(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
励起光学系から眼球に可視から近赤外領域の単色化された又は単一波長の励起光ビームを照射し、眼球から発生する散乱光と蛍光の少なくとも一方を含む測定光を受光光学系で検出して眼内物質を測定する装置において、
眼球軸を固定するために前記励起光学系の光源とは別の可視光を発生する眼球軸固定用の光源を備えてその光源からの光ビームを眼球に入射させる眼球軸固定用光学系を備えており、
前記励起光学系は、眼球を測定用の所定の位置に固定し眼球軸を測定用の方向に固定した状態で、励起光ビームが角膜のみに入射し水晶体にも房水にも入射しないように角膜上で前記受光光学系の光軸と交わり、眼球軸と約４０〜９０°をなす位置関係に配置されたものであり、
前記受光光学系は励起光学系の光軸とは空間的に異なった受光軸をもち、角膜から発生する測定光を他の眼球部分から発生する測定光と区別して導くためのスリット、光ファイバレンズアレイ又はレンズからなる光学素子、及びその光学素子により導かれた角膜から発生する測定光の光路上に配置された光電変換素子を少なくとも有する光検出器を備えていることを特徴とする測定装置。
【請求項２】
前記受光光学系は眼球から発生する測定光を分光する分光手段をさらに備え、前記光検出器はその分光手段により分光された測定光を検出するものである請求項１に記載の測定装置。
【請求項３】
眼球の方向を監視するモニタとして二次元固体撮像素子が設けられており、その二次元固体撮像素子により前記受光光学系の光検出器の出力を取り込むことができるようにした請求項１又は２に記載の測定装置。
【請求項４】
前記受光光学系の光検出器が眼球の方向を監視するモニタとしても使用される二次元固体撮像素子である請求項３に記載の測定装置。
【請求項５】
前記受光光学系の光検出器は、前記励起光学系の光軸と受光光学系の受光軸とを含む平面内の一直線に沿って複数の光電変換素子が配列された固体撮像素子である請求項１から４のいずれかに記載の測定装置。
【請求項６】
受光光学系の光検出器は受光光学系の受光軸上に配置された単一の光電変換素子であり、受光光学系の前記光学素子は角膜上で励起光学系の光軸と受光光学系の受光軸とが交差する点から発生する光のみを前記光検出器に入射させる請求項１から４のいずれかに記載の測定装置。
【請求項７】
前記分光手段はフーリエ変換型分光器、フィルタ、又は音響光学フィルタである請求項２に記載の測定装置。
【請求項８】
受光光学系の光検出器は一次元又は二次元の固体撮像素子であり、受光光学系の前記光学素子は角膜近傍で励起光学系の光軸と受光光学系の受光軸とが交差する点から発生する光のみを導くものであり、前記分光手段はその光を前記固体撮像素子の光電変換素子配列方向に波長分散させて分光する分光器である請求項２に記載の測定装置。
【請求項９】
励起光学系から眼球に照射される励起光ビームは励起光学系の光軸に沿った平行光である請求項１から８のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１０】
励起光学系には励起光ビームを角膜に集光させる集光光学系が設けられている請求項１から８のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１１】
励起光学系の励起光ビームの光軸にビームスプリッタが設けられ、そのビームスプリッタにより取り出された励起光の一部が光検出器の一部の光電変換素子又は他の光検出器に入射され、その一部の光電変換素子又は他の光検出器の出力により、眼球からの測定光を受光した光検出器の出力が補正される請求項１から１０のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１２】
励起光学系及び受光光学系が、顔面に装着できるゴーグル状構造物内に一体的に収納されている請求項１から１１のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１３】
前記ゴーグル状構造物内には、受光光学系により測定されたデータを含む情報を外部のデータ処理装置へ出力できる伝送回路がさらに設けられている請求項１２に記載の測定装置。
【請求項１４】
測定される眼内物質は糖類であり、
グルコースに対しては励起波長からのシフト波数にして420〜1500ｃｍ-1又は2850〜3000ｃｍ-1にあるラマン散乱ピークを用いて定量がなされ、
イノシトールに対しては励起波長からのシフト波数にして400〜1500ｃｍ-1又は2900〜3050ｃｍ-1にあるラマン散乱ピークを用いて定量がなされ、
フルクトースに対しては励起波長からのシフト波数にして550〜1500ｃｍ-1又は2900〜3050ｃｍ-1にあるラマン散乱ピークを用いて定量がなされ、
ガラクトースに対しては励起波長からのシフト波数にして400〜1500ｃｍ-1又は2850〜3050ｃｍ-1にあるラマン散乱ピークを用いて定量がなされ、
ソルビトールに対しては励起波長からのシフト波数にして380〜1500ｃｍ-1又は2700〜2960ｃｍ-1にあるラマン散乱ピークを用いて定量がなされる請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１５】
測定される眼内物質が脂質であり、
レシチンに対しては450〜650ｎｍの蛍光スペクトルのスペクトル強度又はその範囲内の適当な波長範囲のスペクトルの積算値を用いて定量がなされる請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１６】
測定される眼内物質がビリルビンであり、励起波長からのシフト波数にして500〜540ｃｍ-1，670〜710ｃｍ-1，900〜980ｃｍ-1，1220〜1300ｃｍ-1，1310〜1330ｃｍ-1，1400〜1500ｃｍ-1又は1550〜1670ｃｍ-1にあるラマン散乱ピークを用いて定量がなされる請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１７】
測定される眼内物質が糖化タンパクであり、
糖化アルブミンに対しては640〜850ｎｍの蛍光スペクトルのスペクトル強度又はその範囲内の適当な波長範囲のスペクトルの積算値を用いて定量がなされる請求項請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１８】
測定される眼内物質が糖類、脂質、ビリルビン及び糖化タンパクからなる群に含まれる少なくとも２種類の物質であり、それらの物質に選択されたシフト波数のラマン散乱光のピーク強度もしくはピーク面積、又は螢光のスペクトル強度もしくは適当な波長範囲の積算値が用いられ、それらの複数の測定値から多変量解析によりそれぞれの物質の測定値が求められる請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項１９】
測定される眼内物質が糖化タンパク最終産物ＡＧＥである請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項２０】
測定される眼内物質が糖化クリスタリンである請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【請求項２１】
測定される眼内物質は体外から注入された蛍光物質である請求項１から１３のいずれかに記載の測定装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、励起光学系から眼球に可視から近赤外領域の単色化された又は単一波長の励起光ビームを照射し、眼球から発生する散乱光と蛍光の少なくとも一方を含む測定光を受光光学系で検出して眼内物質を測定する装置に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
眼球に励起光を照射し、眼球からの散乱光や螢光から情報を得る方法として、眼内の螢光を測定することにより  ｂｌｏｏｄ−ｏｃｕｌａｒ  ｂａｒｒｉｅｒ  の機能を定量的に検索する検査法として、ガラス体フルオロフォトメトリ（ＶＦＰ）が行われている。糖尿病の診断やインシュリン投与の必要性の判断には血糖値を測定しなければならない。血液を採取して血糖値を測定する方法は正確ではあるが、患者に苦痛を与え、検査に手間がかかり、時間も要する。
【０００３】
そこで、眼球からの光学的な情報に基づいて眼内物質を非侵襲に測定する種々の方法も検討されている。例えば、眼球に励起光を照射し、そこから得られる情報に基づいて血糖値を測定する方法が検討されている。そのような方法の１つは、水晶体に励起光を照射し、その後方散乱光を受光して分光器やダイクロイックビームスプリッタを用いてそれを螢光とレーリ光に分離し、螢光強度をレーリ光強度で正規化した値から糖尿病を診断しうる情報を求め、それに基づいて糖尿病や白内障その他の病気の診断を行う方法である（米国特許第５，２０３，３２８号参照）。
【０００４】
他の方法では、水晶体による赤外吸収又は可視光の屈折率を測定し、それに基づいて水晶体中の血糖値を求める（特開昭５１−７５４９８号公報参照）。さらに他の方法では、角膜と水晶体の間に満たされている房水に平面偏光を照射し、その偏光軸の回転角を測定し、又は屈折率を測定することにより血糖値を求める（米国特許第３，９６３，０１９号参照）。
他の生体物質としてコレステロール値を求める方法も提案されている。そこでは、房水に励起光を照射し、そこからの散乱光強度や散乱体であるタンパク質の移動度を測定することによってコレステロール値を求める（米国特許第４，８３６，２０７号参照）。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
これまで検討されている方法では眼球のガラス体、水晶体、房水などからの情報が中心となっている。しかし、本発明者は、角膜からの情報には眼球の他の部分からの情報では得られない特異的な性質のあることを見出している（第１９回角膜カンファレンス、プロクラム・抄録集、１２２「糖尿病網膜症患者の角膜自然蛍光に与える血糖値変化の影響」参照）。
そこで、本発明は角膜からの光学的な情報を選択的に取り出すことによって、病気の診断に有効な種々の眼内物質を測定する装置を提供することを目的とするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明の測定装置は、眼球軸を固定するために励起光学系の光源とは別の可視光を発生する眼球軸固定用の光源を備えてその光源からの光ビームを眼球に入射させる眼球軸固定用光学系を備えており、眼球を測定用の所定の位置に固定し眼球軸を測定用の方向に固定した状態で、励起光ビームが角膜のみに入射し水晶体にも房水にも入射しないように角膜上で受光光学系の光軸と交わり、眼球軸と約４０〜９０°をなす位置関係に配置された励起光学系と、励起光学系の光軸とは空間的に異なった受光軸をもち、角膜から発生する測定光を他の眼球部分から発生する測定光と区別して導くためのスリット、光ファイバレンズアレイ又はレンズからなる光学素子、及びその光学素子により導かれた角膜から発生する測定光の光路上に配置された光電変換素子を少なくとも有する光検出器を備えた受光光学系とを備えており、励起光学系から角膜に励起光ビームを照射し、角膜から発生する測定光を他の部分から発生する光と区別して受光光学系で検出して眼内物質を測定するものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】
受光光学系は眼球から発生する測定光を分光する分光手段をさらに備えていることが好ましい。分光手段は、例えば角膜から発生する測定光を他の眼球部分から発生する測定光と区別して導く光学素子と光検出器との間に備えられ、光検出器はその分光手段により分光された測定光を検出するように配置される。分光手段が波長分散型でない場合には、上記の光学素子の光入射側に配置することもできる。
【０００８】
測定時は眼球軸を特定の方向、例えば受光光学系の光軸方向又はその光軸方向と一定の角度を保つように固定するために、励起光学系の光源とは別に、可視光を発生する眼球軸固定用の光源を備えてその光源からの光ビームを眼球に入射させる眼球軸固定用光学系がさらに設けられている。
眼球軸固定用光学系は、眼内物質を測定しようとする眼球側に設けてもよく、眼内物質を測定しない他方の眼球側に設けてもよい。
眼球軸を固定しない場合には、眼球軸が測定に適した所定の方向になったときに測定を行なうことができるようになっていることが好ましい。そのために、眼球の方向を監視するモニタとしてＣＣＤ固体撮像装置などの二次元固体撮像素子を設け、その二次元固体撮像素子により受光光学系の光検出器の出力を取り込むことができるようにしてもよい。
【０００９】
本発明では励起光ビームが水晶体に入射しないように励起光学系を配置する。眼球を測定用の所定の位置に固定し眼球軸を測定用の方向に固定した状態で、励起光学系の光軸が角膜上で眼球軸と交わるように励起光ビームを入射させる場合には、入射光ビームが瞳孔を経て水晶体に入射しないようにするために、眼球軸と交わる角度を約４０〜９０°に設定する。瞳孔の大きさは個人差があるので、その角度の下限値の約４０°は被検者により変動するが、励起光ビームが水晶体に入射しないようにする下限の角度の意味である。
【００１０】
受光光学系の光検出器としては、単一の光電変換素子、ＣＣＤセンサやフォトダイオードアレイなどの一次元固体撮像素子、及びＣＣＤ固体撮像装置などの二次元固体撮像素子のいずれも用いることができる。
光検出器が一次元固体撮像素子である場合には、一次元固体撮像素子は励起光学系の光軸と受光光学系の受光軸とを含む平面内で受光光学系の受光軸と所定の角度をなす直線に沿って光電変換素子が配列されるように配置し、角膜から発生する測定光を他の眼球部分から発生する測定光から区別して導く光学素子により、励起光学系の光軸と受光光学系の光軸とを含む平面が眼球と交差する位置と一次元固体撮像素子の光電変換素子の位置とを対応づけることができる。
【００１１】
そのような光学素子は、スリット、光ファイバレンズアレイ又はレンズにより構成することができる。スリットは、受光光学系の光軸に平行で励起光学系の光軸と受光光学系の光軸とを含む平面に直交する方向の複数の薄板を、励起光学系の光軸と受光光学系の光軸とを含む平面内の受光光学系の光軸と直交する方向に配列して実現することができる。光ファイバレンズアレイは収束性ロッドレンズアレイやセルフォックレンズアレイとも呼ばれ、光ファイバを受光光学系の光軸に平行に配置し、励起光学系の光軸と受光光学系の光軸とを含む平面内で受光光学系の光軸と直交する方向に配列したものである。レンズは眼球軸付近の角膜上の像を光検出器上に結像させるものである。
【００１２】
この場合、分光手段としては眼球上の位置と一次元固体撮像素子の光電変換素子の位置との対応関係を維持したままで分光できることが必要であり、そのような分光手段としてはＦＴ（フーリエ変換型分光器）、フィルタ、ＡＯＴＦ（音響光学フィルタ）を採用することができ、一次元固体撮像素子と光学素子との間に配置する。
【００１３】
光検出器が一次元固体撮像素子である場合には、その入射側に設けられた光学素子により、入射光と眼球上の位置とを対応ずけることができ、眼球のどの部分からの情報であるかを識別することができて、眼内物質をより正確に測定することができる。
【００１４】
光検出器が一次元固体撮像素子である場合で、角膜上で励起光学系の光軸と受光光学系の光軸とが交差する点から発生する光のみを受光する場合には、ＦＴ、ＡＯＴＦ又は回折格子を一次元固体撮像素子と組み合わせ、１点からの測定光をその一次元固体撮像素子の光電変換素子の配列方向に波長分散させることによって、分光した多波長を同時に検出できるポリクロメータを構成することができる。
【００１５】
光検出器が単一の光電変換素子である場合、光検出器としてはフォトダイオードを用いることができる。この場合、受光光学系には角膜上で励起光学系の光軸と受光光学系の光軸とが交差する点から発生する光のみを光検出器に入射させる光学素子を設ける。そのような光学素子はスリット、光ファイバレンズアレイ又はレンズにより構成することができる。分光手段としてはＦＴ（フーリエ変換型分光器）、フィルタ、ＡＯＴＦ（音響光学フィルタ）のほか、分散型回折格子も用いることができる。
【００１６】
光検出器が二次元固体撮像素子である場合、受光光学系の光学素子は励起光学系の光軸と受光光学系の受光軸とを含む平面が眼球と交差する位置と二次元固体撮像素子の一列の光電変換素子配列上の位置とを対応づけることができる。そのような光学素子もスリット、光ファイバレンズアレイ又はレンズにより構成することができる。この場合の分光手段は、光電変換素子配列と直交する方向に波長分散させて分光する多チャンネル分光器とすることができ、眼球上の複数の位置から発生した測定光をそれぞれ独立して分光して検出することができる。
また、光検出器が二次元固体撮像素子である場合には、眼球から発生した測定光を検出するとともに、眼球の方向を監視するモニタの機能も兼ねることができる。
【００１７】
励起光学系から眼球に照射される励起光ビームは、可視から近赤外領域の単色化された又は単一波長のビームである。そのような励起光ビームを発生させる励起光学系の一例は、タングステンランプやハロゲンランプのように連続した波長の励起光を発生する白熱ランプの光源と、その光源からの光を単色化するフィルタなどの波長選択手段とを備えている。その励起光を励起光学系の光軸に沿った平行光とする場合には励起光学系にさらにスリットを備えている。
【００１８】
他の励起光学系の例は、可視から近赤外領域の単一波長の励起光を発生するレーザ装置を光源として備えたものである。レーザ装置として半導体レーザを使用した場合は、ビームが発散するので、励起光を励起光学系の光軸に沿った平行光とするためにレンズやスリットが必要となる。半導体レーザが複数の波長光を発振する場合は特定の波長光を選択する光学フィルタなどの波長選択手段が必要になる。
【００１９】
受光する光がラマン散乱光や螢光である場合、励起光ビームが単色光又は単一波長光である場合にはデータ処理が容易になる。また励起光が近赤外光である場合には目が瞳孔反応をしないため、散瞳剤を投与する必要がなく、測定が容易になる。励起光ビームを平行光とすることにより、角膜の微小部を測定したり、面積積分を行なう上で好都合である。
励起光ビームを角膜の１点のみに照射する場合には、励起光を角膜上に集光させる集光レンズを励起光学系に設ければよい。
【００２０】
励起光学系の励起光ビームの光軸にビームスプリッタが設けられ、そのビームスプリッタにより取り出された励起光の一部が光検出器の一部の光電変換素子又は他の光検出器に入射され、その光電変換素子又は光検出器の出力により眼球からの測定光を受光した光検出器の出力が補正されるようにすれば、励起光の変動があっても散乱光や蛍光を正確に測定することができるようになる。
【００２１】
励起光学系及び受光光学系を、顔面に装着できるゴーグル状構造物内に一体的に収納することができ、その場合には、測定を手軽に行うことができる。
そのゴーグル状構造物内には、受光光学系により測定されたデータを含む情報を外部のデータ処理装置へ出力できる伝送回路をさらに設けることができる。測定データを伝送する伝送回路は無線、有線、光パルスなど種々の手段により実現することができる。
【００２２】
測定される眼内物質の第１は糖類であり、そのうち、グルコースに対しては励起波長からのシフト波数にして４２０〜１５００ｃｍ−１又は２８５０〜３０００ｃｍ−１、好ましくは４２０〜４５０ｃｍ−１，４６０〜５５０ｃｍ−１，７５０〜８００ｃｍ−１，８５０〜９４０ｃｍ−１，１０００〜１０９０ｃｍ−１，１０９０〜１１７０ｃｍ−１，１２００〜１３００ｃｍ−１，１３００〜１３９０ｃｍ−１，１４００〜１５００ｃｍ−１又は２８５０〜３０００ｃｍ−１にあるラマン散乱ピークを用いて定量することができる。グルコース（ブドウ糖）は血糖ともよばれ、糖尿病の診断や病態の推移を知る上で最も重要な情報を与えるものである。
【００２３】
他の糖類についても測定することができる。例えば、イノシトールに対しては励起波長からのシフト波数にして４００〜１５００ｃｍ−１又は２９００〜３０５０ｃｍ−１、好ましくは４００〜５００ｃｍ−１，７００〜９００ｃｍ−１，１０００〜１１００ｃｍ−１，１２００〜１５００ｃｍ−１又は２９００〜３０５０ｃｍ−１にあるラマン散乱ピークを用いて定量することができる。
【００２４】
フルクトースに対しては励起波長からのシフト波数にして５５０〜１５００ｃｍ−１又は２９００〜３０５０ｃｍ−１、好ましくは５５０〜６２０ｃｍ−１，６５０〜７００ｃｍ−１，７８０〜８７０ｃｍ−１，９００〜９８０ｃｍ−１，１０００〜１１５０ｃｍ−１，１２００〜１３００ｃｍ−１，１４００〜１４８０ｃｍ−１又は２９００〜３０５０ｃｍ−１にあるラマン散乱ピークを用いて定量することができる。
【００２５】
ガラクトースに対しては励起波長からのシフト波数にして４００〜１５００ｃｍ−１又は２８５０〜３０５０ｃｍ−１、好ましくは４５０〜５５０ｃｍ−１，６３０〜９００ｃｍ−１，１０００〜１１８０ｃｍ−１，１２００〜１２９０ｃｍ−１，１３００〜１３８０ｃｍ−１，１４００〜１５００ｃｍ−１又は２８５０〜３０５０ｃｍ−１にあるラマン散乱ピークを用いて定量することができる。
ソルビトールに対しては励起波長からのシフト波数にして３８０〜１５００ｃｍ−１又は２７００〜２９６０ｃｍ−１、好ましくは３８８〜４８８ｃｍ−１，７４９〜８６２ｃｍ−１，９３３〜１１２０ｃｍ−１，１３８０〜１４６４ｃｍ−１又は２７３１〜２９６０ｃｍ−１にあるラマン散乱ピークを用いて定量することができる。
【００２６】
測定される眼内物質の第２は脂質であり、そのうちのレシチン（ホスファチジルコリン）に対しては４５０〜６５０ｎｍの蛍光スペクトルのスペクトル強度又はその範囲内の適当な波長範囲のスペクトルの積算値を用いて定量することができる。
【００２７】
測定される眼内物質の第３はビリルビンであり、励起波長からのシフト波数にして５００〜５４０ｃｍ−１，６７０〜７１０ｃｍ−１，９００〜９８０ｃｍ−１，１２２０〜１３００ｃｍ−１，１３１０〜１３３０ｃｍ−１，１４００〜１５００ｃｍ−１又は１５５０〜１６７０ｃｍ−１にあるラマン散乱ピークを用いて定量することができる。
【００２８】
測定される眼内物質の第４は糖化タンパクであり、そのうちの糖化アルブミンに対しては６４０〜８５０ｎｍの蛍光スペクトルのスペクトル強度又はその範囲内の適当な波長範囲のスペクトルの積算値を用いて定量することができる。
【００２９】
測定される眼内物質の第５はＡＧＥ（Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｇｌｙｃａｔｅｄ  Ｅｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔ）である。ＡＧＥについても同様に測定し、定量することができる。ＡＧＥは後期段階生成物とよばれ、アミノ酸、ペプチド、タンパク質などのアミノ基が還元糖のカルボニル基と反応する非酵素的糖化反応（グリケーション）の後期段階の生成物であり、糖尿病性慢性合併症による臓器障害と関連するものとして注目されている物質である。
測定される眼内物質の第６は糖化クリスタリンである。糖化クリスタリンについても同様に測定し、定量することができる。
これらの眼内物質は体内に存在している物質である。それに対し、眼球からの蛍光を測定する従来の方法では、ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ−Ｎａを静脈に注射した後に行なうのが一般的である。本発明はそのような対外から注入された蛍光物質を測定する装置としても利用することができる。そこで、測定される眼内物質の第７は対外から注入された蛍光物質であり、そのような蛍光物質としてｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ−Ｎａを挙げることができる。
【００３０】
測定される眼内物質が糖類、脂質、ビリルビン、糖化タンパク、ＡＧＥ、糖化クリスタリンなどからの少なくとも２種類の物質である場合には、それらの物質に選択されたシフト波数のラマン散乱光のピーク強度もしくはピーク面積、又は螢光のスペクトル強度もしくは適当な波長範囲の積算値が用いられ、それらの複数の測定値から多変量解析によりそれぞれの物質の測定値を求めることができる。
【００３１】
多変量解析演算では、主成分回帰分析法（ＰＣＲ法）や部分最小二乗法（ＰＬＳ法）などの多変量回帰分析法を用いてデータ解析を行なう。多変量回帰分析法では、一度に多くのスペクトル強度を用いて回帰分析することができるので、単回帰分析に比べて高い精度の定量分析が可能である。重回帰分析はもっとも多用されているが、多数の試料が必要であり、各波数でのスペクトル強度同士の相関が高い場合にはその定量分析精度は低くなる。一方、多変量回帰分析法であるＰＣＲ法は複数の波数域でのスペクトル強度を互いに無関係な主成分に集約させることができ、さらに不必要なノイズデータを削除することができるので、高い定量分析精度が得られる。またＰＬＳ法は主成分の抽出の際に試料濃度のデータも利用することができるので、ＰＣＲ法と同様に高い定量分析精度を得ることができる。多変量回帰分析に関しては『多変量解析』（中谷和夫著、新曜社）を参考にできる。
【００３２】
種々の変動要因により複雑に変動するスペクトルから必要な情報を引き出すには、コンピューターによるデータ処理が大いに役立つ。代表的な処理法は市販の近赤外装置等に装備されている処理用ソフトウェアにも収容されている。また市販のソフトウェアとしてＣＯＭＯ社のアンスクランバーなどがある。代表的な処理法とは上に挙げた重回帰分析やＰＬＳ法、主成分回帰分析法等である。
【００３３】
定量分析に適用するデータ処理の大きな流れは、▲１▼キャリブレーションモデルの作成、▲２▼キャリブレーションモデルの評価、▲３▼未知試料の定量である。
キャリブレーションを行なうには、適当な数の検量線作成用試料を充分な精度で測定する必要がある。得られたスペクトルは必要に応じて前処理を行なう。代表的な前処理としては、スペクトルの平滑化や微分、正規化があり、いずれも一般的な処理である。
【００３４】
次に、キャリブレーションは、スペクトルデータと目的特性の分析値との間の数学的関係式、すなわちモデルを構築する処理である。モデルの作成は、検量線作成用試料の分析値とスペクトルデータを用い、統計的手法によって行われる。
【００３５】
作成された検量線の未知試料に対する予測の精度を正しく評価するため、評価用試料により、未知試料に対する測定誤差が求められる。検量線の精度が不充分であると判定されたときは、必要に応じて処理法の種類やパラメーターの変更など行い、検量線の修正を行なう。
精度が充分であると認められた検量線は、未知試料の分析に際し、スペクトルデータから目的特性の値を予測する関係式として使用され、未知試料濃度の定量に用いられる。
【００３６】
【実施例】
図１は本発明の測定装置の基本となる構成を概略的に表わしたものである。２は眼球を表わしており、ガラス体４の前方に水晶体６があり、最前方に角膜８がある。角膜８と水晶体６の間には透明な液の房水１０が満たされている。水晶体６と角膜８の間には虹彩１１があり、虹彩１１の中央開口部が瞳孔である。３は眼球軸を表わしている。
【００３７】
励起光学系１２はタングステンランプなどの白熱ランプを光源１４として備えており、励起光学系１２の光軸１６上には光源１４から発生する励起光を集光させるレンズ１８、励起光から狭い波長範囲を取り出して単色化する光学フィルタ２０が設けられている。光学フィルタ２０は複数枚、図の例では３枚が配置されており、所望の励起光ビーム波長に応じて切り換えることができるようになっている。光学フィルタ２０とレンズ１８の間に設けられたスリット２２と、光学フィルタ２０よりも出射側に設けられた複数枚のスリット２４によって励起光ビームを０.１〜２ｍｍの直径の細い平行ビームに調整している。
【００３８】
一方、受光光学系３０はその受光軸３１が励起光学系の光軸１６とは空間的に異なり、角膜８上で励起光学系の光軸１６と交わる位置に配置されている。励起光学系の光軸１６と受光光学系の受光軸３１とのなす角θは、励起光ビームが瞳孔を経てレンズ体６に入射しないように設定されており、眼球軸３が受光光学系の光軸３１と一致するように眼球が固定されたときには、その角θは４０〜９０°である。図１の例ではθは４５°である。
【００３９】
眼球軸３が受光光学系の光軸３１と一致するように、眼球軸３を固定するために、可視光を発生する光源３２と、その光源３２からの光を細い光束にするスリット３３と、スリット３３により調整されたビームを光軸３１上に乗せて眼球２に入射させるためのハーフミラー３４とを備えた光学系が設けられている。
【００４０】
受光光学系３１は、その光軸３２上に光検出器としてＣＣＤセンサ又はフォトダイオードアレイなどの一次元固体撮像素子３５が配置されている。一次元固体撮像素子３５は一列に配列されたＣＣＤ光電変換素子配列を備え、その光電変換素子配列の方向は、励起光学系の光軸１６と受光光学系の光軸３１とを含む平面内で受光光学系の光軸３１と直交する直線に沿った方向である。一次元固体撮像素子３５の光電変換素子配列のピッチは、例えば１２５μｍである。
【００４１】
一次元固体撮像素子３５の光入射側には、角膜８から発生する測定光を他の眼球部分から発生する測定光から区別して光検出器３５に入射させうる光学素子として、スリット３６が配置されている。スリット３６は、受光光学系の光軸３１に平行で励起光学系の光軸１６と受光光学系の光軸３１とを含む平面に直交する方向の複数の薄板を、励起光学系の光軸１６と受光光学系の光軸３１とを含む平面内の受光光学系の光軸３１と直交する方向に配列したものであり、励起光学系の光軸１６と受光光学系の光軸３１とを含む平面が眼球と交差する位置と一次元固体撮像素子３５の光電変換素子の位置とを対応づける。スリット３６は、そのピッチが一次元固体撮像素子３５の光電変換素子ピッチと対応していることが好ましく、スリット３６の深さＤは５〜３０ｍｍである。
【００４２】
スリット３６と一次元固体撮像素子３５の間にはＦＴ、フィルタ又はＡＯＴＦなどの分光手段３７が配置されており、眼球２からの測定光を分光できるようになっている。ＦＴ、フィルタ又はＡＯＴＦなどの分光手段３７は、記号３７’で示されるようにスリット３６への測定光入射側に配置してもよい。
【００４３】
図１の測定装置の動作を説明する。励起光ビームが角膜８から房水１０に入射し、角膜８及び房水１０から発生した散乱光及び螢光の測定光は、スリット３６によって光軸３１に平行な成分のみが分光手段３７を経て分光されて一次元固体撮像素子３５に入射する。スリット３６が設けられていることによって一次元固体撮像素子３５の光電変換素子の位置と眼球２での測定光発生位置とが対応し、どの位置からの情報であるかを識別することができる。特に、光軸３１上のＣＣＤ光電変換素子の検出信号は角膜８から発生した散乱光及び螢光に関する情報であり、眼内物質の測定に重要な情報を含んでいる。他の場所のＣＣＤ光電変換素子による検出信号には房水１０からの散乱光及び螢光が含まれている。
【００４４】
分光手段３７として回折格子を用いることもできる。スリット３６によって角膜上の１点からの光を測定する場合には、スリット３６を透過した光を回折格子に導いて波長分散させ、その分散方向に光電変換素子が配列されるように一次元固体撮像素子３５を配置すれば、ポリクロメータとなって、角膜上の１点からの光を分光して多波長にわたって同時に検出することができる。
【００４５】
光検出器として二次元固体撮像素子を用いた場合には、分光手段３７として多チャンネル分光器を用いることができる。この場合、対応スリット３６を経てその分光器に入射する１列の測定光が眼球上の位置と対応したものとなる。分光器への入射する測定光の配列方向と直交する方向に波長分散させることにより、眼球上の複数の位置からの測定光を同時に分光しそれぞれの多波長にわたって同時に検出できるようになる。
【００４６】
図２は、角膜から発生する測定光を他の眼球部分から発生する測定光から区別して光検出器に入射させうる光学素子として、図１のスリット３６に代わる他の例を示したものである。（Ａ）は光ファイバレンズアレイ４０を用いたものであり、その光ファイバのビッチも一次元固体撮像素子３５の光電変換素子ビッチに対応したものであることが好ましい。（Ｂ）はレンズ４２を用いたものである。レンズ４２により角膜８上の像が一次元固体撮像素子３５上に結像され、角膜及び房水での測定光発生位置が一次元固体撮像素子３５上では逆方向に配列される。
受光光学系３０の光検出器としては、一次元固体撮像素子３５に代えて単一の光電変換素子からなるフォトダイオードを用いることもできる。
【００４７】
図３は光源強度の変動を補正する手段を備えた構成例を表わしたものである。励起光学系の光軸１６上にハーフミラー４４が配置され、励起光の一部が一次元固体撮像素子３５の一部の光電変換素子に直接入射される。その励起光ビームを受光した光電変換素子３５ａの検出信号により一次元固体撮像素子３５の他の部分の光電変換素子が受光した角膜その他の部分からの検出信号を割算して正規化することにより、光源強度の変動分を補正して正確な測定値を得ることができる。
【００４８】
図４は一実施例であり、図１の構成において、励起光学系の光軸１６と受光光学系の光軸３１とのなす角θを９０°としたものである。この場合、励起光ビームは角膜８のみを照射することができ、受光光学系では角膜８からの散乱光と螢光などの測定光のみを受光して、角膜８からの情報のみを得ることができる。
【００４９】
図５は本発明をゴーグル状構造物内に一体化した実施例を表わしたものであり、（Ａ）は内部の光学系の配列を示す平面図、（Ｂ）は内部の光学系の配列を示す受光光学系側の側面図、（Ｃ）は眼球側からみた斜視図である。ゴーグル状構造物５０内には図４に示されたような励起光学系１２と受光光学系３０が配置されている。励起光学系１２では励起光源として小型化に有利な半導体レーザを用いる。また、光源の駆動や光検出器の駆動を行い、光検出器が検出した信号を外部へ伝送する伝送回路などもゴーグル状構造物５０内に備えている。制御部５２はそのような駆動部や伝送回路を含んだものである。
【００５０】
図６から図１３により、本発明で測定しようとする眼内物質のラマン散乱スペクトル及び螢光スペクトルの例を示す。いずれも励起光は６３２.８μｍのＨｅ−Ｎｅレーザ光である。
【００５１】
図６はグルコースのラマン散乱スペクトルであり、励起波長からのシフト波数にして４２０〜４５０ｃｍ−１，４６０〜５５０ｃｍ−１，７５０〜８００ｃｍ−１，８５０〜９４０ｃｍ−１，１０００〜１０９０ｃｍ−１，１０９０〜１１７０ｃｍ−１，１２００〜１３００ｃｍ−１，１３００〜１３９０ｃｍ−１，１４００〜１５００ｃｍ−１及び２８５０〜３０００ｃｍ−１の位置にピークが存在する。それらのピークの中心波数は、４３８ｃｍ−１，５３０ｃｍ−１，７７６ｃｍ−１，９１７ｃｍ−１，１０８７ｃｍ−１，１１０３ｃｍ−１，１２９８ｃｍ−１，１３７３ｃｍ−１，１４６１ｃｍ−１及び２９０７ｃｍ−１である。
【００５２】
図７はイノシトールのラマン散乱スペクトルであり、励起波長からのシフト波数にして４００〜５００ｃｍ−１，７００〜９００ｃｍ−１，１０００〜１１００ｃｍ−１，１２００〜１５００ｃｍ−１及び２９００〜３０５０ｃｍ−１の位置にピークが存在する。それらのピークの中心波数は、４４３．８５２ｃｍ−１，８６４．７４３ｃｍ−１，１０７４．３７ｃｍ−１，１４６８．０６ｃｍ−１及び２９９５．５９ｃｍ−１である。
【００５３】
図８はフルクトースのラマン散乱スペクトルであり、励起波長からのシフト波数にして５５０〜６２０ｃｍ−１，６５０〜７００ｃｍ−１，７８０〜８７０ｃｍ−１，９００〜９８０ｃｍ−１，１０００〜１１５０ｃｍ−１，１２００〜１３００ｃｍ−１，１４００〜１４８０ｃｍ−１及び２９００〜３０５０ｃｍ−１の位置にピークが存在する。それらのピークの中心波数は、５９９．０９３ｃｍ−１，６８８．４８２ｃｍ−１，８０２．１７５ｃｍ−１，９６３．９８２１ｃｍ−１，１０７４．３７ｃｍ−１，１２６７．３８ｃｍ−１，１４６８．０６ｃｍ−１及び２９９５．５９ｃｍ−１である。
【００５４】
図９はガラクトースのラマン散乱スペクトルであり、励起波長からのシフト波数にして４５０〜５５０ｃｍ−１，６３０〜９００ｃｍ−１，１０００〜１１８０ｃｍ−１，１２００〜１２９０ｃｍ−１，１３００〜１３８０ｃｍ−１，１４００〜１５００ｃｍ−１及び２８５０〜３０５０ｃｍ−１の位置にピークが存在する。それらのピークの中心波数は、４９５．８８４ｃｍ−１，８６４．７４３ｃｍ−１，１０６２．１７ｃｍ−１，１２６７．３８ｃｍ−１，１３６２．３８ｃｍ−１，１４６８．０６ｃｍ−１及び２９７６．０２ｃｍ−１である。
【００５５】
図１０はソルビトールのラマン散乱スペクトルであり、励起波長からのシフト波数にして388〜488ｃｍ-1，749〜862ｃｍ-1，933〜1120ｃｍ-1，1380〜1464ｃｍ-1及び2731〜2960ｃｍ-1の位置にピークが存在する。それらのピークの中心波数は、438ｃｍ-1，821ｃｍ-1，1414ｃｍ-1，1600ｃｍ-1付近及び2893ｃｍ-1である。
【００５６】
図１１は糖化アルブミンの蛍光スペクトルであり、６４０〜８５０ｎｍにピークをもっている。濃度が６１．１％、３３．３％、２４．８％の水溶液試料を測定したものであり、高濃度のものほどスペクトル強度が大きくなっている。
【００５７】
図１２はジタウロビリルビンのラマン散乱スペクトルであり、励起波長からのシフト波数にして５００〜５４０ｃｍ−１，６７０〜７１０ｃｍ−１，９００〜９８０ｃｍ−１，１２２０〜１３００ｃｍ−１，１３１０〜１３３０ｃｍ−１，１４００〜１５００ｃｍ−１及び１５５０〜１６７０ｃｍ−１の位置にピークが存在する。それらのピークの中心波数は、５２０ｃｍ−１，６８８ｃｍ−１，９４０ｃｍ−１，１２５０ｃｍ−１，１３２０ｃｍ−１，１４４５ｃｍ−１及び１６１５ｃｍ−１である。
図１３はレシチンの蛍光スペクトルであり、４５０〜６５０ｎｍにピークをもっている。
【００５８】
【発明の効果】
本発明では角膜のみに励起光を照射し、角膜からの散乱光や蛍光を他の眼球部分からの散乱光や蛍光から区別して検出できるように励起光学系と受光光学系とを配置したので、角膜からの光学的な情報を基にして眼内物質を測定することができ、糖尿病その他の病気の診断などに有益な情報を非侵襲に得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の基本となる測定装置の構成を示す概略平面断面図である。
【図２】同測定装置におけるスリット３６に代わる光学素子を示した概略平面断面図であり、（Ａ）は光ファイバレンズアレイを用いたもの、（Ｂ）はレンズを用いたものである。
【図３】光源強度の変動を補正する手段を備えた測定装置を示す概略平面断面図である。
【図４】励起光学系の光軸と受光光学系の光軸とのなす角を９０°とした一実施例を示す概略平面断面図である。
【図５】光学系をゴーグル状構造物内に一体化した実施例を表わしたものであり、（Ａ）は内部の光学系の配列を示す平面図、（Ｂ）は内部の光学系の配列を示す受光光学系側の側面図、（Ｃ）は眼球側からみた斜視図である。
【図６】グルコースのラマン散乱スペクトルを示す図である。
【図７】イノシトールのラマン散乱スペクトルを示す図である。
【図８】フルクトースのラマン散乱スペクトルを示す図である。
【図９】ガラクトースのラマン散乱スペクトルを示す図である。
【図１０】ソルビトールのラマン散乱スペクトルを示す図である。
【図１１】糖化アルブミンの蛍光スペクトルを示す図である。
【図１２】ジタウロビリルビンのラマン散乱スペクトルを示す図である。
【図１３】レシチンの蛍光スペクトルを示す図である。
【符号の説明】
２      眼球
３      眼球軸
１２      励起光学系
１４      励起光源
１６      励起光学系の光軸
１８      レンズ
２０      光学フィルタ
２２，２４      スリット
３０      受光光学系
３１      受光光学系の光軸
３２      眼球軸固定用光源
３５      一次元固体撮像素子
３６      スリット
４０      光ファイバレンズアレイ
４２      レンズ
４６      ハーフミラー
５０      ゴーグル状構造物
【図１】
0003592416.tif 000002
【図２】
0003592416.tif 000003
【図３】
0003592416.tif 000004
【図４】
0003592416.tif 000005
【図５】
0003592416.tif 000006
【図６】
0003592416.tif 000007
【図７】
0003592416.tif 000008
【図８】
0003592416.tif 000009
【図９】
0003592416.tif 000010
【図１０】
0003592416.tif 000011
【図１１】
0003592416.tif 000012
【図１２】
0003592416.tif 000013
【図１３】
0003592416.tif 000014