(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
0003544223.tif 000029
〔式中、Ｒ１は、
（ｉ）水素原子であるか、又は、
（ｉｉ）水酸基であるか、又は、
（ｉｉｉ）炭素数１〜３のアルキルオキシであるか、又は、
（ｉｖ）アリール又は炭素数１〜５のアルキル
（ｖ）炭素数１〜６の鎖状もしくは環状のアルキルを置換基として有し、又は有しないアミノであり、
Ｒ２およびＲ５は、それぞれ、
（ｉ）水素原子であるか、又は、
（ｉｉ）水酸基であるか、又は、
（ｉｉｉ）ハロゲンであり、
Ｒ３はβ−Ｄ−グルコピラノシルオキシであり、
Ｒ４は、
（ｉ）水素原子であるか、又は、
（ｉｉ）水酸基であるか、又は、
（ｉｉｉ）炭素数１〜５のアルキルオキシであるか、又は、
（ｉｖ）脂肪族又は芳香族のアシルオキシである。
但し、式中、
１）７位及び８位の炭素原子に結合する水素原子の配位はシス又はトランスであり、
２）Ｒ２又はＲ５が水酸基である場合は、その水酸基の酸素原子は９位カルボニル炭素原子と共にラクトンを形成してもよい。〕で表されるシンナモイル型化学構造を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする発毛・育毛促進剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【技術分野】
本発明は、前記一般式（Ｉ）で表わされるシンナモイル型化学構造を有する化合物を有効成分として含有する発毛・育毛促進剤に関するものである。
【０００２】
【背景技術】
脱毛症の原因としては、栄養摂取のアンバランス、ふけの過剰発生による頭皮の生理機能の低下、末梢血管の血流量の減少による毛乳頭部位への血液供給不足による新陳代謝の低下、皮脂線及び毛包、毛根部における男性ホルモンの関与による毛包機能の低下、精神的ストレス等が知られており、さまざまな薬剤が脱毛症等の治療に用いられている。例えば、抗アンドロジェン作用を示すエチニルエストラジオール、末梢の血管血流促進作用を示すビタミンＥ、センブリエキス、ニンジンエキス、セファランチン等、局所刺激作用を示すトウガラシチンキ、ハッカ油、１−メントール等が挙げられるが、いまだ満足すべきものがないのが現状である。
【０００３】
本発明者は、先に、トリカブトの根より得られる非アコニチン型アルカロイド成分を含有する画分に顕著な発毛・育毛促進作用のあることを見出した（特開平５−２５５０９９号）。その後、トリカブトの根を加熱処理して毒性を減らした加工ブシに含有されている非アコニチン型アルカロイド成分より一物質を単離し、その化学構造を決定した。さらに、その化学構造に基づき種々誘導体を合成して検討を重ねた結果、前記の一般式（Ｉ）で表わされるシンナモイル型化学構造を有する化合物が発毛・育毛促進作用を有することを見出した。本発明は、かかる知見に基づくものである。
【０００４】
【発明の開示】
本発明は一般式（Ｉ）
【化２】
0003544223.tif 000002
〔式中、Ｒ１は、
（ｉ）  水素原子であるか、又は、
（ｉｉ）水酸基であるか、又は、
（ｉｉｉ）炭素数１〜３のアルキルオキシであるか、又は、
（ｉｖ）アリール又は炭素数１〜５のアルキル
（ｖ）炭素数１〜６の鎖状もしくは環状のアルキルを置換基として有し、又は
有しないアミノであり、
【０００５】
Ｒ２及びＲ５は、それぞれ、
（ｉ）  水素原子であるか、又は、
（ｉｉ）水酸基であるか、又は、
（ｉｉｉ）ハロゲンであり、
【０００６】
Ｒ３はβ−Ｄ−グルコピラノシルオキシであり、
【０００７】
Ｒ４は、
（ｉ）  水素原子であるか、又は、
（ｉｉ）水酸基であるか、又は、
（ｉｉｉ）炭素数１〜５のアルキルオキシであるか、又は、
（ｉｖ）脂肪族又は芳香族のアシルオキシである。
【０００８】
但し、式中、
１）  ７位及び８位の炭素原子に結合する水素原子の配位はシス又はトランスであり、
２）  Ｒ２又はＲ５が水酸基である場合は、その水酸基の酸素原子は９位カルボニル炭素原子と共にラクトンを形成してもよい。〕で表わされるシンナモイル型化学構造を有する化合物を有効成分として含有することを特徴とする発毛・育毛促進剤を提供するものである。
【０００９】
一般式（Ｉ）で表わされる化合物は、相当する置換基を有するベンズアルデヒド型化合物と下記式（ＩＩ）で表わされる化合物の縮合反応を行うことにより得ることができる。この縮合反応では、触媒として弱塩基、例えば溶融酢酸カリウムあるいは溶融酢酸ナトリウム等を用い、適当な温度条件下で行うことができる。例えば、相当する置換基を有するベンズアルデヒド型化合物を無水酢酸に溶解し、これに触媒として溶融酢酸カリウムを加え、加熱することにより、相当する置換基を有するシンナモイル型化学構造を有する化合物を得ることができる。
【００１０】
前記の相当する置換基を有するベンズアルデヒド型化合物は、市販品を用いることができる他、ベンズアルデヒドのｐ−位、ｍ−位あるいはｏ−位に水酸基を有する市販のベンズアルデヒド型化合物を出発物質として、通常化学反応で用いられるアルキル化反応、アシル化反応、グルコシル化反応等を行うことにより得ることができる。
【００１１】
又、一般式（Ｉ）で表わされる化合物は、前述の縮合反応で得られるシンナモイル型化学構造を有する化合物を出発物質として、あるいは市販のケイヒ酸、ｐ−クマル酸又はｏ−クマル酸及びそれらの誘導体を出発物質として、通常化学反応で用いられるアルキル化反応、アシル化反応、グルコシル化反応、エステル化反応又はアミド化反応を行うことにより得ることができる。
【００１２】
一般式（ＩＩ）
【化３】
0003544223.tif 000003
〔式中、Ｒは、
水素原子又はアルキル又はアリール又はアルコキシ又はアリールオキシ又は
アシルオキシである〕
【００１３】
前記のアルキル化反応は、相当する化合物、例えばｐ−クマル酸あるいはｍ−ヒドロキシベンズアルデヒドを適当な溶媒、例えばテトラヒドロフランに溶解し、適当な温度、例えば−６０℃にて、ｎ−ブチルリチウムを加えた後、ハロゲン化アルキル、例えばヨウ化エチルを加え撹拌することにより行うことができる。
【００１４】
前記のアシル化反応は、相当する化合物、例えばｐ−クマル酸あるいはｍ−ヒドロキシベンズアルデヒドを適当な溶媒、例えばピリジンに溶解し、アシル化剤、例えば酸塩化物あるいは酸無水物を加え、適当な温度、例えば室温にて撹拌することにより行うことができる。
【００１５】
前記のグルコシル化反応は、相当する化合物、例えばｐ−クマル酸を適当な溶媒、例えばメタノールに溶解し、ジアゾメタン／エーテル溶液を加え、カルボン酸をメチルエステルとした後、このものを適当な溶媒、例えばジクロロメタンに溶解し、これにグルコース誘導体、例えば２，３，４，６−０−テトラベンゾイルジフェニルフォスフォリルグルコシドを加え、さらに触媒として、例えばテトラメチルウレア及びトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリルを加え、適当な温度、例えば室温にて撹拌し、得られた化合物をメタノールに溶解した後、これにアルカリ、例えば１０％水酸化ナトリウム水溶液を加え、加熱還流することにより行うことができる。
【００１６】
前記のエステル化反応の中で、カルボン酸のエステル化反応は、硫酸等を用いた酸性条件下にて、相当する化合物、例えばケイヒ酸に任意のアルコールを加え、撹拌することにより行うことができる。又、相当する化合物、例えばｐ−クマル酸を塩化チオニル、三塩化リンあるいは五塩化リン等の塩化物と反応させ、構造式中のカルボン酸を酸塩化物とした後、任意のアルコールを加え、撹拌することによりエステル化反応を行うことができる。又、相当する化合物に適当なアルカリ、例えば水酸化ナトリウムを加え、カルボン酸を塩とした後、このものにハロゲン化アルキルを加え、撹拌することにより、カルボン酸のエステル化反応を行うことができる。
【００１７】
前記のエステル化反応の中で、水酸基のエステル化反応は、前述のアシル化反応と同様の操作で行うことができる。
【００１８】
前記のアミド化反応は、相当する化合物、例えばｐ−クマル酸を適当な溶媒、例えば無水エーテルに溶解し、塩化チオニルを加え撹拌し、構造式中のカルボン酸を酸塩化物とした後、このものを適当な溶媒中、例えばクロロホルム中にて、任意のアミン化合物、例えばアンモニア水、メチルアミンあるいはジメチルアミン等を加え、適当な温度条件下にて撹拌することにより行うことができる。
【００１９】
又、前記一般式（Ｉ）で表わされるシンナモイル型化学構造を有する化合物は、前述の有機合成による手法の他、トリカブト属植物の塊根を加熱処理して毒性を減らした加工ブシ、炮附子あるいは修治附子から分離・精製し、単離することができる。例えば、加工ブシ末（三和生薬製）の５０％エタノールエキスを、ポリアミドカラム及びシリカゲルカラムを用いて、分離・精製することにより、ｐ−グルコピラノシルオキシケイヒ酸を得ることができる。さらに、この分離・精製過程の分画エキスは、一般式（Ｉ）で表わされる化合物を高濃度で含むものである。このものは、本発明の発毛・育毛促進剤の有効成分として用いることができる。
【００２０】
前記の式（Ｉ）で表わされるシンナモイル型化学構造を有する化合物は、本発明に係る発毛・育毛促進剤の有効成分として、原体のまま、あるいは適当な基剤を使用して、その基剤に対し希釈して使用することができる。又、トリカブトの根を加熱処理して毒性を減らした加工ブシ、炮附子あるいは修治附子から得られる画分で、上記式（Ｉ）の構造を有する化合物を含むものを有効成分として用いることができる。この発毛・育毛促進剤の基剤としては、化粧品、医薬品等の業界で通常用いられる任意所要の担体、乳化剤、懸濁化剤、芳香剤等の添加剤が用いられ、慣用の方法で製剤化する。
【００２１】
これらの材料の例としては、オレイン酸、トリエタノールアミン、サラシミツロウ、セチルアルコール、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリン、アルギン酸ナトリウム、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ベントナイト、ワセリン、流動パラフィン、アルコール及びそのエステル、例えば、エタノール、プロピレングリコール、セトステアリルアルコール、ソルビタンモノステアレート等があげられ、剤形は、ヘヤートニック、ヘヤークリーム、ヘヤーローション、ヘヤーシャンプー等、その他種々の形で提供することができる。又、軟膏用組成物、あるいは硬膏用組成物の形でも提供することができる。これら各製剤は周知の製剤用担体、例えば、ワセリン、パラフィン、加水ラノリン、プラスチベース、親水ワセリン、マクロゴール類、ロウ、樹脂、精製ラノリン、ゴム類を含有していてもよい。
【００２２】
これ等外用剤に含有させる前記の式（Ｉ）の化合物の含量は約０．００５〜１％、好ましくは０．０１〜０．５％である。
【００２３】
以下に、本発明に用いる前記の式（Ｉ）の化合物の製造実施例、薬理作用試験、安全性試験及び処方例について述べる。尚、以下の表中の化合物Ｎｏ．とその化合物名の対照表を表１に示す。
【００２４】
【実施例】
〔実施例１〕
加工ブシ１ｋｇに５０％エタノール５１を加えて３０分間加熱還流抽出し、冷後ろ過する。ろ液を減圧下濃縮乾固し、抽出エキス３００ｇを得る。これを水３００ｍｌに懸濁し、ポリアミド（３００ｇ）を充填したカラムに付す。カラムを水３１にて洗浄後、４０％エタノール２１にて溶出する。この溶出液を減圧下濃縮乾固し、残留物（９．０ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（５００ｇ）に対し、クロロホルム／メタノール／水混液（６０：３５：４）２．５１にて洗浄後、クロロホルム／メタール／水混液（６０：３５：７）にて溶出する。溶出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物を分取用シリカゲル薄層クロマトグラフィー（分離液：クロロホルム／メタノール／水＝６：４：１）により繰り返し精製し、ｐ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシケイヒ酸２０ｍｇを得る。
【００２５】
〔実施例２〕
グルコース２ｇにピリジン１０ｍｌ及び塩化ベンゾイル１０ｇを加え、室温にて１時間攪拌する。反応液中の析出物を分取し、メタノールから再結晶し、ヘキサ−Ｏ−ベンゾイルグルコシド６．４ｇを得る。ヘキサ−Ｏ−ベンゾイルコシド６．４ｇを無水ベンゼン４０ｍｌに溶解し、これにチオフェノール１ｍｌ及び塩化第二スズ１ｍｌを加え、室温にて２時間撹拌する。反応液中の折出物を分取した後、ベンゼンにて洗浄し、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンゾイルフェニルチオグルコシド５．８ｇを得る。
【００２６】
次に、このものをテトラヒドロフラン／水混液（８５：１５）７０ｍｌこ溶解し、これに酸化第二水銀７．３２ｇ及び三フッ化ホウ素ジエチルエーテル４．３２ｍｌを加え、６０℃にて１２時間還流する。反応溶液をろ過し、ろ液を減圧下濃縮乾固する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（８０ｇ，ベンゼン／酢酸エチル＝９０：１０→８５：１５）にて分離・精製し、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンゾイルグルコース２．５４３ｇを得る。次に、このものを無水テトラヒドロフラン７０ｍｌに溶解し、これにｎ−ブチルリチウム５．８８ｍｌ及びジフェニルフォスフォリルクロリド１．８６ｍｌを加え、窒素気流下−６０℃にて２０分間撹拌する。反応溶液に水５０ｍｌを加えた後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（８０ｇ，ベンゼン／酢酸エチル＝９２：８）にて分離・精製し、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンゾイルジフェニルフォスフォリルグルコシド２．１８ｇを得る。
【００２７】
次に、市販のｐ−クマル酸５１０ｍｇをメタノール１０ｍｌに溶解する。別に、ｐ−トルエンスルホニル−Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロソアミドに１０％水酸化カリウム水溶液を加えて加熱したときに発生するジアゾメタンを、エーテル中に通過させ、ジアゾメタン／エーテル溶液を得る。このジアゾメタン／エーテル溶液を前述のｐ−クマル酸のメタノール溶液に、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１０：１）にて確認しながら適当量を加え、ｐ−クマル酸メチルエステル４５０ｍｇを得る。
【００２８】
ｐ−クマル酸メチルエステル１３９ｍｇと先に得られた２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンゾイルジフェニルフォスフォリルグルコシド５８８ｍｇを無水ジクロロメタン３０ｍｌに溶解した後、これにテトラメチル尿素０．１９ｍｌ及びトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル０．９３ｍｌを加え、室温にて１時間撹拌する。反応溶液に水５０ｍｌを加え、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（７５ｇ，ベンゼン／酢酸エチル＝９６：４）にて分離・精製し、ｐ−クマル酸メチルエステルの配糖体７５ｍｇを得る。このものに１０％水酸化ナトリウム／メタノール溶液５ｍｌを加え、２０分間加熱還流した後、反応溶液を減圧下濃縮乾固する。残留物に１Ｎ塩酸３０ｍｌを加えた後、ｎ−ブタノール３０ｍｌにて抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール／水混液＝６：５：１．５）にて分離・精製し、ｐ−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシケイヒ酸２１ｍｇを得る。
【００２９】
〔実施例３〕
ｏ−ヒドロキシベンズアルデヒド１．２ｇ及び酢酸ナトリウム０．８２ｇを無水酢酸１０ｍｌに溶解し，１４０℃にて８時間加熱還流する。反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸で酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、クロロホルムにて洗浄した後、クロロホルム／メタノール混液（９５：５）にて溶出し、ｏ−アセチルオキシクマル酸３１５ｍｇを得る。ｏ−アセチルオキシクマル酸３１５ｍｇを１０％水酸化ナトリウム／メタノール溶液５ｍｌに溶解し、２０分間加熱還流する。反応溶液を減圧下濃縮乾固し、残留物に１Ｎ塩酸３０ｍｌを加えた後、ｎ−ブタノール３０ｍｌにて抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９５：５）にて分離・精製し、ｏ−クマル酸２６８ｍｇを得る。
【００３０】
〔実施例４〕
ｍ−ヒドロキシベンズアルデヒド１．０ｇを無水酢酸１ｍｌに溶解し、これにトリエルアミン１ｍｌを加え、１４０℃にて１．５時間加熱還流する。反応終了後、反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸で酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９０：１０）にて分離・精製し、ｍ−ヒドロキシケイヒ酸３６７ｍｇを得る。
【００３１】
〔実施例５〕
ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド１．２２ｇ及び酢酸ナトリウム０．８２ｇを無水酢酸１０ｍｌに溶解し、１４０℃にて８時間加熱還流する。反応終了後、反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸で酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９０：１０）にて分離・精製し、ｐ−クマル酸３２５ｍｇを得る。
【００３２】
〔実施例６〕
実施例３のｏ−ヒドロキシベンズアルデヒドの代わりに、４−ヒドロキシ−３−メトキシベンズアルデヒド１．０ｇを用いて、他は実施例３と同様に操作し、４−ヒドロキシ−３−メトキシケイヒ酸４３５ｍｇを得る。
【００３３】
〔実施例７〕
トランス−ｐ−クマル酸３０ｍｇをアセトン３ｍｌに溶解し、室温にて２時間紫外線を照射した後、減圧下濃縮乾固する。残留物を分取用シリカゲル薄層クロマトグラフィー（分離液：クロロホルム／メタノール混液＝５：１）にて分離・精製し、シス−４−ヒドロキシケイヒ酸１７ｍｇを得る。
【００３４】
〔実施例８〕
ベンズアルデヒド１．０ｇを無水酢酸１ｍｌに溶解し、これにトリメチルアミン１ｍ１を加え、１４０℃にて１．５時間加熱還流する。反応終了後、反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸で酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９０：１０）にて分離・精製し、ケイヒ酸４０２ｍｇを得る。
【００３５】
〔実施例９〕
ｐ−クマル酸３０ｍｇをメタノール３ｍｌに溶解する。別に、ｐ−トルエンスルホニル−Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロソアミドに１０％水酸化カリウム水溶液を加えて加熱した時に発生するジアゾメタンを、エーテル中に通過させ、ジアゾメタン／エーテル溶液を得る。このジアゾメタン／エーテル溶液を前述のｐ−クマル酸のメタノール溶液に、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１０：１）にて確認しながら適当量加えた後、減圧下濃縮乾固する。残留物を分取用シリカゲル薄層クロマトグラフィー（分離液：クロロホルム／メタノール混液＝１０：１）にて分離・精製し、ｐ−クマル酸メチルエステル２７ｍｇを得る。
【００３６】
〔実施例１０〕
ｐ−クマル酸１６４ｍｇを無水エーテル２０ｍｌに溶解する。この溶液にジメチルホルムアミド０．１ｍｌ及び塩化チオニル０．５ｍｌを加えた後、室温にて２時間撹拌する。反溶液を減圧下濃縮乾固し，残留物をｎ−プロパノール５ｍｌに溶解した後、室温にて１０分間撹拌する。反応溶液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／酢酸エチル混液＝２：３）にて分離・精製し、ｐ−クマル酸−ｎ−プロピルエステル１３５ｍｇを得る。
【００３７】
〔実施例１１〕
ｐ−アニスアルデヒド１．０ｇ及び酢酸ナトリウム０．７０ｇを無水酢酸１０ｍｌに溶解し、１４０℃にて８時間加熱還流する。反応終了後、反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸で酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９０：１０）にて分離・精製し、４−メトキシケイヒ酸４３６ｍｇを得る。
【００３８】
〔実施例１２〕
ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド１．２ｇをアセトン２０ｍｌに溶解した後、炭酸カリウム２．５ｇ及び臭化エチル２．２ｇを加え、１５時間加熱還流する。反応溶液を冷後ろ過し、ろ液を減圧下濃縮乾固する。残留物をエーテルより再結晶し、４−エトキシベンズアルデヒド０．８２ｇを得る。このものに酢酸ナトリウム０．５４ｇを加え、無水酢酸１０ｍｌに溶解した後、１４０℃にて８時間加熱還流する。反応終了後、反応液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸で酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９０：１０）にて分離・精製し、４−エトキシケイヒ酸３２０ｍｇを得る。
【００３９】
〔実施例１３〕
ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド１．２ｇをジメチルスルフォキシド１５ｍｌに溶解した後、０℃にて水素化ナトリウム２６５ｍｇを加え、この温度条件下にて３０分間撹拌する。この反応溶液に、室温にてヨウ化ｎ−アミル２．２ｇを加え、５時間撹拌する。反応溶液を水５０ｍｌ中に注いだ後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）にて分離・精製し、４−アミロキシベンズアルデヒド５００ｍｇを得る。このものに酢酸ナトリウム３５０ｍｇを加え、無水酢酸１０ｍｌに溶解した後、１４０℃にて８時間加熱還流する。反応終了後、反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸で酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９０：１０）にて分離・精製し、４−アミロキシケイヒ酸２０３ｍｇを得る。
【００４０】
〔実施例１４〕
ｐ−クマル酸３３０ｍｇをピリジン２ｍｌに溶解した後、無水酢酸０．５ｍｌを加え、室温にて３０分間撹拌する。反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注いだ後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出し、抽出液を減圧下濃縮乾固する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９８：２）にて分離・精製し、４−アセトキシケイヒ酸１６６ｍｇを得る。
【００４１】
〔実施例１５〕
ｐ−クマル酸１０２ｍｇをメタノール５ｍｌに溶解する。別に、ｐ−トルエンスルホニル−Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロソアミドに１０％水酸化カリウム水溶液を加えて加熱したときに発生するジアゾメタンを、エーテル中に通過させ、ジアゾメタン／エーテル溶液を得る。このジアゾメタン／エーテル溶液を前述のｐ−クマル酸のメタノール溶液に過剰量加えた後、室温にて１時間撹拌する。反応溶液を減圧下濃縮乾固し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９８：２）にて分離・精製し、４−メトキシケイヒ酸メチルエステル９６ｍｇを得る。
【００４２】
〔実施例１６〕
ｐ−クマル酸１６４ｍｇを無水エーテル２０ｍｌに溶解した後、ジメチルホルムアミド０．１ｍｌ及び塩化チオニル０．５ｍｌを加え、室温にて２時間撹拌する。反応溶液を減圧下濃縮乾固し、残留物をクロロホルム５ｍｌに溶解した後、アンモニア水１ｍｌを加え、室温にて１．５時間撹拌する。この反応溶液を減圧下濃縮乾固し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／酢酸エチル混液＝２：３）にて分離・精製し、ｐ−ヒドロキシシンナムアミド１６ｍｇを得る。
【００４３】
〔実施例１７〕
ｐ−クマル酸１６４ｍｇを無水エーテル２０ｍｌに溶解した後、ジメチルホルムアミド０．１ｍｌ及び塩化チオニル０．５ｍｌを加え、室温にて２時間撹拌する。反応溶液を減圧下濃縮乾固し、残留物をクロロホルム５ｍｌに溶解する。この溶液にトリエチルアミン１５０ｍｇ及び１％メチルアミン／クロロホルム溶液１０ｍｌを滴加した後、室温にて２時間撹拌する。反応溶液をろ過し、ろ液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ベンゼン／酢酸エチル混液＝２：３）にて分離・精製し、Ｎ−メチル−ｐ−ヒドロキシシンナムアミド２４ｍｇを得る。
【００４４】
〔実施例１８〕
実施例１７の１％メチルアミン／クロロホルム溶液の代わりに、１％エチルアミン／クロロホルム溶液１０ｍｌを用いて、他は実施例１７と同様に操作し、Ｎ−エチル−ｐ−ヒドロキシシンナムアミド１１ｍｇを得る。
【００４５】
〔実施例１９〕
実施例１７の１％メチルアミン／クロロホルム溶液の代わりに、１％ジメチルアミン／クロロホルム溶液１０ｍｌを用いて、他は実施例１７と同様に操作し、Ｎ−ジメチル−ｐ−ヒドロキシシンナムアミド１３ｍｇを得る。
【００４６】
〔実施例２０〕
ｐ−クマル酸６０ｍｇを無水テトラヒドロフラン２．５ｍｌに溶解した後、無水ジクロロエタン２．５ｍｌを加え、この溶液に０．４％ジシクロヘキシルカルボジイミド／ジクロロメタン溶液２ｍｌを滴加し、室温にて１５分間撹拌する。次に、反応溶液に１％ジメチルアミン／クロロホルム溶液１０ｍｌを滴加した後、室温にて２時間撹拌する。反応溶液をろ過し、ろ液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝９８：２）にて分離・精製し、Ｎ−シクロヘキシル−ｐ−ヒドロキシシンナムアミド２４ｍｇを得る。
【００４７】
〔実施例２１〕
実施例１７の１％メチルアミン／クロロホルム溶液の代わりに、１％シクロヘキシルアミン／クロロホルム溶液１０ｍｌを用いて、他は実施例１７と同様に操作し、Ｎ−シクロヘキシル−ｐ−ヒドロキシシンナムアミド１８ｍｇを得る。
【００４８】
〔実施例２２〕
Ｏ−ヒドロキシベンズアルデヒド１．２ｇ及び酢酸ナトリウム０．８２ｇを無水酢酸１０ｍｌに溶解し、１４０℃にて８時間加熱還流する。反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、１０％塩酸にて酸性とした後、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）にて分離・精製し、クマリン２５０ｍｇを得る。
【００４９】
〔実施例２３〕
ｐ−クマル酸１６４ｍｇをピリジン２ｍｌに溶解し、この溶液に塩化ベンゾイル１００ｍｇ滴加した後、室温にて１時間撹拌する。反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９９：１→９８：２）にて分離・精製し、ｐ−ベンゾイルオキシケイヒ酸１９ｍｇを得る。
【００５０】
〔実施例２４〕
ベンズアルデヒド１．０６ｇ及びアセトン１．０ｍｌを１０％水酸化ナトリウム／メタノール溶液１５ｍｌに加えて混和した後、室温にて１時間撹拌する。反応溶液中の析出物を分取し、このものをベンゼンから再結晶し、ベンジリデンアセトン１．０３ｇを得る。
【００５１】
〔実施例２５〕
ベンズアルデヒド１．０６ｇ及びアセトフェノン１．３２ｇを１０％水酸化ナトリウム／メタノール溶液１５ｍｌに加えて混和した後、室温にて１時間撹拌する。反応溶液中の析出物を分取し、このものをベンゼンから再結晶し、フェニルスチリルケトン１．７５ｇを得る。
【００５２】
〔実施例２６〕
ベンズアルデヒド１．０６ｇ及びアセトアルデヒド０．４６ｇを１０％水酸化ナトリウム／メタノール溶液１５ｍｌに加えて混和した後、室温にて１時間撹拌する。反応溶液中のメタノールを留去した後、このものに水５０ｍｌを加え、エーテル５０ｍｌにて２回抽出する。抽出液を減圧下濃縮乾固し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）にて分離・精製し、ケイヒアルデヒド０．７５ｇを得る。
【００５３】
〔実施例２７〕
３−ヒドロキシケイヒ酸３０ｍｇをピリジン１ｍｌに溶解し、この溶液に無水酢酸０．３ｍｌを加えた後、室温にて２時間撹拌する。反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、エーテル５０ｍｌにて２回抽出し、抽出液を減圧下濃縮乾固する。残留物をメタノールから再結晶し、３−アセトキシケイヒ酸１８ｍｇを得る。
【００５４】
〔実施例２８〕
３−ヒドロキシケイヒ酸６４ｍｇをピリジン１ｍｌに溶解し、この溶液に無水安息香酸３００ｍｇを加えた後、室温にて１２時間撹拌する。反応溶液を氷水５０ｍｌ中に注ぎ、エーテル５０ｍｌにて２回抽出し、抽出液を減圧下濃縮乾固する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール混液＝９８：２→９６：４）にて分離・精製し、３−ベンゾイルオキシケイヒ酸１５ｍｇを得る。
【００５５】
【表１】
0003544223.tif 000004
【００５６】
【表２】
0003544223.tif 000005
【００５７】
【表３】
0003544223.tif 000006
【００５８】
【表４】
0003544223.tif 000007
【００５９】
【表５】
0003544223.tif 000008
【００６０】
【表６】
0003544223.tif 000009
【００６１】
【表７】
0003544223.tif 000010
【００６２】
【表８】
0003544223.tif 000011
【００６３】
【表９】
0003544223.tif 000012
【００６４】
【表１０】
0003544223.tif 000013
【００６５】
【表１１】
0003544223.tif 000014
【００６６】
【表１２】
0003544223.tif 000015
【００６７】
【表１３】
0003544223.tif 000016
【００６８】
【表１４】
0003544223.tif 000017
【００６９】
【表１５】
0003544223.tif 000018
【００７０】
【表１６】
0003544223.tif 000019
【００７１】
【表１７】
0003544223.tif 000020
【００７２】
【表１８】
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【００７３】
【表１９】
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【００７４】
【表２０】
0003544223.tif 000023
【００７５】
【実験例】
〔実験例１〕
この実験においては、Ｓｔｄ：ｄｄＹ系雄性マウス（体重３０〜３５ｇ）を１群７匹として使用した。動物は室温２４〜２５℃、自由な摂水、摂食及び１２時間周期の明暗条件下で飼育した。マウスは実験開始前日に脱毛クリームにて背部を除毛して用いた。被検化合物０．１ｇを、ジメチルスルホキシド１００ｍｌに溶解し、試料溶液とした。試料溶液の約０．１ｍｌを、毎日朝夕の２回、除毛した背部に塗布し、ジメチルスルホキシドのみを試料として用いたものを陰性対照群とした。判定は肉眼的観察により行い、判定基準は下記の基準に従った。
【００７６】
0003544223.tif 000024
結果を表２に示す。表２の結果から見られるように、本発明の発毛・育毛促進剤で用いるシンナモイル型化学構造を有する化合物は、優れた発毛・育毛促進効果を示すことが認められた。又、実験経過中及び実験終了後において、上記のシンナモイル型化学構造を有する化合物の試料溶液塗布群には皮膚刺激性、アレルギー性は全く認められなかった。
【００７７】
【表２１】
0003544223.tif 000025
【００７８】
〔実験例２〕
この実験においては、Ｓｔｄ：ｄｄＹ系雄性マウス（体重３０〜３５ｇ）を１群７匹として使用した。動物は室温２４〜２５℃，自由な摂水、摂食及び１２時間周期の明暗条件下で飼育した。マウスは実験開始前日に脱毛クリームにて背部を除毛して用いた。被検化合物の試料溶液は実験例１で使用したものと同じものを用いた。陰性対照群では、ジメチルスルホキシドのみを試料として用いた。試料溶液の約０．１ｍｌを、毎日朝夕の２回、除毛した箇所に塗布し、塗布後２１日及び２８日に除毛部位から発生した新生毛についてサンプリングを行い、体毛長を測定した。体毛長の測定は実体顕微鏡を用いて行い、サンプリングした任意の２０本の中から最も長いものを５本選び、その平均値を求め、マウスの体毛長とした。群間比較による薬物投与群の有意差検定は、ステューデントのｔ−検定により行った。結果を表３に示す。表３に見られるように、上記のシンナモイル型化学構造を有する化合物は、陰性対照群に対して、いずれもＰ＜０．０１の有意な毛成長促進効果を示した。
【００７９】
【表２２】
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【００８０】
【表２３】
0003544223.tif 000027
【００８１】
〔実験例３〕（急性毒性）
この実鹸においては、Ｓｔｄ：ｄｄＹ系雄性マウス（２０〜２５ｇ）を使用した。被検化合物は表１で示したものを用いた。被検化合物は、０．９％生理食塩水を用いて、さらにアラビアゴムを３％の濃度で添加し、１００ｍｇ／１０ｍｌの濃度になるよう懸濁し、試料溶液として調製した。この懸濁液を１００ｍｌ／ｋｇの割合で皮下投与し、投与後７２時間の致死数を求めた。その結果、いずれの化合物においても死亡例は見られず、低毒性であることが認められた。
【００８２】
〔実験例４〕（安全性）
試験方法は２４時間人体前腕クローズドバッチテストを用いた。被試験者は成人男子３名、成人女子１名である。判定基準は下記の基準に従った。試料は、実施例１で得られた化合物（１）を用い、処方例１に従って調製したものを用いた。試料溶液を毎日、朝及び夕方２回、１週間頭皮に塗布した。
＋＋：強紅斑                  ±  ：微かな紅斑
＋  ：紅斑                    −  ：陰性
結果を表４に示す。表４に見られるように、本発明に係る化合物からなるヘヤートニックでは、皮膚刺激性、アレルギー性は全く認められず、皮膚に対する安全性は極めて高いものであった。又、被検者において、試験中、副作用は特に認められなかった。
【００８３】
【表２４】
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【００８４】
以下に本発明に係る発毛・育毛促進剤の処方例を示す。
〔処方例１〕ヘヤートニック
エタノール                                            ６０ｍｌ
プロピレングリコール                                  ３ｇ
化合物（１）                                          ０．０５ｇ
香料                                                  適量
精製水を加えて、１００ｍｌとする。
【００８５】
〔処方例２〕ヘヤーローション
エタノール                                            ２ｇ
グリセリン                                        ０．５ｇ
イソプロピルメチルフェノール                      ０．４ｇ
レゾルシン                                            ２ｇ
１−メントール                                        １ｇ
化合物（１）                                      ０．０２ｇ
香料                                                適量
精製水を加えて、１００ｍｌとする。
【００８６】
〔処方例３〕ヘヤークリーム
（Ａ）下記の組成により、油相成分を調製する。
流動パラフィン                                        ４０ｇ
サラシミツロウ                                      ２．５ｇ
ポリオキシエチレンステアリルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）１．５ｇ
ポリオキシエチレンステアリルエーテル（５Ｅ．Ｏ．）  ３．０ｇ
モノステアリン酸ソルビタン                          １．５ｇ
化合物（１）                                        ０．１ｇ
（Ｂ）下記の組成により、水相成分を調製する。
ホウ砂                                              ０．４ｇ
エデト酸四ナトリウム                                    １ｇ
プロピレングリコール                                    ５ｇ
精製水                  適量（全量が１００ｍｌとなるように加える）
（Ａ）の油相成分を７５℃に、（Ｂ）の水相成分を７７℃に、加温、撹拌し、撹拌しながら（Ａ）に（Ｂ）を徐々に加えて乳化液とする。
【００８７】
〔処方例４〕ヘヤーシャンプー
（Ａ）成分
ラウリルエーテル硫酸トリエタノールアミン            １５ｇ
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                        ５ｇ
エチレングリコールモノステアレート                    ２ｇ
（Ｂ）成分
化合物（１）                                    ０．０２ｇ
ラウリル硫酸ナトリウム                                ５ｇ
精製水                  適量（全量が１００ｍｌとなるように加える）
（Ａ）成分及び（Ｂ）成分をそれぞれ、加温、撹拌した後、撹拌しながら（Ｂ）成分を（Ａ）成分に徐々に加えシャンプー用溶液を調製する。