【手続補正書】
【提出日】平成29年10月6日(2017.10.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩＡ
【化１】
2016540724.tif 000001
［式中：
各Ｘ置換基は、独立して、ハロ、ビニル、アルキル、シクロアルキル、ＳｉＲ３、ＳｎＲ３、ＰＲ２、Ｐ（Ｏ）Ｒ２、ＳＲ、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ２Ｒ、アリール、ヘテロアリール、ＣＨＯ、ＣＯ２Ｒ、ＣＮおよびＣＦ３から選択され；
各Ｒは独立して、アルキル、アリール、シクロアルキルまたはヘテロアリールから選択され；
ＡはＯであり、ＢはＣＨ２であり、およびｃは１であり、または
ＡはＣＨ２であり、ＢはＯであり、およびｃは２であり；
ａは１、２、３または４であり、およびｂは０、１、２、３、４または５であり；または
ａは０、１、２、３、４または５であり、およびｂは１、２、３、４または５であり；ならびに
ビニル、アルキル、シクロアルキル、アルキレン、アリールおよびヘテロアリールは、任意で、未置換アルキル、ＯＨ、ＣＮ、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素から独立して選択される１、２または３つの置換基により置換され得る］
で示される化合物。
【請求項２】
ａ＋ｂ＝１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ｂが０である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
式ＩＢ
【化２】
2016540724.tif 000002
で示される、請求項１−３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
各Ｘが、独立して、ハロ、ビニル、ＳＲ、Ｓ（Ｏ）Ｒ、アルキル、Ｐ（Ｏ）Ｒ２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ、ＳｉＲ３から選択される、請求項１−４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ａが４であり、ｂが５であり、各Ｘがメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
下記から選択される化合物：
３−（フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（ノナメチルフェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（１’−クロロ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスピニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリブチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリメチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリブチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリメチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−ビニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−ヨード−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
２−（３−フェロセニルプロポキシ）エタノール；
２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルプロポキシ）エタノール；
２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール；および
２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール。
【請求項８】
請求項１−７のいずれか一項に記載の化合物の官能化誘導体である化合物であって、前記官能化誘導体が、スクシンイミジルエステル基、ホスホラミダイト基、マレイミド基、ビオチンおよびアジド基から選択される部分を含んでもよい、化合物。
【請求項９】
下記から選択される、請求項８に記載の官能化誘導体：
２−シアノエチル−（３−（フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（ノナメチルフェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（１’−クロロ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスピニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリブチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリメチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリブチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリメチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−ビニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−ヨード−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（２−（３−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；および
２−シアノエチル−（２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト。
【請求項１０】
請求項１−９のいずれか一項に記載の化合物で標識された基質であって、前記基質が核酸である場合、前記基質はヌクレオチドの５’位で標識されることを条件とする、前記基質。
【請求項１１】
請求項１０に記載の標識された基質を含む、アッセイ標的の存在を決定するためのアッセイキット。
【請求項１２】
電気化学アッセイにおける標識としての請求項１−９のいずれか一項に記載の化合物の使用であって、前記アッセイが電気化学的に標識された基質を検出するためのものであってもよく、および／または前記アッセイが電気化学的に標識された基質の量を決定するためのものであってもよく、ただし、前記基質が核酸である場合、前記基質はヌクレオチドの５’位で標識されることを条件とする、前記使用。
【請求項１３】
電気化学アッセイにおける内部標準としての、請求項１−９のいずれか一項に記載の化合物または請求項１０に記載の標識された基質の使用。
【請求項１４】
請求項１−７のいずれか一項に記載の化合物を官能化化合物と反応させることを含む、式ＩＡの化合物の官能化誘導体の製造のための方法であって、前記官能化化合物がホスホラミダイト基を含んでもよい、方法。
【請求項１５】
請求項１−９のいずれかに記載の化合物を基質と反応させ、標識された基質を形成させることを含む、標識された基質の製造のための方法であって、ただし、前記基質が核酸である場合、前記基質はヌクレオチドの５’位で標識されることを条件とする、方法。
【請求項１６】
核酸をヌクレオチドの５’位で、請求項１−９のいずれか一項に記載の化合物で標識された相補的核酸プローブと、前記プローブとアンプリコンの間のハイブリダイゼーションを可能にする条件下で接触させること、続いてハイブリダイズされたまたはハイブリダイズされていないプローブのいずれかを選択的に分解する工程を含み、プローブを標識する化合物の電気化学活性を測定する工程を提供する、核酸アンプリコンを検出する方法。
【請求項１７】
プローブと核酸の間のハイブリダイゼーションを可能にする条件下で、核酸を相補的核酸プローブと接触させる工程であって、前記核酸プローブが、ヌクレオチドの５’位で、請求項１−９のいずれか一項に記載の化合物で標識された核酸である工程、続いて、ハイブリダイズされたまたはハイブリダイズされていないプローブのいずれかを選択的に分解する工程および前記化合物の電気化学活性を測定する工程を含み、前記分解が二本鎖特異的エクソヌクレアーゼ酵素により実行されてもよい、核酸を検出する方法。
【請求項１８】
前記電気化学活性が定量的にまたは定性的に、前記プローブの分解の程度に依存する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記核酸がこれを前記プローブと接触させる前に増幅される、請求項１７または１８に記載の方法。
【請求項２０】
少なくとも２つの標識を含むアッセイ装置が使用され、各標識が請求項１−９のいずれか一項に記載の化合物または請求項１０に記載の標識された基質を含む、請求項１６−１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物の電気化学活性を測定する工程を含む、請求項１０に記載の化合物で標識された基質を検出する方法。
【請求項２２】
前記基質が炭水化物、核酸、アミノ酸およびポリペプチドから選択され、前記基質が核酸であってもよい、請求項１０に記載の標識された基質、請求項１１に記載のアッセイキット、請求項１２または１３に記載の使用、あるいは請求項１５または２１に記載の方法。
【請求項２３】
ヌクレオチドの５’位で、請求項１−９のいずれか一項に記載の化合物で標識された核酸であって、前記核酸が病原体における核酸配列と相補的であってもよく、前記病原体がクラミジア・トラコマチス、腟トリコモナス、ナイセリア・ゴノレー、マイコプラズマ・ゲニタリウムおよびメチシリン耐性黄色ブドウ球菌から選択されてもよい、核酸。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９０】
実施例１：３−（フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール（１）の調製
【化１４】
2016540724.tif 000003
マグネチックスターラーバーが取り付けられた丸底フラスコにフェロセンカルボキシアルデヒド（５３５ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ、１ｅｑ）を添加した。フラスコに、その後、エタノール（４ｃｍ３）およびＴＨＦ（１ｃｍ３）を添加した。赤色溶液をその後、水素化ホウ素ナトリウム（１２３ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ、１．３ｅｑ）で処理した。フラスコをその後密閉し、窒素雰囲気下に置いた。３０分後、溶液の色が、オレンジに変化し、ＴＬＣ分析により、開始材料の完全消費が示された。フラスコをその後、真空で元の体積の約９０％まで濃縮した。ダークオレンジ残渣をその後、ＥｔＯＡｃ（１５ｃｍ３）およびＮａＨＣＯ３（１５ｃｍ３）に溶解させた。二相性混合物を分液漏斗に移し、水層を分離し、その後、ＥｔＯＡｃ（３×５ｃｍ３）で逆抽出し、合わせた有機洗液をその後、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、その後、真空で濃縮し、黄色固体を得た。フェロセンメタノールをその後、１，３−プロパンジオール（５ｃｍ３）に溶解させ、黄色溶液をその後、イッテルビウム（ＩＩＩ）トリフラート（７７ｍｇ、０．１２５ｍｍｏｌ、５ｍｏｌ％）で処理した。フラスコをその後密閉し、１００℃まで加熱した。１０分間加熱した後、ＴＬＣ分析により、開始材料の完全消費が示された。フラスコを室温まで冷却し、Ｈ２Ｏ（２０ｃｍ３）およびＥｔＯＡｃ（２０ｃｍ３）で希釈した。有機層をその後分離し、水層を、ＥｔＯＡｃ（３×５ｃｍ３）で逆抽出した。有機層を合わせ、その後、Ｈ２Ｏ（２０ｃｍ３）およびブライン（ｓａｔ）（２０ｃｍ３）で洗浄し、その後、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、その後、真空で濃縮し、オレンジ固体を得た。精製をその後、シリカゲルクロマトグラフィーにより、ｎ−Ｈｅｘ１：１ＥｔＯＡｃで溶離して実施し、所望の生成物３−（フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール（１）をオレンジ粉末として得た（５１４ｍｇ、７４％）。
１Ｈ  ＮＭＲ（２５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）；δＨ：４．２４（ｓ、４Ｈ）、４．１１（ｓ、６Ｈ）、３．６５（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝５．４Ｈｚ）、３．５４（ｔ、２Ｈ  Ｊ＝５．４Ｈｚ）、３．６５（ｔ、２Ｈ  Ｊ＝５．４Ｈｚ）、２．５２（ｂｒ  ｓ、１Ｈ）、１．７（ｑｕｉｎ  ２Ｈ、Ｊ＝５．６Ｈｚ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）；δＣ：８３．６、７７．３、７１．５、６９．４、６９．３、６９．２、６８．７、３２．０；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ  μＴＯＦ）  Ｃ１４Ｈ１８ＦｅＯ２Ｎａに対する計算値ｍ／ｚ  ２９７．０５５３  観測値２９７．０５６０（ｍ／ｚ＋Ｎａ＋）；電気化学電位：１８１ｍＶ。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４７】
発明を、以上、ほんの一例として記載してきたが、改変が可能であり、それらは発明の範囲および精神の範囲内にあることが理解されるであろう。
また、本発明は、以下のものも包含する。
［１］  式Ｉ
【化３３】
2016540724.tif 000004
［式中：
各Ｘ置換基は、独立して、ハロ、ビニル、アルキル、シクロアルキル、ＳｉＲ３、ＳｎＲ３、ＰＲ２、Ｐ（Ｏ）Ｒ２、ＳＲ、Ｓ（Ｏ）Ｒ、ＳＯ２Ｒ、アリール、ヘテロアリール、ＣＨＯ、ＣＯ２Ｒ、ＣＮおよびＣＦ３から選択され；
各Ｒは独立して、アルキル、アリール、シクロアルキルまたはヘテロアリールから選択され；
Ｙはスペーサであり；
Ｚはスペーサであり；
Ｌはリンカー基であり；
ａは０、１、２、３または４であり；
ｂは０、１、２、３、４または５であり；ならびに
ビニル、アルキル、シクロアルキル、アルキレン、アリールおよびヘテロアリールは、任意で、未置換アルキル、ＯＨ、ＣＮ、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素から独立して選択される１、２または３つの置換基により置換され得る］
で示される化合物。
［２］  Ｙがアルキレンであり、Ｚがアルキレンであり、アルキレンが、任意で、未置換アルキル、ＯＨ、ＣＮ、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素から独立して選択される１、２または３つの置換基により置換され得る、上記［１］に記載の化合物。
［３］  Ｌがヒドロキシまたは保護ヒドロキシである、上記［１］または［２］に記載の化合物。
［４］  式ＩＡ
【化３４】
2016540724.tif 000005
［式中：
ＡはＯであり、ＢはＣＨ２であり、およびｃは１であり、または
ＡはＣＨ２であり、ＢはＯであり、およびｃは２である］
で示される、上記［１］−［３］のいずれか１つに記載の化合物。
［５］  ａ＋ｂ＝１である、上記［１］−［４］のいずれか１つに記載の化合物。
［６］  ｂが０である、上記［１］−［５］のいずれか１つに記載の化合物。
［７］  式ＩＢ
【化３５】
2016540724.tif 000006
で示される、上記［１］−［６］のいずれか１つに記載の化合物。
［８］  Ｘが、独立して、ハロ、ビニル、ＳＲ、Ｓ（Ｏ）Ｒ、アルキル、Ｐ（Ｏ）Ｒ２、Ｓ（Ｏ）２Ｒ、ＳｉＲ３から選択され、例えば各ＸがＳＲ、Ｓ（Ｏ）ＲおよびＳ（Ｏ）２Ｒから独立して選択される、上記［１］−［７］のいずれか１つに記載の化合物。
［９］  ａが４であり、ｂが５であり、各Ｘがメチルである、上記［１］−［４］のいずれか１つに記載の化合物。
［１０］  下記から選択される化合物：
３−（フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（ノナメチルフェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（１’−クロロ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（（２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスピニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリブチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリメチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリブチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−トリメチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−ビニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
３−（２−ヨード−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール；
２−（３−フェロセニルプロポキシ）エタノール；
２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルプロポキシ）エタノール；
２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール；および
２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール。
［１１］  上記［１］−［１０］のいずれか１つに記載の化合物の官能化誘導体である化合物であって、前記官能化誘導体が、スクシンイミジルエステル基、ホスホラミダイト基、マレイミド基、ビオチンおよびアジド基から選択される部分、例えばホスホラミダイト基である部分を含んでもよく、前記官能化誘導体が下記から選択されてもよい、化合物：
２−シアノエチル−（３−（フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（ノナメチルフェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（１’−クロロ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（（２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスピニル）−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリブチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリメチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリブチルシリル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−トリメチルスタニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−ビニル−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（３−（２−ヨード−フェロセニルメトキシ）プロパン−１−オール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（２−（３−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルチオ）−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；
２−シアノエチル−（２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルフィニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト；および
２−シアノエチル−（２−（３−（２−ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル）−フェロセニルプロポキシ）エタノール）ジ−イソ−プロピルホスホラミダイト。
［１２］  上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物で標識された基質。
［１３］  上記［１２］に記載の標識された基質を含む、アッセイ標的の存在を決定するためのアッセイキット。
［１４］  電気化学アッセイにおける標識としての上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物の使用であって、前記アッセイが電気化学的に標識された基質を検出するためのものであってもよく、および／または前記アッセイが電気化学的に標識された基質の量を決定するためのものであってもよい、前記使用。
［１５］  電気化学アッセイにおける内部標準としての、上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物または上記［１２］に記載の標識された基質の使用。
［１６］  上記［１］−［１０］のいずれか１つに記載の化合物を官能化化合物と反応させることを含む、式Ｉの化合物の官能化誘導体の製造のための方法であって、前記官能化化合物がホスホラミダイト基を含んでもよい、方法。
［１７］  上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物を基質と反応させ、標識された基質を形成させることを含む、標識された基質の製造のための方法。
［１８］  核酸を、上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物で標識された相補的核酸プローブと、該プローブとアンプリコンの間のハイブリダイゼーションを可能にする条件下で接触させること、続いてハイブリダイズされたまたはハイブリダイズされていないプローブのいずれかを選択的に分解する工程を含み、プローブを標識する化合物の電気化学活性を測定する工程を提供する、核酸を検出する方法。
［１９］  プローブと核酸の間のハイブリダイゼーションを可能にする条件下で、核酸を相補的核酸プローブと接触させる工程であって、前記核酸プローブが上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物で標識された核酸である工程、続いて、ハイブリダイズされたまたはハイブリダイズされていないプローブのいずれかを選択的に分解する工程および前記化合物の電気化学活性を測定する工程を含み、前記分解が二本鎖特異的エクソヌクレアーゼ酵素により実行されてもよい、核酸を検出する方法。
［２０］  前記電気化学活性が定量的にまたは定性的に、前記プローブの分解の程度に依存する、上記［１９］に記載の方法。
［２１］  前記核酸がこれを前記プローブと接触させる前に増幅される、上記［１９］−［２０］のいずれか１つに記載の方法。
［２２］  少なくとも２つの標識を含むアッセイ装置が使用され、各標識が上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物または上記［１２］に記載の標識された基質を含む、上記［１８］−［２１］のいずれか１つに記載の方法。
［２３］  前記化合物の電気化学活性を測定する工程を含む、上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物で標識された基質を検出する方法。
［２４］  前記基質が炭水化物、核酸、アミノ酸およびポリペプチドから選択され、前記基質が核酸であってもよい、上記［１２］に記載の標識された基質、上記［１３］に記載のアッセイキット、上記［１４］−［１５］のいずれか１つに記載の使用、あるいは上記［１７］または［２３］に記載の方法。
［２５］  上記［１］−［１１］のいずれか１つに記載の化合物で標識された核酸であって、前記核酸が病原体における核酸配列と相補的であってもよく、前記病原体がクラミジア・トラコマチス、腟トリコモナス、ナイセリア・ゴノレー、マイコプラズマ・ゲニタリウムおよびメチシリン耐性黄色ブドウ球菌から選択されてもよい、核酸。