【手続補正書】
【提出日】平成29年7月14日(2017.7.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
中枢神経系画像診断を必要とする対象を鑑別するための方法であって：
前記対象からの生体試料をに於ける、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）、及び、神経特異エノラーゼ（ＮＳＥ）又はメタロチオネイン３（ＭＴ３）から成る群から選択されるタンパク質バイオマーカーのレベルを、該試料を該バイオマーカーと特異的に結合する抗体と接触させることによって検出し、及び、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）又は質量分析法によって対照に対する該バイオマーカーのレベルを測定し、前記のバイオマーカーのうち少なくとも１つのレベルが事前に定める閾値を上回るかまたは下回るかにより中枢神経系（ＣＮＳ）画像診断を必要とする対象を鑑別する、
ことを含む前記方法。
【請求項２】
中枢神経系画像診断がコンピューター断層撮影（ＣＴ）スキャンである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
外傷性脳損傷（ＴＢＩ）又は又は頭蓋内出血（ＩＣＨ）を有する対象を鑑別するための方法であって：
前記対象からの生体試料をに於ける、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）、及び、神経特異エノラーゼ（ＮＳＥ）又はメタロチオネイン３（ＭＴ３）から成る群から選択されるタンパク質バイオマーカーのレベルを、該試料を該バイオマーカーと特異的に結合する抗体と接触させることによって検出し、及び、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）又は質量分析法によって対照に対する該バイオマーカーのレベルを測定し、前記のバイオマーカーのうち少なくとも１つのレベルが事前に定める閾値を上回るかまたは下回るかにより外傷性脳損傷（ＴＢＩ）又は又は頭蓋内出血（ＩＣＨ）を有する対象を鑑別する、
ことを含む前記方法。
【請求項４】
前記バイオマーカーの少なくとも一つが、メチル化、シトルリン化、グリコシル化、アセチル化、又はリン酸化されている、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ＢＤＮＦ、ＧＦＡＰ及びＭＴ３；又は、ＢＤＮＦ、ＧＦＡＰ及びＮＳＥを含む複数のバイオマーカーが検出される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の方法であって、前記生体試料が血液、血漿、血清または脳脊髄液（ＣＳＦ）からなる群から選択される、前記方法。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載の方法であって、前記バイオマーカーと特異的に結合する抗体が該抗体の抗原結合フラグメントである前記方法。
【請求項８】
固形基材、および前記基材上に固定された複数の結合物質を含む組成物であって、前記結合物質のそれぞれが前記基材上の相異なる、指標となることのできる位置に固定されかつ前記結合物質が複数のバイオマーカーと特異的に結合する前記組成物であって、前記複数のバイオマーカーがＧＦＡＰ、Ｓ１００Ｂ、ＭＴ３、ＮＳＥ、およびＩＣＡＭ５からの少なくとも二つを含む前記組成物。
【請求項９】
請求項８に記載の組成物であって、前記複数のバイオマーカーがさらに脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）を含む前記組成物。
【請求項１０】
請求項８に記載の組成物であって、前記結合物質が検出可能な構成部分で標識される前記組成物。
【請求項１１】
請求項１０に記載の組成物であって、前記検出可能な構成部分が発光物質、化学発光物質、放射性同位元素、比色物質；および酵素−基質物質からなる群から選択される前記組成物。
【請求項１２】
請求項８〜１１のいずれか一項に記載の組成物であって、前記結合物質が前記バイオマーカーに特異的な抗体またはその抗原結合フラグメントを含む前記組成物。
【請求項１３】
対象が外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を有すると鑑別するための方法であって：
ａ．前記対象から入手した生体試料をＢＤＮＦと選択的に結合する結合物質と結合物質−ＢＤＮＦ複合体を形成するのに十分な時間接触させる段階；
ｂ．前記結合物質−ＢＤＮＦ複合体を検出することにより、前記生体試料中のＢＤＮＦの発現レベルを測定する段階；および
ｃ．対照と比較した前記の測定されたＢＤＮＦレベルに基づいて前記患者がＴＢＩを有すると鑑別する段階を含む前記方法。
【請求項１４】
請求項１３に記載の方法であって、受信者動作特性曲線下面積分析を用いて前記患者がＴＢＩを有すると鑑別する前記方法。
【請求項１５】
請求項１３に記載の方法であって、ロジスティック回帰モデルを用いて前記患者がＴＢＩを有すると鑑別する前記方法。
【請求項１６】
患者がＴＢＩを有すると鑑別するための方法であって：
ａ．前記患者から入手した生体試料を固形基材および前記基材上に固定された複数の結合物質を含む組成物と接触させる段階であって、前記結合物質のそれぞれが相異なる、指標となりうる前記基材上の位置に固定されかつ前記結合物質が複数のタンパク質バイオマーカーと特異的に結合する前記段階であって、前記複数のバイオマーカーが脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）とニューログラニン（ＮＲＧＮ）、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）、ＰＡＤ−２、チューブリンβ−４Ｂ鎖、チューブリンα−１Ｂ鎖、ＣＮＰアーゼ、ＰＰＩＡ、セプチン−７、伸長因子１−α２、ＴＰＰＰ、ＴＰＰＰ３、エルミンアイソフォーム２、ＮＤＲＧ２アイソフォーム２、アストロタクチン１（ＡＳＴＮ１）、脳血管新生阻害物質３（ＢＡＩ３）；カルノシンジペプチダーゼ１（ＣＮＤＰ１）；ＥＲＭＩＮ；グルタミン酸受容体３（ＧＲＭ３）；ケルヒ様タンパク質３２（ＫＬＨ３２）；メラノーマ抗原ファミリーＥ，２（ＭＡＧＥ２）；ニューレグリン３（ＮＲＧ３）；オリゴデンドロサイトミエリン糖タンパク質（ＯＭＧ）；溶質輸送体ファミリー３９（亜鉛輸送体）；レティキュロン１（ＲＴＮ１）；およびペプチジルアルギニンデイミナーゼ（１〜４及び６型）（ＰＡＤ）のうち１つまたはそれ以上を含む前記段階；
ｂ．前記複数の結合物質の前記複数のバイオマーカーとの結合を検出することにより、前記生体試料中の前記複数のバイオマーカーの前記発現レベルを決定する段階；および
ｃ．前記生体試料中の前記複数のバイオマーカーの前記発現レベルを事前に定める閾値と比較する段階であって、前記複数のバイオマーカーのうち少なくとも１つの前記の事前に定める閾値を上回るかまたは下回る発現レベルが患者がＴＢＩを有することを示す前記段階、を含む前記方法。
【請求項１７】
患者のＴＢＩを鑑別するための方法であって：
ａ．質量分析法または酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて前記患者から採取した生体試料中のパネルバイオマーカーのレベルを測定する段階であって、前記バイオマーカーのパネルが脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、そのアイソフォーム、その翻訳後修飾型、または前述のいずれかの組み合わせを含む前記段階；および
ｂ．前記のバイオマーカーのパネルの前記レベルをＴＢＩを有する患者と相関する同じバイオマーカーのパネルの事前に定義するレベルおよびＴＢＩのない患者と相関する同じバイオマーカーのパネルの事前に定義するレベルと比較する段階であって、前記の事前に定義するレベルの１つとの相関が前記患者のＴＢＩの鑑別を提供する前記段階を含む前記方法。
【請求項１８】
患者の短期的及び長期的脳振盪後症状及びＴＢＩ後の障害を予測するための方法であって：
ａ．質量分析法または酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて前記患者から採取した生体試料中のパネルバイオマーカーのレベルを測定する段階であって、前記バイオマーカーのパネルが脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、そのアイソフォーム、その翻訳後修飾型、または前述のいずれかの組み合わせを含む前記段階；および
ｂ．前記のバイオマーカーのパネルの前記レベルを持続性の脳振盪後症状を有する患者と相関する同じバイオマーカーのパネルの事前に定義するレベル、障害を有する患者と相関する同じバイオマーカーのパネルの事前に定義するレベル、脳振盪後症状のない患者と相関する同じバイオマーカーのパネルの事前に定義するレベル、および障害のない患者と相関する同じバイオマーカーのパネルの事前に定義するレベルと比較する段階であって、前記事前に定義するレベルの１つとの相関が前記患者の脳振盪後症状及びＴＢＩ後の障害の予測を提供する前記段階を含む前記方法。
【請求項１９】
ａ．外傷性脳損傷を有することが疑われるヒト患者に由来する生体試料内の複数のバイオマーカーと特異的に結合することのできる複数のバイオマーカー結合物質であって、前記バイオマーカーがＧＦＡＰ、Ｓ１００Ｂ、ＭＴ３、ＮＳＥ、ＩＣＡＭ５およびＢＤＮＦから少なくとも二つを含む前記複数のバイオマーカー結合物質；および
ｂ．前記結合物質の前記バイオマーカーとの結合を示すことのできる検出試薬または検出装置を含むキット。
【請求項２０】
前記結合物質が前記バイオマーカーに特異的な抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、請求項１９記載のキット。