【手続補正書】
【提出日】平成29年9月29日(2017.9.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉｂ：
【化１】
2017500277.tif 000001
（式中：
Ｘが、Ｈ；ＯＨ（ここで、前記ヒドロキシル基が、任意選択的に、スクシネートとして官能化されるかまたは固体担体に結合され得る）；ＯＤＭＴ；カルボン酸；ＲＮＡｉ剤の鎖の３’末端；またはＲＮＡｉ剤の鎖を含む分子の３’末端であり、ここで、前記鎖の３’末端が、ホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーで終端し、５’から３’の順に：スペーサ、および第２のホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーをさらに含み；
ｑが、０、１または２であり；
Ｒ６が、非置換であるかまたはベンゾキシおよび３，４−ジヒドロキシブチルから選択される基で置換されるフェニルであり；
Ｒ７が、水素またはヒドロキシ−エチルであり、ここで、Ｒ７がヒドロキシ−エチルである場合、前記ヒドロキシルは、任意選択的に、スクシネートとして官能化されるかまたは固体担体に結合され得；
Ｒ８が、水素またはメトキシであり；
Ｙ１が、ＣＨまたはＮであり；
Ｙ２が、ＮまたはＣＲ９であり；ここで、Ｒ９が、水素およびメチルから選択される）
の化合物。
【請求項２】
以下のもの：
【化２】
2017500277.tif 000002
2017500277.tif 000003
2017500277.tif 000004
2017500277.tif 000005
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
以下のもの：
【化３】
2017500277.tif 000006
（式中：
Ｘが、Ｈ；ＯＨ（ここで、前記ヒドロキシル基が、任意選択的に、スクシネートとして官能化されるかまたは固体担体に結合され得る）；ＯＤＭＴ；カルボン酸；ＲＮＡｉ剤の鎖の３’末端；またはＲＮＡｉ剤の鎖を含む分子の３’末端であり、ここで、前記鎖の３’末端が、ホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーで終端し、５’から３’の順に：スペーサ、および第２のホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーをさらに含み、
ｑが、１および２から選択される）
から選択される化合物。
【請求項４】
ＲＮＡｉ剤の鎖の３’末端をキャッピングするための方法であって、
前記ＲＮＡｉ剤を、以下のもの：
【化４】
2017500277.tif 000007
2017500277.tif 000008
2017500277.tif 000009
2017500277.tif 000010
2017500277.tif 000011
（式中：
Ｘが、Ｈ、ＯＨ、ＯＤＭＴおよびカルボキシレートから選択され、前記ヒドロキシル基が、任意選択的に、スクシネートとして官能化されるかまたは固体担体に結合され得る）から選択される化合物と反応させる工程と；
固相合成法を用いて、ＸをＲＮＡｉ剤の鎖で置換する工程；または
固体担体上にＲＮＡｉ剤鎖を構築する工程と；
前記鎖を前記化合物と反応させる工程と、
前記固体担体から前記ＲＮＡｉ剤鎖を切断する工程と
を含む方法。
【請求項５】
第１の鎖および第２の鎖を含むＲＮＡｉ剤を含む組成物であって、少なくとも１つの鎖の３’末端が、３’末端キャップを含み、前記３’末端キャップが、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物であり、Ｘが、前記第１または第２の鎖である組成物。
【請求項６】
前記ＲＮＡｉ剤の第１および／または第２の鎖が、約４９ヌクレオチド長以下である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＲＮＡｉ剤の第１および／または第２の鎖が、約３０ヌクレオチド長以下である、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
前記第１および／または第２の鎖が、１８または１９ヌクレオチド長である、請求項５に記載の組成物。
【請求項９】
前記第１の鎖が、アンチセンス鎖であり、１８または１９ヌクレオチド長である、請求
項５に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＲＮＡｉ剤が、１つまたは２つの平滑末端を有する、請求項５に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＲＮＡｉ剤が、少なくとも１つの５’末端または３’末端にオーバーハングを含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＲＮＡｉ剤が、少なくとも１つの５’末端または３’末端に１〜６つのヌクレオチドオーバーハングを含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項１３】
前記ＲＮＡｉ剤が、スペーサを含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項１４】
前記スペーサがリビトールである、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記スペーサが、リビトール、２’−デオキシ−リビトール、ジリビトール、２’−メトキシエトキシ−リビトール（２’−ＭＯＥを有するリビトール）、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、または４−メトキシブタン−１，３−ジオールである、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ＲＮＡｉ剤の少なくとも１つのヌクレオチドが修飾される、請求項５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記少なくとも１つの修飾ヌクレオチドが、２’アルコキシリボヌクレオチド、２’アルコキシアルコキシリボヌクレオチド、または２’−フルオロリボヌクレオチドの中から選択される、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記少なくとも１つの修飾ヌクレオチドが、２’−ＯＭｅ、２’−ＭＯＥおよび２’−Ｈから選択される、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１９】
１つまたは複数のヌクレオチドが、修飾され、またはＤＮＡであり、またはペプチド核酸（ＰＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）、モルホリノヌクレオチド、トレオース核酸（ＴＮＡ）、グリコール核酸（ＧＮＡ）、アラビノース核酸（ＡＮＡ）、２’−フルオロアラビノース核酸（ＦＡＮＡ）、シクロヘキセン核酸（ＣｅＮＡ）、無水ヘキシトール核酸（ＨＮＡ）、および／またはアンロックド核酸（ＵＮＡ）によって置換され；および／または少なくとも１つのヌクレオチドが、修飾されたヌクレオシド間リンカー（例えば、ここで、ヌクレオチドの少なくとも１つのホスフェートが、修飾されたヌクレオシド間リンカーによって置換される）を含み、ここで、前記修飾されたヌクレオシド間リンカーが、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミデート、ボラノホスホノエート、アミドリンカー、および式（Ｉ）
【化５】
2017500277.tif 000012
（式中、Ｒ３が、Ｏ−、Ｓ−、ＮＨ２、ＢＨ３、ＣＨ３、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ６〜１０アリール、Ｃ１〜６アルコキシおよびＣ６〜１０アリール−オキシから選択され、ここで、Ｃ１〜６アルキルおよびＣ６〜１０アリールが、非置換であるか、または任意選択的に、ハロ、ヒドロキシルおよびＮＨ２から独立して選択される１〜３つの基で独立して置換され；Ｒ４が、Ｏ、Ｓ、ＮＨ、またはＣＨ２から選択される）
の化合物から選択される、請求項５に記載の組成物。
【請求項２０】
前記第１および／または第２の鎖の３’末端における最初の２つの塩基対合ヌクレオチドが修飾される、請求項５に記載の組成物。
【請求項２１】
前記第１および／または第２の鎖の３’末端における最初の２つの塩基対合ヌクレオチドが２’−ＭＯＥである、請求項５に記載の組成物。
【請求項２２】
前記第１および／または第２の鎖の３’末端ホスフェートが、修飾されたヌクレオシド間リンカーによって置換される、請求項５に記載の組成物。
【請求項２３】
第１および／または前記第２の鎖が、センス鎖によって仲介されるＲＮＡ干渉の量を減少させる５’末端キャップを含むセンス鎖である、請求項５に記載の組成物。
【請求項２４】
前記センス鎖が、選択される５’末端キャップ：５’ホスフェートまたは５’−ＯＨを含まないヌクレオチド；５’ホスフェートまたは５’−ＯＨを含まず、また２−ＯＭｅまたは２’−ＭＯＥ修飾を含むヌクレオチド；５’−デオキシ−２’−Ｏ−メチル修飾；５’−ＯＭＥ−ｄＴ；ｄｄＴ；および５’−ＯＴｒ−ｄＴを含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
第１の鎖および第２の鎖を含むＲＮＡｉ剤を含む組成物であって、少なくとも１つの鎖の３’末端が、ホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーで終端し、３’末端キャップをさらに含み、前記３’末端キャップが、式ＩａまたはＩｂの化合物または本明細書における任意の表からの化合物から選択され、Ｘが、前記第１または第２の鎖、または本明細書に開示される任意の３’末端キャップであり；ここで：（ａ）前記第１および／または第２の鎖が、４９−ｍｅｒ以下であり、約３０ヌクレオチド長以下であり、１９ヌクレオチド長、または１５〜４９ヌクレオチド長であり；（ｂ）任意選択的に、前記ＲＮＡｉ剤が、１つまたは２つの平滑末端を有し、または前記ＲＮＡｉ剤が、少なくとも１つの５’末端または３’末端に、オーバーハング、任意選択的に、１〜６つのヌクレオチドオーバーハングを含み；（ｃ）任意選択的に、一方または両方の鎖がＲＮＡであり、または任意選択的に、前記ＲＮＡｉ剤の少なくとも１つのヌクレオチドが修飾され、任意選択的に、前記少なくとも１つの修飾ヌクレオチドが、２’アルコキシリボヌクレオチド、２’アルコキシアルコキシリボヌクレオチド、または２’−フルオロリボヌクレオチドの中から選択され、任意選択的に、前記少なくとも１つの修飾ヌクレオチドが、２’−ＯＭｅ、２’−ＭＯＥおよび２’−Ｈから選択され；任意選択的に、前記第１および／または第２の鎖の３’末端における最初の２つの塩基対合ヌクレオチドが修飾され、任意選択的に、前記第１および／または第２の鎖の３’末端における最初の２つの塩基対合ヌクレオチドが２’−ＭＯＥであり；任意選択的に、１つまたは複数のヌクレオチドが、修飾され、またはＤＮＡであり、またはペプチド核酸（ＰＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）、モルホリノヌクレオチド、トレオース核酸（ＴＮＡ）、グリコール核酸（ＧＮＡ）、アラビノース核酸（ＡＮＡ）、２’−フルオロアラビノース核酸（ＦＡＮＡ）、シクロヘキセン核酸（ＣｅＮＡ）、無水ヘキシトール核酸（ＨＮＡ）、および／またはアンロックド核酸（ＵＮＡ）によって置換され；（ｄ）少なくとも１つのヌクレオチドが、修飾されたヌクレオシド間リンカーを含み、ここで、前記修飾されたヌクレオシド間リンカーが、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミデート、ボラノホスホノエート、アミドリンカー、および式（Ｉ）の化合物から選択され；任意選択的に、前記第１および／または第２の鎖の３’末端ホスフェートが、修飾されたヌクレオシド間リンカーによって置換され；および／または（ｅ）任意選択的に、前記第１または第２の鎖が、センス鎖によって仲介されるＲＮＡ干渉の量を減少させる５’末端キャップを含むセンス鎖であり、任意選択的に、前記５’末端キャップが、５’ホスフェートまたは５’−ＯＨを含まないヌクレオチドから選択され；５’ホスフェートまたは５’−ＯＨを含まず、また２−ＯＭｅまたは２’−ＭＯＥ修飾を含むヌクレオチド；５’−デオキシ−２’−Ｏ−メチル修飾；５’−ＯＭＥ−ｄＴ；ｄｄＴ；および５’−ＯＴｒ−ｄＴである組成物。
【請求項２６】
第１の鎖および第２の鎖を含むＲＮＡｉ剤を含む組成物であって、少なくとも１つの鎖の３’末端が、ホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーで終端し、５’から３’の順に：スペーサ、第２のホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカー、および３’末端キャップをさらに含み、前記３’末端キャップが、本明細書に開示される任意の３’末端キャップであり、または式ＩａまたはＩｂの化合物または本明細書における任意の表からの化合物から選択され、Ｘが、ホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーで終端し、５’から３’の順に：スペーサ、第２のホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーをさらに含む前記第１または第２の鎖であり；ここで：（ａ）前記第１および／または第２の鎖が、４９−ｍｅｒ以下であり、約３０ヌクレオチド長以下であり、１９ヌクレオチド長、または１５〜４９ヌクレオチド長であり；（ｂ）任意選択的に、前記ＲＮＡｉ剤が、１つまたは２つの平滑末端を有し、または前記ＲＮＡｉ剤が、少なくとも１つの５’末端または３’末端に、オーバーハング、任意選択的に、１〜６つのヌクレオチドオーバーハングを含み；（ｃ）任意選択的に、一方または両方の鎖がＲＮＡであり、または任意選択的に、前記ＲＮＡｉ剤の少なくとも１つのヌクレオチドが修飾され、任意選択的に、前記少なくとも１つの修飾ヌクレオチドが、２’アルコキシリボヌクレオチド、２’アルコキシアルコキシリボヌクレオチド、または２’−フルオロリボヌクレオチドの中から選択され、任意選択的に、前記少なくとも１つの修飾ヌクレオチドが、２’−ＯＭｅ、２’−ＭＯＥおよび２’−Ｈから選択され；任意選択的に、前記第１および／または第２の鎖の３’末端における最初の２つの塩基対合ヌクレオチドが修飾され、任意選択的に、前記第１および／または第２の鎖の３’末端における最初の２つの塩基対合ヌクレオチドが２’−ＭＯＥであり；任意選択的に、１つまたは複数のヌクレオチドが、修飾され、またはＤＮＡであり、またはペプチド核酸（ＰＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）、モルホリノヌクレオチド、トレオース核酸（ＴＮＡ）、グリコール核酸（ＧＮＡ）、アラビノース核酸（ＡＮＡ）、２’−フルオロアラビノース核酸（ＦＡＮＡ）、シクロヘキセン核酸（ＣｅＮＡ）、無水ヘキシトール核酸（ＨＮＡ）、および／またはアンロックド核酸（ＵＮＡ）によって置換され；（ｄ）前記スペーサが、リビトール、２’−デオキシ−リビトール、ジリビトール、２’−メトキシエトキシ−リビトール（２’−ＭＯＥを有するリビトール）、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ６、または４−メトキシブタン−１，３−ジオールであり；（ｅ）少なくとも１つのヌクレオチドが、修飾されたヌクレオシド間リンカーを含み、ここで、前記修飾されたヌクレオシド間リンカーが、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロアミデート、ボラノホスホノエート、アミドリンカー、および式（Ｉ）の化合物から選択され；任意選択的に、前記第１および／または第２の鎖の３’末端ホスフェートが、修飾されたヌクレオシド間リンカーによって置換され；および／または（ｆ）任意選択的に、前記第１または第２の鎖が、センス鎖によって仲介されるＲＮＡ干渉の量を減少させる５’末端キャップを含むセンス鎖であり、任意選択的に、前記５’末端キャップが、５’ホスフェートまたは５’−ＯＨを含まないヌクレオチドから選択され；５’ホスフェートまたは５’−ＯＨを含まず、また２−ＯＭｅまたは２’−ＭＯＥ修飾を含むヌクレオチド；５’−デオキシ−２’−Ｏ−メチル修飾；５’−ＯＭＥ−ｄＴ；ｄｄＴ；および５’−ＯＴｒ−ｄＴである組成物。
【請求項２７】
請求項２２に記載のＲＮＡｉ剤と、薬学的に許容できる担体とを含む組成物。
【請求項２８】
薬剤として使用するための、請求項２２に記載のＲＮＡｉ剤と、薬学的に許容できる担体とを含む組成物。
【請求項２９】
細胞内の標的遺伝子のレベルおよび／または活性を阻害するかまたは低下させるための方法であって、請求項２２に記載の１つまたは複数のＲＮＡｉ剤を前記細胞内に導入する工程を含む方法。
【請求項３０】
式Ｉａ：
【化６】
2017500277.tif 000013
（式中：
Ｘが、Ｈ；ＯＨ（ここで、前記ヒドロキシル基が、任意選択的に、スクシネートとして官能化されるかまたは固体担体に結合され得る）；ＯＤＭＴ；カルボン酸；ＲＮＡｉ剤の鎖の３’末端；またはＲＮＡｉ剤の鎖を含む分子の３’末端であり、ここで、前記鎖の３’末端が、ホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーで終端し、５’から３’の順に：スペーサ、および第２のホスフェートまたは修飾されたヌクレオシド間リンカーをさらに含み；
Ｙが、ＣＨまたはＮであり；
ｍが、０または１であり；
ｐが、１、２または３であり；
Ｒ３が、水素、２−（ヒドロキシ−メチル）−ベンジル、３−（ヒドロキシ−メチル）−ベンジル、スクシネート、または固体担体であり；
ここで、（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−Ｒ３部分が、３位または４位でフェニル環に結合され；
Ｒ４が水素であり；
Ｒ５が水素であり；または
Ｒ４およびＲ５が、Ｒ４およびＲ５が結合されるフェニル環と一緒に、６Ｈ−ベンゾ［ｃ］クロメンを形成する）
の化合物。
【請求項３１】
以下のもの：
【化７】
2017500277.tif 000014
2017500277.tif 000015
から選択される、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
Ｘが、Ｈ、ＯＨ、ＯＤＭＴまたはカルボキシレートであり、前記ヒドロキシル基が、任意選択的に、スクシネートとして官能化されるかまたは固体担体に結合され得；Ｒ３が、水素、２−（ヒドロキシ−メチル）−ベンジル、３−（ヒドロキシ−メチル）−ベンジル、スクシネート、または固体担体である、請求項３０に記載の式Ｉａの化合物。