【手続補正書】
【提出日】平成29年5月26日(2017.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
開始アミノ酸配列の変異型を含むポリペプチドであって、前記開始アミノ酸配列は、配列番号１のアミノ酸１〜２１７から選択され、
（ａ）前記ポリペプチドは、アミロイドに結合する、及び／またはアミロイドを脱凝集させ、
（ｂ）前記ポリペプチドは、前記開始アミノ酸配列を含むポリペプチドと比較して低減された免疫原性を有し、
（ｃ）前記変異型は、前記開始アミノ酸配列と比較して１〜９つのアミノ酸置換を含み、前記アミノ酸置換の少なくとも１つは、下記のアミノ酸置換の群から選択される、ポリペプチド。
【表１５】
2016526044.tif 000001
【請求項２】
前記開始アミノ酸配列と比較して、以下の修飾：
（ｉ）アミノ酸４３〜４５におけるＡＡＡによるＶＶＶの置換、
（ｉｉ）置換Ｃ５３Ｗ
（ｉｉｉ）アミノ酸９６〜１０３の欠失
（ｉｖ）アミノ酸２１２〜２１４におけるＡＧＡによるＱＰＰの置換、
（ｖ）置換Ｗ１８１Ａ、Ｆ１９０Ａ、及びＦ１９４Ａ
（ｖｉ）アミノ酸１の欠失、ならびに
（ｖｉｉ）アミノ酸１及び２の欠失、
のうちの１つ以上をさらに含む、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
開始アミノ酸配列の変異型を含むポリペプチドであって、前記開始アミノ酸配列は、配列番号３のアミノ酸１〜２１７から選択され、
（ａ）前記ポリペプチドは、アミロイドに結合する、及び／またはアミロイドを脱凝集させ、
（ｂ）前記ポリペプチドは、前記開始アミノ酸配列を含むポリペプチドと比較して低減された免疫原性を有し、
（ｃ）前記変異型は、前記開始アミノ酸配列と比較して１〜９つのアミノ酸置換を含み、前記アミノ酸置換の少なくとも１つは、下記のアミノ酸置換の群から選択される、ポリペプチド。
【表２０】
2016526044.tif 000002
【請求項４】
前記開始アミノ酸配列と比較して、以下の修飾：
（ｉ）アミノ酸４３〜４５におけるＡＡＡによるＶＶＶの置換、
（ｉｉ）置換Ｃ５３Ｗ
（ｉｉｉ）アミノ酸９６〜１０３の欠失
（ｉｖ）アミノ酸２１２〜２１４におけるＡＧＡによるＱＰＰの置換、
（ｖ）置換Ｗ１８１Ａ、Ｆ１９０Ａ、及びＦ１９４Ａ
（ｖｉ）アミノ酸１の欠失、ならびに
（ｖｉｉ）アミノ酸１及び２の欠失、
のうちの１つ以上をさらに含む、請求項３に記載のポリペプチド。
【請求項５】
開始アミノ酸配列の変異型を含むポリペプチドであって、前記開始アミノ酸配列は、配列番号７のアミノ酸１〜２１７から選択され、
（ａ）前記ポリペプチドは、アミロイドに結合する、及び／またはアミロイドを脱凝集させ、
（ｂ）前記ポリペプチドは、前記開始アミノ酸配列を含むポリペプチドと比較して低減された免疫原性を有し、
（ｃ）前記変異型は、前記開始アミノ酸配列と比較して１〜９つのアミノ酸置換を含み、前記アミノ酸置換の少なくとも１つは、下記のアミノ酸置換の群から選択される、ポリペプチド。
【表２１】
2016526044.tif 000003
【請求項６】
前記開始アミノ酸配列と比較して、以下の修飾：
（ｉ）アミノ酸４３〜４５におけるＡＡＡによるＶＶＶの置換、
（ｉｉ）置換Ｃ５３Ｗ
（ｉｉｉ）アミノ酸９６〜１０３の欠失
（ｉｖ）アミノ酸２１２〜２１４におけるＡＧＡによるＱＰＰの置換、
（ｖ）置換Ｗ１８１Ａ、Ｆ１９０Ａ、及びＦ１９４Ａ
（ｖｉ）アミノ酸１の欠失、ならびに
（ｖｉｉ）アミノ酸１及び２の欠失、
のうちの１つ以上をさらに含む、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項７】
前記開始アミノ酸配列と比較した前記変異型における１〜９つのアミノ酸置換の各々は、下記のアミノ酸置換の群から選択される、請求項１〜６のいずれか1項に記載のポリペプチド。
【表１７】
2016526044.tif 000004
【請求項８】
前記変異型アミノ酸配列は、前記開始アミノ酸配列に対して２〜９つのアミノ酸置換を有し、１つの置換は、
【表２２】
2016526044.tif 000005
から選択され、少なくとも１つの置換は、以下の表：
【表２３】
2016526044.tif 000006
から選択される、請求項１または請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項９】
前記変異型アミノ酸配列は、前記開始アミノ酸配列に対して２〜９つのアミノ酸置換を有し、１つの置換は、
【表２４】
2016526044.tif 000007
から選択され、少なくとも１つの置換は、以下の表：
【表２５】
2016526044.tif 000008
から選択される、請求項１または請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項１０】
前記変異型アミノ酸配列は、前記開始アミノ酸配列に対して２〜９つのアミノ酸置換を有し、少なくとも１つの置換が、配列番号１、配列番号３、または配列番号７のアミノ酸４８〜５６を含むエピトープ１、配列番号１、配列番号３、または配列番号７のアミノ酸１３５〜１４３を含むエピトープ２、及び配列番号１、配列番号３、または配列番号７のアミノ酸１７３〜１８１を含むエピトープ３、のうちの少なくとも２つの中に存在する、請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１１】
前記変異型アミノ酸配列は、下記の２つのアミノ酸置換の群から選択される少なくとも２つのアミノ酸置換を有する、請求項１０に記載のポリペプチド。
【表１８】
2016526044.tif 000009
【請求項１２】
前記変異型アミノ酸配列は、前記開始アミノ酸配列に対して３〜９つのアミノ酸置換を有し、１つの置換は、
【表２６】
2016526044.tif 000010
から選択され、エピトープ１、エピトープ２及びエピトープ３の少なくとも２つにおける少なくとも１つの置換は、以下の表：
【表２７】
2016526044.tif 000011
から選択され、
エピトープ１は、配列番号１のアミノ酸４８〜５６を含み、エピトープ２は、配列番号１のアミノ酸１３５〜１４３を含み、そして、エピトープ３は、配列番号１のアミノ酸１７３〜１８１を含む、請求項１または請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
前記変異型アミノ酸配列は、前記開始アミノ酸配列に対して３〜９つのアミノ酸置換を有し、１つの置換は、
【表２８】
2016526044.tif 000012
から選択され、エピトープ１、エピトープ２及びエピトープ３の少なくとも２つにおける少なくとも１つの置換は、以下の表：
【表２９】
2016526044.tif 000013
から選択され、
エピトープ１は、配列番号１のアミノ酸４８〜５６を含み、エピトープ２は、配列番号１のアミノ酸１３５〜１４３を含み、そして、エピトープ３は、配列番号１のアミノ酸１７３〜１８１を含む、請求項１または請求項２に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
前記変異型アミノ酸配列は、前記開始アミノ酸配列に対して３〜９つのアミノ酸置換を有し、少なくとも１つの置換が、配列番号１、配列番号３、または配列番号７のアミノ酸４８〜５６を含むエピトープ１、配列番号１、配列番号３、または配列番号７のアミノ酸１３５〜１４３を含むエピトープ２、及び配列番号１、配列番号３、または配列番号７のアミノ酸１７３〜１８１を含むエピトープ３の各々の中にある、請求項１〜６のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１５】
前記置換は、以下の組のアミノ酸置換：Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｋ、及びＤ１７８Ｎ、Ｔ５６Ｋ、Ｍ１３５Ｋ、及びＤ１７８Ｎ、Ｔ５６Ｋ、Ｍ１３５Ｔ、及びＤ１７８Ｎ、Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｋ、及びＷ１８１Ｒ、Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｔ、及びＷ１８１Ｒ、Ｙ５４Ｋ、Ｍ１３５Ｔ、及びＫ１７４Ｒ、Ｙ５４Ｒ、Ｍ１３５Ｋ、及びＫ１７４Ｒ、Ｙ５４Ｒ、Ｍ１３５Ｔ、及びＫ１７４Ｒ、Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｋ、及びＫ１７４Ｒ、ならびにＴ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｔ、及びＫ１７４Ｒ、のいずれかから選択される、請求項１４に記載のポリペプチド。
【請求項１６】
ペプチドリンカーを介してか、または直接的にかのいずれかで前記変異型アミノ酸配列のＣ末端に融合されるヒトまたはヒト化免疫グロブリンＦｃポリペプチド配列から本質的に成る、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１７】
前記免疫グロブリンＦｃポリペプチド配列は、ヒトＩｇＧのＦｃ部分である、請求項１６に記載のポリペプチド。
【請求項１８】
前記ペプチドリンカー及びヒトＩｇＧのＦｃ部分の前記アミノ酸配列は、配列番号１のアミノ酸２１８〜４８８、配列番号３のアミノ酸２１８〜４８６、及び配列番号７のアミノ酸２１８〜４８８から選択される、請求項１７に記載のポリペプチド。
【請求項１９】
修飾された開始配列から成るポリペプチド変異型であって、前記開始配列は、配列番号３または配列番号７から選択され、前記修飾は、下記から選択されるアミノ酸置換を含む、ポリペプチド変異型。
【表１９−１】
2016526044.tif 000014
【表１９−２】
2016526044.tif 000015
【請求項２０】
前記開始配列が配列番号７であり、前記修飾は、
ａ）Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｋ及びＤ１７８Ｎ；
ｂ）Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｋ及びＷ１８１Ｒ；
ｃ）Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｋ及びＫ１７４Ｒ；
ｄ）Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｔ及びＷ１８１Ｒ；
ｅ）Ｔ５６Ｈ、Ｍ１３５Ｔ及びＫ１７４Ｒ；
ｆ）Ｔ５６Ｋ、Ｍ１３５Ｋ及びＤ１７８Ｎ；
ｇ）Ｔ５６Ｋ、Ｍ１３５Ｔ及びＤ１７８Ｎ；
ｈ）Ｙ５４Ｋ、Ｍ１３５Ｔ及びＫ１７４Ｒ；
ｉ）Ｙ５４Ｒ、Ｍ１３５Ｋ及びＫ１７４Ｒ；ならびに
ｊ）Ｙ５４Ｒ、Ｍ１３５Ｔ及びＫ１７４Ｒ
から選択される３つのアミノ酸置換を含む、請求項１９に記載のポリペプチド変異型。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか一項に記載の前記ポリペプチドと薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【請求項２２】
前記組成物は、患者の血流中への注射または注入のために製剤化される、請求項２１に記載の薬学的組成物。
【請求項２３】
前記組成物は、脳またはＣＮＳへの直接投与のために製剤化される、請求項２２に記載の前記薬学的組成物。
【請求項２４】
アミロイドまたはタウタンパク質凝集体の低減を必要とする患者において、アミロイドまたはタウタンパク質凝集体を低減させるのに使用するための、請求項２１〜２３のいずれか一項に記載の薬学的組成物、または請求項１〜２０のいずれか一項に記載のポリペプチドを含む薬学的組成物。
【請求項２５】
前記患者は、アミロイドまたはタウタンパク質凝集体の存在に関連付けられる神経変性疾患の症状を示す、請求項２４に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記患者は、バイオマーカーフロルベタピルが陽電子放出断層撮影において造影剤として使用されるときに、そのバイオマーカーに関して陽性である、請求項２４または請求項２５に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
前記患者は、アルツハイマー病（早発性アルツハイマー病、遅発性アルツハイマー病、及び発症前アルツハイマー病を含む）、パーキンソン病、ＳＡＡアミロイド症、シスタチンＣ、遺伝性アイスランド病、老衰、多発性骨髄腫、プリオン病（クールー、クロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病（ＧＳＳ）、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）、スクラピー、及び牛海綿状脳症（ＢＳＥ）を含むがそれらに限定されない）、筋委縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、脊髄小脳失調（ＳＣＡ１、ＳＣＡ３、ＳＣＡ６、またはＳＣＡ７）、ハンチントン病、歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症（ｅｎｔａｔｏｒｕｂｒａｌ−ｐａｌｌｉｄｏｌｕｙｓｉａｎ  ａｔｒｏｐｈｙ）、球脊髄性筋萎縮症、遺伝性脳アミロイド血管症、家族性アミロイド症、イギリス型／デンマーク型認知症、家族性脳症、筋委縮性側索硬化症／パーキンソン病・認知症複合病、嗜銀顆粒性認知症、大脳皮質基底核変性症、ボクサー認知症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー病、ハラーホルデン・スパッツ病、筋強直性ジストロフィー、ニーマン・ピック病Ｃ型、神経原線維変化を伴う非グアム型運動ニューロン疾患（Ｎｏｎ−Ｇｕａｍａｎｉａｎ  ｍｏｔｏｒ  ｎｅｕｒｏｎ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｗｉｔｈ  ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ  ｔａｎｇｌｅｓ）、ピック病、脳炎後パーキンソン病、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、亜急性硬化性汎脳炎、神経原線維型認知症、前頭側頭葉変性症（ＦＴＬＤ）、及び前頭側頭葉型認知症（ＦＴＤ）（以下の臨床症候群のうちの１つ以上を有する患者を含む：行動障害型ＦＴＤ（ｂｖＦＴＤ）、進行性非能弁的失語症（ＰＮＦＡ）、１７番染色体に関連付けられるパーキンソン病を伴う前頭側頭型認知症、進行性核上性麻痺（Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  Ｓｕｐｒａｎｕｃｌｅａｒ  Ｐａｌｓｅｙ）（ＰＳＰ）、及び意味性認知症（ＳＤ））から選択される神経変性疾患に罹患している、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
前記神経変性疾患は、パーキンソン病、アルツハイマー病、またはハンチントン病である、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項２９】
前記神経変性疾患は、アルツハイマー病である、請求項２８に記載の薬学的組成物。
【請求項３０】
前記患者は、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー、致死性家族性不眠症、またはゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群から選択されるプリオン媒介疾患に罹患している、請求項２７に記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
請求項１〜２０に記載の前記ポリペプチドのうちのいずれか１つをコードする核酸配列。
【請求項３２】
前記ポリペプチドコード配列にかつインフレームで融合された哺乳類シグナル配列をさらにコードする、請求項３１に記載の核酸配列。
【請求項３３】
請求項３１または３２に記載の核酸配列を含むベクターであって、前記核酸配列は、前記ベクター内の発現制御配列に作動可能に連結される、前記ベクター。
【請求項３４】
請求項３３に記載の前記ベクターを含有する、宿主細胞。
【請求項３５】
請求項１〜２０のいずれか一項に記載のポリペプチドを作製する方法であって、請求項３１または３２に記載の前記核酸配列によってコードされるタンパク質を発現させるステップと、前記発現されたポリペプチドを単離するステップと、を含む、方法。
【請求項３６】
請求項１〜２０のいずれか一項に記載のポリペプチドを作製する方法であって、前記ポリペプチドの発現を可能にするのに十分な条件下で、請求項３４に記載の前記宿主細胞を培養するステップと、前記発現されたポリペプチドを単離するステップと、を含む、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０４】
表１０に記載のアミノ酸置換のうちの２つを各々が異なるエピトープ中にある状態で有するＮ１−Ｎ２−ヒトＩＧ  Ｆｃ融合タンパク質をコードするＤＮＡを、適切な開始ＤＮＡ（典型的には、実施例３に記載される通りに調製される２つの突然変異のうちの１つをコードするＤＮＡ）の部位特異的突然変異生成を使用することによって調製した。得られたこれらの融合タンパク質をコードするＤＮＡを使用して、細胞を形質転換し、実施例４に記載される通りに発現させ、精製し、実施例５に記載される通り結合に関して試験した。次に、エピトープ１、２、及び３の各々の中に１つの置換を有するポリペプチドを、２つのアミノ酸置換ポリペプチドの結合分析の結果に基づいて設計した。エピトープ１、２、及び３の各々の中に１つの置換を有するポリペプチドを、実施例６に記載される通り、Ａβ結合及びＴ細胞応答の両方に関して分析する。具体的には、以下の二重及び三重エピトープ変異型を、下記の表１１に指示される通り、配列番号３または配列番号７中の特定のアミノ酸を置換することによって作製した。
【表１１−１】
2016526044.tif 000016
【表１１−２】
2016526044.tif 000017
【表１１−３】
2016526044.tif 000018
上記のポリペプチドを、実施例５に記載のＥＬＩＳＡ分析を使用してβ−アミロイドへの結合に関して分析した。結果は、表１２及び１３に記載される。相対的結合値は、ＩＣ５０（配列番号３のポリペプチド）／ＩＣ５０（試験ポリペプチド）を反映する（例えば、値が低ければ低いほど、該ポリペプチドの結合は配列番号３のポリペプチドと比較して大きい）。複数の値は、結合分析における二重反復試験を反映している。
【表１２−１】
2016526044.tif 000019
【表１２−２】
2016526044.tif 000020
【表１３−１】
2016526044.tif 000021
【表１３−２】
2016526044.tif 000022