【手続補正書】
【提出日】平成29年7月25日(2017.7.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性化された状態で、２つ以上の標的、２つ以上のエピトープ、又はその組合せを結合する多重特異性活性化可能抗体であって、前記多重特異性活性化可能抗体は：
第１標的又はエピトープを特異的に結合する、少なくとも第１抗体（ＡＢ１）であって、ここで前記ＡＢ１が、Ｈ鎖とＬ鎖を含むＩｇＧ抗体を含む；
第２標的又はエピトープを特異的に結合する、第２抗体又はその抗原結合フラグメント（ＡＢ２）であって、ここで前記ＡＢ２がｓｃＦｖを含み、かつ、ここで前記ＡＢ２が前記ＡＢ１のＨ鎖のそれぞれのアミノ末端に融合されている；
前記多重特異性活性化可能抗体が未切断状態にある場合、前記ＡＢ１のその標的への結合を阻害する、前記ＡＢ１へカップリングされた少なくとも第１マスキング部分（ＭＭ１）；
前記ＡＢ１にカップリングされた少なくとも第１切断部分（ＣＭ１）であって、ここで前記ＣＭ１は第１プロテアーゼのための基質として機能するポリペプチドであり、かつ、ここで前記ＣＭ１が前記ＭＭ１に連結されている；
前記多重特異性活性化可能抗体が未切断状態にある場合、前記ＡＢ２のその標的への結合を阻害する、前記ＡＢ２へカップリングされた少なくとも第２マスキング部分（ＭＭ２）；及び
前記ＡＢ２にカップリングされた少なくとも第２切断部分（ＣＭ２）であって、ここで前記ＣＭ２が第２プロテアーゼのための基質として機能するポリペプチドであり、かつ、ここで前記ＣＭ２が前記ＭＭ２に連結されている；
を含む、多重特異性活性化可能抗体。
【請求項２】
前記ＡＢ１が、２つのＨ鎖（ＡＢ１  ＨＣ）及び２つのＬ鎖（ＡＢ１  ＬＣ）を含むＩｇＧ抗体を含み、そして、前記ＡＢ２が、Ｌ鎖可変領域にカップリングされたＨ鎖可変領域を含み、
ここで、未切断状態の前記多重特異性活性化可能抗体の各Ｈ鎖が、以下のようにＮ末端からＣ末端への構造配置：ＭＭ２−ＣＭ２−ＡＢ２−ＡＢ１  ＨＣ、を有し、そして
ここで、未切断状態の前記多重特異性活性化可能抗体の各Ｌ鎖が、以下のようにＮ末端からＣ末端への構造的配置：ＭＭ１−ＣＭ１−ＡＢ１  ＬＣ、を有する、
請求項１に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項３】
前記ＭＭ１が、前記ＡＢ１のその標的又はエピトープへの結合のための平衡解離定数よりも大きい、前記ＡＢ１への結合のための平衡解離定数を有する；
前記ＭＭ１が、未切断状態において、前記第１標的又は第１エピトープへの前記ＡＢ１の特異的結合を妨害するように、前記ＣＭ１が前記多重特異性活性化可能抗体中に配置される；
前記ＭＭ１が、前記多重特異性活性化可能抗体が切断された状態にある場合、前記第１標的への結合のために、前記ＡＢ１を妨害しないか、又は前記ＡＢ１と競合しない；
前記ＭＭ１ポリペプチド配列が、前記第１標的の配列とは異なる；
前記ＭＭ１ポリペプチド配列が、前記ＡＢ１の任意の天然の結合パートナーと５０％以下、同一である；及び／又は
前記ＭＭ１が、長さ４０アミノ酸以下のポリペプチドである、
請求項１又は２に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項４】
前記ＭＭ２が、前記ＡＢ２のその標的又はエピトープへの結合のための平衡解離定数よりも大きい、前記ＡＢ２への結合のための平衡解離定数を有する；
前記ＭＭ２が、未切断状態において、前記第２標的又は第２エピトープへの前記ＡＢ２の特異的結合を妨害するように、前記ＣＭ２が前記多重特異性活性化可能抗体中に配置される；
前記ＭＭ２が、前記多重特異性活性化可能抗体が切断された状態にある場合、第２標的への結合のために、前記ＡＢ２を妨害しないか、又は前記ＡＢ２と競合しない；
前記ＭＭ２ポリペプチド配列が、前記第２標的の配列とは異なる；
前記ＭＭ２ポリペプチド配列が、前記ＡＢ２の任意の天然の結合パートナーと５０％以下、同一である；及び／又は
前記ＭＭ２が、長さ４０アミノ酸長以下のポリペプチドである、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項５】
ＣＭ１を切断する前記プロテアーゼが組織において前記第１標的又はエピトープと共局在され、そして前記プロテアーゼが、前記多重特異性活性化可能抗体が前記プロテアーゼに暴露される場合、前記多重特異性活性化可能抗体における前記ＣＭ１を切断する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項６】
前記多重特異性活性化可能抗体が：
前記ＭＭ１と前記ＣＭ１との間に結合ペプチド；又は
前記ＣＭ１と前記ＡＢ１との間に結合ペプチド；又は
第１結合ペプチド（ＬＰ１）及び第２結合ペプチド（ＬＰ２）であって、ここで未切断状態での前記多重特異性活性化可能抗体が、以下のＮ−末端からＣ−末端への構造配置：ＭＭ１−ＬＰ１−ＣＭ１−ＬＰ２−ＡＢ１−ＬＣ又はＡＢ１−ＬＣ−ＬＰ２−ＣＭ１−ＬＰ１−ＭＭ１を有し、任意にここで前記２つの結合ペプチドが互いに同一である必要はなく、任意にここでＬＰ１及びＬＰ２のそれぞれが、長さ約１〜２０アミノ酸のペプチドである、
を含む、請求項２に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項７】
前記多重特異性活性化可能抗体が：
前記ＭＭ２と前記ＣＭ２との間に結合ペプチド；又は
前記ＣＭ２と前記ＡＢ２との間に結合ペプチド；又は
第１結合ペプチド（Ｌ１）及び第２結合ペプチド（Ｌ２）であって、そしてここで未切断状態下での前記多重特異性活性化可能抗体が、以下のＮ−末端からＣ−末端への構造配置：ＭＭ２−Ｌ１−ＣＭ２−Ｌ２−ＡＢ２−ＡＢ１  ＨＣ又はＡＢ１  ＨＣ−ＡＢ２−ＬＣ−Ｌ２−ＣＭ２−Ｌ１−ＭＭ２を有し、任意にここで前記２つの結合ペプチドが互いに同一である必要はなく、任意にここでＬ１及びＬ２のそれぞれが、長さ約１〜２０アミノ酸のペプチドである、
を含む、請求項２に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項８】
前記ＣＭ１が、表３に列挙されるプロテアーゼから選択されるプロテアーゼのための基質である、及び／又は前記ＣＭ１が、１５個までの長さのアミノ酸のポリペプチドである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【表１】
2016525551.tif 000001
【請求項９】
前記ＣＭ２が、前記表３に列挙されるプロテアーゼから選択されるプロテアーゼのための基質である、及び／又は前記ＣＭ２が、１５個までの長さのアミノ酸のポリペプチドである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項１０】
前記第２プロテアーゼが組織において前記第２標的又はエピトープと共局在され、そして前記第２プロテアーゼが、前記多重特異性活性化可能抗体が第２プロテアーゼに暴露される場合、前記多重特異性活性化可能抗体における前記ＣＭ２を切断し、任意に：
ここで前記第１プロテアーゼ及び第２プロテアーゼが、組織において、第１標的又はエピトープ及び第２標的又はエピトープと共局在され；及び／又は
ここで前記第１プロテアーゼ及び前記第２プロテアーゼが、同じプロテアーゼであり、任意にここで前記ＣＭ１及びＣＭ２が、同じプロテアーゼのための異なった基質であり、任意にここで前記プロテアーゼが、前記表３に示されるプロテアーゼから成る群から選択され；又は
前記第１プロテアーゼ及び第２プロテアーゼが、異なったプロテアーゼであり、任意にここで前記第１プロテアーゼ及び第２プロテアーゼが、前記表３に示されるプロテアーゼから成る群から選択される異なったプロテアーゼである、
請求項１〜９のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項１１】
前記ＡＢ１が、標的化抗体である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項１２】
前記ＡＢ２が：
免疫エフェクター細胞動員ｓｃＦｖである；
白血球動員ｓｃＦｖである；
Ｔ−細胞動員ｓｃＦｖである；
ＮＫ−細胞動員ｓｃＦｖである；
マクロファージ動員ｓｃＦｖである；又は
単核細胞動員ｓｃＦｖである、
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項１３】
前記ＡＢ２が、抗−ＣＤ３イプシロンｓｃＦｖ又は抗−ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖであり、任意にここで前記抗−ＣＤ３イプシロンｓｃＦｖがＯＫＴ３に由来する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項１４】
前記ＡＢ１が、表１における標的群から選択される標的に結合する抗体に由来する、或いは
前記ＡＢ１が、抗−Ｊａｇｇｅｄ抗体若しくは抗−ＥＧＦＲ抗体であるか、又はその抗体に由来する、或いは
前記ＡＢ１が、表７に示されるアミノ酸配列の少なくとも一部を含む、或いは
前記ＡＢ１が、抗−Ｊａｇｇｅｄ抗体若しくは抗−ＥＧＦＲ抗体であるか、又はその抗体に由来し、そしてここで前記ＡＢ２が、抗−ＣＤ３イプシロン  ｓｃＦｖ若しくは抗−ＣＴＬＡ−４  ｓｃＦｖであるか、又はそれに由来する、或いは
前記多重特異性活性化可能抗体が、配列番号２９２、２９４、３００、３０４、３０６、３０８、３１０、３３６又はその何れかの組合せで示されるようなアミノ酸配列の少なくとも一部を含む、
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【表２】
2016525551.tif 000002
【表３】
2016525551.tif 000003
【請求項１５】
前記ＡＢ１が第１標的を結合し、そして前記ＡＢ２が第２標的に結合し、そして前記第１標的及び第２標的が異なっている、又は前記ＡＢ１が第１エピトープを結合し、そして前記ＡＢ２が第２エピトープを結合し、任意にここで前記第１エピトープ及び第２エピトープが同じ標的上若しくは異なった標的上に存在する、
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか１項に記載される多重特異性活性化可能抗体をコードする、単離核酸分子。
【請求項１７】
請求項１６に記載の単離核酸分子を含むベクター。
【請求項１８】
多重特異性活性化可能抗体の発現をもたらす条件下で、請求項１６に記載の核酸分子を含む細胞を培養することによる、多重特異性活性化可能抗体の製造方法。
【請求項１９】
前記抗体に接合された剤を含み、任意にここで前記剤が、治療剤、抗腫瘍剤、トキシン若しくはそのフラグメント、検出可能部分、又は診断剤であり、任意にここで前記剤が、リンカーを介して抗体に接合され、任意にここで前記リンカーが、切断可能リンカー若しくは非切断可能リンカーである、
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体。
【請求項２０】
活性化状態において、２つ以上の標的又は２つ以上のエピトープ又はそれらの組み合わせに結合する、請求項１に記載の多重特異性活性化可能抗体の製造方法であって、前記方法が：
（ａ）請求項１に記載の多重特異性活性化可能抗体をコードする核酸コンストラクトを含む細胞を、請求項１に記載の多重特異性活性化可能抗体の発現をもたらす条件下で培養し、そして
（ｂ）前記多重特異性活性化可能抗体を回収する
ことを含む、方法。
【請求項２１】
対象における障害に関連する臨床学的徴候の症状を緩和するための使用のための、請求項１〜１５及び１９のいずれか１項に記載の多重特異性活性化可能抗体、又は請求項１８若しくは２０に記載の方法によって製造される多重特異性抗体であって、ここで、前記抗体が前記障害に関連する臨床学的徴候の症状を緩和するために十分な量、それを必要とする対象に投与されるものであり、任意にここで前記対象がヒトであり、任意にここで前記障害が癌である、多重特異性活性化可能抗体。