(57)【要約】用時調製を不要とし、また簡易な構成で製造コストを低減し得る糖鎖抗原抽出キット及び検出キットを提案する。糖鎖抗原抽出キット（1）では、気密性を維持した気密容器（3）に、予め調製した亜硝酸を含む検体抽出液（S）を封入するようにしたことで、従来不可能であった亜硝酸を含ませた状態での検体抽出液（S）の長期保存を可能とし、その結果、医療現場での用時調製を不要にできるとともに、誤った調製をも防止でき、さらに気密容器（3）に1液だけが封入した簡易な構成となる分、製造コストも低減できる。
2013183621.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
気密性を維持した容器部内に、亜硝酸を含む検体抽出液が予め封入された気密容器と、
被検者から検体を採取する採取部を備え、前記採取部にて前記検体を採取した後、該採取部が前記検体抽出液に浸され、前記採取部から前記検体抽出液に前記検体を抽出させる検体採取用スワブと
を備えることを特徴とする糖鎖抗原抽出キット。
【請求項２】
前記気密容器は、気密性を維持した状態で前記検体抽出液を保存し続けることで、前記検体抽出液が持つ検出対象物の抽出能力を、少なくとも6か月以上、好ましくは12か月以上持続させる
ことを特徴とする請求項１記載の糖鎖抗原抽出キット。
【請求項３】
前記容器部は、該容器部内の気体が外部に漏れ出ない気密性を備えた硬質材料により形成されている
ことを特徴とする請求項１又は２記載の糖鎖抗原抽出キット。
【請求項４】
前記気密容器は、前記容器部の開口部にパッキンを間に挟んでキャップが締めつけられることで、該開口部における気密性が維持されている
ことを特徴とする請求項１〜３のうちいずれか１項記載の糖鎖抗原抽出キット。
【請求項５】
前記採取部は、被検者から前記検体を採取した際、少なくとも毛細管現象又は表面張力のいずれか一方により前記検体を付着させる表面を有し、かつ、前記検体抽出液に浸された後、前記容器部から取り出される際、前記容器部の内壁に押し当てられるだけで、前記検体を前記検体抽出液に放出する
ことを特徴とする請求項１〜４のうちいずれか１項記載の糖鎖抗原抽出キット。
【請求項６】
前記容器部には、前記検体採取用スワブの採取部が前記容器部の内部に挿通された際、該採取部と当たるしごき部材が設けられている
ことを特徴とする請求項１〜４のうちいずれか１項記載の糖鎖抗原抽出キット。
【請求項７】
請求項１〜６のうちいずれか１項記載の糖鎖抗原抽出キットと、
Ａ群β溶血連鎖球菌を検出するためのイムノクロマト法用テストストリップと
を備えることを特徴とする検出キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖鎖抗原抽出キット及び検出キットに関し、例えば被検者の咽頭から採取した咽頭ぬぐい液中にＡ群β溶血連鎖球菌（streptococcus pyogenes）抗原が存在するか否かを検査する際に適用して好適なものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、Ａ群β溶血連鎖球菌抗原の存在の有無を検査する検出キットとしては、使用直前に２種の薬液を混合して用いるＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットが知られている（例えば、非特許文献１参照）。実際上、このＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットは、例えば、2[mol/L]亜硝酸ナトリウムを成分とする薬液Ａが入った第１ボトルと、0.2[mol/L]酢酸を成分とする薬液Ｂが入った第２ボトルと、試験管形状の抽出用チューブと、被検者の炎症部分である咽頭から検体を採取する綿棒と、陽性又は陰性を判定するテストストリップとから構成されている。【０００３】
このＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットでは、多糖抗原たるＡ群β溶血連鎖球菌抗原を菌体から遊離させて抽出するために、亜硝酸を用いており、使用直前に亜硝酸を含んだ混合薬液を生成する。実際上、このＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットでは、使用する直前に、図９Ａに示すように、第１ボトル101内の薬液Ａと、第２ボトル102内の薬液Ｂとをそれぞれ数滴、抽出用チューブ100に滴下し、検体抽出液として亜硝酸を成分とした混合薬液を生成する。【０００４】
ここで、図９Ｂに示すように、抽出用チューブ100は、使用者が片方の指Fにて摘める外形形状を有しており、当該指Fで把持された状態で、他方の指にて綿棒105を把持させることができる。この場合、使用者は、被検者の咽頭等の炎症部分を、先端綿球部105aにてぬぐって咽頭ぬぐい液を検体として採取した綿棒105を用意する。次いで、検体を採取した綿棒105の先端綿球部105aを、抽出用チューブ100内の混合薬液に浸し、親指及び人差し指の腹にて抽出用チューブ100を僅かに潰して先端綿球部105aを抽出用チューブ100の両側壁にて軽く挟み、先端綿球部105aにて混合薬液をかき回した後、約１分程度放置する。【０００５】
次いで、図１０Ａに示すように、使用者は、親指及び人差し指の腹にて抽出用チューブ100を潰し、抽出用チューブ100内の先端綿球部105aを、当該抽出用チューブ100の側壁を介して強く摘み、先端綿球部105aに染み込んだ検体や混合薬液を絞り出しながら、綿棒105を抽出用チューブ100から取り出す。このようにして、抽出用チューブ100内には、先端綿球部105aにて採取した検体が混合薬液中に放出された試液が生成され得る。【０００６】
ここで、混合薬液を入れる抽出用チューブ100は、アクリル樹脂のような柔軟性のある軟質材料により形成されていることから、使用者が指Fで摘み所定の把持力を与えることで、対向する側壁が潰れて互いに密着するまで変形可能に構成されている。これにより、抽出用チューブ100は、抽出用チューブ100内に入れられた綿棒105の先端綿球部105aを、側壁を介して外部から確実に摘めるとともに、側壁を介して当該先端綿球部105aを指にて強く摘んだ状態で擦る「しごき作業」を行え、このしごき作業によって当該先端綿球部105aに染み込んだ検体や試液等を確実に絞り出せるように構成されている。【０００７】
最後に、図１０Ｂに示すように、抽出用チューブ100内の試液S2に、テストストリップ110の判定部を浸した後、所定時間経過後に、判定部における抗原抗体反応によるライン出現の有無を目視にて確認し、当該ライン出現の有無を基に、試液S2内にＡ群β溶血連鎖球菌抗原が存在するか否かを判定し得るようになされている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】「スタットチェックTMストレップA-II」、[online]、平成24年4月26日検索、インターネット（URL:http://www.info.pmda.go.jp/downfiles/ivd/PDF/531143_22100AMX02226000_A_01_01.pdf）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、かかる構成でなるＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットにおいて、抽出用チューブ100内に生成された混合薬液は、不安定な亜硝酸を含んでいるため、事前に混合して抽出用チューブ100に保管しておくと変質してしまい、検査に用いることができなくなることから、医療現場にて使用直前にその都度混合せざるを得ず、用時調製する必要があった。そのため、使用者によっては、薬液Ａと薬液Ｂの混合割合を誤ってしまう虞もある。その場合には、陰性にも関わらず偽陽性となってしまったり、また、陽性にも関わらず偽陰性となってしまうこともあるため、正しい診断結果が得られない場合もあるという問題があった。【００１０】
その一方、このような誤った用時調製の問題点を解決するため、従来のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットとして、例えば所定量の薬液Ｂが予め入った外側ボトル中に、所定量の薬液Ａが予め入ったアンプルを収納したアンプル収納型ボトルを用いたものも知られている。この種のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットでは、不使用時、薬液Ａと薬液Ｂとが外側ボトル内にてアンプルにより隔離された状態にあるものの、使用直前に、柔軟性のある軟質材料からなる外側ボトルを指で強く摘んでアンプルを潰すことにより、中のアンプルを破壊し、アンプル内の所定量の薬液Ａを、外側ボトル内の薬液Ｂと混合させることで、薬液Ａと薬液Ｂとが最適な混合比率で混合された混合薬液を生成し得る。【００１１】
しかしながら、この種のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットでも、薬液Ａと薬液Ｂとを最適な混合比率で混合させた混合薬液を生成できるものの、使用直前に混合薬液を用時調製する必要があることに変わりなく、その分、使用者にとって手間がかかるという問題があった。また、使用者が誤って外側ボトル内のアンプルを破壊してしまい薬液Ａと薬液Ｂとを混合させてしまったり、或いは、Ａ群β溶血連鎖球菌抗原キットを搬送中に、何らかの原因でアンプル収納型ボトルに衝撃が加えられ、外側ボトル内のアンプルが破壊されてしまうと、使用者が意図しないタイミングで薬液Ａと薬液Ｂとが混合されてしまう。【００１２】
このように、薬液Ａと薬液Ｂとが意図しないタイミングで混合されてしまった場合には、外側ボトル内にて生成された混合薬液が時間経過とともに変質してしまい、その後、検査に用いることができないことから、このような誤った調製が行われないことが望まれている。【００１３】
また、後者のアンプル収納型ボトルは、外側ボトル内にアンプルを収容させた複雑な構成を有し、かつそれぞれ薬液Ａ及び薬液Ｂを個別に１回使用する分量に分注し、それを外側ボトル及びアンプルにそれぞれ入れる必要があることから、その分、手間がかかり製造コストが増大してしまうという問題があった。【００１４】
そこで、本発明は以上の点を考慮してなされたもので、用時調製を不要とし、また簡易な構成で製造コストを低減し得る糖鎖抗原抽出キット及び検出キットを提案することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
かかる課題を解決するため本発明の請求項１は、気密性を維持した容器部内に、亜硝酸を含む検体抽出液が予め封入された気密容器と、被検者から検体を採取する採取部を備え、前記採取部にて前記検体を採取した後、該採取部が前記検体抽出液に浸され、前記採取部から前記検体抽出液に前記検体を抽出させる検体採取用スワブとを備えることを特徴とする糖鎖抗原抽出キットである。【００１６】
また、本発明では、上記気密容器として、亜硝酸ナトリウム水溶液と、酸性溶液とを混合して予め生成された不安定な亜硝酸を含む検体抽出液が、気密性を維持した容器部内に予め封入された気密容器を備えるようにした。【００１７】
また、本発明では、気密容器内の所定部位に採取部を押し付けることで前記採取部から前記検体抽出液に前記検体を抽出させる検体採取用スワブを備えるようにした。【００１８】
また、請求項７は、請求項１〜６のうちいずれか１項記載の糖鎖抗原抽出キットと、Ａ群β溶血連鎖球菌を検出するためのイムノクロマト法用テストストリップとを備えることを特徴とする検出キットである。
【発明の効果】
【００１９】
本発明の請求項１によれば、気密性を維持した気密容器に、予め調製した亜硝酸を含む検体抽出液を封入するようにしたことで、従来不可能であった亜硝酸を含ませた状態での検体抽出液の長期保存を可能とし、その結果、医療現場での用時調製を不要にできるとともに、誤った調製をも防止でき、さらに気密容器に1液だけが封入した簡易な構成となる分、製造コストも低減できる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本発明による糖鎖抗原抽出キットの全体構成を示す概略図である。
【図２】気密容器の詳細構成を示す概略図である。
【図３】気密容器の容器部に検体採取用スワブを挿入したときの様子を示す概略図である。
【図４】検体抽出液調製後の安定性を示すグラフである。
【図５】他の実施の形態による気密容器の構成を示す概略図である。
【図６】図５に示す気密容器の詳細構成を示す概略図である。
【図７】他の実施の形態によるキャップを設けた気密容器の側断面構成を示す断面図である。
【図８】粉状体を封入した気密容器の構成を示す概略図である。
【図９】従来のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットの使用方法の説明（１）に供する概略図である。
【図１０】従来のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットの使用方法の説明（２）に供する概略図である。
【符号の説明】
【００２１】
1  糖鎖抗原抽出キット
2  検体採取用スワブ
3,20,30,50  気密容器
6  採取部
7  立毛表層部（表面）
10,21,32  キャップ
11,31  容器部
18,24  パッキン
51  粉状体（しごき部材）
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下図面に基づいて本発明の実施の形態を詳述する。
【００２３】
（１）糖鎖抗原抽出キットの全体構成
図１において、1は本発明による糖鎖抗原抽出キットを示し、キャップ10及び容器部11により気密空間が形成されている気密容器3と、被検者から検体を採取し、当該検体を気密容器3内にて検体抽出液Sに抽出させる検体採取用スワブ2とを備え、封入液体として亜硝酸を含む検体抽出液Sが気密容器3内に封入されている。
【００２４】
この実施の形態の場合、糖鎖抗原抽出キット1は、被検者から採取した検体を、気密容器3内の検体抽出液Sに抽出させて試液を生成した後、図示しないテストストリップの判定部をこの試液に浸し、判定部における抗原抗体反応によるライン出現の有無により、試液内にＡ群β溶血連鎖球菌抗原（検出対象物）が存在しているか否かを判定し得るようになされている。
【００２５】
ここで、糖鎖抗原抽出キット1を構成する検体採取用スワブ2は、所定長さでなる棒状の軸部5と、軸部5の先端に設けられ、例えば断面楕円状に形成された採取部6とを備えている。採取部6は、立毛体がブラシ状に密集した立毛表層部7により覆われており、例えばある液体に触れた際、当該液体が採取部6の内部にまで浸透することなく、毛細管現象や表面張力により立毛表層部7に留まり吸着し得るようになされている。
【００２６】
これにより、検体採取用スワブ2は、採取部6にて例えば被検者の炎症部分たる咽頭をぬぐうと、咽頭から得られる検体が採取部6の内部にまで浸透することなく、毛細管現象や表面張力によってその表面の立毛表層部7に吸着し得る。また、この採取部6は、立毛表層部7に検体が吸着された状態で、容器部11内の検体抽出液Sに浸されると、立毛表層部7に吸着していた検体が検体抽出液S中に放出され得るようになされている。
【００２７】
また、この検体採取用スワブ2は、当該検体採取用スワブ2を容器部11から引き出す際に、立毛表層部7をしごく等して外力を与えなくとも、容器部11の内壁に立毛表層部7を単に押し当てるだけで、毛細管現象や表面張力により立毛表層部7に留まっていた検体や検体抽出液Sが内壁に沿って流下し、立毛表層部7から検体や検体抽出液Sを除去し得るようになされている。
【００２８】
一方、気密容器3は、図２に示すように、一端に開口部13を有した瓶状の容器部11と、開口部13の周縁側壁部に螺着することで開口部13を閉塞して容器部11内の気密性を維持させるキャップ10とから構成されており、これら容器部11及びキャップ10により気密性が保持された気密空間内に所定量の検体抽出液Sが封入されている。
【００２９】
ここで、この実施の形態の場合、気密容器3に封入されている検体抽出液Sは、多糖抗原たるＡ群β溶血連鎖球菌抗原を菌体から遊離させて抽出するための亜硝酸が含まれており、例えば亜硝酸ナトリウム水溶液と、酢酸や塩酸等の酸を含む酸性溶液との２液が混合されて亜硝酸が生成され、気密性を維持した気密容器3内に封入されることで、検体抽出液S内に亜硝酸が発生している状態が維持されている。このように、この気密容器3では、キャップ10を開放させるまで気密性が維持された状態で検体抽出液Sを保持し続けることで、例えば6か月以上、好ましくは12か月以上の長期間に亘って、亜硝酸が含まれた状態を維持し、検体抽出液Sが持つＡ群β溶血連鎖球菌抗原の抽出能力を保持し得るようになされている。
【００３０】
なお、この実施の形態においては、亜硝酸を含む検体抽出液Sとして、亜硝酸ナトリウム水溶液と、酸性溶液との２液を混合して予め生成された不安定で分解し易い亜硝酸を含む検体抽出液Sを適用した場合について述べたが、本発明はこれに限らず、亜硝酸を含む検体抽出液Sであれば、特にその生成方法については限定する必要はなく、その他種々の生成方法により生成された検体抽出液Sを適用してもよい。
【００３１】
ここで、この実施の形態の場合、容器部11は、例えば透明ガラス瓶であり、胴径Dが7〜10[mm]、全高Hが10〜40[mm]からなり、1回の検査に使用する分量の検体抽出液Sが容器部11内に封入され得るようになされている。実際上、この容器部11は、ガラス材料でなることから、側壁や底部において、内部の気体が外部へ漏れ出ることなく、かつ外部の気体が内部へ侵入することもないため、開口部13をキャップ10にて密封することで、高い気密性を維持し得、亜硝酸が含まれた状態で検体抽出液Sを長期間保持し得る。
【００３２】
実際上、この容器部11は、検体採取用スワブ2の採取部6が挿通し得るように開口部13が形成されているとともに、容器部11内に検体抽出液Sが、例えば液高3[mm]以上で封入されており、開口部13から容器部11内に検体採取用スワブ2を挿入させた際、検体採取用スワブ2の採取部6の少なくとも先端領域が、検体抽出液Sに浸され得るようになされており、採取部6の先端領域に吸着した検体を検体抽出液Sに抽出し得るようになされている。
【００３３】
また、この容器部11には、開口部13の周縁側壁部に雄ねじ15が形成されており、当該雄ねじ15にキャップ10が螺着され得るようになされている。これにより、容器部11は、開口部13にパッキン18を間に挟んでキャップ10が締めつけられることで、開口部13における気密性が維持され得る。因みに、この実施の形態の場合、キャップ10は、ほぼ円盤状の天板部10aの周縁部から筒部10bが垂下しており、当該筒部10bの内周面に雌ねじ17が形成され、容器部11の雄ねじ15に対して、この雌ねじ17が螺着することで、気密性を維持した状態で容器部11の開口部13を確実に閉塞し得るようになされている。
【００３４】
なお、キャップ10の天板部10aの裏面に設けられるパッキン18は、例えばブチルゴムや、エラストマ、ＥＶＡなどの樹脂材料を成形することにより、半硬質又は軟質な可撓性部材として形成されている。また、パッキン18は、キャップ10の天板部10aの裏面外郭形状に合わせてほぼ円盤状に形成されており、キャップ10の天板部10aと、容器部11の開口部13とに当接し、開口部13を確実に密封し得るようになされている。
【００３５】
実際上、パッキン18は、気密容器3内の亜硝酸と反応せず、かつガス透過性が低く、気密容器3内で生成されるガスが非透過となる樹脂部材で形成されることが望ましく、例えば上述したブチルゴム等の他、シリコンゴムや、フッ素ゴム、多硫化ゴム、ニトリルゴム、アクリルゴム、ウレタンゴム等その他種々の樹脂材料で形成してもよい。また、パッキン18は、気密容器3内の気密性を長期間維持する必要があるため、保存期間中、経時劣化し難い樹脂部材により形成されることが望ましい。
【００３６】
ここで、パッキン18は、例えば亜硝酸から生成される一酸化窒素等のガスを非透過とし、気密容器3内の気密性を維持し得る樹脂部材で形成されることが望ましく、パッキン18を形成する樹脂部材について、一酸化窒素等よりも分子が小さい窒素ガスを基準に規定した場合、温度25℃において窒素ガス透過係数が4.8[ml・cm/cm2・sec・cmHg]以下の樹脂部材により形成されることが望ましく、より好ましくはガス透過性が低いブチルゴムの窒素ガス透過係数以下、すなわち温度25℃において窒素ガス透過係数0.247[ml・cm/cm2・sec・cmHg]以下であることが望ましい。
【００３７】
なお、窒素ガス透過係数は、樹脂部材で形成した試験片について、1[cm]の厚さで、試験片の一面側と他面側との圧力差1気圧（760[mmHg]）1[cm2]当り、1秒間に通過する25[℃]における窒素ガスの透過量を示す。因みに、上述したブチルゴムの窒素ガス透過係数は、「日本ゴム協会誌,Vol.53(1980)No.12.公開日:2008年04月16日,「ゴム技術者のための入門講座[III]わかりやすいゴムの物性(12)」, 剣菱 浩（https://www.jstage.jst.go.jp/article/gomu1944/53/12/53_12_719/_pdf）」に記載された窒素ガス透過係数を目安としている。
【００３８】
このように気密容器3は、1回の検査に使用する分量の検体抽出液Sが、気密性の高い容器部11内に入れられ、かつ開口部13にパッキン18を間に挟んでキャップ10が締めつけられることで、開口部13における気密性が維持され、検体抽出液Sが完全に外気と隔離された状態で封入され、キャップ10が取り外されるまでの間、亜硝酸を含んだ状態で検体抽出液Sを保存し得るようになされている。
【００３９】
次に、この糖鎖抗原抽出キット1を用いて、Ａ群β溶血連鎖球菌抗原の存在の有無を検査する際の一連の作業について以下説明する。この場合、被検者の炎症部分である例えば咽頭を、検体採取用スワブ2の採取部6によりぬぐって、採取部6に検体を吸着させる。この際、検体採取用スワブ2の採取部6には、検体が内部に染み込むことなく、表面にある立毛表層部7に検体が毛細管現象や表面張力により吸着する。そして、使用者は、容器部11からキャップ10を外し、気密性が維持されていた気密容器3を開封し、図３に示すように、開口部13から容器部11内に検体採取用スワブ2の採取部6を挿入し、容器部11内の検体抽出液Sに採取部6を所定時間浸す。
【００４０】
その後、検体採取用スワブ2は、容器部11から取り出されるが、その際、採取部6を従来のように、しごくことなく、立毛表層部7を容器部11の内壁に対し単に押し当てるだけで、毛細管現象や表面張力によって立毛表層部7に吸着していた検体や検体抽出液が内壁に沿って流下し、余分な検体や検体抽出液を立毛表層部7から取り除くことができ、検体抽出液S内に検体が含まれた試液を容器部11内に、より多く残すことができる。
【００４１】
ここで、容器部11内の検体抽出液Sは、気密容器3のキャップ10の開封時、亜硝酸が含まれており、検体中にＡ群β溶血連鎖球菌抗原が含まれているとき、当該亜硝酸の働きによって、検体中の多糖抗原たるＡ群β溶血連鎖球菌抗原を菌体から遊離させ、検体からＡ群β溶血連鎖球菌抗原を抽出し得るようになされている。
【００４２】
最後に、容器部11内の試液に、テストストリップの判定部を浸し、所定時間経過後、判定部における抗原抗体反応によるライン出現の有無を目視にて確認し、当該ライン出現の有無を基に、試液内にＡ群β溶血連鎖球菌抗原が存在するか否かを判定し得る。
【００４３】
（２）作用及び効果
以上の構成において、この糖鎖抗原抽出キット1では、亜硝酸を含む検体抽出液Sを、気密性を維持した気密容器3に封入するようにしたことにより、検体抽出液Sを気密容器3に封入したときから、Ａ群β溶血連鎖球菌抗原の有無の検査に検体抽出液Sを使用するときまでの長期間、不安定な亜硝酸を検体抽出液Sに含ませた状態のまま、当該検体抽出液Sを保存し続けることができる。
【００４４】
また、この糖鎖抗原抽出キット1では、予め最適な混合割合で調製して生成した亜硝酸を含む検体抽出液Sを、気密容器3に封入させておくことができるので、従来、医療現場で行われていた亜硝酸ナトリウム水溶液と酸性溶液との２液を混合して亜硝酸を含む検体抽出液をその都度生成する用時調製を省くことができ、その分、使用者の負担を軽減させることができる。
【００４５】
また、この糖鎖抗原抽出キット1では、採取部6の内部にまで検体が浸透することなく、検体が毛細管現象や表面張力により立毛表層部7に吸着する検体採取用スワブ2を用いるようにしたことから、容器部11内の検体抽出液Sに採取部6を浸すだけで、立毛表層部7に吸着した検体を検体抽出液Sに放出でき、また、採取部6を容器部11から取り出す際、立毛表層部7を容器部11の内壁（所定部位）に押し付けるだけで、立毛表層部7に吸着した検体や検体抽出液が内壁に沿って流下することから、より多くの検体抽出液Sを容器部11内に回収できる。
【００４６】
ところで、図１０Ａに示したように、従来、綿棒105により被検者から採取した検体を検体抽出液に抽出する際には、綿棒105の先端綿球部105aに染み込んだ検体を絞り出すために、指で先端綿球部105aを強く摘んで擦るしごく作業が必ず必要であったことから、このしごき作業が確実に行えるように、使用者の把持力により簡単に潰れる柔軟性のある軟質材料にて製造された抽出用チューブ100を使用せざるをえなかった。
【００４７】
このように、従来の抽出用チューブ100は、しごき作業を第一に考慮して、柔軟性のある軟質材料にて製造されていることから、検体抽出液が漏れ出ることはないものの、気密性に乏しく、仮に開口部にキャップを設けて開口部を閉塞しても、時間経過とともに、不安定な亜硝酸が気化して、生成時から約24時間後には、検体抽出液が持っていたＡ群β溶血連鎖球菌抗原の抽出能力が発揮され得ない状態となってしまう。
【００４８】
これに対してこの糖鎖抗原抽出キット1では、従来必ず行っていたしごき作業ができない硬質材料でなる気密容器3に、検体抽出液Sを封入して気密性を維持することで、検体抽出液Sに含まれる亜硝酸の気化を防止し、検体抽出液Sの持つＡ群β溶血連鎖球菌抗原の抽出能力を保持した状態で長期保存を可能にした。
【００４９】
そして、この糖鎖抗原抽出キット1では、容器部11の内壁に立毛表層部7を単に押し当てることで、立毛表層部7に吸着した検体や検体抽出液を取り除くことができる検体採取用スワブ2を用いるようにしたことで、使用者の把持力により非変形なガラス材料（硬質ガラス）等の硬質材料でなり、しごき作業が行えない容器部11を用いても、従来のしごき作業を行ったときと同じように検体を検体抽出液Sに抽出させることができ、また、試液が検体採取用スワブ2に吸われることなく容器部11内により多くの試液を残させ、従来と同様に、Ａ群β溶血連鎖球菌抗原の存在の有無を検査できる。
【００５０】
また、この実施の形態の場合、容器部11は、透明ガラス瓶のような硬質材料により成形されていることから、使用者の把持力だけでなく、仮に運搬中に何らかの原因によって外部から衝撃が与えられたとしても、容器部11自体が変形し難く、容器部11の気密性を維持した状態を保つことができ、キャップ10の開封時まで亜硝酸を検体抽出液Sに含ませ続けることができる。
【００５１】
さらに、この実施の形態の場合、容器部11は、透明ガラス瓶により成形され、容器部11内が目視確認可能であることから、検体採取用スワブ2の採取部6を検体抽出液Sに浸されている状況や、試液の液量等を目視確認しながら作業を行うことができる。
【００５２】
以上の構成によれば、この糖鎖抗原抽出キット1では、気密性を維持した気密容器3に、予め調製した亜硝酸を含む検体抽出液Sを封入するようにしたことで、従来不可能であった亜硝酸を含ませた状態での検体抽出液Sの長期保存を可能とし、その結果、医療現場での用時調製を不要にできるとともに、誤った調製をも防止でき、さらに気密容器3に1液だけが封入した簡易な構成となる分、製造コストも低減できる。
【００５３】
（３）検証試験
（３-１）検体抽出液の保存性について
次に、市販のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットを７種類用意し、これら７種類のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットにて用いる各検体抽出液の抗原抽出能力がどの程度持続するかについて調べた。ここでは、Ａ群β溶血連鎖球菌抗原キットとして、クリアビューストレップ（株式会社三和化学研究所製）、BinaxNow（アリーア メディカル株式会社製）、エルナス（株式会社テイエフビー製）、イムノカード（株式会社テイエフビー製）、スタットチェックストレップＡ（株式会社ニチレイバイオサイエンス製）、ラピッドテスタ（積水メディカル株式会社製）、クイックビュー（DSファーマバイオメディカル株式会社製）の７種類を用いた。
【００５４】
これら７種類のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットは、いずれもイムノクロマトグラフィーを原理としており、亜硝酸ナトリウムを含む溶液と、酢酸等の酸性溶液とを混合して検体抽出液を用時調製し、被検者の咽頭を綿棒で擦過して採取した検体を検体抽出液に入れ、例えば1分間抽出することで多糖抗原を菌体より遊離して試液を調製するものである。
【００５５】
この場合、これら７種類のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットについて、能書の用量用法に従って各容器に２種の薬液を混合して亜硝酸を含んだ検体抽出液をそれぞれ生成し、直ちに5×107個/mlのＡ群β溶血連鎖球菌（溶連菌：StreptococcusA,Micro Detect,Inc.）を10[μL]、各容器に添加し、1〜2分間放置後、各Ａ群β溶血連鎖球菌抗原キットの用量用法に従い、イムノクロマト反応を開始した。そして、各Ａ群β溶血連鎖球菌抗原キットの能書に指定された反応時間終了後に、イムノクロマトリーダーC10066（浜松ホトニクス株式会社製）にてライン強度を測定したところ、図４に示すような結果（図４中「0」と表記）が得られた。
【００５６】
また、これとは別に、これら７種類のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットについて、能書の用量用法に従って各容器に２種の薬液を混合して亜硝酸を含んだ検体抽出液をそれぞれ生成し、22時間（一日）放置後、5×107個/mlのＡ群β溶血連鎖球菌を10[μL]、各容器に添加し、1〜2分間放置後、各Ａ群β溶血連鎖球菌抗原キットの用量用法に従い、イムノクロマト反応を開始した。そして、各Ａ群β溶血連鎖球菌抗原キットの能書に指定された反応時間終了後に、イムノクロマトリーダーC10066（浜松フォトニクス）にてライン強度を測定したところ、図４に示すような結果（図４中「22」と表記）が得られた。
【００５７】
図４の結果から、全てのＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットで、検体抽出液によるＡ群β溶血連鎖球菌抗原を抽出する抽出能力が時間経過とともに失われてしまっていることが確認できた。このために、従来のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットでは、亜硝酸ナトリウムと酸とを使用直前に混合しなくてはいけないことが分かる。
【００５８】
次に、下記の表１に示す７種類の容器を用いて、亜硝酸ナトリウムと酢酸とを添加して亜硝酸を含んだ検体抽出液を生成し、これら容器毎にそれぞれ検体抽出液の保存実験を行った。
【００５９】
【表１】
2013183621.tif 000003
【００６０】
具体的に、この実験では、使用容器として、LDポリエチレンチューブ（株式会社シン・コーポレイション製）、エッペンセーフロックマイクロテストチューブ（エッペンドルフ株式会社製）、TP311（PET（ポリエチレンテレフタレート（PolyEthylene Terephthalate））チューブ、アズワン株式会社製）、アシストチューブ（株式会社アシスト製）、ガラス瓶（日電理化硝子株式会社製、パッキンS-08用（ブチルゴム）、キャップ S-08用（黒）（フェノール樹脂)）、ガラスバイアル１（オートサンプラー用バイアル+AGキャップ、パッキン（テフロン（登録商標）／ラバーの2層）：アズワン製）、ガラスバイアル２（オートサンプラー用バイアル+AGキャップ、パッキン（テフロン／シリコンの2層）：アズワン製）を用いた。
【００６１】
また、この実験では、ニトロセルロースメンブラン(MilliPore)に、抗ストレップＡウサギポリクローナル抗体を1[μL/cm]の割合でライン状に塗布をしたテストメンプランと、抗ストレップＡウサギポリクローナル抗体を金コロイドと結合させた標識金コロイドを、コンジュゲートパットに染み込ませて乾燥させた標識物コンジュゲートパットとを組み合わせて、イムノクロマト測定用ストリップを作製した。
【００６２】
そして、各使用容器にそれぞれ検体抽出液を入れ、キャップをして使用容器内を外気から隔離した状態にし、それぞれ検体抽出液がどの程度の期間まで抗原の抽出能力を有しているか否かを、イムノクロマト測定用ストリップを用いた抗原抗体反応を基に評価を行ったところ、上記の表１のような結果が得らえた。
【００６３】
なお、表１では、テストラインを目視で検出し陽性判定したときを「+」で表し、テストラインの検出がぎりぎり見える程度の弱いライン強度の陽性判定を「 + 」で表し、テストラインが検出できない陰性判定を「-」で表している。
【００６４】
表１から、各使用容器によって、検体抽出液の抽出能力の有効な保安性の期間がそれぞれ異なることが分かった。具体的に、表１から、ポリエチレン、PET、ポリスチレンを主たる材料とした市販の使用容器は、検体抽出液の抽出能力が2か月と持たず、その反応性を維持できないのに対して、ガラスを素材とした使用容器を用いることで、検体抽出液の抽出能力が12か月以上に亘って長く維持されることが確認できた。
【００６５】
因みに、上記実験から、検体抽出液の抽出能力を維持するためには、ガラス材料を用いた容器部11が好ましいことが確認できたが、本発明はこれに限らず、例えばポリエチレンや、PET、ポリスチレンのような合成樹脂材料であっても、容器部の側壁及び底部を肉厚とし気密性を向上させたり、合成樹脂材を高密度で成形して気密性を向上させたり、或いは気密性シートを容器部の内壁等に貼着して容器部内の気密性を向上させるようにしてよく、また気密性の高い金属材料で容器部を形成するようにしてもよい。
【００６６】
すなわち、気密容器3としては、キャップ10の開封まで容器部11内の気密性を維持して、検体抽出液Sが持つ検出対象物の抽出能力を長期間に亘って保持できれば、この他種々の材料を用いて容器部を成形したり、種々の構造でなる容器部を適用してもよい。そして、これら種々の気密容器としては、気密性を維持した状態で検体抽出液Sを保存し続けることで、検体抽出液Sが持つ検出対象物の抽出能力を、少なくとも6か月、好ましくは12か月以上持続させることができることが好ましい。
【００６７】
また、ブチルゴムのパッキンを用いた表１のガラス瓶（日電理化硝子株式会社製、パッキンS-08用（ブチルゴム）、キャップ S-08用（黒）（フェノール樹脂)）に検体抽出液Sを封入して気密状態を維持したまま6か月間保存し、6か月後にキャップを開封して、容器部内の検体抽出液Sに上述したイムノクロマト測定用ストリップを漬けた後、イムノクロマトリーダーC10066-10（浜松ホトニクス株式会社製）によりテストラインのライン強度について数値を調べた。
【００６８】
また、テフロン／ラバー（天然ゴム）の2層構造のパッキンを用いた表１に示すガラスバイアル１と、テフロン／シリコンの2層構造のパッキンを用いた表１に示すガラスバイアル２についても、上述と同様に、内部に検体抽出液Sを封入して気密状態を維持したまま6か月間保存した後、キャップを開封して、容器部内の検体抽出液Sに上述したイムノクロマト測定用ストリップを漬けた後、イムノクロマトリーダーC10066-10（浜松ホトニクス株式会社製）によりテストラインのライン強度について数値を調べた。
【００６９】
その結果、ブチルゴムのパッキンを用いたガラス瓶では、6か月後のライン強度保持率が約78％であり、一方、テフロン／ラバーの2層構造のパッキンを用いたガラスバイアル１では、6か月後のライン強度保持率が約15％であった。また、テフロン／シリコンの2層構造のパッキンを用いたガラスバイアル２では、6か月後のライン強度保持率が約9％であった。
【００７０】
このことから、ブチルゴムのパッキンを用いたガラス瓶では、他のガラスバイアル１やガラスバイアル２よりも、内部の気密性が一段と維持され、検体抽出液Sが持つ検出対象物の抽出能力を高い状態のまま6か月持続させることができ、密封から6か月後でも臨床試験に使用可能なほど抽出能力を維持できることが確認できた。このことは、ガラス瓶と、ガラスバイアル１,２とではキャップ構造の違いはあるものの、気密容器3内の気密性を維持できるか否かについては、主として容器部の開口部を覆うパッキンの材質による違いも大きく、気密容器3内の気密性を維持するためにはブチルゴムのパッキンを用いることが望ましいことが確認できた。よって、検体抽出液Sが持つ検出対象物の抽出能力を、長期間に亘って高い状態のまま維持するためには、ブチルゴムの窒素ガス透過係数（25[℃]で0.247[ml・cm/cm2・sec・cmHg]）以下の樹脂部材からなるパッキンを用いることが最も望ましいことが確認できた。
【００７１】
（３-２）検体採取用スワブについて
次に、４種類の検体採取用スワブを用意し、各検体採取用スワブの検体の回収率について検証を行った。具体的にこの実験では、上述した実施の形態にて説明した立毛表層部7を備える検体採取用スワブ2であるフログドスワブと、表面に多孔質を有したスポンジからなる採取部を備えたスポンジスワブと、先端部がループ状に折り曲げられＯ状に形成されたループと、一般的に綿棒と呼ばれる通常のレイヨンスワブの４種類を用意した。
【００７２】
ここで、コントロールは、蒸留水を0.7[ml]入れたガラスバイアル（外径14[mm]、全高30[mm]）に、100[mg/ml]のBSA水溶液を10[μL]加えて、その吸光度（OD280[nm]）を３回測定し、BSAの吸光係数を0.584（0.584＝1mgBSA/ml）として、その数字から濃度を求め、ガラスバイアル当たりの量に換算し、それを100[％]回収とした。
【００７３】
そして、これら４種類の各検体採取用スワブに、それぞれ100[mg/ml]のBSA水溶液を10[μL]吸わせて、0.7[ml]の蒸留水を入れたガラスバイアルの内壁に、BSA水溶液を吸わせた先端部を10回押し当てるように回してBSAを抽出回収し、吸光度を測定した。なお、Blankとして検体採取用スワブのみで抽出操作を行い、得られた数字を各検体採取用スワブからのBSA回収操作で得られた値から引き補正した。得られた吸光度から、濃度を換算し、回収量を算出し回収率を求めたところ、下記の表２のような結果が得られた。
【００７４】
【表２】
2013183621.tif 000004
【００７５】
表２から、従来のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットに用いられているレイヨンスワブ（綿棒）は、先端部分を単に壁に押し当てるだけでは回収率が7.2[％]と極めて低くなってしまい、先端部分をしごき、回収率を上げる必要があることが分かる。ここで、本発明による糖鎖抗原抽出キット1を構成する気密容器3は、例えばガラス材料等の硬質材料でなることから、使用者の把持力により変形させることが困難であり、容器部11自体を変形させて容器部11内のレイヨンスワブの先端部分をしごくことができない。従って、回収率を高めるために先端部をしごく作業が必要となるレイヨンスワブは、上述した実施の形態による糖鎖抗原抽出キット1に用いることは好ましくない。
【００７６】
これに対して、フログドスワブ、スポンジスワブ及びループの3種類の検体採取用スワブは、先端部分を単に内壁に押し当てるだけでも、BSAの回収率が非常に高いことから、従来のような先端部分をしごく作業が不要となる。従って、上述した実施の形態による糖鎖抗原抽出キット1では、採取部6の表面に立毛表層部7が設けられた検体採取用スワブ2（フログトスワブ）だけでなく、スポンジスワブやループを用いても、気密容器3内において検体抽出液S内に検体を抽出させて、余分な検体抽出液S等が検体採取用スワブに吸われることなく、より多くの試液を生成できる。
【００７７】
（３-３）容器部内の検体抽出液の液量について
次に、容器部11内に封入する検体抽出液Sの液量について検証する。ここでは、容器部11の内径が異なる11種類の気密容器3を用意し、各容器部11について、容器部11内の液高と液量との関係について調べたところ、下記の表３のような結果が得られた。
【００７８】
【表３】
2013183621.tif 000005
【００７９】
ここで、糖鎖抗原抽出キット1において、検体採取用スワブ2の採取部6にて採取した検体を検体抽出液Sに抽出させるためには、検体採取用スワブ2の採取部6が検体抽出液Sに浸る必要がある。この糖鎖抗原抽出キット1にて用いる検体採取用スワブ2には、採取部6の先端から約3[mm]の付近に採取部6の最大の膨らみ部分が形成されていると仮定する。この場合、採取部6の最大の膨らみ部分を検体抽出液Sに浸すことを考えると、検体抽出液Sの液高としては3[mm]以上とすることが好ましい。
【００８０】
そこで、用意した11種類の容器部11毎にそれぞれ検体抽出液Sの液高が3[mm]以上となる液量を調べた結果、表３に示すような結果が得られ、表３から各容器部11を用いる際に好ましい液量を決定することができる。なお、従来から用いられていた柔らかい抽出用チューブ100（図９Ａ）であれば、指で抽出用チューブを潰すことで全体に検体抽出液Sを行き渡らせて絞ることができるが、本発明によるガラス材料からなる容器部11では、容器部11を潰すことが困難であるものの、容器部11内に液高3[mm]の検体抽出液Sがあれば、容器部11自体を斜めに傾けることで、検体採取用スワブ2の採取部6を検体抽出液Sにほぼ浸して検体を抽出することができる。
【００８１】
ここで、ガラス材料でなる容器部11では、検体抽出液Sに浸した後に検体採取用スワブ2が取り出される際、検体採取用スワブ2の採取部6に吸着し検体抽出液Sを効率良く絞ることができない。その一方で、本発明の糖鎖抗原抽出キット1を構成する検体採取用スワブ2は、採取部6の表面に立毛表層部7が形成されており、採取部6にて検体抽出液Sを多く吸うことなく、表面の立毛表層部7にて毛細管現象や表面張力で検体抽出液Sを保持するだけであることから、その分、採取部6にて保持される検体抽出液Sの液量が約50[μL]程度と少なくなる。その結果、容器部11には、1回の検査に使用する検体抽出液Sとして、50〜200[μL/test]の液量の検体抽出液Sが封入されていればよい。
【００８２】
なお、従来のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットにて用いるレイヨンスワブたる綿棒105（図９Ｂ）は、吸収量が200[μL]と大きいため、抽出用チューブ100に最低350[μL]の液量でなる検体抽出液を貯留させる必要がある。また、この綿棒105は、長い間、抽出したり、抽出用チューブ100の側壁に強く押し付ける等して揉みほぐすと、先端綿球部105aのレイヨンの巻が緩み、形が崩れ膨れるため、より含水量が増える傾向がある。その場合には、検体抽出液の液量をさらに増やしておく必要がある。
【００８３】
これに対して、本発明の糖鎖抗原抽出キット1では、上述したように、検体採取用スワブ2の採取部6にて保持される液量が約50[μL]程度と少ないことから、1回の検査に使用する検体抽出液Sとして、50〜200[μL/test]の検体抽出液Sが気密容器に封入されていればよく、従来のＡ群β溶血連鎖球菌抗原キットよりも検体抽出液Sの液量を格段的に減らすことができる。
【００８４】
なお、上記の表３に示す内径は、容器部11の底部の内径を示す。容器部11の開口部13は底部よりも小さい場合が多いが、これに限らず、検体採取用スワブの採取部の大きさに合わせて、開口部13が採取部6の挿入可能な口径に選定すればよい。例えば検体採取用スワブ2の先端にある採取部6の最大径が5[mm]程度ある場合には、容器部11の開口部13の口径が5[mm]以上必要となり、より好ましくは7[mm]以上の口径が好ましい。
【００８５】
（４）他の実施の形態
（４-１）他の実施の形態による気密容器の構成
なお、本発明は、上述した実施の形態に限定されるものではなく、本発明の要旨の範囲内で種々の変形実施が可能であり、気密性を維持し得れば、種々の構成の気密容器を適用してもよく、例えば、図１との対応部分に同一符号を付して示す図５のように、キャップ21の天板部21aに貫通孔22を設け、当該貫通孔22をパッキン24にて閉塞した気密容器20を適用してもよい。この場合でも、気密容器20では、キャップ21を開放させるまで気密性を維持することで、例えば6か月以上、好ましくは12か月以上の長期間に亘って、検体抽出液Sが持つＡ群β溶血連鎖球菌抗原の抽出能力を保持し得るようになされている。
【００８６】
実際上、この気密容器20は、図２との対応部分に同一符号を付して示す図６のように、キャップ21の天板部21aの中央領域に穿設された貫通孔22を塞ぐようにして、当該天板部21aの裏面にパッキン24が配置され得る。この場合、パッキン24は、天板部21aの裏面に合わせた外郭形状でなり、所定の厚みがある円盤状に形成されており、キャップ21の貫通孔22の気密性を維持し得るようになされている。
【００８７】
因みに、この実施の形態の場合でも、上述した実施の形態と同様の樹脂部材によってパッキン24を形成することが望ましく、好ましくは温度25℃において窒素ガス透過係数が4.8[ml・cm/cm2・sec・cmHg]以下、より好ましくは気密性の高いブチルゴムの窒素ガス透過係数（25[℃]で0.247[ml・cm/cm2・sec・cmHg]）以下の樹脂部材によってパッキン24を形成することが望ましい。
【００８８】
なお、このキャップは、天板部21aの周縁部から筒部21bが垂下しており、当該筒部21bの内周面に雌ねじ17が形成され、雌ねじ17が容器部11の雄ねじ15と螺着し得る。この気密容器20では、キャップ21を外すことなく、例えば検体採取用スワブ2（図１）の軸部5の他方先端などを用いて、キャップ21の貫通孔22から露出したパッキン24を破り、当該貫通孔22から検体採取用スワブ2の採取部6を容器部11内に挿入することもできる。
【００８９】
また、他の実施の形態による気密容器としては、図７に示すように、容器部31の開口部13の周縁側壁部にキャップ32が螺着されることなく、単に覆うようにして固着され、容器部31内の気密性が維持されている気密容器30でもよい。
【００９０】
この場合、キャップ32は、容器部31の開口部13に嵌合される栓体34と、栓体34が嵌合された開口部13の上部及び周辺側壁部全体を覆うプロテクター35と、プロテクター35の上部にて当該プロテクター35と止着され、プロテクター35及び栓体34を覆うカバー部36とで構成されている。
【００９１】
実際上、この実施の形態の場合、栓体34は、例えばブチルゴムや、エラストマ、ＥＶＡなどの樹脂材料を成形することにより、半硬質又は軟質な可撓性部材として形成され、開口部13に嵌め込まれることで、容器部31の気密性を維持し得る。なお、この実施の形態の場合、栓体34は、円筒部が開口部13の内壁に沿って密着するようにして嵌合し、上部にて開口部13全体を覆い、気密性を維持し得るようになされている。
【００９２】
栓体34を覆うプロテクター35は、アルミ材などでなり、開口部13の周縁側壁部に形成された、かぶら部31aから栓体34までを全て覆い、開口部13と栓体34との密封性を向上し得るようになされている。この実施の形態の場合、プロテクター35は、裾部が巻締機により巻締められて、傾斜したかぶら部31aに沿って密着するように形成され、密封性を一段と向上し得るようになされている。
【００９３】
カバー部36は、天板部36aの裏面に設けた突起部42と、裏面との間に破断部41が形成されており、プロテクター35への装着時、当該プロテクター35の開口縁部39と、破断部41とが一体成型されている。すなわち、カバー部36は、プロテクター35への装着時、プロテクター35から離されるような上方への外力が加わると、プロテクター35の開口縁部39に一体成型された破断部41が破断して開口縁部39から切り離され、プロテクター35から外されるようになされている。
【００９４】
このような気密容器30では、カバー部36を外した後、プロテクター35及び栓体34を外すことなく、例えば検体採取用スワブ2の軸部5の他方先端などで、プロテクター35から露出した栓体34の中央領域を破り、検体採取用スワブ2の採取部6を容器部31内に挿入することもできる。
【００９５】
そして、このような気密容器30であっても、キャップ32を開放させるまで容器部31内の気密性を維持し得、例えば6か月以上、好ましくは12か月以上の長期間に亘って、検体抽出液Sが持つＡ群β溶血連鎖球菌抗原の抽出能力を保持し得るようになされている。
【００９６】
（４-２）他の実施の形態による粉状体を入れた気密容器の構成
上述した実施の形態においては、気密容器3内に検体抽出液Sだけを封入させるようにした場合について述べたが、本発明はこれに限らず、図１との対応部分に同一符号を付して示す図８のように、検体抽出液Sとともにガラスビーズ等の粉状体（しごき部材）51を気密容器50内に封入させるようにしてもよい。このように、検体抽出液Sとともに粉状体51を気密容器50内に入れた場合には、検体採取用スワブ2（図１）の採取部6を容器部11内の検体抽出液Sに浸した際、当該採取部6を粉状体51中に埋もらせて擦ることができる。
【００９７】
これにより、粉状体51が入れられた気密容器50では、立毛表層部7を採取部6に設けた検体採取用スワブ2だけでなく、通常用いられるレイヨンスワブたる綿棒105（図９Ｂ）であっても、綿棒105の先端綿球部105aを容器部11から引き抜く際に、容器部11の外側から先端綿球部105aを絞ることができなくとも、当該先端綿球部105aを粉状体51間に埋め込む等して擦ることにより、その衝撃によって先端綿球部105aに浸透した検体を検体抽出液に抽出させることができる。すなわち、綿棒105でも、気密容器50内の粉状体51（所定部位）に採取部6を押し付けることで採取部6から検体抽出液に検体を抽出させることができる。
【００９８】
ここで、このような気密容器50の容器部11内に設けられるしごき部材としては、上述したガラスビーズの他、プラスチックビーズ、アルミナ、砂などの鉱物ビーズ、セラミックビーズ、プラスティックなどその他種々の粉状体を適用してもよい。また、他のしごき部材としては、例えば円筒状パッキンを容器部11の開口部13に設け、円筒状パッキンの筒部に検体採取用スワブの先端部分を出し入れすることで、容器部11内にて筒部の先端に先端部分を当ててしごくなど、種々のしごき部材を適用してもよく、要は検体のついた検体採取用スワブの先端部分が当たるしごき部材を容器部11内に設け、当該しごき部材により検体採取用スワブの先端部分をしごいて、検体を効率よく検体抽出液に抽出することができればよい。
【００９９】
因みに、粉状体としては、検体採取用スワブの先端部分を検体抽出液S内にて粉状体51と接触させてしごいた後、検体採取用スワブを容器部内から引き出す際、表面張力により検体採取用スワブの先端部分に粉状体が付着しない大きさの粉状体が好ましい。
【０１００】
次に、複数種類の粉状体を用意して、容器部に入れた各粉状体によって、綿棒たる咽頭用レイヨンスワブに吸わせたBSAを、どの程度回収できるかについて検証を行った。ここでは、下記の表４に示すように、粉状体を容器部内に入れなかった場合（「BEADSなし」）の他、直径4[mm]のガラスビーズ（「BEADS4」）と、直径3[mm]のガラスビーズ（「BEADS3」）と、直径2[mm]のガラスビーズ（「BEADS2」）と、直径1[mm]のガラスビーズ（「BEADS1」）と、直径0.8[mm]のガラスビーズ（「BEADS0.8」）と、大きさが1[mm]のセラミック粒子（「セラミック」）の6種類の硬質な粉状体を用意した。
【０１０１】
【表４】
2013183621.tif 000006
【０１０２】
なお、「BEADS4」〜「BEADS0.8」の各ガラスビーズは、それぞれアズワン株式会社から購入した。コントロール（「Control」）は、ガラスバイアル（外径14[mm]、全高30[mm]）に蒸留水を0.6[ml]入れたものに、10[mg/ml]のBSA水溶液を100[μL]加えて、その吸光度（OD280nm）を3回測定した。BSAの吸光係数を0.584として、その数字から濃度を求め、ガラスバイアル（容器部）あたりの量に換算しそれを100[％]回収とした。
【０１０３】
BEADSなしでは、先ず初めに、10[mg/ml]のBSA水溶液を、咽頭用レイヨンスワブ（平和メディック）に100[μL]吸わせた。次いで、蒸留水が0.6[ml]入ったガラスビーズの入っていないガラスバイアルの内壁に、咽頭用レイヨンスワブを10回押し当てるように回し、咽頭用レイヨンスワブからBSAを蒸留水に抽出した。
【０１０４】
綿BSAを含まない検体採取用スワブで、10回抽出操作を行い、Blankとして回収で得られた吸光度の値から引いて補正を行った。また、「BEADS4」〜「BEADS0.8」、「セラミック」についても同様の操作を行い、回収率を換算し求めたところ、表４に示すような結果が得られた。
【０１０５】
表４から、各粒径のガラスビーズと、セラミック粒子とを用いた結果、ガラスバイアル（容器部）に何も入れないでBSAの回収作業を行うと、BSAの回収率が10[％]以下であるのに対し、ガラスビーズやセラミック粒子等の不反応の抵抗物をガラスバイアルに入れたときには、BSAの回収率が79[％]以上となり、明らかに高い回収効率を示した。このような結果から、不反応性の抵抗物として各種成形品を容器部内に入れることによって、検体採取用スワブとして、従来から用いていた検体を吸収してしまうレイヨンスワブを用いた場合であっても、レイヨンスワブを成形品によりしごくことで、当該レイヨンスワブに吸収された検体を効率よく抽出できることが確認できた。
【０１０６】
なお、上述した実施の形態においては、検出対象物としてＡ群β溶血連鎖球菌抗原を適用した場合について述べた、本発明はこれに限らず、種々の抗原を検出対象物として適用してもよい。また、上述した実施の形態による検体キット1おいては、毛細管現象や表面張力により立毛表層部7に検体が留まり吸着し得る検体採取用スワブ2を適用した場合について述べたが、本発明はこれに限らず、少なくとも毛細管現象又は表面張力のいずれか一方により採取部の表面に検体が付着し得る検体採取用スワブを適用してもよい。
【０１０７】
また、上述した実施の形態においては、気密容器3と検体採取用スワブ2とを備えた糖鎖抗原抽出キット1について説明したが、本発明はこれに限らず、気密容器3と検体採取用スワブ2とを備えた糖鎖抗原抽出キット1に、Ａ群β溶血連鎖球菌を検出するためのイムノクロマト法用テストストリップを加えた検出キットとしてもよい。
【０１０８】
さらに、上述した実施の形態においては、容器部3の開口部にパッキン18を間に挟んでキャップ10を締めつけることで、開口部における気密性を維持する気密容器3を適用した場合について述べたが、本発明はこれに限らず、開口部における気密性が維持できれば、例えばパッキンを介さずに容器部の開口部に直接キャップを締めつける気密容器を適用してもよい。なお、キャップ10は、フェノール樹脂等の硬質な合成樹脂部材で形成することが望ましいが、硬質ガラス等のガラス材料や、その他種々の材料で形成してもよい。また、キャップは、容器部内の気密性が維持できればその形状についても種々の形状としても良く、例えばシート状に形成し、容器部の開口部に貼着する構成としてもよい。
【０１０９】
さらに、上述した実施の形態においては、容器部3の開口部を閉塞し、容器部3内の気密性を維持させるキャップ10を、容器部3の開口部に着脱自在に設けるようにした場合について述べたが、本発明はこれに限らず、気密容器内の気密性を維持できれば、例えば、容器部よりも胴体径が小さい頭部が、頭部および容器部よりも胴体径が小さい絞り部を介して容器部の開口部に一体成形されたアンプル型の気密容器を適用しても良い。
【０１１０】
このように、頭部が絞り部を介して容器部に一体形成されたアンプル型の気密容器でも、容器部内の気密性を維持し得、従来不可能であった亜硝酸を含ませた状態での検体抽出液の長期保存が可能となり、上述した実施の形態と同様の効果を得ることができる。なお、このような気密容器では、使用時、頭部に外力を与えることで絞り部を破損させて、容器部の開口部を外部に開放し得、容器部内の検体抽出液に検体採取用スワブの先端を浸漬させることができる。因みに、このような頭部が絞り部を介して容器部に一体形成されたアンプル型の気密容器としては、例えば硬質ガラス等のガラス材料により一体形成されることが望ましいが、容器部内の気密性を維持できれば、その他種々の材料により一体形成してもよい。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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