【手続補正書】
【提出日】平成29年1月6日(2017.1.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製する方法であって、
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行うことにより不純調製物から組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製することと、
前記１つ以上のクロマトグラフィーステップからの溶出物をプールすることと、
前記プールした溶出物のｐＨを６．０以上のｐＨに調整することと、
前記ｐＨを調整した溶出物を限外濾過および／または透析濾過に供することと、を含む、方法。
【請求項２】
前記ｐＨが、６．０に調整される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ｐＨが、ｐＨ７．０を有するリン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、およびクエン酸ナトリウムを含む緩衝液を用いて調整される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記緩衝液が、ｐＨ７．０を有する０．１〜０．５Ｍのリン酸ナトリウム、０．５〜２．５Ｍの塩化ナトリウム、および０．１〜０．６Ｍのクエン酸ナトリウムを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ウイルス濾過が、限外濾過および透析濾過の前記ステップ前に行われる、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
限外濾過および／または透析濾過の単一ステップが行われる、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
限外濾過および／または透析濾過の前記単一ステップが、１つの透析濾過のみを含む、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記限外濾過が、接線流限外濾過である、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記１つ以上のクロマトグラフィーステップが、陽イオン交換クロマトグラフィーを含む、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記陽イオン交換クロマトグラフィーが、最後のクロマトグラフィーステップであり、前記陽イオン交換クロマトグラフィーからの溶出物が、前記ｐＨを調整する前にプールされる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
陰イオン交換クロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、および疎水性相互作用クロマトグラフィーのうちの１つ以上が、前記陽イオン交換クロマトグラフィーを行う前に行われる、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、Ｑクロマトグラフィーである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、ＴＭＡＥ樹脂を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＴＭＡＥ樹脂が、一旦前記不純調製物で負荷されると、ｐＨ７．０を有するＭＥＳ−Ｔｒｉｓを含む第１の洗浄緩衝液を用いて洗浄される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記第１の洗浄緩衝液が、２０〜７５ｍＭのＭＥＳ−Ｔｒｉｓを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＴＭＡＥ樹脂が、ｐＨ７．０を有するＭＥＳ−ＴｒｉｓおよびＮａＣｌを含む第２の洗浄緩衝液を用いて洗浄される、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記第２の洗浄緩衝液が、ｐＨ７．０を有する５〜７５ｍＭのＭＥＳ−Ｔｒｉｓおよび５０〜１５０ｍＭのＮａＣｌを含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＴＭＡＥ樹脂が、一旦前記不純調製物で負荷されると、ｐＨ７．０を有するＭＥＳ−ＴｒｉｓおよびＮａＣｌを含む溶出緩衝液を用いて溶出される、請求項１３〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記溶出緩衝液が、ｐＨ７．０を有する５〜７５ｍＭのＭＥＳ−Ｔｒｉｓおよび１５０〜３００ｍＭのＮａＣｌを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）Ｆａｓｔ  Ｆｌｏｗ、Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ、Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）ＸＬ、Ｃａｐｔｏ（商標）Ｑ、ＤＥＡＥ、ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ
ＧｉｇａＣａｐ（登録商標）Ｑ、Ｆｒａｃｔｏｇｅｌ（登録商標）ＴＭＡＥ、Ｅｓｈｍｕｎｏ（商標）Ｑ、Ｎｕｖｉａ（商標）Ｑ、またはＵＮＯｓｐｈｅｒｅ（商標）Ｑからなる群から選択されるカラムを使用する、請求項１１に記載の方法。
【請求項２１】
前記混合モードクロマトグラフィーが、ヒドロキシアパタイト（ＨＡ）クロマトグラフィーである、請求項１１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記疎水性相互作用クロマトグラフィーが、フェニルクロマトグラフィーである、請求項１１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行うことが、ＴＭＡＥ樹脂を用いた陰イオン交換クロマトグラフィー、ＨＡクロマトグラフィー、フェニルクロマトグラフィー、および陽イオン交換ＳＰクロマトグラフィーを、その順で行うことを含む、請求項９〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、４．５ｇ／Ｌ超の負荷容量を有するカラムを用いることを含む、請求項１１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記カラムの前記負荷容量が、５〜２０ｇ／Ｌである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記不純調製物の限外濾過が、前記１つ以上のクロマトグラフィーステップ前に行われる、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記限外濾過が、接線流限外濾過である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
限外濾過が、少なくとも１０ｋＤＡの分子量カットオフを有する細孔径を含む膜フィルターを使用する、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項２９】
限外濾過が、少なくとも３０ｋＤＡの分子量カットオフを有する細孔径を含む膜フィルターを使用する、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項３０】
限外濾過が、少なくとも５０ｋＤＡの分子量カットオフを有する細孔径を含む膜フィルターを使用する、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項３１】
前記組換えＡＳＡの少なくとも７５％が、前記不純調製物中に保持される、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記組換えＡＳＡの少なくとも７５％が、前記フィルターを透過する、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項３３】
限外濾過が、ポリエーテルスルホンまたはセルロース膜を含む、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項３４】
前記限外濾過に続いて、深層濾過および／またはウイルス不活性化の１つ以上のステップが行われる、請求項２６〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
深層濾過および／またはウイルス不活性化の前記１つ以上のステップに続いて、前記１つ以上のクロマトグラフィーステップが行われる、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
ウイルス不活性化の前記ステップが、洗剤を前記不純調製物に添加することを含む、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記組換えＡＳＡタンパク質が、懸濁液中で培養された哺乳動物細胞により生成される、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記哺乳動物細胞が、バイオリアクター中で培養される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記培地が、無血清である、請求項３７または３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記無血清培地が、既知組成培地である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記哺乳動物細胞が、ヒト細胞である、請求項３７〜４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記不純調製物が、潅流バイオリアクターからの供給流である、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記不純調製物が、前記哺乳動物細胞から分泌された組換えＡＳＡタンパク質を含有する前記無血清培地から調製される、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記不純調製物が、冷凍培地の調製物から解凍される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
限外濾過および／または透析濾過の前記ステップが、前記精製された組換えＡＳＡタンパク質を製剤緩衝液に交換することを含む、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
前記組換えＡＳＡタンパク質が、配列番号１（野生型ヒトＡＳＡタンパク質に対応する）と少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を有する、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記組換えＡＳＡタンパク質が、配列番号１と同一のアミノ酸配列を有する、請求項１〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が１００ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が６０ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が、クマシーブルー染色を用いてＳＤＳ−ＰＡＧＥに供するとき、１．０％のアッセイ対照を超える強度を有する新しいバンドを有しない、請求項１〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５１】
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が、１００ｐｇ／ｍｇ未満の宿主細胞ＤＮＡを含有する、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が、５０ｐｇ／ｍｇ未満の宿主細胞ＤＮＡを含有する、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製する方法であって、
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行うことにより不純調製物から組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製することであり、前記第１のクロマトグラフィーステップが４．５ｇ以上のタンパク質／Ｌ樹脂の負荷容量を有するカラムを使用する、精製することと、
前記１つ以上のクロマトグラフィーステップからの溶出物をプールすることと、
前記プールした溶出物のｐＨを６．０以上のｐＨに調整することと、
前記ｐＨを調整した溶出物を限外濾過および／または透析濾過に供することと、を含む、方法。
【請求項５４】
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行う前記ステップが、陰イオン交換クロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、および陽イオン交換クロマトグラフィーを、その順で行うことを含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、ＴＭＡＥ樹脂を含むカラムを使用する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記ＴＭＡＥカラムが、５〜２０ｇタンパク質／Ｌ樹脂の負荷容量を有する、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
限外濾過および／または透析濾過の単一ステップが、前記１つ以上のクロマトグラフィーステップ後に行われる、請求項５３〜５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
請求項１〜５７のいずれか一項に記載の方法により精製された組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質。
【請求項５９】
請求項５８に記載の組換えＡＳＡタンパク質を含む、薬学的組成物。
【請求項６０】
治療を必要とする対象において異染性白質萎縮症を治療するための、請求項５９に記載の薬学的組成物。
【請求項６１】
配列番号１と少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を有する精製された組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）を含む組成物であって、
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも５０Ｕ／ｍｇの比活性を有し、
さらに、前記精製された組換えＡＳＡが、１５０ｎｇ／ｍｇ未満の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）および／または１５０ｐｇ／ｍｇ未満の宿主細胞ＤＮＡ（ＨＣＤ）を含有する、組成物。
【請求項６２】
前記精製された組換えＡＳＡが、１００ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、請求項６１に記載の組成物。
【請求項６３】
前記精製された組換えＡＳＡが、６０ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、請求項６１または６２に記載の組成物。
【請求項６４】
前記精製された組換えＡＳＡが、１００ｐｇ／ｍｇ未満のＨＣＤを含有する、請求項６１〜６３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６５】
前記精製された組換えＡＳＡが、５０ｐｇ／ｍｇ未満のＨＣＤを含有する、請求項６１〜６４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６６】
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも７０Ｕ／ｍｇの比活性を有する、請求項６１〜６５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６７】
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも１００Ｕ／ｍｇの比活性を有する、請求項６１〜６６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６８】
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも１２０Ｕ／ｍｇの比活性を有する、請求項６１〜６７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６９】
前記精製された組換えＡＳＡが、５０〜２００Ｕ／ｍｇの範囲の比活性を有する、請求項６１〜６８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７０】
前記精製された組換えＡＳＡが、５０〜１４０Ｕ／ｍｇの範囲の比活性を有する、請求項６１〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７１】
配列番号１と少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を有する精製された組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）を含む組成物であって、
前記精製されたＡＳＡが、中性（ピーク群１）、モノシアル化（ピーク群２）、キャップされたマンノース−６−リン酸化（ピーク群３）、ジシアル化（ピーク群４）、モノ−マンノース−６−リン酸化（ピーク群５）、ハイブリッド（ピーク群６）、およびジ−マンノース−６−リン酸化（ピーク群７）を示すピーク群から選択される７つ以下のピーク群を含むグリカンマップで特徴付けられる、組成物。
【請求項７２】
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と少なくとも８０％同一のアミノ酸配列を有する、請求項７１に記載の組成物。
【請求項７３】
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有する、請求項７１または７２に記載の組成物。
【請求項７４】
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を有する、請求項７１〜７３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７５】
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と同一のアミノ酸配列を有する、請求項７１〜７４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７６】
請求項７１〜７５のいずれか一項に記載の組成物および生理学的に許容される担体を含む、製剤。
【請求項７７】
前記製剤が、静脈内投与に適している、請求項７６に記載の製剤。
【請求項７８】
前記製剤が、髄腔内投与に適している、請求項７６に記載の製剤。
【請求項７９】
前記製剤が、皮下投与に適している、請求項７６に記載の製剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
本発明の他の特性、目的、および利点は、以下の詳細な説明において明白になる。しかしながら、この詳細な説明は、本発明の実施形態を示しているが、限定ではなく例示としてのみ提供されるものであることを理解されるべきである。本発明の範囲内の様々な変更および修正は、詳細な説明から当業者には明らかになるであろう。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製する方法であって、
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行うことにより不純調製物から組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製することと、
前記１つ以上のクロマトグラフィーステップからの溶出物をプールすることと、
前記プールした溶出物のｐＨを約６．０以上のｐＨに調整することと、
前記ｐＨを調整した溶出物を限外濾過および／または透析濾過に供することと、を含む、方法。
（項目２）
前記ｐＨが、約６．０に調整される、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ｐＨが、ｐＨ７．０を有するリン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、およびクエン酸ナトリウムを含む緩衝液を用いて調整される、項目１または２に記載の方法。
（項目４）
前記緩衝液が、ｐＨ７．０を有する約０．１〜０．５Ｍのリン酸ナトリウム、０．５〜２．５Ｍの塩化ナトリウム、および０．１〜０．６Ｍのクエン酸ナトリウムを含む、項目３に記載の方法。
（項目５）
ウイルス濾過が、限外濾過および透析濾過の前記ステップ前に行われる、項目１〜４のいずれかに記載の方法。
（項目６）
限外濾過および／または透析濾過の単一ステップが行われる、項目１〜５のいずれかに記載の方法。
（項目７）
限外濾過および／または透析濾過の前記単一ステップが、１つの透析濾過のみを含む、項目５に記載の方法。
（項目８）
前記限外濾過が、接線流限外濾過である、項目１〜７のいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記１つ以上のクロマトグラフィーステップが、陽イオン交換クロマトグラフィーを含む、項目１〜８のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記陽イオン交換クロマトグラフィーが、最後のクロマトグラフィーステップであり、前記陽イオン交換クロマトグラフィーからの溶出物が、前記ｐＨを調整する前にプールされる、項目９に記載の方法。
（項目１１）
陰イオン交換クロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、および疎水性相互作用クロマトグラフィーのうちの１つ以上が、前記陽イオン交換クロマトグラフィーを行う前に行われる、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、Ｑクロマトグラフィーである、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、ＴＭＡＥ樹脂を含む、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
前記ＴＭＡＥ樹脂が、一旦前記不純調製物で負荷されると、ｐＨ７．０を有するＭＥＳ−Ｔｒｉｓを含む第１の洗浄緩衝液を用いて洗浄される、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記第１の洗浄緩衝液が、約２０〜７５ｍＭのＭＥＳ−Ｔｒｉｓを含む、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記ＴＭＡＥ樹脂が、ｐＨ７．０を有するＭＥＳ−ＴｒｉｓおよびＮａＣｌを含む第２の洗浄緩衝液を用いて洗浄される、項目１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記第２の洗浄緩衝液が、ｐＨ７．０を有する約５〜７５ｍＭのＭＥＳ−Ｔｒｉｓおよび約５０〜１５０ｍＭのＮａＣｌを含む、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記ＴＭＡＥ樹脂が、一旦前記不純調製物で負荷されると、ｐＨ７．０を有するＭＥＳ−ＴｒｉｓおよびＮａＣｌを含む溶出緩衝液を用いて溶出される、項目１３〜１７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記溶出緩衝液が、ｐＨ７．０を有する約５〜７５ｍＭのＭＥＳ−Ｔｒｉｓおよび約１５０〜３００ｍＭのＮａＣｌを含む、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）Ｆａｓｔ  Ｆｌｏｗ、Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）Ｈｉｇｈ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ、Ｑ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（商標）ＸＬ、Ｃａｐｔｏ（商標）Ｑ、ＤＥＡＥ、ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ
ＧｉｇａＣａｐ（登録商標）Ｑ、Ｆｒａｃｔｏｇｅｌ（登録商標）ＴＭＡＥ、Ｅｓｈｍｕｎｏ（商標）Ｑ、Ｎｕｖｉａ（商標）Ｑ、またはＵＮＯｓｐｈｅｒｅ（商標）Ｑからなる群から選択されるカラムを使用する、項目１１に記載の方法。
（項目２１）
前記混合モードクロマトグラフィーが、ヒドロキシアパタイト（ＨＡ）クロマトグラフィーである、項目１１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記疎水性相互作用クロマトグラフィーが、フェニルクロマトグラフィーである、項目１１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行うことが、ＴＭＡＥ樹脂を用いた陰イオン交換クロマトグラフィー、ＨＡクロマトグラフィー、フェニルクロマトグラフィー、および陽イオン交換ＳＰクロマトグラフィーを、その順で行うことを含む、項目９〜２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、約４．５ｇ／Ｌ超の負荷容量を有するカラムを用いることを含む、項目９〜２３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記カラムの前記負荷容量が、約５〜２０ｇ／Ｌである、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記不純調製物の限外濾過が、前記１つ以上のクロマトグラフィーステップ前に行われる、項目１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記限外濾過が、接線流限外濾過である、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
限外濾過が、少なくとも１０ｋＤＡの分子量カットオフを有する細孔径を含む膜フィルターを使用する、項目２６または２７に記載の方法。
（項目２９）
限外濾過が、少なくとも３０ｋＤＡの分子量カットオフを有する細孔径を含む膜フィルターを使用する、項目２６または２７に記載の方法。
（項目３０）
限外濾過が、少なくとも５０ｋＤＡの分子量カットオフを有する細孔径を含む膜フィルターを使用する、項目２６または２７に記載の方法。
（項目３１）
前記組換えＡＳＡの少なくとも７５％が、前記不純調製物中に保持される、項目２６または２７に記載の方法。
（項目３２）
前記組換えＡＳＡの少なくとも７５％が、前記フィルターを透過する、項目２６または２７に記載の方法。
（項目３３）
限外濾過が、ポリエーテルスルホンまたはセルロース膜を含む、項目２６または２７に記載の方法。
（項目３４）
前記限外濾過に続いて、深層濾過および／またはウイルス不活性化の１つ以上のステップが行われる、項目２６〜３３のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
深層濾過および／またはウイルス不活性化の前記１つ以上のステップに続いて、前記１つ以上のクロマトグラフィーステップが行われる、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
ウイルス不活性化の前記ステップが、洗剤を前記不純調製物に添加することを含む、項目３４または３５に記載の方法。
（項目３７）
前記組換えＡＳＡタンパク質が、懸濁液中で培養された哺乳動物細胞により生成される、項目１〜３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
前記哺乳動物細胞が、バイオリアクター中で培養される、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
前記培地が、無血清である、項目３７または３８に記載の方法。
（項目４０）
前記無血清培地が、既知組成培地である、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記哺乳動物細胞が、ヒト細胞である、項目３７〜４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目４２）
前記不純調製物が、潅流バイオリアクターからの供給流である、項目１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
前記不純調製物が、前記哺乳動物細胞から分泌された組換えＡＳＡタンパク質を含有する前記無血清培地から調製される、項目１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
前記不純調製物が、冷凍培地の調製物から解凍される、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
限外濾過および／または透析濾過の前記ステップが、前記精製された組換えＡＳＡタンパク質を製剤緩衝液に交換することを含む、項目１〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記組換えＡＳＡタンパク質が、配列番号１（野生型ヒトＡＳＡタンパク質に対応する）と少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を有する、項目１〜４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
前記組換えＡＳＡタンパク質が、配列番号１と同一のアミノ酸配列を有する、項目１〜４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が１００ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、項目１〜４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が６０ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、項目１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が、クマシーブルー染色を用いてＳＤＳ−ＰＡＧＥに供するとき、１．０％のアッセイ対照を超える強度を有する新しいバンドを有しない、項目１〜４９のいずれか一項に記載の方法。
（項目５１）
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が、１００ｐｇ／ｍｇ未満の宿主細胞ＤＮＡを含有する、項目１〜５０のいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
前記精製された組換えＡＳＡタンパク質が、５０ｐｇ／ｍｇ未満の宿主細胞ＤＮＡを含有する、項目１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製する方法であって、
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行うことにより不純調製物から組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質を精製することであり、前記第１のクロマトグラフィーステップが約４．５ｇ以上のタンパク質／Ｌ樹脂の負荷容量を有するカラムを使用する、精製することと、
前記１つ以上のクロマトグラフィーステップからの溶出物をプールすることと、
前記プールした溶出物のｐＨを約６．０以上のｐＨに調整することと、
前記ｐＨを調整した溶出物を限外濾過および／または透析濾過に供することと、を含む、方法。
（項目５４）
１つ以上のクロマトグラフィーステップを行う前記ステップが、陰イオン交換クロマトグラフィー、混合モードクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、および陽イオン交換クロマトグラフィーを、その順で行うことを含む、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記陰イオン交換クロマトグラフィーが、ＴＭＡＥ樹脂を含むカラムを使用する、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
前記ＴＭＡＥカラムが、約５〜２０ｇタンパク質／Ｌ樹脂の負荷容量を有する、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
限外濾過および／または透析濾過の単一ステップが、前記１つ以上のクロマトグラフィーステップ後に行われる、項目５３〜５６のいずれか一項に記載の方法。
（項目５８）
項目１〜５７のいずれか一項に記載の方法により精製された組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）タンパク質。
（項目５９）
項目５８に記載の組換えＡＳＡタンパク質を含む、薬学的組成物。
（項目６０）
治療を必要とする対象に、項目５９に記載の薬学的組成物を投与することを含む、異染性白質萎縮症を治療する方法。
（項目６１）
配列番号１と少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を有する精製された組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）を含む組成物であって、
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも約５０Ｕ／ｍｇの比活性を有し、
さらに、前記精製された組換えＡＳＡが、１５０ｎｇ／ｍｇ未満の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）および／または１５０ｐｇ／ｍｇ未満の宿主細胞ＤＮＡ（ＨＣＤ）を含有する、組成物。
（項目６２）
前記精製された組換えＡＳＡが、１００ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、項目６１に記載の組成物。
（項目６３）
前記精製された組換えＡＳＡが、６０ｎｇ／ｍｇ未満のＨＣＰを含有する、項目６１または６２に記載の組成物。
（項目６４）
前記精製された組換えＡＳＡが、１００ｐｇ／ｍｇ未満のＨＣＤを含有する、項目６１〜６３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目６５）
前記精製された組換えＡＳＡが、５０ｐｇ／ｍｇ未満のＨＣＤを含有する、項目６１〜６４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目６６）
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも約７０Ｕ／ｍｇの比活性を有する、項目６１〜６５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目６７）
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも約１００Ｕ／ｍｇの比活性を有する、項目６１〜６６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目６８）
前記精製された組換えＡＳＡが、少なくとも約１２０Ｕ／ｍｇの比活性を有する、項目６１〜６７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目６９）
前記精製された組換えＡＳＡが、約５０〜２００Ｕ／ｍｇの範囲の比活性を有する、項目６１〜６８のいずれか一項に記載の組成物。
（項目７０）
前記精製された組換えＡＳＡが、約５０〜１４０Ｕ／ｍｇの範囲の比活性を有する、項目６１〜６９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目７１）
配列番号１と少なくとも７０％同一のアミノ酸配列を有する精製された組換えアリールスルファターゼＡ（ＡＳＡ）を含む組成物であって、
前記精製されたＡＳＡが、中性（ピーク群１）、モノシアル化（ピーク群２）、キャップされたマンノース−６−リン酸化（ピーク群３）、ジシアル化（ピーク群４）、モノ−マンノース−６−リン酸化（ピーク群５）、ハイブリッド（ピーク群６）、およびジ−マンノース−６−リン酸化（ピーク群７）を示すピーク群から選択される７つ以下のピーク群を含むグリカンマップで特徴付けられる、組成物。
（項目７２）
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と少なくとも８０％同一のアミノ酸配列を有する、項目７１に記載の組成物。
（項目７３）
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を有する、項目７１または７２に記載の組成物。
（項目７４）
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を有する、項目７１〜７３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目７５）
前記精製された組換えＡＳＡが、配列番号１と同一のアミノ酸配列を有する、項目７１〜７４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目７６）
項目７１〜７５のいずれか一項に記載の組成物および生理学的に許容される担体を含む、製剤。
（項目７７）
前記製剤が、静脈内投与に適している、項目７６に記載の製剤。
（項目７８）
前記製剤が、髄腔内投与に適している、項目７６に記載の製剤。
（項目７９）
前記製剤が、皮下投与に適している、項目７６に記載の製剤。