(57)【要約】      （修正有）【課題】細胞培養の全自動化が実現し、細胞培養の効率が高められるロボットアーム全自動細胞培養システムを提供する。【解決手段】選別ユニット１と、培養ユニット２と、遠心トランスフェクションユニット３と、収得ユニット４と、を含み、選別ユニットは、生血液に対してＴ細胞選別を行い、培養ユニットは、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行い、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行い、遠心トランスフェクションユニットは、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行い、収得ユニットは、培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得する。システムは、細胞の選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットに移転する移転ユニット５をさらに含む。【選択図】図５
0003231664.tif 000002
【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
選別ユニットと、培養ユニットと、遠心トランスフェクションユニットと、収得ユニットと、を含み、
前記選別ユニットは、生血液に対してＴ細胞選別を行うのに用い、
前記培養ユニットは、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行い、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うのに用い、
前記遠心トランスフェクションユニットは、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うのに用い、
前記収得ユニットは、培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得するのに用いることを特徴とするロボットアーム全自動細胞培養システム。
【請求項２】
前記システムは、細胞を選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットに移転する移転ユニットをさらに含み、移転ユニットは、６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと、ジグと、防塵リニアガイドと、を含み、ジグは前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと繋ぎ、前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットは前記防塵リニアガイドの上に設置することを特徴とする請求項１に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【請求項３】
前記培養ユニットはＣＯ２培養箱と、培養バッグ保存モジュールと、を含むことを特徴とする請求項２に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【請求項４】
前記遠心トランスフェクションユニットは遠心分離機を含むことを特徴とする請求項３に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【請求項５】
前記収得ユニットは、検出モジュールと、排出モジュールと、廃棄物保存モジュールと、を含み、
前記検出モジュールは、収得した細胞に対して基本品質データの収集と検出に用い、
前記排出モジュールは、完成品の排出に用い、
前記廃棄物保存モジュールは、使用済みの消耗品及び医薬品を保存するのに用いることを特徴とする請求項４に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【請求項６】
前記システムは、環境制御ユニットをさらに含み、前記環境制御ユニットは、選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットがＧＭＰ準拠無菌環境に置かれることを制御するのに用いることを特徴とする請求項５に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本開示は、出願番号が２０１８１０６６６３８５.３であり、出願日が２０１８年６月２６日である中国出願特許を基に提出するものであり、当該中国特許出願の優先権を主張し、当該中国特許出願の全ての内容は、参考のため本考案に援用する。
【０００２】
（技術分野）
本考案は細胞培養の方法に関し、もっと具体的にはロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法及びそのシステムに関する。
【背景技術】
【０００３】
細胞療法はまさに将来の医学革命をリードしている。細胞療法はタンパク質治療薬、化学薬品、医療機器に次いで４番目に大きな医療方法となっている。細胞治療において、細胞培養プロセスは細胞治療を支える基盤となっているが、現在の細胞プロセスにはまだ以下の欠点がある。
【０００４】
市場において従来の手動半自動化装置は、全生産工程における局部工程のステップのためのものだけでなく、同じ期間に１人の患者のためにしか生産できず、工業化された細胞生産規模の達成及びコスト低減による利益に限度がある。従来の手作業による細胞培養法は、効率が低く、汚染の可能性が高く、エラー率が高く、品質を監視するのが難しいなどの不都合があり、作業者の経験、技術、習慣が異なるため、培養細胞の状態は一致性がなく、培養過程に再現性、安定性、均一性を失わせ、よって、細胞の品質に影響を与える。現在最も信頼される方法は、人口培養の代わりに自動化システムを使用することであり、これは現在の業界のトレンドとなっている。巨大な市場容量及び精密医療ニーズの多様性を満たせるため、細胞用途の需要が爆発的な成長が遂げていると同時に、細胞の生産製造効率の改善、生産製造コストの効率的な削減、統一した生産製造の品質標準などに対してより厳しい要求が提示されている。
【考案の概要】
【考案が解決しようとする課題】
【０００５】
現在のところ、市場に出回っている一部の自動単一装置は細胞培養プロセスの一段階又は一操作しかできず、全体の生産プロセスを直列に接続するのは依然として人員に頼り、完全な自動化を実現できない。そのうえ、現在のところ、細胞培養の操作環境は通常Ｃレベルバックグランドにおける局部開放型Ａレベル、またはＢレベルバックグランドにおける局部開放型Ａレベルである。この伝統的な設計はＧＭＰ規格上に多くの欠点があり、且つ工場の機材設備の投資、後期のメンテナンス、どちらもコストが高く、細胞治療のコストが高くて下がらない原因にもなる。
【０００６】
従って、細胞培養の全自動化を実現するために新しい細胞培養の方法を設計する必要があり、さらに、細胞のバッチを培養する過程において、別の細胞のバッチを入り混じって培養することができ、細胞培養の効率が高められ、製造コストも節約される。
【０００７】
本考案の目的は、従来技術の欠陥を克服し、ロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法及びそのシステムを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を実現するために、下記のロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法という技術案を採用する。
前記方法は、
生血液を収得するステップと、
生血液に対してＴ細胞選別を行うステップと、
選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行うステップと、
増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うステップと、
ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うステップと、
増幅培養及び再増幅培養の間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行うステップと、
培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得するステップと、を含む。
【０００９】
さらなる技術案では、増幅培養及び再増幅培養の間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行うステップは、
液体貯蔵タンクを滅菌するステップと、
別のバッチのＴ細胞に対して培養処理を行うステップと、を含む。
【００１０】
そのさらなる解決方式は、別のバッチのＴ細胞に対して培養処理を行うステップは、Ｔ細胞選別を行うステップ、及び／又は、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行うステップ、及び／又は、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うステップ、及び／又は、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うステップを含む。
【００１１】
そのさらなる解決方式は、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うステップは、
空の包装バッグにウイルスを入れて数時間培養するステップと、
血液を包装バッグ内に移して数時間培養するステップと、
包装バッグの中身を洗い、そして新しい培養バッグの中に移すステップと、を含む。
【００１２】
本考案は、選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットを含むロボットアームに基づく全自動細胞培養のシステムをさらに提供し、
前記選別ユニットは、生血液に対してＴ細胞選別を行うのに用い、
前記培養ユニットは、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行い、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うのに用い、
前記遠心トランスフェクションユニットは、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うのに用い、
前記収得ユニットは、培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得するのに用いる。
【００１３】
そのさらなる技術案では、前記システムは細胞を選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットに移転する移転ユニットをさらに含み、移転ユニットは６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと、ジグと、防塵リニアガイドと、を含み、前記ジグは前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと繋ぎ、前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットは前記防塵リニアガイドの上に設置する。
【００１４】
そのさらなる技術案では、前記培養ユニットはＣＯ２培養箱と、培養バッグ保存モジュールと、を含む。
【００１５】
そのさらなる技術案では、前記遠心トランスフェクションユニットは遠心分離機を含む。
【００１６】
そのさらなる技術案では、前記収得ユニットは検出モジュール、排出モジュール及び廃棄物保存モジュールを含み、
前記検出モジュールは、収得した細胞に対して基本品質データの採集と検出に用い、
前記排出モジュールは、完成品の排出に用い、
前記廃棄物保存モジュールは、使用済みの消耗品及び医薬品を保存するのに用いる。
【００１７】
そのさらなる技術案では、前記システムはさらに環境制御ユニットを含むことである。
前記環境制御ユニットは、ＧＭＰの準拠無菌環境において選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットを制御に用いる。
【考案の効果】
【００１８】
本考案と従来の技術を比較した有益な効果は、本考案のロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法が、ロボットアームを利用して細胞培養の様々な段階で細胞を操作し、増幅培養及び再増幅培養の期間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行い、かつ細胞のバッチを培養する過程において、別の細胞のバッチを入り混じって培養することができ、細胞培養の効率を高め、製造コストも節約される。そして遠心トランスフェクションの利用及び培養後の細胞の収集も自動的に行われ、細胞培養の全自動化が実現し、細胞培養の効率が高められる。
【００１９】
以下は図面と具体的な実施例を用いて本考案をさらに説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本考案の具体的な実施例によるロボットアームに基づく全自動細胞培養方法のフローチャート１である。
【図２】本考案の具体的な実施例によるロボットアームに基づく全自動細胞培養方法のフローチャート２である。
【図３】本考案の具体的な実施例による増幅培養及び再増幅培養の期間に、別のバッチＴ細胞に対して処理を行う具体的なフローチャートである。
【図４】本考案の具体的な実施例による増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行う具体的なフローチャートである。
【図５】本考案の具体的な実施例によるロボットアームに基づく全自動細胞培養システムのブロック図である。
【図６】本考案の具体的な実施例による収得ユニットのブロック図である。
【考案を実施するための形態】
【００２１】
本考案の技術内容をより完全に理解するために、具体的な実施例に併せて本考案の技術解決方式をさらに説明するが、それに限定されない。
【００２２】
図１〜６に示された具体的な実施例が示すように、本実施例が提供するロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法は、赤血球細胞などの様々な細胞培養に適用でき、細胞培養の全自動化が実現でき、かつ１つの細胞を培養する過程において、別の細胞を入り混じって培養することができ、細胞培養の効率を高め、製造コストも節約される。
【００２３】
図１に示すように、本実施例がロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法を提供した。この方法は、以下のステップを含む。
Ｓ１では、生血液収得する。
Ｓ２では、生血液に対してＴ細胞選別を行う。
Ｓ３では、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行う。
Ｓ４では、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行う。
Ｓ５では、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行う。
Ｓ６では、増幅培養及び再増幅培養の間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行う。
Ｓ７では、培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得する。
【００２４】
上記Ｓ６からＳ７までのステップは、具体的にはロボットアームによって生血液及び細胞を各段階において移転される。
【００２５】
上記Ｓ１ステップでは、具体的には細胞を培養するのに必要な生血液、例えば患者の生血液などを収得する。
【００２６】
上記Ｓ２ステップでは、生血液に対してＴ細胞選別を行う。具体的には密度勾配遠心分離によりバルク細胞を分離し、分離した細胞を洗浄し、洗浄した細胞をサンプリングしてカウントし、ＯＫＴ３を加えて密度を調整し、細胞に接種し、細胞の選別を完了する。
【００２７】
さらに、いくつかの実施例の中、上記Ｓ４ステップでは、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うステップは具体的に以下のステップを含む。
Ｓ４１では、空の包装バッグにウイルスを入れて数時間培養する。
Ｓ４２では、血液を包装バッグ内に移して数時間培養する。
Ｓ４３では、包装バッグの中身を洗い、そして新しい培養バッグの中に移す。
【００２８】
上記Ｓ３からＳ４までのステップでは、接種した細胞に対してサンプリングして数と生存率を計算し、写真を撮って保存し、量に応じてそれぞれパッケージングし、IL-２と培地を加え、培養製造中の細胞に対して実験する、ことが必要である。
【００２９】
上記Ｓ６ステップでは、増幅培養及び再増幅培養の間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行うステップは、具体的に以下のステップを含む。
Ｓ６１では、液体貯蔵タンクを滅菌する。
Ｓ６２では、別のバッチのＴ細胞に対して培養処理を行う。
【００３０】
液体貯蔵タンクを２つ独立した空間に設置するか、或いは２つの機能が全く同じ液体貯蔵タンクを設置する。２つのタンクは独立しており、お互いに干渉することなく、単独で滅菌することができ、異なるバッチ細胞培養間の素早く切り替えができ、バッチ間の不干渉と相互汚染を確保される。よって、複数のバッチ及び複数の患者細胞の同時培養が実現でき、ＧＭＰ準拠の大前提の下で生産効率が大幅に高められ、コストが低減される。
【００３１】
上記Ｓ６２ステップでは、別のバッチのＴ細胞に対して培養処理ステップは、Ｔ細胞に対して選別を行い、及び／又は、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行い、及び／又は、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行い、及び／又は、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うことを含む。
【００３２】
図２に示すように、Ｓ６２ステップを行った後、ロボットアームの助けを借りて該バッチのＴ細胞を次のステップの培養環境へ輸送することによって迅速な培養を行い、つまりどのバッチであっても上記Ｓ１ステップからＳ７ステップまでの培養工程を完成しなければならない。違いは、現在の細胞はどのバッチの細胞増幅培養それとも再増幅培養過程中に入り混じっているかにある。
【００３３】
上記Ｓ７ステップでは、具体的には新しい培養バック内の細胞を収得し、細胞を洗浄し、洗浄後の細胞をサンプリングしてカウントし、カウントした細胞に対して出荷試験を行い、出荷試験に合格した細胞を冷凍保存及びサンプリング管内に保存する、ことである。
【００３４】
自由度の高いロボット（ロボットアーム）に基づいて設計され、万能な細胞調製／品質検査装置を統合し、ロボット（ロボットアーム）は人のように様々な細胞培養の工程を操作し、細胞の分離選別、感染、液体操作、培養、収集、冷凍保存、包装などの工程を完成させると同時に、生産過程における品質検出モジュール４１を組合せ、関連する中央管理項目の検出を自動的に完成させる。環境制御モジュールを統合し、各コンパートメントが独立密封し、背景環境と完全に隔離したＡレベル空間が形成され、装置が最低のグリーンレベルであるＤ級環境の中に設置運行できる。この方法に対応するシステムは、病院、診療所、生物サーパス会社、製薬会社の工場に柔軟に設置することができ、環境への適応性が高い。このシステムはまた、異なる生産工程の滅菌要件を満たすために空間滅菌システムを統合し、滅菌工程は繰り返し検証され、ＧＭＰ要件を満たすことができる。
【００３５】
ロボットアームは、細胞を各培養過程において自動的に操作し、培養細胞の自動化が実現する。装置の調達、施設の建設及び消耗資材の調達などの費用が伝統的な手作業方法より高くない前提の下、運営コストが大幅に削減される。製造生産過程における人的要因及び環境要因による干渉を排除し、細胞製造工程の安定性と再現性を改善し、製品品質の均一性と安定性を効果的に高められる。人的ミスを効果的に回避し、人員交代による核心的な製造知的財産権の漏洩リスクを低減し、繰り返して行われる人員訓練による高いコストが大幅に低減される。細胞培養過程における増幅培養ステップを利用して、別のバッチの細胞培養を入り混じって、複数バッチの同時製造ができ、細胞製造の効率を大幅に高め、製造コストを節約し、それにより、細胞治療の促進及び普及を加速し、多くの患者に利益をもたらす。
【００３６】
上記ロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法は、ロボットアームを利用して細胞培養の様々な段階で細胞を操作し、増幅培養及び再増幅培養の期間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行い、かつ細胞のバッチを培養する過程において、別の細胞のバッチを入り混じって培養することができ、細胞培養の効率を高め、製造コストも節約される。そして遠心トランスフェクションの利用及び培養後の細胞の収集も自動的に行われ、細胞培養の全自動化が実現し、細胞培養の効率が高められる。
【００３７】
図５に示すように、本実施例はロボットアームに基づく全自動細胞培養システムをさらに提供し、前記ロボットアームに基づく全自動細胞培養システムは、選別ユニット１と、培養ユニット２と、遠心トランスフェクションユニット３と、収得ユニット４と、を含む。
【００３８】
前記選別ユニット１は、生血液に対してＴ細胞選別を行うのに用いる。
前記培養ユニット２は、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行い、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うのに用いる。
前記遠心トランスフェクションユニット３は、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うのに用いる。
前記収得ユニット４は、培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得するのに用いる。
【００３９】
上記システムは、細胞を選別ユニット１、培養ユニット２、遠心トランスフェクションユニット３及び収得ユニット４に移転する移転ユニット５をさらに含む。移転ユニット５は、６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと、ジグと、防塵リニアガイドと、を含み、前記ジグは前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと繋ぎ、前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットは前記防塵リニアガイドの上に設置する。
【００４０】
該移転ユニット５は、患者細胞のサンプルや製剤の消耗資材などが異なる作動モジュール間の操作を行い、そして液体を加えるなどの工程にも参加する。
【００４１】
自由度の高いロボット（ロボットアーム）に基づいて設計され、万能な細胞調製／品質検査装置を統合して、ロボット（ロボットアーム）は人のように様々な細胞培養の工程を操作し、細胞の分離選別、感染、液体操作、培養、収集、冷凍保存、包装などの工程を完成させると同時に、生産過程における品質検出モジュール４１を組合せ、関連する中央管理項目の検出を自動的に完成させる。また、環境制御モジュールを統合し、各コンパートメントが独立密封し、背景環境と完全に隔離したＡレベル空間が形成され、装置が最低のグリーンレベルであるＤ級環境の中に設置運行できる。この方法に対応するシステムは、病院、診療所、生物サーパス会社、製薬会社の工場に柔軟に設置することができ、環境への適応性が高い。このシステムはまた、異なる生産工程の滅菌要件を満たすために空間滅菌システムを統合し、滅菌工程は繰り返し検証され、ＧＭＰ要件を満たすことができる。
【００４２】
ロボットアームは、細胞を各培養過程において自動的に操作し、培養細胞の自動化が実現する。装置の調達、施設の建設及び消耗資材の調達などの費用が伝統的な手作業方法より高くない前提の下、運営コストが大幅に削減される。製造生産過程における人的要因及び環境要因による干渉を排除し、細胞製造工程の安定性と再現性を改善し、製品品質の均一性と安定性を効果的に高められる。人的ミスを効果的に回避し、人員交代による核心的な製造知的財産権の漏洩リスクを低減し、繰り返して行われる人員訓練による高いコストが大幅に低減される。細胞培養過程における増幅培養ステップを利用して，別のバッチの細胞培養を入り混じって、複数バッチの同時製造ができ、細胞製造の効率を大幅に高め、製造コストを節約し、それにより、細胞治療の促進及び普及を加速し、多くの患者に利益をもたらす。
【００４３】
また、前記培養ユニット２はＣＯ２培養箱及び培養バッグ保存モジュールを含む。細胞培養時に、ＣＯ２培養箱内に培養しなければならない。
【００４４】
また、前記遠心トランスフェクションユニット３は遠心分離機を含み、ウイルス（遠心）トランスフェクション、細胞を収穫などの操作を行う。
【００４５】
さらに、いくつかの実施例の中、前記収得ユニット４は検出モジュール４１、排出モジュール４２及び廃棄物保存モジュール４３を含む。
【００４６】
収得した細胞に対して基本品質データの収集と検出を行う検出モジュール４１は、自動倒置顕微鏡、フローサイトメーター及び光学サイトメーターを含み、製造過程中における基本品質データの収集、細胞数、細胞増殖率、細胞生存率、トランスフェクション率、細胞亜集団などの検出を行う。
【００４７】
前記排出モジュール４２は、完成品の排出に用いる。
【００４８】
前記廃棄物保存モジュール４３は、使用済みの消耗品及び医薬品を保存するのに用いる。
【００４９】
また、システムは環境制御ユニット６をさらに含む。
【００５０】
前記環境制御ユニット６は、選別ユニット１、培養ユニット２、遠心トランスフェクションユニット３及び収得ユニット４がＧＭＰ準拠無菌環境に置かれることを制御するのに用いる。
【００５１】
該環境制御ユニット６は、各コンパートメントの独立した層流モジュールとＨ２Ｏ２滅菌モジュールとを含み、システムの中、環境制御を統合し、各コンパートメントが独立密封しＡ級動的層流空間が形成され、装置がＤ級環境の中に設置運行できる。該システムは、病院、診療所、生物サーパス会社、製薬会社の工場に柔軟に設置することができ、環境への適応性が高い。システムの中では、異なる生産工程の滅菌と消毒に適応するため、滅菌と消毒システムを同時に統合する。
【００５２】
好ましい実施例として、上記システムは、液体操作ユニット７を含み、具体的には、該液体操作ユニット７は、バッグ／ボトル液体操作モジュール、大容量試薬溶液操作モジュール、小容量高精度液体操作モジュール、スイッチボトルモジュール及び磁性体操作モジュールを含む。液体操作ユニット７は、各プロセスのステップにおける異なる容量、異なる精度要求の液体操作を行うのに用いる。
【００５３】
システムは、低温保存環境を提供するために、さらに−８０℃、−２０℃、４℃の３つの温度レベルの冷蔵庫セットを含む。 
【００５４】
システムは、電子制御ユニット８をさらに含み、具体的には、電子制御ユニット８は、高性能工業用コンピューティングサーバ、ＰＬＣ制御モジュール、各種センサーネットワーク及び電力モジュールなどを含み、各ユニットに電力を提供する。
【００５５】
また、システムは、保管ユニット９をさらに含み、該保管ユニット９は、生産過程で使う材料のシステム内に一時保管に用いる。システムはデータの収集、品質管理、リモートカスタマーサービスなどのユニットをさらに含み、従来の製造中心の生産方式に適応しながら、新しい分散型細胞製造生産方式を創り出し、エンドユーザーに密着して直接サービスを提供し、異なる生産方式やビジネスモデルに高い適応性を持つ。
【００５６】
上記ロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法は、ロボットアームを利用して細胞培養の様々な段階で細胞を操作し、増幅培養及び再増幅培養の期間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行い、かつ細胞のバッチを培養する過程において、別の細胞のバッチを入り混じって培養することができ、細胞培養の効率を高め、製造コストも節約される。そして遠心トランスフェクションの利用及び培養後の細胞の収集も自動的に行われ、細胞培養の全自動化が実現し、細胞培養の効率が高められる。
【００５７】
以上は、読者がより容易に理解できるよう、実施例のみで本考案の技術内容をさらに説明したが、本考案の実施方法はこれに限定することを意味せず、本考案に基づくいかなる技術的延長又は再創造は、全て本考案に保護され、本考案の保護範囲は特許請求の範囲に準ずる。
【００５８】
（付記）
（付記１）
生血液を収得するステップと、
生血液に対してＴ細胞選別を行うステップと、
選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行うステップと、
増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うステップと、
ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うステップと、
増幅培養及び再増幅培養の間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行うステップと、
培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得するステップと、を含むことを特徴とするロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法。
【００５９】
（付記２）
増幅培養及び再増幅培養の間に、別のバッチのＴ細胞に対して処理を行うステップは、
液体貯蔵タンクを滅菌するステップと、
別のバッチのＴ細胞に対して培養処理を行うステップと、を含むことを特徴とする付記１に記載のロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法。
【００６０】
（付記３）
別のバッチのＴ細胞に対して培養処理を行うステップは、Ｔ細胞選別を行うステップ、及び／又は、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行うステップ、及び／又は、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うステップ、及び／又は、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うステップを含むことを特徴とする付記２に記載のロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法。
【００６１】
（付記４）
増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うステップは、
空の包装バッグにウイルスを入れて数時間培養するステップと、
血液を包装バッグ内に移して数時間培養するステップと、
包装バッグの中身を洗い、そして新しい培養バッグの中に移すステップと、を含むことを特徴とする付記３に記載のロボットアームに基づく全自動細胞培養の方法。
【００６２】
（付記５）
選別ユニットと、培養ユニットと、遠心トランスフェクションユニットと、収得ユニットと、を含み、
前記選別ユニットは、生血液に対してＴ細胞選別を行うのに用い、
前記培養ユニットは、選別後のＴ細胞に対して増幅培養を行い、ＣＡＲトランスフェクション後のＴ細胞に対して再び増幅培養を行うのに用い、
前記遠心トランスフェクションユニットは、増幅培養後のＴ細胞に対してＣＡＲトランスフェクションを行うのに用い、
前記収得ユニットは、培養後のＣＡＲ−Ｔ細胞を収得するのに用いることを特徴とするロボットアーム全自動細胞培養システム。
【００６３】
（付記６）
前記システムは、細胞を選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットに移転する移転ユニットをさらに含み、移転ユニットは、６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと、ジグと、防塵リニアガイドと、を含み、ジグは前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットと繋ぎ、前記６自由度ＧＭＰ準拠ロボットは前記防塵リニアガイドの上に設置することを特徴とする付記５に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【００６４】
（付記７）
前記培養ユニットはＣＯ２培養箱と、培養バッグ保存モジュールと、を含むことを特徴とする付記６に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【００６５】
（付記８）
前記遠心トランスフェクションユニットは遠心分離機を含むことを特徴とする付記７に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【００６６】
（付記９）
前記収得ユニットは、検出モジュールと、排出モジュールと、廃棄物保存モジュールと、を含み、
前記検出モジュールは、収得した細胞に対して基本品質データの収集と検出に用い、
前記排出モジュールは、完成品の排出に用い、
前記廃棄物保存モジュールは、使用済みの消耗品及び医薬品を保存するのに用いることを特徴とする付記８に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【００６７】
（付記１０）
前記システムは、環境制御ユニットをさらに含み、前記環境制御ユニットは、選別ユニット、培養ユニット、遠心トランスフェクションユニット及び収得ユニットがＧＭＰ準拠無菌環境に置かれることを制御するのに用いることを特徴とする付記９に記載のロボットアーム全自動細胞培養システム。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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