(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血小板凝集を阻害するための下記の量比；
１−テトラコサノール                    0.5−1.0％
１−ヘキサコサノール                    5.5−8.5％
１−ヘプタコサノール                    2.0−3.5％
１−オクタコサノール                  60.0−70.0％
１−ノナコサノール                      0.4−1.2％
１−トリアコンタノール                10.0−15.0％
１−ドトリアコンタノール                4.0−6.0％
１−テトラトリアコンタノール            0.4−2.0％
から成る高級脂肪族第一級アルコールの混合物を含有する医薬組成物。
【請求項２】
血栓症を治療するための下記の量比；
１−テトラコサノール                    0.5−1.0％
１−ヘキサコサノール                    5.5−8.5％
１−ヘプタコサノール                    2.0−3.5％
１−オクタコサノール                  60.0−70.0％
１−ノナコサノール                      0.4−1.2％
１−トリアコンタノール                10.0−15.0％
１−ドトリアコンタノール                4.0−6.0％
１−テトラトリアコンタノール            0.4−2.0％
から成る高級脂肪族第一級アルコールの混合物を含有する医薬組成物。
【請求項３】
虚血を治療するための下記の量比；
１−テトラコサノール                    0.5−1.0％
１−ヘキサコサノール                    5.5−8.5％
１−ヘプタコサノール                    2.0−3.5％
１−オクタコサノール                  60.0−70.0％
１−ノナコサノール                      0.4−1.2％
１−トリアコンタノール                10.0−15.0％
１−ドトリアコンタノール                4.0−6.0％
１−テトラトリアコンタノール            0.4−2.0％
から成る高級脂肪族第一級アルコールの混合物を含有する医薬組成物。
【請求項４】
アセチル・サリチル酸またはインドメタシンにより引き起こされる胃潰瘍から保護し、および／または治療するための下記の量比；
１−テトラコサノール                    0.5−1.0％
１−ヘキサコサノール                    5.5−8.5％
１−ヘプタコサノール                    2.0−3.5％
１−オクタコサノール                  60.0−70.0％
１−ノナコサノール                      0.4−1.2％
１−トリアコンタノール                10.0−15.0％
１−ドトリアコンタノール                4.0−6.0％
１−テトラトリアコンタノール            0.4−2.0％
から成る高級脂肪族第一級アルコールの混合物を含有する医薬組成物。
【請求項５】
高級脂肪族第一級アルコールの混合物とアセチルサリチル酸の量比が20:1から1:20となるようアセチルサリチル酸を含有することにより特徴付けられる請求項１−３いずれかに記載の医薬組成物。
【請求項６】
高級脂肪族第一級アルコールの混合物とアセチルサリチル酸の量比が10:1から1:10となるようアセチルサリチル酸を含有することにより特徴付けられる請求項１−３いずれかに記載の医薬組成物。
【請求項７】
高級脂肪族第一級アルコールの混合物が下記の量比；
１−テトラコサノール                0.8＋／−0.1％
１−ヘキサコサノール                6.7＋／−0.3％
１−ヘプタコサノール                3.0＋／−0.3％
１−オクタコサノール               65.6＋／−3.4％
１−ノナコサノール                  0.7＋／−0.1％
１−トリアコンタノール             12.5＋／−0.6％
１−ドトリアコンタノール            5.0＋／−0.4％
１−テトラトリアコンタノール        0.8＋／−0.1％
から成る請求項１−６いずれかに記載の医薬組成物。
【請求項８】
フィラーとしてのラクトースおよび／またはコーン・スターチ、凝結剤としてのシュークロース、タルクおよび／または微晶状セルロース、崩壊剤としてのゼラチンおよび／またはナトリウム・クロスカルメロース、滑剤としてのタルクおよび／またはステアリン酸マグネシウムを含有する請求項１−７いずれかに記載の医薬組成物。
【請求項９】
１日投与量１−100mgの高級脂肪族一級アルコールの混合物を経口または非経口投与するためのものである請求１−８いずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１０】
１日投与量５−20mgの高級脂肪族一級アルコールの混合物を経口または非経口投与するためのものである請求項１−８いずれかに記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
本発明は24から34までの炭素原子を有するアルコールを含有する高級脂肪族第一級アルコール混合物、より詳しくは、24、26、27、28、29、30、32および34炭素原子の直鎖を有するアルコールを含有する高級脂肪族第一級アルコール混合物に関する。
本発明の混合物はバッチ間における再現性の高い各アルコールの相対組成物である。
ヨーロッパ特許出願0488928は、高コレステロール血症、高リポタンパク質血症タイプIIの治療および動物およびヒトの性行動の刺激に使用される医薬製剤の作用要素として使用され得る24から34の炭素原子を有する高級脂肪族第一級アルコールの混合物を記載する。
本発明によると、24から34炭素原子の高級脂肪族第一級アルコールの混合物（以降、M.H.P.A.Aと呼ぶ）は、比較的限られた量比で抗血小板、抗血栓および／または抗虚血剤としての新規な特性を示し、また同様に薬剤誘導性潰瘍の拮抗剤としての新規な特性も有し、このため、調製される医薬製剤の作用成分としてこの特別な混合物が使用され得る。
本発明の目的は、24から34の炭素原子を有するM.H.P.A.A.を医薬製剤として一般の人々が利用できるようにすることである。
本発明のひとつの目的は、炭素原子24から34の高級脂肪族第一級アルコール混合物（M.H.P.A.A.）をサトウキビワックスの粗製品および精製品の両方から得、単離し精製することである。
サトウキビワックスの脂質低下作用はラットにおいて証明されており、（フクダ、サトウキビワックスのラット血清および肝脂質への効果；ケミカル・アブストラクト、106、17、137413頁）、さらにショーH.ら（1984年；オキナワサトウキビワックスと脂肪アルコールの、ラット血清および肝脂質への効果；ジェイ・ニュートリ・ビタミノール（J.Nutri.Vitaminol.）30、６、553−559）によっても証明されている。
第１にサトウキビワックスの血清および肝臓の脂質への効果は、高レベルの植物および動物脂質を給餌されたオスのウイスター種のラットにより研究されている。著者らは0.5％のサトウキビワックスを、植物または動物脂肪を給餌されているラットの餌の脂肪に添加すると有意に血清のトリグリセリドが減少したが、後者においてはコレステロール値のみが肝臓の脂質含量に影響を与えることなく有意に減少した。従って著者らはサトウキビワックスは血中脂質低下効果を有すると結論付けている。
一方、ショーH.ら（1984年）はオキナワサトウキビワックスの血清および肝臓の脂質への効果を、このワックスを0.5％含有する餌で飼育したラットにおいて研究し、血清および肝臓の両方のコレステロール量が有意に減少することを発見した。しかしながら、動物の餌へ同じワックスからの脂肪アルコールを用いた場合でもコレステロール値には有意な変動が認められなかった。従って彼らは、脂質降下作用がアルコールに基づくものであるという考えを放棄した。
しかしながら何年か後、シムラＳ、ハセガワＴ、タカノＳおよびススキＴ（マウスの運動持久性に対するオクタコサノールの効果;1987;ニュートリション・レポート・イント（Nutrition Reports Int.）36、1029−1038）は、物理的に運動させられており、オクタコサノール強化餌を与えられたマウスによりオクタコサノールの効果を研究している。かれらはサトウキビワックスから単離されたオクタコサノールが肝臓内のトリグリセリドおよびコレステロールの両方の含量を有意に減少させることを発見したが、その一方で血清レベルのトリグリセリドのみが有意に減少された。彼らはサトウキビワックスから単離されたオクタコサノールは脂質降下作用を示すと結論付けたが、これは先に述べたショーらの結論（1984）と異なる。
同様に、抗脂肪血症効果はまた、他の高級脂肪族第一級アルコール混合物であるヘキサコサノールにも認められていたが、かかる効果を得るためには非常に高用量（10−30mg/kg/日）が必要であることが報告されている（ハギワラY.1987:高血圧症、動脈硬化症、糖尿病、心臓病および肥満症の治療へ用いられるヘキサコサノールを含有する抗脂肪血症剤;JPA62  099323）。
有効であり、安全で良好な耐容性を有するとみなされているいくつかの市販の脂質降下薬は、しかしながらそのほとんどが、さまざまは副作用を示す。脂質降下治療のためには長期にわたって投与する必要があるため、この点は非常に重要である。
例えば、ゲムフィブロジル（gemfibrozil）は血清トリグリセリドを下げ、HDL−Ｃレベルを上げ、そして血清のコレステロール値の穏やかな低下をもたらすが、いくつかの副作用が報告されている。すなわち、前胃部の痛み、下痢、吐き気、嘔吐および腹部膨張のごとき胃腸への影響が認められている。加えて、頭痛、めまい、霧視、陰萎、リビド減少およびトランスアミラーゼ、LDH、クレアチンホスホキナーゼおよびアルカリ性ホスホキナーゼの増加のごとき肝機能不全がゲムフィブロジル投与患者に認められる。同様に、腎不全の患者には投与すべきでない。
プロブコール（probucol）は抗酸化作用を有する別の脂質降下薬であり、血清コレステロールおよびLDL−Ｃの穏やかな低下をもたらす。しかしながら、この脂質降下活性の不利な点はHDL−Ｃ画分を減少させることである。加えて、心電図の大きな変化のみならず、約10％の投与者に胃腸障害が生じる副作用が報告されている。
しばしば用いられている他の脂質降下薬にはコレスチラミン（Cholestiramine）とコレスチポール（Chorestipol）がある。これらは有効な第一線のコレステロール低下薬であって強力に血清のコレステロールとLDL−Ｃを低下させるが、トリグリセリド値を上げる傾向がある。これらの薬はいくつかの胃腸症状、主に便秘を招く。副作用により、治療の応答性は一般に低く、また吸収されやすい薬品ではないので、所望の効果を得るには12から20g/日の用量が必要である。加えて、ジキトキシン（digitoxin）のごとき他の薬剤との好ましくない化学的相互作用を示すという副作用も報告されている。
ロバスタチン（lovastatin）は最初の「スタチン類」の薬であり、HMGCoAレダクターゼの阻害剤として働き、血清のコレステロールおよびLDL−Ｃのレベルを下げるのに有用であるが、これはまた、ゆっくりとHDL−Ｃを増加させ、トリグリセリドを減少させる。いくつかの副作用がこの薬剤に対して報告されている。すなわち、主な副作用はミオパシー（miopathy）、穏やかからゆっくりとしたクレアチンホスホキナーゼの増加および血清トランスアミナーゼの永続的な増加であり、投与を停止した後にしばしば復帰する。ミオパシーは主にゲムフィブロジルまたはナイアシンのごとき免疫抑制薬と共に投与した患者に生じる。さらに、皮膚皮疹、掻痒症、頭痛および感受性の患者においては重篤な筋肉病変が生じ、これが筋変性へつながる副作用が、ロバスタチンを投与した患者において報告されている。さらに、実験動物においてはこの薬に関連して睾丸萎縮および肝腫瘍の発生が報告されている。
同様に、シンバスタチン（simvastatin）およびパラバスタチン（paravastatin｝は、他の「スタチン類」であり、ロバスタチンと同じ機構で作用し、ほぼ同じコレステロール低下作用を示す。これらの薬を投与した患者に、ロバスタチン投与患者と同様の副作用が報告されているが、その程度はかなり低い。シンバスタチンおよびパラバスタチン投与患者にはトランスアミナーゼおよびクレアチンホスホキナーゼの増加が見られ、便秘、腹部膨張、吐き気、頭痛、疲労、皮下皮疹およびミオパシーが報告されている。
ヨーロッパ特許出願0488928は、高コレステロール血症、高リポタンパク質血症タイプIIの治療および動物およびヒトの性行動の刺激に使用され得る医薬製剤の作用要素として使用され得る24から34の炭素原子を有する高級脂肪族第一級アルコールの混合物を記載する。表１はヨーロッパ特許出願0488928の方法によりサトウキビワックスより得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性値および定量値を示す。
0003602531.tif 000002
本発明で提案されている特定のアルコール混合物は、表２に記載されているその成分間で定性値および定量値を示す。
0003602531.tif 000003
この組成物は驚くべきことに抗血小板、抗血栓および／または抗虚血剤としての新規な効果を示し、また同様に、薬剤誘導潰瘍の拮抗剤としての新規な効果も示す。この特定の混合物はヨーロッパ特許出願0488928に記載されている混合物に関して報告されているものと同じ特性をも示す。
本発明のさらに他の目的は、実験的に誘導した虚血において高級脂肪族第一級アルコール混合物の保護効果を証明することである。
本発明のさらに他の目的は、高級脂肪族第一級アルコール混合物が、脳虚血治療に最もよく使用されているASAとの薬理学的相互作用を示すことを確かめることである。ここで結果は、高級脂肪族第一級アルコール混合物とASAの抗血小板、抗血栓および抗虚血作用の間の共作用性を示した。
本発明のさらに他の目的は、高級脂肪族第一級アルコール混合物は例えばアスピリン、エタノール、インドメタシン、化合物C4880（シグマ）およびその他の、ヒトの治療においてヒトへ胃潰瘍を生じさせる薬物により誘導される胃潰瘍を有意に減少することを証明することである。
アルコールにより誘導された胃潰瘍は主に生理活性物質としてのTxA2の増加が原因であり、C4880に誘導される胃潰瘍は主にセロトニン性のメカニズムで発生するが、TxA2の働きをその作用から除外することはできない。一方、ASAにより誘導される胃潰瘍は、ASAにより生じるプロスタグランジン類（Ｅシリーズ）の合成阻害に関係する、というのはプロスタグランジン類は胃粘膜の保護作用を有するからである。胃粘膜におけるTxA2のPgI2に対する比は、その統合的な内因性機構において重要な意味を有することが証明されている。
一方、一部の脂質降下薬を投与すると、高脂肪血症の患者にみられる血小板の過剰凝集率が減少することが認められており、これらの薬の抗凝集効果の実験データが示されている。しかしながら、コレステロール低下薬ではほんの一部のみがこの効果を示す。アテローム性動脈硬化症と呼ばれている病変は、病巣への脂質、複合炭化水素、血液および血液生成物、繊維素性組織およびカルシウム沈着物の蓄積であってしばしば内膜の変化をひきおこす動脈内膜の変化の様々な組み合わせである。すなわちこの定義によればアテローム性動脈硬化症は高脂血症をのみを危険因子として含むのではなく多因子により発症するものとして定義される。
アテローム性動脈硬化症の発症にかかわる因子の間において、血小板凝集は非常に重要な地位を占める。血小板の遊離する顆粒は活性化アラキドン酸を含有し、これはサイクリックエンドパーオキシドへと代謝される。これらは主にサイクリックパーオキシド類に転換され、最終的には強力な血管収縮剤であり血小板凝集剤であるトロンボキサンA2（TxA2）となる。血小板凝集はコラーゲン、ADPおよびエピネフリンのごとき他の化合物とによっても生じさせることができる。すなわち、予想される抗血小板凝集薬の効果を試験するのに、異なった実験的「イン・ビボ」、「エキソ・ビボ」または「イン・ビトロ」モデルにおいて、通常これらの化合物に誘導される血小板凝集に対する効果が調べられる。
これらの試験は健常者ボランティアにおけるおよび、過コレステリン血症、糖尿病およびその他のごときしばしば高い凝集能を有する疾病の患者における血小板の凝集を調べるためにも用いられる。これらの試験のうち、コラーゲン誘導血小板凝集が最もよく使用される方法である。すなわち、例えば、コラーゲンを静脈内に注射すると可逆的血管内血小板凝集がイン・ビボで生じ、血小板の凝集物が抹消循環血管へ入り込み、その後循環血小板の数が減少し同時にプラズマMDA濃度が上昇する。さらに、いくつかの種においては、コラーゲンの投与は血栓による死亡につながる。これらのモデルにおいては、抗血小板薬は一般に、血小板含量の減少およびMDA濃度の増加を抑制し、同様にコラーゲン誘導性の致死率を低下させる。
血小板抗凝集効果を示すいくつかの薬は血栓症病変、心筋梗塞症および拍動の治療に有効であるが、すべたがこの効能を示すわけではない。一方、主に血液凝固における溶血作用により効果を示す抗血栓薬があるが、ストレプトキナーゼおよびウロキナーゼのごとき血小板凝集には効果を及ぼさない。
虚血性心血管疾患、拍動および抹消血管閉塞性病変がアテローム性動脈硬化症の主な合併症であり、いくつかの薬がこれらの合併症において通常試験されている。すなわち理論的にはコレステロール降下作用を示す薬であって、これらのプロセスに含まれる他の事象に対して作用して併発症を予防し得る薬は患者の治療に有利である。同様に、TxA2レベルの降下は抗血小板および抗血栓効果に関与するのみならず、抗虚血効果も有する。抗虚血薬の薬理学的スクリーニングには通常、脳誘導性全虚血への効果の評価を含む。すなわち、ラットの脳虚血への効果は様々な薬、トロンボキサン合成の特異的阻害剤およびプロスタサイクリン類縁体（PgI2）はもちろんのこと、シクロオキシゲナーゼ触媒反応を阻害するある種の非ステロイド性抗炎症剤（NSAID）においても調べられている（ボーゼイックとチャン（Borzeix MG and Cahn J.）1988;「新規な代謝に対して化学的に安定なプロスタサイクリン類縁体のラット一過性脳血液減少症に対する効果の早期結果；プロスタグランジン35、５、653−664）
モンゴリアン・ゲルビルス（mongolian gerbils）に実験的に誘導した全身虚治療のごとき他の実験モデルもしばしば用いられている。
アセチルサリチル酸（ASA）は抗血小板、抗血栓および抗虚血作用を実験モデルおよびヒトにて示す化合物である。これは血栓性障害のみならず急性心筋梗塞症および拍動の治療に最も広く用いられている。ASAの効果はそのよく知られたシクロオキシゲナーゼ阻害によって支持されており、このシクロオキシゲナーゼはアラキドン酸代謝の鍵となる酵素である。すなわち、ASAは血清のトロンボキサンA2（TxA2）レベルの有意なそして顕著な低下を誘導する。ここでトロンボキサンA2は血管内皮細胞に対する病理生理学的化合物として認識されている化合物であり、このことは上述のASAの効果を説明する。
しかしながら、ASAの阻害はシクロオキシゲナーゼレベルで発生するため、TxA2レベルでは減少されるばかりか、TxB2により示される薬理作用に反する薬理作用を有するプロスタサイクリン（PgI2）レベルも減少させる。一方、ASAがプロスタグランジン類（Ｅシリーズ）の合成を阻害することを考慮に入れても、プロスタグランジン類の細胞保護作用を阻害するため胃へのダメージを誘導する。これはASAについてヒトの副作用として報告されている胃炎、胃潰瘍および関連障害のもととなる。
本発明に言及されている特別な高級脂肪族第一級アルコールの好ましい組成は、表３に記載されているものである。
0003602531.tif 000004
高級脂肪族第一級アルコール混合物は医薬処方に添加し、これをヒトおよび動物へ投与し得る。高級脂肪族第一級アルコール混合物の１日投与量は治療すべき疾病の違いおよび生体の実際の状態によりかなり変わるが、通常は１日あたり１から100mg、好ましくは約３−20mgである。高級脂肪族第一級アルコール混合物は例えば経口または非経口投与により投与してもよい。好ましい投与方法は、顆粒またはカプセルのみならずフィルムで被覆した錠剤の経口投与である。
医薬処方には活性成分として0.5−15.0重量％の高級脂肪族第一級アルコール混合物を含有する。この濃度は高級脂肪族第一級アルコール混合物を、凝集剤、崩壊剤、潤滑剤、スライダーおよび充填剤のごとき他の賦形剤とともに混合することにより得られる。賦形剤にはラクトース、コーン・スターチ、サッカロース、ステアリン酸マグネシウム、微粒子セルロース、ナトリウムクロスカーメロースゼラチン（sodium croscarmellose gelatin）、セルロースアセトフタレート、チタニウムジオキシド、錠剤用の特別なタルクおよびポリエチレングリコールが含まれる。
本発明の目的である、M.H.P.A.A.とアセチルサリチル酸の混合物は、実施例に示されているように、その比が20:1から1:20、特に10:1から1:10である時、抗血小板、抗血栓および抗虚血性に関連するその医薬的相互作用において相助作用を示す。
サトウキビワックスおよびその天然材料であるかすは、工業用途のみならず、その化学組成により常に注目されている。サトウキビ内のワックスの量は種類により0.1％から0.3％の間である。農工業における方法よって、ワックス含量の40％のみがジュースとして蒸留され、その残存物質はしぼりかすとして廃棄されている。この40％分の、95％が泥に吸収され、これより粗ワックスが得られる。このワックスはエステル、アルデヒド、ケトン、炭化水素、脂肪酸および遊離アルコールからなり、それぞれの含量はサトウキビ植物の種類および由来、およびワックスを得るために用いた技術により異なる。
サトウキビの副産物より得られる直鎖脂肪アルコールに関しては、その組成および主な性質が幾人かの研究者に研究されている。全種類のワックスからの異なった群の化合物を得ることが報告されており（J.A.ランバートンら（J.A.Lamberton）、1959;オーストラリアン・ジャーナル・オブ・ケミストリー13、261−268およびホーンＡ（Horn A.）とマルチックJS（Martic JS）、1957;ジャーナル・オブ・サイエンス・フードアンド・アグリカルチャー10、571）、サトウキビのクチクラワックスから脂肪アルコールを、アルコール性水酸化カリウムによる均一系ケン化の後、非ケン化物質をエステル化し、さらに分子蒸留をする方法により得ることを示唆している。
アルコール混合物を高効率高真空カラムを通して単離する、他の方法も報告されている。化学的にカルボニル化合物を単離するための高真空ワックス蒸留および残存ワックスの抽出には石油エーテルを用いる。溶媒を蒸発させ、残存物はアルミナクロマトグラフによりさらに精製するためアセチル化する。最終的に、アルカリ性加水分解によってアルコールが得られ、その後エタノール内で再結晶したところ、80から82℃の融点を得た。
動物および野菜ワックスより高級脂肪第１アルコールの混合物を得る方法は、脂肪エステルのケン化の後にアルコール混合物を、臨界以下および臨界超過の状態のCO2の下に流体を通して抽出する、すなわち圧力60−300kg/cm2の範囲、温度25−100℃の範囲において、適当な溶媒を用いて抽出すると、溶解性の違いおよび少しの温度および圧力の変化に依存して選択的な抽出ができるという方法を基本としている。この方法をサトウキビワックスに適用すると、５％のC20からC36アルコール混合物が得られる。
他の試み（イナダS.、フルカワK.、マツイT.、ホンダK.、オガサワラJ.、ツビカモトG.;1986;標準高級脂肪族第一級アルコールの回収法  JP60−119514）においても、大変よく似た抽出方法をワックスへ適用しており、これは臨界以下または臨界超過のCO2条件下でエチレンと共に流動させる方法を開示している。臨界以下または臨界超か条件下における流動による有機化合物をその混合物により分離する方法もまた開示している。分析的観点からみれば、これらすべては有用な方法であるが、大規模に行うという点は、経済的な方法ではないカラムクロマトグラフィーを用いることおよび分子蒸留を用いることにより妨げられている。
本発明の方法はアルカリおよびアルカリ性水酸化テルム、特に低分子量であるもの、さらに好ましくはナトリウム、カリウムおよびカルシウムのアルカリおよびアルカリ性水酸化テルムの濃厚溶液によるあらかじめ融解させたサトウキビワックスの均一系ケン化に基づく。
水酸化物溶液の濃度は水酸化物の処理されるワックスに対する重量比が５％を越えることが必要であり、特に８から25％、より好ましくは15から25％とする必要がある。ケン化工程は30分間以上続けるが、より好ましくは２から５時間続ける。この工程において得られた固体は固−液抽出器にかけて、高級脂肪族第一級アルコールが選択的に抽出されるよう適当な有機溶媒、すなわち３から８の炭素原子のケトン、１から５の炭素原子のアルコール６から９炭素原子の炭化水素、ハロホルムおよびベンゼンおよびその誘導体のごとき芳香族およびこれらの混合物からなる群から選択される有機溶媒にて抽出する。本発明に用いられる好ましい溶媒は以下のものである：アセトン、メチルエチルケトン、ペンタノン、ヘキサノン、ヘプタノン、２−メチルペンタノン、エタノール、メタノール、２−プロパノール、ブタノール、第三ブチルアルコール、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、クロロホルム、1,2−ジクロロエタン、ジクロロメタン、トリクロロエタン、1,2,3−トリクロロプロパン、ベンゼン、トルエン、フェノール、ｐ−メチルトルエンおよびその他の溶媒。
抽出は５から10時間の間の時間をかけて行われる。その後、生成物を続いて上述の溶媒またはその混合物を用いて結晶化する。収率は約30％を達成し、一方高級脂肪族第一級アルコールの純度は80から98％を、特に90から98％を達成した。こうして得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物は22から38の炭素原子を有するアルコールから構成される。これはオフホワイト色の混合物で融点が76.5と84.5℃の間の範囲である。融合シリカ・キャピラリー・カラムを用いたガスクロマトグラフィーによる高級脂肪族第一級アルコール混合物の分析のため、Ｎ−メチル−Ｎ−TMS−トリフルオロアセタミド（MSTFA）により誘導体とする。
サトウキビワックスから高級脂肪族第一級アルコール混合物を得るために提案している方法は先に報告された方法よりいくつかの有利な点を有する。これらの利点のうちのひとつは、短い処理時間である。本発明の他の利点は実質的な収率（重量で30％程度）にてサトウキビワックスからアルコールが得られることであり、ショーらによって開示された方法ではその収率は５％以下であると報告されている。さらにここで提案する方法の他の利点は、これによって得られる高級脂肪族第一級アルコール混合物の純度（98％近く）であり、これまでの研究報告により報告されているものよりはるかに高い。すなわち本発明の方法は、イナダらのJP60−119514およびハギワラのJP62−87537により報告されている方法と比べると、より簡単であり、より大規模生産に適している。
最後に、高級脂肪族第一級アルコール混合物の性質の全体像において、これは非常に安全で耐容性を示すという、従来あった薬と比べて重要な有用性を示す。すなわち、急性、亜慢性および慢性疾患について、ゲッ歯類、ウサギ、ビーグル犬およびサルで研究したところ、薬による毒性は認められなかった。さらにウサギまたはラットにおいて変異誘発性も、胚子奇形発生も全く示さなかった。２世代にわたる高級脂肪族第一級アルコール混合物の投与によって、ラットの胎児の発育にも再生産行動にも影響を及ぼさなかった。最後に、ラットで行った24カ月の発癌性の研究によっても高級脂肪族第一級アルコール混合物には毒性および発癌性のないことが示された。
さらに短期および長期の臨床試験においても、投与の優れた安全性と耐容性が支持される。
本発明の対象および目的は以下の実施例によりさらに詳細に説明される。実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
実施例１
サトウキビより得た1000gの精製ワックスを100−110℃で融解させ、150mlの水に溶解させた200gの水酸化カリウムを添加した。この間５時間かきまぜた。この工程にて得られた固体よりヘプタンを溶媒として用いる固−液抽出系により高級脂肪族第一級アルコール混合物を12時間かけて抽出した。得られた抽出物を室温に冷却して高級脂肪族第一級アルコール混合物を結晶化させ、メチルエチルケトンにて再結晶とした。285g程度のアルコール混合物が得られ、純度が94.7％に達した。混合物の融点は80.5と82.5℃の間の範囲であった。表４に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000005
実施例２
サトウキビより得られた粗ワックス2kgを85−100℃で融解させ、ここへ200mlの水へ溶解させた300Gの水酸化ナトリウムを添加し、４時間かきまぜながらケン化を行った。高級脂肪族第一級アルコール混合物の抽出はクロロホルムを溶媒として通常の固−液抽出系にて10時間かけて行い、これによって得られた抽出物を室温に冷却し、得られた固体をメタノールで再結晶させ、最後にクロロホルム／メチルエチルケトン混合物にて再結晶させた。高級脂肪族第一級アルコール混合物（405g）が得られ、純度は92.52％を達成した。高級脂肪族第一級アルコール混合物の融点は79.0から80.5℃の範囲であった。表５に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000006
実施例３
7Lの水に溶解させた12kgの水酸化カルシウムを50kgの精製サトウキビワックスであってあらかじめ100−120℃で融解させておいたものに添加した。7.5時間かきまぜながらケン化工程を続けた。高級脂肪族第一級アルコール混合物はエタノールを溶媒として12時間かけて固−液抽出系にて抽出した。得られた抽出物を放置して室温まで冷却させ、その後この固体をクロロホルムにて再結晶した。高級脂肪族第一級アルコール混合物（13.7kg）が純度93.77％にて得られた。この混合物の融点は80.0−82.0℃の範囲であった。表６に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000007
実施例４
4.5リットルの水に溶解させた8.6kgの水酸化カルシウムを、あらかじめ100−120℃で融解させておいた50kgの粗サトウキビワックスへ添加した。３時間かきまぜながらケン化を行った。高級脂肪族第一級アルコール混合物をジクロロメタンを溶媒として12時間かけて固−液抽出器にて抽出した。得られた精製物を室温に冷めるまで放置し、得られた固体をヘキサンとアセトン1:1の混合物にて再結晶化した。アルコール混合物（6.8kg）が92.91％の純度にて得られた。高級脂肪族第一級アルコール混合物の融点は78.5−80.5℃であった。表７に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000008
実施例５
20kgの精製サトウキビワックスをあらかじめ100−110℃にて融解させたものを用い、ここへ3.0Lの水で希釈した3.7kgの水酸化カリウムを添加した。ケン化工程を５時間かきまぜながら続けた。高級脂肪族第一級アルコール混合物の抽出はソクーレット（Soxhlet）抽出器にてメチルエチルケトンを溶媒として、14時間かけて行った。抽出された物質を室温へ冷却した。さらに、ヘキサン：クロロホルム1:1の混合物にて再結晶させた。高級脂肪族第一級アルコール混合物（3.8kg）が92.56％の純度にて得られた。高級脂肪族第一級アルコール混合物の融点は78.5と80.5℃の間の範囲である。表８に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000009
実施例６
あらかじめ100℃で融解させておいた粗サトウキビワックス1kgへ250gの水酸化カルシウムを添加した。ケン化工程はかきまぜながら２時間続けた。高級脂肪族第一級アルコール混合物を２−プロパノールを溶媒として用いて12時間、固−液抽出系にて抽出した。得られた生成物を室温まで冷却し、その後へプタンを用いて再結晶させた。高級脂肪族第一級アルコール混合物（165g）が純度93.63％にて得られた。この高級脂肪族第一級アルコール混合物の融点は80.0から81.5℃の範囲であった。表９に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000010
実施例７
2kgの精製サトウキビワックスを予め110℃にて融解させ、ここへ200mlの水で希釈した400gの水酸化ナトリウムを添加した。この状態でかきまぜながら３時間おいた。高級脂肪族第一級アルコール混合物の抽出はトルエンを溶媒として固体抽出器内で６時間かけて行い、２次再結晶をメタノールを溶媒として行った。高級脂肪族第一級アルコール混合物（389g）が95.10％の純度にて得られた。この混合物の融点は81.0と83.0℃の間の範囲であった。表10に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000011
実施例８
5kgの精製サトウキビワックスを120℃で融解させた後、500mlの水で希釈した1kgの水酸化カリウムを作用させた。この状態をかきまぜながら４時間維持した。高級脂肪族第一級アルコール混合物はエタノールを溶媒として固−液抽出系にて５時間かけて抽出した。抽出物は室温まで冷却し、その後高級脂肪族第一級アルコール混合物はトルエンを溶媒として結晶させた。高級脂肪族第一級アルコール混合物（1490g）が純度92.20％にて得られた。高級脂肪族第一級アルコール混合物の融点は79.5と81.0℃の間であった。表11に本実施例で得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物の定性および定量値を示す。
0003602531.tif 000012
実施例９
高級脂肪族第一級アルコール混合物を活性成分として用いて開発した２つの医薬品の処方を表12に示す。これらの処方は活性成分の物理的、化学的および物理化学的性質を考慮に入れて開発したものである。この処方は湿潤顆粒化工程によって活性成分と薬剤の賦形剤とを、その割合を制御しつつまぜあわせ、乾燥させ、脱顆粒化し、潤滑化および粉末化して製造する。
0003602531.tif 000013
実施例10
オスのニュージーランド・ラビット（２−3kg）を15日間実験室の条件に慣らし、ランダムに４つの群に分けた：コントロール（ビヒクルのみの投与）および３つの高級脂肪族第一級アルコール混合物投与群、それぞれアカシアガム／水ビヒクルに懸濁して得られた高級脂肪族第一級アルコール混合物５、50および200mg/kgを胃内投与（1mg/kg）により４週間投与された群である。脂質プロファイルをベースライン（投与前）および投与４週間後において調べた。高級脂肪族第一級アルコール混合物を30日間５、50および200mg/kg経口投与した群では、用量に依存して全コレステロールおよびLDL−血清レベルが有意に減少した（ウイルコクソンｐ＜0.05）。さらに、コントロール群と投与群の％の変化は統計的に異なっていた（マン・ホイットニーＵ  ｐ＜0.05）図１−４参照のこと。
正常コレステロール血のラビットにおける高級脂肪族第一級アルコール混合物の、Fig.1は血清コレステロールレベルへの効果を示し、Fig.2は血清LDL−Ｃレベルへの効果を示し、Fig.3は血清コレステロールの変化への、Fig.4は血清LDL−Ｃの変化への効果を％で示す。
これらの実験において最も高い用量の高級脂肪族第一級アルコール混合物投与（200mg/kg）によって血清コレステロールとLDL−Ｃがそれぞれ51％および78％減少した。
Fig.5は高級脂肪族第一級アルコール混合物の正常コレステロール血のラビットにおける効果を示す。４つの群すべてにおいて、有意なHDL−Ｃレベルの変化は認められなかった。
正常コレステロール血のラビットにおける、高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果のうちFig.6は血清トリグリセリドレベルへの効果およびFig.7は血清トリグリセリドの変化への効果を表す。投与群とコントロール群のトリグリセリドパーセントの変化もまた有意であった（マン・ホイットニーＵ  ｐ＜0.05）が、用量−効果相関は認められなかった。
実施例11
オスのニュージーランド・ラビットをランダムに４群に分けた：コントロール群（ビヒクルのみを胃内投与にて投与する）および高級脂肪族第一級アルコール混合物、オクタコサノールおよびヘキサコサノールをそれぞれ5mg/kg投与する群である。血清の脂質プロファイルをベースラインおよび投与30日において調べた。高級脂肪族第一級アルコール混合物は有意に全コレステロールとLDL−Ｃを減少させた。さらに、高級脂肪族第一級アルコール混合物投与ラビットのコレステロール、LDL−Ｃおよびトリグリセリドのレベルはコントロールより有意に低かった。しかしながら、オクタコサノールまたはヘキサコサノールを投与した群の血清脂質プロファイルの変化は表13に示すごとく統計学的に有意とはならなかった。
0003602531.tif 000014
実施例12
コレステロール値およびLDL−Ｃ値が食餌のみでは制御できない45人の外来患者へ、５週間食餌のみを与えた後、5mgの高級脂肪族第一級アルコール混合物を含有する錠剤または偽薬を１日２回、昼食または夕食時に６週間投与した。この投与期間の間、食餌療法は維持した。ベースライン（食餌のみの期間の終了時）と治療開始後４および６週の脂質プロファイルレベルを調べた。高級脂肪族第一級アルコール混合物は全血清コレステロールを16.23％およびLDL−Ｃを21.33％と有意に減少させた。また、コレステロールのHDL−Ｃに対する比およびLDL−ＣのHDL−Ｃに対する比がそれぞれ17.67％および22.28％と有意に減少した（ｐ＜0.05:2データのウイルコクソンテスト）。すべての患者において、全コレステロールおよびLDL−Ｃレベルは治療開始６週間後にはベースラインより低下した。他の脂質プロファイルのフラクションの変化は有意ではなかった。結果を表14と15に示す。
0003602531.tif 000015
0003602531.tif 000016
0003602531.tif 000017
実施例13
タイプII高リポプロテイン血症の患者群へ、８週間の食餌のみの期間（ベースライン）の後に15mgの処方を含有する錠剤を投与した。脂質プロファイルをベースラインおよび治療後８週間において測定した。主な結果を表16にまとめた。高級脂肪族第一級アルコール混合物を含む処方は、血清全コレステロール量を16.44％、LDL−Ｃを23.51％と有意に減少させた。
Fig.8にタイプII高リポタンパク血症患者の脂質プロファイルに対する高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果を示すが、ここではコレステロール、LDL−ＣおよびHDL−Ｃの変化を平均値で、トリグリセリドの変化を中央値で示した。HDL−Ｃは6.40％上昇したが、トリグリセリドおよびVLDL−Ｃはそれぞれ7.80％および10.83％減少した。しかしこれらの変化はいずれも統計的に有意ではなかった。表17にはHDL−Ｃに対するLDL−Ｃ比の変化およびHDL−Ｃに対するコレステロール比の変化を示すが、それぞれ29.07％および23.72％と有意に減少した。
0003602531.tif 000018
0003602531.tif 000019
実施例14
最初に高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果およびそのADPおよびコラーゲン誘導血小板凝集に対する効果をラットにおいて調べた。一群のオスのスプラグ−ダウレィ（Sprague−Dawley）ラット、体重250gから350gをランダムに２つの実験群に分けた。高級脂肪族第一級アルコール混合物はアカシア・ガム（Acacia gum）−水ビヒクルへ懸濁して、４週間胃内へ経口投与した。以下の群が含まれる：コントロール群（ビヒクルのみ投与）および高級脂肪族第一級アルコール混合物（25mg/kg）投与群である。血小板凝集アッセイを行うため、ラットをエーテル麻酔した。開腹して血液（5ml）を大静脈より抜き取り、3.8％クエン酸ナトリウムと混合した（血液９容につき１容のクエン酸塩）。血小板に富む血漿（PRP）を血液の遠心分離により得た。血小板に乏しい血漿（PPP）をPRPアリコートを330xgにて15分間の遠心分離により得た。血小板凝集はADPおよびコラーゲンにより誘導し、ペイトン凝集計（Payton aggregometer）により、報告されているようにして測定した（マクレガーら（McGregor L.,Morazain R.and Renaud S.;1980;ラットにおける食餌中のリノレイン酸の血小板機能に対する効果；トロンボシス・レス（Thrombosis Res.20,499））。投与群とコントロール群の結果の統計的な比較はノン・パラメトリック・マン−ホイットニーＵテストを用いて行った。高級脂肪族第一級アルコール混合物25mg/kgを４週間投与したラットはエキソ・ビボにおいて、サブマキシマム（submaximum）用量のADPおよびコラーゲンを処置した場合の血小板凝集に対して有意な阻害を示した。
Fig.9は１カ月間高級脂肪族第一級アルコール混合物を投与したラットにおけるADP誘導血小板凝集を示し、Fig.10は１カ月間高級脂肪族第一級アルコール混合物を投与したラットにおけるコラーゲン誘導血小板凝集を示す（ｐ＜＜,0.05、マン−ホイットニーＵテスト;15cmが100％の透過率に当たる）高級脂肪族第一級アルコール混合物がラットに４週間経口投与することにより有意にADPおよびコラーゲン誘導血小板凝集を阻害したことから、高級脂肪族第一級アルコール混合物が抗血小板薬として作用することが示唆される。
実施例15
高級脂肪族第一級アルコール混合物のラットにおけるエキソ・ビボ血小板凝集に対する効果を解析するため、血小板抗凝集性効果の経時的試験を行った。本目的のため、両性のスプラグ−ダウレイラット、体重250から350gのものを４つの実験群に分けた:1つはコントロール群であり、３群はそれぞれ25、50および200mg/kgの高級脂肪族第一級アルコール混合物を１用量投与する群である。さらに200mg/kg用量を投与後２、６および24時間において、血小板凝集効果を調べた。
高級脂肪族第一級アルコール混合物は実施例14に記載のごとく調製し、実験の２時間前に１用量を経口投与した。コントロール群の動物には同じ体積のビヒクルを投与した。すべての動物は実験の20時間前から絶食としたが水は自由に飲めるようにした。すべての動物をエーテルで麻酔し、血液サンプルを大静脈より抜き取り、3.8％のクエン酸ナトリウムと混合した（９容の血液に対し１容の抗凝固剤）。血液は250gにて10分間遠心分離を行い、血小板に富む血漿（PRP）を得た。一旦PRPを単離した後、残りを1300gで15分間遠心分離して血小板の乏しい血漿（PPP）を得た。
血小板凝集は濁度測定法（ボーン（Born G.）1962;血液中の血小板のアデノシンジホスフェートによる凝集とその回復；ネイチャー（ロンドン）194、927−929）により定量した。血小板凝集レベルは装置を、PRPにより光透過率０％となり、PPPにより光透過率100％となるように調製した後測定した。凝集曲線は５分間記録した。Fig.11はラットの血小板に富む血漿におけるADP誘導血小板凝集に対する高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果を示す:p＜＜0.05（マン−ホイットニーＵテスト）。結果は最大凝集パーセント（％）で表示している。群間の比較はマン−ホイットニーＵテストにより行った（ｐ＜＜0.05）。
血液採取の２時間前に高級脂肪族第一級アルコール混合物（50mg/kgおよび200mg/kg）を投与したラットではADP誘導血小板凝集が阻害されたが、低用量（25mg/kg）においてはADPに対する応答は有意に変化しなかった。最も高い用量の高級脂肪族第一級アルコール混合物（200mg/kg）を用いて抗血小板効果の経時試験を行った。
Fig.12に２μモル/LのADPにより誘導された血小板凝集に対する効果を示す、ｐ＜＜0.01。２時間後では血小板凝集は有意に阻害されるが、６時間後ではこの阻害は有意の限界（ｐ＝0.06）であり、24時間後では統計的な有意性は認められなかった。この結果は高級脂肪族第一級アルコール混合物を50、200mg/kg投与したラットのPRPにおいて、血液採取２時間前のポリコサノールのラットへの経口投与がADP誘導血小板凝集を用量依存的に阻害することを示す。高級脂肪族第一級アルコール混合物のADP誘導凝集阻害は可逆的であり、200mg/kgを投与後６時間では血小板凝集の阻害は有意性の下限であり、投与後24時間ではあきらかに効果がなかった。このことから、高級脂肪族第一級アルコール混合物は永続的な細胞変化をもたらすものではないことが示される。
実施例16
高級脂肪族第一級アルコール混合物の、ラットにおけるイン・ビボでの血管内血小板凝集に及ぼす影響およびマウスにおけるコラーゲン誘因性死亡におよぼす影響を検討した。雄スプラグ・ドウレイ・ラット（体重250−300g）および57BL6雌マウス（体重20−25g）を異なった実験群の間で無差別に分配した。高級脂肪族第一級アルコール混合物を実施例14の方法で調製した。ただし、ASAは５％NaHCO3に溶解した。試料をアッセイ２時間前に餌と共に経口投与した。試料の経口投与に先立ち動物は16時間絶食した。ラットには1ml/100g体重、マウスには0.5ml/20g体重の試料を、コントロール動物にはベヒクルを同量投与した。４つの実験グループをラットの血管内血小板凝集の研究に使用した：（１）はコントロール、２、３および４は高級脂肪族第一級アルコール混合物のそれぞれ５、10、および20mg/kgである。動物をペントバルビタール・ナトリウム塩（30−40mg/kg）で麻酔（i.p.）した。ペニス静脈にコラーゲン30mg/kg静脈注射する前および90秒後に採血するため頚動脈にカニューレを挿入した。
血液（900μＬ）をインドメタシン0.7mg/mlとEDTA  19mg/mlの混合物100μＬを含むプラスチック・チューブ内に集めた。１アリコートを光学顕微鏡計測により各サンプル中の血小板濃度を測定するために使用した。次いで血液を遠心分離し血漿マロンジアルデハイド（MDA）濃度をチオバルビツール酸法（サトウ・エム、1978;新規カラリメトリー法により測定された脳血管性疾患中の血清リピッド・パーオキシド；クリニカ・ヒミカ・アクタ90、34−43）によって測定した。コラーゲン注射後の血小板の計測とプラズマMDA濃度の変化をベース・ライン値のパーセントとして表した。コントロールと処置群間の相違をマン・ホイットニー・Ｕ・テストを用いて測定した。
ラットにおけるコラーゲン誘因性死亡の研究用実験グループは以下の通りである。
１）コントロール：ベヒクルのみを投与した動物、但し、コラーゲン静脈注射により死亡を誘発、
２）コラーゲン注射２時間前に高級脂肪族第一級アルコール混合物360mg/kgで前処理した動物、
３）死亡誘発１、４、８および24時間前に高級脂肪族第一級アルコール混合物360mg/kgで前処理した動物、
４）アッセイ２時間前に高級脂肪族第一級アルコール混合物180mg/kgとASA50mg/kgで前処理した動物。
酸可溶性仔ウシの皮のコラーゲン・タイプIIIを（キムラ・ワイ、カウベ・ティーおよびワタナベ・ケイら著1985;血小板凝集および実験的血栓症に及ぼすセロスタゲルの効果；アルズナイム・フォルシュ・ドラッグ・リサーチ35、114−1148）に記載のごとくして調製し、最終濃度2.5mg/mlの濃度で用いた。0.1ml/20gを後眼窩のプレクサスを介して注射した。この投与はコントロール動物の60から100％を死亡させた。コントロールと処理動物間の死亡％の比較をフィシャーのイクザクト・プロバビリテイー・テストを用いて行った。
図13は高級脂肪族第一級アルコール混合物の、ラットの血管内血小板凝集に及ぼす影響を示す。ｐ＜＜0.05;p＜＜0.01（マン・ホイットニー・Ｕ・テスト）。高級脂肪族第一級アルコール混合物は明らかに循環血小板数の減少およびコラーゲンに因り引き起こされた血漿のMADの同時増加を阻害した。
図14は高級脂肪族第一級アルコール混合物の、C57BL6マウスのコラーゲン誘因性死亡に及ぼす効果を示している。ｐ＜＜0.01（マン・ホイットニー・Ｕ・テスト）。コラーゲン誘因性死亡は明らかに高級脂肪族第一級アルコール混合物360mg/kg処理により減少した。このコラーゲン誘因性死亡に及ぼす防止効果はアッセイ１及び４時間前に投与したときに観察されるが、アッセイ８時間前の投与では顕著には観察されなっかった。図15はC57BL6マウスのコラーゲン誘因性死亡に及ぼす高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果を示す。ｐ＜＜0.05（マン・ホイットニー・Ｕ・テスト）。
図16はマウスのコラーゲン誘因性死亡におよぼす高級脂肪族第一級アルコール混合物とASAの併用効果を示す。ｐ＜＜0.01（フィッシャーズ・イクザクト・プロバビリティー・テスト）。高級脂肪族第一級アルコール混合物（180mg/kg）とASA（50mg/kg）との組合わせ効果はまたコラーゲン誘因性死亡における顕著な統計的減少を引き起こし、それぞれ独立に投与したときは、両者共有効でなかった。
単独では投与したとき有効でない高級脂肪族第一級アルコール混合物とASAの投与量で両者を併用したときは明らかに保護作用があり、これは高級脂肪族第一級アルコール混合物とASA間に抗血栓作用につき相乗作用のあることを示している。
実施例17
高級脂肪族第一級アルコール混合物の脳損傷におよぼす効果を分析するため、雄スプラグ・ドウレイ・ラット（体重290−330g）を以下の実験グループに分けた。
１）ネガテイブ・コントロール：胃投与によってベヒクルのみを投与した結紮・ラット；
２）ポジテイブ・コントロール：胃投与によってベヒクルを投与した結紮・ラット；
３）および４）同一のルートにより高級脂肪族第一級アルコール混合物（５および25mg/kg）を投与した結紮・ラット。
異なった処理を毎日４週間にわたって行った。最後のものはこのモデルに一般に使用されるごとく、結紮12時間前、および結紮８および24時間後に投与した。
脳の虚血を起こすために動物を軽く麻酔し、普通の頚動脈の両側を結紮して虚血させた。直後にナトリウム・ニトロプルッシド（0.8mg/250g）を皮下注射して動脈低血圧を引き起こした。頚動脈クランプを60分後に取り除き、動物を72時間観察した後、殺した。脳をすぐに取り除き、80℃で24時間オーブン中に置いた。湿潤および乾燥重量を計り、含水量（浮腫）を求め、以下の式：
0003602531.tif 000020
を適用した。
結果の統計分析を非パラメトリック・マン・ホイットニー・Ｕ・テストを用いて行った。高級脂肪族第一級アルコール混合物25mg/kgを毎日４週間投与したとき、脳浮腫が著しく減少した（ｐ＜＜0.05）。この投与はまた死亡率および浮腫を有する動物のパーセントを減少させたが、これらの他の減少は有意なレベルには達しなかった。以上の結果は、脳浮腫が有意に減少しているので、高級脂肪族第一級アルコール混合物25mg/kgが、ラットに実験的に引き起こされた脳の虚血を有意に防止することを示している。また処置動物の内脳浮腫を示す動物の割合も減少するが、この減少は有意なレベルには達しなかった（表18）。
0003602531.tif 000021
実施例18
ラットの脳虚血に及ぼす高級脂肪族第一級アルコール混合物とアスピリン間の相乗作用を研究するため、雄スプラグ・ドウレイ・ラット（体重250−300g）を５グループに分けた。
１）ネガテイブ・コントロール（非結紮ラット）、
２）ポジテイブ・コントロール（ベヒクルのみを投与した結紮動物）、
３）高級脂肪族第一級アルコール混合物25mg/kg経口投与動物、
４）５％重炭酸ナトリウム30mg/kgに溶解したASAを経口投与した動物、
５）ASA（30mg/kg）＋高級脂肪族第一級アルコール混合物（25mg/kg）を経口投与したラット。
実験２時間前に処置した。
虚血させるため動物をエーテルで軽く麻酔し、普通の動脈を切開し、結紮した。次いで、ナトリウム・ニトロプルシッド（0.8mg/250g）を皮下注射して低血圧を起こした。60分後頚動脈クランプを取り除き、脳を24時間観察した。動物を殺し、脳を直ぐに取り出し80℃のオーブンに24時間置き含水量を測定した。結果を非パラメトリック・マン・ホイットニー・Ｕ・テストを用いて分析した。図17はラットの脳虚血における高級脂肪族第一級アルコール混合物とASA間の相乗作用を示す。ｐ＜＜0.01（マン・ホイットニー・Ｕ・テスト）。高級脂肪族第一級アルコール混合物もアスピリンも、これらを単独で上記投与量で動物に投与したとき脳虚血を顕著には減少させなかった。にもかかわらず、同時に投与したときは顕著な保護が得られた。これらの結果は高級脂肪族第一級アルコール混合物とASAの抗虚血症への相乗作用である。
実施例19
雌雄モンゴリアン・ジャービル（体重60−80g）を用い、一週間実験室条件に順応させた。高級脂肪族第一級アルコール混合物をツイン20−水ベヒクル中に分散させて胃投与した。動物を無差別に以下のグループに分けた。
１）ポジテイブ・コントロール（結紮動物、ベヒクルのみを投与）、
２）高級脂肪族第一級アルコール混合物（50mg/kg）、および
３）高級脂肪族第一級アルコール混合物（300mg/kg）
脳虚血２時間前全ての処理を行った。左の普通の頚動脈を首から露出させエーテル麻酔して手術糸で結紮した。各動物の挙動を24時間観察し、脳虚血の病理的徴候、例えばサークリングまたはローリンなどの痙攣や発作を記録した。死亡もまた記録した。グループ間の死亡の頻度、病理的徴候の統計的比較をフィシャーズ・イクザクト・プロバビリテイー・テストを用いて比較した。図18はモンゴリアン・ジャービルに生じる脳梗塞に及ぼす高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果を示している。ｐ＜＜0.05（マン・ホイットニー・Ｕ・テスト）。結果は徴候の減少および顕著な死亡率の減少を示す。
モンゴリアン・ジャービルの約60％が神経欠損症、例えばサークリング挙動、およびローリン発作などを普通の頚動脈結紮後に発現した。これらの徴候はこれらの動物の約2/3に基部と頚動脈系の間の動脈の連結が不完全であるかあるいは存在しないと言う事実を予想させる。更に、80％の動物が結紮後72時間以内に病理的死亡の徴候を示した。
全ての脳領域での脳梗塞の程度を評価するのは困難であり、死亡率は定量が容易であるので、通常、推定上の抗虚血薬を評価するために使用されてきた。我々の結果は高級脂肪族第一級アルコール混合物（200mg/kg）がモンゴリアン・ジャービルの普通の動脈の片側の結紮によって生ずる脳の完全な虚血を顕著に防止することを示している。即ち、完全な虚血の発現を防止するために高級脂肪族第一級アルコール混合物が有用であることを示している。
実施例20
異なった薬によって引き起こされる胃潰瘍への高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果を調べた。雌雄のスプラグ・ドウレイ・ラット（体重200−220g）を用いた。動物を任意に水と食物を与えて１週間実験室条件に慣らした。24時間後、ラットを無差別に２つの実験グループに分けた。最初のグループはツイン20/水ベヒクルに分散させた高級脂肪族第一級アルコール混合物25mg/kgを腹膜内注射した。第二のグループ（コントロール）は単にベヒクルのみを同量投与した。薬物で引き起こされた異なったタイプの胃潰瘍を生じさせるための実験方法はコントロール及び試験グループいずれにも行った（二つのグループ共各タイプの潰瘍に対して用いた）。
Ａ）C4880（シグマ社）により実験的に起こした胃潰瘍
方法はアウオウターズ・エフ・ネメジーンズ・シー・ジェイ・イーおよびジャンスケン・ピー・エイ・ジェイ（1985:ア・ファーマコロジカル・アナリシス・オブ・ザ・ラット・マスト・セル・５−エイチ・テイー・ガストリック・レシオン・テスト・アンド・ザ・イフェクト・オブ・ケタンゼリン；ドラッグ・デイブ・レス、5,303−312）により報告されているのと同様である。
そのためにジフェンヒドラミンを10mg/kg皮下注射し、30分後C4880を静脈内注射した。動物をC4880投与４時間後に殺し胃を直ぐに取り出し、より大きい湾曲部を縦に開き、蒸留水で洗浄した。次いで、粘液をさらし、損傷面積を虫眼鏡で測定した。結果を損傷を示す面積のパーセントで表した。このモデルにおいて前処理（高級脂肪族第一級アルコール混合物またはベヒクル）はジフェンヒドラミン注射30分前に行った。
Ｂ）アルコールで起こした潰瘍。ゼンギル・エイチ・オニーク・イー・エリーン・テイー・エスおよびターカー・アール・ケイ（1987:プロテクテイブ・イフェクト・オブ・イロプノスト・アンド・ユー・ケイ・38485・アゲインスト・ガストリック・ムコサール・ダメイジ・バイ・ベアリアス・スチミュリ；プロスタグランヂンズ・ロイコトリエンス・アンド・メデイシン30,61−67）の方法にしたがって行った。高級脂肪族第一級アルコール混合物またはベヒクル投与１時間後に40％エタノール（1ml/ラット）を経口的に胃に投与した。２時間後、ラットを殺し、記載の方法により胃潰瘍を定量した。
Ｃ）ASAによって引き起こされた胃潰瘍：前項において言及されたのと同じ著者の方法に従って測定した。高級脂肪族第一級アルコール混合物またはベヒクル投与１時間後ラットにASA（100mg/kg）経口投与した。２時間後ラットを殺し、胃潰瘍を記載の方法によって測定した。コントロールと高級脂肪族第一級アルコール混合物処理グループ間の比較を非パラメトリック・マン・ホイットニー・Ｕ・テストを用いて行った。図19はC4880とアルコール誘因性胃潰瘍におよぼす高級脂肪族第一級アルコール混合物の効果を示す;p＜＜0.05.高級脂肪族第一級アルコール混合物の腹膜内注射（25mg/kg）により、C4880、エタノール、およびASAによる胃潰瘍の発生が有意に抑制された。
更に、表19に見られるごとく、経口投与された高級脂肪族第一級アルコール混合物はTxB2を減少させるのみでなく、PgI2を増加させ、従ってTxB2のPgI2に対する比を有意に減少させる。
0003602531.tif 000022
TxB2レベルの阻害と高級脂肪族第一級アルコール混合物によって引き起こされたPgI2の増加は胃潰瘍に対する混合物の保護効果を説明する。即ち、高級脂肪族第一級アルコール混合物とASAの組合わせ処置を採用したときTxB2のPgI2に対する高度に有意な減少が観察される。さらに、このメカニズムは他の薬物誘因性胃潰瘍におよぼすアルコール混合物の効果を支持している。
実施例21
II型高リポたん白血症を患った男女の外来患者（25−70才）45人に高級脂肪族第一級アルコール混合物または偽薬タブレットを二重ブラインド条件下に、一日一回（処置を受けた患者は5mg/日）６週間投与した。処理前及び後に以下のパラメーターを検査した：流血時間、血小板カウント、プロトロンビン・タイム、抗トロンビンIII活性、消散時間、血漿オイグロブリン・フラクション、ADPによって引き起こされた血小板凝集およびマロンジアルデヒド（MDA）濃縮。
表20はそのデーターの要約である。これらは凝集工程に関連するパラメーターには影響が見られないが、引き起こされた血小板凝集−ADP間に顕著な相違が観察された。加えて、MDAの有意すれすれの減少が観察された（ｐ＝0.058）。
0003602531.tif 000023
【図１】
0003602531.tif 000024
【図２】
0003602531.tif 000025
【図３】
0003602531.tif 000026
【図４】
0003602531.tif 000027
【図５】
0003602531.tif 000028
【図６】
0003602531.tif 000029
【図７】
0003602531.tif 000030
【図８】
0003602531.tif 000031
【図９】
0003602531.tif 000032
【図１５】
0003602531.tif 000033
【図１０】
0003602531.tif 000034
【図１１】
0003602531.tif 000035
【図１２】
0003602531.tif 000036
【図１３】
0003602531.tif 000037
【図１４】
0003602531.tif 000038
【図１６】
0003602531.tif 000039
【図１７】
0003602531.tif 000040
【図１８】
0003602531.tif 000041
【図１９】
0003602531.tif 000042