(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
レンズがアミン共役結合を介してポリエチレンオキサイドで被覆されたPMMAレンズであり、アミン被覆が３〜12の炭素原子を有するノルマルアルキルアミンまたはアリルアミンのプラズマ蒸着により形成され、そしてポリエチレンオキサイド被覆が、末端アルデヒド基と蒸着された被覆の基における活性第１アミンとの反応によりレンズ表面に付着したものであることを特徴とする改善された生的適合性を有する眼内レンズ。
【請求項２】
アミンがｎ−ヘプチルアミンである請求項１記載の眼内レンズ。
【請求項３】
レンズがアミン共役結合を介してポリエチレンオキサイドで被覆された軟質アクリレートレンズであり、アミン被覆が３〜12の炭素原子を有するノルマルアルキルアミンまたはアリルアミンのプラズマ蒸着により形成され、そしてポリエチレンオキサイド被覆が、末端アルデヒド基と蒸着された被覆における活性第１アミンとの反応によりレンズ表面に付着したものであることを特徴とする改善された生的適合性を有する眼内レンズ。
【請求項４】
アミンがｎ−ヘプチルアミンである請求項３記載の眼内レンズ。
【請求項５】
アクリレートが、少なくとも150％の伸びを有する共重合体であり、該共重合体が、第１のモノマーとして２−フェニルエチルアクリレートと、第２のモノマーとして２−フェニルエチルメタクリレートとの２つのモノマー、および複数の重合可能なエチレン性不飽和基を有する共重合可能な交差結合性モノマーよりなる請求項３記載の眼内レンズ。
【請求項６】
アクリレートが、第１のモノマーとして２−フェニルエチルアクリレートと、第２のモノマーとして２−フェニルエチルメタクリレートとの２つのモノマー、および交差結合性モノマーの1,4−ブタンジオールジアクリレートよりなる少なくとも150％の伸びを有する共重合体である請求項３記載の眼内レンズ。
【請求項７】
第１のモノマーが濃度65重量％で存在し、第２のモノマーが濃度30重量％で存在する請求項３記載の眼内レンズ。
【請求項８】
上記交差結合性モノマーが1,4−ブタンジオールジアクリレートである請求項３記載の眼内レンズ。
【請求項９】
さらに紫外線吸収性物質を含有する請求項３記載の眼内レンズ。
【請求項１０】
紫外線吸収性物質が２−（３′−メタリル−２′−ヒドロキシ−５′−メチルフェニル）ベンゾトリアゾールである請求項９記載の眼内レンズ。
【請求項１１】
レンズがアミン共役結合を介してポリエチレンオキサイドで被覆されたものであって、アミン被覆が３〜12の炭素原子を有するノルマルアルキルアミンまたはアリルアミンのプラズマ蒸着により形成され、そしてポリエチレンオキサイド被覆が、末端アルデヒド基と蒸着された被覆の基における活性第１アミンとの反応によりレンズ表面に付着したものであり、次いで該レンズがエチレンオキサイドで滅菌され、そして次いで水で抽出されたものであることを特徴とする改善された生的適合性を有する眼内レンズ。
【請求項１２】
アミンがｎ−ヘプチルアミンである請求項11記載の眼内レンズ。
【請求項１３】
レンズを次の工程により共役結合を介してポリエチレンオキサイドで被覆することよりなる改善された生的適合性を有する眼内レンズの製造方法：
１）レンズ表面に３〜12の炭素原子を有するｎ−アルキルアミンまたはアリルアミンをプラズマ蒸着して活性第１アミン層を形成し、
２）活性第１アミン層を有するアミン処理レンズを、アルデヒド末端ポリエチレンオキサイドと反応させ、
３）被覆レンズを安定化する。
【請求項１４】
ｎ−アルキルアミンがｎ−ヘプチルアミンである請求項13記載の方法。
【請求項１５】
安定化が、水素化硼素アルカリ金属塩を用いて被覆レンズを処理することによって行われる請求項13記載の方法。
【請求項１６】
アミンPEO被覆が厚さ５〜500オングストロームである請求項13記載の方法。
【請求項１７】
被覆レンズを次いでエチレンオキサイドで滅菌し、そして水で抽出して未反応のエチレンオキサイドを除去する請求項13記載の方法。
【発明の詳細な説明】
本発明は、国家保健機構（National Institutes of Health）によって授与された許可番号GM4011として政府の支持がなされている。米国政府は、発明についての権利を有している。
発明の背景
本発明は、眼内レンズに関し、そして特に生的適合性を改善するようにポリエチレンオキサイドで被覆された眼内レンズに関する。
背景技術
眼内レンズ（IOL）は眼科学の分野においてよく知られている。眼内レンズは、眼に外科的に移植された場合、白内障を病んでいる天然レンズの代わりに使用されることができる。また、そのようなレンズは、屈折の誤りを補正するために眼に置かれることができる。そのようなレンズの光学的部分は、種々の材料により形成される。一つの型のレンズは、ポリメチルメタクリレート（PMMA）から製造される、いわゆるハードレンズである。ハードプラスチックレンズは、優れた光学的特性および良好な機械加工性および研磨特性を有している。第２のクラスのレンズには、柔軟性シリコーンレンズが含まれるが、それは変色されやすい。第３のカテゴリーのレンズには、一般にヒドロゲルレンズと呼ばれる軟質レンズ（非シリコーン型）が含まれる。軟質レンズは、通常ポリHEMAから作製される。第４のカテゴリーのレンズには軟質アクリレートレンズが含まれる。
眼内レンズの移植は、特に白内障の処置において、実質的な外科的利点があるものとして認められる。しかしながら、眼内レンズの移植は、角膜内皮への損傷、眼の前方および後方セグメントの内部の炎症性反応、ならびにその他の問題を引き起こすので、それらの使用には未だ問題が存在している。眼内レンズが眼の中に挿入される時、挿入の仕組みにより、レンズに繊細な眼内組織が付着し、そしてその結果、これらの組織への損傷が直接に、または長期間にわたり引き続いて起こる。その場合、レンズは付着を引き起こし、そして眼内組織を損傷してレンズの除去および取換えが必要になる。レンズは、また、蛋白質を吸着し、そして「汚く」なる。
レンズは被覆材料で被覆することが当該技術において認められている。したがって、米国特許第4,170,043号には、水に徐々に溶解するフィルムで被覆された眼内レンズが開示されている。これは、IOLの移植に際しての内皮の損傷を防止するのに役立つ。この被覆は移植後約24時間以内に溶解する。
米国特許第4,731,080号には、被覆眼内レンズが開示されており、このレンズは、非汚染性の生的に適合可能な疎水性交差結合ビニル含有シリコーン重合体の被覆材料で被覆されている。
米国特許第5,080,924号には、ラジオ周波数プラズマ誘導グラフト化によって基体の表面を変性する方法が開示されている。この方法においては、眼内レンズの上に用いることができるが、第１の生的に適合可能な物質、好ましくは側鎖カルボン酸基またはアミノ基をもつものを、ラジオ周波数プラズマ誘導によって基体重合体コアの表面に共役的にグラフトさせる。次いで、第２の生的に適合可能な物質を交差結合剤を用いて第１の生的に適合可能な物質にグラフトさせる。この特許は、この方法においてポリエチレンオキサイド被覆剤が使用できることを提案していない。
一連の特許には、ポリエチレンオキサイドを含む種々の材料によって被覆されたコンタクトレンズが開示されている。そのような特許としては、特許第4,280,970号；第4,871,785号；第4,740,533号；第5,070,166号；および第5,096,626号があげられる。米国特許第4,280,970号には、コンタクトレンズにポリオキシエチレンをグラフトすることによって被覆することが開示されている。しかしながら、コンタクトレンズおよび眼内レンズは各々異なる問題を持つ異なる製品であり、そのためコンタクトレンズの問題の解決は、眼内レンズの問題の解決に役立てることができない。
改善された生的適合性を有する被覆された眼内レンズを提供するためには当該技術には問題が残っている。本発明は、ポリエチレンオキサイド被覆剤が共役結合を介して付着しているポリエチレンオキサイド被覆眼内レンズを提供することによって、この要求を満たすものである。
発明の概要
したがって、本発明の一目的は、改善された生的適合性を有する眼内レンズを提供することにある。
本発明の更に他の目的は、ポリエチレンオキサイド被覆剤をレンズに共役結合を介して付着させることによって達成することができる改善された生的適合性を有する眼内レンズを提供することにある。
本発明の更に他の目的は、ポリエチレンオキサイド被覆剤をレンズにアミン共役結合を介して付着させることによってレンズの生的適合性が改善された眼内レンズを提供することにある。
本発明の他の目的および利点は、その記述が進むにつれて明らかになるであろう。上記の目的および利点を満足させるものとして、本発明は、レンズがポリエチレンオキサイド被覆剤によってアミン共役結合を介して被覆された、改善された生的適合性を有する眼内レンズを提供する。ポリエチレンオキサイドは、レンズ表面において次の工程によって共役的に結合される。
１）プラズマ処理によって上記レンズに活性表面を形成し、
２）活性レンズ表面を共役結合を介してポリエチレンオキサイドと反応させ、そして
３）得られた被覆を安定化させる。
発明の記述
本発明は、被覆された眼内レンズに関する。眼内レンズは、ポリメチルメタクリレート（PMMA）またはアクリル系レンズから形成されたものを含む、重合体から形成された公知のハードレンズの如何なるものから形成されていてもよい。そのようなレンズは、当該技術において公知である。本発明は、米国特許出願第08/076,378号に記載されている如き、軟質アクリル系レンズの被覆を包含する。一実施態様において、レンズは、第１のモノマーが２−フェニルエチルアクリレートであり、第２のモノマーが２−フェニルエチルメタクリレートである２つのモノマーから形成された、少なくとも150％延伸された共重合体、および1,4−ブタンジオールジアクリレートの如き複数の重合可能なエチレン性不飽和基を有する共重合可能な交差結合性モノマーから形成される。第１のモノマーは65重量％の濃度で存在し、第２のモノマーは30重量％の濃度で存在させることができる。また、２−（３′−メタリル−２′−ヒドロキシ−５′−メチル−フェニル）ベンゾトリアゾールの如き紫外線吸収剤を含ませてもよい。本発明は、全ての型のレンズに適用可能である。上記した従来の特許の開示は、本発明が適用可能である種々の型の眼内レンズの開示および検討に関して、その開示に組み入れられる。
本発明によれば、そのようなレンズの生的適合性は、レンズをポリエチレンオキサイド被覆剤で被覆することによって実質的に改善される。「生的適合」という表現は、得られたポリエチレンオキサイドフィルムで被覆された眼内レンズが、眼に挿入されたときに、公知のレンズよりも一層生物学的に眼に適合されることを意味する。特に、本発明によってポリエチレンオキサイドで被覆された眼内レンズが蛋白質吸着に対して改善された抵抗性を有するという発見により、レンズの生的適合性が改善される。その結果、レンズが「非汚染性」であり、そして細胞付着に対して抵抗性であり、それゆえ、公知のレンズよりも一層生的適合性があるものである。
レンズはここで記載する特別な方法でポリエチレンオキサイドで被覆され、活性中間層を介してレンズ表面への共役結合が得られる。活性中間層を介する共役結合の使用は、レンズ表面に一層密着したポリエチレンオキサイド被覆を作り、そして蛋白質吸着および細胞付着に対して改善された抵抗性を有する均一な連続被膜を提供することが発見された。
本発明によれば、レンズは、まず、レンズ表面に活性被覆剤または層を供給して活性第１アミン層を形成する。好ましい処理は、第１アミンを含む重合体被覆剤のプラズマ付着によってレンズの上に活性層を形成することである。しかしながら、等価の活性中間層を用いてもよい。
第１アミン層は、好ましくは、レンズを、式RNH2（式中、Ｒは炭素原子３〜12のアルキルまたはアリル基である。）のアリルアミンまたは低級アルキルアミンと接触させることによって形成される。好ましくは、アルキルアミンまたはアリルアミンは、Ｒが炭素数５〜８のアルキル基である中間の鎖長を持つものであり、最も好ましくはｎ−ヘプチルアミンである。
アルキルアミンまたはアリルアミンは、レンズの表面に所望の方法で塗布することができる。しかしながら、アルキルまたはアリルアミンのレンズ上へのプラズマ付着によって活性第一アミン層を形成するのが好ましい。プラズマ付着は、例えば、米国特許第4,312,575号および第、4,656,083号において示されるように、一般に当該技術において知られており、そして、それらの開示は参照によって組み入れられる。
本発明によれば、レンズ上への第１アミンのプラズマ付着は、一般に２工程で実施される。まず、レンズを、気体雰囲気（例えば、アルゴン）が供給されている電気的グロー放電装置に置き、次いで気体雰囲気を電気的にグロー放電させて表面を清浄にする。次いで気体を除去する。第２の工程において、第１アミンの蒸気の存在下において、アミンを蒸着するかまたはプラズマを形成させ、そしてレンズの表面に約５〜300オングストロームの極薄被覆が形成される条件下で、プラズマ加熱が行われる。
レンズの表面をアミンで処理した後、アミン層を含むレンズ表面はポリエチレンオキサイドと反応させる。ポリエチレンオキサイドは、アミン被覆と反応性である末端基または保護基を持つべきである。アルデヒド末端ポリエチレンオキサイド類が特に好ましい。ポリエチレンオキサイドとレンズ表面に付着しているアミンとの還元剤の存在下における反応を通して、安定なポリエチレンオキサイド被覆が、形成された共役結合を介してレンズ表面に付着する。そのようなポリエチレンオキサイド類は当該技術において、例えば、Harrisによる刊行物「Polymer  Preprints」、32巻、154頁（1991）から公知である。
上記したように、アルキルまたはアリルアミンは、プラズマ蒸着により付着される。好ましい処理において、先ず眼内レンズを最良の結果が得られるようにアミン蒸着に先だってエッチングする。好ましくは、表面のエッチングは、アルゴンと接触することによって行われる。60〜120cm3/minの範囲のアルゴン流速および200〜300mTorrの室内圧力が好都合である。蒸着を行うに際して、眼内レンズをホールダーに入れ、そして所望のアルゴン流速を有するプラズマ室の中心に置き、アミン蒸着に先だってアルゴンエッチングを行う。アミンのための容器を、プラズマ室ユニットに接続する。次いでプラズマ室をその基準圧力まで排気し、そしてアルゴン流速の下で、短期間、例えば、60Wで６分間発生させる。アルゴンエッチングの後、プラズマ室をその基準圧力まで排気し、アミン蒸気を室に排出し、プラズマを発生させ、そして厚さ５〜500、好ましくは100〜300オングストロームの範囲になるまで蒸着を維持することが行われる。プラズマを消した後、室内条件を短期間、例えば、１〜５分間維持する。次いで室を大気圧条件にし、そしてサンプルを密封したマイクロ遠心チューブの如き容器に移す。
ポリエチレンオキサイド（PEO）、例えば、アルデヒド保護ポリエチレンオキサイドを緩衝液に、５〜50mg/mlの範囲の濃度に溶解し、そして好ましくは精製して粒状物を除去する。次いで、この溶液をアミン−プラズマ被覆眼内レンズを含む各マイクロ遠心チューブに加える。次いで、レンズ上の被覆の安定化を、緩衝液に10〜50mg/mlの濃度で溶解した水素化硼素アルカリ金属塩によってレンズを処理することにより行う。PEOアミン結合の水素化硼素アルカリ金属塩による還元により、５〜500オングストローム、好ましくは100〜300オングストロームの安定なPEO被覆が得られる。溶液の混合は、チューブをひっくり返すことによって好ましく行われる。
次いで、得られたサンプルを、低温、例えば25〜50℃に約10ないし30時間加熱する。好ましい処理において、安定化を繰り返し、そしてレンズを再び加熱する。各レンズは次いで脱イオン水中で洗浄し、水を除去する。
本発明において使用される好ましいポリエチレンオキサイドは、200〜100,000、好ましくは1500〜10,000の範囲の分子量を持つアルデヒド末端ポリエチレンオキサイドである。そのようなアルデヒド保護ポリエチレンオキサイド類は、当該技術、例えば、Harris、「Polymer  Preprints」、第32巻、154頁（1991）において公知である。しかしながら、如何なる反応性末端基を有するポリエチレンオキサイドでも本発明において用いることができる。
好ましい安定化剤は、水素化硼素アルカリ金属塩である、最も好ましくは、式NaCNBH3のシアノボロヒドリンナトリウムまたはカリウムであり、市場で入手可能な物質である。
本発明の重要な態様は、調製後の被覆レンズの滅菌に関する。レンズは、標準エチレンオキサイド滅菌および通気を用いて滅菌することができ、残留エチレンオキサイドを除去する。エチレンオキサイドを用いる滅菌は、好ましくは湿った雰囲気中で予め調湿を行った後、フッ化物溶剤中の10〜20％エチレンオキサイドと１〜４時間、10〜40psiおよび40〜60℃において接触させることよりなる。しかしながら、本発明によれば、滅菌に続く残留エチレンオキサイドの通気よりもむしろ水抽出の方が、ポリエチレンオキサイド皮膜の蛋白質および細胞拒否能力の損失が最小になることが発見された。水抽出は、レンズをレンズ当り１〜3mlの滅菌水と、約25〜60℃の温度に加熱しながら３〜９日の間接触させることよりなる。理論的には、水抽出は、ポリエチレンオキサイド鎖の転化を防止するように思われる。また、水は空気よりも少ない酸素を含んでいるので、ポリエチレンオキサイド分子の分裂が減少する。また、水抽出効率は、35ないし60℃の範囲の温度および３ないし14日の時間で増大することが分かった。6ppm程度の低い残留エチレンオキサイドレベルを達成することができる。更に、水で抽出されたエチレンオキサイドの副生物であるエピクロロヒドリンおよびエチレングリコールの残留レベルは、非常に低く、例えば、それぞれ10ppmおよび50ppmである。これは産業基準より以下であり、水または緩衝剤、例えば、BSSを入れたガラス抽出びんは、また最終的包装のために使用することができる。
得られる眼内レンズは、指示された改善された生的適合性を持ち、蛋白質吸着に対して増大した抵抗性を有し、レンズを非汚染性および細胞付着に対して抵抗性にする。
次の実施例は、本発明を説明するために示すものであるが、本発明はそれらに限定されるべきものではない。部は特記しない限り重量による。
実施例１
A.表面アミノ化
PMMA  IOL（6mm、平面−凸面レンズ、単一片またはモノフレックス−PMMAまたはポリプロピレン・ハプチックス（haptics））を各々バタフライレンズホルダーに入れ、次いでレンズホルダーを清浄なガラスラックに置く。このガラスラックをプラズマ室の中心に置かれたより大きなガラスラックの上に置く。
ｎ−ヘプチルアミン（5.0g）を250mL丸底フラスコに入れる。このフラスコをゴム製ストッパーを経てプラズマ室ユニットの前面に位置する計測バルブに接続する。ニードルバルブでヘプチルアミンフラスコを閉じ、プラズマ室を約13mTorrの基準圧力まで排気する。この状態を30分間保持する。
IOLを、ｎ−ヘプチルアミンの蒸着に先立ってアルゴンでエッチングする。90cm3/minのアルゴン流速および250mTorrの室内圧力において、プラズマを60Wにおいて６分間発生させる。アルゴンでエッチングした後、プラズマ室をその基準圧力まで排気する。
ｎ−ヘプチルアミンの蒸気をプラズマユニットの室に導入する。真空ポンプの速度を低下させ、そして室を10分間平衡を保たせる。プラズマを発生させ、そして膜厚モニターを作動させて蒸着を記録する。プラズマは膜厚モニターの読みが190オングストロームに達するまで維持する。プラズマを消した後、室内条件を２分間維持する。次いで真空ポンプの速度を最高に戻し、10分間維持する。室にアルゴンを返流させることによって大気圧条件にする。サンプルを、それぞれのホルダーから取り除き、それぞれPEO溶液を含むマイクロ遠心チューブに入れる。
B.PEO固定
燐酸塩／硫酸塩緩衝剤：
硫酸カリウム（K2SO4）                     7.838g
二塩基性燐酸ナトリウム（Na2HPO4）         0.060g
脱イオン化水                     最終体積が100mL
K2SO4を溶解するために加熱が必要である。最終pHは8.5〜9.0である。
メトキシ末端保護、ジチオールアルデヒド誘導の分子量5000（MPEG5KS2CHOで規定）のPEOは、Harris他、「Polymer  Preprints」、第32巻、154頁（1991）に示される方法にしたがって製造することができ、それを緩衝剤に10mg/mLの濃度に溶解する。溶液をガラスフィルター（粗い）で濾過して粒状物を除去する。MPEG5KS2CHO溶液（900μＬ）をプラズマ被覆IOLを含むマイクロ遠心チューブに加える。シアノ水素化硼素ナトリウム（NaCNBH3）を緩衝剤に20mg/mLの濃度に溶解する。この溶液100μＬをプラズマ被覆IOLを含むマイクロ遠心チューブに加える。各溶液をチューブを10回ひっくり返すことによって温和に混合する。NaCNBH3溶液は加水分解的に不安定であり、そして反応溶液への添加の直前に調製すべきである。
次いで試料を35℃で夜通し（16〜18時間）加熱する。NaCNBH3で処理を繰り返し、そして試料を更に４時間35℃に加熱する。各IOL試料を脱イオン化水140mLを含む３つのビーカーにおいて連続的な浸漬すすぎによって洗浄する。各IOL試料を次いで3mLの脱イオン化水に入れ、そして５分間音波処理する。次いでこの洗浄水を新鮮な脱イオン化水で置換し、そして音波処理を繰り返す。この最終の音波処理工程を繰り返す。（全部で３回の音波処理）。各IOLを洗浄溶液から取り出し、試料のIOLから過剰の水を除去し、次いで再包装する。
実施例２
生的相互作用の研究：
A.蛋白質吸着
フィブリノーゲンが眼内レンズを含む移植装置の生的適合性において重要な役割を果たすものとして、単一蛋白質およびマルチ蛋白質溶液からのその吸着を調査した。よう素125で放射線標識を入れた人間のフィブリノーゲンを用いて、IOL表面に吸着された蛋白質の量を測定した。蛋白質溶液にさらす前に、IOL試料（hapticsなし）を37℃においてBSS（基準化した塩溶液）中で１時間保持した。単一蛋白質の試験では、各IOLを125I−フィブリノーゲン５μg/mLを含むBSS溶液において37℃で１時間保持した。マルチ蛋白質の試験のためには、各IOLを、125I−フィブリーノーゲン、IgGおよびアルブミンの1:5:16混合物に37℃において１時間さらした。フィブリノーゲン濃度125μg/mL（マルチ蛋白質Ａ）および62.5μg/mL（マルチ蛋白質Ｂ）について調査した。これらの蛋白質濃度は、術後の人の水性体液レベルをまねて選択した。
蛋白質吸着の結果は、未被覆PMMA  IOL対照の上に吸着された量の部分として報告され、表１にまとめられている。単一蛋白質の試験結果では、ヘプチルアミン−プラズマ予備被覆は、未被覆PMMA対照に対して吸着フィブリノーゲンの量が限界的に増加し、一方、PEO被覆は、約85％まで減少することを示した。PEOで被覆されたIOLを、術後の人の疑似の水性体液における、より高い蛋白質濃度にさらした時に同様なレベルの減少が観察された。アルブミンおよびIgGの存在は吸着されたフィブリノーゲンの量に重大には影響しないようであった。
0003553954.tif 000002
B.免疫的金着色
IOL表面に吸着されたフィブリノーゲンのパターンを目に見えるようにし、PEO被覆の均一性について幾つかの推論を引き出すために、金を結合させた抗体を用いる方法が利用された。まず、IOL表面をフィブリノーゲンの溶液（単一蛋白質吸着）にさらした。そして、ついで、兎の抗人フィブリノーゲン抗体の存在下で培養した。続いて試料を山羊−抗兎IgG−金錯体と反応させ、銀粒子で増幅し、そして光学顕微鏡（倍率100〜400X）の下で観察した。金−銀の均一な被覆がPMMAおよびヘプチルアミン−プラズマ被覆表面の両者において観察され、一方、PEO表面には金がなく、殆どまたは全く吸着蛋白質がないことを示していると思われた。
C.細胞の相互作用
（ｉ）人マクロファージの活性化：
人マクロファージから過酸化水素の遊離を誘発する表面を用い、PEO被覆IOLに対する炎症反応のモデルとした。吸着蛋白質が活性化の程度に影響するものとして、試料を、マルチ蛋白質吸着研究について記載したものと同様な実験条件の下で、あらかじめ擬似術後水性体液にさらした。次の方法が行われる。培養した人マクロファージを無血清培地においてIOLの上に37℃で２時間植付け、次いで、フェノールレッド−ホルセラディッシュペルオキシダーゼ（horseradishperoxidase）溶液で37℃において１時間培養した。この溶液を取り出し、アルカリ性にした後、過酸化物濃度を630nmにおいて測定した。結果を、正規化された値（PMMAに対して）として報告し、表２にまとめた。その結果は、PEO被覆がPMMA  IOLに対する急性マクロファージ活性化を著しく減少することを示した。
0003553954.tif 000003
（ii）兎のレンズ上皮細胞の相互作用
移植組織片の表面から蛋白質を追い払うことに関して、固定化したPEOの他の機能が、最終的に装置を失敗に導くような細胞（マクロファージ、好中球、上皮細胞、繊維芽細胞等）の付着および成長を防止した。PEO被覆上への細胞の付着および成長のポテンシャルを評価するために、3H−チミジンを有糸核分裂兎レンズ上皮細胞（LEC）のDNAに結合させることを含む試験法を利用した。この試験法は、後嚢の混獨化を防止するPEO被覆の能力を評価する方法として意図したものではない。簡単にいえば、この試験法は、培養したLECを、５％の血清および3H−チミジンを含む培地において被覆されたおよび未被覆のIOLの両者の光学表面に植付け、次いで37℃において２日間培養することよりなる。細胞は、次いで２％グルタルアルデヒドに固定し、それらの放射能のレベルを測定した。
蛋白質吸着のLECの成長に及ぼす役割を調査するために、その試験法を、裸の表面ならびに予め模擬術後水性体液にさらした表面について行った。表３に示すように、PEO被覆は、蛋白質が予め表面に吸着されているか否かにかかわらず、LECの付着および成長を維持することができなかった。フェイス−コントラスト光学顕微鏡による表面の試験では、PEO表面に僅かに少量の丸い細胞が現れたが、一方、PMMAおよび組織−培養ポリスチレン対照では、広がった細胞の十分に合流した層が観察された。丸まった細胞は、それらが基質表面に付着し拡がる能力のないことに起因する。合流した層において、細胞は、それらの自然多角形の形態になった。PMMAに蛋白質を予め吸着させた場合、表面での細胞がより一層成長するということを注目するのは興味のあることであった。
0003553954.tif 000004
実施例３
滅菌の研究
ポリエチレンオキサイド被覆IOLは、相対湿度60％の雰囲気中で１時間の予備調湿の後、12％エチレンオキサイド（フレオン中）で22〜24psiおよび46℃において２時間滅菌した。次いで、滅菌された各レンズを3mlの滅菌水に移し、60℃に７日間加熱した。次いでレンズをこの溶液中で使用するまで保存した（RTにおいて）。
表に示されるフィブリノーゲンの吸着試験の結果は、水性抽出が被覆剤の効力を回復することを示した。
結果
0003553954.tif 000005
本発明は好ましい実施態様を参照して記述した。しかしながら、その明白な改変が当業者において明らかになるから、本発明がそれらに限定されるものと考えるべきではない。