【手続補正書】
【提出日】平成29年8月31日(2017.8.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
修飾Ｆタンパク質切断配列（ＦＰＣＳ）を含む弱毒化ニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）７３Ｔ株であって、前記修飾ＦＰＣＳが、以下：
【化１】
2016533749.tif 000001
からなる群から選択される、弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項２】
前記修飾ＦＰＣＳが、以下：
【化２】
2016533749.tif 000002
である、請求項１に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項３】
前記ウイルスが、少なくとも約５０〜３００ヌクレオチドの長さの非コード配列を含む増大したＨＮ−Ｌ遺伝子間領域を有する、請求項１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項４】
前記非コード配列が、パラミクソウイルス１型（ＡＰＭＶ−１）、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）又はランダム配列から得られる、請求項３に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項５】
前記ＨＮ−Ｌ遺伝子間非コード配列が、６０、１０２、１４４、１９８又は３１８ヌクレオチドの長さである、請求項３に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項６】
前記ウイルスが、Ｐ−Ｍ結合部及び／又はＨＮ−Ｌ結合部に挿入された１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド配列を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項７】
前記異種ポリヌクレオチド配列が、前記ウイルスの腫瘍溶解性を増強するポリペプチドをコード化するトランスジーンである、請求項６に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項８】
前記トランスジーンが、サイトカイン、細胞表面リガンド、及び／又はケモカインをコード化する、請求項７に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項９】
前記サイトカインが、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−２１、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２、及びＩＬ−１２ｐ７０からなる群から選択される、請求項８に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項１０】
前記サイトカインが、ヒトＧＭ−ＣＳＦである、請求項９に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項１１】
前記ウイルスが、７３Ｔ−Ｒ１１６ｉ−ｈＧＭ−ＣＳＦである、請求項１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスを含む、腫瘍細胞を選択的に殺傷するための組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスを含む、被験者における腫瘍退縮を誘導するための組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスを含む、腫瘍細胞生存又は増殖を低減するための組成物。
【請求項１５】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスを含む、被験者における新生物を治療するための組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスをコード化する核酸。
【請求項１７】
請求項１６に記載の核酸を含む、ベクター。
【請求項１８】
請求項１６に記載の核酸を含む、ビルレント粒子。
【請求項１９】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスに感染した宿主細胞。
【請求項２０】
請求項１６に記載の核酸を含む、宿主細胞。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６０】
本明細書に挙げた全ての特許、刊行物、ＣＡＳ、及びアクセッション番号は、あたかも各々独立した特許、刊行物、及びアクセッション番号が、具体的かつ個別に、参照により組み込まれることが示されているのと同じ程度まで、参照により本明細書に組み込まれるものとする。
本発明はまた、以下に関する。
[項目１]
サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の糖タンパク質Ｂ（ｇＢ）由来のＦタンパク質切断部位（Ｓ１１６）を含む弱毒化ニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）。
[項目２]
前記修飾Ｆタンパク質切断配列（ＦＰＣＳ）が、以下：
[化１]
2016533749.tif 000003
からなる群から選択される配列を含む、項目１に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目３]
前記弱毒化ウイルス株が、修飾７３Ｔ株である、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目４]
前記弱毒化ＮＤＶウイルスが、ｒ７３Ｔ−Ｒ１１６ウイルスである、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目５]
前記ウイルスが、増大したＨＮ−Ｌ遺伝子間領域を有する、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目６]
前記ＨＮ−Ｌ遺伝子間領域が、少なくとも約５０〜３００アミノヌクレオチドの長さの非コード配列である、項目１〜５のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目７]
前記非コード配列が、パラミクソウイルス１型（ＡＰＭＶ−１）、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）又はランダム配列から得られる、項目６に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目８]
前記ＨＮ及びＬ遺伝子間非コード配列が、６０、１０２、１４４、１９８又は３１８ｎｔの長さである、項目６に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目９]
前記ウイルスが、前記Ｐ−Ｍ結合部及び／又はＨＮ−Ｌ結合部に挿入された１つ又は複数の異種ポリヌクレオチド配列を有する、項目１〜８のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１０]
前記ウイルスが、２つ以上の異種ポリヌクレオチド配列を含み、ここで、少なくとも１つの異種ポリヌクレオチド配列が前記Ｐ−Ｍ結合部に挿入されると共に、少なくとも１つが前記ＨＮ−Ｌ結合部に挿入されている、項目９に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１１]
前記異種ポリヌクレオチド配列が、前記ウイルスの腫瘍溶解性を増強するポリペプチドをコード化するトランスジーンである、項目９に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１２]
前記トランスジーンが、サイトカイン、細胞表面リガンド、及び／又はケモカインをコード化する、項目１０に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１３]
前記サイトカインが、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−２１、ＩＬ−１５、ＩＬ−１２、及びＩＬ−１２ｐ７０からなる群から選択される、項目１０に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１４]
前記サイトカインが、ヒトＧＭ−ＣＳＦである、項目１３に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１５]
前記異種ポリヌクレオチド配列が、検出可能な部分をコード化するトランスジーンである、項目９に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１６]
前記検出可能な部分の発現レベルが、ウイルス複製と相関する、項目１５に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１７]
ＮＤＶのＦ及びＨＮ遺伝子が、イヌパラインフルエンザウイルス５（ＰＩＶ５）又はハトパラミクソウイルス１型（ＰＰＭＶ−１）の対応する細胞外ドメインによって置換される、項目１〜１６のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１８]
前記ウイルスが、７３Ｔ−Ｒ１１６ｉ−ｈＧＭ−ＣＳＦである、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目１９]
前記弱毒化ウイルスが、９０時間を超えるか、又は約９０〜１５６時間の鶏卵中平均致死時間（ＭＤＴ）を有する、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目２０]
前記弱毒化ウイルスが、約０〜０．７の脳内病原性インデックスを有する、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目２１]
前記弱毒化ウイルスが、約０の脳内病原性インデックスを有する、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目２２]
前記弱毒化ウイルスが、ＨＴ１０８０細胞において約１５％未満の細胞傷害性を有する、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目２３]
前記弱毒化ウイルスが、少なくとも１０又は１５％の殺傷効率で、腫瘍細胞を選択的に殺傷する、項目１又は２に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目２４]
前記腫瘍細胞殺傷効率が、約７５％〜１００％である、項目２３に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目２５]
腫瘍細胞を選択的に殺傷する方法であって、腫瘍細胞を項目１〜２２のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスと接触させるステップを含む方法。
[項目２６]
被験者における腫瘍退縮を誘導する方法であって、腫瘍細胞を項目１〜２２のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスと接触させるステップを含む方法。
[項目２７]
腫瘍細胞生存又は増殖を低減する方法であって、腫瘍細胞を項目１〜２２のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスと接触させるステップを含む方法。
[項目２８]
前記細胞が、膀胱癌、卵巣癌、脳腫瘍、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、肺癌、乳癌、子宮頸癌、骨、肝臓癌、頭部及び頸部の癌、胃癌、腎臓癌、黒色腫、リンパ腫、白血病、甲状腺癌、結腸癌、結腸直腸癌、並びに黒色腫癌細胞からなる群から選択される癌細胞である、項目２５〜２７のいずれか一項に記載の方法。
[項目２９]
被験者における新生物を治療する方法であって、有効量の項目１〜２２のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスを前記被験者に投与するステップを含む方法。
[項目３０]
前記弱毒化ニューカッスル病ウイルスが、ｒ７３Ｔ−Ｓ１１６である、項目２５〜２９のいずれか一項に記載の方法。
[項目３１]
前記弱毒化ニューカッスル病ウイルスが、全身、腹腔内、又は腫瘍内に送達される、項目２６に記載の方法。
[項目３２]
前記ウイルスが、約１０7ｐｆｕ〜約１０9ｐｆｕの用量で投与される、項目２６に記載の方法。
[項目３３]
前記ウイルスが、約１０9ｐｆｕ〜約１０11ｐｆｕの用量で静脈内投与される、項目２６に記載の方法。
[項目３４]
前記被験者が、膀胱癌、卵巣癌、脳腫瘍、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、肺癌、乳癌、子宮頸癌、骨、肝臓癌、頭部及び頸部の癌、胃癌、腎臓癌、黒色腫、リンパ腫、白血病、甲状腺癌、結腸癌、結腸直腸癌、並びに黒色腫癌からなる群から選択される新生物を有する、項目２９に記載の方法。
[項目３５]
抗ＮＤＶ免疫応答を発生した被験者における新生物を治療する方法であって、有効量の項目１〜２２のいずれか一項に記載の弱毒化キメラニューカッスル病ウイルスを前記被験者に投与するステップを含み、前記ウイルスが、イヌパラインフルエンザウイルス５（ＰＩＶ５）又はハトパラミクソウイルス１型（ＰＰＭＶ−１）のＦ及び／又はＨＮ遺伝子を含むキメラウイルスであり、前記キメラニューカッスル病ウイルスが、ＮＤＶとは抗原が異なる方法。
[項目３６]
前記方法が、抗ＮＤＶ免疫応答を発生しているが、キメラニューカッスル病ウイルスを受けていない対照被験者に存在する腫瘍溶解性ウイルスのレベルと比較して、前記被験者に存在する腫瘍溶解性ウイルスのレベルを増大させる、項目２９に記載の方法。
[項目３７]
７３Ｔの完全長ｃＤＮＡを含む核酸であって、前記核酸が、以下：
[化２]
2016533749.tif 000004
からなる群から選択される修飾Ｆタンパク質切断配列をコード化する核酸。
[項目３８]
７３Ｔの完全長ｃＤＮＡを含むベクターであって、前記ベクターが、以下：
[化３]
2016533749.tif 000005
からなる群から選択される修飾Ｆタンパク質切断配列をコード化するベクター。
[項目３９]
項目３７に記載の核酸を含む、ビルレント粒子。
[項目４０]
項目１〜２４のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルスに感染した宿主細胞。
[項目４１]
項目３７に記載の核酸を含む、宿主細胞。
[項目４２]
前記ニューカッスル病ウイルス株が、７３Ｔである、項目１〜２４のいずれか一項に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。
[項目４３]
前記トランスジーンが、表５に記載のトランスジーンから選択される、項目１０に記載の弱毒化ニューカッスル病ウイルス。