(57)【要約】  新規な医薬組成物、飲食物及びこれらに関する方法を提供する。  本発明に係る医薬組成物は、下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質を有効成分として含有することを特徴とする医薬組成物；（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質、である。すなわち、本発明に係る医薬組成物は、例えば、配列表１に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質、配列表５に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質又はこれらがその脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を損なわない範囲で変異したタンパク質を有効成分として含有する。
2010140531.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質；
（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、
（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質、
を有効成分として含有する
ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
前記（Ｉ）のタンパク質を有効成分として含有する
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項３】
前記（Ｉ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質である
ことを特徴とする請求項２に記載された医薬組成物。
【請求項４】
前記（Ｉ）のタンパク質は、動物のマクロファージアポトーシスインヒビターである
ことを特徴とする請求項２に記載された医薬組成物。
【請求項５】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項４に記載された医薬組成物。
【請求項６】
前記（ＩＩ）のタンパク質を有効成分として含有する
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項７】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項８】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項７に記載された医薬組成物。
【請求項９】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表２に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表３に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表４に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１０】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項９に記載された医薬組成物。
【請求項１１】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表２に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項１０に記載された医薬組成物。
【請求項１２】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項９に記載された医薬組成物。
【請求項１３】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１４】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項１３に記載された医薬組成物。
【請求項１５】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、下記の（ｘ１）、（ｘ２）又は（ｘ３）のタンパク質；
（ｘ１）配列表２に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｘ２）配列表３に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｘ３）配列表４に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、
であって、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１６】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１７】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項１６に記載された医薬組成物。
【請求項１８】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項１６に記載された医薬組成物。
【請求項１９】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項１８に記載された医薬組成物。
【請求項２０】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、ＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインを有する動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項２１】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２２】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２３】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２２に記載された医薬組成物。
【請求項２４】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２５】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２４に記載された医薬組成物。
【請求項２６】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２７】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、ＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインを有する動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項２８】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２７に記載された医薬組成物。
【請求項２９】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２７に記載された医薬組成物。
【請求項３０】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、下記の（ｐ１）、（ｐ２）又は（ｐ３）のタンパク質；
（ｐ１）動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｐ２）動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｐ３）動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、
であって、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項３１】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項３０に記載された医薬組成物。
【請求項３２】
ヒトに投与される医薬組成物である
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項３３】
動物に投与される医薬組成物である
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項３４】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項３３に記載された医薬組成物。
【請求項３５】
請求項１乃至３４のいずれかに記載された前記（Ｉ）のタンパク質又は前記（ＩＩ）のタンパク質であって、医薬組成物の有効成分としての使用のためのタンパク質。
【請求項３６】
請求項１乃至３４のいずれかに記載された医薬組成物を製造する
ことを特徴とする方法。
【請求項３７】
請求項１乃至３４のいずれかに記載された医薬組成物を生体に投与する
ことを特徴とする方法。
【請求項３８】
前記生体はヒトである
ことを特徴とする請求項３７に記載された方法。
【請求項３９】
前記生体は動物である
ことを特徴とする請求項３７に記載された方法。
【請求項４０】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項３９に記載された方法。
【請求項４１】
下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質を含有することを特徴とする飲食物；
（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、
（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質。
【請求項４２】
請求項４１に記載された飲食物を製造する
ことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬組成物、飲食物及びこれらに関する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、様々な抗肥満薬の開発が進められている。例えば、脂肪酸合成酵素（ＦＡＳ）の阻害剤は、視床下部におけるニューロペプチドＹ（ＮＰＹ)の産生量を低減させることにより、顕著な食欲の減退を引き起こし、結果として、体重や脂肪量の減少をもたらすことが報告されている（例えば、非特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Loftus, T.M. et al. Science 288: 2379-2381(2000)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、脳神経系に作用する低分子化合物を有効成分とする抗肥満薬は、好ましくない副作用（例えば、拒食症）を引き起こすという問題があった。【０００５】
したがって、このような副作用（例えば、拒食症）を伴わない新たな抗肥満薬の登場が切望されていた。【０００６】
本発明は、上記課題に鑑みて為されたものであり、新規な医薬組成物、飲食物及びこれらに関する方法を提供することをその目的の一つとする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するための本発明の一実施形態に係る医薬組成物は、下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質；（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質、を有効成分として含有することを特徴とする医薬組成物である。本発明によれば、新規な医薬組成物を提供することができる。【０００８】
上記課題を解決するための本発明の一実施形態に係るタンパク質は、前記（Ｉ）のタンパク質又は前記（ＩＩ）のタンパク質であって、医薬組成物の有効成分としての使用のためのタンパク質である。本発明によれば、新規な医薬用途のためのタンパク質を提供することができる。【０００９】
上述課題を解決するための本発明の一実施形態に係る方法は、前記医薬組成物を製造することを特徴とする。本発明によれば、新規な医薬組成物の製造方法を提供することができる。【００１０】
上述課題を解決するための本発明の一実施形態に係る方法は、前記医薬組成物を生体に投与することを特徴とする。本発明によれば、新規な医薬組成物を生体に投与する方法を提供することができる。【００１１】
上述課題を解決するための本発明の一実施形態に係る飲食物は、下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質を含有することを特徴とする飲食物である；
（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、
（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質。本発明によれば、新規な飲食物を提供することができる。【００１２】
上述課題を解決するための本発明の一実施形態に係る方法は、前記飲食物を製造することを特徴とする。本発明によれば、新規な飲食物の製造方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】ヒトＡＩＭのアミノ酸配列とｃＤＮＡの塩基配列とを対応させて示す説明図である。
【図２】ＳＲＣＲ−ＳＦに属する分子の一例を示す説明図である。
【図３】ヒトのＡＩＭのアミノ酸配列、マウスのＡＩＭのアミノ酸配列及びこれらに共通するコンセンサス配列を対応させて示す説明図である。
【図４】脂肪組織に浸潤したマクロファージがＡＩＭを産生していることを示す顕微鏡写真の一例を示す説明図である。
【図５Ａ】脂肪細胞に対するＡＩＭの負荷スケジュールの一例を示す説明図である。
【図５Ｂ】図５Ａに示すスケジュールでＡＩＭが負荷された細胞をoil-red-o脂肪染色した結果の一例を示す説明図である。
【図６Ａ】脂肪細胞に対するＡＩＭの負荷スケジュールの一例を示す説明図である。
【図６Ｂ】図６Ａに示すスケジュールでＡＩＭが負荷された細胞をoil-red-o脂肪染色した結果の一例を示す説明図である。
【図７Ａ】図６Ａに示すスケジュールでＡＩＭが負荷された場合に得られた脂肪滴を有する細胞の数を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図７Ｂ】図６Ａに示すスケジュールでＡＩＭが負荷された場合に得られた脂肪滴を有する細胞における脂肪滴の直径を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図８Ａ】図６Ａに示すスケジュールでＡＩＭが負荷された場合に培養上清中に放出されたグリセロールの量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図８Ｂ】図６Ａに示すスケジュールでＡＩＭが負荷された場合に培養上清中に放出された遊離脂肪酸の量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図９】脂肪細胞の分化に伴う主な遺伝子の発現様式を模式的に示す説明図である。
【図１０】図５Ａ及び図６Ａに示すスケジュールでＡＩＭが負荷された細胞における遺伝子の発現を解析した結果の一例を示す説明図である。
【図１１Ａ】脂肪細胞に対するＡＩＭの負荷スケジュールの一例を示す説明図である。
【図１１Ｂ】図１１Ａに示すスケジュールでＡＩＭ又はＦＡＳ阻害剤が負荷された細胞におけるＦＡＳの酵素活性を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図１１Ｃ】図１１Ａに示すスケジュールでＡＩＭ又はＦＡＳ阻害剤が負荷された細胞におけるＦＡＳの酵素活性を測定した結果の他の例を示す説明図である。
【図１２Ａ】図１１Ａに示すスケジュールでＡＩＭ又はＦＡＳ阻害剤が負荷された細胞をoil-red-o脂肪染色した結果の一例を示す説明図である。
【図１２Ｂ】図１１Ａに示すスケジュールでＡＩＭ又はＦＡＳ阻害剤が負荷された細胞における遺伝子の発現を解析した結果の一例を示す説明図である。
【図１３Ａ】図１１Ａに示すスケジュールでＡＩＭ又はＦＡＳ阻害剤が負荷された場合に培養上清中に放出されたグリセロールの量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図１３Ｂ】図１１Ａに示すスケジュールでＡＩＭ又はＦＡＳ阻害剤が負荷された場合に培養上清中に放出された遊離脂肪酸の量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図１４】ＨＡタグが付加されたＡＩＭとＦＬＡＧタグが付加されたＦＡＳとの結合を裏付ける免疫沈降の結果の一例を示す説明図である。
【図１５Ａ】ＡＩＭが負荷され抗ＡＩＭ抗体で染色された細胞の共焦点顕微鏡写真の一例を示す説明図である。
【図１５Ｂ】ＡＩＭが負荷され抗ＡＩＭ抗体で染色された細胞の共焦点顕微鏡写真の他の例を示す説明図である。
【図１６Ａ】ＡＩＭが負荷された細胞の免疫電子顕微鏡写真の一例を示す説明図である。
【図１６Ｂ】ＡＩＭが負荷された細胞の免疫電子顕微鏡写真の他の例を示す説明図である。
【図１７】ＡＩＭが細胞内に取り込まれる機構を模式的に示す説明図である。
【図１８Ａ】ＡＩＭ及びＣＤ３６を二重染色された脂肪細胞を共焦点顕微鏡にて二次元的に解析した結果の一例を示す説明図である。
【図１８Ｂ】ＡＩＭ及びＣＤ３６を二重染色された脂肪細胞を共焦点顕微鏡にて三次元的に解析した結果の一例を示す説明図である。
【図１８Ｃ】ＡＩＭ及びＣＤ３６を二重染色された脂肪細胞を共焦点顕微鏡にて三次元的に解析した結果の他の例を示す説明図である。
【図１８Ｄ】ＡＩＭ及びＣＤ３６を二重染色された脂肪細胞を共焦点顕微鏡にて三次元的に解析した結果のさらに他の例を示す説明図である。
【図１９Ａ】ＣＤ３６の中和抗体の非存在下でＡＩＭを負荷された細胞を抗ＡＩＭ抗体で染色した結果の一例を示す説明図である。
【図１９Ｂ】ＣＤ３６の中和抗体とともにＡＩＭを負荷された細胞を抗ＡＩＭ抗体で染色した結果の一例を示す説明図である。
【図２０Ａ】AIM-/- Adipo-/-マウスの腹腔内脂肪組織を撮影した写真の一例を示す説明図である。
【図２０Ｂ】AIM+/+Adipo-/-マウスの腹腔内脂肪組織を撮影した写真の一例を示す説明図である。
【図２１Ａ】AIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+Adipo-/-マウスの体重を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２１Ｂ】AIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+Adipo-/-マウスの脂肪組織の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２２Ａ】ＢＳＡを投与されたマウスにおける脂肪組織の顕微鏡観察結果の一例を示す説明図である。
【図２２Ｂ】ＡＩＭを投与されたマウスにおける脂肪組織の顕微鏡観察結果の一例を示す説明図である。
【図２３Ａ】ＨＦＤを与える前のAIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+Adipo-/-マウスの体重を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２３Ｂ】ＨＦＤを与えた後のAIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+Adipo-/-マウスの体重を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２３Ｃ】AIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+Adipo-/-マウスの内臓脂肪の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２３Ｄ】AIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+Adipo-/-マウスの皮下脂肪の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２３Ｅ】AIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+Adipo-/-マウスの肝臓の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２４Ａ】ＨＦＤを与える前のAIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの体重を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２４Ｂ】ＨＦＤを与えた後のAIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの体重を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２４Ｃ】AIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの内臓脂肪組織の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２４Ｄ】AIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの皮下脂肪組織の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２４Ｅ】AIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの肝臓の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２５】AIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの食糧摂取量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２６】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの脂肪細胞のサイズを測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２７Ａ】AIM+/+マウスから採取された内臓脂肪組織切片をＨＥ染色して位相差顕微鏡下で観察した結果の一例を示す説明図である。
【図２７Ｂ】AIM-/-マウスから採取された内臓脂肪組織切片をＨＥ染色して位相差顕微鏡下で観察した結果の一例を示す説明図である。
【図２８Ａ】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの体重を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２８Ｂ】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの内臓脂肪組織の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２８Ｃ】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの皮下脂肪組織の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２９Ａ】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの体温を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２９Ｂ】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの酸素消費速度を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２９Ｃ】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの食餌摂取量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図２９Ｄ】AIM+/+マウス及びAIM-/-マウスの運動性を評価した結果の一例を示す説明図である。
【図３０Ａ】AIM又はBSAが投与されたAIM-/-マウスの体重を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図３０Ｂ】AIM又はBSAが投与されたAIM-/-マウスの内臓脂肪組織の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図３０Ｃ】AIM又はBSAが投与されたAIM-/-マウスの皮下脂肪組織の重量を測定した結果の一例を示す説明図である。
【図３１】AIM又はBSAが投与されたAIM-/-マウスのｍＲＮＡレベルを評価した結果の一例を示す説明図である。
【図３２】in vivoにおけるＡＩＭとＦＡＳとの結合を確認した結果の一例を示す説明図である。
【図３３Ａ】in vitroにおけるＡＩＭとＦＡＳとの結合を確認した結果の一例を示す説明図である。
【図３３Ｂ】in vitroにおけるＡＩＭとＦＡＳとの結合を確認した結果の他の例を示す説明図である。
【図３４Ａ】二量化したＦＡＳ及び各領域の主な機能を示す説明図である。
【図３４Ｂ】ＦＡＳの各領域をFlag配列でタグ化し、当該各領域とHA-tagged AIMとの結合を共沈試験により調べた結果の一例を示す説明図である。
【図３５Ａ】ワイルドタイプＣＤ３６＋／＋マウスに、ｒＡＩＭを静脈から注射し、脂肪組織へのｒＡＩＭの取り込みを解析した結果の一例を示す説明図である。
【図３５Ｂ】ＣＤ３６−／−マウスに、ｒＡＩＭを静脈から注射し、脂肪組織へのｒＡＩＭの取り込みを解析した結果の一例を示す説明図である。
【図３６Ａ】分化刺激前のＨＭＳＣを位相差顕微鏡下で観察した結果の一例を示す説明図である。
【図３６Ｂ】ｒｈＡＩＭ不存在下での分化刺激後のＨＭＳＣを位相差顕微鏡下で観察した結果の一例を示す説明図である。
【図３６Ｃ】ｒｈＡＩＭ存在下での分化刺激後のＨＭＳＣを位相差顕微鏡下で観察した結果の一例を示す説明図である。
【図３７】ＨＭＳＣにおけるＧｌｕｔ−４のｍＲＮＡレベルを評価した結果の一例を示す説明図である。
【図３８】抗マウスＡＩＭ抗体を用いてイヌ血清及びネコ血清のウェスタンブロッティングを行った結果の一例を示す説明図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の一実施形態について説明する。なお、本発明は本実施形態によって何ら限定されるものではない。
【００１５】
まず、本発明に関連するタンパク質であるマクロファージアポトーシスインヒビター（以下、「ＡＩＭ」という。）について説明する。
【００１６】
ＡＩＭは、そのアミノ酸配列中に、３つのＳＲＣＲ（ｓｃａｖｅｎｇｅｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｙｓｔｅｉｎｅ−ｒｉｃｈ）ドメイン（Ｎ末端側から順に、ＳＲＣＲ１、ＳＲＣＲ２、ＳＲＣＲ３と呼ばれる。）が保存されており、当該３つのＳＲＣＲドメインが直列的に連結された分子構造を有する分泌型のタンパク質である。
【００１７】
本発明の発明者の研究グループは、マウス遺伝子をクローニングして、ノックアウトマウスを作製し解析した結果に基づいて、マクロファージによって特異的に産生され、マクロファージのアポトーシスを抑制する機能を有する分泌型タンパク質としてマウスのＡＩＭを初めて報告した（文献１：Miyazaki, T. et al. Increased susceptibility of thymocytes to apoptosis in mice lacking AIM, a novel murine macrophage-derived soluble factor belonging to the scavenger receptor cysteine-rich domain superfamily. J Exp Med. 189:413-422, 1999.、文献２：Haruta, I., Kato, Y., Hashimoto, E., Minjares, C., Kennedy, S., Uto, H., Yamauchi, K., Kobayashi, M., Yusa, S., Muller, U., Hayashi, N. & Miyazaki, T. Association of AIM, a novel apoptosis inhibitory factor, with hepatitis via supporting macrophage survival and enhancing phagocytotic function of macrophages. J. Biol. Chem. 276: 22910-22914 (2001).）。
【００１８】
一方、他の研究グループによってヒト遺伝子シーケンスが「Ｓｐα」（Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  α）として報告された（文献３：Gebe, J.A. et al. Molecular cloning, mapping to human chromosome 1 q21-q23, and cell binding characteristics of Spalpha, a new member of the scavenger receptor cysteine-rich (SRCR) family of proteins. J Biol Chem. 272: 6151-6158, 1997.）。また、その後、ゲノムシーケンスプロジェクトの一環として同遺伝子に「Ａｐｉ６」の名称が付けられた。さらに、ＳＲＣＲドメインを３つ有する構造がＣＤ５の細胞外ドメインに似ていることから、「ＣＤ５Ｌ」という名称も付けられた。そして、最近、これらの名称を「ＣＤ５Ｌ」に統一することが提案されている。しかしながら、分子の名称がその機能を反映するものであるべきとするならば、これらのタンパク質の名称はいずれも「ＡＩＭ」に統一されることが適切と考えられる。
【００１９】
マウスＡＩＭは、配列表５に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質である。また、ヒトＡＩＭは、配列表１に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質である。なお、図１には、ヒトＡＩＭのアミノ酸配列（配列表１に示されるアミノ酸配列）とｃＤＮＡの塩基配列（配列表９に示される塩基配列）とを対応させて示す。
【００２０】
次に、ＡＩＭ分子の特徴について説明する。マウスＡＩＭは、本来、Ｓｃａｖｅｎｇｅｒ−Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｃｙｓｔｅｉｎｅ−Ｒｉｃｈ  Ｓｕｐｅｒ−Ｆａｍｉｌｙ（ＳＲＣＲ−ＳＦ）の新しいメンバーとして発見された、５４ｋＤａの分子量をもつ分子である。
【００２１】
図２には、このＳＲＣＲ−ＳＦに属する分子の一例を示す。図２に示すように、ＡＩＭ分子は、ＳＲＣＲ−ＳＦに属するメンバー分子間で保存されている、システインを多く含むＳＲＣＲドメインが直列的に３つ連結して構成されている。
【００２２】
このＡＩＭは、最もＮ末端側にあるＳＲＣＲドメインであるＳＲＣＲ１よりさらにＮ末端側にシグナルペプチドを有するが、膜貫通ドメインや細胞内ドメインに相当する部分は有しておらず、シーケンス上典型的な分泌型タンパク質である。なお、図２に示すように、ＣＤ５やＣＤ６等、同様のＳＲＣＲドメインを３つ有する他のＳＲＣＲ−ＳＦメンバーは、膜貫通型タンパク質である。
【００２３】
ちなみに、「ＳＲＣＲ−ＳＦ」という名称は、システイン・リッチのドメインがスカベンジャー受容体において最初に記載されたために付けられた名称であり、このドメインを有している分子が全てスカベンジング機能をもっているわけではない。実際に、マウスＡＩＭにスカベンジング機能はない。
【００２４】
マウスＡＩＭとヒトＡＩＭとは、アミノ酸配列において６８％の相同性がある。また、マウスＡＩＭには３つのＮ−ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ  ｓｉｔｅがあるが、これはヒトＡＩＭには無い。
【００２５】
図３には、ヒトのＡＩＭのアミノ酸配列（配列表１に示されるアミノ酸配列の１文字表記）、マウスのＡＩＭのアミノ酸配列（配列表５に示されるアミノ酸配列の１文字表記）及びこれらに共通するコンセンサス配列を対応させて示す。図３において、６段のうち、最上段から３段目にかけて示されている四角の枠で囲まれた部分が、ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列（ヒトＡＩＭに係る配列表２に示されるアミノ酸配列及びマウスＡＩＭに係る配列表６に示されるアミノ酸配列）である。また、３段目から５段目にかけて示されている四角の枠で囲まれた部分が、ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列（ヒトＡＩＭに係る配列表３に示されるアミノ酸配列及びマウスＡＩＭに係る配列表７に示されるアミノ酸配列）である。そして、５段目から６段目にかけて示されている四角の枠で囲まれた部分が、ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列（ヒトＡＩＭに係る配列表４に示されるアミノ酸配列及びマウスＡＩＭに係る配列表８に示されるアミノ酸配列）である。
【００２６】
さらに、これまでに知られているＡＩＭの機能について説明する。ＡＩＭの機能の一部は、最初ノックアウトマウスを解析することにより明らかになった（上記文献１）。すなわち、ＡＩＭ欠損（ＡＩＭ−／−）マウスは基本的に異常を呈さないが、腹腔マクロファージにおいて、様々な刺激によって誘導されるアポトーシスに対する抵抗性が低いことがわかった。同様に組換えＡＩＭ分子をＡＩＭ−／−マクロファージに負荷すると、アポトーシス抵抗性が上昇する。すなわち、ＡＩＭはマクロファージのアポトーシスを抑制する機能をもつことが明らかとなった。
【００２７】
ＡＩＭにより抑制されるアポトーシスは限定された誘導刺激によるものではなく、Ｆａｓ／ＣＤ９５、放射線、ステロイド、感染（リステリア等）、酸化ＬＤＬ等、様々な刺激によるアポトーシスに対応している。どのようなメカニズムでＡＩＭがアポトーシスを抑制しているかは未だ明らかでない。
【００２８】
そして、本発明の発明者は、このようなＡＩＭについて鋭意検討を重ねた結果、ＡＩＭが、脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制し、また、成熟した脂肪細胞において脂肪滴の分解（lipolysis）を誘導するという意外な機能を発揮することを独自に見出し、本発明を完成するに至った。
【００２９】
しかも、驚くべきことに、ＡＩＭは、分泌型タンパク質でありながら、細胞膜の表面に発現しているＣＤ３６を介して細胞質内に取り込まれることによって、その機能を発揮することが明らかとなった。
【００３０】
この事実は、ＡＩＭがＣＤ３６を発現している細胞に対してのみ特異的に作用することを意味している。すなわち、例えば、ＣＤ３６を発現していない脳神経系の細胞に対しては、ＡＩＭは作用しない。
【００３１】
また、ＡＩＭはタンパク質であるため、血液脳関門を通過することはない。したがって、ＡＩＭは、従来の低分子物質を有効成分とする抗肥満薬によって引き起こされていたような副作用（例えば、拒食症）を起こさない。
【００３２】
次に、本実施形態に係る医薬組成物（以下、「本医薬組成物」という。）について説明する。本医薬組成物は、上述のＡＩＭを含む特定のタンパク質（以下、「本タンパク質」という。）を有効成分として含有する。
【００３３】
すなわち、本医薬組成物は、下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質；（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質、を有効成分として含有する医薬組成物である。ここで、上記（Ｉ）のタンパク質は、ネイティブなＡＩＭであり、上記（ＩＩ）のタンパク質は、当該ネイティブなＡＩＭの変異タンパク質である。
【００３４】
本タンパク質は、上記（Ｉ）のタンパク質又は上記（ＩＩ）のタンパク質であって、医薬組成物の有効成分としての使用のためのタンパク質である。また、本タンパク質は、例えば、後述するいずれかの疾患の診断、治療又は予防における使用のためのタンパク質である。
【００３５】
本医薬組成物は、例えば、ヒト又はヒト以外の動物（以下、単に「動物」という。）のＡＩＭを有効成分として含有する。
【００３６】
本タンパク質は、例えば、配列表１に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質である。すなわち、この場合、本タンパク質は、ヒトのＡＩＭであり、マクロファージのアポトーシスを抑制する機能（以下、「アポトーシス抑制機能」という。）を有する分泌型のタンパク質である。
【００３７】
また、本タンパク質は、例えば、動物のＡＩＭである。動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）である。より具体的に、本タンパク質は、例えば、マウス、イヌ又はネコのＡＩＭである。
【００３８】
本タンパク質は、例えば、配列表５に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質である。すなわち、この場合、本タンパク質は、マウスのＡＩＭであり、アポトーシス抑制機能を有する分泌型のタンパク質である。
【００３９】
これらのＡＩＭは、例えば、遺伝子組み換え技術を利用して製造することができる。すなわち、まず、配列表９に示されるヒトＡＩＭのｃＤＮＡ（なお、配列表９に示されるアミノ酸配列において３’末端の「ｔａｇ」はストップコドンである。）を、適切な発現ベクター（ｐＣＡＧＧＳ等）に組み込む。次いで、この発現ベクターを動物細胞株（ＣＨＯ細胞、２９３Ｔ細胞等）に導入し、当該動物細胞にヒトＡＩＭを産生させる。
【００４０】
ヒトＡＩＭは分泌型のタンパク質であるため、産生された組み換えヒトＡＩＭは培養上清中に放出される。したがって、例えば、このヒトＡＩＭにＨＡ等のタグ・ペプチド（９〜１２個のアミノ酸）を付加しておくことにより、当該タグ・ペプチドに対する抗体が固定化された精製カラムを用いて、培養上清から当該ヒトＡＩＭを精製することができる。また、例えば、予め抗ＡＩＭ抗体が得られている場合には、当該抗ＡＩＭ抗体を用いて培養上清からタグを付加されていないヒトＡＩＭを精製することもできる。
【００４１】
なお、ヒト以外の動物のＡＩＭについても、同様にしてＡＩＭを製造することができる。すなわち、例えば、マウスについては配列表１０に示されるマウスＡＩＭのｃＤＮＡ（なお、配列表１０に示されるアミノ酸配列において３’末端の「ｔｇａ」はストップコドンである。）を用いることにより、上述のヒトＡＩＭの場合と同様の手順で組換えマウスＡＩＭを得ることができる。
【００４２】
また、他の動物種（例えば、イヌ、ネコ）についても、例えば、ＳＲＣＲドメインが保存されている点、当該ＳＲＣＲドメインが３つ直列的につながっている形を有する点、分泌型タンパク質である点、の３つの特徴に基づいて、当該他の動物種のｃＤＮＡライブラリーからＡＩＭのｃＤＮＡを取得し、上述のヒトの場合と同様の手順で組換えＡＩＭを得ることができる。
【００４３】
また、例えば、公知のデータベース（例えば、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＮＣＢＩ）が提供するデータベース）からＡＩＭのアミノ酸配列を取得することもできる。具体的に、例えば、イヌＡＩＭのアミノ酸配列を配列表１１に示し、チンパンジーＡＩＭのアミノ酸配列を配列表１２に示し、ラットＡＩＭのアミノ酸配列を配列表１３に示す。
【００４４】
さらに、これらネイティブなＡＩＭのアミノ酸配列の一部に後述するような変異があるＡＩＭ類似タンパク質についても、例えば、対応するｃＤＮＡを合成して使用すれば、同様の手順で組み換え変異ＡＩＭとして得ることができる。
【００４５】
また、本タンパク質は、その脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能（以下、「脂肪分化抑制機能」という。）及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解（lipolysis）を誘導する機能（以下、「脂肪分解機能」という。）が損なわれない範囲で、上述のネイティブなＡＩＭのアミノ酸配列に変異が生じたタンパク質（ＡＩＭ変異タンパク質）とすることができる。
【００４６】
すなわち、本医薬組成物は、例えば、ヒト又は動物のＡＩＭ変異タンパク質を有効成分として含有する。
【００４７】
ＡＩＭ変異タンパク質は、上述のとおり、ＡＩＭのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００４８】
なお、以下に説明するＡＩＭ変異タンパク質は、明記しない場合においても、さらに次のような特徴を有してもよい。すなわち、ＡＩＭ変異タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、ＡＩＭ変異タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、ＡＩＭ変異タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【００４９】
また、ＡＩＭ変異タンパク質のアミノ酸配列がネイティブなＡＩＭのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有する場合、及びＡＩＭ変異タンパク質のドメインのアミノ酸配列がネイティブなＡＩＭのドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有する場合には、当該相同性は、８５％以上であることが好ましく、９０％以上であることがより好ましく、９５％以上であることが特に好ましい。
【００５０】
また、ＡＩＭ変異タンパク質は、ＡＩＭと同様、ＣＤ３６を介して細胞に作用するタンパク質であってもよい。この場合、ＡＩＭ変異タンパク質は、ＡＩＭと同様、ＣＤ３６を有する細胞に特異的に作用する。また、ＡＩＭ変異タンパク質は、ＡＩＭと同様、細胞のＦＡＳと結合して、当該ＦＡＳの活性を低下させるタンパク質であってもよい。
【００５１】
本タンパク質は、例えば、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００５２】
本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。この場合、本タンパク質は、分泌型タンパク質に特徴的なアミノ酸配列を有する。具体的に、本タンパク質は、例えば、そのアミノ酸配列のＮ端（最初の部分）に疎水性の短い配列（leader sequence）を持ち、且つ、膜透過配列（transmembrane
region：やはり疎水性）や細胞内ドメインを有しないという分子構造を有する分泌型タンパク質となる。実際に、ネイティブなＡＩＭは、このような分子構造を有する分泌型タンパク質である。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。
【００５３】
本タンパク質は、例えば、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００５４】
この場合、本タンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質である。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。
【００５５】
また、本タンパク質は、例えば、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表２に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表３に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表４に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００５６】
すなわち、この本タンパク質は、ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン又はこれに変異のあるドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン又はこれに変異のあるドメイン、及びＳＲＣＲ３ドメイン又はこれに変異のあるドメインの３つを有する。また、この場合、本タンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【００５７】
また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応する配列表に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該対応する配列表に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインがＮ末端側から順に連結してもよい。
【００５８】
さらに、本タンパク質は、例えば、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００５９】
また、本タンパク質は、例えば、配列表２に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメイン（ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン）、配列表３に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメイン（ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメイン）、及び配列表４に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメイン（ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメイン）が直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００６０】
すなわち、この本タンパク質は、ＳＲＣＲドメインとして、ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインの３つを有する。また、この場合、本タンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【００６１】
また、上述した第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質のいずれかは、当該第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質であってもよい。
【００６２】
すなわち、この場合、本タンパク質は、第一のドメインのアミノ酸配列、第二のドメインのアミノ酸配列及び第三のドメインのアミノ酸配列が直列的に直接連結して構成されたアミノ酸配列からなるタンパク質である。したがって、この場合、本タンパク質は、例えば、ヒトＡＩＭにおいてＳＲＣＲ１ドメインとＳＲＣＲ２ドメインとの間の接続部分を構成するアミノ酸配列や、当該ＳＲＣＲ２ドメインとＳＲＣＲ３ドメインとの間の接続部分を構成するアミノ酸配列に相当する、ドメイン間の接続部分を有しない。ただし、上述した第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質は、これに限られず、ドメイン間の接続部分を有するタンパク質であってもよい。
【００６３】
また、本タンパク質は、例えば、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列（図３に示すＳＲＣＲ１ドメイン部分のコンセンサス配列）以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列（図３のＳＲＣＲ２ドメイン部分のコンセンサス配列）以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列（図３のＳＲＣＲ３ドメイン部分のコンセンサス配列）以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００６４】
すなわち、この本タンパク質は、ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン又はヒトＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメインのコンセンサス配列以外の部分に変異のあるドメイン、ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメイン又はＳＲＣＲ２ドメインのコンセンサス配列以外の部分に変異のあるドメイン、及びヒトＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメイン又はＳＲＣＲ３ドメインのコンセンサス配列以外の部分に変異のあるドメインの３つを有する。また、この場合、本タンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるタンパク質である。すなわち、本タンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【００６５】
また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応する配列表に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応する配列表に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。すなわち、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応する配列表に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインがＮ末端側から順に連結してもよい。
【００６６】
また、上述したコンセンサス配列以外の部分に変異を有する第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質のいずれかは、当該第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質であってもよい。
【００６７】
すなわち、この場合、本タンパク質は、第一のドメインのアミノ酸配列、第二のドメインのアミノ酸配列及び第三のドメインのアミノ酸配列が直列的に直接連結して構成されたアミノ酸配列からなるタンパク質である。ただし、上述したコンセンサス配列以外の部分に変異を有する第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質は、これに限られず、ドメイン間の接続部分を有するタンパク質であってもよい。
【００６８】
また、本タンパク質は、例えば、下記の（ｘ１）、（ｘ２）又は（ｘ３）のタンパク質；（ｘ１）配列表２に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｘ２）配列表３に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｘ３）配列表４に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、であって、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００６９】
すなわち、この場合、本タンパク質は、例えば、ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメインからなるタンパク質（第一のドメインタンパク質）であり、又は複数の当該ＳＲＣＲ１ドメインが直列的に連結してなるタンパク質（上記（ｘ１）のタンパク質）である。また、本タンパク質は、例えば、ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメインからなるタンパク質（第二のドメインタンパク質）であり、又は複数の当該ＳＲＣＲ２ドメインが直列的に連結してなるタンパク質（上記（ｘ２）のタンパク質）である。また、本タンパク質は、例えば、ヒトＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメインからなるタンパク質（第三のドメインタンパク質）であり、又は複数の当該ＳＲＣＲ３ドメインが直列的に連結してなるタンパク質（上記（ｘ３）のタンパク質）である。
【００７０】
また、本タンパク質は、同様に、例えば、下記の（ｙ１）、（ｙ２）又は（ｙ３）のタンパク質；（ｙ１）配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表２に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｙ２）配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表３に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｙ３）配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表４に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、であって、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質であってもよい。
【００７１】
また、本タンパク質は、同様に、例えば、下記の（ｚ１）、（ｚ２）又は（ｚ３）のタンパク質；（ｚ１）配列表２に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｚ２）配列表３に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｚ３）配列表４に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、であって、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質であってもよい。
【００７２】
また、上述した第一のドメインタンパク質、第二のドメインタンパク質又は第三のドメインタンパク質を有する本タンパク質のいずれかは、複数の当該第一のドメインタンパク質、第二のドメインタンパク質又は第三のドメインタンパク質が直列的に直接連結して構成されたタンパク質であってもよい。ただし、本タンパク質は、これに限られず、ドメイン間の接続部分を有するタンパク質であってもよい。
【００７３】
また、本タンパク質は、例えば、動物のＡＩＭのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該動物のＡＩＭのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００７４】
この場合、動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【００７５】
すなわち、本タンパク質は、例えば、配列表５に示されるアミノ酸配列（マウスＡＩＭのアミノ酸配列）において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表５に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００７６】
この場合、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。
【００７７】
また、同様に、本タンパク質は、例えば、配列表１１に示されるアミノ酸配列（イヌＡＩＭのアミノ酸配列）、配列表１２に示されるアミノ酸配列（チンパンジーＡＩＭのアミノ酸配列）又は配列表１３に示されるアミノ酸配列（ラットＡＩＭのアミノ酸配列）において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表１１、配列表１２又は配列表１３に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００７８】
さらに、本タンパク質は、例えば、動物のＡＩＭのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００７９】
この場合も、動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【００８０】
すなわち、本タンパク質は、例えば、配列表５に示されるアミノ酸配列（マウスＡＩＭのアミノ酸配列）において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００８１】
この場合、本タンパク質は、配列表５に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質である。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。
【００８２】
また、同様に、本タンパク質は、例えば、配列表１１に示されるアミノ酸配列（イヌＡＩＭのアミノ酸配列）、配列表１２に示されるアミノ酸配列（チンパンジーＡＩＭのアミノ酸配列）又は配列表１３に示されるアミノ酸配列（ラットＡＩＭのアミノ酸配列）において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００８３】
また、本タンパク質は、例えば、ＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインを有する動物のＡＩＭのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、当該ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメイン、当該ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び当該ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００８４】
この場合、本タンパク質は、動物のＡＩＭのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【００８５】
また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応するＳＲＣＲドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該対応するＳＲＣＲドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインがＮ末端側から順に連結してもよい。
【００８６】
この場合、動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【００８７】
すなわち、例えば、動物のＡＩＭのアミノ酸配列は、配列表５に示されるアミノ酸配列（マウスＡＩＭのアミノ酸配列）であり、ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列は、配列表６に示されるアミノ酸配列であり、ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列は、配列表７に示されるアミノ酸配列であり、ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列は、配列表８に示されるアミノ酸配列である。
【００８８】
また、同様に、動物のＡＩＭのアミノ酸配列は、例えば、配列表１１に示されるアミノ酸配列（イヌＡＩＭのアミノ酸配列）、配列表１２に示されるアミノ酸配列（チンパンジーＡＩＭのアミノ酸配列）又は配列表１３に示されるアミノ酸配列（ラットＡＩＭのアミノ酸配列）であってもよい。
【００８９】
さらに、本タンパク質は、例えば、上記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、上記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び上記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００９０】
この場合も、動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【００９１】
すなわち、本タンパク質は、例えば、配列表６に示されるアミノ酸配列又は配列表６に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表７に示されるアミノ酸配列又は配列表７に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表８に示されるアミノ酸配列又は配列表８に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００９２】
すなわち、この本タンパク質は、マウスＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン又はこれに変異のあるドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン又はこれに変異のあるドメイン、及びＳＲＣＲ３ドメイン又はこれに変異のあるドメインの３つを有する。また、この場合、本タンパク質は、配列表５に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるタンパク質である。すなわち、本タンパク質は、配列表５に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【００９３】
また、本タンパク質は、例えば、上記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列からなる第一のドメイン、上記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び上記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００９４】
この場合も、動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【００９５】
すなわち、本タンパク質は、例えば、配列表５に示すアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、配列表６に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメイン（マウスＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン）、配列表７に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメイン（マウスＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメイン）、及び配列表８に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメイン（マウスＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメイン）が直列的に連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【００９６】
すなわち、この本タンパク質は、ＳＲＣＲドメインとして、マウスＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインの３つを有する。また、この場合、本タンパク質は、配列表５に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。すなわち、本タンパク質は、例えば、配列表５に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【００９７】
また、上述した第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質のいずれかは、当該第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質であってもよい。
【００９８】
すなわち、この場合、本タンパク質は、第一のドメインのアミノ酸配列、第二のドメインのアミノ酸配列及び第三のドメインのアミノ酸配列が直列的に直接連結して構成されたアミノ酸配列からなるタンパク質である。ただし、上述した第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質は、これに限られず、ドメイン間の接続部分を有するタンパク質であってもよい。
【００９９】
また、本タンパク質は、例えば、ＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインを有する動物のＡＩＭのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、当該ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、当該ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び当該ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は当該ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【０１００】
この場合、本タンパク質は、動物のＡＩＭのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【０１０１】
また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応するＳＲＣＲドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応するＳＲＣＲドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。すなわち、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインのうち少なくとも一つは、当該少なくとも一つのドメインに対応するＳＲＣＲドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなるドメインであってもよい。また、第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインがＮ末端側から順に連結してもよい。
【０１０２】
動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【０１０３】
すなわち、本タンパク質は、例えば、配列表６に示されるアミノ酸配列又は配列表６に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列（図３に示すＳＲＣＲ１ドメイン部分のコンセンサス配列）以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表７に示されるアミノ酸配列又は配列表７に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列（図３のＳＲＣＲ２ドメイン部分のコンセンサス配列）以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表８に示されるアミノ酸配列又は配列表８に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列（図３のＳＲＣＲ３ドメイン部分のコンセンサス配列）以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【０１０４】
すなわち、この本タンパク質は、ＳＲＣＲドメインとして、マウスＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメイン又はマウスＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメインのコンセンサス配列以外の部分に変異のあるドメイン、マウスＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメイン又はＳＲＣＲ２ドメインのコンセンサス配列以外の部分に変異のあるドメイン、及びマウスＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメイン又はＳＲＣＲ３ドメインのコンセンサス配列以外の部分に変異のあるドメインの３つを有する。また、この場合、本タンパク質は、配列表５に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなるタンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、分泌型タンパク質であってもよい。また、本タンパク質は、アポトーシス抑制機能を有してもよい。また、本タンパク質は、そのアミノ酸配列に含まれるアミノ酸の数が３００〜４００個、好ましくは３２０〜３８０個、より好ましくは３４０〜３６０個であるタンパク質であってもよい。
【０１０５】
また、同様に、動物のＡＩＭのアミノ酸配列は、例えば、配列表１１に示されるアミノ酸配列（イヌＡＩＭのアミノ酸配列）、配列表１２に示されるアミノ酸配列（チンパンジーＡＩＭのアミノ酸配列）又は配列表１３に示されるアミノ酸配列（ラットＡＩＭのアミノ酸配列）であってもよい。
【０１０６】
また、上述したコンセンサス配列以外の部分に変異を有する第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質のいずれかは、当該第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質であってもよい。
【０１０７】
すなわち、この場合、本タンパク質は、第一のドメインのアミノ酸配列、第二のドメインのアミノ酸配列及び第三のドメインのアミノ酸配列が直列的に直接連結して構成されたアミノ酸配列からなるタンパク質である。ただし、上述したコンセンサス配列以外の部分に変異を有する第一のドメイン、第二のドメイン及び第三のドメインを有する本タンパク質は、これに限られず、ドメイン間の接続部分を有するタンパク質であってもよい。
【０１０８】
また、本タンパク質は、例えば、下記の（ｐ１）、（ｐ２）又は（ｐ３）のタンパク質；（ｐ１）動物のＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｐ２）動物のＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、（ｐ３）動物のＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、であって、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【０１０９】
すなわち、この場合、本タンパク質は、例えば、動物ＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメインからなるタンパク質（第一のドメインタンパク質）であり、又は複数の当該ＳＲＣＲ１ドメインが直列的に連結してなるタンパク質（上記（ｐ１）のタンパク質）である。また、本タンパク質は、例えば、動物ＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメインからなるタンパク質（第二のドメインタンパク質）であり、又は複数の当該ＳＲＣＲ２ドメインが直列的に連結してなるタンパク質（上記（ｐ２）のタンパク質）である。また、本タンパク質は、例えば、動物ＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメインからなるタンパク質（第三のドメインタンパク質）であり、又は複数の当該ＳＲＣＲ３ドメインが直列的に連結してなるタンパク質（上記（ｐ３）のタンパク質）である。
【０１１０】
また、本タンパク質は、同様に、例えば、下記の（ｑ１）、（ｑ２）又は（ｑ３）のタンパク質；（ｑ１）動物のＡＩＭのＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に直接連結してなるタンパク質：、（ｑ２）動物のＡＩＭのＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に直接連結してなるタンパク質：、（ｑ３）動物のＡＩＭのＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に直接連結してなるタンパク質、であって、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【０１１１】
また、本タンパク質は、同様に、例えば、下記の（ｒ１）、（ｒ２）又は（ｒ３）のタンパク質；（ｒ１）動物の脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能のＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に直接連結してなるタンパク質：、（ｒ２）動物の脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能のＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に直接連結してなるタンパク質：、（ｒ３）動物の脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能のＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に直接連結してなるタンパク質、であって、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質である。
【０１１２】
また、上述した第一のドメインタンパク質、第二のドメインタンパク質又は第三のドメインタンパク質を有する本タンパク質のいずれかは、複数の当該第一のドメインタンパク質、第二のドメインタンパク質又は第三のドメインタンパク質が直列的に直接連結して構成されたタンパク質であってもよい。ただし、本タンパク質は、これに限られず、ドメイン間の接続部分を有するタンパク質であってもよい。
【０１１３】
これらの場合、動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【０１１４】
すなわち、例えば、動物のＡＩＭがマウスＡＩＭである場合には、上記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列は、配列表６に示されるアミノ酸配列であり、上記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列は、配列表７に示されるアミノ酸配列であり、上記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列は、配列表８に示されるアミノ酸配列である。
【０１１５】
また、同様に、動物のＡＩＭのアミノ酸配列は、例えば、配列表１１に示されるアミノ酸配列（イヌＡＩＭのアミノ酸配列）、配列表１２に示されるアミノ酸配列（チンパンジーＡＩＭのアミノ酸配列）又は配列表１３に示されるアミノ酸配列（ラットＡＩＭのアミノ酸配列）であってもよい。
【０１１６】
本医薬組成物は、上述した本タンパク質のうち１又は複数を有効成分として含有する。また、本医薬組成物は、さらに薬学的に許容され得る担体を含有することができる。薬学的に許容され得る担体は、特に限られないが、例えば、抗体医薬等、いわゆるタンパク質製剤に使用され得るものを好ましく使用することができる。具体的に、例えば、賦形剤、溶剤、希釈剤、分散剤、乳化剤、溶解補助剤、懸濁化剤、安定化剤、等張化剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、無痛化剤、保存剤、抗酸化剤のうち１種又は２種以上を使用することができる。
【０１１７】
本医薬組成物の剤形は特に限られず、例えば、注射剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤とすることができる。すなわち、本医薬組成物は、例えば、生体の組織内に注入する局所注射剤、血管内に注入する静脈注射剤、動脈注射剤又は点滴剤、腹腔内に投与する注射剤とすることができる。
【０１１８】
本医薬組成物が局所注射剤である場合には、本医薬組成物は、例えば、脂肪組織（内臓脂肪組織、皮下脂肪組織等）に直接注入する脂肪組織注射剤や、皮下注射剤、筋肉注射剤とすることができる。
【０１１９】
また、本医薬組成物が注射剤である場合、本医薬組成物は、例えば、本タンパク質と上述の薬学的に許容され得る担体とを含有する溶液を凍結乾燥等の方法により乾燥させることにより調製された粉末状とし、アンプル等の容器に無菌的に保存することができる。なお、本発明の発明者らによって、このような乾燥及び再溶解によってＡＩＭの機能は失われないことが確認されている。
【０１２０】
そして、本医薬組成物を投与する際には、その粉末を適切な溶媒（例えば、生理食塩水、リンゲル液、その他の注射用液）に溶解して、本タンパク質を有効成分として含有する液状の注射剤からなる本医薬組成物を調製する。また、本医薬組成物が注射剤である場合、例えば、本タンパク質と上述の薬学的に許容され得る担体とを含有する溶液をそのままアンプル等の容器に無菌的に保存することもできる。
【０１２１】
本医薬組成物における本タンパク質の含有量は、剤形や、投与量等により適宜決定されるが、例えば、本医薬組成物は、本タンパク質を０．１〜１０重量％含有する液状の注射剤とすることができる。
【０１２２】
本医薬組成物は、ヒト又は動物の疾患の診断、治療又は予防に使用される。動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、野生型でＡＩＭを発現しており、その脂肪細胞がＣＤ３６を発現している動物が好ましい。具体的に、動物は、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。すなわち、本医薬組成物は、例えば、ヒト又はヒト以外の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）の疾患の診断、治療又は予防に使用され、より具体的に、例えば、ヒト、マウス、イヌ又はネコの疾患の診断、治療又は予防に使用される。
【０１２３】
すなわち、本医薬組成物は、例えば、ヒトに投与される医薬組成物（ヒト用医薬組成物）である。また、本医薬組成物は、例えば、動物に投与される医薬組成物（動物用医薬組成物）である。動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、野生型でＡＩＭを発現しており、その脂肪細胞がＣＤ３６を発現している動物が好ましい。具体的に、動物は、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。すなわち、本医薬組成物は、例えば、ヒト又はヒト以外の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）に投与される医薬組成物であり、より具体的に、例えば、ヒト、マウス、イヌ又はネコに投与される医薬組成物である。
【０１２４】
なお、本医薬組成物が適用される対象となる疾患は、広義に解釈されるべきであり、生体において構造的又は機能的に何らかの不具合がある状態を全て含む。すなわち、本医薬組成物は、例えば、代謝性疾患（metabolic disorder）、脂肪性新生物（腫瘍）、（神経を含む）変性疾患の診断、治療又は予防のために生体に投与される医薬組成物である。これらの疾患領域には、例えば、糖尿病、肥満症、高血圧症、動脈硬化症を含む心・血管性疾患、脂肪腫も含まれる。
【０１２５】
より具体的に、本医薬組成物は、例えば、脂肪組織に関連する不具合の診断、治療又は予防のために使用される。脂肪組織に関連する不具合としては、例えば、肥満、脂肪肉腫（liposarcoma）が挙げられる。すなわち、本医薬組成物は、肥満に伴って生じる不具合を解消し又は予防することを目的として、内臓脂肪及び／又は皮下脂肪の量を適切に調整するために使用される。また、本医薬組成物は、脂肪肉腫を縮小し又は増大を抑制するために使用される。また、本医薬組成物は、例えば、外見上視認可能な所望の部位の脂肪組織の量を調整することを目的とした美容整形や形成外科上の処置に使用することもできる。すなわち、本医薬組成物は、脂肪組織の減少、増大の抑制、増大の程度の低減を目的として生体に投与される。
【０１２６】
そして、本実施形態に係る方法（以下、「本方法」という。）の一つは、例えば、本タンパク質の有効量を生体に投与する方法である。すなわち、本方法は、上述した本医薬組成物を生体に投与する方法である。
【０１２７】
ここで、生体は、例えば、ヒトである。また、生体は、例えば、動物である。動物は、ヒト以外の動物であれば特に限られず、野生型でＡＩＭを発現しており、その脂肪細胞がＣＤ３６を発現している動物が好ましい。具体的に、動物は、例えば、哺乳動物（例えば、マウス、ラット、モルモット等のげっ歯類、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、ウシ、ウマ、サル）であり、より具体的には、例えば、マウス、イヌ又はネコである。
【０１２８】
本方法は、例えば、ヒト又はヒト以外の哺乳動物の疾患の診断、治療又は予防のために、当該診断、治療又は予防に有効な量の本タンパク質（すなわち、本医薬組成物）を当該ヒト又はヒト以外の哺乳動物に投与する方法である。
【０１２９】
本タンパク質の投与方法は特に限られず、例えば、局所注射等による局所投与、静脈注射、動脈注射、点滴等による血管内投与、経口投与が挙げられる。
【０１３０】
本タンパク質を局所投与する場合には、例えば、本医薬組成物を注射剤として調製し、注射器等の局所投与用器具を用いて、当該注射剤を生体の組織に注入する。すなわち、例えば、肥満の解消又は予防、美容整形等の目的で、内臓脂肪組織や皮下脂肪組織等の脂肪組織内に本医薬組成物を直接注入する。また、例えば、脂肪肉腫を患っている患者に対しては、当該脂肪肉腫組織内に本医薬組成物を局所注射する。
【０１３１】
本タンパク質を血管内投与する場合には、本医薬組成物を注射剤として調製し、注射器や点滴用器具等の血管内投与用器具を用いて、当該注射剤を生体の血管内に注入する。本タンパク質を経口投与する場合には、本医薬組成物を錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤等の経口投与剤として調製し、当該経口投与剤を患者に服用させる。なお、ＡＩＭはｐＨが２〜３程度の酸性条件下でもその分子構造が安定であり機能を失わない。
【０１３２】
このように本タンパク質を生体に投与することにより、当該生体における脂肪組織の量を効果的に減少させ、増大を抑制し、又は増大の程度を低減することができる。中でも、本タンパク質を注射にて投与する場合、特に本タンパク質を脂肪組織内へ局所投与する場合には、当該脂肪組織の量をより効果的に減少させ、増大を抑制し、又は増大の程度を低減することができる。
【０１３３】
本タンパク質の投与量は、投与する対象の症状、年齢、体重等の条件に応じて適宜決定されるが、例えば、１回の投与量は、体重１ｋｇあたり０．１〜５ｍｇとすることができる。もちろん、本タンパク質の投与量は、投与対象である生体における脂肪組織を減少させ、増加を抑制し、又は増加の程度を低減する上で有効な範囲であれば、これに限られない。すなわち、例えば、局所投与の場合には、本タンパク質を作用させたい部位に当該本タンパク質を効率よく且つ確実に到達させることができるため、血管内投与等の全身投与の場合に比べて、投与量を低減することができる。
【０１３４】
また、本タンパク質の投与スケジュールも同様に、投与する対象の症状、年齢、体重等の条件に応じて適宜決定されるが、例えば、１〜数週間の間隔で数週間〜数カ月にわたって複数回投与することができる。
【０１３５】
このような本タンパク質の投与により、当該本タンパク質が到達した生体内の脂肪組織において、成熟脂肪細胞における脂肪分解を誘導することができ、また、脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制することもできる。すなわち、本医薬組成物は、例えば、脂肪前駆細胞の分化抑制剤や、成熟脂肪細胞における脂肪分解誘導剤ということもできる。そして、本タンパク質を投与した結果、生体における脂肪組織の量の減少、増加の抑制、増加の程度の低減、ひいては体重の減少という効果が得られる。
【０１３６】
また、本方法は、本タンパク質の使用に関連するものであれば、上述の例に限られない。すなわち、本方法は、例えば、本タンパク質を医薬組成物の有効成分として使用する方法である。また、本方法は、例えば、本タンパク質を有効成分として含有する医薬組成物を製造する方法である。この場合、本方法は、例えば、本タンパク質と薬学的に許容され得る担体とを混合して、当該本タンパク質と当該担体とを含有する医薬組成物を製造する方法であってもよい。
【０１３７】
また、本タンパク質は、飲食物に適用することもできる。すなわち、本実施形態に係る飲食物（以下、「本飲食物」という。）は、本タンパク質（すなわち、上記（Ｉ）ＡＩＭ：又は（ＩＩ）ＡＩＭのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪分化抑制機能及び／又は脂肪分解機能を有するタンパク質）を含有する飲食物である。すなわち、本飲食物は、例えば、本タンパク質を含有する食品である。また、本飲食物は、例えば、本タンパク質を含有する飲料である。
【０１３８】
また、本飲食物は、例えば、本タンパク質を含有する経口摂取用組成物である。この経口摂取用組成物は、例えば、医薬品としてではなく、需要者がビタミン剤等のサプリメントに類似して、補助的に摂取するための組成物であり、例えば、錠剤、カプセル、顆粒、ゼリー等の形態で製造される。また、本飲食物は、例えば、本タンパク質を含有する飲食物用添加剤である。この飲食物用添加剤は、例えば、飲食物の製造工程において、原料の一部として使用され、又は原料に添加される組成物である。
【０１３９】
また、本飲食物に関連して、本方法は、例えば、本タンパク質を飲食物の原料の一部として使用する方法である。また、本方法は、本タンパク質を含有する飲食物を製造する方法である。この場合、本方法は、例えば、本タンパク質と他の原料とを混合して、当該本タンパク質と当該他の原料とを含有する飲食物を製造する方法であってもよい。
【０１４０】
ここで、本発明の一側面について記載する。本発明の一実施形態に係る医薬組成物は、以下の（ａ）〜（ｌ）のうち１又は複数のタンパク質を有効成分として含有することを特徴とする医薬組成物である；（ａ）配列表１に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質：、（ｂ）配列表５に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質：、（ｃ）配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｄ）配列表５に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｅ）配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｆ）配列表５に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、当該配列表５に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｇ）配列表２に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｈ）配列表６に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表７に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表８に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｉ）配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｊ）配列表６に示されるアミノ酸配列又は配列表６に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表７に示されるアミノ酸配列又は配列表７に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表８に示されるアミノ酸配列又は配列表８に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｋ）配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質：、（ｌ）配列表６に示されるアミノ酸配列又は配列表６に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表７に示されるアミノ酸配列又は配列表７に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表８に示されるアミノ酸配列又は配列表８に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質。
【０１４１】
本発明の一実施形態に係る方法は、上記医薬組成物を生体に投与することを特徴とする。また、本発明の一実施形態に係る方法は、上記（ａ）〜（ｌ）のうち１又は複数のタンパク質の有効量を生体に投与することを特徴とする。また、本発明の一実施形態に係る方法は、上記（ａ）〜（ｌ）のうち１又は複数のタンパク質を医薬組成物の有効成分として使用することを特徴とする。また、本発明の一実施形態に係る方法は、上記（ａ）〜（ｌ）のうち１又は複数のタンパク質を有効成分として含有する医薬組成物を製造することを特徴とする。また、本発明の一実施形態に係る飲食物は、上記（ａ）〜（ｌ）のうち１又は複数のタンパク質を含有することを特徴とする。また、本発明の一実施形態に係る方法は、上記（ａ）〜（ｌ）のうち１又は複数のタンパク質を含有する飲食物を製造することを特徴とする。
【０１４２】
次に、本実施形態に係る具体的な実施例について説明する。
【実施例１】
【０１４３】
［脂肪組織中のマクロファージによるAIMの発現］
C57BL/6マウスに高脂肪食（High Fat Diet：HFD、fat calorie 60%）を20週与えた。また、より肥満が顕著であるadiponectinノックアウトマウス（Adipo-/-マウス）にも同様にHFDを与えた。その後、これらのマウスの腹腔内から内臓脂肪組織を採取した。この脂肪組織から作製したパラフィン切片を抗マクロファージモノクローナル抗体（F4/80）及び抗マウスAIMポリクローナル抗体（SA-1）にて二重染色した。【０１４４】
図４は、染色された切片を位相差顕微鏡及び蛍光顕微鏡で観察した結果の一例を示す。図４には、ワイルドタイプのC57BL/6マウス（Wild-type）及びAdipo-/-マウス（Adiponectin -/-）について、位相差顕微鏡写真（Phase）、マクロファージを染色した蛍光顕微鏡写真（F4/80 macrophage)、AIMを染色した蛍光顕微鏡写真（AIM）及びこれらの蛍光顕微鏡写真を重ね合わせた写真（merge）をそれぞれ示す。【０１４５】
図４に示すように、ワイルドタイプマウス及びAdipo-/-マウスのいずれについても、マクロファージの染色部分とAIMの染色部分とが重複しており、脂肪組織に浸潤したマクロファージはAIMを強く発現していることが確認された。
【実施例２】
【０１４６】
［AIMによる脂肪細胞の分化抑制］
脂肪組織に浸潤したマクロファージが産生するAIMが周辺の脂肪細胞に対してどのような働きをしているのかを調べるため、3T3L1脂肪前駆細胞（preadipocyte）を成熟脂肪細胞に分化させる培養過程でAIMを負荷する実験を行った。【０１４７】
すなわち、図５Ａに示すように、次の互いに異なる４つのスケジュールａ〜ｄにて3T3L1細胞の培養を行った；（ａ）AIMを負荷しない、（ｂ）分化誘導刺激開始から１０日間（day2-day12）AIMを負荷する、（ｃ）分化誘導前の増殖（clonal expansion）期間のみ（day(-2)-day2）AIMを負荷する、（ｄ）分化誘導刺激の初期のみ（day2-day4）AIMを負荷する。【０１４８】
AIMとしては、マウスの組換えAIMタンパク質又はヒトの組換えAIMタンパク質を用いた。これらの組換えAIMタンパク質は、マウス又はヒトのAIMを発現するベクターをトランスフェクションした、ヒト由来のHEK293T細胞を培養し、その培養上清から単離精製することにより調製した。なお、以下に示す他の実施例においても、AIMとしては同様の組換えAIMタンパク質を使用した。AIMの負荷は、培養液に5μg/mlの濃度でAIMを添加することにより行った。【０１４９】
また、3T3L1細胞の分化誘導は、図５Ａに示すように、まず3T3L1細胞を４日間（day(-2)-day2）培養して増殖させ（cell proliferation）、その後、インスリン、デキサメタゾン（DEX）、イソブチルメチルキサンチン（IBMX）を含有する培養液で２日間（day2-day4）培養することで分化誘導刺激（induction）を開始し、さらにインスリンを含有する培養液で２日間（day4-day6）培養することにより行った。【０１５０】
分化誘導刺激期間（day2-day6）後は、これら分化誘導刺激因子を含有しない培養液にて培養を継続した。そして、分化誘導刺激開始から１０日目（day12）の細胞をoil-red-oにて染色し、3T3L1細胞から成熟脂肪細胞への分化の状況を観察した。【０１５１】
図５Ｂには、４つのスケジュールａ〜ｄのそれぞれについて、マウスAIM（Mouse rAIM）又はヒトAIM（Human rAIM）を負荷した実験（ただし、スケジュールａはAIMの負荷なし）で得られた染色後の細胞の顕微鏡写真を示す。なお、ヒトAIMを使用したスケジュールｃについては、顕微鏡写真を撮影しなかった（N.D.）。【０１５２】
図５Ｂに示すように、スケジュールｄにてAIMを分化誘導刺激の初期のみ（day2-day4）負荷した場合には、脂肪滴を有する細胞はほとんど観察されず、3T3L1細胞の分化はほぼ完全に抑制されていた。すなわち、AIMは、上述の分化誘導因子の存在下で、3T3L1細胞の分化を抑制した。【０１５３】
なお、分化誘導因子とAIMとを含有する培養液を調製後、当該培養液から精製カラムを用いてAIMを除去した場合であっても、当該分化誘導因子による3T3L1細胞を分化させる能力は失われなかった（data not shown）。したがって、分化誘導因子とAIMとの間では実質的に化学的な相互作用はないと考えられた。【０１５４】
また、スケジュールｂにてAIMを分化誘導刺激開始から１０日間（day2-day12）負荷した場合も、脂肪滴を有する細胞はほとんど観察されず、3T3L1細胞の分化はほぼ完全に抑制されていた。また、このようなAIMによる分化抑制効果は、AIMの濃度に依存することも確認された（data not shown）。すなわち、3T3L1細胞に負荷するAIMの濃度を1μg/ml、0.1μg/mlと減少させると、AIMよる分化抑制効果も低減された。【０１５５】
また、AIMの負荷による死細胞数の増加は認められなかった。したがって、AIMによる分化抑制は、細胞死を誘導することなく、成熟脂肪細胞まで分化する3T3L1細胞の数を減少させることによるものと考えられた。【０１５６】
一方、スケジュールｃにてAIMを分化誘導前にのみ（day(-2)-day2）負荷した場合には、スケジュールａにてAIMを負荷しなかった場合と同様、ほとんどの細胞が脂肪滴を有しており、ほとんどの3T3L1細胞が成熟脂肪細胞に分化していることが確認された。すなわち、AIMを分化誘導前のみ負荷しても、3T3L1細胞の成熟脂肪細胞への分化は抑制されなかった。ただし、AIMを分化誘導前から分化誘導期間を経てその後も継続的に（day(-2) - day12）負荷した場合には、3T3L1細胞の脂肪細胞への分化は完全に抑制された（data not shown）。【０１５７】
ここで、マウスAIMとヒトAIMとではアミノ酸配列の相同性が６８％程度と高い。また、図３に示すように、マウスAIMとヒトAIMとでは、SRCRドメインにおけるコンセンサスなシーケンス（CD5、CD6など、SRCRドメインを有する他の分子においても保存されているアミノ酸配列）が完全に一致している。そして、上述のとおり、ヒトAIMは、マウスAIMと同様に、マウス由来の細胞である3T3L1細胞の分化を抑制した。すなわち、ヒトとマウスとの間で、AIMの機能について互換性があった。
【実施例３】
【０１５８】
［AIMによる脂肪油滴融解（Lipolysis）の誘導］
成熟脂肪細胞に対するAIMの効果を検討した。図６Ａに示すように、上述の実施例２と同様に、スケジュールｅとして、3T3-L1細胞が分化して細胞質内に脂肪滴が形成されてから６日間（day6-day12）、マウスAIMを負荷する培養実験を行った。【０１５９】
そして、分化誘導刺激開始から１０日目（day12）の細胞をoil-red-oにて染色した。また、脂肪滴を有する細胞の数を計数した。さらに、脂肪滴を有する細胞については、脂肪滴の直径を計測した。なお、比較のために、上述のスケジュールａで培養された細胞及びスケジュールｄで培養された細胞についても、細胞の計数及び脂肪滴直径の計測を行った。【０１６０】
また、スケジュールｅにてAIMを負荷して培養した後の培養液の上清を回収し、当該上清に含有されるグリセロール及び遊離脂肪酸（free fatty acids：FFAs）の量をELISA法により測定した。また、比較のために、上述のスケジュールａについても同様に、培養上清中のグリセロール及び遊離脂肪酸の量を測定した。【０１６１】
なお、培養液に含まれるアルブミンに対する遊離脂肪酸の吸着を回避するために、分化誘導開始から１０日目（day 12）に、10%FBS（ウシ胎児血清）添加培養液を無血清培養液に交換し、さらに細胞を当該無血清培養液中で６時間培養し、その後、当該無血清培養液の上清中に含まれるグリセロール及び遊離脂肪酸を測定した。【０１６２】
図６Ｂにはoil-red-o脂肪染色された細胞の顕微鏡写真を示す。図７Ａ及び図７Ｂには、スケジュールａ、ｄ及びｅ（Exp. a, d, e）について、脂肪滴を有する細胞（Droplet(+) cells）の数（個／１０４μｍ２）及び脂肪滴の相対的な大きさ（Relative diameter of droplet）（％）を評価した結果をそれぞれ示す。なお、図７Ｂに示す脂肪滴の相対的な大きさは、AIMを負荷しないスケジュールａで得られた細胞の有する脂肪滴の大きさを１００％として算出した。図８Ａ及び図８Ｂには、スケジュールａ及びｅ（Exp. a, e）について、培養液中のグリセロール濃度（Glycerol Efflux）（ｍＭ）及び遊離脂肪酸濃度（FFA Efflux）（×１０  ｍＭ）を測定した結果をそれぞれ示す。【０１６３】
図６Ｂ及び図７Ａに示すように、スケジュールｅにて、分化後の脂肪細胞にAIMを負荷して培養を継続した場合に得られた脂肪滴を有する細胞の数は、スケジュールａにて分化後の脂肪細胞にAIMを負荷することなく培養した場合に比べて、顕著に減少していた。【０１６４】
また、図７Ｂに示すように、スケジュールｅで得られた脂肪細胞に含まれる脂肪滴の直径は、スケジュールａで得られた細胞のそれに比べて、約２５％まで縮小していた。【０１６５】
また、図８Ａ及び図８Ｂに示すように、スケジュールｅにてAIMを負荷した場合には、スケジュールａにてAIMを負荷しなかった場合に比べて、培養上清中のグリセロール濃度及び遊離脂肪酸濃度がいずれも顕著に増加していた。【０１６６】
さらに、スケジュールｅにてAIMを負荷した場合には、AIMの負荷後、培養液の粘度が急激に増加することが観察された。この観察結果は、培養液中のグリセロール及び遊離脂肪酸の量が著しく増加していたことを支持するものであった。【０１６７】
このように、AIMは成熟脂肪細胞におけるlipolysisを誘導することが確認された。以上の結果からAIMは、脂肪前駆細胞の分化及び成熟を抑制するだけではなく、成熟した脂肪細胞にも作用してlipolysisを誘導し、成熟脂肪細胞を“痩せさせる機能”を発揮することが確認された。
【実施例４】
【０１６８】
［脂肪細胞分化に伴う遺伝子群のAIMによる発現制御］
上述の実施例２及び実施例３において上述の５つのスケジュールａ〜ｅにて培養された細胞を分化誘導刺激開始から１０日目（day12）に回収し、脂肪化に伴い発現する遺伝子の発現を定量RT-PCR（QPCR）により解析した。【０１６９】
ここで、図９には、脂肪細胞の分化に伴う主な遺伝子の発現様式を模式的に示す。図９の左の破線box内に示すように、分化誘導期には、分化誘導刺激によって一過性にC/EBPβが誘導され、それによってC/EBPαが、次いでPPARγの発現が上昇する。さらにPPARγによってFatty acid synthase (FAS)、CD36、Glucose transporter 4 (Glut4)などの、分化した脂肪細胞にとって必要な機能遺伝子の発現が誘導される。【０１７０】
その後、C/EBPα以下の遺伝子発現がある程度上昇すると、図９の右の破線box内に示すように、FASによって産生されたfatty acids (FAs)がPPARγタンパク質を活性化し、それがC/EBPα遺伝子の発現を一定のレベルに維持する。C/EBPαはさらにPPARγ遺伝子の発現を誘導する。このような交互刺激によって、C/EBPβの発現がすでに低下していても、PPARγ及びC/EBPαの発現を保持する機構が成立している（図９の右の破線box参照）。【０１７１】
図１０には、５つのスケジュールａ〜ｅにて培養された細胞における遺伝子発現を解析した結果を示す。図１０に示すように、スケジュールｄにてAIM（マウスAIM、本実施例４において以下同様。）を分化誘導刺激の初期のみ（day2-day4）負荷した場合及びスケジュールｂにてAIMを分化誘導刺激から１０日間（day2-day12）負荷した場合には、C/EBPα, PPARγ, CD36, Glut4の各遺伝子発現はほぼ完全に抑制されていた。なお、興味深いことに、これらの場合には、FAS遺伝子のみ、発現がむしろやや上昇していた。【０１７２】
一方、スケジュールｃにてAIMを分化誘導前にのみ（day(-2)-day2）負荷した場合及びスケジュールｅにてAIMを細胞の分化誘導後にのみ（day6-day12）負荷した場合には、スケジュールａにてＡＩＭを負荷しなかった場合と比べて、遺伝子発現パターンは変化しなかった。このように、FAS遺伝子発現以外の遺伝子については、AIMの負荷による発現制御は、上述の実施例２における細胞の形態学的な変化の結果と整合するものであった。
【実施例５】
【０１７３】
［AIMによるFAS酵素活性の抑制］
AIMがFASの酵素活性に影響を及ぼすかどうかを調べた。すなわち、図１１Ａに示すように、上述のスケジュールｄにて、3T3L1細胞の分化誘導初期のみ（day2-day4）AIM（マウスAIM、本実施例５において以下同様。）を負荷し、その後、分化誘導開始から２日後（day4）に細胞を回収して細胞溶解物（cell lysate）を調製し、FASの酵素活性を測定した。【０１７４】
また、上述のスケジュールｅに類似したスケジュールｆとして、3T3L1細胞が分化した後４日間（day8-day12）AIMを負荷し、その後、分化誘導開始から１０日後（day12）に細胞を回収して細胞溶解物（cell lysate）を調製しFASの酵素活性を測定した。なお、FASの酵素活性は、malonyl-CoAの消費量に基づいて測定した。【０１７５】
また、AIMに代えてFAS抑制剤（C75）を使用し、スケジュールｄ及びｆにて当該FAS抑制剤を25μMの濃度で負荷し、上述のAIMの場合と同様に、分化誘導開始から２日後（day4：スケジュールｄ）及び１０日後（day12：スケジュールｆ）に細胞を回収して、FASの酵素活性を測定した。【０１７６】
さらに、比較のため、上述のスケジュールａにてAIMを負荷することなく培養した細胞についても、分化誘導開始から２日後（day4）及び１０日後（day12）のそれぞれのタイミングで同様にFASの酵素活性を測定した。【０１７７】
図１１Ｂ及び図１１Ｃには、FAS酵素活性（Fatty acid synthase activity）（nmol NADPH/min/mg protein）の測定結果を示す。図１１Ｂには、スケジュールａにてAIMが負荷されなかった場合（None）、スケジュールｄにてAIMが負荷された場合（AIM(5μg/ml））、スケジュールｄにてFAS抑制剤が負荷された場合（C75 (25μM)）のそれぞれについて分化誘導開始から２日後（day4）に得られた結果を示している。図１１Ｃには、スケジュールａにてAIMが負荷されなかった場合（None）、スケジュールｆにてAIMが負荷された場合（AIM(5μg/ml））、スケジュールｆにてFAS抑制剤が負荷された場合（C75 (25μM)）のそれぞれについて分化誘導開始から１０日後（day12）に得られた結果を示している。【０１７８】
図１１Ｂ及び図１１Ｃに示すように、いずれのスケジュールの場合でも、AIMを負荷した場合には、AIMを負荷しなかった場合に比べて、FASの酵素活性が著しく低下していた。このAIMによるFAS酵素活性の低下の度合いは、FAS抑制剤であるC75を有効濃度（25μM）で負荷した場合と同程度であった。【０１７９】
また、図１２Ａ及び図１２Ｂには、スケジュールａにてAIMを負荷されなかった場合（None）、スケジュールｄにてAIMが負荷された場合（AIM(5μg/ml））、スケジュールｄにてFAS抑制剤が負荷された場合（C75 (25μM)）のそれぞれについて、分化誘導開始から２日後（day4）に、細胞のoil-red-o染色及び遺伝子発現のRT-PCR解析を行った結果をそれぞれ示す。【０１８０】
また、図１３Ａ及び図１３Ｂには、スケジュールａにてAIMを負荷されなかった場合（None）、スケジュールｆにてAIMが負荷された場合（AIM）、スケジュールｆにてFAS抑制剤が負荷された場合（C75）について、培養液中のグリセロール濃度（Glycerol Efflux）（ｍＭ）及び遊離脂肪酸濃度（FFA Efflux）（×１０  ｍＭ）を分化誘導開始から１０日後（day12）に測定した結果をそれぞれ示す。【０１８１】
これら図１２Ａ、図１２Ｂ、図１３Ａ及び図１３Ｂに示されるように、AIMを負荷した場合とFAS抑制剤（C75）を負荷した場合とでは、細胞の形態、遺伝子発現、グリセロール及び遊離脂肪酸の細胞外放出について、同様の効果がみられた。すなわち脂肪前駆細胞の分化及び成熟脂肪細胞におけるlipolysisの両方について、AIMはC75と同様の効果を示した。【０１８２】
上述の実施例４においてFAS遺伝子の発現のみがAIMによって抑制されなかったのは、AIMによるFAS機能抑制により、恐らくネガティブ・フィードバックがかかり、PPARγ以外の発現制御系（例えばLXR-SREBP1系による制御など）によってFAS遺伝子の発現が上昇したのではないかと考えられた。【０１８３】
また、成熟脂肪細胞にAIMを負荷しFASの機能を抑制すると、内因性の遊離脂肪酸（FFAs）の量が低下するため、そのフィードバックとしてlipolysisが誘導され、FFAsの量を調整していると考えられた。
【実施例６】
【０１８４】
［脂肪細胞内におけるAIMとFASとの結合］
細胞中におけるFASの活性調節は、リン酸化などのタンパク修飾によってではなく、基本的に発現制御と分子構造の調節によって賄われる。AIM負荷によりFASの活性が低下していても、FASの発現は上述のようにmRNAレベル、タンパク質量のいずれについても低下は認められない。したがって、可能性の一つとして、AIMがFASに結合し構造的にその活性を抑制していることが考えられた。【０１８５】
そこで、これを確認するため、まず、HAタグが付加されたAIM（マウスAIM）と、FLAGタグが付加されたFASと、を共に発現するHEK293T細胞を作製した。そして、このHEK293T細胞を所定期間培養した後回収して、cell lysateを調製し、抗FLAG抗体を用いて免疫沈降を行った。【０１８６】
その結果、図１４に示すように、HAタグが付加されたAIM（HA-AIM）とFLAGタグが付加されたFAS（FL- FAS）との共沈降が認められた。すなわち、AIMがFASと結合するポテンシャルを有することが確認できた。この結果は、上述の仮説を支持するものであった。
【実施例７】
【０１８７】
［AIMの脂肪細胞への取り込み］
AIMはマクロファージから分泌される可溶性タンパク質である。通常、分泌タンパク質分子は、標的細胞の膜表面に存在する受容体に結合し、シグナル伝達を誘起して、標的細胞に機能的に作用する。しかし、上述のようにAIMがFASと結合しその活性を抑制するためには、AIMは分子として細胞に取り込まれなくてはならない。【０１８８】
そのことを証明するために、上述の他の実施例と同様に3T3L1細胞を分化誘導し、分化誘導直後の培養４日目（day4）から３時間、AIM（マウスAIM）(5μg/ml)を負荷した。その後、細胞を回収し、抗AIM抗体を用いて細胞内を染色した。なお、さらに細胞の核はDAPIを用いて染色した。【０１８９】
図１５Ａ及び図１５Ｂには、AIMを負荷してから３時間培養した後に染色された細胞を共焦点顕微鏡で観察した結果の一例を示す。図１５Ａは２００倍、図１５Ｂは４００倍の倍率で撮影された結果である。図１５Ａ及び図１５Ｂに示されるように、AIMはドット状（原図では赤色）に細胞質内に取り込まれていることが確認された。【０１９０】
さらに、金コロイド標識された抗AIM抗体を用いた免疫電子顕微鏡法により、AIMが脂肪細胞に取り込まれることを確認した。図１６Ａ及び図１６Ｂには、AIMを負荷してから３時間（3hr）及び１２時間（overnight）培養した細胞の免疫電子顕微鏡写真をそれぞれ示す。図１６ＡはAIM負荷から３時間後に回収された細胞、図１６ＢはAIM負荷から１２時間経過後に回収された細胞についての結果である。【０１９１】
図１６Ａに示すように、AIMの存在下で３時間培養された細胞の細胞質内においては、エンドソーム（endosome）と思われる粒子（particle）の膜上にAIMがドット状に集積していた。これは、脂肪細胞の表面の何らかの分子にAIMが結合し、そのまま当該表面分子と共に細胞内に取り込まれた（Endocytosisされた）ものと考えられた。【０１９２】
また、図１６Ｂに示すように、AIMの存在下で１２時間培養された細胞の細胞質内においては、エンドソーム（endosome）が変性し、そこからAIMが細胞質中に移行している様子も観察された。なお、ファゴソーム（Phagosome）やファゴリソソーム（Phagolysosome）、あるいはミトコンドリアにAIMの集積はなかった。図１７には、これらの知見に基づいて推測された、AIMが細胞内に取り込まれる機構を模式的に示す。
【実施例８】
【０１９３】
［細胞表面のCD36分子を介したAIMの取り込み（internalization）］
上述のように、AIMは細胞表面分子を介して細胞内に取り込まれると考えられた。そこで、その細胞表面分子を同定した。【０１９４】
CD36は膜２回貫通型の分子で、脂肪細胞やマクロファージに発現しており、脂肪酸、LDLなどを始め多くの分子の細胞内取り込みに関与している。そこで、FLAGタグをC端に付加したマウスCD36を過剰発現するHEK293細胞を作製し、当該細胞をマウスAIMとともに３時間培養した。その後、細胞を回収し、抗AIM抗体及び抗CD36抗体を用いて染色し、共焦点顕微鏡で観察した。【０１９５】
図１８Ａ〜Ｄには、得られた共焦点顕微鏡写真を示す。図１８Ａは２次元的に解析した結果（2-dimensional analysis）、図１８Ｂ〜Ｄは３次元的に解析した結果（3-dimensional analysis）をそれぞれ示す。図１８Ａ〜Ｄに示すように、２次元的及び３次元的に解析すると、細胞のCD36が発現している部位（原図ではFLAGが赤色で示された）にAIMのドット（原図では緑色で示された）が結合している様子が観察された。また、一部の細胞については、AIMが細胞内に取り込まれている様子も観察された。これらの結果から、AIMはCD36に結合し、細胞内に取り込まれる（internalizeされる）と考えられた。【０１９６】
ただし、今回用いたHEK293T細胞においては、AIMが細胞表面に存在している様子が主に観察され、上述の実施例７における脂肪細胞（分化した3T3-L1細胞）に比べて、AIMが細胞内に移行されている様子はあまり観察されなかった。これはHEK293T細胞が脂肪細胞に比較してエンドサイトーシス（endocytosis）の能力が弱いため、CD36に結合したAIMがそのまま細胞表面にとどまりやすかったことによると考えられた。【０１９７】
また、さらに、AIMがCD36を介して取り込まれることを確認するため、上述の分化誘導により分化させた3T3L1脂肪細胞にAIMを負荷する際に、CD36へのリガンドの結合を阻害する中和抗体を同時に負荷した。その後、培養された3T3L1脂肪細胞を回収し、抗AIM抗体を用いて染色した。また、CD36の中和抗体を負荷せずAIMのみを同様に負荷して培養した3T3L1脂肪細胞についても同様の染色を行った。【０１９８】
図１９Ａ及び図１９Ｂには、CD36の中和抗体を負荷しなかった場合（no CD36 antibody）及びCD36の中和抗体を負荷した場合（with CD36 neutralizing antibody）の染色結果をそれぞれ示す。図１９Ａに示すように、CD36の中和抗体を負荷しなかった場合には、AIMが細胞内に取り込まれた様子が観察された（原図ではAIMは細胞内に赤色のドット状に検出された）。一方、図１９Ｂに示すように、CD36の中和抗体を負荷した場合には、細胞内は抗AIM抗体によって全く染色されず、AIMの取り込みは観察されなかった。【０１９９】
すなわち、CD36の中和抗体の負荷によって、細胞内へのAIMの取り込みが顕著に抑制された。以上の結果から、脂肪細胞へのAIMの取り込みをつかさどる分子の少なくとも一つはCD36であることが明らかになった。
【実施例９】
【０２００】
［AIM欠損マウスにおける体重及び脂肪量の増加］
上述の実施例で得られた実験結果から、AIMは脂肪前駆細胞の成熟及び分化を抑制し、また成熟した脂肪細胞にlipolysisを誘導することが明らかとなった。そこで、この作用の生体での効果を調べるために、AIMがノックアウトされたAIM欠損マウス（AIM-/-マウス）、及びAIMをノックアウトしていない正常なマウス（AIM+/+マウス）に高脂肪食（HFD）を20週間以上投与し、体重と内臓白色脂肪の重量とを測定した。その結果、AIMが欠損したAIM-/-マウスではAIM+/+マウスに比して、体重及び内臓白色脂肪の重量の増加が有意に亢進していた（data not shown）。【０２０１】
さらに、肥満の進行を増強させるためにそれぞれのマウスにアディポネクチンノックアウトマウス
(Adipo-/-マウス)を交配してAIM-/- Adipo-/-マウスとAIM+/+Adipo-/-マウスとを作製した。そして、これらのマウスにHFDを同様に20週間以上負荷し解析した。【０２０２】
図２０Ａ及び図２０Ｂには、AIM-/- Adipo-/-マウス（AIM-/-）及びAIM+/+Adipo-/-マウス（AIM+/+）の腹腔内を撮影した写真をそれぞれ示す。図２０Ａにおいて、上側の矢印は腸管膜脂肪組織を示し、下側の矢印は精巣上体脂肪組織を示している。図２１Ａ及び図２１Ｂには、AIM+/+ Adipo-/-マウス（WT）及びAIM-/- Adipo-/-マウス（KO）について、体重（Body weight (g)）及び内臓白色脂肪組織の重量（Total fat tissue (g)）を測定した結果をそれぞれ示す。【０２０３】
図２１Ａ及び図２１Ｂに示すように、上述のアディポネクチンをノックアウトしていないマウスと同様に、AIMが欠損したAIM-/-Adipo-/-マウスでは、AIM+/+Adipo-/-マウスに比べて、体重及び内臓白色脂肪重量の増加が亢進していた。この体重の増加の亢進は、主に脂肪組織重量の増加の亢進によるものであった。【０２０４】
これらの結果は、脂肪組織に浸潤したマクロファージが分泌するAIMが、周辺の脂肪細胞において、FAS活性を低下させ、lipolysisを誘導するとともに、新たな成熟脂肪細胞の分化を抑制することによって、脂肪組織の量（mass）を抑制性に調節していることを支持する結果であった。【０２０５】
また、マウスに対するFAS阻害剤（C75）の投与は、視床下部におけるニューロペプチドＹ（NPY）の産生量を低減させ、顕著な食欲の減退と、体重の減少を引き起こすことが報告されている。【０２０６】
これに対し、AIM-/-マウスとAIM+/+マウスとで摂食量（Food intake）に差は見られなかった。したがって、今回のAIM投与実験において、上述のFAS阻害剤（C75）を全身性に投与した場合に見られるような脳神経系に対する作用は存在せず、AIM-/-マウスでの脂肪量増加は、AIMの欠損が脂肪細胞に直接的に与えた影響によるものと考えられた。【０２０７】
これは、AIMが作用するには、視床下部の細胞には存在せず、脂肪細胞に存在する、特異的なエンドサイトーシスメディエータであるCD36の存在が必要であるためと考えられた。
【実施例１０】
【０２０８】
［肥満マウスへのAIM投与による脂肪融解（Lipolysis）の誘導］
HFDを20週以上負荷して肥満したAIM-/-マウスを作製した。一方、精製したマウス組換えAIMタンパク質を準備し、当該AIMをPBS（リン酸バッファー、pH7.4）に0.2mg/mlの濃度で溶解したAIM溶液を注射剤として調製した。そして、このAIM注射剤を、マウスの尾静脈から週２回、４週間投与した。【０２０９】
投与量は、マウスの体重１ｇあたり１μｇとした。なお、この投与量は、上述のin vitro実験における培養液中のAIM濃度に基づいて、マウスの血液中におけるAIM濃度が当該培養液中のAIM濃度と同程度となるよう考慮して決定した。【０２１０】
また、コントロールとして、同様にHFDを20週以上負荷して肥満したAIM-/-マウスに、同量の牛血清アルブミン（BSA）を同様のスケジュールで尾静脈投与した。そして、投与後のマウスについて、体重を測定するとともに、内臓白色脂肪組織を採取して重量を測定した。【０２１１】
その結果、体重及び脂肪組織の総重量についてはAIMの投与の有無によって有意な差は認められなかったが、採取された脂肪組織において、局所的に（スポット状に）、脂肪細胞の縮小及び融解、それを処理するべく集積したマクロファージ、さらに恐らく脂肪滴をほぼ放出（融解）してしまった脂肪細胞と思われる、脂肪細胞の前駆細胞（分化誘導前の3T3L1様の細胞）が観察された。【０２１２】
図２２Ａ及び図２２Ｂには、Hematoxylin-Eosin (HE)染色された脂肪組織切片を顕微鏡で観察した結果を示す。図２２Ａはアルブミンを投与したマウス（BSA injected (control)）、図２２ＢはAIMを投与したマウス（rAIM injected）についての結果をそれぞれ示す。【０２１３】
図２２Ａ及び図２２Ｂに示すように、AIMを投与した場合には、アルブミンを投与した場合に比べて、脂肪組織における脂肪細胞のサイズが顕著に減少するとともに、マクロファージの顕著な集積が確認された。すなわち、肥満マウスへの精製AIMタンパク質のシステミックな静脈投与は、当該肥満マウスの脂肪組織において脂肪融解（Lipolysis）を誘導していた。【０２１４】
今回の実験において、脂肪組織の一部において局所的にLipolysisが観察された理由は、恐らく、静脈注射による全身投与では、脂肪組織中での局所濃度が局所的にしか十分上昇せず（局所濃度は毛細血管の走行などにより左右されると考えられる）、脂肪組織全体でlipolysisを誘導し脂肪組織の総重量及び体重を減少させるにはいたらなかった可能性が高いと考えられた。しかし、上述のように、AIMは生体においても、明らかにlipolysisを誘導する作用を示すことが確認された。なお、AIMの投与によるマウスの摂食量の変化は認められなかった。【０２１５】
上述のように、AIMによりlipolysisを誘導するためには、生体における局所濃度を高めることが有効と考えられた。したがって、例えば、局所注射によってAIMを脂肪組織に局所的に注入することで、lipolysisをより確実に誘導し、脂肪組織の重量及び体重を効果的に減少させることができると考えられた。また、AIMの全身投与及び局所投与によれば、生体における脂肪前駆細胞の分化を抑制する効果も得られると考えられた。【０２１６】
ここで、上述の実施例１〜１０により得られた知見の一部について説明する。実施例１では、肥満したマウスの脂肪組織中に浸潤したマクロファージはAIMを産生することが確認された。肥満したヒトの脂肪組織中にも同様にマクロファージが浸潤することが知られている。したがって、ヒトにおいても脂肪組織中に浸潤したマクロファージはAIMを産生していると考えられた。【０２１７】
実施例２では、AIMが脂肪前駆細胞の成熟分化を抑制することが確認された。また、マウスAIM及びヒトAIMのいずれも同様の分化抑制機能を示した。このようなマウスとヒトとの間での分化抑制機能の互換性は、AIMのアミノ酸配列の相同性が高いことに加え、脂肪前駆細胞の分化及びAIMの機能発現に関与している分子の相同性もまた高いことによるものと考えられた。【０２１８】
実施例３では、AIMが成熟した脂肪細胞に作用して脂肪滴融解（Lipolysis）を誘導することが確認された。実施例７及び実施例８では、AIMが脂肪細胞の細胞膜表面上のCD36分子に結合し、endocytosisによって細胞質内に取り込まれることが確認された。【０２１９】
実施例５及び実施例６では、細胞内に取り込まれたAIMが細胞質に移行し、脂肪酸合成酵素（Fatty acid synthase; FAS）と結合しその酵素活性を抑制することが確認された。したがって、AIMによる脂肪前駆細胞の分化抑制及び成熟脂肪細胞における脂肪分解誘導は、このAIMによるFAS抑制によるものであると考えられた。【０２２０】
実施例９では、高脂肪食（High Fat Diet; HFD）を負荷すると、AIM欠損（AIM-/-）マウスでは正常（AIM+/+）マウスに比して体重及び脂肪組織の重量の増加が亢進することが確認された。【０２２１】
しかしながら、AIM欠損（AIM-/-）マウスと正常（AIM+/+）マウスとの間に摂食量の違いは認められなかった。すなわち、AIMは、従来の抗肥満薬のように食欲の減退を誘導することなく、全く異なる機構（AIMが脂肪細胞又は脂肪組織に特異的に直接作用するという機構）で体重及び脂肪組織重量の増加を抑制していると考えられた。【０２２２】
さらに、実施例１０では、肥満したAIM-/-マウスに尾静脈から精製組換えAIMタンパクを全身投与（４週間）すると、脂肪組織に局所的にlipolysisを生ずることが確認された。すなわち、in vitroで確認された培養細胞に対する効果と同様の効果が、生体においても実際に確認された。【０２２３】
上述のとおり、ヒトAIM及びマウスAIMは、保存された３つの特徴的なドメイン（ＳＲＣＲ１〜３）を有し、アミノ酸配列の相同性は６８％と高い。さらに、脂肪細胞へのAIMの取り込みに関与するCD36及びAIMによる標的分子の一つであるFASもまた、ヒトとマウスとの間で相同性が高い。すなわち、AIMによる脂肪前駆細胞の分化及び成熟脂肪細胞におけるlipolysisを担う分子は、いずれもヒトとマウスとの間で相同性が高いものであった。なお、従来、他の医薬について、マウスを用いた実験で効果があったにもかかわらずヒトでは効果が得られなかった例があるが、これは主に当該効果に関与する分子がマウスとヒトとの間で相同性が低いことに基づくものであった。【０２２４】
また、in vitroにおいて、ヒトAIM及びマウスAIMのいずれも同一の濃度範囲でマウス由来の脂肪細胞に対して同様の分化抑制機能及び脂肪分解誘導機能を発揮した。そして、in vitroで効果が得られた濃度に対応する投与量でAIMをマウスの生体に投与したところ、実際に、脂肪組織におけるlipolysisが確認された。したがって、AIMは、ヒトの生体においても同様に脂肪細胞に作用して、同様の効果をもたらす可能性が極めて高いと考えられた。【０２２５】
また、AIMが上述のような機能を発揮するためには、CD36を介した細胞内への取り込みがなくてはならない。この作用メカニズムによれば、AIMを生体に投与した場合には、従来のFASの阻害剤で見られたような脳神経系への副作用は考えられない。【０２２６】
実際に、AIM欠損マウスの摂食量は、正常なマウスと差がなかった。したがって、ヒト生体にAIMを投与した場合には、少なくとも従来のFASの阻害剤で見られたような脳神経系への副作用は生じないと考えられた。
【実施例１１】
【０２２７】
［肥満マウスに投与されたAIMの脂肪細胞への取り込み及びFASとの結合］
肥満マウスから採取された脂肪組織試料を、抗マクロファージF4/80抗体（赤色）及び抗マウスAIMポリクローナル抗体（SA-1）（緑色）で共染色し、蛍光顕微鏡で観察した。その結果、マクロファージを取り囲む脂肪細胞のいくつかが抗AIM抗体で染色された。一方、マクロファージから離れている脂肪細胞は、抗AIM抗体で染色されなかった。これらの結果は、マクロファージに由来するAIMが組織内の脂肪細胞により取り込まれることを示すものと考えられた。【０２２８】
さらに、肥満AIM-/-マウスの精巣上体脂肪組織に、マウスrAIMを直接注射し、その後、当該脂肪組織を組織学的に分析した。すなわち、精巣上体脂肪組織の数か所に合計１００μｇのrAIMを直接注射した。注射から３時間後に、精巣上体脂肪組織から組織切片を作製し、当該組織切片を抗AIM抗体及び抗マクロファージ抗体で染色した。【０２２９】
その結果、rAIMが注射された脂肪組織内では、AIM-/-脂肪細胞がAIM陽性に染色された。すなわち、脂肪組織において外因性のrAIMが脂肪細胞に取り込まれることが確認された。より高倍率の蛍光顕微鏡観察では、脂肪細胞の細胞質内において、取り込まれた（endocytosed）rAIMの点状の蓄積（dot-forming accumulation）が観察された。【０２３０】
また、rAIMを静脈注射によりAIM-/-マウスに全身投与し、その後、脂肪組織を組織学的に分析した。すなわち、AIM-/-マウスに、静脈内注射により２００μｇのrAIMを全身投与した。注射から３時間後に、精巣上体脂肪組織から組織切片を作製し、当該組織切片を抗AIM抗体及び抗マクロファージ抗体で染色した。【０２３１】
その結果、脂肪組織の脂肪細胞内において、上述の組織内への直接注射の場合に比べて低いレベルではあるが、取り込まれたrAIMのシグナルが検出された。興味深いことに、脂肪組織のマクロファージもまた抗AIM抗体で染色された。この結果は、外因性のrAIMは同様にマクロファージに取り込まれることを示唆していた。【０２３２】
さらに、これらの脂肪組織に由来する溶解物（lysate）を使用して、取り込まれたrAIMを沈殿させ、内因性のFASが共沈されるかどうかを調べた。すなわち、HA-tagged rAIMと抗HA抗体とを使用し、沈殿物におけるFASの存在をウェスタンブロッティングにより分析した。【０２３３】
その結果、rAIM及びFASの両タンパク質は共沈された。この結果から、取り込まれたrAIMと細胞質内のFASとの結合が確認された。【０２３４】
これら全ての結果は、脂肪細胞によるAIMの取り込み、及びそれに続く当該AIMと細胞質内FASとの結合、がin vivoで生理学的に達成されたことを裏付けるものであった。
【実施例１２】
【０２３５】
［AIM欠損がもたらす肥満の促進］
in vivoにおけるAIMの脂肪細胞に対する効果を試験するために、４０週以上にわたってHFDが与えられたAIM-/- Adipo-/-マウス及びAIM+/+ Adipo-/-マウスの肥満状態を解析した。なお、Adipo-/-バックグラウンドのマウスの採用は、脂肪組織量に対するAIM欠損の影響を試験するにあたって、adiponectinの関与を排除する上で有用であった。【０２３６】
解析の結果を図２３Ａ〜Ｅに示す。図２３Ａは、HFDを与える前の体重（BW(pre)）（ｇ）を示し、図２３Ｂは、HFDを与えた後の体重（BW(HFD)（ｇ））を示す。図２３Ｃ、図２３Ｄ及び図２３Ｅは、HFDを与えた後の内臓脂肪（Visceral Fat）の重量（ｇ）、皮下脂肪（Subcutaneous Fat）の重量（ｇ）及び肝臓（Liver）の重量（ｇ）をそれぞれ示す。図２３Ａ〜Ｅにおいて、「＋／＋」はAIM+/+ Adipo-/-マウスの結果を示し、「−／−」はAIM-/- Adipo-/-マウスの結果を示す。【０２３７】
図２３Ａ及び図２３Ｂに示すように、体重の増加は、AIM+/+ Adipo-/-マウスに比べて、AIM-/- Adipo-/-マウスにおいて加速された。この体重の違いは、図２３Ｃ及び図２３Ｄに示すように、主に脂肪組織の重量の増加によるものであった。【０２３８】
また、図２３Ｅに示すように、肝臓組織の重量も同様に、AIM+/+ Adipo-/-マウスに比べて、AIM-/- Adipo-/-マウスにおいて顕著に増加した。この結果は、AIMが肝細胞（hepatocyte）にも作用し、当該細胞内のグリセロール貯蔵を制御している可能性を示すものであった。なお、心臓や腎臓といった他の臓器の重量は、両タイプのマウスで同程度であった。【０２３９】
同様の結果は、４０週以上にわたってHFDが与えられたadiponectinをノックアウトしていないAIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの解析においても観察された。解析の結果を図２４Ａ〜Ｅに示す。図２４Ａ〜Ｅに示すように、Adipo-/-バックグラウンドのマウスと同様、AIM+/+マウスに比べて、AIM-/-マウスの体重、脂肪組織重量及び肝臓重量の増加がより顕著であった。【０２４０】
図２５には、HFDが与えられたAIM-/-マウス及びAIM+/+マウスについて、その食欲の指標となる食餌摂取量（Food intake (g/24h)）を評価した結果を示す。図２５において、「＋／＋」はAIM+/+マウスの結果を示し、「−／−」はAIM-/-マウスの結果を示す。【０２４１】
ここで、上記実施例９でも述べたように、FAS阻害剤C75の投与は、マウスの視床下部においてニューロペプチドＹ（NPY）の産生を減少させ、その結果、食欲の顕著な減退をもたらし、全体として、体重の減少を加速することが報告されている（Loftus, T.M. et al. Reduced food intake and body weight in mice treated with fatty acid synthase inhibitors. Science 288, 2379-2381 (2000)、Kumar, M.V., Shimokawa, T., Nagy, T.R. & Lane, M.D. Differential effects of a centrally acting fatty acid synthase inhibitor in lean and obese mice. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 1921-1925 (2002)、Shimokawa, T., Kumar, M.V. & Lane, M.D. Effect of a fatty acid synthase inhibitor on food intake and expression of hypothalamic neuropeptides. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 66-71 (2002)、Chakravarthy, M.V. et al. Inactivation of hypothalamic FAS protects mice from diet-induced obesity and inflammation. J. Lipid Res. 50, 630-640 (2009)）。【０２４２】
これに対し、本発明に係る実験においては、図２５に示すように、AIM-/-マウス及びAIM+/+マウスの２４時間での食餌摂取量（g/24h）は同程度であった。すなわち、AIMは神経学的な効果をもたないことが示された。これは、AIMの作用には、視床下部の細胞が発現しているとの報告がないCD36を介した、特異的な取り込み過程（endocytotic process）が要求されるためと考えられる。【０２４３】
なお、HFDが与えられたAIM-/-マウス及びAIM+/+マウス（Adipo-/-バックグラウンドかAdipo+/+バックグラウンドかにかかわらず）において、TNFα及びIL-6の血清中レベルに顕著な違いはなく、血中のグルコースレベルもまた同程度であった。
【実施例１３】
【０２４４】
［AIM欠損マウスにおける脂肪細胞サイズ、脂肪組織量及び体重の増加］
AIM-/-マウス及びAIM+/+マウスに、２０週にわたってHFDを付与した。そして、それぞれのマウスから採取された精巣上体脂肪組織切片をHE染色し、顕微鏡下で観察した。また、画像解析ソフトをインストールしたコンピュータを使用して、各組織切片の顕微鏡写真内の異なる領域における５０個の独立した脂肪細胞のサイズを評価した。脂肪細胞のサイズは、平均値±標準偏差（SEM）(in pixels)で表した。【０２４５】
図２６には、AIM+/+マウス（「＋／＋」）及びAIM-/-マウス（「−／−」）のそれぞれについて、脂肪細胞のサイズ（pixel/cell）を測定した結果を示す。図２７Ａ及び図２７Ｂには、AIM+/+マウス（「＋／＋」）及びAIM-/-マウス（「−／−」）から採取された内臓脂肪組織切片をHE染色して位相差顕微鏡下で観察した結果を示す。なお、図２７Ａ及び図２７Ｂに示すスケールバーは１００μｍを示す。【０２４６】
図２６、図２７Ａ及び図２７Ｂに示すように、上述のin vitroでの3T3-L1細胞における観察と一致して、肥満AIM-/-マウスの内臓脂肪細胞のサイズは、肥満AIM+/+マウスのそれに比べて大きかった。【０２４７】
また、AIM-/-マウス及びAIM+/+マウスに、１２週にわたってHFDを付与し、体重及び脂肪組織の重量を測定した。図２８Ａ、図２８Ｂ及び図２８Ｃには、AIM+/+マウス（「＋／＋」）及びAIM-/-マウス（「−／−」）のそれぞれについて、体重（Body）（ｇ）、内臓脂肪組織（Visceral fat）の重量（ｇ）及び皮下脂肪組織（Subcutaneous fat）の重量（ｇ）を測定した結果をそれぞれ示す。【０２４８】
図２８Ａ〜Ｃに示すように、上述の脂肪細胞の増大に関連して、１２週間のHFD付与後の体重、内臓脂肪組織の重量及び皮下脂肪組織の重量の増加は、AIM+/+マウスに比べて、AIM-/-マウスにおいてより加速されていた。【０２４９】
ここで、特筆すべきは、HFDを与えられたAIM+/+マウスとAIM-/-マウスとで代謝速度（metabolic rates）が同程度であったことである。図２９Ａ、図２９Ｂ、図２９Ｃには、AIM+/+マウス（「＋／＋」）及びAIM-/-マウス（「−／−」）のそれぞれについて、代謝速度を反映する指標として、体温（Body temperature）（℃）、酸素消費速度（Oxygen Consumption）（VO2/min/kg）及び食餌摂取量（Food Intake）（g/24h）を評価した結果をそれぞれ示す。なお、図２９Ｃには、HFDを与えた場合（HFD）と、通常の食餌を与えた場合（normal chow）とでの２４時間あたりに摂取した食餌の量を示している。図２９Ａ〜Ｃに示すように、体温、酸素消費速度及び食餌摂取量のいずれも、AIM+/+マウスとAIM-/-マウスとで大差はなかった。【０２５０】
さらに、HFDを与えられたAIM+/+マウスとAIM-/-マウスとでは、運動性（Locomotor activity）もまた同程度であった。図２９Ｄには、AIM+/+マウス（「＋／＋」）及びAIM-/-マウス（「−／−」）のそれぞれについて、運動性（Locomotor activity）（count）を評価した結果を示す。図２９Ｄには、暗い環境下（Dark）での１２時間及び明るい環境下（light）での１２時間における運動性及び合計２４時間での総合的な運動性（Total）を示す。【０２５１】
これらの結果から、AIMは、脂肪細胞に特異的に作用することによって、脂肪組織量に影響を与えると考えられた。
【実施例１４】
【０２５２】
［AIM欠損マウスに対するAIM投与による脂肪組織量及び体重の増加抑制］
AIM-/-マウスにHFDを１５週与える間、最後の９週間に、マウスrAIMを当該AIM-/-マウスの腹腔内に注射し、当該rAIMの投与が脂肪組織量の増加を抑制するかどうかを調べた。すなわち、最後の９週間にわたって、AIM-/-マウスの腹腔内にrAIMを週に３回注射し（［１５０μｇ／注射／マウス］×［３回／週］＝［４５０μｇ／マウス／週］）、１５週目に体重、内臓脂肪の重量及び皮下脂肪の重量を測定した。なお、対照として、同様の投与スケジュールで腹腔内にBSA（Bovine Serum Albumin）を投与したAIM-/-マウスについても、体重、内臓脂肪の重量及び皮下脂肪の重量を測定した。【０２５３】
図３０Ａ、図３０Ｂ及び図３０Ｃには、ＢＳＡが投与されたAIM-/-マウス（「BSA」）及びrAIMが投与されたAIM-/-マウス（「rAIM」）のそれぞれについて、体重（Body）（ｇ）、内臓脂肪組織（Visceral fat）の重量（ｇ）及び皮下脂肪組織（Subcutaneous fat）の重量（ｇ）を測定した結果を示す（n=3）。【０２５４】
図３０Ａ〜Ｃに示すように、内臓脂肪の重量及び皮下脂肪の重量の両方の増加は、体重と同様に、対照としてBSAを注射されたマウスに比べて、rAIMを注射されたマウスにおいて顕著に小さかった。【０２５５】
さらに、BSAが投与されたAIM-/-マウス及びrAIMが投与されたAIM-/-マウスのそれぞれについて、FSP27、Perilipin及びAdipophilinのmRNAレベルを評価した。mRNAレベルは、精巣上体脂肪から単離されたRNAを使用し、QPCRにより測定した。【０２５６】
図３１には、BSAが投与されたAIM-/-マウス（「BSA」）及びrAIMが投与されたAIM-/-マウス（「rAIM」）のそれぞれについて、評価されたFSP27、Perilipin及びAdipophilinのmRNAレベルを示す（n=3）。なお、図３１に示す値は、GAPDHで正規化し（normalized to GAPDH）、BSAを注射されたマウスの結果に対する相対値（Relative Expression）として表した。【０２５７】
図３１に示すように、上述の3T3-L1脂肪細胞をrAIMで処理した場合に観察されたのと同様に、lipolysisが進行するにつれて減少するFSP27、Perilipin及びAdipophilinのmRNAレベルもまた、対照としてBSAを注射されたマウスに比べて、rAIMを注射されたマウスにおいて低かった。したがって、AIMの注射によって、生体内でlipolysisが進行したと考えられた。
【実施例１５】
【０２５８】
［AIMのFASへの結合］
in vivo及びin vitroの両方でAIMとFASとの結合を確認した。すなわち、肥満AIM-/-マウスの精巣上体脂肪組織の数か所に、HAタグ化されたマウスrAIMを、合計１００μｇ、直接注射した。注射から３時間後、精巣上体脂肪組織を採取した。次いで、抗HA抗体を使用して、この脂肪組織の溶解物から、取り込まれたrAIMを沈殿させた。そして、イムノブロッティング（WB）によって、得られた沈殿物にFASが存在するかどうかを分析した。その結果、図３２に示すように、両タンパク質は共沈され、取り込まれたrAIMと内因性の細胞質内FASとの結合が確認された。【０２５９】
加えて、Flagタグ化されたFAS及びHAタグ化されたマウスAIMの両方を発現するHEK293T細胞と、抗Flag抗体又は抗HA抗体と、を使用した共免疫沈降試験を行った。その結果、図３３Ａ及び図３３Ｂに示すように、両タンパク質が互いに共沈された。したがって、AIMは、FASと結合する能力を有すると考えられた。【０２６０】
さらに、FASにおけるAIMに対する結合領域のマッピングを試みた。図３４Ａに示すように、FASは、次の７つの別個の機能ドメインからなる；ketoacyl
synthase(KS)、malonyl/acetyl transferase(MAT)、dehydrase(DH)、enoylreductase(ER)、ketoreductase(KR)、acyl carrier protein(ACP)及びthioesterase(TE)。DHドメインとERドメインとの間にはcentral core(CC)がある。このCCは既知の触媒機能をもたず、二量体の安定化における構造的な役割を担っていると考えられる。なお、図３４Ａには、head-to-tailで二量化したFAS及びその各領域の主な機能を示している。【０２６１】
そこで、Flagタグ化されたFASの各領域と、HAタグ化されたAIMと、の結合（association）を共沈試験により調べた。すなわち、N末端においてFlagタグ化されたFASの各ドメインを、安定してHAタグ化されたマウスAIMを発現するHEK293T細胞に発現させた。そして、抗Flag抗体及び抗HA抗体を使用した共免疫沈降試験により、各領域とAIMとの結合を調べた。その結果、図３４Ｂに示すように、AIMは、ER、DH、TE及びCCドメインに特異的に結合した。しかしながら、AIMは、初期のアシル鎖集合体（initial asyl chain assembly）（すなわち、二酸化炭素の放出を伴う、アセチル基及びマロニル基の3-ketobutyryl-ACPへの凝集（condensation））に関与する、KS及びMATを含むN末端領域（図３４Ａ参照）には結合しなかった。したがって、AIMは、脂肪酸鎖の延長（ER及びDHに関与する）、及び合成されたpalmitate（TEに依存する）の放出に影響していると考えられた。なお、ER又はKRの過剰発現は、多数の細胞の死をもたらした。これは、これらの細胞溶解物を使用したWBにおけるシグナルの低下を引き起こした（図３４Ｂの下側パネル、lanes：ER及びKR）。
【実施例１６】
【０２６２】
［細胞表面CD36を介したAIMの取り込み］
CD36を欠損したCD36-/-マウス及びワイルドタイプCD36+/+マウスのそれぞれに、マウスrAIMを静脈から注射し、脂肪組織へのrAIMの取り込みを解析した。すなわち、rAIMをPSBに溶解して調製した注射液を、CD36-/-マウス及びCD36+/+マウスのそれぞれに静脈注射した（３００μｇ／マウス）。注射から１６時間後に、マウスを犠牲死させ、その精巣上体脂肪組織から組織切片を作製した。そして、組織切片を、抗AIM抗体で染色した。【０２６３】
その結果、図３５Ａ及び図３５Ｂに示すように、CD36-/-マウス（CD36-/-）の脂肪組織において検出されたAIMのシグナルのレベルは、CD36+/+マウス（CD36+/+）に比べて、顕著に小さかった。すなわち、脂肪細胞へのrAIMの取り込みは、CD36+/+マウスに比べて、CD36-/-マウスにおいて顕著に少なかった。
【実施例１７】
【０２６４】
［ヒトrAIMによるヒト脂肪前駆細胞の成熟の抑制］
ヒト細胞においてもAIMが脂肪細胞分化（adipogenesis）に作用することを確認するため、組換えヒトAIM（rhAIM）の存在下及び不存在下において、ヒト間葉系幹細胞（human mesenchymal stem cell：HMSC）(Lonza Walkersville Inc., USA)の分化を刺激した。【０２６５】
すなわち、HMSCは、コンフルエントに達するまで、Mesenchymal Stem Cell
Basal Medium (MSCBM, Lonza Walkersville Inc.)中で１０日間培養された。その後、細胞を、rhAIMの存在下 (１０μｇ／ｍＬ）又は不存在下で、ヒトインシュリン、MCGS、dexamethasone、indomethacin及びIBMXとともに３日間培養することにより、当該細胞のadipogenesisを刺激した（adipogenesis induction）（参考文献：Janderrova et al., Obes. Res. 11: 65, 2003）。この刺激後、細胞は、ヒトインシュリン及びMCGSが添加されたMSCBM中でさらに１０日間培養された。そして、細胞は回収され、oil-red-oにて染色された。【０２６６】
図３６Ａ、図３６Ｂ及び図３６Ｃには、分化刺激前（Pre-stimulation）、rhAIM不存在下での刺激後（rhAIM(-)）及び１０μｇ／ｍＬのrhAIM存在下での刺激後（rhAIM(10μg/mL)）の細胞を位相差顕微鏡下で観察した結果をそれぞれ示す。【０２６７】
図３６Ａ〜Ｃに示すように、rhAIMは、HMSCの分化を劇的に抑制した。また、成熟脂肪細胞で発現するGlut-4のmRNAレベルをRT-PCRにより評価した。また、βアクチンのmRNAについても同様に評価した。図３７に、その結果を示す。図３７には、分化刺激前（Pre）、rhAIM不存在下での刺激後（-rhAIM）及び１０μｇ／ｍＬのrhAIM存在下での刺激後（+rhAIM）の細胞におけるGlut-4及びβアクチン（β-actin）のmRNAレベルを評価した結果を示す。図３７に示すように、上述の組織学的解析の結果と一致して、Glut-4のmRNAレベルは、rhAIM不存在下に比べて、rhAIMの存在下で顕著に減少した。
【実施例１８】
【０２６８】
［イヌ及びネコにおけるAIMの発現］
イヌ及びネコにおけるAIMの発現を調べるため、抗マウスAIMポリクローナル抗体（SA-1）を用いて、３頭のイヌ及び３匹のネコから採取した血清のウェスタンブロッティングを行った。また、比較のため、マウスの血清についても、同様にウェスタンブロッティングを行った。【０２６９】
図３８には、イヌの３例（dog 1,2,3）、ネコの３例（cat 1,2,3）及びマウス（mouse）のそれぞれについて、ウェスタンブロッティングの結果を示す。図３８に示すように、イヌの血清については、明瞭なバンドが検出された。一方、ネコの血清については、イヌに比べて大きく、マウスと同程度の分子量に薄いバンドが検出された。すなわち、イヌ及びネコにおいても、抗マウスAIMポリクローナル抗体により検出される程度にマウスAIMとの相同性を有するAIMが発現していることが確認された。【０２７０】
ここで、上述の実施例１１〜１８により得られた知見の一部について説明する。実施例１１においては、AIM-/-マウスの精巣上体脂肪組織にrAIMを直接注射した場合及びAIM-/-マウスにrAIMを静脈注射した場合のいずれの場合も、投与された外因性のrAIMが脂肪細胞に取り込まれ、且つ取り込まれたrAIMが当該脂肪細胞の細胞質内で内因性のFASと結合することが示された。また、実施例１６においては、CD36-/-マウス及びワイルドタイプCD36+/+マウスのそれぞれにrAIMを静脈注射したところ、脂肪細胞へのrAIMの取り込みは、CD36+/+マウスに比べて、CD36-/-マウスにおいて顕著に少ないことが確認された。すなわち、上述の実施例５〜８において培養細胞を使用してin vitroで確認された現象が、マウスを使用してin vivoでも確認された。なお、実施例１５においては、細胞内においてAIMがFASと結合することが再確認されるとともに、FASのAIMに対する結合領域についての知見も得られた。【０２７１】
実施例１２及び実施例１３においては、HFDが与えられたAIM-/-マウスの体重、脂肪組織の重量、肝臓の重量及び脂肪組織に含まれる脂肪細胞のサイズの増加は、同じくHFDが与えられたAIM+/+マウスのそれに比べて、顕著に促進されること、及びそれにもかかわらず、当該AIM-/-マウスの食餌摂取量、代謝速度及び運動性は、当該AIM+/+マウスのそれと同程度であることが示された。すなわち、上述の実施例９で確認された現象が、より詳細に確認された。【０２７２】
実施例１４においては、HFDの摂取とrAIMの腹腔内注射とを同時に施したAIM-/-マウスの体重、内臓脂肪の重量及び皮下脂肪の重量の増加は、HFDの摂取と腹腔内へのBSAの注射とを同時に施したAIM-/-マウスに比べて、顕著に抑制されることが示された。また、このようなAIMによる効果は、lipolysisが進行するにつれて減少するFSP27、Perilipin及びAdipophilinのmRNAレベルが、BSAを腹腔内注射されたAIM-/-マウスに比べて、rAIMを腹腔内注射されたAIM-/-マウスにおいて低いという解析結果によっても裏付けられた。すなわち、上述の実施例１０において既に理解されていたとおり、静脈注射に比べて脂肪組織における局所濃度を高めることのできる腹腔内注射によって、AIMの投与による体重及び脂肪組織重量の増加抑制効果が明確に確認された。【０２７３】
実施例１７においては、ヒトAIMがヒト脂肪前駆細胞に作用することによって、当該ヒト脂肪前駆細胞のヒト脂肪細胞への分化が抑制されることが確認された。すなわち、上述の実施例１〜１０で得られた知見と、AIM分子の構造及びその作用機構に関するマウスとヒトとの相同性と、に基づいて既に理解されていたとおり、マウスAIMがマウス細胞に作用するのと同様に、ヒトAIMがヒト細胞に作用することが確認された。この結果は、AIMが、ヒトの生体においてもマウスの生体と同様に脂肪細胞に作用して、脂肪前駆細胞の分化抑制、脂肪細胞におけるlipolysis、脂肪組織重量の増加抑制、体重の増加抑制といった効果をもたらすとの理解を支持する根拠を補強するものであった。【０２７４】
実施例１８においては、イヌ及びネコにおいても、抗マウスAIMポリクローナル抗体により検出される程度にマウスAIMとの相同性を有するAIMが発現していることが確認された。実際に、配列表１１に示されるアミノ酸配列からなるイヌAIMは、配列表１に示されるヒトAIMと６６％の相同性を有し、配列表５に示されるマウスAIMと６０％の相同性を有する。【０２７５】
以上のとおり、AIMは、様々な哺乳動物の種間でのアミノ酸配列の相同性及び当該AIMの作用機構の類似性に基づき、生体に投与されることで、当該生体における脂肪組織の量及び／又は体重の減少、増加の抑制、増加の程度の低減といった効果をもたらすとの知見が得られた。さらに、AIMは、ＣＤ３６を介した細胞内への取り込みにより当該細胞に作用するという機構に基づき、生体の代謝状態を変えることなく、当該生体の脂肪細胞に特異的に作用するという、医薬としての有用性及び安全性という点で極めて興味深い知見も得られた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１８Ｃ】
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【図１８Ｄ】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図２０Ａ】
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【図２０Ｂ】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
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【図２２Ａ】
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【図２２Ｂ】
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【図２３Ａ】
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【図２３Ｂ】
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【図２３Ｃ】
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【図２３Ｄ】
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【図２３Ｅ】
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【図２４Ａ】
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【図２４Ｂ】
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【図２４Ｃ】
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【図２４Ｄ】
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【図２４Ｅ】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７Ａ】
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【図２７Ｂ】
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【図２８Ａ】
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【図２８Ｂ】
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【図２８Ｃ】
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【図２９Ａ】
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【図２９Ｂ】
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【図２９Ｃ】
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【図２９Ｄ】
2010140531.tif 000062
【図３０Ａ】
2010140531.tif 000063
【図３０Ｂ】
2010140531.tif 000064
【図３０Ｃ】
2010140531.tif 000065
【図３１】
2010140531.tif 000066
【図３２】
2010140531.tif 000067
【図３３Ａ】
2010140531.tif 000068
【図３３Ｂ】
2010140531.tif 000069
【図３４Ａ】
2010140531.tif 000070
【図３４Ｂ】
2010140531.tif 000071
【図３５Ａ】
2010140531.tif 000072
【図３５Ｂ】
2010140531.tif 000073
【図３６Ａ】
2010140531.tif 000074
【図３６Ｂ】
2010140531.tif 000075
【図３６Ｃ】
2010140531.tif 000076
【図３７】
2010140531.tif 000077
【図３８】
2010140531.tif 000078
【配列表】
2010140531000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成22年10月4日(2010.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脂肪組織の減少、増大の抑制、又は増大の程度の低減のための医薬組成物であって、
下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質；
（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、
（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質、
を有効成分として含有する
ことを特徴とする医薬組成物。
【請求項２】
前記（Ｉ）のタンパク質を有効成分として含有する
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項３】
前記（Ｉ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列からなるタンパク質である
ことを特徴とする請求項２に記載された医薬組成物。
【請求項４】
前記（Ｉ）のタンパク質は、動物のマクロファージアポトーシスインヒビターである
ことを特徴とする請求項２に記載された医薬組成物。
【請求項５】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項４に記載された医薬組成物。
【請求項６】
前記（ＩＩ）のタンパク質を有効成分として含有する
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項７】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表１に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項８】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項７に記載された医薬組成物。
【請求項９】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表１に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表２に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表３に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、配列表４に示されるアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１０】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項９に記載された医薬組成物。
【請求項１１】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表２に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項１０に記載された医薬組成物。
【請求項１２】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項９に記載された医薬組成物。
【請求項１３】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、配列表２に示されるアミノ酸配列又は配列表２に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、配列表３に示されるアミノ酸配列又は配列表３に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び配列表４に示されるアミノ酸配列又は配列表４に示されるアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１４】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項１３に記載された医薬組成物。
【請求項１５】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、下記の（ｘ１）、（ｘ２）又は（ｘ３）のタンパク質；
（ｘ１）配列表２に示されるアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｘ２）配列表３に示されるアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｘ３）配列表４に示されるアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、
であって、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１６】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項１７】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項１６に記載された医薬組成物。
【請求項１８】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項１６に記載された医薬組成物。
【請求項１９】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項１８に記載された医薬組成物。
【請求項２０】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、ＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインを有する動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列と８０％以上の相同性を有するアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項２１】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２２】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列において１若しくは数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２３】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２２に記載された医薬組成物。
【請求項２４】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２５】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２４に記載された医薬組成物。
【請求項２６】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２０に記載された医薬組成物。
【請求項２７】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、ＳＲＣＲ１ドメイン、ＳＲＣＲ２ドメイン及びＳＲＣＲ３ドメインを有する動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第一のドメイン、前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第二のドメイン、及び前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列又は前記ＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列のうちコンセンサス配列以外の部分において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列からなる第三のドメインが直列的に連なって構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項２８】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項２７に記載された医薬組成物。
【請求項２９】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、前記第一のドメイン、前記第二のドメイン、及び前記第三のドメインが直列的に直接連結して構成され、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項２７に記載された医薬組成物。
【請求項３０】
前記（ＩＩ）のタンパク質は、下記の（ｐ１）、（ｐ２）又は（ｐ３）のタンパク質；
（ｐ１）動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのＳＲＣＲ１ドメインのアミノ酸配列からなる第一のドメインタンパク質又は複数の前記第一のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｐ２）動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのＳＲＣＲ２ドメインのアミノ酸配列からなる第二のドメインタンパク質又は複数の前記第二のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質：、
（ｐ３）動物のマクロファージアポトーシスインヒビターのＳＲＣＲ３ドメインのアミノ酸配列からなる第三のドメインタンパク質又は複数の前記第三のドメインタンパク質が直列的に連結してなるタンパク質、
であって、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質である
ことを特徴とする請求項６に記載された医薬組成物。
【請求項３１】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項３０に記載された医薬組成物。
【請求項３２】
ヒトに投与される医薬組成物である
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項３３】
動物に投与される医薬組成物である
ことを特徴とする請求項１に記載された医薬組成物。
【請求項３４】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項３３に記載された医薬組成物。
【請求項３５】
請求項１乃至３４のいずれかに記載された前記（Ｉ）のタンパク質又は前記（ＩＩ）のタンパク質であって、
脂肪組織の減少、増大の抑制、又は増大の程度の低減のための医薬組成物の有効成分としての使用のためのタンパク質。
【請求項３６】
請求項１乃至３４のいずれかに記載された医薬組成物を製造する
ことを特徴とする方法。
【請求項３７】
請求項１乃至３４のいずれかに記載された医薬組成物を、脂肪組織の減少、増大の抑制、又は増大の程度の低減のために生体に投与する
ことを特徴とする方法。
【請求項３８】
前記生体はヒトである
ことを特徴とする請求項３７に記載された方法。
【請求項３９】
前記生体は動物である
ことを特徴とする請求項３７に記載された方法。
【請求項４０】
前記動物は、マウス、イヌ又はネコである
ことを特徴とする請求項３９に記載された方法。
【請求項４１】
脂肪組織の減少、増大の抑制、又は増大の程度の低減のための飲食物であって、
下記の（Ｉ）又は（ＩＩ）のタンパク質を含有することを特徴とする飲食物；
（Ｉ）マクロファージアポトーシスインヒビター：、
（ＩＩ）マクロファージアポトーシスインヒビターのアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加された、前記アミノ酸配列と相同性を有するアミノ酸配列からなり、且つ脂肪前駆細胞の成熟脂肪細胞への分化を抑制する機能及び／又は成熟脂肪細胞において脂肪滴分解を誘導する機能を有するタンパク質。
【請求項４２】
請求項４１に記載された飲食物を製造する
ことを特徴とする方法。
【国際調査報告】
2010140531.tif 000079
2010140531.tif 000080
2010140531.tif 000081
2010140531.tif 000082
2010140531.tif 000083
2010140531.tif 000084