【手続補正書】
【提出日】平成29年9月26日(2017.9.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質ナノゲルを含む組成物であって、タンパク質ナノゲルが互いに可逆性に架橋した複数の生物活性タンパク質を含む、組成物。
【請求項２】
さらにポリマーを含み、生物活性タンパク質がポリマーに可逆性に架橋されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ポリマーが親水性ポリマーである、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
親水性ポリマーがポリエチレングリコール(ＰＥＧ)を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
ポリマーが４アームＰＥＧ−ＮＨ２ポリマーである、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
組成物の平均流体力学的サイズが直径１〜１０００nm、直径１００〜３００nmまたは直径５０〜２５０nmである、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
複数の請求項１に記載の組成物に共有結合的に架橋したＴ細胞を含む、組成物。
【請求項８】
複数の請求項１に記載の組成物に共有結合的に架橋したＴ細胞の集団を含む、組成物。
【請求項９】
生物活性タンパク質がサイトカインである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
サイトカインが融合タンパク質またはスーパーアゴニストである、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
サイトカインがＩＬ−２−Ｆｃである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
サイトカインがＩＬ−１５ＳＡである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
サイトカインがＩＬ−１２またはＩＬ−１５である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１４】
複数の生物活性タンパク質が分解可能リンカーを介して互いに可逆的に架橋している、請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
分解可能リンカーがジスルフィド結合を含む酸化還元応答性リンカーである、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
対象に生理活性タンパク質を提供する医薬を製造するための、請求項１〜１５のいずれかに記載の組成物の使用。
【請求項１７】
対象に生理活性タンパク質を提供する医薬を製造するためのＴ細胞の集団の使用であって、各Ｔ細胞はＴ細胞表面に架橋したタンパク質ナノゲルを含む組成物を有し、タンパク質ナノゲルが互いに可逆性に架橋した複数の生物活性タンパク質を含む、使用。
【請求項１８】
組成物がさらにポリマーを含み、生物活性タンパク質がポリマーに可逆性に架橋されている、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
Ｔ細胞がＣＤ４＋またはＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項１７に記載の使用。
【請求項２０】
Ｔ細胞がＣＤ８＋  Ｔ細胞である、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
ＣＤ８＋  Ｔ細胞がインビボで増幅する、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
Ｔ細胞が養子移入Ｔ細胞である、請求項１９に記載の使用。
【請求項２３】
Ｔ細胞が遺伝子加工されている、請求項１９に記載の使用。
【請求項２４】
組成物がＴ細胞表面に共有結合的に結合する、請求項１７に記載の使用。
【請求項２５】
組成物がＴ細胞表面に非共有結合的に結合する、請求項１７に記載の使用。
【請求項２６】
複数の生物活性タンパク質が分解可能リンカーを介して互いに可逆的に架橋している、請求項１７に記載の使用。
【請求項２７】
分解可能リンカーがジスルフィド結合を含む酸化還元応答性リンカーである、請求項２６に記載の使用。
【請求項２８】
タンパク質ナノゲルがその表面に抗体または抗体フラグメントをさらに含む、請求項１７に記載の使用。
【請求項２９】
抗体または抗体フラグメントがＴ細胞表面部分に特異的である、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
ポリマーが親水性ポリマーである、請求項１７に記載の使用。
【請求項３１】
親水性ポリマーがポリエチレングリコール(ＰＥＧ)を含む、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
ポリマーが４アームＰＥＧ−ＮＨ２ポリマーである、請求項３１に記載の使用。
【請求項３３】
組成物の平均流体力学的サイズが直径１〜１０００nm、直径１００〜３００nm、直径５０〜２５０nmまたは直径約３００nmである、請求項１７に記載の使用。
【請求項３４】
生物活性タンパク質がサイトカインである、請求項１７に記載の使用。
【請求項３５】
サイトカインが融合タンパク質またはスーパーアゴニストである、請求項３４に記載の使用。
【請求項３６】
対象が癌、糖尿病、自己免疫性疾患または心血管疾患から選択される疾患を有する、請求項１７〜３５のいずれかに記載の使用。
【請求項３７】
疾患が癌である、請求項３６に記載の使用。
【請求項３８】
癌が固形腫瘍またはリンパ腫である、請求項３７に記載の使用。
【請求項３９】
癌がホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫およびＢ細胞リンパ腫から選択される、請求項３８に記載の使用。
【請求項４０】
癌が癌腫、肉腫または黒色腫である、請求項３８に記載の使用。
【請求項４１】
癌が骨の癌、脳の癌、乳癌、結腸直腸癌、結合組織癌、消化器系の癌、子宮内膜癌、食道癌、眼の癌、頭頸部癌、胃癌、上皮内腫瘍、黒色腫、神経芽腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞性肺癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫または横紋筋肉腫から選択される、請求項４０に記載の使用。
【請求項４２】
対象が養子細胞治療のために投与される、請求項１７〜４１のいずれかに記載の使用。
【請求項４３】
養子細胞治療がＴ細胞を含む、請求項４２に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７９】
特許請求の範囲ならびに上記記載において、“含む”、“包含する”、“担持する”、“有する”、“含有する”、“関与する”、“保持する”、“構成される”などのような全ての経過句は(transitional phrase)、末端解放型であり、すなわち、含むけれども、限定されないことを意味すると理解すべきである。経過句“からなる”および“本質的にからなる”のみが、米国特許審査マニュアルのセクション２１１１.０３に示されるように、それぞれ閉鎖型または半閉鎖型経過である。
さらに、本願発明は次の態様を含む。
１. 複数の無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルを製造する方法であって、
(ａ)タンパク質と分解可能リンカーを、該分解可能リンカーを介してタンパク質が互いに可逆性共有結合架橋することを可能とする条件下で接触させ、それにより複数のタンパク質ナノゲルを産生し；そして
(ｂ)該タンパク質ナノゲルとポリマーを、該ポリマーと該タンパク質ナノゲルのタンパク質の架橋を可能とする条件下で接触させ、それにより複数の無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルを製造する
ことを含む、方法。
２. (ａ)の条件が、タンパク質と分解可能リンカーを、水性緩衝液中、４℃から２５℃の温度で接触させることを含む、項１に記載の方法。
３. (ａ)の条件が、タンパク質と分解可能リンカーを、水性緩衝液中、３０分から１時間接触させることを含む、項１または２に記載の方法。
４. (ｂ)の条件が、タンパク質ナノゲルとポリマーを、水性緩衝液中、４℃から２５℃の温度で接触させることを含む、項１〜３のいずれかに記載の方法。
５. (ｂ)の条件が、タンパク質ナノゲルとポリマーを、水性緩衝液中、３０分から１時間接触させることを含む、項１〜４のいずれかに記載の方法。
６. (ａ)の条件が、タンパク質と分解可能リンカーを、３０℃を超える温度で接触させることを含まない、項１〜５のいずれかに記載の方法。
７. (ｂ)の条件が、タンパク質ナノゲルとポリマーを、３０℃を超える温度で接触させることを含まない、項１〜６のいずれかに記載の方法。
８. (ａ)の条件が、タンパク質と分解可能リンカーを、有機溶媒中で接触させることを含まない、項１〜７のいずれかに記載の方法。
９. (ｂ)の条件が、タンパク質ナノゲルとポリマーを、有機溶媒中で接触させることを含まない、項１〜８のいずれかに記載の方法。
１０. タンパク質がサイトカイン、増殖因子、抗体または抗原である、項１〜９のいずれかに記載の方法。
１１. タンパク質がサイトカインである、項１０に記載の方法。
１２. サイトカインがＩＬ−２またはＩＬ−２−Ｆｃである、項１１に記載の方法。
１３. サイトカインがＩＬ−１５またはＩＬ−１５ＳＡである、項１１に記載の方法。
１４. 分解可能リンカーがジスルフィド結合を含む酸化還元応答性リンカーである、項１〜１３のいずれかに記載の方法。
１５. ポリマーが親水性ポリマーである、項１〜１４のいずれかに記載の方法。
１６. 親水性ポリマーがポリエチレングリコール(ＰＥＧ)を含む、項１５に記載の方法。
１７. ポリマーが４アームＰＥＧ−ＮＨ２ポリマーである、項１６に記載の方法。
１８. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの乾燥サイズが直径１００nm未満である、項１〜１７のいずれかに記載の方法。
１９. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの乾燥サイズが直径５０〜６０nmである、項１８に記載の方法。
２０. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの流体力学的粒径が直径１００nm未満である、項１〜１９のいずれかに記載の方法。
２１. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの流体力学的粒径が直径８０〜９０nmである、項１９に記載の方法。
２２. 水性緩衝液中のタンパク質の濃度が１０mg／mL〜５０mg／mLである、項２〜２１のいずれかに記載の方法。
２３. 複数の無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルが単分散した複数の無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルである、項１〜２２のいずれかに記載の方法。
２４. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルがアルブミンを含まない、項１〜２３のいずれかに記載の方法。
２５. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも７５％である、項１〜２４のいずれかに記載の方法。
２６. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも８０％である、項２５に記載の方法。
２７. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも８５％である、項２６に記載の方法。
２８. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも９０％である、項２７に記載の方法。
２９. 単分散した複数の無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルを含む組成物であって、ここで、該ナノゲルのタンパク質が分解可能リンカーを介して互いに可逆的かつ共有結合的に架橋し、かつ該ナノゲルのタンパク質がポリマーに架橋している、組成物。
３０. タンパク質がサイトカイン、増殖因子、抗体または抗原である、項２９に記載の組成物。
３１. タンパク質がサイトカインである、項３０に記載の組成物。
３２. サイトカインがＩＬ−２またはＩＬ−２−Ｆｃである、項３１に記載の組成物。
３３. サイトカインがＩＬ−１５またはＩＬ−１５ＳＡである、項３１に記載の組成物。
３４. 分解可能リンカーがジスルフィド結合を含む酸化還元応答性リンカーである、項１〜３２のいずれかに記載の組成物。
３５. ポリマーが親水性ポリマーである、項１〜３４のいずれかに記載の組成物。
３６. 親水性ポリマーがポリエチレングリコール(ＰＥＧ)を含む、項３５に記載の組成物。
３７. ポリマーが４アームＰＥＧ−ＮＨ２ポリマーである、項３６に記載の組成物。
３８. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの乾燥サイズが直径１００nm未満である、項１〜３７のいずれかに記載の組成物。
３９. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの乾燥サイズが直径５０〜６０nmである、項３８に記載の組成物。
４０. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの流体力学的粒径が直径１００nm未満である、項１〜３９のいずれかに記載の組成物。
４１. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルの流体力学的粒径が直径８０〜９０nmである、項４０に記載の組成物。
４２. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲルがアルブミンを含まない、項１〜４１のいずれかに記載の組成物。
４３. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも７５％である、項１〜４２のいずれかに記載の組成物。
４４. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも８０％である、項４３に記載の組成物。
４５. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも８５％である、項４４に記載の組成物。
４６. 無担体生物活性タンパク質−ポリマーナノゲル中のタンパク質の重量パーセンテージが少なくとも９０％である、項４５に記載の組成物。
４７. ポリマーおよび少なくとも７５％ｗ／ｗの分解可能リンカーを介して互いに可逆的かつ共有結合的に架橋したタンパク質を含む、ナノゲル。
４８. 対象に項２９〜４６のいずれかに記載の組成物または項４７に記載のナノゲルを投与することを含む、インビボでタンパク質を送達する方法。
４９. 対象が疾患を有する、項４８に記載の方法。
５０. 疾患が癌、糖尿病、自己免疫性疾患または心血管疾患である、項４９に記載の方法。
５１. タンパク質が、生理的条件下、ナノゲルからその天然立体構造で放出され、生物学的に活性である、項４８〜５０のいずれかに記載の方法。
５２. シランに分解可能リンカーを介して可逆的に結合した、タンパク質。
５３. 重合可能官能基に分解可能リンカーを介して可逆的に結合した、タンパク質。
５４. 重合可能官能基がシランおよび／または架橋可能ポリマーを含む、項５３に記載のタンパク質。
５５. 架橋可能ポリマーがポリ(エチレンオキシド)、ポリ乳酸および／またはポリ(乳酸−コ−グリコール酸)を含む、項５４に記載のタンパク質。
５６. タンパク質がサイトカイン、増殖因子、抗体または抗原である、項５２〜５５のいずれかに記載のタンパク質。
５７. サイトカインがＩＬ−２である、項５６に記載のタンパク質。
５８. 分解可能リンカーがＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを含む、項５２〜５７のいずれかに記載のタンパク質。
５９. 分解可能リンカーが酸化還元応答性リンカーである、項５２〜５８のいずれかに記載のタンパク質。
６０. 酸化還元応答性リンカーがジスルフィド結合を含む、項５９に記載のタンパク質。
６１. ジスルフィド結合を含む酸化還元応答性リンカーを介してシランに可逆的に結合した、サイトカイン。
６２. ＩＬ−２である、項６１に記載のサイトカイン。
６３. 式III
【化７】
2016533344.tif 000001
(ここで、タンパク質はＩＬ−２である)
を含む、タンパク質接合体。
６４. 項５２〜６３のいずれかに記載の多数のタンパク質。
６５. タンパク質が架橋している、項６４に記載の多数のタンパク質。
６６. ポリマーおよび少なくとも５０％ｗ／ｗの分解可能リンカーを介して重合可能官能基に可逆的に結合したタンパク質を含む、ナノ構造体。
６７. 重合可能官能基がシランおよび／または架橋可能ポリマーを含む、項６６に記載のナノ構造体。
６８. 架橋可能ポリマーがポリ(エチレンオキシド)、ポリ乳酸および／またはポリ(乳酸−コ−グリコール酸)を含む、項６７に記載のナノ構造体。
６９. 少なくとも７５％ｗ／ｗの重合可能官能基に可逆的に結合したタンパク質を含む、項６６〜６８のいずれかに記載のナノ構造体。
７０. 少なくとも８０％ｗ／ｗの重合可能官能基に可逆的に結合したタンパク質を含む、項６９に記載のナノ構造体。
７１. タンパク質がサイトカイン、増殖因子、抗体または抗原である、項６６〜７０のいずれかに記載のナノ構造体。
７２. サイトカインがＩＬ−２である、項７１に記載のナノ構造体。
７３. ナノ構造体がその表面に反応性基を含む、項６６〜７２のいずれかに記載のナノ構造体。
７４. 反応性基がマレイミド、ローダミンまたはＩＲ７８３反応性基である、項７３に記載のナノ構造体。
７５. ナノ構造体が担体細胞に結合している、項７３または７４に記載のナノ構造体。
７６. 担体細胞が有核担体細胞である、項７５に記載のナノ構造体。
７７. 有核担体細胞がＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞またはＮＫＴ細胞である、項７６に記載のナノ構造体。
７８. ナノ構造体が直径２０〜５００nmである、項６６〜７７のいずれかに記載のナノ構造体。
７９. 直径１００〜３００nmである、項７８に記載のナノ構造体。
８０. 分解可能リンカーがＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを含む、項６６〜７９のいずれかに記載のナノ構造体。
８１. 分解可能リンカーが酸化還元応答性リンカーである、項６６〜８０のいずれかに記載のナノ構造体。
８２. 酸化還元応答性リンカーがジスルフィド結合を含む、項８１に記載のナノ構造体。
８３. ナノ構造体の製造法であって、
タンパク質を分解可能リンカーおよび重合可能官能基で修飾し；そして
該重合可能官能基と架橋剤および可溶性フッ化物を重合させる、
ことを含む、方法。
８４. 重合可能官能基がシランおよび／または架橋可能ポリマーを含む、項８３に記載の方法。
８５. 架橋可能ポリマーがポリ(エチレンオキシド)、ポリ乳酸および／またはポリ(乳酸−コ−グリコール酸)を含む、項８４に記載の方法。
８６. 可溶性フッ化物がフッ化ナトリウムまたはフッ化カリウムである、項８３〜８５のいずれかに記載の方法。
８７. タンパク質がサイトカイン、増殖因子、抗体または抗原である、項８３〜８６のいずれかに記載の方法。
８８. サイトカインがＩＬ−２である、項８７に記載の方法。
８９. 分解可能リンカーがＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを含む、項８３〜８８のいずれかに記載の方法。
９０. 分解可能リンカーが酸化還元応答性リンカーである、項８３〜８９のいずれかに記載の方法。
９１. 酸化還元応答性リンカーがジスルフィド結合を含む、項９０に記載の方法。
９２. ナノ構造体が直径２０〜５００nmである、項８３〜９１のいずれかに記載の方法。
９３. ナノ構造体が直径１００〜３００nmである、項９２に記載の方法。
９４. さらにナノ構造体の表面を反応性基で修飾することを含む、項８３〜９３のいずれかに記載の方法。
９５. 反応性基がマレイミド、ローダミンまたはＩＲ７８３反応性基である、項９４に記載の方法。
９６. さらにナノ構造体を担体細胞に結合させることを含む、項９４または９５に記載の方法。
９７. 担体細胞が有核担体細胞である、項９６に記載の方法。
９８. 有核担体細胞がＴ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞またはＮＫＴ細胞である、項９７に記載の方法。
９９. インビボでタンパク質を送達する方法であって、
対象に項８３〜９８のいずれかに記載のナノ構造体を投与することを含む、方法。
１００. 対象が疾患を有する、項９９に記載の方法。
１０１. 疾患が癌、糖尿病、自己免疫性疾患または心血管疾患である、項１００に記載の方法。
１０２. タンパク質が、生理的条件下、その天然立体構造でナノ構造体から放出され、生物学的に活性である、項９９〜１０１のいずれかに記載の方法。
１０３. インビボでタンパク質を送達する方法であって、
対象にシランに分解可能リンカーを介して可逆的に結合したタンパク質を含むナノ構造体を投与することを含む、方法。
１０４. 式Ｉ
【化８】
2016533344.tif 000002
を含む、リンカー。
１０５. 式II
【化９】
2016533344.tif 000003
を含む、タンパク質接合体。
１０６. 式III
【化１０】
2016533344.tif 000004
を含む、タンパク質接合体。
１０７. 項４７に記載のナノゲルを含む、医薬組成物。