【手続補正書】
【提出日】平成29年1月25日(2017.1.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２つの標的ヒトＣＤ３εおよびヒトＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）に特異的に結合する二重特異的抗体であって、該二重特異的抗体は、二重特異的様式Ｆａｂ  ＢＣＭＡ−Ｆｃ−Ｆａｂ  ＣＤ３−Ｆａｂ  ＢＣＭＡである、
ａ）該抗ＣＤ３抗体のＦａｂフラグメントは、そのＮ末端において該抗ＢＣＭＡ抗体のＦａｂフラグメントのＣ末端に化学的に結合している、
ｂ）該抗ＣＤ３抗体の可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくは定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられている、
ｃ）ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する１ｐＭ〜２００ｎＭの濃度範囲の該抗体の結合は、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて４０５ｎｍでのＯＤとして測定して、ＡＰＲＩＬなしでのヒトＢＣＭＡへの該抗体の結合と比較して、１００ｎｇ／ｍｌ  ＡＰＲＩＬによって２０％超は低下しない、
ｄ）１ｐＭ〜２００ｎＭの濃度範囲の該抗体は、ＡＰＲＩＬのみと比較して、ＡＰＲＩＬ依存性ＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、および
ｅ）１ｐＭ〜２００ｎＭの濃度範囲の該抗体は、該抗体なしと比較して、ＡＰＲＩＬなしのＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、
ことを特徴とする、二重特異的抗体。
【請求項２】
請求項１に記載の、２つの標的ヒトＣＤ３εおよびヒトＢＣＭＡに特異的に結合する二重特異的抗体であって、
ａ）ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する１ｐＭ〜２００ｎＭの濃度範囲の該抗体の結合は、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて４０５ｎｍでのＯＤとして測定して、ＡＰＲＩＬもしくはＢＡＦＦそれぞれなしでのヒトＢＣＭＡへの該抗体の結合と比較して、２０％超は、１００ｎｇ／ｍｌ  ＡＰＲＩＬによって低下せず、１００ｎｇ／ｍｌ  ＢＡＦＦによって低下しない、
ｂ）１ｐＭ〜２００ｎＭの濃度範囲の該抗体は、ＢＡＦＦのみと比較して、ＢＡＦＦ依存性ＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、および
ｃ）１ｐＭ〜２００ｎＭの濃度範囲の該抗体は、該抗体なしと比較して、ＢＡＦＦおよびＡＰＲＩＬなしでのＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、
ことを特徴とする、二重特異的抗体。
【請求項３】
２つの標的ヒトＣＤ３εおよびヒトＢＣＭＡに特異的に結合する二重特異的抗体であって、該二重特異的抗体は、二重特異的様式Ｆａｂ  ＢＣＭＡ−Ｆｃ−Ｆａｂ  ＣＤ３−Ｆａｂ  ＢＣＭＡである、
ａ）該二重特異的抗体は、抗ＣＤ３抗体のＦａｂフラグメントがそのＮ末端において抗ＢＣＭＡ抗体のＦａｂフラグメントのＣ末端に化学的に結合された融合タンパク質である、および
ｂ）該抗ＣＤ３抗体の可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくは定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる、
ことを特徴とする、二重特異的抗体。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＣＤ３εに特異的に結合する該抗体の部分は、配列番号１、２および３の重鎖ＣＤＲを、それぞれ、該抗ＣＤ３ε抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＨ、ならびに配列番号４、５および６の軽鎖ＣＤＲを、それぞれ、該抗ＣＤ３ε抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＬを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＣＤ３εに特異的に結合する該抗体の部分は、配列番号７および８の可変ドメインを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体の部分は、配列番号３７〜４５、４７〜５５、および５７〜６５の重鎖ＣＤＲを、それぞれ、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＨを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体の部分は、配列番号６７〜７５、７７〜８５、および８７〜９５の軽鎖ＣＤＲをそれぞれ、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＬを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体の部分は、配列番号３７〜４５、４７〜５５、および５７〜６５の重鎖ＣＤＲを、それぞれ、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＨ、ならびに配列番号６７〜７５、７７〜８５、および８７〜９５の軽鎖ＣＤＲを、それぞれ、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＬを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体の部分の可変ドメインＶＨは、配列番号１７〜２５の群から選択され、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体の部分の可変ドメインＶＬは、配列番号２７〜３５の群から選択される、という点でそれぞれ特徴付けられる、抗体。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の抗体であって、
一方の重鎖のＣＨ３ドメインおよび他方の重鎖のＣＨ３ドメインは、各々、該抗体のＣＨ３ドメインの間の元の界面を含む界面で接触することを特徴とし；ここで該界面は、前記二重特異的抗体の形成を促進するように変化し、該変化は、
ａ）該二重特異的抗体内で他方の重鎖のＣＨ３ドメインの元の界面に接触する一方の重鎖のＣＨ３ドメインの元の界面内で、１つのアミノ酸残基が、より大きな側鎖体積を有する１つのアミノ酸残基で置き換えられ、それによって、他方の重鎖のＣＨ３ドメインの界面内の間隙に配置可能である一方の重鎖のＣＨ３ドメインの界面内での突出部を生成するように、一方の重鎖のＣＨ３ドメインが変化する、および
ｂ）該二重特異的抗体内で第１のＣＨ３ドメインの元の界面に接触する第２のＣＨ３ドメインの元の界面内で、１つのアミノ酸残基がより小さな側鎖体積を有する１つのアミノ酸残基で置き換えられ、それによって、該第１のＣＨ３ドメインの界面内の突出部がその内部に配置可能である、該第２のＣＨ３ドメインの界面内の間隙を生成するように、他方の重鎖のＣＨ３ドメインが変化する、
ことを特徴とする、抗体。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の二重特異的抗体を調製するための方法であって、該方法は、
ａ）宿主細胞を、第１の標的に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖をコードする核酸分子を含むベクターおよび第２の標的に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖をコードする核酸分子を含むベクターで形質転換する工程であって、ここでその可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくはその定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる、工程；
ｂ）該宿主細胞を、該抗体分子の合成を可能にする条件下で培養する工程；および
ｃ）該抗体分子を該培養物から回収する工程、
を包含する、方法。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む、薬学的組成物。
【請求項１３】
医薬としての使用のための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体または請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
形質細胞障害の処置における医薬として使用するための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体または請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
多発性骨髄腫ＭＭもしくはＢＣＭＡを発現する他のＢ細胞障害のような形質細胞障害の処置のための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体または請求項１２に記載の薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
本発明によれば、ＯＤは、４０５ｎｍもしくは４５０ｎｍ（好ましくは、同じ相対的結果を伴う、ＡＰＲＩＬもしくはＢＡＦＦなしでの比較）で測定され得る。本発明によれば、ＯＤは、ヒトもしくはマウスＡＰＩＬもしくはＢＡＦＦで、４５０ｎｍ（好ましくは、同じ相対的結果を伴う、ＡＰＲＩＬもしくはＢＡＦＦなしでの比較）で測定され得る。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
２つの標的ヒトＣＤ３εおよびヒトＢＣＭＡに特異的に結合する二重特異的抗体であって、該二重特異的抗体は、
ａ）該標的のうちの一方に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖を含む；および
ｂ）該標的のうちの他方に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖を含み、ここでその可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくはその定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる
ことを特徴とし、そして
ｃ）ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体の結合は、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて４０５ｎｍでのＯＤとして測定して、ＡＰＲＩＬなしでのヒトＢＣＭＡへの該抗体の結合と比較して、１００ｎｇ／ｍｌ  ＡＰＲＩＬによって２０％超は低下しない、
ｄ）該抗体は、ＡＰＲＩＬのみと比較して、ＡＰＲＩＬ依存性ＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、および
ｅ）該抗体は、該抗体なしと比較して、ＡＰＲＩＬなしのＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、
ことを特徴とする、二重特異的抗体。
（項目２）
項目１に記載の、２つの標的ヒトＣＤ３εおよびヒトＢＣＭＡに特異的に結合する二重特異的抗体であって、
ａ）該標的のうちの一方に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖を含む；および
ｂ）該標的のうちの他方に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖を含み、ここでその可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくはその定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる、
ことを特徴とし、そして
ｃ）ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体の結合は、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて４０５ｎｍでのＯＤとして測定して、ＡＰＲＩＬもしくはＢＡＦＦそれぞれなしでのヒトＢＣＭＡへの該抗体の結合と比較して、２０％超は、１００ｎｇ／ｍｌ  ＡＰＲＩＬによって低下せず、１００ｎｇ／ｍｌ  ＢＡＦＦによって低下しない、
ｄ）該抗体は、ＡＰＲＩＬのみと比較して、ＡＰＲＩＬ依存性ＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、
ｅ）該抗体は、ＢＡＦＦのみと比較して、ＢＡＦＦ依存性ＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、および
ｆ）該抗体は、該抗体なしと比較して、ＢＡＦＦおよびＡＰＲＩＬなしでのＮＦ−κＢ活性化を２０％超は変化させない、
ことを特徴とする、二重特異的抗体。
（項目３）
項目１または２に記載の二重特異的抗体であって、
ａ）該二重特異的抗体は、抗ＣＤ３抗体のＦａｂフラグメントがそのＮ末端において抗ＢＣＭＡ抗体のＦａｂフラグメントのＣ末端に化学的に結合された融合タンパク質である、および
ｂ）該抗ＣＤ３抗体のうちの可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくは定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる、
ことを特徴とする、二重特異的抗体。
（項目４）
２つの標的ヒトＣＤ３εおよびヒトＢＣＭＡに特異的に結合する二重特異的抗体であって、
ａ）該二重特異的抗体は、抗ＣＤ３抗体のＦａｂフラグメントがそのＮ末端において抗ＢＣＭＡ抗体のＦａｂフラグメントのＣ末端に化学的に結合された融合タンパク質である、および
ｂ）該抗ＣＤ３抗体の可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくは定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる、
ことを特徴とする、二重特異的抗体。
（項目５）
項目１〜４のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＣＤ３εに特異的に結合する該抗体部分は、配列番号１、２および３の重鎖ＣＤＲを、それぞれ、該抗ＣＤ３ε抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＨ、ならびに配列番号４、５および６の軽鎖ＣＤＲを、それぞれ、該抗ＣＤ３ε抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＬを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
（項目６）
項目１〜５のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＣＤ３εに特異的に結合する該抗体部分は、配列番号７および８の可変ドメインを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
（項目７）
項目１〜６のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体部分は、配列番号３７〜４５、４７〜５５、および５７〜６５の重鎖ＣＤＲを、それぞれ、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＨを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
（項目８）
項目１〜７のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体部分は、配列番号６７〜７５、７７〜８５、および８７〜９５の軽鎖ＣＤＲをそれぞれ、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＬを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
（項目９）
項目１〜８のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体部分は、配列番号３７〜４５、４７〜５５、および５７〜６５の重鎖ＣＤＲを、それぞれ、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＨ、ならびに配列番号６７〜７５、７７〜８５、および８７〜９５の軽鎖ＣＤＲを、それぞれ、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３として含む可変ドメインＶＬを含むことを特徴とする、ことを特徴とする、抗体。
（項目１０）
項目１〜９のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体部分の可変ドメインＶＨは、配列番号１７〜２５の群から選択されることを特徴とする、抗体。
（項目１１）
項目１〜１０のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体部分の可変ドメインＶＬは、配列番号２７〜３５の群から選択されることを特徴とする、抗体。
（項目１２）
項目１〜１１のいずれか１項に記載の抗体であって、
ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体部分の可変ドメインＶＨは、配列番号１７〜２５の群から選択され、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する該抗体部分の可変ドメインＶＬは、配列番号２７〜３５の群から選択される、という点でそれぞれ特徴付けられる、抗体。
（項目１３）
項目１〜１２のいずれか１項に記載の抗体であって、
一方の重鎖のＣＨ３ドメインおよび他方の重鎖のＣＨ３ドメインは、各々、該抗体のＣＨ３ドメインの間の元の界面を含む界面で接触することを特徴とし；ここで該界面は、前記二重特異的抗体の形成を促進するように変化し、該変化は、
ａ）該二重特異的抗体内で他方の重鎖のＣＨ３ドメインの元の界面に接触する一方の重鎖のＣＨ３ドメインの元の界面内で、１つのアミノ酸残基が、より大きな側鎖体積を有する１つのアミノ酸残基で置き換えられ、それによって、他方の重鎖のＣＨ３ドメインの界面内の間隙に配置可能である一方の重鎖のＣＨ３ドメインの界面内での突出部を生成するように、一方の重鎖のＣＨ３ドメインが変化する、および
ｂ）該二重特異的抗体内で第１のＣＨ３ドメインの元の界面に接触する第２のＣＨ３ドメインの元の界面内で、１つのアミノ酸残基がより小さな側鎖体積を有する１つのアミノ酸残基で置き換えられ、それによって、該第１のＣＨ３ドメインの界面内の突出部がその内部に配置かのうである、該第２のＣＨ３ドメインの界面内の間隙を生成するように、他方の重鎖のＣＨ３ドメインが変化する、
ことを特徴とする、抗体。
（項目１４）
両方の重鎖の定常重鎖ドメインＣＨ３のうちの１つは、定常重鎖ドメインＣＨ１によって置き換えられる；および他方の定常重鎖ドメインＣＨ３は、定常軽鎖ドメインＣＬによって置き換えられる、ことを特徴とする、項目１〜１３のいずれか１項に記載の抗体。
（項目１５）
項目１または１４に記載の二重特異的抗体であって、
ａ）該二重特異的抗体は、抗ＣＤ３抗体のＦａｂフラグメントがそのＮ末端において抗ＢＣＭＡ抗体のＦａｂフラグメントのＣ末端に化学的に結合された融合タンパク質である、および
ｂ）該抗ＣＤ３抗体の可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくは定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる、
二重特異的抗体。
（項目１６）
項目１〜１５のいずれか１項に記載の二重特異的抗体を調製するための方法であって、該方法は、
ａ）宿主細胞を、第１の標的に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖をコードする核酸分子を含むベクターおよび第２の標的に特異的に結合する抗体の軽鎖および重鎖をコードする核酸分子を含むベクターで形質転換する工程であって、ここでその可変ドメインＶＬおよびＶＨもしくはその定常ドメインＣＬおよびＣＨ１は、互いに置き換えられる、工程；
ｂ）該宿主細胞を、該抗体分子の合成を可能にする条件下で培養する工程；および
ｃ）該抗体分子を該培養物から回収する工程、
を包含する、方法。
（項目１７）
項目１〜１５のいずれか１項に記載の抗体の軽鎖および重鎖をコードする核酸分子を含むベクターを含む、宿主細胞。
（項目１８）
項目１〜１５のいずれか１項に記載の抗体および薬学的に受容可能な賦形剤を含む、薬学的組成物。
（項目１９）
医薬としての使用のための、項目１〜１５のいずれか１項に記載の抗体または項目８に記載の薬学的組成物。
（項目２０）
形質細胞障害の処置における医薬として使用するための、項目１〜１５のいずれか１項に記載の抗体または項目８に記載の薬学的組成物。
（項目２１）
多発性骨髄腫の処置における医薬として使用するための、項目１〜１５のいずれか１項に記載の抗体または項目８に記載の薬学的組成物。
（項目２２）
多発性骨髄腫ＭＭもしくはＢＣＭＡを発現する他のＢ細胞障害のような形質細胞障害の処置のための、項目１〜１５のいずれか１項に記載の抗体または項目８に記載の薬学的組成物。