(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミネラル及び含有する脱脂卵黄蛋白分解物に含まれる蛋白質中、分子量２０００以下のペプチド画分が８０％以上である脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする飲食物。
【請求項２】
ミネラルが、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、マンガン、銅の中から選ばれる１種または２種以上である請求項１記載の飲食物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅などのミネラルとともにミネラル吸収促進剤として脱脂卵黄蛋白質を蛋白分解酵素で処理して得られる脱脂卵黄蛋白分解物を含む飲食物に関する。詳しくは、ミネラル吸収促進作用をもつ、分子量２０００以下を主成分とする脱脂卵黄蛋白分解物を含むことを特徴とする飲食物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
加工食品の普及や食生活の変化によって、生体に必要なミネラル約２０種類の内、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅などのミネラルが、日本人には不足しやすいことが報告されており、特にカルシウム、鉄の不足が問題になっている。
従来より、カルシウムの吸収促進を目的として、カルシウム吸収促進剤として用いられているものに、牛乳中に含まれるカゼインのトリプシン分解物であるカゼインホスホペプチドなどが知られている。
また、卵黄由来では、水溶性の卵黄蛋白及び分子量２０００〜４００００の卵黄ペプチドでのカルシウム吸収促進効果（特開平４−５３４７１）が知られている。
しかし、分子量２０００以下の卵黄ペプチドによるカルシウム吸収促進効果や、カルシウム以外の鉄やマグネシウムなどのミネラルの吸収促進効果については知られていなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、現在の食生活で不足傾向のあるカルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅などのミネラルを効率よく吸収促進させる作用のある脱脂卵黄蛋白分解物すなわち脱脂卵黄蛋白質を蛋白分解酵素で処理して得られる分子量２０００以下のペプチドを主成分とする脱脂卵黄蛋白分解物を含む飲食物を提供するものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅などのミネラルを吸収促進させる飲料および食物を開発する目的で鋭意研究を行った結果、脱脂卵黄蛋白質を蛋白分解酵素で処理して得られる分子量２０００以下を主成分とする脱脂卵黄蛋白分解物が上記目的を達成することを見出し本発明を完成した。
すなわち、本発明は、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅などのミネラルを効率よく吸収促進させる作用のある脱脂卵黄蛋白分解物すなわち脱脂卵黄蛋白質を蛋白分解酵素で処理して得られる分子量２０００以下のペプチドを主成分とする脱脂卵黄蛋白分解物を含む飲食物に関する。
【０００５】
本発明に用いられる卵黄は、鶏卵，アヒル卵，ウズラ卵などの鳥類の卵から卵白部を除去したものであれば特に制限されるものではないが、経済的に大量に得られる鶏卵が好ましい。
また、この卵黄は、生卵黄，凍結卵黄，卵黄粉末のいずれの形態ものでも利用できる。
本発明において、卵黄は脱脂して使用するが、それは以下にあげる理由によるものである。
（１）ミネラル吸収促進作用をもつ成分は、卵黄中に含まれる蛋白の分解物であり、この成分を効率よく飲食品に添加するため、蛋白質含量を高める。
（２）飲食品中で酸化変敗しやすい脂質を予め除去する。
（３）ダイエット食品への添加の際、カロリーが高くなることをさけるため、カロリーの高い脂質を除去する。
【０００６】
本発明に用いられる脱脂卵黄蛋白は、エタノール，メタノール，ブタノール，プロパノール，イソプロパノールなどのアルコール類またはアセトン，酢酸エチル，ヘキサン，エーテルなどの有機溶剤から選ばれる１種または２種以上を脱脂溶剤として用いることにより、常法に従って卵黄から脂溶性成分を除去して得られれたもので良く、脱脂溶剤による処理後、熱風乾燥，流動乾燥などの方法により、残存する脱脂溶剤を除去，乾燥したものである。得られた脱脂卵黄蛋白の成分組成については特に限定するものではないが、好ましくは、水分１０％以下、脂質１０％以下、蛋白質７５％以上である。
また、この脱脂卵黄蛋白の水に対する溶解性については、水溶性，不溶性のいずれでもかまわない。
本発明の脱脂卵黄蛋白分解物は、脱脂卵黄蛋白を水に懸濁、分散させて、蛋白分解酵素を添加し、反応を行うことにより得られる。
【０００７】
本発明に用いられる蛋白分解酵素は、動植物起源，微生物起源など特に種類は問わないが、中でも酵素処理時にｐＨ調整が不要である中性プロテアーゼが望ましい。得られる卵黄蛋白分解物のｐＨは、中性であることがその用途範囲を広くする意味で望ましいため、中性プロテアーゼ以外の酵素を用いると、酵素処理後にｐＨの再調整及び生成する塩類の除去が必要となり、経済的に高価になる等問題がある。
蛋白分解酵素で市販されているものとしては、例えば、「アマノＰ」「アマノＡ」「アマノＭ」（天野製薬（株）製）、「オリエンターゼＯＮ」「オリエンターゼ９０Ｎ」（上田化学工業（株）製）、「ＰＤ酵素」「ＡＯ−プロテアーゼ」（（株）盛進製）、「ニュートラーゼ」（ノボノルディスク  バイオインダストリー（株）製）などがあげられる。これらの酵素は単独で、あるいは２種以上組み合わせて用いても良い。
【０００８】
本発明に用いられる蛋白分解酵素の脱脂卵黄蛋白に対する添加量は例えば、０．０１〜１５重量％、好ましくは０．０５〜１０重量％、特に好ましくは０．１〜５重量％の範囲で用いられる。この範囲以下では脱脂卵黄蛋白の分解が起こりにくく、得られるペプチドの収量が低くなる。反対にこの範囲以上では、脱脂卵黄蛋白の分解反応は問題なく起こるが経済的に高価になる等問題がある。
また、その添加方法は、酵素反応開始時に一度に添加しても良いし、数回に分けて添加しても良い。数回に分ける際には、同じ酵素を添加しても良いし、異なる酵素を添加しても良い。
本発明の蛋白分解酵素による処理温度は、用いる蛋白分解酵素の至適温度範囲であれば問題ないが、例えば、２５〜８０℃、好ましくは３０〜７０℃、特に好ましくは、３５〜６０℃の温度範囲である。処理温度がこの範囲以下では酵素の活性が低くなり脱脂卵黄蛋白の分解に長時間必要になる等問題がある。一方高くなると、酵素の失活が激しく、分解反応を制御することが困難である。
【０００９】
本発明に用いる脱脂卵黄蛋白の酵素処理時の濃度は例えば、１〜５０重量％、好ましくは２〜４０重量％、特に好ましくは５〜３５重量％の範囲で懸濁、分散される。この範囲以下では酵素分解反応は問題なく行われるが、低濃度のため得られる収量が低くなる。一方この範囲以上では溶液の粘度が上昇し攪拌が困難となり、懸濁、分散が均一に行われにくくなるなどの問題がある。
本発明における酵素処理の時間については、得られる脱脂卵黄蛋白分解物の分子量２０００以下の画分が主成分となれば、特に限定はしないが、例えば２〜７２時間、好ましくは３〜４８時間、特に好ましくは５〜２４時間の範囲である。処理時間がこの範囲以下であると、分解が十分に行われず、一方この範囲以上では、分解がこれ以上進まなくなる等問題がある。
本発明の方法によって得られた水溶液の脱脂卵黄蛋白分解物は、そのまま水溶液の形で、あるいはスプレードライや凍結乾燥などの方法で粉末化し粉末状の形で製品化することができる。
【００１０】
本発明の方法によって得られた脱脂卵黄蛋白分解物は、分子量２０００以下のペプチドを主成分とするものである。
更に好ましくは、脱脂卵黄蛋白分解物に含まれる蛋白質中、分子量２０００以下の画分が８０％以上のものである。
本発明の脱脂卵黄蛋白分解物の飲食品への添加量は例えば、０．００１〜１５重量％、好ましくは０．０５〜１０重量％、特に好ましくは、０．０１〜５重量％の範囲で添加することができる。この範囲以下であれば本発明の効果が期待できず、この範囲以上では脱脂卵黄蛋白分解物の味が飲料および食物にでるため製品化が困難である。
本発明に用いられるミネラルは、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、マンガン、銅、クロム、セレン、モリブデン、コバルト、ニッケル、砒素、沃素、ホウ素、臭素、フッ素、鉛、リチウム、珪素、バナジウム、カドミニウムなどの生体に必要な元素であれば特に限定されるものではない。
本発明に用いられるミネラルは、食品中に含有しているミネラル、天然物から得られるミネラル及び食品添加物に認められているミネラルであり、単独でも２種以上のミネラルの混合物でも用いることができる。
ここでいう食品中に含有しているミネラルとは、例えば、牛乳，脱脂粉乳などの乳製品に含まれるカルシウムや肝などに含まれる鉄などであり、一般に食品といわれるものが含有しているミネラルをいう。
また、天然物から得られるミネラルとは、例えば、卵殻カルシウム，牡蛎殻カルシウムなど天然物を乾燥や焼成により食品として使用できる様にしたものや、乳清ミネラル，牡蛎肉エキスなど天然物から抽出して得られたものなどであり、天然物を加工して食品に添加できる形にしたミネラルをいう。
【００１１】
脱脂卵黄蛋白分解物と同時に添加されるミネラルは、通常用いられている添加量、例えば、栄養所要量の１／２０〜１倍量で良い。
本発明の脱脂卵黄蛋白分解物は、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅などのミネラルを効率よく吸収促進させる作用があるため、ミネラルの吸収に優れた飲料および食物を提供することができる。
本発明の易吸収性ミネラル含有飲料としては、牛乳、乳性飲料、果実飲料、炭酸飲料、トマトジュース、野菜ジュース、豆乳、清涼飲料、コーヒー飲料などがあげられる。
【００１２】
本発明の易吸収性ミネラル含有食物としては、ビスケット、クラッカー、パイなどのビスケット類；ポテトチップ、コーンパフ、コーンチップなどのスナック菓子；あられ、せんべいなどの米菓；チョコレート、ココア、チューインガム；ドロップ、キャラメル、ヌガー、ゼリー、マシマロ、ウイスキーボンボン、金平糖、ラムネ菓子などのキャンディー；ワッフル、パイ、シュークリーム、タルト、ババロア、バームクーヘン、生クリーム、ショートケーキ、バターケーキ、カステラ、ウエハースなどの洋菓子；ういろう、さくらもち、かるかん、水羊かん、大福もち、蒸羊かん、くしだんご、練り羊かん、最中、あん入り打菓子、焼まんじゅう、そばぼーろー、甘納豆、八つ橋などの和菓子；中華まんじゅう、ドーナツ、ピザ、クレープ、パン類、うどん、そば、ラーメン、ひやむぎ、そうめん、即席麺、マカロニ、スパゲッティ；ちくわ、カマボコ、ソーセージ、あげかまなどの水産練り製品；珍味、寒天、バター、チーズ、アイスクリーム、氷菓、マーガリン、ショートニング、ラード、惣菜、佃煮、ハンバーグ、カレー、スープ、冷凍食品、缶びん食品、レトルト食品、マヨネーズ、ドレッシング、調味料などがあげられる。
次に本発明を実施例によって説明するが、本発明はこの実施例の範囲に限定されるものではない。
【００１３】
【実施例】
実施例１．脱脂卵黄蛋白分解物の調製
卵黄粉末２ｋｇにエタノール２０リットルを加えて５時間撹拌した後、遠心分離により脂質成分を除去した。この残渣を熱風乾燥により粉末化し、脱脂卵黄蛋白８３８ｇを得た。
この脱脂卵黄蛋白の水分含量は３．５％、蛋白質含量は７８．８％、脂質含量は４．３％であり、一部、溶剤による変性を受けて水に不溶性となっている部分があり、完全な水溶性ではなかった。
上記で得られた脱脂卵黄蛋白５００ｇを水５リットルに懸濁させ、中性プロテアーゼ（商品名：アマノＰ    天野製薬（株）製）１０ｇを添加し、４５℃において２０時間反応を行った。次に８０℃，３０分の加熱処理を行い酵素を失活させて濾過した。濾液を噴霧乾燥し、脱脂卵黄蛋白分解物を４００ｇ得た。
得られた脱脂卵黄蛋白及び脱脂卵黄蛋白分解物について、高速液体クロマトグラフィー１０５０システム（ヒューレットパッカード社製）を用いてゲル濾過クロマトグラフィーを行った。分析用カラムに、スーパーデックスペプチド（ファルマシア（株）製）を用い、リン酸緩衝液（ｐＨ＝７）を０．５ｍｌ／分の流速で流し、２２０ｎｍで検出した。測定の結果、得られた脱脂卵黄蛋白では分子量４００００〜８０００の間にピークが見られ、分子量１００００以上の画分は９１．２％であった。また、脱脂卵黄蛋白分解物の分子量は１０００００〜１００の間にピークが見られ、分子量２０００以下の画分は８５．３％であった。
【００１４】
【試験例】
試験例１．腸管ループ法によるカルシウム吸収試験
実施例１で得られた脱脂卵黄蛋白及び脱脂卵黄蛋白分解物の腸管からのカルシウム吸収に対する効果を検討する目的で以下の実験を行った。
体重約２００ｇのウィスター系雄ラットを一晩絶食後、麻酔下で小腸の上部及び下部に結紮腸管ループを作成した。サンプルは、４０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）を０．２ｍｌ，続いてサンプル溶液を０．２ｍｌループ内にシリンジを使って注入した。注入後は小腸を腹腔内にもどし、麻酔下で２時間放置してからループ内液を取り出した。ループ内液は、０．０１Ｎ塩酸溶液を用いて洗浄採取した。尚、別のラットはサンプル注入後、直ちにループ内液を採取し、これを０時間とした。
【００１５】
採取した０時間と２時間後のループ内液中に残存するカルシウムの総量を、カルシウム測定キット（和光純薬（株）；カルシウムＣーテストワコー）により測定しカルシウム吸収率（％）を算出した。投与サンプルは以下に示す５群とし、例数は各４例行った。
Ａ群：３０ｍＭ塩化カルシウム溶液
Ｂ群：脱脂卵黄蛋白（１０％水溶液）＋３０ｍＭ塩化カルシウム溶液
Ｃ群：脱脂卵黄蛋白（２．５％水溶液）＋３０ｍＭ塩化カルシウム溶液
Ｄ群：脱脂卵黄蛋白分解物（１０％水溶液）＋３０ｍＭ塩化カルシウム溶液
Ｅ群：脱脂卵黄蛋白分解物（２．５％水溶液）＋３０ｍＭ塩化カルシウム溶液
本試験の結果を表１に示す。
【００１６】
【表１】
0003556009.tif 000002
【００１７】
表１の結果より、本発明品を加えたＤ，Ｅ群は、本発明品を含まないＡ群に比べて有意にカルシウムの吸収率が高かった（Ｐ＜０．０５）。
また、脱脂卵黄蛋白においても吸収を高める効果は見られたが、脱脂卵黄蛋白分解物に比べて効果が弱く、特に小腸上部においては、効果は見られなかった。
以上により、本発明の脱脂卵黄分解物はカルシウム吸収に優れ、無機カルシウムの吸収を高める効果があり、その効果は、分解前の脱脂卵黄蛋白よりも高いことがわかった。
【００１８】
試験例２．ラットにおける食餌中ミネラルの吸収試験
実施例１で得られた脱脂卵黄蛋白分解物の食餌中ミネラルの吸収性を検討する目的で以下の試験を行った。
試験に使用した飼料の組成を表２に示す。飼料の調製において、ミネラルミックスはカルシウム，リン欠乏品を使用し、炭酸カルシウム，リン酸カルシウム，リン酸一カリウムでカルシウム及びリンの含量を調整した。
体重約７０ｇのラット（１群６匹）をコントロール飼料で４日間予備飼育した後、それぞれの飼料で３週間飼育し、その間の体重増加率及び、１６日目から４日間、食餌中と糞中のミネラル含有量の比からその吸収率を試験した。
ミネラルの測定は、カルシウム，マグネシウム，鉄の３種類について行った。
試験結果を表３，４に示す。
【００１９】
【表２】
0003556009.tif 000003
【００２０】
【表３】
0003556009.tif 000004
【００２１】
【表４】
0003556009.tif 000005
【００２２】
表３の結果から、両群の間には体重の変化にほとんど差はみられなかったが、試験飼料群の方が若干重くなる傾向がみられた。
また、表４の結果から、脱脂卵黄蛋白分解物を添加した飼料を与えた群ではコントロール群に比べ、カルシウム，マグネシウム，鉄の吸収が良くなったことがわかった。
実施例２．ヨーグルト風味炭酸飲料（カルシウム含有）
果糖ぶどう糖液糖１６．０ｇ、乳酸カルシウム０．７７ｇ、５０％乳酸０．６０ｇ、実施例１の脱脂卵黄蛋白分解物０．０５ｇ、クエン酸ナトリウム０．０３ｇ、香料０．２０ｇに水を加えて全量を５０ｇとしてシロップを調製した。このシロップ５０ｇに炭酸水を加えて全量を１００ｍｌとしてヨーグルト風味炭酸飲料を調製した。
実施例３．果汁入り清涼飲料（鉄含有）
１／５リンゴ果汁６．０ｇ、果糖ぶどう糖液糖６．０ｇ、果糖４．０ｇ、クエン酸鉄０．３ｇ、ＤＬーリンゴ酸０．１２ｇ、Ｌーアスコルビン酸０．１０ｇ、クエン酸０．０６ｇ、実施例１の脱脂卵黄蛋白分解物０．０５ｇ、クエン酸ナトリウム０．０２ｇ、香料０．２ｇに水を加えて全量１００ｍｌとして果汁入り清涼飲料を調製した。
【００２３】
実施例４．クッキー（カルシウム含有）
小麦粉（薄力）４５０ｇ、上白糖２２０ｇ、ショートニング２００ｇ、全卵１００ｇ、卵殻カルシウム２０ｇ、実施例１の脱脂卵黄蛋白分解物２ｇ、食塩２ｇ、重炭酸アンモニウム２ｇ、バニラエッセンス２ｇを用いて生地を調製した後冷却した。整型した後、焙焼してクッキーを調製した。
実施例５．キャンディー（カルシウム含有）
上白糖５００ｇ、水飴４４０ｇを少量の水に溶解し、減圧下１２０〜１３０℃で煮詰めた。その後乳酸カルシウム５３ｇ、クエン酸３．５ｇ、酒石酸１．５ｇ、実施例１の脱脂卵黄蛋白分解物１ｇ、レモンエッセンス１ｇを添加して混捏した。その後、容器に入れて型をとり、冷却してキャンディーを調製した。
実施例６．アイスクリーム（カルシウム，鉄含有）
牛乳１２００ｇ、生クリーム（４５％）３１０ｇ、上白糖３００ｇ、脱脂粉乳６０ｇ、クエン酸第一鉄ナトリウム８ｇ、実施例１の脱脂卵黄蛋白分解物１ｇ、増粘安定剤６ｇに水を加えて全量２０００ｍｌとして溶解した。この溶解した液を８０℃まで加熱した後、ホモミキサーで予備乳化し、引き続きホモゲナイズした。冷却し熟成させた後バニラエッセンス２ｇを加えフリージングを行った。その後−４０℃まで急冷してアイスクリームを調製した。
【００２４】
本発明の実施様態ならびに目的生成物を挙げれば以下の通りである。
（１）ミネラル及び脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする飲料。
（２）ミネラル及び脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする食物。
（３）含有する脱脂卵黄蛋白分解物に含まれる蛋白質中、分子量２０００以下のペプチド画分が８０％以上であるをことを特徴とする前記（１）または（２）に記載の飲食物。
（４）ミネラルとして、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅、マンガンの中から選ばれる１種または２種以上とともに脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物。
（５）ミネラルとして、カルシウムとともに脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物。
（６）ミネラルとして、鉄とともに脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物。
（７）ミネラルとして、マグネシウムとともに脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物。
（８）ミネラルとして、亜鉛とともに脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物。
（９）ミネラルとして、銅とともに脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物。
（１０）ミネラルとして、マンガンとともに脱脂卵黄蛋白分解物を含有することを特徴とする前記（１）〜（３）のいずれかに記載の飲食物。
【００２５】
【発明の効果】
本発明の方法によって得られた分子量２０００以下のペプチドを主成分とする脱脂卵黄蛋白分解物は、ミネラル吸収促進作用があるため、カルシウム、鉄、マグネシウム、亜鉛、銅などのミネラルとともにこれを配合した飲料および食物を摂取することによりミネラルの吸収が促進される。
本発明の易吸収ミネラル含有飲食物を摂取することにより、成長期の自動のミネラルの補強、妊産婦のミネラルの補充、老年期の骨粗鬆症に代表される骨疾患の予防や治療、更には健康人のミネラルのアンバランスの防止などに効果が期待できるものである。