(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
３−（２−クロロエチル）−２−（クロロエチルアミノ）−テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサザフォスフォリン−２−オキシド（イフォスファミド）の各重量に対して約０．３から５重量部の尿素を含むことを特徴とする熱安定性と保存性に優れた凍結乾燥組成物。
【請求項２】
イフォスファミド１重量に対して約０．８から１．５重量の尿素から成る請求項１記載の凍結乾燥組成物。
【請求項３】
イフォスファミド１重量に対して約０．１から１重量の２−メルカプトエタンスルフォン酸ナトリウム（メスナ、ｍｅｓｎａ）を更に含む請求項１および請求項２記載の凍結乾燥組成物。
【請求項４】
投与時に希釈液で再構成して希望のイフォスファミド濃度の溶液を得るのに十分な大きさの容器に、請求項１記載の凍結乾燥組成物を入れてある１投与単位の配合剤。
【請求項５】
凍結乾燥組成物がおおよそイフォスファミド１ｇと尿素１ｇから成る請求項４記載の１投与単位の配合剤。
【請求項６】
凍結乾燥組成物がおおよそイフォスファミド３ｇと尿素３ｇから成る請求項４記載の１投与単位の配合剤。
【請求項７】
凍結乾燥組成物がイフォスファミド１ｇあたり約１００ｍｇから１ｇのメスナを含む請求項５および請求項６記載の１投与単位の配合剤。
【請求項８】
イフォスファミド１重量に対して主に尿素である賦形剤０．３から５重量を含む水溶液を約−４０℃で凍結し、約−４０℃から約＋２８℃の温度と約０．７から０．１トルの圧力下で、非吸着結合した水と吸着結合した水を昇華作用により除去し、熱安定性と保存性に優れた凍結乾燥組成物を調製する方法。
【請求項９】
凍結させる水溶液がイフォスファミド１重量あたり約０．１から１重量の２−メルカプトエタンスルフォン酸ナトリウムを更に含む請求項８記載の方法。
【請求項１０】
該組成物が、投与用の溶液を得るため、イフォスファミド１ｇあたり約２０ｍｌの希釈液で再構成される請求項５、請求項６、または請求項７記載の１投与単位の配合剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、これまでに開示されている医薬組成物や医薬凍結乾燥物の特性を改良した、凍結乾燥イフォスファミド組成物の発明に関するものである。
【０００２】
イフォスファミド、化学名３−（２−クロロエチル）−２−（クロロエチルアミノ）−テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキサザフォスフォリン−２−オキシドは、オキサザフォスフォリン系アルキル化細胞増殖抑制性抗腫瘍剤の１種である。イフォスファミドは、１９７３年５月８日に公表された米国特許３，７３２，３４０においてアーノルド（Ａｒｎｏｌｄ）らが開示、請求した一連の細胞増殖抑制性化合物の中に含まれる。
【０００３】
イフォスファミドは１０重量％よりやや過剰量、水に溶解する。しかしその水溶液は、室温で保存した場合、数日間しか安定でない。イフォスファミドの無水物は白色結晶状粉体であり、４８℃から５１℃の範囲で融解する。無水物の固体は吸湿性があるだけでなく、融点よりも低い温度で半融するため、薬物を熱と湿度から保護する必要がある。イフォスファミド薬物の他の物質特性に由来するさらなる問題点に直面し、医薬組成物の改良や、製法改良が開示されてきた。
【０００４】
【従来の技術】
エンゲル（Ｅｎｇｅｌ）らにより１９８９年１１月２１日に公表された米国特許４，８８２，４５２では、特別な性質をもつ結晶性イフォスファミドとその製法を請求している。この形のイフォスファミドは優れた乾燥流動性をもつため、無水物形の薬物をバイアルに詰める工程が改善される。
【０００５】
米国特許４，９５２，５７２においてサウアーバイアー（Ｓａｕｅｒｂｉｅｒ）らは、水で希釈する非経口投与用イフォスファミドの濃厚非水溶液の密閉バイアル類を開示している。
【０００６】
イフォスファミドのこれらの固体形や溶液形は長期間保存できないという問題点があるため、イフォスファミドの注射溶液を調製するのに特に適した、保存性に優れた凍結乾燥配合剤がこれまで開示、請求されている。
【０００７】
１９８８年５月４日に公表された欧州特許出願２６５，８１２において、サウアーバイアー（Ｓａｕｅｒｂｉｅｒ）らは、凍結乾燥したイフォスファミド／ヘキシトール組成物を開示している。この凍結乾燥物は、バイアルに詰めたものを再構成する際、乾燥した結晶性イフォスファミドよりも優れていると請求している。凍結乾燥組成物の中で、マンニトールは望ましいヘキシトール成分とされている。さらに、米国特許４，９５９，２１５において、サウアーバイアー（Ｓａｕｅｒｂｉｅｒ）らは尿保護剤として働くメスナ（ｍｅｓｎａ）を追加して含む凍結乾燥イフォスファミド／ヘキシトール組成物を開示、請求している。ここでも望ましいヘキシトールは、マンニトールとされている。
【０００８】
それより前の米国特許４，５３７，８８３において、アレキサンダー（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ）らは、オキサザフォスフォリンシクロフォスファミドから成る水和マンニトール凍結乾燥物を開示、請求している。尿素は、これらの組成物の第一賦形剤として不適当であると開示している。最近、アラム（Ａｌａｍ）らは、米国特許５，０３６，０６０において、マンニトールを含まず、塩化ナトリウムを第一賦形剤としたシクロフォスファミドの凍結乾燥配合剤を開示、請求している。
【０００９】
本発明の凍結乾燥組成物はイフォスファミドと尿素、そして任意に２−メルカプトエタンスルフォン酸ナトリウム（メスナ、ｍｅｓｎａ）から成り、乾燥イフォスファミド粉体やイフォスファミドの非水濃厚溶液やイフォスファミドの以前の凍結乾燥組成物に比べ、優れた安定性、優れた溶解性、優れた外観をもつ。第一賦形剤として尿素を使用すると、他の賦形剤、特にヘキシトールを使用するときに比べ、イフォスファミド凍結乾燥物の安定性が増大するのは予想外のことであった。米国特許４，５３７，８８３において、アレキサンダー（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ）らは、マンニトールは、尿素や他のほとんどの薬物賦形剤に比べ、シクロフォスファミド凍結乾燥組成物中の第一賦形剤として優れていると報告している。それに非常に関連して、サウアーバイアー（Ｓａｕｅｒｂｉｅｒ）らはイフォスファミド凍結乾燥組成物中の第一賦形剤としてヘキシトール、特にマンニトールが好ましいと開示している。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明は、イフォスファミドを含む改良固体医薬組成物類に関するものである。これらの改良組成物類は、尿素を第一賦形剤として含む凍結乾燥物である。尿保護剤であるメスナ（ｍｅｓｎａ）も、この改良凍結乾燥物に含めることができる。これらの改良凍結乾燥組成物は、これまで開示されてきた他の凍結乾燥組成物などのイフォスファミド組成物類に比べ、特に高い温度下で、保存に対して優れた熱安定性、優れた溶解性、優れた外観を示す。第一賦形剤に尿素を使用すると凍結乾燥組成物が改良されることは、特にイフォスファミドに関連したこれまでの報告やオキサザフォスフォリンシクロフォスファミドに関する我々の以前の研究結果からは、予想できない。改良イフォスファミド／尿素凍結乾燥物を調製する方法は、凍結乾燥したイフォスファミドの化学的安定性を最大にするように、開発された。
【００１１】
本発明の治療活性のある化合物イフォスファミドは、よく知られ、そして広く使用されている抗癌薬である。イフォスファミドは癌治療の分野では有用な薬剤であるが、その物理化学的特性に由来するいくつかの問題点がある。特に、製造、船輸送、保存、再構成のときに、イフォスファミドの吸湿性と高湿度下での潮解性が問題となる。これらいずれの段階においても、イフォスファミドを室温やそれ以下の温度に保ち、比較的低い湿度で行わなければならない。イフォスファミド溶液は、主にイフォスファミド分子を分解する溶媒の作用のため、不安定である。生成物の溶液に非水溶媒（加水分解を起こさない溶媒）を使用すると、非経口投与用の最終溶液にその溶媒が入るため、複雑になり、また安全性の問題も残る。
【００１２】
オキサザフォスフォリン類の凍結乾燥医薬組成物をアンプルや密閉バイアルに入れると、以前のこれらの抗癌剤の医薬組成物に比べ、改良されたものとなる。凍結乾燥の工程を取り入れると、バイアル中に入った固体オキサザフォスフォリン組成物を再構成して無菌溶液を得ることが容易になる。さらに、凍結乾燥した組成物は、以前の固体配合剤に比べ、保存安定性と溶解性が向上する。本発明の凍結乾燥組成物は、以前のイフォスファミド凍結乾燥配合剤やイフォスファミドとメスナ（ｍｅｓｎａ）との組み合わせ凍結乾燥配合剤に比べ、高温下における物理的および化学的な安定性と保存期間の点において、予期しない改善を示す。
【００１３】
本発明は、凍結乾燥したイフォスファミド医薬組成物において物理学的特性、特に保存性と温度安定性を向上させることができるか否かを確認するために着手した仕事の結果である。この研究の最初の段階は、さまざまなイフォスファミド／賦形剤組成物を凍結乾燥して得られる凍結乾燥ケーキの安定性評価試験である。これらを評価するため、凍結乾燥ケーキのもともとの形、収縮性、再融解性、着色、均等性、形態、堅さ、結晶性などの特性を調べた。その後、溶解速度、溶解の完全性、得られた溶液の特性（例えば澄明度や色）等、凍結乾燥ケーキの溶解特性を調べた。
【００１４】
この研究の第二段階は、最初の評価試験の結果に基づいて選択した組成物についての、短期での加速安定性試験である。第一段階の試験はしたが、第二段階の評価に進まなかった賦形剤には、乳糖、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、デキストロース、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、酒石酸がある。第二段階の安定性試験には、マンニトール、グリシン、尿素を第一賦形剤とする凍結乾燥組成物を選択した。マンニトールやグリシンを第一賦形剤とする凍結乾燥組成物は、４０℃で行われた短期での安定性試験中に黄変し、効力が減少した。室温（２４℃から２７℃）中で行われた試験では、マンニトールやグリシンを含む凍結乾燥組成物の化学的および物理的安定性は、約３９週間維持された。１年間保存すると、マンニトールやグリシンを含む凍結乾燥組成物は黄変した。尿素を第一賦形剤とする凍結乾燥組成物では、試験したすべての条件において、保存中の黄変や効力の顕著な減少はみられなかった。
【００１５】
マンニトールやグリシンを含む凍結乾燥物に比べ、尿素／イフォスファミド凍結乾燥物が優れた安定性をもつことは、これらの凍結乾燥物が外観や効力に大きな変化を起こすことなく６０℃で３か月間保存することができることを予想外にも発見したときに、明らかになった。６０℃という温度はイフォスファミドの融点より１０℃も高い温度であるため、このことは非常に驚くべきことである。それに対して、マンニトールやグリシンを含む凍結乾燥組成物は、イフォスファミドの融点より１０℃も低い４０℃において、大きな物理的変化と効力の減少を示した。比較検討したところ、イフォスファミドと尿素をほぼ等しい重量比で含む本発明の望ましい凍結乾燥組成物は、３５℃で少なくとも１年間、４０℃で２６週間保存しても、本質的に不変であった。
【００１６】
本発明の改良イフォスファミド凍結乾燥組成物は、外観が変化することなく、優れた溶解性を保ったまま、熱安定性および保存安定性が向上している。一般に、これらの改良組成物は、イフォスファミドの１重量に対して、約０．３から５重量の尿素から成る。望ましい組成物は、イフォスファミド１重量に対して約０．８から１．５重量の尿素から成り、最も望ましい組成物は、ほぼ等しい重量比の尿素とイフォスファミドから成る。
【００１７】
これらの改良尿素／イフォスファミド凍結乾燥組成物は、他の賦形剤物質や他の常套的薬物添加物を少量加えたり、毒性除去剤であるメスナ（ｍｅｓｎａ）を尿保護量加えたりして、部分的に変更することができる。
【００１８】
メスナ（ｍｅｓｎａ）は、化学名２−メルカプトエタンスルフォン酸ナトリウムである。この観点で、イフォスファミド１重量に対して約０．１から１重量のメスナ（ｍｅｓｎａ）と０．３から５重量の尿素から成る凍結乾燥組成物は、本発明の一部と考えることができる。
【００１９】
本発明の他の一面は、尿素／イフォスファミド凍結乾燥組成物を調製するために使用する、緩慢な凍結乾燥法に関するものである。この方法を用いると、以前の尿素／オキサザフォスフォリン凍結乾燥組成物にみられたような凍結乾燥ケーキの収縮を、最小限に抑えることができる。これらの改良凍結乾燥組成物は収縮が制御されており、黄変していないため、薬物生成物の外観が優れている。これらの改良尿素凍結乾燥組成物を生産する際、真空乾燥する前の溶液を凍結するときの速度を制御すると、以前の尿素凍結乾燥物でみられたような収縮の問題を最小限に抑えることができることがわかった。優れた外観の尿素凍結乾燥組成物を調製するために使用する特別な凍結乾燥法は、以下の具体例に記載する。
【００２０】
本発明の改良凍結乾燥組成物は、イフォスファミドと尿素、そして任意に、それより少ない量の他の薬物賦形剤やメスナ（ｍｅｓｎａ）とを、適当量の水に溶解して調製する。これらの水溶液は、水の容量に対して４．０から１０．０重量％のイフォスファミドと、水の容量に対して１．２から２０．０重量％の尿素から成る。水の容量に対して０．４から４．０重量％のメスナ（ｍｅｓｎａ）を任意に含めることもできる。さらに、それより少ない量の賦形剤、緩衝剤、防腐剤、あるいはそれと類似の他の薬学的に有用な付加物質を溶液に加えることもでき、本発明の範囲から外れない。水は溶液の望ましい溶媒であるが、アルコール類やその他の薬学的に利用できる溶媒を使用することもできる。
【００２１】
凍結乾燥する前の溶液を、微生物を通さないフィルターと濾過圧のための窒素ガスを用い、通常の方法で濾過して精製する。その後、濾過滅菌した溶液を適当な大きさの滅菌容器に無菌的に詰め、投与のときに水を再構成して希望の容量の望ましいイフォスファミド濃度の溶液が得られるようにする。通常はバイアルを使用し、１バイアルあたり１．０ｇあるいは３．０ｇのイフォスファミドを含む量の溶液を詰める。
【００２２】
溶液を詰め終わったら、バイアルを皿に載せ、バイアルの上部に凍結乾燥ストッパーを置き、凍結乾燥機のチャンバー内の棚で約−４０℃で凍結する。その後、凍結した溶液を以下に記載する方法で凍結乾燥する。まず、棚の温度を約０℃に設定し、コンデンサーの温度を約−６０℃あるいはそれ以下にして真空を約０．５トル（ｔｏｒｒ）に保つ。初期乾燥が完結した（通常、約２４から４８時間）後、棚の温度を約２５℃から２８℃に上げ、チャンバーの真空を約０．１ｔｏｒｒあるいはそれ以下に下げる。凍結乾燥物の残存水分量がイフォスファミドが化学的に安定化する量に減少するまで、これらの条件での凍結乾燥を続ける。通常、二段階目の乾燥は、さらに２４時間から３６時間を必要とする。
【００２３】
市場に出す典型的なイフォスファミド／尿素凍結乾燥組成物やイフォスファミド／尿素／メスナ（ｍｅｓｎａ）凍結乾燥組成物は、１単位あたりイフォスファミドを約５００ｍｇから５ｇ、望ましくは約１ｇから３ｇ含む。凍結乾燥物１投与単位に含まれるメスナ（ｍｅｓｎａ）の量は、約１００ｍｇから３ｇである。より大きな投与形の改良イフォスファミド／尿素凍結乾燥組成物も可能であり、本発明のさらなる具体例となる。その後、適当な容器（通常はバイアル。アンプル、シリンジ、あるいはその他のよく使用される容器でもよい）に入った上記イフォスファミド凍結乾燥組成物の投与形を、再構成したり、任意に静脈注射液や非経口溶液に加えることもできる。適当な容器とは、例えばストッパーを用いて密閉できるバイアルのように、無菌状態を保つことができる容器を意味している。さらに、適当な容器とは、改良イフォスファミド凍結乾燥組成物を再構成した後の溶液の量を考慮した、適当な大きさの容器を意味している。これらの容器は通常ガラス製（一般にタイプＩガラス製）であるが、凍結乾燥物の成分と相互作用しないその他の適当な物質の製品でもよい。クローザーは通常ストッパーであり、滅菌したゴム製ストッパーあるいは密閉することができる同等なストッパーが望ましく、イフォスファミド溶液に再構成するときに希釈液（例えば滅菌水）を入れることができるようなものにする。改良イフォスファミド凍結乾燥組成物を含む望ましい投与形は、約１０から２５０ｍｌ、望ましくは約２５から１００ｍｌの容量のバイアルである。より大きな投与形やより小さな投与形でも、本発明の一部に含まれることを理解する。
【００２４】
本発明のイフォスファミド／尿素凍結乾燥組成物やイフォスファミド／尿素／メスナ（ｍｅｓｎａ）凍結乾燥組成物は、注射用水（米国薬局方）のような一般的な希釈液で再構成し、非経口投与望ましくは静脈内投与のための適当なイフォスファミドあるいはイフォスファミド／メスナ（ｍｅｓｎａ）の溶液を得ることを意図している。
【００２５】
イフォスファミド凍結乾燥物の代表的なバイアルについて、安定性試験を行った。本発明の改良尿素／イフォスファミド凍結乾燥組成物のサンプルを、第一賦形剤としてグリシンやマンニトールを使用した凍結乾燥組成物と比較した。マンニトール／イフォスファミド組成物は、サウアーバイアー（Ｓａｕｅｒｂｉｅｒ）らが米国特許４，９５９，２１５で記載した性質を示した。表１を見るとわかるように、尿素／イフォスファミド凍結乾燥組成物は、対照組成物に比べて保存安定性が明らかに向上している。
【表１】
0003576180.tif 000002
【００２６】
さらに、尿素とイフオスファミドの重量比が１：１である最も望ましい凍結乾燥組成物のバッチについて、対照の凍結乾燥物（賦形剤としてマンニトールやグリシンを含む）では含有物が使用できなくなるような厳しい条件で、試験を行った。これらのより厳しい試験は、凍結乾燥物を６０℃（イフォスファミドの融点よりも１０℃高い温度）で１２週間保存するものである。表２に示したように、改良凍結乾燥組成物は、初期効力の９５％以上を保持した。凍結乾燥ケーキは、これらの加速条件下でも白色のままで、ケーキの収縮は観察されなかった。
【表２】
0003576180.tif 000003
【００２７】
上記の開発研究の目標は、改良凍結乾燥組成物が優れた特性を示し、保存期間と熱安定性が顕著に向上したために成し遂げられたことがわかる。イフォスファミドの融点より１０℃も高い６０℃においても、本発明の凍結乾燥組成物は、外観、溶解速度、薬効がほとんど変化しなかった。
【００２８】
【実施例】
以下の実施例では、本発明の改良尿素／イフォスファミド凍結乾燥組成物および尿素／イフォスファミド／メスナ（ｍｅｓｎａ）凍結乾燥組成物を調製するための詳細な方法を記載している。この明細の開示目的や開示意図から外れることなく、方法や材料物質にさまざまな変更を行うことができることは、当業者には明らかになる。上記の開示や以下の実施例を見れば、当業者は本発明を充分に利用することができると考えられる。
【００２９】
実施例１
通常、イフォスファミド（２５０ｇ）と尿素（２５０ｇ）を注射用水２．５リットルに溶解して水溶液を調製する。溶液の最終容量を３リットルにするために、さらなる注射用水を加える。得られた溶液をまず滅菌プレフィルターを通過させた後、ポアサイズ０．２ミクロンの滅菌膜フィルターを通過させる。その後、得られた滅菌溶液を、３０ｍｌのガラス製滅菌バイアルに無菌的に詰める。それぞれのバイアルに溶液１２ｍｌ（イフォスファミド１ｇ当量を含む）を詰めた後、滅菌ゴム製ストッパーを無菌的に凍結乾燥機の上部に挿入する。バイアルを適当な凍結乾燥装置内に置き、約−４０℃の温度で冷却（棚凍結）する。
【００３０】
その後、凍結乾燥機のコンデンサーを約−６０℃あるいはそれ以下に冷却し、凍結乾燥機のチャンバーの圧力を約０．５トル（ｔｏｒｒ）（０．３から０．７の範囲）に下げる。棚の温度を約０℃に設定し、乾燥工程を開始する。初期乾燥を約２４時間から４８時間行った後、棚の温度を上げ、生成物の温度を２５℃位にする。その後、最終生成物の温度が約２５℃から２８℃、チャンバーの圧力が０．２トル（ｔｏｒｒ）以下になるまで、凍結乾燥を続ける。凍結乾燥の総時間は装置の能力によって変化するが、一般に約７２時間から９６時間の範囲にある。凍結乾燥工程が完結した後、滅菌した空気や滅菌した窒素を無菌的に導入し、真空を解除する。ここで、棚を機械的に折りたたむことにより、凍結乾燥ストッパーを無菌的にバイアルに装着し、バイアルを閉じる。その後、バイアルを凍結乾燥機から出し、適当なアルミニウムシールで密閉する。
【００３１】
上の例では、最も望ましい組成物（ほぼ等しい重量比のイフォスファミドと尿素とから成る）と、その製法を記載している。イフォスファミド１重量に対して約０．３から５重量の尿素から成る本発明の他の組成物も同様な方法で製造することができるが、薬物と尿素の割合によってはその溶解性に限界があるため、１ｇのイフォスファミドから成る凍結乾燥物を得るために容器に詰める溶液の容量が大きくなり、もっと大きな容器が必要になることがある。
【００３２】
実施例２
イフォスファミド３ｇを含む凍結乾燥物（ほぼ等しい重量比のイフォスファミドと尿素とから成る）も同様な方法で製造することができるが、初期凍結乾燥溶液の容量が約３６ｍｌになるため、容器の大きさ（バイアルの大きさ）を約６０ｍｌから１００ｍｌにしなくてはならない。さらに、溶液の容量が大きくなるため、凍結に必要な時間が若干長くなる。凍結乾燥機の条件は実施例１に記載したものと同じであるが、凍結乾燥の総時間は、一般に、９６時間から１２０時間の範囲となる。ストッパーの装着とバイアルの密閉は、１ｇの大きさのときと同じである。
【００３３】
実施例３
実施例１と実施例２に記載した組成物に、より少ない量の緩衝剤、防腐剤、少量の副賦形剤、あるいはそれらと類似の他の薬学的に有用な付加物質を加えることもでき、本発明の範囲から外れない。さらに、本発明の改良凍結乾燥組成物に、イフォスファミド１重量に対して０．１から１．０重量のメスナ（ｍｅｓｎａ）を加えることもできる。メスナ（ｍｅｓｎａ）を含む組成物の製造は、基本的に上記と同一の方法で行われる。