【手続補正書】
【提出日】平成29年3月7日(2017.3.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
（Ｉ）（ｉ）配列番号：３で表されるＶＨＣＤＲ１領域と、配列番号：４で表されるＶＨＣＤＲ２領域と、配列番号：５で表されるＶＨＣＤＲ３領域とを含む重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号：６または１５で表されるＶＬＣＤＲ１領域と、配列番号：７で表されるＶＬＣＤＲ２領域と、配列番号：８で表されるＶＬＣＤＲ３領域とを含む軽鎖可変領域とを含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメントであるか、あるいは前記ＣＤＲ領域における８個までのアミノ酸置換を除いて、（ｉ）および（ｉｉ）の重鎖可変領域および軽鎖可変領域と同一の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む前記抗体の改変体、またはその抗原結合フラグメントであるか；
（ＩＩ）配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含むか；あるいは
（ＩＩＩ）配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
（ｉ）配列番号：３で表されるＶＨＣＤＲ１領域と、配列番号：４で表されるＶＨＣＤＲ２領域と、配列番号：５で表されるＶＨＣＤＲ３領域とを含む重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号：６または１５で表されるＶＬＣＤＲ１領域と、配列番号：７で表されるＶＬＣＤＲ２領域と、配列番号：８で表されるＶＬＣＤＲ３領域とを含む軽鎖可変領域とを含む、請求項１に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント、あるいは前記ＣＤＲ領域における８個までのアミノ酸置換を除いて、（ｉ）および（ｉｉ）の重鎖可変領域および軽鎖可変領域と同一の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む前記抗体の改変体、またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
前記重鎖可変領域が、配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含むか、または前記軽鎖可変領域が、配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含む、請求項２に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、請求項１に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項５】
配列番号：２で表されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含むか、または配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項４に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項６】
配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項７】
配列番号：１で表されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、請求項６に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項８】
（ａ）前記抗体がヒト化されており、（ｉ）前記ＶＨ領域が好ましくは配列番号：９で表されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＬ領域が好ましくは配列番号：１０または１１で表されるアミノ酸配列を含むか、または（ｉｉ）前記ＶＨ領域が好ましくは配列番号：２２６で表されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＬ領域が好ましくは配列番号：２２７で表されるアミノ酸配列を含むか；あるいは
（ｂ）前記抗体が、単鎖抗体、ＳｃＦｖ、ヒンジ領域を欠く一価抗体、およびミニボディからなる群より選択されるか；あるいは
（ｃ）前記抗体が、ＦａｂまたはＦａｂ’フラグメントであるか；あるいは
（ｄ）前記抗体が、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントであるか；あるいは
（ｅ）前記抗体が、全抗体であるか；あるいは
（ｆ）ヒトＩｇＧ定常ドメインを含み、前記ＩｇＧ定常ドメインが、好ましくはＩｇＧ２  ＣＨ１ドメインを含むか、または前記ＩｇＧ定常ドメインが、好ましくはＩｇＧ２  Ｆｃ領域を含む、
請求項２に記載の単離抗体。
【請求項９】
ヒトＲＡＮＫＬへの結合に関して、請求項１に記載の抗体と競合する、単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
請求項２または請求項８に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメントをコード化する、単離ポリヌクレオチド、または前記単離ポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項１１】
請求項１０に記載のベクターを含む、単離宿主細胞。
【請求項１２】
生理的に許容され得る担体と、請求項２または請求項８に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメントとを含む、組成物。
【請求項１３】
患者における骨減少性障害の処置における使用のための、請求項１２に記載の組成物であって、前記骨減少性障害が、好ましくは、骨粗鬆症、歯周炎、癌関連骨転移、多発性骨髄腫、関節リウマチ、乾癬性関節炎、家族性膨張性骨溶解症、パジェット病、若年性パジェット病、破骨細胞腫、慢性ウィルス感染症ならびに成人性および小児性白血病に関連する骨喪失、ならびにプロテーゼ周囲の骨喪失からなる群より選択される、組成物。
【請求項１４】
ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
（Ｉ）（ｉ）配列番号：１１６で表されるＶＨＣＤＲ１領域と、配列番号：１４０で表されるＶＨＣＤＲ２領域と、配列番号：１５０で表されるＶＨＣＤＲ３領域とを含む重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号：１７１で表されるＶＬＣＤＲ１領域と、配列番号：１８０で表されるＶＬＣＤＲ２領域と、配列番号：２１２で表されるＶＬＣＤＲ３領域とを含む軽鎖可変領域とを含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメントであるか、あるいは前記ＣＤＲ領域における８個までのアミノ酸置換を除いて、（ｉ）および（ｉｉ）の重鎖可変領域および軽鎖可変領域と同一の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む前記抗体の改変体、またはその抗原結合フラグメントであるか；
（ＩＩ）配列番号：３９で表される重鎖可変領域を含み、好ましくは、配列番号：７８で表されるＶＬ領域に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域をさらに含むか、または、好ましくは、配列番号：７８で表される対応する軽鎖可変領域をさらに含むか；あるいは
（ＩＩＩ）配列番号：７８で表されるＶＬ領域を含む軽鎖可変領域を含み、好ましくは、配列番号：３９で表されるＶＨ領域に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域をさらに含むか、または、好ましくは、配列番号：３９で表される重鎖可変領域をさらに含む、
単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１５】
ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
（Ｉ）（ｉ）配列番号：１１５で表されるＶＨＣＤＲ１領域と、配列番号：１４５で表されるＶＨＣＤＲ２領域と、配列番号：１４８で表されるＶＨＣＤＲ３領域とを含む重鎖可変領域と、
（ｉｉ）配列番号：１７１で表されるＶＬＣＤＲ１領域と、配列番号：１８３で表されるＶＬＣＤＲ２領域と、配列番号：２２４で表されるＶＬＣＤＲ３領域とを含む軽鎖可変領域とを含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメントであるか、あるいは前記ＣＤＲ領域における８個までのアミノ酸置換を除いて、（ｉ）および（ｉｉ）の重鎖可変領域および軽鎖可変領域と同一の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む前記抗体の改変体、またはその抗原結合フラグメントであるか；
（ＩＩ）配列番号：５３で表される重鎖可変領域を含み、好ましくは、配列番号：９２で表されるＶＬ領域に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域をさらに含むか、または、好ましくは、配列番号：９２で表される対応する軽鎖可変領域をさらに含むか；あるいは
（ＩＩＩ）配列番号：９２で表されるＶＬ領域を含む軽鎖可変領域を含み、好ましくは、配列番号：５３で表されるＶＨ領域に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域をさらに含むか、または、好ましくは、配列番号：５３で表される対応する軽鎖可変領域をさらに含む、
単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
本発明のさらなる態様は、図１に示すＶＬ領域のいずれか１つを含む軽鎖可変領域を含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメントを提供する。この点に関し、そのような抗体は、図１に示すような対応ＶＨ領域に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域をさらに含んでもよく、または図１に示すような対応重鎖可変領域をさらに含んでもよい。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
（ｉ）配列番号：３で表されるＶＨＣＤＲ１領域と、配列番号：４で表されるＶＨＣＤＲ２領域と、配列番号：５で表されるＶＨＣＤＲ３領域とを含む重鎖可変領域と、（ｉｉ）配列番号：６または１５で表されるＶＬＣＤＲ１領域と、配列番号：７で表されるＶＬＣＤＲ２領域と、配列番号：８で表されるＶＬＣＤＲ３領域とを含む軽鎖可変領域とを含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメント、あるいは前記ＣＤＲ領域における８個までのアミノ酸置換を除いて、（ｉ）および（ｉｉ）の重鎖可変領域および軽鎖可変領域と同一の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む前記抗体の改変体、またはその抗原結合フラグメント。
（項目２）
前記重鎖可変領域が、配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含む、項目１に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目３）
前記軽鎖可変領域が、配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含む、項目１に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目４）
配列番号：１で表されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目５）
配列番号：２で表されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、項目４に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目６）
配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、項目４に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目７）
配列番号：２で表されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、ヒトＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目８）
配列番号：１で表されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、項目７に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目９）
前記抗体がヒト化されている、項目１に記載の単離抗体。
（項目１０）
（ａ）前記ＶＨ領域が配列番号：９で表されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＬ領域が配列番号：１０または１１で表されるアミノ酸配列を含む、または（ｂ）前記ＶＨ領域が配列番号：２２６で表されるアミノ酸配列を含み、前記ＶＬ領域が配列番号：２２７で表されるアミノ酸配列を含む、項目９に記載の単離抗体。
（項目１１）
前記抗体が、単鎖抗体、ＳｃＦｖ、ヒンジ領域を欠く一価抗体、およびミニボディからなる群より選択される、項目１に記載の単離抗体。
（項目１２）
前記抗体が、ＦａｂまたはＦａｂ’フラグメントである、項目１に記載の単離抗体。
（項目１３）
前記抗体が、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントである、項目１に記載の単離抗体。
（項目１４）
前記抗体が、全抗体である、項目１に記載の単離抗体。
（項目１５）
ヒトＩｇＧ定常ドメインを含む、項目１に記載の単離抗体。
（項目１６）
前記ＩｇＧ定常ドメインが、ＩｇＧ２  ＣＨ１ドメインを含む、項目１５に記載の単離抗体。
（項目１７）
前記ＩｇＧ定常ドメインが、ＩｇＧ２  Ｆｃ領域を含む、項目１５に記載の単離抗体。
（項目１８）
ヒトＲＡＮＫＬへの結合に関して、項目１に記載の抗体と競合する、単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目１９）
約０．１６ｎＭまたはそれ未満のＫＤでＲＡＮＫＬを結合する、単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目２０）
ａ．ＲＡＮＫＬのＲＡＮＫへの結合を妨害する、
ｂ．ＲＡＮＫＬ誘発破骨細胞分化を阻害する、
ｃ．破骨細胞活性を阻害する、
ｄ．骨喪失を阻害し、かつ骨密度を増やす、
ｅ．ヒト、げっ歯類およびサルのＲＡＮＫＬを結合し、かつそれを阻害する、または
ｆ．ａ．〜ｅ．のうちの任意の１つまたはそれより多くの組合わせを行う、
単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目２１）
項目１または項目１０に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメントをコード化する、単離ポリヌクレオチド。
（項目２２）
項目２１に記載の単離ポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
（項目２３）
項目２２に記載のベクターを含む、単離宿主細胞。
（項目２４）
生理的に許容され得る担体と、治療的有効量の項目１または項目１０に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメントとを含む、組成物。
（項目２５）
骨減少性障害にかかっている患者を処置するための方法であって、前記患者に、項目２４に記載の組成物を投与することにより、前記骨減少性障害を処置することを含む、方法。
（項目２６）
前記骨減少性障害が、骨粗鬆症、歯周炎、癌関連骨転移、多発性骨髄腫、関節リウマチ、乾癬性関節炎、家族性膨張性骨溶解症、パジェット病、若年性パジェット病、破骨細胞腫、慢性ウィルス感染症ならびに成人性および小児性白血病に関連する骨喪失、ならびにプロテーゼ周囲の骨喪失からなる群より選択される、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
（ｉ）図１に示すＶＨ領域のいずれか１つのＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、およびＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域と、（ｉｉ）図１に示す抗体のいずれか１つの対応ＶＬ領域のＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、およびＶＬＣＤＲ３領域を含む軽鎖可変領域とを含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメント、または前記ＣＤＲ領域における８個までのアミノ酸置換を除いて、（ｉ）および（ｉｉ）の重鎖可変領域および軽鎖可変領域と同一の重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む前記抗体の改変体、またはその抗原結合フラグメント。
（項目２８）
図１に示すＶＨ領域のいずれか１つを含む重鎖可変領域を含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目２９）
図１に示す対応ＶＬ領域に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域をさらに含む、項目２８に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目３０）
図１に示す対応軽鎖可変領域をさらに含む、項目２９に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目３１）
図１に示すＶＬ領域のいずれか１つを含む軽鎖可変領域を含む、ＲＡＮＫＬに結合する単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目３２）
図１に示す対応ＶＨ領域に対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域をさらに含む、項目３１に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。
（項目３３）
図１に示す対応重鎖可変領域をさらに含む、項目３１に記載の単離抗体またはその抗原結合フラグメント。