(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルシウムイオンを含有する溶液に、トロンビンを内包した担体及びフィブリノーゲンを内包した担体を含有させた一液性の血管塞栓剤。
【請求項２】
カルシウムイオン溶液に、トロンビンを内包したリン脂質からなるリポソーム及びフィブリノーゲンを内包したリン脂質からなるリポソームを含有させた請求項１に記載の一液性の血管塞栓剤。
【請求項３】
前記トロンビンを内包した担体及びフィブリノーゲンを内包した担体の少なくとも一方に、他の凝固系因子を封入した請求項１に記載の一液性の血管塞栓剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、脳血管内治療動脈瘤、動静脈奇形（ＡＶＭ）等の血管障害の治療に好適に用いる血管塞栓剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
現在、手術侵襲を加えず、血管カテーテルを応用して血管障害治療を行う血管外科治療が行われている。
例えば、脳血管障害治療に於いては、微小なカテーテルを選択的に能動脈幹部に留置し、該カテーテルにより導入される塞栓物質により異常血流を遮断して血管の修復を行うもので、脳動脈瘤、動静脈奇形等の治療を目的としている。脳動脈瘤は、成人１００人に１人が動脈血管内に有する瘤であり、直径１ｍｍから２０ｍｍのものまで広い形状分布をもち、発生部位も脳動脈の多岐にわたっている。このうち約３０％は破裂せずに経過するが、約７０％は破裂をきたし、クモ膜下出血を起こすと言われている。動静脈奇形は、最も多く、また良く知られた脳血管奇形であり、蛇行、拡張した流入及び流出血管とそのあいだの動静脈吻合を有する血管の集積からなっている。
【０００３】
塞栓術は、このような脳動脈患部を塞栓物質で閉塞し、病変部の血流を止めて患部を固化し、治療するもので、必要な場合はさらに固化した患部の摘出を行う。脳血管は、他の部分と比べ、外弾性膜を欠き、血管壁が薄いため血流の側圧に対して抵抗が弱く、また、頭蓋内で血管は複雑に走行し、分岐部等にかかる応力によって障害が生じやすい。
【０００４】
このため、種々の塞栓剤が研究されている。
従来、血管塞栓用の液体として、シアノアクリレート系の材料が多く用いられてきた（ジャーナル  オブ  バイオメディカル  マテリアル  リサーチ［Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．］，１７：１６７−１７７，１９８３  ハーパーら［Ｍ．Ｃ．Ｈａｒｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，］）。
また、最近では、エチレン−ビニールアルコール共重合体（エバール）のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）溶液を閉塞用の材料として用い、血液中でＤＭＳＯを拡散させ、エバールを析出させて血管を閉塞することが提案されている（メヂカルトリビューン，１９８９年１０月２６日，４６−４７頁）。
【０００５】
一方、カテーテルを用いて、動脈瘤内部で切り離し可能なバルーンをふくらませて動脈瘤を塞ぎ、バルーンを動脈瘤内に留置する方法もとられている（ジャーナル  オブ  ノイロサージャリー［Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ．］，４１：１２５−１４５，１９７４  サルビネンコ［Ｆ．Ａ．Ｓｅｒｂｉｎｅｎｋｏ］）。
他にも従来から用いられているものとして、ポリビニールアルコール（ＰＶＡ）スポンジ、金属コイル、アルコール及び縫合糸等が治療目的に応じて利用されてきた。
【０００６】
【発明が解決しようとする問題点】
シアノアクリレート系の従来の接着剤では、血管中で急速に固化重合する為、塞栓物質の注入が難しく、注入終了と同時にカテーテルをシースの外まで一気に抜去しなければならず、取扱いが困難であり、閉塞状況が不十分でも再注入できない。また、生体への刺激も大きいという問題があった。
エバールをＤＭＳＯ溶媒に溶かして用いる系は、動脈瘤内部に析出したエバールの中心部に、いつまでも溶媒が残存したり、血管中で析出した物質は、血液の乱流によって微小な小片が飛散しやすく、また、動脈瘤出口から血管中にはみ出した部分は、分岐部の流れに沿って付着するという問題がある。
【０００７】
また、溶媒のＤＭＳＯは、化学物質であるため、臨床応用が限定される場合もあり（第１１回日本バイオマテリアル学会大会予稿集、１９８９  ６８：１１−２２，岩田  博夫ほか）、さらに樹脂性の容器に障害を与えるなど、望ましい溶媒ではない。
また、バルーンを用いる場合では、バルーンと瘤内部の反応が弱いので、瘤内腔が十分埋まらないで、僅かでも内腔が残った場合再発の危険性が高い。出来るだけバルーンを多く埋めようとすると動脈瘤の形を変えたることになり、動脈瘤破裂の危険がある。また、バルーンをカテーテルから切り離す時に引っ張る力を掛けねばならないと言う問題がある。
その他、ＰＶＡなどの材料を用いる場合も、カテーテルを用いて血管内に注入する際に抵抗が生じたりするなど、治療上問題が多い。
【０００８】
本発明の目的は、従来技術の問題点を解決し、カテーテル先端に於いて、血栓の固さがある程度の固さと弾力性を持ち、片っ端からちぎれて飛び散ったり、血流にふりまわされて不必要な箇所に移動せず、動脈瘤壁に付着して瘤の形を変えずに内腔を埋め、しかもカテーテルの抜去が容易である血管塞栓剤を提供する事である。
また、本発明の血管塞栓剤とは、上記動脈瘤に於ける塞栓物質に限らず、上記の動静脈奇形などの血管奇形、動静脈奇形、止血、腫瘍の治療などに於いても好適な塞栓剤を提供するものである。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
上記目的は以下の本発明により解決される。
（１）カルシウムイオンを含有する溶液に、トロンビンを内包した担体及びフィブリノーゲンを内包した担体を含有させた一液性の血管塞栓剤。
（２）カルシウムイオン溶液に、トロンビンを内包したリン脂質からなるリポソーム及びフィブリノーゲンを内包したリン脂質からなるリポソームを含有させた上記（１）記載の一液性の血管塞栓剤。
（３）前記トロンビンを内包した担体及びフィブリノーゲンを内包した担体の少なくとも一方に、他の凝固系因子を封入した上記（１）記載の一液性の血管塞栓剤。
【００１０】
本発明は、トロンビン及びフィブリノーゲンを内包した各々の担体を、カルシウムイオン溶液に含有させたものでる。
【００１１】
本発明に用いる各担体は、粒径が０．１〜０．５μｍ、好ましくは０．２〜０．３μｍの大きさが好ましい。
【００１２】
また、構造としては様々な形態が考えられるが、特にその内部にトロンビン及びフィブリノーゲンを高濃度封入することのできる潜在的機能を有する巨大分子、微集合体、微粒子、微小球、ナノ小球、リポソームおよびエマルジョンのの中の少なくとも１つの形態からなることが最も望ましく、特にリポソームが望ましい。また、各々は常法によって製造される。
【００１３】
本発明に用いる各担体において、その構成成分としては、上述した形態を形成できるものであれば特にその配合に限定する必要はないが、その安全性や、生体内において安定な薬物担体を提供する観点から、リン脂質あるいはその誘導体、リン脂質以外の脂質あるいはその誘導体、安定化剤、酸化防止剤等の配合が望ましい。天然由来物及び合成物が利用できる。
【００１４】
具体的には、レシチン（＝ホスファチジルコリン）、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジン酸、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロース等およびこれらを常法に従って水素添加したものが挙げられ、これらを組み合わせるとよい。
【００１５】
本発明において、トロンビンは全容液中０．１〜３００Ｕ／ｍｌ、より好ましくは１００〜２００Ｕ／ｍｌ含有させるとよい。フィブリノーゲンは全容液中０．２〜８％（重量）、より好ましくは２〜６％（重量）含有させるとよい。また、リン脂質等の担体の構成成分は全容液中３〜１２％（重量）、より好ましくは３．５〜４．５％（重量）を用いると良い。
【００１６】
得られたリポソームの外液としては、血栓形成を促進させるためカルシウムイオンが含まれていることが好ましいが、特に組成は限定されない。また、リポソーム内と等張であることが好ましく、塩化ナトリウム等で調整できるが、その濃度は生理食塩水の範囲である。
【００１７】
本発明の血管塞栓剤は、動脈瘤等の患部にカテーテル等により直接注入する。注入された血管塞栓剤中の担体の膜は陽極通電により簡単に破壊される。具体的には、注入させるカテーテル等の先端部分に陽電極を設け、血管塞栓剤がカテーテルの先端を通過する際に破壊させるか、また、電線の陽極側を患部付近に埋入し陰極側を体表に張り付け、血管塞栓剤注入後通電させることにより破壊できる。
【００１８】
担体の膜が破壊されると内包されていたトロンビンとフィブリノーゲンが会合し、反応が開始しフィブリンが生成され患部を閉塞する。また、カルシウムイオンにより、血液の凝固が促進され効果が増大する。
【００１９】
本発明において、陽極通電を併用することにより、血栓形成を起こさせ、また同時に血管内皮を変性させ、その抗血栓性を低下させ、できた血栓の壁接着性をもたらす。それらの修復は、動脈の壁在性血栓の治癒過程をとり、血栓表面を血管内膜が被うことになる。その後、内膜下の血栓は、平滑筋細胞などとおきかわる。若干の退縮により、神経圧迫も解除されることになる。
【００２０】
陽極通電のみによる血栓形成術は他でも報告されているが、生体に用いる為に高電圧、高電流という訳にはいかず、血栓形成のために長時間が必要であると言われている。血管内皮の変性は極めて初期に起きているが血栓形成に時間がかかる事が欠点である。また、全血を血栓材料としている点は良いが、材料中の凝固因子が生理的濃度では少いと考えられる。
【００２１】
また、本発明においてトロンビンを内包した担体及びフィブリノーゲンを内包した担体の少なくとも一方に、好ましくはトロンビンを内包した担体に、他の凝固系因子を封入することができ、具体的には、ＦＸＩＩＩ、ＦＸ、ＦＶ、ＦＶＩＩ、ＦＸＩＶなどが挙げられる。
【００２２】
【実施例】
以下、実施例を示し本発明をさらに詳細に説明する。
（実施例１）
トロンビン内包リポソームの作製
トロンビン（５ｍｇ／ｍｌ）２０ｍｌをプレソーム５ｇに混練し、フレンチプレスにて加圧しトロンビン内包リポソームを調整した。調製後のリポソーム溶液を、超遠心で遠心洗浄し、未封入のトロンビンを除いた。
【００２３】
フィブリノーゲン内包リポソームの作製
同様にの手順で、フィブリノーゲン（５ｍｇ／ｍｌ）２０ｍｌを用いてフィブリノーゲン内包リポソームを調製した。なお外液には生理食塩水を用いた。
【００２４】
血管塞栓剤の作製
得られた両リポソーム液を混合し、さらに外液にカルシウムイオンが血中の２倍濃度（ＣａＣｌ２  １０  ｍｇ／ｍｌ）になるように添加した。
【００２５】
使用例
得られた血管塞栓剤を外科的に作製した兎外頚動脈の静脈瘤に入れ、エナメル線の先端を瘤内に置き陽極とし、体表を陰極にし９Ｖ，２０ｍＡを通電した。
通電開始から、５〜１０分後に、瘤内に血栓が形成された。
【００２６】
（比較例）
ヘパリン化家兎全血を用い電気凝固試みた。試験管内にいれた全血に電極をいれ通電し、外観的に血栓形成を確認した。この電極は先端が陽極で、その先端からやく２ｃｍのところが陰極になっているものを使用した（９Ｖ，２０ｍＡ）。
通電から約３０分後に陽極周辺に黒褐色の血栓が確認された。この血栓は赤血球の変生産物を主体にするものであり陽極周辺にのみ形成された。
【００２７】
【発明の効果】
本発明により、カルシウムイオン溶液に、トロンビンを内包した担体及びフィブリノーゲンを内包した担体を含有させた一液性の血管塞栓剤が得られる。
本発明の血管塞栓剤は、従来の血管塞栓剤の問題点を解決し、カテーテル先端に於いて、血栓の固さがある程度の固さと弾力性を持ち、片っ端からちぎれて飛び散ったり、血流にふりまわされて不必要な箇所に移動せず、動脈瘤壁に付着して瘤の形を変えずに内腔を埋め、しかもカテーテルの抜去が容易である。
また、陽極通電を併用することにより短時間で血栓形成が行え、一液性のため容易に作業できる。