【手続補正書】
【提出日】平成29年3月13日(2017.3.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
関心対象の色を有するコートまたは柔毛を有する非ヒトトランスジェニック動物の細胞であって、該トランスジェニック動物が、
メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／もしくは移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、プロモーターへ機能的に連結された外因性核酸分子；ならびに／または
プロモーターへ機能的に連結された関心対象の外因性阻害性RNAコード配列であって、該外因性阻害性RNAコード配列が、該動物の野生型核酸分子の発現に干渉する阻害性RNAをコードし、該野生型核酸分子が、メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／もしくは移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、関心対象の外因性阻害性RNAコード配列
を含む、前記細胞。
【請求項２】
メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／または移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、プロモーターへ機能的に連結された外因性核酸分子
を含む、請求項1記載の細胞。
【請求項３】
プロモーターへ機能的に連結された関心対象の外因性阻害性RNAコード配列であって、該外因性阻害性RNAコード配列が、前記動物の野生型核酸分子の発現に干渉する阻害性RNAをコードし、該野生型核酸分子が、メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／または移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、関心対象の外因性阻害性RNAコード配列
を含む、請求項1記載の細胞。
【請求項４】
請求項1記載の細胞を含む、非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項５】
イヌ、ネコ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、アヒル、ガチョウ、ニワトリ、霊長類動物、魚、カエル、サンショウウオ、ヘビ、トカゲ、キツネ、イタチ、ウサギ、ミンク、ビーバー、アーミン、カワウソ、クロテン、アザラシ、コヨーテ、チンチラ、シカ、マスクラット、またはポッサムである、請求項4記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項６】
ウシ動物である、請求項4記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項７】
ブラックアンガス（Black Angus）種のウシ動物である、請求項6記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項８】
メラノソームアセンブリを阻害するタンパク質、メラニンの合成を阻害するタンパク質、メラニンの輸送を阻害するタンパク質、メラニン細胞発生および／または移動を阻害するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする外因性核酸分子を含む、請求項6記載の、白色または白色に近いコートまたは柔毛色を有するトランスジェニックウシ動物。
【請求項９】
外因性核酸分子が優性白色対立遺伝子である、請求項8記載のトランスジェニックウシ動物。
【請求項１０】
優性白色対立遺伝子が優性白色Pmel17対立遺伝子である、請求項9記載のトランスジェニックウシ動物。
【請求項１１】
優性白色Pmel17対立遺伝子がセキショクヤケイ（Gallus gallus）由来である、請求項10記載のトランスジェニックウシ動物。
【請求項１２】
外因性阻害性RNAが、
メラノコルチン受容体（MC1R）、メラニン細胞刺激ホルモン（MSH）、β-デフェンシン103、アグーチシグナル伝達タンパク質（ASP）、チロシナーゼ（TYR）、メラニン細胞特異的輸送タンパク質、Ras関連タンパク質Rab-7、rabタンパク質ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ成分A2、推定E3ユビキチンタンパク質リガーゼ（HERC2）、二機能酵素CarRP様、リコペンシクラーゼ／フィトエンシンターゼ様、およびフィトエンデヒドロゲナーゼ様より選択されるタンパク質をコードする野生型核酸分子
の発現に干渉する、請求項4記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項１３】
ウシ動物である、請求項12記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項１４】
ブラックアンガス種のウシ動物である、請求項13記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項１５】
プロモーターが、ユニバーサルプロモーター、構成的プロモーター、組織特異的プロモーター、および誘導性プロモーターより選択される、請求項4記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項１６】
プロモーターが、サイトメガロウイルス(CMV)プロモーター、CMV-ニワトリβアクチンプロモーター、ユビキチンプロモーター、JeTプロモーター、SV40プロモーター、βグロビンプロモーター、伸長因子1α(EF1-α)プロモーター、RSVプロモーター、Ripply2プロモーター、Tickedプロモーター、Tabbyプロモーター、Mo-MLV-LTRプロモーター、Rosa26プロモーター、ケラチノサイト特異的プロモーター、メラニン細胞特異的プロモーター、マトリックス細胞特異的プロモーター、および真皮乳頭特異的プロモーターより選択される、請求項4記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項１７】
外因性核酸分子の発現または外因性阻害性RNAコード配列の発現が、Cre-LoxP組換えシステム、FLP-FRT組換えシステム、テトラサイクリン(Tet)制御転写活性化システム、エクジソン誘導性システム、熱ショックオン／オフシステム、lacO/IPTGシステム、Cumateリプレッサータンパク質CymRシステム、ニトロレダクターゼシステム、クメルマイシン／ノボビオシン調節システム、RheoSwitchリガンドRSL1システム、キメラ二分核内受容体発現システム、GAL4システム、ステロールまたはステロイドもしくは合成ステロイド誘導／抑制システム、およびそれらの任意の組み合わせより選択される誘導性システムの制御下にある、請求項4記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項１８】
誘導性遺伝子発現システムがCre-LoxP組換えシステムを含む、請求項17記載の非ヒトトランスジェニック動物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２９】
一態様において、本発明は、白または白に近いコートまたは柔毛を有するブラックアンガス（Black Angus）種のトランスジェニック牛動物を提供する。
[本発明1001]
関心対象の色を有するコートまたは柔毛を有する非ヒトトランスジェニック動物の細胞であって、該トランスジェニック動物が、
メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／もしくは移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、プロモーターへ機能的に連結された優性活性型外因性核酸分子；ならびに／または
プロモーターへ機能的に連結された関心対象の外因性阻害性RNAコード配列であって、該外因性阻害性RNAコード配列が、該動物の優性活性型野生型核酸分子の発現に干渉する阻害性RNAをコードし、該野生型核酸分子が、メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／もしくは移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、関心対象の外因性阻害性RNAコード配列
を含む、前記細胞。
[本発明1002]
メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／または移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、プロモーターへ機能的に連結された優性活性型外因性核酸分子
を含む、本発明1001の細胞。
[本発明1003]
プロモーターへ機能的に連結された関心対象の外因性阻害性RNAコード配列であって、該外因性阻害性RNAコード配列が、前記動物の優性活性型野生型核酸分子の発現に干渉する阻害性RNAをコードし、該野生型核酸分子が、メラノソームアセンブリに関与するタンパク質、メラニンの合成に関与するタンパク質、メラニンの輸送に関与するタンパク質、ならびにメラニン細胞発生および／または移動に関与するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする、関心対象の外因性阻害性RNAコード配列
を含む、本発明1001の細胞。
[本発明1004]
本発明1001の細胞を含む、非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1005]
イヌ、ネコ、マウス、ラット、モルモット、ハムスター、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、アヒル、ガチョウ、ニワトリ、霊長類動物、魚、カエル、サンショウウオ、ヘビ、トカゲ、キツネ、イタチ、ウサギ、ミンク、ビーバー、アーミン、カワウソ、クロテン、アザラシ、コヨーテ、チンチラ、シカ、マスクラット、またはポッサムである、本発明1004の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1006]
ウシ動物である、本発明1004の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1007]
ブラックアンガス（Black Angus）種のウシ動物である、本発明1006の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1008]
メラノソームアセンブリを阻害するタンパク質、メラニンの合成を阻害するタンパク質、メラニンの輸送を阻害するタンパク質、メラニン細胞発生および／または移動を阻害するタンパク質より選択されるタンパク質をコードする優性活性型外因性核酸分子を含む、本発明1006の、白色または白色に近いコートまたは柔毛色を有するトランスジェニックウシ動物。
[本発明1009]
優性活性型外因性核酸分子が優性白色対立遺伝子である、本発明1008のトランスジェニックウシ動物。
[本発明1010]
優性白色対立遺伝子が優性白色Pmel17対立遺伝子である、本発明1009のトランスジェニックウシ動物。
[本発明1011]
優性白色Pmel17対立遺伝子がセキショクヤケイ（Gallus gallus）由来である、本発明1010のトランスジェニックウシ動物。
[本発明1012]
外因性阻害性RNAが、
メラノコルチン受容体（MC1R）、メラニン細胞刺激ホルモン（MSH）、β-デフェンシン103、アグーチシグナル伝達タンパク質（ASP）、チロシナーゼ（TYR）、メラニン細胞特異的輸送タンパク質、Ras関連タンパク質Rab-7、rabタンパク質ゲラニルゲラニルトランスフェラーゼ成分A2、推定E3ユビキチンタンパク質リガーゼ（HERC2）、二機能酵素CarRP様、リコペンシクラーゼ／フィトエンシンターゼ様、およびフィトエンデヒドロゲナーゼ様より選択されるタンパク質をコードする優性活性型野生型核酸分子
の発現に干渉する、本発明1004の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1013]
ウシ動物である、本発明1012の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1014]
ブラックアンガス種のウシ動物である、本発明1013の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1015]
プロモーターが、ユニバーサルプロモーター、構成的プロモーター、組織特異的プロモーター、および誘導性プロモーターより選択される、本発明1004の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1016]
プロモーターが、サイトメガロウイルス(CMV)プロモーター、CMV-ニワトリβアクチンプロモーター、ユビキチンプロモーター、JeTプロモーター、SV40プロモーター、βグロビンプロモーター、伸長因子1α(EF1-α)プロモーター、RSVプロモーター、Ripply2プロモーター、Tickedプロモーター、Tabbyプロモーター、Mo-MLV-LTRプロモーター、Rosa26プロモーター、ケラチノサイト特異的プロモーター、メラニン細胞特異的プロモーター、マトリックス細胞特異的プロモーター、および真皮乳頭特異的プロモーターより選択される、本発明1004の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1017]
外因性核酸分子の発現または外因性阻害性RNAコード配列の発現が、Cre-LoxP組換えシステム、FLP-FRT組換えシステム、テトラサイクリン(Tet)制御転写活性化システム、エクジソン誘導性システム、熱ショックオン／オフシステム、lacO/IPTGシステム、Cumateリプレッサータンパク質CymRシステム、ニトロレダクターゼシステム、クメルマイシン／ノボビオシン調節システム、RheoSwitchリガンドRSL1システム、キメラ二分核内受容体発現システム、GAL4システム、ステロールまたはステロイドもしくは合成ステロイド誘導／抑制システム、およびそれらの任意の組み合わせより選択される誘導性システムの制御下にある、本発明1004の非ヒトトランスジェニック動物。
[本発明1018]
誘導性遺伝子発現システムがCre-LoxP組換えシステムを含む、本発明1017の非ヒトトランスジェニック動物。