【手続補正書】
【提出日】平成29年2月28日(2017.2.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）または（Ｉｃ）：
2016521291.tif 000001
2016521291.tif 000002
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000003
各Ｙは、互いに独立してハロ基、ＳＯ3Ｈ、Ｃ1-4アルキル基、置換Ｃ1-4アルキル基、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2であり；
各Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
各Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成し；
ｎは、１〜６であり；
２つのＹ置換基は、互いに結合して、５〜７個の環原子を含む環を形成してもよく；及び
少なくとも１つのＹは、ＯＨまたはＮＲ1Ｒ2の何れかである）
で表される化合物。
【請求項２】
式（Ｉｂ）：
2016521291.tif 000004
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000005
各Ｙは、互いに独立してハロ基、ＳＯ3Ｈ、Ｃ1-4アルキル基、置換Ｃ1-4アルキル基、またはＮＲ1Ｒ2であり；
各Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
各Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成し；
ｎは、１〜６であり；
２つのＹ置換基は、互いに結合して、５〜７個の環原子を含む環を形成してもよく；及び
少なくとも１つのＹは、ＮＲ1Ｒ2である）
で表される化合物。
【請求項３】
前記芳香環が、１個のＯＨまたはＮＲ1Ｒ2及び５個以下のハロ基により置換されている、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
前記ハロ基が、フルオロ基またはクロロ基である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
少なくとも１つのＹが、ＳＯ3Ｈである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項６】
式（ＩＩ）：
2016521291.tif 000006
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000007
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物、または、
式（ＩＩＩ）：
2016521291.tif 000008
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000009
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物、または、
2016521291.tif 000010
2016521291.tif 000011
2016521291.tif 000012
からなる群から選択される化合物。
【請求項７】
式（Ｖ）：
2016521291.tif 000013
または式（ＶＩ）：
2016521291.tif 000014
または式（ＶＩＩ）：
2016521291.tif 000015
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000016
各Ｙは、互いに独立してＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
各Ｒ1は、互いに独立してＨ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
各Ｒ2は、互いに独立してＨ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物。
【請求項８】
Ｘが、ＣＮである、請求項１〜７の何れか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘが、
2016521291.tif 000017
である、請求項１〜７の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙが、ＮＲ1Ｒ2である、請求項６〜９の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｙが、ＮＨ2である、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｙが、ＯＨである、請求項５〜８の何れか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
インビトロ（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）のサンプル中の発光を検出する方法であって、
サンプルを、請求項１〜１２の何れか１項に記載の化合物と接触させる工程、
該サンプルを、ルシフェラーゼと接触させる工程（それが該サンプル中に存在していない場合）、及び、
発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
式（ＩＸ）：
2016521291.tif 000018
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000019
Ｙは、ＯＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000020
Ｗは、Ｓ、ＮＲNまたはＯ；
Ｚは、Ｓ、ＮＲN、ＯまたはＣＨ；及び
ＲNは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル基または置換Ｃ1-4アルキル基である）
で表される化合物、または、
式（Ｘ）：
2016521291.tif 000021
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000022
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；及び
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物、または、
式（ＸＩ）：
2016521291.tif 000023
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000024
Ｙは、ＯＲ；及び
Ｒは、
2016521291.tif 000025
である）
で表される化合物、または、
式（ＸＩＩ）：
2016521291.tif 000026
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000027
Ｙは、ＯＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000028
Ａは、ＯＲまたはＮＨＡｃ；
各Ｒ5は、互いに独立してＨ、単糖または４０ユニットまでのポリエチレングリコール部分である）
で表される化合物、または、
式（ＸＩＩＩ）：
2016521291.tif 000029
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000030
Ｙは、ＮＨＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000031
Ｒ7は、アミノ酸側鎖；
Ｒ6は、Ｈ、窒素保護基または３５アミノ酸までの鎖である）
で表される化合物、または、
式（ＸＶ）：
2016521291.tif 000032
（ＸＶ）
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000033
Ｙは、ＨまたはＯＲ；及び
Ｒは、Ｃ1-10アルキル基、置換Ｃ1-10アルキルアリール基、置換アリール基、アラルキル基または置換アラルキル基である）
で表される化合物、または、
式（ＸＶＩ）：
2016521291.tif 000034
（式中、Ｘは、−ＣＨ（ＯＲ10）2；
Ｒ10は、Ｃ1-4アルキル基、置換Ｃ1-4アルキル基、ベンジル基または置換ベンジル基；
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；及び
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物、または、
式（ＸＶＩＩ）：
2016521291.tif 000035
（式中、Ｒ8は、ＣＨ2ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｒ10または−Ｃ（Ｏ）ＺＲ9；
Ｚは、ＯまたはＮＨ；
Ｒ9は、Ｃ1-7アルキル基または置換Ｃ1-7アルキル基；
Ｒ10は、ペプチド；
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；及び
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物、または、
式（ＸＶＩＩＩ）：
2016521291.tif 000036
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000037
Ｙは、ＯＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000038
各Ｒ11は、互いに独立してＨ、Ｃ1-6アルキル基、置換Ｃ1-6アルキル基、ＣＦ3、ハロゲン、ＮＯ2、ＣＯ2Ｒ12、または、少なくとも１つのＲ11がＮＯ2の場合は隣り合う何れか２個のＲ11は縮合環を形成してもよく；及び
Ｒ12は、Ｈ、Ｃ1-6アルキル基または置換Ｃ1-6アルキル基である）
で表される化合物、または、
式（ＸＩＸ）：
2016521291.tif 000039
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000040
Ｙは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1-7アルキル基）またはＮ（置換Ｃ1-7アルキル基）；
Ｚは、存在しないかまたはＯ；
Ａは、Ｃ1-4アルキレン基または置換Ｃ1-4アルキレン基；及び
Ｒ14は、Ｈ、フェナセチル基またはセファロスポリン側鎖である）
で表される化合物、または、
式（ＸＸ）：
2016521291.tif 000041
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000042
Ｙは、Ｌ−Ｒ；
Ｌは、リンカー；及び
Ｒは、ボロン酸またはホウ酸エステルである）
で表される化合物。
【請求項１５】
非ルシフェラーゼ酵素の存在または量を検出する方法であって、
該酵素を含む可能性のあるインビトロのサンプルを、請求項１４に記載の化合物と接触させる工程、
該サンプルに、ルシフェラーゼ反応混合液を添加する工程、及び、
該サンプル中の発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１６】
非ルシフェラーゼ酵素の存在を検出する方法であって、
請求項１４に記載の化合物が投与されている動物から採取されたサンプルを用意する工程、
該サンプルに、ルシフェラーゼ反応混合液を添加する工程、及び、
該サンプルの発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１７】
前記酵素が、ＵＤＰグルクロノシルトランスフェラーゼ（ＵＧＴ）、グルタチオントランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、シトクロームＰ４５０（ＣＹＰ４５０）、フラビンモノアミンオキシダーゼ（ＦＭＯ）、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）、ベータ−ラクタマーゼまたはプロテアーゼから選択される、請求項１５または１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記サンプルが、前記化合物よりも前または同時に試験化合物と接触する、請求項１５〜１７の何れか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記試験化合物が、前記非ルシフェラーゼ酵素の阻害剤、前記非ルシフェラーゼ酵素の誘導因子、前記非ルシフェラーゼ酵素の基質および前記非ルシフェラーゼ酵素の活性化剤からなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
非ルシフェラーゼ酵素の調節因子をスクリーニングするインビトロでの方法であって、
（ａ）細胞を試験化合物と接触させる工程、
（ｂ）請求項１４に記載の化合物を添加し、混合物を形成する工程、
（ｃ）該混合物に、ルシフェラーゼ反応混合液を添加する工程、および、
（ｄ）発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項１〜１２または１４の何れか１項に記載の化合物を含む、キット。
【請求項２２】
ルシフェラーゼ及び／または緩衝試薬をさらに含む、請求項２１に記載のキット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５９】
図１４は２つの基質のスペクトルデータを表し、それらの近ＩＲ特性を示している。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕式（Ｉａ）、（Ｉｂ）及び（Ｉｃ）：
2016521291.tif 000043
2016521291.tif 000044
2016521291.tif 000045
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000046
各Ｙは、互いに独立してハロ基、ＳＯ3Ｈ、Ｃ1-4アルキル基、置換Ｃ1-4アルキル基、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
各Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
各Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成し；
ｎは１〜６；
２つのＹ置換基は、互いに結合して、５〜７個の環原子を含む環を形成してもよく；及び
少なくとも１つのＹは、ＯＨまたはＮＲ1Ｒ2の何れかである）
で表される化合物。
〔２〕少なくとも１つのＹが、ＯＨである、前記〔１〕に記載の化合物。
〔３〕少なくとも１つのＹが、ＮＲ1Ｒ2である、前記〔１〕または〔２〕に記載の化合物。
〔４〕芳香環が、１個のＯＨまたはＮＲ1Ｒ2及び５個以下のハロ基により置換されている、前記〔１〕に記載の化合物。
〔５〕ハロ基が、フルオロ基である、前記〔４〕に記載の化合物。
〔６〕ハロ基が、クロロ基である、前記〔４〕に記載の化合物。
〔７〕少なくとも１つのＹが、ＳＯ3Ｈである、前記〔１〕〜〔３〕の何れか１項に記載の化合物。
〔８〕式（ＩＩ）：
2016521291.tif 000047
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000048
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に環を形成する）
で表される化合物。
〔９〕式（ＩＩＩ）：
2016521291.tif 000049
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000050
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に環を形成する）
で表される化合物。
〔１０〕式（Ｖ）：
2016521291.tif 000051
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000052
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に環を形成する）
で表される化合物。
〔１１〕式（ＶＩ）：
2016521291.tif 000053
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000054
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に環を形成する）
で表される化合物。
〔１２〕式（ＶＩＩ）：
2016521291.tif 000055
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000056
各Ｙは、互いに独立してＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；
各Ｒ1は、互いに独立してＨ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；及び
各Ｒ2は、互いに独立してＨ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、互いに結合して環を形成する）
で表される化合物。
〔１３〕Ｘが、ＣＮである、前記〔１〕〜〔１２〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１４〕Ｘが、
2016521291.tif 000057
である、前記〔１〕〜〔１２〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１５〕Ｙが、ＮＲ1Ｒ2である、前記〔８〕〜〔１４〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１６〕Ｙが、ＯＨである、前記〔８〕〜〔１４〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１７〕Ｙが、ＮＨ2である、前記〔１〕〜〔１５〕の何れか１項に記載の化合物。
〔１８〕サンプル中の発光を検出する方法であって、
サンプルを、前記〔１〕〜〔１７〕の何れか１項に記載の化合物と接触させる工程、
該サンプルを、ルシフェラーゼと接触させる工程（それが該サンプル中に存在していない場合）、及び、
発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
〔１９〕前記サンプルが、生細胞を含む、前記〔１８〕に記載の方法。
〔２０〕前記サンプルが、ルシフェラーゼを含む、前記〔１８〕及び〔１９〕の何れか１項に記載の方法。
〔２１〕トランスジェニック動物中の発光を検出する方法であって、
前記〔１〕〜〔１７〕の何れか１項に記載の化合物を、トランスジェニック動物に投与する工程、及び、
発光を検出する工程
を含み、該トランスジェニック動物が、ルシフェラーゼを発現していることを特徴とする方法。
〔２２〕
式（ＩＸ）：
2016521291.tif 000058
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000059
Ｙは、ＯＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000060
Ｗは、Ｓ、ＮＲNまたはＯ；
Ｚは、Ｓ、ＮＲN、ＯまたはＣＨ；及び
ＲNは、Ｈ、Ｃ1-4アルキル基または置換Ｃ1-4アルキル基である）
で表される化合物。
〔２３〕式（Ｘ）：
2016521291.tif 000061
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000062
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；及び
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物。
〔２４〕式（ＸＩ）：
2016521291.tif 000063
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000064
Ｙは、ＯＲ；及び
Ｒは、
2016521291.tif 000065
である）
で表される化合物。
〔２５〕式（ＸＩＩ）：
2016521291.tif 000066
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000067
Ｙは、ＯＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000068
Ａは、ＯＲまたはＮＨＡｃ；
各Ｒ5は、互いに独立してＨ、単糖または４０ユニットまでのポリエチレングリコール部分である）
で表される化合物。
〔２６〕式（ＸＩＩＩ）：
2016521291.tif 000069
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000070
Ｙは、ＮＨＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000071
Ｒ7は、アミノ酸側鎖；
Ｒ6は、Ｈ、窒素保護基または３５アミノ酸までの鎖である）
で表される化合物。
〔２７〕式（ＸＩＶ）：
2016521291.tif 000072
（式中、Ｘは、−ＣＨ（ＯＲ10）2；
Ｒ10は、Ｃ1-4アルキル基、置換Ｃ1-4アルキル基、ベンジル基または置換ベンジル基；
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；及び
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物。
〔２８〕式（ＸＶ）：
2016521291.tif 000073
（ＸＶ）
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000074
Ｙは、ＨまたはＯＲ；及び
Ｒは、Ｃ1-10アルキル基、置換Ｃ1-10アルキルアリール基、置換アリール基、アラルキル基または置換アラルキル基である）
で表される化合物。
〔２９〕式（ＸＶＩ）：
2016521291.tif 000075
（式中、Ｘは、−ＣＨ（ＯＲ10）2；
Ｒ10は、Ｃ1-4アルキル基、置換Ｃ1-4アルキル基、ベンジル基または置換ベンジル基；
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；及び
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物。
〔３０〕式（ＸＶＩＩ）：
2016521291.tif 000076
（式中、Ｒ8は、ＣＨ2ＯＨ、Ｃ（Ｏ）Ｒ10または−Ｃ（Ｏ）ＺＲ9；
Ｚは、ＯまたはＮＨ；
Ｒ9は、Ｃ1-7アルキル基または置換Ｃ1-7アルキル基；
Ｒ10は、ペプチド；
Ｙは、ＯＲ1またはＮＲ1Ｒ2；及び
Ｒ1は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；
Ｒ2は、Ｈ、Ｃ1-10アルキル基または置換Ｃ1-10アルキル基；または
Ｒ1及びＲ2は、一緒に４〜８員環を形成する）
で表される化合物。
〔３１〕式（ＸＶＩＩＩ）：
2016521291.tif 000077
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000078
Ｙは、ＯＲ；
Ｒは、
2016521291.tif 000079
各Ｒ11は、互いに独立してＨ、Ｃ1-6アルキル基、置換Ｃ1-6アルキル基、ＣＦ3、ハロゲン、ＮＯ2、ＣＯ2Ｒ12、または、少なくとも１つのＲ11がＮＯ2の場合は隣り合う何れか２個のＲ11は縮合環を形成してもよく；及び
Ｒ12は、Ｈ、Ｃ1-6アルキル基または置換Ｃ1-6アルキル基である）
で表される化合物。
〔３２〕式（ＸＩＸ）：
2016521291.tif 000080
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000081
Ｙは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ（Ｃ1-7アルキル基）またはＮ（置換Ｃ1-7アルキル基）；
Ｚは、存在しないかまたはＯ；
Ａは、Ｃ1-4アルキレン基または置換Ｃ1-4アルキレン基；及び
Ｒ14は、Ｈ、フェナセチル基またはセファロスポリン側鎖である）
で表される化合物。
〔３３〕式（ＸＸ）：
2016521291.tif 000082
（式中、Ｘは、ＣＮまたは
2016521291.tif 000083
Ｙは、Ｌ−Ｒ；
Ｌは、リンカー；及び
Ｒは、ボロン酸またはホウ酸エステルである）
で表される化合物。
〔３４〕非ルシフェラーゼ酵素の存在または量を検出する方法であって、
該酵素を含む可能性のあるサンプルを、前記〔２２〕〜〔３３〕の何れか１項に記載の化合物と接触させる工程、
該サンプルに、ルシフェラーゼ反応混合液を添加する工程、及び、
該サンプル中の発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
〔３５〕前記発光が定量化される、前記〔３４〕に記載の方法。
〔３６〕非ルシフェラーゼ酵素の存在をｉｎ  ｖｉｖｏで検出する方法であって、
前記〔２２〕〜〔３３〕の何れか１項に記載の化合物を、トランスジェニック動物に投与する工程、及び、
発光を検出する工程
を含み、該トランスジェニック動物が、ルシフェラーゼを発現していることを特徴とする方法。
〔３７〕非ルシフェラーゼ酵素の存在を検出する方法であって、
前記〔２２〕〜〔３３〕の何れか１項に記載の化合物を、動物に投与する工程、
該動物からサンプルを採取する工程、
該サンプルに、ルシフェラーゼ反応混合液を添加する工程、及び、
該サンプルの発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
〔３８〕前記酵素が、ＵＤＰグルクロノシルトランスフェラーゼ（ＵＧＴ）、グルタチオントランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、シトクロームＰ４５０（ＣＹＰ４５０）、フラビンモノアミンオキシダーゼ（ＦＭＯ）、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）、ベータ−ラクタマーゼまたはプロテアーゼから選択される、前記〔３４〕〜〔３７〕の何れか１項に記載の方法。
〔３９〕前記サンプルが、前記化合物よりも前または同時に試験化合物と接触する、前記〔３４〕〜〔３８〕の何れか１項に記載の方法。
〔４０〕前記試験化合物が、前記非ルシフェラーゼ酵素の阻害剤、前記非ルシフェラーゼ酵素の誘導因子、前記非ルシフェラーゼ酵素の基質および前記非ルシフェラーゼ酵素の活性化剤からなる群から選択される、前記〔３９〕に記載の方法。
〔４１〕非ルシフェラーゼ酵素の調節因子をスクリーニングするｉｎ  ｖｉｔｒｏでの方法であって、
（ａ）細胞を試験化合物と接触させる工程、
（ｂ）前記〔２２〕〜〔３３〕の何れか１項に記載の化合物を添加し、混合物を形成する工程、（ｃ）該混合物に、ルシフェラーゼ反応混合液を添加する工程、および、
（ｄ）発光を検出する工程
を含むことを特徴とする方法。
〔４２〕前記〔１〕〜〔１７〕または〔２２〕〜〔３３〕の何れか１項に記載の化合物を含む、キット。
〔４３〕ルシフェラーゼをさらに含む、前記〔４２〕に記載のキット。
〔４４〕緩衝試薬をさらに含む、前記〔４２〕または前記〔４３〕に記載のキット。
〔４５〕
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からなる群から選択される化合物。