(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖単位間で少なくとも２箇所のグリコシル結合を形成するオリゴ糖の製造方法であって、
（ａ）下記式（Ｉ）
【化１】
0003542143.tif 000006
（上式中、Ｘ１  はグリコシル化反応活性化剤であるトリフルオロメタンスルホン酸銀Ａ１  により活性化されて反応中間体を与える活性化基臭素であり、Ｙは保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基であり、ｐは０または１〜６のいずれかの整数であり、そしてピラノース骨格内の結合手をもたない炭素原子は水素原子以外に保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基を有する）で表される糖誘導体を、活性化剤トリフルオロメタンスルホン酸銀Ａ１  の存在下で、下記式（ＩＩ）
【化２】
0003542143.tif 000007
（上式中、Ｘ２  はグリコシル化反応活性化剤Ａ２  により活性化されて反応中間体を与える活性化基チオフェニル基またはフッ素であり、ここで該グリコシル化反応活性化剤Ａ２はＸ２ がチオフェニル基の場合はＮ−ヨウドスクシンイミドであり、Ｘ２ がフッ素の場合はトリフルオロメタンスルホン酸トリメチル硅素であり、Ｒ１  は反応活性化剤Ａ１  により活性化された式（Ｉ）の誘導体との反応点であって水素原子であり、ｑは０または１〜６のいずれかの整数であり、そしてピラノース骨格内の結合手をもたない炭素原子は水素原子以外に保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基を有する）で表される糖誘体と反応させて式（Ｉ）のＸ１  の結合位置と式（ＩＩ）のＲ１  が結合した酸素原子との間にグリコシル結合を形成する工程、ならびに
（ｂ）工程（ａ）と同時にまたはその後に、活性化剤Ａ２  の存在下で、下記式（ＩＩＩ）
【化３】
0003542143.tif 000008
（上式中、Ｘ３  はグリコシル化反応活性化剤Ａ１  およびＡ２  に不活性な活性化基メトキシ基であり、Ｒ２  は反応活性化剤Ａ２  により活性化された式（ＩＩ）の誘導体部分との反応点であって、反応活性化剤Ａ２がＮ−ヨウドスクシンイミドであるときは水素原子であり、反応活性化剤Ａ２がトリフルオロメタンスルホン酸トリメチル硅素であるときはトリメチル硅素基または水素原子であり、γは０または１〜６のいずれかの整数であり、そしてピラノース骨格内の結合手をもたない炭素原子は水素原子以外に保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基を有する）で表される糖誘導体を反応させて式（ＩＩ）のＸ２  の結合位置と式（ＩＩＩ）のＲ２  が結合した酸素原子との間にグリコシル結合を形成する工程を含んでなり、
工程（ａ）と（ｂ）がそれぞれ生成物を単離することなく共通の反応混合物中で実施され、下記式（ＩＶ）
【化４】
0003542143.tif 000009
（上式中、Ｙ，Ｘ３  ，ｐ，ｑおよびγ、ならびにピラノース骨格の他の置換基は上記に定義した意味を有し、記＊はそれぞれ対応する番号が付された結合に連続する）で表されるオリゴ糖を生成する、ことを特徴とするオリゴ糖の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、薬理活性を有する、もしくはそれらの薬理活性の作用機序等の解明等のために用いられるオリゴ糖の合成に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
糖質類は生体の構成単位やエネルギー源として従来より重要な位置を占めてきたが、近年の分離分析技術の急速な進歩により、細胞間の情報伝達といったより高度な生物学的現象に深く関与していることが明らかになってきた。しかしそれらの機能と糖質類の構造との間の分子レベルでの詳細な解明は緒に就いたばかりである（「蛋白核酸酵素」１９９２年８月増刊号、ｖｏｌ．３７，Ｎｏ．  １１，１９９２共立出版）。
【０００３】
一般に上記のような生理現象にかかわる所謂「生理活性」な糖質類は、生体内での賦存量が極微量であり、有機合成的な手段によりこれらを大量かつ容易に供給することが現在の大きな課題の一つである。
このような観点から、近年新しいグリコシル結合の生成反応の開発を中心として糖質類の合成反応に関する数多くの報告がなされているが、いまだ多くの問題点を残している（Ｈ．Ｐａｕｌｓｅｎ，  Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｅｎｇｌｉｓｈ，  ２１，  １５５  （１９８２））  。
【０００４】
一般に、糖質類の合成反応を行う場合１つの反応に対して数工程の後処理工程が必要とされる。糖質類の場合、骨格中に数多くの酸素官能基を有しているために水溶性が高く、高極性の水酸基を保護している場合においても反応試剤として用いた無機塩類などを除くための水洗工程において基質が溶解し、実質の反応収率の低下を招くことがしばしば見られる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記のような後処理工程を簡略化し、生産効率の向上、装置の簡略化が可能なオリゴ糖の合成法を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、各種グリコシル結合形成反応に着目して鋭意研究したところ、少なくとも２箇所のグリコシル結合を効率よく形成しうる２種以上のグリコシル化反応用の活性化基とその活性剤との組み合わせを選ぶことにより２種以上の反応系が同一反応混合物中で実施できることを見い出し本発明に到った。
【０００７】
従って、本発明は、糖単位間で少なくとも２箇所のグリコシル結合を形成するオリゴ糖の製造方法を提供する。本発明の製造方法は、次の少なくとも２種の反応工程を含んでなる。
工程の１つは、下記式（Ｉ）
【０００８】
【化５】
0003542143.tif 000002
【０００９】
（上式中、Ｘ１  はグリコシル化反応活性化剤Ａ１  により活性化されて反応中間体を与える活性化基であり、Ｙは保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基であり、ｐは０または１〜６のいずれかの整数であり、そしてピラノース骨格内の結合手をもたない炭素原子は水素原子以外に保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基を有する）で表される糖誘導体を、活性化剤Ａ１  の存在下で、下記式（ＩＩ）
【００１０】
【化６】
0003542143.tif 000003
【００１１】
（上式中、Ｘ２  はグリコシル化反応活性化剤Ａ２  により活性化されて反応中間体を与える活性化基であり、Ｒ１  は反応活性化剤Ａ１  により活性化された式（Ｉ）の誘導体との反応点であって、水素原子またはトリアルキル置換硅素基であり、ｑは０または１〜６のいずれかの整数であり、そしてピラノース骨格内の結合手をもたない炭素原子は水素原子以外に保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基を有する）で表される糖誘体と反応させて式（Ｉ）のＸ１  の結合位置と式（ＩＩ）のＲ１  が結合した酸素原子との間にグリコシル結合を形成する工程である。
【００１２】
もう１つの工程は、上記式（ＩＩ）で示される糖誘導体またはそれに由来する糖部分を、活性化剤Ａ２  の存在下で下記式（ＩＩＩ）
【００１３】
【化７】
0003542143.tif 000004
【００１４】
（上式中、Ｘ３  はグリコシル化反応活性化剤Ａ１  およびＡ２  に不活性化な活性化基であり、Ｒ２  は反応活性化剤Ａ２  により活性化された式（ＩＩ）の誘導体部分との反応点であって、水素またはトリアルキル置換硅素であり、γは０または１〜６のいずれかの整数であり、そしてピラノース骨格内の結合手をもたない炭素原子は水素原子以外に保護された水酸基または保護されたヒドロキシメチル基を有する）で表される糖誘導体を反応させて式（ＩＩ）のＸ２  の結合位置と式（ＩＩＩ）のＲ２  が結合した酸素原子との間にグリコシル結合を形成する工程である。
【００１５】
これらの工程は、同一の反応混合物中で同時にかまたは順次実施することができる。こうして本発明によれば、新たなグリコシル結合を少なくとも２箇所もつ下記式（ＩＶ）で表されるオリゴ糖が製造できる。
【００１６】
【化８】
0003542143.tif 000005
【００１７】
上式中、Ｙ，Ｘ３  ，ｐ，ｑおよびγ、ならびにピラノース骨格の他の置換基は上記に定義した意味を有し、記号＊はそれぞれ対応する番号が付された結合に連続する。
なお、上記活性基Ｘ１  ，Ｘ２  およびＸ３  と活性化剤Ａ１  およびＡ２  との間の組み合わせは、Ａ１  はＸ１  に対して活性であるがＸ２  およびＸ３  には不活性であり、そしてＡ２  はＸ２  に対して活性であるがＸ１  およびＸ３  には不活性となるように選ばれ、同一反応混合物中で他の組み合わせに係る反応に悪影響を及ぼさないものであれば、当該技術分野で使用されているどのような組み合わせであってもよい。
【００１８】
【具体的な態様】
本発明で使用する糖誘導類は、それぞれ、ピラノース骨格を有する単糖類またはオリゴ糖のいずれであってもよく、それ自体既知の糖類の水酸基を常用の水酸基保護法により選択的に保護して調製できる。上記の反応に供されるピラノース骨格を有する単糖類またはオリゴ糖としては、グルコースおよびガラクトースなどの単糖類、ならびこれらの糖２個以上から構成されるオリゴ糖類、例えば、マルトース、ラクトースおよびセロビオースなどの２糖類、その他のデンプン、デキストリンまたはセルロースなどの加水分解物から調製される他のオリゴ糖類を挙げることができる。従って、これらのアノメリック位の配置はαまたはβ型のいずれであってもよく、またオリゴ糖の糖単位間の結合様式は１→４，１→６または、まれに１→３もしくは１→２であってもよい。これらの中でα−グルコース型と呼ばれる骨格を有するものが都合よく使用でき、オリゴ糖にあっては、結合様式として１→４結合を有するものが広く使用できる。
【００１９】
水酸基の選択的保護は、アノメリック位（１位）水酸基または上記反応点（好ましくは、４位または６位）の水酸基と他の水酸基を個別に保護できるいずれか既知の保護法（または脱離工程を含んでもよい）によって行うことができる。上記他の水酸基の保護基としては、アセチル基、ベンゾイル基、置換ベンゾイル基、ベンジル基、置換ベンジル基、ピバロイル基、アリルオキシカルボニル基、アセトナイド基などか挙げられ、常法により反応させて保護基を導入することができる。
【００２０】
本発明における原料の糖誘導体中の、活性基Ｘ１  ，Ｘ２  ，Ｘ３  としては、ハロゲン基、チオフェニル基、イミデート基、アリルオキシ基などが挙げられ、活性化剤Ａ１  ，Ａ２  としては、銀塩類、水銀塩類、トリフルオロメタンスルホン酸−Ｎ−ヨウドスクシンイミドなどが挙げられ、そしてＲ１  ，Ｒ２  としては水素元子、トリアルキル置換硅素基などが挙げられるが、上記のような条件を満たす組み合わせを選択することが重要である。
【００２１】
本発明における代表的なＸ１  ，Ｘ２  ，Ｘ３  ，Ａ１  ，Ａ２  ，Ｒ１  ，Ｒ２  の組み合わせとしては、それぞれ、例えば、
（ｉ）Ｘ１  ；臭素、Ｘ２  ；チオフェニル基、Ｘ３  ；メトキシ基、Ａ１  ；トリフルオロメタンスルホン酸銀、Ａ２  ；Ｎ−ヨウドスクシンイミド、Ｒ１  ；水素原子、Ｒ２  ；水素原子
（ｉｉ）Ｘ１  ；臭素、Ｘ２  ；フッ素、Ｘ３  ；メトキシ基、Ａ１  ；トリフルオロメタンスルホン酸銀、Ａ２  ；トリフルオロメタンスルホン酸トリメチル硅素、Ｒ１  ；水素原子、Ｒ２  ；トリメチル硅素基、
などが適している。
【００２２】
また、反応に用いられる溶媒は、通常のグリコシル化において用いられる、ニトロメタン、トルエン、ジクロロメタン、テトロヒドロフラン（ＴＨＦ）等、もしくはこれらの溶媒を組み合わせた混合溶媒を用いることもできる。
本発明の反応は、式（Ｉ）で表される糖誘導体と、式（ＩＩ）で表される糖誘導体とを、通常のグリコシル化において用いられる、ニトロメタン、トルエン、ジクロロメタン、テトロヒドロフラン（ＴＨＦ）等、の溶媒に溶解し、これに式（Ｉ）中Ｘ１  のみを活性化するグリコシル化反応活性化剤Ａ１  を添加して行う。上記反応工程を−２０〜０℃で２〜２４時間反応を行なった後、式（ＩＩＩ）で表されるピラノース骨格を有し、反応点以外の骨格中に存在する水酸基を選択的に保護した単糖もしくはオリゴ糖と、式（ＩＩ）のＸ２  のみを活性化するグリコシル化反応活性化剤Ａ２  を添加し、２０〜８０℃で２〜２４時間反応させる。出発糖誘導体原料および反応活性化剤を選ぶことに、これらの反応は、
を同時に行うこともできる。
【００２３】
以下、上記試薬の組み合わせの一例をもとにして本発明の反応の工程について、反応条件、試薬等をさらに説明する。
原料となる式（Ｉ）のブロム化糖は、対応する単糖もしくはオリゴ糖のアセチル化体、もしくはベンゾイル化体のアノメリック位を臭化水素含有酢酸などによりブロム化することにより得ることができる。
【００２４】
式（ＩＩ）のチオグルコシル化糖は、対応する単糖もしくはオリゴ糖のアセチル化体のアノメリック位を、チオフェノール−塩化錫を用いてチオフェニル化した後、保護基を部分選択的に開裂することにより得ることができる。
また、式（ＩＩＩ）のメチルグルコシル化糖は、対応する単糖、もしくはオリゴ糖のメチルグルコシル化糖の保護基を部分選択的に開裂することにより得ることができる。
【００２５】
式（Ｉ）のブロム化糖および式（ＩＩ）のチオグルコシル化糖を、塩化メチレン−トルエンの混合溶媒中、臭素基のみを活性化可能な活性化剤Ａ１  の銀トリフラートにより、−２０〜０℃で２〜４時間グルコシル化反応を行なった後、式（ＩＩＩ）のメチルグルコシル化糖およびＮ−ヨウドスクシンイミドを加え、反応器中で発生するトリフルオロメタンスルホン酸との反応によりチオフェニル基を活性化する。２０〜８０℃で２〜２４時間反応の後、トリエチルアミン等の有機塩基で反応を停止させた後、遊離した塩類等をろ過により取り除き溶媒を減圧留去することにより粗生成物を得ることができる。
【００２６】
得られた粗生成物は、必要により再結晶、もしくはシリカゲルカラムクロマトグラフィー等により精製する。
【００２７】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明する。
実施例１
メチル２，３，４−トリアセチル−６−ο−    ２，３，４−トリアセチル−６−Ｏ−（２，３，４，６−テトラパラメチルベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル    −α−Ｄ−グルコピラノシドの合成
２，３，４，６−テトラパラメチルベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシルブロマイド（１ａ，１１４ｍｇ、式（Ｉ）中、Ｘ１  ＝α置換臭素基、ｐ＝Ｏ，Ｙ＝パラメチルベンゾイル）とフェニル−２，３，４，−トリアセチル−６−ヒドロキシ−β−Ｄ−チオグルコピラノシド（２ａ，５１ｍｇ、式（ＩＩ）中、Ｘ２  ＝β置換フェニルチオ基、ｑ＝Ｏ，Ｒ１  ＝水素原子）を活性化したモレキュラーシーブスＭＳ４Ａ共存下でジクロロメタンに溶解し、活性化剤Ａ１  としてトルエンに溶解した銀トリフラート（１１４ｍｇ）を−２０〜−１０℃で滴下した。約２時間反応後、薄層クロマトグラフィーで２ａの消失を確認した後、ジクロロメタンに溶解したメチル−２，３，４−トリアセチル−６−ヒドロキシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（３ａ，４５ｍｇ、式（ＩＩＩ）中、Ｘ３  ＝α置換メトキシ基、γ＝Ｏ，Ｒ２  ＝水素原子）と活性化剤Ａ２  のＮ−ヨウドスクシンイミド（２６０ｍｇ）を反応液中に添加し、反応温度を０℃〜室温に上昇させた。
【００２８】
室温で１２〜１８時間攪拌し反応させた後、トリエチルアミン（３ｍｌ）を加えて反応を終了させ、反応液をろ過、溶媒を減圧留去することにより粗生成物を得た。
得られた粗生成物を、ヘキサン−酢酸エチルを溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離・精製し、白色結晶（１３３ｍｇ、収率８３％）を得た。
【００２９】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ｐｐｍ）δ
ＧＸ−５００  ＣＤＣｌ３  ／ＴＭＳ
１．９５，１．９６，１．９９，２．０１，２．０４，２．０７（ｅａｃｈ  ｓ，ｅａｃｈ  ３Ｈ，Ａｃ）
２．２８，２．３４，２．３８，２．４１（ｅａｃｈ  ｓ，ｅａｃｈ  ３Ｈ，−Ｃ６  Ｈ４  −ＣＨ３  ）
３．１３（ｄｄ，Ｈ−６′ｂ，Ｊ５′，６′ｂ＝４．１２，Ｊ６′ａ，６′ｂ＝１１．００）
３．３９（ｓ，３Ｈ，−ＯＣＨ３）
３．６４〜３．７１（ｍ，３Ｈ，Ｈ−５，Ｈ−５′，Ｈ−６）
３．７７（ｄｄ，Ｈ−６′ａ，Ｊ５′６′ａ＝１．７２，Ｊ６′ａ，６′ｂ＝１１．００）
３．８９（ｄ，Ｈ−６ａ，Ｊ６ａ，６ｂ＝１１．００）
４．１３（ｍ，Ｈ−５ａ）
４．３９（ｄ，Ｈ−１′，Ｊ１′，２′＝７．７９）
４．５２（ｄｄ，Ｈ−６″ｂ，Ｊ５″，６″ｂ＝５．０４，Ｊ６″ａ，６″ｂ＝１１．９２）
４．６７（ｄｄ，Ｈ−６″ａ，Ｊ５″ａ，６″ａ＝２．９７，Ｊ６″ａ，６″ｂ＝１１．９２）
４．８０（ｄｄ，Ｈ−４′，Ｊ３′，４′＝Ｊ４′，５′＝９．１７）
４．９１（ｄｄ，Ｈ−２，Ｊ１，２＝３．２０，Ｊ２，３＝９．６３）
４．９４（ｄｄ，Ｈ−１″，Ｊ１″，２″＝８．２４）
４．９１（ｄｄ，Ｈ−２′，Ｊ１′，２′＝７．７９，Ｊ２′，３′＝９．１７）
４．９２（ｄ，Ｈ−１，Ｊ１，２＝３．２０）
４．９５（ｄｄ，Ｈ−４，Ｊ３，４＝Ｊ４，５＝９．６３）
５．１０（ｄｄ，Ｈ−３′，Ｊ２′，３′＝Ｊ３′，４′＝９．１７）
５．４２（ｄｄ，Ｈ−３，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．６３）
５．４５（ｄｄ，Ｈ−２″，Ｊ１″，２″＝８．２４，Ｊ２″，３″＝９．６２）
５．６１（ｄｄ，Ｈ−４″，Ｊ３″，４″＝Ｊ４″，５″＝９．６２）
５．８６（ｄｄ，Ｈ−３″，Ｊ２″，３″＝Ｊ３″，４″＝９．６２）
７．０５〜７．２６，７．６９〜７．９２（ｅａｃｈ  ｍ，１６Ｈ，アロマティック−Ｈ）
実施例２
メチル２−ベンゾイル−３−    ２，３，４−トリアセチル−６−Ｏ−（２，３，４，６−テトラパラメチルベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル    −４，６−Ο−ベンジリデン−α−Ｄ−グルコピラノシド（４ｂ）の合成
式（ＩＩＩ）の化合物を下記のように変えた他は、実施例１と同様の方法に従い、上記オリゴ糖を合成した。
【００３０】
すなわち、式（Ｉ）の１ａ  １１３ｍｇ、式（ＩＩ）の２ａ  ５２ｍｇ、活性化剤Ａ１    銀トリフラート  １１１ｍｇ、活性化剤Ａ２    Ｎ−ヨウドスクシンイミド  ２７８ｍｇ、および式（ＩＩＩ）の化合物として実施例１の３ａに代ってメチル２−ベンゾイル−３ヒドロキシ−４，６−Ο−ベンジリデン−ａ−Ｄ−グルコピラノシド（３ｂ，５１ｍｇ）を用い４ｂの白色結晶１３４ｍｇ（収率７９％）を得た。
【００３１】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ｐｐｍ）δ
ＧＸ−５００  ＣＤＣｌ３  ／ＴＭＳ
１．９６，１．９７，２．０４，（ｅａｃｈ  ｓ，ｅａｃｈ  ３Ｈ，Ａｃ）
２．２８，２．３４，２．３９，２．４２（ｅａｃｈ  ｓ，ｅａｃｈ  ３Ｈ，−Ｃ６  Ｈ４  −ＣＨ３  ）
２．９１（ｄｄ，Ｈ−４，Ｊ３，４＝Ｊ４，５＝９．１６）
３．４２（ｓ，３Ｈ，−ＯＣＨ３）
３．４９（ｄｄ，Ｈ−６′ａ，Ｊ５′，６′ａ＝２．７５，Ｊ６′ａ，６′ｂ＝１３．２９）
３．５６（ｄｄ，Ｈ−４′，Ｊ３′，４′＝Ｊ４′，５′＝９．１６）
３．６５（ｄｄ，Ｈ−３，Ｊ３，４＝Ｊ４，５＝９．１６）
３．７４（ｄｄ，Ｈ−６′ｂ，Ｊ５′，６′ｂ＝５．１４，Ｊ６′ａ，６′ｂ＝１３．２９）
３．８１〜３．８５（ｍ，２Ｈ）
３．９８（ｄｄ，Ｈ−２′，Ｊ２′，３′＝Ｊ３′，４′＝９．１６）
４．６０〜４．６８（ｍ，４Ｈ）
４．８５〜４．９１（ｍ，２Ｈ）
５．００（ｄｄ，Ｈ−３′，Ｊ２′，３′＝Ｊ３′，４′＝９．１６）
５．１５（ｄｄ，Ｈ−２，Ｊ１，２＝３．６６，Ｊ２，３＝９．１６）
５．２３（ｄ，Ｈ−１，Ｊ１，２＝３．６６）
５．２７（ｄ，Ｈ−１″，Ｊ１″，２″＝８．２５）
５．４１（ｄｄ，Ｈ−２″，Ｊ１″，２″＝８．２５，Ｊ２″，３″＝１０．０８）
５．５０（ｄｄ，Ｈ−４″，Ｊ３″，４″＝Ｊ４″，５″＝１０．０８）
５．７２（ｓ，ベンジリデン−Ｈ）
５．７７（ｄｄ，Ｈ−３″，Ｊ２″，３″＝Ｊ３″，４″＝１０．０８）
６．９９〜７．６４，７．８１〜８．１３（ｅａｃｈ  ｍ，２１Ｈ，アロマティック−Ｈ）
比較例
メチル２，３，４−トリアセチル−６−Ｏ−    ２，３，４−トリアセチル−６−Ｏ−（２，３，４，６−テトラパラメチルベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−グルコピラノシル    −α−Ｄ−グルコピラノシド（４ａ）を通常の方法に従い段階的に合成した。
（１）第１段階目の合成として１ａ（２０１ｍｇ）と２ａ（１０３ｍｇ）を、活性化したモレキュラーシーブスＭＳ４Ａ共存下ジクロロメタンに溶解し、トルエンに溶解した銀トリフラート（１７９ｍｇ）、２，４，６−コリジン（３１ｍｇ）を−２０〜−１０℃で滴下した（アクタケミカスカンジナビア、Ｂ３３巻、１６６頁、１９７９年、参照）。
【００３２】
−１０℃で３時間反応を行なった後、反応溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和、ジクロロメタンで抽出、硫酸マグネシウムを用いて乾燥、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。粗生成物をベンゼン−酢酸エチルを溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、フェニル２，３，４−トリアセチル−６−Ｏ−（２，３，４，６−テトラパラメチルベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−チオグルコピラノシドの白色結晶２２８ｍｇ（収率８７％）を得た。
【００３３】
１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（ｐｐｍ）δ
ＧＸ−５００  ＣＤＣｌ３  ／ＴＭＳ
１．９３，１．９５，２．０５（ｅａｃｈ  ｓ，ｅａｃｈ  ３Ｈ，Ａｃ）
２．２９，２．３４，２．３９，２．４１（ｅａｃｈ  ｓ，ｅａｃｈ  ３Ｈ，−Ｃ６  Ｈ４  −ＣＨ３  ）
３．６５（ｍ，Ｈ−５）
３．７４〜３．７８（ｍ，Ｈ−６ａ，Ｈ−６ｂ）
４．００（ｍ，Ｈ−５′）
４．４１（ｄｄ，Ｈ−６′ａ，Ｊ５′，６′ａ＝５．５０，Ｊ６′ａ，６′ｂ＝１２．３７）
４．５８（ｄｄ，Ｈ−６′ｂ，Ｊ５′，６′ｂ＝２．７４，Ｊ６′ａ，６′ｂ＝１２．３７）
４．６０（ｄ，Ｈ−１，Ｊ１，２＝９．６２）
４．７２（ｄｄ，Ｈ−４，Ｊ３，４＝Ｊ４，５＝９．６２）
４．８３（ｄｄ，Ｈ−２，Ｊ１，２＝Ｊ２，３＝９．６２）
４．８７（ｄ，Ｈ−１′，Ｊ１′，２′＝７．７９）
５．１０（ｄｄ，Ｈ−３，Ｊ２，３＝Ｊ３，４＝９．６２）
５．４４（ｄｄ，Ｈ−２′，Ｊ１′，２′＝７．７９，Ｊ２′，３′＝９．６２）
５．５６（ｄｄ，Ｈ−４′，Ｊ３′，４′＝Ｊ４′，５′＝９．６２）
５．７８（ｄｄ，Ｈ−３′，Ｊ２′，３′＝Ｊ３′，４′＝９．６２）
７．０７〜７．４５，７．７１〜７．９３（ｅａｃｈ  ｍ，２１Ｈ，アロマティック−Ｈ）
（２）第２段階目の合成として、上記反応で得られたフェニル２，３，４−トリアセチル−６−Ｏ−（２，３，４，６−テトラパラメチルベンゾイル−β−Ｄ−グルコピラノシル）−β−Ｄ−チオグルコピラノシド９０ｍｇ，３ａの化合物３５ｍｇおよびＮ−ヨウドスクシンイミド７３ｍｇを活性化したモレキュラーシーブスＭＳ４Ａ共存下ジクロロメタンに溶解し、トリフルオロメタンスルホン酸０．１ｍｌをジクロロメタン２ｍｌで希釈した溶液０．０５ｍｌを滴下、室温で約２０分反応させる（ジャーナルオブアメリカンケミカルソサイエティーソサイエティー、１０５巻、２４３０頁、１９８３年、参照）。反応溶液を１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和・洗浄、ジクロロメタンで抽出後、抽出液を硫酸マグネシウムを用いて乾燥、溶媒を減圧留去して粗生成物を得た。粗生成物をヘキサン−酢酸エチルを溶出液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、４ａを７１ｍｇ（収率６６％）得た。
【００３４】
（１），（２）での通算収率は５７％であった。
【００３５】
【発明の効果】
本発明は、薬理活性、及びそれに関連する有用なオリゴ糖を簡略な工程で高い生産性により合成することができる。