【誤訳訂正書】
【提出日】平成29年9月21日(2017.9.21)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１８】
本明細書に記載の単離された一価抗体構築物が本明細書に提供され、その二量体Ｆｃ構築物は、変異型ＣＨ３ドメインを含むヘテロ二量体Ｆｃ構築物である。一実施形態においては、本明細書に記載の単離された一価抗体構築物であり、その変異型ＣＨ３ドメインは、ネイティブのホモ二量体Ｆｃ領域に相当する安定性を持つそのヘテロ二量体の形成を促進するアミノ酸変異を含む。一実施形態においては、単離された一価抗体構築物であり、その変異型ＣＨ３ドメインは、約７０℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有する。さらなる実施形態においては、単離された一価抗体であり、その変異型ＣＨ３ドメインは、約７５℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有する。また、本明細書に記載の単離された一価抗体構築物が提供され、その変異型ＣＨ３ドメインは、約８０℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有する。さらなる実施形態においては、本明細書に記載の単離された一価抗体構築物であり、その二量体Ｆｃ構築物は、Ｆｃγ受容体の選択的結合を促進するアミノ酸修飾を含む変異型ＣＨ２ドメインをさらに含む。関連する実施形態においては、本明細書に記載の単離された一価抗体構築物であり、そのヘテロ二量体Ｆｃ構築物は、野生型Ｆｃ領域と比べて、ＣＨ３ドメインに追加のジスルフィド結合を含まない。一実施形態においては、本明細書に提供される単離された一価抗体構築物であり、そのヘテロ二量体Ｆｃ構築物は、野生型Ｆｃ領域と比べて変異型ＣＨ３ドメインに追加のジスルフィド結合を含み、その変異型ＣＨ３ドメインは少なくとも約７７．５℃の融解温度（Ｔｍ）を有する。一実施形態においては、本明細書に記載の単離された一価抗体構築物であり、その二量体Ｆｃ構築物は、約７５％を超える純度で形成されたヘテロ二量体Ｆｃ構築物である。いくつかの実施形態においては、本明細書に記載の単離された一価抗体であり、その二量体Ｆｃ構築物は、約８０％を超える純度で形成されたヘテロ二量体Ｆｃ構築物である。また、単離された一価抗体構築物が提供され、その二量体Ｆｃ構築物は、約９０％を超える純度で形成されたヘテロ二量体Ｆｃ構築物である。いくつかの実施形態においては、本明細書に記載の単離された一価抗体構築物であり、その二量体Ｆｃ構築物は、約９５％を超える純度で形成されたヘテロ二量体Ｆｃ構築物である。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３９】
いくつかの実施形態においては、本明細書に記載の単離された一価抗体構築物であり、本一価抗体構築物は、抗原に一価的に結合する抗原結合ポリペプチド構築物と、変異型ＣＨ３ドメインを含む二量体Ｆｃポリペプチド構築物と、を含む。いくつかの実施形態において、変異型ＣＨ３ドメインは、ネイティブのホモ二量体Ｆｃ領域に相当する安定性を有するそのヘテロ二量体の形成を促進するアミノ酸変異を含む。いくつかの実施形態において、変異型ＣＨ３ドメインは、約７０℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有する。いくつかの実施形態において、変異型ＣＨ３ドメインは、約７５℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有する。選択された実施形態において、変異型ＣＨ３ドメインは、約８０℃以上の融解温度（Ｔｍ）を有する。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４７】
いくつかの実施形態において、本発明による一価抗体構築物は、そのエフェクター機能を改善するように修飾され得る。そのような修飾は当該技術分野で既知であり、アフコシル化、または活性化受容体、主にＡＤＣＣのＦＣＧＲ３ａに対する、およびＣＤＣのＣ１ｑに対する抗体のＦｃ部分の親和性の操作を含む。以下の表は、エフェクター機能操作に関する文献において報告される異なる設計を要約する。
2015522526.tif 000001
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１５０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１５０】
そのような方法の１つの例は、親和性成熟（ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ）である。ＨＥＲ２抗原結合ドメインの親和性成熟のための１つの例示的な方法は、以下に記載されている。トラスツズマブ／ＨＥＲ２（ＰＤＢコード１Ｎ８Ｚ）複合体およびペルツズマブ／ＨＥＲ２複合体（ＰＤＢコード１Ｓ７８）の構造をモデル化に使用する。分子動力学（ＭＤ）を用いて、水性環境におけるＷＴ複合体の内在性の動的性質を評価することができる。柔軟な骨格を用いて平均場およびデッドエンド排除（ｄｅａｄ−ｅｎｄ  ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ）法を使用して、スクリーニングされる変異体のモデル構造を最適化および調製することができる。パッキングに続いて、接触密度、クラッシュスコア（ｃｌａｓｈ  ｓｃｏｒｅ）、疎水性、および静電気を含む、いくつかの特徴が点数化される。一般化ボルン法によって、溶媒環境の効果の正確なモデル化が可能となり、残基型を交代させるタンパク質の特定の位置の変異に従って、その自由エネルギー差を算出する。接触密度およびクラッシュスコアは、有効なタンパク質パッキングの重要な側面である相補性の尺度を提供する。スクリーニング手順は、知識ベースのポテンシャル、ならびに対残基相互作用エネルギーおよびエントロピー計算に依存する結合分析スキームを用いる。ＨＥＲ２結合を強化することが知られている文献の変異およびそれらの組み合わせを以下の表に要約する。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１５１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１５１】
（表１Ｂ）トラスツズマブ−ＨＥＲ２系に対するＨＥＲ２への結合を増加することが知られているトラスツズマブ変異
2015522526.tif 000002
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１５２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１５２】
（表１Ｃ）ペルツズマブ−ＨＥＲ２系に対するＨＥＲ２への結合を増加することが知られているペルツズマブ変異
2015522526.tif 000003
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２８０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２８０】
実施例１：構築物の調製および発現
以下の一価抗ＨＥＲ２抗体および対照を調製し、試験した。
１．ＯＡ１−Ｆａｂ−Ｈｅｒ２、一価抗ＨＥＲ２抗体であり、Ｈｅｒ２結合ドメインは鎖ＡのＦａｂであり、Ｆｃ領域は、変異Ｔ３５０Ｖ＿Ｌ３５１Ｙ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３５０Ｖ＿Ｔ３６６Ｌ＿Ｋ３９２Ｌ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体であり、抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン４である。
２．ＯＡ２−Ｆａｂ−Ｈｅｒ２、一価抗ＨＥＲ２抗体であり、Ｈｅｒ２結合ドメインは鎖ＢのＦａｂであり、Ｆｃ領域は、変異Ｔ３５０Ｖ＿Ｌ３５１Ｙ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３５０Ｖ＿Ｔ３６６Ｌ＿Ｋ３９２Ｌ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体であり、抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン４である。
３．ＯＡ３−ｓｃＦｖ−Ｈｅｒ２、一価抗ＨＥＲ２抗体であり、Ｈｅｒ２結合ドメインはｓｃＦｖであり、Ｆｃ領域は、変異Ｌ３５１Ｙ＿Ｓ４００Ｅ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３６６Ｉ＿Ｎ３９０Ｒ＿Ｋ３９２Ｍ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体であり、抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン４である。
４．ＦＳＡ−ｓｃＦｖ−Ｈｅｒ２、二価抗Ｈｅｒ２抗体であり、いずれのＨｅｒ２結合ドメインもｓｃＦｖ形式であり、Ｆｃ領域は、変異Ｌ３５１Ｙ＿Ｓ４００Ｅ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３６６Ｉ＿Ｎ３９０Ｒ＿Ｋ３９２Ｍ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体であり、抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン４である。
５．ＦＳＡ−Ｆａｂ−Ｈｅｒ２、二価抗Ｈｅｒ２抗体であり、いずれのＨｅｒ２結合ドメインもＦａｂ形式であり、Ｆｃ領域は、変異Ｔ３５０Ｖ＿Ｌ３５１Ｙ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３５０Ｖ＿Ｔ３６６Ｌ＿Ｋ３９２Ｌ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体であり、抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン４である。
６．ｗｔ  ＦＳＡ  Ｈｃｐｔｎ、対照としてＣＨＯにおいて内部生成した野生型Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ。抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン４である。
６Ａ．市販のＨｅｒｃｅｐｔｉｎ、対照としてＲｏｃｈｅから購入した野生型Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ。抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン４である。
７．ＯＡ４−ｓｃＦｖ−ＢＩＤ２、一価抗ＨＥＲ２抗体であり、Ｈｅｒ２結合ドメインは鎖ＡのｓｃＦｖであり、Ｆｃ領域は、変異Ｌ３５１Ｙ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３６６Ｌ＿Ｋ３９２Ｍ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体である。抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン１である。
８．ＦＳＡ−ｓｃＦｖ−ＢＩＤ２、二価抗Ｈｅｒ２抗体であり、いずれのＨｅｒ２結合ドメインもｓｃＦｖ形式であり、Ｆｃ領域はＷＴである。抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン１である。
Ｒｏｃｈｅから購入した市販のＨｅｒｃｅｐｔｉｎを除いて、ＣＨＯにおいて発現され、実施例１および実施例１６に記載されるすべての抗体は、フコシル化抗体である。市販のＨｅｒｃｅｐｔｉｎ抗体は、ＣＨＯにより生成された抗体と比べて、より高い割合のアフコシル化を含有する。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３８４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３８４】
実施例１６：追加の構築物の調製および発現
実施例１に記載される構築物１〜８に加えて、以下の追加の一価抗ＨＥＲ２抗体および対照を調製し、試験した。
９．ＯＡ５−Ｆａｂ−Ｈｅｒ２、一価抗ＨＥＲ２抗体であり、Ｈｅｒ２結合ドメインは鎖ＡのＦａｂであり、Ｆｃ領域は、変異Ｔ３５０Ｖ＿Ｌ３５１Ｙ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３５０Ｖ＿Ｔ３６６Ｌ＿Ｋ３９２Ｌ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体であり、抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン２である。
１０．ＯＡ６−Ｆａｂ−Ｈｅｒ２、一価抗ＨＥＲ２抗体であり、Ｈｅｒ２結合ドメインは鎖ＢのＦａｂであり、Ｆｃ領域が、変異Ｔ３５０Ｖ＿Ｌ３５１Ｙ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３５０Ｖ＿Ｔ３６６Ｌ＿Ｋ３９２Ｌ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体であり、抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン２である。
１１．ＦＳＡ−Ｆａｂ−Ｐｅｒｔ、二価抗Ｈｅｒ２抗体であり、いずれのＨｅｒ２結合ドメインもＦａｂ形式のペルツズマブであり、Ｆｃ領域は、変異Ｌ３５１Ｙ＿Ｓ４００Ｅ＿Ｆ４０５Ａ＿Ｙ４０７Ｖを鎖Ａに有し、Ｔ３６６Ｉ＿Ｎ３９０Ｒ＿Ｋ３９２Ｍ＿Ｔ３９４Ｗを鎖Ｂに有するヘテロ二量体である。抗原結合ドメインのエピトープは、Ｈｅｒ２のドメイン２である。