(57)【要約】  本発明により、式（Ｉ）で表される化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含む、認知機能疾患または障害の治療または予防のための医薬組成物が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2017131097.tif 000015
［式中、Ｒ１は、水素原子、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｒ２は、水素原子、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｘは、Ｏ、またはＮＲ５であり；
Ｒ３は、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいフェニル、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよい５又は６員環ヘテロアリール、またはＣＯＯＲ６であり；
Ｒ４は、水素原子、ハロゲン原子、アジド、−ＯＲ７、または−ＮＨＲ８であり；
Ｒ５は、水素原子、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６は、水素原子、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｒ８は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｘ１は、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルコキシ、ニトロ、またはシアノである］
で表される化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。
【請求項２】
Ｒ４が、塩素原子、またはアジドである、請求項１に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。
【請求項３】
Ｒ１が、トリフルオロアセチルである、請求項１または２に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。
【請求項４】
Ｒ２が、１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。    
【請求項５】
Ｒ２が、トリフルオロアセチルである、請求項４に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。
【請求項６】
Ｒ３が、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいフェニル、またはＸ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいピリジルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。
【請求項７】
酢酸（Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−５−アジド−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル；
（Ｓ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル；
（Ｒ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−２−（（Ｓ）−２−メトキシ−２−オキソ−１−（２，２，２−トリフルオロアセタミド）エチル）アダマンタン−１−イル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）メチル）アダマンタン−１−イル；
（Ｓ）−２−アミノ−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，５−ジヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸；
Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル）−２，２，２−トリフルオロアセタミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−５−（２−メトキシエトキシ）−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル；
Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（ピリジン−３−イル）メチル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド；
２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル）アセタミド；および
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−５−メトキシ−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル
から選択される、請求項１に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する医薬組成物。
【請求項９】
認知機能疾患または障害の治療又は予防に用いるための、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
認知機能疾患または障害が、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症、パーキンソン病、精神疾患、神経変性疾患から選択される、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
糖尿病または糖尿病性合併症の治療又は予防に用いるための、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する、Ｋｉｒ６．２チャネル阻害薬。
【請求項１３】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する、Ｋｉｒ６．１チャネル阻害薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アダマンタン誘導体およびその医薬的に許容な塩に関する。さらに本発明は、該化合物を含有する医薬組成物、および該化合物を使用する疾患の治療方法または予防方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＡＴＰ感受性Ｋ＋チャネル（ＫＡＴＰチャネル）は，細胞内の代謝状態と細胞膜の興奮性を結びつけている内向き整流性Ｋ＋チャネルであり、ＡＢＣタンパクファミリーに属するスルフォニルウレア受容体（ＳＵＲ）と膜２回貫通型のＫｉｒ６．１およびＫｉｒ６．２からなる，異種八量体構造を有することが知られている。ＫＡＴＰチャネルは，種々のＫ＋チャネル開口薬，阻害薬，あるいは細胞内のヌクレオチドにより，その活性が制御される。これらは全てＳＵＲサブユニットに作用点をもっており，ＳＵＲのサブタイプにより反応が異なるとの報告がされている（非特許文献１）。【０００３】
かご型構造を有するアダマンタンの誘導体は医薬として利用されているものもあり、アマンタジンは抗ウイルス薬およびパーキンソン病治療薬として使用されている。塩酸メマンチンは中等度・重度アルツハイマー型認知症の治療薬として日本においても承認がされている。メマンチンは非競合的ＮＭＤＡ受容体阻害薬であり，虚血が引き起こすグルタミン酸過剰放出による神経細胞死を防ぐという作用機作が報告されている（非特許文献２）。【０００４】
医薬としての活性を有するアダマンタン誘導体についていくつかの報告がされている（特許文献１〜３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表２０１１−５２９０５７号
【特許文献２】特開２０１０−５２２２０３号
【特許文献３】特表２００９−５０８９５６号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】日薬理誌、１２６、３１１〜３１６（２００５）
【非特許文献２】日薬理誌、１２４、１４５〜１５１（２００４）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
アルツハイマー病などの認知機能疾患または障害に対しては十分な効果が得られる治療方法および予防方法が確立しているとは言えず、既存の薬剤とは作用機作が異なる新規な治療剤および予防剤が求められている。また糖尿病に対する新規な治療剤および予防剤も強く求められている。【０００８】
一つの側面において、本発明は認知機能疾患または障害の治療または予防に用いるための医薬組成物の提供を目的とする。さらに本発明は特定のアダマンタン誘導体を用いた認知機能疾患または障害の治療方法または予防方法の提供を目的とする。【０００９】
一つの側面において、本発明は糖尿病または糖尿病合併症の治療または予防に用いるための医薬組成物の提供を目的とする。さらに本発明は特定のアダマンタン誘導体を用いた糖尿病または糖尿病合併症の治療方法または予防方法の提供を目的とする。【００１０】
ＡＴＰ感受性Ｋ＋チャネル（ＫＡＴＰチャネル）は，Ｋｉｒ６．１およびＫｉｒ６．２を含み、抗糖尿病薬などの作用点として知られている。【００１１】
一つの側面において、本発明はＫＡＴＰチャネルのＫｉｒ６．１チャネル阻害薬またはＫｉｒ６．２チャネル阻害薬の提供を目的とする。さらに本発明は、ＫＡＴＰチャネルのＫｉｒ６．１チャネルまたはＫｉｒ６．２チャネルが関与する疾患の治療または予防に用いるための医薬組成物の提供を目的とする。さらに本発明は、特定のアダマンタン誘導体を用いたＫＡＴＰチャネルのＫｉｒ６．１チャネルまたはＫｉｒ６．２チャネルが関与する疾患の治療方法または予防方法の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記課題を達成するために鋭意研究を進めたところ、アダマンタン誘導体にＫｉｒ６．２チャネル阻害活性、Ｋｉｒ６．１チャネル阻害活性、認知機能疾患または障害における治療効果、および血糖値低下作用を見いだし、本発明を完成させた。本明細書の開示は、以下の［１−１］〜［１−２０］に記載の発明を包含する。【００１３】
［１−１］式（Ｉ）：【００１４】
【化１】
2017131097.tif 000002
【００１５】
［式中、Ｒ１は、水素原子、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｒ２は、水素原子、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｘは、Ｏ、またはＮＲ５であり；
Ｒ３は、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいフェニル、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよい５又は６員環ヘテロアリール、またはＣＯＯＲ６であり；
Ｒ４は、水素原子、ハロゲン原子、アジド、−ＯＲ７、または−ＮＨＲ８であり；
Ｒ５は、水素原子、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６は、水素原子、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｒ８は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｘ１は、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルコキシ、ニトロ、またはシアノである］
で表される化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００１６】
［１−２］Ｒ４が、塩素原子、またはアジドである、［１−１］に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００１７】
［１−３］Ｒ１が、トリフルオロアセチルである、［１−１］または［１−２］に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００１８】
［１−４］Ｒ２が、１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルである、［１−１］〜［１−３］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００１９】
［１−５］Ｒ２が、トリフルオロアセチルである、［１−４］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００２０】
［１−６］Ｒ３が、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいフェニル、またはＸ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいピリジルである、［１−１］〜［１−５］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００２１】
［１−７］酢酸（Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−５−アジド−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル；
（Ｓ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル；
（Ｒ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−２−（（Ｓ）−２−メトキシ−２−オキソ−１−（２，２，２−トリフルオロアセタミド）エチル）アダマンタン−１−イル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）メチル）アダマンタン−１−イル；
（Ｓ）−２−アミノ−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，５−ジヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸；
Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル）−２，２，２−トリフルオロアセタミド；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−５−（２−メトキシエトキシ）−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル；
Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（ピリジン−３−イル）メチル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド；
２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル）アセタミド；および
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−５−メトキシ−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル
から選択される、［１−１］に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００２２】
［１−８］［１−１］〜［１−７］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する医薬組成物。【００２３】
［１−９］認知機能疾患または障害の治療又は予防に用いるための、［１−８］に記載の医薬組成物。【００２４】
［１−１０］認知機能疾患または障害が、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症、パーキンソン病、精神疾患、神経変性疾患から選択される、［１−９］に記載の医薬組成物。【００２５】
［１−１１］糖尿病または糖尿病性合併症の治療又は予防に用いるための、［１−８］に記載の医薬組成物。【００２６】
［１−１２］［１−１］〜［１−７］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する、Ｋｉｒ６．２チャネル阻害薬。【００２７】
［１−１３］［１−１］〜［１−７］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する、Ｋｉｒ６．１チャネル阻害薬。【００２８】
［１−１４］認知機能疾患または障害の治療方法又は予防方法であり、治療有効量の［１−１］〜［１−７］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を対象に投与することを含む、前記方法。【００２９】
［１−１５］認知機能疾患または障害が、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症、パーキンソン病、精神疾患、神経変性疾患から選択される、［１−１４］に記載の方法。【００３０】
［１−１６］糖尿病または糖尿病性合併症の治療方法又は予防方法であり、治療有効量の［１−１］〜［１−７］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を対象に投与することを含む、前記方法。【００３１】
［１−１７］Ｋｉｒ６．１チャネルまたはＫｉｒ６．２チャネルが関与する疾患の治療方法又は予防方法であり、Ｋｉｒ６．１チャネル阻害薬またはＫｉｒ６．２チャネル阻害薬として、治療有効量の［１−１］〜［１−７］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を対象に投与することを含む、前記方法。【００３２】
［１−１８］Ｋｉｒ６．１チャネルまたはＫｉｒ６．２チャネルが関与する疾患が、認知機能疾患または障害、または糖尿病または糖尿病性合併症である、［１−１７］に記載の方法。【００３３】
［１−１９］Ｋｉｒ６．１チャネルまたはＫｉｒ６．２チャネルが関与する疾患が、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症、パーキンソン病、精神疾患、神経変性疾患から選択される認知機能疾患または障害である、［１−１７］または［１−１８］に記載の方法。【００３４】
［１−２０］Ｋｉｒ６．１チャネルまたはＫｉｒ６．２チャネルが関与する疾患が、糖尿病または糖尿病性合併症である、［１−１７］または［１−１８］に記載の方法。【００３５】
さらに本明細書の開示は、以下の［２−１］〜［２−１２］に記載の発明を包含する。【００３６】
［２−１］式（Ｉ）：【００３７】
【化２】
2017131097.tif 000003
【００３８】
［式中、Ｒ１は、水素原子、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｒ２は、水素原子、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｘは、Ｏ、またはＮＲ５であり；
Ｒ３は、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいフェニル、またはＣＯＯＲ６であり；
Ｒ４は、水素原子、ハロゲン原子、アジド、−ＯＲ７、または−ＮＨＲ８であり；
Ｒ５は、水素原子、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ６は、水素原子、またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ７は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｒ８は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、または１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニルであり；
Ｘ１は、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン原子、Ｃ１−６アルコキシ、ニトロ、またはシアノである］
で表される化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００３９】
［２−２］Ｒ４が、塩素原子、またはアジドである、［２−１］に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００４０】
［２−３］Ｒ１が、トリフルオロアセチルである、［２−１］または［２−２］に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００４１】
［２−４］Ｒ２が、トリフルオロアセチルである、［２−１］〜［２−３］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００４２】
［２−５］Ｒ３が、Ｘ１より選択される１以上の置換基により置換されていてもよいフェニルである、［２−１］〜［２−４］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００４３】
［２−６］酢酸（Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−５−アジド−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル；
（Ｓ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル；
（Ｒ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−２−（（Ｓ）−２−メトキシ−２−オキソ−１−（２，２，２−トリフルオロアセタミド）エチル）アダマンタン−１−イル；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）メチル）アダマンタン−１−イル；および
（Ｓ）−２−アミノ−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，５−ジヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸
から選択される、［２−１］に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩。【００４４】
［２−７］［２−１］〜［２−６］のいずれかに記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する医薬組成物。【００４５】
［２−８］認知機能疾患または障害の治療又は予防に用いるための、［２−７］に記載の医薬組成物。【００４６】
［２−９］認知機能疾患または障害が、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症、パーキンソン病、精神疾患、神経変性疾患から選択される、［２−８］に記載の医薬組成物。【００４７】
［２−１０］糖尿病または糖尿病性合併症の治療又は予防に用いるための、［２−７］に記載の医薬組成物。【００４８】
［２−１１］［２−１］〜［２−６］のいずれか１項に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する、Ｋｉｒ６．２チャネル阻害薬。【００４９】
［２−１２］［２−１］〜［２−６］のいずれか１項に記載の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含有する、Ｋｉｒ６．１チャネル阻害薬。
【発明の効果】
【００５０】
一つの側面において、本発明により認知機能疾患または障害の治療または予防に用いるための医薬組成物の提供が提供される。別の側面において、本発明によりＫＡＴＰチャネルのＫｉｒ６．１チャネル阻害薬またはＫｉｒ６．２チャネル阻害薬が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】図１は、Ｋｉｒ６．２チャネルの過剰発現細胞（Ｎｅｕｒｏ２Ａ細胞）において、本発明化合物によるＣａＭＫＩＩ活性の増強を示すグラフである。表示されている全ての有意差は対象（Ｃ、Kir6.2発現細胞において薬物無処置群）に対してのものである。本願の図に示される有意差の表示について、＊＊もしくは＋＋は有意差がＰ＜０．０１であることを示し、＋もしくは＊はＰ＜０．０５を示す。
【図２ａ】図２ａは、抗Ｋｉｒ６．２チャネル抗体を用いたＫｉｒ６．２チャネル過剰発現細胞に対する免疫ブロット法により、Ｎ２Ａ細胞におけるＫｉｒ６．２チャネル発現を確認した結果を示す。薬物無処置群（−）に対しての有意差を＊＊で示す。
【図２ｂ】図２ｂは、Ｋｉｒ６．２チャネル過剰発現細胞において、ＴＰ−０１４が外向きカリウム電流を抑制することを示すｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌ  ｐａｔｃｈ−ｃｌａｍｐ法によるアッセイ結果である。この結果より、ＴＰ−０１４はＫｉｒ６．２チャネルを阻害し、カリウム電流を減弱することが示される。
【図３ａ】図３ａは、Ｋｉｒ６．２チャネル過剰発現細胞において、ＴＰ−０１４を投与することにより細胞内のカルシウム濃度が上昇すること示すカルシウムイメージング法によるアッセイを行った結果である。本発明化合物およびメマンチンを処置した際の濃度依存的なカルシウム量の経時変化を４分間にわたって測定した。この結果より、ＴＰ−０１４がＫｉｒ６．２チャネルを阻害し、細胞内カルシウム濃度を上昇させることが示される。
【図３ｂ】図３ｂは、Ｋｉｒ６．２チャネル過剰発現細胞において、ＴＰ−０１４を投与することにより細胞内のカルシウム濃度を上昇すること示すカルシウムイメージング法によるアッセイの結果である。メマンチン、本発明化合物の処置から４分後のカルシウム量を測定した。Kir6.2発現細胞（Neuro2A細胞）において薬物無処置群（−）に対しての有意差が確認されている。この結果より、ＴＰ−０１４がＫｉｒ６．２チャネルを阻害し、細胞内カルシウム濃度を上昇させることが示される。
【図４ａ】図４ａは、アルツハイマー病モデルマウス（ＡＰＰ２３マウス）（１２ヶ月齢）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、Y-maze法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。
【図４ｂ】図４ｂは、アルツハイマー病モデルマウス（ＡＰＰ２３マウス）（１２ヶ月齢）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、Y-maze法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。APP23マウスに対する記憶学習の正解率（alteration）のWTとの比較における有意差を**で、APP23マウスのcontrol（無処置群）との比較における有意差を++でそれぞれ示す。
【図４ｃ】図４ｃは、アルツハイマー病モデルマウス（ＡＰＰ２３マウス）（１２ヶ月齢）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、新規物体認識試験法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。それぞれのFamiliar（同じ物体）と比較した際のNovel（新規物体）の有意差を**で示す。
【図４ｄ】図４ｄは、アルツハイマー病モデルマウス（ＡＰＰ２３マウス）（１２ヶ月齢）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、恐怖条件付け試験法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。Retension trialsにおける WTと比較した有意差を**で示し、APP23マウスと比較した有意差を+で示す。
【図４ｅ】図４ｅは、アルツハイマー病モデルマウス（ＡＰＰ２３マウス）（１２ヶ月齢）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。
【図４ｆ】図４ｆは、アルツハイマー病モデルマウス（ＡＰＰ２３マウス）（１２ヶ月齢）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。
【図４ｇ】図４ｇは、アルツハイマー病モデルマウス（ＡＰＰ２３マウス）（１２ヶ月齢）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。WTと比較した有意差を**で、APP23マウスと比較した有意差を++もしくは+で示す。
【図５ａ】図５ａは、免疫ブロット法によりCaMKII、CaMKIV、ERKに対する抗体を用いて各タンパク質のリン酸化について検討した結果を示す、免疫ブロットを泳動した際に得られるバンド（画像）である。
【図５ｂ】図５ｂは、図５ａの免疫ブロットを泳動した際に得られるバンドのシグナル強度を定量化した解析結果である。WT（−）（薬物無処置群）と比較>した有意差を**にて、APP23マウスの薬物無処置群（−）と比較した有意差を+で示す。
【図５ｃ】図５ｃは、免疫ブロット法によりCaMKII、CaMKIV、ERKに対する抗体を用いて各タンパク質のリン酸化について検討した結果を示す、免疫ブロットを泳動した際に得られるバンド（画像）である。
【図５ｄ】図５ｄは、図５ｃの免疫ブロットを泳動した際に得られるバンドのシグナル強度を定量化した解析結果である。WT（−）（薬物無処置群）と比較した有意差を**にて、APP23マウスの薬物無処置群（−）と比較した有意差を++で示す。
【図６ａ】図６ａは、神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与した結果、Y-maze法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。
【図６ｂ】図６ｂは、神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与した結果、Y-maze法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。OBXマウスに対する記憶学習の正解率（alteration）の有意差を WTと比較して**で、OBXマウスのcontrol（無処置群）と比較して++で示す。
【図６ｃ】図６ｃは、神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与した結果、新規物体認識試験法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。それぞれのFamiliar（同じ物体）と比較した際のNovel（新規物体）の有意差を**で示す。
【図６ｄ】図６ｄは、神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与した結果、恐怖条件付け試験法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。Retension trialsにおける WTと比較した有意差を**で示し、OBXマ>ウスと比較した有意差を+で示す。
【図６ｅ】図６ｅは、神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。
【図６ｆ】図６ｆは、神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。
【図６ｇ】図６ｇは、神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）にＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長増強現象（LTP）について検討した結果を示す。shamと比較した有意差を**で、OBXマウスと比較した有意差を++もしくは+で示す。
【図７ａ】図７ａは、免疫ブロット法によりCaMKII、CaMKIV、ERKに対する抗体を用いて各タンパク質のリン酸化について検討した結果を示す、免疫ブロットを泳動した際に得られるバンド（画像）である。
【図７ｂ】図７ｂは、図７ａの免疫ブロットを泳動した際に得られるバンドのシグナル強度を定量化した解析結果である。
【図７ｃ】図７ｃは、免疫ブロット法によりCaMKII、CaMKIV、ERKに対する抗体を用いて各タンパク質のリン酸化について検討した結果を示す、免疫ブロットを泳動した際に得られるバンド（画像）である。
【図７ｄ】図７ｄは、図７ｃの免疫ブロットを泳動した際に得られるバンドのシグナル強度を定量化した解析結果である。WT（−）（薬物無処置群）と比較した有意差を**で、OBXマウスの薬物無処置群（−）と比較した有意差を++で示す。
【図８ａ】図８ａは、Kir6.2チャネル欠損マウスにＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、Y-maze法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。
【図８ｂ】図８ｂは、Kir6.2チャネル欠損マウスにＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、Y-maze法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。Kir6.2欠損マウスに対する記憶学習の正解率（alteration）の有意差を WTと比較して*もしくは**を示す。
【図８ｃ】図８ｃは、Kir6.2チャネル欠損マウスにＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、新規物体認識試験法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。それぞれのFamiliar（同じ物体）と比較した際のNovel（新規物体）の>有意差を**で示す。
【図８ｄ】図８ｄは、Kir6.2チャネル欠損マウスにＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、恐怖条件付け試験法により認知機能改善効果が認められた実験結果を示すグラフである。Retension trialsにおける WTと比較した有意差を*で示す。
【図８ｅ】図８ｅは、Kir6.2チャネル欠損マウスにＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。
【図８ｆ】図８ｆは、Kir6.2チャネル欠損マウスにＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。
【図８ｇ】図８ｇは、Kir6.2チャネル欠損マウスにＴＰ−０１４を２ヶ月間投与し、電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。WTと比較した有意差を**もしくは*で示す。
【図９ａ】図９ａは、免疫ブロット法によりCaMKII、CaMKIV、ERKに対する抗体を用いて各タンパク質のリン酸化について検討した結果を示す、免疫ブロットを泳動した際に得られるバンド（画像）である。
【図９ｂ】図９ｂは、図９ａの免疫ブロットを泳動した際に得られるバンドのシグナル強度を定量化した解析結果である。WT（−）（薬物無処置群）と比較した有意差を**もしくは*にて示す。
【図１０】図１０は、APP23マウスでのAβの凝集に対する本発明化合物の効果を示す、脳スライス切片の染色結果である。
【図１１ａ】図１１ａは、本発明化合物のOBXマウスのうつ様症状の改善効果を確認するための試験結果である。sham（対照群）と比較した有意差を**で、OBXマウスと比較した有意差を+で示す。
【図１１ｂ】図１１は、本発明化合物のOBXマウスのうつ様症状の改善効果を確認するための試験結果である。sham（対照群）と比較した有意差を**で、OBXマウスと比較した有意差を+で示す。
【図１２ａ】図１２ａは、本発明化合物がKir6.1チャネルの阻害作用を介してうつ改善効果を示すことを確認するための試験結果である。WT（対照群）と比較した有意差を**で示す。
【図１２ｂ】図１２ｂは、本発明化合物がKir6.1チャネルの阻害作用を介してうつ改善効果を示すことを確認するための試験結果である。WT（対照群）と比較した有意差を**で示す。
【図１３ａ】図１３ａは、本発明化合物がKir6.1チャネルを阻害し、CaMKIVの活性化を介してうつ改善効果を示すことを確認するための試験結果である。WT（対照群）と比較した有意差を**で示す。
【図１３ｂ】図１３ｂは、本発明化合物がKir6.1チャネルを阻害し、CaMKIVの活性化を介してうつ改善効果を示すことを確認するための試験結果である。WT（対照群）と比較した有意差を**で示す。
【図１４】図１４は、本発明化合物が血糖値低下作用を有することを確認するための試験結果である。weeksは慢性投与した週齢を示しており、それぞれの週のob/ob (saline）と比較した有意差を*で示す。
【図１５】図１５はTP-014の作用機作を説明する図である。スパインに局在するKir6.2チャネルを阻害されると、Kir6.2チャネルの阻害により細胞内のカリウムが排出できず、細胞膜の閾値が上昇し、その結果、細胞外からのカルシウム流入が促進し、CaMKIIの活性化を惹起し、CaMKIIの下流であるGluA1 (Ser-831)（AMPA受容体）が活性化することにより認知機能改善効果が認められたと考えられる。また、TP-014は神経細胞体に局在するKir6.1チャネルも同様に阻害し、同様のメカニズムにより細胞内にカルシウムを流入する。流入したカルシウムはCaMKIVを活性化し、CREB (Ser-133)の活性化を介して神経新生を介してうつ病改善効果を示すと考えられる。TP-014には、Kir6.2チャネル阻害作用による認知機能改善効果（アルツハイマー病の中核症状）とKir6.1チャネル阻害作用によるうつ病改善効果（アルツハイマー病の周辺症状）の両方の作用を持つ新しい認知機能改善薬である。
【図１６】図１６はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.2の構造を示す図である。
【図１７−１】図１７−１はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.2の配列を示す図である。
【図１７−２】図１７−２はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.2の配列を示す図である。
【図１７−３】図１７−３はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.2の配列を示す図である。
【図１７−４】図１７−４はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.2の配列を示す図である。
【図１７−５】図１７−５はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.2の配列を示す図である。
【図１８ａ】図１８ａは、Ｋｉｒ６．１チャネルの過剰発現細胞（Ｎｅｕｒｏ２Ａ細胞）において、本発明化合物によるＣａＭＫＩＶ活性の増強を示すグラフである。表示されている全ての有意差は対象（Ｃ、Kir6.1発現細胞において薬物無処置群）に対してのものである。
【図１８ｂ】図１８ａは、抗Kir6.1チャネル抗体を用いたKir6.1チャネル過剰発現細胞に対する免疫ブロット法により、N2A細胞におけるKir6.1チャネル発現を確認した結果を示す。薬物無処置群（−）に対しての有意差を**で示す。
【図１８ｃ】図１８ｂは、Kir6.1チャネル過剰発現細胞を用いて、通常のPatch-clamp法により細胞内より細胞外へ排出されるカリウム電流を測定した結果を示す。
【図１９ａ】図１９ａは、高架式十字迷路法により、試験に用いたマウス群の不安に対する脆弱性を検討した結果を示す。open armにおけるマウスの滞在時間についてWT(-)と比較した有意差を**もしくは*で、WT (CORT）と比較した有意差を++で示す。
【図１９ｂ】図１９ｂは高架式十字迷路法に用いた装置を示す写真である。
【図１９ｃ】図１９ｃは、明暗試験法（light-dark 法）による試験結果を示す。WT(-)と比較した有意差を**で、WT (CORT）と比較した有意差を++で示す。
【図１９ｄ】図１９ｄは明暗試験法に用いた装置を示す写真である。
【図１９ｅ】図１９ｅはビー玉かくし試験法（Marble burying法）による結果を示す。WT(-)と比較した有意差を**で、WT (CORT）と比較した有意差を+で示す。
【図１９ｆ】図１９ｆはビー玉かくし試験法に用いた装置を示す写真である。
【図１９ｇ】図１９ｇはオープンフィールド法（open field法）による試験結果を示す。WT(-)と比較した有意差を**で、WT (CORT）と比較した有意差を++で示す。
【図１９ｈ】図１９ｈはオープンフィールド法に用いた装置を示す写真である。
【図１９ｉ】図１９ｉは、は恐怖条件付試験法（fear conditining法）による試験結果を示す。WT(-)と比較した有意差を**もしくは*で、WT (CORT）と比較した有意差を++で示す。
【図２０】図２０はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.1の構造を示す図である。
【図２１−１】図２１−１はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.1の配列を示す図である。
【図２１−２】図２１−２はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.1の配列を示す図である。
【図２１−３】図２１−３はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.1の配列を示す図である。
【図２１−４】図２１−４はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.1の配列を示す図である。
【図２１−５】図２１−５はプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.1の配列を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
以下、本発明を更に具体的に説明する。
【００５３】
本発明の１つの側面によれば、式（Ｉ）で表される化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩を含む、認知機能疾患または障害の治療または予防のための医薬組成物が提供される。すなわち、本発明の化合物は下記の式（Ｉ）および（ＩＩ）で表される化合物を包含する。
【００５４】
【化３】
2017131097.tif 000004
【００５５】
本明細書において「Ｃ１−６アルキル」とは、炭素数１〜６の直鎖状、分岐鎖状、環状または部分的に環状のアルキル基を意味し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−メチルブチル、２−メチルブチル、１−メチルブチル、１−エチルプロピル、ｎ−ヘキシル、４−メチルペンチル、３−メチルペンチル、２−メチルペンチル、１−メチルペンチル、３−エチルブチル、および２−エチルブチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロプロピルメチルなどが含まれ、例えば、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−３アルキルなども含まれる。
【００５６】
本明細書において「Ｃ１−６アルコキシ」とは、アルキル部分として既に定義した炭素数１〜６のアルキル基を有するアルキルオキシ基［−Ｏ−（Ｃ１−６アルキル）］を意味し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、３−メチルブトキシ、２−メチルブトキシ、１−メチルブトキシ、１−エチルプロポキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、４−メチルペントキシ、３−メチルペントキシ、２−メチルペントキシ、１−メチルペントキシ、３−エチルブトキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロプロピルメチルオキシなどが含まれ、例えば、Ｃ１−４アルコキシおよびＣ１−３アルコキシなども含まれる。また、本明細書において「Ｃ１−４アルコキシ」には、例えばＣ１−３アルコキシなども含まれる。
【００５７】
本明細書において「アジド」は−Ｎ３を意味する。
【００５８】
本明細書において「（Ｃ１−６アルキル）カルボニル」とは、アルキル部分として既に定義したＣ１−６アルキル基を有するアルキルカルボニル基を意味し、例えばメチルカルボニル（アセチル）、エチルカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルの他、（Ｃ１−３アルキル）カルボニルなどが含まれる。
【００５９】
本明細書において「５又は６員環ヘテロアリール」とは、酸素原子、窒素原子、および硫黄原子から選択される１以上のヘテロ原子を含有する５員環または６員環のヘテロアリールであれば特に限定されない。その例には、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジル、フラニル（フリル）、チオフェニル（チエニル）、オキサゾリル、オキサジアゾリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリルなどが含まれる。
【００６０】
本明細書において「Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル」とは、Ｃ１−６アルコキシ部分として既に定義したＣ１−６アルコキシにより置換されたＣ１−６アルキルを意味し、Ｃ１−６アルキル部分は既に「Ｃ１−６アルキル」として定義した通りである。その例には、メトキシメチル、エトキシメチル、２−メトキシエチル、１−メトキシエチル、３−メトキシプロピル、２−メトキシプロピル、１−メトキシプロピルなどが含まれる。
【００６１】
ハロゲン原子の例としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子などが挙げられる。
【００６２】
本明細書において「１以上のハロゲン原子で置換されていてもよい（Ｃ１−６アルキル）カルボニル」の例としては、トリフルオロアセチル、ジフルオロアセチル、２，２，２−トリフルオロエチルカルボニル、パーフルオロエチルカルボニルなどが挙げられる。
【００６３】
式（Ｉ）の化合物が水和物などの溶媒和物を形成する場合には、本発明は該溶媒和物を用いて実施することができる。さらに本発明の化合物は、混合物、溶液、結晶多形などとして適宜実施することができる。
【００６４】
本明細書において１以上の置換基により置換されている場合、例えば、１〜３個の置換基により置換されている。
【００６５】
上記式（Ｉ）で表される化合物に関する本発明には、互変異性体、幾何異性体、光学異性体などの各種の立体異性体、ジアステレオマー、およびそれらの混合物が含まれる。例えば、式（Ｉ）で表される化合物は、下記の式（Ｉａ）〜（Ｉｈ）の化合物を包含する。
【００６６】
【化４】
2017131097.tif 000005
【００６７】
本発明の化合物として、例えば本明細書実施例に記載の化合物を使用することができ、より具体的には以下の化合物を使用することができる：
酢酸（Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−５−アジド−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル（ＴＰ−００９）；
（Ｓ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル（ＴＰ−０１０）；
（Ｒ）−２−アセトアミド−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸エチル（ＴＰ−０１１）；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−５−クロロ−２−（（Ｓ）−２−メトキシ−２−オキソ−１−（２，２，２−トリフルオロアセタミド）エチル）アダマンタン−１−イル（ＴＰ−０１２）；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセトアミド）メチル）アダマンタン−１−イル（ＴＰ−０１４）；
（Ｓ）−２−アミノ−２−（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−１，５−ジヒドロキシアダマンタン−２−イル）酢酸（ＴＰ−０１５）；
Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル）−２，２，２−トリフルオロアセタミド（ＴＰ−０４８）；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル（ＴＰ−０４９）；
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−５−（２−メトキシエトキシ）−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル（ＴＰ−０５０）；
Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−５−クロロ−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（ピリジン−３−イル）メチル）−２，２，２−トリフルオロアセトアミド（ＴＰ−０５１）；
２，２，２−トリフルオロ−Ｎ−（（Ｒ）−（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｒ，７Ｓ）−１−ヒドロキシアダマンタン−２−イル）（フェニル）メチル）アセタミド（ＴＰ−０５２）；および
２，２，２−トリフルオロ酢酸（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−５−メトキシ−２−（（Ｒ）−フェニル（２，２，２−トリフルオロアセタミド）メチル）アダマンタン−１−イル（ＴＰ−０５３）。
【００６８】
式（Ｉ）の化合物の「医薬として許容な塩」とは、医薬品として使用可能な塩であれば特に限定されない。本発明化合物が塩基と形成する塩としては、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウムなどの無機塩基との塩；メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン等の有機塩基との塩などが挙げられる。当該塩は、酸付加塩であってもよく、かかる塩としては、具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸；および、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸などの有機酸との酸付加塩が挙げられる。
【００６９】
式（Ｉ）で表される化合物に含まれる原子（例えば、水素原子、炭素原子、酸素原子、窒素原子、および硫黄原子など）は、それぞれの天然に最も多く存在する同位体以外の同位体原子であってもよく、当該同位体原子は放射性同位体原子であってもよい。すなわち、本発明の１つの側面によれば、同位体原子で標識化された本明細書で既に定義された式（Ｉ）の化合物、またはその塩が提供される。ここで、同位体原子による標識化は、例えば、放射性同位体による標識化（３Ｈ、１４Ｃ、３２Ｐなど）であってもよく、化合物の調製の容易さの側面からは、３Ｈによる標識化が好ましい。
【００７０】
本発明の１つの態様において、式（Ｉ）の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩は、プロドラッグとして投与され、生体内において活性化合物に変換される。
【００７１】
本発明における認知機能疾患または障害の治療には、アルツハイマー型認知症、脳血管性認知症、レビー小体型認知症、前頭側頭型認知症、パーキンソン病、精神疾患、神経変性疾患に対する処置が含まれる。また本発明における医薬組成物は、脳機能障害の改善、例えば、脳血管障害、脳外傷、脳腫瘍、ウイルス性脳炎、低酸素脳症、アルコール中毒などに起因する脳機能障害の改善が含まれる。本発明は特に、記憶障害、注意障害、遂行機能障害、社会的行動障害などの認知機能障害に適用することができる。認知機能障害には、例えば、神経変性疾患（アルツハイマー病、パーキンソン病、ピック病、およびハンチントン病など）、精神疾患（統合失調症、双極性障害、うつ病、恐怖症、睡眠障害、薬物依存症など）、広汎性発達障害（自閉症、アスペルガー症候群、精神遅滞、多動性障害、チック障害など）などが含まれる。
【００７２】
本発明における糖尿病合併症には、高血糖症、糖尿病性昏睡、ケトン性昏睡、非ケトン性高浸透圧性昏睡、乳酸アシドーシス、低血糖性昏睡、急性感染症、細小血管障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、大血管障害、脳血管障害、虚血性心疾患、糖尿病性壊疽、高脂血症、慢性感染症、胆石症、白内障などが含まれる。
【００７３】
本発明の１つの態様において、式（Ｉ）の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩は、Ｋｉｒ６．２チャネル阻害薬、またはＫｉｒ６．１チャネル阻害薬として使用される。すなわち、式（Ｉ）の化合物、そのエナンチオマー、そのジアステレオマー、または医薬として許容なその塩は、Ｋｉｒ６．２チャネルに関連する疾患、例えば、認知機能疾患または障害、高血糖症、糖尿病、糖尿病性合併症の治療または予防に使用することができる。Ｋｉｒ６．１チャネルに関連する疾患、例えば、認知機能疾患または障害、高血糖症、糖尿病、糖尿病性合併症、精神疾患の治療または予防に使用することができる。
【００７４】
本発明の医薬組成物は、種々の剤形、例えば、経口投与のためには、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、丸剤、液剤、乳剤、懸濁液、溶液剤、酒精剤、シロップ剤、エキス剤、エリキシル剤とすることができ、非経口剤としては、例えば、皮下注射剤、静脈内注射剤、筋肉内注射剤、腹腔内注射剤などの注射剤；経皮投与または貼付剤、軟膏またはローション；口腔内投与のための舌下剤、口腔貼付剤；ならびに経鼻投与のためのエアゾール剤とすることができるが、これらには限定されない。これらの製剤は、製剤工程において通常用いられる公知の方法により製造することができる。
【００７５】
当該医薬組成物は、一般に用いられる各種成分を含みうるものであり、例えば、１種以上の薬学的に許容され得る賦形剤、崩壊剤、希釈剤、滑沢剤、着香剤、着色剤、甘味剤、矯味剤、懸濁化剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、補助剤、防腐剤、緩衝剤、結合剤、安定剤、コーティング剤等を含みうる。また本発明の医薬組成物は、持続性または徐放性剤形であってもよい。
【００７６】
本発明の治療剤、予防剤、または医薬組成物の投与量は、投与経路、患者の体型、年齢、体調、疾患の度合い、発症後の経過時間等により、適宜選択することができ、本発明の医薬組成物は、治療有効量および／または予防有効量の上記式（Ｉ）の化合物を含むことができる。本発明において上記式（Ｉ）の化合物は、一般に１〜１０００ｍｇ／日／成人または０．０１〜２０ｍｇ／日／ｋｇ体重の用量で使用されうる。当該医薬組成物の投与は、単回投与または複数回投与であってもよい。
【００７７】
本発明の医薬組成物は、必要に応じ、従来公知の着色剤、保存剤、香料、風味剤、コーティング剤、抗酸化剤、ビタミン、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、およびミネラル分（鉄、亜鉛、マグネシム、ヨードなど）などの成分を含有していてもよい。本発明の治療剤または予防剤は、医薬組成物、機能性食品、健康食品、飲料、サプリメントなどに適した形態、例えば顆粒剤（ドライシロップを含む）、カプセル剤（軟カプセル剤、硬カプセル剤）、錠剤（チュアブル剤などを含む）、散剤（粉末剤）、丸剤などの各種の固形製剤、または内服用液剤（液剤、懸濁剤、シロップ剤を含む）などの液状製剤などの形態で調製してもよい。また、本発明の治療剤または予防剤は、そのまま、医薬組成物、機能性食品、健康食品、サプリメントなどとして使用することもできる。
【００７８】
製剤化のための添加物としては、例えば、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、流動化剤、分散剤、湿潤剤、防腐剤、粘稠剤、ｐＨ調整剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、溶解補助剤が挙げられる。また、液剤の形態にする場合は、ペクチン、キサンタンガム、グアガムなどの増粘剤を配合することができる。また、コーティング剤を用いてコーティング錠剤にしたり、ペースト状の膠剤とすることもできる。さらに、他の形態に調製する場合であっても、従来の方法に従えばよい。
【実施例】
【００７９】
以下、実施例を示すことにより本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。【００８０】
実施例１【００８１】
【化５】
2017131097.tif 000006
【００８２】
ビス（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミン（１．８ｇ，１８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液にｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．５６Ｍ，４．８ｍＬ，７．３３ｍｍｏｌ）を氷冷下滴下した。同温度で３０分撹拌後、反応溶液を−７８℃まで冷却した後、トリメチルシリルクロリド（ＴＭＳＣｌ、１．７ｍＬ，１３．３ｍｍｏｌ）を加え，続いて７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（１．０ｇ，１６．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液をカニュレーションにより加えた。１時間撹拌後、反応溶液に水を加え，ジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し，ＭｇＳＯ４で乾燥後，減圧下溶媒を留去した．残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝９：１）に付し、目的のＴＭＳエノールエーテル（１．２４ｇ，８４％）を無色油状物として得た。【００８３】
得られたＴＭＳエノールエーテル（４００ｍｇ，１．８０ｍｍｏｌ）と、文献既知の方法（Kobayashi S et al., J. Combi. Chem. 2001, 3, 401）で調製した（Ｅ）−２−（アセチルイミノ）酢酸エチル（５．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（９ｍＬ）に溶解させて０℃に冷却した。この溶液にトリフルオロメタンスルホン酸トリメチルシリル（ＴＭＳＯＴｆ、２４０μＬ，９００μｍｏｌ）を加えて同温度で１時間撹拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加えて反応を停止し、酢酸エチルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥後、減圧下溶媒を留去してMannich反応の粗生成物（４１０ｍｇ、油状物）を得た。粗生成物（４００ｍｇ）をジクロロメタン（７ｍＬ）に溶解させて−３０℃に冷却した．この溶液にＴｉＣｌ４（１２０μＬ，１．０９ｍｍｏｌ）を加えて同温度で１時間撹拌後、水を加えて反応を停止し、ジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝１０：１〜９：１）に付し、ＴＰ−０１０（１４８ｍｇ，２５％）およびＴＰ−０１１（２２８ｍｇ，５２％）を得た。【００８４】
TP-010 (84% ee): アモルファス; ［α]D29 = 3.4 (c = 1.832, CHCl3); (1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ6.15 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.22-4.15 (m, 2H), 3.00 (s, 1H), 2.29 (br s, 1H), 2.15-1.95 (m, 8H), 2.04 (s, 3H), 1.85-1.78 (m, 2H), 1.50 (br d, J = 12.7 Hz, 1H), 1.37 (br d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.28 (t, J = 7.3 Hz, 3H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ173.1, 170.3, 70.8, 66.6, 61.8, 56.7, 51.8, 51.7, 47.9, 46.6, 37.7, 33.3, 31.8, 29.4, 23.4, 14.0; IR (ニート, cm-1): 3336, 1725, 1654; MS (EI): m/z 329 (M+), 256 (100%); HRMS (EI): 計算値 C16H24NO4Cl (M+) 329.1394, 実測値 329.1399。【００８５】
TP-011 (84% ee): mp 65-68 ℃ (Et2O-n-ヘキサン); [α]D29 = -2.4 (c = 1.72, CHCl3); (1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.64 (br s, 1H), 4.42 (d, J = 10.1, 3.9 Hz, 1H), 4.20 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.70 (s, 1H), 2.30 (br s, 1H), 2.20-1.88 (m, 9H), 1.98 (s, 3H), 1.88 (br d, J = 13.9 Hz, 1H), 1.57 (br d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.38 (br d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ171.7, 170.4, 72.6, 66.0, 61.1, 56.6, 55.1, 48.9, 47.3, 46.2, 38.3, 34.3, 31.8, 29.0, 22.9, 14.1; IR (ニート, cm-1): 3377, 1739, 1650; MS (EI): m/z 329 (M+), 256 (100%); HRMS (EI): 計算値C16H24NO4Cl (M+) 329.1394, 実測値329.1415。【００８６】
実施例２【００８７】
【化６】
2017131097.tif 000007
【００８８】
（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）−２−（（Ｒ）−ヒドロキシ（フェニル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（J. Am.Chem.Soc. 2014, 136, 17591-17600に記載の方法により調製、７５０ｍｇ，２．９ｍｍｏｌ）、ジフェニルリン酸アジド（ＤＰＰＡ、８２０μＬ，３．８１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１．２０ｇ，４．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液にジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ、２．２ｍＬ，４．４ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。同温度で１時間撹拌後，減圧下溶媒を留去した。残渣にジクロロメタン（１５ｍＬ）を加え，氷冷下ＴｉＣｌ４（８２０μＬ，２．３ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて４時間撹拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加えた．セライト（登録商標）で濾過を行い、濾液をジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝１０：１）に付し、白色固体として（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−２−（（Ｓ）−アジド（フェニル）メチル）−５−クロロアダマンタン−１−オール（７５６ｍｇ，９２％）を得た。【００８９】
得られたアジド化合物（７５０ｍｇ，２．６７ｍｍｌ）のＴＨＦ（１４ｍＬ）溶液にＬｉＡｌＨ４（３００ｍｇ，８．００ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。同温度で１時間撹拌後、反応溶液にアンモニア水を加えた。セライト（登録商標）で濾過を行い，減圧下溶媒を留去した。残渣にジクロロメタン（１５ｍＬ）を加えた後、トリエチルアミン（２．２ｍＬ，１６．０ｍｍｏｌ），無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡＡ、１．２ｍＬ，８．０ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温にて終夜撹拌後，飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え，ジクロロメタンにて抽出した。得られた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し，残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝１５：１）に付し、ＴＰ−０１３を（８７１ｍｇ，５６％）を白色固体として得た。【００９０】
mp 83-85℃ (無色針状結晶, n-ヘキサン-Et2O); [α]D31 = -84.1 (c = 1.08, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.35-7.27 (m, 5H), 6.63 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 5.44 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.26 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.45-2.41 (m, 3H), 2.26-2.13 (m, 5H), 1.96 (br d, J = 12.4 Hz, 2H), 1.47 (br d, J = 14.0 Hz, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 156.2 (q, J = 37.4 Hz), 154.9 (q, J = 42.3 Hz), 139.1, 129.2, 128.7, 127.1, 115.8 (q, J = 288.1 Hz), 113.3 (q, J = 287.3 Hz), 86.6, 65.1, 53.4, 50.2, 48.0, 46.9, 46.1, 35.6, 34.6, 31.7, 28.5; IR (ニート, cm-1): 3296, 2945, 1775, 1698; MS (EI): m/z 483 (M+), 202 (100%); HRMS (EI): 計算値 C21H20ClF6NO3(M+) 483.1036, 実測値483.1046。【００９１】
ＴＰ−０１３（５５０ｍｇ，１．１４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１．８ｍＬ）−四塩化炭素（１．８ｍＬ）−水（１．８ｍＬ）中の溶液に氷冷下、ＲｕＣｌ３・３Ｈ２Ｏ（１１４μｍｏｌ）とＨＩＯ４・２Ｈ２Ｏ（３．６ｇ，１６．０ｍｍｏｌ）を加えて同温度で８時間激しく撹拌した。反応溶液に水を加えてジクロロメタンで抽出した。得られた有機層に氷冷下、溶液が黄色となるまでジアゾメタンのジエチルエーテル溶液を加えた。３０分後に溶液に窒素を吹き込んでジアゾメタンを除いた後に、減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝１５：１）に付し、ＴＰ−０１２（２３５ｍｇ，４４％）を白色固体として得た。【００９２】
[α]D24 = -22.7 (c = 1.84, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.10 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 5.02 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 2.92 (dd, J = 10.3, 2.0 Hz, 1H), 2.74 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.69 (dd, J = 11.5, 1.7 Hz, 1H), 2.43 (br s, 1H), 2.30-2.10 (m, 7H), 1.86 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 1.46 (d, J = 14.1 Hz, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3):δ171.1, 157.1 (q, J = 37.9 Hz), 155.2 (q, J = 41.2 Hz), 115.5 (q, J = 285.4 Hz), 113.8 (q, J = 284.6 Hz), 87.0, 64.8, 53.0, 51.3, 49.8, 47.6, 46.5, 45.9, 34.2, 33.5, 31.7, 28.8; IR (ニート, cm-1): 3319, 1780, 1714; MS (EI): m/z 406 (M-CO2CH3); HRMS (EI): 計算値 C15H15NO3F6Cl (M+) 406.0645, 実測値406.0651。【００９３】
ＴＰ−０１２（２５６ｍｇ，５５０μｍｏｌ）のＴＨＦ（２．０ｍＬ）溶液に氷冷下、ＮａＯＨ水溶液（２Ｍ、２．０ｍＬ）を加えて２時間撹拌した。ＴＨＦを留去後、１０％ＨＣｌ水溶液で中和後、イオン交換クロマトグラフィー（ＤＯＷＥＸ５０）に付し、０．２３Ｎ塩化アンモニウム水溶液で溶出し、凍結乾燥してＴＰ−０１５（４８．５ｍｇ，３４％）を白色固体として得た．
[α]D28 = -46.3 (c = 0.78, MeOH); (1H-NMR (600 MHz, CD3OD): δ3.87 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.26 (br s, 1H), 2.19 (br s, 1H), 2.12 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.08 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.80-1.62 (m, 5H), 1.66 (br s, 2H), 1.50 (br d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.37 (br d, J = 13.1 Hz, 1H); 13C-NMR (150 MHz, CD3OD): δ 174.6, 70.3, 68.6, 54.7, 53.8, 49.4, 44.3, 43.4, 38.7, 32.9, 30.9, 29.2; IR (ニート, cm-1): 3336, 1730; MS (FAB): m/z 242 (M+1); HRMS (FAB): 計算値 C12H20NO4 (M+1) 242.1387, 実測値 252.1383。【００９４】
実施例３【００９５】
【化７】
2017131097.tif 000008
【００９６】
（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）−２−（（Ｒ）−ヒドロキシ（フェニル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（２５６ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）溶液にトリメチルアミン（０．４２ｍＬ，３ｍｍｏｌ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、１２ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）、無水酢酸（０．１４ｍＬ，１．５ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温にて２０分撹拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加え，ジクロロメタンにて抽出した。得られた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝４：１）に付し，（１Ｒ，２Ｓ，５Ｓ）−２−（（Ｒ）−アセトキシ（フェニル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（２８９ｍｇ，９７％）を白色固体として得た。【００９７】
得られた生成物（７５．２ｍｇ，０．２５２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２．５ｍＬ）溶液にトリメチルシリルアジド（ＴＭＳＮ３、０．１０ｍＬ，０．７６ｍｍｏｌ），ＢＦ３・ＯＥｔ３（０．０４ｍＬ，０．３０ｍｍｏｌ）を−２０℃で加えた。反応溶液を徐々に室温まで昇温し、３時間撹拌した。続いて、反応溶液に飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加え，ジクロロメタンにて抽出した。得られた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し，減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝２：１）に付し、ＴＰ−００９（３３．５ｍｇ，３９％）を白色固体として得た。【００９８】
mp 114 ℃ (無色結晶, n-ヘキサン-Et2O); [α]D19 = +56.0 (c = 0.67, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.37-7.31 (m, 5H), 6.01 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.95 (br s, 1H), 2.27 (br s, 1H), 2.25 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.15 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.89-1.83 (m, 2H), 1.76-1.61 (m, 7H), 1.18 (d, J = 13.0 Hz, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 169.6, 138.9, 128.7, 128.5, 127.3, 77.0, 71.3, 60.0, 51.9, 50.7, 41.6, 40.4, 38.8, 32.5, 30.6, 29.3, 21.6; IR (ニート, cm-1): 3460, 2931, 2091, 1732; MS (EI): m/z 323 (M+-H2O), 107 (100%); HRMS (EI): 計算値 C19H21N3O2 (M+-H2O) 323.1634, 実測値: 323.1613。【００９９】
実施例４【０１００】
【化８】
2017131097.tif 000009
【０１０１】
ビス（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミン（１０．０ｍＬ，４４ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（３．４ｇ，８０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液にｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（１．５６Ｍ，２８．２ｍＬ，４４ｍｍｏｌ）を氷冷下滴下した。同温度で３０分撹拌後、反応溶液を−７８℃まで冷却した。反応混合物に、７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（６．００ｇ，４０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液をカニュレーションにより加えた。１時間撹拌後、ベンズアルデヒド（６．１ｍＬ，６０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液をカニュレーションにより加えた。２時間撹拌後、反応溶液に酢酸，飽和塩化アンモニウム水溶液を順次加え、ジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝４：１）に付し、（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）−２−（（Ｓ）−ヒドロキシ（フェニル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（８．３ｇ，８１％）を白色固体として得た。これをジエチルエーテルから再結晶を行うことで無色針状結晶を得た。【０１０２】
mp 122 ℃; [α]D21= -17.9 (c = 0.32, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.38-7.25 (m, 5H), 4.79 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.64 (dd, J = 15.7, 6.8 Hz, 1H), 2.48-2.18 (m, 6H), 2.01 (br d, J = 14.3 Hz, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 211.0, 141.6, 128.8, 127.6, 114.8, 74.6, 62.7, 45.7, 42.2, 41.3, 32.4, 31.9, 28.4; IR (ニート, cm-1): 3390, 1711; MS (EI): m/z 256 (M+), 95 (100%); HRMS (EI): 計算値 C17H20O2 (M+) 256.1463, 実測値 256.1450。【０１０３】
（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）−２−（（Ｓ）−ヒドロキシ（フェニル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（２．００ｇ，７．５ｍｍｏｌ）、ＤＰＰＡ（２．３ｍＬ，１１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（３．０ｇ，１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３８ｍＬ）溶液にＤＩＡＤ（２．２ｍＬ，１１ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。同温度で１時間撹拌後、減圧下溶媒を留去した。残渣にジクロロメタン（３８ｍＬ）を加え、氷冷下ＴｉＣｌ４（０．８ｍＬ，７．５ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて４時間撹拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加えた。セライト（登録商標）で濾過を行い、濾液をジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し，残渣にテトラヒドロピラン（ＴＨＰ、４０ｍＬ）を加えた。これにＬｉＡｌＨ４（４３０ｍｇ，１１ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。同温度で３０分撹拌後、反応溶液にアンモニア水を加えた。セライト（登録商標）濾過を行い，減圧下溶媒を留去した。残渣にジクロロメタン（４０ｍＬ）を加えた後，トリエチルアミン（６．３ｍＬ，４５ｍｍｏｌ）、ＴＦＡＡ（３．２ｍＬ，２３ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温にて終夜撹拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を加え、ジクロロメタンにて抽出した。得られた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝１５：１）に付し，粗生成物を白色固体として得た。これをジエチルエーテル−ヘキサンから再結晶し、ＴＰ−０１４（１．２７ｇ，３５％）を白色固体として得た。【０１０４】
mp 89 ℃; [α]D21 = +89.1 (c = 0.31, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.35-7.27 (m, 5H), 6.63 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 5.44 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 3.26 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.45-2.41 (m, 3H), 2.26-2.13 (m, 5H), 1.96 (br d, J = 12.4 Hz, 2H), 1.47 (br d, J = 14.0 Hz, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 156.2 (q, J = 37.4 Hz), 154.9 (q, J = 42.3 Hz), 139.1, 129.2, 128.7, 127.1, 115.8 (q, J = 288.1 Hz), 113.3 (q, J = 287.3 Hz), 86.6, 65.1, 53.4, 50.2, 48.0, 46.9, 46.1, 35.6, 34.6, 31.7, 28.5; IR (ニート, cm-1): 3296, 2945, 1775, 1698; MS (EI): m/z 483 (M+), 202 (100%); HRMS (EI): 計算値 for C21H20ClF6NO3(M+) 483.1036, 実測値 483.1046; 元素分析: 計算値 C21H20ClF6NO3: C, 52.13; H, 4.17; N, 2.89. 実測値 C, 52.27; H, 4.18; N, 2.88。【０１０５】
実施例５【０１０６】
【化９】
2017131097.tif 000010
【０１０７】
ＴＰ−０１４（８４．７ｍｇ，０．１７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に０．５Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（１ｍＬ）を氷冷下加えた。同温度で１５分間攪拌後、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液を加え酢酸エチルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝８：１〜４：１）に付し、ＴＰ−０４８（６５．５ｍｇ，９６％）を白色個体として得た。【０１０８】
[α]D26 = +109.2 (c = 0.772, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.41-7.32 (m, 5H), 6.98 (br, 1H), 5.34 (t, J = 9.7 Hz, 1H), 2.36-2.29 (m, 3H), 2.19-2.00 (m, 7H), 1.77 (br d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.41-1.33 (m, 2H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 156.2 (q, J = 37.1), 140.5, 129.4, 128.6, 127.4, 115.8 (q, J = 288.1 Hz), 72.3, 66.1, 56.7, 54.2, 52.4, 47.7, 46.3, 38.6, 34.4, 31.8, 28.8; IR (ニート, cm-1): 3553, 3297, 2940, 1698, 1552, 1208, 1183, 1165; MS (EI): m/z 387 (M+), 202 (100%); HRMS (EI):計算値C19H21ClF3NO2(M+) 387.1213, 実測値387.1196。【０１０９】
実施例６【０１１０】
【化１０】
2017131097.tif 000011
【０１１１】
ＴＰ−０１４（３０．０ｍｇ，０．０６２ｍｍｏｌ）のトルエン（２ｍＬ）溶液にトリス（トリメチルシリル）シラン（２９μＬ, ０．０９５ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ、２．０ｍｇ，０．０１２ｍｍｏｌ）を室温にて加えた。終夜加熱還流後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝１５：１）に付し、ＴＰ−０４９（２３．０ｍｇ，８３％）を白色個体として得た。【０１１２】
[α]D29 = +106.4 (c = 0.385, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.33-7.27 (m, 5H), 6.31 (br d, J = 10.1 Hz, 1H), 5.50 (dd, J = 10.9, 10.1 Hz, 1H), 3.20 (br d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.60 (br d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.45 (br d, J = 12.1 Hz, 1H), 2.28-2.27 (m, 3H), 2.04-1.80 (m, 6H), 1.72 (br s, 2H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 156.0 (q, J = 37.1 Hz), 155.1 (q, J = 41.8 Hz), 139.8, 129.0, 128.4, 127.2, 115.8 (q, J = 288.1 Hz), 113.5 (q, J = 287.3 Hz), 87.5, 53.6, 49.4, 41.3, 37.2, 36.1, 33.0, 30.6, 30.4, 30.2; IR (ニート, cm-1): 3335, 2927, 1775, 1700, 1556, 1218, 1169; MS (EI): m/z 449 (M+), 202 (100%); HRMS (EI): 計算値C21H21F3NO3 (M+) 449.1426, 実測値449.1447。【０１１３】
ＴＰ−０４９（６１．５ｍｇ，０．１３７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１．４ｍＬ）溶液にＮａＯＨ水溶液（０．５Ｍ、０．５ｍＬ）を氷冷下加えた。同温度で５分間攪拌後、反応溶液に２Ｍ塩酸を加え酢酸エチルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝４：１〜２：１）に付し、ＴＰ−０５２（４９．４ｍｇ，ｑｕａｎｔ．）を白色個体として得た。【０１１４】
TP-052：[α]D14 = +130.7 (c = 0.243, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.39-7.31 (m, 5H), 6.77 (br d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.40 (dd, J = 9.7, 8.9 Hz, 1H), 2.32 (br d, J = 9.7 Hz, 1H), 2.31-2.07 (m, 4H), 1.85-1.79 (m, 2H), 1.72-1.57 (m, 5H), 1.52-1.44 (m, 2H), 1.29 (br, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 156.1 (q, 37.1 Hz), 140.7, 129.4, 128.5, 127.5, 115.9 (q, 288 Hz), 77.2, 54.3, 53.0, 50.5, 48.5, 41.4, 39.6, 39.4, 33.2, 30.6, 29.6; IR (ニート, cm-1): 3566, 3291, 2919, 1698, 1183; MS (EI): m/z 353 (M+), 151 (100%); HRMS (EI): 計算値C19H22F3NO2(M+) 353.1603, 実測値353.1604。【０１１５】
実施例７【０１１６】
【化１１】
2017131097.tif 000012
【０１１７】
（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）−２−（Ｒ−アジド（フェニル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１．］ノナン‐３−オン（５７．４ｍｇ，０．２０４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）溶液に、氷冷下２−メトキシエタノール（７８μＬ，１．０ｍｍｏｌ）、トリフルオロメタンスルホン酸スカンジウム（５．０ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）を順次加えた。室温にて２日間攪拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加えジクロロメタンにて抽出した。得られた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝１：２〜１：１）に付し、（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−２−（（Ｒ）−アジド（フェニル）メチル）−５−（２−メトキシエトキシ）アダマンタン‐１−オール（４１．２ｍｇ，５６％）を無色油状物として得た。【０１１８】
得られたアジド化合物（３９．６ｍｇ，０．１１１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１  ｍＬ）溶液にＬｉＡｌＨ４（８．０ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温までゆっくりと昇温し１時間攪拌後、反応溶液を氷冷しＬｉＡｌＨ４（８．０ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて１時間攪拌後、氷冷下反応溶液にアンモニア水を加えた。セライト（商標登録）で濾過を行い、濾液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し減圧下溶媒を留去した。残渣にジクロロメタン（１ｍＬ）を加え、トリエチルアミン（７７μＬ，０．５６ｍｍｏｌ）、無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡＡ、４７μＬ，０．３３ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温にて５時間攪拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加え、ジクロロメタンで抽出した。得られた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝１：４〜１：２）に付し、ＴＰ−０５０（３１．６ｍｇ，５４％）を無色油状物として得た。【０１１９】
[α]D25 = +72.1 (c = 0.965, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ 7.34-7.23 (m, 5H), 6.33 (br d, J = 9.9 Hz, 1H), 5.44 (dd, J = 10.9, 9.9 Hz, 1H), 3.59-3.56 (m, 2H), 3.51-3.48 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.17 (br d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.65 (br d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.43-2.37 (m, 3H), 1.95-1.81 (m, 7H), 1.38 (br d, J = 11.6 Hz, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3):δ 156.1 (q, J = 37.4 Hz), 154.9 (q, J = 42.1 Hz), 139.4, 129.1, 128.5, 127.2, 115.8 (q, J = 288.1 Hz), 113.4 (q, J = 287.3 Hz), 87.6, 73.7, 72.3, 60.2, 59.1, 53.5, 48.5, 45.0, 41.1, 39.9, 36.3, 30.5, 29.2; IR (ニート, cm-1): 3303, 2936, 1775, 1698, 1554, 1221, 1172; MS (EI): m/z 523 (M+), 202 (100%); HRMS (EI): 計算値 C24H27F6NO5 (M+) 523.1793, 実測値523.1797。【０１２０】
実施例８【０１２１】
【化１２】
2017131097.tif 000013
【０１２２】
（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）−２−（Ｒ−アジド（フェニル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１．］ノナン‐３−オン（２３８ｍｇ，０．８４８ｍｍｏｌ）のメタノール（８．５ｍＬ）溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸スカンジウム（２０ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温にて１８時間攪拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加え酢酸エチルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥後減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝１：４〜１：２）に付し、（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−２−（（Ｒ）−アジド（フェニル）メチル）−５−メトキシアダマンタン‐１−オール（２２５ｍｇ，８５％）を無色油状物として得た。【０１２３】
得られたアジド化合物（２２５ｍｇ，０．７１６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４ｍＬ）溶液にＬｉＡｌＨ４（４１ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。同温で１時間攪拌後、反応溶液にアンモニア水を加えた。セライト（商標登録）で濾過を行い、減圧下溶媒を留去した。残渣にジクロロメタン（４ｍＬ）を加え、トリエチルアミン（４９７μＬ，３．８６ｍｍｏｌ）、無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡＡ、２９９μＬ，２．１５ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温にて４０時間攪拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加え、ジクロロメタンで抽出した。得られた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝１：８〜１：２）に付し、ＴＰ−０５３（２６２ｍｇ，７５％）を白色個体として得た。【０１２４】
[α]D14 = +97.2 (c = 0.179, CHCl3); 1H-NMR (400 MHz, CDCl3):δ 7.33 (m, 5H), 6.35 (br d, J = 9.9 Hz, 1H), 5.45 (dd, J = 10.6, 9.9 Hz, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.17 (br d, J = 10.6 Hz, 1H), 2.61 (br d J = 10.6 Hz, 1H), 2.45-2.37 (m, 3H), 1.97-1.73 (m, 7H), 1.39 (br d, J = 13.5 Hz, 1H); 13C-NMR (100 MHz, CDCl3): δ 156.0 (q, J = 37.4 Hz), 155.0 (q, J = 41.8 Hz), 139.4, 129.1, 128.6, 127.1, 115.8 (q, 288.1 Hz), 113.4 (q, 287.0 Hz), 87.7, 75.5, 53.5, 48.7, 48.6, 44.5, 40.8, 39.5, 36.3, 33.3, 30.4, 29.3; IR (ニート, cm-1): 3299, 2941, 1776, 1697, 1221, 1172; MS (EI): m/z 479 (M+), 202 (100%); HRMS (EI): 計算値C22H23F6NO4(M+) 479.1531, 実測値479.1486。【０１２５】
実施例９【０１２６】
【化１３】
2017131097.tif 000014
【０１２７】
ビス（（Ｓ）−１−フェニルエチル）アミン（２．５ｍＬ，１１ｍｍｏｌ）、塩化リチウム（８５０ｍｇ，２０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液にｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（１．５６Ｍ，７．１ｍＬ，１１ｍｍｏｌ）を氷冷下滴下した。同温度で３０分撹拌後、反応溶液を−７８℃まで冷却した。反応混合物に、７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（１．５２ｇ，１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液をカニュレーションにより加えた。３０分撹拌後、ニコチンアルデヒド（１．１ｍＬ，１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液をカニュレーションにより加えた。４０分撹拌後、反応溶液に酢酸、飽和塩化アンモニウム水溶液を順次加え、酢酸エチルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、Ｋ２ＣＯ３で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐アセトン＝３：２〜１：２）に付し、（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）−２−（（Ｓ）−ヒドロキシ（ピリジン−３−イル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（２．７ｇ，８１％）を白色固体として得た。これを酢酸エチルから再結晶を行うことで無色結晶（９９％ｅｅ）を得た。【０１２８】
得られたアルコール（２５８ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）、ジフェニルリン酸アジド（ＤＰＰＡ、２３７μＬ，１．１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（２３９ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液にジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ、２１４μＬ，１．１ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温までゆっくりと昇温し５時間撹拌後、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン‐酢酸エチル＝４：１〜２：１）に付し、（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ）−２−（（Ｒ）−アジド（ピリジン−３−イル）メチル）−７−メチレンビシクロ［３．３．１］ノナン−３−オン（１８７ｍｇ，６６％）を無色油状物として得た。【０１２９】
得られたアジド化合物（１８７ｍｇ，０．６６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７ｍＬ）溶液に氷冷下ＴｉＣｌ４（３００μＬ，０．２７ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて３時間撹拌後，飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加えジエチルエーテルにて抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し，ＭｇＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し，得られた個体を冷ジエチルエーテルで洗浄し（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−２−（（Ｒ）−アジド（ピリジン−３−イル）メチル）−５−クロロアダマンタン−１−オール（９８．５ｍｇ，９２％）を得た。【０１３０】
得られた化合物（７５．４ｍｇ，０．２５７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液に、ＬｉＡｌＨ４（２３ｍｇ，０．６１ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。同温度で１時間攪拌後、反応溶液にアンモニア水を氷冷下加えた。セライト（商標登録）で濾過を行い、減圧下溶媒を留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨＣｌ３−メタノール＝１：０〜４：１）に付し、粗アミンを得た。【０１３１】
得られた粗アミンにジクロロメタン（２ ｍＬ）を加えた後、トリエチルアミン（１７８μＬ，１．２８ｍｍｏｌ）、無水トリフルオロ酢酸（ＴＦＡＡ、１０７μＬ，０．７６ｍｍｏｌ）を氷冷下加えた。室温まで昇温し４時間攪拌後、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を氷冷下加え、ジクロロメタンで抽出した。得られた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。減圧下溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−酢酸エチル＝２：１〜１：４）に付し、ＴＰ−０５１（４８．８ｍｇ，４９％）を白色個体として得た。【０１３２】
[α]D20 = +53.9 (c = 0.379, CHCl3);1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.57 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.50 (dd, J = 4.9, 1.5 Hz, 1H), 7.72 (br d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.41 (br d, J =9.8 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 7.8, 4.9 Hz, 1H), 5.35 (dd, J = 9.8, 9.3 Hz, 1H), 2.40-2.38 (m, 2H), 2.29 (br s, 1H), 2.22-1.99 (m, 7H), 1.75 (br, 1H), 1.68 (br d, J = 13.7 Hz, 1H), 1.48 (br d, J = 13.2 Hz, 1H), 1.42 (br d, J = 13.2 Hz, 1H); 13C-NMR (100MHz, CDCl3): δ156.4 (q, J = 37.1 Hz), 148.2, 147.7, 138.3, 136.5, 124.0, 115.8 (q, J = 287.8 Hz), 71.9, 66.1, 57.3, 52.6, 51.7, 47.6, 46.3, 38.3, 34.3, 31.6, 28.6; IR (ニート, cm-1): 3292, 2938, 1700, 1558, 1212, 1184, 1161, 759; MS (EI): m/z 388 (M+), 203 (100%); HRMS (EI): 計算値C18H20ClF3N2O2(M+) 388.1165, 実測値388.1177。【０１３３】
試験例１
Kir6.2チャネルのcDNAが挿入されたプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.2は東北大学大学院生命科学研究科、石塚徹博士より入手した。pcDNA3.1-Kir6.2をGenElute HP Plasmid Maxiprep Kit (Sigma-Aldrich社製)を用い付属のマニュアルにしたがい調整した。DMEM培養液（Gibco）に培養しているNeuro2A細胞（N2A細胞、医薬基盤研究所）の培養液（組成：DMEM培養液450mlに50mlの牛血清を加え、ペニシリン・ストレプトマイシンを100 Unit）を、上記調整したpcDNA3.1-Kir6.2（1μg/μl）を加えたOpti-Mem（Gibco）（Lipofectamine R2000を1ug/1mlで加える）に交換し、5時間培養することにより、Kir6.2チャネルを過剰発現させたN2A細胞を得た。再びDMEM培養液に交換後、2日間培養した。その後、メマンチン（Sigma-Aldrich社製）、および本発明化合物（各群について、n=4）を培養液（DMEM、Gibco）に対し10nMの濃度となるように添加後、1時間静置した。静置後、Kir6.2チャネル過剰発現N2A細胞を回収し、同細胞にSDSサンプルバッファーを加え懸濁後、免疫ブロット法により一次抗体に抗リン酸化CaMKII抗体（Fukunaga K et al., J. Biol. Chem. 1992, 267, 22527-22533）を、2次抗体に抗ウサギIgG抗体（SouthernBiotech社製）を用いてCaMKIIの活性化について測定した（前記した抗体の使用以外の条件は通常の免疫ブロット法にしたがった）。その結果、TP-009、TP-010、TP-011、TP-012、TP-014、TP-015、TP-048、TP-049、TP-050、TP-051、TP-052、TP-053においてリン酸化CaMKIIの抗体に反応するバンドが得られ、CaMKIIの活性化の増加が確認された。その結果を図１に示す。図１において、試験化合物を添加しなかった場合（対照：ｃ）の結果を１００％として、メマンチン、TP-009、TP-010、TP-011、TP-012、TP-014、TP-015、TP-048、TP-049、TP-050、TP-051、TP-052、TP-053（それぞれ、Ｍ、９、１０、１１、１２，１２、１５、４８、４９、５０、５１、５２、および５３に対応）を添加した場合のCaMKIIの活性化が示されている。【０１３４】
試験例２
試験例１で得られたKir6.2チャネル過剰発現細胞を用いて、通常のPatch-clamp法により細胞内より細胞外へ排出されるカリウム電流を測定した。結果を図２に示す。ATP感受性カリウムチャネル（Kir6.2チャネル）は、神経細胞の細胞膜に局在し、チャネルが阻害され閉塞すると神経細胞膜の閾値が上昇し、一過性の活動電位が発生するのと類似した状況を作り、細胞内より細胞外へカリウム電流が排出され、その代わりに細胞外より細胞内へカルシウム電流が流入する。図２aは、抗Kir6.2チャネル抗体（常法に基づき作成）を用いたKir6.2チャネル過剰発現細胞（上述の方法による）に対する免疫ブロット法（抗Kir6.2チャネル抗体の使用以外の条件は試験例１の条件と同様、n=5）により、N2A細胞でKir6.2チャネルが過剰発現していることを確認した（上は免疫ブロット法による染色像、下は同染色像のバンドシグナル強度を量的に表現したもの）。ハウスキーピング遺伝子であるβチューブリンに変動はみられなかった（抗βチューブリン抗体はSigma-Aldrichから入手し、他の条件はKir6.2の検出に同じ）。図２bは、TP-014を電気生理学実験用緩衝液中の濃度で10nMになるように添加した電気生理学実験用緩衝液中でKir6.2チャネル過剰発現細胞に静置すると、神経細胞の膜電位をプラス側へ変化させる際に流れる外向きに流れるカリウム電流が抑制されることを確認した結果である（各群n=5）。この結果は、TP-014はKir6.2チャネルを阻害し、細胞内より細胞外へ排出されるカリウム電流を阻害したことを示している。【０１３５】
試験例３
試験例１と同様のKir6.2チャネル過剰発現細胞を用いて、TP-014処置による細胞外より細胞内へ流入するカルシウム量をカルシウムイメージング法により測定した。結果を図３に示す。カルシウムイメージング法は、培養した神経細胞にカルシウム蛍光色素（Fura2、同仁化学研究所製）を培養液中に4μMとなるように調整して処置し、カルシウム量を蛍光の強さで測定する方法である。イメージング装置（SUTTER INSTRUMENT 社製、LAMBDA10-2）を用い、同装置のマニュアルに従いイメージングを行った。図３aは、TP-014（1〜100nM）およびメマンチン（100nM）を処置した際のTP-014濃度依存的なカルシウム量の経時変化を4分間にわたって測定した結果である。図３bは、メマンチン（100nM）、TP-014（1-100nM）処置から4分後のカルシウム量を測定した結果である（各群n=5）。TP-014はメマンチンより強力なカルシウム濃度増加作用を有しており、TP-014処置により、試験例２で確認された細胞外へのカリウム排出阻害作用による細胞内でのカルシウム量の有意な増加が確認された。【０１３６】
試験例４
アルツハイマー病モデルマウス（APP23マウス、Sturchler-Pierrat et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1997, 94, 13287-13292）（12ヶ月齢）にTP-014（1mg/kg）を1日1回、２ヶ月間慢性処置（経口投与）した結果、有意な認知機能改善効果が確認された。結果を図４に示す。図４a-dは、行動解析の結果を示す。図４aおよび図４bは、通常のY-maze法により、野生型マウス（C57BL/6J、日本SLC）およびAPP23マウス（各n=5）の注意機能を検討した結果を示し、TP-014処置により有意な注意機能の改善効果が認められた。Y-maze法は、8分間マウスに３つのアームを自由に歩かせる方法である。アームをそれぞれＡ、Ｂ、ＣとするとＡにいるマウスはＢもしくはＣのアームに入り、仮にＢにマウスが入ったとすると、次にマウスはＣに入り、このように、Ａ−Ｂ−Ｃと入った場合を正解とする。一方、Ａ−Ｂ−Ａと新規のアームに入らない場合を不正解とし、マウスが移動したアームの位置を選択した順に記録し、マウスが測定時間内に各アームに移動した回数をカウントし、これを total arm entries とする。さらにこの中で正解だった場合（連続して異なる三つのアームを選択した組み合わせ）をカウントし、この数を交替行動回数 (No. of alternation) とし、No. of alternation の total arm entries から 2 を引いた数に対する割合を、正常の交替行動の指標 (空間作業記憶の正解率) としてalternation (%) で表す。【０１３７】
マウスは新規性を好む傾向があり、通常のマウスでは70%の正解率を示すが、APP23マウスは50%程度に低下する。この%を指標として注意機能（認知機能）を解析する。【０１３８】
図４cは通常の新規物体認識試験法による新規の物に対する記憶を、野生型マウス、App23マウスともn=5で、測定した結果を示す。新規物体認識試験法は同じ形の積み木を２つマウスケージに入れ、マウスに遊ばせる（10分間、これを訓練試行という）。その1時間後、片方の積み木を別の形のものに変える。通常のマウスは新規の物に興味を示すので、別の形の積み木と遊ぶ時間は増加する。アルツハイマー病マウスは新規物を認識しておらず、記憶障害がみられる。片方を別の積み木にした状態でさらに5分間自由に探索させる (これを保持試行という)。訓練試行及び保持試行では、2つのオブジェクトに対するそれぞれの接触回数を測定し、保持試行における総接触回数に対する入れ替えた別の積み木への接触回数の割合 (%) を判別指数 (Discrimination index) として算出した。【０１３９】
図４dは、通常の恐怖条件付け試験法により恐怖記憶を測定（各n=5）した結果を示す。恐怖条件付け試験法は、マウスが明るい場所より暗い場所を好む特徴を利用した解析で、1日目にマウスを明るい場所に置く。マウスは暗い場所を好むので、暗い場所（暗室ボックス）に入るが、その時に電気刺激を与える。マウスは驚き明るい場所に戻り、その後、暗い場所には戻らない。2日目にマウスを明るい場所（1日目と同じ場所）に置き、マウスが暗い場所にはいるかどうかを5分間測定する。仮に、マウスがすぐに暗い場所に入れば恐怖記憶が低下していることになる。「Latency」は2日目に明るい場所にマウスを置いた際、暗室へ入るまでの時間を測定した秒数である。APP23マウスは暗い場所にすぐに入るので恐怖記憶の低下が確認されるが、TP-014を2ヶ月間処置すると改善効果が確認された。【０１４０】
図４e〜図４gは電気生理学的手法により記憶形成の指標である長期増強現象（LTP）について検討した結果を示す。脳の海馬は記憶に重要であり、海馬をスライス状（400マイクロメートル厚）にし、同スライスを95% O2/5% CO2 ガスで飽和させた人工脳脊髄液 (126 mM NaCl, 5 mM KCl, 26 mM NaHCO3, 1.3 mM MgSO4-7H2O, 1.26 mM KH2PO4, 2.4 mM CaCl2-2H2O, 10 mM グルコース) 中において、34 ℃で2時間回復させた。海馬スライスを測定チャンバーに移し、TP-014を人工脳脊髄液に添加して、灌流適用した。電気刺激による神経細胞の活動を記録と、シナプス後集合電位（fEPSP）の測定を行い、LTPの改善の程度を評価した。記録した波形を、図４eに示す。その後、100Hzの電気刺激を加え海馬に過疎的な変化を生じさせる（海馬では過疎的変化により記憶が形成されると考えられている）。神経細胞の興奮性の上昇率が、APP23マウスでは低下し、TP-014慢性処置では改善することが確認され、LTPの改善による記憶学習の改善効果を示している。【０１４１】
試験例５
APP23マウスの海馬を摘出し、海馬切片にSDSサンプルバッファーを加え懸濁後、免疫ブロット法によりCaMKII、CaMKIV、ERKに対する抗体（CaMKII：Fukunaga et al., J. Biol. Chem. 1992, 267, 22527-22533、CaMKIV：Kasahara et al., J. Biol. Chem.2001, 276, 24044-24050、ERK：Sigma-Aldrich社製）を用いて各タンパク質のリン酸化について検討した。結果を図５aおよび図５b に示す。CaMKII、CaMKIV、ERK はいずれも記憶形成に重要であると考えられている分子である。その結果、通常のAPP23マウスではCaMKIIのリン酸化の低下が見出され、PT-014慢性処置（処置条件は試験例４の場合と同じ）のAPP23マウスではCaMKIIのリン酸化の亢進が見出された。この結果より、CaMKIIの活性化がAPP23マウスにおけるPT-014処置による記憶改善効果に重要であることが示されている。【０１４２】
CaMKIIの活性化により活性化が誘導される分子として知られる、GluA1 (Ser-831)、Synapsin I (Ser-603)、CREB (Ser-133)について、海馬切片にSDSサンプルバッファーを加え懸濁後、免疫ブロット法により検討した。各分子に対する抗体はすべてMilipore社から入手した。結果を図５cおよび図５d に示す。GluA1 (Ser-831)およびCREB (Ser-133)の活性化がCaMKIIの活性化により誘導されていることを示している。図５aおよび図cは、実際に免疫ブロットを泳動した際に得られるバンド（画像）、図５bおよび図５dは図５aおよび図５cのバンドのシグナル強度を定量化しての解析結果である。【０１４３】
試験例６
図４と同様な実験を神経変性疾患モデルマウスである嗅球摘出マウス（OBXマウス）において確認した。結果を図６a〜図６gに示す。OBXマウスにおける認知機能障害は、TP-014の慢性投与（2週間）により有意に改善した。OBXマウスは、10週齢のDDY 雄性マウス(Nippon SLC, Hamamatsu, Japan)を用いて作製した。嗅球摘出手術は、ペントバルビタールナトリウム(50mg/kg i.p.; Dainippon, Osaka, Japan) で麻酔した条件で施行した。マウスを脳固定器に固定し、嗅球上の頭蓋骨をドリルで穿孔し、直径1mmの穴をあけた。嗅球を、吸引ポンプにて前頭前皮質を傷つけないように吸引除去した。Sham 群では、嗅球の吸引除去を除いて OBX 群と同一の操作を行った。【０１４４】
試験例７
図５と同様に、OBXマウスにおける認知機能障害の細胞内メカニズムについて検討した。その結果を図７a〜図７dに示す。記憶形成に重要な部位である海馬ではCaMKIIとCaMKIVの活性化が重要であることが明らかになった。また、CaMKIIとCaMKIVの活性化の下流分子であるGluA1 (Ser-831), CREB (Ser-133)の活性化も同様に重要であることが確認された。GluA1 (Ser-831), CREB (Ser-133)に対する抗体はいずれもMilipore社から入手した。図４〜７の結果より、TP-014の認知機能改善効果には、CaMKIIとCaMKIVの活性亢進が重要であることが明らかとなった。CaMKIVの遺伝子を欠損したマウスでは、認知機能障害は認められないことから、認知機能改善効果にはCaMKIIが重要だと考えられる。【０１４５】
試験例８
TP-014の作用がKir6.2チャネル阻害作用であることを確認するために、Kir6.2チャネル欠損マウスを用いてTP-014の作用部位の同定を図４と同様の行動実験（図８aおよび図８b：Y-mazeテスト、図８c：新規物体認識試験法、図８ｄ：恐怖条件付け試験法、図８e〜図８g：LTP改善評価、各群ともn=5）行った。結果を図８に示す。Kir6.2欠損マウスでは認知機能障害を誘発していることが確認された。この結果は、Kir6.2チャネルが記憶形成に重要であることを示す。また、Kir6.2欠損マウスの記憶障害およびLTPの減弱は、TP-014慢性処置（2ヶ月）では改善しないことが明らかとなった。この結果は、TP-014の作用部位がKir6.2チャネルであることを示している。解析手法は、試験例４〜７と同様である。なお、Kir6.2欠損マウスは神戸大学医学部、清野進教授より入手した（Miki T et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1998, 95, 10402-10406）。【０１４６】
試験例９
図４〜７と同様の手法でCaMKIIの活性化、およびCaMKIIの活性化により活性化が誘導される分子として知られるGluA1 (Ser-831)について海馬切片にSDSサンプルバッファーを加え懸濁後に免疫ブロット法を行い、Kir6.2欠損マウスにおける認知機能障害の細胞内メカニズムについて検討した。結果を図９に示す（図９a：免疫ブロット法によるバンド像、図９b：バンドのシグナル強度の定量化結果）。Kir6.2欠損マウスの海馬では、CaMKIIの活性化は亢進しており、TP-014の慢性処置においても影響は認められなかった。Kir6.2チャネルの欠損により細胞内外におけるカルシウムの恒常性（バランス）に異常が認められ、CaMKIIのリン酸化が亢進した。TP-014はCaMKIIの活性化に影響を与えず、TP-014の作用部位がKir6.2チャネルであることを示す。【０１４７】
試験例１０
アルツハイマー病の原因に関するamyloid-β（Aβ）仮説は、今なお重視されている。Aβの凝集がAPP23マウス（14ヶ月齢）で起こることを免疫染色法により確認している。脳を50マイクロメートルのスライス切片を作成し、WTは野生型（対照マウス）、APP23マウスそれぞれの場合について、6E10（Aβの抗体、abcam社製）およびThioflavinで染色した結果（凝集体を評価する指標）を図１０に示す。それ以外の条件は通常の免疫染色法に従った。APP23マウスにおいてはAβの凝集が促進していることが明らかになり、特に、大脳皮質（PFC）で多く認められた。一方、海馬（CA1）ではほとんど認められなかった。TP-014慢性処置によりAβの凝集は抑制されていた。この結果は、TP-014には、Aβの凝集抑制効果があることを示す。【０１４８】
試験例１１
うつ病モデルマウスとしてOBXマウスを使用し、TP-014のうつ様症状の改善効果を確認した。結果を図１１に示す。OBXマウスは認知機能の低下も認められるが、もともとはうつ病モデルマウスとして確立したマウスであり、うつ病の測定法として、tail-suspension法（a）とforced swim法（b）を解析した。tail-suspension法はマウスの尻尾を挟み、逆向きに吊り下げる方法で、吊り下げられたマウスはうつ病であれば無動時間（immobility time）が長くなる。通常のマウスは吊り下げられても動くので無動時間は低い。forced swim法はビーカーに水を張りマウスをビーカーの中で泳がせる。うつ病のマウスは泳がず動かず（浮いた状況）、この動かない時間（無動時間、immmobility time(s) ）を測定する。OBXマウスはtail-suspension法（a）とforced swim法（b）における無動時間の増加が認められた。TP-014の慢性投与（2週間、投与方法は前例に同じ）で無動時間は改善した。この結果より、TP-014はOBXマウスのうつ様症状の改善効果があることが明らかになった（各群ともn=5）。【０１４９】
試験例１２
マウスは、Kir6.1欠損マウス（ヘテロ型、各群n=5）を用いて、図１１と同様の手法によりtail-suspension法（a）とforced swim法（b）における無動時間を測定した。ヘテロ型マウスはホモ型（完全な欠損マウス）と異なりKir6.1チャネルの発現量が半分になっているマウスである（ホモ型はすると生後に不整脈を起こし死亡する）。結果を図１２に示す。Kir6.1欠損マウスはうつ様症状の亢進を示し、この結果からKir6.1がうつ病に重要な分子であることがわかる。また、TP-014の慢性処置は効果を示さず、TP-014はKir6.1チャネルの阻害作用を介してうつ改善効果を示すことが確認された。Kir6.1欠損マウスは神戸大学医学部、清野進教授より入手した（Miki T et al., Nature Medicine 2002, 8, 466-472）。【０１５０】
試験例１３
図１２と同様にKir6.1チャネルにより誘導されるCaMKIVについてCaMKIV欠損マウス（各群n=5*）を用いて解析した。結果を図１３に示す。CaMKIV欠損マウスでも同様にうつ様症状の亢進が確認され、この結果からCaMKIVもうつ病の発症機序に重要であることがわかる。TP-014は、CaMKIVのうつ症状（無動時間の亢進）に効果を示さなかった。TP-014は、Kir6.1チャネルを阻害し、CaMKIVの活性化を介してうつ病の改善効果を示すことが明らかとなった。CaMKIV欠損マウスは北里大学医学部、坂上洋行教授より入手した（Takao K et al., PLoS One 2010, 5, e9460）。【０１５１】
試験例１４
TP-014の血糖値の低下作用をassay kit（Technicon International co社製）を使用して血液中のglucose濃度を測定して確認した。結果を図１４に示す。測定は4週間行い、TP-014（1mg/kg）を4週間慢性処置した結果、3週目以降において有意な血糖値の低下が確認されました。対照としてtolbutamideを使用した。Kir6.2チャネルは細胞膜上でSUR1（尿素受容体）と結合し、チャネルを形成しており、作用機序は、Kir6.2チャネル阻害作用によるものと考えられる。TolbutamideはSUR1に結合し、Kir6.2チャネルを阻害する。【０１５２】
試験例１５
Kir6.1チャネルのcDNAが挿入されたプラスミドベクター：pcDNA3.1-Kir6.1は東北大学大学院生命科学研究科、石塚徹博士より入手した。当該プラスミドベクターを用いた以外は、試験例１のKir6.2チャネル過剰発現N2A細胞の調製と同じ手法により、Kir6.1チャネルを過剰発現させたN2A細胞を得た。【０１５３】
得られたKir6.1チャネル過剰発現細胞を用いて、CaMKIVの活性化について測定した、測定手法は試験例１と同様の免疫ブロット法であり、一次抗体に抗リン酸化CaMKIV抗体（Kasahara J et al., J. Biol. Chem.2001, 276, 24044-50）を、2次抗体に抗ウサギIgG抗体（SouthernBiotech社製）を用いた。【０１５４】
さらに、得られたKir6.1チャネル過剰発現細胞を用いて、通常のPatch-clamp法により細胞内より細胞外へ排出されるカリウム電流を測定した。結果を図１８に示す。ATP感受性カリウムチャネル（Kir6.1チャネル）は、神経細胞の細胞膜に局在し、チャネルが阻害され閉塞すると神経細胞膜の閾値が上昇し、一過性の活動電位が発生するのと類似した状況を作り、細胞内より細胞外へカリウム電流が排出され、その代わりに細胞外より細胞内へカルシウム電流が流入する。図１８aは、抗Kir6.1チャネル抗体（常法に基づき作成）を用いたKir6.1チャネル過剰発現細胞（上述の方法による）に対する免疫ブロット法（抗Kir6.1チャネル抗体の使用以外の条件は試験例１の条件と同様、n=5）により、N2A細胞でKir6.1チャネルが過剰発現していることを確認した（上は免疫ブロット法による染色像、下は同染色像のバンドシグナル強度を量的に表現したもの）。ハウスキーピング遺伝子であるβチューブリンに変動はみられなかった（抗βチューブリン抗体はSigma-Aldrichから入手し、他の条件はKir6.1の検出に同じ）。図１８ｂは、TP-014を電気生理学実験用緩衝液中の濃度で10nMになるように添加した電気生理学実験用緩衝液中でKir6.2チャネル過剰発現細胞に静置すると、神経細胞の膜電位をプラス側へ変化させる際に流れる外向きに流れるカリウム電流が抑制されることを確認した結果である（各群n=5）。この結果は、TP-014はKir6.1チャネルを阻害し、細胞内より細胞外へ排出されるカリウム電流を阻害したことを示している。【０１５５】
試験例１６
不安様症状を示す疾患モデルマウスとしてコルチコステロンを投与した野生型マウス（C57BL/6J、日本SLC、２ヶ月齢、5mg/kgで1日1回の投与を2週間）およびコルチコステロンを投与したKir6.1欠損マウスを用いて不安関連行動に関する５つの行動試験を行った。なお、Kir6.1欠損マウスは神戸大学医学部、清野進教授より入手した（Miki T et al., Nature Mededicine2002, 8, 466-472）。【０１５６】
コルチコステロン投与野生型マウス、およびコルチコステロン投与Kir6.1欠損マウスにTP-014（1mg/kg）を1日1回、２週間慢性処置（経口投与）した結果、有意な不安症状亢進の改善効果が確認された。結果を図１９に示す。【０１５７】
図１９aは、高架式十字迷路法（elevated-plus maze法、図１９b）により、各群（各n=5）の不安に対する脆弱性を検討した結果を示す。ここで使用する装置では高い場所に十字路となったアームが設けられており、各アームは下が見える状態か、閉ざされた状態のいずれかとなっている。不安に対して脆弱なマウスは閉ざされたアーム（close arm）に長く留まる、不安に対して抵抗性を有するマウスは下が見えるアーム（open arm）に留まる。図１９aは縦軸にopen armの滞在時間を示す。【０１５８】
図１９cは、明暗試験法（light-dark 法、図１９d）による試験結果を示す（各群n=5）。黒い箱の中（暗い場所）に入れたマウスが、光に対して不安を感じた結果、外（明るい場所）へ出て来るまでに要する時間を測定した。図１９cは縦軸に外へ出るまでの時間（entory of open compartment）を示す。【０１５９】
図１９eはビー玉かくし試験法（Marble burying法、図１９f）による結果を示す（各群n=5）。マウスをいれたケージに床敷チップをしき、その上にビー玉を２０個マウスから見えるように置く。マウスを30分間自由に探索させ、床敷チップの中に埋めて隠すビー玉の数を測定する。マウスは光る物体を苦手とするため、不安に対して強いマウスが多くのビー玉に接触する。図１９eは縦軸に埋められたビー玉の数を示す。【０１６０】
図１９gは、オープンフィールド法（open field法、図１９h）による試験結果を示す（各群n=5）。四角い箱の中に入れたマウスに30分間箱内を探索させる。一般的にマウスは不安が強く、箱の隅に沿ってを歩く習性を持つが、不安に強いマウスは箱の中心部分を通る割合が多くなることを指標とする。図１９gは箱の中心部分に留まる時間を示す。【０１６１】
図１９iは、は、恐怖条件付試験法（fear conditining法）による試験結果を示す（各群n=5）。明暗試験法の試験装置を使用し、マウスを暗い場所に入れ、30秒間に渡り音（高音）を鳴らし、その後、電気刺激を3秒与える。音の後に電気刺激を3回繰り返し、マウスに音がなると電気刺激を受けることを認識させる。翌日、5分間音を鳴らし続ける際に恐怖不安を感じたマウスの無動時間（immobility time）を測定する。図１９iの縦軸はマウスの無動時間を示す。【０１６２】
上記の全ての試験結果においてTP-014の慢性投与（２週間）が不安様症状亢進を改善することが確認された。またKir6.1欠損マウスもコルチコステロンの投与により不安様症状を示すが、TP-014の投与による改善効果は認められなかった。この結果より、本発明化合物の不安様症状亢進の改善効果はKir6.1を介することが確認された。【０１６３】
なお、本願の図に示される有意差の表示について、＊＊もしくは＋＋は有意差がＰ＜０．０１であることを示し、＋もしくは＊はＰ＜０．０５を示す。
【図１】
2017131097.tif 000016
【図２ａ】
2017131097.tif 000017
【図２ｂ】
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【図３ａ】
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【図３ｂ】
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【図４ａ】
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【図４ｂ】
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【図４ｃ】
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【図４ｄ】
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【図４ｅ】
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【図４ｆ】
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【図４ｇ】
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【図５ａ】
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【図５ｂ】
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【図５ｃ】
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【図５ｄ】
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【図６ａ】
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【図６ｂ】
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【図６ｃ】
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【図６ｄ】
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【図６ｅ】
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【図６ｆ】
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【図６ｇ】
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【図７ａ】
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【図７ｂ】
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【図７ｃ】
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【図７ｄ】
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【図８ａ】
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【図８ｂ】
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【図８ｃ】
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【図８ｄ】
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【図８ｅ】
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【図８ｆ】
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【図８ｇ】
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【図９ａ】
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【図９ｂ】
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【図１０】
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【図１１ａ】
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【図１１ｂ】
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【図１２ａ】
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【図１２ｂ】
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【図１３ａ】
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【図１３ｂ】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７−１】
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【図１７−２】
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【図１７−３】
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【図１７−４】
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【図１７−５】
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【図１８ａ】
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【図１８ｂ】
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【図１８ｃ】
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【図１９ａ】
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【図１９ｂ】
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【図１９ｃ】
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【図１９ｄ】
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【図１９ｅ】
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【図１９ｆ】
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【図１９ｇ】
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【図１９ｈ】
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【図１９ｉ】
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【図２０】
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【図２１−１】
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【図２１−２】
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【図２１−３】
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【図２１−４】
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【図２１−５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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