(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
0003547794.tif 000010
（式中、Ａｃはアセチル基であり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は同一もしくは異なって、−ＣＯＣnＨ2n+1〔式中、ｎは１〜７の整数である〕で表される直鎖もしくは分岐アルキルカルボニル基あるいはＨである。但し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のすべてがＨであることはない。) で表されるハリメシンＡ誘導体。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、微細藻類に対して活性なハリメシンＡ誘導体に関するものである。微細藻類に対して活性な抗微細藻類物質は赤潮や湖沼、水路の微細藻類の異常発生の防除あるいは制御をする上で有用である。
【０００２】
【従来の技術】
微細藻類に活性な物質としては、ジクロロフェニルジメチルウレア等の化学合成除草剤が考えられる。また、抗微細藻類物質としてはハリメシンＡが知られている（特願平5-267242号明細書) 。ハリメシンＡはフザリウム sp. FE 71-1が生産するエステル化合物でその構造が最近決定されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、新規で安全な抗微細藻類物質を提供することを目的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明は、一般式（Ｉ）
【０００５】
【化２】
0003547794.tif 000002
【０００６】
（式中、Ａｃはアセチル基であり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は同一もしくは異なって、−ＣＯＣnＨ2n+1〔式中、ｎは１〜７の整数である〕で表される直鎖もしくは分岐アルキルカルボニル基あるいはＨである。但し、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のすべてがＨであることはない。) で表されるハリメシンＡ誘導体である。
以下、本発明を詳細に説明する。
【０００７】
ハリメシンＡ誘導体の代表的な化合物として、
次式(II)で表される化合物１（式(I)におけるＲ1＝Ａｃ，Ｒ2＝Ａｃ，Ｒ3＝Ａｃ，Ｒ4＝Ａｃである化合物）、
【０００８】
【化３】
0003547794.tif 000003
【０００９】
次式(III)で表される化合物２（式(I)におけるＲ1＝Ｐｒ, Ｒ2＝Ｐｒ，Ｒ3＝Ｐｒ，Ｒ4＝Ｐｒである化合物）、
【００１０】
【化４】
0003547794.tif 000004
【００１１】
次式(IV)で表される化合物３（式(I)におけるＲ1＝Ｐｒ, Ｒ2＝Ｐｒ，Ｒ3＝Ｈ，Ｒ4＝Ｐｒである化合物）、
【００１２】
【化５】
0003547794.tif 000005
【００１３】
を例示することができる。
なお、式中のＡｃは−ＣＯＣＨ3、Ｐｒは−ＣＯＣＨ2ＣＨ3を表す。
【００１４】
以下に化合物１の物理化学的性質を示す。
１．物質の色：無色
２．分子量  ：972
0003547794.tif 000006
４．核磁気共鳴シグナル：
１）1Ｈ−ＮＭＲ（CDCl3：CD3OD＝１：１）
0.9 (12H), 1.3 (12H), 1.6 (8H), 2.1 (15H), 2.6 (8H), 4.9 (4H), 5.2 (4H) ppm
２）13Ｃ−ＮＭＲ（CDCl3：CD3OD＝１：１）
14.0, 21.0, 21.1, 21.2, 22.5, 24.8, 31.6, 34.0, 34.1, 37.5, 37.9, 38.0, 39.0, 67.7, 67.9, 68.0, 71.0, 71.4, 71.5, 71.6, 169.6, 169.8, 170.1,  170.2, 170.3, 170.7 ppm
５．赤外吸収スペクトルにおける主な吸収帯（KBr法) ：3448, 2998, 2858,   1744, 1462, 1379, 1243, 1033cm-1
６．比旋光度［α］D26+7.8°(c0.3,クロロホルム）
７．溶解性：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチルおよびクロロホルムに可溶、水には難溶
【００１５】
以下に化合物２の物理化学的性質を示す。
１．物質の色：無色
２．分子量  ：1028
0003547794.tif 000007
４．核磁気共鳴シグナル：
１）1Ｈ−ＮＭＲ（CDCl3：CD3OD＝１：１）
0.9 (12H), 1.1 (8H), 1.3 (12H), 1.6 (8H), 2.1 (15H), 2.3 (4H), 2.6 (8H),4.9 (4H), 5.2 (4H) ppm
２）13Ｃ−ＮＭＲ（CDCl3：CD3OD＝１：１）
14.0, 21.0, 22.5, 24.7, 24.8, 27.6, 31.6, 33.9, 34.0, 34.1, 37.5, 37.9, 38.0, 39.0, 39.1, 67.3, 67.7, 67.9, 70.8, 71.3, 71.4, 71.5, 71.6, 169.6,169.7, 169.8, 170.2, 173.4, 170.3, 173.5, 174.2 ppm
５．赤外吸収スペクトルにおける主な吸収帯（KBr法) ：2934, 1742, 1464,   1377, 1181, 1083cm-1
６．比旋光度［α］D26+4.2°(c0.2,クロロホルム）
７．溶解性：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチルおよびクロロホルムに可溶、水には難溶
【００１６】
以下に化合物３の物理化学的性質を示す。
１．物質の色：無色
２．分子量  ：972
0003547794.tif 000008
４．核磁気共鳴シグナル：
１）1Ｈ−ＮＭＲ（CDCl3：CD3OD＝１：１）
0.9 (12H), 1.1 (8H), 1.3 (12H), 1.6 (8H), 2.1 (15H), 2.3 (4H), 2.6 (8H),4.5 (1H), 4.9 (3H), 5.2 (4H) ppm
５．赤外吸収スペクトルにおける主な吸収帯（KBr法) ：2934, 1742, 1464,   1377, 1181, 1083cm-1
６．比旋光度［α］D26+3.2°(c0.1,クロロホルム）
７．溶解性：メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチルおよびクロロホルムに可溶、水には難溶
【００１７】
生物学的性質
化合物１〜３の珪藻（Skeletonema costatum) に対する最小発育阻止濃度をハリメシンＡと比較して表１に示した。
【００１８】
【表１】
0003547794.tif 000009
【００１９】
本発明のハリメシンＡ誘導体は、上記のような生物学的性質を有するので、船底や海上構造物にスライムを形成する微細藻類の防汚染、微細藻類を主とする赤潮の駆除に用いることができる。
【００２０】
次に本発明のハリメシンＡ誘導体の製造法について説明する。
ハリメシンＡ誘導体は、ハリメシンＡの水素原子を適当な官能基で置換することにより得られる。ここで用いるハリメシンＡは、特願平5-267242号明細書記載の方法により製造することができる。即ち、フザリウム・スピーシーズ FE 71-1（FERM P-13910）等の菌株を培地中で培養し、培養物を適当な手段で精製することにより得られる。このようにして得られたハリメシンＡと一般式ＣnＨ2n+1ＣＯＯＨ(式中ｎは１〜７の整数である）で表されるカルボン酸の無水物あるいはアシルハライドとを活性水素原子を持たない有機溶媒中で塩基の存在下、−10〜50℃で10分〜24時間反応させることによりハリメシンＡ誘導体が得られる。
【００２１】
ここで活性水素原子をもたない有機溶媒としてはクロロホルム、ジクロロメタン、ジクロロエタン、ベンゼン、トルエン、アセトン、酢酸エチル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメチルホルムアミド等をあげることができる。
塩基としてはピリジン、キノリン、ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、トリベンジルアミン、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等をあげることができるが、これらの中でもピリジンを好適な塩基として挙げることができる。ピリジンのような弱塩基性の溶媒を塩基として用いる場合は他の有機溶媒を用いずに反応を行うことも可能である。
【００２２】
カルボン酸無水物およびアシルハライドの例としては酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸そしてイソ吉草酸の酸無水物、酸クロライド、酸ブロマイド等をあげることができる。これらの化合物の選択により、置換基の異なるハリメシンＡ誘導体を製造することができる。例えば、無水酢酸を使用すれば、化合物１を製造することができ、無水プロピオン酸を使用すれば、化合物２及び化合物３を製造することができる。
【００２３】
なお、化合物１〜３の製造法としては、ピリジン中でハリメシンＡと酸無水物とを20〜40℃で反応することが最も好ましい。反応物は、例えば、ＯＤＳカラムを用いた高速液体クロマトグラフィーなどを用いて精製することができる。
次に実施例を示す。
【００２４】
【参考例】
フザリウム・スピーシーズ FE 71-1株をを、400mlの酵母エキス液体培地 (酵母エキス：0.4g、グルコース：4.0g、海水400ml、ｐＨ＝8.0)を入れた１Ｌ三角フラスコ中で、30℃、５日間振盪 (120r.p.m) 培養した。培養中、培地のｐＨは特に制御しなかった。
【００２５】
このようにして得られた培養液２Ｌを遠心分離した。遠心分離によって得られた上澄み液を、酢酸エチル (４Ｌ) で抽出した。また得られた菌体は、200mlのエチルアルコールで抽出し、濃縮した後、水(200ml) に懸濁させ、酢酸エチル(500ml) によって抽出分配した。上澄み液の酢酸エチル抽出部と菌体から得られた酢酸エチル抽出部を合わせて、40℃以下で減圧濃縮した。得られた濃縮液をクロロホルム−メタノール (15：1, v/v) を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、抗微細藻類活性を有するハリメシンＡ 25mgを得た。
【００２６】
【実施例】
【００２７】
〔実施例１〕
５酸化リン存在下、減圧で１時間乾燥したハリメシンＡ（５mg）をピリジン（２ml）に溶解し、無水酢酸（１ml）を加えて室温（25℃）で30分放置する。反応混合物を窒素気流下で乾燥して、過剰の試薬を除去する。粗精製物を80％アセトニトリルを溶出溶媒とする高速液体クロマトグラフィー（カラム：資生堂カプセルパック C18SG120 15mmφ×250mm)で精製し、化合物１を3.8mg得た。
【００２８】
〔実施例２〕
５酸化リン存在下、減圧で１時間乾燥したハリメシンＡ（５mg）をピリジン（２ml）に溶解し、無水プロピオン酸（１ml）を加えて室温（25℃）で30分放置する。反応混合物を窒素気流下で乾燥して、過剰の試薬を除去する。粗精製物をシリカゲルカラムに付し、クロロホルム−メタノール（10：１）溶出部を、80％アセトニトリルを溶出溶媒とする高速液体クロマトグラフィー（カラム：資生堂カプセルパック C18SG120 15mmφ×250mm)で精製し、化合物２を1.8mg、化合物３を0.7mg得た。
【００２９】
【発明の効果】
本発明によって新規なハリメシンＡ誘導体が提供される。そして、このハリメシンＡ誘導体は、微細藻類の生育抑制活性を有する。