【手続補正書】
【提出日】平成29年9月21日(2017.9.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化５７】
2016531852.tif 000001
（式中
【化５８】
2016531852.tif 000002
は結合であるか、または存在せず、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ１は、場合により置換されており；
Ｒ２は、水素またはＣ１−６アルキルであり、Ｒ２は、場合により置換されており；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ３は、場合により置換されており；
各Ｒ４は独立して、水素、
【化５９】
2016531852.tif 000003
（式中、Ｘは、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ４は、場合により置換されており；
Ｒ５は、水素またはＣ１−４アルキルであり；
Ｒ６は、水素またはハロであり；
Ｒ７は、水素またはハロであり；
ｎは、０、１、２、３、４または５である）またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４がそれぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項３】
Ｒ１が、水素、Ｃ１−６アルキル、アラルキル、−ＯＨまたはアルコキシである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項４】
Ｒ１が−ＯＨまたはアルコキシである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項５】
Ｒ１がアルコキシである、請求項４に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項６】
Ｒ１がメトキシである、請求項５に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項７】
Ｒ１がＣ１−６アルキルである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項８】
Ｒ１が、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルである、請求項７に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項９】
Ｒ１がエチルである、請求項８に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１０】
Ｒ１がプロピルである、請求項８に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１１】
Ｒ１がアラルキルである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１２】
Ｒ１がベンジルである、請求項１１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１３】
Ｒ２が水素である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１４】
Ｒ２がＣ１−６アルキルである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１５】
Ｒ２がメチルである、請求項１４に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１６】
Ｒ６およびＲ７が両方とも−Ｆであり、
【化６４】
2016531852.tif 000004
が結合である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１７】
Ｒ３が水素である、請求項１６に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１８】
Ｒ３が、オキソで場合により置換されているＣ１−６アルキルである、請求項１６に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項１９】
Ｒ３が
【化６０】
2016531852.tif 000005
である、請求項１８に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２０】
Ｒ３が
【化６１】
2016531852.tif 000006
である、請求項１８に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２１】
Ｒ３が、オキソで場合により置換されているヘテロアラルキルである、請求項１６に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２２】
Ｒ３が
【化６２】
2016531852.tif 000007
である、請求項２１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２３】
Ｒ４が
【化６３】
2016531852.tif 000008
（式中、Ｘは、−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ４が、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２４】
ｎが１である、請求項２３に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２５】
Ｙがアラルキルである、請求項２３に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２６】
Ｙがベンジルである、請求項２５に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２７】
【化６４】
2016531852.tif 000009
が結合である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２８】
Ｒ６およびＲ７の少なくとも１つがハロである、請求項２７に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項２９】
Ｒ６およびＲ７が両方とも−Ｆである、請求項２８に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項３０】
【化６５−１】
2016531852.tif 000010
【化６５−２】
2016531852.tif 000011
から選択される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【請求項３１】
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩と、薬学的に許容され得る担体またはアジュバントとを含む、医薬組成物。
【請求項３２】
生物学的サンプルにおけるグルココルチコイド受容体の活性を調節する方法であって、前記グルココルチコイド受容体を請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩と接触させる工程を含む、方法。
【請求項３３】
患者における炎症性疾患を処置するか、またはその重症度を低減するための組成物であって、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩を含む、組成物。
【請求項３４】
前記疾患が、喘息、関節炎、狼瘡、クローン病、炎症性腸疾患、セリアック病、糸球体腎炎、尋常性座瘡、白血病および膵臓癌から選択される、請求項３３に記載の組成物。
【請求項３５】
前記疾患が、喘息および関節炎から選択される、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
【化６６】
2016531852.tif 000012
の化合物またはその薬学的に許容され得る塩。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
別の態様では、本発明は、式１の化合物と、薬学的に許容され得る担体またはアジュバントとを含む医薬組成物を提供する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
さらに別の態様では、本発明は、生物学的サンプルにおけるグルココルチコイド受容体の活性を調節する方法であって、前記グルココルチコイド受容体を有効量の式１の化合物と接触させる工程を含む方法を提供する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
さらに別の態様では、本発明は、患者における炎症性疾患の重症度を処置または低減する方法であって、有効量の式１の化合物を前記患者に投与する工程を含む方法を提供する。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｉの化合物
【化５７】
2016531852.tif 000013
（式中
【化５８】
2016531852.tif 000014
は結合であるか、または存在せず、
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ１は、場合により置換されており；
Ｒ２は、水素またはＣ１−６アルキルであり、Ｒ２は、場合により置換されており；
Ｒ３は、水素、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、−ＯＨまたはアルコキシであり、Ｒ３は、場合により置換されており；
各Ｒ４は独立して、水素、
【化５９】
2016531852.tif 000015
（式中、Ｘは、−Ｏ−または−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ４は、場合により置換されており；
Ｒ５は、水素またはＣ１−４アルキルであり；
Ｒ６は、水素またはハロであり；
Ｒ７は、水素またはハロであり；
ｎは、０、１、２、３、４または５である）またはその薬学的に許容され得る塩。
（項目２）
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４がそれぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｒ１が、水素、Ｃ１−６アルキル、アラルキル、−ＯＨまたはアルコキシである、項目１に記載の化合物。
（項目４）
Ｒ１が−ＯＨまたはアルコキシである、項目３に記載の化合物。
（項目５）
Ｒ１がアルコキシである、項目４に記載の化合物。
（項目６）
Ｒ１がメトキシである、項目５に記載の化合物。
（項目７）
Ｒ１がＣ１−６アルキルである、項目３に記載の化合物。
（項目８）
Ｒ１が、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルまたはｔｅｒｔ−ブチルである、項目７に記載の化合物。
（項目９）
Ｒ１がエチルである、項目８に記載の化合物。
（項目１０）
Ｒ１がプロピルである、項目８に記載の化合物。
（項目１１）
Ｒ１がアラルキルである、項目３に記載の化合物。
（項目１２）
Ｒ１がベンジルである、項目１１に記載の化合物。
（項目１３）
Ｒ２が水素である、項目１に記載の化合物。
（項目１４）
Ｒ２がＣ１−６アルキルである、項目１に記載の化合物。
（項目１５）
Ｒ２がメチルである、項目１４に記載の化合物。
（項目１６）
Ｒ３が、水素、Ｃ１−６アルキル、アラルキルまたはヘテロアラルキルであり、Ｒ３が、オキソで場合により置換されている、項目１に記載の化合物。
（項目１７）
Ｒ３が水素である、項目１６に記載の化合物。
（項目１８）
Ｒ３が、オキソで場合により置換されているＣ１−６アルキルである、項目１６に記載の化合物。
（項目１９）
Ｒ３が
【化６０】
2016531852.tif 000016
である、項目１８に記載の化合物。
（項目２０）
Ｒ３が
【化６１】
2016531852.tif 000017
である、項目１８に記載の化合物。
（項目２１）
Ｒ３が、オキソで場合により置換されているヘテロアラルキルである、項目１６に記載の化合物。
（項目２２）
Ｒ３が
【化６２】
2016531852.tif 000018
である、項目１８に記載の化合物。
（項目２３）
Ｒ４が
【化６３】
2016531852.tif 000019
（式中、Ｘは、−ＮＨ−であり、Ｙは、Ｃ１−６アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、アルコキシ、−ＯＨ、ハロアルキルまたはスルホニルである）であり、Ｒ４が、ハロ、ＣＮ、カルボキシルまたはオキソで場合により置換されている、項目１に記載の化合物。
（項目２４）
ｎが１である、項目２３に記載の化合物。
（項目２５）
Ｙがアラルキルである、項目２３に記載の化合物。
（項目２６）
Ｙがベンジルである、項目２５に記載の化合物。
（項目２７）
【化６４】
2016531852.tif 000020
が結合である、項目１に記載の化合物。
（項目２８）
Ｒ６およびＲ７の少なくとも１つがハロである、項目２７に記載の化合物。
（項目２９）
Ｒ６およびＲ７が両方とも−Ｆである、項目２８に記載の化合物。
（項目３０）
【化６５−１】
2016531852.tif 000021
【化６５−２】
2016531852.tif 000022
から選択される、項目１に記載の化合物。
（項目３１）
項目１に記載の化合物と、薬学的に許容され得る担体またはアジュバントとを含む、医薬組成物。
（項目３２）
生物学的サンプルにおけるグルココルチコイド受容体の活性を調節する方法であって、前記グルココルチコイド受容体を項目１に記載の化合物と接触させる工程を含む、方法。
（項目３３）
患者における炎症性疾患の重症度を処置または低減する方法であって、有効量の項目１に記載の化合物を前記患者に投与する工程を含む、方法。
（項目３４）
前記疾患が、喘息、関節炎、狼瘡、クローン病、炎症性腸疾患、セリアック病、糸球体腎炎、尋常性座瘡、白血病および膵臓癌から選択される、項目３０に記載の方法。
（項目３５）
前記疾患が、喘息および関節炎から選択される、項目３１に記載の方法。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
【図１３】Ｃ−１７αフロエート基を有する化合物の転写抑制特性。図１３Ａは、ＡＤ２９３細胞におけるＡＰ１−Ｌｕｃ活性に対する、ＶＳＧ２２、ＶＳＧ２４、ＤＡＣおよびＤＥＸの用量反応曲線を示す。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝３。図１３Ｂは、ＡＤ２９３細胞におけるＡＰ１−Ｌｕｃに対する転写抑制活性効力に関する、導入Ｃ−１７αフロエート基を有するおよび有しない化合物の対照比較を示す。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝３。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
【図１４】ＧＲ  Ｑ６４２Ａ突然変異タンパク質のインビトロ結合アッセイ。図１４Ａは、野生型ＧＲまたはＱ６４２Ａ突然変異ＧＲのいずれかを発現したＡＤ２９３細胞由来の細胞質ゾルを使用したインビトロリガンド結合実験を示す。ＣＰＭ：カウント毎分。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝２。図１４Ｂは、ＭＭＴＶ−ＬｕｃレポーターアッセイにおけるＷＴ  ＧＲおよびＱ６４２Ａ  ＧＲのＤＥＸ用量反応曲線を示す。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝３。図１４Ｃは、ＧＲ  Ｑ６４２Ａリガンド競合アッセイを示す。エラーバー＝ＳＤ、ｎ＝２。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１９６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１９６】
異なるリガンドの結合におけるＱ６４２の正確な役割を調査するために、本発明者らは、ＧＲ  Ｑ６４２Ａのリガンド結合能を試験したところ、ＤＥＸは、単一不飽和濃度において転写促進活性をほとんど有していなかった（図５Ｂ）。野生型ＧＲまたはＧＲ  Ｑ６４２Ａのいずれかを発現するＡＤ２９３細胞由来の細胞質ゾルを使用したインビトロ結合アッセイでは、Ｑ６４２Ａ突然変異体は、野生型ＧＲと比較して、ＤＥＸに対する結合親和性の実質的な喪失を示したが（Ｋｄ（Ｑ６４２Ａ）＝２２．３ｎＭ対Ｋｄ（ＷＴ）＝５．２ｎＭ）、高いリガンド濃度では、いくらかの親和性を依然として保持していた（図１４Ａ）。一方、レポーターアッセイでは、Ｑ６４２Ａは、飽和ＤＥＸ濃度においてさえ転写促進活性をほとんど示さなかった（図１４Ｂ）。これらのデータは、ＧＲ  Ｑ６４２ＡのＤＥＸ転写促進の欠如が、リガンド親和性の減少と、ＧＲの活性化を阻害する立体構造変化との両方によるものであることを示している。ＤＥＸおよびコルチゾールとは異なり、Ｑ６４２は、ＭＦと水素結合を形成しない。Ｑ６４２ＡがＭＦ結合能を依然として有するかを決定するために、本発明者らは、ＧＲ  Ｑ６４２Ａ突然変異体タンパク質を使用して、競合結合実験を実施した（図１４Ｃ）。ＭＦおよびコルチゾールは両方とも、ＧＲ  Ｑ６４２Ａに対する３Ｈ−ＤＥＸの結合と競合することができたが、親和性は大きく減少した（野生型ＧＲに対するＫｉが０．７ｎＭおよび９１ｎＭであったのと比較して、ＭＦおよびコルチゾールのＫｉは、それぞれ９ｎＭおよび２５０ｎＭであった）。総合すると、これらの結果は、Ｑ６４２が、Ｃ−１７αフロエート基を有するリガンドを押し出しながら、Ｃ−１７αヒドロキシル基含有リガンドと水素結合を形成することによって、ヘリックス７のリッジを支持するための支柱として作用することを示唆している。アラニンのような小さな残基でＱ６４２を置換することにより、ヘリックス７のリッジを崩壊させて、すべての転写促進の喪失をもたらし得る。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２００
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２００】
ＤＡＣ結合ＧＲ  ＬＢＤの構造により、ＤＡＣのフェニルピラゾール基によって開かれたこれまでに発見されていないチャンネルが明らかになった（３２）。本発明者らは、より大きな基をＣ−３ケトンに導入することによって、いくつかのこのようなグルココルチコイドを設計および合成した（ＶＳＧ０２、ＶＳＧ０３、ＶＳＧ１５；図５Ｂ）。これらの化合物はすべて、比較的低いＧＲ効力を示した。ＭＦ結合ＧＲ  ＬＢＤの構造に基づいて、本発明者らは、フロエート基をＣ−１７α位に導入して、それぞれ対応する化合物ＶＳＧ１０、ＶＳＧ１１およびＶＳＧ１４を生産した。全３つの化合物のうち、１７αフロエートは、ＧＲの効力および有効性の両方を大きく増加させたが（図６Ｂ；図１３）、これは、１７αフロエートが、設計グルココルチコイドの効力を増大させる一般的な戦略であり得ることをさらに示唆している。