(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
光源手段と、励起光の波長選択手段と、蛍光の波長選択手段と、測光手段と、を備え、前記光源手段より出射された光より励起光波長選択手段により選択された波長の励起光を試料に照射し、その試料より放出される光より前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光を前記測光手段により測定する蛍光分光光度計において、
前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値および上限値を記憶し、かつ、その波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量を記憶する励起光波長情報記憶手段と、
前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値および上限値を記憶し、かつ、その波長下限値として、前記励起光波長制御手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量を加算した波長を記憶する蛍光波長情報記憶手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで、前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量づつ移動する単位スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長から前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査する単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値から前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査して得られる複数の単位蛍光スペクトルデータの蛍光の波長を合わせて強度を積算しする積算手段と、
前記積算手段により得られた積算蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを仮の最適蛍光波長として判断する仮最適蛍光波長検出手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長に仮固定する励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、又は、
前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで走査する励起スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による波長選択を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長に仮固定しておいて、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値から下限値まで走査して得られる励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長として判断する最適励起波長検出手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起光波長検出手段により検出された最適励起波長に仮固定する蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査する蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に仮固定しておいて、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の上限値から前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査して得られる蛍光ペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する最適蛍光波長検出手段と、
を備えたことを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項２】
前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値および上限値を記憶し、かつ、その波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量を記憶する励起光波長情報記憶手段と、
前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値および上限値を記憶し、かつ、その波長下限値として、前記励起光波長制御手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量を加算した波長を記憶する蛍光波長情報記憶手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで、前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量づつ移動する単位スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長から前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査する単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値から前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査して得られる単位蛍光スペクトルデータの蛍光強度を積算し、これを励起光選択手段により選択された励起光波長の蛍光強度とする積算手段と、
前記積算手段により得られた積算励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを仮の最適励起波長として判断する仮最適励起波長検出手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に仮固定する蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査する蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起光波長に仮固定しておいて、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値から前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査して得られる蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する最適蛍光波長検出手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長に仮固定する励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで走査する励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長に仮固定しておいて、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値から下限値まで走査して得られる励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長として判断する最適励起波長検出手段と、
を備えたことを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項３】
前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値および上限値を記憶し、かつ、その波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量を記憶する蛍光波長情報記憶手段と、
前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長上限値および下限値を記憶し、かつ、その波長上限値として、前記蛍光波長情報記憶手段により選択された蛍光波長より予め定められた所定量を減算した波長を記憶する励起光波長情報記憶手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで、又は、前記蛍光波長情報手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量づつ移動する単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査する単位スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長から走査範囲の波長下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値から前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査して得られる複数の単位励起スペクトルデータの励起光波長を合わせて蛍光強度を積算する積算手段と、
前記積算手段により得られた積算励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを仮の最適励起波長として判断する仮最適励起波長検出手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に仮固定する蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで、又は、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値まで走査する蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起光波長に仮固定しておいて、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の上限値から前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで、又は、前記仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値まで走査して得られる蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する最適蛍光波長検出手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長に仮固定する励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長に移動し、その波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査する励起スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長に仮固定しておいて、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値から前記最適蛍光波長検出手段により検出された最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査して得られる励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長として判断する最適励起波長検出手段と、
を備えたことを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項４】
前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値および上限値を記憶し、かつ、その波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量を記憶する蛍光波長情報記憶手段と、
前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長上限値および下限値を記憶し、かつ、その波長上限値として、前記蛍光波長情報記憶手段により選択された蛍光波長より予め定められた所定量を減算した波長を記憶する励起光波長情報記憶手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで、又は、前記蛍光波長情報手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量づつ移動する単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査する単位スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長から走査範囲の波長下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値から前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査して得られる単位励起スペクトルデータの蛍光強度を積算し、これを蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長の強度とする積算手段と、
前記積算手段により得られた積算蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを仮の最適蛍光波長として判断する仮最適蛍光波長検出手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長に仮固定する励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査する励起スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長に仮固定しておいて、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長から走査範囲の波長下限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値から前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長から前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を減算した波長まで走査して得られる励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起光波長として判断する最適励起波長検出手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起光波長検出手段により検出された最適励起波長に仮固定する蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段と、
前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで、又は、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値まで走査する蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、
前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起光波長検出手段により検出された最適励起波長に仮固定しておいて、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の上限値から前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記励起波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで、又は、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値まで走査して得られる蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する最適蛍光波長検出手段と、
を備えたことを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項５】
請求項１又は２記載の光度計において、前記励起光波長情報記憶手段は、前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量ΔλＥＸ、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量ΔλＥＸを記憶するとしたとき、
５ｎｍ≦ΔλＥＸ≦４０ｎｍ
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項６】
請求項３又は４記載の光度計において、前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量ΔλＥＭ´、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量ΔλＥＭ´を記憶するとしたとき、
５ｎｍ≦ΔλＥＭ´≦４０ｎｍ
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項７】
請求項１又は２記載の光度計において、前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値として、前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量Δλ１を加算した波長を記憶するとしたとき、
５ｎｍ≦Δλ１≦４０ｎｍ
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項８】
請求項３又は４記載の光度計において、前記励起光波長情報記憶手段は、前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長上限値として、前記蛍光波長情報記憶手段により選択された蛍光波長より予め定められた所定量Δλ１´を減算した波長を記憶するとしたとき、
５ｎｍ≦Δλ１´≦４０ｎｍ
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項９】
請求項１又は２記載の光度計において、前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値として、前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量Δλ１を加算した波長を記憶するとしたとき、
Δλ１＝前記励起光波長選択手段のバンド幅＋前記蛍光波長選択手段のバンド幅
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項１０】
請求項３又は４記載の光度計において、前記励起光波長情報記憶手段は、前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長上限値として、前記蛍光波長情報記憶手段により選択された蛍光波長より予め定められた所定量Δλ１´を減算した波長を記憶するとしたとき、
Δλ１´＝前記励起光波長選択手段のバンド幅＋前記蛍光波長選択手段のバンド幅
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項１１】
請求項１又は２記載の光度計において、前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値として、前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量Δλ２を加算した波長を記憶するとしたとき、
１００ｎｍ≦Δλ２≦４００ｎｍ
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項１２】
請求項３又は４記載の光度計において、前記励起光波長情報記憶手段は、前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値として、前記蛍光波長情報記憶手段により選択された蛍光波長より予め定められた所定量Δλ２´を減算した波長を記憶するとしたとき、
１００ｎｍ≦Δλ２´≦４００ｎｍ
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項１３】
請求項１又は２記載の光度計において、前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値として、前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量Δλ２を加算した波長を記憶するとしたとき、
Δλ２＝前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長の２倍−前記励起光波長選択手段のバンド幅−前記蛍光波長選択手段のバンド幅
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【請求項１４】
請求項３又は４記載の光度計において、前記励起光波長情報記憶手段は、前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値として、前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長より予め定められた所定量Δλ２´を減算した波長を記憶するとしたとき、
Δλ２´＝前記蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長の１／２倍＋前記励起光波長選択手段のバンド幅＋前記蛍光波長選択手段のバンド幅
なる条件式を満足するように構成されてなることを特徴とする蛍光分光光度計。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は蛍光分光光度計、特に、最適励起波長および最適蛍光波長の検出方法の改良に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
分子が光を吸収して電子的に励起されたとき、一定の時間その励起状態に存在しているが、いずれはエネルギーを失って安定な基底状態にもどる。その際、発光を伴なう場合と、伴わない場合とがあり、前者で放出される光が蛍光である。蛍光の波長、強度、偏光性や寿命は、電子的に励起されている分子の性質とその環境とに深く関連しているので、蛍光の測定は化学の重要な研究法である。
【０００３】
蛍光測定には蛍光分光光度計が必要となる。基本的には、光源手段と励起光の波長選択手段からなる励起光手段と、蛍光の波長選択手段と測光手段からなる発光検知手段と、より構成されている。
しかしながら、特定物質を励起させるための励起光および基底状態に戻るときに発せられる蛍光は、いずれも極めて限定された波長の光であり、それぞれの選択は、蛍光分析において大きな意義を有する。
最適励起波長および最適蛍光波長の検出方法としては、白色光法、３次元スペクトル法および同期走査法が周知である。
【０００４】
白色光法としては、特開昭６２−２３８４２６号公報に記載された方法が例として挙げられ、これは白色光をそのまま試料に照射して蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。そして、観測する蛍光波長を前記最適蛍光波長に固定しておいて蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長を判断するものである。
【０００５】
３次元スペクトル法としては、特開昭６１−１００８３２号公報に記載された方法が例として挙げられ、これは励起光の波長を予め定められた所定間隔で変えながら蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。そして、観測する蛍光の波長を前記最適蛍光波長に固定しておいて蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長として判断するものである。
【０００６】
同期走査法としては、特開昭６０−２３９６５２号公報に記載された方法が例として挙げられ、これは励起光波長選択手段が選択する励起光波長と蛍光波長選択手段が選択する蛍光波長を一定間隔で保ちながら励起光波長選択手段と蛍光波長選択手段を同期走査するものである。そして、励起光波長選択手段と蛍光波長選択手段を同期走査しながら蛍光の強度が最大となる励起光波長又は蛍光波長を検出する。
【０００７】
そして、観測する蛍光の波長を前記蛍光の強度が最大となる波長に固定しておいて蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長として判断する。そして、励起光の波長を前記最適励起波長に固定しておいて蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断するものである。
または、励起光の波長を前記蛍光強度が最大となる励起光波長に固定しておいて蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。そして、観測する蛍光の波長を前記最適蛍光波長に固定しておいて蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長として判断するものである。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、前記白色光法、３次元スペクトル法および同期走査法の三者は、それぞれ不具合を有している。
白色光法では、短時間に最適励起波長および最適蛍光波長の検出を行うことができるものの、蛍光の強度が弱く散乱光の強度が強い場合、試料が放出した蛍光が散乱光に妨害されてしまい、最適励起波長および最適蛍光波長の検出を適正に行うことができないことがあった。
【０００９】
３次元スペクトル法では、試料が放出した蛍光が散乱光に妨害されにくいものの、最適励起波長および最適蛍光波長の検出には長時間を要するため、光分解を起こしやすい試料を用いた場合、スペクトルデータ採取中に試料の劣化が進行してしまうことがあった。
同期走査法では、短時間に最適励起波長および最適蛍光波長を検出することができたり、試料が放出した蛍光が散乱光に妨害されにくいものの、励起光波長と蛍光波長の間隔、いわゆるストークス・シフトが大きい場合には、最適励起波長および最適蛍光波長を見落としてしまうことがあった。また、採取される蛍光スペクトルは、非常に複雑な波形をもつので、蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大ではなく、局所極大となる波長を検出してしまうことがあった。
【００１０】
このように従来の検出方法では、何れの場合も短時間に満足のゆく検出結果を得ることができなかった。
本発明は前記従来技術の課題に鑑みなされたものであり、短時間に最適励起波長および最適蛍光波長の適正な検出を行うことのできる蛍光分光光度計を提供することを目的とするものである。
【００１１】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成するために、本発明にかかる蛍光分光光度計は、光源手段と、励起光の波長選択手段と、蛍光の波長選択手段と、測光手段と、を備えた蛍光分光光度計において、励起光波長情報記憶手段と、蛍光波長情報記憶手段と、単位スペクトル採取時励起光波長制御手段と、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、積算手段と、仮最適蛍光波長検出手段と、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、励起スペクトル採取時励起光波長制御手段と、最適励起波長検出手段と、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段と、蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段と、最適蛍光波長検出手段と、を備えたことを特徴とする。
前記励起光波長情報記憶手段は、前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値および上限値を記憶し、かつ、その波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量を記憶する。
【００１２】
前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値および下限値を記憶し、かつ、その波長下限値として、前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量を加算した波長を記憶する。
前記単位スペクトル採取時励起光波長制御手段は、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで、前記励起光波長情報記憶手段で規定された所定量づつ移動する。
【００１３】
前記単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段は、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長から前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査する。
【００１４】
前記積算手段は、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値から前記励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査して得られる複数の単位蛍光スペクトルデータの蛍光の波長を合わせて強度を積算する。
【００１５】
前記仮最適蛍光波長検出手段は、前記積算手段により得られた積算蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを仮の最適蛍光波長として判断する。
前記励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段は、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長に仮固定する。
【００１６】
前記励起スペクトル採取時励起光波長制御手段は、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値に移動し、その波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から下限値まで走査する。
【００１７】
前記最適励起波長検出手段は、前記蛍光波長選択手段による波長選択を、前記仮最適蛍光波長検出手段により検出された仮の最適蛍光波長に仮固定しておいて、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値から上限値まで、又は、前記励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値から下限値まで走査して得られる励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長を検出し、これを最適励起波長として判断する。
前記蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段は、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起光波長検出手段により検出された最適励起波長に仮固定する。
【００１８】
前記蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段は、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長に移動し、その波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値に移動し、その波長上限値から前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで走査する。
【００１９】
前記最適蛍光波長検出手段は、前記励起光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に仮固定しておいて、前記蛍光波長選択手段による選択波長を、前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長から走査範囲の波長上限値まで、又は、前記蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の上限値から前記最適励起波長検出手段により検出された最適励起波長に前記蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量を加算した波長まで、走査して得られる蛍光ペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。
【００２０】
なお、前記蛍光分光光度計において、前記励起光波長情報記憶手段は、前記励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量ΔλＥＸ、又は、その波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量ΔλＥＸ、を記憶するとしたとき、
５ｎｍ≦ΔλＥＸ≦４０ｎｍ
なる条件式を満足するように構成されてなることが好適である。
【００２１】
また、前記蛍光分光光度計において、前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値として、前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量Δλ１を加算した波長を記憶するとしたとき、５ｎｍ≦Δλ１≦４０ｎｍ、または、Δλ１＝前記励起光波長選択手段のバンド幅＋前記蛍光波長選択手段のバンド幅なる条件式を満足するように構成されてなることが好適である。
【００２２】
さらに、前記蛍光分光光度計において、前記蛍光波長情報記憶手段は、前記蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値として、前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長に予め定められた所定量Δλ２を加算した波長を記憶するとしたとき、１００ｎｍ≦Δλ２≦４００ｎｍ、または、Δλ２＝前記励起光波長選択手段により選択された励起光波長の２倍−前記励起光波長選択手段のバンド幅−前記蛍光波長選択手段のバンド幅なる条件式を満足するように構成されてなることが好適である。
【００２３】
【発明の実施の形態】
以下、図面に基づき、本発明の第１の実施形態にかかる蛍光分光光度計について説明する。
図１には、実施形態１にかかる蛍光分光光度計の概略構成が示されている。
同図に示す蛍光分光光度計１０は、光源手段１２と、分光器よりなる励起光の波長選択手段１４と、試料室１６と、分光器よりなる蛍光の波長選択手段１８と、測光手段２０と、を備えている。
【００２４】
また、蛍光分光光度計１０においては、リードオンリーメモリ（以下、ＲＯＭという）よりなる励起光波長情報記憶手段２２と、ＲＯＭよりなる蛍光波長情報記憶手段２４と、中央演算処理ユニット（以下、分光器制御用ＣＰＵという）よりなる単位スペクトル採取時励起光波長制御手段２６と、分光器制御用ＣＰＵよりなる単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２８と、中央演算処理ユニット（以下、データ処理用ＣＰＵという）よりなる積算手段３２と、ハードディスク（以下、ＨＤという）よりなる積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３４と、データ処理用ＣＰＵよりなる仮最適蛍光波長検出手段３６と、を備えている。
【００２５】
励起光波長情報記憶手段２２は、励起光波長選択手段１４の走査範囲の波長下限値λＥＸ１および上限値λＥＸｘを記憶し、その波長下限値λＥＸ１に順次に加算する予め定められた所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）を記憶する。
蛍光波長情報記憶手段２４は、蛍光波長選択手段１８の走査範囲の波長下限値として、励起光波長選択手段２２により選択された励起光波長λＥＸｎに予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長を記憶する。また、その波長上限値として、励起光波長選択手段２２により選択された励起光波長λＥＸｎに予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長を記憶する。
【００２６】
単位スペクトル採取時励起光波長制御手段２６は、ドライバ５６を駆動して励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段２２で規定された移動範囲の波長下限値λＥＸ１に移動し、その波長下限値λＥＸ１から上限値λＥＸｘまで、励起光波長情報記憶手段２２で規定された所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）づつ移動する。
【００２７】
単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２８は、ドライバ５８を駆動して蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光波長選択手段１４により選択された励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ１）に移動し、その波長（λＥＸｎ＋Δλ１）から励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ２）まで走査する。
【００２８】
積算手段３２は、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ１）から、励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ２）まで走査して得られる単位蛍光スペクトルデータの蛍光の強度を、積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３４に記憶されている積算蛍光スペクトルデータの蛍光の強度に波長を合わせて積算する。
【００２９】
仮最適蛍光波長検出手段３６は、積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３４に記憶された積算蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０´を検出し、これを仮の最適蛍光波長として判断する。
また、蛍光分光光度計１０においては、分光器制御用ＣＰＵよりなる励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段３８と、分光器制御用ＣＰＵよりなる励起スペクトル採取時励起光波長制御手段４０と、ＨＤよりなる励起スペクトルデータ記憶手段４２と、データ処理用ＣＰＵよりなる最適励起波長検出手段４４と、を備えている。
【００３０】
励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段３８は、ドライバ５８を駆動して蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、仮最適蛍光波長検出手段３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０´に仮固定する。
励起スペクトル採取時励起光波長制御手段４０は、ドライバ５６を駆動して励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１に移動し、その波長下限値λＥＸ１から、仮の最適蛍光λＥＭ０´から蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を減算した波長（λＥＭ０´−Δλ１）まで走査する。
【００３１】
励起スペクトルデータ記憶手段４２は、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、仮最適蛍光波長検出手段３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０´に仮固定しておいて、励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１から、仮の最適蛍光λＥＭ０から蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を減算した波長（λＥＭ０´−Δλ１）まで走査して得られる、仮の最適蛍光波長λＥＭ０´の励起スペクトルデータを記憶する。
【００３２】
最適励起波長検出手段４４は、励起スペクトルデータ記憶手段４２に記憶された、仮の最適蛍光波長λＥＭ０´の励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長λＥＸ０を検出し、これを最適励起波長として判断する。
さらに、蛍光分光光度計１０においては、分光器制御用ＣＰＵよりなる蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段４６と、分光器制御用ＣＰＵよりなる蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段４８と、ＨＤよりなる蛍光スペクトルデータ記憶手段５０と、データ処理用ＣＰＵよりなる最適蛍光波長検出手段５２と、キーボード、マウスなどの手動入力手段５４と、を備えている。
【００３３】
蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段４６は、ドライバ５６を駆動して励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、最適励起光波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に仮固定する。
蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段４８は、ドライバ５８を駆動して蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、最適励起波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ１）に移動し、その波長（λＥＸ０＋Δλ１）から最適励起光波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ２）まで走査する。
【００３４】
蛍光ペクトルデータ記憶手段５０は、励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、最適励起波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に仮固定しておいて、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、最適励起波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量Δλ１を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ１）から最適励起光波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ２）まで走査して得られる、最適励起光波長λＥＸ０の蛍光スペクトルデータを記憶する。
【００３５】
最適蛍光波長検出手段５２は、蛍光スペクトルデータ記憶手段５０に記憶された、最適励起光波長λＥＸ０の蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。
本発明の実施形態１にかかる蛍光分光光度計１０は概略以上のように構成され、次に図２〜図８に基づきその作用について説明する。
【００３６】
図２に示すように、実施形態１にかかる蛍光分光光度計１０は、手動入力手段５４からの開始信号を受けると、単位スペクトル採取時励起光波長制御手段２６がドライバ５６を駆動して、励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１に移動する。また、この励起光波長選択手段１４と同時に、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２８がドライバ５８を駆動して、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光波長選択手段１４により選択された励起光の波長λＥＸ１に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ１＋Δλ１）に移動する。
【００３７】
励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、その走査範囲の波長下限値λＥＸ１に仮固定し、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光の波長λＥＸ１に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ１＋Δλ１）に移動すると、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２８がドライバ５８を駆動して、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光の波長λＥＸ１に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ１＋Δλ１）から励起光の波長λＥＸ１に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸ１＋Δλ２）まで走査して、励起光波長λＥＸ１の単位蛍光スペクトルデータを採取する。この励起光波長λＥＸ１の単位蛍光スペクトルデータを積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３４に記憶する。
【００３８】
積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３４が、励起光（λＥＸ１）を照射して得られた単位蛍光スペクトルデータを記憶すると、単位スペクトル採取時励起光波長制御手段２６がドライバ５６を駆動して、励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸ２を、励起光の波長λＥＸ１に励起光波長情報記憶手段２２で規定された所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）を加算した波長（λＥＸ２＝λＥＸ１＋ΔλＥＸ）に移動する。また、この励起光波長選択手段１４と同時に、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２８がドライバ５８を駆動して、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光の波長λＥＸ２に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ２＋Δλ１）に移動する。
【００３９】
励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸ２を、励起光の波長λＥＸ１に励起光波長情報記憶手段２２で規定された所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）を加算した波長（λＥＸ２＝λＥＸ１＋ΔλＥＸ）に仮固定し、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光の波長λＥＸ２に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長間隔Δλ１）を加算した波長（λＥＸ２＋Δλ１）に移動すると、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２８がドライバ５８を駆動して、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光の波長λＥＸ２に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ２＋ΔλＥＭ）から励起光の波長λＥＸ２に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸ２＋Δλ２）まで走査して、励起光波長λＥＸ２の単位蛍光スペクトルデータを採取する。
【００４０】
励起光波長λＥＸ２の単位蛍光スペクトルデータを採取すると、積算手段３２が、積分蛍光スペクトルデータ記憶手段３４に記憶されている励起光波長λＥＸ１の蛍光スペクトルデータの蛍光の強度に、励起光波長λＥＸ２の蛍光スペクトルデータの蛍光の強度を波長を合わせて積算する。
そして、実施形態１においては、図２に示すように、前述のような積算処理を、励起光（λＥＸ２）を照射して得られる単位蛍光スペクトルデータ、励起光（λＥＸ２）を照射して得られる単位蛍光スペクトルデータ…励起光（λＥＸｘ）を照射して得られる単位蛍光スペクトルデータについて順次に行い、図６に示す積算蛍光スペクトルデータを得る。
【００４１】
そして、この積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３４に記憶された積算蛍光スペクトルデータの最適蛍光波長を仮最適蛍光波長検出手段３６により検出する。すなわち、図６に示すように、仮最適蛍光波長検出手段３６が、積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３４に記憶された積算蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０´を検出し、これを仮の最適蛍光波長として判断する。
【００４２】
そして、仮の最適蛍光波長λＥＭ０´を検出すると、図３に示すように、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段３８が、ドライバ５８を駆動して蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、仮最適蛍光波長検出手段３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０´に移動する。そして、この蛍光波長選択手段１８と同時に、励起スペクトル採取時励起光波長制御手段４０がドライバ５６を駆動して、励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１に移動する。
【００４３】
蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、仮最適蛍光波長検出手段３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０´に仮固定し、励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１に移動すると、励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１から、仮の最適蛍光λＥＭ０から蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を減算した波長（λＥＭ０−Δλ１）まで走査して、仮の最適蛍光波長λＥＭ０´の励起スペクトルデータを採取する。この蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを仮の最適蛍光波長λＥＭ０´に仮固定しておいて得られた励起スペクトルデータを励起スペクトルデータ記憶手段４２に記憶する。
【００４４】
そして、この励起スペクトルデータ記憶手段４２に記憶された励起スペクトルデータの最適励起波長を最適励起波長検出手段４４により検出する。
すなわち、図７に示すように、最適励起波長検出手段４４が、励起スペクトルデータ記憶手段４２に記憶された励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長λＥＸ０を検出し、これを最適励起波長として判断する。
【００４５】
そして、最適励起波長λＥＸ０を検出すると、図４に示すように、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段４６が、ドライバ５６を駆動して励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、最適励起光波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に仮固定する。また、この励起光波長選択手段１４と同時に、蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段４８がドライバ５８を駆動して、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、最適励起波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ１）に移動する。
【００４６】
励起光波長選択手段１４による選択波長λＥＸｎを、最適励起波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に仮固定し、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、最適励起波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ１）に移動すると、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、最適励起波長検出手段４４により検出された最適励起波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ１）から最適励起波長λＥＸ０に蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸ０＋Δλ２）まで走査して、最適励起波長λＥＸ０の蛍光スペクトルデータを採取する。この励起光（最適励起波長λＥＸ０）を照射して得られた蛍光スペクトルデータを蛍光スペクトルデータ記憶手段５０に記憶する。
【００４７】
そして、この蛍光スペクトルデータ記憶手段５０に記憶された蛍光スペクトルデータの最適蛍光波長を最適蛍光波長検出手段５２により検出する。
すなわち、図８に示すように、最適蛍光波長検出手段５２が、蛍光スペクトルデータ記憶手段５０に記憶された蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。
【００４８】
このように実施形態１にかかる蛍光分光光度計によれば、図５に示すように、蛍光波長選択手段１８による選択波長λＥＭｎを、励起光波長選択手段１４により選択された励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ１）から走査を開始することとしているので、散乱光の波長が観測する蛍光の波長に重なることを常に回避することができるので、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを確実に防ぐことができる。
【００４９】
また、図６に示すように、単位蛍光スペクトルデータについて積算処理を行うこととしているので、単位蛍光スペクトルデータに補正を与えることができる。単位蛍光スペクトルデータに若干のＳ／Ｎ比の低下が生じても積算処理を行うことにより補正を与えることができるので、蛍光スペクトルデータの採取を行うに際し、検出結果の信頼性を損なうことなく、従来と比較して分光器の波長走査速度を高速化することができる。そして、単位蛍光スペクトルデータを従来と比較して高速で採取することができるので、短時間に積算蛍光スペクトルデータの仮最適蛍光波長を検出することができる。
【００５０】
また、このような仮の最適蛍光波長を基準として、最適励起波長および最適蛍光波長を検出することとしているので、何等の基準もなく最適励起波長および最適蛍光波長の検出を行うものと比較して、最適励起波長および最適蛍光波長の検出に要する時間を短縮化することができる。
さらに、仮の最適蛍光波長を検出した後、真の最適蛍光波長を検出することとしているので、仮の最適励起波長に補正を与えることとなり、最適励起波長および最適蛍光波長の検出をより適正に行うことができる。
【００５１】
図９には、本発明の第２の実施形態にかかる蛍光分光光度計１１０の概略構成が示されており、図１０〜図１３には、その作用が示されている。なお、前記実施形態１と対応する部分には符号１００を加えて示し説明を省略する。
【００５２】
図９に示すように実施形態２にかかる蛍光分光度計１１０においては、励起光波長情報記憶手段１２２と、蛍光波長情報記憶手段１２４と、単位スペクトル採取時励起光波長制御手段１２６と、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段１２８の他に、積算手段１３２と、積算励起スペクトルデータ記憶手段１３４と、仮最適励起波長検出手段１３６と、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段１３８と、蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段１４０と、蛍光ペクトルデータ記憶手段１４２と、最適蛍光波長検出手段１４４と、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段１４６と、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段１４８と、励起ペクトルデータ記憶手段１５０と、最適励起波長検出手段１５２と、を備えることとしている。
【００５３】
積算手段１３２は、図１０に示すように、蛍光波長選択手段１１８による選択波長λＥＭｎを、励起光波長選択手段１１４により選択された励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ１）から、励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ２）まで走査して得られる、励起光の波長λＥＸｎの単位蛍光スペクトルデータの蛍光強度を積算し、これを励起光の波長λＥＸｎの積算蛍光強度として積算励起スペクトルデータ記憶手段１３４に記憶する。
【００５４】
そして、前述のような処理を、励起光波長λＥＸ１の単位蛍光スペクトルデータ、励起光波長λＥＸ２の単位蛍光スペクトルデータ…励起光波長λＥＸｘの単位蛍光スペクトルデータについて順次に行い、図１３に示す積算励起スペクトルデータを得る。
積算励起スペクトルデータを採取すると、仮最適励起波長検出手段１３６は、積算励起スペクトルデータ記憶手段１３４に記憶された積算励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長λＥＸ０´を検出し、これを仮の最適励起波長として判断する。
【００５５】
仮の最適励起波長λＥＸ０´を検出すると、図１１に示すように、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段１３８は、励起光波長選択手段１１４による選択波長λＥＸｎを、仮最適励起波長検出手段１３６により検出された仮の最適励起波長λＥＸ０´に仮固定する。
そして、この励起光波長選択手段１１４と同時に、蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段１４０は、蛍光波長選択手段１１８による選択波長λＥＭｎを、仮最適励起波長検出手段１３６により検出された仮の最適励起波長λＥＸ０´に蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ０´＋Δλ１）に移動し、その波長（λＥＸ０´＋Δλ１）から仮の最適励起波長に蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸ０´＋Δλ２）まで走査する。
【００５６】
蛍光ペクトルデータ記憶手段１４２は、励起光波長選択手段１１４による選択波長を、仮最適励起波長検出手段１３６により検出された仮の最適励起波長λＥＸ０´に仮固定しておいて、蛍光波長選択手段１１８による選択波長λＥＭｎを、仮最適励起波長検出手段１３４により検出された仮の最適励起波長λＥＸ０´に蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量Δλ１を加算した波長（λＥＸ０´＋Δλ１）から仮の最適励起波長λＥＸ０´に蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量Δλ２を加算した波長（λＥＸ０´＋Δλ２）まで走査して得られる、仮の最適励起波長λＥＸ０´の蛍光スペクトルデータを記憶する。
【００５７】
最適蛍光波長検出手段１４４は、蛍光スペクトルデータ記憶手段１４２に記憶された蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。
最適蛍光波長λＥＭ０を検出すると、図１２に示すように、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段１４６は、蛍光波長選択手段１１８による選択波長λＥＭｎを、最適蛍光波長検出手段１４４により検出された最適蛍光波長λＥＭ０仮固定する。
【００５８】
そして、この蛍光波長選択手段１１８と同時に、励起スペクトル採取時励起光波長制御手段１４８は、励起光波長選択手段１１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段１２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１に移動し、その波長下限値λＥＸ１から、最適蛍光波長λＥＭ０から蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を減算した波長（λＥＭ０−Δλ１）まで走査する。
【００５９】
励起ペクトルデータ記憶手段１５０は、蛍光波長選択手段１１８による選択波長λＥＭｎを、最適蛍光波長検出手段１４４により検出された最適蛍光波長λＥＭ０に仮固定しておいて、励起光波長選択手段１１４による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段１２２で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１から、最適蛍光波長λＥＭ０から蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を減算した波長（λＥＭ０−Δλ１）まで走査して得られる、最適蛍光波長λＥＭ０の励起スペクトルデータを記憶する。
【００６０】
最適蛍光波長λＥＭ０の励起スペクトルデータを採取すると、最適励起波長検出手段１５２は、励起スペクトルデータ記憶手段１４８に記憶された励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長λＥＸ０を検出し、これを最適励起波長として判断する。
このように実施形態２においては、蛍光波長選択手段１１８による選択波長λＥＭｎを、励起光波長選択手段１１４により選択された励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段１２４で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ１）から走査を開始することとしているので、前記実施形態１と同様に、散乱光の波長が観測する蛍光の波長に重なることを常に回避することができるので、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを確実に防ぐことができる。
【００６１】
また、単位励起スペクトルデータについて積算処理を行うこととしているので、単位励起スペクトルデータに補正を与えることができる。単位励起スペクトルデータに若干のＳ／Ｎ比の低下が生じても積算処理を行うことにより補正を与えることができるので、励起スペクトルデータの採取を行うに際し、検出結果の信頼性を損なうことなく、従来と比較して分光器の波長走査速度を高速化することができる。そして、単位励起スペクトルデータを従来と比較して高速で採取することができるので、短時間に積算励起スペクトルデータの仮最適励起波長を検出することができる。
【００６２】
また、このような仮の最適励起波長を基準として、最適励起波長および最適蛍光波長を検出することとしているので、前記実施形態１と同様に、最適励起波長および最適蛍光波長の検出に要する時間を短縮化することができる。
さらに、仮の最適励起波長を検出した後、真の最適励起波長を検出することとしているので、前記実施形態１と同様に、最適励起波長および最適蛍光波長の検出をより適正に行うことができる。
ところで、実施形態１又は２においては、５ｎｍよりも狭い間隔で励起光の波長を順次に移動すると、分光器の移動回数が非常に多くなり、その結果、最適励起波長および最適蛍光波長の検出に要する時間を従来と比較して短縮化することできない場合がある。
【００６３】
また、４０ｎｍよりも広い間隔で励起光の波長を順次に移動すると、例えば測定点が真の蛍光の強度が最大となる波長を跨ぎ越してしまい、単に蛍光の強度が局所極大となる波長を検出し、これを最適蛍光波長として誤認する場合がある。そこで、実施形態１又は２においては、励起光波長情報記憶手段が、励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）を記憶するとしたとき、５ｎｍ≦ΔλＥＸ≦４０ｎｍなる条件式を満足するように構成するのである。
【００６４】
その結果、実施形態１又は２においては、分光器の移動回数を極端に多くすることなく、しかも測定点が真の蛍光の強度が最大となる波長を跨ぎ越してしまうことがないように、励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値に順次に加算する予め定められた所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）を設定することができるので、短時間に最適励起波長および最適蛍光波長の適正な検出を行うことが可能となる。
【００６５】
また、実施形態１又は２においては、蛍光波長選択手段が、励起光の波長に５ｎｍよりも小さい値の所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長より走査を開始すると、やはり観測する蛍光が散乱光に妨害されてしまい、蛍光強度が最大となる波長の検出を適正に行うことができない場合がある。
これに対し、蛍光波長選択手段が、励起光の波長に４０ｎｍよりも大きい値の所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長より走査を開始すると、励起光波長と蛍光波長の間隔、いわゆるストークス・シフトが大きいため、最適励起波長および最適蛍光波長を見落してしまう場合がある。
【００６６】
そこで、実施形態１又は２においては、蛍光波長情報記憶手段が、蛍光波長選択手段の走査範囲の波長下限値として、励起光波長選択手段により選択された励起波長に予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長を記憶するとしたとき、５ｎｍ≦Δλ１≦４０ｎｍなる条件式を満足するように構成するのである。
その結果、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを防ぐように、最適励起波長および最適蛍光波長を見落すことがないようにストークス・シフトを設定することができるので、最適励起波長および最適蛍光波長の適正な検出を行うことが可能となる。
【００６７】
また、実施形態１又は２においては、蛍光波長情報記憶手段が、蛍光波長選択手段による走査範囲の波長下限値として、励起光波長選択手段により選択された励起光の波長λＥＸｎに予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長を記憶するとき、この蛍光差波長Δλ１は、励起光波長選択手段のバンド幅に蛍光波長選択手段のバンド幅を加算した値とすることが好適である。
すなわち、この蛍光差波長Δλ１を励起光波長選択手段のバンド幅に蛍光波長選択手段のバンド幅を加算した値とすれば、散乱光の波長が観測する蛍光の波長に重なることを常に回避することができるので、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを確実に防ぐことができる。
【００６８】
また、実施形態１又は２においては、蛍光波長情報記憶手段が、蛍光波長選択手段による走査範囲の波長上限値として、励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長を記憶するとき、この蛍光差波長Δλ２は、励起光選択手段により選択された励起光波長の２倍から励起光波長選択手段のバンド幅と蛍光波長選択手段のバンド幅を減算した値とすることが好適である。
すなわち、この蛍光差波長Δλ２を励起光選択手段が選択する励起光波長の２倍から励起光波長選択手段のバンド幅と蛍光波長選択手段のバンド幅を減算した値とすれば、散乱光の波長が観測する２次光の波長に重なることを常に回避することができるので、２次光が励起光に妨害されることを確実に防ぐすることができる。
【００６９】
また、蛍光波長選択手段による選択波長を、励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に１００ｎｍよりも小さい値を加算した波長まで走査しても、最適蛍光波長が蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値よりも長波長側に存在する場合がある。
これに対し、蛍光波長選択手段による選択波長を、励起光波長選択手段により選択された励起光の波長に４００ｎｍよりも大きい値を加算した波長まで走査しても、実質的には、最適蛍光波長が励起光の波長に４００ｎｍを加算した波長よりも長波長側に存在しないため、効率的に最適蛍光波長を検出することができない場合がある。
【００７０】
そこで、実施形態１又は２においては、蛍光波長情報記憶手段が、蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値として、励起光の波長に予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長を記憶するとしたとき、１００ｎｍ≦Δλ２≦４００ｎｍなる条件式を満足するように構成するのである。
なお、実施形態１又は２は、前記構成に限定されるものではなく、発明の要旨の範囲内で種々の変形が可能である。
【００７１】
例えば、実施形態１又は２においては、励起光波長選択手段による選択波長λＥＸｎを、励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値λＥＸ１から上限値λＥＸｘまで、励起光波長情報記憶手段で規定された所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）づつ増加するように移動する構成としたが、励起光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値λＥＸｘから下限値λＥＸ１まで、励起光波長情報記憶手段で規定された所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）づつ減少するように移動する構成とすることも可能である。
【００７２】
また、実施形態１又は２においては、蛍光波長選択手段による選択波長λＥＭｎを、励起光波長選択手段により選択された励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ１）から、励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段で規定された蛍光差波長Δλ２を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ２）まで走査する構成としたが、測定可能な最長波長まで走査する構成とすることも可能である。
【００７３】
さらに、実施形態１又は２においては、蛍光波長選択手段による選択波長λＥＭｎを、励起光波長選択手段により選択された励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ１）から、励起光の波長λＥＸｎに蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸｎ＋Δλ２）まで走査すると、つぎに、蛍光波長選択手段による選択波長λＥＸ（ｎ＋１）を、励起光波長選択手段により選択された励起光の波長（λＥＸ（ｎ＋１）＝λＥＸｎ＋ΔλＥＸ）に蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長（λＥＸ（ｎ＋１）＋Δλ１）に移動する構成としたが、励起光の波長（λＥＸ（ｎ＋１）＝λＥＸｎ＋ΔλＥＸ）に蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長（λＥＸ（ｎ＋１）＋Δλ２）から走査を開始する構成とすることも可能であり、それによって、分光器の移動時間を短縮化することができる。
【００７４】
図１４には、本発明の第３の実施形態にかかる蛍光分光光度計の概略構成が示されており、図１５〜図１８には、その作用が示されている。なお、前記実施例１と対応する部分には符号２００を加えて示し説明を省略する。
【００７５】
実施形態３にかかる蛍光分光光度計２１０においては、蛍光波長情報記憶手段２２２と、励起光波長情報記憶手段２２４と、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２２６と、単位スペクトル採取時励起光波長制御手段２２８と、積算手段２３２と、積算励起スペクトルデータ記憶手段２３４と、仮最適励起波長検出手段２３６と、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段２３８と、蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段２４０と、蛍光スペクトルデータ記憶手段２４２と、最適蛍光波長検出手段２４４と、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段２４６と、励起スペクトル採取時励起光波長制御手段２４８と、励起ペクトルデータ記憶手段２５０と、最適励起波長検出手段２５２と、を備えることとしている。
【００７６】
蛍光波長情報記憶手段２２２は、蛍光波長選択手段２１８の走査範囲の波長下限値λＥＭ１および上限値λＥＭｘを記憶し、その波長上限値λＥＭｘから順次に減算する予め定められた所定量（蛍光波長間隔ΔλＥＭ´）を記憶する。
励起光波長情報記憶手段２２４は、励起波長選択手段２１８の走査範囲の波長上限値λＥＸ１´および下限値λＥＭｘ´を記憶し、その波長上限値λＥＭｘ´として、蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長λＥＭｎ´から予め定められた所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長を記憶する。
【００７７】
単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段２２６は、ドライバ２５８を駆動して、蛍光波長選択手段２１８による選択波長λＥＭｎ´を、蛍光波長情報記憶手段２２２で規定された走査範囲の波長上限値λＥＭｘ´に移動し、その波長上限値λＥＭｘ´から下限値λＥＭ１´まで、蛍光波長情報記憶手段２２２で規定された所定量（蛍光波長間隔ΔλＥＭ´）づつ移動する。
【００７８】
単位スペクトル採取時励起光波長制御手段２２８は、ドライバ２５６を駆動して、励起光波長選択手段２１８による選択波長λＥＸｎ´を、蛍光波長選択手段２１８により選択された蛍光波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭｘ´−Δλ１´）に移動し、その波長（λＥＭｘ´−Δλ１´）から蛍光波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ２´）を減算した波長（λＥＭｘ´−Δλ２´）まで走査する。
【００７９】
積算手段２３２は、図１８に示すように、励起光波長選択手段２１４による選択波長λＥＸｎ´を、蛍光波長選択手段２１８により選択された蛍光の波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭｘ´−Δλ１´）から蛍光波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ２´）を減算した波長（λＥＭｘ´−Δλ２´）まで走査して得られる、蛍光の波長λＥＭｎ´の単位励起スペクトルデータの蛍光強度を、積算励起スペクトルデータ記憶手段２３４に記憶されている積算励起スペクトルデータの蛍光強度に励起光波長を合わせて積算する。
【００８０】
そして、前述のような処理を、蛍光波長λＥＭ１の単位励起スペクトルデータ、蛍光波長λＥＭ２の単位蛍光スペクトルデータ…蛍光波長λＥＭｘの単位励起スペクトルデータについて順次に行い、図１８に示す積算励起スペクトルデータを得る。積算励起スペクトルデータを採取すると、仮最適励起波長検出手段２３６は、積算励起スペクトルデータ記憶手段２３４に記憶された積算励起スペクトルデータの蛍光強度が最大となる励起光波長λＥＸ０″を検出し、これを仮の最適励起波長として判断する。
【００８１】
仮の最適励起波長λＥＸ０″を検出すると、図１６に示すように、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段２３８は、ドライバ２５６を駆動して、励起光波長選択手段２１４による選択波長λＥＸｎ´を、仮最適励起波長検出手段２３６により検出された仮の最適励起波長λＥＸ０″に仮固定する。
そして、この励起光波長選択手段２１４と同時に、蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段２４０は、ドライバ２５８を駆動して、蛍光波長選択手段２１８による選択波長λＥＭｎ´を、蛍光波長情報記憶手段２２２で規定された走査範囲の波長上限値λＥＭｘ´から、仮最適励起波長検出手段２３６により検出された仮の最適励起波長λＥＸ０″に励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長λ１´）を加算した波長（λＥＸ０″＋λ１´）まで走査する。
【００８２】
蛍光ペクトルデータ記憶手段２４２は、励起光波長選択手段２１３による選択波長λＥＸｎ´を、仮最適励起波長検出手段により検出された仮の最適励起光波長λＥＸ０″に仮固定しておいて、蛍光波長選択手段２１８による選択波長λＥＭｎ´を、蛍光波長情報記憶手段２２２で規定された走査範囲の波長上限値λＥＭｘ´から仮最適励起波長検出手段２３６により検出された仮の最適励起波長λＥＸ０´に励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長λ２´）を加算した波長（λＥＸ０″＋λ２´）まで走査して得られる、仮の最適励起波長λＥＸ０´の蛍光スペクトルデータを記憶する。
【００８３】
仮の最適励起波長λＥＸ０´の蛍光スペクトルデータを採取すると、最適蛍光波長検出手段２４４は、蛍光スペクトルデータ記憶手段２４２に記憶された蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０´を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。
最適蛍光波長λＥＭ０´を検出すると、図１７に示すように、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段２４６は、ドライバ２５８を駆動して、蛍光波長選択手段２１８による選択波長λＥＭｎ´を、最適蛍光波長検出手段２４４により検出された最適蛍光波長λＥＭ０´に仮固定する。
【００８４】
そして、この蛍光波長選択手段２１８と同時に、励起スペクトル採取時励起光波長制御手段２４８は、ドライバ２５６を駆動して、励起光波長選択手段２１４による選択波長λＥＸｎ´を、最適蛍光波長検出手段２４４により検出された最適蛍光波長λＥＭ０´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量λ１´を減算した波長（λＥＭ０´−λ１´）に移動し、その波長（λＥＭ０´−λ１´）から最適蛍光波長λＥＭ０´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長λ２´）を減算した波長（λＥＭ０´−λ２´）まで走査する。
【００８５】
励起ペクトルデータ記憶手段２５０は、蛍光波長選択手段２１８による選択波長λＥＭｎ´を、最適蛍光波長検出手段２４８により検出された最適蛍光波長λＥＭ０に仮固定しておいて、励起光波長選択手段２１４による選択波長λＥＸｎ´を、最適蛍光波長検出手段２４４により検出された最適蛍光波長λＥＭ０´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量λ１´を減算した波長（λＥＭ０´−λ１´）から、最適蛍光波長λＥＭ０´から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量を減算した波長（λＥＭ０´−λ２´）まで走査して得られる励起スペクトルデータを記憶する。
【００８６】
最適蛍光波長λＥＭ０´の励起スペクトルデータを採取すると、最適励起波長検出手段２５２は、励起スペクトルデータ記憶手段２５０に記憶された励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長λＥＸ０´を検出し、これを最適励起波長として判断する。
このように実施形態３においては、励起波長選択手段２１８による選択波長λＥＸｎが、蛍光波長選択手段２１４により選択された蛍光の波長λＥＭｎより励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭｎ−Δλ１´）から走査を開始することとしているので、前記実施形態１と同様に、散乱光の波長が観測する蛍光の波長に重なることを常に回避することができるので、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを確実に防ぐことができる。
【００８７】
また、単位励起スペクトルデータについて積算処理を行うこととしているので、単位励起スペクトルデータに補正を与えることができる。単位励起スペクトルデータに若干のＳ／Ｎ比の低下が生じても積算処理を行うことにより補正を与えることができるので、励起スペクトルデータの採取を行うに際し、検出結果の信頼性を損なうことなく、従来と比較して分光器の波長走査速度を高速化することができる。そして、単位励起スペクトルデータを従来と比較して高速で採取することができるので、短時間に積算励起スペクトルデータの仮最適励起波長を検出することができる。
【００８８】
また、このような仮の最適励起波長を基準として、最適励起波長および最適蛍光波長を検出することとしているので、前記実施形態１と同様に、最適励起波長および最適蛍光波長の検出に要する時間を短縮化することができる。
さらに、仮の最適励起波長を検出した後、真の最適励起波長を検出することとしているので、前記実施形態１と同様に、最適励起波長および最適蛍光波長の検出をより適正に行うことができる。
【００８９】
図１９には、本発明の第４の実施形態にかかる蛍光分光光度計の概略構成が示されており、図２０〜図２３には、その作用が示されている。なお、前記実施例１と対応する部分には符号３００を加えて示し説明を省略する。
【００９０】
実施形態４にかかる蛍光分光光度計３１０においては、前記実施形態３と同様に、蛍光波長情報記憶手段３２２と、励起光波長情報記憶手段３２４と、単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段３２６と、単位スペクトル採取時励起光波長制御手段３２８の他に、積算手段３３２と、積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３３４と、仮最適蛍光波長検出手段３３６と、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段３３８と、励起スペクトル採取時励起光波長制御手段３４０と、励起スペクトルデータ記憶手段３４２と、最適励起波長検出手段３４４と、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段３４６と、蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段３４８と、蛍光ペクトルデータ記憶手段３５０と、最適蛍光波長検出手段３５２と、を備えることとしている。
【００９１】
積算手段３３２は、図２０に示すように、励起光波長選択手段３１４による選択波長λＥＸｎ´を、蛍光波長選択手段３１８により選択された蛍光の波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段３２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭｘ´−Δλ１´）から蛍光波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段３２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ２´）を減算した波長（λＥＭｘ´−Δλ２´）まで走査して得られる、蛍光の波長λＥＭｎ´の単位励起スペクトルデータの蛍光強度を積算し、これを蛍光の波長λＥＭｎ´の積算蛍光強度として積算励起スペクトルデータ記憶手段３３４に記憶する。
【００９２】
そして、前述のような処理を、図２０に示すように、蛍光波長λＥＭ１の単位励起スペクトルデータ、蛍光波長λＥＭ２の単位励起スペクトルデータ…蛍光波長λＥＭｘの単位励起スペクトルデータについて順次に行い、図２３に示す積算蛍光スペクトルデータを得る。
仮最適蛍光波長検出手段３３６は、積算蛍光スペクトルデータ記憶手段３３４に記憶された積算蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０″を検出し、これを仮の最適蛍光波長として判断する。
【００９３】
仮の最適蛍光波長λＥＭ０″を検出すると、図２１に示すように、励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段３３８は、蛍光波長選択手段３１８による選択波長λＥＭｎ´を、仮最適蛍光波長検出手段３３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０″に仮固定する。
励起スペクトル採取時励起光波長制御手段３４０は、励起光波長選択手段３１４による選択波長λＥＸｎ´を、仮最適蛍光波長検出手段３３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０″から励起光波長情報記憶手段３２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭ０″−λ１´）に移動し、その波長（λＥＭ０´−λ１´）から最適蛍光波長λＥＭ０´から励起光波長情報記憶手段３２４で規定された所定量λ２´を減算した波長（λＥＭ０″−λ２´）まで走査する。
【００９４】
励起ペクトルデータ記憶手段３４２は、蛍光波長選択手段３１８による選択波長λＥＭｎ´を、仮最適蛍光波長検出手段３３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０″に仮固定しておいて、励起光波長選択手段３１４による選択波長λＥＸｎ´を、仮最適蛍光波長検出手段３３６により検出された仮の最適蛍光波長λＥＭ０″から励起光波長情報記憶手段２２４で規定された所定量（励起光差波長λ１´）を減算した波長（λＥＭ０″−λ１´）から、最適蛍光波長λＥＭ０″から励起光波長情報記憶手段３２４で規定された所定量（励起光差波長λ２´）を減算した波長（λＥＭ０″−λ２´）まで走査して得られる励起スペクトルデータを記憶する。
【００９５】
仮の最適蛍光波長λＥＭ０″の励起スペクトルデータを採取すると、最適励起波長検出手段３４４は、励起スペクトルデータ記憶手段３４２に記憶された励起スペクトルデータより蛍光強度が最大となる励起光波長λＥＸ０″を検出し、これを最適励起光波長として判断する。
最適励起光波長λＥＸ０″を検出すると、図２２に示すように、蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段３４６は、励起光波長選択手段３１４による選択波長λＥＸ０´を、最適励起光波長検出手段３４４により検出された最適励起波長λＥＭ０´に仮固定する。
【００９６】
蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段３４８は、蛍光波長選択手段３１８による選択波長を、蛍光波長情報記憶手段３２２で規定された走査範囲の波長上限値λＥＭｘ´に移動し、その波長上限値λＥＭｘ´から、最適励起波長検出手段３４４により検出された最適励起波長λＥＸ０´に励起光波長情報記憶手段３２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を加算した波長（λＥＸ０´＋Δλ１´）まで走査する。
【００９７】
蛍光ペクトルデータ記憶手段３５０は、励起光波長選択手段３１４による選択波長λＥＸ０´を、最適励起光波長検出手段３４４により検出された最適励起波長λＥＸ０´に仮固定しておいて、蛍光波長選択手段３１８による選択波長λＥＭｎ´を、蛍光波長情報記憶手段３２２で規定された走査範囲の波長上限値λＥＭｘ´から、最適励起波長検出手段３４４により検出された最適励起波長λＥＸ０´に励起波長情報記憶手段３２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を加算した波長（λＥＸ０´＋Δλ１´）まで走査して得られる蛍光スペクトルデータを記憶する。
【００９８】
最適励起波長λＥＸ０´の蛍光スペクトルデータを採取すると、最適蛍光波長検出手段３５２は、蛍光スペクトルデータ記憶手段３５０に記憶された蛍光スペクトルデータより蛍光の強度が最大となる波長λＥＭ０´を検出し、これを最適蛍光波長として判断する。
このように実施形態４においては、励起波長選択手段３１８による選択波長λＥＸｎが、蛍光波長選択手段３１４により選択された蛍光の波長λＥＭｎより励起光波長情報記憶手段３２４で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭｎ−Δλ１´）から走査を開始することとしているので、前記実施形態１と同様に、散乱光の波長が観測する蛍光の波長に重なることを常に回避することができるので、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを確実に防ぐことができる。
【００９９】
また、単位励起スペクトルデータについて積算処理を行うこととしているので、単位励起スペクトルデータに補正を与えることができる。単位励起スペクトルデータに若干のＳ／Ｎ比の低下が生じても積算処理を行うことにより補正を与えることができるので、励起スペクトルデータの採取を行うに際し、検出結果の信頼性を損なうことなく、従来と比較して分光器の波長走査速度を高速化することができる。そして、単位励起スペクトルデータを従来と比較して高速で採取することができるので、短時間に積算蛍光スペクトルデータの仮最適励起波長を検出することができる。
【０１００】
また、このような仮の最適蛍光波長を基準として、最適励起波長および最適蛍光波長を検出することとしているので、前記実施形態１と同様に、最適励起波長および最適蛍光波長の検出に要する時間を短縮化することができる。
さらに、仮の最適蛍光波長を検出した後、真の最適蛍光波長を検出することとしているので、前記実施形態１と同様に、最適励起波長および最適蛍光波長の検出をより適正に行うことができる。
【０１０１】
ところで、実施形態３又は４においては、蛍光波長情報記憶手段が、蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量（蛍光波長間隔ΔλＥＭ）を記憶するとしたとき、５ｎｍ≦ΔλＥＭ≦４０ｎｍなる条件式を満足するように構成することが好適である。
その結果、前記実施形態１と同様に、分光器の移動回数を極端に多くすることなく、しかも測定点が真の蛍光の強度が最大となる波長を跨ぎ越してしまうことがないように、蛍光波長選択手段の走査範囲の波長上限値より順次に減算する予め定められた所定量（蛍光波長間隔ΔλＥＭ）を設定することができるので、短時間に最適励起波長および最適蛍光波長の適正な検出を行うことが可能となる。
【０１０２】
また、実施形態３又は４においては、励起光波長情報記憶手段が、励起光波長選択手段の走査範囲の波長上限値として、蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長より予め定められた所定量（励起光差波長Δλ１′）を減算した波長を記憶するとしたとき、５ｎｍ≦Δλ１′≦４０ｎｍなる条件式を満足するように構成することが好適である。
その結果、前記実施形態１と同様に、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを防ぐように、最適励起波長および最適蛍光波長を見落すことがないようにストークス・シフトを設定することができるので、最適励起波長および最適蛍光波長の適正な検出を行うことが可能となる。
【０１０３】
また、実施形態３又は４においては、励起波長情報記憶手段が、蛍光波長選択手段による走査範囲の波長上限値として、蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長より予め定められた所定量（励起光差波長Δλ１′）を減算した波長を記憶するとき、この励起光差波長Δλ１′は、励起光波長選択手段のバンド幅に蛍光波長選択手段のバンド幅を加算した値とすることが好適である。
すなわち、この励起光差波長Δλ１′を励起光波長選択手段のバンド幅に蛍光波長選択手段のバンド幅を加算した値とすれば、前記実施形態１と同様に、散乱光の波長が観測する蛍光の波長に重なることを常に回避することができるので、観測する蛍光が散乱光に妨害されることを確実に防ぐことができる。
【０１０４】
また、実施形態３又は４においては、励起光波長情報記憶手段が、励起光波長選択手段による走査範囲の波長下限値として、蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長より予め定められた所定量（励起光差波長Δλ２′）を減算した波長を記憶するとき、この励起光差波長Δλ２′は、蛍光波長選択手段により選択された蛍光波長の１／２倍に励起光波長選択手段のバンド幅と蛍光波長選択手段のバンド幅を加算した値とすることが好適である。
すなわち、この励起光差波長Δλ２′を蛍光選択手段が選択する蛍光波長の１／２倍に励起光波長選択手段のバンド幅と蛍光波長選択手段のバンド幅を加算した値とすれば、前記実施形態１と同様に、散乱光の波長が観測する２次光の波長に重なることを常に回避することができるので、２次光が励起光に妨害されることを確実に防ぐすることができる。
【０１０５】
また、実施形態３又は４においては、励起光波長情報記憶手段が、励起光波長選択手段の走査範囲の波長下限値として、蛍光の波長より予め定められた所定量（励起光差波長Δλ２′）を減算した波長を記憶するとしたとき、１００ｎｍ≦Δλ２′≦４００ｎｍなる条件式を満足するように構成するのが好適であり、それによって、前記実施形態１と同様に、最適励起波長及び最適蛍光波長の検出を効率的にしかも適正に行うことが可能となる。
【０１０６】
なお、実施形態３又は４は、前記構成に限定されるものではなく、発明の要旨の範囲内で種々の変形が可能である。
例えば、実施形態３又は４においては、蛍光波長選択手段による選択波長λＥＭｎを、蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長上限値λＥＭｘ´から下限値λＥＭ１´まで、予め定められた所定量（蛍光波長間隔ΔλＥＭ´）づつ減少するように移動する構成としたが、蛍光波長情報記憶手段で規定された走査範囲の波長下限値λＥＭ１´から上限値λＥＭｘ´まで、蛍光波長情報記憶手段で規定された所定量（蛍光波長間隔ΔλＥＭ´）づつ増加するように移動する構成とすることも可能である。
【０１０７】
また、実施形態３又は４においては、励起光波長選択手段による選択波長λＥＸｘ´を、蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭｎ´−Δλ１´）から、蛍光の波長λＥＭｎ´から励起波長情報記憶手段で規定された所定量Δλ２´を減算した波長（λＥＭｎ´−Δλ２´）まで走査する構成としたが、測定可能な最短波長まで走査する構成とすることも可能である。
【０１０８】
さらに、実施形態３又は４においては、励起光波長選択手段による選択波長λＥＸｎ´を、蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長λＥＭｎ´から励起光波長情報記憶手段で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＭｎ´−Δλ１´）から、蛍光の波長λＥＭｎ´から励起光波長選択手段で規定された所定量Δλ２´を減算した波長（λＥＭｎ´−Δλ２´）まで走査すると、つぎに、励起光波長選択手段による選択波長λＥＸ（ｎ＋１）´を、蛍光波長選択手段により選択された蛍光の波長（λＥＭ（ｎ＋１）´＝λＥＭｎ´−ΔλＥＭ´）から励起光波長情報記憶手段で規定された所定量（励起光差波長Δλ１´）を減算した波長（λＥＸ（ｎ＋１）´＝λＥＭｎ´−ΔλＥＭ´）に移動する構成としたが、蛍光の波長（λＥＸ（ｎ＋１）´＝λＥＭｎ´−ΔλＥＭ´）から励起光波長情報記憶手段で規定された所定量（励起光差波長Δλ２´）を減算した波長（λＥＸ（ｎ＋１）´−Δλ２´）から走査を開始する構成とすることも可能であり、それによって、分光器の移動時間を短縮化することができる。
【０１０９】
【実施例】
以下、本発明の好適な実施例を説明する。なお、本発明は実施例に限定されるものではない。
そして、本実施形態においては、励起光波長情報記憶手段２２が、励起光波長選択手段１４の走査範囲の波長下限値λＥＸ１および上限値λＥＸｘを記憶し、その波長下限値λＥＸ１に順次に加算する予め定められた所定量（励起光波長間隔ΔλＥＸ）を記憶する。
蛍光波長情報記憶手段２４は、蛍光波長選択手段１８の走査範囲の波長下限値として、励起光波長選択手段２２により選択された励起光波長λＥＸｎに予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ１）を加算した波長を記憶する。また、その波長上限値として、励起光波長選択手段２２により選択された励起光波長λＥＸｎに予め定められた所定量（蛍光差波長Δλ２）を加算した波長を記憶する。
【０１１０】
積算蛍光スペクトルデータの採取
＜採取条件＞
励起光波長範囲    下限値／上限値はスペクトルデータの採取と同様、既定値は現在設定値
励起光波長間隔        １０、２０ｎｍから選択、既定値は１０ｎｍ
蛍光差波長Δλ１    励起光バンド幅＋蛍光バンド幅に固定
蛍光差波長Δλ２    １００、１５０、２００ｎｍ、ＭＡＸから選択、既定値はＭＡＸ
バンド幅          励起光、蛍光の両者は５、１０、２０ｎｍから選択、既定値は現在設定値
レスポンス        使用しない
波長走査速度      ８０００ｎｍ／ｍｉｎに固定
【０１１１】
＜採取方法＞
ａ．積算蛍光スペクトルデータを格納するデータ領域をクリアする。
ｂ．励起光の波長を走査範囲の波長下限値（１の桁は切り下げ）に移動する。
ｃ．励起光の波長が走査範囲の波長上限値よりも小さい場合、以下に示すｄ〜ｋを繰り返す。
ｄ．蛍光波長を励起光波長＋蛍光差波長Δλ１に移動する。もしその波長が蛍        光測定範囲外であれば終了する。
ｅ．現在の蛍光波長の蛍光差波長Δλ１をモータのステップ数に換算する。も        し、その位置が蛍光測定範囲外であれば、蛍光測定範囲の上限値までの        ステップ数を用意する。
ｆ．現在の蛍光波長（実際ステップ位置）のデータ領域を示すポインタを用意し、その励起光波長の積算蛍光強度用の変数をクリアする。
ｇ．ＡＤＣタイマとＡＤＣ割り込みを有効化する。
ｈ．ＡＤＣ割り込みごとにつぎの作業を行う。
ｈ．１．蛍光強度と励起光強度を取り込む。
ｈ．２．蛍光強度／励起光強度を計算し、ポインタの示すデータ領域に加算する。
ｈ．３．蛍光強度／励起光強度を積算蛍光強度用の変数に加算する。
ｈ．４．ポインタを１つ進め、ステップ数を１つ減らす。
ｈ．５．ステップ数が０になればＡＤＣタイマとＡＤＣ割り込みを無効化する。
ｈ．６．蛍光波長を１ステップ進める。
ｉ．ステップ数が０になるのを待つ。
ｊ．励起光波長と積算蛍光強度を外部手段（ｉＲＭ又はＤＳ）に出力する。
ｋ．励起光波長を指定された波長間隔だけ長波長側に移動する。
ｌ．積算蛍光スペクトルの各要素を励起光点数で割り算する（正規化）。
ｍ．蛍光バンド幅に合わせてレスポンス処理（Ａｕｔｏ）を行う。
ｎ．等間隔データとして外部手段（ｉＲＭ又はＤＳ）に出力する。
【０１１２】
0003554425.tif 000002
【０１１３】
＜採取方法＞
ｏ．蛍光の波長を仮の最適蛍光波長に移動する。
ｐ．通常の励起スペクトルデータの採取を前記条件で行う。
ｑ．蛍光強度が最大となる励起光波長（最適励起波長）を検出する。
【０１１４】
0003554425.tif 000003
【０１１５】
＜採取方法＞
ｒ．励起光の波長を最適励起波長に移動する。
ｓ．通常の蛍光スペクトルデータの採取を前記条件で行う。
ｔ．蛍光の強度が最大となる波長（最適蛍光波長）を検出する。
【０１１６】
結果の表示
＜条件設定時＞
条件設定時は、基本的には他のスペクトルデータの採取と同様である。設定すべき項目を以下に列挙する。
励起光波長範囲        下限値／上限値はスペクトルデータの採取と同様、規定値は現在設定値
励起光波長間隔ΔλＥＸ  １０、２０ｎｍから選択、既定値は１０ｎｍ
蛍光差波長Δλ２        １００、１５０、２００、ＭＡＸから選択、既定値はＭＡＸ
バンド幅                  励起光、蛍光は５、１０、２０ｎｍから選択、既定値  は現在設定値
蛍光感度                  Ｌｏｗ、Ｍｉｄ、Ｈｉｇｈから選択、既定値は現在設定値
波長走査速度              ６０、２５０、１０００、４０００ｎｍ／ｍｉｎから選択
自動印字                  ＯＮ／ＯＦＦ
【０１１７】
＜積算蛍光スペクトル採取時＞
横軸には励起光波長を、縦軸には積算蛍光強度をとった励起スペクトルデータをできる限り実時間で表示する。横軸のスケールは励起光波長範囲とし、縦軸のスケールはＡｕｔｏｓｃａｌｅとする。また、印刷は実行しない。
【０１１８】
＜励起スペクトルデータ／蛍光スペクトルデータの採取時＞
横軸には励起光波長又は蛍光波長をとり、縦軸には蛍光強度をとり、励起スペクトルデータと蛍光スペクトルデータを１つのグラフ上に表示する。できる限り実時間で表示する。縦軸はＡｕｔｏｓｃａｌｅとする（励起スペクトルデータと蛍光スペクトルデータの採取終了時にそれぞれ書き直す）。横軸のスケールは励起スペクトルデータの短波長端から蛍光波長の長波長端までとする。
【０１１９】
＜励起スペクトルデータ／蛍光スペクトルデータの採取後＞
前記スペクトルデータに加え、最適励起波長と最適蛍光波長を表示する。自動印字がＯＮであれば、スペクトルデータ、採取条件、最適励起波長および最適蛍光波長を同時に印字する。
【０１２０】
性能の予想
以下に示す最長条件および一般条件において積算蛍光スペクトルデータの採取に要する時間を推定する。なお、波長走査速度はスローアップなしの８０００ｎｍ／ｍｉｎ、波長移動速度はスローアップなしの３００００ｎｍ／ｍｉｎとして計算する。
0003554425.tif 000004
最長条件では、蛍光の走査が６１回、波長走査が２３８００ｎｍ、波長移動が２５０００ｎｍとなる。つなぎの時間が機械的動作に比べて十分に高速であると仮定すると、所要時間が３分５０秒となる。
一般条件では、蛍光の走査が１９回、波長走査が３５８０ｎｍ、波長移動が３９３０ｎｍとなり、所用時間が３５秒となる。通常のスペクトルデータの採取においても１〜２分を要することから、これは十分に高速であるといえる。
【０１２１】
【発明の効果】
以上説明したように、本発明にかかる蛍光分光光度計によれば、従来と比較して、短時間に最適励起波長および最適蛍光波長の適正な検出を行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施形態１にかかる蛍光分光光度計の概略構成の説明図である。
【図２】前記図１に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図３】前記図１に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図４】前記図１に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図５】本発明において用いられる励起光波長選択手段および蛍光波長選択手段の作用を示す説明図である。
【図６】本発明において用いられる積算手段および仮最適蛍光波長検出手段の作用を示す説明図である
【図７】本発明において用いられる最適励起波長検出手段の作用を示す説明図である。
【図８】本発明において用いられる最適蛍光波長検出手段の作用を示す説明図である。
【図９】本発明の実施形態２にかかる蛍光分光光度計の概略構成の説明図である。
【図１０】前記図７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図１１】前記図７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図１２】前記図７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図１３】実施形態２において用いられる積算手段および仮最適蛍光波長検出手段の作用を示す説明図である
【図１４】本発明の実施形態３にかかる蛍光分光光度計の概略構成の説明図である。
【図１５】前記図９に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図１６】前記図７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図１７】前記図７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図１８】実施形態３において用いられる積算手段および仮最適蛍光波長検出手段の作用を示す説明図である
【図１９】本発明の実施形態４にかかる蛍光分光光度計の概略構成の説明図である。
【図２０】前記図１７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図２１】前記図１７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図２２】前記図１７に示された蛍光分光光度計の作用を示すフローチャート図である。
【図２３】実施形態４において用いられる積算手段および仮最適蛍光波長検出手段の作用を示す説明図である
【符号の説明】
１０    蛍光分光光度計
１２    光源手段
１４    励起光の波長選択手段
１６    試料室
１８    蛍光の波長選択手段
２０    測光手段
２２    励起光波長情報記憶手段
２４    蛍光波長情報記憶手段
２６    単位スペクトル採取時励起光波長制御手段
２８    単位スペクトル採取時蛍光波長制御手段
３２    積算手段
３４    積算蛍光スペクトルデータ記憶手段
３６    仮最適蛍光波長検出手段
３８    励起スペクトル採取時蛍光波長制御手段
４０    励起スペクトル採取時励起光波長制御手段
４２    励起スペクトルデータ記憶手段
４４    最適励起波長検出手段
４６    蛍光スペクトル採取時励起光波長制御手段
４８    蛍光スペクトル採取時蛍光波長制御手段
５０    蛍光スペクトルデータ記憶手段
５２    最適蛍光波長検出手段
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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