(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化１の一般式（１）で表わされるヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体。
【化１】
0003568578.tif 000023
【請求項２】
下記化２の一般式（１）で表わされるヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体を有効成分とする殺菌剤。
【化２】
0003568578.tif 000024
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、殺菌効果に優れる新規なヨノン骨格を有するチオシアナート化合物並びにそれらを含有する殺菌剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
香辛料に含まれるテルペノイドは古くから微生物に対して抗菌作用があることが知られていた。近年、植物からテルペノイドを分離精製する技術が高まり、多数のテルペノイドが天然物からの抽出により、または合成によって製造され、食品添加物として使用されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
現在、使用されている主なテルペノイドの抗菌活性を表１に示す。
【表１】
0003568578.tif 000002
いずれも食品添加剤として使用されているため、細菌に対する抗菌効果が主目的である。
また、本発明が提供しようとするようなヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体及びその抗菌活性についての報告はない。
【０００４】
本発明の目的は、細菌のみならず糸状菌を含めて広範囲の微生物に抗菌活性を有する生理活性化合物を見い出すことにある。
さらに本発明の目的は、これらの化合物を使用し、低濃度で広範囲の微生物に対して有効で、さまざまな用途に使用できる殺菌剤を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するため、本発明によれば、下記化３の一般式（１）で表わされるヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体、すなわち、４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナート（以下、本発明化合物Ａと略称することもある）及び４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナート（以下、本発明化合物Ｂと略称することもある）が提供される。
【化３】
0003568578.tif 000003
さらに本発明によれば、上記一般式（１）で表わされる本発明化合物Ａ及び／又はＢを有効成分とする殺菌剤も提供される。
【０００６】
【発明の作用及び態様】
本発明者らは、種々のテルペノイドを出発物質として各種化合物を合成し、各種微生物に対する抗菌活性を調査した結果、ヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体が細菌のみならず糸状菌を含めて広範囲の微生物に対して優れた抗菌活性を有することを見い出し、本発明を完成するに至ったものである。
上記本発明化合物は、低濃度で広範囲の微生物に対して有効であり、殺菌剤、消毒薬などとして種々の用途に使用できる。また、本発明化合物は、所望により塗膜形成剤、保湿剤、ｐＨ調整剤、防錆剤、乳化剤、分散剤、展着剤、安定剤、溶剤、酸化防止剤、噴射剤、揮散調整剤などを添加して、油剤、乳剤、水和剤、噴霧剤、エアゾール剤、燻煙剤、塗布剤、電気蒸散剤、粉剤、粒剤などの形態で使用することができる。
【０００７】
以下、本発明化合物の合成方法及び各種効力試験を示して本発明についてさらに具体的に説明する。
合成方法：
まず、本発明に係るヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体の一般的な合成方法について概説すると、下記化４の反応式（２）に示すように、まず、出発物質のα−ヨノン（ａ）のオキシム化（ｂ）を行い、次いでオキシムの還元によって対応するアミン（ｃ）を得、これにチオシアン酸クロロメチルを反応させることによって本発明化合物Ａ（４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナート）が得られる。
【化４】
0003568578.tif 000004
【０００８】
一方、出発物質としてβ−ヨノン（ａ′）を用いると、それに対応して下記化５の反応式（３）に示すように、上記α−ヨノンを用いた場合と同様にオキシム（ｂ′）及びアミン（ｃ′）を経て本発明化合物Ｂ（４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナート）が得られる。
【化５】
0003568578.tif 000005
なお、本発明化合物の合成が前記合成経路に限定されるものでないことは勿論である。
【０００９】
【実施例】
以下、前記本発明化合物Ａ及びＢの具体的な合成例を示す。
【００１０】
実施例１（本発明化合物Ａの合成例）
前記反応式（２）に示す合成経路により、以下の手順に従って本発明化合物Ａを合成した。
（ａ）試料の調製：
α−ヨノン（ａ）は市販品（和光純薬工業（株）製）を使用した。その物性は下記のとおりである。
沸点：１３０．０℃／１３ｍｍＨｇ、密度ｄ＝０．９２９８（ｇ／ｍｌ）、
屈折率ｎ＝１．５０４１、ＧＬＣ純度：９５％
分析方法：
入手した反応油は、必要に応じて蒸留、あるいはオープンカラムクロマトグラフィー（充填剤：和光純薬工業（株）製、ワコーゲルＣ−２００、φ１８ｍｍ×３００ｍｍ）で分取し、精製した。
単離精製した物質の構造決定には、ＩＲ（日本分光工業（株）製、ＩＲ−８１０型）及び  １Ｈ−ＮＭＲ（日本電子工業（株）製、ＪＭＮ−ＭＮ−１００型）を用い、そのスペクトルデータより確認した。その結果を表２に示す。
【表２】
0003568578.tif 000006
【００１１】
（ｂ）４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−オン−オキシムの合成：
攪拌機及び還流冷却器を備えた１００ｍｌの四つ口フラスコで、ヒドロキシルアミン塩酸塩２ｇ（０．０２９モル）を１０ｍｌの水に溶解し、これに１規定ＮａＯＨ  ２０ｍｌとα−ヨノン（ａ）１ｇ（０．００５モル）を加えた不均一系混合溶液に、均一になるまでエタノールを加え、３時間加熱還流した。反応終了後、エーテルで抽出し、橙色の粘性液体４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−オン−オキシム（ｂ）を収率８５．５％で得た。この反応生成物のＩＲ及び  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータを表３に示す。
【表３】
0003568578.tif 000007
【００１２】
（ｃ）４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−イル−アミンの合成：
攪拌機、還流冷却器、及び滴下ロートを備えた１００ｍｌの四つ口フラスコにＬｉＡｌＨ４  ０．４ｇ（０．０１０８モル）を取り冷却した後、無水エーテル１０ｍｌに懸濁し、内温４℃以下に保ちながら前記（ｂ）４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−オン−オキシム１．０ｇ（０．００４８モル）と無水エーテル５ｍｌの混合液を１時間かけて滴下した。滴下終了後、油浴中（３５〜４０℃）で４時間加熱還流を行った。反応終了後、氷冷下、リチウムを分解後、エーテルで抽出し、飽和塩化ナトリウム水溶液で中性になるまで洗浄し、乾燥後、溶媒の留去を行い、４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−イル−アミン（ｃ）を収率８５．２％で得た。この反応生成物のＩＲ及び  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータを表４に示す。
【表４】
0003568578.tif 000008
【００１３】
（ｄ）ヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体（Ａ）の４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−イル−アミン（ｃ）とチオシアン酸クロロメチルとの縮合反応による合成：
攪拌機、還流冷却器、及び滴下ロートを備えた５０ｍｌの四つ口フラスコに、４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−イル−アミン（ｃ）０．５ｇ（０．００２６モル）とトリエチルアミン０．５２ｇ（０．００２６×２モル）を取り、室温で、チオシアン酸クロロメチル０．４２ｇ（０．００２６ｍｏｌ）とジメチルスルホキシド１ｍｌの混合液を３０分かけて滴下した後、３５分間攪拌した。反応終了後、酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で中性になるまで水洗した後、Ｎａ２  ＳＯ４  で乾燥し、回収を行なった。得られた粗反応油を、カラムクロマトグラフィー（展開溶媒＝ヘキサン：エーテル＝９：１）で分離・精製し、４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナート（Ａ）を収率３２．３％で得た。この反応生成物のＩＲ及び  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータを表５に示す。
【表５】
0003568578.tif 000009
【００１４】
実施例２（本発明化合物Ｂの合成例）
前記反応式（３）に示す合成経路により、以下の手順に従って本発明化合物Ｂを合成した。
（ａ′）試料の調製：
β−ヨノン（ａ′）は市販品（東京化成（株）製）を使用した。その物性は下記のとおりである。
Ｃ１３Ｈ２０Ｏ＝１９２．３０、
密度ｄ＝０．９５ｇ／ｍｌ、
沸点：１４０℃／１６ｍｍＨｇ
分析方法：
入手した反応油は、オープンカラムクロマトグラフィー（充填剤：シリカゲル６０，２３０〜４００メッシュ）を用いて単離、精製した。
精製した物質は、ＩＲ（日本分光工業（株）製、ＩＲ−８１０型）及び  １Ｈ−ＮＭＲ（日本電子工業（株）製、ＪＮＭ−ＦＸ６０Ｑ）を用いて、そのスペクトルデータより構造の決定及び確認を行った。その結果をそれぞれ表６及び表７に示す。
【表６】
0003568578.tif 000010
【００１５】
【表７】
0003568578.tif 000011
【００１６】
（ｂ′）４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−オン−オキシムの合成：
攪拌機及び還流冷却器を備えた１００ｍｌの四つ口フラスコに、４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−オン（ａ′）１．００ｇ（０．００５２モル）、８ｍｌの水に溶解させたヒドロキシルアミン塩酸塩１．８１ｇ（０．００５２×５．０モル）及び１５ｍｌの１Ｎ−ＮａＯＨを入れ、この混合物が均一になるまでエタノールを加え、７０〜８０℃で２４時間攪拌した。粗反応油を、エーテルを用いて抽出を行い、中性になるまで飽和食塩水で水洗した後、Ｎａ２  ＳＯ４  で乾燥し回収した。溶媒を留去し、粗反応油をカラムクロマトグラフィー（展開溶媒＝ヘキサン：エーテル＝９６：４）を用いて分離・精製し、橙色の粘性液体４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−オン−オキシム（ｂ′）を、収率５２．３２％（収量＝０．５６ｇ）で得た。この反応生成物のＩＲ及び  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータをそれぞれ表８及び表９に示す。
【表８】
0003568578.tif 000012
【００１７】
【表９】
0003568578.tif 000013
【００１８】
（ｃ′）４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−イル−アミンの合成：
攪拌機、還流冷却管、及び滴下ロートを備えた５０ｍｌの四つ口フラスコに、ＬｉＡｌＨ４  ０．２３ｇ（０．００４８×１．３モル）を入れ、蒸留エーテル１０ｍｌを冷却しながら徐々に加えた。氷浴中で１０分間攪拌した後、５ｍｌの蒸留エーテルに溶かした前記（ｂ′）４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−オン−オキシム１．０ｇ（０．００４８モル）を３０分かけて滴下し、４０〜４５℃で４時間加熱還流させた。反応終了後、氷冷水中に反応混合物を加え、未反応のＬｉＡｌＨ４  を分解し吸引濾過した。エーテルで抽出を行ない、中性になるまで飽和食塩水で水洗しＮａ２  ＳＯ４  で乾燥後、回収した。エーテルを留去した後、粗反応油をカラムクロマトグラフィー（展開溶媒＝ヘキサン：エーテル＝９７：３）を用いて分離・精製し、４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−イル−アミン（ｃ′）を収率３８．２％（収量＝０．４１ｇ）で得た。この反応生成物のＩＲ及び  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータをそれぞれ表１０及び表１１に示す。
【表１０】
0003568578.tif 000014
【００１９】
【表１１】
0003568578.tif 000015
【００２０】
（ｄ′）ヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体（Ｂ）４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナートの合成：
攪拌機、冷却管、及び滴下ロートを備えた５０ｍｌの四つ口フラスコに４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−イル−アミン（ｃ′）１．０ｇ（０．００５２モル）、１，５−ジアザビシクロ［４，３，０］−５−ノネン（ＤＢＮ）１．９４ｇ（０．００５２×３モル）及びヘキサメチルフォスフォルアミド（ＨＭＰＡ）５ｍｌを入れ、室温でチオシアン酸クロロメチル０．５６ｇ（０．００５２モル）を３０分かけて滴下し、４時間攪拌した。得られた粗反応油を、エーテルで抽出し、飽和食塩水で中性になるまで水洗し、Ｎａ２  ＳＯ４  で乾燥後、回収した。得られた粗反応油を、カラムクロマトグラフィー（展開溶媒＝ヘキサン：酢酸エチル＝８：２）を用いて分離・精製し、４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナート（Ｂ）を収率１５．３％で得た。この反応生成物のＩＲ及び  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルデータをそれぞれ表１２及び表１３に示す。
【表１２】
0003568578.tif 000016
【００２１】
【表１３】
0003568578.tif 000017
【００２２】
以下、前記本発明化合物を使用した種々の剤型への調剤例について数例を示す。
0003568578.tif 000018
【００２３】
0003568578.tif 000019
【００２４】
0003568578.tif 000020
【００２５】
次に、本発明化合物の抗菌活性について各種試験を行ったので以下に示す。
試験例１
本発明化合物の各種細菌及び糸状菌に対する最小阻止濃度を測定した。
方法：本発明化合物Ａ及びＢをそれぞれアセトンで希釈し、各濃度になるよう添加して固体培地を調整した。調整した培地にあらかじめ前培養した供試菌株培養液を画線塗布し、２５℃で３日間培養を行った。対照として無添加区およびアセトン添加区を用い、生育を阻止した最小の濃度を最小阻止濃度とした。なお、市販品の各殺菌剤、サンプラス及びフレサイドＳについても同様に試験を行った。
細菌は普通寒天培地、糸状菌はポテトデキストロース寒天培地を使用した。供試した菌株は以下の通りである。
細菌
バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ）ＩＦＯ３１３４
エシェリシア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）ＩＦＯ３３０１
スタフィロコッカス・オーレウス  （Ｓｔａｐｈｙｒｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）ＩＦＯ１２７３２
糸状菌
アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ  ）ＩＡＭ３３０１
ペニシリウム・シトリナム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｃｉｔｒｉｎｕｍ）ＩＦＯ６０２０
フザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）ＩＦＯ７１５２
結果を表１４に示す。
【表１４】
0003568578.tif 000021
表１４に示す結果から明らかなように、本発明化合物Ａ及びＢは、市販されているフレサイドＳ及びサンプラスと比較して細菌、糸状菌とも抗菌活性は高かった。
【００２６】
試験例２
蒸散性殺菌剤としての効力を評価した。
方法：各培地に供試菌株を画線塗布した培地の蓋に両面テープでろ紙を貼り付け、本発明化合物Ａ及びＢをそれぞれアセトンで各濃度に希釈した溶液を１ｍｌ含浸させ、アセトンを蒸散させた後、ビニールテープで密封し、２５℃で３日間培養を行った。使用したシャーレは９０ｍｍφである。なお、市販品の各殺菌剤、サンプラス、フレサイドＳ及びＰＣＭＸについても同様に試験を行った。使用した培地及び供試菌株は試験例１と同様である。
結果を表１５に示す。
【表１５】
0003568578.tif 000022
表１５に示す結果から明らかなように、本発明化合物Ａ及びＢは、現在市販されている殺菌剤と比較しても抗菌活性は高かった。
【００２７】
【発明の効果】
以上のように、本発明によれば抗菌活性を有する新規なヨノン骨格を有するチオシアナート化合物誘導体、即ち４−（２，６，６−トリメチル−２−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナート及び４−（２，６，６−トリメチル−１−シクロヘキセン−１−イル）−３−ブテン−２−アミノチオシアナートが提供される。
上記本発明化合物は、細菌のみならず糸状菌を含めて広範囲の微生物に対して優れた抗菌活性を有し、しかも低濃度で有効であり、殺菌剤、消毒薬などとして種々の用途に有利に用いることができる。