【手続補正書】
【提出日】平成29年3月22日(2017.3.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１結合ドメイン及び第２結合ドメインを含む融合タンパク質であって、前記融合タンパク質中に存在する場合、前記第１ドメインが増殖因子受容体の細胞外ドメインに特異的に結合し、前記第２ドメインが軟骨マトリックス成分に特異的に結合する、前記融合タンパク質。
【請求項２】
前記融合タンパク質が単一のポリペプチド鎖からなる、請求項１に記載の前記融合タンパク質。
【請求項３】
前記第１結合ドメインがＩＧＦ−１受容体結合ドメインである、請求項１に記載の前記融合タンパク質。
【請求項４】
前記第２結合ドメインがＧＡＧ（グリコサミノグリカン）結合ドメインである、請求項１に記載の前記融合タンパク質。
【請求項５】
前記第２結合ドメインがコラーゲン結合ドメインである、請求項１に記載の前記融合タンパク質。
【請求項６】
前記ＧＡＧ結合ドメインが、プロリン−アルギニン富化末端ロイシン富化繰り返しタンパク質（ＰＲＥＬＰ）、コンドロアドヘリン、オンコスタチンＭ、コラーゲンＩＸ、ＢＭＰ−４、フィブロネクチン、ＲＡＮＤ１、ＲＡＮＤ２、ＲＡＮＤ３、ＲＡＮＤ４、ＲＡＮＤ５、ＲＡＮＤ６、ＡＫＫ１５、ＲＬＲ２２、Ｒ１Ｑ１７、ＳＥＫ２０、ＡＲＫ２４、ＡＫＫ２４、ＡＬ１、ＡＬ２、ＡＬ３、ＬＧＴ２５、Ｐｅｐ１８４、Ｐｅｐ１８６、Ｐｅｐ１８５、Ｐｅｐ２３９、Ｐｅｐ２４６、ＡＴＩＩＩ、またはＦｉｂＢｅｔａのＧＡＧ結合ドメインの配列、またはこれに相同もしくは実質的に相同の配列を含む、請求項４に記載の前記融合タンパク質。
【請求項７】
前記ＧＡＧ結合ドメインが配列番号２〜１３及び５４〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項４に記載の前記融合タンパク質。
【請求項８】
前記ＧＡＧ結合ドメインが配列番号２を含む、請求項４に記載の前記融合タンパク質。
【請求項９】
前記ＩＧＦ−１受容体結合ドメインがヒトＩＧＦ−１のアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１０】
前記ＩＧＦ−１受容体結合ドメインが配列番号１を含むアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１１】
前記コラーゲン結合ドメインが、ＣＮＡ３５、ＣＮＡ３４４、トロンボスポンジン、マトリリン、軟骨オリゴマーマトリックスタンパク質、ＰＲＥＬＰ、軟骨オリゴマータンパク質、コンドロアドヘリン、フィブロモジュリン、デコリン、またはアスポリンのコラーゲン結合ドメインの配列、またはこれらの配列に相同もしくは実質的に相同の配列を含む、請求項５に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１２】
前記コラーゲン結合ドメインが配列番号１４〜１６及び２１〜２７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項５に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１３】
前記融合タンパク質が配列番号１７〜２０、２８〜５３、及び７１〜８７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１４】
前記融合タンパク質中に存在する場合、各結合ドメインが天然の結合活性を示す、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１５】
前記融合タンパク質が、４０，０００、３５，０００、３０，０００、２５，０００、２０，０００、１５，０００、１０，０００、７，５００、５，０００、２，５００、１，０００、５００、または２５０個未満のアミノ酸を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１６】
哺乳類の関節の関節内空間への注入に際して、前記融合タンパク質が、前記第２結合ドメインが前記軟骨マトリックス成分と特異的に結合しない変異体ドメインである点でのみ請求項１〜１５のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質と異なる融合ムテインより少なくとも１．５倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、または１００倍長い期間、前記関節の軟骨組織内に保持される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１７】
前記関節が傷害関節または疾患関節であり、前記軟骨組織内に保持される融合タンパク質の量が組織１ｇ当たり少なくとも約５、約１０、約２０、または約５０ｐｍｏｌである、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１８】
前記哺乳類がラットまたはウマであり、前記関節が傷害関節または疾患関節であり、前記注入８、９、１０、１１、１２、１３、または１４日後に、前記関節が、対照タンパク質を注入した対応する対照関節の１）前記軟骨組織からのｓＧＡＧ、２）細胞含有量、３）軟骨組織全量、または４）骨の質、の損失と比較した場合、１）、２）、３）、または４）の損失の減少を示す、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項１９】
前記哺乳類がラットまたはウマであり、前記関節が傷害関節または疾患関節であり、前記注入８、９、１０、１１、１２、１３、または１４日後に、前記軟骨組織が、対照タンパク質を注入した対応する対照関節の軟骨組織のｓＧＡＧ生成と比較した場合、前記軟骨組織のｓＧＡＧ生成の増大により特徴付けられる、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項２０】
前記哺乳類がラットまたはウマであり、前記関節が傷害関節または疾患関節であり、前記注入８、９、１０、１１、１２、１３、または１４日後に、前記軟骨組織が、対照タンパク質を注入した対応する対照関節の軟骨組織のｓＧＡＧレベルと比較した場合、前記軟骨組織のｓＧＡＧレベルの増大により特徴付けられる、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質。
【請求項２１】
前記組成物がグルココルチコイドをさらに含み、任意選択で前記グルココルチコイドがアルクロメタゾン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、クロロプレドニゾン、シクレソニド、コルチゾール、コルチスポリン、コルチバゾール、デフラザコート、デキサメタゾン、フルドロキシコルチド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオコルトロン、フルオロメトロン、フルチカゾン、ヘキスアセトンヒドロコルタメート、ヒドロコルチゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、モメタゾン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プレドニリデン、プレグナジエン、プレグナトリエン、プレグネン、プロクトセディル、リメキソロン、テトラヒドロコルチコステロン、トリアムシノロン、及びウロベタゾール、並びにこれらの薬理学的に許容される塩、水和物、及びエステルからなる群から選択される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質を含む組成物。
【請求項２２】
前記グルココルチコイドが前記組成物１ｇ当たり１〜１０００μｇの濃度で存在する、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の前記組成物。
【請求項２３】
前記グルココルチコイドが脂肪酸に抱合され、前記脂肪酸への前記抱合が任意選択でエステル結合を介する、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の前記組成物。
【請求項２４】
前記脂肪酸がパルミチン酸を含む、請求項２３に記載の前記組成物。
【請求項２５】
前記グルココルチコイドがミクロ粒子担体中に含有される、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の前記組成物。
【請求項２６】
前記ミクロ粒子担体がリポソームである、請求項２５に記載の前記組成物。
【請求項２７】
前記ミクロ粒子担体が多層状小胞である、請求項２５に記載の前記組成物。
【請求項２８】
前記ミクロ粒子担体が高融点脂質を含む、請求項２６または請求項２７に記載の前記組成物。
【請求項２９】
前記脂質がジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、またはヒドロソイ（Ｈｙｄｒｏ  Ｓｏｙ）ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）を含む、請求項２８に記載の前記組成物。
【請求項３０】
前記グルココルチコイドが前記ミクロ粒子担体脂質の０．１〜２０モル％の濃度で前記ミクロ粒子担体中に存在する1、請求項２６または請求項２７に記載の前記組成物。
【請求項３１】
配列番号１８で示されるアミノ酸配列及びデキサメタゾン２１−パルミチン酸塩を有する融合タンパク質を含む組成物であって、前記デキサメタゾン２１−パルミチン酸塩がＨＳＰＣ含有多層状小胞中に含有される、前記組成物。
【請求項３２】
傷害関節または疾患関節の関節内空間への前記組成物の注入後、軟骨マトリックス合成読み取りまたは軟骨分解読み取りが得られ、前記読み取りが、グルココルチコイドを含まない対応する組成物の対応する注入後に得られた対照の読み取りに優る改善を示す、請求項２１〜３１のいずれか一項に記載の前記組成物。
【請求項３３】
関節傷害または疾患の治療剤を製造するための請求項１〜１５のいずれか一項に記載の前記融合タンパク質または請求項２１〜３２のいずれか一項に記載の前記組成物の使用であって、前記治療剤は、関節の関節内空間に治療的に有効な量投与される、使用。
【請求項３４】
前記関節傷害または疾患が、骨関節炎、リウマチ性関節炎、軟骨分解、急性炎症性関節炎、感染性関節炎、骨粗しょう症、薬物毒性関連軟骨欠損、または外傷性軟骨傷害から選択される、請求項３３に記載の使用。