【手続補正書】
【提出日】平成27年4月28日(2015.4.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】線維芽細胞によるプロテイン産生速度の向上方法及びその装置
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
本発明は、線維芽細胞を生理活性化し、分泌するプロテインの産生速度を向上せしめる方法とその装置に関する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
前記した電界印加による線維芽細胞の生理活性化及び自己増殖は、実用上重要な技術であるが、生体に適用する場合危険を伴う。すなわち、前記した米国における創傷治療は、表皮が損傷消失している第２期〜第４期の重症患者に対して行われており、感染の危険を伴うので医師などの医療専門家が行っている。これに対して、表皮が損傷を受けていない状態で前記技術を適用し非侵襲的に線維芽細胞を生理活性化、自己増殖させようとすれば、表皮上に配置された電極間に電圧を印加することになる。表皮のもっとも上には厚さ２０μｍ程度の角質層があり、それより下の皮膚層に比べて電気抵抗が数桁高い（上腕部で１００ｋΩ）。したがって印加電圧の大半は表皮角質層にかかる。角質層は非常に緻密な構造を持っているが、１００Ｖ以上の電気パルスを数回印加しただけで簡単に組織秩序が一時的に破壊され、巨大分子も容易に皮内に侵入できることがわかっている（たとえば、非特許文献４）。このために、表皮上電極から皮膚に電圧を印加する場合、真皮領域に１３〜３０Ｖ／ｃｍの電界強度を付与することは事実上困難である（その過程で角質層の秩序が一時的に破壊されるのでウイルス感染やアレルゲン侵入を引き起こす危険に直面する）。電圧が数百Ｖ以上に及んだり、持続的に１００Ｖ以上の電圧を印加した場合、損傷を受けた角質層秩序は容易に回復しない。
本発明は、角質層や表皮に悪影響を与えることなく線維芽細胞の活性化を可能にし、繊維芽細胞によるプロテイン産生の速度を向上させる方法とその装置を開示提供することを目的としている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
本発明は、培養性環境に在る線維芽細胞に、０．００１〜０．３Ｖ／ｃｍの強度の電界を持続的に付与することによって、当該電界付与の通電領域の線維芽細胞を生理活性化させ、プロテイン産生速度を向上せしめた方法である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
更に本発明は、培養性環境に在る線維芽細胞のプロテイン産生速度を向上させる装置であって、電源と、該電源に導線によってつながり、且つ、上記培養性環境内又はその近傍に載置可能な第１、第２の電極と、を具え、上記電源は、培養性環境内で０．００１〜０．３Ｖ／ｃｍの電界を発生させるような容量とし、以てこの通電領域の線維芽細胞を生理活性化させてプロテインの産生速度を向上させることを特徴とする線維芽細胞のプロテイン産生速度の向上装置である。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
更に本発明は、培養性環境に在る線維芽細胞のプロテイン産生速度を向上させる装置であって、金属層と、この金属層に導線によってつながり且つこの金属層と電気親和力を異にする半導体層と、接触面を持ち、この接触面にこの金属層と半導体層とが接触し、この接触面と反対側の面が培養性環境に在る皮膚面に皮接可能とする電解質層と、を具え、
上記電子親和力を異にする金属層と半導体層とは、上記培養性環境に在る皮膚面内の表皮領域の線維芽細胞を増殖させ、生理活性化させるべく、その培養性環境内で０．００１〜０．３Ｖ／ｃｍの電界を発生させるような容量を持つものとすることを特徴とする線維芽細胞のプロテイン産生速度の向上装置である。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
更に本発明は、上記発明において、上記金属層と半導体層とは、シート上に所定の間隔幅を持って短冊状に配置され、且つその短冊状の金属層と半導体層とに交叉するように上記電極が配置されて成るものとする線維芽細胞のプロテイン産生速度の向上装置である。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
本発明によれば、極めて低い電界強度で線維芽細胞の活性化を実現できることになった。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
【図１】本発明の線維芽細胞の活性化用電気装置の実施例図である。
【図２】本発明の微弱電界印加時の負極近傍の線維芽細胞活性化のデータ図である。
【図３】本発明の微弱電界印加時の電極間中央部の線維芽細胞活性化のデータ図である。
【図４】本発明の微弱電界印加時の正極近傍での線維芽細胞活性化のデータ図である。
【図５】本発明の実施例である電気装置の治癒データ図である。
【図６】従来の線維芽細胞の活性化データ例図である。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
皮膚起電素子による皮内通電は、表皮上に密着させた電解質層を介して行うことも出来る。この場合、皮膚起電は、表皮上の電解質層と皮内電解質層の双方で発生し、皮膚起電電池が外部導線に対して並列接続した状況となる。
なお、本発明における適合電界領域０．００１〜０．３Ｖ／ｃｍは、線維芽細胞が産生するプロテインの産生速度が電界非印加時に比べて１０％以上高まる領域に設定した。これは、実施例その１における放射化測定結果を基にしたもので、プロテイン産生実験過程において個々の線維芽細胞活性化のばらつきが±１０％程度見られたためである。  
【手続補正１１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養性環境に在る線維芽細胞に、０．００１〜０．３Ｖ／ｃｍの強度の電界を持続的に付与することにより生理活性化させる線維芽細胞のプロテイン産生速度の向上方法。
【請求項２】
培養性環境に在る線維芽細胞のプロテイン産生速度を向上させる装置であって、
電源と、該電源に導線によってつながり、且つ、上記培養性環境内又はその近傍に載置可能な第１、第２の電極と、を具え、上記電源は、培養性環境内で０．００１〜０．３Ｖ／ｃｍの電界を発生させるような容量とし、以てこの通電領域の線維芽細胞を生理活性化させてプロテインの産生速度を向上させることを特徴とする線維芽細胞のプロテイン産生速度の向上装置。
【請求項３】
培養性環境に在る線維芽細胞のプロテイン産生速度を向上させる装置であって、
金属層と、この金属層に導線によってつながり且つこの金属層と電気親和力を異にする半導体層と、接触面を持ち、この接触面にこの金属層と半導体層とが接触し、この接触面と反対側の面が培養性環境に在る皮膚面に皮接可能とする電解質層と、を具え、
上記電子親和力を異にする金属層と半導体層とは、上記培養性環境に在る皮膚面内の表皮領域の線維芽細胞を増殖させ、生理活性化させるべく、その培養性環境内で０．００１〜０．３Ｖ／ｃｍの電界を発生させるような容量を持つものとすることを特徴とする線維芽細胞のプロテイン産生速度の向上装置。
【請求項４】
上記金属層と半導体層とは、シート上に所定の間隔幅を持って短冊状に配置され、且つその短冊状の金属層と半導体層とに交叉するように上記電極が配置されて成るものとする請求項３記載の線維芽細胞のプロテイン産生速度の向上装置。