(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a)溶解性の低い結晶性薬物、及び
(b)該薬物の表面に吸着した非架橋表面変性剤
を含んで成り、該表面変性剤の存在下で粒子サイズを機械的手段により低減して得られた粒子であって、
該薬物の存在量が、該薬物と該表面変性剤との合計質量を基準として９９.９％〜１０％の範囲内にあり、
該表面変性剤の存在量が、該薬物と該表面変性剤との合計質量を基準として０.１％〜９０％の範囲内にあり、かつ、該粒子の９０質量％以上が４００nm未満の平均粒子サイズを有することを維持するのに十分な量であり、そして
該粒子を含む分散体が、その調製後２日以上裸眼で観察できる凝集沈殿または粒子凝集を示さない
ことを特徴とする粒子。
【請求項２】
該平均粒子サイズが２５０nm未満である、請求項１記載の粒子。
【請求項３】
該薬物が、鎮痛薬、抗炎症薬、駆虫薬、抗不整脈薬、抗生物質、抗凝固薬、抗降圧薬、抗糖尿病薬、抗てんかん薬、抗ヒスタミン薬、降圧薬、抗ムスカリン薬、抗ミコバクテリア薬、抗新生物薬、免疫抑制薬、抗甲状腺薬、抗ウイルス薬、不安解消薬、アストリンゼント、アドレナリン性β受容体遮断薬、血液製剤、代用血漿、心筋変性力薬、コントラスト媒質、コルチコステロイド、咳抑制薬、診断薬、診断像形成薬、利尿薬、ドパーミン作用薬、止血薬、免疫薬、リピッド調節薬、筋肉弛緩薬、副交感神経刺激興奮薬、副甲状腺カルシトニン、ビホスホネート類、プロスタグランジン、放射性医薬、性ホルモン、抗アレルギー薬、興奮薬、食欲減退物質、交感神経興奮薬、甲状腺薬、血管拡張剤およびキサンチン類からなる群より選ばれる、請求項１又は２に記載の粒子。
【請求項４】
該薬物が、ダナゾール、５α，１７α，−１′−（メチルスルホニル）−１′Ｈ−プレグノ−２０−イノ−〔３，２−ｃ〕−ピラゾル−１７−オール（ステロイドＡ）、〔６−メトキシ−４−（１−メチルエチル）−３−オキソ−１，２−ベンズイソチアゾル−２（３Ｈ）−イル〕メチル２，６−ジクロロベンゾエート１，１−ジオキシド（ＷＩＮ  ６３３９４）、３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシド（ＷＩＮ  ５９０７５）、ピポサルファム、ピポサルファン、カプトテシン、アセトミノフェン、アセチルサリチル酸、アミオダロン、コレスチラミン、コレスチポール、クロモリンナトリウム、アルブテロール、スクラルフェート、スルファサラジン、ミノキシジル、テンパゼパム、アルプラゾラム、プロポキシフェン、オーラノフィン、エリスロマイシン、サイクロスポリン、アシクロビア、ガンシクロビア、エトポサイド、メファラン、メトトリキセート、ミトキサントロン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、メゲステロール、タモキシフェン、メドロキシプロゲステロン、ナイスタチン、テルブタリン、アンホテリシンＢ、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、ジクロフェナック、ケトプロフェン、フルビプロフェン、ジフルミサール、エチル−３，５−ジアセトアミド−２，４，６−トリヨードベンゾエート（ＷＩＮ  ８８８３）、エチル（３，５−ビス（アセチルアミノ）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）アセテート（ＷＩＮ  １２９０１）およびエチル−２−（３，５−ビス（アセチルアミノ）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）アセテート（ＷＩＮ  １６３１８）からなる群より選ばれる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の粒子。
【請求項５】
該表面変性剤が、ゼラチン、カゼイン、レシチン、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、ベンザルコニウムクロライド、ステアリン酸カルシウム、グリセリルモノステアレート、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化性ワックス、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンひまし油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンステアレート、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非結晶性セルロース、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール及びポリビニルピロリドンからなる群より選ばれる、請求項１〜４のいずれか１項に記載の粒子。
【請求項６】
該表面変性剤が、ポリビニルピロリドン、チロキサポール、エチレンオキシド−プロピレンオキシドブロックコポリマー、エチレンジアミンへのエチレンオキシドおよびプロピレンオキシドの連続付加物由来の４官能性ブロックコポリマー、デキストラン、レシチン、スルホコハク酸ナトリウムのジオクチルエステル、ラウリル硫酸ナトリウム、アルキルアリールポリエーテルスルホネート、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール及びスクロースステアレートとスクロースジステアレートとの混合物からなる群より選ばれる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の粒子。
【請求項７】
該薬物の液体分散媒への溶解度が１０mg/mL未満である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の粒子。
【請求項８】
液体分散媒と請求項１〜７のいずれか１項に記載の粒子とを含んで成る安定な分散体。
【請求項９】
該液体分散媒が、水、サフラワーオイル、エタノール、ｔ−ブタノール、ヘキサン及びグリコールからなる群より選ばれる、請求項７記載の粒子。
【請求項１０】
該液体分散媒が、水、サフラワーオイル、エタノール、ｔ−ブタノール、ヘキサン及びグリコールからなる群より選ばれる、請求項８記載の分散体。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の粒子又は分散体と、そのための薬学的に許容されるキャリヤとを含んで成る医薬組成物。
【請求項１２】
該薬学的に許容されるキャリヤが、無毒性の生理学上許容されるキャリア、アジュバント、非経口用ベヒクル、経口投与用ベヒクル及び直腸投与用ベヒクルからなる群より選ばれる、請求項１１記載の医薬組成物。
【請求項１３】
静注に適した請求項１１又は１２記載の医薬組成物。
【請求項１４】
溶解性の低い結晶性薬物と非架橋表面変性剤とを、該薬物の表面に非架橋表面変性剤が吸着し、かつ、９０質量％以上が４００nm未満の平均粒子サイズを有する粒子又はその分散体が得られるのに十分な時間及び条件下で接触させる工程を含む機械的手段を使用することを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の粒子又は分散体の製造方法。
【請求項１５】
該接触工程が摩砕工程を含む、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
該摩砕工程が、硬質粉砕媒体の存在下で湿式摩砕する工程を含む、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
該粉砕媒体の平均粒子サイズが３mm未満である、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
該粉砕媒体の平均粒子サイズが１mm未満である、請求項１６記載の方法。
【請求項１９】
該粉砕媒体の密度が３g/cm3より高い、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
該粉砕媒体が、酸化ジルコニウム、マグネシア安定化酸化ジルコニウム、イットリウム安定化酸化ジルコニウム、珪酸ジルコニウム、ガラス、ステンレススチール、チタニア及びアルミナからなる群より選ばれた、請求項１６〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
該摩砕工程が、ボールミル、アトリッターミル、バイブレーターミル及び媒体ミルからなる群より選ばれたミルにおいて行われる、請求項１５〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
該摩砕工程が、サンドミル、ビーズミル、ローラーミル、カウレスタイプミキサー及び高せん断媒体ミルからなる群より選ばれたミルにおいて行われる、請求項１５〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
該薬物と該表面変性剤との混合物に超音波処理を施す工程を含む、請求項１５〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
この発明は薬物粒子、その調製方法およびその粒子を含有する分散体に関する。この発明は、さらに医薬組成物におけるこのような粒子の使用および哺乳類の処置方法にも関する。
【０００２】
【従来の技術】
生体利用効率は、投与後に薬物が標的組織に対して利用可能になる程度である。投与剤形および各種の特性（例えば、薬物の溶解速度）をはじめとする多くの因子が生体利用効率に影響を及ぼしうる。低い生体利用効率は、医薬組成物、特に水溶性が低い活性成分を含む組成物において遭遇する重要な問題点である。水溶性の低い薬物（すなわち、約１０ｍｇ／ｍＬ未満の溶解性を示すもの）  は、血流中に吸収される前に胃腸管から排出される傾向がある。さらに、水溶性の低い薬物は、十分に溶解する薬物が主として使用される静注にとって安全でない可能性がある。
【０００３】
粒状薬剤の溶解速度は、表面積の増大、すなわち粒子サイズの低減につれて増加できることが知られている。従って、微細薬剤の調製方法が研究されてきたし、さらに医薬組成物中の薬剤粒子のサイズやサイズ範囲を調節することが行われてきた。例えば、乾式粉砕法を使用して粒子サイズを低減することにより薬物の吸収を促進してきた。しかしながら、ラッチマン（Ｌａｃｈｍａｎ）らによって、Ｔｈｅ  Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２章、「Ｍｉｌｌｉｎｇ（粉砕）  」、４５ページ、（１９８６）で検討されているような従来の乾式粉砕方法では、材料が粉砕チャンバーに固まりつくとき、細末度の限界が１００ミクロン（１００，０００ｎｍ）の範囲内に達する。ラッチマンは、さらに粒子サイズを低減するには湿式粉砕化が有利であるが、凝集がより小さい粒子サイズでも約１０ミクロン（１０，０００ｎｍ）までに限定することに付言している。しかしながら、前記文献は汚染を案ずるため、湿式粉砕法に対して偏見が存在する可能性がある。実用化されているエアージェット粉砕法は、約１〜５０μｍ（１，０００〜５０，０００ｎｍ）程度の小さな平均粒子サイズの範囲内の粒子を提供してきた。しかしながら、このような乾式粉砕法は許容できない程度の粉塵を生ずる可能性がある。
【０００４】
医薬組成物を調製するための他の方法としては、薬物をリポソームに担持する方法や、例えば乳化重合を介してポリマー中に担持する方法が挙げられる。しかしながら、これらの方法も問題点や限界を有する。例えば、適当なリポソームを調製する際には油溶性薬物が必要な場合が多い。さらに、許容できない程多量のリポソームやポリマーが単位薬用量の調製に必要な場合がよくある。さらにまた、このような医薬組成物を調製する方法は、複雑になる傾向がある。乳化重合の際に、困難性を伴う主な方法は、製造工程の最終段階での未反応モノマーや開始剤（毒性を示す可能性がある）のような汚染物質の除去にある。
【０００５】
米国特許第４，５４０，６０２号明細書〔モトヤマ（Ｍｏｔｏｙａｍａ）  ら〕は、湿式粉砕機を用いて水溶性高分子物質の水性溶液中で粉砕された固体薬物を公表する。モトヤマらは、このような湿式粉砕化の結果として、薬物が０．５μｍ（５００ｎｍ）〜５μｍ（５，０００ｎｍ）の範囲内の微粒子に成形されることを教示する。しかしながら、モトヤマらによって記載された湿式粉砕方法を再現したところ、１μｍを遙かに超える平均粒子サイズの粒子をもたらした。
【０００６】
ヨーロッパ特許出願公開第２７５，７９６号明細書は、５００ｎｍより小さい球状粒子体を含んでなるコロイド分散系の製造方法を記載する。しかしながら、この方法はその物質とそれに対する混和性の非溶媒との溶液を混合することによって沈殿を起こし、そして非結晶性微小粒子の形成をもたらす必要がある。さらに、粒子を調製するための沈殿法は、溶媒で汚染された粒子を提供する傾向がある。このような溶媒は、毒性を示すことが多く、医薬上実用できるレベルまで十分に除去可能であるとしても非常に困難な可能性がある。
【０００７】
米国特許第４，１０７，２８８号明細書は、生物学的または薬力学的な活性物質を含む１０〜１，０００ｎｍのサイズ範囲内にある粒子を記載する。しかしながら、これらの粒子は活性物質をマトリックス上に担持するかまたは取り込んだ高分子架橋マトリックスから構成されている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
容易に調製でき、そして粒子間引力で感知できる程凝集沈殿または凝集せず、かつ架橋マトリックスの存在を必要としないサブミクロンサイズ範囲内にある安定な分散性薬物粒子を提供することが望まれるであろう。さらに、高い生体利用効率を示す医薬組成物を提供することも強く望まれるであろう。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、安定で分散性の薬物微粒子および表面変性剤と共に粉砕媒体の存在下での湿式粉砕化によるそのような粒子の調製方法を発見した。これらの粒子は、著しく高い生体利用効率を示す医薬組成物に製剤することができる。
【００１０】
より具体的には、本発明により、有効平均粒子サイズ約４００ｎｍ未満を維持するのに十分量で表面に表面変性剤が吸着された結晶性薬物を必須のものとして含んでなる粒子が提供される。
【００１１】
この発明はまた、液体分散媒質とそれらに分散された前記粒子を必須のものとして含んでなる安定な分散体も提供する。
【００１２】
この発明のもう一つの態様として、液体分散媒質中に薬物を分散する工程、および粉砕媒体の存在下の機械的な手段により約４００ｎｍ未満の有効平均粒子サイズまで薬物の粒子サイズを低減する工程を含んでなる前記粒子の調製方法が提供される。これらの粒子は、そのサイズを表面変性剤の存在下で低減できる。別法として、当該粒子を摩砕後に表面変性剤と接触せしめてもよい。
【００１３】
この発明の特に有用で重要な態様では、前記粒子とそれらに対して薬学的に許容されるキャリアとを含んでなる医薬組成物が提供される。当該医薬組成物は哺乳類を処置する方法において有用である。
【００１４】
【具体的な態様】
この発明の粒子は薬物を含んでなる。この薬物は離散した結晶相として存在する。結晶相は非結晶相または非晶相（上述のヨーロッパ特許出願公開第２７５，７９６号明細書に記載されるような沈殿法から得られる）と区別される。
【００１５】
この発明は、多種多様な薬物で実施できる。薬物は、実質的に純粋な状態で存在する有機物質が好ましい。薬物は、少なくとも一種の液体媒質に低い溶解性で分散可能であることが必要である。低い溶解性とは、薬物が処理温度（例えば、室温）で液体分散媒質（例えば、水）に約１０ｍｇ／ｍＬ未満、好ましくは約１ｍｇ／ｍＬ未満の溶解性を有することを意味する。好ましい液体分散媒質は水である。しかしながら、この発明は、薬物がほとんど溶解せずそして分散可能な、例えば、水性塩溶液、サフラワーオイルならびにエタノール、ｔ−ブタノール、ヘキサンおよびグリコールのような溶媒をはじめとする他の液体媒質で実施することもできる。水性分散媒質のｐＨは、当該技術分野で既知の方法によって調節できる。
【００１６】
適当な薬物は、例えば、鎮痛薬、抗炎症薬、駆虫薬、抗不整脈薬、抗生物質（ペニシリン類を含む）、抗凝固薬、抗降圧薬、抗糖尿病薬、抗てんかん薬、抗ヒスタミン薬、降圧薬、抗ムスカリン薬、抗ミコバクテリア薬、抗新生物薬、免疫抑制薬、抗甲状腺薬、抗ウイルス薬、不安解消薬（催眠薬および神経弛緩薬）、アストリンゼント、アドレナリン性β受容体遮断薬、血液製剤および代用血漿、心筋変性力薬、コントラスト媒質、コルチコステロイド、咳抑制薬（去痰薬および粘液破壊薬）、診断薬、診断像形成薬、利尿薬、ドパーミン作用薬（抗パーキンソ氏病薬）、止血薬、免疫薬、リピッド調節薬、筋肉弛緩薬、副交感神経刺激興奮薬、副甲状腺カルシトニンおよびビホスホネート類、プロスタグランジン、放射性医薬、性ホルモン（ステロイド類を含む）、抗アレルギー薬、興奮薬および食欲減退物質、交感神経興奮薬、甲状腺薬、血管拡張剤およびキサンチン類を含む各種既知薬物類から選ぶことができる。好ましい薬物としては、経口投与および静注を意図するものが挙げられる。これらのクラスの薬物類の記載および各クラスに含まれるリストは、Ｍａｒｔｉｎｄａｌｅ，  Ｔｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ  ，  第２９版、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ，１９８９  、に見い出すことができる。これらの薬物は市販されており、そして／または当該技術分野で既知の方法で製造できる。
【００１７】
この発明を実施する上で有用な薬物の具体例としては、１７−α−プレグノ−２，４−ジエン−２０−イノ−〔２，３−ｄ〕−イソキサゾール−１７−オール（ダナゾール）、５α，１７α，−１′−（メチルスルホニル）−１′Ｈ−プレグノ−２０−イノ−〔３，２−ｃ〕−ピラゾール−１７−オール（ステロイドＡ）、〔６−メトキシ−４−（１−メチルエチル）−３−オキソ−１，２−ベンズイソチアゾール−２（３Ｈ）−イル〕メチル２，６−ジクロロベンゾエート１，１−ジオキシド（ＷＩＮ  ６３，３９４）、３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシド（ＷＩＮ  ５９，０７５）、ピポサルファム、ピポサルファン、カプトテシン、アセトミノフェン、アセチルサリチル酸、アミオダロン、コレスチフミン、コレスチポール、クロモリンナトリウム、アルブテロール、スクラルフェート、スルファサラジン、ミノキシジル、テンパゼパム、アルプラゾラム、プロポキシフェン、オーラノフィン、エリスロマイシン、サイクロスポリン、アシクロビア、ガンシクロビア、エトポサイド、メファラン、メトトリキセート、ミノキサントロン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、メガステロール、タモキシフェン、メドロキシプロゲステロン、ナイスタチン、テルブタリン、アンホテリシンＢ、アスピリン、イブプロフェン、ナプロキセン、インドメタシン、ジクロフェナック、ケトプロフェン、フルビプロフェン、ジフルミサール、エチル−３，５−ジアセトアミド−２，４，６−トリヨードベンゾエート（ＷＩＮ  ８８８３）、エチル（３，５−ビス（アセチルアミノ）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）アセテート（ＷＩＮ  １２，９０１）およびエチル−２−（３，５−ビス（アセチルアミノ）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）アセテート（ＷＩＮ  １６，３１８）が代表的なものとして挙げられる。
【００１８】
この発明の好ましい態様では、薬物がダナゾール（Ｄａｎａｚｏｌ）  またはステロイド（Ｓｔｅｒｏｉｄ）Ａのようなステロイド、抗ウイルス薬、抗炎症薬、抗新生物薬、放射性医薬または診断像形成剤である。
【００１９】
この発明の粒子は、前記のような表面に表面変性剤を担持する薬物の離散した相を含む。有用な表面変性剤は、薬物に化学的に結合することなく薬物表面に物理的に付着するものが含まれると信じられている。
【００２０】
好ましくは、適当な表面変性剤は、既知の有機および無機医薬賦形剤から選ばれる。このような賦形剤としては、各種ポリマー類、低分子オリゴマー類、天然物および界面活性剤が挙げられる。好ましい表面変性剤は非イオンおよび陰イオン界面活性剤を含む。賦形剤の代表例としては、ゼラチン、カゼイン、レシチン（ホスファチド類）、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、ベンザルコニウムクロライド、ステアリン酸カルシウム、グリセリルモノステアレート、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化性ワックス、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば、セトマクロゴール１０００のようなマクロゴールエーテル類）、ポリオキシエチレンひまし油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば、市販の  Ｔｗｅｅｎ類）、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンステアレート、コロイド状二酸化ケイ素、ホスフェート、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非結晶セルロース、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）およびポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）が挙げられる。これらの賦形剤のほとんどは、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ  」（アメリカ薬学会およびイギリス薬学会からの共同出版、ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６）に詳細に記載されている。これらの表面変性剤は、市販されており、そして／または当該技術分野で既知の方法によって製造できる。２種以上の表面変性剤を組み合わせて使用してもよい。
【００２１】
特に好ましい表面変性剤としては、ポリビニルピロリドン、チロキサポール、プルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）Ｆ６８およびＦ１０８（これらは、ＢＡＳＦから入手できるエチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーである）、テトロニック（Ｔｅｔｒｏｎｉｃ）９０８（Ｔ９０８）（これは、ＢＡＳＦから入手できる、エチレンジアミンへのエチレンオキシドおよびプロピレンオキシドの連続付加物由来の４官能性ブロックコポリマーである）、デキストラン、レシチン、エーロゾル（Ａｅｒｏｓｏｌ）ＯＴ（これは、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ  から入手できる、スルホコハク酸ナトリウムのジオクチルエステルである）  、デュポノール（Ｄｕｐｏｎｏｌ）Ｐ（これは、ＤｕＰｏｎｔから入手できる、ラウリル硫酸ナトリウムである）  、トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ）Ｘ−２００（これは、Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ  から入手できる、アルキルアリールポリエーテルスルホネートである）  、ツウィーン（Ｔｗｅｅｎ）２０およびツウィーン８０（これらは、ＩＣＩ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  から入手できる、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類である）  、カーボワックス（Ｃａｒｂｏｗａｘ）３３５０および９３４（これらは、Ｕｎｉｏｎ  Ｃａｒｂｉｄｅ  から入手できる、ポリエチレングリコール類である）  、クロデスタ（Ｃｒｏｄｅｓｔａ）Ｆ−１１０（これは、Ｃｒｏｄａ  Ｉｎｃ．から入手できる、シュークロースステアレートおよびシュークロースジステアレートの混合物である）  、クロデスタ５Ｌ−４０（これはＣｒｏｄａ  Ｉｎｃ．から入手できる）  、ならびにＳＡ９０ＨＣＯ〔これは、Ｃ１８Ｈ３７ＣＨ２  −（ＣＯＮ（ＣＨ３）ＣＨ２（ＣＨＯＨ）４  ＣＨ２  ＯＨ）２である〕が挙げられる。特に、有用であることが見い出された表面変性剤としては、ポリビニルピロリドン、プルロニックＦ−６８およびレシチンが挙げられる。
【００２２】
表面変性剤は、約４００ｎｍ未満の有効平均粒子サイズを維持するのに十分量で薬物表面に吸着される。この表面変性剤は薬物またはそれ自体とは化学反応しない。さらに、表面変性剤の個々に吸着された分子は、実質的に分子間架橋を含まない。
【００２３】
本明細書で使用する「粒子サイズ」とは、当該技術分野で周知の通常の粒子サイズ測定法、例えば、沈降フィールド・フロー・フラクショネーション、光子相関分光法（ｐｈｏｔｏｎ  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ）  またはディスク遠心分離のような常用されている粒子サイズ測定法によって測定されるような数平均粒子サイズをいう。「約４００ｎｍ未満の有効平均粒子サイズまたは有効平均粒子サイズ約４００ｎｍ未満」とは、前記方法で測定した場合に、粒子の少なくとも９０％が約４００ｎｍ未満の重量平均粒子サイズを持つことを意味する。この発明の好ましい態様では、有効平均粒子サイズが約２５０ｎｍ未満である。この発明のある態様では、約１００ｎｍ未満の有効平均粒子サイズが達成された。有効平均粒子サイズに関して、好ましくは粒子の少なくとも９５％、より好ましくは少なくとも９９％が有効平均値、例えば、４００ｎｍより小さい粒子サイズを持つことが好ましい。特に好ましい態様では、実質的に全部の粒子が４００ｎｍより小さいサイズを持つ。ある態様では、実質的に全部の粒子が２５０ｎｍより小さいサイズを持つ。
【００２４】
この発明の粒子は、液体分散媒質に薬物を分散する工程および約４００nm未満の有効平均粒子サイズまで薬物の粒子サイズを低減するように粉砕媒体の存在下で機械的手段にかける工程を含んでなる方法で調製できる。これらの粒子は表面変性剤の存在下でサイズを低減できる。
【００２５】
この発明の粒子の一般的な調製方法は、下記に示す。選ばれる薬物は、通常の粗い状態で市販されており、そして／または当該技術分野で既知の方法によって調製される。必須でないが、選ばれる粗い薬物の粒子サイズは、篩い分け分析により測定した場合に約１００μｍ未満であることが好ましい。薬物の粒子サイズが約１００μｍより大きい場合には、通常の粉砕方法、例えばエアージェットミルまたはフラグメンテーションミル法で１００μｍ未満に薬物粒子のサイズを低減することが好ましい。
【００２６】
次に、選ばれた粗い薬物を実質的に不溶性でプレミックスを形成する液体媒質に添加することができる。液体媒質中の医薬濃度は、約０．１〜６０重量％、好ましくは５〜３０重量％に変動することができる。表面変性剤の濃度は、薬物と表面変性剤とを合わせた総重量に基づいて約０．１〜約９０重量％、好ましくは１〜７５重量％、より好ましくは２０〜６０重量％で変動できる。このプレミックスの見掛粘度は約１００センチポアズ未満が好ましい。
【００２７】
プレミックスを機械的手段に直接かけることによって、分散体中の平均粒子サイズを４００ｎｍ未満まで低減することができる。摩砕にボールミルが使用される場合には、プレミックスを直接使用することが好ましい。別法としては、場合によって、薬物および表面変性剤を適当な攪拌機、例えばローラーミルまたはカウレス（Ｃｏｗｌｅｓ）タイプミキサーを用い、大きな凝集体が肉眼で見られない均質な分散体が観察されるまで液体分散媒質に分散できる。摩砕に再循環媒体ミルが使用される場合には、このようなプレミル分散工程にプレミックスを用いることが好ましい。
【００２８】
薬物の粒子サイズを低減するのに使用する機械的手段は、都合よくは、分散ミルの形式をとることができる。適当な分散ミルとしては、ボールミル、アトリッターミル、バイブレーターミル、ならびにサイドミルおよびビーズミルのような媒体ミルが挙げられる。
意図する結果、すなわち所望の粒子サイズへの低減を得るには比較的短時間であることが必要であるため、媒体ミルが好ましい。媒体ミルではプレミックスの見掛粘度が約１００〜約１０００センチポアズであることが好ましい。ボールミルではプレミックスの見掛粘度が約１〜約１００センチポアズであることが好ましい。このような範囲が粒子破砕と媒体浸触との間の最適なバランスを与える傾向にある。
【００２９】
粒子サイズ低減工程の粉砕媒体は、好ましくは球形または粒状で、平均粒子サイズ約３ｍｍ未満、より好ましくは約１ｍｍ未満を有する硬質媒体から選ぶことができる。このような媒体は、短い処理時間で、かつミル装置に摩損をほとんどもたらさないで本発明の粒子を提供できるものが好ましい。粉砕媒体用の材質の選択は、限定されないものと思われている。本発明者らは、マグネシアで安定化した９５％ＺｒＯのような酸化ジルコニウム、ケイ酸ジルコニウムおよびガラス粉砕媒体が医薬組成物の調製に許容できるものと思われる汚染レベルの粒子を提供することを見い出した。しかしながら、ステンレス鋼、チタニア、アルミナおよびイットリウムで安定化した９５％ＺｒＯのような他の媒体も有用であるものと予想されている。好ましい媒体は、約３ｇ／ｃｍ３  より大きい密度を有する。
【００３０】
摩砕時間は、主として特定の機械的手段や選ばれた処理条件に応じて広範に変動できる。ボールミルについては、５日までまたはそれより長い処理時間が必要となろう。他方、１日未満の処理時間（１分〜数時間滞留時間）では、より強い剪断媒体ミルを用いて所望の結果が得られた。
【００３１】
粒子は、薬物を著しく失活させない温度でサイズを低減しなければならない。処理温度は、約３０〜４０℃未満が一般的に好ましい。場合によって、処理装置を通常の冷却装置で冷却することができる。この方法は、周囲温度条件下に粉砕工程にとって安全で有効な処理圧力下で実施することが簡便である。例えば、ボールミル、アトリッターミルおよびバイブレーターミルの周囲処理圧力が典型である。約２０ｐｓｉ（１．４ｋｇ／ｃｍ２）までの処理圧力が媒体ミルの典型である。
【００３２】
その後、分散体を、例えば激しく振とうすることによって混合することができる。場合によっては、分散体を、例えば超音波出力源を用いて音波処理にかけることもできる。例えば、２０〜８０kHz の振動数を有する超音波エネルギーに約１〜１２０秒間かけることができる。
【００３３】
薬物と表面変性剤の相対量は、広範に変えることができ、そして表面変性剤の最適量は、例えば、選ばれる特定の薬物と表面変性剤に依存し、表面変性剤がミセルを形成する場合には臨界ミセル濃度、などに依存する。表面変性剤は薬物の表面積（１ｍ２  ）当り約０．１〜１０ｍｇの量で存在することが好ましい。表面変性剤は、乾燥粒子の総重量に基づき、０．１〜９０重量％、好ましくは２０〜６０重量％の量で存在できる。
【００３４】
後述する例のように、表面変性剤と薬物のどの組み合わせも所望の結果を提供するとは限らない。従って、本発明者らは所望の粒子の安定な分散体を提供するのに適する表面変性剤と薬物を選択できる簡単なスクリーニング方法を開発した。まず最初に、目的とする選ばれた薬物の粗粒子を薬物が実質的に不溶性の液体（例えば、水）に５重量／重量％で分散させ、次いで下記例１に示す標準的なミル条件下のＤＹＮＯ−ＭＩＬＬで６０分間粉砕した。次に、粉砕された物質を既知小量ずつ分割し、薬物と表面変性剤の合わせた総量に基づき、２重量％、１０重量％および５０重量％の濃度で表面変性剤を添加した。次に、これらの分散体を音波処理（１分、２０ｋＨｚ）して凝集体を分散させ、そして光学顕微鏡（１０００倍）下での試験で粒子サイズを分析した。安定な分散体が観察できる場合には、次に、上述に従って特定の薬物表面変性組み合わせ体を調製するための工程を最適化できる。「安定」とは、分散体が調製後少なくとも１５分、好ましくは２日以上裸眼で観察できる凝集沈殿または粒子の凝集を示さないことを意味する。
【００３５】
この発明で得られた分散体は安定であり、そして液体分散媒質と前記粒子からなる。この表面変性薬物微小粒子の分散体は、当該技術分野で周知の方法により流動床式スプレーコーターで糖球上または医薬賦形剤上に噴霧塗布できる。
【００３６】
この発明の医薬組成物は、前記粒子とそれらに対する薬学的に許容される賦形剤とを含む。適当な薬学的に許容される賦形剤は当業者に周知である。これらとしては、非経口用、固体状もしくは液状の経口投与用、直腸投与用などの無毒性の生理学上許容されるキャリア、アジュバントまたはベヒクルが挙げられる。
この発明による哺乳類の処置方法は、処置を要する哺乳類に有効量の前記医薬組成物を投与する工程を含んでなる。
【００３７】
処置用薬物の薬物の有効用量レベルは、投与する特定の組成物および方法に対する所望の治療応答を得るための有効量である。従って、選ばれた用量レベルは、特定の薬物、所望の治療効果、投与経路、所望の処置持続時間および他の因子に依存する。記載したように、この発明の医薬組成物は下記例で具体的に説明するような驚くべき高い生体利用効率を示すことが、特に有益な特徴である。さらに、この発明の薬物粒子は経口投与で薬物作用のより迅速な開始を示し、低い胃刺激性を示す。
【００３８】
この発明の医薬組成物は、経口および静注をはじめとする非経口投与法において特に有用であるものと考えられる。この発明前には静注できなかった低い水溶性の薬物も、この発明によって安全に投与できることが期待される。さらに、生体利用効率が乏しいため経口投与できなかった薬物もこの発明により有効に投与可能である。
【００３９】
本発明者らは理論的な機構に拘束されることを欲しないが、表面変性剤は粒子間の機械的または立体的障壁として作用することにより粒子の凝集沈殿および／または凝集を妨げ、粒子間が凝集や凝集沈殿に必要な近くまで接近することを最小限に止めるものと信じられる。また、表面変性剤がイオン性基である場合には、静電斥力によって安定化がもたらされるのかも知れない。このように小さな有効平均粒子サイズと許容できない汚染を伴なわない安定な薬物粒子がこの発明の方法によって調製できることは予想外のことであった。
【００４０】
【実施例】
以下の例により、この発明をさらに具体的に説明する。
【００４１】
例１  ＰＶＰ変性ダナゾール粒子のボールミルでの調製
ダナゾールの微粒子分散体を、ＤＹＮＯ−ＭＩＬＬ（ＫＤＬ型、Ｗｉｌｌｙ  Ａ．Ｂａｃｈｏｆｆｅｎ  ＡＧ  Ｍａｓｃｈｉｎｅｎｆａｂｒｉｋで製造）  を用いて調製した。以下の成分をガラス容器に加え、次いで２４時間ローラーで攪拌してポリビニルピロリドン表面変性剤を溶解した。
ポリビニルピロリドンＫ−１５（ＧＡＦ製）−９８ｇ
高純水−６６４ｇ
【００４２】
次に、乾燥粉末ダナゾール３２７ｇを前記溶液に加え、次いで１週間粉砕した。この工程は表面変性剤溶液にダナゾールを均質に分散させるのに役立つので、媒体ミルで必要な処理時間を短縮する。ダナゾールは、Ｓｔｅｒｌｉｎｇ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｃ．より超微粉砕した状態のもの（平均粒子サイズ約１０ミクロン）を購入した。これらの粒子は、通常のエアージェットミル法で調製されたものである。このプレミックスを収容容器に加え、低速で通常の羽根ミキサーで攪拌して媒体ミル処理用の均質混合物を保持した。次に、媒体ミル工程用の媒体ミルを用意した。ミル粉砕容器をシリカガラス球体を部分的に充填し、以下の条件で操作される媒体ミルによりプレミックスを連続的に再循環させた。
【００４３】
粉砕容器：水ジャケットを備えたステンレス鋼容器
プレミックスの流速：１分当り２５０ｍＬ
粉砕容器の有効容積：５５５ｍＬ
媒体容量：ガラスビーズ４７２ｍＬ
媒体タイプ：サイズ範囲０．５〜０．７５ｍｍのシリカガラスビーズ（無鉛）（                  Ｇｌｅｎ  Ｍｉｌｌｓ，Ｉｎｃ．から入手）
再循環時間：２４０分
滞留時間：６０分
羽根の速度：３０００ＲＰＭ  、接線速度１９５２ｆｔ／ｍｉｎ（５９５  ｍ／ｍｉｎ）
粉砕容器の冷却液：水
冷却液温度：５０°Ｆ（１０℃）
【００４４】
２４０分間スラリーを再循環後、分散体試料を採取し、沈降フィールド・フロー・フラクショネーター  （ＤｕＰｏｎｔ製）で粒子サイズ分布を評価した。これらの粒子は、数平均直径７７．５ｎｍを有し、そして重量平均直径１３９．６ｎｍを有することが決定された。この分散体の粒子サイズは、３〜３２０ｎｍの範囲であった。
【００４５】
例２  ＰＶＰ変性ダナゾール粒子のローソリッド（ｌｏｗ  ｓｏｌｉｄ）  ボールミルによる調製
ダナゾールの微粒子分散体をボールミル法で調製した。シリンダー様ガラス容器６００ｍＬ（内径＝３．０インチ（７．６ｃｍ））を、下記粉砕媒体でほぼ半分程充填した。
【００４６】
粉砕媒体：酸化ジルコニウム粉砕球体（Ｚｉｒｃｏａ，Ｉｎｃ．製）
媒体サイズ：０．８５〜１．１８ｍｍ径
媒体容積：３００ｍＬ
このガラス容器に下記の乾燥成分を直接加えた。
ダナゾール（超微粉砕されたもの）：１０．８ｇ
ポリビニルピロリドンＫ−１５：３．２４ｇ
高純水：２０１．９６ｇ
【００４７】
ダナゾールはＳｔｅｒｌｉｎｇ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｃ．から超微粉砕された状態（平均粒子サイズ１０ミクロン）のものを購入した。そしてポリビニルピロリドンはＧＡＦ製のＫ−１５グレードであった。シリンダー様の容器を、「臨界回転速度」の５７％でその軸線に対して水平方向に回転させた。「臨界回転速度」は、粉砕媒体の遠心力が生じるときの粉砕容器の回転速度と定義される。この速度において、粉砕球体に作用する遠心力が容器の内壁にそれらを押し付けそしてしっかりと保持する。好ましくない遠心をもたらす条件は、簡単な物理の原理から算出できる。
【００４８】
ボールミルの５日後、粉砕媒体からスラリーをスクリーンを通して分離し、沈降フィールド・フロー・フラクショネーターで粒子サイズについて評価した。測定された数平均粒子径は８４．９ｎｍであり、重量平均粒子径は１６９．１ｎｍであった。これらの粒子は粒子サイズ２６〜３４０ｎｍの範囲にあった。表面変性剤の量は、凝集に対するコロイド安定性を提供し、そして次の段階で正確な物質の供給を保証する均質な成分のブレンドを維持するのに十分であった。
【００４９】
生体利用効率試験
絶食した雄のビーグル犬で上述の微小粒子に由来するダナゾールの生体利用効率を、未粉砕ダナゾールの懸濁物に由来するものと比較した。この懸濁物は、ボールミル処理工程を除いて前記分散体と同様な方法により懸濁物として調製した。両製剤を経口ガバージュにより５匹の犬それぞれに投与し、次いで橈側皮静脈中のカニューレを介して血漿を得た。２４時間中、血漿ダナゾールレベルをモニターした。
【００５０】
微小粒子分散体に由来するダナゾールの相対生体利用効率は、通常のエアージェットミル処理によって調製された約１０ミクロンの平均粒子サイズを有するダナゾール粒子を含むダナゾール懸濁物より１５．９倍高かった。経口血漿レベルをダナゾール静注後の用量補正血漿レベルにたとえると、平均絶対生体利用効率（±ＳＥＭ）は微小粒子分散体について８２．３±１０．１％を与え、そして未粉砕物について５．１±１．９％を与えた。
【００５１】
例３  ＰＶＰ変性ダナゾール粒子のハイソリッド（ｈｉｇｈ  ｓｏｌｉｄ）ボールミルによる調製
ダナゾールの微小粒子分散体を、径１ｍｍのガラス粉砕媒体（Ｐｏｔｔｅｒｓ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓより入手、０．８５〜１．１８ｍｍ）を用いて調製した。容積４００ｍＬで径２．７５インチ（７．０ｃｍ）のシリンダー様ガラス容器に無鉛ガラス粉砕媒体２１２ｍＬを充填した。以下の成分をこの容器に加えた。
【００５２】
超微粉砕されたダナゾール−３０．４ｇ
ポリビニルピロリドンＫ−１５−９．１２ｇ
高純水−１１２．４８ｇ
【００５３】
この容器を５日間１分当りの回転数（ＲＰＭ）８０．４（臨界回転速度の５０％）に制御された回転速度でその軸線に対して水平方向に回転させた。スラリーをすぐさま粉砕媒体から分離し、誘導結合高周波プラズマ発光分光分析（ＩＣＰ）を用いて粒子サイズおよび粉砕媒体アトリッションについて評価した。沈降フィールド・フロー・フラクショネーターで測定された粒子サイズは、数平均径が１１２．７ｎｍであり、そして重量平均径が１７９．３ｎｍであった。媒体アトリッションの程度を誘導結合プラズマ原子発光分光法により測定して、最終分散体の純度を確定した。最終分散体におけるケイ素レベルは、スラリー１００万部当り元素ケイ素１０部未満であった。
【００５４】
例４  ＰＶＰ変性ダナゾール粒子
ボールミル分散法でダナゾールの微小粒子分散体を調製して臨床評価した。この分散体はガラス粉砕媒体でミル処理することにより調製した。使用した粉砕媒体は、媒体タイプが０．８５〜１．１８ｍｍの無鉛ガラス球体であり、媒体量は６１００ｍＬであった。この媒体を３ガロン（１１．３６ｌ）の磁器ジャーに加えた。次に以下の成分をこのジャーに加えた。
【００５５】
ダナゾール（超微粉砕された）−１０００ｇ
ポリビニルピロリドンＫ−１５−３００ｇ
高純水−３７００ｇ
【００５６】
容器を３９．５ＲＰＭ  （臨界回転速度の５０％）の回転速度で５日間ロールした。液体スラリーを、スクリーンにより粉砕媒体から分離し、それを使用して臨床試験用固体経口用量剤を調製した。この分散体を、沈降フィールド・フロー・フラクトメーターにより評価したところ、数平均径１３４．９ｎｍで重量平均径２２２．２ｎｍと測定された。粉砕媒体に由来する汚染度を測定（ＩＣＰにより）ところ、分散体１００万部当りケイ素３６部であった。５ｐｐｍ  未満のアルミニウムが検出された。出発粉末のＸ線粉末回折データを分散ダナゾールと比較したところ、固体分散粒子の結晶構造形態は分散処理によって変化しないことを示した。
【００５７】
例５  ＰＶＰ変性ダナゾール粒子
ダナゾールの微小粒子分散体を、実験室媒体ミル（粉砕機）とガラス粉砕媒体を用いて調製した。媒体ミルは５０ｍｌ粉砕チャンバーを備えていて、このミルは  Ｅｉｇｅｒ  Ｍａｃｈｉｎｅｒｙ  Ｉｎｃ製の「Ｍｉｎｉ」Ｍｏｔｏｒｍｉｌｌ  であった。
【００５８】
媒体ミルは、以下の処理条件で操作した。
充填ビーズ：ガラス球体４２．５ｍＬ
ローター速度：５０００ＲＰＭ  〔１分当り２６１７フィート（７９８  ｍ／ｍｉｎ  ）接線速度〕
粉砕媒体：無鉛ガラスビーズ  ０．７５〜１．０ｍｍ（Ｇｌｅｎｓ  Ｍｉｌｌｓより市販）
【００５９】
分散体製品は、５０ｍｍ「Ｃｏｗｌｅｓ」タイプ羽根を備えたスチール容器中、水１８３ｇにポリビニルピロリドン２７ｇを溶解して、未溶解ＰＶＰポリマーがなくなりそして溶液が透明になるまで攪拌した。最大回転速度を５０００ＲＰＭ  に維持した。このブレンドを３０分間混合しながらそれに超微粉砕ダナゾール９０ｇをゆっくり添加した。このプレミックス２００ｃｃをミルの貯蔵タンクに加え、次いで５時間５１分再循環させた。粉砕ゾーンにおける最終滞留時間は４０分であった。
【００６０】
最終平均粒子サイズを測定したところ、数平均径７９．９ｎｍで重量平均径１６１．２ｎｍを有することが測定された。粒径の変動幅は３０〜４１５ｎｍであった。粉砕媒体と粉砕容器の浸触に由来するアトリッションレベルを測定（ＩＣＰにより）したところ、鉄１７０ｐｐｍ  およびケイ素７１ｐｐｍ  であった。結晶構造をＸ線回折により測定したところ、それは分散処理によって変化しなかった。
【００６１】
例６  レシチン変性ステロイドＡ粒子
ステロイドＡの微小粒子分散体を、酸化ジルコニウム粉砕ビーズを備えたボールミルで調製した。表面変性剤の不存在下で分散体を調製したところ、ステロイドＡの分散相を安定化し、そして凝集および急な沈降を防ぐにはレシチンの後添加と音波処理工程が必要であった。ステロイドＡの微小粒子分散体を、以下の成分のボールミル処理により調製した。
【００６２】
ステロイドＡ−５ｇ
高純水−９５ｇ
ステロイドＡは約１００μｍの粒子サイズで約４００μｍまでの範囲内にある未粉砕粗粉末状であった。
【００６３】
以下の処理条件を使用した。
媒体：１３５ｍＬ
容器容積：２４０ｍＬ
媒体タイプ：０．８５〜１．１８ｍｍのジルビーズ（Ｚｉｒｂｅａｄ）（Ｚｉｒｃｏａ  Ｉｎｃ．  製）  粉砕時間：４日
粉砕速度：８６ＲＰＭ（臨界回転速度の５０％）
【００６４】
ボールミル処理４日後、スラリーを粉砕媒体からスクリーンを介して分離した。この未安定化スラリーをレシチンの水性溶液（高純水中１重量％のＣｅｎｔｒｏｌｅｘ  「Ｐ」，Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｓｏｙａ  Ｃｏｍｐａｎｙ製のレシチン）１０ｇに加え、激しく撹拌して混合し、次いで超音波ホーン（モデル３５０、Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  Ｐｏｗｅｒ  Ｓｕｐｐｌｙ  、ホーン径＝０．５インチ（１．２７ｃｍ）、パワー設定＝２）を用いて２０秒間音波処理した。このスラリー顕微鏡下でサイズを測定した。位相差イルミネーションを伴うオリンパス（Ｏｌｙｍｐｕｓ）ＢＨ−２光学顕微鏡を使用して分散体のサイズと状態を観察した。
【００６５】
前記希釈スラリー１滴を顕微鏡スライドとカバーグラススリットとの間に置き、高倍率（１，０００倍）で顕微鏡観察し、水単独（表面変性剤を含まない）で同様に希釈したスラリーと比較した。未変性分散体は、強い粒子凝集を示した。未変性分散体の粒子サイズは１０μｍを越え、そしてこの未変性分散体はブラウン運動を示さなかった。ブラウン運動は、約１μｍ未満のサイズ範囲内にある粒子が液体中で示す振動または不規則運動である。レシチン変性粒子は、激しいブラウン運動を示した。このように観察された分散体は、数平均粒子サイズ４００ｎｍ未満に一致する特性と特徴を有していた。さらに、追加のミル処理はさらなる粒子サイズの低減をもたらすであろうと予期される。
【００６６】
例７  アルキルアリールポリエーテルスルホネート変性ステロイドＡ
レシチンをトリトン（Ｔｒｉｔｏｎ）Ｘ−２００（Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓ  製）  で置き換えたこと以外は、例６を繰り返した。同様の結果が観察された。
【００６７】
例８  アラビアゴム変性ステロイドＡ
レシチンをアラビアゴム（Ｅａｓｔｍａｎ  Ｋｏｄａｋ  Ｃｏ  より入手可）で置き換えたこと以外は、例６を繰り返した。同様の結果が観察された。
【００６８】
例９  ラウリル硫酸ナトリウム変性ステロイドＡ
レシチンをラウリル硫酸ナトリウム（ＤｕＰｏｎｔ，Ｉｎｃ．よりＤｕｐｏｎｏｌ  ＭＥとして入手可）で置き換えたこと以外は例６を繰り返した。同様の結果が観察された。
【００６９】
例１０  スルホコハク酸ナトリウムのジオクチルエステルで変性したステロイドＡ
レシチンをエーロゾル（Ａｅｒｏｓｏｌ）ＯＴ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｙａｎａｍｉｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｉｎｃ．より入手可）で置き換えたこと以外は例６を繰り返した。同様の結果が観察された。
【００７０】
例１１  エチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーで変性したステロイドＡ
レシチンをプルロニック（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）Ｆ６８（ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐ．より入手可）で置き換えたこと以外は例６を繰り返した。同様の結果が観察された。
【００７１】
例１２  エチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーで変性したステロイドＡ
ステロイドＡの微小粒子分散体を、５日間酸化ジルコニウム粉砕媒体でボールミル処理して調製した。粉砕媒体７０ｃｃを１１５ｃｃの容器に加え、次いでステロイドＡ２．５ｇ、プルロニックＦ６８  ０．７５ｇおよび高純水４６．７５ｇを加えた。
【００７２】
得られた混合物を、臨界回転速度の５０％で５日間ボールミル処理した。最終分散体を、粉砕媒体から分離し、例６のように粒子サイズについて顕微鏡で評価した。この分散体は激しいブラウン運動を示し、１ミクロンを越える粒子は存在しなかった。ほとんどの粒子が４００ｎｍ未満であった。
【００７３】
例１３  レシチン変性ステロイドＡ粒子
プルロニックＦ６８をセントロレックス（Ｃｅｎｔｒｏｌｅｘ）Ｐで置き換えたこと以外は例１２を繰り返した。１μｍを越える粒子は顕微鏡で観察されず、そしてほとんどが４００ｎｍ未満であった。
【００７４】
例１４  エチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーで変性したステロイドＡ粒子
ステロイドＡの微小粒子分散体をボールミル処理により調製した。以下の成分をシリンダー様０．９５Ｌ容器に加えた。この容器を以下の粉砕媒体で約半分まで満たした。
【００７５】
粉砕媒体：径０．８５〜１．１８ｍｍの酸化ジルコニウム球体（Ｚｉｒｃｏａ製）
以下の分散体成分を前記ガラス容器に直接添加した。
ステロイドＡ：１８ｇ
プルロニックＦ６８（ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐより購入）：４．５ｇ
高純水：３３６．６ｇ
ステロイドＡはＳｔｅｒｌｉｎｇ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｃ．から平均粒子サイズ約１００μｍを有する超微粉砕された平板状結晶の形状のものを購入した。
【００７６】
この容器を、５日間臨界回転速度の５０％で軸線を中心に回転させた。その後、プルロニックＦ６８  ４．４５ｇをスラリーに加え、同一条件でさらに５日間回転させた。次に、スラリーを取り出して粉砕媒体と分離し、沈降フィールド・フロー・フラクショネーターで粒子サイズについて評価した。測定された数平均粒子サイズは２０４．６ｎｍで、重量平均粒子サイズは３１０．６ｎｍであった。この粒子サイズ分布は、約６８〜５２０ｎｍの範囲内にあった。分散体を光学顕微鏡で試験した。このものは、優れた粒子保全性を示し、凝集沈殿も凝集も存在しなかった。この分散粒子は激しいブラウン運動を示した。
【００７７】
生体利用効率試験
雄ビーグル犬における上述の微小粒子分散体に由来するステロイドＡの生体利用効率を、未粉砕ステロイドＡ（約１００μｍの平均粒子サイズを有する）の懸濁物のそれとを比較した。この未粉砕物は、ボールミル処理を除く以外は前記分散体と同様な方法により懸濁物として調製した。両製剤を経口ガバージュにより５匹の犬それぞれに投与し、次いで橈側皮静脈中のカニューレを介して血漿を得た。２４時間中、血漿ステロイドＡレベルをモニターした。微小粒子分散体に由来するステロイドＡの相対生体利用効率は、未粉砕ステロイドＡ懸濁物のものよりも７．１倍高かった。経口血漿レベルをステロイドＡ静注後の用量補正血漿レベルにたとえると、平均絶体生体利用効率（±ＳＥＭ）は微小粒子分散体について１４．８±３．５％を示し、未粉砕物について２．１±１．０％を示した。
【００７８】
比較例Ａ
酸化ジルコニウム粉砕ビーズを用いるボールミル処理によりステロイドＡの分散体を調製した。この分散体は表面変性剤の不存在下で調製し、次いで凝集沈殿および凝集を最小化する目的で後音波処理工程を使用した。
【００７９】
微小粒子分散体は以下の成分のボールミル処理によって調製した。
ステロイドＡ：５ｇ
高純水：９５ｇ
以下の処理条件を使用した。
粉砕媒体：１３５ｍＬ
容器容積：２４０ｍＬ
粉砕媒体：０．８５〜１．１８ｍｍのジルビーズ（Ｚｉｒｂｅａｄ）ＸＲ
粉砕時間：４日
粉砕速度：８６ＲＰＭ（臨界回転速度の５０％）
【００８０】
ボールミル処理４日後、スクリーンを介してスラリーを粉砕媒体から分離した。未安定化スラリー１ｇを高純水１０ｇを混合して激しく振盪させ、次いで超音波ホーン（モデル３５０、Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  Ｐｏｗｅｒ  Ｓｕｐｐｌｙ  、ホーン径＝０．５インチ（１．２７ｃｍ）、パワー設定＝２）を用いて２０秒間音波処理を行った。スラリーを顕微鏡下でサイズ測定した。位相差イルミネーションを備えた光学顕微鏡を用いて分散状態を観察した。
【００８１】
希釈スラリー１滴を、顕微鏡スライドとカバーグラススリップとの間に置き、高倍率（４００倍）で観察した。この分散体はひどい粒子凝集を示した。凝集体サイズは１０ミクロンを越え、このものはブラウン運動を示さなかった。
【００８２】
例１５〜４９
表１にこの発明の追加の例をまとめる。表１の例のそれぞれは、４００ｎｍ未満の有効平均粒子サイズを有する粒子をもたらした。
【００８３】
【表１】
0003602546.tif 000002
【００８４】
【表２】
0003602546.tif 000003
【００８５】
これらの例は、この発明の湿式粉砕方法が、基が相違する化学構造を有する、ステロイド類、抗炎症薬、抗新生物薬、放射性医薬および診断像形成薬をはじめとする多種多様の水溶性に乏しい薬物に広範に適用できることを示す。その上、これらの例は、この発明が各種表面変性剤と一緒に、そして多様な表面変性剤濃度で実施できる。
【００８６】
さらに、実験結果は、この発明に従って調製した粒子が、各種の予期できない、特に高い生体利用効率に関する特性を示したことを明らかにした。例えば、上述のように、この発明によるステロイドＡおよびダナゾールを含有する医薬組成物は、驚くべきことに、常法により調製された分散体に比し、７倍および１６倍高い生体利用効率を示した。この発明により調製されたＷＩＮ  ６３，３９４の水性分散体はＷＩＮ  ６３，３９４の通常の分散体に比べた場合、３７倍も高い生体利用効率をもたらした。
【００８７】
これらの分散体は、２方法の交差試験として、絶食状態にある３匹の犬に体重１ｋｇ当り５ｍｇのＷＩＮ  ６３，３９４用量で投与した。連続的に血液試料を採取し、ＷＩＮ  ６３，３９４についてＨＰＬＣで分析した。相対生体利用効率は、時間に対する濃度についてプロットした曲線の下部面積から算出した。この発明の粒状薬物は従来法で調製したより多量の薬物用量と同等の治療効果を達成できるので、前記のように高い生体利用効率が特に有益である。
【００８８】
それに加え、この発明の粒子を含有する医薬組成物は、改良された用量比と低い変動性（食事をとった場合と絶食の場合の）を示した。さらに、ナプロキセンまたはインドメタシンを含んでなるこの発明の粒子は、経口投与した場合に、従来のナプロキセン製剤およびインドメタシン製剤に比べ遙かに迅速に作用が開始された。さらにまた、この発明の粒子のあるものは、Ｘ線コントラスト組成物として著しく有用であることがわかった。
【００８９】
【発明の効果】
許容できない汚染を伴なわない多種多様の表面変性薬物微小粒子がこの発明によって調製できることが有益な特徴である。
従来の乾式粉砕法のような許容できない粉塵レベルをもたらすことなく、表面変性剤と共に湿式粉砕することによる簡便な薬物微小粒子の調製方法が提供されることも、もう一つのこの発明の利点である。
【００９０】
この発明の他の特に有益な特徴は、予期できない程高い生体利用効率を示す医薬組成物が提供されることにある。
さらにまた、この発明の他の有益な特徴は、低い水溶性の薬物を含有し、静注に適する医薬組成物が提供されることにある。
【００９１】
この発明は、非常に小さな有効平均粒子サイズを有する薬物粒子が、表面変性剤と共に粉砕媒体の存在下で湿式粉砕することにより調製でき、ならびにこのような粒子が安定であり、そし粒子間引力に起因するフロキュレート（または凝集体）をほとんど生じず、さらに予期できないほど高い生体利用効率を示す医薬組成物として製剤できる発見に一部基づく。この発明は、本明細書において、主としてその好ましい用途、すなわち医薬組成物で使用する微小粒子薬物に関して記載してきたが、粒子化粧組成物の調製ならびに画像および磁気記録要素で使用する粒子分散体の調製のような他の用途にも有用である。