(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下：
【化１−１】
0006989509.tif 000073
【化１−２】
0006989509.tif 000074
から選択される化合物、またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物、またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体とともに、１種または複数種の薬学的に許容される添加剤、希釈剤または担体を含む医薬組成物。
【請求項３】
医薬品として使用するための請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
インフルエンザの処置で使用するための請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項５】
生体サンプル中または患者中におけるインフルエンザウイルスの複製を阻害するのに使用するための、請求項１に記載の化合物、またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体を含む医薬組成物。
【請求項６】
追加の治療薬を共投与するのに用いるための、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記追加の治療薬は、抗ウイルス剤もしくはインフルエンザワクチンまたは両方から選択される、請求項６に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
インフルエンザは、ヒト集団で発生率が高く罹患率および死亡率が定期的に大規模になる公衆衛生上の深刻な問題である。インフルエンザは、急性の発熱性疾患を引き起こす、感染性が高い空気感染性疾患である。全身症状は、軽度の倦怠感から呼吸不全および死亡まで重症度が異なる。ＷＨＯによれば、毎年の流行の世界的負担の平均は毎年、１０億例のオーダー、３００万〜５００万例の重度疾患および３００，０００〜５００，０００例の死亡であるだろう。毎年、インフルエンザウイルスがヒトで流行し、あらゆる年齢群の個体群の５〜２０％に概して影響を及ぼし、この数字は大規模流行の間には３０％まで上昇する。重病および死亡の割合は、６６歳以上の人々、２歳未満の子供、ならびにインフルエンザの合併症のリスクが増大する医学的状態（例えば、慢性の心疾患、肺疾患、腎臓疾患、肝臓疾患、血液疾患もしくは代謝性疾患、または弱い免疫系）を有するあらゆる年齢の人々が最も高い。子供が死亡することは稀ではあるが、入院の割合は、併存する状態の有無に応じて、５歳未満の子供の場合には１００，０００例当たり約１００〜５００例の範囲である。２４ヶ月齢未満の子供の入院割合は、６６歳以上の人々で報告されている割合と同程度である。
【背景技術】
【０００２】
米国では、毎年のインフルエンザの流行により、約３０００万人が外来患者となり、医療費が年間１００億ドルに達する。病気および死亡による収入の損失は毎年１５０億ドルを超える経費と同等であり、毎年のインフルエンザ流行の米国の経済的負担の合計は８５０億ドル超に達する。
【０００３】
インフルエンザを引き起こす病原体はマイナス鎖の一本鎖ＲＮＡウイルスであり、このウイルスはオルトミクソウイルス（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）科に属する。インフルエンザウイルスにはＡ、ＢおよびＣの３種の型が存在する。インフルエンザＡ型ウイルスは最も一般的な型であり、哺乳類および鳥類で伝播し得る。インフルエンザＡ型の亜型は、表面タンパク質ヘマグルチニン（Ｈ）およびノイラミニダーゼ（Ｎ）の型により命名される。１８種の異なるヘマグルチニンおよび１１種の既知のノイラミニダーゼが存在する。ヒトで見出されている現在の季節性インフルエンザウイルスは、主にＨ１Ｎ１亜型およびＨ３Ｎ２亜型である。インフルエンザＢ型ウイルスは通常、ヒトにおいてのみ見出されている。インフルエンザＢ型ウイルスは亜型に分類されていないが、異なる株にさらに分類され得る。流行しているインフルエンザウイルスは毎年大きく変わり、インフルエンザＡ型およびインフルエンザＢ型の両方が世界中で季節性流行を引き起こす。インフルエンザＣ型ウイルスは非常に軽度の症状を与え、流行を引き起こすことがない。
【０００４】
３種の型のウイルス全てが類似のゲノム構造を有する。このゲノムは、型に応じて８種のセグメント（９〜１１種のタンパク質をコードする）を含む。インフルエンザＡ型は１１種のタンパク質をコードし、これらのタンパク質として、表面タンパク質（ヘマグルチニン（ＨＡ）およびノイラミニダーゼ（ＮＡ）、ポリメラーゼ複合体（ＰＡ、ＰＢ１およびＰＢ２）、核タンパク質（ＮＰ）、膜タンパク質（Ｍ１およびＭ２）、ならびに他のタンパク質（ＮＳ１、ＮＳ２、ＮＥＰ）が挙げられる。３種のインフルエンザ型の中でも、インフルエンザＡ型が最も高い割合の変異を有する。インフルエンザＢ型はＡ型と比べて進化が遅いが、Ｃ型と比べて速い。セグメント化されたゲノムは異なるウイルス株間の遺伝子交換を可能にし、それによりインフルエンザウイルスの新しいバリアントが生じる。
【０００５】
インフルエンザウイルスは、感染した個体またはウイルスに汚染された物質への直接接触により、ヒトの間で伝染され得る。ヒトはまた、空気中に浮遊するウイルス飛沫の吸入によっても感染され得る。この飛沫は、感染した個体の咳、くしゃみまたは会話により生じる。季節性インフルエンザは、急激な高熱、（通常は乾いた）咳、頭痛、筋肉および関節の疼痛、重度の倦怠感（気分がすぐれない感じ）、喉の痛みおよび鼻水を特徴とする。咳は、重度であり且つ２週間以上にわたり持続する可能性がある。ほとんどの人は、治療を必要とすることなく１週間以内に熱および他の症状から回復する。しかし、インフルエンザは、特に上述した高リスクの人で重病または死亡を引き起こす可能性がある。感染から病気までの時間（潜伏期間として知られている）は約２日である。
【０００６】
疾患および／または病気の重度の転帰を予防する最も有効な方法はワクチン接種である。安全且つ有効なワクチンが利用可能であり、６０年を超えて使用されている。健康な成人では、インフルエンザワクチンは十分な保護を提供することができる。しかしながら、ワクチン接種はいくつかの制限がある。初めに、インフルエンザワクチンは高齢者では病気の予防に効果が少なく、疾患の重症度ならびに合併症および死亡の発生率を低下させ得るのみである。加えて、インフルエンザワクチン接種は、流行しているウイルスがワクチンウイルスと十分に一致している場合に最も有効であり、ワクチン接種の成功は、その季節の最も流行するウイルス型の良好な予測に大きく依存する。抗原連続変異によるインフルエンザウイルス株の急速且つ継続的な進化は、現在のインフルエンザワクチンに対するウワクチン誘発性免疫応答の短命の性質と相まって、予防には季節的に適切な株のワクチン接種が毎年必要とされることを意味する。
【０００７】
インフルエンザの現在の処置は、直接抗ウイルス剤、またはインフルエンザが誘発する症状を除く薬剤を使用する。２種のインフルエンザ抗ウイルス剤：ノイラミニダーゼ阻害剤およびＭ２チャネル阻害剤が市場で入手可能である。ノイラミニダーゼ阻害剤オセルタミビルまたはザナミビルは、インフルエンザの予防および処置に推奨される主要な抗ウイルス剤である。これらのノイラミニダーゼ阻害剤は、インフルエンザＡ型ウイルスおよびインフルエンザＢ型ウイルスの両方に対して有効である。これらの抗ウイルス剤に対する耐性の発生が、季節性インフルエンザの処置の間に且つ散発性のオセルタミビル耐性２００９Ｈ１Ｎ１ウイルスにおいて特定されているが、これまで公衆の健康への影響は限定されている。Ｍ２チャネル阻害剤（例えばアマンタジンおよびリマンタジン（アマンタダン））は、インフルエンザＡ型株に対して有効であるが、インフルエンザＢ型株に対しては有効ではない。流行しているインフルエンザＡ型ウイルス中におけるアマンタダン耐性は、２００３〜２００４年に始まり世界中に急速に増加した。従って、アマンタジンおよびリマンタジンは、現在流行しているインフルエンザＡ型ウイルス株の抗ウイルス処置または化学的予防には推奨されていない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
２００９年、ヒト、ブタおよび鳥のＨ１Ｎ１ウイルスの遺伝子の再集合の結果としての新規のブタＨ１Ｎ１株が、予期しないインフルエンザパンデミックを引き起こした。この過去のパンデミックは、高病原性鳥Ｈ５Ｎ１株の継続中の流行と、中国で単離され且つ死亡率４０％の重度の呼吸器系疾患を伴う、鳥起源の新規の再集合体であるＨ７Ｎ９ウイルス（ヒトからヒトへの伝染に潜在的に適合し得た）の最近の出現と共に、新規のインフルエンザ株に対する世界人口の脆弱性を浮き彫りにした。ワクチン接種はインフルエンザ感染を制御する主要な予防戦略であり続けているが、新規のワクチンが入手可能になる前の期間を埋めるために、重度のインフルエンザ症例を処置するために、およびウイルス耐性の問題に立ち向かうために、抗インフルエンザ剤の幅広い選択が必要とされている。従って、新規の抗インフルエンザウイルス剤の開発が再び高い優先度を持つようになり、満たされていない医学的要求になっている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、インフルエンザウイルス感染の処置またはインフルエンザウイルス感染に対する処置に使用され得る下記式（Ｉ）：
【化１】
0006989509.tif 000002
（式中、
Ｘは−ＣＦまたはＮから選択され、
Ｙは、Ｎ、−ＣＦ、−Ｃ−Ｃｌ、−Ｃ−ＣＮまたは−Ｃ−ＣＨ３から選択され、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３、−シクロプロピル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１〜３アルキル）または−ＣＯＮ（Ｃ１〜３アルキル）２から選択され、
ＱはＮまたはＯから選択され、
Ｒ２は複素環であり、前記複素環は、ハロゲン、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、ヒドロキシル、アミノ、メトキシ、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３またはシクロアルキルで任意選択的に置換されている）
の化合物、その立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体に関する。
【００１０】
本発明に係る好ましい化合物のうちの１つは下記構造：
【化２】
0006989509.tif 000003
を有する。
【００１１】
本発明の一部はまた、式（Ｉ）の化合物またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体と、１種または複数種の薬学的に許容される添加剤、希釈剤または担体とを含む医薬組成物でもある。
【００１２】
この医薬組成物はまた、別の抗ウイルス剤もしくはインフルエンザワクチンまたは両方のような追加の治療薬を含むこともできる。
【００１３】
本発明には、医薬品としての使用のための式（Ｉ）の化合物またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体または医薬組成物も属する。
【００１４】
加えて、本発明は、インフルエンザの処置においての使用のための式（Ｉ）の化合物またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体または医薬組成物に関する。
【００１５】
前記使用はまた、追加の治療薬の共投与も含み得、前記追加の治療薬は、抗ウイルス剤もしくはインフルエンザワクチンまたは両方から選択される。
【００１６】
本発明の一部は、生体サンプル中または患者中におけるインフルエンザウイルスの複製を阻害するための、下記構造式（Ｉ）
【化３】
0006989509.tif 000004
（式中、
Ｘは−ＣＦまたはＮから選択され、
Ｙは、Ｎ、−ＣＦ、−Ｃ−Ｃｌ、−Ｃ−ＣＮまたは−Ｃ−ＣＨ３から選択され、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３、−シクロプロピル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１〜３アルキル）または−ＣＯＮ（Ｃ１〜３アルキル）２から選択され、
ＱはＮまたはＯから選択され、
Ｒ２は複素環であり、前記複素環は、ハロゲン、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、ヒドロキシル、アミノ、メトキシ、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３またはシクロアルキルで任意選択的に置換されている）
で表される化合物、その立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体の使用である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
用語「アルキル」は、特定の数の炭素原子を含む直鎖または分枝鎖の飽和脂肪族炭化水素を指す。
【００１８】
用語「シクロアルキル」は、特定の数の炭素原子を含む炭素環を指す。
【００１９】
用語「ヘテロ環」は、Ｎ、ＯまたはＳ（特にＮおよびＯ）から選択される１種または複数種のヘテロ原子を含む飽和または不飽和である分子を指す。前記ヘテロ環は４個、５個、６個または７個の環原子を有し得、別の環系に任意選択で縮合され得る。
【００２０】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容される塩として、その酸付加塩または塩基塩が挙げられる。好適な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成されている。好適な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成されている。
【００２１】
本発明の化合物はまた、非溶媒和形態および溶媒和形態で存在することもできる。用語「溶媒和物」は、本明細書では、本発明の化合物と、１種または複数種の薬学的に許容される溶媒分子（例えばエタノール）とを含む分子複合体を説明するために使用される。
【００２２】
用語「多形体」は、本発明の化合物の複数種の形態または結晶構造で存在する能力を指す。
【００２３】
本発明の化合物は、結晶質または非結晶質の生成物として投与され得る。本発明の化合物を、例えば、沈殿、結晶化、凍結乾燥、噴霧乾燥または蒸発乾燥等の方法により固体プラグ、粉末またはフィルムとして得ることができる。本発明の化合物を、単独で、または本発明の１種もしくは複数種の他の化合物と組み合わせて、または１種もしくは複数種の他の薬剤と組み合わせて投与することができる。一般に、本発明の化合物を、１種または複数種の薬学的に許容される添加剤との製剤として投与される。用語「添加剤」は、本明細書では、本発明の化合物以外の任意の成分を説明するために使用される。添加剤の選択は、具体的な投与形態、溶解性および安定性への添加剤の影響、ならびに剤形の性質等の因子に大きく左右される。
【００２４】
本発明の化合物またはその任意のサブグループを、投与目的のために様々な医薬品形態へと製剤化することができる。適切な組成物として、全身投与薬物に通常利用される全ての組成物を挙げることができる。本発明の医薬組成物を調製するために、活性成分としての特定の化合物（任意選択で付加塩の形態）の有効量を、薬学的に許容される担体と組み合わせて密接な混合物にし、この担体は、投与のために所望される製剤の形態に応じて多種多様な形態をとることができる。この医薬組成物は、例えば経口投与、直腸投与または経皮投与に好適な単一の剤形が望ましい。例えば、経口投与形態の組成物の調製では、懸濁液、シロップ、エリキシル剤、乳液および溶液等の経口液体製剤の場合には通常の医薬媒体（例えば、水、グリコール、油、アルコールおよび同類のもの）のいずれかを利用し得る、または粉末、丸剤、カプセルおよび錠剤の場合には固体担体（例えば、デンプン、糖、カオリン、希釈剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤および同類のものを利用し得る。投与の容易さから、錠剤およびカプセルが最も有利な経口投与単位剤形を代表し、この場合、固体医薬担体が明らかに利用される。使用直前に液体に変換され得る固形製剤も含まれる。経皮投与に好適な組成物では、担体は、浸透促進剤および／または好適な湿潤剤を、小さい割合の任意の性質の好適な添加剤と任意選択で組み合わせて任意選択で含み、この添加剤は皮膚への有意な悪影響を引き起こさない。前記添加剤は皮膚への投与を容易にし得、および／または所望の組成物の調製に有用であり得る。この組成物を様々な方法で投与し得、例えば経皮パッチとして、スポットオンとして、軟膏として投与し得る。吸入または吹送による投与のために当分野で用いられる方法および製剤により、本発明の化合物を吸入または吹送により投与することもできる。そのため、一般には、本発明の化合物を、溶液、懸濁液または乾燥粉末の形態で肺に投与することができる。
【００２５】
投与の容易さおよび投与量の均一さのために、上述した医薬組成物を単位剤形で製剤化することが特に有利である。単位剤形は、本明細書で使用される場合、単位投与量として好適な物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要とされる医薬担体と関連して所望の治療効果を生じるように算出された所定量の活性成分を含む。そのような単位剤形の例は、錠剤（例えば分割錠またはコーティング錠）、カプセル、丸剤、粉末パケット、ウエハ、坐薬、注射液または懸濁液および同類のもの、ならびにそれらの分離複合剤である。
【００２６】
感染性疾患の処置の当業者は、下記に示す試験結果から有効量を決定することができる。一般に、有効な日量は０．０１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／体重ｋｇであり、より好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／体重ｋｇであろうと考えられる。必要な用量を２つ、３つ、４つまたはより多いサブ用量として１日の間に適切な間隔で投与することが適切であり得る。前記サブ用量は、例えば単位剤形当たり１〜１０００ｍｇ（特に５〜２００ｍｇ）の活性成分を含む単位剤形として製剤化され得る。
【００２７】
正確な投与量および投与頻度は、当業者に公知であるように、使用される式（Ｉ）の特定の化合物、処置される特定の状態、処置される状態の重症度、特定の患者の年齢、体重および全身的な身体状態、ならびに個体が服用している可能性がある他の薬剤に左右される。さらに、処置される対象の応答に応じて、および／または本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて、有効量を減少させてもよいし増加させてもよいことは明らかである。従って、上述した有効量範囲は指針に過ぎず、本発明の範囲または使用を何らかの範囲に限定することを意図するものではない。
【００２８】
本開示はまた、本発明の化合物中に存在する原子の任意の同位体を含むことも意図する。例えば、水素の同位体としてトリチウムおよび重水素が挙げられ、炭素の同位体としてＣ−１３およびＣ−１４が挙げられる。
【００２９】
本発明で使用される本化合物は、その立体化学的異性体でも存在し得、同一の結合の配列で結合されるが異なる三次元構造を有する（互換的にではない）同一の原子で構成された全ての可能な化合物を定義する。別途言及しない限りまたは指示しない限り、化合物の化学的な命名は、前記化合物が有する可能性がある全ての可能な立体化学的異性体の混合物を包含する。
【００３０】
前記混合物は、前記化合物の基本的な分子構造の全てのジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーを含む場合がある。純粋な形態または互いの混合物のいずれかで本発明で使用される化合物の全ての立体化学的異性体は、任意のラセミ混合物またはラセミ体を含む本発明の範囲内に包含されることを意図する。
【００３１】
本明細書で言及されている化合物および中間体の純粋な立体異性体は、前記化合物または中間体の同じ基本的な分子構造の他のエナンチオマー体またはジアステレオマー体を実質的に含まない異性体として定義される。具体的には、用語「立体異性体的に純粋な」は、少なくとも８０％の立体異性体過剰率（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｉｃ  ｅｘｃｅｓｓ）（即ち、ある異性体が最小９０％および他の可能な異性体が最大１０％）〜１００％の立体異性体過剰率（即ち、ある異性体が１００％および他はなし）を有する化合物または中間体に関し、より具体的には９０％〜１００％の立体異性体過剰率を有する化合物または中間体に関し、さらにより具体的には９４％〜１００％の立体異性体過剰率を有する化合物または中間体に関し、最も具体的には９７％〜１００％の立体異性体過剰率を有する化合物または中間体に関する。用語「エナンチオマー的に純粋」および「ジアステレオマー的に純粋な」を同様に理解すべきであるが、問題の混合物のそれぞれエナンチオマー過剰率（ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃ  ｅｘｃｅｓｓ）、ジアステレオマー過剰率（ｄｉａｓｔｅｒｅｏｍｅｒｉｃ  ｅｘｃｅｓｓ）を考慮する。
【００３２】
本発明で使用される化合物および中間体の純粋な立体異性体を、当分野で既知の手順の適用により得ることができる。例えば、エナンチオマーを、光学活性な酸または塩基とのジアステレオマー塩の選択的結晶化により互いに分離することができる。光学活性な酸の例は、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸およびカンファースルホン酸（ｃａｍｐｈｏｒｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）である。あるいは、キラル固定相を使用するクロマトグラフィー技術によりエナンチオマーを分離することができる。反応が立体異性体的に起こるならば、前記純粋な立体化学的異性体を適切な出発物質の対応する純粋な立体化学的異性体から得ることもできる。好ましくは、特定の立体異性体が望ましい場合、立体特異的な調製方法により前記化合物を合成する。この方法は、エナンチオマー的に純粋な出発物質を有利に利用する。
【実施例】
【００３３】
スキーム１。
３の調製。
【化４】
0006989509.tif 000005
スキーム１：ｉ）ＴＢＡＨＳ、ＮａＯＨ、トルエン  ｉｉ）ＮＢＳ、ＤＭＦ  ｉｉｉ）４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ−１，３，２−ジオキサボロラン、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２、ＫＯＡｃ、１，４−ジオキサン、９０℃
【００３４】
スキーム２．式（Ｉ）の生成物への一般的なスキーム。
１０の調製。
【化５】
0006989509.tif 000006
スキーム２：ｉ）ＰｈＣＨ２ＯＨ、ＤＰＰＡ、Ｅｔ３Ｎ、トルエン、１００℃、１２時間  ｉｉ）ＨＣｌ、ＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨ３ＯＨ、ｒｔ、４８時間  ｉｉｉ）ＤＩＰＥＡ、ＣＨ３ＯＨ、ＴＨＦ、ｒｔ、１２時間  ｉｖ）Ｎａ２ＣＯ３、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４、Ｈ２Ｏ、１，４−ジオキサン、８０℃、１２時間  ｖ）Ｐｄ／Ｃ、Ｈ２、ＴＨＦ、ｖｉ）ＤＩＰＥＡ、ＣＨ３ＯＨ、ＴＨＦ、８０〜９０℃、２日  ｖｉｉ）ＬｉＯＨ、１，４−ジオキサン、Ｈ２Ｏ、還流
【００３５】
１の調製
【化６】
0006989509.tif 000007
５，７−ジフルオロ−１Ｈ−インドール（３０ｇ、１９５．９１ｍｍｏｌ）のトルエン（５００ｍＬ）溶液を窒素下で撹拌した。ＴＢＡＨＳ（５ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＮａＯＨ（Ｈ２Ｏ中に５０％）（１０５ｍＬ）を添加し、この混合物を激しく撹拌した。ｐ−トルエンスルホニルクロリド（６３．５ｇ、３３３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物をｒｔで１２時間にわたり撹拌した。結果として得られた溶液をトルエン２５０ｍＬで希釈し、水で２回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去した。粗生成物（ｃｒｕｄｅ）をメタノール中で粉砕し、ｒｔで１２時間にわたり撹拌した。沈殿物をろ過で回収し、真空中で乾燥させて５，７−ジフルオロ−１−トシル−１Ｈ−インドール、１を得た。
【００３６】
２の調製
【化７】
0006989509.tif 000008
５，７−ジフルオロ−１−トシル−１Ｈ−インドール、１（５０．８５ｇ、１６５．４６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３３０ｍＬ）溶液に、ＮＢＳ（３５．３４ｇ、１９８．５６ｍｍｏｌ）を少量ずつ（ｐｏｒｔｉｏｎ  ｗｉｓｅ）添加した。１時間にわたり５０℃で撹拌し続けた。この混合物を、ＮａＯＨ（１Ｎ、２００ｍＬ）の氷水（１Ｌ）撹拌溶液に滴下し、一晩撹拌した。沈殿物をろ過で回収し、真空中で乾燥させて３−ブロモ−５，７−ジフルオロ−１−トシル−１Ｈ−インドール、２を得た。
【００３７】
３の調製
【化８】
0006989509.tif 000009
１，４−ジオキサン（１．５Ｌ）中の３−ブロモ−５，７−ジフルオロ−１−トシル−１Ｈ−インドール、２（６０ｇ、１５５．３５ｍｍｏｌ）、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ−１，３，２−ジオキサボロラン（１１８．３５ｇ、４６６．０６ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２２．７４ｇ、３１．０７ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（４５．７４ｇ、４６６．０６ｍｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２下で一晩９０℃に加熱した。ろ過および濃縮後、粗生成物を、ＣＨ２Ｃｌ２からヘプタンへの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。純粋な生成物を含む画分をプールし、溶媒を減圧下で除去して５，７−ジフルオロ−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１−トシル−１Ｈ−インドール、３を得た。
【００３８】
４の調製
【化９】
0006989509.tif 000010
トリエチルアミン（３５ｍＬ、２５１．６ｍｍｏｌ）およびジフェニルホスホリルアジド（３９ｍＬ、１８１ｍｍｏｌ）を、ｃｉｓ−３−［（ｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］シクロヘキサンカルボン酸（３９ｇ、１６０．２５ｍｍｏｌ）のトルエン（６００ｍＬ）撹拌溶液に添加し、結果として得られた混合物を３時間にわたりｒｔで撹拌した。ベンジルアルコール（３３．１６７ｍＬ、３２０．５１ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１００℃に加熱した。１２時間後、この反応混合物をｒｔまで冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、固体をろ過で除去し、ろ液を真空中で濃縮した。精製を順相キラル分離（固定相：Ｄａｉｃｅｌ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ  ２ｋｇ、移動相：８０％ヘプタン、２０％エタノールから８０％ヘプタン、２０％エタノールへの勾配）で実施して、（＋）−ベンジルｔ−ブチル（（ｃｉｓ）−シクロヘキサン−１，３−ジイル）ジカルバメート、［α］Ｄ２０＋１０．９（ｃ０．５２、ＤＭＦ）４ｂおよび（−）−ベンジルｔ−ブチル（（ｃｉｓ）−シクロヘキサン−１，３−ジイル）ジカルバメート、［α］Ｄ２０−１０．９（ｃ０．４７、ＤＭＦ）４ａを得た。
【００３９】
５の調製
【化１０】
0006989509.tif 000011
磁気撹拌子を備えた５００ｍＫ丸底フラスコに、４ａ（１０ｇ、２８．７ｍｍｏｌ）、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）およびメタノール（１００ｍＬ）を入れた。４８時間にわたり室温で撹拌しつつ、イソプロパノール中の６Ｍ  ＨＣＬを緩やかに添加した。溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をジイソプロピルエーテル含有イソプロパノール中で撹拌した。白色沈殿物をろ過で単離し、真空中で乾燥させて（−）５を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．０１−１．１３（ｍ，１Ｈ）１．１６−１．３６（ｍ，３Ｈ）１．６６−１．８０（ｍ，２Ｈ）１．８６−１．９９（ｍ，１Ｈ）２．１４（ｍ，１Ｈ）２．９５−３．１７（ｍ，１Ｈ）３．２８−３．５１（ｍ，１Ｈ）４．９５−５．０８（ｍ，２Ｈ）７．２７−７．４５（ｍ，５Ｈ）８．２１（ｓ，３Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝２４９．３；Ｒｔ：１．４８分，方法Ｃ．
【００４０】
６の調製
【化１１】
0006989509.tif 000012
５（４０ｇ、１４０．４６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、７２．６１ｍＬ、４２１．３７ｍｍｏｌ）の溶液を、ＣＨ３ＯＨ（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（４００ｍＬ）中にて室温で撹拌した。この反応混合物に、２，４−ジクロロ−５−フルオロプリミジン（２３．５ｇ、１４１ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。この反応混合物を室温で１８時間にわたり撹拌した。溶媒を蒸発させ、酢酸エチルに溶解させ、水およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去した。残渣を、約５％アセトニトリルを含むジイソプロピルエーテル中において週末にわたり撹拌しつつ結晶化させた。この結晶をろ過で回収し、真空中で乾燥させて６を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．９９−８．１４（ｍ，２Ｈ），７．２４−７．４５（ｍ，６Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ），３．８２−３．９９（ｍ，１Ｈ），１．９９（ｍ，１Ｈ），１．６７−１．８５（ｍ，３Ｈ），１．１７−１．４４（ｍ，３Ｈ），１．００−１．１５（ｍ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝３７９．２；Ｒｔ：１．９４分，方法Ｃ．
【００４１】
７の調製
【化１２】
0006989509.tif 000013
磁気撹拌子を備えた２５０ｍＬ丸底フラスコに、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）および１，４−ジオキサン（８０ｍＬ）中の３（５ｇ、１１．５４ｍｍｏｌ）、６（３．６４ｇ、９．６２ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（１．７０ｇ、１６．０３ｍｍｏｌ）の混合物を入れ、１０分にわたりＮ２の気流で脱気した。Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（４６３ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を１２時間にわたり８０℃で加熱した。この混合物を減圧下で濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２に溶解させた。沈殿物をろ過で除去し、ろ液を、ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨへの勾配を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。最良画分の溶媒を減圧下で除去して７を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６５０．２；Ｒｔ：２．５５分、方法Ｃ。
【００４２】
８の調製
【化１３】
0006989509.tif 000014
Ｐｄ／Ｃ（１０％）（２．９０ｇ、２．７１ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下でＣＨ３ＯＨ（２４０ｍＬ）およびＴＨＦ（２４０ｍＬ）の混合物に添加した。その後、（−）−７（１１．７５ｇ、１８．０９ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を、１当量の水素が消費されるまでＨ２下でｒｔにて撹拌した。触媒を、ダイカライト（Ｄｉｃａｌｉｔｅ）によるろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、イソプロパノール中の６Ｎ  ＨＣｌで処理した。沈殿物を真空中で乾燥させて８を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝５１６．１；Ｒｔ：２．１０分、方法Ｃ。
【００４３】
９の調製
【化１４】
0006989509.tif 000015
８（２５０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．２５ｍＬ、１．４６ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＯＨ（１ｍＬ）溶液を室温で撹拌した。この反応混合物に４−クロロ−２−メチルピリミジン（６２ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、８０℃で１８時間にわたり撹拌した。４−クロロ−２−メチルピリミジン（６２ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）の過剰当量を添加し、混合物全体を２４時間にわたり９０℃で加熱した。この混合物を蒸発させ、粗生成物９を、さらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６０７．７；Ｒｔ：２．３８分、方法Ｄ。
【００４４】
１０の調製
【化１５】
0006989509.tif 000016
１００ｍＬフラスコ中で、ＬｉＯＨ（６２ｍｇ、２．６１ｍｍｏｌ）の水（１ｍＬ）溶液を添加しつつ、９（３００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を６０℃にて１，４−ジオキサン（９ｍＬ）中で撹拌した。この混合物を１時間にわたり還流させ、周囲温度で一晩撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をＣＨ３ＯＨ（３０ｍＬ）に取り、撹拌し、そして濃ＨＣｌで中和した。この溶液を分取（ｐｒｅｐａｒａｔｏｒｙ）ＨＰＬＣ（固定相：ＲＰ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＤＢ−５μｍ、３０×２５０ｍｍ、移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＯＨ）で精製した。所望の画分を回収し、蒸発乾固させた。ＣＨ３ＯＨの添加後、この溶液を再度濃縮して１０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．１４−１．４２（ｍ，３Ｈ）１．４８−１．５９（ｍ，１Ｈ）１．８０−１．９２（ｍ，１Ｈ）１．９４−２．０９（ｍ，２Ｈ）２．２４（ｓ，３Ｈ）２．２６−２．３１（ｍ，１Ｈ）４．０５−４．３０（ｍ，２Ｈ）６．２２−６．３０（ｍ，１Ｈ）７．０２−７．０８（ｍ，１Ｈ）７．２０（ｍ，１Ｈ）７．５０（ｍ，１Ｈ）７．８８（ｍ，１Ｈ）８．０４（ｍ，１Ｈ）８．１２−８．１７（ｍ，２Ｈ）１２．１７（ｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝４５３．８；Ｒｔ：１．８６分，方法Ｄ
【００４５】
１３の調製
【化１６】
0006989509.tif 000017
８（６５ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ  １０ｍＬに分注し、ＤＢＵ（０．１２ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）およびＰＹＢＯＰ（２５２ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を、均一溶液が得られるまでｒｔで撹拌した。２−アミノキナゾリン−４−オール（２５０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物をｒｔで１６時間にわたり撹拌した。ＤＢＵ、ＰＹＢＯＰおよび２−アミノキナゾリン−４−オールの過剰当量を添加し、混合物全体を周囲温度で週末にわたり撹拌した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を分取ＨＰＬＣ（固定相：ＲＰ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＤＢ−５μｍ、３０×２５０ｍｍ、移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＯＨ）で精製した。所望の画分を回収し、蒸発乾固させた。ＣＨ３ＯＨの添加後、この溶液を再度濃縮して１３を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝５０５．５；Ｒｔ：１．８０分、方法Ｄ
【００４６】
１７の調製
９を調製する方法に従って１７を調製した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６２７．９；Ｒｔ：１．８２分、方法Ｃ。
【００４７】
１８の調製
【化１７】
0006989509.tif 000018
Ｐｄ／Ｃ（１０％）（０．０２ｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＮ２下でＣＨ３ＯＨ（５ｍＬ）の混合物に添加した。その後、１７（１８３ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を、１当量のＨ２が消費されるまでＨ２下でｒｔにて撹拌した。触媒を、Ｄｉｃａｌｉｔｅによるろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を、５０％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−５０％［ＭｅＣＮ：ＣＨ３ＯＨ  １：１］から２５％［２５ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３］−７５％［ＭｅＣＮ：ＣＨ３ＯＨ  １：１］への分取ＨＰＬＣで精製した。所望の画分を回収し、蒸発乾固させた。ＣＨ３ＯＨの添加後、この溶液を再度濃縮して１８を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δｐｐｍ１．２３−１．５５（ｍ，３Ｈ）１．５９−１．８２（ｍ，１Ｈ）１．８９−２．６４（ｍ，４Ｈ）３．９６−４．１９（ｍ，１Ｈ）４．２６−４．３９（ｍ，１Ｈ）６．４７（ｂｒｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）６．７６−６．８６（ｍ，１Ｈ）７．８９−８．００（ｍ，２Ｈ）８．０４−８．１１（ｍ，２Ｈ）８．３１（ｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝４４０．１；Ｒｔ：１．９８分，方法Ｃ
【００４８】
２０の調製
【化１８】
0006989509.tif 000019
ＡＣＮ（２ｍＬ）中の８（７６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、６−クロロピリミジン−４−カルボン酸（０．０５ｇ、０．３１ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．０６ｍＬ、０．４２１ｍｍｏｌ）の混合物を、１２時間にわたり１００℃で撹拌した。６−クロロピリミジン−４−カルボン酸（０．０５ｇ、０．３１５ｍｍｏｌ）の添加を、３日の期間にわたり３回繰り返し、１００℃で加熱した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を逆相分取ＨＰＬＣで精製した。所望の画分を回収し、蒸発乾固させて２０を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δｐｐｍ１．２４−１．７３（ｍ，４Ｈ）１．９０−２．５２（ｍ，４Ｈ）３．９７−４．２１（ｍ，１Ｈ）４．２３−４．４５（ｍ，１Ｈ）６．６６−６．９３（ｍ，１Ｈ）７．０４（ｓ，１Ｈ）７．９９（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ）８．０４（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，１Ｈ）８．０８（ｓ，１Ｈ）８．２１（ｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝４８３．９；Ｒｔ：２．１０分，方法Ｃ
【００４９】
２１の調製
【化１９】
0006989509.tif 000020
５−ブロモ−７−フルオロ−１Ｈ−インドール（４ｇ、１８．６８ｍｍｏｌ）、シアン化亜鉛（１．３１ｇ、１１．２１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．８６ｇ、０．９３ｍｍｏｌ）、Ｚｎ（０．３１ｇ、４．６７ｍｍｏｌ）およびｄｐｐｆ（１．０４ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＡ（６０ｍＬ）に溶解させ、Ｎ２下で１２時間にわたり還流させた。この混合物を室温まで冷却し、ろ過し、ろ液を真空中で濃縮した。粗生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、まとめた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を、ｎ−ヘプタンから酢酸エチルへの勾配を使用するシリカカラムクロマトグラフィーで精製した。所望の画分を回収し、減圧下で濃縮して２１を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝１６１．０；Ｒｔ：０．５７９分、方法Ｃ。
【００５０】
２２の調製
【化２０】
0006989509.tif 000021
窒素流下で撹拌しつつ、２１（１．９ｇ、１１．８６ｍｍｏｌ）をトルエン（３０ｍＬ）に添加した。次いで、ＴＢＡＨＳ（４０２ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＮａＯＨ（Ｈ２Ｏ中に１０％）（１０ｍＬ）を添加し、この混合物を激しく撹拌した。ｐ−トルエンスルホニルクロリド（３．３９ｇ、１７．８０ｍｍｏｌ）のトルエン（３０ｍＬ）溶液を添加し、この混合物全体を１２時間にわたり室温で撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、酢酸エチルを添加した。有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去した。結果として得られた粗生成物を、ｎ−ヘプタンからＥｔＯＡｃへの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。純粋な生成物を含む画分をプールし、溶媒を減圧下で除去して２２を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝３１５．０；Ｒｔ：１．０１分、方法Ｃ。
【００５１】
２３の調製
【化２１】
0006989509.tif 000022
２２（１．７ｍｇ、５．４１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（１５ｍＬ）溶液に、０℃で臭素（０．３３ｍＬ、６．４９ｍｍｏｌ）を滴下した。この混合物を３０分にわたり０℃で撹拌し、次いでさらに１時間にわたり室温で撹拌した。この反応混合物をＮａＨＣＯ３飽和水溶液で処理した。有機層を分離し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去して２３を得、さらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝３９４．０；Ｒｔ：１．１５分、方法Ｃ。
【００５２】
２４の調製
【化２２】
0006989509.tif 000023
溶媒１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）を１０分にわたり脱気した。２３（１．１０ｇ、２．８０ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（２．１３ｇ、８．３９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２０４ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（１．２４ｇ、１２．５９ｍｍｏｌ）を、不活性雰囲気下でｒｔにて添加した。この混合物を８０℃で加熱して１６時間にわたり撹拌した。結果として得られた混合物を室温まで冷却し、セライトのパッドに通してろ過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。ろ過および濃縮の後、粗生成物を、ｎ−ヘプタンからＥｔＯＡｃへの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。純粋な生成物を含む画分をプールし、溶媒を減圧下で除去して２４を得た。
【００５３】
２５の調製
【化２３】
0006989509.tif 000024
Ｐｄ／Ｃ（１０％）（３．０５ｇ、２．８７ｍｍｏｌ）を、窒素ガス下でＣＨ３ＯＨ（３５０ｍＬ）に添加した。４（１０ｇ、２８．７０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を、１当量のＨ２が吸収されるまでＨ２下でｒｔにて撹拌した。触媒を、Ｎ２流下にてダイカライトによるろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮して２５を得、この２５を精製することなくさらに使用した。
【００５４】
２６の調製
【化２４】
0006989509.tif 000025
ＥｔＯＨ（１３０ｍＬ）およびＴＨＦ（１３０ｍＬ）中の２５（６．１５ｇ、２８．７０ｍｍｏｌ）、２，４−ジクロロ−５−フルオロ−ピリミジン（４．７９ｇ、２８．７０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２９．７ｍＬ、１７２．２ｍｍｏｌ）の混合物を撹拌し、１７時間にわたり７０℃で加熱した。この反応混合物の溶媒を減圧下で蒸発させた。結果として得られた残渣を水に取り、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。まとめた有機層を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去した。結果として得られた粗生成物を、ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨへの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。純粋な生成物を含む画分をプールし、溶媒を減圧下で除去して２６を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝３４５．０；Ｒｔ：１．９７分、方法Ｃ。
【００５５】
２７の調製
【化２５】
0006989509.tif 000026
１，４−ジオキサン（３ｍＬ）およびＨ２Ｏ（０．３ｍＬ）中の２４（１．１０ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、２６（０．８６ｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１６２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（１．５９ｇ、７．５０ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２で脱気し、マイクロ波照射下で３０分にわたり１００℃に加熱した。この反応混合物をセライトでろ過し、濃縮した。次いで、この混合物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、水で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を、ｎ−ヘプタンからＥｔＯＡｃへの勾配を使用するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。純粋な生成物を含む画分をプールし、溶媒を減圧下で除去して２７を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６２３；Ｒｔ：１．３４分、方法Ｃ。
【００５６】
２８の調製
【化２６】
0006989509.tif 000027
２７（４００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２．５ｍＬ）に溶解させ、次いで１，４−ジオキサン（２．４１ｍＬ、９．６４ｍｍｏｌ）中の４Ｍ  ＨＣｌを緩やかに添加した。結果として得られた混合物を一晩６０℃で撹拌した。次いで、この反応混合物を蒸発乾固させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液の添加によりクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去して２８を得、この２８を精製することなく次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝５２３；Ｒｔ：０．８９分、方法Ｃ。
【００５７】
２９の調製
【化２７】
0006989509.tif 000028
ＡＣＮ（５ｍＬ）中の２８（０．２ｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、２，４−ジクロロピリミジン（０．１０ｇ、０．７０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．２ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）の混合物を、１２時間にわたり１２０℃で撹拌した。この反応混合物の溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去して２９を得、この２９をさらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６３４．９；Ｒｔ：１．７８分、方法Ｃ。
【００５８】
３０の調製
【化２８】
0006989509.tif 000029
１９を調製する方法に従って３０を調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δｐｐｍ１．２９−１．４９（ｍ，３Ｈ）１．６６−１．８４（ｍ，１Ｈ）１．９３−２．１６（ｍ，２Ｈ）２．１９−２．３０（ｍ，１Ｈ）２．４９−２．６１（ｍ，１Ｈ）３．９６−４．１８（ｍ，１Ｈ）４．１９−４．３７（ｍ，１Ｈ）６．４２−６．５３（ｍ，１Ｈ）７．２４−７．３２（ｍ，１Ｈ）７．８７−７．９５（ｍ，１Ｈ）７．９７−８．０３（ｍ，１Ｈ）８．１５−８．２４（ｍ，２Ｈ）８．８２（ｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝４４６．７；Ｒｔ：２．０５分，方法Ｃ．
【００５９】
３１の調製
【化２９】
0006989509.tif 000030
６を調製する方法に従って３１を調製した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝３９３．２；Ｒｔ：２．０２分、方法Ｃ。
【００６０】
３２の調製
【化３０】
0006989509.tif 000031
７を調製する方法に従って３２を調製した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６６４．３；Ｒｔ：１．０５分、方法Ａ。
【００６１】
３３の調製
【化３１】
0006989509.tif 000032
８を調製する方法に従って３３を調製した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝４９６．２；Ｒｔ：０．８９分、方法Ａ。
【００６２】
３４の調製
【化３２】
0006989509.tif 000033
磁気撹拌子を備え且つ窒素で曝気した２０ｍＬ試験管に、３３（３５０ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、ＡＣＮ（７ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（０．２９ｍＬ、１．６５ｍｍｏｌ）および２，４−ジクロロ−６−（トリフルオロメチル）ピリミジン（１５０．６ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を入れた。このフラスコを密閉し、この混合物を１８時間にわたり７５℃で撹拌した。３４を含む粗溶液を、さらに精製することなく次の工程で使用した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝７１０．３；Ｒｔ：２．６５分、方法Ｃ。
【００６３】
３５の調製
【化３３】
0006989509.tif 000034
３４を含む粗反応混合物に、１，４−ジオキサン（８ｍＬ）、水（１ｍＬ）およびＬｉＯＨ（１０当量）を添加した。この混合物を６０℃まで加熱し、２日にわたり撹拌した。この溶液を濃ＨＣｌで中和した後、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（固定相：ＲＰ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＤＢ  ５μｍ、３０×２５０ｍｍ、移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＯＨ）で精製した。所望の画分を回収し、蒸発乾固させた。ＣＨ３ＯＨの添加後、この溶液を再度濃縮して３５を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝５５６．２；Ｒｔ：２．３１分、方法Ｃ。
【００６４】
４３の調製
【化３４】
0006989509.tif 000035
磁気撹拌子を備え且つ窒素で曝気した２０ｍＬ試験管に、（−）３３（０．３ｇ、０．４６５ｍｍｏｌ）、ＡＣＮ（５ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（０．２４ｍＬ、１．３９ｍｍｏｌ）および２，４−ジクロロ−５−シアノピリミジン（１６２ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）を入れた。このフラスコを密閉し、この混合物を１８時間にわたり７０℃で撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相勾配  ヘプタン／ＡｃＯＥｔ  ７５／２５から５０／５０へ）で精製して、２４０ｍｇの白色固体２−クロロ−４−（（（ｃｉｓ）−３−（（２−（５，７−ジフルオロ−１−トシル−１Ｈ−インドール−３−イル）−５−フルオロ−６−メチルピリミジン−４−イル）アミノ）シクロヘキシル）アミノ）ピリミジン−５−カルボニトリルを得た。この白色固体に、水（０．５４ｍＬ）、ＬｉＯＨ（０．７２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１．６ｍＬ）を添加した。この混合物を７２時間にわたり６０℃で撹拌した。酢酸エチルを添加し、この混合物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相勾配  ＣＨ２Ｃｌ２／ＣＨ３ＯＨ  ９８／２から９４／６へ）で精製した。純粋な画分をプールし、溶媒を減圧下で除去した。結果として得られた白色固体をエーテル中で粉砕し、次いでろ過で単離して白色固体４３を得た。［α］Ｄ２０−２１９．２（ｃ０．２５、ＤＭＦ）。
【００６５】
４８の調製
【化３５】
0006989509.tif 000036
ＤＢＵ（２．５８ｍＬ、１７．２ｍｍｏｌ）を、５−フルオロオロチン酸（３ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に添加した。３０分にわたる撹拌後、この溶液にヨードエタン（２．６９ｍｇ、１７．２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を２時間にわたり６０℃に加熱した。この混合物に水（１００ｍＬ）を添加し、結果として得られた沈殿物をろ過で回収し、水で洗浄し、乾燥させて４８（エチル５−フルオロオロテート）を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ−  ｍ／ｚ＝２００．９；Ｒｔ：０．９１分、方法Ｄ。
【００６６】
４９の調製
【化３６】
0006989509.tif 000037
エチル５−フルオロオロテート４８（２．１３ｇ、１０．５４ｍｍｏｌ）を、９０℃でＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（１．０９ｍＬ、７．１６ｍｍｏｌ）およびＰＯＣｌ３（２．６４ｍＬ、２８．４５ｍｍｏｌ）の混合物に添加し、この混合物を４時間にわたり還流させた。この溶液を氷水に注ぎ、次いで、ｐＨ８まで重炭酸ナトリウムを添加した。この反応混合物を酢酸エチルで抽出し、５％重硫酸カリウム水溶液およびブラインで洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。粗生成物を、ｎ−ヘプタンからｎ−ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ８／２への勾配を使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。所望の画分をプールし、蒸発乾固させて４９（エチル２，６−ジクロロ−５−フルオロピリミジン−４−カルボキシレート）を得た。
【００６７】
５０の調製
【化３７】
0006989509.tif 000038
３４を調製する方法に従って５０を調製した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝４５１．２；Ｒｔ：１．０９分、方法Ａ
【００６８】
５１の調製
【化３８】
0006989509.tif 000039
３２を調製する方法に従って５１を調製した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝７２２．４；Ｒｔ：２．５６分、方法Ｂ
【００６９】
５２の調製
【化３９】
0006989509.tif 000040
２５０ｍＬフラスコ中で、ＬｉＯＨ（３７４ｍｇ、１５．６３ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）溶液を添加しつつ、５１（１ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）をｒｔにて１，４−ジオキサン（４５ｍＬ）中で撹拌した。この混合物を、約４時間にわたり８０〜９０℃で加熱した。この反応混合物をＨＣｌ  ３７％で中和し、溶媒を減圧下で除去した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液の溶媒を減圧下で除去して５２を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝５４０．２；Ｒｔ：０．８３分、方法Ａ
【００７０】
５３の調製
【化４０】
0006989509.tif 000041
Ｐｄ／Ｃ（１０％）（１７２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下でＣＨ３ＯＨ（１５ｍＬ）およびＴＨＦ（１５ｍＬ）の混合物に添加した。その後、５２（５８０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を、１当量のＨ２が消費されるまでＨ２雰囲気下で室温にて撹拌した。触媒を、ダイカライトによるろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮して５３を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝４０６．３；Ｒｔ：１．０３分、方法Ｂ。
【００７１】
５４の調製
【化４１】
0006989509.tif 000042
３４を調製する方法に従って５４を調製した。1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．０７−１．６３（ｍ，４Ｈ）１．９３（ｍ，３Ｈ）２．１４（ｓ，３Ｈ）２．１７−２．２６（ｍ，１Ｈ）３．８６−４．０４（ｍ，１Ｈ）４．１２−４．３０（ｍ，１Ｈ）６．２２（ｂｒｓ，１Ｈ）６．９６−７．１４（ｍ，１Ｈ）７．５４−７．６９（ｍ，１Ｈ）７．７５（ｂｒｓ，１Ｈ）８．０６（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ，１Ｈ）８．１８（ｓ，１Ｈ）１２．１８（ｂｒｓ，１Ｈ）ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝５３２．１；Ｒｔ：１．４１分，方法Ｂ．
【００７２】
５５の調製
【化４２】
0006989509.tif 000043
７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１１．５ｇ、７３．９２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３５０ｍＬ）撹拌溶液に、０℃で臭素（１１．８ｇ、７３．８４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液を添加した。冷却浴を取り除き、この反応物を８時間にわたり２０℃で撹拌し、次いでこの反応混合物を氷水に注ぎ、Ｎａ２ＣＯ３で塩基性化した。この混合物を酢酸エチルで抽出した。まとめた有機層を１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液を減圧下で濃縮して５５（５−ブロモ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）を黄色固体として得、この５５をさらに精製することなく次の工程で使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ７．８４（ｓ，１Ｈ），８．８４（ｓ，１Ｈ），８．９２（ｓ，１Ｈ），１２．５７（ｂｒ，１Ｈ）．
【００７３】
５６の調製
【化４３】
0006989509.tif 000044
５−ブロモ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１２．８ｇ、５５．１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ撹拌溶液に、窒素下で０℃にてＮａＨ（４．４８ｇ、１１２．０１ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。この混合物を１時間にわたり５℃で撹拌し、次いでｐ−トルエンスルホニルクロリド（１１．６ｇ、６０．８５ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。この反応混合物を２０℃まで温め、３時間にわたり撹拌した。この反応混合物を、撹拌しつつ氷および１ＭのＨＣｌ水溶液の混合物に注いだ。この混合物を酢酸エチルで抽出した。まとめた有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、固体をろ過で除去し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物を酢酸エチルからの結晶化により精製し、５６（５−ブロモ−７−トシル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ２．３６（ｓ，３Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ），９．０３（ｓ，１Ｈ），９．０６（ｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝３５１．８；Ｒｔ：２．０２分，方法Ｄ．
【００７４】
５７の調製
【化４４】
0006989509.tif 000045
１，４−ジオキサン（１７０ｍＬ、窒素で脱気済）中の５−ブロモ−７−トシル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１０ｇ、２８．３９ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（１４．４２ｇ、５６．７９ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（８．３６ｇ、８５．１８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１ｇ、１．３７ｍｍｏｌ）の混合物を、還流冷却器を備えた５００ｍＬ丸底フラスコ中において窒素下で１６時間にわたり８０℃にて加熱した。この反応混合物を室温まで冷却し、パックしたセライトに通してろ過し、固体を酢酸エチルで濯いだ。ろ液を減圧下で濃縮し、粗生成物を、ｎ−ヘプタンから酢酸エチルへの勾配を使用するシリカカラムクロマトグラフィーで精製した。所望の画分を回収し、減圧下で濃縮して５７（５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−７−トシル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．３３（ｓ，１２Ｈ）２．３７（ｓ，３Ｈ）７．４７（ｄ，Ｊ＝８．３６Ｈｚ，２Ｈ）８．１１（ｄ，Ｊ＝８．５８Ｈｚ，２Ｈ）８．１４（ｓ，１Ｈ）９．００（ｓ，１Ｈ）９．１０（ｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝３１８．１；Ｒｔ：０．７４分，方法Ａ．
【００７５】
５８の調製
【化４５】
0006989509.tif 000046
密閉管中で、５７（１．５２５ｇ、３．８２ｍｍｏｌ）、３１（１．６ｇ、４．０７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（５．７３ｍＬ、２Ｍ、１１．４６ｍｍｏｌ）のＤＭＥ（２４ｍＬ）溶液を５分にわたりＮ２でパージし、次いでＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２．ＣＨ２Ｃｌ２（３１３ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を撹拌し、６０分にわたり１１０℃にてオートクレーブ中で加熱し、次いでダイカライトでろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物を、ｎ−ヘプタンからｎ−ヘプタン中の２５％ＥｔＯＡｃへの勾配を使用するシリカカラムクロマトグラフィーで精製した。最良画分の溶媒を減圧下で除去して５８を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６３０．２；Ｒｔ：１．２８分、方法Ａ
【００７６】
５９の調製
【化４６】
0006989509.tif 000047
Ｐｄ／Ｃ（１０％）（１７３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を、Ｎ２下でＣＨ３ＯＨ（１５ｍＬ）およびＴＨＦ（１５ｍＬ）の混合物に添加した。その後、５８（４１０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を、１当量のＨ２が消費されるまでＨ２雰囲気下でｒｔにて撹拌した。触媒をダイカライトによるろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮した。粗生成物をＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、ＩＰＡ中の６Ｎ  ＨＣｌの混合物で処理した。形成された沈殿物をろ過で単離し、次いで真空中で乾燥させて５９を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝４９６．２；Ｒｔ：０．８９分、方法Ａ。
【００７７】
６０および６１の調製
【化４７】
0006989509.tif 000048
２，４−ジクロロ−６−メチルピリミジン（３０３ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．５３ｍＬ、３．１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液を、窒素下で室温にて撹拌した。次いで５９（３３０ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）を添加し、約６０℃で４時間にわたり撹拌し続けた。この混合物を氷水に注ぎ、一晩撹拌した。沈殿物をろ過で回収し、真空中で乾燥させて６０および６１の混合物を得た。
【００７８】
６２および６３の調製
【化４８】
0006989509.tif 000049
Ｐｄ／Ｃ（１０％）（１０２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を、Ｎ２雰囲気下でＣＨ３ＯＨ（３０ｍＬ）およびＴＨＦ（１５ｍＬ）の混合物に添加した。その後、６０および６１の混合物（２４０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を、１当量の水素が消費されるまでＨ２雰囲気下でｒｔにて撹拌した。触媒を、ダイカライトによるろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮して６２および６３の混合物を得た。
【００７９】
６４および６５の調製
【化４９】
0006989509.tif 000050
１００ｍＬフラスコ中で、ＬｉＯＨ（９０ｍｇ、３．７４ｍｍｏｌ）の水（２ｍＬ）溶液を添加しつつ、６２および６３の混合物（１１０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を８５℃で１，４−ジオキサン（１８ｍＬ）中にて撹拌した。この混合物を１時間にわたり還流させ、周囲温度で一晩撹拌した。１，４−ジオキサンを蒸発させ、粗生成物を酢酸エチル（２０ｍＬ）で再構成し、撹拌し、そして濃ＨＣｌで中和した。溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を、分取ＨＰＬＣ（固定相：ＲＰ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｐｒｅｐ  Ｃ１８  ＯＤＢ  ５μｍ、３０×２５０ｍｍ、移動相：０．２５％ＮＨ４ＨＣＯ３水溶液、ＣＨ３ＣＮ）で精製した。所望の画分を回収し、蒸発乾固させて６４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．１０−１．４５（ｍ，３Ｈ）１．５０−１．５９（ｍ，１Ｈ）１．８１−１．９２（ｍ，１Ｈ）１．９３−２．０７（ｍ，２Ｈ）２．１６（ｓ，３Ｈ）２．２９−２．３７（ｍ，１Ｈ）２．３３（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，３Ｈ）３．８４−４．０３（ｍ，１Ｈ）４．０７−４．３１（ｍ，１Ｈ）６．３３（ｓ，１Ｈ）７．００（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）７．１２−７．３３（ｍ，１Ｈ）８．０９（ｓ，１Ｈ）８．２９（ｓ，１Ｈ）８．７８（ｓ，１Ｈ）９．６６（ｓ，１Ｈ）１２．１９（ｂｒｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝４３４．３；Ｒｔ：０．７２分，方法Ａ．および６５１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．１５−１．４３（ｍ，３Ｈ）１．４３−１．５７（ｍ，１Ｈ）１．８１−１．８８（ｍ，１Ｈ）１．９０−２．０１（ｍ，２Ｈ）２．１７（ｓ，３Ｈ）２．２７（ｍ，１Ｈ）２．３３（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，３Ｈ）３．８４−４．００（ｍ，１Ｈ）４．０８−４．２２（ｍ，１Ｈ）６．３９（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ）７．００（ｂｒｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）７．３６（ｍ，１Ｈ）８．０８（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ）８．１４（ｓ，１Ｈ）８．８０（ｓ，１Ｈ）９．６６（ｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋ｍ／ｚ＝４３４．３；Ｒｔ：１．６４分，方法Ｂ．
【００８０】
６６の調製
【化５０】
0006989509.tif 000051
適切に乾燥させて不活性状態の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のｔ−ブチル（３−ヒドロキシシクロヘキシル）カルバメート（３．０ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）の混合物に、２，４−ジクロロ−６−メチルピリミジン（２．７８１ｇ、１６．７２ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で少量ずつ添加した。この反応混合物を室温で１５〜２０分にわたり撹拌し、続いてカリウムｔ−ブトキシドを０℃で少量ずつ添加した。１時間後、この反応を０℃にて冷水でクエンチし、水をＥｔＯＡｃで抽出してブラインで洗浄した。有機層を乾燥させ、濃縮して粗物質を得た。この粗生成物を、ｎ−ヘプタンからＥｔＯＡｃへの勾配を使用するシリカカラムクロマトグラフィーで精製した。最良画分の溶媒を減圧下で除去して６６を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝３４２．２；Ｒｔ：２．１４分、方法Ｃ
【００８１】
６７の調製
【化５１】
0006989509.tif 000052
Ｐｄ／Ｃ（１０％）（９３４ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）をＮ２下でＴＨＦ（８０ｍＬ）の混合物に添加した。その後、６６（３ｇ、８．７８ｍｍｏｌ）を添加し、この反応混合物を、１当量の水素が消費されるまでＨ２下で室温にて撹拌した。触媒を、ダイカライトによるろ過によって除去した。ろ液を減圧下で濃縮して６７の混合物を得た。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝３０８．２；Ｒｔ：０．９６分、方法Ａ
【００８２】
６８の調製
【化５２】
0006989509.tif 000053
磁気撹拌子を備えた１００ｍＬ丸底フラスコに、１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）中の６７（３ｇ、９．７６ｍｍｏｌ）を入れた。１８時間にわたり室温で撹拌しつつ、１，４−ジオキサン（１２ｍＬ）中の４Ｍ  ＨＣｌを緩やかに添加した。溶媒を減圧下で除去し、粗生成物６８を次の工程で使用した。
【００８３】
６９の調製
【化５３】
0006989509.tif 000054
２，４−ジクロロ−５−フルオロ−６−メチルピリミジン（０．７８ｇ、４．３１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１．７７ｍＬ、１０．２６ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２０ｍＬ）溶液を、Ｎ２下でｒｔにて撹拌した。次いで６８（１ｇ、４．１０ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１６時間にわたり撹拌し続けた。この反応混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を、ｎ−ヘプタンから酢酸エチルへの勾配を使用するシリカカラムクロマトグラフィーで精製した。所望の画分を回収し、減圧下で濃縮して６９を得た。
【００８４】
７０の調製
【化５４】
0006989509.tif 000055
７を調製する方法に従って７０を調製した。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳ＋  ｍ／ｚ＝６２３．２；Ｒｔ：２．７３分、方法Ｄ。
【００８５】
７１の調製
【化５５】
0006989509.tif 000056
６４を調製する方法に従って７１を調製した。分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＡＤ−Ｈ  ２０ｍｍ×２５０ｍｍ、移動相：ＣＯ２、イソプロパノール＋０．４％イソプロピルアミン）で精製を実施して７１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δｐｐｍ１．３３−１．４２（ｍ，１Ｈ）１．３４−１．４２（ｍ，１Ｈ）１．５１−１．５９（ｍ，２Ｈ）１．８９（ｍ，１Ｈ）２．０３（ｍ，１Ｈ）２．１５（ｍ，１Ｈ）２．２７（ｍ，１Ｈ）２．３２（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，３Ｈ）２．４６−２．５３（ｍ，１Ｈ）４．２０（ｍ，１Ｈ）５．２０（ｍ，１Ｈ）６．７６（ｓ，１Ｈ）７．０４（ｍ，１Ｈ）７．３４（ｄ，１Ｈ）８．０６（ｍ，１Ｈ）８．１４（ｓ，１Ｈ）８．５９（ｓ，１Ｈ）１２．１８（ｂｒｓ，１Ｈ）．ＬＣ−ＭＳＥＳ＋  ｍ／ｚ＝４６９．２；Ｒｔ：２．３０分，方法Ｄ．分析ＳＦＣ−ＭＳ  Ｒｔ：３．７９分、ｍ／ｚ＝４６９．１。（分析ＳＦＣ条件：固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＡＤ−Ｈ  ４．６ｍｍ×２５０ｍｍ、移動相Ａ：ＣＯ２、Ｂ：ＥｔＯＨ＋０．２％イソプロピルアミン、勾配：４分にわたり２５％Ｂを保持、次いで１分で５０％Ｂへ、２分にわたり保持。流速は５ｍＬ／分であり、カラム温度は４０℃であった）。
【００８６】
【表１】
0006989509.tif 000057
【００８７】
【表２】
0006989509.tif 000058
【００８８】
【表３】
0006989509.tif 000059
【００８９】
【表４】
0006989509.tif 000060
【００９０】
【表５】
0006989509.tif 000061
【００９１】
【表６】
0006989509.tif 000062
【００９２】
【表７】
0006989509.tif 000063
【００９３】
【表８】
0006989509.tif 000064
【００９４】
【表９】
0006989509.tif 000065
【００９５】
【表１０】
0006989509.tif 000066
【００９６】
【表１１】
0006989509.tif 000067
【００９７】
ＬＣポンプ、ダイオードアレイ（ＤＡＤ）またはＵＶ検出器、およびそれぞれの方法で規定したカラムを使用して、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定を実施した。必要な場合には、追加の検出器を含めた（下記の方法についての表を参照されたい）。
【００９８】
カラムからの流れを、大気圧イオン源で構成された質量分析計（ＭＳ）に導いた。化合物の名目上のモノアイソトピック分子量（ＭＷ）の同定を可能にするイオンを得るために調整パラメーター（例えば、操作範囲、滞留時間等）の設定を行なうことは、当業者の知識の範囲内である。適切なソフトウェアでデータ取得を実施した。
【００９９】
化合物を、その実験保持時間（Ｒｔ）およびイオンで説明する。データについての表で別に指定しない場合、報告した分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子）および／または［Ｍ−Ｈ］−（脱プロトン化分子）に対応する。化合物を直接イオン化できなかった場合には、付加物の種類を特定する（即ち、［Ｍ＋ＮＨ４］＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］−等）。複数の同位体パターン（Ｂｒ、Ｃｌ等）を有する分子の場合、報告した値は、最も低い同位体質量で得られたものである。全ての結果を、使用した方法に通常関連する実験の不確実性を伴って得た。
【０１００】
【表１２】
0006989509.tif 000068
【０１０１】
式（Ｉ）の化合物の生物学的活性
これらの化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの抗ウイルス活性を、細胞ベースの抗ウイルスアッセイを使用して決定した。このアッセイでは、インフルエンザウイルスＡ／Ｔａｉｗａｎ／１／８６（Ｈ１Ｎ１）に感染したＭａｄｉｎ−Ｄａｒｂｙイヌ腎臓（ＭＤＣＫ）細胞においての細胞変性効果（ＣＰＥ）を、化合物の存在下または非存在下でモニタリングした。ｅｃｈｏ  ｌｉｑｕｉｄ  ｈａｎｄｌｅｒ（Ｌａｂｃｙｔｅ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）を使用する音響液滴放出（ａｃｏｕｓｔｉｃ  ｄｒｏｐ  ｅｊｅｃｔｉｏｎ）により、白色３８４ウェルマイクロタイターアッセイプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ）を充填した。このアッセイプレートに、２００ナノリットルの化合物原液（１００％ＤＭＳＯ）を移した。このプレートに、２５，０００個または６，０００個の細胞／ウェルの最終密度でＭＤＣＫ細胞を分注した。次いで、インフルエンザＡ／Ｔａｉｗａｎ／１／８６（Ｈ１Ｎ１）ウイルスをそれぞれ０．００１または０．０１の感染多重度で添加した。ウェルは、１体積当たり０．５％ＤＭＳＯを含む。各試験には、ウイルス感染および偽感染のコントロールを含めた。このプレートを５％ＣＯ２中で３７℃にてインキュベートした。ウイルス曝露の３日後、ＡＴＰｌｉｔｅ（商標）キット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｚａｖｅｎｔｅｍ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）を製造業者の使用説明書に従って使用してＡＴＰレベルの低下を測定することにより、細胞変性効果を定量化した。ＩＣ５０を５０％阻害濃度として定義した。並行して、化合物を白色３８４ウェルマイクロタイタープレート中で３日にわたりインキュベートし、ＡＴＰｌｉｔｅ（商標）キット（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｚａｖｅｎｔｅｍ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）を製造業者の使用説明書に従って使用して細胞のＡＴＰ含有量を測定することにより、ＭＤＣＫ細胞中の化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの細胞毒性を決定した。細胞毒性をＯＣ５０（細胞生存率の５０％低下を引き起こす濃度）として報告した。
【０１０２】
【表１３】
0006989509.tif 000069
以下の態様を包含し得る。
［１］  式（Ｉ）
【化５６−１】
0006989509.tif 000070
（式中、
Ｘは−ＣＦまたはＮから選択され、
Ｙは、Ｎ、−ＣＦ、−Ｃ−Ｃｌ、−Ｃ−ＣＮまたは−Ｃ−ＣＨ３から選択され、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３、−シクロプロピル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１〜３アルキル）または−ＣＯＮ（Ｃ１〜３アルキル）２から選択され、
ＱはＮまたはＯから選択され、
Ｒ２は複素環であり、前記複素環は、ハロゲン、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、ヒドロキシル、アミノ、メトキシ、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３またはシクロアルキルで任意選択的に置換されている）
の化合物、その立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体。
［２］  下記構造式
【化５６−２】
0006989509.tif 000071
を有する上記［１］に記載の化合物。
［３］  上記［１］または［２］に記載の式（Ｉ）の化合物またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体とともに、１種または複数種の薬学的に許容される添加剤、希釈剤または担体を含む医薬組成物。
［４］  医薬品として使用するための上記［１］に記載の式（Ｉ）の化合物またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体または上記［３］に記載の医薬組成物。
［５］  インフルエンザの処置で使用するための上記［１］に記載の式（Ｉ）の化合物またはその立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物もしくは多形体または上記［３］に記載の医薬組成物。
［６］  生体サンプル中または患者中におけるインフルエンザウイルスの複製を阻害するための、下記構造式（Ｉ）
【化５６−３】
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（式中、
Ｘは−ＣＦまたはＮから選択され、
Ｙは、Ｎ、−ＣＦ、−Ｃ−Ｃｌ、−Ｃ−ＣＮまたは−Ｃ−ＣＨ３から選択され、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３、−シクロプロピル、−ＣＯＮＨ２、−ＣＯＮＨ（Ｃ１〜３アルキル）または−ＣＯＮ（Ｃ１〜３アルキル）２から選択され、
ＱはＮまたはＯから選択され、
Ｒ２は複素環であり、前記複素環は、ハロゲン、シアノ、Ｃ１〜３アルキル、ヒドロキシル、アミノ、メトキシ、−ＣＯＯＨ、−ＣＦ３またはシクロアルキルで任意選択的に置換されている）
で表される化合物、その立体異性体、薬学的に許容される塩、溶媒和物または多形体の使用。
［７］  追加の治療薬を共投与することをさらに含む上記［６］に記載の使用。
［８］  前記追加の治療薬は、抗ウイルス剤もしくはインフルエンザワクチンまたは両方から選択される、上記［７］に記載の使用。