(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳又は乳由来原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる乳由来塩基性タンパク質画分とカルシウムとを配合することを特徴とする骨の発育を促進する離乳食。
【請求項２】
カルシウムとして、乳由来カルシウムを配合する請求項１記載の離乳食。
【請求項３】
乳由来塩基性タンパク質画分が、乳又は乳由来原料をタンパク質分解酵素で分解し陽イオン交換樹脂に接触させた後、塩濃度0.1M〜1.0Mの溶出液で溶出して得られる乳由来塩基性ペプチド画分、あるいは乳由来塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で分解して得られる乳由来塩基性ペプチド画分である請求項１又は２記載の離乳食。
【請求項４】
離乳食原料に対し、カルシウムを0.1〜1.0重量％配合する請求項１〜３のいずれかに記載の離乳食。
【請求項５】
離乳食中に含まれるカルシウム量に対し、重量比で0.01〜1倍量の乳由来塩基性タンパク質画分を配合する請求項１〜４のいずれかに記載の離乳食。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、生体利用性の高いカルシウム及び骨成長促進作用を有する乳由来塩基性タンパク質画分を配合した離乳食に関する。本発明の離乳食は、乳幼児の骨の発育に有用である。
【０００２】
【従来の技術】
離乳食は、天然の食品素材等を配合して作られ、６〜９カ月齢頃から固形の食事に切り換える時期までに用いられる栄養的にバランスのとれた種々の形態を有する食品である。これらの離乳食の中、おやつ類に属する離乳食については、乳幼児においしく楽しく噛む練習をさせることを目的として用いられているが、最近では、通常の離乳食に不足しがちなミネラル類を強化することも行われるようになってきている。そして、このような離乳食が種々市販されており、ニンジンやレバー等の風味を有するビスケット、カルシウムを強化したウエハースやセンベイ類等が知られている。
しかしながら、近年、幼児から子供に骨軟化症等や骨の成長不良による骨折等が顕在化するようになってきている。これらの現象については、日常の食事がバラエティー化してエネルギー充足は過剰になる一方で、偏食等により栄養のバランスが崩れてきていることが一因であると考えられている。したがって、従来の離乳食のようなカルシウムのみの強化を考慮した離乳食では、必ずしも充分であるとはいえず、カルシウムを含めて、骨の成長を促進する効果を有する物質を添加した離乳食の開発が求められてきている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明者らは従来より、種々のカルシウムの生体利用性について研究を進め、乳及び乳原料由来カルシウム、海草由来カルシウム、カキ殻、ウニ殻、イカ甲、魚骨等の海産物由来カルシウム等の天然物由来カルシウムが生体利用性に優れていることを見出した。また、本発明者らは、従来より、食品素材中に含まれる骨成長促進物質についても研究を進め、乳中に含まれる塩基性タンパク質画分に骨成長促進作用があることを見出した。そこで、カルシウム及び乳由来塩基性タンパク質画分を一定の比率で配合した食餌を離乳期のラットに投与する動物実験を行ったところ、カルシウム及び乳由来塩基性タンパク質画分を一定の比率で配合した食餌を投与したラットの方が通常の食餌を投与したラットよりも骨の成長が促進されていることを見出した。そして、このカルシウム及び乳由来塩基性タンパク質画分が離乳食の素材として適していることを見出し、本発明を完成するに至った。したがって、本発明は、乳幼児の離乳期から成長期にかけて必要なカルシウムと骨の発育を促進する乳由来塩基性タンパク質画分とを配合してなる栄養バランスの優れた離乳食を提供することを課題とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明の離乳食の特徴は、カルシウム及び乳由来塩基性タンパク質画分を配合することにある。離乳食に配合するカルシウムとしては、乳又は乳由来原料から得られるカルシウム（特開平６−１２５７４０号公報）、海草由来カルシウム、カキ殻、ウニ殻、イカ甲、魚骨等の海産物由来カルシウム等、天然物由来カルシウムを使用することが好ましいが、炭酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、乳酸カルシウム、クエン酸カルシウム、第３リン酸カルシウム等のカルシウム塩を使用しても良い。特に、乳由来のカルシウムは吸収が優れており望ましい。乳由来のカルシウムは乳を脱脂し限外濾過して乳糖及び可溶性ミネラルを除き、さらにカゼインを沈澱させて除去した上清が用いられる。この上清中にはカゼイン結合性カルシウム、コロイド状カルシウム等やリン、ナトリウム、カリウム、マグネシウム等が複合体の形態で含まれており、多種類のミネラルを含むという点からもこのような上清を用いることが望ましい。この上清は、噴霧乾燥、凍結乾燥等適宜の乾燥手段を用い粉末化して用いるとよい。このような上清中には、粉末当りカルシウムが１０〜１５％含有されている。
【０００５】
また、離乳食に配合する乳由来塩基性タンパク質画分は、牛乳、人乳、山羊乳、羊乳等の哺乳類の乳から得られるものであり、好ましくは、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を１５重量％以上含有している画分である。なお、乳由来塩基性タンパク質画分は、例えば、脱脂乳や乳清等の乳原料を陽イオン交換樹脂と接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、塩濃度０．１Ｍ〜１．０Ｍの溶出液で溶出し、この溶出画分を逆浸透膜や電気透析法等により脱塩及び濃縮し、必要に応じて乾燥することにより得ることができる。
【０００６】
また、乳由来塩基性タンパク質画分を得る方法としては、乳又は乳由来原料を陽イオン交換体に接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、この陽イオン交換体に吸着した塩基性タンパク質を、ｐＨ５を越え、イオン強度  ０．５を越える溶出液で溶出して得る方法（特開平５−２０２０９８号公報）、アルギン酸ゲルを用いて得る方法（特開昭  ６１−２４６１９８号公報）、硫酸化エステルを用いて乳から得る方法（特開昭  ６３−２５５３００号公報）、無機多孔質粒子を用いて乳清から得る方法（特開平１−８６８３９  号公報）、あるいは、ウシインスリン様成長因子−１含有物を製造する方法（特願平６−  ８５３３３号）等が知られており、本発明では、このような方法で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を使用することもできる。
【０００７】
また、本発明における乳由来塩基性タンパク質画分は、あらかじめその原料の乳をペプシン、トリプシン、キモトリプシンなどのタンパク質分解酵素を作用させ、さらに必要に応じてパンクレアチンを作用させて平均分子量３万以下、好ましくは平均分子量４，０００  以下のペプチド組成物としこれを用いて前記陽イオン交換樹脂処理して塩基性ペプチドを吸着させ、これを塩濃度０．１Ｍ〜１．０Ｍの溶出液で溶出させて乳由来塩基性ペプチド画分として使用してもよい。さらに、乳由来塩基性タンパク質画分に、ペプシン、トリプシン、キモトリプシンなどのタンパク質分解酵素を作用させ、さらに必要に応じ、パンクレアチンなどのタンパク質分解酵素を作用させて平均分子量３万以下、好ましくは平均分子量４，０００  以下の乳由来の塩基性ペプチド画分として用いてもよい。
これらの塩基性ペプチド画分は塩基性タンパク質画分と同様の作用がある限り、本発明の離乳食に配合することができ、本発明における塩基性タンパク質画分として用いられる。
本発明ではこのような塩基性ペプチド画分も塩基性タンパク質画分のなかに包含する。
【０００８】
さらに、本発明の離乳食では、卵、牛乳、小麦粉等、通常の離乳食に含まれている主原料を使用することができる。また、離乳食の使用目的や使用形態によっては、ミネラルの吸収性を損なわない範囲で使用する原料を自由に変更することが可能であり、必要に応じて、ビタミン類及びカルシウム以外のミネラル類も添加することができる。なお、ビタミンとしては、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＢ１  、ビタミンＢ２  、ビタミンＢ６  、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、葉酸、ナイアシン、パントテン酸、コリン、イノシトール、ニコチン酸アミド等を、また、ミネラル類としては、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、リン、鉄、イオウ等を、それぞれ例示することができる。
本発明の離乳食において、カルシウムの配合量は特に制限はないが、好ましくは、カルシウムを離乳食原料に対し  ０．１〜  １．０重量％配合すると良い。また、乳由来塩基性タンパク質画分は、離乳食中に含まれるカルシウム量に対し重量比で０．０１〜１倍量配合することが好ましい。本発明の離乳食は離乳児に対しカルシウムとして１日０．１  〜０．３ｇ摂取できるようにすると一層好ましい。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明の離乳食は、従来の離乳食に、カルシウム及び乳由来塩基性タンパク質を配合し、乳幼児の骨の発育を促進させるものである。このカルシウム及び乳由来塩基性タンパク質の配合量は上記した通りであるが、これらの配合方法については特に制限は無く、粉末状の原料であれば粉々混合したり、ペースト状の原料であれば予め温水に懸濁もしくは溶解して混練したり、乳化タイプの離乳食であれば水相にカルシウム及び乳由来塩基性タンパク質を懸濁もしくは溶解した後、油相と混合乳化すれば良い。そして、それぞれの離乳食の通常の製造方法に従って本発明の離乳食を製造すれば良い。
このようにして、ビスケット、ウエハース、煎餅、タマゴボーロ等のおやつに適した離乳食、あるいは、フリーズドライやレトルトタイプのポタージュ、クリーム煮、シチュー、レバーペースト、グラタン等に加工した離乳食を提供することができる。
【００１０】
【参考例１】
生乳２０リットルを  ４，５００×ｇ  で１０分間遠心分離し、脱脂乳１８リットルを得た。次に、この脱脂乳を分画分子量５０，０００の限外濾過膜を装着した限外濾過装置に通液し、乳糖及び可溶性ミネラルを除去した脱脂乳を調製した後、この乳糖及び可溶性ミネラルを除去した脱脂乳９リットルに塩酸溶液を加え、ｐＨを  ４．６に調整してカゼインを凝固、沈澱させた。そして、  ４，５００×ｇ  で１０分間遠心分離して、凝固、沈澱したカゼインを除去し、カゼイン結合性カルシウム及びコロイド状カルシウムを含む上清を回収した後、ロータリーエバポレーターで減圧濃縮し、凍結乾燥して粉末状の乳由来ミネラル  ５８ｇを得た。
なお、この乳由来ミネラル中に含まれる主なミネラルの組成を表１に示す。
【００１１】
【表１】
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Ｘ線回折により結晶構造を調べた結果、リン酸カルシウムやクエン酸カルシウム等の単純な結晶構造は認められず、むしろハイドロキシアパタイト構造に類似した複合体の形態であることが認められた。
【００１２】
【参考例２】
陽イオン交換樹脂のスルホン化キトパール（富士紡績製）４００ｇを充填したカラムに、未殺菌のチーズホエー４０リットルを通液した後、このカラムを脱イオン水で洗浄し、  ０．９８Ｍ塩化ナトリウムを含む  ０．０２Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ  ７．０）で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を逆浸透膜により脱塩、濃縮し、凍結乾燥して粉末状の乳由来塩基性タンパク質画分  １５ｇを得た。
なお、この塩基性タンパク質画分の成分組成を表２に示す。
塩基性タンパク質画分の成分組成は、常法により、タンパク質はケルダール法、脂質はレーゼゴットリーブ法、灰分は湿式灰化法によりそれぞれ定量した。
【００１３】
【表２】
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【００１４】
また、この塩基性タンパク質画分中に含まれるアミノ酸の組成を表３に示す。
【００１５】
【表３】
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アミノ酸組成は、６Ｎ塩酸溶液にて１１０  ℃、２４時間加水分解後、アミノ酸分析計（日立Ｌ−８５００型）  にて測定した。
【００１６】
【参考例３】
陽イオン交換樹脂のスルホン化キトパール（富士紡績（株）製）４００ｇを充填したカラムに未殺菌チーズホエーを４０リットル通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で洗浄し、０．９８Ｍ  塩化ナトリウムを含む０．０２Ｍ  炭酸緩衝液（ｐＨ７．０）  で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。次いで、塩酸溶液にてｐＨを１．５に調整した。ペプシン  （関東化学  （株）  製）  を２％濃度になるように添加して３７℃で１時間攪拌しながら加水分解した。その後、水酸化ナトリウム溶液でｐＨ６．８に中和後、パンクレアチン（和光純薬  （株）  製）  を０．５  ％濃度になるように加えて、３７℃で１時間攪拌しながら加水分解した。その後、８５℃で１０分間加熱して酵素を失活させた。そして、この加水分解物を分画分子量２０，０００で限外濾過し、透過液を逆浸透膜により脱塩・濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の塩基性ペプチド画分１５ｇ  を得た。
【００１７】
塩基性ペプチドの成分組成
上記で得られた、塩基性ペプチド画分について、常法に従い、タンパク質はケルダール法、脂質はレーゼゴットリーブ法、灰分は湿式灰化法によりそれぞれ定量した。その成分組成を分析した。その結果を表４に示す。
【００１８】
【表４】
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【００１９】
塩基性ペプチドのアミノ酸組成
上記で得られた、塩基性ペプチド画分について、常法に従い、６Ｎ塩酸溶液にて１１０  ℃、２４時間加水分解後、アミノ酸分析計  （日立Ｌ−８５００型）  にて測定した。
その結果を表５に示す。
【００２０】
【表５】
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【００２１】
【実施例１】
カルシウムとして参考例１で得られた乳由来ミネラルと参考例２で得られた乳由来塩基性タンパク質画分とを使用し、ウエハースタイプの離乳食を製造した。なお、シート部の配合を表６に示す。
【００２２】
【表６】
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表６に示した配合で、カルシウムとしての乳由来ミネラル及び乳由来塩基性タンパク質画分を含む原料を予め粉々混合し、水を適当量加えてバッターを調製し、ウエハース焼成機で焼成してウエハースのシートを製造した。次に、ショートニング、乳糖、粉糖、脱脂粉乳及び香料を配合して調製したクリームを塗布し、サンドイッチ状にクリームを内層に挟んでカッティングし、ウエハースタイプの離乳食を製造した。なお、カルシウム及び乳由来塩基性タンパク質画分をウエハースのシートに配合しても、シートの膨張性や製品の風味には全く影響がなかった。
【００２３】
【実施例２】
カルシウムとして市販の魚骨由来ミネラル  （焼津水産化学工業製）  及び参考例２で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を使用し、タマゴボーロタイプの離乳食を製造した。なお、タマゴボーロの配合を表７に示す。
【００２４】
【表７】
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表７に示した配合の原料をケーキミキサーで混練し、生地を作成後、直径１０ｍｍ前後の球状に成形した後、常法に従って焼成し、冷却してタマゴボーロタイプの離乳食を製造した。なお、カルシウム及び乳由来塩基性タンパク質画分をタマゴボーロに配合しても、タマゴボーロのサクサク性や製品の風味には全く影響がなかった。
【００２５】
【実施例３】
カルシウムとして市販の焼成牛骨粉（エヌ・シー・コーボレーション（株）製）及び参考例３で得られた乳由来塩基性ペプチド画分を使用し、タマゴボーロタイプの離乳食を実施例２と同様の方法で製造した。なお、タマゴボーロの配合を表８に示す。
【００２６】
【表８】
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表８に示した配合の原料をケーキミキサーで混練し、生地を作成後、直径１０ｍｍ前後の球状に成形した後、常法に従って焼成し、冷却してタマゴボーロタイプの離乳食おやつを製造した。なお、カルシウム及び乳由来塩基性ペプチド画分を配合しても、タマゴボーロのサクサク性や製品の風味には全く影響を与えなかった。
【００２７】
【試験例１】
カルシウムとして参考例１で得られた乳由来ミネラルあるいは炭酸カルシウムと、参考例２で得られた乳由来塩基性タンパク質画分とを用い、離乳期ラットの骨成長作用を調べた。なお、各群の飼料組成を表９に示す。
Ａ群：炭酸カルシウム投与群
Ｂ群：炭酸カルシウム＋乳由来塩基性タンパク質画分投与群
Ｃ群：乳由来ミネラル投与群
Ｄ群：乳由来ミネラル＋乳由来塩基性タンパク質画分投与群
【００２８】
【表９】
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３週齢のＳＤ系雄ラット（日本チャールスリバー製）を用い、３２匹を１群８匹の４群に分け、表９に示した飼料を２週間投与した。２週間後、エーテル麻酔下で大腿骨を摘出し、レオロメーター  （ＲＸ−１００、アイテクノ製）  で骨強度を測定した。その結果を図１に示す。
骨強度は、乳由来ミネラル＋乳由来塩基性タンパク質画分投与群（Ｄ群）＞炭酸カルシウム＋乳由来塩基性タンパク質画分投与群（Ｂ群）＞乳由来ミネラル投与群（Ｃ群）＞炭酸カルシウム投与群（Ａ群）の順に強かった。したがって、カルシウム又は乳由来ミネラルを単独で使用するよりも乳由来塩基性タンパク質画分を配合することにより、相乗的に骨の成長を促進することができることが判る。
【００２９】
【試験例２】
参考例２及び３で得られた塩基性タンパク質画分及び塩基性ペプチド画分の効果について骨芽細胞の増殖効果で比較した。
培養骨芽細胞細胞様株（ＭＣ３Ｔ３−Ｂ１）  を９６穴の平底細胞培養プレートに撒き込み、０．２  重量％ウシ血清を含むα−ＭＢＭ培地（Ｆｌｏｗ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社製）  で１８時間培養した。なお、培養に際しては、培地  １００μｌ  に対し、塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を０．５  重量％濃度となるように溶解した溶液２μｌを添加した。培養後、トリチウムでラベルしたチミジンを添加し、２時間後に細胞に取り込まれたチミジンの放射活性を測定することにより骨芽細胞増殖活性を求めた。その結果を図２に示す。図２では、培地に塩基性タンパク質画分あるいは塩基性ペプチド画分を添加しなかった群の放射活性を１００  ％とし、放射活性の相対値で塩基性タンパク質画分及び塩基性ペプチド画分を添加した群の骨芽細胞増殖活性を表した。これによると、参考例２及び３で得られた塩基性タンパク質画分及び塩基性ペプチド画分を添加した群は、添加しなかった群に比べて、両者とも２倍以上の骨芽細胞増殖活性を示した。
【００３０】
【発明の効果】
本発明の離乳食は、生体利用性の高いカルシウムと骨の成長を促進する乳由来塩基性タンパク質画分を配合した乳幼児の骨の発育に有用な離乳食である。この離乳食を摂取することにより、乳幼児の骨の発育不良を防止することや骨軟化症を予防することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】試験例１における各飼料の骨強化作用を示す。
【図２】試験例２における骨芽細胞増殖活性を示す。
【図１】
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【図２】
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