【手続補正書】
【提出日】平成29年10月18日(2017.10.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも３０重量％のグリコシド残基を含むラブリシン糖タンパク質を少なくとも０．４ｇ／リットルの培地中濃度で産生するのに十分な時間及び培養条件下で、ヒトＰＲＧ４遺伝子をトランスフェクトされそれを発現しその発現産物を翻訳後にグリコシル化するチャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞を培地中で培養する工程と、
前記培地からラブリシン糖タンパク質を精製する工程と
を含む、組換えラブリシン糖タンパク質の製造方法。
【請求項２】
前記ＣＨＯ細胞が、前記ヒトＰＲＧ４遺伝子をコードする核酸を含むＣＨＯ−Ｍ細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＣＨＯ細胞が、クロマチンエレメントをコードする核酸を含む第１のベクター及び前記ヒトＰＲＧ４遺伝子をコードする核酸を含む第２のベクターをトランスフェクトされる、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記クロマチンエレメントが、境界エレメント、マトリックス付着領域、遺伝子座調節領域又はユニバーサルクロマチンオープニングエレメントである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記クロマチンエレメントが、マトリックス付着領域である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記細胞が、前記ラブリシン糖タンパク質を少なくとも０．５ｇ／リットルの培地中濃度で産生するのに十分な時間及び培養条件下で培養される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記細胞が、前記ラブリシン糖タンパク質を少なくとも０．８ｇ／リットルの培地中濃度で産生するのに十分な時間及び培養条件下で培養される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記細胞が、前記ラブリシン糖タンパク質を少なくとも１．０ｇ／リットルの培地中濃度で産生するのに十分な時間及び培養条件下で培養される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記ラブリシン糖タンパク質のグリコシル化の少なくとも９５重量％が、コア１のグリコシル化である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ラブリシン糖タンパク質のグリコシル化の少なくとも９９重量％が、コア１のグリコシル化である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記グリコシド残基が、天然ヒトラブリシンと比較して硫酸化糖類側鎖に富む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ラブリシン糖タンパク質が、軟骨−軟骨摩擦検査において測定される、精製された天然ウシラブリシンの静止摩擦係数の１５０％以下の静止摩擦係数を生ずる多量体タンパク質を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記ラブリシン糖タンパク質が、軟骨−軟骨摩擦検査において測定される、精製された天然ウシラブリシンの静止摩擦係数の１２０％以下の静止摩擦係数を生ずる多量体タンパク質を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ラブリシン糖タンパク質が、軟骨−軟骨摩擦検査において測定される、精製された天然ウシラブリシンの静止摩擦係数の１１０％以下の静止摩擦係数を生ずる多量体タンパク質を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ラブリシン糖タンパク質が、前記培養培地から多量体ラブリシン種と共精製され、前記多量体ラブリシン種と混合している単量体ラブリシン種を含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ラブリシン糖タンパク質が、二量体ラブリシン種を含む、請求項１２〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記ラブリシン糖タンパク質が、ジスルフィド結合又は非共有結合により会合した個々のグリコシル化アミノ酸鎖を少なくとも５個含み、少なくとも１２００ｋＤａの分子量を有する、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記細胞が、少なくとも１０、５０又は１００リットルの培地において培養される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ラブリシン糖タンパク質が、少なくとも３５重量％のグリコシド残基を含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法によって産生されるラブリシン糖タンパク質。
【請求項２１】
宿主細胞培養液においてヒトＰＲＧ４遺伝子から発現された組換え多量体ラブリシン糖タンパク質であって、少なくとも３０重量％のグリコシド残基を含み、軟骨−軟骨摩擦検査において測定される、精製された天然ウシラブリシンの動摩擦係数の１５０％以下の動摩擦係数を生ずる組換え多量体ラブリシン糖タンパク質を含む組成物。
【請求項２２】
前記ラブリシン糖タンパク質が、軟骨−軟骨摩擦検査において測定される、精製された天然ウシラブリシンの動摩擦係数の１２０％以下の動摩擦係数を生ずるものとして特徴付けられる、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記ラブリシン糖タンパク質が、軟骨−軟骨摩擦検査において測定される、精製された天然ウシラブリシンの動摩擦係数の１１０％以下の動摩擦係数を生ずるものとして特徴付けられる、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ラブリシン糖タンパク質が、少なくとも３５重量％のグリコシド残基を含む、請求項２１〜２３のいずれかに記載の組成物。
【請求項２５】
前記ラブリシン糖タンパク質が、少なくとも４０重量％のグリコシド残基を含む、請求項２１〜２３のいずれかに記載の組成物。
【請求項２６】
前記ラブリシン糖タンパク質のグリコシル化の少なくとも９９重量％が、コア１のグリコシル化である、請求項２１〜２５のいずれかに記載の組成物。
【請求項２７】
前記グリコシド残基が、天然ヒトラブリシンと比較して硫酸化糖類側鎖に富む、請求項２１〜２６のいずれかに記載の組成物。
【請求項２８】
多量体ラブリシン種と混合している単量体ラブリシン種を更に含む、請求項２１〜２７のいずれかに記載の組成物。
【請求項２９】
二量体ラブリシン種を含む、請求項２１〜２８のいずれかに記載の組成物。
【請求項３０】
少なくとも１２００ｋＤａの分子量を有する、ジスルフィド結合又は非共有結合により会合した個々のグリコシル化アミノ酸鎖を少なくとも５個含むラブリシン種を含む、請求項２１〜２９のいずれかに記載の組成物。
【請求項３１】
前記ラブリシン糖タンパク質と混合しているヒアルロン酸又はその塩を更に含む、請求項２１〜３０のいずれかに記載の組成物。
【請求項３２】
関節内補充療法による関節結合部の処置のための医薬の調製のための、請求項２１〜３１のいずれかに記載の組成物。
【請求項３３】
組織表面への局所的適用のための医薬の調製のための、請求項２１〜３１のいずれかに記載の組成物。
【請求項３４】
ドライアイ疾患の処置のための医薬の調製のための、請求項２１〜３１のいずれかに記載の組成物。
【請求項３５】
後に接着又は線維性結合組織が形成されるのを阻害するための、外科手術における身体表面への適用のための医薬の調製のための、請求項２１〜３１のいずれかに記載の組成物。
【請求項３６】
脈管構造内の細胞−細胞接着又は運動性を阻害するための、全身注射のための医薬の調製のための、請求項２１〜３１のいずれかに記載の組成物。
【請求項３７】
前記ラブリシン糖タンパク質のグリコシル化の少なくとも９５重量％が、コア１のグリコシル化である、請求項２１〜３６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
前記ラブリシン糖タンパク質のグリコシル化の少なくとも９０重量％が、コア１のグリコシル化である、請求項２１〜３６のいずれか一項に記載の組成物。