(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一価または二価のカチオンによる塩の形態、または遊離酸の形態の１種類以上のフマル酸Ｃ１〜Ｃ５−モノアルキルエステルまたはこれとジ−Ｃ１〜Ｃ５−アルキルフマレートとを含む器官および細胞移植における宿主対移植片反応の治療剤。
【請求項２】
一般式
【化１】
0003553883.tif 000012
（式中、ＡはＣａ、Ｍｇ、ＺｎまたはＦｅからなる群の二価のカチオン、あるいはＬｉ、ＮａまたはＫの群からの一価のカチオンであり、ｎはカチオンの種類によって１または２の数を表す）
のフマル酸モノアルキルエステルの一価または二価のカチオンの一種類以上の塩と、
任意で、式
【化２】
0003553883.tif 000013
のジアルキルフマレートとの混合物と、および／または一般式
【化３】
0003553883.tif 000014
の１種類以上のアルキル水素フマレートと、任意で式
【化４】
0003553883.tif 000015
のジアルキルフマレートとの混合物と、任意で、一般的に用いられる製薬賦形剤からなる請求項１記載の宿主対移植片反応の治療剤。
【請求項３】
フマル酸モノメチルまたはエチルエステルのカルシウム塩を含有することを特徴とする請求項１または２記載の治療剤。
【請求項４】
フマル酸モノエチルエステルのカルシウム、マグネシウムおよび／または亜鉛塩のうち１種類以上と、ジメチルフマレートとの混合物を含有することを特徴とする請求項１または２記載の治療剤。
【請求項５】
活性成分がカプセル内包タブレット、マイクロタブレット、ペレットまたは顆粒、またはカプセルの形態で経口投与されることを特徴とする請求項１乃至４のいずれか一項記載の治療剤。
【請求項６】
フマル酸モノアルキルエステルのカルシウム塩を１０〜３００ｍｇの量で用い、前記活性成分の総量が１０〜３００ｍｇであることを特徴とする請求項５記載の治療剤。
【請求項７】
フマル酸モノアルキルエステルのカルシウム塩１０〜２９０重量部およびジメチルフマレート２９０〜１０重量部を用い、前記活性成分の総重量が２０〜３００ｍｇであることを特徴とする請求項５記載の治療剤。
【請求項８】
フマル酸モノアルキルエステルのカルシウム塩１０〜２５０重量部、ジメチルフマレート１〜５０重量部およびフマル酸モノアルキルエステルの亜鉛塩１〜５０重量部を用い、前記活性成分の総重量が２０〜３００ｍｇであることを特徴とする請求項５記載の治療剤。
【請求項９】
フマル酸モノアルキルエステルのカルシウム塩１０〜２５０重量部、ジメチルフマレート２５０〜１０重量部、フマル酸モノアルキルエステルのマグネシウム塩１〜５０重量部およびフマル酸モノアルキルエステルの亜鉛塩１〜５０重量部を用い、前記活性成分の総重量が３０〜３００ｍｇであることを特徴とする請求項５記載の治療剤。
【請求項１０】
治療が免疫抑制剤と組み合わせて行われることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか一項記載の治療剤。
【請求項１１】
サイクロスポリンがフマル酸化合物の適用に続いてまたは交互に適用されることを特徴とする請求項１０記載の治療剤。
【請求項１２】
治療が移植医療において用いられる１種類以上の製剤と組み合わせて行われることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか一項記載の治療剤。
【請求項１３】
ペレットまたはマイクロタブレットのサイズまたは平均粒径が３００〜２０００μｍの範囲であることを特徴とする請求項５乃至１２のいずれか一項記載の治療剤。
【請求項１４】
薬剤が、軟または硬ゼラチンカプセルの形態であることを特徴とする請求項５記載の治療剤。
【請求項１５】
薬剤の投与単位に腸溶皮が与えられていることを特徴とする請求項１乃至１４のいずれか一項記載の治療剤。
【請求項１６】
前記薬剤が、皮膚および経皮投与のための製剤、非経口投与のための製剤および直腸投与のための製剤の形態であることを特徴とする請求項１乃至４のいずれか一項記載の治療剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、移植医療に用いる製薬組成物を調製するために、塩または遊離酸の形態のいずれかで特定のフマル酸モノアルキルエステルを単独で、またはジアルキルフマレートと共に用いることに関する。特に、受容体による移植拒絶、すなわち、宿主対移植片反応、を治癒、緩和または抑制するために、フマル酸アルキルエステルを含有する前記製薬製剤を用いることに関する。
【０００２】
移植は組織または器官の移植であり、例えば、角膜、皮膚、骨（骨細片）、血管または筋膜のような組織、腎臓、心臓、肝臓、肺、すい臓または腸のような器官、または膵島細胞、α−細胞および肝臓細胞のような個々の細胞の移植があり、移植器官としては腎臓が最も重要である。
【０００３】
ドナーと受容体間の関係の程度によって、自家移植（同一個体の身体の他の部分への移植）、同種組織移植（遺伝的に同質の個体への移植）または同種異系移植（同種族の他の個体への移植）に区別される。起源および移植の部位に応じて、同位置移植（同一部位への移植）と異所移植（異なる部位への移植）とにさらに区別される。上述の移植は、最新医療において重要な役割を演じている。
【０００４】
移植医療における主な問題は、組織、器官または細胞の移植後の受容体の免疫防御反応による移植片拒絶である。かかる移植片拒絶はまた宿主対移植片反応とも呼ばれている。異種蛋白質に対する生物の免疫防御反応によりしばしば移植片拒絶または溶解が生じる。最新の免疫抑制剤、中でも最も重要な代表例であるサイクロスポリン、特にサイクロスポリンＡを用いることによって、ここ数年にわたって移植結果が大きく改善された。現在のところ、１年生存率は、肝臓移植については約６０％、心臓移植については約８０％、腎臓移植については９０％を超えている。
【０００５】
宿主対移植片反応は、異なる段階に分けられる。受容体とドナーの差異の程度に応じて、この反応は異なる速度で生じ、急性、亜急性または慢性反応と呼ばれる。急性拒絶プロセスは、４８時間以内の動脈炎（ａｒｔｅｒｉｉｔｉｓ）または細動脈炎の結果としての移植の非可逆的損失（壊死性炎）を伴うものであり、薬を投与しても効き目がない。亜急性の拒絶反応は、移植脈管障害の結果として、１２日〜４ヶ月の可逆的機能不全による拒絶発症として発現する。最後に、数週間または数年にわたって進行し、薬は実際に効き目がない、閉塞性動脈症のような血管の変化の結果としての移植の機能喪失は、慢性的な拒絶反応とされる。
【０００６】
かかる拒絶反応、すなわち宿主対移植片反応を排除するために、移植医療では、本質的に免疫抑制、すなわち通常の免疫反応を弱めることを利用している。この目的で、抗リンパ球血清を、核酸や蛋白質合成に影響して、細胞分裂や増殖を防ぐコルチコステロイドやいわゆる代謝拮抗物質である、６−メルカプトプリンやチオグアニンのようなプリン類似体と組み合わせて用いられることが多い。これによって、抗体の生成や細胞免疫反応が抑制される。治療に用いられる免疫抑制剤は、身体の免疫反応を特異的または非特異的に抑制または弱める物質である。非特異的免疫抑制剤は、例えば、アルキル化剤や代謝拮抗物質のような細胞増殖抑制剤である。さらに、コルチコステロイド、抗血清、抗体ＦＫ−５０６、タクロリムス、マイコフェノレートモフェティル（ｍｙｃｏｐｈｅｎｏｌａｔｅｍｏｆｅｔｉｌ）およびサイクロスポリンＡのような主たるサイクロスポリンのような活性成分は、少なくとも部分的に特異的な免疫抑制を生じさせるものとして知られている。
【０００７】
免疫抑制剤を用いる危険は、伝染病に対する身体の防御を弱めたり、悪性腫瘍疾患の危険性を増大させることである。従って、本発明の目的は、宿主対移植片反応を治療、特に抑制し、これを弱め、かつ／または緩和するのに用いることができ、上述の欠点を持たない移植医療用の製薬製剤を提供することである。
【０００８】
本発明の目的は、移植医療に用いる製薬組成物を調製するために、一価または二価のカチオンによる塩または遊離酸の形態のいずれかで特定のフマル酸モノアルキルエステルを単独で、またはジアルキルフマレートと共に用いることにより達成される。本発明の構成要件は請求項にその詳細な特徴が記されている。本発明による組成物にはフマル酸それ自体は含まれていない。
【０００９】
製薬製剤は、投与後の生物分解の際に、クエン酸サイクルに入るか、または、特に大量投与のときは、潜伏性疾患を緩和したり治癒することができるため、その製剤の一部が治療上非常に重要となることが分かっている。
【００１０】
フマル酸は、例えば、マウスのエーリッヒ腹水腫瘍の成長を抑制し、マイトマイシンＣおよびアフラトキシンの毒性を減じ［Ｋ．Ｋｕｒｏｄａ、Ｍ．Ａｋａｏ、Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． ２９， ２８３９−２８４４（１９８０年）／Ｇａｎｎ． ７２， ７７７−７８２（１９８１年）／Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ３６， １９００−１９０３（１９７６年）］、抗乾癬および抗微生物活性を示す［Ｃ．Ｎ． Ｈｕｈｔｓｎｅｎ、Ｊ．Ｆｏｏｄ Ｓｃｉ． ４８， １５７４（１９８３年）／Ｍ．Ｎ． Ｉｓｌａｍ、米国特許（ＵＳ−Ａ）第４，３４６，１１８号、１９８２年８月２４日／Ｃ．Ａ． ９７、１６１３１７ｂ（１９８２年）］。
【００１１】
高投与量のフマル酸またはジヒドロキシルフマル酸のようなその誘導体を非経口、経皮、特に経口で投与すると、フマルアミドおよびフマロニトリルは許容されない重症な副作用および高毒性をもっており［Ｐ． Ｈｏｌｌａｎｄ、Ｒ．Ｇ． Ｗｈｉｔｅ、Ｂｒｉｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． ８５、２５９−２６３（１９７１年）、Ｍ．Ｈａｇｅｄｏｒｎ、Ｋ．Ｗ． Ｋａｌｋｏｆｆ、Ｇ．Ｋｉｅｆｅｒ、Ｄ．Ｂａｒｏｎ． Ｊ．Ｈｕｇ、Ｊ． Ｐｅｔｒｅｓ、Ａｒｃｈ． Ｄｅｒｍ． Ｒｅｓ． ２５４、６７−７３（１９７５年）］、たいていの場合、以前は、かかる治療法は断念せざるを得なかった。
【００１２】
欧州特許出願第０  １８８  ７４９号には、フマル酸誘導体および乾癬の治療のためのそれを含有する製薬組成物が既に記載されている。フマル酸およびその他フマル酸誘導体の混合物を含有する乾癬治療用製薬組成物は、ＤＥ−Ａ−２５  ３０  ３７２号から公知である。遊離フマル酸が含有されていることがこれらの薬剤にとって必須である。
【００１３】
ＤＥ−Ａ−２６  ２１  ２１４号には、乾癬の治療のための活性成分としてフマル酸モノエチルエステルおよびその鉱物塩を含有する薬剤が記載されている。刊行物である「Ｈａｕｔａｒｚｔ（皮膚科医）」（１９８７年）２７９−２８５」では、フマル酸モノエチルエステル塩を用いることが議論されている。乾癬、乾癬性関節炎、神経皮膚炎および限局性回腸炎クローンの治療のためのフマル酸モノアルキルエステル塩とフマル酸ジエステルの混合物を含有する製薬組成物はＥＰ第０  ３１２  ６９７  Ｂ１号より公知である。
【００１４】
意外にも、フマル酸Ｃ１〜Ｃ５−モノアルキルエステルは一価または二価のカチオンによる塩の形態、好ましくはカルシウム、マグネシウム、亜鉛または鉄の塩、およびリチウム、ナトリウムまたはカリウム塩、または遊離酸の形態で単独またはジ−Ｃ１〜Ｃ５−アルキルフマレートと組み合わせると、移植医療に用いる製薬組成物を調製するのに有利であることを見出した。かかるフマル酸Ｃ１〜Ｃ５−モノアルキルエステルを含有する組成物は、意外なことに、宿主対移植片反応における免疫系の正変調を可能にする。
【００１５】
本発明は、好ましくは、一般式
【化５】
0003553883.tif 000002
【００１６】
（式中、ＡはＣａ、Ｍｇ、ＺｎまたはＦｅからなる群の二価のカチオン、あるいはＬｉ、ＮａまたはＫからなる群（ｓｅｒｉｅｓ）の一価のカチオンであり、ｎはカチオンの種類によって１または２の数を表す）のフマル酸モノアルキルエステルのカルシウム、マグネシウム、亜鉛および鉄の塩またはリチウム、ナトリウムまたはカリウム塩からなる群からの１種類以上の化合物を含有し、任意で、式
【００１７】
【化６】
0003553883.tif 000003
のジアルキルフマレートとの混合物とし、任意で通常の製薬付形剤および展色剤と共に用いられる製薬組成物を用いるものである。
【００１８】
一般式
【化７】
0003553883.tif 000004
の１種類以上のアルキル水素フマレートを含有し、任意で式
【００１９】
【化８】
0003553883.tif 000005
のジアルキルフマレートとの混合物とし、そして任意で通常製薬付形剤および展色剤と共に用いられる製薬組成物もまた有利に用いられる。
【００２０】
活性成分を、カプセル内包タブレット、マイクロタブレット、ペレットまたは顆粒、または（軟または硬ゼラチン）カプセルの形態で経口投与する使用法が好ましい。
【００２１】
本発明による好ましい組成物は、フマル酸モノメチルエステルまたはモノエチルエステルのカルシウム塩、またはジメチルフマレートとの混合物でのフマル酸モノメチルエステルまたはモノエチルエステルのカルシウム塩を含有する。
【００２２】
遊離酸の形態のフマル酸モノアルキルエステルまたはフマル酸アルキルエステルのカルシウム塩を１０〜３００ｍｇの量含有する製剤が投与するのに特に好適である。このとき、活性成分の総重量は１０〜３００ｍｇである。
【００２３】
他の好ましい経口形態の投与では、フマル酸モノアルキルエステルのカルシウム塩１０〜２９０重量部、ジメチルフマレート２９０〜１０重量部、フマル酸モノアルキルエステルの亜鉛塩１〜５０重量部またはジメチルフマレート１〜２５０重量部、フマル酸モノアルキルエステル、例えば、モノメチルエステルのマグネシウム塩１〜５０重量部を含有し、このとき、活性成分の総重量は３０〜３００ｍｇである。
【００２４】
本発明による好ましい組成物はまた、メチル水素フマレートを１０〜３００ｍｇの量で含有している。
【００２５】
経皮（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ、ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）投与のための組成物および直腸投与のための組成物の形態で薬剤を使用することもできる。
【００２６】
本発明による組成物中に含有されるフマル酸誘導体は、例えば、
ａ）式
【化９】
0003553883.tif 000006
【００２７】
の化合物を、２モルのジアルキルアルコール（ＲＯＨ）と公知の方法により縮合させてジエステルを得た後、制御された加水分解によりモノエステルを得る、
ｂ）１モルの関連のアルキルアルコールと通常の方法により縮合させた後、一酸塩化物の加水分解により酸を得る、
ｃ）フマル酸を２モルのアルキルアルコール（ＲＯＨ）と公知の方法により直接縮合させて関連のジエステルを得た後、制御された加水分解によりモノエステルを得る、または
ｄ）マレイン酸または無水マレイン酸を１〜２モルの関連のアルキルアルコール（ＲＯＨ）と公知の方法により直接縮合させてモノ−またはジエステルを得た後、触媒異性化によりそれぞれのフマル酸誘導体を得ることにより得られる。
【００２８】
フマル酸モノアルキルエステルの塩はまた、一般式
【化１０】
0003553883.tif 000007
【００２９】
（式中、ＲはＣ１〜Ｃ５のアルキル基）の化合物を等モル量のＮａ、Ｋ、Ｆｅ、Ｃａ、ＭｇまたはＺｎ水酸化物または酸化物とトルエン中で反応させて、反応中に生成された水を除去することによっても得られる。
【００３０】
特に好ましい用途については、以下に記載した投与量および比率の活性成分を含有する組成物を用いる。
１）フマル酸モノメチルエステルのカルシウム塩を１０〜３００ｍｇの量で含有し、活性成分の総重量が１０〜３００ｍｇであることを特徴とするカプセル内包タブレット、マイクロタブレットまたはペレット、またはカプセルの形態の経口投与の製薬組成物、
２）フマル酸モノメチルエステルのカルシウム塩を１０〜２９０重量部およびジメチルフマレートを２９０〜１０重量部含有し、活性成分の総重量が２０〜３００ｍｇであることを特徴とするカプセル内包タブレット、マイクロタブレットまたはペレット、またはカプセルの形態の経口投与の製薬組成物、
３）フマル酸モノメチルエステルのカルシウム塩を１０〜２５０重量部、ジメチルフマレートを１〜５０重量部およびフマル酸モノメチルエステルの亜鉛塩１〜５０重量部含有し、活性成分の総重量が２０〜３００ｍｇであることを特徴とするカプセル内包タブレット、マイクロタブレットまたはペレット、またはカプセルの形態の経口投与の製薬組成物、
４）フマル酸モノメチルエステルのカルシウム塩を１０〜２５０重量部、ジメチルフマレートを２５０〜１０重量部、フマル酸モノメチルエステルのマグネシウム塩を１〜５０重量部およびフマル酸モノメチルエステルの亜鉛塩を１〜５０重量部含有し、活性成分の総重量が３０〜３００ｍｇであることを特徴とするタブレットまたはカプセルの形態の経口投与の製薬組成物。
【００３１】
以下の薬剤の形態、投与量および比率が好ましい。
５）一般式
【化１１】
0003553883.tif 000008
のフマル酸モノアルキルエステルの遊離酸の群からの１種類以上の化合物を含有し、任意で、式
【００３２】
【化１２】
0003553883.tif 000009
【００３３】
のジアルキルフマレートおよび展色剤と混合されていて、フマル酸を遊離形態で含有していない経口投与の製薬組成物、
６）アルキル水素フマレート、好ましくはメチル水素フマレートを、１０〜３０ｍｇの量で含有し、活性成分の総重量が１０〜３００ｍｇであることを特徴とするカプセル内包タブレット、マイクロタブレットまたはペレット、またはカプセルの形態の経口投与の製薬組成物、
７）アルキル水素フマレート、好ましくはメチル水素フマレートを１０〜２９０重量部およびジアルキルフマレートを２９０〜１０重量部を含有し、活性成分の総重量が２０〜３００ｍｇであることを特徴とするカプセル内包タブレット、マイクロタブレットまたはペレット、またはカプセルの形態の経口投与の製薬組成物。
【００３４】
経口組成物は、腸溶皮により覆われていてもよい。前記組成物は、カプセル中に含有されているマイクロタブレット、ペレットまたは顆粒の形態で提供されてもよい。かかるカプセルは軟または硬ゼラチンカプセルであってもよい。
【００３５】
好ましい実施形態によれば、ペレットまたはマイクロタブレットのサイズまたは平均粒径は、３００〜２０００μｍの範囲、特に５００〜１０００μｍの範囲である。
【００３６】
本発明によれば、フマル酸モノアルキルエステルまたはその塩による治療はまた、器官の移植に一般的に用いられる三重薬剤治療の１種類以上の組成物、または、特に宿主対移植片反応の治療、緩和または抑制のためにサイクロスポリンＡと組み合わせて行うこともできる。
【００３７】
この目的で、投与された組成物は、既知の投与量または量で活性成分の組み合わせを含有していてもよい。同様に、組み合わせ治療は、同一または異なる経路の適用による個別の組成物の並列投与からなっていてもよい。任意で、本発明に従って投与されたフマル酸誘導体投与量に加えて含有される活性成分の投与量を減らすと有利な結果が得られる。
【００３８】
本発明による使用の他の実施形態は、薬剤治療を上述のフマル酸誘導体の適用に続いて、サイクロスポリンのような免疫抑制剤を交互に行うことである。これは、上記に定義されたフマル酸誘導体を１週間以上にわたって適用した後、サイクロスポリン治療を１週間以上続けることを意味している。これによりサイクロスポリンＡの投与量を減らすことができ、長期治療における副作用の頻度がかなり減じられる。
【００３９】
本発明による使用を例証するために、以下の実施例により好ましい薬剤の組成物について記載する。
【００４０】
生成物の実施例
実施例１
モノメチルフマル酸Ｃａ塩１００．０ｍｇ（フマル酸７１ｍｇに相当）を含有する腸溶皮膜タブレットの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノエチルフマル酸Ｃａ塩１０．０００ｋｇを破砕し、激しく混合して、８００シーブによりホモジナイズする。以下の組成により付形剤混合物を調製する。デンプン誘導体（ＳＴＡ−ＲＸ１５００登録商標）２１．０００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ １０１登録商標）２．０００ｋｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）０．６００ｋｇ、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ登録商標４．０００ｋｇ、コロイドケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ登録商標）０．３００ｋｇ。
【００４１】
活性成分を粉末混合物全体に加え、混合し、シーブ２００によりホモジナイズして、通常の方法でポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）の２％水溶液により処理してバインダー顆粒とし、乾燥状態にある外部相と混合する。後者は、タルク８０％、ケイ酸１０％およびステアリン酸マグネシウム１０％を含有するいわゆるＦＳＴ錯体２．０００ｋｇからなる。
【００４２】
この後、通常の方法により、混合物を重さ４００ｍｇ、直径１０．０ｍｍの凸状タブレットに圧縮する。これらの標準的な圧縮方法の代わりに、直接圧縮または溶融およびスプレー乾燥方法による固体分散のような他の方法を用いてタブレットを作成してもよい。
【００４３】
腸溶：
ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ、Ｐｈａｒｍａｃｏａｔ ＨＰ登録商標５０）２．２５０ｋｇの溶液を、脱塩水２．５０リットル、アセトン（Ｐｈ． Ｈｅｌｖ． ＶＩＩ）１３．００リットルおよびエタノール（９４重量％）１３．００リットルからなる溶剤混合物中で溶解し、ひまし油（Ｐｈ． Ｅｕｒ． ＩＩ）０．２４０ｋｇをこの溶液に加える。この溶液の一部を、通常の方法で被覆皿においてタブレットコアに注ぐか、スプレーする、あるいは、適切な構造の流動床装置により適用する。
【００４４】
乾燥後、皮膜を形成する。前記皮膜は、２−プロパノール（Ｐｈ． Ｈｅｌｖ． ＶＩＩ）８．２００ｋｇ、グリセリントリアセテート（Ｔｒｉａｃｅｔｉｎ登録商標）および脱塩水０．２００ｋｇの溶剤混合物中のＥｕｄｒａｇｉｔ Ｅ１２．５％登録商標４．８００ｋｇ、タルク（Ｐｈ． Ｅｕｒ． ＩＩ）０．３４０ｋｇ、酸化チタン（ＶＩ）Ｃｒｏｎｕｓ ＲＮ ５６登録商標０．５２０ｋｇ、着色ラッカーＺＬＴ−２青色（Ｓｉｅｇｌｅ）０．２１０ｋｇおよびポリエチレングリコール６０００（Ｐｈ． Ｈｅｌｖ． ＶＩＩ）０．１２０ｋｇの溶液からなる。被覆皿または流動床における均一分配後、通常の方法でこの混合物を乾燥し研磨する。
【００４５】
実施例２
モノエチルフマル酸Ｃａ塩８６．５ｍｇおよびジメチルフマレート１１０．０ｍｇ（フマル酸計１５０ｍｇに相当）を含有する腸溶皮膜カプセルの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノエチルフマル酸Ｃａ塩８．６５０ｋｇおよびジメチルフマレート１１．０００ｋｇを、デンプン１５．０００ｋｇ、乳糖（Ｐｈ． Ｈｅｌｖ． ＶＩＩ）６．０００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ登録商標）２０００ｋｇ、ポリビニルピロリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）１．０００ｋｇおよびＰｒｉｍｏｇｅｌ登録商標４．０００ｋｇからなる混合物と激しく混合して、シーブ８００によりホモジナイズする。
【００４６】
ポリビニルピロリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）の２％水溶液と共に、粉末混合物全体を通常の方法で処理して、バインダー顆粒とし、乾燥状態にある外部相と混合する。前記外部相は、コロイドケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ登録商標）０．３５０ｋｇ、ステアリン酸Ｍｇ０．５００ｋｇおよびタルク（Ｐｈ． Ｈｅｌｖ． ＶＩＩ）１．５００ｋｇからなる。均一な混合物の一部である５００．０ｍｇを適切なカプセルに充填し、ヒドロキシプロピルメチルセルロースステアレートおよび軟化剤としてひまし油からなる腸溶皮（耐胃酸性）膜を公知の方法により与える。硬ゼラチンカプセルの代わりに、混合物を、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）およびヒドロキシプロピルエチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）の混合物からなる適切な耐胃酸性のカプセルに充填してもよい。
【００４７】
実施例３
モノエチルフマル酸Ｃａ塩２０３．０ｍｇ、モノエチルフマル酸−Ｍｇ塩５．０ｍｇおよびモノエチルフマル酸−Ｚｎ塩３．０ｍｇ（フマル酸計１５０ｍｇに相当）を含有する腸溶皮膜カプセルの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノエチルフマル酸Ｃａ塩２０．３００ｋｇ、モノエチルフマル酸−Ｍｇ塩０．５００ｋｇおよびモノエチルフマル酸−Ｚｎ塩０．３００ｋｇを破砕し、激しく混合して、シーブ８００によりホモジナイズする。以下の組成による均一な粉末混合物を混合して、この活性成分混合物とする。スプレー乾燥乳糖１２．９００ｋｇ、コロイドケイ酸１．０００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ登録商標）２．０００ｋｇ、ステアリン酸マグネシウム（Ｐｈ． Ｈｅｌｖ． ＶＩＩ）１．０００ｋｇおよびタルク（Ｐｈ． Ｈｅｌｖ． ＶＩＩ）２．０００ｋｇ。粉末混合物全体をシーブ２００により再びホモジナイズし、正味重量４００ｍｇで硬ゼラチンカプセルに充填し封止する。耐胃酸性皮膜を実施例２に従って適用する。
【００４８】
実施例４
モノエチルフマル酸Ｃａ塩８７．０ｍｇ、ジメチルフマレート１２０．０ｍｇ、モノエチルフマル酸−Ｍｇ塩５．０ｍｇおよびモノエチルフマル酸−Ｚｎ塩３．０ｍｇ（フマル酸計１６４ｍｇに相当）を含有するカプセル内包腸溶皮膜マイクロタブレット（「強力（ｆｏｒｔｅ）」タブレット）の作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノエチルフマル酸Ｃａ塩８．７００ｋｇ、ジメチルフマレート１２．０００ｋｇ、モノエチルフマル酸−Ｍｇ塩０．５００ｋｇおよびモノエチルフマル酸−Ｚｎ塩０．３０ｋｇを破砕し、激しく混合して、シーブ８００によりホモジナイズする。以下の組成による付形剤混合物を調製する。デンプン誘導体（ＳＴＡ−ＲＸ １５００）１８．００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ １０１）０．３０ｋｇ、ＰＶＰ（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ １２０）０．７５ｋｇ、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ４．００ｋｇ、コロイダルケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ）０．２５ｋｇ。粉末混合物全体を活性成分混合物に加え、２００シーブによりホモジナイズして、通常の方法でポリビニルピロリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ Ｋ２５）の２％水溶液により処理してバインダー顆粒を得た後、ステアリン酸マグネシウム０．５０ｋｇおよびタルク１．５０ｋｇからなる外部相と乾燥状態で混合する。次に、通常の方法により、粉末混合物を総重量１０．０ｍｇ、直径２．０ｍｍの凸状マイクロタブレットに圧縮する。この標準的な成形方法の代わりに、直接成形または溶融方法およびスプレー乾燥方法による固体分散のような他の方法を用いてタブレットを作成してもよい。
【００４９】
耐胃酸性皮膜は、標準的な被覆皿において注ぐか、スプレーする、あるいは、流動床装置において適用してよい。胃酸に対する抵抗性を得るために、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ、Ｐｈｒｍａｃｏａｔ ＨＰ ５０）２．２５０ｋｇの溶液の一部を、アセトン１３．００ｌ、２％のケトン１３．５０ｌで変性させたエタノール９４重量％および脱塩水２．５０ｌの溶剤混合物に溶解させた。ひまし油０．２４０ｋｇを軟化剤として最終溶液に加え、一部を通常の方法でタブレットコアに適用する。
【００５０】
塗膜：完全に乾燥した後、以下の組成の懸濁液を同じ装置で塗膜として適用する。２−プロパノール８．１７０ｋｇ、脱塩水０．２００ｋｇおよびグリセリントリアセテート（Ｔｒｉａｃｅｔｉｎ）０．６００ｋｇの溶剤混合物中、タルク０．３４０ｋｇ、酸化チタン（ＶＩ）Ｃｒｏｎｕｓ ＲＮ ５６を０．４００ｋｇ、着色ラッカーＬ赤色ラッカー８６８３７を０．３２４ｋｇ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｅ１２．５％を４．８００ｋｇおよびポリエチレングリコール６０００ ｐＨ １１ ＸＩを０．１２０ｋｇ。
【００５１】
耐胃酸性マイクロタブレットを、正味重量５００．０ｍｇで硬ゼラチンカプセルに充填し封止する。
【００５２】
実施例５
モノエチルフマル酸Ｃａ塩６７．０ｍｇ、ジメチルフマレート３０．０ｍｇ、モノエチルフマル酸−Ｍｇ塩５．０ｍｇおよびモノエチルフマル酸−Ｚｎ塩３．０ｍｇ（フマル酸計７５ｍｇに相当）を含有する腸溶皮膜マイクロタブレット（「小（ｍｉｔｅ）」タブレット）の作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、ジメチルフマレート３．０００ｋｇ、モノエチルフマル酸Ｃａ塩６．７００ｋｇ、モノエチルフマル酸−Ｍｇ塩０．５００ｋｇおよびモノエチルフマル酸−Ｚｎ塩０，３００ｋｇをシーブ８００によりホモジナイズする。以下の組成の付形剤混合物を実施例４と同様の方法で調製する。すなわち、デンプン誘導体（ＳＴＡ−ＲＸ １５００登録商標）３０．０００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ １０１登録商標）３．０００ｋｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）０．７５０ｋｇ、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ４．０００ｋｇ、コロイダルケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ登録商標）０．２５０ｋｇ。付形剤および活性成分の混合物をよく混合し、２００シーブによりホモジナイズする。ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）の２％水溶液を用いて、この塊を通常の方法で処理してバインダー顆粒を得る。ステアリン酸Ｍｇ（Ｐｈ． Ｅｕｒ．）０．５００ｋｇおよびタルク（Ｐｈ． Ｅｕｒ． ＩＩ）０．８００ｋｇの付形剤の粉末混合物を、外部相として乾燥顆粒に加える。
【００５３】
均一な顆粒混合物を、通常の方法で圧縮して、重さ５００．０ｍｇ、直径１１．５ｍｍの凸状タブレットコアを得る。バインダー方法に加えて、実施例１および４による他の成形方法を用いてもよい。耐胃酸性膜および塗膜を、実施例１および２に記載したのと同様にタブレットコアへ適用する。
【００５４】
本発明の組成物は、タブレットまたはカプセルの形態で経口投与するのが好ましい。これらの固体の一回投与薬剤には耐胃酸性膜があるのが好ましい。これは胃を通過すると、小腸の分泌液により数分のうちに溶解して薬剤から活性成分を放出するものである。全身治療の最初および最後には、低量投与（小）が必要であるが、初期段階後の投薬計画には大量投与（強力）が好適である。
【００５５】
実施例６
モノメチルフマル酸Ｃａ塩１００．０ｍｇ（フマル酸７８ｍｇに相当）を含有する腸溶皮膜タブレットの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノメチルフマル酸カルシウム塩１０．０００ｋｇを破砕し、混合して、シーブ８００によりホモジナイズする。以下の組成により付形剤混合物を調製する。デンプン誘導体（ＳＴＡ−ＲＸ １５００登録商標）２１．０００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ１０１登録商標）２．０００ｋｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）０．６００ｋｇ、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ４．０００ｋｇ、コロイドケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ登録商標）０．３００ｋｇ。活性成分を混合物に加え、混合し、シーブ２００によりホモジナイズして、通常の方法でポリビニルピロリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標Ｋ３０）の２％水溶液により処理してバインダー顆粒を得た後、乾燥状態にある外部相と混合する。前記外部相は、タルク８０％、ケイ酸１０％およびステアリン酸マグネシウム１０％を含有するいわゆるＦＳＴ錯体２．０００ｋｇからなる。この後、この混合物を通常の方法により圧縮して、重さ４００ｍｇ、直径１０ｍｍの凸状タブレットを得る。これらの標準的な成形方法の代わりに、直接成形や、溶融およびスプレー乾燥方法による固体分散のような他の方法を用いてタブレットを作成してもよい。耐胃酸性膜および塗膜を、実施例１および４に記載したのと同様にタブレットコアへ適用する。
【００５６】
実施例７
モノメチルフマル酸Ｃａ塩５０．０ｍｇ、ジメチルフマレート５０．０ｍｇ、モノメチルフマル酸−Ｍｇ塩５．０ｍｇおよびモノメチルフマル酸−Ｚｎ塩３．０ｍｇ（フマル酸計８５ｍｇに相当）を含有する腸溶皮膜タブレットの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、ジメチルフマレート５．０００ｋｇ、モノメチルフマル酸Ｃａ塩５．０００ｋｇ、モノメチルフマル酸−Ｍｇ塩０．５００ｋｇおよびモノメチルフマル酸−Ｚｎ塩０．３００ｋｇを粉砕して、混合し、シーブ８００によりホモジナイズする。以下の組成の付形剤混合物を実施例４と同様の方法で調製する。デンプン誘導体（ＳＴＡ−ＲＸ １５００登録商標）１９．０００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ １０１登録商標）３．０００ｋｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標１２０）０．７５０ｋｇ、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ４．０００ｋｇ、コロイダルケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ登録商標）０．２５０ｋｇ。
【００５７】
付形剤および活性成分を激しく混合し、シーブ２００によりホモジナイズし、通常の方法でポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標２５）の２％水溶液により処理して、バインダー顆粒を得た後、乾燥状態にある外部相と混合する。前記外部相は、ステアリン酸マグネシウム（Ｐｈ． Ｅｕｒ．）０．５００ｋｇおよびタルク（Ｐｈ． Ｅｕｒ． ＩＩ）１．５００ｋｇからなる。
【００５８】
顆粒全体を、通常の方法で圧縮して、重さ４００．０ｍｇ、直径１０ｍｍの凸状タブレットを得る。これらの標準的な成形方法の代わりに、直接成形や、溶融およびスプレー乾燥方法による固体分散を用いてタブレットを作成してもよい。
【００５９】
耐胃酸性膜および塗膜を、実施例１および４に記載したのと同様にタブレットコアへ適用する。
【００６０】
実施例８
モノ−ｎ−プロピルフマル酸Ｃａ塩５０．０ｍｇ（フマル酸３２，８ｍｇに相当）を含有する腸溶皮膜タブレットの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノプロピルフマル酸Ｃａ塩５．０００ｋｇを破砕し、混合して、シーブ８００によりホモジナイズする。以下の組成による付形剤混合物を調製する。デンプン誘導体（ＳＴＡ−ＲＸ １５００登録商標）２５．０００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ １０１登録商標）３．０００ｋｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標 ２５）０．６００ｋｇ、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ４．０００ｋｇ、コロイダルケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ）０．３００ｋｇ。活性成分を、粉末混合物全体に加え、混合し、シーブ２００によりホモジナイズして、通常の方法でポリビニルピロリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ登録商標 Ｋ３０）の２％水溶液により処理してバインダー顆粒を得た後、乾燥状態にある外部相と混合する。前記外部相は、タルク８０％、ケイ酸１０％およびステアリン酸マグネシウム１０％を含有するいわゆるＦＳＴ錯体２．０００ｋｇからなる。この後、顆粒全体を通常の方法により圧縮して、重さ４００ｍｇ、直径１０ｍｍの凸状タブレットを得る。これらの標準的な成形方法の代わりに、直接成形や、溶融およびスプレー乾燥方法による固体分散のような他の方法を用いてタブレットを作成してもよい。耐胃酸性膜および塗膜を、実施例１および４に記載したのと同様にタブレットコアへ適用する。
【００６１】
実施例９
モノメチルフマル酸Ｃａ塩５０．０ｍｇ、モノメチルフマル酸−Ｍｇ塩５．０ｍｇおよびモノメチルフマル酸−Ｚｎ塩３．０ｍｇ（フマル酸４５ｍｇに相当）を含有する耐胃酸性ペレットの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノメチルフマル酸Ｃａ塩５．０００ｋｇ、モノメチルフマル酸−Ｍｇ塩０．５００ｋｇおよびモノメチルフマル酸−Ｚｎ塩０．３００ｋｇを破砕し、激しく混合して、シーブ４００によりホモジナイズする。同時に、エタノール中２０％（ｍ／Ｖ）のポリビニルピロリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ Ｋ３０）溶液２ｌを調製する。非パレイル（ｎｏｎ−ｐａｒｅｉｌｌｅｓ）ペレット７．２５０ｋｇを被覆皿に置き、やや湿るまでＫｏｌｌｉｄｏｎ Ｋ３０溶液の一部をスプレーする。次に、ペレットが乾燥するまで、活性成分混合物を一部添加する。すべての活性成分混合物を添加するまで、この湿潤／乾燥手順を続ける。ＰＶＰ溶液の残りをＥｕｄｒａｇｉｔ Ｅ１２．５％溶液０．７２０ｋｇと混合し、ペレット全体にスプレーする。最後に、完全に乾燥するまでペレットを動かす。この方法の代わりに、流動床皮膜または押出し球状化（ｓｐｈｅｒｏｓｉｎａｔｉｏｎ）方法のような他の方法を用いてペレットを作成してもよい。さらに、個々の活性成分を含有するペレットを調製し、塗膜を与えた後適切な比率で添加してもよい（下記参照）。
【００６２】
ペレットにＥｕｄｒａｇｉｔ Ｓ１２．５％溶液をスプレーし、タルクで乾燥する。各スプレー／乾燥サイクル後、活性成分の放出を測定し、放出値が仕様と適合するまでＥｕｄｒａｇｉｔ Ｓ１２．５％溶液／タルクの添加を続ける。
【００６３】
次に、腸溶ペレットをカプセルに充填する（１４６ｍｇペレット／カプセル）。
【００６４】
実施例１０
モノ−イソ−プロピルフマル酸Ｃａ塩５０．０ｍｇ、ジ−イソ−プロピルフマレート５０．０ｍｇ、モノ−イソプロピルフマル酸−Ｍｇ塩５．０ｍｇおよびモノ−イソ−プロピルフマル酸−Ｚｎ塩３．０ｍｇ（フマル酸６７ｍｇに相当）を含有する耐胃酸性カプセルの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、モノ−イソ−プロピルフマル酸Ｃａ塩５．０００ｋｇ、ジ−イソ−プロピルフマレート５．０００ｋｇ、モノ−イソ−プロピルフマル酸−Ｍｇ塩０．５００ｋｇおよびモノ−イソ−プロピルフマル酸−Ｚｎ塩０．３００ｋｇを破砕し、激しく混合して、シーブ８００によりホモジナイズする。次に、以下の組成による粉末混合物を混合して、この活性成分混合物とする。スプレー乾燥乳糖３２．２００ｋｇ、微結晶セルロース（Ａｖｉｃｅｌ）２．０００ｋｇおよびコロイドケイ酸（Ａｅｒｏｓｉｌ登録商標）１．０００ｋｇ、ステアリン酸マグネシウム１．０００ｋｇおよびタルク２．０００ｋｇ。粉末混合物全体を２００シーブによりもう一度ホモジナイズし、正味重量５００ｍｇで硬ゼラチンカプセルに充填し封止する。
【００６５】
これらのカプセルに、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（ＨＰＭＣＰ）および軟化剤としてひまし油からなる腸溶皮膜を通常与える。硬ゼラチンカプセルの代わりに、活性成分を、セルロースアセテートフタレート（ＣＡＰ）およびヒドロキシプロピルエチルセルロースアセテートフタレート（ＨＰＭＣＰ）の混合物からなる他の耐胃酸性のカプセルに充填してもよい。
【００６６】
実施例１１
メチル水素フマレート５０．０ｍｇ（フマル酸計４４．６ｍｇに相当）を含有するカプセル内包のマイクロペレットの作成
必要な予防措置を講じて（呼吸マスク、手袋、保護服等）、メチル水素フマレート５．０００ｋｇを破砕し、シーブ４００によりホモジナイズする。さらに、エタノール中２０％（ｍ／Ｖ）のポリビニルピロリドン（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ Ｋ３０）溶液２ｌを調製する。非パレイルペレット７．２５０ｋｇを被覆皿に置き、やや湿るまでＫｏｌｌｉｄｏｎ Ｋ３０溶液の一部をスプレーする。次に、ペレットが乾燥するまで、活性成分混合物を一部添加する。すべての活性成分混合物を添加するまで、この湿潤／乾燥サイクルを続ける。最後に、完全に乾燥するまでペレットを動かす。この方法の代わりに、流動床皮膜または押出し／球状化方法のような他の方法を用いてペレットを作成してもよい。さらに、個々の活性成分によりペレットを調製し、塗膜を与えた後適切な比率で添加してもよい。
【００６７】
次に、ペレットをカプセルに充填する（１２６．５ｍｇペレット／カプセル）。
【００６８】
適用の実施例
急性および慢性拒絶事例の両方における宿主対移植片反応を緩和するメチルフマル酸カルシウムの影響をラットの腎臓移植事例により調査した。
【００６９】
急性拒絶の事例
移植片の急性拒絶に対するメチルフマル酸カルシウムの影響を調査するために、動物実験を行った（ラットにより）。この目的のために、２つのグループのラットをメチルフマル酸カルシウム（ＣａＭＦ、投与量：３３．３ｍｇ／ｋｇ／日）または擬薬により合計で５６日間［腎臓移植の２８日前（−２８）〜移植後２８日（＋２８）］治療した。評価の目的に適った動物の数は、擬薬グループでｎ＝９、ｖｅｒｕｍグループでｎ＝１２であった。その後、移植後の動物の生存時間を日数で評価した。表１に実験結果を示す。
【００７０】
メチルフマル酸カルシウムの投与後の平均生存日数の大幅な増加は、この薬剤が拒絶を抑えることができる、すなわち、宿主対移植片反応に対するその影響が移植薬剤に対して確かであるということを明らかに示している。
【００７１】
【表１】
0003553883.tif 000010
【００７２】
慢性拒絶の事例
慢性拒絶に対するメチルフマル酸カルシウムの影響を調査するために、動物実験において３つのグループのラットに移植（腎臓）を行った。グループ１と２に、移植の２８日前から２８日後まで活性成分として擬薬（グループ１）またはメチルフマル酸カルシウム（ＣａＭＦ）（グループ２）を与えた。第３のグループには、腎臓移植後３０〜６０日までＣａＭＦを与えた。すべての動物に移植後０〜９日までサイクロスポリンを与えた。投与量はサイクロスポリン１．５ｍｇ／ｋｇ／日（皮下）、ＣａＭＦ３３．３ｍｇ／ｋｇ／日（経口）であった。
【００７３】
まず０、１、３、５および１０日の、その後は１週間に一度、血清中のクレアチニンレベルを測定し、１週間に一度測定した尿蛋白を観察することにより、治療の影響を確認した。グループ１および２ではｎ＝１０の動物が評価に適した結果を与え、グループ３ではｎ＝９であった。移植後１０週間の治療の結果を表２に示す。
【００７４】
１０週間の追跡後、擬薬治療の動物は、血清クレアチニンレベルの大幅な増大を示し、２つのｖｅｒｕｍグループに比較して蛋白尿が増大しており、予備治療グループ２では、後治療のグループ３よりも良い結果が得られた。これらの結果によれば、メチルフマル酸カルシウムにより腎臓が受けるダメージを大幅に抑制することが示される。
【００７５】
【表２】
0003553883.tif 000011