(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式
0003605432.tif 000009
で表される化合物である抗生物質ＡＢ５３６６、またはその塩。
【請求項２】
ピィクニディエラ属に属して請求項1記載の式（Ｉ）で表される化合物である抗生物質ＡＢ５３６６を産生する能力を有する微生物を培地で培養し、その培養物中に抗生物質ＡＢ５３６６またはその塩を生成し蓄積せしめ、次いでこれを培養物から採取することを特徴とする、抗生物質ＡＢ５３６６またはその塩の製造法。
【請求項３】
請求項1記載の式（Ｉ）で表わされる化合物である抗生物質
ＡＢ５３６６またはその塩を有効成分として含有することを特徴とする、医療用抗真菌剤および農園芸用殺菌剤。
【請求項４】
請求項１記載の式（Ｉ）で表される化合物である抗生物質
ＡＢ５３６６またはその塩を産生できる特性を有して受託番号FERM  P−14662で寄託されてあるピィクニディエラ・エスピー  ＡＢ５３６６（Pycnidiella sp.  AB5366）菌株。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は人間および動物に感染する真菌又は植物の病原菌に対する抗菌活性を有する新規な抗生物質ＡＢ５３６６に関し、またその製造法およびその用途に関する。
【０００２】
更に詳しく言えば、本発明は、ピィクニディエラ属に属する抗生物質ＡＢ５３６６生産菌を培養して生産される新規な抗生物質ＡＢ５３６６に関し、またこの抗生物質の製造法および用途に関する。しかもまた、本発明は抗生物質ＡＢ５３６６の生産菌として有用である新規な微生物であるピィクニディエラ・エスピーＡＢ５３６６株に関するものである。
【０００３】
本発明の新規な抗生物質ＡＢ５３６６は、人間および動物に感染する真菌に抗真菌活性を有することから真菌感染症に対する化学療法剤として有用であり、また植物病原菌に対して抗菌活性を有し、しかも植物病害防除試験においても実際に優れた防除効果を示すことから農園芸用殺菌剤としても有用である。
【０００４】
【従来の技術】
微生物が生産する抗生物質のうち、医療用の抗真菌性抗生物質としては、アンホテリシンＢおよびナイスタチン等が知られ、また農園芸用殺菌剤としては、カスガマイシンおよびバリダマイシン等が知られている。
【０００５】
【発明が解決すべき課題】
従来知られる医療用の抗真菌性抗生物質は、臨床で実用されている薬剤が僅かに限られていること、さらにその副作用を示すものが多いことから、抗真菌剤として有用な新しい抗生物質が常に要望されている。農園芸用殺菌剤として用いる抗生物質についても、耐性菌の出現、薬害および施用の安全性の面から、従来開発された殺菌剤とは異なる作用機作あるいは新規な化学構造を持つ物質が同様に望まれている。さらに、キュウリ等に起る灰色かび病の防除に有効である抗菌性物質は、現在までにわずかしか知られておらず、それらの物質の防除効果も充分ではなかった。本発明の目的は、上記の課題に対応できる優れた抗真菌活性および植物病原菌に対する抗菌活性と望ましい性質をもつ新規で有用な抗生物質を提供することであり、またそのような新規な抗生物質の製造法を確立することであり、それによって従来技術に伴う前記の問題点を解決しようとするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決する目的のために種々の土壌および植物などから多くの微生物を分離し、それらの微生物が培養液中に生産する抗生物質について鋭意研究を重ねた。その結果、糸状菌の一種であるピィクニディエラ属に属する新規な菌株を土壌試料から単離することに成功し、またその菌株の培養液中に抗真菌活性を示す抗生物質が生産されていることを発見した。そこで、該微生物の培養物から抗真菌活性を指標にして活性な抗生物質を単離、精製したところ、得られた単一の抗生物質が上記の抗真菌活性または植物病原菌に対する抗菌活性を示すことを見いだした。さらに、該抗生物質はその化学構造および生物活性の対象、効果などを含めた諸性質が既知の抗生物質と一致しない新規な抗生物質であって抗真菌活性および植物病原菌に対する抗菌活性を有すること及び両性物質であることを確認した。その結果、これを抗生物質ＡＢ５３６６と称することにした。
【０００７】
すなわち、第１の本発明においては、次式
0003605432.tif 000002
で表される化合物である抗生物質ＡＢ５３６６、またその塩が提供される。
【０００８】
本発明の抗生物質ＡＢ５３６６の塩の例として、第４級アンモニウム塩などの有機塩基との塩ならびに各種金属との塩、例えばアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩およびアンモニウム塩がある。また、塩酸、硫酸などのいわゆる鉱酸または酢酸、カプロン酸等の有機酸との酸付加塩もある。
【０００９】
次に、本発明の抗生物質ＡＢ５３６６の物理化学的性質を記載する。
【００１０】
（１）外  観：淡黄色粉末
（２）分子式：Ｃ１９Ｈ３７ＮＯ８Ｓ
（３）分子量：４３９
（４）比旋光度：〔α〕Ｄ２３＋２．０°（ｃ  １．０，メタノール）
（５）紫外部吸収スペクトル（メタノール溶液中）：末端吸収のみを示す。
【００１１】
（６）赤外部吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）：添付図面の図１に示す
（７）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（５００ＭＨｚ、重メタノール中で測定）：添付図面の図２に示す
（８）１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル（１２５ＭＨｚ、重ジメチルスルホキシド中で測定）：添付図面の図３に示す
（９）溶解性：水、メタノールのような低級アルコール、ジメチルスルホキシドに可溶、アセトン、酢酸エチル、ヘキサンに不溶である。
【００１２】
（１０）薄層クロマトグラフィー：Ｒｆ値＝０．３３
吸着剤としてメルク社製キーゼルゲル６０  Ｆ２５４（Ａｒｔ．５７１５）を使用し、展開溶剤としてクロロホルム−メタノール−ギ酸（１０：５：１）で展開して測定した
（１１）呈色反応：バニリン硫酸反応（桃色）、ヨウ素反応、ニンヒドリン反応およびライドン−スミス反応が陽性である。
【００１３】
次に、本発明の抗生物質ＡＢ５３６６の生物学的活性を説明する。
【００１４】
試験例１  抗生物質ＡＢ５３６６物質の抗真菌活性
抗生物質ＡＢ５３６６のモノＮａ塩の動物感染性の各種真菌に対する最小生育阻止濃度（ＭＩＣ）（μｇ／ｍｌ）を感性ディスク培地（日水製薬製）を用いて寒天平板上で倍数希釈法にて測定した。その試験結果を表１に示した。
【００１５】
0003605432.tif 000003
【００１６】
試験例２  抗生物質ＡＢ５３６６の植物病原菌に対する殺菌活性
抗生物質ＡＢ５３６６のモノＮａ塩の各植物病原菌に対する最小生育阻止濃度（ＭＩＣ）（μｇ／ｍｌ）をポテト・スクロース寒天培地を用いた寒天平板倍数希釈法にて測定した。その試験結果を表２に示した。
【００１７】
0003605432.tif 000004
【００１８】
試験例３  急性毒性試験
ＣＤＦ１雄性マウスに本発明の抗生物質ＡＢ５３６６のＮａ塩を経口投与して評価すると、急性毒性はＬＤ５０値で５００ｍｇ／ｋｇ以上であると認められた。
【００１９】
さらに、第２の本発明によると、ピィクニディエラ属に属して前記の式（Ｉ）で表される化合物である抗生物質ＡＢ５３６６の生産菌を倍地で培養し、その培養物中に抗生物質ＡＢ５３６６またはその塩を生成し蓄積せしめ、次いでこれを培養物から採取することを特徴とする、抗生物質ＡＢ５３６６またはその塩の製造法が提供される。
【００２０】
次に、第２の本発明による抗生物質ＡＢ５３６６物質の製造法について説明する。
第２の本発明の方法で用いられる抗生物質ＡＢ５３６６の生産菌としては、抗生物質ＡＢ５３６６またはその塩を産生する能力を有する微生物であればいかなる微生物でもよい。その微生物の具体的な例としては、本発明者らが宮崎県北諸県郡三股町のアカマツの根元より採取した土壌試料から新たに分離したＡＢ５３６６菌株がある。この菌株はピィクニディエラ属（Ｐｙｃｎｉｄｉｅｌｌａ属）に属する菌株であり、本発明の方法に最も好適に用いられる抗生物質ＡＢ５３６６生産菌の一例である。
【００２１】
このＡＢ５３６６株の菌学的性質を以下に記載する。
（１）各培地における生育状態
コーンミール寒天培地上において本菌株は良好に生育し、２５℃、１５日間培養て集落の直径は６７ｍｍに達する。集落はビロード状を呈し、各々の集落の周辺部にはうす灰白色の気生菌糸を形成する。集落表面および裏面はうす灰白色を呈する。菌糸は隔壁を有し、培地上および培地中に伸長する。菌糸の幅は２．０〜５．０μｍで、無色、平滑で分枝する。
【００２２】
麦芽エキス寒天培地上における生育は、コーンミール寒天培地上に比べやや遅く、２５℃、１５日間培養で集落の直径が２９ｍｍに達する。集落はビロード状で、集落表面および裏面はうす黄茶色を呈する。
バレイショ・ブドウ糖寒天培地上における生育はやや良好で、２５℃、１５日間培養で集落の直径は４５ｍｍに達する。集落は羊毛状で、集落表面は白色〜クリーム色を示し、集落裏面はうす黄茶色を呈する。
【００２３】
本菌株をコーンミール寒天培地上において、２５℃、１か月間培養すると、白色〜クリーム色の分生子果（Ｃｏｎｉｄｉｏｍａｔａ）が培地上に形成される。分生子果は子座状に形成され、群生または散生する。分生子果は球形〜亜球形で、直径は６０〜１５０μｍである。分生子形成細胞は、無色、平滑のフィアライド（ｐｈｉａｌｉｄｅ）で４．０〜１０．０×２．０〜２．５μｍである。分生子は、単細胞、無色、平滑、球形〜亜球形、直径２．０〜２．５μｍである。
【００２４】
（２）生理学的性質
▲１▼生育温度
コーンミール寒天培地を用いて、５℃、１０℃、１５℃、２０℃、２５℃、３０℃および３７℃の各温度で培養した結果、ＡＢ５３６６株は１０℃〜３０℃までいずれの温度でも生育したが、５℃および３７℃では生育しなかった。生育最適温度は２５℃〜３０℃である。
【００２５】
（３）分類学的考察
ＡＢ５３６６株は、１）分生子果が子座状、２）分生子の形成方法が出芽型、３）分生子の形成様式がフィアライド型、４）分生子が単細胞、無色、平滑、球形〜亜球形、直径２．０〜２．５μｍの特徴を有する。以上の菌学的性状より、ＡＢ５３６６株は不完全菌亜門（Ｄｅｕｔｅｒｍｙｃｏｔｉｎａ）、分生子果不完全菌網（Ｃｏｅｌｏｍｙｃｅｔｅｓ）に帰属すると認められる。本菌株の分類学上の位置をブライアン・シー・サットン著、「ザ・シーロマイセテス」、英国コモンウエルス・マイコロジカル・インスティテュート刊行（１９８０年）〔Ｂｒｉａｎ  Ｃ．  Ｓｕｔｔｏｎ．「Ｔｈｅ  Ｃｏｅｌｏｍｙｃｅｔｅｓ」，Ｃｏｍｍｏｎｗｅａｌｔｈ  Ｍｙｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，  Ｅｎｇｌａｎｄ  （１９８０）〕に従って検索したところ、本菌株の特徴はピィクニディエラ属（Ｐｙｃｎｉｄｉｅｌｌａ属）の形態学的特徴によく合致した。従って、本発明者らは、本菌株をピィクニディエラ属の菌株と同定し、ＡＢ５３６６株をピィクニディエラ・エスピー  ＡＢ５３６６（Ｐｙｃｎｉｄｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＡＢ５３６６）と称することにした。
【００２６】
なお、ＡＢ５３６６株は工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託申請され、平成６年１１月２５日、ＦＥＲＭ  Ｐ−１４６６２として受託されている。
【００２７】
以上、抗生物質ＡＢ５３６６生産菌の一例であるＡＢ５３６６株について説明したが、一般的には糸状菌類はその菌学的性状が極めて変化しやすく、一定したものではない。菌類は、自然的あるいは通常行われている紫外線照射、Ｘ線照射、変異誘発剤（例えば、Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジンなど）または遺伝子組換えを用いる人為的変異手段により変異することが周知の事実である。このような自然変異株ならびに人工変異株も含め、ピィクニディエラ属に属し、抗生物質ＡＢ５３６６またはその塩を生産する能力を有する菌株はすべて本発明の方法に使用することができる。
【００２８】
第２の本発明の方法を実施するに当っては、まずピィクニディエラ属に属する抗生物質ＡＢ５３６６生産菌を、通常の微生物が資化しうる栄養物を含有する培地、好ましくは液体培地中において培養する。本生産菌の培養には、微生物の培養に用いられる通常の培養方法が適用される。栄養源としては、使用された微生物が資化しうる炭素源、窒素源、および無機塩などを程よく含有する培地であれば天然培地あるいは合成培地のいずれでも利用できる。
【００２９】
用いる培地に含有される資化しうる炭素源としては、グルコース、シュクロース、ガラクトース、デキストリン、グリセロール、澱粉、水飴、糖蜜、動・植物油等を利用できる。また、窒素源としては、魚粉、大豆粉、小麦胚芽、コーンスティープリカー、綿実かす、肉エキス、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、尿素などを使用できる。そのほか必要に応じ、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、コバルト、塩素、燐酸、硫酸およびその他のイオンを生成することができる無機塩類を培地中に添加することは有効である。また、使用する抗生物質ＡＢ５３６６生産菌株の発育を助け、ＡＢ５３６６物質の生産を促進するような無機物質および（または）有機物質を適当に添加できる。なお、培地中に金属イオンあるいは塩基等が存在する場合、それに対応する金属カチオンあるいはアニオンとの塩の形で抗生物質ＡＢ５３６６が得られることがある。
【００３０】
抗生物質ＡＢ５３６６生産菌の培養方法には、好気的条件下での培養法、特に通気下の深部液体培養法が最も適している。培養に適当な温度は、１５〜３０℃であるが、多くの場合２４〜３０℃で培養するのがよい。抗生物質ＡＢ５３６６の生産は、用いた培地の種類や培養条件によって異なるが、振とう培養、タンク培養とも３〜１０日間の培養でその蓄積量が最高に達する。
【００３１】
培養物中に生産された抗生物質ＡＢ５３６６の蓄積量が最高に達した時点で培養を停止し、その培養物から、発酵生産物を採取する一般的な方法に準じて抗生物質ＡＢ５３６６物質の単離を行うのがよい。抗生物質ＡＢ５３６６を効率よく生産させる培養条件は、前記の培地成分の組成、培養温度、攪拌速度、ｐＨ、通気量、種母の培養時間、種母の接種量等を、使用する生産菌株の種類および外部条件等に応じて、適宜に調節あるいは選択して設定する。液体培養法において発泡がある場合は、シリコーン油、植物油および界面活性剤等の消泡剤を単独または混合して適宜に培地に配合する。
【００３２】
この様にして抗生物質ＡＢ５３６６生産菌の培養で得られた培養物中に蓄積された抗生物質ＡＢ５３６６は、前述した物理化学的性質を有するので、その性質に従い培養物から分離して精製することが可能である。特に、下記の方法により効率的に分離精製することが好ましい。
【００３３】
蓄積した抗生物質ＡＢ５３６６を培養物中から採取するに際しては、通常の生理活性物質を培養物中から単離する方法が適用される。すなわち、培養液からブタノールによる抽出法、また菌体からメタノール等の有機溶剤による抽出法により、あるいは水または二種類以上の有機溶媒系を用いる向流分配法により、もしくはイオン交換樹脂、合成吸着樹脂、シリカゲル、シラナイズドシリカゲル、アルミナ、セルロース、珪藻土、ゲル濾過剤、活性炭等を用いるカラムクロマトグラフィーもしくは薄層クロマトグラフィーによる活性物質の吸脱着処理法により、あるいは逆層カラムを用いた高速液体クロマトグラフィーなどによって抗生物質ＡＢ５３６６物質を単離できる。
【００３４】
第３の本発明によると、前記の式（Ｉ）で表される化合物である抗生物質ＡＢ５３６６物質またはその塩を有効成分として含有することを特徴とする、医療用抗真菌剤および農園芸用殺菌剤が提供される。
【００３５】
抗生物質ＡＢ５３６６は低毒性であり、これを医療用の抗真菌剤で有効成分として使用する場合には経口的又は非経口的に投与できる。
【００３６】
これには、有効成分化合物を単独に、あるいは賦形剤と配合した組成物の形にして軟膏剤、注射剤、経口剤、坐剤等として製剤化できる。賦形剤は製剤学的に許容される固体又は液体状の担体であればいずれでもよく、その種類および組成は投与経路や投与方法によって適宜選択する。抗生物質ＡＢ５３６６又はその塩の投与量は、年齢、体重等によって異なるが、通常は成人に対して１−１，０００ｍｇ程度を経口的あるいは非経口的（例えば静脈注射により）に投与できる。
【００３７】
一方、本発明の抗生物質ＡＢ５３６６を農園芸用殺菌剤で有効成分として用いる場合には、その使用目的に応じて単体でも施用できるが、生物効果を助長または安定化するために、農薬に常用される適当な担体および補助剤例えば界面活性剤と混和して製剤化された組成物とし、これを直接に植物の茎葉または種子に施用するか、あるいは必要に応じて水で希釈した液を施用する。
【００３８】
第４の本発明によると、新規な微生物として、前記の式（Ｉ）で表される化合物である抗生物質AB５３６６を産生できる特性を有して、受託番号FERM P−14662で寄託されてあるピィクニディエラ  エスピーＡＢ５３６６菌株が提供される。
【００３９】
【実施例】
次に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、これは単なる一例であって、これによって本発明が限定されない。また、ここに例示しなかった多くの変法または修飾手段が用いられることは言うまでもなく可能であり、有効な手段となり得る。なお、実施例中に部とあるのは重量部を示している。
【００４０】
実施例１
本例は抗生物質ＡＢ５３６６の醗酵的製造を例示する。
菌の培養に用いた生産培地は、ブドウ糖  １．０％、デキストリン  １．５％、酵母エキス  １．０％、マルトエキス  １．０％、ＫＨ２ＰＯ４  ０．５％、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  ０．５％、炭酸カルシウム  ０．３％の組成からなる（ｐＨ６．５）。
前記の組成の培地１１０ｍｌを分注した５００ｍｌ容量のバッフル付き三角フラスコ９１本（培地の総量１０リットル分）を１２１℃で２０分間滅菌した。滅菌された培地に１本当りピィクニディエラ・エスピー  ＡＢ５３６６株（ＦＥＲＭＰ−１４６６２号）の斜面寒天培養菌体の１〜２白金耳を植菌した。
【００４１】
その後、ロータリーシェーカー（１８０ｒｐｍ）上で２５℃で５日間、回転振とう培養した。培養終了後、培養液を濾過することにより、培養濾液８リットルと菌体を得た。上記の濾別された菌体中の活性物質はメタノール４リットルで菌体から抽出し、濾過により菌体を除いて菌体抽出液として得た。この菌体抽出液を減圧下でメタノールを溜去し、得られた濃縮液１リットルを、前記の培養濾液と混合した。この得られた混合溶液９リットルを、合成吸着樹脂、ダイアイオンＨＰ−２０（登録商標）を充填させたカラム（容量：７５０ｍｌ）に吸着させ、その後、２リットルの水および４０％メタノール水でそれぞれカラムを洗浄した。次いで１００％メタノールを用いて分画溶出させ、活性画分を集めて減圧下で濃縮乾固させることにより褐色飴状物質８７５ｍｇを得た。
【００４２】
この褐色飴状物質８７５ｍｇを少量の５０％メタノール水に溶解させた後、同溶媒にして調製したセファデックスＬＨ−２０（登録商標）のカラム（容量：１５０ｍｌ）上におき、つづいて同溶媒を用いて分画溶出させた。得られた活性画分を集めて減圧下に濃縮乾固し、クロロホルム−メタノール−ギ酸（２０：５：１）の組成からなる少量の混合溶媒に溶解させた後、さらにシリカゲル（メルク社製）を充填したカラム（容量：２０ｍｌ）に吸着させ、同溶媒にて展開溶出するクロマトグラフィーを行った。活性画分を集め、減圧下で濃縮乾固することにより黄色粉末１８５ｍｇを得た。
【００４３】
この黄色粉末１８５ｍｇを上記のセファデックスＬＨ−２０カラムにおいて用いた方法と全く同様にして、再度カラムクロマトグラフィーを行うことにより、目的の活性成分を単離した。以上の方法により１０リットルの菌体を含む培養液から、抗生物質ＡＢ５３６６の純品の６２．１ｍｇを黄色粉末として得た。
【００４４】
次に、第３の本発明による農園芸用殺菌剤の製剤例を実施例２〜４に例示する。
【００４５】
実施例２（水和剤）
抗生物質ＡＢ５３６６  ２０部、アルキルベンゼンスルホン酸カリウム  ３部、ポリオキシエチレンノニルフェニルエーテル  ５部、および白土  ７２部を均一に混合し、粉砕して、有効成分を２０重量％含有する水和剤を得る。
【００４６】
実施例３（粉剤）
抗生物質ＡＢ５３６６  ２部、ＰＡＰ（物理性改良剤）１部およびクレー  ９７部を均一に混合し、粉砕して、有効成分を２重量％含有する粉剤を得た。
【００４７】
実施例４（乳剤）
抗生物質ＡＢ５３６６  ３０部、メチルエチルケトン  ４０部およびポリオキシエチレンノニルフェニルエーテル  ３０部を混合し、溶解して、有効成分を３０重量％含有する乳剤を得た。
【００４８】
次に、本発明による抗生物質ＡＢ５３６６を含む農園芸用殺菌剤の植物病害防除効果を試験例について説明する。
【００４９】
試験例４  灰色かび病の防除効果試験
温室内において直径６ｃｍのビニール樹脂製ポットで土耕栽培した子葉期のキュウリ苗（品種：相模半白）に対して、実施例２に準じて調製した水和剤の所定濃度希釈液を１鉢当り１０ｍｌ散布した。薬液散布１日後、予めＰＳＡ培地で生育させた灰色かび病菌（ボトリチス・シネレア）の胞子を胞子濃度５×１０５胞子数（個）／ｍｌになるように１％ブドウ糖水溶液に懸濁して作った胞子懸濁液を、子葉の中央へ滴下した。次いで子葉を２０℃、湿度１００％の接種箱内で保温、発病させ、接種３日後に１葉当りの菌叢直径を測定した後、次の計算式により防除価（％）を算出した。
【００５０】
0003605432.tif 000005
本試験は１薬液濃度区当り２連制で行い、その平均防除価（％）を求め、さらにそれから下記の基準により防除効果の評価値を求めた。また、下記の薬害調査の基準によりキュウリ（品種：相模半白）に対する薬害も調査した。
【００５１】
0003605432.tif 000006
【００５２】
＜薬害の調査指数＞
５：激甚    ４：甚      ３：多
２：若干    １：わずか  ０：なし
【００５３】
なお、比較対照のために、市販殺菌剤のプロシミドン（化学名：Ｎ−（３，５−ジクロロフェニル）−１，２−ジメチルシクロプロパン−１，２−ジカルボキシミド）も上記と同様の方法で試験した。無散布区では、有効成分を含む薬液で供試植物を処理しなかった。
以上の試験結果は表３に示すとおりである。
【００５４】
0003605432.tif 000007
【００５５】
試験例５  インゲン菌核病防除効果試験
温室内で直径６ｃｍの大きさのビニール樹脂製ポットで土耕栽培した子葉期のインゲン苗に対して、実施例２に準じて調製した水和剤の所定濃度希釈液を１鉢当り１０ｍｌ散布した。薬剤散布１日後、予めＰＳＡ培地で培養したインゲン菌核病菌（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ：  スクレロチニア  スクレロチオラム）の含菌ディスクを子葉の中央へ置床した。そして、２０℃、湿度１００％の接種箱内で保温し、発病させた。接種３日後に１葉当りの菌叢直径を測定し、試験例４に示した計算式により防除価（％）を算出した。
【００５６】
本試験は１薬液濃度区当り２連制で行い、その平均防除価（％）を求め、試験例４と同様の基準により評価値を求めた。また、試験例４と同様の基準によりインゲンに対する薬害を調査した。その結果は表４のとおりである。
【００５７】
0003605432.tif 000008
【００５８】
【発明の効果】
本発明の新規抗生物質ＡＢ５３６６は、以上に述べたように人間および動物に感染する真菌に抗真菌活性および植物病原菌に抗菌活性を有することから、新規な医療用抗真菌剤および農園芸用殺菌剤として期待される。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の抗生物質ＡＢ５３６６の臭化カリウム錠剤中で測定した赤外部吸収スペクトル図である。
【図２】抗生物質ＡＢ５３６６の重メタノール中で測定した１Ｈ核磁気共鳴スペクトル図である。
【図３】抗生物質ＡＢ５３６６の重ジメチルスルホキシド中で測定した１３Ｃ核磁気共鳴スペクトル図である。
【図１】
0003605432.tif 000010
【図２】
0003605432.tif 000011
【図３】
0003605432.tif 000012