【手続補正書】
【提出日】平成28年12月6日(2016.12.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般構造：
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰはＡＬＧＰ（配列番号１）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、又はＫＬＧＰ（配列番号６）を有するテトラペプチドであり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）を有する化合物
又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
前記キャッピング基Ｃがホスホノアセチル基又はスクシニル基である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
前記薬物Ｄがドキソルビシンである、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
前記薬物Ｄがペグ化されている、請求項１又は３に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
存在するとき、前記リンカー又はスペーシング基が自己脱離リンカー又はスペーシング基である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
前記化合物が化合物Ｉ：
【化１】
2016509586.tif 000001
である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を含む組成物。
【請求項８】
薬学的に許容可能な溶媒、希釈剤又は担体の少なくとも１つをさらに含む、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
癌の治療で用いられる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物若しくはその塩又は請求項７若しくは８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記癌の治療が併用化学療法処置又は集学的化学療法処置である、請求項９に記載の化合物若しくはその塩、又は組成物。
【請求項１１】
前記癌の治療が、薬剤耐性克服剤（ｒｅｖｅｒｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を含む治療と併用される、請求項９又は１０に記載の化合物若しくはその塩、又は組成物。
【請求項１２】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物を含む、腫瘍又は癌を有する対象に前記腫瘍又は癌の近傍に薬物の治療有効量を提供するのに十分な量で投与し、前記投与が前記腫瘍又は癌の処置をもたらすものである、医薬。
【請求項１３】
前記薬物の治療有効量が白血球減少症又は心毒性を引き起こさない、請求項１２に記載の薬剤。
【請求項１４】
併用化学療法処置又は集学的化学療法処置の一部として投与される、請求項１２又は１３に記載の薬剤。
【請求項１５】
前記対象に薬剤耐性克服剤（ｒｅｖｅｒｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を投与するステップを含む治療と併用される、請求項１２又は１３に記載の薬剤。
【請求項１６】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物の作製方法であって、
（ｉ）前記薬物を入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物を、キャッピングされたオリゴペプチド部分に結合させるステップであって、それにより前記化合物を生じさせるステップ；又は、それに代えて、
（ｉｉ’）前記薬物をオリゴペプチド部分に結合させて、次に前記オリゴペプチド部分にキャッピング基を結合させるステップであって、それにより前記化合物を生じさせるステップ；及び
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）又は（ｉｉ’）で得られた前記化合物を精製するステップ
を含み、前記オリゴペプチド部分は、ＡＬＧＰ（配列番号１）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、又はＫＬＧＰ（配列番号６）を有するテトラペプチドである、方法。
【請求項１７】
一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰはＡＬＧＰ（配列番号１）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、又はＫＬＧＰ（配列番号６）を有するテトラペプチドであり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）を有する候補化合物のスクリーニング方法であって、
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物ＤをＧＰ−ジペプチドとコンジュゲートするステップであって、それによりＧＰ−Ｄジペプチド−薬物中間体化合物を得るステップ；
（ｉｉｉ）薬物Ｄ及び前記ジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄの各々を、独立に、インビトロ培養細胞と接触させるステップ；
（ｉｖ）前記薬物Ｄ及びジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄの細胞毒性を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、薬物Ｄと同等の細胞毒性活性を有するジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定されたジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄに対応する［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補化合物として選択するステップ
を含む方法。
【請求項１８】
一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰはＡＬＧＰ（配列番号１）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、又はＫＬＧＰ（配列番号６）を有するテトラペプチドであり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）を有する候補化合物のスクリーニング方法であって、
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物Ｄを［Ｃｘ−ＯＰ］ｙとコンジュゲートするステップであって、それにより［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ化合物を得るステップ；
（ｉｉｉ）薬物Ｄ及び化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄの各々を、独立に、インビトロ培養細胞と接触させるステップ；
（ｉｖ）薬物Ｄ及び化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄの細胞毒性を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、薬物Ｄと同等の細胞毒性活性を有する化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定された［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補化合物として選択するステップ
を含む方法。
【請求項１９】
一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰはＡＬＧＰ（配列番号１）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、又はＫＬＧＰ（配列番号６）を有するテトラペプチドであり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）を有する候補化合物のスクリーニング方法であって、
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物Ｄを［Ｃｘ−ＯＰ］ｙとコンジュゲートするステップであって、それにより［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ化合物を得るステップ；
（ｉｉｉ）化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄをインビトロ培養細胞と３７℃で５時間接触させるステップ；
（ｉｖ）化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄから遊離薬物Ｄへの変換を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、少なくとも５０％がＤに変換される化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定された［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補化合物として選択するステップ
含む方法。
【請求項２０】
一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰはＡＬＧＰ（配列番号１）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、又はＫＬＧＰ（配列番号６）を有するテトラペプチドであり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）を有する候補化合物のスクリーニング方法であって
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物ＤをＧＰ−ジペプチドとコンジュゲートするステップであって、それによりＧＰ−Ｄジペプチド−薬物中間体化合物を得るステップ；
（ｉｉｉ）ジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄを単離ＦＡＰ及び／又はＤＰＩＶペプチダーゼと３７℃で３時間接触させるステップ；
（ｉｖ）ジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄから遊離薬物Ｄへの変換を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、少なくとも５０％がＤに変換されるジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定されたジペプチド−薬物中間体化合物ＧＰ−Ｄに対応する［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補化合物として選択するステップ
を含む方法。
【請求項２１】
一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰはＡＬＧＰ（配列番号１）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、又はＫＬＧＰ（配列番号６）を有するテトラペプチドであり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）を有する候補化合物のスクリーニング方法であって
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物Ｄを［Ｃｘ−ＯＰ］ｙとコンジュゲートするステップであって、それにより［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ化合物を得るステップ；
（ｉｉｉ）化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを単離ＣＤ１０及び／又はＴＯＰペプチダーゼと、及び単離ＦＡＰ及び／又はＤＰＩＶペプチダーゼと３７℃で３時間〜２４時間接触させるステップ；
（ｉｖ）化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄから遊離薬物Ｄへの変換を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、少なくとも５０％がＤに変換される化合物［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定された［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補化合物として選択するステップ
含む方法。
【請求項２２】
前記キャッピング基Ｃがホスホノアセチル基又はスクシニル基である、請求項１６〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記薬物Ｄが、メイタンシン、ゲルダナマイシン、パクリタキセル、ドセタキセル、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｈｏｔｈｅｃｉｎ）、ビンブラスチン、ビンクリスチン、メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｈｒｅｘａｔｅ）、アミノプテリン、アムルビシン、又はそのいずれかの誘導体からなる群から選択される、請求項１６〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
存在するとき、前記リンカー又はスペーシング基が自己脱離リンカー又はスペーシング基である、請求項１６〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物若しくはその塩又は請求項７若しくは８に記載の組成物を含む容器を含むキット。
【請求項２６】
同じ容器又は１つ以上の別個の容器に、１つ以上のさらなる抗癌薬をさらに含む、請求項２５に記載のキット。
【請求項２７】
前記さらなる抗癌薬が抗体又はその断片である、請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
同じ容器又は１つ以上の別個の容器に、１つ以上の薬剤耐性克服剤をさらに含む、請求項２６又は２７に記載のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３０】
総白血球数及び総好中球数
対照又はドキソルビシン処置動物と比較して、ＰｈＡｃ−ＡＬＧＰ−ｄｏｘで処置したマウスにおいて総白血球及び総好中球に重大な変化は観察されなかった（それぞれ図１８及び図１９；対照群：ｎ＝４；ＰｈＡｃ−ＡＬＧＰ−ｄｏｘ処置群：ｎ＝３；ドキソルビシン処置群：ｎ＝４）。好中球減少症は、遊離ドキソルビシン処置の最も重大な毒性副作用の１つである。従って、遊離ドキソルビシンと比べて４０倍高い用量のＰｈＡｃ−ＡＬＧＰ−ドキソルビシンを投与した２１日後の好中球（ｎｅｔｒｏｐｈｉｌ）数が変化しないままであることは、臨床的観点からは極めて有望な新規の実験結果である。
さらに、本願発明は次の態様を含む。
項１. 一般構造：
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰはオリゴペプチド部分であり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）
を有するプロドラッグ又はその薬学的に許容可能な塩。
項２. 前記オリゴペプチド部分ＯＰが、配列ＡＬＧＰ（配列番号１）、ＡＬＡＬ（配列番号２）、ＡＬＡＰ（配列番号３）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、ＴＳＡＰ（配列番号５）、ＫＬＧＰ（配列番号６）、ＫＬＡＰ（配列番号７）、ＡＬＫＰ（配列番号８）、ＴＳＫＰ（配列番号９）、又はＫＬＫＰ（配列番号１０）を有するテトラペプチドである、項１に記載のプロドラッグ又はその塩。
項３. 前記キャッピング基Ｃがホスホノアセチル基である、項１に記載のプロドラッグ又はその塩。
項４. 前記キャッピング基Ｃがホスホノアセチル基であり、前記オリゴペプチド部分ＯＰが、配列ＡＬＧＰ（配列番号１）、ＡＬＡＬ（配列番号２）、ＡＬＡＰ（配列番号３）、ＴＳＧＰ（配列番号４）、ＴＳＡＰ（配列番号５）、ＫＬＧＰ（配列番号６）、ＫＬＡＰ（配列番号７）、ＡＬＫＰ（配列番号８）、ＴＳＫＰ（配列番号９）、又はＫＬＫＰ（配列番号１０）を有するテトラペプチドである、項１に記載のプロドラッグ又はその塩。
項５. 前記薬物Ｄがドキソルビシンである、項１〜４のいずれか一項に記載のプロドラッグ又はその塩。
項６. 前記薬物Ｄがペグ化されている、項１〜５のいずれか一項に記載のプロドラッグ又はその塩。
項７. 前記リンカー又はスペーシング基が存在する場合、自己脱離リンカー又はスペーシング基である、項１〜６のいずれか一項に記載のプロドラッグ又はその塩。
項８. 前記プロドラッグが化合物Ｉである、項１〜７のいずれか一項に記載のプロドラッグ又はその塩。
項９. 項１〜８のいずれか一項に記載のプロドラッグ又はその塩を含む組成物。
項１０. 薬学的に許容可能な溶媒、希釈剤又は担体の少なくとも１つをさらに含む、項９に記載の組成物。
項１１. 癌の処置に用いるための、項１〜８のいずれか一項に記載のプロドラッグ若しくはその塩又は項９若しくは１０に記載の組成物。
項１２. 前記癌の処置が併用化学療法処置又は集学的化学療法処置である、項１１に記載のプロドラッグ若しくはその塩、又は組成物。
項１３. 前記癌の処置が、薬剤耐性克服剤（ｒｅｖｅｒｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を含む治療と併用される、項１１又は１２に記載のプロドラッグ若しくはその塩、又は組成物。
項１４. 対象における腫瘍又は癌の治療方法であって、前記腫瘍又は癌の近傍に薬物の治療有効量を提供するのに十分な量の項１〜８のいずれか一項に記載のプロドラッグ若しくはその塩又は項９若しくは１０に記載の組成物を、癌を有する対象に投与することを含み、前記投与が前記腫瘍又は癌の処置をもたらす、方法。
項１５. 前記プロドラッグ若しくはその塩、又は前記組成物の治療有効量が白血球減少症又は心毒性を引き起こさない、項１４に記載の方法。
項１６. 併用化学療法処置又は集学的化学療法処置の一部である、項１４又は１５に記載の方法。
項１７. 前記対象に薬剤耐性克服剤（ｒｅｖｅｒｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）を投与することを含む処置と併用される、項１４〜１６のいずれか一項に記載の方法。
項１８. 項１〜８のいずれか一項に記載のプロドラッグの製造方法であって、
（ｉ）前記薬物を入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物を、キャッピングされたオリゴペプチド部分に結合させるステップであって、それにより前記プロドラッグを生じさせるステップ；又は、それに代えて、
（ｉｉ’）前記薬物をオリゴペプチド部分に結合させて、次に前記オリゴペプチド部分にキャッピング基を結合させるステップであって、それにより前記プロドラッグを生じさせるステップ；及び
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）又は（ｉｉ’）で得られた前記プロドラッグを精製するステップ
を含む方法。
項１９. 一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰは、グリシン−プロリン（ＧＰ）、アラニン−プロリン（ＡＰ）、及びリジン−プロリン（ＫＰ）からなる群から選択されるジペプチドを含む、プロリンをカルボキシ末端に含む最小長さが４連続アミノ酸（テトラペプチド）及び最大長さが８アミノ酸のペプチド（即ち４、５、６、７又は８連続アミノ酸の長さを有するペプチド）であり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）
を有する候補プロドラッグのスクリーニング方法であって、
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物ＤをＧＰ−、ＡＰ−又はＫＰ−ジペプチドとコンジュゲートするステップであって、それによりＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄジペプチド−薬物中間体プロドラッグを得るステップ；
（ｉｉｉ）薬物Ｄ及び前記ジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄの各々を、独立に、インビトロ培養細胞と接触させるステップ；
（ｉｖ）前記薬物Ｄ及びジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄの細胞毒性を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、薬物Ｄと同等の細胞毒性活性を有するジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定されたジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄに対応する［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補プロドラッグとして選択するステップ
を含む方法。
項２０. 一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰは、グリシン−プロリン（ＧＰ）、アラニン−プロリン（ＡＰ）、及びリジン−プロリン（ＫＰ）からなる群から選択されるジペプチドを含む、プロリンをカルボキシ末端に含む最小長さが４連続アミノ酸（テトラペプチド）及び最大長さが８アミノ酸のペプチド（即ち４、５、６、７又は８連続アミノ酸の長さを有するペプチド）であり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）
を有する候補プロドラッグのスクリーニング方法であって、
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物Ｄを［Ｃｘ−ＯＰ］ｙとコンジュゲートするステップであって、それにより［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄプロドラッグを得るステップ；
（ｉｉｉ）薬物Ｄ及びプロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄの各々を、独立に、インビトロ培養細胞と接触させるステップ；
（ｉｖ）薬物Ｄ及びプロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄの細胞毒性を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、薬物Ｄと同等の細胞毒性活性を有するプロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定された［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補プロドラッグとして選択するステップ
を含む方法。
項２１. 一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰは、グリシン−プロリン（ＧＰ）、アラニン−プロリン（ＡＰ）、及びリジン−プロリン（ＫＰ）からなる群から選択されるジペプチドを含む、プロリンをカルボキシ末端に含む最小長さが４連続アミノ酸（テトラペプチド）及び最大長さが８アミノ酸のペプチド（即ち４、５、６、７又は８連続アミノ酸の長さを有するペプチド）であり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）
を有する候補プロドラッグのスクリーニング方法であって、
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物Ｄを［Ｃｘ−ＯＰ］ｙとコンジュゲートするステップであって、それにより［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄプロドラッグを得るステップ；
（ｉｉｉ）プロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄをインビトロ培養細胞と３７℃で５時間接触させるステップ；
（ｉｖ）プロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄから遊離薬物Ｄへの変換を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、少なくとも５０％がＤに変換されるプロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定された［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補プロドラッグとして選択するステップ
を含む方法。
項２２. 一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰは、グリシン−プロリン（ＧＰ）、アラニン−プロリン（ＡＰ）、及びリジン−プロリン（ＫＰ）からなる群から選択されるジペプチドを含む、プロリンをカルボキシ末端に含む最小長さが４連続アミノ酸（テトラペプチド）及び最大長さが８アミノ酸のペプチド（即ち４、５、６、７又は８連続アミノ酸の長さを有するペプチド）であり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）
を有する候補プロドラッグのスクリーニング方法であって
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物ＤをＧＰ−、ＡＰ−、又はＫＰ−ジペプチドとコンジュゲートするステップであって、それによりＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄジペプチド−薬物中間体プロドラッグを得るステップ；
（ｉｉｉ）ジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄを単離ＦＡＰ及び／又はＤＰＩＶペプチダーゼと３７℃で３時間接触させるステップ；
（ｉｖ）ジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄから遊離薬物Ｄへの変換を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、少なくとも５０％がＤに変換されるジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定されたジペプチド−薬物中間体プロドラッグＧＰ−Ｄ、ＡＰ−Ｄ又はＫＰ−Ｄに対応する［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補プロドラッグとして選択するステップ
を含む方法。
項２３. 一般構造
［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄ
（式中、Ｃはキャッピング基であり；
ＯＰは、グリシン−プロリン（ＧＰ）、アラニン−プロリン（ＡＰ）、及びリジン−プロリン（ＫＰ）からなる群から選択されるジペプチドを含む、プロリンをカルボキシ末端に含む最小長さが４連続アミノ酸（テトラペプチド）及び最大長さが８アミノ酸のペプチド（即ち４、５、６、７又は８連続アミノ酸の長さを有するペプチド）であり；
Ｄは薬物であり；
ｘは、ｙ＝１のとき少なくとも１である整数であり；
ｙは、少なくとも１である整数であり、ｙが１より大きい場合、少なくとも１つのＯＰがキャッピング基を有し；及び
ＣとＯＰとの間の結合及びＯＰとＤとの間の結合は直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介し、及び、ｙが１より大きい場合、複数のＯＰ部分は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介して互いに結合し、及び／又は独立に、直接か又はリンカー若しくはスペーシング基を介してＤに結合する）
を有する候補プロドラッグのスクリーニング方法であって
（ｉ）前記薬物Ｄを入手するステップ；
（ｉｉ）前記薬物Ｄを［Ｃｘ−ＯＰ］ｙとコンジュゲートするステップであって、それにより［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄプロドラッグを得るステップ；
（ｉｉｉ）プロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを単離ＣＤ１０及び／又はＴＯＰペプチダーゼと、及び単離ＦＡＰ及び／又はＤＰＩＶペプチダーゼと３７℃で３時間〜２４時間接触させるステップ；
（ｉｖ）プロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄから遊離薬物Ｄへの変換を決定するステップ；
（ｖ）（ｉｖ）から、少なくとも５０％がＤに変換されるプロドラッグ［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを同定するステップ；及び
（ｖｉ）ステップ（ｖ）で同定された［Ｃｘ−ＯＰ］ｙ−Ｄを候補プロドラッグとして選択するステップ
を含む方法。
項２４. 前記キャッピング基Ｃがホスホノアセチル基である、項１９〜２３のいずれか一項に記載の方法。
項２５. 前記薬物Ｄが、メイタンシン、ゲルダナマイシン、パクリタキセル、ドセタキセル、カンプトテシン（ｃａｍｐｔｈｏｔｈｅｃｉｎ）、ビンブラスチン、ビンクリスチン、メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｈｒｅｘａｔｅ）、アミノプテリン、アムルビシン、又はそのいずれかの誘導体からなる群から選択される、項１９〜２３のいずれか一項に記載の方法。
項２６. 前記リンカー又はスペーシング基が、存在する場合、自己脱離リンカー又はスペーシング基である、項１９〜２５のいずれか一項に記載の方法。
項２７. 項１〜８のいずれか一項に記載のプロドラッグ若しくはその塩又は項９若しくは１０に記載の組成物を含む容器を含むキット。
項２８. 同じ容器又は１つ以上の別個の容器に、１つ以上のさらなる抗癌薬をさらに含む、項２７に記載のキット。
項２９. 前記さらなる抗癌薬が抗体又はその断片である、項２８に記載のキット。
項３０. 同じ容器又は１つ以上の別個の容器に、１つ以上の薬剤耐性克服剤をさらに含む、項２７又は２８に記載のキット。