【手続補正書】
【提出日】平成29年3月7日(2017.3.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）１又は２以上のポリペプチドを含み、少なくとも１つの細胞外標的生体分子に特異的に結合することができる免疫グロブリン型結合領域と、
ｂ）志賀毒素Ａサブユニットエフェクターポリペプチドと
を含む細胞毒性タンパク質。
【請求項２】
免疫グロブリン型結合領域が、相補性決定領域３断片、拘束されたＦＲ３−ＣＤＲ３−ＦＲ４ポリペプチド、単一ドメイン抗体断片、一本鎖可変断片、抗体可変断片、抗原結合断片、Ｆｄ断片、フィブロネクチン由来第１０フィブロネクチンIII型ドメイン、テナシンIII型ドメイン、アンキリンリピートモチーフドメイン、低密度リポタンパク質受容体由来Ａドメイン、リポカリン、Kunitzドメイン、プロテインＡ由来Ｚドメイン、ガンマ−Ｂ結晶由来ドメイン、ユビキチン由来ドメイン、Ｓａｃ７ｄ由来ポリペプチド、Ｆｙｎ由来ＳＨ２ドメイン、操作された抗体模倣物、及び結合機能を保持する前記のいずれかの任意の遺伝子操作された対応物からなる群から選択されるポリペプチドを含む、請求項１に記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項３】
細胞毒性タンパク質を、免疫グロブリン型結合領域の細胞外標的生体分子と物理的にカップリングした細胞へ投与すると、前記細胞毒性タンパク質が前記細胞の死滅を引き起こすことができる、請求項１又は２に記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項４】
細胞毒性タンパク質を、メンバーが免疫グロブリン型結合領域の細胞外標的生体分子と物理的にカップリングした第１の細胞集団、及びメンバーが免疫グロブリン型結合領域の任意の細胞外標的生体分子と物理的にカップリングしていない第２の細胞集団へ投与すると、前記第２の細胞集団のメンバーと比較した前記第１の細胞集団のメンバーに対する前記細胞毒性タンパク質の細胞毒性効果が少なくとも３倍高い、請求項３に記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項５】
免疫グロブリン型結合領域が、
ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４０、ＣＤ７９、ＣＤ２５、ＣＤ３０、ＨＥＲ２／ｎｅｕ／ＥｒｂＢ２、ＥＧＦＲ、ＥｐＣＡＭ、ＥｐｈＢ２、前立腺特異的膜抗原、Ｃｒｉｐｔｏ、エンドグリン、線維芽細胞活性化タンパク質、Ｌｅｗｉｓ−Ｙ、ＣＤ１９、ＣＤ２１、ＣＳ１／ＳＬＡＭＦ７、ＣＤ３３、ＣＤ５２、ＥｐＣＡＭ、ＣＥＡ、ｇｐＡ３３、Ｍｕｃｉｎ、ＴＡＧ−７２、IX型炭酸脱水酵素、葉酸結合タンパク質、ガングリオシドＧＤ２、ガングリオシドＧＤ３、ガングリオシドＧＭ２、ガングリオシドＬｅｗｉｓ−Ｙ２、ＶＥＧＦＲ、アルファＶベータ３、アルファ５ベータ１、ＥｒｂＢ１／ＥＧＦＲ、Ｅｒｂ３、ｃ−ＭＥＴ、ＩＧＦ１Ｒ、ＥｐｈＡ３、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、ＲＡＮＫＬ、ＦＡＰ、テナシン、ＣＤ６４、メソテリン、ＢＲＣＡ１、ＭＡＲＴ−１／ＭｅｌａｎＡ、ｇｐ１００、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−１／２、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＣＤＫ−４、ベータ−カテニン、ＭＵＭ−１、キャスパーゼ−８、ＫＩＡＡ０２０５、ＨＰＶＥ６、ＳＡＲＴ−１、ＰＲＡＭＥ、がん胎児抗原、前立腺特異的抗原、前立腺幹細胞抗原、ヒトアスパルチル（アスパラギニル）ベータ−ヒドロキシラーゼ、ＥｐｈＡ２、ＨＥＲ３／ＥｒｂＢ−３、ＭＵＣ１、ＭＡＲＴ−１／ＭｅｌａｎＡ、ｇｐ１００、チロシナーゼ関連抗原、ＨＰＶ−Ｅ７、エプスタイン−バーウイルス抗原、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、アルファ−フェトタンパク質抗原、１７−Ａ１、膀胱腫瘍抗原、ＣＤ３８、ＣＤ１５、ＣＤ２３、ＣＤ５３、ＣＤ８８、ＣＤ１２９、ＣＤ１８３、ＣＤ１９１、ＣＤ１９３、ＣＤ２４４、ＣＤ２９４、ＣＤ３０５；Ｃ３ＡＲ、ＦｃｅＲＩａ、ガレクチン−９、ｍｒｐ−１４、ｓｉｇｌｅｃ−８、ｓｉｇｌｅｃ−１０、ＣＤ４９ｄ、ＣＤ１３、ＣＤ４４、ＣＤ５４、ＣＤ６３、ＣＤ６９、ＣＤ１２３、ＴＬＲ４、ＦｃｅＲＩａ、ＩｇＥ、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ６８、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１０５、ＣＤ１１５、Ｆ４／８０、ＩＬＴ−３、ガレクチン−３、ＣＤ１１ａ〜ｃ、ＧＩＴＲＬ、ＭＨＣクラスII、ＣＤ２８４−ＴＬＲ４、ＣＤ１０７−Ｍａｃ３、ＣＤ１９５−ＣＣＲ５、ＨＬＡ−ＤＲ、ＣＤ１６／３２、ＣＤ２８２−ＴＬＲ２、及び前記のいずれかの任意の免疫原性断片
からなる群から選択される細胞外標的生体分子に結合することができる、請求項１〜４のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項６】
志賀毒素エフェクターポリペプチドが、
（i）配列番号１、配列番号２、又は配列番号３のアミノ酸７５〜２５１；
（ii）配列番号１、配列番号２、又は配列番号３のアミノ酸１〜２４１；
（iii）配列番号１、配列番号２、又は配列番号３のアミノ酸１〜２５１；又は
（iv）配列番号１、配列番号２、又は配列番号３のアミノ酸１〜２６１
のポリペプチド配列を含むか、若しくはそれから本質的になる、請求項１〜５のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項７】
免疫グロブリン型結合領域が、配列番号４のアミノ酸２６９〜５０８のポリペプチド配列を含むか、又はそれから本質的になる、請求項５に記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項８】
免疫グロブリン型結合領域が、配列番号５のアミノ酸１〜１１９のポリペプチド配列を含むか、又はそれから本質的になる、請求項５に記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項９】
配列番号５のポリペプチド配列を含むか、又はそれから本質的になる、請求項８に記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項１０】
志賀毒素エフェクターポリペプチドが、志賀毒素エフェクターポリペプチドの酵素活性を変化させる、志賀毒素ファミリーのメンバーの天然のＡサブユニットに対する変異であって、少なくとも１つのアミノ酸残基の欠失又は置換から選択される変異を含む、請求項１〜９のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質と、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤又は担体とを含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質をコードすることができるポリヌクレオチド、又はその相補体、又は前記いずれかの断片。
【請求項１３】
請求項１２に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項１４】
請求項１２又は１３に記載のポリヌクレオチド又は発現ベクターのいずれかを含む形質転換された宿主細胞。
【請求項１５】
細胞を、請求項１〜１０のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質又は請求項１１に記載の医薬組成物とインビトロで接触させるステップを含む、前記細胞をインビトロで死滅させる方法。
【請求項１６】
請求項１〜１０のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質又は請求項１１に記載の医薬組成物を含む、それを必要とする患者における疾患、障害、又は状態の治療剤。
【請求項１７】
疾患、障害、又は状態ががん、腫瘍、免疫障害、及び微生物感染症からなる群から選択される、請求項１６に記載の治療剤。
【請求項１８】
がんが、骨のがん、乳がん、中枢／末梢神経系のがん、消化管のがん、生殖細胞がん、腺がん、頭頸部がん、血液がん、腎臓−尿路のがん、肝臓がん、肺／胸膜がん、前立腺がん、肉腫、皮膚がん、及び子宮がんからなる群から選択されるか、或いは、
免疫障害が、アミロイドーシス、強直性脊椎炎、喘息、クローン病、糖尿病、移植片拒絶、移植片対宿主疾患、橋本甲状腺炎、溶血性尿毒症症候群、ＨＩＶ関連疾患、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、多発動脈炎、乾癬、乾癬性関節炎、関節リウマチ、強皮症、敗血性ショック、シェーグレン症候群、潰瘍性大腸炎、及び血管炎からなる群から選択される疾患と関連する、請求項１７に記載の治療剤。
【請求項１９】
がん、腫瘍、免疫障害、又は微生物感染の治療又は予防のための医薬の製造における、請求項１〜１０のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質又は請求項１１に記載の医薬組成物の使用。
【請求項２０】
がん、腫瘍、又は免疫障害の治療又は予防のための、請求項１〜１０のいずれかに記載の細胞毒性タンパク質又は請求項１１に記載の医薬組成物。