【手続補正書】
【提出日】平成29年11月9日(2017.11.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
表１の単一の行に示す通りのＦ１からＦ５またはＦ１からＦ６と命名されて並べられた５または６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質。
【請求項２】
請求項１に記載のジンクフィンガータンパク質と、野生型または操作された開裂ドメインまたは開裂ハーフドメインとを含む融合タンパク質。
【請求項３】
請求項１または請求項２に記載の１種または複数種のタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
【請求項４】
請求項３に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項５】
前記ベクターが、ＡＡＶベクターである、請求項４に記載の発現ベクター。
【請求項６】
前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ２／６ベクターである、請求項５に記載の発現ベクター。
【請求項７】
請求項４〜６のいずれかに記載の発現ベクターを含む医薬組成物。
【請求項８】
第１のポリヌクレオチドを含む請求項４〜６のいずれかに記載の第１の発現ベクターと、第２のポリヌクレオチドを含む請求項４〜６のいずれかに記載の第２の発現ベクターとを含み、該第１のポリヌクレオチドと該第２のポリヌクレオチドとは異なっている、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
（ｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ５に並べられた５個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第１の行に示されている（配列番号４〜８）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ６に並べられた６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第２の行に示されている（配列番号９〜１４）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉｉ）第ＩＸ因子タンパク質をコードするドナーを含むＡＡＶベクターと
を含む、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記第１のポリヌクレオチドが、配列番号１５に示す配列を含むまたはそれからなり、前記第２のポリヌクレオチドが、配列番号１６に示す配列を含むまたはそれからなる、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ドナー配列をさらに含む、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ドナー配列が、発現ベクターに関連する、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ドナー配列が、配列番号１７に示す配列を含むまたはそれからなる、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記発現ベクターが、ＡＡＶベクターである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ２／６ベクターである、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
少なくとも１種のタンパク質が、細胞におけるアルブミン遺伝子に結合する、請求項１〜１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１〜１６のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１８】
細胞におけるアルブミン遺伝子を開裂するための組成物であって、該組成物は、請求項４〜６のいずれかに記載の１種または複数種の発現ベクターを含み、該ベクターは、前記１種または複数種のタンパク質が発現され、該アルブミン遺伝子が開裂されるような条件下で、該細胞に導入されることを特徴とする、組成物。
【請求項１９】
ドナー配列をさらに含み、該ドナー配列が、開裂された前記アルブミン遺伝子に組み込まれることを特徴とする、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ドナー配列が、ＡＡＶベクターを使用して導入される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ２／６ベクターである、請求項２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記ドナー配列が、第ＩＸ因子（Ｆ．ＩＸ）タンパク質をコードする、請求項１８〜２１のいずれかに記載の組成物。
【請求項２３】
前記細胞が、肝臓細胞である、請求項１８〜２２のいずれかに記載の組成物。
【請求項２４】
血友病Ｂの患者を処置するための、請求項４〜６のいずれかに記載の発現ベクターを含む組成物または請求項７に記載の医薬組成物であって、該組成物または該医薬組成物は、内在性アルブミン遺伝子への機能的第ＩＸ因子タンパク質をコードする導入遺伝子の標的化組込みを媒介することを特徴とする、組成物または医薬組成物。
【請求項２５】
（ｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ５に並べられた５個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第１の行に示されている（配列番号４〜８）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ６に並べられた６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第２の行に示されている（配列番号９〜１４）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉｉ）第ＩＸ因子タンパク質をコードするドナーを含むＡＡＶベクターと
を含む、請求項２４に記載の組成物または医薬組成物。
【請求項２６】
前記組成物または医薬組成物および導入遺伝子が、静脈内投与される、請求項２４または請求項２５に記載の組成物または医薬組成物。
【請求項２７】
請求項４〜６のいずれかに記載の発現ベクターを含むキット。
【請求項２８】
前記第１のヌクレアーゼ、該第１のヌクレアーゼとは異なる前記第２のヌクレアーゼおよび前記導入遺伝子ドナーが、約１：１：１、約１：１：２、約１：１：３、約１：１：４、約１：１：５、約１：１：６、約１：１：７、約１：１：８、約１：１：９、約１：１：１０、約１：１：１１、約１：１：１２、約１：１：１３、約１：１：１４、約１：１：１５、約１：１：１６、約１：１：１７、約１：１：１８、約１：１：１９または約１：１：２０の比で提供される、請求項８または１０〜１７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項２９】
（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）が、約１：１：１、約１：１：２、約１：１：３、約１：１：４、約１：１：５、約１：１：６、約１：１：７、約１：１：８、約１：１：９、約１：１：１０、約１：１：１１、約１：１：１２、約１：１：１３、約１：１：１４、約１：１：１５、約１：１：１６、約１：１：１７、約１：１：１８、約１：１：１９または約１：１：２０の比で提供される、請求項９に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
これらおよび他の態様は、全体としての開示を踏まえて、当業者に容易に明らかである。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
表１の単一の行に示す通りのＦ１からＦ５またはＦ１からＦ６と命名されて並べられた５または６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質。
（項目２）
項目１に記載のジンクフィンガータンパク質と、野生型または操作された開裂ドメインまたは開裂ハーフドメインとを含む融合タンパク質。
（項目３）
項目１または項目２に記載の１種または複数種のタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
（項目４）
項目３に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
（項目５）
前記ベクターが、ＡＡＶベクターである、項目４に記載の発現ベクター。
（項目６）
前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ２／６ベクターである、項目５に記載の発現ベクター。
（項目７）
項目４〜６のいずれかに記載の発現ベクターを含む医薬組成物。
（項目８）
第１のポリヌクレオチドを含む項目４〜６のいずれかに記載の第１の発現ベクターと、第２のポリヌクレオチドを含む項目４〜６のいずれかに記載の第２の発現ベクターとを含み、該第１のポリヌクレオチドと該第２のポリヌクレオチドとは異なっている、項目７に記載の医薬組成物。
（項目９）
（ｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ５に並べられた５個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第１の行に示されている（配列番号４〜８）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ６に並べられた６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第２の行に示されている（配列番号９〜１４）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉｉ）第ＩＸ因子タンパク質をコードするドナーを含むＡＡＶベクターと
を含む、項目７に記載の医薬組成物。
（項目１０）
前記第１のポリヌクレオチドが、配列番号１５に示す配列を含むまたはそれからなり、前記第２のポリヌクレオチドが、配列番号１６に示す配列を含むまたはそれからなる、項目８に記載の医薬組成物。
（項目１１）
ドナー配列をさらに含む、項目１０に記載の医薬組成物。
（項目１２）
前記ドナー配列が、発現ベクターに関連する、項目１１に記載の医薬組成物。
（項目１３）
前記ドナー配列が、配列番号１７に示す配列を含むまたはそれからなる、項目１１に記載の医薬組成物。
（項目１４）
前記発現ベクターが、ＡＡＶベクターである、項目１３に記載の医薬組成物。
（項目１５）
前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ２／６ベクターである、項目１４に記載の医薬組成物。
（項目１６）
少なくとも１種のタンパク質が、細胞におけるアルブミン遺伝子に結合する、先行する項目のいずれかに記載の医薬組成物。
（項目１７）
薬学的に許容される担体をさらに含む、先行する項目のいずれかに記載の医薬組成物。
（項目１８）
細胞におけるアルブミン遺伝子を開裂する方法であって、
前記１種または複数種のタンパク質が発現され、該アルブミン遺伝子が開裂されるような条件下で、該細胞に、項目４〜６のいずれかに記載の１種または複数種の発現ベクターを導入するステップ
を含む方法。
（項目１９）
開裂された前記アルブミン遺伝子にドナー配列を組み込むステップをさらに含む、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記ドナー配列が、ＡＡＶベクターを使用して導入される、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ２／６ベクターである、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記ドナー配列が、第ＩＸ因子（Ｆ．ＩＸ）タンパク質をコードする、項目１８〜２１のいずれかに記載の方法。
（項目２３）
前記細胞が、肝臓細胞である、項目１８〜２２のいずれかに記載の方法。
（項目２４）
血友病Ｂの患者を処置する方法であって、内在性アルブミン遺伝子への機能的第ＩＸ因子タンパク質をコードする導入遺伝子の標的化組込みを媒介する、項目４〜６のいずれかに記載の発現ベクターまたは項目７に記載の医薬組成物を該患者に投与するステップを含む方法。
（項目２５）
（ｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ５に並べられた５個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第１の行に示されている（配列番号４〜８）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉ）ジンクフィンガーヌクレアーゼをコードするポリヌクレオチドを含むＡＡＶベクターであって、該ジンクフィンガーヌクレアーゼが、ＦｏｋＩ開裂ドメインと、Ｆ１からＦ６に並べられた６個のジンクフィンガードメインを含むジンクフィンガータンパク質とを含み、各ジンクフィンガードメインが、認識ヘリックス領域を含み、該ジンクフィンガータンパク質の該認識ヘリックス領域が、表１の第２の行に示されている（配列番号９〜１４）ＡＡＶベクターと、
（ｉｉｉ）第ＩＸ因子タンパク質をコードするドナーを含むＡＡＶベクターと
を含む系が前記患者に投与される、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記発現ベクター（複数可）または医薬組成物および導入遺伝子が、静脈内投与される、項目２４または項目２５に記載の方法。
（項目２７）
項目４〜６のいずれかに記載の発現ベクターを含むキット。
（項目２８）
前記第１のヌクレアーゼ、該第１のヌクレアーゼとは異なる前記第２のヌクレアーゼおよび前記導入遺伝子ドナーが、約１：１：１、約１：１：２、約１：１：３、約１：１：４、約１：１：５、約１：１：６、約１：１：７、約１：１：８、約１：１：９、約１：１：１０、約１：１：１１、約１：１：１２、約１：１：１３、約１：１：１４、約１：１：１５、約１：１：１６、約１：１：１７、約１：１：１８、約１：１：１９または約１：１：２０の比で提供される、項目８または１０〜１７に記載の医薬組成物。
（項目２９）
（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）が、約１：１：１、約１：１：２、約１：１：３、約１：１：４、約１：１：５、約１：１：６、約１：１：７、約１：１：８、約１：１：９、約１：１：１０、約１：１：１１、約１：１：１２、約１：１：１３、約１：１：１４、約１：１：１５、約１：１：１６、約１：１：１７、約１：１：１８、約１：１：１９または約１：１：２０の比で提供される、項目９に記載の医薬組成物。