【誤訳訂正書】
【提出日】平成29年5月29日(2017.5.29)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）野菜原料を選別し、天然抗菌剤を添加するステップと、
（ｂ）前記選別された野菜原料の水気の一部を取り除く半乾燥ステップと、
（ｃ）前記選別された野菜原料を包装するステップと、
（ｄ）前記包装された野菜原料をブランチングした後に冷却させる熱湯および冷却ステップと、
（ｅ）前記包装された野菜原料に超高圧を用いて常温下で３〜６０分間２００〜９００ＭＰａの圧力を加える殺菌ステップと、
を含む野菜食品の製造方法。
【請求項２】
（ａ）野菜原料を選別し、天然抗菌剤を添加するステップと、
（ｂ）前記選別された野菜原料の水気の一部を取り除く半乾燥ステップと、
（ｃ）前記選別された野菜原料を包装するステップと、
（ｄ）前記包装された野菜原料をブランチングした後に冷却させる熱湯および冷却ステップと、
（ｅ）前記包装された野菜原料に超高圧を用いて７０〜１００℃において３〜６０分間５００〜９００ＭＰａの圧力を加える殺菌ステップと、
を含む野菜食品の製造方法。
【請求項３】
前記天然抗菌剤は、総重量を基準として０．０５〜３％（ｗ／ｗ）添加することを特徴とする請求項１又は２に記載の野菜食品の製造方法。
【請求項４】
前記天然抗菌剤は、有機酸およびナイシンのうちの少なくとも一方を含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の野菜食品の製造方法。
【請求項５】
前記有機酸は、乳酸、酢酸、クエン酸およびコハク酸よりなる群から選ばれることを特徴とする請求項４に記載の野菜食品の製造方法。
【請求項６】
前記有機酸は、乳酸であることを特徴とする請求項４に記載の野菜食品の製造方法。
【請求項７】
前記天然抗菌剤を用いてｐＨ４〜５に調整することを特徴とする請求項１又は２に記載の野菜食品の製造方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１２】
【図１】図１は、超高圧・非加熱殺菌工程を含む調理野菜に対する殺菌工程を示す図である。
【図２】図２は、超高圧を用いたペプトン水における病原性菌の殺菌効果を示す図である。
【図３】図３は、超高圧を用いた生野菜における病原性菌に対する殺菌効果を示す図である。縦軸の単位はＬｏｇ（Ｎ／Ｎｏ）であり、最初の菌数に対する殺菌後の菌数をＬｏｇ資料として示す値である。
【図４】図４は、超高圧を用いた調理野菜における病原性菌に対する殺菌効果を示す図である。
【図５】図５は、超高圧およびｐＨ調節を併用処理したときの殺菌効果を示す図である。（Ａ）ｐＨ７．２、（Ｂ）ｐＨ４．０、（Ｃ）ｐＨ５．０、（Ｄ）ｐＨ６．０ＨＣｌを用いて調節した群は□で示し、乳酸を用いて調節した群は■で示す。各グラフに表記されているアルファベットＡ〜Ｄ、ａ〜ｂは、各データを統計処理したとき、有意差（ｐ＜０．０５）別に区別した表示であり、同じアルファベットの間には有意差がないことを意味する（例えば、Ａ−Ａ、ｂ−ｂ）。
【図６】図６は、超高圧およびｐＨ調節を併用処理した病原性菌の電子顕微鏡写真である。
【図７】図７は、超高圧と、ｐＨ調節およびナイシンを併用処理したときの殺菌効果を示す図である。ナイシン添加群は（＋）で、未添加群は（−）で示す。
【図８】図８は、超高圧と、ｐＨ調節およびナイシンを併用処理した病原性菌の電子顕微鏡写真である。
【図９】図９は、超高圧処理を施した野菜のアスコルビン酸およびカロチノイドの含量に対する図である。アスコルビン酸および合計のカロチノイドの含量（にんじん（■）、ほうれん草（□））Ａ−Ｃ；にんじんサンプル別の平均値の有意差の検証（Ｐ＜０．０５）による分類（同じアルファベットである場合、有意差がない。）ａ−ｃ；ほうれん草サンプル別の平均値の有意差の検証（ｐ＜０．０５）による分類（同じアルファベットである場合、有意差がない。）
【図１０】図１０は、超高圧処理を施した野菜の電子顕微鏡写真である。
【図１１】図１１は、超高圧を用いたバシラス胞子に対する殺菌効果を示す図である。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１７】
本発明の第三の態様として、本発明は、また、超高圧殺菌効果を極大化させるために超高圧・非加熱殺菌工法および天然抗菌剤を併用処理する野菜類食品の製造方法を提供する。
より好ましくは、本発明は、超高圧殺菌効果を極大化させるために、胞子型微生物の減菌効果を有する天然抗菌剤とともに、常温または７０〜１００℃において２００〜９００ＭＰａの圧力を３〜６０分間加えることにより、酵母、カビ、病原性菌および胞子型微生物の胞子を死滅させることを特徴とする野菜類食品の製造方法を提供する。
前記天然抗菌剤は、有機酸、バクテリオシン、カルシウム製剤を含む群から選ばれる。前記天然抗菌剤は、総重量を基準として０．０５〜３％（ｗ／ｗ）添加することが好ましく、より好ましくは、０．５％（ｗ／ｗ）を添加する。
好ましくは、前記天然抗菌剤は、乳酸、酢酸、クエン酸およびコハク酸よりなる群から選ばれる有機酸であり、より好ましくは、前記有機酸は、乳酸である。
前記天然抗菌剤は、背品に対する予想殺菌効果と、製品の風味、香り、色相および組織感などの官能品質に及ぼす影響などを総合的に考慮して使用する。
乳酸は、微生物の細胞膜を介して細胞質に拡散されて生育に欠かせないタンパク質および核酸に影響を及ぼして殺菌効果を発生させる。
より好ましくは、超高圧および有機酸を併用処理したときの殺菌効果をさらに高めるために、天然抗菌剤としてバクテリオシン系のナイシンをさらに添加する。このとき、ナイシンの添加量は、０．０１〜１．０％であることが好ましく、対象となる食品の官能品質に及ぼす影響を考慮して添加量を変更する。
さらに好ましくは、本発明は、前記有機酸を用いて野菜食品類のｐＨを酸性条件であるｐＨ４〜５に調整する。
前記有機酸の添加は、真空包装前に行われる。有機酸の処理は、生野菜および加熱調理野菜を有機酸溶液に浸漬したり、有機酸を野菜の表面に吹き付けたりして行う。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２２
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２２】
実施例４：病原性菌に対する超高圧および有機酸の併用処理時の殺菌効果の測定
超高圧・非加熱殺菌効果を向上させるために、超高圧・非加熱殺菌および有機酸を併用処理した場合の殺菌効果を調べるための実験を行った。
本実施例においては、微生物に対する正確な殺菌効果を調べるために、病原性菌を培養して滅菌水に希釈して滅菌済みビニル袋に包装した後、超高圧殺菌を行った。
（１）有機酸の添加および超高圧・非加熱殺菌の併用
リステリア菌を接種した野菜原料において、乳酸などの有機酸または塩化水素（ＨＣｌ）を用いて調節したｐＨ条件下で、３００Ｍｐａの圧力で５分間超高圧・非加熱殺菌を行った。
乳酸を用いてｐＨ４〜５の酸性に調整した後に超高圧・非加熱殺菌を行った場合、ｐＨ無調整条件であるｐＨ７．２の中性条件およびｐＨ６．０において超高圧・非加熱殺菌を行った場合と効果を比較し、超高圧処理／非処理を行った後に直ぐ（０ｈ）、１２時間が経過した後（１２ｈ）および２４時間が経過した後（２４ｈ）の減菌効果を図５に示す。
図５は、超高圧処理／非処理およびｐＨ条件（（Ａ）：ｐＨ７．２、（Ｂ）：ｐＨ４．０、（Ｃ）：ｐＨ５．０、（Ｄ）：ｐＨ６．０）による殺菌効果を示すグラフであり、実験したところ、１０３〜１０５ＣＦＵ／ｇの減菌効果の上昇が観察されて１０６ＣＦＵ／ｇの殺菌効果を示す。
電子走査顕微鏡（ＳＥＭ）を用いて、超高圧および酸性条件下でリステリア菌の死滅機作を細部的に観察し、その結果を図６に示す。分析したところ、細胞がさらに長くなったことが観察されて、死滅の原因が細胞膜の破壊にあるわけではなく、細胞の内部構造の変形にあるものと推察された。
（２）有機酸およびナイシンの添加、ならびに超高圧・非加熱殺菌の併用
有機酸および超高圧・非加熱殺菌を併用処理したときの殺菌効果をさらに高めるために、有機酸を用いてｐＨ５に調整した後、天然抗菌剤としてバクテリオシン系の乳酸菌が生成するナイシンをさらに添加して４００ＭＰａの圧力で２０分間超高圧・非加熱殺菌を行い、その結果を図７に示す。
ここで、ＴＳＡは、リステリア菌に対する菌数が測定可能な一般培地であり、ＭＯＸは、バイオフィルムを形成しているリステリア菌に対する測定が行える選択培地である。２種類の培地を使い分けて、通常のリステリア菌およびバイオフィルムを形成しているリステリア菌に対する殺菌効果を区別して観察し、その結果を図７に示す。
乳酸を用いてｐＨ５．０に調整した場合、ナイシンを添加しなくても１０４〜１０５ＣＦＵ／ｇのリステリア菌が減菌されてナイシン添加効果が区別され難かったが、有機酸およびナイシンを併用添加した後に超高圧処理を行うと、殺菌効果は理論的には上昇することが予想された。
これに対し、有機酸を添加しなかったｐＨ７．０の場合、ナイシンを添加したときの殺菌効果を測定したところ、１０２ＣＦＵ／ｇ以内に減菌効果が向上した。また、設備の表面などへの菌の付着を促して生育し易くする、汚染の主原因であるバイオフィルムを形成しているリステリア菌の場合もまた、ナイシンおよび超高圧んに処理したときに１０２ＣＦＵ／ｇ以上の殺菌効果を示すことから、加工食品の生産現場における衛生の確保面からみて色々なメリットがあるといえる。
超高圧および前記処理によるリステリア菌の死滅機作を細部的に調べるために、電子走査顕微鏡（ＳＥＭ）を用いて観察を行い、その結果を図８に示す。分析したところ、超高圧が細胞膜の構造を効率よく破壊されるため、ナイシンが微生物の内部に上手く浸透されて殺菌効果の上昇を引き起こすものと考えられる。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図８】
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