(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）：
【化１】
0003575686.tif 000020
（式中、
Ｘはハロゲン原子を表し；
Ｂは互いに独立して、ハロゲン原子、ヒドロキシル基または１乃至６個の炭素原子を有するカルボキシレート基を表し；および
Ａは基−ＮＨ２−Ｒ（ここで、Ｒはそれぞれ１乃至４個の炭素原子を有する１つまたは２つのアルキル基によって三環式の環に任意に置換されていてもよい１０乃至１４個の炭素原子を有する三環式炭化水素部分である）を表す）の酸化数ＩＶの白金錯体。
【請求項２】
下記式（Ｉ）：
【化２】
0003575686.tif 000021
（式中、
Ｘはハロゲン原子を表し；
Ｂは互いに独立して、ハロゲン原子、ヒドロキシル基または１乃至６個の炭素原子を有するカルボキシレート基を表し；および
Ａは基−ＮＨ２−Ｒ（ここで、Ｒはそれぞれ１乃至４個の炭素原子を有する１つまたは２つのアルキル基によって三環式の環に任意に置換されていてもよい１０乃至１４個の炭素原子を有する三環式炭化水素部分である）を表す）の酸化数ＩＶの白金錯体と、１乃至６個の炭素原子を有するヒドロキシアルキル基によって任意に置換されていてもよいβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体。
【請求項３】
Ａがアダマンチルアミノ基を表し、およびＸおよびＢが請求項１に定義した意味を有する式（Ｉ）の請求項１記載の錯体。
【請求項４】
Ａが３，５−ジメチルアダマンチルアミノ基を表し、およびＸおよびＢが請求項１に定義した意味を有する式（Ｉ）の請求項１記載の錯体。
【請求項５】
請求項１記載の式（Ｉ）の白金錯体の製造方法において、下記式（ＩＩ）；
【化３】
0003575686.tif 000022
（式中、ＸおよびＡは請求項１で定義した意味を有する）の二価白金の錯体を白金原子において過酸化水素によって酸化して白金（ＩＶ）ジヒドロオキソ錯体を生成させ、そして場合によっては、当該錯体のヒドロキシ基をアシル化剤の作用によりカルボキシレート基で置換することを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項２記載の１乃至６個の炭素原子を有するヒドロキシアルキル基によって任意に置換されていてもよいβ−またはγ−シクロデキストリンと式（Ｉ）の白金錯体との包接錯体の製造方法において、有機溶剤中式（Ｉ）の白金錯体の溶液、および１乃至６個の炭素原子を有するヒドロキシアルキル基によって任意に置換されているβ−またはγ−シクロデキストリンの水溶液を混合し、その後得られた溶液から溶剤を蒸発させることを特徴とする方法。
【請求項７】
薬剤として使用するための請求項１または２記載の式（Ｉ）の白金錯体または当該白金錯体とβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体。
【請求項８】
有効成分として少なくとも１種の請求項１または２記載の式（Ｉ）の白金錯体または当該白金錯体とβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体、および少なくとも１種の薬物学的賦形剤を含有することを特徴とする腫瘍性疾患を治療するための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の分野】
本発明は腫瘍性疾患の治療のため医薬の分野で有用な新規な白金錯体に関する。本発明はさらにこの錯体の製造方法、薬剤としてのこの錯体の用法ならびに有効成分としてこの白金錯体を含有する医薬組成物に関する。
【０００２】
【発明の背景】
今世紀の７０年代の終わり頃までに細胞増殖抑制剤として有効な白金錯体が医薬の実用の分野に導入されてきた。白金錯体をベースとした最初の薬物学的製品はシスプラチン（シス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ））であった。この錯体をさらに発展させている間に数十の白金錯体が合成され試験された。これらのうち、カルボプラチンが腫瘍学において最大の重要性を得た物質となった。しかしながら、これらの化合物はいずれも非経口的によってのみ投与されねばならず、経口投与には適さないものであった。経口投与に関する限りにおいては、ＥＰ３２８２７４号および４２３７０７号明細書に開示されているようないくつかの四価白金の錯体が適することが示されている。これらの四価白金の錯体は、４つのハロゲンまたはカルボキシレート配位子のほかに、２つの塩基性の非対称基を有しており、その一方はアンミンそして他方は置換アルキル−またはシクロアルキルアミンである。
【０００３】
現在においても、公知の白金錯体と比較してより高度の抗腫瘍効果を示す白金錯体がいぜんとして探究されている。
【０００４】
今回、本発明によって、従来技術の白金錯体と比較してより高度の抗腫瘍効能を示すある種の新規な白金錯体が発見された。これら新規な錯体は本発明の基礎をなすものである。
【０００５】
本発明の１つの様相によれば、下記式（Ｉ）：
【化４】
0003575686.tif 000002
（式中、
Ｘはハロゲン原子を表し；
Ｂは互いに独立して、ハロゲン原子、ヒドロキシル基または１乃至６個の炭素原子を有するカルボキシレート基を表し；および
Ａは基−ＮＨ２−Ｒ（ここで、Ｒはそれぞれ１乃至４個の炭素原子を有する１つまたは２つのアルキル基によって三環式の環に任意に置換されていてもよい１０乃至１４個の炭素原子を有する三環式炭化水素部分である）を表す）の白金錯体が提供される。
本発明の第２の様相によれば、下記式（Ｉ）：
【化５】
0003575686.tif 000003
（式中、
Ｘはハロゲン原子を表し；
Ｂは互いに独立して、ハロゲン原子、ヒドロキシル基または１乃至６個の炭素原子を有するカルボキシレート基を表し；および
Ａは基−ＮＨ２−Ｒ（ここで、Ｒはそれぞれ１乃至４個の炭素原子を有する１つまたは２つのアルキル基によって三環式の環に任意に置換されていてもよい１０乃至１４個の炭素原子を有する三環式炭化水素部分である）を表す）の酸化数ＩＶの白金錯体と、１乃至６個の炭素原子を有するヒドロキシルアルキル基によって任意に置換されていてもよいβ−またはγ−シクロデキストリンとの包接錯体が提供される。
【０００６】
特に有利な本発明の白金錯体は、式中のＡがアダマンチルアミノ基を表しおよびＸおよびＢが上記に定義した意味を有する式（Ｉ）の錯体、およびさらに、上記のごとく任意に置換されていてもよいβ−またはγ−シクロデキストリンを含む上記白金錯体の包接錯体である。
【０００７】
別の有利な本発明の白金錯体は、式中のＡが３，５−ジメチルアダマンチルアミノ基を表しおよびＸおよびＢが上記に定義した意味を有する式（Ｉ）の錯体、およびさらに、上記のごとく任意に置換されていてもよいβ−またはγ−シクロデキストリンを含む上記白金錯体の包接錯体である。
【０００８】
本願のいま１つの様相によれば、上記式（Ｉ）の白金錯体の製造方法が提供され、その方法は下記式（ＩＩ）：
【化４】
0003575686.tif 000004
（式中、ＸおよびＡは上記に定義した意味を有する）の二価白金の錯体を白金原子において過酸化水素によって酸化して白金（ＩＶ）ジヒドロオキソ錯体を生成させ、そして場合によってはこの錯体のヒドロキシ基をアシル化剤の作用によりカルボキシレート基で置換することを特徴とする。
【０００９】
さらに本発明は、１乃至６個の炭素原子を有するヒドロキシアルキル基によって任意に置換されていてもよいβ−またはγ−シクロデキストリンを含む式（Ｉ）の白金錯体の包接錯体の製造方法を提供し、その方法は、有機溶剤中式（Ｉ）の白金錯体の溶液、１乃至６個の炭素原子を有するヒドロキシアルキル基によって任意に置換されているβ−またはγ−シクロデキストリンの水溶液を混合し、そのあと得られた溶液から溶剤を蒸発させることを特徴とする。
【００１０】
本願のさらにいま１つの様相は、上記式（Ｉ）の白金錯体またはそのβ−またはγ−シクロデキストリンを含む包接錯体を薬剤として使用することである。
【００１１】
最後に、本願発明は、有効成分として少なくとも１種の上記の式（Ｉ）の白金錯体または上記のように任意に置換されてもよいβ−またはγ−シクロデキストリンを含む包接錯体、および少なくとも１種の薬物学的賦形剤を含有することを特徴とする腫瘍性疾患を治療するための医薬組成物を提供する。
【００１２】
本発明の白金錯体は新規な化学的化合物であり、今までこれら化合物が従来技術の文献いずれに特定的に開示されたことはまったくない。また、それら化合物の特性が特定化されたこともなく、それらの製造方法が開示されたこともない。腫瘍性疾患の治療のための活性物質としてのこれら化合物の有用性も同じく新規である。なぜならば、四価白金錯体内の三環式第一アミン配位子の存在によって本新規化合物の抗腫瘍作用の根本的増強が導かれるであろうことは公知の従来技術から容易に想到することが不可能であったからである。
【００１３】
従来公知の白金錯体、すなわち、欧州特許ＥＰ３２８２７４およびＥＰ４２３７０７号明細書に開示されている白金錯体と比較した本発明の白金錯体の主たる利点は、経口投与での効果が高くかつ毒性が低いということのみならず、抗腫瘍作用のスペクトルが広いということである。
【００１４】
以下、本発明を具体的な例によってさらに詳細に説明する。これらの例は説明のために記載されるものであって、本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。本発明の範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定されるものである。
【００１５】
実施例１
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（以下”ＬＡ−１２”という）［（ＯＣ−６−４３）−ビス（アセテート）（１−アダマンタンアミン）アンミンジクロロ白金（ＩＶ）］の合成
ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ−ａｆ−ジヒドロオキソ白金（ＩＶ）錯体  ［（ＯＣ−６−４３）−（１−アダマンタンアミン）アンミンジクロロジヒドロオキソ白金（ＩＶ）］  ６．２５ｇ（１３．３ミリモル）を室温で過剰の無水酢酸（５０．２ｍｌ、５３２ミリモル）と共に攪拌した。攪拌中に元の溶液から固体が連続的に沈殿する。沈殿終了後、固体を濾別して少量の無水酢酸とエーテルで洗浄した。真空乾燥機で乾燥後、標記生成物４．２８ｇ（５８．２％）を得た。
【００１６】
得られた生成物を１Ｈおよび１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルおよび赤外線スペクトルによって同定し、その純度を高性能液体クロマトグラフィーによって決定した。
Ｃ１４Ｈ２６Ｃｌ２Ｎ２ Ｏ４ Ｐｔ に対する生成物の元素分析：
0003575686.tif 000005
【００１７】
実施例２
ａｆ−ビス（ アセテート）−ｂ−（１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（以下”ＬＡ−１５”という）［（ＯＣ−６−４３）−ビス（アセテート）（１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン）アンミンジクロロ白金（ＩＶ）］の合成
ｂ−（ １−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ−ａｆ−ジヒドロオキソ白金（ＩＶ）錯体  ［（ＯＣ−６−４３）−（１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン）アンミンジクロロジヒドロオキソ白金（ＩＶ）］  ０．９６ｇ（１．９３ミリモル）を室温で過剰の無水酢酸（８ｍｌ、８４．７ミリモル）と共に攪拌した。溶解後、この反応混合物にエーテル１０ｍｌを添加した。沈殿の形成が終了するまで攪拌を続けた。沈殿した固体を濾別し、エーテルで洗浄し、真空乾燥機で乾燥した。標記生成物０．７２ｇ（６４．３％）を得た。
【００１８】
得られた生成物を１Ｈおよび１３Ｃ核磁気共鳴スペクトルおよび赤外線スペクトルによって同定し、その純度を高性能液体クロマトグラフィーによって決定した。
Ｃ１６Ｈ３０Ｃｌ２Ｎ２ Ｏ４ Ｐｔ に対する生成物の元素分析：
0003575686.tif 000006
【００１９】
実施例２ａ
ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ−ａｆ−ジヒドロオキソ白金（ＩＶ）錯体（以下ＬＡ−１１という）の合成
シス−（ １−アダマンチルアミン）−アンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体８．０１ｇ（１８．４４モル）を室温で水１２０ｍｌに懸濁した。この懸濁物に過酸化水素の３０％（ｗ／ｗ） 水溶液の化学量論的過剰量（２０ｍｌ）を添加し、この反応混合物を８０℃で１時間加熱し、次いで室温まで冷却した。固体を濾別し、水で洗浄し、軽く乾燥した。総量１５０ｍｌのジメチルホルムアミドで生成物を抽出して洗浄した。ジメチルホルムアミドの残分をエーテルで洗って除去した。このあと、真空乾燥機で乾燥した。乾燥後の収量は６．４５ｇすなわち理論値の７４．６％（出発白金（ＩＩ）錯体に関して）であった。
【００２０】
生成物を赤外線スペクトル分析によって同定し、その純度を高性能液体クロマトグラフィーによって決定した。
得られた生成物の元素分析（Ｃ１０Ｈ２２Ｃｌ２Ｎ２ Ｏ２ Ｐｔ に対する）
0003575686.tif 000007
【００２１】
実施例３
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含む化合物ＬＡ−１２の包接錯体（以下”ＬＡ−１２の包接薬剤形”という）の合成
化合物ＬＡ−１２をアセトンに最終濃度が２０ｇ／ｌ となるように溶解させた。得られた溶液にヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（１６４ｇ／ｌ ）を添加した。この混合物に室温で攪拌しながら ｐＨ７．３の１００ミリモルＨｅｐｅｓの緩衝水性相をゆっくりと、アセトンと水性相の最終容積比が１：１０となるまで添加した。水性相の最初の数添加（水性相の全量の１０％まで）の後では未溶解のシクロデキストリンが急速に溶解した。最後に、包接錯体の溶液から凍結乾燥によってアセトンと水を除去した。
【００２２】
本発明の化合物の抗腫瘍作用のスクリーニングは次のような実験的腫瘍を有するマウスのような動物に対するインビボ動物実験で本化合物を試験することによって、すなわちＶ． Ｊｅｌｉｎｅｋの方法（Ｎｅｏｐｌａｓｍａ １２，４６９（１９６５），同書． ７，１４６（１９６０） ）によって実施した：ＤＢＡ２マウスに増殖させた腹水型（ＩＰ−Ｌ１２１０）または固体型（ＳＣ−Ｌ１２１０）の白血病Ｌ１２１０、Ｃ３Ｈマウスに増殖させた固体型および腹水型（ＬｓＧ）ガードナー（Ｇａｒｄｎｅｒ） リンパ肉腫、ＮＭＲＩマウスに増殖させた固体型（ＳＴＥ） および腹水型（ＡＴＥ） エーリッヒ（Ｅｈｒｌｉｃｈ） 腫、ＤＢＡＩマウスに増殖させた腫瘍ＭＣ２１１１（ 移植可能な乳腺ガン）、Ｃ５７Ｂ１６マウスに増殖させた固体型および腹水型（ＳＣ−Ｂ１６、 ＩＰ−Ｂ１６） 転移性色素ガン、およびＣ５７Ｂ１６マウスに増殖させたルイス（Ｌｅｗｉｓ） 転移性肺ガン（ＬＬ） 。
【００２３】
Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ−検定により評価されるポイント評価のほかに、生存時間および最適投与量をＣｏｘ の比例リスクモデルおよびＣａｒｔｅｒの方法（ Ｃａｒｔｅｒ Ｗ． Ｈ． ｅｔ ａｌ．：Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４２，２９６３（１９８２） ）によって評価した。この計算方式によって描かれた作用曲線から最適投与量の計算と毒性投与量の推定が可能となる。この方法によれば単一療法における効果の評価が可能になるばかりでなく、組合せ療法の複数の成分の全毒性と影響の評価も可能になる。したがって、いくつかの実施例では、この方法によって投与量と作用の間の依存性がモデル化されそして評価された。
【００２４】
本発明の目的において、「治療」という用語は腫瘍を有する生物学的対象の病気の特徴的症候および症状の抑制、すなわち、腫瘍増殖の抑制と生物学的対象の生存時間減少の抑制を意味する。腫瘍の増殖は臨床的ならびにインビボ実験すなわち実験動物に対する実験の両方で観察できる。腫瘍の増殖の判定は腫瘍組織の重さを量ることによって、あるいは、腫瘍のサイズを測定することによって行うことができる。
【００２５】
本発明の化合物のＣ３Ｈ種メスマウスにおける好ましい治療効果が、固体型ガードナーリンパ腫（ＳＣ−ＬｓＧ） を有するマウス、ＳＴＥ、 ＳＣ−Ｂ１６、 ＳＣ−ＬＬおよびＭＣ２１１１の腫瘍を有するマウスの腫瘍の重量がこの薬剤グループの化合物の経口投与により減少することによって証明された。対照、すなわち未処置グループと比較して、腫瘍の平均質量の統計的に有意な（ｐ ≦ ０．０５）あるいはかなり有意な（ｐ ≦ ０．０１）減少が明らかに立証された。
【００２６】
同様に、本発明の化合物は適当な生物学的対象、たとえば、ＩＰ−Ｌ１２１０、ＭＣ２１１、ＳＣ−Ｌ１２１０、 ＩＰ−ＬｓＧおよび ＡＴＥの腫瘍を有するマウス、さらには、さほどではないがＩＰ−Ｂ１６やＩＰ−ＬｓＧの腫瘍を有するマウスでも、経口投与で生存時間を延長させる。上記の使用した試験方式の状態は致死であるから、本発明の化合物の抗腫瘍効果は未処置対照動物と処置動物（これはより長く生存する）の生存時間を比較することによって示すことができる。典型的実験（実施例参照）においては、１つの実験グループは通常１０匹の動物からなり、処置グループは対照すなわち未処置グループよりも統計的に有意な程度までより長く生存した。
【００２７】
その抗腫瘍作用を利用するためには、本化合物は適当な生物学的対象すなわち哺乳動物に、適当な投与形態でかつ常用投与法で投与することができる。本化合物は単独でそのまま投与することができるし、また、有利には有効成分として、適当な非毒性の薬物学的キャリヤーと一緒に、水、緩衝液、生理学的食塩水に溶解または懸濁して、あるいはメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールなどに溶解した溶液の形で投与することができる。経口投与が最も有利な投与法である。最適投与量は処置されるべき腫瘍の種類、処置を受ける生物学的対象の種類、その体重および／または体面積、腫瘍の部位、その形態学的タイプ、投与処方などに依存する。実施した生物学的実験から、経口投与されたＬＡ−１２のただ一回の有効投与量はＩＰ−Ｌ１２１０ の場合わずか１０ｍｇ／Ｋｇ（３０ｍｇ／ｍ２）であり、他方ＬＡ−２（下記参照）はこの投与量ではまったく効果を示さないことが明らかになっている。また、ＬＡ−１２の典型的投与法である間欠投与（１日目、４日目、９日目）の場合では、白血病Ｌ１２１０を有するＤＢＡ２マウスに対する最適投与量は２２．９ｍｇ／Ｋｇ ｐ．ｏ． ｘ３（６８．７ｍｇ／ｍ２ ｘ ３）であり、連続投与（１日目から９日目まで）の場合では、同じマウスに対する最適投与量は９．６ｍｇ／Ｋｇ ｐ．ｏ． ｘ９（２８．８ｍｇ／ｍ２ ｘ ９）であることが判明している。
【００２８】
本発明の化合物の毒性は低く、ＮＭＲＩマウスにおけるＬＤ５０値は約６００ｍｇ／Ｋｇ ｐ．ｏ．以上であることがわかる。
【００２９】
哺乳動物の器官に対してまったく毒性のない投与量で有用な治療学的効果が期待できる。実施した生物学的試験によれば、３０ｍｇ／ｍ２ のレベルでヒトに対する許容可能かつ有効な単一経口投与ができるものと期待できる。
【００３０】
本発明の化合物の抗腫瘍作用を立証する以下の実施例では、参考として次の従来技術の化合物を使用した：
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体  ［（ＯＣ−６−４３）−ビス（アセテート）アンミンジクロロ（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）］（ＪＭ２１６、 Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｅｎｔｒｅ，  Ｒｅａｆｉｎｇ，  Ｂｅｒｋｓｈｉｒｅ， Ｇｒｅａｔ Ｂｒｉｔａｉｎ， Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．， １９９３） 、この化合物を以下化合物「ＬＡ−２」という、および、シス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体、この化合物は医薬製剤であるＰｌａｔｉｄｉａｍ １０の活性物質である。
【００３１】
実施例４
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（ １−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）の単回経口投与後のマウスにおける抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（ シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コードＪＭ２１６−Ｊｏｈｎｓｏｎ Ｍａｔｔｈｅｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｅｎｔｒｅ ．，”ＬＡ−２”）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ ＮＳＣ １１９８７５、 製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ ｉｎｊ． ｓｉｃｃ． の活性物質）との比較
体重約１８ｇのＤＢＡ２種のメスのマウス１５０匹を１４のグループ、すなわち、１つの対照グループ（２１匹）と１３の実験グループ（９〜１０匹）に分けた。すべての動物にＬ１２１０白血病からの腹水液の致死量を腹腔内に接種した。試験グループのうちの１０グループには、使用直前に特に調製された化合物ＬＡ−１２と化合物ＬＡ−２の水中懸濁物を投与した。それぞれの懸濁液はそれぞれ当該化合物を、懸濁液０．２乃至０．４ｍｌ中に、実験動物が腫瘍接種後１日目にそれぞれ１６０ｍｇ／Ｋｇ、８０ｍｇ／Ｋｇ、４０ｍｇ／Ｋｇ、２０ｍｇ／Ｋｇ、１０ｍｇ／Ｋｇ の投与量を得るような量で含有していた。３つのグループには使用直前に凍結粉末を注射用水に溶解して調製された等張水溶液の形でＰＬＡＴＩＤＩＡＭ を皮下注射により投与した。これらの動物を観察して生存時間を決定した。生存時間の数値が投与量に依存する依存性を対照グループと比較して評価した。生物学的応答として各１つの評価時間ポイントを、時間値の分布の対数／正規の特性の仮定ならびに起こり得る未知数散在の仮定（Ｒｏｔｈ ｅｔ ａｌ．，１９６２）のもとに、２つの平均値の等価試験（Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ−検定） によって評価した。生存時間のそれら各１つの数値から幾何平均値を計算した。その差が５％の有意レベルで臨界値を超えた試験評価の平均値を統計学的に有意なものとして評価した。
【００３２】
ＬＡ−１２で処置した動物は１０ｍｇ／Ｋｇ ｐ．ｏ．の投与量グループで未処置対照グループと比較して、生存時間の平均値が統計学的に有意（ｔ−検定，ｐ≦０．０５） な高い、すなわち５５％高い数値を示した。Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は５ｍｇ／Ｋｇ ｓ．ｃ．の投与量で対照に比較して生存時間の平均値を３２％まで増加させた。しかし数値のこの差は対照グループと比較して統計学的に有意ではなかった。ＬＡ−２では効果はまったく認められなかった。
【００３３】
結果を次の表にまとめて示す：
表１
白血病Ｌ１２１０を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２およびＬＡ−１２の抗腫瘍効果
マウスＤＢＡ２、メス、体重１６．６乃至１９．１ｇ。１０６ 腫瘍細胞の腹腔内接種により腫瘍を移植。移植後１日目に治療開始（１ｘｐ．ｏ．，ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １ ｘ ｓ．ｃ．１日目）。
表には、それぞれの投与量について、生存時間の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する幾何平均の信頼区間および対照グループの平均生存時間のパーセントとしての平均生存時間の相対値を記載する。
【表１】
0003575686.tif 000008
【００３４】
実施例５
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（ １−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）の間欠経口投与後のマウスにおける抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コード ＪＭ２１６”ＬＡ−２”−Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９３）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ＮＳＣ １１９８７５、製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ｉｎｊ． ｓｉｃｃ．の製剤の活性物質）との比較
白血病Ｌ１２１０を有する動物に対する前記と同様な動物実験において、化合物（Ｉ）（Ａ＝アダマンチルアミン、ＬＡ−１２）を一日３回に分けて、すなわち接種後１日目、４日目および９日目にくり返し投与した。同じ処方でＬＡ−２ ｐ．ｏ． およびＰｌａｔｉｄｉａｍ ｓ．ｃ．も投与した。
観察の結果、ＬＡ−１２で処置した動物は未処置対照グループと比較して４ｍｇ／Ｋｇ ／ 日 ｐ．ｏ． ｘ ３の投与量グループにおいて、統計学的に有意（ｔ−ｔｅｓｔ，ｐ≦０．０５） な高い（１４８％）生存時間の平均値を示した。他方、化合物ＬＡ−２は２倍もの投与量、すなわち８ｍｇ／Ｋｇ ／ 日 ｐ．ｏ． ｘ ３の投与量でようやく同程度の効果（１４８％）を示した。Ｃａｒｔｅｒの説に従って計算したＬＡ−１２の最適投与量はわずか４．５５ｍｇ／Ｋｇ ／ 日 ｐ．ｏ． ｘ ３であった。これに対してＬＡ−２の最適投与量は１０．９６ｍｇ／Ｋｇ ／ 日 ｐ．ｏ． ｘ ３、すなわち２倍以上であった。したがって、本発明の特定化合物は上記に引用した特許の代表的化合物よりもその最適治療処方において２倍以上の効果がある。
【００３５】
実験結果を次表にまとめて示す。
表２
白血病Ｌ１２１０を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２およびＬＡ−１２の抗腫瘍効果
マウスＤＢＡ２、メス、体重１９．８乃至２１．２ｇ。１０６ 腫瘍細胞の腹腔内接種により腫瘍を移植。移植後１日目に治療開始（３ｘｐ．ｏ．，ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ は３ｘ ｓ．ｃ．１日目、５日目および９日目）。
表には、それぞれの投与量について、生存時間の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する幾何平均の信頼区間および対照グループの平均生存時間のパーセントとしての平均生存時間の相対値を記載する。
【表２】
0003575686.tif 000009
【００３６】
実施例６
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）を白血病Ｌ１２１０を有するマウスに連続経口投与および間欠経口投与した場合の抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コード ＪＭ２１６”ＬＡ−２”−Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９３）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ ＮＳＣ １１９８７５、製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ ｉｎｊ． ｓｉｃｃ． の活性物質）との比較
実施例４および５と同様に白血病Ｌ１２１０を有するマウスに対して実施した動物実験において、化合物（Ｉ）（Ａ＝アダマンチルアミン、ＬＡ−１２）を接種後９日間、すなわち１日目から９日目まで毎日繰り返し投与し、さらにまた間欠的に１日目、４日目および９日目に投与した。ＬＡ−２も同様に投与した。投与は連続投与と間欠投与の両者が投与総量で同じになるよう経口で行った。Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は皮下注射により投与した。
【００３７】
化合物ＬＡ−１２は６ｍｇ／Ｋｇ／ ｐ．ｏ． ｘ９の投与量において対照グループと比較して生存時間の数値を統計学的に有意な程度まで、すなわち１３０％まで増加させた。そして８ｍｇ／Ｋｇ および４ｍｇ／Ｋｇ ｓ．ｃ．ｘ１の投与量のＰｌａｔｉｄｉａｍ と同程に効果があると評価した。化合物ＬＡ−２はいずれの投与量グループにおいても対照グループと比較して統計学的に有意な増加を示さず、したがって、抗腫瘍効果がないと評価される。
間欠的投与処方（接種後１日目、５日目および９日目）ではポイント評価によってはまったく効果が証明されなかった。
ＬＡ−１２の投与量／効果依存性の評価も結果は同じ総投与量では連続投与治療処方がより有利であることを示す。
実験結果を次表にまとめて示す。
【００３８】
表３
白血病Ｌ１２１０を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２およびＬＡ−１２の抗腫瘍効果；連続的投与処方と間欠的投与処方との比較
マウスＤＢＡ２、メス、体重１９．３乃至２１．４ｇ。１０６ 腫瘍細胞の腹腔内接種により腫瘍を移植。接種後１日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．１日目から９日目までと３ｘ１日目、５日目および９日目、ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ は１ｘ ｓ．ｃ．１日目）。
表には、それぞれの投与量について、生存時間の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する幾何平均の信頼区間および対照グループの平均生存時間のパーセントとしての平均生存時間の相対値を記載する。
【表３】
0003575686.tif 000010
【００３９】
実施例７
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）、ＬＡ−１２の包接薬剤形およびａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン、”ＬＡ−１５”）を白血病Ｌ１２１０を有するマウスに連続経口投与した場合の抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コード ＪＭ２１６，”ＬＡ−２” − Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９３）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ ＮＳＣ １１９８７５、  製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ ｉｎｊ． ｓｉｃｃ． の活性物質）との比較
実施例４、５および６と同様に白血病Ｌ１２１０を有するマウスに対して実施した動物実験において、化合物ＬＡ−１２、その化合物の新規な薬剤形および化合物ＬＡ−１５を接種後９日間、すなわち１日目から９日目まで毎日繰り返し投与し、またＬＡ−２ ｐ．ｏ． を同じ投与処方で投与した。Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は皮下注射により投与した。
化合物ＬＡ−１２、その包接薬剤形およびＬＡ−１５は対照グループと比較して生存時間の数値を統計学的に有意な程度まで、すなわち１３０％まで増加させそしてこれら化合物は４ｍｇ／Ｋｇ ｓ．ｃ．ｘ１投与のＰｌａｔｉｄｉａｍ （１２３％）および３ｍｇ／Ｋｇ／日 ｐ．ｏ． ｘ９投与のＬＡ−２（１１４％）と同程度に抗腫瘍効果があると評価された。
【００４０】
実験結果を次表にまとめて示す。
表４
白血病Ｌ１２１０を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２、ＬＡ−１２の新規薬剤形およびＬＡ−１５の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＤＢＡ２、メス、体重１８．０乃至１９．７ｇ。１．２．１０６ 腫瘍細胞の腹腔内接種により腫瘍を移植。接種植後１日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．  １日目から９日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘ ｓ．ｃ．  １日目）。
表には、それぞれの投与量について、生存時間の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する幾何平均の信頼区間および対照グループの平均生存時間のパーセントとしての平均生存時間の相対値を記載する。
【表４】
0003575686.tif 000011
【００４１】
実施例８
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）をＧａｒｄｎｅｒリンパ肉腫を有するマウスに単一経口投与した場合の抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コード ＪＭ２１６，”ＬＡ−２”−Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９３）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ ＮＳＣ １１９８７５、  製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ ｉｎｊ． ｓｉｃｃ．の活性物質）との比較
体重約２５ｇのＣ３Ｈ種のメスのマウス２００匹を１０グループ、すなわち、それぞれマウス２０匹を含む１つの対照グループと９つの実験グループに分けた。  これらすべての動物に致死量のＧａｒｄｎｅｒ リンパ肉腫症からの腫瘍ホモジネートを皮下注射により移植した。実験グループは使用直前に特に調製した化合物ＬＡ−１２とＬＡ−２の水中懸濁物で処置した。この懸濁物は腫瘍移植後５日目に実験動物がそれぞれ３２、８および２ｍｇ／Ｋｇ の投与量を得るような量で各化合物を０．２〜０．４ｍｌ中に含有していた。ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ は８、４、２ｍｇ／Ｋｇ ｓ．ｃ．の量で一回投与した。各投与量グループにおいて動物の半分は接種後１４日目にエーテル麻酔して殺し、身体から腫瘍を外科的に摘出した。各動物の腫瘍の質量を重量測定によって決定した。動物の残りの半分は生存時間を観察するため生存させた。
ＬＡ−１２で処置した動物は、３２ｍｇ／ｋｇの経口投与で、対照グループ（１００％）に比較して腫瘍の平均質量は統計学的に有意な（ｔ−ｔｅｓｔ， ｐ≦０．０５） 程度に低い（７７％）値を有することがわかった。従来技術のＬＡ−２では効果はまったく観察されなかった。
【００４２】
実験結果を次表にまとめて示す。
表５
固体型ガードナーリンパ肉腫を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２およびＬＡ−１２の抗腫瘍効果
マウスＣ３Ｈ、メス、体重２０．７乃至２８．３ｇ。腫瘍ホモジネート０．２ｍｌの皮下注射により腫瘍を移植。移植後５日目に治療開始（１ｘｐ．ｏ．、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ １ｘ ｓ．ｃ．５日目）。
表には、それぞれの投与量について、腫瘍質量の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する相加平均の信頼区間および対照グループの平均腫瘍質量のパーセントとしての平均腫瘍質量の相対値を記載する。
【表５】
0003575686.tif 000012
【００４３】
実施例９
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）を乳腺ガンＭＣ２１１１を有するマウスに反復連続経口投与した場合の抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コード ＪＭ２１６”ＬＡ−２”−Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９３ ）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ ＮＳＣ １１９８７５、 製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ ｉｎｊ． ｓｉｃｃ． の活性物質）との比較
体重約２０ｇのＤＢＡ１種のメスのマウス１３０匹を１２のグループ、すなわち、１つの対照グループとマウス各１０匹を含む１１の実験グループに分けた。これらのすべての動物に致死量の腫瘍ホモジネートを皮下注射により接種した。実験グループを使用直前に特に調製した化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２およびＬＡ−１５の水中懸濁物で処置した。この懸濁物は実験動物がそれぞれ１２、６および３ｍｇ／Ｋｇ／日ｐ．ｏ．ｘ９の投与量を得るような量で各化合物を０．２〜０．４ｍｌ中に含有していた。ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ は０．２ｍｌと０．４ｍｌ中８ｍｇ／Ｋｇ と４ｍｇ／Ｋｇ ｓ．ｃ．の投与量で接種後５日目一回与えられた。
【００４４】
対照グループの動物と各投与量グループの動物の体重を量りそして接種後１４日目に腫瘍のサイズを測定した。対照グループの動物の半分をエーテル麻酔して殺し、身体から腫瘍を外科的に摘出した。腫瘍質量のそのサイズに依る依存性を回帰分析によって評価した。各動物の腫瘍の質量はその回帰関数から決定された。腫瘍質量は２つの平均値の等価試験（Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ−ｔｅｓｔ） によるポイント評価の場合は質量値の分布の正規性の仮定および起こりうる未知数散在の仮定のもとに評価された。腫瘍質量の各１つの値から相加平均を計算した。５％の有意レベルにおいて試験評価の値が臨界値を超しているような平均値の差が統計学的に有意なものとして評価された。
【００４５】
使用投与量に依る生存時間の依存性を未処置対照と比較して評価した。この時間は白血病および腹水型腫瘍の場合と同様に評価された。すなわち、２つの平均値の等価試験（Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ−ｔｅｓｔ） によるポイント評価の場合は時間値の分布の対数／正規性の仮定および起こりうる未知数散在の仮定のもとに（ Ｒｏｔｈ Ｚ．， Ｊｏｓｉｆｋｏ Ｍ． Ｍａｌｙ Ｖ．，Ｔｒｃｋａ Ｖ．：Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｋｅ ｍｅｔｏｄｙ ｖ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｎｉ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ＳＺＮ Ｐｒａｇｕｅ １９６２， ｐ． ２７８）評価された。生存時間の各１つの値から幾何平均値を計算した。その差が５％の有意レベルにおいて臨界値を超過しているような試験評価の平均値が統計学的に有意なものとして評価された。
ＬＡ−１２で処置した動物は３ｍｇ／Ｋｇ／日 ｐ．ｏ． ｘ９の投与量において腫瘍の平均質量が統計学的に有意な（ｔ−ｔｅｓｔ， ｐ≦０．０５） 程度に小さい（８６％）値を有することがわかった。さらに、それら動物は未処置対照（１００％）と比較して、生存時間の平均値が統計学的に有意な（ｔ−ｔｅｓｔ， ｐ≦０．０５） より高い（１２８％）値を有することがわかった。試験された他の物質（Ｐｌａｔｉｄｉａｍ を除く）は生存時間のポイント評価が対照グループと比較して統計学的に有意な差を示さなかった。化合物ＬＡ−１２ならびにＰｌａｔｉｄｉａｍ は抗腫瘍効果があると評価された。従来技術のＬＡ−２には効果がまったく観察されなかった。
【００４６】
実験結果を次表にまとめて示す。
表６−１
固体型乳腺ガンＭＣ２１１１を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２およびＬＡ−１５の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＤＢＡ１、メス、体重２０．４乃至２１．８ｇ。１：１希釈率の腫瘍ホモジネート０．２ｍｌの皮下注射により腫瘍を接種。接種植後５日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．５日目から１３日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘ ｓ．ｃ． ５日目）。
表には、それぞれの投与量について、生存時間の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する幾何平均の信頼区間および対照グループの平均生存時間のパーセントとしての平均生存時間の相対値を記載する。
【表６】
0003575686.tif 000013
【００４７】
表６−２
固体型乳腺ガンＭＣ２１１１を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２およびＬＡ−１５の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＤＢＡ１、メス、体重２０．４乃至２１．８ｇ。１：１希釈率の腫瘍ホモジネート０．２ｍｌの皮下注射により腫瘍を接種。接種植後５日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．５日目から１３日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘ ｓ．ｃ． ５日目）。
【表７】
0003575686.tif 000014
表には、それぞれの投与量について、腫瘍質量の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する相加平均の信頼区間および対照グループの平均腫瘍質量のパーセントとしての平均腫瘍質量の相対値を記載する。
【００４８】
実施例１０
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）を腹水エーリッヒ腫瘍を有するマウスに反復連続経口投与した場合の抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コード ＪＭ２１６”ＬＡ−２”−Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９３）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ＮＳＣ １１９８７５、 製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ ｉｎｊ． ｓｉｃｃ． の活性物質）との比較
体重約２４ｇのＩＣＲ種のメスのマウス２００匹を１０グループ、すなわち、１つの対照グループとマウス各２０匹を含む９つの実験グループに分けた。これらのすべての動物に致死量のＡＴＥからの腹水を腹腔内注射により接種した。実験グループを使用直前に特に調製した化合物ＬＡ−１２およびＬＡ−２の水中懸濁物で処置した。この懸濁物は実験動物がそれぞれ１２、６および３ｍｇ／Ｋｇ／日ｐ．ｏ．ｘ９の投与量を得るような量で各化合物を０．２〜０．４ｍｌ中に含有していた。ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ は０．２ｍｌと０．４ｍｌ中８、４および２ｍｇ／Ｋｇ ｓ．ｃ．の投与量で接種後第一日目に一回与えた。各投与量グループの動物の半数は接種後１０日目にエーテル麻酔して殺し、そして開腹後腹水を吸引した。各動物の腫瘍の質量は腹水の吸引前と吸引後の質量差から決定した。残りの動物はそのまま生存させて生存時間を観察した。
【００４９】
処置した動物は未処置対照に比較して腫瘍の質量が小さい（表７−１）ことがわかった。しかし、未処置対照と比較して平均生存時間の増加が統計学的に十分有意（ｐ≦ ０．０１）であったのはＬＡ−１２の場合とＰｌａｔｉｄｉａｍ の場合だけであり、ＬＡ−２では見られなかった（表７−２）。
【００５０】
表７−１
腹水型エーリッヒ腫瘍（ＡＴＥ）を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２およびＬＡ−１２の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＩＣＲ、メス、体重２３．７乃至２５．４ｇ。腹水０．２ｍｌを腹腔内に注射して腫瘍を接種。接種植後１日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．１日目から９日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘｓ．ｃ．１日目）。
表には、それぞれの投与量について、腫瘍質量の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する相加平均の信頼区間および対照グループの平均腫瘍質量のパーセントとしての平均腫瘍質量の相対値を記載する。
【表８】
0003575686.tif 000015
【００５１】
表７−２
腹水型エーリッヒ腫瘍（ＡＴＥ）を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２およびＬＡ−１２の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＩＣＲ、メス、体重２３．７乃至２５．４ｇ。腹水０．２ｍｌを腹腔内に注射して腫瘍を接種。接種植後１日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．１日目から９日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘｓ．ｃ．１日目）。
表には、それぞれの投与量について、生存時間の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する幾何平均の信頼区間および対照グループの平均生存時間のパーセントとしての平均生存時間の相対値を記載する。
【表９】
0003575686.tif 000016
【００５２】
実施例１１
ａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アダマンチルアミン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体（化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アダマンチルアミン、”ＬＡ−１２”）、ＬＡ−１２の包接薬剤形およびａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−（１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン）−ｃ−アンミン−ｄｅ−ジクロロ白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝１−アミノ−３，５−ジメチルアダマンタン、”ＬＡ−１５”）をＡＴＥ罹患マウスに連続および間欠経口投与した場合の抗腫瘍作用ならびにａｆ−ビス（アセテート）−ｂ−アンミン−ｃｄ−ジクロロ−ｅ−（シクロヘキシルアミン）白金（ＩＶ）錯体 （化合物（Ｉ）、Ａ＝シクロヘキシルアミン、コード ＪＭ２１６”ＬＡ−２”−Ｋｅｌｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，１９９３ ）およびシス−ジアンミン−ジクロロ白金（ＩＩ）錯体（ ＮＳＣ １１９８７５、製剤ＰＬＡＴＩＤＩＡＭ １０ ｉｎｊ． ｓｉｃｃ． の活性物質）との比較
実施例１０と同様にＡＴＥ罹患マウスに対して実施した動物実験において、化合物ＬＡ−１２、その化合物の包接薬剤形および化合物ＬＡ−１５を、接種後９日間、すなわち１日目から９日目まで毎日繰り返し投与した。また、ＬＡ−２ｐ．ｏ．を同じ投与処方で投与した。Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は皮下注射により投与した。
【００５３】
投与終了後、各投与グループの動物の半数を接種後１０日目にエーテル麻酔して殺し、開腹術のあと腹水を吸引した。各動物の腫瘍の質量を腹水の吸引前と吸引後の質量差から決定した。各１匹の動物の腹水中のＡｓｃｉｔｏｃｒｉｔを長さ７５ｍｍのヘパリン処理された毛細管内でのマイクロヘマトクリット遠心分離により測定した。腹水中の細胞の質量に相当する”ｔｏｔａｌ ａｓｃｉｔｏｃｒｉｔ” の数値をａｓｃｉｔｏｃｒｉｔのパーセントと腫瘍質量から決定した。残りの動物はそのまま生かして生存時間を観察した。これらの動物において、生存時間を日基準でモニターした。使用投与量に依る生存時間の依存性が対照グループと比較して評価された。
【００５４】
生物学的応答としてそれぞれ１つの評価時間ポイントを２つの平均値の等価試験（Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ−ｔｅｓｔ） により評価した。これらの生存時間の各１つの値から幾何平均を計算した。相加平均を腫瘍質量および全ａｓｃｉｔｏｃｒｉｔの単一値から計算した。平均値間の差が、質量値ならびにｔｏｔａｌ ａｓｃｉｔｏｃｒｉｔ値の正規確率分布および時間値の対数／正規分布の仮定のもとにそしてすべて起こり得る未知数散在の仮定のもとに、２つの平均値の等価試験（Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ−ｔｅｓｔ ）によって評価された。５％および１％の有意レベルにおいて試験評価の値が臨界値を超しているような平均値の差がそれぞれ統計学的に有意なものおよび大いに統計学的に有意なものとして評価された。
【００５５】
最適投与量はＣｏｘの比例リスクモデル（Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．， １９８２ ） によって生存時間の数値から計算した。実験データからの基本および修正生存関数の推定のためには、予備データのＷｅｉｎｂｕｌｌ分布と対数変換のパラメータを使用した。
化合物ＬＡ−１２の包接薬剤形は対照グループと比較して生存時間の数値を統計学的に有意な大きさで増加させ、８ｍｇ／Ｋｇ と４ｍｇ／Ｋｇ ｓ．ｃ．ｘ１の投与量のＰｌａｔｉｄｉａｍ と同程度に抗腫瘍効果があると評価された。化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２およびＬＡ−１５は対照グループと比較して統計学的に有意なほどに生存時間を増加させなかった（表８−１）。
【００５６】
処置した動物は未処置対照グループと比較して腫瘍質量の平均値がより小さい（表８−２）が、しかしその差は統計学的に有意なほどではないことが判明した。
腫瘍の細胞画分（ｔｏｔａｌ ａｓｃｉｔｏｃｒｉｔ）の質量の平均値は６ｍｇ／Ｋｇ／日 ｐ．ｏ． ｘ９の投与量の化合物ＬＡ−１５の場合にのみ統計学的に有意な程度低い値であった（表８−３）。これはこの化合物の抗腫瘍作用の証拠となるものである。
【００５７】
実験結果を次表にまとめて示す。
表８−１
腹水型エーリッヒ腫瘍（ＡＴＥ）を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２、ＬＡ−１２の包接薬剤形およびＬＡ−１５の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＩＣＲ、メス、体重３０．１乃至３３．７ｇ。腹水０．２ｍｌ中の５・１０６ 腫瘍細胞を腹腔内に注射して腫瘍を接種。接種植後１日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．１日目から９日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘｓ．ｃ．１日目）。
表には、それぞれの投与量について、生存時間の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する幾何平均の信頼区間および対照グループの平均生存時間のパーセントとしての平均生存時間の相対値を記載する。
【表１０】
0003575686.tif 000017
【００５８】
表  ８−２
腹水型エーリッヒ腫瘍（ＡＴＥ）を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２、ＬＡ−１２の包接薬剤形およびＬＡ−１５の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＩＣＲ、メス、体重３０．１乃至３３．７ｇ。腹水０．２ｍｌ中の５・１０６ 腫瘍細胞を腹腔内に注射して腫瘍を接種。接種植後１日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．１日目から９日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘｓ．ｃ．１日目）。
表には、それぞれの投与量について、腫瘍質量の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する相加平均の信頼区間および対照グループの平均腫瘍質量のパーセントとしての平均腫瘍質量の相対値を記載する。
【表１１】
0003575686.tif 000018
【００５９】
表８−３
腹水型エーリッヒ腫瘍（ＡＴＥ）を有する動物におけるＰＬＡＴＩＤＩＡＭ 注射と比較した化合物ＬＡ−２、ＬＡ−１２、ＬＡ−１２の包接薬剤形およびＬＡ−１５の抗腫瘍効果；連続治療処方
マウスＩＣＲ、メス、体重３０．１乃至３３．７ｇ。腹水０．２ｍｌ中の５・１０６ 腫瘍細胞を腹腔内に注射して腫瘍を接種。接種植後１日目に治療開始（９ｘｐ．ｏ．１日目から９日目まで、Ｐｌａｔｉｄｉａｍ は１ｘｓ．ｃ．１日目）。
表には、それぞれの投与量について、腫瘍質量の平均値、Ｐ＝１−α＝０．９５ に対する相加平均の信頼区間および対照グループの平均腫瘍質量のパーセントとしての平均腫瘍質量の相対値を記載する。
【表１２】
0003575686.tif 000019