【手続補正書】
【提出日】平成29年5月26日(2017.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウイルス構造ポリペプチドおよび少なくとも１つのマラリア抗原を含むウイルス様粒子であって、該ウイルス構造ポリペプチドが、少なくとも１つの第一付着部位を含み、少なくとも１つのマラリア抗原が少なくとも１つの第二付着部位を含み、該ウイルス構造ポリペプチドおよび該マラリア抗原が、少なくとも１つの第一付着部位および少なくとも１つの第二付着部位を介して結合しているウイルス様粒子。
【請求項２】
該ウイルス様粒子が、アルファウイルスまたはフラビウイルス由来である、請求項１記載のウイルス様粒子。
【請求項３】
該アルファウイルスまたはフラビウイルスが、アウラウイルス、ババンキウイルス（Babanki virus）、バーマフォレストウイルス(Barmah Forest virus) (BFV)、ベバルウイルス、カバソウウイルス（Cabassou virus)、チクングニアウイルス(CHIKV)、東部ウマ脳炎ウイルス(EEEV)、エイラートウイルス(Eilat virus)、エバーグレードウイルス(Everglades virus)、フォートモーガンウイルス(Fort Morgan virus)、ゲタウイルス、ハイランドJウイルス(Highlands J virus)、キジラガチウイルス(Kyzylagach virus)、マヤロウイルス、メトリウイルス（Me Tri virus）、ミデルバーグウイルス(Middelburg virus)、モッソダスペドラスウイルス(Mosso das Pedras virus)、ムカンボウイルス、ヌドゥムウイルス、オニョンニョンウイルス、ピクスナウイルス、リオネグロウイルス、ロスリバーウイルス(RRV)、サケ膵臓病ウイルス(Salmon pancreas disease virus)、セムリキ森林ウイルス、シンドビスウイルス、ミナミゾウアザラシウイルス(Southern elephant seal virus)、トナテウイルス(Tonate virus)、トロカラウイルス(Trocara virus)、ウナウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス(VEEV)、西部ウマ脳炎ウイルス(WEEV)、ワタロアウイルス、ウエストナイルウイルス、デングウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルスおよび黄熱ウイルスからなる群から選択される、請求項２記載のウイルス様粒子。
【請求項４】
該アルファウイルスがチクングニアウイルス(CHIKV)またはベネズエラウマ脳炎ウイルス(VEEV)である、請求項３記載のウイルス様粒子。
【請求項５】
該ウイルス構造ポリペプチドが、エンベロープタンパク質を含む、請求項１〜４のいずれかに記載のウイルス様粒子。
【請求項６】
該ウイルス構造ポリペプチドが、カプシドおよび/またはエンベロープタンパク質E1およびE2を含む、請求項１〜５のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項７】
少なくとも１つのマラリア抗原が、エンベロープタンパク質のE2に挿入されている、請求項６記載のウイルス様粒子。
【請求項８】
該ウイルス構造ポリペプチドが、チクングニアウイルス(CHIKV)またはベネズエラウマ脳炎ウイルス(VEEV)由来のポリペプチドである、請求項１〜７のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項９】
抗原が挿入されるエンベロープタンパク質E2、エンベロープタンパク質E1およびカプシドを含む、請求項１〜８のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項１０】
抗原が挿入される１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなるチクングニアウイルス様粒子であって、
抗原が挿入される該エンベロープタンパク質E2が配列番号50で表されるアミノ酸配列からなり; 該エンベロープタンパク質E1が配列番号51で表されるアミノ酸配列からなり; 該カプシドが、配列番号52で表されるアミノ酸配列からなる、請求項１〜８のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項１１】
抗原が挿入される１つ以上のエンベロープタンパク質E2、１つ以上のエンベロープタンパク質E1および１つ以上のカプシドからなるベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子であって、
抗原が挿入される該エンベロープタンパク質E2が、配列番号53で表されるアミノ酸配列からなり;該エンベロープタンパク質E1が配列番号54で表されるアミノ酸配列からなり;該カプシドが配列番号55で表されるアミノ酸配列からなる、
請求項１〜８のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項１２】
少なくとも１つのマラリア抗原および該ウイルス構造ポリペプチドが融合タンパク質として発現する、請求項１〜１１のいずれかに記載のウイルス様粒子。
【請求項１３】
該ウイルス構造ポリペプチドおよび少なくとも１つのマラリア抗原が直接融合している、請求項１２記載のウイルス様粒子。
【請求項１４】
少なくとも１つのマラリア抗原が、該ウイルス構造ポリペプチドと融合しており、１つまたは2つのリンカーが該抗原および該ポリペプチドのN末端残基および/または該抗原および該ウイルス構造ポリペプチドのC末端残基の間に介在する、請求項１３記載のウイルス様粒子。
【請求項１５】
少なくとも１つのマラリア抗原が、配列番号1または2の第531番および第532番の残基の間、または配列番号3の第518番および第519番の残基の間に挿入される、請求項９〜１４のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項１６】
配列番号28、31、34、37、39、41または43で表されるアミノ酸配列に相当する核酸分子を哺乳類細胞に形質導入することによって、該融合タンパク質を含むウイルス様粒子が発現する、請求項９〜１５のいずれかに記載のウイルス様粒子。
【請求項１７】
該融合タンパク質を含む該ウイルス様粒子が、配列番号28、31、34、37、39、41または43で表されるアミノ酸配列と90%以上の配列同一性を有するアミノ酸配列に相当する核酸分子を哺乳類細胞に形質導入することにより発現する、請求項９〜１５のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項１８】
少なくとも１つのマラリア抗原が、化学架橋により該ウイルス構造ポリペプチドに結合している、請求項１〜８のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項１９】
少なくとも１つのマラリア抗原が、スポロゾイト周囲タンパク質由来の断片である、請求項１〜１８のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項２０】
少なくとも１つのマラリア抗原が、(NPNA)nを含む抗原であり、式中、nが4〜30である、および/または (EYLNKIQNSLSTEWSPCSVT)yを含む抗原であり、式中yが1〜6である、請求項１〜１９のいずれか記載のウイルス様粒子。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子を発現するための核酸配列を含む単離された核酸分子。
【請求項２２】
配列番号26〜27、29〜30、32〜33、35〜36、38、40または42で表されるヌクレオチド配列からなる単離された核酸分子。
【請求項２３】
配列番号26〜27、29〜30、32〜33、35〜36、38、40または42で表されるヌクレオチド配列と90%以上の配列同一性を有するヌクレオチド配列からなる、単離された核酸分子。
【請求項２４】
請求項２１〜２３のいずれか記載の核酸分子を含むベクターであって、該核酸分子に操作可能に結合している発現制御配列を含んでいてよい、ベクター。
【請求項２５】
請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子および/または請求項２１〜２４のいずれか記載の核酸分子を含む、組成物。
【請求項２６】
(a) 請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子および/または請求項２１〜２４のいずれか記載の核酸分子; および
(b) 薬学的に許容される担体
を含む、医薬組成物。
【請求項２７】
請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子を含む、ワクチン組成物。
【請求項２８】
請求項２１〜２４のいずれか記載の核酸分子を含む、DNAワクチン組成物。
【請求項２９】
抗体の作製方法であって、請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子および/または請求項２１〜２４のいずれか記載の核酸分子を非ヒト哺乳動物に接触させることを含む、方法。
【請求項３０】
該抗体がモノクローナル抗体である、請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
哺乳動物における免疫調節のための、請求項２５〜２８のいずれか記載の組成物。
【請求項３２】
哺乳動物において、マラリア抗原に対する免疫応答を誘発および/または増強するための、請求項２５〜２８のいずれか記載の組成物。
【請求項３３】
哺乳動物におけるマラリアの処置方法のための、請求項２５〜２８のいずれか記載の組成物。
【請求項３４】
哺乳動物においてマラリア発症性の病原体に対する受動免疫を与えるための、請求項２９または３０記載の方法により得られる抗体を含む組成物。
【請求項３５】
マクロファージ上に抗原を提示する方法であって、請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子および/または請求項２１〜２４のいずれか記載の核酸分子を哺乳動物に接触させることを含む、方法。
【請求項３６】
請求項９〜２０のいずれかに記載のウイルス様粒子の製造方法であって、該ウイルス様粒子の発現用に設計されたベクターを製造すること; 該ウイルス様粒子を発現するように該ベクターで形質導入した細胞を培養すること; および該ウイルス様粒子を回収することを含む、方法。
【請求項３７】
少なくとも１つのマラリア抗原が、少なくともスポロゾイト周囲ポリペプチドの断片を含む、請求項２９〜３５のいずれかに記載の組成物。
【請求項３８】
マラリアの予防または処置のための請求項２７または２８記載のワクチン組成物であって、少なくとも１つの第一マラリア抗原または少なくとも１つの第一マラリア抗原をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む、刺激組成物; および、少なくとも１つの第二マラリア抗原を含む少なくとも１つのポリペプチドまたは少なくとも１つの第二マラリア抗原をコードする少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む、追加免疫組成物を別の成分として含む、ワクチン。
【請求項３９】
該ポリヌクレオチドが、スポロゾイト周囲タンパク質を実質的に全てコードする、請求項３８記載のワクチン組成物。
【請求項４０】
マラリアの予防または処置に用いるための、請求項２７記載のワクチン組成物であって、マラリア由来の抗原を複数含む、ワクチン組成物。
【請求項４１】
(a) 請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子を含むワクチン組成物; および
(b) 請求項１〜２０のいずれか記載のウイルス様粒子を含む他のワクチン組成物
を含むキットであって、(a)に含まれるウイルス様粒子が、(b)に含まれるウイルス様粒子とは異なるウイルス様粒子である、キット。
【請求項４２】
(a) に含まれるウイルス様粒子が、チクングニアウイルス様粒子であり、(b)に含まれるウイルス様粒子がベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子であるか、または、(a) に含まれるウイルス様粒子がベネズエラウマ脳炎ウイルス様粒子であり、 (b)に含まれるウイルス様粒子がチクングニアウイルス様粒子である、請求項４１記載のキット。
【請求項４３】
(c)それぞれが請求項１〜２０のいずれかに記載のウイルス様粒子を含む、１つ以上のワクチン組成物をさらに含む、請求項４１または４２記載のキットであって、(a) が免疫化の刺激に用いられ、(b)および(c)が追加免疫化に用いられ、かつ、(c) に含まれるウイルス様粒子が、(a)および(b)に含まれるウイルス様粒子と異なるか、または(a)または(b)に含まれるウイルス様粒子と同じである、キット。
【請求項４４】
それぞれのワクチン組成物が、同時、別または連続的に投与される、請求項４１〜４３のいずれかに記載のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
態様の一において、該ポリペプチドおよび該抗原は直接融合している。あるいは、１つまたは２つのリンカーが該抗原のＮ−末端残基と該ポリペプチドおよび／または該抗原のＣ−末端残基と該ポリペプチドの間に介在していてもよい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６１】
ベネズエラウマ脳炎ウイルス構造ポリペプチドの例として、以下の配列が挙げられる(配列番号3):
【化４】
2016521539.tif 000001
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３１】
チクングニアウイルス構造ポリペプチドと結合したVLP74または78を含むVLPの発現は、CHIKVに対する特異的な抗体(ATCC: VR-1241AF)およびVLP74または78に対する特異的な抗体を用いてウェスタンブロッティングにより確認した。