【手続補正書】
【提出日】平成26年12月12日(2014.12.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
親インスリンに対し、少なくとも２の疎水性アミノ酸が親水性アミノ酸で置換されており、該置換が、親インスリンの２以上のプロテアーゼ切断部位の内部又はこれに近接して存在しているインスリンアナログであって、一又は複数の付加的な変異をさらに含んでいてもよいインスリンアナログ。
【請求項２】
親タンパク質に対して、増加した溶解性の得られた請求項１に記載のインスリンアナログ。
【請求項３】
インスリンアナログのＡ鎖が少なくとも一の変異を含み、インスリンアナログのＢ鎖が親インスリンに対して少なくとも一の変異を含んでいる請求項１又は２に記載のインスリンアナログ。
【請求項４】
インスリンアナログが、最初に修飾されたインスリンアナログのプロテアーゼ部位において少なくとも一つのアミノ酸置換をさらに含み、前記少なくとも一つのアミノ酸置換が少なくとも一つの疎水性アミノ酸が少なくとも一つの親水性アミノ酸により置換されているものである、請求項１から３の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項５】
・Ａ１２位のアミノ酸がＧｌｕ又はＡｓｐであり、及び／又はＡ１３位のアミノ酸がＨｉｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ又はＡｓｐであり、及び／又はＡ１４位のアミノ酸がＡｓｎ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｇｌｙ又はＨｉｓであり、及び／又はＡ１５位のアミノ酸がＧｌｕ又はＡｓｐであり；及び
・Ｂ２４位のアミノ酸がＨｉｓであり、及び／又はＢ２５位のアミノ酸がＨｉｓであり、及び／又はＢ２６位のアミノ酸がＨｉｓ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ又はＴｈｒであり、及び／又はＢ２７位のアミノ酸がＨｉｓ、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ又はＡｒｇであり、及び／又はＢ２８位のアミノ酸がＨｉｓ、Ｇｌｙ又はＡｓｐであり;
場合によっては、一又は複数の付加的な変異をさらに含む請求項１から４の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項６】
Ａ１４位のアミノ酸がＧｌｕ、Ａｓｐ又はＨｉｓであり、Ｂ２５位のアミノ酸がＨｉｓであり、場合によっては、一又は複数の付加的な変異をさらに含む請求項１から５の何れか一項に記載のインスリンアナログ。 
【請求項７】
Ａ１４位のアミノ酸がＧｌｕ、Ａｓｐ又はＨｉｓであり、Ｂ２５位のアミノ酸がＨｉｓであり、Ｂ３０位のアミノ酸が欠失している請求項１から６の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項８】
Ａ１４位のアミノ酸がＧｌｕ、Ａｓｐ又はＨｉｓであり、Ｂ２５位のアミノ酸がＨｉｓである請求項１から６の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項９】
一又は複数の付加的な変異が、Ａ(−３)Ｇｌｙ、Ａ(−２)Ｇｌｙ、Ａ(−１)Ｐｒｏ、Ａ(０)Ｐｒｏ、Ａ８Ｈｉｓ、Ａ１８Ｇｌｎ、Ａ１８Ｇｌｎ、Ａ２１Ｇｌｎ、Ａ２１Ｇｌｙ、Ｂ(−３)Ｇｌｙ、Ｂ(−２)Ｇｌｙ、Ｂ(−１)Ｐｒｏ、Ｂ(０)Ｐｒｏ、Ｂ１Ｇｌｕ、Ｂ１Ｇｌｎ、ｒｏ、Ｂ１Ｇｌｕ、Ｂ１Ｇｌｎ、Ｂ３Ｇｌｎ、Ｂ１０Ｐｒｏ、Ｂ１４Ｔｈｒ、Ｂ１６Ｇｌｕ、Ｂ１７Ｓｅｒ、Ｂ２６Ａｓｐ、ＤｅｓＢ２６、ＤｅｓＢ２７、Ｂ２７Ｇｌｕ、Ｂ２７Ｇｌｕ、Ｂ２８Ａｓｐ、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０、Ｂ３１Ｌｅｕ、Ｂ３２Ｇｌｕからなる群から選択される請求項１から６の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１０】
付加的な変異がｄｅｓＢ３０である請求項１から６又は９の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１１】
Ａ１４がＧｌｕである請求項１から１０の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１２】
親タンパク質に対して、一又は複数のプロテアーゼ酵素への増加した安定性を示す請求項１から１１の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１３】
親タンパク質に対して、２以上のプロテアーゼ酵素への増加した安定性を示す請求項１から１２の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１４】
親インスリンが、
ヒトインスリン;
・Ｂ２８位のアミノ酸残基がＰｒｏ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ又はＡｌａであり、Ｂ２９位のアミノ酸残基がＬｙｓ又はＰｒｏであり、場合によってはＢ３０位のアミノ酸残基が欠失しているヒトインスリンのインスリンアナログ；
・ｄｅｓ(Ｂ２６-Ｂ３０)ヒトインスリン、ｄｅｓ(Ｂ２７-Ｂ３０)ヒトインスリン、ｄｅｓ(Ｂ２８-Ｂ３０)ヒトインスリン、ｄｅｓ(Ｂ２９-Ｂ３０)ヒトインスリン、ｄｅｓ(Ｂ２７)ヒトインスリン、又はｄｅｓ(Ｂ３０)ヒトインスリン;
・Ｂ３位のアミノ酸残基がＬｙｓであり、Ｂ２９位のアミノ酸残基が Ｇｌｕ又はＡｓｐであるヒトインスリンのインスリンアナログ;
・Ａ２１位のアミノ酸残基が Ｇｌｙであり、２つのＡｒｇ残基でＣ末端がさらに伸長しているヒトインスリンのインスリンアナログ；
・Ｂ３０位のアミノ酸残基がスレオニンメチルエステルで置換されているインスリン誘導体；
・ｄｅｓ(Ｂ３０)ヒトインスリンのＢ２９位にあるリジンのＮε位にテトラデカノイル鎖が結合したインスリン誘導体；
からなる群から選択される請求項１から１３の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１５】
一又は複数の付加的な変異が、インスリンの化学的安定性を高めるように選択される請求項１から６、９又は１１から１４の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１６】
一又は複数の付加的な変異が、Ａ１８Ｇｌｎ、Ａ２１Ｇｌｎ、Ａ２１Ｇｌｙ及びＢ３Ｇｌｎからなる群から選択される請求項１５に記載のインスリンアナログ。
【請求項１７】
式１：
ＸａａＡ(−２)-ＸａａＡ(−１)-ＸａａＡ０-Ｇｌｙ-Ｉｌｅ-Ｖａｌ-Ｇｌｕ-Ｇｌｎ-Ｃｙｓ-Ｃｙｓ-ＸａａＡ８-Ｓｅｒ-Ｉｌｅ-Ｃｙｓ-ＸａａＡ１２-ＸａａＡ１３-ＸａａＡ１４-ＸａａＡ１５-Ｌｅｕ-Ｇｌｕ-ＸａａＡ１８-Ｔｙｒ-Ｃｙｓ-ＸａａＡ２１-ＸａａＡ２２
式(１)(配列番号１)
のＡ鎖アミノ酸配列、及び次の式２：
ＸａａＢ(−２)-ＸａａＢ(−１)-ＸａａＢ０-ＸａａＢ１-ＸａａＢ２-ＸａａＢ３-ＸａａＢ４-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ-Ｃｙｓ-Ｇｌｙ-Ｓｅｒ-ＸａａＢ１０-Ｌｅｕ-Ｖａｌ-Ｇｌｕ-Ａｌａ-Ｌｅｕ-ＸａａＢ１６-Ｌｅｕ-Ｖａｌ-Ｃｙｓ-Ｇｌｙ-Ｇｌｕ-Ａｒｇ-Ｇｌｙ-ＸａａＢ２４-ＸａａＢ２５-ＸａａＢ２６-ＸａａＢ２７-ＸａａＢ２８-ＸａａＢ２９-ＸａａＢ３０-ＸａａＢ３１-ＸａａＢ３２
式(２)(配列番号２)
のＢ鎖アミノ酸配列を含み、上記式中、
ＸａａＡ(−２)は存在しないか又はＧｌｙであり;
ＸａａＡ(−１)は存在しないか又はＰｒｏであり;
ＸａａＡ０は存在しないか又はＰｒｏであり;
ＸａａＡ８は独立して、Ｔｈｒ及びＨｉｓから選択され;
ＸａａＡ１２は独立して、Ｓｅｒ、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１３は独立して、Ｌｅｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１４は独立して、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１５は独立して、Ｇｌｎ、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１８は独立して、Ａｓｎ、Ｌｙｓ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＡ２１は独立して、Ａｓｎ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＡ２２は存在しないか又はＬｙｓであり;
ＸａａＢ(−２)は存在しないか又はＧｌｙであり;
ＸａａＢ(−１)は存在しないか又はＰｒｏであり;
ＸａａＢ０は存在しないか又はＰｒｏであり;
ＸａａＢ１は存在しないか、又は独立してＰｈｅ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ２は存在しないか又はＶａｌであり;
ＸａａＢ３は存在しないか、又は独立してＡｓｎ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ４は独立して、Ｇｌｎ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ１０は独立して、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｐｒｏ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ１６は独立して、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ２４は独立して、Ｐｈｅ及びＨｉｓから選択され;
ＸａａＢ２５は独立して、Ｐｈｅ及びＨｉｓから選択され;
ＸａａＢ２６は存在しないか、又は独立してＴｙｒ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ及びＡｓｐから選択され;
ＸａａＢ２７は存在しないか、又は独立してＴｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ２８は存在しないか、又は独立してＰｒｏ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ及びＡｓｐから選択され;
ＸａａＢ２９は存在しないか、又は独立してＬｙｓ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ３０は存在しないか又はＴｈｒであり;
ＸａａＢ３１は存在しないか又はＬｅｕであり;
ＸａａＢ３２は存在しないか又はＧｌｕであり;
場合によってはＣ末端がアミドとして誘導体化されていてもよく；
ここで、Ａ鎖アミノ酸配列及びＢ鎖アミノ酸配列が、Ａ鎖の７位にあるシステインとＢ鎖の７位にあるシステインとの間、及びＡ鎖の２０位にあるシステインとＢ鎖の１９位にあるシステインとの間でジスルフィド架橋により結合しており、Ａ鎖の６及び１１位にあるシステインがジスルフィド架橋により結合しており；
場合によってはＡ鎖アミノ酸配列のＮ末端が、３−７のアミノ酸を含有するアミノ酸配列により、Ｂ鎖アミノ酸配列のＣ末端に結合して、単鎖インスリン分子を形成してよく、場合によってはＢ鎖のＮ末端が１−１０のアミノ酸で伸長しており；
ＸａａＡ８がＴｈｒで、ＸａａＡ１２がＳｅｒで、ＸａａＡ１３がＬｅｕで、ＸａａＡ１４がＴｙｒであるならば、ＸａａＡ１５はＧｌｕ又はＡｓｐであり；及び
ＸａａＢ２４がＰｈｅで、ＸａａＢ２５がＰｈｅで、ＸａａＢ２６がＴｙｒで、ＸａａＢ２７がＴｈｒで、ＸａａＢ２８がＰｒｏであるならば、ＸａａＢ２９はＧｌｎである、
請求項１から４又は１２から１４の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１８】
次の式３：
Ｇｌｙ-Ｉｌｅ-Ｖａｌ-Ｇｌｕ-Ｇｌｎ-Ｃｙｓ-Ｃｙｓ-ＸａａＡ８-Ｓｅｒ-Ｉｌｅ-Ｃｙｓ-ＸａａＡ１２-ＸａａＡ１３-ＸａａＡ１４-ＸａａＡ１５-Ｌｅｕ-Ｇｌｕ-ＸａａＡ１８-Ｔｙｒ-Ｃｙｓ-ＸａａＡ２１
式(３)(配列番号３)
のＡ鎖アミノ酸配列、及び次の式(４)：
ＸａａＢ１-Ｖａｌ-ＸａａＢ３-ＸａａＢ４-Ｈｉｓ-Ｌｅｕ-Ｃｙｓ-Ｇｌｙ-Ｓｅｒ-ＸａａＢ１０-Ｌｅｕ-Ｖａｌ-Ｇｌｕ-Ａｌａ-Ｌｅｕ-ＸａａＢ１６-Ｌｅｕ-Ｖａｌ-Ｃｙｓ-Ｇｌｙ-Ｇｌｕ-Ａｒｇ-Ｇｌｙ-ＸａａＢ２４-Ｈｉｓ-ＸａａＢ２６-ＸａａＢ２７-ＸａａＢ２８-ＸａａＢ２９-ＸａａＢ３０
式(４)(配列番号４)
のＢ鎖アミノ酸配列を含み、上記式中、
ＸａａＡ８は独立して、Ｔｈｒ及びＨｉｓから選択され;
ＸａａＡ１２は独立して、Ｓｅｒ、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１３は独立して、Ｌｅｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１４は独立して、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１５は独立して、Ｇｌｎ、Ａｓｐ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１８は独立して、Ａｓｎ、Ｌｙｓ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＡ２１は独立して、Ａｓｎ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ１は独立して、Ｐｈｅ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ３は独立して、Ａｓｎ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ４は独立して、Ｇｌｎ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ１０は独立して、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｐｒｏ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ１６は独立して、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ２４は独立して、Ｐｈｅ及びＨｉｓから選択され;
ＸａａＢ２６は存在しないか、又は独立してＴｙｒ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ及びＡｓｐから選択され;
ＸａａＢ２７は存在しないか、又は独立してＴｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ２８は存在しないか、又は独立してＰｒｏ、Ｈｉｓ、Ｇｌｙ及びＡｓｐから選択され;
ＸａａＢ２９は存在しないか、又は独立してＬｙｓ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ３０は存在しないか又はＴｈｒであり;
場合によってはＣ末端がアミドとして誘導体化されていてもよく；
ここで、Ａ鎖アミノ酸配列及びＢ鎖アミノ酸配列が、Ａ鎖の７位にあるシステインとＢ鎖の７位にあるシステインとの間、及びＡ鎖の２０位にあるシステインとＢ鎖の１９位にあるシステインとの間でジスルフィド架橋により結合しており、Ａ鎖の６及び１１位にあるシステインがジスルフィド架橋により結合している、請求項１から４又は１２から１４の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項１９】
ＸａａＡ８は独立して、Ｔｈｒ及びＨｉｓから選択され;
ＸａａＡ１２は独立して、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１３は独立して、Ｌｅｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１４は独立して、Ａｓｐ、Ｈｉｓ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１５は独立して、Ｇｌｎ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＡ１８は独立して、Ａｓｎ、Ｌｙｓ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＡ２１は独立して、Ａｓｎ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ１は独立して、Ｐｈｅ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ３は独立して、Ａｓｎ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ４は独立して、Ｇｌｎ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ１０は独立して、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｐｒｏ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ１６は独立して、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ２４は独立して、Ｐｈｅ及びＨｉｓから選択され;
ＸａａＢ２６は独立して、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ及びＡｓｐから選択され;
ＸａａＢ２７は独立して、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｒｇ及びＧｌｕから選択され;
ＸａａＢ２８は独立して、Ｐｒｏ、Ｇｌｙ及びＡｓｐから選択され;
ＸａａＢ２９は独立して、Ｌｙｓ及びＧｌｎから選択され;
ＸａａＢ３０存在しないか又はＴｈｒであり;
場合によってはＣ末端がアミドとして誘導体化されていてもよく；
ここで、Ａ鎖アミノ酸配列及びＢ鎖アミノ酸配列が、Ａ鎖の７位にあるシステインとＢ鎖の７位にあるシステインとの間、及びＡ鎖の２０位にあるシステインとＢ鎖の１９位にあるシステインとの間でジスルフィド架橋により結合しており、Ａ鎖の６及び１１位にあるシステインがジスルフィド架橋により結合している、請求項１８に記載のインスリンアナログ。
【請求項２０】
Ｂ鎖のＣ末端が、３−１５のアミノ酸又は３−７のアミノ酸で、Ａ鎖のＮ末端に結合し、単鎖インスリン分子を形成しており、場合によってはＢ鎖のＮ末端が１−１０のアミノ酸で伸長している請求項１から１６の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項２１】
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｈ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２８Ｄ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ１６Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ１６Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２６Ｄ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２８Ｄ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｄ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ（−１）Ｐ、Ａ（０）Ｐ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ（−１）Ｐ、Ｂ（０）Ｐ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ（−１）Ｐ、Ａ（０）Ｐ、Ａ１４Ｅ、Ｂ（−１）Ｐ、Ｂ（０）Ｐ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ３０Ｔ、Ｂ３１Ｌ、Ｂ３２Ｅヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｈ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１０Ｐ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１０Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｈ、Ｂ１６Ｈ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｈ、Ｂ１０Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１０Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ１８Ｑ、Ｂ３Ｑ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２４Ｈ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１０Ｄ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２６Ｇ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１０Ｄ、Ｂ２５Ｈ−アミド、ｄｅｓＢ２６、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；  
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２６、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２６Ｇ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ−アミド、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２６Ｇ、Ｂ２７Ｇ、Ｂ２８Ｇ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２６Ｇ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２６、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ１８Ｑ、Ａ２１Ｑ、Ｂ３Ｑ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ１８Ｑ、Ａ２１Ｑ、Ｂ３Ｑ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ１８Ｑ、Ｂ３Ｑ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｎ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｎ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ（−２）Ｇ、Ａ（−１）Ｐ、Ａ（０）Ｐ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ（−２）Ｇ、Ｂ（−１）Ｐ、Ｂ（０）Ｐ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ（−２）Ｇ、Ａ（−１）Ｐ、Ａ（０）Ｐ、Ａ１４Ｅ、Ｂ（−２）Ｇ、Ｂ（−１）Ｐ、Ｂ（０）Ｐ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２７Ｒ、Ｂ２８Ｄ、Ｂ２９Ｋ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｒ、Ｂ２８Ｄ、Ｂ２９Ｋ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２６Ｔ、Ｂ２７Ｒ、Ｂ２８Ｄ、Ｂ２９Ｋ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ１８Ｋ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ２２Ｋ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ２２Ｋ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、ｄｅｓＢ１、ｄｅｓＢ２、ｄｅｓＢ３、Ｂ２５Ｈ−アミド、ｄｅｓＢ２６、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、ｄｅｓＢ１、ｄｅｓＢ２、ｄｅｓＢ３、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、ｄｅｓＢ１、ｄｅｓＢ２、ｄｅｓＢ３、Ｂ１６Ｈ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ２８、ｄｅｓＢ２９、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｒ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｒ、ｄｅｓＢ２８−Ｂ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｈ、ｄｅｓＢ２８−Ｂ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ２８−Ｂ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｋ、ｄｅｓＢ２８−Ｂ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２７Ｋ、ｄｅｓＢ２８−Ｂ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ａ１８Ｑ、Ｂ３Ｑ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｅ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１２Ｅ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１５Ｅ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１２Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１５Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ２７、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２６Ｄ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
ＥＥＡＥＡＥＡＰＫ−Ｂ（１−２９）−Ｂ２５Ｈ−ＡＡＫ−Ａ（１−２１）−Ａ１４Ｅヒトインスリン；
ＥＥＡＥＰＫ−Ｂ（１−２９）−Ｂ２５Ｈ−ＤＧＫ−Ａ（１−２１）−Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ｂ（１−２９）−Ｂ２５Ｈ−ＡＡＫ−Ａ（１−２１）−Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ｂ（１−２９）−Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ−ＡＡＫ−Ａ（１−２１）−Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ｂ（１−２９）−Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ−ＡＡＫ−Ａ（１−２１）−Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ｂ（１−２９）−Ｂ１Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ−ＡＡＫ−Ａ（１−２１）．Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅヒトインスリン；
ＥＥＡＥＡＥＡＰＫ−Ｂ（１−２９）−Ｂ１６Ｅ、Ｂ２５Ｈ−ＡＡＫ−Ａ（１−２１）−Ａ８Ｈ．Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ｂ（１−２９）−Ｂ２５Ｈ、Ｂ２９Ｑ−ＴＧＬＧＧＧＱ−Ａ（１−２１）−Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ｂ（１−２９）−Ｂ１６Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２９Ｑ−ＴＧＬＧＧＧＱ−Ａ（１−２１）−Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ｂ（１−２９）−Ｂ２５Ｈ、Ｂ２９Ｑ−ＴＧＬＧＧＧＱ−Ａ（１−２１）−Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｒ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｎ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｄ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｑ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｅ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｇ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｋ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｐ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｓ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、Ｂ２７Ｔ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｒ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｎ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｄ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｑ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｅ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｇ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｋ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｐ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｓ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１３Ｔ、Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｒ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｄ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｑ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ１６Ｈ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｒ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｎ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｄ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｑ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｇ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ１４Ｈ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン；
Ａ８Ｈ、Ｂ１０Ｄ、Ｂ２５Ｈヒトインスリン；および
Ａ８Ｈ、Ａ１４Ｅ、Ｂ１０Ｅ、Ｂ２５Ｈ、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン
からなる群から選択される、請求項１から２０の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項２２】
請求項１から２１の何れか一項に記載の生物活性量のインスリンアナログと製薬的に許容可能な担体を含有する製薬用組成物。
【請求項２３】
請求項１から２１の何れか一項に記載の２以上のインスリンアナログを含有し、各アナログが、他の変異体の少なくとも一つに存在しない少なくとも一の変異を有することによって定められた製薬用組成物。
【請求項２４】
製薬的に許容可能な担体及び／又は賦形剤と、場合によってはアジュバントをさらに含有する請求項２２又は２３に記載の製薬用組成物。
【請求項２５】
請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログ、又は請求項２２から２４の何れか一項に記載の製薬用組成物を患者に投与することを含む患者における真性糖尿病を治療する方法。
【請求項２６】
請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログ、又は請求項２２から２４の何れか一項に記載の製薬用組成物の治療的活性量を、かかる治療を必要とする患者に投与することを含む、哺乳動物の血糖値を低下させる方法。
【請求項２７】
経口投与である請求項２５又は２６の方法。
【請求項２８】
非経口投与である請求項２５又は２６の方法。
【請求項２９】
気管内投与である請求項２５又は２６の方法。
【請求項３０】
高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、肥満、Ｘ症候群、及び脂質代謝異常の治療又は予防における医薬として使用される請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項３１】
２型糖尿病の疾患進行の遅延化又は予防における医薬として使用される請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項３２】
食物摂取の低下、β細胞アポトーシスの低下、β細胞機能及びβ細胞量の増加、及び／又はβ細胞に対するグルコース感受性の回復において医薬として使用される請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログ。
【請求項３３】
請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログをコードする核酸配列、その誘導体、その部分配列、その変性配列、又はストリンジェントな条件下でそれにハイブリダイズする配列。
【請求項３４】
請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログの前駆体をコードする核酸配列、その誘導体、その部分配列、その変性配列、又はストリンジェントな条件下でそれにハイブリダイズする配列。
【請求項３５】
請求項３３又は３４の核酸配列を含む発現ベクター。
【請求項３６】
請求項３５の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項３７】
請求項３６の宿主細胞を培養する工程を含む、インスリンアナログの製造方法。
【請求項３８】
アミノ酸の置換を、部位特異的突然変異誘発により実施する請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログの製造方法。
【請求項３９】
製薬的に許容可能な物質及び／又は賦形剤と請求項１から２１の何れか一項に記載のインスリンアナログとを混合することを含む請求項２２から２４の何れか一項に記載の製薬用組成物の製造方法。
【請求項４０】
請求項３９の方法により得られうる製薬用組成物。