【手続補正書】
【提出日】平成28年10月31日(2016.10.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
眼組織における蛍光体の量を測定する方法であって、
ａ）前記眼組織をタンパク質に特異的に結合する第１の蛍光体と接触させるステップと、
ｂ）前記第１の蛍光体の蛍光を誘発するのに適し、参照として用いられる第２の蛍光体の蛍光を誘発するのに適する光源で前記眼組織を照らすステップと、
ｃ）前記第１の蛍光体によって放射される蛍光の選択された寿命値（τ１）または寿命区間（ｄｔ１）について第１の光シグナル強度を、前記第２の蛍光体の選択された寿命値（τ２）または寿命区間（ｄｔ２）について第２の光シグナル強度を決定するステップであって、前記第１および第２の光シグナルは目の同じ領域に由来するステップと、
ｄ）前記第１のシグナル強度対前記第２のシグナル強度の比（ｒ）を決定するステップと、
ｅ）決定した光シグナル強度の標準化のために前記第１対前記第２のシグナル強度の前記比（ｒ）を用いるステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記比（ｒ）が、測定中の目の瞬きまたは目の運動とは無関係に不変である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記選択された寿命値（τ１）または寿命区間（ｄｔ１）および前記選択された寿命値（τ２）または寿命区間（ｄｔ２）が、アレイ中の最大総光子数に対応するそれぞれの寿命値を含むように選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記選択された寿命区間（ｄｔ１）および前記選択された寿命区間（ｄｔ２）が、寿命値の半値全幅内に入る寿命値に対応する個別の時点を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記第２の蛍光体が眼組織に含まれ、前記第２の光シグナルが眼組織の自己蛍光に由来する、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
光シグナル強度の決定が、センサーへのそれらの到達時間によってビンに振り分けられる光子を検出することによって実施される、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記光シグナルが時間相関単一光子計数法によって決定される、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
ヒストグラムが経時的な光子の分布を示す、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
ヒストグラムの曲線あてはめが実施される、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記蛍光寿命値τ１およびτ２が前記曲線から読み出される、請求項１〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
各寿命値について、光子数が要素のアレイに割り当てられ、前記要素の中の各値が前記アレイの第ｎ番目のビンに振り分けられる、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
それぞれ前記シグナルおよびバックグラウンドの各々について、それぞれの最大光子数に対応する寿命値が決定される、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
ａ）前記シグナルに関連する最大光子数に対応する寿命値（τ１）での前記シグナルに関連する光子数
対
ｂ）バックグラウンドに関連する最大光子数に対応する寿命値（τ２）でのバックグラウンドに関連する光子数
の比が決定される、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
ａ）前記第１のシグナルに対応する寿命区間値（ｄｔ１）に関連する光子数
対
ｂ）バックグラウンドに対応する寿命区間値（ｄｔ２）に関連する光子数
の比が決定される、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記蛍光体によって放射される蛍光の前記寿命（τ１）および眼組織の前記自己蛍光の寿命（τ２）が、少なくとも０．３ナノ秒、好ましくは少なくとも０．４ナノ秒、より好ましくは少なくとも０．５ナノ秒、さらにより好ましくは少なくとも１ナノ秒、最も好ましくは少なくとも１．５ナノ秒異なる、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
前記タンパク質がアミロイドタンパク質、好ましくはアミロイドタンパク質凝集体である、請求項１〜１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記タンパク質がアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）またはその切断産物である、請求項１〜１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
前記タンパク質が、β−アミロイド（Ａβ）、Ａβ１−４０、Ａβ２−４０、Ａβ１−４２またはこれらのタンパク質のうちの少なくとも１つの凝集体である、請求項１〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
前記光シグナルが水晶体、好ましくは核上領域に由来する、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
前記比（ｒ）がタンパク質の正常および病的レベルを区別するための閾値を決定する、請求項１〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記比（ｒ）がアミロイドタンパク質の正常および病的レベルを区別するための閾値を決定する、請求項１〜２０のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
前記比（ｒ）が疾患の診断を助けるために用いられる、請求項１〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記比（ｒ）が、アミロイド形成性疾患の診断を助けるために用いられる、請求項１〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
前記比（ｒ）が、アルツハイマー病（ＡＤ）、家族性ＡＤ、散発性のＡＤ、クロイツフェルト−ヤコブ病、変異クロイツフェルト−ヤコブ病、海綿状脳症、プリオン病（スクレーピー、ウシの海綿状脳症および他の獣医プリオン症を含む）、パーキンソン病、ハンチントン病（およびトリヌクレオチド反復病）、筋萎縮性側索硬化症、ダウン症候群（２１トリソミー）、ピック病（前頭側頭骨の認知症）、レーヴィ小体病、脳鉄蓄積による神経変性（ハレルフォルデン−スパッツ病）、シヌクレイン症（パーキンソン病、多系萎縮、レーヴィ小体による認知症および他を含む）、神経細胞核内封入体疾患、タウタンパク質症（進行性核上性麻痺、ピック病、大脳皮質基底核変性症、遺伝性前頭側頭骨の認知症（パーキンソン症を伴うまたは伴わない）、発病前の神経変性状態およびグアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症症候群を含む）からなる群から選択される疾患の診断を助けるために用いられる、請求項１〜２３のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記第１の蛍光体が前記タンパク質に直接的または間接的に結合する、請求項１〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記タンパク質に特異的に結合する別の分子に前記第１の蛍光体が共有結合または非共有結合している、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記第１の蛍光体が蛍光分子ローター化合物である、請求項１〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記蛍光分子ローター化合物が以下の構造式（Ｉ）または薬学的に許容されるその塩を有し：
【化２２】
2016538986.tif 000001
上式で：
Ａ１は、任意選択で置換されたＣ６〜Ｃ１８アリーレン、任意選択で置換されたＣ５〜Ｃ１８ヘテロアリーレンであるか、または以下の構造式によって表され：
【化２３】
2016538986.tif 000002
Ｒ１およびＲ２は、各々独立して水素、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ１２アルキル、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ１２ヘテロアルキル、任意選択で置換されたＣ３〜Ｃ１２シクロアルキルであるか、またはＲ１およびＲ２は、それらが結合する窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜１２員のヘテロシクロアルキルを形成し；
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して水素、メチルまたはエチルであり；
Ｒ５は−ＯＨ、任意選択で置換された−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＮＲ６Ｒ７であるか、または以下の構造式によって表され：
【化２４】
2016538986.tif 000003
Ｒ６およびＲ７は、各々独立して水素、メチル、エチルであるか、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合する窒素原子と一緒に、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される１〜３個の環ヘテロ原子を含有する５〜７員のヘテロシクロアルキルを形成し；
上式で：
ｙは、１から１０の整数であり；
Ｒ８は、出現毎に独立して、水素、−ＯＨまたは−ＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ９は、水素、−ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ６ヘテロアルキルであり；
Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、各々独立して水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルである、
請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
Ａ１が、任意選択で置換されたフェニル、任意選択で置換されたナフチル、任意選択で置換された（Ｅ）−スチルベンまたは任意選択で置換された（Ｚ）−スチルベンからなる群から選択される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
Ａ１が任意選択で置換されたナフチルである、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜１２員のヘテロシクロアルキルを形成する、請求項２８〜３０のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
Ｒ５が、
【化２５】
2016538986.tif 000004
である、請求項２８〜３１のいずれかに記載の方法。
【請求項３３】
Ｒ５が、
【化２６】
2016538986.tif 000005
であり、
ｙは３であり；
Ｒ９は、メチルである、
請求項２８〜３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
前記蛍光分子ローター化合物が以下の構造式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）または薬学的に許容されるその塩を有し：
【化２７】
2016538986.tif 000006
上式で：
Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、各々独立して水素、−ＯＨまたは任意選択で置換された−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）である、
請求項２７に記載の方法。
【請求項３５】
前記蛍光分子ローター化合物が：
【化２８−１】
2016538986.tif 000007
【化２８−２】
2016538986.tif 000008
からなる群から選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
前記蛍光分子ローター化合物が、以下の構造：
【化２９】
2016538986.tif 000009
を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３７】
前記蛍光分子ローター化合物がアフトベチン−ＨＣｌである、請求項２７に記載の方法。
【請求項３８】
眼組織における蛍光体の量を測定するためのシステムであって、
ａ）前記眼組織を照らすための光源であって、前記光源は前記第１の蛍光体の蛍光を誘発するのに適しており、そして、参照として用いられる第２の蛍光体の蛍光を誘発するのに適しており、前記第１の蛍光体はタンパク質に特異的に結合し、前記第１の蛍光体は前記眼組織と接触させられる、光源と、
ｂ）前記第１の蛍光体によって放射される蛍光の選択された寿命値（τ１）または寿命区間（ｄｔ１）について第１の光シグナル強度を、そして、前記第２の蛍光体の選択された寿命値（τ２）または寿命区間（ｄｔ２）について第２の光シグナル強度を決定するための手段であって、前記決定するための手段は、目の同じ領域に由来する前記第１および第２の光シグナルの強度を決定することを可能にするように適合されている、手段と、
ｃ）前記第１のシグナル強度対前記第２のシグナル強度の比（ｒ）を決定する手段であって、ここで、前記第１対前記第２のシグナル強度の前記比（ｒ）は決定した光シグナル強度の標準化のために用いられる、手段と
を含むシステム。
【請求項３９】
前記比（ｒ）が、測定中の目の瞬きまたは目の運動とは無関係に不変である、請求項３８に記載のシステム。
【請求項４０】
前記選択された寿命値（τ１）または寿命区間（ｄｔ１）および前記選択された寿命値（τ２）または寿命区間（ｄｔ２）が、アレイ中の最大総光子数に対応するそれぞれの寿命値を含むように選択される、請求項３８または３９に記載のシステム。
【請求項４１】
前記選択された寿命区間（ｄｔ１）および前記選択された寿命区間（ｄｔ２）が、寿命値の半値全幅内に入る寿命値に対応する個別の時点を含む、請求項３８または３９に記載のシステム。
【請求項４２】
前記第２の蛍光体が眼組織に含まれ、前記第２の光シグナルが眼組織の自己蛍光に由来する、請求項３８〜４１のいずれかに記載のシステム。
【請求項４３】
光シグナル強度の前記決定が、センサーへのそれらの到達時間によってビンに振り分けられる光子を検出することによって実施されることを特徴とする、請求項３８〜４２のいずれかに記載のシステム。
【請求項４４】
前記光シグナルが時間相関単一光子計数法によって決定されることを特徴とする、請求項３８〜４３のいずれかに記載のシステム。
【請求項４５】
ヒストグラムが経時的な光子の分布を示す、請求項３８〜４４のいずれかに記載のシステム。
【請求項４６】
ヒストグラムの曲線あてはめが実施されることを特徴とする、請求項３８〜４５のいずれかに記載のシステム。
【請求項４７】
前記蛍光寿命値τ１およびτ２が前記曲線から読み出される、請求項３８〜４６のいずれかに記載のシステム。
【請求項４８】
各寿命値について、光子数が要素のアレイに割り当てられ、前記要素の中の各値が前記アレイの第ｎ番目のビンに振り分けられる、請求項３８〜４７のいずれかに記載のシステム。
【請求項４９】
それぞれ前記シグナルおよびバックグラウンドの各々について、それぞれの最大光子数に対応する寿命値が決定される、請求項３８〜４８のいずれかに記載のシステム。
【請求項５０】
ａ）前記シグナルに関連する最大光子数に対応する寿命値（τ１）での前記シグナルに関連する光子数
対
ｂ）バックグラウンドに関連する最大光子数に対応する寿命値（τ２）でのバックグラウンドに関連する光子数
の比が決定されることを特徴とする、請求項３８〜４９のいずれかに記載のシステム。
【請求項５１】
ａ）前記第１のシグナルに対応する寿命区間値（ｄｔ１）に関連する光子数
対
ｂ）バックグラウンドに対応する寿命区間値（ｄｔ２）に関連する光子数
の比が決定されることを特徴とする、請求項３８〜４９のいずれかに記載のシステム。
【請求項５２】
前記蛍光体によって放射される蛍光の前記寿命（τ１）および眼組織の前記自己蛍光の寿命（τ２）が、少なくとも０．３ナノ秒、好ましくは少なくとも０．４ナノ秒、より好ましくは少なくとも０．５ナノ秒、さらにより好ましくは少なくとも１ナノ秒、最も好ましくは少なくとも１．５ナノ秒異なる、請求項３８〜５１のいずれかに記載のシステム。
【請求項５３】
前記タンパク質がアミロイドタンパク質、好ましくはアミロイドタンパク質凝集体である、請求項３８〜５２のいずれかに記載のシステム。
【請求項５４】
前記タンパク質がアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）またはその切断産物である、請求項３８〜５３のいずれかに記載のシステム。
【請求項５５】
前記タンパク質が、β−アミロイド（Ａβ）、Ａβ１−４０、Ａβ２−４０、Ａβ１−４２またはこれらのタンパク質のうちの少なくとも１つの凝集体である、請求項３８〜５４のいずれかに記載のシステム。
【請求項５６】
前記光シグナルが水晶体、好ましくは核上領域に由来することを特徴とする、請求項３８〜５５のいずれかに記載のシステム。
【請求項５７】
前記比（ｒ）がタンパク質の正常および病的レベルを区別するための閾値を決定する、請求項３８〜５６のいずれかに記載のシステム。
【請求項５８】
前記比（ｒ）がアミロイドタンパク質の正常および病的レベルを区別するための閾値を決定する、請求項３８〜５７のいずれかに記載のシステム。
【請求項５９】
前記比（ｒ）が疾患の診断を助けるために用いられることを特徴とする、請求項３８〜５８のいずれかに記載のシステム。
【請求項６０】
前記比（ｒ）が、アミロイド形成性疾患の診断を助けるために用いられることを特徴とする、請求項３８〜５９のいずれかに記載のシステム。
【請求項６１】
前記比（ｒ）が、アルツハイマー病（ＡＤ）、家族性ＡＤ、散発性のＡＤ、クロイツフェルト−ヤコブ病、変異クロイツフェルト−ヤコブ病、海綿状脳症、プリオン病（スクレーピー、ウシの海綿状脳症および他の獣医プリオン症を含む）、パーキンソン病、ハンチントン病（およびトリヌクレオチド反復病）、筋萎縮性側索硬化症、ダウン症候群（２１トリソミー）、ピック病（前頭側頭骨の認知症）、レーヴィ小体病、脳鉄蓄積による神経変性（ハレルフォルデン−スパッツ病）、シヌクレイン症（パーキンソン病、多系萎縮、レーヴィ小体による認知症および他を含む）、神経細胞核内封入体疾患、タウタンパク質症（進行性核上性麻痺、ピック病、大脳皮質基底核変性症、遺伝性前頭側頭骨の認知症（パーキンソン症を伴うまたは伴わない）、発病前の神経変性状態およびグアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症症候群を含む）からなる群から選択される疾患の診断を助けるために用いられることを特徴とする、請求項３８〜６０のいずれかに記載のシステム。
【請求項６２】
前記第１の蛍光体が前記タンパク質に直接的または間接的に結合することを特徴とする、請求項３８〜６１のいずれかに記載のシステム。
【請求項６３】
前記タンパク質に特異的に結合する別の分子に前記第１の蛍光体が共有結合または非共有結合していることを特徴とする、請求項３８〜６２のいずれかに記載のシステム。
【請求項６４】
前記第１の蛍光体が蛍光分子ローター化合物である、請求項３８〜６３のいずれかに記載のシステム。
【請求項６５】
前記蛍光分子ローター化合物が以下の構造式（Ｉ）または薬学的に許容されるその塩を有し：
【化２２】
2016538986.tif 000010
上式で：
Ａ１は、任意選択で置換されたＣ６〜Ｃ１８アリーレン、任意選択で置換されたＣ５〜Ｃ１８ヘテロアリーレンであるか、または以下の構造式によって表され：
【化２３】
2016538986.tif 000011
Ｒ１およびＲ２は、各々独立して水素、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ１２アルキル、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ１２ヘテロアルキル、任意選択で置換されたＣ３〜Ｃ１２シクロアルキルであるか、またはＲ１およびＲ２は、それらが結合する窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜１２員のヘテロシクロアルキルを形成し；
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して水素、メチルまたはエチルであり；
Ｒ５は−ＯＨ、任意選択で置換された−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＮＲ６Ｒ７であるか、または以下の構造式によって表され：
【化２４】
2016538986.tif 000012
Ｒ６およびＲ７は、各々独立して水素、メチル、エチルであるか、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合する窒素原子と一緒に、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される１〜３個の環ヘテロ原子を含有する５〜７員のヘテロシクロアルキルを形成し；
上式で：
ｙは、１から１０の整数であり；
Ｒ８は、出現毎に独立して、水素、−ＯＨまたは−ＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ９は、水素、−ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ６ヘテロアルキルであり；
Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、各々独立して水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルである、
請求項６４に記載のシステム。
【請求項６６】
Ａ１が、任意選択で置換されたフェニル、任意選択で置換されたナフチル、任意選択で置換された（Ｅ）−スチルベンまたは任意選択で置換された（Ｚ）−スチルベンからなる群から選択される、請求項６５に記載のシステム。
【請求項６７】
Ａ１が任意選択で置換されたナフチルである、請求項６５または６６に記載のシステム。
【請求項６８】
Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜１２員のヘテロシクロアルキルを形成する、請求項６５〜６７のいずれかに記載のシステム。
【請求項６９】
Ｒ５が、
【化２５】
2016538986.tif 000013
である、請求項６５〜６８のいずれかに記載のシステム。
【請求項７０】
Ｒ５が、
【化２６】
2016538986.tif 000014
であり、
ｙは３であり；
Ｒ９は、メチルである、
請求項６５〜６９のいずれかに記載のシステム。
【請求項７１】
前記蛍光分子ローター化合物が以下の構造式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）または薬学的に許容されるその塩を有し：
【化２７】
2016538986.tif 000015
上式で：
Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、各々独立して水素、−ＯＨまたは任意選択で置換された−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）である、
請求項６５に記載のシステム。
【請求項７２】
前記蛍光分子ローター化合物が：
【化２８−１】
2016538986.tif 000016
【化２８−２】
2016538986.tif 000017
からなる群から選択される、請求項６５に記載のシステム。
【請求項７３】
前記蛍光分子ローター化合物が、以下の構造：
【化２９】
2016538986.tif 000018
を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である、請求項６５に記載のシステム。
【請求項７４】
前記蛍光分子ローター化合物がアフトベチン−ＨＣｌである、請求項６５に記載のシステム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８０】
本明細書で用いるように、用語「第１の光子」および「第２の光子」は、光子の到達順序を指すものととるべきでなく、単に２つの群の光子が２つの群（「第１の」群および「第２の」群）、例えば異なる特徴的蛍光寿命を有する２つの群の１つに属することを表示するカテゴリー的意味ととるべきであることが理解される。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
眼組織における蛍光体の量を測定する方法であって、
ａ）前記眼組織をタンパク質に特異的に結合する第１の蛍光体と接触させるステップと、
ｂ）前記第１の蛍光体の蛍光を誘発するのに適し、参照として用いられる第２の蛍光体の蛍光を誘発するのに適する光源で前記眼組織を照らすステップと、
ｃ）前記第１の蛍光体によって放射される蛍光の選択された寿命値（τ１）または寿命区間（ｄｔ１）について第１の光シグナル強度を、前記第２の蛍光体の選択された寿命値（τ２）または寿命区間（ｄｔ２）について第２の光シグナル強度を決定するステップであって、前記第１および第２の光シグナルは目の同じ領域に由来するステップと、
ｄ）前記第１のシグナル強度対前記第２のシグナル強度の比（ｒ）を決定するステップと、
ｅ）決定した光シグナル強度の標準化のために前記第１対前記第２のシグナル強度の前記比（ｒ）を用いるステップと
を含む方法。
（項目２）
前記比（ｒ）が、測定中の目の瞬きまたは目の運動とは無関係に不変である、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記選択された寿命値（τ１）または寿命区間（ｄｔ１）および前記選択された寿命値（τ２）または寿命区間（ｄｔ２）が、アレイ中の最大総光子数に対応するそれぞれの寿命値を含むように選択される、項目１または２に記載の方法。
（項目４）
前記選択された寿命区間（ｄｔ１）および前記選択された寿命区間（ｄｔ２）が、寿命値の半値全幅内に入る寿命値に対応する個別の時点を含む、項目１または２に記載の方法。
（項目５）
前記第２の蛍光体が眼組織に含まれ、前記第２の光シグナルが眼組織の自己蛍光に由来する、項目１〜４のいずれかに記載の方法。
（項目６）
光シグナル強度の決定が、センサーへのそれらの到達時間によってビンに振り分けられる光子を検出することによって実施される、項目１〜５のいずれかに記載の方法。
（項目７）
前記光シグナルが時間相関単一光子計数法によって決定される、項目１〜６のいずれかに記載の方法。
（項目８）
ヒストグラムが経時的な光子の分布を示す、項目１〜７のいずれかに記載の方法。
（項目９）
ヒストグラムの曲線あてはめが実施される、項目１〜８のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記蛍光寿命値τ１およびτ２が前記曲線から読み出される、項目１〜９のいずれかに記載の方法。
（項目１１）
各寿命値について、光子数が要素のアレイに割り当てられ、前記要素の中の各値が前記アレイの第ｎ番目のビンに振り分けられる、項目１〜１０のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
それぞれ前記シグナルおよびバックグラウンドの各々について、それぞれの最大光子数に対応する寿命値が決定される、項目１〜１１のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
ａ）前記シグナルに関連する最大光子数に対応する寿命値（τ１）での前記シグナルに関連する光子数
対
ｂ）バックグラウンドに関連する最大光子数に対応する寿命値（τ２）でのバックグラウンドに関連する光子数
の比が決定される、項目１〜１２のいずれかに記載の方法。
（項目１４）
ａ）前記第１のシグナルに対応する寿命区間値（ｄｔ１）に関連する光子数
対
ｂ）バックグラウンドに対応する寿命区間値（ｄｔ２）に関連する光子数
の比が決定される、項目１〜１２のいずれかに記載の方法。
（項目１５）
前記蛍光体によって放射される蛍光の前記寿命（τ１）および眼組織の前記自己蛍光の寿命（τ２）が、少なくとも０．３ナノ秒、好ましくは少なくとも０．４ナノ秒、より好ましくは少なくとも０．５ナノ秒、さらにより好ましくは少なくとも１ナノ秒、最も好ましくは少なくとも１．５ナノ秒異なる、項目１〜１４のいずれかに記載の方法。
（項目１６）
前記タンパク質がアミロイドタンパク質、好ましくはアミロイドタンパク質凝集体である、項目１〜１５のいずれかに記載の方法。
（項目１７）
前記タンパク質がアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）またはその切断産物である、項目１〜１６のいずれかに記載の方法。
（項目１８）
前記タンパク質が、β−アミロイド（Ａβ）、Ａβ１−４０、Ａβ２−４０、Ａβ１−４２またはこれらのタンパク質のうちの少なくとも１つの凝集体である、項目１〜１７のいずれかに記載の方法。
（項目１９）
前記光シグナルが水晶体、好ましくは核上領域に由来する、項目１〜１８のいずれかに記載の方法。
（項目２０）
前記比（ｒ）がタンパク質の正常および病的レベルを区別するための閾値を決定する、項目１〜１９のいずれかに記載の方法。
（項目２１）
前記比（ｒ）がアミロイドタンパク質の正常および病的レベルを区別するための閾値を決定する、項目１〜２０のいずれかに記載の方法。
（項目２２）
前記比（ｒ）が疾患の診断を助けるために用いられる、項目１〜２１のいずれかに記載の方法。
（項目２３）
前記比（ｒ）が、アミロイド形成性疾患の診断を助けるために用いられる、項目１〜２２のいずれかに記載の方法。
（項目２４）
前記比（ｒ）が、アルツハイマー病（ＡＤ）、家族性ＡＤ、散発性のＡＤ、クロイツフェルト−ヤコブ病、変異クロイツフェルト−ヤコブ病、海綿状脳症、プリオン病（スクレーピー、ウシの海綿状脳症および他の獣医プリオン症を含む）、パーキンソン病、ハンチントン病（およびトリヌクレオチド反復病）、筋萎縮性側索硬化症、ダウン症候群（２１トリソミー）、ピック病（前頭側頭骨の認知症）、レーヴィ小体病、脳鉄蓄積による神経変性（ハレルフォルデン−スパッツ病）、シヌクレイン症（パーキンソン病、多系萎縮、レーヴィ小体による認知症および他を含む）、神経細胞核内封入体疾患、タウタンパク質症（進行性核上性麻痺、ピック病、大脳皮質基底核変性症、遺伝性前頭側頭骨の認知症（パーキンソン症を伴うまたは伴わない）、発病前の神経変性状態およびグアム筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症症候群を含む）からなる群から選択される疾患の診断を助けるために用いられる、項目１〜２３のいずれかに記載の方法。
（項目２５）
前記蛍光体が前記タンパク質に直接的または間接的に結合する、項目１〜２４のいずれかに記載の方法。
（項目２６）
前記タンパク質に特異的に結合する別の分子に前記蛍光体が共有結合または非共有結合する、項目１〜２５のいずれかに記載の方法。
（項目２７）
前記蛍光体が蛍光分子ローター化合物である、項目１〜２６のいずれかに記載の方法。
（項目２８）
前記蛍光分子ローター化合物が以下の構造式（Ｉ）または薬学的に許容されるその塩を有し：
【化２２】
2016538986.tif 000019
上式で：
Ａ１は、任意選択で置換されたＣ６〜Ｃ１８アリーレン、任意選択で置換されたＣ５〜Ｃ１８ヘテロアリーレンであるか、または以下の構造式によって表され：
【化２３】
2016538986.tif 000020
Ｒ１およびＲ２は、各々独立して水素、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ１２アルキル、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ１２ヘテロアルキル、任意選択で置換されたＣ３〜Ｃ１２シクロアルキルであるか、またはＲ１およびＲ２は、それらが結合する窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜１２員のヘテロシクロアルキルを形成し；
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して水素、メチルまたはエチルであり；
Ｒ５は−ＯＨ、任意選択で置換された−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）、−ＮＲ６Ｒ７であるか、または以下の構造式によって表され：
【化２４】
2016538986.tif 000021
Ｒ６およびＲ７は、各々独立して水素、メチル、エチルであるか、またはＲ６およびＲ７は、それらが結合する窒素原子と一緒に、Ｎ、ＯおよびＳから独立して選択される１〜３個の環ヘテロ原子を含有する５〜７員のヘテロシクロアルキルを形成し；
上式で：
ｙは、１から１０の整数であり；
Ｒ８は、出現毎に独立して、水素、−ＯＨまたは−ＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ９は、水素、−ＮＲ１０Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル、任意選択で置換されたＣ１〜Ｃ６ヘテロアルキルであり；
Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、各々独立して水素またはＣ１〜Ｃ６アルキルである、
項目２７に記載の方法。
（項目２９）
Ａ１が、任意選択で置換されたフェニル、任意選択で置換されたナフチル、任意選択で置換された（Ｅ）−スチルベンまたは任意選択で置換された（Ｚ）−スチルベンからなる群から選択される、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
Ａ１が任意選択で置換されたナフチルである、項目２８または２９に記載の方法。
（項目３１）
Ｒ１およびＲ２が、それらが結合する窒素原子と一緒に、任意選択で置換された３〜１２員のヘテロシクロアルキルを形成する、項目２８〜３０のいずれかに記載の方法。
（項目３２）
Ｒ５が、
【化２５】
2016538986.tif 000022
である、項目２８〜３１のいずれかに記載の方法。
（項目３３）
Ｒ５が、
【化２６】
2016538986.tif 000023
であり、
ｙは３であり；
Ｒ９は、メチルである、
項目２８〜３２のいずれかに記載の方法。
（項目３４）
前記蛍光分子ローター化合物が以下の構造式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）または薬学的に許容されるその塩を有し：
【化２７】
2016538986.tif 000024
上式で：
Ｒ１３、Ｒ１４およびＲ１５は、各々独立して水素、−ＯＨまたは任意選択で置換された−Ｏ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）である、
項目２７に記載の方法。
（項目３５）
前記蛍光分子ローター化合物が：
【化２８−１】
2016538986.tif 000025
【化２８−２】
2016538986.tif 000026
からなる群から選択される、項目２７に記載の方法。
（項目３６）
前記蛍光分子ローター化合物が、以下の構造：
【化２９】
2016538986.tif 000027
を有する化合物または薬学的に許容されるその塩である、項目２７に記載の方法。
（項目３７）
前記蛍光分子ローター化合物がアフトベチン−ＨＣｌである、項目２７に記載の方法。