【手続補正書】
【提出日】平成29年11月10日(2017.11.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３３】
一定の実施形態において、ケモカインの産生増強はＣＣＬ５をコードするｍＲＮＡの転写増強を含み、ＣＣＬ５をコードするｍＲＮＡの転写は、少なくとも２倍、少なくとも４倍、少なくとも６倍、少なくとも８倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、少なくとも５０倍、または少なくとも１００倍以上増加する。一定の実施形態において、ケモカインの産生増強はＣＣＬ５タンパク質の分泌増強を含み、ＣＣＬ５タンパク質の分泌は、少なくとも２倍、少なくとも４倍、少なくとも６倍、少なくとも８倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、少なくとも５０倍、または少なくとも１００倍以上増加する
なお、本願は、特許請求の範囲に記載の発明に関するものであるが、他の態様として以下も包含し得る。
１．感染初期に過剰な二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）を発現する異種核酸を含んでなる組換えポックスウイルス。
２．上記１に記載の組換えポックスウイルスであって、更に、１以上の共刺激分子をコードする異種配列を含んでなる前記組換えポックスウイルス。
３．上記２に記載の組換えポックスウイルスであって、前記１以上の共刺激分子がＴＲＩＣＯＭ（Ｂ７−１、ＩＣＡＭ−１、及びＬＦＡ−３）である前記組換えポックスウイルス。
４．上記１〜３の何れか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、更に、１以上の細菌抗原、ウイルス抗原、真菌抗原、寄生虫抗原、または腫瘍抗原をコードする異種配列を含んでなる前記組換えポックスウイルス。
５．上記１〜４の何れか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ポックスウイルスがオルソポックスウイルス、パラポックスウイルス、ヤタポックスウイルス、アビポックスウイルス、レポリポックスウイルス、スイポックスウイルス、カプリポックスウイルス、セルビドポックスウイルス、またはモルシポックスウイルスである前記組換えポックスウイルス。
６．上記５に記載の組換えポックスウイルスであって、前記オルソポックスウイルスは、ワクシニアウイルス、牛痘ウイルス、及びサル痘ウイルスからなる群から選択される前記組換えポックスウイルス。
７．上記６に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ワクシニアウイルスは、ワクシニアウイルス・ウェスタンリザーブ、ワクシニアウイルス・コペンハーゲン、ドライワックス（Ｄｒｙｖａｘ：ワクシニアウイルス・ワイス（Ｗｙｅｔｈ）としても知られる）、ワクシニアウイルス・リスター、ワクシニアウイルス・アカンビス（Ａｃａｍｂｉｓ）２０００及び３０００、家兎痘ウイルス、バッファロー痘ウイルス、修飾ワクシニアウイルス・アンカラ（ＭＶＡ）、及び修飾ワクシニアウイルス・アンカラ・ババリアンノルディック（ＭＶＡ−ＢＮ）からなる群から選択される前記組換えポックスウイルス。
８．上記１〜７の何れか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、ｄｓＲＮＡを生成する前記異種核酸は、部分的にまたは完全に相補的なＲＮＡ転写物をコードする配列を含んでなり、前記ＲＮＡ転写物の相補的部分は、転写後にアニールしてｄｓＲＮＡを形成する前記組換えポックスウイルス。
９．上記８に記載の組換えポックスウイルスであって、前記相補的なＲＮＡ転写物は、タンパク質をコードするオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）または非タンパク質をコードする遺伝子を含んでなる前記組換えポックスウイルス。
１０．上記９に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ＲＮＡ転写物の前記相補的部分は５０以上のヌクレオチドを含んでなる前記組換えポックスウイルス。
１１．上記１０に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ＲＮＡ転写物の前記相補的部分は、５０〜７００のヌクレオチドを含んでなる前記組換えポックスウイルス。
１２．上記１０に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ＲＮＡ転写物の前記相補的部分は、７００を超えるヌクレオチドを含んでなる前記組換えポックスウイルス。
１３．上記１０に記載の組換えポックスウイルスであって、完全にまたは部分的に相補的なＲＮＡ転写産物をコードする前記異種核酸は、前記相補的な領域内において同一であるか、または前記相補的な領域内において９９％超、９５％超、９０％超、８０％超、または７０％超の類似性を有する前記組換えポックスウイルス。
１４．上記１３に記載の組換えポックスウイルスであって、部分的または完全に相補的な転写物をコードする前記二つの同一または非常に類似した配列が、１以上の必須のウイルス遺伝子によって分離されている前記組換えポックスウイルス。
１５．上記１４に記載の組換えポックスウイルスであって、センスメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）は前記二つの同一または非常に類似した配列の一方から転写され、及びアンチセンスｍＲＮＡは他方の同一または非常に類似した配列から転写される前記組換えポックスウイルス。
１６．上記１５に記載の組換えポックスウイルスであって、センス及びアンチセンスＲＮＡが、前記同じ異種配列の挿入物の両方の鎖から転写される前記組換えポックスウイルス。
１７．上記１５に記載の組換えポックスウイルスであって、センス及びアンチセンスＲＮＡは、天然ポックスウイルス配列、好ましくは初期遺伝子、より好ましくは即時初期遺伝子の両方の鎖から転写される前記組換えポックスウイルス。
１８．上記１５〜１７の何れか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、相補的なＲＮＡ転写物をコードする前記配列の発現は、各々ポックスウイルスプロモータによって指令される前記組換えポックスウイルス。
１９．上記１６に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ポックスウイルスプロモータは、初期プロモータまたは即時初期プロモータである前記組換えポックスウイルス。
２０．上記１〜１９に記載の初期ｄｓＲＮＡの発現により、標準的な複製能力をもつワクシニアウイルス株及びチョルドポックスウイルス亜科由来の他の種を弱毒化させる方法。
２１．自然免疫の活性化を増強する方法であって、脊椎動物被験対象に上記１９に記載の組換えポックスウイルスを投与することを含んでなり；前記投与は、前記被験対象におけるＩ型インターフェロン（Ｉ型ＩＦＮ）、サイトカイン及びケモカインの産生を高める方法。
２２．上記２１に記載の方法であって、Ｉ型ＩＦＮの産生は、インターフェロン−β（ＩＦＮ−β）をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の転写を含んでなり、該ＩＦＮ−β・ｍＲＮＡの転写が少なくとも２倍増加する前記方法。
２３．上記２２に記載の方法であって、ＩＦＮ−βをコードするｍＲＮＡの転写が少なくとも１０倍増加する前記方法。
２４．上記２３に記載の方法であって、ＩＦＮ−βをコードするｍＲＮＡの転写が少なくとも５０倍増加する前記方法。
２５．上記２１に記載の方法であって、Ｉ型ＩＦＮの産生はＩＦＮ−βタンパク質の分泌を含んでなり、該ＩＦＮ−βタンパク質の分泌が少なくとも２倍増加する前記方法。
２６．上記２５に記載の方法であって、ＩＦＮ−βタンパク質の分泌が少なくとも４倍増加する前記方法。
２７．上記２６に記載の方法であって、ＩＦＮ−βタンパク質の分泌が少なくとも１０倍増加する前記方法。
２８．上記２１に記載の方法であって、前記投与は、サイトカインＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−６、及びＩＬ−１８の産生を増強する前記方法。
２９．上記２１に記載の方法であって、前記投与は、ケモカインＣＸＣＬ１、ＣＣＬ２及びＣＣＬ５の産生を増強する前記方法。
３０．上記２１に記載の方法であって、前記投与は、ベクター特異的ＣＤ８Ｔ細胞の産生を、少なくとも１０％、好ましくは２５％、より好ましくは５０％超増強する前記方法。
３１．上記１９に記載のポックスウイルスであって、ニワトリ線維芽細胞株ＤＦ−１（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ−１２２０３）において産生される前記ポックスウイルス。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
感染初期に過剰な二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）を発現する異種核酸を含んでなる組換えポックスウイルスであって、ｄｓＲＮＡを生成する前記異種核酸が、部分的にまたは完全に相補的なＲＮＡ転写物をコードする配列を含んでなり、前記ＲＮＡ転写物の相補的部分が転写後にアニールしてｄｓＲＮＡを形成し、前記ＲＮＡ転写物の相補的部分が１００を超えるヌクレオチドで重なる、前記組換えポックスウイルス。
【請求項２】
請求項１に記載の組換えポックスウイルスであって、更に、ａ）ＴＲＩＣＯＭ（Ｂ７−１、ＩＣＡＭ−１、及びＬＦＡ−３）である１以上の共刺激分子あるいはｂ）１以上の細菌抗原、ウイルス抗原、真菌抗原、寄生虫抗原または腫瘍抗原をコードする異種配列を含んでなる前記組換えポックスウイルス。
【請求項３】
請求項１または２に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ポックスウイルスが、ワクシニアウイルス、牛痘ウイルス及びサル痘ウイルスからなる群から選択されるオルソポックスウイルスである、前記組換えポックスウイルス。
【請求項４】
請求項３に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ワクシニアウイルスは、ワクシニアウイルス・ウェスタンリザーブ、ワクシニアウイルス・コペンハーゲン、ドライワックス（Ｄｒｙｖａｘ：ワクシニアウイルス・ワイス（Ｗｙｅｔｈ）としても知られる）、ワクシニアウイルス・リスター、ワクシニアウイルス・アカンビス（Ａｃａｍｂｉｓ）２０００及び３０００、家兎痘ウイルス、バッファロー痘ウイルス、修飾ワクシニアウイルス・アンカラ（ＭＶＡ）、及び修飾ワクシニアウイルス・アンカラ・ババリアンノルディック（ＭＶＡ−ＢＮ）からなる群から選択される前記組換えポックスウイルス。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ＲＮＡ転写物の前記相補的部分が１００〜１０００ヌクレオチド、好ましくは３００〜１０００ヌクレオチド重なる、前記組換えポックスウイルス。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ＲＮＡ転写物の前記相補的部分が７００を超えるヌクレオチドで重なる、前記組換えポックスウイルス。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、完全にまたは部分的に相補的なＲＮＡ転写産物をコードする前記異種核酸は、前記相補的な領域内において同一であるか、または前記相補的な領域内において９９％超、９５％超、９０％超、８０％超、または７０％超の類似性を有する前記組換えポックスウイルス。
【請求項８】
請求項７に記載の組換えポックスウイルスであって、部分的または完全に相補的な転写物をコードする前記二つの同一または非常に類似した配列が、１以上の必須のウイルス遺伝子によって分離されている前記組換えポックスウイルス。
【請求項９】
請求項７に記載の組換えポックスウイルスであって、センスメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）は前記二つの同一または非常に類似した配列の一方から転写され、及びアンチセンスｍＲＮＡは他方の同一または非常に類似した配列から転写される前記組換えポックスウイルス。
【請求項１０】
請求項９に記載の組換えポックスウイルスであって、センス及びアンチセンスＲＮＡが、前記同じ異種配列の挿入物の両方の鎖から転写される前記組換えポックスウイルス。
【請求項１１】
請求項１０に記載の組換えポックスウイルスであって、センス及びアンチセンスＲＮＡは、天然ポックスウイルス配列、好ましくは初期遺伝子、より好ましくは即時初期遺伝子の両方の鎖から転写される前記組換えポックスウイルス。
【請求項１２】
請求項９〜１１の何れか１項に記載の組換えポックスウイルスであって、相補的なＲＮＡ転写物をコードする前記配列の発現は、各々ポックスウイルスプロモータによって指令される前記組換えポックスウイルス。
【請求項１３】
請求項１０に記載の組換えポックスウイルスであって、前記ポックスウイルスプロモータは、初期プロモータまたは即時初期プロモータである前記組換えポックスウイルス。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の初期ｄｓＲＮＡの発現により、標準的な複製能力をもつワクシニアウイルス株及びチョルドポックスウイルス亜科由来の他の種を弱毒化させるｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法。
【請求項１５】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスと、医薬的に許容可能な担体または賦形剤を含有する医薬組成物。
【請求項１６】
医薬を製造するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスの使用。
【請求項１７】
脊椎動物対象に請求項１３に記載の組換えポックスウイルスを投与することを含んでなる自然免疫の活性化を増強するための請求項１３に記載の組換えポックスウイルスの使用であって；前記投与が、前記対象におけるＩ型インターフェロン（Ｉ型ＩＦＮ）、サイトカイン及びケモカインの産生を高める、使用。
【請求項１８】
請求項１７に記載の組換えポックスウイルスの使用であって、Ｉ型ＩＦＮの産生は、インターフェロン−β（ＩＦＮ−β）をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の転写を含んでなり、該ＩＦＮ−β・ｍＲＮＡの転写が少なくとも２倍、少なくとも１０倍または少なくとも５０倍増加する前記使用。
【請求項１９】
請求項１７に記載の組換えポックスウイルスの使用であって、Ｉ型ＩＦＮの産生はＩＦＮ−βタンパク質の分泌を含んでなり、該ＩＦＮ−βタンパク質の分泌が少なくとも２倍、少なくとも４倍または少なくとも１０倍増加する前記使用。
【請求項２０】
請求項１７に記載の組換えポックスウイルスの使用であって、前記投与は、ａ）サイトカインＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−６またはＩＬ−１８、あるいはｂ）ケモカインＣＸＣＬ１、ＣＣＬ２またはＣＣＬ５の産生を増強する前記使用。
【請求項２１】
請求項１７に記載の組換えポックスウイルスの使用であって、前記投与は、ベクター特異的ＣＤ８Ｔ細胞の産生を、少なくとも１０％、好ましくは２５％、より好ましくは５０％超増強する前記使用。