織再生療法は、生理活性タンパク質であるｂＦＧＦそのものを有効成分としており、これを商品化しようとすると、ｂＦＧＦの安価な調製や配合したｂＦＧＦの安定性や安全性など様々な問題をクリアする必要があることから、必ずしも今すぐに実現可能な実用的な方法とはいえなかった。【００１０】
また、単一化合物または組成物で歯周組織の血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、ｂＦＧＦを誘導・産生し、ｂＦＧＦの作用を持続させる効果を兼ね備えたものは報告されていない。【００１１】
従来、上述したように、アデニン系核酸化合物、ポリリン酸をそれぞれ個別に口腔用組成物に配合する例は知られていたが、両者を併用した例は全く報告されていない。【００１２】
また、アデニン系核酸化合物またはポリリン酸の配合時における目的・効果は上述のとおりであって、アデニン系核酸化合物単独またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を併用したときにｂＦＧＦを誘導し、歯周組織の血流を増加させ、歯周組織または歯槽骨を再生する機能を持続的に発揮することは全く予想されるものではなかった。【００１３】
さらに、アデノシンが心臓冠血管での血流増加作用を有することは知られているが（非特許文献３）、歯周組織において血流増加作用を有することは全く知られていないし、ＡＭＰにおいては、血流増加作用を有すること自体知られていない。【００１４】
さらにまた、ポリリン酸がｂＦＧＦを安定化させる作用を有することが報告されている（非特許文献４）が、アデニン系核酸化合物とポリリン酸を併用したときにｂＦＧＦを誘導し、歯周組織または歯槽骨を再生する機能を持続的に発揮することは知られていない。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
そこで、本発明者らは、歯周組織の血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、ｂＦＧＦを誘導し、抗歯周病により破壊や退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を発揮できる化合物を見出すことができれば、ｂＦＧＦを用いた歯周組織再生療法をより実用に近づけ、さらにはこれを超える効果を得ることができると考え、様々な化合物をスクリーニングした。【００１６】
その結果、アデノシンやアデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）等のアデニン系核酸化合物が、歯周組織局所において血流を促進し、かつ歯周組織の再生を強力に誘導するｂＦＧＦを誘導・産生することを見出した。【００１７】
さらに、歯周組織の血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、ｂＦＧＦを誘導・産生する化合物としてアデノシンやアデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）等のアデニン系核酸化合物とポリリン酸を併用することにより、アデニン系核酸化合物により誘導されたｂＦＧＦが、ポリリン酸との併用でその作用をより強くより長時間持続させることができ、アデニン系核酸化合物を単独で用いたときに比べて著しい効果の増幅が生じることを見出し、本発明を完成させた。したがって、本発明は以下の通りである。【００１８】
（１）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有することを特徴とする歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導剤。
（２）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有することを特徴とする歯周組織または歯槽骨の再生促進剤。【００１９】
（３）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有することを特徴とする抗歯周病剤。
（４）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分として含有する口腔衛生剤。【００２０】
（５）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を有効成分とし、歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を発揮できる量を含有する飲食品。
（６）アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、上記（１）〜（５）のいずれか１項に記載の薬剤または飲食品。【００２１】
（７）ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、上記（１）〜（５）のいずれか１項に記載の薬剤または飲食品。
（８）歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。【００２２】
（９）歯周組織または歯槽骨の再生促進剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。
（１０）歯周病予防治療剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。【００２３】
（１１）口腔衛生剤を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。
（１２）歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を発揮する食品を製造するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の使用。【００２４】
（１３）アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、上記（８）〜（１２）のいずれか１項に記載のいずれか記載の使用。
（１４）ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、上記（８）〜（１２）のいずれか１項に記載の使用。【００２５】
（１５）歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
（１６）歯周組織または歯槽骨の再生促進のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。【００２６】
（１７）歯周病予防治療のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
（１８）口腔衛生のためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。【００２７】
（１９）食品形態で歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する機能を発揮するためのアデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有する組成物。
（２０）アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、上記（１５）〜（１９）のいずれか１項に記載の化合物または組成物。【００２８】
（２１）ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、上記（１５）〜（１９）のいずれか１項に記載の化合物または組成物。
（２２）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、歯周組織血流促進および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導方法。【００２９】
（２３）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、歯周組織または歯槽骨の再生促進方法。
（２４）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、歯周病予防治療方法。【００３０】
（２５）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を投与することを特徴とする、口腔衛生方法。
（２６）アデニン系核酸化合物またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸の有効量を経口投与することを特徴とする、歯周組織において血流を促進し、かつ歯周組織または歯槽骨において、塩基性線維芽細胞増殖因子を誘導し、歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生する方法。【００３１】
（２７）アデニン系核酸化合物がアデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）および／またはアデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）である、上記（２２）〜（２６）のいずれか１項に記載の方法。
（２８）ポリリン酸が、直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、および枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩から選択されたものである、上記（２２）〜（２６）のいずれか１項に記載の方法。
【発明の効果】
【００３２】
本発明は、（１）アデノシンやＡＭＰなどのアデニン系核酸化合物が、歯周組織局所において、血流を促進し、かつ歯周組織の再生を強力に誘導するｂＦＧＦを誘導・産生すること、（２）当該アデニン系核酸化合物とポリリン酸の併用により産生されたｂＦＧＦの作用が増強・持続するという今までにない知見に基づきなされたものであり、アデニン系核酸化合物が、歯周組織局所において、血流を促進し、かつ歯周組織の再生を強力に誘導するｂＦＧＦを誘導・産生し、もって歯周病により破壊・退縮した歯周組織または歯槽骨を再生することができ、アデニン系核酸化合物とポリリン酸の併用によりｂＦＧＦの作用をより強くより長時間持続させることができる。したがって、本発明は、このような機能を有する塩基性線維芽細胞増殖因子誘導剤、歯周組織もしくは歯槽骨の再生促進剤、抗歯周病剤、口腔衛生剤等の薬剤、または飲食品を初めて提供するものである。【００３３】
また、有効成分であるアデニン系核酸化合物の中でもアデノシンおよびＡＭＰは、安価に入手可能な低分子化合物で、生体成分であることから安全性が高く、かつ毒性の極めて低いことから連続的に摂取可能である。また、ポリリン酸も生体成分で、多くの食品に用いられていることから安全性が高く、かつ毒性の極めて低いことから連続的に摂取可能である。したがって、本発明の薬剤、飲食品または組成物は、現代社会で問題となっている歯周病を軽減、緩和、治癒するのに有効であり、症状発症前に服用すれば、その予防も可能である。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】ヒト歯肉繊維芽細胞における細胞内のｂＦＧＦ量に及ぼすＡＭＰ処置効果を示す図である。
【図２】ヒト歯肉繊維芽細胞における細胞内のｂＦＧＦ量を及ぼすアデノシン（Ａｄｏ）処置効果を示す図である。
【図３】ヒト歯髄細胞における細胞内のｂＦＧＦ量に及ぼすアデノシン（Ａｄｏ）処置効果を示す図である。
【図４】ヒト歯髄細胞における細胞表面のｂＦＧＦ量に及ぼすアデノシン（Ａｄｏ）処置効果を示す図である。
【図５】ヒト歯髄細胞における細胞表面のｂＦＧＦ量に及ぼすＡＭＰ処置効果を示す図である。
【図６】ヒト歯髄細胞における培養液中のｂＦＧＦ量に及ぼすアデノシン（Ａｄｏ）処置効果を示す図である。
【図７】ＡＭＰ処置被検者の口腔前庭歯肉における最初の１分間の総血液量の平均増加量を示す。
【図８】ＡＭＰ処置被検者の口腔前庭歯肉における全体（５分間）の総血液量の平均増加量を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３５】
本発明の薬剤、飲食品または組成物は、歯周組織局所において血流を促進し、かつ歯周組織の再生を強力に誘導するｂＦＧＦを誘導・産生およびｂＦＧＦの効果を増強・持続し、歯周病の各種症状を減少、緩和あるいは消失させ、歯周組織および歯槽骨を再生させる作用を有し、その作用を示す有効成分としてアデニン系核酸化合物単独またはアデニン系核酸化合物とポリリン酸を含有するものである。【００３６】
有効成分としてのアデニン系核酸化合物としては、アデノシン、アデノシン５’−モノリン酸（ＡＭＰ）、アデノシン５’−ジリン酸（ＡＤＰ）、アデノシン５’−トリリン酸（ＡＴＰ）などの天然由来の核酸化合物を例示することができ、その中でも特にアデノシンまたはＡＭＰが好適である。【００３７】
アデノシンやＡＭＰは、いずれも生体内に存在する天然成分として認知されている化合物であり、特にＡＭＰは食品添加物として使用されており、安全性が高く、好都合な化合物である。【００３８】
また、本発明の有効成分は、アデニン系核酸化合物単独であっても、他の核酸化合物との複数混合されているものであってもかまわない。なお、複数混合したものを使用する場合には、核酸化合物中に占めるアデニン系核酸化合物の割合が５０％以上、好ましくは７０％以上のものを使用するのが好ましい。【００３９】
このようなアデニン系核酸化合物は、その由来に格別制限されないものの、酵母、細菌、魚介類、動物、植物等の天然物由来のものが好適である。また、アデニン系核酸化合物を複数混合したものとしては、ＲＮＡを酵素分解して得られるヌクレオチド混合物を分画、塩析、沈殿等の簡単な精製処理を施し、アデニン系核酸化合物の含量割合を向上せしめたものを例示することができる。【００４０】
また、本発明において使用するポリリン酸は、ポリリン酸が直鎖状もしくは枝分かれ状のポリリン酸もしくはその塩、環状のメタリン酸もしくはその塩、枝分かれ状のウルトラリン酸もしくはその塩を挙げることができる。【００４１】
このような有効成分を含有する本発明の薬剤、飲食品または組成物は、ヒトまたはヒト以外の動物用の医薬品、飲食品、サプリメント、健康飲食品（特定保健用食品を含む）、動物飼餌料用添加物等各種タイプの組成物として用いることができる。【００４２】
たとえば、飲食品、健康飲食品、調製粉乳等として使用する場合には、本発明の有効成分をそのまま使用したり、他の食品ないし食品成分と併用して、定法に従って、固体状、粉末状、顆粒状、ペースト状、液状ないし懸濁状の各種組成物とすることが可能である。【００４３】
また、薬剤、具体的には、血流増加および塩基性線維芽細胞増殖因子誘導剤、歯周組織もしくは歯槽骨の再生促進剤、抗歯周病剤、口腔衛生剤等として使用する場合、本発明の有効成分と製剤補助剤（賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤など）を併用し、定法に従って、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、注射剤等の各種組成物とすることが可能である。【００４４】
口腔用衛生剤を具体的に説明すれば、練歯磨、液状歯磨、潤性歯磨、顆粒状歯磨等の歯磨類、口腔用パスタ、マウスウォッシュ、口腔トローチ等が挙げられ、その剤型に応じ、本発明の有効成分に加えて任意成分としてその他の添加剤を配合することで調製することができる。たとえば、歯磨類の場合は、本発明の有効成分以外に、通常使用し得る、潤滑剤、研磨剤、粘結剤、粘稠剤、界面活性剤、甘味剤、防腐剤、着色剤などを配合し得、これら成分を水または適当な溶媒と混合して製造することができる。【００４５】
さらに上記の各種組成物には、有効成分であるアデニン系核酸化合物およびポリリン酸の他に、各種薬効成分を配合することもできる。薬効成分としてはたとえば、抗炎症剤や血流促進剤、フッ化物、殺菌剤等などを配合し得るが、これらに限定されるものではない。【００４６】
有効成分の配合量は、使用目的（予防、保健、または症状緩和）、対象者の年令、投与または摂取方法、剤型等に応じて、０．１〜３０％（Ｗ／Ｖ）の範囲から適宜選定すればよい。具体的には、アデニン系核酸化合物の含有量としては特に限定はないが、配合濃度０．０１〜５．０重量％であることが好ましい。また、ポリリン酸の含有量も特に限定はないが、配合濃度０．０１〜１０．０重量％であることが好ましい。【００４７】
投与あるいは摂取方法は、特に制限されるものではないが、口腔内に適時留まる方法が好ましい。また、投与または摂取量は、対象者の年令、体重、症状の程度、投与または摂取方法等に応じて変動するものの、有効成分としてのアデニン系核酸化合物の量は１日１人当たり１ｍｇ〜５００ｇ程度、好ましくは１ｍｇ〜１０ｇの範囲内から抗歯周病作用を発揮できる量を適宜選択すればよい。ポリリン酸の量は１日１人あたり１ｍｇ〜１０ｇ程度、好ましくは１０ｍｇ〜５ｇの範囲内から適宜選択すればよい。【００４８】
より具体的に、たとえば経口で使用した場合、１日当たり０．０１ｍｇ／ｋｇ以上、好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ程度のアデニン系核酸化合物を摂取することにより、抗歯周病作用を発揮でき、予防もしくは症状の緩和や改善が期待できる。また、ポリリン酸は１日あたり０．０１ｍｇ／ｋｇ以上、好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｇ／ｋｇを摂取するのが好ましい。【００４９】
なお、本発明の有効成分は、安全性が高いことから、上記範囲よりも多めに摂取しても一向にさしつかえない。
【実施例】
【００５０】
以下、実施例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明がこれに限定されないことは明らかである。【００５１】
実施例１
＜方法＞
ヒト歯肉繊維芽細胞またはヒト歯髄細胞をプラスティックシャーレで培養し、アデノシン０．０２〜０．８ｍＭまたはＡＭＰ０．２〜５０ｍＭを１〜５３時間処置した。細胞表面および細胞内のｂＦＧＦは以下の方法を用いて抽出した。【００５２】
（細胞表面に存在するｂＦＧＦの抽出）
培地を吸引し、リン酸緩衝液（ＰＢＳ）（２ｍＬ）で２回細胞を洗浄した。その後細胞を０．９ｍＬの２Ｍ  ＮａＣｌ、２０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．０の溶出液で２回リンスし、マイクロチューブに採取した。この操作によって細胞表面に結合したｂＦＧＦを溶出し、回収した。回収した溶出液にはキャリアータンパクとして５％ウシ血清アルブミン（シグマ社製）を５マイクロリットル加えてよく混和し、最終濃度で５％になるようにトリクロル酢酸を加えて、氷中に１５分以上放置した。その後１０，０００×ｇで１０分間遠心分離し、沈殿物を回収した。回収した沈殿物に微量の１Ｎ  水酸化ナトリウムを加えて中和し、測定用サンプルとした。【００５３】
（細胞内に存在するｂＦＧＦの抽出）
細胞表面に結合しているｂＦＧＦの溶出を行った後、セルスクレイパーを用いて物理的に細胞をシャーレより剥ぎ取った。ＰＢＳを用いてシャーレを洗浄し、はがれた細胞をすべてマイクロチューブに回収した。その後１０，０００×ｇで１０分間遠心分離し、沈殿として細胞を回収した。回収した細胞に５０マイクロリットルのミリＱ水を加えて超音波破砕を行った。細胞破砕後の液を用いてＢＣＡ法にてタンパク定量し、それぞれのサンプルのタンパク量を揃えて測定用サンプルとした。【００５４】
（ｂＦＧＦの定量）
ｂＦＧＦは、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ウェスタンブロッティング後、ＥＣＬ  Ａｄｖａｎｃｅ  Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｂｌｏｔｔｉｎｇ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔ，（ＲＰＮ２１３５，Ａｍｅｒｓｈａｍ）とＥＣＬ  Ｐｌｕｓ  Ｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ  ｒｅａｇｅｎｔ  ｐａｃｋ，（ＰＰＮ２１２４，Ａｍｅｒｓｈａｍ）を用いて検出し、画像解析プログラムソフトＩｍａｇｅＪ（フリーウェア）でｂＦＧＦを定量化した。対照群を１００％としてアデノシンまたはＡＭＰ処置の効果を検討した。【００５５】
＜結果＞
（試験１）
ヒト歯肉繊維芽細胞にＡＭＰ０．２ｍＭまたは５０ｍＭを１５時間処置後に細胞内のｂＦＧＦを定量化し、対照群を１００％としてＡＭＰ処置の効果を検討した。その結果、図１に示すように、ヒト歯肉繊維芽細胞にＡＭＰを処置することによりｂＦＧＦが増加することが確認された。【００５６】
（試験２）
ヒト歯肉繊維芽細胞に、アデノシン０．８ｍＭを１５時間処置後に細胞内のｂＦＧＦを定量化し、対照群を１００％としてアデノシン処置の効果を検討した。その結果、図２に示すように、ヒト歯肉繊維芽細胞にアデノシンを処置することによりｂＦＧＦが増加することが確認された。【００５７】
（試験３）
ヒト歯髄細胞にアデノシン０．０２ｍＭまたは０．１ｍＭを１．５時間処置後に細胞内のｂＦＧＦを定量化し、対照群を１００％としてアデノシン処置の効果を検討した。その結果、図３に示すように、ヒト歯髄細胞にアデノシンを処置することによりｂＦＧＦが増加することが確認された。【００５８】
（試験４）
ヒト歯髄細胞にアデノシン０．５ｍＭを２２時間処置後に細胞表面のｂＦＧＦを定量化し、対照群を１００％としてアデノシン処置の効果を検討した。その結果、図４に示すように、ヒト歯髄細胞にアデノシンを処置することによりｂＦＧＦが増加することが確認された。【００５９】
（試験５）
ヒト歯髄細胞にＡＭＰ０．５ｍＭを５３時間処置後に細胞表面のｂＦＧＦを定量化し、対照群を１００％としてＡＭＰ処置の効果を検討した。その結果、図５に示すように、ヒト歯髄細胞にＡＭＰを処置することによりｂＦＧＦが増加することが確認された。【００６０】
（試験６）
ヒト歯髄細胞にアデノシン０．５ｍＭを５３時間処置後に培養液中のｂＦＧＦを定量化し、対照群を１００％としてアデノシン処置の効果を検討した。その結果、図６に示すように、ヒト歯髄細胞にアデノシンを処置することによりｂＦＧＦが増加することが確認された。【００６１】
実施例２
＜方法＞
健康な口腔状態である被験者５名（男性４名  女性１名  ２５〜３０歳）の口腔前庭歯肉に、ＡＭＰ製剤（２５％ＡＭＰ＋３％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）／０．１％安息香酸Ｎａ）またはプラセボ（３％ＣＭＣ／０．１％安息香酸Ｎａ）を３７℃としたものを約０．８ｍＬ塗布し、口腔前庭歯肉の血流量変化を測定した。血流量の測定は以下の方法にて行なった。【００６２】
（口腔前庭歯肉の血流量変化測定方法）
無侵襲酸素モニターＯＭ−２２０（島津製作所製）を用いて近赤外光の透過量によりヘモグロビン量（血流量）を測定し、その血流量により血行促進効果を評価した。口腔前庭歯肉に製剤を塗布しやすいように口角鉤を装着し、その口角鉤に発光部プローブを固定し、口腔前庭に近赤外線を照射した。受光部センサーは口腔外のオトガイ部に密着させて固定した。製剤を塗布する約１分前から測定を開始し、総血流量が±０．０５ｍＭｃｍ（ミリモルセンチメートル）の振れがない安定した状態になった後、製剤を塗布し、サンプリング間隔は１秒で約５分間計測した。【００６３】
＜結果＞
それぞれの被験者において１秒毎の総血液量の増減について、最初の１分間の総血液量の平均増加量と全体（５分間）の総血液量の平均増加量を算出した。両群のｔ−ｔｅｓｔを行った結果、１分間の平均増加量はＡＭＰ群とプラセボ群との間に５％の有意差（＊）が認められ（図７）、５分間の平均増加量はＡＭＰ群とプラセボ群との間に１％の有意差（＊＊）が認められ（図８）、ＡＭＰを処置することにより口腔前庭歯肉の血流量が速やかに、且つ持続的に増加することが確認された。【００６４】
実施例３
＜方法＞
ｂＦＧＦの作用発現の指標として、リン酸化されたｅｘｔｅａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｋｉｎａｓｅｓ（ＥＲＫ）を測定した。ＥＲＫのリン酸化はｂＦＧＦのシグナル伝達機構のうち重要な因子であり、ｂＦＧＦの歯周組織再生効果の指標となるとされている。【００６５】
すなわち、ヒト歯髄細胞（ＨＤＰ−２株）を９６穴プレートに播種してセミコンフルエントにしたあと、１）０．２ｍＭ  ＡＭＰ単独溶液、２）１ｍＭ  ポリリン酸単独溶液、３）０．２ｍＭ  ＡＭＰ＋１ｍＭ  ポリリン酸混合溶液で一定時間（３０分間、１２０分間、２４時間）処理し、ＣＡＳＡ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（ＳｕｐｅｒＡｒｒａｙ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社製）でリン酸化ＥＲＫおよびトータルのＥＲＫをそれぞれ定量した。細胞数はアロマーブルーで染色してその色の濃さで算出し、それぞれのｗｅｌｌで補正した。
測定値をもとに、リン酸化ＥＲＫ／ｔｏｔａｌ  ＥＲＫの比率を計算し、薬物処置初期、すなわち各薬剤処理１０分間後の値を１００とした場合の各処理群の３０分後、１２０分後、２４時間後の相対値（％）を求めた。【００６６】
＜結果＞
表１に示すように、処理後３０分経過した時点であっても、ＡＭＰ単独処理群およびＡＭＰとポリリン酸の併用処理群ではＥＲＫのリン酸化活性はほとんど低下することなく、ｂＦＧＦによる細胞の活性化が強く誘導されていることが明らかとなった。さらに、ＡＭＰ又はポリリン酸の単独処理群では２４時間後にＥＲＫのリン酸化活性の減少が認められたが、ＡＭＰとポリリン酸の併用処理群ではその減少は抑制され、併用処理によってｂＦＧＦによる細胞の活性化が単独処理より長時間持続することが明らかになった。【００６７】
【表１】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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