(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成物中に固形１００ｇ当たり０．０５ｇ〜４．０ｇのスフィンゴミエリンが含まれるようにスフィンゴミエリン又は乳由来のスフィンゴミエリン含有リン脂質を配合したことを特徴とする消化管成熟促進作用を有する乳幼児用栄養組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、スフィンゴミエリン又はスフィンゴミエリン含有リン脂質を配合した、消化管成熟促進作用を有する乳幼児用栄養組成物に関する。
本発明の栄養組成物を摂取することによって、消化管の成熟及び発達が促進され、消化吸収性の向上などの効果が得られる。
【０００２】
【従来の技術】
最近、乳幼児用栄養組成物については、技術の向上により、究極の目標である成分的に母乳に相当に近似した製品が提供されている。しかし、機能面では未だ母乳に比べ多くの改良の余地が残されている。
一方、スフィンゴミエリンは、母乳中に多く含まれているにもかかわらず、その研究は細胞レべルにとどまっており、生体、特に乳幼児期における生理学的機能についての研究報告は数少ない。そのため、スフィンゴミエリンの栄養素の一成分としての有効性は認識されていなかった。また含量的にも、牛乳を主体とした栄養組成物、中でも育児用粉乳について、Ｚｅｉｓｅｌらが報告した分析結果（Ｊ．Ｎｕｔｒ．，ｖｏｌ．１１６，ｐｐ．５０−５８，１９８６  ）から計算すると、母乳中の平均スフィンゴミエリン含量は０．０１４４％であるのに対し、調乳後の育児用粉乳で０．００１８〜０．００７１％と、半量以下しか含有していない。
なお、本発明における乳幼児用栄養組成物とは、乳児用に調製された調製乳、タンパク質分解乳、フォローアップミルク、特殊栄養調製乳、あるいは幼児用として調製された調製乳及び離乳食であって、これらは液状品、レトルト加工品、粉乳を含む乾燥品など形態を問わない。
【０００３】
また、リン脂質の混合物であるレシチンは、天然の乳化剤として一般的に使用されているが、表１に示すように、代表的な大豆由来リン脂質にはスフィンゴミエリンは含まれていない。このようなことから、現在提供されている乳幼児用栄養組成物ではスフィンゴミエリンが十分供給されない。
【０００４】
【表１】
0003544493.tif 000002
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
上記状況に鑑み、本発明者らは、母乳中に含まれているスフィンゴミエリンが、乳幼児に対して何らかの生理学的効果を有するものであることを確信し、鋭意研究を重ねてきた。その結果、乳幼児の消化管成熟を促進する効果を有することを見出した。したがって、本発明品は、スフィンゴミエリンを配合あるいは強化することによって、消化管成熟促進作用を有する乳幼児用栄養組成物を提供することを課題とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明では、消化管成熟を促進させる有効成分として、スフィンゴミエリンを乳幼児用栄養組成物に配合することを特徴とする。用いるスフィンゴミエリンは、精製したものでもよいし、スフィンゴミエリン含有リン脂質として使用してもよい。ただし、その原料は、表１に示したように、乳由釆であることが望ましく、生乳やホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）などを用いるのがよい。
生乳やホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）などからスフィンゴミエリンを得る方法としては、エーテルやアセトンで抽出する方法（特開平３−４７１９２号公報）、バターを加温融解して得られるバターカードやバターセーラムを含む水溶性画分を用いる方法、バターミルクやバターセーラム中に含まれる乳脂肪球被膜画分を用いる方法などがあり、それぞれスフィンゴミエリン含有量は、約２８％、約９％、約９％である。また、これらのスフィンゴミエリン含有リン脂質を透析、硫安分画、ゲル濾過、等電点沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、溶媒分画などの手法により精製することによって純度を高めたスフィンゴミエリンを使用してもよい。これらのスフィンゴミエリンやスフィンゴミエリン含有リン脂質は、液体、粉体どちらの状態でも使用できる。
【０００７】
本発明の乳幼児用栄養組成物とは、乳幼児用調製粉乳、低出生体重児用調製粉乳、フォローアップミルク、アレルギー疾患児用調製粉乳などであり、タンパク質、脂質、糖質、ビタミン類及びミネラル類を主成分として構成される。また、その他、乳幼児用栄養組成物に配合が可能な成分を加えてもよい。
タンパク質源としては、カゼイン、ホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）、ホエータンパク質分離物（ＷＰＩ）、αＳ  −カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラクトグロブリンなどの乳タンパク質分画物、あるいは大豆タンパク質や小麦タンパク質などの植物タンパク質、さらにはこれらのタンパク質を種々の分解度で酵素的に分解したペプチドやアミノ酸などを用いることができる。
脂質源としては、乳脂肪、ラード、牛脂やカツオ油、マグロ油などを含む魚油などの動物性油脂、あるいは大豆油、菜種油、コーン油、ヤシ油、パーム油、パーム核油、サフラワー油、エゴマ油、アマニ油、月見草油、中鎖脂肪酸トリグリセリド（ＭＣＴ）、又は綿実油などの植物性油脂、さらにはこれらの油脂の分別油、水添油、エステル交換油などを用いることができる。
糖質源としては、乳糖、麦芽糖、ブドウ糖、ショ糖、デキストリンやガラクトシルラクトース、フラクトオリゴ糖、ラクチュロースなどのオリゴ糖、人工甘味料、可溶性多糖類、又は澱粉などを用いることができる。
【０００８】
ビタミン及びミネラル源としては、「乳幼児食品を含む特殊用途食品の  ＣＯＤＥＸ規格および関連衛生作業規則、ＣＡＣ／ＶＯＬ．ＩＸ−第１版およびＳｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  １，２，３，４」（日本国際酪農連盟発行，  １９９３年）  、「１９９３年版指定品目食品添加物便覧  （改訂第３１版）  」  （食品と科学社発行，  １９９３年）  、又は「届け出制食品添加物・食品素材天然物便覧  （第１２版）  」  （食品と科学社発行，  １９９２年）  に記載のビタミン類及びミネラル類の中、乳幼児食品に使用が可能なものを用いることができる。例えば、ビタミン類としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、葉酸、パントテン酸、β−カロチン、ニコチン酸アミドなどを挙げることができ、また、ミネラル類としては、カルシウム、マグネシウム、鉄、銅、亜鉛、ヨウ素、マンガン、セレンなどを挙げることができる。
また、乳幼児用栄養組成物にスフィンゴミエリンを配合して消化管成熟促進作用を発揮させるには、通常の栄養組成物の摂取量を考慮すると、組成物の固形１００ｇ当たりスフィンゴミエリンを０．０５ｇ以上含むようにすることが望ましいが、４．０ｇを越えて配合しても効果はさほど変わらない。
【０００９】
【参考例１】
〈牛乳由来のスフィンゴミエリン含有リン脂質の調製〉
ホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）の１０％水溶液にプロテアーゼを作用させて
得られた反応液をクロロホルム‐メタノール（２：１）溶液で抽出した後、濃縮し、さらにアセトン抽出して複合脂質画分を得た。次に、この複合脂質画分をフロロシリルカラムクロマトグラフィー処理し、クロロホルム‐メタノール溶液で段階抽出してリン脂質画分を得た。このリン脂質画分をシリカゲルクロマトグラフィー処理し、クロロホルム‐メタノール溶液で段階抽出して得られた画分を凍結乾燥してスフィンゴミエリン含有リン脂質を得た。
このスフィンゴミエリン含有リン脂質を薄層クロマトグラフィー処理した後、ディットマー試薬で発色し、デンシトメトリー法で測定したところ、スフィンゴミエリン含有率は９５．２％であった。
【００１０】
【実施例１】
＜スフィンゴミエリンを用いた乳児用調製粉乳の製造＞
脱脂乳２４ｋｇに、ホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）７５０ｇと、乳糖４．４ｋｇを添加溶解し、これに水溶性ビタミン類（ビタミンＢ１  、ビタミンＢ２  、ビタミンＢ６  、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ナイアシン、葉酸、パントテン酸、ビオチン、コリン、イノシトール）と、ミネラル類（炭酸カルシウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、クエン酸第一鉄ナトリウム、硫酸銅、硫酸亜鉛）をそれぞれ１００ｇ、スフィンゴミエリン１０ｇ、及び脂溶性ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、β‐カロチン）を溶解した調製脂肪２．３９ｋｇを混合して均質化した。得られた溶液を殺菌し、常法により濃縮・乾燥して、粉乳１０ｋｇを得た。
この粉乳を温水に溶解して固形率１３％に調整した調製乳には、スフィンゴミエリン１３ｍｇ／１００ｍｌが含まれていた。
【００１１】
【実施例２】
＜牛乳由来のスフィンゴミエリン含有脂質を用いた乳児用調製粉乳の製造＞
脱脂乳２４ｋｇに、ホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）７５０ｇと、乳糖４．４ｋｇを添加溶解し、これに水溶性ビタミン類（ビタミンＢ１  、ビタミンＢ２  、ビタミンＢ６  、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ナイアシン、葉酸、パントテン酸、ビオチン、コリン、イノシトール）と、ミネラル類（炭酸カルシウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム、クエン酸第一鉄ナトリウム、硫酸銅、硫酸亜鉛）をそれぞれ１００ｇ、参考例１で得られた牛乳由来のスフィンゴミエリン含有リン脂質５０ｇ、及び脂溶性ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、β‐カロチン）を溶解した調製脂肪２．０ｋｇを混合して均質化した。得られた溶液を殺菌し、常法により濃縮・乾燥して、粉乳１０ｋｇを得た。
この粉乳を温水に溶解して固形率１３％に調整した調製乳には、スフィンゴミエリン１７．７ｍｇ／１００ｍｌが含まれていた。
【００１２】
【試験例１】
＜消化管成熟促進作用の確認試験＞
哺乳期のＳ．Ｄ．系ラットを、ラット用に調製した人工乳を用いて人工哺育する実験を行なった。参考例１で得られた牛乳由来のスフィンゴミエリン含有リン脂質０．５％（ｗ／ｖ）を添加した人工乳（固形１００ｇ中のスフィンゴミエリン含量２．２ｇ）を投与する群（添加群）と無添加人工乳を投与する群（無添加群）を設定し、７日齢のラットに胃カニュレーション手術を施した後、シリンジポンプで送乳しながら人工哺育した。人工哺育６日目に絶食し、７日目に解剖して小腸を摘出し、その重量と長さを計測した後、氷温下で小腸粘膜をカバーグラスで掻き取り、小腸粘膜酵素であるラクターゼ、マルターゼ及びスクラーゼの二糖類水解酵素活性とロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）活性を測定した。小腸の重量と長さの計測値を表２に示す。
【００１３】
【表２】
0003544493.tif 000003
【００１４】
表３における小腸粘膜酵素の活性測定は以下の方法で行なった。
小腸粘膜を冷生理食塩水に懸濁後、ホモゲナイザーにて均質画分を調製した。この小腸粘膜の均質画分のタンパク質含量をＬｏｗｒｙ  法により測定した。
二糖類水解酵素活性の測定は、基質にラクトース、マルトース、スクロースを用い、基質溶液５０μｌ、小腸粘膜の均質画分５０μｌ  を混合し、３７℃、３０分間インキュベートした。その反応液２０μｌ  について、グルコース測定用キット（和光純薬工業社製）を用い、酵素により分解され遊離したグルコース量を測定した。活性は、小腸粘膜の均質画分のタンパク質１ｇにより１分間に遊離するグルコース量（μｍｏｌ  ）で示した。
ロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）活性の測定は、ロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）活性測定用キット（和光純薬工業社製）を用いた。
その結果は表３に示す。
なお、小腸の重量増加、小腸の伸張、ラクターゼ活性の低下、スクラーゼ活性、マルターゼ活性及びＬＡＰ活性の上昇を消化管成熟の指標とした。
【００１５】
【表３】
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【００１６】
表２から、添加群は無添加群に比べ、小腸の重量が増加し、小腸の長さが伸張していることが認められた。
また、表３に示すように、添加群のラクターゼ活性は低下し、スクラーゼ活性、マルターゼ活性及びＬＡＰ活性は上昇した。
【００１７】
通常、哺乳後期にはラクターゼ活性は低下し、スクラーゼ活性及びマルターゼ活性は上昇する。これは、離乳が近づき、少しずつ乳以外の食物を摂取するようになることで、乳中の唯一の糖である乳糖の分解酵素ラクターゼの必要性が低下し、ショ糖や麦芽糖を分解するためのスクラーゼやマルターゼの必要性が増すからである。よってこれら二糖類水解酵素の活性は、哺乳期から離乳期にかけての小腸機能の変化を直に反映している。ロイシンアミノペプチダーゼ（ＬＡＰ）活性は、タンパク質の終末消化に関与する酵素として、哺乳期から消化管の成熟とともに上昇していく。今回の実験で、ラクターゼ活性は低下し、スクラーゼ活性、マルターゼ活性及びＬＡＰ活性が上昇したことから、添加群は無添加群と比較して小腸の機能がより成熟化していることがわかった。
以上のことより、スフィンゴミエリンは消化管の成熟を促進していることが明らかとなった。
【００１８】
【発明の効果】
本発明で用いるスフィンゴミエリン又はスフィンゴミエリン含有リン脂質は、消化管の成熟や発達を促進する作用を有し、消化吸収性の向上などの効果が顕著となるので、これらを含む組成物は、医薬あるいは食品として有用である。また、乳児用に調製された調製乳、タンパク質分解乳、フォロ一アップミルク、特殊栄養調製乳、あるいは幼児用として調製された離乳食として摂取することによって、乳幼児の消化管の成熟や発達が促進され、消化吸収性の向上などの効果を有するので、乳幼児用栄養組成物として特に有用である。