【手続補正書】
【提出日】平成29年5月25日(2017.5.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離された抗体を標識又は誘導体化試薬にコンジュゲートする方法であって、グリシン以外の、α位又はβ位にアミン置換基を有するモノカルボン酸バッファー化合物を含む緩衝系中で、前記抗体を、活性化標識若しくは活性化誘導体化試薬と接触させるか、又は前記抗体を、抗体コンジュゲーション試薬が存在する状態で前記標識若しくは誘導体化試薬と接触させる工程を含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
前記抗体コンジュゲーション試薬又は活性化標識が、カルボジイミド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、マレイミド、イソチオシアネート又はチオール化試薬を含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、１つ以上の非アミン置換基を更に含むか、又は更なる置換基を含まない、及び／又は、
前記モノカルボン酸のアミン置換基が、第二級若しくは第三級アミン、又は第四級アンモニウムである請求項１から２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、ベタインである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ベタインが、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルグリシンである請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、第一級アミノ酸である請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記第一級アミノ酸が、アラニン、β−アラニン又は２−アミノ酪酸である請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、プロリン、トリシン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン又は２−ピコリン酸である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記モノカルボン酸バッファー化合物のカルボキシル基が、１〜４の範囲のｐＫａ、又は１．５〜３．５の範囲のｐＫａを有する、及び／又は、
前記モノカルボン酸バッファー化合物のアミンが、８を超えるｐＫａ、又は９を超えるｐＫａを有する請求項１から８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、２００ｍＭ未満の濃度、又は１００ｍＭ未満の濃度、又は５０ｍＭ未満の濃度で存在する請求項１から９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記緩衝系が、５．５を超えるｐＫａを有する中和バッファー化合物を更に含む請求項１から１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記中和バッファー化合物が、モルホリノ、ピペラジン又はＮ−シクロヘキシル化合物を含む請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記中和バッファー化合物が、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、３−モルホリノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳＯ）、（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ）、３−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳ又はＨＥＰＰＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）（ＨＥＰＰＳＯ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（４−ブタンスルホン酸）（ＨＥＰＢＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳ）、４−（シクロヘキシルアミノ）−１−ブタンスルホン酸（ＣＡＢＳ）又は３−（シクロヘキシルアミノ）−２−ヒドロキシル−１−プロパンスルホン酸（ＣＡＰＳＯ）である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記緩衝系が、６〜８の範囲のｐＫａを有するキャッチバッファー化合物を更に含み、前記中和バッファー化合物が、８を超えるｐＫａ、又は８〜１１の範囲のｐＫａを有する請求項１１から１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記キャッチバッファーが、ＭＯＰＳ又はＨＥＰＥＳである、及び／又は、
前記キャッチバッファー化合物の濃度が、前記中和バッファー化合物の濃度未満である請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記標識が、酵素、蛍光性タンパク質、有機色素、着色粒子、ビオチン、ストレプトアビジン又はポリマーを含む請求項１から１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
５〜９の範囲のｐＨで実施される請求項１から１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
固相から抗体を溶出するための、バッファーの使用であって、前記バッファーが、グリシン以外の、α位又はβ位にアミン置換基を有するモノカルボン酸バッファー化合物を含むことを特徴とする使用。
【請求項１９】
前記固相が、カラム内に配置されている、及び／又は、
前記固相が、前記抗体のためのアフィニティーマトリックスを含む請求項１８に記載の使用。
【請求項２０】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、１つ以上の非アミン置換基を更に含むか、又は更なる置換基を含まない、及び／又は、
前記モノカルボン酸のアミン置換基が、第二級若しくは第三級アミン、又は第四級アンモニウムである請求項１８から１９のいずれかに記載の使用。
【請求項２１】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、ベタインである請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
前記ベタインが、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルグリシンである請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、第一級アミノ酸である請求項１８から２０のいずれかに記載の使用。
【請求項２４】
前記第一級アミノ酸が、アラニン、β−アラニン又は２−アミノ酪酸である請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、プロリン、トリシン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン又は２−ピコリン酸である請求項２０に記載の使用。
【請求項２６】
前記モノカルボン酸バッファー化合物のカルボキシル基が、１〜４の範囲のｐＫａ、又は１．５〜３．５の範囲のｐＫａを有する、及び／又は、
前記モノカルボン酸バッファー化合物のアミンが、８を超えるｐＫａ、又は９を超えるｐＫａを有する請求項２０から２５のいずれかに記載の使用。
【請求項２７】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、２００ｍＭ未満の濃度、又は１００ｍＭ未満の濃度、又は５０ｍＭ未満の濃度で存在する請求項２０から２６のいずれかに記載の使用。
【請求項２８】
前記バッファーのｐＨが、１．８〜４．８の範囲にある請求項２０から２７のいずれかに記載の使用。
【請求項２９】
前記抗体を、前記標識、誘導体化試薬、活性化標識又は活性化誘導体化試薬と接触させる工程の前に、前記抗体が、請求項１８から２８のいずれかに記載の固相から前記抗体を溶出する工程によって単離され、前記緩衝系が、前記抗体を溶出する前記工程で使用された前記バッファーを含む請求項１から１７のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
抗体を結合するための固相アフィニティーマトリックスと、前記抗体が前記アフィニティーマトリックスに結合した場合に前記抗体を溶出するためのバッファーとを含む抗体単離キットであって、前記バッファーが、グリシン以外の、α位又はβ位にアミン置換基を有するモノカルボン酸バッファー化合物を含むことを特徴とする抗体単離キット。
【請求項３１】
前記バッファーが請求項２０から２８のいずれかに記載されている通りである、及び／又は、
前記抗体単離キットが、５．５を超えるｐＫａを有する中和バッファーを更に含む請求項３０に記載の抗体単離キット。
【請求項３２】
５．５を超えるｐＫａを有する中和バッファーを含み、
前記中和バッファーが、モルホリノ、ピペラジン又はＮ−シクロヘキシル化合物を含む請求項３１に記載の抗体単離キット。
【請求項３３】
前記中和バッファーが、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、３−モルホリノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳＯ）、（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ）、３−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳ又はＨＥＰＰＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）（ＨＥＰＰＳＯ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（４−ブタンスルホン酸）（ＨＥＰＢＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳ）、４−（シクロヘキシルアミノ）−１−ブタンスルホン酸（ＣＡＢＳ）又は３−（シクロヘキシルアミノ）−２−ヒドロキシル−１−プロパンスルホン酸（ＣＡＰＳＯ）を含む請求項３２に記載の抗体単離キット。
【請求項３４】
６〜８の範囲のｐＫａを有するキャッチバッファーを更に含み、前記中和バッファーが８を超えるｐＫａ、又は８〜１１の範囲のｐＫａを有する請求項３１から３３のいずれかに記載の抗体単離キット。
【請求項３５】
前記キャッチバッファーが、ＭＯＰＳ又はＨＥＰＥＳである請求項３４に記載の抗体単離キット。
【請求項３６】
前記キャッチバッファーの濃度が、前記中和バッファーの濃度未満である請求項３４から３５のいずれかに記載の抗体単離キット。
【請求項３７】
前記キャッチバッファーのｐＨが、６〜８の範囲にある、及び／又は、
前記中和バッファーのｐＨが、６を超える、又は８を超える、又は８．５〜１１の範囲にある、又は９〜９．５の範囲にある請求項３４から３６のいずれかに記載の抗体単離キット。
【請求項３８】
緩衝系中に単離された抗体を含む、コンジュゲーション反応に使用するための抗体組成物であって、前記緩衝系が、グリシン以外の、α位又はβ位にアミン置換基を有するモノカルボン酸バッファー化合物を含むことを特徴とする抗体組成物。
【請求項３９】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、１つ以上の非アミン置換基を更に含むか、又は更なる置換基を含まない、及び／又は、
前記モノカルボン酸のアミン置換基が、第二級若しくは第三級アミン、又は第四級アンモニウムである請求項３８に記載の抗体組成物。
【請求項４０】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、ベタインである請求項３９に記載の抗体組成物。
【請求項４１】
前記ベタインが、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルグリシンである請求項４０に記載の抗体組成物。
【請求項４２】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、第一級アミノ酸である請求項３８から３９のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項４３】
前記第一級アミノ酸が、アラニン、β−アラニン又は２−アミノ酪酸である請求項４２に記載の抗体組成物。
【請求項４４】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、プロリン、トリシン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン又は２−ピコリン酸である請求項３９に記載の抗体組成物。
【請求項４５】
前記モノカルボン酸バッファー化合物のカルボキシル基が、１〜４の範囲のｐＫａ、又は１．５〜３．５の範囲のｐＫａを有する請求項３８から４４のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項４６】
前記モノカルボン酸バッファー化合物のアミンが、８を超えるｐＫａ、又は９を超えるｐＫａを有する請求項３８から４５のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項４７】
前記モノカルボン酸バッファー化合物が、２００ｍＭ未満の濃度、又は１００ｍＭ未満の濃度、又は５０ｍＭ未満の濃度で存在する請求項３８から４６のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項４８】
前記緩衝系が、５．５を超えるｐＫａを有する中和バッファー化合物を更に含む請求項３８から４７のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項４９】
前記中和バッファー化合物が、モルホリノ、ピペラジン又はＮ−シクロヘキシル化合物を含む請求項４８に記載の抗体組成物。
【請求項５０】
前記中和バッファー化合物が、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、３−モルホリノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳＯ）、（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ）、３−［４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジニル］プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳ又はＨＥＰＰＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−エタンスルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）（ＨＥＰＰＳＯ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（４−ブタンスルホン酸）（ＨＥＰＢＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（ＣＨＥＳ）、Ｎ−シクロヘキシル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＣＡＰＳ）、４−（シクロヘキシルアミノ）−１−ブタンスルホン酸（ＣＡＢＳ）又は３−（シクロヘキシルアミノ）−２−ヒドロキシル−１−プロパンスルホン酸（ＣＡＰＳＯ）である請求項４９に記載の抗体組成物。
【請求項５１】
前記緩衝系が、６〜８の範囲のｐＫａを有するキャッチバッファー化合物を更に含み、前記中和バッファー化合物が、８を超えるｐＫａ、又は８〜１１の範囲のｐＫａを有する請求項４８から５０のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項５２】
前記キャッチバッファーが、ＭＯＰＳ又はＨＥＰＥＳである請求項５１に記載の抗体組成物。
【請求項５３】
前記キャッチバッファー化合物の濃度が、前記中和バッファー化合物の濃度未満である請求項５１から５２のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項５４】
５〜９の範囲のｐＨを有する請求項３８から５３のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項５５】
前記単離された抗体が、標識にコンジュゲートされている請求項３８から５４のいずれかに記載の抗体組成物。
【請求項５６】
前記標識が、酵素、蛍光性タンパク質、有機色素、着色粒子、ビオチン、ストレプトアビジン又はポリマーを含む請求項５５に記載の抗体組成物。
【請求項５７】
抗体又は抗体コンジュゲートのための保存媒体としての請求項４８から５１のいずれかに記載の緩衝系の使用。