【手続補正書】
【提出日】平成29年10月20日(2017.10.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）生殖系列に妊孕性遺伝子の破壊、および（２）破壊されていない妊孕性遺伝子を含むドナー多能性細胞を含む、着床前の非ヒトホスト胚（例えば胚盤胞）。
【請求項２】
ドナー多能性細胞がゲノム中に遺伝子改変をさらに含む、請求項１に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項３】
多能性細胞が雄の多能性細胞である、請求項１または２に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項４】
破壊された妊孕性遺伝子が雄性の妊孕性を阻害する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項５】
妊孕性遺伝子が精子形成を調節する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項６】
妊孕性遺伝子が性染色体上に位置する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項７】
性染色体がＸ染色体である、請求項６に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項８】
性染色体がＹ染色体である、請求項６に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項９】
妊孕性遺伝子がＧＩＬＺである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項１０】
多能性細胞が幹細胞である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項１１】
幹細胞が胚性幹（ＥＳ）細胞である、請求項１０に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項１２】
ホスト胚の生殖系列における妊孕性遺伝子の両方のアレルが破壊されている、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚。
【請求項１３】
非ヒト動物の作製方法であって、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚を、偽妊娠非ヒト動物に導入し、該着床前の非ヒトホスト胚を、該胚の発生に適当な条件下で懐胎させることにより、非ヒト動物を作製することを含む、方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の非ヒトホスト胚を含む、代理親（surrogate）または里親（foster）である、非ヒト動物。
【請求項１５】
キメラ非ヒト動物の作製方法であって、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚を、偽妊娠非ヒト動物に導入し、該着床前の非ヒトホスト胚を、該胚の発生に適当な条件下で懐胎させることにより、キメラ非ヒト動物を作製することを含む、方法。
【請求項１６】
妊孕性遺伝子の破壊および破壊されていない妊孕性遺伝子を含むドナー多能性細胞を含む、非ヒトホスト胚の作製方法であって: １)破壊可能な妊孕性遺伝子を含む条件的不妊導入遺伝子を保有する第一の動物系統(「条件的不妊系統」)を; ２)破壊可能な妊孕性遺伝子を破壊する遺伝子を含む、不妊活性化導入遺伝子を保有する第二の動物系統(「不妊活性化系統」)と交雑させることにより、破壊された妊孕性遺伝子を有する生殖細胞を含む、遺伝子導入非ヒトホスト胚を作製し、かつ３）遺伝子導入非ヒトホスト胚に破壊されていない妊孕性遺伝子を含む、ドナー多能性細胞を導入することを含む、方法。
【請求項１７】
第一の動物系統の雌を、第二の動物系統の雄と交雑させる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ドナー多能性細胞の生殖系列伝達を改善するための系であって、該系は、以下を含む：
１)妊孕性遺伝子破壊分子により破壊可能である妊孕性遺伝子(「破壊可能な妊孕性遺伝子」)を含み、破壊可能な妊孕性遺伝子がプロモーターに作動可能に結合している、第一の繁殖パートナーおよび(２)妊孕性遺伝子破壊分子をコードするヌクレオチド配列 (「破壊ヌクレオチド配列」)を含む破壊導入遺伝子を含み、該破壊ヌクレオチド配列がプロモーターに作動可能に連結している、第二の繁殖パートナーを含む、非ヒト動物のつがい；ならびに破壊されていない妊孕性遺伝子を含む、ドナー多能性細胞。
【請求項１９】
妊孕性遺伝子破壊因子がリコンビナーゼであり、破壊可能な妊孕性遺伝子が、該リコンビナーゼの存在下において妊孕性遺伝子の破壊を媒介するリコンビナーゼ認識部位に作動可能に連結している、請求項１８に記載の系。
【請求項２０】
妊孕性遺伝子破壊因子が、適当にはアンチセンス抑制またはＲＮＡ干渉により、該妊孕性遺伝子の発現を阻害する抑制ＲＮＡ分子である、請求項１８に記載の系。
【請求項２１】
妊孕性遺伝子破壊因子が、妊孕性遺伝子のポリペプチド産物と免疫相互作用を示す抗体である、請求項１８に記載の系。
【請求項２２】
該破壊ヌクレオチド配列が条件的に発現可能である、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の系。
【請求項２３】
該破壊導入遺伝子が、破壊ヌクレオチド配列に作動可能に連結した発現調節エレメントを含み、該エレメントが、該破壊ヌクレオチド配列の発現を条件的に阻害する、請求項２２に記載の系。
【請求項２４】
該発現調節エレメントが第一の条件下で、破壊ヌクレオチド配列の転写を阻害し、第二の条件下において、該発現調節エレメントの破壊により、破壊ヌクレオチド配列の転写が可能になるか、または増大する、請求項２３に記載の系。
【請求項２５】
該発現調節エレメントが、破壊ヌクレオチド配列の発現を阻害し、リコンビナーゼ認識部位に作動可能に連結している阻害ヌクレオチド配列(例えば転写終結配列)を含み、該リコンビナーゼ認識部位が、リコンビナーゼの存在下において、該阻害ヌクレオチド配列の破壊を媒介し、第一の繁殖パートナーが、プロモーターに作動可能に結合した、リコンビナーゼのコード配列を含む活性化導入遺伝子を含む、請求項２３または２４に記載の系。
【請求項２６】
第一の繁殖パートナーが雌であり、第二の繁殖パートナーが雄である、請求項１８〜２５のいずれか一項に記載の系。
【請求項２７】
第一の繁殖パートナーが、該活性化導入遺伝子についてホモ接合型である、請求項２５または２６に記載の系。
【請求項２８】
第二の繁殖パートナーが、破壊導入遺伝子についてホモ接合型である、請求項１８〜２７のいずれか一項に記載の系。
【請求項２９】
キメラ非ヒト動物の作製方法であって、
(１) (例えば請求項１〜１２のいずれか一項に記載のように)妊孕性遺伝子の破壊を生殖系列中に含み、さらにドナー多能性細胞を含み、ここで、ドナー多能性細胞が遺伝子改変を含む、着床前の非ヒト胚を移植すること; および
(２) （１）の該非ヒトホスト胚を、胚の発生に適当な条件下で懐胎させることにより、破壊された妊孕性遺伝子および遺伝子改変を生殖系列中に有するキメラ非ヒト動物を作製することを含む、方法。
【請求項３０】
該キメラ非ヒト動物が、雄のキメラ非ヒト動物である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
ゲノム中に遺伝子改変を含む非ヒト動物の作製方法であって、請求項３０に記載の方法により作製される、雄のキメラ非ヒト動物を、ゲノム中に破壊されていない妊孕性遺伝子を含む、同族の雌の非ヒト動物と繁殖させ、該雄キメラ非ヒト動物が、ドナー多能性細胞由来の生殖細胞または配偶子を含む場合に、該遺伝子改変を含む非ヒト動物を得ることを含む、方法。
【請求項３２】
移植された請求項１〜１２のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚を有する、非ヒト動物（例えば、代理親または里親である非ヒト動物）。
【請求項３３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の着床前の非ヒトホスト胚由来である、キメラ非ヒト動物。
【請求項３４】
請求項３１に記載の方法により作製される、非ヒト動物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４１】
「抗体」という語は、抗原結合領域を有する任意の抗体様分子を指すのに用い、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆ(ａｂ’)２、単一ドメイン抗体(ＤＡＢ)、ＦｖおよびｓｃＦｖ(一本鎖Ｆｖ)等のような、抗体断片を含む。