【手続補正書】
【提出日】平成29年3月10日(2017.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（a）式V1-L1-V2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖であって、式中、V1およびV2は免疫グロブリン可変領域であり、L1およびL2はリンカーであり、L2は存在してもよいし、または存在しなくてもよく、CH1は第1の免疫グロブリン重鎖定常領域である、第1のポリペプチド鎖；ならびに
（b）式V3-L3-V4-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖であって、式中、V3およびV4は免疫グロブリン可変領域であり、L3およびL4はリンカーであり、L4は存在してもよいし、または存在しなくてもよく、CLは免疫グロブリン軽鎖定常領域である、第2のポリペプチド鎖
を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体であって、
第1および第2のポリペプチド鎖の一方または両方が、さらに、（a）および（b）に記載された領域から下流に半減期延長部分を含み；
V1、V2、V3、およびV4が、異なるアミノ酸配列を有し；
ヘテロ二量体性二重特異性抗体が、標的細胞および免疫エフェクター細胞に結合し、かつ／または免疫エフェクター細胞による標的細胞の細胞溶解を媒介する、
ヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２】
半減期延長部分がポリペプチドであり、かつ／またはL2およびL4が存在しない、請求項1に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３】
（a）に記載された領域から下流に半減期延長部分を含む、請求項1または2に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項４】
（b）に記載された領域から下流に半減期延長部分を含む、請求項1〜3のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項５】
（a）の第1のポリペプチド鎖および／または（b）の第2のポリペプチド鎖の半減期延長部分が、Fcポリペプチド鎖である、請求項3または4に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項６】
（a）の第1のポリペプチド鎖および（b）の第2のポリペプチド鎖の両方が、Fcポリペプチド鎖を含む、請求項5に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項７】
標的細胞ががん細胞である、請求項1〜6のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項８】
免疫エフェクター細胞がT細胞であり、ヘテロ二量体性二重特異性抗体が、標的細胞の存在下でT細胞上のCD25およびCD69の発現増加を媒介することができるが、標的細胞の非存在下では媒介することができない、請求項1〜7のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項９】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖が、ヒトIgG Fcポリペプチド鎖である、請求項6に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１０】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖が、ヒトIgG1 Fcポリペプチド鎖、ヒトIgG2 Fcポリペプチド鎖、またはヒトIgG4 Fcポリペプチド鎖である、請求項9に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１１】
L1およびL3が、それぞれ12アミノ酸長以下であるか、またはそれぞれ10アミノ酸長以下である、請求項1〜10のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１２】
V1およびV4の一方が、免疫グロブリン重鎖可変（VH）領域であり、もう一方が、免疫グロブリン軽鎖可変（VL）領域であり、V1およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV3の一方がVH領域であり、もう一方がVL領域であり、V2およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができる、
請求項1〜11のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１３】
V1およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができ；
V2およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができるか、または
V1およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができる、
請求項12に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１４】
V1およびV3が、VL領域であり、
V2およびV4が、VH領域であるか、または
V1およびV3が、VH領域であり、
V2およびV4が、VL領域であるか、または
V1およびV2が、VL領域であり、
V3およびV4が、VH領域であるか、または
V1およびV2が、VH領域であり、
V3およびV4が、VL領域である、
請求項1〜13のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１５】
V1およびV3の一方がVH領域であり、もう一方がVL領域であり、V1およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV4の一方がVH領域であり、もう一方がVL領域であり、V2およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができる、
請求項1〜11のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１６】
V1およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができ；
V2およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができるか、または
V1およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができる、
請求項15に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１７】
V1およびV2が、VH領域であり、
V3およびV4が、VL領域であるか、または
V1およびV2が、VL領域であり、
V3およびV4が、VH領域であるか、または
V1およびV4が、VH領域であり、
V2およびV3が、VL領域であるか、または
V1およびV4が、VL領域であり、
V2およびV3が、VH領域である、
請求項15または16に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１８】
エフェクター細胞が、ヒトTCR-CD3複合体の一部であるエフェクター細胞タンパク質を発現する、請求項1〜17のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項１９】
エフェクター細胞タンパク質が、CD3ε鎖（CD3ε）である、請求項18に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２０】
第1のポリペプチド鎖および第2のポリペプチド鎖が、それぞれFcポリペプチド鎖を含み、
各Fcポリペプチド鎖が、少なくとも1つの電荷対置換（charge pair substitution）を含む、
請求項1〜19のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２１】
第1のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換E356K、E356R、D356R、もしくはD356Kと、D399KもしくはD399Rとを含み、かつ第2のポリペプチドのFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換R409D、R409E、K409E、もしくはK409Dと、N392D、N392E、K392E、もしくはK392Dとを含むか、または
第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換E356K、E356R、D356R、もしくはD356Kと、D399KもしくはD399Rとを含み、かつ第1のポリペプチドのFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換R409D、R409E、K409E、もしくはK409Dと、N392D、N392E、K392E、もしくはK392Dとを含む、
請求項20に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２２】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、Fcγ受容体（FcγR）の結合を阻害する1つまたは複数の改変を含む、請求項20または21に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２３】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、改変L234A、L235A、および／または位置297における任意の置換を含む、請求項22に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２４】
半減期を延長するFc改変を含む、請求項20〜23のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２５】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、EUナンバリングシステムによる残基384と385との間に挿入部を含み、該挿入部がSEQ ID NO:54〜65のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、請求項24に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２６】
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分に、ADCCを増強する改変を含む、請求項20〜25のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２７】
（a）式VH1-L1-VL2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH2-L3-VL1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（b）式VL2-L1-VH1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL1-L3-VH2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（c）式VH2-L1-VL1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH1-L3-VL2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（d）式VL2-L1-VL1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH1-L3-VH2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（e）式VL1-L1-VH2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL2-L3-VH1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（f）式VH1-L1-VH2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL2-L3-VL1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（g）式VH2-L1-VH1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL1-L3-VL2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；ならびに
（h）式VL1-L1-VL2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH2-L3-VH1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖
からなる群より選択される2つのポリペプチド鎖を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体であって、
L1、L2、L3、およびL4が、リンカーであり；
L2およびL4が、存在するか、または存在せず；
VH1およびVL1が、それぞれ重鎖および軽鎖可変領域であり、それらがIgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、標的細胞に結合することができ；
VH2およびVL2が、それぞれ重鎖および軽鎖可変領域であり、それらがIgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、免疫エフェクター細胞に結合することができ；
VH1およびVH2が、異なるアミノ酸配列を有し；
第1および第2のポリペプチド鎖の一方または両方が、さらに、（a）〜（h）に記載された式によって表される領域から下流に半減期延長部分を含む、
ヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２８】
VL1およびVL2が、異なるアミノ酸配列を有するか、または同じアミノ酸配列を有する、請求項27に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項２９】
第1および第2のポリペプチド鎖が、それぞれ、（a）〜（h）に記載された式を有するアミノ酸配列から下流にFcポリペプチド鎖を含む、請求項27または28に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３０】
L1およびL3が、それぞれ12アミノ酸長以下であり、かつ／またはL2およびL4が存在しない、請求項27〜29のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３１】
SEQ ID NO:42、44、または82中の重鎖CDR1、CDR2、およびCDR3配列、ならびにSEQ ID NO:43、45、または83中の軽鎖CDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む、請求項1〜26のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３２】
SEQ ID NO:42、44、もしくは82のアミノ酸配列を含むVH領域、またはSEQ ID NO:42、44、もしくは82に比べて10個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含むその変異体；および
SEQ ID NO:43、45、もしくは83のアミノ酸配列を含むVL領域、またはSEQ ID NO:43、45、もしくは83に比べて10個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含むその変異体
を含む、請求項31に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３３】
SEQ ID NO:42、44、または82のアミノ酸配列を含むVH領域、およびSEQ ID NO:43、45、または83のアミノ酸配列を含むVL領域を含む、請求項32に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３４】
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:46もしくは49、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:42、およびSEQ ID NO:48のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含むか、または
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:43、SEQ ID NO:46もしくは49、SEQ ID NO:48、およびSEQ ID NO:42のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含むか、または
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:50、SEQ ID NO:46もしくは49、SEQ ID NO:48、およびSEQ ID NO:51のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含むか、または
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:44、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、およびSEQ ID NO:45のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含む、
請求項1〜11のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項３５】
請求項1〜34のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体をコードする1種または複数種の核酸。
【請求項３６】
請求項35に記載の核酸を含む、1種または複数種のベクター。
【請求項３７】
請求項35に記載の核酸または請求項36に記載のベクターを含有する、宿主細胞。
【請求項３８】
ヘテロ二量体性二重特異性抗体をコードする核酸を発現するような条件下で請求項37に記載の宿主細胞を培養する段階、および
細胞集団または細胞培養上清から抗体を回収する段階
を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体を作製する方法。
【請求項３９】
医薬として使用するための請求項1〜34のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【請求項４０】
請求項1〜34のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む薬学的組成物。
【請求項４１】
請求項1〜34のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む、がんまたは感染症または自己免疫疾患または炎症性疾患または線維性疾患の処置における使用のための薬学的組成物。
【請求項４２】
SEQ ID NO:82および83のアミノ酸配列を含む、請求項1〜33のいずれか一項に記載のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
さらなる一局面では、本明細書記載の任意のヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む薬学的組成物が、本明細書において記載される。薬学的組成物は、がん、感染症、自己免疫疾患もしくは炎症性疾患、または線維性疾患の処置のためのものであることができる。
[本発明1001]
（a）式V1-L1-V2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖であって、式中、V1およびV2は免疫グロブリン可変領域であり、L1およびL2はリンカーであり、L2は存在してもよいし、または存在しなくてもよく、CH1は第1の免疫グロブリン重鎖定常領域である、第1のポリペプチド鎖；ならびに
（b）式V3-L3-V4-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖であって、式中、V3およびV4は免疫グロブリン可変領域であり、L3およびL4はリンカーであり、L4は存在してもよいし、または存在しなくてもよく、CLは免疫グロブリン軽鎖定常領域である、第2のポリペプチド鎖
を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体であって、
第1および第2のポリペプチド鎖の一方または両方が、さらに、（a）および（b）に記載された領域から下流に半減期延長部分を含み；
V1、V2、V3、およびV4が、異なるアミノ酸配列を有し；
ヘテロ二量体性二重特異性抗体が、標的細胞および免疫エフェクター細胞に結合し、かつ／または免疫エフェクター細胞による標的細胞の細胞溶解を媒介する、
ヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1002]
半減期延長部分がポリペプチドであり、かつ／またはL2およびL4が存在しない、本発明1001のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1003]
（a）に記載された領域から下流に半減期延長部分を含む、本発明1001または1002のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1004]
（b）に記載された領域から下流に半減期延長部分を含む、本発明1001〜1003のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1005]
（a）の第1のポリペプチド鎖および／または（b）の第2のポリペプチド鎖の半減期延長部分が、Fcポリペプチド鎖である、本発明1003または1004のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1006]
（a）の第1のポリペプチド鎖および（b）の第2のポリペプチド鎖の両方が、Fcポリペプチド鎖を含む、本発明1005のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1007]
標的細胞ががん細胞である、本発明1001〜1006のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1008]
免疫エフェクター細胞がT細胞であり、ヘテロ二量体性二重特異性抗体が、標的細胞の存在下でT細胞上のCD25およびCD69の発現増加を媒介することができるが、標的細胞の非存在下では媒介することができない、本発明1001〜1007のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1009]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖が、ヒトIgG Fcポリペプチド鎖である、本発明1006のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1010]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖が、ヒトIgG1 Fcポリペプチド鎖である、本発明1009のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1011]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖が、ヒトIgG2 Fcポリペプチド鎖である、本発明1009のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1012]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖が、ヒトIgG4 Fcポリペプチド鎖である、本発明1009のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1013]
L1およびL3が、それぞれ12アミノ酸長以下である、本発明1001〜1012のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1014]
L1およびL3が、それぞれ10アミノ酸長以下である、本発明1013のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1015]
V1およびV4の一方が、免疫グロブリン重鎖可変（VH）領域であり、もう一方が、免疫グロブリン軽鎖可変（VL）領域であり、V1およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV3の一方がVH領域であり、もう一方がVL領域であり、V2およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができる、
本発明1001〜1014のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1016]
V1およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができ；
V2およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができる、
本発明1015のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1017]
V1およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができる、
本発明1015のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1018]
V1およびV3が、VL領域であり、
V2およびV4が、VH領域である、
本発明1001〜1017のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1019]
V1およびV3が、VH領域であり、
V2およびV4が、VL領域である、
本発明1001〜1017のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1020]
V1およびV2が、VL領域であり、
V3およびV4が、VH領域である、
本発明1001〜1017のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1021]
V1およびV2が、VH領域であり、
V3およびV4が、VL領域である、
本発明1001〜1017のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1022]
V1およびV3の一方がVH領域であり、もう一方がVL領域であり、V1およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV4の一方がVH領域であり、もう一方がVL領域であり、V2およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞または免疫エフェクター細胞に結合することができる、
本発明1001〜1014のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1023]
V1およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができ；
V2およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができる、
本発明1022のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1024]
V1およびV3が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが免疫エフェクター細胞に結合することができ；
V2およびV4が、IgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、それらが標的細胞に結合することができる、
本発明1022のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1025]
V1およびV2が、VH領域であり、
V3およびV4が、VL領域である、
本発明1022〜1024のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1026]
V1およびV2が、VL領域であり、
V3およびV4が、VH領域である、
本発明1022〜1024のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1027]
V1およびV4が、VH領域であり、
V2およびV3が、VL領域である、
本発明1022〜1024のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1028]
V1およびV4が、VL領域であり、
V2およびV3が、VH領域である、
本発明1022〜1024のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1029]
エフェクター細胞が、ヒトTCR-CD3複合体の一部であるエフェクター細胞タンパク質を発現する、本発明1001〜1028のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1030]
エフェクター細胞タンパク質が、CD3ε鎖（CD3ε）である、本発明1029のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1031]
第1のポリペプチド鎖および第2のポリペプチド鎖が、それぞれFcポリペプチド鎖を含み、
各Fcポリペプチド鎖が、少なくとも1つの電荷対置換（charge pair substitution）を含む、
本発明1001〜1030のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1032]
第1のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換E356K、E356R、D356R、もしくはD356Kと、D399KもしくはD399Rとを含み、かつ第2のポリペプチドのFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換R409D、R409E、K409E、もしくはK409Dと、N392D、N392E、K392E、もしくはK392Dとを含むか、または
第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換E356K、E356R、D356R、もしくはD356Kと、D399KもしくはD399Rとを含み、かつ第1のポリペプチドのFcポリペプチド鎖部分が、電荷対置換R409D、R409E、K409E、もしくはK409Dと、N392D、N392E、K392E、もしくはK392Dとを含む、
本発明1031のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1033]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、Fcγ受容体（FcγR）の結合を阻害する1つまたは複数の改変を含む、本発明1031または1032のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1034]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、改変L234A、L235A、および／または位置297における任意の置換を含む、本発明1033のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1035]
半減期を延長するFc改変を含む、本発明1031〜1034のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1036]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分が、EUナンバリングシステムによる残基384と385との間に挿入部を含み、該挿入部がSEQ ID NO:54〜65のいずれか1つのアミノ酸配列を含む、本発明1035のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1037]
第1および第2のポリペプチド鎖のFcポリペプチド鎖部分に、ADCCを増強する改変を含む、本発明1031〜1036のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1038]
（a）式VH1-L1-VL2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH2-L3-VL1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（b）式VL2-L1-VH1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL1-L3-VH2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（c）式VH2-L1-VL1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH1-L3-VL2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（d）式VL2-L1-VL1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH1-L3-VH2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（e）式VL1-L1-VH2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL2-L3-VH1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（f）式VH1-L1-VH2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL2-L3-VL1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；
（g）式VH2-L1-VH1-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VL1-L3-VL2-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖；ならびに
（h）式VL1-L1-VL2-L2-CH1を有するアミノ酸配列を含む第1のポリペプチド鎖および式VH2-L3-VH1-L4-CLを有するアミノ酸配列を含む第2のポリペプチド鎖
からなる群より選択される2つのポリペプチド鎖を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体であって、
L1、L2、L3、およびL4が、リンカーであり；
L2およびL4が、存在するか、または存在せず；
VH1およびVL1が、それぞれ重鎖および軽鎖可変領域であり、それらがIgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、標的細胞に結合することができ；
VH2およびVL2が、それぞれ重鎖および軽鎖可変領域であり、それらがIgGおよび／またはscFv抗体の一部である場合に、免疫エフェクター細胞に結合することができ；
VH1およびVH2が、異なるアミノ酸配列を有し；
第1および第2のポリペプチド鎖の一方または両方が、さらに、（a）〜（h）に記載された式によって表される領域から下流に半減期延長部分を含む、
ヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1039]
VL1およびVL2が、異なるアミノ酸配列を有する、本発明1038のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1040]
VL1およびVL2が、同じアミノ酸配列を有する、本発明1038のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1041]
第1および第2のポリペプチド鎖が、それぞれ、（a）〜（h）に記載された式を有するアミノ酸配列から下流にFcポリペプチド鎖を含む、本発明1038〜1040のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1042]
L1およびL3が、それぞれ12アミノ酸長以下であり、かつ／またはL2およびL4が存在しない、本発明1038〜1041のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1043]
SEQ ID NO:42、44、または82中の重鎖CDR1、CDR2、およびCDR3配列、ならびにSEQ ID NO:43、45、または83中の軽鎖CDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む、本発明1001〜1037のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1044]
SEQ ID NO:42、44、もしくは82のアミノ酸配列を含むVH領域、またはSEQ ID NO:42、44、もしくは82に比べて10個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含むその変異体；および
SEQ ID NO:43、45、もしくは83のアミノ酸配列を含むVL領域、またはSEQ ID NO:43、45、もしくは83に比べて10個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含むその変異体
を含む、本発明1043のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1045]
SEQ ID NO:42、44、または82のアミノ酸配列を含むVH領域、およびSEQ ID NO:43、45、または83のアミノ酸配列を含むVL領域を含む、本発明1044のヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1046]
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:46もしくは49、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:42、およびSEQ ID NO:48のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含む、本発明1001〜1014のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1047]
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:43、SEQ ID NO:46もしくは49、SEQ ID NO:48、およびSEQ ID NO:42のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含む、本発明1001〜1014のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1048]
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:50、SEQ ID NO:46もしくは49、SEQ ID NO:48、およびSEQ ID NO:51のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含む、本発明1001〜1014のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1049]
V1、V2、V3、およびV4が、それぞれSEQ ID NO:44、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、およびSEQ ID NO:45のアミノ酸配列、またはこれらの配列の1つに比べて20個以下の単一アミノ酸の挿入、欠失、もしくは置換を含有するこれらの配列の変異体を含む、本発明1001〜1014のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。
[本発明1050]
本発明1001〜1049のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体をコードする1種または複数種の核酸。
[本発明1051]
本発明1050の核酸を含む、1種または複数種のベクター。
[本発明1052]
本発明1050の核酸または本発明1051のベクターを含有する、宿主細胞。
[本発明1053]
ヘテロ二量体性二重特異性抗体をコードする核酸を発現するような条件下で本発明1052の宿主細胞を培養する段階、および
細胞集団または細胞培養上清から抗体を回収する段階
を含む、ヘテロ二量体性二重特異性抗体を作製する方法。
[本発明1054]
本発明1001〜1049のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体の治療有効量をがん患者に投与する段階を含む、該患者を処置する方法であって、標的細胞タンパク質ががん細胞抗原である、方法。
[本発明1055]
化学療法または放射線が、抗体の投与と同時、投与の前、または投与の後に患者に施される、本発明1054の方法。
[本発明1056]
非化学療法的抗腫瘍剤が、抗体の投与と同時、投与の前、または投与の後に患者に投与される、本発明1054の方法。
[本発明1057]
本発明1001〜1045のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体の治療有効用量を、感染症を有する患者に投与する段階を含む、該患者を処置するための方法であって、標的細胞が感染細胞である、方法。
[本発明1058]
本発明1001〜1045のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体の治療有効用量を、自己免疫性状態または炎症性状態を有する患者に投与する段階を含む、該患者を処置するための方法。
[本発明1059]
本発明1001〜1045のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体の治療有効用量を、線維性状態を有する患者に投与する段階を含む、該患者を処置するための方法。
[本発明1060]
本発明1001〜1049のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体の医薬としての使用。
[本発明1061]
本発明1001〜1049のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む薬学的組成物。
[本発明1062]
本発明1001〜1049のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む、がんの処置のための薬学的組成物。
[本発明1063]
本発明1001〜1045のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む、感染症の処置のための薬学的組成物。
[本発明1064]
本発明1001〜1045のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む、自己免疫疾患または炎症性疾患の処置のための薬学的組成物。
[本発明1065]
本発明1001〜1045のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体を含む、線維性疾患の処置のための薬学的組成物。
[本発明1066]
SEQ ID NO:82および83のアミノ酸配列を含む、本発明1001〜1045のいずれかのヘテロ二量体性二重特異性抗体。