(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的試料の脂質過酸化度を測定する方法であって、当該方法が、当該試料を加熱して熱化学ルミネセンス（ＴＣＬ）を誘発し、次いで、当該ＴＣＬを測定する方法であって、以下の工程、すなわち；
（ａ） 実質的に平坦な底面を具備した前記試料を受け入れるための容器を準備し、
（ｂ） 当該容器に、当該試料を移し、
（ｃ） 当該容器を、熱伝導性が大きな物質から形成されたヒートシンク材と接触せしめ、
（ｄ） 当該容器の底面上にある当該試料を実質的に均質に分散させるために、当該容器を往復運動せしめ、
（ｅ） 当該試料の凍結を招くことなく、また、当該試料から水分を除去し、かつ固相フィルムの連続層を形成するに必要な時間は加熱せずして、当該試料に減圧を負荷して当該試料を乾燥し、
（ｆ） その内部でＴＣＬを誘発するに十分な温度で、当該固相フィルムを加熱し、および
（ｇ） ＴＣＬ強度と時間との間に安定な相関を確立するに十分な時間をかけて、当該ＴＣＬを感知し、そして、その強度を測定する、
工程を含む、ことを特徴とする生物学的試料の脂質過酸化度を測定する方法。
【請求項２】
前記容器が、薄いアルミニウム箔から形成された使い捨て型容器を含み、かつ前記ヒートシンク材がアルミニウム板である請求項１に記載の方法。
【請求項３】
０．３ｍｍ〜０．５ｍｍの厚みの前記連続層を形成するために、少なくとも４０秒間、前記容器を往復運動せしめる請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記減圧の程度が、２ミリバール（ｍｂａｒ）を超えず、かつ前記乾燥時間が、１０分を超えない請求項１乃至３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記固相フィルムが、少なくとも６０℃の温度にて加熱される請求項１乃至４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記ＴＣＬ強度が、少なくとも３００秒間にわたって、４００ｎｍ〜６００ｎｍの範囲で測定される請求項１乃至５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
生物学的試料の脂質過酸化度を測定するための装置であって、当該試料を加熱して当該試料の熱化学ルミネセンス（ＴＣＬ）を誘発し、次いで、当該ＴＣＬを測定するための装置であって、以下の要素、すなわち；
当該試料が移された容器を収容する乾燥室、すなわち、当該試料の凍結を招かず、また、当該試料を加熱せずして、当該試料から水分を除去する排出手段と連絡しており、かつ（ｉ） 熱伝導性が大きな物質から形成されたヒートシンク材、および（ｉｉ）当該容器に運動力を付与するための駆動手段を含む乾燥室；
当該容器を加熱するための加熱手段、および当該乾燥試料のＴＣＬを測定するための手段を具備した加熱室、
ＴＣＬの測定結果を表示するためのデータ表示ユニット、および
当該駆動手段、当該排出手段、当該加熱手段、当該ＴＣＬ測定手段、および当該データ表示ユニットを制御するための制御およびデータ処理ユニット、
を含む、ことを特徴とする生物学的試料の脂質過酸化度を測定するための装置。
【請求項８】
前記容器がアルミニウム箔から形成された使い捨て型容器を含み、かつ前記ヒートシンク材がアルミニウム板であり、そして、当該アルミニウム板が容器を収容するための凹部を有している請求項７に記載の装置。
【請求項９】
前記排出手段が、前記乾燥室内を減圧するための真空ポンプを含む請求項７または８に記載の装置。
【請求項１０】
前記アルミニウム板が、前記乾燥室の土台と前記アルミニウム板とを接続する弾性管状要素によって支持されており、そして、前記駆動手段が、モーターとカムを含む請求項８または９に記載の装置。
【請求項１１】
前記加熱手段が、トランジスターと温度センサーを含み、そして、前記ＴＣＬ測定手段が、光電増倍管を含む請求項７乃至１０のいずれかに記載の装置。
【発明の詳細な説明】
要  約
本願発明は、生物学的流体および組織懸濁液での脂質過酸化の程度を測定するための方法および装置に関し、試料を含んだ脂質を調製し、これを熱に曝すことで試料から熱化学ルミネセンス光を発光せしめ、そして、特殊用途光検出器によって検出可能な量にまでその光量を増大せしめる。  この光を測定することで、過酸化物のおおよその量が決定でき、そして、脂質過酸化の正確な評価が可能となる。
【０００１】
発明の背景
１．発明の分野
本願発明は、生物学的流体、特にヒトの体液および組織懸濁液での脂質過酸化の程度を測定するための方法および装置に関する。  しかしながら、本願発明は、脂質を含んだ他の物質での脂質過酸化の評価にも適用できることを理解されたい。
【０００２】
２．従来技術
酸素は、生命維持に関わる多くの代謝反応において必要とされる。  一般に、不飽和脂肪酸に作用する酸素の活性型（フリーラジカル）は、過酸化脂質を生成する。  酸素分子が二重結合に取り込まれることで、不飽和脂肪酸は酸化される。
この反応において、シス型の二重結合部位は共役二重結合に転化され、これにより、共役二重結合を持ったヒドロペルオキシド型の過酸化脂質が生成される。
【０００３】
感光性酸化反応において酸素分子が飽和または不飽和脂肪酸に直接導入されると、共役二重結合を持った／持たない脂質ヒドロペルオキシドが生成される。
分解および重合反応において、酸化して得られた第一産物としての脂質ヒドロペルオキシドは、異なるタイプの第二の酸化物を生成する。
【０００４】
酸素とその活性中間体は、細胞成分と反応して、分子の分解または失活を招く。
【０００５】
スーパーオキシドラジカル、過酸化水素、過酸化脂質またはこれらの関連物質のような反応性酸素含有物質の化学的または代謝産生を可能とする細胞内または細胞外の条件は、酸化ストレスとして知られている。  通常、細胞の代謝活性によって、酸化ストレスによる副作用は制御または回避できる。  酸化ストレスに対する感受性は、酸化ストレスをもたらす要素と抗酸化体として機能する要素との間での優位差の相対関係による。
【０００６】
フリーラジカルによって引き起こされる膜脂質の過酸化障害は、細胞の損傷に至る決定的なきっかけとして永らく知られていた。  フリーラジカルまたはフリーラジカル開始剤の存在下で、生物学的物質、特に、ポリ不飽和脂質を比較的多く含む細胞膜は、酸化に対して感受的になる。
【０００７】
このように、脂質過酸化のプロセスは、生体膜でのポリ不飽和脂肪酸の喪失、そして、ヒドロペルオキシド、フリーラジカル中間体および他の二次産物の形成に関与する。  必須脂肪酸の過酸化は、生体膜の微細構造を攪乱し、また生体膜の透過性と機能に影響を与えかねない。  脂質過酸化のプロセスが順調に進行すれば、細胞膜の断裂や分解物の放出を招く。  その結果、これらプロセスは、細胞に不可逆的な傷を与える上に、ある一定の傷や疾患の病因の進行を開始および／または促進する。
【０００８】
酸素およびその反応性中間体による副作用は、細胞中にすでに存在する幾つかの抗酸化体防御系、または異なる形態の人工の抗酸化体を外部から導入することで防止できる。
【０００９】
それ故、生物学的流体、特にヒトの体液および組織での脂質過酸化の程度を測定するための、簡便で、感度および信頼性の高い方法は、例えば、栄養失調、遺伝疾患、心臓血管疾患、癌、糖尿病、成人呼吸器疾患症候群（ＡＲＤＳ）などの疾患での様々な病理を研究する上での重要な手段を構成する。
【００１０】
過酸化物が分解すると、化学ルミネセンスの形でエネルギーが放出される。
化学ルミネセンスの強度とヒドロペルオキシドの分解速度との間に相関があることは、すでに周知の事実である。  化学ルミネセンスは、熱化学ルミネセンス（ＴＣＬと略称する）プロセスにおいて熱を加えることで誘発できる。
【００１１】
ＴＣＬの現象は、主に、２つのタイプの基本反応によって引き起こされる。
Ｉ．ジオクサンタン−環状過酸化物の熱分解は、下記の通り進行する。
【００１２】
【化１】
0003586192.tif 000002
【００１３】
ＩＩ．加熱中の脂質ラジカルの酸化は、下記の通り進行する。
【００１４】
【化２】
0003586192.tif 000003
【００１５】
式中、１Ｏ２は一重項酸素、Ｃ＝Ｏ＊は不安定カルボニル化合物、そして、ＲＯＯｏは脂質ペルオキシラジカルである。
【００１６】
双方のタイプの反応は、脂質物質の可能性を示すものであり、この物質は生物学的流体および組織に存在し、フリーラジカル酸化連鎖反応を介して反応して、不安定なカルボニル産物を形成する。
【００１７】
起源を異にするカルボニル断片の不安定性によって、低強度の化学ルミネセンスが、４００〜６００ｎｍの範囲の可視光として検出できる。
【００１８】
脂質過酸化の程度を測定するためのたいていの従来法、例えば、普及が進んでいるＴＢＡ−ＲＳ脂質過酸化試験法は、化学ルミネセンスを利用していない。
【００１９】
宮沢らの米国特許第４，９００，６８０号に記載の方法では、脂質を含む試料を脂質クロマトグラフィーに適用して脂質の等級分けを行い、次いで、発光試薬と接触せしめて脂質ヒドロペルオキシドの含有量に応じた光量で発光させている。
【００２０】
本願発明に最も近いと思われる公知の方法は、本明細書に参考までに取り込んだシュナイザーらのドイツ国公開特許公報第４４２１７９２号に記載の、生物学的流体中のルミネセンスを測定するための方法と装置である。
【００２１】
この公開公報では、生物学的流体の試料調製のための方法が記載されており、その方法は、試料の凍結点から試験試料からルミネセンスを発光させるに十分な温度に至る温度範囲にて、真空下で、試料を加熱することを含んでいる。
【００２２】
残念なことに、これら公知の方法によれば、信頼のおける方法でルミネセンスの強度を測定することも、またＴＣＬの強度と時間との間に安定した相関を確立することも望めない。  その理由は、凍結した試料は連続しておらず、また液相の排出に伴う空隙を含んでいることにある。  他の理由として、比較的緩慢に試料が加熱されるので、ＴＣＬを測定するに十分な時間にわたって試料を留め置けない点が挙げられる。
【００２３】
信頼のおけるＬＰＸの量の測定方法に関連する問題点の解消が、未だ待望されているのである。
【００２４】
３．発明の要旨
本願発明の主たる目的は、上述した問題点を十分に緩和あるいは解消せしめる、ＴＣＬを測定するための方法と装置を提供することにある。
【００２５】
特に、本願発明の主たる目的は、信頼のおけるＬＰＸの測定を可能ならしめ、またＴＣＬの強度と時間との間に安定した相関を確立せしめる、脂質過酸化の程度を測定するための新規で改善された方法と装置を提供することにある。
【００２６】
本願発明の上記および他の目的と利点は、その他の実施態様に関して後述する、本願発明の必須の特徴部分の組み合わせに従って実現することができる。
【００２７】
本願発明の実施態様において、生物学的流体、生物学的組織の懸濁液などでの脂質過酸化を測定する方法、すなわち、前記流体または懸濁液の試料を加熱して、熱化学ルミネセンス（ＴＣＬ）を誘発せしめ、そして、前記ＴＣＬの量を測定できる方法は、以下の一連の工程、すなわち；
（ａ） 前記流体または懸濁液の試料を、実質的に平坦な底面を具備した容器に移し、
（ｂ） 前記容器を昇華室内に入れ、そして、実質的に金属物質からなる支持体の上に置き、
（ｃ） 前記試料が実質的に均質に分散するように、前記容器の底面を介して前記容器を往復運動せしめ、
（ｄ） 前記室内に残留している前記試料を、前記試料から液相を排出するに十分な時間をかけて減圧下にて昇華し、また、乾燥固形残留物からなる実質的に連続なフィルムを前記容器の底面で形成し、
（ｅ） 前記残留物と共に前記容器を処理室に移し、そして、ＴＣＬの誘発と前記残留物によるその放出に十分な温度のプレート上に置き、
（ｆ） ＴＣＬ強度と時間との間に安定な相関を確立するに十分な時間内に、例えば、光学光検知器によって、前記ＴＣＬの感知およびその強度を測定する、工程を含む。
【００２８】
方法に関する好ましい一実施態様によれば、前記容器を薄い金属箔から形成された使い捨て容器とし、また、前記プレートをアルミニウム製とする。
【００２９】
他の好適な実施態様によれば、前記往復運動は、少なくとも４０秒の間に、前記容器の底面を介して前記試料を０．３〜０．５ｍｍの厚みの層として分散する。
【００３０】
その他の好適な実施態様によれば、前記昇華工程は、２ミリバール（ｍｂａｒ）を超えない減圧下で、１０分を超えない時間内で実施される。
【００３１】
さらにその他の好適な実施態様によれば、前記容器を前記プレート上に置く前に、前記容器は少なくとも６０℃にまで加熱される。
【００３２】
そして、方法に関するさらにその他の好適な実施態様によれば、前記ＴＣＬ強度は、少なくとも３００秒の間に、４００〜６００ｎｍの範囲で測定される。
【００３３】
生物学的流体、生物学的組織の懸濁液などでの脂質過酸化を測定するための装置に関する好ましい第一態様によれば、前記流体または懸濁液の試料を加熱することで、熱化学ルミネセンス（ＴＣＬ）を誘発せしめ、そして、前記ＴＣＬの量が測定できるものであり、前記装置は；
（ａ） 容器内で前記試料を均質に分散するための手段と、乾燥固形残留物からなる実質的に連続な薄いフィルムを形成するために前記試料から液相を排出できる昇華手段を具備した昇華室、すなわち、均質に分散するための前記手段が、好ましくは金属物質からからなる支持体を含み、前記支持体が、そこに前記容器を受け入れるための凹部を具備し、そして、前記支持体に往復運動を付与するための駆動手段を具備している昇華室、
（ｂ） 前記容器を置くためのプレート、前記プレートを加熱するための加熱手段、および前記ＣＴＬを検出および測定するための手段を具備した加熱室、
（ｃ） 前記ＴＣＬの測定結果を視覚的表示に供するためのデータ記録ユニット、
（ｄ） 均質に分散するための前記手段、前記駆動手段、前記昇華手段、前記加熱手段、前記ＴＣＬを検出および測定するための前記手段、および前記データ記録ユニットを制御するための制御およびデータ処理ユニット、を含む。
【００３４】
装置の好ましい一実施態様によれば、前記昇華手段は、前記昇華室を減圧することができる真空ポンプを含む。
【００３５】
他の好ましい実施態様によれば、前記支持体は、アルミニウム製のディスクとして形成され、前記ディスクが、前記昇華室の土台と前記ディスクを接続する弾性管状要素によって支持されており、そして、前記駆動手段は、カムを介して前記プレートに往復運動を付与するモーターを含む。
【００３６】
さらにその他の装置の好適な実施態様によれば、前記加熱手段が、トランジスターと温度センサーを含み、そして、ＴＣＬを検出および測定するための前記手段が、光電増倍管を含む。
【００３７】
本願発明の様々な実施態様について簡潔にまとめた。  本願発明とその利点をより良く理解する上で、本願発明の実施態様に関する以下の記載を参照されたい。
【００３８】
好適な実施態様の詳細な説明
図１（ａ）を参照すると、本願発明によるＴＣＬを測定するための装置は、試料調製ユニット１と測定ユニット２を含む。  図１（ｂ）を参照すると、脂質過酸化の量が試験される、少量の、通常は１５０ｍｌの生物学的流体の試料を、通常は直径５ｃｍの平坦な底面を具備した、好ましくは使い捨て可能なキュベットとした容器３に移す。
【００３９】
液体試料を含んだ前述のキュベットを、円筒形の昇華室４、すなわち、昇華室内部を外部から遮蔽するためにＯ−リングシール５をカバー（図示せず）でぴたりと閉じることができる昇華室４とした試料調製ユニットに入れる。
【００４０】
昇華室内部には、ブラケット６’によって昇華室の土台に固定したモーター６が具備されている。  このモーターには、昇華室の土台に設けられた開口７を通された電線を介して電力が供給される。  このモーターのシャフト８は、固定ネジ９’によってシャフトに固定されたカム９を具備している。  支持要素１０の上には、その上面に容器３を収容するための凹部１２が形成された、実質的に平坦なプレート１１が置かれる。  このプレートの下面には、円筒形の穴１３が設けられており、その直径は、その中にカムを入れることができ、そして、モーターによってカムを回転することでプレートに往復運動を付与できる大きさの直径を選択する。
【００４１】
カムによって駆動した時に、プレートが実質的に平坦な往復運動を可能とすべく、支持要素１０は、弾性物質からなる薄い管として形成する。  生物学的流体の試料が入った容器をプレートの凹部１２に入れ、プレートを往復運動せしめるためにモーターを駆動させると、試料が震とうされる。  震とうの振動数と時間は、基本的には、容器の底面に液体試料層が均質に分散するように選択する。  実際問題として、震とう後に０．３〜０．５ｍｍの厚みの試料層を得るためには、震とう作業を４０〜６０秒の間で実施すべきである。  上述した実験的に決定した液体試料層の厚みは、液体試料での好ましくない気泡の発生を回避し、また、以下に詳述する、震とう後に行う乾燥（昇華）工程での気泡による影響を回避する上で必須である。
【００４２】
この震とう工程が適切に実施されれば、来たるべき昇華工程を終えた後に、容器の底面に均質には分散した薄い連続したフィルム形状の乾燥残留物（昇華物）が形成される。
【００４３】
この乾燥（昇華）工程は、減圧された昇華室内で実施され、その減圧状態は、引込口１４を介して昇華室内に連絡している真空ポンプ（図示せず）によってもたらされ、そして維持されている。  引込口１５を介して昇華室内に連絡せしめることで、昇華室内の圧力を測定するための好適な真空感知手段も提供される。  減圧状態を得るに必要な乾燥プロセスに割り当てる適当な時間と、信頼度の高いＴＣＬの測定を可能ならしめる乾燥残留物の良好な性状との間には、ある種のバランスがあることが経験的に知られている。  これらには、残留薄層フィルムでの乾燥物質の量も含まれ、この量は少なくとも９９．９％であり、また昇華中に流体から発生する気泡による空隙は伴わない。
【００４４】
昇華室の気圧を少なくとも２ミリバールにまで減圧するために１〜３分間脱気し、そして、この気圧を少なくとも６〜８分間維持することで、短期間の乾燥プロセスおよび最も信頼度の高いＴＣＬの測定を可能ならしめる乾燥試料で得られる性状に関して、最良の結果が得られることが経験的に知られている。  この目的のために、２０ｍｌ／分の脱気速度と１×１０−３トルの最高圧力の性能を備えた自動真空ポンプが好適に用いることができる。  迅速に乾燥を行うことによる乾燥試料の凍結を回避するために、プレート１１は、熱伝導性の高い物質、例えば、金属物質で作製する。  試料を収容した容器をプレートの凹部１２に移す場合には熱の移動が行えるよう互いに接触せしめること、そして、プレートの高い熱伝導性によって乾燥中に試料の凍結が認められない、ことは容易に理解されよう。  実用面からして、良好な熱伝導性と可削性とを兼ね備えたアルミニウムでプレートを作製するのが好ましい。
【００４５】
しかしながら、他の金属材料または非金属材料であっても、熱伝導性、可削性およびコストが、アルミニウムのそれらと遜色無ければ同様に利用することができる。
【００４６】
乾燥プロセスが終了すれば、真空ポンプを停止し、次いで、昇華室内の気圧を常圧に戻すために、引込口１６を介して昇華室と周囲環境とを連絡せしめる。
【００４７】
カバーを開蓋し、そして、乾燥した試料が収容された容器を、試料調製ユニット１から、そこでＴＣＬが測定される、測定ユニット２内の処理室２０に移す。
【００４８】
この処理室は、光検出手段１８の真下に配置される、凍結試料を収容した容器を置くためのプレート１７、このプレートを加熱するための加熱手段１９、およびこのプレートの温度を測定するための感知手段２１を具備している。
【００４９】
従来周知の方法にあっては、ＴＣＬを誘発するために、プレートに置かれた凍結試料はプレートと一緒に加熱すべきところ、本願発明にあっては、容器が置かれる以前にすでに所定温度域にまで加熱されたプレート上に試料が置かれる。
【００５０】
強力なトランジスターを加熱手段としての利用が、非常に有用であることが明らかになっている。  このトランジスターの温度は、トランジスター本体に添設された温度センサーによって制御される。  このトランジスターの反応時間の短さが故に、ルミネセンス測定を適切に行う上で重要な、安定した温度管理が図れる。  実用面からすれば、容器を処理室内に移してプレートの上に置く前に、このプレートを約６０℃にまで加熱すべきである。
【００５１】
試料の解析は、光検出手段１８、例えば、ＴＣＬの強度を３００〜６５０ｎｍの可視領域で測定できる従来の光電子増倍管によって行うことができる。
【００５２】
高周波ダイオード標準信号発振器２２から出される較正信号は、試料からのＴＣＬ放出の測定前および測定後に測定され、そして、増幅器２３によって増幅される。
【００５３】
増倍管のアノードから出力される信号は増幅され、そして、データ回収末端として機能し、放出されたルミネセンス光の時間と強度も同時に記録するコンピューターに送られる。  得られたＴＣＬ曲線は数学的に処理され、そして、その処理のための二つの主要なパラメーター、すなわち、加熱したプレート上に試料が入った容器が置かれて以後の１２０〜１４０秒の間に測定された、１）ＴＣＬの大きさと２）ＴＣＬ曲線の勾配が得られる。  この時間が経過すれば、測定は終了する。  解析結果の加工および数学的処理は、制御およびデータ処理ユニット２４にて、周知の信号処理方法によって行われる。
【００５４】
ＴＣＬ強度と時間に関する測定結果は、データ記録ユニット２５のコンピュータースクリーンおよび／またはプリンターに表示される。  装置を稼働するに必要な電力を供給するために、電源ユニット２６も設けた。
【００５５】
ここで、図４、５の（ａ）、（ｂ）および後述する限定を意図しない実施例を参照すれば、いかにして本願発明に従ってＴＣＬの測定を行えうるのか、そして、従来の方法と比較して実用面で、これら測定結果がいかに有効に利用できるかが明らかになるであろう。
【００５６】
図４には、昇華した試料をプレートと共に加熱する従来技術の方法に従って測定した、時間に関するＴＣＬ強度の一般的な依存関係が示されている。  この依存関係が、単調な特性を指し示すものではなく、また、二つの区間からなることが容易に理解できよう。  最初の上昇区間は、試料の加熱に関連するものであり、ルミネセンスの開始に対応する。  第二の区間は、試料から放出された幾分かの量のルミネセンスに関連するものである。  この区間のグラフ形状では、ルミネセンスの速度を決定することは難しく、ＴＣＬ強度が時間により大きく変化するようにも見えず、それ故、前述の依存関係の傾向を明確に予測できない。
【００５７】
限定を意図しない以下の実施例１には、急性呼吸器疾患症候群を患った患者での脂質過酸化の程度の測定のために、いかにして本願発明の方法に従ったＴＣＬ測定を使用したかについて記載した。
【００５８】
実施例１
急性呼吸器疾患症候群（ＡＲＤＳ）を患った患者から得た、１２個の気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）の試料について試験を行った。
【００５９】
すべての患者が、肺損傷スコアが２．５を超える重度の肺機能不全を患っており、正圧換気によって機械的に換気されていた。  対照のグループは、正常の呼吸活動が可能な６人の患者から構成されていた。  患者に徹底した腔内処置を施した後に術後ブロックを行い、そして、２〜４時間後に抜管した。  その抜管に先駆けて、ＴＣＬ分析を行った。
【００６０】
１５０ｍｌのＢＡＬＦが入ったキュベットを、装置の昇華室に移し、次いで、プレート上に置き、そして、キュベットの底面を試料が均質に分散するように、水平方向に４０秒間震とうした。  次に、その気圧を２ミリバールにまで低減するために、この昇華室を脱気した。  ０．３ｍｍの厚みを持ったＢＡＬＦの乾燥残留物の比較的薄い連続フィルムがキュベットの底に形成されるまで、この圧力を６〜８分間維持した。  このキュベットを測定室に移し、そして、予め８０℃にまで加熱した加熱用プレートの上に置いた。
【００６１】
市販の光増倍管によって、ＴＣＬの測定を実施した。
【００６２】
測定の結果を、図５（ａ）および（ｂ）に示した。
【００６３】
対照のグループの患者でのＢＡＬＦ ＴＣＬ（図５（ａ））は、下降勾配によって定義されたＴＣＬ強度の降下が特徴であった。  ＡＲＤＳ患者でのＴＣＬ運動曲線（図５（ｂ））は、非常に明確な上昇勾配によって定義されたＴＣＬ強度の素早い上昇が特徴であった。ＴＣＬ強度の雪崩様の増大が、ＡＲＤＳ患者のＢＡＬＦでの高い脂質過酸化（ＬＰｘ）状態と関連していることが認められた。
【００６４】
上記したＴＣＬの測定方法とそれを実行するための装置は、ＬＰｘ生成物として活性反応性カルボニルを測定する上で、実用上、非常に有用である。  簡単な試料調製手順にて素早くデータが取得され、そして、時間との相関関係におけるＴＣＬ強度の確かな予測と、それによる、ＬＰｘに関連した病因に関するより貴重な診断を可能ならしめる。
【００６５】
本願発明は、ＬＰｘの評価が必要とされ、ＴＣＬの測定によりそれが実行される様々な分野、例えば、栄養失調、環境露出、遺伝疾患、癌、肝障害、糖尿病、腎機能不全、不妊症などによって引き起こされる特定疾患の評価、新規形態の抗酸化体の活性評価、酸化などに対する新規医薬物質の耐性評価、に応用することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】（ａ）および（ｂ）は、本願発明に従って脂質過酸化の程度を測定するための装置と、生物学的流体の試料を収容するための容器の概略を示している。
【図２】（ａ）および（ｂ）は、それぞれ、昇華室の縦横断面図と部分断面平面図である。
【図３】本願発明による脂質過酸化の程度を測定するための方法の工程系統図である。
【図４】従来の方法によって得たＴＣＬ強度と時間との相関を示すグラフである。
【図５】本願発明の方法によって確立されたＴＣＬ強度と時間との相関を示す２つの曲線を表している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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