【手続補正書】
【提出日】平成29年3月8日(2017.3.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
代謝障害を治療する必要のある対象へ治療有効量の、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアント、または配列番号１の残基１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３または１〜６２を含むこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、代謝障害を治療する方法。
【請求項２】
前記代謝障害は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪性肝炎、２型糖尿病、高血糖、高脂血症、脂質異常血症、肥満、高インスリン血症、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常血症、粥状硬化症、早発性冠動脈性心疾患、脂質異常血症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、及び硬変症からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ニューレグリン４（Ｎｒｇ４）の欠損を特徴とする疾患または容態を治療する必要のある患者へ、治療有効量の、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアント、または配列番号１の残基１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３または１〜６２を含むこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、該疾患または容態を治療する方法。
【請求項４】
前記疾患または容態は、健常患者由来の脂肪組織におけるＮＲＧ４の発現と比較して、脂肪組織におけるＮＲＧ４の発現が低下している、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記疾患または容態は、代謝障害である、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記代謝障害は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪性肝炎、II型糖尿病、高血糖、高脂血症、脂質異常血症、肥満、高インスリン血症、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常血症、粥状硬化症、早発性冠動脈性心疾患、脂質異常血症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、及び硬変症からなる群から選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
肝臓における脂肪蓄積を低下させる必要のある患者へ、治療有効量の、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアント、または配列番号１の残基１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３または１〜６２を含むこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、肝臓における脂肪蓄積を低下させる方法
【請求項８】
前記Ｎｒｇ４タンパク質、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある前記断片は、治療有効量の脂質低下薬と併用投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記脂質低下薬は、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタチン、フルバスタチン、エゼチミブ、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、ナイアシン、ゲムフィブロジル、及びフェノフィブラートからなる群から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
血糖値を低下させる必要のある患者へ、治療有効量の、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアント、または配列番号１の残基１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３または１〜６２を含むこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、血糖値を低下させる方法。
【請求項１１】
前記Ｎｒｇ４タンパク質，Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある前記断片は、治療有効量のインスリン、ＧＬＰ−１、メトホルミン、またはＤＰＰ４阻害薬と併用投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアント、または配列番号１の残基１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３または１〜６２を含むこれらの生物活性のある断片を含む組成物。
【請求項１３】
対象由来の検体における、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、または配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアントの水準を判定する工程を含む、該対象における代謝障害を診断する方法であって、この中で、正常対象における該水準と比較して該対象において低い該水準は、該代謝障害を示唆しており、かつこの中で、該正常対象は、該代謝障害に罹患していないことが判っている、該方法。
【請求項１４】
対象由来の検体における、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、または配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアントの水準を判定する工程を含む、該対象における易罹患性を判定するための方法であって、この中で、正常対象由来の検体における該水準と比較して低い、該対象における該水準は、代謝障害に対する易罹患性を示しており、かつこの中で、該正常対象は、該代謝障害に罹患していないことが判っている、該方法。
【請求項１５】
対象由来の検体における、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアント、または配列番号１の残基１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３または１〜６２を含むこれらの生物活性のある断片の水準を経時的に判定する工程を含む、該対象における代謝障害の進行を判定するための方法であって、この中で、経時的な該Ｎｒｇ４タンパク質、バリアント、またはこれらの生物活性のある該断片の水準の低下は、該代謝障害の進行を示唆している、該方法。
【請求項１６】
対象由来の検体における、配列番号１のアミノ酸配列を含むＮｒｇ４タンパク質、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＮｒｇ４バリアント、または配列番号１の残基１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３または１〜６２を含むこれらの生物活性のある断片の水準を判定する工程を含む、該対象における代謝障害の治療の有効性をモニターするための方法であって、この中で、経時的な該Ｎｒｇ４タンパク質、バリアント、またはこれらの生物活性のある該断片の水準の上昇は、有効な治療を示唆している、該方法。
【請求項１７】
前記代謝障害は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪性肝炎、II型糖尿病、高血糖、高脂血症、脂質異常血症、肥満、高インスリン血症、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常血症、粥状硬化症、早発性冠動脈性心疾患、脂質異常血症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、及び硬変症からなる群から選択される、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
本開示の他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかとなる。しかしながら、詳細な説明及び具体的な実施例は、本開示の好ましい実施形態を示しながらも、例示だけを意図している。その理由は、本開示の精神及び範囲内の種々の変更及び改変が、この詳細な説明から当業者に明らかとなるからである。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
代謝障害を治療する必要のある患者へ治療有効量のＮｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、代謝障害を治療する方法。
（項目２）
前記代謝障害は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪性肝炎、２型糖尿病、高血糖、高脂血症、脂質異常血症、肥満、高インスリン血症、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常血症、粥状硬化症、早発性冠動脈性心疾患、脂質異常血症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、及び硬変症からなる群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記生物活性のある断片は、配列番号１の残基５〜４６、５〜５５、５〜６２、１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３、４〜５２、４〜５３、または１〜６２を含む、項目１または２に記載の方法。
（項目４）
前記Ｎｒｇ４バリアントは、配列番号１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％同一である、項目１または２に記載の方法。
（項目５）
前記Ｎｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片は、ウイルスベクターによってコードされる、項目１〜４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
前記Ｎｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片は、化学的に合成されまたは組換え源から精製される、項目１〜４のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
ニューレグリン４（Ｎｒｇ４）の欠損を特徴とする疾患または容態を治療する必要のある患者へ、治療有効量のＮｒｇ４（配列番号１）、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、該疾患または容態を治療する方法。
（項目８）
前記疾患または容態は、健常患者由来の脂肪組織におけるＮＲＧ４の発現と比較して、脂肪組織におけるＮＲＧ４の発現が低下している、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記脂肪組織は、褐色脂肪組織または白色脂肪組織である、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記疾患または容態は、脂肪細胞と体組織の間にある異常な情報伝達である、項目７、８、または９に記載の方法。
（項目１１）
前記疾患または容態は、代謝障害である、項目７に記載の方法。
（項目１２）
前記代謝障害は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪性肝炎、II型糖尿病、高血糖、高脂血症、脂質異常血症、肥満、高インスリン血症、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常血症、粥状硬化症、早発性冠動脈性心疾患、脂質異常血症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、及び硬変症からなる群から選択される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記生物活性のある断片は、配列番号１の残基５〜４６、５〜５５、５〜６２、１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３、４〜５２、４〜５３、または１〜６２を含む、項目７に記載の方法。
（項目１４）
前記Ｎｒｇ４バリアントは、配列番号１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％同一である、項目７に記載の方法。
（項目１５）
前記Ｎｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片は、ウイルスベクターによってコードされる、項目７に記載の方法。
（項目１６）
前記Ｎｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片は、化学的に合成されまたは組換え源から精製される、項目７に記載の方法。
（項目１７）
肝臓における脂肪蓄積を低下させる必要のある患者へ、治療有効量のＮｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、肝臓における脂肪蓄積を低下させる方法
（項目１８）
前記Ｎｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片は、治療有効量の脂質低下薬と併用投与される、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記脂質低下薬は、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタチン、フルバスタチン、エゼチミブ、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クロフィブラート、ナイアシン、ゲムフィブロジル、及びフェノフィブラートからなる群から選択される、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
血糖値を低下させる必要のある患者へ、治療有効量のＮｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片を投与することを含む、血糖値を低下させる方法。
（項目２１）
前記Ｎｒｇ４，Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片は、治療有効量のインスリン、ＧＬＰ−１、メトホルミン、またはＤＰＰ４阻害薬と併用投与される、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
Ｎｒｇ４、Ｎｒｇ４バリアント、またはこれらの生物活性のある断片、及び医薬として許容し得る担体を含む組成物。
（項目２３）
前記生物活性のある断片は、配列番号１の残基５〜４６、５〜５５、５〜６２、１〜４６、１〜５５、１〜５２、１〜５３、４〜５２、４〜５３、または１〜６２を含む、項目２２に記載の組成物。
（項目２４）
前記Ｎｒｇ４バリアントは、配列番号１と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％同一である、項目２２に記載の組成物。
（項目２５）
検査個体由来の検体におけるＮｒｇ４水準を判定する工程を含む、検査個体における代謝障害を診断する方法であって、この中で、正常個体におけるＮｒｇ４水準と比較して該検査個体において低いＮｒｇ４水準は、当該容態を示唆しておりかつこの中で、該正常個体は、該代謝障害に罹患していないことが判っている、該方法。
（項目２６）
個体由来の検体におけるＮｒｇ４水準を検出する工程を含む、個体における代謝障害を診断するための方法であって、この中で、同じ個体における先行Ｎｒｇ４水準と比較して低いＮｒｇ４水準は、該代謝障害を示唆している、該方法。
（項目２７）
検査個体由来の検体におけるＮｒｇ４水準を判定する工程を含む、該検査個体における代謝障害に対する易罹患性を判定するための方法であって、この中で、正常な個体由来の検体におけるＮｒｇ４水準と比較して低い、該検査個体におけるＮｒｇ４水準は、該容態に対する易罹患性を示しており、かつこの中で、該正常な個体は、該代謝障害に罹患していないことが判っている、該方法。
（項目２８）
個体由来の検体におけるＮｒｇ４水準を検出する工程を含む、個体における代謝障害に対する易罹患性を判定するための方法であって、この中で、同じ個体における先行Ｎｒｇ４水準と比較して低いＮｒｇ４水準は、該代謝障害に対する易罹患性を示唆している、該方法。
（項目２９）
個体由来の検体におけるＮｒｇ４水準を経時的に判定する工程を含む、個体における代謝障害の進行を判定するための方法であって、この中で、経時的なＮｒｇ４水準の低下は、代謝障害の進行を示唆している、該方法。
（項目３０）
個体由来の検体におけるＮｒｇ４水準を判定する工程を含む、該個体における代謝障害の治療の有効性をモニターするための方法であって、この中で、経時的なＮｒｇ４水準の上昇は、有効な治療を示唆している、該方法。
（項目３１）
前記代謝障害は、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、脂肪性肝炎、II型糖尿病、高血糖、高脂血症、脂質異常血症、肥満、高インスリン血症、インスリン抵抗性、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常血症、粥状硬化症、早発性冠動脈性心疾患、脂質異常血症、高トリグリセリド血症、高脂肪酸血症、及び硬変症からなる群から選択される、項目２５〜３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
Ｎｒｇ４水準は、Ｎｒｇ４の血清タンパク質濃度の尺度である、項目２５〜３１のいずれか一項に記載の方法。
（項目３３）
Ｎｒｇ４水準は、ＮＲＧ４ｍＲＮＡ水準の尺度である、項目２５〜３１のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
Ｎｒｇ４水準は、Ｎｒｇ４活性の尺度である、項目２５〜３１のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
前記Ｎｒｇ４活性は、特異的な結合の活性である、項目３４に記載の方法。