(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式１：
【化１】
0003555876.tif 000083
〔式中、Ｘ及びＸ′の一方は、水素、ハロゲン又は（Ｃ1-6）アルキルであり、他方は、式Ｘ−６：
【化２】
0003555876.tif 000084
で示される基であって、
Ｒ1は、水素又は（Ｃ1-6）アルキルであり、
Ｒ15は、水素、ハロゲン、ニトロ、（Ｃ1-6）アルキルスルホニル、シアノ、（Ｃ1-6）アルキル、ＯＨ、（Ｃ1-6）アルコキシ、（Ｃ1-6）アルコキシカルボニル、カルボキシル、（Ｃ1-6）アルキルアミノスルホニル、ペルフルオロ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルチオ、ヒドロキシ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルコキシ（Ｃ1-6）アルキル、ハロ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルチオ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルスルフィニル（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルスルホニル（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルスルフィニル、（Ｃ1-6）アルキルカルボニル、アロイル、アリール、アリールオキシ、又は式Ｒ17−Ｃ≡Ｃ−の基であり、
Ｒ16は、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、（Ｃ1-6）アルキル、ＯＨ、ペルフルオロ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルチオ、又はアリールオキシであり、
Ｒ17は、水素、アリール、ヘテロアリール、又は非置換であるか、もしくはＯＨ、アリールもしくはヘテロアリールで置換された（Ｃ1-6）アルキルであり、
ａは、０又は１であるか、あるいは
Ｘ及びＸ′の一方は、式Ｘ−７：
【化３】
0003555876.tif 000085
で示される基であって、
Ｈｅｔは、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる１、２又は３個のヘテロ原子を含む、５もしくは６員の複素芳香環であるか、又は
Ｈｅｔは、Ｏ、Ｓ及びＮから選ばれる１、２、３又は４個のヘテロ原子を含む、９もしくは１０員の二環式複素芳香環であり、
ａ、Ｒ1、Ｒ15及びＲ16は、上記のとおりであり、
Ｒ30は、水素もしくは（Ｃ1-6）アルキルであるか、又は存在しないか；あるいは
Ｘ及びＸ′の一方は、式Ｘ−１０：
【化４】
0003555876.tif 000086
で示される基であって、
Ｒ18は、水素、（Ｃ1-6）アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリール（Ｃ1-6）アルキル、ヘテロアリール（Ｃ1-6）アルキルであり、
Ｒ19は、非置換であるか、又は１個もしくはそれ以上のハロゲン、ヒドロキシル、（Ｃ1-6）アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、（Ｃ1-6）アルキルチオで置換された（Ｃ1-6）アルキルであるか、又はＲ19は、アリールもしくはヘテロアリールであり、
Ｒ20は、（Ｃ1-6）アルキル又は（Ｃ1-6）アルキルカルボニルであるか、あるいは
Ｒ19及びＲ20は、一緒になって、テトラメチレンであり；
Ｙは、式Ｙ−１：
【化５】
0003555876.tif 000087
で示される基であって、
Ｒ22及びＲ23は、独立に、水素、（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルコキシ、（Ｃ1-6）アルコキシ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルアミノ、アリール、アリール（Ｃ1-6）アルキル、ニトロ、シアノ、（Ｃ1-6）アルキルチオ、（Ｃ1-6）アルキルスルフィニル、（Ｃ1-6）アルキルスルホニル、（Ｃ1-6）アルキルカルボニル、ハロゲン又はペルフルオロ（Ｃ1-6）アルキルであり、かつＲ22及びＲ23の少なくとも一方は、水素以外であり、そして
Ｒ24は、水素、ヒドロキシル、（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルコキシ、アミノ、アリール、ニトロ、シアノ、（Ｃ1-6）アルキルスルホニル、ハロゲンであるか、又は下式：
【化６】
0003555876.tif 000088
で示される基であって、
Ｒ25は、水素、（Ｃ1-6）アルキル、アリール、アリール（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルコキシ（Ｃ1-6）アルキルであり、Ｒ26は、水素もしくは（Ｃ1-6）アルキルであるか、又は
Ｒ22及びＲ24は、一緒になって、縮合ベンゼン環であるか；あるいは
Ｙは、Ｎ及びＯから選ばれる１、２又は３個のヘテロ原子を含む、５もしくは６員の単環式複素芳香環基である基Ｙ−２であるが、ここで、該複素芳香族基は、炭素原子を介してアミドカルボニルに結合し、該複素芳香環基の１もしくは２個の炭素原子は、（Ｃ1-6）アルキル、ハロゲン、シアノ、ペルフルオロ（Ｃ1-6）アルキルもしくはアリールで置換されており、該置換された炭素原子のうち少なくとも１個は、アミドカルボニルに結合した炭素原子に隣接しており；
Ｚは、水素又は（Ｃ1-6）アルキルである。
ここで、アリールは、非置換であるか、又は（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ1-6）アルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシ（Ｃ1-6）アルコキシ、ハロゲン、（Ｃ1-6）アルキルチオ、（Ｃ1-6）アルキルスルフィニル、（Ｃ1-6）アルキルスルホニル、シアノ、ニトロ、ペルフルオロ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルカルボニル、（Ｃ2-6）アルキニルもしくは（Ｃ1-6）アルキルカルボニルアミノで置換された、単環もしくは二環式芳香族基を意味し；
ヘテロアリールは、（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルコキシ、ヒドロキシ（Ｃ1-6）アルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシ（Ｃ1-6）アルコキシ、ハロゲン、（Ｃ1-6）アルキルチオ、（Ｃ1-6）アルキルスルフィニル、（Ｃ1-6）アルキルスルホニル、シアノ、ニトロ、ペルフルオロ（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルカルボニル、（Ｃ2-6）アルキニルもしくは（Ｃ1-6）アルキルカルボニルアミノで置換されているか、又はされていない、５もしくは６員の単環式複素芳香環、又は独立にＮ、Ｓ又はＯである１、２、３又は４個のヘテロ原子を含む、９もしくは１０員の二環式複素芳香環を意味し；
アロイルは、カルボニル基を介して結合している、上記で定義した、単環又は二環式のアリールもしくはヘテロアリール基を意味し；
アリールオキシは、酸素原子を介して結合している、上記で定義したアリール基を意味する〕
で示される化合物、並びに製薬上許容され得るその塩及びエステル
〔ここで、エステルは、式２：
【化９６】
0003555876.tif 000089
（式中、Ｘ、Ｘ′、Ｚ及びＹは、上記に記載のとおりであり、
Ｒ31は、（Ｃ1-6）アルキルであるか、又は
Ｒ31は、式Ｐ−１：
【化９７】
0003555876.tif 000090
（式中、Ｒ32は、水素又は（Ｃ1-6）アルキルであり、Ｒ33は、水素、（Ｃ1-6）アルキル又はアリールであり、Ｒ34は、水素又は（Ｃ1-6）アルキルであり、ｈは、０〜２の整数であり、ｇは、０〜２の整数であり、ｈ及びｇの合計は、１〜３である）で示される基であるか、又は
Ｒ31は、式Ｐ−２：
【化９８】
0003555876.tif 000091
（式中、Ｒ32、ｇ及びｈは、上記に記載のとおりであり、Ｔは、Ｏ、Ｓ、−（ＣＨ2）j−、結合（ｊ＝０のとき）、又は式Ｎ−Ｒ35の基であり、ここでＲ35は、水素、（Ｃ1-6）アルキル、（Ｃ1-6）アルキルカルボニル、（Ｃ1-6）アルコキシカルボニルであり、そしてｊは、０、１又は２である）で示される基である）
を有する〕。
【請求項２】
Ｚが水素である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｘ′が水素である、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２２及びＲ２３が、独立に、水素、（Ｃ１−６）アルキル、ニトロ、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ１−６）アルキルアミノ、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルホニル、（Ｃ１−６）アルキルカルボニル、ハロゲン又はペルフルオロ（Ｃ１−６）アルキルであって、Ｒ２２及びＲ２３の少なくとも一方は、水素ではなく、Ｒ２４が、水素、ヒドロキシル、（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ１−６）アルキルスルホニル、アミノ、ニトロ、ハロゲン、又は下式：
【化７】
0003555876.tif 000092
で示される基であって、
Ｒ２５が、アリール（Ｃ１−６）アルキルであり、Ｒ２６が、水素もしくは（Ｃ１−６）アルキルであるか、又はＲ２２及びＲ２４が、一緒になって、縮合ベンゼン環である、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２２が、水素（Ｒ２３が水素以外である場合）、（Ｃ１−６）アルキル又はハロゲンである、請求項４記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２４が、水素、ヒドロキシル、（Ｃ１−６）アルキルスルホニル、（Ｃ１−６）アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、もしくは（Ｃ１−６）アルコキシ、又は下式：
【化８】
0003555876.tif 000093
で示される基であって、
Ｒ２５が、非置換もしくはヒドロキシ置換フェニル（Ｃ１−６）アルキルであり、Ｒ２６が、水素であるか、又はＲ２２及びＲ２４が、一緒になって、縮合フェニル環である、請求項４又は５記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２４が、水素、ヒドロキシル、アミノ、メチル、クロロ、ブロモ、ニトロ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＣＨ３であり、Ｒ２６が、水素であり、Ｒ２５が
【化９】
0003555876.tif 000094
である、請求項６記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２３が、水素（Ｒ２２が水素以外である場合）、（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−６）アルキルアミノ、ハロゲン、ニトロ、ペルフルオロ（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−６）アルコキシ、（Ｃ１−６）アルキルカルボニル、（Ｃ１−６）アルキルスルフィニル、（Ｃ１−６）アルキルスルホニル、又は（Ｃ１−６）アルキルチオである、請求項４〜７のいずれか１項記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ２３が、メチル、エチル、イソプロピル、ｔ−ブチル、トリフルオロメチル、クロロ、ブロモ、フルオロ、ニトロ、−ＣＯＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＳＯＣＨ３、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＮＨＣＨ３又は−ＯＣＨ３である、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙ−１が、下記：
【化１０】
0003555876.tif 000095
よりなる群から選ばれる、請求項４〜９のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙ−２において、単環式複素芳香族基が、下記：
【化１１】
0003555876.tif 000096
の群から選ばれる、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１２】
基Ｙ−２が、式：
【化１２】
0003555876.tif 000097
を有する、請求項１１記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘ−６において、基Ｒ１５及びＲ１６が、独立に、水素、（Ｃ１−６）アルキル、ニトロ、ハロゲン、ペルフルオロ（Ｃ１−６）アルキル、シアノ又はアリールオキシである、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ１５又はＲ１６が、Ｈ、メチル、ニトロ、クロロ、フルオロ、トリフルオロメチル、シアノ又はフェノキシである、請求項１３記載の化合物。
【請求項１５】
基Ｘ−６が、式：
【化１３】
0003555876.tif 000098
を有する、請求項１３又は１４記載の化合物。
【請求項１６】
Ｘ−７において、Ｈｅｔが、１、２もしくは３個の窒素、又は１個の窒素及び１個の硫黄、又は１個の窒素及び１個の酸素を含む５もしくは６員の単環式複素芳香環である、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１７】
複素芳香環が、
【化１４】
0003555876.tif 000099
である、請求項１６記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘ−７において、Ｈｅｔが、１〜３個の窒素をヘテロ原子として含む二環式複素芳香環である、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１９】
二環式複素芳香環が、４−キノリニル、１−イソキノリニル、又は
【化１５】
0003555876.tif 000100
である、請求項１８記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘ−７において、Ｒ１５が、水素、ニトロ、（Ｃ１−６）アルキルスルホニル、シアノ、（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−６）アルコキシ、ペルフルオロ（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−６）アルキルチオ、（Ｃ１−６）アルキルカルボニル又はアリールである、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２１】
Ｒ１５が、イソプロピル、メチル又はフェニルである、請求項２０記載の化合物。
【請求項２２】
Ｘ−７のＲ１６が、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、（Ｃ１−６）アルキル又はペルフルオロ（Ｃ１−６）アルキルである、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２３】
Ｒ１６が、メチル又はトリフルオロメチルである、請求項２２記載の化合物。
【請求項２４】
Ｘ−７のＲ３０が、水素又は（Ｃ１−６）アルキルである、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２５】
基Ｘ−７が、式：
【化１６】
0003555876.tif 000101
を有する、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２６】
Ｘ−６又はＸ−７においてＲ１が水素である、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２７】
Ｘ−６又はＸ−７においてａが０である、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２８】
Ｘ−１０において、Ｒ１８が、（Ｃ１−６）アルキル、又はフェニル（ここで、フェニル環は非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシルでモノ置換されている）であるか、あるいはフェニル（Ｃ１−６）アルキルである、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項２９】
Ｒ１８がｔ−ブチル、フェニル、ヒドロキシフェニル、クロロフェニル又はフェニルエチルである、請求項２８記載の化合物。
【請求項３０】
Ｘ−１０において、Ｒ１９が、非置換であるか、又はピリジルもしくはフェニル（ここで、フェニル環は、非置換であるか、又は（Ｃ１−６）アルコキシもしくはハロゲンでモノ置換されている）で置換された（Ｃ１−６）アルキルである、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３１】
Ｒ１９がメチル、イソブチル、ベンジル、４−クロロベンジル、４−メトキシベンジル又は２−ピリジルメチルである、請求項３０記載の化合物。
【請求項３２】
Ｘ−１０において、Ｒ２０が（Ｃ１−６）アルキルカルボニルである、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３３】
Ｒ２０がアセチルである、請求項３２記載の化合物。
【請求項３４】
基Ｘ−１０が式：
【化１７】
0003555876.tif 000102
を有する、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物。
【請求項３５】
群：
【化１８】
0003555876.tif 000103
【化１９】
0003555876.tif 000104
【化２０】
0003555876.tif 000105
【化２１】
0003555876.tif 000106
【化２２】
0003555876.tif 000107
【化２３】
0003555876.tif 000108
【化２４】
0003555876.tif 000109
【化２５】
0003555876.tif 000110
から選ばれる化合物。
【請求項３６】
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン、又はＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンのナトリウム塩である、請求項１記載の化合物。
【請求項３７】
式：
【化９２】
0003555876.tif 000111
〔式中、Ｘ、Ｘ′、Ｚ、及びＹは、請求項１に記載のとおりであり、
Ｒ３１は、（Ｃ１−６）アルキルであるか；又は、
Ｒ３１は、式Ｐ−１：
【化９３】
0003555876.tif 000112
〔式中、Ｒ３２は、水素又は（Ｃ１−６）アルキルであり、Ｒ３３は、水素、（Ｃ１−６）アルキル又はアリールであり、Ｒ３４は、水素又は（Ｃ１−６）アルキルであり、ｈは、０〜２の整数であり、ｇは、０〜２の整数であり、そしてｈ及びｇの合計は、１〜３である〕で示される基であるか；又は
Ｒ３１は、式Ｐ−２：
【化９４】
0003555876.tif 000113
〔式中、Ｒ３２、ｇ及びｈは、上記に記載のとおりであり、Ｔは、Ｏ、Ｓ、−（ＣＨ２）ｊ−、結合（ｊ＝０である場合）、又は式：Ｎ−Ｒ３５の基であり、ここでＲ３５は、水素、（Ｃ１−６）アルキル、（Ｃ１−６）アルキルカルボニル、又は（Ｃ１−６）アルコキシカルボニルであり、ｊは、０、１又は２である〕で示される基である〕で示される、請求項１記載の化合物。
【請求項３８】
Ｒ３１が、（Ｃ１−６）アルキルである、請求項３７記載の化合物。
【請求項３９】
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル；
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンエチルエステル；
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンブチルエステル；
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  １−メチルエチルエステル；及び
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−メチルプロピルエステル；
からなる群より選択される、請求項３８記載の化合物。
【請求項４０】
Ｒ３１が、Ｐ−１又はＰ−２である、請求項３７記載の化合物。
【請求項４１】
Ｒ３１が、ジエチルアミノエチル、２−（４−モルホリニル）エチル、１−メチル−２−（４−モルホリニル）エチル、１−メチル−４−ピペリジニル、２−（１−ピペラジニル）エチル、又は２−（４−メチル−１−ピペラジニル）エチルである、請求項４０記載の化合物。
【請求項４２】
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（４−モルホリニル）エチルエステル；
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  １−メチル−２−（４−モルホリニル）エチルエステル；
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  １−メチル−４−ピペリジニルエステル；
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（１−ピペラジニル）エチルエステル；及び
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（４−メチル−１−ピペラジニル）エチルエステル；
からなる群から選択される、請求項４１記載の化合物。
【請求項４３】
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−ジエチルアミノエチルエステルである、式：
【化９５】
0003555876.tif 000114
で示される、請求項４１記載の化合物。
【請求項４４】
Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−メトキシエチルエステル又はＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−ヒドロキシエチルエステルである、請求項１記載の化合物。
【請求項４５】
医薬として用いるための、請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項４６】
慢性関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸疾患又は喘息の処置のための医薬として用いるための、請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物。
【請求項４７】
請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物と、治療上不活性である担体物質とを含有する医薬。
【請求項４８】
慢性関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸疾患又は喘息の処置のための医薬であって、請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物と、治療上不活性である担体物質とを含有する医薬。
【請求項４９】
特に慢性関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸疾患又は喘息の処置のための医薬を製造する方法であって、請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物を、治療上不活性である担体物質、及び望みならば、治療上活性である１種類又はそれ以上の追加物質とともに投与剤型化することを含む方法。
【請求項５０】
慢性関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸疾患又は喘息の処置用医薬の製造における、請求項１〜４４のいずれか１項記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）は、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパー遺伝子ファミリーの一員であって、活性化されているが、休止してはいない内皮で発現される。インテグリンであるＶＬＡ−４（ａ４ｂ１）は、循環リンパ球、好酸球、好塩基球及び単球を包含するが、好中球は包含しない多くの細胞型で発現され、ＶＣＡＭ−１の主要受容体である。ＶＣＡＭ−１又はＶＬＡ−４に対する抗体は、活性化された内皮へのこれらの単核白血球はもとより、黒色腫細胞のｉｎ ｖｉｔｒｏでの接着も遮断する。いずれのタンパク質に対する抗体も、動物のいくつかの炎症モデルでの白血球の浸潤の阻害、及び組織損傷の防止に効果的である。抗ＶＬＡ−４モノクローナル抗体は、アジュバントで誘導される関節炎におけるＴ細胞の遊出を遮断し、喘息モデルでの好酸球の蓄積及び気管支収縮を防止し、実験的自己免疫脳炎（ＥＡＥ）での麻痺を軽減し、かつ単球及びリンパ球の浸潤を阻害することが示されている。抗ＶＣＡＭ−１モノクローナル抗体は、心同種移植片の生存時間を延長することが示されている。最近の研究は、抗ＶＬＡ−４ｍＡｂが、非肥満性糖尿病マウスでのインスリン炎及び糖尿病を防止し、コットントップタマリンの大腸炎モデルでの炎症を有意に軽減することを立証した。
【０００２】
したがって、含ａ４インテグリンとＶＣＡＭ−１との間の相互作用を阻害する化合物は、ＲＡ、多発性硬化症（ＭＳ）、喘息及び炎症性腸疾患（ＩＢＤ）のような慢性の炎症性疾患の処置のための治療剤として有用であると思われる。
【０００３】
上記により、本発明は、式１：
【０００４】
【化２６】
0003555876.tif 000002
【０００５】
〔式中、Ｘ、Ｘ′、Ｚ及びＹは、以下に定義されるとおり〕で示される、ＶＬＡ−４とのＶＣＡＭ−１の結合を阻害する新規化合物、並びに製薬上許容され得るその塩及びエステル、そのような化合物を製造する方法、医薬、そのような医薬の製造方法、並びにそのような結合が疾患をもたらす疾病、特に炎症性疾患の処置における該新規化合物の使用に関する。
【０００６】
本明細書に用いられる限りで、単独又は併用での用語「低級アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖アルキル基、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどを意味する。低級アルキル基は、非置換であっても、あるいはシクロアルキル、ニトロ、アリールオキシ、アリール、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノ、低級アルコキシ、低級アルカノイル、低級アルキルチオ、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、及び置換アミノから独立に選ばれる１個もしくはそれ以上の基で置換されていてもよい。置換低級アルキル基の例は、２−ヒドロキシエチル、３−オキソブチル、シアノメチル及び２−ニトロプロピルを包含する。
【０００７】
用語「シクロアルキル」は、非置換であるか、又は置換された３ないし７員の炭素環式の環を意味する。本発明により有用な置換基は、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノ、低級アルコキシ、低級アルカノイル、低級アルキル、アロイル、低級アルキルチオ、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、アリール、ヘテロアリール及び置換アミノである。
【０００８】
用語「低級アルコキシ」は、最高６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖アルコキシ基、例えばメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔ−ブトキシなどを意味する。
【０００９】
用語「低級アルキルチオ」は、二価の硫黄原子を介して結合している低級アルキル基、例えばメチルメルカプト又はイソプロピルメルカプト基を意味する。
【００１０】
用語「アリール」は、非置換であるか、又は慣用の置換基で置換された、単環もしくは二環式芳香族基、例えばフェニル又はナフチルを意味する。好適な置換基は、低級アルキル、低級アルコキシ、ヒドロキシ低級アルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルコキシ、ハロゲン、低級アルキルチオ、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、シアノ、ニトロ、ペルフルオロアルキル、アルカノイル、アロイル、アリールアルキニル、低級アルキニル及び低級アルカノイルアミノである。特に好適な置換基は、低級アルキル、ヒドロキシル及びペルフルオロ低級アルキルである。本発明により用いることができるアリール基の例は、フェニル、ｐ−トルイル、ｐ−メトキシフェニル、ｐ−クロロフェニル、ｍ−ヒドロキシフェニル、ｍ−メチルチオフェニル、２−メチル−５−ニトロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、１−ナフチルなどである。
【００１１】
用語「アリールアルキル」は、１個もしくはそれ以上の水素原子が、ここに定義されたとおりのアリール又はヘテロアリール基で置換されている、上記に定義されたとおりの低級アルキル基を意味する。慣用のいかなるアラルキル、例えばベンジルなども、本発明により用いることができる。
【００１２】
用語「へテロアリール」は、置換されているか、又はされていない、５もしくは６員の単環式複素芳香環、又は独立にＮ、Ｓ又はＯである１、２、３又は４個のヘテロ原子を含む、９もしくは１０員の二環式複素芳香環を意味する。ヘテロアリール環の例は、ピリジン、ベンズイミダゾール、インドール、イミダゾール、チオフェン、イソキノリン、キノゾリンなどである。アリールについて上記に定義された置換基は、ヘテロアリールの定義に包含される。
【００１３】
用語「低級アルコキシカルボニル」は、カルボニル基を介して結合している低級アルコキシ基を意味する。アルコキシカルボニル基の例は、エトキシカルボニルなどである。
【００１４】
用語「低級アルキルカルボニルオキシ」は、酸素原子を介して結合している低級アルキルカルボニルオキシ基、例えばアセトキシ基を意味する。
【００１５】
用語「低級アルカノイル」は、カルボニル基を介して結合している低級アルキル基を意味し、前記の定義の意味でアセチル、プロピオニルなどのような基を包含する。
【００１６】
用語「低級アルキルカルボニルアミノ」は、窒素原子を介して結合している低級アルキルカルボニル基、例えばアセチルアミノを意味する。
【００１７】
用語「アロイル」は、カルボニル基を介して結合している、単環又は二環式のアリールもしくはヘテロアリール基を意味する。アロイル基の例は、ベンゾイル、３−シアノベンゾイル、２−ナフチルなどである。
【００１８】
用語「アリールオキシ」は、上記に定義されたとおり、酸素原子を介して結合しているアリール基を意味する。好適なアリールオキシ基は、フェノキシである。
【００１９】
第一の態様では、本発明は、式１：
【００２０】
【化２７】
0003555876.tif 000003
【００２１】
〔式中、Ｘ及びＸ′の一方は、水素、ハロゲン又は低級アルキルであり、他方は、式Ｘ−６：
【００２２】
【化２８】
0003555876.tif 000004
【００２３】
で示される基であって、
Ｒ１は、水素又は低級アルキルであり、
Ｒ１５は、水素、ハロゲン、ニトロ、低級アルキルスルホニル、シアノ、低級アルキル、ＯＨ、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、カルボキシル、低級アルキルアミノスルホニル、ペルフルオロ低級アルキル、低級アルキルチオ、ヒドロキシ低級アルキル、アルコキシ低級アルキル、ハロ低級アルキル、アルキルチオ低級アルキル、アルキルスルフィニル低級アルキル、アルキルスルホニル低級アルキル、低級アルキルスルフィニル、低級アルカノイル、アロイル、アリール、アリールオキシ、又は式Ｒ１７−Ｃ≡Ｃ−の基であり、
Ｒ１６は、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、低級アルキル、ＯＨ、ペルフルオロ低級アルキル、低級アルキルチオ、又はアリールオキシであり、
Ｒ１７は、水素、アリール、ヘテロアリール、又は非置換であるか、もしくはＯＨ、アリールもしくはヘテロアリールで置換された低級アルキルであり、
ａは、０又は１であるか、あるいは
Ｘ及びＸ′の一方は、式Ｘ−７：
【００２４】
【化２９】
0003555876.tif 000005
【００２５】
で示される基であって、
Ｈｅｔは、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる１、２又は３個のヘテロ原子を含む、５もしくは６員の複素芳香環であるか、又は
Ｈｅｔは、Ｏ、Ｓ及びＮから選ばれる１、２、３又は４個のヘテロ原子を含む、９もしくは１０員の二環式複素芳香環であり、
ａ、Ｒ１、Ｒ１５及びＲ１６は、上記のとおりであり、
Ｒ３０は、水素もしくは低級アルキルであるか、又は存在しないか；あるいは
Ｘ及びＸ′の一方は、式Ｘ−１０：
【００２６】
【化３０】
0003555876.tif 000006
【００２７】
で示される基であって、
Ｒ１８は、水素、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキルであり、
Ｒ１９は、非置換であるか、又は１個もしくはそれ以上のハロゲン、ヒドロキシル、低級アルコキシ、アリール、ヘテロアリール、アルキルチオで置換された低級アルキルであるか、又はＲ１９は、アリールもしくはヘテロアリールであり、
Ｒ２０は、低級アルキル又は低級アルカノイルであるか、あるいは
Ｒ１９及びＲ２０は、一緒になって、テトラメチレンであり；
Ｙは、式Ｙ−１：
【００２８】
【化３１】
0003555876.tif 000007
【００２９】
で示される基であって、
Ｒ２２及びＲ２３は、独立に、水素、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルコキシアルキル、低級アルキルアミノ、アリール、アリールアルキル、ニトロ、シアノ、低級アルキルチオ、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、低級アルカノイル、ハロゲン又はペルフルオロアルキルであり、かつＲ２２及びＲ２３の少なくとも一方は、水素以外であり、そして
Ｒ２４は、水素、ヒドロキシル、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルキルスルホニル、アミノ、アリール、ニトロ、シアノ、ハロゲンであるか、又は下式：
【００３０】
【化３２】
0003555876.tif 000008
【００３１】
で示される基であって、
Ｒ２５は、水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、アルコキシ低級アルキルであり、Ｒ２６は、水素もしくは低級アルキルであるか、又は
Ｒ２２及びＲ２４は、一緒になって、縮合ベンゼン環であるか；あるいは
Ｙは、Ｎ、Ｏ及びＳから選ばれる１、２又は３個のヘテロ原子を含む、５もしくは６員の単環式複素芳香環基であるか、又はＯ、Ｓ及びＮから選ばれる１、２、３又は４個のヘテロ原子を含む、９もしくは１０員の二環式複素芳香環基である基Ｙ−２であるが、ここで、該複素芳香族基は、炭素原子を介してアミドカルボニルに結合し、該複素芳香環基の１もしくは２個の炭素原子は、低級アルキル、ハロゲン、シアノ、ペルフルオロアルキルもしくはアリールで置換されており、該置換された炭素原子のうち少なくとも１個は、アミドカルボニルに結合した炭素原子に隣接している〕
で示される化合物、並びに製薬上許容され得るその塩及びエステルに関する。
【００３２】
本発明の化合物は、立体異性体及びジアステレオマーとして存在することができ、それらすべてが、本発明の範囲に包含される。
【００３３】
式１の化合物では、Ｘ′は、好ましくは水素であって、それは、その場合、Ｘが、基Ｘ−６、Ｘ−７又はＸ−１０であることを意味する。Ｚが低級アルキルであるときは、メチルが好ましい。Ｚは、好ましくは水素である。
【００３４】
この基が、Ｙ−２より好ましいＹ−１である式１の化合物では、Ｒ２２及びＲ２３は、好ましくは、独立に、水素、低級アルキル、ニトロ、低級アルキルチオ、低級アルコキシ、低級アルキルアミノ、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、低級アルカノイル、ハロゲン又はペルフルオロアルキルであって、ここでＲ２２及びＲ２３の少なくとも一方は、水素ではなく、そして
Ｒ２４は、水素、ヒドロキシル、低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルキルスルホニル、アミノ、ニトロ、ハロゲンであるか、又は下式：
【００３５】
【化３３】
0003555876.tif 000009
【００３６】
で示される基であって、ここでＲ２５は、アリール低級アルキルであり、Ｒ２６は、水素もしくは低級アルキルであるか、又は
Ｒ２２及びＲ２４は、一緒になって、縮合ベンゼン環である。
【００３７】
好ましくは、Ｒ２２は、水素（Ｒ２３が水素以外である場合）、低級アルキル又はハロゲンである。Ｒ２４は、好ましくは、水素、ヒドロキシル、低級アルキルスルホニル、低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノもしくは低級アルコキシ、又は下式：
【００３８】
【化３４】
0003555876.tif 000010
【００３９】
で示される基であって、ここでＲ２５は、非置換もしくはヒドロキシ置換フェニル低級アルキルであり、Ｒ２６は、水素であるか、又は
Ｒ２２及びＲ２４は、一緒になって、縮合フェニル環である。
【００４０】
より好適なＲ２４は、水素、ヒドロキシル、アミノ、メチル、クロロ、ブロモ、ニトロ、−ＯＣＨ３、−ＳＯ２ＣＨ３であり、Ｒ２６は水素であり、Ｒ２５は下記の基である：
【００４１】
【化３５】
0003555876.tif 000011
【００４２】
Ｒ２３は、好ましくは、水素（Ｒ２２が水素以外である場合）、低級アルキル、低級アルキルアミノ、ハロゲン、ニトロ、ペルフルオロ低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルカノイル、低級アルキルスルフィニル、低級アルキルスルホニル、又は低級アルキルチオである。Ｒ２３は、より好ましくは、メチル、エチル、イソプロピル、ｔ−ブチル、トリフルオロメチル、クロロ、ブロモ、フルオロ、ニトロ、−ＣＯＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＳＯＣＨ３、−ＳＯ２ＣＨ３、−ＮＨＣＨ３又は−ＯＣＨ３である。
【００４３】
最も好適なＹ−１は、下記よりなる群から選ばれる：
【００４４】
【化３６】
0003555876.tif 000012
【００４５】
Ｙ−２が単環式複素芳香環又は９もしくは１０員二環式複素芳香環基である、式１の化合物では、この複素環は、好ましくは、下記の群から選ばれる：
【００４６】
【化３７】
0003555876.tif 000013
【００４７】
より好適なＹ−２基は、下式を有する：
【００４８】
【化３８】
0003555876.tif 000014
【００４９】
ＸがＸ−６である式１の化合物では、基Ｒ１５及びＲ１６は、好ましくは、独立に、水素、低級アルキル、ニトロ、ハロゲン、ペルフルオロ低級アルキル、シアノ又はアリールオキシである。より好適なＲ１５又はＲ１６は、Ｈ、メチル、ニトロ、クロロ、フルオロ、トリフルオロメチル、シアノ又はフェノキシである。
【００５０】
最も好適なＸ−６基は、下式を有する：
【００５１】
【化３９】
0003555876.tif 000015
【００５２】
ＸがＸ−７である式１の化合物では、Ｈｅｔは、好ましくは、１、２もしくは３個の窒素、又は１窒素及び１硫黄、又は１窒素及び１酸素を含む５もしくは６員の単環式複素芳香環である。より好適な複素芳香環は、下式を有する：
【００５３】
【化４０】
0003555876.tif 000016
【００５４】
ＸがＸ−７である式１の化合物では、Ｈｅｔは、好ましくは１〜３個の窒素をヘテロ原子として含む、二環式複素芳香環である。より好ましくは、二環式複素芳香環は、４−キノリニル、１−イソキノリニル、又は下式の基である：
【００５５】
【化４１】
0003555876.tif 000017
【００５６】
Ｘ−７の複素環での置換基に関しては、Ｒ１５は、好ましくは、水素、ニトロ、低級アルキルスルホニル、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、ペルフルオロ低級アルキル、低級アルキルチオ、低級アルカノイル又はアリールである。より好ましくは、Ｒ１５は、イソプロピル、メチル又はフェニルである。
【００５７】
Ｘ−７複素環のＲ１６は、好ましくは、水素、ハロゲン、ニトロ、シアノ、低級アルキル又はペルフルオロ低級アルキルである。より好適なＲ１６は、メチル又はトリフルオロメチルである。
【００５８】
Ｘ−７のＲ３０は、好ましくは、水素又は低級アルキル、特にメチルである。
【００５９】
好適なＸ−７基は、下式を有する：
【００６０】
【化４２】
0003555876.tif 000018
【００６１】
Ｘ−６又はＸ−７の好適実施態様では、Ｒ１は水素である。もう一つのそれでは、ａは０である。
【００６２】
ＸがＸ−１０である式１の化合物では、Ｒ１８は、好ましくは、低級アルキル、又はフェニル（ここで、フェニル環は非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシルでモノ置換されている）であるか、あるいはフェニル低級アルキルである。より好適なＲ１８は、ｔ−ブチル、フェニル、ヒドロキシフェニル、クロロフェニル又はフェニルエチルである。
【００６３】
Ｒ１９は、好ましくは、非置換であるか、又はピリジルもしくはフェニル（ここで、フェニル環は、非置換であるか、又は低級アルコキシもしくはハロゲンでモノ置換されている）で置換された低級アルキルである。より好適なＲ１９は、メチル、イソブチル、ベンジル、４−クロロベンジル、４−メトキシベンジル又は２−ピリジルメチルである。
【００６４】
Ｘ−１０のＲ２０が低級アルキルであるときは、メチルが好ましい。好ましくは、低級アルカノイル、特にアセチルである。
【００６５】
最も好適な基Ｘ−１０は、下式を有する：
【００６６】
【化４３】
0003555876.tif 000019
【００６７】
本発明の化合物は、製薬上許容され得るその塩及びエステルを包含する。本発明の一定の好適なエステルは、本発明の化合物のバイオアベイラビリティを向上させるのに有用である。これらの好適なエステルは、式２：
【００６８】
【化４４】
0003555876.tif 000020
【００６９】
〔式中、Ｘ、Ｘ′、Ｚ及びＹは、上記のとおりであり、Ｒ３１は、低級アルキルであるか、又はＲ３１は、式Ｐ−１：
【００７０】
【化４５】
0003555876.tif 000021
【００７１】
で示される基であって、ここで、
Ｒ３２は、水素又は低級アルキルであり、
Ｒ３３は、水素、低級アルキル、アリールであり、
Ｒ３４は、水素又は低級アルキルであり、
ｈは、０〜２の整数であり、
ｇは、０〜２の整数であり、
ｈ及びｇの合計は、１〜３であるか、又は
Ｒ３１は、式Ｐ−２：
【００７２】
【化４６】
0003555876.tif 000022
【００７３】
で示される基であって、ここで、
Ｒ３２、ｇ及びｈは、以前に定義されたとおりであり、
Ｔは、Ｏ、Ｓ、−（ＣＨ２）ｊ−、結合（ｊ＝０のとき）、又は式Ｎ−Ｒ３５で示される基であって、
Ｒ３５は、水素、低級アルキル、低級アルカノイル、低級アルコキシカルボニルであり、そして
ｊは、０、１又は２である〕
を有する。
【００７４】
具体的な低級アルキルエステル基は、メチル、エチル、ブチル、１−メチルエチル、２−メチルプロピル、２−メトキシエチル及び２−ヒドロキシエチルである。具体的なＰ１基は、２−ジエチルアミノエチルである。具体的なＰ２基は、２−（４−モルホリニル）−エチル、１−メチル−２−（４−モルホリニル）エチル、１−メチル−４−ピペリジニル、２−（１−ピペラジニル）エチル及び２−（４−メチル−１−ピペラジニル）エチルである。
【００７５】
Ｒ３１は、好ましくは、メチル、エチル又は２−（４−モルホリニル）エチルである。
【００７６】
式１及び２の好適な化合物は、下記の群から選ばれる：
【００７７】
【化４７】
0003555876.tif 000023
【００７８】
【化４８】
0003555876.tif 000024
【００７９】
【化４９】
0003555876.tif 000025
【００８０】
【化５０】
0003555876.tif 000026
【００８１】
【化５１】
0003555876.tif 000027
【００８２】
【化５２】
0003555876.tif 000028
【００８３】
【化５３】
0003555876.tif 000029
【００８４】
【化５４】
0003555876.tif 000030
【００８５】
本発明の化合物は、循環リンパ球、好酸球、好塩基球及び単球（「ＶＬＡ−４発現細胞」）でのＶＬＡ−４とのＶＣＡＭ−１及びフィブロネクチンの結合を阻害する。そのような細胞でのＶＬＡ−４とのＶＣＡＭ−１及びフィブロネクチンの結合は、一定の疾患状態、例えば慢性関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸疾患に、また特に喘息で発生する肺の炎症の原因である、肺内皮との好酸球の結合に関与することが知られている。したがって、本発明の化合物は、喘息の処置に有用であると思われる。
【００８６】
もう一つの態様では、循環リンパ球、好酸球、好塩基球及び単球でのＶＬＡ−４とのＶＣＡＭ−１及びフィブロネクチンの結合を阻害できるその能力に基づいて、本発明の化合物は、そのような結合と関連することが公知である疾患の処置のための医薬として用いることができる。そのような疾患の例は、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、喘息及び炎症性腸疾患である。本発明の化合物は、好ましくは、肺の炎症を伴う疾患、例えば喘息の処置に用いる。喘息で発生する肺の炎症は、肺への好酸球の浸潤に関連し、ここで好酸球は、何らかの喘息誘発性の事象又は物質によって活性化された内皮に結合する。
【００８７】
更に、本発明の化合物は、細胞受容体であるα４−β７とのＶＣＡＭ−１及びＭａｄＣＡＭの結合も阻害するが、該受容体は、ＬＰＡＭとしても知られ、リンパ球、好酸球及びＴ細胞で発現される。喘息のような炎症状態での様々なリガンドとの、α４−β７の相互作用の正確な役割は、完全には理解されていないが、α４−β１とα４−β７の双方の受容体の結合を阻害する本発明の化合物は、喘息の動物モデルでは特に効果的である。更に、α４−β７に対するモノクローナル抗体での研究は、ＭａｄＣＡＭ又はＶＣＡＭへのα４−β７の結合を阻害する化合物が、炎症性腸疾患の処置に役立つことを示している。そのような結合が疾患の損傷又は症状の原因と目される、その他の疾患の処置にも役立つと思われる。
【００８８】
本発明の化合物は、経口的、経直腸的又は非経口的、例えば静脈内、筋内、皮下、鞘内もしくは経皮的にか、又は舌下にか、あるいは眼科製剤としてか、又は肺の炎症の処置用のエアゾルとして投与することができる。経口投与のためのカプセル剤、錠剤、懸濁液もしくは液剤、坐剤、注射剤、点眼剤、軟膏剤又はスプレー剤は、投与剤型の例である。
【００８９】
静脈内、筋内、経口又は吸入投与は、好適な投与形態である。本発明の化合物が有効量で投与される用量は、特定の活性成分の性質、患者の年齢及び必要条件、並びに投与様式に依存する。用量は、慣用のいかなる手段、例えば用量限定的な臨床試験によって決定することができる。したがって、本発明は、ＶＬＡ−４発現細胞とのＶＣＡＭ−１又はフィブロネクチンの結合が疾患の症状又は損傷の誘因である、疾患に罹患した宿主を、該症状又は該損傷が軽減されるよう、ＶＬＡ−４発現細胞とのＶＣＡＭ−１又はフィブロネクチンの結合を阻害するのに充分な量の本発明の化合物を投与することによって処置する方法を更に含む。一般に、１日につき体重１ｋｇ当たり約０．１〜１００ｍｇの用量が好ましく、１日につき約１〜２５ｍｇ／ｋｇの用量が、特に好ましく、１日につき体重１ｋｇ当たり約１〜１０ｍｇの用量が、特別に好ましい。
【００９０】
本発明は、更に、治療有効量の本発明の化合物と、製薬上かつ治療上許容され得る物質とを含有する製剤組成物又は医薬に関する。そのような組成物は、本発明による化合物を、治療上不活性である担体物質とともに製剤化することによる、慣用のいかなる手段によっても処方化することができる。望みであれば、１種類又はそれ以上の追加的な治療活性物質を加えてもよい。
【００９１】
錠剤又は顆粒剤は、一連の結合剤、充填剤、担体又は希釈剤を含有することができる。液体組成物は、例えば、無菌の水混和性溶液の形態であることができる。カプセル剤は、活性成分に加えて、充填剤又は増粘剤を含有することができる。その上、香味改良用添加物はもとより、防腐剤、安定剤、保湿剤及び乳化剤として常用される物質、並びに浸透圧を変えるための塩類、緩衝液及びその他の添加物も存在することができる。
【００９２】
前記の担体物質及び希釈剤は、製薬上許容され得る慣用のいかなる有機又は無機物質、例えば水、ゼラチン、乳糖、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アラビアゴム、ポリアルキレングリコールなども含むことができる。
【００９３】
経口単位用量の剤型、例えば錠剤及びカプセル剤は、好ましくは、２５〜１，０００ｍｇの本発明の化合物を含有する。
【００９４】
本発明の化合物は、慣用のいかなる手段によって製造してもよい。反応スキーム１では、Ｒ１がＨ又は低級アルキルであり、公知化合物であるか、又は標準的方法論によって製造できる式１の化合物を、ベンジル性アルコールの存在下で、選択的にニトロ基を還元できる還元剤で処理する。この手順は、好都合には、Ｘが離脱基であり、Ｒ２がｔ−アルキル、ベンジルなどである、式Ｒ２−ＯＣＯＸで示される誘導体形成剤の存在下で実施して、容易に開裂され得る保護基を形成し、こうして式２の化合物へと直ちに導く。例えば、この手順は、好都合には、ジ−ｔ−ブチルジカルボナートの存在下、酢酸エチル中での１のＰｄ（Ｃ）上の接触水素化によって行い、Ｒ２がｔ−ブチルである２の誘導体を得ることができる。
【００９５】
式３のアルデヒドへの変換は、ベンジル性アルコールを対応するアルデヒドへと酸化できる、様々な酸化剤のいずれか一つ、例えば活性化された二酸化マンガンを適切な溶媒、例えばジクロロメタン中で用いて、実施することができる。式５のデヒドロアミノ酸を得るための３の反応は、Ｒ３が低級アルキルであり、Ｒ４が、アルコキシ基、例えばベンジルオキシもしくはｔ−ブトキシであるか、又は本発明の化合物のアシル基の一部、例えば置換低級アリールを表す、式４のウィッティッヒ試薬による処理によって実施することができる。例えば、適切な塩基、例えばテトラメチルグアニジンの存在下での（±）−Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−ａ−ホスホノグリシントリメチルエステルでの３の処理により、式５（Ｒ３＝メチル、Ｒ４＝ベンジルオキシ）のデヒドロアミノ酸が直接得られる。Ｌ−アミノ酸６への５のエナンチオ選択的還元反応は、この目的に適した多くの還元剤、例えば、最近記載されたエチル−ＤｕＰＨＯＳロジウム試薬〔Ｂｕｒｋ， Ｍ．Ｊ．， Ｆｅａｓｔｅｒ， Ｊ．Ｅ．； Ｎｕｇｅｎｔ， Ｗ．Ａ．； Ｈａｒｌｏｗ， Ｒ．Ｌ．， Ｊ． Ａｍ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． １９９３， １１５， １０１２５〕を用いることにより、基本的には文献の手順を用いて実施することができる。
【００９６】
【化５５】
0003555876.tif 000031
【００９７】
本発明の化合物への構造６の化合物の変換の一方法を、反応スキーム２に示す。Ｒ２を取り込んでいる保護基は、Ｒ２、並びにＲ３及びＲ４の特定の選択に応じた条件下で除去することができる。これらの基の選択は、特定の標的化合物に依存する。一般的な様々な保護基、及びそれらの用途が、「Ｔ．Ｗ． Ｇｒｅｅｎ ＆ Ｐ．Ｇ．Ｍ． Ｗｕｔｓ， Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， ２ｎｄ ｅｄ．， Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９９１」に記載されている。例えば、Ｒ２がｔ−ブチル基であり、Ｒ３が低級アルキルであり、Ｒ４が、ベンジルオキシ基であるか、又は本発明の化合物のアシル基の一つ、例えばオルト置換アリールの部分を表すかするとき、適切な捕集剤、例えばトリエチルシラン又はアニソールの存在下での、そのままでか、又はジクロロメタン溶液中でのトリフルオロ酢酸による処理によって、式７の化合物が得られる。この化合物は、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて、式８のカルボン酸と結合させて、式９の化合物を得ることができる。式８のカルボン酸で、Ｒ５は、置換アルキル基、置換芳香環、又は置換複素芳香環を表してよい。Ｒ５は、適切に保護された反応性に富む官能基も組み込んで、本発明の化合物への最終的な変換を可能とすることができる。そのような基の選択及び使用は、当業者には明白であると思われる。
【００９８】
Ｒ４の選択、及び合成の目標がエステルであるか、酸であるかに応じて、化合物９は、本発明の化合物であるか、又はＲ４が保護基、例えばベンジルオキシ基である場合は、それを、適切な条件下、例えば低級アルコールのような適切な溶媒中でのＰｄ（Ｃ）上の接触水素化によって除去して、式１０の化合物を得てもよい。この中間体は、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて、式１１のカルボン酸と結合させて、式１２の化合物を得ることができる。式１１のカルボン酸では、Ｒ６は、本発明の化合物の一部、例えばオルト置換アリール又はヘテロアリールを表してよい。これらの化合物は、公知化合物であるか、又は公知の方法によって製造することができる。Ｒ６は、適切に保護された反応性に富む官能基も組み込んで、本発明の化合物への最終的な変換を可能とすることができる。そのような基の選択及び用途は、当業者には明白であると思われる。酸１３が標的化合物であるならば、式１２の化合物の変換は、Ｒ３、並びにＲ５及びＲ６の部分として存在するいかなる官能基の特定の選択に適した、標準的加水分解条件を用いて実施することができる。Ｒ３が低級アルキルである場合は、水性ＴＨＦ中でのアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化リチウムによる処理が、概して効果的である。
【００９９】
【化５６】
0003555876.tif 000032
【０１００】
反応スキーム３では、Ｒ７が、保護基、又はプロドラッグに用いるのに適した基として役立ち得る低級アルキル、例えばメチル、エチル、ｔ−ブチルなどの基であるか、又は固相樹脂、例えばワング樹脂との結合を表す、式１４の化合物を、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて、式１１のカルボン酸と結合させて、式１５の化合物を得る。１５のニトロ基の還元は、例えばＰｄ（Ｃ）を触媒として用いる接触水素化によってか、又は標準的還元剤、例えばＳｎＣｌ２による処理によって実施することができる。その結果得られる構造１６の化合物は、数系列の化合物の枢要な中間体として役立つ。スキーム３で強調された事例では、これを、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて、式８の酸と結合させて、式１７の化合物を得ることができる。化合物１７は、Ｒ７の性質によっては、本発明の化合物であり、又は適切な加水分解の手順によって、例えばＲ７が低級アルキルである場合、水性アルコール中での過剰なアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化リチウムによる処理による加水分解によって、本発明の化合物へと変換してもよい。Ｒ７が、固相合成に適した樹脂を表すとき、適切な加水分解条件は、樹脂の選択に依存することになる。ワング樹脂の場合、適切な捕集剤の存在下でのトリフルオロ酢酸による処理によって、式１８の酸が得られる。
【０１０１】
【化５７】
0003555876.tif 000033
【０１０２】
固相合成に特に充分に適した方法では、Ｎ′−Ａｌｌｏｃ−アミノ−Ｎａ−Ｆｍｏｃで保護された、式１９のフェニルアラニン誘導体を、固相合成に適した樹脂、例えばワング樹脂に、標準的なカップリング手順を用いて、例えば、２，６−ジクロロベンゾイルクロリドとの混合無水物を形成させ、Ｎ−メチルピロリジノンのような極性非プロトン性溶媒中でのカップリング反応を実施することによって結合させて、Ｒ７’が樹脂を表す、構造２０の化合物を得ることができる。Ａｌｌｏｃ基は、標準的な方法、例えばＰｄ０の供給源となる触媒、例えばＰｄ（Ｐｈ３Ｐ）２Ｃｌ２の存在下で、ｎＢｕ３ＳｎＨのような還元剤による処理によって除去して、構造２１のアミン誘導体を得ることができる。この化合物は、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて、式８のカルボン酸と結合させて、式２２の化合物を得ることができる。Ｆｍｏｃ保護基は、ペプチド化学を実践する者には周知である標準的な塩基処理、例えばＤＭＦ中でのピペリジンによるそれを用いて、２２から除去して、式２３のアミンを得ることができる。得られる化合物２３は、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて、式１１のカルボン酸と結合させて、式２４の化合物を得ることができる。最後に、構造２４の化合物を、樹脂の特定の選択に応じた条件下で、樹脂から開裂除去することができる。例えば、ワング樹脂の場合、必要に応じた捕集剤の存在下でのジクロロメタン中のトリフルオロ酢酸による酸処理により、式１８の化合物が得られる。
【０１０３】
特定の合成の標的に応じて、１９からの保護基の除去の順序は、Ｆｍｏｃ基を最初に除去するように変更してもよく、得られたアミンの式１１の酸とのカップリングを実施した後に、Ａｌｌｏｃ基を除去し、生成物を式８の酸と結合させ、樹脂から切断する。保護基の選択も、樹脂の反応性、又はＲ７’の選択、並びにＲ５及びＲ６に組み込んだいかなる官能基の性質を反映して、変更することができる。
【０１０４】
【化５８】
0003555876.tif 000034
【０１０５】
３−又は４−（アルキルアミノ）フェニルアラニン誘導体から誘導される化合物は、反応スキーム５に概略を示したとおりに製造することができる。式１６又は７の化合物は、適切な溶媒、例えばエチルエーテル中でジアゾメタンで処理して、それぞれ、Ｒ８がメチルである、式２５及び２６の生成物を得る。これに代えて、構造１６又は７の化合物は、低級アルキルアルデヒド又はケトン、例えばアセトンで処理して、中間体のシッフ塩基を得、次いでこれを、接触水素化、又は有機酸、例えば酢酸の存在下でシアノホウ水素化ナトリウムによる還元に付して、Ｒ８がメチル以外の低級アルキルである、式２５又は２６の化合物を得る。プロドラッグエステル２７もしくは２８、又は対応する酸２９もしくは３０への、それぞれ、化合物２５もしくは２６の変換は、反応スキーム２及び３に上記したとおりに実施することができる。
【０１０６】
【化５９】
0003555876.tif 000035
【０１０７】
３−又は４−スルホニルアミノフェニルアラニン誘導体を製造するには、式７、１６、２５又は２６の化合物を、Ｒ９が置換アリール又はヘテロアリール部分である、式３１の塩化スルホニルと、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中で、非求核性塩基、例えばトリエチルアミン又はピリジンの存在下、約０℃ないし室温で反応させて、化合物７及び２６について反応スキーム６に示したとおり、それぞれ、構造３２又は３３の化合物を得る。これらは、望みであれば、反応スキーム２及び３に上記した一般的方法を用いて、式３４及び３５の化合物へと更に変換することができる。
【０１０８】
３−又は４−アミノメチルフェニルアラニンから誘導される化合物を製造するには、反応スキーム７に示した手順を用いてよい。Ｒ１０が低級アルキルである式３６の３−もしくは４−ヒドロキシメチルベンゾアートは、公知化合物であるか、又は公知の方法によって製造することができ、Ｒ１１〜Ｒ１３が低級アルキルもしくはフェニルであるシリル化剤、例えばｔ−ブチルジメチルシリルクロリドで、不活性溶媒、例えばジメチルホルムアミド中で、イミダゾールの存在下、約０℃で処理して、式３７のシリル保護された化合物を得る。３７の還元は、適切な様々な還元剤、例えば水素化アルミニウムリチウムを、エーテル又はテトラヒドロフランのような不活性溶媒中で約０℃の温度で用いて行い、その後、水性工程を実施して、中間体のアルコールを得、これを、ベンジルアルコールを対応するアルデヒドへと酸化するのに適した、いくつかの酸化剤のいずれ、例えば活性化二酸化マンガンによって酸化して、式３８のアルデヒドを得ることができる。モノシリル保護されたジオールは、モノシリル化、及び副生物の分離によって、３−又は４−ヒドロキシメチルベンジルアルコールから代替的に得られる。これに代えて、式３７のエステルを、低温度、例えば−７８℃で水素化アルミニウムジイソブチルを用いて、式３８のアルデヒドへと直接還元してもよい。
【０１０９】
式３９のデヒドロアミノ酸を得るための３８の反応は、Ｒ３が低級アルキルであり、Ｒ４が、アルコキシ基、例えばベンジルオキシもしくはｔ−ブトキシ−であるか、又は本発明の化合物のアシル基の１つの一部、例えばオルト置換アリールもしくはヘテロアリールを表す、式４のウィッティッヒ試薬による処理によって実施することができる。例えば、適切な塩基、例えばテトラメチルグアニジンの存在下での（±）−Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−ａ−ホスホノグリシントリメチルエステルによる３８の処理により、式３９（Ｒ３＝メチル、Ｒ４＝ベンジルオキシ）のデヒドロアミノ酸が直接得られる。Ｌ−アミノ酸４０への３９のエナンチオ選択的還元反応は、この目的に適した多くの還元剤のうち１種、例えば、最近記載されたエチル−ＤｕＰＨＯＳロジウム試薬を用いることによって実施することができる。本発明の化合物へと４０を更に変換する最適の手順がＲ４及びＲ３の選択に依存することは、当業者には容易に明白であると思われる。Ｒ３が低級アルキルであり、Ｒ４がベンジルオキシである場合については、式４１のアミンへの変換は、好都合には、還元剤としてのギ酸アンモニウムの存在下、適切な溶媒、例えばメタノール中でのＰｄ（Ｃ）上での４０の接触転移水素化によって実施することができる。式１１のカルボン酸による４１のアシル化は、反応スキーム２に上記されたとおりに実施して、式４２の化合物を得ることができる。シリル保護基の除去の条件は、Ｒ１１〜Ｒ１３の特定の選択に依存することになる。Ｒ１１、Ｒ１２＝メチル、かつＲ１３＝ｔ−ブチルの場合、この基は、Ｒ３の選択に適切である溶媒、例えば、Ｒ３がメチルである場合は、メタノール中での強酸、例えば塩酸による処理によって、容易に除去される。
【０１１０】
得られる式４３のベンジル性アルコールは、類似の変換のために充分に確立された手順を用いて、式４５のアミンへと変換することができる。例えば、式４３のアルコールは、プロトン受容体、例えばピリジンの存在下でのメタンスルホニルクロリドによる処理、次いで、ジメチルホルムアミドのような極性非プロトン性溶媒中でのアルカリ金属アジ化物、例えばアジ化ナトリウムによる置換によって、離脱基、例えばメシラートへと変換することができる。これに代えて、式４４のアジ化物への４３からの変換は、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ， Ａ．Ｓ．； Ｈｕｍｐｈｒｅｙ， Ｇ．Ｒ．； ＤｅＭａｒｃｏ， Ａ．Ｍ．； Ｍａｔｈｒｅ， Ｄ．Ｊ．； Ｇｒａｂｏｗｓｋｉ， Ｅ．Ｊ．Ｊ．， Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９９３， ５８， ５８８６−５８８８に記載のとおり、ジフェニルホスホロアジダートによる処理によって直接実施することができる。式４５のアミンへのアジ化物４４の還元は、アジ化物からアミンへの変換に適した多数の手段、例えば、ジクロロメタン又はＴＨＦのような不活性溶媒中でのホスフィン、例えばトリフェニルホスフィンによる処理の後、水性工程、又は低級アルカノールもしくはテトラヒドロフランのような、接触水素化に適した溶媒中での適切な触媒、例えばＰｄ−Ｃ上での接触水素化によって、実施することができる。得られる式４５のアミンは、他の反応スキームに記載された遊離アミンに適用できる手順を用いて、対応する本発明の化合物へと変換することができる。例えば、反応スキーム２に記載された条件下での、式８のカルボン酸との４５のカップリングにより、式４６のアミドが得られ、望みであれば、それを、反応スキーム２に記載されたとおり、塩基で触媒される加水分解によって、式４７の酸へと更に変換する。
【０１１１】
【化６０】
0003555876.tif 000036
【０１１２】
【化６１】
0003555876.tif 000037
【０１１３】
尿素誘導体を合成するには、式２６の化合物を、Ｒ１４が、置換アリール、置換へテロアリール又は置換低級アルキルである、潜在的に反応性に富む置換基を慣用の保護基対策を用いて適宜保護した、式４９のイソシアン酸エステルにより、適切な不活性溶媒、例えばジクロロメタン中で処理して、式５０の尿素を得る。より一般的には、式２６の化合物を、ホスゲン等価体、例えばトリホスゲンにより、非求核性プロトン受容体、例えばジイソプロピルエチルアミンの存在下、ジクロロメタンのような不活性溶媒中で処理して、式４８の中間体を得ることができる。その後の、Ｒ１５及びＲ１６が、独立に、水素、置換低級アルキル、置換アリール、置換ヘテロアリールであるか、又は一緒になって、置換５、６もしくは７員環を形成する、式５１のアミンによる式４８の化合物の処理によって、式５２の化合物を得る。望みであるならば、本発明の化合物への５０又は５１の更なる変換は、反応スキーム５に記載されたとおりに実施することができる。
【０１１４】
【化６２】
0003555876.tif 000038
【０１１５】
イミドを合成するには、Ｒ１が、Ｈ又は低級アルキルであり、Ｒ６が、前記に定義のとおりであり、Ｒ７″が、Ｈ、もしくは置換ベンジル、ｔ−ブチル、アリルなどのような容易に開裂除去し得る基であるか、又はプロドラッグのエステルが最終生成物として望まれる場合は、そのエステルの基、例えばエチルである、構造５３のアミノフェニルアラニン誘導体を用いる。式５３の化合物は、反応スキーム２に上記された中間体から容易に得ることができる。不活性溶媒、例えばジクロロメタン中での、式５３の化合物と式５４の環状無水物との反応により、式５５の開環中間体が得られる。５４が意味する構造は、縮合芳香環又は複素芳香環を組み込んでよい、二環式の分子を包含する。５４に代えて、環状イミドを形成できるジカルボン酸を用いることも可能である。後者の場合は、縮合剤、例えばカルボニルジイミダゾールを、第一工程で用いなければならない。脱水環化を実施できるカルボニルジイミダゾールのような試薬による、式５５の化合物の処理により、式５６のイミドが得られる。式５４の無水物に存在した官能基のそれ以上の操作、及びＲ７″の修飾を、イミド官能基の存在と適合し得る標準的な化学を用いて、望みに応じて化合物５６で実施して、更に類似体を得ることができる。
【０１１６】
Ｒ１がハロゲン、好ましくはクロロである、本発明の化合物を合成するには、適切なハロゲン原子を、分子中の追加の官能性の性質に応じて、合成の途中の様々な時点で挿入することができる。例えば、Ｒ１が水素である、式６の化合物は、プロトン受容体、例えば酢酸ナトリウムの存在下で、穏やかな塩素化剤、例えばＮ−クロロスクシンイミドで処理して、Ｒ１がクロロである、対応する式６の化合物を得ることができる。６を３−アミノ−Ｌ−フェニルアラニンから誘導する場合は、位置異性体の混合物が結果的に生じることがあり、これらは、合成全体の好都合な時点で分離してよい。上記のスキームに記載されたその他の中間体は、特定の目的分子のためのハロゲン化に更に適した出発材料であり得る。個々の候補となる出発物質の特定の長所は、当業者には明らかであると思われる。
【０１１７】
【化６３】
0003555876.tif 000039
【０１１８】
反応スキーム１０に記載された、式６２のチアゾリジノンを合成するには、Ｒ６及びＲ７が前記に定義されたとおりである、構造１６のアミノフェニルアラニン誘導体を用いることができる。１６と、Ｒ２０が水素、低級アルキル又はアリールであり得る、式５９のａ−メルカプトカルボン酸、例えばａ−メルカプト酢酸、及びＲ２１がアルキル、ヒドロキシアルキル又は置換アリール基であり得る、式６０のアルデヒド、例えばベンズアルデヒドとの、ベンゼン、ＴＨＦ又は低級アルコール、例えばメタノールのような適切な溶媒中での、４Å分子ふるいのような水捕集剤の存在下、６０〜８０℃での反応により、式６１の化合物が得られる。化合物６１は、Ｒ７の性質によっては、本発明の化合物であり、又は適切な加水分解の手順によって、例えばＲ７が低級アルキルである場合、水性アルコール中での過剰なアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウムによる処理によって、本発明の化合物へと変換することができる。Ｒ７が、固相合成に適した樹脂を表すとき、適切な加水分解条件は、樹脂の選択に依存することになる。ワング樹脂の場合、適切な捕集剤の存在下でのトリフルオロ酢酸による処理によって、式６２の酸が得られる。順序は、関連するアニリン、例えば、Ｒ１が低級アルキル又はハロゲンである、式７の化合物で開始して、対応するチアゾリジノンを得ることができる。
【０１１９】
【化６４】
0003555876.tif 000040
【０１２０】
反応スキーム１１に示した、式６７のイミダゾリジノンを合成するには、Ｒ６及びＲ７が前記に定義されたとおりである、構造１６のアミノフェニルアラニン誘導体を用いてよい。化合物１６は、反応スキーム３に記載された合成を経由して、容易に得ることができる。この化合物を、式６３のＮ−保護ａ−アミノ酸と結合させることができるが、式中、Ｒ２２は低級アルキル又はアリール基であり、Ｒ２３は、天然又は非天然のＤ−もしくはＬ−ａ−アミノ酸の側鎖であることができるか、あるいはＲ２２及びＲ２３は、一緒になって、環、例えばプロリン又はピペコリン酸の環を形成することができ、Ｒ２４は、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ２２及びＲ２３の特定の選択に適した、標準的アミン保護基、例えばｔ−ブトキシカルボニルであってよい。このカップリング反応は、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて実施して、式６４の化合物を得ることができる。保護基Ｒ２４の性質によっては、適切な脱保護法を用いて、式６５の化合物を得る。保護基Ｒ２４がＢｏｃ基である場合、脱保護は、室温でのジオキサン中のＨＣｌとの６４の反応によって実施することができる。化合物６５と、Ｒ２１が上記に定義されたとおりである、式６０のアルデヒドとの、適切な溶媒、例えばＴＨＦ中での、４Å分子ふるいのような水捕集剤の存在下、６０〜８０℃での反応により、式６６の化合物が得られる。化合物６６は、Ｒ７の性質によっては、本発明の化合物であり、又は適切な加水分解の手順によって、例えばＲ７が低級アルキルである場合、水性アルコール中でのアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウムによる処理による加水分解により本発明の化合物へと変換して、式６７のカルボン酸を得ることができる。
【０１２１】
【化６５】
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【０１２２】
反応スキーム１２に示した、式６８のイミダゾリジノンを合成するには、Ｒ６及びＲ７が前記に定義されたとおりである、構造１６のアミノフェニルアラニン誘導体を用いる。化合物１６は、Ｒ７が低級アルキルである場合は、反応スキーム３に記載された合成を経由して、容易に得ることができる。この化合物は、Ｒ２５が、天然又は非天然のＤ−もしくはＬ−ａ−アミノ酸の側鎖であることができ、Ｒ２６が、ペプチド化学で慣用される種類の窒素保護基、例えばＦｍｏｃである、式６９のＮ−保護ａ−アミノ酸と、標準的なペプチドカップリング条件、例えば、０℃ないし室温の温度で、ＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒中のＤＩＰＥＡの存在下でＨＢＴＵを用いて結合させて、式７０の化合物とすることができる。保護基Ｒ２６の性質によっては、適切な脱保護法を用いて、式７１の化合物を得る。保護基Ｒ２６が、Ｆｍｏｃ基である場合は、ペプチド化学を実践する者には周知である、標準的な塩基処理、例えばＤＭＦ中のピペリジンによるそれを用いて、７０から除去して、式７１のアミンを得る。次いで、化合物７１を、ジクロロメタン又はＴＨＦのような適切な溶媒中で、４Å分子ふるいのような水捕集剤の存在下、２５〜６０℃で、Ｒ２１が上記に定義されたとおりである、アルデヒド６０と反応させて、式７２のイミンを得ることができる。次いで、イミン７２を、Ｒ２７がアルキル又はアリール基であることができる、式７４の塩化アシルのようなアシル化剤により、ＤＩＰＥＡ又はＤＢＵのような塩基の存在下、ジクロロメタン又はＴＨＦのような適切な溶媒中で２５〜６０℃で処理して、式７３のアシルイミダゾリジノンを得る。これに代えて、酸無水物又は混合無水物のような反応性アシル化基を、この反応に用いてもよい。化合物７３は、本発明の化合物であり、又はＲ７の性質に応じて、適切な加水分解の手順によって、例えばＲ７が低級アルキルである場合、水性アルコール中でのアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウムによる処理による加水分解によって、本発明の化合物へ変換し、酸性化の後に式６８のカルボン酸とすることができる。順序は、関連するアニリン、例えば、Ｒ１が低級アルキル又はハロゲンである式７の化合物で開始して、対応する３−アシルイミダゾリジノンを得る。
【０１２３】
【化６６】
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【０１２４】
商業的に入手できないオルト置換安息香酸誘導体は、慣用の手段によって製造することができる。例えば、オルト置換ヨウ化アリール又はトリフラートを、一酸化炭素、及び適切なパラジウム触媒の存在下でカルボニル化する。そのようなヨウ化物又はトリフラート中間体の製造は、望みの特定の置換形式に依存し、アニリンの直接ヨウ素化、又はジアゾ化と、その後の、ヨウ素源、例えばヨウ化カリウムによる処理によって得られる。トリフラートは、トリエチルアミン又はジイソプロピルエチルアミンのような塩基の存在下、不活性溶媒中でのトリフルオロメタンスルホン酸無水物による処理のような、慣用の手段によって、対応するフェノールから誘導してよい。オルト置換安息香酸を得るその他の手段は、アルキルグリニャール試薬による７５のような２−メトキシフェニルオキサゾリン誘導体の処理とその後の、Ｍｅｙｅｒｓ， Ａ．Ｉ．， Ｇａｂｅｌ， Ｒ．， Ｍｉｈｅｌｉｃｋ， Ｅ．Ｄ．， Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． １９７８， ４３， １３７２−１３７９に記載の一般的手順に従う、オキサゾリン環の加水分解を伴い、式７６の酸を得る。２−又は２，６−ジ置換ベンゾニトリルも、対応する安息香酸への好都合な前駆体として役立つ。高度に立体障害されたニトリル類、例えば２−クロロ−６−メチルベンゾニトリルの場合は、酸性又は塩基性条件下での慣用の加水分解は、困難であり、対応するベンズアルデヒドへのＤＩＢＡＬ還元とその後の、クロム酸化剤を用いた酸化によって、より優れた結果が得られる。
【０１２５】
【化６７】
0003555876.tif 000043
【０１２６】
（総論）
融点は、Ｔｈｏｍａｓ−Ｈｏｏｖｅｒ装置で計測し、２４１旋光計である。１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を内部標準として用いて、ＶａｒｉａｎＸＬ−２００及びＵｎｉｔｙｐｌｕｓ４００ＭＨｚ分光計で記録した。電子衝撃（ＥＩ、７０ｅＶ）及び高速原子衝撃（ＦＡＢ）質量スペクトルは、ＶＧＡｕｔｏｓｐｅｃ又はＶＧ７０Ｅ−ＨＦ質量分析計で計測した。カラムクロマトグラフィーに用いたシリカゲルは、フラッシュクロマトグラフィー用の、ＭａｌｌｉｎｋｒｏｄｔのＳｉｌｉＣａｒ ２３０−４００メッシュのシリカゲルであり；カラムは、０〜５ｐｓｉの窒素頭の下で流れを支援して流下させた。薄層クロマトグラムは、ガラス薄層で未補正で実施した。旋光は、Ｅ． Ｍｅｒｃｋが供給した（Ｅ． Ｍｅｒｃｋ Ｎｏ．１．０５７１９）とおりの、シリカゲルで被覆したパーキン−エルマーモデル層プレートで決定し、Ｉ２蒸気への露出、又は水性エタノール中のリンモリブデン酸（ＰＭＡ）によるか、もしくはＣｌ２への露出後の４，４′−テトラメチルジアミノジフェニルメタン試薬（Ｅ． Ｖｏｎ Ａｒｘ， Ｍ． Ｆａｕｐｅｌ ＆ Ｍ． Ｂｒｕｇｇｅｒ， Ｊ． Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ， １９７６， １２０， ２２４−２２８により調製）によるかのいずれかでの吹付けによって、検分箱内での２５４ｎｍＵＶ光の下で視認することによって視覚化した。
【０１２７】
逆相高圧液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）は、３×３０ｃｍのＷａｔｅｒｓ Ｄｅｌｔａ Ｐａｋという１５μＭのＣ−１８カラムを用いた、アセトニトリル：水（それぞれ０．７５％ＴＦＡを含有）の、代表的には５〜９０％のアセトニトリルの勾配を用いた、４０ｍｌ／分の流速で３５〜４０分間のＷａｔｅｒｓ Ｄｅｌｔａ Ｐｒｅｐ ４０００、又は４１．４×３００ｍｍ、８μＭのＤｙｎａｍａｘ（登録商標）Ｃ−１８カラムを用いた、４９ｍｌ／分の流速、及び上記と類似のアセトニトリル：水の勾配でのＲａｉｎｉｎ ＨＰＬＣのいずれかを用いて実施した。ＨＰＬＣの条件は、代表的には、フォーマット（５−９５−３５−２１４）に記載されており；これは、水中の５％から９５％までのアセトニトリルの３５分間にわたる線形勾配を意味するが、この間、流出物をＵＶ検出器で２１４ｎｍの波長で監視した。
【０１２８】
塩化メチレン（ジクロロメタン）、２−プロパノール、ＤＭＦ、ＴＨＦ、トルエン、ヘキサン、エーテル及びメタノールは、フィッシャーの試薬グレードのものであり、特筆された以外は、更に精製することなく用いた。アセトニトリルは、フィッシャーのＨＰＬＣグレードであり、そのままで用いた。
【０１２９】
（定義）
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン、
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、
ＨＯＢＴ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、
ＢＯＰ：〔（ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシ〕トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウム＝ヘキサフルオロホスファート、
ＨＡＴＵ：Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，３，３，３−テトラメチルウロニウム＝ヘキサフルオロホスファート、
ＨＢＴＵ：Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウム＝ヘキサフルオロホスファート、
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン、
ＤＭＡＰ：４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン、
ＤＰＰＡ：アジ化ジフェニルホスホリル
ＤＰＰＰ：１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン、
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデカ−７−エン、
ＮａＨ：水素化ナトリウム
ブライン：飽和塩化ナトリウム水溶液、
ＴＬＣ：薄層クロマトグラフィー、
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＢＯＰ−Ｃｌ：ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィンクロリド、
ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリジノン
【０１３０】
実施例
実施例１．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
ジクロロメタン（２０ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２．６ｇ、８．６ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（２．３ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）、次いで２，６−ジクロロベンゾイルクロリド（１．９９ｇ、９．５ｍｍｏｌ）を室温にて添加した。混合物を１５時間撹拌し、その時点において白色沈殿が形成された。混合物を３０ｍＬのジクロロメタン及び５０ｍＬの水にて希釈した。層を分離し、水性層をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）により抽出した。合わせた抽出物を、ブラインにて洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。溶媒の濾過及び濃縮により、４．０３ｇ（定量的）の４−〔（２，６−ジクロロフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、白色固体として得た：融点１４８〜１５１℃。
【０１３１】
実施例２．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩の合成
４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．８６ｇ、４．０ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中で室温にて１０ｍＬの４規定塩酸にて処理した。５分後に固体が溶液となり、混合物を１時間撹拌し、２５ｍＬのエチルエーテルを添加して生成物を沈殿させた。固体を濾過により集め、ヘキサンにて洗浄した。得られた水性的なゴム状の固体を５０ｍＬのメタノールに溶解し、濃縮した。高真空下で乾燥後、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（１．６４ｇ、９７％）を明黄色固体として得た。融点１５８〜１６１℃。
【０１３２】
実施例３．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
【０１３３】
【化６８】
0003555876.tif 000044
【０１３４】
ＤＭＦ（１２ｍＬ）中の４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（１．２３ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）、２−クロロ−６−メチル安息香酸（０．５０ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．１６ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．３３ｍＬ、７．６ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて１５時間撹拌した。該混合物を酢酸エチル（２５０ｍＬ）にて希釈し、０．５規定ＨＣｌ（２×８０ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（２×８０ｍＬ）及びブライン（２×８０ｍＬ）にて洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。溶液を濾過し、濃縮して黄色のゴム状物質を得、これを酢酸エチル−ヘキサンから結晶化して、次の工程にて使用するために適したＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（０．７５ｇ）を得た。母液を濃縮し、１：１酢酸エチル：ヘキサンにて溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、更に０．６２５ｇを得た。
【０１３５】
実施例４〜１２．以下に示す化合物を、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩及び適切な安息香酸誘導体から、実施例３に記述された方法に従って調製した。
【０１３６】
【化６９】
0003555876.tif 000045
【０１３７】
【表１】
0003555876.tif 000046
【０１３８】
実施例１３．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
エタノール（４５ｍＬ）中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．３１ｇ、２．６ｍｍｏｌ）の溶液及び１．０規定水酸化ナトリウム（４５ｍＬ、４５ｍｍｏｌ）を室温にて一夜撹拌し、透明な溶液を得た。混合物を１規定塩酸にて中和して１．２８ｇの白色固体を沈殿させた。母液を酢酸エチル（２×５０ｍＬ）により抽出し、合わせた抽出物を飽和ブラインにて洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させて０．５６ｇを得た。酢酸エチルからの再結晶の最初の収穫物として、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（０．７７ｇ）を得た。酢酸エチルからの再結晶の第２の収穫物として、更に０．２０ｇを得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：測定質量５０５．０４８３。計算質量５０５．０４８８（Ｍ＋Ｈ）。
【０１３９】
実施例１４．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンナトリウム塩の合成
１．０規定ＮａＯＨ（０．３ｍＬ）中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（０．１５ｇ）の溶液を、水、次いで水中の４０−５０％メタノールにて溶出するＣ−１８逆相シリカゲル（４０〜６３μＭ、ＲＰシリカゲル６０、ＥＭ  Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓにより供給、カタログ番号１０１６７）の２×２０ｃｍ開放カラムにかけて、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンナトリウム塩（１４７ｍｇ）を、凍結乾燥後に無定形白色固体として得た。
【０１４０】
実施例１５〜３０．以下に示される化合物を実施例１３に記述される方法を使用して、対応するメチルエステルから調製した。
【０１４１】
【化７０】
0003555876.tif 000047
【０１４２】
【表２】
0003555876.tif 000048
【０１４３】
実施例２９．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−（メチルチオ）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
酢酸エチル（１２ｍＬ）及び水（６ｍＬ）中の４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−（メチルチオ）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（０．２５ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）及びオキソン（１４７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて２時間撹拌し、オキソン（１４７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の第２の部分を添加した。該混合物を一夜撹拌し、その時点でＴＬＣ（２０：１のジクロロメタン：メタノール）により、２種のスルホキシドに加えて出発物質及びスルフォンの存在が示された。層を分離し、水性層を酢酸エチルにより抽出し、合わせた抽出物を飽和ブラインにて洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。濃縮後の残渣を２０：１のジクロロメタン：メタノールにて溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−（メチルスルフィニル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２１８ｍｇ）を、ジアステレオマーの混合物として得た。
【０１４４】
実施例３０．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−（メチルスルフィニル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
加水分解を、実施例１３に記述されるように実施した。４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−（メチルスルフィニル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２１４ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）から出発し、生成物のアセトニトリル：水により溶出するＲＰ  ＨＰＬＣによる単離及び引き続く凍結乾燥により、より極性のジアステレオマー、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−（メチルスルフィニル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン（６３．６ｍｇ）を、無定形固体、ＨＲ  ＭＳ：測定質量５４１．０３８５、計算質量５４１．０３６８（Ｍ＋Ｎａ）として得、引き続いてより極性の低いジアステレオマー（７４．２ｍｇ）、ＨＲ  ＭＳ：測定質量５４１．０３５１、計算質量５４１．０３６８（Ｍ＋Ｎａ）を得た。
【０１４５】
実施例３１．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ａ．  ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の４−〔〔（２−プロペニルオキシ）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（９３５ｍｇ、３．５４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡＴ（６５８ｍｇ、５．３１ｍｍｏｌ）、２−ベンジル安息香酸（１．１３ｇ、５．３１ｍｍｏｌ）及びＤＣＣ（１．０９ｇ、５．３１ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて一夜撹拌した。混合物を水にて希釈し、酢酸エチルにて抽出した。合わせた抽出物を水及び飽和ブラインにて洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。残渣を少量のジクロロメタン及びメタノールを含む酢酸エチルから再結晶し、次の工程にて使用するために適した４−〔〔（２−プロペニルオキシ）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン（１．２１ｇ、７４％）を得た。
【０１４６】
ｂ．  アルゴンを、４５ｍＬのジクロロメタン中の４−〔〔（２−プロペニルオキシ）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（１．２１ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）及びテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（６１ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）の溶液に５分間通気し、トリブチルスズ  ヒドリド（８００μＬ、２．９ｍｍｏｌ）を添加した。室温にて１．５時間後、混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ）にて希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインにて洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮した。残渣をジクロロメタンに溶解し、エーテル及びヘキサンを添加して９９ｍｇの白色固体を沈殿させた。濾液を濃縮し、残渣をジクロロメタンから再結晶して４−アミノ−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５９４ｍｇ）を得た。
【０１４７】
ｃ．  ５ｍＬのジクロロメタン中の４−アミノ−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２００ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、２，６−ジクロロベンゾイルクロリド（１３１ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１０８μＬ、０．７８ｍｍｏｌ）の混合物を室温にて６時間撹拌した。混合物をジクロロメタン（１０ｍＬ）にて希釈し、水及び飽和ブラインにて洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、残渣を、ヘキサン中の２０〜６０％酢酸エチルにて溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけ、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１９５ｍｇ）を灰白色固体として得た。
【０１４８】
ｄ．  ＴＨＦ：メタノール：水（６ｍＬ、３：１：１）中の４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１９５ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）及び水酸化リチウム（３３．５ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて一夜撹拌し、濃縮した。残渣を１規定ＨＣｌ水溶液にて１０分間摩砕し、固体を遠心分離により集め、水及びエーテルにて洗浄して４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔（２−フェニルメチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン（１６５ｍｇ）を白色粉末として得、これはＨＰＬＣ分析によって９７％の純度であった。ＦＡＢ  ＭＳ  ５６９（Ｍ＋Ｎａ）（１Ｃｌ）、５４７（Ｍ＋Ｈ）（１Ｃｌ）。
【０１４９】
実施例３２．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕カルボニル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
【０１５０】
ａ．  不活性雰囲気下で、ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）中の３−クロロ−４−メトキシカルボニル安息香酸（１．１３ｇ、５．２７ｍｍｏｌ）、３−ヒドロキシベンジルアミン塩酸塩（０．８５ｇ、５．３５ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（２．０８ｇ、５．４８５ｍｍｏｌ）の溶液を撹拌しつつ、ＤＩＰＥＡ（３．５４ｍＬ、２６．３３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて一夜撹拌し、次いで揮発成分を真空下で除去した。コハク色の油状残渣を、酢酸エチル（５０ｍＬ）及び０．５規定ＨＣｌ（３０ｍＬ）の間で分配させ、有機抽出物をブライン（３０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（３０ｍＬ）及びブライン（３０ｍＬ）にて順次洗浄した。水性層を酢酸エチル（３０ｍＬ）にて順次逆洗浄した。合わせ、乾燥（ＭｇＳＯ４）させた有機層の蒸発により、１．７ｇの粗生成物を得た。この物質をクロマトグラフィー（シリカゲル；５０ｇ）にかけ、酢酸エチル−ヘキサン（２：３）にて溶出してアミドを無色油状物（１．３ｇ）として得た。へーテル−ヘキサンからの結晶化により、１．１２ｇの２−クロロ−４−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕カルボニル〕安息香酸  メチルエステルが無色固体として得られた。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ１６Ｈ１４ＣｌＮＯ４）測定質量３２０．０６８１、計算質量３２０．０６８９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５１】
ｂ．  ０．５規定水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）中の２−クロロ−４−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕カルボニル〕安息香酸  メチルエステル（９００ｍｇ；２．８２ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴン下で、室温にて撹拌した。２時間後、溶液を１規定ＨＣｌ（１１ｍＬ）にて酸性化し、得られた無色固体を濾過し、水にて洗浄し、真空下で乾燥させて８４０ｍｇの２−クロロ−４−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕カルボニル〕安息香酸を得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ１５Ｈ１２ＣｌＮＯ４）測定質量３０６．０５４８、計算質量３０６．０５３３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５２】
ｃ．  アルゴン雰囲気において、ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２−クロロ−４−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕カルボニル〕安息香酸（４５ｍｇ；０．１４７２ｍｍｏｌ）、４−（２，６−ジクロロベンゾイルアミノ）−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（６０ｍｇ；０．１４８８ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（５９ｍｇ；０．１６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１０２ｍＬ；０．５８５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて１７時間撹拌し、次いで真空下で濃縮乾固し、残渣をジクロロメタン（２５ｍＬ）及び０．５規定ＨＣｌ（１０ｍＬ）の間で分配させた。有機層を水にて洗浄し、水性層を次いでジクロロメタンにて逆洗浄した。合わせたジクロロメタン抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、蒸発させて８０ｍｇの粗物質を得、これをメタノール−酢酸エチルから結晶化して３８ｍｇのＮ−〔〔２−クロロ−４−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕カルボニル〕フェニル〕カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを得た。融点２３０〜２３２℃。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ３２Ｈ２６Ｃｌ３Ｎ３Ｏ６）測定質量６５４．０９５２、計算質量６５４．０９６５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５３】
ｄ．  メタノール（０．３５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．３５ｍＬ）中のＮ−〔〔２−クロロ−４−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕カルボニル〕フェニル〕カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（３５ｍｇ；０．０５３ｍｍｏｌ）の溶液を、１規定水酸化リチウム水溶液（０．１６ｍＬ）により処理し、混合物をアルゴン下、室温にて９０分間撹拌した。溶液を減圧下で濃縮し、次いで水（５ｍＬ）にて希釈し、ジエチルエーテル（２×５ｍＬ）により抽出した。分離された水性層を１規定ＨＣｌ（０．１８ｍＬ）にて酸性化し、得られた無色固体を濾別し、水にて洗浄し、乾燥させて２９ｍｇのＮ−〔〔２−クロロ−４−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕カルボニル〕フェニル〕カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ３１Ｈ２４Ｃｌ３Ｎ３Ｏ６）測定質量６４０．０８２１、計算質量６４０．０８０９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５４】
実施例３３．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔５−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕−１Ｈ−テトラゾール−１−イル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ａ．  無水酢酸（１００ｍＬ；１．０６ｍｏｌ）中の３−ヒドロキシフェニル酢酸（１０．２ｇ；６７ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁物を、無水条件下でピリジン（０．５ｍＬ）により処理した。穏やかな発熱反応において、固体は数分間で溶解し、混合物を４０℃に５時間維持した。反応物を真空下で約半分の体積まで濃縮し、次いで水（３０ｇ）を氷片の形態で温度が＜４５℃に維持される速度で添加した。発熱が収まった際に水の第２の部分（２００ｍＬ）をゆっくり添加し、混合物を更に３０分間撹拌した。沈殿した固体を濾過し、水にて洗浄し、真空下、Ｐ２Ｏ５にて一定重量となるまで乾燥させ、３−アセトキシフェニル酢酸（１１．７ｇ）を得、これを更なる精製無しに使用した、
【０１５５】
不活性雰囲気において、ベンゼン（２５ｍＬ）中の上記３−アセトキシフェニル酢酸（１．９４２ｇ；１０ｍｍｏｌ）、ジフェニルホスホリルアジド（２．８ｇ；１０．１７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１．９２ｍＬ；１１ｍｍｏｌ）の溶液を室温において１時間撹拌し、次いで反応温度を７０℃までゆっくり上昇させた。反応温度が約５５℃に達すると気体発生が明らかになり始め、反応温度が７０℃に近づくとかなり激しくなった。その温度において３０分間で、気体発生が停止し、形成された３−アセトキシベンジルイソシアネートを含む反応溶液を４０℃に冷却した。ＤＩＰＥＡの残る部分（３．８４ｍＬ；２２ｍｍｏｌ）及び続いて４−アミノ−２−クロロ安息香酸メチルエステル塩酸塩（２．９５ｇ；１３．３ｍｍｏｌ）を添加し、褐色がかった紫色の溶液をアルゴン下で還流しつつ一夜撹拌、加熱した。反応混合物を冷却し、ベンゼン（５０ｍＬ）にて希釈し、１規定ＨＣｌ（５０ｍＬ）及び希釈ブラインにて順に洗浄した。水性層をベンゼンにて再抽出し、次いで合わせて乾燥（ＭｇＳＯ４）させた有機抽出物を蒸発させ、粗製残渣をＨＰＬＣ（シリカゲル；酢酸エチル−ヘキサン−２：３）により精製した。適切な画分の蒸発により、３．２４ｇの固体尿素が得られ、次いでこれをジクロロメタン−酢酸エチルから再結晶して４−〔３−（３−アセトキシベンジル）ウレイド〕−２−クロロ安息香酸メチルエステル（２．７１ｇ）を無色固体として得た。融点１１３〜１１４℃。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ１８Ｈ１７ＣｌＮ２Ｏ５）測定質量３７７．０８９８、計算質量３７７．０９０５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５６】
ｂ．  乾燥アルゴン雰囲気において、乾燥ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（１．６８４ｇ；６．４２ｍｍｏｌ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（１．１３ｇ；６．４２ｍｍｏｌ）及び４−〔３−（３−アセトキシベンジル）ウレイド〕−２−クロロ安息香酸メチルエステル（１．２１ｇ；３．２１ｍｍｏｌ）の溶液を、トリメチルシリルアジド（０．８６ｍＬ；６．４８ｍｍｏｌ）にて処理し、室温にて２４時間撹拌した。ＴＬＣによる反応混合物の試験により、かなりな量の出発物質の存在が示され、したがって、追加量のトリフェニルホスフィン（０．８４２ｇ；３．２１ｍｍｏｌ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（０．５６５ｇ；３．２１ｍｍｏｌ）及びトリメチルシリルアジド（０．４３ｍＬ；３．２１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温にて更に４０時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去後、残渣をジクロロメタン（１００ｍＬ）中に取り、水（２×５０ｍＬ）にて洗浄した。水性抽出物をジクロロメタン（５０ｍＬ）により逆洗浄し、合わせて乾燥（ＭｇＳＯ４）させた抽出物を真空下で蒸発させた。前の実験から、反応により複雑で分離困難な、あるものは脱アセチル化され、及び／又は脱エステル化された数種の生成物の混合物が生じることが確立されていた。したがって、この実験においては残渣をメタノール（３０ｍＬ）及び１規定水酸化リチウム（１５ｍＬ）の混合物に溶解し、混合物を室温にて２時間撹拌してエステル及びフェノール性アセテート基の両者の加水分解を完全に行った。揮発性成分のほとんどを減圧下で除去し、次いで塩基性溶液を水（２０ｍＬ）にて希釈し、ジクロロメタン（２×３０ｍＬ）により洗浄した。水性層を次いで１規定ＨＣｌ（１６ｍＬ）にて酸性化し、酢酸エチル（２×５０ｍＬ）により抽出した。乾燥（ＭｇＳＯ４）させた酢酸エチル抽出物を蒸発させ、所望のアミノテトラゾール及びその位置異性体の約４：１混合物である残渣固体（８１０ｍｇ）をエーテルから結晶化し、５６０ｍｇの２−クロロ−４−〔５−〔（３−ヒドロキシフェニル）アミノ〕テトラゾール−１−イル〕安息香酸を無色固体として得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ１５Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ３）測定質量３４５．０６２４、計算質量３４５．０６２９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５７】
ｃ．  アルゴン雰囲気中で、ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２−クロロ−４−〔５−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕−１Ｈ−テトラゾール−１−イル〕安息香酸（５１ｍｇ；０．１５ｍｍｏｌ）、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（６０ｍｇ；０．１５ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（５９ｍｇ；０．１５５５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＩＰＥＡ（０．１０２ｍＬ；０．５８５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温にて１７時間撹拌し、次いで減圧下で濃縮した。残渣油状物をジクロロメタン（２５ｍＬ）中に取り、０．５規定ＨＣｌ（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）にて順に洗浄した。水性層を次いでジクロロメタンにより逆洗浄した。合わせた有機層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、蒸発させて８５ｍｇの粗生成物を得た。この物質をジクロロメタン−ジクロロエーテルから結晶化し、７９ｍｇの４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔５−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕−１Ｈ−テトラゾール−１−イル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、無色固体、融点１５５〜１５８℃として得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ３２Ｈ２６Ｃｌ３Ｎ７Ｏ５）測定質量６９４．１１５８、計算質量６９４．１１３９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５８】
ｄ．  １規定水酸化リチウム水溶液（０．３３ｍＬ）を、メタノール（０．６６ｍＬ）及びＴＨＦ（０．６６ｍＬ）中の４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔５−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕−１Ｈ−テトラゾール−１−イル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（７５ｍｇ；０．１０８ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温にて９０分間撹拌した。減圧下で溶媒を取り除いた後、残渣を水（２０ｍＬ）に溶解し、ジエチルエーテル（３×５ｍＬ）にて抽出した。水性層をセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）を通して濾過し、次いで１規定ＨＣｌ（０．３５ｍＬ）により酸性化した。得られた無色固体を濾別し、水により洗浄し、真空下で乾燥させて５７ｍｇの４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔５−〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕−１Ｈ−テトラゾール−１−イル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンを得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ３１Ｈ２４Ｃｌ３Ｎ７Ｏ５）測定質量６８０．０９８１、計算質量６８０．０９８３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１５９】
実施例３４．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕スルホニル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ａ．  室温において、濃ＨＣｌ（１０ｍＬ）中の４−アミノ−２−クロロ安息香酸メチルエステル塩酸塩（１．１１ｇ；５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液を、水（３ｍＬ）中のＮａＮＯ２（０．４２ｇ；６．０９ｍｍｏｌ）により一度に処理した。１５分後に得られた懸濁物を、水（１ｍＬ）中のＣｕＣｌ２（０．１５ｇ）を含む激しく撹拌される酢酸（１５ｍＬ）中のＳＯ２の飽和溶液に、２分間で添加した。直ちに激しい気体発生があり、これは１０分後に収まり、そこで反応混合物を氷水（２００ｍＬ）にて希釈した。得られた紫色固体を濾別し、水により洗浄し、次いでジクロロメタンに溶解させた。乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた溶液を真空下で蒸発させ、残渣物質をシリカゲル（５０ｇ）上でのクロマトグラフィーにかけた。ヘキサン中の３０〜４０％ジエチルエーテルにより溶出される適切な画分を、減圧下で濃縮乾固して１．１ｇの３−クロロ−４−メトキシカルボニルベンゼンスルホニルクロリドを無色固体として得た。
【０１６０】
ジクロロメタン（０．５ｍＬ）中の上記３−クロロ−４−メトキシカルボニルベンゼンスルホニルクロリド（０．１４ｇ；０．５２ｍｍｏｌ）をひとまとめで、ジクロロメタン（０．２ｍＬ）中の３−アセトキシベンジルアミン塩酸塩（０．１０５ｇ；０．５２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．２ｍＬ；１．４２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に添加した。反応を周囲温度下で９０分間進行せしめ、次いでジクロロメタン（２０ｍＬ）にて希釈し、０．５規定ＨＣｌ（１０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（１０ｍＬ）及びブライン（１０ｍＬ）にて順に洗浄した。水性層を次いでジクロロメタン（１０ｍＬ）により逆洗浄し、合わせて乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた有機層を濃縮して０．２ｇの油状物を得、これをクロマトグラフィー（シリカゲル；１５ｇ）にかけた。生成物をジエチルエーテル−ヘキサン（４：１）及びジエチルエーテルによりカラムから溶出させて、適切な画分の蒸発後に１６５ｍｇの４−〔（３−アセトキシベンジルアミノ）スルホニル〕−２−クロロ安息香酸メチルエステルを無色固体として得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ１７Ｈ１６ＣｌＮＯ６Ｓ）測定質量３９８．０４６９、計算質量３９８．０４６５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６１】
ｂ．  メタノール（３ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（３ｍＬ）中の４−〔（３−アセトキシベンジルアミノ）スルホニル〕−２−クロロ安息香酸メチルエステル（１６３ｍｇ；０．４１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液を、室温にて１規定水酸化リチウム水溶液（１．６５ｍＬ）により処理した。２時間後に揮発成分を減圧下で除去し、残渣物質を水（１５ｍＬ）に溶解し、溶液をセライトを通して濾過した。濾液を１規定ＨＣｌ（２ｍＬ）にて酸性化し、酢酸エチル（３×１０ｍＬ）にて抽出した。抽出物を次いでブラインにて逆洗浄した後に、それらを合わせ、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、真空下で蒸発させて１４０ｍｇの２−クロロ−４−〔（３−ヒドロキシベンジルアミノ）スルホニル〕安息香酸を得た。生成物の少量の試料を酢酸エチル−ヘキサンから結晶化し、無色固体、融点１６７−１６９℃を得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ１４Ｈ１２ＣｌＮＯ５Ｓ）測定質量３４２、計算質量３４２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６２】
ｃ．  ジメチルホルムアミド（３ｍＬ）中の２−クロロ−４−〔（３−ヒドロキシベンジルアミノ）スルホニル〕安息香酸（５０ｍｇ；０．１４６ｍｍｏｌ）、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（６０ｍｇ；０．１４８６ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（５ｍｇ；０．１５ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．１０２ｍＬ；０．５８５ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン下、室温にて１７時間撹拌し、次いで減圧下で濃縮乾固した。残渣をジクロロメタン（２５ｍＬ）及び０．５規定ＨＣｌ（２５ｍＬ）の間にて分配した。分離された水性相をジクロロメタン（１０ｍＬ）により再抽出し、次いで有機抽出物を水（２×１０ｍＬ）にて洗浄した。合わせたジクロロメタン層を乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、蒸発させて９０ｍｇの粗生成物を暗色油状物として得た。油状物のシリカゲル（９ｇ；４：１酢酸エチル−ヘキサン）でのクロマトグラフィーにより、５５ｍｇの４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕スルホニル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、無色固体として得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ３１Ｈ２６Ｃｌ３Ｎ３Ｏ７Ｓ）測定質量６９０．０６３９、計算質量６９０．０６３５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６３】
ｄ．  １規定水酸化リチウム水溶液（０．２５ｍＬ）をメタノール（０．５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（０．３５ｍＬ）中の４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕スルホニル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５１ｍｇ；０．０７３８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を室温にて９０分間撹拌した後、減圧下で溶媒を取り除いた。最小量のメタノール中の粗生成物を、次いでクロロホルム、メタノール、酢酸及び水（１５：３：１：０．６）の混合物中にて調合されたシリカゲル（５ｇ）のカラムにかけた。カラムを同じ溶媒混合物により溶出させ、適切な画分を合わせて蒸発させた。残渣を脱イオン水から凍結乾燥して３６ｍｇの４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−クロロ−４−〔〔〔（３−ヒドロキシフェニル）メチル〕アミノ〕スルホニル〕フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンを灰白色固体として得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：（Ｃ３０Ｈ２４Ｃｌ３Ｎ３Ｏ７Ｓ）測定質量６７６．０４８２、計算質量６７６．０４７９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１６４】
実施例３５．Ｎ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−４−〔〔（２−プロペニルオキシ）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンのワング樹脂への結合
【０１６５】
【化７１】
0003555876.tif 000049
【０１６６】
粗ガラスフリットを備えた２５０ｍＬの円筒状ガラス製反応容器に１０ｇのワング（Ｗａｎｇ）樹脂を入れた（負荷係数：１．１５ｍｍｏｌ／ｇ、３００メッシュ）。樹脂をジクロロメタン（２×１００ｍＬ）、メタノール（２×１００ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（２×１００ｍＬ）にて洗浄した。膨張した樹脂に、Ｎ−メチルピロリドン（７０ｍＬ）中のＮ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−４−〔〔（２−プロペニルオキシ）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（１１．２ｇ；２３ｍｍｏｌ）及び２，６−ジクロロベンゾイルクロリド（８．０６ｍＬ；５７．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を３０分間激しく振とうした。ピリジン（６．４５ｍＬ；８０．５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を２４時間激しく振とうした。樹脂上に存在するＦｍｏｃの定量的ＵＶ測定によって、樹脂１グラム当たりに、０．７５ｍｍｏｌのＮ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−４−〔〔（２−プロペニルオキシ）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの置換が見出された。
【０１６７】
実施例３６．４−アミノ−Ｎ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンのワング樹脂上の合成
粗ガラスフリットを備えた５００ｍＬの円筒状ガラス製反応容器に、実施例３５にて得られた１０ｇのＮ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−４−〔〔（２−プロペニルオキシ）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン置換ワング樹脂（１０ｇ）、並びに乾燥ジクロロメタン（１５０ｍＬ）中のＰｄ（Ｐｈ３Ｐ）２Ｃｌ２（１．６ｇ、２．３ｍｍｏｌ）及び酢酸（５ｍＬ、８３ｍｍｏｌ）から調製された溶液を入れた。得られた混合物を３０分間激しく振とうし、続いてトリ−ｎ−ブチルスズ  ヒドリド（２０ｍＬ、７４．３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１時間激しく振とうした。混合物にトリ−ｎ−ブチルスズ  ヒドリド（１０ｍＬ、３７ｍｍｏｌ）を添加した。激しい振とうを１時間継続し、混合物を濾過した。得られた樹脂に、乾燥ジクロロメタン（１５０ｍＬ）中のＰｄ（Ｐｈ３Ｐ）２Ｃｌ２（１．６ｇ、２．３ｍｍｏｌ）及び酢酸（５ｍＬ、８３ｍｍｏｌ）から調製された溶液を添加した。混合物を３０分間激しく振とうし、続いてトリ−ｎ−ブチルスズ  ヒドリド（２０ｍＬ、７４．３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１時間激しく振とうした。混合物にトリ−ｎ−ブチルスズ  ヒドリド（１０ｍＬ、３７．１５ｍｍｏｌ）を添加した。激しい振とうを１時間継続した。第２の脱保護サイクルの後に、混合物をジクロロメタン（２×１００ｍＬ）、メタノール（２×１００ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（２×１００ｍＬ）にて洗浄し、引き続く工程にて使用するために適したワング樹脂上の４−アミノ−Ｎ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンを得た。
【０１６８】
実施例３７．ワング樹脂上の４−〔〔（４−キノリニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
粗ガラスフリットを備えた２５０ｍＬの円筒状ガラス製反応容器に、実施例３６にて得られた４−アミノ−Ｎ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン置換ワング樹脂（１０ｇ）、並びに７０ｍＬのＮＭＰ中のキノリン−４−カルボン酸（５．２ｇ、３０ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ（１３．７５ｇ、３０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（６．８ｍＬ）から調製された溶液を入れた。スラリーを４時間激しく振とうした。混合物を濾過し、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）、メタノール（２×１００ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（２×１００ｍＬ）にて洗浄した。洗浄した樹脂にＮＭＰ中の２５％ピペリジン溶液（８０ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて２０分間激しく振とうし、濾過した。この工程を反復し、得られたスラリーを濾過し、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）、メタノール（２×１００ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（２×１００ｍＬ）にて洗浄した。濾過により、次の工程にて使用するために適したワング樹脂上の４−〔〔（４−キノリニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを得た。
【０１６９】
実施例３８．Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（４−キノリニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ワング樹脂上の４−〔〔（４−キノリニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（３００ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２×１０ｍＬ）、メタノール（２×１０ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（２×１０ｍＬ）にて洗浄した。樹脂に、４ｍＬのＮ−メチルピロリドン中の２，６−ジメチル安息香酸（１５０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ（４５０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．２３ｍＬ）から調製した溶液を室温にて添加した。得られた混合物を２時間激しく振とうした。反応混合物を、次いで濾過し、ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）、メタノール（２×１０ｍＬ）及びジクロロメタン（２×１０ｍＬ）にて洗浄した。ジクロロメタン中の９０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用いる５分間の処理によって開裂を行った。混合物を濾過し、ＴＦＡを高真空下で除去した。エーテル（２５ｍＬ）の添加によりＮ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（４−キノリニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（０．１６ｇ）の沈殿が生じた。
【０１７０】
実施例３９−４９．実施例３８に記述した方法を使用し、下記に示される化合物を、４−〔〔（４−キノリニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン及び適切な安息香酸誘導体を使用して調製した。
【０１７１】
【化７２】
0003555876.tif 000050
【０１７２】
【表３】
0003555876.tif 000051
【０１７３】
実施例５０〜６１．実施例３７から３８に記述した方法を使用し、下記に示される化合物を、ワング樹脂上の４−アミノ−Ｎ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン及び適切なカルボン酸を使用して調製した。
【０１７４】
【化７３】
0003555876.tif 000052
【０１７５】
【表４】
0003555876.tif 000053
【０１７６】
実施例６２．Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，４，６−トリメチルフェニル）スルホニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ピリジン（１５ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン（３．０ｇ、２．２８ｍｍｏｌ）を負荷したワング樹脂を０℃に冷却し、２，４，６−ベンゼンスルホニルクロリド（２．４９ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温にて一夜激しく振とうした。混合物を濾過し、樹脂をメタノール及びジクロロメタンにより洗浄した。結合処理を反復した。洗浄した樹脂に、Ｎ−メチルピロリドン中の２５％ピペリジン溶液（１０ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて２０分間激しく振とうし、濾過した。工程を反復し、得られたスラリーを濾過し、ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）、メタノール（２×１０ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（２×１０ｍＬ）にて洗浄した。濾過により、次の工程において使用するために適したワング樹脂上の４−〔〔（２，４，６−トリメチルフェニル）スルホニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを得た。
【０１７７】
上記樹脂の試料（０．３ｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をＮ−メチルピロリジノン（３ｍＬ）に懸濁し、２，６−ジメチル安息香酸（１７１ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ（０．５０ｇ、１．１４ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．２６ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）により処理した。混合物を室温にて３時間撹拌し、濾過し、ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）、メタノール（２×１０ｍＬ）及びジクロロメタン（２×１０ｍＬ）にて洗浄した。ジクロロメタン中の９０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用いて５分間の処理によって開裂を行った。混合物を濾過し、ＴＦＡを高真空下で除去した。エーテル（２５ｍＬ）の添加によりＮ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，４，６−トリメチルフェニル）スルホニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの沈殿が生じた。
【０１７８】
実施例６３．Ｎ−（２−ブロモベンゾイル）−４−〔〔（２，４，６−トリメチルフェニル）スルホニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、実施例６２に記述される一般的方法を使用して、ワング樹脂上の４−〔〔（２，４，６−トリメチルフェニル）スルホニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン及び２−ブロモ安息香酸から調製した。
【０１７９】
実施例６４．４−〔〔（４−シアノ−４−フェニル−１−ピペリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ワング樹脂上の４−アミノ−Ｎ−〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン（３．０ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）を、ガラスフリットを備えた容器に入れ、ジクロロメタン（５０ｍＬ）及びＤＩＰＥＡ（０．９８ｍＬ、５．６ｍｍｏｌ）に懸濁した。混合物を１５分間振とうし、トリホスゲン（１．１ｇ、３．７ｍｍｏｌ）を一度に添加した。混合物を室温にて２時間激しく振とうした。混合物を次いで濾過し、ジクロロメタン（３×２５ｍＬ）にて洗浄した。樹脂をジクロロメタン（５０ｍＬ）及びＤＩＰＥＡ（１．０ｍＬ、５．６ｍｍｏｌ）に懸濁し、４−シアノ−４−フェニルピペリジン塩酸塩（２．７３ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を４時間激しく振とうした。反応混合物を次いで濾過し、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）、メタノール（２×５０ｍＬ）、ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）及びメタノール（２×１０ｍＬ）にて洗浄した。Ｆｍｏｃ基の開裂を、Ｎ−メチルピロリジノン中の２５％ピペリジン（２×１５ｍＬ）を用いる処理によって行った。
【０１８０】
上記樹脂（０．３ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、２，６−ジメチル安息香酸（０．１５ｇ、１ｍｍｏｌ）を、Ｎ−メチルピロリジノン（３ｍＬ）に懸濁し、ＢＯＰ−Ｃｌ（０．２６ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．２３ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）により処理した。混合物を室温にて３時間撹拌し、濾過した。次いで反応混合物を濾過し、ジクロロメタン（２×１０ｍＬ）、メタノール（２×１０ｍＬ）及びジクロロメタン（２×１０ｍＬ）にて洗浄した。開裂を、ジクロロメタン中の９０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用い、３分間で行った。混合物を濾過し、ＴＦＡを高真空下で除去した。エーテル（２５ｍＬ）の添加により４−〔〔（４−シアノ−４−フェニル−１−ピペリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの沈殿が生じた。
【０１８１】
実施例６５〜６６．実施例６４に記述された方法を使用し、以下の化合物を調製した：
【０１８２】
【化７４】
0003555876.tif 000054
【０１８３】
【表５】
0003555876.tif 000055
【０１８４】
実施例６７．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
【０１８５】
【化７５】
0003555876.tif 000056
【０１８６】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩（１．５２７ｇ、５．８６ｍｍｏｌ）、２−クロロ−６−メチル安息香酸（１．０ｇ、５．８６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（３．２ｍＬ、２．３ｇ、１８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＢＴＵ（２．２２ｇ、５．８６ｍｍｏｌ）を室温で添加した。室温にて４時間後、反応混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）にて希釈し、有機層を水（２０ｍＬ）、１規定ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３及びブライン（各溶媒について２×３０ｍＬ）にて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４により乾燥させた。溶媒除去後、残渣を酢酸エチル：ヘキサン（１：２）にて溶出するシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製し、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．７１ｇ、４．５０ｍｍｏｌ、７７．６％）を得た。融点１２３〜４℃、分析（Ｃ１８Ｈ１７ＣｌＮ２Ｏ５）計算値：Ｃ，５７．３８、Ｈ，４．５５、Ｎ，７．４３、測定値：Ｃ，５７．１１、Ｈ，４．５８、Ｎ，７．２７。
【０１８７】
実施例６８．４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．５１ｇ、４．０ｍｍｏｌ）及びＳｎＣｌ２・Ｈ２Ｏ（４．５ｇ、２０ｍｍｏｌ）を、３０ｍＬのエタノールに懸濁した。懸濁物を９７℃の温度の浴において１時間撹拌した。それを室温まで冷却後、溶媒を蒸発させ、残渣を１５ｍＬの水に溶解した。次いで水溶液を固体Ｋ２ＣＯ３の添加によりｐＨ＞１０までアルカリ性とし、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）にて抽出した。合わせた抽出物をＫ２ＣＯ３にて乾燥させ、濃縮して４−アミノ−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを明黄色泡状物（１．３７ｇ）として得た。
【０１８８】
実施例６９．（Ｓ）−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔〔〔１−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−２−ピペリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
ＤＭＦ（２．０ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（３４７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液を、（Ｓ）−ピペリジン−１，２−ジカルボン酸  １−（１，１−ジメチル）エチルエステル（３４７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（３８０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．５４ｍＬ、３．０ｍｍｏｌ）により室温にて６時間処理した。反応混合物を６ｍＬの水により希釈し、白色沈殿を濾過により集め、水（２×２ｍＬ）により洗浄した。真空下で乾燥後、明黄色粉末を酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して、（Ｓ）−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔〔〔１−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−２−ピペリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５０７ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ、８２％）を白色固体、融点８７〜９１℃として得た。ＨＲＭＳ：計算値５５８．２３７１，測定値５５８．２３５９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１８９】
実施例７０．（Ｓ）−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２−ピペリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩の合成
２ｍＬのジクロロメタン中の（Ｓ）−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔〔〔１−（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−２−ピペリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（４７５ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）の溶液を、ジオキサン（２ｍＬ）中の４規定ＨＣｌにより処理した。溶液を室温にて４時間撹拌し、次いで溶媒を真空下で除去した。次いで残渣を５０ｍＬのエーテルにて処理し、明黄色沈殿を集め、真空下で乾燥させて、（Ｓ）−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２−ピペリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩を明黄色粉末として得た（４４０ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ、＞１００％）。ＥＳ  ＭＳ：４５８（１００％）（Ｍ＋Ｈ）。ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６， ｄ， ｐｐｍ）：１０．２６ （ｓ， １Ｈ）， ９．３０ （ｂｄ， １Ｈ）， ９．００ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ ９Ｈｚ）， ８．８０ （ｂｔ， １Ｈ）， ７．６５ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ７．８Ｈｚ）， ７．２４ （ｍ， ５Ｈ）， ４．７０ （ｍ， １Ｈ）， ３．９０ （ｍ， １Ｈ）， ３．６７ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０５ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２５ （ｍ， １Ｈ）， ２．０５ （ｓ， ３Ｈ）， １．７０ （ｍ， ５Ｈ）。
【０１９０】
実施例７１．Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔（８ａＳ）−ヘキサヒドロ−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソイミダゾ〔１，５−ａ〕ピリジン−２−イル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
（Ｓ）−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２−ピペリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（１００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１０ｍＬ、０．５４ｍｍｏｌ）及び４−ヒドロキシベンズアルデヒド（３０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１．５ｍＬ）中の活性化３Åモレキュラシーブ（１００ｍｇ）の懸濁物に添加した。得られた混合物を室温にて一夜、６０℃にて３時間撹拌した。それを室温まで冷却後、混合物をシリカゲルカラム上に移し、酢酸エチル：ヘキサン（２：１）により溶出してＮ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔（８ａＳ）−ヘキサヒドロ−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソイミダゾ〔１，５−ａ〕ピリジン−２−イル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１７．５ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）を泡状物として得た。メチルエステル（１７．５ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）を、０．５ｍＬのエタノール中の１規定ＮａＯＨ（０．１ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）を用いて室温にて６時間加水分解した。反応混合物をＴＦＡを用いてｐＨ＜２まで酸性化し、ＲＰ−ＨＰＬＣにて精製してＮ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔（８ａＳ）−ヘキサヒドロ−３−（４−ヒドロキシフェニル）−１−オキソイミダゾ〔１，５−ａ〕ピリジン−２−イル〕−Ｌ−フェニルアラニン（８．３ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）を収率７．５％で得た。ＨＲＭＳ：計算値５４８．１９５２，測定値５４８．１９３８（Ｍ＋Ｈ）。
【０１９１】
実施例７２〜７４．実施例７１に記述される方法を使用して、以下に示される化合物を調製した。
【０１９２】
【化７６】
0003555876.tif 000057
【０１９３】
【表６】
0003555876.tif 000058
【０１９４】
実施例７５．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチル−１−オキソペンチル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
ＤＭＦ（４．５ｍＬ）中の、実施例６８に記述される方法を使用して調製された４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５６１ｍｇ、１．６１ｍｍｏｌ）の溶液を、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｄ−ロイシン（３９３．２ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（６４４．３ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．６２ｍＬ、３．５０ｍｍｏｌ）により室温にて６時間処理した。反応混合物を水により希釈して３０ｍＬとし、白色沈殿を濾過により集め、水（２×２ｍＬ）により洗浄した。真空下で乾燥後、明黄色粉末を酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２Ｒ）−２−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ−４−メチル−１−オキソペンチル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（９２０ｍｇ）を白色固体として得た。ＭＳ５６０（Ｍ＋Ｈ，１Ｃｌ）。固体を、ジオキサン中の４規定ＨＣｌ（５ｍＬ）に溶解した。溶液を室温にて一夜撹拌した。エーテルにて希釈後、白色懸濁物を−５℃にて１時間静置した。白色固体を濾過により集め、真空下で５時間乾燥させた。次いで上記固体を２０ｍＬの水に溶解し、溶液を重炭酸ナトリウム、次いでＫ２ＣＯ３にてｐＨ＞９になるまで処理した。次いで混合物をジクロロメタン（２×２５ｍＬ）にて抽出し、硫酸ナトリウムにて乾燥させた。溶媒の除去後、残渣を次いで真空下で５０℃にて一夜乾燥させ、白色固体（５２０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を全収率７０％にて得た。ＨＲＭＳ：測定値４６０．１９９７，計算値４６０．２００３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１９５】
実施例７６〜７７．４−〔（２Ｓ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（２−メチルプロピル）−５−オキソ−イミダゾリジン−１−イル〕−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン及び４−〔（２Ｒ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（２−メチルプロピル）−５−オキソ−イミダゾリジン−１−イル〕−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン
（Ｓ）−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（（２Ｒ）−２−アミノ−４−メチル−１−オキソペンチル）アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／ＣＨ（ＯＭｅ）３混合物（１／１、１．０ｍＬ）に溶解した。次いで、溶液にベンズアルデヒド（２１．２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を添加し、溶液を室温にて撹拌した。２４時間後、反応混合物を９５℃に加熱し、無水酢酸（０．１ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）をシリンジを介して導入し、溶液を１１０℃にて３時間撹拌した。溶媒の蒸発後、残渣を酢酸エチルにて希釈し、飽和重炭酸ナトリウム溶液にて２回洗浄した。溶媒除去後、残渣を３ｍＬの混合溶媒（ＴＨＦ／エタノール／Ｈ２Ｏ＝２／２／１）に溶解し、１規定水酸化ナトリウム（０．２ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）にて処理した。室温にて４時間後、反応を０．５ｍＬの酢酸により停止させ、粗生成物をＲＰ−ＨＰＬＣ（Ｃ１８、５−９５−３５−２１４）にて精製してトランス異性体、４−〔（２Ｓ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（２−メチルプロピル）−５−オキソイミダゾリジン−１−イル〕−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン（２７ｍｇ、４６μｍｏｌ）、ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：測定値５７６．２２５１，計算値５７６．２２６５を得た。対応するシス異性体４−〔（２Ｒ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（２−メチルプロピル）−５−オキソイミダゾリジン−１−イル〕−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン（５０．１ｍｇ、８６μｍｏｌ）、ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：計算値５７６．２２６５，測定値５７６．２２５０。
【０１９６】
実施例７８．Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔（Ｓ）−ヘキサヒドロ−１，３−ジオキソイミダゾ〔１，５−ａ〕ピリジン−２−イル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
０．２ｍＬのジクロロメタン中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（Ｓ）−（２−ピペリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０２０ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液に、カルボニルジイミダゾール（１６．２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を室温にて添加した。次いで溶液をこの温度にて６時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルにて５ｍＬまで希釈し、有機層を１規定ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３及びブライン（各溶媒について２×１ｍＬ）にて洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４にて乾燥させた。次いで溶媒を真空下で除去し、明黄色固体（５３．４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を得た。次いで上記固体をエタノール（１ｍＬ）に溶解し、１規定ＮａＯＨ（０．１ｍＬ、０．１ｍｍｏｌ）と共に室温にて６時間撹拌した。反応混合物をＴＦＡによりｐＨ＜２まで酸性化し、ＲＰ−ＨＰＬＣにて精製して、Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔（Ｓ）−ヘキサヒドロ−１，３−ジオキソイミダゾ〔１，５−ａ〕ピリジン−２−イル〕−Ｌ−フェニルアラニン（２７．０ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）を全収率５７％で得た。ＨＲＭＳ：測定値４７０．１４６５，計算値４７０．１４８３（Ｍ＋Ｈ）。
【０１９７】
実施例７９〜８４．実施例６９、７０及び７８に記述される方法を使用して、以下の化合物を、４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び適切なアミノ酸誘導体から調製した。
【０１９８】
【化７７】
0003555876.tif 000059
【０１９９】
【表７】
0003555876.tif 000060
【０２００】
実施例８５．４−ニトロ−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
２０ｍＬのジクロロメタン中の４−ニトロフェニルアラニン  メチルエステル（５．２１ｇ、２０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１５ｍＬ）の溶液を、２，６−ジメチルベンゾイルクロリドにより処理した。４時間後、混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に取り、１規定ＨＣｌ（５０ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）及び飽和ブラインにより洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させた。濾過及び濃縮により８．０ｇの固体を得、これをＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ｐｒｅｐ ５００−デュアルシリカゲルカートリッジ；１：１酢酸エチル−ヘキサン）により精製して４−ニトロ−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５．２６ｇ、７４％）を得た。
【０２０１】
実施例８６．４−アミノ−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例６８に記述した方法を使用して調製し、４−ニトロ−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５．２ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）から４−アミノ−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（４．６ｇ、９７％）を明黄色ガラス状物として得た。
【０２０２】
実施例８７．４−〔〔（４−カルボキシ−３−ピリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン及び４−〔〔（３−カルボキシ−４−ピリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ジクロロメタン（３０ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５３０ｍｇ、１．１６２ｍｍｏｌ）及び３，４−ピリジンジカルボン酸無水物の溶液を、一夜撹拌し、沈殿を集めた。固体をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、濾過し、濃縮して１．１ｇの異性体カルボン酸混合物を得た。この物質をエタノール（５０ｍＬ）に溶解し、１規定ＮａＯＨ（１５ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）にて処理し、２．５時間撹拌した。混合物を過剰量の酢酸により酸性化し、レイニン（Ｒａｉｎｉｎ）ＲＰ−ＨＰＬＣにて３バッチとして精製し、異性体ジカルボン酸混合物として０．６０ｇの白色固体を得た。
【０２０３】
実施例８８．４−（２，３−ジヒドロ−１，３−ジオキソ−１Ｈ−ピロロ〔３，４−ｃ〕ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２，６−ジメチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニンの合成
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の実施例８７からの酸混合物（２７２ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）の溶液を、カルボニルジイミダゾール（３８５ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）にて処理し、一夜撹拌した。混合物を濾過し、レイニン装置上でＨＰＬＣにより直接精製して、生成物画分の凍結乾燥後に４−（２，３−ジヒドロ−１，３−ジオキソ−１Ｈ−ピロロ〔３，４−ｃ〕ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２，６−ジメチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン（１０８ｇ、４１％）を得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：測定値４４４．１５４８，計算値４４４．１５５９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２０４】
実施例８９．Ｎ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−４−〔（Ｒ，Ｓ）−２，３，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−１，３−ジオキソ−１Ｈ−ピロロ〔３，４−ｃ〕ピリジン−２−イル〕−Ｌ−フェニルアラニンの合成
エタノール：ＴＨＦ（２５ｍＬ、１：１）中の４−（２，３−ジヒドロ−１，３−ジオキソ−１Ｈ−ピロロ〔３，４−ｃ〕ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２，６−ジメチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン（１０８ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液を、１０％Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ）にて４時間水素添加した。混合物を濾過し、濃縮し、レイニンＨＰＬＣ上でＲＰ−ＨＰＬＣにて精製した。溶出する最初の生成物を凍結乾燥してＮ−〔（２，６−ジメチルフェニル）カルボニル〕−４−〔（Ｒ，Ｓ）−２，３，５，６，７，７ａ−ヘキサヒドロ−１，３−ジオキソ−１Ｈ−ピロロ〔３，４−ｃ〕ピリジン−２−イル〕−Ｌ−フェニルアラニン（２９ｍｇ、２７％）を得た。ＦＡＢ  ＨＲＭＳ：測定値４４８．１８６２，計算値４４８．１８７３（Ｍ＋Ｈ）。溶出する第２の生成物を凍結乾燥して、回収される出発材料（４７ｍｇ、４３％）を得た。
【０２０５】
実施例９０〜９６．以下に示す化合物を、実施例１３に記述した方法を使用し、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−アロイル−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル誘導体の加水分解により調製した。
【０２０６】
【化７８】
0003555876.tif 000061
【０２０７】
【表８】
0003555876.tif 000062
【０２０８】
実施例９６．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−〔（Ｒ）−２，５−ジオキソ−３−メチル−４−（１−メチルエチル）−１−イミダゾリニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例６９、７０及び７８に記述した方法を使用して４−アミノ−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及びＮ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｎ−メチル−Ｄ−バリンから調製した。
【０２０９】
実施例７５、７６及び７７に記述した方法を使用し、以下の化合物を４−アミノ−Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び適切なＢｏｃ保護アミノ酸から調製した。
【０２１０】
【化７９】
0003555876.tif 000063
【０２１１】
【表９】
0003555876.tif 000064
【０２１２】
実施例１０３．２−ブロモ−６−メチル安息香酸の調製
【０２１３】
【化８０】
0003555876.tif 000065
【０２１４】
臭化第一銅を、ＨＢｒ（３３ｍＬ、４８％）中のＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ（３３ｍｍｏｌ、８．２５ｇ）及びＮａＢｒ（６６ｍｍｏｌ、６．７５ｇ）の濃紫色溶液を加熱し、Ｃｕ粉末（６６ｍｍｏｌ、４．２ｇ）を小分けに紫色溶液が無色溶液になるまで添加することにより調製した。次いでこの溶液を、Ｈ２Ｏ（８０ｍＬ）及びＨＢｒ（１１．５ｍＬ）中の２−アミノ−６−メチル安息香酸（３３ｍｍｏｌ、５ｇ）の熱溶液（約９０℃）に小分けに添加した。これに続いてＨ２Ｏ（２０ｍＬ）中のＮａＮＯ２（９９ｍｍｏｌ、６．８５ｇ）の溶液を、前記撹拌される加熱溶液に２５分間で滴下添加した。暗帯褐色混合物を約９０℃にて１時間加熱し、次いで還流下に更に３０分間加熱し、その後室温に冷却して２時間撹拌した。次いで混合物を氷（〜５００ｇ）に注ぎ、５％ＮａＯＨ溶液をｐＨ１４に達するまで添加し、得られた暗色懸濁物を、セライトを通して濾過した。黄色の濾液を濃ＨＣｌにてｐＨ１まで酸性化した。抽出処理（Ｅｔ２Ｏ、３×１５０ｍＬ）により、暗色残渣を得、これをＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）に溶解して活性炭を添加し、得られた溶液を還流下に加熱した。濾過及び濃縮により物質を得、これをヘキサン（１００ｍＬ）中にてＥｔ２Ｏ／石油エーテルから再結晶し、２−ブロモ−６−メチル安息香酸（３．５ｇ、４９％、ＨＲ  ＭＳ：測定質量２１３．９６３３、計算質量２１３．９６２９、Ｍ＋）を、結晶性明桃色固体として得た。融点１０４〜１０６℃。
【０２１５】
実施例１０４．２−エチル−６−メチル安息香酸の調製
【０２１６】
【化８１】
0003555876.tif 000066
【０２１７】
２５０ｍＬの圧力容器に２−エチル−６−メチルヨードベンゼン（３０．０７ｍｍｏｌ、７．４ｇ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１．４３ｍｍｏｌ、３３４ｍｇ）及びｄｐｐｐ（１．４３ｍｍｏｌ、６２０ｍｇ）を充填した。フラスコを隔壁にて閉じ、アルゴンにて３回掃気した。次いで、アセトニトリル（９６ｍＬ）、トリエチルアミン（１８９ｍｍｏｌ、１９．０ｇ、２６．２５ｍＬ）及び水（１９．１ｍＬ）を順にシリンジを用いて添加した。次いで、ゴム製隔壁を、一酸化炭素供給源に連結したテフロン引きキャップと交換した。ここでフラスコを一酸化炭素にて加圧し（４０ｐｓｉ）、過剰な圧力は逃がした。この工程を３回反復し、最終的に混合物を４０ｐｓｉ一酸化炭素圧下で５分間撹拌した。フラスコを、次いで一酸化炭素シリンダーから切り離し、あらかじめ加熱した油浴（８３〜８５℃）に浸した。反応混合物は１時間で黒色に変わり、更に１４時間この温度にて撹拌した。次いで反応混合物を室温に冷却し、圧力を逃がした。得られた混合物をエーテル（２００ｍＬ）及び１．０規定ＮａＯＨ（２０ｍＬ）にて希釈した。形成された酸を、水（２×１００ｍＬ）にて抽出した。合わせた水抽出物を、１．０規定ＨＣｌにて中和し、酸をジクロロメタン（３×１００ｍＬ）中に抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物をブライン溶液にて洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過、及び溶媒の真空下での除去により、３．５８ｇ（７２．５％）の粘性の褐色油状物を得、これは一夜で徐々に固化した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量１６４．０８３３，計算質量１６４．０８３７（Ｍ＋）。
【０２１８】
実施例１０５．２−クロロ−６−アセチル安息香酸の調製
ａ）．１−アセチル−３−クロロ−２−〔〔（トリフルオロメチル）スルホニル〕オキシ〕ベンゼンの調製
ジクロロメタン（３３ｍＬ）中の１−アセチル−６−クロロフェノール（２．９ｍｍｏｌ、０．５ｇ）の溶液に、−７０℃にて４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジン（６．５４ｍｍｏｌ、０．８ｇ）、次いで−７０℃にて無水トリフリル酸（ｔｒｉｆｌｉｃ ａｎｈｙｄｒｉｄｅ）（４．３３ｍｍｏｌ、１．２２ｇ、０．７３ｍＬ）を添加した。添加後に、懸濁物をこの温度にて３０分間撹拌し、次いで室温まで加温し、更に３時間撹拌し、この時点で反応混合物のＴＬＣは出発物質の不在を示した。混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）にて希釈し、２層を分離した。水性相をジクロロメタン（５０ｍＬ）にて抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物をブライン溶液にて洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過、及び溶媒の真空下での除去により、黄色油状物を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して０．７６ｇ（８６％）の無色油状物を得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量３０１．９６１７、計算質量３０１．９６２７（Ｍ＋）。
【０２１９】
ｂ）．１−アセチル−３−クロロ安息香酸の調製
１００ｍＬの圧力容器を、１−アセチル−３−クロロ−２−〔〔（トリフルオロメチル）スルホニル〕オキシ〕ベンゼン（２．４１ｍｍｏｌ、０．７３ｇ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（０．２ｍｍｏｌ、４７ｍｇ）及びｄｐｐｐ（０．２ｍｍｏｌ、８７ｍｇ）で充填した。フラスコを隔壁にて閉じ、アルゴンにて３回掃気した。次いで、アセトニトリル（９６ｍＬ）、トリエチルアミン（１８８．７ｍｍｏｌ、１９．０ｇ、２６．２５ｍＬ）及び水（１９．１ｍＬ）を順にシリンジを用いて添加した。次いで、ゴム製隔壁を、一酸化炭素供給源に連結したテフロン引きキャップと交換した。ここでフラスコを一酸化炭素にて加圧し（４０ｐｓｉ）、過剰な圧力は逃がした。この工程を３回反復し、最終的に混合物を４０ｐｓｉ一酸化炭素圧下で５分間撹拌した。フラスコを、次いで一酸化炭素シリンダーから切り離し、あらかじめ加熱した油浴（８３〜８５℃）に浸し、３時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、圧力を逃がし、混合物をエーテル（２００ｍＬ）及び１．０規定ＮａＯＨ（２０ｍＬ）にて希釈した。酸を、水（２×１００ｍＬ）にて抽出した。合わせた水抽出物を、１．０規定ＨＣｌにて中和し、再度、酸をジクロロメタン（３×１００ｍＬ）中に抽出した。合わせたジクロロメタン抽出物をブライン溶液にて洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過、及び溶媒の真空下での除去により、粗生成物を得、これをジクロロメタン（〜１０ｍＬ）及びヘキサン（〜８ｍＬ）から、及び冷蔵庫内の一夜の保存により再結晶した。沈殿した固体を濾過により集め、高真空下で乾燥させて３３０ｍｇ（６９％）の無色固体を得た。融点１２８−１２９℃。ＨＲ  ＭＳ：測定質量１９８．００９０，計算質量１９８．００８４（Ｍ＋）。
【０２２０】
実施例１０６．２−イソプロピル−６−メチル安息香酸の調製
ａ）．２−（１−メチルエチル）−６−メチルヨードベンゼンの調製
濃ＨＣｌ（５０ｍＬ）及び３０ｇの氷中の２−（１−メチルエチル）−６−メチルアニリン（１５．５７ｍｍｏｌ、１４．９ｇ）の溶液に、Ｈ２Ｏ（３５ｍＬ）中のＮａＮＯ２（１１０ｍｍｏｌ、８ｇ）の溶液を−５℃〜５℃にて３０分間で滴下添加した。添加後に赤色溶液を更に３０分間撹拌した。次いでＨ２Ｏ（５０ｍＬ）中のＫＩ（２００ｍｍｏｌ、３３．２ｇ）の溶液を０〜５℃にて２０分間で滴下添加した。添加後に混合物を室温まで昇温させ、この間に気体発生を伴う発熱反応がおきた。得られた赤色溶液を１８時間撹拌した。次いで混合物を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）にて抽出した。合わせた抽出物を、チオ硫酸ナトリウム溶液（２００ｍＬ）、ブライン溶液にて洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過、及び溶媒の真空下での濃縮により、着色化合物を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な２−（１−メチルエチル）−６−メチルヨードベンゼン（１７．８ｇ、６８％）を黄色油状物として得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量２６０．００６３，計算質量２６０．００６２（Ｍ＋）。
【０２２１】
ｂ）．２−（１−メチルエチル）−６−メチル安息香酸の調製
２５０ｍＬの圧力容器を、２−（１−メチルエチル）−６−メチルヨードベンゼン（２５．２ｍｍｏｌ、６．５５ｇ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１．２ｍｍｏｌ、２８０ｍｇ）及びｄｐｐｐ（１．２ｍｍｏｌ、５２０ｍｇ）で充填した。次いでフラスコを隔壁にて閉じ、アルゴンにて３回掃気した。次いで、アセトニトリル（９６ｍＬ）、トリエチルアミン（１８８．７ｍｍｏｌ、１９．０ｇ、２６．２５ｍＬ）及び水（１９．１ｍＬ）を順にシリンジを用いて添加した。次いで、ゴム製隔壁を、一酸化炭素供給源に連結したテフロン引きキャップと交換した。ここでフラスコを一酸化炭素にて加圧し（４０ｐｓｉ）、過剰な圧力は逃がした。この工程を３回反復し、最終的に混合物を４０ｐｓｉ一酸化炭素圧下で５分間撹拌した。フラスコを、次いで一酸化炭素シリンダーから切り離し、あらかじめ加熱した油浴（８３〜８５℃）に浸した。反応混合物は１時間で黒色に変わり、更に４時間この温度にて撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、圧力を逃がし、混合物をエーテル（２００ｍＬ）及び１．０規定ＮａＯＨ（１０ｍＬ）にて希釈した。酸を、水（２×１００ｍＬ）にて抽出した。合わせた水抽出物を、１．０規定ＨＣｌにて中和し、酸を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）中に抽出した。合わせた有機抽出物をブライン溶液にて洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過、及び溶媒の真空下での除去により、２．８ｇ（６２％）の粘性黄色油状物を得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量１７８．０９９６，計算質量１７８．０９９４（Ｍ＋）。
【０２２２】
実施例１０７．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，４−ジメチル−３−ピリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン
ａ．〔〔（２，４−ジメチル−３−ピリジル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩の調製
ＤＭＦ（１２ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．４ｇ、４．８ｍｍｏｌ）の溶液に、２，４−ジメチル−３−ピリジンカルボン酸塩酸塩（９１９ｍｇ、４．９ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１９００ｍｇ、５ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（２．７ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を室温にて添加した。混合物を１５時間撹拌し、１０ｍＬの酢酸エチル及び１０ｍＬの水にて希釈した。層を分離し、水性相を酢酸エチル（２×２０ｍＬ）にて抽出した。合わせた抽出物をブラインにて洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。濾過及び溶媒の濃縮により、粗生成物を得、これを酢酸エチル：ヘキサン（２：１〜４：１）にて溶出するシリカゲルにて精製し、４−〔（２，４−ジメチル−３−ピリジル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２２６ｍｇ）を得た。この化合物（２２０ｍｇ）をジオキサン中の６ｍＬの４規定塩酸により室温にて処理した。５分後、固体は溶液になり、混合物を１８時間撹拌し、濃縮して白色固体（２１０ｍｇ）を得た。この中間体を、次の工程の合成に更に精製することなく使用した。
【０２２３】
ｂ．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，４−ジメチル−３−ピリジル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の４−〔（２，４−ジメチル−３−ピリジル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（５０ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ）、２−クロロ−６−メチル安息香酸（３４ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）ＨＢＴＵ（７６ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０７１ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）の溶液を室温にて１５時間撹拌した。混合物を酢酸エチル（１０ｍＬ）により希釈し、０．５規定ＨＣｌ（２×８ｍＬ）、飽和重炭酸ナトリウム（２×８ｍＬ）及びブライン（２×８ｍＬ）にて洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。溶液を濾過し、黄色ゴム状物になるまで濃縮し、これをＭｅＯＨ（３ｍＬ）中の１規定ＮａＯＨ（０．５ｍＬ）により室温にて４時間加水分解した。反応混合物を、次いで酢酸にて酸性化し、実施例７６−７７に記述した条件を使用してＨＰＬＣにより精製し、白色固体（２３．３ｍｇ）を得た。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４６６（１Ｃｌ）。
【０２２４】
実施例１０８．Ｎ−（２−ブロモ−５−メトキシベンゾイル）−４−〔（２，４−ジメチル−３−ピリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、４−〔（２，４−ジメチル−３−ピリジル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩及び２−ブロモ−５−メトキシ安息香酸から、実施例１０７に記述される一般的方法を使用して調製した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２６（１Ｂｒ）。
【０２２５】
実施例１０９．４−〔〔（２−クロロ−５−シアノフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ａ）．４−〔（２−クロロ−５−ブロモフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ＤＭＦ（７０ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２０ｍｍｏｌ、５．８８ｇ）、２−クロロ−５−ブロモ安息香酸（２２ｍｍｏｌ、５．１８ｇ）及びＨＢＴＵ（２２ｍｍｏｌ、８．３４ｇ）の混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（５０ｍｍｏｌ、８．７ｍＬ）を室温にて添加した。懸濁物を４８時間撹拌し、この時点で混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。混合物を水（１００ｍＬ）にて希釈し、固体を濾過により集め、水（１５０ｍＬ）で洗浄した。空気乾燥した後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、１．０２ｇ（１０％）の白色固体を得た：融点１５８〜１６１℃。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５３３．０４４２，計算質量５３３．０４５５（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２２６】
ｂ）．４−〔〔（２−クロロ−５−シアノフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
４−〔（２−クロロ−５−ブロモフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２ｍｍｏｌ、１．０２ｇ）、シアン化亜鉛（１．３ｍｍｏｌ、１５２ｍｇ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．２ｍｍｏｌ、２３１ｍｇ）の混合物に、蒸留及び脱酸素したＤＭＦ（８ｍＬ）を室温にて添加した。懸濁物を８０〜８５℃に加熱し、１５時間撹拌し、この時点で混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチル（７０ｍＬ）にて希釈し、２０％水酸化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）、ブライン溶液（５０ｍＬ）にて洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。乾燥剤の濾過、及び溶媒の濃縮により、粗生成物を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製して５５５ｍｇ（６１％）の白色固体を得た。融点１８５〜１８７℃。ＨＲ  ＭＳ：測定質量４８０．１３０１，計算質量４８０．１３０２（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２２７】
ｃ）．４−〔（２−クロロ−５−シアノフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルＴＦＡ塩の調製
ジクロロメタン（１２ｍＬ）中の４−〔（２−クロロ−５−シアノフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．２ｍｍｏｌ、０．５５ｇ）の溶液に、トリフルオロ酢酸（３ｍＬ）を室温にて添加した。反応混合物を室温で１５時間撹拌し、この時点で混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。溶媒を真空下で除去し、残渣をトルエン（２×１０ｍＬ）にて共沸させ、高真空下で乾燥させて０．４３ｇ（１００％）の黄色固体を得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量３５８．０９６３，計算質量３５８．０９５９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２２８】
実施例１１０．４−〔〔（２−クロロ−５−シアノフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
ａ）４−〔（２−クロロ−５−シアノフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
実施例３に記述した方法を使用し、４−〔（２−クロロ−５−シアノフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、全収率６１％を以て白色固体として調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５１０．１００３，計算質量５１０．０９８８、Ｍ＋Ｈ。
【０２２９】
ｂ）４−〔（２−クロロ−５−シアノフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
４−〔（２−クロロ−５−シアノフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（０．１４６ｍｍｏｌ、７５ｍｇ）及びヨウ化リチウム（１．５ｍｍｏｌ、２００ｍｇ）の混合物に、ピリジン（３ｍＬ）を室温にて添加した。溶液を１５時間還流し、この時点で混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。次いで、それを室温まで冷却し、水（１５ｍＬ）にて希釈した。ピリジンを、ロータリーエバポレータで、減圧下にて除去し、残渣をエーテル（２×１５ｍＬ）にて抽出して中性不純物を除去した。水性層を、１規定ＨＣｌにて酸性化し、沈殿した白色固体を濾過により集め、２０ｍＬの水及び２０ｍＬのヘキサンにより洗浄した。空気乾燥後、粗生成物を酢酸エチル−ヘキサンに溶解し、冷蔵庫に一夜保存した。わずかに痕跡量の固体が形成され、溶媒をデカントし、真空下で除去して５５ｍｇ（７６％）を白色固体として得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量４９６．０８５０，計算質量４９６．０８３１（Ｍ＋Ｈ）。
【０２３０】
実施例１１１．４−〔（２−クロロ−６−メチルフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
【０２３１】
【化８２】
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【０２３２】
実施例１に記述した方法を使用し、４−〔（２−クロロ−６−メチルフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、４−アミノ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−クロロ−６−メチルベンゾイルクロリドから、全収率８３％にて白色固体、融点１５４〜１５７℃として得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量４６９．１５１３，計算質量４６９．１５０７（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２３３】
実施例１１２．４−〔（２−クロロ−６−メチルフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩の調製
実施例２に記述した方法を使用し、４−〔（２−クロロ−６−メチルフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩を、実施例１１１の生成物から全収率９９％にて、白色固体として調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量３４７．１１６５，計算質量３４７．１１６２（Ｍ＋Ｈ）。
【０２３４】
実施例１１３．実施例３に記述した方法を使用し、４−〔（２−クロロ−６−メチルフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔１−（２−メチル−６−エチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、全収率７０％にて、白色固体として調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５１５．１６９０，計算質量５１５．１７１４（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２３５】
【化８３】
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【０２３６】
実施例１１４．実施例１０９及び１３に記述した方法を使用し、Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジフルオロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２，６−ジフルオロ安息香酸から調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量４７３．１０９４，計算質量４７３．１０７９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２３７】
実施例１１５．実施例１０９及び１３に記述した方法を使用し、Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及びペンタフルオロ安息香酸から調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５２７．０７９８，計算質量５２７．０７９７（Ｍ＋Ｈ）。
【０２３８】
実施例１１６．（Ｚ）−３−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチルフェニル〕−２−〔〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕アミノ〕−２−プロペン酸メチルエステルの調製
ａ．４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチルベンジルアルコールの調製
酢酸エチル（１７５ｍＬ）中の３−メチル−４−ニトロベンジルアルコール（７．０ｇ、４２ｍｍｏｌ）の溶液及びＢｏｃ無水物（９．１ｇ、４２．７ｍｍｏｌ）を、１０％炭素上パラジウム（０．３３ｇ）にて２時間水素添加した。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をエーテル−ヘキサンから再結晶し、白色結晶性固体（６．７３ｇ、６８％）を得た。融点７３〜７４℃。分析値（Ｃ１３Ｈ１９ＮＯ３）：Ｃ，６５．８０；Ｈ，８．０７；Ｎ，５．９０。測定値Ｃ，６５．７４；Ｈ，７．８０；Ｎ，５．８０。
【０２３９】
ｂ．４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチルベンズアルデヒドの調製
ジクロロメタン（６０ｍＬ）中の４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチルベンジルアルコール（７．２ｇ、３０．４ｍｍｏｌ）の溶液を、２時間の間隔をもって二酸化マンガン（４×７ｇ）により処理し、混合物を室温にて１８時間撹拌した。混合物をセライトパッドを通して濾過し、ジクロロメタンにて洗浄し、濾液を濃縮した。残渣をエーテル−ヘキサンから再結晶し、白色結晶性固体（６．３ｇ、８７％）、融点１０９〜１１１℃を得た。分析値（Ｃ１３Ｈ１７ＮＯ３）：計算値Ｃ，６６．３６；Ｈ，７．２８；Ｎ，５．９５。測定値Ｃ，６６．１４；Ｈ，７．１４；Ｎ，５．８５。
【０２４０】
ｃ．（Ｚ）−３−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチルフェニル〕−２−〔〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕アミノ〕−２−プロペン酸メチルエステルの調製
ジクロロメタン（６０ｍＬ）中のＮ−〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕−２−ホスホノグリシン  トリメチルエステル（１１．９ｇ、３６ｍｍｏｌ）の溶液を、テトラメチルグアニジン（４．５ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）により処理した。１時間後、混合物を−３０℃の内部温度に冷却し、ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチルベンズアルデヒド（７．０２ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）の溶液により、温度上昇がない速度で処理した。反応混合物を−３０℃にて３０分間撹拌し、一夜で室温まで昇温させた。混合物をエーテル（１５０ｍＬ）にて希釈し、０．５規定ＨＣｌ（２×５０ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３（１×５０ｍＬ）により順次洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。溶液を濃縮し、残渣を、シリカゲルカートリッジを使用し、酢酸エチル：ヘキサン（１：２）にて溶出するバイオテージ・キロ・プレップ（Ｂｉｏｔａｇｅ Ｋｉｌｏ Ｐｒｅｐ）ＨＰＬＣでのクロマトグラフィーにより精製した。Ｚ−異性体を含む画分を合わせ、濃縮し、最終的に高真空下において無色ガラス状物（１１．４８ｇ、８６％）として得た。分析値（Ｃ２４Ｈ２８Ｎ２Ｏ６）：計算値Ｃ，６５．４４；Ｈ，６．４１；Ｎ，６．３６。測定値Ｃ，６４．８１；Ｈ，６．４３；Ｎ，６．０４。ＨＲ  ＭＳ：測定質量４４０．１９３３，計算質量４４０．１９４７（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４１】
実施例１１７．４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチル−Ｎ−〔〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
メタノール（５０ｍＬ）及びＴＨＦ（２０ｍＬ）中の実施例１１６からの（Ｚ）−３−〔４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチルフェニル〕−２−〔〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕アミノ〕−２−プロペン酸メチルエステル（１０ｇ、２２．７ｍｍｏｌ）の溶液を、圧力ビンに入れ、Ａｒ気流を混合物に一夜通気した。（＋）−１，２−ビス（２Ｓ，５Ｓ）−２，５−ジメチルホスホラノ）ベンゼン（シクロオクタジエン）ロジウム  トリフルオロメタンスルホネート（１００ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加し、ビンを水素にて３回、５０ｐｓｉに加圧し、混合物を５０ｐｓｉの水素下で、室温にて一夜撹拌した。圧力を開放し、溶液を濃縮した。残渣を活性炭により処理し、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して６．７２ｇ（６７％）、融点１２０〜１２１℃を得た。〔ａ〕５８９−５．９°（ｃ＝１％、メタノール）
ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２４Ｈ３０Ｎ２Ｏ６）：測定質量４４２．２１１３，計算質量４４２．２１０４（Ｍ＋）。
【０２４２】
実施例１１８．４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチル−Ｎ−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ａ．エタノール（４０ｍＬ）及びシクロヘキセン（１４ｍＬ、１４０ｍｍｏｌ）中の４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチル−Ｎ−〔〔（フェニルメトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（３．０ｇ、６．８ｍｍｏｌ）の溶液を、１０％炭素上パラジウム（１．５ｇ）により処理し、混合物を２０分間還流加熱し、冷却した。混合物をセライトパッドを通して濾過し、エタノールにて洗浄し、濾液を濃縮して４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチル−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２．２４ｇ）を明黄色油状物として得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ１６Ｈ２４Ｎ２Ｏ４）：測定質量３０９．１８１９，計算質量３０９．１８１５（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４３】
ｂ．ＤＭＦ（８ｍＬ）中の４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチル−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．０ｇ、３．２４ｍｍｏｌ）及び２−クロロ−６−メチル安息香酸（０．６６ｇ、３．８６ｍｍｏｌ）の溶液を、ＨＢＴＵ（１．７２ｇ、４．５３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（３ｍＬ、１７ｍｍｏｌ）により処理し、混合物を一夜撹拌した。溶液を濃縮した。残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（１０ｍＬ）、０．１規定ＨＣｌ（１０ｍＬ）及びブライン（１０ｍＬ）にて洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。濾過及び蒸発後に得られた残渣を、１：９の酢酸エチル：ジクロロメタンにより溶出する１４０ｇのシリカゲル上でのシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して１．１６ｇ（７８％）のゴム状物を得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２４Ｈ２９Ｎ２Ｏ５Ｃｌ）：測定質量４６１．１８５８，計算質量４６１．１８４４（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４４】
実施例１１９．４−アミノ−３−メチル−Ｎ−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩の調製
実施例１１８からの４−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−３−メチル−Ｎ−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．１ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を、ジオキサン（２０ｍＬ）中の４規定ＨＣｌにより４時間処理し、濃縮乾固した。残渣をエーテルにて摩砕し、濾過して０．８３ｇ、９６％を白色固体として得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ１９Ｈ２２Ｎ２Ｏ３Ｃｌ２）：測定質量３６１．１３０９，計算質量３６１．１３２０（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４５】
実施例１２０．Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔３−（３−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロピル〕アミノ〕−３−メチル−Ｌ−フェニルアラニンの調製
ａ．ジクロロメタン（３ｍＬ）中の、実施例１１９からの４−アミノ−３−メチル−Ｎ−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（７９．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、３−（３−ヒドロキシフェニル）プロパン酸（３３．２ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（１２０μｌ、０．６９ｍｍｏｌ）の溶液を１０℃に冷却し、ＢＯＰ−Ｃｌ（５１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）により処理した。混合物を４時間撹拌し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、５ｍＬずつの０．５規定ＮａＣＯ３、０．５規定ＨＣｌ及び飽和ブラインにて洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。得られた残渣を、濾過及び濃縮後に７：３の酢酸エチル：ヘキサンにより溶出する２５ｇのシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより精製して４７ｍｇの無色ガラス状物を得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５０９．１８４９，計算質量５０９．１８４４（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４６】
ｂ．ＴＨＦ（３０ｍＬ）中のＮ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔３−（３−ヒドロキシフェニル）−１−オキソプロピル〕アミノ〕−３−メチル−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（４５ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）の溶液を、水（１．０ｍＬ）中のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）溶液により処理した。溶解性のためにメタノール（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を室温にて１８時間撹拌した。混合物を０．５ｍＬの酢酸により酸性化し、直接にＲＰ−ＨＰＬＣ（５−９５−３５−２１４）により精製して、凍結乾燥後に３４．３ｍｇの白色粉末を得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２７Ｈ２７Ｎ２Ｏ５Ｃｌ）：測定質量４９５．１６９７，計算質量４９５．１６８７（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４７】
実施例１２１．実施例１２０に記述した方法を使用し、Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔２−（３−ヒドロキシフェニル）−１−オキソエチル〕アミノ〕−３−メチル−Ｌ−フェニルアラニンを、４−アミノ−３−メチル−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（７９．５ｍｇ）及び２−（３−ヒドロキシフェニル）酢酸（３０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）から調製し、２３ｍｇの無色ガラス状物を得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２６Ｈ２５Ｎ２Ｏ５Ｃｌ）：測定質量４８１．１５２７，計算質量４８１．１５３０（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４８】
実施例１２２．実施例１２０に記述した方法を使用し、Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔２−（３−ニトロフェニル））−１−オキソエチル〕アミノ〕−３−メチル−Ｌ−フェニルアラニンを、４−アミノ−３−メチル−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５２ｍｇ）及び３−ニトロ安息香酸（３２ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）から調製し、１５ｍｇの白色粉末を得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２５Ｈ２２Ｎ３Ｏ６Ｃｌ）：測定質量４９６．１２８８，計算質量４９６．１２８８（Ｍ＋Ｈ）。
【０２４９】
実施例１２３．実施例１及び１２０に記述した方法を使用し、Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−３−メチル−Ｌ−フェニルアラニンを、４−アミノ−３−メチル−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（８７．４ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及び２，６−ジクロロベンゾイルクロリドから調製し、５６ｍｇの白色粉末を得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２５Ｈ２１Ｎ２Ｏ４Ｃｌ３）：測定質量５１９．０６５６，計算質量５１９．０６４５（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５０】
実施例１２４．Ｎ−〔（４−アミノ−２−クロロフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
ａ．ＤＭＦ（３ｍＬ）中の４−アミノ−２−クロロ安息香酸（４３ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）及び４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（１００ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（１００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＩＰＥＡ（０．２０ｍｍｏｌ）により処理し、混合物を室温にて２時間撹拌した。混合物を水にて希釈し、酢酸エチルにて抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３により洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させた。残渣を、濾過及び濃縮後、４：１の酢酸エチル：ヘキサンにて溶出する１６ｇのシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、白色泡状物のＮ−〔（４−アミノ−２−クロロフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（６６ｍｇ、５１％）を得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２４Ｈ２０Ｃｌ３Ｎ３Ｏ４）：測定質量５２０．０５８９，計算質量５２０．０５９７（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５１】
ｂ．ＴＨＦ（３ｍＬ）中のＮ−〔（４−アミノ−２−クロロフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（６６ｍｇ、０．１２６ｍｍｏｌ）の溶液を、水（０．５ｍＬ）中のＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（２０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の溶液により処理し、混合物を室温にて一夜撹拌した。酢酸（０．５ｍＬ）を添加し、混合物を直接にＲＰ−ＨＰＬＣ（５−９５−３５−２１４）により精製して４０ｍｇの白色固体を得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ２３Ｈ１８Ｃｌ３Ｎ３Ｏ４）：測定質量５０６．０４６１，計算質量５０６．０４４１（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５２】
実施例１２５．４−（４−シアノ−１，３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
ａ．４−（４−シアノ−１，３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
【０２５３】
【化８４】
0003555876.tif 000069
【０２５４】
実施例３に記述した方法を使用し、４−（４−シアノ−１，３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、全収率６３％で、白色粉末：融点２００〜２０２℃として調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５０２．１１７３，計算質量５０２．１１６９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５５】
ｂ）４−（４−シアノ−１，３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
実施例１１０に記述した方法を使用し、４−（４−シアノ−１，３−ジオキソ−２Ｈ−イソインドール−２−イル）−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンを、全収率２６％で白色固体：融点１７０〜１７５℃として調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量４８８．１００４，計算質量４８８．１０１３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５６】
実施例１２６．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  エチルエステルの合成
ＤＭＦ（７５ｍＬ）中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンのナトリウム塩（１．５８３ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液に、過剰量のヨードエタン（３．２７ｇ、２１ｍｍｏｌ）を室温に添加した。得られた溶液を２４時間撹拌した。混合物のＴＬＣ分析は、出発物質の不在を示し、過剰量のヨードエタン及びいくらかのＤＭＦを真空下でロータリーエバポレータにより除去した。残渣を１００ｍＬの酢酸エチルにより希釈し、水（２×１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）にて順に洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過及び溶媒の除去により、白色固体を得、これを酢酸エチル：ヘキサン（１：１）にて溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、１．４ｇ（８７％）のエチルエステルを白色固体、融点２３０〜２３５℃として得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５３３．０８１７，計算質量５３３．０８０１（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５７】
実施例１２７．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  エチルエステルの合成
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（７．０ｇ、１３．８４ｍｍｏｌ）及び粉末重炭酸ナトリウム（５．８８ｇ、７０ｍｍｏｌ）の懸濁物に、過剰量のヨードエタン（１０．９１ｇ、７０ｍｍｏｌ）を室温に添加した。得られた懸濁物を２０時間撹拌し、その時点において混合物のＴＬＣ分析は、出発物質の不在を示し、過剰量のヨードエタン及びいくらかのＤＭＦを真空下でロータリーエバポレータにより除去した。残留する残渣を１５０ｍＬの酢酸エチルにより希釈し、水（２×１００ｍＬ）、ブライン溶液（１００ｍＬ）にて順に洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過及び溶媒の除去により、白色固体を得、これをアセトニトリルから結晶化した。得られた結晶性固体を濾過により集め、高真空下で乾燥させて５．５８ｇ（７７％）のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  エチルエステルを白色固体、融点２３０〜２３５℃として得た。
【０２５８】
実施例１２８．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−モルホリノエチルエステルの合成
ＴＨＦ（１３ｍＬ）中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（０．５０５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及び２−（４−モルホリノ）エタノール（０．２６２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．３０９ｇ、１．５ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を室温に添加した。得られた曇った溶液を４時間撹拌し、その時点において反応混合物のＴＬＣ分析は、酸の不在を示した。次いで混合物を水（５０ｍＬ）にて希釈し、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）にて抽出した。合わせた抽出物を水（２×１００ｍＬ）及びブライン溶液（１００ｍＬ）にて洗浄し、ＭｇＳＯ４により乾燥させた。乾燥剤の濾過及び溶媒の除去により、白色固体を得、これをジクロロメタン：メタノール（１５：１）を溶出液として使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．４２８ｇ（６９％）のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（４−モルホリノ）エチルエステルを、白色固体、融点１０９〜１１８℃として得た。ＨＲ  ＭＳ：測定質量６１８．１３１１，計算質量６１８．１３２９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２５９】
実施例１２９．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（４−モルホリノ）エチルエステルの合成
【０２６０】
【化８５】
0003555876.tif 000070
【０２６１】
ＴＨＦ（５ｍＬ）中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン（０．２５３ｇ、０．５ｍｍｏｌ）及び２−（４−モルホリノ）エタノール（０．１３１ｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に、ジイソプロピルカルボジイミド（９４．６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン（３０．５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を室温に添加した。得られた混合物を室温にて１５時間撹拌し、その時点において反応混合物のＴＬＣ分析は、酸の不在を示した。次いで混合物を水（５０ｍＬ）にて希釈し、ＴＨＦを真空下で除去し、残渣をジクロロメタン（３×２５ｍＬ）にて抽出した。合わせた抽出物を水（２×５０ｍＬ）及びブライン溶液（５０ｍＬ）にて洗浄し、ＭｇＳＯ４により乾燥させた。乾燥剤の濾過及び溶媒の濃縮により、白色固体を得、これをジクロロメタン及び酢酸エチル（５：１から１：１）並びに純粋な酢酸エチルを溶出液として使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、０．２ｇ（６５％）の白色固体、融点１０９〜１１８℃を得た。
【０２６２】
実施例１３０〜１３２．実施例１２９に記述した方法を使用し、以下のエステル誘導体を調製した。
【０２６３】
【表１０】
0003555876.tif 000071
【０２６４】
実施例１３３．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  １−メチル−２−（４−モルホリノ）エチルエステルの合成を、実施例１２９に記述した方法に従って、３２％の収率を以て行った。ＨＲ  ＭＳ：計算質量６３２．１４８４，測定質量６３２．１４８６（Ｍ＋Ｈ）。
【０２６５】
実施例１３４．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  １−メチルエチルエステルを、実施例１２７に記述した方法に従って、６０％の収率で調製した。ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ：計算質量５６９．０７７８，測定質量５６９．０７７４（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２６６】
実施例１３５．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−メチルプロピルエステルを、実施例１２７に記述した方法に従って調製した。ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ：計算質量５６１．１１１４，測定質量５６１．１１２５（Ｍ＋Ｈ）。
【０２６７】
実施例１３６．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  １−メチル−４−ピペリジニルエステルを、実施例１２８に記述した方法に従って、６５％の収率で調製した。ＨＲＭＳ（Ｃ３０Ｈ３０Ｃｌ３Ｎ３Ｏ４）：測定質量６０２．１３８６，計算質量６０２．１３８０（Ｍ＋Ｈ）。
【０２６８】
実施例１３７．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ブチルエステルを、実施例１２７に記述した方法に従って、７５％の収率で調製した。ＨＲＭＳ（Ｃ２８Ｈ２７Ｃｌ３Ｎ２Ｏ４）：測定質量５６１．１１１５，計算質量５６１．１１１４（Ｍ＋Ｈ）。
【０２６９】
実施例１３８．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−〔４−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−１−ピペラジニル〕エチルエステルを、実施例１２９に記述した方法に従って、７８％の収率で、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン及び２−〔４−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−１−ピペラジニル〕エタノールから調製した。ＨＲＭＳ：測定質量７１７．１９９５，計算質量７１７．２０１３（Ｍ＋）。
【０２７０】
実施例１３９．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（１−ピペラジニル）エチルエステル
ジオキサン（４ｍＬ）中のＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−〔４−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−１−ピペラジニル〕エチルエステル（１．０ｍｍｏｌ、０．７２ｇ）の溶液に、ジオキサン中のＨＣｌ溶液（３．０ｍｍｏｌ、０．７５ｍＬ、４規定）を室温にて添加した。得られた溶液を室温にて２時間撹拌し、その時点において反応混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。次いでジオキサンを真空下で除去し、固体をエーテル（１５ｍＬ）により摩砕した。エーテルをデカントし、固体を高真空下で乾燥させて、０．６８ｇ（９０％）を白色固体として得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ３０Ｈ３１Ｃｌ３Ｎ４Ｏ４）：測定質量６１７．１４６４，計算質量６１７．１４８９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７１】
実施例１４０．Ｎ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（４−メチル−１−ピペラジニル）エチルエステル
ＮＭＰ（１０ｍＬ）中の実施例１３９からのＮ−（２−クロロ−６−メチルベンゾイル）−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  ２−（１−ピペラジニル）エチルエステル塩酸塩（１．０ｍｍｏｌ、０．６１７ｇ）及びＫ２ＣＯ３（８．０ｍｍｏｌ、１．１ｇ）の溶液に、ヨウ化メチル（３．０ｍｍｏｌ、０．４３ｇ）を室温にて添加した。得られた混合物を室温にて４８時間撹拌し、その時点において反応混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。次いで混合物を水（１００ｍＬ）により希釈し、沈殿した固体を濾過により集め、高真空下で乾燥させた。この固体を逆相ＨＰＬＣにより精製して０．３５ｇ（５５％）を白色固体として得た。ＨＲ  ＭＳ（Ｃ３１Ｈ３３Ｃｌ３Ｎ４Ｏ４）：測定質量６３１．９２０８，計算質量６３１．９１９３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７２】
実施例１４１．Ｎ−メチル−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＮ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−ニトロフェニルアラニン  メチルエステル（０．３７５ｍｍｏｌ、１４２ｍｇ）及び酸化銀（１．５ｍｍｏｌ、３４０ｍｇ）の懸濁物に、ヨウ化メチル（２８ｍｍｏｌ、１．７５ｍＬ）を室温にて添加した。懸濁物を室温にて２日間撹拌し、その時点において混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示し、固体を濾過した。溶液を濃縮し、酢酸エチル（３０ｍＬ）により希釈し、水（２０ｍＬ）及びブライン溶液（２０ｍＬ）にて洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。乾燥剤の濾過、及び溶媒の除去により、９９ｍｇ（６７％）の明褐色油状物を得た。ＬＲ  ＭＳ（Ｃ１９Ｈ１９ＣｌＮ２Ｏ５）：３９０（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７３】
実施例１４２．４−アミノ−Ｎ−メチル−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
実施例１４１からのＮ−メチル−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（０．５ｍｍｏｌ、１９２ｍｇ）、亜鉛末（〜３２５メッシュ、５．０ｍｍｏｌ、０．３３ｇ、１０当量）及び塩化アンモニウム（７．５ｍｍｏｌ、０．４ｇ、１５当量）の混合物に、室温にてメタノール（４ｍＬ）及び水（２ｍＬ）を添加した。水の添加後、反応は発熱的であった。懸濁物を室温にて２時間撹拌し、その時点において混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示し、反応混合物をセライトを通して濾過した。フィルターケーキをメタノール（３０ｍＬ）及び水（２０ｍＬ）にて洗浄した。濾液を濃縮してメタノールを除去し、残渣を酢酸エチル（３×２０ｍＬ）により抽出した。合わせた抽出物をブライン溶液（３０ｍＬ）にて洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。乾燥剤の濾過及び溶媒の濃縮により、１４８ｍｇ（８２％）の黄色油状物を与えた。ＬＲ  ＭＳ（Ｃ１９Ｈ２１ＣｌＮ２Ｏ３）：３６１（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７４】
実施例１４３．４−〔（２，６−ジクロロフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−メチル−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
【０２７５】
【化８６】
0003555876.tif 000072
【０２７６】
実施例１に記述した方法を使用して、メチル  ４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕−アミノ〕−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンを、全収率６８％で、無定形固体として調製した。ＬＲ  ＭＳ（Ｃ２６Ｈ２３Ｃｌ３Ｎ２Ｏ４）：５３４（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７７】
実施例１４４．４−〔（２，６−ジクロロフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−メチル−Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
実施例１３に記述した方法を使用して、Ｎ−〔１−（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｎ−メチル−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、実施例１４３の生成物から５９％の全収率で、白色固体として調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５１９．０６３１，計算質量５１９．０６４５（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７８】
実施例１４５．２−クロロ−６−メチル安息香酸の調製
ａ．２−クロロ−６−メチルベンズアルデヒドの調製
磁気撹拌機、温度計、添加ロート、及びアルゴン導入部を備えた５００ｍＬの三首丸底フラスコに、７５ｇ（４９４ｍｍｏｌ）の２−クロロ−６−メチルベンゾニトリル及び４００ｍＬのトルエン（４Åモレキュラシーブにて保存）を充填した。混合物を−２℃（氷＋アセトン）に冷却し、ヘキサン中のＤＩＢＡＬ−Ｈ（５９３ｍｍｏｌ、５９３ｍＬ、１．０規定）の溶液を、温度を０℃以下に保ちつつ、３０分間で滴下添加した。添加後、反応混合物を０℃にて１時間撹拌し、次いで室温まで昇温させた。室温にて２時間後、ＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した（４：１のヘキサン：エーテル、ＵＶ蛍光による分析は誤りを生じるので、ホスホモリブデン酸スプレー）。反応混合物を氷（２０００ｇ）及び濃硫酸（５０ｍＬ）に注入し、一夜撹拌した。沈殿した固体を濾過により集め、濾液をエーテル（２×２００ｍＬ）にて抽出した。合わせた抽出物をブライン溶液にて洗浄し、ＭｇＳＯ４にて乾燥させた。乾燥剤の濾過及び溶液の濃縮により、粗生成のアルデヒドを得、これを上記固体と合わせて、次の工程に使用するために適した７１．３１ｇ（９３％）の明黄色固体を得た。
【０２７９】
ｂ．２−クロロ−６−メチル安息香酸の調製
磁気撹拌機、温度計、添加ロート、及びアルゴン導入部を備えた１０００ｍＬの三首丸底フラスコに、７１．３１ｇ（４６１ｍｍｏｌ、上記実験にて得られた粗生成物）の２−クロロ−６−メチルベンズアルデヒド及び７５０ｍＬのアセトニトリルを充填した。この懸濁物に、水（２４０ｍＬ）中の一塩基リン酸ナトリウム（１１５ｍｍｏｌ、１５．９ｇ、０．２５当量）の溶液を添加し、次いで過酸化水素（５０ｍＬ、３０％）を室温にて添加した。次いで水（７００ｍＬ）中の亜塩素酸ナトリウム（７３．５ｇ、８１１ｍｍｏｌ、１．７６当量）溶液を、０℃にて滴下添加し、この間温度を３℃以下に維持した。添加後、黄色懸濁物を０℃から室温までにおいて１５時間撹拌し、この時点で混合物のＴＬＣ分析はアルデヒドの不在を示した。次いで水（２００ｍＬ）中の重亜硫酸ナトリウム溶液（７３ｇ、７０１ｍｍｏｌ、１．５２当量）を、０℃にて黄色が消えるまで（ＫＩ−試験紙陽性）滴下添加した。冷却は、発熱反応の制御に重要である。溶媒を真空下で除去して白色固体を得た。固体を濾過により集め、濾液をエーテル（２００ｍＬ）にて抽出した。上記固体もこのエーテル溶液に溶解し、１０％ＮａＯＨ溶液（２×２００ｍＬ）にて洗浄した。塩基性水溶液を、１０％ＨＣｌにてｐＨ〜１まで中和した。沈殿した白色固体を濾過により集め、空気乾燥して５４．８８ｇ（６５％、２工程全体）の２−クロロ−６−メチル安息香酸を白色固体として得た。
【０２８０】
実施例１４６．４−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ａ．４−ニトロ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ＤＭＦ中（５００ｍＬ）の４−ニトロ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン（２２６．２ｍｍｏｌ、７０．２ｇ）及び炭酸ナトリウム（１．１３ｍｏｌ、９５ｇ）の懸濁物に、室温にてヨウ化メチル（１．１３ｍｏｌ、７０．４ｍＬ）を添加した。懸濁物を室温にて１５時間撹拌し、この時点で混合物のＴＬＣ分析は出発酸物質の不在を示し、過剰量のヨウ化メチル及びいくらかのＤＭＦを、高真空下で除去した。混合物を水（２Ｌ）に注入し、沈殿がゆっくり形成されるため、室温にて週末にわたって撹拌した。沈殿した固体を濾過により集め、水（２Ｌ）により洗浄した。空気及び真空乾燥後に、７２ｇ（９８％）の４−ニトロ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、明黄色固体、融点９５〜９６℃として単離した。１Ｈ ＮＭＲ， ＤＭＳＯ−ｄ６（４００ＭＨｚ）δ ８．１６ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ２０Ｈｚ）， ７．５３ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ２０Ｈｚ）， ７．３９ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ ２２Ｈｚ）， ４．２６−４．２８ （ｍ， １Ｈ）， ３．６ （ｓ， ３Ｈ）， ２．９６−３．１９ （ｍ， ２Ｈ）， １．２５ （ｓ， ９Ｈ）． １３Ｃ ＮＭＲ， ＣＤＣｌ３（１００Ｍｈｚ） ｄ １７２．０４， １５５．２９， １４６．２７， １４５．９６， １３０．４８， １２３．１８， ７８．３６， ５４．４４， ５１．９， ３６．１， ２７．９９。ＨＲ  ＭＳ：測定質量３２５．１４０４，計算質量３２５．１４００（Ｍ＋Ｈ）。
【０２８１】
ｂ．４−アミノ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
４−ニトロ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（２２２ｍｍｏｌ、７２ｇ）、亜鉛末（〜３２５メッシュ、２．２ｍｏｌ、１４５．２ｇ、１０当量）及び塩化アンモニウム（３．３ｍｍｏｌ、１７８．１ｇ、１５当量）の混合物に、室温にてメタノール（１Ｌ）及び水（５００ｍＬ）を添加した。水の添加後、反応は発熱的であり、温度が４５〜５０℃に上昇した。懸濁物を室温にて１時間撹拌し、その時点において混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示し、反応混合物をセライトを通して濾過し、フィルターケーキをメタノール（１Ｌ）及び水（５００ｍＬ）にて洗浄した。濃縮によりメタノール及びいくらかの水を除去して、白色固体を形成させ、これを濾過により集め、水にて洗浄した。空気乾燥後、６５．５ｇ（定量的）の白色固体、融点８６〜８９℃を得た。１Ｈ ＮＭＲ， ＤＭＳＯ−ｄ６（４００ＭＨｚ）δ ６．９ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ２０Ｈｚ）， ６．６２ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ２０Ｈｚ）， ７．３９ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ ２２Ｈｚ）， ４．２６−４．２８ （ｍ， １Ｈ）， ３．６８ （ｓ， ３Ｈ）， ２．９６−３．１９ （ｍ， ２Ｈ）， １．２５ （ｓ， ９Ｈ）。ＨＲ  ＭＳ：測定質量２８４．１６１４，計算質量２９４．１６２１）。
【０２８２】
ｃ．４−〔（２，６−ジクロロフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ジクロロメタン（３５０ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１２７．６ｍｍｏｌ、３７．５７ｇ）及び２，６−ジクロロベンゾイルクロリド（１４０．６ｍｍｏｌ、２９．４５ｇ）の溶液に、室温にてジイソプロピルエチルアミン（１９２ｍｍｏｌ、３３．４ｍＬ）を添加した。褐色溶液を室温にて１５時間撹拌し、白色の懸濁物を得た。この時点において混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。固体を濾過により集め、ジクロロメタン（１５０ｍＬ）にて洗浄し、空気乾燥して５２．７５ｇ（８８．４％）の白色固体、融点１４８〜１５１℃を得た。１Ｈ ＮＭＲ， ＤＭＳＯ−ｄ６（４００ＭＨｚ）δ １０．６８ （ｓ， １Ｈ）， ７．４７−７．６ （ｍ， ５Ｈ）， ７．２−７．２９ （ｍ， ３Ｈ）， ４．１２−４．１７ （ｍ， １Ｈ）， ３．６２ （ｓ， ３Ｈ）， ２．７９−２．９９ （ｍ， ２Ｈ）， １．３３ （ｓ， ９Ｈ）． １３Ｃ ＮＭＲ， ＣＤＣｌ３（１００Ｍｈｚ） ｄ １７２．４９， １６１．８２， １５５．３７， １３６．９９， １３６．３６， １３１．２８， １３１．１６， １２９．４８， １２８．１９， １１９．３１， ７８．２７， ５５．３， ５１．７６， ３５．９， ２７．７７。ＨＲ  ＭＳ：測定質量４６６．１０６９，計算質量４６６．１０６２（Ｍ＋Ｈ）。
【０２８３】
ｄ．４−〔（２，６−ジクロロフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩の調製
ジオキサン（９０ｍＬ）中の４−〔（２，６−ジクロロフェニルカルボニル）アミノ〕−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（９２．９７ｍｍｏｌ、４３．４５ｇ）を、室温にてジオキサン中の１６６ｍＬの４規定塩酸にて処理した。５分間後、固体が溶液中に解け、混合物を２時間撹拌した。いくらかのジオキサンを真空下で除去して黄色シロップ状物を得、２５０ｍＬのエチルエーテルを添加した。ゴム状物が形成され、これをＴＨＦ（１００ｍＬ）及びメタノール（１００ｍＬ）に溶解した。溶媒を真空下で除去して、４３．７ｇ（１００％）の塩酸塩を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ， ＤＭＳＯ−ｄ６（４００ＭＨｚ）δ １０．８１ （ｓ， １Ｈ）， ７．７６ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ２２Ｈｚ）， ７．５８ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ １８Ｈｚ）， ７．５１ （ｔ， １Ｈ， Ｊ ＝ １５Ｈｚ）， ７．２４ （ｄ， ２Ｈ， Ｊ ＝ ２２Ｈｚ）， ４．２３−４．２６ （ｍ， １Ｈ）， ３．５６ （ｓ， ３Ｈ）， ３．１４−３．１７ （ｍ， ２Ｈ）． １３Ｃ ＮＭＲ， ＣＤＣｌ３（１００Ｍｈｚ） ｄ １６９．０３， １６１．７２， １３７．５６， １３６．１１， １３１．１９， １３０．９５， １２９．９３， １２９．７９， １２８．０６， １１９．４６， ５３．１７， ５２．６， ３５．１３。ＨＲ  ＭＳ：測定質量３６７．０６１１，計算質量３６７．０６１６（Ｍ＋）。
【０２８４】
実施例１４７．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
ＤＭＦ（６００ｍＬ）中の実施例１４６からの４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩（２７２．５ｍｍｏｌ、１１０ｇ）及び２−クロロ−６−メチル安息香酸（２７６ｍｍｏｌ、４７．１５ｇ）の溶液に、ＨＢＴＵ（２７６ｍｍｏｌ、１０５ｇ）及びジイソプロピルエチルアミン（１．２４ｍｏｌ、１１９ｍＬ）を室温にて添加した。透明溶液を室温にて４８時間撹拌し、この時点において反応混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。反応混合物を、温度を低下させるためにいくらかの氷を入れた５Ｌの水にゆっくり注入した。白色の沈殿した固体を沈め、固体を濾過により集めた。固体ケーキを水（１Ｌ）及びヘキサン（１Ｌ）にて洗浄し、空気乾燥して１５０ｇの粗生成物を得た。この固体生成物を熱アセトニトリル（１Ｌ）に溶解し、冷蔵庫にて冷却した。固体を濾過により集め、ヘキサン（５００ｍＬ）にて洗浄し、空気乾燥して１０１．１ｇを得た。母液を濃縮し、残渣をジクロロメタン及び酢酸エチル（１５：１）にて溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、更に１７．０７ｇ（全量＝１１８．１７ｇ、８３％）、融点２４４〜２４５℃を得た。１Ｈ ＮＭＲ， ＤＭＳＯ−ｄ６（４００ＭＨｚ）δ １０．６６ （ｓ， １Ｈ）， ８．８３ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ １９Ｈｚ）， ７．４７−７．６ （ｍ， ５Ｈ）， ７．１５−７．２９ （ｍ， ５Ｈ）， ４．５８−４．６８ （ｍ， １Ｈ）， ３．６５ （ｓ， ３Ｈ）， ３．１２ （ｄｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ １７．１３Ｈｚ）， ２．８７ （ｄｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ １７，１１Ｈｚ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ）。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５１８．０６５２，計算質量５１８．０６４１。
【０２８５】
実施例１４８．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
エタノール（３５０ｍＬ）中の、実施例１４７からの４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１６６ｍｍｏｌ、８６．２ｇ）の懸濁物に、室温にて１規定水酸化ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）を添加した。混合物を４０〜４５℃に加熱し、得られた透明溶液を３〜４時間撹拌した。次いで混合物を室温まで冷却し、エタノールをロータリーエバポレータにて除去した。残渣を１００ｍＬの水にて希釈した。中性不純物をエーテル（２×１００ｍＬ）中に抽出し、塩基性水性相を１規定ＨＣｌにて中和した。沈殿した固体を濾過により集め、固体ケーキを水（１Ｌ）にて洗浄し、週末にわたって空気にて乾燥させた。粗生成物の固体を熱アセトニトリル（２Ｌ）に溶解し、得られた溶液を冷蔵庫で１５時間保存した。白色結晶性固体を、濾過により集め、冷アセトニトリル（１００ｍＬ）により洗浄した。空気乾燥後、７９．７６ｇ（９５％）の白色固体、融点２１２〜２１５℃を得た。１Ｈ ＮＭＲ， ＤＭＳＯ−ｄ６（４００ＭＨｚ）δ１０．６６ （ｓ， １Ｈ）， ８．８５ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ １９Ｈｚ）， ７．４７−７．６ （ｍ， ５Ｈ）， ７．１５−７．２９ （ｍ， ５Ｈ）， ４．５８−４．６８ （ｍ， １Ｈ）， ３．１２ （ｄｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ １７，１３Ｈｚ）， ２．８７ （ｄ， １Ｈ， Ｊ ＝ １７，１１Ｈｚ）， ２．０９ （ｓ， ３Ｈ）。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５０５．０４８３．計算質量５０５．０４８８（Ｍ＋）。
【０２８６】
実施例１４９．２，６−ジメチル−４−トリフルオロメチル−３−ピリジンカルボン酸の調製
４０ｍＬのＴＨＦ中の２，６−ジメチル−４−トリフルオロメチル−３−ピリジンカルボン酸エチルエステルの溶液及び１０ｍＬの１規定水酸化ナトリウム溶液を、還流下で４８時間加熱した。混合物のＴＬＣ（３：７のメタノール：ジクロロメタン）は、出発物質が消費されたことを示した。混合物を酢酸（５ｍＬ）により酸性化し、蒸発乾固させた。残渣をＴＨＦにて摩砕し、溶液を濃縮して、ＮＭＲにて示されるようにいくらかのＴＨＦ及び酢酸を含む０．７ｇの物質を得た。この物質を同様な実験の生成物と合わせ、（３：７）メタノール：ジクロロメタンにて溶出される９０ｇのシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけて、１．０５ｇの固体を得た。この物質をトルエン（６ｍＬ）にて希釈し、数回蒸発させてほとんどの酢酸を除去し、高真空下で乾燥させた後に０．９ｇの白色泡状物を得た。ＬＲ−ＥＳ−ＭＳ（Ｃ９Ｈ６Ｆ３ＮＯ２）：２１８（Ｍ−Ｈ）。
【０２８７】
実施例１５０．Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジメチル−４−トリフルオロメチル−３−ピリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
ａ．ジクロロメタン（３ｍＬ）中の、実施例１４９からの２，６−ジメチル−４−トリフルオロメチルピリジンカルボン酸（１０２ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃（氷浴）において１滴のＤＭＦ及びオキサリルクロリド（０．７８ｍｍｏｌ、９９ｍｇ）を添加した。溶液をこの温度にて３０分間撹拌し、室温まで昇温させ、更に１時間撹拌した。次いで溶媒及び過剰量のオキサリルクロリドを真空下で除去し、残渣を高真空下で乾燥させた。これに、４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル（０．５ｍｍｏｌ、２１２ｍｇ）を添加し、混合物をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解した。この透明溶液に、室温にてＤＩＰＥＡ（２．０ｍｍｏｌ、０．２５８ｇ）を添加した。混合物を１５時間撹拌し、この時点において混合物のＴＬＣ分析は出発物質の不在を示した。混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）及び水（１００ｍＬ）で希釈した。２層を分離し、有機層を飽和重炭酸ナトリウム溶液（２０ｍＬ）及びブライン溶液（３０ｍＬ）にて洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥させた。乾燥剤の濾過及び溶媒の除去により、粗生成物を得、これを次の工程に直接に使用した。
【０２８８】
実施例１５１〜１５５．以下に示すＮ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（ヘテロアリール）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン誘導体を、実施例１０９に記述した結合方法及び実施例１３に記述したエステル加水分解方法を使用して、当モル量の４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び適切なヘテロ芳香族性カルボン酸の処理により調製した。
【０２８９】
【化８７】
0003555876.tif 000073
【０２９０】
【表１１】
0003555876.tif 000074
【０２９１】
実施例１５６〜１６０．以下に示す４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（ヘテロアリール）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン誘導体を、実施例３に記述した一般的方法及び、次いで実施例１３に記述したエステル加水分解の一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び適切なヘテロ芳香族性カルボン酸を結合させることにより調製した。
【０２９２】
【化８８】
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【０２９３】
【表１２】
0003555876.tif 000076
【０２９４】
実施例１６１．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（１−ナフチル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び１−ナフトイン酸から収率７７％で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５２１．１０２４，計算質量５２１．１０５３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２９５】
実施例１６２．Ｎ−〔（２−アセチル−６−メチルフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−アセチル−６−メチル安息香酸から収率３８％で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５４７．０５７９，計算質量５４７．０５９４（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２９６】
実施例１６３．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２−（１，１−ジメチルエチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−（１，１−ジメチルエチル）安息香酸から調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５２７．１５２３，計算質量５２７．１５７３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２９７】
【化８９】
0003555876.tif 000077
【０２９８】
実施例１６４．２，６−ビス−（１−メチルエチル）安息香酸を、実施例１０５に記述した２工程の一般的方法を使用して、２，６−ビス（１−メチルエチル）フェノールから２工程で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量２０６．０３２５，計算質量２０６．３４２（Ｍ＋）。
【０２９９】
実施例１６５．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔〔２，６−ビス−（１−メチルエチル）フェニル〕カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２，６−ビス−（１−メチルエチル）安息香酸から調製した。ＬＲ  ＭＳ：５５５（Ｍ＋）。
【０３００】
実施例１６６．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−メトキシフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−メトキシ安息香酸から調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５０１．０９８４，計算質量５０１．０９８４（Ｍ＋Ｈ）。
【０３０１】
実施例１６７．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−クロロ−４−メチルスルホニルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−クロロ−４−メチルスルホニル安息香酸から収率７３％で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５８３．０２６３，計算質量５８３．０２６４（Ｍ＋Ｈ）。
【０３０２】
実施例１６８．Ｎ−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２，６−ジクロロ安息香酸から調製した。
【０３０３】
実施例１６９．Ｎ−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、実施例１３に記述した一般的方法を使用して、実施例１６８からのＮ−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを加水分解することにより調製した。
【０３０４】
実施例１７０．４−〔（２Ｓ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（フェニルメチル）−５−オキソ−１−イミダゾリニル〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン及び４−〔（２Ｒ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（フェニルメチル）−５−オキソ−１−イミダゾリニル〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンの調製
【０３０５】
【化９０】
0003555876.tif 000078
【０３０６】
ａ．Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−４−〔〔（２Ｒ）−２−アミノ−１−オキソ−３−フェニルプロピル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンメチルエステルの合成
ＤＭＦ（６０ｍＬ）中の４−アミノ−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（５．０９ｇ、１７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｆｍｏｃ−Ｄ−フェニルアラニン（８．７０ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１２ｍＬ、６９ｍｍｏｌ）及びＨＢＴＵ（８．５０ｇ、２２．５ｍｍｏｌ）を添加した。次いで混合物を室温にて４時間撹拌した。反応混合物を水（１５０ｍＬ）にて希釈し、沈殿した明黄色固体を濾過により集めた。次いでこの固体を６０ｍＬのアセトンに再溶解し、溶液を１００ｍＬの水にて処理した。固体を濾過により集め、１規定ＨＣｌ、Ｈ２Ｏにて洗浄した。真空下、６０℃にて一夜乾燥させ、明黄色固体（１３．２ｇ）を得た。この固体の一部（２．５１ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）を１５ｍＬのＤＭＦに溶解し、この溶液に１．５ｍＬのピペリジンを添加した。上記溶液を室温にて４５分間撹拌した。溶媒の除去後、残渣を酢酸エチル−ヘキサンから再結晶し、Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−４−〔〔（２Ｒ）−２−アミノ−１−オキソ−３−フェニルプロピル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（１．３６ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を８１．５％の収率で得た。ＬＲ  ＭＳ４４２（Ｍ＋Ｈ）。
【０３０７】
ｂ．４−（３−アセチル−５−オキソ−２−フェニル−４−フェニルメチル−１−イミダゾリジニル）−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの合成
ジクロロメタン（１０ｍＬ）及びオルトギ酸メチル（１０ｍＬ）中の上記アミン（１．４８ｇ、３．３５ｍｍｏｌ）及びベンズアルデヒド（３７６μｌ、３．７ｍｍｏｌ）の溶液を、室温にて３日間撹拌した。次いで反応フラスコを９０℃に加温し、無水酢酸（ニート、１．８ｍＬ）を添加した。得られた混合物を１１０℃にて４時間撹拌した。次いで溶媒を蒸発させ、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）により精製して、４−（３−アセチル−５−オキソ−２−フェニル−４−フェニルメチル−１−イミダゾリジニル）−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルジアステレオマー１（４１７ｍｇ）及びジアステレオマー２（１．２５ｇ）を得た。これらの化合物は、イミダゾリジノン環の２位においてジアステレオマーである。両方のジアステレオマーはＬＲ  ＭＳ（Ｃ３３Ｈ３７Ｎ３Ｏ６）：５７２（Ｍ＋Ｈ）であった。
【０３０８】
ｃ．４−〔（２Ｓ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（フェニルメチル）−５−オキソ−１−イミダゾリニル〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルの調製
４−（３−アセチル−５−オキソ−２−フェニル−４−フェニルメチル−１−イミダゾリジニル）−Ｎ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル（ジアステレオマー１）（４１５ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中の４規定ＨＣｌ、１０ｍＬにより室温にて２時間処理した。溶媒の除去後、残渣を真空下で一夜乾燥させた。残渣（２４１ｍｇ、０．４７１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４ｍＬ）に溶解し、２−クロロ−６−メチル安息香酸（１０５ｍｇ、０．６１７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２３４ｍｇ、０．６１７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（２４６μＬ、１．４２ｍｍｏｌ）により、室温にて４時間処理した。混合物を３０ｍＬの酢酸エチルにより希釈し、混合物を１規定ＨＣｌ、水及びブライン（それぞれ８ｍＬ）により洗浄した。ＭｇＳＯ４にて乾燥後、溶媒を除去し、残渣を酢酸エチル：ヘキサン（４：１）にて溶出するシリカゲルを通して濾過し、４−（３−アセチル−５−オキソ−２−フェニル−４−フェニルメチル−１−イミダゾリジニル）−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル  ジアステレオマー１を得た。
【０３０９】
ｄ．４−（３−アセチル−５−オキソ−２−フェニル−４−フェニルメチル−１−イミダゾリジニル）−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  ジアステレオマー１の調製
ＥｔＯＨ（３ｍＬ）中の４−（３−アセチル−５−オキソ−２−フェニル−４−フェニルメチル−１−イミダゾリジニル）−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル  ジアステレオマー１（９０ｍｇ、０．１２８ｍｍｏｌ）を、ＮａＯＨ（１規定、０．３ｍＬ）により室温にて３０分間処理した。得られた溶液を、１滴のＨＯＡｃにより酸性化し、ＨＰＬＣ（Ｃ−１８、水中の５％アセトニトリルから９５％までの３０分間の線形勾配）により精製し、凍結乾燥後に白色固体を得た。ＭＳ：測定質量６０９．９（Ｍ＋Ｈ）。
【０３１０】
実施例１７１．４−〔（２Ｓ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（３−ピリジニルメチル）−５−オキソ−１−イミダゾリニル〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン及び４−〔（２Ｒ，４Ｒ）−３−アセチル−２−フェニル−４−（３−ピリジニルメチル）−５−オキソ−１−イミダゾリニル〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニンを、実施例１７０に記述した一般的方法を使用して、４−アミノ−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及びＦｍｏｃ−Ｄ−３−ピリジニルアラニンから調製した。イミダゾリン環の２−位における２種のジアステレオマーは、Ｃ−１８  ＲＰ−ＨＰＬＣによって容易には分離されず、化合物は混合物としてアッセイされた。ＨＲ  ＭＳ：測定値６１１．２０７０，計算値６１１．２０６１（Ｍ＋Ｈ）。
【０３１１】
実施例１７２．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−クロロ−４−ヒドロキシフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−クロロ−４−ヒドロキシ安息香酸から、３５％の収率で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５２１．０４３３，計算質量５２１．０４３８（Ｍ＋Ｈ）。
【０３１２】
実施例１７３．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−メチルスルホニルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−メチルスルホニル安息香酸から、９９％の収率で調製した。ＬＲ  ＭＳ：５４８（Ｍ＋）。
【０３１３】
実施例１７４．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−（１−メチル）エチル−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−（１−メチル）エチル−６−メチル安息香酸から、３５％の収率で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５２６．１４１７，計算質量５２６．１４２６（Ｍ＋）。
【０３１４】
実施例１７５．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−ブロモ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−ブロモ−６−メチル安息香酸から、６４％の収率で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５６３．０１３８，計算質量５６３．０１４０（Ｍ＋Ｈ）。
【０３１５】
実施例１７６．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−エチル−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステルを、実施例３に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル及び２−エチル−６−メチル安息香酸から、４６％の収率で調製した。ＨＲ  ＭＳ：測定質量５１３．１３５９，計算質量５１３．１３４８（Ｍ＋Ｈ）。
【０３１６】
実施例１７７．Ｎ−〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕−４−〔〔（２，４−ジメチル−３−ピリジニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニンを、実施例１０７に記述した一般的方法を使用して、４−〔〔（２，４−ジメチル−３−ピリジル）カルボニル〕アミノ〕−Ｌ−フェニルアラニン  メチルエステル塩酸塩及び２，６−ジクロロ安息香酸から調製した。ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４８６（２Ｃｌ）
【０３１７】
実施例１７８．４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン  ナトリウム塩の調製
水（５００ｍＬ）中の４−〔〔（２，６−ジクロロフェニル）カルボニル〕アミノ〕−Ｎ−〔（２−クロロ−６−メチルフェニル）カルボニル〕−Ｌ−フェニルアラニン（１２７．１３ｍｍｏｌ、６４．３ｇ）の懸濁物を、１．０規定水酸化ナトリウム水溶液（１２０ｍＬ）を用いて、室温にて溶液のｐＨが中性となるまで滴定した。完全に溶解させるために、滴定の間、混合物を４０〜４５℃に加温した。量がほぼ３００〜３５０ｍＬになるようにいくらかの水を真空下で除去し、透明な溶液を真空下で２日間凍結乾燥し、６７ｇ（１００％）を白色無定形固体として得た。分析（Ｃ２４Ｈ１８ＣｌＯ３ＮａＯ４・０．７０Ｈ２Ｏ）：計算値  Ｃ，５４．６２；Ｈ，３．４４；Ｎ，５．３１；Ｃｌ，２０．１５；Ｎａ，４．３６；  Ｈ２Ｏ，２．３３。測定値：Ｃ，５４．３７；Ｈ，３．４９；Ｎ，５．１８；Ｃｌ，２０．１１；Ｎａ，４．２５；Ｈ２Ｏ，２．５４。
【０３１８】
実施例１７９．ＶＬＡ−４／ＶＣＡＭ−１スクリーニングアッセイ
固定化ＶＣＡＭ−１への結合に対する競合能として定義されるＶＬＡ−４アンタゴニスト活性を、固相二重抗体ＥＬＩＳＡを使用して定量した。ＶＣＡＭ−１に結合するＶＬＡ−４（ａ４ｂ１インテグリン）は、抗−インテグリンｂ１抗体：ＨＲＰ−結合抗−マウスＩｇＧ：発色基質（Ｋ−Ｂｌｕｅ）の複合体により検出した。最初に、これは９６ウエルプレート（Ｎｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐ）を組換えヒトＶＣＡＭ−１（１００μｌ ＰＢＳ中に０．４μｇ）により被覆し、各プレートを封止し、次いでプレートを４℃にて１８時間静置することを伴う。ＶＣＡＭ−被覆プレートを、次いで非特異的結合を低減するために、２５０μｌの１％ＢＳＡ／０．０２％ＮａＮ３を用いてブロックした。アッセイの日に、すべてのプレートを、ＶＣＡＭアッセイ緩衝溶液（２００μｌ／ウエルの、５０ｍＭトリス−ＨＣｌ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＭｎＣｌ２、０．０５％トゥイーン２０；ｐＨ７．４）により２回洗浄した。試験化合物を、１００％ＤＭＳＯに溶解し、次いで１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを補充したＶＣＡＭアッセイ緩衝溶液にて１：２０に希釈した（即ち最終ＤＭＳＯ＝５％）。各試験化合物について０．００５ｎＭ−１．５６３μＭの濃度範囲が達成されるように一連の１：４希釈を行った。各希釈のウエル当たり１００μｌをＶＣＡＭ−被覆プレートに添加し、続いて１０μｌのラモス（Ｒａｍｏｓ）細胞−誘導ＶＬＡ−４を加えた。これらのプレートを、プラットホーム振とう機により引き続いて１分間混合し、３７℃にて２時間インキュベートし、次いで２００μｌ／ウエルのＶＣＡＭアッセイ緩衝溶液にて４回洗浄した。各ウエルに１００μｌのマウス抗−ヒトインテグリンｂ１抗体を加え（ＶＣＡＭアッセイ緩衝溶液中に０．６μｇ／ｍＬ＋１ｍｇ／ｍＬＢＳＡ）、３７℃にて１時間インキュベートした。このインキュベーション時間の最後に、すべてのプレートを、ＶＣＡＭアッセイ緩衝溶液（２００μｌ／ウエル）にて４回洗浄した。対応する第２の抗体、ＨＲＰ−結合ヤギ抗−マウスＩｇＧ（ウエル当たり１００μｌ＠ＶＣＡＭアッセイ緩衝溶液中に１：８００希釈＋１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ）を、次いで各ウエルに添加し、続いて室温における１時間のインキュベーションを行い、最後にＶＣＡＭアッセイ緩衝溶液（２００μｌ／ウエル）による３回の洗浄を行った。発色は、ウエル当たり１００μｌのＫ−Ｂｌｕｅを添加することにより開始し（１５分間インキュベーション、室温）、ウエル当たり１００μｌのレッド・停止緩衝溶液の添加により終了した。すべてのプレートは、次いでＵＶ／可視分光光度計にて６５０ｎｍにて読みとった。結果は、全結合（即ち、試験化合物非存在でのＶＬＡ−４＋ＶＣＡＭ−１）の％阻害として計算した。本発明の化合物の選択されたデータを下記の表に示す。
【０３１９】
【表１３】
0003555876.tif 000079
【０３２０】
実施例１８０．ラモス（ＶＬＡ−４）／ＶＣＡＭ−１細胞に基づくスクリーニングアッセイプロトコール
材料：
可溶性組換えヒトＶＣＡＭ−１（５−及び７−Ｉｇドメインの混合物）を、免疫アフィニティクロマトグラフィーによりＣＨＯ細胞培養培地から精製し、０．１Ｍトリス−グリシン（ｐＨ７．５）、０．１Ｍ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＰＭＳＦ、０．０２％ＮａＮ３、及び１０μｇ／ｍＬロイペプチンを含む溶液中に維持した。
カルセイン−ＡＭ（Ｃａｌｃｅｉｎ−ＡＭ）は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅ Ｉｎｃ．から購入した。
【０３２１】
方法：
固定化ＶＣＡＭ−１に対する結合について、細胞表面ＶＬＡ−４と競合する能力として定義されるＶＬＡ−４（ａ４ｂ１インテグリン）アンタゴニスト活性を、ラモス−ＶＣＡＭ−１細胞接着アッセイを使用して定量した。細胞表面ＶＬＡ−４を有するラモス細胞を、蛍光色素（カルセイン−ＡＭ）により標識し、試験化合物の存在又は不在下でＶＣＡＭ−１と結合させた。接着細胞と関連した蛍光強度の低下（％阻害）は、試験化合物によるＶＬＡ−４媒介細胞接着の競合的阻害を反映していた。
【０３２２】
最初に、これは９６ウエルプレート（Ｎｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐ）を組換えヒトＶＣＡＭ−１（１００μｌ ＰＢＳ中に１００ｎｇ）により被覆し、各プレートを封止し、次いでプレートを４℃にて１８時間静置することを伴う。ＶＣＡＭ−被覆プレートを、次いでＰＢＳ中の０．０５％トゥイーン−２０により２回洗浄し、次いで非特異的結合を低減するために、２００μｌのブロック緩衝溶液（１％ＢＳＡ／０．０２％チメロサール）を用いて１時間（室温）、ブロックした。ブロック緩衝溶液を用いたインキュベーションに次いで、プレートを裏返し、吸い取り、残留する緩衝溶液を吸引した。次いで各プレートを３００μｌのＰＢＳにて洗浄し、裏返し、残るＰＢＳを吸引した。
【０３２３】
試験化合物を、１００％ＤＭＳＯに溶解し、次いでＶＣＡＭ細胞接着アッセイ緩衝溶液（５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ中に４ｍＭ ＣａＣｌ２、４ｍＭ ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．５）にて１：２５に希釈した（即ち最終ＤＭＳＯ＝４％）。各試験化合物について、一連の８組の１：４希釈を行った（全体の濃度範囲は１ｎＭ−１２，５００ｎＭ）。各希釈の１００μｌ／ウエルをＶＣＡＭ−被覆プレートに添加し、続いて１００μｌのラモス細胞（１％ＢＳＡ／ＰＢＳ中に２００，０００細胞／ウエル）を加えた。試験化合物及びラモス細胞を含むプレートを、室温にて４５分間インキュベートし、その後、１６５μｌ／ウエルのＰＢＳを添加した。プレートを、非接着細胞を除去するために裏返し、吸い取り、３００μｌ／ウエルのＰＢＳを加えた。プレートを、再度裏返し、吸い取り、残る緩衝溶液を穏やかに吸引した。１００μｌの溶解緩衝溶液（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ中の０．１％ＳＤＳ、ｐＨ８．５）を各ウエルに入れ、回転振とうプラットホーム上で２分間激しく振とうした。次いでプレートは、サイトフロー（Ｃｙｔｏｆｌｕｏｒ）２３００（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）蛍光測定システムにて蛍光強度を読みとった（励起＝４８５ｎｍ、発光＝５３０ｎｍ）。
結果を以下の表に示す。
【０３２４】
【表１４】
0003555876.tif 000080
【０３２５】
実施例１８１．経口剤型
【０３２６】
【表１５】
0003555876.tif 000081
【０３２７】
製造方法
１．適当な混合機で品目１、２、３を１５分間混合する。
２．工程１の粉末混合物を、２０％ＰＶＰ  Ｋ３０溶液を用いて顆粒化する。
３．工程２の顆粒を５０℃にて乾燥させる。
４．工程３からの顆粒を、適当な粉砕装置に通す。
５．工程４からの粉砕した顆粒に、品目５を添加し、３分間混合する。
６．工程５の顆粒を適当なプレスにて圧縮する。
【０３２８】
実施例１８２．エアロゾル投与処方物
【０３２９】
【表１６】
0003555876.tif 000082
【０３３０】
ｐＨは、水酸化ナトリウム溶液（１規定）又はＨＣｌ溶液（１０％ｗ／ｖ）にて調整され得る。
【０３３１】
方法：
１．医薬物質を緩衝溶液に溶解する。
２．０．２２ミクロン・フィルターを通して溶液を濾過する。
上記溶液を噴霧した後の粒径分布（マルバーン・マスターサイザーＸを用いて測定）は、１〜６ミクロンの範囲である。