【手続補正書】
【提出日】平成29年6月27日(2017.6.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウイルス構造タンパク質および、PD-1由来の抗原およびPD-1のリガンド由来の抗原からなる群から選択される抗原を含む、ウイルス様粒子。
【請求項２】
該ウイルス構造タンパク質が、アルファウイルスまたはフラビウイルス由来である、請求項１記載のウイルス様粒子。
【請求項３】
該ウイルス構造タンパク質が、チクングニアウイルスまたはベネズエラウマ脳炎ウイルス由来である、請求項２記載のウイルス様粒子。
【請求項４】
該ウイルス構造タンパク質が、カプシドおよび/またはエンベロープタンパク質E1およびE2を含む、請求項１〜３いずれかに記載のウイルス様粒子。
【請求項５】
PD-1由来の抗原が10〜300アミノ酸残基のPD-1断片であり、PD-1のリガンド由来の抗原が10〜300アミノ酸残基のPD-L1またはPD-L2断片である、請求項１〜４いずれかに記載のウイルス様粒子。
【請求項６】
PD-1由来の抗原が配列番号4〜12で表されるアミノ酸配列から選択されるPD-1断片であり、PD-1のリガンド由来の抗原が配列番号13〜24で表されるアミノ酸配列から選択されるPD-L1断片である、請求項５記載のウイルス様粒子。
【請求項７】
PD-1またはPD-L1由来の抗原が挿入されている１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなる、チクングニアウイルス様粒子であって、
PD-1またはPD-L1由来の抗原が挿入されている該エンベロープタンパク質E2が、配列番号33〜36に表されるアミノ酸配列からなり; 該エンベロープタンパク質E1が配列番号37で表されるアミノ酸配列からなり; 該カプシドが配列番号38で表されるアミノ酸配列からなる、請求項５または６記載のウイルス様粒子。
【請求項８】
PD-1またはPD-L1由来の抗原が挿入されている１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなる、ベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子であって、
PD-1またはPD-L1由来の抗原が挿入されている該エンベロープタンパク質E2が、配列番号39〜42に表されるアミノ酸配列からなり; 該エンベロープタンパク質E1が配列番号43で表されるアミノ酸配列からなり; 該カプシドが配列番号44で表されるアミノ酸配列からなる、請求項５または６記載のウイルス様粒子。
【請求項９】
請求項７または８記載のウイルス様粒子のアミノ酸配列と９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなるウイルス様粒子。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれかに記載のウイルス様粒子を発現させるためのヌクレオチド配列を含む、単離核酸分子。
【請求項１１】
請求項１０記載の核酸分子を含み、該核酸分子に操作可能に連結した発現調節配列を含んでいてもよい、ベクター。
【請求項１２】
(a) 請求項１〜９のいずれかに記載のウイルス様粒子、請求項１０記載の核酸分子および請求項１１記載のベクター；および
(b) 薬学的に許容される担体
を含む、医薬組成物。
【請求項１３】
該医薬組成物がワクチンである、請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
がんまたは感染性疾患の処置または予防；哺乳動物におけるPD-1またはPD-1のリガンドに対する抗体の産生；免疫応答の調節；免疫刺激；PD-1とPD-1のリガンドの間の相互作用の阻害；またはPD-1活性の阻害のための請求項１２記載の医薬組成物。
【請求項１５】
(a) 請求項１〜９のいずれか記載のウイルス様粒子を含む医薬組成物；および
(b) 請求項１〜９のいずれか記載のウイルス様粒子を含む他の医薬組成物
を含むキットであって、
(a) に含まれるウイルス様粒子が、(b) に含まれるウイルス様粒子と異なる、
キット。
【請求項１６】
がんまたは感染性疾患の処置または予防；哺乳動物におけるPD-1またはPD-1のリガンドに対する抗体の産生；免疫応答の調節；免疫刺激；PD-1とPD-1のリガンドの間の相互作用の阻害；またはPD-1活性の阻害のための請求項１５記載のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
PD-1は、PD-L1 (Programmed Death Ligand 1またはPDCD1L1またはB7-H1) およびPD-L2 (Programmed Death Ligand 2またはPDCD1L2またはB7-DC)の２つのリガンドを持ち、これらはB7ファミリーリガンドの一員である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
本明細書において、「PD-1リガンド抗原」という語は、PD-1のリガンド由来の抗原を指す。PD-1リガンドの例としては、例えば、PD-L1およびPD-L2が挙げられるが、これらに限定するものではない。好ましくは、PD-1リガンドはヒトPD-L1またはヒトPD-L2である。PD-L1またはPD-L2由来の抗原は、PD-L1またはPD-L2の断片; またはPD-L1またはPD-L2の断片の誘導体であってよい。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
ベネズエラウマ脳炎ウイルス構造タンパク質の例は、以下の配列である (配列番号3):
【化３】
2016526374.tif 000001
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９４】
以下の例示的な態様 (1)〜(35) は、本発明がさらに提供するものである：
(1)  ウイルス構造タンパク質ならびに、PD-1由来の抗原およびPD-1のリガンド由来の抗原からなる群から選択される少なくとも1つの抗原を含む粒子; 
(2)  (1) に記載の粒子の誘導体である、粒子; 
(3)  抗原が、PD-1、PD-L1またはPD-L2由来の抗原である、(1) または (2) 記載の粒子;
(4)  該粒子の動物への投与が、該抗原に対する抗体を誘発し、該抗体が、PD-1およびPD-L1の相互作用またはPD-1およびPD-L2の相互作用を遮断する、(1)〜(3) のいずれか記載の粒子; 
(5)  該粒子がウイルス様粒子である、(1)〜(4) のいずれか記載の粒子; 
(6)  該粒子が、アルファウイルスまたはフラビウイルス由来であるウイルス様粒子である、(1)〜(5) のいずれか記載の粒子; 
(7)  該粒子がチクングニアウイルスまたはベネズエラウマ脳炎ウイルス由来のウイルス様粒子である、(1)〜(6) のいずれか記載の粒子; 
(8)  ウイルス構造タンパク質が少なくとも１つの第一付着部位を含み、少なくとも１つの抗原が少なくとも１つの第二付着部位を含み、該ウイルス構造タンパク質および該抗原が少なくとも１つの第一付着部位および少なくとも１つの第二付着部位を介して連結している、ウイルス様粒子である、(1)〜(7) のいずれか記載の粒子; 
(9)  該ウイルス構造タンパク質が、カプシドおよび/またはエンベロープタンパク質E1およびE2を含む、(1)〜(8) のいずれか記載の粒子; 
(10)  少なくとも１つのPD-1由来の抗原または少なくとも１つのPD-L1由来の抗原が、エンベロープタンパク質のE2に挿入されている、(9) 記載の粒子; 
(11)  該ウイルス構造タンパク質が、チクングニアウイルス (CHIKV) またはベネズエラウマ脳炎ウイルス (VEEV) 由来のタンパク質である、(1)〜(10) のいずれか記載の粒子; 
(12)  PD-1由来の抗原が挿入されている１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなるチクングニアウイルス様粒子である粒子であって、PD-1由来の抗原が挿入されているエンベロープタンパク質E2が、配列番号33〜35で表されるアミノ酸配列からなり；エンベロープタンパク質E1が配列番号37で表されるアミノ酸配列からなり；該カプシドが配列番号38で表されるアミノ酸配列からなる、(1)〜(11) のいずれか記載の粒子; 
(13)  PD-1由来の抗原が挿入されている１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなるベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子である粒子であって、PD-1由来の抗原が挿入されているエンベロープタンパク質E2が配列番号39〜41で表されるアミノ酸配列からなり;該エンベロープタンパク質E1が配列番号43で表されるアミノ酸配列からなり; 該カプシドが配列番号44で表されるアミノ酸配列からなる、(1)〜(11) のいずれか記載の粒子; 
(14)  PD-L1由来の抗原が挿入されている１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなるチクングニアウイルス様粒子である粒子であって、PD-L1由来の抗原が挿入されているエンベロープタンパク質E2が配列番号36で表されるアミノ酸配列からなり;該エンベロープタンパク質E1が配列番号37で表されるアミノ酸配列からなり; 該カプシドが配列番号38で表されるアミノ酸配列からなる、(1)〜(11) のいずれか記載の粒子; 
(15)  PD-L1由来の抗原が挿入されている１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなるベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子である粒子であって、PD-L1由来の抗原が挿入されているエンベロープタンパク質E2が配列番号42で表されるアミノ酸配列からなり; 該エンベロープタンパク質E1が配列番号43で表されるアミノ酸配列からなり; 該カプシドが配列番号44で表されるアミノ酸配列からなる、(1)〜(11) のいずれか記載の粒子; 
(16)  (1)〜(15) のいずれかに記載の粒子のアミノ酸配列と90%以上 (または95%以上) の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる粒子;
(17)  (1)〜(16) のいずれかに記載の粒子を発現させるためのヌクレオチド配列を含む単離核酸分子; 
(18)  配列番号27〜32のいずれかによって表されるヌクレオチド配列と90%以上の配列同一性を有するヌクレオチド配列かなる単離核酸分子; 
(19)  該核酸分子が配列番号27〜32のいずれかによって表されるヌクレオチド配列からなる、(18) 記載の核酸分子; 
(20)  (17)〜(19) のいずれかに記載の核酸分子を含むベクターであって、該核酸分子に操作可能に連結した発現調節配列を含んでいてよい、ベクター (例えば、配列番号45、46、47、48、49または50で表されるヌクレオチド配列からなるベクター); 
(21)  (a) (1)〜(16) のいずれか記載の粒子、(17)〜(19) のいずれか記載の核酸分子および/または (20) 記載のベクター; および
(b) 薬学的に許容される担体; 
を含む、医薬組成物
(22) (1)〜(16) のいずれか記載の粒子および薬学的に許容される担体を含む、(21) 記載の医薬組成物（例えばワクチン）
(23)  がんまたは感染性疾患の処置または予防；哺乳動物におけるPD-1またはPD-1リガンドに対する抗体産生；免疫応答の調節；免疫刺激；PD-1とPD-1のリガンド間の相互作用の阻害；またはPD-1活性を阻害するための医薬組成物またはキットの作製のための、(1)〜(16) のいずれか記載の粒子、(17)〜(19) のいずれか記載の核酸分子および/または (20) 記載のベクターの使用; 
(24)  該医薬組成物が、PD-L1および/またはPD-L2のPD-1への結合を阻害するために投与される、(23) 記載の使用; 
(25)  該がんが黒色腫、腎臓がん、前立腺がん、乳がん、結腸がんまたは非小細胞肺がんである、(23) または (24) 記載の使用; 
(26)  該がんが、骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、皮膚性または眼内の悪性黒色腫、子宮がん、卵巣がん、直腸がん、肛門領域のがん、胃がん、精巣がん、卵管がん、子宮内膜がん、子宮頸がん、膣がん、外陰がん、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道がん、小腸がん、内分泌系がん、甲状腺がん、副甲状腺がん、副腎腺がん、軟組織肉腫、尿道がん、陰茎がん、慢性または急性白血病、例えば急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、幼児期の固形腫瘍、リンパ性リンパ腫、膀胱がん、腎臓または尿管のがん、腎盂がん、中枢神経系 (CNS) の腫瘍、原発性CNSリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄腫瘍、脳幹がん、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮がん、扁平上皮がん、T細胞リンパ腫、環境誘発性のがん、例えばアスベストにより誘発されるがんおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、(23) または(24) 記載の使用; 
(27)  感染性疾患が、HIV、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア、マラリア、リーシュマニア、肝炎ウイルス (A型、B型およびC型)、ヘルペスウイルス (例えばVZV、HSV-I、HAV-6、HSV-IIおよびCMV、エプスタイン・バーウイルス)、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス (cornovirus)、RSウイルス、ムンプスウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、HTLVウイルス、デングウイルス、パピローマウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、JCウイルスおよびアルボウイルス脳炎ウイルスによる病原体感染症、クラミジア菌、リケッチア菌、マイコバクテリア、ブドウ球菌、連鎖球菌、肺炎球菌、髄膜炎菌およびコノコッカス (conococci)、クレブシエラ、プロテウス、セラチア、シュードモナス、レジオネラ、ジフテリア、サルモネラ、桿菌、コレラ、破傷風菌、ボツリヌス、炭疽菌、ペスト、レプトスピラ症およびライム病菌による病原体感染症、カンジダ菌 (カンジダ・アルビカンス、カンジダ・クルセイ、カンジダ・グラブラータ、カンジダ・トロピカリス等)、クリプトコッカス・ネオフォルマンス、アスペルギルス（アスペルギルス・フミガーツス、クロコウジカビ等）、ケカビ目（Genus Mucorales） (ムコール属、アブシディア属、リゾプス属)、スポロトリックス・シェンキイ、ブラストミセス・デルマチチジス、南アメリカ分芽菌、コクシジオイデス・イミチスおよびヒストプラズマ・カプスラーツムによる病原体感染症ならびに寄生生物である、赤痢アメーバ、大腸バランチジウム、フォーラーネグレリア、アカントアメーバ種、ランブル鞭毛虫、クリプトスポリジウム種、ニューモシスチス・カリニ、三日熱マラリア原虫、ネズミバベシア、ブルセイトリパノソーマ、クルーズトリパノソーマ、ドノバンリーシュマニア、トキソプラズマ原虫およびブラジル鉤虫による病原体感染症からなる群から選択される、(23) または (24) 記載の使用; 
(28)  (a) (1)〜(16) のいずれか記載の粒子を含む医薬組成物; および
(b) (1)〜(16) のいずれか記載の粒子を含む他の医薬組成物
を含むキットであって、(a) に含まれる粒子が、(b) に含まれる粒子と異なるウイルス様粒子である、キット; 
(29) (a) に含まれる粒子がチクングニアウイルス様粒子であり、(b) に含まれる粒子がベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子であるか、または、(a) に含まれる粒子がベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子であり、(b) に含まれる粒子がチクングニアウイルス様粒子である、(28) 記載のキット;
(30)  (c) (1)〜(16) のいずれかに記載の粒子をそれぞれが含む１つ以上の医薬組成物をさらに含むキットであって、(a) が免疫化の開始に用いられ、(b) および (c) が追加免疫に用いられ、(c) に含まれる粒子が、(a) および(b) に含まれる粒子と異なるか、または (a) または (b) に含まれる粒子と同じである、(28) または (29) 記載のキット; 
(31)  それぞれの医薬組成物が、同時、別または連続的に投与される、(28)〜(30)のいずれかに記載のキット; 
(32)  がんまたは感染性疾患の処置または予防；哺乳動物におけるPD-1またはPD-1リガンドに対する抗体産生；免疫応答の調節；免疫刺激；PD-1とPD-1のリガンド間の相互作用の阻害；またはPD-1活性を阻害する方法に用いるための、(1)〜(16) のいずれかに記載の粒子、(17)〜(20) のいずれかに記載の核酸分子、(20) に記載のベクター、(21) または (22) 記載の医薬組成物または (28)〜(31) のいずれか記載のキット；
(33)  (25) または(26) に記載のがんから選択される、がんの処置または予防方法に用いるための、(1)〜(16) のいずれかに記載の粒子、(17)〜(20) のいずれかに記載の核酸分子、(20) に記載のベクター、(21) または (22) 記載の医薬組成物または (28)〜(31) のいずれか記載のキット; 
(34)  (27)に記載の感染性疾患から選択される感染性疾患の処置または予防方法に用いるための、(1)〜(16) のいずれかに記載の粒子、(17)〜(20) のいずれかに記載の核酸分子、(20) に記載のベクター、(21) または (22) 記載の医薬組成物または (28)〜(31) のいずれか記載のキット; 
(35)  チクングニアウイルス様粒子またはベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子の作製方法であって、該粒子を発現させるために、(20) に記載のベクターを用いて遺伝子導入した細胞を培養し、超遠心分離法を用いて該粒子を精製することを含む、方法。