【手続補正書】
【提出日】平成29年2月16日(2017.2.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
肝臓がん治療を必要とする個体における肝臓がんを治療するための医薬であって、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を含む、医薬。
【請求項２】
図１１に示されるポリペプチドに対して少なくとも９０％の同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチドをコードするＳｐｐ１遺伝子を発現する細胞を含む肝臓がんを有する哺乳動物を治療的に処置するための医薬であって、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を含む、医薬。
【請求項３】
肝臓がんにおいて、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、ＳＰＰ１発現の減少をもたらす、請求項２に記載の医薬。
【請求項４】
哺乳動物はヒトである、請求項２又は３に記載の医薬。
【請求項５】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を含む、肝臓がんを有する個体を治療するための方法に使用するための医薬であって、前記方法は
（ａ）個体にＮｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与する工程、及び
（ｂ）Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達を決定する工程を含み、
治療前のＮｏｔｃｈ２シグナル伝達と比較した、治療後のＮｏｔｃｈ２シグナル伝達の減少が、個体における肝臓がんの減少を示している、医薬。
【請求項６】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達が、Ｎｏｔｃｈ２ ＩＣＤの核局在化を測定することによって、又はＮｏｔｃｈ２、Ｊａｇ１、Ｈｅｓ又はＨｅｙ１の発現を測定することによって決定される、請求項５に記載の医薬。
【請求項７】
肝臓がんを有する個体における血清ＳＰＰ１タンパク質レベルを減少させるための医薬であって、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤の有効量が個体に投与され、これにより個体における血清ＳＰＰ１濃度を減少させることを含む、医薬。
【請求項８】
個体にＮｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与する前の血清ＳＰＰ１タンパク質レベルが、少なくとも約８０ｎｇ／ｍｌであるか、又は約８０ｎｇ／ｍｌと約５００ｎｇ／ｍｌの間である、請求項７に記載の医薬。
【請求項９】
個体にＮｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与する前の血清ＳＰＰ１タンパク質レベルが、約８６ｎｇ／ｍｌと約２５０ｎｇ／ｍｌの間であるか、又は約１２０ｎｇ／ｍｌと約１７０ｎｇ／ｍｌの間である、請求項７に記載の医薬。
【請求項１０】
個体にＮｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与すると、８０ｎｇ／ｍｌ未満の血清ＳＰＰ１タンパク質レベルをもたらす、請求項７から９の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１１】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与する前の血清ＳＰＰ１タンパク質レベルが、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与する前２４時間に決定される、請求項７から９の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１２】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与する前の血清ＳＰＰ１タンパク質レベルが、酵素結合免疫吸着法により決定される、請求項７から１１の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１３】
血清ＳＰＰ１タンパク質レベルが、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を投与した後、約１ヶ月、２ヶ月、又は３ヶ月減少する、請求項７から１２の何れか一項に記載の医薬。
【請求項１４】
哺乳動物の肝臓がんを治療的に処置するための医薬であって、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達の増殖増強効果に少なくとも一部依存している腫瘍を、Ｎｏｔｃｈ２又はＪａｇ１に結合する抗体であるＮｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤と接触させ、それによって腫瘍を効果的に治療することを含む、医薬。
【請求項１５】
抗体の、がんに対する結合が、Ｎｏｔｃｈ２の増殖増強活性に拮抗する、請求項１４に記載の医薬。
【請求項１６】
肝臓がんを有する危険性にある個体における肝臓がんを予防するための医薬であって、抗Ｊａｇ１抗体であるＮｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を含む、医薬。
【請求項１７】
図８Ｃに示されるポリペプチドに対して少なくとも９０％のアミノ酸配列の同一性を有するタンパク質の増加した発現又は活性と関連した肝細胞増殖性疾患を治療するための医薬であって、抗Ｊａｇ１アンタゴニスト抗体であるＮｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤を含む、医薬。
【請求項１８】
細胞増殖性疾患ががんである、請求項１７に記載の医薬。
【請求項１９】
個体が、Ｂ型又はＣ型肝炎、肝硬変、良性肝腫瘍、血管腫、肝腺腫、及び限局性結節性過形成からなる群から選択される肝臓の状態を有する、請求項１６又は１７に記載の医薬。
【請求項２０】
分泌型ホスホプロテイン１（ＳＰＰ１）を発現する肝臓がん細胞の増殖を阻害するための医薬であって、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤と細胞を接触させ、それによって細胞の増殖を阻害することを含む、医薬。
【請求項２１】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が抗体であり、細胞と前記抗体接触させることが肝臓がん細胞においてＳＰＰ１発現を減少させる、請求項２０に記載の医薬。
【請求項２２】
ＳＰＰ１発現を、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％又は１００％減少させる、請求項２１に記載の医薬。
【請求項２３】
発現が、ＲＮＡｓｅｑ、マイクロアレイ分析、免疫組織化学、酵素結合免疫吸着法、遺伝子発現プロファイリング、ポリメラーゼ連鎖反応、ＳＡＧＥ、ＭａｓｓＡＲＲＡＹ技術、蛍光インサイツハイブリダイゼーション及びウェスタンブロッティングからなる群から選択される方法により決定される、請求項２１又は２２に記載の医薬。
【請求項２４】
細胞を抗体と接触させると、（ｉ）細胞によるＥｐＣＡＭ、ＡＦＰ、Ｐｒｏｍ１、Ｓｐｐ１、ＦｏｘＭ１、Ｐｌｋ１、ｃｃｎｂ１及びＡｕｒｋｂの少なくとも一の発現の減少をもたらすか、又は（ｉｉ）細胞によるＷｎｔ２、Ａｘｉｎ２及びＧｌｕｌの少なくとも一の発現の増加をもたらす、請求項２０から２３の何れか一項に記載の医薬。
【請求項２５】
細胞は個体中にある、請求項２０から２４の何れか一項に記載の医薬。
【請求項２６】
ＳＰＰ１タンパク質が、図１１に示されるアミノ酸配列を含む、請求項６から１３及び２０から２５の何れか一項に記載の医薬。
【請求項２７】
肝臓がんが、肝細胞がん、ヘパトーマ、胆管がん、肝芽腫、肝がん、肝血管肉腫、又は転移性肝臓がんである、請求項１から１４及び１７の何れか一項に記載の医薬。
【請求項２８】
肝臓がんが、ＥｐＣＡＭ、ＡＦＰ、Ｎｏｔｃｈ２、Ｊａｇ１、Ｓｏｘ９、ＣＫ１９、Ｒａｓ、Ｐｒｏｍ１、Ｓｐｐ１、ＦｏｘＭ１、Ｐｌｋ１、ｃｃｎｂ１、Ａｕｒｋｂ、Ｗｎｔ２、Ａｘｉｎ２、又はＧｌｕｌの少なくとも一を発現する細胞を含む、請求項１から１４、１８、及び２７の何れか一項に記載の医薬。
【請求項２９】
肝臓がんが、核Ｎｏｔｃｈ２を有する細胞を含むか、又は活性化Ｒａｓを有する細胞を含む；
肝臓がんが、ＥｐＣＡＭを発現する細胞を含み、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤の投与が、細胞におけるＥｐＣＡＭ発現の減少をもたらす；
肝臓がんが、ＡＦＰを発現する細胞を含み、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤の投与が、細胞におけるＡＦＰ発現の減少をもたらす；
肝臓がんにおいて、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤の投与が、阻害剤を投与する前の発現と比較して、Ｐｒｏｍ１、Ｓｐｐ１、ＦｏｘＭ１、Ｐｌｋ１、ｃｃｎｂ１及びＡｕｒｋｂの少なくとも一の発現の減少をもたらす；又は
肝臓がんにおいて、Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤の投与が、Ｗｎｔ２、Ａｘｉｎ２及びＧｌｕｌの少なくとも一の発現の増加をもたらす、請求項２８に記載の医薬。
【請求項３０】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、抗体、ｓｉＲＮＡ又は小分子阻害剤である、請求項１から１４、及び２０に記載の医薬。
【請求項３１】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、モノクローナル抗体及び／又はアンタゴニスト抗体である、請求項１から３０の何れか一項に記載の医薬。
【請求項３２】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、抗Ｎｏｔｃｈ２抗体であり、場合により抗Ｎｏｔｃｈ２ ＮＲＲ抗体である、請求項１から１４、及び１９から３０の何れか一項に記載の医薬。
【請求項３３】
抗体が、Ｎｏｔｃｈ２以外のＮｏｔｃｈファミリーメンバーには有意に結合せず、抗体が、マウスＮｏｔｃｈ２ ＮＲＲ及びヒトＮｏｔｃｈ２ ＮＲＲに結合するか、若しくは抗体が、Ｎｏｔｃｈ２ ＮＲＲに１０ｎＭ以下のＫｄで結合する、請求項３１に記載の医薬。
【請求項３４】
抗体が、
（ａ）配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｄ）配列番号９のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｅ）配列番号１４のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び
（ｆ）配列番号１９のコンセンサス配列に一致するアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３
を含む、請求項３０から３３の何れか一項に記載の医薬。
【請求項３５】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、抗Ｊａｇ１抗体である、請求項１から１４及び１９から３１の何れか一項に記載の医薬。
【請求項３６】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、
（ｉ）
（ａ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列番号８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｄ）配列番号８８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｅ）配列番号８９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び
（ｆ）配列番号９２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３
から選択される、少なくとも１、２、３、４、５、又は６つＨＶＲを含む抗体；
（ｉｉ）
（ａ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｄ）配列番号８８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｅ）配列番号８９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び
（ｆ）配列番号９０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３
を含む抗体；
（ｉｉｉ）
（ａ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列番号８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列番号８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｄ）配列番号８８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｅ）配列番号８９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び
（ｆ）配列番号９１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３
を含む抗体；又は
（ｉｖ）
（ａ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１；
（ｂ）配列番号８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２；
（ｃ）配列番号８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３；
（ｄ）配列番号８８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１；
（ｅ）配列番号８９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２；及び
（ｆ）配列番号９０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３
を含む抗体
である、請求項１から３１の何れか一項に記載の医薬。
【請求項３７】
抗体が、
（ｉ）図１８の、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８の軽鎖可変ドメインフレームワークのＬＣ−ＦＲ１、ＬＣ−ＦＲ２、ＬＣ−ＦＲ３、及びＬＣ−ＦＲ４のアミノ酸配列を順番に含む、軽鎖の可変ドメインフレームワークのＬＣ−ＦＲ１、ＬＣ−ＦＲ２、ＬＣ−ＦＲ３、及びＬＣ−ＦＲ４；
（ｉｉ）図１８の、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８の重鎖可変ドメインフレームワークのＨＣ−ＦＲ１、ＨＣ−ＦＲ２、ＨＣ−ＦＲ３、及びＨＣ−ＦＲ４のアミノ酸配列を順番に含む、重鎖の可変ドメインフレームワークのＨＣ−ＦＲ１、ＨＣ−ＦＲ２、ＨＣ−ＦＲ３、及びＨＣ−ＦＲ４；
（ｉｉｉ）図１９の、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８の軽鎖可変ドメインフレームワークのＬＣ−ＦＲ１、ＬＣ−ＦＲ２、ＬＣ−ＦＲ３、及びＬＣ−ＦＲ４のアミノ酸配列を順番に含む、軽鎖の可変ドメインフレームワークのＬＣ−ＦＲ１、ＬＣ−ＦＲ２、ＬＣ−ＦＲ３、及びＬＣ−ＦＲ４；又は
（ｉｖ）図１９の、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８の重鎖可変ドメインフレームワークのＨＣ−ＦＲ１、ＨＣ−ＦＲ２、ＨＣ−ＦＲ３、及びＨＣ−ＦＲ４のアミノ酸配列を順番に含む、重鎖の可変ドメインフレームワークのＨＣ−ＦＲ１、ＨＣ−ＦＲ２、ＨＣ−ＦＲ３、及びＨＣ−ＦＲ４を更に含む、請求項３６に記載の医薬。
【請求項３８】
抗体が、
（ａ）配列番号９３のアミノ酸配列に対して、少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｂ）配列番号９６のアミノ酸配列に対して、少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；
（ｃ）（ａ）に記載のＶＨ配列及び（ｂ）に記載のＶＬ配列；
（ｄ）配列番号９４のアミノ酸配列に対して、少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｅ）配列番号９７のアミノ酸配列に対して、少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；
（ｆ）（ｄ）に記載のＶＨ配列及び（ｅ）に記載のＶＬ配列；
（ｇ）配列番号９５のアミノ酸配列に対して、少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＨ配列；
（ｈ）配列番号９８のアミノ酸配列に対して、少なくとも９５％の配列同一性を有するＶＬ配列；又は
（ｉ）（ｇ）に記載のＶＨ配列及び（ｈ）に記載のＶＬ配列
を含む、Ｊａｇ１に結合する単離された抗体である、請求項１から３１及び３５から３７の何れか一項に記載の医薬。
【請求項３９】
抗体が、
（ｉ）配列番号９３のＶＨ配列及び／又は配列番号９６のＶＬ配列；
（ｉｉ）配列番号９４のＶＨ配列及び／又は配列番号９７のＶＬ配列；又は
（ｉｉｉ）配列番号９５のＶＨ配列及び／又は配列番号９８のＶＬ配列を含む、請求項３８に記載の医薬。
【請求項４０】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、
完全長ＩｇＧ１又ｇはＩｇＧ２ａ抗体であるか、
抗体断片であるか、
ヒト、ヒト化、又はキメラ抗体であるか、
増殖阻害剤にコンジュゲートされているか、又は
細胞傷害性薬剤にコンジュゲートされており、任意に毒素、抗生物質、放射性同位体又は核酸分解酵素である、
請求項１から３９の何れか一項に記載の医薬。
【請求項４１】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が細菌で産生されるか、又はＣＨＯ細胞で産生される抗体である、請求項１から４０の何れか一項に記載の医薬。
【請求項４２】
Ｎｏｔｃｈ２シグナル伝達阻害剤が、がん細胞死を引き起こす抗体である、請求項１から４１の何れか一項に記載の医薬。
【請求項４３】
少なくとも一の付加的な治療剤を更に含み、場合により付加的な治療剤が化学療法剤又は抗体である、請求項１から４２の何れか一項に記載の医薬。
【請求項４４】
付加的な治療剤が抗Ｎｏｔｃｈ２アンタゴニスト抗体である、請求項４３に記載の医薬。
【請求項４５】
Ｎｏｔｃｈ２又はＪａｇ１に対する抗体を用いて、哺乳動物の肝臓がん細胞を治療するための薬剤を含む、細胞の増殖を阻害するための医薬。
【請求項４６】
細胞が、ヒトにあるか、又は培地中にある、請求項４５に記載の医薬。
【請求項４７】
（ａ）容器；（ｂ）肝臓がんの治療のための抗Ｎｏｔｃｈ２抗体又は抗Ｊａｇ１抗体及び担体を含む、容器内に含まれる組成物；及び（ｃ）肝臓がんの治療的処置又は診断的検出のための組成物の使用に言及する、容器に貼付されたラベル又は容器と共に含まれる添付文書を含む製造品。
【請求項４８】
肝臓がん又は肝細胞増殖性疾患の治療のための医薬の調製における、請求項４７に記載される製造品の使用。