【手続補正書】
【提出日】平成29年11月14日(2017.11.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
新規発症糖尿病を有する哺乳動物において血中グルコース濃度を低下させるための組成物であって、寛容原性樹状細胞を含み、
前記新規発症糖尿病を有する哺乳動物の膵臓の近位にある１カ所または複数カ所の注射部位に前記組成物の注射が２回またはそれ超投与されることを特徴とし、
前記血中グルコースが、少なくとも２４時間の期間にわたって正常な血中グルコース濃度まで低下する、組成物。
【請求項２】
前記寛容原性樹状細胞が、前記哺乳動物から、または同じ種の異なる哺乳動物から単離されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記寛容原性樹状細胞が、予め凍結されている、請求項１から２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４】
前記１カ所または複数カ所の注射部位のうちの１カ所が、
（１）前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部であるか、
（２）前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部であるか、
（３）前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部であるか、または
（４）前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部である、
請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記投与が、少なくとも４カ所の注射部位を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
第１の注射部位が、前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部であり、第２の注射部位が前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部であり、第３の注射部位が前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部であり、第４の注射部位が前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物の前記注射が少なくとも３回、４回または５回投与されることをさらに特徴とする、請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記血中グルコースが、正常な血中グルコース濃度まで低下し、少なくとも約７日の間にわたって前記正常な血中グルコース濃度まで回復する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記投与が、追加的な免疫抑制療法の投与を含まない、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
２回またはそれ超の前記組成物の前記注射が、少なくとも１つの粒子を含み、前記粒子が、配列番号４、配列番号５、配列番号６、もしくは配列番号７として記載されている核酸配列、またはそれらの組合せを含むオリゴヌクレオチドを含む、請求項１から９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
（１）前記少なくとも１つの粒子が少なくとも１つのマーカーで標識されており、任意選択で、前記マーカーが蛍光マーカーであり、好ましくはｐＨ指示薬であるか、または
（２）前記少なくとも１つの粒子の全てがマーカーで標識されているわけではなく、任意選択で、前記マーカーが蛍光マーカーであり、好ましくはｐＨ指示薬である、
請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記哺乳動物が、最大で１年にわたって１型糖尿病の臨床発症を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１４】
前記臨床発症が、（ｉ）高血糖、（ｉｉ）前記哺乳動物の前記血中グルコース濃度の制御の不能、または（ｉｉｉ）それらの組み合わせを含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記寛容原性樹状細胞がオリゴヌクレオチドを含み、前記オリゴヌクレオチドが、配列番号４、配列番号５、配列番号６または配列番号７として記載されている核酸、あるいはそれらの組み合わせを含む、請求項１から９および１２から１４のいずれか一項に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
一部の態様では、小児哺乳動物において血中グルコースを前糖尿病レベルまで回復させるための方法であって、哺乳動物の膵臓リンパ節または膵臓の近位にある１カ所または複数カ所の注射部位に寛容原性（tolerogenic）樹状細胞の皮下注射を２回またはそれ超投与するステップを含み、前記血中グルコースを少なくとも２４時間の期間にわたって前記前糖尿病レベルまで回復させることができる方法が本明細書において提供される。一部の実施形態では、前記寛容原性樹状細胞は、前記哺乳動物から、または異なる哺乳動物から単離されていてもよい。一部の実施形態では、前記寛容原性樹状細胞は、予め凍結されていてよい。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
小児哺乳動物において血中グルコースを前糖尿病レベルまで回復させるための、寛容原性樹状細胞の使用であって、
前記小児哺乳動物の膵臓の近位にある１カ所または複数カ所の注射部位に前記寛容原性樹状細胞の皮下注射を２回またはそれ超投与するステップを含み、
前記血中グルコースが、少なくとも２４時間の期間にわたって前記前糖尿病レベルまで回復する、使用。
（項目２）
前記寛容原性樹状細胞が、前記小児哺乳動物から、または同じ種の異なる哺乳動物から単離される、項目１に記載の使用。
（項目３）
前記寛容原性樹状細胞が、予め凍結されている、項目１から２のいずれか一項に記載の使用。
（項目４）
前記１カ所または複数カ所の注射部位のうちの１カ所が、前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部である、項目１から３のいずれか一項に記載の使用。
（項目５）
前記１カ所または複数カ所の注射部位のうちの１カ所が、前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部である、項目１から３のいずれか一項に記載の使用。
（項目６）
前記１カ所または複数カ所の注射部位のうちの１カ所が、前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部である、項目１から３のいずれか一項に記載の使用。
（項目７）
前記１カ所または複数カ所の注射部位のうちの１カ所が、前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部である、項目１から３のいずれか一項に記載の使用。
（項目８）
前記投与が、少なくとも４カ所の注射部位を含む、項目１から３のいずれか一項に記載の使用。
（項目９）
第１の注射部位が、前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部であり、第２の注射部位が前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約２〜約１インチ上部であり、第３の注射部位が前記膵臓から約３．２５〜約２．２５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部であり、第４の注射部位が前記膵臓から約１．７５〜約０．７５インチ左外側かつ前記膵臓から約３〜約２インチ上部である、項目８に記載の使用。
（項目１０）
前記寛容原性樹状細胞の皮下注射を少なくとも３回、４回または５回投与するステップをさらに含む、項目１から３のいずれか一項に記載の使用。
（項目１１）
前記血中グルコースが、約２５日から約３５日の間にわたって前記前糖尿病レベルまで回復する、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目１２）
前記血中グルコースが、約６５週間から７５週間の間にわたって前記前糖尿病レベルまで回復する、項目１から１０のいずれか一項に記載の使用。
（項目１３）
前記小児哺乳動物がヒトである、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目１４）
前記投与が、追加的な免疫抑制療法を投与することを含まない、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目１５）
前記投与により、前記注射部位まで３細胞長の半径距離内にあるＴ細胞の同時刺激が妨げられる、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目１６）
前記寛容原性樹状細胞が少なくとも１つのマーカーで標識されている、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目１７）
前記マーカーが蛍光マーカーである、項目１６に記載の使用。
（項目１８）
前記蛍光マーカーが生存能力の指標である、項目１７に記載の使用。
（項目１９）
前記寛容原性樹状細胞の全てがマーカーで標識されているわけではない、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目２０）
２回またはそれ超の前記寛容原性樹状細胞の皮下注射が、少なくとも１つの粒子を含み、前記粒子が、配列番号４、配列番号５、配列番号６、もしくは配列番号７として記載されている核酸配列、またはそれらの組合せを含むオリゴヌクレオチドを含む、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目２１）
前記粒子が少なくとも１つのマーカーで標識されている、項目２０に記載の使用。
（項目２２）
前記粒子の全てがマーカーで標識されているわけではない、項目２０に記載の使用。
（項目２３）
前記マーカーが蛍光マーカーである、項目２１から２２のいずれか一項に記載の使用。
（項目２４）
前記蛍光マーカーがｐＨ指示薬である、項目２３に記載の使用。
（項目２５）
前記寛容原性樹状細胞を投与した後に前記マーカーを追跡するステップをさらに含む、項目１６に記載の使用。
（項目２６）
所定の解剖学的位置における前記少なくとも１つのマーカーの蓄積を定量化するステップをさらに含む、項目１６に記載の使用。
（項目２７）
前記小児哺乳動物が、少なくとも１カ月にわたって１型糖尿病の臨床発症を有する、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目２８）
前記小児哺乳動物が、少なくとも１年にわたって１型糖尿病の臨床発症を有する、項目１から２６のいずれか一項に記載の使用。
（項目２９）
前記小児哺乳動物が、少なくとも５年にわたって１型糖尿病の臨床発症を有する、項目１から２６のいずれか一項に記載の使用。
（項目３０）
前記小児哺乳動物がヒトである、前記項目のいずれか一項に記載の使用。
（項目３１）
前記小児哺乳動物が、マウスまたは非ヒト霊長類である、項目１から２９のいずれか一項に記載の使用。
（項目３２）
前記ヒトが、約１歳から約５歳の間、約６歳から約１０歳の間、または約１１歳から約１８歳の間である、項目３０に記載の使用。
（項目３３）
前記ヒトが、糖尿病を小児期発症している、項目３０に記載の使用。
（項目３４）
前記小児哺乳動物における抑制性Ｂ細胞集団を増大させるステップであって、全身的な抑制性Ｂ細胞増大と比較してより大きな抑制性Ｂ細胞の局所的増大が前記膵臓の近くで起こる、ステップをさらに含む、項目１に記載の使用。
（項目３５）
追加的な免疫抑制療法を施さない、項目３４に記載の使用。
（項目３６）
前記小児哺乳動物がヒトである、項目３４に記載の使用。
（項目３７）
前記小児哺乳動物がマウスまたは非ヒト霊長類である、項目３４に記載の使用。
（項目３８）
前記ヒトが、約１歳から約５歳の間、約６歳から約１０歳の間、または約１１歳から約１８歳の間である、項目３６に記載の使用。
（項目３９）
前記小児哺乳動物が、最大で１カ月にわたって１型糖尿病の臨床発症を有する、項目３４から３８のいずれか一項に記載の使用。
（項目４０）
前記小児哺乳動物が、最大で１年にわたって１型糖尿病の臨床発症を有する、項目３４から３８のいずれか一項に記載の使用。
（項目４１）
前記小児哺乳動物が、最大で５年にわたって１型糖尿病の臨床発症を有する、項目３４から３８のいずれか一項に記載の使用。
（項目４２）
前記抑制性Ｂ細胞集団が、以下のマーカー：ＣＤ１９、ＩｇＤ、ＩｇＭ、ＣＤ１０、ＣＤ２１、ＣＤ２７、ＣＤ３８、ＩＬ−１０、およびＣＤ４０を発現する、項目３４から４１のいずれか一項に記載の使用。
（項目４３）
前記抑制性Ｂ細胞集団が、以下のマーカー：ＣＤ１９、ＣＤ２７、ＣＤ３８、およびＣＤ２４を発現する、項目３４から４１のいずれか一項に記載の使用。
（項目４４）
前記抑制性Ｂ細胞集団が、以下のマーカー：ＣＤ１Ｂ、ＣＤ５、ＣＤ１９、およびＩＬ１０を発現する、項目３４から４１のいずれか一項に記載の使用。
（項目４５）
前記抑制性Ｂ細胞集団が、ＣＤ１１ｃマーカーを発現しない、項目３４から４４のいずれか一項に記載の使用。
（項目４６）
前記抑制性Ｂ細胞集団が、メモリーＢ細胞集団を含む、項目３４から４５のいずれか一項に記載の使用。
（項目４７）
前記メモリーＢ細胞集団が、以下のマーカー：ＣＤ２７、ＣＤ３８、およびＣＤ４０を発現する、項目４６に記載の使用。
（項目４８）
前記抑制性Ｂ細胞集団が増殖する、項目３４から４７のいずれか一項に記載の使用。
（項目４９）
前記抑制性Ｂ細胞集団が分化する、項目３４から４８のいずれか一項に記載の使用。
（項目５０）
Ｔ細胞集団の増殖を抑制するステップをさらに含む、項目３４から４９のいずれか一項に記載の使用。
（項目５１）
前記抑制性Ｂ細胞集団からの抑制性Ｂ細胞と前記Ｔ細胞集団からのＴ細胞を接触させるステップをさらに含む、項目５０に記載の使用。
（項目５２）
前記抑制性Ｂ細胞集団が、寛容原性樹状細胞、ナノ粒子、微小粒子、またはそれらの組合せを含む皮下注射を２回またはそれ超投与することによって誘導される、項目３４から５１のいずれか一項に記載の使用。
（項目５３）
２回またはそれ超の前記皮下注射を、前記膵臓の近位にある１カ所または複数カ所の注射部位に投与する、項目５２に記載の使用。
（項目５４）
２回またはそれ超の前記皮下注射が、４カ所の注射部位を含む、項目５３に記載の使用。
（項目５５）
前記ナノ粒子が、オリゴヌクレオチドを含む、項目５２に記載の使用。
（項目５６）
前記微小粒子が、オリゴヌクレオチドを含む、項目５２に記載の使用。
（項目５７）
前記抑制性Ｂ細胞集団の表面上の生存促進性シグナルの発現を非抑制性細胞集団と比較して増加させるステップをさらに含む、項目３４から５６のいずれか一項に記載の使用。
（項目５８）
少なくとも１つの寛容原性樹状細胞を投与することによって非抑制性Ｂ細胞集団におけるアポトーシスを誘導するステップをさらに含む、項目３４から５６のいずれか一項に記載の使用。
（項目５９）
小児哺乳動物における１型糖尿病に対する処置である抑制性Ｂ細胞とＴ細胞の比を変更するための、寛容原性樹状細胞の使用であって、
寛容原性樹状細胞を前記哺乳動物に送達するステップを含み、前記変更が、前記抑制性Ｂ細胞を増加させ、かつ前記Ｔ細胞を減少させることを含む、使用。
（項目６０）
前記寛容原性樹状細胞を前記哺乳動物の膵臓の近位にある部位に注射するステップをさらに含む、項目５９に記載の使用。
（項目６１）
前記抑制性Ｂ細胞を増大させるステップをさらに含む、項目５９から６０のいずれか一項に記載の使用。
（項目６２）
前記Ｔ細胞の増殖を抑制するステップをさらに含む、項目５９から６１のいずれか一項に記載の使用。
（項目６３）
前記抑制性Ｂ細胞が、以下のマーカー：Ｂ２２０、ＣＤ１９、およびＩＬ１０を発現する、項目５９から６２のいずれか一項に記載の使用。
（項目６４）
前記抑制性Ｂ細胞が、ＣＤ１１ｃマーカーを発現しない、項目５９から６３のいずれか一項に記載の使用。
（項目６５）
前記抑制性Ｂ細胞とＴ細胞の比が約１：１０である、項目５９から６４のいずれか一項に記載の使用。
（項目６６）
前記Ｔ細胞の前記増殖を約４０％〜約５５％低下させることによって前記比を変更する、項目６３に記載の使用。
（項目６７）
前記Ｔ細胞の前記増殖を約６５％〜約８０％低下させることによって前記比を変更する、項目６５に記載の使用。
（項目６８）
前記抑制性Ｂ細胞とＴ細胞の比が約１：１である、項目５９に記載の使用。
（項目６９）
前記抑制性Ｂ細胞の少なくとも１つと前記Ｔ細胞の少なくとも１つを接触させるステップをさらに含む、項目５９に記載の使用。
（項目７０）
哺乳動物における炎症応答を低減するための、寛容原性樹状細胞の使用であって、
前記哺乳動物の膵臓内またはその近くに寛容原性樹状細胞を導入し、それにより、前記哺乳動物においてレチノイン酸を産生させるステップを含み、
前記レチノイン酸の産生により、少なくとも１つのレチノイン酸受容体および少なくとも１つのレチノイドＸ受容体を発現する抑制性Ｂ細胞集団の増加がもたらされる、使用。
（項目７１）
前記哺乳動物がヒトである、項目７０に記載の使用。
（項目７２）
前記哺乳動物がマウスまたは非ヒト霊長類である、項目７０に記載の使用。
（項目７３）
前記ヒトが、約１歳から約５歳の間、約６歳から約１９歳の間、または約１１歳から約１８歳の間である、項目７０に記載の使用。
（項目７４）
前記哺乳動物が過敏性腸疾患（ＩＢＤ）を有する、項目７０から７３のいずれか一項に記載の使用。
（項目７５）
前記哺乳動物が１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）を有する、項目７０から７３のいずれか一項に記載の使用。