【手続補正書】
【提出日】平成29年1月10日(2017.1.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第1ポリペプチドおよび第2ポリペプチドを含むタンパク質であって、該第1および第2ポリペプチドが各々、少なくとも免疫グロブリン重鎖のヒンジ領域、CH2領域、およびCH3領域を含み、該第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれL、L、およびDではない、タンパク質。
【請求項２】
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれL、L、およびDではなく、ヒトIgG1重鎖における位置N297およびP331に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれQおよびSではない、請求項1記載のタンパク質。
【請求項３】
前記タンパク質が、わずか10%、例えばわずか8%、わずか7%、わずか5%、わずか3%、わずか1%、およびわずか0%しか野生型タンパク質から逸脱しない血漿クリアランス速度（mL/日/kg）を有し、血漿クリアランス速度が、曲線下面積（AUC）で割った対象へ投与される用量（μg/kg）によって算出され、AUC値が濃度-時間曲線から決定される、請求項1または2のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項４】
前記第1および第2ポリペプチドが、それぞれ免疫グロブリンの第1および第2重鎖である、請求項1〜3のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項５】
前記第1および第2ポリペプチドが、それぞれ第1および第2結合領域をさらに含む、請求項1〜4のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項６】
前記タンパク質が、免疫グロブリンの第1および第2軽鎖をさらに含み、該第1軽鎖がジスルフィド架橋を介して前記第1重鎖と連結されており、該第2軽鎖がジスルフィド架橋を介して前記第2重鎖と連結されており、それによって、第1結合領域および第2結合領域がそれぞれ形成されている、請求項1〜5のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項７】
前記第1および第2結合領域のうちの少なくとも1つがCD3に結合する、請求項5または6記載のタンパク質。
【請求項８】
少なくとも前記第1ポリペプチドのヒトIgG1重鎖におけるL234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれL、L、およびDではなく、前記第1結合領域がCD3に結合する、請求項5〜7のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項９】
前記第1および第2結合領域の両方がCD3に結合する、請求項5〜8のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１０】
前記タンパク質が、CD3に結合する単一特異性抗体として存在する場合、末梢血単核細胞（PBMC）に基づく機能アッセイにおいてCD69発現を測定した場合に、野生型タンパク質と比較して少なくとも50%、例えば少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、少なくとも99%、および100%低下したFc媒介性CD69発現を媒介する、請求項1〜9のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１１】
前記タンパク質が、CD3に結合する単一特異性抗体として存在する場合、PBMCに基づく機能アッセイにおいてT細胞増殖を測定した場合に、野生型タンパク質と比較して少なくとも50%、例えば少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、少なくとも99%、および100%低下したFc媒介性T細胞増殖を媒介する、請求項1〜10のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１２】
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、疎水性アミノ酸または極性アミノ酸である、請求項1〜11のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１３】
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、脂肪族非荷電アミノ酸、芳香族アミノ酸、または酸性アミノ酸である、請求項1〜12のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１４】
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応するアミノ酸が、それぞれF、E、およびA；またはA、A、およびAである、請求項1〜13のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１５】
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応するアミノ酸が、それぞれF、E、およびAである、請求項1〜14のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１６】
免疫グロブリン重鎖のアイソタイプが、IgG1、IgG2、IgG3、およびIgG4からなる群より選択される、請求項1〜15のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１７】
少なくとも前記第1結合領域が、
a．SEQ ID NO：6に示される重鎖可変領域配列およびSEQ ID NO：12に示される軽鎖可変領域配列を含む結合領域；
b．SEQ ID NO：8に示される重鎖可変領域配列およびSEQ ID NO：12に示される軽鎖可変領域配列を含む結合領域；ならびに
c．SEQ ID NO：9に示される重鎖可変領域配列およびSEQ ID NO：10に示される軽鎖可変領域配列を含む結合領域
からなる群より選択される、請求項5〜16のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１８】
前記第1および第2ポリペプチドの両方が請求項1〜16のいずれか一項に記載されるものである、請求項1〜17のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項１９】
前記第1結合領域が前記第2結合領域とは異なる標的に結合する、請求項5〜8および12〜18のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項２０】
前記標的が、異なる細胞上に存在する、請求項19記載のタンパク質。
【請求項２１】
前記第1ポリペプチドにおいて、ヒトIgG1重鎖におけるT366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409からなる群より選択される位置に対応する位置におけるアミノ酸のうちの少なくとも1つが置換されており、前記第2ポリペプチドにおいて、ヒトIgG1重鎖におけるT366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409からなる群より選択される位置に対応する位置におけるアミノ酸のうちの少なくとも1つが置換されており、かつ該第1および該第2ポリペプチドの該置換が同じ位置においてではない、請求項1〜20のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項２２】
ヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置におけるアミノ酸が、前記第1ポリペプチドにおいてLであり、かつヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置におけるアミノ酸が、前記第2ポリペプチドにおいてRであるか、またはその逆である、請求項21記載のタンパク質。
【請求項２３】
抗体である、請求項1〜22のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項２４】
タンパク質が二重特異性抗体である、請求項1〜23のいずれか一項記載のタンパク質。
【請求項２５】
前記第1および第2ポリペプチドの両方において、ヒトIgG1重鎖におけるL234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれF、E、およびAであり、かつ前記第1結合領域がCD3に結合し、かつ前記第2結合領域が癌特異的標的に結合する、請求項24記載のタンパク質。
【請求項２６】
請求項1〜25のいずれか一項に記載される、親タンパク質の変異体。
【請求項２７】
抗体である、請求項26記載の変異体。
【請求項２８】
請求項1〜27のいずれか一項記載のタンパク質または変異体を含む、組成物。
【請求項２９】
請求項1〜25のいずれか一項記載のタンパク質、または請求項26および27のいずれか一項記載の変異体、ならびに薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
【請求項３０】
疾患の治療における使用のための、請求項1〜25のいずれか一項記載のタンパク質、請求項26および27のいずれか一項記載の変異体、請求項28記載の組成物、または請求項29記載の薬学的組成物。
【請求項３１】
疾患が、癌、感染症、または自己免疫疾患である、請求項30記載のタンパク質、変異体、組成物、または薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
本発明の別の局面は、本発明に従うタンパク質、変異体、組成物、または薬学的組成物を対象へ投与する工程を含む、癌の治療方法に関する。
[本発明1001]
第1ポリペプチドおよび第2ポリペプチドを含むタンパク質であって、該第1および第2ポリペプチドが各々、少なくとも免疫グロブリン重鎖のヒンジ領域、CH2領域、およびCH3領域を含み、該第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれL、L、およびDではない、タンパク質。
[本発明1002]
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれL、L、およびDではなく、ヒトIgG1重鎖における位置N297およびP331に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれQおよびSではない、本発明1001のタンパク質。
[本発明1003]
前記タンパク質が、わずか10%、例えばわずか8%、わずか7%、わずか5%、わずか3%、わずか1%、およびわずか0%しか野生型タンパク質から逸脱しない血漿クリアランス速度（mL/日/kg）を有し、血漿クリアランス速度が、曲線下面積（AUC）で割った対象へ投与される用量（μg/kg）によって算出され、AUC値が濃度-時間曲線から決定される、本発明1001または1002のいずれかのタンパク質。
[本発明1004]
前記第1および第2ポリペプチドが、それぞれ免疫グロブリンの第1および第2重鎖である、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1005]
前記第1および第2ポリペプチドが、それぞれ第1および第2結合領域をさらに含む、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1006]
前記タンパク質が、免疫グロブリンの第1および第2軽鎖をさらに含み、該第1軽鎖がジスルフィド架橋を介して前記第1重鎖と連結されており、該第2軽鎖がジスルフィド架橋を介して前記第2重鎖と連結されており、それによって、第1結合領域および第2結合領域がそれぞれ形成されている、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1007]
前記第1および第2結合領域のうちの少なくとも1つがCD3に結合する、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1008]
少なくとも前記第1ポリペプチドのヒトIgG1重鎖におけるL234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれL、L、およびDではなく、前記第1結合領域がCD3に結合する、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1009]
前記第1および第2結合領域の両方がCD3に結合する、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1010]
前記タンパク質が、CD3に結合する単一特異性抗体として存在する場合、末梢血単核細胞（PBMC）に基づく機能アッセイにおいてCD69発現を測定した場合に、野生型タンパク質と比較して少なくとも50%、例えば少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、少なくとも99%、および100%低下したFc媒介性CD69発現を媒介する、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1011]
前記タンパク質が、CD3に結合する単一特異性抗体として存在する場合、PBMCに基づく機能アッセイにおいてT細胞増殖を測定した場合に、野生型タンパク質と比較して少なくとも50%、例えば少なくとも60%、少なくとも70%、少なくとも80%、少なくとも90%、少なくとも99%、および100%低下したFc媒介性T細胞増殖を媒介する、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1012]
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、疎水性アミノ酸または極性アミノ酸である、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1013]
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、脂肪族非荷電アミノ酸、芳香族アミノ酸、または酸性アミノ酸である、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1014]
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応するアミノ酸が、それぞれF、E、およびA；またはA、A、およびAである、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1015]
前記第1および第2ポリペプチドのうちの少なくとも1つにおいて、ヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応するアミノ酸が、それぞれF、E、およびAである、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1016]
免疫グロブリン重鎖のアイソタイプが、IgG1、IgG2、IgG3、およびIgG4からなる群より選択される、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1017]
少なくとも前記第1結合領域が、
a．SEQ ID NO：6に示される重鎖可変領域配列およびSEQ ID NO：12に示される軽鎖可変領域配列を含む結合領域；
b．SEQ ID NO：8に示される重鎖可変領域配列およびSEQ ID NO：12に示される軽鎖可変領域配列を含む結合領域；ならびに
c．SEQ ID NO：9に示される重鎖可変領域配列およびSEQ ID NO：10に示される軽鎖可変領域配列を含む結合領域
からなる群より選択される、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1018]
前記第1および第2ポリペプチドの両方が本発明1001〜1016のいずれかに記載されるものである、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1019]
前記第1結合領域が前記第2結合領域とは異なる標的に結合する、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1020]
前記標的が、異なる細胞上に存在する、本発明1019のタンパク質。
[本発明1021]
前記第1ポリペプチドにおいて、ヒトIgG1重鎖におけるT366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409からなる群より選択される位置に対応する位置におけるアミノ酸のうちの少なくとも1つが置換されており、前記第2ポリペプチドにおいて、ヒトIgG1重鎖におけるT366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409からなる群より選択される位置に対応する位置におけるアミノ酸のうちの少なくとも1つが置換されており、かつ該第1および該第2ポリペプチドの該置換が同じ位置においてではない、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1022]
ヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置におけるアミノ酸が、前記第1ポリペプチドにおいてLであり、かつヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置におけるアミノ酸が、前記第2ポリペプチドにおいてRであるか、またはその逆である、本発明1021のタンパク質。
[本発明1023]
抗体である、前記本発明のいずれかのタンパク質。
[本発明1024]
タンパク質が二重特異性抗体である、本発明1001〜1023のいずれかのタンパク質。
[本発明1025]
前記第1および第2ポリペプチドの両方において、ヒトIgG1重鎖におけるL234、L235、およびD265に対応する位置におけるアミノ酸が、それぞれF、E、およびAであり、かつ前記第1結合領域がCD3に結合し、かつ前記第2結合領域が癌特異的標的に結合する、本発明1024のタンパク質。
[本発明1026]
前記本発明のいずれかに記載される、親タンパク質の変異体。
[本発明1027]
抗体である、本発明1026の変異体。
[本発明1028]
前記本発明のいずれかのタンパク質または変異体を含む、組成物。
[本発明1029]
本発明1001〜1025のいずれかのタンパク質、または本発明1026および1027のいずれかの変異体、ならびに薬学的に許容される担体を含む、薬学的組成物。
[本発明1030]
疾患の治療における使用のための、本発明1001〜1025のいずれかのタンパク質、本発明1026および1027のいずれかの変異体、本発明1028の組成物、または本発明1029の薬学的組成物。
[本発明1031]
本発明1001〜1025のいずれかのタンパク質、本発明1026および1027のいずれかの変異体、本発明1028の組成物、または本発明1029の薬学的組成物を対象へ投与する工程を含む、癌の治療方法。
[本発明1032]
疾患が、癌、感染症、または自己免疫疾患である、本発明1030〜1031のいずれかの使用または方法。