(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式（Ａ）
【化１】
0003576044.tif 000012
（式中のＰＡはポリマー固相を示す）で表わされる固相反応担体に次式（Ｂ）
【化２】
0003576044.tif 000013
（式中のＮｓは、２−ニトロベンゼンスルホニル基を示す）で表わされるポリアミン類の第１級アミノ基を反応連結し、次いで保護基Ｎｓを脱離させた後に前記固相反応担体から次式（Ｃ）
【化３】
0003576044.tif 000014
で表わされるくも毒ＨＯ−４１６ｂ化合物を切り出すことを特徴とするポリアミン固相合成反応方法。
【請求項２】
次式（Ａ）
【化４】
0003576044.tif 000015
（式中のＰＡはポリマー固相を示す）で表わされ、ポリアミン類の第１級アミノ基を反応連結することを特徴とするポリアミン類固相反応用の担体。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
この出願の発明は、ポリアミン固相合成反応方法と固相反応担体に関するものである。さらに詳しくは、この出願の発明は、充填効率が高く、高い極性を持つポリアミン類を、煩雑な精製操作を必要とすることなく単離精製することをも可能とする新しい固相反応担体の使用によるポリアミン固相合成反応方法と、このための固相反応担体に関するものである。
【０００２】
【従来の技術とその課題】
従来より、固相合成法は、１９６０年にマレーフィールドがその方法論を発表して以来、ペプチドや核酸のような高分子化合物の合成に盛んに用いられてきている。そして近年になって、新規薬物探索のために一度に数万種類の化合物を合成するコンビナトリアルケミストリーの観点からも注目されているのが固相合成法である。
【０００３】
これまでにもこの固相合成についてはより効率の高い固相の開発について様々な検討が加えられてきており、数多くの固相反応担体が提案されてもいる。
しかしながら、従来の固相合成とそのための固相反応担体についての数多くの提案にもかかわらず、アミノ基窒素原子を連結する固相反応担体についてはいずれも一長一短があった。たとえば固相からの切り出しに強い条件が必要であったり、充填効率が低い等の問題があった。
【０００４】
この出願の発明者らは、従来その全合成が極めて困難であったポリアミン類の一種としての次式（Ｃ）
【０００５】
【化５】
0003576044.tif 000002
で表わされるくも毒ＨＯ−４１６ｂの全合成を可能とすべく検討し、この全合成において固相合成反応を採用しようとしてきた。しかし、従来の固相合成のための担体等の手段の適用は難しいのが実情であった。
【０００６】
そこで、この出願の発明は、以上のとおりの従来技術の問題点を解消し、充填効率が高く、しかも切り出し操作等も容易であって、生理活性機序の検討にとっても有用なくも毒ＨＯ−４１６ｂの全合成への適用も可能とする。新しいポリアミン固相合成反応方法とそのための固相反応担体を提供することを課題としている。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
この出願の発明は、上記のとおりの課題を解決するものとして、第１には、第１級アミノ基を有するポリアミン類の第１級アミノ基を次式（Ａ）
【０００８】
【化６】
0003576044.tif 000003
（式中のＰＡはポリマー固相を示し、式中のベンゼン環は許容される置換基を有していてもよい。）
で表わされる固相反応担体に反応連結し、連結された前記第１級アミノ基以外の少くとも一つのアミノ基を化学反応させることを特徴とするポリアミン固相合成反応方法を提供する。
【０００９】
また、この出願の発明は、第２には、化学反応の終了後に酸性条件下に固相反応担体から切り出す前記ポリアミン固相合成反応方法を提供し、第３には、ポリアミン類が次式（Ｂ）
【００１０】
【化７】
0003576044.tif 000004
（式中のＮｓは、２−ニトロベンゼンスルホニル基を示す）
で表わされるものであって、Ｎｓ基の脱保護を行い、次式（Ｃ）
【００１１】
【化８】
0003576044.tif 000005
で表わされるくも毒ＨＯ−４１６ｂ化合物もしくはその誘導体を合成する前記の固相合成反応方法を提供する。
【００１２】
さらにこの出願は、第４には、次式（Ａ）
【００１３】
【化９】
0003576044.tif 000006
（式中のＰＡはポリマー固相を示し、式中のベンゼン環は許容される置換基を有していてもよい。）
で表わされるポリアミン類の固相反応担体も提供する。
【００１４】
【発明の実施の形態】
この出願の発明は、上記のとおりの特徴をもつものであるが、以下にその実施の形態について説明する。
【００１５】
この出願の発明のポリアミン固相合成反応方法では、前記のとおりの式（Ａ）で表わされる固相反応担体を用いる。このものは、従来市販の１級アミンの連結に用いられる固相担体よりも充填効率が高く、なおかつ切り出し等の操作が容易であるという優れた特徴を有している。なお、この発明の式（Ａ）における固相反応担体は、前記のとおり、構造中のベンゼン環には、アルキル基をはじめとする許容される置換基を有していてもよく、また、ポリマー固相（ＰＡ）については、各種ポリマーにより構成されていてよく、代表的にはポリスチレンであるものが例示される。このポリスチレン固相のものは、たとえば市販のＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  ｒｅｓｉｎより製造することができる。
【００１６】
以上のこの発明の固相反応担体を用いてのポリアミン固相合成反応方法では、第１級アミノ基、すなわち−ＮＨ２  基を持つポリアミン類のこの第１級アミノ基を前記の固相反応担体に反応連結し、連結されていないアミノ基について所望の化学反応を行わせることになる。この場合の反応は各種のものでよく、窒素原子との結合の形成、窒素原子の置換等の広範な反応が考慮される。当然のこととして、この反応には、通常の意味で示される保護基による窒素原子の保護や、保護基の脱離の反応も含まれる。
【００１７】
また、対象とする原料のポリアミン類、そして目的とする反応生成物も各種のものであってよい。原料ポリアミンとしては、前記のとおりの第１級アミノ基（−ＮＨ２  ）を持つ、さらに他にアミノ基を分子構造中に有しているものとして特定される。なかでも第１級アミノ基（−ＮＨ２  ）が、さらにはこの第１級アミノ基（−ＮＨ２  ）と他のアミノ基とがともに、脂肪族炭素（鎖）に結合しているポリアミン類が好適なものとして例示される。
【００１８】
反応終了後のこの発明の固相反応担体からの切り出しは、たとえば酸性条件下で容易に行うことができ、溶媒を留去するのみで純粋な反応生成化合物を取得することもでき、煩雑な精製操作をほとんど必要としていない。
【００１９】
以上のとおりのこの発明の固相合成反応方法により、たとえば後述の実施例にも示したように、従来その全合成が難しかったくも毒ＨＯ−４１６ｂ化合物、もしくはその誘導体の効率的な全工程も可能となる。
【００２０】
そこで以下に実施例を示し、さらに詳しくこの出願の発明について説明する。
【００２１】
【実施例】
（実施例１）
次の反応式；
【００２２】
【化１０】
0003576044.tif 000007
に従って、固相反応担体としての４−（クロルジフェニルメチル）フェノキシメチル−ポリスチレンを製造した。
【００２３】
すなわち、１．４０ｇ（１．６８ｍｍｏｌ）のＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  Ｒｅｓｉｎと、４．６４ｇ（１６．８ｍｍｏｌ）のＰ−ヒドロキシトリチルアルコールの３０ｍｌＤＭＦの懸濁液に、室温およびアルゴン雰囲気下に１１．６ｇ（８４．０ｍｍｏｌ）の炭酸カリウムを添加し、６０℃の温度で２０時間加熱した。その後室温に冷却した。
【００２４】
生成物を濾別し、Ｈ２  Ｏ：ＴＨＦ（１：９）およびＥｔ２  Ｏにより洗浄し、次いで真空乾燥して１．５４ｇの樹脂生成物を得た。
この樹脂生成物のＣＨ２  Ｃｌ２  懸濁液に、室温およびアルゴン雰囲気下でＳＯＣｌ２  を添加した。３０分間攪拌した。溶媒を蒸発除去した後に、真空乾燥して、１．５４ｇの４−（クロルジフェニルメチル）フェノキシメチル−ポリスチレンを得た。
（実施例２）
次の反応式に従って、固相合成による脱保護基反応を行った。
【００２５】
【化１１】
0003576044.tif 000008
すなわち、まず、次式
【００２６】
【化１２】
0003576044.tif 000009
で表わされるＮｓ（２−ニトロベンゼンスルホニル）基により保護された、６５ｍｇ（０．０６８ｍｍｏｌ）のＨＯ−４１６ｂ化合物（１３）を、２．５ｍｌのＣＨ２  Ｃｌ２  溶媒中において、０．１４１ｍｌ（０．８２８ｍｍｏｌ）のｉＰｒ２  ＮＥｔの存在下に、実施例により製造した固相反応担体と室温にて反応させた。
【００２７】
４８時間振とう後、０．１ｍｌのＭｅＯＨを添加し、濾別した後に、固相分をＭｅＯＨ：ＣＨ２  Ｃｌ２  （１：９）、Ｈ２  Ｏ：ＭｅＯＨ：ＣＨ２  Ｃｌ２  （１：１：８）、並びにＣＨ２  Ｃｌ２  により洗浄し、その後真空乾燥した。以上のようにして、前記化合物（１３）をこの固相反応担体に連結担持させた。
【００２８】
この担持樹脂の１．５ｍｌ  ＤＭＦ懸濁液に、０．１４０ｍｌ（２．００ｍｍｏｌ）のメルカプトエタノールおよび０．３０ｍｌ（２．００ｍｍｏｌ）のＤＢＵを、室温およびアルゴン雰囲気下に添加した。
【００２９】
２６時間振とう後、濾別し、Ｈ２  Ｏ：ＴＨＦ（１：９）、ＭｅＯＨ：ＣＨ２  Ｃｌ２  （１：９）、並びにＣＨ２  Ｃｌ２  により洗浄し、真空乾燥した。これによりＮｓ保護基の脱離を行った。
【００３０】
次に、樹脂固相分の２．５ｍｌ  ＣＨ２  Ｃｌ２  混合物に、２５μｌ（０．３２４ｍｍｏｌ）のＴＦＡを室温において添加した。５分間振とう後、濾別し、ＭｅＯＨ：ＣＨ２  Ｃｌ２  （１：９）により洗浄した。
【００３１】
このような酸性条件下の切り出し操作をさらに３回繰り返した。
洗浄後の液を一緒にして蒸発処理し、真空乾燥して、くも毒ＨＯ−４１６ｂ（２５．５ｍｇ、６８％）をＴＦＡ塩として得た。
【００３２】
また、回収された樹脂固相担体はＳＯＣｌ２  ：ＣＨ２  Ｃｌ２  （１：９）で処理することにより再利用された。
以上のことから、次のことが結論づけられる。
【００３３】
充填効率の高い、新しい固相を開発した。ニトロベンゼンスルホンアミドの脱保護をその固相上で行い、切り出すことによりポリアミンを得た。高い極性をもつポリアミンを、煩雑な精製操作をすることなく、溶媒を留去するのみで単離できたことは画期的である。
（実施例３）
実施例２において用いたＮｓ基により保護されたＨＯ−４１６ｂ化合物（１３）について、次の反応式に従って合成した。
【００３４】
【化１３】
0003576044.tif 000010
反応条件（ａ）〜（ｉ）は次のとおりである。
【００３５】
【表１】
0003576044.tif 000011
以上の合成反応においては、たとえば化合物（９）と化合物（１１）と反応収率が９４％であるように、Ｎｓ保護基の採用によって極めて高い選択性で目的とするＮｓ保護ＨＯ−４１６ｂ化合物（１３）が得られている。
【００３６】
以上のことから次のことが確認された。
１）通常は困難であることが知られている、ジアミンの片方のみの選択的保護を、ニトロベンゼンスルホンアミド保護基により達成した。その保護されたジアミンを原料として用いることにより、効率的にＨＯ−４１６ｂ化合物の全合成を終了できた。
【００３７】
２）すべての炭素−窒素結合を、スルホンアミドとハライドとのアルキル化反応により構築した。これらはスケールアップが可能であるばかりでなく、容易に入手可能な種々のハライドを用いることにより多様な化合物を合成可能である。
【００３８】
【発明の効果】
以上詳しく説明したとおり、この出願の発明によって、充填効率が高く、しかも切り出し操作等も容易であって、生理活性機序の検討にとっても有用なくも毒ＨＯ−４１６ｂの全合成への適用も可能とされる、新しいポリアミン固相合成反応方法とそのための固相反応担体が提供される。