【手続補正書】
【提出日】平成29年3月10日(2017.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号９（プレマスター）、配列番号１１（ＭＶＳ）、配列番号１３（ＷＶＳ）、配列番号１５（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表される核酸配列を含む、改変された弱毒生デング−２ウイルスをコードする核酸配列を含む核酸配列。
【請求項２】
配列番号１０（プレマスター）、配列番号１２（ＭＶＳ）、配列番号１４（ＷＶＳ）、配列番号１６（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表されるポリペプチド分子を含む、弱毒生デング−２ウイルスをコードする核酸配列によってコードされるポリペプチド分子。
【請求項３】
請求項１に記載の核酸配列、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項４】
請求項２に記載のポリペプチド分子、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項５】
対象においてデングウイルスに対する免疫応答を誘導するためのワクチンの製造における、請求項３または４に記載の組成物の使用。
【請求項６】
請求項１に記載の核酸配列をコードするベクター。
【請求項７】
配列番号１（プレマスター）、配列番号３（ＭＶＳ）、配列番号５（ＷＶＳ）、配列番号７（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表される核酸配列を含む、デング−１／デング−２キメラを含むポリペプチドをコードする核酸配列を含む核酸キメラ。
【請求項８】
配列番号２（プレマスター）、配列番号４（ＭＶＳ）、配列番号６（ＷＶＳ）、配列番号８（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表されるポリペプチド分子を含む、デング−１／デング−２キメラをコードする核酸配列によってコードされるポリペプチド分子。
【請求項９】
少なくとも１つの請求項７に記載の核酸キメラ、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１０】
少なくとも１つの請求項８に記載のポリペプチド分子、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１１】
対象においてデングウイルスに対する免疫応答を誘導するためのワクチンの製造における、請求項９または１０に記載の組成物の使用。
【請求項１２】
請求項７に記載の核酸配列をコードするベクター。
【請求項１３】
配列番号１７（プレマスター）、配列番号１９（ＭＶＳ）、配列番号２１（ＷＶＳ）、配列番号２３（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表される核酸配列を含む、デング−３／デング−２キメラを含むポリペプチドをコードする核酸配列を含む核酸キメラ。
【請求項１４】
配列番号１８（プレマスター）、配列番号２０（ＭＶＳ）、配列番号２２（ＷＶＳ）、配列番号２４（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表されるポリペプチド分子を含む、デング−３／デング−２キメラをコードする核酸配列によってコードされるポリペプチド分子。
【請求項１５】
請求項１３に記載の核酸キメラ、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１４に記載のポリペプチド分子、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１７】
対象においてデングウイルスに対する免疫応答を誘導するためのワクチンの製造における、請求項１５または１６に記載の組成物の使用。
【請求項１８】
請求項１３に記載の核酸配列をコードするベクター。
【請求項１９】
配列番号２５（プレマスター）、配列番号２７（ＭＶＳ）、配列番号２９（ＷＶＳ）、配列番号３１（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表される核酸配列を含む、デング−４／デング−２キメラを含むポリペプチドをコードする核酸配列を含む核酸キメラ。
【請求項２０】
配列番号２６（プレマスター）、配列番号２８（ＭＶＳ）、配列番号３０（ＷＶＳ）、配列番号３２（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せによって表されるポリペプチド分子を含む、デング−４／デング−２キメラをコードする核酸配列によってコードされるポリペプチド分子。
【請求項２１】
請求項１９に記載の核酸キメラ、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項２２】
請求項２０に記載のポリペプチド分子、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項２３】
対象においてデングウイルスに対する免疫応答を誘導するためのワクチンの製造における、請求項２１または２２に記載の組成物の使用。
【請求項２４】
請求項１９に記載の核酸配列をコードするベクター。
【請求項２５】
デング−１／デング−２キメラについては配列番号１、３、５、および７によって、弱毒生デング−２ウイルスについては配列番号９、１１、１３、および１５によって、デング−３／デング−２キメラについては配列番号１７、１９、２１、および２３によって、デング−４／デング−２キメラについては配列番号２５、２７、２９、および３１によって表される、デングウイルス又はデングウイルスキメラをコードするヌクレオチド配列を有する１つ以上の弱毒生デングウイルスと、薬学的に許容される担体とを含む免疫原性組成物。
【請求項２６】
前記弱毒生デング−２ウイルスは、配列番号１５の核酸配列によって表される、請求項２５に記載の免疫原性組成物。
【請求項２７】
前記組成物は全４種のデングウイルス血清型、四価組成物のうちの少なくとも１種の弱毒生ウイルスを含む、請求項２５に記載の免疫原性組成物。
【請求項２８】
黄熱ウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ウエストナイルウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、およびこれらの２つ以上の組合せのうちから選択されるフラビウイルスを含む免疫原性組成物をさらに含む、請求項２５〜２７のいずれか一項に記載の免疫原性組成物。
【請求項２９】
少なくとも１つの請求項１、７、１３および１９のいずれか一項に記載の核酸配列；または少なくとも１つの請求項２、８、１４および２０のいずれか一項に記載のポリペプチド配列あるいは少なくとも１つの請求項３、４、９、１０、１５、１６、２１、２２、および２５〜２８のいずれか一項に記載の組成物；および容器を含むキット。
【請求項３０】
配列番号１（プレマスター）、配列番号３（ＭＶＳ）、配列番号５（ＷＶＳ）、配列番号７（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せを含む１つ以上の核酸配列にコードされる１つ以上のポリペプチド配列を含み、前記核酸配列のうちの１つ以上がカプシドに包まれている、弱毒生デング−１キメラウイルス。
【請求項３１】
配列番号９（プレマスター）、配列番号１１（ＭＶＳ）、配列番号１３（ＷＶＳ）、配列番号１５（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せを含む１つ以上の核酸配列にコードされる１つ以上のポリペプチド配列を含み、前記核酸配列のうちの１つ以上がカプシドに包まれている、弱毒生デング−２ウイルス。
【請求項３２】
配列番号１７（プレマスター）、配列番号１９（ＭＶＳ）、配列番号２１（ＷＶＳ）、配列番号２３（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せを含む１つ以上の核酸配列にコードされる１つ以上のポリペプチド配列を含み、前記核酸配列のうちの１つ以上がカプシドに包まれている、弱毒生デング−３キメラウイルス。
【請求項３３】
配列番号２５（プレマスター）、配列番号２７（ＭＶＳ）、配列番号２９（ＷＶＳ）、配列番号３１（ＢＶＳ）、またはこれらの組合せを含む１つ以上の核酸配列にコードされる１つ以上のポリペプチド配列を含み、前記核酸配列のうちの１つ以上がカプシドに包まれている、弱毒生デング−４キメラウイルス。
【請求項３４】
薬学的に許容されるアジュバントをさらに含む、請求項３、４、１０、１５、１６、２１、２２、および２５〜２８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
ヌクレオチド２３８４位にヌクレオチドＣおよびＧを含む種の混合物をコードする配列番号７によって表される複数の核酸配列を含むデング−１核酸キメラであって、前記複数の核酸配列は、アミノ酸４８３位にアミノ酸ＧｌｙおよびＡｌａを含むデングウイルス種の混合物をコードする、デング−１核酸キメラ。
【請求項３６】
ヌクレオチド６４８１位にヌクレオチドＧおよびＣを含む種の混合物をコードする配列番号１３によって表される複数の核酸配列を含むデング−２核酸配列であって、前記複数の核酸配列は、ＮＳ４Ａ−３６にアミノ酸ＡｌａおよびＰｒｏを含むデングウイルス種の混合物をコードする、デング−２核酸配列。
【請求項３７】
ヌクレオチド７１５６位にヌクレオチドＣおよびＴを含む種の混合物をコードする配列番号１３によって表される複数の核酸配列を含むデング−２核酸配列であって、前記複数の核酸配列は、ＮＳ４Ｂ−１１１にＬｅｕおよびＰｈｅを含むデングウイルス種の混合物をコードする、デング−２核酸配列。
【請求項３８】
ヌクレオチド７５３８位にヌクレオチドＣおよびＴを含む種の混合物をコードする配列番号３０によって表される複数の核酸配列を含むデング−４核酸キメラであって、前記複数の核酸配列は、ＮＳ４Ｂ−２３８にＳｅｒおよびＰｈｅを含むデングウイルス種の混合物をコードする、デング−４核酸キメラ。
【請求項３９】
ヌクレオチド７３３７位にヌクレオチドＡおよびＧを含む種の混合物をコードする配列番号３０によって表される複数の核酸配列を含むデング−４核酸キメラであって、前記複数の核酸配列は、ＮＳ４Ａ−９９にＬｙｓおよびＡｒｇを含むデングウイルス種の混合物をコードする、デング−４核酸キメラ。
【請求項４０】
請求項１、７、１３、１９、および３５〜３９のいずれか一項に記載の核酸配列を含む単離細胞。
【請求項４１】
対象においてデングウイルスに対する免疫応答を誘導するためのワクチンの製造における、請求項１、７、１３、１９、２５〜２８および３５〜３９のいずれか一項に記載の組成物、核酸配列、または弱毒生デングウイルスの使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
ある実施形態では、複数のデングウイルス血清型のキメラデングウイルス構築物は、配列番号１、９、１７、および２５で示される核酸配列または配列番号２、１０、１８、および２６で示されるポリペプチド配列を有する継代７（Ｐ７）の弱毒化ウイルスまたはキメラウイルスを含むことができる。本願では、本明細書に記載の任意の弱毒生ウイルスを任意の代数で継代させたものが、提示されるデングウイルス（例えば血清型１〜４）に対する免疫応答を誘導するための免疫原性組成物に使用可能であると考えられる。これらの実施形態に従って、単離したＰ−８弱毒生ウイルスを含む免疫原性組成物を、選択された構築物に応じた１種以上のデングウイルス血清型に対する免疫原性応答を誘導するために、対象に投与することができる。さらに、弱毒生ウイルスは、これらのキメラウイルスのうちの１つ以上と組み合わせることができる。これは、その後の各細胞継代（例えば、アフリカミドリザルＶｅｒｏ細胞産生、以降「Ｖｅｒｏ細胞」）において単離／生成された弱毒生ウイルスの各々について考慮される。本願では、デングウイルスを産生可能なあらゆる細胞株（例えば、ＧＭＰに準拠して作られたセルバンク、ＦＤＡまたはＥＭＡが許可したもの）が、製造規模で、あるいは、デングウイルスに対するワクチンまたは免疫原性組成物中でのその後の使用のために本願で適切と考えられる態様で、いずれのウイルス構築物の継代にも使用されると考えられる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
フラビウイルスＮＳ３タンパク質は少なくとも２つの認識された機能を有する。すなわち、ウイルスプロテイナーゼおよびＲＮＡヘリカーゼ／ＮＰＴアーゼである。６９８ａａ長（ＤＥＮ−２ウイルス）ＮＳ３タンパク質は、アミノ末端セリンプロテアーゼドメイン（ＮＳ３−５１−Ｈｉｓ、−７５−Ａｓｐ、−１３５−Ｓｅｒ触媒三残基）およびそれに続くＲＮＡヘリカーゼ／ＮＴＰアーゼ機能に関する配列モチーフ（ＮＳ３−１９６−ＧＡＧＫＴ、−２８４−ＤＥＡＨ、−４５９−ＧＲＩＧＲ）を含む。ＤＥＮ−１、ＤＥＮ−２、またはＤＥＮ−３ウイルスのＮＳ３タンパク質における突然変異は、いずれも認識されたモチーフ内には生じなかった。ＤＥＮ−１  ＰＤＫ−１３ウイルスにおけるＮＳ３−５１０  ＴｒｙからＰｈｅへの突然変異は保存的である。野生型ＤＥＮ−２、−３および−４ウイルスはこの位置にＰｈｅを含むため、ＴｒｙからＰｈｅへの突然変異がＤＥＮ−１ウイルスの弱毒化に寄与することは考えにくい。ＤＥＮ−１  ＰＤＫ−１３ウイルスにおけるＮＳ３−１８２  ＧｌｕからＬｙｓへの突然変異は、大部分の蚊媒介性フラビウイルスでＡｓｐまたはＧｌｕとして保存された位置に生じており、弱毒化に何らかの役割を担っている可能性がある。この突然変異はＧＡＧＫＴヘリカーゼモチーフの１５アミノ酸残基上流に位置した。以前の報告で述べたように、ＤＥＮ−２  １６６８１ウイルスにおけるＮＳ３−２５０−Ｇｌｕは黄熱ウイルスを除く全ての蚊媒介性フラビウイルスで保存されている。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】変更
【補正の内容】
【配列表】
2016513970000001.app