(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトフェリンを有効成分とするウシ乳腺を泌乳期から乾乳期に移行させるためのウシ乳房投与用医薬組成物。
【請求項２】
搾乳を止めて乾乳期に導入した後、ラクトフェリンを有効成分とする医薬組成物をウシ乳房に投与することからなるウシ乳腺を泌乳期から乾乳期に迅速に移行させるための方法。
【請求項３】
前記投与は、ウシ乳房に直接注入することである請求項２の方法。
【請求項４】
前記投与は、搾乳を止めて乾乳期に導入した日から乾乳導入後３週間までの間に行われる請求項２又は３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、泌乳牛の乳腺における免疫系の賦活化剤および免疫賦活化方法に関する。より詳細には、本発明は、泌乳牛の乳腺を泌乳期から乾乳期に円滑に移行させるための免疫賦活化剤および免疫賦活化方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
乳牛は泌乳期に授精を受けて妊娠する。そして、授精から５ヶ月経過すると、妊娠母体の胎盤はエストロジェン等のホルモンを盛んに分泌して乳量は減少し、乳腺の一部の組織および細胞は退行し始める。
【０００３】
さらに胎児の成長に伴って、母胎における乳腺の退行は進み、乳汁産生機能は衰えてくる。酪農家は、分娩前の適当な時期に、これらの泌乳牛の搾乳を停止することにより乳腺を乾乳期に導入させる。これにより、乳牛が円滑な分娩をし、分娩後に円滑な泌乳活動を再開することを促す。
【０００４】
乾乳期には、分娩後に子牛を哺乳飼育するための新しい乳腺組織の造成分化が進む。造成分化は、乳腺粘膜組織における古い乳腺上皮がアポトーシスにより退行し、その代わりに多種類の血液細胞が移入するものである。造成分化が始まると、乳房内の細胞組織は、顆粒球、単球、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、マスト細胞等の極めて多様な要素の細胞から構成される。そのため、乳腺組織および乳汁には、顆粒球およびマクロファージ等の食菌細胞が分布するようになり、また、リンパ球は、血行に由来したヘルパー型ＣＤ４＋Ｔ細胞、および抗体を産生するＢ細胞が分布するようになる（Ｖｅｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．＆Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．，６５巻５１−６１，１９９８；Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．，８２巻，１４５９−１４６４，１９９９）。このため、乾乳期に、乳腺は感染に対する抵抗性が高くなる。
【０００５】
従来は、泌乳牛を乾乳期に導入させるために、泌乳牛の搾乳を一度に止め、乳房内圧を高めて泌乳を抑制する方法を主に用いていた。しかしながら、酪農家がこの方法により泌乳牛を乾乳期に導入しても、実際には泌乳牛の乳腺が乾乳期に円滑に移行しない場合があった。この様な場合には、外来細菌が容易に乳腺に感染し乳房炎発生率が高くなるという問題があった。
【０００６】
また、この移行が円滑に行われず遅延すると、母牛の乳腺の発育も遅延する。そして、乳腺の発達が遅れた母牛によって子牛が飼育されると、子牛は発育不全になったり、種々の細菌やウイルスによる感染性下痢症に罹患したりするという問題があった。
【０００７】
これらの問題は、酪農家にとって深刻な問題であり、一刻も早い解決が望まれている。しかしながら、これらを解決する有効な手段は見いだされてなかった。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、泌乳牛の乳腺を迅速に乾乳期に移行させることを目的とする。また、本発明は、乳腺の発達および初乳の形成を円滑に進めることを目的とする。
【０００９】
【発明を解決するための手段】
本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、少量のラクトフェリンを母牛に投与することにより、母牛の免疫系を賦活化させ、母牛の乳腺を泌乳期から乾乳期に円滑に移行することができることを見いだした。
【００１０】
すなわち、上記目的を解決するため、本発明は、ラクトフェリンまたはその医薬上許容される塩を有効成分とする泌乳牛における乳腺の免疫賦活化剤を提供する。
【００１１】
さらに、本発明は、ラクトフェリンまたはその医薬上許容される塩を有効成分とする医薬組成物を泌乳牛に投与することからなる乳牛における乳腺の免疫賦活化方法を提供する。
【００１２】
【発明の実施の形態】
本発明は、ラクトフェリンまたはその医薬上許容される塩を有効成分とする乳牛における乳腺の免疫賦活化剤および免疫賦活化方法である。
【００１３】
本発明に用いるラクトフェリン（以下、Ｌｆと略す。）は、哺乳動物の乳汁、唾液、涙、気管支粘液、胆汁、腸液に含まれる分子量約８万の巨大な糖タンパク質である。
【００１４】
医薬上許容されるＬｆの塩としては、ウシ母体および胎牛に対する安全性が高いものであればよく、例えば、アンモニウム塩、アルカリ金属塩、塩酸塩、酢酸塩又は炭酸塩であってもよい。
【００１５】
本発明においては、これらのＬｆまたはＬｆの塩を、単独で用いても、または二種以上を混合して用いてもよい。
【００１６】
本発明において用いるＬｆおよびＬｆの塩は、ヒト母乳から分離精製したもの、ウシ、ヤギおよび羊等の哺乳動物の母乳から分離精製したもの、およびトランスジェニック動物や微生物の遺伝子組み換えにより得られたものであってもよい。
【００１７】
本発明の剤型としては、例えば、軟膏および液剤が挙げられる。軟膏とするために用いる基剤としては、例えば、白色ワセリン、黄色ワセリン、流動パラフィン、オリーブ油、ラッカセイ油、ダイズ油、ラノリン等の親油性軟膏基材、ポリエチレングリコール、ポリアクリル酸ナトリウム、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ステアリン酸アルミニウム、グリセリン、アルギン酸ソーダ、カルボキシメチルセルロース等の親水性軟膏基材が挙げられる。液剤とするために用いる溶媒としては、上述の他に、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセリンが挙げられる。
【００１８】
本発明の医薬組成物には、任意に添加剤を加えてもよい。添加剤として、例えば、緩衝剤、等張化剤、安定剤、防腐剤が挙げられる。
【００１９】
本発明の投与量は、投与により得られる効果と経済性を考慮すると、Ｌｆに換算して１分房あたり１００〜２５０ｍｇを投与することが好ましく、より好ましくは１００〜２００ｍｇである。乳汁中のＬｆ濃度は、投与直後に搾乳した乳汁を測定した際のＬｆの測定値が１０００〜２５００μｇ／ｍｌとなるように投与するのが好ましく、より好ましくは１０００〜２０００μｇ／ｍｌである。
【００２０】
投与回数は、上記の量の薬剤を、乾乳導入日から乾乳導入後３週間までの間に、１回、もしくは、数日間の間隔を置いて、この期間に何回か投与しても良い。
【００２１】
本発明の投与形態としては、例えば、注入が挙げられ、好ましくは直接注入、さらに好ましくは、乳房への注射である。
【００２２】
以下の実施例１および２に、本発明の医薬組成物を液剤とした場合、および軟膏とした場合の処方例を示す。
【００２３】
（処方例１）
ウシラクトフェリン１００ｍｇ
塩化ナトリウム８０ｍｇ
塩化カリウム２ｍｇ
リン酸二水素カリウム２ｍｇ
リン酸二水素ナトリウム２ｍｇ
上記の化合物を混合して蒸留水で１０ｍｌになるようメスアップし、本発明の液剤とした。
【００２４】
（処方例２）
ウシラクトフェリン  １００ｍｇ
カカオバター  ４ｇ
アスコルビン酸  ２５ｍｇ
塩化ナトリウム  ８０ｍｇ
上記の化合物を混合して蒸留水で１０ｍｌになるようメスアップし、本発明の軟膏とした。
【００２５】
（試験例１）
乾乳導入日に泌乳牛の乳房にＬｆを投与して、その後の乳汁中の体細胞数（Ｓｏｍａｔｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔ，  以下ＳＣＣと略す。）を定量した。これと比較するために、Ｌｆを投与しなかった泌乳牛についても、乳汁中のＳＣＣを測定した。
【００２６】
体細胞は、大部分が白血球から構成され、また、炎症に対する反応として乳汁中に出現するものである。さらに、乾乳期に導入されるとＳＣＣは一旦増加し、ほぼ元の値に戻った後、安定した値をとることが知られている。
【００２７】
このＳＣＣの定量を、具体的に次の方法で行った。乾乳導入日（０日目）に、健康な泌乳牛の乳房２９例に対して、処方例１で作成した液剤を注入した。液剤の投与量は、液剤中に含まれるラクトフェリンに換算して、１乳房あたり１００〜２５０ｍｇとなるよう注入した。
【００２８】
また、健康な泌乳牛の乳房１１例に対しては、処方例１で作成した液剤を注入しなかった。
【００２９】
液剤を注入した乳房群（以下、Ｌｆ投与分房と略す。）と、注入しなかった乳房群（以下、非投与分房と略す。）から得られた乳汁について、０、１、３、７および１４日目にＳＣＣを測定し、平均値をそれぞれ算出した。ＳＣＣの測定は、乳汁検体を２０ｍＭエチレンビス４酢酸ナトリウム加リン酸生理緩衝液（ＥＤＴＡ−ＰＢＳ）で洗浄後、ヨウ化プロピディウムを用いて染色した後、フローサイトメーター（商品名：ファックスキャリバー、日本ベクトンディッキンソン社製）を用いておこなった。これらの結果を表１および図１に示す。
【００３０】
【表１】
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表１および図１に示されるように、Ｌｆ投与分房では、投与直後からＳＣＣが増加して３日目には最高値に達し、７日過ぎにはその増加は止み、Ｌｆ投与前の低値にもどる。これに対して、非投与分房では、１日経過後からＳＣＣ数が徐々に上昇し始め、７日目付近に最高値を示した後減少し、１４日目の時点でも減少が続きＳＣＣ値は安定しなかった。また、Ｌｆ投与分房のＳＣＣ最高値は、非投与分房のＳＣＣ最高値と比較して、より高かった。
【００３１】
以上の結果より、Ｌｆ投与分房は、非投与分房と比較して、血液由来細胞の乳腺組織内への移入が急速に促進されることが分かる。
【００３２】
従って、Ｌｆを投与することにより、早期に、著しい除菌効果を得ることが可能となる。
【００３３】
（試験例２）
試験例１で用いた、Ｌｆ投与分房群と非投与分房群から得られた乳汁について、食菌機能の代表細胞であるＣＤ１１ｂ抗原陽性細胞数を定量した。
【００３４】
乾乳期に導入されると、ＣＤ１１ｂ抗原陽性の細胞数は一旦上昇し、その後安定することが知られている。そこで、このＣＤ１１ｂ抗原陽性の細胞数を測定することにより、Ｌｆ投与による食菌機能への影響を調べた。
【００３５】
具体的には、遠心分離により乳汁細胞を回収し、ウシＣＤ１１ｂモノクローナル抗体とＦＩＴＣ標識マウスＩｇＧ２ｂモノクローナル抗体により染色し、フローサイトメーターにより、０、１、３、７および１４日目に、ＣＤ１１ｂ抗原陽性細胞数を測定した。得られたＣＤ１１ｂ抗原陽性細胞数を表２および図２に示す。
【００３６】
【表２】
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表２および図２に示されるように、Ｌｆ投与分房では、投与直後からＣＤ１１ｂ抗原陽性細胞数が増加し、３日目に最高値を示した後、７日目には既に安定した値となった。これに対して、非投与分房では、１日経過後から上昇し、３日目に高値を示した後減少し、１４日目の時点ではまだ減少が続き安定しなかった。
【００３７】
また、Ｌｆ投与分房における最高値は、非投与分房における最高値と比較すると、極めて高い値を示した。
【００３８】
以上の結果より、Ｌｆ投与分房は、非投与分房と比較して、血液由来細胞数が迅速に、かつ、顕著に増加することがわかる。
【００３９】
従って、Ｌｆを投与することにより、早期に、著しい除菌効果を得ることが可能である。
【００４０】
（試験例３）
試験例１で用いた、Ｌｆ投与分房群と非投与乳房群から得られた乳汁について、免疫応答系細胞であるＴリンパ球系細胞に対するＬｆの影響を調べるため、ＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔを定量した。
【００４１】
Ｔリンパ球サブタイプのうち、ＣＤ４＋Ｔは乾乳期における乳汁および乳腺に主成分として含まれ、ＣＤ８＋Ｔは泌乳期における乳汁および乳腺に主成分として含まれることが知られている。また、ＣＤ４＋Ｔ細胞は抗体産生系でヘルパーＴ細胞として働き、ＣＤ８＋Ｔは抑制細胞として働くものとして知られている。
【００４２】
具体的には、以下の通りに実験した。試験例１で用いた、Ｌｆ投与分房群と非投与分房群から得られた乳汁について、ＣＤ４＋Ｔ細胞とＣＤ８＋Ｔ細胞との濃度を測定した。測定方法は、ＣＤ４＋Ｔ細胞についてはウシＣＤ４モノクローナル抗体とＦＩＴＣ標識マウスＩｇＧ１モノクローナル抗体で、ＣＤ８＋Ｔ細胞についてはウシＣＤ８モノクローナル抗体とＦＩＴＣ標識マウスＩｇＭモノクローナル抗体で、それぞれ染色し、フローサイトメーターを用いて０、１、３、７および１４日目に測定した。得られたＣＤ４＋Ｔ細胞／ＣＤ８＋Ｔ細胞の平均値を、表３および図３に示す。
【００４３】
【表３】
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表３および図３に示されるように、Ｌｆ投与分房では２日目からＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔ値は急激に上昇し、その効果は７日目まで継続した。これに対して、非投与分房では、ＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔ値は特に大きな変化は見られないまま緩やかに上昇した。
【００４４】
以上の結果から、Ｌｆ投与分房は、非投与分房と比較して、ヘルパー型Ｔ細胞とキラー型Ｔ細胞の割合を大きく変化させることが分かった。
【００４５】
従って、Ｌｆを投与することが、乳腺を早期に乾乳期に移行させることを可能とすることが分かった。
【００４６】
（試験例４）
さらに、試験例４に続いてＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋ＴのＬｆ添加による影響を調べるために、Ｌｆを添加した培地と、ＬｆおよびＬｆ抗体を添加した培地の、それぞれのＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔ濃度比を測定した。
【００４７】
具体的には、先ず、ここで使用された培地は、ウシ胎児血清を５％に含むＲＰＭＩ  １６４０培地（日水製薬社製）である。測定方法は、健康な泌乳牛の末梢血から比重遠心法によりリンパ球を採取し、（１）培地、（２）Ｌｆを１００μｇ添加した培地、および（３）１００μｇのＬｆおよびＬｆ１００μｇのＬｆと結合する力価のウシＬｆウサギアフィニティー抗体を添加した培地を用いて、それぞれを３日間培養し、培養前と培養３日後のＴリンパ球サブセットをフローサイトメーターにより解析した。この結果を表４及び図４に示す。
【００４８】
【表４】
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表４及び図４に示されるように、Ｌｆが添加された培地のＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔ値は、無添加の培地と比較して大きく増加した。これに対して、Ｌｆ及びＬｆ抗体を添加した培地のＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔ値は、無添加の培地と比較して減少した。このことから、ＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔ値はＬｆの添加に大きく依存することが理解される。
【００４９】
（試験例５）
Ｌｆの投入による免疫蛋白成分の増加を調べた。免疫蛋白としては、免疫グロブリンＩｇＧ、特に、サブクラス中最も多く存在するＩｇＧ１を定量した。
【００５０】
具体的には、以下の通りに行った。乾乳導入日（０日目）に、健康な泌乳牛の乳房５例に対して、処方例１で作成した液剤を注入した。液剤の投与量は、液剤中に含まれるラクトフェリンに換算して、１乳房あたり１００ｍｇ（乳汁中濃度１０００μｇ／ｍｌ）となるよう注入した。
【００５１】
また、健康な泌乳牛の乳房３例に対しては、処方例１で作成した液剤を注入しなかった。
【００５２】
液剤を注入した乳房群（以下、Ｌｆ投与分房と略す。）と注入しなかった乳房群（以下、非投与分房と略す。）から得られた乳汁について、ＩｇＧ１を、０日、７日、１４日、分娩前３０日、分娩前１４日および初乳が得られたそれぞれの日に定量した。ＩｇＧ１の濃度の測定は、一元放射免疫拡散（ＳＲＩＤ）法を用いて行い、得られたＩｇＧ１の濃度の平均値を算出した。その結果を表５および図５に示す。
【００５３】
【表５】
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表５及び図５に示されるように、Ｌｆ投与分房では、非投与分房後と比較して、いずれの日においてもＩｇＧ１濃度の増加が顕著であった。
【００５４】
従って、Ｌｆの投与は、乾乳期における乳腺の免疫系を活性化させることが分かった。
【００５５】
（試験例６）
ＩｇＧ１のＬｆ依存性を調べるために、１分房あたりのＬｆ投与量を１０、１００、２００及び５００ｍｇとして、試験例５と同様にＩｇＧ１濃度を測定した。この結果を表６及び図６に示す。
【００５６】
【表６】
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表６及び図６に示されるように、Ｌｆの投与量が１０ｍｇの場合は、ＩｇＧ１濃度の増加が小さい。これに対し、Ｌｆの投与量１００ｍｇ以上では、ＩｇＧ１濃度が大きく増加する。従って、１分房あたりＬｆを１００ｍｇ以上投与すると、ＩｇＧ１の分泌を強く刺激することが分かる。
【００５７】
（試験例７）
Ｌｆの除菌効果および乳房炎治療効果を調べるため、乳房炎に罹患した乾乳期乳房内の泌乳牛にＬｆを投与し、乳房炎の状態及び感染菌数を調べた。
【００５８】
具体的には、乳房炎に罹患した乾乳期における分房１２例（顕性乳房炎８例、不顕性乳房炎４例）に対して、処方例１で作成した液剤を注入した。液剤の投与量は、液剤に含まれるＬｆに換算して、乳房１分房あたり１００ｍｇであった。
【００５９】
また、これと比較するために、乳房炎に罹患した乾乳期における分房２９例に対して、乾乳期における乳房炎治療剤として用いられる乾乳軟膏を、乳腺内に注入により投与した。この乾乳軟膏として、日本全薬（株）製、製品名  セファメジンＤＣを用いた。
【００６０】
上記のＬｆ投与分房と軟膏投与分房について、分娩１週間後までの乳房炎の症状を調べた。また、乳房炎の主な起炎菌であるブドウ球菌の数を測定した。
【００６１】
ブドウ球菌の測定方法は次の通りに行った。Ｌｆの投与直前から投与後６日の間に乳腺から採取した乳汁と、分娩後の初乳を、それぞれ減菌生理的食塩水により、１０、１００、１０００倍に希釈し、これを寒天培地（Ｎｏ．１１０培地）に平板塗抹法により塗布し、３７℃で４８時間培養後、寒天培地上に形成された集落数からブドウ球菌数をカウントした。
【００６２】
また、乳房炎症状については、Ｌｆまたは軟膏投与時と、分娩１週間後に触診及び目視により調べた。
【００６３】
これらの結果を、Ｌｆ投与分房については表７に、軟膏投与分房については表８に示す。
【００６４】
ここで、図中の乳房炎症状の評価については、−：乳房炎に罹患していない状態、＋：軽度の乳房炎症状、＋＋：中程度の乳房炎、＋＋＋：急性乳房炎を示す。また、ブドウ球菌数については、１ｍｌあたりのコロニー形成単位（ＣＦＵ）で表し、その評価は−：＜２．０×１０２ＣＦＵ／ｍｌ、±：２．０×１０２〜４．０×１０２ＣＦＵ／ｍｌ、＋：４．０×１０２〜１．０×１０３ＣＦＵ／ｍｌ、＋＋：１．０×１０３〜５．０×１０３ＣＦＵ／ｍｌ、＋＋＋：＞５．０×１０３ＣＦＵ／ｍｌとした。
【００６５】
【表７】
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【表８】
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表７及び８に示されるとおり、Ｌｆ投与分房の初乳におけるブドウ球菌の陽性率（（＋、＋＋及び＋＋＋例）／測定例、２例／８例）は２５％であった。これに対して、軟膏投与分房の初乳中の陽性率は５５．２％（１６例／２９例）であった。
【００６６】
また、乳房炎発症率については、Ｌｆ投与分房では８．３％（（＋、＋＋又は＋＋＋例）／測定例、１例／１２例）であったのに対して、軟膏投与分房では５０％（１５例／２９例）であった。
【００６７】
これにより、乾乳期の泌乳牛にＬｆを投与することにより、乳房炎の治療効果が得られることが理解される。
【００６８】
（試験例８）
Ｌｆの乳房炎予防効果を調べるために、乳房炎症状の見られない乾乳期の泌乳牛にＬｆを投与し、その後の感染菌数及び乳房炎症状の有無を検査した。
【００６９】
具体的には、乳房炎の症状が見られない乾乳期の分房１７例に対して、処方例１で作成した液剤を注入した。液剤の注入量は、Ｌｆに換算して１分房あたり１００ｍｇであった。
【００７０】
また、これと比較するために、同じく乳房炎の症状が見られない乾乳期の泌乳牛を用いて、これらの乳房１７例に対して試験例７と同様に軟膏を注入した。
【００７１】
上記のＬｆ投与分房と軟膏投与分房について、分娩１週間後までに罹患した乳房炎症状を調べた。また、乳房炎の主な起炎菌であるブドウ球菌の数を測定した。測定方法は、試験例７と同様である。
【００７２】
これらの結果を表９及び１０に示す。なお、各評価については、試験例７と同様である。
【００７３】
【表９】
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【表１０】
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表９及び１０に示されるとおり、乳房炎発症率（（＋、＋＋及び＋＋＋例）／全例）は、Ｌｆ投与分房では０％であったが、軟膏投与分房では４７．１％（８例／１７例）であった。
【００７４】
また、ブドウ球菌数については、Ｌｆ投与分房の初乳における陽性率は１１．８％（（＋、＋＋および＋＋＋例）／測定例、２例／１７例）であった。これに対して、軟膏投与分房の初乳中の陽性率は、５５．８％（１０例／１７例）であった。
【００７５】
これにより、乾乳期の泌乳牛にＬｆを投与することにより、乳房炎の予防効果が得られることが理解される。
【００７６】
【発明の効果】
本発明によると、泌乳牛の乳腺の免疫系を賦活化させることを可能とする。
【００７７】
また、本発明によると、泌乳牛の乳腺を泌乳期から乾乳期に円滑かつ迅速に移行することを可能とする。
【００７８】
さらに、本発明によると、子牛への移行抗体を豊富に含み、かつ、細菌による汚染の少ない清浄な初乳を形成することが可能となり、さらには、子牛の発育不全を防止することを可能とする。
【００７９】
さらに、本発明によると、分娩、初乳の形成、成乳分泌開始等の周産期の移行を円滑に進めることが可能となる。
【００８０】
さらに、本発明は、泌乳期から乾乳期への移行期に、または、乾乳期に、母牛の乳腺が直接細菌に感染するのを防ぐことを可能とする。
【００８１】
さらに、本発明は、泌乳期から乾乳期への移行期に、または、乾乳期に、乳房炎に罹患するのを防ぐことを可能とする。
【図面の簡単な説明】
【図１】Ｌｆ投与分房と非投与分房におけるＳＣＣの変動を示すグラフである。
【図２】Ｌｆ投与分房と非投与分房におけるＣＤ１１ｂ抗原陽性体細胞数の変動を示すグラフである。
【図３】Ｌｆ投与分房と非投与分房におけるＣＤ４＋Ｔ細胞／ＣＤ８＋Ｔ細胞濃度比の変動を示すグラフである。
【図４】各培地におけるＣＤ４＋Ｔ細胞／ＣＤ８＋Ｔ細胞濃度比の変動を示すグラフである。
【図５】Ｌｆ投与分房と非投与分房におけるＩｇＧ１濃度の変動を示すグラフである。
【図６】各濃度のＬｆ投与に対するＩｇＧ１濃度の変動を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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