【手続補正書】
【提出日】平成29年2月17日(2017.2.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、ヒト化ＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドをコードするヌクレオチド配列およびヒト化ＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む遺伝子改変非ヒト動物であって、
該キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドが、ヒトＣＤ４ポリペプチドの少なくともＭＨＣ  ＩＩ結合ドメインならびに非ヒトＣＤ４ポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含み、
該ヒト化ＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドが、ヒトＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドのα１ドメインおよびα２ドメインならびに非ヒトＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドの膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含み、
該ヒト化ＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドが、ヒトＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドのβ１ドメインおよびβ２ドメインならびに非ヒトＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドの膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含み、
該非ヒト動物が、該キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドならびに該ヒト化ＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドおよびヒト化ＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドを含むヒト化ＭＨＣ  ＩＩタンパク質を発現し、
該キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドと該ヒト化ＭＨＣ  ＩＩタンパク質とが相互作用する、
非ヒト動物。
【請求項２】
前記キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドが、Ｂ細胞またはＣＤ８シングルポジティブＴ細胞上で発現されない、請求項１に記載の動物。
【請求項３】
キメラヒト／非ヒトＣＤ８αポリペプチドをコードする核酸配列、キメラヒト／非ヒトＣＤ８βポリペプチドをコードする核酸配列、ヒト化ＭＨＣ  Ｉポリペプチドをコードする核酸配列、および任意選択で、ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンをコードする核酸配列を含む遺伝子改変非ヒト動物であって、
該キメラヒト／非ヒトＣＤ８αポリペプチドは、ヒトＣＤ８αポリペプチドの少なくともＭＨＣ  Ｉ結合ドメインならびに非ヒトＣＤ８αポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含み、
該キメラヒト／非ヒトＣＤ８βポリペプチドは、ヒトＣＤ８βポリペプチドの少なくともＭＨＣ  Ｉ結合ドメインならびに非ヒトＣＤ８βポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含み、
該ヒト化ＭＨＣ  Ｉポリペプチドは、ヒトＭＨＣ  Ｉポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメインおよびα３ドメインならびに非ヒトＭＨＣ  Ｉポリペプチドの膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含み、
該非ヒト動物は、ＣＤ８αポリペプチドおよびＣＤ８βポリペプチドを含むキメラヒト／非ヒトＣＤ８タンパク質ならびに該ヒト化ＭＨＣ  Ｉポリペプチド、ならびに任意選択で、該ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンを発現し、
該キメラヒト／非ヒトＣＤ８タンパク質とヒト化ＭＨＣ  Ｉポリペプチドとが相互作用する、
非ヒト動物。
【請求項４】
前記キメラヒト／非ヒトＣＤ８タンパク質が、Ｂ細胞またはＣＤ４シングルポジティブＴ細胞上で発現されない、請求項３に記載の動物。
【請求項５】
キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列が内在性非ヒトＣＤ４補助受容体遺伝子座に存在するか、またはキメラヒト／非ヒトＣＤ８αポリペプチドをコードする前記核酸配列が内在性非ヒトＣＤ８α補助受容体遺伝子座に存在し、キメラヒト／非ヒトＣＤ８βポリペプチドをコードする前記核酸配列が内在性非ヒトＣＤ８β補助受容体遺伝子座に存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の動物。
【請求項６】
内在性ＣＤ４遺伝子座に由来する機能的な内在性非ヒトＣＤ４補助受容体を発現しないか、または内在性ＣＤ８遺伝子座に由来する機能的な内在性非ヒトＣＤ８補助受容体を発現しない、請求項１〜５のいずれか一項に記載の動物。
【請求項７】
げっ歯類である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の動物。
【請求項８】
前記げっ歯類がマウスである、請求項７に記載の動物。
【請求項９】
キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列がマウスＣＤ４プロモーター配列および調節配列に作動可能に連結しているか、またはキメラヒト／非ヒトＣＤ８αポリペプチドをコードする前記核酸配列がマウスＣＤ８αプロモーター配列および調節配列に作動可能に連結しており、キメラヒト／非ヒトＣＤ８βポリペプチドをコードする前記核酸配列がマウスＣＤ８βプロモーター配列および調節配列に作動可能に連結している、請求項８に記載のマウス。
【請求項１０】
キメラヒト／非ヒトＣＤ４ポリペプチドをコードする前記ヌクレオチド配列またはキメラヒト／非ヒトＣＤ８αポリペプチドをコードする前記核酸配列およびキメラヒト／非ヒトＣＤ８βポリペプチドをコードする前記核酸配列が前記マウスの生殖細胞系列に含まれる、請求項８〜９のいずれか一項に記載のマウス。
【請求項１１】
マウスのＣＤ４遺伝子座を、発現されたヒト化ＨＭＣ  Ｉポリペプチドと相互作用するキメラヒト／マウスＣＤ４ポリペプチドを発現するように改変する方法であって、
（ｉ）マウスの内在性ＣＤ４遺伝子座において、内在性マウスＣＤ４ポリペプチドをコードする第一のヌクレオチド配列をキメラヒト／マウスＣＤ４ポリペプチドをコードする第二のヌクレオチド配列で置き換えるステップ；ならびに
（ｉｉ）前記マウスにヒト化ＭＨＣ  ＩＩをコードするヌクレオチド配列を導入するステップであって、該ヒト化ＭＨＣ  ＩＩが、（ａ）ヒトＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドの前記α１ドメインおよびα２ドメインならびに前記内在性マウスＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインならびに（ｂ）ヒトＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドの前記β１ドメインおよびβ２ドメインならびに前記内在性マウスＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドの膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、ステップ
を含む方法。
【請求項１２】
前記キメラヒト／マウスＣＤ４ポリペプチドのヒト部分が、ヒトＣＤ４ポリペプチドの少なくともＤ１ドメインおよびＤ２ドメインならびに内在性マウスＣＤ４ポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ヒト部分が、前記ヒトＣＤ４ポリペプチドのＤ１ドメイン、Ｄ２ドメインおよびＤ３ドメインを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
マウスのＣＤ８遺伝子座を、発現されたヒト化ＭＨＣ  Ｉポリペプチドと相互作用するキメラヒト／マウスＣＤ８ポリペプチドを発現するように改変する方法であって、
（ｉ）マウスの内在性ＣＤ８遺伝子座において、内在性マウスＣＤ８ポリペプチドをコードする第一のヌクレオチド配列をキメラヒト／マウスＣＤ８ポリペプチドをコードする第二のヌクレオチド配列で置き換えるステップ；ならびに
（ｉｉ）前記マウスにヒトＭＨＣ  Ｉポリペプチドのα１ドメイン、α２ドメインおよびα３ドメインならびに前記内在性マウスＭＨＣ  Ｉポリペプチドの膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインをコードする核酸を導入するステップ
を含む方法。
【請求項１５】
前記ＣＤ８ポリペプチドがＣＤ８α、ＣＤ８β、またはこれらの組合せから選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記キメラヒト／マウスＣＤ８ポリペプチドが、ヒトＣＤ８ポリペプチドの細胞外ドメインならびに内在性マウスＣＤ８ポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、請求項１４または請求項１５に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
対照的に、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）は、補助受容体ＣＤ８を発現し、ＭＨＣ  Ｉ分子に結合した外来抗原を認識する。ＣＴＬは、それ自体の膜に結合したＴＣＲによって認識されるＭＨＣ  Ｉ結合ペプチドを担持するいかなる細胞をも死滅させるように特殊化されている。細胞により通常は存在しない細胞タンパク質に由来するペプチド（例えば、ウイルス、腫瘍、または他の非自己起源のもの）がディスプレイされる場合、そのようなペプチドはＣＴＬによって認識され、それによりＣＴＬが活性化し、そのペプチドをディスプレイしている細胞を死滅させる。ＣＤ４と同様に、ＣＤ８の会合により、ＭＨＣ  Ｉに提示された抗原に対するＣＴＬの感受性がより高くなる。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
キメラヒト／非ヒトＴ細胞補助受容体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
該キメラポリペプチドの非ヒト部分が、非ヒトＴ細胞補助受容体の少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、遺伝子改変非ヒト動物であって、
キメラＴ細胞補助受容体ポリペプチドを発現する非ヒト動物。
（項目２）
前記ヌクレオチド配列が内在性Ｔ細胞補助受容体遺伝子座に存在する、項目１に記載の動物。
（項目３）
内在性遺伝子座に由来する機能的な内在性非ヒトＴ細胞補助受容体を発現しない、項目１に記載の動物。
（項目４）
前記キメラＴ細胞補助受容体ポリペプチドが前記非ヒト動物のＢ細胞上で発現されない、項目１に記載の動物。
（項目５）
前記Ｔ細胞補助受容体遺伝子座がＣＤ４遺伝子座であり、前記Ｔ細胞補助受容体ポリペプチドがＣＤ４である、項目１に記載の動物。
（項目６）
前記キメラＣＤ４ポリペプチドがＢ細胞またはＣＤ８系列のＴ細胞上で発現されない、項目５に記載の動物。
（項目７）
前記キメラＴ細胞補助受容体遺伝子座がＣＤ８遺伝子座であり、前記Ｔ細胞補助受容体ポリペプチドがＣＤ８α、ＣＤ８β、またはこれらの組合せから選択されるＣＤ８ポリペプチドである、項目１に記載の動物。
（項目８）
ＣＤ８αポリペプチドおよびＣＤ８βポリペプチドを含むキメラヒト／非ヒトＣＤ８タンパク質を発現する、項目７に記載の動物。
（項目９）
前記キメラＣＤ８タンパク質がＢ細胞またはＣＤ４系列のＴ細胞上で発現されない、項目８に記載の動物。
（項目１０）
げっ歯類である、項目１に記載の動物。
（項目１１）
マウスである、項目１０に記載の動物。
（項目１２）
キメラヒト／マウスＣＤ４ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
前記キメラポリペプチドのヒト部分が、図１に記載されているヒトＣＤ４ポリペプチドのドメインを少なくとも含み、
前記キメラポリペプチドのマウス部分が、マウスＣＤ４ポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、遺伝子改変マウスであって、
キメラヒト／マウスＣＤ４を発現するマウス。
（項目１３）
前記ヒト部分が、前記ヒトＣＤ４ポリペプチドの細胞外ドメインを含む、項目１２に記載のマウス。
（項目１４）
前記ヌクレオチド配列が内在性ＣＤ４遺伝子座に存在する、項目１２に記載のマウス。
（項目１５）
内在性マウスＣＤ４遺伝子座に由来する機能的な内在性マウスＣＤ４を発現しない、項目１２に記載のマウス。
（項目１６）
前記ヌクレオチド配列がマウスプロモーター配列および調節配列に作動可能に連結している、項目１２に記載のマウス。
（項目１７）
前記キメラＣＤ４タンパク質がＢ細胞またはＣＤ８系列のＴ細胞上で発現されない、項目１２に記載のマウス。
（項目１８）
ヒトまたはヒト化ＭＨＣ  ＩＩタンパク質をさらに含み、該ＭＨＣ  ＩＩタンパク質が、ヒトＭＨＣ  ＩＩαポリペプチドの細胞外ドメインおよびヒトＭＨＣ  ＩＩβポリペプチドの細胞外ドメインを含む、項目１２に記載のマウス。
（項目１９）
前記ヌクレオチド配列が前記マウスの生殖細胞系列に含まれる、項目１２に記載のマウス。
（項目２０）
マウスのＣＤ４遺伝子座を、キメラヒト／マウスＣＤ４ポリペプチドを発現するように改変する方法であって、マウスの内在性ＣＤ４遺伝子座において、内在性マウスＣＤ４ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列をキメラヒト／マウスＣＤ４ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列で置き換えるステップを含む方法。
（項目２１）
前記キメラヒト／マウスＣＤ４ポリペプチドのヒト部分が、図１に記載されているヒトＣＤ４ポリペプチドのドメインを少なくとも含み、内在性マウスＣＤ４ポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記ヒト部分が、前記ヒトＣＤ４ポリペプチドの細胞外ドメインを含む、項目２０に記載の方法。
（項目２３）
キメラヒト／マウスＣＤ８αポリペプチドをコードする第１のヌクレオチド配列およびキメラヒト／マウスＣＤ８βポリペプチドをコードする第２のヌクレオチド配列を含み、該第１のヌクレオチド配列が、ヒトＣＤ８αポリペプチドの細胞外ドメインならびにマウスＣＤ８αポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインをコードする配列を含み、
該第２のヌクレオチド配列が、ヒトＣＤ８βポリペプチドの細胞外ドメインならびにマウスＣＤ８βポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインをコードする配列を含む、遺伝子改変マウスであって、
キメラヒト／マウスＣＤ８タンパク質を発現するマウス。
（項目２４）
前記第１のヌクレオチド配列および前記第２のヌクレオチド配列が、それぞれ内在性ＣＤ８α遺伝子座および内在性ＣＤ８β遺伝子座に存在する、項目２３に記載のマウス。
（項目２５）
内在性ＣＤ８遺伝子座に由来する機能的な内在性ＣＤ８タンパク質を発現しない、項目２３に記載のマウス。
（項目２６）
前記キメラヒト／マウスＣＤ８タンパク質がＢ細胞またはＣＤ４系列のＴ細胞上で発現されない、項目２３に記載のマウス。
（項目２７）
前記第１のヌクレオチド配列がマウスＣＤ８αプロモーター配列および調節配列に作動可能に連結しており、前記第２のヌクレオチド配列がマウスＣＤ８βプロモーター配列および調節配列に作動可能に連結している、項目２３に記載のマウス。
（項目２８）
ヒトまたはヒト化ＭＨＣ  Ｉポリペプチドをさらに含み、該ＭＨＣ  ＩポリペプチドがヒトＭＨＣ  Ｉポリペプチドの細胞外ドメインを含む、項目２３に記載のマウス。
（項目２９）
ヒトまたはヒト化β２ミクログロブリンポリペプチドをさらに含む、項目２８に記載のマウス。
（項目３０）
前記第１のヌクレオチド配列および前記第２のヌクレオチド配列が前記マウスの生殖細胞系列に含まれる、項目２３に記載のマウス。
（項目３１）
マウスのＣＤ８遺伝子座を、キメラヒト／マウスＣＤ８ポリペプチドを発現するように改変する方法であって、マウスの内在性ＣＤ８遺伝子座において、内在性マウスＣＤ８ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列をキメラヒト／マウスＣＤ８ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列で置き換えるステップを含む方法。
（項目３２）
前記ＣＤ８ポリペプチドがＣＤ８α、ＣＤ８β、またはこれらの組合せから選択される、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記キメラヒト／マウスＣＤ８ポリペプチドが、ヒトＣＤ８ポリペプチドの細胞外ドメインならびに内在性マウスＣＤ８ポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
キメラヒト／マウスＣＤ８αポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
該キメラヒト／マウスＣＤ８αポリペプチドが、ヒトＣＤ８αポリペプチドの細胞外ドメインならびにマウスＣＤ８αポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、遺伝子操作されたマウスであって、
キメラヒト／マウスＣＤ８αポリペプチドを発現するマウス。
（項目３５）
前記ヌクレオチド配列が内在性マウスＣＤ８遺伝子座に存在する、項目３４に記載のマウス。
（項目３６）
内在性ＣＤ８遺伝子座に由来する機能的な内在性ＣＤ８αポリペプチドを発現しない、項目３４に記載のマウス。
（項目３７）
前記ヌクレオチド配列がマウスＣＤ８αプロモーター配列および調節配列に作動可能に連結している、項目３４に記載のマウス。
（項目３８）
キメラヒト／マウスＣＤ８βポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
該キメラヒト／マウスＣＤ８βポリペプチドが、ヒトＣＤ８βポリペプチドの細胞外ドメインならびにマウスＣＤ８βポリペプチドの少なくとも膜貫通ドメインおよび細胞質ドメインを含む、遺伝子操作されたマウスであって、
キメラヒト／マウスＣＤ８βポリペプチドを発現するマウス。
（項目３９）
前記ヌクレオチド配列が内在性マウスＣＤ８遺伝子座に存在する、項目３８に記載のマウス。
（項目４０）
内在性ＣＤ８遺伝子座に由来する機能的な内在性ＣＤ８βポリペプチドを発現しない、項目３８に記載のマウス。
（項目４１）
前記ヌクレオチド配列がマウスＣＤ８βプロモーター配列および調節配列に作動可能に連結している、項目３８に記載のマウス。