【手続補正書】
【提出日】平成29年10月5日(2017.10.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それの結合部位で被検体に結合できる結合分子の存在下で被検体の総量および／または総濃度を決定するための in vitro 方法であって、下記の工程を含む方法：
（ｉ）被検体および結合分子を含む試料を
−結合分子の結合部位を指向するトラッピング分子、および
−被検体との複合体を形成できる検出分子
と接触させる；そして
（ｉｉ）検出分子−被検体複合体を検出し、それにより被検体の総量および／または総濃度を決定する；
その際、検出分子は結合分子とは異なり、かつ
その際、被検体はトラッピング分子とは異なり、かつ
その際、検出分子は被検体が結合分子により結合されていない場合にのみ被検体との複合体を形成でき、
前記トラッピング分子が、抗体もしくは抗体の機能活性部分、または受容体もしくは受容体フラグメントである。
【請求項２】
トラッピング分子が結合分子からの被検体の本質的に完全な解放を容易にする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
−  Ｋ（トラッピング分子）／Ｋ（結合分子）は、少なくとも３、好ましくは少なくとも５、より好ましくは少なくとも１０である；および／または
−  Ｃｏｎｃ（トラッピング分子）／Ｃｏｎｃ（結合分子）は、少なくとも３、好ましくは少なくとも５、より好ましくは少なくとも１０である；および／または
−  （Ｋ（トラッピング分子）／Ｋ（結合分子））×（Ｃｏｎｃ（トラッピング分子）／Ｃｏｎｃ（結合分子））は、少なくとも３、好ましくは少なくとも５、より好ましくは少なくとも１０である；および／または
−  （Ｋ（トラッピング分子）／Ｋ（結合分子））×（Ｃｏｎｃ（トラッピング分子）／Ｃｏｎｃ（結合分子））×（ＭＲ（トラッピング分子）／ＭＲ（結合分子））は、少なくとも３、好ましくは少なくとも５、より好ましくは少なくとも１０である；
その際、Ｋ（トラッピング分子）は結合分子に対するトラッピング分子の親和性であり、Ｋ（結合分子）は被検体に対する結合分子の親和性であり、かつ
その際、Ｃｏｎｃ（トラッピング分子）およびＣｏｎｃ（結合分子）はそれぞれ、工程ｉ）におけるトラッピング分子および結合分子のモル濃度であり、特にＣｏｎｃ（結合分子）は１〜５μｍｏｌ／ｌの範囲であり、および／またはＣｏｎｃ（トラッピング分子）は３＊（１〜５）μｍｏｌ／ｌの範囲であり、かつ
その際、ＭＲ（トラッピング分子）は結合分子への結合についてのトラッピング分子の結合原子価であり、ＭＲ（結合分子）は被検体への結合についての結合分子の結合原子価である、
請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
−被検体への結合についての検出分子の親和性は、少なくとも１０８（ｍｏｌ／ｌ）−１、より好ましくは少なくとも１０９（ｍｏｌ／ｌ）−１、よりさらに好ましくは少なくとも１０１０（ｍｏｌ／ｌ）−１である；および／または
−結合分子への結合についてのトラッピング分子の親和性は、少なくとも５×１０９（ｍｏｌ／ｌ）−１、より好ましくは少なくとも１０１０（ｍｏｌ／ｌ）−１である；および／または
−検出分子のモル濃度は、試料中の結合分子のモル濃度の最大で５％、好ましくは最大で３％、より好ましくは最大で１％、よりさらに好ましくは最大で０．５％、最も好ましくは最大で０．１％である；
請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
検出分子−被検体複合体の検出を非競合アッセイ、特にサンドイッチアッセイで実施し、殊にサンドイッチアッセイは被検体に結合できるキャプチャー分子を使用し、
その際、
−キャプチャー分子は固定化のための手段を保有し、
−検出分子とキャプチャー分子は被検体上のオーバーラップしない異なるエピトープに結合する、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
−結合分子は、抗体もしくはその機能活性部分であるか、もしくはそれを含む；および／または
−トラッピング分子は、結合分子の抗原結合部位を指向する抗イディオタイプ抗体もしくはその機能活性部分であるか、もしくはそれを含む；および／または
−検出分子は、抗体もしくはその機能活性部分であるか、もしくはそれを含む；および／または
−キャプチャー分子は、抗体もしくはその機能活性部分であるか、もしくはそれを含む；
特に、その際、トラッピング分子、結合分子、検出分子およびキャプチャー分子はそれぞれ抗体もしくはその機能活性部分であるか、もしくはそれを含む、
請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
−結合分子は、抗体、抗体の機能活性部分、受容体もしくは受容体フラグメント、特に療法活性抗体、抗体の療法活性−機能活性部分、または療法活性受容体、もしくは療法活性受容体フラグメントであるか、またはそれを含む；ならびに／あるいは
−被検体は、化学物質、好ましくはホルモン、ペプチドもしくはタンパク質、動物もしくはヒトの血中を循環している分子、またはバイオマーカー、特に腫瘍マーカーである；ならびに／あるいは
−検出分子は、検出可能な標識化のための手段、特に直接検出もしくは間接検出のための手段を保有する；
請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
被検体がタンパク質であり、および／または試料中のタンパク質が変性もしくは不可逆的変性していない、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
−工程（ｉ）の後に洗浄工程を実施するか、または
−工程（ｉ）の後に洗浄工程を実施しない、
好ましくは、工程（ｉ）の後に洗浄工程を実施しない、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
−試料が液体、特に水性液体、血液もしくは血清である；および／または
−試料、特に血液もしくは血清中の被検体の濃度が、１ｐｇ／ｍｌ〜２０μｇ／ｍｌ、好ましくは１ｎｇ／ｍｌ〜１０μｇ／ｍｌの範囲である；および／または
−結合分子、特に療法薬もしくは診断薬が、その試料を入手した対象に投与されたものである；
請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
ｉ）工程（ｉ）を請求項１〜１０のいずれか１項の記載に従って実施する；
ｉｉ）工程（ｉｉ）を請求項１〜１０のいずれか１項の記載に従って実施する；
ｉｉｉ）さらに、−トラッピング分子の非存在下で−試料中の結合分子に結合していない遊離被検体の量および／または濃度を決定し、場合により、試料中の結合分子に結合している被検体の量および／または濃度および／または比率を決定する；
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
−被検体の総量および／または総濃度は、患者の疾患の非存在、存在および／または重症度の指標となる、ならびに／あるいは
−特に患者が結合分子で処置されていた場合、総量および／または総濃度は処置に対する患者の療法応答の指標となる、ならびに／あるいは
−試料中の結合分子に結合した被検体の量および／または濃度および／または比率は、患者の疾患の非存在、存在および／または重症度の指標となり、ならびに／あるいは特に患者がその結合分子で処置されていた場合、処置に対する患者の療法応答の指標となる、ならびに／あるいは
−その方法を、特に癌療法において、療法をモニタリングするために使用する、
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
被検体に結合できる結合分子をさらに含む試料中の被検体の総量および／または総濃度を決定するのに適した、下記のものを含むキットまたは組成物：
ａ）被検体との複合体を形成できる検出分子；および
ｂ）結合分子の結合部位を指向するトラッピング分子；および
ｃ）被検体；および
ｄ）被検体に結合できる結合分子；および
ｅ）場合により、被検体の固定化のための手段を保有するキャプチャー分子；
その際、検出分子は結合分子とは異なり、かつ
その際、被検体はトラッピング分子とは異なり、かつ
その際、検出分子は被検体が結合分子により結合されていない場合にのみ被検体との複合体を形成でき、
前記トラッピング分子が、抗体もしくは抗体の機能活性部分、または受容体もしくは受容体フラグメントであり、
特にその際、キットまたは組成物は請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法に使用するのに適している。
【請求項１４】
被検体に結合できる結合分子をさらに含む試料中の被検体の総量および／または総濃度を決定するのに適した、下記のものを含むキットまたは組成物の使用であって、
−請求項１〜１２のいずれか１項に記載のいずれかの方法における使用；ならびに／あるいは
−試料中の被検体の総量および／または総濃度を決定するための使用；好ましくは、その際、被検体はバイオマーカーであり、および／または試料は血液もしくは血清である；ならびに／あるいは
−処置に対する患者の療法応答を決定するための使用；特にその際、患者は結合分子で処置され、
前記キットまたは組成物が、
ａ）被検体との複合体を形成できる検出分子；および
ｂ）結合分子の結合部位を指向するトラッピング分子；および
ｃ）場合により、被検体；および
ｄ）場合により、被検体に結合できる結合分子；および
ｅ）場合により、被検体の固定化のための手段を保有するキャプチャー分子；
を含み、
その際、検出分子は結合分子とは異なり、かつ
その際、被検体はトラッピング分子とは異なり、かつ
その際、検出分子は被検体が結合分子により結合されていない場合にのみ被検体との複
合体を形成でき、
前記トラッピング分子が、抗体もしくは抗体の機能活性部分、または受容体もしくは受容体フラグメントである、
前記使用。