(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
培養基表面に覆土を行わない菌床人工栽培方法においてＩＦＯ ３０２６０と比較して子実体形成能が優れたハタケシメジ新菌株であって、ハタケシメジＫ−３３０３（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４７）、ハタケシメジＫ−３３０４（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４８）、ハタケシメジＫ−３３０５（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４９）、及びこれらの変異株から選択されるハタケシメジ新菌株を、培養基表面に覆土を行わない菌床人工栽培方法で栽培することを特徴とするハタケシメジ菌株の人工栽培方法。
【請求項２】
培養基表面に覆土を行わない菌床人工栽培方法が、ハタケシメジの種菌を固形培養基に接種しハタケシメジ菌糸を培養する培養工程、種菌部分と培養基表面をかき取る菌かき工程、子実体原基形成の芽だし工程、成熟子実体形成の生育工程を包含する人工栽培方法である請求項１に記載のハタケシメジ新菌株の人工栽培方法。 
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、食用きのことして有用なハタケシメジ〔学名  リオフィラム  デカステス（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ）  〕の人工栽培方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ハタケシメジは、夏から秋にかけて人家の近くや、畑、林地等に広く発生するきのこで、形はホンシメジに良く似ている。味は非常に良く、肉質はホンシメジより固くて歯切れの良いきのこであり、好んで食用とされている。
近年、エノキタケ、ヒラタケ、ブナシメジ、ナメコ等において、主に鋸屑と米糠を混合した培養基を用いて栽培を行う菌床人工栽培方法が確立され、一年を通して四季に関係なく、安定してきのこが収穫できるようになっている。
ハタケシメジについても食用きのことして有用なことから、栽培方法が種々検討されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、ハタケシメジは腐生性菌のために一般の原木利用の栽培は困難であるといわれている。福島県林業試験場ではバーク堆肥を培地素材の主体とし、それに栄養添加剤として米糠やフスマを加えた培地を用いた袋栽培方法や、培地を野外に埋め込む自然栽培方法を検討している。バーク堆肥と米糠を重量比で１０：１．５とし、仕込み時含水率で６５％の培地１ｋｇを用いた袋栽培での栽培試験によれば、ハタケシメジ子実体の発生期間は長期間にわたり、その集中的な発生もなく、発生割合で最も大きな値となった期間を接種からの通算日数で見ると、供試菌株間で差のあるものの、１８０〜２４０日と栽培に長時間を要している。また、栽培中の害菌の発生も多く、本方法による栽培方法では効率が悪いと報告している（福島県林業試験場研究報告  Ｎｏ．１９）。
そこで次に、培養培地を野外に埋め込む自然栽培方法の検討を開始している（福島県林業試験場研究報告  Ｎｏ．２０）。
また、特開昭６３−１６９９１３号公報においては、鋸屑１００に対し、鶏糞、腐葉土、灰、糠をそれぞれ０．５〜０．６の重量比で混合した培地を用いたビン栽培によるハタケシメジの栽培方法が記載されているが、該栽培方法は通常のきのこビン栽培方法と異なり、菌かき、注水処理後にビン口を逆にして一週間程度栽培し、あとビン口を上とする元の状態に戻し、再び栽培する工程を行っており、通常のきのこビン栽培方法に比べ、操作が煩雑で作業性も悪い。
【０００４】
本発明の目的は、上記現状にかんがみ、有用食用きのこであるハタケシメジを、施設において工業的に、高品質かつ安価に、短期間に効率よく製造することが可能なハタケシメジの人工栽培方法を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明を概説すれば、本発明は、培養基表面に覆土を行わない菌床人工栽培方法においてＩＦＯ ３０２６０と比較して子実体形成能が優れたハタケシメジ新菌株であって、ハタケシメジＫ−３３０３（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４７）、ハタケシメジＫ−３３０４（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４８）、ハタケシメジＫ−３３０５（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４９）、及びこれらの変異株から選択されるハタケシメジ新菌株を、培養基表面に覆土を行わない菌床人工栽培方法で栽培することを特徴とするハタケシメジ菌株の人工栽培方法に関する。
【０００６】
きのこは一般に、同じ種に属する菌株でありながら、採集された場所の違いにより菌糸の生育速度及び子実体形成能力が著しく異なることが知られている。本発明者らは、通常の菌床人工栽培に適する菌株が、自然界に必ず存在するはずであるとの考えに立ち、各地よりハタケシメジの採集を行い鋭意検討した結果、スイス国内にて採集した菌株等が、容易かつ高収量で良好な子実体を形成することを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を具体的に説明する。
菌株の検討は、以下のごとく行った。ＰＧＹ液体培地（組成：グルコース２．０％、ペプトン０．２％、酵母エキス０．２％、ＫＨ２  ＰＯ４  の０．０５％及びＭｇＳＯ４  ・７Ｈ２  Ｏの０．０５％、ｐＨ６．０）１００ｍｌにハタケシメジ各菌株を接種して、２５℃で１０日間培養し液体種菌とした。ポリプロピレン製の広口培養ビン（８５０ｍｌ）に、腐葉土５０ｇ、鋸屑５０ｇ、米糠１００ｇに水３５０ｇを加えて良く混合し、湿潤状態にしたものを圧詰して、中央に直径１ｃｍ程度の穴を開け、打栓後１２０℃６０分間殺菌し、固形培養基を調製した。これに上記の各液体種菌を２０ｍｌずつ接種し、まず暗所で、温度２５℃、湿度５５％条件下、培養基に見掛け上菌糸がまわるまで培養し、更に３０日間培養を続け熟成させた。次に、菌かきをして培養基の上部から約１ｃｍほどの菌糸層を除いてから、水道水をビン口まで加えて３時間放置後排水し、照度２０ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下で子実体原基が形成されるまで培養を続けた。原基が形成された培養基は、次に照度５００ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下で成熟子実体が得られるまで培養を続け、ハタケシメジの各菌株における子実体収量、総栽培日数、子実体の形状について調べた。
その結果を表１に示す。
【０００８】
【表１】
0003542945.tif 000002
【０００９】
表１において不可とは総栽培日数１８０日を経過しても子実体が形成されない場合をいう。また、表１における形状とは、◎は子実体の形が優れたもの、○は子実体の形が良いもの、×は子実体の形が劣るものを示す。
【００１０】
表１で明らかなように、供試した菌株のうち、Ｋ−３３０３株、Ｋ−３３０４株、Ｋ−３３０５株の３株は、総栽培日数約９０日と短かく、収量も約１４０ｇ以上と多く、その栽培子実体も、傘色、柄色、形状等天然採取物と同等であり、特に優れた性状を示した。
なお、表１に示した各菌株について、前述特開昭６３−１６９９１３号公報の方法に準じ、菌かき、注水後ビン口を逆にする工程を加え、栽培試験を行ったが、顕著な効果は認められず、むしろ減収であった。
【００１１】
表１で示したハタケシメジ菌株のうち、Ｋ−番号で示した菌株の子実体及び胞子の形態的特徴は、以下の通りである。
【００１２】
子実体は群生、傘は径５ｃｍ前後、広く凸状でほぼ円形。表面は灰褐色で、古いものは色が薄くなる。傘中央部が特にやや粉状のビロード毛で覆われ、縁部は下方に巻く。肉は白色を帯び、香りは多少粉臭がある。ヒダはやや黄色を帯びた白色で、密。柄は長さ５ｃｍ前後、太さ１ｃｍ前後で、上下同大あるいは下方がややふくらみ、淡灰色で、固く弾力があってしっかり詰まる。胞子は平滑で球形あるいはほぼ球形。５．５〜７．５  ×５〜７μｍ。
【００１３】
以上の特徴を今関六也、本郷次雄編著「原色日本新菌類図鑑  （Ｉ）」保育社（昭和６２年６月１０日初版発行）の記載と比較すると、これらの菌株はハタケシメジであることが明りょうである。
【００１４】
これらの供試菌株中、Ｋ−３３０３株は  Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ  Ｋ−３３０３と表示し、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４７として、Ｋ−３３０４株は  Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ  Ｋ−３３０４と表示し、ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４８として、Ｋ−３３０５株は  Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｄｅｃａｓｔｅｓ  Ｋ−３３０５と表示し、ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４９としてそれぞれ寄託されている。
【００１５】
次に、寄託菌株、ハタケシメジＫ−３３０３株、Ｋ−３３０４株、Ｋ−３３０５株の３株の菌学的諸性質をそれぞれ以下に示す。
【００１６】
（１）ハタケシメジＫ−３３０３株
▲１▼  麦芽エキス寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は２８ｍｍ、白色で密な菌糸、気菌糸を生じる。１５日目でコロニー径は４８ｍｍ、２０日目でコロニー径は６７ｍｍとなり、菌糸は白色で密、直線状に伸びる。気菌糸が多い。裏面は一様で変色はない。
▲２▼  バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は２８ｍｍ、白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１５日目でコロニー径は４９ｍｍ、２０日目でコロニー径は６４ｍｍとなり、菌糸は白色で密、マット状に盛り上がる。気菌糸が大変多い。裏面は一様で変色はない。▲３▼  オートミール寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は３４ｍｍ、菌糸は薄く放射状に伸びる。１５日目でコロニー径は５８ｍｍ、２０日目でコロニー径は８０ｍｍとなり、菌糸は白色で放射状に伸びる。気菌糸は薄いが２０日目では濃くなる。裏面は一様で変色はない。
▲４▼  フェノールオキシダーゼ検定用培地〔０．１％没食子酸添加ポテト・グルコース寒天培地〕（２０℃）における生育状態
１０日目では生育悪く、コロニー径は９ｍｍ、菌糸は白色で、気菌糸は多い。褐変半径は３５ｍｍ。２０日目でコロニー径は１５ｍｍ、褐変半径は５０ｍｍ。菌糸は白色で盛り上がる。
▲５▼  最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地（ＰＧＹ液体培地に寒天を加えたもの）に直径６ｍｍの種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１４日後に各コロー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃ではほとんど生育せず、３０℃では全く生育しなかった。
▲６▼  最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地４０ｍｌを殺菌後、各ｐＨに調整し、直径６ｍｍの種菌を接種して、２５℃、１４日間培養した。集菌後、乾燥して重量を測定したところ、最適ｐＨは６付近であった。また、本菌株の生育範囲は、ｐＨ４〜ｐＨ９の間であった。
【００１７】
（２）ハタケシメジＫ−３３０４株
▲１▼  麦芽エキス寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は２５ｍｍ、白色で密な菌糸、気菌糸を生じる。１５日目でコロニー径は４４ｍｍ、２０日目でコロニー径は６５ｍｍとなり、菌糸は白色で密、直線状に伸びる。気菌糸が多い。裏面は一様で変色はない。
▲２▼  バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は３２ｍｍ、白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１５日目でコロニー径は５３ｍｍ、２０日目でコロニー径は６９ｍｍとなり、菌糸は白色で密、マット状に盛り上がる。気菌糸が大変多い。裏面は一様で変色はない。▲３▼  オートミール寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は３１ｍｍ、菌糸は薄く放射状に伸びる。１５日目でコロニー径は５５ｍｍ、２０日目でコロニー径は７６ｍｍとなり、菌糸は白色で放射状に伸びる。気菌糸は薄いが２０日目では濃くなる。裏面は一様で変色はない。
▲４▼  フェノールオキシダーゼ検定用培地（２０℃）における生育状態
１０日目では生育悪く、コロニー径は９ｍｍ、菌糸は白色で、気菌糸は多い。褐変半径は３６ｍｍ。２０日目でコロニー径は１８ｍｍ、褐変半径は５２ｍｍ。菌糸は白色で盛り上がる。
▲５▼  最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１４日後に各コロー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃ではほとんど生育せず、３０℃では全く生育しなかった。
▲６▼  最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地４０ｍｌを殺菌後、各ｐＨに調整し、直径６ｍｍの種菌を接種して、２５℃、１４日間培養した。集菌後、乾燥して重量を測定したところ、最適ｐＨは５付近であった。また、本菌株の生育範囲は、ｐＨ４〜ｐＨ９の間であった。
【００１８】
（３）ハタケシメジＫ−３３０５株
▲１▼  麦芽エキス寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は２０ｍｍ、白色で密な菌糸、気菌糸を生じる。１５日目でコロニー径は３５ｍｍ、２０日目でコロニー径は４９ｍｍとなり、菌糸は白色で密、直線状に伸びる。気菌糸が多い。裏面は中央部に放射状のしわがあり、変色は無し。
▲２▼  バレイショ・ブドウ糖寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は２７ｍｍ、白色で密な菌糸、気菌糸を多量に生じる。１５日目でコロニー径は４２ｍｍ、２０日目でコロニー径は５７ｍｍとなり、菌糸は白色で密、マット状に盛り上がる。気菌糸が大変多い。裏面は中央部に放射状のしわがあり、変色は無し。
▲３▼  オートミール寒天培地（２０℃）における生育状態
１０日目でコロニー径は３３ｍｍ、菌糸は薄く放射状に伸びる。１５日目でコロニー径は５３ｍｍ、２０日目でコロニー径は７３ｍｍとなり、菌糸は白色で放射状に伸びる。気菌糸は２０日目でも薄い。裏面は中央部に放射状のしわがあり、変色は無し。
▲４▼  フェノールオキシダーゼ検定用培地（２０℃）における生育状態
１０日目では生育悪く、コロニー径は１１ｍｍ、菌糸は白色で、気菌糸は多い。褐変半径は３０ｍｍ。２０日目でコロニー径は１４ｍｍ、褐変半径は４３ｍｍ。菌糸は白色で盛り上がる。
▲５▼  最適生育温度
ＰＧＹ寒天培地に直径６ｍｍの種菌を接種し、各温度でそれぞれ培養して、１４日後に各コロニー径を測定したところ、最適生育温度は２５℃付近であった。また、５℃ではほとんど生育せず、３０℃では全く生育しなかった。
▲６▼  最適生育ｐＨ
ＰＧＹ液体培地４０ｍｌを殺菌後、各ｐＨに調整し、直径６ｍｍの種菌を接種して、２５℃、１４日間培養した。集菌後、乾燥して重量を測定したところ、最適ｐＨは５付近であった。また、本菌株の生育範囲は、ｐＨ４〜ｐＨ９の間であった。
【００１９】
更に、ハタケシメジＫ−３３０３株、Ｋ−３３０４株、Ｋ−３３０５株と他のハタケシメジとの異同について、寒天培地上における対峙培養によって調べた。供試したハタケシメジ株は、表１に示した１５株すべてである。供試菌株の二核菌糸を保存スラント（ＰＧＹ寒天斜面培地）より３ｍｍ×３ｍｍ×３ｍｍのブロックとして切り出し、それぞれをＰＧＹ寒天平板培地の中央部に対峙して接種し（２ｃｍ間隔）、２５℃、２０日間培養後、両コロニー境界部に帯線が生じるか否かを判定した。結果を表２に示す。
【００２０】
【表２】
0003542945.tif 000003
【００２１】
表２に示したように、Ｋ−３３０３株、Ｋ−３３０４株、Ｋ−３３０５株の３株は、供試菌株すべてと帯線を形成したことから、新しい株であることは明白である。
【００２２】
本発明のハタケシメジ菌株は、通常の菌床人工栽培方法で栽培することができる。
【００２３】
本発明において、通常の菌床人工栽培方法とは、エノキタケ、ヒラタケ、ブナシメジなどのきのこ栽培に用いられている方法であって、ビン栽培、袋栽培、箱栽培等があり、菌かき後にビン口を逆さにする栽培工程、又は栽培物を覆土する栽培工程は包含しない栽培方法をいう。
ここでは一例としてビン栽培について述べると、その方法とは通常、培地調製、ビン詰め、殺菌、接種、培養、菌かき、芽だし、生育、収穫の各工程からなる。培地調製とは、通常きのこの人工栽培に使用されている鋸屑と米糠、ふすま、大麦粉砕物などの混合物に水を加えて湿潤状態にする工程で腐葉土、バーク堆肥、麦わら堆肥、廃オガ堆肥、コンポストなどを加えることが好ましく、水分含量は６０〜７５％好ましくは６５％付近が適当である。培地組成はハタケシメジ子実体形成良好な組成であればよいが、その一例を示せば、鋸屑、腐葉土、米糠の組合せがある。鋸屑は培地基材として、米糠は栄養源として、腐葉土は腐生性菌の例えば生長因子として作用する。腐葉土の培地への添加量は重量比として、１％以上添加されれば良く、好ましくは５％以上の添加が良い。ビン詰めとは、８００〜１０００ｍｌ容好ましくは８５０ｍｌ容のポリプロピレン製広口培養ビンに、調製した培地を  ４５０ｇ〜７５０ｇ好ましくは５５０ｇ圧詰し、中央に１ｃｍ程度の穴を開け、打栓する工程をいう。殺菌とは、蒸気により培地中のすべての微生物を死滅させる工程で、常圧殺菌では９８℃、４〜５時間、高圧殺菌では１２０℃、３０〜９０分間行われる。接種とは、放冷された培地に種菌を植えつける工程で、種菌としてはハタケシメジ菌株をＰＧＹ液体培地で２５℃、１０〜１５日間培養したものを用いることができ、１ビン当り２０ｍｌほど無菌的に植えつける。また、ここまで説明した工程で得られる液体種菌接種済みの培養基を、２５℃で３０〜４０日間培養し、培養基全体にハタケシメジの菌糸がまん延したものを固体種菌として用いることができ、１ビン当り１５ｇほど無菌的に植えつける。培養とは、接種済みの培養基を温度２０〜２５℃、湿度４０〜７０％において菌糸をまん延させ、更に熟成をさせる工程で、４０〜１２０日間好ましくは８０日間前後行われる。菌かきとは、種菌部分と培養基表面をかき取り、原基形成を促す工程で、菌かき後は、直ちにビン口まで水を入れ３〜５時間後排水する。芽だしとは、子実体原基を形成させる工程で、温度１０〜２０℃好ましくは１５℃前後、湿度８０％以上好ましくは８５〜９５％、照度５００ルックス以下好ましくは５０ルックス以下で１０〜２０日間培養を続けると、ハタケシメジの原基が形成される。生育とは、子実体原基から成熟子実体を形成させる工程で温度１０〜２０℃好ましくは１５℃前後、湿度８０％以上好ましくは８５〜９５％、照度５０ルックス以上好ましくは  ２００〜５００  ルックスで５〜１５日間培養を続けると、ハタケシメジの成熟子実体を得ることができ、収穫を行って栽培の全工程は終了する。以上ビン栽培方法について説明したが、本発明はビン栽培に限定されるものではない。
【００２４】
本発明によれば、施設栽培において、総栽培日数１５０日以下で、収量としては、８５０ｍｌ培養ビンの場合１００ｇ以上の、形状の良いハタケシメジを集中的に発生することができる。
【００２５】
本発明で使用し得るハタケシメジ菌株としてはハタケシメジＫ−３３０３株、ハタケシメジＫ−３３０４株、ハタケシメジＫ−３３０５株等が最適であるが、本発明は、これらの菌株に限定されるものではなく、上記性質を有する菌株であれば、変異株であっても用いることができる。
【００２６】
【実施例】
以下に、本発明によるハタケシメジの菌床人工栽培方法を、実施例をもって更に具体的に説明するが、本発明は以下の実施例の範囲のみに限定されるものではない。
【００２７】
実施例１
ＰＧＹ液体培地（組成：グルコース２．０％、ペプトン０．２％、酵母エキス０．２％、ＫＨ２  ＰＯ４  の０．０５％及びＭｇＳＯ４  ・７Ｈ２  Ｏの０．０５％、ｐＨ６．０）１００ｍｌにハタケシメジＫ−３３０３株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４７）  を接種して、２５℃で１０日間培養し液体種菌とした。一方、ポリプロピレン製の広口培養ビン（８５０ｍｌ）に、腐葉土５０ｇ〔（有）コトヒラ製〕、鋸屑（スギ材）５０ｇ、米糠１００ｇ、水  ３５０ｇを加えて良く混合し湿潤状態にしたものを圧詰して、中央に直径１ｃｍ程度の穴を開け、打栓後１２０℃６０分間高圧蒸気殺菌を行い、放冷して固形培養基とした。これに上記の液体種菌約２０ｍｌを接種し、まず暗所にて、温度２５℃、湿度５５％の条件下、培養基に見掛け上菌糸がまわるまで３５日間培養し、更に３０日間培養を続け熟成させた。次に、菌かきをして培養基の上部から約１ｃｍほどの菌糸層を除いてから、水道水をビン口まで加えて３時間放置後排水し、照度２０ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下で１０日間培養を続け、子実体原基を形成させた。原基が形成された培養基は、次に照度５００ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下１２日間培養を続けて、成熟子実体を得た。収穫されたハタケシメジは、天然に近く形状に優れ非常に美味であった。得られた子実体の１ビン当りの重量は１４７ｇで、総栽培日数は、８７日間であった。
【００２８】
実施例２
ＰＧＹ液体培地１００ｍｌにハタケシメジＫ−３３０４株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４８）  を接種して、２５℃で１０日間培養し液体種菌とした。一方、ポリプロピレン製の広口培養ビン（８５０ｍｌ）に、バーク堆肥〔富士見工業（株）製〕５０ｇ、鋸屑（スギ材）５０ｇ、米糠１００ｇ、水３５０ｇを加えて良く混合し湿潤状態にしたものを圧詰して、中央に直径１ｃｍ程度の穴を開け、打栓後１２０℃６０分間高圧蒸気殺菌を行い、放冷して固形培養基とした。これに上記の液体種菌約２０ｍｌを接種し、まず暗所にて、温度２５℃、湿度５５％の条件下、培養基に見掛け上菌糸がまわるまで３５日間培養し、更に３０日間培養を続け熟成させた。次に、菌かきをして培養基の上部から約１ｃｍほどの菌糸層を除いてから、水道水をビン口まで加えて３時間放置後排水し、照度２０ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下で１１日間培養を続け、子実体原基を形成させた。原基が形成された培養基は、次に照度５００ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下１２日間培養を続けて、成熟子実体を得た。収穫されたハタケシメジは、天然に近く形状に優れ非常に美味であった。得られた子実体の１ビン当りの重量は１３５ｇで、総栽培日数は、８８日間であった。
【００２９】
実施例３
ＰＧＹ液体培地１００ｍｌにハタケシメジＫ−３３０５株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４９）  を接種して、２５℃で１０日間培養し液体種菌とした。一方、ポリプロピレン製の広口培養ビン（８５０ｍｌ）に、腐葉土〔（有）コトヒラ製〕５０ｇ、鋸屑（ブナ材）５０ｇ、米糠１００ｇ、水３５０ｇを加えて良く混合し湿潤状態にしたものを圧詰して、中央に直径１ｃｍ程度の穴を開け、打栓後１２０℃６０分間高圧蒸気殺菌を行い、放冷して固形培養基とした。これに上記の液体種菌約２０ｍｌを接種し、まず暗所にて、温度２５℃、湿度５５％の条件下、培養基に見掛け上菌糸がまわるまで３５日間培養し、更に３０日間培養を続け熟成させた。次に、菌かきをして培養基の上部から約１ｃｍほどの菌糸層を除いてから、水道水をビン口まで加えて３時間放置後排水し、照度２０ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下で１２日間培養を続け、子実体原基を形成させた。原基が形成された培養基は、次に照度５００ルックス、温度１５℃、湿度９０％の条件下１３日間培養を続けて、成熟子実体を得た。収穫されたハタケシメジは、天然に近く形状に優れ非常に美味であった。得られた子実体の１ビン当りの重量は１５０ｇで、総栽培日数は、９０日間であった。
【００３０】
実施例４
腐葉土５０ｇ、鋸屑（スギ材）５０ｇ、米糠１００ｇに水３５０ｇを加えて良く混合し湿潤状態にしたものをポリプロピレン製の広口培養ビン（８５０ｍｌ）に圧詰して、中央に直径１ｃｍ程度の穴を開け、打栓後１２０℃６０分間高圧蒸気殺菌を行い、放冷して固形培養基とした。これに固形培養基に、実施例１と同様に調製したＫ−３３０３株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４３４７）の種菌を接種し、温度２５℃、湿度５５％の条件下で３０日間培養したところ、種菌用固体培養基が得られた。一方、バーク堆肥５０ｇ、鋸屑（スギ材）５０ｇ、米糠１００ｇ、水３５０ｇを用いて実施例１と同様に固形培養基を調製した。これに上記種菌用固体培養基からの種菌を、無菌的に接種し、実施例１のごとくハタケシメジの人工栽培を行ったところ、総栽培日数８７日間で、１ビン当り１４５ｇの形状に優れ非常に美味な子実体が得られた。
【００３１】
【発明の効果】
以上詳細に説明したように、本発明の栽培方法によれば、形状に優れ美味なハタケシメジを高収量かつ短期間に栽培することができる。