【手続補正書】
【提出日】平成29年4月14日(2017.4.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）により表されるアミノ酸配列
【化１】
2016524592.tif 000001
Ａ−は、配列番号１、配列番号４もしくは配列番号７であり、
Ｘは、６もしくは７のアミノ酸残基を有するＣＤＲ１領域であり、
Ｂ−は、配列番号２、配列番号５もしくは配列番号８であり、
Ｙは、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０もしくは２１のアミノ酸残基を有するＣＤＲ３領域であり、
Ｃ−は、配列番号３、配列番号６もしくは配列番号９であり、
またはそれと少なくとも５０％相同な配列を含むＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子であって、
この際、
配列番号１が、ＴＲＶＤＱＴＰＲＴＡＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＴＤＴ、ＴＲＶＤＱＴＰＲＴＡＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＶＴＧＡであり、
配列番号２が、ＴＳＷＦＲＫＮＰＧＴＴＤＷＥＲＭＳＩＧＧＲＹＶＥＳＶＮＫＧＡＫＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＹＣＫＡまたはＴＳＷＦＲＫＮＰＧＴＴＤＷＥＲＭＳＩＧＧＲＹＶＥＳＶＮＫＧＡＫＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＩＣＲＡであり、
配列番号３が、ＤＧＡＧＴＶＬＴＶＮであり、
配列番号４が、ＡＳＶＮＱＴＰＲＴＡＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＴＤＴであり、
配列番号５が、ＴＹＷＹＲＫＮＰＧＳＳＮＱＥＲＩＳＩＳＧＲＹＶＥＳＶＮＫＲＴＭＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＹＣＫＡまたはＴＹＷＹＲＫＮＰＧＳＳＮＱＥＲＩＳＩＳＧＲＹＶＥＳＶＮＫＲＴＭＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＩＣＲＡであり、
配列番号６が、ＹＧＡＧＴＶＬＴＶＮであり、
配列番号７が、ＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＤＰまたはＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＤＡまたはＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＤＧまたはＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＥＳであり、
配列番号８が、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＡまたはＴＣＷＳＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＬ、ＴＣＷＴＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＡＬ、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＶ、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＨ、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＳＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＨであり、
配列番号９が、ＣＧＧＧＴＶＶＴＶＮ、ＣＧＧＧＴＡＶＴＶＮ、ＣＧＤＧＴＡＶＴＶＮ、またはＣＧＤＧＴＡＶＴＶＮである、ＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
【請求項２】
前記ＣＤＲ３領域が、配列番号１１７〜１４３または１５０〜１６９に示されるアミノ酸配列を有する、請求項１に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
【請求項３】
前記ＣＤＲ１領域が、配列番号９０〜１１６または１４４〜１４９に示されるアミノ酸配列を有する、請求項１または２に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
【請求項４】
前記抗原特異的抗原結合分子が、配列番号１６〜４２または７０〜７９に示されるアミノ酸配列を有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
【請求項５】
ヒト化された、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子を含む、融合タンパク質。
【請求項７】
前記ＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子が、生物学的に活性なタンパク質へ融合している、請求項６に記載の融合タンパク質。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子、または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質をコードする、核酸。
【請求項９】
請求項８に記載の核酸を含む、核酸構築物。
【請求項１０】
請求項９に記載の核酸構築物を含む、宿主細胞。
【請求項１１】
請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質の製造方法であって、
宿主細胞で前記分子をコードする核酸配列を発現する工程を有する、方法。
【請求項１２】
請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質を含む、薬剤組成物。
【請求項１３】
薬剤に使用される、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質。
【請求項１４】
請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質の、疾患の治療を必要とする患者への前記治療のための薬剤の製造における使用。
【請求項１５】
治療を必要とする患者における疾患の治療に使用するための請求項１２に記載の薬剤組成物であって、治療上有効量の前記薬剤組成物が前記患者に投与される、薬剤組成物。
【請求項１６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の検出可能な標識ＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質をサンプルに添加し、および前記分子の標的分析物への結合を検出することを含む、前記サンプル中の前記標的分析物の存在をアッセイする方法。
【請求項１７】
被験者の疾患の部位を画像化するために前記被験者に投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質。
【請求項１８】
被験者の疾患または医学的状態を診断するために前記被験者に投与される、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または請求項６もしくは７に記載の融合タンパク質。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２５】
実施例５：分子融合タンパク質としての抗ＩＣＯＳＬ  ＶＮＡＲドメインの再フォーマット
合成ライブラリ、ＥＬＳＳ１から単離された抗ＩＣＯＳＬドメインは、（ＧＧＧＳ）４アミノ酸ストレッチと結合した三量体の融合生成物を生成するためにタンデムにクローニングすることができ、発現することができ、精製することができ、ＥＬＩＳＡによる３つの個別標的すべてへ結合することを示すことができる。図１１は、抗ヒトＩＣＯＳＬ  ＶＮＡＲドメイン、２Ｄ４、および抗ＨＳＡ特異的ＶＮＡＲドメイン、Ｅ６（ＷＯ２０１３／１６７８８３の記載のように調製した）の両方へ融合した、抗マウスＩＣＯＳＬ  ＶＮＡＲドメイン  ＣＣ３（２０１３年４月２３日に出願されたＵＳ６１／８１５，０４３からの優先権を主張する２０１４年４月２３日に出願された同時係属中の国際特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ２０１４／０５８２５１にて記載されている（参照により引用される）方法に従って調製された）を用いる３量体構築物の２つの異なる配向性を例示する。３つのＶＮＡＲドメインのすべては、単一の分子融合タンパク質として結合した場合、標的へ結合する能力を保持している。
１．式（Ｉ）により表されるアミノ酸配列
【化４】
2016524592.tif 000002
Ａ−は、配列番号１、配列番号４もしくは配列番号７であり、
Ｘは、６もしくは７を有するアミノ酸残基のＣＤＲ１領域であり、
Ｂ−は、配列番号２、配列番号５もしくは配列番号８であり、
Ｙは、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０もしくは２１のアミノ酸残基を有するＣＤＲ３領域であり、
Ｃ−は、配列番号３、配列番号６もしくは配列番号９であり、
またはそれと少なくとも５０％相同な配列を含むＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子であって、
この際、
配列番号１が、ＴＲＶＤＱＴＰＲＴＡＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＴＤＴ、ＴＲＶＤＱＴＰＲＴＡＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＶＴＧＡであり、
配列番号２が、ＴＳＷＦＲＫＮＰＧＴＴＤＷＥＲＭＳＩＧＧＲＹＶＥＳＶＮＫＧＡＫＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＹＣＫＡまたはＴＳＷＦＲＫＮＰＧＴＴＤＷＥＲＭＳＩＧＧＲＹＶＥＳＶＮＫＧＡＫＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＩＣＲＡであり、
配列番号３が、ＤＧＡＧＴＶＬＴＶＮであり、
配列番号４が、ＡＳＶＮＱＴＰＲＴＡＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＴＤＴであり、
配列番号５が、ＴＹＷＹＲＫＮＰＧＳＳＮＱＥＲＩＳＩＳＧＲＹＶＥＳＶＮＫＲＴＭＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＹＣＫＡまたはＴＹＷＹＲＫＮＰＧＳＳＮＱＥＲＩＳＩＳＧＲＹＶＥＳＶＮＫＲＴＭＳＦＳＬＲＩＫＤＬＴＶＡＤＳＡＴＹＩＣＲＡであり、
配列番号６が、ＹＧＡＧＴＶＬＴＶＮであり、
配列番号７が、ＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＤＰまたはＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＤＡまたはＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＤＧまたはＡＲＶＤＱＴＰＲＳＶＴＫＥＴＧＥＳＬＴＩＮＣＶＬＲＥＳであり、
配列番号８が、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＡまたはＴＣＷＳＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＬ、ＴＣＷＴＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＡＬ、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＶ、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＮＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＨ、ＴＣＷＹＲＫＫＳＧＳＴＮＥＥＳＩＳＫＧＧＲＹＶＥＴＶＮＳＧＳＫＳＦＳＬＲＩＳＤＬＴＶＥＤＧＧＴＹＲＣＧＨであり、
配列番号９が、ＣＧＧＧＴＶＶＴＶＮ、ＣＧＧＧＴＡＶＴＶＮ、ＣＧＤＧＴＡＶＴＶＮ、またはＣＧＤＧＴＡＶＴＶＮである、ＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
２．前記ＣＤＲ３領域が、図１０Ａ、図１０Ｂまたは図１０Ｃで示されるＣＤＲ３領域である、上記１に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
３．前記ＣＤＲ１領域が、図１０Ａまたは図１０Ｂで示されるＣＤＲ１領域である、上記１または２に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
４．前記抗原特異的抗原結合分子が、図９Ａまたは図９Ｃのいずれかで示される配列を有する、上記１から３のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
５．ヒト化された、上記１〜４のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子。
６．上記１〜５のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子を含む、融合タンパク質。
７．前記ＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子が、生物学的に活性なタンパク質へ融合している、上記６に記載の融合タンパク質。
８．上記１〜５のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子、または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質をコードする、核酸。
９．上記８に記載の核酸を含む、核酸構築物。
１０．上記９に記載のベクターを含む、宿主細胞。
１１．上記１〜５のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質の製造方法であって、
宿主細胞で前記分子をコードする核酸配列を発現する工程を有する、方法。
１２．上記１〜５のいずれか１項に記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質を含む、薬剤組成物。
１３．薬剤に使用される、上記１〜５のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質。
１４．疾患の治療を必要とする患者への前記治療のための薬剤の製造における上記１〜５のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質の使用。
１５．治療上有効な量の上記１２に記載の薬剤組成物を患者に投与することを含む、治療を必要とする患者における疾患の治療方法。
１６．上記１〜５のいずれか一つに記載の検出可能な標識ＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質をサンプルに添加し、および前記分子の標的分析物への結合を検出することを含む、前記サンプル中の前記標的分析物の存在をアッセイする方法。
１７．上記１〜５のいずれか一つに記載の検出可能な標識ＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質を被験者に投与することを含む、前記被験者の疾患の部位を画像化する方法。
１８．上記１〜５のいずれか一つに記載のＩＣＯＳＬ特異的抗原結合分子または上記６もしくは７に記載の融合タンパク質を被験者に投与することを含む、前記被験者の疾患または医学的状態を診断する方法。