【手続補正書】
【提出日】平成29年6月5日(2017.6.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性化可能抗体を部分的に還元し、剤を複合化することで、該剤の配置に選択性を与える方法であって、該方法は：
活性化可能抗体内のいずれの鎖内ジスルフィド結合も妨害することなく、還元剤を用いて活性化可能抗体内の少なくとも１つのジスルフィド結合を還元し、これにより、活性化可能抗体を部分的に還元すること、及び、
部分的に還元された活性化可能抗体の少なくとも１つのチオールに該剤を複合化することを含み、
ここで、前記活性化可能抗体は、標的に特異的に結合する抗体又はその抗原結合フラグメント（ＡＢ）、切断されていない状態で活性化可能抗体のＡＢが標的に結合するのを阻害するＡＢにカップリングしたマスキング部分（ＭＭ）、及びＡＢにカップリングした切断可能部分（ＣＭ）を含み、ここで、前記ＣＭは、プロテアーゼの基質として機能するポリペプチドである方法。
【請求項２】
前記少なくとも１つのジスルフィド結合は、鎖間ジスルフィド結合である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記少なくとも１つのジスルフィド結合は、活性化可能抗体と第２の分子との間のジスルフィド結合であり、任意には、前記第２の分子は、システイン又はグルタチオンである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記還元剤はＴＣＥＰである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記剤は、表４に列挙した剤の群から選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記剤は、毒素又はそのフラグメントであり、任意には、前記剤は：微小管阻害剤、核酸損傷剤、ドラスタチン又はその誘導体、アウリスタチン又はその誘導体、マイタンシノイド又はその誘導体、デュオカルマイシン又はその誘導体、カリケアマイシン又はその誘導体、アウリスタチンＥ又はその誘導体、モノメチルアウリスタチンＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、ＤＭ１、及びＤＭ４から成る群から選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記剤は、リンカーを介してＡＢに結合され、任意には、切断可能なリンカーである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記剤は、検出可能部分であり、前記検出可能部分は、診断薬である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記の切断されていない状態にある活性化可能抗体はスペーサーを含み、ここで、該スペーサーは、ＭＭに直接連結され、そして、スペーサー−ＭＭ−ＣＭ−ＡＢのＮ末端からＣ末端への構造配置を有する請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
活性化状態で標的と結合する複合活性化可能抗体であって、以下の：
該標的に特異的に結合する抗体又はその抗原結合フラグメント（ＡＢ）、ここで、該ＡＢはモノメチルアウリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）に複合化され；
活性化可能抗体が切断されていない状態にあるとき、標的へのＡＢの結合を阻害するＡＢにカップリングしたマスキング部分（ＭＭ）；及び
ＡＢとカップリングした切断可能部分（ＣＭ）、ここで、該ＣＭは、プロテアーゼの基質として機能するポリペプチドである、
を含む複合活性化可能抗体。
【請求項１１】
前記ＭＭは、標的へのＡＢの平衡解離定数より高い、ＡＢへの結合のための平衡解離定数を有する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＭＭは、活性化可能抗体が切断された状態にあるとき、標的への結合のためのＡＢと干渉しないし、競合もしない、請求項１〜９及び１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記プロテアーゼは、組織中で標的と共に局在し、活性化可能抗体が該プロテアーゼに晒されたとき、該プロテアーゼは活性化可能抗体内のＣＭを切断する、請求項１〜９、１１及び１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記の切断されていない状態にある活性化可能抗体は、以下のようなＮ末端からＣ末端への構造配置：ＭＭ−ＣＭ−ＡＢ又はＡＢ−ＣＭ−ＭＭを有する、請求項１〜９及び１１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記活性化可能抗体は、ＭＭとＣＭとの間、及び／又はＣＭとＡＢとの間に連結ペプチドを含む、請求項１〜９及び１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記活性化可能抗体は、第１連結ペプチド（ＬＰ１）及び第２連結ペプチド（ＬＰ２）を含み、そして、切断されていない状態にある活性化可能抗体は、以下のようなＮ末端からＣ末端への構造配置：ＭＭ−ＬＰ１−ＣＭ−ＬＰ２−ＡＢ又はＡＢ−ＬＰ２−ＣＭ−ＬＰ１−ＭＭを有し、任意には、前記ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは、（ＧＳ）ｎ、（ＧＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号２１）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２２）、ＧＧＳＧ（配列番号２３）、ＧＧＳＧＧ（配列番号２４）、ＧＳＧＳＧ（配列番号２５）、ＧＳＧＧＧ（配列番号２６）、ＧＧＧＳＧ（配列番号２７）、及びＧＳＳＳＧ（配列番号２８）｛式中、ｎは少なくとも１の整数である｝から成る群から選択されるアミノ酸配列である、請求項１〜９及び１１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記の２つの連結ペプチドは、互いに同一である必要はなく、任意には、前記のＬＰ１及びＬＰ２のそれぞれは、長さが約１〜２０個のアミノ酸のペプチドである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＭＭは、長さが４０個以下のアミノ酸のポリペプチドであり、及び／又は長さが最大１５個のアミノ酸のポリペプチドである、請求項１〜９及び１１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＭＭポリペプチド配列は、標的の配列と異なり、そして、該ＭＭポリペプチド配列は、ＡＢの任意の天然の結合パートナーに対して５０％以下同一であり、任意には、前記ＭＭは、標的に対して２５％超のアミノ酸配列同一性を有さず、任意には、前記ＭＭは、標的に対して１０％超のアミノ酸配列同一性を有さない、請求項１〜９及び１１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
以下の群：
前記ＣＭは、表３に示した酵素から成る群から選択される酵素のための基質である、
前記ＡＢの標的は、表１に列挙した標的の群から選択される、そして
前記ＡＢは、表２に列挙した抗体又はこれらに由来する、
から成る群から選択される１又は複数の特徴を有する、請求項１〜９及び１１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記のその抗原結合フラグメントは、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）2フラグメント、ｓｃＦｖ、ｓｃＡｂ、ｄＡｂ、単一ドメインＨ鎖抗体、及び単一ドメインＬ鎖抗体から成る群から選択される、請求項１〜９及び１１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＭＭは、標的へのＡＢの平衡解離定数より高い、ＡＢへの結合のための平衡解離定数を有する、請求項１０に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項２３】
前記ＭＭは、活性化可能抗体が切断された状態にあるとき、標的への結合のためのＡＢと干渉しないし、競合もしない、請求項１０又は２２に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項２４】
前記プロテアーゼは、組織中で標的と共に局在し、活性化可能抗体が該プロテアーゼに晒されたとき、該プロテアーゼは活性化可能抗体内のＣＭを切断する、請求項１０、２２及び２３のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項２５】
前記の切断されていない状態にある活性化可能抗体は、以下のようなＮ末端からＣ末端への構造配置：ＭＭ−ＣＭ−ＡＢ又はＡＢ−ＣＭ−ＭＭを有する、請求項１０及び２２〜２４のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項２６】
前記活性化可能抗体は、ＭＭとＣＭとの間、及び／又はＣＭとＡＢとの間に連結ペプチドを含む、請求項１０及び２２〜２５のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項２７】
前記活性化可能抗体は、第１連結ペプチド（ＬＰ１）及び第２連結ペプチド（ＬＰ２）を含み、そして、切断されていない状態にある活性化可能抗体は、以下のようなＮ末端からＣ末端への構造配置：ＭＭ−ＬＰ１−ＣＭ−ＬＰ２−ＡＢ又はＡＢ−ＬＰ２−ＣＭ−ＬＰ１−ＭＭを有し、任意には、前記ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つは、（ＧＳ）ｎ、（ＧＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号２１）、（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号２２）、ＧＧＳＧ（配列番号２３）、ＧＧＳＧＧ（配列番号２４）、ＧＳＧＳＧ（配列番号２５）、ＧＳＧＧＧ（配列番号２６）、ＧＧＧＳＧ（配列番号２７）、及びＧＳＳＳＧ（配列番号２８）｛式中、ｎは少なくとも１の整数である｝から成る群から選択されるアミノ酸配列である、請求項１０及び２２〜２６のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項２８】
前記の２つの連結ペプチドは、互いに同一である必要はなく、任意には、前記のＬＰ１及びＬＰ２のそれぞれは、長さが約１〜２０個のアミノ酸のペプチドである、請求項２７に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項２９】
前記ＭＭは、長さが４０個以下のアミノ酸のポリペプチドであり、及び／又は長さが最大１５個のアミノ酸のポリペプチドである、請求項１０及び２２〜２８のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項３０】
前記ＭＭポリペプチド配列は、標的の配列と異なり、そして、該ＭＭポリペプチド配列は、ＡＢの任意の天然の結合パートナーに対して５０％以下同一であり、任意には、前記ＭＭは、標的に対して２５％超のアミノ酸配列同一性を有さず、任意には、前記ＭＭは、標的に対して１０％超のアミノ酸配列同一性を有さない、請求項１０及び２２〜２９のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項３１】
以下の群：
前記ＣＭは、表３に示した酵素から成る群から選択される酵素のための基質である、
前記ＡＢの標的は、表１に列挙した標的の群から選択される、そして
前記ＡＢは、表２に列挙した抗体又はこれらに由来する、
から成る群から選択される１又は複数の特徴を有する、請求項１０及び２２〜３０のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項３２】
前記のその抗原結合フラグメントは、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）2フラグメント、ｓｃＦｖ、ｓｃＡｂ、ｄＡｂ、単一ドメインＨ鎖抗体、及び単一ドメインＬ鎖抗体から成る群から選択される、請求項１０及び２２〜３１のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項３３】
前記ＭＭＡＤは、リンカーを介してＡＢに複合化され、任意には、前記リンカーは、切断可能なリンカーである、請求項１０及び２２〜３２のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体。
【請求項３４】
前記の切断されていない状態にある活性化可能抗体はスペーサーを含み、ここで、該スペーサーは、ＭＭに直接連結され、そして、スペーサー−ＭＭ−ＣＭ−ＡＢのＮ末端からＣ末端への構造配置を有する請求項１０及び２２〜３３のいずれか１項の複合活性化可能抗体。
【請求項３５】
治療上有効な量の請求項１０及び２２〜３４のいずれか１項に記載の複合活性化可能抗体、又は請求項１〜９及び１１〜２１のいずれか１項に記載の方法により生じた複合活性化可能抗体を含む、障害又は疾患を予防、治療、又は改善するための医薬組成物であって、任意には、前記障害又は疾患は、対象におけるＡＢの標的の発現及び／又は活性に関連し、そして、任意には、前記障害又は疾患は、癌、炎症性障害又は自己免疫疾患である、医薬組成物。