(57)【要約】  利便性良く含水試料を大気雰囲気またはガス雰囲気または所望の圧力下で観察するために、本発明では、荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒の内部空間から隔膜によって隔離された非真空空間に配置された試料に対して荷電粒子線を照射して観察するための観察支援ユニットを提供する。  当該観察支援ユニットは、試料（６）が観察される観察領域を形成する穴部（５０１ａ）と前記試料を蓋う本体部（５０２ｂ）とを備え、前記試料（６）と前記隔膜の間であって、前記試料上に直接載置される。
2017033219.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒の内部空間から隔膜によって隔離された非真空空間に配置された試料に対して荷電粒子線を照射して観察するための観察支援ユニットであって、  前記試料が観察される観察領域を形成する穴部と前記試料を蓋う本体部とを備え、  当該観察支援ユニットは前記試料と前記隔膜の間であって、前記試料上に直接載置されることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項２】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  当該観察支援ユニットは、前記隔膜と前記試料とを非接触の状態に保つことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項３】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記穴部の大きさは、前記隔膜の荷電粒子線が透過する部分である窓部の大きさ以上であることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項４】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記本体部の大きさは、前記隔膜を保持する隔膜保持部材の大きさより大きいことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項５】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記穴部は前記隔膜を保持する隔膜保持部材の大きさより小さいことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項６】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記本体部の前記穴部周囲の厚みが一定であることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項７】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記本体部の前記穴部周囲の厚みが、前記荷電粒子線による観察条件における当該荷電粒子線の平均自由工程よりも小さいことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項８】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  当該観察支援ユニットの外周部が、前記本体部の前記穴部周囲より厚いまたは硬いことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項９】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記本体部と前記試料が載置される試料台との間の空間を封止する封止部材を備えることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項１０】
請求項９に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記封止部材によって封止された前記本体部と前記試料が載置される試料台との間の空間は、前記穴部より面積が小さい孔によって当該空間の外部と連通されていることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項１１】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、  前記本体部の少なくとも一部は前記試料の主成分とは異なる材料からなることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項１２】
荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒の内部空間から隔膜によって隔離された非真空空間に配置された試料に対して荷電粒子線を照射して観察する試料観察方法であって、  前記試料上に、前記試料が観察される観察領域を形成する穴部と前記試料を蓋う本体部とを備えた観察支援ユニットを直接搭載するステップと、  前記観察支援ユニットが搭載された状態の試料を前記隔膜に接近させるステップと、を有することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の試料観察方法において、  前記隔膜と前記試料とは非接触の状態に保たれることを特徴とする試料観察方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の試料観察方法において、  光学顕微鏡を用いて、前記観察支援ユニットの穴部を前記試料上の観察したい部位に位置合わせするステップを有することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１５】
請求項１２に記載の試料観察方法において、  前記穴部から露出した試料部と前記本体部の荷電粒子顕微鏡画像における明るさの違いを識別して前記試料が載置された試料ステージを移動させることによって、前記穴部を前記隔膜の直下に配置するステップを有することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１６】
請求項１２に記載の試料観察方法において、  前記本体部と前記試料が載置される試料台との間の空間を封止することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１７】
請求１２に記載の試料観察方法において、  前記観察支援ユニットが搭載された状態において前記穴部に露出している前記試料の表面に存在する液滴を除去することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載の試料観察方法において、  前記観察支援ユニットが搭載された状態の試料が載置された空間を真空引きすることにより、前記穴部に露出している前記試料の表面に存在する液滴を除去することを特徴とする試料観察方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、試料を大気圧下、所望のガス圧下またはガス種下で観察可能な荷電粒子線装置および当該荷電粒子線装置向けの観察支援ユニットに関する。
【背景技術】
【０００２】  物体の微小な領域を観察するために、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）や透過型電子顕微鏡（ＴＥＭ）などが用いられる。一般的に、これらの装置では試料を配置するための筐体を真空排気し、試料雰囲気を真空状態にして試料を撮像する。しかしながら、生物試料や液体試料などの含水試料の場合は真空によってダメージを受け、または状態が変わってしまう。一方で、このような試料を電子顕微鏡で観察したいというニーズは大きいため、観察対象試料を大気圧下や所望のガス圧下またはガス種下で観察可能なＳＥＭ装置が強く望まれている。【０００３】  そこで、近年、電子光学系と試料の間に電子線が透過可能な隔膜や微小穴を設けて電子線が飛来する真空状態と試料雰囲気下を仕切ることによって、大気圧下や所望のガス圧下またはガス種下に試料が配置可能なＳＥＭ装置が知られている。特許文献１では、隔膜直下に配備された試料ステージを使って隔膜と試料とが非接触な状態で大気圧下の試料をＳＥＭ観察することおよび観察のために試料の位置を調整することが開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１２−２２１７６６号公報（米国特許出願公開第２０１４／００２１３４７号明細書）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】  特許文献１に記載の荷電粒子線装置では、観察のために隔膜と試料との間の距離が非常に小さく調整されることが必要であるが、観察対象が含水試料の場合、試料表面上に存在する水滴が隔膜と試料との間に入り、試料観察が困難になる場合がある。特に、観察したい部位や隔膜直下に水滴がない状態であっても、隔膜に試料を接近させると隔膜を保持する部材に水滴が接触したことによって、隔膜側に液滴が押し寄せるといった問題があった。そのため、従来の装置では含水試料を観察することが困難であった。【０００６】  本発明は、かかる問題に鑑みてなされたもので、利便性良く含水試料を大気雰囲気またはガス雰囲気または所望の圧力下で観察することが可能な試料観察方法及びこれに用いる観察支援ユニットを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】  上記課題を解決するために、荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒の内部空間から隔膜によって隔離された非真空空間に配置された試料に対して荷電粒子線を照射して観察するための観察支援ユニットを提供する。当該観察支援ユニットは、試料が観察される観察領域を形成する穴部と試料を蓋う本体部とを備える。また、当該観察支援ユニットは試料と隔膜の間であって、試料上に直接載置される。【０００８】  また、本観察支援ユニットを用いた試料観察方法として、当該観察支援ユニットを直接試料上に搭載するステップと、当該観察支援ユニットが搭載された状態の試料を隔膜に接近させるステップと、を有する試料観察方法を提供する。
【発明の効果】
【０００９】  本発明によれば、隔膜と試料間に観察支援ユニットとしてのカバーを配置することによって、余分な液滴が隔膜に接触する確率を大幅に低減させることができる。その結果、含水試料の画像を利便性良く明瞭に取得することができる。また、液滴が隔膜に接触する確率が大幅に低減することによって、隔膜交換の頻度を低減しランニングコストを抑えることができる。【００１０】  上記した以外の課題、構成及び効果は、以下の実施形態の説明により明らかにされる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実施例１の荷電粒子顕微鏡の全体構成図。
【図２】カバーを用いない場合の隔膜と含水試料近傍の説明図。
【図３】実施例１における隔膜およびカバーの説明図。
【図４】実施例１におけるカバーを用いた場合の試料近傍の説明図。
【図５】実施例１において光学顕微鏡を用いてカバーを配置するときの操作の説明図。
【図６】実施例１におけるカバーを用いて荷電粒子顕微鏡を操作するときの説明図。
【図７】実施例１におけるカバーを用いるための操作手順の説明図。
【図８】実施例１におけるカバーの形状を説明する図。
【図９】実施例２の荷電粒子顕微鏡の全体構成図。
【図１０】実施例２におけるカバーを用いて荷電粒子顕微鏡を操作するときの説明図。
【図１１】水滴の乾燥時間と蒸発時間の関係。
【図１２】実施例２における、カバー及び封止部材を用いた時の含水試料近傍の説明図。
【図１３】実施例２における、カバー及び封止部材を用いた時の含水試料近傍の説明図。
【図１４】実施例２における、カバー及び封止部材を用いた時の含水試料近傍の説明図。
【図１５】実施例２における、カバー及び封止部材を用いた時の含水試料近傍の説明図。
【図１６】実施例２における、カバー及び封止部材を用いるための操作手順の説明図。
【発明を実施するための形態】
【００１２】  以下、図面を用いて各実施形態について説明する。
【００１３】  以下では、荷電粒子線装置の一例として、荷電粒子線顕微鏡について説明する。ただし、これは本発明の単なる一例であって、本発明は以下説明する実施の形態に限定されるものではない。本発明は、走査電子顕微鏡、走査イオン顕微鏡、走査透過電子顕微鏡、これらと試料加工装置との複合装置、またはこれらを応用した解析・検査装置にも適用可能である。
【００１４】  また、本明細書において「大気圧」とは大気雰囲気または所定のガス雰囲気であって、大気圧または若干の負圧状態の圧力環境のことを意味する。具体的には約１０5Ｐａ（大気圧）から１０3Ｐａ程度である。また、この圧力範囲を「非真空」と称することもある。
【実施例１】
【００１５】  本実施例では、基本的な実施形態について説明する。図１には、本実施例の荷電粒子顕微鏡の全体構成図を示す。なお、以下の実施例は走査電子顕微鏡を意図して説明するが、上記の通り本発明はこれに限らない。【００１６】  図１に示される荷電粒子顕微鏡は、荷電粒子光学鏡筒の内部空間から隔膜によって隔離された非真空空間に配置された試料に対して荷電粒子線を照射して観察する装置である。図１に示される荷電粒子顕微鏡は、主として、荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒２、荷電粒子光学鏡筒２と接続されこれを支持する筐体（真空室）７、大気雰囲気下に配置される試料ステージ５、およびこれらを制御する制御系によって構成される。荷電粒子顕微鏡の使用時には荷電粒子光学鏡筒２と筐体７の内部は真空ポンプ４により真空排気される。真空ポンプ４の起動・停止動作も制御系により制御される。図中、真空ポンプ４は一つのみ示されているが、二つ以上あってもよい。荷電粒子光学鏡筒２及び筺体７は図示しない柱によって支えられているとする。【００１７】  荷電粒子光学鏡筒２は、荷電粒子線を発生する荷電粒子源８、発生した荷電粒子線を集束して鏡筒下部へ導き、一次荷電粒子線として試料６を走査する光学レンズ１などの要素により構成される。荷電粒子源の寿命等の問題から、一般に荷電粒子源周辺の雰囲気は１０-1Ｐａ以下の気圧（以下、高真空とする）となっている。荷電粒子光学鏡筒２は筐体７内部に突き出すように設置されており、真空封止部材１２３を介して筐体７に固定されている。荷電粒子光学鏡筒２の端部には、上記一次荷電粒子線の照射により得られる二次的荷電粒子（二次電子または反射電子）を検出する検出器３が配置される。検出器３で得られた信号に基づいて試料の画像を取得する。検出器３は荷電粒子光学鏡筒２の外部にあっても内部にあってもよい。荷電粒子光学鏡筒には、これ以外に他のレンズや電極、検出器を含んでもよいし、一部が上記と異なっていてもよく、荷電粒子光学鏡筒に含まれる荷電粒子光学系の構成はこれに限られない。【００１８】  本実施例の荷電粒子顕微鏡は、制御系として、装置使用者が使用するコンピュータ３５、コンピュータ３５と接続され通信を行う上位制御部３６、上位制御部３６から送信される命令に従って真空排気系や荷電粒子光学系などの制御を行う下位制御部３７を備える。コンピュータ３５は、装置の操作画面（ＧＵＩ）が表示されるモニタと、キーボードやマウスなどの操作画面への入力手段を備える。上位制御部３６、下位制御部３７およびコンピュータ３５は、各々通信線４３、４４により接続される。【００１９】  下位制御部３７は真空ポンプ４、荷電粒子源８や光学レンズ１などを制御するための制御信号を送受信する部位であり、さらには検出器３の出力信号をディジタル画像信号に変換して上位制御部３６へ送信する。図では検出器３からの出力信号をプリアンプなどの増幅器１５４を経由して下位制御部３７に接続している。もし、増幅器が不要であればなくてもよい。【００２０】  上位制御部３６と下位制御部３７ではアナログ回路やディジタル回路などが混在していてもよく、また上位制御部３６と下位制御部３７が一つに統一されていてもよい。荷電粒子顕微鏡には���このほかにも各部分の動作を制御する制御部が含まれていてもよい。上位制御部３６や下位制御部３７は、専用の回路基板によってハードウェアとして構成されていてもよいし、コンピュータ３５で実行されるソフトウェアによって構成されてもよい。ハードウェアにより構成する場合には、処理を実行する複数の演算器を配線基板上、または半導体チップまたはパッケージ内に集積することにより実現できる。ソフトウェアにより構成する場合には、コンピュータに高速な汎用ＣＰＵを搭載して、所望の演算処理を実行するプログラムを実行することで実現できる。【００２１】  筐体７には、一端が真空ポンプ４に接続された真空配管１６が接続され、内部を真空状態に維持できる。同時に、筐体内部を大気開放するためのリークバルブ１４を備え、メンテナンス時などに、筐体７の内部を大気開放することができる。リークバルブ１４は、なくてもよいし、二つ以上あってもよい。また、筐体７におけるリークバルブ１４の配置箇所は、図１に示された場所に限られず、筐体７上の別の位置に配置されていてもよい。【００２２】  なお、図１に示す制御系の構成は一例に過ぎず、制御ユニットやバルブ、真空ポンプまたは通信用の配線などの変形例は、本実施例で意図する機能を満たす限り、本実施例のＳＥＭないし荷電粒子線装置の範疇に属する。【００２３】  筐体下面には上記荷電粒子光学鏡筒２の直下になる位置に隔膜１０を備える。この隔膜１０は、荷電粒子光学鏡筒２の下端から放出される一次荷電粒子線を透過または通過させることが可能であり、一次荷電粒子線は、隔膜１０を通って最終的に試料台５０６に搭載された試料６に到達する。隔膜１０によって試料載置空間から隔離されて構成される閉空間（すなわち、荷電粒子光学鏡筒２および筐体７の内部）は真空排気可能である。本実施例では、隔膜１０によって真空排気される空間の気密状態が維持されるので、荷電粒子光学鏡筒２を真空状態に維持できかつ試料６周囲の雰囲気を大気圧に維持して観察することができる。また、荷電粒子線が照射されている状態でも試料が設置された空間が大気雰囲気であるまたは大気雰囲気の空間と連通しているため、観察中、試料６を自由に交換できる。【００２４】  隔膜１０は隔膜保持部材９上に成膜または蒸着されている。隔膜１０はカーボン材、有機材、金属材、シリコンナイトライド、シリコンカーバイド、酸化シリコンなどである。隔膜保持部材１５９は例えばシリコンや金属部材のような部材である。隔膜１０部は複数配置された多窓であってもよい。一次荷電粒子線を透過または通過させることが可能な隔膜の厚みは数ｎｍ〜数μｍ程度である。隔膜は大気圧と真空を分離するための差圧下で破損しないことが必要である。そのため、隔膜１０の面積は数十μｍから大きくとも数ｍｍ程度の大きさである。【００２５】  隔膜１０を支持する固定部材１５５は隔膜保持部材１５９上に具備されている。図示しないが、固定部材１５５と隔膜保持部材１５９は後術する固定部材１５５等に真空シールが可能なＯリングやパッキンや接着剤や両面テープなどによって接着されているものとする。隔膜保持部材１５９は、筐体７の下面側に真空封止部材１２４を介して脱着可能に固定される。隔膜１０は��荷電粒子線が透過する要請上、厚さ数ｎｍ〜数μｍ程度以下と非常に薄いため、経時劣化または観察準備の際に破損する可能性がある。また、隔膜１０及びそれを支持する土台９は小さいので、直接ハンドリングすることが非常に困難である。そのため、本実施例のように、隔膜１０および固定部材１５５を隔膜保持部材１５９と一体化し、固定部材１５５を直接ではなく隔膜保持部材１５９を介してハンドリングできるようにすることで、隔膜１０及び固定部材１５５の取扱い（特に交換）が非常に容易となる。つまり、隔膜１０が破損した場合には、固定部材１５５全体を交換すればよい。仮に隔膜１０を直接交換しなければならない場合でも、固定部材１５５全体を装置外部に取り出し、隔膜１０と一体化された固定部材１５５から隔膜１０を取り外すことで、隔膜１０の取り外し作業を装置外部で交換することができる。【００２６】  本荷電粒子顕微鏡の試料は試料ステージ５上に配置される。試料ステージ５は少なくともＺ軸駆動機構を有する。Ｚ軸方向とは荷電粒子線光軸の方向５４を指す。このＺ軸駆動機構は試料６と隔膜１０との距離を任意に調整するために使用する機構である。また、荷電粒子顕微鏡の試料ステージ５はＸＹ平面駆動機構を有していてもよい。ＸＹ平面とは前述のＺ軸に垂直な平面を指す。このＸＹ平面移動機構は、試料ステージ上の任意の部位を観察するために使用する機構である。これにより、試料上で任意の観察対象部位を探して視野中心に移動することができる。【００２７】  大気圧下において観察可能な荷電粒子顕微鏡においては、荷電粒子線の散乱を極力抑え、なおかつ隔膜を試料との接触により破損させないために、隔膜１０と試料６の観察対象部位の距離を数百μｍから数十μｍまたは数μｍ程度に調整する必要がある。この操作は非常に繊細であり、隔膜と試料とを近接させる作業を利便性良くすることは大気圧下で観察を行う荷電粒子顕微鏡の利便性向上に大きく寄与する。【００２８】  また、図示しないが、試料６の直下または近傍に試料が観察可能な光学顕微鏡を配置してもよい。この場合は、隔膜１０が試料上側にあり、光学顕微鏡は試料下側から観察することになる。そのため、この場合は、試料台５２は光学顕微鏡の光に対して透明である必要がある。透明な部材としては、透明ガラス、透明プラスチック、透明の結晶体などである。より一般的な試料台としてスライドグラス（又はプレパラート）やディッシュ（又はシャーレ）などの透明試料台などがある。【００２９】  また、温度ヒータや試料中に電界を発生可能な電圧印加部を備えてもよい。この場合、試料が加熱または冷却していく様子や、試料に電界が印加されている様子を観察することが可能となる。【００３０】  また、図１では検出器３は真空空間１１内にあるが、透過信号を検出することが可能な透過検出器が試料直下または近傍にあってもよい。【００３１】  隔膜は２つ以上配置してもよい。例えば、荷電粒子光学鏡筒２の内部に隔膜があってもよい。あるいは、真空と大気とを分離する第一の隔膜の下側に、第二の隔膜を備え第二の隔膜と試料ステージとの間に試料が内包されていてもよい。【００３２】  本発明では隔膜の数や種類は問わず、本実施例で意図する機能を満たす限り���本実施例のＳＥＭないし荷電粒子線装置の範疇に属する。【００３３】  （カバーの説明）  図１の装置を用いると、試料が大気中に配置することが可能であるために、水分を含んだ状態の試料の荷電粒子顕微鏡観察することが可能であった。しかしながら、多量の水分を含んだ試料を観察することはこれまでに困難であった。この理由について図２を用いて説明する。試料６に多くの水分が含まれている場合、試料表面上にも液滴がつくことがよくある。この状態で、隔膜１０に試料６を接近させると、試料表面上の液滴５００が観察される。荷電粒子線の物質内部への侵入深さ（または平均自由行程）は短いために、観察したい試料部位に液滴がついていると、試料６表面まで荷電粒子線が到達することができない。このため、水滴が残っている試料表面の観察が困難といった問題が発生する。【００３４】  このような場合、液滴が付着していない試料部位６ａを観察することが可能であるように思えるが、実際は液滴５００が試料部位６ａ上に付着していない場合でも観察が困難な場合が多い。例えば、観察したい試料部位６ａに液滴がなく、隔膜１０の窓長Ｄｍの範囲以外に液滴５００が存在している場合を考える。このような状況下で試料６を隔膜１０に接近した時に、隔膜を保持する土台１５９に液滴５００が接触する（接触部位５０８）。荷電粒子顕微鏡から放出される荷電粒子線は隔膜１０の窓長Ｄｍの範囲しか観察できないため、接触部位５０８を観察することができないため、装置操作者は、土台１５９に液滴５００が接触したことが認識できない。その結果、装置操作者は隔膜保持部材１５９に液滴５００が接触したことを知らない状態で、さらに、隔膜１０に試料６を接近させる。その後、液滴５００が広がっていき、隔膜１０に到達する。液滴が存在している部位（図中Ａ部）は荷電粒子線が試料６まで到達しないために、Ａ部の試料表面は観察できないことになる。このように、観察したい試料部位６ａに液滴がなくても、隔膜１０の窓長Ｄｍの範囲以外に液滴５００が存在している場合には観察が困難となる。【００３５】  これを解決する方法としては、隔膜保持部材１５９の幅Ｄｗの範囲内に液滴が試料６上にない必要があるが、一般的には隔膜保持部材１５９の幅Ｄｗは数ｍｍ〜数十ｍｍ角といった大きさなので（図３（ａ）に隔膜形状を図示）、多量な水分を多く含んだ含水試料でこのような状況をつくることは大変困難である。【００３６】  この問題を解決するために、図３（ｂ）で示したような部材を観察支援ユニット（以下、カバー）として用いる。例えば、図３（ｂ）で示されるカバー５０１は外径Ｄｏで内径Ｄｉの穴が開いた厚みｔのリング形状の部品である。カバーの本体部５０１ｂ直下の試料は観察できないが、穴部５０１ａ経由で試料が観察可能となっている。カバー５０１は試料上に直接載置される。カバー５０１が試料上に載置されたとき、カバー５０１の穴部５０１ａは試料を観察するための観察領域を形成し、カバー本体部５０１ｂは試料を蓋う部分となる。このカバーによって、試料と隔膜とは非接触の状態に保たれる。【００３７】  図４を用いて、カバー５０１の使い方を説明する。カバー５０１の本体部５０１ｂをピンセット等で持って、カバー５０１の���５０１ａの直下に観察したい試料部位６ａを持ってくる（図４（ａ））。次に、試料６上にカバー５０１を搭載する。試料６上に液滴５００があった場合、液滴５００はカバーの穴５０１ａの内部に広がる液滴５００ｂと、カバーの本体部５０１ｂと試料６との間に広がる液滴５００ａとに分かれる（図４（ｂ））。次に、液滴５００ｂは荷電粒子顕微鏡観察の妨げとなるため、液滴５００ｂを濾紙５０２等で除去する。または、空気圧をかけて液滴５００ｂを吹きとばしてもよい。こうすると、カバーの穴５０１ａで開口された部分の試料表面だけに液滴が存在しない状態を作ることができる（図４（ｃ））。一般的に含水試料は全ての水分を除去しようとすると試料が乾燥してしまうため観察に適さない。例えば、濾紙等で含水試料の表面の液滴を除去すると含水試料は乾燥しすぎてしまう。一方で、このようにカバー５０１を用いると、カバー５０１下には水分が残った状態で、観察したい領域だけの液滴を除去することが可能となり、乾燥を防止された状態で試料の荷電粒子顕微鏡観察が可能である。【００３８】  以上をまとめると、カバーの穴５０１ａが観察領域となり、カバー５０１の本体部５０１ｂが非観察領域となる。ここで観察領域とは、試料を観察する際に観察窓として使用される領域のことをいい、非観察領域とは、試料を蓋う部分であって観察目的対象物である試料が観察できない領域のことをいう。【００３９】  図３（ｂ）では穴部が一か所であるリング形状を例にしたが、本実施例の変形例として、例えばカバーの穴部５０１ａは一か所でなくてもよく、メッシュ形状のように穴部が複数あってもかまわない。また、シートの外形は円形でなくてもよく、シート状のカバーを２枚以上並べることによって、その隙間を観察領域５０１ａとしてもよい。この場合には複数のシートを組み合わせて一つのカバーを形成しているということもできる。このように複数の部材を組み合わせてカバーを形成する場合も含め、観察支援ユニットと称する。（光学顕微鏡の説明）  後述するように、荷電粒子顕微鏡にて観察したい領域は小さいので、カバーの穴５０１ａは隔膜の窓面積と同等か若干大きいぐらいの大きさであることが望ましい。そのため、観察したい試料部位６ａに正確にカバーの穴５０１ａをあわせるために、カバー５０１を試料６上へ搭載する作業は光学顕微鏡下で行うことが望ましい。【００４０】  図５に光学顕微鏡にてカバー５０１を配置する様子を示す。図５（ａ）が試料を光学顕微鏡に設置した直後の様子で、図５（ｂ）がカバー５０１を搭載して余分な液滴５０１ｂを除去した後の様子である。光学顕微鏡４０２は、光を集光可能な対物レンズ４１２と、光学顕微鏡の位置を駆動することが可能な位置駆動機構部４０６と土台４０７を有する。土台４０７は試料台５０６が搭載可能な試料配置部４０１を備える。試料配置部４０１に試料台５０６を設置した後で試料を試料台に搭載する。その後、光学顕微鏡で観察しながら、観察したい試料６ａにカバーの穴５０１ａが位置するようにカバー５０１を配置する。（接近の説明）  図６に荷電粒子顕微鏡装置の中にカバー５０１が搭載された試料６を設置した様子を図示する。最初は図６（ａ）のように観察したい試料部位６ａは隔膜１０の直下にないことがある。そのため、図中白矢印方向に試料を動かす必要がある。その際は、隔膜１０と試料６とが接触しないで十分離れている位置（距離ｈ１）で試料を図中横方向（荷電粒子線の光軸に垂直な平面内）に動かす。観察したい試料部位６ａが隔膜１０の直下に来た様子を図６（ｂ）に示す。その後、隔膜１０に試料６を接近させることによって、荷電粒子線が試料６に照射され、試料６から放出される二次電子や反射電子などの荷電粒子線やＸ線や発光などの放射線を検出することで顕微鏡画像を取得可能となる。【００４１】  カバー５０１の厚みtが既知であるので、カバー５０１は隔膜１０と試料６との距離を制限するために距離制限部材としての機能を持つ。荷電粒子線は物質内部の侵入深さ（または平均自由行程）が短い。一般的な荷電粒子線顕微鏡装置の荷電粒子線の加速電圧の場合には数μｍから１ｍｍ以下程度である。例えば、加速電圧１５ｋＶの電子線が大気圧中に照射された場合の平均自由行程（Mean Free Pass:MFP）は数十μｍ程度である。そこで、カバーの厚みを前記値（観察条件での荷電粒子線の平均自由工程）と同等かそれ以下にしておく。【００４２】                ＭＦＰ ≧ｔ                    ・・・式１  式１を満たすような厚さのカバーであれば、カバー５０１の下にある試料と隔膜１０が接触するよりも前に、荷電粒子線が試料表面に到達するようになる。つまり、カバー５０１と隔膜保持部材１５９に接触した状態では平均自由工程以下に隔膜１０に試料を接近させることができる。そのため、本発明におけるカバー５０１は安全に試料６と隔膜１０を接近させるといった目的でも使用することができる。なお、ここで、カバーの厚みとは、カバーの穴部周囲（少なくとも隔膜保持部材に対向する部分）の厚みのことであり、カバー全体の厚みである必要はない。【００４３】  また、もし試料が簡単に変形するような材質の場合、隔膜保持部材１５９とカバー５０１を接触した後に、さらに試料６と隔膜１０を近づけようと試料ステージ１５を動かすと、カバー５０１と試料ホルダの間に挟まれて試料６が変形することもある。そのような場合、隔膜１０と試料６接触する可能性もある。この時、カバーの穴部５０１から観察される観察したい試料部位６ａの位置が横方向に動くか、形状がつぶれるような動きを観察される。そのため、試料６を観察しているときに形状がつぶれるまたは広がるような動きが観察されたら、試料ステージを駆動するのを停止するなどすることで、隔膜１０と試料６とが接触することを防止することができる。【００４４】  なお、上記の理由からカバーの厚みｔは荷電粒子線の平均自由行程の長さと同等かそれ以下にする必要があるので非常に薄いため、カバー５０１はピンセットなどで操作する必要がある。この薄いカバーをピンセットにより正確に操作するためにも、図５で示したように光学顕微鏡下で実施することがより望ましい。(材料に関して)  また、本実施例におけるカバー５０１は試料６とは異種材料であることが望ましい。図６（ａ）を用いてカバー５０１と観察したい試料６との材料が異なる場合の効果について説明する。隔膜１０直下にカバーの穴５０１ａがない場合、操作者は荷電粒子顕微鏡内で隔膜直下にカバーの穴５０１ａが位置するように試料ステージを用いて調整する必要がある。ここで、カバー５０１と試料６とが異種材料の場合はカバー５０１と試料６とが異なるコントラストの顕微鏡画像となる。つまりカバー５０１の本体部は試料の主成分と異なる材料からなることが好ましい。より具体的には、カバー５０１と試料６とが異種材料の場合、一次荷電粒子線ＰＥ１がカバーの穴５０１ａを経由して試料６に照射して発生した二次的荷電粒子線５０６と、一次荷電粒子線ＰＥ２がカバー５０１に照射して発生した二次的荷電粒子線５０７では信号量が異なる。例えば、試料６が生体試料などの有機材料で、カバー５０１が金属材料の場合は、二次的荷電粒子線５０６よりも二次的荷電粒子線５０７のほうが多いため、荷電粒子顕微鏡画像はカバー５０１部のほうが明るく観察される。つまり、明るさの違いがわかる程度の距離（ｈ１）まで隔膜１０と試料６と接近させて、試料ステージ５を用いてＸＹ平面方向に動かすことで暗く観察される試料部分（つまりカバーの穴部５０１ａ）を探しやすくなる。ここでカバー５０１の本体部全体が試料と異種の材料からなる必要はなく、例えばカバーの穴部周辺部分だけが試料と異なる材料からできていてもよい。なお、カバーの穴部方向がわかるように、カバーの穴部方向を指示するための、異種材料でできたマーキングがあってもよい。あるいは、カバーの穴部方向を指示する加工などがカバーにされていてもよい。こうすることで、穴部が観察されない位置にある場合に、穴部を探すことが容易となる。【００４５】  例えば、動物の生体組織や植物組織材料、動植物を原料とした食品などの加工材料、水分を含むことが可能な有機材料またはソフトマテリアル、試料内に液体成分を含むまたは試料表面に液体成分が付着した状態の無機材料、ペースト、ゾル、ゲルなどの粘性が高い有機または無機材料などの場合には、カバー５０１は金属材料がよい。この場合、カバーの材料としては特に、アルミ、モリブデン、タングステン、白金、銅、鉄、SUSなどの金属がよい。反対に、試料が金属や半導体などの場合は、カバー部材５０１はプラスチックなどの有機材料とするのがよい。したがって、異なる材料からなる複数のカバーを用意し、観察対象とする試料によってカバーを使い分けるのがよい。なお、前述の通りカバー５０１の厚みｔは非常に薄いので、簡単に破損することなく柔軟性のある材料であることが好ましい。（各ステップの説明）  図７を用いて、本実施例の観察支援ユニットを用いて観察する手順について説明する。初めに、試料台５０６に試料６を搭載する。次のステップでは、試料台５０６が搭載可能で光学顕微鏡４０２に具備される台４０１に試料台５０６を搭載する。前記二つのステップの順番は反対でも構わない。次のステップでは、光学顕微鏡に具備される高さ調整機構４０６を用いて光学顕微鏡４０２の対物レンズ４１２の焦点位置４０８を試料６に合わせて観察を開始する。この状態は図５（ａ）に示されている。次のステップでは、光学顕微鏡にて観察したい試料部位６ａを見つける。この時に、光学顕微鏡に具備される図示しない試料ステージを用いてもよいし、ピンセット等で試料を動かしてもよいし、試料台５０６に具備される試料位置を変更する��とが可能な駆動機構を用いてもよい。なお、試料を試料台に搭載するステップを光学顕微鏡下で実施してもよい。最初から観察したい試料部位６ａが光学顕微鏡下で観察できるようにするために、試料台５０６上に図示しないマークが予めマーキングされていてもよい。次のステップでは、カバー５０１を観察したい試料６ａ上に配置する。このときに、カバー５０１の本体部５０１ｂをピンセット等で持って、カバー５０１の穴５０１ａの直下に観察したい試料部位６ａを配置するようにする。ここまでの一連の作業は光学顕微鏡をもちいておこなわれることが好ましい。次に、カバー穴５０１ａ部から露出している試料表面にある余分な液滴５００を濾紙等で除去する。この状態を図５（ｂ）に示す。【００４６】  この後に、試料台５０６ごと荷電粒子顕微鏡装置に配置して観察を開始する。次に、カバー部（カバー本体部）とカバー穴部から露出した試料部の荷電粒子顕微鏡画像におけるコントラスト（明るさ）の違いを使って穴部５０１ａを識別し、試料ステージを移動することで隔膜直下に穴部５０１ａを配置する。次に、カバーが搭載された状態の試料を、カバーの形状またはカバーの穴部５０１ａ部の位置が確認できる程度の距離（ｈ１）まで隔膜１０に近づけることによって、試料部位６ａを観察することができる。隔膜１０と試料６との距離を近づけるステップにおいて、カバー５０１と隔膜保持部材１５９を接触させてもよい。つまり、カバー５００と隔膜保持部材１５９との距離ｈ２をゼロにしてもよい。カバー５００の厚みをｔとすると、カバーの穴５０１ａよりも突出した試料部位の高さが厚みtよりも小さければ隔膜１０に試料が接触することはない。（接触認識手段）  隔膜１０と試料６との距離を近づけてカバー５０１と隔膜保持部材１５９が接触することを認識する手段として、前述の通り試料が簡単に変形するような材質の場合は、画像を見ながら試料と隔膜を近づけることで、カバー５０１と隔膜保持部材１５９が接触したときに試料が横方向に動くまたは形状が変化する様子が観察される。これによって、カバー５０１と隔膜保持部材１５９が接触したことを認識できる。コンピュータにより自動的に認識する場合には、取得される画像をリアルタイムにモニタリングし画像中の試料形状の変化を検知した場合にアラートをディスプレイに表示することも可能である。【００４７】  もし、試料が簡単に変形しない材質であれば、カバー５０１と隔膜保持部材１５９を接触させたあとは試料ステージ５にてＺ軸方向に動かすことができなくなることで接触を認識できる。または、カバー５０１が隔膜保持部材１５９を押すことによって隔膜１０が隔膜保持部材１５９ごと上下左右のいずれかに動くので、その様子を観察することでカバー５０１と隔膜保持部材１５９とが接触したことが認識できる。この場合にも上記の通り画像をモニタリングすることで、コンピュータにより自動的に認識することが可能である。(各サイズに関して)  以下では、各サイズに関しては、各部材が円形と仮定して説明しているが、円形でない場合にはそれぞれ対角線の長さまたは外接円の直径など、各部材の形状の大きさを代表する数値に読み替えればよい。例えば、以下の式や説明では直径や窓長と記載しているが、面積と読み替えることも可能である。【００４８】  まず、隔膜１０の窓長Ｄｍ（荷電粒子線が透過する部分を「窓」と称する）よりカバーの穴部５００ａの直径Ｄｉが小さいと視野が狭くなってしまうので、Ｄｉ≧Ｄｍが好ましい。ただし、隔膜１０の窓長Ｄｍよりもカバーの穴部５００ａの直径Ｄｉが大きすぎると除去しなければならない液滴５００が多くなるので、カバーの穴部５００ａの直径Ｄｉは隔膜１０の窓長Ｄｍより若干大きいぐらいがよい。少なくとも隔膜保持部材の長さＤｗより小さいことが好ましい。【００４９】  また、カバー５０１の外径Ｄｏ（すなわちカバー本体部の直径）が隔膜保持部材１５９の長さＤｗよりも小さいと、液滴５００がカバー５０１の外径より外側から隔膜保持部材１５９に接触する可能性があるので、カバー５０１の外径Ｄｏは隔膜保持部材１５９の長さＤｗより大きいことが望ましい。【００５０】  その結果、おおざっぱには以下式が成り立つのが望ましい。この様子を図８に示す。【００５１】  Ｄｏ＞Ｄｗ＞Ｄｉ≧Ｄｍ  ・・・式２  また、ピンセットでのカバー５００の操作をより簡単にするために、カバー５０１の外径Ｄｏは例えば数ｍｍ以上の大きさであることが望ましい。【００５２】  また、ピンセットでの操作性も考えて、カバー５０１にカバー５０１の本体部５０１ｂよりも硬いまたは厚い材料であるカバー保持用部材５０８がカバー５０１の外周に具備されていると、操作性向上のため好ましい。このカバー保持用部材５０８の厚みは隔膜１０へのカバー５０１の接近の際に邪魔になるようなサイズであってはならない。例えば、隔膜保持部材１５９を支持する固定部材１５５と隔膜１０との距離ｔ２よりも、カバー保持用部材５０８の厚みｔ１は薄いほうがのぞましい。【００５３】  ｔ１＞ｔ２  ・・・（式３）  なお、カバー保持用部材５０８はカバー本体部と別個に設けられた部品でなくてもよい。例えばカバー本体部の外周部がカバー本体部のカバー穴部周囲より厚いまたは硬い材料でできていてもよい。【００５４】  また、観察領域である穴部５０１ａの近傍の非観察領域５０１ｂ（カバー本体部）の厚みは少なくとも厚みtで一定である必要がある。こうすることで、隔膜１０と観察試料６との距離を一定に保ちながら観察を実施することが可能となる。
【実施例２】
【００５５】  実施例１で述べたとおり、観察試料として含水試料を観察するため、観察したい部位６ａ上に液滴が存在することも多い。このような場合で、濾紙等で観察したい試料部位６ａ上の水滴を除去することが難しい場合は、見たい部位の表面だけの水滴を蒸発させて観察することが望ましい。そこで、本実施例では観察したい試料部位６ａの水滴を乾燥させることが可能な装置及び方法について説明する。図９に、本実施例に用いられる荷電粒子顕微鏡を示す。【００５６】  図９に、本実施例の荷電粒子顕微鏡の全体構成図を示す。本実施例の荷電粒子顕微鏡では、荷電粒子光学鏡筒２、該荷電粒子光学鏡筒を装置設置面に対して支持する第１筐体（真空室）７、第１筐体７に挿入して使用される第２筐体（アタッチメント）１２１、制御系などによって構成される。【００５７】  本実施例の荷電粒子顕微鏡の場合、第２の空間の少なくとも一つの側面（第２筐体１２１の開放面）を蓋部材１２２で蓋うことができるようになっており、種々の機能が実現できる。以下ではそれについて説明する。【００５８】  本実施例の荷電粒子顕微鏡においては、試料が配置される空間１２を真空ポンプ１０３を用いて大気圧（約１０５Ｐａ）ないし約１０３Ｐａに設定された圧力よりも若干真空の減圧条件下にすることができる。荷電粒子光学鏡筒２の下端から放出された荷電粒子線は、高真空に維持された第１の空間１１を通って、図９に示す隔膜１０を通過し、更に、大気圧または所望の圧力状態やガス状態に維持された第２の空間１２に侵入する。第２の空間の雰囲気は大気圧または大気圧と同程度の圧力である。荷電粒子線は気体分子によって散乱されるため、平均自由行程は短くなる。つまり、隔膜１０と試料６の距離が大きいと荷電粒子線が試料まで届かなくなる。以上の理由から、本実施例の荷電粒子顕微鏡では、蓋部材１２２に真空配管１００の取り付け部を設けている。真空配管１００は連結部１０２により真空ポンプ１０３と連結されており、これにより第２の空間１２内を減圧することが可能となる。真空配管１００の途中には、ガス制御用バルブ１０１が配置されており、管内を排気するガス流量を制御できる。このため、ガス制御用バルブ１０１から下位制御部３７に信号線が伸びており、装置ユーザは、コンピュータ３５のモニタ上に表示される操作画面で、排気量を制御できる。また、ガス制御用バルブ１０１は手動にて操作して開閉してもよい。なお、図示した真空ポンプ１０３は、荷電粒子顕微鏡に備え付けられる場合もあれば、装置ユーザが事後的に取り付ける場合もある。【００５９】  このように本実施例では、試料が載置された空間を大気圧（約１０５Ｐａ）から約１０３Ｐａまでの任意の真空度に制御することができる。従来のいわゆる低真空走査電子顕微鏡では、電子線カラムと試料室が連通しているので、試料室の真空度を下げて大気圧に近い圧力とすると電子線カラムの中の圧力も連動して変化してしまい、大気圧（約１０５Ｐａ）〜約１０３Ｐａの圧力に試料室を制御することは困難であった。本実施例によれば、第２の空間と第１の空間を薄膜により隔離しているので、第２の筐体１２１および蓋部材１２２に囲まれた第２の空間の中の雰囲気の圧力およびガス種は自由��制御することができる。したがって、これまで制御することが難しかった大気圧（約１０５Ｐａ）〜約１０３Ｐａの圧力に試料室を制御することができる。さらに、大気圧（約１０５Ｐａ）での観察だけでなく、その近傍の圧力に連続的に変化させて試料の状態を観察することが可能となる。【００６０】  次に、試料６の位置調整方法について説明する。本実施例の荷電粒子顕微鏡は、観察視野の移動手段として試料ステージ５を備えている。試料ステージ５には、面内方向へのＸＹ駆動機構および高さ方向へのＺ軸駆動機構を備えている。蓋部材１２２には試料ステージ５を支持する底板となる支持板１０７が取り付けられており、試料ステージ５は支持板１０７に固定されている。支持板１０７は、蓋部材１２２の第２筐体１２１への対向面に向けて第２筐体１２１の内部に向かって延伸するよう取り付けられている。Ｚ軸駆動機構およびＸＹ駆動機構からはそれぞれ支軸が伸びており、各々操作つまみ１０８および操作つまみ１０９と繋がっている。装置ユーザは、これらの操作つまみ１０８および１０９を操作することにより、試料６の第２筐体１２１内での位置を調整する。【００６１】  次に、試料６の交換のための機構について説明する。本実施例の荷電粒子顕微鏡は、第１筐体７の底面および蓋部材１２２の下面に、蓋部材用支持部材１９、底板２０をそれぞれ備える。蓋部材１２２は第２筐体１２１に真空封止部材１２５を介して取り外し可能に固定される。一方、蓋部材用支持部材１９も底板２０に対して取り外し可能に固定されており、図９に示すように、蓋部材１２２および蓋部材用支持部材１９を丸ごと第２筐体１２１から取り外すことが可能である。なお、本図では電気配線などは省略している。【００６２】  底板２０には、取り外しの際にガイドとして使用される図示しない支柱１８を備える。通常の観察時の状態では、支柱１８は底板２０に設けられた格納部に格納されており、取り外しの際に蓋部材１２２の引出し方向に延伸するように構成される。同時に、支柱１８は蓋部材用支持部材１９に固定されており、蓋部材１２２を第２筐体１２１から取り外した際に、蓋部材１２２と荷電粒子顕微鏡本体とが完全には分離しないようになっている。これにより、試料ステージ５または試料６の落下を防止することができる。【００６３】  第２筐体１２１内に試料を搬入する場合には、まず試料ステージ５のＺ軸操作つまみを回して試料６を隔膜１０から遠ざける。その後、第２筐体内部が減圧状態または極端な与圧状態になっていないことを確認後、蓋部材１２２を装置本体とは反対側に引き出す。これにより試料６を交換可能な状態となる。試料交換後は、蓋部材１２２を第２筐体１２１内に押し込み、図示しない締結部材にて蓋部材１２２を合わせ部１３２に固定後、必要に応じて置換ガスを導入する。以上の操作は、電子光学鏡筒２内部の光学レンズ２に高電圧を印加している状態や荷電粒子線源８から電子線が放出している状態の時にも実行することができる。そのため、本実施例の荷電粒子顕微鏡は、試料交換後、迅速に観察を開始することができる。【００６４】  以上説明したように、本実施例では、試料ステージ５およびその操作つまみ１０８、１０９、真空配管１００、圧力���整弁１０４が全て蓋部材１２２に集約して取り付けられている。従って装置ユーザは、上記操作つまみ１０８、１０９の操作、試料の交換作業、または真空配管１００、圧力調整弁１０４の脱着作業を第１筐体の同じ面に対して行うことができる。よって、上記構成物が試料室の他の面にバラバラに取り付けられている構成の荷電粒子顕微鏡に比べて、大気圧下での観察用の状態と高真空下での観察用の状態とを切替える際の操作性が非常に向上している。【００６５】  ここで図１０（ａ）で示したように観察したい部位６ａに水滴５００ｂが付いている状態を考える。この場合は、実施例１で説明したようにカバー５０１では水滴を除去できないため、濾紙５０２を観察部位６ａに接触させて水滴を除去することが考えられる。しかし、濾紙を試料に観察したい部位６ａに接触させたくない場合もある。その場合、水滴を除去するために、図９の装置を用いるとよい。つまり、試料６を隔膜１０の近傍にある状態で第二の空間１２を真空ポンプ１０３で真空引きする。ここで真空引きとは１気圧より若干減圧の状態のことをいう。【００６６】  図１１に、実際に水滴が蒸発する圧力と時間の関係を取得した実験例を示す。アルミ台上に水を一滴（１０μＬ）をのせて、それがどの程度の時間で蒸発するかを室温条件で実験した結果である。１気圧(１００ｋＰａ)で１０μＬの水滴が蒸発するのに要した時間は約１２０分であるが、０．３気圧（３０ｋＰａ）では１０μＬの水滴が蒸発するのに要した時間は約２０ｍｉｎである。このように、大気圧（１気圧）よりも減圧のほうが、水滴が蒸発する時間は短い。また、０．１気圧（１０ｋＰａ）以下では水滴が急激に蒸発するか、水滴が蒸発する気化熱により凍結するなどの現象がみられる。これは室温では飽和上気圧が０．０３気圧（３０００Ｐａ）程度であるため非常に早いスピードで蒸発がすすんだためである。このため、０．１気圧（１０ｋＰａ）以上で水滴を蒸発させるのが望ましい。上記のように１．０気圧以下の状態にすることが可能な図９の装置を用いてカバーが搭載された状態の試料が載置された空間を真空引きすると、試料に直接接触せずに、カバー穴部に露出している試料６ａ表面の液滴を図１０（ｂ）で示したように除去することが可能である。【００６７】  一方で、１気圧以下の減圧下の状態では水分の蒸発スピードが速いため、試料のサイズや種類によっては試料内部の水分やカバー５０１下の液滴５００ａも無くなってしまうこともある。この状態を図１０（ｃ）に示す。この問題を解決するために、図１２（ａ）のようにカバー５０１に試料６からの水分蒸発を制限させる封止部材５０３を設ける。封止部材５０３を設けると、カバー５０１下面にある液滴５００ａの蒸発が制限され、カバー５０１の穴部からのみ蒸発が進むため、試料６ａに付着している水滴が最初に蒸発する（図１２（ｂ））。一方で、空間１３は封止部材５０３によって空間１２と直接的にはつながっていないため、蒸発速度は遅い。その結果、観察したい試料部位６ａの表面に水滴がついていない状態で且つ試料６全体が乾燥や収縮しない状態で観察したい部位を観察することができる。【００６８】  この封止部材５０３はカバー５０１と試料台５０６とに接触または密着して、カバー本体部と試料台との間の空間を封止する。これにより試料とその周辺の水滴を内部に格納する。封止部材５０３は両面テープのようにカバー５０１と試料台５０６と封止部材５０３とが密着させることが可能な接着性の材料であってもよい。または、図１３（ａ）に示すように、例えば接着剤のように固形化する部材を使ってもよい。または、図示されないねじやクランプなどで試料台とカバー５０１を固定する部位を有してもよい。図１２及び図１３（ａ）では図中試料台５０６の上面と封止部材５０３が接触しているが、図１３（ｂ）のように試料台５０６の側面または下面と接触させてもよい。こうすると、より空間１３と空間１２の隔離が可能となる。【００６９】  なお、空間１２と空間１３の隔離をしすぎて、空間１２と空間１３に圧力差が生じると、カバー５０１の穴部からのみ水分が蒸発することになる。その結果、観察したい部位６ａの水分５００ｂが常に残るといった問題が起こる。この空間１２と空間１３に圧力差が発生することを防ぐために、封止部材５０３には、図１３（ｂ）のように通気口５０７を設けてもよい。通気口５０７はカバー５０１の穴部５０１ａよりも面積またはコンダクタンスが小さい。通気口５０７は複数あってもよいし、カバー５０１と封止部材５０３と試料台５０６との間に通気口５０７を設けてもよい。すなわち通気口５０７はカバー５０１と試料台５０６と封止部材５０３で囲まれた空間から、外部に連通するカバーの穴部以外の孔であればよい。【００７０】  図１４のように封止部材５０４はカバー５０１よりも上側にあってもよい。ただし、この場合は、カバー５０１よりも上側に出ている部分が隔膜１０と試料６とを接近させる時に隔膜保持部材１５９や土台１５５に接触しないことが必要である。例えば、図で示したように隔膜１０を保持している隔膜保持部材１５９が土台１５５に具備されている場合、カバー５０１より上側に出ている部分の厚みｔ１は隔膜保持部材１５９の厚みｔ０よりも薄いことが必要である。【００７１】  ｔ０≧ｔ１    ・・・式４  なお、カバー５０１は電子線の平均自由工程よりも短い厚みでできているため、カバー５０１が図１５のように試料台５０６側にたわんでいてもよい（図中５０７部）。この場合カバー５０１上面が封止部５０４の上面と同等か上側に配置することができるので、この場合、式４を必ずしも満たす必要はない。【００７２】  図１６を用いて本実施例における封止部５０３または５０４を用いる方法について説明する。初めに、試料台５０６に試料６を搭載する。次のステップでは、試料台５０６が搭載可能で光学顕微鏡４０２に具備される台４０１に試料台５０６を搭載する。前記二つのステップの順番は反対でも構わない。次のステップでは、光学顕微鏡に具備される高さ調整機構４０６を用いて光学顕微鏡４０２の対物レンズ４１２の焦点位置４０８を試料６の表面に合わせて観察を開始する。次のステップでは、光学顕微鏡にて観察したい試料部位６ａを見つける。次のステップでは、カバー５０１を観察したい試料６ａ上に配置する。ここで必要に応じて、カバー穴５０１ａ部にある余分な液滴５０１ｂを濾紙等で除去する。次のステップでは、封止部材５０３または５０４を取���付ける。なお、封止部材５０３または５０４は最初から試料台やカバー５０１に取り付けられていてもかまわない。この後のステップは図７と同様である。【００７３】  なお、本発明は上記した実施例に限定されるものではなく、様々な変形例が含まれる。例えば、上記した実施例は本発明を分かりやすく説明するために詳細に説明したものであり、必ずしも説明した全ての構成を備えるものに限定されるものではない。また、ある実施例の構成の一部を他の実施例の構成に置き換えることが可能であり、また、ある実施例の構成に他の実施例の構成を加えることも可能である。また、各実施例の構成の一部について、他の構成の追加・削除・置換をすることが可能である。また、上記の各構成、機能、処理部、処理手段等は、それらの一部又は全部を、例えば集積回路で設計する等によりハードウェアで実現してもよい。また、上記の各構成、機能等は、プロセッサがそれぞれの機能を実現するプログラムを解釈し、実行することによりソフトウェアで実現してもよい。【００７４】  各機能を実現するプログラム、テーブル、ファイル等の情報は、メモリや、ハードディスク、ＳＳＤ（Solid State Drive）等の記録装置、または、ＩＣカード、ＳＤカード、光ディスク等の記録媒体に置くことができる。【００７５】  また、制御線や情報線は説明上必要と考えられるものを示しており、製品上必ずしも全ての制御線や情報線を示しているとは限らない。実際には殆ど全ての構成が相互に接続されていると考えてもよい。
【符号の説明】
【００７６】１：光学レンズ、２：荷電粒子光学鏡筒、３：検出器、４：真空ポンプ、５：試料ステージ、６：試料、７：筐体、８：荷電粒子源、９：土台、１０：隔膜、１１：第１の空間、１２：第２の空間、１３：空間、１４：リークバルブ、１５：開放面、１６：真空配管、３５：コンピュータ、３６：上位制御部、３７：下位制御部、４３，４４：通信線、５２：試料台、５３：荷電粒子線顕微鏡、５４：荷電粒子線の光軸、５６：接触防止部材、６０：導入ポート、６１：ニードルバルブ、６２：オリフィス、６３：ニードルバルブ、６４：バルブ、１００：真空配管、１０１：ガス制御用バルブ、１０２：連結部、１０３：真空ポンプ、１０４：圧力調整弁、１０７：支持板、１０８，１０９：操作つまみ、１２１：第２筐体、１２２：蓋部材、１２３，１２４，１２６：真空封止部材、１３１：本体部、１３２：合わせ部、１５４：信号増幅器、１５５固定部材、１５９：隔膜保持部材、４０１：位置決め構造、４０２：光学顕微鏡、４０６：光学顕微鏡位置駆動機構、４０７：土台、４０８:焦点位置、４１２：対物レンズ、５００：液滴、５００ａ：カバー下の液体、５０１：カバー、５０１ａ：カバー穴部、５０１ｂ：カバー本体部、５０２：濾紙、５０３：封止部材、５０４：封止部材、５０５：カバーと試料の接触部、５０６：試料台、５０７：たわんでいる部位、５０８：カバー保持用部材
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【手続補正書】
【提出日】平成30年1月17日(2018.1.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒の内部空間から隔膜によって隔離された非真空空間に配置された試料に対して荷電粒子線を照射して観察するための観察支援ユニットであって、
前記試料が観察される観察領域を形成する穴部と前記試料を蓋う本体部とを備え、
当該観察支援ユニットは前記試料と前記隔膜の間であって、前記試料上に直接載置されることを特徴とする観察支援ユニット。 
【請求項２】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
当該観察支援ユニットは、前記隔膜と前記試料とを非接触の状態に保つことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項３】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記穴部の大きさは、前記隔膜の荷電粒子線が透過する部分である窓部の大きさ以上であることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項４】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記本体部の大きさは、前記隔膜を保持する隔膜保持部材の大きさより大きいことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項５】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記穴部は前記隔膜を保持する隔膜保持部材の大きさより小さいことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項６】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記本体部の前記穴部周囲の厚みが一定であることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項７】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記本体部の前記穴部周囲の厚みが、前記荷電粒子線による観察条件における当該荷電粒子線の平均自由工程よりも小さいことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項８】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
当該観察支援ユニットの外周部が、前記本体部の前記穴部周囲より厚いまたは硬いことを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項９】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記本体部と前記試料が載置される試料台との間の空間を封止する封止部材を備えることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項１０】
請求項９に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記封止部材によって封止された前記本体部と前記試料が載置される試料台との間の空間は、前記穴部より面積が小さい孔によって当該空間の外部と連通されていることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項１１】
請求項１に記載の観察支援ユニットにおいて、
前記本体部の少なくとも一部は前記試料の主成分とは異なる材料からなることを特徴とする観察支援ユニット。
【請求項１２】
荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒の内部空間から隔膜によって隔離された非真空空間に配置された試料に対して荷電粒子線を照射して観察する試料観察方法であって、
前記試料上に、前記試料が観察される観察領域を形成する穴部と前記試料を蓋う本体部とを備えた観察支援ユニットを直接搭載するステップと、
前記観察支援ユニットが搭載された状態の試料を前記隔膜に接近させるステップと、を有することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の試料観察方法において、
前記隔膜と前記試料とは非接触の状態に保たれることを特徴とする試料観察方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の試料観察方法において、
光学顕微鏡を用いて、前記観察支援ユニットの穴部を前記試料上の観察したい部位に位置合わせするステップを有することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１５】
請求項１２に記載の試料観察方法において、
前記穴部から露出した試料部と前記本体部の荷電粒子顕微鏡画像における明るさの違いを識別して前記試料が載置された試料ステージを移動させることによって、前記穴部を前記隔膜の直下に配置するステップを有することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１６】
請求項１２に記載の試料観察方法において、
前記本体部と前記試料が載置される試料台との間の空間を封止することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１７】
請求項１２に記載の試料観察方法において、
前記観察支援ユニットが搭載された状態において前記穴部に露出している前記試料の表面に存在する液滴を除去することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１８】
請求項１７に記載の試料観察方法において、
前記観察支援ユニットが搭載された状態の試料が載置された空間を真空引きすることにより、前記穴部に露出している前記試料の表面に存在する液滴を除去することを特徴とする試料観察方法。
【請求項１９】
荷電粒子線を発生する荷電粒子光学鏡筒の内部空間と試料が配置される空間とを隔離し、前記荷電粒子線を透過または通過させる隔膜と、
前記試料が載置される試料台と、
前記試料が観察される観察領域を形成する穴部と前記試料を蓋う本体部とを有する観察支援ユニットと、を有し、
前記試料台と前記本体部との間には、液体が保持されることを特徴とする荷電粒子線装置。
【請求項２０】
請求項１９に記載の荷電粒子線装置において、
前記穴部は前記隔膜を保持する隔膜保持部材の大きさより小さく、
前記本体部の前記穴部周囲の厚みが、前記荷電粒子線による観察条件における当該荷電粒子線の平均自由工程よりも小さく、
当該観察支援ユニットの外周部が、前記本体部の前記穴部周囲より厚いまたは硬いことを特徴とする荷電粒子線装置。
【請求項２１】
請求項２０に記載の荷電粒子線装置において、
前記本体部と前記試料台との間の空間を封止する封止部材を備え、
前記封止部材によって封止された前記本体部と前記試料台との間の空間は、前記穴部より面積が小さい孔によって当該空間の外部と連通されていることを特徴とする荷電粒子線装置。
【国際調査報告】
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