(57)【要約】  複雑な装置や吸引操作を要することなく、単純な操作で精度の高い分析結果を迅速に得ることができ、さらには分析に要するコストが低廉であるような、体液中に含まれる特定成分を分析するための、体液成分の分析器具を提供する。  分析対象物質を含む試料を試料供給口（２）に供給し、所定の圧力よりも低い圧力で試料供給口（２）を加圧すると、試料は反応室（４）に移送され、そこで抗原抗体反応により固定化抗体―分析対象物質―標識抗体の複合体が形成される。反応が完了した後所定の圧力以上の圧力で試料供給口（２）を加圧すると、余剰の試料および余剰の標識抗体は廃液室（６）に移送され、その後反応室（４）を光学的に測定することによって、試料に含まれる分析対象物質を精度よく測定することができる。
2010119501.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料が内部に供給される試料供給口と、
前記試料供給口から延出する第１の流路と、
前記第１の流路に連通する反応室と、
前記反応室から延出する第２の流路と、
前記第２の流路に連通する廃液室と、
前記第２の流路を閉塞するよう設けられた閉塞部材とを備え、
前記閉塞部材は、通気性を有するとともに、所定の圧力より低い圧では通水せず、前記所定の圧力以上の圧力で通水し、
前記反応室を取り囲み対面する２つの壁面が光透過性を有し、
前記２つの壁面のいずれか一方に前記試料に含まれる分析対象物質と特異的に結合する抗体が固定化されており、
さらに前記反応室に前記分析対象物質と特異的に結合する標識された抗体が遊離可能に保持されており、
前記廃液室を取り囲む壁面の少なくとも一部が通気性を有する
ことを特徴とする体液成分の分析器具。
【請求項２】
前記閉塞部材が撥水処理された多孔質材料からなる
ことを特徴とする請求項１に記載の体液成分の分析器具。
【請求項３】
不通気性でありかつ不通水性の保持プレートを備え、
前記保持プレートに、前記第２の流路の一部を構成する貫通孔が、板厚方向に貫通して設けられており、
前記貫通孔に前記閉塞部材が収容されており、
前記第２の流路のうち前記反応室と前記貫通孔とを連通する上流部分が、前記保持プレートの一の面側に配置されており、
前記第２の流路のうち前記貫通孔と前記廃液室とを連通する下流部分が、前記保持プレートの他の面側に配置されている
ことを特徴とする請求項１または２に記載の体液成分の分析器具。
【請求項４】
前記廃液室が、不通水性で通気性のある通気プレートと、不通気性でありかつ不通水性の封止プレートとを積層して形成されている
ことを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の体液成分の分析器具。
【請求項５】
請求項１〜４にいずれかに記載の体液成分の分析器具を用い、
試料を前記試料供給口に供給する工程と、
前記所定の圧力より低い第１の圧力を前記使用供給口に与えて前記試料を前記反応室に移送する工程と、
所定の時間が経過した後、前記所定の圧力以上の第２の圧力を前記試料供給口に与えて前記試料を前記廃液室に移送する工程と、
前記反応室の光学的変化量を測定する工程とを備える
ことを特徴とする体液成分の分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は生体の体液中の特定成分、特に糖化ヘモグロビン、腫瘍マーカー、甲状腺ホルモンなどの免疫反応を利用して検出する成分を、簡易に測定する分析器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来免疫反応を利用した簡易的な器具として、イムノクロマトを利用した器具が知られている（特許文献１参照）。典型例としては、液体が毛管現象で移動することができる多孔質材からなるストリップの一部に、分析対象物質に特異的に結合する抗体が固定化されており（固定化抗体）、その上流に金コロイドなどの着色粒子で標識された、分析対象物質に特異的に結合する抗体（標識抗体）が、ストリップ上に固定されていない状態で配置されている器具が挙げられる。これに標識抗体の上流から試料を滴下すると、試料はストリップ中の毛管を伝わって浸透し標識抗体を溶解し、さらに、標識抗体とともにストリップの抗体を固定化した部位を通過してストリップの下流に移動するが、試料中に分析対象物質が存在する場合には、溶解した標識抗体と反応し、ついでストリップに固定化された抗体に「分析対象物質−標識抗体」複合体として捕獲される。未反応の標識抗体は下流に移動してしまうため、分析対象物質が存在する場合にだけストリップの抗体を固定化した部分に金コロイドによる着色が観察される。この器具は簡易に測定が可能ではあるが、試料の展開速度が多孔質材からなるストリップのクロマト作用に依存しているため、展開速度で規定される抗原−抗体反応の時間を一定に制御することができないという問題があった。【０００３】
一方、試料をクロマト移動させることに代え、ポンプによる吸引によって流路を通じて試料を移送させる器具が知られている（特許文献２参照）。この器具は、順に、試料供給口、標識抗体が備えられた試料処理室、固定化抗体が備えられた測定室、廃液室およびポンプ接続口が、流路により連通している。試料を試料供給口に滴下した後、ポンプによる吸引によってまず試料処理室に移送し、標識抗体を遊離させるとともに試料に含まれる分析対象物質と抗原抗体反応を生じさせる。そこで所定の時間停止した後、再び吸引して測定室に移送し、分析対象物質と標識抗体との結合物を抗原抗体反応により固定化抗体に結合させ、そこで所定の時間停止した後、吸引して廃液室に移送する。そして測定室について測光することによって試料に含まれる分析対象物質の定量測定を実施することができる。この器具は、ポンプにより試料を能動的に移送させる構成となっているため、移送速度を制御することが可能となる。しかし、特に微小な領域で微量な試料の移送をする場合、吸引動作の微細な制御が不可欠となり、ポンプの微小な作動誤差や微小領域に存在する空気の膨張収縮などの影響により、測定結果が大きな影響を受けるという問題があった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平９−１３３６８２号公報
【特許文献２】特開平９−１９６９２０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
そこで、簡易な操作で分析を実施することができ、精度が高い分析結果を迅速に得ることができ、さらには分析に要するコストが低廉であるような、体液の特定成分を分析するための分析器具が求められていた。【０００６】
ところで、本願発明者らの検討によれば、体液成分の分析器具の試料供給口に可撓性を有するカップ型の容器の開口を当接し、ストローク量を制御して容器の底部を圧縮すると、容器内の圧力は制御の直接の対象であるストローク量とほぼ線形の関係を有し、かつ圧力の再現性も高いということが明らかになった。すなわち、ストロークを制御することによって、試料を器具内で移動させるために付与すべき圧力を、高い再現性のもとで制御することが可能であることが明らかとなった。【０００７】
そこで、本発明が解決しようとする課題は、本願発明者らの知見により明らかとなった上述の圧力の高い再現性を利用することによって、分析器具の製造公差や微小な作動誤差などに左右されることなく、精度が高い分析結果を迅速に得ることができ、さらには分析に要するコストが低廉であるような、体液の特定成分を分析するための分析器具を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、前記課題を解決するためになされたもので、請求項１に記載の発明は、試料が内部に供給される試料供給口と、前記試料供給口から延出する第１の流路と、前記第１の流路に連通する反応室と、前記反応室から延出する第２の流路と、前記第２の流路に連通する廃液室と、前記第２の流路を閉塞するよう設けられた閉塞部材とを備え、前記閉塞部材は、通気性を有するとともに、所定の圧力より低い圧では通水せず、前記所定の圧力以上の圧力で通水し、前記反応室を取り囲み対面する２つの壁面が光透過性を有し、前記２つの壁面のいずれか一方に前記試料に含まれる分析対象物質と特異的に結合する抗体が固定化されており、さらに前記反応室に前記分析対象物質と特異的に結合する標識された抗体が遊離可能に保持されており、前記廃液室を取り囲む壁面の少なくとも一部が通気性を有することを特徴とする体液成分の分析器具である。【０００９】
請求項１に記載の発明によれば、分析対象物質を含む試料を試料供給口に滴下し試料供給口を所定の圧力より低い圧力で加圧すると、試料は第１の流路を通り反応室に移送されるとともに、そこで滞留して抗原抗体反応が起こり、標識された抗体と結合した分析対象物質がさらに固定化された抗体と結合することによって反応室内に捕捉され、その後試料供給口を所定の圧力以上で加圧すると、滞留していた試料が閉塞部材を通過するため、未反応の標識された抗体を試料とともに廃液室に移送することが可能な、体液成分の分析器具を提供することができる。当該分析器具を用いれば、微細な吸引動作の制御を必要とすることなく、試料に含まれる分析対象物質を反応室に捕捉することができ、反応室の光学的変化量を計測することにより分析対象物質を定量的に測定することができる。【００１０】
請求項２に記載の発明は、前記閉塞部材が撥水処理された多孔質材料からなることを特徴とする請求項１に記載の体液成分の分析器具である。【００１１】
請求項２に記載の発明によれば、閉塞部材に撥水処理が施された多孔質材料を適用することによって、請求項１に記載の発明の効果を得ることができる。【００１２】
請求項３に記載の発明は、不通気性でありかつ不通水性の保持プレートを備え、前記保持プレートに、前記第２の流路の一部を構成する貫通孔が、板厚方向に貫通して設けられており、前記貫通孔に前記閉塞部材が収容されており、前記第２の流路のうち前記反応室と前記貫通孔とを連通する上流部分が、前記保持プレートの一の面側に配置されており、前記第２の流路のうち前記貫通孔と前記廃液室とを連通する下流部分が、前記保持プレートの他の面側に配置されていることを特徴とする請求項１または２に記載の体液成分の分析器具である。【００１３】
請求項３に記載の発明によれば、閉塞部材を保持プレートに設けられた貫通孔に収容可能な板状の部材とすることができるため、厚さを調整することにより閉塞部材を通水することができる圧力を容易に設定することができる。【００１４】
請求項４に記載の発明は、前記廃液室が、不通水性で通気性のある通気プレートと、不通気性でありかつ不通水性の封止プレートとを積層して形成されていることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の体液成分の分析器具である。【００１５】
請求項４に記載の発明によれば、体液成分の分析器具を積層構造とすることによって、低コストかつ確実に請求項１〜３に記載の発明の効果を得ることができる。【００１６】
請求項５に記載の発明は、請求項１〜４にいずれかに記載の体液成分の分析器具を用い、試料を前記試料供給口に供給する工程と、前記所定の圧力より低い第１の圧力を前記使用供給口に与えて前記試料を前記反応室に移送する工程と、所定の時間が経過した後、前記所定の圧力以上の第２の圧力を前記試料供給口に与えて前記試料を前記廃液室に移送する工程と、前記反応室の光学的変化量を測定する工程とを備えることを特徴とする体液成分の分析方法である。【００１７】
請求項５に記載の発明によれば、微細な吸引動作の制御を必要とすることなく、試料に含まれる分析対象物質を反応室に捕捉することができ、反応室の光学的変化量を計測することにより分析対象物質を定量的に測定することができる。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、ポンプの微細な吸引動作の制御を必要とすることなく、体液成分の免疫測定を実施することができる。すなわち、高精度の体液成分分析が簡便な手法にて可能となり、それに伴い分析に要するコストも低廉となる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具を示す平面図である。
【図２】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具の、図１における断面Ａ−Ａを示す断面図である。
【図３】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具を示す分解斜視図である。
【図４】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具の反応室の断面模式図である。
【図５】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具の反応室に試料が流入した状態での断面模式図である。
【図６】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具の反応室において抗原抗体反応が完了した状態での断面模式図である。
【図７】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具において、試料を廃液室に移送した後での反応室を示す断面模式図である。
【図８】本発明の第１の実施形態に係る体液成分の分析器具において、濾過手段および血漿貯留室を備えるものを示す分解斜視図である。
【図９】本発明の第２の実施形態に係る体液成分の分析器具を示す分解斜視図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
次に、この発明の実施の形態について図面に基づき説明する。
【００２１】
（第１の実施形態）
図１〜図４に、本発明に係る体液成分の分析器具の第１の実施の形態を示す。図１に平面図、図２に断面図を示し、図３に分解斜視図を示す。本実施の形態は、赤血球を溶血した試料をもとにヘモグロビンＡ１ｃ（以下糖化ヘモグロビン）を測定するための形態となっている。
【００２２】
図１および図２のように、本実施の形態に係る分析器具は、第１プレート１１と、第２プレート１２と、第３プレート１３と、第４プレート１４と、第５プレート１５とが、両面テープなどの接着層（図示なし）を介して接着されて構成されている。
【００２３】
第１プレート１１には貫通孔２１が設けられており、試料供給口２を形成している。第２プレート１２にも貫通孔２１と略同心位置に貫通孔２２が設けられ、貫通孔２２からは溝３１が延出している。溝３１と第１プレート１１および第３プレート１３とで囲まれた領域が、試料供給口２から延出する第１の流路３を画成している。
【００２４】
第２プレート１２の、貫通孔２２から離隔した位置に、溝３１と連通する貫通孔４１が設けられている。第３プレート１３には、貫通穴４１と略同心位置に固定化抗体保持部４３が設けられ、当該部に、分析対象物質に特異的に結合する抗体が固定される。また、第１プレート１１には、貫通孔４１と略同心位置に標識抗体保持部４２が設けられ、当該部に、分析対象物質に特異的に結合する標識された抗体が遊離可能に保持される。貫通孔４１と第１プレート１１および第３プレート１３とで囲まれた領域が反応室４を画成し、固定化抗体保持部４３と標識抗体保持部４２とは、反応室４を取り囲み対面する２つ壁面となる。なお、固定化抗体保持部４３を第１プレート１１に、標識抗体保持部４２を第２プレート１２に設けることも可能である。また、第１プレート１１および第３プレート１３のうち、少なくとも貫通孔４１と略同心位置にある領域については、光透過性を有するよう構成されており、さらに、第４プレート１４および第５プレート１５には貫通孔４１と略同心位置にそれぞれ貫通孔４４，４５が設けられている。反応後の反応室４における光学的変化量を測定する際に外部から反応室４まで光が到達するよう構成するためである。このとき、光透過性を有する部分の大きさを貫通孔４１の大きさより小さく制限することによって、反応室４に入射される光束を制限することができるため好適である。開孔が設けられた光透過性を有さない膜を第１プレート１１および第３プレート１３に貼着したり、光透過性を付与する領域の周囲に光透過性を有さない塗料を塗布することなどによって、光透過性を有する部分の大きさを制限することができる。
【００２５】
第２プレート１２の貫通孔４１からは溝５１１が延出し、端部５１１ａまで延びている。第３プレート１３には、端部５１１ａを投影した位置と略同一位置に保持孔５２が板厚方向に貫通して設けられており、保持孔５２には閉塞部材５３が収容されている。第４プレート１４には、保持孔５２を投影した位置と略同一位置に端部５４１ａを有する溝５４１が設けられている。溝５１１と第１プレート１１および第３プレート１３とで囲まれた領域が、反応室４から連通する第２の流路５のうち、上流部５１を画成しており、溝５４１と第３プレート１３および第５プレート１５とで囲まれた領域が、第２の流路５のうち下流部５４を画成している。また、保持孔５２は上流部５１および下流部５４と連通しており、すなわち、上流部５１と保持孔５２と下流部５４とが第２の流路５を構成し、閉塞部材５３が第２の流路５を閉塞するよう設けられている。
【００２６】
第４プレート１４には、溝５４１と連通する貫通孔６１が設けられており、貫通孔６１と第３プレート１３および第５プレート１５とで囲まれた領域が廃液室６を画成している。
【００２７】
第１プレート１１、第３プレート１３および第５プレート１５は不通気性でありかつ不通水性であり、材質としては、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）やＡＳ樹脂のようなプラスチック材料が、加工が容易であるため好適である。しかし、試料が漏出することがない流路を形成することができれば、これに限定されるものではない。また、第１プレート１１および第３プレート１３のうち、少なくとも貫通孔４１と略同心位置にある領域については、光透過性を有するよう構成されている。反応後の反応室４における光学的変化量を測定するためである。
【００２８】
第２プレート１２および第４プレート１４には、不通水性で通気性のある多孔質材が用いられる。孔および溝の加工が容易であり、廃液室６の壁面から空気が逃げるため、空気抜き孔等を設けることなく試料を廃液室６まで移送することが可能となるからである。不通水性で通気性のある多孔質材として、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）や、撥水処理を施したセルロースアセテートおよびセルロース混合エステルなどが、好適に使用される。なお、試料が廃液室６に到達するために外部に放出される必要がある流路内の空気は全て、廃液室６から抜くことが可能であるため、第２プレート１２について不通気性でありかつ不通水性の材料を用いることも可能である。また、廃液室６の壁面から外部に連通する空気抜き孔を設けることもでき、その場合第４プレート１４に不通気性でありかつ不通水性の材料を用いることも可能となる。
【００２９】
閉塞部材５３には、所定の圧力より低い圧力では通水せず、所定の圧力以上の圧力で通水する材料が用いられる。具体的には、セルロースアセテートおよびセルロース混合エステルなどの多孔質材に撥水処理を施したものが適用可能である。このとき、多孔質材の孔径が小さいと通水可能となる圧力が上昇し、試料が閉塞部材５３を通水する前に第２プレート１２に浸透するおそれが生じる。そのため、第２プレート１２に用いる多孔質材の孔径より大きい孔径の多孔質材を選択することによって、第１の流路３、反応室４および第２の流路５の上流部５１の壁面から試料が第２プレート１２の内部に浸透する前に、閉塞部材５３を通水して廃液室６まで試料を移送することが可能となる。具体的には、第２プレート１２に用いる多孔質材の孔径を３μｍ以下、好ましくは１μｍ以下とする一方で、閉塞部材５３に用いる多孔質材の孔径をそれより大きくすることが好ましい。なお、第２プレート１２に施す撥水処理を閉塞部材５３に施す撥水処理より強くすることによっても、上記と同等な効果を得ることができる。また、第２プレート１２を不通気性でありかつ不通水性の材料で構成すると、試料が廃液室に進行する前に第２プレート１２に浸透するおそれは生じない。
【００３０】
図４に反応室４の断面模式図を示す。第３プレート１３の固定化抗体保持部４３には、分析対象物質に特異的に結合する抗体が固定され、固定化抗体４３１が形成される。本実施形態においては、例えば抗ヘモグロビン抗体としてのモノクローナル抗体やポリクローナル抗体が使用され、物理吸着（ファンデルワールス結合）、疎水結合、化学結合などの一般的手法で固定化抗体保持部４３に固定される。なお、ここに記載する「ヘモグロビン」とは、糖化ヘモグロビンおよび未糖化ヘモグロビンの両方を含む。
【００３１】
第１プレート１１の標識抗体保持部４２には、分析対象物質に特異的に結合する、標識された標識抗体４２１が遊離可能に保持されている。本実施形態においては、例えば蛍光色素などで化学結合により標識された抗糖化ヘモグロビンモノクローナル抗体が適切な可溶性保持体４２２を介して当該部に塗布されている。標識の蛍光色素としては、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ローダミン、１−ジメチルアミノナフタレン５−スルホニルクロリド（ＤＡＮＳ）などが用いられる。蛍光色素以外には、青色ラテックス粒子などの着色粒子を標識物質として使用することができる。また、可溶性保持体４２２は任意であるが、スクロース、ソルビトール、トレハロースなどの多糖類の溶液を塗布・乾燥させたものが好適に使用される。
【００３２】
次に、本実施の形態に係る器具を用いた分析の手順および器具の作用について説明する。
【００３３】
赤血球を希釈・溶血した試料を試料供給口２に滴下する。希釈・溶血操作は、一般的にはサポニンなどの界面活性剤を含む溶液を用い、検出の際の光学的変化量を考慮した適度な希釈倍率で行われる。試料を滴下した後、試料供給口２を所定の圧力より低い圧力で加圧する。ここで「所定の圧力」とは、閉塞部材５３が通水する圧力である。なお、ここで加える圧は、反応が終了するまで加圧した状態を維持したままでもよいし、試料が反応室４に到達した後に一旦解除し、さらに後の工程で再加圧する方法を用いてもよい。
【００３４】
このとき閉塞部材５３は通気性を有しつつ不通水性を有し、また廃液室６の壁面も通気性を有するため、試料は第１の流路３を通り反応室４まで到達する。第２の流路５は閉塞部材５３によってせき止められているため、試料はそれ以上は進行せず、反応室４にとどまる。この状態での反応室４の断面模式図を図５に示す。
【００３５】
反応室４において、試料に含まれる分析対象物質である未糖化ヘモグロビン８２と糖化ヘモグロビン８１とは、その構成比に比例した割合で固定化抗体保持部４３に備えられた固定化抗体４３１に特異的に結合する。一方、標識抗体保持部４２に備えられた標識抗体４２１は、試料に溶かされ遊動を開始し、試料に含有される糖化ヘモグロビン８１のみと抗原抗体反応を開始する。ここで反応が完了するまで待機する。すると、試料中の未糖化ヘモグロビン８２と糖化ヘモグロビン８１の構成比に比例した割合で、固定化抗体４３１−未糖化ヘモグロビン８２の複合体と、固定化抗体４３１−糖化ヘモグロビン８１−標識抗体４２１の複合体とが、固定化抗体保持部４３に形成される。なお、この結合反応が完了した後でも、試料の中には未反応の標識抗体４２１が多量に含まれている。この状態での反応室４の断面模式図を図６に示す。
【００３６】
反応室４での反応が完了するのに必要な時間が経過したあと、試料供給口２を所定の圧力以上の圧力で加圧する。閉塞部材５３に所定の圧力以上の圧力が加えられると通水を開始するため、試料は廃液室６に移送される。このとき、前記の複合体形成に使用されなかった試料中の未反応の標識抗体４２１は、試料とともに廃液室６に移送されることとなる。すなわち、別途洗浄液を注入することなく反応室４の手前に余剰に存在する試料によるＢ／Ｆ分離が行われることになる。この状態での反応室４の断面模式図を図７に示す。なお、本実施形態では、試料が閉塞部材５３の厚さ方向に進行するよう構成されているため、閉塞部５３および第３プレート１３の厚さを適宜に設定することによって通水するために必要な圧力を変更することができる。また、微小に成形された流路に大きさを合わせる必要がないため、閉塞部材５３は容易に成形することが可能である。
【００３７】
試料が廃液室６に移送された後、例えば標識物質が蛍光色素の場合では、反応室４の蛍光強度を光学的に計測することにより、固定化抗体保持部４３に捕捉された糖化ヘモグロビン８１の量を定量的に測定することができる。また、標識物質が青色ラテックス粒子などの着色粒子の場合では、反応室４の吸光度や反射率を測定することにより、固定化抗体保持部４３に捕捉された糖化ヘモグロビン８１の量を定量的に測定することができる。糖化ヘモグロビン測定の場合は、全ヘモグロビン中の糖化ヘモグロビン割合（百分率）で表記することが一般的であるが、本法によれば、反応室４の単位面積における抗ヘモグロビン抗体の固定化量を一定にしておくことにより、ここに結合するヘモグロビン量も一定となることから、複合体を形成した糖化ヘモグロビン量に依存する蛍光強度を計測することだけで、全ヘモグロビン中の糖化ヘモグロビン割合（百分率）を得ることができる。
【００３８】
本実施の形態は、糖化ヘモグロビンを測定するための器具として構成しているため、試料として溶血したものを供給する形態としているが、全血を供給して器具の試料供給口と反応室との間に溶血手段を設けることによって、全血の試料を供給して糖化ヘモグロビンを測定するように構成することも可能である。
【００３９】
また、固定化抗体および標識抗体を適宜選択することによって、分析対象物質をＣＥＡ、ＡＦＰ等の腫瘍マーカーとすることも可能である。その際は試料として血漿を供給することが好適であるが、図８に示すように、供給口保持体２５に設けられた試料供給口２と反応室４との間に血球成分を分離する濾過手段２３を設けることによって、試料として全血を供給し、試料の中に含有される腫瘍マーカーを測定することも可能となる。さらにこの場合、図８に示すように、濾過手段２３と反応室４との間に、血漿を蓄えるための血漿貯留室２４を設けると、抗原抗体反応が完了した後、血漿貯留室２４に貯留された余剰試料を用いて未反応の標識抗体４２１を反応室４から廃液室６に移送することができるため、好適である。
【００４０】
（第２の実施形態）
図９に、本発明の第２の実施形態に係る体液成分の分析器具１００について、分解斜視図を示す。以下においては、第１の実施形態との相違点を中心に説明し、対応する箇所には同一の符号を付して説明する。
【００４１】
本実施の形態は、第１の実施形態と同様に、赤血球を溶血した試料をもとに糖化ヘモグロビンを測定するための形態となっている。第１の実施形態との主たる相違点として、第１の実施形態に係る体液成分の分析器具が計５枚のプレートから構成されているのに対して、本実施形態では、第１プレート１１、第２プレート１２および第３プレート１３の、計３枚のプレートから構成されている点が挙げられる。第１プレート１１の構成は第１の実施形態と同様である。第２プレート１２には、第１の実施形態と同様に貫通孔２２、貫通孔から延出する溝３１、溝３１と連通する貫通孔４１、貫通孔４１から延出する溝５１１が設けられているとともに、溝５１１に連通する貫通孔６１が設けられている。また、貫通孔４１と貫通孔６１との間には、溝５１１を閉塞するように閉塞部材５３が設けられている。第３プレート１３には、第１の実施形態と同様に固定化抗体保持部４３が設けられているが、貫通孔は設けられていない。体液成分の分析器具１００が組み立てられたとき、貫通孔４１と第１プレート１１および第３プレート１３とで囲まれた領域が反応室４を画成し、貫通孔６１と第１プレート１１および第３プレート１３とで囲まれた領域が廃液室６を画成する。また、溝３１と第１プレート１１および第３プレート１３とで囲まれた領域が第１の流路３を画成し、溝５１１と第１プレート１１および第３プレート１３とで囲まれた領域が第２の流路５を画成する。なお、固定化抗体保持部４３に配置されている固定化抗体４３１、および標識抗体保持部４３に保持されている標識抗体４２１も、第１の実施形態と同様である。
【００４２】
本実施形態においても、第１の実施形態と同様に閉塞部材５３は第２の流路５を閉塞するよう構成されているが、第１の実施形態に係る体液成分の分析器具１は、第２の流路５が閉塞部材５３を挟んで上下のプレートに分かれて配置されているのに対して、本実施形態に係る体液成分の分析器具１００では、第２の流路５の全体と、閉塞部材５３と、廃液室６とが、１つのプレート（第２プレート１２）内に収められている。
【００４３】
第１プレート１１および第３プレート１３は不通気性でありかつ不通水性の材料が用いられ、少なくとも貫通孔４１と略同心位置にある領域については光透過性を有するよう構成されていることは、第１の実施形態と同様である。また、第２プレート１２には、試料の浸透を防止しつつ廃液室６から空気を逃がすため、不通水性で通気性のある多孔質材が用いられるが、廃液室６に空気孔などを設けることによって、不通気性でありかつ不通水性の材料を適用することも可能である。
【００４４】
本実施の形態に係る体液成分の分析器具１００を用いた分析の手順および器具の作用は、第１の実施の形態と全く同様である。
【符号の説明】
【００４５】
１  体液成分の分析器具
１１  第１プレート
１２  第２プレート
１３  第３プレート
１４  第４プレート
１５  第５プレート
１００  体液成分の分析器具
２  試料供給口
２１  貫通孔
２２  貫通孔
２３  濾過手段
２４  血漿貯留室
２５  供給口保持体
３  第１の流路
３１  溝
４  反応室
４１  貫通孔
４２  標識抗体保持部
４２１  標識抗体
４２２  可溶性保持体
４３  固定化抗体保持部
４３１  固定化抗体
４４  貫通孔
４５  貫通孔
５  第２の流路
５１  上流部
５１１  溝
５１１ａ  端部
５２  保持孔
５３  閉塞部材
５４  下流部
５４１  溝
５４１ａ  端部
６  廃液室
６１  貫通孔
８１  糖化ヘモグロビン
８２  未糖化ヘモグロビン
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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