(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
赤鼻性座瘡または脂漏性皮膚炎を治療するための皮膚科用および／または化粧用組成物であって、下記の一般式（Ｉ）に対応し、
【化１】
0003604382.tif 000014
ここに、
R1とR2はそれぞれ別個に下記を表わし、
【化２】
0003604382.tif 000015
あるいはR1とR2は一緒に酸素原子との二重結合を形成し、または窒素原子との二重結合を形成して式＝Ｎ−R4のイミン基を成し、
R3は水素原子、水酸基または５炭素原子のアシルオキシ基とし、
R4は下記から選定された基を示し、
−CH2−（CH2）ｎ−Ｏ−R5、または
【化３】
0003604382.tif 000016
ここに、ｎは０乃至５とし、
またここに、
R5は水素原子、１乃至５以下の炭素原子のアルキル基、または１乃至５以下の炭素原子のアシル基とし、
R6およびR7はそれぞれ別個に、水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とし、
またR8は水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とする事を特徴とするレチノイドを少なくとも含有してなる皮膚科用および／または化粧用組成物。
【請求項２】
赤鼻性座瘡および／または脂漏性皮膚炎の治療用皮膚科組成物を製造するための、請求項１に記載の一般式Ｉに対応し、この式においてR1とR2は一緒に酸素原子との二重結合を示すレチノイドを少なくとも含有してなる組成物。
【請求項３】
前記組成物は薬理学的に許容される担体中に0.01％乃至５％のレチノイドを含有する事を特徴とする請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物が0.1乃至１％のレチノイドを含有する事を特徴とする請求項１及び３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
下記の一般式（Ｉ）に対応する請求項１に記載の少なくとも一種のレチノイドを含有し、
【化４】
0003604382.tif 000017
ここに、
R1とR2はそれぞれ別個に下記を表わし、環状アセタールを形成する基
【化５】
0003604382.tif 000018
あるいはR1とR2は一緒に窒素原子との二重結合を形成して式＝Ｎ−R4のイミン基を成し、
R3は水素原子、水酸基または５炭素原子のアシルオキシ基とし、
R4は下記から選定された基を示し、
−CH2−（CH2）ｎ−Ｏ−R5、または
【化６】
0003604382.tif 000019
ここに、ｎは０乃至５とし、
またここに、
R5は水素原子、１乃至５以下の炭素原子のアルキル基、または１乃至５以下の炭素原子のアシル基とし、
R6およびR7はそれぞれ別個に、水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とし、
またR8は水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とする事を特徴とする皮膚科用および／または化粧用組成物。
【請求項６】
下記の式（II）のグリセロールの１−２環式アセタールを含む事を特徴とする請求項５に記載の組成物。
【化７】
0003604382.tif 000020
【請求項７】
下記の式（III）のグリセロールの1,2環式アセタールのアセチル誘導体を含む事を特徴とする請求項５に記載の組成物。
【化８】
0003604382.tif 000021
【請求項８】
下記の式（IV）のグリセロールの1,3環式アセタールを含む事を特徴とする請求項５に記載の組成物。
【化９】
0003604382.tif 000022
【請求項９】
下記の式（Ｖ）に対応するアミノエタノールとイミン官能基を形成する化合物を含む事を特徴とする請求項５に記載の組成物。
【化１０】
0003604382.tif 000023
【請求項１０】
式（VI）に対応するグリシンアミドとイミン官能基を形成する化合物を含む事を特徴とする請求項５に記載の組成物。
【化１１】
0003604382.tif 000024
【請求項１１】
前記組成物は薬理学的に許容される担体中に0.01％乃至５％の少なくとも一種のレチノイドを含有する事を特徴とする請求項５乃至10のいずれかに記載の皮膚科用組成物。
【請求項１２】
乾癬、座瘡、湿疹、赤鼻性座瘡、刺激性角膜炎、脂漏性皮膚炎、先天的角質化障害を含むグループから選定された疾患の治療に使用される請求項11に記載の皮膚科組成物の製造のための請求項５乃至10のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
薬理学的に許容される担体中に0.01％乃至５％のレチノイドを含有する事を特徴とする請求項５乃至10のいずれかに記載の口腔病治療用組成物。
【請求項１４】
薬理学的に許容される担体中に0.1％乃至１％のレチノイドを含有する事を特徴とする請求項５乃至10のいずれかに記載の口腔病治療用組成物。
【請求項１５】
化粧用に許容される担体中に0.01％乃至５％の式Ｉのレチノイドを含有する事を特徴とする請求項５乃至10のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項１６】
化粧用に許容される担体中に0.1％乃至１％の式Ｉのレチノイドを含有する事を特徴とする請求項５乃至10のいずれかに記載の化粧用組成物。
【請求項１７】
特に老化および／または脂漏による障害の治療に有用な請求項15または16による組成物の製造のための請求項５乃至10のいずれかに記載の式Ｉの組成物。
【発明の詳細な説明】
本発明は特に皮膚科用および／または化粧用に局所使用される組成物、およびこのような組成物の製造のために新規レチノイドを使用する方法に関するものである。また本発明は新規なレチノイド誘導体グループに関するものである。
実際に、レチノールまたは（ROL）は視覚、細胞の再生、成長および分化にとって本質的であるが、これに対してレチノイン酸（またはAR）は細胞成長の調整および制御または分化にのみ関連する事は一般に認められている（G.ウオルフ、Physio.Rev.64,p.873−937;1984）。
レチノイン酸は血漿中にレチノールの約1/150の割合で存在する（Dleehefrほか、J.Lipid.Res.,23,p.1362−1367,1982）。
さらにレチノイン酸は生体中において急速に除去されるが、これはこの酸がその生理学的作用部位の近くでレチノールから産生される事を示している。レチノイン酸は２段階の酵素酸化によって産生される。このプロセスにおいて、レチノールがレチナールに酸化され、次にこのレチナールがレチノイン酸に酸化される。この２段階プロセスは補助因子NADを必要とする。最近の研究は、ラットの腎臓および肝臓あるいはマウスの皮膚など、ある種の齧歯類の組織の中にレチノールをレチノイン酸に変換する事のできる酵素系の存在を実証した（M.J.コノールほか、Biochem J.,244,P.489−492,1987）。
しかしこれらの研究は使用される酵素系の基質に対する特異性の問題を明かにしていない。すなわちこれらの組織は高率のアルコール−およびアルデヒド−デヒドロゲナーゼを含有し、これがレチノールおよびレチナールを含む多数のアルコールおよびアルデヒドを非特異的に酸化する事ができる。
またこれらの研究は、レチノイドの自然代謝においてROL→AR酸化に関連するデヒドロゲナーゼがアルコールの代謝に関連するデヒドロゲナーゼと相違するか否かを示していない。
表皮細胞の中で利用されるレチノイン酸の起源も現在討論中である。
血漿中のレチノイン酸が起源であるかもしれない。しかし、レチノイン酸は急速に代謝し除去されるので、レチノイン酸がその作用部位においてレチノールから酵素的に産生される可能性がある。ともかく、先行技術の研究は関連の酵素系の正確な性質を明かにする事ができなかった。
レチノイン酸とのその類似体の細胞中の作用メカニズムは、レチノイン酸によって誘導されるゲノム転写因子として作用するチロキソ−ステロイドホルモンの受容体のスーパファミリーに属する核受容体を介入させる（A.Krustほか、Proc.Natl.,Acad.Sci.,U.S.A.,86,5310−5314,1989）。しかし、チロキソ−ステロイドホルモンの作用モードとレチノイン酸の作用モードとの間のアナロジーが全部ではない。実際に、組織中のレチノイン酸は細胞内輸送タンパク質またはCRABP（細胞レチノイン酸結合タンパク質）を必要とし、このタンパク質はおそらくそのリガンドを細胞質から核に輸送するベクターの役割を果たす。
レチノイン酸はレチノールの一部の特異機能（細胞分化）における活性中間代謝物である。というのも、レチノイン酸は細胞分化制御においてレチノールよりはるかに活性であり、これは少なくとも部分的にレチノールのレチノイン酸への転化がレチノールに帰せられる活性の原因である事を示す。これが、レチノイン酸またはその類似体が治療剤として選択された事の理由の１つである。
さらにクリークほか（J.Invest.Dermatol.,92,p.283−289,1989）は、細胞外間質の中に入れられたレチノールが培養された表皮ケラチン細胞によってレチノール−エステル（不活性）に代謝された事を示した。S.オットネロほか（J.Biol.Chem.,262,p.3975−3981,1987）は、レチノイドの標的細胞の原形質膜がレチノールをエステル化してこれを不活性化し細胞膜の中に貯蔵する事のできる極度に活性の酵素系を有する事を示した。この故に、細胞の中へのレチノールの進入はエステラーゼを経由する非常に活性の制御メカニズムによって制限されると考える十分な根拠がある。これらの事実は、皮膚科治療剤としてのレチノールの効果の低さを説明している。
従ってレチノイン酸は例えば特願EP230,498に記載のように、皮膚の光老化に対処する組成物の中に「ビタミンＡ酸」として使用されている。
従来から皮膚科に使用されるレチノイドは全トランス型レチノイン酸素およびその類似体、例えば13  Ｚ  レチノイン酸、アシトレチン、アロチノイン酸などであって、実際の生理学的活性を有する。しかしこれらのレチノイドは、全身的経路でも局所経路でも大きな副作用を生じ、特に強い局所的刺激を生じる。
種々の化合物の中に同族化合物が使用されている。すなわち、EP339,905は少なくとも１つのポリペプチド因子と少なくとも１つのレチノイドとの組合わせ含む癒着組成物を記載している。
EP71,537は、アレルギー障害および炎症の治療のため、かならずリノレイン酸または等価物をビタミンＡ型の生成物と組合わせた薬剤組成物を記載している。
レチノイン酸またはその類似体の生合成に際して細胞中においてレチノールをレチノイン酸に活性化する代謝を短絡するために中間生成物を使用すれば、レチノイン酸の核受容体に対して相異なる親和性を有しまたレチノイン酸の活性と同等でない固有活性を有する分子が得られる。
従って本発明の目的は、
下記一般式（Ｉ）の少なくとも１つのレチノイドを含み、
0003604382.tif 000002
ここに、
R1とR2はそれぞれ別個に下記を表わし、
0003604382.tif 000003
あるいはR1とR2は一緒に酸素原子との二重結合を形成し、または窒素原子との二重結合を形成して式＝Ｎ−R4のイミン基を表わし、
R3は水素原子、水酸基または５炭素原子のアシルオキシ基とし、
R4は下記から選定された基を示し、
0003604382.tif 000004
ここに、ｎは０乃至５とし、
またここに、
R5は水素原子、１乃至５以下の炭素原子のアルキル基、または１乃至５以下の炭素原子のアシル基とし、
R6およびR7はそれぞれ別個に、水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とし、
またR8は水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とする事を特徴とする皮膚科用および化粧用組成物を提供するにある。
前記式Ｉの化合物はレチナールのバイオ前駆体グループに属する。
レチナールおよび／またはそのバイオ前駆体は、各細胞に適した酵素系によってレチノイン酸に酸化されまたはレチノールに還元される事ができる。
レチナールのバイオ前駆体は、表皮細胞の細胞内レチノイド代謝酵素によって、レチノイン酸に酸化され、また／あるいはレチナールとそのアセタールの場合にはレチノールに変化されうる。本発明による１つまたは複数の物質を使用する事により、天然レチノイドの代謝に影響しまたは制御する事ができるのは、細胞がこれらの物質の滲透を阻止する膜機構を有しないからである。さらにこれらの物質はレチノイン酸またはその類似体よりもはるかに低い急性毒性を示すので、これらの物質を化粧用にも使用する事ができる。
レチナールのバイオ前駆体と表皮細胞との接触により、代謝が強く制御されるので、それ自体薬剤として活性のレチノイン酸および／またはレチノールの生合成を生じる事ができる。
本発明による組成物は、レチノイン酸およびその類似体のような先行技術の物質の副作用を伴なう事なく、またレチノールの効果不足を伴なう事なく、特定の皮膚科および／または化粧上の障害の治療に有効であろう。
実際にレチノールをレチノイン酸に変換する酵素系を細胞代謝調整の重要段階として使用して、上流において核受容体に作用する事ができる。
従って式Ｉの化合物は薬剤活性を有する中間生成物とみなされる。各組織はそれぞれの酵素活性に対応して、その特異的必要に従って式Ｉの化合物をレチノイン酸にあるいはレチノールに変換する事ができよう。
酸性レチノイドは核受容体を介して直接にゲノムレベルに作用する。この故に、細胞は核受容体の比率、その異化作用またはその生使用性（膜透過性）を別として、現在まで使用されているレチノイドの作用を識別する可能性がなく、これが副作用（口唇炎、皮膚炎など）を生じると思われる。
好ましいバイオ前駆体は、これに対して標的細胞が滲透バリヤを成す膜メカニズムを有しないバイオ前駆体である。またレチナールそのものはレチノイン酸および／またはレチノールに代謝される事ができる。これらのバイオ前駆体の利点は、レチノイン酸および／またはレチノールの生合成の全体メカニズムを変更するにある。これは、追加的な薬理学的制御手段を与える。
本発明によるバイオ前駆体は、一般式Ｉのアセタール誘導体、特に１−２または１−３位においてグリセロールによって環化された誘導体である。
従って本発明の１つのアスペクトによれば、本発明の目的は下記の式（II）のグリセロールの１−２環式アセタールを含む事を特徴とする局所使用組成物である。
0003604382.tif 000005
他のアスペクトによれば，本発明の目的は下記の式（III）のグリセロールの１−２環式アセタールのアセチル誘導体を含む事を特徴とする局所使用組成物である。
0003604382.tif 000006
本発明の他のアスペクトによれば、本発明の目的は下記の式（IV）のグリセロールの１−３環式アセタールを含む事を特徴とする局所使用組成物である。
0003604382.tif 000007
本発明による特に好ましい他の組成物は下記の式（Ｖ）または式（VI）に対応するアミノエタノールまたはグリシンアミドとのイミンを含む。
0003604382.tif 000008
または
0003604382.tif 000009
本発明による組成物は特に皮膚科、口腔病および／または化粧用に有効である。
好ましくは皮膚科用および／または口腔病用の本発明による組成物は0.01乃至５重量％の式（Ｉ）の少なくとも一種のレチノイドを含む。
好ましくは、このレチノイドは組成物中に0.1乃至１重量％の濃度で存在する。
本発明の実施態様の１つによれば、式（Ｉ）のレチノイドは、乾癬、座瘡、湿疹、赤鼻性座瘡、刺激性角膜炎、脂漏性皮膚炎、先天的多角化障害を含むグループから選定された疾患の治療用皮膚科組成物の製造に使用される。
この点に関して、赤鼻性座瘡および脂漏性皮膚炎の治療用組成物の製造のためにはレチナールが特に適当である。
赤鼻性座瘡は特に顔のレベルに赤色膿疹が存在する事によって示される。脂漏性皮膚炎は頭皮、顔および場合によっては身体の他の部分の表皮脱落を伴なう炎症を特徴とする。
これらの疾患を示す患者に対するレチナール含有組成物の施用は観察される徴候の顕著な改善を生じる。
本発明による式（Ｉ）のレチノイドの他の用途は、粘膜、特に口腔粘膜の疾患の治療に有効な口腔治療組成物の製造にある。
本発明の他のアスペクトによれば、本発明の目的は、化粧品として許容される担体の中に0.01乃至５重量％、好ましくは0.1乃至１％のレチノイドを含有する事を特徴とする化粧用組成物にある。
従って本発明の１つの目的は、特に老化および／または脂漏による障害の治療に有効な化粧用組成物の製造のために、前記に定義されたような式Ｉの少なくとも１つの化合物を利用するにある。
実際に、標的細胞に対するレチナールの局所使用はレチノールとそのエステルの再分布、および細胞中のレチノイン酸の割合を著しく変更する。さらにこの再分布はその細胞に固有の酵素活性に従って実施される。このような活性が組織中の同一細胞の発育段階に従って、あるいは細胞または組織の型に従って相違する事を出願人は発見した。さらに、細胞は他の細胞に対する望ましくない拡散を防止するため、このようにして産生されたレチノイン酸の劣化を管理する事ができる。
本発明の新規技術は、細胞の必要とする代謝物、例えばレチノールおよびレチノイン酸の産生を固有の代謝機能によって管理する可能性を与えないで組織または器官にレチノイン酸またはその類似物を規則的に散布する事を避ける。活性薬剤前駆体としての本発明によるレチノイドの利用は、細胞それ自体にその瞬間に必要なレチノールとレチノイン酸の比率を管理させる事ができる。
従って本発明の目的の組成物はレチノイン酸による副作用を伴なう事なく、乾癬のみならず、レチノイン酸による治療に対応するすべての疾患、特に細胞異化に関連するすべての疾患、例えば、皮膚から誘導された光老化または皮下前癌症状に対して有効である。
この故に、本発明の目的は、下記の一般式（Ｉ）に対応し、
0003604382.tif 000010
ここに、
R1とR2はそれぞれ別個に下記を表わし、
0003604382.tif 000011
あるいはR1とR2は一緒に酸素原子との二重結合を形成し、または窒素原子との二重結合を形成して式＝Ｎ−R4のイミン基を成し、
R3は水素原子、水酸基または５炭素原子のアシルオキシ基とし、
R4は下記から選定された基を示し、
0003604382.tif 000012
ここに、ｎは０乃至５とし、
またここに、
R5は水素原子、１乃至５以下の炭素原子のアルキル基、または１乃至５以下の炭素原子のアシル基とし、
R6およびR7はそれぞれ別個に、水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とし、
またR8は水素原子または１乃至５以下の炭素原子のアルキル基とする事を特徴とする化合物にある。
以下、本発明を実施例について詳細に説明するが本発明はこれに限定されるものではない。
実施例  1:試験管テスト
出願人はレチノールのレチノイン酸への転化を測定した。また出願人は人体表皮細胞の抽出物中のレチナールの酵素酸化−還元を試験管測定した（細胞質ゾル抽出物を標識3HのRALおよびROLと共に培養する事によって得られた生成物のHPLC分析）。
HPLCによるレチノイドの分析は下記の技術によって実施される。
角質細胞の細胞質ゾル分画の100μｌアリコートを（3H）−レチノールまたは（3H）−レチナール、600μＭと共に１時間培養する。
100μｌのエタノールを添加して反応を停止する。
次に、４−オキソ−レチノイン酸、全トランスレチノイン酸、13−シス−レチノイン酸、レチノールおよびレチナールを含有する内部標準溶液５μｌを反応媒質に加える。
次に放射性物質を３×1mlのヘキサンによって抽出する。
有機相を捕集し、窒素ガスジェットによって完全に蒸発させる。
次に残留物を50μｌのアセトニトリルの中にとり、HPLCカラム上で分析する。
HPLCシステムは、逆相ODS−Ultrasylカラム（10μｍ、25×0.4cm）を備えた装置VARIAN  5000から成る。
イソクラティックエリューション・システムは、71％のアセトニトリル、23％の酢酸アンモニウム緩衝液（50mM、pH7）および６％のテトラヒドロフランによって構成された流速2.4ml/min.の溶液混合物から成る。
非標識レチノイドを340nmで測定されるその吸光度によって検出する。また600μｌの分画を分画コレクターによって捕集し、4mlのピコフルオールを添加した後にシンチレーションカウンターによって放射能を測定する。
生理濃度のレチノールを使用して、培養異化された人角質細胞の細胞質ゾル抽出物が4.49＋0.17pmol/h/mgタンパク質の酵素活性をもってレチノールをレチノイン酸に転化できるが、培養異化されていない人角質細胞の細胞質ゾル抽出物は検出可能の活性を示さない事を実証した（角質細胞はRheinwald−Green,Cell..6,p.331−334,1957の技術に従って培養され、また異化は外生Ca＋＋によって制御される）。
さらに出願人は乾癬円盤のタンパク質抽出物もレチノールをレチノイン酸に転化する事ができるが異化された角質細胞よりも活性が低い（0.33＋0.07pmol/h/mg）事を実証した。
これに対して、正常な人皮膚の角質細胞抽出物は測定可能の転化率を示さない。これらの転化活性の相違は、研究される生理学的活性の相違、またはその相違なる異化状態によるとする事ができる。
このような正常皮膚と乾癬円盤との間の活性の相違は病理学的意味を有し、また薬剤の製造に応用される。実際に乾癬円盤はAR（レチノイン酸）およびレチノイン酸のレチノイド類似物による治療に対してプラスの反応を示す。
人表皮細胞中この酵素系の活性はアルコールを代謝する酵素系と相違する。
実際に、出願人は、レチノールからのレチノイン酸の産生が４−メチル−ピラゾールおよびジスルフィラムなど、アルコール代謝の特異的阻害剤によっても、過剰なエタノールによっても影響されない事を実証した。
表皮細胞中のこの酵素系の特異性を示す他の実験的事実は、異化されていない角質細胞の細胞質ゾルは、異化された角質細胞の細胞質ゾルと同率のアルコール・デヒドロゲナーゼ活性が存在するにも関わらず、レチノイン酸を形成できない事である。
異化されていない角質細胞はレチノール・デヒドロゲナーゼ活性を有しないが、レチナールをレチノールに還元する事ができる。レチノール転化の第１段階は、それぞれ１方向（還元または酸化）に作用する相異なる２つの酵素あるいは可逆的に作用する事のできる単一酵素によって制御され、これらの酵素がレチノールの第１酸化段階を生じると思われる。
この一般的メカニズムは下記のように表示される：
0003604382.tif 000013
正常皮膚の活性を病理皮膚または培養された表皮細胞（角質細胞）と比較すれば、これらの酵素活性E1,E2,E3が相互に大きな差異を示す事がわかる。
また皮膚中の天然レチノイドの一般的代謝作用においてはレチナール（RAL）が中心的役割を果たす事がわかる。
実際に、補助因子NAD/NADHの比率に従って、RALは細胞の必要に応じてARまたはレチノールに転化される事ができる。従って生理学的メッセージが相違する。さらにRALは非常に活性の代謝物であると思われる。このRALは現在まで組織中に検出されず（非常に低い含有量）、ROLからARの産生に際しての中間代謝物と思われるからである。
レチナールの代謝の分析は、表皮細胞中において、レチナールがレチノールに還元されまたはレチノイン酸に酸化されうる事を示している。反応方向は、酸化還元酵素メカニズムに介入する補助因子NAD/NADHの比率に影響される。すなわち、NADHの存在においてはレチナールは異化された細胞抽出物において異化されない細胞抽出物と同一の酵素活性（8pmol/h/mg）をもって還元されるが、レチナールの酸化は異化されない細胞抽出物におけるよりも、異化された細胞抽出物中において著しく高い（51.6pmol/h/mg）事が実証された。
出願人は、正常皮膚の抽出物と乾癬円盤の抽出物が同一活性をもって、すなわち1.35＋0.4pmol/h/mgの割合をもってレチナールをレチノイン酸に酸化できる事を実証した。しかし、乾癬円盤の抽出物は正常皮膚（1.0＋0.3pmol/h/mg）の２倍急速に（2.5＋0.2pmol/h/mg）レチナールをレチノールに還元する事を実証した。これらの観察は、レチノールの産生またはレチノイン酸の産生におけるレチナールの中間代謝物としての中心的役割、およびROLあるいはARの生合成を生じるためにRALを使用する可能性を示している。
レチナールは非常に重要で決定的な代謝物であるにちがいない。レチナールは組織中には痕跡量存在し（胚組織中においては測定不能の濃度でしか検出されない）（タレールほか、Developpement,103,p.473−483,1988）、また成人組織中においては検出不能であり（ナポリほか、J.Biol.Chem.,263,p.17372−17377,1988およびコナーほか、Biochem.Pharmacol.,36,p.919−924,1987）、これは多量のレチノールによって処理された動物においても同様である。
レチナールはレチノールのレチノイン酸への酸化中間代謝物であるのみならず、β−カロチンの分解代謝物である。β−カロチンはプロビタミンＡであって、そのビタミンＡ活性はそのレチナールへの転化によって説明される。ナポリほか（J.Biol.Chem.,263,p.17372−17377,1988）は、ラットの組織抽出物（腎臓、肺、肝臓および腸）がβ−カロチンをレチノイン酸よりはレチノールに転化したが、中間代謝物としてのレチナールの存在を示さなかったと記載している。
この転化プロセスにおけるレチナールの存在の証明は、15,15′−β−カロチン  ジオキシゲナーゼの部分的精製後においてのみ成された。これらの結果は、レチノールへのレチナールの転化段階がエステルの形でその貯蔵またはその他の特異的生理作用、膜作用、第２メッセンジャー作用にとって重要である事を示す。
実施例  2:生体テスト
1.正常な人皮膚に対する投与
このテストは30人の健康なボランティアについて実施され、レチナールの局所投与後の生理学的効果の存在と耐性とを評価するにある。
３種類の濃度、1.0％、0.1％および0.05％を使用し、10被検者について少なくとも15日乃至３カ月間、毎日投与した。
0.1％乃至0.05％の製剤の耐性は優である。刺激もなく、またレチノイン酸の0.01％の濃度の投与から見られるようなレチノイド性皮膚炎の徴候は見られなかった。しかし生理学的効果は見られ、これは「老化防止」効能のARの局所使用後に見られるような皮膚外観の改善を生じた。
濃度１％の製剤は黄色化を生じた。また10％のケースについてのみ刺激が見られた。これは同一濃度のARについて見られるものと著しく相違する。
これは、レチノールが非常に高い治療濃度で使用でき、またこれより低濃度では、刺激を生じる事なくレチノイン酸と類似のしかし相違する「化粧品型」効果を示す事を証明している。
2.乾癬円盤に対する投与
0.1％乃至0.05％の製剤は最初のパイロットテストに際して乾癬円盤に対して可の効果しか有しなかった（しかしこれらの低濃度はUVAの作用に対して増強効果を有する）。従って、１％製剤を使用し、毎日投与の効果を12人の患者において佐薬の効果と比較した。
投与は６ケースにおいて「公開」され、他の６ケースにおいて非公開であった。11ケース（非公開５ケース、公開６ケース）が評価可能であった。レチナールによって処理された試料を佐薬によって処理された対称試料と比較して標準法（紅疹０−３、鱗屑０−３、浸潤０−３）によって効果を測定した。各対照ごとに写真を作製した。
非公開で治療されたシリーズにおいては、結果は非常に明瞭であった。すなわち５ケースに対して３ケースにおいて第１週から鱗屑の消失と浸潤の減少とが観察され、50％以上の傷痕の退行を伴なった。１つのケースにおいて結果は良であって（30％の傷痕退行）、他の１つのケースにおいて結果は可であった（10％の傷痕退行）。佐薬によって治療された乾癬円盤は不変であった。公開シリーズにおいては、非常に良好な結果は１つだけで、１つの良な結果と４つの可の結果とを得た。
重要な観察事項は、表皮剥離に続いて、浸潤の改善に先行して、乾癬円盤に特異的に限定された炎症の発生であった。
これは、乾癬プロセスの部位に特異的に局限された生理学的効果を示す。
テストの結論
前記の結果によれば、レチナールは人表皮セルにおいて、レチノールとレチノイン酸の細胞内産生の中心的役割を果たす。細胞内レチノール率を増大する２つの可能性がある。その１つは、高濃度の細胞外レチノールによて細胞の原形質膜を飽和して細胞内部に滲透させるにある。他のすぐれた可能性は、細胞中に滲透しやすい前駆体（例えばレチナール）によってレチノールを細胞内で生合成するにある。細胞中の遊離（非エステル化）レチノールの存在が非常に重要である。実際にこの遊離レチノールはその核受容体によってゲノム転写を変更し、また前述のように第２メッセンジャーを活性化するために原形質膜のレベルに作用する事ができると思われる。
実際に細胞中への細胞外レチノイン酸の滲透はレチノールほど繊細に制御する事ができないと思われる。またレチノイン酸は望ましくない副作用を生じる。出願人は、外生レチナールの付加によって副作用なしで、内生レチノイン酸の合成を可能とする事を発見した。
実施例  3:赤鼻性座瘡に対する投与
このテストは赤鼻性座瘡の徴候を示す10被検者について実施された。３カ月間、毎日投与のために、0.1％のレチナールを含有する局所組成物を使用した。
結果
結果はきわめて明白であった。10ケース中の６ケースにおいて、最初の月から赤鼻性座瘡の顕著な改善が見られる。治療３カ月後に、被検者の70％が実際上、赤鼻性座瘡に特徴的な赤色色素を示さなくなった。
実施例  4:脂漏性皮膚炎に対する投与
このテストは脂漏性皮膚炎の徴候を示す10被検者について実施された。
レチナールを0.05％含有する局所組成物を１カ月間、毎日投与した。
結果
治療１カ月後に、被検者の80％が実際上、脂漏性皮膚炎の徴候を示さなくなった。