【手続補正書】
【提出日】平成29年2月16日(2017.2.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
非修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントの可変重鎖(ＶＨ)に、配列番号２または７において１０４位に対応する位置に、グルタミン酸(Ｅ)なるアミノ酸置換（Ｙ１０４Ｅ）を含む修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
対応するアミノ酸位置は本抗体の可変重鎖と配列番号２または７に示す可変重鎖のアライメントにより決定され；
該修飾抗ＥＧＦＲ抗体、またはその抗原結合フラグメントが上皮成長因子受容体(ＥＧＦＲ)またはその可溶性フラグメントに特異的に結合し、非修飾抗体またはその抗原結合フラグメント中にＹ１０４Ｅ置換単独を含むか、またはＹ１０４Ｅに加えて最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸置換を含み；
修飾抗ＥＧＦＲ抗体、またはその抗原結合フラグメントが、ｐＨの差異以外同じ条件で測定したとき、ｐＨ７.４の存在下と比較して、ｐＨ６.０〜６.５(両端を含む)のｐＨの存在下で２.０を超えるＥＧＦＲに対する結合活性比を示し、
該非修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ｉ)配列番号２または７に示す可変重鎖と配列番号４、９または１１に示す可変軽鎖を含むセツキシマブまたはその抗原結合フラグメント；
ｉｉ)配列番号１に示す重鎖と配列番号３に示す軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメント；
ｉｉｉ）配列番号５に示す重鎖と配列番号３に示す軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメント；
ｉｖ）配列番号１２に示す重鎖と配列番号１３に示す軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメント；
ｖ）配列番号６に示す重鎖と配列番号８に示す軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメント；
ｖｉ）配列番号６に示す重鎖と配列番号１０に示す軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメント；
ｖｉｉ）ヒト化形態のｉ)〜ｖｉ）のいずれか
から選択されるものである、修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
非修飾抗ＥＧＦＲ抗体が
配列番号２に示す可変重鎖と配列番号４に示す可変軽鎖；または
配列番号７に示す可変重鎖と配列番号９または１１に示す可変軽鎖を含む、
請求項１に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
非修飾抗体またはその抗原結合フラグメントがヒト化されており、ヒト化形態の配列番号２に示す可変重鎖と配列番号４に示す可変軽鎖、またはヒト化形態の配列番号７に示す可変重鎖と配列番号９または１１に示す可変軽鎖を含む、請求項１または２に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４】
ヒト化非修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントが
配列番号１４に示す可変重鎖と配列番号１５に示す可変軽鎖；または
配列番号１６に示す可変重鎖と配列番号１７に示す可変軽鎖を含む、
請求項３に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項５】
完全長抗体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項６】
Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ(ａｂ’)２、一本鎖Ｆｖ(ｓｃＦｖ)、Ｆｖ、ｄｓＦｖ、二重特異性抗体、ＦｄおよびＦｄ’フラグメントから選択される抗原結合フラグメントである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項７】
ａ)配列番号７４もしくは７５に示すアミノ酸配列、または重鎖における１０４位に対応する位置でのＥでの置換以外に、配列番号７４もしくは７５に示す可変重鎖中に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸置換を含む可変重(ＶＨ)鎖；および
ｂ)配列番号４、９もしくは１１に示すアミノ酸配列、または配列番号４、９もしくは１１に示す可変軽鎖中に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸置換を含む可変軽(ＶＬ)鎖を含むか、または完全長ＩｇＧ抗体を含み、
該修飾抗ＥＧＦＲ抗体が
ａ)配列番号７２に示すアミノ酸配列、または重鎖における１０４位に対応する位置でのＥでの置換以外に、配列番号７２に示す重鎖中に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸置換を含む重鎖；および
ｂ)配列番号３、８、１０もしくは１３のいずれかに示すアミノ酸配列、または配列番号３、８、１０もしくは１３のいずれかに示す軽鎖中に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０アミノ酸置換を含む軽鎖、を含む、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項８】
ａ)配列番号７４、７７、７８、８０、８１、８３、８４、８６、８７、８９、９０、９２、９３、９５、９６、９８、９９、１０１、１０２、１０４、１０５、１０７、１０８、１１０、１１１、１１３、１１４、１１６、１１７、１１９、１２０、１２２もしくは１２３に示すアミノ酸配列を含む可変重(ＶＨ)鎖；および
ｂ)配列番号４、９もしくは１１に示すアミノ酸配列を含む可変軽(ＶＬ)鎖；または
ａ)配列番号７６、７９、８２、８５、８８、９１、９４、９７、１００、１０３、１０６、１０９、１１２、１１５、１１８もしくは１２１のいずれかに示す重鎖定常領域；および
ｂ）配列番号３、８、１０もしくは１３のいずれかに示す軽鎖定常領域；または
ａ）配列番号７４、７５、７７、７８、８０、８１、８３、８４、８６、８７、８９、９０、９２、９３、９５、９６、９８、９９、１０１、１０２、１０４、１０５、１０７、１０８、１１０、１１１、１１３、１１４、１１６、１１７、１１９、１２０、１２２もしくは１２３のいずれかに示すアミノ酸配列を含む可変重(ＶＨ)鎖；および
ｂ)配列番号１２５、１２６もしくは１２７に示すアミノ酸配列を含む可変軽(ＶＬ)鎖；または
ａ）配列番号７２、７６、７９、８２、８５、８８、９１、９４、９７、１００、１０３、１０６、１０９、１１２、１１５、１１８もしくは１２１のいずれかに示すアミノ酸配列を含む重鎖；および
ｂ）配列番号１２４に示すアミノ酸配列を含む軽鎖、を含む、
請求項１〜７のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項９】
修飾抗体またはその抗原結合フラグメントが、位置１０４位に対応する位置にグルタミン酸(Ｅ)でのアミノ酸置換を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
修飾抗体またはその抗原結合フラグメントがヒト化されている、請求項１〜９のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１１】
（ａ）重鎖における１０４位に対応する位置でのＥでの置換以外に、配列番号６１または６３に示す、または配列番号６１または６３に示す可変重鎖に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０アミノ酸置換を含む、可変重鎖および配列番号１８３、１８４または１８６に示す、または配列番号１８３、１８４または１８６に示す可変軽鎖に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０アミノ酸置換を含む、可変軽鎖；または
（ｂ）重鎖における１０４位に対応する位置でのＥでの置換以外に、配列番号５９に示す、または配列番号５９に示す重鎖に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０アミノ酸置換を含む、重鎖および配列番号１８１に示す、または配列番号１８１に示す軽鎖に最大１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０アミノ酸置換を含む、軽鎖、
を含む、請求項１０に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１２】
Ｖ２４Ｅ、Ｓ２５Ｃ、Ｓ２５Ｖ、Ｆ２７Ｒ、Ｔ３０Ｆ、Ｓ５３Ｇ、Ｄ７２Ｌ、Ｒ９７ＨおよびＱ１１１Ｐから選択されるアミノ酸置換を非修飾抗体の可変重鎖に含む、請求項１〜７、１０および１１のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１３】
アミノ酸置換がＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ；ＨＣ−Ｓ２５Ｃ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＬＣ−Ｉ２９Ｓ；ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ／ＬＣ−Ｉ２９Ｓ；ＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；ＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ；ＨＣ−Ｓ２５Ｖ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；ＨＣ−Ｓ２５Ｖ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ；ＨＣ−Ｓ２５Ｖ／ＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；ＨＣ−Ｓ２５Ｖ／ＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ；ＨＣ−Ｔ３０Ｆ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；ＨＣ−Ｔ３０Ｆ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ；ＨＣ−Ｔ３０Ｆ／ＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；ＨＣ−Ｔ３０Ｆ／ＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ；ＨＣ−Ｄ７２Ｌ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；ＨＣ−Ｄ７２Ｌ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐ；ＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｄ７２Ｌ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ；またはＨＣ−Ｓ５３Ｇ／ＨＣ−Ｄ７２Ｌ／ＨＣ−Ｙ１０４Ｅ／ＨＣ−Ｑ１１１Ｐである、請求項１２に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１４】
次のものから選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体もしくはその抗原結合フラグメント：
ａ)配列番号１３１もしくは１３３に示す可変重鎖および配列番号１５５、１５６もしくは１５８に示す可変軽鎖；
ｂ)配列番号１３１もしくは１３３に示す可変重鎖および配列番号１６２、１６３もしくは１６５に示す可変軽鎖；
ｃ)配列番号１３７もしくは１３９に示す可変重鎖および配列番号１５５、１５６もしくは１５８に示す可変軽鎖；
ｄ)配列番号１３１もしくは１３３に示す可変重鎖および配列番号１６９、１７０もしくは１７２に示す可変軽鎖；
ｅ)配列番号１３１もしくは１３３に示す可変重鎖および配列番号１７６、１７７もしくは１７９に示す可変軽鎖；
ｆ)配列番号１３１もしくは１３３に示す可変重鎖および配列番号１８３、１８４もしくは１８６に示す可変軽鎖；
ｇ)配列番号１３７もしくは１３９に示す可変重鎖および配列番号１８３、１８４もしくは１８６に示す可変軽鎖；
ｈ)配列番号１３１もしくは１３３に示す可変重鎖および配列番号１９０、１９１もしくは１９３に示す可変軽鎖；
ｉ)配列番号１４３もしくは１４５に示す可変重鎖および配列番号１８３、１８４もしくは１８６に示す可変軽鎖；
ｊ)配列番号１４９もしくは１５１に示す可変重鎖および配列番号１９７、１９８もしくは２００に示す可変軽鎖；
ｋ)配列番号１４３もしくは１４５に示す可変重鎖および配列番号１９７、１９８もしくは２００に示す可変軽鎖；
ｌ)配列番号１４９もしくは１５１に示す可変重鎖および配列番号２０４、２０５もしくは２０７に示す可変軽鎖；
ｍ)配列番号１４３もしくは１４５に示す可変重鎖および配列番号２０４、２０５もしくは２０７に示す可変軽鎖；
ｎ)配列番号２１１もしくは２１３に示す可変重鎖および配列番号２５３、２５４もしくは２５６に示す可変軽鎖；
ｏ)配列番号２１７もしくは２１９に示す可変重鎖および配列番号２５３、２５４もしくは２５６に示す可変軽鎖；
ｐ)配列番号２２３もしくは２２５に示す可変重鎖および配列番号２６０、２６１もしくは２６３に示す可変軽鎖；
ｑ)配列番号２２９もしくは２３１に示す可変重鎖および配列番号２６０、２６１もしくは２６３に示す可変軽鎖；
ｒ)配列番号２３５もしくは２３７に示す可変重鎖および配列番号２６７、２６８もしくは２７０に示す可変軽鎖；
ｓ)配列番号２４１もしくは２４３に示す可変重鎖および配列番号２７４、２７５もしくは２７７に示す可変軽鎖；
ｔ)配列番号２２３もしくは２２５に示す可変重鎖および配列番号２７４、２７５もしくは２７７に示す可変軽鎖；
ｕ)配列番号２２９もしくは２３１に示す可変重鎖および配列番号２７４、２７５もしくは２７７に示す可変軽鎖；
ｖ)配列番号２３５もしくは２３７に示す可変重鎖および配列番号２８１、２８２もしくは２８４に示す可変軽鎖；
ｗ)配列番号２４７もしくは２４９に示す可変重鎖および配列番号２８１、２８２もしくは２８４に示す可変軽鎖；
ｘ)配列番号２２３もしくは２２５に示す可変重鎖および配列番号２８１、２８２もしくは２８４に示す可変軽鎖；
ｙ)配列番号２２９もしくは２３１に示す可変重鎖および配列番号２８１、２８２もしくは２８４に示す可変軽鎖；
ｚ)配列番号２３５もしくは２３７に示す可変重鎖および配列番号２８８、２８９もしくは２９１に示す可変軽鎖；
ａａ)配列番号２４７もしくは２４９に示す可変重鎖および配列番号２８８、２８９もしくは２９１に示す可変軽鎖；
ｂｂ)配列番号２２３もしくは２２５に示す可変重鎖および配列番号２８８、２８９もしくは２９１に示す可変軽鎖；
ｃｃ)配列番号２２９もしくは２３１に示す可変重鎖および配列番号２８８、２８９もしくは２９１に示す可変軽鎖；
ｄｄ)配列番号２３５もしくは２３７に示す可変重鎖および配列番号２９５、２９６もしくは２９８に示す可変軽鎖；
ｅｅ)配列番号２４７もしくは２４９に示す可変重鎖および配列番号３０２、３０３もしくは３０５に示す可変軽鎖；
ｆｆ)配列番号２１１もしくは２１３に示す可変重鎖および配列番号３０２、３０３もしくは３０５に示す可変軽鎖；
ｇｇ)配列番号２１１もしくは２１３に示す可変重鎖および配列番号２８１、２８２もしくは２８４に示す可変軽鎖；
ｈｈ)配列番号２１１もしくは２１３に示す可変重鎖および配列番号２８８、２８９もしくは２９１に示す可変軽鎖。
【請求項１５】
完全長抗体であり、該抗体が次のものから選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１０〜１４のいずれかに記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント：
ａ)配列番号１２９に示す重鎖および配列番号１５３に示す軽鎖；
ｂ)配列番号１２９に示す重鎖および配列番号１６０に示す軽鎖；
ｃ)配列番号１３５に示す重鎖および配列番号１５３に示す軽鎖；
ｄ)配列番号１２９に示す重鎖および配列番号１６７に示す軽鎖；
ｅ)配列番号１２９に示す重鎖および配列番号１７４に示す軽鎖；
ｆ)配列番号１２９に示す重鎖および配列番号１８１に示す軽鎖；
ｇ)配列番号１３５に示す重鎖および配列番号１８１に示す軽鎖；
ｈ)配列番号１２９に示す重鎖および配列番号１８８に示す軽鎖；
ｉ)配列番号１４１に示す重鎖および配列番号１８１に示す軽鎖；
ｊ)配列番号１４７に示す重鎖および配列番号１９５を示す軽鎖；
ｋ)配列番号１４１に示す重鎖および配列番号１９５を示す軽鎖；
ｌ)配列番号１４７に示す重鎖および配列番号２０２に示す軽鎖；
ｍ)配列番号１４１に示す重鎖および配列番号２０２に示す軽鎖；
ｎ)配列番号２０９に示す重鎖および配列番号２５１に示す軽鎖；
ｏ)配列番号２１５に示す重鎖および配列番号２５１に示す軽鎖；
ｐ)配列番号２２１に示す重鎖および配列番号２５８に示す軽鎖；
ｑ)配列番号２２７に示す重鎖および配列番号２５８に示す軽鎖；
ｒ)配列番号２３３に示す重鎖および配列番号２６５に示す軽鎖；
ｓ)配列番号２３９に示す重鎖および配列番号２７２に示す軽鎖；
ｔ)配列番号２２１に示す重鎖および配列番号２７２に示す軽鎖；
ｕ)配列番号２２７に示す重鎖および配列番号２７２に示す軽鎖；
ｖ)配列番号２３３に示す重鎖および配列番号２７９に示す軽鎖；
ｗ)配列番号２４５に示す重鎖および配列番号２７９に示す軽鎖；
ｘ)配列番号２２１に示す重鎖および配列番号２７９に示す軽鎖；
ｙ)配列番号２２７に示す重鎖および配列番号２７９に示す軽鎖；
ｚ)配列番号２３３に示す重鎖および配列番号２８６に示す軽鎖；
ａａ)配列番号２４５に示す重鎖および配列番号２８６に示す軽鎖；
ｂｂ)配列番号２２１に示す重鎖および配列番号２８６に示す軽鎖；
ｃｃ)配列番号２２７に示す重鎖および配列番号２８６に示す軽鎖；
ｄｄ)配列番号２３３に示す重鎖および配列番号２９３に示す軽鎖；
ｅｅ)配列番号２４５に示す重鎖および配列番号３００に示す軽鎖；
ｆｆ)配列番号２０９に示す重鎖および配列番号３００に示す軽鎖；
ｇｇ)配列番号２０９に示す重鎖および配列番号２７９に示す軽鎖；および
ｈｈ)配列番号２０９に示す重鎖および配列番号２８６に示す軽鎖。
【請求項１６】
配列番号６１に示す可変重鎖および配列番号１８３に示す可変軽鎖を含むアミノ酸配列または配列番号５９に示す重鎖および配列番号１８１に示す軽鎖を含むアミノ酸配列を含む、請求項１１に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１７】
結合活性比が少なくとも２.０である、請求項１に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１８】
標的剤に直接的または間接的に結合した請求項１〜１７のいずれか一項に記載の修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、接合体。
【請求項１９】
次の成分：
(Ａｂ)、(Ｌ)ｑおよび(標的剤)ｍ
を含み、ここで、
接合体が次の式Ａｂ−[(Ｌ)ｑ−(標的剤)ｍ]を有し；
ＡｂはＥＧＦＲに結合する修飾抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントであり；
ＬはＡｂを標的剤に結合するためのリンカーであり；
ｍが１〜８であり；
ｑが０〜８であり；かつ
得られた接合体がＥＧＦＲに結合する、請求項１８に記載の接合体。
【請求項２０】
標的剤がタンパク質、ペプチド、核酸、細胞毒性部分、放射性同位体、化学療法剤、溶解性ペプチド、サイトカインまたは小分子である、請求項１８または１９に記載の接合体。
【請求項２１】
リンカーＬがＮ−スクシンイミジル−４(２−ピリジルチオ)プロパノエート(ＳＰＤＰ)、スクシンイミジル−４−(Ｎ−マレイミドメチル)シクロヘキサン−１−カルボキシレート(ＳＭＣＣ)およびＮ−スクシンイミジル−４−(２−ピリジルチオ)ペンタノエート(ＳＰＰ)から選択される、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の接合体。
【請求項２２】
治療部分がアウリスタチンまたはその機能的ペプチド類似体またはモノメチルアウリスタチンＥ(ＭＭＡＥ)もしくはＦ(ＭＭＡＦ)である誘導体である、請求項１８〜２１のいずれか一項に記載の接合体。
【請求項２３】
治療部分がＭＭＡＥであり；
ＭＭＡＥが構造
【化１】
2016536342.tif 000001
を有するかまたはその薬学的に許容される塩形態である、請求項２２に記載の接合体。
【請求項２４】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントをコードするヌクレオチド配列を含むか、または請求項１〜１７のいずれか一項に記載の抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントのいずれかの重鎖をコードするヌクレオチド配列を含む、核酸分子。
【請求項２５】
請求項２４に記載の核酸分子を含む、ベクター。
【請求項２６】
請求項２５に記載のベクターを１個または複数個含む、細胞。
【請求項２７】
軽鎖もコードする、請求項２５に記載の細胞を培養し、任意に、産生した抗体または抗原結合フラグメントを回収することを含む、抗ＥＧＦＲ抗体またはその抗原結合フラグメントの製造法方法。
【請求項２８】
請求項１〜１７のいずれかに記載の抗ＥＧＦＲ抗体または抗原結合フラグメントまたは請求項１８〜２３のいずれかに記載の接合体および
薬学的に許容される担体または添加物
を含む、医薬組成物。
【請求項２９】
対象における抗ＥＧＦＲ抗体での処置に応答性である状態の処置のための、請求項１〜１７のいずれかに記載の抗体もしくは抗原結合フラグメント、請求項１８〜２３のいずれかに記載の接合体、または請求項２８に記載の医薬組成物であって、抗ＥＧＦＲ抗体での処置に応答性である状態が腫瘍、癌または転移である、抗体もしくは抗原結合フラグメント、接合体または医薬組成物。
【請求項３０】
腫瘍が固形腫瘍である、請求項２９に記載の抗体もしくは抗原結合フラグメント、接合体または医薬組成物。