(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の化１で表わされる少なくとも３つのカルボキシル基を有するテトラピロールカルボン酸と天然のセリン、アラニン、グリシン、アスパラギン酸またはグルタミン酸から選ばれるいずれか１種のα−アミノモノまたはジカルボン酸とのモノ、ジもしくはポリアミドならびにこれらの塩からなる群から選ばれる少なくとも一種の蛍光性化合物からなる哺乳類の関節炎診断剤および／または治療剤。
【化１】
0003565442.tif 000013
【請求項２】
前記アミドがモノ−Ｌ−アスパルチルクロリンｅ6またはモノ−Ｌ−セリニルクロリンｅ6である請求項１に記載の関節炎診断剤および／または治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は関節炎の光線診断および光線治療に関し、特に哺乳動物の関節炎の診断および治療に使用する薬剤に関するものである。詳しくは、本発明の薬剤はテトラピロール骨格を有する特定の蛍光性化合物に属する。薬剤の有効量を罹病動物に投与すると、薬剤は炎症のある部位に集積する。そこで検査もしくは治療すべき関節部位に必要な波長の光線を照射すると、この化合物は炎症部位において蛍光を発生する。これにより関節炎の存在を検出することができる。これが光線診断である。治療の場合には、適切な波長および強度の光を照射すると薬剤が活性化され、その殺細胞効果により関節炎の病変細胞に死滅作用を及ぼす。これを光線治療という。本発明は、このような関節炎、特に慢性関節リウマチ症の診断剤および治療剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
慢性関節リウマチ症とは、多発性の関節炎を主症状とする慢性全身性疾患である。手や足の小さい関節あるいは肘、膝関節などの疼痛と腫張で初発し、次第に全身の関節を侵す。当初、関節内腔を覆う滑膜がなんらかの起炎因子に反応して増殖し、腫瘍状になる。また、関節の軟骨、靱帯、骨などは骨膜から産生される酵素によって破壊され、関節の機能障害を起こす。この病理現象は全人種に見られ、世界中に分布している。
【０００３】
慢性関節リウマチ症の診断に当たっては、血液検査によるリウマトイド因子の発現ならびに炎症反応の有無の確認、関節の腫張と疼痛の発現の確認、更にＸ線検査による骨の変形の有無の確認等を行い、これらの結果から慢性関節リウマチ症であるとの診断を下す。
慢性関節リウマチ症の原因療法はまだ開発されておらず、個々の症例に応じて患部温存的な対症療法が行われているが、その有効性は明かでないのが現状である。すなわち、先ず非ステロイド性抗炎症鎮痛剤の投与などにより、緩解を促す目的で薬物療法を行うと同時に、理学療法を行う。薬物療法を施しても、関節の腫張が悪化し、滑膜増殖が著しくなった場合には、関節鏡視下における滑膜切除術を施す。関節形成術は、損傷した関節を人工関節で置き換えることにより、関節の機能を回復させるために行う。
関節の温存を考えるならば、滑膜の特に初期の細胞性免疫応答を低下させることが必要である。
【０００４】
従来、ヘマトポルフィリン誘導体をアジュバント関節炎ラットに投与し、光線を用いて慢性関節リウマチ症の診断および治療を行うことは知られている。例えば、日本リウマチ学会誌、２３巻、５７４〜５７５頁、１９８３年「慢性関節リウマチとレーザー（アジュバント関節炎へのレーザー照射の効果）」に記載されている。しかし、ヘマトポルフィリン誘導体の代表例であるホトフリンＩＩを使用した場合には、慢性関節リウマチ症の病変部位に選択的に取り込まれず、慢性関節リウマチ症に対する治療効果が顕著に表れないことが本発明者らの実験で明らかにされている。
なお、本発明の物質はいずれも癌の治療、診断薬としては知られているが、関節炎の診断治療薬としてはその例をみない。勿論、本発明の技術分野は、この癌の診断または治療の分野とは全く相違する。
また、以下の報告もあるが、やはり本発明の対象とは相違している。
（１）光化学および光生物学、４９巻、４５３〜４５８頁、１９８９年「光線治療による全身性免疫抑制はマクロファージにより移入される」
（Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ，４９，ｐｐ  ４５３−４５８，１９８９“ＳＹＳＴＥＭＩＣ  ＩＭＭＵＮＯＳＵＰＰＲＥＳＳＩＯＮ  ＩＮＤＵＣＥＤ  ＢＹ  ＰＨＯＴＯＤＹＮＡＭＩＣ  ＴＨＥＲＡＰＹ（ＰＤＴ）ＩＳ  ＡＤＯＰＴＩＶＥＬＹＴＲＡＮＳＦＥＲＲＥＤ  ＢＹ  ＭＡＣＲＯＰＨＡＧＥＳ”）
（２）癌の研究、４６巻、１６０８〜１６１１頁、１９８６年「ヘマトポルフィリン誘導体の光照射治療におけるマウスの免疫抑制」
（ＣＡＮＣＥＲ  ＲＥＳＥＡＲＣＨ，４６，ｐｐ  １６０８−１６１１，１９８６“Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ＭｉｃｅＴｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｈｅｍａｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ  Ｐｈｏｔｏｒａｄｉａｔｉｏｎ”）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、前記のような関節炎を診断および治療するための薬剤を提供することであり、場合によっては従来の関節鏡視下における診断法や滑膜切除法を応用して、関節炎、特に慢性関節リウマチ症の光線診断および光線治療を行うために用いる薬剤を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記の目的に沿って鋭意検討した結果、慢性関節リウマチ症の光線診断および光線治療に有効な新規な薬剤を見出して本発明に到達した。
すなわち本発明は、下記の化４および化５で表わされる少なくとも一つのカルボキシル基を有するテトラピロールカルボン酸類または対応するジもしくはテトラヒドロテトラピロールカルボン酸、同テトラピロールカルボン酸とアミノモノもしくはジカルボン酸とのモノ、ジもしくはポリアミドならびにこれらの塩からなる群から選ばれる少なくとも一種の蛍光性化合物からなる哺乳類の慢性関節リウマチ症診断剤および治療剤を提供するものである。
【化４】
0003565442.tif 000002
【化５】
0003565442.tif 000003
【０００７】
以下に本発明の内容を詳述する。
本発明の化合物は、いずれも蛍光性化合物であって、まず上記化３で表わされるテトラピロールカルボン酸が挙げられる。このテトラピロールカルボン酸は、少なくとも１つ、好ましくは少なくとも３つのカルボキシル基を有するもであり、かつそれらが非対称的に結合していることが望ましい。例えば、カルボキシル基が分子のＡ環およびＢ環の側、あるいは分子のＣ環およびＤ環の側に存在することが望ましい。
また本発明の化合物には、上記のテトラピロールカルボン酸に対応するジもしくはテトラヒドロテトラピロールカルボン酸も含まれる。これらカルボン酸におけるカルボキシル基の薬理学的に許容される塩、例えばアルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびアミンなどの塩も含まれる。
更に本発明の化合物は、上記テトラピロールカルボン酸とアミノモノカルボン酸とのモノ、ジまたはポリアミドである。他の１つの群は、同じく上記テトラピロールカルボン酸とアミノジカルボン酸とのモノ、ジまたはポリアミドである。これらアミドの薬理学的に許容される塩、例えばアルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびアミンなどの塩も含まれる。
【０００８】
アミド結合を介して上記テトラピロールカルボン酸と結合し、モノ、ジまたはポリアミドとなるアミノモノカルボン酸は、セリン、グリシン、α−アラニン、β−アラニン、ε−アミノ−ｎ−カプロン酸、ピペリジン−２−カルボン酸、ピペリジン−６−カルボン酸、ピロール−２−カルボン酸、ピペリジン−６−プロピオン酸、ピロール−５−酢酸そのほかである。特に好ましいアミノモノカルボン酸は、天然のα−アミノモノカルボン酸、例えばセリン、アラニンおよびグリシンである。これらは容易に入手することができ、また最良の結果を与えるものである。
【０００９】
また、アミノジカルボン酸としては、α−アミノコハク酸（アスパラギン酸）、α−アミノグルタル酸（グルタミン酸）、β−アミノグルタル酸、β−アミノセバシン酸、２，６−ピペリジンカルボン酸、２，５−ピロールジカルボン酸、２−カルボキシピロール−５−酢酸、２−カルボキシピペリジン−６−プロピオン酸、α−アミノアジピン酸、α−アミノアゼライン酸などである。好ましいアミノジカルボン酸は、天然のα−アミノジカルボン酸、たとえばアスパラギン酸およびグルタミン酸などである。これらは容易に入手することができ、また最良の結果を与えるものである。
【００１０】
本発明の特に好ましいテトラピロールは、以下の化６で表わされる。
【化６】
0003565442.tif 000004
0003565442.tif 000005
具体的なテトラピロール類の化合物は次の表１および表２に例示されており、この表においては、テトラピロール環構造の各位置の番号を用い各置換基の位置を示している。環内において二重結合が存在しない場合は、項目「ジヒドロ」の下に二重結合の不存在箇所を示す各組の数字（環の位置）で示す。
【００１１】
【表１】
0003565442.tif 000006
【００１２】
【表２】
0003565442.tif 000007
【００１３】
本発明の診断剤および治療剤に用いられる具体的なアミドを例示すると以下の通りである。まず、アミノモノカルボン酸とのアミドとしては以下のものがある。
＜クロリン誘導体＞
（ＤＬ）−セリニル−トランス−メソクロリンＩＸ
グリシル−トランス−メソクロリンＩＸ
α−（ＤＬ）−アラニル−トランス−メソクロリンＩＸ
β−アラニル−トランス−メソクロリンＩＸ
ε−アミノ−ｎ−カプロイル−メソクロリンＩＸ
（Ｄ、Ｌ）−セリニルクロリンｅ６
（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソクロリンｅ６
グリシルクロリンｅ６
グリシルメソクロリンｅ６
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルクロリンｅ６
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソクロリンｅ６
β−アラニルクロリンｅ６
β−アラニルメソクロリンｅ６
ε−アミノ−ｎ−カプロイルクロリンｅ６
ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソクロリンｅ６
（Ｄ、Ｌ）−セリニルクロリンｅ４
（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソクロリンｅ４
（Ｄ、Ｌ）−セリニルイソクロリンｅ４
（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソイソクロリンｅ４
グリシルクロリンｅ４
グリシルメソクロリンｅ４
グリシルイソクロリンｅ４
グリシルメソイソクロリンｅ４
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルクロリンｅ４
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソクロリンｅ４
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルイソクロリンｅ４
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソイソクロリンｅ４
β−アラニルクロリンｅ４
β−アラニルメソクロリンｅ４
β−アラニルイソクロリンｅ４
β−アラニルメソイソクロリンｅ４
ε−アミノ−ｎ−カプロイルクロリンｅ４
ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソクロリンｅ４
ε−アミノ−ｎ−カプロイルイソクロリンｅ４
ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソイソクロリンｅ４
（ＤＬ）−セリニル−ピロフェオホーバイドａ
グリシル−ピロフェオホーバイドａ
α−（ＤＬ）−アラニルピロフェオホーバイドａ
β−アラニルピロフェオホーバイドａ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルピロフェオホーバイドａ
（ＤＬ）−セリニルーフェオホーバイドａ
グリシル−フェオホーバイドａ
α−（ＤＬ）−アラニルフェオホーバイドａ
β−アラニルフェオホーバイドａ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルフェオホーバイドａ
（Ｄ、Ｌ）−セリニルホトプロトポルフィリンＩＸ
グリシルホトプロトポルフィリンＩＸ
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルホトプロトポルフィリンＩＸ
β−アラニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ε−アミノ−ｎ−カブロイルホトプロトポルフィリンＩＸ
トレオニニルクロリンｅ６
チロシルクロリンｅ６
バリルクロリンｅ６
ロイシルクロリンｅ６
イソロイシルクロリンｅ６
プロリルクロリンｅ６
メチオニルクロリンｅ６
ヒスチジルクロリンｅ６
アルギニルクロリンｅ６
リシルクロリンｅ６
グルタミニルクロリンｅ６
４−ヒドロキシプロリルクロリンｅ６
５−ヒドロキシリシルクロリンｅ６
ε−アミノ−ｎ−カプロイルクロリンｅ６
γアミノブタノイルクロリンｅ６
３−メチルヒスチジルクロリンｅ６
アラニル−２−アセチルクロリンｅ６
バリル−２−アセチルクロリンｅ６
ロイシル−２−アセチルクロリンｅ６
イソロイシル−２−アセチルクロリンｅ６
プロリル−２−アセチルクロリンｅ６
メチオニル−２−アセチルクロリンｅ６
グリシル−２−アセチルクロリンｅ６
セリニル−２−アセチルクロリンｅ６
トレオニニル−２−アセチルクロリンｅ６
システイニル−２−アセチルクロリンｅ６
チロシル−２−アセチルクロリンｅ６
アスパルギニル−２−アセチルクロリンｅ６
リシル−２−アセチルクロリンｅ６
アルギニル−２−アセチルクロリンｅ６
ヒスチジル−２−アセチルクロリンｅ６
グルタミニル−２−アセチルクロリンｅ６
４−ヒドロキシプロリル−２−アセチルクロリンｅ６
５−ヒドロキシリシル−２−アセチルクロリンｅ６
ε−アミノ−ｎ−カプロイル−２−アセチルクロリンｅ６
γ−アミノブタノイル−２−アセチルクロリンｅ６
３−メチルヒスチジル−２−アセチルクロリンｅ６
β−アラニル−２−アセチルクロリンｅ６
アラニル−２−ホルミルクロリンｅ６
バリル−２−ホルミルクロリンｅ６
ロイシル−２−ホルミルクロリンｅ６
イソロイシル−２−ホルミルクロリンｅ６
プロリル−２−ホルミルクロリンｅ６
メチオニル−２−ホルミルクロリンｅ６
グリシル−２−ホルミルクロリンｅ６
セリニル−２−ホルミルクロリンｅ６
トレオニニル−２−ホルミルクロリンｅ６
システイニル−２−ホルミルクロリンｅ６
チロシル−２−ホルミルクロリンｅ６
アスパルギニル−２−ホルミルクロリンｅ６
リシル−２−ホルミルクロリンｅ６
アルギニル−２−ホルミルクロリンｅ６
ヒスチジル−２−ホルミルクロリンｅ６
グルタミニル−２−ホルミルクロリンｅ６
４−ヒドロキシプロリル−２−ホルミルクロリンｅ６
５−ヒドロキシリシル−２−ホルミルクロリンｅ６
ε−アミノ−ｎ−カプロイル−２−ホルミルクロリンｅ６
γ−アミノブタノイル−２−ホルミルクロリンｅ６
３−メチルヒスチジル−２−ホルミルクロリンｅ６
β−アラニル−２−ホルミルクロリンｅ６
アラニルジューテロクロリンｅ６
バリルジューテロクロリンｅ６
ロイシルジューテロクロリンｅ６
イソロイシルジューテロクロリンｅ６
プロリルジューテロクロリンｅ６
メチオニルジューテロクロリンｅ６
グリシルジューテロクロリンｅ６
セリニルジューテロクロリンｅ６
トレオニニルジューテロクロリンｅ６
システイニルジューテロクロリンｅ６
チロシルジューテロクロリンｅ６
アスパルギニルジューテロクロリンｅ６
リシルジューテロクロリンｅ６
アルギニルジューテロクロリンｅ６
ヒスチジルジューテロクロリンｅ６
グルタミニルジューテロクロリンｅ６
４−ヒドロキシプロリルジューテロクロリンｅ６
５−ヒドロキシリシルジューテロクロリンｅ６
ε−アミノ−ｎ−カプロイルジューテロクロリンｅ６
γ−アミノブタノイルジューテロクロリンｅ６
３−メチルヒスチジルジューテロクロリンｅ６
β−アラニルジューテロクロリンｅ６
バリルメソクロリンｅ６
ロイシルメソクロリンｅ６
イソロイシルメソクロリンｅ６
プロリルメソクロリンｅ６
メチオニルメソクロリンｅ６
セリニルメソクロリンｅ６
トレオニニルメソクロリンｅ６
システイニルメソクロリンｅ６
チロシルメソクロリンｅ６
アスパルギニルメソクロリンｅ６
リシルメソクロリンｅ６
アルギニルメソクロリンｅ６
ヒスチジルメソクロリンｅ６
グルタミニルメソクロリンｅ６
４−ヒドロキシプロリルメソクロリンｅ６
５−ヒドロキシリシルメソクロリンｅ６
γ−アミノブタノイルメソクロリンｅ６
３−メチルヒスチジルメソクロリンｅ６
＜ポルフィリン誘導体＞
（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソポルフィリンＩＸ
グリシルメソポルフィリンＩＸ
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソポルフィリンＩＸ
β−アラニルメソポルフィリンＩＸ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソポルフィリンＩＸ
（Ｄ、Ｌ）−セリニルプロトポルフィリンＩＸ
グリシルプロトポルフィリンＩＸ
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルプロトポルフィリンＩＸ
β−アラニルプロトポルフィリンＩＸ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルプロトポルフィリンＩＸ
（Ｄ、Ｌ）−セリニルジューテロポルフィリンＩＸ
グリシルジューテロポルフィリンＩＸ
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルジューテロポルフィリンＩＸ
β−アラニルジューテロポルフィリンＩＸ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルジューテロポルフィリンＩＸ
テトラ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルコプロポルフィリンＩＩＩ
テトラ−グリシルコプロポルフィリンＩＩＩ
テトラ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルコプロポルフィリンＩＩＩ
テトラ−β−アラニルコプロポルフィリンＩＩＩ
テトラ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルコプロポルフィリンＩＩＩ
（Ｄ、Ｌ）−セリニルヘマトポルフィリンＩＸ
グリシルヘマトポルフィリンＩＸ
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルヘマトポルフィリンＩＸ
β−アラニルヘマトポルフィリンＩＸ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルヘマトポルフィリンＩＸ
＜バクテリオクロリン誘導体＞
（Ｄ、Ｌ）−セリニルバクテリオクロリンｅ４
グリシルバクテリオクロリンｅ４
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルバクテリオクロリンｅ４
β−アラニルバクテリオクロリンｅ４
ε−アミノ−ｎ−カプロイルバクテリオクロリンｅ４
（Ｄ、Ｌ）−セリニルバクテリオイソクロリンｅ４
グリシルバクテリオイソクロリンｅ４
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルバクテリオイソクロリンｅ４
β−アラニルバクテリオイソクロリンｅ４
ε−アミノ−ｎ−カプロイルバクテリオイソクロリンｅ４
（Ｄ、Ｌ）−セリニルバクテリオクロリンｅ６
グリシルバクテリオクロリンｅ６
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルバクテリオクロリンｅ６
β−アラニルバクテリオクロリンｅ６
ε−アミノ−ｎ−カプロイルバクテリオクロリンｅ６
（Ｄ、Ｌ）−セリニルピロバクテリオフェオホーバイドａ
グリシルピロバクテリオフェオホーバイドａ
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルピロバクテリオフェオホーバイドａ
β−アラニルピロバクテリオフェオホーバイドａ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルピロバクテリオフェオホーバイドａ
（Ｄ、Ｌ）−セリニルバクテリオフェオホーバイドａ
グリシルバクテリオフェオホーバイドａ
α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルバクテリオフェオホーバイドａ
β−アラニルバクテリオフェオホーバイドａ
ε−アミノ−ｎ−カプロイルバクテリオフェオホーバイドａ
【００１４】
次に、アミノモノカルボン酸とのジまたはポリアミドとしては以下のものがある。
＜クロリン誘導体＞
ジ−（ＤＬ）−セリニル−トランス−メソクロリンＩＸ
ジ−グリシル−トランス−メソクロリンＩＸ
ジ−α−（ＤＬ）−アラニル−トランス−メソクロリンＩＸ
ジ−β−アラニル−トランス−メソクロリンＩＸ
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイル−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルクロリンｅ６
ジ、トリ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソクロリンｅ６
ジ、トリ−グリシルクロリンｅ６
ジ、トリ−グリシルメソクロリンｅ６
ジ、トリ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルクロリンｅ６
ジ、トリ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソクロリンｅ６
ジ、トリ−β−アラニルクロリンｅ６
ジ、トリ−β−アラニルメソクロリンｅ６
ジ、トリ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルクロリンｅ６
ジ、トリ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソクロリンｅ６
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルクロリンｅ４
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソクロリンｅ４
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルイソクロリンｅ４
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソイソクロリンｅ４
ジ−グリシルクロリンｅ４
ジ−グリシルメソクロリンｅ４
ジ−グリシルイソクロリンｅ４
ジ−グリシルメソイソクロリンｅ４
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルクロリンｅ４
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソクロリンｅ４
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルイソクロリンｅ４
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソイソクロリンｅ４
ジ−β−アラニルクロリンｅ４
ジ−β−アラニルメソクロリンｅ４
ジ−β−アラニルイソクロリンｅ４
ジ−β−アラニルメソイソクロリンｅ４
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルクロリンｅ４
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソクロリンｅ４
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルイソクロリンｅ４
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソイソクロリンｅ４
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−グリシルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−β−アラニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルホトプロトポルフィリンＩＸ
＜ポルフィリン誘導体＞
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−グリシルメソポルフィリンＩＸ
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−β−アラニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルメソポルフィリンＩＸ
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−グリシルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−β−アラニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ−グリシルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ−β−アラニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ、トリ、テトラ−グリシルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ、トリ、テトラ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ、トリ、テトラ−β−アラニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ、トリ、テトラ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−グリシルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−β−アラニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルヘマトポルフィリンＩＸ
＜バクテリオクロリン誘導体＞
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−グリシルバクテリオクロリンｅ４
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−β−アラニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルバクテリオクロリンｅ４
ジ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ−グリシルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ−β−アラニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−（Ｄ、Ｌ）−セリニルバクテリオクロリンｅ６
ジ、トリ−グリシルバクテリオクロリンｅ６
ジ、トリ−α−（Ｄ、Ｌ）−アラニルバクテリオクロリンｅ６
ジ、トリ−β−アラニルバクテリオクロリンｅ６
ジ、トリ−ε−アミノ−ｎ−カプロイルバクテリオクロリンｅ６
【００１５】
同様にして、他のアミノ酸を使用し、以下に示すアミドを用いることができるが、これらは本発明を限定するものではない。
ジ−トレオニニルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−トレオニニルクロリンｅ６
ジ、トリ−トレオニニルメソクロリンｅ６
ジ−トレオニニルクロリンｅ４
ジ−トレオニニルメソクロリンｅ４
ジ−トレオニニルイソクロリンｅ４
ジ−トレオニニルメソイソクロリンｅ４
ジ−トレオニニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−トレオニニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−トレオニニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−トレオニニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−トレオニニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−トレオニニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−トレオニニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−トレオニニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−トレオニニルバクテリオクロリンｅ６
ジ−システイニルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−システイニルクロリンｅ６
ジ、トリ−システイニルメソクロリンｅ６
ジ−システイニルクロリンｅ４
ジ−システイニルメソクロリンｅ４
ジ−システイニルイソクロリンｅ４
ジ−システイニルメソイソクロリンｅ４
ジ−システイニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−システイニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−システイニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−システイニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−システイニル−コプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−システイニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−システイニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−システイニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−システイニルバクテリオクロリンｅ６
ジ−チロシルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−チロシルクロリンｅ６
ジ、トリ−チロシルメソクロリンｅ６
ジ−チロシルクロリンｅ４
ジ−チロシルメソクロリンｅ４
ジ−チロシルイソクロリンｅ４
ジ−チロシルメソイソクロリンｅ４
ジ−チロシルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−チロシルメソポルフィリンＩＸ
ジ−チロシルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−チロシルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−チロシルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−チロシルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−チロシルバクテリオクロリンｅ４
ジ−チロシルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−チロシルバクテリオクロリンｅ６
ジ−バリルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−バリルクロリンｅ６
ジ、トリ−バリルメソクロリンｅ６
ジ−バリルクロリンｅ４
ジ−バリルメソクロリンｅ４
ジ−バリルイソクロリンｅ４
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ジ−バリルホトプロトポルフィリンＩＸ
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ジ−バリルプロトポルフィリンＩＸ
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ジ、トリ、テトラ−バリルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−バリルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−バリルバクテリオクロリンｅ４
ジ−バリルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−バリルバクテリオクロリンｅ６
ジ−ロイシルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−ロイシルクロリンｅ６
ジ、トリ−ロイシルメソクロリンｅ６
ジ−ロイシルクロリンｅ４
ジ−ロイシルメソクロリンｅ４
ジ−ロイシルイソクロリンｅ４
ジ−ロイシルメソイソクロリンｅ４
ジ−ロイシルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−ロイシルメソポルフィリンＩＸ
ジ−ロイシルプロトポルフィリンＩＸ
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ジ、トリ、テトラ−ロイシルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−ロイシルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−ロイシルバクテリオクロリンｅ４
ジ−ロイシルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−ロイシルバクテリオクロリンｅ６
ジ−イソロイシルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−イソロイシルクロリンｅ６
ジ、トリ−イソロイシルメソクロリンｅ６
ジ−イソロイシルクロリンｅ４
ジ−イソロイシルメソクロリンｅ４
ジ−イソロイシルイソクロリンｅ４
ジ−イソロイシルメソイソクロリンｅ４
ジ−イソロイシルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−イソロイシルメソポルフィリンＩＸ
ジ−イソロイシルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−イソロイシルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−イソロイシルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−イソロイシルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−イソロイシルバクテリオクロリンｅ４
ジ−イソロイシルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−イソロイシルバクテリオクロリンｅ６
ジ−プロリルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−プロリルクロリンｅ６
ジ、トリ−プロリルメソクロリンｅ６
ジ−プロリルクロリンｅ４
ジ−プロリルメソクロリンｅ４
ジ−プロリルイソクロリンｅ４
ジ−プロリルメソイソクロリンｅ４
ジ−プロリルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−プロリルメソポルフィリンＩＸ
ジ−プロリルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−プロリルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−プロリルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−プロリルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−プロリルバクテリオクロリンｅ４
ジ−プロリルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−プロリルバクテリオクロリンｅ６
ジ−フェニルアラニルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−フェニルアラニルクロリンｅ６
ジ、トリ−フェニルアラニルメソクロリンｅ６
ジ−フェニルアラニルクロリンｅ４
ジ−フェニルアラニルメソクロリンｅ４
ジ−フェニルアラニルイソクロリンｅ４
ジ−フェニルアラニルメソイソクロリンｅ４
ジ−フェニルアラニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−フェニルアラニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−フェニルアラニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−フェニルアラニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−フェニルアラニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−フェニルアラニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−フェニルアラニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−フェニルアラニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−フェニルアラニルバクテリオクロリンｅ６
ジ−トリプトフィルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−トリプトフィルクロリンｅ６
ジ、トリ−トリプトフィルメソクロリンｅ６
ジ−トリプトフィルクロリンｅ４
ジ−トリプトフィルメソクロリンｅ４
ジ−トリプトフィルイソクロリンｅ４
ジ−トリプトフィルメソイソクロリンｅ４
ジ−トリプトフィルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−トリプトフィルメソポルフィリンＩＸ
ジ−トリプトフィルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−トリプトフィルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−トリプトフィルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−トリプトフィルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−トリプトフィルバクテリオクロリンｅ４
ジ−トリプトフィルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−トリプトフィルバクテリオクロリンｅ６
ジ−メチオニルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−メチオニルクロリンｅ６
ジ、トリ−メチオニルメソクロリンｅ６
ジ−メチオニルクロリンｅ４
ジ−メチオニルメソクロリンｅ４
ジ−メチオニルイソクロリンｅ４
ジ−メチオニルメソイソクロリンｅ４
ジ−メチオニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−メチオニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−メチオニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−メチオニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−メチオニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−メチオニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−メチオニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−メチオニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−メチオニルバクテリオクロリンｅ６
ジ−ヒスチジルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−ヒスチジルクロリンｅ６
ジ、トリ−ヒスチジルメソクロリンｅ６
ジ−ヒスチジルクロリンｅ４
ジ−ヒスチジルメソクロリンｅ４
ジ−ヒスチジルイソクロリンｅ４
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ジ−ヒスチジルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−ヒスチジルメソポルフィリンＩＸ
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ジ、トリ、テトラ−ヒスチジルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−ヒスチジルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−ヒスチジルバクテリオクロリンｅ４
ジ−ヒスチジルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−ヒスチジルバクテリオクロリンｅ６
ジ−アルギニルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−アルギニルクロリンｅ６
ジ、トリ−アルギニルメソクロリンｅ６
ジ−アルギニルクロリンｅ４
ジ−アルギニルメソクロリンｅ４
ジ−アルギニルイソクロリンｅ４
ジ−アルギニルメソイソクロリンｅ４
ジ−アルギニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−アルギニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−アルギニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−アルギニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−アルギニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−アルギニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−アルギニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−アルギニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−アルギニルバクテリオクロリンｅ６
ジ−リシルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−リシルクロリンｅ６
ジ、トリ−リシルメソクロリンｅ６
ジ−リシルクロリンｅ４
ジ−リシルメソクロリンｅ４
ジ−リシルイソクロリンｅ４
ジ−リシルメソイソクロリンｅ４
ジ−リシルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−リシルメソポルフィリンＩＸ
ジ−リシルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−リシルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−リシルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−リシルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−リシルバクテリオクロリンｅ４
ジ−リシルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−リシルバクテリオクロリンｅ６
ジ−グルタミニルトランス−メソクロリンＩＸ
ジ、トリ−グルタミニルクロリンｅ６
ジ、トリ−グルタミニルメソクロリンｅ６
ジ−グルタミニルクロリンｅ４
ジ−グルタミニルメソクロリンｅ４
ジ−グルタミニルイソクロリンｅ４
ジ−グルタミニルメソイソクロリンｅ４
ジ−グルタミニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−グルタミニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−グルタミニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−グルタミニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−グルタミニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−グルタミニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−グルタミニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−グルタミニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−グルタミニルバクテリオクロリンｅ６
ジ−アスパルギニルトランスーメソクロリンＩＸ
ジ、トリ−アスパルギニルクロリンｅ６
ジ、トリ−アスパルギニルメソクロリンｅ６
ジ−アスパルギニルクロリンｅ４
ジ−アスパルギニルメソクロリンｅ４
ジ−アスパルギニルイソクロリンｅ４
ジ−アスパルギニルメソイソクロリンｅ４
ジ−アスパルギニルホトプロトポルフィリンＩＸ
ジ−アスパルギニルメソポルフィリンＩＸ
ジ−アスパルギニルプロトポルフィリンＩＸ
ジ−アスパルギニルジューテロポルフィリンＩＸ
ジ、トリ、テトラ−アスパルギニルコプロポルフィリンＩＩＩ
ジ−アスパルギニルヘマトポルフィリンＩＸ
ジ−アスパルギニルバクテリオクロリンｅ４
ジ−アスパルギニルバクテリオイソクロリンｅ４
ジ、トリ−アスパルギニルバクテリオクロリンｅ６
【００１６】
更に、アミノジカルボン酸とのモノ、ジまたはポリアミドとしては以下のものがある。
＜クロリン誘導体＞
モノおよびジアスパルチルトランスメソクロリンＩＸ
モノおよびジグルタミルトランスメソクロリンＩＸ
モノ、ジおよびトリアスパルチルクロリンｅ６
モノ、ジおよびトリアスパルチルメソクロリンｅ６
モノ、ジおよびトリグルタミルクロリンｅ６
モノ、ジおよびトリグルタミルメソクロリンｅ６
モノおよびジアスパルチルクロリンｅ４
モノおよびジアスパルチルメソクロリンｅ４
モノおよびジアスパルチルイソクロリンｅ４
モノおよびジアスパルチルメソイソクロリンｅ４
モノおよびジグルタミルクロリンｅ４
モノおよびジグルタミルメソクロリンｅ４
モノおよびジグルタミルイソクロリンｅ４
モノおよびジグルタミルメソイソクロリンｅ４
モノアスパルチルピロフェオホーバイドａ
モノグルタミルピロフェオホーバイドａ
モノアスパルチルフェオホーバイドａ
モノグルタミルフェオホーバイドａ
モノおよびジアスパルチルホトプロトポルフィリンＩＸ
モノおよびジグルタミルホトプロトポルフィリンＩＸ
モノおよびジ−Ｌ−α−アミノアジピルトランス−メソクロリンＩＸ
＜ポルフィリン誘導体＞
モノおよびジアスパルチルメソポルフィリンＩＸ
モノおよびジグルタミルメソポルフィリンＩＸ
モノおよびジアスパルチルプロトポルフィリンＩＸ
モノおよびジグルタミルプロトポルフィリンＩＸ
モノおよびジアスパルチルジューテロポルフィリンＩＸ
モノおよびジグルタミルジューテロポルフィリンＩＸ
モノ、ジ、トリおよびテトラアスパルチルコプロポルフィリンＩＩＩ（異性体混合物）
モノ、ジ、トリおよびテトラグルタミルコプロポルフィリンＩＩＩ
モノおよびジアスパルチルヘマトポルフィリンＩＸ
モノおよびジグルタミルヘマトポルフィリンＩＸ
＜バクテリオクロリン誘導体＞
モノおよびジアスパルチルバクテリオクロリンｅ４
モノおよびジグルタミルバクテリオクロリンｅ４
モノおよびジアスパルチルバクテリオイソクロリンｅ４
モノおよびジグルタミルバクテリオイソクロリンｅ４
モノ、ジおよびトリアスパルチルバクテリオクロリンｅ６
モノ、ジおよびトリグルタミルバクテリオクロリンｅ６
モノアスパルチルピロバクテリオフェオホーバイドａ
モノグルタミルピロバクテリオフェオホーバイドａ
モノアスパルチルバクテリオフェオホーバイドａ
モノグルタミルバクテリオフェオホーバイドａ
【００１７】
本発明のテトラピロールは文献に見られる種々の合成方法により製造することができる。例えば、クロリンｅ６については以下の文献が挙げられる：
（１）ウィルスタッター，アール．（Ｗｉｌｌｓｔａｔｔｅｒ，Ｒ．）およびストール，エー．  （Ｓｔｏｌｌ，Ａ．）共著；インベスティゲイションズ・オン・クロロフィル（Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ  ｏｎ  Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ：クロロフィルの研究）、〔訳者：シェルツ，エフ．エム．（Ｓｃｈｅｒｔｚ，Ｆ．Ｍ．）およびメルツ，エー．アール．（Ｍｅｒｚ，Ａ．Ｒ．）〕、サイエンス・プリンティング・プレス（Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｐｒｅｓｓ）、ペンシルバニア州ランカスター、１９２８年、１７６頁。
（２）ウィルスタッター，アール．（Ｗｉｌｌｓｔａｔｔｅｒ，Ｒ．）およびアイスラー，エム．（Ｉｓｌｅｒ，Ｍ．）共著；アナレン・デル・ヘミー（Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．）、３９０号、１９１２年、２６９頁。
【００１８】
本発明の化合物は慢性関節リウマチ症の光線診断および光線治療に有用である。慢性関節リウマチ症のある人間または哺乳類の動物に本発明の化合物を投与すると、上記化合物は同病変部位に選択的に取り込まれ、これに適切な波長および強度の光を照射すると、同化合物は蛍光を発生すると共に活性酸素を発生する。このとき発生する蛍光を観測して病変部位を検出（診断）し、かつ発生する活性酸素による殺細胞効果によって病変部位を治療する。
投与対象は、生体内に慢性関節リウマチ症を有する哺乳類の動物である。
光線診断および光線治療に使用する化合物は、理想的には次の性質を有していなければならない：
（ａ）光線によって活性化されない場合、および光線によって活性化されるまでの間、正規の診断および治療の投与量において無毒であること、
（ｂ）選択的に病変部位に蓄積されやすいこと、
（ｃ）特定の光線に対し選択的に活性であること、
（ｄ）光線すなわち電磁波を照射したときに、特異的でかつ測定可能な蛍光を生すること。
（ｅ）光線すなわち電磁波を照射したときに、慢性関節リウマチ症に対して細胞死滅作用を及ぼす程度まで活性化されること、および
（ｆ）診断および治療後、容易に代謝または排泄されること。
【００１９】
本発明の薬剤である化合物は上記の特性を有すると共に、更に生理的な水素イオン濃度を示す水に適度な溶解性を有するという特徴がある。
また本発明の化合物は、前記のヘマトポルフィリン誘導体のホトフリンＩＩを用いた場合と比較すると、同程度の病変部位で、同一量の投与であってもより強い強度の蛍光を発生することが認められる。従って本発明の化合物を使用すると、病変部の周囲の正常組織と比較して慢性関節リウマチ部分がより著しいコントラストを示す。
更に、従来のテトラピロールのいくつかは、ばらつきのある蛍光特性を示し、あるいは蛍光が日によって変化するのに対し、本発明の化合物はより安定した蛍光を発生する。
【００２０】
本発明の化合物は、波長３００〜８００ｎｍの範囲内において光線診断および治療用の活性エネルギーを吸収し、前記の特に好ましい化合物の場合には、３６０〜７６０ｎｍの範囲内における光線、すなわち病変部にエネルギーを容易に浸透させ得る長い波長の光線を吸収して、光線診断および治療の目的をより好適に達成する。
なお、病変部位に取り込まれた本治療剤の発生蛍光の固有波長は、同じ物質のリン酸緩衝塩溶液中におけるそれとは、通常１０ｎｍ程度波長の遷移が認められる。これは、本発明の薬剤が、単に物理的に病変部内に取り込まれているのではなく、なんらかの態様で病変部と結合していることを示すものと想像される。波長の遷移が認められる場合には、同時に発生蛍光の強度変化も生じているのが通例であるが、本発明の化合物の場合にはむしろその強度は高まりこそすれ低下することはない。従って本発明の化合物は光線診断および治療に最適の化合物である。
【００２１】
現在までの経験によれば、本発明の化合物は、慢性関節リウマチ症の病変部位全体にわたって均一に分布するため、投与量はかなり少なくすることができる。投与量を少なくすることは、もし上記化合物が排泄されなくても、宿主の光線感作を低下することになる。
本発明の化合物の投与量は、目的が診断であるか、または治療であるかによって異なる。診断のためには１ｍｇ／ｋｇ（生体重量）のわずかな量で効果を示し、約５ｍｇ／ｋｇまでの投与量が用いられる。治療のための投与量は通常約０．１〜２０ｍｇ／ｋｇである。診断および治療における投与量は、本発明の化合物の前記の有利な特性、例えば生体から化合物が容易に排泄されることから判断して、広い範囲で変化させることができる。本発明の化合物は、診断および治療に用いられる投与量においては明らかに無毒（無害）である。例えば２０ｍｇ／ｋｇまでの投与量を用いた実験において、実験動物は本発明の化合物によって死亡することはなかった。
【００２２】
本発明の化合物は、リン酸緩衝塩溶液などの適宜の水溶液に溶解させ、適宜の方法により診断および治療の対象である生体内に投与する。水溶液の他に、適宜の分散剤により分散させた水分散液とすることもできる。血管内に直接注射などにより投与するのが好ましい。経口的に、あるいは筋肉または皮下などへ投与することもできる。また投与方法の１つとして関節内腔に直接化合物を注入する。いずれの場合も、投与に際して本発明の化合物の他に従来公知のトラガカントゴムなどの結合剤；リン酸二カルシウムなどの賦型剤；トウモロコシデンプンなどの分解代謝剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；蔗糖などの甘味料；パラベン類などの防腐剤；染料；サクランボ香料などの香料；水、エタノール、グリコールなどの溶媒または分散媒；抗菌剤；糖または塩化ナトリウムなどの等張剤などを含むことができる。
これらの化合物は、好ましくは塩基性塩、例えば、ナトリウム塩の形で凍結乾燥した無菌の、発熱性物質を含まない化合物として製剤することができる。好ましい製剤形態は、注射可能な（等張性の）溶液である。
【００２３】
本発明の化合物は、投与後、理由は不明であるが、生体内の慢性関節リウマチの病変部位（滑膜増殖部位）に特異的かつ選択的に集積する。そこで、適宜の時間後、例えば血管内投与の場合には数分から数時間経過後に、病変部位に光線を照射する。
光線は、化合物が診断用蛍光を発生し、かつ治療用の細胞死滅作用を及ぼすことができる程度の照射量であることが必要である。光線診断および光線治療用の照射源については限定されないが、レーザー光線が好ましい。なぜならば、所望の波長範囲内において強い光線を選択的に照射することができるからである。
レーザー光線の照射には、フィルターを通した強力な連続光源、励起した色素レーザーまたは他のレーザー、および送光システム等が使用される。使用するレーザー光は前記のように３６０〜７６０ｎｍの波長が用いられる。照射強度は適宜に選択され、通常は１０〜１０００ｍＷ／ｃｍ２、好ましくは２０〜５００ｍＷ／ｃｍ２の範囲が用いられ、装置の出力は少なくとも５００ｍＷである。現在市販されているいくつかのレーザーはこれらの基準を満足するものである。
例えば光線診断の場合には、本発明の化合物は人間または動物の体内に投与され、一定の時間後に検査すべき部位に光線を照射する。肘、膝関節のような照射部位に関節内視鏡が用いられるときには、その内視鏡を用いて照射を行う。慢性関節リウマチの病変部位は選択的に蛍光を発生し、この部位は直接視覚によって観察され、またはファイバースコープを通して肉眼によりもしくはＣＲＴスクリーン上に映し出して観察される。
光線治療の場合には、化合物投与後、レーザー光線を石英繊維の先端から照射する。慢性関節リウマチの病変部位の表面に照射する他に、石英繊維の先端を病変部位に挿入して内部を照射することもできる。照射状態は直接視覚によって観察され、またはＣＲＴスクリーン上に映し出して観察する。
【００２４】
本発明の化合物による光線診断および光線治療は、関節内腔の滑膜の増殖もしくは炎症を生じる疾患、すなわち、関節炎を呈する疾患や慢性関節リウマチに類似する、もしくは慢性関節リウマチ病変を合併する他の疾患にも応用することができる。例えば、若年性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、ライター症候群、乾癬性関節炎、色素性絨毛性滑膜炎などの類縁疾患に応用が可能である。
【００２５】
【実施例】
以下、本発明の化合物について薬効試験の実施例を示し、本発明をより詳細に説明する。
本試験では形態学的および生化学的にヒト慢性関節リウマチ症にきわめて類似した慢性関節リウマチ病変が形成されるアジュバント関節炎（ＡｄｊｕｖａｎｔＡｒｔｈｒｉ−ｔｉｓ）ラット（以下、「Ａ．Ａ．ラット」という）に本発明の化合物を投与して光線診断および光線治療を行った。
試験化合物として、モノ−Ｌ−アスパルチルクロリンｅ６（以下、「ＮＰｅ６」という）を用いた。
比較化合物として、ホトフリンメディカ（ＰＨＯＴＯＦＲＩＮ  ＭＥＤＩＣＡ）社製のホトフリンＩＩ（商品名）を用いた。これらの化合物はリン酸塩緩衝溶液（ＰＨ７．４）に溶解し使用した。
【００２６】
＜製造例１＞
モノ−Ｌ−アスパルチルクロリンｅ６の製造：
フィッシャー（Ｆｉｓｃｈｅｒ）およびシュテルン（Ｓｔｅｒｎ）共著；ディー・ヘミー・デス・ピローレス（Ｄｉｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｄｅｓ  Ｐｙｒｒｏｌｅｓ：ピロールの化学）、第２巻、後半、アカデーミッシェ・フェルラークスゲゼルシャフト（Ａｋａｄｅｍｉｓｃｈｅ  Ｖｅｒｌａｇｓ−ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ）、ライプチッヒ、１９４０年、９１〜９３頁に記載された方法によりクロリンｅ６を調製した。
１５０ｍｇのクロリンｅ６（遊離酸の形態）および２５０ｍｇのＬ−アスパラギン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルハイドロクロライドを２０ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解させた。１時間ごとに３回、各１００ｍｇのＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドを加えた。４時間後、反応混合物を３００ｍｌのエーテルで希釈し、２００ｍｌの水で２回洗浄し、４０ｍｌの１Ｍ  ＫＯＨで抽出した。このＫＯＨ溶液を一晩放置して加水分解し、７０℃で１０分間加熱した。溶液のｐＨを７に調節し、フラッシュ蒸発により残留エーテルを除去した。次に溶液を逆相カラム（Ｃ−１８シリカ充てん、１．５ｃｍφ×３０ｃｍ）に導入した。生成物をメタノールおよびｐＨ６．８５の０．０１Ｍリン酸カリウム緩衝液で段階的溶離法により精製した。望ましくない極性色素が除去されるまで、５％メタノールで溶離を行い、次にモノアスパルチルクロリンｅ６を６〜８％メタノールで溶離し、未反応のクロリンｅ６を２５％メタノールで溶離した。
簡単にフラッシュ蒸発を行ってメタノールを除去した後、ｐＨ３で生成物を沈澱させ、その後遠心分離機を用いて希酢酸により３回洗浄した。
減圧下で生成物を乾燥したところ、モノ−Ｌ−アスパルチルクロリンｅ６の収量は５０ｍｇであった。
【００２７】
＜製造例２＞
モノ−Ｌ−セリニルクロリンｅ６の調製：
上記製造例１と同様の方法で製造したクロリンｅ６を使用した。１００ｍｇのクロリンｅ６および３５ｍｇの１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドハイドロクロライドを２ｍｌのＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドに溶解させた。５分後に１２５ｍｇのＬ−セリンベンジルエステルハイドロクロライドを添加し、完全に溶解するまで激しく攪拌し、次に室温で２時間静置した。これに０．５ｍｌの氷酢酸を加え、次に３０ｍｌのメタノールおよび１２ｍｌの水を加えた。
溶液をＣ−１８逆相カラムに通した。カラムを１００ｍｌの水で洗浄し、次に４ｍｌの１Ｍ  ＮＨ４ＯＨで洗浄し、再度５０ｍｌの水で洗浄した。次に、生成物をメタノール／水で溶出した。３０〜８０％メタノールでカラムから溶出した留分は、メタノール／緩衝液（ｐＨ６．８５の０．１Ｍリン酸ナトリウム）の容量比７０／３０の溶媒を用いてＣ−１８逆相プレート薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）で測定したところ、生成物の他にカルボジイミド活性化クロリンを含んでいた。
これらの溶出分を集め、十分な３Ｎ  ＮａＯＨを添加し、０．１Ｎ  ＮａＯＨ溶液を調製した。１時間後、加水分解が完結したことを上記のＴＬＣで確認した。メタノールをロータリー蒸発器により除去し、ＨＣｌによりｐＨを７．５に調整した。クロリン溶液を同一の逆相カラムに再度通し、水で洗浄し、メタノール／水を使用して段階傾斜溶離法により、１０〜５０％のメタノール濃度で溶出した。ＴＬＣにより測定し純粋なモノ−Ｌ−セリニルクロリンｅ６（Ｒｆは非置換クロリンｅ６よりも僅かに大きい）を含む溶出分を集めた。メタノールをロータリー蒸発器により除去し、生成物を三ナトリウム塩として凍結乾燥により乾燥した。
【００２８】
＜試験動物＞
正常なＬｅｗｉｓ系ＬＥＷ／Ｃｒｊラット（日本チャールスリバー社）に次のようにして人工的に慢性関節リウマチ症を発生させたＡ．Ａ．ラットを実験対象動物として用いた。このラットはヒトとの対応が良好で、この種の薬効試験に好適である。
８週齢の雄性Ｌｅｗｉｓ系ＬＥＷ／Ｃｒｊラットの右後肢の足裏（ｆｏｏｔ  ｐａｄ）に結核菌の死菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  Ｈ３７  ＲＡ、Ｄｉｆｃｏ社製）のアジュバントを０．６ｍｇ／ａｎｉｍａｌの量で皮下接種した。接種後、２４時間までに足は急速に発赤、腫張し始め、２〜３週目には関節周囲に慢性増殖性滑膜炎を発症し、慢性関節炎を呈した。各薬物の投与における診断および治療群としてそれぞれ５匹のラットを用いた。
【００２９】
＜実験装置＞
本実験では直径２１ｍｍのカテーテル（住友電工（株）製）、光感受性物質励起用のアルゴン・ダイ・レーザー（スペクトル・フィジックス社製）、蛍光スペクトル解析装置を使用した。光感受性物質励起用のアルゴン・ダイ・レーザーは各物質の吸収帯に合わせた波長、すなわち４０５ｎｍ、６３０ｎｍないしは６６４ｎｍの波長変換が可能で、照射強度１００ｍＷ／ｃｍ２で使用した。このレーザー光はコア径３００μｍの石英ファイバーに導入しカテーテルに通して使用した。
【００３０】
＜診断例１＞
アジュバント接種後１、２、３および４週目のＡ．Ａ．ラットに、試験化合物を体重１ｋｇ当たり１ｍｇの量で尾静脈より投与した。投与後６時間目にネンブタール麻酔下で、アジュバントを接種した右後肢の膝関節を切開し、関節腔内にレーザー光を導入したカテーテル（内視鏡）にて４０５ｎｍのレーザー光線を照射して、病変部位（滑膜増殖部位）に蓄積している物質が発する特有の蛍光スペクトルを蛍光解析装置により観測した。ここで観測された６００〜７００ｎｍの範囲の蛍光スペクトルの面積積分重量値から蛍光量を算出し、化合物の取り込み量の目安とした。
光線診断後、動物を麻酔死させ、膝関節を摘出して組織標本を作製し、ヘマトキシリン・エオジン染色（Ｈ．Ｅ．染色）による組織学的診断を行い、蛍光量と病変程度とを比較した。
コントロールには同一週齢の正常なラットを用い、比較例としては同一病状のＡ．Ａ．ラットにホトフリンＩＩを投与したものを用いて同様の実験を行った。
【００３１】
＜治療例１＞
表３の治療条件に従い、アジュバント接種後３週目のＡ．Ａ．ラットに試験化合物を体重１ｋｇ当たり０５ｍｇの量で尾静脈より投与した。投与後６時間目にネンブタール麻酔下で、アジュバントを接種した右後肢の膝関節を切開し、関節腔内に直接レーザー光線を照射して病変部位（滑膜増殖部位）に取り込まれている物質が発する特有の蛍光スペクトルを蛍光解析装置により観測した。次いで、化合物を十分に取り込んでいると観測された病変部位に４０５ｎｍ、６３０ｎｍもしくは６６４ｎｍのレーザー光線を５０Ｊ／ｃｍ２照射して治療を行った。治療終了後、切開部を縫合し、傷口および関節腔内に抗生物質を注入して、１週間飼育した。治療１週間後に同一試験化合物を１ｍｇ／ｋｇ投与して光線診断を行い、診断後、動物を麻酔死させ、膝関節を摘出して組織標本を作製し、ヘマトキシリン・エオジン染色（Ｈ．Ｅ．染色）による組織学的診断を行い、蛍光量と病変程度とを比較した。
コントロールには同一病状のＡ．Ａ．ラットに薬物を投与せず、レーザー光線を５０Ｊ／ｃｍ２照射した群を用い、また比較例として同一病状のＡ．Ａ．ラットにホトフリンＩＩを投与したものを用いて同様の実験を行った。
【００３２】
【表３】
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【００３３】
＜試験結果１＞
診断例１の結果を以下に述べる。
慢性関節リウマチ症を呈するアジュバント接種後３週のＡ．Ａ．ラットに各化合物を投与し、膝関節にレーザー光線を照射し、光線診断を行って関節腔内の化合物の蛍光量を観測した（表４参照）。
その結果、ホトフリンＩＩ投与群の病変部位である滑膜細胞増殖部位における蛍光量は３．５、他の正常組織である軟骨では１．２を示し、関節周辺の正常組織であるアキレス腱および筋肉では０．５を示した。一方、ＮＰｅ６投与群の病変部位である滑膜細胞増殖部位における蛍光量は１６．０、他の正常組織である軟骨は１．０、関節周辺の正常組織であるアキレス腱および筋肉では０．２を示した。
同一週齢の正常なラットにおけるホトフリンＩＩ投与群では正常な滑膜細胞における蛍光量は０．２、他の正常組織である軟骨、アキレス腱および筋肉では蛍光は観察されなかった。一方、ＮＰｅ６投与群においても、正常な滑膜細胞における蛍光量は０．２、他の正常組織である軟骨、アキレス腱および筋肉では蛍光は観察されなかった。
【００３４】
【表４】
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【００３５】
次にアジュバント接種後１〜４週の病変程度の異なるＡ．Ａ．ラットにＮＰｅ６を投与して同様な光線診断を行い、蛍光量を観測して組織的診断における病変程度との相関性を検討した（表５参照）。
その結果、アジュバント接種後１週目の滑膜細胞における蛍光量は２．０、他の正常組織である軟骨、アキレス腱および筋肉では蛍光は観察されなかった。同一の各部位の組織的診断では、滑膜細胞はあまり増殖しておらず、軟骨は正常であった（＋１）。また、アジュバントを接種した右肢の腫張度もわずかに観察された程度であった。
アジュバント接種後２週目の滑膜細胞における蛍光量は１０．５、他の正常組織である軟骨、アキレス腱および筋肉ではほとんど蛍光は観察されなかった。同一の各部位の組織的診断では、滑膜細胞が増殖しており（＋４）、腫張度も正常の２倍以上を示した。
アジュバント接種後３、４週目の蛍光量はいずれも、滑膜細胞において１６．０、他の正常組織である軟骨では１．０、アキレス腱および筋肉では０．２を示した。同一の各部位の組織的診断では滑膜細胞の増殖が著しく、絨毛の増生、更に肉芽の増生によるパンヌスの形成が観察された（＋５）。また、腫張度も正常の２倍以上を示し、アジュバント関節炎を形成していた。
このように、ＮＰｅ６の蛍光量はアジュバント関節炎の病変程度と相関性を示すので、ＮＰｅ６の取り込み量を比較することにより病変程度を判断することができる。
【００３６】
【表５】
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【００３７】
＜試験結果２＞
治療例１の結果を以下に述べる。
慢性関節リウマチ症を呈するアジュバント接種後３週のＡ．Ａ．ラットに各化合物を投与して、膝関節腔内にレーザー光を照射して光線診断を行って、化合物を十分に取り込んでいると観測された病変部位（滑膜増殖部位）にレーザー光線を５０Ｊ／ｃｍ２照射して治療を行った。治療１週間後に同一の薬物を投与して光線診断を行い、治療前の蛍光量と比較した（表６参照）。
その結果、ホトフリンＩＩ投与群の病変部位における蛍光量は治療前では３．５から３．６、治療後では１．８から２．０を示した。一方、ＮＰｅ６投与群の病変部位における蛍光量は治療前では１６．０から１６．２、治療後では１．９から２．４を示した。
また、同一病状のＡ．Ａ．ラットの非投与群では、治療前後とも蛍光は観察されなかった。
ホトフリンＩＩ投与群の場合には、病変部位の治療前の蛍光量に対する治療後の蛍光量は平均５４％である。それに対してＮＰｅ６投与群の場合には平均１３％と少なく、ホトフリンＩＩ投与群に比べ、ＮＰｅ６投与群では治療により病変程度が著しく軽減することが確認された。
【００３８】
【表６】
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【００３９】
更に治療部位の組織標本を作製して組織的診断および肉眼的診断を行い比較した（表７参照）。ホトフリンＩＩ治療群では滑膜細胞のわずかな変性が見られる程度で、有為な差はみられず顕著な治療効果は得られなかった（＋３）。
一方、ＮＰｅ６治療群では滑膜細胞が空胞化し、あるいは萎縮し、一部滑膜細胞の脱落が見られた。それにより腫張度も軽減されており、病変部位の改善が認められた（±０〜＋１）。
なお、ＮＰｅ６投与群では、２種の波長４０５ｎｍおよび６６４ｎｍのレーザー光線による治療が同程度の高い治療効果を示した。
また、同一病状のＡ．Ａ．ラットの非投与群の場合には、５０Ｊ／ｃｍ２のレーザー照射のみでは、病変部位に変化は観察されなかった（＋５）。
上記のように、ホトフリンＩＩ投与群の治療効果に比べ、ＮＰｅ６投与群の治療効果は高く、慢性関節リウマチ症の軽減、改善が明確に示された。
【００４０】
【表７】
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【００４１】
本発明の化合物による毒物学的特性のうち、急性毒性について試験を行った。上記のＮＰｅ６を用い、ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ系）に静脈内投与して５０％致死量（ＬＤ５０）を測定した結果、雄では１７６ｍｇ／ｋｇ、雌では１８４ｍｇ／ｋｇであった。マウス（Ｃ３Ｈ／ＨＥＪ系）に静脈内投与して５０％致死量を測定した結果、雄では２１４ｍｇ／ｋｇ、雌では１８７ｍｇ／ｋｇであった。
【００４２】
＜結果のまとめ＞
（１）ＮＰｅ６による慢性関節リウマチ症の光線治療は、慢性関節リウマチの病変程度を軽減もしくは改善し、従来のホトフリンＩＩによる治療効果に比べ、同程度の慢性関節リウマチ病変に対して同一量の投与であってもより高い治療（壊死）効果を示した。
（２）ＮＰｅ６による光線診断では、従来のホトフリンＩＩに比べ慢性関節リウマチ病変において優れた選択的取り込みが示され、低い投与量であっても明確に病変部位を診断し、更に病変部位だけを的確に（局所的に）治療することが可能であった。
（３）ＮＰｅ６の蛍光量は、慢性関節リウマチ症の病変程度と相関性を示すことから、ＮＰｅ６の取り込み量を比較することにより病変程度を判断することができる。
（４）ＮＰｅ６の２種の吸収帯に合わせた波長４０５ｎｍおよび６６４ｎｍのレーザー光線による治療は、いずれも高い治療効果を発揮した。
【００４３】
【発明の効果】
本発明の化合物を関節炎を有する哺乳動物に投与して光線診断および光線治療を行った結果、以下の効果が認められる。
（１）前記の化合物は、関節炎病変部位に選択的に取り込まれるため、同病変を的確かつ直接的に診断および治療することができる。
（２）治療１週間後には、関節の滑膜異常増殖部が空胞化し、あるいは萎縮し、腫張度も軽減した状態となった。
（３）従来のホトフリンＩＩなどに比べて、同程度の関節炎に対して同一量の投与でより強い治療効果が得られる。