(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式（１）
【化１】
0003586504.tif 000011
で表されるセスキテルペン化合物。
【請求項２】
請求項１記載の化合物を有効成分とする抗菌剤。
【請求項３】
請求項１記載の化合物を含有する口腔用組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、う蝕、歯周病及び口臭等の原因菌の生育を著しく阻害し、う蝕及び歯周病に有効に作用するセスキテルペン化合物、これを有効成分とする抗菌剤及びこれを含有する口腔用組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
う蝕及び歯周病は、口腔内の疾患であり、いずれも特定の細菌による感染症であることが知られている。ストレプトコッカス・ミュータンスはヒトのう蝕病巣や歯垢の中に見出され、う蝕発生において重要な役割をはたす。この菌種はショ糖から菌体外酵素によってグルカンとよばれる粘着性の高い高分子多糖体を産生し、歯のエナメル質表層に強く定着し歯垢を形成する。歯垢に生息する微生物群は糖代謝により酸を産生し、う蝕が誘発される。
【０００３】
一方、歯周病は作用因子、環境及び宿主からなる多因性疾患である。この中で最も病因的な役割を果たすのは細菌であり、近年の研究によりいくつかの病原菌及びその病原性因子等が報告されている。中でもポルフィロモナス・ジンジバリスは、歯周炎患者の歯周ポケットから高頻度に分離されることから、歯周病の中で最も多い成人性歯周炎の病原菌として有力視されている。
【０００４】
また、口臭の原因は主としてフゾバクテリウム・ヌクレイタムなどの嫌気性細菌がメチオニン代謝により産生するメチルメルカプタンである。
う蝕、歯周病及び口臭を予防するためには、病巣においてこれらの菌類の生育を阻害することが重要であり、これらの菌類に対して有効な抗菌性物質の応用が効果的である。
【０００５】
従来、このような抗菌性物質として、テトラサイクリン、ミノサイクリン等の抗生物質が用いられてきた。
【０００６】
しかしながら、これらの抗生物質は、作用が強力である反面、副作用が強く、更に耐性菌が出現する等の欠点があり、日常的に使用できるものではなかった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
従って本発明の目的は、う蝕、歯周病及び口臭の原因となる細菌に対し強い抗菌活性を持ち、副作用が少なく、日常的に使用できる抗菌剤及びこれを含む口腔用組成物を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
斯かる実情に鑑み、本出願人は、すでに副作用の心配がなく、古くから漢方薬として用いられている天然物たるウコン（Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ  Ｌ．）の抽出物が、う蝕、歯周病菌に対して強い抗菌活性を有することを見出し特許出願した（特開平４−５２２２号公報）。本発明者らはより強力な抗菌活性をもつ物質を得るべく更に研究を行った結果、ウコンの抽出物中に強力な抗菌活性を有する下記式（１）で表される化合物を見出し本発明を完成した。
【０００９】
すなわち本発明は、次の式（１）
【００１０】
【化２】
0003586504.tif 000002
【００１１】
で表されるセスキテルペン化合物、これを有効成分とする抗菌剤及びこれを含有する口腔用組成物を提供するものである。
【００１２】
【発明の実施の形態】
上記式（１）で表されるセスキテルペン化合物は、本発明者らによってウコンより初めて単離されたものであり、この化合物がう蝕、歯周病、口臭の原因となる菌に対して優れた抗菌性を示すことを見出したのも本発明者が初めてである。
【００１３】
本発明のセスキテルペン化合物（１）は、ウコンに含まれているので、これから単離することができる。また化学合成によりこの化合物を製造することもできる。
【００１４】
上記植物から、セスキテルペン化合物（１）を単離するには例えば、上記植物の抽出物よりクロマトグラフィーにて分取することが好ましい。
すなわち乾燥させたＣｕｒｃｕｍａ属植物を粉砕し、水、アルコール、グリコール類、アセトンなどの親水性有機溶媒、ジエチルエーテルなどのエーテル類、酢酸エチルなどのエステル類、クロロホルムなどのハロゲン化有機溶媒、ベンゼン、トルエンなどの芳香族炭化水素類、ペンタン、ヘキサンなどの炭化水素系溶媒、又はこれらの混合溶液を用いて粗抽出液を得る。粗抽出液から溶媒を除去して得た粗抽出物を、水、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、アセトニトリル、アセトン、メチルエチルケトン、クロロホルム、ジエチルエーテル、酢酸エチル、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、石油エーテルより選ばれる少なくとも一種類の溶媒を溶出溶媒として、ＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ−２０、ＴＳＫＧＥＬ  ＨＷ−４０などのポーラスポリマー、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０などのセファデックス、ポリアミド、セルローズ、逆相系シリカゲル、シリカゲルなどを担体に用いたカラムクロマトグラフィー、分取、ＨＰＬＣ、調製薄層クロマトグラフィーなどの分画法に付すことによりセスキテルペン化合物（１）を得る。
【００１５】
本発明の口腔用組成物は、上記のセスキテルペン化合物（１）を有効成分として含有せしめたものであり、この含有量は、０．０００１〜１０重量％（以下、単に「％」という）、特に０．００１〜５％とすることが好ましい。
【００１６】
本発明の口腔用組成物は上記必須成分の他、本発明の効果を損なわない範囲で通常用いられている口腔用ビヒクルを配合し、トローチ、粉歯磨、練歯磨、液状歯磨、液体歯磨（デンタルリンス）、洗口剤（マウスウォッシュ）、うがい薬、歯肉マッサージクリーム、キャンディー、チューインガム等の形態とすることができる。このような口腔用ビヒクルとしては、研磨剤、粘結剤、湿潤剤、界面活性剤、香料、甘味料、防腐剤、色素、水、殺菌剤、水溶性フッ化物及びその他の有効成分等が挙げられる。
【００１７】
ここで研磨剤としては歯磨用リン酸水素カルシウム、炭酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム、不溶性メタリン酸ナトリウム、メタリン酸カリウム、無水ケイ酸、含水ケイ酸、ケイ酸アルミニウム、ケイ酸ジルコニウム、ベントナイト、ゼオライト、酸化アルミニウム、水酸化アルミニウム、レジン及びこれらの混合物が挙げられる。粘結剤としてはカルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、アルギン酸塩、カラギーナン、アラビアゴム、ポリビニルアルコール、キサンタンガム、トラガントガム、デンプン、ポリアクリル酸ナトリウム等が挙げられる。湿潤剤としてはポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ソルビトール、グリセリン、マルチトール、キシリトール等が挙げられる。
【００１８】
界面活性剤は、発泡剤又は油状物質の安定化剤として用いられるものである。好ましい界面活性剤の例としては、アルキル硫酸ナトリウム、アルキルリン酸エステル、アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム、Ｎ−アシルザルコシン酸ナトリウム、Ｎ−アシルグルタミン酸塩、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンポリプロピレンブロック共重合体（プルロニック型）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグリコシド類、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アルキルジメチルアミンオキサイド、アルキルベタイン類等が挙げられる。
【００１９】
香料としてはスペアミント油、ペパーミント油、ウインターグリーン油、サッサフラス油、丁子油、セージ油、ユーカリ油、マヨナラ油、肉桂油、タイム油、レモン油及びオレンジ油等の天然香料；及びｌ−メントール、アネトール、カルボン、オイゲノール、チモール、サリチル酸メチル等の合成香料が挙げられる。
【００２０】
甘味料としてはサッカリン、サッカリンナトリウム、ステビオサイド、ネオヘスペリジルジヒドロカルコン、ベルラルチン、ｐ−メトキシシンナミックアルデヒド、グリチルリチン酸塩、アスパルテーム（アスパルチルフェニルアラニンメチルエステル）等が挙げられる。防腐剤としては安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラヒドロキシ安息香酸エステル、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、ソルビン酸、イソプロピルメチルフェノール等が挙げられる。殺菌剤としてはクロルヘキシジン類、第４級アンモニウム塩、トリクロサン、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン等が挙げられる。水溶性フッ化物としてはフッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム等が挙げられる。その他の有効成分としては、クロロフィル化合物、塩化ナトリウム、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ニコチン酸エステル、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、アズレン、塩化リゾチーム、ヒノキチオール、β−グリチルレチン酸、グリチルリチン酸ジカリウム、プロテアーゼ、他の生薬抽出物等が挙げられる。
【００２１】
これらの口腔用ビヒクルの配合量は口腔用組成物の形態によって異なり、液体組成物の場合には当該液状組成物には前記の口腔用ビヒクルのうち、研磨剤を除くすべてのビヒクルが配合できるが、基本的には界面活性剤を０．０５〜１０％、湿潤剤を１〜３０％、アルコール及び水を５０〜９６％含有するのが好ましい。ここで水：アルコールの比率は重量比で１：１〜１：０、特に５：１〜１００：１が好ましい。
【００２２】
ペースト状の組成物の場合には、前記口腔用ビヒクルの全てが配合できるが、基本的には研磨剤を１０〜７５％、粘結剤を０．５〜５％、湿潤剤及び水を１０〜８５％含有するのが好ましい。ここで、研磨剤は、練歯磨の場合には２０〜７５％、液状歯磨の場合には１０〜３０％が好ましい。
【００２３】
前記口腔用ビヒクルのうち、香料及び甘味料は合計で０．０１〜５％配合するのが好ましい。また、本発明口腔用組成物のｐＨは４〜１１、特に５〜１０の範囲内とすることが好ましい。
【００２４】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明は、これら実施例に限定されるものではない。
【００２５】
製造例１（ウコンからセスキテルペン化合物（１）の単離）
ウコン原体（粉末）２．０ｋｇをヘキサン２リットルで室温にて抽出を２回行い、濾過後濃縮して粗抽出物（Ｋ１００４Ａ  ５１．３ｇ）を得た。粗抽出物４９．３ｇをヘキサン１リットルに溶解したのち、当量の９０％メタノール水で３回分配抽出して得た９０％メタノール水層を濃縮した（画分Ｋ１００４Ｍ  ２９．６ｇ）画分Ｋ１００４Ｍ  ２１．５ｇを逆相フラッシュクロマトグラフィー（ＹＭＣ社製  ＯＤＳ−Ａ  水／メタノール／クロロホルム系）に供して、メタノール溶出区を濃縮した（画分Ｋ１００６Ｄ  １７．６ｇ）。画分Ｋ１００６Ｄ  ９．５ｇを中圧順相クロマトグラフィー（メルク社製  キーゼルゲル６０  ２３０−４００メッシュ  ヘキサン／酢酸エチル系）に供し、ヘキサン：酢酸エチル＝２０：１、１５：１、１０：１溶出区を濃縮した（画分Ｋ１０２８Ｇ  ２１９．２ｍｇ）。画分Ｋ１０２８Ｇ  ２１２．９ｍｇを更にＨＰＬＣ（ＹＭＣ  ＰＡＣＫＣ８  １０μｍ  ２５０×２０ｍｍ、９５％メタノール水、流速５ｍｌ／ｍｉｎ、検出ＵＶ２２０ｎｍ）に供し、画分Ｋ１０４２Ｂを２３．１ｍｇ得た。全量を調製薄層クロマトグラフィー（メルク社製  キーゼルゲル６０Ｆ２５４  Ａｒｔ．１１７９８、ヘキサン：酢酸エチル＝６：１）に供し、単離化合物Ｋ１０４３Ａを２０．０ｍｇ得て、化合物１と同定した。
機器分析結果
〔α〕Ｄ２０  １８９．５°（ｃ＝０．６５ＣＨＣｌ３）
ＦＡＢ−ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）＋２３３
２００ＭＨｚ  １Ｈ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ３）；１．１２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ），  １．９４（ｓ，３Ｈ），
２．１２（ｓ，３Ｈ），  ２．３３（ｓ，３Ｈ），  ３．１５（ｄｑ，Ｊ＝７．１，３．１Ｈｚ，１Ｈ），  ３．７０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），
４．３０（ｄｄ，Ｊ＝５．５，３．１Ｈｚ，１Ｈ），  ６．０９（ｍ，１Ｈ），  ７．１３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），
７．２４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）
５０ＭＨｚ  １３Ｃ−ＮＭＲδ（ＣＤＣｌ３）；１４．０，  ２１．０，  ２１．４，  ２８．０，  ４２．４，  ８０．５，  １１９．８，
１２７．６，  １２９．０，  １３６．１，  １４０．８，  １５９．４，  ２００．２
【００２６】
試験例１（抗菌性試験）
ヘミン及びメナジオンを添加したＢＨＩ液体培地（Ｄｉｆｃｏ社製）を調製し、滅菌後、本発明化合物（１）及びチモール（比較化合物）を倍々に段階希釈して各濃度になるように添加した。
試験菌として、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ＪＣ２（Ｓｍ）、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＡＴＣＣ  ３３２２７（Ｐｇ）、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍ  ＡＴＣＣ  ２５５８６（Ｆｎ）、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ  ＡＴＣＣ  ６９１９（Ｐａ）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＩＦＯ  ３９７２（Ｅｃ）を選び、それぞれ約１０６ＣＦＵ／ｍｌになるように試験培地に接種した。
Ｓｍ、Ｐｇ、Ｆｎ、Ｐａは嫌気グローブボックス内（Ｎ２：Ｈ２：ＣＯ２＝８０：１０：１０）３７℃で２日間培養し、Ｅｃは好気的に３７℃で２日間培養し、発育の認められない薬剤の最小濃度（ＯＤ６００が０．１以下）を求めた。
結果を表１に示す。
【００２７】
【表１】
0003586504.tif 000003
【００２８】
その結果、表１に示すように、本発明化合物は、う蝕、歯周病、口臭、ニキビの病原菌に対して顕著な抗菌効果を有し、一般的な腸内細菌であるエシェリヒア・コリにはほとんど効果を示さなかった。
【００２９】
実施例１
下記組成の各成分を混合した後、打錠機を用いて円盤状に圧縮成形し、１錠の直径が１８ｍｍで重量が１．５ｇのトローチ剤（口中清涼剤）を得た。
【００３０】
【表２】
0003586504.tif 000004
【００３１】
実施例２
下記組成の各成分を混合し、粉歯磨剤を得た。ここで、下記表における吸着デキストリンはｌ−メントールをペパーミント油に溶解後、多孔質デキストリンと共にヘンシェルミキサーで攪拌し、吸着させながら整粒調製したものを用いた。吸着デキストリン３．０％の内容は、多孔質デキストリン２．２％、ｌ−メントール０．４％、ペパーミント油０．４％である。
【００３２】
【表３】
0003586504.tif 000005
【００３３】
実施例３
下記組成の各成分を脱気混合し、ペースト状の練歯磨を得た。
【００３４】
【表４】
0003586504.tif 000006
【００３５】
実施例４
下記組成の各成分を脱気混合し、液状歯磨を得た。
【００３６】
【表５】
0003586504.tif 000007
【００３７】
実施例５
下記組成の各成分を攪拌混合し、洗口液を得た。
【００３８】
【表６】
0003586504.tif 000008
【００３９】
実施例６
下記組成の各成分を加熱溶解しながら混合し、更に板状に引き延ばし、その後冷却乾燥固化させることによりチューインガムを得た。
【００４０】
【表７】
0003586504.tif 000009
【００４１】
実施例７
下記糖成分を精製水に溶解させ、これを１４５℃まで煮詰めた後、１００℃以下に冷却し、その後下記の他の成分を添加し、冷却固化させることによりキャンディーを得た。
【００４２】
【表８】
0003586504.tif 000010
【００４３】
【発明の効果】
本発明の化合物はう蝕病原菌であるストレプトコッカス・ミュータンス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）、歯周病原因菌であるポルフィロモナス・ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）、口臭原因菌であるフゾバクテリウム・ヌクレイタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、ニキビ原因菌であるプロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）  の生育を抑える効果を有し、腸内細菌であるエシェリヒア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）にはほとんど効果を示さない。従って、これを含有する抗菌剤及び口腔用組成物は、う蝕、歯周病、口臭の予防及び治療に優れた効果を示す。