(57)【要約】  核酸アナログ製剤の活性増強剤などの提供。  イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を含むことを特徴とする、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性増強剤。【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を含むことを特徴とする、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性増強剤。
【請求項２】
抗ウイルス活性を有する核酸アナログの投与対象に対して適用されるものである、請求項１に記載の剤。
【請求項３】
抗ウイルス活性を有する核酸アナログの投与前に用いられる、請求項１または２に記載の剤。
【請求項４】
抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の剤。
【請求項５】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と、抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、ウイルス性肝炎の予防または治療剤。
【請求項６】
抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、請求項５に記載の剤。
【請求項７】
ウイルス性肝炎が、Ｂ型ウイルス性肝炎である、請求項５または６に記載の剤。
【請求項８】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、ウイルス性肝炎用医薬。
【請求項９】
抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、請求項８に記載の医薬。
【請求項１０】
ウイルス性肝炎が、Ｂ型ウイルス性肝炎である、請求項８または９に記載の医薬。
【請求項１１】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、肝予備能改善剤。
【請求項１２】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、耐性ウイルス出現抑制剤。
【請求項１３】
有効量の、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を用いることを特徴とする、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させる方法。
【請求項１４】
以下の工程：
（１）抗ウイルス活性を有する核酸アナログを対象に投与する工程；
（２）有効量の、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも１種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を対象に投与する工程；
を含んでなる、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させる方法。
【請求項１５】
工程（２）を工程（１）よりも先に行うことを特徴とする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩、及び当該分岐鎖アミノ酸またはその塩が抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させるのに使用することができること又は使用すべきであることを記載した、当該分岐鎖アミノ酸またはその塩に関する説明を記載した記載物を含む商業用パッケージ。
【請求項１８】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを用いることを特徴とする、ウイルス性肝炎を予防または治療する方法。
【請求項１９】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを用いることを特徴とする、肝予備能を改善する方法。
【請求項２０】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを用いることを特徴とする、耐性ウイルスの出現を抑制する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分岐鎖アミノ酸を含んでなる核酸アナログの活性増強剤、分岐鎖アミノ酸と核酸アナログを組み合わせてなるウイルス性肝炎の予防または治療剤、ウイルス性肝炎用医薬などに関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｂ型肝炎ウイルス（以下、「ＨＢＶ」とも記載する）はヘパドナウイルス科オルソヘパドナウイルス属に属するＢ型肝炎の原因ウイルスであり、主に血液媒介、母子（垂直）、性行為（水平）により感染する。この持続感染は自覚症状に乏しいものの、慢性肝炎を引き起こし、次いで徐々に肝臓の線維化が進行し、肝硬変に至り肝癌が発生することがある。一方でＢ型肝炎ウイルスに感染した場合、原理的に当該ウイルスを完全に駆除することは困難であるが、抗ウイルス療法を適用してウイルスを減少させることは、肝機能を維持すると共に、肝硬変や肝不全への進行を抑制し、肝癌の発生を阻止するために非常に重要なことである。【０００３】
ラミブジンはＨＢＶの治療薬として開発された抗ウイルス剤の有効成分であり、ヌクレオシド様構造を有する核酸アナログ製剤の代表的な成分である。ラミブジンは当初ＡＩＤＳウイルスに対する抗ウイルス作用が示されたが、ＨＢＶに対して増殖抑制効果を示すことが明らかとなった。ラミブジンのＨＢＶへの作用機序は、細胞内で三リン酸誘導体にリン酸化されたラミブジンがＨＢＶの逆転写酵素を阻害し、ウイルスＤＮＡ鎖に取り込まれ、その伸長を止めるものである（非特許文献１参照）。ラミブジンをはじめとする核酸アナログは、経口剤として適用可能で、副作用も少なく、またインターフェロンと同等以上の抗ウイルス活性を有している。【０００４】
しかしながらこれらの核酸アナログ製剤は、その投与を中止した場合、高い確率でウイルスの再燃が起こるという問題がある。中止後の再燃を避けるためには核酸アナログの半永久的な投与が必要となるが、長期間投与してもその効果は早い段階で頭打ちしてしまうし、また長期投与により耐性ウイルスが発現することや医療コストが増加するなど、デメリットが多い。さらに若年者への長期投与では生殖系への影響も懸念される。またＢ型肝炎キャリアでは自然経過で高頻度に肝炎の活動性低下が認められるため、特に若年者において核酸アナログを早期に投与し、かつ長期に投与することは過剰医療となる可能性もある。こうした観点から、ドラッグフリーで長期の寛解を目指す治療戦略として、他の薬物との併用療法が盛んに研究されている（非特許文献２参照）。【０００５】
インターフェロン（以下、「ＩＦＮ」と記載する）は直接的な抗ウイルス作用と宿主免疫の賦活化という二つの機序を介して効果を発揮する薬物である。インターフェロンは発熱、頭痛、関節痛などの副作用が多く医療費も高額となる（非特許文献３参照）が、セロコンバージョンやウイルスＤＮＡの沈静化が優位に長く持続する（非特許文献４参照）こともあり、長期の寛解を目指すための有力な選択肢となっている。しかしながらＰＥＧインターフェロンと核酸アナログとの組合せでは、耐性ウイルスの産生を防止する効果はあるものの、その治療成績はインターフェロン単独の場合と差異がないことが示唆されている（非特許文献５〜７参照）。従ってＩＦＮ以外の、核酸アナログと併用でき、かつ治療成績が向上する薬物が求められている。【０００６】
分岐鎖アミノ酸をＩＦＮ療法に適用した場合、血中濃度が低下することが報告されている（非特許文献８参照）。また分岐鎖アミノ酸がＩＦＮの効果を増強する作用やＩＦＮの副作用を軽減する作用を有することが報告されている（特許文献１参照）。しかしながら、分岐鎖アミノ酸が、核酸アナログが持つ抗ウイルス作用を増強させる機能を有することは、これまで明らかにされていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開ＷＯ２００７／０１３６７７号パンフレット
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】佐田通夫著、Ｂ型肝炎におけるラミブジン療法、臨床と薬物治療、１９９９年６月号
【非特許文献２】南祐仁ら、Ｂ型慢性肝炎の持続沈静化を目指した抗ウイルス療法の評価：インターフェロン単独療法、ラミブジン・インターフェロン併用療法、消化器科、４２（４）：４１１−４１６、２００６
【非特許文献３】飯野四郎  編著、慢性肝炎最新の治療（中外医学社）ｐ１５４（２００１年）
【非特許文献４】Ｖａｎ  Ｎｕｎｅｎ  ＡＢ，ｅｔ  ａｌ．，Ｄｕｒａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ＨＢｅＡｇ  ｓｅｒｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ａｎｔｉｖｉｒａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ：  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｙｐｅ  ｏｆ  ｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｓｅｒｕｍ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ  ｖｉｒｕｓ  ＤＮＡ  ａｎｄ  ａｌａｎｉｎｅ  ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ．Ｇｕｔ  ２００３；５２；ｐｐ．４２０
【非特許文献５】Ｍａｒｃｅｌｌｉｎ  Ｐ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｌｆａ−２ａ  ａｌｏｎｅ，  ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅａｌｏｎｅ，  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｔｗｏ  ｉｎ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ＨＢｅＡｇ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，２００４；３５１：ｐｐ．１２０６
【非特許文献６】Ｊａｎｓｓｅｎ  ＨＬ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｅｇｙｌａｔｅｄ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  ａｌｆａ−２ｂ  ａｌｏｎｅ  ｏｒ  ｉｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ  ｆｏｒ  ＨＢｅＡｇ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ；ａ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  ２００５；３６５；ｐｐ．１２３
【非特許文献７】Ｌａｕ  ＧＫ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ａｌｆａ−２ａ，ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ，ａｎｄ  ｔｈｅ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ＨＢｅＡｇ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｈｅｐａｔｉｔｉｓ  Ｂ．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，２００５；３５２；ｐｐ．２６８２
【非特許文献８】各務ら、犬山シンポジウム２４  セッション３、ｐ．１４２−１４６（２００３年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明が解決しようとする課題は、核酸アナログ製剤の活性増強剤等を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも１種の分岐鎖アミノ酸が核酸アナログ製剤の活性を増強することを見出し、本発明を完成した。【００１１】
すなわち、本発明は以下の通りである。
［１］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を含むことを特徴とする、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性増強剤；
［２］抗ウイルス活性を有する核酸アナログの投与対象に対して適用されるものである、［１］に記載の剤；
［３］抗ウイルス活性を有する核酸アナログの投与前に用いられる、［１］または［２］に記載の剤；
［４］抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、［１］〜［３］のいずれか一に記載の剤；
［５］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と、抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、ウイルス性肝炎の予防または治療剤；
［６］抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、［５］に記載の剤；
［７］ウイルス性肝炎が、Ｂ型ウイルス性肝炎である、［５］または［６］に記載の剤；
［８］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、ウイルス性肝炎用医薬；
［９］抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、［８］に記載の医薬；
［１０］ウイルス性肝炎が、Ｂ型ウイルス性肝炎である、［８］または［９］に記載の医薬；
［１１］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、肝予備能改善剤；
［１２］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、耐性ウイルス出現抑制剤；
［１３］有効量の、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を用いることを特徴とする、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させる方法；
［１４］以下の工程：
（１）抗ウイルス活性を有する核酸アナログを対象に投与する工程；
（２）有効量の、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも１種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を対象に投与する工程；
を含んでなる、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させる方法；
［１５］工程（２）を工程（１）よりも先に行うことを特徴とする、［１４］に記載の方法；
［１６］抗ウイルス活性を有する核酸アナログが、ラミブジン、クレブジン、エンテカビルまたはアデホビルである、［１３］〜［１５］のいずれか一に記載の方法；
［１７］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩、及び当該分岐鎖アミノ酸またはその塩が抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させるのに使用することができること又は使用すべきであることを記載した、当該分岐鎖アミノ酸またはその塩に関する説明を記載した記載物を含む商業用パッケージ；
［１８］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを用いることを特徴とする、ウイルス性肝炎を予防または治療する方法；
［１９］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを用いることを特徴とする、肝予備能を改善する方法；
［２０］イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを用いることを特徴とする、耐性ウイルスの出現を抑制する方法。
【発明の効果】
【００１２】
本発明により、継続投与により底打ちする核酸アナログ製剤の活性を、より増強させることができる。これにより核酸アナログ製剤を単独で使用した場合よりも肝予備能が改善するので、肝癌をはじめとした肝病変における治療法をより広く選択することができるようになる点で有用である。
また本発明により、従来存在する核酸アナログよりも強力なウイルス性肝炎の予防または治療剤、ウイルス性肝炎治療用医薬などを得ることができる。
さらに本発明により、核酸アナログ製剤のウイルス増殖抑制効果を長期間安定的に維持できる。なお、Ｂ型肝炎ウイルス陽性患者では急性増悪、劇症化が懸念されるが、発症後の核酸アナログ製剤の投与では予後不良の場合が多いところ、本発明は、特に前記劇症化前の予防投与において予後不良を改善し得る。また、化学療法、免疫療法、移植療法時に抗癌剤や免疫抑制剤を使用する際、Ｂ肝炎ウイルスが急激に増殖する場合があるが、各療法施行前に核酸アナログ製剤を予防投与する際にも本発明が有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、リーバクト顆粒の投与を開始してからの血清アルブミン値の変化量を表す。白丸はラミブジン処方歴なし群を、黒丸はラミブジン処方歴あり群を示す。
【図２】図２は、リーバクト顆粒の投与を開始してからのＡＳＴ値の変化量を表す。白丸はラミブジン処方歴なし群を、黒丸はラミブジン処方歴あり群を示す。
【図３】図３は、リーバクト顆粒の投与を開始してからのＡＬＴ値の変化量を表す。白丸はラミブジン処方歴なし群を、黒丸はラミブジン処方歴あり群を示す。
【図４】図４は、リーバクト顆粒と核酸アナログ製剤を併用投与した場合の血清中のＢ型肝炎ウイルスＤＮＡ量の低減効果を示す図である。縦軸は、リーバクト顆粒と核酸アナログ製剤との（併用）投与開始時と比較した、各併用期間におけるＢ型肝炎ウイルスＤＮＡ量の減少量を対数値で示す。横軸は（併用）投与開始からの時間を示す。図４中、横縞のバーは、核酸アナログ製剤の単独投与（Ａ群）を、黒のバーはリーバクト顆粒を１年間投与した後の核酸アナログ製剤の併用投与（Ｂ群）を、白のバーは核酸アナログ製剤を一年間投与した後のリーバクト顆粒の併用投与（Ｃ群）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の「抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性増強剤（以下、本発明の活性増強剤と記載する）」における有効成分（分岐鎖アミノ酸）である、イソロイシン、ロイシンおよびバリンはそれぞれＬ−体、Ｄ−体、ＤＬ−体いずれも使用可能であるが、好ましくはＬ−体、ＤＬ−体であり、さらに好ましくはＬ−体である。
【００１５】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンはそれぞれ、遊離体のみならず、塩の形態でも使用することができる。塩の形態には酸付加塩や塩基付加塩等を挙げることもでき、化学的に許容されうる塩であればいずれの形態を採ることもできるが、本発明が医療目的で用いられる観点から、イソロイシン、ロイシンおよびバリンの医薬品として許容される塩を選択することが好ましい。
【００１６】
イソロイシン、ロイシンおよびバリンにそれぞれ付加する、医薬として許容される塩としては、例えば酸との塩、塩基との塩が挙げられる。塩を形成する酸としては、例えば、塩化水素、臭化水素酸、硫酸、リン酸等の無機酸や、酢酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸又はモノメチル硫酸等の有機酸が挙げられる。またこれらの分岐鎖アミノ酸は塩基との塩も形成することができ、このような塩基の例としては、例えば、ナトリウム、カリウムなどの金属の水酸化物や、カルシウム等の金属の炭酸化物、アンモニア等の無機塩基、エチレンジアミン、プロピレンジアミン、エタノールアミン、モノアルキルエタノールアミン、ジアルキルエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン等の有機塩基が挙げられる。
【００１７】
本発明の活性増強剤が活性を増強する、「抗ウイルス活性を有する核酸アナログ」としては、核酸アナログ製剤の有効成分として知られている物質のほか、核酸（ヌクレオシド）に類似した構造を有し、抗ウイルス活性を有するものであれば特に限定されない。このような核酸アナログとしては、例えばプリン環またはピリミジン環などの核酸（ヌクレオシド）類似構造を有することで、天然のヌクレオシド分子と競合的な分子間相互作用を奏し、最終的にウイルスを構成する蛋白質の合成を阻害する物質が挙げられる。このような物質として具体的には、ラミブジン（シトシン類似物質）、クレブジン（ピリミジン類似物質）、エンテカビル（デオキシグアノシン類似物質）、アデホビル（アデニン類似物質）、テルビブジン（シトシン類似物質）、テノホビル（アデニン類似物質）、エムトリシタビン（シトシン類似物質）などが挙げられる。なかでも、核酸アナログとして好ましくはラミブジン、クレブジン、エンテカビル、アデホビルであり、より好ましくはラミブジン、エンテカビル、アデホビルである。
なおＢ型慢性肝炎の治療において、３５歳未満の患者ではｄｒｕｇ  ｆｒｅｅを目指してＩＦＮによる治療が基本となるが、３５歳以上の患者では、ＨＢＶ  ＤＮＡの持続的陰性化を目指して、初回投与する核酸アナログ製剤としては特にエンテカビルが好ましい。一方、ラミブジン及びエンテカビル耐性株が出現した患者に対しては、ラミブジンとアデホビルの併用投与が好ましい。
【００１８】
本発明の活性増強剤は、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩が、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させることを発見したことに基づき完成したものである。したがって本発明は、有効量の、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を用いることを特徴とする、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させる方法も提供する。ここで「有効量」とは、後述する本発明の核酸アナログの活性増強剤における分岐鎖アミノ酸の投与量である。
【００１９】
本発明の活性増強剤は、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種またはそれらの塩が分岐鎖アミノ酸として含有されていれば良く、たとえばイソロイシンのみでもよいが、イソロイシン、ロイシン、バリン全てが含有されていることが好ましい。
このような分岐鎖アミノ酸の含有比（重量比）は、当業者であれば、投与する対象の状態に応じて適宜調整することが可能であるが、例えばイソロイシン、ロイシン、バリン全てが含有されている場合、イソロイシン、ロイシン、バリンの重量比が１：１〜３：０．５〜２．０であることがさらに好ましい。加えて、イソロイシン、ロイシン、バリンの重量比が１：１．５〜２．５：０．８〜１．５であることが特に好ましく、最も好ましい重量比は１：２：１．２である。
【００２０】
本発明の活性増強剤は、さらに、製剤用担体を含有していてもよい。用いられる製剤用担体としては、例えば、乳糖、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、澱粉、結晶セルロース、炭酸カルシウム、カオリン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、エタノール、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム塩、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アセチルセルロース、白糖、酸化チタン、安息香酸、パラオキシ安息香酸エステル、デヒドロ酢酸ナトリウム、アラビアゴム、トラガント、メチルセルロース、卵黄、界面活性剤、単シロップ、クエン酸、蒸留水、グリセリン、プロピレングリコール、マクロゴール、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、フェノール、チメロサール、亜硫酸水素ナトリウム等があり、これらの機能は当業者に公知である。これらの担体は製剤の形に応じて、本発明の活性増強剤に配合された形で使用される。これらの製剤用担体の含有量は、当業者であれば適宜調整可能である。
【００２１】
本発明の活性増強剤における分岐鎖アミノ酸の配合量は、当業者であれば、投与する対象における疾病や対象の年齢、性別、体重などを考慮して適宜調整することができる。
本発明の活性増強剤は、さらに用途に応じて、分岐鎖アミノ酸以外の成分、例えばアミノ酸、糖類、脂肪、微量元素等の成分を含有していてもよい。
例えば、肝性脳症を伴うＨＢＶ陽性患者においては、分岐鎖アミノ酸（イソロイシン、ロイシン、バリンの重量比が１：０．９〜１．５：０．７〜１．１）に加えて、分岐鎖アミノ酸以外の成分、例えばリジン等のアミノ酸を含有していてもよく、デキストリン等の糖類、米油や大豆油等の脂肪やビタミン類、カルシウムやナトリウム、カリウム等のミネラル成分、亜鉛、鉄等の微量元素を含有していてもよい。
前記肝性脳症を伴うＨＢＶ陽性患者用の活性増強剤は、分岐鎖アミノ酸が一回当たり３〜６ｇ含まれるように配合され、一日３回投与することが好ましい。
【００２２】
具体的な例としては、Ｌ−イソロイシン１．９２２５ｇ、Ｌ−ロイシン２．０３７ｇ、Ｌ−リジン塩酸塩０．２４２５ｇ、Ｌ−トレオニン０．１３３ｇ、Ｌ−バリン１．６０２ｇ、Ｌ−アルギニン塩酸塩０．３０２ｇ、Ｌ−塩酸ヒスチジン０．１８７５ｇ、Ｌ−トリプトファン７３．５ｍｇを含有する「アミノレバン（登録商標）ＥＮ」や、Ｌ−イソロイシン１，７３０ｍｇ、Ｌ−ロイシン２，１２２ｍｇ、Ｌ−リジン塩酸塩９７４ｍｇ、Ｌ−メチオニン１１７ｍｇ、Ｌ−フェニルアラニン１１７ｍｇ、Ｌ−トレオニン４３６ｍｇ、Ｌ−トリプトファン５６ｍｇ、Ｌ−バリン１，６１５ｍｇ、Ｌ−ヒスチジン３０６ｍｇ、Ｌ−アルギニン１，６４７ｍｇ、Ｌ−アルギニン塩酸塩１０８ｍｇ、Ｌ−アラニン９７８ｍｇ、グリシン４３０ｍｇ、Ｌ−プロリン５２２ｍｇ、Ｌ−セリン２５７ｍｇを含有する「へパンＥＤ（登録商標）」などがある。 
【００２３】
本発明において「核酸アナログの活性増強」とは、直接的には核酸アナログ治療において、核酸アナログが有する抗ウイルス作用を増強することをいう。
またこれには、ウイルスを減少させた結果として得られる、血中ＨＢＶ  ＲＮＡ量の減少、血清アルブミン値の改善、ＡＬＴ／ＡＳＴ値の改善、治療期間の短縮、核酸アナログの投与量の減少、核酸アナログ治療患者の著効率の改善なども含む。
ＨＢＶ陽性患者の中で悪性腫瘍を合併した患者に対して、化学療法を施行した場合、ウイルスの急激な増殖、再活性化により重症、劇症肝炎が発症することが懸念される。化学療法剤の投与に際しては、直接的にウイルス遺伝子の複製が助長されるため、予防的に本発明の活性増強剤を投与することができる。また核酸アナログを活性増強することによって、具体的には一定期間の化学療法の後に長期間、本発明の活性増強剤を投与することにより、ＰＣＲ法やＴＭＡ法によりモニタリング可能なＨＢＶ−ＤＮＡの持続的な陰性化にも効果的である。
【００２４】
ここで「核酸アナログ治療」とは、抗ウイルス活性を有する核酸アナログによって抗ウイルス作用を発揮せしめ、結果としてウイルスの増殖を抑制させることや、ウイルスを減少させることなどによってウイルス性疾患を治療することをいう。
核酸アナログ治療によれば、例えばウイルス性疾患がウイルス性肝炎の場合、肝炎ウイルスの増殖を抑制させることにより、あるいは肝炎ウイルスを減少させることによりウイルス性肝炎を治療するだけでなく、さらにウイルス性肝炎に起因する肝硬変および肝癌においても残存するウイルスに対して抗ウイルス活性を示し、ウイルス性肝炎から肝硬変および肝癌へ進行するのを遅延させ得る。
したがって、本発明の「抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性増強剤」は、例えばウイルス性肝炎だけでなく、ウイルス性肝炎に起因する肝硬変および肝癌の予防・進展抑制などの用途にも使用することができる。
【００２５】
また仮にウイルス性肝炎から肝硬変および肝癌へ進行した場合であっても、肝癌に対する治療法の選択肢は背景となる肝病変の肝予備能によって規定されるため、できる限り肝臓の機能を回復させておくことはその後の治療方法の選択肢が広がる点で重要である。したがって本発明の活性増強剤は、核酸アナログと併せて肝予備能の改善剤として適用することが可能である。
【００２６】
「核酸アナログ治療」には、単一の核酸アナログを用いて治療する場合だけでなく、複数の核酸アナログを併用して治療する場合や、核酸アナログとそれ以外の薬剤とを併用して治療する場合も含まれる。このような併用の例としては、例えば核酸アナログと国際公開ＷＯ２００７／０１３６７７号パンフレットに記載のＩＦＮ作用物質との組合せや、異なる核酸アナログ同士の組合せが挙げられる。
【００２７】
本発明の活性増強剤は、核酸アナログの投与歴がある対象に対して適用することができる。核酸アナログの投与を中止すると高確率で肝炎ウイルスが増殖することがわかっており、また核酸アナログ製剤自体の効果も一定の値で底打ちする（例えば「臨床と薬物医療」１９９９年６月号、５６３頁の図６参照）。そのような場合でも、継続的な核酸アナログの投与に加えて本発明の活性増強剤を適用することにより、底打ちした核酸アナログ製剤の効果をさらに増強させることができる。
【００２８】
あるいは本発明の活性増強剤は、核酸アナログ製剤を投与しようとする対象に対し、核酸アナログの投与に先がけて投与することによっても、後に投与する核酸アナログ製剤の効果をさらに増強させることができる。特に核酸アナログ製剤を単独で投与した場合、その効果は一定の値で底打ちするが、先に本発明の活性増強剤を投与しておくことによって効果の底打ちを抑え、核酸アナログ製剤の効果を増強させることができる。この際、本発明の活性増強剤は、核酸アナログの投与後も継続して投与することが望ましい。
本発明の活性増強剤の投与開始時期については、当業者であれば望ましい核酸アナログ製剤の効果を得るための適切な時期を適宜選択することができる。例えば、投与対象に対して本発明の活性増強剤を１日１２ｇずつ１年間投与し、その後も同様に本発明の活性増強剤を投与しながら、核酸アナログ製剤をたとえばエンテカビル水和物の投与の場合１日０．５ｍｇ（エンテカビルとして）ずつ投与する。
ここで対象としては特に限定されずあらゆる哺乳動物を投与対象とすることができるが、好ましくはヒトである。
【００２９】
本発明の活性増強剤は、上記核酸アナログ製剤と共の医薬品として投与することができる。当該医薬品は、核酸アナログ製剤を有効成分とする従来の医薬品よりも強い核酸アナログ治療効果を有する医薬品である。
【００３０】
また本発明の活性増強剤は、上記剤や医薬品の投与形態だけでなく、種々の形態、例えば、機能性食品や健康食品（飲料を含む）、特定保健用食品の形で与えることも可能である。
本発明の活性増強剤は、食品又は飲料の原料に、分岐鎖アミノ酸を添加することにより製造することができ、経口的に摂取することが可能である。本発明の活性増強剤を機能性食品や健康食品、特定保健用食品として投与する場合、その食品自体は、分岐鎖アミノ酸を添加する以外は、通常の飲食品組成物と同様にして調製することができる。
このような飲食品組成物の形態としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、シャーベット、かき氷等の氷菓；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；加工乳、乳飲料、発酵乳、バター等の乳製品；パン；経腸栄養食、流動食、育児用ミルク、スポーツ飲料；その他機能性食品等が例示される。飲食品の形状としては、タブレット、顆粒状のサプリメント等が例示される。これによって、一日当りの食事量及び摂取カロリーのコントロールについて、本発明の活性増強剤摂取との関係で、他の食品の摂取量を加味した上でコントロールする必要が無くなる。また予め飲食品組成物の形態にしておけば、活性増強剤の摂取量を正確に把握できる。
これらの食品中に含まれる分岐鎖アミノ酸の量は、当業者であれば、投与する対象における疾病や対象の年齢、性別、体重などを考慮して適宜調整することができる。
このような食品の例としては、活性増強剤としてイソロイシン、ロイシン、バリンの重量比が１：２：１の分岐鎖アミノ酸を３．２ｇ含み、更に、ビタミン類と亜鉛等の微量元素を含んだ１回当たりの服用量が４ｇとなるような顆粒状の食品が挙げられる。また、分岐鎖アミノ酸としてイソロイシンのみを、０．５〜３ｇ配合するような流動食等の栄養組成物を調製することも可能である。
【００３１】
また本発明は、以下の工程
（１）抗ウイルス活性を有する核酸アナログを対象に投与する工程；
（２）有効量の、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも１種の分岐鎖アミノ酸またはその塩を対象に投与する工程；
に基づき、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強することができる方法をも提供するものである。
この際、工程（１）を継続したまま工程（２）を行うことが望ましい。工程（１）では継続して当該核酸アナログを投与してもその効果が頭打ちになるので、工程（１）を継続したまま工程（２）を行うことにより工程（１）で投与された当該核酸アナログの活性をさらに増強せしめ、より効果的にウイルス（例、肝炎ウイルス）を減少させうる。
【００３２】
あるいは、上記工程（２）を継続したまま工程（１）を行うことが望ましい。単に工程（１）を行うだけでは継続して当該核酸アナログを投与してもその効果が頭打ちになるので、工程（２）を先に行っておき、これを継続したまま工程（１）を行うことにより工程（１）で投与される当該核酸アナログの活性をさらに増強せしめ、より効果的にウイルス（例、肝炎ウイルス）を減少させうる。
【００３３】
ところで一旦開始した核酸アナログによる治療を中断した場合、一旦減少したウイルスが再燃する可能性が高いので、核酸アナログの投与は長期間継続的に行う必要がある。しかしながら長期間の継続的な投与によって、投与対象は常に核酸アナログの投与による副作用（例えば、赤血球の減少、白血球の減少、血小板減少、抑うつ、意識障害、再生不良性貧血、呼吸困難、不整脈、網膜症、発熱、倦怠感、頭痛、食欲不振、脱毛、関節痛など）に悩まされることとなる。しかしながら本発明の活性増強剤を適用することにより、核酸アナログとしての同等の効果をそれ単独で用いた場合より少ない量で得ることができるので、結果的に製剤全体における核酸アナログそれ自体の相対的な投与量を減少させることができる。よって本発明の活性増強剤は、核酸アナログを併用した場合、核酸アナログの副作用軽減剤としても適用することが可能である。
【００３４】
さらに本発明の活性増強剤を適用することで核酸アナログの長期投与が可能となり、このため耐性ウイルスの出現の可能性が低くなる。従って本発明の活性増強剤は、核酸アナログと併せて耐性ウイルス出現の抑制剤としても適用することが可能である。
【００３５】
本発明の核酸アナログが治療対象とする肝炎ウイルスとしては、公知のあらゆる肝炎ウイルスを対象として挙げることができるが、なかでもＢ型肝炎ウイルスが好ましい。
【００３６】
前述したとおり、本発明の活性増強剤は、イソロイシン、ロイシン及びバリンから選ばれる少なくとも１種の分岐鎖アミノ酸を含むものであり、本発明の活性増強剤はこれらの分岐鎖アミノ酸が核酸アナログの活性を増強させることを発見したことに基づいて完成したものである。すなわち、イソロイシン、ロイシン及びバリンから選ばれる少なくとも１種の分岐鎖アミノ酸と、抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなるものは、核酸アナログ単独に比べて、ウイルス性肝炎に対してより強い活性を有するウイルス性肝炎の予防または治療剤として適用可能である。したがって本発明は、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩と、抗ウイルス活性を有する核酸アナログとを組み合わせてなる、ウイルス性肝炎の予防または治療剤（以下、「本発明の予防または治療剤」と記載する）も提供する。
【００３７】
本発明の予防または治療剤は、イソロイシン、ロイシン、バリンのいずれか１種以上が分岐鎖アミノ酸として含有されていれば良く、たとえばイソロイシンのみでもよいが、イソロイシン、ロイシン、バリン全てが含有されていることが好ましい。
このような分岐鎖アミノ酸の含有比（重量比）は、当業者であれば、投与する対象の状態に応じて適宜調整することが可能であるが、イソロイシン、ロイシン、バリンの重量比が１：１〜３：０．５〜２．０であることがさらに好ましい。加えて、イソロイシン、ロイシン、バリンの重量比が１：１．５〜２．５：０．８〜１．５であることが特に好ましく、最も好ましい重量比は１：２：１．２である。
本発明の予防または治療剤は、さらに、本発明の活性増強剤で記載した一般的な製剤用担体を含有していてもよい。これらの製剤用担体の含有量は、当業者であれば適宜調整可能である。
【００３８】
本発明の予防または治療剤が対象とする肝炎ウイルスとしては特に限定されず、公知のあらゆる肝炎ウイルスを対象として挙げることができるが、なかでもＢ型肝炎ウイルスが好ましい。本発明の予防または治療剤を適用することで、これらの肝炎ウイルスに起因するウイルス性肝炎を予防し、また治療することができる。
【００３９】
本発明の予防または治療剤は、上記分岐鎖アミノ酸および抗ウイルス活性を有する核酸アナログ以外に、公知の抗ウイルス成分を含んでいてもよい。このような抗ウイルス成分としては、例えばＩＦＮが挙げられる。当該抗ウイルス成分の含有量は、当業者であれば適宜調整可能である。
【００４０】
本発明の予防または治療剤は、抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させることによってウイルス性肝炎を抑制することができる。具体的には、本発明の予防または治療剤は、肝炎ウイルスの増殖を抑制させ、また肝炎ウイルスを減少させることができる。したがって本発明の予防または治療剤は、薬理学的に許容される担体と混合して、ウイルス性肝炎用医薬組成物（例えば注射剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤、クリーム剤、坐剤等）としても適用可能である。当該医薬または医薬組成物は、経口又は非経口（例、局所、直腸、静脈投与等）で投与することができるが、経口投与によって投与することが好ましい。
【００４１】
用いられる薬理学的に許容される担体としては、例えば、乳糖、ブドウ糖、Ｄ−マンニトール、澱粉、結晶セルロース、炭酸カルシウム、カオリン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、エタノール、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム塩、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アセチルセルロース、白糖、酸化チタン、安息香酸、パラオキシ安息香酸エステル、デヒドロ酢酸ナトリウム、アラビアゴム、トラガント、メチルセルロース、卵黄、界面活性剤、単シロップ、クエン酸、蒸留水、グリセリン、プロピレングリコール、マクロゴール、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、フェノール、チメロサール、亜硫酸水素ナトリウム等があり、これらの機能は当業者に公知である。これらの担体は製剤の形に応じて、本発明の医薬または医薬組成物に配合された形で使用される。これらの担体の含有量は、当業者であれば適宜調整可能である。
【００４２】
本発明の活性増強剤、副作用軽減剤、予防または治療剤、医薬および医薬組成物等（以下、これらをまとめて「本発明の剤、医薬および医薬組成物」と記載する）において、分岐鎖アミノ酸の投与量（摂取量）は、患者の病態、年齢、投与方法などによって異なるが、通常、１人あたり１日、イソロイシン０．５〜３０．０ｇ、ロイシン１．０〜６０．０ｇ、バリン０．５〜３０．０ｇである。一般の成人の場合、好ましくは１人あたり１日、イソロイシン２．０〜１０．０ｇ、ロイシン３．０〜２０．０ｇ、バリン２．０〜１０．０ｇ、より好ましくは、イソロイシン２．５〜３．５ｇ、ロイシン５．０〜７．０ｇ、バリン３．０〜４．０ｇである。上記した本発明の剤、医薬および医薬組成物において、イソロイシン、ロイシン、バリン全てが含有されている場合は、成人１日あたりの投与量が３種の分岐鎖アミノ酸の合計量として、通常２．０〜５０．０ｇ程度が好ましく、これを必要に応じて１〜６回、好ましくは１〜３回に分割して投与する。
【００４３】
これに対し、核酸アナログの投与量は、投与する核酸アナログの種類、患者の病態、年齢、投与方法など種々の要件によって異なるが、成人１日量として、通常０．０１ｍｇ〜１００ｍｇ程度、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇ程度である。特に腎機能障害患者（血液透析を行っている患者など）の場合はその投与量を減少させる必要があり、成人１日量として０．０１ｍｇ〜１０ｍｇ程度である。
【００４４】
例えば、Ｂ型肝炎ウイルス陽性の患者群のうち、肝癌が認められない肝硬変患者においては、エンテカビル水和物０．５ｍｇ（エンテカビルとして）を一日一回空腹時に（そして分岐鎖アミノ酸３種類を全て含むアミノ酸製剤（分岐鎖アミノ酸量として一回３〜４ｇ）を一日３回それぞれ）投与することが好ましい。
【００４５】
本発明の剤、医薬および医薬組成物において、分岐鎖アミノ酸および核酸アナログは、それぞれ別々の製剤として、同一または異なる投与形態で投与してもよいし、あるいは分岐鎖アミノ酸と核酸アナログとを同一の製剤中に含有する配合剤として投与してもよい。分岐鎖アミノ酸と核酸アナログとが別々の製剤である場合でも、また同一の製剤中に配合される場合であっても、上記した本発明の剤、医薬および医薬組成物における１回投与当たりの分岐鎖アミノ酸の配合量は、通常０．５〜５０．０ｇ程度、好ましくは１．０〜２０．０ｇ程度、より好ましくは２．０〜６．０ｇ程度とする。なお１回投与当たりの核酸アナログの配合量は、それぞれ薬剤ごとに設定する。
例えば、Ｂ型肝炎ウイルス陽性の患者群のうち、肝癌が認められない肝硬変患者においては、エンテカビル水和物０．５ｍｇ（エンテカビルとして）を一日一回空腹時に投与する場合、分岐鎖アミノ酸３種類を全て含むアミノ酸製剤の一回投与あたりの分岐鎖アミノ酸量は、３〜４ｇである（好ましくはこれを一日三回投与する）。
【００４６】
上記した本発明の剤、医薬および医薬組成物において、分岐鎖アミノ酸と本発明の核酸アナログとを別々の製剤として併用投与する場合、その併用投与の順序としては特に限定されないが、当業者であれば、好ましい核酸アナログの投与効果を得るべく投与剤形、投与方法などにより適切な順序と時間差を選択することができる。
投与順と時間差の例としては、例えば、分岐鎖アミノ酸を先に投与する場合、分岐鎖アミノ酸を投与した後５分〜２年以内に核酸アナログを投与する方法が挙げられる。一方で核酸アナログを先に投与する場合、核酸アナログを投与した後、例えば５分〜２年以内に分岐鎖アミノ酸を投与する方法が挙げられる。
分岐鎖アミノ酸を先に投与する場合は、核酸アナログの投与を開始した後も分岐鎖アミノ酸の投与を継続することが望ましい。一方で核酸アナログを先に投与する場合は、核酸アナログは各製剤の添付書類に記載されている処方に従って継続的に投与することが望ましく、また分岐鎖アミノ酸の投与を開始した後も核酸アナログの投与は継続することが望ましい。
【００４７】
本発明の剤、医薬および医薬組成物における有効成分である分岐鎖アミノ酸の投与量（摂取量）について算出する際、本発明の目的とする疾患の予防、治療等の目的で使用される薬剤などの有効成分としては、前記したように一回投与ごとの配合量の範囲が決められているので、本発明の目的とは異なる目的で、例えば通常の食生活の必要から、或いは別の疾患の治療目的で、摂取または投与される分岐鎖アミノ酸についてはこれを前記配合量に含める必要はない。例えば、通常の食生活から摂取される一日あたりの分岐鎖アミノ酸の量を前記本発明における有効成分の一日あたりの投与量から控除して算定する必要はない。
【００４８】
また本発明は、イソロイシン、ロイシンおよびバリンから選ばれる少なくとも一種の分岐鎖アミノ酸またはその塩、及び当該分岐鎖アミノ酸またはその塩が抗ウイルス活性を有する核酸アナログの活性を増強させるのに使用することができること又は使用すべきであることを記載した、当該分岐鎖アミノ酸またはその塩に関する説明を記載した記載物を含む商業用パッケージを提供する。
【実施例】
【００４９】
次に、実施例により本発明をさらに詳細に述べる。なお、以下の実施例は、本発明の一例について具体的に説明するものであって、本発明をこれに限定するものではない。【００５０】
実施例１：核酸アナログ製剤と本発明の活性増強剤との併用効果（１）
（方法）
十分な食事摂取にもかかわらず低アルブミン血症を呈する非代償性肝硬変患者でＢ型肝炎ウイルス陽性の患者に、イソロイシン、ロイシン、バリンの重量比が、１：２：１．２（イソロイシン：０．９５２ｇ、ロイシン：１．９０４ｇ、バリン：１．１４４ｇ）である分岐鎖アミノ酸製剤リーバクト（登録商標）顆粒（味の素株式会社）１回１包を１日３回食後経口投与し、血清アルブミン値、ＡＳＴ及びＡＬＴ値の変化を経日的に測定した。その結果について、抗ウイルス化学療法剤であるラミブジン（製品名：ゼフィックス（登録商標）錠、製造販売会社  グラクソ・スミスクライン株式会社）の処方歴の有無で２群に分けて解析した。前記両群の患者背景を表１に示す。【００５１】
【表１】
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【００５２】
図１は、表１に示された両患者群の血清アルブミン値について、リーバクト顆粒の投与開始前の値を基準として、６、１２、１８、２４ヶ月経過後の変化量（各経過後の値−投与開始前の値）をプロットしたものを示す。図２はＡＳＴの変化量を示す。図３はＡＬＴの変化量をプロットしたものを示す。【００５３】
（結果）
Ｂ型肝炎ウイルス陽性の非代償性肝硬変患者において、リーバクト顆粒を継続して投与することにより、特に２年間の長期に亘る投与期間中にＡＳＴ、ＡＬＴの両測定値共に増加する傾向は認められず、ウイルスの再活性化、肝硬変の重症化を招くことなく安定した状態を維持できることが判る。また、ラミブジン錠の投与により積極的にＢ型肝炎ウイルスの増殖抑制を図る場合、リーバクト顆粒を併用すると、長期間に亘りＡＳＴ、ＡＬＴの低下効果を維持でき、血清アルブミン値も半年経過毎に上昇する傾向が認められる。【００５４】
実施例２：核酸アナログ製剤と本発明の活性増強剤との併用効果（２）
リーバクト顆粒および／または抗ウイルス剤として、ラミブジン（「ゼフィックス（登録商標）」グラクソスミスクライン社）、エンテカビル水和物（「バラクルード（登録商標）」ブリストル・マイヤー社）およびアデホビルピボキシル（「ヘプセラ（登録商標）」グラクソスミスクライン社）から選択される核酸アナログ製剤を３ヶ月〜１２ヶ月間投薬された、Ｂ型肝硬変患者２０名について、血清中のＢ型肝炎ウイルス量を核酸増幅検査により測定した。
なお、前記２０名の患者は肝硬変患者で肝癌は発症していない。
核酸増幅検査は、患者のウイルス量に応じてＰＣＲ法とＴＭＡ法のいずれかにより行った（測定範囲：２．６−７．６ｌｏｇ．ｃｏｐｉｅｓ／ｍＬ（ＰＣＲ法）、３．７−８．７ＬＧＥ／ｍＬ（ＴＭＡ法））。ＬＧＥはＬｏｇａｒｉｔｈｍ  ｇｅｎｏｍｅ  ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔを意味し、実質的な意味はｌｏｇ．ｃｏｐｉｅｓと同じである。【００５５】
個々の患者の併用前測定値（Ａ群（図４中、横縞のバー）については薬剤投与前）に対する変化量を算出し、リーバクト顆粒の併用投与がＢ型肝炎ウイルスの減少に与える影響について解析した。結果を図４に示す。図４において、Ａ群では核酸アナログ製剤の単独投与を開始してから３、６、１２ヶ月目のＨＢＶ  ＤＮＡ値から、同製剤の投与開始前の同値を差し引いた差分を縦軸に表している（ｎ＝１１）。Ｂ群（図４中、黒のバー）では、リーバクト顆粒を一年間投与した後に測定したＨＢＶ  ＤＮＡ値を基準値として、その後核酸アナログ製剤の併用投与を継続した際のウイルス量から基準値を差し引いた差分を表している（ｎ＝３）。Ｃ群（図４中、白のバー）は、Ｂ群とは反対に核酸アナログ製剤を１年間投与した後にリーバクト顆粒を併用投与した場合の差分を表している。
（患者群）
Ａ群：核酸アナログ製剤を単独投与した患者群（ｎ＝１１）、
Ｂ群：リーバクト顆粒を１年間投与した後、引き続きリーバクト顆粒を投与しながら核酸アナログ製剤の投与を開始し、同製剤を一年間継続して併用投与した患者群（ｎ＝３）、Ｃ群：核酸アナログ製剤を１年間単独投与した後、同製剤を継続投与しながらリーバクト顆粒の投与を開始し、リーバクト顆粒を１年間継続して併用投与した患者群（ｎ＝６）。【００５６】
図４に示されるように、核酸アナログ製剤の単独投与では、同製剤を３ヶ月投与することでウイルス量は低下するが、その効果は１年継続投与しても著しく増加するものではない。一方、リーバクト顆粒を１年間投与した患者に、核酸アナログ製剤を投与したＢ群では、核酸アナログ製剤単独投与に比べウイルス量が低下し易い傾向が認められ、また併用投与期間が１年となるとその低下量は維持されるかむしろウイルス量はより低下する傾向が認められる。Ｃ群を見ると核酸アナログのウイルス低減効果が顕れてからリーバクト顆粒を併用しても大きなウイルス量の低減効果は認められないが、１年間継続してリーバクト顆粒を投与すると、併用３ヶ月の時点に比べるとウイルス量は低下する傾向が見られる。
【産業上の利用可能性】
【００５７】
本発明により、継続投与により底打ちする核酸アナログ製剤の活性を、より増強させることができる。これにより核酸アナログ製剤を単独で使用した場合よりも肝予備能が改善するので、肝癌をはじめとした肝病変における治療法をより広く選択することができるようになる点で有用である。
また本発明により、従来存在する核酸アナログよりも強力なウイルス性肝炎の予防または治療剤、ウイルス性肝炎治療用医薬などを得ることができる。
さらに本発明により、核酸アナログ製剤のウイルス増殖抑制効果を長期間安定的に維持できる。なお、Ｂ型肝炎ウイルス陽性患者では急性増悪、劇症化が懸念されるが、発症後の核酸アナログ製剤の投与では予後不良の場合が多いところ、本発明は、特に前記劇症化前の予防投与において予後不良を改善し得る。また、化学療法、免疫療法、移植療法時に抗癌剤や免疫抑制剤を使用する際、Ｂ肝炎ウイルスが急激に増殖する場合があるが、各療法施行前に核酸アナログ製剤を予防投与する際にも本発明が有用である。
本出願は、日本で出願された特願２００９−１５０２９６（出願日：２００９年６月２４日）および特願２０１０−０４０４２３（出願日：２０１０年２月２５日）を基礎としており、それらの内容は本明細書に全て包含されるものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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