【手続補正書】
【提出日】平成27年5月7日(2015.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のペプチド、またはその薬学的に許容される塩：
【化１】
2014224121.tif 000001
式中、
各Ｒ１およびＲ２は独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリールアルキル、またはヘテロシクリルアルキルであり；
各Ｒ３は独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル；または［Ｒ４−Ｋ−Ｒ４’］ｎであり；その各々は０〜６個のＲ５で置換され；
各Ｒ４およびＲ４’は独立して、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンであり；
各Ｒ５は独立して、ハロ、アルキル、ＯＲ６、Ｎ（Ｒ６）２、ＳＲ６、ＳＯＲ６、ＳＯ２Ｒ６、ＣＯ２Ｒ６、Ｒ６、蛍光部分、または放射性同位元素であり；
各Ｋは独立して、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、ＣＯ２、ＣＯＮＲ６、または
【化２】
2014224121.tif 000002
であり；
各Ｒ６は独立して、Ｈ、アルキル、または治療剤であり；
各ｎは独立して、１〜４の整数であり；
各ｘは独立して、２、３、４、または６であり；
各ｙは独立して、０〜１００の整数であり；
各ｗは独立して、０〜１００の整数であり；
ｚは、１〜１０の整数であり；かつ
各Ｘａａは独立して、アミノ酸であり；
該ペプチドは、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、およびＴｒｐを含む、８個の連続したアミノ酸残基のスパンを含み、該ペプチドは、約０．７５ｎＭ〜約１１０ｎＭのＨＤＭ２への結合親和性を示す。
【請求項２】
ポリペプチドがさらにＨＤＭＸに結合する、請求項１に記載の修飾されたポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
ｘが２である、請求項１または２記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
ｘが３である、請求項１または２記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
ｘが６である、請求項１または２記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ３が独立してアルケニレンである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ３が独立してアルキレンである、請求項１〜５のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
各Ｒ１および各Ｒ２が独立してアルキルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
各Ｒ１および各Ｒ２がメチルである、請求項８に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
各Ｒ１および各Ｒ２がＨである、請求項１〜７のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
ｚが１である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
各ｗが独立して３〜１５の整数である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
各ｙが独立して３〜１５の整数である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
ペプチドが細胞膜透過性である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１５】
ペプチドがヘリックスを含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１６】
ペプチドがα−ヘリックスを含む、請求項１５に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１７】
Ｒ３が１個のヘリックスターンの長さにわたって伸びる、請求項１６記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１８】
Ｒ３が２個のヘリックスターンの長さにわたって伸びる、請求項１６記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩を含有する、医薬組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載のペプチド、またはその薬学的に許容される塩の製造方法であって、
（ａ）メタセシス反応を受けることができる少なくとも２つの部分を含むペプチドを、固相ペプチド化学を使用して合成すること；
（ｂ）閉環メタセシス反応を行うこと；
を含む、前記方法
【請求項２１】
工程（ａ）で合成されるペプチドがＮ末端のキャップを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
工程（ａ）で合成されるペプチドが固体支持体に結合する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
低下したｐ５３活性と関連した障害の感受性があるか、その障害を有する対象を処置するために使用される、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
障害が癌である、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
癌が、骨肉腫、結腸癌、乳癌、Ｔ細胞癌、Ｂ細胞癌、粘液性類表皮癌、網膜芽腫、リンパ腫、白血病、および髄芽腫から選択される、請求項２４に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１３】
他の適用
多くの本発明の態様を説明してきた。しかし、本発明の精神および範囲を逸脱することなく、様々な修飾を行うことができることは理解されると思われる。したがって他の態様も、特許請求の範囲内である。
本明細書は以下の発明の開示を包含する：
［１］下記式(I)の修飾されたポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩：
【化２４−１】
2014224121.tif 000003
式中、
各R1およびR2は独立して、H、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリールアルキル、またはヘテロシクリルアルキルであり；
各R3は独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル；[R4-K-R4']nであり；その各々は0〜6個のR5で置換され；
R4およびR4'は独立して、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレンであり；
各R5は独立して、ハロ、アルキル、OR6、N(R6)2、SR6、SOR6、SO2R6、CO2R6、R6、蛍光部分、または放射性同位元素であり；
各Kは独立して、O、S、SO、SO2、CO、CO2、CONR6、または
【化２４−２】
2014224121.tif 000004
であり；
各R6は独立して、H、アルキル、または治療剤であり；
nは、1〜4の整数であり；
xは、2、3、4、または6であり；
yおよびwは独立して、0〜100の整数であり；
zは、1〜10の整数であり；かつ
各Xaaは独立して、アミノ酸であり；
該修飾されたポリペプチドは、
(a)8個の連続したアミノ酸内に、3、4、または6アミノ酸で隔てられた少なくとも1対のアミノ酸の側鎖が、式Iに示すアミノ酸対のα炭素に接続している連結基R3で置き換えられていること；および
(b)アミノ酸対の第一のアミノ酸のα炭素が式Iに示すR1で置換されており、かつアミノ酸対の第二のアミノ酸のα炭素が式Iに示すR2で置換されていることを除いて、ヒトp53もしくはこのバリアント、またはヒトp53もしくはこのバリアントのホモログの少なくとも8個の連続したアミノ酸を含む。
［２］ヒトp53ポリペプチドが、SEQ ID NO:1を含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３］ヒトp53の少なくとも8個の連続したアミノ酸が、SEQ ID NO:2の少なくとも8個の連続したアミノ酸を含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［４］ヒトp53の少なくとも8個の連続したアミノ酸が、Xaa1、Xaa4、Xaa7、Xaa8、Xaa11、Xaa14、Xaa15のそれぞれがSEQ ID NO:3の任意のアミノ酸である、
【化２４−３】
2014224121.tif 000005
の少なくとも8個の連続したアミノ酸を含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［５］修飾されたポリペプチドがHDM2に結合する、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［６］xが2である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［７］xが3である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［８］xが6である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［９］xが2、3、または6であり、R3が単一の二重結合を含むアルケニルであり、かつR1およびR2が両方ともHである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［１０］各yが独立して、3〜15の間の整数である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［１１］ポリペプチドが、SEQ ID NO:2の少なくとも8個の連続したアミノ酸を含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［１２］Ser7およびPro14の側鎖が、アミノ酸対のα炭素に連結している式Iに示す連結基R3と置換されており、かつアミノ酸対の第一のアミノ酸のα炭素が式Iに示すR1で置換されており、かつアミノ酸対の第二のアミノ酸のα炭素が式Iに示すR2で置換されており、かつPhe6、Trp10、およびLeu13以外の0個または最大6個のアミノ酸が独立して、他の任意のアミノ酸と置換されている、
【化２４−４】
2014224121.tif 000006
の少なくとも8個の連続したアミノ酸を含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［１３］Ser7およびPro14の側鎖が、アミノ酸対のα炭素に接続している式Iに示す連結基R3と置換されており、かつアミノ酸対の第一のアミノ酸のα炭素が式Iに示すR1で置換されており、かつアミノ酸対の第二のアミノ酸のα炭素が式Iに示すR2で置換されており、かつPhe6、Trp10、およびLeu13以外の0個または最大6個のアミノ酸が独立して、他の任意のアミノ酸と置換されている、
【化２４−５】
2014224121.tif 000007
の少なくとも8個の連続したアミノ酸を含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［１４］Leu1およびLys11がいずれも独立して、他の任意のアミノ酸と置換されている、［13］記載の修飾されたポリペプチド。
［１５］Glu4がAsp以外の任意のアミノ酸と置換されている、［13］記載の修飾されたポリペプチド。
［１６］Asp8がGlu以外の任意のアミノ酸と置換されている、［13］記載の修飾されたポリペプチド。
［１７］ポリペプチドがpH 7で正味の負電荷を有しない、［13］記載の修飾されたポリペプチド。
［１８］ポリペプチドが、pH 7で正電荷を有する少なくとも1個のアミノ酸を含み、(a)アミノ末端がLeu1であるか、もしくはLeu1と置換されたアミノ酸、または(b)カルボキシ末端がAsn16であるか、もしくはAsn16と置換されたアミノ酸のいずれかである、［17］記載の修飾されたポリペプチド。
［１９］ポリペプチドがPEGと共有結合されている、［17］記載の修飾されたポリペプチド。
［２０］R1およびR2が各々独立して、HまたはC1-C6アルキルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［２１］R1およびR2が各々独立して、C1-C3アルキルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［２２］R1およびR2がメチルである、［12］記載の修飾されたポリペプチド。
［２３］R3がアルキルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［２４］xが3である、［22］記載の修飾されたポリペプチド。
［２５］R3がC8アルキルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［２６］xが6である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［２７］R3がC11アルキルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［２８］R3がアルケニルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［２９］xが3である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３０］R3がC8アルケニルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３１］xが6である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３２］R3がC11アルケニルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３３］R3が直鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３４］R3が[R4-K-R4]であり；かつR4が直鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３５］R1またはR2の少なくとも一方がアルキルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３６］R1およびR2が各々独立して、HまたはC1-C3アルキルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３７］R1およびR2がメチルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３８］xが3または6であり、かつzが1である、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［３９］R3が、C8またはC11のアルキルもしくはアルケニルである、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［４０］乳酸とグリコール酸のコポリマーをさらに含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［４１］アミノ末端の脂肪酸をさらに含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［４２］HDM2を発現する細胞にペプチドを標的輸送する抗体をさらに含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［４３］ビオチン部分をさらに含む、［1］記載の修飾されたポリペプチド。
［４４］下記式を有する化合物：
【化２４−６】
2014224121.tif 000008
式中、
R1は、Gln以外の任意のアミノ酸の側鎖であり；
R2は、-CH2OH[S]であり；
R3は、-CH2CH2C(O)NH2[Q]であり；
R4は、GluまたはAsp以外の任意のアミノ酸の側鎖であり；
R5は、-C(OH)CH3[T]であり；
R6は、ベンジル[F]であり；
R7およびR14は合わせてRxであり；
R8は、R4は、GluまたはAsp以外の任意のアミノ酸の側鎖であり；
R9は、-CH2CH(CH3)2[L]であり；
R10は、
【化２４−７】
2014224121.tif 000009
であり；
R11は、Lys以外の任意のアミノ酸の側鎖であり；
R12およびR13は、-CH2CH(CH3)2[L]であり；
R15は、-CH2CH2C(O)NH2[Q]であり；かつ
R16は、-CH2C(O)NH2[N]であり；
Rxは、アルキル、アルケニル、アルキニル；[Rx1-K-Rx1]nであり；その各々は、0〜6個のRx2で置換され；
Rx1およびRx1'は独立して、アルキル、アルケニル、またはアルキニルであり；
Rx2は、ハロ、アルキル、ORx3、N(Rx3)2、SRx3、SORx3、SO2Rx3、CO2Rx3、Rx3、蛍光部分、または放射性同位元素であり；
Kは、O、S、SO、SO2、CO、CO2、CONRx3、または
【化２４−８】
2014224121.tif 000010
であり；
Rx3は、H、アルキル、または治療剤であり；かつ
RzおよびRwは独立して、H、ヒドロキシル、アミド(NH2)、アミノ酸、ペプチド結合によって連結された2〜10アミノ酸；tat；およびPEGである。
［４５］各yが独立して、3〜15の間の整数である、［44］記載のポリペプチド。
［４６］R1およびR2が各々独立して、HまたはC1-C6アルキルである、［44］記載のポリペプチド。
［４７］R1およびR2が各々独立して、C1-C3アルキルである、［44］記載のポリペプチド。
［４８］R1およびR2の少なくとも一方がメチルである、［44］記載のポリペプチド。
［４９］R1およびR2がメチルである、［44］記載のポリペプチド。
［５０］R3がアルキルである、［44］記載のポリペプチド。
［５１］R3がC8アルキルである、［44］記載のポリペプチド。
［５２］R3がC11アルキルである、［44］記載のポリペプチド。
［５３］R3がアルケニルである、［44］記載のポリペプチド。
［５４］R3がC8アルケニルである、［44］記載のポリペプチド。
［５５］R3がC11アルケニルである、［44］記載のポリペプチド。
［５６］R3が、直鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニルである、［44］記載のポリペプチド。
［５７］R3が[R4-K-R4]であり、かつR4が直鎖アルキル、アルケニル、またはアルキニルである、［44］記載のポリペプチド。
［５８］xが3であり、かつzが1である、［44］記載のポリペプチド。
［５９］細胞膜を通って輸送される、［47］記載のポリペプチド。
［６０］下記式(II)の修飾されたポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩：
【化２４−９】
2014224121.tif 000011
式中、
各R1およびR2は独立して、HまたはC1〜C10アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアリールアルキル、またはヘテロシクリルアルキルであり；
R3は、アルキレン、アルケニレン、もしくはアルキニレン、または[R4'-K-R4]nであり；その各々は0〜6個のR5で置換され；
R4およびR4'は独立して、アルキレン、アルケニレン、またはアルキニレン(例えば各々独立して、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、またはC10のアルキレン、アルケニレン、もしくはアルキニレン)であり；
R5は、ハロ、アルキル、OR6、N(R6)2、SR6、SOR6、SO2R6、CO2R6、R6、蛍光部分、または放射性同位元素であり；
Kは、O、S、SO、SO2、CO、CO2、CONR6、または
【化２４−１０】
2014224121.tif 000012
、アジリジン、エピスルフィド、ジオール、アミノアルコールであり；
R6は、H、アルキル、または治療剤であり；
nは、2、3、4、または6であり；
xは、2〜10の整数であり；
wおよびyは独立して、0〜100の整数であり；
zは、1〜10の整数(例えば1、2、3、4、5、6、7、8、9、10)であり；かつ
各Xaaは独立して、アミノ酸(例えば、20種の天然のアミノ酸の1つ、または任意の天然の、非天然のアミノ酸)であり；
R7は、例えばチオカルバミン酸塩またはカルバミン酸結合を介して連結された、PEG、tatタンパク質、アフィニティー標識、標的化部分、脂肪酸由来のアシル基、ビオチン部分、蛍光プローブ(例えばフルオレセインもしくはローダミン)であり；
R8は、H、OH、NH2、NHR8a、NR8aR8bであり；
該ポリペプチドは、(a)SEQ ID NO:1の8個の連続したアミノ酸内に、3、4、または6アミノ酸で隔てられた少なくとも1対のアミノ酸の側鎖が、式Iに示すアミノ酸対のα炭素に接続している連結基R3で置き換えられていること；および(b)アミノ酸対の第一のα炭素が、式IIに示すR1で置換されており、かつアミノ酸対の第二のα炭素が式IIに示すR2で置換されていることを除いて、SEQ ID NO:1(ヒトp53)もしくはこのバリアント、SEQ ID NO:2もしくはこのバリアント、または本明細書に記載された別のポリペプチド配列の少なくとも8個の連続したアミノ酸を含む。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１４】
【化２４−１１】
2014224121.tif 000013