(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
複合体からなるリポソームからなり、該複合体が構成要素である２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリンと、活性薬物がトレミフェン、デスメチルトレミフェン、タモキシフェンおよびデスメチルタモキシフェンからなる群より選択されるまたはその薬学的に許容しうる非毒性塩である構成要素である活性薬物からなる非経口薬物製剤。
【請求項２】
構成要素である２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリンが２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンである請求の範囲第１項記載の製剤。
【請求項３】
薬物がトレミフェンまたはその非毒性の薬学的に許容しうる塩である請求の範囲第１または２項記載の製剤。
【発明の詳細な説明】
本発明は非経口投与に用いる、抗エストロゲン類、とくにはトリフェニルブテン部分からなる抗エストロゲン類の薬物製剤（drug formulations）に関する。
トレミフェン（toremifene）、デスメチルトレミフェン（desmethyl toremifene）、デスメチルタモキシフェン（desmethyl tamoxifen）およびタモキシフェン（tamoxifen）は全てガン治療に有用な置換トリフェニルブテン類の具体的な化合物である。これらは米国特許第4696949号明細書、米国特許第4990538号明細書および米国特許第4356516号明細書に言及される。前記化合物は全て式：
0003558344.tif 000002
（式中、R1はCH3またはＨを表し、R2はＨまたはClを表す）で示されうる。
前記の化合物は以下に示されるR1およびR2を有する；
R1    R2
トレミフェン              CH3   Cl
デスメチルトレミフェン    Ｈ    Cl
タモキシフェン            CH3   Ｈ
デスメチルタモキシフェン  Ｈ    Ｈ
これらの抗エストロゲン類の共通の特徴はそれらが水に溶けにくいことである。したがって、これらの薬物の非経口投与は単に有効成分の水溶液によっては達成することができない。
抗ガン性の抗エストロゲン類の非経口製剤が明らかに必要とされる。注射可能な高濃度のトレミフェン製剤は、以下のばあいに重要な臨床における利点をもつであろう。
１）組織において高濃度に到達しようと試みるばあい。これはトレミフェンと細胞毒性薬物とを組合せて患者に投与するばあいとくに必要である。デグレゴリオ（DeGregorio）ら（ジェイ・クリニカル・オンコロジィ（J Clinical Oncology）、７巻、No9、1989年:1359〜1364頁）によって示されるように、高血漿濃度は低濃度より多薬物耐性（mulidrug resistance）をくつがえす（reversing）際により有効である。注射可能な製剤は患者を長期間の治療にさらすことなく血液および組織における高いピーク濃度を可能にする；
２）腫瘍に局所的に（locally）投与するばあい。これは腫瘍において達成されるべき高くかつ有効な濃度を可能にする；
３）トレミフェンが疼痛のあるのう胞に直接注射されうる、のう胞性乳房痛のような良性のエストロゲン−依存性病変に局部的に（topically）用いられるばあい；
４）触知できかつ皮下の乳ガン転移部に局部的にトレミフェンをいきわたらせる（spread）ばあい；
５）表在性の膀胱ガン治療のために膀胱内用の点滴を投与するばあい。この適用においてトレミフェンは他の抗ガン剤とそれらの有効性を高めるためによく併用されうる；
６）あるタイプの卵巣ガン治療に腹腔内用の溶液を投与するばあい；
７）他の局部の、エストロゲン−依存性病変を抗エストロゲンで治療するばあい。
本発明による非経口薬物製剤は、エマルジョン、シクロデキストリン−薬物複合体（complex）の水溶液およびリポソームを含む。
薬物の分解性（dissolution properties）は薬物物質とシクロデキストリン類との複合体形成により著しく改良されうる。（α、βおよびΓシクロデキストリン類およびそれらの誘導体を含む）シクロデキストリン類は、全てグルコースの環状オリゴマー類である。シクロデキストリン類は、薬物との封入複合体を形成することができ、薬物分子がシクロデキストリン分子の求親油空隙（lipophile−seeking cavities）に包含される。したがってシクロデキストリン類は親油性薬物を水性媒体に効果的に可溶化する。薬学分野におけるシクロデキストリン類の用途は、たとえばドラッグ・デベロップメント・アンド・インダストリアル・ファーマシィ（Drug Development and Industrial Pharmacy）、17（11）、1503〜1549頁、1991年に記載されている。
しかしながら、前記の抗エストロゲン類について、活性薬物物質と２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリン類との複合体形成にもとづく非経口薬物製剤はこの分野においては知られていない。本発明の目的の１つはトレミフェン、デスメチルトレミフェン、タモキシフェンおよびデスメチルタモキシフェンからなる群より選択される活性薬物物質またはその薬学的に許容しうる非毒性塩を含む、２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリン、好ましくは２−ヒドロキシプロピル  β−シクロデキストリンまたは２−ヒドロキシプロピル−Γ−シクロデキストリン複合体にもとづく非経口製剤であり、該複合体は水溶液中に存在する。
前記の抗エストロゲン類のエマルジョンは、薬物または該薬物のシクロデキストリン複合体を薬学的に許容しうる乳化剤に分散し、適宜安定剤を加えることにより調製されうる。
また、前記の薬物の非経口投与は該薬物またはその塩を含有するリポソームの水溶液により達成されてもよい。リポソームは、水性コンパートメントを囲む脂質二重層により形成される、水性媒体における球状粒子である。脂質表面は一枚膜状（unilamellar）か多重層状（multilamellar）のどちらであってもよい。リポソームに疎水性薬物物質または親水性薬物物質のどちらを入れてもよい。
本発明の別の目的はリポソームに入れられるような薬物物質にもとづく非経口製剤である。このようなりリポソームは、薬物または薬物−シクロデキストリン複合体を構成要素であるリン脂質、好ましくはDMPG（ジミリストイルホスファチジルグリセロール）および／またはPOPC（＝１−パルミトイル−２−オレオイル−sn−グリセロ−３−ホスホリルコリン）とともに、クロロホルム−メタノール混合物に溶解し、その溶媒を蒸発し、残渣を水に溶解してホモジナイゼーションを行なうことにより調製されうる。
本発明の別の目的は、トレミフェン、デスメチルトレミフェン、タモキシフェンおよびデスメチルタモキシフェンからなる群より選択される活性薬物物質またはその薬学的に許容しうる非毒性塩を含む、２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリン、好ましくは２−ヒドロキシプロピル  β−シクロデキストリンまたは２−ヒドロキシプロピル  Γ−シクロデキストリン複合体にもとづく非経口製剤であり、該複合体はリポソームに入れられる。
抗エストロゲン−２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリン複合体の調製：
測定された量の２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリンをシェーカーで振とうしながら蒸留水に溶解した。このようにしてえられた透明な溶液を沸点で大過剰の抗エストロゲンを用いて平衡させた。ほぼ透明な溶液を除去したのち過剰の抗エストロゲンは沈殿しはじめた。その溶液を室温で一晩おき過剰の沈殿した抗エストロゲンを遠心分離により除去した。
２−ヒドロキシプロピルシクロデキストリンの水溶液における抗−エストロゲンの溶解度のHPLCによる測定
充分に自動化されたHPLC装置（ヒューレット−パッカード（Hewlett−Packard）、米国）は、ポンプ1090、自動サンプラーおよび注入容量10μｌの自動インジェクター（79847A）ならびに固定された波長のUVデテクター、280nm（79881A）からなった。クロマトグラムおよびピーク領域はインテグレーター3393を用いて記録した。分離は35  ★4.6mmのステンレススチールカラム（３−μｍ球状オクタデシルシランが結合したシリカ粒子が充填されたカラム;HS−３  Ｃ−18、（パーキン−エルマー（Perkin−Elmer）、米国）で室温にて行なった。
移動相はpH7.4の0.004Mのジメチルオクチルアミンを含有する0.05Mの水性リン酸緩衝液：アセトニトリルの混合物からなった。流速は0.8ml/分であった。
リポソームの調製
１）シクロデキストリン−薬物複合体にもとづき、構成要素を有機溶液に溶解して調製したリポソーム
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（12mg）、POPC（32mg）、コレステロール（4mg）、DMPG（ジミリストイルホフファチジルグリセロール）（8mg）およびクエン酸トレミフェン（2mg）をクロロホルム−メタノール（2:1）に溶解し蒸発させた。残渣を水に溶解し音波処理（ラブソニック（Labsonic）Ｕ、50W）によりホモジナイズした。溶液の安定性は良好であり；混濁は室温で１カ月後も観察されなかった。
２）シクロデキストリン−薬物複合体にもとづき、水に直接構成要素を溶解しホモジナイズすることにより調製したリポソーム
２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（24mg）、DMPG（ジミリストイルホフファチジルグリセロール）（16mg）およびクエン酸トレミフェン（2mg）を同時に水2mlに溶解し音波処理（ラブソニックＵ、50W）によりホモジナイズした。最終溶液はさきの溶液と同程度に透明であった。これらの２つの溶液の平均粒子径は約100nm（ニコンプ（Nicomp）370/HPL  ハイ・パワー・レーザー・オプション（high power laser option））であった。溶液は室温での１週間の貯蔵後も安定であった。
３）シクロデキストリン複合体にもとづかなかったリポソーム
これらの溶液の調製は構成要素を直接水に溶解することにより試みられた。透明またはわずかに乳光の溶液がえられた組成物は水2mlに溶解され音波処理（50W）によりホモジナイズされたクエン酸トレミフェン（2mg）、DMPG（16または32mg）のみであったが、前記溶液の安定性は充分なものではなかった；溶液は室温での１カ月の貯蔵でわずかに不透明になり、たとえばクエン酸トレミフェン（2mg）、DMPG（32mg）およびコレステロール（4mg）の組成物を水2mlに溶解しホモジナイズすることはできなかった。
これらの結果は構成要素であるシクロデキストリンが存在しなければ、とくに薬物およびリン脂質を直接水に加えるばあい、安定なリポソームは達成されえないことを示す。
しかしながら、シクロデキストリンのないリポソームは、シクロデキストリン含有リポソームについて前述したように、クロロホルム／エタノール（2:1）にまず成分を加えることにより調製されうる。
0003558344.tif 000003
前記トレミフェン製剤の薬物動態は、静脈内に投与されるばあい、経口的に投与されたトレミフェンの薬物動態によく類似している。しかしながら、最初の数分間および１〜２時間のあいだ、静脈的に投与された薬物の濃度は高いが、経口投与されたばあい、薬物は胃腸管からまだ完全に吸収されていない。
エマルジョンの調製：
薬物を市販の脂肪エマルジョン（fat emulsion）に溶解することにより調製したエマルジョン
使用した市販の脂肪エマルジョンはエマルサン（Emulsan）（登録商標）20％（製造業者  レイラス−カビ・インフュージョン・リミテッド（Leiras−Kabi Infusion Ltd）、フィンランド共和国）であった。異なる量のクエン酸トレミフェンをエマルサン溶液に溶解し音波処理（ラブソニックＵ、50W）によりホモジナイズした。トレミフェン濃度は10mg/ml、14mg/mlおよび20mg/mlであった。ホモジナィゼーションを行なったのちサンプルを0.2μｍ、0.45μｍおよび1.2μｍのフィルターによりろ過した。
トレミフェンの濃度は278nmの波長を用いる分光光度法（spectrofotometric method）を用いてろ液から測定した。サンプルをメタノールに溶解し0.02mg/mlの濃度に希釈した。
結果を以下の表に示す。
0003558344.tif 000004
前記の結果は、トレミフェンの溶解度はエマルジョン液滴にトレミフェンを被包することによりかなり高められうることを示す。