【手続補正書】
【提出日】平成29年10月31日(2017.10.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象においてTR1細胞および/または制御性B細胞の集団を増殖および/または発生させるための、ナノ粒子と疾患に関連する抗原-MHCII複合体とを含む複合体であって、該ナノ粒子が、約1 nm〜約100 nm; 約1 nm〜約50 nm; または約1 nm〜約20 nmもしくは約5 nm〜約100 nmの群から選択される直径を有し、かつ抗原-MHCII複合体とナノ粒子との数の比率が約10:1〜約1000:1である、前記複合体。
【請求項２】
抗原-MHCIIの密度が、前記ナノ粒子の表面積100 nm2あたりpMHC約0.05個〜約25個である、請求項1に記載の複合体。
【請求項３】
前記抗原が、自己免疫応答に関与する自己抗原またはその模倣体に由来し、かつ任意で、該自己抗原が、膵β細胞によって発現される抗原、IGRP、インスリン、GAD、IA-2、またはミエリンオリゴデンドロサイトタンパク質（MOG）に由来するエピトープである、請求項1または2に記載の複合体。
【請求項４】
前記ナノ粒子が、非リポソーム性であり、かつ/または固形コア、好ましくは金もしくは酸化鉄のコアを有する、請求項1〜3のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項５】
前記抗原-MHCIIが、共有結合または非共有結合によって前記ナノ粒子に結合されている、請求項1〜3のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項６】
前記抗原-MHCIIが、サイズが5 kD未満のリンカーを介して共有結合によって前記ナノ粒子に結合されている、請求項1〜4のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項７】
前記ナノ粒子が、生体吸収性かつ/または生体分解性である、請求項1〜6のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項８】
ナノ粒子複合体が、約10:1〜約100:1の抗原-MHCII複合体とナノ粒子との比率を含む、請求項1〜6のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項９】
前記リンカーがポリエチレングリコールを含む、請求項5に記載の複合体。
【請求項１０】
前記抗原-MHCII複合体が異なる、請求項1〜9のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１１】
前記リンカーが異なる、請求項9または10に記載の複合体。
【請求項１２】
担体をさらに含む、請求項1〜11のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１３】
前記担体が薬学的に許容される担体である、請求項12に記載の複合体。
【請求項１４】
抗原-MHCII複合体をナノ粒子上にコーティングするかまたは複合体化させる工程を含む、請求項1〜11のいずれか一項に記載の複合体を作製する、調製する、または得るための方法。
【請求項１５】
有効量の請求項1〜13のいずれか一項に記載の複合体を含む、Tr1細胞および/または制御性B細胞の形成、増殖、および動員をそれを必要とする対象において抗原特異的に促進するための医薬。
【請求項１６】
有効量の請求項1〜13のいずれか一項に記載の複合体を含み、ただし、抗原が自己免疫に関連する自己抗原である、ウイルス感染または自己免疫障害の治療または予防をそれを必要とする対象において行うための医薬。
【請求項１７】
対象が哺乳動物である、請求項15または16に記載の医薬。
【請求項１８】
自己免疫障害が、糖尿病、前糖尿病、多発性硬化症、または多発性硬化症に関連する障害の群より選択され、ただし、抗原が、治療される自己免疫障害に関連する、請求項16または17に記載の医薬。
【請求項１９】
請求項1〜13のいずれか一項に記載の複合体と使用説明書とを含む、キット。
【請求項２０】
鉄アセチルアセトネートを熱分解する工程を含む、酸化鉄ナノ粒子を作製するための方法。
【請求項２１】
前記酸化鉄ナノ粒子が水溶性である、請求項20に記載の方法。
【請求項２２】
熱分解が単一工程の反応を含む、請求項20または21に記載の方法。
【請求項２３】
熱分解が官能化PEG分子の存在下で起こる、請求項20〜22のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
熱分解がベンジルエーテルの存在下で行われる、請求項23に記載の方法。
【請求項２５】
熱分解の温度が、約80〜約300℃、または約80〜約200℃、または約80〜約150℃、または約100〜約250℃、または約100〜約200℃、または約150〜約250℃、または約150〜約250℃である、請求項20または21に記載の方法。
【請求項２６】
熱分解が約1〜約2時間行われる、請求項20〜25のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記ナノ粒子が、検出可能ないかなる分解または凝集もなしにPBS中、約4℃で安定である、請求項20〜26のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ナノ粒子が少なくとも6ヶ月間安定である、請求項27に記載の方法。
【請求項２９】
前記ナノ粒子を磁気カラムで精製する工程をさらに含む、請求項20〜28のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
請求項20〜29のいずれか一項から得られた酸化鉄ナノ粒子とpMHCを接触させる工程を含み、それによってナノ粒子複合体が提供される、ナノ粒子複合体を作製するための方法。
【請求項３１】
前記ナノ粒子を磁気カラムで精製する工程をさらに含む、請求項30に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
一局面において、ナノ粒子複合体を作製する方法は、例えばMiltenyi Biotec LS磁気カラムの使用による、精製工程を含む。
[本発明1001]
対象におけるTR1細胞および/または制御性B細胞の集団の増殖および/または発生において用いるための、ナノ粒子と疾患に関連する抗原-MHCII複合体とを含む複合体であって、該ナノ粒子が、約1 nm〜約100 nm; 約1 nm〜約50 nm; または約1 nm〜約20 nmもしくは約5 nm〜約100 nmの群から選択される直径を有し、かつ抗原-MHCII複合体とナノ粒子との数の比率が約10:1〜約1000:1である、前記複合体。
[本発明1002]
抗原-MHCIIの密度が、前記ナノ粒子の表面積100 nm2あたりpMHC約0.05個〜約25個である、本発明1001の複合体。
[本発明1003]
前記抗原が、自己免疫応答に関与する自己抗原またはその模倣体に由来し、かつ任意で、該自己抗原が、膵β細胞によって発現される抗原、IGRP、インスリン、GAD、IA-2、またはミエリンオリゴデンドロサイトタンパク質（MOG）に由来するエピトープである、本発明1001または1002の複合体。
[本発明1004]
前記ナノ粒子が、非リポソーム性であり、かつ/または固形コア、好ましくは金もしくは酸化鉄のコアを有する、本発明1001〜1003のいずれかの複合体。
[本発明1005]
前記抗原-MHCIIが、共有結合または非共有結合によって前記ナノ粒子に結合されている、本発明1001〜1003のいずれかの複合体。
[本発明1006]
前記抗原-MHCIIが、サイズが5 kD未満のリンカーを介して共有結合によって前記ナノ粒子に結合されている、本発明1001〜1004のいずれかの複合体。
[本発明1007]
前記ナノ粒子が、生体吸収性かつ/または生体分解性である、本発明1001〜1006のいずれかの複合体。
[本発明1008]
ナノ粒子複合体が、約10:1〜約100:1の抗原-MHCII複合体とナノ粒子との比率を含む、本発明1001〜1006のいずれかの複合体。
[本発明1009]
前記リンカーがポリエチレングリコールを含む、本発明1005の複合体。
[本発明1010]
前記抗原-MHCII複合体が同一であるかまたは異なる、本発明1001〜1009のいずれかの複合体。
[本発明1011]
前記リンカーが同一であるかまたは異なる、本発明1009または1010の複合体。
[本発明1012]
治療有効量の前記本発明のいずれかの複合体および担体を含む、組成物。
[本発明1013]
前記担体が薬学的に許容される担体である、本発明1012の組成物。
[本発明1014]
抗原-MHCII複合体をナノ粒子上にコーティングするかまたは複合体化させる工程を含む、前記本発明のいずれかの複合体を作製する、調製する、または得るための方法。
[本発明1015]
Tr1細胞および/または制御性B細胞の形成、増殖、および動員をそれを必要とする対象において抗原特異的に促進するための方法であって、該対象に有効量の本発明1001〜1011のいずれかの複合体または本発明1012もしくは1013の組成物を投与する工程を含む、前記方法。
[本発明1016]
ウイルス感染または自己免疫障害の治療または予防をそれを必要とする対象において行うための方法であって、該対象に有効量の本発明1001〜1011のいずれかの複合体または本発明1012もしくは1013の組成物を投与する工程を含み、ただし、抗原が自己免疫に関連する自己抗原である、前記方法。
[本発明1017]
対象が哺乳動物である、本発明1014〜1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
自己免疫障害が、糖尿病、前糖尿病、多発性硬化症、または多発性硬化症に関連する障害の群より選択され、ただし、抗原が、治療される自己免疫障害に関連する、本発明1015または1017の方法。
[本発明1019]
本発明1001〜1011のいずれかの複合体または本発明1011もしくは1012の組成物と使用説明書とを含む、キット。
[本発明1020]
鉄アセチルアセトネートを熱分解する工程を含む、酸化鉄ナノ粒子を作製するための方法。
[本発明1021]
前記酸化鉄ナノ粒子が水溶性である、本発明1020の方法。
[本発明1022]
熱分解が単一工程の反応を含む、本発明1020または1021の方法。
[本発明1023]
熱分解が官能化PEG分子の存在下で起こる、本発明1020〜1022のいずれかの方法。
[本発明1024]
熱分解がベンジルエーテルの存在下で行われる、本発明1023の方法。
[本発明1025]
熱分解の温度が、約80〜約300℃、または約80〜約200℃、または約80〜約150℃、または約100〜約250℃、または約100〜約200℃、または約150〜約250℃、または約150〜約250℃である、本発明1020または1021の方法。
[本発明1026]
熱分解が約1〜約2時間行われる、本発明1020〜1025のいずれかの方法。
[本発明1027]
前記ナノ粒子が、検出可能ないかなる分解または凝集もなしにPBS中、約4℃で安定である、本発明1020〜1026のいずれかの方法。
[本発明1028]
前記ナノ粒子が少なくとも6ヶ月間安定である、本発明1027の方法。
[本発明1029]
前記ナノ粒子を磁気カラムで精製する工程をさらに含む、本発明1020〜1028のいずれかの方法。
[本発明1030]
本発明1020〜1029のいずれかから得られた酸化鉄ナノ粒子とpMHCを接触させる工程を含み、それによってナノ粒子複合体が提供される、ナノ粒子複合体を作製するための方法。
[本発明1031]
前記ナノ粒子を磁気カラムで精製する工程をさらに含む、本発明1030の方法。