【手続補正書】
【提出日】平成29年9月20日(2017.9.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１および第２の免疫グロブリン単一可変ドメイン（ＩＳＶ）を含むポリペプチドであって、ここで、
−  該第１のＩＳＶが１０ｎＭ〜２００ｎＭの平均ＫＤ値で第１の標的に結合し、
−  該第２のＩＳＶが１０ｎＭ〜０．１ｐＭの平均ＫＤ値で第２の標的に結合し、および
ここで、該第１の標的および該第２の標的が細胞の表面上に存在し、
ここで、該第１の標的は該第２の標的とは異なり、
ここで、該第２のＩＳＶが該第１のＩＳＶの結合を向上させ、および
ここで、該第１のＩＳＶによる結合が該第１の標的の機能を阻害する、
前記ポリペプチド。
【請求項２】
細胞が有疾患細胞、好ましくは癌細胞である、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
細胞が、第１の標的および第２の標的の０．０１〜０．９、さらにより好ましくは０．２〜０．８、０．３〜０．７、０．４〜０．６の比、例えば０．０２、０．０５、０．０８、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９の比、好ましくは０．５の比を含む、請求項１または２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
ポリペプチドが、
−  好ましくは表面プラズモン共鳴によって測定された場合に、少なくとも約１０２Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０３Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０４Ｍ−１ｓ−１、少なくとも約１０５Ｍ−１ｓ−１、および少なくとも約１０６Ｍ−１ｓ−１からなる群から選択される、第１の標的に対するｏｎ速度定数（Ｋｏｎ）を有し、および／または
−  好ましくは表面プラズモン共鳴によって測定された場合に、多くて約１０−３ｓ−１、多くて約１０−４ｓ−１、多くて約１０−５ｓ−１、および多くて約１０−６ｓ−１からなる群から選択される、第１の標的に対するｏｆｆ速度定数（Ｋｏｆｆ）を有し、および／または
−  好ましくは表面プラズモン共鳴によって測定された場合に、多くて約１０−７Ｍ、多くて約１０−８Ｍ、多くて約１０−９Ｍ、多くて約１０−１０Ｍ、多くて約１０−１１Ｍ、および多くて約１０−１２Ｍからなる群から選択される、第１の標的に対する解離定数（ＫＤ）を有する、
請求項１〜３のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項５】
第１のＩＳＶが、
−  好ましくはＳＰＲによって測定された場合に、１０ｎＭ〜２００ｎＭの平均ＫＤ値、例えば１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、または１９０ｎＭの平均ＫＤ値で第１の標的に結合し、および／または
−  走化性を走化性アッセイにおいて約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、８０％、９０％、および好ましくは９５％またはそれより大きく阻害し、および／または
−  細胞の退形成、侵襲性、転移、増殖、分化、遊走、および／または生存を阻害し、および／または
−  細胞のアポトーシス、殺細胞、および／または増殖停止を増大させる、
請求項１〜４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項６】
第２のＩＳＶが、
−  好ましくはＳＰＲによって測定された場合に、１０ｎＭ〜０．１ｐＭの平均ＫＤ値、例えば１０ｎＭまたはそれより小さい平均ＫＤ値、さらにより好ましくは９ｎＭまたはそれより小さい、例えば８、７、６、５、４、３、２、１、０．５ｎＭ未満またはそれよりもなお小さい、例えば４００、３００、２００、１００、５０、４０、３０、２０、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、０．５ｐＭ未満またはそれよりもなお小さい、例えば０．４ｐＭ未満の平均ＫＤ値で第２の標的に結合し、および／または
−  第２の標的への天然のリガンドの結合を約５０％未満、例えば４０％、３０％、もしくは２０％、またはさらに１０％未満、例えば５％未満阻害する、
請求項１〜５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項７】
第１の標的が、受容体チロシンキナーゼ（好ましくはクラスＩ）、ＧＰＣＲ、ＤＤＲ１、ディスコイディンＩ（ＣＤ１６７ａ抗原）、ＤＤＲ２、ＥｒｂＢ−１、Ｃ−ｅｒｂＢ−２、ＦＧＦＲ−１、ＦＧＦＲ−３、ＣＤ１３５抗原、ＣＤ１１７抗原、蛋白質チロシンキナーゼ−１、ｃ−Ｍｅｔ、ＣＤ１４８抗原、Ｃ−ｒｅｔ、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、Ｔｉｅ−１、Ｔｉｅ−２、ＣＤ２０２ｂ抗原、Ｔｒｋ−Ａ、Ｔｒｋ−Ｂ、Ｔｒｋ−Ｃ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３、Ｎｏｔｃｈ受容体１〜４、ＦＡＳ受容体、ＤＲ５、ＤＲ４、ＣＤ４７、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ−３、ＣＸＣＲ−４、ＣＸＣＲ−７、ケモカイン結合蛋白質２、ならびにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、およびＣＣＲ１１からなる群から選ばれ、第２の標的が、ＭＡＲＴ−１、癌胎児性抗原（「ＣＥＡ」）、ｇｐ１００、ＭＡＧＥ−１、ＨＥＲ−２、ならびにルイスＹ抗原、ＣＤ１２３、ＣＤ４４、ＣＬＬ−１、ＣＤ９６、ＣＤ４７、ＣＤ３２、ＣＸＣＲ４、Ｔｉｍ−３、ＣＤ２５、ＴＡＧ−７２、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＰＳＭＡ、ＰＳＡ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３６、ＣＤ４５、ＣＤ５２、およびＣＤ１４７、成長因子受容体（ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４を包含する）、ならびにサイトカイン受容体（インターロイキン−２受容体ガンマ鎖（ＣＤ１３２抗原）、インターロイキン−１０受容体アルファ鎖（ＩＬ−１０Ｒ−Ａ）、インターロイキン−１０受容体ベータ鎖（ＩＬ−１０Ｒ−Ｂ）、インターロイキン−１２受容体ベータ−１鎖（ＩＬ−１２Ｒ−ベータ１）、インターロイキン−１２受容体ベータ−２鎖（ＩＬ−１２受容体ベータ−２）、インターロイキン−１３受容体アルファ−１鎖（ＩＬ−１３Ｒ−アルファ−１）（ＣＤ２１３ａ１抗原）、インターロイキン−１３受容体アルファ−２鎖（インターロイキン−１３結合蛋白質）、インターロイキン−１７受容体（ＩＬ−１７受容体）、インターロイキン−１７Ｂ受容体（ＩＬ−１７Ｂ受容体）、インターロイキン２１受容体前駆体（ＩＬ−２１Ｒ）、インターロイキン−１受容体Ｉ型（ＩＬ−１Ｒ−１）（ＣＤ１２１ａ）、インターロイキン−１受容体ＩＩ型（ＩＬ−１Ｒ−ベータ）（ＣＤｗ１２１ｂ）、インターロイキン−１受容体アンタゴニスト蛋白質（ＩＬ−１ｒａ）、インターロイキン−２受容体アルファ鎖（ＣＤ２５抗原）、インターロイキン−２受容体ベータ鎖（ＣＤ１２２抗原）、インターロイキン−３受容体アルファ鎖（ＩＬ−３Ｒ−アルファ）（ＣＤ１２３抗原）を包含する）からなる群から選ばれる、
請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項８】
第１の標的および第２の標的が、
−  第１の標的としてのＥＧＦＲおよび第２の標的としてのＣＥＡ、
−  第１の標的としての受容体チロシンキナーゼおよび第２の標的としての腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）、
−  第１の標的としてのＧ蛋白質共役受容体（ＧＰＣＲ）および第２の標的としての造血系分化抗原、
−  第１の標的としての受容体チロシンキナーゼおよび第２の標的としての造血系分化抗原、
−  第１の標的としてのＧ蛋白質共役受容体（ＧＰＣＲ）および第２の標的としての腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）、
−  第１の標的としてのＣＸＣＲ４および第２の標的としてのＣＤ１２３、
−  第１の標的としてのＤＲ５および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＤＲ４および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＣＤ９５および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＣＤ４７および第２の標的としてのＣＤ１２３、
−  第１の標的としてのＣＤ４７および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＣＤ４および第２の標的としてのＣＸＣＲ４、
−  第１の標的としてのＩＬ１２Ｒβ１および第２の標的としてのＣＤ４、
−  第１の標的としてのＩＬ１２Ｒβ２および第２の標的としてのＣＤ４、ならびに
−  第１の標的としてのＩＬ２３Ｒおよび第２の標的としてのＣＤ４、
からなる群から選ばれる、
請求項７に記載のポリペプチド。
【請求項９】
第１および第２の免疫グロブリン単一可変ドメイン（ＩＳＶ）を含むポリペプチドであって、
−  該第１のＩＳＶが、１０ｎＭ〜２００ｎＭの平均ＥＣ５０値で細胞の表面上の第１の標的に結合し、
−  該第２のＩＳＶが、１０ｎＭ〜０．１ｐＭの平均ＥＣ５０値で前記細胞の表面上の第２の標的に結合し、および
ここで、該第１の標的が該第２の標的とは異なり、
ここで、該第２のＩＳＶが該第１のＩＳＶの結合を向上させ、および、
ここで、該第１のＩＳＶが該第１の標的の機能を阻害する、
前記ポリペプチド。
【請求項１０】
第１のＩＳＶが、１０ｎＭ〜２００ｎＭの平均ＫＤ値、例えば１０、１５、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、またはｌ９０ｎＭの平均ＥＣ５０値で細胞の表面上の第１の標的に結合する、請求項９に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
第２のＩＳＶが、１０ｎＭ〜０．１ｐＭの平均ＥＣ５０値、例えば１０ｎＭまたはそれより小さい平均ＥＣ５０値、さらにより好ましくは９ｎＭまたはそれより小さい、例えば８、７、６、５、４、３、２、１、０．５ｎＭ未満またはそれよりもなお小さい、例えば４００、３００、２００、１００、５０、４０、３０、２０、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、０．５ｐＭ未満またはそれよりもなお小さい、例えば０．４ｐＭ未満の平均ＫＤ値で、細胞の表面上の第２の標的に結合する、請求項９または１０に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
第１の標的および第２の標的が、０．０１〜０．９、例えば０．２〜０．８、０．３〜０．７、０．４〜０．６の比、例えば０．０１、０．０２、０．０５、０．０８、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９の比で細胞の表面上に存在する、請求項９〜１１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
第１の標的が、受容体チロシンキナーゼ（好ましくはクラスＩ）、ＧＰＣＲ、ＤＤＲ１、ディスコイディンＩ（ＣＤ１６７ａ抗原）、ＤＤＲ２、ＥｒｂＢ−１、Ｃ−ｅｒｂＢ−２、ＦＧＦＲ−１、ＦＧＦＲ−３、ＣＤ１３５抗原、ＣＤ１１７抗原、蛋白質チロシンキナーゼ−１、ｃ−Ｍｅｔ、ＣＤ１４８抗原、Ｃ−ｒｅｔ、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、Ｔｉｅ−１、Ｔｉｅ−２、ＣＤ２０２ｂ抗原、Ｔｒｋ−Ａ、Ｔｒｋ−Ｂ、Ｔｒｋ−Ｃ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３、Ｎｏｔｃｈ受容体１〜４、ＦＡＳ受容体、ＤＲ５、ＤＲ４、ＣＤ４７、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ−３、ＣＸＣＲ−４、ＣＸＣＲ−７、ケモカイン結合蛋白質２、ならびにＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、およびＣＣＲ１１からなる群から選ばれ、第２の標的が、ＭＡＲＴ−１、癌胎児性抗原（「ＣＥＡ」）、ｇｐ１００、ＭＡＧＥ−１、ＨＥＲ−２、ならびにルイスＹ抗原、ＣＤ１２３、ＣＤ４４、ＣＬＬ−１、ＣＤ９６、ＣＤ４７、ＣＤ３２、ＣＸＣＲ４、Ｔｉｍ−３、ＣＤ２５、ＴＡＧ−７２、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＰＳＭＡ、ＰＳＡ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３６、ＣＤ４５、ＣＤ５２、およびＣＤ１４７、成長因子受容体（ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４を包含する）、ならびにサイトカイン受容体（インターロイキン−２受容体ガンマ鎖（ＣＤ１３２抗原）、インターロイキン−１０受容体アルファ鎖（ＩＬ−１０Ｒ−Ａ）、インターロイキン−１０受容体ベータ鎖（ＩＬ−１０Ｒ−Ｂ）、インターロイキン−１２受容体ベータ−１鎖（ＩＬ−１２Ｒ−ベータ１）、インターロイキン−１２受容体ベータ−２鎖（ＩＬ−１２受容体ベータ−２）、インターロイキン−１３受容体アルファ−１鎖（ＩＬ−１３Ｒ−アルファ−１）（ＣＤ２１３ａ１抗原）、インターロイキン−１３受容体アルファ−２鎖（インターロイキン−１３結合蛋白質）、インターロイキン−１７受容体（ＩＬ−１７受容体）、インターロイキン−１７Ｂ受容体（ＩＬ−１７Ｂ受容体）、インターロイキン２１受容体前駆体（ＩＬ−２１Ｒ）、インターロイキン−１受容体Ｉ型（ＩＬ−１Ｒ−１）（ＣＤ１２１ａ）、インターロイキン−１受容体ＩＩ型（ＩＬ−１Ｒ−ベータ）（ＣＤｗ１２１ｂ）、インターロイキン−１受容体アンタゴニスト蛋白質（ＩＬ−１ｒａ）、インターロイキン−２受容体アルファ鎖（ＣＤ２５抗原）、インターロイキン−２受容体ベータ鎖（ＣＤ１２２抗原）、インターロイキン−３受容体アルファ鎖（ＩＬ−３Ｒ−アルファ）（ＣＤ１２３抗原）を包含する）からなる群から選ばれる、
請求項９〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
第１の標的および第２の標的が、
−  第１の標的としてのＥＧＦＲおよび第２の標的としてのＣＥＡ、
−  第１の標的としての受容体チロシンキナーゼおよび第２の標的としての腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）、
−  第１の標的としてのＧ蛋白質共役受容体（ＧＰＣＲ）および第２の標的としての造血系分化抗原、
−  第１の標的としての受容体チロシンキナーゼおよび第２の標的としての造血系分化抗原、
−  第１の標的としてのＧ蛋白質共役受容体（ＧＰＣＲ）および第２の標的としての腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）、
−  第１の標的としてのＣＸＣＲ４および第２の標的としてのＣＤ１２３、
−  第１の標的としてのＤＲ５および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＤＲ４および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＣＤ９５および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＣＤ４７および第２の標的としてのＣＤ１２３、
−  第１の標的としてのＣＤ４７および第２の標的としてのＥｐＣａｍ、
−  第１の標的としてのＣＤ４および第２の標的としてのＣＸＣＲ４、
−  第１の標的としてのＩＬ１２Ｒβ１および第２の標的としてのＣＤ４、
−  第１の標的としてのＩＬ１２Ｒβ２および第２の標的としてのＣＤ４、ならびに
−  第１の標的としてのＩＬ２３Ｒおよび第２の標的としてのＣＤ４、
からなる群から選ばれる、
請求項１３に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
毒素または毒素部分などの薬物をさらに含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
有機分子、酵素標識、放射性標識、有色標識、蛍光標識、クロモゲン標識、発光標識、ハプテン、ジゴキシゲニン、ビオチン、金属錯体、金属、金コロイド、蛍光標識、金属標識、ビオチン、化学発光、生物発光、クロモフォア、およびその混合物からなる群から好ましくは選択される分子を包含するが、これに限定されないイメージング剤をさらに含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む医薬組成物。
【請求項１８】
体内の特異的な場所、組織、または細胞型に予防もしくは治療ポリペプチド、ＰＤＣ、またはイメージング剤を送達するための、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
その必要がある対象を処置することへの使用のための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。