(57)【要約】  本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有することを特徴とする。また、本発明の育毛剤は、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする。また、本発明の家畜動物用外用組成物は、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする。これにより、ＦＧＦ−５阻害活性に優れるＦＧＦ−５阻害組成物、及びそのＦＧＦ−５阻害組成物を含有し育毛効果に優れる育毛剤、並びに家畜動物用外用組成物を提供することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有することを特徴とするＦＧＦ−５阻害組成物。
【請求項２】
米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも２種を含有する請求項１に記載のＦＧＦ−５阻害組成物。
【請求項３】
更に、タモギタケ抽出物を含有する請求項１又は２に記載のＦＧＦ−５阻害組成物。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれかに記載のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする育毛剤。
【請求項５】
請求項１乃至３のいずれかに記載のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする家畜動物用外用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＦＧＦ−５の阻害に好適な組成物、及び育毛剤、並びに家畜動物用外用組成物に関する。本発明は、更に詳しくは、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有し、ＦＧＦ−５阻害の阻害活性に優れるＦＧＦ−５阻害組成物、及びこのＦＧＦ−５阻害組成物を含有し、脱毛防止効果、育毛効果、養毛効果及び発毛効果に優れる育毛剤、並びに家畜動物用外用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
薄毛及び脱毛症状の原因としては、ストレス、内分泌異常、遺伝、血液循環不良、栄養障害及び老化等が挙げられる。この薄毛及び脱毛症状の緩和、並びに、育毛、養毛及び発毛の回復のため、様々なタイプの育毛剤の検討が進められている。
毛の成長及び分化には、ホルモン、細胞増殖因子、ビタミン及び薬剤類等の様々な物質が影響を及ぼしていると考えられる。これらのうち細胞増殖因子は、毛乳頭や外毛根鞘、内毛根鞘等の細胞で産生され、細胞を増殖・抑制することにより毛周期（成長期、退行期、休止期）の調節に働くと考えられている。このような細胞増殖因子の一つにＦＧＦ−５がある。このＦＧＦ−５は、ｆｇｆ−５遺伝子からつくられる蛋白質であり、毛包や毛の成長を抑制する性質があることが知られている。【０００３】
従って、薄毛及び脱毛症状を緩和し、育毛、養毛及び発毛を回復するには、ＦＧＦ−５を阻害することが効果的であると考えられ、ＦＧＦ−５を阻害する育毛剤が各種提案されている。例えば、特許文献１には、線維芽細胞成長因子５の一部からなるポリペプチドであって、毛の生育に対する線維芽細胞成長因子５の抑制作用を阻害する活性を有するポリペプチドを含有する育毛剤が開示されている。また、特許文献２には、ローヤルゼリーからなる育毛促進剤が開示されている。また、特許文献３には、テストステロン−５α−レダクターゼ阻害剤、及びそれを含有する育毛・養毛剤が記載されている。そして、そのテストステロン−５α−レダクターゼ阻害剤としては、ヒイロタケ、シュタケ、ニンギョウタケ、オシロイタケ、キコブタケ、タモギタケ、ナメコ、エノキタケ、オウギタケの各子実体からなる群から選ばれた子実体抽出物の少なくとも１種を含有しているテストステロン−５α−レダクターゼ阻害剤が記載されている。【０００４】
また、人間以外の愛玩動物及び畜産動物においても同様に、皮膚病、加齢、及び飼育環境等による外的要因等から生ずる脱毛症状に対して、育毛効果を奏する外用組成物が必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００２-２９３７２０号公報
【特許文献２】特開２００３-１９２５４１号公報
【特許文献３】特開平７−２７８００６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、特許文献１及び特許文献２に記載の育毛剤は、ＦＧＦ−５阻害活性が必ずしも十分ではなく、また、特許文献１〜３に記載の育毛剤は、育毛効果がいまだ十分とはいえない。
また、愛玩動物及び畜産動物等の家畜動物における脱毛症状等に対して育毛効果を奏する家畜動物用外用組成物が求められている。更に、体毛が衣料等に使用される羊等の畜産動物において、この体毛を増やすことができる家畜動物用外用組成物が求められている。【０００７】
本発明の目的は、ＦＧＦ−５の阻害に優れるＦＧＦ−５阻害組成物及び育毛効果に優れる育毛剤並びに家畜動物用外用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、以下に示す通りである。
１．米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有することを特徴とするＦＧＦ−５阻害組成物。
２．米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも２種を含有する上記１．に記載のＦＧＦ−５阻害組成物。
３．更に、タモギタケ抽出物を含有する上記１．又は２．に記載のＦＧＦ−５阻害組成物。
４．上記１．乃至３．のいずれかに記載のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする育毛剤。
５．上記１．乃至３．のいずれかに記載のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする家畜動物用外用組成物。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有することから、優れたＦＧＦ−５阻害活性を有し、脱毛防止効果を有する。
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物が、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも２種を含有する場合には、より優れたＦＧＦ−５阻害活性を有し、脱毛防止効果を有する。
また、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物が、更に、タモギタケ抽出物を含有する場合には、より優れたＦＧＦ−５阻害活性を有し、脱毛防止効果を有する。
また、本発明の育毛剤は、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することにより、優れた育毛効果、養毛効果及び発毛効果を有する。
また、本発明の家畜動物用外用組成剤は、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物を含有することにより、家畜動物に対して優れた育毛効果、養毛効果及び発毛効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】実験例１で得られたＢＩＡＣＯＲＥアッセイのセンサーグラムの図である。
【図２】実験例２で得られたＢＩＡＣＯＲＥアッセイのセンサーグラムの図である。
【図３】実験例３で得られたＢＩＡＣＯＲＥアッセイのセンサーグラムの図である。
【図４】実験例４で得られたＢＩＡＣＯＲＥアッセイのセンサーグラムの図である。
【図５】実験例５で得られたＢＩＡＣＯＲＥアッセイのセンサーグラムの図である。
【図６】実験例６で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図７】実験例７で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図８】実験例８で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図９】実験例９で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１０】実験例１０で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１１】実験例１１で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１２】実験例１２で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１３】実験例１３で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１４】実験例１４で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１５】実験例１５で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１６】実験例１６で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１７】実験例１７で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【図１８】実験例１８で得られた、２８日経過後のマウス背部の画像である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本明細書において、ＦＧＦ−５とは、ｆｇｆ−５遺伝子からつくられる蛋白質を意味する。
［１］ＦＧＦ−５阻害組成物
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有することを特徴とする。
【００１２】
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有し、好ましくは、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも２種を含有する。
米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンは、それぞれ優れたＦＧＦ−５阻害活性を有する。そして、これらのうちの少なくとも１種を含有することにより、ＦＧＦ−５阻害活性に優れるＦＧＦ−５阻害組成物とすることができる。
また、米糠・大豆発酵物、バラ科バラ属植物の花びら抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも２種を含有する場合、２種以上の成分による相乗効果により、更に、ＦＧＦ−５阻害活性に優れるＦＧＦ−５阻害組成物とすることができる。
【００１３】
上記米糠・大豆発酵物は、米糠と大豆ペプチドとを枯草菌で発酵させた後、精製処理することにより製造される発酵物である。
上記米糠及び上記大豆ペプチドは、市販の米糠及び大豆ペプチドを使用することができる。米糠及び大豆ペプチドを発酵させる際の使用量の割合は、米糠：大豆ペプチドの質量基準で、（１００：１）〜（１００：２０）が好ましい。これらの範囲にある場合には菌の生育に最も好ましいものとなる。
また、上記米糠・大豆発酵物は、米糠エキスと大豆エキスとを枯草菌で発酵させた後、精製処理することにより製造することもできる。また、上記米糠エキス及び上記大豆エキスは、市販の米糠エキス及び大豆エキスを使用することができる。米糠エキス及び大豆エキスを発酵させる際の使用量の割合は、米糠エキス：大豆エキスの質量基準で、（１００：１）〜（１００：２０）が好ましい。これらの範囲にある場合には菌の生育に最も好ましいものとなる。
【００１４】
また、米糠及び大豆ペプチド等の発酵に用いる枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）は、代表的な好気性胞子形成細菌である。この枯草菌としては、安全性が保証されているものであれば特に限定されないが、入手の容易性、製造コストの観点から、納豆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｎａｔｔｏ）が好ましい。
【００１５】
米糠と大豆ペプチドとを枯草菌で発酵させ、米糠・大豆発酵物を得るには、最適なｐＨや栄養条件等を与える必要がある。即ち、グルコース等の糖類、炭酸水素ナトリウム等の塩類、プロテアーゼ等の酵素、及び水（精製水）等の添加が必要である。
また、発酵させた後に行われる精製処理は、上記発酵後の発酵液を、圧搾し、ろ過することにより行われる。更に、必要に応じて発酵後、圧搾し、ろ過し、次いで、活性炭等により脱臭・脱色処理、及び／又は、沈殿物の除去処理を行うことができる。また、その後、再度ろ過することにより処理をしてもよい。
【００１６】
また、米糠・大豆発酵物は、市販品を用いてもよい。例えば、「ＣＥＬＡＢＩＯ」（株式会社東洋発酵製）等が挙げられる。
【００１７】
上記バラ科バラ属植物の花びらの抽出物（以下、単に「バラ抽出物」という）は、バラ科バラ属植物の花びらから抽出された抽出物である。
上記バラ科バラ属植物としては、バラ科バラ属に属するバラ（Ｒｏｓａ  ｓｐｐ．）であれば、特に制限はされない。具体的には、ロサ・ガリカ（Ｒｏｓａ  ｇａｌｌｉｃａ）、ロサ・センチフォリア（Ｒｏｓａ  ｃｅｎｔｉｆｏｌｉａ）、ロサ・モスカタ（Ｒｏｓａ  ｍｏｓｃｈａｔａ）、ロサ・フォエティダ（Ｒｏｓａ  ｆｏｅｔｉｄａ）、ロサ・ギガンテア（Ｒｏｓａ  ｇｉｇａｎｔｅａ）、ノイバラ（Ｒｏｓａ  ｍｕｌｔｉｆｌｏｒａ）、テリハノイバラ（Ｒｏｓａ  ｗｉｃｈｕｒａｉａｎａ）、ハマナス（Ｒｏｓａ  ｒｕｇｏｓａ）、ダマスカスローズ（Ｒｏｓａ  ｄａｍａｓｃｅａ）等の野生種、又はこれらを交配して得られた園芸種が挙げられる。
【００１８】
また、バラ抽出物を得るために用いる上記バラ科バラ属植物は、収穫したままの植物体の一部及び／又は全部を用いてもよく、乾燥させて用いてもよい。さらに、上記バラ科バラ属植物の抽出物を得る場合、抽出原料は未粉砕でも、粉砕したものでもよく、不純物除去等の前処理をしてもよい。
【００１９】
バラ抽出物を得る場合、抽出方法、抽出条件は特に限定はされない。抽出用溶媒としては、水又は熱水の他、アルコール類（メタノール及びエタノール等）、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン、アセトン等の有機溶媒や、これらの有機溶媒と水又は熱水との混合溶媒等を用いることができる。通常は、水又は熱水や、水若しくは熱水とアルコール類との混合溶媒が用いられる。これらの抽出用溶媒のうち熱水が好ましい。混合溶媒としては、例えば、水−メタノール混合溶媒や、水−エタノール混合溶媒等が挙げられる。また、上記水又は熱水とアルコール類との混合溶媒を用いる場合、アルコール類の割合は、混合溶媒の全量を１００体積％としたときに、通常２０〜９０体積％、好ましくは３０〜７０体積％、更に好ましくは４０〜６０体積％である。
また、抽出の際の抽出用溶媒のｐＨは、通常３〜７、好ましくは４〜６、更に好ましくは４〜５である。抽出温度は特に制限されないが、常温又は加熱抽出が好ましい。常温抽出であれば、例えば、原料を水−メタノール混合溶媒等の溶媒に浸漬し、１〜５日間程度室温にて放置することにより、抽出することができる。加熱抽出の場合、加熱温度としては、通常４０〜１００℃、好ましくは５０〜８０℃、更に好ましくは５０〜７０℃である。加熱温度をかかる範囲とすることにより、抽出を効率的に行うことができるので好ましい。
【００２０】
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物に、上記バラ抽出物を用いる場合、抽出後の抽出物残渣（抽出後のバラ科バラ属植物の花びら）と、抽出液（バラ抽出物と抽出用溶媒とを含む液）とは、通常、分離する。この際の分離方法は特に限定されないが、フィルタプレス、及び濾過（加圧、常圧）等により分離することができる。抽出物残渣から分離された抽出液は、そのまま本発明のＦＧＦ阻害組成物の調製に用いることができる。また、抽出液は、更にその後、抽出液に含まれる抽出用溶媒を除去して用いることができる。抽出液からの抽出用溶媒の除去方法は特に限定されず、例えば、噴霧乾燥法（スプレードライ法）、エバポレーション及び凍結乾燥法等により行うことができる。抽出液から分取された固形分（バラ抽出物固形分）はそのまま用いてもよく、更に精製を行ってもよい。即ち、この固形分を水及び／又は有機溶媒等に溶解させた後、濾過を行って夾雑物等を除去し、その後、溶媒を除去して精製することができる。更に、必要に応じて、滅菌処理等を施すことができる。
【００２１】
また、バラ抽出物は、市販品を用いてもよい。例えば、「ＲＯＳＥ  ＣＹＲＳＴＡ」（株式会社東洋発酵製）等が挙げられる。
【００２２】
上記カラギーナンとは、紅藻類海藻から抽出及び精製される天然高分子物質であり、分子量が１００，０００〜５００，０００のガラクトース，及び３，６アンヒドロガラクトースを主成分とする多糖類であり、分子内には、半エステル型の硫酸基を有する。このカラギーナンは大きく分けて３種類があり、カッパ型、イオタ型及びラムダ型の３種類に分かれる。これらはカラギーナン中に含まれるガラクトースの繰り返し単位の性質に基づいて区別される。これらのうち、本発明には、イオタ型カラギーナンを含有させることが好ましい。
【００２３】
上記イオタ型カラギーナンを得る抽出原料としては、紅藻類海藻等とすることができ、例えば、キリンサイ属のＥｕｃｈｅｕｍａ  ｓｐｉｎｏｓｕｍ等の紅藻が挙げられる。
また、イオタ型カラギーナンを得る場合、抽出方法、抽出条件は特に限定されない。抽出方法及び抽出条件としては、例えば、以下の方法が挙げられる。海藻を最初に冷水で洗浄して海藻に存在する砂やその他の微粒子を取り除く。ここで、海藻中のカラギーナンは海藻の構造成分、通常セルロースと会合しているため、冷水洗浄の過程では膨潤しない。そして、冷水洗浄に引き続き、熱水抽出工程が実施される。その後、熱水抽出された抽出液は、更に高温下で塩基水溶液により処理される。この塩基水溶液に使用される塩基としては、ＮａＯＨ、Ｃａ（ＯＨ）２、又はＫＯＨのようなアルカリ又はアルカリ土類金属水酸化物が挙げられる。この高温塩基水溶液の処理によって、ガラクトース単位中の３，６−無水結合の生成が導かれる。そして、塩基変性後に、抽出液をろ過してセルロース、ヘミセルロース及びその他の微粒子等の不溶性物質を取り除き、そして酸を加えてｐＨを９又はそれ以下に調節する。また、抽出後は、所望により遠心分離及び漂白剤による漂白工程を備えることができる。そして、抽出液に、ＫＣｌ又はイソプロパノール等アルコールを添加することにより抽出液から抽出物として沈殿させることによって得られる。また、抽出液の抽出用溶媒を蒸発させ、抽出液を濃縮し、その後乾燥させることにより得ることもできる。更に、乾燥させることにより得られる乾燥物は粉砕機等により粉砕、粉末化してもよい。
尚、抽出液から分取された固形分はそのまま用いてもよく、更に精製を行ってもよい。
【００２４】
また、イオタ型カラギーナンは市販のものをそのまま用いてもよい。例えば、「Ｖｉｃａｒｉｎ  ＳＤ３８９」（エフエムシー・ケミカルズ株式会社製）等が挙げられる。
【００２５】
また、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、更に、タモギタケ抽出液を含有することができる。
上記タモギタケ抽出物とは、タモギタケの子実体等から抽出された抽出物である。上記タモギタケとは、担子菌亜門真正担子菌網帽菌亜網ハラヒラタケ目ヒラタケ科ヒラタケ属に属するタモギタケ（学名；プレウロタス  コルヌコピアエ「Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ」）のことをいう。
【００２６】
また、タモギタケ抽出物の含有成分としては、トレハロース、マンニトール、リンゴ酸、グリコーゲン、リジン、グルタミン酸、Ｄ−キシロース、セラミド、βーＤグルカン類、エルゴステロール、不飽和脂肪酸類、ピログルタミン酸、ペンチトール、ヘキシトール、シスタチオニン、オルニチン、スフィンゴ糖脂質等のグルコシルセラミド、エルゴチオネイン、タマビジン等が挙げられる。
【００２７】
タモギタケ抽出物の原料であるタモギタケは、子実体の生の物、又は乾燥物が利用できるが、子実体の生のものが好ましい。このタモギタケ抽出物を得る場合、抽出方法については特に限定はない。抽出用溶媒としては、水又は熱水の他、アルコール類（メタノール及びエタノール等）、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン、アセトン等の有機溶媒や、これらの有機溶媒と水又は熱水との混合溶媒等を用いることができ、通常は、水又は水とアルコール類との混合溶媒が用いられる。また、抽出の際の抽出用溶媒のｐＨは、通常、５〜９、好ましく６〜８である。抽出方法としては、特に限定されないが、例えば、原料を溶媒と共に粉砕機等により粉砕し、粉砕品を調製する。そして、その粉砕品を常温又は加熱抽出する。常温抽出であれば、１日〜５日間程度放置する。加熱抽出の場合、加熱温度としては、通常４０〜１００℃、好ましくは７０〜９０℃である。加熱温度をかかる範囲とすることで抽出を効率的に行うことができる。
【００２８】
また、粉砕品を調製する前に、原料に対して前処理を行うこともできる。この前処理としては、常温下で原料を溶媒に浸漬し、５時間〜３日間室温にて放置する。更に、必要に応じて、浸漬後の原料に対して恒温槽中にてインキュベートを行う。インキュベートの条件は特に限定されないが、通常、温度６０℃以上、湿度７０％以上であり、インキュベート時間は１０分〜２時間である。そして、上記前処理を行った場合は、前処理後の原料を用いて粉砕機等により粉砕し、粉砕品を調製する。
【００２９】
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物に、タモギタケ抽出物を用いる場合、抽出後の抽出物残渣（抽出後のタモギタケ）と抽出液（タモギタケ抽出物を含む抽出用溶媒）とは、通常、分離する。この際の分離方法は特に限定されないが、フィルタプレス、及び濾過（加圧、常圧）等により分離することができる。抽出物残渣から分離された抽出液は、そのまま本発明のＦＧＦ−５阻害組成物の原料として用いることができる。また、抽出液は、更にその後、含まれる抽出用溶媒を除去して用いることができる。抽出液からの抽出用溶媒の除去方法は特に限定されず、例えば、噴霧乾燥法（スプレードライ法）、エバポレーション及び凍結乾燥法等により行うことができる。抽出液から分取された固形分はそのまま用いてもよく、更に精製を行ってもよい。即ち、この固形分を水及び／又は有機溶媒等に溶解させた後、濾過を行って夾雑物等を除去し、その後、溶媒を除去して精製することができる。更に、必要に応じて、滅菌処理等を施すことができる。
【００３０】
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも１種を含有し、上記のように好ましくは、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも２種を含有する。
米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンは、いずれもＦＧＦ−５に対する親和性が高く、ＦＧＦ−５阻害活性を有する。従って、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、毛包や毛の成長に対して抑制的に働くＦＧＦ−５に対して、優れた阻害活性を有する。従って、脱毛防止効果を奏し、更には、育毛効果、養毛効果及び発毛効果を奏するものである。
上記のように、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンから選択される少なくとも２種を含有する態様としては、以下に例示される。
（１）米糠・大豆発酵物、及びバラ抽出物を含有する組成物。
（２）米糠・大豆発酵物、及びイオタ型カラギーナンを含有する組成物。
（３）バラ抽出物、及びイオタ型カラギーナンを含有する組成物。
（４）米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンを含有する組成物。
【００３１】
本発明において、更に、好ましくは、米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物から選択される少なくとも１種と、タモギタケ抽出物とを含有し、特に好ましくは、米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物から選択される少なくとも２種と、タモギタケ抽出物とを含有する。
【００３２】
また、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物に含まれる米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンの量は特に限定されず、ＦＧＦ−５阻害組成物の一部として含有されてもよく、ＦＧＦ−５阻害組成物の全量を構成してもよい。即ち、ＦＧＦ−５阻害組成物の全質量を１００質量％とした場合に、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンの合計含有量は、０．１〜１００質量％であり、好ましくは３〜１００質量％であり、より好ましくは１５〜１００質量％であり、特に好ましくは２０〜１００質量％である。上記範囲内にある場合には、十分なＦＧＦ−５阻害性を得ることができる。
【００３３】
また、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物がタモギタケ抽出物を含有する場合も、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナン、並びにタモギタケ抽出物の含有量は特に限定されず、ＦＧＦ−５阻害組成物の一部として含有されてもよく、ＦＧＦ−５阻害組成物の全量を構成してもよい。即ち、ＦＧＦ−５阻害組成物の全質量を１００質量％とした場合に、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナン並びにタモギタケ抽出物の合計含有量は、０．１〜１００質量％であり、好ましくは３〜１００質量％であり、より好ましくは１５〜１００質量％であり、特に好ましくは２０〜１００質量％である。上記範囲内にある場合には、十分なＦＧＦ−５阻害性を得ることができる。
【００３４】
ＦＧＦ−５阻害組成物の固形分濃度は、特に限定されないが、通常、０．０００５〜１００質量％であり、好ましくは０．００１〜５０質量％であり、より好ましくは０．０１〜５質量％であり、特に好ましくは０．０１〜１．５質量％である。
尚、ＦＧＦ−５阻害組成物の固形分濃度における固形分は、構成成分の、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンからなる固形分を意味する。
また、ＦＧＦ−５阻害組成物が、タモギタケ抽出物を含有する場合、固形分濃度における固形分は、構成成分の、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナン並びにタモギタケ抽出物からなる固形分を意味する。
【００３５】
ＦＧＦ−５阻害組成物が、米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物から選択される少なくとも２種を含有する場合、２種のうちの一方と他方との固形分での質量比は、米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物の合計固形分を１００質量％としたときに、１０〜９０質量％及び１０〜９０質量％とすることができる。
また、ＦＧＦ−５阻害組成物が、米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物の３種を含有する場合、３種の固形分での質量比は、米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物の合計固形分を１００質量％としたときに、米糠・大豆発酵物は１〜９０質量％、イオタ型カラギーナンは１〜９０質量％及び、バラ抽出物は１〜９０質量％とすることができる。
また、ＦＧＦ−５阻害組成物が、タモギダケ抽出物を含有する場合、米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物から選択される少なくとも１種の合計量と、タモギタケ抽出物との固形分での質量比は、上記固形分を１００質量％としたときに、１０〜９０質量％及び１０〜９０質量％とすることができる。
尚、固形分濃度とは、一般の乾燥減量法（１０５℃で４時間）による乾燥固形分の質量％である（以下、同様。）。また、濃縮とは、水分が蒸発する状態に物質を保ち、固形分濃度を高める処理を言う。濃縮の方法は、特に限定されないが、例えば、減圧濃縮及び瞬間減圧濃縮等が挙げられる。
【００３６】
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物の形態については特に限定はない。通常は、発酵物及び抽出物の種々の形態で用いられる。例えば、液状、固形状、粉末状、顆粒状、造粒した造粒状等とすることができる。
また、含有成分の発酵物（培養して得られた培養発酵液）及び抽出液は、濾過したままの液でもよいし、これを脱色等の後処理をした液でもよいし、又はこれを濃縮した濃縮液でもよい。その他にも、凍結乾燥等の公知の方法により溶媒を除去した固形物や粉末化した粉末物でもよい。
【００３７】
また、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナン並びにタモギタケ抽出物以外にも、その他のＦＧＦ−５阻害成分を含有することができる。その他のＦＧＦ−５阻害成分としては、ラムダ型カラギーナン、カッパ型カラギーナン等を挙げることができる。
【００３８】
本発明のＦＧＦ−５阻害組成物は、ＦＧＦ−５の阻害活性を有する。そのＦＧＦ−５の阻害活性の測定方法は、例えば、ＢＩＡＣＯＲＥアッセイにより調べることができる。
このＢＩＡＣＯＲＥアッセイによる測定は、ＦＧＦ−５の阻害活性を調べる成分（以下、「検体」という）と、固定化されたＦＧＦ−５蛋白質との結合における結合速度定数及び解離速度定数をＢＩＡＣＯＲＥ分析により決定して、ＫＤ値を導き出すことにより行われる。ＦＧＦ−５を、２分子間相互作用測定装置のセンサーチップの表面に固定して、検体との結合を表面プラズモン共鳴法（２分子間相互作用測定装置等を使用する。）により測定し、ＦＧＦ−５との親和性を調べるものである。
【００３９】
具体的には、表面プラズモン共鳴効果に基づく２分子間相互作用測定装置（ＢＩＡＣＯＲＥ社製）（以下、単に「測定装置」ともいう）のセンサーチップ（「ＣＭ５」ＢＩＡＣＯＲＥ社製）の表面にコートされているＤｅｘｔｒａｎを活性させた後、その活性ＤｅｘｔｒａｎにＦＧＦ−５の一定量をアミン結合させる。そのセンサーチップを測定装置内に装着し、ＦＧＦ−５と検体との相互作用をみるためにミクロ流路を通して検体の段階希釈溶液を順番に作用させる。ＦＧＦ−５と検体との間に相互作用が生じた場合には、センサーグラム上に相互作用（結合）を意味するラインの上昇が示される。また上記の相互作用が失われた場合には速やかなラインの下降パターンがリアルタイムに示される。また、上記相互作用の反応により相互作用物が残存しても再生操作によりＦＧＦ−５を固定化した最初の状態に戻し、繰り返し測定が行える。この再生操作としては、８ｍｍｏｌ／ｌの水酸化ナトリウムを３０秒間作用させる。
親和性の検討は反応速度論に基づき、そのセンサーグラムの傾き（一定時間内の変化率）から結合定数と解離定数が求められ、更に、反応定数であるＫＤ（Ｍ）が算出される。その反応定数の値が小さい値であるほど２分子間の親和性が高いと判定される。また、この反応定数ＫＤの値は、一般的な抗原抗体反応等では、１０−７〜１０−８Ｍであり、ビオチンとアビジンのような特異性の極めて高いものでは、１０−１２〜１０−１３Ｍである。例えば、反応定数ＫＤが１０−８Ｍの場合は、１０−７Ｍに対して、親和性が１０倍高いと評価される。そして、その親和性が高いほど、ＦＧＦ−５との強い相互作用を示し、検体とＦＧＦ−５とから形成される「検体−（ＦＧＦ−５）複合体」が、より形成されやすくなり、ＦＧＦ−５に対する阻害活性が高くなる。
【００４０】
また、本発明のＦＧＦ−５阻害組成物の１日あたりの使用量は特に限定されないが、上記必須成分の総量での固形分換算で、０．０００５〜５０ｇが好ましく、より好ましくは０．００１〜５ｇであり、更に好ましくは０．０１〜１．５ｇである。１日の使用量が上記範囲内にある場合には、優れた脱毛防止効果を有する。
【００４１】
また、ＦＧＦ−５阻害活性を有する本発明のＦＧＦ−５阻害組成物を外用剤に用いることにより、脱毛防止効果、育毛効果、養毛効果及び発毛効果を備える外用剤とすることができる。
【００４２】
［２］育毛剤
本発明の育毛剤は、上記ＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする。このＦＧＦ−５組成物は、上述の通りである。
【００４３】
本発明の育毛剤に含まれる上記ＦＧＦ−５阻害組成物の含有量は特に限定されず、育毛剤の一部として含有されてもよく、育毛剤の全量を構成してもよい。育毛剤の全量とする場合、ＦＧＦ−５阻害組成物をそのまま育毛剤として用いることができる。
また、育毛剤の全質量を１００質量％とした場合に、ＦＧＦ−５阻害組成物の含有量は、０．１〜１００質量％であり、好ましくは３〜１００質量％であり、より好ましくは１５〜１００質量％であり、特に好ましくは２０〜１００質量％である。上記範囲内にある場合には、優れた育毛効果を有する。
【００４４】
本発明の育毛剤の固形分濃度は、特に限定されないが、通常、０．０００５〜１００％であり、好ましくは０．００１〜５０％であり、より好ましくは０．０１〜５％であり、特に好ましくは０．０１〜３％である。
尚、上記の育毛剤の固形分濃度における固形分は、ＦＧＦ−５阻害組成物の構成成分である、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物及びイオタ型カラギーナンからなる固形分、並びに、米糠・大豆発酵物、バラ抽出物、イオタ型カラギーナン及びタモギタケ抽出部からなる固形分を意味する。
【００４５】
また、本発明の育毛剤に含有されるＦＧＦ−５阻害組成物としては、好ましくは、タモギタケ抽出物を含有する組成物である。タモギタケ抽出物は、より優れた育毛効果及び発毛効果を有することから、タモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を用いることにより、より育毛効果及び発毛効果に優れる育毛剤とすることができる。
【００４６】
本発明の育毛剤の好ましい態様としては、例えば、以下に示される。
（１）米糠・大豆発酵物、及びタモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有する育毛剤。
（２）バラ抽出物、及びタモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有する育毛剤。
（３）イオタ型カラギーナン、及びタモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有する育毛剤。
（４）米糠・大豆発酵物、及びイオタ型カラギーナン、並びにタモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有する育毛剤。
（５）米糠・大豆発酵物、及びバラ抽出物、並びにタモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有する育毛剤。
（６）イオタ型カラギーナン、及びバラ抽出物、並びにタモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有する育毛剤。
（７）米糠・大豆発酵物、イオタ型カラギーナン及びバラ、並びにタモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有する育毛剤。
【００４７】
上記態様のうち、タモギタケ抽出物は、より優れた育毛効果及び発毛効果を有し、イオタ型カラギーナンは、より優れたＦＧＦ−５阻害作用を有することから、タモギタケ抽出物とイオタ型カラギーナンとを含有する（３）〜（７）の育毛剤がより好ましい。更に、育毛剤に含有されるＦＧＦ−５阻害組成物が、タモギタケ抽出物及びイオタ型カラギーナンと、米糠・大豆発酵物及びバラ抽出物から選択される少なくとも１種と、を含有する（６）及び（７）が特に好ましい。タモギタケ抽出物及びイオタ型カラギーナンと、米糠・大豆発酵物及びバラ抽出物から選択される少なくとも１種とを含有するＦＧＦ−５阻害組成物を用いると、それらが有するＦＧＦ−５阻害効果及び育毛効果が、相乗的に発揮されて、より育毛効果及び発毛効果が優れる育毛剤とすることができる。
【００４８】
また、本発明の育毛剤には、公知の添加剤を含有することができる。例えば、細胞賦活剤、ビタミン類、ホルモン類、血管拡張剤、アミノ酸類、抗炎症剤、殺菌剤、角質溶解剤等が挙げられる。これらは、単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
具体的には、上記細胞賦活剤としては、ペンタデカン酸グリセリド、ヒノキチオール、フォルスコリン、トランス−３，４’−ジメチル−３−ヒドロキシフラバノン等が挙げられる。
上記ビタミン類としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ群、トコフェロール類、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、パルミチン酸レチノール、β−カロチン、カルシフェロール、葉酸、ビオチン、Ｄ−パントテニルアルコール、アセチルパントテニルエチルエーテル、パントテン酸類等が挙げられる。
上記ホルモン類としては、エストラジオール等が挙げられる。
上記血管拡張剤としては、ミノキシジル、センブリ抽出液等が挙げられる。
上記アミノ酸類としては、アルギニン、アスパラギン酸、メチオニン、セリン、グリシン、グルタミン酸、シスチン等、抗炎症剤としては、β−グリチルレチン酸、グリチルリチン酸類、塩酸ピリドキシン等が挙げられる。
上記殺菌剤としては、イソプロピルメチルフェノール、ピロクトンオラミン等が挙げられる。
【００４９】
本発明の育毛剤は、本発明の上記ＦＧＦ-５阻害組成物等を含有し、且つ、本発明の作用効果を阻害しない限り、更に、他の成分を含んでいてもよい。例えば、従来、化粧料及び育毛剤等に含有されている公知の成分を添加することができる。具体的には、界面活性剤、油剤、アルコール、ｐＨ調整剤、防腐剤、酸化防止剤、増粘剤、色素、香料等が挙げられる。これらは、単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００５０】
本発明の育毛剤の形態は特に限定はなく、必要に応じて種々の形態を適宜選択することができる。例えば、液状（化粧水、乳液、分散液等）、ゲル状、クリーム状、スプレー状、パウダー状等が挙げられる。液状の場合には、上記の成分等を水、エタノール、プロピレングリコール等の水系溶媒に溶解する等により得られる液状の他、流動パラフィン等の炭化水素系油、オリーブ油、小麦胚芽油、ナッツ油、トウモロコシ油、米糠油、米胚芽油、ハトムギ油、ホホバ油、及びブドウ種子油等の植物油、スクワラン及び馬油等の動物油、その他のオイル、並びにゲルマール変性エタノール等の低級エタノールの１種又は２種以上を適宜、配合することにより得ることができる。また、ゲル状の場合には、これらのオイルやエタノールに加え、ＣＭＣ等のセルロース誘導体、ＰＶＰ、及びカルボキシビニルポリマー等の増粘剤の１種又は２種以上を配合することにより製造することができる。更に、クリーム状の場合、流動パラフィン、ワセリン、蜜ロウ等の油分だけであっても良く、これらの油分と水とを界面活性剤で乳化したものであってもよい。また、乳化タイプとしては、Ｗ／Ｏ乳化型、Ｏ／Ｗ乳化型のいずれでもよい。
また、スプレー状の場合には、上記の成分以外に、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の低級アルコール、ブタン、プロパン、イソブタン、液化石油ガス、ジメチルエーテル等の可燃性ガス、窒素ガス、酸素ガス、炭酸ガス、亜酸化窒素ガス等の圧縮ガスを配合することができ、これらの混合物の使用も可能である。その場合、ジメチルエーテルと窒素ガスを質量比（ジメチルエーテル／窒素ガス）＝（９９．９９／０．０１）〜（５０／５０）で配合、液化石油ガスとジメチルエーテルを質量比（液化石油ガス／ジメチルエーテル）＝（９９／１）〜（１／９９）で配合、液化石油ガスと窒素を質量比（液化石油ガス／窒素）＝（９９．９９／０．０１）〜（５０／５０）で配合することにより得ることができる。
【００５１】
また、上記育毛剤の１日あたりの使用量は特に限定されないが、上記含有成分の総量での固形分換算で、０．０００５〜５０ｇが好ましく、より好ましくは０．００１〜５ｇであり、更に好ましくは０．０１〜３ｇである。１日の使用量が上記範囲内にある場合には、優れた脱毛防止効果を有する。
【００５２】
［３］家畜動物用外用組成物
本発明の家畜動物用外用組成物は、上記ＦＧＦ−５阻害組成物を含有することを特徴とする。
本発明の家畜動物用外用組成物は、上記ＦＧＦ−５阻害組成物を含有するものであれば、特に限定されないが、更に、タモギタケ抽出物を含有するＦＧＦ−５阻害組成物を含有することが好ましい。
【００５３】
本発明の家畜動物用外用剤は、本発明の育毛剤を人間以外の動物に使用することを目的とするものであり、愛玩動物及び畜産動物等の家畜動物を使用対象とする外用組成物である。従って、本発明の家畜動物用外用組成物において、含有成分、含有成分の製造方法、含有成分の性状、含有成分の物性、その他含有成分、及び本外用組成物の形態等は本発明の育毛剤と同様である。
【００５４】
本発明の家畜動物用外用組成物を使用する家畜動物は、特に限定されない。この家畜動物とは人間に飼育される鳥獣を意味し、例えば、犬、猫、馬、羊、山羊、牛、豚、驢馬、駱駝、アルパカ、モルモット、兎、ミンク、ラット、及びネズミ等の哺乳類、鶏、家鴨、鵞鳥、七面鳥、雉、及び鶉等の鳥類が挙げられる。
【００５５】
本発明の家畜動物用外用組成物は、上述の成分を含有するものであることから、家畜動物等の動物に対する育毛、発毛、及び脱毛防止効果を奏する。本発明の家畜動物用外用組成物の使用態様としては、例えば以下の態様が挙げられる。
（１）畜産動物から得られる体毛の収穫量を増やすための外用剤。
（２）皮膚病及び加齢等による脱毛等に対する、育毛、発毛、又は脱毛予防に使用する外用剤。
【００５６】
上記（１）の態様としては、体毛が衣料等に使用される羊等の畜産動物に対し、その体毛の伸長速度及び体毛量の増加を促し、それらの畜産動物から得られる体毛収量を効果的に増加させることができる家畜動物用外用組成物とすることができる。
上記（２）の態様としては、皮膚病、加齢、及び飼育環境から生ずるストレス等による家畜動物の脱毛症状に対する、育毛、発毛、又は予防に使用する家畜動物用外用剤とすることができる。
【００５７】
本発明の家畜動物用外用組成物は、天然物から抽出された抽出物を主成分とするものであり、合成成分を主成分とする外用剤と比較し、より安全に家畜動物に対して使用することができる。特に、家畜動物においては、皮膚に外用組成物が塗布された場合、その塗布部の外用組成物を舐めることが多い。本発明の家畜動物用外用組成物は、天然物から抽出された抽出物を主成分とするものであり、家畜動物の摂取に対しても安全に使用することができる。
【００５８】
また、本発明の家畜動物用外用組成物は、家畜動物に対して、育毛効果、発毛効果又は脱毛防止効果を有することから、家畜動物用の育毛剤、発毛剤又は脱毛防止剤等として好適に用いることができる。
【００５９】
上記家畜動物用外用組成物の１日あたりの使用量は特に限定されないが、上記含有成分の総量での固形分換算で、０．０００５〜５０ｇが好ましく、より好ましくは０．００１〜５ｇであり、更に好ましくは０．０１〜３ｇである。１日の使用量が上記範囲内にある場合には、優れた脱毛防止効果及び育毛効果並びに発毛効果を有する家畜動物用外用組成物とすることができる。
【実施例】
【００６０】
以下に、実施例を挙げ、本発明を更に詳細に説明するが、本発明の主旨を超えない限り、本発明はかかる実施例に限定されるものではない。また、各種抽出物（抽出液）は水系媒体による抽出液であり、イオタ型カラギーナン及びラムダ型カラギーナンについては乾燥粉末を使用した。
尚、下記において、％は特に断らない限り、質量基準である。【００６１】
［１］ＦＧＦ−５阻害組成物の原料成分の調製
バラ抽出物、米糠・大豆発酵物、及びタモギタケ抽出物を下記の方法により調製した。また、イオタ型カラギーナン及びラムダ型カラギーナンは下記市販品を用いた。
（１）調製例１：バラ抽出物１の調製
バラ科バラ属植物としてロサ・ケンテフォリア（Ｒｏｓａ  ｃｅｎｔｉｆｏｌｉａ）を用いた。この花びらの乾燥物（粉砕品）２０ｇを７０℃の熱水５００ｍｌで３０分間抽出後、濾過（濾過助剤としてパーライト使用）した。次いで、減圧濃縮した後、凍結乾燥し、バラ抽出物１０ｇを得た。そして、上記により得られたバラ抽出物を水で希釈し、固形分濃度２％に調整して使用した。
（２）調製例２：米糠・大豆発酵物１の調製
米糠３０ｇ、リン酸一水素ナトリウム１０ｇ、大豆ペプチド４ｇ、炭酸水素ナトリウム４５ｇ、グルコース５ｇ、アルカリ性プロテアーゼ０．１ｇ、水５００ｇを混合した後、ｐＨ８．８〜９．０に調整した培地で納豆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｎａｔｔｏ）を４２℃、４８時間培養した後、該培養液を、圧搾、ろ過、活性炭による脱色脱臭後、再度ろ過することにより液状の米糠・大豆発酵物５ｇを得た。そして、上記により得られた米糠・大豆発酵物を水で希釈し、固形分濃度を、０．８％に調整して使用した。
（３）調製例３：タモギタケ抽出物の調製
生タモギタケ１Ｋｇを水２５ｌに２０時間浸した後、温度約８５℃、湿度約９０％に設定した恒温槽中でスチームした。次いで、スチームされたタモギタケと、スチーム工程で用いた水と、スチームでタモギタケから抽出された成分と、を全てあわせて、４０℃に設定された水浴中で粉砕機（「ポータブルミキサーＡ５１０」ＴＥＲＡＯＫＡ社製）へ移した。この粉砕は、ブレンダーを用いて１２００ｒｐｍ程度で、ペースト状になるまで行った。次いで、このペーストを約８５〜９０℃の条件下で煮出した。その後、煮て得られた抽出液全てを濾過して固体成分を除去した。得られた濾過液を加温によって殺菌を行いタモギタケ抽出物と抽出用溶媒（水）とを含む抽出液２０ｌを得た。また、この抽出液を、２８０ｎｍの吸光度で、１０ｍｇ／ｍｌまで水で希釈したものを試料１とし、２０ｍｇ／ｍｌまで希釈したものを試料２として使用した。尚、この試料１のタモギタケ抽出物の固形分濃度は１％であり、試料２のタモギタケ抽出物の固形分濃度は２％であった。
（４）イオタ型カラギーナン
「Ｖｉｃａｒｉｎ  ＳＤ３８９」（エフエムシー・ケミカルズ株式会社製）を使用した。
（５）ラムダ型カラギーナン
商品名「Ｖｉｓｃａｒｉｎ  ＧＰ２０９」（エフエムシー・ケミカルズ株式会社製）を使用した。【００６２】
［２］ＦＧＦ−５阻害効果実験（ＢＩＡＣＯＲＥアッセイ）
下記方法により、上記により得られたＦＧＦ−５阻害組成物の原料成分について、ＦＧＦ−５に対する親和性を測定することによりＦＧＦ−５阻害効果を調べた。
表面プラズモン共鳴効果に基づく２分子間相互作用測定装置（「ＢＩＡＣＯＲＥ  ２０００」、ＧＥヘルスケアサイエンス社製）（以下、単に「測定装置」という）のセンサーチップ（「ＣＭ５」ＧＥヘルスケアサイエンス社製）の表面にコートされているＤｅｘｔｒａｎ（カルボキシルメチルデキストラン）を活性させた後、その活性ＤｅｘｔｒａｎにＦＧＦ−５蛋白質の一定量をアミン結合させ、そのセンサーチップを測定装置内に装着し、ＦＧＦ−５蛋白質と検体（実験例１〜５のＦＧＦ−５阻害組成物をいう。以下同様。）との間の相互作用をみるためにミクロ流路を通して検体の段階希釈溶液を順番に作用させた。【００６３】
上記測定実験は以下の方法で行った。
ＦＧＦ−５をＢｉａｃｏｒｅセンサーチップＣＭ５（カルボキシルメチルデキストランをコートしたチップ）上の４つのフローセルに固定化するために、カルボキシルメチルデキストランにアミンカップリング処理を１８分間行った。その後、ＦＧＦ−５を３００秒間、１０μｌ／分の流速で注入することで、ＦＧＦ−５をセンサーチップに固定化した。また、チップ表面上に存在する遊離のアミノ基にエタノールアミン１ｍｏｌを１８分間反応させて、非特異的結合を生じないようにした。
そして、相互作用を検討する際には、緩衝液としてＨＢＳ  ｂｕｆｆｅｒ（１０ｍｍｏｌ／ｌのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１５０ｍｍｏｌ／ｌのＮａＣｌ、３ｍｍｏｌ／ｌのＥＤＴＡ）を１５０秒間流した（１０μｌ／分）。次いで、１０μｌ／分の流速で、検体を１８０秒間注入し、ＦＧＦ−５と検体との相互作用を示すセンサーグラムを得た。
また、一つの検体の測定後は、８ｍｍｏｌ／ｌの水酸化ナトリウム溶液を３０秒間流して、ｐＨ約８．０のパルスでフローセルを再生した。
また、ＫＤ（Ｍ）値は、各々８種の異なる濃度の検体を測定して得られたセンサーグラムから、ＢＩＡＣＯＲＥ専用解析ソフト（ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｖｅｒ．３．０）により算出した。【００６４】
下記の実験例１〜５によりＦＧＦ−５阻害組成物の原料成分を用いて、検体を調製し、ＫＤ（Ｍ）値を測定した。そして、得られたＫＤ（Ｍ）値を表１に示す。また、下記実験例１〜５におけるセンサーグラムをそれぞれ図１〜５に示す。尚、図１〜５のセンサーグラムにおいて、各８種のグラフは上から濃度が高い順のグラフである。
また、実験例１〜５における測定に用いた検体の調製方法、及び濃度は以下の通りである。尚、下記各検体の調製（希釈）のために使用した溶媒としては、上記のＨＢＳ  ｂｕｆｆｅｒを使用した。
（１）実験例１
調製例１で得られたバラ抽出物を上記ＨＢＳ  ｂｕｆｆｅｒにより希釈し、固形分濃度が０．００２％、０．００１％、０．０００５％、０．０００２５％、０．０００１２５％、０．００００６２５％、０．００００３１３％、及び０．００００１５６％である８種類の濃度の検体を作製した。そして、これらの検体を用いてＦＧＦ−５に対する親和性を測定した。
（２）実験例２
調製例２で得られた米糠・大豆発酵物を上記ＨＢＳ  ｂｕｆｆｅｒにより希釈し、固形分濃度が０．０００８％、０．０００４％、０．０００２％、０．０００１％、０．００００５％、０．００００２５％、０．００００１２５％、及び０．０００００６２５％である８種類の濃度の検体を作製した。そして、これらの検体を用いてＦＧＦ−５に対する親和性を測定した。
（３）実験例３
上記のイオタ型カラギーナンを上記ＨＢＳ  ｂｕｆｆｅｒにより希釈し、固形分濃度が１％、０．５％、０．２５％、０．１２５％、０．０６２５％、０．００３１３％、０．００１５６％、及び０．０００７８１％である８種類の濃度の検体を作製した。そして、これらの検体を用いてＦＧＦ−５に対する親和性を測定した。
（４）実験例４
調製例３で得られたタモギタケ抽出物（試料１）を上記ＨＢＳ  ｂｕｆｆｅｒにより希釈し、固形分濃度が１％、０．５％、０．２５％、０．１２５％、０．０６２５％、０．００３１３％、０．００１５６％、及び０．０００７８１％である８種類の濃度の検体を作製した。そして、これらの検体を用いてＦＧＦ−５に対する親和性を測定した。
（５）実験例５
上記のラムダ型カラギーナンを上記ＨＢＳ  ｂｕｆｆｅｒにより希釈し、固形分濃度が１％、０．５％、０．２５％、０．１２５％、０．０６２５％、０．００３１３％、０．００１５６％、及び０．０００７８１％である８種類の濃度の検体を作製した。そして、これらの検体を用いてＦＧＦ−５に対する親和性を測定した。【００６５】
【表１】
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【００６６】
また、上記検体の希釈濃度は、実験例１〜５の各ＦＧＦ−５阻害組成物が、１００μｍｏｌ／ｌ濃度から、１／２段階づつ希釈し、５０μｍｏｌ／ｌ、２５μｍｏｌ／ｌ、１２．５μｍｏｌ／ｌ、６．２５μｍｏｌ／ｌ、３．１２５μｍｏｌ／ｌ、１．５６μｍｏｌ／ｌ、及び０．７８μｍｏｌ／ｌの８濃度となるようにした。
尚、上記濃度の算出において、バラ抽出物及び米糠・大豆発酵物に含まれる含有成分の分子量を１万と仮定し、また、タモギタケ抽出物に含まれる含有成分、イオタ型カラギーナン、及びラムダ型カラギーナンの分子量を１０万と仮定した。【００６７】
［３］育毛剤（畜産動物用外用組成物）の調製及び評価
実験例６〜１８（６週令Ｃ３Ｈ系統雄マウスを用いた育毛実験）
〔１〕育毛剤（畜産動物用外用組成物）の評価方法
６５匹の６週令Ｃ３Ｈ系統雄マウス（三協ラボサービス株式会社製）をネンブタールにより麻酔し、上記マウスの背部をバリカンを用いて体毛を刈り取り（２ｃｍ×４ｃｍ長方形形状）、更に、その刈り取った長方形形状部分をシェーバーにより剃り上げ、実験用マウスを得た。
上記により得られた６５匹の実験用マウスを各５匹づつ１３群に分け、その各５匹づつをそれぞれ実験例６〜１８に用いた。
そして、下記に示される実験例６〜１８の育毛剤（畜産動物用外用組成物）を１日当たり２０μｍｌ（１匹当たり）づつ、実験用マウス（各実験例５匹づつ）に１日１回、実験用マウスの剃り上げた背部中央部に塗布した。そして、この操作を２８日間行い、マウスの体毛における育毛効果を測定した。
上記育毛効果の測定は、実験開始から２８日後の各実験例で使用した実験用マウスをネンブタールにより麻酔し、各実験例の５匹づつをとりまとめ、デジタルカメラにより、一定距離（マウスを置いた机から２５ｃｍの距離）、一定光度下（同一の蛍光灯下）にて画像を取得した。そして、マウス背部の体毛を剃り上げていない通常の１０週令Ｃ３Ｈ系統雄マウス背部の体毛状態の画像と比較した。そして、実験に用いたマウスの明確に体毛の少ない部分の面積を数値化し、各実験群の５匹の数値化した面積の平均値を無毛面積とした。その数値化した無毛面積を統計処理することにより、育毛効果を測定した。尚、数値化及び統計処理は、解析ソフト（「Ｑｕａｎｔｉｔｙ  Ｏｎｅ」ＢＩＯ  ＲＡＤ社製）を使用した。また、実験例６〜１８の無毛面積（ｍｍ２）、及び実験例７〜１８の無毛面積と実験例６の無毛面積との差（Δ１値）を表２に示す。また、実験例６〜１８で得られた、２８日後のマウス背部の画像をそれぞれ図６〜１８に示す。【００６８】
〔２〕育毛剤（畜産動物用外用組成物）の調製
下記に示す育毛剤（畜産動物用外用組成物）の調製において、バラ抽出物及び米糠・大豆発酵物については、以下の試料３及び４によるＦＧＦ−５阻害組成物を使用した。
（１）バラ抽出物２（試料３）
商品名「ＲＯＳＥ  ＣＹＲＳＴＡ」株式会社東洋発酵製をＦＧＦ−５阻害組成物とした（試料３）。このバラ抽出物の固形分濃度は、４％であった。
（２）米糠・大豆発酵物２（試料４）
商品名「ＣＥＬＡＢＩＯ」株式会社東洋発酵製をＦＧＦ−５阻害組成物とした（試料４）。この米糠・大豆発酵物の固形分濃度は、０．８％であった。【００６９】
実験例６〜１８で使用した育毛剤（畜産動物用外用組成物）を以下に示す。
（１）実験例６
純度９９．５％のエタノール２００μｌ、及び水２００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせて約５０％エタノール溶液とした。
（２）実験例７
実験例６と同様にして得られた約５０％エタノール溶液に、全質量を１００％として、ミノキシジルを１％添加して、ミノキシジル含有物を得た。
（３）実験例８
純度９９．５％のエタノール２００μｌ、及び上記実験例４（試料２）で得られたタモギタケ抽出物（固形分濃度２％）２００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせて、タモギタケ抽出物含有物（固形分濃度１％）を得た。
（４）実験例９
実験例６と同様にして得られた約５０％エタノール溶液に、全質量を１００％として、実験例３のイオタ型カラギーナンを０．５％添加し、イオタ型カラギーナン含有物を得た。
（５）実験例１０
純度９９．５％のエタノール２００μｌ、及び上記試料４の米糠・大豆発酵物（固形分濃度０．８％）２００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせて、米糠・大豆発酵物含有物（固形分濃度０．４％）を得た。
（６）実験例１１
純度９９．５％のエタノール２００μｌ、及び上記試料３のバラ抽出物（固形分濃度４％）２００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせて、バラ抽出物含有物（固形分濃度２％）を得た。
（７）実験例１２
実験例８と同様にして得られたタモギタケ抽出物含有物（固形分濃度１％）４００μｌ、及び実験例９と同様にして得られたイオタ型カラギーナン含有物４００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせてタモギタケ抽出物及びイオタ型カラギーナン含有物を得た。
（８）実験例１３
実験例８と同様にして得られたタモギタケ抽出物含有物（固形分濃度１％）４００μｌ、及び実験例１０と同様にして得られた米糠・大豆発酵物含有物（固形分濃度０．４％）４００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせてタモギタケ抽出物及び米糠・大豆発酵物含有物を得た。
（９）実験例１４
実験例９と同様にして得られたイオタ型カラギーナン含有物４００μｌ、及び実験例１０と同様にして得られた米糠・大豆発酵物含有物（固形分濃度０．４％）４００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせてイオタ型カラギーナン及び米糠・大豆発酵物含有物を得た。
（１０）実験例１５
実験例８と同様にして得られたタモギタケ抽出物含有物（固形分濃度１％）４００μｌ、及び実験例１１と同様にして得られたバラ抽出物含有物（固形分濃度２％）４００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせてタモギタケ抽出物及びバラ抽出物含有物を得た。
（１１）実験例１６
実験例９と同様にして得られたイオタ型カラギーナン含有物４００μｌ、及び実験例１１と同様にして得られたバラ抽出物含有物（固形分濃度２％）４００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせてイオタ型カラギーナン及びバラ抽出物含有物を得た。
（１２）実験例１７
実験例８と同様にして得られたタモギタケ抽出物含有物（固形分濃度１％）４００μｌ、及び実験例９と同様にして得られたイオタ型カラギーナン含有物４００μｌ、並びに実験例１０と同様にして得られた米糠・大豆発酵物含有物（固形分濃度０．４％）４００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせてタモギタケ抽出物、イオタ型カラギーナン及び米糠・大豆発酵物含有物を得た。
（１３）実験例１８
実験例８と同様にして得られたタモギタケ抽出物含有物（固形分濃度１％）４００μｌ、及び実験例９と同様にして得られたイオタ型カラギーナン含有物４００μｌ、並びに実験例１１と同様にして得られたバラ抽出物含有物（固形分濃度２％）４００μｌを容量１．５ｍｌのエッペンに入れ、それを混ぜ合わせてタモギタケ抽出物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物含有物を得た。【００７０】
【表２】
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【００７１】
［４］育毛相乗効果性評価
上記実験例１２〜１８は、複数抽出物（複数成分）を含有するため、複数抽出物による相乗効果を下記方法により検討した。相乗効果の確認は、下記計算値（体毛の少ない部分の面積計算値）を、下記の方法により算出し、各実験例と比較することにより行った。
計算値１：実験例８及び９の相加平均を計算値１とし、実験例１２の対象計算値として比較した。
計算値２：実験例８及び１０の相加平均を計算値２とし、実験例１３の対象計算値として比較した。
計算値３：実験例９及び１０の相加平均を計算値３とし、実験例１４の対象計算値として比較した。
計算値４：実験例８及び１１の相加平均を計算値４とし、実験例１５の対象計算値として比較した。
計算値５：実験例９及び１１の相加平均を計算値５とし、実験例１６の対象計算値として比較した。
計算値６：実験例８、９及び１０の相加平均を計算値６とし、実験例１７の対象計算値として比較した。
計算値７：実験例８、９及び１１の相加平均を計算値７とし、実験例１８の対象計算値として比較した。
また、上記計算値、上記計算値と実験例６の面積値との差（Δ２値）、対象実験、及び対象実験のΔ１値と計算値のΔ２値との差を表３に示す。【００７２】
【表３】
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【００７３】
また、上記計算値のΔ２値と各対象実験のΔ１値との比（各実施例のΔ１値／各計算値のΔ２値）から相乗効果性を評価した。上記計算値のΔ２値と各対象実験のΔ１値との比を表４に示す。【００７４】
【表４】
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【００７５】
表１の結果より、実験例１のバラ抽出物、実験例２米糠・大豆発酵物及び実験例３のイオタ型カラギーナンについては、実験例４のタモギタケ抽出物に比べ、ＦＧＦ−５との親和性が高いことが分かる。特に、実験例３のイオタ型カラギーナンは、ＫＤ値（Ｍ）が２．９５×１０−８であり、ＦＧＦ−５との親和性に優れ、ＦＧＦ−５の阻害効果が高いことが分かる。【００７６】
表２の結果より、実験例８〜１８は、５０％エタノールの実験例６と比較して、無毛面積は少なく、実験例８〜１８に含有されている抽出物等は、育毛効果が高いことが分かる。更に、実験例８（タモギタケ抽出物）、実験例９（イオタ型カラギーナン）、実験例１１（バラ抽出物）は、実験例７（ミノキシジル）よりも無毛面積は少なく、これらは、ミノキシジルよりも優れた育毛効果があることが分かる。【００７７】
また、表４の結果より、３成分を含有する実験例１７（タモギタケ抽出物、イオタ型カラギーナン及び米糠・大豆発酵物）、実験例１８（タモギタケ抽出物、イオタ型カラギーナン及びバラ抽出物）は、育毛相乗効果の値が高い。従って、各含有成分を単独で使用した場合に較べ、３成分による相乗効果から、高い育毛効果が発現されていることが分かる。【００７８】
以上より、バラ抽出物、米糠・大豆発酵物及びイオタ型カラギーナンは、ＦＧＦ−５阻害活性が高く、また、タモギタケ抽出物は育毛効果が高いことから、これらを含有する育毛剤は、脱毛防止効果、育毛効果、養毛効果及び発毛効果に優れることが分かる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【国際調査報告】
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