(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ぶどうのジュース、ワイン等の加工時に生じる圧縮搾汁粕の果皮を、１．５〜５倍容の９９〜４０％エチルアルコールにより、５〜２４時間、２０〜４０℃で抽出処理した後、固液分離し、該分離液を濃縮することを特徴とした天然抗酸化剤の製造方法。
【請求項２】
ぶどうのジュース、ワイン等の加工時に生じる圧縮搾汁粕の果皮を、１．５〜５倍容の水により、５〜２４時間、２０〜４０℃で抽出処理した後、固液分離し、該分離液を濃縮することを特徴とした天然抗酸化剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
この発明は、ジュース又はワインの製造時に多量に排出されるぶどうの圧縮搾汁粕の果皮を原料として得られる天然抗酸化剤を目的とした天然抗酸化剤の製造方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来ぶどうの圧縮搾汁粕の果皮は、廃棄されたり、飼料又は肥料の原料とされている。
【０００３】
また天然抗酸化剤を、ハーブ、香辛料、緑茶などの植物から抽出する技術が提案されている。
【０００４】
【発明により解決すべき課題】
前記ぶどうの圧縮搾汁粕の果皮の利用については甚だ不十分であって廃棄されるものが多かつた。これは加工しても、加工費に見合うだけの付加価値を付与することが難しかつたからである。
【０００５】
前記天然抗酸化剤は、抽出効率の向上がむつかしいのみならず、原料費及び加工費を見込むと、経済的かつ工業的に抽出することが困難であって、一部実用化されているに過ぎない。
【０００６】
また現在食品に使用されている化学的合成抗酸化剤（例えばＢＨＡ、ＢＨＴ）に関し食品に多量に使用するには、安全性その他の疑問を指摘される場合もあつて、これに代るビタミン類が多用されている。
【０００７】
然し乍ら食品の抗酸化剤として使用されているビタミンＥ、ビタミンＣについては、その摂取過剩が指摘され始めている問題点もある。
【０００８】
またぶどうの圧縮搾汁粕の果皮量は、原料ぶどうの２０％にも及ぶ厖大な量であって、これを付加価値の大きい抗酸化剤製造の原料に利用できることは、産業上多大の貢献をすることに疑はない。
【０００９】
【課題を解決する為の手段】
然るにこの発明は多年の研究の結果、ぶどうの果皮から天然抗酸化剤を製造することに成功し、かつ従来の問題点を廃棄物の利用（原料低廉）と付加価値の飛躍的向上とにより解決したのである。
【００１１】
即ち、この発明は、ぶどうジュース、ワイン加工時に生じる圧縮搾汁粕の果皮を、１．５〜５倍容の９９〜４０％エチルアルコールにより、５〜２４時間、２０〜４０℃で抽出処理をした後、固液分離し、該分離液を濃縮することを特徴とした天然抗酸化剤の製造方法であり、ぶどうのジュース、ワイン等の加工時に生じる圧縮搾汁粕の果皮を、１．５〜５倍容の水により、５〜２４時間、２０〜４０℃で抽出処理した後、固液分離し、該分離液を濃縮することを特徴とした天然抗酸化剤の製造方法である。
【００１２】
この発明は、原料のぶどう（ソービニヨン種、カルベネ・フラン種、カベルネ・ソービニヨン種、メルロー種、セミヨン種、ソービニョン・ブラン種、ピノ・ノワール種、ガメー種、シャルドネー種、ピノ・ブラン種、アリゴテ・ピノー・ノワール種、カリニャン・サンソー種、グルナシュ種、リースニング種、シルファーナー種、ミュラー・トウガル種、フルミトン種、パロミノ種、マスカット・ベリーＡ種、巨峰種、甲州種等）の果皮は、これらを原料とした、ジュース、ワイン等の圧縮搾汁粕の果皮からより効率的に抗酸化成分である低分子の糖類の単体及びその他の物質との複合体を、工業的に有利に、かつ安価に分離精製する技術を確立した。
【００１３】
その抽出方法として、原料のぶどうの果皮又は、ジュース、ワイン等の製造時に産出されるブドウの圧縮搾汁粕の果皮を１．５〜５倍容の９９〜４０％エチルアルコール又は水溶媒により、５〜２４時間、２０〜４０℃で抽出処理を行った。処理後、遠心分離、フィルタープレス等で固液を分離し、分離液を減圧濃縮等で濃縮した。更に、真空乾燥、減圧乾燥等を行い乾燥させることにより、粉末化が可能であった。
【００１４】
乾燥を行う前の濃縮液を、膜処理（限外濾過膜、逆浸透膜）または、クロマトグラフィーによって処理することにより、更に精製度の高い抗酸化性の高い天然成分を得ることができた。
【００１５】
【作用】
この発明は、廃棄物に等しいぶどうのジュースやワインの圧縮搾汁粕の果皮から、有用な抗酸化剤を多量生産できるので、食品の添加物に利用した場合であつても、安全性の問題点はなく、使用量に制約が少ない。
【００１６】
また製造に際し、原料の安定供給が約束される。
【００１７】
【実施例１】
赤ぶどうジュース製造時に発生する圧縮搾汁粕の果皮（品種：メルロー種）１００Kgを５０％エチルアルコール５００Kgと混合し、３０℃で２４時間放置した。ついで、振動振るいを使用して果皮と抽出液とを分離した。分離された果皮は、フィルタープレスを使用して圧搾し、分離液は、前記の抽出液と混合した。この混合液を遠心分離機で（３０００Ｇ）清澄化した。次に減圧濃縮を行い、アルコールを除去しながら、固形分６０％まで濃縮して、１６．４Kgの濃縮液ペーストを得た。
【００１８】
この濃縮液をＥＳＲによる、活性酸素のスーパーオキサイドとＯＨ−ラジカルを消去する力価を測定するＥＳＲ法、ＴＢＡ法、ＨＰＴＬＣ−α−メチルインドール法の３つの測定方法により抗酸化性を測定し評価した。前記ＥＳＲ法とは、電子スピン共鳴法で、不対電子を持つ試料を磁場の中に置き、マイクロ波を照射して共鳴現象による電磁波の吸収を測定する方法で、ＳＯＤ（スーパーオキサイドディスムターゼ）の活性が、ＥＳＲ法で測定できることの発見以来、スピントラップ剤を用いてのスーパーオキサイドを容易に測定できる事から、最近では抗酸化能の測定に利用されている方法である。このＥＳＲ法によりスーパーオキサイドとＯＨ−ラジカルを消去する能力を測定した。コントロールとしては両者とも代表的水溶性抗酸化剤であるビタミンＣを用いている。ＥＳＲ法による濃縮液の抗酸化能力は、スーパーオキサイド消去活性値が１２８４３０unit／ｇ（ビタミンＣ（ (ナカライテスク) 以下この試薬で比較）比：０．７５８）であり（図１参照）ＯＨ−ラジカル消去率が８５％（ビタミンＣ比：７６％）であった（図２参照）。
【００１９】
ＴＢＡ法とは、金属触媒による活性酸素生成系で試料とデオキシリボースを混合し反応させ、デオキシリボースが酸化的損傷を受けることによって発生するマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）の量を測定する方法で、α−トコフェロールを試料とした時の酸化度を０％とした比較値で抗酸化能を表すものである。この方法により濃縮液のデオキシリボースの過酸化抑制する力を測定したところ、α−トコフェロール（ (ナカライテスク) 以下この試薬で比較）の酸化度を０％とした時の比較値で、１０％であった（図３参照）。
【００２０】
又、ＨＰＴＬＣ−α−メチルインドール法（以下ＨＰＴＬＣ法とする）とは、試料を非常に酸化されやすい油脂であるリノレイン酸と混合し加熱することにより生じる、過酸化脂質の量を測定する方法で、この過酸化脂質の量を１００とした場合、その５０％を抑制するだけの試料の濃度（ｇ／ml）を算出して、その物質の抗酸化能とする方法である。この方法により試料の抗酸化能が数値化され、ビタミンＥなどを指標に各試料の比較ができる。この方法により、濃縮液の抗酸化力をビタミンＥ（ (ＤＬ−α−トコフェロール：日本ロッシュ) 以下この試薬で比較）と比較したところ、１．３０８倍であった（図４参照）。
【００２１】
【実施例２】
ワイン発酵終了後の圧縮搾汁粕の果皮（品種：メルロー種）を粉砕機で粉砕し、ペースト状にした。このペースト１００Kgを５００Kgの５０％エチルアルコールと混合し、４０℃で２４時間攪拌抽出した。脱水機を使用してペースト状の果皮と抽出液とを分離した。抽出液は、遠心分離機で（３０００Ｇ）清澄化した。濃縮は減圧濃縮を行い、アルコールを除去しながら、固形分６０％まで濃縮を行い、１３．９Kgの濃縮液ペーストを得た。
【００２２】
前記のＥＳＲ法によるスーパーオキサイドとＯＨ−ラジカルの消去する力を測定したところ、スーパーオキサイド消去活性値は３９５００unit／ｇ（ビタミンＣ比：０．２３３）、ＯＨ−ラジカル消去率は８５％（ビタミンＣ比：７６％）であった（図１、２参照）。更に、ＴＢＡ法では、α−トコフェロールの酸化度を０％とした時の比較値で７．０％（図３参照）、ＨＰＴＬＣ法では、その抗酸化力をビタミンＥと比較したところ、１．３６倍であった（図４参照）。
【００２３】
【実施例３】
白ぶどうジュース製造時に生ずる圧縮搾汁粕の果皮（品種：甲州種）１００Kgを５００Kgの５０％エチルアルコールと混合し、３０℃で２４時間放置した。放置後、振動振るいを使用して果皮、抽出液とを分離した。分離された果皮は、フィルタープレスを使用して圧搾し、分離液は、前記の抽出液と混合した。この混合液を遠心分離機で（３０００Ｇ）清澄化した。濃縮は減圧濃縮を行い、アルコールを除去しながら、固形分６０％まで濃縮を行い、１２．５Kgの濃縮液ペーストを得た。
【００２４】
ＥＳＲ法により、スーパーオキサイドとＯＨ−ラジカルの消去する力を測定したところ、スーパーオキサイド消去活性値は１９１８０unit／ｇ（ビタミンＣ比：０．１１３）、ＯＨ−ラジカル消去率は８６％（ビタミンＣ比：７６％）であった（図１、２参照）。更に、ＴＢＡ法では、α−トコフェロールの酸化度を０％とした時の比較値で１７．４％（図３参照）、ＨＰＴＬＣ法では、その抗酸化力をビタミンＥと比較したところ、０．４９３倍であった（図４参照）。
【００２５】
【実施例４】
ワイン発酵終了時に発生する圧縮搾汁粕の果皮（品種：メルロー種）１００Kgを２５０Kgの水と混合し、セルラーゼ（セルラーゼオノズカ３Ｓ：ヤクルト株式会社）を１／５００〜１／１０００添加し、果皮を溶解させることを目的として、５０℃で２〜６時間反応させた。反応終了後、２５０Kgの９９％以上エチルアルコールを加え攪拌混合後、常温で１６時間放置した。ついで脱水機を使用して果皮のペーストと抽出液とを分離した。この抽出液を遠心分離機で（３０００Ｇ）清澄化した。濃縮は減圧濃縮を行い、アルコールを除去しながら、固形分６０％まで濃縮を行い、１９．６Kgの濃縮液ペーストを得た。
【００２６】
ＥＳＲ法によりスーパーオキサイドとＯＨ−ラジカルの消去する力を測定したところ、スーパーオキサイド消去活性値は、６６８００unit／ｇ（ビタミンＣ比：０．３９４）、ＯＨ−ラジカル消去率は９４％（ビタミンＣ比：７６％）であった。（図１、２参照）。更に、ＴＢＡ法ではα−トコフェロールの酸化度を０％とした時の比較値で７．０％（図３参照）であった。またＨＰＴＬＣ法では、その抗酸化力をビタミンＥと比較したところ０．５０倍であった（図４参照）。
【００２７】
【実施例５】
赤ブドウジュース製造時に発生する圧搾汁粕の果皮（品種：メルロー種）９００kgを１５００kgの水（水道水、蒸留水、イオン交換水など）と混合し、４０℃で１６時間放置した。放置後、振動振るいを使用して果皮と抽出液とを分離した。分離された果皮は、フィルタープレスを使用して圧搾し、分離液は、前述の抽出液と混合した。この混合液を遠心分離に掛け（３０００Ｇ）清澄化した。濃縮は減圧濃縮を行い、固形分６０％まで濃縮を行い、１９６．４kgの濃縮液ペーストを得た。
【００２８】
この濃縮液をＥＳＲによる、活性酸素のスーパーオキサイドとＯＨ  ラジカルを消去する力価を測定するＥＳＲ法、ＴＢＡ法、ＨＰＴＬＣ−α−メチル・インドール法の４つの測定方法により抗酸化性を測定し評価した。ＥＳＲ法とは、電子スピン共鳴法で、不対電子を持つ試料を磁場の中に置き、マイクロ波を照射して共鳴現象による電磁波の吸収を測定する方法で、ＳＯＤ（スーパーオキサイドディスムターゼ）の活性が、ＥＳＲ法で測定できることの発見以来、スピントラップ剤を用いてのスーパーオキサイドを容易に測定できる事から、最近では抗酸化能の測定に利用されている方法である。このＥＳＲ法によりスーパーオキサイドとＯＨ  ラジカルを消去する能力を測定した。コントロールとしては両者とも代表的水溶性抗酸化剤であるビタミンＣを用いている。ＥＳＲ法による濃縮液の抗酸化能力は、スーパーオキサイド消去活性値が１０２７４４unit/g（ビタミンＣ比：０．６０６）であり（図５参照）、ＯＨ  ラジカル消去率が８４％であった（図２参照）。ＴＢＡ法とは、金属触媒による活性酸素生成系で試料とデオキシリボースを混合し反応させ、デオキシリボースが酸化的損傷を受けることによって発生するマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）の量を測定する方法で、α−トコフェロールを試料とした時の酸化度を０％とした比較値で抗酸化能を表すものであり、この方法により濃縮液のデオキシリボースの過酸化抑制する力を測定したところ、α−トコフェロールの酸化度を０％とした時の比較値で、２３％であった（図７参照）、又、ＨＰＴＬＣ−α−メチル・インドール法（以下ＨＰＴＬＣ法とする）とは、試料を非常に酸化されやすい油脂であるリノレイン酸と混合し加熱することにより生じる過酸化脂質の量を測定する方法で、この過酸化脂質の量を１００とした場合、その５０％を抑制するだけの試料の濃度（g/ml）を算出して、その物質の抗酸化能とする方法で、この方法により試料の抗酸化能が数値化され、ビタミンＥなどを指標に各試料の比較ができる。この方法により、濃縮液の抗酸化力をビタミンＥと比較したところ、１．０４倍であった（図８参照）。
【００２９】
【実施例６】
ワイン発酵終了後の圧縮搾汁粕の果皮（品種：メルロー種）を粉砕機で粉砕し、ペースト状にした。このペースト６００kgを水（水道水、蒸留水、イオン交換水など）１５００kgと混合し、４０℃で１６時間撹拌抽出した。脱水機を使用してペースト状の果皮と抽出液とを分離した。抽出液は、遠心分離に掛け（３０００Ｇ）清澄化した。濃縮は減圧濃縮を行い、固形分６０％まで濃縮を行い、３６．５kgの濃縮液ペーストを得た。
【００３０】
前述のＥＳＲ法によるスーパーオキサイドとＯＨ  ラジカルの消去する力価を測定したところ、スーパーオキサイド消去活性値は３３５７５unit/g（ビタミンＣ比：０．１９８）、ＯＨ  ラジカル消去率は７０％（ビタミンＣで６２％）であった（図５、６参照）。更に、ＴＢＡ法では、α−トコフェロールの酸化度を０％とした時の比較値で１１％（図７参照）、ＨＰＴＬＣ−α−メチル・インドール法では、その抗酸化力をビタミンＥと比較したところ、１．１６倍であった（図８参照）。
【００３１】
【実施例７】
白ブドウジュース製造時に生ずる圧縮搾汁粕の果皮（品種：甲州種）１００kgを水（水道水、蒸留水、イオン交換水など）５００kg混合し、３０℃で２４時間放置した。放置後、振動振るいを使用して果皮と抽出液とを分離した。分離された果皮は、フィルタープレスを使用して圧搾し、分離液は、前述の抽出液と混合した。この混合液を遠心分離に掛け（３０００Ｇ）清澄化した。濃縮は減圧濃縮を行い、アルコールを除去しながら、固形分６０％まで濃縮を行い、１２．５kgの濃縮液ペーストを得た。
【００３２】
ＥＳＲ法により、スーパーオキサイドとＯＨ  ラジカルの消去する力価を測定したところ、スーパーオキサイド消去活性値は９２０６unit/g（ビタミンＣ比：０．０５１）、ＯＨ  ラジカル消去率は７０％（ビタミンＣで６２％）であった（図５、６参照）。更に、ＴＢＡ法ではα−トコフェロールの酸化度を０％とした時の比較値で１９．８％（図７参照）、ＨＰＴＬＣ−α−メチル・インドール法では、その抗酸化力をビタミンＥと比較したところ、０．２９６倍であった（図８参照）。
【００３３】
【実施例８】
ワイン発酵終了時に発生する果皮（品種：メルロー種）１００kgを圧偏ロールにより粉砕し、水（水道水、蒸留水、イオン交換水など）５００kg混合し、４０℃で５時間放置した。放置後、振動振るいを使用して果皮と抽出液とを分離した。分離された果皮は、フィルタープレスを使用して圧搾し、分離液は、前述の抽出液と混合した。この混合液を遠心分離に掛け（３０００Ｇ）清澄化した。濃縮は減圧濃縮を行い、固形分６０％まで濃縮を行い、１５．５kgの濃縮液ペーストを得た。
【００３４】
ＥＳＲ法により、スーパーオキサイドとＯＨ  ラジカルの消去する力価を測定したところ、スーパーオキサイド消去活性値は６０１２０unit/g（ビタミンＣ比０．３５５）、ＯＨ  ラジカル消去率は８３％（ビタミンＣ値６７％）であった（図５、６参照）。更に、ＴＢＡ法ではα−トコフェロールの酸化度を０％とした時の比較値で１５．０％（図７参照）、ＨＰＴＬＣ−α−メチル・インドール法では、その抗酸化力をビタミンＥと比較したところ、０．３６倍であった（図８参照）。
【００３５】
【発明の効果】
この発明は、抗酸化物質がぶどうの圧縮搾汁粕の果皮から得られ、未利用の資源の活用という事において新たな用途を開発するものであり、得られた抗酸化物質は安全且つ安価な抗酸化剤とし、食品用の天然抗酸化剤として利用され、産業上著しく貢献するものである。
【図面の簡単な説明】
【図１】この発明の抗酸化剤とビタミンＣ等とのＥＳＲ法によるスーパーオキサイド消去能を示す力価の比較グラフ。
【図２】同じくＯＨ−ラジカル消去率を示す比較グラフ。
【図３】同じくＴＢＡ法による抗酸化性を示す力価の比較グラフ。
【図４】同じくＨＰＴＬＣ法による抗酸化性を示す力価の比較グラフ。
【図５】この発明の水抽出における抗酸化剤とビタミンＣ等とのＥＳＲ法によるスーパーオキサイド消去能を示す力価の比較グラフ。
【図６】同じくＯＨ−ラジカル消去率を示す比較グラフ。
【図７】同じくＴＢＡ法による抗酸化性を示す力価の比較グラフ。
【図８】同じくＨＰＴＬＣ法による抗酸化性を示す力価の比較グラフ。
【図１】
0003561885.tif 000002
【図２】
0003561885.tif 000003
【図３】
0003561885.tif 000004
【図４】
0003561885.tif 000005
【図５】
0003561885.tif 000006
【図６】
0003561885.tif 000007
【図７】
0003561885.tif 000008
【図８】
0003561885.tif 000009