(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式（Ｉ）：
【化１】
0003545791.tif 000006
（式中、Ｒ１  は水素原子又はアルカリ金属原子を表し、Ｒ２  及びＲ３  は、同一又は相異なり、水素原子又はメチル基を表す。）
で示されるニトリル化合物を、アルカリゲネス属に属し、該ニトリル化合物を資化する能力を有する微生物の培養液、菌体又は菌体処理物で処理することを特徴とするニトリル化合物の分解法。
【請求項２】
微生物がアルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株であることを特徴とする請求項１記載のニトリル化合物の分解法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、次式（Ｉ）：
【０００２】
【化２】
0003545791.tif 000002
【０００３】
（式中、Ｒ１  は水素原子又はアルカリ金属原子を表し、Ｒ２  及びＲ３  は、同一又は相異なり、水素原子又はメチル基を表す。）
で示されるニトリル化合物の微生物分解法に関する。
【０００４】
【従来の技術】
本発明に係るニトリル化合物（Ｉ）は、下記の式に示すように、α，β−不飽和ニトリル化合物（ＩＩ）と亜硫酸又はそのアルカリ金属塩  （ＩＩＩ）とが共存すると容易に生成する化合物である。
【０００５】
【化３】
0003545791.tif 000003
【０００６】
（式中、Ｒ１  、Ｒ２  及びＲ３  は前記と同義である。）
このニトリル化合物（Ｉ）は、通常の化学的酸化処理（例えば、過マンガン酸による酸化）では分解されにくいので、排水中に存在する場合には分解除去が困難である。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、微生物を利用してニトリル化合物（Ｉ）を分解する方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、前述した目的を達成すべく、広く微生物の探索を行った結果、ニトリル化合物（Ｉ）を資化する能力を有するアルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）  属の微生物を用いることにより該化合物を分解処理できることを見いだし、本発明を完成するに至った。
【０００９】
即ち、本発明は、次式（Ｉ）：
【００１０】
【化４】
0003545791.tif 000004
【００１１】
（式中、Ｒ１  は水素原子又はアルカリ金属原子を表し、Ｒ２  及びＲ３  は、同一又は相異なり、水素原子又はメチル基を表す。）
で示されるニトリル化合物を、アルカリゲネス属に属し、該ニトリル化合物を資化する能力を有する微生物の培養液、菌体又は菌体処理物で処理することを特徴とするニトリル化合物の分解法である。
【００１２】
本発明に用いる微生物としては、アルカリゲネス属に属し、かつニトリル化合物（Ｉ）を資化する能力を有するものであれば、特に制限はない。微生物がニトリル化合物（Ｉ）を資化することは本発明者らにより初めて見いだされた。
代表的な微生物としては、アルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株が挙げられる。
アルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株は、本発明者らが新たに土壌中より分離したもので、通商産業省工業技術院生命工学工業技術研究所に  ＦＥＲＭ  Ｐ−１３９５８  として寄託されており、その菌学的性質は以下に示す通りである。
【００１３】
形態                      桿  菌
グラム染色性                −
胞子                        −
運動性                      ＋
鞭毛                      周  毛
酸素に対する態度          好気性
オキシダーゼ                ＋
カタラーゼ                  ＋
ＯＦテスト                  −
キノン系                  Ｑ−８
以上の菌学的性質をＢｅｒｇｅｙ’ｓ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ  （１９８６）  に基づいて分類すると、アルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株はアルカリゲネス属に属する細菌であると同定された。
【００１４】
前記微生物を用いてニトリル化合物（Ｉ）を処理するには、通常の培養で得られる培養液又は菌体もしくは菌体処理物  （破砕菌体、粗・精製酵素、固定化菌体・酵素等）  を含む媒体中にニトリル化合物（Ｉ）を共存させる方法をとることができるが、前述したアルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株のようにニトリル化合物（Ｉ）を唯一炭素源、窒素源として生育する微生物を用いる場合は、特に他の炭素源や窒素源を加えなくても、微生物を培養する過程でニトリル化合物（Ｉ）を資化せしめて処理することも可能である。例えば、ニトリル化合物（Ｉ）の代表的化合物である次式（Ｉ’）：
【００１５】
【化５】
0003545791.tif 000005
【００１６】
で示されるアクリロニトリルの亜硫酸付加体（以下「化合物（Ｉ’）」という。）を唯一炭素源、窒素源として用いた表１に示す培地でアルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株を培養することにより目的が達せられる。
表１  培地組成の一例
化合物（Ｉ’）              ５〜１０ｇ
ＫＨ２  ＰＯ４                ３．５  ｇ
ＭｇＳＯ４  ・７Ｈ２  Ｏ      ０．８  ｇ
ＺｎＳＯ４  ・７Ｈ２  Ｏ      ０．６  ｇ
ＦｅＳＯ４  ・７Ｈ２  Ｏ      ０．０９ｇ
ＣｕＳＯ４  ・５Ｈ２  Ｏ      ０．００５  ｇ
ＭｎＳＯ４  ・４Ｈ２  Ｏ      ０．０１ｇ
ＮａＣｌ                  ０．１  ｇ
水道水                    １０００ｍｌ
ｐＨ                      ７．０
培養は、通常１０〜４０℃、ｐＨ５〜１０で好気的に行い、好ましくは３０℃前後、ｐＨ６〜８で行う。培地のｐＨは水酸化ナトリウム等を用いて調整するのが好ましい。
【００１７】
【実施例】
以下、参考例及び実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、これらは本発明の範囲を何等制限するものではない。
（参考例１）アクリロニトリル亜硫酸付加体（化合物（Ｉ’））の合成
蒸留水４００ｍｌ  に溶解させた亜硫酸水素ナトリウム４００  ｇ中にアクリロニトリル２０８  ｇを滴下、３時間攪拌した。反応液を冷蔵庫で冷却し、生成した沈殿を濾別、取得した。更に、取得物をアセトンで十分に洗浄し、乾燥させることにより化合物（Ｉ’）３２０  ｇを得た。取得物が目的物（Ｉ’）であることをＩＲ、ＮＭＲで確認した。
【００１８】
（実施例１）
参考例１で合成した化合物（Ｉ’）１ｇ、ＫＨ２  ＰＯ４  ０．０１ｇを含む培地（ｐＨ７．０  ）１００ｍｌ  を５００ｍｌ  容の坂口フラスコに分注し、１２１  ℃で２０分加熱殺菌した。これにアルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株を接種し、３０℃で振盪培養を行った。菌体濃度の経時変化は波長６１０ｎｍ  の濁度を指標として求めた。培養液中の化合物（Ｉ’）の濃度はイオンクロマトグラフィー法で測定した。この結果を図１に示す。
【００１９】
この結果より、アルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株が経時的に化合物（Ｉ’）を分解することを確認した。
【００２０】
【発明の効果】
本発明によれば、アルカリゲネス属に属する微生物を用いることによりニトリル化合物（Ｉ）を分解処理することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】アルカリゲネス  ｓｐ．  ＭＲ−２２０１株の培養液中の化合物（Ｉ’）の濃度及び菌体濃度の経時変化を示す図である。
【符号の説明】
●  化合物（Ｉ’）の濃度
○  菌体濃度
【図１】
0003545791.tif 000007