(57)【要約】  腫瘍に特異的に滞留する新規化合物、それを腫瘍に滞留させる方法、それを用いた腫瘍を検出、診断および治療する方法を提供する。本発明は、式（I）の化合物またはその薬学的に許容される塩に関する：【化ａ】2010082634.tif 000034ここで、Ｒは水素と結合した陰イオン性基であり、Ｒ１はＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数であり、Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数であり、Ｒ３はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、Ｒ４はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、Ｒ５はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つが作用基を含む。
2010082634.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）の化合物またはその薬学的に許容される塩
【化ａ】
2010082634.tif 000032
ここで、
Ｒは水素と結合した陰イオン性基であり、
Ｒ１はＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数であり、
Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数であり、
Ｒ３はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ４はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、および
Ｒ５はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つが作用基を含む。
【請求項２】
式（II）の化合物またはその薬学的に許容される塩
【化ｂ】
2010082634.tif 000033
ここで、
Ｒは水素と結合した陰イオン性基であり、
Ｒ１はＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数であり、
Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数であり、
Ｒ３はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ４はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ５はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
ｊは１以上の整数であり、および
Ｘは作用基または陽イオン性基であり、ｋは１以上の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＸの少なくとも１つは作用基である。
【請求項３】
ＲがＳＯ３Ｈであり、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ５がＯＨであり、並びに
Ｒ１がＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３、Ｏ−（作用基）、ＯＣＯ−（作用基）またはＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ２−（作用基）であり、ｈは０以上の整数であり、
Ｒ２がＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３、作用基、Ｏ−（作用基）、ＯＣＯ−（作用基）またはＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ２−（作用基）であり、ｉは０以上の整数であり、
ここで、Ｒ１およびＲ２の少なくとも一方が作用基を含む
請求項１または２の何れか１項に記載の化合物または塩。
【請求項４】
ＲがＳＯ３Ｈであり、
Ｒ１がＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数であり、
Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数であり、
Ｒ３＝Ｒ４＝Ｒ５で且つＯＨである、またはＲ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つが作用基であり、残りの基がＯＨであり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１が作用基を含む
請求項１または２の何れか１項に記載の化合物または塩。
【請求項５】
その何れかの側鎖が作用基と結合しているスルホピラノシル（アシル）グリセロール、スルホピラノシル（アシル）プロパンジオール若しくはスルホキノボシルアシルプロパンジオールまたはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
前記作用基が、標識物質または抗腫瘍物質である請求項１から５の何れかに１項に記載の化合物または塩。
【請求項７】
請求項１から６の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与することを特徴とする腫瘍に式（I）若しくは式（II）の化合物または塩を滞留させる方法。
【請求項８】
前記作用基が標識物質である請求項１から５の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与すること、
当該化合物または塩が、腫瘍以外の組織よりも腫瘍において高い濃度で存在する時点で、当該標識物質を検出すること、および
当該検出の結果を基に当該対象において腫瘍を検出すること
を具備する腫瘍を検出するための方法。
【請求項９】
前記作用基が標識物質である請求項１から５の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与すること、
当該化合物または塩が、腫瘍以外の組織よりも腫瘍において高い濃度で存在する時点で、当該標識物質を検出すること、および
当該検出の結果を基に当該対象に腫瘍の有無を決定すること、
を具備する腫瘍について診断する方法
【請求項１０】
前記検出することが非侵襲的手段により行われる請求項８または９の何れか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記作用基が抗腫瘍物質である請求項１から５の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与することを具備する腫瘍の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍滞留性を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
医療分野では、画像診断法として、ＭＲＩ、ＰＥＴ、Ｘ線、ＣＴなどが使用されている。これらを用いた癌の検出および診断法が開発され用いられている。当該方法では、周囲の組織と比較してＸ線吸収に差が出るような物質や核磁気共鳴に影響を与える物質などが造影剤として使用される。これらの造影剤は、組織に分布することによりＸ線やＭＲＩ画像にコントラストを付与し、組織の形状を画像化する。【０００３】
近年、ＭＲＩ、ＰＥＴ、Ｘ線、ＣＴなどのために、上記のようなコントラストによる組織の形状についての情報を得る技術だけではなく、腫瘍そのものを検出する技術が開発されている。そのような技術において使用される造影剤の例は、例えば、正常細胞よりも代謝が亢進している癌組織に取り込まれやすいグルコースのような分子を放射性物質、蛍光物質または磁性体などで標識したものや、癌細胞表面に特異的に存在する糖鎖や抗原を標的として集まるタンパク質などの分子を同様に標識したものが挙げられる。これらの造影剤は、ＰＥＴ、ＭＲＩ、ＣＴなどの検出器により癌組織の検出および／または画像化に利用される。【０００４】
一方、癌組織への薬剤の運搬方法として、微小な粒子に抗癌剤などの薬剤を封入または結合させ、癌組織の近傍まで運ぶドラッグデリバリーシステムの技術が開発されている。そのようなドラッグデリバリーシステムには、例えば、腫瘍組織と親和性を有する分子や、体内の免疫システムにより異物として排除されるのを防ぐための分子をその粒子表面に取り込ませたものなどがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の目的は、腫瘍に特異的に滞留する新規化合物を提供することである。【０００６】
更なる本発明の目的は、当該化合物を腫瘍に滞留させる方法を提供することである。【０００７】
更なる本発明の目的は、当該化合物を用いた腫瘍の検出方法を提供することである。【０００８】
更なる本発明の目的は、当該化合物を用いた腫瘍の診断方法を提供することである。【０００９】
更なる本発明の目的は、当該化合物を用いた腫瘍の治療方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上記課題は、以下に記す本発明によって解決される。【００１１】
（１）  式（I）の化合物またはその薬学的に許容される塩
【化ａ】
2010082634.tif 000003
【００１２】
ここで、
Ｒは水素と結合した陰イオン性基であり、
Ｒ１はＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数であり、
Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数であり、
Ｒ３はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ４はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、および
Ｒ５はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つが作用基を含む。【００１３】
（２）  式（II）の化合物またはその薬学的に許容される塩
【化ｂ】
2010082634.tif 000004
【００１４】
ここで、
Ｒは水素と結合した陰イオン性基であり、
Ｒ１はＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数であり、
Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨまたはＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数であり、
Ｒ３はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ４はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ５はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
ｊは１以上の整数であり、および
Ｘは作用基または陽イオン性基であり、ｋは１以上の整数であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＸの少なくとも１つは作用基である。【００１５】
（３）  前記（１）または（２）の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与することを特徴とする腫瘍に式（I）若しくは式（II）の化合物または塩を滞留させる方法。【００１６】
（４）  前記作用基が標識物質である前記（１）または（２）の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与すること、
当該化合物または塩が、腫瘍以外の組織よりも腫瘍において高い濃度で存在する時点で、当該標識物質を検出すること、および
当該検出の結果を基に当該対象において腫瘍を検出すること
を具備する腫瘍を検出するための方法。【００１７】
（５）  前記作用基が標識物質である前記（１）または（２）の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与すること、
当該化合物または塩が、腫瘍以外の組織よりも腫瘍において高い濃度で存在する時点で、当該標識物質を検出すること、および
当該検出の結果を基に当該対象に腫瘍があるか否かを診断すること、
を具備する腫瘍について診断する方法。【００１８】
（６）  前記作用基が抗腫瘍物質である前記（１）または（２）の何れか１項に記載の化合物または塩を対象に投与することを具備する腫瘍の治療方法。
【発明の効果】
【００１９】
本発明の一つの側面によれば、腫瘍に特異的に滞留する新規化合物が提供される。【００２０】
本発明の一つの側面によれば、当該化合物を腫瘍に滞留させる方法が提供される。【００２１】
また、本発明の一つの側面によれば、当該化合物を用いる腫瘍の検出方法が提供される。【００２２】
本発明の更なる一側面によれば、当該化合物を用いる腫瘍の診断方法が提供される。【００２３】
更にまた、本発明の一側面によれば、当該化合物を用いる腫瘍の治療方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】図１は、ビオチン化αＳＱＭＧ Ｃ１８：０の腫瘍への貯留を示すグラフである。
【図２】図２は、ビオチン化αＳＱＡＰ Ｃ１８：０の腫瘍への貯留を示すグラフである。
【図３】図３は、αＳＱＭＧ Ｃ１８：０を腹腔内投与したヌードマウスの血漿および臓器中における濃度−時間推移曲線である。
【図４】図４は、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０を腹腔内投与したヌードマウスの血漿および臓器中における濃度−時間推移曲線である。
【図５】図５は、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０を静脈内投与したヌードマウスの血漿および臓器中における濃度−時間推移曲線である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明者らによる鋭意研究の結果、腫瘍に特異的に分布する新規化合物が見出された。
【００２６】
本発明の一態様によれば、当該新規化合物は、以下の式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩である。
【化ｃ】
2010082634.tif 000005
【００２７】
式（Ｉ）中、
Ｒは水素と結合した陰イオン性基であり、
Ｒ１はＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数、好ましくは０以上３０以下、より好ましくは０以上２６以下、更に好ましくは１以上２２以下であり、
Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数、好ましくは０以上３０以下、より好ましくは０以上２６以下、更に好ましくは１以上２２以下であり、
Ｒ３はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ４はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、および
Ｒ５はＯＨ、ＳＯ３Ｈまたは作用基であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つが作用基を含み、好ましくはＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の何れか１つが作用基を含む。
【００２８】
一態様に従えば、本発明に従う化合物は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩であって、
ＲがＳＯ３Ｈであり、Ｒ３がＯＨであり、Ｒ４がＯＨであり、Ｒ５がＯＨであり、
Ｒ１がＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３、Ｏ−（作用基）、ＯＣＯ−（作用基）またはＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ２−（作用基）であり、ｈは０以上の整数であり、好ましくは０以上３０以下、より好ましくは０以上２６以下、更に好ましくは１以上２２以下であり、
Ｒ２がＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３、作用基、Ｏ−（作用基）、ＯＣＯ−（作用基）またはＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ２−（作用基）であり、ｉは０以上の整数、好ましくは０以上３０以下、より好ましくは０以上２６以下、更に好ましくは１以上２２以下であり、
Ｒ１およびＲ２の少なくとも一方が作用基を含む
化合物またはその薬学的に許容される塩であってもよい。
【００２９】
更なる一態様に従えば、本発明に従う化合物は、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩であって、
ＲがＳＯ３Ｈであり、
Ｒ１がＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３または作用基であり、ｈは0以上の整数であり、好ましくは０以上３０以下、より好ましくは０以上２６以下、更に好ましくは１以上２２以下であり、
Ｒ２はＨ、ＯＨ、ＯＣＯＨ、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３または作用基であり、ｉは0以上の整数であり、好ましくは０以上３０以下、より好ましくは０以上２６以下、更に好ましくは１以上２２以下であり、
Ｒ３＝Ｒ４＝Ｒ５で且つＯＨである、またはＲ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つが作用基であり、残りの基がＯＨであり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５の少なくとも１つが作用基を含む
化合物またはその薬学的に許容される塩であってもよい。
【００３０】
当該式（Ｉ）の化合物において、Ｒ１および／またはＲ２が、ＯＣＯ（ＣＨ２）ｈＣＨ３またはＯＣＯ（ＣＨ２）ｉＣＨ３である場合、これらは、直鎖状または分岐状の飽和または不飽和脂肪酸であってもよい。
【００３１】
また、更なる一態様に従えば、本発明の化合物は、その少なくとも１つの側鎖が作用基と結合しているスルホピラノシル（アシル）グリセロール、スルホピラノシル（アシル）プロパンジオール若しくはスルホキノボシルアシルプロパンジオールまたはその薬学的に許容される塩であってもよい。
【００３２】
上記式（Ｉ）の化合物において、ピラノシドを構成する糖骨格であるピラノースが存在する場合、当該ピラノースは、α−Ｄ−グルコース、β−Ｄ−グルコース、α−Ｄ−ガラクトース、β−Ｄ−ガラクトース、α−Ｄ−マンノースおよびβ−Ｄ−マンノースなどであってよい。
【００３３】
これらピラノシドの糖骨格は、舟形、イス型の何れの配置であってもよく、またはその混合物であってもよい。しかしながら、イス型のものの方が安定性の観点から好ましい。
【００３４】
当該式（Ｉ）の化合物において、不斉炭素が存在する場合、その絶対配置はＳまたはＲの何れでもよい。例えば、当該化合物がスルホピラノシル（アシル）グリセロールと作用基からなる場合、グリセロール部分の２位の炭素が不斉炭素となるが、この場合においても絶対配置はＳであってもＲであっても、その混合であってもよい。
【００３５】
また、当該式（Ｉ）の化合物がスルホキノボシルアシルプロパンジオールと作用基からなる場合、そこに含まれるキノボース環は、舟形であってもイス形であってもよく、またはその混合物であってもよい。しかしながら、一般的にイス形の方が安定であるので好ましい。また、当該キノボース環へのプロパンジオール部位の立体配置はαアノマーでもβアノマーでもよく、またはその混合物であってもよい。
【００３６】
当該式（Ｉ）の化合物において、水素と結合した陰イオン性基の例は、これらに限定するものではないが、ＳＯ３Ｈ、ＯＳＯ３Ｈ、ＰＯ３Ｈ２およびＣＯ２Ｈなどであり、好ましくは、ＳＯ３Ｈ、ＯＳＯ３ＨおよびＰＯ３Ｈ２であり、より好ましくはＳＯ３Ｈである。
【００３７】
ここにおいて使用される「作用基」とは、腫瘍に輸送することが望まれる所望の作用を示す基をいう。これらに限定するものではないが、式（Ｉ）の化合物は、例えば、標識物質および抗腫瘍物質などの作用物質を作用基として含んでよい。また、式（Ｉ）の化合物において、当該作用物質は、式（Ｉ）の化合物の何れかの位置において共有結合により維持される。また、作用基は、一分子の式（Ｉ）の化合物中に１つまたは１つ以上で含まれてよい。また、一分子の式（Ｉ）の化合物中に２以上の作用基が存在する場合、それらの作用基は互いに等しくてもよく、互いに異なっていてもよい。
【００３８】
また、当該作用基は、互いに特異的に結合可能な結合対の一方であってもよい。そのような結合対の例は、これらに限定するものではないが、ビオチンとアビジン、抗原とその抗原に対する特異抗体および抗原とその抗原に対する特異的なレセプターなどを含む。このような化合物の場合、当該結合対の一方を作用基として含む本発明に従う化合物を対象に投与し、所望の間隔の後に、所望の効果を奏する薬剤や標識物質を結合させた当該結合対の他方を当該対象に投与することにより、当該薬剤や標識物質を特異的に腫瘍に送達することが可能である。
【００３９】
当該作用基は、作用物質と糖脂質部分とを結合するためのリンカーを含んでいてもよく、或いは、含んでいなくてもよい。
【００４０】
ここで使用される「標識物質」とは、非侵襲的な診断において一般的に使用されるイメージング技術を利用する腫瘍の診断技術において使用されるマーカーであればよい。当該標識物質は、生体染色可能なそれ自身公知の何れの標識物質であってもよい。例えば、そのような標識物質は、これらに限定するものではないが、放射性物質、常磁性体金属、Ｘ線不透性金属および色素などを含む。
【００４１】
当該放射性物質の例は、これらに限定されるものではないが、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆ、５８Ｃｏ、５９Ｆｅ、６２Ｃｕ、６４Ｃｕ、６７Ｃｕ、６７Ｇａ、６８Ｇａ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、８２Ｂｒ、８９Ｓｒ、９０Ｙ、１１１Ｉ、１１３Ｓｎ、１１７ｍＳｎ、１５３Ｓｍ、１６５Ｄｙ、１６６Ｈｏ、１６９Ｅｒ、１８６Ｒｅ、２０１Ｔｌ、２１２Ｂｉ、２１３Ｂｉなどを含む。
【００４２】
当該常磁性体金属の例は、これらに限定されるものではないが、Ｃｒ（III）、Ｍｎ（III）、Ｆｅ（II）、Ｆｅ（III）、Ｐｒ（III）、Ｎｄ（III）、Ｓｍ（III）、Ｙｂ（III）、Ｇｄ（III）、Ｔｂ（III）、Ｄｙ（III）、Ｈｏ（III）、Ｅｒ（III）などを含む。
【００４３】
当該Ｘ線不透性金属の例は、これらに限定されるものではないが、Ｉ、Ｂｉ、Ｗ、Ｔａ、Ｈｆ、Ｌａ、Ｌｎ、Ｂａ、Ｍｏ、Ｎｂ、ＺｒおよびＳｒなどを含む。
【００４４】
当該色素の例は、これらに限定されるものではないが、それ自身公知の生体染色用色素であればよく、例えば、蛍光色素などの色素を含む。例えば、蛍光色素には、蛍光発色団に以下の骨格を有するものが含まれる；ナフタレン、アントラセン、キノリン、アクリジン、クマリン、サリチル酸、アントラニル酸、NBD（7-ニトロベンズ-2-オキサ-1,3-ジアゾール）、スチルベン、レゾルフィン、BODIPY（4,4-ジフルオロ-4-ボラ-3a,4a-ジアザ-s-インデセン、カルボシアニン、チアカルボシアニンおよびテトラメチルインドカルボシアニンなど。また、当該蛍光色素の例は、R.P.ホーグランドによるモレキュラー・プローブズ・ハンドブックに開示される物質を含む(R.P.Haugland、Molecular Probes Handbook、第６版)。
【００４５】
ここで使用される「抗腫瘍物質」とは、細胞毒性により腫瘍を攻撃する物質であればよい。従って、当該抗腫瘍物質は、腫瘍を治療するために使用されるそれ自身公知の何れの物質であってもよい。これらに限定するものではないが、例えば、抗腫瘍物質は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗癌抗生物質、金属錯体、植物アルカロイド類、トポイソメラーゼ阻害剤、微小管重合阻害剤、微小管脱重合阻害剤、分子標的薬およびホルモン剤であってもよい。当該抗腫瘍物質の例は、これらに限定するものではないが、アセグラトン（Aceglatone）、塩酸アクラルビシン（Aclarubicin hydrochloride）、アクチノマイシンＤ（Actinomycin D (ダクチノマイシン（Dactinomycin）とも称する)）、塩酸アムルビシン（Amrubicin hydrochloride）、アナストロゾール（Anastrozole）、三酸化砒素（Arsenic trioxide）、アスパラジナーゼ（Asparaginase (L-アスパラジナーゼ（L-Asparaginase）とも称する)）、ビカルタミド（Bicalutamide）、塩酸ブレオマイシン（Bleomycin hydrochloride）、ボルテゾミブ（Bortezomib）、ブスルファン（Buslufan）、カペシタビン（Capecitabine）、カルボプラチン（Carboplatin）、カルボクオン（Carboquone）、カルモフォア（Carmofur）、セルモロイキン（Celmoleukin）、シスプラチン（Cisplatin）、カラドリビン（Cladribine）、シクロホスファミド（Cyclophosphamide）、シタラビン（Cytarabine）、ダカルバジン（Dacarbazine）、塩酸ダウノルビシン（Daunorubicin hydrochloride（ダウノマイシン(Daunomycin）とも称する）)、ドセタキセル（Docetaxcel）、ドキシフルリジン（Doxifluridine）、塩酸ドキソルビシン（Doxorubicin hydrochloride (アドリアマイシン（Adriamycin)とも称する））、エノシタビン（Enocitabine）、塩酸エキルビシン（Epirubicin hydrochloride）、塩酸エルロチニブ（Erlotinib hydrocloride）、エストラムスチンリン酸エステルナトリウム水和物（Estramustine phosphate sodium hydrate）、エトポシド（Etoposide）、エキセメスタン（Exemestane）、塩酸ファドロゾール水和物（Fadrozole hydrochloride hydrate）、リン酸フルダラビン（Fludarabine phosphate）、フルオロウラシル（Fluorouracil）、フルタミド（Flutamide）、ゲフィチニブ（Gefitinib）、塩酸ゲムシタビン（Gemcitabine hydrochloride）、酢酸ゴセレリン（Goserelin acetate）、ヒドロキシカルバミド（Hydroxycarbamide（ヒドロキシウレア(Hydroxyurea)とも称する））、塩酸イダルビシン（Idarubicin hydrochloride）、イホスファミド（Ifosfamide）、イマチニブメシレート（Imatinib mesylate）、塩酸イリノテカン（Irinotecan hydrochloride）、レトロゾール（Letrozole）、酢酸ロイプロレリン（Leuprorelin acetate）、酢酸メドロキシプロゲステロン（Medroxyprogestrone acetate）、メルファラン（Melphalan）、メピチオスタン（Mepitiostane）、メルカプトプリン水和物（Mercaptopurine hydrate）、メトトレキサート（Methotrexate）、マイトマイシンＣ（Mitomycin C）、ミトタン（Mitotane）、塩酸ミトキサントロン（Mitoxantrone hydrochloride）、ネダプラチン（Nedaplatin）、ネララビン（Nelarabine）、ネオカルジノスタチン（Neocarzinostatine）、塩酸ニムスチン（Nimustine hydrochloride）、酢酸オクトレオチド（Octreotide acetate）、オキサリプラチン（Oxaliplatin）、パクリタキセル（Paclitaxel）、ペメトレキセド二ナトリウム（Pemetrexed disodium）、ペントスタチン（Pentostatin）、硫酸ペプロマイシン（Peplomycin sulfate）、ピラルビシン（Pirarubicin）、ポルフィマーナトリウム（Porfimer sodium）、塩酸プロカルバジン（Procarbazine hydrochloride）、ラニムスチン（Ranimustine）、シゾフィラン（Sizofiran）、ソブゾキサン（Sobuzoxane）、ソラフェニブトシレート（Sorafenib tosylate）、タラポルフィンナトリウム（Talaporfin sodium）、タミバロテン（Tamibarotene）、クエン酸タモキシフェン（Tamoxifen citrate）、テセロウキン（Teceleukin）、テガフール（Tegafur）、テモゾロミド（Temozolomide）、チオテパ（Thiotepa）、塩酸トポテカン（Topotecan hydrochloride（塩酸ノギテカン(Nogitecan hydrochloride)とも称する））、クエン酸トレミフェン（Toremifene citrate）、トレチノイン（Tretinoin）、ウベニメックス（Ubenimex）、硫酸ビンブラスチン（Vinblastine sulfate）、硫酸ビンクリスチン（Vincristine sulfate）、硫酸ビンデシン（Vindesine sulfate）、二酒石酸ビノレルビン（Vinorelbine ditartrate）およびジノスタチン  スチマラマー（Zinostatin stimalamer）を含む。
【００４６】
また、当該作用物質は、腫瘍を治療するために使用されるそれ自身公知の何れの物質であってもよい。例えば、熱中性子捕捉物質であってもよく、その例には、ＢおよびＧｄなどの元素を含む化合物が含まれる。
【００４７】
本発明に従う化合物は、式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される塩であってもよい。そのような塩は、式（Ｉ）の化合物のＲ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４および／またはＲ５で示される側鎖の少なくとも１つがイオン化されることにより生じるイオン性基と、このイオン性基とイオン結合可能なイオンとの結合により得られる塩であればよい。また、イオン化した式（Ｉ）の化合物と当該イオン性物質は、１分子当たり１分子で、即ち、１：１で結合してもよく、ｍ：ｎで結合してもよい。ここで、ｍおよびｎは１つ以上の整数である。例えば、当該塩は、イオン化した式（Ｉ）の化合物の複数の分子と、１分子の当該イオン性物質からなってもよい。また、当該塩は、イオン化した式（Ｉ）の化合物の１分子と、複数の分子の当該イオン性物質からなってもよい。
【００４８】
イオン化された式（Ｉ）の化合物が負の電荷を有する場合、対になる当該イオン性物質は、正の電荷を有した陽イオンであればよい。当該陽イオンは、Ｎａ＋およびＫ＋などの一価の金属イオン、Ｃａ２＋などの二価の金属イオンなどを含む金属イオンであってよい。例えば、当該陽イオンは、これらに限定するものではないが、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、鉄、亜鉛、銅、ストロンチウム、鉛、銀、バリウム、アルミニウム、クロム、コバルト、ニッケル、アンモニウム、モノアルキルアンモニウム、ジアルキルアンモニウム、トリアルキルアンモニウム、テトラアルキルアンモニウム、モノヒドロキシアルキルアンモニウム、ジヒドロキシアルキルアンモニウム、トリヒドロキシアルキルアンモニウムおよびテトラヒドロキシアルキルアンモニウムなどであってよい。
【００４９】
また、本発明に従う化合物は、錯体であってもよい。そのような錯体は、以下の式（II）により示される化合物またはその薬学的に許容される塩である。
【化ｄ】
2010082634.tif 000006
【００５０】
ここで、
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、式（Ｉ）において定義した通りであり、
ｊは１以上の整数であり、および
Ｘは作用基または陽イオン性基であり、ｋは１以上の整数であり、好ましくは
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＸの少なくとも１つは作用基である。
【００５１】
ここで、陽イオン性基は、正の電荷を有した陽イオンであればよい。当該陽イオン性基は、Ｎａ＋およびＫ＋などの一価の金属イオン、Ｃａ２＋などの二価の金属イオンなどを含む金属イオンであってよい。例えば、当該陽イオン性基は、これらに限定するものではないが、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、鉄、亜鉛、銅、ストロンチウム、鉛、銀、バリウム、アルミニウム、クロム、コバルト、ニッケル、アンモニウム、モノアルキルアンモニウム、ジアルキルアンモニウム、トリアルキルアンモニウム、テトラアルキルアンモニウム、モノヒドロキシアルキルアンモニウム、ジヒドロキシアルキルアンモニウム、トリヒドロキシアルキルアンモニウムおよびテトラヒドロキシアルキルアンモニウムなどであってよい。
【００５２】
また、式（II）のＸに作用基が含まれる場合、当該作用基は式（Ｉ）において定義されたのと同様の作用物質であってよく、この場合には、当該作用物質と糖脂質は、配位結合で結合されてよい。
【００５３】
式（I）の化合物および式（II）の化合物並びにそれらの薬学的に許容される塩は、それ自身公知の反応経路を利用して合成することが可能である。
【００５４】
本発明に従う化合物の非限定的な例である式（１）〜式（１３）の化合物を以下に記載する。
【化１】
2010082634.tif 000007
【化２】
2010082634.tif 000008
【化３】
2010082634.tif 000009
【化４】
2010082634.tif 000010
【化５】
2010082634.tif 000011
【化６】
2010082634.tif 000012
【化７】
2010082634.tif 000013
【化８】
2010082634.tif 000014
【化９】
2010082634.tif 000015
【化１０】
2010082634.tif 000016
【化１１】
2010082634.tif 000017
【化１２】
2010082634.tif 000018
【化１３】
2010082634.tif 000019
【００５５】
本発明に従う化合物は、他組織に比べて腫瘍組織において長時間滞留性を示す。即ち、他組織と腫瘍組織とで分布濃度に大きな違いがある。従って、本発明に従う化合物、即ち、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容される塩または式（II）の化合物を対象に投与することにより、腫瘍に当該式（I）若しくは式（II）の化合物または塩を滞留させることが可能である。従って、本発明に従うと、腫瘍に式（I）若しくは式（II）の化合物またはその薬学的に許容される塩を滞留させる方法も提供される。
【００５６】
上述したように、本発明に従う化合物の対象における消失時間は、腫瘍組織と他の組織では異なり、当該化合物は、他組織に比べて腫瘍に長く留まる。即ち、当該化合物の腫瘍における消失時間は、腫瘍以外の組織における消失時間よりも長い。
【００５７】
また、当該化合物は、その構造中に作用基を有する。従って、当該化合物の腫瘍滞留性と作用基により奏される効果を利用することにより、当該化合物により、腫瘍の検出、腫瘍の診断および腫瘍の治療を行うことが可能である。言い換えれば、本発明に従う化合物は、腫瘍の診断剤、治療剤および造影剤として利用することが可能である。
【００５８】
腫瘍を検出する場合には、当該作用基として標識物質を選択すればよい。標識物質を含む当該化合物またはその薬学的に許容される塩を対象に投与し、当該化合物または塩が、腫瘍以外の組織よりも腫瘍において高い濃度で存在する時点で、当該標識物質を検出し、その検出結果から当該対象に腫瘍があるのかないのか、および／またはどの組織のどの部分に腫瘍があるのかを検出することが可能である。
【００５９】
同様に、当該作用基として標識物質を選択すれば、標識物質を含む当該化合物またはその薬学的に許容される塩を対象に投与し、当該化合物または塩が、腫瘍以外の組織よりも腫瘍において高い濃度で存在する時点で、当該標識物質を検出し、その検出結果から当該対象に腫瘍があるか否か、および／またはどの組織に腫瘍が存在するのかを診断することが可能である。
【００６０】
当該標識物質の検出は、作用基として含まれる標識物質の種類に応じたそれ自身公知の何れの方法により行われてもよい。
【００６１】
例えば、当該標識物質が放射性物質である場合、それ自身公知のＰＥＴおよびＳＰＥＣＴなどの画像診断法および／またはガンマプローブを用いる検出法により当該標識物質は検出されてもよい。この場合、本発明に従う化合物は、放射性診断剤と解されてもよい。
【００６２】
当該標識物質が常磁性金属である場合、それ自身公知のＭＲＩなどの核磁気共鳴を利用する方法により当該標識物質は検出されてもよい。この場合、本発明に従う化合物は、核磁気共鳴診断剤と解されてもよい。
【００６３】
当該標識物質がＸ線不透過性物質である場合、それ自身公知の何れかのＣＴおよびＸ線撮影などにより当該標識物質は検出されてもよい。この場合、本発明に従う化合物は、Ｘ線造影剤と解されてもよい。
【００６４】
当該標識物質が蛍光色素である場合、それ自身公知の蛍光検出法により当該標識物質は検出されてもよい。この場合、本発明に従う化合物は、蛍光診断薬と解されてもよい。
【００６５】
また、当該検出は、上記の検出手段に限定するものではなく、それ自身公知の何れの非侵襲的手段により行われてもよい。ここで、非侵襲的手段とは、対象に外科的処理を施すことなく実施できる手段であればよい。このような非侵襲的手段により標識物質を検出することは対象のＱＯＬの観点から望ましい。
【００６６】
当該作用基として抗腫瘍物質を用いることにより、腫瘍の治療を行うことが可能である。そのような方法は、前記作用基が抗腫瘍物質である式（I）若しくは（II）の化合物またはその薬学的に許容される塩を対象に投与することを具備すればよい。そのような方法に使用するための本発明に従う化合物は、抗癌剤または抗腫瘍剤と解されてよい。
【００６７】
また、当該作用基として含まれる物質が熱中性子捕捉物質である場合にも、腫瘍の治療を行うことが可能である。そのような方法は、前記作用基が熱中性子捕捉物質である式（I）若しくは（II）の化合物またはその薬学的に許容される塩を対象に投与すること、腫瘍以外の組織よりも腫瘍において高い濃度で存在する時点で、中性子を照射することとを具備すればよい。中性子の照射は、それ自身公知の何れかの手段により行うことが可能である。このような方法に使用するための本発明に従う化合物は、癌治療剤または腫瘍治療剤と解されてよい。
【００６８】
上述の放射線の照射条件と本発明に従う化合物の投与条件は、放射線治療の分野で周知のとおり、放射線源の種類、照射方法、照射部位および照射期間；当該化合物の種類、投与ルートおよび投与時期；治療すべき疾患の種類および疾患の重症度；照射される被検体の年齢、体重、健康状態、病歴などに依存して、医療従事者その他の専門家により適宜選択することができる。
【００６９】
ここにおいて「対象」とは、ヒト、ヒト以外の動物、例えば、ネコ、イヌ、ウマ、ウシ、ヒツジ、マウス、ラットおよびウサギなどの哺乳類、爬虫類、両生類、魚類および鳥類などをいう。
【００７０】
上述したように、本発明に従う化合物は、診断剤、治療剤および造影剤などの活性成分として使用することが可能である。当該化合物は、例えば、経口投与、非経口投与することができる。また、当該化合物は、これらの投与経路に応じて、適切な薬学的に許容される賦形剤又は希釈剤などと組み合わせることにより薬学的製剤にすることができる。
【００７１】
経口投与に適した剤型としては、固体、半固体、液体又は気体等の状態のものが含まれ、具体的には、錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤などを挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００７２】
当該化合物を錠剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、溶液剤および懸濁剤などに製剤化するためには、それ自体は既知の方法を用いて、当該化合物をバインダー、錠剤崩壊剤、潤滑剤等と混合し、さらに、必要に応じて、希釈剤、緩衝剤、浸潤剤、保存剤、フレーバー剤等と混合することにより行うことができる。一例を挙げると、上記バインダーには、結晶セルロース、セルロース誘導体、コーンスターチおよびゼラチンなどが、錠剤崩壊剤には、コーンスターチ、馬鈴薯デンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどが、潤滑剤には、タルクおよびステアリン酸マグネシウムなどが含まれ、さらには、ラクトースおよびマンニトールなどのような従来用いられている添加剤などを用いることができる。
【００７３】
また、当該化合物は、液体、微細粉末の形態のものを、気体又は液体の噴霧剤と共に、又は必要に応じて浸潤性付与剤のような既知の助剤と共に、エアロゾル容器、ネブライザーのような非加圧容器に充填し、エアロゾル剤又は吸入剤の形態で投与することもできる。噴霧剤としては、ジクロロフルオロメタン、プロパン、窒素などの加圧ガスを用いることができる。
【００７４】
当該化合物を活性成分として含む薬学的製剤を非経口投与する場合、例えば、直腸投与および注射などにより投与することができる。
【００７５】
直腸投与する場合、例えば、坐薬として投与することができる。坐薬は、それ自体は既知の方法により、本発明の医薬活性物質を、体温で融解するが室温では固化しているカカオバター、カーボンワックス、ポリエチレングリコールのような賦形剤と混合し、成形することにより製剤化することができる。
【００７６】
注射による投与としては、皮下、皮内、静脈内、筋肉内等に投与することができる。これらの注射用製剤は、それ自体は既知の方法により、本発明に従う化合物を、植物性油、合成樹脂酸グリセリド、高級脂肪酸のエステル、プロピレングリコールのような水性又は非水性の溶媒中に溶解、懸濁又は乳化し、さらに、所望により、可溶化剤、浸透圧調節剤、乳化剤、安定剤および保存料のような従来用いられている添加剤と共に製剤化することができる。
【００７７】
本発明に従う化合物を、溶液、懸濁液、シロップ、エリキシルなどの形態にするためには、注射用滅菌水や規定生理食塩水のような薬学的に許容される溶媒を用いることができる。
【００７８】
本発明に従う化合物を、薬学的に許容される他の活性を有する化合物と併用して薬学的製剤とすることもできる。
【００７９】
本発明に従う薬学的製剤は、投与形態、投与経路、検出しようとする腫瘍の種類および位置、治療の対象とする疾病の程度や段階等に応じて適宜設定、調節することができる。一例を挙げると、経口投与する場合は、本発明に従う化合物の有効量として、０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日、注射剤として投与する場合は、同有効量として、０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ体重／日、直腸投与する場合は、同有効量として、０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ体重/日に設定することができるが、これらに限定されるものではない。
【００８０】
本発明に従う化合物は、腫瘍を治療するために使用することが可能である。腫瘍とは、例えば、脳腫瘍等を含む神経原性腫瘍、扁平上皮癌や腺癌等の癌腫に分類される以下の癌（頭頚部癌、皮膚癌、食道癌、甲状腺癌、胃癌、肺癌、胆のう癌、胆道癌、膵臓癌、肝臓癌、前立腺癌、子宮癌、卵巣癌、乳癌、腎癌、膀胱癌、大腸癌等）、黒色腫、骨・軟部腫瘍、並びにリンパ腫、白血病、骨髄腫などが含まれるがこれらに限定されるものではない。ここで使用される「治療」とは、上記のような腫瘍を縮小すること、消失することおよび／または増大化を抑制することをいう。
【００８１】
本発明に従う薬学的製剤は、式（Ｉ）および式（II）で表される化合物並びにその薬学的に許容される塩からなる群から選択される１種またはそれ以上の有効量を活性成分として含有してもよい。また、当該薬学的製剤は、本発明に従う化合物のうち、異なる複数種類の化合物を含有することも可能である。さらに、本発明に従う化合物は、その活性に悪影響を及ぼさない限り、他の放射線増感剤や、抗腫瘍剤若しくはその他の薬理学的活性を有する物質および／または薬学的活性を有する物質と組み合わせて使用されてもよい。
【００８２】
またここでは、本発明に従う化合物に含まれる糖脂質部分の１例であるスルホキノボシルアシルプロパンジオールを「ＳＱＡＰ」とも記す。また、「αＳＱＡＰ Ｃｐ：ｑ」と記載した場合、「α」はαアノマーを表し、「Ｃｐ：ｑ」はＳＱＡＰのＲ１基に含まれる炭素の数が「ｐ」であり、二重結合が「ｑ」であることを示す。ここで、「ｐ」は１以上の整数であり、「ｑ」は０以上の整数である。従って、例えば、「αＳＱＡＰ Ｃ１８：０」と記載された場合には、αアノマーで当該化合物のＲ１における炭素の数が１８で、二重結合の数が０のスルホキノボシルアシルプロパンジオールであることを示す。
【００８３】
更にここでは、本発明に従う化合物に含まれる糖脂質部分の１例であるスルホキノボシルアシルグリセロールを「ＳＱＭＧ」とも記す。「αＳＱＭＧ Ｃｒ：ｓ」と記載した場合、「α」はαアノマーを表し、「Ｃｒ：ｓ」はＳＱＭＧのＲ１基に含まれる炭素の数が「ｒ」であり、二重結合が「ｓ」であることを示す。ここで、「ｒ」は１以上の整数であり、「ｓ」は０以上の整数である。従って、例えば、「αＳＱＭＧ Ｃ１８：０」と記載された場合には、αアノマーで当該化合物のＲ１における炭素の数が１８で、二重結合の数が０のスルホキノボシルアシルグリセロールであることを示す。
【００８４】
例
例１．合成
合成例１
本発明のスルホピラノシルグリセロール誘導体の製造工程を、α−スルホキノボシルアシルグリセロールのビオチン誘導体（「ビオチン化αＳＱＭＧ」とも記す）を例に挙げて次のスキーム１に示す。
【化ｅ】
2010082634.tif 000020
【００８５】
次に各工程について、詳しく説明する。
【００８６】
経路A1；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  (1-2)
化合物(1-1)（100 g、555 mmol）のアリルアルコール（500 mL）懸濁液に、トリフルオロメタンスルホン酸（1.00 mL）を0℃で加え、反応液を８０℃にて４８時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、トリエチルアミン（3 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。次いで、残渣を無水アセトニトリル（500 mL）に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（127 g、1.5当量）およびｐ-トルエンスルホン酸一水和物（5.28 g、0.05当量）を加えた。反応液を４０℃で４時間攪拌後、トリエチルアミン（10 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。残渣をヘキサン（2000 mL）および水（500 mL）中に注ぎ、混合液を激しく撹拌した。生じた沈殿物を濾別し、水およびヘキサンでリンスした。沈殿物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(1-2)を得た｛34.5 g（112 mmol）、20.2%｝。
【００８７】
LRMS 331 m/Z (M+Na)＋。
【００８８】
経路B1；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  (1-3)
化合物(1-2)（30.0 g、97.3 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（DMF、300 mL）溶液に、ベンジルブロミド（41.6 g、2.5当量）および水酸化ナトリウム（11.7 g、3.0当量）を加え、反応液を室温にて24時間激しく撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（900 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×300 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(1-3)を得た（33.5 g）。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 15:1→10:1→8:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同化合物(1-3)を得た（6.63 g）。｛計40.1 g （82.1 mmol）、84.4 %｝
LRMS 511 m/Z (M+Na)＋。
【００８９】
経路C1；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-α-D-グルコピラノシド  (1-4)
化合物(1-3)（15.6 g、32.0 mmol）を酢酸（90 mL）に溶解し、さらに蒸留水（50 mL）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、室温まで冷却し、エバポレーターで溶媒を留去し、蒸留水（15 mL）を加えて再び減圧濃縮することを4回繰り返した後、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→2:1→1:1→1:2）で精製し、標題化合物(1-4)を得た｛12.1g （30.2 mmol）, 94.5%｝。
【００９０】
LRMS 423 m/Z (M+Na)＋。
【００９１】
経路D1；1-O-アリル-2,3,4-ジ-O-ベンジル-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  (1-5)
化合物(1-4)（12.1 g、30.2 mmol）の無水ピリジン（120 mL）溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド（7.5 g、39.3 mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（369 mg、3.0 mmol）を加え、反応液を０℃で１６時間撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、次に反応液を氷水（100 mL）にゆっくり注ぎ、水層を酢酸エチル（3×200 mL）で抽出した。有機層を合わせて１Ｎ  ＨＣｌ水溶液でｐＨ４になるまで洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル、6:1→4:1→2:1）で精製し、標題化合物(1-5)を得た。｛15.3 g （27.6 mmol）、91.4 %｝。
【００９２】
LRMS 577 m/Z (M+Na)＋ 。
【００９３】
経路E1；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド(1-6)
化合物(1-5)（15.3 g, 27.6 mmol）、N-カルボベンゾキシ-β-アラニン(12.32 g, 55.2 mmol)、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（15.8 mg, 82.8 mmol）および４−ジメチルアミノピリジン （6.7 g, 55.2 mmol）を無水ジクロロメタン（200 mL）及び無水ピリジン（50 mL）の混合溶液に溶解し、室温にて18時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（10 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(1-6)を得た[17.1 g （22.5 ｍmol ）, 81.5 %]。
【００９４】
LRMS 782 m/z （M+Na）＋。
【００９５】
経路F1；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-グルコピラノシド  (1-7)
化合物(1-6)（17.1 g、22.5 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（300 mL）溶液に、チオ酢酸カリウム（5.1 g、45.0 mmol）を加え、90 ℃で3時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（400 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(1-7)を得た{14.2 g （20.3 mmol ）, 90.0 %}。
【００９６】
LRMS 686 m/Z (M+Na)＋ 。
【００９７】
経路G1；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-グリセロール  (1-8)
化合物(1-7)（14.2 g、20.4 mmol）をt-ブチルアルコール：蒸留水＝４：１溶液（200 mL）に溶解し、０．０４Ｍ四酸化オスミウム-t-ブチルアルコール（3 mL）、トリメチルアミンN-オキシド（3.4 g、30.5 mmol）を加え、室温にてスターラーで２４時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、活性炭を３ｇ加え、３０分間攪拌し触媒を吸着させ、セライトをひいた桐山ロートで吸引濾過し触媒を除き、セライトに残っている反応生成物を酢酸エチルで3回洗浄し回収した。回収した濾液に蒸留水(200 mL)を加え、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 2:1→1:1→2:3→1:2→1:4→1:8）で精製し、標題化合物(1-8)を得た{13.2 g （18.9 mmol ）, 93.0 %}。
【００９８】
LRMS 720 m/Z (M+Na)＋ 。
【００９９】
経路H1；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール(1-9)
化合物(1-8)（13.1 g、18.8 mmol）の無水ジクロロメタン（200 mL）および無水ピリジン（50 mL）混合溶液に、ステアロイルクロリド（8.5 g、28.2 mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（200 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル、6:1→4:1→2:1→3:2→1:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(1-9)を得た{7.1 g（7.4 mmol）、39.4 %}。
【０１００】
LRMS 987 m/Z (M+Na)＋。
【０１０１】
経路I1；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール(1-10)
化合物(1-9)（7.1 g、7.4 mmol）の酢酸（160 g、4 mol ）溶液に、オキソン（18.1 g、29.5 mmol）および酢酸カリウム（4.0 g）を加え、室温で48時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷7.5 M水酸化ナトリウム（500 mL）溶液に注ぎ、酢酸エチル（4×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール、100:1→50:1→20:1→15:1→12:1）で精製し、無色ワックス状物質として標題化合物（10）を得た{5.2 g（5.24 mmol ）、71.2 %}。
【０１０２】
LRMS 968 m/Z (M-Na)−。
【０１０３】
経路J1；3-O-［4-O-（β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール(1-11)
化合物(1-10)（490 mg、494 μmol）のメタノール（20 mL）および酢酸（0.6 mL）溶液に、１０％パラジウム活性炭素（300 mg）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、パラジウム活性炭素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水、100:25:3→65:25:4→65:35:5→65:45:6）で精製して標題化合物(1-11)を得た{221 mg （327 μmol ）、66.1 %}。
【０１０４】
LRMS 654 m/Z (M-Na)−。
【０１０５】
経路K1；3-O-［4-O-（ビオチニル-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール(1-12)
化合物(1-11)（273.2 mg、403 μmol）を無水N,N-ジメチルホルムアミド（20 mL）及びトリエチルアミン（1 mL）混合溶液に溶解し、ビオチンp-ニトロフェニルエステル（162 mg、443 μmol）を加えて、スターラーで攪拌しながら室温で24時間反応した。反応が充分進行していることを確認した後、トルエン、メタノールを加え共沸させながら減圧下溶媒を留去し濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水、40:10:1.2→70:30:2.6→30:10:1.5→65:25:4）で精製して標題化合物(1-12)を得た{320.8 mg（355 μmol）、88.0 %}。
【０１０６】
LRMS 880 m/Z (M-Na)−。
【０１０７】
合成例２
本発明のスルホピラノシルアシルプロパンジオール誘導体の製造工程を、α−スルホキノボシルアシルプロパンジオールビオチン誘導体（「ビオチン化αＳＱＡＰ」とも記す）を例に挙げて次のスキーム２に示す。
【化ｆ】
2010082634.tif 000021
【０１０８】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０１０９】
＜合成例＞
経路A2；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  (2-2)
D-グルコース(2-1)(100g, 555mmol)のアリルアルコール(500mL)懸濁液に、トリフルオロメタンスルホン酸(1.00mL)を0℃で加え、反応液を80℃にて48時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、トリエチルアミン(3mL)を添加して反応を停止し減圧濃縮した。次いで、残渣を無水アセトニトリル(500mL)に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール(127g, 1.5当量)およびp-トルエンスルホン酸一水和物(5.28g, 0.05当量)を加えた。反応液を40℃で4時間攪拌後、トリエチルアミン(10mL)を添加して反応を停止し減圧濃縮した。残渣をヘキサン(2000mL)および水(500mL)中に注ぎ、混合液を激しく撹拌した。生じた沈殿物を濾別し、水およびヘキサンでリンスした。沈殿物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(2-2)を得た｛34.5g (112mmol), 20.2%｝。[α]23D +97.5° (c1.00 CH3OH), LRMS m/z 331 [M + Na]＋, mp 139-141℃
1H NMR (400MHz, CD3OD); δ 7.51-7.47 (m, 2H, ArH), 7.37-7.32 (m, 3H, ArH), 5.99 (dddd, 1H, J=17.2, 10.5, 6.08, 5.32Hz, H2), 5.56 (s, 1H, PhCH), 5.36 (dq, 1H, J=17.3, 1.68Hz, H3a), 5.20 (ddt, 1H, J=10.4, 1.80, 1.28Hz, H3b), 4.88 (d, 1H, J=3.86Hz, H1’), 4.25-4.18 (m, 2H, H1a & H6’a), 4.07 (ddt, 1H, J=13.0, 6.10, 1.36Hz, H1b), 3.85 (t, 1H, J=9.38Hz, H3’), 3.81-3.71 (m, 2H, H5’ & H6’b), 3.52 (dd, 1H, J=9.38, 3.86Hz, H2’), 3.45 (t, 1H, J=9.24Hz, H4’)
13C NMR (100MHz, CD3OD); δ 139.1 (Ar-ipso), 135.4 (C2), 129.9 (Ar), 129.0 (Ar), 127.5 (Ar), 117.8 (C3), 103.0 (PhCH), 100.0 (C1’), 82.9 (C4’), 74.0 (C2’), 72.0 (C3’), 69.9 (C6’), 69.7 (C1), 64.1 (C5)。
【０１１０】
経路B2；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  (2-3)
化合物(2-2)(30.0g, 97.3mmol)の無水N,N-ジメチルホルムアミド(DMF, 300mL)溶液に、ベンジルブロミド(41.6g, 2.5当量)および水酸化ナトリウム(11.7g, 3.0当量)を加え、反応液を室温にて24時間激しく撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水(900mL)に注ぎ、酢酸エチル(3×300mL)で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水(2 x 100mL)で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物3を得た(33.5g)。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル, 15:1→10:1→8:1)で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同化合物(2-3)を得た(6.63g)。｛計40.1g (82.1mmol), 84.4%｝[α]26D −1.46°(c1.03 CHCl3), LRMS m/z 511 [M + Na]＋, mp 86-87℃
1H NMR (400MHz, CDCl3); δ 7.50-7.47 (m, 2H, ArH), 7.40-7.24 (m, 13H, ArH), 5.94 (dddd, 1H, J=17.0, 10.4, 6.70, 5.24Hz, H2), 5.56 (s, 1H, PhCH), 5.33 (dq, 1H, J=17.2, 1.56Hz, H3a), 5.24 (ddt, 1H, J=10.3, 1.56, 1.12Hz, H3b), 4.92 (d, 1H, J=11.2Hz, ArCH2), 4.84 (d, 1H, J=11.2Hz, ArCH2), 4.83 (d, 1H, J=12.1Hz, ArCH2), 4.80 (d, 1H, J=3.76Hz, H1'), 4.68 (d, 1H, J=12.1Hz, ArCH2), 4.26 (dd, 1H, J=10.2, 4.84Hz, H6'a), 4.18 (ddt, 1H, J=12.9, 5.18, 1.40Hz, H1a), 4.79 (t, 1H, J=9.30Hz, H3'), 4.03 (ddt, 1H, J=12.9, 6.68, 1.20Hz, H1b), 3.89 (dt, 1H, J=9.96, 4.80Hz, H5'), 3.70 (t, 1H, J=10.3Hz, H6'b), 3.61 (t, 1H, J=9.44Hz, H4'), 3.57 (dd, 1H, J=8.72, 3.80Hz, H2’) 
13C NMR (100MHz, CDCl3); δ 138.7 (Ar-ipso), 138.1 (Ar-ipso), 137.3 (Ar-ipso), 133.5 (C2), 128.9-127.5 (m, Ar), 126.0 (Ar), 118.4 (C3), 101.2 (PhCH), 96.7 (C1’), 82.1 (C3'), 79.1 (C2’), 78.6 (C4'), 75.3 (ArCH2), 73.6 (ArCH2), 69.0 (C6’), 68.4 (C1), 62.5 (C5’)。
【０１１１】
経路C2；1-O-アリル-2,3,4-トリ-O-ベンジル-α-D-グルコピラノシド  (2-4)
水素化リチウムアルミニウム(2.02g, 1.3当量)が懸濁している無水ジクロロメタン(100mL)-無水ジエチルエーテル(100mL)混合溶液に化合物(2-3)(20.0g, 40.9mmol)を加えた。次いで反応液に塩化アルミニウム(7.09g, 1.3当量)の無水ジエチルエーテル溶液200mLを加えて、加熱還流下、4時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、水(10mL)をゆっくりと滴下し、一晩後沈殿物を濾別し、ジエチルエーテルで沈殿をリンスした。濾液を水(2 x 100mL)で洗浄し、水層を合わせてジエチルエーテル(2 x 100mL)で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水(2 x 200mL)で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル, 5:1→4:1→3:1→2:1)で精製し、無色油状物として標題化合物(2-4)を得た｛18.1g (36.9mmol), 90.2%｝。[α]22D +45.0° (c1.21 CHCl3), LRMS m/z 513 [M + Na]＋
1H NMR (400MHz, CDCl3); δ 7.37-7.26 (m, 15H, ArH), 5.92 (dddd, 1H, J=17.1, 10.4, 6.66, 5.24Hz, H2), 5.31 (dq, 1H, J=17.2, 1.52Hz, H3a), 5.22 (ddt, 1H, J=10.3, 1.46, 1.10Hz, H3b), 5.00 (d, 1H, J=10.9Hz, ArCH2), 4.89 (d, 1H, J=11.0Hz, ArCH2), 4.84 (d, 1H, J=10.9Hz, ArCH2), 4.77 (d, 1H, J=12.0Hz, ArCH2), 4.77 (d, 1H, J=3.60Hz, H1'), 4.65 (d, 1H, J=12.1Hz, ArCH2), 4.64 (d, 1H, J=11.0Hz, ArCH2), 4.14 (ddt, 1H, J=12.9, 5.22, 1.34Hz, H1a), 4.04 (t, 1H, J=9.36Hz, H3'), 3.99 (ddt, 1H, J=12.9, 6.64, 1.08Hz, H1b), 3.79-3.66 (m, 3H, H5' & H6'a & H6'b), 3.54 (t, 1H, J=9.28Hz, H4'), 3.51 (dd, 1H, J=9.60, 3.64Hz, H2'), 1.69 (t, 1H, J=12.0Hz, 6'-OH)
13C NMR (100MHz, CDCl3); δ 138.7 (Ar-ipso), 138.1 (Ar-ipso), 138.1 (Ar-ipso), 133.6 (C2), 128.4-127.6 (m, Ar), 118.3 (C3), 95.6 (C1’), 81.9 (C3’), 79.9 (C2’), 77.3 (C4’), 75.7 (ArCH2), 75.0 (ArCH2), 73.2 (ArCH2), 70.8 (C5’), 68.2 (C1), 61.7 (C6’)。
【０１１２】
経路D2；1-O-アリル-2,3,4-トリ-O-ベンジル-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  (2-5)
化合物(2-4)(25.1g, 51.2mmol)の無水ピリジン(250mL)溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド(14.6g, 1.5当量)および4-ジメチルアミノピリジン(626mg, 0.1当量)を加え、反応液を室温にて16時間撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、水(10mL)を加えて反応を止め、反応液を減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を0.5M塩酸(200mL)に注ぎ、酢酸エチル(3×200mL)で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水(2 x 100mL)および飽和食塩水(2 x 100mL)で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(2-5)を得た(25.0g)。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル, 5:1→4:1→3:1)で精製し、同化合物(2-5)を得た(4.00g)。｛計29.0g (45.0mmol), 87.9%｝  [α]25D +32.1°(c1.02 CHCl3), LRMS m/z 667 [M+Na]＋, mp 86-87℃
1H NMR (400MHz, CDCl3); δ 7.76 (ddd, 2H, J=8.32, 1.96, 1.76Hz, ArH), 7.35-7.26 (m, 15H, ArH), 7.17-7.12 (m, 2H, ArH), 5.88 (dddd, 1H, J=17.2, 10.3, 6.62, 5.24Hz, H2), 5.28 (dq, 1H, J=17.2, 1.56Hz, H3a), 5.20 (ddt, 1H, J=10.3, 1.60, 1.12Hz, H3b), 4.99 (d, 1H, J=10.9Hz, ArCH2), 4.82 (d, 1H, J=10.6Hz, ArCH2), 4.78 (d, 1H, J=10.8Hz, ArCH2), 4.74 (d, 1H, J=12.1Hz, ArCH2), 4.72 (d, 1H, J=3.58Hz, H1'), 4.62 (d, 1H, J=12.1Hz, ArCH2), 4.42 (d, 1H, J=10.6Hz, ArCH2), 4.22 (dd, 1H, J=10.5, 4.20Hz, H6'a), 4.16 (dd, 1H, J=10.5, 2.12Hz, H6'b), 4.07 (ddt, 1H, J=12.9, 5.24, 1.40Hz, H1a), 3.98 (t, 1H, J=9.24Hz, H3'), 3.93 (ddt, 1H, J=12.9, 6.64, 1.16Hz, H1b), 3.81 (ddd, 1H, J=10.1, 4.12, 2.04Hz, H5'), 3.48 (dd, 1H, J=9.62, 3.58Hz, H2'), 3.45 (dd, 1H, J=10.0, 8.90Hz, H4’), 2.39 (s, 3H, Ts-Me)
13C NMR (100MHz, CDCl3); δ 144.8 (Ar-ipso), 138.5 (Ar-ipso), 137.9 (Ar-ipso), 137.7 (Ar-ipso), 133.4 (C2), 132.8 (Ar-ipso), 129.8 Ar(), 128.4-127.6 (m, Ar), 118.4 (C3), 95.4 (C1’), 81.8 (C3’), 79.6 (C2’), 76.9 (C4’), 75.7 (ArCH2), 75.0 (ArCH2), 73.2 (ArCH2), 68.6 (C5’), 68.5 (C6’), 68.3 (C1), 21.6 (Ts-Me)。
【０１１３】
経路E2；1-O-(2,3,4-トリ-O-ベンジル-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシル)-プロパン-1,3-ジオール  (2-6)
化合物(2-5)(29.0g, 45.0mmol)の無水テトラヒドロフラン(THF, 150mL)溶液に、アルゴン雰囲気下、0℃で、0.5M 9-ボラビシクロ[3,3,1]ノナン(9-BBN)のテトラヒドロフラン溶液(180mL, 90.0mmol)を加えた。1時間後、反応液を室温に戻し、引き続き10時間撹拌した。反応液を再び0℃に冷却し、まず水(20mL)を加え、次に3M水酸化ナトリウム溶液(70mL)および35％過酸化水素水(70mL)を順次加え、1時間後室温に戻し、12時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、この溶液を酢酸エチル(3 x 100mL)で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水(2 x 100mL)で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル, 3:2→1:1→2:3)で精製し、無色油状物として標題化合物(2-6)を得た｛28.2g (42.5mmol), 94.4%｝。  [α]24D +26.6° (c1.02 CHCl3), LRMS m/z 685 [M + Na]＋
1H NMR (400MHz, CDCl3); δ 7.76-7.74 (m, 2H, ArH), 7.35-7.26 (m, 15H, ArH), 7.16-7.12 (m, 2H, ArH), 4.94 (d, 1H, J=10.9Hz, ArCH2), 4.82 (d, 1H, J=10.7Hz, ArCH2), 4.77 (d, 1H, J=10.9Hz, ArCH2), 4.75 (d, 1H, J=12.0Hz, ArCH2), 4.61 (d, 1H, J=12.0Hz, ArCH2), 4.61 (d, 1H, J=3.64Hz, H1'), 4.43 (d, 1H, J=10.7Hz, ArCH2), 4.20-4.13 (m, 2H, H6'a & H6'b), 3.92 (t, 1H, J=9.24Hz, H3'), 3.84-3.74 (m, 4H, H1a & H3a & H3b & H5'), 3.48-3.40 (m, 3H, H1b & H2' & H4'), 2.52 (t, 1H, J=4.74Hz, 3-OH), 2.39 (s, 3H, Ts-Me), 1.88-1.75 (m, 2H, H2a & H2b)
13C NMR (100MHz, CDCl3); δ 144.8 (Ar-ipso), 138.4 (Ar-ipso), 137.9 (Ar-ipso), 137.6 (Ar-ipso), 132.7 (Ar-ipso), 129.8 (Ar), 128.5-127.6 (m, Ar), 97.1 (C1’), 81.8 (C3’), 79.5 (C2’), 76.8 (C4’), 75.6 (ArCH2), 75.0 (ArCH2), 73.4 (ArCH2), 68.7 (C5’), 68.6 (C6’), 67.5 (C1), 61.5 (C3), 31.5 (C2), 21.6 (Ts-Me)。
【０１１４】
経路F2；1-O-(2,3,4-トリ-O-ベンジル-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル)-プロパン-1,3-ジオール  (2-7)
化合物(2-6)(28.2g, 42.5mmol)の無水DMF (300mL)溶液に、チオ酢酸カリウム(7.28g, 1.5当量)を加え、90℃で3時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水(900mL)に注ぎ、酢酸エチル(3 x 300mL)で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水(2 x 200mL)で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル, 2:1→3:2→1:1→2:3)で精製し、淡褐色油状物質として標題化合物(2-7)を得た{21.9g (38.6mmol ), 90.8%}。[α]23D +33.0°(c1.02 CHCl3), LRMS m/z 584 [M + Na]＋ 
1H NMR (400MHz, CDCl3); δ 7.37-7.24 (m, 15H, ArH), 4.95 (d, 1H, J=10.8Hz, ArCH2), 4.89 (d, 1H, J=10.6Hz, ArCH2), 4.80 (d, 1H, J=10.8Hz, ArCH2), 4.77 (d, 1H, J=12.1Hz, ArCH2), 4.63 (d, 1H, J=12.0Hz, ArCH2), 4.63 (d, 1H, J=3.52Hz, H1'), 4.61 (d, 1H, J=10.7Hz, ArCH2), 3.94 (t, 1H, J=9.22Hz, H3'), 3.88 (ddd, 1H, J=9.86, 6.10, 4.88Hz, H1a), 3.83-3.73 (m, 3H, H3a & H3b & H5'), 3.50 (dd, 1H, J=9.60, 3.64Hz, H2'), 3.45 (ddd, 1H, J=9.92, 5.24, 2.28Hz, H1b), 3.41 (dd, 1H, J=13.6, 3.00Hz, H6'a), 3.30 (dd, 1H, J=9.54, 9.06Hz, H4'), 3.02 (dd, 1H, J=13.7, 7.64Hz, H6'b), 2.67 (br, 1H, 3-OH), 2.32 (s, 3H, SAc-Me), 1.92-1.78 (m, 2H, H2a & H2b)
13C NMR (100MHz, CDCl3); δ 195.0 (SAC-C=O), 138.5 (Ar-ipso), 137.9 (Ar-ipso), 137.8 (Ar-ipso), 128.5-127.6 (m, Ar), 96.9 (C1’), 81.8 (C3’), 80.4 (C4’), 79.8 (C2’), 75.7 (ArCH2), 75.2 (ArCH2), 73.4 (ArCH2), 69.5 (C5’), 67.2 (C1), 61.5 (C3), 31.5 (C2), 30.8 (C6’), 30.5 (SAc-Me)。
【０１１５】
経路G2；3-O-(2,3,4-トリ-O-ベンジル-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル)-プロパン-1,3-ジオール  ナトリウム塩  (2-8)
式(2-7)の化合物(500 mg, 0.88 mmol)の酢酸(5 mL)溶液に、オキソン(1.63 g, 2.65 mmol)および酢酸カリウム(25 mg)を加え、室温で2日間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷7.5M水酸化ナトリウム(15 mL)溶液に注ぎ、クロロホルム(4×30 mL)で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水(2 x 20mL)および飽和食塩水(2 x 20mL)で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をさらにメタノール(20 mL)に溶解しナトリウムメトキシド（NaOMe）を適量加え室温にて３時間反応した。反応液に氷冷下冷水を加え反応を停止し減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルクロマトグラフィー(クロロホルム-メタノール, 100:0→3:1)で精製し、無色ワックス状物質として標題化合物(2-8)を得た{498 mg (0.87 mmol ), 98.7 %}。 LRMS m/z 571 [M - Na]−。
経路H2；3-O-(2,3,4-トリ-O-ベンジル-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル) -1-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-プロパン-1,3-ジオール  ナトリウム塩  (2-9)
化合物(2-8)（900 mg, 1.51 mmol）、N-カルボベンゾキシ-β-アラニン(440 mg, 1.97 mmol)、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（871 mg, 4.55 mmol）および４−ジメチルアミノピリジン （55 mg, 0.15 mmol）を無水DMF (15 mL)の混合溶液に溶解し、室温にて一晩反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（1 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 100:0→12:1）で精製し、標題化合物(2-9)を得た{517 mg （0.65 ｍmol ）, 42.8 %}。
【０１１６】
LRMS m/z 776 [M - Na]− 。
【０１１７】
経路I2；3-O-(6-スルホ-α-D-キノボピラノシル)-1-O-(β-アラニル)-プロパン-1,3-ジオール  ナトリウム塩  (1-10)
化合物(2-9)(517 mg, 0.65 mmol)のメタノール(3.0 mL)、ジクロロメタン(3.0 mL) および酢酸(0.2 mL)溶液に、20％水酸化パラジウム活性炭素(50 mg)を加え水素ガス雰囲気下、室温で一晩反応させた。反応が十分に進まなかったので更にメタノール(3.0 mL)、10％パラジウム活性炭素(50 mg)を加え、水素ガス雰囲気下、室温で2日間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、パラジウム活性炭素をセライトで濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(クロロホルム-メタノール, 4:1→2:1→1:1→2:3)で精製し、標題化合物(2-10)を得た{250.8 mg (0.63 mmol ), 98.2%}。LRMS m/z 372 [M - Na]− 。
【０１１８】
経路J2；3-O-(6-スルホ-α-D-キノボピラノシル)-1-O-(ビオチニル-β-アラニル)-プロパン-1,3-ジオール  カルシウム塩  (1-11)
化合物(2-10)（226 mg, 0.57 mmol）を無水DMF（5 mL）及びトリエチルアミン（2 mL）混合溶液に溶解し、ビオチンp-ニトロフェニルエステル（313 mg, 0.86 mmol）を溶解した無水DMF（2mL）溶液を加えて、スターラーで攪拌しながら室温で一晩反応した。反応が充分進行していることを確認した後、トルエン、メタノールを加え共沸させながら減圧下溶媒を留去し濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 10:1→1:4）で精製してナトリウム塩体を得た。塩化カルシウム水溶液にてカルシウム体に交換したイオン交換樹脂（アンバーライト(登録商標)IR-120、15.7 mL）をカラムに充填した。ナトリウム塩体水溶液を反復してカラムを通過させカルシウム塩体へ交換する操作を行い標題化合物(2-11)を得た{210 mg （340 μmol ）, 59.5 %}。
【０１１９】
LRMS m/z 598 [M - H]-, m/z 638 [M - H + Ca]＋。
【０１２０】
合成例３
本発明のスルホピラノシルアシルグリセロール誘導体の製造工程を、α−スルホキノボシルモノアシルグリセロールモノヨード誘導体を例に挙げて次のスキーム３に示す。
【化ｇ】
2010082634.tif 000022
【０１２１】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０１２２】
＜合成例＞
経路A3；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  （3-2）
化合物(3-1)（100 g, 555 mmol）のアリルアルコール（500 mL）懸濁液に、トリフルオロメタンスルホン酸（1.00 mL）を0℃で加え、反応液を80 ℃にて48時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、トリエチルアミン（3 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。次いで、残渣を無水アセトニトリル（500 mL）に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（127 g, 1.5当量）およびp-トルエンスルホン酸一水和物（5.28 g, 0.05当量）を加えた。反応液を40℃で4時間攪拌後、トリエチルアミン（10 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。残渣をヘキサン（2000 mL）および水（500 mL）中に注ぎ、混合液を激しく撹拌した。生じた沈殿物を濾別し、水およびヘキサンでリンスした。沈殿物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(3-2)を得た｛34.5 g （112 mmol）, 20.2%｝。
【０１２３】
LRMS m/z 331 [M+Na]＋。
【０１２４】
経路B3；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  （3-3）
化合物(3-2)（30.0 g, 97.3 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（DMF, 300 mL）溶液に、ベンジルブロミド（41.6 g, 2.5当量）および水酸化ナトリウム（11.7 g, 3.0当量）を加え、反応液を室温にて24時間激しく撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（900 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×300 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(3-3)を得た（33.5 g）。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 15:1→10:1→8:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同表題化合物(3-3)を得た（6.63 g）。｛計40.1 g （82.1 mmol）, 84.4 %｝
LRMS m/z 511 [M+Na]＋。
【０１２５】
経路C3；1-O-アリル-2,3 -ジ-O-ベンジル-α-D-グルコピラノシド  （3-4）
化合物(3-3)（15.6 g, 32.0 mmol）を酢酸（90 mL）に溶解し、さらに蒸留水（50 mL）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、室温まで冷却し、エバポレーターで溶媒を留去し、蒸留水（15 mL）を加えて再び減圧濃縮することを4回繰り返した後、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→2:1→1:1→1:2）で精製し、標題化合物(3-4)を得た｛12.1g （30.2 mmol）, 94.5%｝。
【０１２６】
LRMS m/z 423 [M+Na]＋。
【０１２７】
経路D3；1-O-アリル-2,3,4-ジ-O-ベンジル-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  （3-5）
化合物(3-4)（12.1 g, 30.2 mmol）の無水ピリジン（120 mL）溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド（7.5 g, 39.3 mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（369 mg, 3.0 mmol）を加え、反応液を0 ℃で16時間撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、次に反応液を氷水（100 mL）にゆっくり注ぎ、水層を酢酸エチル（3×200 mL）で抽出した。有機層を合わせて1N HCl水溶液でpH4になるまで洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 6:1→4:1→2:1）で精製し、標題化合物(3-5)を得た。｛15.3 g （27.6 mmol）, 91.4 %｝。
【０１２８】
LRMS m/z 577 [M+Na]＋。
【０１２９】
経路E3；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  （3-6）
化合物(3-5)（15.3 g, 27.6 mmol）、N-カルボベンゾキシ-β-アラニン(12.32 g, 55.2 mmol)、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（15.8 mg, 82.8 mmol）および４−ジメチルアミノピリジン （6.7 g, 55.2 mmol）を無水ジクロロメタン（200 mL）及び無水ピリジン（50 mL）の混合溶液に溶解し、室温にて18時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（10 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(3-6)を得た[17.1 g （22.5 ｍmol ）, 81.5 %]。
【０１３０】
LRMS m/z 782 [M+Na]＋。
【０１３１】
経路F3；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-グルコピラノシド（3-7）
化合物(3-6)（17.1 g, 22.5 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（300 mL）溶液に、チオ酢酸カリウム（5.1 g, 45.0 mmol）を加え、90 ℃で3時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（400 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(3-7)を得た{14.2 g （20.3 mmol ）, 90.0 %}。
【０１３２】
LRMS m/z 686 [M+Na]＋ 。
【０１３３】
経路G3；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-グリセロール（3-8）
化合物(3-7)（14.2 g, 20.4 mmol）をt-ブチルアルコール：蒸留水＝4：1溶液（200 mL）に溶解し、0.04 M四酸化オスミウム-t-ブチルアルコール（3 mL）、トリメチルアミンN-オキシド（3.4 g, 30.5 mmol）を加え、室温にてスターラーで24時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、活性炭を3 g加え、30分間攪拌し触媒を吸着させ、セライトをひいた桐山ロートで吸引濾過し触媒を除き、セライトに残っている反応生成物を酢酸エチルで3回洗浄し回収した。回収した濾液に蒸留水(200 mL)を加え、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 2:1→1:1→2:3→1:2→1:4→1:8）で精製し、標題化合物(3-8)を得た{13.2 g （18.9 mmol ）, 93.0 %}。
【０１３４】
LRMS m/z 720 [M+Na]＋ 。
【０１３５】
経路H3；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（3-9）
化合物(3-8)（13.1 g, 18.8 mmol）の無水ジクロロメタン（200 mL）および無水ピリジン（50 mL）混合溶液に、ステアロイルクロリド（8.5 g, 28.2 mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（200 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,6:1→4:1→2:1→3:2→1:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(3-9)を得た{7.1 g （7.4 mmol ）, 39.4 %}。
【０１３６】
LRMS m/z 987 [M+Na]＋。
【０１３７】
経路I3；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（3-10）
化合物(3-9)（7.1 g, 7.4 mmol）の酢酸（160 g, 4 mol ）溶液に、オキソン（18.1 g, 29.5 mmol）および酢酸カリウム（4.0 g）を加え、室温で48時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷7.5 M水酸化ナトリウム（500 mL）溶液に注ぎ、酢酸エチル（4×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 100:1→50:1→20:1→15:1→12:1）で精製し、無色ワックス状物質として標題化合物(3-10)を得た{5.2 g （5.24 mmol ）, 71.2 %}。
【０１３８】
LRMS m/z 968 [M-Na]−。
【０１３９】
経路J3；3-O-［4-O-（β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（3-11）
化合物(3-10)（490 mg, 494 μmol）のメタノール（20 mL）および酢酸（0.6 mL）溶液に、10 ％パラジウム活性炭素（300 mg）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、パラジウム活性炭素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 100:25:3→65:25:4→65:35:5→65:45:6）で精製して標題化合物(3-11)を得た{221 mg （327 μmol ）, 66.1 %}。
【０１４０】
LRMS m/z 654 [M-Na]−。
【０１４１】
経路K3；3-O-［4-O-（4-ヨードベンゾイル-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-モノ-O-ステアロイル-グリセロール（3-12）
化合物(3-11)（221 mg, 327 μmol）を無水ジクロロメタン（15 mL）、ピリジン（5 mL）及びトリエチルアミン（2 mL）混合溶液に溶解し、（４-ヨードベンゾイル）-  p-ニトロフェニルエステル（241 mg, 653 μmol）を加えて、スターラーで攪拌しながら室温で24時間反応した。反応が充分進行していることを確認した後、トルエン、メタノールを加え共沸させながら減圧下溶媒を留去し濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 30:5:0.5→30:6:0.7→30:8:0.9→30:10:1.1）で精製して標題化合物(3-12)を得た{262 mg （238 μmol ）, 72.8 %}。
【０１４２】
LRMS m/z 884 [M - Na]−。
【０１４３】
合成例４
本発明のスルホピラノシルアシルグリセロール誘導体の製造工程を、αスルホキノボシルモノアシルグリセロールトリヨード誘導体を例に挙げて次のスキーム4に示す。
【化ｈ】
2010082634.tif 000023
【０１４４】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０１４５】
＜合成例＞
経路A4；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  （4-2）
化合物(4-1)（100 g, 555 mmol）のアリルアルコール（500 mL）懸濁液に、トリフルオロメタンスルホン酸（1.00 mL）を0℃で加え、反応液を80 ℃にて48時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、トリエチルアミン（3 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。次いで、残渣を無水アセトニトリル（500 mL）に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（127 g, 1.5当量）およびp-トルエンスルホン酸一水和物（5.28 g, 0.05当量）を加えた。反応液を40℃で4時間攪拌後、トリエチルアミン（10 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。残渣をヘキサン（2000 mL）および水（500 mL）中に注ぎ、混合液を激しく撹拌した。生じた沈殿物を濾別し、水およびヘキサンでリンスした。沈殿物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(4-2)を得た｛34.5 g （112 mmol）, 20.2%｝。
【０１４６】
LRMS m/z 331 [M+Na]+。
【０１４７】
経路B4；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  （4-3）
化合物(4-2)（30.0 g, 97.3 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（DMF, 300 mL）溶液に、ベンジルブロミド（41.6 g, 2.5当量）および水酸化ナトリウム（11.7 g, 3.0当量）を加え、反応液を室温にて24時間激しく撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（900 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×300 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物3を得た（33.5 g）。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 15:1→10:1→8:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同表題化合物(4-3)を得た（6.63 g）。｛計40.1 g （82.1 mmol）, 84.4 %｝
LRMS m/z 511 [M+Na]+。
【０１４８】
経路C4；1-O-アリル-2,3 -ジ-O-ベンジル-α-D-グルコピラノシド  （4-4）
化合物(4-3)（15.6 g, 32.0 mmol）を酢酸（90 mL）に溶解し、さらに蒸留水（50 mL）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、室温まで冷却し、エバポレーターで溶媒を留去し、蒸留水（15 mL）を加えて再び減圧濃縮することを4回繰り返した後、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→2:1→1:1→1:2）で精製し、標題化合物(4-4)を得た｛12.1g （30.2 mmol）, 94.5%｝。
【０１４９】
LRMS m/z 423 [M+Na]+。
【０１５０】
経路D4；1-O-アリル-2,3,4-ジ-O-ベンジル-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  （4-5）
化合物(4-4)（12.1 g, 30.2 mmol）の無水ピリジン（120 mL）溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド（7.5 g, 39.3 mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（369 mg, 3.0 mmol）を加え、反応液を0 ℃で16時間撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、次に反応液を氷水（100 mL）にゆっくり注ぎ、水層を酢酸エチル（3×200 mL）で抽出した。有機層を合わせて1N HCl水溶液でpH4になるまで洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 6:1→4:1→2:1）で精製し、標題化合物(4-5)を得た。｛15.3 g （27.6 mmol）, 91.4 %｝。
【０１５１】
LRMS m/z 577 [M+Na]＋。
【０１５２】
経路E4；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  （4-6）
化合物(4-5)（15.3 g, 27.6 mmol）、N-カルボベンゾキシ-β-アラニン(12.32 g, 55.2 mmol)、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（15.8 mg, 82.8 mmol）および４−ジメチルアミノピリジン （6.7 g, 55.2 mmol）を無水ジクロロメタン（200 mL）及び無水ピリジン（50 mL）の混合溶液に溶解し、室温にて18時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（10 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(4-6)を得た[17.1 g （22.5 ｍmol ）, 81.5 %]。
【０１５３】
LRMS m/z 782 [M+Na]＋。
【０１５４】
経路F4；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-グルコピラノシド（4-7）
化合物(4-6)（17.1 g, 22.5 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（300 mL）溶液に、チオ酢酸カリウム（5.1 g, 45.0 mmol）を加え、90 ℃で3時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（400 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(4-7)を得た{14.2 g （20.3 mmol ）, 90.0 %}。
【０１５５】
LRMS m/z 686 [M+Na]＋。
【０１５６】
経路G4；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-グリセロール（4-8）
化合物(4-7)（14.2 g, 20.4 mmol）をt-ブチルアルコール：蒸留水＝4：1溶液（200 mL）に溶解し、0.04 M四酸化オスミウム-t-ブチルアルコール（3 mL）、トリメチルアミンN-オキシド（3.4 g, 30.5 mmol）を加え、室温にてスターラーで24時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、活性炭を3 g加え、30分間攪拌し触媒を吸着させ、セライトをひいた桐山ロートで吸引濾過し触媒を除き、セライトに残っている反応生成物を酢酸エチルで3回洗浄し回収した。回収した濾液に蒸留水(200 mL)を加え、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 2:1→1:1→2:3→1:2→1:4→1:8）で精製し、標題化合物(4-8)を得た{13.2 g （18.9 mmol ）, 93.0 %}。
【０１５７】
LRMS m/z 720 [M+Na]＋。
【０１５８】
経路H4；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（4-9）
化合物(4-8)（13.1 g, 18.8 mmol）の無水ジクロロメタン（200 mL）および無水ピリジン（50 mL）混合溶液に、ステアロイルクロリド（8.5 g, 28.2 mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（200 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,6:1→4:1→2:1→3:2→1:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(4-9)を得た{7.1 g （7.4 mmol ）, 39.4 %}。
【０１５９】
LRMS m/z 987 [M+Na]＋。
【０１６０】
経路I4；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（4-10）
化合物(4-9)（7.1 g, 7.4 mmol）の酢酸（160 g, 4 mol ）溶液に、オキソン（18.1 g, 29.5 mmol）および酢酸カリウム（4.0 g）を加え、室温で48時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷7.5 M水酸化ナトリウム（500 mL）溶液に注ぎ、酢酸エチル（4×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 100:1→50:1→20:1→15:1→12:1）で精製し、無色ワックス状物質として標題化合物(4-10)を得た{5.2 g （5.24 mmol ）, 71.2 %}。
【０１６１】
LRMS m/z 968 [M-Na]−。
【０１６２】
経路J4；3-O-［4-O-（β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（4-11）
化合物(4-10)（191 mg, 193 μmol）のメタノール（10 mL）、ジクロロメタン (10mL)および酢酸（0.2 mL）溶液に、10 ％水酸化パラジウム活性炭素（160 mg）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、水酸化パラジウム活性炭素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 100:25:3→65:25:4→65:35:5→65:45:6）で精製して標題化合物(4-11)を得た。
【０１６３】
LRMS m/z 654 [M-Na]−。
【０１６４】
経路K4；3-O-［4-O-（2,3,5-トリヨードベンゾイル-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（4-12）
化合物(4-11)、2,3,5-トリヨウ素安息香酸(192 mg, 385 μmol)、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（73.8 mg, 385 μmol）および４−ジメチルアミノピリジン （2 mg, 19 μmol）を無水ジクロロメタン（10 mL）及び無水ピリジン（5 mL）の混合溶液に溶解し、室温にて18時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（10 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 50:10:1→40:10:1.2→30:10:1.5→20:10:2）で精製して標題化合物(4-12)を得た{81 mg （70 μmol ）, （経路J4およびK4二経路での収率）36.3 %}。
【０１６５】
LRMS m/z 1136 [M - Na]−。
【０１６６】
合成例５
本発明のスルホピラノシルアシルグリセロール誘導体の製造工程を、αスルホキノボシルジアシルグリセロールモノヨード誘導体を例に挙げて次のスキーム5に示す。
【化ｉ】
2010082634.tif 000024
【０１６７】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０１６８】
＜合成例＞
経路A5；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  （5-2）
化合物(5-1)（100 g, 555 mmol）のアリルアルコール（500 mL）懸濁液に、トリフルオロメタンスルホン酸（1.00 mL）を0℃で加え、反応液を80 ℃にて48時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、トリエチルアミン（3 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。次いで、残渣を無水アセトニトリル（500 mL）に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（127 g, 1.5当量）およびp-トルエンスルホン酸一水和物（5.28 g, 0.05当量）を加えた。反応液を40℃で4時間攪拌後、トリエチルアミン（10 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。残渣をヘキサン（2000 mL）および水（500 mL）中に注ぎ、混合液を激しく撹拌した。生じた沈殿物を濾別し、水およびヘキサンでリンスした。沈殿物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(5-2)を得た｛34.5 g （112 mmol）, 20.2%｝。
【０１６９】
LRMS m/z 331 [M+Na]＋。
【０１７０】
経路B5；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  （5-3）
化合物(5-2)（30.0 g, 97.3 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（DMF, 300 mL）溶液に、ベンジルブロミド（41.6 g, 2.5当量）および水酸化ナトリウム（11.7 g, 3.0当量）を加え、反応液を室温にて24時間激しく撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（900 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×300 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物3を得た（33.5 g）。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 15:1→10:1→8:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同表題化合物(5-3)を得た（6.63 g）。｛計40.1 g （82.1 mmol）, 84.4 %｝
LRMS m/z 511 [M+Na]＋。
【０１７１】
経路C5；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-α-D-グルコピラノシド  （5-4）
化合物(5-3)（15.6 g, 32.0 mmol）を酢酸（90 mL）に溶解し、さらに蒸留水（50 mL）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、室温まで冷却し、エバポレーターで溶媒を留去し、蒸留水（15 mL）を加えて再び減圧濃縮することを4回繰り返した後、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→2:1→1:1→1:2）で精製し、標題化合物(5-4)を得た｛12.1g （30.2 mmol）, 94.5%｝。
【０１７２】
LRMS m/z 423 [M+Na]＋。
【０１７３】
経路D5；1-O-アリル-2,3,4-ジ-O-ベンジル-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  （5-5）
化合物(5-4)（12.1 g, 30.2 mmol）の無水ピリジン（120 mL）溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド（7.5 g, 39.3 mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（369 mg, 3.0 mmol）を加え、反応液を0 ℃で16時間撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、次に反応液を氷水（100 mL）にゆっくり注ぎ、水層を酢酸エチル（3×200 mL）で抽出した。有機層を合わせて1N HCl水溶液でpH4になるまで洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 6:1→4:1→2:1）で精製し、標題化合物(5-5)を得た。｛15.3 g （27.6 mmol）, 91.4 %｝。
【０１７４】
LRMS m/z 577 [M+Na]＋。
【０１７５】
経路E5；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-O-トシル-α-D-グルコピラノシド  （5-6）
化合物(5-5)（15.3 g, 27.6 mmol）、N-カルボベンゾキシ-β-アラニン(12.32 g, 55.2 mmol)、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（15.8 mg, 82.8 mmol）および４−ジメチルアミノピリジン （6.7 g, 55.2 mmol）を無水ジクロロメタン（200 mL）及び無水ピリジン（50 mL）の混合溶液に溶解し、室温にて18時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（10 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(5-6)を得た[17.1 g （22.5 mmol ）, 81.5 %]。
【０１７６】
LRMS m/z 782 [M+Na]＋。
【０１７７】
経路F5；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-グルコピラノシド（5-7）
化合物(5-6)（17.1 g, 22.5 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（300 mL）溶液に、チオ酢酸カリウム（5.1 g, 45.0 mmol）を加え、90 ℃で3時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（400 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(5-7)を得た{14.2 g （20.3 mmol ）, 90.0 %}。
【０１７８】
LRMS m/z 686 [M+Na]＋ 。
【０１７９】
経路G5；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-グリセロール（5-8）
化合物(5-7)（14.2 g, 20.4 mmol）をt-ブチルアルコール：蒸留水＝4：1溶液（200 mL）に溶解し、0.04 M四酸化オスミウム-t-ブチルアルコール（3 mL）、トリメチルアミンN-オキシド（3.4 g, 30.5 mmol）を加え、室温にてスターラーで24時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、活性炭を3 g加え、30分間攪拌し触媒を吸着させ、セライトをひいた桐山ロートで吸引濾過し触媒を除き、セライトに残っている反応生成物を酢酸エチルで3回洗浄し回収した。回収した濾液に蒸留水(200 mL)を加え、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 2:1→1:1→2:3→1:2→1:4→1:8）で精製し、標題化合物(5-8)を得た{13.2 g （18.9 mmol ）, 93.0 %}。
【０１８０】
LRMS m/z 720 [M+Na]＋ 。
【０１８１】
経路H5；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール（5-9）
化合物5-8（13.1 g, 18.8 mmol）の無水ジクロロメタン（200 mL）および無水ピリジン（50 mL）混合溶液に、ステアロイルクロリド（8.5 g, 28.2 mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（200 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,6:1→4:1→2:1→3:2→1:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(5-9)を得た{12.2 g （9.9 mmol ）, 52.8 %}。
【０１８２】
LRMS m/z 1253 [M+Na]＋。
【０１８３】
経路I5；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール（5-10）
化合物(5-9)（12.2 g, 9.9 mmol）の酢酸（150 g, 3.8 mol ）溶液に、オキソン（24.4 g, 39.7 mmol）および酢酸カリウム（3.8 g）を加え、45℃で48時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷7.5 M水酸化ナトリウム（500 mL）溶液に注ぎ、酢酸エチル（4×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 100:1→50:1→20:1→15:1→12:1）で精製し、無色ワックス状物質として標題化合物(5-10)を得た{8.6 g （6.97 mmol ）, 70.3 %}。
【０１８４】
LRMS m/z 1235 [M-Na]−。
【０１８５】
経路J5；3-O-［4-O-（β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール  ナトリウム塩（5-11）
化合物(5-10)（480.8 mg, 382μmol）のメタノール（20 mL）、クロロホルム(10 mL)および酢酸（0.5 mL）溶液に、10 ％パラジウム活性炭素（300 mg）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、パラジウム活性炭素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 100:25:3→65:25:4→65:35:5→65:45:6）で精製し(5-11)を得た。
【０１８６】
LRMS m/z 921 [M-Na]-。
【０１８７】
経路K5；3-O-［4-O-（4-ヨードベンゾイル-β-アラニル）-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール  ナトリウム塩（5-12）
化合物(5-11)を無水ジクロロメタン（15 mL）、ピリジン（15 mL）及びトリエチルアミン（2 mL）混合溶液に溶解し、（４-ヨードベンゾイル）-  p-ニトロフェニルエステル（635 mg, 1.72 mmol）を加えて、スターラーで攪拌しながら室温で24時間反応した。反応が充分進行していることを確認した後、トルエン、メタノールを加え共沸させながら減圧下溶媒を留去し濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 80:10:0.8→70:10:1.0→65:10:1.0→60:10:1.0）で精製して標題化合物(5-12)を得た{279 mg （238μmol ）, (経路  J5, K5の二反応で収率55.2 %}。
【０１８８】
LRMS m/z 1151 [M - Na]−。
【０１８９】
合成例６
本発明のスルホピラノシルアシルグリセロール誘導体の製造工程を、αスルホキノボシルアシルグリセロールモノヨード誘導体を例に挙げて次のスキーム6に示す。
【化ｊ】
2010082634.tif 000025
【０１９０】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０１９１】
＜合成例＞
経路A6；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-α-D-グルコピラノシド  （6-2）
化合物(6-1)（100 g, 555 mmol）のアリルアルコール（500 mL）懸濁液に、トリフルオロメタンスルホン酸（1.00 mL）を0℃で加え、反応液を80 ℃にて48時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、トリエチルアミン（3 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。次いで、残渣を無水アセトニトリル（500 mL）に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（127 g, 1.5当量）およびp-トルエンスルホン酸一水和物（5.28 g, 0.05当量）を加えた。反応液を40℃で4時間攪拌後、トリエチルアミン（10 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。残渣をヘキサン（2000 mL）および水（500 mL）中に注ぎ、混合液を激しく撹拌した。生じた沈殿物を濾別し、水およびヘキサンでリンスした。沈殿物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(6-2)を得た｛34.5 g （112 mmol）, 20.2%｝。
【０１９２】
LRMS m/z 331 [M+Na]＋。
【０１９３】
経路B6；1-O-(2-プロペニル)-α-D-グルコース(6-3)
化合物(6-2) 10.7g(34.7mmol)を酢酸：水＝8：5の溶液260mLに溶解し、100℃、1時間反応後、減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝6：1)で精製して化合物（6-3）を得た。。(収量6.3g 28.6mmol、収率82.4％）
経路C6; 1-O-(2-プロペニル)-6-O-(4-トリルスルホニル)-α-D-グルコース(6-4)
化合物(6-3) 6.3g(28.6mmol)を乾燥ピリジン200mLに溶解し、p-ジメチルアミノピリジン(DMAP)195mg、p-トルエンスルホニルクロリド7.0gを添加し、撹拌しながら室温で16時間反応した。その後、冷蒸留水20mLを加えて反応を停止し、酢酸エチルで抽出(200mL×3回)し、有機層を合わせて1.0Mおよび0.1M塩酸でpH4まで中和し、飽和食塩水で洗浄(200mL×2回)後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ジクロロメタン：メタノール＝20：1)で精製して表題化合物(6-4)を得た。(収量8.6mg 23.0mmol、収率83.8％）。
【０１９４】
経路D6；2,3,4-トリ-O-(t-ブチルジメチルシリル)-1-O-(2-プロペニル)-6-O-(4-トリルスルホニル)-α-D-グルコース(6-5)
化合物(6-4)11.2g(29.9mmol)を乾燥ジクロロメタン25mLに溶解し、t-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート23.8g、2,6-ルチジン14.4gを添加し、窒素気流下で撹拌しながら16時間反応した。その後、ジクロロメタン150mLを加えて反応を停止し、飽和食塩水で洗浄(100mL×2回)後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン：酢酸エチル＝30：1)で精製して表題化合物(6-6)を得た。(収量19.6g 27.4mmol、収率91.6％）。
【０１９５】
経路E6; 2,3,4-トリ-O-(t-ブチルジメチルシリル)-1-O-(2-プロペニル)-6-デオキシ-6-アセチルチオ-α-D-グルコース(6-6)
化合物(6-5) 7.9g(11.0mmol)を乾燥エタノール20mLに溶解し、チオ酢酸カリウム1.8gを添加し、還流条件下で撹拌しながら3時間反応した。その後、冷蒸留水100mLを加えて反応を停止し、酢酸エチルで抽出(200mL×3回)し、有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄(200mL×2回)後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン：酢酸エチル＝50：1)で精製して表題化合物(6-6）を得た。(収量5.6g 9.02mmol、収率82.0％）。
【０１９６】
経路F6；3-O-[2,3,4-トリ-O-(t-ブチルジメチルシリル)-6-デオキシ-6-アセチルチオ-α-D-グルコピラノシル]-グリセロール(6-7)
化合物(6-6) 5.6g(9.02mmol)をt-ブタノール：水＝4：1溶液に溶解し、トリメチルアミンN-オキシド二水和物1.5g、四酸化オスミウム-t-ブタノール溶液(0.04M)15mLを添加し、撹拌しながら室温で22時間反応した。その後活性炭15gを加え、撹拌しながら室温で1.5時間放置し、四酸化オスミウムを吸着させた後、吸引濾過した。次に冷蒸留水200mLを加えて反応を停止し、酢酸エチルで抽出(200mL×3回)し、有機層を合わせて飽和食塩水で洗浄(300mL×2回)後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、濾過、減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン：酢酸エチル＝3：1→2：1)で精製して表題化合物(6-7）を得た。(収量5.2g 7.94mmol、収率88.0％)
経路G6；3-O-［2,3,4-O-tert-ブチルジメチルシリル-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（6-8）
化合物（6-7）（1.4 g, 6.1 mmol）の無水ジクロロメタン（20 mL）および無水ピリジン（5 mL）混合溶液に、ステアロイルクロリド（692 mg, 2.3 mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（1 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（20 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×20 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 20 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,10:1→8:1→6:1→4:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(6-8)を得た{1.6 g （1.7 mmol ）, 83.6 %}。
【０１９７】
LRMS m/z 944 [M+Na]＋。
【０１９８】
経路H6；3-O-［2,3,4-O-tert-ブチルジメチルシリル-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-2-O-（4-ヨードベンゾイル）-グリセロール（6-9）
化合物(6-8)（1.6 g, 1.7 mmol）の無水ジクロロメタン（20 mL）および無水ピリジン（5 mL）混合溶液に、4-ヨード塩化ベンゾイル（555 mg, 2.1 mmol）を加え、室温で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（1 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（20 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×20 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 20 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,12:1→10:1→8:1→6:1→5:1→4:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(6-9)を得た{1.7 g （1.5 mmol ）, 85.0 %}。
【０１９９】
LRMS m/z 1174 [M+Na]＋。
【０２００】
経路I6；3-O-［2,3,4-O-tert-ブチルジメチルシリル-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-2-O-（4-ヨードベンゾイル）-グリセロール（6-10）
化合物(6-9)（1.7 g, 1.5 mmol）の酢酸（50 mL）溶液に、オキソン（2.7 g, 4.4 mmol）および酢酸カリウム（1.25 g）を加え、室温で48時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液に酢酸エチル（200 mL）を注いだ。飽和食塩水（2 x 50 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、酢酸エチルを減圧除去した。酢酸を含む得られた残渣を表題化合物(6-10）として得て、そのまま次の反応に用いることとした。
【０２０１】
経路J6；3-O-［6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-2-O-（4-ヨードベンゾイル）-グリセロール（6-11）
化合物（6-10）と酢酸を含む混合液にテトラヒドロフラン（1.5 mL）および水（1.5mL）を加え、更にトリフルオロ酢酸（0.3 mL）を加え、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 100:10:0.5→80:10:0.5→60:10:1→40:10:1→60:25:2）で精製して標題化合物(6-11)を得た{（経路I6およびJ6の二反応で752 mg （899 μmol ）, 60.9 %}。
【０２０２】
LRMS m/z 813 [M-Na]−。
【０２０３】
合成例７
本発明のスルホピラノシルアシルグリセロール誘導体の製造工程を、αスルホキノボシルアシルグリセロールトリヨード誘導体を例に挙げて次のスキーム7に示す。
【化ｋ】
2010082634.tif 000026
【０２０４】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０２０５】
＜合成例＞
上記の合成例6の経路A6〜経路G6と同様の方法により化合物(7-8)を得た。
【０２０６】
経路H7；3-O-［2,3,4-O-tert-ブチルジメチルシリル-6-チオアセチル-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-2-O-（2,3,5-トリヨードベンゾイル）-グリセロール（7-9）
化合物(7-8)（467 mg, 507 μmol）、2,3,5-トリヨード安息香酸(303.8 mg, 608 μmol)、炭酸ジ-2-ピリジル（DPC）（219 mg, 1013 μmol）および４−ジメチルアミノピリジン （6.2 mg, 51 μmol）を無水ジクロロメタン（10 mL）に溶解し、室温にて48時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（30 mL）を注ぎ、反応を停止した後、ジクロロメタン（3×20 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 20 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,12:1→10:1→8:1→6:1→5:1→4:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(7-9)を得た{245 mg （174μmol ）, 34.4 %}。
【０２０７】
LRMS m/z 1425 [M + Na]−。
【０２０８】
経路I7；3-O-［2,3,4-O-tert-ブチルジメチルシリル-6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-2-O-（2,3,5-トリヨードベンゾイル）-グリセロール（7-10）
化合物(7-9)（245 mg, 174μmol）の酢酸（10 mL）溶液に、オキソン（322 mg, 523μmol）および酢酸カリウム（250 mg）を加え、室温で24時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液に酢酸エチル（50 mL）を注いだ。飽和食塩水（2 x 20 mL）で洗浄、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧下濃縮した。酢酸を含む得られた残渣を表題化合物(7-10)としてそのまま次の反応に用いることとした。
【０２０９】
経路J7；3-O-［6-スルホ-α-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-2-O-（2,3,5-トリヨードベンゾイル）-グリセロール（7-11）
経路 I7で得られた化合物(7-10)と酢酸を含む混合液にテトラヒドロフラン（5 mL）、酢酸（10 mL）および水（5 mL）を加え、更にトリフルオロ酢酸（1 mL）を加え、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 100:10:0.5→80:10:0.5→60:10:1→40:10:1→60:25:2）で精製して標題化合物(7-11)を得た{（経路I7およびJ7の二反応で102 mg （94μmol ）, 53.7 %}。
【０２１０】
LRMS m/z 1065 [M-Na]−。
【０２１１】
合成例８
本発明のスルホピラノシルアシルグリセロール誘導体の製造工程を、βスルホキノボシルモノアシルグリセロールモノヨード誘導体を例に挙げて次のスキーム８に示す。
【化ｌ】
2010082634.tif 000027
【０２１２】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０２１３】
＜合成例＞
経路A8；2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-1-O-アリル-β-D-グルコピラノシド  （8-2）
化合物(8-1)（50.0 g, 128 mmol）、アリルアルコール（22.3 g, 384 mmol）および塩化亜鉛（17.4 g, 128 mmol）のトルエン溶液（500 mL）を、窒素雰囲気下、反応液を80 ℃にて48時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、室温に戻し飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(8-2)を得た｛24.8 g （64 mmol）, 50.0%｝。
【０２１４】
LRMS m/z 411 [M+Na]＋。
【０２１５】
経路B8； 1-O-アリル-β-D-グルコピラノシド  （8-3）
化合物(8-2)（21.0 g, 54 mmol）をメタノール（200 mL）に溶解し、窒素雰囲気下、室温にて攪拌しているところへ、28%-ナトリウムメチラートメタノール溶液（1 mL）を加え、室温にて2時間攪拌した。反応が十分に進行していることを確認し、反応を終了した。反応液をそのまま減圧濃縮し得られた化合物(8-3)の粗製物を次反応に用いた。
【０２１６】
LRMS m/z 243 [M+Na]＋。
【０２１７】
経路C8；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-β-D-グルコピラノシド  （8-4）
化合物(8-3)（11.9 g, 54 mmol）を無水アセトニトリル（60 mL）に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（16.4 g, 2.0当量）およびp-トルエンスルホン酸一水和物（1.0 g, 0.05当量）を加えた。反応液を40℃で4時間攪拌後、トリエチルアミン（0.5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。濃縮物を少量の酢酸エチルに溶解し、冷水を200 mL加え、酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 50 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物8-4を得た。更に濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 100:1→50:1→25:1→20:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同化合物(8-4)を得た。｛11.6 g （37.6 mmol）, 69.6 %｝
LRMS m/z 311 [M+Na]＋。
【０２１８】
経路D8；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4,6-O-ベンジリデン-β-D-グルコピラノシド  （8-5）
化合物8-4 （11.6 g, 37.6 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（DMF, 100 mL）溶液に、ベンジルクロリド（4.76 g, 4当量）および水酸化ナトリウム粉末（4.5 g, 3.0当量）を加え、反応液を室温にて24時間激しく撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（100 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×50 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 30 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(8-5)を得た。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 12:1→10:1→8:1→6:1→4:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同化合物(8-5)を得た。得られた化合物をフラスコに集めそのまま次反応に用いた。
【０２１９】
LRMS m/z 511 [M+Na]＋。
【０２２０】
経路E8；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-β-D-グルコピラノシド  （8-6）
経路D8で得られた化合物(8-5)を酢酸（72 mL）に溶解し、さらに蒸留水（40 mL）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、室温まで冷却し、エバポレーターで溶媒を留去し、蒸留水（15 mL）を加えて再び減圧濃縮することを4回繰り返した後、得られた残渣をメタノール（150 mL）に溶解し、窒素雰囲気下、室温にて攪拌しているところへ、28%-ナトリウムメチラートメタノール溶液（0.7 mL）を加え、室温にて2時間攪拌した。反応が十分に進行していることを確認し、反応を終了した。反応液をそのまま減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2→1:1→2:3→1:2）で精製し、標題化合物(8-6)を得た｛9.3 g （23.2 mmol）, 経路  D8, E8の二反応で収率61.7%｝。
【０２２１】
LRMS m/z 423 [M+Na]＋。
【０２２２】
経路F8；1-O-アリル-2,3,4-ジ-O-ベンジル-6-O-トシル-β-D-グルコピラノシド  （8-7）
化合物(8-6)（9.3 g, 23.2 mmol）の無水ピリジン（120 mL）溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド（5.8 g, 30.2 mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（283 mg, 2.3 mmol）を加え、反応液を0 ℃で16時間撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、次に反応液を氷水（100 mL）にゆっくり注ぎ、水層を酢酸エチル（3×200 mL）で抽出した。有機層を合わせて1N HCl水溶液でpH4になるまで洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 6:1→4:1→2:1）で精製し、標題化合物(8-7)を得た。｛12.3 g （22.2 mmol）, 95.7 %｝。
【０２２３】
LRMS m/z 577 [M+Na]＋。
【０２２４】
経路G8；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-O-トシル-β-D-グルコピラノシド  （8-8）
化合物(8-7)（12.3 g, 22.2 mmol）、N-カルボベンゾキシ-β-アラニン(12.1 g, 44.4 mmol)、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（17.0 g, 88.8 mmol）および４−ジメチルアミノピリジン （5.4 g, 44.4 mmol）を無水ジクロロメタン（200 mL）及び無水ピリジン（50 mL）の混合溶液に溶解し、室温にて18時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（10 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(8-8)を得た[15.7 g （20.7 mmol ）, 93.0%]。
【０２２５】
LRMS m/z 782 [M+Na]＋。
【０２２６】
経路H8；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-β-D-グルコピラノシド（8-9）
化合物(8-8)（15.7 g, 20.7 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（200 mL）溶液に、チオ酢酸カリウム（4.7 g, 41.3 mmol）を加え、90 ℃で3時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（400 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(8-9)を得た{13.6 g （20.5 mmol ）, 99.2 %}。
【０２２７】
LRMS m/z 686 [M+Na]＋。
【０２２８】
経路I8；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-β-D-キノボピラノシル］-グリセロール（8-10）
化合物(8-9)（13.6 g, 20.5 mmol）をt-ブチルアルコール：蒸留水＝4：1溶液（200 mL）に溶解し、0.04 M四酸化オスミウム-t-ブチルアルコール（5 mL）、トリメチルアミンN-オキシド（3.4 g, 30.7 mmol）を加え、室温にてスターラーで24時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、活性炭を3 g加え、30分間攪拌し触媒を吸着させ、セライトをひいた桐山ロートで吸引濾過し触媒を除き、セライトに残っている反応生成物を酢酸エチルで3回洗浄し回収した。回収した濾液に蒸留水(200 mL)を加え、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（トルエン-酢酸エチル, 2:1→3:2→1:1→2:3→1:2→1:4）で精製し、標題化合物(8-10)を得た{11.7 g （16.8 mmol ）, 81.8 %}。
【０２２９】
LRMS m/z 720 [M+Na]＋。
【０２３０】
経路J8；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-β-D-キノボピラノシル］］-1-O-ステアロイル-グリセロール（8-11）
化合物(8-10)（11.7 g, 16.8 mmol）の無水ジクロロメタン（200 mL）および無水ピリジン（50 mL）混合溶液に、ステアロイルクロリド（5.4 g, 26.8 mmol）を加え、0℃で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（200 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,6:1→4:1→2:1→3:2→1:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(8-11)を得た{10.7 g （11.1 mmol ）, 66.2%}。
【０２３１】
LRMS m/z 987 [M+Na]＋。
【０２３２】
経路K8；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-スルホ-β-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（8-12）
化合物(8-11)（10.7 g, 11.1 mmol）の酢酸（147 g, 2.5 mol ）溶液に、オキソン（27.3 g, 44.4 mmol）および酢酸カリウム（3.7 g）を加え、室温で48時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷7.5 M水酸化ナトリウム（500 mL）溶液に注ぎ、酢酸エチル（4×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 100:1→50:1→20:1→15:1→12.5:1→10:1→8:1）で精製し、無色ワックス状物質として標題化合物(8-12)を得た。
【０２３３】
LRMS m/z 968 [M-Na]−。
【０２３４】
経路L8；3-O-［4-O-（β-アラニル）-6-スルホ-β-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（8-13）
化合物(8-12)（756 mg, 762μmol）のメタノール（10 mL）、ジクロロメタン(10 mL)および酢酸（0.5 mL）溶液に、10 ％水酸化パラジウム活性炭素（835 mg）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、パラジウム活性炭素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣（化合物(8-13)の粗製物）をそのまま次反応に用いた。
【０２３５】
LRMS m/z 654 [M-Na]−。
【０２３６】
経路M8；3-O-［4-O-（4-ヨードベンゾイル-β-アラニル）-6-スルホ-β-D-キノボピラノシル］-1-O-ステアロイル-グリセロール（8-14）
経路L8で得られた化合物(8-13)の粗製物を無水ジクロロメタン（15 mL）、ピリジン（5 mL）及びトリエチルアミン（2 mL）混合溶液に溶解し、（４-ヨードベンゾイル）-p-ニトロフェニルエステル（563 mg, 1.5 mmol）を加えて、スターラーで攪拌しながら室温で24時間反応した。反応が充分進行していることを確認した後、トルエン、メタノールを加え共沸させながら減圧下溶媒を留去し濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 70:10:1→60:10:1.1→50:10:1.2→40:10:2→30:10:1.5→65:25:4）で精製して標題化合物(8-14)を得た{442.5mg （487.4μmol ）,64.0 %}。
【０２３７】
LRMS m/z 884 [M - Na]−。
【０２３８】
合成例９
本発明のスルホピラノシルアシルグリセロール誘導体の製造工程を、βスルホキノボシルジアシルグリセロールモノヨード誘導体を例に挙げて次のスキーム９に示す。
【化ｍ】
2010082634.tif 000028
【０２３９】
次に各工程の合成例について、詳しく説明する。
【０２４０】
＜合成例＞
経路A9；2,3,4,6-テトラ-O-アセチル-1-O-アリル-β-D-グルコピラノシド  （9-2）
化合物(9-1)（50.0 g, 128 mmol）、アリルアルコール（22.3 g, 384 mmol）および塩化亜鉛（17.4 g, 128 mmol）のトルエン溶液（500 mL）を、窒素雰囲気下、反応液を80 ℃にて48時間激しく撹拌した。反応が充分進行したことを確認した後、室温に戻し飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(9-2)を得た｛24.8 g （64 mmol）, 50.0%｝。
【０２４１】
LRMS m/z 411 [M+Na]＋。
【０２４２】
経路B9； 1-O-アリル-β-D-グルコピラノシド  （9-3）
化合物(9-2)（21.0 g, 54 mmol）をメタノール（200 mL）に溶解し、窒素雰囲気下、室温にて攪拌しているところへ、28%-ナトリウムメチラートメタノール溶液（1 mL）を加え、室温にて2時間攪拌した。反応が十分に進行していることを確認し、反応を終了した。反応液をそのまま減圧濃縮し得られた化合物の粗製物を表題化合物(9-3)として次反応に用いた。
【０２４３】
LRMS m/z 243 [M+Na]＋。
【０２４４】
経路C9；1-O-アリル-4,6-O-ベンジリデン-β-D-グルコピラノシド  （9-4）
化合物(9-3)（11.9 g, 54 mmol）を無水アセトニトリル（60 mL）に懸濁し、ベンズアルデヒドジメチルアセタール（16.4 g, 2.0当量）およびp-トルエンスルホン酸一水和物（1.0 g, 0.05当量）を加えた。反応液を40℃で4時間攪拌後、トリエチルアミン（0.5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。濃縮物を少量の酢酸エチルに溶解し、冷水を酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 50 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(9-3)を得た（33.5 g）。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 15:1→10:1→8:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同表題化合物(9-3)を得た（6.63 g）。｛計40.1 g （82.1 mmol）, 84.4 %｝
LRMS m/z 511 [M+Na]＋。
【０２４５】
経路D9；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4,6-O-ベンジリデン-β-D-グルコピラノシド  （9-5）
化合物(9-4) （11.6 g, 37.6 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（DMF, 100 mL）溶液に、ベンジルクロリド（4.76 g, 4当量）および水酸化ナトリウム粉末（4.5 g, 3.0当量）を加え、反応液を室温にて24時間激しく撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（100 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×50 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 30 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣を熱エタノールから2回結晶化させることにより、無色針状結晶として標題化合物(9-5)を得た。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 12:1→10:1→8:1→6:1→4:1）で精製後、熱エタノールから結晶化させることにより同表題化合物(9-5)を得た。得られた化合物をフラスコに集めそのまま次反応に用いた。
【０２４６】
LRMS m/z 511 [M+Na]＋。
【０２４７】
経路E9；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-β-D-グルコピラノシド  （9-6）
経路D9で得られた化合物5を酢酸（72 mL）に溶解し、さらに蒸留水（40 mL）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、室温まで冷却し、エバポレーターで溶媒を留去し、蒸留水（15 mL）を加えて再び減圧濃縮することを4回繰り返した後、得られた残渣をメタノール（150 mL）に溶解し、窒素雰囲気下、室温にて攪拌しているところへ、28%-ナトリウムメチラートメタノール溶液（0.7 mL）を加え、室温にて2時間攪拌した。反応が十分に進行していることを確認し、反応を終了した。反応液をそのまま減圧濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2→1:1→2:3→1:2）で精製し、標題化合物(9-6)を得た｛9.3 g （23.2 mmol）, 経路D9およびE9二反応で収率61.7%｝。
【０２４８】
LRMS m/z 423 [M+Na]＋。
【０２４９】
経路F9；1-O-アリル-2,3,4-ジ-O-ベンジル-6-O-トシル-β-D-グルコピラノシド  （9-7）
化合物(9-6)（9.3 g, 23.2 mmol）の無水ピリジン（120 mL）溶液に、p-トルエンスルホニルクロリド（5.8 g, 30.2 mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（283 mg, 2.3 mmol）を加え、反応液を0 ℃で16時間撹拌した。反応が充分進行していることを確認した後、次に反応液を氷水（100 mL）にゆっくり注ぎ、水層を酢酸エチル（3×200 mL）で抽出した。有機層を合わせて1N HCl水溶液でpH4になるまで洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 100 mL）および飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。濃縮物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 6:1→4:1→2:1）で精製し、標題化合物(9-7)を得た。｛12.3 g （22.2 mmol）, 95.7 %｝。
【０２５０】
LRMS m/z 577 [M+Na]＋。 
経路G9；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-O-トシル-β-D-グルコピラノシド  （9-8）
化合物(9-8)（12.3 g, 22.2 mmol）、N-カルボベンゾキシ-β-アラニン(12.1 g, 44.4 mmol)、1-エチル-3-（3-ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（EDCI・HCl）（17.0 g, 88.8 mmol）および４−ジメチルアミノピリジン （5.4 g, 44.4 mmol）を無水ジクロロメタン（200 mL）及び無水ピリジン（50 mL）の混合溶液に溶解し、室温にて18時間反応した。反応が充分進行していることを確認し、反応液に水（10 mL）を注ぎ、反応を停止した後、溶液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(9-8)を得た[15.7 g （20.7 ｍmol ）, 93.0%]。
【０２５１】
LRMS m/z 782 [M+Na]＋。
【０２５２】
経路H9；1-O-アリル-2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-β-D-グルコピラノシド（9-9）
化合物(9-8)（15.7 g, 20.7 mmol）の無水N,N-ジメチルホルムアミド（200 mL）溶液に、チオ酢酸カリウム（4.7 g, 41.3 mmol）を加え、90 ℃で3時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷水（400 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル, 4:1→3:1→2:1→3:2）で精製し、標題化合物(9-9)を得た{13.6 g （20.5 mmol ）, 99.2 %}。
【０２５３】
LRMS m/z 686 [M+Na]＋。 
経路I9；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-β-D-キノボピラノシル］-グリセロール（9-10）
化合物(9-9)（13.6 g, 20.5 mmol）をt-ブチルアルコール：蒸留水＝4：1溶液（200 mL）に溶解し、0.04 M四酸化オスミウム-t-ブチルアルコール（5 mL）、トリメチルアミンN-オキシド（3.4 g, 30.7 mmol）を加え、室温にてスターラーで24時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、活性炭を3 g加え、30分間攪拌し触媒を吸着させ、セライトをひいた桐山ロートで吸引濾過し触媒を除き、セライトに残っている反応生成物を酢酸エチルで3回洗浄し回収した。回収した濾液に蒸留水(200 mL)を加え、酢酸エチル（3 x 150 mL）で抽出した。有機層を合わせて飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（トルエン-酢酸エチル, 2:1→3:2→1:1→2:3→1:2→1:4）で精製し、標題化合物(9-10)を得た{11.7 g （16.8 mmol ）, 81.8 %}。
【０２５４】
LRMS m/z 720 [M+Na]＋。 
経路J9；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-チオアセチル-β-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール（9-11）
化合物(9-10)（11.7 g, 16.8 mmol）の無水ジクロロメタン（200 mL）および無水ピリジン（50 mL）混合溶液に、ステアロイルクロリド（5.4 g, 26.8 mmol）を加え、0℃で2時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、メタノール（5 mL）を添加して反応を停止し減圧濃縮した。少量の酢酸エチルで懸濁させた残渣を水（200 mL）に注ぎ、酢酸エチル（3×100 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和食塩水（2 x 100 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン-酢酸エチル,6:1→4:1→2:1→3:2→1:1）で精製し、無色油状物質として標題化合物(9-11)を得た{3.3 g （2.7 mmol ）, 16.0%}。
【０２５５】
LRMS m/z 1253 [M+Na]＋。
【０２５６】
経路K9；3-O-［2,3-ジ-O-ベンジル-4-O-（カルボベンゾキシ-β-アラニル）-6-スルホ-β-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール（9-12）
化合物(9-11)（3.3 g, 2.7 mmol）の酢酸（100 g, 2.5 mol ）溶液に、オキソン（6.6 g, 10.7 mmol）および酢酸カリウム（2.5 g）を加え、室温で48時間激しく攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、反応液を冷7.5 M水酸化ナトリウム（100 mL）溶液に注ぎ、酢酸エチル（4×50 mL）で抽出した。有機層を合わせ飽和炭酸水素ナトリウム水（2 x 50 mL）および飽和食塩水（2 x 50 mL）で洗浄、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール, 100:1→50:1→20:1→15:1→12.5:1→10:1→8:1）で精製し、無色ワックス状物質として標題化合物(9-12)を得た。
【０２５７】
LRMS m/z 1235 [M-Na]−。
【０２５８】
経路L9；3-O-［4-O-（β-アラニル）-6-スルホ-β-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール（9-13）
化合物(9-12)（345 mg, 274μmol）のメタノール（10 mL）、ジクロロメタン(15 mL)および酢酸（0.6 mL）溶液に、10 ％水酸化パラジウム活性炭素（300 mg）を加え、水素ガス雰囲気下、室温で48時間攪拌した。反応が充分進行していることを確認した後、パラジウム活性炭素を濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣（化合物9-13の粗製物）を表題化合物(9-13)を含む物質としてそのまま次反応に用いた。
【０２５９】
LRMS m/z 921 [M-Na]−。
【０２６０】
経路M9；3-O-［4-O-（4-ヨードベンゾイル-β-アラニル）-6-スルホ-β-D-キノボピラノシル］-1,2-ジ-O-ステアロイル-グリセロール（9-14）
経路L9で得られた化合物(9-13)の粗製物を無水ジクロロメタン（15 mL）、ピリジン（5 mL）及びトリエチルアミン（2 mL）混合溶液に溶解し、（４-ヨードベンゾイル）-p-ニトロフェニルエステル（202 mg, 548μmol）を加えて、スターラーで攪拌しながら室温で24時間反応した。反応が充分進行していることを確認した後、トルエン、メタノールを加え共沸させながら減圧下溶媒を留去し濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム-メタノール-蒸留水, 70:10:1→60:10:1→60:14:1.6→60:18:2→60:22:2.4→60:25:3）で精製して標題化合物(9-14)を得た{77.6 mg （82.1μmol ）,30.0 %}。
【０２６１】
LRMS m/z 1151 [M - Na]−。
【０２６２】
例２．生体内分布
１）ビオチン化αＳＱＭＧ
ヒト食道扁平上皮癌細胞ＴＥ−８の１×１０６個を１１匹の雄のＫＳＮヌードマウス（日本エスエルシー社）右大腿部に移植し、腫瘍の体積が３００〜９００ｃｍ３になるまで飼育した。
【０２６３】
その後、ビオチン化αＳＱＭＧ Ｃ１８:０(式(1-12)の化合物) を生理食塩水に溶解し、４０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇとなるように各群３匹ずつの担癌ヌードマウスに１回につき０．１ｍＬを静脈注射した。対照の担癌マウス２匹には生理食塩水を注射した。投与９時間後、各マウスを屠殺し、腫瘍を摘出してただちに凍結した。凍結した腫瘍から厚さ５μｍの凍結切片を作成し、各切片を蛍光色素ＴＲＩＴＣ（Tetramethylrhodamine-5-(and 6)-isothiocyanate ）で標識したアビジンで染色した。各染色切片は蛍光顕微鏡で観察し、デジタル化処理した後、フォトショップ（Photoshop (Adobe)） を用いて画像処理を行った。
【０２６４】
ＴＲＩＴＣにより蛍光を発する腫瘍領域を評価するためにフォトショップによる二値化イメージングを行った。その後、視野から腫瘍組織を含む部分（フラクション）を切り出し、ＴＲＩＴＣに陽性の領域（黒色の領域）と全体領域のそれぞれの画素数をカウントし、以下の式に従って陽性領域の割合を算出した。
【数１】
2010082634.tif 000029
【０２６５】
同様に異なる腫瘍組織部分を切り出し、５ヶ所でＴＲＩＴＣ陽性領域の割合を算出し平均した。
【０２６６】
その結果を図１に示す。ビオチン化αＳＱＭＧ Ｃ１８：０の投与量に従って腫瘍組織が強く染色され、腫瘍へのビオチン化αＳＱＭＧ Ｃ１８：０の滞留量が多いことが示された。
【０２６７】
２）ビオチン化αＳＱＡＰ
ヒト大細胞肺がん細胞Lu65の１×１０６個／匹を6週齢の雄のKSNヌードマウスに移植し、１４日飼育し、各ヌードマウスに１００〜２００mm３の腫瘍塊を形成させた。
【０２６８】
その後、以下の（１）〜（４）の４群に対して３個体ずつを割り当てた。使用したビオチン化αＳＱＡＰは式(2-11)の化合物である。
【０２６９】
（１）Control群・・・生理食塩水投与
（２）高用量群・・・ビオチン化α  50mg/kg  投与
（３）中用量群・・・同5mg/kg  投与
（４）低用量群・・・同1mg/kg  投与。
【０２７０】
生理食塩水に溶解したビオチン化αＳＱＡＰまたはコントロール群においては生理食塩水を各ヌードマウスの尾静脈から上記の量になるように投与し、投与１時間後に腫瘍を摘出し、OCTコンパウンドにて腫瘍片を浸漬し液体窒素で凍結した。
【０２７１】
凍結した各試験動物の腫瘍を１０umの厚さに切り出し、マイクロプレート上に切片を固定化し、Ａｌｅｘａ４８８標識アビジンにてビオチンが分布している部位を染色した。
【０２７２】
蛍光顕微鏡により、画像切片を観察し、それを画像化してそのデータを取り込み、各画像のポジティブシグナルを画像解析ソフトにて定量化した。
【０２７３】
具体的にはＡｌｅｘａ４８８により蛍光を発する腫瘍領域を評価するためにフォトショップによる二値化イメージングを行った。その後、視野から腫瘍組織を含む部分（フラクション）を切り出し、Ａｌｅｘａ４８８に陽性の領域（黒色の領域）と全体領域のそれぞれの画素数をカウントし、以下の式に従って陽性領域の割合を算出した。
【数２】
2010082634.tif 000030
【０２７４】
同様に異なる腫瘍組織部分を切り出し、５ヶ所でＡｌｅｘａ４８８陽性領域の割合を算出し平均した。
【０２７５】
他の標識物質を使用しても下の式を用いて同様に値を算出できる。
【数３】
2010082634.tif 000031
【０２７６】
その結果を図２に示す。ビオチン化αＳＱＡＰの50mg/kgにおいて腫瘍組織が強く染色された。ビオチン化αＳＱＡＰは腫瘍への滞留量が多いことが示された。
【０２７７】
例３．薬物動態１
（１）動物試験
8週齢の雄性ＫＳＮヌードマウス（日本エスエルシー社）にヒト結腸癌由来細胞（SW480株）２×１０６個を皮下移植し、２週間後(体重約25ｇ腫瘍体積約200 mm3)にαＳＱＭＧ Ｃ１８：０またはαＳＱＡＰ Ｃ１８：０を生理食塩液に溶解し投与量１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与した(0.1mL)。投与後経時的に３０分、１、２、４、１２および２４時間後において二酸化炭素により窒息死後、血液、肝臓、腎臓、肺、脾臓および腫瘍組織を採取した。なお、各組織は採取時間毎に５匹の動物を用いた。
【０２７８】
（２）分析試料前処理
血漿
ヘパリンナトリウム注射液（10,000単位/10mL）で湿らせた注射針を用いて後大静脈より全採血し、６，０００ｇで２０分間遠心分離し血漿を得た。血漿９０μＬに内部標準物質（αSQMG C16:0）５μＬ、蒸留水５μＬおよびリン酸４μＬをそれぞれ加え、９６μＬのアセトニトリルを添加することによりタンパク変性を行った。この溶液０．２ｍＬに１０ｍＭの酢酸アンモニウム水溶液６００μＬを加え、よく攪拌し、１６，０００ｇで１５分間遠心分離を行って上清を得た。その上清６００μＬについて以下の通り、固相抽出操作を行った。固相抽出はＥｍｐｏｒｅ（登録商標）ディスクカートリッジ（３Ｍ社、製品番号4115SD）を用い、測定試料添加後、１０ｍＭの酢酸アンモニウム水溶液１，０００μＬ、１０％アセトニトリルを含む１０ｍＭの酢酸アンモニウム水溶液２００μＬで洗浄し、７０％アセトニトリルを含む１０ｍＭの酢酸アンモニウム水溶液２００μＬにより被検物質を溶出した。ＬＣ／ＭＳ分析試料とした。
【０２７９】
臓器試料
採血後に各臓器を摘出し、直ちにドライアイス上で凍結した。この試料を凍結粉砕し、重量測定後、１／２倍量（重量比）の内部標準物質（αSQMG C16:0）および蒸留水を添加し、さらに８倍量（重量比）の抽出溶液（2.5% NP-40、2% リン酸、2mM Eserine水溶液）を添加後、ホモジナイズした。上記のホモジナイズ液を遠心分離した上清１００μＬについて上記血漿の前処理同様、アセトニトリルによるタンパク変性および固相抽出を行うことにより分析試料を得た。
【０２８０】
（３）分析定量法
当該分析試料１０μＬをＣａｐｃｅｌｌ  Ｐａｋ  ＭＧカラム、（粒子径；3μm、カラムサイズ；2.1×50mm、資生堂）を装着した逆相ＨＰＬＣシステムで分離した。ＨＰＬＣは６８％アセトニトリル、１０ｍＭ酢酸アンモニウム水溶液の単一溶媒、１分当たり０．２ｍＬの流速で溶出を行った。質量スペクトルの測定は陰イオンモードで行い、αＳＱＭＧ Ｃ１８：０は分子量関連イオン；ｍ／ｚ＝５８３．１、フラグメントイオンｍ／ｚ＝２２４．７、およびｍ／ｚ＝２９８．８を測定し、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０では分子量関連イオン；ｍ／ｚ＝５６７．１、フラグメントイオンｍ／ｚ＝２２４．７、およびｍ／ｚ＝２８３．１、また内部標準物質であるαＳＱＭＧ Ｃ１６：０は分子量関連イオン；ｍ／ｚ＝５５５．１、フラグメントイオンｍ／ｚ＝２２４．７、およびｍ／ｚ＝２９８．８を測定して各イオンに対応したクロマトグラムからピーク面積を積算して内部標準物質のピーク面積比をもとめた。定量分析方法としては内部標準法を用いた。即ち、被検物質を添加した試料を分析することにより内部標準物質のピーク面積比から標準直線を作成し、被検物質の濃度を定量した。
【０２８１】
図３は、αＳＱＭＧ Ｃ１８：０を１０ｍｇ／ｋｇで腹腔内投与したヌードマウスの血漿および臓器中における濃度−時間推移曲線である。
【０２８２】
図３に示すように、血漿をはじめ、肝臓、腎臓、脾臓、および肺ではαＳＱＭＧ Ｃ１８：０投与直後最高組織内濃度を示し、その後急速にαＳＱＭＧ Ｃ１８：０は減少した。肝臓、肺、腎臓、血漿では投与後４時間目、脾臓では１２時間目には検出限界以下となった。一方、腫瘍組織では、他臓器と比較して投与直後の組織内濃度は低かったが、投与後２４時間目においてもαＳＱＭＧ Ｃ１８：０が検出された。このことから、αＳＱＭＧ Ｃ１８：０は、腫瘍組織には長時間滞留することが明らかになった。
【０２８３】
図４は、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０を１０ｍｇ／ｋｇ腹腔内投与したヌードマウスの血漿および臓器中における濃度-時間推移曲線を示すグラフである。
【０２８４】
図４の結果より、血漿を始め、肝臓、腎臓、脾臓および肺ではαＳＱＡＰ Ｃ１８：０投与直後最高組織内濃度を示し、その後急速にαＳＱＡＰ Ｃ１８：０は減少した。そして、脾臓、肺、腎臓、血漿では、投与後４時間目、肝臓では１２時間目には検出限界以下となった。一方、腫瘍組織では、他臓器と比較して、αＳＱＡＰＣ １８：０の投与直後の組織内濃度は低かったが、投与後２４時間目においても検出された。従って、腫瘍組織では、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０は長時間滞留することが明らかとなった。
【０２８５】
例４．薬物動態２
移植腫瘍モデルの腫瘍としてヒト食道扁平上皮癌細胞ＴＥ−８を用いたこと、および腹腔内投与に代えて静脈内投与により投与したこと以外は例３と同様の方法によってαＳＱＡＰ Ｃ１８：０の１ｍｇ／ｋｇを動物に投与して、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０の薬物動態について試験した。
【０２８６】
その結果を図５に示す。図５から分かるように、血漿を始め、肝臓、脾臓および肺では、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０投与直後に最高組織内濃度を示し、その後急速にαＳＱＡＰ Ｃ１８：０は減少した。血漿、肝臓および肺では、投与後２時間目、脾臓では２４時間目には検出限界以下となった。一方、腫瘍組織では、他臓器と比較して、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０の投与直後の組織内濃度は低いが、２時間目においても減少傾向は見られず、２４時間目においても検出された。従って、αＳＱＡＰ Ｃ１８：０は腫瘍組織において長時間滞留することが明らかになった。
【産業上の利用可能性】
【０２８７】
本発明の新規化合物は、腫瘍に特異的に滞留し、その構造中に作用基を含む物質である。従って、当該作用基の種類に応じて、腫瘍への薬物輸送、腫瘍の検出および診断、並びに腫瘍の治療などのために有用に使用される。
【図１】
2010082634.tif 000035
【図２】
2010082634.tif 000036
【図３】
2010082634.tif 000037
【図４】
2010082634.tif 000038
【図５】
2010082634.tif 000039
【国際調査報告】
2010082634.tif 000040
2010082634.tif 000041
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2010082634.tif 000043
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