【手続補正書】
【提出日】平成29年2月2日(2017.2.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプル中の小分子を検出するための方法であって、
a）検出されるべき小分子に特異的なアプタマーにナノ粒子（NP）又はマイクロ粒子（MP）をカップリングして、NP-アプタマーコンジュゲートを形成する工程；
b）該NP-アプタマーコンジュゲートをサンプルと接触させる工程；及び
c）該NP-アプタマーコンジュゲートのサイズの低下、表面電位の変化又は移動度の変化を検出する工程を含み、ここで、該低下又は変化が該小分子の存在を示す、方法。
【請求項２】
工程（a）が、任意選択で、アプタマーがNP又はMPとカップリングしているかを確認するために、NP-アプタマーコンジュゲートのサイズの低下、表面電位の変化及び／又は移動度の変化のいずれかを検出する工程を含む、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
NP-アプタマーコンジュゲートのサイズの低下、表面電位の変化及び／又は移動度の変化が、RPS、DLS及びその組み合わせから選択される技術により検出される、請求項1又は2に記載の方法。
【請求項４】
洗剤若しくは界面活性剤、又はその組み合わせが、任意選択で、工程（b）において使用される、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
洗剤又は界面活性剤が、アニオン性界面活性剤又は洗剤、カチオン性界面活性剤又は洗剤、及び非イオン性界面活性剤又は洗剤から選択される、請求項4に記載の方法。
【請求項６】
アプタマーが、配列：
5’-ATACGAGCTTGTTCAATACGAAGGGATGCCGTTTGGGCCCAAGTTCGGCATAGTGTGGTGATAGTAAGAGCAATC-3’、又は
70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98若しくは99％の同一性を有する配列
を含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
アプタマーが、任意選択で、蛍光タグを含んでよい、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ナノ粒子又はマイクロ粒子が、約5 nm〜約5ミクロンのサイズである、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ナノ粒子又はマイクロ粒子が、金、パラジウム、ポリスチレン及びラテックスから選択される、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
NP又はMP、及びアプタマーが、NP又はMPのアプタマーに対する数の比率が約1：1,000,000〜約1：1で存在する、請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
サンプルが、環境サンプル又は生物学的サンプルである、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
生物学的サンプルが、ex vivo生物学的サンプルである、請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
小分子が汚染物質である、請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
小分子がホルモンである、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ホルモンが、17β-エストラジオール、テストステロン及びプロゲステロンから選択される、請求項14に記載の方法。
【請求項１６】
（a）ナノ又はマイクロ粒子；及び
（b）アプタマー
を含むバイオセンサーであって、ここで、
該ナノ粒子又はマイクロ粒子は該アプタマーとカップリングして、NP-アプタマーコンジュゲートを提供し、且つ
該NP-アプタマーコンジュゲートがサンプル中の小分子と接触した場合に、該NP-アプタマーコンジュゲートのサイズの低下、表面電位の変化及び／又は移動度の変化が生じる、
バイオセンサー。
【請求項１７】
NP-アプタマーコンジュゲートのサイズの低下、表面電位の変化及び／又は移動度の変化が、RPS、DLS及びその組み合わせから選択される技術により検出される、請求項16に記載のバイオセンサー。
【請求項１８】
洗剤若しくは界面活性剤、又はその組み合わせを任意選択で含む、請求項16又は17に記載のバイオセンサー。
【請求項１９】
洗剤又は界面活性剤が、アニオン性界面活性剤又は洗剤、カチオン性界面活性剤又は洗剤、及び非イオン性界面活性剤又は洗剤から選択される、請求項18に記載のバイオセンサー。
【請求項２０】
アプタマーが、タグ化された蛍光を任意選択で含む、請求項16〜19のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項２１】
ナノ粒子又はマイクロ粒子が、約5 nm〜約5ミクロンのサイズである、請求項16〜20のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項２２】
ナノ粒子又はマイクロ粒子が、金、パラジウム、ポリスチレン及びラテックスから選択される、請求項16〜21のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項２３】
NP又はMPのアプタマーに対する数の比率が約1：1,000,000〜約1：1である、請求項16〜22のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項２４】
サンプルが、環境サンプル又は生物学的サンプルである、請求項16〜23のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項２５】
生物学的サンプルが、ex vivo生物学的サンプルである、請求項24に記載のバイオセンサー。
【請求項２６】
小分子が汚染物質である、請求項16〜25のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項２７】
小分子がホルモンである、請求項16〜26のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項２８】
ホルモンが、17β-エストラジオール、テストステロン及びプロゲステロンから選択される、請求項27に記載のバイオセンサー。
【請求項２９】
アプタマーが、配列：
5’-ATACGAGCTTGTTCAATACGAAGGGATGCCGTTTGGGCCCAAGTTCGGCATAGTGTGGTGATAGTAAGAGCAATC-3’、又は
70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98若しくは99％の同一性を有する配列
を含む、請求項16〜28のいずれか一項に記載のバイオセンサー。
【請求項３０】
請求項16〜29のいずれか一項に記載のバイオセンサーの、サンプル中の小分子の検出における使用。
【請求項３１】
バイオセンサーが、RPS、DLS及びその組み合わせから選択される技術とともに使用される、請求項30に記載の使用。
【請求項３２】
バイオセンサーが、任意選択で、洗剤又は界面活性剤とともに使用される、請求項30又は31に記載の使用。
【請求項３３】
小分子が汚染物質である、請求項30〜32のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３４】
小分子がホルモンである、請求項30〜33のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３５】
ホルモンが、17β-エストラジオール、テストステロン及びプロゲステロンから選択される、請求項34に記載の使用。
【請求項３６】
配列：
5’-ATACGAGCTTGTTCAATACGAAGGGATGCCGTTTGGGCCCAAGTTCGGCATAGTGTGGTGATAGTAAGAGCAATC-3’、又は
70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98若しくは99％の同一性を有する配列
を含むアプタマー。
【請求項３７】
ナノ粒子にカップリングしている、請求項36に記載のアプタマー。
【請求項３８】
エストロゲンファミリーの化合物に属する化合物に選択的に結合する、請求項36に記載のアプタマー。
【請求項３９】
エストロゲン化合物が、17β-エストラジオール、テストステロン及びプロゲステロンである、請求項38に記載のアプタマー。
【請求項４０】
任意選択で、蛍光タグを含んでよい、請求項36〜39のいずれか一項に記載のアプタマー。