【手続補正書】
【提出日】平成29年8月7日(2017.8.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性化肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ莢膜多糖を調製するための方法であって、
（ａ）血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ莢膜多糖単離物を酸化剤と反応させるステップと、
（ｂ）反応停止剤を加えることにより酸化反応を停止させ、活性化肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖を得るステップと
を含む方法。
【請求項２】
ステップ（ａ）における血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖の濃度が、０．５ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬの間である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップ（ａ）において、前記多糖を０．０１〜１０、０．０５〜５、０．１〜１、０．５〜１、０．７〜０．８、０．０１〜０．２、０．０５〜０．５、０．０５〜０．２、０．１〜０．３モル当量の酸化剤と反応させる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
酸化剤がペルヨーデートであるか、またはメタ過ヨウ素酸ナトリウムである、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ステップ（ａ）における反応の温度が１℃〜１０℃の間に保たれる、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
反応停止剤が、式（ＩＩ）の化合物
【化１】
2017504660.tif 000001
［式中、Ｒ１およびＲ２は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピルからそれぞれ独立に選択される］
であるか、または、
グリセロール、エチレングリコール、プロパン−１，２−ジオール、ブタン−１，２−ジオール、またはブタン−２，３−ジオールから選択される化合物である、
請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
０．１〜１０、０．５〜５、０．５〜３または０．５〜２モル当量の反応停止剤を加えることにより酸化反応を停止させる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ｂ）における反応の温度が１℃〜１０℃の間に保たれる、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
請求項１から８のいずれか一項に記載の方法によって取得されたかまたは取得可能な活性化肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型１０Ａ莢膜多糖であって、
５０ｋＤａ〜４００ｋＤａ、５０ｋＤａ〜３５０ｋＤａ、５０ｋＤａ〜３００ｋＤａ、５０ｋＤａ〜２５０ｋＤａ、５０ｋＤａ〜２００ｋＤａ、１００ｋＤａ〜３００ｋＤａ、１００ｋＤａ〜２５０ｋＤａ、もしくは１００ｋＤａ〜２００ｋＤａの間の分子量を有する、および／または
５〜２０、５〜１５、８〜１４、８〜１２、もしくは９〜１１の間の酸化度を有する、
多糖。
【請求項１０】
請求項１から８のいずれか一項に記載の方法によって取得されたかまたは取得可能な活性化肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型２２Ｆ莢膜多糖であって、
２５ｋＤａ〜１０００ｋＤａ、１００ｋＤａ〜１０００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜８００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜７００ｋＤａ、３００ｋＤａ〜６００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜１０００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜８００ｋＤａ、４００ｋＤａ〜７００ｋＤａ、もしくは４００ｋＤａ〜６００ｋＤａの間の分子量を有する、および／または
１０〜２５、１０〜２０、１２〜２０、もしくは１４〜１８の間の酸化度を有する、および／または
血清型２２Ｆ多糖１ｍＭあたり少なくとも０．６ｍＭのアセテートを含む、
多糖。
【請求項１１】
請求項１から８のいずれか一項に記載の方法によって取得されたかまたは取得可能な、活性化肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型３３Ｆ莢膜多糖であって、
５０Ｄａ〜１２５０Ｄａ、２００Ｄａ〜１２００Ｄａ、５００Ｄａ〜１２００Ｄａ、５００Ｄａ〜１０００Ｄａ、７００Ｄａ〜１２００Ｄａ、８００Ｄａ〜１２００Ｄａ、８００Ｄａ〜１１００Ｄａ、９００Ｄａ〜１２００Ｄａもしくは８００Ｄａ〜１０００Ｄａの間の分子量を有する、および／または
１０〜２０の間の酸化度を有する、および／または
血清型３３Ｆ多糖１ｍＭあたり少なくとも０．７ｍＭのアセテートを含む、
多糖。
【請求項１２】
担体タンパク質に共有結合で連結された肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖を含む免疫原性コンジュゲートを調製するための方法であって、
（ａ）請求項１から８のいずれか一項に記載の方法によって取得したまたは取得可能な活性化血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖を担体タンパク質と混和するステップと、
（ｂ）混和された活性化血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖と担体タンパク質を還元剤と反応させて、血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖：担体タンパク質コンジュゲートを形成するステップと
を含む調製方法。
【請求項１３】
（ｃ）血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖：担体タンパク質コンジュゲート中の未反応アルデヒドをキャッピングするステップ
をさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ステップ（ａ）および（ｂ）がＤＭＳＯ中で実施されるか、または水溶液中で実施される、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
ステップ（ｂ）における活性化多糖の濃度が、０．１ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬ、または０．５ｍｇ／ｍＬ〜２ｍｇ／ｍＬの間である、請求項１２から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
活性化血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ多糖の担体タンパク質に対する初期比が、５：１〜０．１：１、２：１〜０．１：１、２：１〜１：１、１．５：１〜１：１、０．１：１〜１：１、０．３：１〜１：１、または０．６：１〜１．２：１の間である、請求項１２から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
ステップ（ｂ）において、活性化多糖を、０．５〜２．５モル当量の間のシアノ水素化ホウ素ナトリウムと反応させる、請求項１２から１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
多糖：担体タンパク質コンジュゲートを精製するステップをさらに含む、請求項１２から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１２から１８のいずれか一項に記載の方法によって取得されたかまたは取得可能な、担体タンパク質に共有結合で連結された肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型１０Ａ多糖を含む、免疫原性コンジュゲートであって、
５００ｋＤａ〜１５０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜１００００ｋＤａ、２０００ｋＤａ〜１００００ｋＤａ、もしくは３０００ｋＤａ〜８０００ｋＤａの間の分子量を有する、および／または
血清型１０Ａ多糖の総量に対して、約２０％未満の遊離血清型１０Ａ多糖を含む、および／または
コンジュゲートにおける血清型１０Ａ多糖の担体タンパク質に対する比が０．５〜３の間である、および／または
その少なくとも４０％が、ＣＬ−４Ｂカラムにおいて０．３以下のＫｄを有する、および／または
複合化度が、２〜１５、２〜１３、２〜１０、２〜８、２〜６、２〜５、２〜４、３〜１５、３〜１３、３〜１０、３〜８、３〜６、３〜５、３〜４、５〜１５、５〜１０、８〜１５、８〜１２、１０〜１５、もしくは１０〜１２の間である、
免疫原性コンジュゲート。
【請求項２０】
請求項１２から１８のいずれか一項に記載の方法によって取得されたかまたは取得可能な、担体タンパク質に共有結合で連結された肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型２２Ｆ多糖を含む、免疫原性コンジュゲートであって、
血清型２２Ｆ多糖１ｍＭあたり少なくとも０．５、０．６、もしくは０．７ｍＭのアセテートを含む、および／または
免疫原性コンジュゲートにおける血清型２２Ｆ多糖１ｍＭあたりのアセテートｍＭの、活性化多糖における血清型２２Ｆ多糖１ｍＭあたりのアセテートｍＭに対する比が少なくとも０．７である、および／または
４００ｋＤａ〜１５０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜１００００ｋＤａ、２０００ｋＤａ〜１００００ｋＤａ、３０００ｋＤａ〜８０００ｋＤａ、もしくは３０００〜５０００ｋＤａの間の分子量を有する、および／または
血清型２２Ｆ多糖の総量に対して、約５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、もしくは１５％未満の遊離血清型２２Ｆ多糖を含む、および／または
コンジュゲートにおける血清型２２Ｆ多糖の担体タンパク質に対する比が０．５〜２の間である、および／または
その少なくとも４０％が、ＣＬ−４Ｂカラムにおいて０．３以下のＫｄを有する、および／または
複合化度が、２〜１５、２〜１３、２〜１０、２〜８、２〜６、２〜５、２〜４、３〜１５、３〜１３、３〜１０、３〜８、３〜６、３〜５、３〜４、４〜７、５〜１５、５〜１０、８〜１５、８〜１２、１０〜１５、もしくは１０〜１２の間である、
免疫原性コンジュゲート。
【請求項２１】
請求項１２から１８のいずれか一項に記載の方法によって取得されたかまたは取得可能な、担体タンパク質に共有結合で連結された肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型３３Ｆ多糖を含む、免疫原性コンジュゲートであって、
血清型３３Ｆ多糖１ｍＭあたり少なくとも０．５、０．６、もしくは０．７ｍＭのアセテートを含む、および／または
免疫原性コンジュゲートにおける血清型３３Ｆ多糖１ｍＭあたりのアセテートｍＭの、活性化多糖における血清型３３Ｆ多糖１ｍＭあたりのアセテートｍＭに対する比が少なくとも０．７である、および／または
５００ｋＤａ〜３００００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜２５０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜２００００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜１５０００ｋＤａ、５００ｋＤａ〜１００００ｋＤａ、１０００ｋＤａ〜１００００ｋＤａ、１０００ｋＤａ〜８０００ｋＤａ、１０００ｋＤａ〜５０００ｋＤａ、２０００ｋＤａ〜１００００ｋＤａ、２０００ｋＤａ〜８０００ｋＤａ、もしくは２０００ｋＤａ〜５０００ｋＤａの間の分子量を有する、および／または
血清型３３Ｆ多糖の総量に対して、約５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、もしくは１５％未満の遊離血清型３３Ｆ多糖を含む、および／または
血清型３３Ｆ多糖の総量に対して、約２０％未満の遊離血清型３３Ｆ多糖を含む、および／または
コンジュゲートにおける血清型３３Ｆ多糖の担体タンパク質に対する比が０．５〜２の間である、および／または
その少なくとも４０％が、ＣＬ−４Ｂカラムにおいて０．３以下のＫｄを有する、および／または
複合化度が、２〜１５、２〜１３、２〜１０、２〜８、２〜６、２〜５、２〜４、３〜１５、３〜１３、３〜１０、３〜８、３〜６、３〜５、３〜４、５〜１５、５〜１０、８〜１５、８〜１２、１０〜１５、もしくは１０〜１２の間である、
免疫原性コンジュゲート。
【請求項２２】
担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項１９から２１のいずれか一項に記載の免疫原性コンジュゲート。
【請求項２３】
担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項１２から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
コンジュゲートを多価ワクチンに製剤化するステップをさらに含む、請求項１２から１８または２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１９から２２のいずれか一項に記載の免疫原性コンジュゲートと、生理学的に許容できるビヒクルとを含む、免疫原性組成物。
【請求項２６】
アジュバントをさらに含む、請求項２５に記載の免疫原性組成物。
【請求項２７】
対象において、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）感染、血清型１０Ａ、２２Ｆ、または３３Ｆ肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）と関連する疾患または状態を治療または防止する方法であって、請求項２５または２６のいずれか一項に記載の免疫原性組成物の治療または予防有効量を投与するステップを含む方法。