(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
0003566990.tif 000012
（式中、Ｒ1は水素原子であり、Ｒ2はホルミル基、カルボキシル基、Ｃ1-8 アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、モノ若しくはジＣ1-8 アルキルアミノカルボニル基又はホルミル、ヒドロキシル、アシルオキシ、カルボキシル、Ｃ1-8 アルコキシカルボニル、アミノカルボニル又はモノ若しくはジＣ1-8 アルキルアミノカルボニルにより置換されたＣ1-8 アルキル基であり、Ｒ3 は水素原子、−ＳＯ3 Ｈ基又はアシル基であり、Ｒ4 はヒドロキシル基、−Ｏ−ＳＯ3 Ｈ基、Ｃ1-8 アルコキシ基又はアシルオキシ基であり、Ｒ3 及びＲ4 は一緒になって単結合を形成してもよく、Ａは＝Ｏ基又は−Ｏ−Ｘ基であり、Ｘは水素原子、−ＳＯ3 Ｈ基又はアシル基であり、但しＲ1 及びＲ2 が同時に水素原子でない）で表わされるエノピラノース誘導体又はその塩。
【請求項２】
一般式（Ｉ−１）又は（Ｉ−２）
【化２】
0003566990.tif 000013
（式中、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 及びＲ4 は請求項１と同じ定義である）で表わされる請求項１のエノピラノース誘導体又はその塩。
【請求項３】
一般式（Ｉ−１）又は（Ｉ−２）において、Ｒ1 が水素原子であり、Ｒ2 がホルミル基、カルボキシル基又はヒドロキシメチル基であり、Ｒ3 が水素原子であり、Ｒ4 がヒドロキシル基であるか、又はＲ3 及びＲ4 が一緒になって単結合を形成している、請求項２のエノピラノース誘導体又はその塩。
【請求項４】
一般式（Ｉ−３）、（Ｉ−４）、（Ｉ−５）又は（Ｉ−６）
【化３】
0003566990.tif 000014
（式中、Ｒ1 、Ｒ2 、Ｒ3 、Ｒ4 及びＸは請求項１と同じ定義である）で表わされる請求項１のエノピラノース誘導体又はその塩。
【請求項５】
一般式（Ｉ−３）、（Ｉ−４）、（Ｉ−５）又は（Ｉ−６）において、Ｒ1 が水素原子であり、Ｒ2 がホルミル基、カルボキシル基又はヒドロキシメチル基であり、Ｒ3 が水素原子であり、Ｒ4 がヒドロキシル基であるか、又はＲ3 及びＲ4 が一緒になって単結合を形成し、Ｘが水素原子である、請求項４のエノピラノース誘導体又はその塩。
【請求項６】
一般式（Ｉ）のエノピラノース誘導体又はその塩を有効成分として含有するα−グルコシダーゼ阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明はエノピラノース誘導体又はその塩、それらを含有するα−グルコシダーゼ阻害剤又は免疫機能抑制剤に関する。より詳しくは、本発明は生体内の糖鎖プロセッシングに係わる酵素の阻害剤であって、糖蛋白質糖鎖プロセッシングの研究用試薬、更には癌転移、ＡＩＤＳなどウイルス性疾患、糖尿病、高脂血症、炎症性疾患、自己免疫疾患、臓器移植時の拒絶反応およびアレルギー性疾患などの治療薬として有用である、エノピラノース誘導体又はその塩に関する。
【０００２】
【従来の技術】
α−グルコシダーゼ阻害剤としては、カスタノスペルミン、１−デオキシノジリマイシンなどが知られている。しかしながら、本発明のα−グルコシダーゼ阻害剤はそれらとは有効成分の化学構造が異なる。
糖鎖プロセッシングに係わる酵素の阻害剤は、α−グルコシダーゼ阻害剤であるカスタノスペルミンに代表されるように、癌転移抑制（Ｈｕｍｐｈｒｉｅｓら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４６，５２５１−５２２２，１９８６）、自己免疫脳脊髄炎動物モデルに対する発症抑制（Ｗｉｌｌｅｎｂｏｒｇら、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｓｃｉ，９０，７７−８５，１９８９）、関節炎動物モデルに対する発症抑制（Ｗｉｌｌｅｎｂｏｒｇら、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．７０，３６９−３７７，１９９２）、免疫応答に重要な細胞膜上主要組織適合抗原クラスＩ分子の発現抑制（Ｍｏｏｒｅら、Ｊ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃ．Ｃｈｅｍ．２６８，３８０９−３８１２，１９９３）などへ利用できることが明らかになっている。加えて、日本公表特許公報（Ａ）平４−５００９５９には、自己免疫脳脊髄炎動物モデル、アジュバント関節炎モデル、組織移植片拒絶モデル、遅延型過敏症反応モデルに対して病態を改善する効果があることから、カスタノスペルミンによる動物またはヒト患者の抗炎症的および／または免疫抑制的治療方法が提示されている。さらに国際特許明細書ＷＯ  ８７０３９０３には、ＡＩＤＳウイルスなどレトロウイルス性病原に対する治療的薬剤としてカスタノスペルミンの使用が提示されている。その作用は、糖鎖のプロセッシング阻害の結果もたらされる感染細胞内におけるレトロウイルス複製の妨害、感染細胞上におけるウイルス性エンベロップ糖蛋白質の提示に伴う病原性効果の軽減として記述されている。また、ヨーロッパ特許明細書第２０２６６１号では、カスタノスペルミンによる高脂血症および過剰な脂質蓄積の防止ならびに糖尿病治療への利用が提示されている。これは、消化酵素阻害の結果、脂質生合成阻害、複合糖の加水分解によるグルコース形成阻害がもたらされることによっている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
以上のように、癌転移、ＡＩＤＳなどウイルス性疾患、糖尿病、高脂血症、炎症性疾患、自己免疫疾患、臓器移植時の拒絶およびアレルギー性疾患などの治療において、糖鎖プロセッシングに係わる酵素を阻害することが重要であると考えられる。そして、このような考えのもとに、α−グルコシダーゼ阻害作用を有する医薬品の開発が望まれている。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、α−グルコシダーゼ阻害活性を指標として鋭意研究した結果、下記一般式（Ｉ）で表わされる化合物が優れた阻害作用を有していることを見出し、本発明を完成した。
すなわち、本発明は、一般式（Ｉ）
【０００５】
【化４】
0003566990.tif 000002
【０００６】
（式中、Ｒ１  及びＲ２  はそれぞれ独立に水素原子、ホルミル基、カルボキシル基、Ｃ１−８  アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、モノ若しくはジＣ１−８  アルキルアミノカルボニル基又はホルミル、ヒドロキシル、アシルオキシ、カルボキシル、Ｃ１−８  アルコキシカルボニル、アミノカルボニル又はモノ若しくはジＣ１−８  アルキルアミノカルボニルにより置換されたＣ１−８  アルキル基であり、Ｒ３  は水素原子、−ＳＯ３  Ｈ基又はアシル基であり、Ｒ４  はヒドロキシル基、−Ｏ−ＳＯ３  Ｈ基、Ｃ１−８  アルコキシ基又はアシルオキシ基であり、Ｒ３  及びＲ４  は一緒になって単結合を形成してもよく、Ａは＝Ｏ基又は−Ｏ−Ｘ基であり、Ｘは水素原子、−ＳＯ３  Ｈ基又はアシル基であり、但しＲ１  及びＲ２  が同時に水素原子でない）で表わされるエノピラノース誘導体又はその塩、それらを有効成分として含有するα−グルコシダーゼ阻害剤又は免疫機能抑制剤に関する。
一般式（Ｉ）には以下の立体構造が含まれる。
【０００７】
【化５】
0003566990.tif 000003
【０００８】
（式中、Ｒ１  、Ｒ２  、Ｒ３  、Ｒ４  及びＸは前述の通りである）
ここで、Ｒ４  がヒドロキシル基の場合には、（Ｉ−１）と（Ｉ−２）とは互変異性体である。また、同様に（Ｉ−３）と（Ｉ−４）、（Ｉ−５）と（Ｉ−６）とは互変異性体である。
Ｒ１  又はＲ２  のＣ１−８  アルキル基及びＣ１−８  アルキル部分、またＲ４  のＣ１−８  アルコキシ基のアルキル部分は、炭素数１〜８のアルキル基又はアルキル部分を意味する。それらは直鎖又は枝分れ鎖であってよく、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどが挙げられる。
Ｒ３  又はＸのアシル基、Ｒ２  のアシルオキシにより置換されたＣ１−８  アルキル基のアシル部分又はＲ４  のアシルオキシ基のアシル部分は、カルボン酸に含まれる、ＲＣＯ−で表わされる基を意味する。ここでＲは、置換されてもよい鎖式炭化水素基、置換されてもよい単環式炭化水素基、置換されてもよい多環式炭化水素基、置換されてもよい単環式複素環基又は置換されてもよい多環式複素環基である。
【０００９】
Ｒに含まれる前記鎖式炭化水素基としてはアルキル基、アルケニル基、アルキニル基などが挙げられ、前記単環式炭化水素基としてはシクロアルキル基、シクロアルケニル基、フェニル基などが挙げられ、前記多環式炭化水素基としては、ナフチル基、テトラヒドロナフチル基、インダニル基のような縮合型多環式炭化水素基又はアダマンチル基、ノルアダマンチル基、ノルボルナニル基、ノルボルナノニル基のような架橋型多環式炭化水素基が挙げられ、前記単環式複素環基としてはピロリル基、フラニル基、チエニル基、ピラゾリル基、イミダゾリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、チアジアゾリル基、ピロリニル基、ピロリジニル基、ジヒドロフラニル基、テトラヒドロフラニル基、ジヒドロチエニル基、テトラヒドロチエニル基、ピラドリニル基、ヒダントイニル基、オキサゾリニル基、イソオキサゾリニル基、イソオキサゾリジニル基、チアゾリニル基、チアゾリジニル基、ジオキソラニル基、ジチアラニル基、ピリジル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、ジヒドロピリジル基、テトラヒドロピリジル基、ピペリジニル基、ジヒドロオキソピリダジニル基、テトラヒドロオキソピリダジニル基、ジヒドロオキソピリミジニル基、テトラヒドロオキソピリミジニル基、ピペラジニル基、ジヒドロピラニル基、テトラヒドロピラニル基、ジオキサニル基、ジヒドロジチイニル基、ジチアニル基、モルホリニル基などが挙げられ、前記多環式複素環基としては、チエノチエニル基、ジヒドロシクロペンタチエニル基、インドリル基、ベンゾフラニル基、ベンゾチエニル基、ベンズオキサゾリル基、ベンズイソオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンズイミダゾリル基、テトラヒドロベンゾチエニル基、ジヒドロベンゾフラニル基、テトラヒドロベンズイソオキサゾリル基、ベンゾジオキソリル基、キノリニル基、イソキノリニル基、ベンゾジオキサニル基、キノキサリニル基のような縮合型多環式複素環基又はキヌクリジニル基のような架橋型多環式複素環基が挙げられる。
【００１０】
Ｒに含まれる置換されてもよい鎖式炭化水素基の置換基としてはハロゲン原子、アルコキシ基、ハロアルコキシ基、アルキルチオ基、シクロアルキル基、シクロアルコキシ基、シクロアルケニル基、シクロアルケニルオキシ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシル基、アルキルカルボニル基、アルキルカルボニルオキシ基、アリール基、アリールオキシ基、アリールチオ基、アミノ基、アルキル基で置換されたアミノ基などが挙げられ、それらの置換基又はそれらの置換基に付随する置換基の数は１ヶであっても２ヶ以上であってもよく、２ヶ以上の場合それらの置換基は同一であっても異なってもよい。
また、Ｒに含まれる置換されてもよい単環式炭化水素基、置換されてもよい多環式炭化水素基、置換されてもよい単環式複素環基及び置換されてもよい多環式複素環基の置換基としてはハロゲン原子、アルキル基、ハロアルキル基、アルコキシ基、ハロアルコキシ基、アルキルチオ基、シクロアルキル基、シクロアルコキシ基、シクロアルケニル基、シクロアルケニルオキシ基、アルコキシカルボニル基、アルキルカルボニル基、アルキルカルボニルオキシ基、アリール基、アリールオキシ基、アリールチオ基、アミノ基、アルキル基で置換されたアミノ基、シアノ基、ニトロ基、ヒドロキシル基などが挙げられ、それら置換基又はそれらの置換基に付随する置換基の数は１ヶであっても２ヶ以上であってもよく、２ヶ以上の場合それらの置換基は同一であっても異なってもよい。
【００１１】
Ｒに含まれるアルキル基並びにアルキル部分としては、炭素数１〜２０のもの、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、デシル基、ノナデシル基などが挙げられ、それらは直鎖又は枝分れ脂肪鎖の構造異性のものも含む。Ｒに含まれるアルケニル基としては、炭素数が２〜２０のもの、例えばビニル基、プロペニル基、ブテニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基、デセニル基、ノナデセニル基などが挙げられ、またそれらは直鎖又は枝分れ脂肪鎖の構造異性のものも含む。Ｒに含まれるアルキニル基としては、炭素数が２〜２０のもの、例えばエチニル基、プロピニル基、ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル基、デシニル基、ノナデシニル基などが挙げられ、またそれらは直鎖又は枝分れ脂肪鎖の構造異性のものも含む。Ｒに含まれるシクロアルキル基並びにシクロアルキル部分としては、炭素数３〜８のもの、例えば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロオクチル基などが挙げられる。Ｒに含まれるシクロアルケニル基並びにシクロアルケニル部分としては、炭素数５〜８のもの、例えば、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロオクテニル基などが挙げられる。更にＲに含まれるハロゲン原子としては弗素原子、塩素原子、臭素原子、沃素原子が挙げられる。Ｒに含まれるアリール基並びにアリール部分としては、フェニル基、チエニル基、フラニル基、ピリジル基、ナフチル基、ベンゾチエニル基、ベンゾフラニル基、キノリニル基などが挙げられる。
【００１２】
一般式（Ｉ）で表わされるエノピラノース誘導体の塩としては、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、カルシウムのようなアルカリ土類金属塩、アミン塩などがあげられる。
本発明の有効成分であるエノピラノース誘導体又はその塩は、以下の化合物群であることが望ましい。
（１）一般式（Ｉ−１）又は（Ｉ−２）において、Ｒ１  が水素原子であり、Ｒ２  がホルミル基、カルボキシル基、Ｃ１−８  アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、モノ若しくはジＣ１−８  アルキルアミノカルボニル基又はホルミル、ヒドロキシル、アシルオキシ、カルボキシル、Ｃ１−８  アルコキシカルボニル、アミノカルボニル又はモノ若しくはジＣ１−８  アルキルアミノカルボニルにより置換されたＣ１−８  アルキル基であり、Ｒ３  は水素原子、−ＳＯ３  Ｈ基又はアシル基であり、Ｒ４  はヒドロキシル基、−Ｏ−ＳＯ３  Ｈ基、Ｃ１−８  アルコキシ基又はアシルオキシ基であり、Ｒ３  及びＲ４  は一緒になって単結合を形成してもよいエノピラノース誘導体又はその塩。
（２）一般式（Ｉ−１）又は（Ｉ−２）において、Ｒ１  が水素原子であり、Ｒ２  がホルミル基、カルボキシル基又はヒドロキシメチル基であり、Ｒ３  が水素原子であり、Ｒ４  がヒドロキシル基であるか、又はＲ３  及びＲ４  が一緒になって単結合を形成しているエノピラノース誘導体又はその塩。
（３）一般式（Ｉ−３）、（Ｉ−４）、（Ｉ−５）又は（Ｉ−６）において、Ｒ１  が水素原子であり、Ｒ２  がホルミル基、カルボキシル基、Ｃ１−８  アルコキシカルボニル基、アミノカルボニル基、モノ若しくはジＣ１−８  アルキルアミノカルボニル基又はホルミル、ヒドロキシル、アシルオキシ、カルボキシル、Ｃ１−８  アルコキシカルボニル、アミノカルボニル又はモノ若しくはジＣ１−８  アルキルアミノカルボニルにより置換されたＣ１−８  アルキル基であり、Ｒ３  は水素原子、−ＳＯ３  Ｈ基又はアシル基であり、Ｒ４  はヒドロキシル基、−Ｏ−ＳＯ３  Ｈ基、Ｃ１−８  アルコキシ基又はアシルオキシ基であり、Ｒ３  及びＲ４  は一緒になって単結合を形成してもよく、Ｘは水素原子、−ＳＯ３  Ｈ基又はアシル基であるエノピラノース誘導体又はその塩。
（４）一般式（Ｉ−３）、（Ｉ−４）、（Ｉ−５）又は（Ｉ−６）において、Ｒ１  が水素原子であり、Ｒ２  がホルミル基、カルボキシル基又はヒドロキシメチル基であり、Ｒ３  が水素原子であり、Ｒ４  がヒドロキシル基であるか、又はＲ３  及びＲ４  が一緒になって単結合を形成し、Ｘが水素原子であるエノピラノース誘導体又はその塩。
【００１３】
一般式（Ｉ）で表わされるエノピラノース誘導体又はその塩は、例えば以下に示す反応により取得することができる。
【００１４】
【化６】
0003566990.tif 000004
【００１５】
メチル基のヒドロキメチル基への酸化には、酸化剤として二酸化セレン、一重項酸素酸化、クロム酸などが使用される。メチル基又はヒドロキシメチル基のホルミル基への酸化には酸化剤として二酸化セレン、酸化クロム、二酸化マンガンなどが使用される。また、メチル基、ヒドロキシメチル基又はホルミル基のカルボキシル基への酸化には、酸化剤として次亜塩素酸、塩化ルテニウム、酸化クロムなどが使用される。これらの酸化反応は原料化合物と酸化剤とを１モル：１〜１０モルの割合で混合することにより達成される。反応温度は０〜１５０℃、望ましくは２５〜１００℃であり、反応時間は０．５〜２４時間である。また、これらの酸化反応は酵素を使用して行われてもよい。
酸化反応によって得られるそれぞれの化合物は、水素化ホウ素ナトリウム、水素化アルミニウムリチウムなどの還元剤によりピラノース環２位を還元することができる。これら還元反応は原料化合物と還元剤とを１モル：０．３〜１モルの割合で混合することにより達成される。反応温度は−７８〜＋５０℃、望ましくは−２０〜＋１５℃であり、反応時間は５〜６０分である。これら還元反応のうち、ホルミル基の化合物は反応条件によりヒドロキシルメチル基の化合物に還元されることもある。
酸化又は還元された化合物は、更にピラノース環１位及び６位を加水分解することができる。加水分解反応は酸の存在下に原料化合物と水とを混合することにより達成される。反応温度は０〜１５０℃、望ましくは２５〜１１０℃であり、反応時間は１〜１２時間である。
【００１６】
出発物質である１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースに代えて次の化合物を使用することができる。
【００１７】
【化７】
0003566990.tif 000005
【００１８】
（Ｒ１’及びＲ２’はそれぞれ独立に水素原子又はアルキル基であり、但しＲ１’及びＲ２’が同時に水素原子ではない）
それらの化合物はヨーロッパ特許出願公開公報ＥＰ０５６００５５Ａに記載された方法によって取得することができる。また、出発物質の一つ、１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースは公知の化合物であるが、次の方法によって取得することができる。
【００１９】
【化８】
0003566990.tif 000006
【００２０】
参考例１  １，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースの合成
（１）１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−Ｓ−フェニルチオ−β−Ｄ−エリスロ−ヘキソエノピラノース−２−ウロースの合成
１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース３０ｇとチオフェノール２９．４ｍｌの乾燥クロロホルム溶液に、０℃でトリエチルアミン２．５ｍｌを加えた。反応溶液を室温で３０分攪拌した後、減圧下で溶媒を留去した。得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：４）で精製し、目的物を５３ｇ得た。
【００２１】
（２）１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−フェニルチオ−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースの合成
上記（１）で得た１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−Ｓ−フェニルチオ−β−Ｄ−ヘキソエノピラノース−２−ウロース５３ｇの乾燥四塩化炭素溶液５００ｍｌに０℃で、Ｎ−クロロスクシイミド３３ｇを加え、室温で５時間攪拌した。得られた反応溶液をセライトで濾過し、濾液を５％炭酸水素ナトリウム５００ｍｌで１回洗浄した。更に飽和食塩水５００ｍｌで２回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下で溶媒を留去した。得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：９）で精製し、目的物４２ｇを得た。
【００２２】
（３）１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースの合成
窒素ガスの不活性雰囲気下、０℃で第一ヨウ化銅３２．９ｇに乾燥テトラヒドロフラン８００ｍｌ中で、メチルリチウム（ジエチルエーテル溶液、１．５Ｍ）２３０ｍｌを徐々に加え、１５分攪拌した。反応混合物を−７８℃に冷却し、上記（２）で得た１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−フェニルチオ−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース４０ｇの乾燥テトラヒドロフラン溶液１００ｍｌを徐々に加えた。更に１５分攪拌した後、少量の塩化アンモニウム水溶液を加え、室温で３０分攪拌した。反応混合物をセライトで濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた粗生成物に酢酸エチル８００ｍｌを加え、飽和食塩水５００ｍｌで２回洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で溶媒を留去した。得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、目的物１２ｇを得た。
さらに、１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−３，４−ジメチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースは次の方法によって取得することができる。
【００２３】
【化９】
0003566990.tif 000007
【００２４】
参考例２  １，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−３，４−ジメチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースの合成
（４）１，６−アンヒドロ−３−ブロモ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースの合成
上記（３）で得た１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース１ｇの乾燥四塩化炭素溶液４０ｍｌに、−２０℃で臭素０．７４ｍｌの四塩化炭素溶液５ｍｌを加えた。０℃で１５分攪拌し、トリエチルアミン３ｍｌを滴下して加えた。室温で１０分攪拌した後、少量の水を加え塩化メチレン２００ｍｌで抽出した。飽和食塩水２００ｍｌで２回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で溶媒を留去した。得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、目的物を１．２ｇ得た。このもののＮＭＲの分析値は次のとおり。
【００２５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，４００ＭＨｚ）：２．２２（３Ｈ，ｓ）；３．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ）；３．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．２，４．４Ｈｚ）；４．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）；５．５１（１Ｈ，ｓ）
【００２６】
（５）１，６−アンヒドロ−３−ブロモ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース  エチレン  アセタールの合成
上記（４）で得た１，６−アンヒドロ−３−ブロモ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース１．１７ｇとエチレングリコール３ｍｌ、バラトルエンスルホン酸０．１ｇの乾燥トルエン溶液７０ｍｌを１時間加熱還流した。反応溶液を室温にまで冷却し、７０ｍｌの酢酸エチルを加えた。この溶液を飽和食塩水２００ｍｌで２回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下で溶媒を留去した。得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、１．２５ｇの目的物を得た。このもののＮＭＲの分析値は次のとおり。
【００２７】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，４００ＭＨｚ）：１．９０（３Ｈ，ｓ）；３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，３，６Ｈｚ）；３．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）；４．０２（１Ｈ，ｍ）；４．１５（１Ｈ，ｍ）；４．２８（２Ｈ，ｍ）；４．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）；５．２４（１Ｈ，ｓ）
【００２８】
（６）１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−３，４−ジメチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース  エチレン  アセタールの合成
窒素ガスの不活性雰囲気下−７８℃で、上記（５）でえた１，６−アンヒドロ−３−ブロモ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース  エチレン  アセタール１．２５ｇの乾燥テトラヒドロフラン溶液６０ｍｌにｎ−ブチルリチウム（ヘキサン溶液、１．６Ｍ）３．６ｍｌを徐々に加え、１０分間攪拌した。この反応溶液にヨウ化メチル１．４８ｍｌ、ＨＭＰＡ１．６５ｍｌの乾燥テトラヒドロフラン溶液５ｍｌを徐々に加えた。１０分間攪拌した後、ドライアイス浴を外し更に１５分攪拌した。この反応混合物に少量の飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、減圧下で溶媒を留去した。残渣を酢酸エチル２００ｍｌで抽出し、飽和食塩水２００ｍｌで２回洗浄した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下で溶媒を留去し、得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、目的物を０．７６ｇ得た。このもののＮＭＲの分析値は次のとおり。
【００２９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，４００ＭＨｚ）：１．６０（３Ｈ，ｓ）；１．７３（３Ｈ，ｓ）；３．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ）；３．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．０，３．６Ｈｚ）；３．９８〜４．１８（４Ｈ，ｍ）；４．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）；５．１８（１Ｈ，ｓ）
ｍｐ．１３１〜１３４℃
【００３０】
（７）１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−３，４−ジメチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロースの合成
上記（６）で得た１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−３，４−ジメチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース  エチレンアセタール１．０５ｇのクロロホルム溶液５ｍｌに、水５ｍｌとトリフルオロ酢酸１０ｍｌを加え、室温で５分間攪拌した。この反応混合物を１規定の水酸化ナトリウムで中和し、クロロホルム２００ｍｌで抽出した。飽和食塩水２００ｍｌで２回洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下で溶媒を留去した。得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：３）で精製し、目的物を０．８ｇ得た。このもののＮＭＲの分析値は次の通り。
【００３１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，４００ＭＨｚ）：１．７６（３Ｈ，ｓ）；２．０１（３Ｈ，ｓ）；３．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）；３．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，４．４Ｈｚ）；４．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）；５．３５（１Ｈ，ｓ）
【００３２】
また、前記参考例１（３）において、メチルリチウムの代りにエチルリチウム、プロピルリチウムなどのアルキルリチウムを用いれば、Ｒ２  がメチル以外のアルキル基を有する化合物を取得することができる。またアルキルリチウムの代りにグリニヤール試薬を用いることもできる。Ｒ１  がメチル以外のアルキル基を有する化合物を取得するには、前記参考例２（６）においてヨウ化メチルの代りにヨウ化エチル、ヨウ化プロピルなどのアルキルヨウ化物を用いればよい。
Ｒ１  及び／又はＲ２  のカルボキシル基はエステル化又はアミド化することができる。エステル化の反応は、カルボキシル基を有する一般式（Ｉ）の化合物と炭素数１〜８のアルコールとを脱水剤の存在下又は非存在下に混合することにより達成される。この時の反応温度は−２０℃〜＋６０℃であり、反応時間は１〜２４時間である。アミド化の反応は、カルボキシル基を有する一般式（Ｉ）の化合物とアンモニア、炭素数１〜８のアルキルアミン又は同ジ（アルキル）アミンとを混合することにより達成される。この時の反応温度は０℃〜１５０℃であり、反応時間は１〜２４時間である。
また、Ｒ１  及び／又はＲ２  のヒドロキシル基はアシル化することができる。アシル化の反応は、ヒドロキシル基を有する一般式（Ｉ）の化合物とカルボン酸又はその反応性誘導体とを混合することにより達成される。カルボン酸の反応性誘導体としては、酸ハロゲン化物、酸無水物又はエステルが挙げられ、反応に酸ハロゲン化物を使用する場合には塩基が使用される。この時の反応温度は−２０℃〜＋５０℃であり、反応時間は１〜２４時間である。
Ｒ３  が水素原子の場合、すなわちエノピラノース環の６位がヒドロキシル基である場合、Ｒ４  がヒドロキシル基である場合、又はＸが水素原子の場合、すなわちエノピラノース環２位がヒドロキシル基である場合には、それらヒドロキシル基をアシル化することができる。アシル化の反応は前記Ｒ１  及び／又はＲ２  のヒドロキシル基のアシル化と同様の方法で達成される。また、それらヒドロキシル基は硫酸化することができる。硫酸化の反応は、ヒドロキシル基を有する一般式（Ｉ）の化合物とＳＯ３  −ピリジン  コンプレックスとを混合することにより達成される。このときの反応温度は−３０℃〜＋２５℃、望ましくは−１０〜０℃であり、反応時間は１〜２４時間である。反応にはピリジンなどの溶媒を用いることができる。
【００３３】
前記一般式（Ｉ）で表わされるエノピラノース誘導体又はその塩は、α−グルコシダーゼ阻害活性を有し、また、免疫機能抑制活性も有する。α−グルコシダーゼ阻害剤としては、癌転移抑制剤、ウイルス性疾患、糖尿病、高脂肪血症、炎症性疾患、自己免疫疾患、拒絶反応およびアレルギー性疾患治療剤として使用することができる。
前記一般式（Ｉ）で表されるエノピラノース誘導体又はその塩を医薬の有効成分として用いる場合、患者の年齢、体重、病気の性質と程度、投与経路などの投与条件の違いにより一概に規定できないが、その投与量は通常、成人１日当たり約５０ｍｇ〜５０００ｍｇであり、経口的ないし非経口的に投与される。薬剤投与は、経口、静脈内、筋肉内、関節腔内、組織内、皮膚経路、粘膜経路などの方法でおこなうことができる。投与剤形としては、末剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、糖衣剤、カプセル剤、注射剤、点鼻剤、懸濁剤、滴剤、軟膏剤、シロップ、舌下錠、座剤、持続性放出製剤などがあげられる。これらは、通常の医薬の場合と同様に、通常の医薬上許容される製剤担体を用い、常法により製造することができる。
【００３４】
【実施例】
以下に本発明に係る化合物の合成例を記載する。
合成例１  １，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−ホルミル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース（化合物Ｎｏ．５）の合成
１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−メチル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース１．５ｇの乾燥１，４−ジオキサン溶液７０ｍｌに二酸化セレン１．５ｇを加えた。この反応混合物を窒素ガスの不活性雰囲気下、２０時間加熱還流した。薄層シリカゲルカラムクロマトグラフィーで原料の消失を確認した後、反応溶液を室温にまで冷却し、生じた沈殿をセライトで濾過することにより除いた。濾液を減圧下で濃縮し、得られたシロップ状の粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し、目的物を３００ｍｇ得た。このもののＮＭＲの分析値は次の通り。
【００３５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，４００ＭＨｚ）：３．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）；３．９８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．８，４．４Ｈｚ）；５．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）；５．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；６．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）；９．８２（１Ｈ，ｓ）
合成例２  １，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−カルボキシル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース（化合物Ｎｏ．６）の合成
上記合成例１で得られた１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−ホルミル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース３００ｍｇのアセトニトリル３ｍｌの溶液に、７．５％のリン酸水素ナトリウム水溶液１．２ｍｌと３５％過酸化水素水溶液０．１３ｍｌを加えた。得られた混合溶液に１０℃以下で亜塩素酸ナトリウム２７０ｍｇを３ｍｌの水に溶かして徐々に加えた。一時間攪拌し、酸素ガスの発生が止んだところで亜硫酸ナトリウム１００ｍｇを加え過剰の過酸化水素を分解した。この反応混合物を１Ｎ塩酸で酸性にし、酢酸エチル５０ｍｌを加え、室温で３０分攪拌した。有機層を分離し、さらに同様の抽出操作を２回繰り返した。得られた有機層を合わせ無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で溶媒を留去した。得られたシロップ状の生成物をシリカゲル薄層クロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝４：１）で精製し、１８０ｍｇの目的物を得た。このもののＮＭＲの分析値は次の通り。
【００３６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３  ＯＤ，４００ＭＨｚ）：３．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ）；３．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．１，４．９Ｈｚ）；５．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）；５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ）；６．４１（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ）
合成例３  １，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−ヒドロキシメチル−β−Ｄ−スレオ−ヘキソ−３−エノピラノース（化合物Ｎｏ．２９）の合成
１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−ホルミル−β−Ｄ−グリセロ−ヘキソ−３−エノピラノース−２−ウロース３０７ｍｇのメタノール溶液１５ｍｌに、０℃で水素化ホウ素ナトリウム１５１ｍｇを徐々に加え３０分攪拌した。減圧下で溶媒を留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（塩化メチレン：メタノール＝２０：１）で精製し、１８８ｍｇの目的物を得た。このもののＮＭＲの分析値は次の通り。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，４００ＭＨｚ）：３．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，３．６Ｈｚ）；３．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）；４．１３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１３．６，１．６Ｈｚ）；４．１７（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１３．６，１．６Ｈｚ）；４．３５（１Ｈ，ｍ）；４．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ）；５．５２（１Ｈ，ｍ）；５．５８（１Ｈ，ｍ）
上記合成例３の場合に準じて下記の化合物が合成されたが、それらの物性値を記載する。
【００３７】
１，６−アンヒドロ−３，４−ジデオキシ−４−カルボキシル−β−Ｄ−スレオ−ヘキソ−３−エノピラノース（化合物Ｎｏ．３１）
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３  ＯＤ，４００ＭＨｚ）：３．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．４，４．４Ｈｚ）；３．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）；４．３６（１Ｈ，ｂｒ，ｓ）；５．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ）；５．３７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）；６．３２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）
本発明の有効成分であるエノピラノース又はその塩の代表例を表１及び表２に記載する。
【００３８】
【表１】
0003566990.tif 000008
【００３９】
【表２】
0003566990.tif 000009
【００４０】
試験例１〔α−グルコシダーゼ阻害活性〕
４−ニトロフェニル−α−Ｄ−グルコピラノシドを基質としてα−グルコシダーゼを作用させ、加水分解させて遊離する４−ニトロフェノールを比色法で定量することにより測定した。即ち、４０ｍＵ／ｍｌのα−グルコシダーゼ溶液（１０ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ７．２に溶解）０．０１ｍｌと検体を含む溶液（１０ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ７．２に溶解）０．０１ｍｌを混合した後、１．５ｍｇ／ｍｌの基質溶液（１０ｍＭリン酸緩衝液、ｐＨ７．２に溶解）０．０８ｍｌを加えて反応を開始した。３７℃、６０分間反応後、１Ｍ炭酸ナトリウム０．１ｍｌを加えて反応を停止させ、４０５ｎｍにおける吸光度を測定した。検体を含む反応液の吸光度（Ａ）と含まない反応液の吸光度（Ｂ）を測定し、阻害率を（Ｂ−Ａ）／Ｂ×１００により算出し、α−グルコシダーゼ活性を５０％阻害する濃度（ＩＣ５０）を求めた。その試験結果を表３に示す。なお、α−グルコシダーゼはサッカロミセス属（Ｓａｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）由来のものを用いた。表３の結果は、本発明における有効成分化合物がα−グルコシダーゼ阻害活性を有することを示している。
【００４１】
【表３】
0003566990.tif 000010
【００４２】
試験例２〔免疫抑制活性〕
（ａ）マウス胸腺細胞を用いた幼若化反応に及ぼす作用
ＢＡＬＢ／ｃマウス胸腺細胞を用いて、コンカナバリンＡ（以下ＣｏｎＡと略す。ベクターラボラトリーズ社製、製品Ｎｏ．Ｌ−１０００）刺激によるリンパ球幼若化反応に及ぼす一般式（Ｉ）の化合物の作用を検討した。即ち、胸腺細胞４×１０５  個をＣｏｎＡ（５μｇ／ｍｌ）及び一般式（Ｉ）の化合物と共に１０％牛胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０溶液（以下１０％ＦＣＳ−ＲＰＭＩ液と略す）にて９６穴マイクロプレート内に４８時間培養した（インキュベーター中、５％ＣＯ２  、３７℃）。その後、０．５μＣｉの  ３Ｈ−チミジン（以下  ３Ｈ−ＴｄＲと略す）を添加し、さらに４時間培養後、セルハーベスターにて細胞を採取し、細胞内に取り込まれた  ３Ｈ−ＴｄＲの放射活性（ｄｐｍ）を測定した。これらの測定された  ３Ｈ−ＴｄＲの細胞内への取込み量を胸腺細胞の幼若化反応の指標とし、一般式（Ｉ）の化合物の各濃度（０．００１〜１０００μｇ／ｍｌ）での放射活性値をＣｏｎＡ単独処理の対照値と比較して、ＩＣ５０値を算定し、この結果を表４に示した。この表４において、胸腺細胞の結果を（ａ）として示す。これらの基本操作については、細胞免疫実験操作法、１４４〜１４６頁（今井勝行他訳、理工学社出版、１９８２年）を参考とした。
【００４３】
（ｂ）マウスリンパ球混合培養反応に及ぼす作用
ＢＡＬＢ／ｃ及びＣ５７ＢＬ／６マウスの脾臓細胞を用いて、２方向性のリンパ球混合培養反応に及ぼす一般式（Ｉ）の化合物の作用を検討した。即ち、両系のマウスの脾臓細胞各々５×１０５  個を混合し、一般式（Ｉ）の化合物と共に１０％ＦＣＳ−ＲＰＭＩ液にて９６穴マイクロプレート内に４８時間培養した（インキュベーター中、５％ＣＯ２  、３７℃）。その後、０．５μＣｉの  ３Ｈ−ＴｄＲを添加し、更に１６〜１８時間培養後、セルハーベスターにて細胞を採取し、細胞内に取り込まれた  ３Ｈ−ＴｄＲの放射活性（ｄｐｍ）を測定した。これらの測定された  ３Ｈ−ＴｄＲの細胞内への取込み量をリンパ球混合培養反応の指標とし、一般式（Ｉ）の化合物の各濃度（０．００１〜１０００μｇ／ｍｌ）での放射活性値を無処理の対照値と比較して、ＩＣ５０値を算定し、この結果を表４に示した。この表４において、リンパ球混合培養反応の結果を（ｂ）として示す。これらの基本操作については、細胞免疫実験操作法、１４７〜１４９頁（今井勝行他訳、理工学社出版、１９８２年）を参考とした。
【００４４】
【表４】
0003566990.tif 000011
【００４５】
〔毒性〕
ＤＢＡ／１ｊマウス、６周齢、雄に本発明における有効成分化合物（１０ｍｇ／ｋｇ）を投与して死亡を調べた。その結果、投与したすべての化合物において２４時間後の死亡例はなかった。
【００４６】
【発明の効果】
本発明によれば、公知のα−グルコシダーゼ阻害剤とは化学構造が異なる新しいタイプのα−グルコシダーゼ阻害剤が提供され、また免疫機能抑制剤も提供される。