(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
0003568800.tif 000004
〔式中、Ｒ１はヒドロキシＣ３−６アルキル、ジヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルキルアリールアルキル、ジヒドロキシアルキルアリールアルキル、アシルオキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、アルコキシカルボニルアミノアルキル、アシルアミノアルキル、アリールスルホンアミドアルキル、アリル、ジヒドロキシアルキルアリル、ジオキソラニルアリルおよびヒドロキシアルコキシアルキルからなる群から選択されるものである；ここで、「アルコ(alk-)」または「アルキル」の語は、特記しない限り、直鎖または分枝鎖Ｃ２−６アルキルを意味する；Ｒ４はメチルまたはＲ４とＲ１が一緒になってＣ２−６アルキレンを形成する。〕
で示される構造式を有する化合物または４０−Ｏ−(２−ヒドロキシエトキシ)カルボニルメチル−ラパマイシンまたは４０−Ｏ−[(３Ｓ)−２,２−ジメチルジオキソラン−３−イル]メチル−ラパマイシンまたは４０−Ｏ−[２−(４',５'−ジカルボエトキシ−１',２',３'−トリアゾル−１'−イル)−エチル]−ラパマイシン。
【請求項２】
Ｒ４がメチルである、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
次のいずれかである、請求項１記載の化合物：
４０−Ｏ−(４'−ヒドロキシメチルベンジル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[４'−(１,２−ジヒドロキシエチル)ベンジル]−ラパマイシン、
４０−Ｏ−アリル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[３'−(２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４(Ｓ)−イル)−プロプ−２'−エン−１'−イル]−ラパマイシン、
(２'Ｅ,４'Ｓ)−４０−Ｏ−(４',５'−ジヒドロキシペント−２'−エン−1'−イル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(３−ヒドロキシプロピル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(６−ヒドロキシヘキシル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[２−(２−ヒドロキシエトキシ)エチル]−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[(２Ｓ)−２,３−ジヒドロキシプロプ−１−イル]−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(２−アセトキシエチル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(２−ニコチノイルオキシエチル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[２−(Ｎ−モルホリノアセトキシ)エチル]−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[２−(Ｎ−イミダゾリルアセトキシ)エチル]−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[２−(Ｎ−メチル−Ｎ'−ピペラジニルアセトキシ)エチル]−ラパマイシン、
３９−Ｏ−デスメチル−３９,４０−Ｏ,Ｏ−エチレン−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(２−アミノエチル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(２−アセトアミノエチル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(２−ニコチンアミドエチル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−[２−(Ｎ−メチル−イミダゾ−２'−イルカルボキシアミド)エチル]−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(２−エトキシカルボニルアミノエチル)−ラパマイシン、
４０−Ｏ−(２−トリルスルホンアミドエチル)−ラパマイシン。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の化合物を薬学的に許容される希釈剤または担体と共に含む、免疫抑制に使用するための医薬組成物。
【請求項５】
同種免疫拒絶反応、自己免疫疾患または喘息の予防または処置に使用するための、請求項４記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、特に免疫抑制剤としての医薬的実用性を有するラパマイシンの新規アルキル化誘導体を含む。
【０００２】
【従来の技術】
ラパマイシンはストレプトマイセス・ヒグロスコピカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）から製造され、式Ａ：
【化２】
0003568800.tif 000002
で示される構造式を有する既知のマクロライド系抗生物質である。例えばマッカルピン，Ｊ．Ｂ．ら、Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ（１９９１）４４：６６８、シェライバー，Ｓ．Ｌら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（１９９１）１１３：７４３３；米国特許第３９２９９９２号参照。ラパマイシンは、極めて有効な免疫抑制剤であり、抗癌および抗真菌活性を有することもまた示されている。しかしながら、その医薬としての実用性は、その非常に低く変わりやすい生体内利用能およびその高い毒性により制限されている。更に、ラパマイシンは非常に不溶性であり、安定なガレヌス製剤の調剤を困難にしている。
【０００３】
【発明の記載】
ラパマイシンのある新規誘導体（新規化合物）がラパマイシンより改善された医薬特性を有し、大きい安定性および生体内利用能を示し、ガレヌス調剤において、大きな容易性を可能にすることが、驚くべきことに分かった。新規化合物は、式Ｉ：
【化３】
0003568800.tif 000003
〔式中、Ｘは（Ｈ，Ｈ）またはＯ；
Ｙは（Ｈ，ＯＨ）またはＯ；
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立してＨ、アルキル、チオアルキル、アリールアルキル、ヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルキルアリールアルキル、ジヒドロキシアルキルアリールアルキル、アルコキシアルキル、アシルオキシアルキル、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、アルコキシカルボニルアミノアルキル、アシルアミノアルキル、アリールスルホンアミドアルキル、アリル、ジヒドロキシアルキルアリル、ジオキソラニルアリル、ヒドロキシアルコキシアルキルおよび（Ｒ３）３Ｓｉ（式中、Ｒ３はそれぞれ独立してＨ、メチル、エチル、イソプロピル、ｔ−ブチルおよびフェニルから選択される）からなる群から選択されるものである；ここで、“アルコ（ａｌｋ−）”または“アルキル（ａｌｋｙｌ）”の語は、分枝鎖または直鎖Ｃ１−６アルキル、好ましくはＣ１−３アルキルを意味し、その炭素鎖は所望によりエーテル（−Ｏ−）架橋により中断されていてもよい；および
Ｒ４はメチルまたはＲ４とＲ１が一緒になってＣ２−６アルキレンを形成する；
但し、Ｒ１およびＲ２は両方ともにＨではない；および
Ｒ１が（Ｒ３）３Ｓｉまたはカルボアルコキシアルキルである場合、ＸおよびＹは両方ともにＯではない。〕
で示される構造式を有するラパマイシンのアルキル化誘導体である。
【０００４】
好ましい新規化合物は下記の物を含む：
４０−Ｏ−ベンジル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（４’−ヒドロキシメチル）ベンジル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［４’−（１，２−ジヒドロキシエチル）］ベンジル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−アリル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［３’−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４（Ｓ）−イル）−プロプ−２’−エン−１’−イル］−ラパマイシン、
（２’Ｅ，４’Ｓ）−４０−Ｏ−（４’，５’−ジヒドロキシペント−２’−エン−１’−イル）−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エトキシカルボニルメチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（３−ヒドロキシ）プロピル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（６−ヒドロキシ）ヘキシル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［２−（２−ヒドロキシ）エトキシ］エチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［（３Ｓ）−２，２−ジメチルジオキソラン−３−イル］メチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロプ−１−イル］−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−アセトキシ）エチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−ニコチノイルオキシ）エチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［２−（Ｎ−モルホリノ）アセトキシ］エチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−Ｎ−イミダゾリルアセトキシ）エチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［２−（Ｎ−メチル−Ｎ’−ピペラジニル）アセトキシ］エチル−ラパマイシン、
３９−Ｏ−デスメチル−３９，４０−Ｏ，Ｏ−エチレン−ラパマイシン、
（２６Ｒ）−２６−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン、
２８−Ｏ−メチル−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−アミノエチル）−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−アセトアミノエチル）−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−ニコチンアミドエチル）−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−（Ｎ−メチル−イミダゾ−２’−イルカルボキサミド）エチル）−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−エトキシカルボニルアミノエチル）−ラパマイシン、
４０−Ｏ−（２−トリスルホンアミドエチル）−ラパマイシン、
４０−Ｏ−［２−（４’，５’−ジカルボエトキシ−１’，２’，３’−トリアゾル−１’−イル）−エチル］−ラパマイシン。
【０００５】
免疫抑制的使用のための新規化合物は、好ましくはＸおよびＹが両方Ｏ、Ｒ２がＨ、Ｒ４がメチルおよびＲ１がＨ以外である４０−Ｏ−置換ラパマイシンである；最も好ましくは、Ｒ１はヒドロキシアルキル、ヒドロキシアルコキシアルキル、アシルアミノアルキルおよびアミノアルキルから選択されたものである；特に４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン、４０−Ｏ−（３−ヒドロキシ）プロピル−ラパマイシン、４０−Ｏ−［２−（２−ヒドロキシ）エトキシ］エチル−ラパマイシンおよび４０−Ｏ−（２−アセトアミノエチル）−ラパマイシンである。
【０００６】
好ましくはＣ４０におけるＯ−置換またはＣ２８およびＣ４０におけるＯ，Ｏ−ジ置換は、以下の一般的な方法にしたがって行う：ラパマイシン（またはジヒドロまたはデオキソラパマイシン）を、遊離基（例えばＲＸ、ここでＲはＯ−置換基として望まれる有機ラジカル、例えばアルキル、アリルまたはベンジル分子およびＸは遊離基、例えばＣＣｌ３Ｃ（ＮＨ）ＯまたはＣＦ３ＳＯ３）に結合した有機ラジカルと、好適な反応条件下、好ましくは酸性または中性条件で、例えばトリフルオロメタンスルホン酸、カンファースルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等のような酸またはＸがＣＣｌ３Ｃ（ＮＨ）Ｏである場合、その対応するピリジニウムまたは置換ピリジニウム塩、またはＸがＣＦ３ＳＯ３の場合、ピリジン、置換ピリジン、ジイソプロピルエチルアミンまたはペンタメチルピリジンのような塩基の存在下反応される。Ｃ２８のみのＯ−置換は同様の方法で行うが、予めＣ４０を保護しておく。更なる修飾が可能である。例えば、置換基がアリルの場合、アリル分子の孤立した、単置換２重結合が更なる修飾を非常に受けることが可能である。
【０００７】
９−デオキソラパマイシン化合物は、好ましくは水素化硫黄を使用して、ラパマイシンをジフェニルジセレニドおよびトリブチルホスフィンと反応させることにより還元して、または他の好適な還元反応により、製造する。
【０００８】
２６−ジヒドロ−ラパマイシンは、好ましくは、ラパマイシンまたは９−デオキソラパマイシンを、水素化ホウ素還元反応のような緩和な還元反応によりＣ２６をケトからヒドロキシに還元することにより産生する。
【０００９】
新規化合物は、以下の状態に特に有用である：
ａ）例えば、例えば心臓、肺、複合心肺、肝臓、腎臓、膵臓、皮膚または角膜移植の受容者の処置のための、器官または組織移植拒絶反応の処置および予防。骨髄移植に続くような、移植片対宿主疾病の予防もまた示唆される。
【００１０】
ｂ）自己免疫疾患および炎症状態、特に関節炎（例えば関節リュウマチ、アースリティス・クロニカ・プログレディエンテ（ａｒｔｈｒｉｔｈｉｓ  ｃｈｒｏｎｉｃａ  ｐｒｏｇｒｅｄｉｅｎｔｅ）および変形性関節炎）およびリュウマチ疾患のような自己免疫要素を含む病因の炎症状態の処置および予防。本発明の化合物を使用し得る特異的自己免疫疾患は、自己免疫血液学的疾患（例えば、溶血性貧血、再生不良性貧血、赤血球癆および突発性血小板減少症を含む）、全身性エリテマトーデス、ポリコンドリティス、スクレロドーマ、ウェグナー肉芽腫症、皮膚筋炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、乾癬、スチーブン・ジョンソン症候群、特発性スプルー、自己免疫炎症性腸疾患（例えば潰瘍性大腸炎およびクローン病を含む）、内分泌性眼病、甲状腺機能亢進症、サルコイドーシス、多発性硬化症、原発性胆汁性肝硬変、若年性糖尿病（Ｉ型糖尿病）、ぶどう膜炎（前方および後方）、乾性角結膜炎および春季角結膜炎、間質性肺線維症、乾癬性関節炎、糸球体腎炎（例えば特発性ネフローゼ症候群または微小変化腎症を含むネフローゼ症候群を伴うまたは伴わない）および若年性皮膚筋炎を含む。
ｃ）喘息の処置および予防。
【００１１】
ｄ）多剤耐性（ＭＤＲ）の処置。新規化合物は、ＭＤＲに関連する膜輸送分子であるＰ−グリコプロテイン（Ｐｇｐ）を抑制する。ＭＤＲは、特に医薬がＰｇｐにより細胞からくみ出されるため、既知の化学療法に反応しない癌患者およびＡＩＤＳ患者において問題である。新規化合物は、したがって、多剤耐性癌または多剤耐性ＡＩＤＳのような多剤耐性状態の処置および制御における他の化学療法剤の作用を促進するのに有用である。
【００１２】
ｅ）例えば癌、増殖性皮膚疾患等のような増殖性疾患の処置。
ｆ）真菌感染の処置。
ｇ）特にステロイドの活性を増強することによる、炎症の処置および予防。
ｈ）感染、特にＭｉｐまたはＭｉｐ様因子を有する病原菌による感染の処置および予防。
ｉ）ＦＫ−５０６、ラパマイシン、免疫抑制新規化合物および他のマクロフィリン結合免疫抑制剤の過剰投与の処置。
【００１３】
本発明は、従って、新規中間体または医薬としての新規化合物の使用、有効量の新規化合物を必要とする患者に投与することを含む上記の疾患処置または予防法、上記疾患を処置または予防するための医薬の製造における新規化合物の使用および、薬理学的に許容可能な希釈剤または担体と組み合わせたまたは関連した新規化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００１４】
本明細書に記載の新規化合物の多く、特にＣ４０でＯ−置換された新規化合物は非常に免疫抑制でありこれらの新規化合物は、ａおよびｂの指示には特に有用であるが、ｉの指示にはそうではない。あまり免疫抑制でない新規化合物、特にＣ２８のみでＯ−置換されてるものは、特にｈおよびｉの指示には有用であるが、ａまたはｂの指示にはあまり好ましくない。
【００１５】
新規化合物は薬理学的に許容可能な形で、処置を必要とする患者に、薬理学的有効量を投与することにより利用する。新規化合物の好適な量は、例えば処置すべき状態（例えば病気の型または耐性の性質）、所望の効果および投与経路に依存して、もちろん変化する。
【００１６】
しかしながら、一般に、経口で、０．０５から５または１０ｍｇ／ｋｇ／日までの範囲、例えば０．１から２または７．５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲の一度、または２から４×日の投与、または非経口で、例えば静脈内、例えば静脈内滴注または注入で、０．０１から２．５または５ｍｇ／ｋｇ／日、例えば０．０５または０．１から１．０ｍｇ／ｋｇ／日までの範囲で充分な結果が得られる。患者への好適な一日量は、従って、５００ｍｇｐ．ｏ．の範囲、例えば５から１００ｍｇｐ．ｏ．、または０．５から１２５から２５０ｍｇｉ．ｖ．の範囲、例えば２．５から５０ｍｇｉ．ｖ．の範囲である。
【００１７】
別法としてそして好ましくは、薬用量は、例えばＲＩＡ技術により測定されたような血中濃度を通して見積もりを提供する具体的方法で患者に調整する。従って、患者の薬用量は、５０または１５０から５００または１０００ｎｇ／ｍｌの範囲でＲＩＡにより測定される血中濃度により一定の進行が達成されるように、即ちシクロスポリン免疫抑制治療で現在使用されている薬用量の方法と同様に、調整し得る。
【００１８】
新規化合物は単独活性成分としてまたは他の医薬と共に投与され得る。例えば、移植片対宿主疾病、移植拒絶または自己免疫疾患の予防および処置のような免疫抑制適用において、新規化合物はシクロスポリン、ＦＫ−５０６またはその免疫抑制誘導体；コルチコステロイド；アザチオプレン；免疫抑制モノクローナル抗体、例えばＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ２５、ＣＤ２８またはＣＤ４５に対するモノクローナル抗体；および／または他の免疫調節化合物と組み合わせて使用し得る。抗炎症適用において、新規化合物は、抗炎症剤、例えばコルチコステロイドと共に使用できる。抗感染適用において、新規化合物は他の抗感染剤、例えば抗ウィルス剤または抗生物質と共に使用できる。
【００１９】
新規化合物は任意の既知の経路、特に腸内的に、例えば経口で、例えば飲むための溶液、錠剤またはカプセルの形、または非経口的に、例えば注射可能溶液または懸濁液の形で投与する。経口投与のための好適な単位用量形態は、例えば１から５０ｍｇ、通常１から１０ｍｇの本発明の化合物を含む。新規化合物を含む医薬組成物は、ラパマイシンを含む医薬組成物と同様に、例えばＥＰＡ００４１７９５号と同様に製造し得、それは当分野の技術者には明らかである。
【００２０】
新規化合物の薬理活性は、例えば以下の試験で証明される：
１．リンパ球混合反応（ＭＬＲ）
リンパ球混合反応は、本来、可能性のある器官提供者および受容者の間の組織適合性を評価するために、同種移植片に関連して開発され、インビトロ免疫反応の最も良く確立されたモデルの一つである。Ｔ．メオ、“イムノロジカル・メソッズ”、Ｌ．レフコビッツおよびＢ．ペリス編、アカデミック・プレス、ニュー・ヨーク、２２７−２３９頁（１９７９）に記載されているようなマウスモデルＭＬＲを使用し、新規化合物の免疫抑制効果を証明する。Ｂａｌｂ／ｃマウス（雌、８−１０週）由来の脾臓細胞（０．５×１０６）をＣＢＡマウス（雌、８−１０週）由来の０．５×１０６の放射線照射（２００ｒａｄｓ）したまたはマイトマイシンＣ処置した脾臓細胞と共に５日間インキュベーションする。放射線照射した同種細胞はＢａｌｂ／ｃ脾臓細胞に増殖反応を誘発し、それはＤＮＡへの標識前駆体取り込みにより測定できる。刺激細胞が放射能照射（またはマイトマイシンＣ処置）されているため、それらはＢａｌｂ／ｃ細胞に増殖で応答しないが、その抗原性は維持されている。新規化合物のＢａｌｂ／ｃ細胞における抗増殖効果を種々の希釈で測定し、細胞増殖の５０％阻害をもたらす濃度（ＩＣ５０）を計算する。試験サンプルの阻害能力はラパマイシンと比較し得、相対的ＩＣ５０（即ち試験サンプルＩＣ５０／ラパマイシンＩＣ５０）で示す。
【００２１】
２．ＩＬ−６媒介増殖
信号経路に関連する成長因子を妨害する新規化合物の能力を、インターロイキン−６（ＩＬ−６）−依存性マウスハイブリドーマ細胞系を使用して評価する。測定は９６ウェルマイクロタイタープレートで行う。５０００細胞／ウェルを（Ｍ．Ｈ．シェラーおよびＲティースが、イムノロジカル・メソッズ、Ｉ．レフコビッツおよびＢ．ペーニス編、アカデミック・プレス１９８１、Ｖｏｌ．ＩＩ、２６３−２７５頁に記載のような）無血清培地中で、１ｎｇの組換ＩＬ−６／ｍｌを添加して培養する。試験サンプル存在下または不存在下の６６時間のインキュベーションに続き、細胞を１μＣｉ（３Ｈ）−チミジン／ウェルで更に６時間パルスし、回収し、液体シンチレーションにより計数する。（３Ｈ）−チミジンのＤＮＡへの取り込みは細胞数の増加と関連し、従って細胞の増殖の尺度である。試験サンプルの一連の希釈は細胞増殖の５０％阻害（ＩＣ５０）をもたらす濃度の計算を可能にする。試験サンプルの阻害能力はラパマイシンと比較し得、相対的ＩＣ５０（即ち試験サンプルＩＣ５０／ラパマイシンＩＣ５０）で示す。
【００２２】
３．マクロフィリン結合測定
ラパマイシンおよび構造的に関連のある免疫抑制剤ＦＫ−５０６は、両方ともマクロフィリン−１２（ＦＫ−５０６結合タンパク質またはＦＫＢＰ−１２としてまた既知）にインビボで結合し、この結合はこれらの化合物の免疫抑制活性に関連があると思われている。新規化合物はまた、相対的結合測定により証明されるようにマクロフィリン−１２に強く結合する。
【００２３】
この測定において、ＢＳＡと結合したＦＫ−５０６を、マイクロタイターウェルを被覆するために使用する。ビオチン化組換ヒトマクロフィリン−１２（ｂｉｏｔ−ＭＡＰ）は、固定化ＦＫ−５０６に、試験サンプルの存在下または不存在下結合させる。洗浄後（非特異的に結合したマクロフィリンの除去のため）、結合ｂｉｏｔ−ＭＡＰをストレプトアビジン−アルカリホスファターゼコンジュゲートと共にインキュベーションし、続いて洗浄し、ｐ−ニトロフェニルホスフェートを基質として加える。読みだしは４０５ｎｍのＯＤである。試験サンプルのｂｉｏｔ−ＭＡＰへの結合は、ＦＫ−５０６に結合するｂｉｏｔ−ＭＡＰの量の減少をもたらし、従ってＯＤ４０５を減少する。試験サンプルの一連の希釈はｂｉｏｔ−ＭＡＰの固定化ＦＫ−５０６への結合の５０％阻害（ＩＣ５０）をもたらす濃度の計算を可能にする。試験サンプルの阻害能力は標準として遊離ＦＫ−５０６と比較し得、相対的ＩＣ５０（即ち試験サンプルＩＣ５０／遊離ＦＫ−５０６  ＩＣ５０）で示す。
【００２４】
４．局所的移植片対宿主（ＧｖＨ）反応
新規化合物のインビボ効果は、例えばフォードら、トランスプランテーション１０（１９７０）２５８に記載のような好適な動物モデルにより提供される。６週齢雌ウィスター／フース（ＷＦ）ラット由来の脾臓細胞（１×１０７）を、約１００ｇの体重の雌（Ｆ３４４×ＷＦ）Ｆ１ラットの左後足に皮下的に０日に注射する。動物を連続４日間処置し、膝窩リンパ節を除去し、７日目に秤量する。２個のリンパ節の重量の違いを反応の評価のパラメーターとする。
【００２５】
５．ラットにおける腎臓同種移植反応
雌フィッシャー３４４ラット由来の一つの腎臓を、端と端をつなぐ吻合術を使用して片側（左側）を腎摘出したＷＦ受容ラットの腎臓管に移植する。尿管吻合もまた端と端をつなぐ。処置は移植の日に開始し、１４日間続ける。反対側の腎摘出は移植７日後に行い、受容者を提供者腎臓の作用に頼らせる。移植片受容者の生存を、移植片機能のパラメーターとする。
【００２６】
６．ラットにおける実験的誘発アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）
ＥＡＥにおける新規化合物の効果を、例えばレビン＆ウェンク、ＡＭＥＲ．Ｊ．ＰＡＴＨ．、４７（１９６５）６１；マックラーリンら、Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ．、１１３（１９７４）、ボレル、ＴＲＡＮＳＰＬＡＮＴ＆ＣＬＩＮ．ＩＭＭＵＮＯＬ．１３（１９８１）３に記載の方法により測定する。ＥＡＥは多発性硬化症の広く認められているモデルである。雄ウィスターラットの後足にウシ脊索および完全フロインドアジュバントの混合物を注射する。疾病の症状（しっぽおよび両後足の麻痺）は通常１６日以内に現れる。疾病の動物の数および発病の時間を記録する。
【００２７】
７．フロインドアジュバント関節炎
実験的に誘発した関節炎に対する効果は、例えばウィンター＆ナス、ＡＲＴＨＲＩＴＩＳ＆ＲＨＥＵＭＡＴＩＳＭ、９（１９６６）３９４；ビリンガム＆デーヴィス、ハンドブック・オブ・エクスペリメンタル・ファーマコル（ヴァン＆フェレイラ編、スプリンガー−フェラッヒ、ベルリン）５０／ＩＩ（１９７９）１０８−１４４に記載の方法を使用して示される。ＯＦＡおよびウィスターラット（雄または雌、体重１５０ｇ）に、しっぽの付け根または後足に、０．６ｍｇの凍結乾燥熱殺菌マイコバクテリウム・スメグマティス（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｍｅｇｍａｔｉｓ）を含む０．１ｍｌの鉱物油をｉ．ｃ．注射する。関節炎モデルの発病において、処置をアジュバント注射直後から開始する（１−１８日）；確立された関節炎モデルにおいて処置は、２次的炎症が非常に発達した（１４−２０日）場合、１４日に開始する。実験の終わりに、関節の腫張をミクロカリパス（ｍｉｃｒｏ−ｃａｌｉｐｅｒ）を使用して測定する。ＥＤ５０は、腫張（初期または２次の）を対照の半分に減少させる、ｍｇ／ｋｇでの経口投与量である。
【００２８】
８．抗癌およびＭＤＲ活性
新規化合物の抗癌活性および多剤耐性を軽減することによる抗癌剤の作用を促進する能力は、例えば抗癌剤、例えばコルヒチンまたはエトポシドをインビトロの多剤耐性細胞および医薬感受性細胞でインビトロでまたは多剤耐性または医薬感受性癌または感染を有する動物に、試験すべき新規化合物と共に、またはなしに投与することにより、および新規化合物単独の投与により証明される。
【００２９】
このようなインビトロ試験は、例えばリングら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、８３、１０３−１１６（１９７４）およびベック−ハンセンら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、８８、２３−３２（１９７６）に記載のように産生された任意の好適な薬剤耐性細胞系および対照（親）細胞系を使用して行う。具体的に選択すべきクローンは、多剤耐性（例えばクロリン耐性）系ＣＨＲ（サブクローンＣ５Ｓ３．２）および親、感受性系ＡＵＸ
Ｂ１（サブクローンＡＢ１  Ｓ１１）である。
【００３０】
インビボ抗癌および抗ＭＤＲ活性は、例えば多剤耐性および医薬感受性癌細胞を注射されたマウスにおいて示される。医薬物質ＤＲ、ＶＣ、ＡＭ、ＥＴ、ＴＥまたはＣＣに耐性のエーリッヒ腹水癌（ＥＡ）サブラインを、スラターら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、７０、１１３１（１９８２）に記載の方法によりＥＡ細胞のＢＡＬＢ／ｃ宿主マウスの続く世代への連続移植により発現させる。
【００３１】
同等の結果が類似の設計、例えばインビボ新規化合物試験モデルを使用して、または薬剤耐性および薬剤感受性ウィルス株、抗生物質（例えばペニシリン）耐性および感受性細菌株、抗真菌耐性および感受性菌株および医薬耐性プロトゾール株、例えばプラスモディアル株、例えば後天性化学療法剤、抗マラリア薬耐性を示す自然に発生するプラスモジウム・ファルシパラムのサブストレインを感染させた試験動物を使用して、同様の結果が得られ得る。
【００３２】
９．ＦＫＢＰ結合
ある新規化合物、特に２８−Ｏ−メチル−ラパマイシンのようなＣ２８のみでＯ−置換されたものは免疫抑制性ではない。これはＦＫ５０６およびラパマイシンと比較した標準インビトロ測定において示すことができる。例えば、ＦＫ５０６は、ＩＬ−２レポーター遺伝子測定で示すことができるように、ＩＬ−２転写の有効な阻害剤として知られている。ラパマイシンはＩＬ−２レポーター遺伝子測定では活性ではないが、ＩＬ−６依存Ｔ−細胞増殖を強く阻害する。両方の化合物はリンパ球混合反応の非常に有効な阻害剤である。非免疫抑制性は、上記１−７のインビボモデルでまた示すことができる。しかしながら、免疫抑制性でないこれらの新規化合物でさえマクロフィリンに結合し、非免疫抑制性が利点となるある実用性を提供する。
【００３３】
マクロフィリンに強く結合し、それ自身免疫抑制性でないこれらの新規化合物は、ＦＫ５０６、ラパマイシンおよび免疫抑制性新規化合物のようなマクロフィリン結合免疫抑制剤の過剰投与の処置に使用できる。
【００３４】
１０．ステロイド相乗作用
新規化合物のマクロフィリン結合活性により、またそれはコルチコステロイドの活性の促進または相乗に有効である。本発明の化合物とデキサメタゾンのようなコルチコステロイドと組み合わせた処置は、非常に促進されたステロイド様活性をもたらす。これは、例えばニングら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９３）２６８：６０７３に記載のような、例えばマウス乳癌ウィルス−クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＭＭＴＶ−ＣＡＴ）レポーター遺伝子測定により示すことができる。この相乗作用はコルチコステロイドの投与量の減少を可能にし、それによりある場合の副作用の危険性を減少させる。
【００３５】
１１．ＭｉｐおよびＭｉｐ様因子阻害
加えて、新規化合物は、マクロフィリンに構造的に類似する種々のＭｉｐ（マクロファージ感染性促進物）およびＭｉｐ様因子に結合し、阻害する。ＭｉｐおよびＭｉｐ様因子は、クラミジア属（ｇｅｎｅｒａ  Ｃｈｌａｍｉｄｉａ）、例えばクラミジア・トラコマティス（Ｃｈｌａｍｉｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）；ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、例えばナイセリア・メニンギチディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）；およびレジオネラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）、例えばレジオネラ・ニューモフィリア（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ）を含む広範囲の種々の病原菌、およびまたリッケトシアレス目の強制寄生虫の仲間により産生されるビルレンス因子である。これらの因子は細胞内感染の確立において重要な役割を担う。ＭｉｐまたはＭｉｐ様因子を産生する病原菌の感染性の減少における新規化合物の効力は、例えばラントモースら、Ｍｏｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．（１９９３）７：７７７に記載の方法を使用して、マクロライドの存在下または非存在下で培養した細胞における病原菌の感染性を比較することにより示すことができる。本発明の非免疫抑制性化合物は、それらが免疫抑制性でなく、病原菌に対する体の本来の免疫防御を減少させないため、この徴候に使用するのは好ましい。
【００３６】
新規化合物は、診断またはスクリーニングの目的の例えば競合測定において、マクロフィリン結合化合物の存在または量の検出の測定にまた有用である。したがって、他の態様において、本発明は、試験すべき試験溶液、例えば血液、血漿または試験ブロス中のマクロフィリン結合化合物の存在を検出するためのスクリーニングツールとしての新規化合物の使用を提供する。好ましくは、新規化合物はマイクロタイターウェル中で非動化し、標識マクロフィリン−１２（ＦＫＢＰ−１２）に、試験溶液の存在下または非存在下結合させる。あるいは、ＦＫＢＰ−１２をマイクロタイターウェル中で非動化し、標識された新規化合物、例えば蛍光、酵素または放射能標識された新規化合物、例えばＣ４０および／またはＣ２８を標識基でＯ−置換された新規化合物に、試験溶液の存在下または非存在下結合させる。プレートを洗浄し、結合標識化合物の量を測定する。試験溶液中のマクロフィリン−結合物質は結合標識化合物の量とおおまかに反比例している。定量的分析のために、標準結合曲線を、既知の濃度のマクロフィリン結合化合物を使用して作成する。
【００３７】
【実施例】
以下の実施例において、特有の分光データは容易な同定のために記載した。ラパマイシンと明白に異ならないピークは含んでいない。生物学的データは、リンパ球混合反応（ＭＬＲ）およびＩＬ−６依存性増殖（ＩＬ−６  ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．）測定の場合はラパマイシンと、マクロフィリン結合測定（ＭＢＡ）においてはＦＫ−５０６と比較した相対的ＩＣ５０で示す。高いＩＣ５０は低い結合親和性に相関する。
【００３８】
実施例１：４０−Ｏ−ベンジル−ラパマイシン
２：１シクロヘキサン−塩化メチレン２．１ｍｌ中のラパマイシン１８３ｍｇ（０．２００ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ベンジル−トリクロロアセトイミデート７５μｌ（０．４０２ｍｍｏｌ）、続いてトリフルオロメタンスルホン酸２．６μｌ（２９μｍｏｌ  １５モル％）を添加し、そうすると混合物はすぐに黄色に変わる。３時間後、混合物を酢酸エチルで希釈し、１０％水性炭酸水素ナトリウムで停止させる。層を分離し、水性層を酢酸エチルで２回抽出する。合わせた有機溶液を１０％水性炭酸水素ナトリウムで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下濃縮する。残渣をシリカゲル（５０：５０  ヘキサン−酢酸エチル）上のカラムクロマトグラフィーで精製し、白色無定形結晶として４０−Ｏ−ベンジル−ラパマイシンを得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７３（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７３（３Ｈ，ｓ），３．１２（４Ｈ，ｓおよびｍ），３．３３（３Ｈ，ｓ），３．４９（３Ｈ，ｓ），４．１５（１Ｈ，ｂｄ），４．６５（１Ｈ，ｄ），４．７１（１Ｈ，ｄ），７．２２−７．３８（５Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０２６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９７２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９５４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．８
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      １０
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            １１０
【００３９】
実施例２：４０−Ｏ−（４’−ヒドロキシメチル）ベンジル−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−［４’−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシメチル］ベンジル−ラパマイシン
塩化メチレン５ｍｌ中の無水トリフレート（ｔｒｉｔｌｉｃ  ａｎｈｙｄｒｉｄｅ）３４５μｌ（２．０ｍｍｏｌ）の撹拌した、冷（−７８℃）溶液に、塩化メチレン５ｍｌ中の４−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシメチル−ベンジルアルコール５０４ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ）および２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチル−ピリジン８２０ｍｇ（４．０ｍｍｏｌ）を加える。得られる混合物を−２０℃まで暖め、撹拌をその温度で０．５時間続ける。混合物を−７８℃まで再冷却し、塩化メチレン５ｍｌ中のラパマイシン９１４ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）の溶液を加える。混合物を一晩室温まで暖め、次いで１０％水性炭酸水素ナトリウムで停止する。層を分離し、水性溶液を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濾過し、濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（５０：５０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４０−Ｏ−［４’−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシメチル］ベンジル−ラパマイシンを白色泡として得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１７０（［Ｍ；Ｎａ］＋）、１０９８（［Ｍ−（Ｏ−ＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
【００４０】
ｂ）４０−Ｏ−（４’−ヒドロキシメチル）ベンジル−ラパマイシン
アセトニトリル２ｍｌ中の実施例２で得た化合物９８ｍｇ（０．０９３ｍｍｏｌ）の撹拌した冷（０℃）溶液にＨＦ−ピリジン０．２ｍｌを加える。得られる混合物を２時間撹拌し、水性炭酸水素ナトリウムで停止し、酢酸エチルで抽出する。有機溶液を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（２０：８０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、標題化合物を白色泡として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７３（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），３．２２（１Ｈ，ｍ），４．６７（４Ｈ，ｍ），７．３５（４Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０５６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１００２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９８４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９６６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），９３４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ２．７
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ３．９
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ３
【００４１】
実施例３：４０−Ｏ−［４’−（１，２−ジヒドロキシエチル）］ベンジル−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−［４’−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）］ベンジル−ラパマイシン
４−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）ベンジルトリクロロアセトイミデート４５２ｍｇ（１．２４ｍｍｏｌ）、続いて２，６−ジ−ｔ−ブチルピリジン０．１４ｍｌ（０．６４ｍｍｏｌ）およびトリフルオロメタンスルホン酸５６μｌ（０．６４ｍｍｏｌ）を１：１シクロヘキサン−塩化メチレン１０ｍｌに溶解する。この混合物に塩化メチレン２ｍｌ中のラパマイシン５８７ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ）の溶液を加える。反応物を一晩室温で撹拌し、水性炭酸水素ナトリウムで停止する。層を分離し、水性層を２回酢酸エチルで抽出する。合わせた有機溶液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（５０：５０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、白色、無定形固体として４０−Ｏ−［４’−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）］ベンジル−ラパマイシンを得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７３（１Ｈ，ｄｄ），１．４８（３Ｈ，ｓ），１．５５（３Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），３．６７（３Ｈ，ｍ），４．２８（１Ｈ，ｄｄ），４．６２（１Ｈ，ｄ），４．６９（１Ｈ，ｄ），５．０６（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（４Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１２６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０７２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１０５４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），１０１４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＣＯＣＨ３）］＋），９９６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ＋ＣＨ３ＣＯＣＨ３）］＋），９７８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ＋ＣＨ３ＣＯＣＨ３）］＋）。
【００４２】
ｂ）４０−Ｏ−［４’−（１，２−ジヒドロキシエチル）］ベンジル−ラパマイシンメタノール４ｍｌ中の４０−Ｏ−［４’−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−イル）］ベンジル−ラパマイシン９０．７ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）の溶液に１Ｎ水性ＨＣｌ１ｍｌを加える。２時間後、混合物を水性炭酸水素ナトリウムで停止し、２回酢酸エチルで抽出する。有機層を食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で精製し、白色泡として標題化合物を得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７３（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），３．７０（４Ｈ，ｍ），４．６３（１Ｈ，ｄ），４．６９（１Ｈ，ｄ），４．８０（１Ｈ，ｄｄ），７．３３（４Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０８６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０３２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１０１４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９９６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ０．９２
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      １０．５
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ２２
【００４３】
実施例４：４０−Ｏ−アリル−ラパマイシン
塩化メチレン１０ｍｌ中の無水トリフレート０．３３ｍｌ（２．０１ｍｍｏｌ）の撹拌した、冷（−７８℃）溶液に、塩化メチレン５ｍｌ中のアリルアルコール０．１４ｍｌ（２．０６ｍｍｏｌ）および２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチル−ピリジン０．４２ｇ（２．０４ｍｍｏｌ）を加える。得られる緑色がかった溶液を１．５時間撹拌し、塩化メチレン５ｍｌ中のラパマイシン９１５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）および２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチル−ピリジン０．４２ｇ（２．０４ｍｍｏｌ）を加える。撹拌を−７８℃で０．５時間続け、混合物を室温まで暖める。１時間以上たった後、混合物を水性炭酸水素ナトリウムで停止し、層を分離する。水性層を２回酢酸エチルで抽出する。合わせた有機溶液を水性炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し濃縮する。得られる緑色油状物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（６０：４０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、標題化合物を無色、無定形固体として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），３．０５（１Ｈ，ｍ），４．１３（２Ｈ，ｂｄ），５．１４（２Ｈ，ｍ），５．２７（２Ｈ，ｍ），５．９２（２Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９７６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９２２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９０４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），８８６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），８７２（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），８５４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ８
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ２６０
【００４４】
実施例５：４０−Ｏ−［３’−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４（Ｓ）−イル）−プロプ−２’−エン−１’−イル］−ラパマイシン
塩化メチレン２０ｍｌ中のＥ−（４Ｓ）−４，５−Ｏ，Ｏ−イソプロピリデン−ペンタ−２−エン−１，４，５−トリオール０．６４ｇ（４．００ｍｍｏｌ）および２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチル−ピリジン１．２６ｇ（６．００ｍｍｏｌ）の撹拌、冷（−７８℃）溶液に、無水トリフレート０．８２ｍｌ（５．００ｍｍｏｌ）を加える。得られる混合物をその温度で２時間撹拌し、塩化メチレン５ｍｌ中のラパマイシン１．８２ｇ（２．００ｍｍｏｌ）および２，６−ジ−ｔ−ブチル−４−メチル−ピリジン１．２６ｇ（６．００ｍｍｏｌ）の溶液を加える。混合物を徐々に一晩で室温まで暖め、次いで水性炭酸水素ナトリウムで停止する。層を分離し、水性層を３回酢酸エチルで抽出する。有機溶液を水性炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（４０：６０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、標題化合物を白色固体として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．３８（３Ｈ，ｓ），１．４２（３Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７３（３Ｈ，ｓ），３．０６（１Ｈ，ｍ），３．５８（２Ｈ，ｍ），４．０８（１Ｈ，ｄｄ），４．１５（２Ｈ，ｍ），４．５２（１Ｈ，ｂｄｄ），５．７２（１Ｈ，ｍ），５．８８（１Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０７６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０２２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１００４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９６４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＣＯＣＨ３）］＋），９４６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ＋ＣＨ３ＣＯＣＨ３）］＋），９４６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ＋ＣＨ３ＣＯＣＨ３）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ０．６４
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                  １１
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ８
【００４５】
実施例６：（２’Ｅ，４’Ｓ）−４０−Ｏ−（４’，５’−ジヒドロキシペント−２’−エン−１’−イル）−ラパマイシン
実施例３、工程ｂ）に記載の条件を前の実施例で得られた化合物に適用し、続いてシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（９５：５  酢酸エチル−メタノール）による精製により、標題化合物を白色泡として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．６８（１Ｈ，ｄｄ），３．０４（１Ｈ，ｍ），４．１８（５Ｈ，ｍ），５．７５（１Ｈ，ｄｄ），５．８８（１Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０３６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０１３（Ｍ＋），９９５（［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋），９８２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９６４（［Ｍ−ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９４６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），８３２（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），９１４（［Ｍ−ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．７
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                    １２
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ３．５
【００４６】
実施例７：４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エトキシカルボニルメチル−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］エトキシカルボニルメチル−ラパマイシン
塩化メチレン３０ｍｌ中のラパマイシン２．７４ｇ（３．００ｍｍｏｌ）および四酢酸二ロジウム二水和物３０ｍｇ（０．０６ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、塩化メチレン１０ｍｌ中の２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシエチルジアゾ酢酸０．３８ｍｌ（３．６０ｍｍｏｌ）の溶液を５時間にわたって加える。この添加が完了した後、撹拌を更に１時間続け、次いで反応を１Ｎ水性ＨＣｌで停止させる。層を分離し、水性層を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機溶液を水性炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（４０：６０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］エトキシカルボニルメチル−ラパマイシンを産生する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．０６（６Ｈ，ｓ），０．６８（１Ｈ，ｄｄ），０．８８（９Ｈ，ｓ），１．６４（３Ｈ，ｓ），１．７３（３Ｈ，ｓ），３．１２（５Ｈ，ｓおよびｍ），３．８１（２Ｈ，ｄｄ），４．１９（２Ｈ，ｄｄ），４．３２（２Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１５２（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０８０（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
【００４７】
ｂ）４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エトキシカルボニルメチル−ラパマイシン
アセトニトリル１．５ｍｌ中の４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］エトキシカルボニルメチル−ラパマイシン８１ｍｇ（０．０７ｍｍｏｌ）の撹拌した、冷（０℃）溶液にＨＦ−ピリジン０．１５ｍｌを加える。２時間後反応を水性炭酸水素ナトリウムで停止する。混合物を酢酸エチルで抽出する。有機溶液を食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリムで乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をＰＴＬＣ（酢酸エチル）で精製し、標題化合物を白色固体として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７０（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），３．１３（５Ｈ，ｓおよびｍ），３．８５（３Ｈ，ｍ），４．２５（５Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０３８（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９８４（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９６６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９４８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ４
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ９．７
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ２．１
【００４８】
実施例８：４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］エチル−ラパマイシン
トルエン３０ｍｌ中のラパマイシン９．１４ｇ（１０ｍｍｏｌ）および２，６−ルチジン４．７０ｍｌ（４０ｍｍｏｌ）の溶液を６０℃まで暖め、トルエン２０ｍｌ中の２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシエチルトリトリフレート６．１７ｇ（２０ｍｍｏｌ）および２，６−ルチジン２．３５ｍｌ（２０ｍｍｏｌ）を加える。本混合物を１．５時間撹拌する。次いで、トルエン１０ｍｌ中のトリフレート３．０８ｇ（１０ｍｍｏｌ）および２，６−ルチジン１．２ｍｌ（１０ｍｍｏｌ）の溶液の２回分を１．５時間間隔で添加する。最後の分を添加した後、撹拌を６０℃で２時間続け、得られる茶色の懸濁液を濾過する。濾液を酢酸エチルで希釈し、水性炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄する。有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（４０：６０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］エチル−ラパマイシンを白色固体として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．０６（６Ｈ，ｓ），０．７２（１Ｈ，ｄｄ），０．９０（９Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），３．０２（１Ｈ，ｍ），３．６３（３Ｈ，ｍ），３．７２（３Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０９４（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０２２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
【００４９】
ｂ）４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン
メタノール２０ｍｌ中の４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］エチル−ラパマイシン４．５ｇ（４．２ｍｍｏｌ）の撹拌、冷（０℃）溶液に、１Ｎ  ＨＣｌ２ｍｌを加える。溶液を２時間撹拌し、水性炭酸水素ナトリウムで中和する。混合物を３分割の酢酸エチルで抽出する。有機溶液を水性炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。シリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）による精製により、白色固体として標題化合物を得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ）３．１３（５Ｈ，ｓおよびｍ），３．５２−３．９１（８Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９８０（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９２６（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９０８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），８９０（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），８７６（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），８５８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ２．２
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ２．８
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ３．４
【００５０】
実施例９：４０−Ｏ−（３−ヒドロキシ）プロピル−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−［３−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］プロピル−ラパマイシン
３−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシプロプ−１−イルトリフレートを使用して実施例８、工程ａ）と同様の方法により、４０−Ｏ−［３−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］プロピル−ラパマイシンを得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．０５（６Ｈ，ｓ），０．７２（１Ｈ，ｄｄ），０．９０（９Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），１．７７（２Ｈ，ｍ），３．０３（１Ｈ，ｍ），３．５２−３．７３（７Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１０８（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０３６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
【００５１】
ｂ）４０−Ｏ−（３−ヒドロキシ）プロピル−ラパマイシン
工程ａ）で得られた化合物の実施例８、工程ｂ）と同様の条件での処理により、標題化合物を産生する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），１．８０（２Ｈ，ｍ），３．０５（１Ｈ，ｍ），３．５５−３．９１（８Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９９４（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９４０（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９２２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９０４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），８７２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．６
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ２．７
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            １１
【００５２】
実施例１０：４０−Ｏ−（６−ヒドロキシ）ヘキシル−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−［６−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］ヘキシル−ラパマイシン
６−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシヘキシ−１−イルトリフレートを使用して実施例８、工程ａ）と同様の方法により、４０−Ｏ−［６−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］ヘキシル−ラパマイシンを得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１５０（［Ｍ＋Ｎａ］＋）。
【００５３】
ｂ）４０−Ｏ−（６−ヒドロキシ）ヘキシル−ラパマイシン
工程ａ）で得られた化合物の実施例８、工程ｂ）に記載の条件での処理により、標題化合物を産生する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．３８（２Ｈ，ｍ），１．５７（４Ｈ，ｍ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），３．０２（１Ｈ，ｍ），３．４９−３．７２（８Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０３６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９８２（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９６４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９４６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），９１４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ０．８
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ８．５
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            １８
【００５４】
実施例１１：４０−Ｏ−［２−（２−ヒドロキシ）エトキシ］エチル−ラパマイシンａ）４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシエトキシ］エチル−ラパマイシン
２−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシエトキシ］エチルトリフレートを使用して実施例８、工程ａ）の記載と同様の方法により、４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシエトキシ］エチル−ラパマイシンを得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．０６（６Ｈ，ｓ），０．７１（１Ｈ，ｄｄ），０．８８（９Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），３．０７（１Ｈ，ｍ），３．５１−３．７９（１１Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１３８（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１１１５（Ｍ＋），１０９７（［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋），１０８４（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１０６６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），１０４８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），１０３４（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），１０１６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
【００５５】
ｂ）４０−Ｏ−［２−（２−ヒドロキシ）エトキシ］エチル−ラパマイシン
工程ａ）で得られた化合物の実施例８、工程ｂ）に記載の条件での処理により、標題化合物を製造する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７４（３Ｈ，ｓ），３．０５（１Ｈ，ｍ），３．５１−３．７７（１１Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０２４（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１００１（Ｍ＋），９８３（［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋），９７０（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９５２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９３４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），９２０（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），９０２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．２
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ３．２
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ２
【００５６】
実施例１２：４０−Ｏ−［（３Ｓ）−２，２−ジメチルジオキソラン−３−イル］メチル−ラパマイシン
グリセロールアセトニドのトリフレートを使用して実施例８、工程ａ）に記載の方法で、標題化合物を得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．３６（３Ｈ，ｓ），１．４２（３Ｈ，ｓ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），３．０６（１Ｈ，ｍ），３．５５（２Ｈ，ｍ），３．６９（３Ｈ，ｍ），４．０６（１Ｈ，ｄｄ），４．２６（１Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０５０（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９９６（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９７８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９６０（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ０．９
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ８
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ２９０
【００５７】
実施例１３：４０−Ｏ−［（２Ｓ）−２，３−ジヒドロキシプロプ−１−イル］−ラパマイシン
前の実施例で得られた化合物の、実施例３に記載の条件での処理により、標題化合物を産生する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），３．０７（１Ｈ，ｍ），３．６８（８Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０１０（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９５６（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９３８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９２０（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），８８８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ０．６７
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ９
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            １０
【００５８】
実施例１４：４０−Ｏ−（２−アセトキシ）エチル−ラパマイシン
塩化メチレン２ｍｌ中の４０−Ｏ−ヒドロキシエチル−ラパマイシン５３ｍｇ（０．０５５ｍｍｏｌ）の撹拌した冷（０℃）溶液に、ピリジン０．２ｍｌ、続いて塩化アセチル０．０２ｍｌ（０．２８１ｍｍｏｌ）を加える。混合物を３時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、次いで水性炭酸水素ナトリウム、冷１Ｎ  ＨＣｌそして再び水性炭酸水素ナトリウムで洗浄する。有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（３０：７０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、標題化合物を白色固体として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），２．０８（３Ｈ，ｓ），３．０７（１Ｈ，ｍ），３．７８（２Ｈ，ｄｄ），４．２０（２Ｈ，ｄｄ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０２２（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９９９（Ｍ＋），９８２（［Ｍ−ＯＨ］＋），９６８（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９５０（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），９３２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），９１８（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），９００（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ２
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ７．６
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ３．６
【００５９】
実施例１５：４０−Ｏ−（２−ニコチノイルオキシ）エチル−ラパマイシン
塩化ニコチノイル塩酸塩を使用して前の実施例の記載と同様の方法により、標題化合物を得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６５（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），３．０７（１Ｈ，ｍ），３．９４（２Ｈ，ｄｄ），４．４９（２Ｈ，ｔ），７．３９（１Ｈ，ｄｄ），８．３１（１Ｈ，ｄｄｄ），８．７８（１Ｈ，ｄｄｄ），９．２４（１Ｈ，ｄｄ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０８５（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０６３（［Ｍ＋Ｈ］＋），１０４５（［Ｍ−ＯＨ］＋），１０３１（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１０１３（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．１
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ６．９
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ５
【００６０】
実施例１６：４０−Ｏ−［２−（Ｎ−モルホリノ）アセトキシ］エチル−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−（２−ブロモアセトキシ）エチル−ラパマイシン
塩化ブロモアセチルを使用して実施例１４の記載と同様の方法により、４０−Ｏ−（２−ブロモアセトキシ）エチル−ラパマイシンを得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６７（３Ｈ，ｓ），１．７６（３Ｈ，ｓ），３．０３（１Ｈ，ｍ），３．８２（２Ｈ，ｍ），３．８７（２Ｈ，ｓ），４．３１（２Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１００，１１０２（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０７７（Ｍ＋），１０６１（［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋），１０４６，１０４８（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１０２８，１０３０（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），１０１２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），９９６（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），９８０（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
【００６１】
ｂ）４０−Ｏ−［２−（Ｎ−モルホリノ）アセトキシ］エチル−ラパマイシン
ＤＭＦ０．５ｍｌ中４０−Ｏ−（２−ブロモアセトキシ）エチル−ラパマイシン５４ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）の撹拌した冷（−４５℃）の溶液に、ＤＭＦ０．２ｍｌ中のモルホリン０．０２２ｍｌ（０．２５ｍｍｏｌ）の溶液を加え、得られる混合物をその温度で１時間撹拌し、次いで水性炭酸水素ナトリウムで処理する。本混合物を３回酢酸エチルで抽出する。有機溶液を食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（９５：５  酢酸エチル−メタノール）で精製して、標題化合物を無定形白色固体として産生する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６７（３Ｈ，ｓ），１．７６（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｍ），３．０７（１Ｈ，ｍ），３．２４（２Ｈ，ｓ），３．７８（８Ｈ，ｍ），４．２７（２Ｈ，ｔ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１０７（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０８５（［Ｍ＋Ｈ］＋），１０６７（［Ｍ−ＯＨ］＋），１０５３（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１０３５（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．３
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ４
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ３．５
【００６２】
実施例１７：４０−Ｏ−（２−Ｎ−イミダゾリルアセトキシ）エチル−ラパマイシン
イミダゾールを使用して実施例１６、工程ｂ）の記載と同様の方法により、標題化合物を得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６７（３Ｈ，ｓ），１．７８（３Ｈ，ｓ），３．０６（１Ｈ，ｍ），３．８０（２Ｈ，ｍ），４．３２（２Ｈ，ｍ），４．７３（２Ｈ，ｓ），６．９７（１Ｈ，ｄｄ），７．０９（１Ｈ，ｄｄ），７．５２（１Ｈ，ｄｄ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０６６（［Ｍ＋Ｈ］＋），１０４８（［Ｍ−ＯＨ］＋），１０３４（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），１０１６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ７．６
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ３．４
【００６３】
実施例１８：４０−Ｏ−［２−（Ｎ−メチル−Ｎ’−ピペラジニル）アセトキシ］エチル−ラパマイシン
Ｎ−メチルピペラジンを使用して実施例１６、工程ｂ）の記載と同様の方法により、標題化合物を得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７２（１Ｈ，ｄｄ），１．６７（３Ｈ，ｓ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．７８（４Ｈ，ｓおよびｍ），３．０２（４Ｈ，ｂｓ），３．０８（１Ｈ，ｍ），３．３２（２Ｈ，ｓ），３．８０（２Ｈ，ｄｄ），４．２７（２Ｈ，ｔ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０９８（［Ｍ＋Ｈ］＋），１０６６（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ２．６
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      １０．３
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            ５
【００６４】
実施例１９：３９−Ｏ−デスメチル−３９，４０−Ｏ，Ｏ−エチレン−ラパマイシン
塩化メチレン０．５ｍｌ中の４０−Ｏ−ヒドロキシエチル−ラパマイシン４８ｍｇ（０．０５ｍｍｏｌ）および２，６−ルチジン０．０２３ｍｌ（０．２０ｍｍｏｌ）の撹拌した冷（−２０℃）溶液に、無水トリフレート０．００８ｍｌ（０．０５ｍｍｏｌ）を加える。混合物をその温度で２時間撹拌し、次いで室温まで暖め、更に１時間撹拌する。反応を水性炭酸水素ナトリウムを加えて停止させ、得られる混合物を３回分の酢酸エチルで抽出する。有機溶液を食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（３０：７０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、標題化合物を白色固体として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ１．６６（３Ｈ，ｓ），１．７５（３Ｈ，ｓ），３．１４（３Ｈ，ｓ），３．３５（３Ｈ，ｓ），３．７６（４Ｈ，ｓ）：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９４８（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９２５（Ｍ＋），９０８（［Ｍ−ＯＨ］＋），８９４（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），８７６（［Ｍ（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），８５８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋），８４４（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），８２６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．６
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ２２．９
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            １６
【００６５】
実施例２０：（２６Ｒ）−２６−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン
ａ）（２６Ｒ）−２６−ジヒドロ−４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）］エチル−ラパマイシン
２：１アセトニトリル−酢酸４．５ｍｌ中にトリメチルアンモニウム−トリアセトキシボロハイドライド３１５ｍｇ（１．２ｍｍｏｌ）を溶解する。得られる溶液を１時間室温で撹拌し、−３５℃に冷却し、次いで４０−Ｏ−［２−（ｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］エチル−ラパマイシンを加える。得られる混合物を同様の温度で一晩撹拌し、水性炭酸水素ナトリウムの添加により停止する。混合物を３分割の酢酸エチルで抽出する。有機溶液を水性炭酸水素ナトリウム、２分割の３０％水性ロシェル塩および食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（４０：６０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、標題化合物を白色結晶として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．０６（６Ｈ，ｓ），０．７３（１Ｈ，ｄｄ），０．９０（９Ｈ，ｓ），１．６４（３Ｈ，ｓ），１．６７（３Ｈ，ｓ），３．０２（１Ｈ，ｍ），３．１５（１Ｈ，ｍ），３．６４（３Ｈ，ｍ），３．７１（２Ｈ，ｄｄ），３．９１（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０９６（［Ｍ＋Ｎａ］＋），１０４１（［Ｍ−ＨＯＣＨ３］＋），１０２４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），１００６（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）＋），９７４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
【００６６】
ｂ）（２６Ｒ）−２６−ジヒドロ−４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン
工程ａ）で得た化合物の実施例８、工程ｂ）に記載の条件での処理により、標題化合物を産生する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７５（１Ｈ，ｄｄ），１．６６（３Ｈ，ｓ），１．７０（３Ｈ，ｓ），３．１８（１Ｈ，ｍ），３．５２−３．８４（７Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９８２（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９２８（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），９１０（［Ｍ−（ＯＣＨ３−Ｈ２Ｏ）］＋），８９２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            ３．９
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      ５３
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            １８
【００６７】
実施例２１：２８−Ｏ−メチル−ラパマイシン
塩化メチレン０．５ｍｌ中の４０−Ｏ−ＴＢＳ−ラパマイシン（ラパマイシンを、２当量の２，６−ルチジンの存在下、塩化メチレン中の１当量のＴＢＳトリフレートでシリル化することにより得る）１０３ｍｇ（０．１ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、プロトンスポンジ８５．８ｍｇ（０．４０ｍｍｏｌ）、続けてトリメチルオキソニウムテトラフルオロボレート４４ｍｇ（０．３０ｍｍｏｌ）を加える。得られる茶色の不均質混合物を一晩撹拌し、水性炭酸水素ナトリウムで停止し、酢酸エチルで抽出する。有機溶液を１Ｎ  ＨＣｌ、水性炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（６０：４０  ヘキサン−酢酸エチル）で精製し、４０−Ｏ−ｔ−ブチルジメチルシリル−２８−Ｏ−メチル−ラパマイシンを得る。後者の化合物を実施例１０、工程ｂ）に記載の条件下でシリル化し、ＰＴＬＣ（酢酸エチル）の後、標題化合物を白色固体として得る：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ０．７０（１Ｈ，ｄｄ），１．６８（６Ｈ，２ｓ），２．９５（１Ｈ，ｍ），３．１３（３Ｈ，ｓ），３．１４（３Ｈ，ｓ），３．２８（３Ｈ，ｓ），３．４１（３Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９５０（［Ｍ＋Ｎａ］＋），９２７（Ｍ＋），９０９（［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋），８９６（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），８７８（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ）］＋），８６４（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋ＣＨ３ＯＨ）］＋），８４６（［Ｍ−（２ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋），８３２（［Ｍ−（ＯＣＨ３＋２ＣＨ３ＯＨ）］＋），８１４（［Ｍ−（３ＣＨ３ＯＨ＋ＯＨ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）                                            １．５８
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）                      １２４０
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）                                            １３００
【００６８】
実施例２２：４０−Ｏ−（２−アミノエチル）−ラパマイシン
ａ）４０−Ｏ−（２−ブロモエチル）−ラパマイシン
２，６−ルチジン０．６４ｍｌおよび２−ブロモエチルトリフレート１．２８ｇを含むトルエン５ｍｌ中のラパマイシン９１４ｍｇの溶液を６５℃で１８時間加熱する。次いで反応混合物を室温まで冷却し、飽和二炭酸溶液２０ｍｌに注ぎ、酢酸エチル３×２０ｍｌで抽出する。有機層を炭酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下ロータリーエバポレーターで蒸発させる。残渣をシリカゲル１００ｇ上でクロマトグラフィーを行い、ヘキサン／酢酸エチル  ３／２で溶出し、４０−Ｏ−（２−ブロモエチル）−ラパマイシンを無定形固体として得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０４４および１０４２（１００％，Ｍ＋Ｎａ）；９７２および９７０（５５％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ））。
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ：０．７２（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；３．１３（３Ｈ，ｓ）；３．３３（３Ｈ，ｓ）；３．４５（３Ｈ，ｓ）；３．９（４Ｈ，ｍ）；４．７８（１Ｈ，ｓ）
【００６９】
ｂ）４０−Ｏ−（２−アジドエチル）−ラパマイシン
ＤＭＦ４０ｍｌ中の４０−Ｏ−（２−ブロモエチル）−ラパマイシン２．４ｇの溶液をナトリウムアジド０．１９ｇで室温で処理する。２時間後、混合物を飽和炭酸水素ナトリウム１００ｍｌに注ぎ、酢酸エチル３×１００ｍｌで抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下蒸発させる。粗生産物をヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカゲル上のクロマトグラフィーで精製し、４０−Ｏ−（２−アジドエチル）−ラパマイシンを得る：ＭＳ（ＦＡＢ）；１００５（１００％，Ｍ＋Ｎａ）；９５１（２４％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；９３３（１００％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ）
【００７０】
ｃ）４０−Ｏ−（２−アミノエチル）−ラパマイシン
ＴＨＦ／水５／１  ３ｍｌ中の４０−Ｏ−（アジドエチル）−ラパマイシン２３０ｍｇの溶液に、室温でトリフェニルホスフィン３０７ｍｇを加える。反応混合物は黄色になる。７時間後、反応混合物をシリカゲルｘｇにかけ、酢酸エチル／メタノール／酢酸５０／５０／０．５で溶出してクロマトグラフィーを行い、標題化合物をその酢酸塩の形で得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９７９（４５％，Ｍ＋Ｎａ）；９５７（１００％，ＭＨ）；９２５（６３％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；９０７（２５％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ）
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：０．７
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：１０
【００７１】
実施例２３：４０−Ｏ−（２−アセトアミノエチル）−ラパマイシン
ＴＨＦ２ｍｌ中の４０−Ｏ−（２−アミノエチル）−ラパマイシンの酢酸塩１０１ｍｇの溶液に、ピリジン０．０２ｍｌおよび塩化アセチル０．０７ｍｌを加える。反応混合物を室温に１８時間維持し、次いで飽和炭酸水素ナトリウム７ｍｌに注ぐ。水性層を酢酸エチル３×５ｍｌで抽出し、有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥する。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲル１０ｇ上のクロマトグラフィーにかけ、最初は酢酸エチル、続いて酢酸エチル／メタノール／酢酸５０／５０／０．５で溶出し、標題生産物を得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０２１（２０％，Ｍ＋Ｎａ）；９６７（２８％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；９４９（１００％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ）
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ：０７１（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；１．９８（３Ｈ，ｓ）；３．１３（３Ｈ，ｓ）；３．３４（３Ｈ，ｓ）；３．４４（３Ｈ，ｓ）；４．７５（１Ｈ，ｓ）
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：１．１
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：２．３
【００７２】
実施例２４：４０−Ｏ−（２−ニコチンアミドエチル）−ラパマイシン
４０−（２−アミノエチル）−ラパマイシン酢酸塩１０１ｍｇを酢酸エチル５ｍｌに溶解し、飽和炭酸水素ナトリウムで２×抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで抽出し、ＤＣＣ２２ｍｇおよびニコチン酸１５ｍｇで処理する。室温で１５時間の後、反応混合物を蒸発させ、残渣をシリカゲル上のクロマトグラフィーにかけ、酢酸エチル、続いて酢酸エチル／メタノール９／１で溶出し、標題生産物を得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０８４（８０％，Ｍ＋Ｎａ）；１０６２（４０％，ＭＨ）；１０３８（１００％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；１０１２（５０％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ）
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ：０．７２（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；３．１３（３Ｈ，ｓ）；３．３３（３Ｈ，ｓ）；３．３７（３Ｈ，ｓ）；７．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６Ｈｚ，Ｊ＝８Ｈｚ），８．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）；８．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ）；９．０４（１Ｈ，広いｓ）
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：１．２
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：２．８
【００７３】
実施例２５：４０−Ｏ−（２−（Ｎ−メチル−イミダゾ−２’−イル−カルベトオキサミド）エチル）−ラパマイシン
ＤＭＦ１ｍｌ中のＮ−メチル−イミダゾル−２−カルボン酸３０ｍｇの溶液に、ＤＣＣ５８ｍｇおよびＨＯＢＴ５８ｍｇを加える。２時間後４０−Ｏ−（２−アミノエチル）−ラパマイシン１５０ｍｌを加え、反応混合物を室温で１８時間撹拌する。次いで懸濁液を濾過し、濾液を酢酸エチル５ｍｌで希釈し、飽和水性炭酸水素塩溶液２×２ｍｌで洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下蒸発させる。残渣をシリカゲル１０ｇのクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン／酢酸エチル１／４、次いで酢酸エチルで溶出し、標題生産物を得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０８７（３６％，Ｍ＋Ｎａ）；１０６５（５７％，ＭＨ）；１０３３（１００％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；１０１５（４６％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ））
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ：０．７２（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；３．１３（３Ｈ，ｓ）；３．３３（３Ｈ，ｓ）；３．４６（３Ｈ，ｓ）；４．０３（３Ｈ，ｓ）；６．９３（１Ｈ，広いｓ）；６．９８（１Ｈ，広いｓ）；７．７８（１Ｈ，ｍ）
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：１．１
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：７
【００７４】
実施例２６：４０−Ｏ−（２−エトキシカルボニルアミノエチル）−ラパマイシンＴＨＦ／水５／１  ３ｍｌ中の４０−Ｏ−（２−アジドエチル）−ラパマイシン２００ｍｇの溶液をトリフェニルホスフィン２６７ｍｇで、室温で７時間処理する。次いでピリジン０．４ｍｌ、続いてエチルクロロホルミエート１９４μｌを加える。２時間後、反応混合物を酢酸エチル５ｍｌに注ぎ、飽和炭酸水素ナトリウム１０ｍｌ、水５ｍｌおよび１０％クエン酸５ｍｌで連続して洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を蒸発させる。残渣をシリカゲル２０ｇのクロマトグラフィーにかけ、酢酸エチル、続いて酢酸エチル／メタノール９／１で溶出して標題生産物を得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１０５１（３５％，Ｍ＋Ｎａ）；９９７（３０％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；９７９（１００％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ）
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ：０．７１（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；１．２４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ）；３．１３（３Ｈ，ｓ）；３．３４（３Ｈ，ｓ）；３．４３（３Ｈ，ｓ）；４．１０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝８Ｈｚ）；５．４８（１Ｈ，ｍ）
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：１．１
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：１．７
【００７５】
実施例２７：４０−Ｏ−（２−トリルスルホンアミドエチル）−ラパマイシン
ＴＨＦ３ｍｌ中の４０−Ｏ−（２−アミノエチル）−ラパマイシン２００ｍｇの溶液を、ピリジン０．４ｍｌおよび塩化トシル３９０ｍｇで処理し、反応混合物を室温で１２時間撹拌する。次いで、溶液を飽和炭酸水素塩溶液５ｍｌに注ぎ、水性層を酢酸エチル２×５ｍｌで抽出する。合わせた有機層を１０％クエン酸５ｍｌおよび水５ｍｌで洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲル２０ｇのクロマトグラフィーにかけ、ヘキサン／酢酸エチル１／１で溶出し、標題生産物を白色泡として得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１３３（１００％，Ｍ＋Ｎａ）；１０７８（２５％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；１０６１（８５％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ））Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）ｄ：０．６８（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；２．４３（３Ｈ，ｓ）；３．１３（３Ｈ，ｓ）；３．３５（３Ｈ，ｓ）；３．４１（３Ｈ，ｓ）；４．７６（１Ｈ，ｓ）；５．８５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ）；７．３０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）；７．７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：１５．９
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：１４
【００７６】
実施例２８：４０−Ｏ−［２−（４’，５’−ジカルボエトキシ−１’，２’，３’−トリアゾル−１’−イル）−エチル］−ラパマイシン
４０−Ｏ−（２−アジドエチル）−ラパマイシン９８ｍｇおよびジエチルアセチレンジカルボキシレート３２ｍｇをトルエン０．５ｍｌに懸濁し、６５℃で５時間加熱する。次いで、反応混合物を室温まで冷却し、シリカゲル１０ｇにかけ、ヘキサン／酢酸エチル１／１で溶出し、標題生産物を得る：ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ１１７５（２０％，Ｍ＋Ｎａ）；１１２１（１５％，Ｍ−ＭｅＯＨ）；１１０３（６０％，Ｍ−（ＭｅＯＨ＋Ｈ２Ｏ））
Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｄ：０．６２（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２Ｈｚ）；１．４０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ）；１．４２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ）；３．１３（３Ｈ，ｓ）；３．２５（３Ｈ，ｓ）；３．３３（３Ｈ，ｓ）
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：２．７
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：１２
【００７７】
ラパマイシンの変わりに９−デオキソ−ラパマイシン、２６−ジヒドロ−ラパマイシンまたは９−デオキソ，２６−ジヒドロ−ラパマイシンを出発物質として使用して前の実施例をまたなし得る。別法として、そして好ましくは、例えば実施例２０に記載のように、上記に列記のラパマイシン化合物を必要な場合好適な保護基を使用して水素化または還元し得る。Ｃ９位のケトを還元またはＣ２６位のケトを水素化する以下の新規方法を提供する：
【００７８】
実施例２９：Ｃ９位のケトの除去
ピリジン５０ｍｌおよびＤＭＦ２．５ｍｌ中のラパマイシン３．２ｇ（３．５ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に硫化水素流を室温で通す。溶液は、無色から黄色に変わる。２時間後、硫化水素の導入を停止し、撹拌を５日間続け、その間に溶液は徐々にオレンジ色に変わる。ＴＬＣおよびＨＰＬＣ分析は、出発物質の完全な消費および単一新化合物の存在を証明する。溶液を窒素で１時間浄化し、減圧下濃縮する。残渣を酢酸エチルに溶解し、冷１Ｎ  ＨＣｌ溶液（３×）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液および飽和食塩水で洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下濃縮する。残渣をエーテルに溶解し、沈澱した硫酸を濾取する。エーテル化溶液の濃縮、続くシリカゲルクロマトグラフィー（１０：４：１  ＣＨ２Ｃｌ２／ｉ−Ｐｒ２Ｏ／ＭｅＯＨ）により、９−デオキシロラパマイシンが無色泡として産生する。生産物の同定は、核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）、マススペクトル（ＭＳ）および／または赤外線スペクトル（ＩＲ）で確認する。９−デオキソラパマイシンは以下の特徴的な物理的データを示すことが分かる：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）δ１．６１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，Ｃ１７−ＣＨ３），１．７６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，Ｃ２９−ＣＨ３），２．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．５Ｈｚ，Ｈ−９），２．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．５Ｈｚ，Ｈ−９），３．１３（３Ｈ，ｓ，Ｃ１６−ＯＣＨ３），３．５（３Ｈ，ｓ，Ｃ２７−ＯＣＨ３），３．４０（３Ｈ，ｓ，Ｃ３９−ＯＣＨ３），５．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，Ｈ−３０），５．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝８．６Ｈｚ，Ｊ２＝１５Ｈｚ，Ｈ−２２），５．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９Ｈｚ，Ｈ−１８），６．０９（１Ｈ，ｄｓＪ＝１．７Ｈｚ，１０−ＯＨ），６．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１０Ｈｚ，Ｊ２＝１５Ｈｚ，Ｈ−２１），６．３７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１．５Ｈｚ，Ｊ２＝５Ｈｚ，Ｈ−１９），６．３８（１Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，Ｈ−２０）。
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ３８．５（Ｃ−９），９８．０（Ｃ１０），１７０．７（Ｃ−１），１７３．０（Ｃ−８），２０８．８（Ｃ−３２），２１６．９（Ｃ−２６）。
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９２２（［Ｍ＋Ｎａ＋］），８９９（Ｍ＋），８８１（［Ｍ−Ｈ２Ｏ］＋），８６８（［Ｍ−ＯＣＨ３］＋），８５０（［Ｍ−（Ｈ２Ｏ＋ＯＣＨ３）］＋）。
ＩＲ（主要ピーク）（ｃｍ−１）９８７，１０８６，１１９３，１４５３，１６１６，１７１７，１７３９，３４４３。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：１
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）：１４
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：９
【００７９】
実施例３０：Ｃ２６位のケトの二水素化
アセトニトリル２ｍｌ中のテトラメチルアンモニウムトリアセトキシボロハイドライド４２１ｍｇ（１．６ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、酢酸２ｍｌを加える。得られる混合物を室温で３０分撹拌し、−３５℃に冷却する。この温度でアセトニトリル１ｍｌ中９−デオキソ−ラパマイシン１８０ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）の溶液を加え、得られる混合物を２４時間撹拌し続ける。混合物を飽和酒石酸ナトリウムカリウム溶液で停止し、室温まで暖める。撹拌を両方の層が透明になるまで続け、酢酸エチルを加える。層を分離し、水性層を２回酢酸エチルで抽出する。得られる有機溶液を１度１０％炭酸水素ナトリウム溶液、２回飽和食塩水で洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して減圧下濃縮する。残渣をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（９０：１０  ＡｃＯＥｔ−ヘキサン）で精製する。出発物質が、この場合、９−デオキソラパマイシンであったため、最終化合物は９−デオキソラパマイシンであり、２６−ジヒドロラパマイシンが無色泡として産生され、以下の特徴的スペクトルデータを有する：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）（主要異性体）δ．９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＣＨＣＨ３），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＣＨＣＨ３），１．００（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＣＨＣＨ３），１．０７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＣＨＣＨ３），１．１７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，ＣＨＣＨ３），１．６１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１Ｈｚ，Ｃ１７−ＣＨ３），１．７３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，Ｃ２９−ＣＨ３），２．４３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．１および１６．０Ｈｚ，Ｈ−３３），２．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，Ｈ−９），２．５８（１Ｈ，ｍ，Ｈ−２５），２．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，Ｈ−９），２．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３および１６．０Ｈｚ，Ｈ−３３），３．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．１および９．２Ｈｚ，Ｈ−２７），３．６１（２Ｈ，ｍ，Ｈ−１４およびＨ２８），５．１９（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝４．１，４．６および８．３Ｈｚ，Ｈ−３４），５．４９（１Ｈ，広いｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，Ｈ−２），５．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，Ｈ−３０），５．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．９および１４．７Ｈｚ，Ｈ−２２），５．７６（１Ｈ，ｓ，１０−ＯＨ），５．９９（１Ｈ，広いｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ｈ−１８），６．１０（１Ｈ，ｍ，Ｈ−２１），６．３６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−１９およびＨ−２０）；
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ９２４（［Ｍ＋Ｎａ］），８５２（［Ｍ−（Ｈ２Ｏ＋ＣＨ３Ｏ）］＋）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：４７
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）：１３４
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：７８
【００８０】
２６−ジヒドロラパマイシンは、同様の方法で９−デオキソラパマイシンの変わりにラパマイシンを使用して製造する。本生産物は以下の特徴的スペクトルデータを有する：１３Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）（主要異性体）ｄ＝２０８．３（Ｃ−３２）；１９４．０（Ｃ−９）；１６９．３（Ｃ−１）；１６６．６（Ｃ−８）；１４０．９（Ｃ−２２）；１３６．５（Ｃ−２９）；１３６．２（Ｃ−１７）；１３３．５（Ｃ−２０）；１２９．１（Ｃ−２１）；１２８．７（Ｃ−１８）；１２６．２（Ｃ３０）；１２５．３（Ｃ−１９）；９８．６（Ｃ−１０）；８４．４（Ｃ−３９）；８３．９（Ｃ−１６）；８１．６（Ｃ−２７）；７５．４（Ｃ−３４）；７４．３（Ｃ−２８）；７３．９（Ｃ−４０）；７２．９（Ｃ−２６）；６７．４（Ｃ−１４）；５９．１（２７−ＯＣＨ３）；５６．６（３９−ＯＣＨ３）；５５．９（１６−ＯＣＨ３）；５１．３（Ｃ−２）；４６．８（Ｃ−３１）；４４．３（Ｃ−６）；４０．４（Ｃ−３３）；４０．４（Ｃ−２５）；３９．５（Ｃ−２４）；３８．８（Ｃ−１５）；３８．０（Ｃ−３６）；３４．３（Ｃ−２３）；３４．２（Ｃ−３８）；３３．５（Ｃ−１１）；３３．３（Ｃ−３７）；３３．２（Ｃ−３５）；３１．５：（Ｃ−４２）；３１．３（Ｃ−４１）；３０．９（Ｃ−１３）；２７．１（Ｃ−１２）；２７．０（Ｃ−３）；２５．２（Ｃ−５）；２１．４（２３−ＣＨ３）；２０．７（Ｃ−４）：１７．３（１１−ＣＨ３）；１６．１（３１−ＣＨ３）；１５．９（３５−ＣＨ３）；１４．４（２５−ＣＨ３）；１４．２（２９−ＣＨ３）；１０．３（１７−ＣＨ３）。
ＭＳ（ＦＡＢ）ｍ／ｚ：８８４（Ｍ−ＯＣＨ３，３５％）；８６６（Ｍ−［ＯＣＨ３＋Ｈ２Ｏ），１００％；８４８（Ｍ−［ＯＣＨ３＋２Ｈ２Ｏ］，４０％）。
ＭＢＡ（相対ＩＣ５０）：１．７
ＭＬＲ（相対ＩＣ５０）：１
ＩＬ−６ｄｅｐ．ｐｒｏｌ．（相対ＩＣ５０）：７．５