(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
二室凍結バッグに細胞浮遊液を充填した後、凍結を行う前に、部分解凍に備えて予め複数の室を連通するチャンネルを封止する装置であって、容量の大きい室と容量の小さい室とを有する二室凍結バッグを水平に載置する載置台と、該載置台に載置された容量の小さい室の凍結バッグを押圧して、容量の小さい室の凍結バッグの膨張を適当な位置で阻止し、収容される細胞浮遊液の容量を規定容量以下に規制する開閉自在な蓋と、載置台に設けられたピンと、ピンを軸に回動可能なように載置台１１に固定された前記蓋を固定するロック、載置台に二室凍結バッグの連通チャンネルを封止するヒートシーラーを備えた、扁平な四角い室を有する二室凍結バッグの連通チャンネル封止装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は二室凍結バッグの二室を連通しているチャンネルを封止する装置に関する。詳しくは、二室連結バッグに細胞浮遊液を充填した後、凍結を行う前に、部分解凍に備えて予め二室を連通するチャンネルを封止する装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、血液細胞など生体由来の細胞浮遊液を長期に保存する方法として、細胞浮遊液を密着した二つの面からなる平面型凍結バッグに収容し凍結保存する方法が採用されている。
近年、細胞内の水結晶（氷）の挙動により、細胞膜の損傷が左右され、その結果として、細胞の生存が左右されることが明らかになった。また、細胞内の水結晶の挙動は、細胞浮遊液の冷却速度によって左右されることが明らかになった。そのため、細胞浮遊液を凍結バッグに収納して凍結保存する場合、凍結中および解凍後の細胞の生存を維持するには、凍結開始時から細胞内の水が細胞膜を損傷しない微細な水結晶として安定する温度まで、冷却速度を厳密に調整する必要がある。そして、細胞浮遊液の冷却速度を厳密に調整するためには、凍結バッグに収容されている細胞浮遊液の厚さを、凍結バッグの全面にわたって均一にする必要がある。
【０００３】
しかしながら、従来の平面型凍結バッグに細胞浮遊液を収容する場合、収容量に応じて、収容後のバッグ形状が板状から枕状まで大きく変化することとなるため、収容量の許容範囲がかなり大きく、また、細胞浮遊液収容後のバッグ全面にわたる液の厚さは、バッグの端部で小さく中央部で大きくなるため、冷却中の細胞浮遊液温度は急速に冷却されるバッグ端部で低く冷却の遅れる中央部で高くなる。従って、平面型凍結バッグでは、冷却温度をいかに厳密に制御したとしても、収容されている細胞浮遊液を均一な速さで凍結させることは不可能であり、この様な不都合は細胞浮遊液の収容量が多いほど激しくなる。
そこで、近時、この様な問題を解決するために、扁平な四角い室を有する所謂立体型凍結バッグが採用されるようになった。
【０００４】
この立体型凍結バッグは、これに細胞浮遊液を収容した時に、バッグ全体に渡って液厚が均一となるため、容易に細胞浮遊液全体を均一な速度で凍結させることができるものである。
しかしながら、立体型凍結バッグを用いた場合であっても、収容される細胞浮遊液の容量が規定容量を超えた場合、水が凍結により膨張してバッグの破損の原因となることがあり、また、バッグを水平に保持しないで凍結した場合、細胞浮遊液が低位に移動して下膨れ状態になり、細胞浮遊液全体を均一な速度で凍結させることができなくなるだけでなく、バッグの破損の原因になることもあった。そのため、バッグを水平状態に保持しなくても均一な速度で凍結し、かつバッグの破損を防ぐことができるように、近時、立体型二室凍結バッグを扁平な四角い容器（キャニスター）に収容して細胞浮遊液の厚さを一定に保ちながら凍結する方法が採用されている。
【０００５】
一方、細胞浮遊液を臨床応用するに当たって、例えば、同一細胞浮遊液の一部のみを解凍して細胞を増殖するなど、同一細胞浮遊液を複数回にわたって使用することが要求されるようになっており、そのため、近時、立体型二室凍結バッグが採用されるようになっている。
しかしながら、このような二室凍結バッグに細胞浮遊液を収納し凍結する場合、細胞浮遊液の一部のみを切り離して使用することができるように、細胞浮遊液を収容後、各室間の連通チャンネルをシールして凍結しているが、凍結時にしばしば、二室凍結バッグの小さい方の室が破損し、貴重な細胞浮遊液が失われるという問題があった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、如上の事情に鑑みてなされたもので、二室凍結バッグの凍結時の破損事故を防止する装置を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、上記の課題を解決するために鋭意検討した結果、特に、二室間の収容量に大きな差がある場合、全体として規定容量の細胞浮遊液を収容した場合であっても、何らかの理由で、例えば、細胞浮遊液充填時に、二室凍結バッグの小さな室の位置が大きな室の位置より低かった場合等に、室間の収容量のバランスが崩れ、小さな室に規定容量を超える細胞浮遊液が収容された状態で連通チャンネルがシールされることがあり、この過剰に収容された細胞浮遊液が凍結時のバッグの破損の原因になることを見出し、本発明に到達した。
すなわち、本発明は、二室凍結バッグに細胞浮遊液を充填した後、凍結を行う前に、部分解凍に備えて予め複数の室を連通するチャンネルを封止する装置であって、容量の大きい室と容量の小さい室とを有する二室凍結バッグを水平に載置する載置台と、該載置台に載置された容量の小さい室の凍結バッグを押圧して、容量の小さい室の凍結バッグの膨張を適当な位置で阻止し、収容される細胞浮遊液の容量を規定容量以下に規制する開閉自在な蓋と、載置台に設けられたピンと、ピンを軸に回動可能なように載置台１１に固定されたロック、載置台に二室凍結バッグの連通チャンネルを封止するヒートシーラーを備えた、扁平な四角い室を有する二室凍結バッグの連通チャンネル封止装置である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
次に本発明の実施例について図面に基づいて説明する。
図１は本発明の二室凍結バッグの連通チャンネル封止装置の一実施例を示す平面図であり、図２は図１に示す封止装置に適用される二室凍結バッグの一例を示す平面図である。
図１に示すように、本発明の封止装置１は、本発明の封止方法を実施するための基本的な構成要素として、二室凍結バッグ２を水平に載置する載置台１１と、この載置台１１に載置された二室凍結バッグ２に収容される細胞浮遊液の量を規制する手段（蓋１２およびロック１３）と、二室凍結バッグ１の連通チャンネル２４、２５を封止する封止手段（インパルスシーラー１５）と、を含んでいる。
【０００９】
図２に示す二室凍結バッグは扁平な四角い室を有する所謂立体型凍結バッグであり、容量の大きい室２１と容量の小さい室２２および連通部２３を有しており、連通部２３の両端には二室２１と２２を連通する連通チャンネル２４、２５が形成されている。そして大きい室２１には細胞浮遊液採取手段２６と細胞浮遊液取出口２７が、小さい室２２には細胞浮遊液取出口２８が設けられている。
載置台１１には二室凍結バッグ２を収容する室が設けられており、室は介在するインパルスシーラー１５のヒーター台１５１により大小二つの扁平な四角い室１１１、１１２に仕切られている。大室１１１および小室１１２はそれぞれ二室凍結バッグ２の大きい室２１および小さい室２２と相似形かつ同サイズになっており、ヒーター台１５１の高さは、二室凍結バッグ２を載置台１１に収容した時に連通部２３が密接するように決められている。
【００１０】
載置台１１には、これに載置された二室凍結バッグ２に収容される細胞浮遊液（図示していない）の量を規制する手段として、小室１１２側に小さい室２２の細胞浮遊液の量を規制する開閉自在な蓋１２と、この蓋１２を固定するためのロック１３が設けられており、ロック１３はこれを載置台１１に固定するピン１４を軸に回動可能になっている。尚、蓋とロック手段の組合せは大室１１１側にも設けてよく、細胞浮遊液収容量規制手段としては、蓋１２とロック１３の組合せの他に、例えば、適当な位置で小さな室の膨張を阻止する押圧部材（図示していない）など、種々の方法が採用可能である。
【００１１】
載置台１１の室はインパルスシーラー１５のヒーター台１５１によって大室１１１と小室１１２に仕切られている。インパルスシーラー１５は二室凍結バッグ１の連通チャンネル２４、２５を封止する封止手段としてのヒートシーラーであり、ヒーター１５３を備えたヒーター台１５１と、このヒーター台１５１との間に被溶着物を挟んで押さえつける挟持具１５２からなり、挟持具１５２で被溶着物をヒーター台１５１に押さえ付けるとヒーター１５３が加熱するようになっている。ヒートシーラーはバッグの形成材料がオレフィン系プラスチックである場合に好ましく採用されるが、インパルスシーラーの他に加熱金型なども採用可能である。
【００１２】
〔実施例１〕
容量２０ｍｌの室と容量５ｍｌの室を有する、全容量２５ｍｌの図２に示すような立体型二室凍結バッグ（バッグの厚さ８ｍｍ）を１０個用意し、各バッグにそれぞれ２５ｍｌの水を充填して、図１に示すような専用の封止装置を用いて連通チャンネルを封止した後、これをステンレス製ケース（バッグの厚みを一定に保つための扁平な容器）に収容して、小室を下にして垂直方向に保ち、液体窒素に浸漬して凍結した。凍結後、バッグを液体窒素の中から取り出して、３７℃の温浴に浸漬して解凍し、バッグの破損および水の漏出の有無を調べたところ、全てのバッグについて破損および水の漏洩が見られなかった。
【００１３】
〔比較例１〕
実施例１と同様の立体型二室凍結バッグ５個を用いて、それぞれ２５ｍｌの水を充填後、連通チャンネルを封止しないで実施例１と同様の凍結・解凍を行い、バッグの破損および水の漏出の有無を調べたところ、ステンレス製ケースに収容して液の厚さを一定に保っているにも係わらず、全てのバッグについて破損および水の漏洩が見られた。
【００１４】
【発明の効果】
以上説明してきたことから明らかなように、本発明を採用することにより、二室凍結バッグの凍結による破損を防止することが出来る。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の二室凍結バッグの連通チャンネル封止装置の一実施例を示す平面図である。
【図２】図１に示す封止装置に適用される二室凍結バッグの一例を示す平面図である。
【符号の説明】
１      封止装置
１１    載置台
１１１  大室
１１２  小室
１２    蓋
１３    ロック
１４    ピン
１５    インパルスシーラー（封止手段）
１５１  ヒーター台
１５２  挟持具
１５３  ヒーター
２      二室凍結バッグ
２１    大きい室
２２    小さい室
２３    連通部
２４、２５  連通チャンネル
２６    細胞浮遊液採取手段
２７、２８  細胞浮遊液取出口
【図１】
0003551022.tif 000002
【図２】
0003551022.tif 000003