(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
β‐１，４マンノビオース、β‐１，４マンノトリオース、β‐１，４マンノテトラオース、β‐１，４マンノペンタオース、β‐１，４マンノヘキサオース、β‐１，４マンノヘプタオース、β‐１，４マンノオクタオース、β‐１，４マンノノナオース、β‐１，４マンノデカオースからなる群から選ばれた１種以上のオリゴ糖類を主成分とすることを特徴とするビフィズス菌の増殖促進作用を有する組成物。
【請求項２】
β‐１，４マンノビオース、β‐１，４マンノトリオース、β‐１，４マンノテトラオース、β‐１，４マンノペンタオース、β‐１，４マンノヘキサオース、β‐１，４マンノヘプタオース、β‐１，４マンノオクタオース、β‐１，４マンノノナオース、β‐１，４マンノデカオースからなる群から選ばれた１種以上のオリゴ糖類を主成分とすることを特徴とする難う蝕性組成物。
【請求項３】
β‐１，４マンノビオース、β‐１，４マンノトリオース、β‐１，４マンノテトラオース、β‐１，４マンノペンタオース、β‐１，４マンノヘキサオース、β‐１，４マンノヘプタオース、β‐１，４マンノオクタオース、β‐１，４マンノノナオース、β‐１，４マンノデカオースからなる群から選ばれた１種以上のオリゴ糖類を主成分とすることを特徴とする低カロリー組成物。
【請求項４】
総固形分に対し、β‐１，４マンノビオース、β‐１，４マンノトリオース、β‐１，４マンノテトラオース、β‐１，４マンノペンタオース、β‐１，４マンノヘキサオース、β‐１，４マンノヘプタオース、β‐１，４マンノオクタオース、β‐１，４マンノノナオース、β‐１，４マンノデカオースからなる群から選ばれた１種以上のオリゴ糖類の合計含有割合が６０ｗ／ｗ％以上である請求項１乃至３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
β‐１，４マンノビオース、β‐１，４マンノトリオース、β‐１，４マンノテトラオース、β‐１，４マンノペンタオース、β‐１，４マンノヘキサオース、β‐１，４マンノヘプタオース、β‐１，４マンノオクタオース、β‐１，４マンノノナオース、β‐１，４マンノデカオースからなる群から選ばれたオリゴ糖類がコーヒー由来であることを特徴とする請求項１乃至４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
請求項５に記載の組成物がコーヒー抽出残渣を加水分解処理することによって得られる組成物。
【請求項７】
請求項１乃至６のいずれかに記載の組成物を含有する飲食物または飼料。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、マンノースを主体としたオリゴ糖類を主成分とする腸内有用菌増殖促進作用を有する組成物、難う蝕性組成物、低カロリー組成物およびその組成物を用いた飲食物および飼料に関するものである。
【０００２】
人間の腸内には３００から４００種類の細菌が常住し、腸内細菌叢を構成している。腸内細菌叢のバランスは人間の健康に大きな影響を及ぼすことが明らかになっており、腸内有害菌によって生成される腐敗産物、細菌毒素、発がん性物質は人間の各種臓器に障害を与え、生活習慣病の原因の一つとなっている。一方、ビフィズス菌、ラクトバチルス菌等の有用菌は、各種腸内腐敗細菌の増殖を抑制し、その結果、有害物質の生成を抑制して成人病の予防に働いていることが知られている。
【０００３】
また、近年、虫歯予防、低カロリー化の傾向が顕著になり、難う蝕性で低カロリーの組成物への要望が高まっている。
近年、Ｄ−マンノースがβ−１，４グリコシド結合した化合物であるβ−１，４マンノビオースなどのβ−１，４−マンノオリゴ糖の持つ生理機能が注目されており、家畜の有害菌汚染防止物質としても知られている（特開平８−３８０６４）。また人間の糖タンパク質の糖鎖の重要な部分構造にはＤ−マンノースがβ−１，４グリコシド結合したマンノオリゴ糖が含まれており、飲食品原料としてのみならず、医薬品の原料としての応用も期待されている（特昭５８−２１２７８、特開平８−９９８９）。
【０００４】
また、本発明は未利用資源の有効活用にも関するものである。
コーヒーの抽出残渣は従来、そのほとんどが焼却あるいは産業廃棄物として処理されてきた。近年になり、コーヒー抽出残渣が堆肥原料あるいは活性炭原料として利用されるようになってきたが、それらは未利用資源の高度利用という観点からは十分とはいえず、更なるコーヒー抽出残渣の高度利用の方法を確立することは重要課題となっている。
【０００５】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】
従来、マンノース残基を有する単糖、およびオリゴ糖類の生理機能については有害細菌の感染を予防するために飼料へ添加する方法（特開平０８−３８０６４）、植物の生長を促進させるために植物または土壌に施用する方法（特開昭６３−２１５６０６）等が提案されているが、ヒトが摂取するにあたり、どのような生理機能を示すかは、ほとんど不明であり、コンニャクの加水分解物であるグルコマンナンオリゴ糖を摂取することによるビフイドバクテリウム増殖方法（特開昭５８−２１２７８０）が提案されているのみである。しかもその内容は、ビフイドバクテリウム菌を増殖させる方法であり、その他の腸内有害菌も増殖させてしまう虞れがある。また、コンニャクの加水分解物には糖鎖中にマンノース残基以外にグルコース残基が多く含まれており、マンノース残基以外の糖残基がほとんど含まれていないマンノオリゴ糖についての報告はまだない。
【０００６】
マンノース残基を有する単糖類およびオリゴ糖類の製造方法としては、例えば、コンニャク、ユリ等に含まれるグルコマンナンや、グアガム、ローカストビーンガム等に含まれるガラクトマンナン等を酸や酵素で加水分解する方法（特開昭６３−４９０９３）、コプラミールから酵素加水分解によりマンノビオースを製造する方法（特開平１１−１８７９３）等が提案されている。
【０００７】
しかし、グルコマンナンやガラクトマンナンの加水分解物からグルコース、ガラクトース等が混在しマンノースを主要構成糖とするマンノオリゴ糖と呼ぶにはかけ離れた物であった。
【０００８】
また、コーヒー抽出残渣を加水分解することにより、糖鎖中にマンノース残基以外の糖残基の含有量が少ないマンノオリゴ糖類を得ることはできる（米国特許第４，４８４，０１２号、米国特許第４，５０８，７４５号、米国特許第４，７９８，７３０）が、着色物質、脂質、蛋白質、塩、酸等が混在しているため、食品、医薬品等への適用が制限される。
【０００９】
さらに、コプラミールを加水分解およびマンノースを縮合または転移反応させることにより、糖鎖中にマンノース残基以外の糖残基の含有量が少ないマンノオリゴ糖類を得ることができる（特開平１１−０１８７９１）が、これらの生理機能および飲食料品への利用については未知である。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、これらのような課題を解決するために鋭意検討の結果、マンナンを多く含む食品素材、主に、コーヒー抽出粕加水分解物から、糖鎖中にマンノース残基以外の糖残基の含有量が少ない重合度１〜１０のマンノオリゴ糖類又はマンノースとグルコースおよびガラクトースのような単糖類の少なくとも１種とが１〜１０分子結合したマンノースを主体としたオリゴ糖類が腸内有用菌増殖促進作用を有するとともに低カロリーおよび難う蝕性を有することを見いだし、本発明を完成するに至った。さらに、無着色、無酸の糖鎖中にマンノース残基以外の糖残基の含有量が少ない重合度１〜１０のマンノオリゴ糖類を得ることで、食品への適用範囲を飛躍的に広げることができることを見いだした。
【００１１】
本発明は、β‐１，４マンノビオース、β‐１，４マンノトリオース、β‐１，４マンノテトラオース、β‐１，４マンノペンタオース、β‐１，４マンノヘキサオース、β‐１，４マンノヘプタオース、β‐１，４マンノオクタオース、β‐１，４マンノノナオース、β‐１，４マンノデカオースからなる群から選ばれた１種以上のオリゴ糖類を主成分とするビフィズス菌の増殖促進作用を有する組成物、難う蝕性組成物、低カロリー組成物に関する。
【００１２】
本発明の組成物において、総固形分に対し、マンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類の合計含有割合が６０重量％以上が好ましく、８０重量％以上がさらに好ましい。
【００１３】
本発明における組成物の糖組成においてはマンノース残基の割合が７０重量％以上、更に好ましくは８０重量％以上であるものが望ましい。マンノース残基の割合が７０％に満たないと、効果が大きく期待できないとともに、甘味度も増し適用の幅が狭まる傾向にある。構成糖としては、マンノース以外には、加水分解する出発物質にもよるがグルコース、ガラクトースなどが含まれるが必要に応じて除去することもできる。組成物中の遊離のマンノース含量については５０％以下に抑えられたものが望ましい。５０重量％を越えると、マンノース由来の苦味のために、適用の範囲に制約を受ける傾向にある。さらに、マンノースを主体としたオリゴ糖類は、マンノースが２〜６分子結合したオリゴ糖類であることが好ましい。
【００１４】
本発明においては、マンナンを加水分解処理することによって得られたマンノースを主成分とする腸内有用菌増殖促進作用を有する組成物、難う蝕性組成物、低カロリー組成物が好ましい。また、当該マンナンがコーヒー豆および／またはコーヒー抽出残渣から得られるものであることが好ましい。
【００１５】
さらに、本発明においては、コーヒー抽出残渣を加水分解処理することによって得られたマンノースを主成分とする腸内有用菌増殖促進作用を有する組成物、難う蝕性組成物、低カロリー組成物が好ましい。
【００１６】
また、本発明は、上記に説明した本発明に係る組成物を含有する飲食物および飼料にも関する。なお、本発明に係る組成物は、飲食物、飼料のみならず化粧品、医薬品等幅広い分野で使用することが可能である。
【００１７】
本発明の組成物は、例えばココナッツ椰子から得られるコプラミール、フーク、南アフリカ産椰子科植物ＨｕａｃｒａＰａｌｍ、ツクネイモマンナン、ヤマイモマンナンよりマンナンを抽出後、酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解の中から選ばれる１種または２種以上の方法で処理し、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で精製された糖混合物および／またはコンニャクイモ、ユリ、スイセン、ヒガンバナ等に含まれるグルコマンナン、ローカストビーンガム、グアーガム等に含まれるガラクトマンナンを酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解の中から選ばれる１種または２種以上の方法で処理し、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で分離精製し構成糖としてマンノースの比率を高めたものであってもよい。
【００１８】
さらに、コーヒー生豆または焙煎したコーヒー豆を酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解の中から選ばれる１種または２種以上の方法で処理し、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で精製することによって得ることができる。
【００１９】
あるいは、使用済みコーヒー残渣を、酸加水分解、高温加熱加水分解、酵素加水分解の中から選ばれる１種または２種以上の方法で可溶化処理した水溶液を活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理、イオン交換膜処理等の方法で精製することによって得ることができる。
【００２０】
一般に、焙煎粉砕コーヒーを商業用の抽出器にて抽出すると、その際に焙煎コーヒーに含まれるガラクトマンナンの側鎖であるガラクトースが可溶化したり、アラビノガラクタンが加水分解によって可溶化する。従って、コーヒー残渣中にはマンナンが豊富であり、しかも直鎖構造をとっているものと推定される。一方、セルロースは分解されにくく残渣として残っているが、セルロースを分解せずにマンナンを特異的に加水分解する条件を適宜選択することにより、マンノースを主体とするオリゴ糖を得ることができる。
【００２１】
本発明において使用されるコーヒー抽出残渣は通常の液体コーヒーあるいはインスタントコーヒー製造工程において抽出されたものであれば、常圧下、加圧下抽出であろうと、またいかなる起源、製法のコーヒー抽出残渣であっても使用することができる。
【００２２】
コーヒー抽出残渣を酸および／または熱により加水分解しオリゴ糖類を高純度に含むように調製した組成物を液体コーヒー、インスタントコーヒー等にそのまま添加して使用することもできるが、必要に応じて活性炭、イオン交換樹脂等で脱色、脱臭、脱酸等の精製処理をしたものを添加した方がコーヒー本来の味、香りのより豊かなコーヒーを提供することができる。
【００２３】
更に、カラムクロマトグラフィー等で特定の重合度をもつマンノオリゴ糖に分画した上で使うこともできる。
以下に本発明において、コーヒー抽出残渣からマンノースを主成分とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物を製造する代表的な方法を述べるが、必ずしも以下の製法に限定されるものではない。
【００２４】
コーヒー抽出残渣を分解する方法としては、酸および／または高温により加水分解する方法と酵素により分解する方法が挙げられる。酸および／または高温により加水分解する方法としては特開昭６１−９６９４７号、特開平２−２００１４７号等に開示されている。商業用のコーヒー多段式抽出系において出てくる使用済みコーヒー残渣を反応容器中において酸触媒を添加して加水分解することもできるし、酸触媒を添加せずに高温で短時間処理して加水分解することによっても得ることができる。管形栓流反応器を使用するのが便利であるが比較的高温で短時間の反応を行わせるのに向いているものならば、いかなる反応器を使用しても良好な結果が得られる。反応時間と反応温度を調節し、可溶化して加水分解させることによってＤＰ１０〜４０のマンナンをＤＰ１〜１０のマンノオリゴ糖に分解し、その後コーヒー残渣と分離してマンノオリゴ糖類を得る。
【００２５】
「マンナン」という用語は、広くｄ−マンノースからなる多糖を意味する。単糖ｄ−マンノースはアルドヘキソースであり、ｄ−グルコース中のカルボキシル基に隣接する炭素に結合している水酸基の立体配置が逆になっているものである。
【００２６】
「オリゴ糖」は、単糖の数が比較的少ないポリマーを意味する。とくに、本明細書においては、単糖の数が１０以下であるポリマーをさす。マンノースは、便宜上ＤＰ１のオリゴ糖とするが、厳密にいうとオリゴ糖は２以上の単糖からなるものをさす。
【００２７】
「重合度」または「ＤＰ」とは、オリゴ糖を構成している単糖の数を意味する。従って、たとえばマンノースが４つの単糖から構成されているマンノオリゴ糖の重合度は４であるのでＤＰ４と記載する。
【００２８】
「コーヒー残査」とは、たとえば大気条件中で抽出した後のいわゆるコーヒー抽出粕を意味する。
また、酵素により分解する方法としては、例えばコーヒー抽出残渣を水性媒体に懸濁させ、ここへ例えば市販のセルラーゼおよびヘミセルラーゼ等を加えて撹拌しながら懸濁させればよい。酵素の量、作用させる温度およびその他の条件としては、通常の酵素反応に用いられる量、温度、条件であれば特に問題はなく、使用する酵素の最適作用量、温度、条件およびその他の要因によって適宜選択すればよい。
【００２９】
上記の方法によって得られたマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物を含む反応液は、必要に応じて精製を行う。精製法としては、骨炭、活性炭、炭酸飽充法、吸着樹脂、マグネシア法等で脱色を行い、イオン交換樹脂、イオン交換膜、電気透析等で脱塩、脱酸を行う。精製法の組み合わせおよび精製条件としては、マンノースが１〜１０分子結合したマンノオリゴ糖類を含む反応液中の色素、塩、および酸等の量およびその他の要因に応じて適宜選択すればよい。
【００３０】
次に、本発明を実施例および試験例により具体的に説明する。
実施例１
コーヒー抽出残渣を反応器に送りやすくするために、まず粉砕して粒径を約１ｍｍにした。次いで、総固形分濃度が約１４ｗ／ｗ％の水と粉砕物からなるスラリーを調製し４ｍの熱栓流反応器内において熱処理した。滞留時間８分に対応する速度で高圧蒸気とともに栓流反応器にポンプ輸送し、６．３５ｍｍφオリフィスを用いて約２２０℃に維持した。その後、大気圧下に噴出することによって、反応を急止した。できたスラリーを濾過して、不溶性固形分から可溶性固形分を含む液を分離した。この可溶性固形分含有液を活性炭、吸着樹脂で脱色し、さらにイオン交換樹脂で脱塩した後、濃縮、乾燥してマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物を収率１４％で得た。
このようにして得られた難う蝕性、腸内有用菌選択資化、および低カロリー組成物のＤＰ分布は、例えばＤＰ１；２０．４％、ＤＰ２；１６．６％、ＤＰ３；１６．２％、ＤＰ４；１３．７％、ＤＰ５；１０．９％、ＤＰ６；８．９％、ＤＰ７；６．０％、ＤＰ８；３．６％、ＤＰ９；１．９％、ＤＰ１０；１．７％で、糖鎖中のマンノース残基の含有量は８０％であるが、ＤＰ分布および糖鎖中のマンノース残基の含有量は加水分解条件により種々の値をとりうる。オリゴ糖のＤＰ１としてはマンノース等、ＤＰ２としてはマンノビオース等、ＤＰ３としてはマンノトリオース等、ＤＰ４としてはマンノテトラオース等、ＤＰ５としてはマンノペンタオース等、ＤＰ６としてはマンノヘキサオース等、ＤＰ７としてはマンノヘプタオース等、ＤＰ８としてはマンノオクタオース等、ＤＰ９としてはマンノノナオース等、ＤＰ１０としてはマンノデカオース等で、結合様式はβ−１，４グリコシド結合であると推定される。
【００３１】
次に、マンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物の効果についての試験例を示して詳細に説明する。
試験例１：難う蝕性試験
ＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｍｕｔａｎｓＩＦＯ１３９５５株をトリプトソイ寒天培地で培養後、得られた菌体を滅菌生理食塩水に浮遊させ、菌数が約１０６／ｍｌとなるように調製した。また、クックドミート培地から肉片を除き、リン酸２カルシウム０．２５％および寒天０．０８％を添加し、ｐＨ６．５に調整後、Ｌ字管に１３．５ｍｌ分注し、濾過除菌した２０％糖液を１．５ｍｌ添加し、試験培地とした。糖質無添加の培地も準備し、陰性対照とした。なお、糖液として実施例１で調整したマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物、シュークロース（陽性対照）のそれぞれ２０％溶液を用いた。
【００３２】
ついで、試験培地、陰性対照に接種用菌液を０．１５ｍｌ添加し、連続式吸光度測定計を用いて３５℃で静置培養し、６６０ｎｍの吸光度を連続的にプロットして生育曲線を得た。結果を図１．に示す。
【００３３】
図１．から明らかなように、マンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物はシュークロースに比較し、難う蝕性である。
試験例２：低カロリー試験
病者用特別用途食品の表示許可の取り扱いて（昭和４９年衛栄第２１号）別紙２「病者用特別用途食品の試験方法」に従い、実施例１で調整したマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物の生理的燃焼熱を測定した。結果は２．３ｋｃａｌ／ｇであり、シュークロース等の消化性糖質に比べて低カロリーであることが判明した。
試験例３：腸内菌叢を構成する菌類に対する資化性試験
実施例１で調整したマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物につき、腸内菌叢を構成する菌類に対する資化性を、他の糖類と比較した結果を含めて以下に示す。
使用培地
供試糖類を１０％水溶液として濾過滅菌後、最終濃度０．５％になるように滅菌Ｐｅｐｔｏｎ−Ｙｅａｓｔ−Ｆｉｌｄｅｓ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＰＹＦ）半流動寒天培地に添加した。ＰＹＦ培地は次の組成からなるものである。
【００３４】
【表１】
0003553866.tif 000002
【００３５】
上記の成分を混合し、５５℃温浴槽水中で１夜保持し、消化させる。
これに２０％ＮａＯＨ溶液１２ｍｌを加えた後、ＮａＯＨによりｐＨ７．６になるように調整する。
試験法および結果の判定法
寒天平板培地で培養した、表１．記載の新鮮な菌を、ＰＹＦ培地（供試糖類を０．５％添加したもの）に、各菌株が各々１０８ＣＦｕ／チューブとなるように接種し、３７℃で９６時間嫌気培養した。
菌数の増加をｐＨの低下を測定することにより求めた。なお、糖類はグルコース（対照）と実施例１で調整したマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物を用いた。
結果  表２．に示した。但し第２表において。
【００３６】
−は６．０≦培養液ｐＨ
±は５．５≦培養液ｐＨ＜６．０
＋は５．０≦培養液ｐＨ＜５．５
＋＋は４．５≦培養液ｐＨ＜５．０
＋＋＋は培養液ｐＨ＜４．５
をそれぞれ表わす。
【００３７】
【表２】
0003553866.tif 000003
【００３８】
表２から明らかなように、マンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物はビフィズス菌・乳酸菌等の有用菌を資化し腐敗菌は資化しないことを確認した。対照のブドウ糖に比し明らかに選択資化性が高いことが判明した。
【００３９】
次にこの組成物を飲食物の製造に応用した実施例について述べる。
実施例２
レギュラーコーヒーの製造法
８ｇのレギュラーコーヒーに熱湯を加えてペーパードリップにて抽出して、１４０ｍｌのコーヒー液を得た。これに、実施例１で調整したマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物を５ｇ添加した。本来のコーヒー味を持ち、僅かに甘味を有しコクの有るコーヒーが調製できた。蔗糖を５ｇ使った場合に比べ、カロリー的には３２％低減できた。このコーヒー液は腸内有用菌増殖促進作用と難う蝕性であることが期待できる。
実施例３
リンゴ果汁飲料の製造法
１００ｍｌのリンゴ果汁飲料（果汁含有量５０％）に、実施例１で調整したマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を主成分とする組成物を５ｇ添加し評価したところ、自然な香りと本来のリンゴジュースの持つさわやかな味わいがあった。カロリー的には蔗糖を使用した場合に比べ、８％低減が可能となった。このジュースは腸内有用菌増殖促進作用が期待できる。
実施例４
コーヒーゼリーの製造法
インスタントコーヒー０．８５ｇとゼラチン（ニッタゼラチン２１）１．２５ｇおよび実施例１で調整したマンノースを主体とする単糖類が１〜１０分子結合したオリゴ糖類を含有する組成物を８ｇとを混合した後、熱湯７０ｍｌで溶解した。この液を型に流し入れたあと、冷却した。コーヒー性が高く良好な食感を有した低甘味のコーヒーゼリーが得られた。カロリー的には、蔗糖使用時に比し、３４％低減できた。このコーヒーゼリーは腸内有用菌増殖促進作用と難う蝕性であることが期待できる。
試験例４：ヒト腸内菌叢に及ぼす影響
健常成人１２名（２０歳から４４歳）を対象として行った。被験者は本試験開始３週間前から試験期間中を通じて、薬物投与や生菌剤（乳酸菌製品）を摂取していないが、その他の食事制限は行わなかった。オリゴ糖は、マンノース直鎖β−１，４グリコシド結合からなるマンノオリゴ糖の重合度組成が、ＤＰ１；１％、ＤＰ２；３７％、ＤＰ３；２７％、ＤＰ４；２０％、ＤＰ５；１％からなる組成のものを試験に供した。
試験スケジュールは、オリゴ糖３ｇを１日１回飲料に溶かして連続２週間摂取させた。摂取前、摂取２週間目、摂取終了２週間目の計３回、糞便を全量採取し、直ちに氷冷し測定に供した。
菌叢の測定は、光岡の方法（「腸内菌の世界」光岡知足編、１９８４年発行、冬至書房新社）に従った。総菌数は、総嫌気性菌数（ＥＧ培地またはＢＬ培地上の集落数）と総好気性菌数（ＴＳ培地上の集落数）の和より求めた。ビフィズス菌数はＢＬ培地上の集落の形状、グラム染色性、細胞の形態によって菌群を同定し、計数した。そして総菌数に占めるビフィズス菌の割合を算出した。
【表３】
0003553866.tif 000004
表３に糞便中の総菌数に占めるビフィズス菌の割合の変動を示した。ビフィズス菌の占有率は組成物摂取前が平均７．４％であったのに対し、組成物３ｇ摂取２週目で３０．５％を占め、有意（ｐ＜０．００５）に増加した。また摂取を終了して２週間経過後においても１３．６％を占め、摂取前よりも有意（ｐ＜０．１）に高い占有率を示した。以上より、腸内有用菌であるビフィズス菌の増殖を促進する作用を有することが確認できた。
【図面の簡単な説明】
【図１】生育曲線を示す。
【図１】
0003553866.tif 000005