(57)【要約】  本発明は、肺高血圧症の治療剤又は予防剤の提供を目的とする。本発明は、一般式（Ｉ）で表される２−イミノピロリジン誘導体のようなＰＡＲ１阻害作用を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物を含有する、肺高血圧症の治療剤又は予防剤に関する。2014046125.tif 000015
2014046125.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロテアーゼ活性化受容体１の機能を阻害する作用を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物を含有する、肺高血圧症の治療剤又は予防剤。
【請求項２】
プロテアーゼ活性化受容体１の機能を阻害する作用を有する化合物が、PAR1拮抗物質である、請求項１記載の治療剤又は予防剤。
【請求項３】
プロテアーゼ活性化受容体１の機能を阻害する作用を有する化合物が、２−イミノピロリジン誘導体である、請求項１又は２記載の治療剤又は予防剤。
【請求項４】
２−イミノピロリジン誘導体を含有する肺高血圧症の治療剤又は予防剤であって、
前記２−イミノピロリジン誘導体が、一般式（Ｉ）
【化９】
2014046125.tif 000011
[式（Ｉ）中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立し、同一又は相異なって、水素原子、メトキシ基又はエトキシ基を；Ｘ1は水素原子又はハロゲン原子を；Ａｒ2は、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、ｔ−ブチル基、モルホリニル基、又は下記式（ＩＩ）で表される置換基から選ばれる１又は２以上の置換基で置換されていてもよいフェニル基を示し、
【化１０】
2014046125.tif 000012
式（ＩＩ）中、Ｗは−ＣＨ−又は窒素原子を；Ａ１は−ＣＨ２−又は単結合を；Ｒ３は水素原子又は−ＯＲ５ａを；Ｘ２は−ＣＨ２−、酸素原子、単結合又はカルボニル基を；Ｙは単結合又はＣ１〜Ｃ４アルキレン基を；Ｒ４は水素原子、−ＯＲ６ａ、シアノ基又は−ＣＯＯＲ７を；Ｒ５ａ、Ｒ６ａ及びＲ７は、それぞれ独立し、同一又は相異なって、水素原子又はC１〜C４アルキル基を示す。]
で表される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、またはそれらの水和物である、前記治療剤又は予防剤。
【請求項５】
前記Ｒ１及びＲ２がエトキシ基であり、かつ、前記Ｘ1がフッ素原子である、請求項４記載の治療剤又は予防剤。
【請求項６】
２−イミノピロリジン誘導体を含有する肺高血圧症の治療剤又は予防剤であって、
前記２−イミノピロリジン誘導体が、式（ＩＩＩ）〜（ＩＸ）で表される化合物からなる群から選ばれる少なくとも１つ、もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物である、前記治療剤又は予防剤。
【化１１】
2014046125.tif 000013
【請求項７】
２−イミノピロリジン誘導体を含有する肺高血圧症の治療剤又は予防剤であって、
前記２−イミノピロリジン誘導体が、式（ＩＩＩ）で表される化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物である、前記治療剤又は予防剤。
【化１２】
2014046125.tif 000014
【請求項８】
請求項４〜７のいずれか一項に記載の２−イミノピロリジン誘導体を含む、肺高血圧症の治療用又は予防用キット。
【請求項９】
請求項４〜７のいずれか一項に記載の２−イミノピロリジン誘導体の有効量を対象に投与することを含む、肺高血圧症の治療又は予防のための方法。
【請求項１０】
肺高血圧症の治療剤又は予防剤のための、請求項４〜７のいずれか一項に記載の２−イミノピロリジン誘導体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肺高血圧症の予防剤及び治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
肺高血圧症（pulmonary hypertension；ＰＨ）は、進行性の肺血管抵抗および肺動脈圧の上昇を特徴とする慢性かつ進行性の難病であり、従来の治療では５年間の生存率が３０％といわれている。肺高血圧症の3大病理所見は、（１）血管収縮、（２）血管リモデリング、（３）血栓形成であり、これらは血管抵抗性の上昇に関与すると考えられている。血液抗凝固療法が、肺高血圧患者の予後を改善するという報告もあるが（非特許文献１）、肺高血圧症における血栓形成の役割は未だ解明されていない。【０００３】
肺高血圧を治療するために、過去10余年の間に、プロスタサイクリン製剤、ホスホジエステラーゼ阻害剤、エンドセリン受容体拮抗薬が開発され、予後改善に大きな貢献を果たしてきた。しかしながら、肺高血圧症は未だ予後不良の疾患であり、新たな視点からの病態解明と治療法の開発が急務である。【０００４】
ところで、プロテアーゼ活性化受容体(ＰＡＲ)は、Ｇタンパク質共役受容体の１ファミリーを形成し、トロンビン等の血液凝固に関与するプロテアーゼによる種々の細胞作用を仲介する。トロンビンは、ＰＡＲの４つのサブタイプの中、主にＰＡＲ１を活性化することによって血管平滑筋の収縮、遊走、および増殖を誘導する。体循環系の正常な動脈では、ＰＡＲは平滑筋においてほとんど発現せず、トロンビンによる収縮効果はほぼ観察されないことが知られている。一方、本発明者らは、病変部血管では、動脈平滑筋においてＰＡＲの発現が誘導され、トロンビンに対する反応性が誘導、あるいは、増強されることを明らかにした（非特許文献２、図１）。さらに、本発明者らは、肺動脈平滑筋においてＲＯＣＫ（Rho-associated kinase）の活性上昇とＲＯＳ（reactive oxygen species）の産生が確認されることも見出した（非特許文献３および４、図２）。【０００５】
しかしながら、トロンビンおよびＰＡＲ１と、肺高血圧症の発症、病変形成および病理との関係については未だ解明されておらず、また、トロンビン及びＰＡＲ１に関連するメカニズムを介した肺高血圧症の治療薬の研究も行われていなかった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Johnson SR, Mehta S, Granton JT, Eur Respir J, 28: 999-1004, 2006.
【非特許文献２】Hirano K, Arterioscler Thromb Vasc Biol, 27: 27-36, 2007.
【非特許文献３】Maki J, Hirano M, Hoka S, Kanaide H, Hirano K, Br J Pharmacol, 159: 919-927, 2010.
【非特許文献４】Maki J, Hirano M, Hoka S, Kanaide H, Hirano K, Am J Respir Crit Care Med, 182: 1435-1444, 2010.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、肺高血圧症に対する治療剤または予防剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決するために鋭意研究した結果、ＰＡＲ１が肺高血圧症の新たな治療ターゲットとして有効であること、およびＰＡＲ１を阻害することにより、肺高血圧症を予防または治療することが可能であることを明らかにし、本発明を完成させた。【０００９】
すなわち、本発明は以下に関する。
[１]  プロテアーゼ活性化受容体１（PAR1）の機能を阻害する作用を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物を含有する、肺高血圧症の治療剤又は予防剤。
[２]  プロテアーゼ活性化受容体１の機能を阻害する作用を有する化合物が、PAR1拮抗物質である、上記[１]記載の治療剤又は予防剤。
[３]  プロテアーゼ活性化受容体１の機能を阻害する作用を有する化合物が、２−イミノピロリジン誘導体である、上記[１]又は[２]記載の治療剤又は予防剤。
[４]  ２−イミノピロリジン誘導体を含有する肺高血圧症の治療剤又は予防剤であって、
前記２−イミノピロリジン誘導体が、一般式（Ｉ）
【化１】
2014046125.tif 000003
[式（Ｉ）中、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立し、同一又は相異なって、水素原子、メトキシ基又はエトキシ基を；Ｘ1は水素原子又はハロゲン原子を；Ａｒ2は、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、ｔ−ブチル基、モルホリニル基、又は下記式（ＩＩ）で表される置換基から選ばれる１又は２以上の置換基で置換されていてもよいフェニル基を示し、
【化２】
2014046125.tif 000004
式（ＩＩ）中、Ｗは−ＣＨ−又は窒素原子を；Ａ１は−ＣＨ２−又は単結合を；Ｒ３は水素原子又は−ＯＲ５ａを；Ｘ２は−ＣＨ２−、酸素原子、単結合又はカルボニル基を；Ｙは単結合又はＣ１〜Ｃ４アルキレン基を；Ｒ４は水素原子、−ＯＲ６ａ、シアノ基又は−ＣＯＯＲ７を；Ｒ５ａ、Ｒ６ａ及びＲ７は、それぞれ独立し、同一又は相異なって、水素原子又はC１〜C４アルキル基を示す。]
で表される化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、またはそれらの水和物である、前記治療剤又は予防剤。
[５]  前記Ｒ１及びＲ２がエトキシ基であり、かつ、前記Ｘ1がフッ素原子である、上記[４]記載の治療剤又は予防剤。
[６]  ２−イミノピロリジン誘導体を含有する肺高血圧症の治療剤又は予防剤であって、
前記２−イミノピロリジン誘導体が、式（ＩＩＩ）〜（ＩＸ）で表される化合物からなる群から選ばれる少なくとも１つ、もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物である、前記治療剤又は予防剤。
【化３】
2014046125.tif 000005
[７]  ２−イミノピロリジン誘導体を含有する肺高血圧症の治療剤又は予防剤であって、
前記２−イミノピロリジン誘導体が、式（ＩＩＩ）で表される化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物である、前記治療剤又は予防剤。
【化４】
2014046125.tif 000006
[８]  上記[４]〜[７]のいずれか一項に記載の２−イミノピロリジン誘導体を含む、肺高血圧症の治療用又は予防用キット。
[９]  上記[４]〜[７]のいずれか一項に記載の２−イミノピロリジン誘導体の有効量を対象に投与することを含む、肺高血圧症の治療又は予防のための方法。
[１０]  肺高血圧症の治療剤又は予防剤のための、上記[４]〜[７]のいずれか一項に記載の２−イミノピロリジン誘導体。
【発明の効果】
【００１０】
本発明により、トロンビンとその受容体が肺高血圧の発症と病態形成に重要な役割を果たすことが明らかになった。ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物は、心拍および全身収縮期血圧を変化させることなく、右心室圧および右心室肥大を抑制することが可能である。したがって、ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物は、副作用を引き起こす可能性の低い、肺高血圧症の治療剤および予防剤の有効成分として有用であるといえ、本発明により、ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物を有効成分として含む肺高血圧症の治療剤および肺高血圧症の予防剤が提供される。本発明により、肺高血圧症の新たな治療法または予防法が提供され、肺高血圧症患者の治療または予防に貢献することが可能となった。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】肺動脈平滑筋のトロンビンに対する反応性を示す模式図である。
【図２】肺動脈平滑筋のトロンビンに対する反応性を示す模式図である。
【図３】トロンビン及びPAR1-活性化ペプチド（PAR1-AP）によるPAR1の活性化機構を示す図である。
【図４】モノクロタリン誘発ラット肺高血圧症に対するAtopaxar（30 mg/kg/day）の効果を示す図である。左図は右心室圧における効果を示し、右図は右心室肥大における効果を示す。
【図５】モノクロタリン誘発ラット肺高血圧症に対するAtopaxar（30 mg/kg/day）の効果を示す図である。左図は全身収縮期血圧における効果を示し、右図は心拍における効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明を詳細に説明する。以下の実施の形態は、本発明を説明するための例示であり、本発明をこの実施の形態にのみ限定する趣旨ではない。本発明は、その要旨を逸脱しない限り、さまざまな形態で実施をすることができる。また、本明細書において引用した刊行物は、全体を通して本明細書に組み込むものとする。
【００１３】
本発明は、PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物を有効成分として含有する、肺高血圧症の治療剤もしくは予防剤または治療用もしくは予防用キットを提供するものである。
【００１４】
１．PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物
（１）PAR1
PAR1は、プロテアーゼ活性化受容体（protease-activated receptor）の一つであり、その細胞外の特定の領域がプロテアーゼによって分解を受けることにより活性化されるGタンパク質共役型受容体である。PAR1の活性化機構を図３に示す。受容体の活性化は、受容体のN末端側の特定部位がセリンプロテアーゼによって切断されることにより受容体活性化配列が露出し、これがリガンドとなって受容体のリガンド結合部位に結合することにより生ずる。PAR1のアゴニストは、プロテアーゼとして機能するトロンビン、トリプシンが見出されているほか、受容体活性化配列の合成ペプチド、例えばPAR1-AP（PAR1 activating peptide）もアゴニストとして機能することが知られている。このPAR1-APの配列には、SFLLRN（ヒト、アミノ酸一文字表記、配列番号１）、TFRIFD（カエル、アミノ酸一文字表記、配列番号２）などが同定されている。
【００１５】
（２）PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物
本明細書において、「PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物」（本明細書において、「PAR1阻害物質」ともいう）は、PAR1の活性化を抑制する作用を有する物質であれば特に限定されず、国際公開０３／８９４２８号パンフレットに開示されているＳＣＨ５３０３４８（Ｎ−［（１Ｒ，３ａＲ，４ａＲ，６Ｒ，８ａＲ，９Ｓ，９ａＳ）−９−［２−［５−（３−Ｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）ｐｙｒｉｄｉｎ−２−ｙｌ］ｖｉｎｙｌ］−１−ｍｅｔｈｙｌ−３−ｏｘｏｐｅｒｈｙｄｒｏｎａｐｈｔｈｏ［２，３−ｃ］ｆｕｒａｎ−６−ｙｌ］ｃａｒｂａｍｉｃ  ａｃｉｄ  ｅｔｈｙｌ  ｅｓｔｅｒ）等のPAR1拮抗物質の他、PAR1脱感作促進物質、PAR1アンチセンスオリゴヌクレオチド、PAR1 siRNA、PAR1中和抗体などを意味する。本発明に使用するPAR1阻害物質の好ましい特徴としては、PAR1に対して高い選択性を有していること、治療有効量において有効な作用、例えば右心室圧の上昇や右心室の肥大に対する阻害作用を示すこと、治療有効量において重篤な副作用、例えば心拍の異常亢進や全身収縮期血圧の上昇を生じないこと、及び即効性があることなどを挙げることができる。また、本発明においてPAR1阻害物質は、その薬学的に許容される塩またはそれらの水和物（詳細は後述する）も含まれる。
【００１６】
したがって、本発明において、肺高血圧症の治療剤又は予防剤として使用するための好ましい化合物には、「PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物」、特にPAR1拮抗物質もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物を挙げることができる。
【００１７】
本明細書において、「PAR1拮抗物質」、「PAR1の拮抗物質」とは、プロテアーゼ活性化受容体１の拮抗物質であり、PAR1に結合し、PAR1に存在する受容体活性化配列に相当する配列を含むポリペプチド部分とPAR1との結合を阻害する物質（いわゆる、PAR1アンタゴニスト）を意味する。
また、本明細書において、「PAR1脱感作促進物質」とは、プロテアーゼ活性化受容体１を脱感作し、不活性化させる物質を意味する。PAR1脱感作促進物質は、当分野で公知の物質を選択し、使用することができる。また、当分野で公知の方法を用いて製造することができる。
また、本明細書において、「PAR1アンチセンスオリゴヌクレオチド」とは、プロテアーゼ活性化受容体１遺伝子のｍＲＮＡに結合し得る一本鎖核酸である。アンチセンスオリゴヌクレオチドの長さは、好ましくは１０〜１００塩基である。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ｍＲＮＡに結合して二重鎖を形成し、タンパク質の合成を抑制する。また、本明細書において、「PAR1 siRNA」とは、細胞においてＲＮＡ干渉により遺伝子発現を調節し得る低分子二本鎖ＲＮＡである。siRNAの長さは、好ましくは１５〜３０塩基である。ヘアピン構造を有するshRNAは、細胞内で切断されsiRNAを生じるため、PAR1 siRNAとしてshRNAを用いることもできる。本発明で用いられるPAR1アンチセンスオリゴヌクレオチドまたはPAR1 siRNA（shRNA）は、当分野で公知の方法で設計し、公知の化学合成法又は生化学的合成法を用いて製造することができる。
また、本明細書において、「PAR1中和抗体」とは、プロテアーゼ活性化受容体１に結合し、受容体へのリガンドの結合を阻害し得る抗体を意味する。PAR1中和抗体は、当分野で公知の方法を用いて製造することができる。また、当分野で公知の中和抗体を使用してもよい。
【００１８】
（３）２−イミノピロリジン誘導体
本発明に使用するPAR1阻害物質またはPAR1の拮抗物質として、２−イミノピロリジン誘導体を用いることができる。
【００１９】
本発明において、２−イミノピロリジン誘導体には、以下の一般式（Ｉ）で表される化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物が含まれる。
【００２０】
一般式（Ｉ）
【化５】
2014046125.tif 000007
一般式（Ｉ）中、
Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立し、同一又は相異なって、水素原子、メトキシ基又はエトキシ基を；
Ｘ1は水素原子又はハロゲン原子を；
Ａｒ2は、メチル基、エチル基、メトキシ基、エトキシ基、ｔ−ブチル基、モルホリニル基、又は下記の式（ＩＩ）で表される置換基から選ばれる１又は２以上の置換基で置換されていてもよいフェニル基を示し、
【化６】
2014046125.tif 000008
式（ＩＩ）中、
Ｗは−ＣＨ−又は窒素原子を；
Ａ１は−ＣＨ２−又は単結合を；
Ｒ３は水素原子又は−ＯＲ５ａを；
Ｘ2は−ＣＨ２−、酸素原子、単結合又はカルボニル基を；
Ｙは単結合又はＣ１〜Ｃ４アルキレン基を；
Ｒ４は水素原子、−ＯＲ６ａ、シアノ基又は−ＣＯＯＲ７を；
Ｒ５ａ、Ｒ６ａ及びＲ７は、それぞれ独立し、同一又は相異なって、水素原子又はC１〜C４アルキル基を示す。
【００２１】
一般式（Ｉ）において、好ましくは、Ｒ１及びＲ２がエトキシ基であり、かつ、Ｘ1がフッ素原子である。
【００２２】
本明細書において「ハロゲン原子」は、例えばフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子などの原子が挙げられ、好ましくはフッ素原子、塩素原子、臭素原子である。
【００２３】
本明細書において「C1〜C4アルキル基」は、炭素数が１から４個のアルキル基を示し、好適な基としては例えばメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉｓｏ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等の直鎖又は分枝状アルキル基があげられ、より好ましくはメチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉｓｏ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉｓｏ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等である。
【００２４】
本明細書において「C１〜C４アルキレン基」は、C１〜C４アルキル基の任意の位置の水素原子をさらに１個除いて誘導される二価の基を示し、好適な基としては例えば、メチレン基、エチレン基、メチルエチレン基、プロピレン基、エチルエチレン基、1,1−ジメチルエチレン基、1,2−ジメチルエチレン基等が挙げられる。
【００２５】
また、本明細書において「置換基を有していてもよい」とは、「置換可能な部位に、任意に組み合わせて１又は複数個の置換基を有してもよい」と同意義である。
【００２６】
本明細書において「ｎ−」とはノルマルタイプ又は１級置換基であることを意味し、「ｓｅｃ−」とは２級置換基であることを意味し、「ｔ−（ｔｅｒｔ−）」とは３級置換基であることを意味し、「ｉ−（ｉｓｏ−）」とはイソタイプの置換基であることを意味する。
【００２７】
本発明において使用する前記PAR1の機能を阻害する化合物もしくは薬学的に許容される塩またはそれらの水和物は、当業者であれば公知の方法で製造することができる。例えば、前記の一般式（Ｉ）で表される２−イミノピロリジン誘導体は、国際公開02/085855号パンフレットに記載の方法で製造することができる。
【００２８】
本発明において、本発明の一般式（Ｉ）で表される２−イミノピロリジン誘導体もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物の中から１個又は複数個を適宜組み合わせて使用することができる。
【００２９】
一般式（Ｉ）において、好ましい化合物は、式（ＩＩＩ）〜（ＩＸ）で表される化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物であり、より好ましくは式（ＩＩＩ）で表される化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物である。
【化７】
2014046125.tif 000009
【００３０】
式（ＩＩＩ）で表される化合物は、本明細書において「E5555」と称する場合もある。また、式（ＩＩＩ）で表される化合物の臭化水素酸塩は、「Atopaxar」と称する場合もある。
【化８】
2014046125.tif 000010
【００３１】
式（ＩＩＩ）〜（ＩＸ）で表される２−イミノピロリジン誘導体は、国際公開02/085855号パンフレットに記載の方法で製造することができる。
【００３２】
本発明において使用する２−イミノピロリジン誘導体を含むPAR1阻害物質は、酸又は塩基と塩を形成する場合もある。本発明における当該物質は、これらの薬学的に許容される塩をも包含する。本明細書において、塩は「薬学的に許容される塩」を意味し、薬学的に許容される塩は当該化合物と薬学的に許容される塩を形成するものであれば特に限定されない。具体的には、例えば、ハロゲン化水素酸塩（例えばフッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩等）、無機酸塩（例えば硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、炭酸塩、重炭酸塩等）、有機カルボン酸塩（例えば酢酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩等）、有機スルホン酸塩（例えばメタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩等）、アミノ酸塩（例えばアスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等）、四級アミン塩、アルカリ金属塩（例えばナトリウム塩、カリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えばマグネシウム塩、カルシウム塩等）等が挙げられるが、これに限定されない。
【００３３】
また、本発明において使用されるPAR1阻害物質または２−イミノピロリジン誘導体は、置換基の種類によっては不斉炭素を有し、幾何異性体、光学異性体、ジアステレオマーなどの光学異性体が存在しうるが、これら光学異性体も本発明のPAR1の機能を阻害する作用を有する化合物に含まれる。
【００３４】
また、本発明において、２−イミノピロリジン誘導体を含むPAR1阻害物質は、水和物が存在する場合には、これら水和物も本発明に使用するPAR1の機能を阻害する作用を有する化合物に含まれる。
【００３５】
２．肺高血圧症の治療剤及び予防剤
本発明の医薬組成物、すなわち、本発明の肺高血圧症の治療剤及び予防剤は、PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物を含むものである。本発明の治療剤および予防剤において、PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物は、好ましくはPAR1拮抗物質であり、より好ましくは一般式（Ｉ）で表される２−イミノピロリジン誘導体であり、さらに好ましくは式（ＩＩＩ）〜（ＩＸ）で表される化合物から選択される少なくとも１つの化合物であり、最も好ましくは式（ＩＩＩ）で表される化合物である。本発明の肺高血圧症の治療剤又は予防剤に含まれるPAR1阻害物質には、その薬学的に許容される塩またはそれらの水和物も含まれる。好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される化合物の臭化水素酸塩である。
【００３６】
PAR1阻害物質もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの水和物は、肺高血圧症モデル動物において肺高血圧症の指標となる右心室圧の上昇を抑制する作用、右心室肥大を抑制する作用、および肺高血圧症の発症を予防する作用を有するため、当該物質を有効成分として含む本発明の医薬組成物は、肺高血圧の治療または予防に有効である。特に、本発明の医薬組成物は、肺高血圧症の症状を消失させること、症状を軽減すること、進行を遅延させること、肺高血圧症の発症を防止すること、発症を遅延させること、発症時の症状を軽減することなどに有用である。すなわち、本発明の医薬組成物は、肺高血圧の治療剤として、または肺高血圧の予防剤として用いることができる。
【００３７】
本発明の治療剤または予防剤は、肺高血圧症の治療または予防の必要のある対象に投与することができる。対象は、哺乳動物が好ましく、例えばヒト、ラット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルであり、中でもヒトが好ましい。
【００３８】
本発明において、治療剤には予後改善剤および再発予防剤なども含まれる。
【００３９】
また、本発明の治療剤または予防剤は、キットとして提供されてもよい。本発明のキットは、PAR1阻害物質もしくはその薬学的に許容される塩またはそれらの水和物を含む他、容器、ラベル、添付文書等を含めることができる。
【００４０】
本発明の治療剤及び予防剤には、前記PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物もしくは薬学的に許容される塩又はそれらの水和物をそのまま用いてもよいし、公知の薬学的に許容される担体などを配合して製剤化して用いてもよい。このような薬学的に許容される担体としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤、安定化剤、乳化剤、吸収促進剤、界面活性剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、抗酸化剤などを挙げることができる。
【００４１】
また、本発明の治療剤及び予防剤の投与形態は特に限定されず、経口又は非経口的に投与することができる。非経口投与の形態として、例えば静脈内注射、点滴静注、皮下注射、皮内注射、腹腔内注射、又は筋肉内注射などが挙げられる。経口投与に用いられる剤形としては、錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤などが挙げられる。非経口投与に用いられる剤形としては、坐剤、注射剤、軟膏剤、バップ剤などが挙げられる。
【００４２】
経口投与に用いられる経口用製剤を調製する場合には、有効成分に賦形剤、さらに必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤等とすることができる。
【００４３】
賦形剤としては、例えば、乳糖、コーンスターチ、白糖、ぶどう糖、ソルビット、結晶セルロース、二酸化ケイ素などが、結合剤としては、例えばポリビニルアルコール、エチルセルロース、メチルセルロース、アラビアゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が、滑沢剤としては、例えばステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ等が、着色剤としては医薬品に添加することが許可されているものが、矯味矯臭剤としては、ココア末、ハッカ脳、芳香酸、ハッカ油、龍脳、桂皮末等が用いられる。これらの錠剤、顆粒剤には糖衣、ゼラチン衣、その他必要により適宜コーティングすることは勿論差し支えない。
【００４４】
本発明において、注射剤は、必要により主薬に非水性の希釈剤（例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどのグリコール、オリーブ油などの植物油、エタノールなどのアルコール類など）、懸濁剤、溶解補助剤、安定化剤、等張化剤、保存剤、pH調整剤、緩衝剤などを添加して調製することが可能である。注射剤の無菌化は、フィルターによる濾過滅菌、殺菌剤の配合などにより行えばよい。また、注射剤は、用時調製の形態として製造することができる。すなわち、凍結乾燥法などによって無菌の固体組成物とし、使用前に無菌の注射用蒸留水又は他の溶媒に溶解して使用することができる。貼布剤として経皮吸収により投与する場合には、塩を形成しない、いわゆるフリー体を選択することが好ましい。注射剤は、常法により点滴静注剤、あるいは静脈、皮下、筋肉内注射剤とすることができる。
【００４５】
懸濁剤としては、例えば、メチルセルロース、ポリソルベート80、ヒドロキシエチルセルロース、アラビアゴム、トラガント末、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートなどを挙げることができる。
【００４６】
溶解補助剤としては、例えばポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリソルベート80、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マクロゴール、ヒマシ油脂肪酸エチルエステルなどを挙げることができる。
【００４７】
また、安定化剤としては、例えば亜硫酸ナトリウム、メタ亜硫酸ナトリウム等を、保存剤としては、例えばパラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、ソルビン酸、フェノール、クレゾール、クロロクレゾールなどを挙げることができる。
【００４８】
経口投与における前記PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物の有効な投与量は、症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与方法、投与時期、投与間隔、投与期間、製剤の性質、調剤、種類、有効成分の種類等によって異なるが、当業者であれば適宜設定することができる。例えば、成人（体重６０Ｋｇ）に１日あたり０．１〜５００ｍｇ、好ましくは０．５〜２００ｍｇ、より好ましくは５〜２００ｍｇを経口投与することができる。
【００４９】
非経口投与、例えば注射剤における前記PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物もしくはその薬学的に許容される塩又はそれらの水和物の有効な投与量は、症状の程度、患者の年齢、性別、体重、感受性差、投与方法、投与時期、投与間隔、投与期間、製剤の性質、調剤、種類、有効成分の種類等によって異なるが、当業者であれば適宜設定することができ、生理食塩水又は市販の注射用蒸留水などの薬学的に許容される担体中に、適当な濃度になるように溶解又は懸濁したものを、処置を必要とする患者に対し、適宜投与することができる。例えば、注射剤の場合、成人（体重６０Ｋｇ）に１日あたり０．１〜５００ｍｇ、好ましくは０．５〜２００ｍｇ、より好ましくは５〜２００ｍｇを投与することができる。
【００５０】
本発明は、また、前記PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物もしくは薬学的に許容される塩又はそれらの水和物の有効量を対象に投与することを特徴とする、肺高血圧症の治療方法及び予防方法をも提供する。本発明の方法において、PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物は、好ましくはPAR1拮抗物質であり、より好ましくは一般式（Ｉ）で表される２−イミノピロリジン誘導体であり、さらに好ましくは式（ＩＩＩ）〜（ＩＸ）で表される化合物から選択される少なくとも１つの化合物であり、最も好ましくは式（ＩＩＩ）で表される化合物である。本発明の方法において、PAR1阻害物質には、その薬学的に許容される塩、またはそれらの水和物も包含される。好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される化合物の臭化水素酸塩である。本発明の方法において、PAR1阻害物質の投与径路および投与方法は特に限定されないが、上記本発明の医薬組成物の記載を参照することができる。
【００５１】
さらに、本発明には、肺高血圧症の治療剤又は予防剤のための、前記PAR1の機能を阻害する作用を有する化合物もしくは薬学的に許容される塩又はそれらの水和物、好ましくは肺高血圧症の治療剤又は予防剤のための、２−イミノピロリジン誘導体も含まれる。ここで、２−イミノピロリジン誘導体は、好ましくは一般式（Ｉ）で表される２−イミノピロリジン誘導体であり、より好ましくは式(ＩＩＩ）〜（ＩＸ）で表される化合物から選択される少なくとも１つの化合物であり、最も好ましくは式(ＩＩＩ）で表される化合物である。上記の２−イミノピロリジン誘導体には、その薬学的に許容される塩またはそれらの水和物も包含される。好ましくは、式（ＩＩＩ）で表される化合物の臭化水素酸塩である。
【実施例】
【００５２】
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本実施例により本発明は限定されるものではない。【００５３】
Abe K, Circ Res, 94: 385-393, 2004に記載の方法に従い、モノクロタリン誘発ラット肺高血圧モデルを作製した。5ないし6週齢（体重250-300 g）の雄性Sprague Dawleyラット（ＳＤラット）に、モノクロタリン（シグマアルドリッチ社製）を60 mg/kgの用量で１回皮下に注入した。E5555（Atopaxar）は、モノクロタリンを皮下注した当日から測定の前日まで毎日１回、0.5％メチルセルロース液に6 mg/mlの濃度に懸濁させたものを30 mg/kgの用量で、ゾンデを用いて、経口投与した。E5555非治療の肺高血圧モデルには、0.5％メチルセルロース液を同量、同期間投与した（図４および５における「ＭＣＴ」）。モノクロタリンおよびE5555を投与しない正常対象群には同週齢を用いた（図４および５における「Ｎｏｒｍａｌ」）。
モノクロタリン注入3週間後に、右室収縮期圧、体動脈圧、心拍数、右室左室重量比（右室肥大）を測定した。ペントバルビタール（30 mg/kg）静脈麻酔下に、右心カテーテル法により右室収縮期圧を測定した。コンダクタンスカテーテルを用いて、頸動脈より体動脈圧、心拍数を測定した。測定後、ラットを致死量のペントバルビタール静注にて安楽死させ、心臓を摘出し、右室および心室中隔を含む左室の重量を測定し、その比を右室肥大の指標とした。【００５４】
図４は、モノクロタリン誘発ラット肺高血圧症に対するAtopaxar（30 mg/kg/day）の効果を示す。左図は右心室圧における効果を示し、右図は右心室肥大における効果を示す。
図５は、モノクロタリン誘発ラット肺高血圧症に対するAtopaxar（30 mg/kg/day）の効果を示す。左図は全身収縮期血圧における効果を示し、右図は心拍における効果を示す。
これらの結果より、ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物は、心拍および全身収縮期血圧を変化させることなく、非治療のモノクロタリン誘発肺高血圧症群と比較して右心室圧および右心室肥大を有意に抑制することが明らかとなった（p＜０．０１）。したがって、ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物は、肺高血圧症の治療および予防に有用であることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００５５】
本発明者により、トロンビンとその受容体が肺高血圧の発症と病態形成に重要な役割を果たすことが明らかになった。ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物は、心拍および全身収縮期血圧を変化させることなく、右心室圧および右心室肥大を抑制することが可能である。したがって、ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物は、副作用を引き起こす可能性の低い、肺高血圧症の治療剤および予防剤の有効成分として有用であるといえ、本発明により、ＰＡＲ１の機能を阻害する作用を有する化合物を有効成分として含む肺高血圧症の治療剤および肺高血圧症の予防剤が提供される。本発明により、肺高血圧症の新たな治療法または予防法が提供され、肺高血圧患者の治療または予防に貢献することが可能となった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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