【手続補正書】
【提出日】平成29年4月6日(2017.4.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
野生型クロストリジウムボツリナム（Clostridium botulinum）神経毒の単離され生理学的に活性な誘導体を含む、対象を治療するための薬学的組成物であって、該クロストリジウムボツリナム神経毒誘導体が、野生型クロストリジウムボツリナム神経毒の毒性の原因となるメタロプロテアーゼ活性を減少させる、野生型クロストリジウムボツリナム神経毒に対する1つまたは複数のアミノ酸置換を含み、該神経毒誘導体が軽鎖領域と重鎖領域を含み、該軽鎖領域と重鎖領域がジスルフィド結合によって連結され、該軽鎖と重鎖が切断されておらず、該神経毒誘導体が、そのＮ末端にカーゴ付着ペプチド配列を持たず、且つ該対象が該治療のために該組成物に接触される、前記薬学的組成物。
【請求項２】
前記クロストリジウムボツリナム神経毒誘導体が、クロストリジウムボツリナムセロタイプＡ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＢ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＣ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＤ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＥ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＦ、及びクロストリジウムボツリナムセロタイプＧからなる群より選択されるセロタイプを持つ、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
前記神経毒誘導体が、組換えタンパク質である、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
しわ、肥大性咬筋、及び局所多汗症からなる群より選択される皮膚科的または美容的な状態を治療するための、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
食道運動障害、咽頭食道痙攣、及び裂肛からなる群より選択される胃腸病学的な状態を治療するための、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
尿路神経原性機能障害、過活動膀胱、及び切迫性尿失禁の神経調節からなる群より選択される尿生殖器学的な状態を治療するための、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
トゥーレット症候群、局所の筋痙縮またはジストニア、痙性斜頚、原発性眼瞼痙攣、片側顔面痙攣、痙攣性発声障害、顔面神経障害、ラスムッセン症候群、切断痛、声の震え、ワニの涙症候群、辺縁性下顎神経麻痺、疼痛、食道由来の胸痛、頭痛、脳性麻痺、多発性硬化症の臀部内転筋機能障害、神経痛及び炎症、関節炎、医原性耳下腺唾液腺粘液腫、ならびに慢性ＴＭＪ疼痛及び転位からなる群より選択される神経学的な状態を治療するための、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
前記神経毒誘導体が、対応する野生型クロストリジウムボツリナム神経毒のＬＤ５０よりも少なくとも１，０００倍高いＬＤ５０を持つ、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
前記神経毒誘導体が、プロペプチドを切断することによって生成され、
該プロペプチドが、
軽鎖領域と、
重鎖領域と、
該軽鎖領域及び重鎖領域を結合し、高度に特異的なプロテアーゼ切断部位を含む中間領域と
を含み、
該軽鎖領域及び重鎖領域がジスルフィド結合によって連結され、該高度に特異的なプロテアーゼ切断部位が、切断を可能にするために、高度に特異的なプロテアーゼによって認識される三つ以上の特異的近接アミノ酸残基を持つ、
請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
（ａ）前記高度に特異的なプロテアーゼ切断部位が、エンテロキナーゼ切断部位及びタバコエッチ病ウイルスプロテアーゼ認識（ＴＥＶ）配列から選択される；または
（ｂ）前記プロペプチドが、前記中間領域内に低度に特異的なプロテアーゼ切断部位を持たず、該低度に特異的なプロテアーゼ切断部位が、切断を許容するために、プロテアーゼによって認識される二つ以下の近接アミノ酸残基を持つ；または
（ｃ）前記軽鎖領域及び重鎖領域が切断されていない；または
（ｄ）前記プロペプチドが、前記軽鎖領域に結合されたシグナルペプチドをさらに含み、該シグナルペプチドが、真核細胞から培地への前記神経毒プロペプチドの分泌を可能にするのに適切であり、任意で、
（ｉ）該シグナルペプチドが、ｇｐ６４シグナルペプチドである；または
（ｉｉ）該プロペプチドが、該シグナルペプチドと該軽鎖領域との間に位置する親和性タグをさらに含み、任意で、該親和性タグが配列番号１０の配列を持つ、
請求項９に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
前記重鎖がトリプシン感受性の認識配列を持たない、請求項１に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
対象を治療するための医薬の製造における、野生型クロストリジウムボツリナム神経毒の単離され生理学的に活性な誘導体の使用であって、該クロストリジウムボツリナム神経毒誘導体が、野生型クロストリジウムボツリナム神経毒の毒性の原因となるメタロプロテアーゼ活性を減少させる、野生型クロストリジウムボツリナム神経毒に対する1つまたは複数のアミノ酸置換を含み、該神経毒誘導体が軽鎖領域と重鎖領域を含み、該軽鎖領域と重鎖領域がジスルフィド結合によって連結され、該軽鎖と重鎖が切断されておらず、該神経毒誘導体が、そのＮ末端にカーゴ付着ペプチド配列を持たず、且つ該対象が該治療のために該医薬に接触される、前記使用。
【請求項１３】
前記クロストリジウムボツリナム神経毒誘導体が、クロストリジウムボツリナムセロタイプＡ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＢ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＣ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＤ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＥ、クロストリジウムボツリナムセロタイプＦ、及びクロストリジウムボツリナムセロタイプＧからなる群より選択されるセロタイプを持つ、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記神経毒誘導体が、組換えタンパク質である、請求項１２に記載の使用。
【請求項１５】
前記医薬が、しわ、肥大性咬筋、及び局所多汗症からなる群より選択される皮膚科的または美容的な状態を治療するためのものである、請求項１２に記載の使用。
【請求項１６】
前記医薬が、食道運動障害、咽頭食道痙攣、及び裂肛からなる群より選択される胃腸病学的な状態を治療するためのものである、請求項１２に記載の使用。
【請求項１７】
前記医薬が、尿路神経原性機能障害、過活動膀胱、及び切迫性尿失禁の神経調節からなる群より選択される尿生殖器学的な状態を治療するためのものである、請求項１２に記載の使用。
【請求項１８】
前記医薬が、トゥーレット症候群、局所の筋痙縮またはジストニア、痙性斜頚、原発性眼瞼痙攣、片側顔面痙攣、痙攣性発声障害、顔面神経障害、ラスムッセン症候群、切断痛、声の震え、ワニの涙症候群、辺縁性下顎神経麻痺、疼痛、食道由来の胸痛、頭痛、脳性麻痺、多発性硬化症の臀部内転筋機能障害、神経痛及び炎症、関節炎、医原性耳下腺唾液腺粘液腫、ならびに慢性ＴＭＪ疼痛及び転位からなる群より選択される神経学的な状態を治療するためのものである、請求項１２に記載の使用。
【請求項１９】
前記神経毒誘導体が、対応する野生型クロストリジウムボツリナム神経毒のＬＤ５０よりも少なくとも１，０００倍高いＬＤ５０を持つ、請求項１２に記載の使用。
【請求項２０】
前記神経毒誘導体が、プロペプチドを切断することによって生成され、
該プロペプチドが、
軽鎖領域と、
重鎖領域と、
該軽鎖領域及び重鎖領域を結合し、高度に特異的なプロテアーゼ切断部位を含む中間領域と
を含み、
該軽鎖領域及び重鎖領域がジスルフィド結合によって連結され、該高度に特異的なプロテアーゼ切断部位が、切断を可能にするために、高度に特異的なプロテアーゼによって認識される三つ以上の特異的近接アミノ酸残基を持つ、
請求項１２に記載の使用。
【請求項２１】
（ａ）前記高度に特異的なプロテアーゼ切断部位が、エンテロキナーゼ切断部位及びタバコエッチ病ウイルスプロテアーゼ認識（ＴＥＶ）配列から選択される；または
（ｂ）前記プロペプチドが、前記中間領域内に低度に特異的なプロテアーゼ切断部位を持たず、該低度に特異的なプロテアーゼ切断部位が、切断を許容するために、プロテアーゼによって認識される二つ以下の近接アミノ酸残基を持つ；または
（ｃ）前記軽鎖領域及び重鎖領域が切断されていない；または
（ｄ）前記プロペプチドが、前記軽鎖領域に結合されたシグナルペプチドをさらに含み、該シグナルペプチドが、真核細胞から培地への前記神経毒プロペプチドの分泌を可能にするのに適切であり、任意で、
（ｉ）該シグナルペプチドが、ｇｐ６４シグナルペプチドである；または
（ｉｉ）該プロペプチドが、該シグナルペプチドと該軽鎖領域との間に位置する親和性タグをさらに含み、任意で、該親和性タグが配列番号１０の配列を持つ、
請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
前記重鎖がトリプシン感受性の認識配列を持たない、請求項１２に記載の使用。