(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）アッセイしようとする液状検体を受け入れるのに適した検体調製手段を含む第１の対置成分と、
（ｂ）検出しようとする分析対象物に特異的に結合しクロマトグラフィ媒体上の検出ゾーンに結合された少なくとも１種類の試薬を有する前記クロマトグラフィ媒体を含み前記第１の対置成分に取り付けられる第２の対置成分と、
（ｃ）前記第２の対置成分に取り付けられた導伝バリアとを含み、
前記第１と第２の対置成分をこれらが対置していない位置から対置させて前記検体調製手段に検査しようとする前記液状検体を前記導伝バリア経由で前記クロマトグラフィ媒体へ添着できるようにしまた前記クロマトグラフィ媒体を通して流すことができるようにし、クロマトグラフィ・アッセイが前記クロマトグラフィ媒体内部での前記検体の移動の結果として行なわれて、検出しようとする分析対象物に特異的に結合する標識試薬の結合による前記移動の結果として前記分析対象物が検出され、前記検体が前記クロマトグラフィ媒体に添着された位置とは異なる位置で前記分析対象物が検出され、前記検出ゾーンに結合した前記分析対象物に対する前記標識試薬の結合により移動後に前記クロマトグラフィ媒体上で前記分析対象物が検出されるようにしてあることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項２】
前記検体調製手段は前記検体を前記クロマトグラフィ媒体に添着する前に前記検体の処理用に少なくとも１つの試薬を含むことと、前記検体処理用の前記試薬は前記検体から分析対象物を抽出する抽出試薬であることを特徴とする請求の範囲１に記載の装置。
【請求項３】
前記検出ゾーンは前記クロマトグラフィ媒体より実質的に小さいことと、前記検出ゾーンはこれに不動化した前記分析対象物に体する第１の特異的結合パートナーを含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項４】
前記分析対象物は抗原またはハプテンであり、前記第１の特異的結合パートナーは前記抗原またはハプテンに体する抗体であることを特徴とする請求の範囲３に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項５】
前記分析対象物はヒトヘモグロビンであり前記第１の特異的結合パートナーは抗ヒトヘモグロビン抗体であることを特徴とする請求の範囲４に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項６】
前記分析対象物は抗体であり前記第１の特異的結合パートナーは前記抗体により特異的に結合され得るハプテンまたは抗原であることを特徴とする請求の範囲３に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項７】
前記クロマトグラフィ媒体はさらに前記クロマトグラフィ媒体より実質的に小さい対照ゾーンを含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項８】
前記対照ゾーンはこれに不動化した分析対象物を含むことを特徴とする請求の範囲７に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項９】
前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段をさらに含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１０】
前記検体調製手段は前記検体調製手段へ液体の添加により再溶解可能な形で検出可能な標識で標識した前記分析対象物に体する特異的結合パートナーをさらに含むことを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１１】
前記第１と第２の対置成分はこれらが対置していない位置から直接用手的に閉じることで対置させ得ることを特徴とする請求の範囲１に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１２】
（ａ）請求の範囲１の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、（ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置で使用され、検出可能な標識で標識され前記分析対象物に対する特異的結合パートナーと、を別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のための検査キット。
【請求項１３】
（ａ）各々がアッセイしようとする検体を受け入れるのに適した横方向に分離された複数の検体調製手段を含む第１の対置成分と、（ｂ）前記第１の対置成分に取り付け可能で前記第１の対置成分上の各検体調製手段用のクロマトグラフィ媒体を含み、前記クロマトグラフィ媒体が横方向に分離されている第２の対置成分と、（ｃ）各クロマトグラフィ媒体に１つづつ各々が前記第２の対置成分に取り付けられた複数の導伝バリアとを含み、前記第１と第２の対置成分が各検体調製手段で検査しようとする各検体をこれに対応する前記導伝バリアを介してこれに対応する前記クロマトグラフィ媒体へ添着するように対置できることを特徴とする少なくとも１つの分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１４】
各クロマトグラフィ媒体はさらに前記クロマトグラフィ媒体より実質的に小さい検出ゾーンを含むことと、各検出ゾーンはアッセイしようとする前記分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーをそのクロマトグラフィ媒体上に含むことを特徴とする請求の範囲13に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１５】
少なくとも１つの検体調製手段は検体を含む器具を受け入れるのに適した折り畳みウェルを含むことを特徴とする請求の範囲13に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１６】
前記第１の対置成分は前記第１の対置成分と前記第２の対置成分を対置させた時に前記第２の対置成分上に折り曲がる蝶番式に折り曲げ自在な羽根をさらに含むことを特徴とする請求の範囲15に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１７】
（ａ）請求の範囲13記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、（ｂ）各々の特異的結合パートナーが検出可能な標識で標識してあり、各々の特異的結合パートナーは別々にパッケージされ、各々の特異的結合パートナーが前記クロマトグラフィ・アッセイ装置で使用され、検査しようとする各分析対象物のための特異的結合パートナーと、を別々のパッケージに含むことを特徴とする少なくとも１つの分析対象物の検出および／または判定のための検査キット。
【請求項１８】
分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置であって、（ａ）（ｉ）検体調製手段と（ii）前記検体調製手段と動作的に接触するクロマトグラフィ媒体とを含む第１の対置成分と、（ｂ）前記第１の対置成分に取り付け可能で、液体の添加により再溶解可能な形で検出可能な標識により標識された前記分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む添着手段を含む第２の対置成分と、（ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアとを含み、前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記添着手段を前記伝導バリアと接触させ、前記分析対象物に対する前記標識特異的結合パートナーが前記導伝バリアを通る液体により溶解されることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項１９】
前記第１の対置成分は導伝手段をさらに含み、前記検体調製手段と前記クロマトグラフィ媒体の間の動作的接触が前記検体調製手段と前記クロマトグラフィ媒体の両方を前記導伝手段と動作的に接触させることで実現することを特徴とする請求の範囲18に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項２０】
前記クロマトグラフィ媒体は第１と第２の端部を有し前記導伝手段は前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触し、前記第１の対置成分は前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段をさらに含むことを特徴とする請求の範囲19に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項２１】
（ａ）請求の範囲18記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、（ｂ）前記検体調製手段上の前記検体の抽出に必要とされる少なくとも１種類の試薬とを別々のパッケージに含み、前記試薬の少なくとも１種類が前記検体調製手段に添着されることを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のための検査キット。
【請求項２２】
分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置であって、（ａ）（ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と（ii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触する導伝手段と（iii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段とを含む第１の対置成分と、（ｂ）（ｉ）第１の添着手段と（ii）第２の添着手段とを含む第２の対置成分と、（ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアとを含み、前記第１と第２の添着手段は前記第１と第２の対置成分が対置されていない時に動作的に接触しないように前記第２の対置成分上に配置され、前記第１と第２の対置成分を対置することで、前記導伝手段を前記第１の添着手段と前記導伝バリア経由で動作的間接的に接触させ、また前記導伝手段を前記第２の添着手段と動作的に接触させることで前記第１と第２の添着手段を互いに動作的に接触させることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項２３】
前記第１の添着手段は検体添着パッドを含み前記第２の添着手段は検出器添着パッドを含み、これに検出試薬を添加できることで、前記第１と第２の対置成分を対置させた時に、前記検体添着パッドと前記検出器添着パッドの内容が前記導伝バリアを介して前記導伝手段に添着されることを特徴とする請求の範囲22に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項２４】
（ａ）請求の範囲23記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、（ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置の前記第２の添着手段に適用されて検出可能な標識で標識した前記分析対象物に対する特異的結合パートナーと、を別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物の検出および判定のための検査キット。
【請求項２５】
（ａ）（ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と（ii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触する導伝手段と（iii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段と（iv）前記導伝手段と直接接触し前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と間接接触するように配置された検出器添着パッドとを含む第１の対置成分と、（ｂ）検体添着バッドを含む第２の対置成分と、（ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアとを含み、前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記検体添着パッドに検査しようとする前記検体を前記導伝バリア経由で前記検出器添着パッドへさらに前記導伝手段経由で前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ添着させることを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項２６】
（ａ）請求の範囲25記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置と、（ｂ）前記第２の添着手段に添着される、検出可能な標識で標識された前記分析対象物のための特異的結合パートナーと、を含むことを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のための検査キット。
【請求項２７】
（ａ）（ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と（ii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段と（iii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と直接接触する検出器添着パッドとを含む第１の対置成分と、（ｂ）検体添着パッドを含む第２の対置成分と、（ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアと、を含み、前記第１と第２の対置成分を対置させた時に前記検出器添着パッドと前記検体添着パッドが、前記クロマトグラフィ媒体の第１の端部に直接隣接する前記検出器添着パッドの一部を除き、前記導伝バリアを介して間接接触し、これにより前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記検体添着パッドに検査しようとする前記検体を前記検出器添着パッドへさらに前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ添着させることを特徴とする分析対象物検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項２８】
（ａ）請求の範囲27記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、（ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置の前記第２の添着手段に添着されて検出可能な標識で標識した前記分析対象物に対する特異的結合パートナーと、を別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物検出および／または判定のための検査キット。
【請求項２９】
（ａ）複数の横方向に分離した試薬パッドを含む第１の対置成分と、（ｂ）複数の乾燥試料を含む検査カードを受け入れるのに適した第２の対置成分とを含み、前記第２の対置成分は、（ｉ）横方向に分離され各々が第１と第２の端部を有し、前記第１の対置成分上の各検体調製手段のためのクロマトグラフィ媒体と（ii）各クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触し前記検査カードを前記第２の対置成分に挿入した時に前記検査カードの各々の乾燥試料と動作的に接触する導伝手段と、（iii）各クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触する吸収手段とを含み、（ｃ）さらに前記第２の対置成分に各々が取り付けられ各クロマトグラフィ媒体に１つづつの複数の導伝バリアを含み、各試薬パッドをこれに対応する導伝バリア経由で対応する乾燥試薬に添着させるように前記第１と第２の対置成分を対置させ得ることを特徴とする少なくとも１つの分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項３０】
各試薬パッドは前記試薬パッドへ水性試薬の添加により再溶解可能な形で検出可能な標識により標識された前記分析対象物に対する特異的結合パートナーを含むことを特徴とする請求の範囲29に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項３１】
前記分析対象物はヒトヘモグロビンであり前記特異的結合パートナーは抗ヒトヘモグロビン抗体であることを特徴とする請求の範囲30に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項３２】
（ａ）請求の範囲29記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と（ｂ）前記クロマトグラフィ・アッセイ装置へ挿入するための複数の乾燥試料を含むことのできる検査カードと、（ｃ）アッセイしようとする前記分析対象物について前記検査カードに添着される抽出試薬とを別々のパッケージに含むことを特徴とする分析対象物の検出および／または判定のための検査キット。
【請求項３３】
検体中の分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置であって、（ａ）（ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と（ii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触し前記分析対象物の検出用に少なくとも１種類の試薬を含む検出器添着パッドと（iii）前記検出器添着パッドと動作的に接触し前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と間接接触して液体を通すことのできる導体と（iv）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触して液体を吸収するためのアブソーバとを含む第１の対置成分と、（ｂ）検査しようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンを含む第２の対置成分であって、前記第１と第２の対置成分が対置されて液体が前記第２の対置成分から前記第１の対置成分へ移し換えられるように前記第１の対置成分に取り付け自在にしてある第２の対置成分と、（ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアとを含み、前記第１と第２の対置成分が前記第１と第２の対置成分が対置されない時に前記第２の対置成分上の前記検体調製ゾーンへ検体を添着できるように、また前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記検体調製ゾーンが前記導体と間接接触して前記検査しようとする検体を前記導伝バリア経由で前記導体へ添着させて前記導体を通しさらに前記検出器添着パッド経由で前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ添着して前記検体に対して前記分析対象物の検出用試薬を追加し、前記導体から前記検出器添着パッドを通り前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部への流れが前記アブソーバによる液体の吸収で支援されることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項３４】
（ａ）請求の範囲33記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と（ｂ）前記検出器添着パッドへ適用される検出可能な標識で標識された前記分析対象物に対する特異的結合パートナーとを別々の容器に含むことを特徴とする検体中の分析対象物の検出および／または判定のための検査キット。
【請求項３５】
検体中の分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置であって、（ａ）（ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と（ii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触し液体の添加により再溶解可能な形で前記分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、前記第１の特異的結合パートナーを検出可能な標識で標識してある第１の検出器添着パッドと（iii）前記第１の検出器添着パッドと動作的に接触して液体を通過させる導体であって、前記第１の検出器添着パッドが前記導体と前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部とを架橋して前記導体から前記第１の検出器添着パッドを通り前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ液体が流れるようにするための導体と（iv）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触して液体を吸収するためのアブソーバとを含む第１の対置成分と、（ｂ）前記第１と第２の対置成分を当接させて液体が前記第２の対置成分から前記第１の対置成分へ移し換えるように前記第１の対置成分に取り付け自在な第２の対置成分であって、（ｉ）アッセイしようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンと（ii）前記検体調製ゾーンと動作的に接触し、前記検体調製ゾーンへ検体の添加により再溶解可能な形で前記分析対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含み、前記第２の特異的結合パートナーを検出可能な標識で標識してあり、前記検体調製ゾーンへの前記検体の添加で前記第２の特異的結合パートナーを溶解できるように前記第２の対置成分上の前記検体調製ゾーンに隣接して配置されて前記検体調製ゾーンが前記検体と前記第２の特異的結合パートナーの混合物を含むようにずる第２の検出器添着パッドと、（ｃ）前記第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアと、前記第１と第２の対置成分は前記第１と第２の対置成分が対置されていない時に前記第２の対置成分上の前記検体調製ゾーンへ検体を添着でき、また前記第１と第２の対置成分を対置させることによって前記第２の対置成分上の前記検体調製ゾーンが前記導伝バリアを介して前記第１の対置成分上の前記導体と動作的間接的に接触して検査しようとする前記検体と前記第２の特異的結合パートナーを前記導体に添着させ、前記導体経由でさらに前記第１の検出器添着パッドを通り前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部へ流して前記第１の特異的結合パートナーを前記検体と前記第２の特異的結合パートナーに追加し、前記導体から前記第１の検出器添着パッド経由で前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部への流れが前記アブソーバによる液体の吸収によって支援されることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項３６】
前記クロマトグラフィ媒体は前記クロマトグラフィ媒体より面積が実質的に小さい検出ゾーンをさらに含み、前記検出ゾーンは不動化した前記分析対象物に対する第３の特異的結合パートナーを含み、前記検体中に分析対象物が存在している場合に（１）前記第１と第２の特異的結合パートナーの一方と、（２）前記分析対象物と、（３）前記不動化した第３の特異的結合パートナーとを含む三次元複合体が前記検出ゾーンに形成されることを特徴とする請求の範囲33に記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項３７】
（ａ）請求の範囲35記載の前記クロマトグラフィ・アッセイ装置と、（ｂ）前記分析対象物に対する前記第１の特異的結合パートナーと前記分析対象物に対する前記第２の特異的結合パートナーの少なくとも一方を溶解し、前記第１の対置成分上の前記第１の検出器添着パッドと前記第２の対置成分上の前記第２の検出器添着パッドの少なくとも一方に添着される液体とを別々の容器に含むことを特徴とする検体中の分析対象物の検出および／または判定のための検査キット。
【請求項３８】
検体中の分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ・アッセイ装置であって、（ａ）（ｉ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と（ii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第１の端部と動作的に接触して液体を通過させる導体と（iii）前記クロマトグラフィ媒体の前記第２の端部と動作的に接触して液体を吸収するためのアブソーバとを含む第１の対置成分と、（ｂ）前記第１の対置成分に取り付けられる第２の対置成分であって、前記第１と第２の対置成分を対置させて液体を前記第２の対置成分から前記第１の対置成分へ移し換えできるようにし、前記第１と第２の対置成分を対置させた時に前記第１の対置成分上の前記導体へ液体を添着するためのアプリケータを含み、前記アプリケータが、（ｉ）前記第１と第２の対置成分が対置されていない時に前記アプリケータへ液体の添加により再溶解可能な形で前記分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み前記第１の特異的結合パートナーが検出可能な標識で標識される第１のセクタと（ii）前記分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを欠如する第２のセクタとの２つのセクタに分割されている前記第２の対置成分と、（ｃ）前記第１の対置成分に取り付けてある導伝バリアと、を含み、前記第１と第２の対置成分は前記第１と第２の対置成分を対置させることで前記第２の対置成分上の前記アプリケータの前記第２のセクタではなく前記第１のセクタを前記導伝バリア経由で前記第１の対置成分上の前記導体と間接接触させ、前記アプリケータの前記第２のセクタは前記第１のセクタ経由で前記導体と間接接触して、前記アプリケータの前記第１のセクタの内容を前記クロマトグラフィ媒体に添着し、前記アプリケータの前記第１のセクタの内容の前記クロマトグラフィ媒体への添着に続けて、前記アプリケータの前記第２のセクタの内容を前記クロマトグラフィ媒体へ添着させ、前記アブソーバが前記クロマトグラフィ媒体から液体を排出させて前記アプリケータから前記導体と前記クロマトグラフィ媒体を通る液体の流れを支援するようにしてあることを特徴とするクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【請求項３９】
前記クロマトグラフィ媒体は前記クロマトグラフィ媒体より面積が実質的に小さい検出ゾーンをさらに含み、前記検出ゾーンはこれに不動化した前記分析対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含み、分析対象物が前記検体中に存在する場合には前記第１の特異的結合パートナーと、前記分析対象物と、前記第２の特異的結合パートナーとを含む三次元複合体が前記検出ゾーンに形成されることを特徴とする請求の範囲23,25,27,33,または38のいずれか１つに記載のクロマトグラフィ・アッセイ装置。
【発明の詳細な説明】
発明の背景
本発明は検体特性の判定用検査ストリップ、一体化されたハウジング、および当該検査ストリップを含むキット、ならびに当該検査ストリップを用いて検体の特性を判定する方法に関する。
分析対象物特に生物学的に問題とされる分析対象物の検出および／または判定に用いられる多くの分析システムにはクロマトグラフィ・アッセイ系がある。
当該クロマトグラフィ系は医師や技師が各種条件や疾病の迅速診断および治療モニタに繁用している。また患者自身によるこうした条件や疾病の在宅モニタ用にも使用が増加しでいる。
こうしたシステムで最も重要なものに、薄層システムがあり、これは溶媒が薄く平坦な吸収剤媒体を横断して移動するものである。
当該薄層システムで行なうことのできる検査の最も重要なものとして、抗原またはハプテンとこれに対応する抗体の間の特異的作用に依存したイムノアッセイがある。臨床的に重要な分子の存在および／または量を検査する手段としてのイムノアッセイの使用は近年では公知である。1956年に早くも、J.M.Singerはリュウマチ因子検出のための免疫法ラテックス凝集検査の使用を報告している（Singer et al.,Am.J.Med.22:888−892（1956））。
イムノアッセイと関連して使用されるクロマトグラフィ技術にはイムノクロマトグラフィとして知られる手順がある。
イムノクロマトグラフィ・アッセイは、検出しようとする抗原抗体複合体の性質と複合体を作成するのに必要とされる反応順序によって、大きくサンドイッチ法と競合法の２つのカテゴリに分けられる。一般に、サンドイッチ法イムノクロマトグラフィでは検定しようとする分析対象物を含むと思われる検体とその分析対象物に対する抗体とを混合する必要がある。これらの抗体は易動性で代表的にはラベルまたは標識試薬たとえば染色ラテックス、コロイド金属ゾル、またはラジオアイソトープなどと結合しておく。混合物はバンドまたはゾーンを含むクロマトグラフィ媒体に塗布する。このバンドまたはゾーンには問題の分析対象物に対して不動化した抗体が含まれる。クロマトグラフィ媒体は検査テープに似たストリップの形状を取ることが多い。検定しようとする分子複合体と標識抗体がクロマトグラフィ媒体上で不動化した抗体のゾーンに達すると、結合が起り結合した標識抗体はそのゾーンに集結する。これで検定しようとする分子の存在が明らかになる。この技術は定量または半定量的結果を得るためにも使用可能である。
検査ストリップで行なうサンドイッチ法イムノアッセイの例としては、Grubb et al.の米国特許第4,168,146号、Tom et al.の米国特許第4,366,241号に記載があり、両方とも本明細書で参照に含まれる。
イムノクロマトグラフィ・アッセイに加えて、酵素法クロマトグラフィ・アッセイを用いることも公知になっている。これらの技術はイムノクロマトグラフィ・アッセイとほぼ類似しているが、抗原抗体反応の代わりに酵素触媒反応を使用する。酵素触媒反応は検出可能な生成物を産生することが多い。他の類似のクロマトグラフィ・アッセイも公知である。
検査ストリップを用いる現在利用可能なクロマトグラフィ技術は有用であるが多数の欠点を含んでいる。多数の検体、たとえば便検体は、クロマトグラフィ媒体の穴を塞栓するような粒子を含み、イムノクロマトグラフィ処理を大幅に阻害する。他の検体、たとえば血液などは検査結果を読み難くしてしまうような細胞成分や有色成分を含んでいる。検体が干渉を発生させなくとも、既存のクロマト検査装置で検体をクロマトグラフィ媒体に塗布して検体界面が均一にクロマトグラフィ媒体中を移動し均一な直線状に結合を発生させる領域まで検体が到達できるようにするのは難しいことが多い。
検体の調製と廃棄物生成はイムノクロマトグラフィで現在利用可能な装置および技術の別の問題の発生源である。感染血液および血液分画を介して拡散する疾病たとえばAIDSや肝炎の発病率増加はこの問題を悪化させて来た。検体（たとえば糞便）またはサンプリング器具（たとえば咽頭スワブ）を直接クロマトグラフィ媒体に塗布するのはほとんど不可能である。検体をクロマトグラフィ媒体に塗布する前に幾つかの抽出および前処理反応が必要とされることが多い。このような反応は、検査を行なう医師や技師が、小さい数個の容器たとえば試験管や微量遠沈管内で行なうのが普通で、移し換え器具たとえばピペットを用いる必要がある。このような器具の各々が汚染されるので特に注意して用意する必要があり、作業員や廃棄物と不意に接触することのある人が汚染されないようにしなければならない。
したがって、イムノクロマトグラフィ・アッセイまたはその他の類似アッセイを施行するためのクロマト装置の改良が必要とされる。このような装置は恐らく汚染されている検体または検体調製器具を直接受け入れて抽出容器や移し換え器具を必要としないようにできるべきである。このような装置は、検査ストリップの形が望ましく、有色検体または粒子を含む検体で干渉を起こさずにイムノクロマトグラフィ・アッセイを施行できなければならず、またクロマトグラフィ媒体へ検体を均一にかつ均等に供給して検査の正確度および精密度を改善できるべきである。アッセイ装置改良のこの側面は偽陰性および偽陽性の防止として特に重要である。
開示
上述の必要性に適合し生物学的に問題となる分析対象物の改良アッセイを提供しつつ、アッセイの施行を簡略化して汚染を防止するアッセイ装置を開発した。
本装置はサンドイッチ法イムノアッセイ、競合法イムノアッセイ、両原理を組み合せて用いるアッセイを含め、全ての種類のイムノアッセイを実行できる。本装置は検出しようとする抗原それ自体が抗体たとえばH.ピロリ抗体などの血清学アッセイを実行できる。本装置は検出しようとする抗原が分析対象物に対する第１抗体に結合する標識第２抗体を用いて間接的に検出されるアッセイを実行可能である。これらのアッセイ装置はどれも、少なくとも２個の対置成分を含む装置の対置成分に取り付けた導伝バリアを含む。
本発明によるアッセイ装置は液圧で一方の対置成分から他方の対置成分へ液体を移動させ、液体をクロマトグラフィ媒体中に浸透させる。液圧は装置の動作を加速するものではないが、追加ステップたとえば抽出ステップなどを実行して単一装置内で粒子成分の干渉を除去できる。圧力は係合装置たとえば対置成分の各々に設けたインターロック部材などで対置成分を相互に保持することにより発生する。望ましくは、所定圧力を加えてアッセイ法の各ステップの最適性能を保証する。
さらに、本装置は他の種類の特異的結合アッセイも実行できる。たとえば（１）特異的リガンドに対する特異的結合蛋白たとえばレクチン、ホルモン受容体、ウィルス受容体の親和性に基づくアッセイ、（２）酵素のそれに対応する基質またはインヒビタ（阻害剤）に対する親和性に基づくアッセイ、または（３）ワトソン−クリック（Watson−Crick）の配位理論に基づいて拡散（DNAまたはRNA）セグメントの相補的核酸セグメントに対する親和性に基づくアッセイ。
一般に、本発明によるアッセイ装置は、（１）アッセイしようとする液状検体を受け入れるのに適した検体調製手段を含む第１の対置成分、（２）前記クロマトグラフィ媒体上の検出ゾーンに結合されて検出しようとする分析対象物に特異的に結合する少なくとも１種類の試薬を有するクロマトグラフィ媒体を含み、前記第１の対置成分に取り付けられる第２の対置成分、（３）前記第２の対置成分に取り付けられる導伝バリアを含む。
第１と第２の対置成分は対置されないで検体調製手段から検査しようとする液状検体を導伝バリアを通してクロマトグラフィ媒体に添加しクロマトグラフィ媒体中を流せるようにする位置から対置位置に移動させることができる。クロマトグラフィ・アッセイはクロマトグラフィ媒体内部を検体が移動した結果実行されて検出しようとする分析対象物に特異的結合する標識試薬の結合による移動の結果としてクロマトグラフィ媒体内部で分析対象物が検出されるようになる。分析対象物は検体がクロマトグラフィ媒体に添加された位置とは異なる位置で検出される。分析対象物は検出ゾーンに結合されている分析対象物に標識試薬が結合することで移動後にクロマトグラフィ媒体上で検出される。
代表的には、検体調製手段は検体をクロマトグラフィ媒体に添加する前に検体処理のために少なくとも１種類の試薬を含む。検体処理用試薬は検体から分析対象物を抽出するための抽出試薬であり得る。
一般に、検出ゾーンはクロマトグラフィ媒体より実質的に小さい。この構成では、検出ゾーンは不動化した分析対象物に対して第１の特異的結合するパートナーを含むことができる。分析対象物が抗原またはハプテンの場合、第１の特異的結合パートナーは抗原またはハプテンに対する抗体であり得る。１つの特に好適な代替例において、分析対象物はヒトヘモグロビンであり第１の特異的結合パートナーは抗ヒトヘモグロビン抗体である。
これ以外に、分析対象物を抗体として第１の特異的結合パートナーを抗体により特異的に結合できるハプテンまたは抗原とすることができる。
代表的に、クロマトグラフィ媒体はさらにクロマトグラフィ媒体より実質的に小さな対照ゾーンを含む。代表的に、対照ゾーンはこれに不動化した分析対象物を含む。
クロマトグラフィ・アッセイ装置はクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段をさらに含むことができる。
代表的に、検体調製手段は検体調製手段へ液体の追加により溶解できる形で検出可能な標識によって標識した分析対象物のための特異的結合パートナーをさらに含む。一般に、液体には液体から分析対象物を抽出するための抽出試薬を含まれるが、その他の液体も使用できる。
代表的には、本発明によるアッセイ装置では、第１と第２の対置成分が対置していない位置から直接手動的に閉じることで第１と第２の対置成分を対置させることができる。
本発明の別の側面は分析対象物の検出および判定のための検査キットである。検査キットは、別々にパッケージされて（１）前述したクロマトグラフィ・アッセイ装置と、（２）検出可能な標識で標識された分析対象物のための、クロマトグラフィ・アッセイ装置で使用する特異的結合パートナーと、を含むことができる。
本発明によるその他の装置も検査キットに含めることができ、別々にパッケージされて、検出可能な標識で標識された分析対象物のための特異的結合パートナーまたは装置に含まれる溶解可能な標識特異的結合パートナーを溶解するための液体のどちらかと併せて当該装置を含む。場合によって、検査キットは検査カードまたは検体から分析対象物を抽出するための抽出試薬を含むことができる。
本発明のさらに別の側面は同一装置で同時に多数のアッセイを実行できる複合装置である。一般に本装置は、（１）各々がアッセイしようとする検体を受け入れるのに適した複数の横方向に離れた検体調製手段を含む第１の対置成分と、（２）前記第１の対置成分に取り付けることができ第１の対置成分上の各検体調製手段のために横方向にきりはなされているクロマトグラフィ媒体を含む第２の対置成分と、（３）それぞれが第２の対置成分に取り付けてあり各クロマトグラフィ媒体に１つづつの複数の導伝バリアとを含む。
本装置において、第１と第２の対置成分を対置させて、各検体調製手段に検査しようとする各検体をこれに対応する導伝バリアを介して対応するクロマトグラフィ媒体へ適用させるようにできる。
この複合装置では、少なくとも１つの検体調製手段は検体を含む装置を受け入れるのに好適な折り畳み可能なウェルを含む。折り畳みウェルが含まれる場合第１の対置成分はさらにヒンジで折り曲げられる羽根を含むことができ第１の対置成分と第２の対置成分を対置する際に第２の対置成分の上に折り畳まれる。
本発明による複合アッセイ装置の別の実施態様は検査カードを受け入れるのに適する。本実施態様は、（１）複数の横方向に分離された試薬パッドを含む第１の対置成分と、（２）複数の乾燥試料を含む検査カードを受け入れるのに適した第２の対置成分とを含み、第２の対置成分には（ａ）第１の対置成分上の各検体調製手段用に横方向に分離され各々が第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、（ｂ）各クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触し検査カードを第２の対置成分に挿入した時に検査カードの各乾燥試料と動作的に接触する導伝手段と、（ｃ）各クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段とを含み、（３）各々が第２の対置成分に取り付けられ各クロマトグラフィ媒体に１つづつ備える複数の導伝バリアと、を含む。
本発明による複合アッセイ装置の本実施態様において、第１と第２の対置成分は各試薬パッドに対応する導伝バリアを介して対応する乾燥試料を添着させられるように対置できる。
本実施態様において、各試薬パッドは試薬パッドへ水性試薬の追加により溶解できる形で検出可能な標識により標識された分析対象物に対する特異的結合パートナーを含むことができる。本実施態様の１つの特に好適なバージョンでは、分析対象物はヒトヘモグロビンであり特異的結合パートナーは抗ヒトヘモグロビン抗体である。
本発明の別の実施態様は、クロマトグラフィ媒体と同じ対置成分上に検体調製手段が配置されるアッセイ装置である。本装置は、（１）（ａ）検体調製手段と（ｂ）検体調製手段と動作的に接触するクロマトグラフィ媒体とを含む第１の対置成分と、（２）第１の対置成分に取り付けでき添着手段へ液体の追加により溶解可能な形で検出可能な標識で標識された分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む添着手段を含む第２の対置成分と、（３）第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアとを含む。
本装置において、第１と第２の対置成分を対置させることで添着手段を導伝バリアと接触させて分析対象物に対する標識された特異的結合パートナー導伝バリアを透過した液体により溶解されるようにする。クロマトグラフィ媒体はクロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する導伝手段を有する第１と第２の端部を有することができ、この構成で第１の対置成分はさらにクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段をさらに含むことができる。
本発明の別の実施態様はクロマトグラフィ媒体を含まない対置成分上に２つの添着手段を有する。
本実施態様は、（１）（ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、（ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する????手段と、（ｃ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段と、を含む第１の対置成分と、（２）（ａ）第１の添着手段と、（ｂ）第２の添着手段と、を含む第２の対置成分と、（３）第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアと、を含む。
第１と第２の添着手段は第１と第２の対置成分が対置していない場合には動作的に接触しないように第２の対置成分上に配置される。第１と第２の対置成分を対置させる導伝手段が導伝バリアを介して第１の添着手段と動作的に間接的に接触し、第２の添着手段と導伝手段を動作的に接触させることで、第１と第２の添着手段が互いに動作的に接触する。
代表的には、本実施態様において、第１の添着手段は検体添着パッドを含み、第２の添着手段は検出器添着パッドを含み、これに検出試薬を添着することができるので、第１と第２の対置成分を対置させた時に、検体添着パッドと検出器添着パッドの内容が導伝バリアを介して導伝手段に適用される。一般に、検出器添着パッドは検出器添着パッドへの液体の添加により溶解することのできる形で分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、第１の特異的結合パートナーは検出可能な標識で標識され、クロマトグラフィ媒体はさらにクロマトグラフィ媒体より面積的に実質的に小さい検出ゾーンを含み、検出ゾーンは不動化してある分析対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含み、分析対象物が検体中に存在する場合には第１の特異的結合パートナーと分析対象物と第２の特異的結合パートナーを含む３重複合体（即ちサンドイッチ法複合体）が検出ゾーンに形成されるようにしてある。
本発明によるアッセイ装置の別の実施態様は対置成分上に検出器添着パッドを有し、さらにクロマトグラフィ媒体と検体添着パッドを他方の対置成分に有する。本実施態様は、（１）（ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、（ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する導伝手段と、（ｃ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段と、（ｄ）導伝手段と直接接触しクロマトグラフィ媒体の第１の端部と間接的に接触するように配置した検出器添着パッドと、を含む第１の対置成分と、（２）検体添着パッドを含む第２の対置成分と、（３）第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアと、を含む。
本実施態様において、第１と第２の対置成分を対置させることで検体添着パッドが検査しようとする検体を導伝バリア経由で検出器添着パッドに添着させ、さらに導伝手段経由でクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着させる。
本発明のさらに別の実施態様は、（１）（ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、（ｂ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触する吸収手段と、（ｃ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と直接接触する検出器添着パッドと、を含む第１の対置成分と、（２）検体添着パッドを含む第２の対置成分と、（３）第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアと、を含む。
本実施態様において、第１と第２の対置成分が対置された時、検出器添着パッドと検体添着パッドはクロマトグラフィ媒体の第１の端部に直接隣接している検出器添着パッドの領域以外で導伝バリアを介して間接的に接触する。第１と第２の対置成分を対置させることで検体添着パッドは検査しようとする検体を検出器添着パッドに添着ざせさらにクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着させる。
本発明によるアッセイ装置のさらに別の実施態様は、（１）（ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、（ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する検出器添着パッドであって分析対象物の検出用に少なくとも１種類の試薬を含むパッドと、（ｃ）検出器添着パッドと動作的に接触しクロマトグラフィ媒体の第１の端部と間接的に接触し液体を通過させられる導体と、（ｄ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触して液体を吸収するためのアブソーバと、を含む第１の対置成分と、（２）検査しようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンを含み第１の対置成分に取り付けることができ第１と第２の対置成分を対置させ液体を第２の対置成分から第１の対置成分へ移動させられるようにしてある第２の対置成分、（３）第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアと、を含む。
本実施態様において、第１と第２の対置成分は、第１と第２の対置成分が対置していない時に第２の対置成分上の検体調製ゾーンに検体を添着でき、また第１と第２の対置成分を対置させることで検体調製ゾーンが導体と間接的に接触して検査しようとする検体をDB経由で導体に添着して導体を通って流れさらに検出器添着パッドを経由してクロマトグラフィ媒体の第１の端部へ添着されて検体に対する分析対象物の検出用の試薬を追加できるようにしてある。導体から検出器添着パッドを通ってクロマトグラフィ媒体の第１の端部への流れはアブソーバによる液体の吸収で補助される。
望ましくは、検出器添着パッドは前述したように分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、クロマトグラフィ媒体はさらに前述のように検出ゾーンを含む。
本発明によるアッセイ装置の別の実施態様は２種類の標識特異的結合パートナーを含む。本実施態様は、（１）（ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、（ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触し、液体の添加により溶解することのできる形で、検出可能な標識で標識してある分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含む第１の検出器添着パッドと、（ｃ）第１の検出器添着パッドと動作的に接触して液体を通過させることができ、第１の検出器添着パッドが導体とクロマトグラフィ媒体の第１の端部とを架橋して導体から第１の検出器添着パッドを介してクロマトグラフィ媒体の第１の端部へ液体を流せるようにしてある導体と、（ｄ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触して液体を吸収するアブソーバと、を含む第１の対置成分と、（２）第１の対置成分に取り付けることができ、第１と第２の対置成分が対置されて液体が第２の対置成分から第１の対置成分へ移し換えられるようにしてある第２の対置成分であって、（ａ）アッセイしようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーンと、（ｂ）検体調製ゾーンと動作的に接触し、検体調製ゾーンへの検体の添加により溶解することのできる形で分析対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含み、第２の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識され、第２の対置成分上の検体調製ゾーンに隣接して配置して検体調製ゾーンへの検体の添着で第２の特異的結合パートナーを溶解し検体調製ゾーンが検体と第２の特異的結合パートナーの混合物を含むようにする第２の検出器添着パッドと、を含む第２の対置成分と、（３）第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアと、を含む。
第１と第２の対置成分は第１と第２の対置成分が対置していない時に検体を第２の対置成分上の検体調製ゾーンに添着できるように構成する。第１と第２の対置成分を対置させると第２の対置成分上の検体調製ゾーンが第１の対置成分上の導体と導伝バリアを介して動作的に間接的に接触するので検査しようとする検体と第２の特異的結合パートナーを導体を介して流れるように導体に添着させ、さらに第１の検出器添着パッドを介してクロマトグラフィ媒体の第１の端部へ添着させて第１の特異的結合パートナーを検体と第２の特異的結合パートナーに加えることができるようにしてある。導体から第１の検出器添着パッドを経由してクロマトグラフィ媒体の第１の端部への流れはアブソーバによる液体の吸収で補助される。
本発明によるアッセイ装置のさらに別の実施態様は２つのセクタに分割されたアプリケータを有する。本実施態様は、（１）（ａ）第１と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、（ｂ）クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触して液体を通過させることのできる導体と、（ｃ）クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触して液体を吸収するアブソーバと、を含む第１の対置成分と、（２）第１の対置成分に取り付けることができ第１と第２の対置成分を対置させ第２の対置成分から第１の対置成分へ液体を移し換えることができるようにしてあり、第１と第２の対置成分を対置させた時に第１の対置成分上の導体に液体を添加するためのアプリケータを含む第２の対置成分であって、アプリケータが、（ａ）第１と第２の対置成分が対置されていない時にアプリケータへの液体の添加により溶解できるような形で分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、第１の特異的結合パートナーは検出可能な標識で標識してある第１のセクタと、（ｂ）分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーの欠如した第２のセクタの２つのセクタに分割してある第２の対置成分と、（３）第１の対置成分に取り付けられた導伝バリアとを含む。
本実施態様において、第１と第２の対置成分は、第１と第２の対置成分を対置させた時に第２の対置成分上のアプリケータの第２のセクタを除く第１のセクタが導伝バリアを介して第１の対置成分上の導体と間接的に接触し、アプリケータの第２のセクタは第１のセクタを介して導体と間接的に接触するように構成してある。これによりアプリケータの第１のセクタの内容がクロマトグラフィ媒体に添着され、続けて、アプリケータの第１のセクタの内容をクロマトグラフィ媒体に添着してからアプリケータの第２のセクタの内容をクロマトグラフィ媒体へ添着する。アブソーバはクロマトグラフィ媒体から液体を吸収して導体およびクロマトグラフィ媒体を通るアプリケータからの液体の流れを補助する。
本発明の前述のおよびその他の特徴、態様、利点は以下の詳細な説明と、付属の請求項と、添付の図面とを参照してより良く理解される。
説明
定義
本開示の状況で、以下の術語が特に断らない限り以下のように定義される。
特異的結合パートナー：関する分子の三次元構造に依存する特異的非共有反応によって相互作用する分子対の構成要素である。特異的結合パートナーの代表的な対は、抗原−抗体、ハプテン−抗体、ホルモン−受容器、核酸ストランド−相補的核酸ストランド、基質−酵素、インヒビタ−酵素、炭化水素−レクチン、ビオチン−アビジン、ウィルス−細胞受容体などがある。
動作的接触:2つの成分の一方から他方へ、実質的に中断なしで、毛細管または何らかにより液体が流れられるような方法で２つの固形成分が直接的または間接的に接触する場合、２つの固形成分は動作的に接触すると言う。「直接接触」は、２つの成分が物理的に、たとえば端端または前後で接触することを表わす。「間接接触」は２つの成分が物理的に接触していないが、１つまたはそれ以上の導伝手段により架橋されることを表わす。１つまたはそれ以上の導伝手段による架橋は平坦な成分の退避によるなどの端端または前後いずれかの架橋とすることができる。
導伝バリア：術語「導伝バリア」は本明細書において液体および液体に含まれる溶質を導伝することができる一方で、粒子に対してはバリアとして働き一方の成分から他方へ導伝バリアを通る以外の液体の流れを阻止する成分を記述するために用いている。後述のように、このようなバリアは紙などのセルローズから作成できる。
有限容量：吸収手段が配置されている装置内で通常のアッセイ実行中に吸収手段が飽和した場合吸収手段は有限容量であるという。この点で、吸収手段は吸収した余分な液体を放出して少なくとも部分的に導伝性になることができる。
分析対象物：術語「分析対象物」は、アッセイしようとする実際の分子および類似物とこれの誘導体などが分析対象物それ自体と実質的に透過な方法でアッセイに用いられる別の分子に結合する場合に、これらの類似物や誘導体の両方を含む。
抗体：術語「抗体」は適当な特異性の抗体分子それ自体と、抗体フラグメント（Fab、Ｆ（ab'）、Ｆ（ab'）２フラグメントも含む）ならびに化学的に改編した本来の抗体分子ならびに抗体フラグメントを含み、in vitro（試験管内）でのサブユニット再結合により構成したハイブリッド抗体も含まれる。ポリクローナルおよびモノクローナル両方の抗体が特に指定しない限り含まれるものとする。
第２の特異的結合パートナー：特異的結合パートナー対が相互作用する時に特異的結合パートナーの対の構成要素に結合する追加の特異的結合パートナーは、第２の特異的結合パートナーと呼ばれる。たとえば、特異的結合パートナーの対はジアルジア抗原とウサギ抗ジアルジア抗原の両方を含むことができる。この場合、第２の特異的結合パートナーはヤギ抗ウサギIgG抗体であり得る。第２の特異的結合パートナーは、これの結合する抗体特異的結合パートナーの種、クラス、サブクラスに対して特異的なことがある。これ以外に、特異的結合パートナーの一方がビオチン標識されている場合、第２の特異的結合パートナーはアビジンに結合した分子を含むことができる。
I.クロマトグラフィ・アッセイ装置
本発明の１つの態様は生物学的検体中の分析対象物のアッセイに特に有用なクロマトグラフィ・アッセイ装置を含む。本装置は予備的抽出ステップなしに生物検体の直接添着に適し、粒子または有色検体に起因するアッセイ結果との相互作用を最小限に押えるように構成される。
本装置は、対置成分の一方に取り付けて、一方の対置成分から他方の対置成分へ移動する材料のさらに均等な流れを提供するために用いられる導伝バリアを含む。これは一層再現性の高いアッセイを提供し偽陰性または偽陽性の発生確率を減少する。
本装置は少なくとも実質的に平坦な対置成分を有する。実質的に平坦な成分の一方はその表面にクロマトグラフィ媒体を有する。
２個の対置成分がある場合、対置成分の一方は第１の対置成分、また他方は第２の対置成分と呼ばれる。この呼称は任意であり、説明の便宜上のものである。
対置成分各々の役割はこれに設けた成分または成分群によって決まる。
本装置は対置成分を対置させるためとこれに圧力を印加するための手段も有する。対置成分は直接用手的に閉じることで、即ち操作員による操作で、対置していない位置から対置させることができる。印加圧力は一方の対置成分から他方の対置成分へ対置成分に実質的に直交する方向に液体を流して検体が分析対象物の検出および／または判定のためのクロマトグラフィ媒体に適用されるのに十分なものとする。この圧力はクロマトグラフィ媒体を通して液体を流してクロマトグラフィ処理を加速し、少ない時間で検出可能な結果をもたらす。さらに、この圧力により装置内でのたとえば抽出ステップなどのステップの実行が可能になり、アブソーバによるクロマトグラフィ媒体からの過剰な液体の排除を行なってアッセイのバックグラウンドを減少させるためにも使用できる。この圧力は対置成分を対置させ、ロックまたはクランプなどの係合装置により成分どうしを対置させて保持することにより維持される。
本発明による装置はサンドイッチ法または競合法アッセイの実行用に製造できる。
本発明による装置が特に有用なアッセイの種類はサンドイッチ法イムノアッセイである。本明細書で用いているように、術語「イムノアッセイ」は特異的結合アッセイを含むように用いられるのが一般的で、特に指定しない限り、特異的結合パートナーが抗体であるようなアッセイに必ずしも制限される必要はない。
A.本発明による装置および方法の原理
本発明による装置の全部はクロマトグラフィ媒体を有し導伝バリアによりクロマトグラフィ媒体への液体の添着が調節される。バリアは一層スムーズな流れを提供し、クロマトグラフィ開始時にクロマトグラフィ媒体上の特定位置における分析対象物の高度に局部的な集中や、または場合によって標識特異的結合パートナーの集中を防止する。これによりクロマトグラフィの均等な進行を保証し、分析対象物の集中の結果としてクロマトグラフィ・レートの遅延を防止する。
本発明の基本原理は単一成分アッセイ装置に使用できるが、ヒンジまたはその他の接続により接続される２つまたはそれ以上の対置成分を含みロックなどの係合装置により締結可能なアッセイ装置を構成するのに一般に適したものである。
これにより成分上に圧力をかけて１つの成分から別の成分へ液体を流し、フローレートを加速することができる。使用される圧力の度合は、クロマトグラフィ媒体、分析対象物、ラベルの特性に対して最適になるように調節できる。
B.本発明による装置で共通の成分
本発明によるアッセイ装置で多数の成分が共通でありここで便宜を計るために説明する。
1.クロマトグラフィ媒体  クロマトグラフィ媒体はストリップである。代表的には、ストリップは実質的に平坦だが、全ての用途で必要とされるものではない。代表的には長方形で、第１と第２の端部を有し、第１と第２の表面を有する。本明細書を通して、術語「第１の端部」は液体をクロマトグラフィ媒体に第１に添着する端部またはその付近を表わし、術語「第２の端部」はクロマトグラフィ媒体の対抗する端部に適用する。クロマトグラフィ媒体の第１の端部またはその付近に添着される液体は、必ずではないが、検体または処理済み検体であり得る。クロマトグラフィ媒体は分析対象物および分析対象物−抗体結合体の薄層クロマトグラフィ用媒体として好適な材料たとえばニトロセルロース、ナイロン、レーヨン、セルロース、紙、またはシリカから構成する。クロマトグラフィ媒体は必要に応じて前処理または改良できる。代表的にはクロマトグラフィ媒体は透明としてこれに出現する有色ゾーンをいずれかの側面から観察できるようにする。
2.導伝バリア
導伝バリアは線維性、多孔性材料たとえばヤルロース（即ち紙）または液体に対して湿潤性があり、添着された液体を実質的に吸収しないニトロセルロースなどが代表的である。代表的には、導伝バリアは長方形または正方形である。導伝バリアはアッセイ装置内に配置し導伝バリアの一側面が装置の対向成分の一方と直接接触し他方の側面は装置の第２の対置成分と直接接触する。導伝バリアは導伝バリアの一側面に添着された液体が他側面に浸透する特性を有している。
3.アブソーバ  本発明による多数の装置で、アブソーバ（吸収層）はクロマトグラフィ媒体の一端または両端と動作的に接触する。アブソーバは十分な液体を保持するような何らかの吸水性材料から作成して液体がクロマトグラフィ媒体から排水されアブソーバ内に溜るようにする。代表的な材料として、これに制限されないが、ろ紙が挙げられる。
4.その他の液体担送成分  後述のように、本発明による特定の装置で、検体調製ゾーン、アプリケータ、拡散膜および／または導体としてその他の液体担送成分を用いることができる。
これらの成分は実質的に吸収することなく液体を通すような親水性材料から調製する。このような材料は従来技術で周知である。場合によって、これらの成分は成分に液体を添加して溶解することのできる乾燥した形で成分を含むことができる。
5.対置成分  本発明によるアッセイ装置の実施態様の多くは２個の対置成分を含む。対置成分の本体は湿気に対して十分な耐水性があり本装置で行なうアッセイの実行に関係する液体を含むことができるような積層厚紙から作成するのが望ましい。その他のセルロース基材たとえば板紙やソリッドブリーチサルファイト（SBS）も使用できる。これ以外に、対置成分の本体は湿気を通さないプラスチックから作成できる。好適なプラスチックはレクサンTMなどのポリカーボネート・プラスチックである。
対置成分は液体に耐水性のある材料たとえばプラスチックから作成するのが望ましく第１と第２の対置成分で用いられている材料と共通に接続できるかまたは同一のヒンジによって接続する。
6.標識成分
サンドイッチ法イムノアッセイを実行することを意図しているアッセイ装置では、標識成分は分析対象物に対する標識特異的結合パートナーが代表的である。この標識成分は代表的には易動性で、クロマトグラフィ媒体を通って自由にまたは分析対象物と結合して移動できる。標識は視覚的に検出できる標識、たとえばコロイド金属標識などが望ましい。望ましくは、コロイド金属標識は、金、銀、青銅、鉄、またはスズで、最も望ましいのは金である。金標識抗体および抗原の調製は、J.DeMey,“The  Preparation  and  Use  of  Gold  Probes,"in Immunocytochemistry:Modern Methods and Applications（J.M.Polak and S.Van Noorden,eds.,Wright,Bristol,1986）ch.8,pp.115−145に記載があり、本明細書で参照として含まれる。コロイド金で標識した抗体は、たとえばシグマSigma Chemical Company St.Louis,MOから入手できる。
これ以外に、他のコロイド標識たとえばコロイド硫黄標識または染料シリカ標識も使用可能である。あまり好ましくない代替実施態様において、たとえば放射性標識または酵素標識などの他の標識も使用することが可能である。
C.2成分装置の一般構成  一般に、本発明による２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置は、（１）アッセイしようとする検体を受け入れるのに適した検体調製ゾーンを含む第１の対置成分、（２）クロマトグラフィ媒体を含む第２の対置成分、（３）第２の対置成分に取り付けた導伝バリア、を含む。
この装置において、第１と第２の対置成分は装置を閉じて検体調製ゾーンがクロマトグラフィ媒体へ検査しようとする検体を添着させられるように対置させることができる。使用において、第１と第２の対置成分は検出試薬を検体調製ゾーンに添着した後で対置させるのが代表的である。第１と第２の対置成分を対置させた時、検体調製ゾーンは検体と検出試薬を導伝バリア経由でクロマトグラフィ媒体に添着させ、検体と検出試薬の組み合せが導伝バリア内部を拡散してからクロマトグラフィ媒体に添着されるようにする、検体と検出試薬がクロマトグラフィ媒体の少なくとも一部を横断した後、検出試薬が分析対象物の有無および／または量の検出可能な表示をもたらし、クロマトグラフィ媒体の少なくとも一部で検出試薬を観察および／または測定してこの表示を得ることができる。これによって分析対象物の検出および／または判定を得ることができる。
この基本装置の構造の詳細の説明は、可能な限り本発明による他の２成分アッセイ装置へも適用される。
検出試薬は前述の分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、さらに成分を含むことがある。
この処理では検出ゾーン内の第２の特異的結合パートナーの濃度と検出ゾーンのサイズによっては分析対象物の定性的および／または定量的表示を行なうことができる。
代表的には、結果を得るために、アッセイには、検体調製ゾーン上での検体のインキュベーション時間、ならびにクロマトグラフィそれ自体に必要な時間を含めて30秒から10分、さらに代表的には１ないし５分間を必要とする。代表的には、アッセイは室温で行なうが、分析対象物と特異的結合パートナーの性質によっては４℃から37℃、または場合によってはもっと高温で行なうこともできる。場合により、低温でアッセイを実行する方が変性を制限するのに望ましいことがあるが、別の場合には適当な分析対象物と特異的結合パートナーによりもっと高温で実行する方がアッセイを高速化できることもある。
本発明による装置では、検体をクロマトグラフィ媒体に添着すると分析対象物の検出が検体と何らかの添加液体の接触なしに行なわれる。検体の洗浄を行なっている場合でもこれが当てはまる。言い換えれば、本装置は自己内蔵型で、検体をクロマトグラフィ媒体へ添着すれば検体の希釈または追加の液体による標識は必要とされない。これは検体と標識特異的結合パートナーを最大感度で最適な濃度に提供するものである。
本発明による装置では、クロマトグラフィ・アッセイはクロマトグラフィ媒体内部の検体の移動の結果として行なわれる。分析対象物は検体がクロマトグラフィ媒体に添着された位置とは異なる位置で検出される。
クロマトグラフィ・アッセイ装置の一般構成が図1Aに図示してある。クロマトグラフィ・アッセイ装置10は第１の対置成分12、第２の対置成分14、および第２の対置成分14に取り付けた導伝バリア16を有する。代表的には、導伝バリア16は、たとえば導伝バリア16と第２の対置成分14の相対移動ができるようにする接着剤などで第２の対置成分14に可撓的に取り付ける。図１Ａおよびその他の図面において、導伝バリア16は図示の便宜のために第２の対置成分14から分離して図示してあるが、クロマトグラフィ・アッセイ装置10の動作中は導伝バリア16は第２の対置成分14と直接接触する。導伝バリア16は導伝バリア16の端部で第２の対置成分14に取り付けることができる。
第１の対置成分12は検体調製ゾーン18を含む。第２の対置成分14はクロマトグラフィ媒体20を含む。クロマトグラフィ媒体20は第１の端部22と第２の端部24とを有し、クロマトグラフィ媒体20は検出ゾーン26と対照ゾーン28とを含む第１の対置成分12と第２の対置成分14はヒンジ30によって接続する。第１の対置成分12と第２の対置成分14は第１と第２の対置成分を対向して固定するための係合装置をさらに含むのが望ましい。係合装置は第１の対置成分12と第２の対置成分14が対置された時に係合するロック32と34のようなロックを含むことができる。ロック32と34の構造と寸法は対置成分12と14に最適な度合の圧力をかけられるように変更できる。最適な圧力の度合は、クロマトグラフィ媒体20の厚みと構造、意図している検体量、およびその他の要因によって変化する。検体または試薬の漏洩を防止するには、封止リッジまたはガスケット36を第１と第２の対置成分12および14の周辺部の周りに配置する。ロック32と34などの係合装置の使用と、封止リッジまたはガスケット36の使用は一般に好適であるが、これらの成分は本発明による基本装置を製作する上で必須ではない。第２の対置成分14は第１の窓38を有し、オプションで、第１の対置成分12はいずれかの側面からクロマトグラフィ媒体20を観察できるようにするための第２の窓40を有することができる。第２の窓40によって試薬が添着された表面に対向する側の表面からクロマトグラフィ媒体20を観察できる。別のオプションとして、第１の窓38を無くし、第２の窓40をクロマトグラフィ媒体20の観察に使用しても良い。これ以外にも、第１のおよび／または第２の対置成分12と14を透明または透光性の材料から作成して、クロマトグラフィ媒体20を別々の開口部または窓なしに観察できるようにしても良い。
図1Bは第１の対置成分12と第２の対置成分14を対置させた後のクロマトグラフィ・アッセイ装置10を示す。検出ゾーン26と対照ゾーン28を含むクロマトグラフィ媒体20は、窓38から観察できる。検体調製ゾーン18から導伝バリア16を通る流れは第１の端部22でまたはその付近でクロマトグラフィ媒体20と接触し、検体調製ゾーン18の内容が、検出ゾーン26と対照ゾーン28を含めクロマトグラフィ媒体20を通って流れる。
アッセイ装置10は、オプションとして、図1Aに図示してあるようにクロマトグラフィ媒体20の第１の端部22と動作的に接触する導体42をさらに含む。導体42は実質的に液体を吸収することなく伝達できるセルロースまたはその他の材料などの材料とすることができる。導体42は界面活性剤処理してクロマトグラフィ媒体20へ試薬がさらに均等に添着できるようにしても良い。導体42が存在する場合で導伝バリア16は第１と第２の対置成分12および14が対置した時に、導体42と接触するのが望ましい。
図1Cは第１と第２の対置成分12および14を対置させた後で導体42を備えたアッセイ装置10の側面図をさらに詳細に示し、検体調製ゾーン18,導伝バリア16,導体42の大まかな寸法上の関連性を示している。代表的には、導伝バリア16のエッジは検体調製ゾーン18のエッジを越えて延出し、さらに導体42のエッジは導伝バリア16のエッジを越えて延出する。これは、これらのエッジを越える望ましくない試薬の流れを最小限に抑さえるかまたは排除するためである。図1Cの矢印は検体調製ゾーン18,導伝バリア16,導体42を通る液体の流路を示す。
アッセイ装置10はクロマトグラフィ媒体20の第２の端部24と動作的に接触して第１の端部22から第２の端部24へ向かいクロマトグラフィ媒体20を通る、図1Aに図示したような液体を吸い取る際の補助のためのアブソーバ44をさらに含むことができる。
検体調製ゾーン18はたとえば、セルロース、紙、ナイロン、レーヨン、グラスファイバー、羊毛、または合成不織布などの何らかの好適な材料から作成できるが、これに制限されない。検体調製ゾーン18の多孔性は、全血または便検体などの検体中の細胞性または粒状物質を瀘過できるように選択する。検体調製ゾーン18は導伝バリア16を介してクロマトグラフィ媒体20に検体を添着する前に検体の処理のために少なくとも１種類の試薬を含むことができる。検体調製ゾーン18は液状検体を受け入れるのに適している。本明細書で用いているように、術語「液状検体」はクロマトグラフィを実行できる十分な液体を有する検体で、半固形検体および粒状物質を含む検体を含むものと定義される。
検体調製ゾーン18に存在し得る試薬は、検体調製ゾーン18に添着される検体やアッセイしようとする分析対象物によって変化する。試薬には、pHを調節するための酸または塩基、pHを安定させるための緩衝液、EDTAまたはEGTAなどの金属をギレート化するためのキレート剤、動物細胞の細胞膜やバクテリアの細胞壁を水解して分析対象物を開放するための水解酵素、酵素のための基質または補酵素、その他を含むことができ、これに限定されない。特に有用な抽出試薬の１つは窒素酸を生成するため窒化ナトリウムと酢酸を混合した混合物である。窒化ナトリウムは検体調製ゾーン18上に乾燥した形で存在でき、酢酸は検体追加後に検体調製ゾーン18へ追加できる。
検体、またはオプションで、咽喉スワブなどのサンプリング器具または微孔フィルタを検体調製ゾーン18に操作員が配置できる。必要であれば、他の試薬を追加できる。
第１と第２の対置成分12および14の本体はアッセイの実行の際に関係する液体を含むように湿気に対して十分な非透過性の積層厚紙から作成するのが望ましい。その他のセルロース基材の材料、たとえば板紙やソリッドブリーチサルファイト（SBS）も使用できる。これ以外に、本体は湿気に対して非透過性のプラスチックから作成できる。好適なプラスチックは、レクサンなどのポリカーボネート・プラスチックである。
ヒンジ30は液体に対して非透水性の材料、たとえば第１と第２の対置成分12および14の本体に使用される材料と接合性のあるまたは同一のプラスチックなどから作成するのが望ましい。
代表的には、クロマトグラフィ媒体20,アブソーバ44,導体42,導伝バリア16およびその他の液体を受け入れる成分は接着剤で第１と第２の対置成分12および14の本体に固定する。適当な接着剤は従来技術で周知である。その他の接合方法、たとえばステープロ止めやタックも使用できる。
分析対象物は分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを用いて、またはそれ自身は標識していない分析対象物に対する特異的結合パートナーに対する標識第２の特異的結合パートナーを用いて検出する。多くの場合、分析対象物に対する標識特異的結合パートナーの使用が好適である。標識特異的結合パートナーの標識は前述したようにコロイド金属標識などの視覚的に検出可能な標識が望ましい。
これ以外に、他のコロイド標識、たとえばコロイド硫黄標識または染料シリカ標識も使用できる。あまり好適でない代替実施態様において、視覚的に検出可能な標識は有色ラテックス標識である。他の標識、たとえば放射性標識の使用もまた可能である。
本発明の出願人はこの理論に必ずしも固執することを意図していないが、検体を含む液体をコロイド金などのコロイド金属標識で標識してある溶解可能な特異的結合パートナーに添加した場合、分析対象物と標識特異的結合パートナーの間の反応速度はきわめて高速である。このような速い反応速度によって、分析対象物と標識特異的結合パートナーの組み合せが導伝バリア16を介してクロマトグラフィ媒体20に添着される前に分析対象物の完全な標識が実質的に行なえる。
つまり、本発明によるアッセイ装置で行なう一次元クロマトグラフィ法では、クロマトグラフィにかけるものがほとんど分析対象物とこれに対応する標識特異的結合パートナーの２相性複合体である。これにより特異的結合パートナーを結合しない汚染物質から複合体を分離できアッセイの精度を向上させられる。
本実施態様において、標識特異的結合パートナーは検体調製ゾーン18へ液体の添加により再溶解できる形で検体調製ゾーン18上に存在するのが望ましい。
代表的には、液体は水性液体である。代表的には、液体は検体それ自体である。
場合によっては、特に小量の検体量を使用する場合、追加の緩衝液またはその他の液体を検体調製ゾーンに追加するのが望ましい場合がある。
後述する他の実施態様において、標識特異的結合パートナーは検体調製ゾーンから分離されているがアッセイ実行中にはこれと接触するクロマトグラフィ・アッセイ装置の成分上に存在できる。これらの実施態様において、標識特異的結合パートナーはこの成分上に再溶解可能な形で存在するのが望ましく、また検体が成分と接触する時に溶解される。場合によっては標識特異的結合パートナーは、検体とは別個の、違う液体を成分に追加して溶解できる。
第２の対置成分14上のクロマトグラフィ媒体20は平坦なストリップである。代表的には、第１と第２の端部22および24を有する長方形である。本明細書全体で、術語「第１の端部22」は検体を添着するクロマトグラフィ媒体20の端部を表わし、術語「第２の端部24」はこれに対向する端部を表わす。アッセイ実行中の検体の流れる方向はクロマトグラフィ媒体20の第１の端部22から第２の端部24に向かう方向である。クロマトグラフィ媒体20は前述のように分析対象物および分析対象物−抗体複合体の薄層クロマトグラフィのための媒体として好適な材料から構成される。
用途によっては、クロマトグラフィ媒体20の上部に第２の可撓性で透明な支持を配置して、膜を通って流れる検体を調節し、膜最上部を越える移動を防止するのが好ましい。適当な可撓性透明支持としては、ポリエチレン、ビニール、マイラー、セロファンなどが挙げられる。
クロマトグラフィ・アッセイ装置10をサンドイッチ法イムノアッセイなどのアッセイに使用する場合、クロマトグラフィ媒体20は実質的にクロマトグラフィ媒体20より小さい検出ゾーン26をさらに含むことができる。検出ゾーン26は拡散しないように不動化してある分析対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含むことができる。第２の特異的結合パートナーは共有または非共有手段のどちらかでクロマトグラフィ媒体に結合できる。共有手段が一般に好適である。アッセイしようとする分析対象物が抗原またはハプテンの場合、第２の特異的結合パートナーは抗原またはハプテンに対する抗体とすることができる。これ以外に、分析対象物を抗体として、第２の特異的結合パートナーを抗体によって特適に結合され得る抗原またはハプテンとすることができる。
クロマトグラフィ媒体20はクロマトグラフィ媒体20より実質的に小さく、検出ゾーン20から離れて対照ゾーン28をさらに含むことができる、対照ゾーン28は三次元「サンドイッチ法」複合体の形成で検出ゾーン26で結合されなかった標識抗体を結合するために拡散しないように不動化した分析対象物を含むことができる。このような抗体はどれも対照ゾーン28で不動化分析対象物によって結合され対照ゾーン28で検出可能領域またはバンドを形成する。これによって後述するようにアッセイの動作と試薬の正しい結合についてのチェックを提供する。検出ゾーン26での第２の特異的結合パートナーと対照ゾーン28での分析対象物とを結合するために用いられる方法は従来技術で周知であり、これ以上説明する必要はない。
これ以外に、分析対象物の種類によっては、たとえば炭化水素などで、分析対象物をクロマトグラフィ媒体20に安定に固定するのが困難または不可能なことがある。このような場合、対照ゾーン28は標識抗分析対象物抗体に特異的な抗体を不動化したゾーンを含むことができる。たとえば、分析対象物がストレプトコッカスＡ特異性炭化水素で、ストレプトコッカスＡ抗原に特異性のある標識抗体がウサギIgGの場合、対照ゾーン28はヤギ抗ウサギIgG抗体を含むことができる。このような場合に、分析対象物濃度が高い検出ゾーン26で標識抗分析対象物抗体の完全な取り込みとこれに続く対照ゾーン28からの標識抗分析対象物抗体の消失を防止するため、分析対象物に対して非特異的で標識抗分析対象物抗体以外の種の標識抗体を追加するのが望ましいことがある。このような抗体は免疫学的に相違のない免疫グロブリンまたは被験検体に見付からない分析対象物に対する抗体を構成し得る。対照ゾーン28は被験検体に見付からない抗種抗体または分析対象物を含むことになる。
本装置の幾つかの変化が可能である。１つの変化において、前述したように、検体調製ゾーン18は検体調製ゾーン18への液体の添加により溶解できる形で検出可能な標識により標識された分析対象物に対する特異的結合パートナーをさらに含むことができる。液体は検体それ自体とすることができる。標識特異的結合パートナーは凍結乾燥または可逆的に沈澱させ検体調製ゾーンへの検体の追加により再溶解され易動性になるようにできる。この変化において、検体調製ゾーン18への検出試薬追加は、検出試薬が検体調製ゾーン18への検体の添加により自動的に生成されるので、必要ではない。
別の変化において、第２の対置成分14上のクロマトグラフィ媒体20の第１の端部22と動作的に接触する導体42を動作的に接触する有限容量のアブソーバ42aで置き換えられる。アブソーバ42aは第１と第２の対置成分12および14が対置された時に導伝バリア16と接触するように配置して、検体をアブソーバ42aに添加する。これはクロマトグラフィ媒体20が過負荷にならないようにクロマトグラフィ媒体20への検体の流れを調節する際に有用である。
このバージョンで、アブソーバ42aは前述したように再溶解できる形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含むことができる。この構成において、標識特異的結合パートナーは第１と第２の対置成分12および14を対置させた時に再溶解され、導伝バリア16を介してアブソーバ42aへ検体を添着する。検体と再溶解した標識特異的結合パートナーの混合物が第１の端部22からクロマトグラフィ媒体20に入る。
本発明によるアッセイ装置での導伝バリアの使用は、試薬の過剰に高濃度の局部的集中を防止し、クロマトグラフィ媒体へまたこれを通る試薬の流れが実質的に同期するように保証することで、クロマトグラフィの一層定常的で再現性のある処理を提供する。
D.2成分装置の別の構成
前述の図1A、図1B、図1Cに図示した装置の構造の一般原理は、本発明による他の装置を製作するためにも使用できる。これらの装置の詳細を以下に説明する。
1.第１の対置成分上に検体調製ゾーンを備える装置
本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置の別の実施態様は、第１の対置成分上に、即ちクロマトグラフィ媒体が配置されている成分上に検体調製ゾーンを含む装置である。代表的には、本実施態様において、第２の対置成分は再溶解できる形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含むアプリケータを含む。本実施態様において、導伝バリアは第１の対置成分に取り付けておきアプリケータと検体調製ゾーンの間の動作的接触が導伝バリア経由で行なわれるようにする。
本実施態様において、第１と第２の対置成分を対置させることでアプリケータは導伝バリアを介して検体調製ゾーンと接触するようになり、分析対象物に対する標識特異的結合パートナーが再溶解される。
望ましくは、第１の対置成分はさらに導体を含み、検体調製ゾーンとクロマトグラフィ媒体の間の動作的接触が検体調製ゾーンおよびクロマトグラフィ媒体両者の導体との動作的な接触によって実現されるようにする。
望ましくは、第１の対置成分はさらにクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触するアブソーバを含む。
クロマトグラフィ媒体は前述したように検出ゾーンおよび調製ゾーンを備えて製作されるのが望ましい。
アッセイ装置の本実施態様を図２に図示してある。クロマトグラフィ・アッセイ装置60は第１の対置成分62と第２の対置成分64とを含む。062は検体調製ゾーン66、検体調製ゾーン66と動作的に接触する導体68、第１の端部72と第２の端部74とを有するクロマトグラフィ媒体70を含む。クロマトグラフィ媒体70は検出ゾーン78と対照ゾーン80とを含む。導伝バリア82は第１の対置成分62に取り付けられる。第２の対置成分64は再溶解できる形で標識特異的結合パートナーを含むのが望ましいアプリケータ84を含む。第１の対置成分62と第２の対置成分64はヒンジ86によって接合される。第１の対置成分62はクロマトグラフィ媒体70の少なくとも一部が観察できるようにする窓88を含む。第１の対置成分62と第２の対置成分64はロック90および92などの係合装置を有し、ガスケット94が第１と第２の対置成分62および64を包囲する。
動作において、検体は検体調製ゾーン66に添着され、前述の装置を運用できる。
2.同一の対置成分上に２個の別個のアプリケータを含む装置
本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置のさらに別の実施態様は、同一の動作的に接触上に２個の別個のアプリケータを含む。これら２個のアプリケータは、動作的接触が導伝バリアによって行なわれる対置成分を対置させた時に対置成分上の導体により架橋されるまで動作的に接触しない。
クロマトグラフィ・アッセイ装置の本実施態様が図３に図示してある。クロマトグラフィ・アッセイ装置100は第１の対置成分102と第２の対置成分104とを含む。第１の対置成分102は第１の端部108と第２の端部110とを有するクロマトグラフィ媒体106、第１の端部108と動作的に接触する導体112、およびクロマトグラフィ媒体106の第２の端部110と動作的に接触するアブソーバ114を含む。クロマトグラフィ媒体106は検出ゾーン116と対照ゾーン118を含む。導伝バリア120は第１の対置成分102に取り付けられる。第２の対置成分104は第１のアプリケータ（検体添着パッド）122と第２のアプリケータ（検出器添着パッド）124とを含む。第１のアプリケータ122と第２のアプリケータ124は第１の対置成分102と第２の対置成分104が対置されるまで動作的に接触しない。第１の対置成分102と第２の対置成分104とを対置すると、第１のアプリケータ122が導伝バリア120を介して導体122と動作的に接触するようになり、第２のアプリケータ124は導体122とクロマトグラフィ媒体106の第１の端部108の両方に導伝バリア120を介して動作的に接触する。重複部分は数ミリメートル、即ち液体の移し換えに十分な量が代表的である。これによって第１のアプリケータ122と第２のアプリケータ124は導体112により架橋されて、第１のアプリケータ122と第２のアプリケータ124の内容が導伝バリア120を通り、さらに導体112を通ってクロマトグラフィ媒体106に添着される。第１の対置成分102と第２の対置成分104はヒンジ126によって接合される。第２の対置成分104はクロマトグラフィ媒体106の観察ができるように窓128を含む。
第１と第２の対置成分102と104はロック130および132などの係合装置とガスケット134も含む。
第１のアプリケータ122は検体添着パッドを含むことができ、第２のアプリケータ124は検出器添着パッドを含み、これに検出試薬を添着できる。術語「検出器添着パッド」は、本明細書で用いているように、検出試薬、代表的には分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含む成分を表わす。術語「検出器添着パッド」の使用はこの成分において検出を行なうことを意味するものではなく、代表的には検出はクロマトグラフィ媒体の検出ゾーンで行なわれる。
望ましくは、第２のアプリケータ124（検出器添着パッド）は、第２のアプリケータ124への液体の添加により再溶解できる形で検出可能な標識により標識された分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む。液体は代表的には検体それ自体であり、これが第１と第２の対置成分102および104を対置させた時に標識特異的結合パートナーを溶解する。ある種のアッセイでは、検出器添着パッドに別々に再構成する液体を添加するのが望ましいこともある。これ以外にも、標識特異的結合パートナーは第２のアプリケータ124に液状で添着できる。
3.クロマトグラフィ媒体として同一対置成分上に標識特異的結合パートナー用の備える装置
本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置のさらに別の実施態様は、クロマトグラフィ媒体として同一対置成分上に標識特異的結合パートナー用のパッドを含む２成分装置である。本装置において、第２のアプリケータは他方の対置成分上に配置される。
本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置の本実施態様は図4Aに図示してある。クロマトグラフィ・アッセイ装置140は第１の対置成分142と第２の対置成分144とを有する。第１の対置成分142は第１の端部148と第２の端部150とを有するクロマトグラフィ媒体146を有する。クロマトグラフィ媒体146は検出ゾーン152と、オプションで、サンドイッチ法イムノアッセイに適したアッセイ装置の他の変化について前述したように、対照ゾーン154を有する。第１の対置成分142はクロマトグラフィ媒体146の第１の端部148と動作的に接触する導体156と、クロマトグラフィ媒体146の第２の端部150と動作的に接触するアブソーバ158も有する。第１の対置成分142は導体156と直接接触してクロマトグラフィ媒体146の第１の端部148と間接的に接触するように配置された検出器添着パッド160も有する。第１の対置成分142には導伝バリア162が取り付けられている。第２の対置成分144は検体添着パッド164を有する。第１の対置成分142と第２の対置成分144はヒンジ166によって接合される。第１の対置成分142と第２の対置成分144を対置させた時、検体添着パッド164は導伝バリア162を介して検出器添着パッド160と動作的に接触するようになる。第２の対置成分144はクロマトグラフィ媒体146を観察できるようにするための窓168を含む。第１と第２の対置成分142と144はロック170および172などの係合装置と、前述したようなガスケット174を含む。
装置140の断面後面図が図4Bに図示してある。図4Bに図示した断面は図4Aの図面からみて、クロマトグラフィ媒体146とヒンジ166の間でヒンジ166に対向するエッジに向かって見たものである。図4Bでは第１の対置成分142と第２の対置成分144を対向して図示しており、導伝バリア162がこの間にある。検体添着パッド164は導伝バリア162を介して検出器添着パッド160と間接接触して図示してある。検出器添着パッド160は導体156と接触し、これがさらにクロマトグラフィ媒体146の第１の端部148に接触する。クロマトグラフィ媒体146の検出ゾーン152と対照ゾーン154が図示してある。クロマトグラフィ媒体146の第２の端部150は、対照ゾーン154に近い方で、アブソーバ158と接触する。図4Bの矢印は検体添着パッド164、導伝バリア162、検出器添着パッド160を通る液体の流路を示す。
第１と第２の対置成分142と144を対置させることで検体添着パッド164が導伝バリア162を介して検出器添着パッド160に検査しようとする検体を添着させ、さらに導体156を介してクロマトグラフィ媒体146の第１の端部148に添着させる。
望ましくは、検出器添着パッド160は検出器添着パッド160への液体の添加により再溶解可能な形で分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含み、第１の特異的結合パートナーは検出可能なラベルで標識される。
望ましくは、検体を添着した後の検体添着パッド164の内容は液体を含み、検出器添着パッド160へ添着された液体は検体添着パッドの内容を含む。この構成において、標識特異的結合パートナーを再溶解するのには追加の液体を必要としない。
本装置の変化において、アブソーバは第１の対置成分上に配置されるのではなく、第２の対置成分上に配置されている。アブソーバは第２の対置成分上にこれも配置されている検体添着パッドから分離され第１の対置成分と第２の対置成分を対置させた時にクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触するように配置されている。装置のこの変化が図５に図示してある。図５において、アブソーバ158が第２の対置成分144上の再配置され、第１と第２の対置成分142と144が当接された時にクロマトグラフィ媒体146の第２の端部150と動作的に接触することを除いて、装置の全ての成分は図４と同一である。これにより一層大きいアブソーバが使用できる。大きなアブソーバの利点は、多くの検体量を使用でき、希釈検体を分析できるようになることを含むものである。これはアッセイに大きなダイナミックレンジを提供できる。
4.クロマトグラフィ媒体の第１の端部と直接接触する検出器添着パッドを備えた装置
本装置の更なる変化では、検出器添着パッドとクロマトグラフィ媒体の間の導体を排除して、検出器添着パッドがクロマトグラフィ媒体の第１の端部と直接接触する。この変化において、第１と第２の対置成分を対置させた時、検出器添着パッドと検体添着パッドはクロマトグラフィ媒体の第１の端部に直接隣接している検出器添着パッドの領域を除いて導伝バリアを介して動作的に接触する。検出器添着パッドのこの領域には僅かなギャップまたはオフセットがあり、検体は検体添着パッドまたは導伝バリアからクロマトグラフィ媒体へ直接流れることができない。このギャップまたはオフセットは約0.5ミリメートルから約２ミリメートルが代表的で、約0.5ミリメートルから約１ミリメートルがさらに代表的である。
この変化は大量の「フック」効果による偽陰性を発生することなく標識抗ヘモグロビン抗体の使用による便潜血の検出に特に好適である。これは他の分析対象物にも使用可能である。
この変化は図6Aに図示してある。クロマトグラフィ・アッセイ装置200は第１の対置成分202と第２の対置成分204を有する。第１の対置成分202は、第１の端部208と第２の端部210を有するクロマトグラフィ媒体206を有する。クロマトグラフィ媒体206は検出ゾーン212と対照ゾーン214を有する。第１の対置成分202はクロマトグラフィ媒体206の第２の端部210と動作的に接触するアブソーバ216も有する。第１の対置成分202はクロマトグラフィ媒体206の第１の端部208と直接接触する検出器添着パッド218も有する。第１の対置成分202には導伝バリア220が取り付けられている。
第２の対置成分204は検体添着パッド222を有する。第１の対置成分202と第２の対置成分204はヒンジ224によって接合される。第１の対置成分202と第２の対置成分206を対置させた時に、検体添着パッド222はクロマトグラフィ媒体206の第１の端部208と接触する検出器添着パッド218の端部にある狭いギャップまたはオフセット226を除き、導伝バリア220を介して検出器添着パッド218と接触するようになる。このギャップ226は検体添着パッド222へ添着された検体がクロマトグラフィ媒体206へ直接流れるのを防止する。第２の対置成分204はクロマトグラフィ媒体206を観察できるように窓228を有する。第１と第２の対置成分202および204は、前述のようにロック230および232などの係合装置とガスケット234を有する。
図6Aの装置200の後面断面図が図6Bに図示してある。図6Bに図示した断面図は図6Aの図面からクロマトグラフィ媒体206とヒンジ224の間でヒンジ224に対向するエッジに向かってみたものである。図6Bでは第１の対置成分202と第２の対置成分第２の端部24を対置して示し、これらの間の導伝バリア220とヒンジ224を閉じた位置で示してある。検体添着パッド222は、クロマトグラフィ媒体206に最も近い検出器添着パッド218の端部にある小さいギャップ226を除いて検出器添着パッド218と間接接触するように図示してある。検出器添着パッド218はクロマトグラフィ媒体206の第１の端部208と直接的に接触する。クロマトグラフィ媒体206の検出ゾーン212と対照ゾーン214が図示されている。クロマトグラフィ媒体206の、対照ゾーン214に近い方の第２の端部210はアブソーバ216と接触している。
5.第１の成分上に検出器添着パッドを備える装置
本発明による２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の別の実施態様は、第１の対置成分上に配置した検出器添着パッドと検体添着パッド上に配置したSZPを有する。本装置において、検出器添着パッドはクロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触するように配置されている。検出器添着パッドは検出器添着パッドへの液体の添加により再溶解可能な形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含むのが望ましい。本装置はさらに検出器添着パッドと動作的に接触しクロマトグラフィ媒体の第１の端部と間接接触する導体、ならびにクロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触するアブソーバを含む。
本発明の装置の本実施態様の動作において、検体を第２の対置成分上の検体調製ゾーンに添着してから第１と第２の対置成分を対置させる。これにより検体調製ゾーンの内容を導伝バリアを介して導体に添着し、さらに検出器添着パッドを介してクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着する。検体が検出器添着パッドに達すると、検出器添着パッドの内容が溶解される。検出器添着パッドの内容が分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む場合、検出器添着パッドを介しての検体の通過により検体中に存在するあらゆる分析対象物に特異的結合パートナーが結合することになる。
本装置の実施態様が図７に図示してある。アッセイ装置240は第１の対置成分242と第２の対置成分244とを有する。第１の対置成分242は第１の端部248と第２の端部250とを有するクロマトグラフィ媒体246を含む。第１の対置成分242はクロマトグラフィ媒体246の第１の端部248に動作的に接触し、検出器添着パッド252と動作的に接触しクロマトグラフィ媒体246の第１の端部248と間接接触する検出器添着パッド252と、クロマトグラフィ媒体246の第２の端部250と動作的に接触するアブソーバ256も含む。クロマトグラフィ媒体246は検出ゾーン258と対照ゾーン260を含む。第１の対置成分242には導伝バリア262を取り付けてある。
第２の対置成分244は検体調製ゾーン264を含む。FSCC242および244はヒンジ266によって接合される。第２の対置成分244はクロマトグラフィ媒体246の少なくとも一部を観察できるようにするか移行部268を有する。第１と第２の対置成分242および244は前述のように係合装置270および272とガスケット274を含む。
本実施態様の変化は第２の対置成分244上と第１の対置成分242上に再溶解可能な形で分析対象物に対する特異的結合パートナーを含む。再溶解可能な特異的結合パートナーが第２の対置成分244上に配置される場合、検体調製ゾーン264それ自体に直接配置しないのが望ましい。むしろ、検体が第１に検体調製ゾーン264を通過し、その後で検体調製ゾーン264を包囲する領域276に移動して、特異的結合パートナーを再溶解するように領域276で検体調製ゾーン264を包囲するのが望ましい。たとえば、検体調製ゾーン264は第２の対置成分244の表面に載置し接着剤または締結具によって接着され、また適当に処理したろ紙片を含むことができる。これによって、溶解可能な特異的結合パートナーに検体が接触する前にたとえばpHの調節、完全な細胞の溶解、および／または粒子の除去と言った検体処理を行なうことができる。本実施態様のこの変化では、広いダイナミックレンジを提供でき、利用可能な抗体が低親和性の場合、または低濃度の分析対象物を検出しようとする時に有用である。
6.洗浄を提供するための２セクタ・アプリケータを備える装置
本発明による２成分アッセイ装置の別の実施態様は、検体と標識特異的結合パートナーの混合物がクロマトグラフィ媒体を通過した後で標識特異的結合パートナーと反応しなかった検体の洗浄を提供するための２セクタ・アプリケータを有する。本実施態様は一層はっきりしたバックグラウンドを提供し弱陽性の読取りを簡単にする利点を有している。
本実施態様において、第１の対置成分は第１の端部と第２の端部を有するクロマトグラフィ媒体と、クロマトグラフィ媒体の第１の端部と動作的に接触する導体と、クロマトグラフィ媒体の第２の端部と動作的に接触するアブソーバとを含む。第２の対置成分は２セクタに分割したアプリケータを含む。第１のセクタは溶解可能な形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含み、第２のセクタは標識特異的結合パートナーを欠如する。第１と第２の対置成分を対置させることで、アプリケータの第２のセクタではなく第１のセクダだけを導伝バリア経由で導体に間接接触させて、アプリケータの第１のセクタの内容を導体に添着しさらにクロマトグラフィ媒体の第１の端部に添着させる。第２のセクタは導体と間接接触して置かれ、第２のセクタの内容は第１のセクタを通って流れてから導伝バリア経由で導体に達する。つまり、アプリケータの第１のセクタの内容の導体への添着に続けて、第２のセクタの内容が導体に添着される。検体を含むが標識特異的結合パートナーを含まない第２のセクタの内容はクロマトグラフィ媒体から未結合の標識特異的結合パートナーを洗い流すために用い、これによってクロマトグラフィ媒体に見られる視認可能な標識のバックグラウンドを減少し、アッセイ装置の読みを改善する。これは弱陽性アッセイで特に有利である。
アッセイ装置の本実施態様が図８に図示してある。アッセイ装置300は第１の対置成分302と第２の対置成分304を有する。第１の対置成分302は第１の端部308と第２の端部310を有するクロマトグラフィ媒体306、クロマトグラフィ媒体306の第１の端部308と動作的に接触する導体312、クロマトグラフィ媒体306の第２の端部310と動作的に接触するアブソーバ314を含む。第１の対置成分302には導伝バリア316が取り付けてある。
第２の対置成分304は２つのセクタに分割されたアプリケータ318を有する：第１と第２の対置成分302および304が対置されると導体312と直接接触する第１のセクタ320、および第１と第２の対置成分302および304が対置された時に導体312と間接接触する第２のセクタ322である。
クロマトグラフィ媒体306は検出ゾーン324と対照ゾーン326を有する。第１と第２の対置成分302および304はヒンジ328で接合される。第２の対置成分304はクロマトグラフィ媒体306の少なくとも一部を観察できるようにするための窓330を有する。第１と第２の対置成分302および304は前述したように係合装置332および334とガスケット336も含む。
7.別の対置成分上に２個の検出器添着パッドを設けた装置
本発明による２成分アッセイ装置のさらに別の実施態様は別の対置成分上に２個の独立した検出器添着パッドを含む。この構造は比較的大量の標識特異的結合パートナーを使用したい場合、たとえば標識抗体が希釈した形でのみ利用できる場合や抗体を濃縮しようとすると変性させるかまたは不活化させてしまうような場合に特に有用である。
２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の実施態様が図９に図示してある。クロマトグラフィ・アッセイ装置350は第１の対置成分352と第２の対置成分352をヒンジ356で接続してある。第１の対置成分352は第１の端部360と第２の端部362とを有するクロマトグラフィ媒体358を含む。クロマトグラフィ媒体358は検出ゾーン364と、オプションとして対照ゾーン366を含む。
第１の対置成分352はクロマトグラフィ媒体358の第１の端部360と動作的に接触する第１の検出器添着パッド368も有している。第１の検出器添着パッド368は第１の検出器添着パッド368に液体の添加により再溶解可能な形で分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを含む。第１の対置成分352は第１の検出器添着パッド368と動作的に接触する導体370も有し、第１の検出器添着パッド368がクロマトグラフィ媒体358の第１の端部360と導体370を架橋するようにしてある。第１の対置成分352はクロマトグラフィ媒体358の第２の端部362と動作的に接触するアブソーバ372も有する。第１の対置成分352には????バリア374が取り付けてある。
第２の対置成分354はアッセイしようとする検体を受け入れるための検体調製ゾーン376を含む。第２の対置成分354は検体調製ゾーン376と動作的に接触する第２の検出器添着パッド378も含み、検体調製ゾーン376は第２の検出器添着パッド378上に配置される。検体調製ゾーン376と第２の検出器添着パッド378は締結具または接着剤で互いに保持できる。第２の検出器添着パッド378と検体調製ゾーン376は、検体調製ゾーン376に添着される検体が第２の検出器添着パッド378に入る前に検体調製ゾーン376を通過しなければならないように配置してある。第２の検出器添着パッド378は検体調製ゾーン376への検体の添加により再溶解可能な形で分析対象物に対する第２の特異的結合パートナーを含む。第２の検出器添着パッド378は検体調製ゾーン376への検体の添着で第２の特異的結合パートナーを溶解して、検体調製ゾーン376に検体と第２の特異的結合パートナーの混合物が含まれるように配置してある。
第２の特異的結合パートナーは検出可能な標識で標識してある。望ましくは、第１と第２の特異的結合パートナーが同一で、第１と第２の特異的結合パートナーを標識する検出可能なラベルを同一にする。
第２の対置成分352は検出ゾーン364と、存在するならば対照ゾーン366も含めてクロマトグラフィ媒体358の少なくとも一部を観察できるようにするための開口部380も含む。第１と第２の対置成分352および354は導伝バリアを含む２成分装置で前述したようにロック382および384などの係合装置とガスケット386も有する。
第１と第２の対置成分352および354を対置させると、検体調製ゾーン376が導伝バリア374と対置されて、検体と第２の特異的結合パートナーを導体370に、また導伝バリア374を経由して第１の検出器添着パッド368を通りクロマトグラフィ媒体358へ添着する。つまり、検体は第２の特異的結合パートナーについで第１の特異的結合パートナーと順番に接触してからクロマトグラフィのためにクロマトグラフィ媒体358の第１の端部360へ添着される。これによって一層大量の標識特異的結合パートナーが検体と接触することになりアッセイの感度が増大する。
E.多重アッセイ装置  上記の装置の説明は一度に１つのアッセイを実行するアッセイ装置に関するものである。しかし、本発明によるアッセイ装置は同時に多数のアッセイを実行できるようにも製作できる。アッセイは同一の分析対象物または別個の分析対象物に対して実行できる。一般に、前述の装置の全てのバージョンで、多数のクロマトグラフィ媒体、検体調製ゾーン、導伝バリア、アプリケータ、導体、アブソーバ、その他必要とされる成分に第１と第２の対置成分を提供することで多重使用に適合する。本発明による多重装置の以下の説明は例示を目的としたものであって排他的なものではない。
1.基本的多重装置
本発明による多重アッセイ装置の１つのバージョンが図10に図示してある。アッセイ装置400は第１の対置成分402と第２の対置成分404を有する。第２の対置成分404はヒンジ406により第１の対置成分402へ蝶番式に取り付けてある。第１の対置成分402は複数のクロマトグラフィ媒体408を含む。クロマトグラフィ媒体408の各々は第１の端部410と第２の端部412を有し、検出ゾーン414と対照ゾーン416を含む。各クロマトグラフィ媒体408の第２の端部412はアブソーバ418と動作的に接触して、クロマトグラフィ媒体408へ流れを導く。各クロマトグラフィ媒体408には別個のアブソーバ418を設ける。第１の対置成分402には複数の導伝????バリア420が取り付けてある。導伝バリア420は物理的に分離できるが、これ以外に、単一の構造に組み合せておき実質的に防水性のバリアで機能的に分離することもできる。
第２の対置成分404は各クロマトグラフィ媒体408に１つづつ、複数の検体調製ゾーン422を含む。代表的には、各検体調製ゾーン422は検体調製ゾーン422への液状検体の添加により再溶解可能な形で検査しようとする分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含む。これ以外にも、検体の添加の前または後で液状の標識特異的結合パートナーを検体調製ゾーン422に添加できる。第１と第２の対置成分402と404を対置させることで検体調製ゾーン422の各々を第１の端部410で対応するクロマトグラフィ媒体408に加えられる。第２の対置成分404は各クロマトグラフィ媒体408に１つづつの、複数の開口部424を含む。第１の対置成分402と第２の対置成分404は前述のように係合装置426および428とガスケット430を含む。
この多重装置は、装置を用いようとするアッセイに合わせて、２ないし12個またはそれ以上の検体調製ゾーンとクロマトグラフィ媒体を含むことができる。代表的には、本装置は２ないし５個の独立検体調製ゾーンおよびクロマトグラフィ媒体を含む。
本装置のこの実施態様は同一検体の異なる希釈倍率で多数の異なる分析対象物をアッセイするために使用でき、または多数の異なる検体で同一分析対象物をアッセイするために使用できる。後者のモードは同一症例から異なる時刻に採取した検体を問題とする分析対象物について、たとえば便潜血について、アッセイしなければならないような条件でアッセイする場合に特に有用である。便潜血の存在は１日１回またはそれ以外の間隔で所定の期間にわたって採取した一連の便検体を用いて決定することが多い。これ以外に、アッセイの１つまたはそれ以上にコントロールまたは対照スタンダードを立てることができる。
2.折り畳みウェルを設けた多重装置
多重装置のさらに別の変化において、少なくとも１つの検体調製ゾーンが折り畳み式ウェルを含むことができ、ここに採取スワブまたはその他の検体を含む器具を付加することができる。
多重装置のこの変化は図11Aに図示してある。装置440は第１の対置成分442と第２の対置成分444を有する。第２の対置成分444はヒンジ446により第１の対置成分442へ蝶番式に取り付けてある。第１の対置成分442は対照ウェル448と折り畳み式即ちスポンジ状材料から作成された検体ウェル450とを有する。第２の対置成分444は本実施態様では２個の、複数の横方向に分離されたクロマトグラフィ媒体452を有し、各々が第１の端部454と第２の端部456を備える。クロマトグラフィ媒体452の各々は検出ゾーン458と対照ゾーン460を有する。第２の対置成分444には各クロマトグラフィ媒体452に対して１つづつの複数の導伝バリア462が取り付けてある。
第１の対置成分は検出ゾーン458と対照ゾーン460を含めクロマトグラフィ媒体452の各々の一部を観察するための開口部464を有している。第１と第２の対置成分442および444は係合装置466および468とガスケット470を含む。第１の対置成分442と第２の対置成分444が対置されると、対照ウェル448内と折り畳み式検体ウェル450内の検体がクロマトグラフィのために導伝バリア462を介して対応するクロマトグラフィ媒体452に添着される。
折り畳み式ウェルが含まれる場合、第１の対置成分は、ガスケット470の代わりに、第１の対置成分と第２の対置成分を対置させた時に第２の対置成分上に折り曲げられる蝶番式に折り曲げられる羽根472を含むことができる。本発明による多重アッセイ装置のこのバージョンは図11Bに図示してある。
スワブの適用に適している本発明の本実施態様およびその他の実施態様において、装置はスワブに付着する液体量の大幅な変化に対応することができ、スワブの過飽和が有害になることはない。本装置はスワブを包囲する周辺領域に移動する液体が装置の動作に干渉しないように設計されている。
3.検査カードを受け入れるのに適した多重装置
多重装置のさらに別の変化は便潜血中のHb判定に特に有用である。本装置は代表的には連続病日に採取される数個の乾燥便検体を含む検査カードを受け入れるのに適している。
この変化が図12に図示してある。アッセイ装置480は第１の対置成分482と第２の対置成分484とを有する。第２の対置成分484はヒンジ486によって第１の対置成分482に蝶番式に取り付けられている。第１の対置成分482は複数の横方向に分離された試薬パッド488、即ちアプリケータを含む。望ましくは、各アプリケータ488は溶解可能な形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを含む。
第２の対置成分484は第１の対置成分482上の各々の試薬パッド488にクロマトグラフィ媒体490を含む。クロマトグラフィ媒体490は横方向に分離される。クロマトグラフィ媒体490の各々は第１の端部492と第２の端部494を有し、検出ゾーン496と対照ゾーン498を含む。各クロマトグラフィ媒体490の第１の端部492は導体500と動作的に接触し、各クロマトグラフィ媒体490の第２の端部949はアブソーバ502と動作的に接触する。各々のクロマトグラフィ媒体490には独立した導体500とアブソーバ502がある。第２の対置成分484は、たとえば第２の対置成分484の凹部508によって各導体500と動作的に接触するように配置された複数の乾燥試料を含む検査カード504を受け入れるのに適している。
第２の対置成分484には各クロマトグラフィ媒体490毎に１つづつの複数の導伝バリア510が取り付けてある。
第２の対置成分482は各クロマトグラフィ媒体488に１つづつ、各クロマトグラフィ媒体488を観察するための複数の開口部512を含む。第１と第２の対置成分482および484は各々が検体と試薬を保持するための係合装置514および516とガスケット518を含む。
使用において、緩衝液またはその他の液体を各アプリケータ188に添加して標識特異的結合パートナーを再構成する。第１と第２の対置成分482および484を対置させることでアプリケータ488の各々を対応する乾燥試料506に付着させて各々の乾燥試料506と各アプリケータ488の内容が各????バリア510へ、さらに導体500へ、さらに各クロマトグラフィ媒体490の第１の端部492へ添着されるようにする。検査カード504は試料506の各々を所定位置に保持してアプリケータ488の内容を受け入れられるようにし、また試料506の分析対象物が抽出され、標識特異的結合パートナーと反応し、導伝バリア510へさらには導体500へ添着されるようにする。
本発明による検査装置のさらに別の変化も可能である。たとえば、前述の２成分装置のいずれも対置成分の一方にカバーを蝶番式に取り付けることができる。このカバーは開口部を設けてクロマトグラフィ媒体の少なくとも一部を観察できるようにしてある。
II.アッセイ装置で使用する分析対象物と抗体
本発明によるアッセイ装置での検出に適した分析対象物は、抗原、ハプテン、抗体を含む。本装置で検出可能な抗原は、ヘモグロビン、ストレプトコッカス（Streptococcus）ＡおよびＢ抗原、原虫寄生体ジアルジア特異性抗原、HIV特異性抗原や肝炎特異性オーストラリア抗原を含むウィルス抗原が挙げられる。アッセイ可能な抗体には、たとえばヘリコバクタ・ピロリなどの細菌やHIVを含むウィルスに対する抗体が挙げられる。検出可能なハプテンとしては、十分な特異性を有する抗体を調製可能なハプテンが含まれる。
本発明による装置が特に適した２種類の抗原はヒトヘモグロビンとストレプトコッカスＡ抗原である。ヒトHb検出は、糞便中のヒトHbの存在が小腸または直腸からの出血のマーカーであり、消化器系腫瘍やその他病原性疾患の存在を示唆するものであることから、臨床的に有意である、ストレプトコッカスＡ抗原の検出は、ストレプトコッカス感染では転帰が速く致命的になり得ることから、これも臨床的に有意である。
分析対象物が抗原またはハプテンの場合で、サンドイッチ法を用いる場合、第１と第２の特異的結合パートナーは抗体が望ましい。多くの用途で、第１と第２の特異的結合パートナーは分析対象物の異なるエピトープに対する抗体とするのが望ましいが、これは必須ではない、抗体はポリクローナルまたはモノクローナルで良くIgG、IgM、またはIgAとすることができる。多くの用途では、ポリクローナル抗体はその本来の変異性により抗原多形性が存在するか存在し得るような系で一層正確な検出が期待し得ることから好適である。
分析対象物がハプテンでサンドイッチ法アッセイを用いる場合、第１と第２の特異的結合パートナーを異なるエピトープに対する抗体とするのが強く推奨される。それ以外に、標識特異的結合パートナーと分析対象物の複合体の不動化した第２の特異的結合パートナーに対する結合で干渉するような望ましくない競合反応を惹起することがある。全てのハプテンが１つ以上のエピトープに対応できる程十分に大きくないことが分かっているが、ある種のハプテンは、それ自身を注入した時に効率的な抗原形成を惹起するのに十分な程大きくないものの、１つ以上のエピトープを保有するのに十分な大きさである。ハプテンの１つ以上のエピトープに対する抗体を得られないような場合では、競合法アッセイが一般に好適である。
分析対象物が抗体でサンドイッチ法アッセイを用いる場合、第１の特異的結合パートナーは種、クラス、またはサブクラス（アイソタイプ）特異性に基づいて分析対象物に結合する標識抗体が代表的である。干渉を防止するため、抗体分析対象物に対する第１の特異的結合パートナーを抗体分析対象物の定常領域に結合するのが高く推奨される。分析対象物が抗体の場合、第２の特異的結合パートナーは抗原分析対象物に特異的な抗原またはハプテンが望ましい。
ある種の用途では、間接標識法を用いるのが望ましい。たとえば、ジアルジア抗原の検査で、IgM抗体を使用することができるが直接標識するのが困難である。その場合、易動性の第１の特異的結合パートナーに特異的な第２の特異的結合パートナーを標識することができる。代表的には、標識した第２の特異的結合パートナーを種、クラス、またはサブクラス特異性に基づく第１の特異的結合パートナーである抗体に結合させる。
第２の特異的結合パートナーの使用に代わる方法として、第１の特異的結合パートナーをビオチンと共役させてアビジン共役標識を使用することができる。
サンドイッチ法イムノアッセイでの分析対象物、特異的結合パートナー、標識の間の関連性を以下の表Ｉに要約した：
表Ｉ
サンドイッチ法イムノアッセイの結合様式
分析１次SBP2次SBP2次形成される複合体
（易動性）      （固定）
Ag＝抗原  Ｈ＝ハプテン  Ab＝抗体  Ab1＝１次抗体  Ab2＝２次抗体  Abc,Abc1,Abc2＝別の抗体に特異性の抗体  Bi＝ビオチン  Av＝アビジン  Ｌ＝標識  ＊は標識成分を表わす。
（１）Ab2とAb1＊は異なるエピトープに結合するのが望ましい。全てのハプテンがこのような別のエピトープを保有するとは限らない。
III.検査キット
本発明の別の態様は特定の分析対象物の検出に使用可能な検査キットである。検査キットは、別々の容器に、
（１）本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置、
（２）検体を処理または抽出するのに要求される必要なあらゆる試薬、
（３）オプションで、アッセイ装置が再溶解可能な形で分析対象物に対する標識特異的結合パートナーを内包しない場合、要求される特異的結合パートナーを含む。
（２）と（３）に必要な成分は別々にパッケージし、液状または固形（凍結乾燥、結晶化、沈降化、または凝集による）とすることができる。後者の場合、使用者が代表的には蒸留水または純水、生食、または緩衝液で溶解する。
検体を処理または抽出するのに必要な試薬は前述したような試薬である。場合によってはこれらの試薬は溶解可能な形で装置に含まれる試薬と反応することがある。一例として窒化ナトリウムと酢酸またはその他の弱酸との反応による窒素酸の生成がある。
場合によって、検査キットは溶解可能な形で特異的結合パートナーまたは分析対象物類似のいずれかの装置上にある試薬の溶解液も含むことができる。特定の例は各種の装置の動作の開示で前述した。
本発明は以下の例で図示される。実施例は開示を目的としたものであって何らかの方法で本発明の範囲を制限するように構成されているものではない。
例
例１
ストレプトコッカス抗原検出用装置の構成  ストレプトコッカスＡ抗原に対する標識抗体を用いたストレプトコッカスＡ抗体検出用装置を作成した。本装置は基本的に図13に図示した通りに作成された。
図１では第１の対置成分542と、第１の対置成分542へヒンジ545によって蝶番式に取り付けられた第２の対置成分544を備える本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置540を示す。第１の対置成分542は第１の端部548と第２の端部550を有するクロマトグラフィ媒体546、検出ゾーン552、対照ゾーン554を含む。第１の対置成分542はクロマトグラフィ媒体546の第１の端部548に接して溶解性抗ストレプトコッカスＡ抗体556のゾーン（検出器添着パッド）も含む。第１の対置成分はクロマトグラフィ媒体546の第２の端部550に接してアブソーバ558も含む。第１の対置成分542には導伝バリア560が取り付けてある。第２の対置成分544は咽喉スワブを受け入れることのできるウェル562を含む。ウェル562は、スワブ挿入用の第１の開口部566と、抽出検体の導伝バリア560添着用の第２の開口部568との、２個の開口部をウェルの各端に１つづつ備える非透水性バリア564で被覆される。第１の対置成分542は窓570を含む。
対置成分はポリカーボネートなどの硬質非透水性プラスチックで作成した。第１と第２の対置成分は各々長さ約３インチ、第１の対置成分は幅約2.25インチ、第２の対置成分は各々幅約2.375インチとした。第２の対置成分はフォームラバー製受け口と揃えておき、これに涙滴状ウェルを開けてスワブまたはその他のサンプリング器具を受け入れるようにした。
クロマトグラフィ媒体は孔径８μｍ、長さ0.5インチのニトロセルロース・ストリップ（MSI社製、マサチューセッツ州ウェストボロー）で、両面テープ（3M社製、ミネソタ州ミネアポリス）でプラスチック製裏板に固定した。導伝バリアとアブソーバはセルロース・ストリップ（アールストローム・フィルトレーション社製、ペンシルバニア州ホリースプリングス）で、アブソーバは長さ17/32インチで、アールストローム・グレード939とし、導伝バリアは長さ0.25インチでアールストローム・グレード1281を用いた。検出器添着パッドもアールストローム・グレード1281で、幅0.375インチとした。クロマトグラフィ媒体は第２の端部をアブソーバと僅かに重ねた。
必要な試薬は第１にクロマトグラフィ媒体と溶解性抗体のゾーンに含め、このあと両面テープを用いて成分を裏板に保持して装置を組み立てた。
検出ゾーンには0.001モル/lリン酸バッファpH7.2に2mg/mlでウサギ抗ストレプトコッカスＡ抗原を含めた。対照ゾーンは同じバッファに同様の濃度でヤギ抗ウサギIgGを含めた。抗体溶液をクロマトグラフィ媒体の適当な領域に添着してから低湿度環境において100゜Fで乾燥した。クロマトグラフィ媒体は余剰阻止溶液（ELISA用ブロッキング試薬、ベーリンガーマンハイム社製、ドイツ・マンハイム、0.2％Tween20含有蒸留水で1:10希釈）で湿潤させた後さらに100゜Fで乾燥した。
検出器添着パッドは40ナノメートルコロイド金粒子で標識したウサギ抗ストレプトコッカス抗体を含めた。標識抗体を検出器添着パッドに添着するため、標識抗体をDBN（1.5モル/lトリ−HCl,pH7.4,1％（v/v）Tween20,0.4％（v/v）Brij35,0.02％（w/v）アジ化ナトリウム、3mg/mlウサギIgG）で1:1.5に希釈した。１検査あたり、15μ１の希釈標識抗体を検出器添着パッドに追加した。検出器添着パッドは100゜Fで30分間乾燥させた。
例２
例１の装置を用いたストレプトコッカス抗原の検出  例１の装置を用いてストレプトコッカスＡ抗原を検出した。様々な量でストレプトコッカスＡ型菌を付着させた繊維状ダクロン・スワブを検体ウェルに挿入した。抽出試薬Ａ（0.25％酢酸,5％Tween20）３滴と、抽出試薬Ｂ（２モル/l窒化ナトリウム,5％Tween20）３滴をスワブに添加し、ゆっくりスワブを回転させて混和し、１分間インキュベートした。装置を閉じ、第１と第２の対置成分を接触させた。２分から５分のインキュベーション時間の後で結果を読み取った。クロマトグラフィ媒体の検出ゾーンにおけるピンク〜赤のバンドの発生でストレプトコッカスＡ抗原の検出が示された。
例１の装置は、２分間のインキュベーション後に１×105個のストレプトコッカスＡ菌体、また５分間のインキュベーション後に５×104個のストレプトコッカスＡ菌体を検出できた。比較対象として、ハイブリテック社（カリフォルニア州ジョーラ）製コンサイスTM・イムノアッセイ装置は、５分間のインキュベーション後でのみ１×105個のストレプトコッカスＡ菌体を検出し、また20分間のインキュベーション後でも５×104個のストレプトコッカスさ菌体を検出できなかった。同様に、ニューホライズン社製スマートTM・イムノアッセイ装置は７分間のインキュベーション後でのみ１×105個のストレプトコッカスＡ菌体を検出し、７分間のインキュベーション後に５×104個のストレプトコッカスＡ菌体で不確実な結果となった。
例３
便潜血中のヘモグロビン検出用装置  便潜血中のヘモグロビン検出用アッセイ装置を図4Aおよび図4Bにしたがって作成し、材料と構造の細部は例１と同様にした。標識特異的結合パートナーは溶解可能な形で検体添着パッドに添着した。標識特異的結合パートナーはコロイド金で標識したヤギ抗ヒト抗体とした。60μｌの便検体を検体添着パッドに塗抹し共役溶液と混和できるようにした。装置を閉じ便検体と溶解抗体の組み合せを導体に接触させクロマトグラフィ媒体へ流した。クロマトグラフィは約１分間から約５分間の期間にわたり進行させた。クロマトグラフィ媒体は不動化した抗ヒトHb抗体の検出ゾーンとウサギ抗ヤギIgG抗体を不動化した対照ゾーンを含んでいた。
検出ゾーンと対照ゾーンの両方に見られた色は結果が陽性、即ち便検体中の潜血の存在を示した。対照ゾーンに現われたが検出ゾーンに現われなかった色は、便潜血の欠如と検査の正しい実施を表わしていた。
本装置は血液約0.2ml/便100gから血液約17ml/便100gの濃度範囲で便潜血中のHbを検出できる。本装置はペルオキシダーゼや摂食（非ヒト由来）ヘモグロビンによる干渉を受けない。
本発明の利点  本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置は対置成分から構成することによる利点を提供する。対置成分の使用で、多数の異なったシーケンスにおける反応を行なえるため多大な汎用性を提供する。当該対置成分の使用で検査ストリップまたはその他の反応成分の正確に画定された領域へ試薬を供給できるために可能になっている。対置成分の使用はさらに装置の死腔内に留まることで試薬を無駄にしないように保証することで試薬の最小限の消費で最適な測定を提供する。最後に、対置成分の使用は、HIVまたは肝炎ウィルスを含む検体など、汚染されていると思われる血液検体の最適な収容を提供する。
本発明によるアッセイ装置の別の利点は圧力を用いて１つの対置成分から別の対置成分へさらにクロマトグラフィ媒体を通して液体を移動させ、また実行しようとする各アッセイで最適になるように印加される圧力を制御する本装置の能力による。これはアッセイ処理を加速しアッセイ装置内での抽出などの操作の実行が可能になる。また成分内に残る試薬の死腔量を減少し、少量の検体と少量の高価なまたは精製困難な試薬たとえば標識抗体を使用できるようになる。
本発明によるアッセイ装置の更に別の利点は流れを調節し特異的結合反応における反応系の不均一な流れまたは高濃度の局在を防止する????バリアの使用に由来する。これは本発明によるアッセイ装置を使用するアッセイの実施で大きな再現性と信頼性を提供する。
更に、本発明によるクロマトグラフィ・アッセイ装置は、臨床的に重要な分析対象物たとえばストレプトコッカスＡおよびＢ抗原、便潜血判定でのヘモグロビン、またヘリコバクタ・ピロリ抗体、ならびに臨床的に重要なハプテンの迅速で正確な検出が行なえる。装置の構造はクロマトグラフィ媒体への検体の一層均等な添着が行なえ他の方法では粒子または有色検体により導入されることのある干渉を減少する。溶解可能な形でコロイド金属標識を使用することにより標識のきわめて迅速な反応を提供し、検体をクロマトグラフィ媒体へ添着する前に２相性分析対象物−標識複合体の実質的に完全な形成を行なえる。これは汚染物質の分離に役立ち、アッセイの能力を改善する。更に、装置ハウジングの構造と構成は他の方法では干渉を発生させ得る過剰な免疫グロブリン含有検体の排出を保証することによりアッセイの性能を支援する。
血液、喀痰、便などの生物検体の柚出は装置内で直接実行可能で、破棄する必要のある汚染材料の量を減少させ、また当該汚染材料による医師、技師、または大衆の感染事故の発生確率を減少できる。更に、本装置は双方向クロマトグラフィを実行可能なため更に精度を向上させ干渉を減少できる。本発明による装置を用いた検査法は広いダイナミックレンジを有し、他の検査法では高濃度の分析対象物で発生し得る偽陰性が実質的に発生しない。
本発明の幾つかの好適バージョンを参照して相当詳細に説明したが、他のバージョンや実施態様が可能である。これらのバージョンは本明細書で説明した基本原理で動作し、（ａ）検体のその場合抽出、（ｂ）標識特異的結合パートナーの再溶解と分析対象物への高速結合、（ｃ）他の方法では干渉を発生し得るような過剰検体を除去するクロマトグラフィ媒体とアブソーバの構成、のいずれかを用いる２または３成分装置の他の構成を含む。これらのバージョンは競合法イムノアッセイならびにサンドイッチ法イムノアッセイに適した各種構成のアッセイ装置を含む。特に、本発明による装置は直線的な流れの代わりにクロマトグラフィ媒体を通る放射方向または円周方向の流れを利用するのにも適している。本発明は装置の２または３成分が永久固定構造に保持されないが、たとえば電力または磁力により、またはたとえばベルクロTMなどのマジックテープなどの分離自在なファスナーを使用することにより、アッセイを実行するために分離したり合わせたりできるような変化をさらに含む。したがって本発明の範囲は後述の請求項によって決定される。
【図面の簡単な説明】
図1Aは本発明による導伝バリアを用いる２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の１つのバージョンの略図である。
図1Bは図1Aの２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の図面で２成分が対置された状態で図示してある。
図1Cは図1Aおよび図1Bの装置の側面図で検体調製ゾーン、導伝バリア、導体の関連を示す。
図２本発明による導伝バリアを備えた２成分クロマトグラフィ・アッセイ装置の１つのバージョンの略図で、第１の対置成分は検体調製ゾーンを含む。
図３は本発明による導伝バリアを備えた２成分アッセイ装置の別のバージョンの略図で同一の対置成分上に２個のアプリケータを備える。
図4Aは本発明による導伝バリアを備えた２成分アッセイ装置の別のバージョンの略図でクロマトグラフィ媒体と同一の対置成分上に標識特異的結合パートナーのためのパッドを、また他方の対置成分上に検体調製ゾーンを含む。
図4Bは図4Aの２成分アッセイ装置の後面断面図でクロマトグラフィ媒体、第１と第２の対置成分、導伝バリアの詳細を示す。
図５は図4Aおよび図4Cに図示した２成分アッセイ装置の変化の略図で第２の対置成分上のアブソーバを備える。
図6Aは本発明による２成分アッセイ装置のさらに別のバージョンの略図で、一般に図4Aおよび図4Bのバージョンと類似しているが、クロマトグラフィ媒体と直接接触する検出器添着パッドを備える。
図6Bは図6Aの２成分アッセイ装置の後面断面図で対置した成分の詳細を示す。
図７は本発明による導伝バリアを用いる２成分アッセイ装置のさらに別のバージョンの略図で、検出器添着パッドは第１の対置成分上にありクロマトグラフィ媒体と導体の間に配置される。
図８は本発明による導伝バリアを用いる２成分アッセイ装置のさらに別のバージョンの略図で、洗浄用の２−17クタアプリケータを用いる。
図９は本発明による導伝バリアを用いる２成分アッセイ装置のさらに別のバージョンの略図で、各々の対置成分に１つづつ２個の検出器添着パッドを備える。
図10は本発明による複合アッセイ装置の略図で、１つまたはそれ以上の検体の同時アッセイに適した装置を示す。
図11Aは本発明による複合アッセイ装置の別のバージョンの略図で、検体を受け入れる折り畳み式ウェルを含む。
図11Bは図11Aと同様の複合アッセイ装置のバージョンの略図で、ガスケットをヒンジで折り曲げられる羽根で置き換えている点が異なる。
図12は検査カードを受け入れるのに適した本発明による複合アッセイ装置の別のバージョンの略図である。
図13は例１で構成したストレプトコッカス（Streptococcus）Ａ抗原の検出用に設計されスワブまたは同様のサンプリング器具を受け入れるのに適した本発明によるアッセイ装置の略図である。
【図１Ａ】
0003585933.tif 000002
【図１Ｂ】
0003585933.tif 000003
【図１Ｃ】
0003585933.tif 000004
【図６Ｂ】
0003585933.tif 000005
【図２】
0003585933.tif 000006
【図３】
0003585933.tif 000007
【図４Ａ】
0003585933.tif 000008
【図４Ｂ】
0003585933.tif 000009
【図１１Ａ】
0003585933.tif 000010
【図５】
0003585933.tif 000011
【図６Ａ】
0003585933.tif 000012
【図７】
0003585933.tif 000013
【図８】
0003585933.tif 000014
【図９】
0003585933.tif 000015
【図１１Ｂ】
0003585933.tif 000016
【図１０】
0003585933.tif 000017
【図１２】
0003585933.tif 000018
【図１３】
0003585933.tif 000019