(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
難消化性成分の含有量が３０〜６０重量％の酸添加焙焼デキストリンを、酸の存在下に加水分解して得た物質を、食品に添加または食品の構成成分の一部と置換することを特徴とする、食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与する方法。
【請求項２】
酸加水分解後の上記物質の難消化性成分の含有量が２６〜５０重量％である、請求項１に記載する食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与する方法。
【請求項３】
上記焙焼デキストリンがコーンスターチを原料として使用した焙焼デキストリンである場合にその酸加水分解後の上記物質の難消化性成分の含有量が、２６〜４４重量％である請求項１に記載する食品にビフィズズ菌の増殖作用を付与する方法。
【請求項４】
酸加水分解後の上記物質のＤＥが１７〜４４であり、難消化性成分の平均分子量が１０８５以下であることを特徴とする、請求項３に記載する食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与する方法。
【請求項５】
酸加水分解後の上記物質のＤＥが２８〜３９であり、且つ該物質に含有されている難消化性成分の平均分子量が７２２〜９０８であることを特徴とする、請求項３に記載する食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与する方法。
【請求項６】
ビフィズス菌がＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍであることを特徴とする、請求項１〜５のいずれかに記載する食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与する方法。
【請求項７】
食品への添加量または置換量が食品の１食あたり上記物質に含まれている難消化性成分換算で約４ｇ以上であることを特徴とする、請求項１〜６に記載する食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は酸添加焙焼デキストリンを酸の存在下に加水分解して得た物質を食品に添加、または食品成分の一部と置換することにより食品にビフィズス菌の増殖を促進する作用を付与する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
ヒトの腸内には１００種類、１００兆個もの細菌が生息して腸内細菌叢を構成し、食餌成分や腸内に分泌された成分を栄養として増殖し、種々の物質を生成している。腸内細菌叢はヒトの加齢に伴って変化し、乳児ではビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）が優勢であるが、離乳期に近くなるとバクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄａｃｅａｅ）などの嫌気性菌が出現し、成人に近い細菌叢を構成するようになる。一方、高齢者では健康成人にはほとんど認められないような異常菌叢がしばしば認められるようになり、ビフィズス菌が減少し、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、腸球菌（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）などの増加が認められるようになる。このような腸内菌叢の変化は人体に種々の悪影響を及ぼすことが知られており、腸内菌のバランスをビフィズス菌優勢、ウエルシュ菌などの有害菌劣勢の状態に維持することが重要であると考えられている。
【０００３】
近年、ビフィズス菌を増加させるために種々のビフィズス菌含有製剤やそれを含む乳製品が開発されている。しかしながら、ビフィズス菌の菌体を経口的に摂取しても一般的には体内に定着しにくいとされている。従って、腸内のビフィズス菌を増加させるためには、消化吸収されずに大腸まで到達し、そこでビフィズス菌に利用されるような難消化性の糖質を含む食品を、経口的に摂取することが有効である。
【０００４】
しかし、難消化性多糖類であるセルロースや、リグニンなどの不溶性食物繊維は、ほとんど大腸まで到達するが、腸内細菌に利用されず、またペクチンやグアーガムなどの水溶性食物繊維は、腸内細菌に一部利用されるものの、ビフィズス菌を選択的に増加させるには至らない。またフラクトオリゴ糖や、大豆オリゴ糖、イソマルトオリゴ糖などのオリゴ糖は大腸でビフィズス菌に利用される糖であるが、ビフィズス菌選択性が低かったり、熱や酸に弱いために食品への使用範囲が限定されたり、製造コストがかかり高価になるため、日常的に続けて摂取することが困難である。
【０００５】
焙焼デキストリンの酸加水分解に関しては、特開平４−１３５４９５号に無機酸添加焙焼デキストリンの水溶液をそのままか、または更に無機酸または有機酸を添加して加圧加熱、中和してグルコースの発生量が約１０％の酸加水分解物を得て、これに糖化型アミラーゼを作用させて難消化性多糖類と消化性糖類に糖化し、次に難消化性多糖類を分離する方法と、この難消化性多糖類が低粘性で低カロリーであるため、摂取カロリーや糖類の摂取を制限する人の食餌療法に用いられることと、食物繊維として健康維持のための食品素材として利用されることがが記載されているが、難消化性成分とＤＥ、分子量との相関やビフィズス菌増殖活性については全く記載されていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明が解決しようとする課題は、強いビフィズス菌選択増殖活性を有する食品を開発することである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は難消化性成分を３０〜６０重量％含有する焙焼デキストリンを酸加水分解することにより、酸加水分解前にはほとんど見られなかったビフィズス菌選択増殖活性が発現することと、酸加水分解物のＤＥと難消化性成分の平均分子量が後記する特定の条件を満たすときに、特に強いビフィズス菌増殖活性を有する物質が得られ、この物質は水飴や粉飴と同様の一般的物性を有し、各種の食品の構成成分の一部として食品を製造することができるとの知見を得て、本発明を完成するに至ったのである。
【０００８】
【発明の作用並びに構成】
澱粉などの糖質は、生体内の酵素で分解されてできた単糖だけが、上部消化管で吸収され、二糖類以上の糖は吸収されずに大腸に達する。従って、本発明をα−アミラーゼ、グルコアミラーゼで加水分解した後のグルコース以外の部分が、難消化性成分として、上部消化管で吸収されずに大腸まで達し、そこでビフィズス菌の増殖に利用されるので、ある程度の難消化性成分の含量が必要である。
【０００９】
本発明の基本的な特徴は、（ａ）澱粉に無機酸を添加し、低水分状態で加熱して生成する焙焼デキストリンを原料として用い、その水溶液に無機酸または有機酸を添加し、加圧加熱して加水分解せしめるという方法で製造された酸加水分解物であり、またコーンスターチを原料とした場合には（ｂ）原料の焙焼デキストリンをα−アミラーゼ、グルコアミラーゼで加水分解した後のグルコース以外の難消化性成分が３０〜６０重量％であること、（ｃ）酸加水分解物のＤＥが１７〜４４であり、難消化性成分が２６〜４４重量％の範囲内であること、及び（ｄ）この酸加水分解物が、ビフィズス菌選択増殖活性を有するものであることである。
【００１０】
本発明に使用される焙焼デキストリンの原料である澱粉としては、特に限定されないが、例えばコーン（とうもろこし）、ワキシー・コーン（もちとうもろこし）、馬鈴薯、甘藷、タピオカ、小麦、大麦、米、等の澱粉が使用できる。以下上記方法について更に詳細に説明する。
【００１１】
澱粉に対して鉱酸（例えば、塩酸、硝酸、硫酸）、好ましくは塩酸を澱粉１００重量部に対して、例えば、１重量％の塩酸水溶液として３〜１０重量％添加、加熱処理して、中間物質である焙焼デキストリンを得る。この加熱処理の前に澱粉と鉱酸の水溶液を均一に混合するために、適当なミキサー中で攪拌、熟成させてから好ましくは１００℃〜１２０℃程度で予備乾燥して、混合物中の水分を５重量％程度まで減少させることが好ましい。加熱処理は従来技術の加酸焙焼デキストリン（白色デキストリン、黄色デキストリン）の加熱条件とは異なり、１４０〜２００℃で２分〜１２０分、好ましくは１０分〜１２０分が適当である。加熱処理の温度は高い方が目的生成物中の難消化性成分の含量が増加するが、１８０℃付近から着色物質が増加するので、より好ましくは１５０℃前後である。
【００１２】
加熱装置を選択することによって高温短時間の反応を行うことも可能であるので、例えばエクストルーダーのようにごく短時間に均一な反応を行うことができる装置を用いれば、効率的に加熱処理することができる。また、粉末状態での反応であるから大規模生産の場合は、加熱条件を変更する必要もあるので、加熱処理後の製品の品質を検討した上で、適宜加熱条件を変更することが望ましい。
【００１３】
このようにして得られた焙焼デキストリンは水に易溶性であるので、水を加えて攪拌すると水溶液が得られる。この水溶液をそのままか、または酸、特に塩酸や蓚酸等を加えて、ｐＨを１．６〜２．０に調整し、１００〜１４０℃好ましくは１２０〜１４０℃で１５〜６０分間、０〜２．７Ｋｇｆ／ｃｍ２、好ましくは１．０〜２．７Ｋｇｆ／ｃｍ２で加圧加熱を行って加水分解させる。このようにして得られた酸加水分解物は、中和後、常法に従って脱色、脱塩、濃縮して液状の製品とするか、またはスプレードライして粉末製品とすることができる。
【００１４】
本発明において、後記する測定方法によって求められる出発原料の焙焼デキストリン中の難消化性成分の含量は酸の添加量、焙焼時間により変化するが、難消化性成分が６０重量％以上のものについては着色やこげがはなはだしくなり、製品の品質が低下して食品用として不適当である。また、本発明の効果を発現させるためには、１日当りの摂取量が難消化性成分換算で約４ｇ以上が必要である。従って焙焼デキストリン中の難消化性成分の含量が３０重量％以下のものでは、大腸に達する量が少なく、かなり大量に摂取することが必要となるため、コストが高くなり、添加できる食品が限定される。従って本発明においてビフィズス菌の増殖促進作用を発揮するのは原料焙焼デキストリン中の難消化性成分の含量が３０〜６０重量％の範囲内のものである。次に焙焼デキストリンを酸加水分解することによって、難消化性成分の含量が低下するが、特にコーンスターチを原料とした場合には、酸加水分解後の含量が２６〜４４重量％の範囲内であることが好ましい。また酸加水分解によって後記するＤＥの値が上昇するが、このＤＥは好ましくは約１７〜４４の範囲内、さらに好ましくは約２８〜３９の範囲内のものがビフィズス菌の増殖促進作用を強く発揮する。さらに酸加水分解物中の難消化性成分の平均分子量が１０８５以下、好ましくは約７２２〜９０８であるときビフィズス菌の増殖作用を強く発揮する。
【００１５】
またこの焙焼デキストリンの酸加水分解物を食品に添加するか、または食品の成分の１部と置換することによって、食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与することができる。その添加量または置換量は、その食品の１食分あたり難消化性成分換算で約４ｇ以上であることが好ましい。ただし難消化性成分が生理作用に及ぼす影響は個人差があることから、効果を見ながら適宜増減するのが良い。
【００１６】
以下に実験例を示して、本発明を詳細に説明する。本明細書においてＤＥとはＤｅｘｔｒｏｓｅ  Ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ（ブドウ糖当量）の略で、澱粉加水分解物の加水分解の程度を表すのに広く用いられる指標である。即ち還元糖をブドウ糖として測定し、その還元糖の固形分１００に対する比をＤＥとする。この還元糖の測定には各種の方法があるが、本発明ではウィルシュテッター・シューデル法を用いた。また表中に％と記載したものはすべて重量％である。
次に本発明に使用される各定量法及び試験法を詳細に記す。
【００１７】
〔難消化性成分の定量法〕
難消化性デキストリン中の難消化性成分の含量は、以下に説明する方法（「難消化性成分の定量法」（澱粉科学、第３７巻、第２号、１０７頁、１９９０）に記載の方法の改良法）によって測定したものである。
【００１８】
難消化性デキストリン試料１ｇを精秤し、０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ６．０）５０ｍｌを加え、α−アミラーゼ（ノボ・ノルディスク・バイオインダストリー社製造：ターマミル１２０Ｌ、力価：１２０ＫＮＵ／ｇ）０．１ｍｌを添加し９５℃で３０分間反応させる。冷却後、ｐＨ４．５に調整しアミログルコシダーゼ（シグマ社製造：Ｎｏ．Ａ−３０４２、力価：６１００単位／ｍｌ）０．１ｍｌを添加し、６０℃で３０分間反応させた後、９０℃まで昇温し反応を終了させた。終了後、反応液を水で１００ｍｌにフィルアップし、ピラノース・オキシダーゼ法によりグルコース量（Ｂ）（ｇ）を求め、反応前の試料についても同様にグルコース量（Ａ）（ｇ）を求め、次式により難消化性成分の含量（重量％）を算出した。
【００１９】
難消化性成分含量（重量％）＝〔１−Ａ−（Ｂ−Ａ）×０．９〕×１００
Ａ＝反応前のグルコース量（ｇ）
Ｂ＝反応後のグルコース量（ｇ）
【００２０】
〔グルコースの定量法〕
１ｇの試料を１００ｍｌのメスフラスコに精秤し、蒸留水で溶解してメスアップする。この溶液についてピラノースオキシダーゼ（協和メデック社製造：デターミナーＧＬ−Ｅを使用）法により定量した。
【００２１】
〔平均分子量の測定法〕
グルコースの定量に用いた溶液を混床式イオン交換樹脂のカラムにＳＶ１．０で通液して脱塩し、溶出液をロータリーエバポレーターを用いて５重量％濃度まで濃縮して試料液とした。この試料２０μｌを下記の条件で液体クロマトグラフィーを行い測定した。
【００２２】
0003559790.tif 000002
【００２３】
測定結果から下式を用いて平均分子量を求めた。
【００２４】
0003559790.tif 000003
【００２５】
〔ビフィズス菌によるｉｎ  ｖｉｔｒｏの資化性試験法〕
（１）Ｆｉｌｄｅｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ
生理食塩水１５０ｍｌ、濃塩酸６ｍｌ、馬血液５０ｍｌ及びペプシン（１：１００００）１ｇを２５０ｍｌフラスコに入れてよく混合し、５５℃に保ったウォーターバス中に一夜放置して馬血液をペプシンにより消化させた。次に２０重量％ＮａＯＨ溶液１２ｍｌを加え、ｐＨが正確に７．６になるようにＮａＯＨまたはＨＣｌで修正し、クロロフォルム２ｍｌを添加して冷蔵保存した。
【００２６】
（２）Ｓａｌｔｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ
無水ＣａＣｌ２Ｏ．２ｇとＭｇＳＯ４０．２ｇを３００ｍｌの精製水に溶解し、次いでこの溶液をよく攪拌しながら精製水５００ｍｌを加え、Ｋ２ＨＰＯ４１ｇ、ＫＨ２ＰＯ４１ｇ、ＮａＨＣＯ３１０ｇ及びＮａＣｌ２ｇを加えて完全に溶解し、更に２００ｍｌの精製水を加えて混合して４℃で保存した。
【００２７】
（３）ＢＬ寒天平板
ＢＬ寒天培地（日水製薬社製造）１００ｍｌに対し馬脱繊維血液（コージン社製造）５ｍｌを添加したものを約１５〜２０ｍｌ宛シャーレーに分注し、寒天平板として用いた。
【００２８】
（４）Ｆｉｌｄｅｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ加ＧＡＭ半流動寒天培地
ＧＡＭブイヨン（日水製薬製造）に、Ｆｉｌｄｅｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎを０．４重量％と寒天０．１５重量％を添加して４ｍｌ宛試験管に分注して用いた。
【００２９】
（５）供試菌株の培養
供試菌株をＢＬ寒天平板に画線培養し、単離集落を得ることを２回繰り返すことにより純粋培養菌株を得、これをＦｉｌｄｅｓ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ加ＧＡＭ半流動寒天培地で、３７℃、２４時間の培養条件で植え継いだ。
【００３０】
0003559790.tif 000004
【００３１】
（７）嫌気培養及び資化性の判定
嫌気培養は、嫌気性インキュベーター（ＳＡＮＹＯ／ＦＯＲＭＡ社製造）を用い、雰囲気は、ＣＯ２１０容積％、Ｈ２容積１０％、Ｎ２バランスの混合ガスを用いた。培養後にｐＨが低下した程度から次の判定基準で資化性の有無、または強弱を判定した。
【００３２】
0003559790.tif 000005
【００３３】
【実験例１】
市販のコーンスターチに６７０ｐｐｍの塩酸を添加し、フラッシュドライヤーで水分が約２〜３重量％になるまで予備乾燥し、次にロータリーキルンで１４０〜１４５℃で約３０分間焙焼し、難消化性成分の含量が５３％のデキストリンを得た。この焙焼デキストリンの２０重量％溶液に、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を添加してｐＨ６．０に調整し、α−アミラーゼ（ターマミル６０Ｌ、ノボ・ノルディスク・バイオインダストリー社製造）を焙焼デキストリンに対して０．２重量％を添加して約８５℃で６０分間加水分解し、次いでｐＨ４．５に再調整した後、グルコアミラーゼ（グルクザイムＮＬ−４、天野製薬社製造）を同様に０．１重量％を添加して約５５℃で２４時間加水分解し、イオン交換樹脂で脱塩を行い、約５０重量％濃度に濃縮した。次にこの溶液約４リットルをナトリウム型にした強酸性陽イオン交換樹脂であるＸＦＳ−４３２７９（ダウ・ケミカル日本社製造）１０リットルを充填した連続クロマトグラフ装置（ＣＣＳ−１０−Ａ型、日立製作所製造）のカラムに７０℃、ＳＶ０．３で通液し、次に水で押し出してグルコアミラーゼによる加水分解で消化性画分から生成したグルコースを除去し、再度イオン交換樹脂で精製した後、濃縮後にスプレードライして、難消化性成分の分離試料を得た。この試料を用いて、ヒトにおける消化吸収性を調べるために、健康な５名のボランティアによる負荷試験を実施し、血中の糖濃度（血糖値）とインシュリン値を経時的に測定して結果を表１に示す。
【００３４】
【表１】
0003559790.tif 000006
【００３５】
表１において焙焼デキストリン中の難消化性成分は血糖値、インシュリン値に対してほとんど影響を与えないこと認められる。このことはこの難消化性成分はほとんど消化吸収を受けないことを意味し、従って焙焼デキストリンを摂取した場合、難消化性成分のみが消化されずに大腸まで達し、腸内細菌に利用されると考えられる。従ってこの難消化性成分の含量が多いほど、ピフィズス菌増殖の程度は強くなると言える。
【００３６】
【実験例２】
各種澱粉（コーンスターチ、馬鈴薯澱粉、ワキシー・コーンスターチ、米澱粉）に塩酸を混合して均質化し、水分が約２〜３重量％になるまで予備乾燥を行い、次いで、オイルバス中で焙焼して４種類の焙焼デキストリンを得た。これらの焙焼デキストリンおよび市販の焙焼デキストリン２種（コーンスターチ原料および、馬鈴薯澱粉原料のもの）の焙焼条件と、難消化性成分の含量の分析値を表２に示す。
【００３７】
【表２】
0003559790.tif 000007
【００３８】
次に表２の各焙焼デキストリンの２０重量％溶液を実験例１と同様にｐＨ調整、α−アミラーゼ加水分解、グルコアミラーゼ加水分解、イオン交換樹脂処理を行った後に濃縮し、スプレードライして、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、及びＦの６種類の難消化性成分の試料を得た。
【００３９】
ヒトの加齢に伴い、ビフィズス菌の菌種の構成に変化が認められるが、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍは、乳児、幼児、成人、および老人のどの年齢層にも広く検出される菌種であるため、ビフィズズ“アマノ”１００（天野製薬（株）製造のＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  Ｌｏｎｇｕｍ）を用いてｉｎ  ｖｉｔｒｏの資化性試験を行った。前記の試料及びグルコースを、ＰＹＦ半流動寒天培地にそれぞれ最終濃度０．５重量％になるように添加したものと、対照として糖を加えないものをそれぞれ１１５℃で２０分オートクレーブ滅菌して試験培地とした。この試験培地１．５ｍｌにビフィズス菌の培養液０．０３ｍｌを接種し、３７℃、９６時間嫌気培養後、ｐＨを測定してビフィズス菌資化性の判定結果を表３に示した。
【００４０】
【表３】
0003559790.tif 000008
【００４１】
表３で明かなように、難消化性成分が２５重量％以下の焙焼の程度の低い試料はＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｏｎｇｕｍで僅かに資化されたが、難消化性成分が５０重量％以上の焙焼デキストリンは資化されなかった。従って実用上充分な量、すなわち３０重量％以上の難消化性成分を有する焙焼デキストリン中に存在する難消化性成分は、ビフィズス活性を有しないことを示している。
【００４２】
【実験例３】
表４の条件で実験例２と同様にコーンスターチを焙焼し、難消化性成分が異なるＧ、Ｈ、Ｉ、Ｊの４種類の焙焼デキストリンを得た。
【００４３】
【表４】
0003559790.tif 000009
【００４４】
これらの焙焼デキストリンをそれぞれ０．２Ｎ塩酸に溶解し、１００℃の沸騰水浴中で２０分、４０分、６０分間加水分解し、加水分解前の焙焼デキストリンとともにそれぞれを中和した後にＤＥと難消化性成分を測定した。次に実験例２と同様に処理して分離した得た難消化性成分の試料合計１６種類について実験例２と同様に資化性試験を行なった。また同時に平均分子量を測定し、結果を一括して表５に示す。
【００４５】
【表５】
0003559790.tif 000010
【００４６】
表５の結果は難消化性成分３１．６〜６０．２重量％の焙焼デキストリンにはビフィズス活性が認められなかったが、酸加水分解によってＤＥが約１７〜４４の範囲のものにビフィズス活性が発現し、ＤＥが１８以下のものはビフィズス活性が僅かであるが、ＤＥが約２８〜３９の範囲のものに、強いビフィズス菌増殖活性が発現することが明らかになった。また酸加水分解物中の難消化性成分の平均分子量が１０８５以下、好ましくは約７２２〜９０８のものが、実用上充分な量の難消化性成分を残し、強いビフィズス菌増殖活性を有する物質であることを示している。
【００４７】
【実験例４】
実験例２で調製した馬鈴薯澱粉、ワキシー・コーンスターチ、米澱粉の焙焼デキストリンをそれぞれ３０重量％溶液とし、０．２Ｎ塩酸でｐＨ１．９に調整し、オートクレーブ中で１２１℃、１．１Ｋｇｆ／ｃｍ２で６０分間加水分解した。得られた３種類の試料を中和後にＤＥと難消化性成分を測定して表６に示す。
【００４８】
【表６】
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【００４９】
この３種類の焙焼デキストリン酸加水分解物を実験例１と同様にｐＨ調整、α−アミラーゼ加水分解、グルコアミラーゼ加水分解、イオン交換樹脂処理してＫ、Ｌ、Ｍ、の３種類の難消化性成分の試料を得、それぞれについて実験例２と同様に資化性試験を行なった。その結果を表７に示す。
【００５０】
【表７】
0003559790.tif 000012
【００５１】
表７の結果はコーンスターチ以外の澱粉を原料として得た焙焼デキストリンの酸加水分解物も、コーンスターチと同様に実用上充分な量の難消化性成分とビフィズス菌増殖活性を有することを示す。
【００５２】
【実験例５】
市販のコーンスターチに６７０ｐｐｍの塩酸を添加し、均一になるように混合した後、１４０〜１４５℃で３０分間加熱処理して難消化性成分５１．５重量％の焙焼デキストリンを得た。これを３０重量％溶液として２分し、０．２Ｎ塩酸でｐＨをそれぞれ１．９、１．６に調整して約１２７℃、１．５Ｋｇｆ／ｃｍ２で２０分間加熱し、ＤＥ２３．６、難消化性成分４３．７重量％及び、ＤＥ３３．０、難消化性成分４３．５重量％の試料を得た。この２種類の焙焼デキストリンを実験例２と同様に酵素加水分解、グルコースの除去を行ってＮ、Ｏの２種類の難消化性成分の試料を得た。この試料Ｎ、Ｏについて詳細な資化性試験を実施した。
【００５３】
供試菌株はＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ１３株、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ１８株、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ２５株、Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ６株、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ３株、Ｐｅｐｔｓｔｒｅｐｔｐｃｐｃｃｕｓ４株、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ９株、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ５株、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ５株、その他１８株である。
【００５４】
上記試料およびグルコースを、実験例１と同様にＰＹＦ半流動寒天培地にそれぞれ最終濃度０．５重量％になるように添加し、１１５℃で２０分オートクレーブ滅菌して調製した試験培地を用いて培養し、資化性試験を行った結果を表８に示す。
【００５５】
【表８−１】
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【００５６】
【表８−２】
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【００５７】
【表８−３】
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0003559790.tif 000019
0003559790.tif 000020
【００５８】
Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓでは、病原性をもつｆｒａｇｉｌｉｓには、グルコースとくらべて弱い資化性を示した。それ以外の種も同程度か、やや弱い資化性を示した。
【００５９】
Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍでは、ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ、ｂｒｅｂｅに特によく資化された。
【００６０】
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍでは、整腸作用をもつ有用菌であるｂｕｔｙｒｉｃｕｍによく資化されたが、ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓやｄｉｆｆｉｃｉｌｅなどの病原菌には、全く資化されなかった。また、それ以外の種にもほとんど資化されなかった。
【００６１】
下痢などの際の整腸剤として知られている、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓには少し資化された。
Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓでは、整腸作用のあるａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓや有害菌の働きを抑制する、ｃａｓｅｉに資化された。
【００６２】
その他、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓなどの病原菌には全く資化されなかった。
【００６３】
【実験例６】
実験例５で調製したサンプルＯを用いて、ビフィズス菌選択増殖活性（ｉｎｖｉｖｏ）を調べた。
【００６４】
７名の成人男子（平均年齢４３．３±５．０歳）に、それぞれ１日１０ｇ（難消化成分量４．４ｇ）を１４日間投与し、摂取前、摂取１４日後および摂取中止後１４日の便を採取し、便中の腸内細菌叢の検索を行なった。試験期間中は、乳製品などの腸内細菌叢に影響を及ぼす食品および抗生物質などの医薬品の摂取を制限した。
【００６５】
採取した糞便サンプル１ｇを秤取し、希釈液９ｍｌ中に入れ、混和して均質にしたものを１０−１希釈液として、順次１０倍段階希釈を行ない、１０−８希釈液までつくり、ＴＳ培地には１０−５、１０−６、１０−７希釈液、ＥＧ、ＢＬ培地には１０−６、１０−７、１０−８希釈液、ＢＳ、ＮＢＧＴ、ＥＳ、ＮＮ、ＶＳ、ＬＢＳ、ＴＡＴＡＣ、ＤＨＬ、ＰＥＥＳ、Ｐ培地には１０−１、１０−３、１０−５、１０−７希釈液をそれぞれ０．０５ｍｌ滴下し、コンラージ棒で均一に塗布した。ＴＳ、ＤＨＬ培地は３７℃、２４時間、ＴＡＴＡＣ、ＰＥＥＳ、Ｐ培地は３７℃、７２時間好気培養し、残りの培地はガスパック（ＢＢＬ社製）で、３７℃、７２時間嫌気培養した。培養終了後、集落の形状、グラム染色性、細胞の形態によって菌群を決定して集計し、表９に糞便１グラムあたりの菌数を対数で、表１０に糞便総菌数当りの占有率（％）を示した。
【００６６】
【表９】
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【００６７】
【表１０】
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【００６８】
焙焼デキストリンの酸加水分解物の投与によって、ビフィズス菌の増加が認められ、Ｂｃｔｅｒｏｉｄｅｓの占有率が低下し、腸内細菌叢に変化をもたらした。従って難消化成分換算で、１日４．４ｇの投与でビフィズス菌の増殖に効果があることが明らかとなった。
【００６９】
以上の実験例５、６の結果から焙焼デキストリンの酸加水分解物は表９において、投与前と投与中のＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ数に危険率５％で有意差が認められた。またビフィズス菌選択増殖活性を有し、ビフィズス菌の増殖による有機酸の生成を促進して、大腸内のｐＨを下げ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ等の腐敗菌の生育を抑制し、また、腐敗菌が産生するアンモニア、フェノール、インドール等の有害物質の発生を抑制し、腸内環境の改善に有効であることが明らかとなった。
【００７０】
【参考例１】
市販のコーンスターチに７５０ｐｐｍの塩酸を添加し、均一に混合後に１６０℃で２０分間加熱して難消化性成分が５５．９％の焙焼デキストリンを得た。この焙焼デキストリンを水に溶解して３０％の溶液として１０％塩酸水溶液を加えてｐＨを１．８に調整した。溶液をオートクレーブに移して１２１℃で３０分間加熱して加水分解物を得た。この加水分解物を活性炭脱色、濾過に続いてイオン交換樹脂で脱塩処理後、濃度５０％に濃縮してスプレードライして粉末製品を得た。
【００７１】
【参考例２】
参考例１の焙焼デキストリンを同様に１２１℃で４０分間加熱処理して加水分解物を得た。この加水分解物を参考例１と同様に精製後、濃度７５％に濃縮して液状製品を得た。
【００７２】
【参考例３】
市販の馬鈴薯澱粉に７５０ｐｐｍの塩酸を添加し、均一に混合後に１７５℃で１２０分間加熱して難消化性成分が５６．９％の焙焼デキストリンを得た。この焙焼デキストリンを水に溶解して３０％の溶液として１０％塩酸水溶液を加えてｐＨを１．８に調整した。溶液をオートクレーブに移して１２１℃で２０分間加熱して加水分解物を得た。この加水分解物を参考例１と同様に精製、スプレードライして粉末製品を得た。
【００７３】
【参考例４】
参考例３の焙焼デキストリンを同様に１２１℃で４０分間加熱処理して加水分解物を得た。この加水分解物を参考例２と同様に精製、濃縮して液状製品を得た。
【００７４】
各参考例で得た加水分解物の分析値と実験例２と同様にして行った資化性を表１１に示す。
【００７５】
【表１１】
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【００７６】
本発明に於いては、酸添加焙焼デキストリンの加水分解物は、従来の水あめや粉あめ等と上記ビフィズス菌増殖促進作用の有無を除けば、ほぼ同じ物性を有するので、従来の水あめや粉あめ等と同じ用途に同じ様に使用することが出来る。
【００７７】
【実施例】
次に実施例によって本発明をさらに詳細に説明する。実施例中に部とあるのは重量部を示す。
【００７８】
【実施例１】
表１２の配合で原料を溶解して１８０℃まで煮詰め、１個当り５ｇの型に流し込んで放冷してハードキャンデーを試作した。このキャンデー６個中の難消化性成分量の合計が４．２ｇである。
【００７９】
【表１２】
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【００８０】
【実施例２】
表１３の配合で水に水あめを加え８０℃まで加熱し、他の全原料を追加して１２５℃になるまで煮詰め、トレーに移して冷却、成型して１個当り５ｇのキャラメルを試作した。このキャラメル７個中の難消化性成分量の合計が４．３ｇである。
【００８１】
【表１３】
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【００８２】
【実施例３】
表１４の配合で小型ニーダーで１２０℃で風船ガムベースと酢酸ビニールを混合し、そこに他の原料も順次混合し、均一になるまで撹拌し、２０℃まで放冷後に成型して１枚７ｇの風船ガムを試作した。この風船ガム７枚の難消化性成分量の合計が４．１ｇである。
【００８３】
【表１４】
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【００８４】
【実施例４】
表１５の配合で水に全原料をよく分散撹拌させながら９５℃まで加熱し、３０℃まで冷却してクリームフィリングを試作した。このフイリングの７０ｇの難消化性成分量が４．９ｇである。
【００８５】
【表１５】
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【００８６】
【実施例５】
表１６の配合で水に全原料を混合し８０℃まで加熱後、３０℃まで冷却した。予備乳化後、本乳化して２４時間エージングし、フリージングして急冷後、冷蔵庫で保存してアイスクリームを試作した。この８０ｇカップ２個の難消化性成分量が４．３ｇである。
【００８７】
【表１６】
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【００８８】
【実施例６】
表１７の配合で水に粉砕したイチゴと糖分の半量を加えて、弱火で煮詰め、水が蒸発してから、残りの半量とペクチン、クエン酸を加えてよく撹拌しながら全体が８０部になるまで煮詰め、放冷してイチゴジャムを試作した。この５０ｇの難消化性成分量が５．０ｇである。
【００８９】
【表１７】
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【００９０】
【効果】
本発明によれば、食品にビフィズス菌の増殖促進作用を付与出来るので、得られる食品は極めて優れた健康食品となるという優れた効果を発揮する。