【手続補正書】
【提出日】平成28年12月2日(2016.12.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
モグロシド化合物を製造する方法であって、１または２以上の以下のステップ：
（ａ）オキシド−スクアレンをオキシド−スクアレンの変換を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させてククルビタジエノールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するククルビタジエノールシンターゼを含む；
（ｂ）ジオキシド−スクアレンをジオキシド−スクアレンの変換を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させて２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するククルビタジエノールシンターゼを含む；
（ｃ）ククルビタジエノールをククルビタジエノールのヒドロキシル化を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させて１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｄ）１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールを１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールの変換を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させてモグロールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｅ）１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールを１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールのエポキシ化を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させて１１−ヒドロキシ−２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｆ）１１−ヒドロキシ−２４，２５エポキシククルビタジエノールを１１−ヒドロキシ−２４，２５エポキシククルビタジエノールの変換を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させてモグロールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｇ）ククルビタジエノールをククルビタジエノールのエポキシ化を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させて２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｈ）２４，２５エポキシククルビタジエノールを２４，２５エポキシククルビタジエノールのヒドロキシル化を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させて１１−ヒドロキシ−２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；または
（ｉ）モグロールおよび／またはグリコシル化モグロールをモグロールおよび／またはグリコシル化モグロールのグリコシル化を触媒可能な１または２以上の酵素と接触させてモグロシド化合物を製造すること、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号２１〜２５に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＵＧＴ７３Ｃ３、ＵＧＴ７３Ｃ５、ＵＧＴ７３Ｃ６、ＵＧＴ７３Ｅ１およびＵＧＴ８５Ｃ２ならびに／または配列番号２６〜３６に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＵＧＴ９８、ＵＧＴ１４９５、ＵＧＴ１８１７、ＵＧＴ３４９４、ＵＧＴ５９１４、ＵＧＴ８４６８、ＵＧＴ１０３９１、ＵＧＴ１１７８９、ＵＧＴ１１９９９、ＵＧＴ１３６７９およびＵＧＴ１５４２３を含む；
を含み、これにより、モグロシド化合物を製造する、
前記方法。
【請求項２】
ステップ（ａ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップ（ｂ）、（ｆ）、（ｈ）および（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ステップ（ｃ）、（ｄ）および（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
ステップ（ｆ）、（ｈ）および（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ステップ（ａ）、（ｃ）、（ｅ）、（ｆ）および（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ステップ（ａ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｆ）および（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
モグロシド化合物を単離することをさらに含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
組換え宿主細胞であって、１または２以上の以下の部分：
（ａ）ククルビタジエノールを製造するための、オキシド−スクアレンの変換を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するククルビタジエノールシンターゼを含む；
（ｂ）２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造するための、ジオキシド−スクアレンの変換を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号１に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するククルビタジエノールシンターゼを含む；
（ｃ）１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールを製造するための、ククルビタジエノールのヒドロキシル化を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｄ）モグロールを製造するための、１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールの変換を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｅ）１１−ヒドロキシ−２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造するための、１１−ヒドロキシ−ククルビタジエノールのエポキシ化を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｆ）モグロールを製造するための、１１−ヒドロキシ−２４，２５エポキシククルビタジエノールの変換を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｇ）２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造するための、ククルビタジエノールのエポキシ化を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；
（ｈ）１１−ヒドロキシ−２４，２５エポキシククルビタジエノールを製造するための、２４，２５エポキシククルビタジエノールのヒドロキシル化を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号３〜２０および４１に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＣＹＰ５３３、ＣＹＰ９３７、ＣＹＰ１７９８、ＣＹＰ１９９４、ＣＹＰ２０４８、ＣＹＰ２７４０、ＣＹＰ３４０４、ＣＹＰ３９６８、ＣＹＰ４１１２、ＣＹＰ４１４９、ＣＹＰ４４９１、ＣＹＰ６４７９、ＣＹＰ７６０４、ＣＹＰ８２２４、ＣＹＰ８７２８、ＣＹＰ１００２０、ＣＹＰ１０２８５およびＣＹＰ１０９６９を含む；または
（ｉ）モグロシド化合物を製造するための、モグロールおよび／またはグリコシル化モグロールのグリコシル化を触媒可能な１または２以上の酵素をコードする１または２以上の遺伝子、ここで、１または２以上の酵素は、配列番号２１〜２５に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＵＧＴ７３Ｃ３、ＵＧＴ７３Ｃ５、ＵＧＴ７３Ｃ６、ＵＧＴ７３Ｅ１およびＵＧＴ８５Ｃ２を含み、ならびに／または、配列番号２６〜３６に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有する、ＵＧＴ９８、ＵＧＴ１４９５、ＵＧＴ１８１７、ＵＧＴ３４９４、ＵＧＴ５９１４、ＵＧＴ８４６８、ＵＧＴ１０３９１、ＵＧＴ１１７８９、ＵＧＴ１１９９９、ＵＧＴ１３６７９およびＵＧＴ１５４２３を含む；
ここで、少なくとも１つの遺伝子が、組換え遺伝子であり；および
ここで、組換え宿主細胞が、モグロシド化合物を製造可能である、
を含む、前記組換え宿主細胞。
【請求項１１】
部分（ａ）、（ｃ）、（ｄ）および（ｉ）を含む、請求項１０に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１２】
部分（ｂ）、（ｆ）、（ｈ）および（ｉ）を含む、請求項１０に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１３】
部分（ｃ）、（ｄ）および（ｉ）を含む、請求項１０に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１４】
部分（ｆ）、（ｈ）および（ｉ）を含む、請求項１０に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１５】
部分（ａ）、（ｃ）、（ｅ）、（ｆ）および（ｉ）を含む、請求項１０に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１６】
部分（ａ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｆ）および（ｉ）を含む、請求項１０に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１７】
部分（ｉ）を含む、請求項１０に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１８】
組換え宿主細胞が、スクアレンエポキシダーゼをコードする組換え遺伝子をさらに含む、請求項１０〜１７のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞。
【請求項１９】
組換え宿主細胞が、ラノステロールシンターゼの発現を低減するように改変されている、請求項１０〜１７のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞。
【請求項２０】
請求項１０〜１９のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞であって、組換え宿主細胞が、植物細胞、哺乳動物細胞、昆虫細胞、真菌細胞、藻類細胞または細菌細胞を含み；
ここで、細菌細胞は、Escherichia細胞、Lactobacillus細胞、Lactococcus細胞、Cornebacterium細胞、Acetobacter細胞、Acinetobacter細胞またはPseudomonas細胞を含み；
ここで、真菌細胞は、酵母細胞を含み；
ここで、酵母細胞は、Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pombe、Yarrowia lipolytica、Candida glabrata、Ashbya gossypii、Cyberlindnera jadinii、Pichia pastoris、Kluyveromyces lactis、Hansenula polymorpha、Candida boidinii、Arxula adeninivorans、Xanthophyllomyces dendrorhousまたはCandida albicans種からの細胞であり；または
ここで、酵母細胞は、Saccharomyceteであり；または
ここで、酵母細胞は、Saccharomyces cerevisiae種からの細胞である、
前記組換え宿主細胞。
【請求項２１】
モグロシド化合物を製造する方法であって、以下：
（ａ）請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞を提供すること；および
（ｂ）培養培地中で組換え宿主細胞を増殖させること；
ここで、モグロシド化合物は、組換え宿主細胞によって製造される、
を含む、前記方法。
【請求項２２】
モグロシド化合物を、培養培地および／または組換え宿主細胞から単離することをさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
モグロシド化合物が、Ｃ２４’位、Ｃ３’位またはＣ２４’およびＣ３’位の両方でグリコシル化される、請求項１〜９、２１および２２のいずれか一項に記載の方法または請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞。
【請求項２４】
モグロシド化合物が、モグロシドＩＥ１、モグロシドＩＡ１、モグロシドＩＩＥ、モグロシドＩＩＡ、モグロシドＩＩＩＡ２、モグロシドＩＩＩ、モグロシドＩＶ、モグロシドＩＩＩＡ１、シアメノシドまたはモグロシドＶまたはそれらの混合物である、請求項１〜９、２１および２２のいずれか一項に記載の方法または請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞。
【請求項２５】
糖部分を、モグロールおよび／またはモグロシドのＣ２４’位、Ｃ３’位またはＣ２４’およびＣ３’位の両方へ移動させるための方法であって、モグロールおよび／またはモグロシドへの糖部分の移動に適切な反応条件下、モグロールまたはモグロシドを、モグロールまたはモグロシドおよびＵＤＰ糖のＣ２４’グリコシル化、Ｃ３’グリコシル化またはＣ２４’グリコシル化およびＣ３’グリコシル化の両方が可能な組換えポリペプチドと接触させること；
ここで、モグロシドは、モグロシドＩＡ１、モグロシドＩＥ１、モグロシドＩＩＡ、モグロシドＩＩＥ、モグロシドＩＩＩＡ１、シアメノシド１であり；および
ここで、モグロシドＩＡ１、モグロシドＩＥ１、モグロシドＩＩＡ、モグロシドＩＩＥ、モグロシドＩＩＩＡ１、モグロシドＩＶ、１１−オキソ−モグロシドＶ、シアメノシドＩ、モグロシドＶ、その異性体および／またはそのモグロシド組成物が、糖部分の移動に際し製造される、
を含む、前記方法。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法であって：
（ａ）糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＡ１がグルコース部分のモグロールへの移動に際して製造される；
（ｂ）糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＥ１がグルコース部分のモグロールへの移動に際して製造される；
（ｃ）モグロシドがモグロシドＩＡ１であり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＩＥがグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｄ）モグロシドがモグロシドＩＡ１であり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＩＡがグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｅ）モグロシドがモグロシドＩＥ１であり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＩＥがグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｆ）モグロシドがモグロシドＩＥ１であり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＩＩＡ１がグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｇ）モグロシドがモグロシドＩＩＡであり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＩＩＡ１がグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｈ）モグロシドがモグロシドＩＩＩＡ１であり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、シアメノシド１がグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｉ）モグロシドがシアメノシド１であり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＶがグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｊ）モグロシドがモグロシドＩＩＥであり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＩＶがグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｋ）モグロシドがモグロシドＩＩＥであり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、モグロシドＶがグルコース部分への移動に際して製造される；
（ｌ）モグロシドがモグロシドＩＩＥであり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、１１−オキソ−モグロシドＶがグルコース部分への移動に際して製造される；または
（ｍ）モグロシドがモグロシドＩＩＥであり、ここで、糖部分がグルコースであり、および、シアメノシドＩがグルコース部分への移動に際して製造される、
である、前記方法。
【請求項２７】
請求項２５に記載の方法であって、モグロールまたはモグロシドのＣ２４’グリコシル化、Ｃ３’グリコシル化またはＣ２４’グリコシル化およびＣ３’グリコシル化の両方が可能なポリペプチドが、配列番号２１〜２５に示されるアミノ酸配列に対して少なくとも８０％の同一性を有するポリペプチドおよび／または配列番号２６〜３６に示されるヌクレオチド配列によってコードされたアミノ酸配列に対し少なくとも８０％の同一性を有するポリペプチドを含む、前記方法。
【請求項２８】
細胞培養ブロスであって、以下：
（ａ）請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞；
（ｂ）組換え宿主細胞によって製造される１または２以上のモグロシド化合物；
ここで、１または２以上のモグロシド化合物が、モグロシドＩＥ１、モグロシドＩＡ１、モグロシドＩＩＥ、モグロシドＩＩＡ、モグロシドＩＩＩＡ２、モグロシドＩＩＩ、モグロシドＩＶ、モグロシドＩＩＩＡ１、シアメノシドまたはモグロシドＶまたはそれらの混合物であり；
ここで、１または２以上のモグロシド化合物が、少なくとも０．１ｍｇ／Ｌの細胞培養ブロスの濃度で存在する、
を含む、前記細胞培養ブロス。
【請求項２９】
細胞培養ブロスであって、以下：
（ａ）請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞；
（ｂ）組換え宿主細胞によって製造される１または２以上のモグロシド化合物；
ここで、１または２以上のモグロシド化合物が、モグロシドＩＥ１、モグロシドＩＡ１、モグロシドＩＩＥ、モグロシドＩＩＡ、モグロシドＩＩＩＡ２、モグロシドＩＩＩ、モグロシドＩＶ、モグロシドＩＩＩＡ１、シアメノシドまたはモグロシドＶまたはそれらの混合物であり；
ここで、１または２以上のモグロシド化合物が、少なくとも０．１ｍｇ／Ｌの細胞培養ブロスの濃度で存在し、および、細胞培養ブロスが、グルコースおよび／またはＹＮＢをさらに含む、
を含む、前記細胞培養ブロス。
【請求項３０】
細胞培養ブロスであって、以下：
（ａ）請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞；
（ｂ）組換え宿主細胞によって製造される１または２以上のモグロシド化合物；
ここで、１または２以上のモグロシド化合物が、モグロシドＩＥ１、モグロシドＩＡ１、モグロシドＩＩＥ、モグロシドＩＩＡ、モグロシドＩＩＩＡ２、モグロシドＩＩＩ、モグロシドＩＶ、モグロシドＩＩＩＡ１、シアメノシドまたはモグロシドＶまたはそれらの混合物であり；
ここで、１または２以上のモグロシド化合物が、少なくとも０．１ｍｇ／Ｌの細胞培養ブロスの濃度で存在し、および、細胞培養ブロスが、グルコースおよび／またはＹＮＢをさらに含み；および
ここで、細胞培養ブロスが、請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の遺伝子を欠く組換え宿主細胞を含む細胞培養ブロスに対して、増加したレベルの１または２以上のモグロシド化合物を有する、
を含む、前記細胞培養ブロス。
【請求項３１】
グルコースおよび／またはＹＮＢをさらに含む、請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞によって製造される１または２以上のモグロシド化合物を含む、細胞溶解物。
【請求項３２】
請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞または請求項１〜９、２１および２２のいずれか一項に記載の方法によって製造される、１または２以上のモグロシド化合物。
【請求項３３】
請求項１０〜２０のいずれか一項に記載の組換え宿主細胞または請求項１〜９、２１および２２のいずれか一項に記載の方法によって製造されるモグロシド組成物であって、１または２以上のモグロシドＩＥ１、モグロシドＩＡ１、モグロシドＩＩＥ、モグロシドＩＩＡ、モグロシドＩＩＩＡ２、モグロシドＩＩＩ、モグロシドＩＶ、モグロシドＩＩＩＡ１、シアメノシドまたはモグロシドＶまたはそれらの混合物を含む、前記モグロシド組成物。
【請求項３４】
請求項３２に記載の１または２以上のモグロシド化合物または請求項３３に記載のモグロシド組成物を含む、甘味料組成物。
【請求項３５】
請求項３４に記載の甘味料組成物を含む、食品。
【請求項３６】
請求項３４に記載の甘味料組成物を含む、飲料または飲料濃縮物。