【手続補正書】
【提出日】平成29年3月13日(2017.3.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドを製造する方法において、精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａまたは精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂを、０．１５％〜０．８％ホルムアルデヒド（ｗ／ｖ）と共に、１５〜３２℃で２〜２１日間インキュベートすることにより不活化する工程を含む方法。
【請求項２】
（ａ）前記インキュベートが、０．１５％〜０．５％ホルムアルデヒド（ｗ／ｖ）と共に行われる、および／または
（ｂ）前記インキュベートが、１７〜３２℃で行われる、請求項１記載の方法。
【請求項３】
（ａ）毒素Ａを０．２％ホルムアルデヒドと共に２５℃で２日間または６日間インキュベートしてトキソイドＡを製造する、および／または
（ｂ）毒素Ｂを０．４％ホルムアルデヒドと共に２５℃で１３日間インキュベートしてトキソイドＢを製造する、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
（ａ）毒素Ａを０．２１％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒドと共に２５℃で６〜１３日間インキュベートすることにより、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａをトキソイド（Ｔｏｘｏｉｄ  Ａ）に変換する、または
（ｂ）毒素Ｂを０．４２％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒドと共に２５℃で１３〜２０日間インキュベートすることにより、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂをトキソイド（Ｔｏｘｏｉｄ  Ｂ）に変換する、請求項１または２記載の方法。
【請求項５】
前記毒素Ａを０．２１％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒド／１００ｍＭ  ＰＯ４、ｐＨ７中でインキュベートすることにより、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａをトキソイド（Ｔｏｘｏｉｄ  Ａ）に変換する、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記毒素Ｂを０．４２％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒド／１００ｍＭ  ＰＯ４、ｐＨ７中でインキュベートすることにより、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂをトキソイド（Ｔｏｘｏｉｄ  Ｂ）に変換する、請求項４記載の方法。
【請求項７】
精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを含む免疫原性組成物を調製する方法において、精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを、残存量のホルムアルデヒドを含む組成物と共に混ぜ合わせる工程を含み、
前記精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢは３７℃で６週間まで安定であり、および
前記残存量のホルムアルデヒドが０．００１％〜０．００８％（ｗ／ｖ）である、方法。
【請求項８】
精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを含む免疫原性組成物を調製する方法において、
（ｉ）精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂを０．１５％〜０．８％ホルムアルデヒド（ｗ／ｖ）と共に１５〜３２℃で２〜２１日間インキュベートすることによって不活化して、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよびＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを作成する工程、および
（ｉｉ）精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを、残存量のホルムアルデヒドを含む組成物と共に混ぜ合わせる工程
を含む、方法。
【請求項９】
トキソイド含有免疫組成物またはワクチン組成物を調製する方法において、
（ｉ）精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂを０．１５％〜０．８％ホルムアルデヒド（ｗ／ｖ）と共に１５〜３２℃で２〜２１日間インキュベートすることによって不活化して、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよびＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを作成する工程、および
（ｉｉ）前記トキソイドを混合して、残存量のホルムアルデヒドを含むトキソイド含有免疫組成物またはワクチン組成物を作成する工程
を含む、方法。
【請求項１０】
（ａ）前記インキュベートが、０．１５％〜０．５％ホルムアルデヒド（ｗ／ｖ）と共に行われる、および／または
（ｂ）前記インキュベートが、１７〜３２℃で行われる、請求項８または９記載の方法。
【請求項１１】
前記Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよびＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢが３７℃で６週まで安定である、請求項８〜１０いずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
前記残存量のホルムアルデヒドが０．００１％〜０．０１６％（ｗ／ｖ）である、請求項８〜１１いずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物が、２０ｍＭクエン酸塩、８％スクロース、および０．０１６％ホルムアルデヒドを含み、ｐＨ７．５である、請求項８〜１２いずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物が凍結乾燥される、請求項７〜１３いずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
毒素Ａおよび毒素Ｂを含むＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）培養物を提供する工程、および前記培養物から毒素Ａおよび毒素Ｂを精製する工程をさらに含む、請求項８〜１４いずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
請求項１〜６いずれか１項記載の方法によって製造されたトキソイドＡおよび／またはトキソイドＢを含む組成物、または請求項７〜１５いずれか１項記載の方法を用いて調製された組成物。
【請求項１７】
請求項１〜６いずれか１項記載の方法によって製造されたＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡまたはＣディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢ。
【請求項１８】
請求項１〜６いずれか１項記載の方法によって製造されたＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよびＣディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを含むワクチン組成物。
【請求項１９】
０．００１％〜０．０２０％ホルムアルデヒドを含む、請求項１８記載のワクチン組成物。
【請求項２０】
前記トキソイドＡと前記トキソイドＢが５：１〜１：５のＡ：Ｂ比で組成物中に存在する、請求項１８または１９記載のワクチン組成物。
【請求項２１】
前記ワクチン組成物が凍結乾燥、噴霧乾燥、または泡沫乾燥されている、あるいは液体である、請求項１８〜２０いずれか１項記載のワクチン組成物。
【請求項２２】
１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項１８〜２１いずれか１項記載のワクチン組成物。
【請求項２３】
クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、グリシン緩衝液、炭酸緩衝液、重炭酸緩衝液、またはｐＨ−制御水溶液を含む、請求項１６、または請求項１８〜２２いずれか１項記載の組成物。
【請求項２４】
糖、または糖アルコールをさらに含む、請求項２３記載の組成物。
【請求項２５】
スクロースおよびクエン酸塩を含む、請求項２４記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
好ましい実施形態に関して特定の実施形態を記述してきたが、変更および修正が当業者に思い浮かぶであろうことが理解される。したがって、添付の特許請求の範囲は、以下の特許請求の範囲の範囲内に入る全てのそのような等価の変更を対象として含むことが意図されている。
他の実施態様
１．Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドを製造する方法において、精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａまたは精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂを、約０．１５％〜０．５％ホルムアルデヒド（ｗ／ｖ）と共に、約１７〜３２℃で約２〜約２１日間インキュベートすることにより不活化する工程を含む、方法。
２．トキソイドＡを生成するために、毒素Ａが約０．２％ホルムアルデヒドと共に約２５℃で約２日間インキュベートされる、実施態様１に記載の方法。
３．トキソイドＢを生成するために、毒素Ｂが約０．４％ホルムアルデヒドと共に約２５℃で約１３日間インキュベートされる、実施態様１または２に記載の方法。
４．実施態様１または２に記載の方法で調製されるトキソイドＡ、および／または実施態様１または３に記載の方法で調製されるトキソイドＢを含む組成物。
５．精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを、残存量のホルムアルデヒドを含む組成物と混ぜ合わせる工程を含む、精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを含む免疫原性組成物を調製する方法。
６．前記精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢが３７℃で約６週間まで安定である、実施態様５に記載の方法。
７．前記残存量のホルムアルデヒドが約０．００１％〜０．０２５％（ｗ／ｖ）である、実施態様５または６に記載の方法。
８．実施態様５〜７のいずれかに記載の方法を使用して調製される組成物。
９．精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを含む免疫原性組成物を調製する方法において、
精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂを約０．１５％〜０．５％ホルムアルデヒド（ｗ／ｖ）と共に約１７〜３２℃で約２〜２１日間インキュベートすることによって不活化する工程と、
精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを、残存量のホルムアルデヒドを含む組成物と混ぜ合わせる工程と
を含む、方法。
１０．前記精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよび精製Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢが３７℃で約６週まで安定である、実施態様９に記載の方法。
１１．前記残存量のホルムアルデヒドが約０．００１％、０．００４％、０．００８％、または０．０１６％（ｗ／ｖ）である、実施態様９または１０に記載の方法。
１２．前記トキソイドＡおよび／またはトキソイドＢが２０ｍＭクエン酸塩、ｐＨ７．５、８％スクロース、および０．０１６％ホルムアルデヒドの組成物中に維持される、実施態様１〜３、実施態様５〜７または実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法。
１３．トキソイドＡおよび／またはトキソイドＢを含む前記組成物が凍結乾燥される、実施態様１〜３、実施態様５〜７、または実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法。
１４．実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法を使用して調製される組成物。
１５．前記方法が毒素Ａおよび毒素Ｂを含むＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）培養を提供する工程と、培養から毒素Ａおよび毒素Ｂを精製する工程とをさらに含む、実施態様１〜３、実施態様５〜７、または実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法。
１６．実施態様１、実施態様２、実施態様５〜７、または実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法に従って製造される、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡ。
１７．実施態様１、実施態様３、実施態様５〜７、または実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法に従って製造される、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢ。
１８．実施態様１、実施態様２、実施態様５〜７、または実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法に従って前記Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡが製造され、また実施態様１、実施態様３、実施態様５〜７、または実施態様９〜１３のいずれかに記載の方法に従ってトキソイドＢが製造される、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＡおよびＣディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）トキソイドＢを含むワクチン組成物。
１９．前記ワクチン組成物が約０．００１％〜０．０２０％ホルムアルデヒドを含む、実施態様１８に記載のワクチン組成物。
２０．前記ワクチン組成物が約０．００４％ホルムアルデヒドを含む、実施態様１９に記載のワクチン組成物。
２１．前記ワクチン組成物が０．００８％ホルムアルデヒドを含む、実施態様１９に記載のワクチン組成物。
２２．前記ワクチン組成物が約０．０１６％ホルムアルデヒドを含む、実施態様１９に記載のワクチン組成物。
２３．前記トキソイドＡおよび前記トキソイドＢが５：１〜１：５のＡ：Ｂ比で前記組成物中に存在する、実施態様１８〜２２のいずれかに記載のワクチン組成物。
２４．前記トキソイドＡおよび前記トキソイドＢが３：１または３：２のＡ：Ｂ比で前記組成物中に存在する、実施態様２３に記載のワクチン組成物。
２５．前記ワクチン組成物が凍結乾燥、噴霧乾燥、または泡沫乾燥される、実施態様１８〜２４のいずれかに記載のワクチン組成物。
２６．前記ワクチン組成物が液体である、実施態様１８〜２４のいずれかに記載のワクチン組成物。
２７．１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、実施態様１８〜２５のいずれかに記載のワクチン組成物。
２８．クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、グリシン緩衝液、炭酸緩衝液、重炭酸緩衝液、またはｐＨ−制御水溶液を含む、実施態様４、実施態様８、実施態様１４または実施態様１８〜２６のいずれかに記載の組成物。
２９．糖、または糖アルコールをさらに含む、実施態様２８に記載の組成物。
３０．スクロースおよびクエン酸塩を含む、実施態様２９に記載の組成物。
３１．前記毒素Ａを約０．２１％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒドと共に約２５℃で約６〜１３日間インキュベートする工程によって、Ｃ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ａをトキソイド（Ｔｏｘｏｉｄ  Ａ）に変換する方法。
３２．前記インキュベーションが約６日間である、実施態様３１に記載の方法。
３３．前記インキュベーションが０．２１％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒド／１００ｍＭ  ＰＯ４、ｐＨ７中で行われる、実施態様３１または３２に記載の方法。
３４．前記毒素Ｂを約０．４２％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒドと共に約２５℃で約１３〜約２０日間インキュベートする工程によってＣ．ディフィシル（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）毒素Ｂをトキソイド（Ｔｏｘｏｉｄ  Ｂ）に変換する方法。
３５．前記インキュベーションが約１３日間である、実施態様３４に記載の方法。
３６．前記インキュベーションが０．４２％（ｗ／ｖ）ホルムアルデヒド／１００ｍＭ  ＰＯ４、ｐＨ７中で行われる、実施態様３４または３５に記載の方法。