(57)【要約】  本発明は、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、及び薬学的に許容される担体を含有し、室温保存可能である、水性組成物に関する。  さらに本発明は、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、ソルビトール、及び薬学的に許容される担体を含有する水性組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、及び薬学的に許容される担体を含有し、室温保存可能である、水性組成物。
【請求項２】
コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、ソルビトール、及び薬学的に許容される担体を含有する、水性組成物。
【請求項３】
コンドロイチン硫酸を２０〜６０ｍｇ／ｍＬ、ヒアルロン酸を１０〜４０ｍｇ／ｍＬ含有する、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
有効成分としてコンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有し、添加剤としてソルビトールを含有する、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
ソルビトールがＤ−ソルビトールである、請求項２〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
２５℃、せん断速度２Ｓ−１における粘度が２０，０００〜１２０，０００ｍＰａ・ｓである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
室温保存可能である、請求項２〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
粘弾剤である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
眼科用組成物である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
ソルビトールを含有させることによる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物の安定化方法。
【請求項１１】
ソルビトールを含有させる工程を含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物の製造方法。
【請求項１２】
ソルビトールを含有させることによる、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物の保存方法。
【請求項１３】
請求項１〜９のいずれかに記載の水性組成物の有効な量を、眼科手術において眼科手術補助剤を必要とする患者に投与する工程を含む、眼疾患の治療方法。
【請求項１４】
請求項１〜９のいずれかに記載の水性組成物を室温で保存する工程、及び
該室温で保存された水性組成物の有効な量を、眼科手術において眼科手術補助剤を必要とする患者に投与する工程
を含む、請求項１３に記載の眼疾患の治療方法。
【請求項１５】
眼疾患の治療における眼科手術における眼科手術補助剤の製造のための、請求項１〜９のいずれかに記載の水性組成物の使用。
【請求項１６】
水性組成物が、室温で保存した後に眼科手術に用いるための水性組成物である、請求項１５に記載の使用。
【請求項１７】
眼科手術における眼科手術補助剤としての、眼疾患の治療における使用のための、請求項１〜９のいずれかに記載の水性組成物。
【請求項１８】
水性組成物が、室温で保存した後に眼科手術に用いるための水性組成物である、請求項１７に記載の水性組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、及び薬学的に許容される担体を含有し、室温保存可能である、水性組成物に関する。さらに、本発明は、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、及びソルビトールを含有する水性組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
コンドロイチン硫酸ナトリウム及びヒアルロン酸ナトリウムを含有する粘弾剤（ビスコート（登録商標））が、眼科手術補助剤として市販されている。【０００３】
この市販の粘弾剤は、室温において安定性を欠き、保存中にその粘度が低下することが知られている。また、同粘弾剤は光に対して不安定であり、光照射によりその粘度が低下することが知られている。このため、ビスコート（登録商標）は１９８６年に米国において承認されて以来、「遮光して、凍結を避け、冷所（２〜８℃）で保存」が必須とされている（非特許文献１）。【０００４】
特許文献１は、ヒアルロン酸を含有する点眼水溶液の安定化方法に関する。また、特許文献２は、安定化されたヒアルロン酸含有組成物に関する。しかし、これらの文献には、コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有する水性組成物自体の安定化方法に関する開示はない。【０００５】
コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有する水性組成物は、各成分単独の粘性からは予期し得ない高い粘度を有することが知られている（特許文献３）。この増粘のメカニズムとして、コンドロイチン硫酸とヒアルロン酸の相互作用が提唱されているが、詳細は明らかではない。このことから、同組成物の性質、特に粘性については、コンドロイチン硫酸やヒアルロン酸に係る個々の知見をそのまま適用することはできない。【０００６】
現に、ビスコート（登録商標）の承認から約３０年経過しても、遮光不要、又は室温保存が可能な製剤は実用化されておらず、また、コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有する水性組成物の粘度安定化方法に関する報告もない。このことは、同組成物の特殊性、すなわち、コンドロイチン硫酸やヒアルロン酸の個々の知見を、同組成物にそのまま適用できないことを裏付けるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開平１０−７２３７６号公報
【特許文献２】特開平１１−３０２１９７号公報
【特許文献３】米国特許第６，０５１，５６０号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】ＶＩＳＣＯＡＴ（登録商標）、添付文書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
コンドロイチン硫酸ナトリウム、及びヒアルロン酸ナトリウムを含有する水性組成物のプレフィルドシリンジ製剤であるビスコート（登録商標）は、室温保存によりその粘度が低下するため、冷所保存が必要とされる（ビスコート（登録商標）、インタビューフォーム）。一般的に、冷所保存が必要なプレフィルドシリンジ製剤は、輸送時の温度管理、医療機関における保存場所の確保、使用に先立ち一定時間室温に保つこと等が必要であるため、取扱いが煩雑である。それにもかかわらず、同組成物については、その性質の特殊性からか、これまでに同組成物自体の安定化方法に関する報告はない。【００１０】
そこで本発明は、コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有する安定化された水性組成物を提供することを課題とする。特に、本発明は、室温においても安定化された水性組成物を提供することを課題とする。
また、本発明は、同組成物の安定化方法、保存方法又は、安定化された同組成物の製造方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有する水性組成物に、ソルビトールを含有させることによって、同組成物の粘度低下を室温においても抑制できることを見出し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、及び薬学的に許容される担体を含有し、室温保存可能な水性組成物である。さらに本発明は、コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、及びソルビトールを含有する水性組成物である。【００１２】
＜１＞コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、及び薬学的に許容される担体を含有し、室温保存可能である、水性組成物。
＜２＞コンドロイチン硫酸、ヒアルロン酸、ソルビトール、及び薬学的に許容される担体を含有する、水性組成物。
＜３＞コンドロイチン硫酸を２０〜６０ｍｇ／ｍＬ、ヒアルロン酸を１０〜４０ｍｇ／ｍＬ含有する、＜１＞または＜２＞に記載の組成物。
＜４＞有効成分としてコンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有し、添加剤としてソルビトールを含有する、＜１＞〜＜３＞のいずれかに記載の組成物。
＜５＞ソルビトールがＤ−ソルビトールである、＜２＞〜＜４＞のいずれかに記載の組成物。
＜６＞２５℃、せん断速度２Ｓ−１における粘度が２０，０００〜１２０，０００ｍＰａ・ｓである、＜１＞〜＜５＞のいずれかに記載の組成物。
＜７＞室温保存可能である、＜２＞〜＜６＞のいずれかに記載の組成物。
＜８＞粘弾剤である、＜１＞〜＜７＞のいずれかに記載の組成物。
＜９＞眼科用組成物である、＜１＞〜＜８＞のいずれかに記載の組成物。
＜１０＞眼科手術補助剤である、＜１＞〜＜９＞のいずれかに記載の組成物。
＜１１＞眼粘弾剤である、＜１＞〜＜１０＞のいずれかに記載の組成物。
＜１２＞無色澄明である、＜１＞〜＜１１＞のいずれかに記載の組成物。
＜１３＞注射剤である、＜１＞〜＜１２＞のいずれかに記載の組成物。
＜１４＞ソルビトールを含有させることによる、＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の組成物の安定化方法。
＜１５＞ソルビトールを含有させる工程を含む、＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の組成物の製造方法。
＜１６＞ソルビトールを含有させることによる、＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の組成物の保存方法。
＜１７＞水性組成物を室温で保存することを含む、＜１６＞に記載の保存方法。
＜１８＞＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の水性組成物の有効な量を、眼科手術において眼科手術補助剤を必要とする患者に投与する工程を含む、眼疾患の治療方法。
＜１９＞＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の水性組成物を室温で保存する工程、及び
該室温で保存された水性組成物の有効な量を、眼科手術において眼科手術補助剤を必要とする患者に投与する工程
を含む、＜１８＞に記載の眼疾患の治療方法。
＜２０＞眼疾患の治療における眼科手術における眼科手術補助剤の製造のための、＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の水性組成物の使用。
＜２１＞水性組成物が、室温で保存した後に眼科手術に用いるための水性組成物である、＜２０＞に記載の使用。
＜２２＞眼科手術における眼科手術補助剤としての、眼疾患の治療における使用のための、＜１＞〜＜１３＞のいずれかに記載の水性組成物。
＜２３＞水性組成物が、室温で保存した後に眼科手術に用いるための水性組成物である、＜２２＞に記載の水性組成物。
【発明の効果】
【００１３】
ソルビトールを含有させることにより、コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有する水性組成物の粘度低下を抑制することができる。また、同組成物を長期間安定に保存することができる。コンドロイチン硫酸及びヒアルロン酸を含有する水性組成物を冷所において保存する必要がなくなり、室温保存することが可能であり、例えば８℃を超える温度においても保存することが可能となる。また、本発明の水性組成物の一態様によれば、光照射下においても粘度の低下を抑制することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
＜定義＞
本明細書において使用する用語を以下のように定義する。
「コンドロイチン硫酸」（「ＣＳ」ともいう。）とは、別に記載のない限りコンドロイチン硫酸又はその塩のことを意味する。なお、「コンドロイチン硫酸ナトリウム」という用語は、「コンドロイチン硫酸エステルナトリウム」と同義で用いられる。
「ヒアルロン酸」（「ＨＡ」ともいう。）とは、別に記載のない限りヒアルロン酸又はその塩のことを意味する。
「分子量」とは、別に記載のない限り重量平均分子量を意味する。
「粘度」とは、別に記載のない限り２５℃、せん断速度２Ｓ−１における粘度を意味する。
【００１５】
本明細書において、「〜」を用いて示された数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値をそれぞれ最小値及び最大値として含む範囲を示す。また、組成物中の各成分の含有量は、組成物中に各成分に該当する物質が複数存在する場合、特に断らない限り、組成物中に存在する当該複数の物質の合計量を意味する。
【００１６】
（１）本発明組成物
本発明組成物は、ＣＳ、ＨＡ、及び薬学的に許容される担体を含有し、室温保存可能である、水性組成物である。さらに、本発明組成物は、ＣＳ、ＨＡ、ソルビトール、及び薬学的に許容される担体を含有する水性組成物である。
【００１７】
＜ＣＳ＞
ＣＳは、Ｄ−グルクロン酸残基とＮ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン残基とがβ１，３結合で結合してなる二糖単位を構成単位とし、当該二糖単位がβ１，４結合により繰り返し結合することにより構成されている構造を基本骨格とし、主に構成糖のヒドロキシ基の一部が硫酸化されたグリコサミノグリカンである限りにおいて特に限定されない。また、塩を形成しない遊離状態であっても、薬学的に許容されうる塩を形成していてもよい。ＣＳは、非架橋ＣＳであってよい。
【００１８】
ＣＳは、天然物由来のもの、化学合成されたもの、微生物の培養又は遺伝子工学的手法により生産させたものの何れでも構わない。例えば天然物からＣＳを取得する場合には、所望のＣＳの種類等に応じて、原料とすべき天然物を適宜選択することができる。また、天然物由来物質を化学合成手法により適宜修飾して、目的とするＣＳを得てもよい。
【００１９】
ＣＳの重量平均分子量は特に限定されないが、例えば１万〜１０万が挙げられ、好ましくは１万〜６万であり、より好ましくは１万５千〜５万であり、更に好ましくは１万５千〜４万であり、特に好ましくは１万５千〜２万５千である。なお、ＣＳの重量平均分子量は、光散乱法により測定できる。
【００２０】
＜ＨＡ＞
ＨＡは、Ｄ−グルクロン酸残基とＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミン残基とがβ１，３結合で結合してなる二糖単位を構成単位とし、当該二糖単位がβ１，４結合により繰り返し結合することにより構成されているグリコサミノグリカンである限りにおいて特に限定されない。また、塩を形成しない遊離状態であっても、薬学的に許容されうる塩を形成していてもよい。ＨＡは、非架橋ＨＡであってよい。
【００２１】
ＨＡは、鶏冠、臍帯、軟骨、皮膚など生体の一部から抽出し得られる天然物由来のもの、化学合成されたもの、微生物の培養又は遺伝子工学的手法により生産させたものの何れでも構わない。
【００２２】
ＨＡの重量平均分子量は特に限定されないが、例えば１万〜５００万が挙げられ、好ましくは２０万〜３００万であり、より好ましくは３０万〜２００万であり、更に好ましくは４０万〜１２０万であり、更に好ましくは、４０万〜９０万であり、特に好ましくは４５万〜８０万であり、一層好ましくは５０万〜７５万である。なお、本明細書におけるＨＡの重量平均分子量は、第十六改正日本薬局方の「粘度測定法」に従って極限粘度を測定し、Laurentらの式（Biochim. Biophys. Acta, 42, 476(1960)）によって算出できる。
【００２３】
＜ＣＳ及びＨＡの薬学的に許容されうる塩＞
ＣＳ及びＨＡの薬学的に許容されうる塩としては、それぞれ独立して、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属イオンとの塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属イオンとの塩等が例示される。本発明におけるＣＳ及びＨＡは、生体への適用性及び親和性の観点から、アルカリ金属イオンとの塩がより好ましく、ナトリウム塩が特に好ましい。
【００２４】
＜ソルビトール＞
本明細書における「ソルビトール」としては、Ｄ−ソルビトールが好ましい。
本発明組成物に含まれるソルビトールの濃度は特に限定されないが、０．１ｍｇ／ｍＬ以上が好ましく、０．５ｍｇ／ｍＬ以上がより好ましく、１ｍｇ／ｍＬ以上が更に好ましく、２ｍｇ／ｍＬ以上が特に好ましい。また、ソルビトールの含量が多いほど、ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の粘度低下に対する抑制効果が高いため、本発明組成物に含まれるソルビトールの濃度の上限は特に限定されないが、１００ｍｇ／ｍＬ以下、８０ｍｇ／ｍＬ以下、５０ｍｇ／ｍＬ以下、２０ｍｇ／ｍＬ以下、１０ｍｇ／ｍＬ以下が例示される。本発明組成物に含まれるソルビトールの濃度は特に限定されないが、０．５〜１００ｍｇ／ｍＬ、１〜８０ｍｇ／ｍＬ、２〜４０ｍｇ／ｍＬ、２．５〜２０ｍｇ／ｍＬ、５〜１０ｍｇ／ｍＬが例示される。
ソルビトールの含量としては、ＣＳ及びＨＡの総量としての１００質量部に対して、０．５〜１２０質量部が好ましく、１〜６０質量部がより好ましく、１．４〜３０質量部が更に好ましく、３〜２０質量部が特に好ましい。
【００２５】
＜薬学的に許容される担体＞
本明細書における「薬学的に許容される担体」としては、例えば、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、リン酸緩衝液、精製水、注射用水等が挙げられる。また、適宜、ｐＨ調整剤、緩衝剤、等張化剤、防腐剤等の通常用いられる添加剤を使用してよい。ソルビトール以外の添加剤としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸水素一カリウム等が例示される。なお、本発明組成物は、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、及び／又はグリセリンを含有しなくてもよい。
【００２６】
＜水性組成物＞
本明細書における「水性組成物」とは、水を５０％（ｗ／ｖ）以上含有する組成物である限り特に限定されないが、本発明組成物においては、組成物の８０％（ｗ／ｖ）以上が水であることが好ましく、９０％（ｗ／ｖ）以上が水であることがより好ましい。
【００２７】
＜ＣＳ及びＨＡの濃度＞
ＣＳ及びＨＡを含有する粘弾性組成物について開示した米国特許第６，０５１，５６０号公報によれば、ＣＳとＨＡの間の相互作用はいかなる濃度においても起こると考察されている。そのため本発明組成物におけるＣＳ及びＨＡの濃度は特に限定されないが、ＣＳ及びＨＡの濃度としては、それぞれ独立して以下が例示される。すなわち、ＣＳの濃度としては、１０〜１００ｍｇ／ｍＬが好ましく、２０〜６０ｍｇ／ｍＬがより好ましく、２５〜５５ｍｇ／ｍＬがより好ましく、３０〜５０ｍｇ／ｍＬがより好ましく、３５〜４５ｍｇ／ｍＬが更に好ましく、４０ｍｇ／ｍＬが特に好ましい。ＨＡの濃度としては、５〜５０ｍｇ／ｍＬが好ましく、１０〜４０ｍｇ／ｍＬがより好ましく、１５〜３５ｍｇ／ｍＬがより好ましく、２５〜３５ｍｇ／ｍＬがより好ましく、２７〜３３ｍｇ／ｍＬが更に好ましく、３０ｍｇ／ｍＬが特に好ましい。ＣＳ及びＨＡがこのような濃度であると、水性組成物が一定の粘度を発揮することができる。また、眼科用組成物として、なかでも眼科手術補助剤及び／又は眼粘弾剤として使用する場合に好ましい。
【００２８】
＜ＣＳとＨＡの配合比＞
ＣＳとＨＡの配合比は特に限定されないが、ＣＳ１０質量部に対して、ＨＡとして、１〜２０質量部が好ましく、３〜１０質量部がより好ましく、４〜８質量部が更に好ましく、７〜８質量部が特に好ましく、７．５質量部が最も好ましい。ＣＳとＨＡとの配合比がこのような範囲にあると、水性組成物が一定の粘度を発揮するのに好ましい。また、眼科用組成物として、なかでも眼科手術補助剤、及び／又は眼粘弾剤として使用する場合に好ましい。
【００２９】
＜ｐＨ＞
本発明組成物のｐＨは特に限定されないが、６．０〜８．０が好ましく、６．５〜７．８がより好ましく、６．８〜７．６が更に好ましく、７．０〜７．５が特に好ましい。
【００３０】
＜粘度＞
本発明組成物の粘度は、実施例に記載の方法により測定することができる。また、「粘度保存率」（％）は、以下の式（Ａ）により算出される。例えば、保存開始時の粘度が５０Ｐａ・ｓで、評価時点における粘度が３０Ｐａ・ｓの場合の粘度保存率は、６０％である。
【００３１】
【数１】
2017131130.tif 000002
【００３２】
また、「粘度保存の改善率」（％）は、以下の式（Ｂ）により算出される。なお、ここでいう「陰性対照試料」とは、評価対象である添加剤を含有しない点においてのみ、評価対象試料と異なる試料をいう。例えば、ある評価時点における陰性対照試料における粘度保存率が２５％であり、同評価時点における評価対象試料の粘度保存率が５０％の場合の粘度保存の改善率は、２００％である。
【００３３】
【数２】
2017131130.tif 000003
【００３４】
本発明組成物の粘度は特に限定されないが、２０，０００〜１２０，０００ｍＰａ・ｓが好ましく、３０，０００〜１１０，０００ｍＰａ・ｓがより好ましく、３５，０００〜８０，０００ｍＰａ・ｓが更に好ましく、３５，０００〜６０，０００ｍＰａ・ｓが特に好ましい。本発明組成物を４０℃、相対湿度２５％以下の条件下で暗所に６か月間保存した際の粘度保存率は特に限定されないが、５５％以上が好ましく、６０％以上がより好ましく、６５％以上が更に好ましく、７０％以上が特に好ましい。本発明組成物を２５℃、及び相対湿度６０％の条件下で暗所に２４か月間保存した際の粘度保存率は特に限定されないが、６０％以上が好ましく、７０％以上がより好ましく、８０％以上が更に好ましく、８５％以上が特に好ましい。
【００３５】
＜組成物の安定化＞
本発明において、「組成物の安定化」とは、組成物の粘度の安定化を意味し、具体的には組成物の粘度が一定範囲に維持されること、好ましくは組成物の粘度の低下が抑制されることを意味する。粘度の安定化は、室温及び／又は光照射下における組成物の粘度の安定化を含む。
粘度の安定化は、たとえば、前記粘度保存率などを指標に評価することができ、一態様において粘度保存率が上記のような範囲にある場合、たとえば室温においても組成物の安定化が図られたと評価できる。
本明細書において組成物の「安定性」、組成物の「安定」という用語も同様の意味で用いられる。
またしたがって、本明細書において、「室温保存可能」とは、室温において、粘度が一定範囲に維持されることを意味する。
たとえば、「室温保存可能」な組成物としては、具体的には、上述の粘度保存率との関係で、４０℃、相対湿度２５％以下の条件下で暗所に６か月間保存した際の粘度保存率が、好ましくは５５％以上、より好ましくは６０％以上、更に好ましくは６５％以上、特に好ましくは７０％以上である組成物が挙げられる。あるいは、２５℃、及び相対湿度６０％の条件下で暗所に２４か月間保存した際の粘度保存率が、好ましくは６０％以上、より好ましくは７０％以上、更に好ましくは８０％以上、特に好ましくは８５％以上である組成物が挙げられる。
【００３６】
＜組成物の保存＞
本発明において、「組成物の保存」とは、組成物を容器等内で保持することを意味する。
組成物の保存は、たとえば、組成物の製造直後、組成物の輸送時、組成物の使用者における使用に先立つ保管、さらに手術等における使用直前における保持等の各段階を含むことができる。
【００３７】
＜浸透圧＞
本発明組成物の生理食塩液に対する浸透圧比としては、特に限定されないが、０．８〜１．４が好ましく、０．９〜１．３が特に好ましい。
【００３８】
＜剤形＞
本発明組成物の剤形は特に限定されないが、注射剤、点眼剤等が例示され、なかでも注射剤が好ましい。注射剤としては、本発明組成物がプレフィルドシリンジに充填された注射剤が例示される。
【００３９】
＜性状＞
本発明組成物の性状は特に限定されないが、注射、点眼、塗布等が可能な点で、溶液又はゲルが好ましい。また、詳細は後述するが、本発明組成物は無色澄明であることが好ましい。
【００４０】
＜室温、常温＞
本発明において、室温とは、好ましくは約０〜４０℃、より好ましくは約０〜３５℃、さらに好ましくは約１〜３０℃の範囲をいう。
本発明において、常温とは、好ましくは約１０〜３０℃、より好ましくは約１５〜２５℃程度の範囲をいう。
【００４１】
（２）本発明組成物の製造方法
本発明組成物の製造方法は、ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の製造方法において、ソルビトールを含有させる工程を含む限りにおいて特に限定されない。ＣＳ及びＨＡを含有する組成物の製造方法は、特に限定されないが、例えば、米国特許第６，０５１，５６０号公報に記載された方法に準じ、製造することができる。本発明組成物の製造方法としては、ＣＳ、ＨＡ、ソルビトール、及び薬学的に許容される担体を含有させる方法が例示される。各成分をそれぞれ溶媒に溶解後に混合してもよく、溶媒に各成分を順次添加することにより混合してもよい。同方法においては、前記「（１）本発明組成物」における、記述、例示、好ましい範囲などがそのまま適用できる。
【００４２】
（３）本発明組成物の使用方法
＜用途＞
本発明組成物の用途は特に限定されないが、眼科用組成物として、眼科用途に使用することが好ましい。なかでも眼科手術補助剤として使用することが好ましく、眼粘弾剤又はＯＶＤ（Ophthalmic Viscosurgical Device）として使用することがより好ましい。また、ソルビトールを含有させることにより本発明組成物の粘度低下が室温、さらには常温においても抑制されることから、本発明組成物は粘弾剤として実用的に使用することができる。粘弾剤としては、眼粘弾剤などが例示される。
【００４３】
本発明組成物は、眼科手術補助剤及び／又は眼粘弾剤として使用する場合、白内障手術の補助剤として使用することが好ましく、白内障摘出術及び／又は眼内レンズ挿入術の補助剤として使用することがより好ましい。本発明組成物は、必要に応じて、眼内レンズのコーティングに使用することができる。
【００４４】
本発明組成物は、前記いずれかの用途で使用する際の有効成分として、ＣＳ及び／又はＨＡを含有してよい。なお、本発明組成物を眼科手術補助剤、及び／又は眼粘弾剤として使用する場合、術野である眼内の視認性を確保するために、本発明組成物は無色澄明であることが好ましい。
【００４５】
＜投与方法＞
本発明組成物は、ヒトを含む動物を含む患者に投与することにより使用できる。本発明組成物を眼科用途に使用する場合には、動物の眼への投与として医学的に許容される態様で行われるものである限りにおいて特に限定されない。投与の具体的方法は特に限定されないが、点眼、又は眼内注入が好ましく例示され、眼内注入がより好ましい。眼内注入のなかでも前房内注入が特に好ましい。
【００４６】
＜投与容量＞
本発明組成物の投与容量は、用途に応じて適宜選択することができる。眼科手術補助剤及び／又は眼粘弾剤として使用する場合の投与容量は特に限定されないが、０．０５〜２ｍＬが好ましく、０．１〜１ｍＬがより好ましく、０．１〜０．４ｍＬが更に好ましい。特に、白内障摘出時、及び／又は眼内レンズ挿入時に、それぞれ独立して、０．１〜０．４ｍＬを前房内に注入することができる。また、眼内レンズのコーティングのために０．１〜０．２ｍＬを使用することができる。
【００４７】
＜治療方法＞
上記用途のうち、本発明の水性組成物は、その有効な量を、眼科手術において眼科手術補助剤を必要とする患者に投与する工程を含む、眼疾患の治療方法に用いることができる。
当該治療方法においては、前記工程の前に、さらに本発明の水性組成物を室温で保存する工程を含むことが好ましい。
前記保存する工程には、組成物の製造直後、組成物の輸送時、組成物の使用者における使用に先立つ保管、さらに手術等における使用直前における保持等の各段階を含むことができる。
眼疾患としては、たとえば白内障などが挙げられる。
同方法においては、前記「（１）本発明組成物」、下記「（４）本発明の安定化方法」、「（５）本発明の保存方法」における、記述、例示、好ましい範囲などがそのまま適用できる。
【００４８】
＜他の使用態様＞
さらに、上記用途のうち、本発明の水性組成物は、眼科手術における眼科手術補助剤の製造のための、水性組成物の使用に適用できる。
この場合において、水性組成物は、室温で保存した後に眼科手術に用いるための水性組成物であることが好ましい。
また、眼科手術における眼科手術補助剤としての、眼疾患の治療における使用のために、本発明の水性組成物を適用できる。
この場合において、水性組成物は、室温で保存した後に眼科手術に用いるための水性組成物であることが好ましい。
前記保存する工程には、組成物の製造直後、組成物の輸送時、組成物の使用者における使用に先立つ保管、さらに手術等における使用直前における保持等の各段階を含むことができる。
眼疾患としては、たとえば白内障などが挙げられる。
同使用においては、前記「（１）本発明組成物」、下記「（４）本発明の安定化方法」、「（５）本発明の保存方法」における、記述、例示、好ましい範囲などがそのまま適用できる。
【００４９】
（４）本発明の安定化方法
本発明に係る水性組成物の安定化方法は、ＣＳ、ＨＡ、及び薬学的に許容される担体を含有し、室温保存可能である、水性組成物の安定化方法である。
さらに本発明に係る水性組成物の安定化方法は、ソルビトールを含有させることによる、ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の安定化方法である。
同方法においては、前記「（１）本発明組成物」における、記述、例示、好ましい範囲などがそのまま適用できる。
本発明に係る水性組成物の安定化方法によれば、水性組成物を安定に保存することができる。
本発明の安定化方法では、室温において水性組成物を保存することが好ましく、室温においても長期に亘って水性組成物を安定に保存でき、組成物の粘度低下を抑制できる。
また上記安定化方法では、一態様において組成物を遮光下又は非遮光下のいずれにおいても安定に保存することができ、たとえば非遮光下においても水性組成物を安定に保存でき、組成物の粘度低下を抑制することができる。
【００５０】
（５）本発明の保存方法
本発明に係る水性組成物の保存方法は、ＣＳ、ＨＡ、及び薬学的に許容される担体を含有する、室温保存可能である水性組成物の保存方法である。
本発明に係る水性組成物の保存方法は、ソルビトールを含有させることによる、ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の保存方法である。
保存対象である水性組成物は、前記「（１）本発明組成物」における水性組成物であり、前記記述、例示、好ましい範囲などがそのまま適用できる。
本発明の水性組成物の保存方法においては、組成物の使用前のいずれの段階においても、室温、常温、あるいは室温を超える温度においても安定に組成物を保存することが可能である。たとえば、８℃を超える温度においても、組成物を安定に保存することができる。「安定」の意味は上記「組成物の安定化」の定義のとおりである。このような本発明の水性組成物の保存方法においては、室温において水性組成物を保存することが好ましい。
また上記保存方法では、一態様において、組成物を遮光下又は非遮光下のいずれにおいても安定に保存することができ、たとえば非遮光下においても水性組成物を安定に保存でき、組成物の粘度低下を抑制できる。
なお、水性組成物の保存期間は特に限定されず、使用態様や移動時間等に応じて任意に設定することができる。例えば、水性組成物の製造直後〜２４時間という短期間であってもよいし、１日〜６ヶ月という中長期間であってもよいし、６ヶ月以上の長期間であってもよい。
本発明に係る水性組成物の保存方法は、組成物の製造直後、組成物の輸送時、組成物の使用者における使用に先立つ保管、さらに手術等における使用直前における保持等の各段階を含むことができる。このうち、本発明においては、組成物の製造直後、組成物の輸送時、組成物の使用者における使用に先立つ保管が可能である。すなわち、本発明の組成物は低温保存が不要であるため、組成物の使用直前における室温までの昇温が不要である。
水性組成物の保存は、公知の容器が使用でき特に限定されず、好ましくは密閉可能な容器で実施すればよい。
【００５１】
以下、本発明を実施例及び試験例により具体的に詳説するが、本発明はこれらにより限定されるものではない。
【実施例】
【００５２】
（実施例１）６０℃における保存安定性試験
（１）リン酸緩衝液の調製
リン酸二水素ナトリウム二水和物０．５０９ｇ、リン酸水素二ナトリウム１２水和物５．０４ｇ、塩化ナトリウム４．３０ｇを注射用水に溶解後、１０００ｇにメスアップし、リン酸緩衝液（以下、「ＰＢＳ」ともいう。）を調製した。なお、ここでの各重量は重量比を表す。【００５３】
（２）ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の調製
ヒアルロン酸ナトリウム（重量平均分子量約９０万、生化学工業製）を加熱処理することにより低分子化し、重量平均分子量約７０万のヒアルロン酸ナトリウムを得た。このヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム（重量平均分子量約２万、生化学工業製）、及び添加剤を、表１に示す処方で混合し各水性組成物を調製した。添加剤としては、Ｄ−ソルビトール（一級、和光純薬工業製）、グリシン（特級、和光純薬工業製）、Ｌ−グルタミン酸（特級、和光純薬工業製）、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム（局外規、和光純薬工業製）、又はＬ−メチオニン（特級、和光純薬工業製）を使用した。溶媒としてはＰＢＳを使用した。なお、表中の数値は、各組成物１ｍＬ中の各成分の含量を表す。「−」は該当成分を含有しないことを意味する。【００５４】
【表１】
2017131130.tif 000004
【００５５】
（３）試験方法
処方１〜６の各組成物を、６０℃の条件下で暗所に１４日間保存し、保存開始時、並びに保存開始後３、７、１０、及び１４日の各時点における粘度を測定した。各処方の各時点における粘度を、添加剤を含まない処方１の保存開始時の粘度と比較し、添加剤が組成物の粘度に与える影響を評価した。１４日の時点には、褐変の有無を確認した。【００５６】
粘度測定方法
回転粘度計（型番：ＴＶＥ−２２Ｈ、東機産業製）を用い、各時点の組成物について、２５℃、せん断速度２Ｓ−１における粘度を測定した。【００５７】
褐変の判定方法
保存開始後１４日に各組成物の褐変の有無を目視で確認し、以下の判定基準に従ってスコア化した。
＜判定基準＞
−    処方１（陰性対照）に比べ褐変が小さい。
±    処方１（陰性対照）と同程度。
＋    処方１（陰性対照）に比べ褐変が大きい。【００５８】
（４）結果
結果を表２に示す。【００５９】
【表２】
2017131130.tif 000005
【００６０】
特開平１１−３０２１９７号公報においてＨＡを安定化させるとの報告があるグリシン、Ｌ−グルタミン酸、又はＬ−グルタミン酸ナトリウムを含有する、ＣＳ及びＨＡを含む処方の粘度は、いずれの時点においても陰性対照である処方１と比べて明らかに低かった。この結果から、これら添加剤は、ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の場合は、該組成物の粘度低下を促進することが示された。また、市販のヒアルロン酸製剤（スベニール（登録商標））において安定化剤として使用されているＬ−メチオニンを含有する処方６の各時点における粘度は、処方１と同程度であり、粘度低下抑制効果はわずかであった。同処方６の褐変は処方１と比べて大きかったことから、Ｌ−メチオニンは褐変を促進することが示された。一方で、Ｄ−ソルビトールを含有する処方２の各時点における粘度は処方１よりも高く、また、Ｄ−ソルビトールを含有することにより褐変を促進することはなかった。以上より、ソルビトールが、ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の粘度低下を抑制し、同組成物の安定化剤として極めて有用であることが示された。
また、これらの結果は、ＣＳとＨＡのいずれをも含有する組成物が、ＨＡを単独で含有する組成物とは異なる挙動を示すことを示唆している。【００６１】
（実施例２）６０℃における保存安定性試験
添加剤として、グルコース（特級、和光純薬工業製）、マルトース水和物（特級、和光純薬工業製）、キシリトール（特級、和光純薬工業製）、濃縮混合トコフェロール（一級、和光純薬工業製）を使用し、実施例１と手順、使用量（ＣＳ：４０ｍｇ、ＨＡ：３０ｍｇ、各添加剤５ｍｇ）、実験条件など同様の条件で、水性組成物を調製し、添加剤が組成物の粘度に与える影響を評価するとともに、褐変の有無を確認した。結果を下記表３に示す。【００６２】
【表３】
2017131130.tif 000006
【００６３】
添加剤として、マルトース水和物、キシリトール、又はトコフェロールを含有する、ＣＳ及びＨＡを含む処方８、９、１０の粘度は、処方１と同程度で粘度低下抑制効果はわずかであり、グルコースを含有する処方７では粘度が著しく低下した。また処方９のキシリトールは１４日後に粘度の急激な低下が見られた。一方で、上述のとおりＤ−ソルビトールを含有する処方２の各時点における粘度は処方１よりも高く、また、Ｄ−ソルビトールを含有することにより褐変を促進することはなかった。以上より、ソルビトールが、ＣＳ及びＨＡを含有する水性組成物の粘度低下を抑制し、同組成物の安定化剤として極めて有用であることが示された。【００６４】
（実施例３）ソルビトール濃度の検討
（１）試験方法
実施例１に準じ、表４に示す処方の各水性組成物を調製した。なお、表中の数値は、各組成物１ｍＬ中の各成分の含量を表す。「−」は該当成分を含有しないことを意味する。【００６５】
【表４】
2017131130.tif 000007
【００６６】
上記処方１１〜１４の組成物について、１２１℃、５分の熱処理前後の粘度を、実施例１に準じて測定し、粘度保存率、及び粘度保存の改善率を算出した。【００６７】
（２）結果
結果を表５に示す。【００６８】
【表５】
2017131130.tif 000008
【００６９】
表５に示したとおり、１２１℃、５分の熱処理により、陰性対照である処方１１の粘度保存率が低下した。一方、Ｄ−ソルビトールを含有する処方１２〜１４の粘度保存率は対照の粘度保存率を上回った。これらのことから、本方法により、Ｄ−ソルビトールによる粘度低下抑制作用を評価可能であることが分かった。また、０．１％〜１％（ｗ／ｖ）の濃度範囲で、ソルビトールによる本発明組成物の粘度低下抑制作用が発揮されることが示された。【００７０】
次に、より高濃度領域における粘度低下抑制作用について検討するために、Ｄ−ソルビトールを０．２５％、０．５％、１％、２％、４％、又は８％（ｗ／ｖ）の濃度で含有する組成物を、実施例１に準じて調製し、６０℃の条件下で暗所に１４日間保存した。保存開始時、及び保存開始後１４日における粘度を測定し、粘度保存の改善率を算出した。その結果、Ｄ−ソルビトール濃度０．２５％、０．５％、１％、２％、４％、及び８％における粘度保存の改善率は、それぞれ１７５％、１８１％、１９１％、１７８％、２６３％、及び３００％であり、Ｄ−ソルビトールの含量が増えるに従い、組成物の粘度低下が抑制されることが示された。【００７１】
これらのことから、少なくとも０．１％（１ｍｇ／ｍＬ）〜８％（８０ｍｇ／ｍＬ）という広範囲の濃度で、ソルビトールによる粘度低下抑制効果が発揮されることが示された。【００７２】
（実施例４）光安定性試験
（１）試験方法
実施例１に準じ、表６に示す処方の水性組成物を調製した。なお、表中の数値は、各組成物１ｍＬ中の各成分の含量を表す。「−」は該当成分を含有しないことを意味する。【００７３】
【表６】
2017131130.tif 000009
【００７４】
上記処方１５〜１７の組成物をプラスチックシリンジ（Schott社製）に充填し、１２０万ｌｘ・ｈｒに曝光した。すなわち、光安定性試験機（型番ＬＴ−１２０  Ｄ３Ｊ、ナガノサイエンス社製）を用いて、２５℃の条件下で、同シリンジに２０００ｌｘ／ｈｒの光を２５日間照射した。照射前後の各組成物の粘度を実施例１に準じて測定し、粘度保存率を算出した。なお、アルミ箔で遮光したシリンジを対照とした。【００７５】
（２）結果
結果を表７に示す。【００７６】
【表７】
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【００７７】
表７に示したとおり、Ｄ−ソルビトールを含有する処方１６及び１７は、対照である処方１５に比べて、光照射による粘度低下が抑制された。よって、Ｄ−ソルビトールを含有することにより、光に対する安定性が高まることが示された。【００７８】
（実施例５）長期保存安定性試験
（１）試験方法
実施例１に準じ、ＣＳ、ＨＡ、及びＤ−ソルビトールを含有する水性組成物を調製し、これをシリンジ（ポリオレフィン樹脂製）に充填した。このシリンジを２５℃、及び相対湿度６０％の条件下で暗所に保存し、保存開始時、並びに保存開始後３、６、９、１２、１８、及び２４か月の各時点における粘度を実施例１に準じて測定し、粘度保存率を算出した。【００７９】
（２）結果
保存開始後３、６、９、１２、１８、２４か月における粘度保存率は、それぞれ９５．５％、９６．７％、９４．６％、９３．９％、９３．９％、９０．０％であり、高い粘度保存率が確認された。よって、本発明組成物は、室温において少なくとも２４か月間、安定に保存可能であることが示された。【００８０】
（実施例６）４０℃における保存安定性試験
（１）試験方法
実施例１に準じ、ＣＳ、ＨＡ、及びＤ−ソルビトールを含有する水性組成物を調製し、これをシリンジ（ポリオレフィン樹脂製）に充填した。このシリンジを４０℃、及び相対湿度２５％以下の条件下で暗所に保存し、保存開始時、及び保存開始後６か月の各時点における粘度を実施例１に準じて測定し、粘度保存率を算出した。【００８１】
（２）結果
保存開始後６か月における粘度保存率は、７６．２％であり、高い粘度保存率が確認された。よって、本発明組成物は、４０℃の条件下においても高い安定性を有することが示された。【００８２】
（実施例７）光安定性試験
（１）試験方法
実施例１に準じ、ＣＳ、ＨＡ、及びＤ−ソルビトールを含有する水性組成物を調製し、これをシリンジ（ポリオレフィン樹脂製）に充填した。光安定性試験機（型番ＬＴ−１２０  Ｄ３Ｊ、ナガノサイエンス社製）を用いて、２５℃の条件下で、同シリンジに２０００ｌｘ／ｈｒの光を２５日間照射した（曝光量：１２０万ｌｘ・ｈｒ。総近紫外放射エネルギー：２００Ｗ・ｈ／ｍ２以上）。照射前後の各組成物の粘度を実施例１に準じて測定し、粘度保存率を算出した。なお、アルミ箔で遮光したシリンジを対照とした。【００８３】
（２）結果
曝光群と遮光群（対照）の粘度保存率は、それぞれ９５．４％、９７．６％であり、高い粘度保存率が確認された。よって、本発明組成物は、保存時の遮光が不要であることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００８４】
本発明組成物は、ＣＳ及びＨＡを含有する安定化された水性組成物であるため、眼科用組成物、特に眼科手術補助剤として利用できることから、産業上利用可能性を有している。
【国際調査報告】
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