(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ケフィア・グレインを用いた牛乳からなる発酵産物の凍結乾燥品、ナットウキナーゼ及び食品に使用可能な担体を含有してなる食品組成物。
【請求項２】
ナットウキナーゼが、納豆抽出物又はその加工品からなるものである請求項１に記載の食品組成物。
【請求項３】
食品組成物が、さらに補助成分を含むものである請求項１又は２に記載の健康組成物。
【請求項４】
補助成分が、ホスファチジルセリン、高麗人参加工品の少なくとも１種である請求項３に記載の食品組成物。
【請求項５】
抗血栓作用を有する機能性食品である請求項１〜４のいずれかに記載の食品組成物。
【請求項６】
血液流動性向上作用を有する機能性食品である請求項１〜４に記載の食品組成物。
【請求項７】
血小板凝集抑制作用を有する機能性食品である請求項１〜４に記載の食品組成物。
【請求項８】
脂質代謝改善作用を有する機能性食品である請求項１〜４に記載の食品組成物。
【請求項９】
食品組成物が、錠剤状に成型されたものである請求項１〜８のいずれかに記載の食品組成物。
【請求項１０】
錠剤状に成型された食品組成物が、コーティングされた錠剤状である請求項９に記載の健康食品。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、日本の食生活に古くから入り込んでいる納豆に由来する健康食品に関する。より詳細には、その保健効果が注目されている獣乳発酵産物と日本の食生活に古くから取り入れられている納豆に由来するナットウキナーゼを含有してなる食品組成物に関し、特に抗血栓作用、血液流動性向上作用、血小板凝集抑制作用、及び脂質代謝改善作用を有し、血栓症の治療と予防に優れた効果が期待される機能性食品に関する。
背景技術
近年、健康に対する関心の高まりから、食品が従来持っている生命を維持するための栄養素という一次機能及び味覚という二次機能に加え、三次機能である生体のリズム調節、生体防御、疾病予防と回復、老化防止などの健康を維持する体調調節機能に対しても、種々の研究が進められている。そして、対症療法的な治療を目的とした医薬品とは別に、三次機能を高めた、より積極的に健康を維持するための健康食品又は機能性食品を日常生活に取り入れることは、健康に対する関心の高まりと共に医療費の増加抑制などの期待から、広く注目されてきている。特に、生活様式の多様化、食生活の変化などから、このような健康食品又は機能性食品が有する生活習慣病及び各種慢性病に対する予防効果について、様々な分野からのさらなる研究が必要とされている。
機能性食品とは、一般に、通常の食品等を素材及び成分として新しい技術により製造され、日常的に摂取可能な、健康食品よりもさらに特定の保健効果を持たせた食品とされている。例としては、虫歯になりにくい甘味料を使用した食品などが市場に出ている。これらは特別に調製の必要な原料及び素材ではなく、日常摂取していたり、伝統的に利用している食品から、多くが開発製造されている。
このような状況の下、健康食品又は機能性食品は幅広いニーズを有しており、より具体的な効能が求められてもいる。
例えば、機能性食品に対して「血液をサラサラにする効果」と一般に言われている血液流動性向上効果を求める傾向が見られる。血液の流動性を支配する因子には、血管系の問題と血液成分の機能が関係している。血管の内径が動脈硬化で狭くなれば血流が悪くなり、また、血液中の脂質レベルが高くなれば血液粘度が上昇し、さらに血小板凝集能が冗進し、血管内血栓形成の際には血栓溶解能が低下し、血流が悪くなる。また、血球成分においては毛細血管よりも直径の大きい赤血球が毛細血管を通過するには、自身の形を柔軟に変えて血管内皮細胞に酸素を与え、Ｃｏ２を受け取り、静脈を通じて肺へと循環している。このような赤血球の柔軟性を赤血球変形能といい、この機能は生活習慣病や慢性病、ストレスなどによって悪化し、微小循環機能が低下する。
具体的な食品例を挙げると、納豆は、我が国に古くから愛用されてきた食品であり、枯草菌の１種として分類される納豆菌（Bacillus subtilis natto）による発酵食品である。日本の伝統的な健康食品として、欧米にも「野菜のチーズ（vegetable chees）」などと紹介されている。近年になって、納豆にはナットウキナーゼ〔納豆キナーゼ（nattokinase）〕という酵素が含有されていることが報告されてきた。このナットウキナーゼは、納豆から抽出・塩析・クロマトグラフィー・ゲル濾過等の操作を組合せることによって容易に精製され、白色結晶性粉末で、納豆臭があり、水溶液は無色透明で、ｐH６〜１２の塩基性水溶液中では６０℃までの加熱に対して安定であることが知られている。また、そのアミノ酸配列も決定され、Ｓ−Ｓ結合を全く持たない２７５個のアミノ酸残基からなる１本鎖構造のポリペプチドであることが分かっている。そのゲル濾過による分子量は、２０，０００±５，０００である。
また、持続性においても、ナットウキナーゼは４〜１２時間という作用時間を有し、これはナットウキナーゼと比較すると長いものである。
納豆に含まれるこのナットウキナーゼが納豆の独特の食感を呈するのみならず、この酵素は血栓溶解酵素であるウロキナーゼ、組織プラスミノーゲンアクチベーター（ＴＰＡ）等と同じセリンプロテアーゼ系の酵素であり、それ自身強力な血栓溶解能を有すると共に、血中のＴＰＡ量を増加させる間接的効果も確認されている。
このようにナットウキナーゼの有する健康上の好ましい作用については種々報告されてきているが、ナットウキナーゼには納豆独特の臭いがあり、これをそのまま含有させて食品として使用するには、食感上で多くの問題があった。
また、ヨーグルト、チーズなどの獣乳発酵産物は、その食品が有する保健効果への関心の高まりによって消費量が増えてきており、獣乳発酵産物をベースにした菓子等の多様な食品類が開発されてきている。特に獣乳発酵産物を多量に摂取する民族に長生きをするヒトが多いことや、癌などの発病率が低いことなどが報告されてきており、健康食品としての獣乳発酵産物が注目されてきた。また、近年では、血圧降下作用を有することも判ってきている。
しかし、元来、米食基本の食生活を有する日本人、とりわけ高齢者にとっては、本質的になじみにくい食材である。
発明の開示
本発明は、それぞれ保健効果が注目されているが、依然苦手な人がいる乳発酵産物と納豆を組み合わせて、高齢者でも若者でも、どの地方の誰でもが、容易に摂取が可能で、それらの保健効果を享受できるような食品組成物を提供するものである。
また、本発明は、ナットウキナーゼの有する特有の臭いや味を改善することにより、ナットウキナーゼを容易に摂取することができるようにした食品組成物を提供するものである。
本発明者らは、納豆の作用効果と獣乳発酵産物の作用効果とを併せ持つ健康食品を検討していたところ、和風食材の納豆と洋風食材の獣乳発酵産物の両者を含有した食品組成物が意外にもナットウキナーゼが有する特有の臭いや味を改善すると共に、両者の作用効果を充分に引き出すことができる食品となりうることを見出した。
即ち、本発明は、凍結乾燥した乳発酵産物、ナットウキナーゼ、及び食品に使用可能な担体を含有してなる食品組成物に関する。また、本発明は、凍結乾燥した乳発酵産物、及びナットウキナーゼに、さらにホスファチジルセリン、高麗人参加工品などからなる補助成分を含有させてなる食品組成物に関する。さらに、本発明は、これら成分を含有した抗血栓作用、血液流動性向上作用、血小板凝集抑制作用、及び脂質代謝改善作用を有する機能性食品に関する。
【図面の簡単な説明】
第１図は、試験例２の結果を示す図である。ケフィア・ナットウキナーゼ錠を１回摂取した場合の血液流動性向上効果を示す。
第２図は、試験例２の結果を示す図である。ケフィア・ナットウキナーゼ錠を１回摂取した場合の血液流動性向上効果を示す。
第３図は、試験例２の結果を示す図である。ケフィア・ナットウキナーゼ錠を７日間摂取した場合の血液流動性向上効果を示す。
第４図は、試験例２の結果を示す図である。ケフィア・ナットウキナーゼ錠による血液流動性向上効果を示す。
第５図は、試験例２の結果を示す図である。被験者のうちＮ−５及びＮ−６についての血液流動性向上効果を示す。
発明を実施するための最良の形態
本発明の食品組成物における凍結乾燥した乳発酵産物とは、獣乳すなわち牛、馬、羊、山羊などの乳を発酵させて出来るケフィア、ヨーグルト、クーミス、ラッシーなどの凍結乾燥品であり、当該分野において知られている方法によって製造することができる。好ましくは、牛乳へのケフィア・グレインの添加、発酵によって得られる産物であるケフィアの凍結乾燥品であり（以下、ケフィアと略記する）、その製造方法については、例えば特開昭６２−８３８４２号などを参照することができ、その形状は白色〜淡黄白色粉末状である。
次に、本発明におけるナットウキナーゼ（納豆キナーゼ：nattokinase）について説明する。このナットウキナーゼは、我が国古来の大豆発酵食品であるナットウ（納豆）から抽出、塩析、クロマトグラフィー、ゲル濾過等の操作の組合せによって容易に製造され、市販品も知られている。白色結晶性粉末、納豆臭があり、水溶液は無色透明で、ｐＨ６〜１２の塩基性水溶液中では６０℃までの加熱に対して安定である。血栓溶解酵素であるウロキナーゼ、組織プラスミノーゲンアクチベーター（ＴＰＡ）等と同じセリン酵素であり、そのアミノ酸配列も決定され、Ｓ−Ｓ結合を全く持たない２７５個残基からなる１本鎖構造のポリペプチドであることが特徴的である。ゲル濾過による分子量は２０，０００±５，０００であり、平均的な活性は約４０ＣＵ（プラスミン単位）／ｇである。そして、強力な血栓溶解能を有すると共に、血中のＴＰＡ量を増加させる間接的効果も確認されている。ナットウキナーゼは安価である上に、その作用の持続性が長時間であり、さらに、最近ではＯ−１５７のような感染症に対する有効性も注目されている。
本発明のナットウキナーゼとしては、市販のナットウキナーゼをそのまま使用することができ、必ずしも充分に精製されたナットウキナーゼを使用する必要はなく、ナットウキナーゼを含有しているものであって食品として使用できるものであれば特に制限はない。例えば、納豆抽出物またはその加工品のようなナットウキナーゼを含有するものであれば、本発明のナットウキナーゼとして使用することができる。
本発明の食品組成物における担体は、食品に使用可能で、本発明の食品組成物の風味に格別の悪影響を与えるものでなく、ナットウキナーゼや乳発酵産物の保健上の作用効果に好ましい影響を与えるものであれば特に制限はない。
本発明の食品組成物における補助成分は、食品として使用される食材又はそのエキスなどであって、本発明の健康食品の風味に格別の悪影響を与えるものでなく、ナットウキナーゼや乳発酵産物の保健上の作用効果に好ましい影響を与えるものであれば特に制限はない。好ましい補助成分としては、ホスファチジルセリンなどのリン脂質、高麗人参などが挙げられる。
ホスファチジルセリン（ＰＳ）はリン脂質の一種であり、初期のアルツハイマー病や加齢による記憶力低下に対して学習能力、記憶力、思考力、認識力などの脳の機能を高める事ができるとされており、他にパーキンソン病やうつ病への改善効果も期待されている。すなわちＰＳは細胞内への栄養の取り込みを促進し、神経細胞間の情報伝達を活性化し、神経伝達物質の生成を促進する作用を有すると考えられ、アルツハイマー型痴呆の治療への効果が期待される。
高麗人参は、古くから健康食品や漢方薬の成分として知られているものであり、血糖降下作用、副腎皮質機能の改善、心筋機能の改善、新陳代謝の改善、コレステロールの改善などの作用を有することが知られている。高麗人参しては、高麗人参加工品、例えばその抽出物、乾燥品、散剤などを使用することができる。
さらに、本発明の食品組成物における他の好ましい補助成分として、食品として使用される食材又はそのエキスである、各種ビタミン、カルシウム剤、乳酸菌、オリゴ糖、食物繊維、ムメフラール含有梅エキス、黒酢などが挙げられる。
オリゴ糖はグルコース、フラクトースあるいはガラクトースなどの単糖類が２〜１０個グリコシド結合したものであり、すでに市販品が知られており、腸内の有用菌であるビフィズス菌や乳酸菌などの乳酸菌類やフェカリス菌の栄養分となる増殖因子である。従って腸内有用菌が増殖し、有用菌優勢の好ましい腸内環境をつくることができる。
食物繊維は、おから、干ししたけ、干しひじき、きくらげ、海苔、大豆などの植物性食品に多く含まれている繊維質である。これらの成分は古くは栄養分の消化及び吸収を妨げ、エネルギー源にならない不消化成分として軽視されていたが、近年では整腸効果及び便通改善などの点で注目されている。
有胞子乳酸菌は安定性が高く、乳酸菌生成能力も優れているので、確実に腸管に到達し、活発な整腸作用が見込まれる。カルシウム剤はカルシウム補強作用を、複合ビタミン剤は特定ビタミン強化の作用を有する。
ムメフラール含有梅エキスは、古くから薬効が認められており、疲労回復、抗菌、消炎、消化器官の活性化などの作用を有することが知られている。その含有成分は、ミネラル、カテキン、アミノ酸などと多様である。近年、特に、生梅から梅エキスを製造する過程おいて含有成分を加熱することにより生成されるムメフラールが、血小板凝集を阻害する作用を有することが見いだされ、梅エキスに含有される他の成分との相乗効果による血流改善効果が注目されている。
黒酢は、米から製造される酢の１種であり、コレステロールや中性脂肪の改善（脂質代謝改善作用）、血液流の改善（赤血球変形能改善作用）、抗アレルギー作用、血圧降下作用、血糖降下作用、肝臓活性化作用、抗酸化作用などを有することが知られている。ただし、ナットウキナーゼの有する保健効果を充分に享受できるように、食品組成物に含有させる際に予めマイクロカプセル化するなどの加工を施すことが好ましい。黒酢としては、米麹、蒸米、及び地下水を原料とし、糖化、アルコール発酵、及び酢酸発酵の３つの発酵が自然に進行した黒酢が好ましい。
さらにまた、次のような食品として使用される食材又はそのエキスも、本発明の食品組成物における補助成分として、挙げることができる。すなわち、繊維素溶解活性作用及び脂質低下作用を有するタマネギエキス、血流改善作用を有するピーマン及びピーナツ、血流改善作用を有するイチョウ葉及びトマト、抗酸化作用及び心臓疾患予防作用を有するＣｏＱ１０（補酵素Ｑ１０）、抗酸化作用を有するアスタキサンチン、抗酸化作用及び動脈硬化改善作用を有するトコトリエノール、心臓疾患予防を期待できる抗不安作用を有するセントジョーンズウォート、抗酸化作用を有する松の樹皮抽出エキス、並びに血圧上昇抑制作用を有するＧＡＢＡ（γ−アミノ酪酸）などである。
本発明の食品組成物における、凍結乾燥した乳発酵産物の使用量としては、健康食品全重量に対して、１０〜４０重量％、好ましくは１０〜３５重量％、より好ましくは２０〜３０重量％である。本発明のナットウキナーゼとしては、市販のナットウキナーゼの重量として、食品組成物全重量に対して、５〜２５重量％、好ましくは５〜２０重量％、より好ましくは１０〜１５重量％である。
本発明の食品組成物における、凍結乾燥した乳発酵産物とナットウキナーゼの使用量は、その重量比で１：０．１〜２、好ましくは１：０．３〜１、より好ましくは約１：０．３〜０．８である。
前記した補助成分の使用量には特に制限はないが、食品組成物全重量に対して、０．１〜３５重量％、好ましくは０．２〜２５重量％、より好ましくは０．２〜２０重量％である。補助成分は添加する成分によってその使用量を調整することも必要である。
本発明の食品組成物は、前記した成分のほかに、食品として使用される増量剤、増粘剤、味覚調整剤、滑沢剤、崩壊剤などを添加することができる。また、必要に応じて色素により着色することもできる。
これらの添加成分としては、例えばマルチトール、結晶セルロース、増粘多糖類、馬鈴薯デンプン、米ヌカロウなどが挙げられる。
本発明の食品組成物は上述した成分を混合して製造することができる。混合はこれらの成分を一度に混合することができるが、数種類の成分を混合して得られた混合物を他の成分と混合してもよい。
本発明の食品組成物及びこれを用いた食品類の形状は粉末状であっても良いが、摂取を容易にするために好ましくは錠剤状または顆粒状である。更に好ましくは、コーティングされた錠剤状である。コーティング層によって納豆の臭いをさらに効果的に防止することができる。錠剤は摂取の妨げにならない範囲において如何なる形および大きさであっても良く、たとえば微小卵形または鼓形であってもよい。
コーティング剤としては、酵母細胞壁、ゼラチン、グリセリン、デンプン、セルロース等の既存材料を適宜用いることができ、好ましくは酵母細胞壁である。
本発明の食品組成物は、主成分に加えて複合ビタミン剤、有胞子性乳酸菌、カルシウム剤、オリゴ糖、食物繊維、ホスファチジルセリンなどの補助成分、および増量剤などの錠剤化成分、並びにコーティング剤からなる群から各成分を必要に応じて適宜選択することができる。脳細胞活性化作用を有することから、少なくともホスファチジルセリン（ＰＳと略記）を添加したものが好ましい。
本発明の食品組成物の一粒子中の成分と組成の一例を下記の表１に示す。
0003572306.tif 000002
本発明の食品組成物の好ましい態様としては、凍結乾燥ケフィアおよびナットウキナーゼを主成分とし、補助成分としてのホスファチジルセリンなどのリン脂質、高麗人参など、さらに複合ビタミン剤、有胞子性乳酸菌、カルシウム剤、オリゴ糖、食物繊維、ムメフラール含有梅エキスや、錠剤形成を容易にするための増量剤および適度の粘度を付与するための増粘剤などの錠剤化材料が用いられ、コーティング剤によって被覆されているものが挙げられる。
本発明の食品組成物は上述したとおり、凍結乾燥した乳発酵産物、例えば凍結乾燥ケフィアとナットウキナーゼを主成分とするので、下記の効果を奏することができる。
まず、ナットウキナーゼは、納豆菌が産生する極めて強いフィブリン分解能を有する血栓溶解酵素である。すなわち、乳発酵産物とナットウキナーゼが共に抗血栓作用を有するので、相乗作用による更なる効果がある。従って本発明の食品組成物は、心臓病（心筋梗塞・狭心症等）、脳血管疾患（脳梗塞・脳血栓等）のような日本人の死亡原因の３１％（平成７年、厚生省統計）を占める血栓症の治療と予防に十分な効果があると考えられる。ナットウキナーゼは、従来使用されてきた血栓溶解剤（ウロキナーゼ・ＴＰＡ）がいずれも血中半減期が４〜２０分と極めて短いのに対して４〜１２時間と長時間である。従ってナットウキナーゼは血栓溶解作用を長時間にわたって持続することができる。更に血栓症は老人性痴呆症の一つの原因であることから、ナットウキナーゼは血栓型痴呆症の予防にも効果があると考えられる。しかも、ナットウキナーゼは日本古来の代表的発酵食品である納豆中に見出された酵素であるので、大量生産が可能で、他の薬品と比較して非常に安価で提供することができ、かつ古来から食品として経口摂取されている納豆の安全性が十分に保証されているなどの優れた特徴を有している。
一方、乳発酵産物の保健効果については、古くから整腸作用を有することが知られており、また消化管を中心とする感染防御の関点から、そして癌細胞抑制効果との関連で免疫賦活作用が示唆されている。更に乳発酵産物の摂取が癌の発生を抑制することが示唆され、抗腫瘍活性が報告されている。更にまた乳発酵産物の投与によって血小板やフィブリノーゲンが増加し、一方、フィブリンの分解によって形成されるフィブリン分解産物が減少して正常値に近づくことが認められている。すなわち、フィブリン分解産物の減少は、フィブリンの更なる減少を意味し、血栓は血液凝固により生じたフィブリンが主体であるので、血流が順調になり血流阻害が解消されて抗血栓作用が高められ、血圧降下作用も期待できる。
また、本発明の食品組成物は、好ましくは錠剤化され、かつその表面がコーティングされているので、取り扱いと摂取が容易であり、かつ納豆の臭気への違和感を解消することができる。加えて本発明の食品組成物においては、補助成分の配合とその種類の選択によって、主成分のみで充足しえない補助成分固有の効果を期対することができる。すなわち、有胞子乳酸菌は安定性が高く、乳酸菌生成能力も優れているので、確実に腸管に到達し、活発な整腸作用が見込まれる。カルシウム剤はカルシウム補強作用を、複合ビタミン剤は特定ビタミン強化作用を有する。
以下に、実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
実施例
実施例１
ケフィア粉末２５．０ｇ、ナットウキナーゼ１０．５ｇ、及び錠剤化材料を混合、錠剤化し、末コーティングの微小鼓状の錠剤を得た。得られた錠剤は、平均重量０．３００ｇであった。これに酵母細胞壁コーティング剤により被覆を施し、本発明の健康食品を得た。コーティングした錠剤は０．３１０ｇ（平均重量）であった。この錠剤を１日３粒投与した。
実施例２
ケフィア粉末２０．０ｇ、ナットウキナーゼ１０．５ｇ、高麗人参１０ｇ、黒酢８ｇ、いちょう葉５ｇ、ホスファチジルセリン５ｇ、及びカプセル化材料を混合し、平均重量０．３００ｇのカプセルを得た。このカプセルを１日３カプセル投与した。
実施例３
ケフィア粉末２８．０ｇ、ナットウキナーゼ１０．５ｇ、複合ビタミン剤（粉末）２．５ｇ、有胞子性乳酸菌０．２ｇ、カルシウム剤（ミルクＣａ）４．８ｇ、及び錠剤化材料マルチトール（増量剤）２８．５ｇ、錠剤化材料８．５ｇを混合し、混練物を得た。次に、この混練物から造粒工程において微小鼓状の末コーティング錠剤を得た。得られた錠剤は、平均重量０．３５０ｇであり、酵母細胞壁コーティング剤により被覆を施し、本発明の健康食品を得た。コーティングした錠剤は０．３７１ｇ（平均重量）であった。この錠剤を１日３粒投与した。
試験例１
実施例３で製造したケフィア・ナットウキナーゼ錠（以下、ＫＫと略記することもある。）を、納豆及び乳製品のどちらかが苦手な人２０名（男性８名、女性１２名）に１週間服用してもらい、その効果を調査した。
〈調査の結果〉
１．食べるのに抵抗はありましたか？
はい                          ０名  （０％）
いいえ                      １９名（９５％）
どちらでもない                １名  （５％）
２．飲み終えて、体に変化はありましたか。
お腹の調子がよくなった。      ８名（４０％）
肩こりがよくなった。          ３名（１５％）
よく眠れるようになった。      ２名（１０％）
つかれにくくなった。          １名  （５％）
特に変化はない。              ５名（２５％）
途中で飲むことを止めた。      １名  （５％）
この結果、本発明の食品組成物は、納豆や乳製品が苦手な人においても摂取できる食品であり、納豆や乳製品に含有されている健康上好ましい成分を容易に摂取することができる食品であることがわかった。
また、調査が１週間という短い期間であったことから、特に変化はないと回答した人が２５％であったが、１週間という短い期間にもかかわらず「お腹の調子がよくなった」という人が２５％おり、「肩こりがよくなった」という人が１５％おり、「よく眠れるようになった」という人が１０％いたことは、本発明の食品組成物が優れた作用効果を有するものであることを示している。
試験例２
実施例３で調製したケフィア・ナットウキナーゼ錠の摂取による血液流動性向上効果について、Ｍｉｃｒｏ  Ｃｈａｎｎｅｌ  Ａｒｒａｙ  Ｆｌｏｗ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（ＭＣ−ＦＡＮ）を用いて血小板凝集の抑制と赤血球変形能の改善、および血中脂質量を指標にした効果を試験した。
Ｉ．試験方法
（１）被験者
男性は女性よりも血液の流動性が一般的に低く、年齢が高くなるにつれてその流動性が低くなる傾向にあることが予試験の結果から明らかである。そこで、今回の臨床試験においては、被験者に試験の意義、被検体の安全性について十分な説明を行った上で、４０代以上の日本人男性のボランティア８名（Ｎ−１〜８）に協力してもらった。
（２）ケフィア・ナットウキナーゼ錠の摂取
被験者には測定１週間前より納豆、ピーマン、南京豆（ピーナッツ）、玉葱、梅など、血液の流動性に影響を及ぼすといわれている食材の摂取を控えてもらった。試験当日の朝食は水以外を取らず、午前９時から１０時までに医師の立ち会いの下、採血後の飲食も水以外は控えてもらった。
採血は医師により行われ、採血後に本発明による通常の２倍量である６錠のケフィア・ナットウキナーゼ錠を白湯で摂取してもらった。
（３）採血とヘパリン化血液の調製
被験者の上腕静脈より７〜８ｍＬの血液を採取し、その１．９ｍＬをヘパリン溶液１０００単位／ｍＬの０．１ｍＬを前もって分注しておいたポリエチレン製測定用試験管に分取し、全血の流動性測定用血液とした。残りの血液４ｍＬは血液検査用に用いた。
（４）血液流動性の測定
血液の流動性はＫｉｋｕｃｈｉらの方法に従って測定した。すなわち、２０ｃｍ水柱差でＭＣ−ＦＡＮに組み込まれたマイクロチャンネルアレイ（Ｂｌｏｏｄｙ  ６−７：日立原町電子工業社製）を全血１００μｌが通過する時間を計測した。血液通過時間は測定する直前に計測される生理食塩液１００μｌの通過時間を１２秒として換算し、次式により算出した。
血液通過時間×１２秒／生理食塩液通過時間
（５）血液流動性試験
（ｉ）１回摂取による効果
ケフィア・ナットウキナーゼ錠に摂取前と摂取２時間後に採取した血液の流動性を比較し、１回摂取による効果を判定した。今回、血液凝固阻止剤としてヘパリンを用いた。ヘパリンは血液中の凝固因子フィブリノーゲンをフィブリンに変換するトロンビンの活性を阻害する。しかし、血小板凝集に対するその効果は弱いといわれている。よって、採取された血液に含まれる血小板は凝集しやすい状態にあるといえる。
そこで、全血の流動性と血小板凝集に及ぼすケフィア・ナットウキナーゼ錠の影響をみる目的で、採血の直後（実際には採血後３分）とその１０分後（血小板凝集しやすい血液性状にある血液が凝集を起こす時間）に測定した。
（ｉｉ）連日摂取による効果
上記の試験日を０日目とし、被験者にはそれ以後１週間、毎食前３回、通常の２倍量である６錠のケフィア・ナットウキナーゼ錠を白湯で摂取してもらい、７日後に再度全血の流動性を測定した。
なお、この期間中の食事は先にあげた食材以外のものを普段どおりに摂ってもらい、生活様式も極力普段どおりにしてもらった。
（ｉｉｉ）血液検査
血液検査は試験開始日と最終日に血液の流動性や血小板凝集に影響を及ぼすといわれている総コレステロール、ＨＤＬコレステロール、ＬＤＬコレステロール、中性脂肪、遊離脂肪酸、Ｈｔ値、赤血球数、血小板数および白血球数を測定した。
ＩＩ．試験結果
（１）被験者の血液性状と今回の測定方法の評価
上記の技術による血液の流動性を測定する方法は、比較的簡単で再現性にも優れている。しかし、採血時に何らかの刺激が加わると、血液は急激に凝固する性質があり、またこの反応は連鎖反応でもある。これはヒトの生体防御システムのひとつで、出血した時にこの反応が起こらないと止血できず、死に至ることになる。
今回の試験には８名の被験者に協力をしてもらったが、採血時の不手際で２例に凝固反応がみられた。これらの被験者についてはすべてのデータを削除し、６名のデータをもってケフィア・ナットウキナーゼ錠の有効性を判定した。
まず、採血３分後における摂取前の全血の流動性を、１００μＬの血液が通過する時間として第１図に示した。最も短いヒトで３４．２秒で、最も長いヒトでも６０．４秒で、文献値からみてもこれらの被験者の値は健常といえる。ところが、採血後１０分に再度同血液を測定したところ、被験者Ｎ−５及びＮ−６から採血した血液の全血通過時間は、それぞれ、４６．１秒から８４．１秒へ、４５．８秒から１２０．０秒へと変化し、モニター上に血小板凝集が観察された。すなわち、被験者Ｎ−５、Ｎ−６の血液は血小板易凝集状態といえる。測定時間を２段階方式にすることによって、このような極めて価値ある被験者についての情報を見出すことができた。
（ｉ）ケフィア・ナットウキナーゼ錠の１回摂取による効果
前値測定直後に通常量の２倍量のケフィア・ナットウキナーゼ錠を摂取してもらい、その２時間後に再度、全血の通過時間を採血後３分と１０分に測定した。
採血後３分の測定においては、６例中１例を除き５例において全血の通過時間が短縮された。その結果を第１図に示す。
採血後１０分の測定においては、血小板が易凝集状態にある被験者のＮ−５、Ｎ−６の全血通過時間が顕著に短縮され、モニター上にも血小板凝集が観察されなかった。その結果を第２図に示す。
これらの結果から、ケフィア・ナットウキナーゼ錠は、血液をサラサラにする効果、いわゆる血液流動性向上効果があり、その作用機序の一つとして血小板凝集抑制作用が示唆された。
（ｉｉ）ケフィア・ナットウキナーゼ錠の連日摂取による効果
上述のようにケフィア・ナットウキナーゼ錠を７日間連日摂ってもらい、再度、全血の通過時間を測定した。その結果、６例中４例の全血通過時間が短縮し、１例は変化せず、１例（Ｎ−８）が延長した。その結果を第３図に示す。さらに、摂取前、摂取後２時間の測定結果と併せて、第４図に示す。
被験者Ｎ−８は、測定前にセットの準備、医師と被験者間の指示連絡、他の被験者へのケアなどに関わっていたため、これがストレッサーになり、全血の通過時間が延長されたことも考えられる。
また、血小板が易凝集状態にある被験者Ｎ−５及びＮ−６について、摂取前、摂取後２時間、摂取後１週間の測定結果を併せて、第５図に示す。
（ｉｉｉ）血液検査
全血の流動性や血小板凝集に及ぼす血清成分や血球成分を測定し、その結果を下記の表２に示した。１週間の連日摂取により中性脂肪量が低下し、遊離脂肪酸量が増加する傾向がみられた。この結果より、脂質代謝異常への有効性が期待できる。
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（２）結果の考察
以上の結果から、ケフィア・ナットウキナーゼ錠には全血の流動性を向上させる効果、血小板凝集抑制効果が示唆された。特に、血小板が易凝集状態にあるヒトの全血通過時間を短縮させたことは極めて価値のある効果といえる。
今後は血液が凝固した時に積極的にそれを早く溶解させる線溶系に対する効果を検討する必要があると思われる。
産業上の利用可能性
本発明の食品組成物は上述したとおり、納豆由来のナットウキナーゼと凍結乾燥した乳発酵産物、例えば凍結乾燥ケフィアを主成分とするので、下記の効果を奏することができる。
ます、ナットウキナーゼは、納豆菌が産生する極めて強いフィブリン分解能を有する血栓溶解酵素であり、乳発酵産物と共に抗血栓作用を有するので、相乗作用による更なる効果があり、血栓症の治療と予防に十分な効果があると考えられる。またナットウキナーゼは、血栓型痴呆症の予防にも効果があると考えられる。
しかもナットウキナーゼは日本古来の代表的発酵食品である納豆中に見出された酵素であるので、大量生産が可能で、他の薬品と比較して安価に提供することができ、かつ古来からの納豆の経口摂取により安全性が十分に保証されているなどの優れた特徴を有している。
一方、乳発酵産物の保健効果については、古くから整腸作用を有することが知られており、また消化管を中心とする感染防御の関点から、そして癌細胞抑制効果との関連で免疫賦活作用が示唆されている。更に乳発酵産物の摂取が癌の発生を抑制することが示唆され、抗腫瘍活性が報告されている。更にまた乳発酵産物の投与によって血小板やフィブリノーゲンが増加し、一方、フィブリンの分解によって形成されるフィブリン分解産物が減少して正常値に近づくことが認められている。すなわち、フィブリン分解産物の減少は、フィブリンの更なる減少を意味し、血栓は血液凝固により生じたフィブリンが主体であるので、血流が順調になり血流阻害が解消されて抗血栓作用が高められ、血圧降下作用も期待できる。
さらに、本発明の食品組成物は、他の各種補助成分を含有させることにより、抗血栓作用のみならず、血液流動性向上作用、血小板凝集抑制作用、及び脂質代謝改善作用など種々の保健効果を期待できる機能性食品として利用が可能である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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