【誤訳訂正書】
【提出日】平成28年12月19日(2016.12.19)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】心房細動の治療
【技術分野】
【０００１】
関連特許出願への相互参照
本出願は、米国仮出願番号第６１／２６１，９２５号（出願日：２００９年１１月１７日）に対する優先権を主張し、本明細書中、同文献の内容全体を参考のため援用する。
【０００２】
本発明は、４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド（サルカルディン；ｓｕｌｃａｒｄｉｎｅ）又はその薬学的に受容可能な塩による心房細動（ＡＦ）の治療に関する。
【背景技術】
【０００３】
本開示を通じて、多様な公開文献、特許及び公開特許明細書について引用及び言及する。本発明が関連する技術分野を説明するために、これらの公開文献、特許及び公開特許明細書の開示内容全体を参考のため援用する。
【０００４】
心不整脈（「不整脈」としても知られる）は、心臓の異常電気活動によって特徴付けられる一連の状態を示す項目である。不整脈の例を挙げると、心室性期外収縮、心室頻拍、心室細動及び上室性頻脈性不整脈（例えば心房細動）がある。例えば、心房細動（ＡＦ）は上室性頻脈性不整脈であり、心房興奮の非協調に起因する心房機械機能の劣化によって特徴付けられる。持続性ＡＦ及び／又は慢性ＡＦを有する場合、ＭＩを含む血栓塞栓症及び脳卒中及び心不全の危険性が増す。ＡＦが進行する仕組みにおいては、以下の２つの主なプロセスが発生する：すなわち、１つ又はいくつかの高速脱分極焦点における自動能の向上、及び１つ以上の回路を通じたリエントリーである。
【０００５】
ＡＦは、医療的ケアを必要とする最も一般的な不整脈であり、米国成人人口に占める有病率は１％に近い（米国における２００６年における予測では６００万人、米国における２０２０年までの予測では９００万人）。ＡＦの有病率は年齢と共に上昇し、８０歳を越えた人口の有病率は８％となっている。米国及び欧州の人口動態の高齢化と共に、ＡＦも、さらに一般的な心疾患となる。患者におけるＡＦの再発性発作は、平均で５０％／年となっている。そのため、ＡＦはヘルスケアシステムにおいて大きな負担となっており、米国における１件あたりの平均コストは＄３６００／年となっている。
【０００６】
ＡＦを有する場合、例えば、息切れ、胸部不快感又は胸部の痛み、及び運動不耐性を含む、生活の質へ悪影響を与える症状が発生する。患者のＡＦ罹病歴が長くなるほど、心房中の血栓形成リスクも高まり、その結果、血栓塞栓性脳卒中リスクも高まり、その結果、長期抗凝固療法が必要となる。米国における全ての脳卒中症例のうち大部分が、持続性ＡＦ又は慢性ＡＦに続発していると考えられている。ＡＦ患者においてかなりの高確率で発生する他の深刻な心血管事故を挙げると、心不全及び心筋梗塞（ＭＩ）がある。
【０００７】
ＡＦ治療では、持続性ＡＦ及び慢性ＡＦにおいて、主に電気的除細動及び抗凝固剤が用いられている。急性症候性ＡＦ又は発作性ＡＦの患者の電気的除細動は、抗不整脈薬（ＡＡＤ）又は電気的除細動の利用によって達成することができ、これにより洞律動（ＳＲ）が回復する。あるいは、医師が房室結節伝導を遅延させる薬剤を用いて拍動数を制御して、ＡＦ患者の心室拍動数を制御する場合もある。
【０００８】
調律制御は患者拍動数制御よりも優れているのかについて、現在も大きな議論が行われているが、多くのオピニオンリーダーの意見によれば、患者がＳＲで、抗凝固が不要な方が好ましいとされている。いずれかのアプローチを用いた場合による重篤な心臓血管（ＣＶ）の結果又は死亡についての調査研究は、現時点では結論が出ていない。除細動（defibrillation）による電気的除細動は大がかりな作業であり、また、先ず麻酔専門医の下で患者を鎮静させる必要もあり、また、筋肉痛及び皮膚火傷も高確率で発生する。抗不整脈薬は、作用機序に基づいて複数のクラスの薬理学的分類に分類される。以下のような５種類のＡＡＤクラスが認識されている。
クラスＩ：ナトリウムチャネルブロッカー
クラスＩＩ：ベータブロッカー
クラスＩＩＩ：カリウムチャネルブロッカー
クラスＩＶ：カルシウムチャネルブロッカー
クラスＶ：その他（アデノシン、ジゴキシンなど）
【０００９】
現時点においては、新規抗ＡＦ剤が開発されいるものの、薬理学的除細動は一般的になっていない。なぜならば、薬理学的除細動の場合、有効率が低く、薬剤に起因する心室性不整脈（ＴｄｅＰ）、心室頻拍、又は現在利用可能な薬剤と関連する他の重篤な不整脈の危険性があるからである。また、薬理学的除細動は電気的除細動よりも有効性が低いため、除細動は、不応性急性心房細動の治療において主に用いられている。
【００１０】
プロポフェノン (ｐｒｏｐｏｆｅｎｏｎｅ)、フレカイニド（ｆｌｅｃａｎｉｄｅ）及びイブタリド (ｉｂｕｔａｌｉｄｅ) などの最も普及している薬剤の場合、ＴｄｅＰを誘発する危険性があるため、これらの薬剤のうちほとんどは、虚血性心疾患、心筋梗塞の既往、及びＱＴ延長症候群のいずれかに罹患している、及びそのいずれかの病歴がある患者には推奨されない。これらの薬剤のうち複数のもの、例えば、ソルタロル (ｓｏｔａｌｏｌ)、フレカイニド、プロポフェノン及びドロナダロン (ｄｒｏｎａｄａｒｏｎｅ）は、心臓収縮性に悪影響も与えるため、心臓収縮に起因する心不全の原因となる。最も一般的な重度有害事象として、催不整脈作用がある。催不整脈作用は一般的にはヒト遅延整流性カリウムイオンチャネル遺伝子（ｈＥＲＧ）符号化カリウムチャネルＩＫｒの封鎖と関連し、その結果、ＱＴ間隔延長が発生し、これに相応して致死的心室不整脈ＴｄｅＰが発生する。特に、ＩＫｒに対する阻害活性を持たないナトリウムチャネルブロッカーも、活動電位持続時間を長期化させることが可能であるため、催不整脈性が高い場合があり（フレカイニド）、その場合、Ｃａオーバーロードが顕著となり、リエントリー調律が誘発される。
【００１１】
抗不整脈剤（例えば、ナトリウムチャネルブロッカー（クラスＩ）、カルシウムチャネルブロッカー（クラスＩＶ）及びベータブロッカー（クラスＩＩ）、及びジゴキシン及びアデノシン（クラスＶ））は全て一定の抗ＡＦ特性を有しているものの、クラスＩＩＩの抗不整脈剤は全てカリウムチャネル阻害剤であり、医療専門家による最近の合意によれば、混合チャネルブロッカーが安全性において有利であり且つ心房不整脈において有効であることが認識されているため、抗ＡＦ用途として混合チャネルブロッカーが好ましい。急性ＡＦ、持続性ＡＦ及び発作性ＡＦが再発した場合、最終的には慢性ＡＦに繋がり、心房組織において電気的リモデリングが発生する。これは、適応反応であり、異なる心房からの相対的貢献により、イオンチャネルが変化する。このようなチャネルトラフィッキングの変化は、活動電位（ＡＰ）持続時間の短縮によって示され、このような活動電位（ＡＰ）持続時間の短縮は、超高速カリウム電流ＩＫｕｒ、一過性外向きカリウム電流Ｉｔｏ、及びムスカリン性アセチルコリンカリウム電流ＩＫＡｃｈからの比較的高い貢献によって発生し、また、遅延整流カリウム電流及びカルシウム電流による影響の低下によっても発生する。遅延整流カリウム電流は、２つの構成成分からなる（すなわち、高速［ＩＫｒ］及び低速［ＩＫｓ］））。慢性ＡＦは、医学的介入による治療が困難であり、これらの患者におけるＳＲの維持は極めて困難であり、そのため、ＡＦからまたＡＦが発生する状態となっている。
【００１２】
カリウムチャネルを標的とする現在利用可能なＡＡＤの場合、後期フェーズ３再分極電流ＩＫｒ及びＩＫｓをブロックする傾向があるため、慢性ＡＦによってフェーズ３が短くなるため、ＡＦ時における有効性が低い場合がある。しかし、この仮説はまだ確証されていない。心室中の同じイオンチャネルを標的とする現在利用可能なＡＡＤの場合、ＱＴ間隔が長くなることがあり、その結果、ＴｄｅＰの危険性が高まる。心房特有のチャネル（ＩＫｕｒ、Ｉｔｏ、ＩＫＡｃｈ）に対して選択性のあるＡＡＤの場合、ＡＦ電気的リモデリングの後により高い活性を示し、そのため、心室催不整脈性の危険性を最小限に抑えつつ有効な調律制御が得られ得るが、これらの心房選択性チャネルのうち少なくとも１つ（ＩＫＡｃｈ）のダウンレギュレーションが、持続性／慢性ＡＦについて報告されている。
【００１３】
サルカルディン、４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド、及びその塩（例えば、サルカルディン硫酸塩）は、有効な抗不整脈活性を有する新規の化学物質の一群を構成する。サルカルディンは、マルチイオン（高速及び低速Ｎａ、Ｌ−Ｃａ、及びＫＩｔｏ）のチャネルブロッカーであり、置換スルホンアミドクラスの抗不整脈のおそらく唯一の例である。サルカルディン塩は、上室性頻脈性不整脈、心室性期外収縮、心室頻拍及び心室細動を含む不整脈の治療のために静脈注射又は経口投与を介して用いることができる。
【００１４】
加えて、今日までの証拠により、サルカルディン及び塩の１つの利点として、ＭＩ後突然死覚醒イヌモデル及び有効ウサギ心室ウェッジモデルを含む厳密な前臨床安全性モデルにおいて実証されているような、顕著な催不整脈性活性が無い点があることが分かっている。さらに、サルカルディン及び塩の場合、ＭＩ後イヌモデルにおいて、フレカイニドにおいて見られたような除細動閾値の上昇がみられず、除細動失敗の危険性も高くならないことも分かっている。これらのデータに基づけば、サルカルディン及び塩は、明らかに催不整脈性が極めて低いため、器質的心疾患、長期ＱＲ症候群、及び心室不整脈（例えば、心室性期外収縮（ＰＶＣ）、心室頻拍（ＶＴ）、及び心室細動（ＶＦ））の存在における急性心房細動及び再発性心房細動の治療に用いることができ、また、静脈内投与及び経口投与に適した製剤設計にすることが可能であるため、急性投与設定又は慢性投与設定のいずれかにおいて用いることが可能である。
【発明の概要】
【００１５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏヒト心房心筋細胞において、サルカルディン及びその塩を用いた場合、ＩＣ５０値が２６〜１００μＭとなることが報告されている。これらの発見によれば、イオンチャネルの有効な薬理学的封鎖をｉｎ  ｖｉｖｏで行う場合、抗不整脈効果を引き出すためには、濃度がこれらのＩＣ５０値を越える（恐らくは、これらのＩＣ５０値の数倍となる）必要がある。さらにサルカルディン硫酸塩の血漿濃度がこのＩＣ５０の範囲に近いか又はこの範囲を超えた場合、とりわけ血圧低下、ＱＴ延長、及び心室収縮性への望ましくない影響に関連することが分かった。そのため、ＡＦに対して有効なサルカルディン血液濃度を、厄介な副作用無しに達成することは不可能であると予測されていた。
【００１６】
このような予測に反して、本発明によれば、これらの副作用の発生無く、サルカルディン又はサルカルディンの薬学的に受容可能な塩を用いたＡＦの治療が可能となる。よって、本発明の一局面によれば、ＡＦの治療方法が提供される。前記方法は、ＡＦに罹患しているか又はＡＦ罹患の危険性のある対象に対する一定量の活性薬剤を含んだ組成物の投与を含む。前記活性薬剤は、４メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド（サルカルディン）又はその薬学的に受容可能な塩である。前記対象中の活性薬剤の最大定常状態血漿濃度（Ｃｍａｘ）は、約１μＭ〜約２０μＭである。本発明はまた、前記活性薬剤のＣｍａｘが約０．１μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、３μＭ、４μＭ又は５μＭ〜約２５μＭ、２０μＭ、１８μＭ、１５μＭ、１２μＭ、１０μＭ、９μＭ、８μＭ、７μＭ又は６μＭの範囲内にある治療も企図する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、高速ＩＶ点滴後のサルカルディン硫酸塩の薬物動態（ＰＫ）曲線を示す。サルカルディン硫酸塩の合計注入量は、８ｍｇ／ｋｇであった。
【００１８】
【図２】図２は、突然死モデルの麻酔犬にサルカルディン硫酸塩を４５分間静脈内点滴投与した場合の血行力学的効果を示す。Ｘ軸上の時間は、４５分間の薬剤点滴完了後の時間を示す。[発明の詳細な説明]
【００１９】
本出願全体において、本発明による化合物、組成物及び方法の多様な実施形態について以下の記載で説明する。記載される多様な実施形態は、ひとえに例示的なものであり、代替的種類を記載しているものとして解釈されるべきではない。すなわち、本明細書中の記載は、範囲が重複している場合がある。以下に記載される実施形態は、ひとえに例示的なものであり、本発明の範囲を制限することを意図していない。
【００２０】
Ｉ． 定義
他に明記されていない限り、本記載において用いられる用語及び表現の定義は以下の通りである。
【００２１】
本記載において、「治療」とは、予防目的及び／又は治療目的のための薬学組成物又は薬剤の投与を指す。「治療法」とは、不整脈などの病態に罹患している患者への治療付与を指す。よって、好適な実施形態において、治療とは、治療的に有効な量の抗不整脈剤の哺乳類への投与を指す。
【００２２】
治療「対象」とは、原核細胞又は真核細胞、組織培養物、組織又は動物（例えば、ヒトを含む哺乳類）を指す。ヒト以外の動物の治療対象を挙げると、例えば、サル、ネズミ、イヌ、ウサギ科（例えばウサギ）、家畜、競技用動物及びペットがある。
【００２３】
本明細書中で用いられる「抗不整脈剤」という用語は、対象内における不整脈の治療又は関連症状の軽減の治療効果を有する分子を指す。不整脈の非限定的例を挙げると、例えば心房細動などの上室性頻脈性不整脈、心室性期外収縮、心室頻拍、及び心室細動がある。一局面において、抗不整脈剤は、４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド（サルカルディン）又はその薬学的に受容可能な塩である。別の局面において、抗不整脈剤は、サルカルディン硫酸塩である。
【００２４】
本発明によれば、サルカルディン、４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミドの薬学的に受容可能な塩は、不整脈の治療において有用な製剤設計における活性薬剤であり得る。このようなサルカルディン塩の例を以下に挙げる：（Ａ）無機酸塩（例えば、酢酸、ホウ酸塩、重炭酸塩、硫酸塩、塩酸塩、臭化物、塩化物、ヨウ化物、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸エステル、リン酸塩、二リン酸塩、及びフルオロリン酸塩）、（Ｂ）有機酸塩（例えば、アムソナート（４，４−ジアミノスチルベン−２，２−二硫酸塩）、酸性酒石酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、エデト酸カルシウム、カンシル酸、エジシル酸塩、エストレート、エシレート、グルタマート、グルコネート、グルセプテート、乳酸塩、ラクトビオン酸、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸エステル、マンデル酸、臭化メチル、硝酸メチル、硫酸メチル、ムチン酸、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸（１，１−メテン−ビス−２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸、エインボネート）、パモ酸、パントテン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸エステル、硫酸塩、スルホサリチル酸、スラマート、プロピオン酸塩、吉草酸塩、フマル酸塩、フマル酸エステル、及び酒石酸塩、並びに（Ｃ）アルカリ金属塩及びアルカリ土類塩（例えば、サルカルディンのナトリウム、カリウム、リチウム及びカルシウム塩）。この文脈において、薬学的に受容可能な塩は、１つよりも多くの荷電原子、よって１つ以上の対イオンをその構造内に有し得る。
【００２５】
「有効な量」、「治療的に有効な量」、及び「薬学的に有効な量」という表現は、治療効果をもたらす活性薬剤（本開示中の抗不整脈剤）の量を示す。治療において有用な活性薬剤の投与量が、治療的に有効な量である。よって、治療的に有効な量とは、臨床試験結果及び／又はモデル動物研究によって判明した所望の治療効果が得られる活性薬剤量である。特定の実施形態において、前記活性薬剤は、所定の投与量だけ投与される。よって、治療的に有効な量とは、投与された量である。この量及び抗不整脈剤量は、規定通りに従来の方法によって決定することができ、異なる要素（例えば、関連する特定の不整脈事象）の関数として変化する。この量は、患者の身長、体重、性別、年齢及び病歴に応じても異なり得る。
【００２６】
「キャリア」又は「賦形剤」とは、例えば化合物の投与を促進するために（例えば、化合物の放出及び／又はバイオアベイラビリティを制御するために）用いられる化合物又は材料である。固形キャリアを挙げると、例えば、でんぷん、乳糖、第二リン酸カルシウム、スクロース、及びカオリンがある。液体キャリアを挙げると、例えば、滅菌水、生理食塩水、緩衝液、非イオン界面活性剤、及び食用油（例えば、油、ピーナツ油及びごま油）がある。加えて、当該分野において一般的に用いられている多様なアジュバントも用いることが可能である。上記及び他のこのような化合物について、例えば、以下の文献に記載がある：Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ，Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｒａｈｗａｙ，Ｎ．Ｊ。薬学組成物中の多様な構成要素の含有についての検討について、例えば以下の文献に記載がある：Ｇｉｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｅｄｓ．）（１９９０）；ＧＯＯＤＭＡＮ  ＡＮＤ  ＧＩＬＭＡＮ’Ｓ：ＴＨＥ  ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＢＡＳＩＳ  ＯＦ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，８ｔｈＥｄ．，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ。
【００２７】
「薬学的に受容可能なキャリア」及び「薬学的に受容可能な賦形剤」という表現は、任意且つ全ての溶媒、分散媒、コーティング、等張剤及び吸収遅延剤などを指す。薬学的に活性の物質に対するこのような媒体及び薬剤の使用は、当該分野において周知である。任意の従来の媒体又は薬剤が当該活性成分と適合しない場合を除いて、当該媒体又は薬剤の治療組成物中での使用が企図される。補助活性成分を組成物中に含めてもよい。適切な薬学的に受容可能な賦形剤を非限定的に挙げると、緩衝液、希釈剤、等張化剤、安定剤、抗酸化剤、防腐剤及びこれらの混合物がある。
【００２８】
「緩衝液」という用語は、薬学的に受容可能な賦形剤を指し、薬学調製物のｐＨを安定させる。適切な緩衝液は当該分野において周知であり、文献にも記載されている。薬学的に受容可能な緩衝液の内容物を非限定的に挙げると、グリシン緩衝液、ヒスチジン緩衝液、クエン酸塩緩衝液、コハク酸エステル緩衝液及びリン酸塩緩衝液がある。用いられる緩衝液から独立したｐＨの調製範囲として、約２〜約９の範囲あるいは約２．５〜約７の範囲、あるいは約３〜約５の範囲あるいは約３の当該分野において公知の酸又は塩基（例えば、コハク酸、塩酸、酢酸、リン酸、硫酸及びクエン酸、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウム）がある。適切な緩衝液を非限定的に挙げると、グリシン緩衝液、ヒスチジン緩衝液、２モルホリノエタンスルホン酸（ＭＥＳ）、カコジル酸塩、リン酸塩、酢酸、コハク酸エステル、及びクエン酸塩がある。一局面において、前記緩衝液はグリシン緩衝液である。別の局面において、前記緩衝液はヒスチン緩衝液である。前記緩衝液の濃度は、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、あるいは約２ｍＭ〜約４０ｍＭ、あるいは約５ｍＭ〜約２０ｍＭであり得る。
【００２９】
「希釈剤」、「フィラー」、「賦形剤」及び「薄め液」とは、活性薬剤と共に錠剤又はカプセルに付加される不活性成分である。希釈剤は、結合剤、（消化器系内における錠剤の崩壊を支援する）崩壊剤、又は調味料として用いられ得る。一局面において、希釈剤は固体である（例えば、でんぷん、セルロース誘導体、及びステアリン酸マグネシウム）。別の局面において、希釈剤は、液体（例えば、水、生理食塩水、及びブドウ糖液（例えば、５％））である。
【００３０】
「等張化剤」という表現は、製剤設計の等張性を調整するために用いられる、薬学的に受容可能な薬剤のカテゴリを指す。等張性とは、一般的には、溶液に対する（通常はヒト血清に対する）浸透圧を指す。製剤設計は、低張、等張又は高張であり得る。一局面において、製剤設計は等張である。等張製剤設計は、液体又は固体形態（例えば、凍結乾燥形態）から再構築された液体であり、比較相手としての他の溶液（例えば、生理食塩水及び血清）と同じ等張性を有する溶液を指す。適切な等張剤を非限定的に挙げると、塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトール、スクロース、グリセリン及び本明細書中に定義されるようなアミノ酸、糖類の群からの任意の構成要素、並びにこれらの組み合わせがある。いくつかの実施形態において、マンニトールの濃度は約１％〜約２０％（ｗ／ｖ％）であるか、あるいは約２％〜約１０％であるか、あるいは約２．５％〜約５％である。一局面において、マンニトールの濃度は約３％である。
【００３１】
「安定剤」という用語は、薬学的に受容可能な賦形剤であり、製造時、保管時及び使用時における活性薬学成分及び／又は製剤設計の化学的劣化及び／又は物理的劣化を保護する。安定剤を非限定的に挙げると、糖類、アミノ酸、ポリオール、界面活性剤、抗酸化剤、防腐剤、シクロデキストリン（例えば、ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン、スルホブチルエチルβシクロデキストリン、βシクロデキストリン、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ３０００、３３５０、４０００、６０００）、アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡ））がある。一局面において、安定剤は、亜硫酸ナトリウム、重硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、塩化ナトリウム、ＥＤＴＡ、ブドウ糖、ソルビトール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、グリセロール及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００３２】
本文脈において、「界面活性剤」という用語は、両親媒性構造を有する、薬学的に受容可能な有機物質を指す。すなわち、「界面活性剤」は、複数の対照的な溶解度傾向（典型的には、油溶性の炭化水素鎖及び水溶性のイオン基）を含む。界面活性剤は、表面活性部分の荷電に応じて、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤及び非イオン界面活性剤に分類することができる。界面活性剤は、多様な薬学組成物及び生体物質の調製湿潤剤、乳化剤、可溶化剤及び分散剤として用いられることが多い。本明細書中に記載の薬学製剤設計のいくつかの実施形態において、界面活性剤の量は、重量／体積パーセント（ｗ／ｖ％）によって表される。適切な薬学的に受容可能な界面活性剤を非限定的に挙げると、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｔｗｅｅｎ）のグループ、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｂｒｉｊ）、アルキルフェニルポリオキシエチレンエーテル（Ｔｒｉｔｏｎ-Ｘ）、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン共重合体（Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ）、又はドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）がある。ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、ポリソルベート２０、（Ｔｗｅｅｎ２０（登録商標）の名称で販売）及びポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０（登録商標）の名称で販売）を含む。ポリエチレンポリプロピレン共重合体を挙げると、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（コピーライト）Ｆ６８又はＰｏｌｏｘａｍｅｒ１８８（登録商標）の名称で販売されているものがある。ポリオキシエチレンアルキルエーテルを挙げると、Ｂｒｉｊ（登録商標）の名称で販売されているものがある。アルキルフェノールポリオキシエチレンエーテルを挙げると、Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ（登録商標）の名称で販売されているものがある。ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０（登録商標））及びポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０（登録商標））。
【００３３】
「抗酸化剤」とは、他の分子の酸化を遅延又は回避することが可能な分子を指す。酸化とは、物質からの電子を酸化剤へと移動させる化学反応である。酸化反応により発生した遊離基により開始した連鎖反応により、製品治療が不安定化し、最終的には製品活性に影響する。抗酸化剤は、遊離基中間体を除去することによりこれらの連鎖反応を終了させ、自身を酸化させることにより、他の酸化反応を抑制する。その結果、抗酸化剤は、往々にして還元剤、キレート剤及び脱酸素剤（例えば、チオール、アスコルビン酸又はポリフェノール）となる。抗酸化剤の非限定的例を挙げると、アスコルビン酸（ＡＡ、Ｅ３００）、チオ硫酸塩、メチオニン、トコフェロール（Ｅ３０６）、没食子酸プロピル（ＰＧ、Ｅ３１０）、三級ブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）、ブチルヒドロキシアニゾール（ＢＨＡ、Ｅ３２０）及びブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ、Ｅ３２１）がある。
【００３４】
「防腐剤」とは、微生物増殖又は望ましくない化学的変化による分解を回避するための天然化学物質又は合成化学物質であり、製品（例えば、食物、医薬品、塗料、生体サンプル、木材、）などに添加される。防腐剤添加物は、単独で用いることもできるし、あるいは、他の保存方法と併用してもよい。防腐剤は、バクテリア及び菌類の増殖を抑制する抗菌防腐剤であってもよいし、あるいは、構成要素の酸化を抑制する抗酸化剤（例えば、酸素吸収剤）であってもよい。一般的な抗菌防腐剤を挙げると、塩化ベンザルコニウム、安息香酸、クロルヘキシジン、グリセリン、フェノール、ソルビン酸カリウム、チメロサール、亜硫酸塩（二酸化硫黄、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸水素カリウムなど）、及び２ナトリウムＥＤＴＡがある。
【００３５】
ＩＩ．本発明を実施するための実施形態
ヒトの心房心筋細胞において、サルカルディン及び塩により、２６〜１００μＭの範囲内においてＩＣ５０が示されていることが報告されている。これらの発見に基づいて、イオンチャネルの有効な薬理学的封鎖をｉｎ  ｖｉｖｏで行うためには、抗不整脈効果をを得るために、濃度がこれらのＩＣ５０値を越えること（恐らくはこれらの値の２〜３倍）が必要となると考えられている。
【００３６】
サルカルディン硫酸塩の血漿濃度が上記のＩＣ５０の範囲に近いか又はこの範囲を上回った場合、副作用（例えば、血圧低下、ＱＴ延長及び心室収縮性への影響）を起こすことが分かっている。例えば、ミニ豚において１３．６μＭＣｍａｘ、霊長類において２１μＭＣｍａｘ、及びイヌにおいて２５μＭＣｍａｘである場合、血圧低下などの副作用がみられる。そのため、ＡＦに対して有効なサルカルディン硫酸塩の血液濃度を、厄介な副作用を引き起こすことなく達成することは不可能であることは、当業者であれば理解している。しかし、本発明を用いれば、これらの副作用を引き起こすことなく、サルカルディン又は薬学的に受容可能な塩によってＡＦを治療する方法が可能となる。
【００３７】
本発明の一局面によれば、心房細動（ＡＦ）を治療する方法が提供される。前記方法は、ＡＦに罹患しているか又はＡＦ罹患の危険性がある対象に対し、一定量の活性薬剤を含んだ組成物を投与する工程を含む。前記活性薬剤は、４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド（サルカルディン）又はその薬学的に受容可能な塩である。前記工程により、前記対象中の前記活性薬剤の最大定常状態血漿濃度（Ｃｍａｘ）が約１μＭ〜約２０μＭの範囲内になる。あるいは、前記対象中の前記活性薬剤のＣｍａｘは、約０．１μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、３μＭ、４μＭ又は５μＭ〜約２５μＭ、２０μＭ、１８μＭ、１５μＭ、１２μＭ、１０μＭ、９μＭ、８μＭ、７μＭ又は６μＭの範囲内である。
【００３８】
ＡＦの治療における薬理学的治療の目的は、治療しているのは急性ＡＦ又は発作性ＡＦであるか、正常洞律動に対する高速電気的除細動を誘導するのか、又は薬剤の長期投与によるＡＦ再発を回避するためなのかに応じて異なる。頻繁な再発歴の無い急性ＡＦ又は発作性ＡＦの患者の場合、目的は、典型的には単一回の薬剤投与又は制限された投与回数で、ＡＦエピソードのある患者の薬理学的電気的除細動を迅速に誘導することである。あるいは、再発性ＡＦエピソードを回避するには、長期の予防治療が必要になる。
【００３９】
急性ＡＦ又は発作性ＡＦの治療において電気的除細動を迅速に誘導するため、サルカルディン及びその薬学的に受容可能な塩の有効性はピーク血漿濃度の関数であるため、電気的除細動によって正常洞律動を得るための時間を得るために、高血漿レベルを、例えば、数分間〜１時間未満の最短期間にわたって維持する必要がある。その期間後、患者は、薬剤による血漿レベル治療を継続する必要なく、正常洞律動となるはずである (ただし、他の引き金となる事象に起因して将来において不整脈が再発した場合を除く)。ＡＦエピソードの既往症が無い又はほとんど無い患者の場合、再発リスクは低く、そのため、電気的除細動後の継続的薬剤治療は適用されない。急性ＡＦ又は発作性ＡＦの適応の場合、数日間から数ヶ月間から数年間にわたってＡＦ再発を一度に防ぐため、薬剤の血中濃度（血漿−時間曲線下における一定剤濃度領域）を長期間一定に保つ必要は無い。このような臨床的状況における薬剤の使用は、心臓を正常洞律動に迅速に戻すための電気的除細動の利用に類似している。
【００４０】
また、持続性ＡＦ又は頻発性再発ＡＦの患者の治療におけるサルカルディン及びその薬学的に受容可能な塩の有効性は、ピーク血漿濃度ではなく、血漿−時間曲線下の領域の関数であることも分かっている。ＡＦ既往及び頻繁なＡＦ再発のある患者の場合、上述した急性コホートの再発リスクがずっと高い。頻繁なＡＦエピソード又は長期（慢性）ＡＦエピソードを経た後の心房は、リモデルするようであり、その結果、患者において将来の事象が発生する危険性が増す。すなわち、臨床医が言うように、ＡＦによって次のＡＦが発生する。
【００４１】
このような慢性ＡＦ患者における再発性ＡＦを防ぐためには、薬剤濃度ピーク及びトラフ濃度を、投与期間にわたって、高血漿濃度に関連する有害事象の危険性を最小化しつつ最小限に薬理学的に活性な濃度を上回る血中濃度の範囲に維持する必要がある。そのため、急性／発作性ＡＦ及び再発性ＡＦ双方の治療において、例えば放出製剤設計の制御又はゆっくりとした静脈内点滴による長期間にわたる活性薬剤投与を行う必要がある。急性ＡＦ／発作性ＡＦのための医療設定における目的は、数分間〜１又は２時間にわたって高い血中濃度を達成することで、心臓が薬剤治療に反応して正常洞律動へと戻ることが可能なだけの十分な時間をとることである。高速ＩＶ押圧による薬剤投与の代わりにこのように薬剤投与を連続的な短期間の点滴で行うことで、電気的除細動が得られるだけの十分な期間にわたって高い血中濃度を達成しつつ、血漿濃度ピークが鈍化し、血圧低下の危険性が最小になる。
【００４２】
以下の例に示すような、薬剤のＣｍａｘを測定する従来技術が存在する。さらに、活性薬剤のＣｍａｘは、対象に対して投与される活性薬剤の量、前記対象の特性、投与経路及び他の関連情報に基づいて決定することができる。よって、本発明の上記実施形態一局面において、前記投与される活性薬剤の量は、約９０ｍｇ／ｋｇよりも低いか、あるいは約８０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ又は約０．１ｍｇ／ｋｇよりも低い。別の局面において、前記投与される活性薬剤の量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約８０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜約７０ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、又は約５ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇである。
【００４３】
前記投与される活性薬剤の量は、前記対象の特性（例を非限定的に挙げると、前記対象の種、性別及び年齢）に部分的に依存する。例えば種間における投与量の変換を行うための多様な数学アルゴリズムについて、例えば以下の文献に記載がある：ＧＵＩＤＡＮＣＥ  ＯＦ  ＩＮＤＵＳＴＲＹ−ＥＳＴＩＭＡＴＩＮＧ  ＴＨＥ  ＭＡＸＩＭＵＭ  ＳＡＦＥ  ＳＴＡＲＴＩＮＧ  ＤＯＳＥ  ＩＮ  ＩＮＩＴＩＡＬ  ＣＬＩＮＩＣＡＬ  ＴＲＩＡＬＳ  ＦＯＲ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ  ＩＮ  ＡＤＵＬＴ  ＨＥＡＬＴＨＹ  ＶＯＬＵＮＴＥＥＲＳ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  （Ｊｕｌｙ ２００５）、(ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／Ｄｒｕｇｓ／ＧｕｉｄａｎｃｅＣｏｍｐｌｉａｎｃｅＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ／Ｇｕｉｄａｎｃｅｓ／ｕｃｍ０６５０１４．ｈｔｍ）。よって、イヌに対する前記活性薬剤の１ｍｇ／ｋｇでの投与は、ヒトに対する約０．５４ｍｇ／ｋｇでの投与に相当し、イヌに対する前記活性薬剤の０．３ｍｇ／ｋｇでの投与は、ヒトに対する約０．１６ｍｇ／ｋｇでの投与に相当する。
【００４４】
さらに、前記活性薬剤量と及びＣｍａｘ及びＡＵＣとの間の変換率は、所与の投与経路及び投与様態に基づいて実験的に決定することができる。このような決定は、当該分野において従来からある。
【００４５】
上記したように、本発明の製剤設計の活性薬剤は、サルカルディン、４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミドの薬学的に受容可能な塩であり得る。以下、このような塩の調製について、反応化学を用いて説明する。
【００４６】
１．サルカルディンと有機酸又は無機酸との反応
アミン（例えば第３アミンＲ３Ｎ）が強無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸又はヨウ化水素酸）と反応すると、対応するアンモニウム塩Ｒ３ＮＨ＋Ｘ−（ＸはＣｌ、Ｂｒ、又はＩ）が発生する。一般的に、この反応を行う手順を述べると、先ずアミンを水性溶媒中に溶解させた後、僅かに過剰な強酸を前記アミンに付加する。典型的プロトコルにおいては、サルカルディンを水性溶媒又は水性−アルコール性溶媒中に溶解させた後、フラスコを氷浴中に入れて冷却する。この冷却攪拌溶液に対し、僅かに過剰な強酸を滴下する。前記酸の付加後、反応混合物を室温にし、濃縮させ、対応する塩を沈殿させ、その後この塩をフィルタリングにより分離する。約１．１当量の強酸を付加した場合、サルカルディンのモノ塩が形成され、約２．１当量の強酸を付加した場合、ビス塩が容易に得られる。
【００４７】
サルカルディンの有機酸塩（例えば酢酸塩）の合成は、水性有機溶媒システム（例えば、１．０〜２．０当量の酢酸を含む水−メタノール又は水−アセトニトリル溶媒システム）を用いた逆相高圧液体クロマトグラフィーカラムを通じて化合物を送ることにより、行うことができる。その結果、サルカルディンのモノ塩及びビス塩が形成される。以下の文献を参照されたい：Ｓｔｒｅｉｔｗｉｅｓｓｅｒ ｅｔ ａｌ. ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮ  ＴＯ  ＯＲＧＡＮＩＣ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ  ４ｔｈ  ｅｄ．（Ｍａｃｍｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．）、７３６ページ）。
【００４８】
２．サルカルディンとハロゲン化アルキルとの反応
一般的に、第４級ハロゲン化アンモニウムの調製は、アルキル又はハロゲン化アラルキルと適切な第３アミンとを非反応性有機溶媒中において反応させることにより、行うことができる。同様に、サルカルディンとアルキル臭化物又はアルキルヨウ化物とをエーテル又はテトラヒドロフラン中において室温で反応させると、メチルピロリジニウムカチオンの形成を介して、対応するメチル塩を形成することができる。反応物中のハロゲン化アルキルの化学量論により、形成される塩の種類が決定する。よって、１．０モルのハロゲン化アルキルを付加した場合、単一の対応するピロリジルメチルメチル塩が得られ、２．０モルのハロゲン化アルキルを付加した場合、ビス塩が形成される（Ｓｔｒｅｉｔｗｉｅｓｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．、同上、７３７ページを参照）。
【００４９】
３．サルカルディンのアルカリ金属塩の形成
サルカルディンのアルカリ金属塩を合成するには、スルホンアミドの‐ＮＨプロトンの抽出を可能にするための強塩基の使用が必要となる。そのため、水素化ナトリウムをサルカルディンの低温高速攪拌溶液へと非プロトン性無水溶媒（例えば無水テトラヒドロフラン）中で付加した場合、化１に示すようなナトリウム塩が形成される。以下の文献を参照：Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．、ＢＩＯＯＲＧＡＮＩＣ＆ＭＥＤ．ＣＨＥＭ．ＬＥＴＴＥＲＳ１６：３９２１−２６（２００６）。
【化１】
2013511473.tif 000001
【００５０】
スクラディン(ｓｕｃｒａｄｉｎｅ)溶液を含む低温丸底フラスコに対し、水素化ナトリウムのテトラヒドロフラン溶液を滴下することにより反応を行う。水素化ナトリウムの付加後、反応物を室温まで加熱し、攪拌する。その後、水素ガスが発生しなくなると、反応は完了である。
【００５１】
いくつかの実施形態において、前記対象に投与された組成物は、薬学的に受容可能な賦形剤又はキャリア又は他の薬剤を更に含む。前記組成物中の活性薬剤の量は、当業者によって用いられる範囲全体内において異なり得る。典型的には、前記組成物は、重量パーセント（ｗｔ％）ベースにおいて、製剤設計全体に基づいて、約０．０１〜９９．９９ｗｔ％の前記活性薬剤を含む。その他の残りは、１つ以上の適切な薬学賦形剤である。好適には、前記活性薬剤は、約１〜８０ｗｔ％のレベルで存在する。
【００５２】
本発明を実行するために適した薬学的に受容可能な賦形剤を非限定的に挙げると、緩衝液、希釈剤、等張化剤、安定剤、抗酸化剤、防腐剤及びこれらの混合物がある。適切な薬学的に受容可能な賦形剤の例を本明細書中に開示する。
【００５３】
いくつかの実施形態において、前記薬学的に受容可能な賦形剤は、緩衝液である。一局面において、前記緩衝液は、グリシン緩衝液である。別の局面において、前記緩衝液は、ヒスチジン緩衝液である。一局面において、前記緩衝液の濃度は、約１ｍＭ〜約１００ｍＭ、あるいは約２ｍＭ〜約４０ｍＭ、あるいは約５ｍＭ〜約２０ｍＭである。別の局面において、前記緩衝液の濃度は約１０ｍＭである。前記緩衝液のｐＨは、独立的に調整することができる。一局面において、前記緩衝液のｐＨは、約２〜約９、あるいは約２．５〜約７、約３〜約５あるいは約３である。
【００５４】
いくつかの実施形態において、前記薬学的に受容可能な賦形剤は、希釈剤である。一局面において、前記希釈剤は、生理食塩水である。別の局面において、前記希釈剤は、５％ブドウ糖である。
【００５５】
さらなるいくつかの実施形態において、前記薬学的に受容可能な賦形剤は、安定剤である。一局面において、前記安定剤は、ソルビトール、ＥＤＴＡ及びグリセロールからなる群から選択される。別の局面において、前記安定剤はソルビトールであり、前記組成物中に約３％の濃度で存在する。さらに別の局面において、前記安定剤はＥＤＴＡであり、前記組成物中に約０．０５％の濃度で存在する。さらに別の局面において、前記安定剤はグリセロールであり、前記組成物中に約２％の濃度で存在する。
【００５６】
前記投与される活性薬剤又は前記組成物の有効量は、実験的に決定することができ、特定の薬剤、治療又は軽減すべき疾病又は症状、治療対象の年齢、性別及び体重、製剤設計の投与計画、病状の深刻度、投与方法などによって異なり、これらは全て、当業者であれば容易に決定することができる。
【００５７】
前記活性薬剤又は前記組成物の投与は、当該分野において公知の方法によって行うことができる。一局面において、投与経路は、筋肉内注入である。別の局面において、投与経路は、静脈内注入である。別の局面において、投与経路は、皮下注入である。さらなる別の局面において、投与経路は、経口投与、直腸投与、口腔投与、膣内投与、舌下投与、経皮投与、吸入投与又は経鼻投与である。また、好適な経路は、レシピエントの状態及び年齢並びに治療対象疾病によって異なることが理解される。静脈内投与は、薬剤の血中濃度を高速及び一貫させるための好適な手段であり、経口投与、経鼻投与、口腔投与、舌下投与、経皮投与又は直腸投与又は急性又は発作性ＡＦに対する心変換のための好適な投与経路の他の手段に伴う変動を回避できる。再発性ＡＦの治療においては、毎日の投与が無期限ではないにしろ長期期間にわたって行われることが一般的であり、非経口投与方法はあまり望ましくない。そのため、特定の放出制御製剤を使用する場合、血流中への薬剤の吸収の制御及び継続を経時的に行うためには、経口投与経路又は経皮投与経路がより好適である。これらの投与経路は、患者の服薬順守の観点からも最も望ましい。投与における最も効果的な手段及び量を決定する方法は、当業者にとって公知であり、治療に用いられる組成物、治療目的、及び治療対象によって異なる。治療担当医師によって選択された投与レベル及びパターンは、投与を単回又は複数回行うことができる。適切な投与量の設計及び投与方法は、当該分野において公知である。
【００５８】
前記活性薬剤又は前記組成物の投与は、１回だけ行ってもよいし、あるいは、連続的に複数回行ってもよい。複数回の投与は、類似の投与量で行ってもよいし、あるいは、初回の投与量よりも後続投与量を少なくしたり、放出／送達を制御してもよい。投与の量及び頻度は、当該分野において公知の方法により決定することができ、継続リスクの危険性、活性成分の半減期、活性薬剤又は組成物の毒性などの要素によって異なる。
【００５９】
本発明の製剤設計の投与は、対象の１つの部位に対して行ってもよいし、あるいは対象の複数部位に対して行ってもよい。投与の量及び部位は、当該分野において公知の方法によって決定することができる。一局面において、前記投与は、対象の大腿部又は腕部における１回以上の静脈注射である。別の局面において、前記投与は、対象の大腿の後部における１回以上の筋肉内注射である。
【００６０】
本発明の方法及び製剤設計によって適切に治療される対象は、ヒトを含む哺乳類であり得る。ヒト以外の治療対象動物を挙げると、サル、ネズミ、イヌ、ウサギ科（例えばウサギ）、家畜、競技用動物及びペットがある。
【実施例】
【００６１】
本発明は、以下の例を参照すればさらに理解される。これらの例は、ひとえに本発明を例示するものである。本発明の範囲は、これらの例示的実施形態によって限定されない。これらの例示的実施形態は、本発明の単一の局面を例示するものに過ぎない。機能面において相当する任意の方法は、本発明の範囲内である。当業者であれば、上記の記載及び添付図面を参照すれば、本明細書中の記載の他に本発明の多様な改変を想起する。このような改変は、添付の特許請求の範囲内である。
【００６２】
実施例１．多様な種から分離された心房心筋細胞中の半最大阻害（ＩＣ５０）における抑制濃度
ウサギ心房及びヒト心房から得たＩＣ５０値（表１）並びに上記の開示から、心房組織中の高速及び低速Ｎａチャネル、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｉｋｒチャネル及びＩｔｏチャネルの有意義なイオンチャネル封鎖と、心房抗不整脈効果とを得るためには、目標血液濃度又は心臓組織濃度を２６μＭ〜１００μＭの範囲内に納める必要があることが分かる。
表１： ウサギ及びヒトの心房心筋細胞ＩＣ５０
【表１】
2013511473.tif 000002
【００６３】
実施例２．イヌにおける多様な投与レベルのサルカルディン硫酸塩の心臓血管に対する安全効果と達成された血中濃度
犬にモルヒネ投与（２ｍｇ／ｋｇ皮下）を行った後、約１０〜１９分後に麻酔を投与した。犬への麻酔は１％α−クロラロース（１００ｍｇ／ｋｇ静脈内）によって行い、その後α−クロラロースを一定点滴した（３５〜７５ｍｇ／ｋｇ／時間、ＩＶ）。２匹の健康な雌犬に対し、サルカルディン硫酸塩静脈内投与を１５分間にわたり、酢酸緩衝液系において投与量を１０、３０及び９０ｍｇ／ｋｇに徐々に上げて行い、投与間隔を６０分間空けて行った。薬剤投与後、犬に対し、心室、肺及び周辺についての血行動態変化の評価を行った。この評価は、Ｓｗａｎｚ  Ｇａｎｚカテーテル及び大腿部カテーテルの使用と、血液酸素飽和度、被験物質血中濃度、体温、血液生化学、血液学、ＥＣＧ及びヒスタミンレベルの監視とによって行った。
【００６４】
血行動態の結果
サルカルディン硫酸塩の全投与において、血行力学的効果を観測した。イヌに対するサルカルディン硫酸塩の初回点滴を１０ｍｇ／ｋｇで行った際、心拍数（ＨＲ）の急上昇（＋１９４％から＋２７１％）及び収縮性の急上昇（＋９６％から＋１０９％）を含む変化がみられた。投与直後、左心室端部の拡張圧力（ＬＶＥＤＰ）が初期上昇し、その後急降下した（−１５７％から−７１０％）。サルカルディン硫酸塩投与を１０ｍｇ／ｋｇで行った後、平均肺動脈圧力（ＭＰＡＰ）（＋３５％から＋７６％）及び心拍出量（ＣＯ）（＋８０から１３１％）も上昇した。同一期間において、２匹のうち１匹の動物において平均動脈圧が初期上昇（＋６６％）し、投与開始から１０分後において最大となった。しかし、どちらの動物においても、投与後期間において最終的に平均動脈圧（ＭＡＰ）が低下した（−３３％から−４１％）。点滴開始から約１０分後において最大効果がみられ、その後６０分の監視期間の終了時において徐々に基準へと戻った。ただし、ＨＲ、収縮性及びＬＶＥＤＰは前記監視期間全体において上昇したままであった。２回目の点滴（３０ｍｇ／ｋｇ）の開始時においても、同様の血行動態の変化がみられた。ただし、２回目の点滴においては、ＨＲ及び収縮性は投与時において点滴終了時まで若干低下した後、投与完了後に上昇した。９０ｍｇ／ｋｇ時において、最後の１５分間点滴の完了後、全動物を殺処分した。この最後の１５分間点滴において、心機能低下に起因する重篤な低血圧がみられた。
【００６５】
ヒスタミンプロファイリング
ヒスタミン分析結果によれば、前処理時では全動物において正常なヒスタミンレベルがみられた。被験物質投与後、双方のグループ及び全投与レベルにおいて、ヒスタミンレベルの上昇がみられた。サルカルディン硫酸塩が１０ｍｇ／ｋｇのとき、ヒスタミン血漿濃度が急上昇し、投与から５分後及び１０分後においてそれぞれ最大の１８７４ｎＭ及び１９１９ｎＭとなり、その際の前処理値はそれぞれ９．４８及び１４．３４１であった。その後、ヒスタミン血漿濃度は徐々に低下したが、６０分間の観察期間において基準値よりも高いままであった。その後のサルカルディン硫酸塩の投与における増加は、投与時又は投与後１０分後において最大となった増加よりも緩やかであった。３０ｍｇ／ｋｇにおいて、血漿濃度は２５１ｎＭ及び１８３ｎＭの最大レベルとなった。９０ｍｇ／ｋｇにおいては、最大レベルは９９ｎＭ及び６４ｎＭにとどまった。この反応は、恐らくは被験物質への予備照射後のマスト細胞微小体の枯渇に起因する。
【００６６】
サルカルディン硫酸塩投与後の血行動態変化は、投与後のヒスタミン放出に部分的に起因するが、抗ヒスタミン（ジフェンヒドラミン）による前処理ではこれらの血行力学的効果は部分的にしか改善しなかった（データは図示せず）。
【００６７】
心電図記録法
全ての動物において、ＱＴｃの投与依存性増加がみられた。サルカルディン硫酸塩での治療を１０ｍｇ／ｋｇにおいて開始してから５分間以内において、（およそ２０ミリ秒までの）若干のＱＴｃ延長がみられた。３０ｍｇ／ｋｇ点滴（およそ３５ミリ秒）の開始時において累積投与量に依存するＱＴｃ間隔延長がみられ、その後９０ｍｇ／ｋｇにおいてより顕著となった（基準ＱＴｃ値から約５０〜１２０ミリ秒への範囲）。また、全投与レベルにおいて、投与反応の証拠と共にＱＲＳ拡張がみられた。
【００６８】
薬物動態結果
各１５分間のサルカルディン硫酸塩の１０、３０及び９０ｍｇ／ｋｇにおける点滴で、通常、開始から１０分後にピークを迎えた平均ピークサルカルディン硫酸塩濃度はそれぞれ１．８、１１．２及び１００．１μｇ／ｍＬであった。これらの値は、約４、２４．６及び２１８μＭに変換される。
【００６９】
結論
Ｎａチャネル、Ｌ−Ｃａチャネル及びＩｋｒチャネルにおけるヒト心房心筋細胞のパッチクランプＩＣ５０値の低端範囲に近いピーク血漿濃度（２５μＭ）を達成したサルカルディン硫酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）の投与量において、平均動脈圧、頻脈、ＱＴ間隔延長の大幅な低下と、心室収縮性の変化とがみられた。心房パッチクランプ及びイヌ心臓血管安全及びＰＫ発見によれば、比較的短期間の薬剤点滴期間（≦１５分）におけるサルカルディン硫酸塩投与を用いた場合、血行動態及びＥＣＧに対する悪影響なしに、パッチクランプによって示される血漿レベルを心房細動に対する抗不整脈効果の薬理学的範囲内に収めることは不可能な場合がある。
【００７０】
実施例３．サルカルディン硫酸塩薬物動態パラメータ
ＰＯ投与を４０ｍｇ／ｋｇ（有効な経口投与範囲）で行ったイヌにおいて、ピークレベルは２．１μｇ／ｍＬ（４．６μＭ）であった。８ｍｇ／ｋｇ（有効範囲）におけるＩＶデータは、Ｃｍａｘ（表２、図１）とならなかったが、以下の表中の曲線をみれば、心室不整脈に対して有効な投与量をＩＶ投与した後、Ｃｍａｘは約１０μｇ／ｍＬとなったことが分かる。６０分間の点滴後、ＡＦイヌ有効性についての計画で想定されたように、また臨床投与経路からさらに分かるように、このＣｍａｘ値は大きく低下し、恐らくは５μｇ／ｍＬ（１１μＭ）を下回った。これらのＰＫデータ及び外挿結論は、１５分点滴後にＰＫを行ったＣＶ安全性調査と一致する。一般的に、サルカルディン硫酸塩の各１５分点滴を１０及び３０ｍｇ／ｋｇ（心室不整脈に対する有効投与量）で開始してから１０分間後、平均濃度がピークとなった。平均ピーク血漿濃度はそれぞれ、１．８（４．２μＭ）及び１１．２μｇ／ｍＬ（２４．６μＭ）であった（データは図示せず）。これらの値は、低投与量の場合においてずっと低くなったが、多様なイオンチャネル上の心房セルパッチクランプＩＣ５０全てには到達しなかった。しかし、平均動脈圧、頻脈、ＱＴ間隔延長の大幅低下と関連し、心室収縮性変化がみられた。
表２．経口投与及びＩＶ投与後のビーグル犬におけるサルカルディン硫酸塩の血漿ＰＫパラメータ
【表２】
2013511473.tif 000003
【００７１】
実施例４．霊長類中のサルカルディン硫酸塩の多様な投与レベルによる、心臓血管への安全性に対する効果、及び達成された血中濃度
雌カニクイザルに対し、モルヒネ（２ｍｇ／ｋｇ皮下）を投与した後、麻酔をかけた。サルへの麻酔は１％α−クロラロース（１００ｍｇ／ｋｇ静脈内）によって行い、その後α−クロラロースを一定点滴した（４０ｍｇ／ｋｇ／時間）。治療のおよそ９２〜９８分前に、低血圧のため、３０ｍｇ／ｋｇ／時間まで減らした。サルを加温パッド上に配置して、体温をおよそ３７℃で保持した。実験中、直腸温度計又は移植されたＳｗａｎＧａｎｚ（熱希釈カテーテル）を介して体温を監視した。サルに挿管を行い、人工呼吸器を装着して酸素補給を行って、酸素供給を正常な生理学的範囲内に維持した。前記動物に対する機械的酸素供給を１２呼吸／分及び１７〜１８ｃｍＨ２Ｏの圧力で行った。以下のパラメータを定期的に監視して、前記動物への適切な酸素供給を保証した（報告なし）：ＳｐＯ２、吸気及び呼気ＣＯ２、吸気Ｏ２及び呼吸数。
【００７２】
ＳｗａｎＧａｎｚ（熱希釈カテーテル）を静脈切開術を介して右太腿静脈へ挿入した後、心拍出量測定のために肺動脈内へと進展させた。血液ガス決定のために、カテーテルを動脈切開を介して左大腿動脈へ挿入した。別のカテーテルを左大腿部静脈に挿入して血液を収集し、トキシコキネティクス評価を行った。最後に、頚部左側にも切開を行って左頸動脈を露出させ、電子デュアル圧力センサカテーテル（Ｍｉｌｌａｒ）を動脈切開を介して配置し、左心室内へと進展させた。前記カテーテルを配置して、左心室血圧測定及び大動脈圧力を同時収集した。加えて、一時的なカテーテルを頭部静脈のいずれかに配置して、実験の間中ずっと乳酸化リンガーの投与を１０ｍＬ／ｋｇ／時間で行った。
【００７３】
外科的準備の後、血行動態パラメータ及び心電図パラメータを少なくとも１５分間において安定させた。その後、基剤対照及び被験物質を投与し、血行動態パラメータ及び心電図パラメータを監視した。ヒスタミン及び血漿ＰＫのデータを入手した。
【００７４】
血行動態の結果
サルカルディン硫酸塩投与により、投与に関連して心臓血管が変化した。１０ｍｇ／ｋｇにおいて、平均肺動脈圧力が上昇し（＋２５％から６９％）、比較的安定した心拍数（ＨＲ）（１０％内）及び収縮性低下（−４８％から−５５％）もみられた。これらの効果のうちほとんどは、被験物質投与直後にみられ、完了時においてピークとなった。次回投与前までに、全パラメータが正常値へ戻った。
【００７５】
サルカルディン硫酸塩の２回目の投与を３０ｍｇ／ｋｇで行ったところ、第１回目の投与と同様の変化に加えて、平均動脈圧降下（−６９％まで）及び平均肺動脈圧力の降下（−３１％から−８８％）がみられた。同一期間において、収縮性の降下（−６９％から−７７％）及び心拍数の降下（−２４％から−５４％）もみられた。同様に、点滴完了時において、心拍数は基準に戻り、収縮性はやや下がったままだった（−２８％から−２５％）。平均動脈圧は増加した（＋３２％から４３％）。平均肺動脈圧力は急上昇（＋２４５％まで）し、２匹の動物のうち１匹において大幅に上昇したままであった。
【００７６】
サルカルディン硫酸塩を９０ｍｇ／ｋｇにおいて点滴したところ、大幅な血圧低下及び収縮性低下が発生し、その結果、１５分点滴の終了前に動物は死亡した。
【００７７】
心電図記録法
どちらの動物においても、ＱＴｃＢの投与依存型増加がみられた。若干のＱＴｃＢ延長が双方の動物においてみられ（１９〜２０ミリ秒）、サルカルディン硫酸塩の１０ｍｇ／ｋｇでの治療から２分後にピークとなった。３０ｍｇ／ｋｇ点滴の開始時（６０〜１２３ミリ秒）において、ＱＴｃＢ間隔の累積投与量依存型延長が双方の動物においてみられ、その後、点滴完了から５分後に最大となった。ＱＴｃＢ延長は９０ｍｇ／ｋｇにおいてより顕著となり（基準ＱＴｃＢ値から増加して、７８及び１１２ミリ秒に達した）。
【００７８】
ＱＲＳ拡張は、全投与レベルにおいてもみられ、投与反応もみられた。１０ｍｇ／ｋｇにおいて、サルカルディン硫酸塩に起因して、ＱＲＳが基準から１１％及び２６％増加した。３０ｍｇ／ｋｇにおいて、ＱＲＳのさらなる延長がみられ、最大増加は基準から５９％〜１１９％の範囲であった。９０ｍｇ／ｋｇの点滴時において記録されたＱＲＳ間隔は、基準からの８８％及び１３３％の増加と共に最も大きく変化した。投与依存型ＱＲＳの拡張は、多チャネルブロッカーにおける予期される薬理学的観測である。
【００７９】
投与依存型ＰＲ間隔増加も双方の動物においてみられ、最初の増加は、１０ｍｇ／ｋｇにおいて双方の動物においてみられた（＋１８％及び＋３０％）。さらなる増加が３０及び９０ｍｇ／ｋｇにおいてみられた。１匹の動物（１６０２Ｂ）において、死亡直前に、心室補充収縮による洞房ブロックがみられた。これらの観察結果は全て、多イオンチャネルブロッカーの過度の薬理学的活性と適合する。
【００８０】
１匹の動物（１５０１Ａ）は、３０ｍｇ／ｋｇでの点滴時において右脚ブロック（ＲＢＢＢ）を示した。動物１６０２Ｂも、９０ｍｇ／ｋｇでの点滴時においてＲＢＢＢを示した。右脚ブロックは、恐らくは導通低下に起因してサルにおいて一般的にみられる。同様の心電図変化が、例えばジソピラミドなどの他の抗不整脈薬と関連して報告され、サルカルディン硫酸塩の過度の薬理学的特性と関連する。
【００８１】
ヒスタミンプロファイリング
目標収集時点からの顕著な逸脱なく、ヒスタミンレベル決定サンプルのための血液サンプルを収集した。
【００８２】
被験物質投与を１０ｍｇ／ｋｇで行った後、ヒスタミンレベルの顕著な増加はみられなかった。動物Ｎｏ．１５０１Ａにおいては、３０ｍｇ／ｋｇ点滴から１０分経過後において一過性増加がみられ、その後、９０ｍｇ／ｋｇ点滴開始時及び死亡時において再度増加した。動物Ｎｏ．１６０２Ｂにおいては、どの投与レベルにおいても顕著な増加はみられなかった。
【００８３】
薬物動態結果
サルカルディン硫酸塩の平均血漿濃度は、各１５分点滴を１０、３０及び９０ｍｇ／ｋｇにおいて開始してから１０分経過後に概してピークとなり、それぞれ９．８、７４．３及び８４５．５ｕｇ／ｍＬであった。これらの値は、２１．６、１６３．５及び１，８６０．１μＭに相当する。
【００８４】
結論
１５分以上の点滴プロトコルを用いて、サルカルディン硫酸塩の投与を１０ｍｇ／ｋｇで行ったところ、ピーク血漿濃度（２１μＭ）が目標範囲の下端となり、心房パッチクランプＩＣ５０（２６〜１００μＭ）によって示されるように心房不整脈に対して有効となり得、血行動態も若干変化した（例えば、心室圧力の低下や肺動脈圧力の増加）。この投与量を３倍にして３０ｍｇ／ｋｇとした結果、ピーク血漿レベルは１６３μＭとなり、薬剤が活性を有する全心房イオンチャネルの抑制に必要な最低目標濃度を若干上回った。この投与量、投与速度及び血漿濃度において、平均動脈圧（６７％）が若干低下し、心室収縮性がさらに低下した。ＱＴ間隔、ＱＲＳ及びＲＰ間隔の穏やかな延長が２１μＭ血漿レベルにおいてみられ、血漿濃度が１６４μＭのときに顕著となった。その結果、サルカルディン硫酸塩による血圧及び収縮性の低下並びにＱＴ間隔の拡張の効果が、ヒト心房パッチクランプデータに基づいた心房不整脈の治療のための治療範囲の下端において予測された血漿濃度においてみられた。このデータによれば、血行動態及びＱＴ間隔への悪影響を引き起こすことなく、心房不整脈に対して有効なサルカルディン硫酸塩の血液濃度を達成することはできない可能性がある。イヌの場合と異なり、血行動態に対する薬剤の影響は、霊長類におけるヒスタミン放出とは完全に無関係なようである。イヌの場合、ある程度の血行力学的効果（特に心拍数への影響）はヒスタミン放出に起因し得る。
【００８５】
実施例５．ミニ豚における多様な投与レベルのサルカルディン硫酸塩による心臓血管への安全効果、及び達成された血中濃度
動物に対し、モルヒネ（２ｍｇ／ｋｇ皮下）を投与した後、麻酔をかけた。動物への麻酔は１％α−クロラロース（１００ｍｇ／ｋｇ急速静脈内投与）によって行い、その後α−クロラロースの一定点滴をＩＶで２０ｍｇ／ｋｇ／時間から３０〜４０ｍｇ／ｋｇ／時間の一定速度まで徐々に増加させた。その後、被験物質の投与を行った。動物を加温パッド上に配置して、体温をおよそ３７℃で保持した。実験中、直腸温度計又は移植されたＳｗａｎＧａｎｚ（熱希釈カテーテル）を介して体温を監視した。動物に挿管を行い、人工呼吸器を装着して酸素補給を行って、酸素供給を正常な生理学的範囲内に維持した。その後、前記動物に対する機械的酸素供給を１１〜１３呼吸／分及びピーク吸気圧力（１８ｃｍＨ２Ｏ）で行った。以下のパラメータを定期的に監視して、前記動物への適切な酸素供給を保証した（報告なし）：ＳｐＯ２、吸気及び呼気ＣＯ２、吸気Ｏ２及び呼吸数。
【００８６】
ＳｗａｎＧａｎｚ（熱希釈カテーテル）を静脈切開術を介して右太腿静脈へ挿入した後、心拍出量測定のために肺動脈内へと進展させた。血液ガス決定のために、カテーテルを動脈切開を介して左大腿部動脈へ挿入した。別のカテーテルを左大腿静脈に挿入して血液を収集し、トキシコキネティクス評価を行った。最後に、頚部左側にも切開を行って左頸動脈を露出させ、電子デュアル圧力センサカテーテル（Ｍｉｌｌａｒ）を動脈切開を介して配置し、左心室内へと進展させた。前記カテーテルを配置して、左心室血圧測定及び大動脈圧力を同時収集した。加えて、一時的なカテーテルを頭部静脈のいずれかに配置して、実験時においてずっと乳酸加リンガーの投与を１０ｍＬ／ｋｇ／時間で行った。
【００８７】
外科的準備の後、血行動態パラメータ及び心電図パラメータを少なくとも１５分間において安定させた。その後、基剤対照及び被験物質を投与し、血行動態パラメータ、心電図パラメータ、ヒスタミンパラメータ及びＰＫパラメータを監視した。
【００８８】
血行動態の結果
サルカルディン硫酸塩投与により、投与関連変化が発生した。１０ｍｇ／ｋｇにおいて、収縮性の低下（−５１％から−５２％）、脈圧低下（−２６％から−３７％）が発生し、心拍数が若干増加した（＋１９％から２７％）。同一期間において、心拍出量も低下した（−１３％から−１６％）。これらの効果のうちほとんどは、被験物質投与開始の直後にみられ、完了時においてピークとなった。次回投与前までに、全パラメータが部分的に回復した。
【００８９】
サルカルディン硫酸塩の２回目の投与を３０ｍｇ／ｋｇで行ったところ、第１回目の投与と同様の変化がより大きな規模でみられた。収縮性の低下（−７６％から−７８％）、脈圧低下（−５６から−５９％）及び全身動脈圧力（収縮、平均及び拡張）が双方の動物においてみられた。これらの変化に加えて、心拍出量低下（−４５％から−４９％）及び心拍数増加（＋４０％から４１％）がみられ、これは、全身血圧低下に対する代償反応と思われる。第２回投与後、動脈圧力及び心拍出量は、６０分間の監視期間の終了時までに正常レベルへと戻った（心拍数は除く）。肺動脈圧力（ＰＡＰ）、肺血管抵抗（ＰＶＲ）及び全身血管抵抗（ＳＲＶ）の変化は、収縮性及び心拍出量の低下に続発するものと考えられる。
【００９０】
サルカルディン硫酸塩の点滴を９０ｍｇ／ｋｇで行ったところ、重篤な血圧低下及び収縮性低下を伴う心機能低下が発生し、その結果、１５分点滴時又はその終了前に動物は死亡した。
【００９１】
ヒスタミンプロファイリング
ヒスタミン分析結果によれば、双方の動物の前処理において、ヒスタミンレベルは正常であった。全投与量における被験物質投与後のヒスタミンレベルにおいても、顕著な増加はみられなかった。
【００９２】
心電図記録法
房室伝導に対する投与依存型の影響（例えば、ＱＲＳ複合持続時間、ＨＲ及びＱＴｃＣ間隔の増加）が、１０ｍｇ／ｋｇの投与開始時から片方の動物又は双方の動物においてみられた。動物１６０１Ｃにおいては、１０ｍｇ／ｋｇにおいて１５％のＱＴｃＣ延長がみられ、３０及び９０ｍｇ／ｋｇにおいて双方の動物において影響の増加が（３０％まで）みられた。投与依存型ＰＲ間隔の増加も双方の動物においてみられ、１０ｍｇ／ｋｇにおいて双方の動物において先ず延長がみられた（＋３８％及び＋１０％）。さらなる増加も３０及び９０ｍｇ／ｋｇにおいてみられた。同様の投与依存型パターンを描くＱＲＳ持続時間の増加が１０ｍｇ／ｋｇでの開始時から双方の動物においてみられた。これらの観察結果は全て、多イオンチャネルブロッカーの過度の薬理学的活性と適合する。
【００９３】
薬物動態結果
サルカルディン硫酸塩のピーク血漿濃度は、投与量増加と共に増加した。平均濃度は、各１５分点滴を１０、３０及び９０ｍｇ／ｋｇで開始してから１０分経過後に概してピークとなり、それぞれ６．２０、１９．９及び２５．６ｕｇ／ｍＬであった。これらの値を血漿濃度に変換すると、それぞれ１３．６、４３．８及び５６．３μＭとなる。
【００９４】
結論
サルカルディン硫酸塩の投与を１０ｍｇ／ｋｇで１５分間行ったところ、ピーク血漿濃度が発生し（１３．６μＭ）、濃度は目標範囲を下回り、心房パッチクランプＩＣ５０（２６〜１００μＭ）によって示されるように心房不整脈に対して有効となり得、血圧、収縮性及び心拍出量及び代償性頻脈も大幅に低下した。この投与量を３倍にして３０ｍｇ／ｋｇとした結果、ピーク血漿レベルは最大４４μＭとなり、薬剤が活性を有する全てではなく一部の心房イオンチャネルの抑制に必要な最低目標濃度内に収まった。この投与量及び血漿濃度において、動脈圧力、心室収縮性及び心拍出量がさらに低下し、頻脈が悪化した。１３．６μＭ血漿レベルにおいて、ＱＴ間隔、ＱＲＳ及びＲＰ間隔の緩やかな延長がみられ、血漿濃度の上昇と共により顕著となった。その結果、サルカルディン硫酸塩による血圧、収縮性及び心拍出量の低下並びにＱＴ間隔の拡張の効果が、ヒト心房パッチクランプデータに基づいた心房不整脈の治療のための治療範囲を下回ると予測された血漿濃度においてみられた。このデータによれば、血行動態及びＱＴ間隔への悪影響を引き起こすことなく、心房不整脈に対して有効なサルカルディン硫酸塩の血液濃度を達成することはできない。イヌの場合と異なり、血行動態に対する薬剤の影響は、ミニ豚においてヒスタミン放出とは完全に無関係なようである。イヌの場合、ある程度の血行力学的効果（特に心拍数への影響）はヒスタミン放出に起因し得る。
【００９５】
実施例６．投与速度依存型の血行力学的効果
サルカルディン硫酸塩による静脈内投与を１０分間点滴した場合における、覚醒ビーグル犬の平均血圧、心拍数、及び血漿ヒスタミン濃度への影響を調査した。３匹の目的繁殖ビーグル犬（雄及び雌、体重は１０．０〜１２．７Ｋｇ）に対するサルカルディン硫酸塩の静脈内投与を、投与量を徐々に増やしながら、１０分間点滴後に１５分間隔を空けて繰り返した（累積投与量：１〜４４ｍｇ／ｋｇ）。投与量を以下に示す：１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇのサルカルディン硫酸塩。各薬剤点滴期間完了後、１０分間隔を空けて心拍数、平均動脈血圧及びヒスタミン濃度を測定した（表３）。
表３：１０分点滴後における血行動態へのサルカルディン硫酸塩による影響のデータ要約
【表３】
2013511473.tif 000004
【００９６】
調査時において、１０分間のサルカルディン硫酸塩の静脈内投与は、投与量に依存した動脈血圧の低下と関連することが分かった。投与量に依存した動脈血圧の低下は、顔面及び耳部の紅斑炎症並びにじんま疹の発症を伴った。この効果は、恐らくはヒスタミンの肥満細胞保存量の枯渇に起因して、連続的注入の進行と共に弱くなった。血漿ヒスタミン濃度の投与依存型増加は、ＥＬＩＳＡアッセイによって記録されている。
【００９７】
３匹のさらなる動物に対し、サルカルディン硫酸塩（１４ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｖ．）の点滴を４５分間行った。この調査の目的は、サルカルディン硫酸塩の緩速点滴（４５分）によって心拍数及び血圧に影響が出るか否かについて調査することであった。結果を表４中にまとめる。このデータは、点滴時における安静時心拍数の漸進的増加を示す。血圧変化は、恐らくは安静時心拍数の代償性増加に起因して緩やかであった。よって、サルカルディン硫酸塩の緩速静脈内投与を１４ｍｇ／ｋｇの合計静脈投与量で行ったところ、ボーラス注入の場合のような安静時の血圧及び／又は心拍数の目立った変化はみられなかった。
表４：点滴を４５分間行った場合の、心拍数及び血圧に対するサルカルディン硫酸塩（１４ｍｇ／ｋｇ）の効果
【表４】
2013511473.tif 000005
【００９８】
麻酔ＭＩ後突然心臓死モデルの調査において、サルカルディン硫酸塩の血行力学的効果についても調査した。調査対象母集団は、１０匹の目的繁殖雌ビーグル犬（体重：１０．０〜１２．０Ｋｇ）からなる。これらの動物においては、左冠動脈前下行枝の９０分間閉塞の後に再かん流を行うことで、左心室壁虚血性傷害を発生させている。５匹の動物に対し、サルカルディン硫酸塩（１５ｍｇ／ｋｇ）の静脈内点滴を１０分間行うことで治療し、その他の５匹の動物は、０．９％塩化ナトリウム溶液（プラセボ）で治療したビークル犬（vehicle dogs）であった。治療後、１２０分間にわたり、最低平均動脈血圧を１５分毎に測定した。結果の概要を図２に示す。
【００９９】
サルカルディン硫酸塩（１５ｍｇ／ｋｇ）の１０分間点滴完了後１５分、３０分及び４５分経過後における平均動脈血圧は、サルカルディン硫酸塩の基準値（Ｐ＜０．０５、反復測定ＡＮＯＶＡ）よりもずっと低かった。ビークル動物における平均動脈血圧の有意な経時的変化は無かった。双方向ＡＮＯＶＡを用いた、Ｐ＜０．０５プラセボ対サルカルディン硫酸塩。サルカルディン硫酸塩点滴を１０分間行った後、動脈血圧が漸進的に戻った。このような血圧の漸進的回復は、薬剤前基準又は薬剤点滴後５０分後のプラセボ処理動物と同様であった。
【０１００】
実施例７．サルカルディン硫酸塩の短期点滴とジフェンヒドラミン前処理とを組み合わせた場合の麻酔犬における血行力学的効果
犬にモルヒネ投与（２ｍｇ／ｋｇ皮下）を行った後、約１０〜１９分後に麻酔を投与した。犬への麻酔は１％α−クロラロース（１００ｍｇ／ｋｇ静脈内）によって行い、その後α−クロラロースを一定点滴した（３５〜７５ｍｇ／ｋｇ／時間、ＩＶ）。２匹の健康な雌犬に対し、サルカルディン硫酸塩静脈内投与を１５分間にわたって酢酸緩衝液系において投与量を１０、３０及び９０ｍｇ／ｋｇに徐々に上げて行い、投与間隔を６０分間空けて行った。他に２匹の犬に対し、ジフェンヒドラミンでの前処理（被験物質点滴開始の３０分前に１ｍｇ／ｋｇを投与）後に被験物質を投与した。薬剤投与後、犬に対し、心室、肺及び周辺についての血行動態変化の評価を行った。この評価は、ＳｗａｎｚＧａｎｚカテーテル及び大腿部カテーテルの使用と、血液酸素飽和度、被験物質血中濃度、体温、血液生化学、血液学、ＥＣＧ及びヒスタミンレベルの監視とによって行った。
【０１０１】
血行動態の結果
グループ１（１０、３０及び９０ｍｇ／ｋｇにおけるサルカルディン硫酸塩）。全ての投与量のサルカルディン硫酸塩において、血行力学的効果がみられた。ジフェンヒドラミンでの１０ｍｇ／ｋｇでの前処理を行わなかった犬におけるサルカルディン硫酸塩の初期点滴では、心拍数（ＨＲ）の急上昇（＋１９４％から＋２７１％）及び収縮性の急上昇（＋９６％から＋１０９％）が見られた。投与直後に左心室端部拡張圧（ＬＶＥＤＰ）において初期増加がみられ、その後、急低下した（−１５７％から−７１０％）。サルカルディン硫酸塩を１０ｍｇ／ｋｇで投与した後、平均肺動脈圧（ＭＰＡＰ）（＋３５％から＋７６％）及び心拍出量（ＣＯ）（＋８０から１３１％）も増加した。同じ期間において、平均動脈圧の初期増加（＋６６％）が２匹のうち１匹においてみられ、これら２匹は、投与開始から１０分後に最大となった。しかし、どちらの動物も、最終的には投与後期間において平均動脈圧（ＭＡＰ）の低下を示した（３３％から−４１％）。点滴開始から約１０分経過後において最大効果が観測され、その後６０分間の監視期間の終了に向かうにつれて、徐々に基準値に戻っていった。ただし、ＨＲ、収縮性及びＬＶＥＤＰは、前記監視期間全体において例外的に上昇したままであった。２回目の点滴（３０ｍｇ／ｋｇ）の開始時においても、同様の血行動態の変化がみられた。ただし、２回目の点滴においては、ＨＲ及び収縮性は投与時において点滴終了時まで若干低下した後、投与完了後に上昇した。９０ｍｇ／ｋｇ時において、最後の１５分間点滴の完了後、全動物を殺処分した。この最後の１５分間の点滴において、心機能低下に起因する血圧急降下がみられた。
【０１０２】
グループ２の動物：サルカルディン硫酸塩をジフェンヒドラミン（１ｍｇ／ｋｇ）と共に１０、３０及び９０ｍｇ／ｋｇで投与した約３０分間後、サルカルディン硫酸塩を１０ｍｇ／ｋｇで治療した。ジフェンヒドラミン（Ｈ１拮抗薬）による前処理及びサルカルディン硫酸塩の投与（１０ｍｇ／ｋｇ）を施した動物については、Ｈ２レセプターによって媒介された血行動態変化がみられた。これらの変化は、グループ１の動物の変化と類似しているが、変化はグループ２の方が小さい。変化を挙げると、心拍数（ＨＲ）の急上昇（＋１２４％から＋１５７％）があるが、この上昇は継続しなかった。収縮性も急上昇しており（＋４１％から＋５８％）、平均肺動脈圧（ＭＰＡＰ）も急上昇しており（＋３０％から＋５７％）、心拍出量（ＣＯ）も急上昇しており（＋１０８から１８４％）、平均動脈圧ＭＡＰは若干低下している（−１２％から−１７％）。左心室端拡張圧（ＬＶＥＤＰ）については、投与直後に初期増加を示した後に急降下している（−１６３％から−４３５％）。点滴開始から約１０〜１５分経過後において最大効果が観測され、その後６０分間の監視期間の終了に向かうにつれて、徐々に基準値に戻っていった。ただし、２匹のうち１匹の動物のＭＡＰは低下したままだった。監視期間全体にわたって、収縮性の増加及びＬＶＥＤＰの低下がみられた。２回目の点滴開始（３０ｍｇ／ｋｇ）時においても、同様の血行動態がみられた。ただし、ＨＲ及び収縮性については、２回目の上昇がみられた（それぞれ、＋１５８から＋１７４％及び＋２５％から＋３３％）。これらの心臓血管の変化は、血漿ヒスタミンレベルと相関する。３０ｍｇ／ｋｇにおいて投与完了後、頻脈の深刻度が基準の２００％を上回った。９０ｍｇ／ｋｇにおいて、グループ１の動物について、最終の１５分間点滴の完了後、全ての動物を殺処分した。この最終の１５分間の点滴において、漸進的且つ大幅な血圧低下がみられた。
【０１０３】
本発明について上記の実施形態と関連して説明してきたが、上記の記載及び例は本発明を例示するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。本発明の関連する当業者にとって、本発明の範囲内の他の局面、利点及び改変が明らかである。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド又はその薬学的に受容可能な塩である一定量の活性薬剤を含む組成物であって、前記組成物は、心房細動（ＡＦ）を治療するために使用され、前記治療は、ＡＦに罹患しているか又はＡＦ罹患の危険性のある対象に、４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド又はその薬学的に受容可能な塩である一定量の活性薬剤を含む前記組成物を投与することを含み、これにより前記対象中の前記活性薬剤の最大定常状態血漿濃度（Ｃｍａｘ）が１μＭ〜２０μＭの範囲内となる、組成物。
【請求項２】
前記Ｃｍａｘは２μＭ〜１０μＭの範囲内である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記活性薬剤の量は３ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇの範囲内である請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記活性薬剤の量は５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内である請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記活性薬剤は４−メトキシ−Ｎ−（３，５−ビス−（１−ピロリジルメチル）−４−ヒドロキシベンジル）ベンゼンスルホンアミド硫酸塩である請求項１乃至４の何れか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物は薬学的に受容可能な賦形剤をさらに含む請求項１乃至４の何れか１項に記載の組成物。
【請求項７】
前記薬学的に受容可能な賦形剤は、緩衝液、希釈剤、安定剤及びこれらの組み合わせからなる群から選択される請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記投与することは、筋肉内注入、静脈内注入、皮下注入、又は経口投与、経皮投与、吸入投与、直腸投与、舌下投与、口腔投与、膣内投与又は経鼻投与によって行われる請求項１に記載の組成物。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図２】
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