(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種以上の酸化カロテノイドの乾燥粉末を製造する方法であって、
a) １種以上の酸化カロテノイドを保護コロイドの水性分子分散液またはコロイド分散液に懸濁させ、そして
b) 水と他に使用した溶媒を除去し、コーティング剤の存在または不在下で乾燥することにより、生成した懸濁液を乾燥粉末に変換する、
ことにより行われるものであり、ステップa) における保護コロイドとして、加水分解率が６〜20％の少なくとも１種の部分加水分解ダイズタンパク質を使用することを含む、上記方法。
【請求項２】
ステップa) で製造される懸濁液を乾燥粉末に変換する前に挽く、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ステップa)の懸濁液の製造が、以下の工程：
a1) １種以上の酸化カロテノイドを、水混和性有機溶媒、もしくは水と水混和性有機溶媒との混合液に溶解するか、または
a2) １種以上の酸化カロテノイドを、水不混和性有機溶媒に溶解し、そして
a3) 工程a1) またはa2) 後に得られる溶液と、加水分解率が６〜20％の部分加水分解ダイズタンパク質の水性分子分散液もしくはコロイド分散液とを混合することによって、カロテノイドの疎水相をナノ分散相として製造する、
ことを含む、請求項１記載の方法。
【請求項４】
保護コロイドが、加水分解率が６〜12％の少なくとも１種の部分加水分解ダイズタンパク質である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
酸化カロテノイドが、アスタキサンチン、カンタキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、シトラナキサンチンおよびβ-アポ-8’-カロチン酸（carotinic acid）エチルエステルからなる群より選択される化合物である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
請求項５記載の方法であって、
a) アスタキサンチンおよび／またはカンタキサンチンを、30℃以上の温度にて水混和性有機溶媒または水と水混和性有機溶媒との混合液に溶解し、
b) 得られる溶液を、加水分解率が６〜９％の部分加水分解ダイズタンパク質の水性分子分散液またはコロイド分散液と混合し、
c) 生成した懸濁液を乾燥粉末に変換する、
ものである、上記方法。
【請求項７】
カロテノイドがアスタキサンチンである、請求項６記載の方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法により得られる酸化カロテノイドの乾燥粉末。
【請求項９】
アスタキサンチン、カンタキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、シトラナキサンチンおよびβ-アポ-8’-カロチン酸エチルエステルからなる群より選択される酸化カロテノイドを含むものである、請求項８記載の乾燥粉末。
【請求項１０】
カロテノイド含量が0.1〜30重量％である、請求項８または９記載の乾燥粉末。
【請求項１１】
５〜20重量％のアスタキサンチンを含むものである、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の乾燥粉末。
【請求項１２】
５〜20重量％のカンタキサンチンを含むものである、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の乾燥粉末。
【請求項１３】
食品、医薬品および／または動物用飼料の添加物としての請求項８〜１２のいずれか１項に記載の乾燥粉末の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、１種以上の酸化カロテノイドの乾燥粉末、特に、アスタキサンチン、カンタキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、シトラナキサンチンおよびβ−アポ−８’−カロチン酸エチルエステルからなる群より選択されるカロテノイドの乾燥粉末の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
カロテノイド類に属する物質は、２つの主要なグループ、すなわちカロテン類およびキサントフィル類に分類される。純粋なポリエン炭化水素であるカロテン（例えば、β−カロテンまたはリコペンなど）とは対照的に、キサントフィルでは、ヒドロキシル、エポキシおよび／またはオキソ基などの酸素官能基もまた存在する。このグループの典型的な代表例としては、とりわけ、アスタキサンチン、カンタキサンチン、ルテインおよびゼアキサンチンが挙げられる。
【０００３】
酸化カロテノイドは、天然に広く存在し、とりわけ、トウモロコシ（ゼアキサンチン）、藍晴インゲン（ルテイン）、パプリカ（カプサンシン）、卵黄（ルテイン）ならびにカニおよびサケ（アスタキサンチン）に存在し、これらの食物にその特徴的な色を与えている。
【０００４】
これらのポリエーテルは、工業的に合成することも、天然源から単離することもでき、食品および飼料産業用ならびに医薬品部門用の重要な着色剤の代表であり、アスタキサンチンの場合は、サケにおいてプロビタミンＡ活性を有する活性成分である。
【０００５】
キサントフィル類は全てのカロテノイドと同様に水に不溶性であるが、油脂に対してわずかな溶解性が認められる。このような乏しい溶解性および酸化に対する高い感受性のため、食品および飼料の着色において、合成により得られる比較的粗い粒子を直接使用することが難しい。なぜなら、粗い結晶形態の物質を用いると乏しい着色しか得られないためである。キサントフィル類の実際の使用に関する上記のような不利な作用は、水性媒質において特に顕著である。
【０００６】
活性成分が微細に分散した形態で存在し、必要に応じ、保護コロイドによって酸化から保護されている、特別に製造した配合物を用いた場合のみ、食品の直接着色において色収量（ｃｏｌｏｒ  ｙｉｅｌｄｓ）を改善することが可能になる。更に、飼料に使用される上記配合物は、キサントフィル類の高度な生物学的利用能をもたらし、その結果間接的に、例えば卵黄または魚の色素形成における着色特性が改善される。
【０００７】
色収量を改善するためならびに吸収性および生物学的利用能を増大させるための様々な方法が記載されているが、それらはすべて、活性成分の結晶サイズを１０μｍ未満の粒度範囲に減じることを目的としている。
【０００８】
非常に多くの方法、とりわけ、Ｃｈｉｍｉａ  ２１，  ３２９  （１９６７）、ＷＯ  ９１／０６２９２号およびＷＯ  ９４／１９４１１号に記載された方法は、カロテノイド類の粉砕にコロイドミルを利用し、そうして２〜１０μｍの粒度を達成している。
【０００９】
また、乳化／噴霧乾燥を組み合わせた多くの方法が存在し、これらは、例えば、ＤＥ−Ａ−１２  １１  ９１１号およびＥＰ−Ａ−０  ４１０  ２３６号に記載されている。
【００１０】
欧州特許ＥＰ−Ｂ−０  ０６５  １９３号は、カロテノイドを揮発性で水に混和性の有機溶媒中に高温で、必要に応じ過圧下で溶解し、保護コロイド水溶液と混合してカロテノイド類を沈殿させ、それを噴霧乾燥することにより、微細に粉砕された粉末状カロテノイド調製物を製造することについて開示している。
【００１１】
微細に粉砕された粉末状カロテノイド調製物の同様の製造方法が、ＥＰ−Ａ−０  ９３７  ４１２号に記載されており、この方法は水不混和性溶媒を用いるものである。
【００１２】
しかしながら、ＥＰ−Ｂ−０  ０６５  １９３号に従って製造されたキサントフィル類のナノ粒子活性成分分散液では、以下のような現象が頻繁に観察される。
【００１３】
キサントフィル含有活性成分水性分散液は、特に濃縮時に、コロイドとして不安定なことが多い。この過程における活性成分粒子の凝集により（沈降するものもあれば、クリーム状になるものもある）、該分散液を乾燥粉末に変換することは、もはや不可能となる。
【００１４】
加えて、カルボニル基を有するキサントフィル類の場合は、保護コロイドとして使用されるゼラチンに架橋が生じる可能性もあり、そうして、もはや再分散不可能で、その上乾燥粉末に変換することができないゲルが形成する。
【００１５】
このように、上述した製造方法に伴う問題のために、着色作用および生物学的利用能に関してキサントフィル含有配合物の製造に対する高度な必要条件が常に満たされるとは限らない。
またゼラチンの欠点は、その高度な粘着性である。ゼラチン含有生成物を使用する場合には、噴霧乾燥または噴霧流動床乾燥などの液体系用の従来の乾燥方法を用いると、フィラメント形成または堆積が起こり得る。
さらに、ゼラチン含有製品は常に消費者に受け入れられなくなる傾向にある。一般的に、比較的低濃度の脂溶性物質のみが他の頻繁に使用される保護コロイド、例えばアラビアゴム、デンプン、デキストリン、ペクチンまたはトラガキサント（ｔｒａｇａｘａｎｔｈ）などに組み込まれ得る。さらに、過去にアラビアゴムは、回収の失敗により必ずしも利用可能とはならず、また十分な品質のものが得られない。
【００１６】
また合成コロイド（例えばポリビニルピロリドンなど）または部分合成ポリマー（例えばセルロース誘導体など）の乳化能には限界があり、これは特に食品分野において許容されない場合もある。
ＤＥ−Ａ−４４  ２４  ０８５号には、部分加水分解ダイズタンパク質の、脂溶性活性成分の保護コロイドとしての使用が記載されている。ここに開示されたダイズタンパク質は加水分解率が０．１〜５％のものである。
上記ダイズタンパク質の欠点は、乏しい溶解性、不十分な乳化性および架橋しやすい傾向であり、架橋の傾向は特に、水に再分散させる可能性のある乾燥粉末の製造において望ましいものではない。
【００１７】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の目的は、上述の従来技術の欠点を有しない保護コロイドを用いて酸化カロテノイドの乾燥粉末を製造する方法を提供することである。
【００１８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、驚くべきことに、
ａ）  １種以上の酸化カロテノイドを保護コロイドの水性分子分散液またはコロイド分散液に分散させ、そして
ｂ）  水と他に使用した溶媒を除去し、コーティング剤の存在または不在下で乾燥することにより、生成した分散液を乾燥粉末に変換する、
ことにより行われる１種以上の酸化カロテノイドの乾燥粉末を製造する方法であって、ステップａ）  における保護コロイドとして、加水分解率が５％より大きい少なくとも１種の部分加水分解ダイズタンパク質を使用することを含む方法によって、上記目的が達成されることを見出した。
【００１９】
【発明の実施の形態】
本発明において、保護コロイドは、加水分解率（ＤＨ）が５％より大きい、好ましくは６〜２０％、特に好ましくは６〜１２％、さらに非常に好ましくは６〜９％の部分加水分解ダイズタンパク質である。加水分解率「ＤＨ」は以下の通り定義される：
ＤＨ＝（分解されたペプチド結合の数）／（ペプチド結合の総数）×１００％
加水分解率は、Ｃ．Ｆ．Ｊａｃｏｂｓｅｎら、「生化学分析の方法」（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ），  Ｖｏｌ．ＩＶ，  ｐｐ．１７１−２１０，  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｉｎｃ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  １９５７に記載されているような「ｐＨ−Ｓｔａｔ−法」により測定し得る。
部分加水分解は一般に酵素処理によって行われ、適切な酵素としては植物、微生物および真菌類由来のプロテアーゼまたは動物性プロテアーゼが考えられる。好ましくは、部分加水分解を植物プロテアーゼであるブロメラインを用いて実施する。
使用するダイズタンパク質は、タンパク質含量の７０〜９０重量％がダイズタンパク質であり、残りの１０〜３０重量％は多少とも不特定の他の植物成分である、慣例的な市販のダイズタンパク質単離物およびダイズタンパク質濃縮物である。本発明で用いるのに好ましいダイズタンパク質は、遺伝的に改変されていないダイズタンパク質である。
ダイズタンパク質単離物を、水溶性媒質中で好ましくは５０〜７０℃、ｐＨ７〜９にて酵素と共にインキュベートする。適切なタンパク質と酵素との比率は、当業者はには簡単な研究室での実験により所望の加水分解率に関して個々に決定し得る。
ダイズタンパク質加水分解産物の水溶液は一般的にはタンパク質含量が６〜１０重量％となるように調製する。
本発明において使用する部分加水分解ダイズタンパク質の重量平均分子量は、一般的には１５０００〜２５００００、好ましくは２５０００〜２２００００、特に好ましくは５００００〜２０００００、さらに非常に好ましくは１２００００〜１８００００である。
また、種々の加水分解率の部分加水分解ダイズタンパク質の混合物、または部分加水分解ダイズタンパク質と非加水分解ダイズタンパク質との混合物を本発明の方法において保護コロイドとして用いることが可能である。上記混合物に関して、それらの重量平均分子量もまた上記範囲内である。
分散という用語は、好ましくは水性懸濁液および水性乳化液の生成を指す。特に好ましくは、分散ステップａ）  は、部分加水分解ダイズタンパク質の水性分子分散液またはコロイド分散液に懸濁した１種以上の酸化カロテノイドの懸濁液の生成である。該懸濁液において、分散相は少なくとも１種の活性成分をナノ微粒子性粒子として含む。
上記方法の好ましい実施形態において、ステップａ）  において生成される懸濁液を乾燥粉末に変換する前に粉砕する。この場合、活性成分は、粉砕操作前に結晶状に懸濁することが好ましい。
上記粉砕は、本発明においては、自体公知の方法、例えばボールミルを用いて実施し得る。使用するミルのタイプに応じて、フラウンホーファー回折Ｄ［４，３］で測定される粒子の平均粒径が０．１〜１００μｍ、好ましくは０．２〜５０μｍ、特に好ましくは０．２〜２０μｍ、さらに非常に好ましくは０．２〜５μｍ、特に０．２〜０．８μｍとなるまで粉砕を行なう。Ｄ［４，３］という用語は、体積加重平均直径を表す（「Ｍａｌｖｅｒｎマスターサイザへのハンドブック」（Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｔｏ  Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  Ｓ，  Ｍａｌｖｅｒｎ
Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｔｄ．，  ＵＫを参照されたい）。
粉砕およびそのために使用する装置に関するさらなる詳細は、特に、「Ｕｌｌｍａｎｎの工業化学百科事典」（Ｕｌｌｍａｎｎ’ｓ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），  第６版，  １９９９，  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｒｅｌｅａｓｅ，  「体積減少」（Ｓｉｚｅ  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ），  第３．６章「湿式粉砕」（Ｗｅｔ  Ｇｒｉｎｄｉｎｇ）、およびＥＰ−Ａ−０  ４９８  ８２４号に記載されている。
本発明の方法の変法もまた好ましく、ステップａ）  の分散は、以下の工程：
ａ１）  １種以上の酸化カロテノイドを、水混和性有機溶媒、もしくは水と水混和性有機溶媒との混合液に溶解するか、または
ａ２）  １種以上の酸化カロテノイドを、水不混和性有機溶媒に溶解し、そして
ａ３）  工程ａ１）  またはａ２）  後に得られる溶液と、加水分解率が５％より大きい部分加水分解ダイズタンパク質の水性分子分散液もしくはコロイド分散液とを混合することによって、カロテノイドの疎水相をナノ分散相として製造する、
ことを含むものである。
【００２０】
使用する溶媒の種類に応じて、工程ａ３）  におけるナノ分散相は固体ナノ粒子（懸濁液）であってもよいしまたはナノ小滴（乳化液）であってもよい。
工程ａ１）  において使用する水混和性溶媒は、主に、炭素、水素および酸素のみを含有する水混和性、熱安定性かつ揮発性の溶媒、例えばアルコール類、エーテル類、エステル類、ケトン類およびアセタール類である。水混和性が少なくとも１０％、沸点が２００℃以下および／または炭素数１０以下である溶媒を用いることが好適である。特に、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、１，２−ブタン−１−ジオールメチルエーテル、１，２−プロパン−１−ジオール  ｎ−プロピルエーテル、テトロヒドロフランまたはアセトンが好ましい。
本発明に関して、水不混和性有機溶媒とは、大気圧において１０％以下の水溶性の有機溶媒である。使用し得る溶媒は、特に、ハロゲン化脂肪族炭化水素、例えば塩化メチレン、クロロホルムおよび四塩化炭素、カルボン酸エステル（炭酸ジメチル、炭酸ジエチル、炭酸プロピレン、ギ酸エチル、酢酸メチル、エチル若しくはイソプロピルなど）、ならびにエーテル類（メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルなど）がある。好ましい水不混和性有機溶媒は、炭酸ジメチル、炭酸プロピレン、ギ酸エチル、酢酸エチル、酢酸イソプロピルおよびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルからなる群より選択される化合物である。
本発明は、好ましくは、アスタキサンチン、カンタキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、シトラナキサンチンおよびβ−アポ−８’−カロチン酸エチルエステルからなる群より選択される酸化カロテノイドの乾燥粉末の製造方法である。
本発明の方法において特に好ましくは、
ａ）  アスタキサンチンおよび／またはカンタキサンチンを、３０℃以上の温度にて水混和性有機溶媒または水と水混和性有機溶媒との混合液に溶解し、
ｂ）  得られる溶液を、加水分解率が６〜９％の部分加水分解ダイズタンパク質の水性分子分散液またはコロイド分散液と混合し、
ｃ）  生成した分散液を乾燥粉末に変換する。
さらに非常に好ましくは、本発明は、アスタキサンチン含有乾燥粉末の製造方法である。
本発明の乾燥粉末は、少なくとも１種の酸化カロテノイドを水混和性有機溶媒中に、３０℃を越える温度、好ましくは５０℃〜２４０℃、特に好ましくは１００℃〜２００℃、さらにより好ましくは１４０℃〜１８０℃の温度で、必要に応じ加圧下で溶解することにより製造することが有利である。
【００２１】
場合によっては所望の全トランス異性体の高い含量が、高温の作用によって減少する可能性があるので、カロテノイド類を可能な限り迅速に、例えば、秒単位で（例えば０．１〜１０秒で）、特に好ましくは１秒未満で分散させる。分子分散液の迅速な調製のためには、高圧、例えば、２０バール〜８０バール、好ましくは３０バール〜６０バールの圧力をかけるのが有利であり得る。
【００２２】
上記のようにして得られた分子分散液を、冷却しないかまたは冷却した、保護コロイドの水性分子分散液またはコロイド分散液と混合温度が約３５℃〜８０℃に設定されるようにして混合する。
【００２３】
この間、溶媒成分を水相に移動させ、カロテノイド類の疎水相をナノ分散相として形成させる。
【００２４】
上記分散液に関する方法および装置の詳細な説明については、特にＥＰ−Ｂ−０  ０６５  １９３号を参照されたい。
【００２５】
乾燥粉末への変換は、本発明では、コーティング剤の存在または不在下にて、特に、噴霧乾燥、噴霧冷却、凍結乾燥または流動床乾燥により行ない得る。適切なコーティング剤は、例えば、トウモロコシデンプン、ケイ酸またはリン酸三カルシウムである。
最終生成物の機械的安定性を高めるために、場合によってはコロイドに、糖または糖アルコール（例えば、スクロース、グルコース、グルコースシロップ、デキストリン、ラクトース、転化糖、ソルビトール、マンニトールまたはグリセロール）などの可塑剤を添加するのが好適である。
【００２６】
酸化的分解に対する活性成分の安定性を高めるために、α−トコフェロール、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシアニソール、アスコルビン酸またはエトキシキンなどの安定剤を添加することが有利である。これらは、水相または溶媒相のいずれにも添加できるが、活性成分と一緒に溶媒相に溶解するのが好ましい。
【００２７】
場合によっては、更にこの溶媒相中に、生理学的に許容される油（例えば、ゴマ油、トウモロコシ油、綿実油、大豆油または落花生油）、ならびに中等度の鎖長の植物性脂肪酸のエステルを、キサントフィル類の重量に基づいて、０〜５００重量％、好ましくは１０〜３００重量％、特に好ましくは２０〜１００重量％の濃度で溶解することも有利であり、その後、この油は、水相と混合する際に、活性成分および上記の添加剤とともに非常に微細に沈殿する。
【００２８】
保護コロイドと可塑剤の、酸化カロテノイドに対する比率は、一般的に、最終生成物が０．１〜３０重量％、好ましくは１〜２５重量％、特に好ましくは５〜２０重量％のカロテノイド、１０〜７０重量％の保護コロイド、１０〜７０重量％の可塑剤（％で表したデータはすべて、粉末の乾燥重量に基づく）、および必要に応じて少量の安定剤を含有するように選択する。
【００２９】
本発明はまた、本明細書に記載した方法の１つにより得られる酸化カロテノイドの乾燥粉末に関する。
好ましくは、これらは、アスタキサンチン、カンタキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、シトラナキサンチンおよびβ−アポ−８’−カロチン酸エチルエステルからなる群より選択されるもの、特に好ましくはカンタキサンチンおよびアスタキサンチン、さらに非常に好ましくはアスタキサンチンの酸化カロテノイドを含む乾燥粉末である。
本発明の乾燥粉末中の活性成分含量は、０．１〜３０重量％、好ましくは１〜２５重量％、特に好ましくは５〜２０重量％、特に非常に好ましくは８〜１５重量％である。
本発明の乾燥粉末は、特に、問題なく水系に再分散させて、粒径１μｍ未満の活性成分の均一な微細分散液を形成し得るという事実で区別される。
【００３０】
また、酸化カロテノイドのコロイドとして安定で非架橋ナノ粒子状活性成分分散液であって、その粘性挙動がニュートン流体にほぼ一致するものが得られることが見出された。このタイプの流体は、その流動抵抗によって区別される。流動抵抗は、ニュートン方程式  τ＝  ｈ・Ｄ（τ＝  剪断応力、Ｄ＝  剪断速度勾配、ｈ  ＝  動的粘度）によって定義され、これは一定の温度における物質定数である。ニュートン流体の流動挙動をグラフで表すと、一定の温度において、ほぼ直線を与える。特に、活性成分分散液の粘度の変化量は、４０℃および６０℃において、１０−２秒−１〜１０＋２秒−１の剪断範囲で±５０％未満である。
【００３１】
このようなニュートン粘性挙動に近い粘性挙動の利点は、とりわけ、本質的に粘性である分散液の場合に比べて、特に濃縮後に、活性成分分散液をより容易にポンプ送りできることである。更に、噴霧乾燥において、ほぼニュートン粘性挙動を示す活性成分分散液は、スプレーヘッドのパラメーターをより容易に最適化できるという利点と、このような分散液はスプレーヘッド内で望ましくない挙動をしにくいという利点を有する。
【００３２】
５％未満の加水分解率が低い部分加水分解ダイズタンパク質と比較すると、本発明で使用するダイズタンパク質により、色彩強度が改善され、冷水再分散性が改善されたキサントフィル含有乾燥粉末を製造し得る。
加水分解率が５％より大きい部分加水分解ダイズタンパク質は、驚くべきことに、本明細書に記載する水混和性溶媒とのより良好な混和性を示す。結果として、操作がより集約された様式となり、それ故により経済的な工程で、本発明の乾燥粉末を製造することができる。
さらに、本発明の方法を利用すると、Ｈ凝集体を形成するキサントフィル凝集が回避されることが見出された。
カロテノイド類の凝集は文献に開示されている現象であり、非常に多数の刊行物に記載されている［Ｐ．  Ｓｏｎｇ，  Ｔ．Ａ．  Ｍｏｏｒｅ，  Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ，  １９，  ４３５−４４１  （１９７４）；  Ａ．Ｖ．  Ｒｕｂａｎ，  Ｐ．  Ｈｏｒｔｏｎ，  Ａ．Ｊ．  Ｙｏｕｎｇ，  Ｊ．  Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ．  Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．  Ｂ：  Ｂｉｏｌ．，  ２１，  ２２９−２３４  （１９９３）；  Ｖ．Ｒ．  Ｓａｌａｒｅｓ，  Ｎ．Ｍ．  Ｙｏｕｎｇ，  Ｐ．Ｒ．  Ｃａｒｅｙ，  Ｈ．Ｊ．  Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒａｍａｎ  Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ，  ６（６），  ２８２−２８８  （１９７７）］。
【００３３】
カロテノイド凝集体は、例えば、水混和性有機溶媒（例えば、イソプロパノール、エタノール、アセトンまたはテトラヒドロフランなど）中のカロテノイドの溶液を、水と混合することにより生成し得る。
【００３４】
従って、上記の文献に記載されているように、水と有機溶媒の量の正確な比率を選択することにより、いわゆるＨまたはＪ凝集体のいずれかを生成することも可能である。
【００３５】
Ｈ凝集体では、ポリエン鎖がカード積重ね凝集体となっており、ＵＶ／可視光スペクトルにおいて、モノマー形態の吸収に対して浅色シフトを示す新たなバンドが、３２０〜４００  ｎｍの範囲に出現するという特徴を示す。これに対しＪ凝集体は、ポリエンの頭−尾凝集体を示すか、または矢筈型凝集体の形態をとる。双方の凝集体は、ポリエンのＵＶ吸収に、深色シフトを引き起こす。
【００３６】
マスに対する給餌試験により、キサントフィル類のＨ凝集体、特にアスタキサンチンのＨ凝集体は、対応するＪ凝集体よりも低い生物学的利用能を示すことが明らかとなり、これは、本発明の方法で製造された乾燥粉末の更なる利点を示している。
【００３７】
上述した乾燥粉末は、特に食品および飼料の添加剤として、および医薬製品の添加剤として適切である。動物飼料分野におけるカロテノイド含有乾燥粉末の用途の典型的な分野は、例えば水産養殖における魚類着色ならびに家禽畜産における卵黄および若鶏皮膚の着色である。
【００３８】
【実施例】
本発明の方法のための手順を以下の実施例に詳細に説明する。
【００３９】
実施例１
酵素分解によるダイズタンパク質加水分解産物の製造
６００  ｍｌの水および４０  ｇのダイズタンパク質単離物（タンパク質含量  ８５重量％）を２Ｌガラスビーカーに投入し、撹拌しながら６０℃に加熱した。続いて１  Ｍ  水酸化ナトリウム溶液を用いてｐＨを９．０に調整し、０．５  ｇのブロメラインを添加し、混合液をさらに６０℃にて４５分間撹拌した。続いて１  Ｍ  水酸化ナトリウム溶液を用いて再度ｐＨを９．０に調整した。水酸化ナトリウム溶液の消費量を基準として、ＤＨを７％と算出した。次に、１００℃にて溶液を２分間加熱することにより酵素を失活させた。
実施例２
アスタキサンチン乾燥粉末
４８  ｇの結晶アスタキサンチンおよび２０  ｇのα−トコフェロールを、加熱容器（３０℃）の３５０  ｇの共沸イソプロパノール／水混合液中に室温にて懸濁した。続いて、活性成分の懸濁液を流速２．１  ｋｇ／ｈで１００℃に加熱し、さらにイソプロパノール／水共沸混合液と温度２２６℃、流速２．６  ｋｇ／ｈでさらに連続的に混合し、６０バールの加圧下にて混合温度１７２℃でアスタキサンチンが溶解した。その直後にこの活性成分溶液を、蒸留水６０００ｇ中の加水分解率７％の部分加水分解ダイズタンパク質７２ｇおよびグルコースシロップ２００ｇの溶液（１  Ｍ  ＮａＯＨでｐＨ９．５に調整済み）からなる水相と流速３５．８  ｋｇ／ｈで混合した。
混合過程で形成した活性成分粒子は、イソプロパノールの水混合液中で粒径１７４ｎｍであり、Ｅ１／１値１１９であった。
続いて、活性成分懸濁液を薄膜エバポレーターで濃度が約３．４％の活性成分含量となるように濃縮し、噴霧乾燥した。乾燥粉末は、アスタキサンチン含量が１２．３重量％であった。水に再分散した乾燥粉末は、粒径２００  ｎｍであり、Ｅ１／１値が１０１であった。
実施例３
アスタキサンチン乾燥粉末
最初に、４８  ｇの結晶アスタキサンチン、１．６  ｇのアスコルビルパルミテートおよび２０  ｇのα−トコフェロールを、３５０  ｇの共沸イソプロパノール／水混合液に室温で懸濁した。次にこの活性成分の懸濁液を８８℃に加熱し、流速２．１  ｋｇ／ｈで連続的に混合し、さらに温イソプロパノール／水共沸混合液を流速２．７  ｋｇ／ｈを加え、６０バールの加圧下にて混合温度１６５℃でアスタキサンチンが溶解した。活性成分溶液を、流速６０  ｋｇ／ｈで、蒸留水１０８００ｇ中の実施例１で調製した部分加水分解ダイズタンパク質１０３ｇおよびグルコース１６３ｇの溶液（１  Ｍ  ＮａＯＨを用いてｐＨ９．５に調整済み）からなる水相と混合した。
混合過程で形成した活性成分粒子は、イソプロパノール／水混合液において粒径１５３ｎｍであり、Ｅ１／１値が１２４だった。次にこの活性成分分散液を薄膜エバポレーターで濃度が約３．６％の活性成分含量となるように濃縮し、噴霧乾燥した。乾燥粉末は、アスタキサンチン含量が１３．０重量％だった。水に再分散させた乾燥粉末は、平均粒径が４００ｎｍであり、Ｅ１／１値が１０６であった。
実施例４
カンタキサンチン乾燥粉末
最初に、４８  ｇの結晶カンタキサンチン、４  ｇのアスコルビルパルミテートおよび１６  ｇのα−トコフェロールを室温で３５０  ｇの共沸イソプロパノール／水混合液中に懸濁した。続いて、この活性成分懸濁液を流速２．９ｋｇ／ｈで８８℃に加熱し、流速４．８ｋｇ／ｈでさらに温イソプロパノール／水共沸混合液と連続的に混合し、６０バールの加圧下にて１７５℃の混合温度にてカンタキサンチンが溶解した。続いて、この活性成分溶液を流速５２  ｋｇ／ｈで、蒸留水７４００Ｇ中の加水分解率７％の部分加水分解ダイズタンパク質１２０ｇおよびグルコース１９７ｇの溶液（１  Ｍ  ＮａＯＨでｐＨ９．５に調整済み）からなる水相と混合した。
混合過程で形成した活性成分粒子は、イソプロパノール／水混合液において粒径１３９  ｎｍであり、Ｅ１／１値が１３４であった。この活性成分分散液を薄膜エバポレーターで濃度が約３．３％の活性成分含量になるまで濃縮し、噴霧乾燥した。乾燥粉末はカンタキサンチン含量が１２．５重量％であった。水に再分散させた乾燥粉末は、平均粒径２２４  ｎｍであり、Ｅ１／１値が１２５であった。
実施例５
シトラナキサンチン乾燥粉末
１００  ｇの結晶シトラナキサンチン、５９  ｇの加水分解率７％の部分加水分解ダイズタンパク質および５０  ｇのアスコルビン酸ナトリウムを室温で２８０ｇの脱イオン水に懸濁した。続いて、この活性成分懸濁液を、約４００  ｇの酸化ジルコニウムセラミック粉砕ビーズ（直径  １  ｍｍ）と共に、高速分散機器（Ｒｅｄ−Ｄｅｖｉｌ（登録商標），  Ｅｒｉｃｈｓｅｎ，  Ｇｅｒｍａｎｙ）において１０００ｍｌガラスフラスコ中で懸濁した。１時間の粉砕後、粉砕した懸濁液を、窒素下にて、加水分解率７％の部分加水分解ダイズタンパク質１３０ｇ、スクロース２００ｇの水溶液にアスコルビルパルミテート１ｇおよびα−トコフェロール１．５ｇの存在下で添加した。混合液をホモジネートした後、懸濁液を噴霧冷却により乾燥した。活性成分含量が１３重量％のシトラナキサンチン乾燥粉末を得た。