【手続補正書】
【提出日】平成29年3月14日(2017.3.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｖ９１Ｋ置換と、配列番号１に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列とを含み、前記ＩＬ−２ムテインは、制御性Ｔ細胞を選択的に刺激する、ヒトインターロイキン−２（ＩＬ−２）ムテイン。
【請求項２】
１２５位はアラニンである、請求項１に記載のヒトＩＬ−２ムテイン。
【請求項３】
１２５位はシステインである、請求項１に記載のヒトＩＬ−２ムテイン。
【請求項４】
Ｆｃ及び請求項１〜３のいずれかに記載のヒトＩＬ−２ムテインを含む、Ｆｃ融合タンパク質。
【請求項５】
前記Ｆｃは、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃである、請求項４に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項６】
前記ヒトＩｇＧ１  Ｆｃは、前記Ｆｃのエフェクター機能を変化させる１つ以上の変異を含む、請求項５に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項７】
前記ヒトＩｇＧ１は、Ｎ２９７に置換を含む、請求項６に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項８】
Ｎ２９７の前記置換はＮ２９７Ｇである、請求項７に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項９】
前記ヒトＩｇＧ  ＦｃのＣ末端リジンの置換または欠失を含む、請求項５〜８のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１０】
前記ヒトＩｇＧ  Ｆｃの前記Ｃ末端リジンが欠失される、請求項９に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１１】
リンカーが、前記タンパク質のＦｃとヒトＩＬ−２ムテイン部分とを接続する、請求項４〜１０のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１２】
前記リンカーは、ＧＧＧＧＳ（配列番号５）、ＧＧＮＧＴ、または（配列番号６）、及びＹＧＮＧＴ（配列番号７）である、請求項１１に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１３】
前記リンカーはＧＧＧＧＳ（配列番号５）である、請求項１２に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１４】
前記ＩＬ−２ムテインは、哺乳動物細胞内で発現させた時に前記Ｆｃ融合タンパク質のグリコシル化を変化させるアミノ酸の付加、置換、または欠失をさらに含む、請求項４〜１３のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１５】
前記ＩＬ−２ムテインは、Ｔ３置換を含む、請求項１４に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１６】
前記ＩＬ−２ムテインは、Ｔ３ＮまたはＴ３Ａ置換を含む、請求項１５に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１７】
前記ＩＬ−２ムテインは、Ｔ３Ｎ置換を含む、請求項１６に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１８】
前記ＩＬ−２ムテインは、Ｓ５変異をさらに含む、請求項１７に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項１９】
前記ＩＬ−２ムテインは、Ｓ５Ｔ変異をさらに含む、請求項１８に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項２０】
前記Ｆｃ融合タンパク質は、Ｆｃ二量体を含む、請求項４から１９のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項２１】
前記Ｆｃ融合タンパク質は、２つのＩＬ−２ムテインを含む、請求項２０に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項２２】
前記Ｆｃ融合タンパク質は、単一のＩＬ−２ムテインを含む、請求項２０に記載のＦｃ融合タンパク質。
【請求項２３】
請求項１〜３のいずれかに記載のヒトＩＬ−２ムテインをコードする、単離された核酸。
【請求項２４】
請求項４〜２２のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質をコードする、単離された核酸。
【請求項２５】
抗体の前記Ｆｃ部分及び前記ヒトＩＬ−２ムテインは、単一のオープンリーディングフレーム内でコードされる、請求項２４に記載の単離された核酸。
【請求項２６】
プロモーターに作動可能に連結された請求項２３〜２５のいずれかに記載の前記単離された核酸を含む、発現ベクター。
【請求項２７】
請求項２３〜２５のいずれかに記載の単離された核酸を含む、宿主細胞。
【請求項２８】
前記単離された核酸は、プロモーターに作動可能に連結される、請求項２７に記載の宿主細胞。
【請求項２９】
前記宿主細胞は、原核細胞である、請求項２７または２８に記載の宿主細胞。
【請求項３０】
前記宿主細胞は、大腸菌である、請求項２９に記載の宿主細胞。
【請求項３１】
前記宿主細胞は、真核細胞である、請求項２７または２８に記載の宿主細胞。
【請求項３２】
前記宿主細胞は、哺乳動物細胞である、請求項３１に記載の宿主細胞。
【請求項３３】
前記宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株である、請求項３２に記載の宿主細胞。
【請求項３４】
ヒトＩＬ−２ムテインを作製する方法であって、前記プロモーターが発現される条件下で請求項２８〜３３のいずれかに記載の宿主細胞を培養することと、前記培養物から前記ヒトＩＬ−２ムテインを回収することと、を含む、方法。
【請求項３５】
Ｆｃ融合タンパク質を作製する方法であって、前記プロモーターが発現される条件下で請求項２８〜３３のいずれかに記載の宿主細胞を培養することと、前記培養物から前記Ｆｃ融合タンパク質を回収することと、を含む、方法。
【請求項３６】
Ｔ細胞の集団を、有効量の請求項１〜３のいずれかに記載のヒトＩＬ−２ムテインまたは請求項４〜２２のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質と接触させることを含む、
Ｔ細胞の集団内の非制御性Ｔ細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率を増加させる、
対象の末梢血中の非制御性Ｔ細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率を増加させる、または
対象の末梢血中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率を増加させる、方法。
【請求項３７】
ＣＤ３＋ＦｏｘＰ３−に対するＣＤ３＋ＦｏｘＰ３＋細胞の比率が増加する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
ＣＤ３＋ＦｏｘＰ３−に対するＣＤ３＋ＦｏｘＰ３＋細胞の比率は、少なくとも５０％増加する、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
有効量の請求項１〜３のいずれかに記載のヒトＩＬ−２ムテインまたは請求項４〜２２のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質を投与することを含む、対象の末梢血中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率を増加させる方法。
【請求項４０】
ＣＤ５６及び／またはＣＤ１６を発現するＣＤ３−ＣＤ１９−リンパ球に対するＣＤ３＋ＦｏｘＰ３＋細胞の比率が増加する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
ＣＤ５６及び／またはＣＤ１６を発現するＣＤ３−ＣＤ１９−リンパ球に対するＣＤ３＋ＦｏｘＰ３＋細胞の比率は、少なくとも５０％増加する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記対象に治療有効量の請求項１〜３のいずれかに記載のＩＬ−２ムテインまたは請求項４〜２２のいずれかに記載のＦｃ融合タンパク質を投与することを含む、炎症性疾患または自己免疫性疾患に罹患する患者を治療する方法。
【請求項４３】
請求項４２に記載の炎症性疾患または自己免疫性疾患に罹患する患者を治療する方法であって、投与が、前記疾患の少なくとも１つの症状の軽減をもたらす、方法。
【請求項４４】
対象の末梢血中の非制御性Ｔ細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率は、投与後に増加する、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
対象の末梢血中の非制御性Ｔ細胞に対する制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）の比率は、投与後も本質的に同じままである、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記炎症性疾患または自己免疫性疾患は、炎症、アトピー性疾患、腫瘍随伴性自己免疫疾患、軟骨炎症、関節炎、関節リウマチ、若年性関節炎、若年性関節リウマチ、少関節型若年性関節リウマチ、多関節型若年性関節リウマチ、全身型若年性関節リウマチ、若年性強直性脊椎炎、若年性腸炎性関節炎、若年性反応性関節炎、若年性ライター症候群、ＳＥＡ症候群（血清陰性、腱付着部症、関節症症候群）、若年性皮膚筋炎、若年性乾癬性関節炎、若年性強皮症、若年性全身性エリテマトーデス、若年性血管炎、少関節型関節リウマチ、多関節型関節リウマチ、全身型関節リウマチ、強直性脊椎炎、腸炎性関節炎、反応性関節炎、ライター症候群、ＳＥＡ症候群（血清陰性、腱付着部症、関節症症候群）、皮膚筋炎、乾癬性関節炎、強皮症、血管炎、筋炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、結節性多発動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、サルコイドーシス、硬化症、原発性胆汁性硬化症、硬化性胆管炎、シェーグレン症候群、乾癬、プラーク乾癬、滴状乾癬、逆性乾癬、膿胞性乾癬、乾癬性紅皮症、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、粥状動脈硬化、狼瘡、スティル病、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、重症筋無力症、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、多発性硬化症（ＭＳ）、喘息、ＣＯＰＤ、副鼻腔炎、ポリープを伴う副鼻腔炎、好酸球性食道炎、好酸球性気管支炎、ギラン−バレー疾患、Ｉ型糖尿病、甲状腺炎（たとえばグレーブス病）、アジソン病、レイノー現象、自己免疫性肝炎、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、移植拒絶反応、腎障害、Ｃ型肝炎誘発性血管炎および自然流産からなる群から選択される、請求項４２〜４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
疾患が、ループス、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、Ｃ型肝炎誘発性血管炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ、乾癬、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、多発性硬化症（ＭＳ）、Ｉ型糖尿病、自然流産、アトピー性疾患または炎症性腸疾患である、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
請求項１に記載のヒトインターロイキン−２（ＩＬ−２）ムテインまたは請求項４に記載のＦｃ融合タンパク質を用いた治療に対する対象の反応を監視する方法であって、前記対象における変化を検出することを含み、前記変化は、
ａ）体温の上昇、
ｂ）前記対象の末梢血中のＣＲＰの上昇、
ｃ）前記対象の末梢血中の血小板の減少、
ｄ）前記対象の末梢血中の好中球の減少、または
ｅ）前記対象の末梢血中のアルブミンの減少であり、
前記変化が検出された後、前記治療は、中止されるか、一時中断されるか、投与頻度が減少されるか、または投薬量が減少される、方法。
【請求項４９】
前記変化は、
ａ）少なくとも０．５℃の体温の上昇、
ｂ）少なくとも０．２ｍｇ／ｍＬの前記対象の末梢血中のＣＲＰの上昇、
ｃ）少なくとも０．８倍の前記対象の末梢血中の血小板の減少、
ｄ）少なくとも０．８倍の前記対象の末梢血中の好中球の減少、または
ｅ）少なくとも０．４倍の前記対象の末梢血中のアルブミンの減少を含む、請求項４８に記載の方法。