【手続補正書】
【提出日】平成29年8月14日(2017.8.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドナー哺乳類からレシピエント哺乳類へ移植された臓器の生存を延長するための、補体阻害剤を含む組成物であって、該組成物は、移植の直前に該臓器へ投与されることを特徴とし、ここで該補体阻害剤が、７０ｋＤａの最大分子量および／または１０日未満の半減期を有し、ここで、該補体阻害剤が、１本鎖抗体、エクリズマブのＦａｂ、または補体Ｈ因子（ＣＦＨ）の補体阻害ドメインに連結した補体受容体２（ＣＲ２）断片を含む融合タンパク質である、組成物。
【請求項２】
前記補体阻害剤が、配列番号３を含むヒトＣＲ２−ＦＨ融合タンパク質である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記補体阻害剤が１本鎖抗Ｃ５抗体である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記補体阻害剤が、配列番号２７もしくは配列番号２９を含む１本鎖抗Ｃ５抗体である、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物が、前記レシピエント哺乳類へ移植された臓器の拒絶反応を予防または減弱する、請求項１〜４のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記拒絶反応が、超急性拒絶反応、臓器移植後臓器機能障害、抗体媒介性拒絶反応（ＡＭＲ）または慢性拒絶反応である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記補体阻害剤が、約２６ｋＤａまたは約６５ｋＤａの分子量を有する、請求項１〜６のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記レシピエント哺乳類が、移植の前に、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓに対してワクチン接種されていない、請求項１〜７のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記補体阻害剤が、前記レシピエント哺乳類への移植の前に、前記臓器から実質的に除去されている、および／または前記レシピエントが、移植後に補体阻害剤で処置されない、請求項１〜８のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記臓器が、腎臓、心臓、肺、膵臓、肝臓、脈管組織、眼、角膜、レンズ、皮膚、骨髄、筋肉、結合組織、胃腸組織、神経組織、骨、幹細胞、膵島、軟骨、肝細胞、および造血細胞からなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、必要に応じて臓器調達センターで、ドナー哺乳類から前記臓器を取り出した後でかつレシピエント動物への該臓器の移植前に、該臓器へ投与されることを特徴とする、請求項１〜１０のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ドナー哺乳類およびレシピエント哺乳類がヒトである、請求項１〜１１のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が、前記補体阻害剤を含む溶液で前記臓器を灌流することによって、または前記補体阻害剤を含む溶液中に前記臓器を浸漬することによって、該臓器に投与されることを特徴とする、請求項１〜１２のうちのいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記臓器が、０．５から６０時間、例えば１から３０時間または２８時間にわたって灌流または浸漬されることを特徴とする、請求項１３に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
本発明の方法で使用し得る代表的な臓器は、腎臓、心臓、肺、膵臓、肝臓、脈管組織、眼、角膜、レンズ、皮膚、骨髄、筋肉、結合組織、胃腸組織、神経組織、骨、幹細胞、膵島、軟骨、肝細胞、および造血細胞を含むがこれに限らない。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
ドナー哺乳類からレシピエント哺乳類へ移植された臓器の生存を延長する方法であって、該方法は、補体阻害剤を移植の前に該臓器へ投与することを包含し、ここで該補体阻害剤が、７０ｋＤａの最大分子量および／または１０日未満の半減期を有する、方法。
（項目２）
ドナー哺乳類からレシピエント哺乳類へ移植された臓器の生存を延長する方法であって、該方法は、補体阻害剤を移植の前に該臓器へ投与することを包含し、ここで該補体阻害剤が、配列番号３を含むヒトＣＲ２−ＦＨ融合タンパク質、または配列番号２７もしくは配列番号２９を含む１本鎖抗体である、方法。
（項目３）
レシピエント哺乳類において移植された臓器の拒絶反応を予防または減弱する方法であって、該方法は、補体阻害剤を移植の前に該臓器へ投与することを包含し、ここで該補体阻害剤が、７０ｋＤａの最大分子量および／または１０日未満の半減期を有する、方法。
（項目４）
レシピエント哺乳類において移植された臓器の拒絶反応を予防または減弱する方法であって、該方法は、補体阻害剤を移植の前に該臓器へ投与することを包含し、ここで該補体阻害剤が、配列番号３を含むヒトＣＲ２−ＦＨ融合タンパク質、または配列番号２７もしくは配列番号２９を含む１本鎖抗体である、方法。
（項目５）
前記拒絶反応が、超急性拒絶反応、抗体媒介性拒絶反応（ＡＭＲ）または慢性拒絶反応である、項目３または４に記載の方法。
（項目６）
前記補体阻害剤が、約２６ｋＤａの分子量を有する、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
前記補体阻害剤が、約６５ｋＤａの分子量を有する、項目１〜５のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目８）
前記レシピエント哺乳類が、移植の前にワクチン接種されていない、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
前記レシピエント哺乳類が、移植の前に、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓに対してワクチン接種されていない、項目８に記載の方法。
（項目１０）
前記補体阻害剤が、前記レシピエント哺乳類への移植の前に、前記臓器から実質的に除去されている、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
前記補体阻害剤が、配列番号３を含むヒトＣＲ２−ＦＨ融合タンパク質である、項目１または３に記載の方法。
（項目１２）
前記補体阻害剤が、１本鎖抗体である、項目１または３に記載の方法。
（項目１３）
前記補体阻害剤が、１本鎖抗Ｃ５抗体である、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記補体阻害剤が、配列番号２７もしくは配列番号２９を含む１本鎖抗Ｃ５抗体である、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
前記臓器が、腎臓、心臓、肺、膵臓、肝臓、脈管組織、眼、角膜、レンズ、皮膚、骨髄、筋肉、結合組織、胃腸組織、神経組織、骨、幹細胞、膵島、軟骨、肝細胞、および造血
細胞からなる群から選択される、項目１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記補体阻害剤が、ドナー哺乳類から前記臓器を取り出した後でかつレシピエント動物への該臓器の移植前に、該臓器へ投与される、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
前記補体阻害剤が、臓器調達センターで投与される、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
前記補体阻害剤が、移植の直前に投与される、項目１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記ドナー哺乳類およびレシピエント哺乳類がヒトである、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
前記レシピエントが、移植後に補体阻害剤で処置されない、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記補体阻害剤を前記臓器へ投与することが、前記補体阻害剤を含む溶液で、該臓器を灌流することを含む、先行する項目のうちのいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記補体阻害剤を前記臓器へ投与することが、前記補体阻害剤を含む溶液中に該臓器を浸漬することを含む、項目１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
前記臓器が、０．５から６０時間にわたって灌流または浸漬される、項目２１または２２に記載の方法。
（項目２４）
前記臓器が、１から３０時間にわたって灌流または浸漬される、項目２１または２２に記載の方法。
（項目２５）
前記臓器が、２８時間にわたって灌流または浸漬される、項目２１または２２に記載の方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７３】
いくつかの実施態様において、そのＣＲ２−ＦＨ分子は、融合タンパク質である。本明細書中で使用される「融合タンパク質」は、お互いに操作可能に連結された、２つまたはそれより多くのペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質を指す。いくつかの実施態様において、ＣＲ２部分およびＦＨ部分は、お互いに直接融合している。いくつかの実施態様において、そのＣＲ２部分およびＦＨ部分は、アミノ酸リンカー配列によって連結している。リンカー配列の例は、当該分野で公知であり、そして例えば（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）（配列番号３２）、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）２（配列番号３３）、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３（配列番号３４）、（Ｇｌｙ３Ｓｅｒ）４（配列番号３５）、（ＳｅｒＧｌｙ４）（配列番号３６）、（ＳｅｒＧｌｙ４）２（配列番号３７）、（ＳｅｒＧｌｙ４）３（配列番号３８）、および（ＳｅｒＧｌｙ４）４（配列番号３９）を含む。連結配列はまた、補体因子の異なるドメイン間に見出される「天然」連結配列を含み得る。例えば、ヒトＣＲ２の最初の２つのＮ末端のショートコンセンサスリピートドメイン間の連結配列である、ＶＳＶＦＰＬＥ（配列番号４０）を使用し得る。いくつかの実施態様において、ヒトＣＲ２の４番目および５番目のＮ末端のショートコンセンサスリピートドメイン間の連結配列（ＥＥＩＦ）（配列番号４１）を使用する。融合タンパク質におけるＣＲ２部分およびＦＨ部分の順序は変動し得る。例えば、いくつかの実施態様において、ＣＲ２部分のＣ末端が、分子のＦＨ部分のＮ末端に融合している（直接的または間接的に）。いくつかの実施態様において、ＣＲ２部分のＮ末端が、分子のＦＨ部分のＣ末端に融合している（直接的または間接的に）。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０１】
いくつかの実施態様において、そのＦＨ部分は、Ｈ因子遺伝子の選択的スプライシングされた転写物によってコードされるタンパク質である、Ｈ因子様１分子（ＦＨＬ−１）の全長または断片を含む。成熟ＦＨＬ−１は、４３１アミノ酸を含む。最初の４２７アミノ酸は、７つのＳＣＲドメインを構築し、そしてＦＨのＮ末端ＳＣＲドメインを同一である。Ｃ末端の残りの４つのアミノ酸残基Ｓｅｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ（ＳＦＴＬ）（配列番号４２）は、ＦＨＬ−１に特異的である。ＦＨＬ−１は、機能的に特徴付けられ、そしてＨ因子補体調節活性を有することが示されている。「ＦＨ部分」という用語はまた、ＦＨＲ１遺伝子、ＦＨＲ２遺伝子、ＦＨＲ３遺伝子、ＦＨＲ４遺伝子、ＦＨＲ５遺伝子によってコードされるタンパク質を含むがこれに限らない、Ｈ因子関連分子の全長または断片を包含する。これらのＨ因子関連タンパク質は、例えばＣｏｒｄｏｂａら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ２００４、４１：３５５−３６７において開示される。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４５】
図１９に示すように、ＴＴ３０または１８Ａ１０処置腎を移植された動物は、コントロール処置腎を移植された動物と比較して、移植片の生存が有意に増加した（ＴＴ３０は６６．７％（６匹のうち４匹）、および１８Ａ１０は６６．７％（６匹のうち４匹）対ＵＷ溶液単独は０％（６匹のうち０匹）；Ｐ＜０．０１）。これらのデータは、移植前のドナー臓器の第二経路阻害剤または終末経路阻害剤のいずれか、特に低分子量阻害剤（例えば７０ｋＤａまたはそれより小さい）および／または短い半減期を示す（例えば１０日未満）阻害剤、例えばＴＴ３０および１８Ａ１０（１本鎖抗体）による処置は、ＩＲＩを低減し、そして移植片の生存を延長し得ることを明らかに示す。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４８】
図２０に示すように、調達灌流および２８時間の保存におけるＴＴ３０処置は、ＵＷ溶液単独と比較して、Ｃ３レベルを有意に低減した。虚血後灌流および４５分間の保存におけるＴＴ３０処置の使用は、ＵＷ溶液コントロールと比較して、Ｃ３レベルの低減に有意な効果を達成しなかった。これらの結果は、特に低分子量阻害剤（例えば７０ｋＤａまたはそれより小さい）および／または短い半減期（例えば１０日未満）を示す阻害剤、例えばＴＴ３０および１８Ａ１０を用いた、ドナー臓器における補体活性化の第二経路の阻害は、臓器における補体活性化を有効に予防し得ることを明らかに示した。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５３】
本明細書中で引用された全ての参考文献の内容は、その全体が参考文献に組み込まれる。
配列のまとめ
【表１−１】
2016531910.tif 000001
【表１−２】
2016531910.tif 000002
【表１−３】
2016531910.tif 000003
【表１−４】
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【表１−５】
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【表１−６】
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【表１−７】
2016531910.tif 000007
【表１−８】
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【表１−９】
2016531910.tif 000009
【表１−１０】
2016531910.tif 000010
【表１−１１】
2016531910.tif 000011
【表１−１２】
2016531910.tif 000012
【手続補正８】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図８】
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