(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−アシルアミノアルコールの生産法であって、有機溶媒中において、次式の混成無水物：
Ｒ−CO−Ｏ−SO2R'''
（式中、Ｒは55個までの炭素原子を有する直鎖または枝分かれしたアルキル基であり、該アルキル鎖は、任意に酸素原子または内部のエステル基により中断されていてもよく、任意に１つまたはそれ以上の二重結合を含んでいてもよく、かつ任意に１つまたはそれ以上の保護されたヒドロキシル部分で置換されていてもよく、また、R'''はC1〜C6のアルキルまたはC1〜C6のアルキルフェニル基である。）
を、
0003594962.tif 000005
（式中、R'は30個までの炭素原子を有する直鎖または枝分かれしたアルキル基であり、該アルキル鎖は、任意に酸素原子により中断されていてもよく、任意に１つまたはそれ以上の二重結合を含んでいてもよく、かつ任意に１つまたはそれ以上のヒドロキシル基で置換されていてもよく、
R''はＨまたは炭水化物（任意に、さらに炭水化物部分に結合していてもよい。）である。）からなる群より選ばれるアミノアルコールまたはその塩と反応させて、対応するＮ−アシルアミノアルコールを形成することを特徴とする該生産法。
【請求項２】
更に、次式の有機酸（またはその塩）：
Ｒ−COOH
（式中、Ｒは請求項１で定義した通りである。）
を、有機溶媒中有機塩基の存在下において、C1-6のアルキルスルホニルクロリドまたはC1-6のアルキルフェニルスルホニルクロリドと反応させて、請求項１記載の対応する混成無水物を形成し、かつ、該混成無水物を請求項１記載のアミノアルコールまたはその塩と反応させて、対応するＮ−アシルアミノアルコールを形成する、請求項１記載の生産法。
【請求項３】
前記アミノアルコールが、スフィンゴシン、ジヒドロスフィンゴシン、フィトスフィンゴシン、グルコスフィンゴシン、グルコジヒドロスフィンゴシン、グルコフィトスフィンゴシン、ガラクトスフィンゴシン、ガラクトジヒドロスフィンゴシンまたはガラクトフィトスフィンゴシンからなる群から選択される請求項１又は２記載の生産法。
【請求項４】
前記有機溶媒が、塩化メチレン、トルエン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ピリジン、メチルエチルケトン、アセトンまたはエーテルである請求項１又は２記載の生産法。
【請求項５】
Ｎ−アシルアミノアルコールの生成のために、混成無水物がアミノアルコールに対して過剰の量存在する請求項１又は２記載の生産法。
【請求項６】
前記C1-6のアルキルスルホニルクロリドまたはC1-6のアルキルフェニルスルホニルクロリドがｐ−トルエンスルホニルクロリドまたはメタンスルホニルクロリドである請求項２記載の生産法。
【請求項７】
前記有機塩基が三級アミンまたはピリジンである請求項２記載の生産法。
【請求項８】
２つの工程が混成無水物の分離なしに連続的に同一の反応器において行われる請求項２記載の生産法。
【請求項９】
有機塩基を除いた全ての反応体を共に１つの反応器に加え、続いて有機塩基を添加して前記反応を開始する請求項２記載の生産法。
【請求項１０】
前記混成無水物の生成のために、有機酸がスルホニルクロリドに対して僅かに過剰の量存在し、有機塩基のスルホニルクロリドに対するモル比が2:1〜3:1である請求項２記載の生産法。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、アミノアルコールのアミノ基の選択的アシル化によるＮ−アシルアミノアルコールの生産に関する。
背景技術
出発材料中の多数の官能基のうちの１つのみが反応させられる反応生成物の有効な選択的合成は、有機化学における継続的な課題である。そのような例の１つにアミノアルコールのアミノ基の選択的アシル化がある。
Ｎ−アシル化されたアミノアルコールのうち、スフィンゴ脂質、特にセラミド並びにセレブロシド、ガングリオシド及びスフィンゴミエリンなどのそれらの誘導体は商業上及び治療上の重要性を有するので、これらの化合物は特に重要である。例えば、セラミドは、毛髪及び肌の手入れの製品などの化粧品及び医薬品における商業上の利用可能性がかなり高い（Zysman,A.ら（1991）欧州特許出願公報第0420722 A2号）。
セラミドは表皮由来の極性脂質の一種である。セラミドは表皮の水−保持特性において重要な役割を果たす。セラミド−及び疑セラミド−含有組成物の局所適用は、乾燥肌の水分を回復するのに効果的であり、かつアトピー性湿疹を直すのに効果的であり得る（Kerscher,M.ら（1991）Eur.J.Dermatol.,１,39−43;Imokawa,G.ら（1989）J.Soc.Cosmet.Chem.,40,273−285）。
スフィンゴ脂質が、細胞の修復及び成長の促進による傷及び潰瘍の治療などの治療上の特性を示すことはわかっている（Tschannen,R.ら（1985）欧州特許出願公報第0146810 A2号）。
現在の実践においては、主に、スフィンゴ脂質、特にセラミドは、動物の組織、通常は牛の脳または豚の表皮の組織からの抽出及び分離により得られる。これらの抽出物は、主にグリコセラミドからなり、一般にほんの数パーセントのセラミドを含む。明らかに、この方法を用いた場合、セラミドの生産は工業規模でかなりの費用がかかる。従って、これらの高価な生成物を得るためのその代わりとなる費用−効果のある収率の高い方法を見つけることが望ましい。
化学的な合成の方法により、適切な代わりとなる方法が提供され得る。上述したようなスフィンゴ脂質は脂肪質のＮ−アシル部分により特徴づけられている。アミンのアシル化を、従来技術において公知であるいくつかの方法により行うことができる。これらの方法のうち、Heymes,R.ら（（1983）欧州特許第0023453 B1号）は、アミノ基と結合する酸部分をハロゲン化スルホニルと反応させることにより混成無水物を生成し、その後その混成無水物をアミノ基と反応させることによるセファロスポリンの７−アミノ基のアシル化の方法を記載している。
しかしながら、スフィンゴシン及びその誘導体は、多数の遊離ヒドロキシル部分及び遊離アミノ基を含む多間能価化合物である。上述したように、多くの官能基を有する出発材料からの一置換された化合物の選択的合成には、１つの官能基のみを有する出発材料の反応にはない特別な複雑さがある。実際、Ong,D.とBrody,R.（（1972）J.Lipid Res.,13,819−822）は、１つよりも多い遊離ヒドロキシル基及び遊離アミノ基を有するスフィンゲニン（スフィンゴシン）及びスフィンガニン（ジヒドロスフィンゴシン）などの化合物の脂肪酸塩化物によるアシル化は、１つの遊離アミノ基及び１つの遊離ヒドロキシル部分を有する化合物と比較して選択性が欠けており、ジ−Ｏ−アシル−Ｎ−アシル化合物の生成を導き得ると教示している。Ｏ−アシル化された類似化合物が生成されると、所望の一置換されたＮ−アシルアミノアルコールを得るために、Ｏ−アシル結合を切る特別な段階が必要である。所望のＮ−アシル化された生成物の生成（ジ−Ｏ−アシル−Ｎ−化合物の付随の生成を伴わない）を促進するための、この後者の方法を改良する他の試みでは、その収率は低かった（Weiss,B.とRaizman,P.（1958）J.Amer.Chem.Soc.,80,4657−4658）。
従って、（上記の）Heymes,R.らにより記載された方法が、所望のＮ−アシル化された生成物の収率が良好である１つよりも多い遊離ヒドロキシル部分を有するアミノアルコールのアミノ基の選択的なアシル化を導くかどうかは予測できない。
発明の要約
本発明により、スフィンゴ脂質の効果的な選択的生産を導くだけでなく、アミノアルコールの遊離アミンの選択的アシル化によるＮ−アシルアミノアルコールの生産に一般に応用することができる化学的な合成の方法が提供される。
本発明により、Ｎ−アシルアミノアルコールは、有機溶媒中有機塩基の存在下において、それらの有機酸または塩をアルキルスルホニルクロリドまたはアルキルフェニルスルホニルクロリドと反応させて対応する混成無水物を形成し、その後その混成無水物をアミノアルコールまたはそれらの塩と反応させて対応するＮ−アシルアミノアルコールを形成することにより生産される。
両方の段階を同一の反応器において行い、混成無水物の中間生成物の分離の必要性を避けることができる。
本発明の方法は、大きな規模においてでも良好な収率で所望のＮ−アシルアミノアルコールを提供し、工業規模での使用に魅力的なものである。
発明の詳細な説明
本発明により、Ｎ−アシルアミノアルコールの生産法が提供され、該方法においては、まず最初の段階として次式の有機酸（またはその塩）：
Ｒ−COOH
（式中、Ｒは55個までの炭素原子を有する直鎖または枝分かれしたアルキル基であり、該アルキル鎖は、任意に酸素原子または内部のエステル基により中断されていてもよく、任意に１つまたはそれ以上の二重結合を含んでいてもよく、かつ任意に１つまたはそれ以上の保護されたヒドロキシル部分で置換されていてもよい。）
を、有機溶媒中有機塩基の存在下において、C1-6のアルキルスルホニルクロリドまたはC1-6のアルキルフェニルスルホニルクロリドと反応させて次の一般式の対応する混成無水物を形成する。
Ｒ−CO−Ｏ−SO2R'''
（式中、R'''はC1-6のアルキルまたはC1-6のアルキルフェニル基である。）
好ましい実施態様において、Ｒは10〜50個の炭素原子を有する直鎖または枝分かれしたアルキル基であり、任意に酸素原子または内部のエステル基により中断されていてもよく、任意に１つまたはそれ以上の二重結合を含んでいてもよく、かつ任意に保護されたヒドロキシル部分を有するものである。
最も好ましい実施態様において、Ｒは14〜48個の炭素原子を有する直鎖のアルキル基であり、任意に酸素原子または内部のエステル基により中断されていてもよく、任意に１つまたはそれ以上の二重結合を含んでいてもよく、かつ任意に保護されたオメガヒドロキシル部分を有するものである。
任意のヒドロキシル部分のための保護基は従来技術において周知であり、Greene,T.（1981）有機合成における保護基（John Wiley ＆ Sons;New York）に開示されたような適切な基から選択され得る。好ましい実施態様において、ヒドロキシル基はアセチルエステルまたはメトキシメチルエーテルとして保護される。
また、上記に記載した脂肪酸の塩を、本発明の方法に使用することができる。好ましい実施態様において、脂肪酸のトリエチルアンモニウム塩を使用する。
上記に記載した最初の段階に生産され得るような混成無水物を、その後、好ましくは混成無水物の生成に使用されたような同一の有機溶媒中においてアミノアルコール（またはその塩）と反応させて対応するＮ−アシルアミノアルコールを形成する。
本発明の方法によりアシル化されるアミノアルコールは、アミノ糖、スフィンゴシン、ジヒドロスフィンゴシン、フィトスフィンゴシン及びそれらの誘導体などの少なくとも１つのアミノ置換基及び１つより多くの保護されていないヒドロキシル置換基を有する種々のC2-35の直鎖または枝分かれしたアルキル鎖から選択することができる。さらに、フェニル置換基、エーテル置換基またはエステル置換基などの未反応性置換基が、当業者に決定され得るようにアミノアルコール上に存在し得る。また、不飽和結合も、アミノアルコール上に存在し得る。必要な場合には、選択されたアミノアルコールの特定の異性体を使用することができる。
好ましいアミノアルコールは、次式のものまたはそれらの塩である。
0003594962.tif 000002
0003594962.tif 000003
（式中、R'は30個までの炭素原子を有する直鎖または枝分かれしたアルキル基であり、該アルキル鎖は、任意に酸素原子により中断されていてもよく、任意に１つまたはそれ以上の二重結合を含んでいてもよく、かつ任意に１つまたはそれ以上のヒドロキシル基で置換されていてもよく、
R''はＨまたはヘキソースもしくはペントース部分などの炭水化物である（任意に、さらに炭水化物部分に結合している。）。）
本発明のより好ましい実施態様において、R'は11〜22個の炭素原子を有する直鎖または枝分かれしたアルキル基であり、R''はＨまたはグルコシルもしくはガラクトシル基である。
本発明の最も好ましい実施態様において、アミノアルコールは、スフィンゴシン、ジヒドロスフィンゴシン、フィトスフィンゴシン、グルコスフィンゴシン、グルコジヒドロスフィンゴシン、グルコフィトスフィンゴシン、ガラクトスフィンゴシン、ガラクトジヒドロスフィンゴシン、ガラクトフィトスフィンゴシン、及びそれらの塩である。これらのうち、スフィンゴシン、ジヒドロスフィンゴシン及びフィトスフィンゴシンが市場で入手可能である。ギリコシル化された類似化合物を、Schmidt,R.とZimmermann,P.（（1986）Angew.Chem.,98,722−723）、Schmidt,R.と
0003594962.tif 000004
R.（（1985）Angew.Chem.,97,60−61）、Sugiyamaら（（1990）Liebigs Ann.Chem.,1063−1068））または（上記の）Tschannenらにより記載された方法に従って容易に合成することができる。
アミン塩として、塩酸及び硫酸の塩が特に好ましい。
本発明の混成無水物の生成段階において使用するためのC1-6のアルキルスルホニルクロリド及びC1-6のアルキルフェニルスルホニルクロリドの好ましいものとして、メタンスルホニルクロリド及びｐ−トルエンスルホニルクロリドがある。最も好ましいのはｐ−トルエンスルホニルクロリドである。
本発明の方法に使用することができる有機溶媒に、塩化メチレン、トルエン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ピリジン、メチルエチルケトン、アセトン及びエーテルがある。これらの溶媒のうち、塩化メチレンが好ましい。選択されたアミノアルコールがアミノ糖である場合は、非プロトン性溶媒を使用しなければならない。
混成無水物の生成に使用される有機塩基は、好ましくはトリ−C1-6アルキルアミンなどの三級アミン及びピリジンである。好ましい三級アミンはトリメチルアミン及びトリエチルアミンである。トリエチルアミンが特に好ましい。
本発明の方法では、混成無水物の生成のために、有機酸はスルホニルクロリドに対して僅かに過剰の量存在する。好ましい実施態様において、有機酸のスルホニルクロリドに対するモル比は約1.05:1である。有機塩基のスルホニルクロリドを基準としたモル比は2:1〜3:1、好ましくは約2.5:1である。
混成無水物の生成をもたらす反応は、好適には、０℃〜30℃、好ましくは20℃〜25℃の範囲内で、約15分〜１時間半、通常は約25分〜１時間行われる。
本発明では、所望の最終生成物の生成のために、混成無水物はアミノアルコールに対して通常約1:1〜2.5:1の範囲内で過剰の量存在する。好ましい実施態様において、混成無水物のアミノアルコールに対するモル比は約1.2:1〜2:1の範囲内である。注意すべきことは、上記に記載した範囲を超える混成無水物の量により、エステルの生成（Ｏ−アシル化）が導かれ得るということである。
混成無水物と所望のアミノアルコールとの反応は、好適には、０℃〜35℃、好ましくは20℃〜30℃の範囲内で、少なくとも15分間行われる。
必要な場合には、混成無水物の生産及びその後の該無水物のアミノアルコールとの反応の両方を同一の反応器において連続的に行い、それにより混成無水物の中間体を分離する必要性を避ける。
別の方法において、三級アミンを除いた全ての反応体を共に１つの反応器中に加えることができることが判明した。その後の三級アミンの付加により、前記反応が始まる。
反応を、薄層クロマトグラフィーなどの手段により監視して、アミノアルコール出発材料の存在を測定することができる。アミノアルコールがいくらかでも未反応のままであるならば、混成無水物の付加溶液を単独に生産し、反応溶液に加えて反応を完了させ、最適な収率を得ることができる。
アミノアルコール出発材料の消耗により示されるような反応が完了したという測定が一度なされたら、最終生成物、通常は固形沈殿物を炉過などの従来の手段により反応溶液から除去する。その後、その沈殿物をリンスし、必要な場合には、クロマトグラフィー及び／または再結晶などの当業者には公知である従来の手段によりさらに精製することができる。しかしながら、α−アセトキシ誘導体は反応溶液中に残存しがちである。従って、最初に反応溶液を水で冷却及び／または抽出し、蒸発させてから、さらに精製する。
最終生成物の最終的な仕上げの前、またはその精製後のいずれかに、全ての保護されたヒドロキシル基の脱保護を（上記の）Greene,T.に記載されたような従来の方法に従って行うことができる。
本発明の方法により、Ｏ−アシル化された類似化合物の生成を伴うことなしに、良好な収率及び遊離アミノ基の一置換の良好な選択性で所望のＮ−アシルアミノアルコールが提供される。
本発明に従って有利に生産され得る数多くのＮ−アシルアミノアルコールのうちのいくつかの例に、セラミド1,2,3,4,5,6I及び6II、並びに疑セラミド（（上記の）Imokawaらにより記載されたものなど）並びにセレブロシド、ガングリオシド及びスフィンゴミエリンなどのセラミドの他の誘導体などがある。
本発明の方法の使用による費用−効果のある効果的な方法におけるそのような化合物を生産する能力により、該化合物の直接的な治療上のまたは化粧品としての使用のために該化合物を動物の組織から抽出及び分離する（費用のかかる）必要性が排除される。
あるいは、本発明に従って生産したＮ−アシルアミノアルコールを、他の反応におけるさらなる使用のための中間体として使用することができる。例えば、本発明に従って生産したセラミドを、その後、中でも、上述したグリコシル化の方法に従ってグリコシル化してセレブロシドを生産することができる。さらに、セラミド6IIは、従来技術において公知である方法に従って、セラミド6Iの合成のための出発材料として使用することができる。
以下の実施例は、通常の当業者に本発明の生産及び使用法の完全な開示及び記載を提供するためのものであり、発明者が彼らの発明に関して考えている範囲に限られるものではない。使用する数値（例えば、量、温度及びpHなど）の精度を守る努力をしてきたが、いくらかの実験誤差及び偏差は生じたであろう。他に記載がない限り、温度は摂氏温度であり、圧力は大気圧またはそれに近いものである。純度はNMR分析により測定した。他に記載がない限り、TLCはシリカを用いて行った（その溶離剤は、クロロホルム：メタノール（9:1）であり、検出は硫酸：メタノール（1:2）の溶液の吹付、その後の加熱により行った。）。
実施例１
Ｎ−オクタデカノイルフィトスフィンゴシン
Ｐ−トルエンスルホニルクロリド（1.59g、8.34mmol）を、塩化メチレン45ml及びトリエチルアミン3.1ml（22mmol）中のステアリン酸2.57g（9mmol）中の攪拌された溶液に加えた。
24℃で25分間の攪拌後、フィトスフィンゴシン塩酸−塩（2.5g、7.1mmol）を加え、その後直ちにトリエチルアミン1.3ml（9.3mmol）を加えた。その温度が、28℃まで上がったので、該混合物を24℃まで冷却した。
攪拌を１時間続け、アセトン200mlを加えた。30分間の攪拌後、沈澱物をガラス炉過器で炉過して取り除き、アセトン25ml、脱イオン水25ml/アセトン5mlの溶液、50％アセトン20ml及びアセトン15mlで連続的に洗浄した。乾燥により、ほとんど純粋な表題の化合物3.10gを得た。収率は75％だった。
実施例２
Ｎ−オクタデカノイルフィトスフィンゴシン
トリエチルアミン（TEA、63ml、0.452mol）を、塩化メチレン450ml中の97％ステアリン酸（アルドリッチ）60.33g（0.206mol）の攪拌された懸濁液に加えた。温度が（外部からの冷却なしに）22℃から14℃まで下がり、透明な溶液を得た。
Ｐ−トルエンスルホニルクロリド（Fluka、puriss.p.a.、融点67〜69℃、TsCl、37.1g、0.194mol）を加え、温度が30分で30℃まで上がった。
前記混合物を、塩化メチレン150ml及び（塩化メチレン25mlでリンスされた）TEA21ml（0.15mol）中のフィトスフィンゴシンスルフェート46.4g（104mmol、純度82％）の攪拌された懸濁液に加え、その温度は直ちに22℃から27℃まで上がり、30分後には33℃まで上がり、その１時間後には26℃まで下がり、その１時間半の間攪拌を続けた。
TLCは出発材料の痕跡を表し、追加の試薬をステアリン酸6g、塩化メチレン45ml、TEA6ml、ｐ−トルエンスルホニルクロリド3.7gから、30分で生産し、前記混合物に加えた。１時間の攪拌後、TLCはさらに出発材料を示さず、アセトン500mlを加え、該混合物を１時間で０℃まで冷却した。沈澱物を（ガラス炉過器で）炉過して取り除き、アセトン200ml及び脱イオン水（70℃）400mlで洗浄して、スルフェート（塩化バリウム／塩酸−試験）を除去し、40℃、減圧下で一晩中乾燥させて、純度83.3％（NMR）の表題の化合物69.41gを得た。
収率は95.2％だった。
実施例３
Ｎ−ヘキサデカノイルフィトスフィンゴシン
Ｐ−トルエンスルホニルクロリド（3.73g、19.65mmol）を、塩化メチレン45ml及びトリエチルアミン6.34ml中のヘキサデカン酸5.44g（19.15mmol）の攪拌された溶液に加えた。
25℃で25分間の攪拌後、上記の混合物を塩化メチレン15ml及びトリエチルアミン2.1ml中のフィトスフィンゴシンスルフェート4.68g（11.5mmol）（純度82％）を含む予め調製された、攪拌された懸濁液に加えた。
攪拌を１時間続け、前記混合物を20℃まで冷却し、ガラス炉過器で炉過した。固形物を塩化メチレン20ml、アセトン10ml、及び脱イオン水（40℃）50mlで洗浄し、乾燥して、純度90.3％の材料5.53gを得た。収率は85.6％だった。
実施例４
Ｎ−（２−（R,S）−ヒドロキシ−オクタデカノイル）フィトスフィンゴシン
a.  Ｎ−（２−アセトキシ−オクタデカノイル）フィトスフィンゴシン
Ｐ−トルエンスルホニルクロリド23.5g（123mmol）を塩化メチレン500ml及びトリエチルアミン55ml（395mmol）中の２−アセトキシ−オクタデカン酸44.5g（130mmol）の攪拌された溶液に加えた。
21℃で40分間の攪拌後、フィトスフィンゴシン30g（94.6mmol）を加えた。
攪拌を２時間半続け、脱イオン水250mlを加え、該混合物を35℃で攪拌して、その生成物の沈澱を防止した。有機層を35℃の脱イオン水250mlで洗浄し、蒸発させ、酸化アルミニウム活性III（ICN Biochemicals）550gで精製して粗製の材料60gを得た。
b.  Ｎ−（２−（R,S）−ヒドロキシ−オクタデカノイル）フィトスフィンゴシン
Ｎ−（２−アセトキシ−オクタデカノイル）フィトスフィンゴシン35.62g（55.4mmol）、96％エタノール250ml及び6.18M水酸化ナトリウム20mlの混合物を1.5時間攪拌した。追加の6.18M水酸化ナトリウム5mlを加え、攪拌を１時間続けた。
沈澱物を（ガラス炉過器で）炉過して取り除き96％エタノール100ml及び脱イオン水で洗浄した。湿った生成物を熱い96％エタノール（熱いうちに炉過された）350mlから再結晶化させて、純度93.6％（NMRにより測定）の材料27.12gを得た。TLCは分離スポットとして２種のジアステレオ異性体を示した。収率は81.5％だった。
実施例５
Ｎ−（２−メトキシメトキシ−オクタデカノイル）フィトスフィンゴシン
ｐ−トルエンスルホニルクロリド（3.8g、19.9mmol）を塩化メチレン100ml及びトリエチルアミン9ml中の２−メトキシメトキシ−オクタデカン酸7.23g（21.0mmol）の攪拌された溶液に加えた。23℃で30分間の攪拌後、フィトスフィンゴシンスルフェート（純度82％）（4.9g、12.05mmol）を加え、その後直ちにトリエチルアミン5mlを加えた。
30分間の攪拌後、脱イオン水100mlを加え、有機層を分離し、脱イオン水で洗浄した。前記溶媒を減圧下で除去し、その残留物を溶離剤として2.5％メタノールを加えたクロロホルムを用いて酸化アルミニウム活性III（ICN Biochemicals）150gで精製した。表題の化合物を含むフラクションを合わせ、酸化アルミニウムで再び精製して、２種のジアステレオ異性体（TLC、NMR）の混合物である生成物4.95gを得た。収率は64％だった。
実施例６
Ｎ−テトラコサノイルフィトスフィンゴシン
ｐ−トルエンスルホニルクロリド（0.77g、4.03mmol）を塩化メチレン40ml及びトリエチルアミン2ml（14.4mmol）中のテトラコサン酸（Janssen Chimica）1.55g（4.2mmol）の攪拌された溶液に加えた。
24℃で40分間の攪拌後、フィトスフィンゴシン（1.0g、3.15mmol）を加えた。攪拌を２時間続けた。沈澱物を（ガラス炉過器で）炉過して取り除き、25ml容量の塩化メチレン、50％メタノール及び脱イオン水で連続的に洗浄した。乾燥後、粗製の表題の化合物を得た。これは、テトラコサン酸及び／またはテトラコサン酸無水物で汚染されていることがわかった（赤外−スペクトル）。汚染物を溶離剤としてクロロホルム：メタノール（19:1）を用いて酸化アルミニウム活性IIIで精製すること、及び熱いエタノールからの再結晶により除去した。
実施例７
Ｎ−（α−ヒドロキシ−テトラコサノイル）フィトスフィンゴシン
a.  （R,S）−２−ブロモ−テトラコサン酸
テトラコサン酸（Janssen Chimica）5.2g（14.1mmol）、三塩化リン0.4ml及び臭素4mlの混合物を油浴中で75℃まで加熱しながら攪拌した。
３時間後、僅かな減圧を施して、HBr及び臭素を除去し、無色の油を得た。これを脱イオン水50mlに流し込み、攪拌した。大きな塊を機械的に粉砕した。固形物を（ガラス炉過器で）炉過して取り除き、脱イオン水で洗浄し、乾燥してほとんど純粋な表題の化合物6.7gを得た。
b.  （R,S）−２−ヒドロキシ−テトラコサン酸
テトラコサン酸18.5gから生産した粗製の湿った２−ブロモ−テトラコサン酸を脱イオン水250ml、水酸化ナトリウム10g及び（溶解度を改良するための）イソプロパノール15mlと混合し、４時間還流させた。
前記混合物を室温で一晩中攪拌し、36％塩酸25mlで酸性にした。前記混合物をしばらくの間蒸気浴で加熱して、炉過段階を改良した。
沈殿物を（ガラス炉過器で）炉過して取り除き、脱イオン水で洗浄した。湿った材料をヘキサン200mlと共に加熱し、その水性の層を吸込みにより除去した。前記ヘキサン層を熱いうちに炉過して、冷却した。沈殿物を炉過器から除去し、ヘキサンで洗浄し、乾燥して、表題の化合物14.14gを得た。
c.  （R,S）−２−アセトキシ−テトラコサン酸
２−ヒドロキシ−テトラコサン酸0.39g、ピリジン1ml及び無水酢酸1mlの混合物を室温で１時間半攪拌した。
その後、脱イオン水（10ml）を慎重に加えた。水浴（室温）において冷却している間、前記混合物をクロロホルムを用いて酸性にし、抽出した。抽出物を1M塩酸で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、（ガラス炉過器で）炉過し、蒸発させて、固形物0.42gを得た。固形物を熱いヘキサン5mlから結晶化させて、少量の出発材料及びα−ブロモ化合物で汚染された表題の化合物312mgを得た。
d.  Ｎ−（α−アセトキシ−テトラコサノイル）フィトスフィンゴシン
ｐ−トルエンスルホニルクロリド（36mg、0.188mmol）を塩化メチレン2ml及びトリエチルアミン0.1ml（0.72mmol）中の２−アセトキシ−テトラコサン酸（86mg、0.2mmol）の攪拌された溶液に加えた。
45分間の攪拌後、フィトスフィンゴシン（40mg、0.126mmol）を加え、攪拌を１時間続けた。
その後、前記混合物を溶離剤としてクロロホルム：メタノール（19:1）を用いて酸化アルミニウム活性III（ICN Biochemicals）6gでクロマトグラフィーにかけて、固形物である表題の化合物58mgを得た。収率は63.5％だった。
e.  Ｎ−（α−ヒドロキシ−テトラコサノイル）フィトスフィンゴシン
水酸化ナトリウム（0.08ml、6.18M）を、96％エタノール3ml中のＮ−（α−アセトキシ−テトラコサノイル）フィトスフィンゴシン58mgの攪拌された溶液に加えた。１時間半後、追加の6.18M水酸化ナトリウム（0.05ml）を加え、攪拌を30分間続けた。
沈殿物を（ガラス炉過器で）炉過して取り除き、エタノールと脱イオン水で洗浄し、乾燥して、表題の化合物34mgを得た。
TLCは分離スポットとして２種のジアステレオ異性体を示した。
実施例８
Ｎ−オクタデカノイルフィトスフィンゴシン
全部で9.2lのトリエチルアミン（66mol）を塩化メチレン66l中のオクタデカン酸8.9kg（30.2mol）の懸濁液に加えた。溶液が透明になった後、ｐ−トルエンスルホニルクロリド5.45kg（28.5mol）を加え、該溶液を30分間攪拌した。
上述した溶液をできる限りすばやく塩化メチレン20l及びトリエチルアミン2.8l（20mol）中のフィトスフィンゴシンスルフェート（純度82％）6.2kg（13.9mol）の懸濁液に加えた。
攪拌を１時間半続け、前記反応をTLCにより監視した。必要な場合には、付加的に生産された（上記で記載したように生産された）混成無水物の溶液を加えることができる。
反応が完了したという測定の後、混合物を１時間で０℃まで冷却した。沈殿物を炉過して取り除き、アセトンで洗浄した。その後、沈殿物を水（40℃）27lでリンスし、減圧（40℃）下で一晩中乾燥した。表題の化合物9.7kgを回収した（収率86％）。その後、この生成物を、温かいエタノール62lから結晶化した。表題の化合物7.8kgを回収した（収率97.5％）。
実施例９
Ｄ−トレオ−Ｎ−オクタデカノイル−１−ｐ−ニトロフェニル
ｐ−トルエンスルホニルクロリド（1.94g、10.17mmol）を塩化メチレン35ml及びトリエチルアミン3.6ml中のステアリン酸3.05g（97％、10.5mmol）の攪拌された溶液に加えた。
20℃で30分間の攪拌後、Ｄ−（−）−トレオ−１−ｐ−ニトロフェニルー２−アミノ−1,3−プロパンジオール2g（9.42mmol）を加え、攪拌を２時間続けた。
混合物を脱イオン水（２×25ml）で洗浄し、抽出物を蒸発させ、その残留物をメタノールから結晶化して純度86％（NMR）の表題の化合物3.48gを得た。母液は、約0.5gより多くの材料を含んでいた。TLC（シリカ、溶離剤＝クロロホルム：メタノール＝9:1、検出＝50％硫酸中の５％K2CrO7）及びNMR分析により測定したところ、生成物中にはＯ−アシル化された生成物は全く見つからなかった。