【手続補正書】
【提出日】平成29年3月9日(2017.3.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
コード領域及び任意で１つ以上の非コード領域を有するｍＲＮＡ分子であって、前記ｍＲＮＡ分子が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む少なくとも１つのヌクレオチド残基を含む、前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項２】
前記アデノシンヌクレオチド残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項３】
前記グアノシン残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１または請求項２に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項４】
前記ウリジン残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項５】
前記シチジン残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項６】
前記ヌクレオチド残基のうちの１０％未満が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項７】
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも１０％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項８】
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも２０％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項９】
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも２５％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１０】
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも３０％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１１】
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも４０％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１２】
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも５０％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１３】
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも９９％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、請求項１〜５または７〜１２のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１４】
前記非コード領域がポリＡテールを含み、前記ポリＡテールが４’−チオ−アデノシン残基を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１５】
前記ポリＡテールが、少なくとも約９０ヌクレオチド残基長である、請求項１４に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１６】
前記ポリＡテールが、少なくとも約５００ヌクレオチド残基長である、請求項１４または請求項１５に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１７】
前記ｍＲＮＡ分子が、少なくとも１つの非標準ヌクレオチド残基を更に含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１８】
前記非標準ヌクレオチド残基が、５−メチル−シチジン、プソイドウリジン、及び２−チオ−ウリジンのうちの１つ以上から選択される、請求項１７に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項１９】
前記１つ以上の非標準ヌクレオシド残基が、４’−チオ−フラノースを含むように更に修飾される、請求項１８に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項２０】
前記分子が、少なくとも２００個のヌクレオチド残基を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項２１】
前記分子が、少なくとも５０００個のヌクレオチド残基を含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項２２】
前記コード領域が、治療用タンパク質をコードする、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項２３】
前記治療用タンパク質が、エリスロポエチン、ヒト成長ホルモン、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）、インスリン、アルファ−ガラクトシダーゼＡ、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、イズロネート−２−スルファターゼ、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸トランスフェラーゼ、Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼ、アルファ−グルコサミニドアセチルトランスフェラーゼ、Ｎ−アセチルグルコサミン６−スルファターゼ、Ｎ−アセチルガラクトサミン−４−スルファターゼ、ベータ−グルコシダーゼ、ガラクトース−６−硫酸スルファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルクロニダーゼ、グルコセレブロシダーゼ、ヘパランスルファミダーゼ、ヒアルロニダーゼ、ガラクトセレブロシダーゼ、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）、カルバモイル−リン酸シンテターゼ１（ＣＰＳ１）、アルギニノコハク酸シンテターゼ（ＡＳＳ１）、アルギニノコハク酸リアーゼ（ＡＳＬ）、及びアルギナーゼ１（ＡＲＧ１）、グルコース−６−ホスファターゼ、グルコース−６−リン酸トランスロカーゼ、グリコーゲン脱分枝酵素、リソソームアルファ−グルコシダーゼ、１，４−アルファ−グルカン分枝酵素、グリコーゲンホスホリラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、肝臓ホスホリラーゼ、ＧＬＵＴ−２、ＵＤＰグリコーゲンシンターゼ、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、イズロネート硫酸シルファターゼ、ヘパラン硫酸スルファミダーゼ、アルファ−Ｎ−アセチルグルコースアミダーゼ、アルファ−グルコサミニド−Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−硫酸スルファターゼ、アポリポタンパク質Ｅ、低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、脊髄運動ニューロン１（ＳＭＮ１）、フェニルアラニンヒドロキシラーゼ、プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ、ポルフォビリノーゲンデアミナーゼ、ペチルマロニル（ｐｅｔｈｙｌｍａｌｏｎｙｌ）−ＣｏＡムターゼ、尿酸オキシダーゼ、Ｃ１エステラーゼ阻害剤、及び酸性アルファ−グルコシダーゼから選択される、請求項２２に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の少なくとも１つのｍＲＮＡ分子及び担体を含む、組成物。
【請求項２５】
前記担体が、脂質を含む、請求項２４に記載の前記組成物。
【請求項２６】
前記ｍＲＮＡ分子が、脂質ナノ粒子内に被包される、請求項２５に記載の前記組成物。
【請求項２７】
前記担体が、ＸＴＣ（２，２−ジリノレイ１−４−ジメチルアミノエチル−［１，３］−ジオキソラン）、ＭＣ３（（（６Ｚ，９Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−ヘプタトリアコンタ−６，９，２８，３１−テトラエン−１９−イル４−（ジメチルアミノ）ブタン酸）、ＡＬＮＹ−１００（（３ａＲ，５ｓ，６ａＳ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２，２−ジ（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエニル）テトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−アミン））、ＮＣ９８−５（４，７，１３−トリス（３−オキソ−３−（ウンデシルアミノ）プロピル）−Ｎ１，Ｎ１６−ジウンデシル−４，７，１０，１３−テトラアザヘキサデカン−１，１６−ジアミド）、ＤＯＤＡＰ（１，２−ジオレイル−３−ジメチルアンモニウムプロパン）、ＨＧＴ４００３、ＩＣＥ、ＨＧＴ５０００、シス、またはトランスＨＧＴ５００１、ＤＯＴＡＰ（１，２−ジオレイル−３−トリメチルアンモニウムプロパン）、ＤＯＴＭＡ（１，２−ジ−Ｏ−オクタデセニル−３−トリメチルアンモニウムプロパン）、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉＮ−ＫＣ２−ＤＭＡ、及びＣ１２−２００から選択される１つ以上の陽イオン性脂質を含む脂質ナノ粒子である、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の前記組成物。
【請求項２８】
前記脂質ナノ粒子が、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＰＰＥ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＭＰＥ（１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＰＧ（，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール））、及びコレステロールから選択される１つ以上のヘルパー脂質を含む、請求項２６または請求項２７に記載の前記組成物。
【請求項２９】
前記脂質ナノ粒子が、ペグ化脂質を含む、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の前記組成物。
【請求項３０】
前記脂質ナノ粒子が、１つ以上の陽イオン性脂質、１つ以上のヘルパー脂質、及びペグ化脂質を含む、請求項２６に記載の前記組成物。
【請求項３１】
前記担体が、ポリマーを含む、請求項２４に記載の前記組成物。
【請求項３２】
前記ポリマーが、ポリエチレンイミンである、請求項３１に記載の前記組成物。
【請求項３３】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子、または請求項２４〜３２のいずれか一項に記載の前記組成物を含む、タンパク質をインビボで産生するための組成物。
【請求項３４】
治療用タンパク質のインビボでの発現を誘発することができる薬物の製造のための、請求項１〜２３のいずれか一項に記載のｍＲＮＡ分子の使用。
【請求項３５】
治療用タンパク質のインビボでの発現を誘発するための組成物であって、請求項１〜２３のいずれか一項に記載のｍＲＮＡ分子を含む、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
前述の一般的な記載及び以下の詳細な記載の両方は、例示的かつ説明的であるのみであって、主張される本発明を限定するものではないことが理解されるべきである。本明細書に組み込まれ、本明細書の一部を構成する添付図面は、本発明のいくつかの実施形態を図示し、記載と共に、本発明の原理を更に説明する役割を果たす。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
コード領域及び任意で１つ以上の非コード領域を有するｍＲＮＡ分子であって、前記ｍＲＮＡが、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む少なくとも１つのヌクレオチド残基を含む、前記ｍＲＮＡ分子。
（項目２）
前記アデノシンヌクレオチド残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、項目１に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目３）
前記グアノシン残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、項目１または項目２に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目４）
前記ウリジン残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、項目１〜３のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目５）
前記シチジン残基のうちの少なくとも１％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、項目１〜４のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目６）
前記ヌクレオチド残基のうちの１０％未満が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、項目１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目７）
前記残基のうちの少なくとも５０％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、項目１〜５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目８）
前記ヌクレオチド残基のうちの少なくとも９９％が、４’−チオ−置換フラノース環を組み込む、項目１〜５または７のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目９）
前記非コード領域がポリＡテールを含み、前記ポリＡテールが４’−チオ−アデノシン残基を含む、項目１〜８のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１０）
前記ポリＡテールが、少なくとも約９０ヌクレオチド残基長である、項目９に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１１）
前記ポリＡテールが、少なくとも約５００ヌクレオチド残基長である、項目９または項目１０に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１２）
前記ｍＲＮＡが、少なくとも１つの非標準ヌクレオチド残基を更に含む、項目１〜１１のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１３）
前記非標準ヌクレオチド残基が、５−メチル−シチジン、プソイドウリジン、及び２−チオ−ウリジンのうちの１つ以上から選択される、項目１２に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１４）
前記１つ以上の非標準ヌクレオシド残基が、４’−チオ−フラノースを含むように更に修飾される、項目１３に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１５）
前記分子が、少なくとも２００個のヌクレオチド残基を含む、項目１〜１４のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１６）
前記分子が、少なくとも５０００個のヌクレオチド残基を含む、項目１〜１５のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１７）
前記コード領域が、治療用タンパク質をコードする、項目１〜１６のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１８）
前記治療用タンパク質が、エリスロポエチン、ヒト成長ホルモン、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）、インスリン、アルファ−ガラクトシダーゼＡ、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、イズロネート−２−スルファターゼ、Ｎ−アセチルグルコサミン−１−リン酸トランスフェラーゼ、Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼ、アルファ−グルコサミニドアセチルトランスフェラーゼ、Ｎ−アセチルグルコサミン６−スルファターゼ、Ｎ−アセチルガラクトサミン−４−スルファターゼ、ベータ−グルコシダーゼ、ガラクトース−６−硫酸スルファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルクロニダーゼ、グルコセレブロシダーゼ、ヘパランスルファミダーゼ、ヒアルロニダーゼ、ガラクトセレブロシダーゼ、オルニチントランスカルバミラーゼ（ＯＴＣ）、カルバモイル−リン酸シンテターゼ１（ＣＰＳ１）、アルギニノコハク酸シンテターゼ（ＡＳＳ１）、アルギニノコハク酸リアーゼ（ＡＳＬ）、及びアルギナーゼ１（ＡＲＧ１）、グルコース−６−ホスファターゼ、グルコース−６−リン酸トランスロカーゼ、グリコーゲン脱分枝酵素、リソソームアルファ−グルコシダーゼ、１，４−アルファ−グルカン分枝酵素、グリコーゲンホスホリラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、肝臓ホスホリラーゼ、ＧＬＵＴ−２、ＵＤＰグリコーゲンシンターゼ、アルファ−Ｌ−イズロニダーゼ、イズロネート硫酸シルファターゼ、ヘパラン硫酸スルファミダーゼ、アルファ−Ｎ−アセチルグルコースアミダーゼ、アルファ−グルコサミニド−Ｎ−アセチルトランスフェラーゼ、Ｎ−アセチルグルコサミン−６−硫酸スルファターゼ、アポリポタンパク質Ｅ、低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、脊髄運動ニューロン１（ＳＭＮ１）、フェニルアラニンヒドロキシラーゼ、プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ、ポルフォビリノーゲンデアミナーゼ、ペチルマロニル（ｐｅｔｈｙｌｍａｌｏｎｙｌ）−ＣｏＡムターゼ、尿酸オキシダーゼ、Ｃ１エステラーゼ阻害剤、及び酸性アルファ−グルコシダーゼから選択される、項目１７に記載の前記ｍＲＮＡ分子。
（項目１９）
項目１〜１８のいずれか一項に記載の少なくとも１つのｍＲＮＡ分子及び担体を含む、組成物。
（項目２０）
前記担体が、脂質を含む、項目１９に記載の前記組成物。
（項目２１）
前記ｍＲＮＡが、脂質ナノ粒子内に被包される、項目２０に記載の前記組成物。
（項目２２）
前記担体が、ＸＴＣ（２，２−ジリノレイ１−４−ジメチルアミノエチル−［１，３］−ジオキソラン）、ＭＣ３（（（６Ｚ，９Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−ヘプタトリアコンタ−６，９，２８，３１−テトラエン−１９−イル４−（ジメチルアミノ）ブタン酸）、ＡＬＮＹ−１００（（３ａＲ，５ｓ，６ａＳ）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２，２−ジ（（９Ｚ，１２Ｚ）−オクタデカ−９，１２−ジエニル）テトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−アミン））、ＮＣ９８−５（４，７，１３−トリス（３−オキソ−３−（ウンデシルアミノ）プロピル）−Ｎ１，Ｎ１６−ジウンデシル−４，７，１０，１３−テトラアザヘキサデカン−１，１６−ジアミド）、ＤＯＤＡＰ（１，２−ジオレイル−３−ジメチルアンモニウムプロパン）、ＨＧＴ４００３、ＩＣＥ、ＨＧＴ５０００、シス、またはトランスＨＧＴ５００１、ＤＯＴＡＰ（１，２−ジオレイル−３−トリメチルアンモニウムプロパン）、ＤＯＴＭＡ（１，２−ジ−Ｏ−オクタデセニル−３−トリメチルアンモニウムプロパン）、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉＮ−ＫＣ２−ＤＭＡ、及びＣ１２−２００から選択される１つ以上の陽イオン性脂質を含む脂質ナノ粒子である、項目１９〜２１のいずれか一項に記載の前記組成物。
（項目２３）
前記脂質ナノ粒子が、ＤＳＰＣ（１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＰＰＥ（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＭＰＥ（１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン）、ＤＯＰＧ（，２−ジオレイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホ−（１’−ｒａｃ−グリセロール））、及びコレステロールから選択される１つ以上のヘルパー脂質を含む、項目２１または項目２２に記載の前記組成物。
（項目２４）
前記脂質ナノ粒子が、ペグ化脂質を含む、項目２１〜２３のいずれか一項に記載の前記組成物。
（項目２５）
前記脂質ナノ粒子が、１つ以上の陽イオン性脂質、１つ以上のヘルパー脂質、及びペグ化脂質を含む、項目２１に記載の前記組成物。
（項目２６）
前記担体が、ポリマーを含む、項目１９に記載の前記組成物。
（項目２７）
前記ポリマーが、ポリエチレンイミンである、項目２６に記載の前記組成物。
（項目２８）
項目１〜１８のいずれか一項に記載の前記ｍＲＮＡ、または項目１９〜２７のいずれか一項に記載の前記組成物を対象に投与することを含む、タンパク質をインビボで産生する方法。
（項目２９）
治療用タンパク質のインビボでの発現を誘発することができる薬物の前記製造のための、項目１〜１８のいずれか一項の記載のｍＲＮＡ分子の使用。