【手続補正書】
【提出日】平成29年10月23日(2017.10.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
中枢神経系（ＣＮＳ）にメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を送達するための組成物であって、
前記組成物は、リポソーム内に封入されたタンパク質をコードしたｍＲＮＡを含み、前記組成物の投与が、脳内及び／または脊髄中のニューロンにおいて、ｍＲＮＡの細胞内送達をもたらすように、送達する必要のある検体に髄腔内投与されることを特徴とし、
そこにおいて、前記リポソームは、陽イオン性または非陽イオン性脂質、コレステロール系脂質及びＰＥＧ−修飾脂質を含む、組成物。
【請求項２】
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、前記脊髄中の運動ニューロンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、オリゴデンドロサイト、オリゴデンドログリア細胞、星状膠細胞、神経膠細胞、及びそれらの組合せから成る群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、脊髄前角細胞及び背根神経節を含む、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項５】
前記リポソームが、一種または複数種の陽イオン性脂質、一種または複数種の中性脂質、一種または複数種のコレステロール系脂質、及び一種または複数種のＰＥＧ−修飾脂質を含む、請求項１〜４のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項６】
一種または複数種の前記陽イオン性脂質が、Ｃ１２−２００、ＭＣ３、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎｋＣ２ＤＭＡ、ｃＫＫ−Ｅ１２、ＩＣＥ（イミダゾール系）、ＨＧＴ５０００、ＨＧＴ５００１、ＤＯＤＡＣ、ＤＤＡＢ、ＤＭＲＩＥ、ＤＯＳＰＡ、ＤＯＧＳ、ＤＯＤＡＰ、ＤＯＤＭＡ及びＤＭＤＭＡ、ＤＯＤＡＣ、ＤＬｅｎＤＭＡ、ＤＭＲＩＥ、ＣＬｉｎＤＭＡ、ＣｐＬｉｎＤＭＡ、ＤＭＯＢＡ、ＤＯｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＤＡＰ、ＤＬｉｎｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＣＤＡＰ、ＫＬｉｎ−Ｋ−ＤＭＡ、ＤＬｉｎ−Ｋ−ＸＴＣ２−ＤＭＡ、ＨＧＴ４００３、及びそれらの組合せ、から成る群から選択される、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
一種または複数種の前記陽イオン性脂質がＣ１２−２００を含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
一種または複数種の前記陽イオン性脂質がＤＬｉｎｋＣ２ＤＭＡを含む、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
前記陽イオン性脂質が、ｃＫＫ−Ｅ１２:
【化８】
2016539916.tif 000001
である、請求項６に記載の組成物。
【請求項１０】
一種または複数種の前記非陽イオン性脂質が、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸エタノールアミン）、ＤＯＰＣ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン）、ＤＰＰＥ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸エタノールアミン）、ＤＭＰＥ（１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−エタノールアミンリン酸）、ＤＯＰＧ（，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸−（１’−ｒａｃ−グリセロール））、スフィンゴミリン、セラミド、セファリン、セレブロシド、ジアシルグリセロール、ＰＯＰＣ、ＤＯＰＧ、ＤＰＰＧ、ＰＯＰＣ、ＰＯＰＥ、ＤＳＰＥ、ＳＯＰＥ、スフィンゴミエリンから選択される、請求項１〜９のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項１１】
一種または複数種の前記非陽イオン性脂質が、スフィンゴミエリンを含む、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
一種または複数種の前記ＰＥＧ−修飾脂質が、ＤＭＧ−ＰＥＧ、Ｃ８−ＰＥＧ、ＤＯＧ  ＰＥＧ、セラミドＰＥＧ、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ、及びそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項１３】
一種または複数種の前記ＰＥＧ−修飾脂質が、全脂質組成において、モル比で約１〜１０％を構成する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
一種または複数種の前記ＰＥＧ−修飾脂質が、全脂質組成において、モル比で約５％を構成する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１５】
一種または複数種の前記コレステロール系脂質が、コレステロール、またはＰＥＧ化されたコレステロールから選択される、請求項１〜１４のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項１６】
前記リポソームが、
Ｃ１２−２００、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧＰＥＧ；
Ｃ１２−２００、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ５００１、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ４００３、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＩＣＥ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＯＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；または、
ＤＯＤＭＡ、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ、
から選択された組合せを含む、請求項１〜１５のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項１７】
前記リポソームが、約４０〜１００ｎｍの範囲の大きさを有する、請求項１〜１６のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項１８】
前記ｍＲＮＡが、約０．５ｋｂ、１ｋｂ、１．５ｋｂ、２ｋｂ、２．５ｋｂ、３ｋｂ、３．５ｋｂ、４ｋｂ、４．５ｋｂ、または５ｋｂ位以上の長さを有する、請求項１〜１７のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項１９】
前記ｍＲＮＡによってコードされた前記タンパク質が、通常、前記脳内及び／または脊髄中の前記ニューロンの中で機能する、請求項１〜１８のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項２０】
前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質が、通常、前記脊髄中の運動ニューロンの中で機能する、請求項１〜１９のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項２１】
前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質が、生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質である、請求項１〜２０のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項２２】
前記ｍＲＮＡが、コドン最適化をされている、請求項１〜２１のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項２３】
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１１を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３または配列番号４を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２５】
前記ｍＲＮＡが、配列番号７の５’ＵＴＲ配列を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記ｍＲＮＡが、配列番号８または配列番号９の３’ＵＴＲ配列を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２７】
前記ｍＲＮＡが、キャップ構造を含む、請求項１〜２６のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項２８】
前記キャップ構造が、キャップ０、キャップ１、またはキャップ２構造から選択される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記キャップ構造が、アンチリバースキャップアナログ（ＡＲＣＡ）、または、修飾されたＡＲＣＡである、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３０】
前記ｍＲＮＡにコードされた前記タンパク質が、酵素である、請求項１〜２０のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項３１】
前記酵素が、リソソーム酵素である、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記ｍＲＮＡの細胞内送達が、前記ニューロンのサイトゾルの中で、前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質の細胞内発現をもたらす、請求項１〜３１のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項３３】
前記ｍＲＮＡの細胞内送達が、前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質の細胞内発現、及び発現後前記ニューロンから細胞外への分泌をもたらす、請求項１〜３２のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項３４】
前記ｍＲＮＡが、一種または複数種の修飾されたヌクレオチドを含む、請求項１〜３３のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項３５】
一種または複数種の修飾された前記ヌクレオチドが、プソイドウリジン、２−アミノアデノシン、２−チオウリジン、イノシン、ピロロ−ピリミジン、３−メチルアデノシン、５−メチルシチジン、Ｃ−５プロピニル−シチジン、Ｃ−５プロピニル−ウリジン、２−アミノアデノシン、Ｃ５−ブロモウリジン、Ｃ５−フルオロウリジン、Ｃ５−ヨードウリジン、Ｃ５−プロピニル−ウリジン、Ｃ５−プロピニル−シチジン、Ｃ５−メチルシチジン、２−アミノアデノシン、７−デアザアデノシン、７−デアザグアノシン、８−オキソアデノシン、８−オキソグアノシン、Ｏ（６）−メチルグアニン、Ｎ−１−メチルプソイドウリジン、及び／または、２−チオシチジンを含む、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記ｍＲＮＡが、無修飾である、請求項１〜３３のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項３７】
前記ｍＲＮＡが、体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約１０ｍｇの範囲の量で送達されることを特徴とする、請求項１〜３６のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項３８】
前記ｍＲＮＡが、実質的毒性、または免疫応答を引き起こすことがなく送達されることを特徴とする、請求項１〜３７のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項３９】
前記検体が、前記ＣＮＳ中の前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質が欠乏している、請求項１〜３８のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項４０】
前記中枢神経系（ＣＮＳ）で、タンパク質の欠乏に関連する、疾患、障害、または異常を治療するための、請求項１〜３９のいずれか１つに記載の組成物であって、前記ｍＲＮＡが、前記ＣＮＳに対して欠乏した前記タンパク質をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）である、組成物。
【請求項４１】
脊髄性筋萎縮症を治療するための組成物であって、
前記組成物は、リポソーム内に封入された生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードしたｍＲＮＡを含み、前記組成物の投与が、前記脳内及び／または脊髄中のニューロンにおいて、ｍＲＮＡの細胞内送達をもたらすように、治療する必要のある検体に髄腔内投与されることを特徴とし、
そこにおいて、前記リポソームは、陽イオン性または非陽イオン性脂質、コレステロール系脂質及びＰＥＧ−修飾脂質を含む、組成物。
【請求項４２】
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、前記脊髄中の運動ニューロンを含む、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、脊髄前角細胞及び背根神経節を含む、請求項４１または４２に記載の組成物。
【請求項４４】
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１１を含む、請求項４１〜４３のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項４５】
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、または配列番号４を含む、請求項４１〜４３のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項４６】
前記ｍＲＮＡが、配列番号７の５’ＵＴＲ配列を含む、請求項４５に記載の組成物。
【請求項４７】
前記ｍＲＮＡが、配列番号８、または配列番号９の３’ＵＴＲ配列を含む、請求項４５に記載の組成物。
【請求項４８】
一種または複数種の前記非陽イオン性脂質が、スフィンゴミエリンを含む、請求項４１〜４７のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項４９】
前記リポソームが、
Ｃ１２−２００、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ  ＰＥＧ；
Ｃ１２−２００、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ５００１、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ４００３、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＩＣＥ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＯＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；または、
ＤＯＤＭＡ、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ、
から選択された組合せを含む、請求項４１〜４８のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項５０】
脊髄性筋萎縮症の治療のための組成物であって、
リポソームリポソーム内に封入された、前記生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードするｍＲＮＡと、そこにおいて、前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１１を含み、
さらに、そこにおいて、前記リポソームが、陽イオン性または非陽イオン性脂質、コレステロール系脂質、及びＰＥＧ−修飾脂質を含む、組成物。
【請求項５１】
脊髄性筋萎縮症の治療のための組成物であって、
リポソーム内に封入された、前記生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、そこにおいて、前記リポソームが、式Ｉ−ｃ１−ａの陽イオン性脂質を含む、組成物であって、
【化９】
2016539916.tif 000002
または、薬学的に受容可能なそれらの塩であり、式中、
各Ｒ２は、独立に水素またはＣ１−３のアルキル基であり、
各ｑは、独立に２〜６であり、
各Ｒ’は、独立に水素またはＣ１−３のアルキル基であり、
及び各ＲＬは独立にＣ８−１２のアルキル基である。
【請求項５２】
前記陽イオン性脂質が、ｃＫＫ−Ｅ１２：
【化１０】
2016539916.tif 000003
である、請求項４４に記載の方法。
【請求項５３】
脊髄性筋萎縮症を治療のための組成物であって、
リポソーム内に封入された、前記生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、そこにおいて、前記リポソームが、
Ｃ１２−２００、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ  ＰＥＧ；
Ｃ１２−２００、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ５００１、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ４００３、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＩＣＥ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＯＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；または、
ＤＯＤＭＡ、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２
Ｋ、
から選択された組合せを含む、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
本発明のその他の特徴、目的、及び利点は、以下の詳細な説明、図面、及び特許請求の
範囲により明らかとなる。しかし、詳細な説明、図面、及び特許請求の範囲は、本発明の
実施形態を示す一方で、実例としてのみ与えられ、限定されないということを理解するべ
きである。本発明の範囲において種々の変更及び修正は、当業者には明白となるだろう。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
中枢神経系（ＣＮＳ）にメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を送達する方法であって、
組成物の投与が、脳内及び／または脊髄中のニューロンにおいて、ｍＲＮＡの細胞内送達をもたらすように、リポソーム内に封入されたタンパク質をコードしたｍＲＮＡを含む組成物を送達する必要のある検体に髄腔内投与することと、
そこにおいて、前記リポソームは、陽イオン性または非陽イオン性脂質、コレステロール系脂質及びＰＥＧ−修飾脂質を含む、方法。
（項目２）
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、前記脊髄中の運動ニューロンを含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、オリゴデンドロサイト、オリゴデンドログリア細胞、星状膠細胞、神経膠細胞、及びそれらの組合せから成る群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、脊髄前角細胞及び背根神経節を含む、項目１または２に記載の方法。
（項目５）
前記リポソームが、一種または複数種の陽イオン性脂質、一種または複数種の中性脂質、一種または複数種のコレステロール系脂質、及び一種または複数種のＰＥＧ−修飾脂質を含む、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目６）
一種または複数種の前記陽イオン性脂質が、Ｃ１２−２００、ＭＣ３、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎｋＣ２ＤＭＡ、ｃＫＫ−Ｅ１２、ＩＣＥ（イミダゾール系）、ＨＧＴ５０００、ＨＧＴ５００１、ＤＯＤＡＣ、ＤＤＡＢ、ＤＭＲＩＥ、ＤＯＳＰＡ、ＤＯＧＳ、ＤＯＤＡＰ、ＤＯＤＭＡ及びＤＭＤＭＡ、ＤＯＤＡＣ、ＤＬｅｎＤＭＡ、ＤＭＲＩＥ、ＣＬｉｎＤＭＡ、ＣｐＬｉｎＤＭＡ、ＤＭＯＢＡ、ＤＯｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＤＡＰ、ＤＬｉｎｃａｒｂＤＡＰ、ＤＬｉｎＣＤＡＰ、ＫＬｉｎ−Ｋ−ＤＭＡ、ＤＬｉｎ−Ｋ−ＸＴＣ２−ＤＭＡ、ＨＧＴ４００３、及びそれらの組合せ、から成る群から選択される、項目５に記載の方法。
（項目７）
一種または複数種の前記陽イオン性脂質がＣ１２−２００を含む、項目６に記載の方法。
（項目８）
一種または複数種の前記陽イオン性脂質がＤＬｉｎｋＣ２ＤＭＡを含む、項目６に記載の方法。
（項目９）
前記陽イオン性脂質が、ｃＫＫ−Ｅ１２:
【化８】
2016539916.tif 000004
である、項目６に記載の方法。
（項目１０）
一種または複数種の前記非陽イオン性脂質が、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸エタノールアミン）、ＤＯＰＣ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスファチジルコリン）、ＤＰＰＥ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸エタノールアミン）、ＤＭＰＥ（１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−エタノールアミンリン酸）、ＤＯＰＧ（，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−リン酸−（１’−ｒａｃ−グリセロール））、スフィンゴミリン、セラミド、セファリン、セレブロシド、ジアシルグリセロール、ＰＯＰＣ、ＤＯＰＧ、ＤＰＰＧ、ＰＯＰＣ、ＰＯＰＥ、ＤＳＰＥ、ＳＯＰＥ、スフィンゴミエリンから選択される、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目１１）
一種または複数種の前記非陽イオン性脂質が、スフィンゴミエリンを含む、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
一種または複数種の前記ＰＥＧ−修飾脂質が、ＤＭＧ−ＰＥＧ、Ｃ８−ＰＥＧ、ＤＯＧ  ＰＥＧ、セラミドＰＥＧ、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ、及びそれらの組合せからなる群から選択される、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目１３）
一種または複数種の前記ＰＥＧ−修飾脂質が、全脂質組成において、モル比で約１〜１０％を構成する、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
一種または複数種の前記ＰＥＧ−修飾脂質が、全脂質組成において、モル比で約５％を構成する、項目１２に記載の方法。
（項目１５）
一種または複数種の前記コレステロール系脂質が、コレステロール、またはＰＥＧ化されたコレステロールから選択される、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目１６）
前記リポソームが、
Ｃ１２−２００、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧＰＥＧ；
Ｃ１２−２００、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ５００１、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ４００３、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＩＣＥ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＯＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；または、
ＤＯＤＭＡ、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ、
から選択された組合せを含む、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目１７）
前記リポソームが、約４０〜１００ｎｍの範囲の大きさを有する、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目１８）
前記ｍＲＮＡが、約０．５ｋｂ、１ｋｂ、１．５ｋｂ、２ｋｂ、２．５ｋｂ、３ｋｂ、３．５ｋｂ、４ｋｂ、４．５ｋｂ、または５ｋｂ位以上の長さを有する、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目１９）
前記ｍＲＮＡによってコードされた前記タンパク質が、通常、前記脳内及び／または脊髄中の前記ニューロンの中で機能する、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目２０）
前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質が、通常、前記脊髄中の運動ニューロンの中で機能する、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目２１）
前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質が、生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質である、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目２２）
前記ｍＲＮＡが、コドン最適化をされている、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目２３）
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１１を含む、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３または配列番号４を含む、項目２２に記載の方法。
（項目２５）
前記ｍＲＮＡが、配列番号７の５’ＵＴＲ配列を含む、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記ｍＲＮＡが、配列番号８または配列番号９の３’ＵＴＲ配列を含む、項目２４に記載の方法。
（項目２７）
前記ｍＲＮＡが、キャップ構造を含む、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目２８）
前記キャップ構造が、キャップ０、キャップ１、またはキャップ２構造から選択される、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記キャップ構造が、アンチリバースキャップアナログ（ＡＲＣＡ）、または、修飾されたＡＲＣＡである、項目２７に記載の方法。
（項目３０）
前記ｍＲＮＡにコードされた前記タンパク質が、酵素である、項目１〜２０のいずれか１つに記載の方法。
（項目３１）
前記酵素が、リソソーム酵素である、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記ｍＲＮＡの細胞内送達が、前記ニューロンのサイトゾルの中で、前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質の細胞内発現をもたらす、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目３３）
前記ｍＲＮＡの細胞内送達が、前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質の細胞内発現、及び発現後前記ニューロンから細胞外への分泌をもたらす、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目３４）
前記ｍＲＮＡが、一種または複数種の修飾されたヌクレオチドを含む、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目３５）
一種または複数種の修飾された前記ヌクレオチドが、プソイドウリジン、２−アミノアデノシン、２−チオウリジン、イノシン、ピロロ−ピリミジン、３−メチルアデノシン、５−メチルシチジン、Ｃ−５プロピニル−シチジン、Ｃ−５プロピニル−ウリジン、２−アミノアデノシン、Ｃ５−ブロモウリジン、Ｃ５−フルオロウリジン、Ｃ５−ヨードウリジン、Ｃ５−プロピニル−ウリジン、Ｃ５−プロピニル−シチジン、Ｃ５−メチルシチジン、２−アミノアデノシン、７−デアザアデノシン、７−デアザグアノシン、８−オキソアデノシン、８−オキソグアノシン、Ｏ（６）−メチルグアニン、Ｎ−１−メチルプソイドウリジン、及び／または、２−チオシチジンを含む、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記ｍＲＮＡが、無修飾である、項目１〜３３のいずれか１つに記載の方法。
（項目３７）
前記ｍＲＮＡが、体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約１０ｍｇの範囲の量で送達される、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目３８）
前記ｍＲＮＡが、実質的毒性、または免疫応答を引き起こすことがなく送達される、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目３９）
前記検体が、前記ＣＮＳ中の前記ｍＲＮＡでコードされた前記タンパク質が欠乏している、先行する項目のいずれか１つに記載の方法。
（項目４０）
前記中枢神経系（ＣＮＳ）で、タンパク質の欠乏に関連する、疾患、障害、または異常を治療する方法であって、先行する項目のいずれか１つによる方法を用いて、前記ＣＮＳへ欠乏した前記タンパク質をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を送達することを含む、方法。
（項目４１）
脊髄性筋萎縮症を治療する方法であって、
前記組成物の投与が、前記脳内及び／または脊髄中のニューロンにおいて、ｍＲＮＡの細胞内送達をもたらすように、リポソーム内に封入された生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードしたｍＲＮＡを含む組成物を治療する必要のある検体に髄腔内投与することと、
そこにおいて、前記リポソームは、陽イオン性または非陽イオン性脂質、コレステロール系脂質及びＰＥＧ−修飾脂質を含む、方法。
（項目４２）
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、前記脊髄中の運動ニューロンを含む、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記脳及び／または脊髄中の前記ニューロンが、脊髄前角細胞及び背根神経節を含む、項目４１または４２に記載の方法。
（項目４４）
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１１を含む、項目４１〜４３のいずれか１つに記載の方法。
（項目４５）
前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、または配列番号４を含む、項目４１〜４３のいずれか１つに記載の方法。
（項目４６）
前記ｍＲＮＡが、配列番号７の５’ＵＴＲ配列を含む、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
前記ｍＲＮＡが、配列番号８、または配列番号９の３’ＵＴＲ配列を含む、項目４５に記載の方法。
（項目４８）
一種または複数種の前記非陽イオン性脂質が、スフィンゴミエリンを含む、項目４１〜４７のいずれか１つに記載の方法。
（項目４９）
前記リポソームが、
Ｃ１２−２００、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ  ＰＥＧ；
Ｃ１２−２００、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ５００１、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ４００３、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＩＣＥ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＯＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；または、
ＤＯＤＭＡ、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ、
から選択された組合せを含む、項目４１〜４８のいずれか１つに記載の方法。
（項目５０）
脊髄性筋萎縮症の治療のための組成物であって、
リポソームリポソーム内に封入された、前記生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードするｍＲＮＡと、そこにおいて、前記コドン最適化ｍＲＮＡが、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１１を含み、
さらに、そこにおいて、前記リポソームが、陽イオン性または非陽イオン性脂質、コレステロール系脂質、及びＰＥＧ−修飾脂質を含む、組成物。
（項目５１）
脊髄性筋萎縮症の治療のための組成物であって、
リポソーム内に封入された、前記生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、そこにおいて、前記リポソームが、式Ｉ−ｃ１−ａの陽イオン性脂質を含む、組成物であって、
【化９】
2016539916.tif 000005
または、薬学的に受容可能なそれらの塩であり、式中、
各Ｒ２は、独立に水素またはＣ１−３のアルキル基であり、
各ｑは、独立に２〜６であり、
各Ｒ’は、独立に水素またはＣ１−３のアルキル基であり、
及び各ＲＬは独立にＣ８−１２のアルキル基である。
（項目５２）
前記陽イオン性脂質が、ｃＫＫ−Ｅ１２：
【化１０】
2016539916.tif 000006
である、項目４４に記載の方法。
（項目５３）
脊髄性筋萎縮症を治療のための組成物であって、
リポソーム内に封入された、前記生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、そこにおいて、前記リポソームが、
Ｃ１２−２００、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ  ＰＥＧ；
Ｃ１２−２００、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ｃＫＫ−Ｅ１２、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ５００１、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＨＧＴ４００３、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＩＣＥ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；
ＤＯＤＭＡ、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２Ｋ；または、
ＤＯＤＭＡ、スフィンゴミエリン、ＤＯＰＥ、コレステロール、及びＤＭＧ−ＰＥＧ２
Ｋ、
から選択された組合せを含む、組成物。