(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
TNF誘発病状の治療薬を調製するためのベンジダミンおよび生理学的に許容されるその酸付加塩の使用法。
【請求項２】
TNF誘発病状が、敗血症ショック、カヘキシー、腫瘍性疾患を伴う全身衰弱、慢性のウイルス性感染症および細菌性感染症並びに変成疾患から成る群から選択される病状である請求項１記載の使用法。
【請求項３】
細菌性感染症が結核である請求項２記載の使用法。
【請求項４】
ウイルス性感染症がエイズである請求項２記載の使用法。
【請求項５】
変成疾患が多発性硬化症または潰瘍性大腸炎である請求項２記載の使用法。
【発明の詳細な説明】
この発明は、TNF（Tumour Necrosis Factor;腫瘍壊死因子）によって誘発される病状の治療におけるベンジダミン（benzydamine）および生理学的に許容されるその酸付加塩の使用に関する。
ベンジダミン［ザ・メルック・インデックス、第９版（1976年）、第147頁、No.1136参照］は米国特許第3,318,905号明細書において最初に開示された。該特許は、鎮痛性で抗炎症性の筋弛緩活性を有する化合物群に関する。
ベンジダミンはヒトの病気の治療においては塩酸塩として広く使用されている。全身的にはベンジダミンは主として抗炎症剤や鎮痛剤として使用されている。しかしながら、局部的にはベンジダミンは局部的炎症を伴う疾患、例えば、筋肉痛、腱炎、外陰腟炎、歯肉炎、口内炎および口腔粘膜炎等の治療に主として使用されている。
さらに、ベンジダミンサリチル酸塩はリューマチ性疾患の治療においても使用されている。
TNFは17,500（17.5KDa）の相対分子質量（Mr）と既知のアミノ酸配列を有する非グリコシル化ポリペプチドであって、活性形態はトリマーであると考えられている［オールド（Old L.J.、サイエンス、第230巻、第630頁〜第632頁（1985年）；ビュトラー（Beutler B.）ら、ネイチャー、第320巻、第585頁〜第588頁（1986年）；ジョーンズ（Jones E.Y.）ら、ネイチャー、第338巻、第225頁〜第228頁（1989年）；コルチ（Corti A.）ら、Biochem.J.、第284巻、第905頁〜第910頁（1992年）］。
アルファTNFもしくはカケクチン（cachectin）として知られているTNFはサイトキン類に属しており、外部攻撃から生物を防御する免疫反応の刺激における役割の一部をはたしている［エプスタイン（Epstein F.H.）、ザ・ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディスン、第316巻、第379頁〜385頁（1987年）；ウルダル（Urdal D.L.）、アニュアル・リポーツ・イン・メディカルケミストリー、第26巻、第221頁〜第227頁（1991年）］。
一方、TNFの過度の活性はTNFのかなりの毒性による実際の病原となる［ワージ（Waage A.）ら、イムノロジカル・レヴューズ、第127号、第221頁〜第230頁（1992年）］。
TNFが急性および慢性の非常に重い病状、例えば、敗血性ショックやカヘキシー（エプスタインの前記文献；ワージらの前記文献）および多発性硬化症［ジジェクストラ（Dijkstra D.C.）ら、トレンズ・イン・ファーマコロジカルサイエンス、第14巻、第124頁〜第129頁（1993年）］において非常に重要な役割を果たしていることが認められている。
このため、TNFについての多年にわたる研究はその特性、構造および調製に関するものであったが、最近は、TNFの生産もしくは作用を妨げる薬剤であって、毒性、細菌性、ウイルス性または内因性の因子がマクロファージの刺激によって毒性のTNFをもたらす病状の治療手段として使用し得る薬剤が要請されるようになっている。
異なる機構によってではあるが、TNFの作用を妨げる化合物が知られている。
特に、ある種の化合物は、特に敏感な細胞系をTNFの毒性作用から保護し得ることが報告されている。
スラミン（suramin）（ヨーロッパ特許出願第486,809号）、タリドミド（thalidomide）［サムパイオ（Sampaio E.P.）、J.Exp.Med.、第173巻、第699頁〜第703頁（1991年）］およびグルタルイミドの誘導体、例えば、シクロヘキシミド（Transplant Proc.、第23巻、第254頁〜第255頁（1991年）は、機構と特異性は異なるが、TNFの生産を妨げる。
これに対して、ビニグロール（vinigrol）［PCT−WO−91/07953;ウェーバー（Weber E.）、ジャーナル・オブ・オーガニックケミストリー、第52巻、第5292頁〜第5293頁（1987年）］はTNFの作用を、その合成経路を変えることなく妨害する。
TNFに関する拮抗作用が認められる前は、この種の化合物の間には構造または臨床的用途についての関連性は知られていなかった。
実際、スラミン、即ち、8,8'−（カルボニルビス（イミノ−3,1−フェニレンカルボニルイミノ（４−メチル−3,1−フェニレン）カルボニルイミノ））ビス−1,3,5−ナフタレントリスルホン酸は殺トリパノソーマ剤（trypanocide）として知られていた。シクロヘキシミド、即ち、４−（２−（3,5−ジメチル−２−オキソ−シクロヘキシル）−２−ヒドロキシエチル）−2,6−ピペリジンジオンは殺菌剤として知られていた。さらに、ビニグロール、即ち、4,8a（1H）−ジオール,4,4a,5,6,7,8−ヘキサヒドロ−３−（ヒドロキシメチル）−8.9−ジメチル−12−（１−メチルエチル）−（1R−１α,4β,4αβ,5α,8β,8αβ,9S＊,12S＊））−1,5−ブタノナフタレンは血圧降下剤および抗血小板凝集剤として知られていた。
本発明者は、常套の抗炎症剤、例えば、イブプロフェン（ibuprofen）およびインドメタシン（indomethacin）はTNFは拮抗しないことを実験によって確認した（実施例１参照）、
予想外なことには、本発明者は、ベンジダミンおよび生理学的に許容されるその酸付加塩が、TNFの毒性作用から敏感な細胞の培養を生体外で保護し、また、ラットの足におけるTNFの浮腫形成作用を生体内で拮抗することを見出した。
今までおこなった実験によれば、TNFに関して抗炎症効果を得るための投与量よりも多量に投与することによってベンジダミンおよび生理学的に許容されるその酸付加塩の作用が発揮されることが判明した。
従って、本発明の第一の目的は、TNFによって誘発される病状の治療用薬剤を調製するためのベンジダミンおよび生理学的に許容されるその酸付加塩の使用である。
TNFによって誘発される病状の代表的な例は敗血性ショック、カヘキシー、腫瘍性疾患を伴う全身衰弱［バルクウィル（Balkwill F.）ら、ザ・ランセット、ii Sec.、第1229頁〜第12232頁（1987年）］、慢性のウイルス性もしくは細菌性感染症、例えば結核およびエイズ［バルネス（Barnes P.F.）ら、ザ・ジャーナル・オブ・イムノロジー、第145巻、第149頁〜第154頁（1990年）］、変性疾患、例えば多発性硬化症（ジジェクストラらの前記文献）および潰瘍性大腸炎である。
本発明に係る該化合物は、実際の使用に際してはそのままで投与してもよいが、全身用の製剤形態で投与するのが好ましい。
本発明の第二の目的は、TNFによって誘発される病状で患う患者に有効量のベンジダミンまたは生理学的に許容されるその酸付加塩を投与することを含む該病状の治療法を提供することである。
本発明に係る該化合物は、実際の使用に際してはそのままで投与してもよいが、全身用の製剤形態で投与するのが好ましい。
本発明による製剤は全身的または局部的に投与してもよい。
全身的に投与する場合、製剤は固体、例えば錠剤、糖衣錠、カプセル、粉末および徐放剤または液体、例えば筋肉内注射または静脈内注射用殺菌溶液、懸濁液およびエマルジョンの形態であってもよい。
局部的に使用する場合の製剤の形態は、腟用投与形態、例えば洗浄液、クリームおよびフォーム（foam）、口腔用治療形態、例えばうがい液もしくはスプレー、並びに耳鼻用投与形態、例えば軟膏、ペースト、クリーム、フォーム、ゲル、溶液およびパウダーであってもよい。
本発明による製剤には、常套の賦形剤のほかに、他の適当な薬剤用添加剤、例えば防腐剤、安定剤、乳化剤、浸透圧調整用塩類、緩衝剤、着色剤および香味剤等を適宜配合してもよい。
特定の治療に使用する場合、本発明に係る製剤には、同時に投与するのが有効なさらに別の融和性活性成分を配合してもよい。
実際の使用に供する場合、ベンジダミンおよび生理学的に許容されるその酸付加塩の有効量は既知の要因、例えば要求される個々の治療の種類、選択される製剤形態および投与法等に応じて広範囲に変化させてもよい。しかしながら、最適な有効量は単純な常套の手順に従って当業者が容易に選定することができる。
一般的には、一日あたりの投与量はベンジダミンベースで0.1〜10mg/kg、より好ましくは３〜10mg/kgである。もちろん、ベンジダミンの酸付加塩を使用する場合、上記のベンジダミンの量に対応する量の酸付加塩が投与される。
本発明に係る製剤は当業者には既知の常套法に従い、所望の効果を得るのに必要な成分を混合して顆粒化し、さらに必要に応じて圧縮するか、または該成分を混合して溶解することによって調製することができる。
以下の実施例は本発明の例示的に説明するものであり、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
実施例１
生体外でのTNFの毒性に対するベンジダミン、イブプロフェンおよびインドメタシンの効果
細胞培養L929をベンジダミン塩酸塩、イブプロフェンまたはインドメタシン31μg/mlの存在下または不存在下でTNF［ムリン（murine）組換えα−TNF「ゲンザイム（Genzyme）」］と共に、ブランチ（D.R.Branch）らの方法［ジャーナル・オブ・イムノロジカル・メソッド、第143巻、第251頁〜第261頁（1991年）参照］に従ってインキュベートした。
溶液の光学濃度は生存細胞数を直接的に示すものであり、550nmフィルターを備えたタイターテック（Titertek）MIKIIを用いて測定した。結果を以下の表１に示す。
表１
光学濃度（Abs）
対象                                       0.768
TNF（１μ/ml）                             0.133
TNF＋イブプロフェン                        0.118
TNF＋インドメタシン                        0.152
TNF＋ベンジダミン                          0.573
実施例２
TNFによって誘発されるラットの組織障害におけるベンジダミンの効果
この試験は各グループが５匹のラットから成る３つのグループについておこなった（雄、CD種、体重101〜125g）。市販のTNF溶液（ムリン組換えα−TNF「ゲンザイム」）をラットの後の右足に40,000ユニット（0.1ml）注射することによって浮腫を誘発させた。
第二グループ（グループＢ）のラットには、同時にベンジダミン塩酸塩を40mg/kg皮下注射した。一方、第三グループ（グループＣ）のラットにはインドメタシンを3mg/kg経口投与した。以下の表２に示す所定の時間におけるラットの足の体積をBASILEプレチスモメーターを使用し、ウィンター（C.A.Winter）らの方法［「プロシーディングズ・オブ・ザ・ソサイアティー・フォア・エクスペリメンタル・バイオロジー・アンド・メディスン」、第IV巻、第544頁〜第547頁（1962年）］に従って測定した。
測定結果を以下の表２に示す。
表２
足の体積の経時変化（ml）
グループ  ０  30分    １時間  ３時間  ６時間
Ａ     ０  ＋90    ＋70    ＋90    ＋10
Ｂ     ０  ＋50    ＋30    ＋30    −10
Ｃ     ０  ＋110   ＋40    ＋90    ＋110
グループＡは対照グループであり、グループＢはベンジダミンを用いて処理したグループであり、グループＣはインドメタシンを用いて処理したグループである。
表２に示すデータの有意性（significance）はｐ＜0.01である。