【誤訳訂正書】
【提出日】平成29年1月17日(2017.1.17)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
3'→5'エクソヌクレアーゼ活性を欠くポリメラーゼの存在下で産生される、プライマー伸長産物を検出するための方法であって、
a)少なくとも2つの単一標識オリゴヌクレオチド配列を用意する工程であって、
前記少なくとも2つの単一標識オリゴヌクレオチド配列が、一方または両方の配列と相補的な配列が導入されると、前記相補的な配列が前記少なくとも2つの単一標識オリゴヌクレオチド配列のうちの一方とハイブリダイズする場合に、測定可能なシグナルを発生させる、蛍光消光対を形成するために、遊離溶液中で相互にハイブリダイズし、
前記オリゴヌクレオチド配列のうちの少なくとも1つが、少なくとも1つのホスホロチオエート基を含有し、
ホスホロチオエート基を含有するオリゴヌクレオチド(複数可)の塩基のうちの30〜70%が、ホスホロチオエートである、工程と、
b)少なくとも1つのプライマーを用意し、前記少なくとも1つのプライマーからプライマー伸長反応を開始させ、これにより、前記単一標識オリゴヌクレオチド配列のうちの少な
くとも1つと相補的な配列を作り出す工程と、
c)前記相補的な配列が前記少なくとも2つの単一標識オリゴヌクレオチド配列のうちの一方とハイブリダイズする場合に、発生する検出可能なシグナルを測定する工程と
を含む、方法。
【請求項２】
3'→5'エクソヌクレアーゼ活性を欠くポリメラーゼの存在下で産生される、プライマー伸長産物を検出するためのキットであって、
前記キットが、少なくとも2つの単一標識オリゴヌクレオチド配列を含み、
前記少なくとも2つの単一標識オリゴヌクレオチド配列が、一方または両方の配列と相補的な配列が導入されると、前記相補的な配列が前記2つの単一標識オリゴヌクレオチド配列のうちの一方とハイブリダイズする場合に、測定可能なシグナルを発生させる、蛍光消光対を形成するために、遊離溶液中で相互にハイブリダイズし、
前記オリゴヌクレオチド配列のうちの少なくとも1つが、少なくとも1つのホスホロチオエート基を含有し、
ホスホロチオエート基を含有するオリゴヌクレオチド(複数可)の塩基のうちの30〜70%が、ホスホロチオエートである、キット。
【請求項３】
第1のオリゴヌクレオチド配列のTm(溶融温度)と、第2のオリゴヌクレオチド配列のTmとが異なる、請求項1に記載の方法。
【請求項４】
前記第1のオリゴヌクレオチド配列および前記第2のオリゴヌクレオチド配列のうちの一方のTmが、前記プライマー伸長反応のTa(アニーリング温度)以下である、請求項3に記載の方法。
【請求項５】
前記第1のオリゴヌクレオチド配列および前記第2のオリゴヌクレオチド配列のうちの一方のTmが、前記プライマー伸長反応のTaを上回る、請求項3または4に記載の方法。
【請求項６】
3'→5'エクソヌクレアーゼ活性を欠くポリメラーゼの存在下で産生される、プライマー伸長産物を、PCRを使用して検出するための方法であって、
a)i) 第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列；および
ii) 少なくとも第2の単一標識オリゴヌクレオチド配列
であって、前記第1のオリゴヌクレオチド配列のTmと、前記第2のオリゴヌクレオチド配列のTmとが異なり、ここで、前記第1のオリゴヌクレオチド配列と、前記第2のオリゴヌクレオチド配列とが、遊離溶液中で相互にハイブリダイズして、蛍光消光対を形成する、第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列および少なくとも第2の単一標識オリゴヌクレオチド配列；ならびに
iii) 少なくとも1つのプライマー
を用意する工程であって、
前記第1のオリゴヌクレオチド配列および前記第2のオリゴヌクレオチド配列のうちの一方のTmが、PCRプロセスのTa以下であり、
前記オリゴヌクレオチド配列のうちの少なくとも1つが、少なくとも1つのホスホロチオエート基を含有し、ホスホロチオエート基を含有するオリゴヌクレオチド(複数可)の塩基のうちの30〜70%が、ホスホロチオエートであり、
前記少なくとも1つのプライマーが、少なくとも1つの非標識のテイルドプライマーを含み、前記非標識のテイルドプライマーがテイル領域を有し、前記テイル領域が、前記第2の単一標識オリゴヌクレオチド配列のオリゴヌクレオチド配列と相補的なオリゴヌクレオチド配列を含み、
前記第2の単一標識オリゴヌクレオチド配列が、前記第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列とハイブリダイズすることがもはや可能でなくなり、これにより、測定可能なシグナルを発生させるように、前記第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列が、PCRプロセスにおいて前記第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列と相補的な配列が作り出されたら、そこからDNA合成を開始させるプライマーである、工程；
b)前記少なくとも1つのプライマーからプライマー伸長反応を開始させ、これにより、前記第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列と相補的な配列を作り出す工程；
c)前記相補的な配列が、前記第1の単一標識オリゴヌクレオチド配列とハイブリダイズする場合に、発生する検出可能なシグナルを測定する工程
を含む、方法。
【請求項７】
前記単一標識オリゴヌクレオチドのうちの一方が、他方より10塩基を超えて短い、請求項1及び3から6のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記PCRプロセスを、各サイクルにおいて、または、そうでなく、反応が測定可能なシグナルを創出するのに十分な産物をいまだ産生していない場合は、反応の温度を下げて、ハイブリダイゼーションを生じさせることによる、多数のサイクルの後において、リアルタイムでモニタリングする、請求項6および7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記単一標識オリゴヌクレオチドのうちの前記他方のTmが、Taを上回る、請求項6から8のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記単一標識オリゴヌクレオチドのうちの前記一方が、前記蛍光消光対の消光剤標識を有する、請求項1及び3から9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ホスホロチオエート基を含有するオリゴヌクレオチド(複数可)の内部塩基のうちの少なくとも1つが、ホスホロチオエートである、請求項1及び3から10のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
対立遺伝子特異的PCRベースのSNPジェノタイピングにおける使用のための、請求項1及び3から11のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ハイブリダイゼーションだけの使用を介して、前記プライマー伸長産物をモニタリングする、請求項1及び3から12のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
PCR後のハイブリダイゼーションだけの使用を介して、前記プライマー伸長産物をモニタリングする、請求項6から13のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記蛍光消光オリゴ対が、10bp〜100bpの範囲にある、請求項1及び3から14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記蛍光消光オリゴ対が、10bp〜100bpの範囲にあるが、長さが対応していない、請求項15に記載の方法。
【請求項１７】
フルオロフォア標識オリゴヌクレオチドの塩基のうちの少なくとも1つが、少なくとも1つのホスホロチオエート基を含有する、請求項1及び3から16のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記蛍光消光オリゴ対が、対のうちの一方はフルオロフォアで標識されており、他方は非蛍光消光分子で標識されている、請求項1及び3から17のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記蛍光消光オリゴ対を、ヌクレアーゼ分解に対して耐性となるように修飾する、請求項1及び3から18のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
第1のオリゴヌクレオチド配列のTm(溶融温度)と、第2のオリゴヌクレオチド配列のTmとが異なる、請求項2に記載のキット。
【請求項２１】
前記第1のオリゴヌクレオチド配列および前記第2のオリゴヌクレオチド配列のうちの一方のTmが、前記プライマー伸長反応のTa(アニーリング温度)以下である、請求項20に記載のキット。
【請求項２２】
前記第1のオリゴヌクレオチド配列および前記第2のオリゴヌクレオチド配列のうちの一方のTmが、前記プライマー伸長反応のTaを上回る、請求項20または21に記載のキット。
【請求項２３】
前記単一標識オリゴヌクレオチドのうちの一方が、他方より10塩基を超えて短い、請求項2及び20から22のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２４】
前記単一標識オリゴヌクレオチドのうちの前記一方が、前記蛍光消光対の消光剤標識を有する、請求項2及び20から23のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２５】
前記ホスホロチオエート基を含有するオリゴヌクレオチド(複数可)の内部塩基のうちの少なくとも1つが、ホスホロチオエートである、請求項2及び20から24のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２６】
対立遺伝子特異的PCRベースのSNPジェノタイピングにおける使用のための、請求項2及び20から25のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２７】
前記蛍光消光オリゴ対が、10bp〜100bpの範囲にある、請求項2及び20から26のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２８】
前記蛍光消光オリゴ対が、10bp〜100bpの範囲にあるが、長さが対応していない、請求項27に記載のキット。
【請求項２９】
フルオロフォア標識オリゴヌクレオチドの塩基のうちの少なくとも1つが、少なくとも1つのホスホロチオエート基を含有する、請求項2及び20から28のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３０】
前記蛍光消光オリゴ対が、対のうちの一方はフルオロフォアで標識されており、他方は非蛍光消光分子で標識されている、請求項2及び20から29のいずれか一項に記載のキット。
【請求項３１】
前記蛍光消光オリゴ対を、ヌクレアーゼ分解に対して耐性となるように修飾する、請求項2及び20から30のいずれか一項に記載のキット。