(57)【要約】【課題】本発明は、腹膜肥厚の抑制・予防または治療を可能にし、かつ副作用が軽減される腹膜肥厚を抑制する肥厚抑制剤または当該肥厚抑制剤を含む透析液を提供することを目的とする。【解決手段】本発明は、  以下の化学式（１）：2010113960.tif 000011（ただし、式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３およびＲ４は同一または異なる水素原子または低級アルキル基を表わし、Ｒ５は水素原子、低級アルキル基または低級アシル基を表わし、Ｘは糖残基中の水酸基の水素原子が低級アルキル基または低級アシル基で置換されていてもよい単糖残基またはオリゴ糖残基を表し、ｎは０〜６の整数であり、およびｍは１〜６の整数である）で表されるクロマノール配糖体を有効成分として含む腹膜肥厚抑制剤またはそれらを含む透析液により上記課題を解決する。【選択図】なし
2010113960.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の化学式（１）：
【化１】
2010113960.tif 000010
（ただし、式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３およびＲ４は同一または異なる水素原子または低級アルキル基を表わし、Ｒ５は水素原子、低級アルキル基または低級アシル基を表わし、Ｘは糖残基中の水酸基の水素原子が低級アルキル基または低級アシル基で置換されていてもよい単糖残基またはオリゴ糖残基を表し、ｎは０〜６の整数であり、およびｍは１〜６の整数である）
で表されるクロマノール配糖体を有効成分として含む腹膜肥厚抑制剤。
【請求項２】
前記クロマノール配糖体は２−（α−Ｄ−グルコピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールである請求項１記載の腹膜肥厚抑制剤。
【請求項３】
浸透圧調節物質と、請求項１または２のいずれかに記載の腹膜肥厚抑制剤とを含む腹膜肥厚を抑制する腹膜透析液。
【請求項４】
請求項１または２に記載の前記腹膜肥厚抑制剤の有効成分であるクロマノール配糖体を０．００５〜０．１５ｇ／ｌの濃度で含む、請求項３に記載の腹膜透析液。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腹膜の肥厚を抑制する腹膜肥厚抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在日本における腎機能の低下または喪失した腎不全で人工透析を受ける患者は、約２２万人ともいわれ、該患者のうち約９５％が血液体外循環回路を用いた血液透析、残る５％が腹膜透析を受けている。血液透析による治療の場合、一般に患者は週３回ほど専門の病院で１回約４時間もかけて体外に引き出した血液から老廃物を取り除く必要があり、時間的制約が大きい。一方、腹膜透析は、腹部に予めカテーテルを埋め込み、胃や腸などの内臓を覆う腹膜に囲まれた腹腔内部に当該カテーテルを介して浸透圧の高い透析液を貯留することで、貯留された透析液と体液との浸透圧差が生じ、腹膜毛細血管から腹腔内の腹膜透析液に生体内の余分な水および老廃物が移動することを利用したものである。そのため、腹膜透析による治療は、血液透析と比較すると血液を体外に引き出すための装置を必要としないため、“クオリティーオブライフ”の観点から患者に対する負担が低い。【０００３】
しかし、腹膜透析を行っている患者には、硬化性被嚢性腹膜炎（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ  ｐｅｒｉｔｉｏｎｅａｌ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ；ＥＰＳ）、腹膜硬化症、または腹膜繊維症などの総称として知られる腹膜肥厚疾患を発症する可能性がある。現在のところ腹膜肥厚の原因は解明されていないが、例えば非特許文献１では、肥厚した腹膜組織において血管の異常や血管数の増加が認められることや、腹膜透析を受けている患者の腹腔内液に血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）が高濃度含まれていることから、血管新生が腹膜肥厚疾患に関与しているのではないかと考え、血管新生を促進する作用を持った増殖因子である血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）を阻害する薬剤であるＴＮＰ−４７０を投与して腹膜肥厚を抑制する研究が報告されている。この研究によると、ＴＮＰ−４７０の投与により血管新生の阻害や筋線維芽細胞の増殖を抑制したことが報告されている。【０００４】
また、非特許文献２では、コラーゲンに特異的な分子シャペロンＨｓｐ４７の発現が腹膜肥厚の原因であり、Ｈｓｐ４７を中皮細胞およびアクチン陽性細胞に発現してＩ型およびＩＩＩ型コラーゲンを産生することが報告されている。さらに、この報告に関連した腹膜肥厚を抑制する発明として、例えば特許文献１がある。特許文献１には、予めラットの腹腔内にグルコン酸クロルヘキシジンでラットを腹腔肥厚させた後、Ｈｓｐ４７を阻害する物質としてオリゴヌクレオチドを腹腔内に投与した旨が記載されている。【０００５】
また、上記コラーゲンの異常産生と血管新生との関係に着目した技術として、例えば特許文献２に示すコラーゲンの産生を抑制する発明がある。当該特許文献２の発明は、上記非特許文献１に示すように、血管新生が腹膜肥厚疾患に関与しているとして血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）を阻害する薬剤を投与することで腹膜肥厚を抑制する以外に、血管新生において基底膜などの細胞外骨格中のコラーゲン合成が、重要な役割をはたすという報告（Ｍａｒａｇｏｕｄａｋｉｓ，  Ｅ．，  Ｓａｒｍｏｎｉｋａ，  Ｍ．，  ａｎｄ  Ｐａｎｏｕｔｓａｃｏｐｏｕｌｏｕｓ，  Ｍ．，  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｅｘｐ．  Ｔｈｅｒ．，  ２４４  ：  ７２９，  １９８８  ；  Ｉｎｇｂｅｒ，  Ｄ．  Ｅ．，  Ｍａｄｒｉ，  Ｊ．  Ａ．，  ａｎｄ  Ｆｏｌｋｍａｎ，  Ｊ．，  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，  １１９  ：  １７６８，  １９８６）を基に、カワラタケ属に属する担子菌由来の糖タンパク質複合体が、病態を示す組織の細胞におけるＨｓｐ４７の合成を特異的に抑制することを確認している。この発明によると、臓器、組織の線維化、硬化が阻止されるだけではなく、Ｉ型コラーゲンとフィブロネクチンを基本骨格とする間質が、癌の転移において離脱した癌細胞が近傍の脈管に侵入するまでのガイド役を果たすことが、明らかとなっているので、癌の転移も抑制することも可能である旨が記載されている。【０００６】
さらに、非特許文献３では、クロルへキシジンの腹膜傷害を抗ウイルス剤であるガンシクロビルの投与により軽快することを報告しており、予めマウスの腹腔内にクロルヘキシジンを投与し腹膜肥厚させた後、２週間後にガンシクロビルを腹腔内に注入すると腹膜肥厚が軽減する旨が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００１−３１５８８号公報
【特許文献２】特開平８−３０１７８４号公報
【非特許文献１】ＴＮＰ−４７０，  ａｎ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｔｈｅ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｍｏｄｅｌ，  Ｙｏｓｈｉｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  ｖｏｌ  ６６，  １６７７−１６８５，  ２００４．
【非特許文献２】Ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅａｔ  ｓｈｏｃｋ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ４７  ｉｎ  ｒａｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ，  Ｍｉｓｈｉｍａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｄｉａｌｙｓｉｓ  ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  ｖｏｌ．２３，  Ｎｏ．１，  Ｊａｎｕａｒｙ  ２００３
【非特許文献３】Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  ｐｒｅｓｅｒｖｅｓ  ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  ｏｆ  ｐｅｒｉｔｏｎｅｕｍ  ｉｎ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｅ  ｗｉｔｈ  ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  ｆｉｂｒｏｓｉｎｇ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ，  Ｏｋａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｋｉｄｎｅｙ  ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，  ｖｏｌ  ６６，  １６７７−１６８５，  ２００４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、従来の研究では腹膜肥厚の原因が解明されていないことに起因して、種々のアプローチで腹膜肥厚を抑制しており、単純に本発明との効果の差異を検証できないが、例えば、非特許文献３では、ガンシクロビルを５０ｍｇ／ｋｇも投与している。通常の腎機能正常者の場合、ガンシクロビルは１２時間ごとに５ｍｇ／ｋｇ投与とされているため、非特許文献３の研究では、腎機能正常者の投与量（５ｍｇ／ｋｇ）の１０倍である。さらに、一般的には、腎不全（透析患者）ではガンシクロビルは４８時間〜９６時間に１回、５ｍｇ／ｋｇ投与と定められているため、明らかに容量のオーバーであることが理解できる。さらに、ガンシクロビルは、好中球減少症・血小板減少症などの副作用を有するため、使用上の制約を受ける。また、非特許文献２でもＴＮＰ−４７０を２０ｍｇ／ｋｇ投与しており、副作用の懸念が残る。【０００９】
また、特許文献１および特許文献２では、所定のオリゴヌクレオチドや糖タンパクを主成分としているためその取り扱いは簡便ではなく、さらに特許文献２では、血管新生における内皮細胞の細胞外骨格への遊走及び増殖により新しい血管が作られる際に、当該細胞外骨格の主成分のＩ型コラーゲンの産生を抑制できるものの、腹膜肥厚を抑制・阻害した結果については開示されていない。【００１０】
そこで、本発明の目的は、腹膜肥厚の抑制・予防または治療を可能にし、かつ副作用が軽減される腹膜肥厚を抑制する肥厚抑制剤または当該肥厚抑制剤を含む透析液を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、上記目的を以下の化学式（１）：【００１２】
【化１】
2010113960.tif 000003
【００１３】
（ただし、式中、Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３およびＲ４は同一または異なる水素原子または低級アルキル基を表わし、Ｒ５は水素原子、低級アルキル基または低級アシル基を表わし、Ｘは糖残基中の水酸基の水素原子が低級アルキル基または低級アシル基で置換されていてもよい単糖残基またはオリゴ糖残基を表し、ｎは０〜６の整数であり、およびｍは１〜６の整数である）
で表わされるクロマノール配糖体を含む腹膜肥厚抑制剤または当該腹膜肥厚抑制剤を有する透析液により達成される。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、副作用が軽減され、かつ腹膜肥厚の抑制・予防または治療を可能にすることができる。また、本発明に係る腹膜肥厚抑制剤または当該腹膜肥厚抑制剤はクロマノール配糖体を有効成分としているため、当該クロマノール配糖体の性質である、極めて高い水溶性（約１００ｇ／１００ｍｌ）、かつ油溶性（オクタノール／水系分配係数＞３）を示す両親媒性分子の特性を発揮することができ、本発明のクロマノール配糖体を含んだ腹膜肥厚抑制剤または当該腹膜肥厚抑制剤は、その取り扱いが簡便であり、かつ従来の水に不溶性あるいは貧溶性の薬剤とは異なり、水に溶解して使用しても高い脂質親和性を保つので、細胞膜を透過しさらに細胞内にも入ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１−Ａ】Ｈ．Ｅ染色したＣＧ群の腹膜
【図１−Ｂ】Ｈ．Ｅ染色したＴＭＧ群の腹膜
【図１−Ｃ】Ｈ．Ｅ染色したコントロール群の腹膜
【図２−Ａ】Ｉ型コラーゲンを染色したＣＧ群の腹膜
【図２−Ｂ】Ｉ型コラーゲンを染色したＴＭＧ群の腹膜
【図２−Ｃ】Ｉ型コラーゲンを染色したコントロール群の腹膜
【図３−Ａ】Ｈｓｐ４７陽性細胞を染色したＣＧ群の腹膜
【図３−Ｂ】Ｈｓｐ４７陽性細胞を染色したＴＭＧ群の腹膜
【図３−Ｃ】Ｈｓｐ４７陽性細胞を染色したコントロール群の腹膜
【発明を実施するための形態】
【００１６】
なお、本出願は、２００９年３月３１日に出願された日本国特許出願第２００９−８５５５７号に基づいており、その開示内容は、参照により全体として引用されている。
【００１７】
本発明の第一は、下記化学式（１）：
【００１８】
【化２】
2010113960.tif 000004
【００１９】
（ただし、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は同一または異なる水素原子または低級アルキル基を表し、Ｒ５は水素原子、低級アルキル基または低級アシル基を表し、Ｘは糖残基中の水酸基の水素原子が低級アルキル基または低級アシル基で置換されていてもよい単糖残基またはオリゴ糖残基を表し、ｎは０〜６の整数であり、およびｍは１〜６の整数である）で表わされるクロマノール配糖体を含む肥厚抑制剤である。
【００２０】
これにより、腹膜肥厚の抑制・予防または治療を可能にすることができ、従来の腹膜透析による問題点の一つである腹膜機能の低下による１０年程度の使用期間を延長させることができる。
【００２１】
例えば、特開２００１−０６６３０６によると、腹膜肥厚発症時の肥厚した腹膜の主要成分はコラーゲン線維であるという知見から、ファイブロネクチンに代表されるコラーゲンに作用する物質の濃度を測定すると、腹膜肥厚の発症状況、進行状況をより的確に把握でき、高い正確性で腹膜肥厚を診断できることが確認されている。このことからも、腹膜肥厚の原因の一つとしてコラーゲンの異常亢進が関与している可能性が高いため、コラーゲンなど細胞外骨格を形成する物質の産生を阻害・抑制すると腹膜肥厚を抑制できるものと考えられる。そこで、上記特許文献１および非特許文献２などに示すように、Ｈｓｐ４７は、細胞内で小胞体内でのプロコラーゲンのプロセシング、三重鎖ヘリックス形成、あるいは小胞体からゴルジ装置へのプロコラーゲン輸送・分泌という局面で、コラーゲンの特異的分子シャペロンとして機能しているとされているので、増大したＨｓｐ４７発現は、細胞外骨格におけるコラーゲン分子の蓄積を刺激する。そのため、後述する実施例において、壁側腹膜に対するＩ型コラーゲンの占める割合と、Ｈｓｐ４７陽性細胞とを測定することで、本発明に係る肥厚抑制剤の効果を確認している。その結果、後述する実施例で示すように、本発明に係る肥厚抑制剤により、Ｉ型コラーゲンの産生および／またはＨｓｐ４７陽性細胞を抑制・阻害することができる。
【００２２】
本発明に係るクロマノール配糖体の上記化学式（１）において、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の低級アルキル基としては、炭素原子数が１〜８、好ましくは１〜６の低級アルキル基がよく、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基等が挙げられる。これらの中では、メチル基またはエチル基が好ましい。また、Ｒ５の低級アシル基としては、炭素原子数が１〜８、好ましくは１〜６の低級アシル基がよく、例えば、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、ヘキサノイル基、ヘプタノイル基、オクタノイル等が挙げられる。これらの中では、アセチル基、プロピオニル基またはブチリル基が好ましい。また、Ｘの単糖残基としては、グルコース、ガラクトース、フコース、キシロース、マンノース、ラムノース、フルクトース、アラビノース、リキソース、リボース、アロース、アルトロース、イドース、タロース、デオキシリボース、２−デオキシリボース、キノボース、アベクオース等の糖残基が挙げられる。Ｘのオリゴ糖残基としては、上記単糖が２〜４個結合したもの、例えばマルトース、ラクトース、セロビオース、ラフィノース、キシロビオース、スクロースの糖残基等が挙げられる。これらの中ではグルコース、ガラクトース、フコース、キシロース、ラムノース、マンノース、フルクトース等の単糖残基が好ましい。また、Ｘの糖残基中の水酸基の水素原子は低級アルキル基、好ましくは炭素原子数が１〜８の低級アルキル基、または低級アシル基、好ましくは炭素原子数が１〜１０の低級アシル基で置換されていてもよい。さらに、ｎは０〜６、好ましくは１〜４の整数であり、ｍは１〜６、好ましくは１〜３の整数である。
【００２３】
本発明に係る化学式（１）で表されるクロマノール配糖体は、上記化学式（１）で表わされる化合物であれば特に制限されないが、具体的には、２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）エチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）プロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）イソプロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）ブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）イソブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）ペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）イソペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）ヘキシル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）ヘプチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−グルコピラノシル）オクチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）エチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）プロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）イソプロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）ブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）イソブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）ペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）イソペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）ヘキシル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）ヘプチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−ガラクトピラノシル）オクチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）エチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）プロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）イソプロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）ブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）イソブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）ペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）イソペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）ヘキシル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）ヘプチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−フコピラノシル）オクチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）エチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）プロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）イソプロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）ブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）イソブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）ペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）イソペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）ヘキシル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）ヘプチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−キシロピラノシル）オクチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）エチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）プロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）イソプロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）ブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）イソブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）ペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）イソペンチル−２，５，７，８−テ��ラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）ヘキシル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）ヘプチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｌ−ラムノピラノシル）オクチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）エチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）プロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）イソプロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）ブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）イソブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）ペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）イソペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）ヘキシル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）ヘプチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−マンノピラノシル）オクチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）エチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）プロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）イソプロピル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）ブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）イソブチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）ペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）イソペンチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）ヘキシル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）ヘプチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール；および２−（（αまたはβ）−Ｄ−フルクトフラノシル）オクチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールが挙げられる。
【００２４】
本発明に係るクロマノール配糖体は、公知の方法で合成しても市販のものを購入してもよく特に制限されることはなく、例えば特開平７−１１８２８７号公報に記載の方法により、本発明に係るクロマノール配糖体を合成する場合、下記化学式（２）：
【００２５】
【化３】
2010113960.tif 000005
【００２６】
（ただし、式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びｎは前記と同義である）で表される２−置換アルコール及びオリゴ糖類、可溶性澱粉、澱粉またはシクロデキストリンを相当する糖転位作用を触媒する酵素の存在下に反応させ、２−置換アルコールの２位の水酸基に対して特異的に糖の特定の水酸基を結合させることからなる酵素反応によって製造される（酵素法）。
【００２７】
上記反応において原料として用いられる化学式（２）で表される２−置換アルコール（以下、単に「２−置換アルコール」という）は公知の物質であり、例えば、特公平１−４３７５５号公報や特公平１−４９１３５号公報等に開示された方法により得ることができる。また、例えば、化学式（２）中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４がメチル基、Ｒ５が水素原子であり、ｎが１である２−置換アルコールの場合には、トロロックスを水素化リチウムアルミニウムの存在下においてジエチルエーテル中で加熱還流処理すること等により容易に得ることができる。
【００２８】
また、上記反応において使用される糖転位作用を触媒する酵素は、当該反応に用いる糖の種類によって以下のように使い分けることが好ましい。
（１）２−置換アルコールにα−結合でグルコース残基を結合させる場合：（ａ）マルトースからマルトテトラオース位のマルトオリゴ糖に対してはα−グルコシダーゼ（α−ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．２０）を作用させることが望ましい。α−グルコシダーゼとしては、ほぼ全ての起源由来のものを用いることができ、具体的には、東洋紡績株式会社製のサッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．）由来のα−グルコシダーゼ、オリエンタル酵母工業株式会社製のサッカロマイセス セロビイシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）由来のα−グルコシダーゼ、天野製薬株式会社製のアスペルギルス ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）由来のα−グルコシダーゼ、和光純薬工業株式会社製のサッカロマイセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｓｅｓ ｓｐ．）由来のα−グルコシダーゼ、シグマ（ＳＩＧＭＡ）製のベーカー イースト（Ｂａｋｅｒｓ ｙｅａｓｔ）由来のα−グルコシダーゼ、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）由来のα−グルコシダーゼ等が挙げられる。
（ｂ）可溶性澱粉または澱粉に対しては４−α−グルカノトランスフェラーゼ（４−α−Ｄ−ｇｌｕｃａｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＣ２．４．１．２５）を作用させることが望ましい。
（２）２−置換アルコールにα−結合でグルコース残基またはマルトオリゴ糖残基を結合させる場合：マルトオリゴ糖、可溶性澱粉、澱粉またはシクロデキストリン（α、β、γ）などに対してはシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ（ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ  ｇｌｕｃａｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＣ２．４．１．１９）を作用させることが望ましい。代表的な例としては、天野製薬株式会社製のバチルス  マセランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍａｃｅｒａｎｓ）由来のシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ、株式会社林原生物化学研究所製のバチルス  ステアロサーモフィラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）由来のシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ、その他にはバチルス  メガテリウム（Ｂａｃｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス  サーキュランス  ＡＴＣＣ  ９９９５（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｉｒｃｕｌａｎｓ  ＡＴＣＣ  ９９９５）由来のシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼなどが挙げられる。
（３）２−置換アルコールにβ−結合でグルコース残基を結合させる場合：（ａ）セロビオース、カードランまたはラミナランなどのβ−結合よりなるオリゴ糖に対してはβ−グルコシダーゼ（β−ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．２１）を作用させることが望ましい。
（ｂ）リン酸存在下のセロビオースに対してはセロビオース  ホスホリラーゼ（ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ，ＥＣ２．４．１．２０）を作用させることが望ましい。
（４）２−置換アルコールにα−結合でガラクトース残基を結合させる場合：（ａ）メリビオースまたはラフィノースなどに対してはα−ガラクトシダーゼ（α−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．２２）を作用させることが望ましい。
（５）２−置換アルコールにβ−結合でガラクトース残基を結合させる場合：（ａ）ラクトースなどに対してはβ−ガラクトシダーゼ（β−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．２３）を作用させることが望ましい。
（ｂ）アラビノガラクタンなどに対してはエンド−１，４−β−ガラクタナーゼ（Ｅｎｄｏ−１，４−β−ｇａｌａｃｔａｎａｓｅ，ＥＣ３．２．１．８９）を作用させることが望ましい。
（６）２−置換アルコールにβ−結合でフルクトース残基を結合させる場合：（ａ）ショ糖、ラフィノースまたはメリビオースなどに対してはレバンシュークラーゼ（ｌｅｖａｎｓｕｃｒａｓｅ，ＥＣ２．４．１．１０）を作用させることが望ましい。
（ｂ）ショ糖に対してはβ−フルクトフラノシダーゼ（β−ｆｒｕｃｔｏｆｕｒａｎｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ３．２．１．２６）を作用させることが望ましい。
（ｃ）イヌリンなどに対してはイヌリンフルクトトランスフェラーゼ（ｉｎｕｌｉｎ  ｆｒｕｃｔｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＥＣ２．４．１．９３）を作用させることが望ましい。
（７）２−置換アルコールにα結合でマンノース残基を結合させる場合（ａ）メチルマンノピラノシドなどに対してはα−マンノシダーゼ（α−ｍａｎｎｏｓｉｄａｓｅ，ＥＣ ３．２．１．２４）、例えば、シグマ（ＳＩＧＭＡ）社製のジャック ビーンズ（Ｊａｃｋ Ｂｅａｎｓ）由来のα−マンノシダーゼを作用させることが望ましい。
【００２９】
上記反応における反応条件は、使用するクロマノール配糖体や酵素の種類によって異なるが、例えば、化学式（１）中のｍが１であるクロマノール配糖体をα−グルコシダーゼを用いて合成する場合には、２−置換アルコールを糖溶液に溶解させることが望ましい。そのためには有機溶媒の添加が望ましく、例えば、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、メタノール、エタノール、アセトン、及びアセトニトリルなどが挙げられ、α−グルコシダーゼの転移活性を高める点を考慮すると、ジメチルスルホキシドやＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドが好ましく使用される。有機溶媒の添加濃度は、１〜５０（ｖ／ｖ）％であり、反応効率を考えると５〜３５（ｖ／ｖ）％であることが好ましい。
【００３０】
２−置換アルコールの濃度は、反応液中において飽和濃度若しくはそれに近い濃度にすることが望ましい。用いる糖の種類はマルトースからマルトテトラオース位の低分子のものが良く、好ましくはマルトースである。糖の濃度は１〜７０（ｗ／ｖ）％、好ましくは３０〜６０（ｗ／ｖ）％である。ｐＨは４．５〜７．５、好ましくは５．０〜６．５である。反応温度は１０〜７０℃、好ましくは３０〜６０℃である。反応時間は１〜４０時間、好ましくは２〜２４時間である。但し、これらの条件は使用する酵素量等により影響をうけることはいうまでもない。反応終了後、反応液をＸＡＤ（オルガノ株式会社）を担体として用いたカラムクロマトグラフィーで処理することにより、目的とするクロマノール配糖体が高純度で得られる。
【００３１】
また、例えば、化学式（１）中のｍが１であるクロマノール配糖体をシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼを用いて合成する場合の反応条件としては、２−置換アルコールを糖溶液に溶解させることが望ましい。そのためには有機溶媒の添加が望ましく、ジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、メタノール、エタノール、アセトン及びアセトニトリルなどが挙げられる。添加する有機溶媒の濃度は１〜５０（ｖ／ｖ）％、好ましくは反応効率を考えると５〜３５（ｖ／ｖ）％である。２−置換アルコールの濃度は反応液中において、飽和濃度もしくはそれに近い高い濃度にすることが望ましい。
【００３２】
上記反応において用いられる糖の種類としては、マルトトリオース以上の重合度を持つマルトオリゴ糖、可溶性澱粉、澱粉およびシクロデキストリン（α、β、γ）などが好ましく挙げられる。糖の濃度は１〜７０（ｗ／ｖ）％、好ましくは５〜５０（ｗ／ｖ）％である。ｐＨは４．５〜８．５、好ましくは５．０〜７．５である。反応温度は１０〜７０℃、好ましくは３０〜６０℃である。反応時間は１〜６０時間、好ましくは２〜５０時間である。但し、これらの条件は使用する酵素量により影響を受ける。このような反応により得られたクロマノール配糖体はｍの数が１から８位の混合物となる。そこで、この混合物をグルコアミラーゼ（ＥＣ３．２．１．３）を用いて処理することによって、化学式（１）中のｍが１であるクロマノール配糖体だけを得ることができる。この際の反応温度は２０〜７０℃、好ましくは３０〜６０℃であり、反応時間は０．１〜４０時間、好ましくは１〜２４時間である。但し、これらの条件は使用する酵素の量により影響を受ける。次に、上記グルコアミラーゼ処理後の液を、ＸＡＤ（オルガノ株式会社）を担体として用いたカラムクロマトグラフィー処理することにより、化学式（１）中のｍが１であるクロマノール配糖体が高純度で得られる。
【００３３】
化学式（１）中のｍが２であるクロマノール配糖体を得る場合には、上記と同様の条件下で、シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼによって得られる化学式（１）におけるｍが１から８位の混合物の形態を有するクロマノール配糖体にβ−アミラーゼ（ＥＣ３．２．１．２）を作用させることにより、化学式（１）におけるｍが１または２であるクロマノール配糖体のみが得られる。この時の反応温度は２０〜７０℃、好ましくは３０〜６０℃であり、反応時間は０．１〜４０時間、好ましくは１〜２４時間である。但し、これらの条件は使用する酵素量により影響を受ける。β−アミラーゼ処理後の液は、ＸＡＤ（オルガノ株式会社）を担体として用いたカラムクロマトグラフィー処理により、化学式（１）におけるｍが２であるクロマノール配糖体が高純度で得られると同時に、化学式（１）におけるｍが１であるクロマノール配糖体も得られる。
【００３４】
化学式（１）におけるｍが３以上であるクロマノール配糖体を得る場合には、上記と同様の条件下で、シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼによって得られる化学式（１）におけるｍが１から８位の混合物の形態を有するクロマノール配糖体を、ＨＰＬＣを用いた分取クロマトグラフィーなどで処理することにより、高純度のクロマノール配糖体が各ｍ毎に得ることができる。
【００３５】
上記実施態様では２−置換アルコールにグルコース残基やマルトオリゴ糖残基を糖残基として結合させる場合の態様を記載したが、ガラクトース残基、β−グルコース残基、マンノース残基、フルクトース残基等を糖残基として２−置換アルコールに結合させることによる態様も本発明では好ましく使用できる。このような態様においては、上記糖転位作用を触媒する酵素の項において説明した適切な酵素をそれぞれ使用する以外は上記実施態様と同様の操作を行うことによって、目的とするクロマノール配糖体が高純度で得られる（特開平９−２４９６８８号公報、特願平１１−２１２９１号）。
【００３６】
一方、本発明に用いられるクロマノール配糖体は、特開平１１−２７９１９２号公報に記載の方法により、前記２−置換アルコールの６位の水酸基を保護基で保護したもの（以下「糖受容体」という）とアノマー位に脱離基を導入し他の水酸基を保護基で保護した糖の誘導体（以下、「糖供与体」という）とを縮合反応させることによっても製造できる（有機合成法）。
【００３７】
上記反応において使用される糖受容体の６位の水酸基を保護する保護基としては、アセチル基、ベンゾイル基、ビバロイル基、クロロアセチル基、レブリノイル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、アリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基、トリメチルシリル基およびトリチル基等が挙げられ、特にアセチル基およびベンゾイル基が好ましい。
【００３８】
上記反応において使用される糖供与体のアノマー位に導入される脱離基としては、塩素、臭素やフッ素等のハロゲン原子、チオメチル基、チオエチル基やチオフェニル基等の硫黄化合物およびトリクロロアセトイミド基などが挙げられ、特に臭素、塩素、チオメチル基、チオエチル基、チオフェニル基およびトリクロロアセトイミド基が好ましい。また、アノマー位以外の水酸基を保護する保護基としては、アセチル基、ベンゾイル基、ピバロイル基、クロロアセチル基及びレブリノイル基等のアシル系保護基、およびベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、アリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、ｔ−ブチルジフェニルシリル基、トリメチルシリル基及びトリチル基等のエーテル系保護基が挙げられ、中でもアシル系保護基、特にアセチル基が好ましい。
【００３９】
これらの糖供与体は、周知の方法により糖の全ての水酸基へ保護基を導入し、次いでアノマー位を脱離基に置換することにより容易に調製することができる。
【００４０】
上記糖受容体と糖供与体の縮合反応について示せば、まず、糖受容体と糖供与体を非極性溶媒に溶解する。糖受容体と糖供与体の仕込量は、糖受容体に対する糖供与体のモル比が１．０〜１．５、好ましくは１．１〜１．３がよい。非極性溶媒としては、塩化メチレン、ベンゼン等が挙げられる。
【００４１】
次に、無水条件下で活性化剤の存在下で糖供与体及び糖受容体の縮合反応を行う。活性化剤としては、三フッ化ホウ酸・エーテル錯体、過塩素酸銀、トリフルオロメタンスルホン酸銀、臭化水銀、シアン化水銀、Ｎ−ヨードコハク酸イミド−トリフルオロメタンスルホン酸、ジメチルメチルチオスルホニウムトリフラート、ｐ−トルエンスルホン酸等が挙げられ、特に、臭素を糖誘導体の脱離基として使用した場合には過塩素酸銀等の重金属塩を使用することが好ましい。反応温度は５〜３０℃、好ましくは１０〜２５℃がよく、反応時間は１２〜４８時間、好ましくは２０〜３０時間がよい。
【００４２】
次いで得られた反応物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー等で精製し、保護基を水酸化ナトリウムおよびメタノール性塩酸等で脱保護することにより、２−（β−Ｌ−フコピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール、２−（α−Ｌ−ラムノピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール、２−（β−Ｄ−キシロピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オール等を得ることができる（特開平１１−２７９１９２）。
【００４３】
このようにして得られたクロマノール配糖体は、一般的に、高い水溶性を有しかつ油溶性にも富むので、細胞膜近傍に局在化したり、また、細胞膜を透過し、さらに細胞内にも入ることができる。
【００４４】
本発明に係る腹膜肥厚抑制剤は、有効成分として上記化学式（１）に示されるクロマノール配糖体のみでも、他の成分を含有してもよく、当該他の成分としては、製剤上必要なものが挙げられ、製薬の分野で用いられる薬学的に受容可能なキャリア、緩衝剤、保存剤、酸化防止剤、香味料、着色料、甘味料などの添加剤も適宜使用できる。当該薬学的に受容可能なキャリアとしては、ラクトース、デキストリン、スクロース、マンニトール、コーンスターチ、ソルビトールなどの賦形剤、結晶セルロース、ポリビニルピロリドンなどの補助剤が挙げられ、これらを単独または適宜組み合わせて使用することができる。また、これらの賦形剤、補助剤、または添加剤の含有量は、当業者によって適切に決定され得る。あるいは、この製剤は、腹膜肥厚抑制作用を阻害しない他の薬効成分を含んでいてもよい。
【００４５】
本発明の腹膜肥厚抑制剤は、有効成分である化学式（１）で表される化合物に、生理的に無害な固体または液体の製剤担体を配合した種々の医薬組成物として使用することができる。この医薬組成物は、投与方法に応じた各種の製剤形態に調製され使用される。製剤形態としては、錠剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、水剤、シロップ剤、懸濁剤、乳濁剤または注射剤が挙げられる。製剤担体として、通常用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、被覆剤、溶解補助剤、乳化剤、懸濁化剤、安定化剤または溶剤を使用することができる。
【００４６】
また、本発明に係る化学式（１）で示される化合物ならびに上記に述べた医薬組成物は、経口投与、静注などの非経口投与、徐放性製剤による徐放性投与または局所投与カテーテルなどによる局所投与により使用することができる。
【００４７】
さらに、本発明に係る化学式（１）で表される化合物の実際の投与量は、患者の年齢、症状の重篤度、投与経路などに依存し、一般に許容される有効な一日用量は成人に対し、例えば１０〜１０００ｍｇであり、好ましくは２０〜６００ｍｇである。このような用量を治療を必要とする患者に一日につき１回〜５回に分けて投与することが好ましい。
【００４８】
本発明に係る腹膜肥厚を抑制する腹膜透析液は、上記化学式（１）で示されるクロマノール配糖体と、浸透圧調整剤とを含むことが好ましい。
【００４９】
これにより、副作用が軽減され、かつ腹膜肥厚の抑制・予防または治療を可能にすることができる。
【００５０】
現在腹膜肥厚疾患の原因の一つとしては、腹膜表面の中皮細胞が酸性透析液やグルコースなど糖類の終末糖下産物等といった外部刺激を受けて、コラーゲンなど細胞外骨格を形成する物質を産生することに起因して、線維芽細胞などが増殖したり、腹膜のコラーゲン層が厚くなるのではとも考えられている。しかしながら、上記の説明のように、未だ腹膜肥厚の原因は解明されていないため、後段の実施例で示すように、本発明に係るクロマノール配糖体を透析液に添加することで腹膜肥厚を抑制しているが、実際にどのような機構で腹膜肥厚を抑制しているのかは定かではないが、酸性透析液やグルコースなど糖類の終末糖化産物等といった外部刺激を軽減したり、またはコラーゲン産生や線維芽細胞などの増殖を抑制しているものと考えられる。
【００５１】
本発明に係る腹膜透析液は、上記化学式（１）で示されるクロマノール配糖体を、０．００１〜０．３ｇ／ｌの濃度で含むことが好ましく、０．００２〜０．２ｇ／ｌの濃度で含むことがより好ましく、０．００５〜０．１５ｇ／ｌの濃度で含むことがさらに好ましい。  上記クロマノール配糖体の濃度が０．００１ｇ／ｌ未満だと効果が期待できず。０．３ｇ／ｌ超だと濃度に見合った効果が期待できない。
【００５２】
本発明に係る浸透圧調節物質は、生体に安全な浸透圧調節物質であれば特に制限されることはなく、例えば、糖類、ペプチド、アミノ酸などが挙げられるが、糖類が好ましい。当該糖類としては、グルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトースなどの単糖類、スクロース、マルトース、ラクトース、トレハロースなどの二糖類、グリコーゲン、マルトオリゴ糖、イソマルトオリゴ糖、オリゴグリコシルスクロース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖などの多糖類、マルチトール、エリスリトール、キシリトールなどの糖アルコールなど、およびこれらの誘導体が挙げられる。これらのなかでも、グルコースおよびグルコース誘導体が好ましい。また、当該グルコース誘導体は、グルコースを化学修飾したものでも、グルコースを基本単位とする多糖類でもよい。さらにより好ましくは、D-グルコースである。
【００５３】
また、本発明に係る浸透圧調節物質としてアミノ酸を、グルコースに代えて、またはグルコースとともに含む透析液も挙げられる。たとえば、特許第３４８３８８５号に提案されたアミノ酸の特定組成混合物：メチオニンが総溶液１００ｍＬ当たり４８ｍｇ以下で、フェニルアラニン／チロシン比が約１．３〜約３．０であり、そして塩基性アミノ酸／酸性アミノ酸比が約１〜約２．２である、ロイシン、バリン、スレオニン、イソロイシン、リジン、ヒスチジン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、アラニン、プロリン、アルギニン、グリシン、セリン、チロシン、アスパラギン酸塩、およびグルタミン酸塩のアミノ酸混合物を１．６ｗ／ｖ％以下の濃度で含む透析液を使用することもできる。
【００５４】
本発明に係る腹膜透析液は、上記浸透圧調節物質を、２〜３５ｇ／ｌの濃度で含むことが好ましく、５〜３０ｇ／ｌの濃度で含むことがより好ましく、１０〜２５ｇ／ｌの濃度で含むことがさらに好ましい。
【００５５】
本発明に係る腹膜透析液の浸透圧は、３００〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇが好ましく、３３０〜４９０ｍＯｓｍ／ｋｇがより好ましい。
【００５６】
上記浸透圧調節物質および浸透圧は患者の体液の過剰な量によって、上記の範囲内で使うことが好ましい。
【００５７】
本発明に係る腹膜透析液は、必要に応じてさらに他の成分を含有していてもよく、例えば、電解質（ナトリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、クロルイオンなど）を含むことができる。上記電解質を腹膜透析液に添加する場合には、下記組成例の範囲に入るように添加することが好ましい。
【００５８】
また、本発明に係る腹膜透析液は、酸性透析液でも中性透析液でもよく、本発明に係る腹膜透析液のｐＨは、４〜８が好ましく、４．５〜７．５がより好ましい。
【００５９】
本発明に係る腹膜透析液の電気的中性を保つために、乳酸イオン、重炭酸イオンなどのアルカリ化剤などを含むこともできる。また、たとえば総カチオンとクロルイオンとの濃度差に応じて有機酸などを含有することができる。このような有機酸としては、たとえばプロピオン酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、オキサル酢酸、Ｎ−アセチルグリシン、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン、グルタル酸、グルクロン酸、アスコルビン酸、クエン酸、イソクエン酸、グルコン酸、Ｎ−アセチル−Ｌ−アスパラギン酸、Ｎ−アセチル−Ｌ−グルタミン酸、Ｎ−アセチル−Ｌ−メチオニン、Ｎ−アセチル−Ｌ−プロリン、Ｎ−アセチル−Ｌ−バリン、Ｎ−アセチル−Ｌ−グルタミン、Ｎ−アセチル−Ｌ−アルギニン、Ｎ−アセチル−Ｌ−ヒスチジン、Ｎ−アセチル−Ｌ−ロイシン、Ｎ−アセチル−Ｌ−トリプトファン、およびこれらの塩などが挙げられる。上記アルカリ化剤や有機酸を腹膜透析液に添加する場合には、下記組成例の範囲に入るように添加することが好ましい。
【００６０】
本発明に係る腹膜透析液の調製方法は特に限定されず、たとえば塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、乳酸ナトリウム、カルシウム塩、マグネシウム塩、重炭酸ナトリウムなどのカチオンおよびクロルイオン源、酸成分などを水に溶解する一般的な腹膜透析液と同様に調製することができる。また、各溶質を溶解して調製された腹膜透析液は、軟質プラスチック製バッグあるいはガラス製容器などに封入した後、高圧蒸気滅菌や熱水滅菌を行うことが望ましい。
【００６１】
本発明に係る腹膜透析液の組成例（溶媒が水の場合）：
ナトリウムイオン（Ｎａ＋）：１３０〜１３５ｍＥｑ／Ｌ、
カルシウムイオン（Ｃａ２＋）：２〜４ｍＥｑ／Ｌ、
マグネシウムイオン（Ｍｇ２＋）：０．４〜０．６ｍＥｑ／Ｌ、
クロルイオン（Ｃｌ−）：９４〜９７ｍＥｑ／Ｌ、
グルコース：１２〜４０ｇ／ｌ、クロマノール：０．０１〜０．１ｇ／ｌおよび乳酸イオンを含むアルカリ化剤：３５〜４５ｍＥｑ／Ｌである。
【実施例】
【００６２】
本発明を以下の実施例および比較例を用い説明する。ただし、本発明の技術的範囲が以下の実施例のみに限定されない。また、以下の実施例において、組織の長さの測定、％Ａｒｅａの測定、細胞数カウントは画像解析ソフトＩｍａｇｅ  Ｊ（参考文献：羊土社  画像解析テキスト  ＮＩＨ  Ｉｍａｇｅ，  Ｓｃｉｏｎ  Ｉｍａｇｅ，  Ｉｍａｇｅ  Ｊ  実践講座  改訂第３版）を用いて行った。
「実施例１」
＜クロルヘキシジン惹起性腹膜肥厚モデルの作製＞
マウス（Ｃ５７／ＢＬ６、オス、生後７週、重量２１±１ｇ）の腹腔内にクロルヘキシジンを投与することにより、腹膜肥厚モデルを作製した（Ｊｕｎｏｒ  ＢＪＲ，  Ｂｒｉｇｇｓ  ＪＤ，  Ｆｏｒｗｅｌｌ  ＭＡ，  Ｄｏｂｂｉｅ  ＪＷ，  Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ  Ｉ  ：Ｓｃｌｅｒｏｓｉｎｇ  ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ−Ｔｈｅ  ｃｏｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｈｌｏｒｈｅｘｉｄｉｎｅ  ｉｎ  ａｌｃｏｈｏｌ．  Ｐｅｒｉｔ  Ｄｉａｌ  Ｂｕｌｌ  １０１−１０４，  １９８５）。具体的には。このマウスをＣＧ群（５匹）と、コントロール群（４匹）と、ＴＭＧ群（５匹）とに分けて、各群に対して以下のような操作を行った。
（ＣＧ群）
０．１％クロルヘキシジン／１５％エタノール／生理食塩水の溶液０．２ｍｌを週３回マウスの腹腔内に投与した。
（コントロール群）
１５％エタノール／生理食塩水の溶液０．２ｍｌを週３回マウスの腹腔内に投与した。
（ＴＭＧ群）
０．１％クロルヘキシジン／１５％エタノール／生理食塩水の溶液にＴＭＧ（＝２−（α−Ｄ−グルコピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールの略語であり）を１５ｍｇ／ｌの濃度で加えた溶液０．２ｍｌを週３回マウスの腹腔内に投与した。各群に対して上記の操作を行った後、全てのマウスを２２日後に部検した。【００６３】
なお、ＴＭＧは、２−（α−Ｄ−グルコピラノシル）メチル−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−６−オールの略語であり、以下の化学式の（３）で示される。【００６４】
【化４】
2010113960.tif 000006
【００６５】
＜腹膜組織切片の作製＞
マウスをエーテル麻酔した後、脱血死させ、左側腹部より腹膜を採取した。腹膜の採取部位は各マウスで同じ場所になるようにした。次に、得られた腹膜を１０％ホルマリン／０．１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）で固定した後、パラフィンで包埋し、２〜３μｍの厚さの組織切片を作成した。これらの切片は、腹膜の厚さが測定できるように腹膜に対して垂直方向に作成した。
「実施例２」
＜腹膜肥厚に対する効果＞
実施例１で作製した腹膜組織切片をＨ．Ｅ染色した結果を、図１−Ａ、図１−Ｂ、および図１−Ｃに示す。また、腹膜の厚さを測定した。１匹につき無作為に１０箇所測定し、その平均値を求めた。その結果を下記の表１に示す。【００６６】
【表１】
2010113960.tif 000007
【００６７】
図１−Ａ〜図１−Ｃおよび表１の結果から、ＣＧ投与にて引き起こされる腹膜の肥厚は、ＴＭＧの投与で抑制されていることが確認できる。
「実施例３」
＜Ｉ型コラーゲンに対する効果＞
実施例１で作製した腹膜組織切片をＩ型コラーゲンに対するポリクローナル抗体ＲＡＢＢＩＴ  ＡＮＴＩ  ＭＯＵＳＥ  ＣＯＬＬＡＧＥＮ  Ｉ（ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  ＩｇＧ）（ＡｂＤ  ｓｅｒｏｔｅｃ；  ＵＫ  ）により免疫染色した結果を、図２−Ａ、図２−Ｂ、および図２−Ｃに示す。抗体の賦活はオートクレーブにて行い、２５０倍に希釈したものを免疫染色に使用した。４００倍視野において、１匹につき無作為に１０ヶ所、壁側腹膜に対するＩ型コラーゲンの占める割合を測定し、その平均値をだした。その結果を下記の表２に示す。【００６８】
【表２】
2010113960.tif 000008
【００６９】
図２−Ａ〜図２−Ｃおよび表２の結果から、ＣＧ投与にて引き起こされるＩ型コラーゲンの産生は、ＴＭＧの投与で抑制されていることが確認できる。
「実施例４」
＜Ｈｓｐ４７陽性細胞の抑制効果＞
実施例１で作製した腹膜組織切片をＨｅａｔ  ｓｈｏｃｋ  ｐｒｏｔｅｉｎ４７（Ｈｓｐ）に対するポリクローナル抗体Ｈｓｐ４７  Ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ（ＢＩＯＶＩＳＩＯＮ：  ＵＳＡ）で免疫染色した結果を、図３−Ａ、図３−Ｂ、および図３−Ｃに示す。抗体の賦活はオートクレーブにて行い、２０倍に希釈したものを免疫染色に使用した。４００倍視野において、１匹につき無作為に１０ヶ所、Ｈｓｐ４７陽性細胞を測定し、その平均値をだした。その結果を下記の表３に示す。【００７０】
【表３】
2010113960.tif 000009
【００７１】
図３−Ａ〜図３−Ｃおよび表３の結果から、ＣＧ投与にて引き起こされるＨｓｐ４７陽性細胞の増加は、ＴＭＧの投与で抑制されていることが確認できる。
【図１−Ａ】
2010113960.tif 000012
【図１−Ｂ】
2010113960.tif 000013
【図１−Ｃ】
2010113960.tif 000014
【図２−Ａ】
2010113960.tif 000015
【図２−Ｂ】
2010113960.tif 000016
【図２−Ｃ】
2010113960.tif 000017
【図３−Ａ】
2010113960.tif 000018
【図３−Ｂ】
2010113960.tif 000019
【図３−Ｃ】
2010113960.tif 000020
【国際調査報告】
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2010113960.tif 000022
2010113960.tif 000023
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