(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
醤油粕と、１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、エーテル及びジオキサンからなる群より選ばれる１種または２種以上の抽出溶媒とを接触させることによって、該抽出溶媒中に醤油粕中の有用物質を抽出する第１工程と、
前記抽出操作後の醤油粕と、水、メタノール及びエタノールからなる群より選ばれる１種または２種以上の脱塩溶媒とを接触させることによって、該脱塩溶媒に醤油粕中の塩を溶解せしめて醤油粕の脱塩を行う第２工程とを包含することを特徴とする醤油粕からの有用物質、塩の抽出分離方法。
【請求項２】
前記有用物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸である請求項１に記載の醤油粕からの有用物質、塩の抽出分離方法。
【請求項３】
前記抽出溶媒として１−プロパノール及び２−プロパノールからなる群より選ばれる溶媒を用いる請求項１または２に記載の醤油粕からの有用物質、塩の抽出分離方法。
【請求項４】
前記抽出溶媒として１−プロパノールを用いる請求項１または２に記載の醤油粕からの有用物質、塩の抽出分離方法。
【請求項５】
前記抽出溶媒としてアセトンを用い、前記脱塩溶媒としてエタノールを用いる請求項１または２に記載の醤油粕からの有用物質、塩の抽出分離方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
【０００２】
この発明は、醤油の製造過程で排出される醤油粕からイソフラボン、ペプチド、アミノ酸などの有用物質を選択性良く抽出することを可能ならしめる抽出分離方法に関する。
【従来の技術】
【０００３】
醤油の製造過程においては多量の醤油粕が排出されるが、このような醤油粕は有効利用する途がなく廃棄物として取り扱われており、従来では焼却処理されることが最も多かった。その他に地中投棄もされており、またごく一部ではあるが家畜飼料として利用されている。
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、醤油粕は塩分濃度が高いのでこれを焼却処理した場合には、ダイオキシンの発生が懸念されるし、焼却炉が腐食しやすいといった問題を抱えていた。
【０００５】
また、醤油粕を地中投棄した場合には、塩害を引き起こすことが懸念され、環境保護の観点からあまり好ましいものではない。
【０００６】
また、醤油粕を家畜飼料として用いる場合には、家畜の塩分補給にもつながり有効な利用方法となるものであるが、その使用量は極めて少ないものであり、排出される醤油粕の一部を有効利用できるにとどまるものであって、多量に排出される醤油粕の処理問題に対して抜本的な解決を図り得るものではなかった。
【０００７】
このような状況の中、２００１年４月に制定された食品リサイクル法により、塩分を含有する醤油粕は廃棄することはできず、醤油製造メーカーがその処理を行うことが義務付けられたところである。
【０００８】
ところで、醤油粕は、その原料が大豆であるがゆえに、大豆イソフラボン、各種アミノ酸のような人体に有用な物質を豊富に含有していることが知られているが、醤油製造時に多量に添加される食塩のために排出される醤油粕における塩分濃度が高くなってしまい、このために醤油粕の有効利用の途が閉ざされ廃棄物として取り扱われてきたものである。
【０００９】
この発明は、かかる技術的背景に鑑みてなされたものであって、塩分濃度の高い醤油粕からイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を塩分と分離させて選択性良く抽出することを可能ならしめる醤油粕からの有用物質、塩の抽出分離方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
この発明に係る醤油粕からの有用物質、塩の抽出分離方法は、醤油粕と、１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、エーテル及びジオキサンからなる群より選ばれる１種または２種以上の抽出溶媒とを接触させることによって、該抽出溶媒中に醤油粕中の有用物質を抽出する第１工程と、前記抽出操作後の醤油粕と、水、メタノール及びエタノールからなる群より選ばれる１種または２種以上の脱塩溶媒とを接触させることによって、該脱塩溶媒に醤油粕中の塩を溶解せしめて醤油粕の脱塩を行う第２工程とを包含することを特徴とする。
【００１１】
第１工程では、抽出溶媒として上記群より選ばれる溶媒を用いるので、醤油粕中から塩分をあまり抽出することなく、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出することができる。また、第２工程では、上記特定の脱塩溶媒と接触させることで醤油粕の脱塩を十分に行うことができるので、抽出操作後の醤油粕の有効利用の用途が非常に拡がり、家畜飼料の他に、例えば肥料として用いることもできるし、この醤油粕を活性炭に転換して利用することもできる。従って、この方法によれば、醤油粕中からイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出できると共に、抽出操作後の醤油粕の広範な有効利用も図ることができ、醤油粕を十分に有効利用することができる。これにより、未利用のまま焼却処理等される醤油粕の量を大幅に低減することができるので、環境保護の要請にも十分に応えることができる。
【００１２】
有用物質がイソフラボン、ペプチド及びアミノ酸である場合には、回収される有用物質が人体に有用な医薬品、健康食品等として有効利用できるものとなり得る。
【００１３】
上記抽出溶媒としては１−プロパノール及び２−プロパノールからなる群より選ばれる溶媒を用いるのが、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質の抽出効率に優れている点で、好ましい。
【００１４】
中でも、上記抽出溶媒としては１−プロパノールを用いるのが好ましい。１−プロパノールは２−プロパノールよりも塩分溶解量が小さいので、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を一段と選択性良く抽出することができる利点がある。
【００１５】
また、上記抽出溶媒としてアセトンを用い、上記脱塩溶媒としてエタノールを用いる構成を採用すれば、第１工程における抽出選択性を向上できると共に、第２工程における脱塩率や環境安全性を向上させることができ、また第１工程、第２工程を通じてコストも低く抑えることができる。
【発明の実施の形態】
【００１６】
この発明に係る醤油粕からの有用物質の抽出分離方法について説明する。醤油の製造工程で排出される醤油粕は、イソフラボン、各種アミノ酸等の人体に有用な物質を豊富に含有していることが知られているが、醤油製造工程で多量に添加される食塩のために該醤油粕の塩分濃度は非常に高いものとなっており、例えばエタノールやメタノールを用いて醤油粕からの有用物質の抽出を試みても、これらの溶媒には有用物質と共に塩分も多量に抽出されてしまうという問題を抱えており、このために従来では醤油粕の有効利用の途が閉ざされてその殆どが廃棄物として処理されてきた。この発明の醤油粕からの有用物質の抽出分離方法は、このような塩分濃度の高い醤油粕から、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を塩分と分離させて選択性良く抽出することが可能になる点で非常に優れた抽出分離方法である。
【００１７】
まず、第１発明の抽出分離方法について説明する。この第１発明の抽出分離方法は、醤油粕と、１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、エーテル及びジオキサンからなる群より選ばれる１種または２種以上の抽出溶媒とを接触させることによって、該溶媒中に醤油粕中のイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を抽出するものである。
【００１８】
抽出溶媒として、上記群より選ばれる１種の溶媒または２種以上の混合溶媒を用いるので、醤油粕中から塩分をあまり抽出することなく、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出することができる。例えば抽出溶媒としてメタノールやエタノールを用いた場合には、イソフラボン等と共に塩分も高濃度で抽出してしまうために、これらから回収された有用物質を医薬品、健康食品等として利用することは到底できなかったのであるが、本抽出分離方法は、抽出塩分濃度を抑制しつつイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を抽出することができる、即ちイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出できる点で、非常に優れた抽出分離方法である。しかして、この抽出液からイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を、例えば吸着剤による吸着法、溶媒蒸発法などの手法により回収すれば、塩分含有の少ない有用物質を得ることができ、ひいては醤油粕の有効利用を図ることができ、これにより未利用のまま焼却処理等される醤油粕の量を大幅に低減できる。
【００１９】
図２に、各種溶媒（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、tert−ブチルアルコール、アセトン、エーテル、水）を用いて、醤油粕からイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質の抽出分離操作を行った際における脱塩率（％）を示す。この「脱塩率」は、各溶媒を用いた抽出操作によって醤油粕中から何％の塩分（ＮａＣｌ）が抽出されたかを示す値であり、この数値が大きい程当該溶媒中に抽出される塩分量が大きいことを意味する。この図２から明らかなように、１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、エーテルを用いた場合には、該溶媒に抽出される塩分量は、メタノールやエタノールの場合と比較して格段に小さい。従って、抽出溶媒として１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン及びエーテルからなる群より選ばれる１種または２種以上の溶媒を用いれば、抽出塩分濃度を抑制しつつイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を抽出することができる、即ちイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出できる。
【００２０】
なお、上記図２のデータ採取のための実験手法は次のとおりである。即ち、粉末状に粉砕した醤油粕１ｇに各溶媒３０ｍＬを加えたものを３００ｓｐｍで１０分間振盪した後、これを濾過し、濾過物である醤油粕に新たに溶媒３０ｍＬを加えて３００ｓｐｍで１０分間振盪した（溶媒抽出操作完了）。これを濾過した後、残留濾過物（醤油粕）に水３０ｍＬを加えて３００ｓｐｍで１０分間振盪し、これを１０００ｒｐｍで３分間遠心分離した後、上澄み液中に存在するＮａ濃度を原子吸光分光光度計で測定することによって、脱塩率（％）を算出した。
【００２１】
次に、第２発明の抽出分離方法について説明する。まず、第１工程として、醤油粕と、１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、エーテル及びジオキサンからなる群より選ばれる１種または２種以上の抽出溶媒とを接触させることによって、該溶媒中に醤油粕中のイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を抽出する。この第１工程は、前記第１発明そのものであり、抽出溶媒として、上記群より選ばれる１種の溶媒または２種以上の混合溶媒を用いるので、醤油粕中から塩分をあまり抽出することなく、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出することができる。
【００２２】
次に、第２工程として、前記抽出操作後の醤油粕と、水、メタノール及びエタノールからなる群より選ばれる１種または２種以上の脱塩溶媒とを接触させることによって、該脱塩溶媒に醤油粕中の塩を溶解せしめて醤油粕の脱塩を行う。抽出操作後の醤油粕を前記特定の脱塩溶媒と接触させるので、醤油粕の脱塩を十分に行うことができ、これにより抽出操作後の醤油粕の有効利用の用途が非常に拡がる。例えば、塩分濃度の高いままの醤油粕では、家畜飼料としての用途以外の用途はなかったのが実状であったが、この第２工程で醤油粕の脱塩が十分になされるので、ドッグフード、キャットフード等の家畜飼料のほかにも、例えば肥料として用いることもできるし、この醤油粕を活性炭に転換して利用することもできるのであり、このように第２工程を経ることによって抽出操作後の醤油粕の有効利用の用途が非常に拡がる。
【００２３】
以上のように、第２発明の抽出分離方法によれば、醤油粕中からイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出できると共に、抽出操作後の醤油粕の広範な有効利用も図ることが可能となるので、未利用のまま焼却処理等される醤油粕の量を大幅に低減することができる。
【００２４】
この発明において、前記醤油粕と抽出溶媒との接触操作は、接触処理槽中に両者を投入して撹拌翼等による撹拌により行うのが好ましく、これにより抽出効率が顕著に向上する。また、前記抽出操作後の醤油粕と脱塩溶媒（水等）との接触操作も、同様の理由から、撹拌翼等による撹拌により行うのが好ましい。
【００２５】
また、一般に、抽出処理時の液温を高くすると有用物質の抽出量は増大し、脱塩処理時の液温を高くすれば脱塩溶媒への塩の溶解量、すなわち脱塩量は増大する。
【００２６】
なお、この発明の効果を阻害しない範囲であれば、前記特定の抽出溶媒（１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、エーテル及びジオキサンからなる群より選ばれる１種または２種以上の抽出溶媒）に、他の溶媒を混合せしめて用いるものとしても良い。また、前記脱塩溶媒（水、メタノール及びエタノールからなる群より選ばれる１種または２種以上の脱塩溶媒）についても同様に、その効果を阻害しない範囲であれば、これに他の溶媒を混合せしめて用いるものとしても良い。
【００２７】
次に、この発明の抽出分離方法の具体例を図１に基づいて説明する。この具体例は、抽出分離操作を連続的に行うものである。図１において、（１）は第１接触処理槽、（２）は第２接触処理槽、（３）は第３接触処理槽、（４）は第４接触処理槽であり、これら各接触処理槽は、いずれもミキサー部（１ａ）（２ａ）（３ａ）（４ａ）と、セトラー部（１ｂ）（２ｂ）（３ｂ）（４ｂ）とからなるものであり、前記ミキサー部（１ａ）（２ａ）（３ａ）（４ａ）において醤油粕と溶媒（１−プロパノール、２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、水等）とを撹拌翼等により撹拌混合する一方、該撹拌混合後の混合液をセトラー部（１ｂ）（２ｂ）（３ｂ）（４ｂ）において静置せしめることによって、醤油粕と上澄み液（溶媒）の２層に分離させるものである。
【００２８】
まず、醤油製造工程で排出された醤油粕を粉末状に粉砕した後、これを図１に示すように前記第１接触処理槽（１）のミキサー部（１ａ）に投入し、該ミキサー部（１ａ）において抽出溶媒である１−プロパノールと混合して撹拌翼により撹拌することによって、１−プロパノール中に醤油粕中の有用物質であるイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等を抽出させる。これら有用物質を溶解含有した１−プロパノールは、ミキサー部（１ａ）からセトラー部（１ｂ）に移され、ここで静置することによって、沈殿醤油粕（２０）と１−プロパノール（有用物質を溶解含有）の２層に分離せしめ、次いでこの１−プロパノール溶媒層を蒸留工程に移送し、ここで１−プロパノールの蒸留操作を行うことによって、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を固形状態で回収する一方、蒸留された１−プロパノールを、再び抽出操作に用いるべく、第２接触処理槽（２）のミキサー部（２ａ）に移送する。
【００２９】
なお、本実施形態では、有用物質の回収を溶媒蒸発法により行っているが、特にこの手法に限定されるものではなく、例えば吸着剤（多孔性樹脂等）を用いる吸着法により有用物質の回収を行うものとしても良いし、あるいはイオン交換法、膜分離法、限外濾過法等により有用物質の回収を行うものとしても良い。また、これら有用物質から、各個別成分（イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等）に単離して利用するものとしても良い。
【００３０】
前記第１接触処理槽（１）のセトラー部（１ｂ）で生じた沈殿醤油粕（２０）は、移送管（１０）を介して第２接触処理槽（２）のミキサー部（２ａ）に移送され、ここで前記蒸留された１−プロパノールと混合され、撹拌翼によって撹拌混合することによって、醤油粕中に残存しているイソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質をさらにこの１−プロパノール中に抽出する。次いで、これらをミキサー部（２ａ）からセトラー部（２ｂ）に移し、ここで静置することによって、沈殿醤油粕（２０）と１−プロパノール（有用物質を溶解含有）の２層に分離せしめた後、この１−プロパノール溶媒層を前記第１接触処理槽（１）のミキサー部（１ａ）に移送する。このように抽出溶媒である１−プロパノールを循環させて再利用するので経済的である。なお、ここまでが第１工程である。
【００３１】
この第２接触処理槽（２）のセトラー部（２ｂ）で生じた沈殿醤油粕（２０）を、移送管（１０）を介して次の第３接触処理槽（３）のミキサー部（３ａ）に移送して、次の第２工程である脱塩工程に入る。
【００３２】
即ち、前記第３接触処理槽（３）のミキサー部（３ａ）に投入された醤油粕を、該ミキサー部（３ａ）において水と撹拌混合せしめ、これにより該水中に醤油粕中の塩を溶解せしめて醤油粕の脱塩を行う。次いで、これらをミキサー部（３ａ）からセトラー部（３ｂ）に移し、ここで静置することによって、沈殿醤油粕（２０）と塩分含有水の２層に分離せしめた後、沈殿醤油粕（２０）は移送管（１０）を介して次の第４接触処理槽（４）のミキサー部（４ａ）に移送する一方、塩分含有水はセトラー部（３ｂ）より外に排出させる。なお、この塩分含有水の水を蒸発乾固させて得た塩は、牛などの動物の塩分補給用、工業塩、食用塩（醤油塩）として特に好適に利用できるものである。
【００３３】
次に、前記第４接触処理槽（４）のミキサー部（４ａ）に投入された醤油粕を、該ミキサー部（４ａ）において水と撹拌混合せしめ、これにより該水中に醤油粕中に残存している塩をさらに溶解せしめて２回目の脱塩処理を行う。次いで、これらをミキサー部（４ａ）からセトラー部（４ｂ）に移し、ここで静置することによって、沈殿醤油粕（２０）と塩分含有水の２層に分離せしめ、沈殿醤油粕はセトラー部（４ｂ）より取り出して有効利用に供すると共に、塩分含有水は前記第３接触処理槽（３）のミキサー部（３ａ）に移送して、ここで再度脱塩処理に用いる。
【００３４】
前記セトラー部（４ｂ）より取り出された沈殿醤油粕は、水を用いた抽出操作によって脱塩処理されたものであるから、相当程度に脱塩が行われているものであり、従って家畜飼料として用いることができることは勿論のこと、これ以外にも例えば肥料としても利用することが可能となるし、これを活性炭に転換して利用することも可能となるものであり、このように第１工程及び第２工程を経た醤油粕は、広範な有効利用を図ることができる。
【００３５】
図１に例示した構成では、４つの接触処理槽（１）（２）（３）（４）を備えて、連続的に抽出分離操作を行い得るように構成されているが、特にこのような構成に限定されるものではなく、例えば１つの接触処理槽を備えた構成とし、該接触処理槽において前記各操作をバッチ的に順に行うものとしても良い。また、図１に例示した構成では、第１工程における接触処理槽の数を２個としているが、この数も特に限定されるものではなく、１個としても良いし、或いは３個以上としても良い。また、第２工程における接触処理槽の数も２個としているが、この数も特に限定されるものではなく、１個としても良いし、或いは３個以上としても良い。そして、この第２工程の接触処理槽の数を増大することにより、即ち脱塩処理の回数を増大することにより、得られる沈殿醤油粕として塩分含有量を極力小さく抑えること又は塩分含有量を０にすることも可能となる。
【００３６】
また、前記抽出溶媒としては１−プロパノールを用いるものとしているが、これの代わりに２−プロパノール、ブチルアルコール、アセトン、エーテル或いはジオキサンを用いても良いし、これらの混合溶媒を用いるものとしても良い。ただ、塩分溶解量がより小さくて、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を一段と選択性良く抽出できる点で、１−プロパノールを用いるのが好ましい。なお、前記ブチルアルコールとしては、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、sec-ブチルアルコール、tert−ブチルアルコールが挙げられる。また、前記エーテルとしては、エチルエーテル、プロピルエーテル等が挙げられる。
【００３７】
また、前記脱塩溶媒としては、水に代えてメタノール又はエタノール、或いは水／メタノール混合液、水／エタノール混合液、水／メタノール／エタノール混合液を用いるものとしても良い。前記脱塩溶媒として水を用いた場合には、水は脱塩率が最も大きいので高効率で脱塩できる利点がある。また、前記脱塩溶媒としてメタノール又は／及びエタノールを用いた場合には、脱塩溶媒は蒸留により完全に回収できるので、排水の全く出ないプロセスが可能となり、低コスト化できる利点がある。従って、排水なし、低コスト化という観点からすると、メタノール又は／及びエタノールを用いるのが好ましい。
【００３８】
また、第１工程における抽出選択性、コスト等、及び第２工程における脱塩率、コスト、環境性等を含めて総合的な観点からすると、第１工程における抽出溶媒としてアセトンを用い、かつ第２工程における脱塩溶媒としてエタノールを用いるのが、好ましい。
【００３９】
なお、図１に示した装置は、この発明に係る抽出分離方法を実施するための装置の一例を示したに過ぎず、この発明の抽出分離方法は、このような装置で行われるものに特に限定されるものではない。
【実施例】
【００４０】
次に、この発明の具体的実施例について説明する。
【００４１】
＜実施例１＞
図１に示した構成の抽出分離装置を用いて前述した操作を行うことによって、第１接触処理槽（１）のセトラー部（１ｂ）から、有用物質を抽出含有した１−プロパノールを得た。なお、第１接触処理槽のミキサー部（１ａ）における１−プロパノールの収容量は３Ｌであり、このミキサー部（１ａ）に醤油粕を１００ｇ投入した。
【００４２】
この１−プロパノール中に抽出含有された物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸であることをＴＬＣによる発色定性分析により確認した。なお、イソフラボンとしては、ゲニステイン、ダイゼイン、グリシテインを同定した。
【００４３】
次に、この抽出１−プロパノール液の抗酸化性の有無を調べるべく、後述するインドフェノール法によって抗酸化化合物の定量を行ったところ、１２．７７ｍｇ／Ｌであり、抗酸化性が高いことを確認した。従って、この２−プロパノール液に抽出された物質は、機能性食品としての利用が期待できる。
【００４４】
また、この抽出１−プロパノール液のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を、後述する分析法によって調べたところ、４５．０％であり、アンジオテンシン変換酵素阻害活性が高いことを確認し得た。従って、この１−プロパノール液に抽出された物質は高血圧症の治療に効果を発揮することが期待される。
【００４５】
前記抽出１−プロパノール液より吸着法によって有用物質（イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等）を回収した。また、第３接触処理槽（３）のセトラー部（３ｂ）から塩分含有水を得、これの溶媒（水）を蒸発させることにより塩を得た。また、第４接触処理槽（４）のセトラー部（４ｂ）から脱塩醤油粕（沈殿物）を得た。
【００４６】
＜実施例２＞
抽出溶媒として、１−プロパノールに代えて２−プロパノールを用いた以外は、実施例１と同様にして有用物質を抽出含有した２−プロパノール液を得た。
【００４７】
この２−プロパノール中に抽出含有された物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸であることをＴＬＣによる発色定性分析により確認した。なお、イソフラボンとしては、ゲニステイン、ダイゼイン、グリシテインを同定した。また、前記抽出２−プロパノール液中におけるダイゼイン濃度は８４μｇ／ｍＬであり、ゲニステイン濃度は３３μｇ／ｍＬであった。
【００４８】
次に、この抽出２−プロパノール液の抗酸化性の有無を調べるべく、後述するインドフェノール法によって抗酸化化合物の定量を行ったところ、２４．４６ｍｇ／Ｌであり、抗酸化性が高いことを確認した。従って、この２−プロパノール液に抽出された物質は、機能性食品としての利用が期待できる。
【００４９】
また、この抽出２−プロパノール液のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を、後述する分析法によって調べたところ、４５．４５％であり、アンジオテンシン変換酵素阻害活性が高いことを確認し得た。従って、この２−プロパノール液に抽出された物質は高血圧症の治療に効果を発揮することが期待される。
【００５０】
前記抽出２−プロパノール液より溶媒蒸発法によって有用物質（イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等）を回収した。また、第３接触処理槽（３）のセトラー部（３ｂ）から塩分含有水を得、これの溶媒（水）を蒸発させることにより塩を得た。また、第４接触処理槽（４）のセトラー部（４ｂ）から脱塩醤油粕（沈殿物）を得た。
【００５１】
＜実施例３＞
抽出溶媒として、１−プロパノールに代えてtert−ブチルアルコールを用いた以外は、実施例１と同様にして有用物質を抽出含有したtert−ブチルアルコール液を得た。
【００５２】
このtert−ブチルアルコール液中に抽出含有された物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸であることをＴＬＣによる発色定性分析により確認した。
【００５３】
＜実施例４＞
抽出溶媒として、１−プロパノールに代えてエチルエーテルを用いた以外は、実施例１と同様にして有用物質を抽出含有したエチルエーテル液を得た。
【００５４】
このエチルエーテル液中に抽出含有された物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸であることをＴＬＣによる発色定性分析により確認した。
【００５５】
＜実施例５＞
抽出溶媒として１−プロパノールに代えてアセトンを用いるものとし、かつ脱塩溶媒として水に代えてエタノールを用いた以外は、実施例１と同様にして有用物質を抽出含有したアセトン液を得た。
【００５６】
このアセトン液中に抽出含有された物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸であることをＴＬＣによる発色定性分析により確認した。
【００５７】
＜実施例６＞
脱塩溶媒として水に代えてメタノールを用いた以外は、実施例１と同様にして有用物質を抽出含有した１−プロパノール液を得た。
【００５８】
この１−プロパノール中に抽出含有された物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸であることをＴＬＣによる発色定性分析により確認した。
【００５９】
＜実施例７＞
抽出溶媒として、１−プロパノールに代えてジオキサンを用いた以外は、実施例１と同様にして有用物質を抽出含有したジオキサン液を得た。
【００６０】
このジオキサン液中に抽出含有された物質が、イソフラボン、ペプチド及びアミノ酸であることをＴＬＣによる発色定性分析により確認した。
【００６１】
＜インドフェノール法による抗酸化化合物の定量＞
この定量法は、還元型ビタミンＣが酸性溶液中で２，６−ジクロロフェノールインドフェノールを速やかにかつ定量的に還元し、無色の化合物に変換し、自らは酸化型ビタミンＣに変化することを利用している。試料２ｍＬに、０．０１５％（ｗ／ｖ）２，６−ジクロロフェノールインドフェノール溶液を２．５ｍＬ、０．２Ｍ酢酸−酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．０）を１ｍＬ加えて撹拌し、３分間発色させる。これにキシレン７．５ｍＬを添加し、よく撹拌した後、色素をキシレン層に抽出し、このキシレン層の５３０ｎｍの吸光度を測定する。予めビタミンＣを用いて検量線を作成して、試料中の抗酸化量の定量を行った。
【００６２】
＜アンジオテンシン変換酵素阻害活性の測定＞
アンジオテンシンＩ変換酵素（ＡＣＥ）は、不活性なアンジオテンシンＩのＣ末端Ｈｉｓ−Ｌｅｕを切断し、血管収縮などの強い血圧上昇作用を有するアンジオテンシンIIを生じさせ、一方では、強い血管拡張作用を有するブラジキニンを分解する働きをしている。このＡＣＥの働きを阻害することにより高血圧症の治療をおこなうことが可能である。
【００６３】
試験管に３０μＬの試料溶液、２５０μＬの基質（Ｈｉｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ）溶液を入れ、３７℃の恒温槽で５分間保温する。１００μＬのＡＣＥ溶液（６ｍＵ）を添加し、直ちに撹拌した後、３７℃にて３０分間反応させる。１Ｎ塩酸２５０μＬを添加し、撹拌して反応を停止せしめた後、１．５ｍＬの酢酸エチルを添加し、十分に撹拌し、遊離した馬尿酸を抽出する。酢酸エチルを完全に除いた後、蒸留水を４ｍＬ加え、十分に撹拌して馬尿酸を溶解させる。分光光度計により２２８ｎｍの吸光度を測定する。この数値が高いほど阻害活性が大きい。
【発明の効果】
【００６４】
請求項１の抽出分離方法によれば、醤油粕中から塩分をあまり抽出することなく、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を選択性良く抽出できると共に、抽出操作後の醤油粕の脱塩を行うので抽出操作後の醤油粕の有効利用の用途が非常に拡がり（例えばドッグフード、キャットフード等の家畜飼料、肥料、活性炭への転換等）、このように醤油粕を十分に有効利用できるものとなる。これにより未利用のまま焼却処理等される醤油粕の量を大幅に低減できる。
【００６５】
請求項２のように有用物質がイソフラボン、ペプチド及びアミノ酸である場合には、回収される有用物質が人体に有用な医薬品、健康食品等として有効利用できるものとなり得る。
【００６６】
請求項３の抽出分離方法では、抽出溶媒として１−プロパノール及び２−プロパノールからなる群より選ばれる溶媒を用いるので、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を効率良く抽出できる。
【００６７】
請求項４の抽出分離方法では、抽出溶媒として１−プロパノールを用いるので、イソフラボン、ペプチド、アミノ酸等の有用物質を一段と選択性良く抽出できる。
【００６８】
請求項５の抽出分離方法では、抽出溶媒としてアセトンを用い、脱塩溶媒としてエタノールを用いるので、第１工程での抽出選択性が向上すると共に、第２工程での脱塩率と環境安全性が向上する。
【図面の簡単な説明】
【００６９】
【図１】この発明の抽出分離方法を示す概略説明図である。
【図２】各種溶媒を用いて醤油粕を抽出した際の脱塩率を比較対照して示す棒グラフである。
【符号の説明】
【００７０】
１…第１接触処理槽（他端）
２…第２接触処理槽（一端）
３…第３接触処理槽（他端）
４…第２接触処理槽（一端）
１ａ、２ａ、３ａ、４ａ…ミキサー部
１ｂ、２ｂ、３ｂ、４ｂ…セトラー部
２０…沈殿醤油粕
【図１】
0003569699.tif 000002
【図２】
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