【手続補正書】
【提出日】平成29年9月8日(2017.9.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（a）SEQ ID NO: 5に示される重鎖可変領域配列の重鎖相補性決定領域（H-CDR）1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 6に示される軽鎖可変領域配列の軽鎖相補性決定領域（L-CDR）1、L-CDR2、およびL-CDR3（m830）；
（b）SEQ ID NO: 1に示される重鎖可変領域のH-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 2に示される軽鎖可変領域のL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3（m825）；
（c）SEQ ID NO: 3に示される重鎖可変領域配列のH-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 4に示される軽鎖可変領域配列のL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3（m822）；または
（d）SEQ ID NO: 7に示される重鎖可変領域配列のH-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 8に示される軽鎖可変領域配列のL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3（m863）
のうちの1つを含む重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、TEM8に特異的に結合し、かつ中和する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
（a）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 5のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜110を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 6のアミノ酸27〜32、50〜52、および89〜97を含む（m830）か；
（b）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 1のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜106を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 2のアミノ酸26〜31、49〜51、および88〜97を含む（m825）か；
（c）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 3のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜106を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 4のアミノ酸26〜31、49〜51、および88〜97を含む（m822）か；または
（d）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 7のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜110を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 8のアミノ酸27〜32、50〜52、および89〜97を含む（m863）、
請求項1記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項３】
重鎖可変領域が、SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 3、またはSEQ ID NO: 7に示されるアミノ酸配列を含む、請求項1または請求項2記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項４】
軽鎖可変領域が、SEQ ID NO: 6、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 4、またはSEQ ID NO: 8に示されるアミノ酸配列を含む、請求項1または請求項2記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項５】
重鎖可変領域および軽鎖可変領域が、
（a）それぞれ、SEQ ID NO: 5およびSEQ ID NO: 6；
（b）それぞれ、SEQ ID NO: 1およびSEQ ID NO: 2；
（c）それぞれ、SEQ ID NO: 3およびSEQ ID NO: 4；または
（d）それぞれ、SEQ ID NO: 7およびSEQ ID NO: 8
に示されるアミノ酸配列を含む、請求項1または請求項2記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項６】
モノクローナル抗体または抗原結合フラグメントがヒトフレームワーク領域を含む、請求項1〜5のいずれか一項記載の抗体。
【請求項７】
IgGである、請求項1〜6のいずれか一項記載の抗体。
【請求項８】
請求項1〜6のいずれか一項記載の抗原結合フラグメント。
【請求項９】
Fv、Fab、F(ab')2、scFv、またはscFV2フラグメントである、請求項8記載の抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
エフェクター分子または検出可能マーカーにコンジュゲートされている、請求項1〜9のいずれか一項記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１１】
エフェクター分子が、抗血管新生剤、化学療法剤、および／または毒素である、請求項10記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１２】
毒素が、メイタンシノイド毒素またはオーリスタチン毒素である、請求項11記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１３】
メイタンシノイド毒素が、DM1であり；かつ／または
オーリスタチン毒素が、モノメチルオーリスタチンE（MMAE）もしくはモノメチルオーリスタチンF（MMAF）である、
請求項12記載の単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１４】
リンカーによりエフェクター分子にコンジュゲートされている、請求項10〜13のいずれか一項記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１５】
リンカーが、選択的に切断可能なペプチドリンカーなどの切断可能リンカーである、請求項14記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１６】
リンカーがカテプシン切断可能リンカーである、請求項15記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１７】
リンカーが切断不能リンカーである、請求項14記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１８】
検出可能マーカーが、蛍光マーカー、酵素マーカー、重金属マーカー、または放射性マーカーである、請求項17記載の抗体または抗原結合フラグメント。
【請求項１９】
請求項1〜9のいずれか一項記載の抗体または抗原結合フラグメントをコードする、単離された核酸分子。
【請求項２０】
キメラ抗原受容体をコードする、請求項19記載の核酸分子。
【請求項２１】
請求項19または請求項20記載の核酸分子を含む、ベクター。
【請求項２２】
キメラ抗原受容体T細胞の作製における使用のための、請求項21記載のベクター。
【請求項２３】
請求項19〜22のいずれか一項記載の核酸分子またはベクターを含む、宿主細胞。
【請求項２４】
T細胞である、請求項23記載の宿主細胞。
【請求項２５】
式Iの抗体薬物コンジュゲートであって、
2016533721.tif 000001
式中、Aは、SEQ ID NO: 1のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜106をそれぞれ含む重鎖相補性決定領域（H-CDR）1、H-CDR2、およびH-CDR3を含む重鎖可変領域と、SEQ ID NO: 2のアミノ酸26〜31、49〜51、および88〜97をそれぞれ含む軽鎖相補性決定領域（L-CDR）1、L-CDR2、およびL-CDR3を含む軽鎖可変領域とを含む、TEM8に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントであり；
Sは、該抗体の硫黄原子であり；かつ
nは、1〜10の整数である、
抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２６】
重鎖可変領域が、SEQ ID NO: 1に示されるアミノ酸配列を含み、かつ軽鎖可変領域が、SEQ ID NO: 2に示されるアミノ酸配列を含む、請求項25記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２７】
nが2〜8の偶数である、請求項25または請求項26記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２８】
nが2〜4の偶数である、請求項25または請求項26記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９】
有効量の請求項1〜28のいずれか一項記載の抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、または抗体薬物コンジュゲートと、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
【請求項３０】
治療有効量の請求項1〜29のいずれか一項記載の抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、抗体薬物コンジュゲート、または組成物
を含む、腫瘍を有する対象を処置するための薬学的組成物であって、
免疫複合体を形成するために十分な条件下での該組成物の投与による免疫複合体の形成により、対象における腫瘍が処置される、薬学的組成物。
【請求項３１】
治療有効量の追加の剤をさらに含む、請求項30記載の薬学的組成物。
【請求項３２】
追加の剤が抗血管新生剤である、請求項31記載の薬学的組成物。
【請求項３３】
追加の剤が化学療法剤である、請求項31記載の薬学的組成物。
【請求項３４】
腫瘍が、結腸直腸がん、皮膚がん、肺がん、乳がん、前立腺がん、または頭頸部がんである、請求項30〜33のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項３５】
腫瘍量の減少のために有効である、請求項30〜33のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項３６】
腫瘍成長の減少のために有効である、請求項30〜33のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項３７】
腫瘍が、TEM8の細胞表面発現が増大した細胞を含む腫瘍微小環境にある、請求項30〜33のいずれか一項記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
前記細胞が、内皮細胞または間質細胞である、請求項37記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
有効量の請求項1〜9のいずれか一項記載の抗体または抗原結合フラグメントと対象由来の細胞とを、免疫複合体を形成するのに十分な条件下でインビトロで接触させる工程；および
対象由来の細胞上の免疫複合体の存在を検出する工程であって、対象由来の細胞上の免疫複合体の存在が、対象におけるTEM8の細胞表面発現を有する細胞の存在を示す、工程
を含む、対象におけるTEM8の細胞表面発現を有する細胞の存在を検出する方法。
【請求項４０】
内皮細胞が、対象由来の生物学的サンプル中にある、請求項39記載の方法。
【請求項４１】
前記細胞が、内皮細胞、腫瘍間質細胞、および／または腫瘍細胞である、請求項39記載の方法。
【請求項４２】
前記細胞が内皮細胞であり、対象におけるTEM8を発現する内皮細胞の存在の検出が、対象における病的な血管新生を検出する、請求項39記載の方法。
【請求項４３】
対象におけるTEM8を発現する内皮細胞の存在の検出が、対象における腫瘍を検出する、請求項39記載の方法。
【請求項４４】
有効量の請求項1〜9のいずれか一項記載の抗体または抗原結合フラグメント
を含む、細胞に対する炭疽防御抗原の結合を低減させるための薬学的組成物であって、
免疫複合体を形成するために十分な条件下での該組成物と細胞との接触による免疫複合体の形成により、細胞に対する炭疽防御抗原の結合が低減する、薬学的組成物。
【請求項４５】
対象における病的な血管新生を検出するか、対象における腫瘍を処置するか、または細胞に対する炭疽防御抗原の結合を低減させるためのキットであって、請求項1〜29のいずれか一項記載の抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、抗体薬物コンジュゲート、または組成物を含む容器と、該キットを使用するための指示とを含む、キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
[本発明1001]
（a）SEQ ID NO: 1に示される重鎖可変領域の重鎖相補性決定領域（H-CDR）1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 2に示される軽鎖可変領域の軽鎖相補性決定領域（L-CDR）1、L-CDR2、およびL-CDR3（m825）；
（b）SEQ ID NO: 3に示される重鎖可変領域配列のH-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 4に示される軽鎖可変領域配列のL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3（m822）；
（c）SEQ ID NO: 5に示される重鎖可変領域配列のH-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 6に示される軽鎖可変領域配列のL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3（m830）；または
（d）SEQ ID NO: 7に示される重鎖可変領域配列のH-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3、ならびにSEQ ID NO: 8に示される軽鎖可変領域配列のL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3（m863）
のうちの1つを含む重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む、TEM8に特異的に結合し、かつ中和する、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメント。
[本発明1002]
（a）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 1のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜106を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 2のアミノ酸26〜31、49〜51、および88〜97を含む（m825）か；
（b）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 3のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜106を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 4のアミノ酸26〜31、49〜51、および88〜97を含む（m822）か；
（c）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 5のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜110を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 6のアミノ酸27〜32、50〜52、および89〜97を含む（m830）か；または
（d）H-CDR1、H-CDR2、およびH-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 7のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜110を含み、かつL-CDR1、L-CDR2、およびL-CDR3が、それぞれ、SEQ ID NO: 8のアミノ酸27〜32、50〜52、および89〜97を含む（m863）、
本発明1001の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1003]
重鎖可変領域が、SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO: 3、SEQ ID NO: 5、またはSEQ ID NO: 7に示されるアミノ酸配列を含む、本発明1001または本発明1002の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1004]
軽鎖可変領域が、SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 4、SEQ ID NO: 6、またはSEQ ID NO: 8に示されるアミノ酸配列を含む、本発明1001または本発明1002の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1005]
重鎖可変領域および軽鎖可変領域が、
（a）それぞれ、SEQ ID NO: 1およびSEQ ID NO: 2；
（b）それぞれ、SEQ ID NO: 3およびSEQ ID NO: 4；
（c）それぞれ、SEQ ID NO: 5およびSEQ ID NO: 6；または
（d）それぞれ、SEQ ID NO: 7およびSEQ ID NO: 8
に示されるアミノ酸配列を含む、本発明1001または本発明1002の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1006]
モノクローナル抗体または抗原結合フラグメントがヒトフレームワーク領域を含む、本発明1001〜1005のいずれかの抗体。
[本発明1007]
IgGである、本発明1001〜1006のいずれかの抗体。
[本発明1008]
本発明1001〜1006のいずれかの抗原結合フラグメント。
[本発明1009]
Fv、Fab、F(ab')2、scFv、またはscFV2フラグメントである、本発明1008の抗原結合フラグメント。
[本発明1010]
エフェクター分子または検出可能マーカーにコンジュゲートされている、本発明1001〜1009のいずれかの抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1011]
エフェクター分子が、抗血管新生剤、化学療法剤、および／または毒素である、本発明1010の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1012]
毒素が、メイタンシノイド毒素またはオーリスタチン毒素である、本発明1011の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1013]
メイタンシノイド毒素が、DM1であり；かつ／または
オーリスタチン毒素が、モノメチルオーリスタチンE（MMAE）もしくはモノメチルオーリスタチンF（MMAF）である、
本発明1012の単離されたモノクローナル抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1014]
リンカーによりエフェクター分子にコンジュゲートされている、本発明1010〜1013のいずれかの抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1015]
リンカーが、選択的に切断可能なペプチドリンカーなどの切断可能リンカーである、本発明1014の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1016]
リンカーがカテプシン切断可能リンカーである、本発明1015の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1017]
リンカーが切断不能リンカーである、本発明1014の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1018]
検出可能マーカーが、蛍光マーカー、酵素マーカー、重金属マーカー、または放射性マーカーである、本発明1017の抗体または抗原結合フラグメント。
[本発明1019]
本発明1001〜1009のいずれかの抗体または抗原結合フラグメントをコードする、単離された核酸分子。
[本発明1020]
キメラ抗原受容体をコードする、本発明1019の核酸分子。
[本発明1021]
本発明1019または本発明1020の核酸分子を含む、ベクター。
[本発明1022]
キメラ抗原受容体T細胞の作製における使用のための、本発明1021のベクター。
[本発明1023]
本発明1019〜1022のいずれかの核酸分子またはベクターを含む、宿主細胞。
[本発明1024]
T細胞である、本発明1023の宿主細胞。
[本発明1025]
式Iの抗体薬物コンジュゲートであって、
2016533721.tif 000002
式中、Aは、SEQ ID NO: 1のアミノ酸26〜33、51〜58、および97〜106をそれぞれ含む重鎖相補性決定領域（H-CDR）1、H-CDR2、およびH-CDR3を含む重鎖可変領域と、SEQ ID NO: 2のアミノ酸26〜31、49〜51、および88〜97をそれぞれ含む軽鎖相補性決定領域（L-CDR）1、L-CDR2、およびL-CDR3を含む軽鎖可変領域とを含む、TEM8に特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントであり；
Sは、該抗体の硫黄原子であり；かつ
nは、1〜10の整数である、
抗体薬物コンジュゲート。
[本発明1026]
重鎖可変領域が、SEQ ID NO: 1に示されるアミノ酸配列を含み、かつ軽鎖可変領域が、SEQ ID NO: 2に示されるアミノ酸配列を含む、本発明1025の抗体薬物コンジュゲート。
[本発明1027]
nが2〜8の偶数である、本発明1025または本発明1026の抗体薬物コンジュゲート。
[本発明1028]
nが2〜4の偶数である、本発明1025または本発明1026の抗体薬物コンジュゲート。
[本発明1029]
有効量の本発明1001〜1028のいずれかの抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、または抗体薬物コンジュゲートと、薬学的に許容される担体とを含む、組成物。
[本発明1030]
腫瘍を有するかまたは腫瘍の危険がある対象を選択する工程；および
治療有効量の本発明1001〜1029のいずれかの抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、抗体薬物コンジュゲート、または組成物を、免疫複合体を形成するのに十分な条件下で対象に投与する工程であって、免疫複合体の形成が対象における腫瘍を処置する、工程
を含む、腫瘍を有する対象を処置する方法。
[本発明1031]
治療有効量の追加の剤を対象に投与する工程をさらに含む、本発明1030の方法。
[本発明1032]
追加の剤が抗血管新生剤である、本発明1031の方法。
[本発明1033]
追加の剤が化学療法剤である、本発明1031の方法。
[本発明1034]
腫瘍が、結腸直腸がん、皮膚がん、肺がん、乳がん、前立腺がん、または頭頸部がんである、本発明1030〜1033のいずれかの方法。
[本発明1035]
腫瘍の処置が、腫瘍量の減少を含む、本発明1030〜1033のいずれかの方法。
[本発明1036]
腫瘍の処置が、腫瘍成長の減少を含む、本発明1030〜1033のいずれかの方法。
[本発明1037]
腫瘍が、TEM8の細胞表面発現が増大した細胞を含む腫瘍微小環境にある、本発明1030〜1033のいずれかの方法。
[本発明1038]
前記細胞が、内皮細胞または間質細胞である、本発明1037の方法。
[本発明1039]
有効量の本発明1001〜1009のいずれかの抗体または抗原結合フラグメントと対象由来の細胞とを、免疫複合体を形成するのに十分な条件下で接触させる工程；および
対象由来の細胞上の免疫複合体の存在を検出する工程であって、対象由来の細胞上の免疫複合体の存在が、対象におけるTEM8の細胞表面発現を有する細胞の存在を示す、工程
を含む、対象におけるTEM8の細胞表面発現を有する細胞の存在を検出する方法。
[本発明1040]
接触させる工程がインビボである、本発明1039の方法。
[本発明1041]
接触させる工程がインビトロである、本発明1039の方法。
[本発明1042]
内皮細胞が、対象由来の生物学的サンプル中にある、本発明1041の方法。
[本発明1043]
前記細胞が、内皮細胞、腫瘍間質細胞、および／または腫瘍細胞である、本発明1039〜1041のいずれかの方法。
[本発明1044]
前記細胞が内皮細胞であり、対象におけるTEM8を発現する内皮細胞の存在の検出が、対象における病的な血管新生を検出する、本発明1039〜1041のいずれかの方法。
[本発明1045]
対象におけるTEM8を発現する内皮細胞の存在の検出が、対象における腫瘍を検出する、本発明1039〜1041のいずれかの方法。
[本発明1046]
有効量の本発明1001〜1009のいずれかの抗体または抗原結合フラグメントと細胞とを、免疫複合体を形成するのに十分な条件下で接触させる工程であって、免疫複合体の形成が細胞に対する炭疽防御抗原の結合を低減させる、工程
を含む、細胞に対する炭疽防御抗原の結合を低減させる方法。
[本発明1047]
有効量の抗体または抗原結合フラグメントと細胞とを接触させる工程が、該細胞を含む対象への治療有効量の抗体または抗原結合フラグメントの投与を含む、本発明1046の方法。
[本発明1048]
対象における病的な血管新生を検出するか、対象における腫瘍を処置するか、または細胞に対する炭疽防御抗原の結合を低減させるためのキットであって、本発明1001〜1029のいずれかの抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、抗体薬物コンジュゲート、または組成物を含む容器と、該キットを使用するための指示とを含む、キット。
[本発明1049]
対象において腫瘍を処置するための、本発明1001〜1029のいずれかの抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、抗体薬物コンジュゲート、または組成物の使用。
[本発明1050]
対象においてTEM8を発現する内皮細胞の存在を検出するための、本発明1001〜1029のいずれかの抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、抗体薬物コンジュゲート、または組成物の使用。
[本発明1051]
細胞に対する炭疽防御抗原の結合を阻害するための、本発明1001〜1029のいずれかの抗体、抗原結合フラグメント、核酸分子、ベクター、宿主細胞、抗体薬物コンジュゲート、または組成物の使用。
前述のおよび本願開示の特徴および利点は、添付図面を参照しつつ進められる下記の詳細な説明からより明確になるであろう。