【誤訳訂正書】
【提出日】平成29年4月6日(2017.4.6)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２９】
固定剤／ヒドロゲル組成物は、ポリエチレングリコールおよびその誘導体（例えばＰＥＧジアクリレート（ＰＥＧ−ＤＡ）、ＰＥＧ−ＲＧＤ）、ポリ脂肪族ポリウレタン、ポリエーテルポリウレタン、ポリエステルポリウレタン、ポリエチレンコポリマー、ポリアミド、ポリビニルアルコール、ポリプロピレングリコール、ポリテトラメチレンオキシド、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ならびにポリヒドロキシエチルメタクリレート等だがそれらに限定されないあらゆる好都合なヒドロゲルサブユニット、コラーゲン、ヒアルロン酸、キトサン、デキストラン、アガロース、ゼラチン、アルギン酸塩、タンパク質ポリマー、メチルセルロース等を含んでよい。一部の実施例では、ヒドロゲルサブユニットは、ヒドロゲルに特異性を加えるために修飾されてよく、例えば、ペプチド配列が、分解を誘発するために（例えば、Ｗｅｓｔ  ａｎｄ  Ｈｕｂｂｅｌｌ，１９９９，Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，３２：２４１を参照されたい）、または細胞接着を修飾するために（例えば、Ｈｅｍ  ａｎｄ  Ｈｕｂｂｅｌｌ，１９９８，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．，３９：２６６を参照されたい）組み込まれることができる。親水性ナノ粒子、例えば、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＬＧ）、乳酸−グリコール酸共重合体（ｐｏｌｙ（ｌａｃｔｉｃ−ｃｏ−ｇｌｙｃｏｌｉｃ  ａｃｉｄ））（ＰＬＧＡ）、ポリスチレン、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）等の作用剤は、パターニング性を維持しながら、ヒドロゲルの透過性を向上させるために使用されてよい（例えば、米国特許出願第１３／０６５，０３０、Ｌｅｅ  Ｗ．ｅｔ  ａｌ．２０１０  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１０７，２０７０９−２０７１４を参照されたい）。ＰＥＧ、分解性ＰＥＯ、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、およびその他の類似の物質のブロックコポリマー等の物質は、ヒドロゲルに特異性を加えるために使用されることができる（例えば、Ｈｕｈ  ａｎｄ  Ｂａｅ，１９９９，Ｐｏｌｙｍｅｒ，４０：６１４７を参照されたい）。架橋剤（例えば、ビスアクリルアミド、ジアジリン等）および開始剤（例えば、アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）、リボフラビン、Ｌ−アルギニン等）は、後の重合ステップにおいて、相互作用する高分子間の共有結合を推進するために含まれてよい。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
顕微分析のための生体標本を調製する方法であって、
固定剤および複数のヒドロゲルサブユニットと前記標本を接触させることによって前記標本を固定することと、
前記ヒドロゲルサブユニットを重合させて、ヒドロゲル包埋標本を形成することと、
前記標本から複数の細胞成分を実質的に除去することによって、前記ヒドロゲル包埋標本を透明化することと、を含む、方法。
【請求項２】
前記ヒドロゲル包埋標本を透明化することが、前記標本から複数の細胞成分を実質的に除去することを伴う、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記細胞成分が脂質を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ヒドロゲル包埋標本を透明化することが、前記ヒドロゲル包埋標本を電気泳動装置で処理することを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記標本が、イオン性界面活性剤を含む緩衝溶液を使用して電気泳動される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記イオン性界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウムである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記標本が、１０〜６０ボルトの範囲の電圧を使用して電気泳動される、請求項４から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記標本が、１５分〜最大１０日の範囲の期間中電気泳動される、請求項４から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記透明化された標本の屈折率と整合する屈折率を有する封入剤の中で、前記透明化された標本をインキュベートすることを更に含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記封入剤が前記標本の光学的透明度を増加させる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記封入剤がグリセロールを含む、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記顕微分析が、光学顕微鏡法、レーザー顕微鏡法、電子顕微鏡法、および走査型プローブ顕微鏡法からなる群から選択される、請求項１から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記固定剤がパラホルムアルデヒドである、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ヒドロゲルサブユニットがアクリルアミドを含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記標本を重合させることが熱架橋を含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記方法が、前記標本を固定する前、または前記ヒドロゲルサブユニットを重合した後、または前記標本を透明化した後に、前記標本を、ポリペプチド、核酸、または小分子と接触させることを更に含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記接触させることが、電気泳動、流体動圧、超音波振動、溶質コントラスト、マイクロ波放射、または血管循環によって行う、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ポリペプチド、核酸、または小分子が、前記標本が顕微鏡的に分析されるときに、可視にされ得る成分を含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記標本が中枢神経系（ＣＮＳ）組織である、請求項１から１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＣＮＳ組織が全脳である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
顕微鏡法によって生体標本を画像化する方法であって、
請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法に従って生体標本を調製することと、
顕微鏡で前記生体標本を画像化することと、を含む、方法。
【請求項２２】
前記顕微鏡が、光学顕微鏡、レーザー顕微鏡、電子顕微鏡、または走査型プローブ顕微鏡である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記標本内に１つ以上の小分子、核酸、またはタンパク質を輸送して、前記標本の細胞または亜細胞性状を標識することを更に含む、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記標本内に事前に輸送された１つ以上の前記小分子、核酸、またはタンパク質を除去することを更に含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
神経系組織の接続性をマッピングする方法であって、
請求項１から２０のいずれか一項に記載の方法に従って神経系組織標本を調製することと、
顕微鏡で前記標本中の１つ以上のニューロンを画像化することと、を含む、方法。
【請求項２６】
前記ニューロンを画像化する前に、可視にされ得る成分で、前記標本中の前記１つ以上のニューロンを標識することを更に含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ニューロンが、前記標本を固定する前に標識する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ニューロンが、前記ヒドロゲルを重合させた後かつ画像化する前に標識される、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項２９】
顕微分析のために組織を調製するためのキットであって、
固定剤と、
複数のヒドロゲルサブユニットと、
電気泳動組織透明化装置であって、
３次元のヒドロゲル包埋標本を収容するための電気泳動チャンバ、
前記電気泳動チャンバ内に電場を創出するために電流が適用される電気泳動チャンバに操作可能に関連する２つ以上の電極であって、このとき前記電気泳動チャンバが、２つ以上の電極の間に生成される電場の実質的に中にある位置で、ヒドロゲル包埋標本を支持するように構成される構成要素を含む、２つ以上の電極、
前記２つ以上の電極と操作可能に連結している電源、および、
温度制御式緩衝液循環器であって、前記電気泳動チャンバが、複数の流体注入口および／または排出口ポートを含み、それを通って緩衝液がチャンバに入る、および／または出る、温度制御式緩衝液循環器、を具備する電気泳動組織透明化装置と
を備える、キット。
【請求項３０】
前記透明化されたヒドロゲル包埋標本を封入剤の中で保管することを更に含む、請求項９に記載の方法。
【請求項３１】
前記透明化されたヒドロゲル包埋標本を、病理状態の評価、診断、または予後診断のために分析することを更に含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記標本が生検標本または剖検標本である、請求項３０または３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記病理状態が、癌、免疫系機能不全、神経精神疾患、内分泌／生殖器系疾患、心血管／肺疾患、筋骨格疾患、または消化器疾患である、請求項３１または３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記標本が健常な組織を含み、前記方法が、発達段階を含む細胞、組織、器官、もしくは系統機能および／または細胞と組織との間の関係を評価するために、前記標本を分析することを更に含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
前記標本に、遺伝子、転写、ゲノム、プロテオーム、メタボロミクス、および／または薬剤スクリーニング分析を行うことを更に含む、請求項３３または３４に記載の方法。
【請求項３６】
将来的な分析、査定、または機能化のために、前記標本を保管することを更に含む、請求項３０から３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記固定剤が、ホルムアルデヒド、パラホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、アセトン、エタノール、またはメタノールである、請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記ヒドロゲルサブユニットが、ポリエチレングリコールおよびその誘導体（例えばＰＥＧジアクリレート（ＰＥＧ−ＤＡ）、ＰＥＧ−ＲＧＤ）、ポリ脂肪族ポリウレタン、ポリエーテルポリウレタン、ポリエステルポリウレタン、ポリエチレンコポリマー、ポリアミド、ポリビニルアルコール、ポリプロピレングリコール、ポリテトラメチレンオキシド、ポリビニルピロリドン、ポリアクリルアミド、ポリヒドロキシエチルアクリレート、ならびにポリヒドロキシエチルメタクリレート、コラーゲン、ヒアルロン酸、キトサン、デキストラン、アガロース、ゼラチン、アルギン酸塩、タンパク質ポリマー、またはメチルセルロースを含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。