【手続補正書】
【提出日】平成28年12月15日(2016.12.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下：
（ｉ）ヒトジストロフィンプレｍＲＮＡのエキソン５３の標的領域に１００％相補的である２８塩基の長さのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、前記標的領域はアニーリング部位Ｈ５３Ａ（＋３３＋６０）であり、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドはモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、そして、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドは、エキソン５３スキッピングを誘発する、アンチセンスオリゴヌクレオチド；
（ｉｉ）ヒトジストロフィンプレｍＲＮＡのエキソン５３の標的領域に１００％相補的である２８塩基の長さのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、前記標的領域はアニーリング部位Ｈ５３Ａ（＋４６＋７３）であり、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドはモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、そして、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドは、エキソン５３スキッピングを誘発する、アンチセンスオリゴヌクレオチド；
（ｉｉｉ）ヒトジストロフィンプレｍＲＮＡのエキソン５３の標的領域に１００％相補的である２５塩基の長さのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、前記標的領域はアニーリング部位Ｈ５３Ａ（＋２２＋４６）であり、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドはモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、そして、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドは、エキソン５３スキッピングを誘発する、アンチセンスオリゴヌクレオチド；
（ｉｖ）ヒトジストロフィンプレｍＲＮＡのエキソン５３の標的領域に１００％相補的である２４塩基の長さのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、前記標的領域はアニーリング部位Ｈ５３Ａ（＋４６＋６９）であり、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドはモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、そして、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドは、エキソン５３スキッピングを誘発する、アンチセンスオリゴヌクレオチド；および
（ｖ）ヒトジストロフィンプレｍＲＮＡのエキソン５３の標的領域に１００％相補的である２２塩基の長さのアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、前記標的領域はアニーリング部位Ｈ５３Ａ（＋４０＋６１）であり、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドはモルホリノアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、そして、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドは、エキソン５３スキッピングを誘発する、アンチセンスオリゴヌクレオチド；
からなる群より選択される単離されたアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
以下：
（ｉ）塩基配列ＧＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＴＴＣＴＧＡＡＧＧＴＧＴＴＣＴＴＧ（配列番号１）（配列中、チミン塩基は任意選択でウラシルである）を含む２８塩基を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはその薬学的に許容される塩；
（ｉｉ）塩基配列ＡＴＴＴＣＡＴＴＣＡＡＣＴＧＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＴＴＣＴ（配列番号６）（配列中、チミン塩基は任意選択でウラシルである）を含む２８塩基を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはその薬学的に許容される塩；
（ｉｉｉ）塩基配列ＴＧＡＡＧＧＴＧＴＴＣＴＴＧＴＡＣＴＴＣＡＴＣＣＣ（配列番号７）（配列中、チミン塩基は任意選択でウラシルである）を含む２５塩基を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはその薬学的に許容される塩；
（ｉｖ）塩基配列ＣＡＴＴＣＡＡＣＴＧＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＴＴＣＴ（配列番号８）（配列中、チミン塩基は任意選択でウラシルである）を含む２４塩基を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはその薬学的に許容される塩；および
（ｖ）塩基配列ＴＧＴＴＧＣＣＴＣＣＧＧＴＴＣＴＧＡＡＧＧＴ（配列番号９）（配列中、チミン塩基は任意選択でウラシルである）を含む２２塩基を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド、またはその薬学的に許容される塩；
からなる群から選択される、請求項１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項３】
チミン塩基がウラシル塩基である、請求項２に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項４】
配列番号１、６、７、８または９に示されたヌクレオチド配列からなる、請求項２に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項５】
前記アンチセンスオリゴヌクレオチドの活性、細胞分布、または細胞取込みを増強する１つまたは複数の部分または結合体に化学的に連結している、請求項１〜４のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項６】
アルギニンに富んだ細胞透過性ペプチドに結合体化している、請求項１〜４のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項７】
ポリエチレングリコール鎖に化学的に連結している、請求項５に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項８】
前記オリゴヌクレオチドの少なくとも１つのピリミジン塩基が、５−置換ピリミジン塩基を含む、請求項１〜７のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項９】
前記ピリミジン塩基が、シトシン、チミンおよびウラシルからなる群より選択される、請求項８に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項１０】
前記５−置換ピリミジン塩基が、５−メチルシトシンである、請求項８に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項１１】
前記オリゴヌクレオチドの少なくとも１つのプリン塩基が、Ｎ−２、Ｎ−６置換プリン塩基を含み、前記Ｎ−２、Ｎ−６置換プリン塩基が、好ましくは２，６−ジアミノプリンである、請求項１〜１０のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
【請求項１２】
（ｉ）請求項１〜１１のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド、および（ｉｉ）薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１３】
筋ジストロフィーの処置における使用のための、請求項１〜１１のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む組成物。
【請求項１４】
デュシェンヌ型筋ジストロフィーの処置における使用のための、請求項１〜１１のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む組成物であって、前記アンチセンスオリゴヌクレオチドは、エキソン５３スキッピングを誘発する、組成物。
【請求項１５】
少なくとも１つの請求項１〜１１のいずれかに記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド、適切な担体、および使用のための指示書を含むキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
これらおよび他の目的および特色は、下記の発明の詳細な説明を図面と併せて読んだときにより完全に理解される。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
長さが２０〜５０のヌクレオチドの単離されたアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、前記オリゴヌクレオチドは、アニーリング部位Ｈ５３Ａ（＋３３＋６０）と指定されるジストロフィン遺伝子のエキソン５３標的領域に対して相補的である少なくとも２０の連続したヌクレオチドを含み、ここで前記オリゴヌクレオチドは、前記ジストロフィン遺伝子のエキソン５３標的領域に特異的にハイブリダイズし、エキソン５３スキッピングを誘発する、アンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目２）
配列番号１に示されたヌクレオチド配列を含む、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドであって、ここでチミン塩基は任意選択でウラシル塩基である、アンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目３）
配列番号１に示されたヌクレオチド配列からなる、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目４）
ＲＮａｓｅ  Ｈを活性化しない、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目５）
非天然骨格を含む、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目６）
前記オリゴヌクレオチドの骨格の糖部分が、非天然部分で置き換えられている、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目７）
前記非天然部分が、モルホリノである、項目６に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目８）
前記オリゴヌクレオチドの骨格のヌクレオチド間連結が、非天然ヌクレオチド間連結で置き換えられている、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目９）
前記非天然ヌクレオチド間連結が、修飾されたホスフェートである、項目８に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１０）
前記オリゴヌクレオチドの骨格の糖部分が、非天然部分で置き換えられており、前記オリゴヌクレオチドの骨格のヌクレオチド間連結が、非天然ヌクレオチド間連結で置き換えられている、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１１）
前記非天然部分が、モルホリノであり、そして前記非天然ヌクレオチド間連結が、修飾されたホスフェートである、項目１０に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１２）
前記修飾されたホスフェートが、メチルホスホネート、メチルホスホロチオエート、ホスホロモルホリデート、ホスホロピペラジデート、またはホスホロアミデートである、項目１１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１３）
２’−Ｏ−メチル−オリゴリボヌクレオチドである、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１４）
ペプチド核酸である、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１５）
前記アンチセンスオリゴヌクレオチドの活性、細胞分布、または細胞取込みを増強する１つまたは複数の部分または結合体に化学的に連結している、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１６）
アルギニンに富んだ細胞透過性ペプチドに結合体化している、項目１５に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１７）
ポリエチレングリコール部分に化学的に連結している、項目１５に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１８）
前記オリゴヌクレオチドの少なくとも１つのピリミジン塩基が、５−置換ピリミジン塩基を含む、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目１９）
前記ピリミジン塩基が、シトシン、チミンおよびウラシルからなる群より選択される、項目１８に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目２０）
前記５−置換ピリミジン塩基が、５−メチルシトシンである、項目１８に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目２１）
前記オリゴヌクレオチドの少なくとも１つのプリン塩基が、Ｎ−２、Ｎ−６置換プリン塩基を含む、項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目２２）
前記Ｎ−２、Ｎ−６置換プリン塩基が、２，６−ジアミノプリンである、項目２１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド。
（項目２３）
項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む発現ベクター。
（項目２４）
項目１に記載のアンチセンスオリゴヌクレオチド、およびリン酸緩衝液を含む食塩溶液を含む医薬組成物。
（項目２５）
デュシェンヌ型筋ジストロフィーの処置を必要とする患者に有効量の項目２４に記載の医薬組成物を投与することを含む、デュシェンヌ型筋ジストロフィーを処置するための方法。
（項目２６）
筋ジストロフィーを処置するための医薬を製造するための、項目１に記載のアンチセンス分子の使用。
（項目２７）
アンチセンス分子をベースとする治療において使用するための、項目１に記載のアンチセンス分子。
（項目２８）
少なくとも１つの項目１に記載のアンチセンス分子、適切な担体、および使用のための指示書を含むキット。
【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２】
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