(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式［１］
【化１】
0003590450.tif 000037
［式中、Ｒ１はメチル基またはメチレン基を表す。ただし、Ｒ１がメチレン基を表す場合、Ｒ１とラクトン環の３位との結合は二重結合を表す（以下同じ）。Ｒ２およびＲ３は同一または異なり、水素原子、トリ（Ｃ１〜Ｃ７炭化水素）シリル基、またはＣ２〜Ｃ８のアシル基を表す。］
で表されるビタミンＤ３誘導体。
【請求項２】
上記式［１］のＲ１がメチル基であり、ラクトン環の３位の不斉中心が（Ｓ）配置であり、５位の不斉中心が（Ｓ）配置である請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体。
【請求項３】
上記式［１］のＲ１がメチル基であり、ラクトン環の３位の不斉中心が（Ｓ）配置であり、５位の不斉中心が（Ｒ）配置である請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体。
【請求項４】
上記式［１］のＲ１がメチレン基であり、ラクトン環の５位の不斉中心が（Ｓ）配置である請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体。
【請求項５】
上記式［１］のＲ１がメチレン基であり、ラクトン環の５位の不斉中心が（Ｒ）配置である請求項１に記載のビタミンＤ３誘導体。
【請求項６】
下記式［２］
【化２】
0003590450.tif 000038
［式中、Ｒ１は上記式［１］における定義に同じ。Ｘは臭素原子またはヨウ素原子を表す。］
で表されるラクトン化合物。
【請求項７】
下記式［３］
【化３】
0003590450.tif 000039
［式中、Ｒ１は上記式［１］における定義に同じ。］
で表されるラクトン化合物。
【請求項８】
下記式［４］
【化４】
0003590450.tif 000040
［式中、Ｘは臭素原子またはヨウ素原子を表す。］
で表されるヘプタン酸誘導体。
【請求項９】
下記式［５］
【化５】
0003590450.tif 000041
［式中、Ｒ１は上記式［１］における定義に同じ。Ｒ４は水素原子、トリ（Ｃ１〜Ｃ７炭化水素）シリル基、またはＣ２〜Ｃ８のアシル基を表す。］
で表されるラクトン化合物。
【請求項１０】
下記式［６］
【化６】
0003590450.tif 000042
［式中、Ｒ４は水素原子、トリ（Ｃ１〜Ｃ７炭化水素）シリル基、またはＣ２〜Ｃ８のアシル基を表す。］
で表されるヘプタン酸誘導体。
【請求項１１】
下記式［８］
【化８】
0003590450.tif 000043
で表されるラクトン化合物をナトリウムビストリメチルシリルアミド存在下、ブロモメチレントリフェニルホスホニウムブロミドと反応させることを特徴とする下記式［９］
【化９】
0003590450.tif 000044
［式中、Ｘは臭素原子またはヨウ素原子を表す。］
で表されるラクトン化合物の製造法。
【請求項１２】
上記式［２］で表されるラクトン化合物と、下記式［１０］
【化１０】
0003590450.tif 000045
［式中、Ｒ２およびＲ３は上記式［１］における定義に同じ。］
で表される化合物とをパラジウム触媒の存在下に反応させることを特徴とする上記式［１］で表されるビタミンＤ３誘導体の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は医薬品として有用なビタミンＤ３  誘導体に関する。更に詳しくは、骨形成促進剤、腫瘍細胞増殖抑制剤、免疫抑制剤、高カルシウム血症剤等の医薬品として有用な１α―ヒドロキシビタミンＤ３  誘導体およびその製造法、ならびにその製造中間体に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ビタミンＤ３  代謝物が生体内のカルシウムおよびリン酸塩の物質代謝の制御物質として、極めて重要な働きをしていることは、今までに特許公報や一般文献中の多くの開示を通して十分認識されている。また最近では腫瘍性の骨髄細胞の分化誘導能を有するものも数多く見いだされているなど、さまざまな疾患に対する治療用の薬剤として臨床的用途の増加を見つつある。一方最近、α―ヒドロキシラクトン環をステロイド側鎖に有する新規なビタミンＤ３  活性代謝物が見いだされた［アーカイブス・オブ・バイオケミストリー・アンド・バイオフィジクス（Ａｒｃｈ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．，２０４，３３９〜３９１（１９８０））；フェブス・レターズ（ＦＥＢＳ  ＬＥＴＴＥＲＳ）１３４，２０７〜２１１（１９８１）］。この化合物は１α，２５―ジヒドロキシビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンであり、下記に示す構造式で表わされる。
【０００３】
【化１１】
0003590450.tif 000002
【０００４】
この化合物には血清中のカルシウム濃度低下作用（特開昭５８―１１８５１６号公報）、腫瘍細胞増殖抑制作用（特開昭５８―２１００１１号公報）、骨形成作用促進作用（特開昭６０―１８５７１５号公報）などの作用があることが報告されており、さまざまな疾患の治療薬として期待されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明が解決しようとする課題は、骨形成促進作用等を有する新規なビタミンＤ３  誘導体を見いだすことである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的で鋭意研究した結果、以下の発明に到達した。
【０００７】
すなわち、本発明は下記式［１］
【０００８】
【化１２】
0003590450.tif 000003
【０００９】
で表わされるビタミンＤ３  誘導体である。上記式［１］中、Ｒ１  はメチル基、メチレン基いずれであってもよい。なお、Ｒ１  がメチレン基を表わす場合、Ｒ１  とラクトン環の３位との結合は二重結合を表わす（以下同じ）。また、Ｒ１  がメチル基のとき、ラクトン環の３位の不斉中心についての立体配置は（Ｓ）配置であり、５位の不斉中心についての立体配置は（Ｓ）、（Ｒ）配置のいずれであってもよく、さらに（Ｓ）、（Ｒ）配置の任意の割合の混合物であってもよい。またＲ１  がメチレン基のときラクトン環の５位の不斉中心についての立体配置は（Ｓ）、（Ｒ）配置のいずれであってもよく、さらに（Ｓ）、（Ｒ）配置の任意の割合の混合物であってもよい。その中でも５位の不斉中心が（Ｓ）配置であるものが好ましい。
【００１０】
上記式［１］中、Ｒ２  およびＲ３  は同一または異なり、水素原子、トリ（Ｃ１  〜Ｃ７  炭化水素）シリル基、またはＣ２  〜Ｃ８  のアシル基を表わす。
【００１１】
ここで、Ｒ２  、Ｒ３  がトリ（Ｃ１  〜Ｃ７  炭化水素）シリル基を表わす場合、その具体例として、例えばトリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ―ブチルジメチルシリル基のごときトリ（Ｃ１  〜Ｃ４  アルキル）シリル基、ｔ―ブチルジフェニルシリル基のごときジフェニル（Ｃ１  〜Ｃ４  アルキル）シリル基、トリベンジルシリル基等を好ましいものとして挙げることができる。さらに、ジメチル（２，４，６―トリ―ｔ―ブチルフェノキシ）シリル基を用いることができる。
【００１２】
また、Ｒ２  、Ｒ３  がＣ２  〜Ｃ８  のアシル基を表わす場合、その具体例として、例えばアセチル、プロピオニル、ｎ―ブチリル、ｉｓｏ―ブチリル、ｎ―バレリル、ｉｓｏ―バレリル、カプロイル、エナンチル、ベンゾイル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル基等を挙げることができる。これらのうち、Ｃ２  〜Ｃ６  アシル基、例えばｎ―ブチリル、ｉｓｏ―ブチリル、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル基、およびベンゾイル基が好ましい。
【００１３】
本発明の好ましい上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体の具体例を示すと以下の通りである。
１）  １α―ヒドロキシビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン
２）  ２３（Ｓ），２５（Ｓ）―１α―ヒドロキシビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン
３）  ２３（Ｒ），２５（Ｓ）―１α―ヒドロキシビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン
４）  １α―ヒドロキシ―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン
５）  ２３（Ｓ）―１α―ヒドロキシ―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン
６）  ２３（Ｒ）―１α―ヒドロキシ―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン
本発明にはまた、上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体の製造法が含まれる。すなわち下記式［２］
【００１４】
【化１３】
0003590450.tif 000004
【００１５】
［上記式中、Ｘは、臭素原子またはヨウ素原子を表わし、Ｒ１  はメチル基またはメチレン基を表わす。］
で表わされるラクトン化合物と、下記式［１０］
【００１６】
【化１４】
0003590450.tif 000005
【００１７】
［式中、Ｒ２  およびＲ３  は上記式［１］における定義に同じ。］
で表わされる化合物とをパラジウム触媒の存在下に反応させることを特徴とする上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体の製造法である。
【００１８】
このビタミンＤ３  誘導体は、必要に応じて脱保護反応させることにより下記式［１１］
【００１９】
【化１５】
0003590450.tif 000006
【００２０】
［式中、Ｒ１  は上記式［１］における定義に同じ。］
で表わされるビタミンＤ３  誘導体とすることができる。
【００２１】
本発明のビタミンＤ３  誘導体の製造法において、上記式［１］、［２］および［１１］で表わされる化合物のラクトン環の３位、５位の立体配置は、Ｒ１  がメチル基のとき３位は（Ｓ）配置であるが、５位については（Ｓ）、（Ｒ）配置のいずれであってもよく、それらの任意の割合の混合物であってもよい。
【００２２】
また、Ｒ１  がメチレン基のとき、ラクトン環の５位の立体配置は（Ｓ）、（Ｒ）配置のいずれであってもよく、それらの任意の割合の混合物であってもよい。
【００２３】
例えば、ラクトン環の３位の不斉中心が（Ｓ）配置であり、５位の不斉中心が（Ｓ）配置である上記式［２］で表わされる化合物を用いた場合には、反応中これらの部位の立体配置は保存され、ラクトン環の３位の不斉中心が（Ｓ）配置であり、５位の不斉中心が（Ｓ）配置である上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体が得られる。
【００２４】
同様に、ラクトン環の３位の不斉中心が（Ｓ）配置であり、５位の不斉中心が（Ｒ）配置である上記式［２］で表わされる化合物を用いた場合には、ラクトン環の３位の不斉中心が（Ｓ）配置であり、５位の不斉中心が（Ｒ）配置である上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体が得られる。
【００２５】
上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体の製造は、上記式［２］で表わされるラクトン化合物と、上記式［１０］で表わされる化合物とをパラジウム触媒存在下に反応させることにより行う。ここで、パラジウム触媒とは、例えば０価または２価の有機パラジウム化合物および三置換リン化合物（モル比１：１〜１：１０）である。そのような有機パラジウム化合物としては、例えばテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウムクロロホルム、酢酸パラジウムを挙げることができる。また、三置換リン化合物としては、例えばトリフェニルホスフィン、トリブチルホスフィンを挙げることができる。これらの中でもパラジウム触媒としては、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウムおよびトリフェニルホスフィン、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウムクロロホルムおよびトリフェニルホスフィン（１：１〜１：１０）が好ましい。
【００２６】
ここで、上記式［２］で表わされるラクトン化合物と上記式［１０］で表わされる化合物とは化学量論的には等モル反応を行うが、反応を確実に完結させるためにどちらか一方、普通は入手容易な方を小過剰用いることが望ましい。
【００２７】
また、パラジウム触媒は上記式［２］で表わされるラクトン化合物に対して１〜１００モル％、好ましくは５〜３０モル％の範囲で使用される。
【００２８】
さらに、三置換リン化合物は、活性なパラジウムを生成するために、有機パラジウム触媒に対して１〜１０当量用いられる。
【００２９】
本製造法において用いられる有機溶媒としては、ヘキサン、トルエン等の炭化水素系溶媒、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル系溶媒、Ｎ，Ｎ―ジメチルホルムアミド、アセトニトリル等の水溶性溶媒、またはこれらの混合溶媒等が挙げられ、いずれも十分に脱気した後に使用することが重要である。
【００３０】
反応温度は、一般に室温から溶媒の沸点の範囲が使用される。反応時間は用いる反応溶媒および反応温度により異なり、通常、薄層クロマトグラフィー等の分析手段を用いて上記式［２］で表わされるラクトン化合物、あるいは上記式［１０］で表わされる化合物のいずれかが消滅するまで行うことが望ましい。
【００３１】
また、パラジウム触媒に加えて、ハロゲン化水素を補足するために、例えばトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の塩基の存在下に反応させることが好ましい。
【００３２】
かかる塩基の量として上記式［２］で表わされるラクトン化合物に対して１当量以上が好ましく、必要により溶媒と兼用することもできる。
【００３３】
また、本発明の上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体は、必要により脱保護することにより、上記式［１１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体とすることができる。
【００３４】
かかる脱保護反応は、公知の方法（例えばＣａｌｖｅｌｙ，  Ｍ．Ｊ．，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｏｒｏｎ，２０，４６０９〜４６１９，１９８７）に準じて行うことができ、その場合の脱保護剤としては、例えばテトラブチルアンモニウムフロリド、ピリジニウムｐ―トルエンスルホネート等が挙げられる。
【００３５】
本発明方法において原料として用いられる上記式［２］で表わされる化合物は、例えば下記のスキームに従って合成することができる。Ｘがヨウ素原子である場合、立体配置が異る場合も同様である。
【００３６】
【化１６】
0003590450.tif 000007
【００３７】
【化１７】
0003590450.tif 000008
【００３８】
【化１８】
0003590450.tif 000009
【００３９】
【化１９】
0003590450.tif 000010
【００４０】
すなわち、上記式［２］で表わされるラクトン化合物は、下記式［３］
【００４１】
【化２０】
0003590450.tif 000011
【００４２】
［式中、Ｒ１  は上記式［１］における定義に同じ。］
で表わされるラクトン化合物をハロメチレン化することにより得られる。例えば、下記式［８］
【００４３】
【化２１】
0003590450.tif 000012
【００４４】
で表わされる化合物からは、下記式［９］
【００４５】
【化２２】
0003590450.tif 000013
【００４６】
［式中、Ｘは臭素原子またはヨウ素原子を表わす。］
で表わされる化合物が得られる。
【００４７】
また、かかる上記式［３］で表わされる化合物は、下記式［５］
【００４８】
【化２３】
0003590450.tif 000014
【００４９】
［式中、Ｒ１  は上記式［１］における定義に同じ。Ｒ４  は水素原子、トリ（Ｃ１〜Ｃ７  炭化水素）シリル基、またはＣ２〜Ｃ８  のアシル基を表わす。］
で表わされるラクトン化合物を、必要により脱保護した後、酸化することにより得られる。さらに、かかる上記式［５］で表わされるラクトン化合物は、下記式［６］
【００５０】
【化２４】
0003590450.tif 000015
【００５１】
［式中、Ｒ４  は［５］における定義に同じ。］
で表わされるヘプタン酸誘導体から合成することができる。一方、上記式［２］で表わされるラクトン化合物は、下記式［４］
【００５２】
【化２５】
0003590450.tif 000016
【００５３】
［式中、Ｘは臭素原子またはヨウ素原子を表わす。］
で表わされるヘプタン酸誘導体から導くこともできる。
【００５４】
さらに、かかる上記式［４］で表わされるヘプタン酸誘導体は下記式［７］
【００５５】
【化２６】
0003590450.tif 000017
【００５６】
［式中、Ｘは臭素原子またはヨウ素原子を表わし、Ｙはｐ−トルエンスルホニルオキシ基、シアノ基、またはホルミル基を表わす。］
で表わされる化合物から合成することができる。これらの反応は実施例においてさらに具体的に示される。
【００５７】
本発明には、かかる上記式［１］で表わされるビタミンＤ３  誘導体の合成中間体たる上記式［２］、［３］、［４］、［５］、［６］、および［７］で表わされる化合物も含まれる。
【００５８】
ここで上記式［３］および［５］で表わされるラクトン化合物のＲ１  がメチル基のとき、ラクトン環の３位の不斉中心は（Ｓ）配置であるが、５位の不斉中心は（Ｒ）配置、（Ｓ）配置いずれであってもよく、両者の任意の割合の混合物であってもよい。
【００５９】
また、上記式［４］または［６］で表わされるヘプタン酸誘導体において、４位の不斉中心は（Ｒ）配置、（Ｓ）配置いずれであってもよく、両者の任意の割合の混合物であってもよい。
【００６０】
本発明の、好ましい上記式［２］で表わされる化合物の具体例を示すと次の通りである。
１）  （５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
２）  （５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
３）  （３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
４）  （３Ｓ，５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
５）  （５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
６）  （５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
７）  （３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
８）  （３Ｓ，５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
【００６１】
本発明の、好ましい上記式［３］で表わされる化合物の具体例を示すと次の通りである。
１）  （５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
２）  （５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
３）  （３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
４）  （３Ｓ，５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
【００６２】
本発明の、好ましい上記式［４］で表わされる化合物の具体例を示すと次の通りである。
１）  （４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
２）  （４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
３）  （４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
４）  （４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
【００６３】
本発明の、好ましい上記式［５］で表わされる化合物の具体例を示すと次の通りである。
１）  （５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
２）  （５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
３）  （３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
４）  （３Ｓ，５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
５）  （５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―トリメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
６）  （５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―トリメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
７）  （３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―トリメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
８）  （３Ｓ，５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―トリメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
９）  （５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
１０）  （５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
１１）  （３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
１２）  （３Ｓ，５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン
【００６４】
本発明の、好ましい上記式［６］で表わされる化合物の具体例を示すと次の通りである。
１）  （４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
２）  （４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
３）  （４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―トリメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
４）  （４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―トリメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
５）  （４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
６）  （４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ｔ―ブチルジメチルシリルオキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン
【００６５】
本発明の、好ましい上記式［７］で表わされる化合物の具体例を示すと次の通りである。
１）  （２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピルパラトルエンスルホネート
２）  （３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブチロニトリル
３）  （３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブタナール
４）  （２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピルパラトルエンスルホネート
５）  （３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブチロニトリル
６）  （３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヨードメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブタナール
【００６６】
【実施例】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれによって限定されるものではない。
【００６７】
［実施例１］
（４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン、および（４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテンの製造
【００６８】
【化２７】
0003590450.tif 000018
【００６９】
５００ｍｌナスフラスコに（３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブタナール３．０ｇを入れ、ＴＨＦ１００ｍｌ加えて攪拌し、氷冷却バスで冷却した。ここにメチル―２―ブロモメチルアクリレート３．２ｍｌを滴下した。次に亜鉛粉末１．３７ｇと飽和塩化アンモニウム水３９０ｍｌを加えて同温度で４５分間攪拌した。
【００７０】
反応液に酢酸エチル１５０ｍｌを加えて抽出した。有機層を飽和食塩水で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し、粗体５．０ｇを得た。これをシリカゲルカラム（メルクゲル、２５０ｇ、ヘキサン／酢酸エチル＝９／１〜３／１）で精製を行い、（４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン（ｍｏｒｅ  ｐｏｌａｒ）を２．０３ｇと、（４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン（ｌｅｓｓ  ｐｏｌａｒ）を１．５２ｇ（収率８１％）得た。
【００７１】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．２５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），５．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
４．０７（ｂｒ，１Ｈ），３．８２〜３．８８（ｂｒ，１Ｈ），
３．７７（ｓ，３Ｈ），
２．５１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝１Ｈｚ，Ｊ２＝９Ｈｚ），
２．３６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝８Ｈｚ，Ｊ２＝１４Ｈｚ），
０．９６（ｓ，１Ｈ），０．９４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），
６．２７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１Ｈｚ），５．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１Ｈｚ），
４．０７（ｂｒ，１Ｈ），３．８０〜３．８６（ｂｒ，１Ｈ），
３．７７（ｓ，３Ｈ），
２．６９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝１Ｈｚ，Ｊ２＝１０Ｈｚ），
２．１８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝９Ｈｚ，Ｊ２＝１４Ｈｚ），
０．９８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．９５（ｓ，３Ｈ）
【００７２】
［実施例２］
（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【００７３】
【化２８】
0003590450.tif 000019
【００７４】
１００ｍｌナスフラスコに（４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテンを１．００ｇとり、ＴＨＦ１５ｍｌを加えて溶解した。さらに、水１５ｍｌを加えて攪拌し、氷冷却バスで冷却した。ここに４Ｎの水酸化リチウム水溶液を６ｍｌ加え、同温度で１時間攪拌した。次に同温度下に濃塩酸を滴下してｐＨ＝２に調整し、室温下に３時間攪拌した。反応液に水５０ｍｌ、酢酸エチル２００ｍｌを加えて抽出した。有機層を、さらに水で３回、飽和食塩水で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを８８０ｍｇ得た。
【００７５】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），５．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
４．５８（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝７Ｈｚ，Ｊ２＝１４Ｈｚ），
４．０８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），３．０１〜３．１０（ｍ，１Ｈ），
２．５６〜２．６（ｍ，１Ｈ），１．００（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），
０．９５（ｓ，３Ｈ）
【００７６】
［実施例３］
（５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【００７７】
【化２９】
0003590450.tif 000020
【００７８】
１００ｍｌナスフラスコに（４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテンを５７０ｍｇとり、ＴＨＦ５ｍｌを加えて溶解した。さらに水５ｍｌを加えて攪拌し、氷冷却バスで冷却した。ここに４Ｎの水酸化リチウム水溶液を３ｍｌ加え、同温度で１時間攪拌した。次に同温度下に濃塩酸を滴下してｐＨ＝２に調整し、室温下に３時間攪拌した。反応液に水５０ｍｌ、酢酸エチル２００ｍｌを加えて抽出した。有機層を、さらに水で３回、飽和食塩水で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し（５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを４５１ｍｇ得た。
【００７９】
［実施例４］
（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７Ｒ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【００８０】
【化３０】
0003590450.tif 000021
【００８１】
２００ｍｌナスフラスコに重クロム酸ピリジニウム２．３８ｇをとり、ＤＭＦ５０ｍｌ加えて、氷冷却バスで冷却した。ここに（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７Ｒ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン８８０ｍｇをＤＭＦ２０ｍｌに溶解した溶液を滴下し、室温で３時間攪拌した。反応液にエーテル２００ｍｌ加えて不溶物を濾別し、水、次いで飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し、粗体１．０２ｇを得た。これをシリカゲルカラム（ダイソーゲルＩＲ―６０、１５０ｇ、ヘキサン／酢酸エチル＝３／１〜２／１）で精製を行い、（５Ｓ）―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを７００ｍｇ（収率６９％）得た。
【００８２】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．２３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），５．６３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
４．６〜４．７（ｍ，１Ｈ），３．０〜３．１３（ｍ，１Ｈ），
２．４〜２．６（ｍ，１Ｈ），１．０５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），
０．６７（ｓ，３Ｈ）
【００８３】
［実施例５］
（５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【００８４】
【化３１】
0003590450.tif 000022
【００８５】
２００ｍｌナスフラスコに重クロム酸ピリジニウム６４８ｍｇをとり、ＤＭＦ１０ｍｌを加えて、氷冷却バスで冷却した。ここに（５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ヒドロキシ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン２４０ｍｇをＤＭＦ１０ｍｌに溶解した溶液を滴下し、室温で３時間攪拌した。反応液にエーテル１００ｍｌを加えて不溶物を濾別し、水、次いで飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し、粗体６００ｍｇを得た。これをシリカゲルカラム（ダイソーゲルＩＲ―６０、１００ｇ、ヘキサン／酢酸エチル＝３／１〜２／１）で精製を行い、（５Ｒ）―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを３２７ｍｇ得た。
【００８６】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．２３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），５．６３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
４．５９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），３．０〜３．１０（ｍ，１Ｈ），
２．４〜２．６（ｍ，１Ｈ），１．０７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），
０．６６（ｓ，３Ｈ）
【００８７】
［実施例６］
（３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【００８８】
【化３２】
0003590450.tif 000023
【００８９】
１００ｍｌナスフラスコに（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを２００ｍｇとり、エタノール５０ｍｌを加えて攪拌溶解した。窒素雰囲気下に１０％Ｐｄ／カーボン５０ｍｇを投入し、水素雰囲気（風船）に置換して室温で３時間攪拌した。窒素置換後に触媒を濾別して溶媒を減圧下留去し、（３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン１８５ｍｇを得た。
【００９０】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
４．４０〜４．５１（ｍ，１Ｈ），２．６２〜２．７２（ｍ，１Ｈ），
２．４１〜２．５１（ｍ，２Ｈ），２．２７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），
１．０３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．６６（ｓ，３Ｈ）
【００９１】
［実施例７］
（３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【００９２】
【化３３】
0003590450.tif 000024
【００９３】
１００ｍｌナスフラスコにブロモメチレントリフェニルホスホニウムブロミド１．７９ｇをとり、乾燥したＴＨＦ２０ｍｌを加えて攪拌し、−７０℃冷却バスで冷却した。ここに１Ｍの［（ＣＨ３  ）３  Ｓｉ］２  ＮＮａ／ＴＨＦ溶液３．９ｍｌを滴下して、同温度で１時間攪拌した。次に（３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノン１２０ｍｇを乾燥したＴＨＦ５ｍｌに溶かした溶液を滴下した。冷却バスをはずして２時間攪拌した。次にヘキサンを加えて不溶物を濾別し、溶媒を減圧下留去し、粗体１．２ｇを得た。これをシリカゲルカラム（ダイソーゲルＩＲ―６０、８０ｇ、ヘキサン／酢酸エチル＝１５／１）で精製を行い、（３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを６９ｍｇ（収率４６％）得た。
【００９４】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
５．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），４．４０〜４．５０（ｍ，１Ｈ），
２．８５〜２．９０（ｍ，１Ｈ），２．６２〜２．７２（ｍ，１Ｈ），
２．４１〜２．５０（ｍ，１Ｈ），２．６７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），
１．００（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．５８（ｓ，３Ｈ）
【００９５】
［実施例８］
（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピルパラトルエンスルホネートの製造
【００９６】
【化３４】
0003590450.tif 000025
【００９７】
１００ｍｌナスフラスコにブロモメチレントリフェニルホスホニウムブロミド２．３９ｇをとり、乾燥したＴＨＦ４０ｍｌを加えて攪拌し、−７０℃冷却バスで冷却した。ここに１Ｍの［（ＣＨ３  ）３  Ｓｉ］２  ＮＮａ／ＴＨＦ溶液５．２８ｍｌを滴下して、同温度で１時間攪拌した。次に（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―オキソ―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピルパラトルエンスルホネート３００ｍｇを乾燥したＴＨＦ１０ｍｌに溶かした溶液を滴下した。冷却バスをはずして１時間攪拌した。次にヘキサンを加えて不溶物を濾別し、溶媒を減圧下留去して、粗体２．５ｇを得た。これをシリカゲルカラム（メルクゲル、１００ｇ、ヘキサン／酢酸エチル＝１４／１、９／１）で精製を行い、｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピルパラトルエンスルホネートを１７８ｍｇ（収率４８％）得た。
【００９８】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
７．７８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），７．３５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），
５．６４（ｓ，１Ｈ），
３．９６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝３Ｈｚ，Ｊ２＝９Ｈｚ），
３．８２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝６Ｈｚ，Ｊ２＝９Ｈｚ），
２．４５（ｓ，３Ｈｚ），０．９９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），
０．５３（ｓ，３Ｈ）
【００９９】
［実施例９］
（３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブチロニトリルの製造
【０１００】
【化３５】
0003590450.tif 000026
【０１０１】
５０ｍｌナスフラスコに（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピルパラトルエンスルホネートを１７８ｍｇとり、ＤＭＦ６ｍｌ加えて溶解した。ここにＫＣＮ２１５ｍｇを投入し、５０℃バスで２４時間攪拌した。反応液に水５０ｍｌを加え、エーテルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、乾燥剤を濾別した。溶媒を減圧下留去して、粗体１１０ｍｇを得た。これをシリカゲルカラム（ダイソーゲル、ヘキサン／酢酸エチル＝１４／１）で精製を行い、（３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブチロニトリルを８４ｍｇ（収率６９％）得た。
【０１０２】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
５．６７（ｓ，１Ｈ），２．８６〜２．９１（ｍ，１Ｈ），
２．２１〜２．３５（ｍ，２Ｈ），１．１８（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），
０．５９（ｓ，３Ｈ）
【０１０３】
［実施例１０］
（３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブタナールの製造
【０１０４】
【化３６】
0003590450.tif 000027
【０１０５】
２５ｍｌナスフラスコに（３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブチロニトリルを８４ｍｇとり、乾燥したジクロロメタン５ｍｌ加えて溶解した。−７０℃バスで冷却し１．５Ｍの［（ＣＨ３  ）２  ＣＨＣＨ２  ］２  ＡｌＨ／トルエン溶液６６０μｌを滴下した。同温度で１時間攪拌し、飽和硫酸ナトリウム水０．５ｍｌ、メタノール０．３ｍｌ、２Ｎの塩酸０．５ｍｌ、酢酸エチル１５ｍｌを加えて３０分間攪拌した。反応液をセライト濾過し、飽和塩化アンモニウム水、次いで飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、乾燥剤を濾別した。溶媒を減圧留去して、（３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブタナールを８５ｍｇ得た。
【０１０６】
［実施例１１］
（４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン、および（４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテンの製造
【０１０７】
【化３７】
0003590450.tif 000028
【０１０８】
５０ｍｌナスフラスコに（３Ｒ）―３―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］ブタナールを１０５ｍｇとり、乾燥したＴＨＦ８ｍｌを加えて溶解した。氷冷却バスで冷却し、メチル―２―ブロモメチルアクリレート８４μｌを滴下した。さらに亜鉛粉末３５ｍｇと飽和塩化アンモニウム水１０ｍｌを加え、同温度で１時間攪拌した。反応液を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去して粗体１６６ｍｇを得た。これをシリカゲルカラム（メルクゲル、ヘキサン／酢酸エチル＝９／１）で精製を行い、（４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン４３ｍｇと（４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテン５５ｍｇを得た。
【０１０９】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．２６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１Ｈｚ），５．６６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１０Ｈｚ），
３．７７（ｓ，３Ｈ），２．８４〜２．９３（ｍ，１Ｈ），
２．６５〜２．７２（ｍ，１Ｈ），２．１３〜２．２７（ｍ，１Ｈ），
１．０２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．５８（ｓ，３Ｈ），
６．２４９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１Ｈｚ），５．６５（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ），
３．７７（ｓ，３Ｈ），２．８４〜２．９０（ｍ，１Ｈ），
２．５３〜２．５５（ｍ，１Ｈ），２．３１〜２．３９（ｍ，１Ｈ），
０．９７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），０．５９（ｓ，３Ｈ）
【０１１０】
［実施例１２］
（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【０１１１】
【化３８】
0003590450.tif 000029
【０１１２】
５０ｍｌナスフラスコに（４Ｓ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテンを５５ｍｇとり、ＴＨＦ６ｍｌを加えて溶解した。さらに水６ｍｌを加え、氷冷却バスで冷却し、４Ｎの水酸化リチウムを０．２５ｍｌ滴下し、同温度で１時間攪拌した。次に同温度下に濃塩酸を滴下してｐＨ＝２に調整し、室温下に３時間攪拌した。反応液に水１０ｍｌ、酢酸エチル１００ｍｌを加えて抽出した。有機層を水で３回、飽和食塩水で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを５１ｍｇ得た。
【０１１３】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．２３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），５．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
５．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
４．１２（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝７Ｈｚ，Ｊ２＝１４Ｈｚ），
３．００〜３．１１（ｍ，１Ｈ），２．８５〜２．９（ｍ，１Ｈ），
２．４７〜２．５７（ｍ，１Ｈ），１．０３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），
０．５８（ｓ，３Ｈ）
【０１１４】
［実施例１３］
（５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンの製造
【０１１５】
【化３９】
0003590450.tif 000030
【０１１６】
５０ｍｌナスフラスコに（４Ｒ，６Ｒ）―６―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］―２―メトキシカルボニル―４―ヒドロキシ―１―ヘプテンを７０ｍｇとり、ＴＨＦ６ｍｌを加えて溶解した。さらに水６ｍｌを加え、氷冷却バスで冷却し、４Ｎの水酸化リチウムを０．３５ｍｌ滴下し、同温度で１時間攪拌した。次に同温度下に濃塩酸を滴下してｐＨ＝２に調整し、室温下に３時間攪拌した。反応液に水１０ｍｌ、酢酸エチル１００ｍｌを加えて抽出した。有機層を水で３回、飽和食塩水で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し（５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを６０ｍｇ得た。
【０１１７】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．２３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），５．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
５．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），４．５９〜４．６９（ｍ，１Ｈ），
３．０１〜３．１２（ｍ，１Ｈ），２．８５〜２．９（ｍ，１Ｈ），
２．４７〜２．５７（ｍ，１Ｈ），１．０２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），
０．５９（ｓ，３Ｈ）
【０１１８】
［実施例１４］
２３（Ｓ），２５（Ｓ）―１α―ヒドロキシビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンの製造
【０１１９】
【化４０】
0003590450.tif 000031
【０１２０】
乾燥したナスフラスコにトリフェニルホスフィン２８ｍｇをとり、脱気した。そこにトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムクロロホルム１９ｍｇを加えてさらに脱気し、窒素雰囲気下に、蒸留したトルエン／ジイソプロピルエチルアミン＝１／１の混合溶媒６ｍｌを加え、５０℃で２０分間攪拌した。次に（３Ｓ，５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチルジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを６５ｍｇと、（３Ｓ），（５Ｒ）―３，５―ビス（トリメチルシリルオキシ）―１―オクテン―７―イン６０ｍｇを蒸留したトルエン／ジイソプロピルエチルアミン＝１／１の混合溶媒３ｍｌに溶かした溶液を滴下した。この反応液を１００℃で１．５時間攪拌した。室温にもどし、反応液を酢酸エチル５０ｍｌ―飽和硫酸水素カリウム水溶液１０ｍｌの中に注ぎ、抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し、粗体１２０ｍｇを得た。これをシリカゲルカラム（メルクゲル、ヘキサン／酢酸エチル＝１４／１〜９／１）で精製を行い、２３（Ｓ），２５（Ｓ）―１α，３―ビス（トリメチルシリルオキシ）ビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンを５２ｍｇ（収率５０％）得た。これを２５ｍｌナスフラスコに入れ、メタノール５ｍｌを加えて溶解した。氷冷却バスで冷却し、ここにポリマーに結合したピリジニウムトルエン―４―スルホネートを１００ｍｇ投入して１５時間攪拌した。反応液をセライトで濾過後、溶媒を減圧下留去して、粗体１１０ｍｇを得た。これをシリカゲルカラム（メルクゲル、ヘキサン／酢酸エチル＝２／１〜１／１）で精製を行い、２３（Ｓ），２５（Ｓ）―１α―ヒドロキシビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンを２８ｍｇ（収率７２％）得た。
【０１２１】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．３７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１Ｈｚ），６．００（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１Ｈｚ），
５．３３（ｓ，１Ｈ），５．０１（ｓ，１Ｈ），４．４４（ｂｒ，２Ｈ），
４．２４（ｂｒ，１Ｈ），１．２６５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝８Ｈｚ），
０．９９（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），０．５６（ｓ，３Ｈ）
【０１２２】
［実施例１５］
２３（Ｓ）―１α―ヒドロキシ―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンの製造
【０１２３】
【化４１】
0003590450.tif 000032
【０１２４】
乾燥したナスフラスコにトリフェニルホスフィン２２ｍｇをとり、脱気した。そこにトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムクロロホルム１４ｍｇを加えてさらに脱気し、窒素雰囲気下に、蒸留したトルエン／ジイソプロピルエチルアミン＝１／１の混合溶媒３ｍｌを加え、５０℃で２０分間攪拌した。次に（５Ｓ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを５１ｍｇと、（３Ｓ），（５Ｒ）―３，５―ビス（トリメチルシリルオキシ）―１―オクテン―７―イン６１ｍｇを蒸留したトルエン／ジイソプロピルエチルアミン＝１／１の混合溶媒４ｍｌに溶かした溶液を滴下した。この反応液を１００℃で１．５時間攪拌した。室温にもどし、反応液を酢酸エチル５０ｍｌ―飽和硫酸水素カリウム水溶液１０ｍｌの中に注ぎ、抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し、粗体１２０ｍｇを得た。これをシリカゲルセップパック（ウォーターズ、ヘキサン／酢酸エチル＝１９／１〜９／１）で精製を行い、２３（Ｓ）―１α，３―ビス（トリメチルシリルオキシ）―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンを４６ｍｇ（収率５０％）得た。これを２５ｍｌナスフラスコに入れ、メタノール５ｍｌを加えて溶解した。氷冷却バスで冷却し、ここにポリマーに結合したピリジニウムトルエン―４―スルホネートを５０ｍｇ投入して１５時間攪拌した。反応液をセライトで濾過後、溶媒を減圧下留去して、粗体１１０ｍｇを得た。これをシリカセップパック（ウォーターズ、ヘキサン／酢酸エチル＝３／１〜１／１）で精製を行い、２３（Ｓ）―１α―ヒドロキシ―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン１２ｍｇ（収率４０％）得た。
【０１２５】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．３７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１２Ｈｚ），６．２２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），
６．００（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１Ｈｚ），５．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），
５．３２３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１Ｈｚ），５．００（ｓ，１Ｈ），
４．５９（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７Ｈｚ），４．４３〜４．５４（ｂｒ，１Ｈ），
４．２２〜４．２４（ｂｒ，１Ｈ），２．９９〜３．１１（ｍ，１Ｈ），
２．７９〜２．８５（ｍ，１Ｈ），２．４８〜２．６１（ｍ，２Ｈ），
２．２８〜２．３５（ｍ，１Ｈ），１．０３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），
０．５６（ｓ，３Ｈ）
【０１２６】
［実施例１６］
２３（Ｒ）―１α―ヒドロキシ―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンの製造
【０１２７】
【化４２】
0003590450.tif 000033
【０１２８】
乾燥したナスフラスコにトリフェニルホスフィン２６ｍｇをとり、脱気した。そこにトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムクロロホルム２０ｍｇを加えてさらに脱気し、窒素雰囲気下に、蒸留したトルエン／ジイソプロピルエチルアミン＝１／１の混合溶媒３ｍｌを加え、５０℃で２０分間攪拌した。次に（５Ｒ）―５―｛（２Ｒ）―２―［（１Ｒ，７ａＲ）―オクタヒドロ―４―ブロモメチレン―７ａ―メチル―１Ｈ―インデン―１―イル］プロピル｝―３―メチレンジヒドロ―２（３Ｈ）―フラノンを７０ｍｇと、（３Ｓ），（５Ｒ）―３，５―ビス（トリメチルシリルオキシ）―１―オクテン―７―イン８４ｍｇを蒸留したトルエン／ジイソプロピルエチルアミン＝１／１の混合溶媒４ｍｌに溶かした溶液を滴下した。この反応液を１００℃で１．５時間攪拌した。室温にもどし、反応液を酢酸エチル５０ｍｌ―飽和硫酸水素カリウム水溶液１０ｍｌの中に注ぎ、抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウム上にて乾燥した。乾燥剤を濾別し、溶媒を減圧下留去し、粗体１９０ｍｇを得た。これをシリカゲルセップパック（ウォーターズ、ヘキサン／酢酸エチル＝１９／１〜９／１）で精製を行い、２３（Ｒ）―１α，３―ビス（トリメチルシリルオキシ）―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトンを５０ｍｇ（収率４０％）得た。これを２５ｍｌナスフラスコに入れ、メタノール５ｍｌを加えて溶解した。氷冷却バスで冷却し、ここにポリマーに結合したピリジニウムトルエン―４―スルホネートを１００ｍｇ投入して１５時間攪拌した。反応液をセライトで濾過後、溶媒を減圧下留去して、粗体１１０ｍｇを得た。これをシリカセップパック（ウォーターズ、ヘキサン／酢酸エチル＝３／１〜１／１）で精製を行い、２３（Ｒ）―１α―ヒドロキシ―２７―ノル―２５―メチレンビタミンＤ３  ―２６，２３―ラクトン１４ｍｇ（収率４３％）得た。
【０１２９】
１Ｈ―ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３  ，δｐｐｍ）
６．３７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１Ｈｚ），６．２２５（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝３Ｈｚ），
６．００（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１Ｈｚ），５．６２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），
５．３３（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝２Ｈｚ），５．００（ｓ，１Ｈ），
４．５９〜４．６９（ｍ，１Ｈ），４．４１〜４．４５（ｍ，１Ｈ），
４．２１〜４．２５（ｍ，１Ｈ），３．０１〜３．１０（ｍ，１Ｈ），
２．７９〜２．８５（ｍ，１Ｈ），２．４７〜２．５８（ｍ，２Ｈ），
２．２８〜２．３５（ｍ，１Ｈ），１．０２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ），
０．５８（ｓ，３Ｈ）
［実施例１７］
１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３  惹起破骨細胞形成に対する抑制作用の測定
マウス（Ｃ２５／Ｂｌａｃｋ６，５週齢，オス）の大腿骨、脛骨より骨髄細胞を分離し、１０％牛胎児血清を含むα−ＭＥＭ培地中で１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３（１０−８Ｍ）存在下、一定濃度の被験化合物を添付し７日間培養した。細胞を酒石酸抵抗性酸フォスファターゼ（ＴＲＡＰ）染色し、核をメチルグリーンで染色した。その後、核が３個以上のＴＲＡＰ染色された細胞（破骨細胞）を顕微鏡下カウントした。その結果を表１に示す。これより本発明化合物は１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３  惹起破骨細胞形成に対する抑制作用を有することがわかる。
【０１３０】
【表１】
0003590450.tif 000034
【０１３１】
［実施例１８］
ニワトリ小腸粘膜細胞質内１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３  リセプター（ＶＤＲ）に対する本発明化合物の結合親和性
ニワトリ小腸粘膜細胞質内１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３  リセプターの単離およびリセプター結合親和性の測定は公知の方法［ステロイド（Ｓｔｅｒｏｉｄｓ），３７，３３−４３（１９８１）］で行った。すなわち１２×７５ｍｍのポリプロピレンチューブに２０ｐｇの［２６，２７−メチル−３Ｈ］１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３  （１５８  Ｃｉ／ｍｍｏｌ，１６８００ｄｐｍ）と被験化合物を５０μｌのエタノールに溶解して加え、これにリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍｌにニワトリ小腸粘膜細胞質内１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３  リセプター蛋白質０．２ｍｇと１ｍｇのゲラチンを溶解したものを加え、２５℃で１時間反応させた。反応後４０％ポリエチレングリコール６０００溶液１ｍｌを各々のチューブに加え、激しく撹拌後、４℃で２２６０×ｇで６０分間遠心分離した。沈殿部分のチューブをカッターナイフで切り取り、液体シンチレーション用バイアルに入れ、１０ｍｌのジオキサンシンチレーターを加え、液体シンチレーションカウンターでその放射能を測定した。その結果を後記表２に示す。
【０１３２】
［実施例１９］
ウシ胎児血清中ビタミンＤ結合蛋白質に対する本発明化合物の結合親和性
ウシ胎児血清中ビタミンＤ結合蛋白質に対する２５−ヒドロキシビタミンＤ３ および本発明化合物の結合親和性は、ジャーナル  ステロイド  バイオケミストリー  モレキュラー  バイオロジー（Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．４１，１０９−１１２（１９９２））の方法で行った。すなわち１２×１０５ｍｍのガラスチューブに２００ｐｇの［２６，２７−メチル−３Ｈ］２５−ヒドロキシビタミンＤ３  （２８  Ｃｉ／ｍｍｏｌ，３１０００ｄｐｍ）を溶解した０．０１％トライトンＸ−１００溶液と被験化合物をエタノール１０μｌに溶解して加えた。これにウシ胎児血清を０．９％塩化ナトリウム含有リン酸緩衝液（ｐＨ７．０）で２５００倍希釈した溶液０．２ｍｌを加え、４℃で２４時間反応後、０．５ｍｌの０．５％チャーコール、０．０７５％デキストランおよび０．５％ウシ血清アルブミン溶液を加えた。４℃で１５分反応後、２２６０×ｇで１０分間遠心分離し、その上清０．５ｍｌを液体シンチレーションバイアルに取り、液体シンチレーションカウンターでビタミンＤ結合蛋白質に結合している［２６，２７−メチル−３Ｈ］２５−ヒドロキシビタミンＤ３  の放射能量を測定した。その結果を、実施例１８の結果とともに表２に示す。
【０１３３】
【表２】
0003590450.tif 000035
【０１３４】
［実施例２０］
骨芽細胞でのコラーゲン合成および非コラーゲン蛋白質合成
マウス骨芽細胞株（ＭＣＪＴ細胞）を１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）含有α−ＭＥＭ培地中に分散させ（１×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍｌ培地）、このものを２ｍｌずつ３５ｍｍ培養シャーレに播種し、３７℃で５％ＣＯ２下で培養した。４日後、コンフルエントに達した後、同一培養液に交換後、被験化合物のエタノール溶液（１×１０−４Ｍおよび１×１０−５Ｍ）を２μｌずつ加えた。コントロール群にはエタノールのみを２μｌ加えた。これらを３７℃で５％ＣＯ２下で培養した。培養４５時間後に培地を０．１％牛血清アルブミン（ＢＳＡ）、０．１ｍＭアスコルビン酸、０．５ｍＭフマル酸−β−アミノプロピオニトリルを含むα−ＭＥＭ培地に交換し、再度被験化合物のエタノール溶液またはエタノールを前回と同量添加してから３０分間培養後、４μＣｉの［３Ｈ］プロリンを各々のシャーレに加え、３時間骨芽細胞に取り込ませた。
【０１３５】
合成されたコラーゲン量および非コラーゲン蛋白質量は、Ｐｅｒｔｅｒｋｏｆｓｋｙ等の方法［バイオケミストリー（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）１０，９８８−９９４（１９７１）］で測定した。結果を表３に示す。
【０１３６】
【表３】
0003590450.tif 000036
【０１３７】
【発明の効果】
本発明のビタミンＤ３  誘導体は、骨形成促進剤、免疫抑制剤、腫瘍細胞増殖抑制剤、高カルシウム血症剤等の医薬品として用いられる。また、前記式［２］、［３］、［４］、［５］、［６］、および［７］で表わされる化合物はその合成中間体として用いられ、本発明方法はそのビタミンＤ３  誘導体の合成法を提供する。