(57)【要約】      （修正有）【課題】生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩をベースとし、１種以上の他の多糖類や抗菌活性のある化合物を適宜含み、表層創傷，特に慢性的創傷、例えば静脈瘤性潰瘍を治療するために使用可能な表層創傷治療用混合物に関するものであり、また前記混合物を含有する被覆剤を提供する。【解決手段】創傷と接触する面に生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩とオクテニジン二塩酸塩との重量比５００：１の混合物から形成される被膜（Ｐ）を含む接触層（Ｋ）を含むことを特徴とする。さらに、多層形態であり、１以上の吸収層Ａ−１、Ａ−２及び表面層（Ｒ）を更に含み、全層が創傷から、創傷と接触する面又は両面において被膜（Ｐ）を含む接触層（Ｋ）、１以上の吸収層及び表面層（Ｒ）の順に配列されている。【選択図】図１
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【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩を含む創傷治療補助用の混合物であって，オクテニジン二塩酸塩，セトリミド，塩化ベンザルコニウム，臭化ベンザルコニウム，クロルヘキシジン，ジグルコン酸クロルヘキシジン，ポリヘキサメチレンビグアニド，臭化カルベトペンデシニウム，臭化セチルトリメチルアンモニウム，及び任意の比率のこれらの混合物から成る群より選択される抗菌物質を更に含むことを特徴とする混合物。
【請求項２】
天然又は修飾多糖類，ヒアルロナン，キサンタン，シゾフィラン，キトサン，グルカン，アルギン酸塩，セルロース，β‐１‐３‐グルカン，及びこれらの混合物から成る群より選択される１種以上の多糖類を更に含むことを特徴とする請求項１記載の混合物。
【請求項３】
前記抗菌物質がオクテニジン二塩酸塩であることを特徴とする請求項１又は２記載の混合物。
【請求項４】
生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩とオクテニジン二塩酸塩とを５００：１の重量比で含むことを特徴とする請求項１〜３いずれか１項記載の混合物。
【請求項５】
前記修飾多糖類が共有結合分子又は官能基を有する多糖類であり，前記分子は同一の多糖類，又は別の多糖類，同一又は異なる分子から構成される合成ポリマー又は重合もしくは架橋多糖類とすることを特徴とする請求項１〜４いずれか１項記載の混合物。
【請求項６】
抗菌効果を高める補助剤，例えばＥＤＴＡ，ベタイン及び２‐フェノキシエタノール等のキレート剤を更に含むことを特徴とする請求項１〜５いずれか１項記載の混合物。
【請求項７】
ブドウ糖，果糖及びショ糖から成る群より選択される糖類，及び／又は塩化ナトリウム，塩化カリウム，ヨウ化カリウム，塩化マグネシウム，リン酸水素ナトリウム，リン酸二水素ナトリウム，硫化亜鉛から成る群より選択される電解質，及び／又はミツバチプロポリス，オリーブ油，ティーツリー油，オーク樹木，キンセンカ，ミント，又は柑橘系のエキスから成る群より選択される植物エキス又は他の天然産物，或いは前記物質の任意の組み合わせによる混合物を更に含むことを特徴とする請求項１〜６いずれか１項記載の混合物。
【請求項８】
化学的混合物又は物理的混合物の形態であることを特徴とする請求項１〜７いずれか１項記載の混合物。
【請求項９】
前記化学的混合物がアルコール含有水溶液であることを特徴とする請求項８記載の混合物。
【請求項１０】
前記物理的混合物がその構造内に抗菌物質を含有する多糖繊維の層であることを特徴とする請求項８記載の混合物。
【請求項１１】
創傷と接触する面に請求項１〜１０いずれか１項記載の混合物から形成される被膜（Ｐ）を含む接触層（Ｋ）を含むことを特徴とする抗菌効果を有する創傷治療補助用被覆剤。
【請求項１２】
多層形態であり，１以上の吸収層（Ａ）及び表面層（Ｒ）を更に含み，全層が創傷から：前記創傷と接触する面又は両面において請求項１〜１０いずれか１項の混合物から形成される前記被膜（Ｐ）を含む前記接触層（Ｋ）；１以上の吸収層（Ａ）及び表面層（Ｒ）の順に配列されていることを特徴とする請求項１１記載の被覆剤。
【請求項１３】
前記接触層が好ましくはポリアミド（ＰＡＤ）モノフィラメント，場合によりステープル繊維製の織地又は編地から；不織布又は多孔膜，ポリウレタン，ポリエステル，ビスコース，前記繊維又は他の材料の混合物，例えばポリプロピレン等の合成繊維から形成されることを特徴とする請求項１１又は１２記載の被覆剤。
【請求項１４】
請求項１〜１０いずれか１項記載の前記混合物から形成される前記被膜（Ｐ）が凍結乾燥物又は乾燥被膜の形態とすることを特徴とする請求項１１〜１３いずれか１項記載の被覆剤。
【請求項１５】
前記被膜（Ｐ）が請求項９記載の前記化学的混合物の凍結乾燥又は乾燥した層，又は，請求項１０記載の前記物理的混合物の層であることを特徴とする請求項１１〜１４いずれか１項記載の被覆剤。
【請求項１６】
ポリエステル，ビスコース，ポリアミド，ポリエチレン，ポリプロピレン，キサンタン又はセルロース誘導体等の多糖類，超吸収材料，織布又は不織布繊維と超吸収体との組み合わせ，又は前記材料の混合物から成る群より選択される材料から調製された１以上の吸収層（Ａ）を含むことを特徴とする請求項１２〜１５いずれか１項記載の被覆剤。
【請求項１７】
前記創傷から吸収能が高い順に配列された吸収層（Ａ）を更に含むことを特徴とする請求項１２〜１６いずれか１項記載の被覆剤。
【請求項１８】
吸収層（Ａ‐１）及び（Ａ‐２）を含み，前記吸収層（Ａ‐１）は前記創傷に隣接し，１００％ポリエステルから成り，前記吸収層（Ａ‐２）は前記創傷から更に離間しており，ポリエステルとビスコースとの１：１の混合物から形成されていることを特徴とする請求項１７記載の被覆剤。
【請求項１９】
前記表面層（Ｒ）が好ましくは不織布ポリエステル生地から調製され，場合により好適な抗菌物質による含浸により，例えば竹から得られた抗菌繊維の含有により，又は銀微粒子の含有により抗菌処理されていることを特徴とする請求項１２〜１８いずれか１項記載の被覆剤。
【請求項２０】
前記被膜（Ｐ）が沈殿多糖類繊維層から成り，その層上に，抗菌物質溶液の層を塗布し，多糖被膜の量は少なくとも０．１mg/m2であり，抗菌物質被膜の量は少なくとも０．０００１mg/m2であることを特徴とする請求項１１〜１９いずれか１項記載の被覆剤。
【請求項２１】
前記多糖類がヒアルロナンであり，前記多糖類被膜の量は１〜５０g/m2の範囲内にあり，前記抗菌物質が二塩化オクテニジンであり，オクテニジン二塩酸塩被膜の量は０．００１〜０．５g/m2の範囲内にあることを特徴とする請求項２０記載の被覆剤。
【請求項２２】
ヒアルロナン被膜の量が５〜２０g/m2の範囲内にあり，前記オクテニジン二塩酸塩被膜の量が１０〜４０mg/m2の範囲内にあることを特徴とする請求項２１記載の被覆剤。
【請求項２３】
前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）との間で１又は複数の吸収層（Ａ）を閉止するために，前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）とをその縁部で互いに接合することを特徴とする請求項１２〜２２いずれか１項記載の被覆剤。
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術的解決策は，生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩をベースとし，１種以上の他の多糖類及び抗菌活性を有する化合物を適宜含み，表層創傷，特に慢性的創傷，例えば静脈瘤性潰瘍を治療するために使用可能な表層創傷治療用混合物に関するものであり，又，前記混合物を含有する被覆剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
創傷治療，特に異常創傷治療は複雑なプロセスであり，その治療は，適切な治療条件を提供し，及び／又は活性化合物を含有する被覆剤により補助することが可能である。異常創傷治療には，過剰な創傷治療（線維症，癒着及び拘縮等），又は更に頻度の高い不十分な創傷治療（慢性静脈瘤性潰瘍又は糖尿病創傷等）の状態が挙げられる。近年，当技術分野では目覚ましい進歩が多くあるにもかかわらず，異常創傷治療は依然としてコスト，罹病率及び死亡率を上昇させる原因の代表例である。このことは全面的に，治療プロセスに良い影響を与え得る創傷治療に最適な環境を提供するための重要度に悪影響を与える（Stephanie R.Goldberg, Robert F.Diegelmann:Wound Healing Primer, Surgical Clinics of North America,第９０巻，第６号，２０１０年１２月，１１３３〜１１４６ページ）。
【０００３】
創傷治療の話題を扱った文献を概略した書評が発表されている：例えば，James R.Hanna,Joseph A.Giacopelliの出版物：A review of wound healing and wound dressing products,  The Journal of Foot and Ankle Surgery,第３６巻，第１号，１９９７年１〜２月，２〜１４ページ。著者らは創傷治療のために最適な環境を確保する適切な創傷被覆剤の重要性を特に論じている。そこでは，現行の被覆剤は通常，複数層から成り，接触層は最も大きく治療に影響を与えることが記述されている。
【０００４】
今日，多くの市販製品が市場に出ているが，それらは創傷被覆剤に課せられた重要な要件を十分に満たすものではないか，又は製造コストが高く，それにより大量使用に限界が生じるものである。通常，水分を調節し得る様々なゲル形成性の天然又は合成物質が使用されている。しかし，これらの物質は殆ど，創傷内の水分を調節するだけであり，身体の自己調節能を補助するものではない。更に，このような物質を利用すると気体透過性が低下し，よって創傷の呼吸が遮断される。包帯をする前に消毒薬を塗布することで感染を防止するが，これは消毒効果が短期間に過ぎないことを意味している。湿潤環境が感染の増強を促進し，よって患者の症状を大幅に悪化させるリスクがあることから，これらの創傷被覆剤は慢性的創傷には適用することができない。
【０００５】
多くの特許文書や出版物が創傷被覆剤の主成分としてヒアルロナンの応用を述べているが，これら製剤は高額であることから，さほど多くは市販されていない。したがってヒアルロナンの実用的用途は体内（関節内注射）のみを目的としており，場合により特別な用途（眼科，コンタクトレンズ着用患者のための眼表面湿潤用点眼薬）に使用しているのが現状である。
【０００６】
ヒアルロナンの商業的応用は，米国特許第４７３６０２４号に記載されている他の活性物質と組み合わせたヒアルロナンをベースとした製剤で説明されている。製品は特に眼科に指定されており，使用する薬理学的活性物質には例えば，カナマイシン，ネオマイシン，テトラサイクリン，クロラムフェニコール及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０００７】
米国特許第５１２８１３６号には，創傷脱水及び感染の予防用，すなわち既存の製剤と同様の目的で使用する製剤が記載されている。しかし本考案による製剤とは異なり，その製剤は創傷治療に影響を与えない主成分として可溶コラーゲンを含有しており，ヒアルロン酸又はその塩は含有していない。米国特許第５１２８１３６号の短所は，コラーゲンが炎症等の望ましくない反応を引き起こす可能性を有することである。別の短所としては，その液体は塗布後に固体ゲルへと相が変わり，気体透過を遮断することである。
【０００８】
本考案の内容
現存する創傷治療補助用化合物の前記短所は，本考案の混合物によって解消され，該混合物は，生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩と，オクテニジン二塩酸塩，セトリミド，塩化ベンザルコニウム，臭化ベンザルコニウム，クロルヘキシジン，ヒビテン，ポリヘキサメチレンビグアニド，臭化カルベトペンデシニウム，臭化セチルトリメチルアンモニウム，及び任意の比率のこれらの混合物から成る群より選択される抗菌物質とを含む。前記混合物は，天然又は修飾多糖類，ヒアルロナン，キサンタン，シゾフィラン，キトサン，グルカン，アルギン酸塩，セルロース，β‐１‐３‐グルカン，及びこれらの混合物から成る群より選択される１種以上の多糖類；及び，任意で抗菌効果を高める補助剤，例えばＥＤＴＡ，ベタイン及び２‐フェノキシエタノール等のキレート剤を更に含むことができる。前記混合物は，任意で，ブドウ糖，果糖及びショ糖から成る群より選択される糖類，及び／又は塩化ナトリウム，塩化カリウム，ヨウ化カリウム，塩化マグネシウム，リン酸水素ナトリウム，リン酸二水素ナトリウム，硫化亜鉛から成る群より選択される電解質，及び／又はミツバチプロポリス，オリーブ油，ティーツリー油，オーク樹木，キンセンカ，ミント，又は柑橘系のエキスから成る群より選択される植物エキス又は他の天然産物，又は前記物質の任意の組み合わせによる混合物も含むことができる。
【０００９】
本考案の混合物は好ましくは抗菌物質としてヒアルロン酸塩とオクテニジン二塩酸塩とを好ましくは５００：１の重量比で含む。
【００１０】
修飾多糖類という用語が共有結合分子又は官能基を有する多糖類を意味し，前記分子は同一の多糖類，又は別の多糖類，同一又は異なる分子から構成される合成ポリマー又は重合もしくは架橋多糖類とする。
【００１１】
前記混合物は化学的又は物理的混合物の形態とすることも可能であり，ここでは化学的混合物はアルコール含有水溶液であることが好ましく，物理的混合物はその構造内に抗菌物質を含有する多糖繊維の層であることが好ましい。
【００１２】
更に本考案は，単層又は多層構成の形態である創傷治療補助用の被覆剤に関する。多層構成は創傷側から順に以下のように配列した層から成る：片側面が創傷と接触するように付与された接触層（Ｋ），抗菌物質含有多糖類，すなわち本考案による前記混合物（化学的又は物理的混合物）から形成される被膜（Ｐ），次に，１層以上の吸収層（Ａ）及び表面層（Ｒ）を付与する。したがって下方の接触層（Ｋ）は，創傷と接触する目的の片側（下側）で，抗菌物質含有多糖混合物から形成される被膜（Ｐ）を含み，他方（上側）の面は１層以上の吸収層（Ａ又はＡ‐１，Ａ‐２等）と隣接している。創傷から最も離間した最上吸収層の上面は表面層（Ｒ）と接触している。全層はその縁部で接合することが可能であり，例えば１０×１０cmの寸法の所謂ティーバッグを形成する。１層の被覆剤の場合，その構成は，多糖類と抗菌物質との混合物から形成された被膜（Ｐ）を有する接触層（Ｋ）のみから成るものであり，ここでは接触層（Ｋ）は高吸収能を有する生地（超吸収体にもなり得る）から構成できる。
【００１３】
接触層はポリアミド（ＰＡＤ）モノフィラメント，場合によりステープル繊維製の織地又は編地から；不織布又は多孔膜，ポリウレタン，ポリエステル，ビスコース，これら繊維又は他の材料の混合物，例えばポリプロピレン等の合成繊維から形成されることが好ましい。被膜（Ｐ）は好ましくは，凍結乾燥物又は乾燥被膜の形態であること，より具体的には，化学的混合物の凍結乾燥層もしくは乾燥層，又は物理的混合物の層の形態とし得る。１又は複数の吸収層（Ａ）は，ポリエステル，ビスコース，ポリアミド，ポリエチレン，ポリプロピレン，多糖類，例えばキサンタン又はセルロース誘導体，超吸収材料，織布又は不織布繊維と超吸収体との組み合わせ，又は前記材料の混合物から成る群より選択される材料から形成することが好ましい。吸収層（Ａ）が更に多い場合，創傷から吸収能が高い順にそれらを配列することが好ましく，例えば前記吸収層（Ａ‐１）は創傷に隣接し，１００％ポリエステルから形成され，前記吸収層（Ａ‐２）は前記創傷から更に離間しており，ポリエステルとビスコースとの１：１混合物から成る。前記表面層（Ｒ）が好ましくは不織布ポリエステル生地から調製され，場合により好適な抗菌物質による含浸により，例えば竹から得られた抗菌繊維の含有により，又は銀微粒子の含有により抗菌処理され得る。
【００１４】
前記被膜（Ｐ）が沈殿多糖類繊維層から成り得て，その層上に，抗菌物質溶液の層を塗布し，多糖被膜の量は少なくとも０．１mg/m2であり，抗菌物質被膜の量は少なくとも０．０００１mg/m2である。ヒアルロナンが多糖類として使用され，二塩化オクテニジンが抗菌物質として使用された場合，ヒアルロナン被膜の量が１〜５０g/m2の範囲内にあり，オクテニジン二塩酸塩の被膜の量は０．００１〜０．５g/m2の範囲内である。より好ましくは，前記ヒアルロナン被膜の量が５〜２０g/m2の範囲内にあり，前記オクテニジン二塩酸塩被膜の量が１０〜４０mg/m2の範囲内にある。
【００１５】
前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）との間で１又は複数の吸収層（Ａ）を閉止するために，前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）とをその端部で互いに接合する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】被覆剤の断面図であり，下側面は，多糖類と抗菌物質との混合物の被膜Ｐを有して１００％ポリアミドから成る接触層Ｋであり，次に，１００％ポリエステルから成る第１吸収層Ａ‐１，５０％ポリエステル及び５０％ビスコースの混合物から成る第２吸収層Ａ‐２，この上に１００％ポリエステルから成る表面層Ｒが付与される。層Ｋと層Ｒとは「ティーバッグ」のように接合し，その内部には茶葉ではなく吸収層が入っている。
【図２】多糖被膜の方向から見た被覆領域の図。端部Ｓは接合部により形成され（図１でＫ及びＲと符号を付与した層を接合する），部位Ｎは多糖及び抗菌物質の混合物からなる被膜である。
【図３】健常ラットモデルにおける創傷治療の有効性を示すグラフであり，ここでは実施例１の被覆剤，及び製剤を全く含まない（すなわち多糖類も抗菌物質も含まない）ガーゼから成る包帯を使用し，創傷の治癒面積を治療時間に対して測定した。
【図４】健常ミニブタモデルにおける創傷治療の有効性を示すグラフであり，ここでは実施例１の被覆剤，及び同じ生地材料から成る同じ構造の対照包帯を使用したが製剤被膜は全く使用せずに（すなわち多糖及び抗菌物質を使用せずに），創傷の治癒面積を治療時間に対して測定した。
【図５】ミニブタモデルにおける，実施例１の製剤及び対照包帯（図４に関する記述を参照）の抗菌効果全体の有効性を示すグラフである。
【図６】ミニブタモデルにおける，「Ｇ」桿菌上での実施例１の製剤及び対照包帯（図４に関する記述を参照）の抗菌効果を示すグラフである。
【００１７】
実施例
実施例１
ヒアルロナン，オクテニジン二塩酸塩，及び２つの異なる吸収体層を含む凍結乾燥させた被覆剤
オクテニジン二塩酸塩（１０mg）を１mlの無水エタノールに溶解し，その後，この溶液３０μｌを採取し，注射用滅菌水で１０mlにする。この溶液に，分子量１，６５０，０００ｇ／molのヒアルロナンナトリウム（１５０mg）を攪拌しながら徐々に添加し，１２時間攪拌する。得られた粘性溶液を，１mmの幅及び１０×１０cmの孔を有するテンプレートを使用して，寸法１３×１３cmの補助生地（接触層）上に均一に塗布する。この補助生地は２２dtexのポリアミド「Ｍ」のモノフィラメントから成る４０g/m2編み込み格子である。好適な支持体に塗布された被膜を有する接触層を急速に−７０℃まで凍結させた後，凍結乾燥機に移し（被膜は凍結したままでなければならない），凍結乾燥させる。得られたスポンジ状の白色多孔弾性凍結乾燥物を接触層に緊密に接着し，一部が生地の材料の内部にあるが，堆積した材料の大部分は生地の片側にある。載置する基部，例えば生地を伸長させるテーブル又はフレームと凍結乾燥物が接触するように接触層を配置し（すなわち被膜の大部分を基部に向ける），１０×１０cm四方の１４０g/m2ポリエステル製不織布（第１吸収層）をその上に配置する。第１吸収層上に，第２吸収層を配置する（ポリエステル及びビスコース１：１から成る１０×１０cm四方の１４０g/m2不織布）。第２吸収層上に，寸法１３×１３cmの３０g/m2不織ポリエステルから形成された表面層を配置する。熱による損傷を避けるために吸収層から好ましい距離をとり，接触層と表面層を接合させることで被覆剤を仕上げる。次いで，表面層と接触層の余分な端部を切断し，約１１×１１cm四方の最終製品を製作する。
接触層を創傷に向けるようにして，得られた四角形の被覆剤を創傷に当て，その後第２被覆剤で固定する。高滲出性の創傷に，乾燥した被覆剤を当てる。低滲出性の創傷では，使用前に５〜１０mlの生理溶液，滅菌水又は飲料水により前記接触層に水分を与える。乾燥した創傷では常に，１０mlの好適な液体（上記の例）により被覆剤に水分を与えることが必要である。この被覆剤は最長で３又は４日間，創傷に当てておき，その後，包帯交換することが可能である。滲出が大量である場合，必要な時は何度でも第２被覆剤のみを交換し，第１の被覆剤は交換しない。市販の超吸収体又は別の適切な系を使用することで第２被覆剤の吸収能が高まる。
【００１８】
実施例２
ヒアルロナン，オクテニジン二塩酸塩，及び２つの異なる吸収体層を含む乾燥させた被覆剤
オクテニジン二塩酸塩（１０mg）を１mlの無水エタノールに溶解し，この溶液３０μｌを採取し，注射用滅菌水及びイソプロパノール１：１（すなわちイソプロパノール５０％溶液）で１０mlにする。この溶液に，分子量１，６５０，０００ｇ／molのヒアルロナンナトリウム（１５０mg）を攪拌しながら徐々に添加し，３０分間攪拌する。得られた粘性溶液を，１mmの幅及び１０×１０cmの孔を有するテンプレートを使用して，寸法１３×１３cmの補助生地（接触層）上に均一に塗布し，この補助生地は２２dtexのポリアミド「Ｍ」のモノフィラメントから成る４０g/m2の編み込み格子である。好適な支持体に堆積させた溶液を有する接触層を４０℃で２．５時間オーブン乾燥させるか，又は好適な乾燥プロファイルを利用する（例えば，４０℃で６０分間乾燥させ，７０℃で３０分間加熱し，７０℃で１５分間経過した後，４０℃に冷却する）。得られたガラス状の弾性透明（無色）フィルムを接触層に緊密に接着させ，一部が生地材料の内部にあるが，堆積した材料の大部分は生地の片側面にあり，生地を固定する支持体の表面と同じ構造を有する；支持体が滑らかであれば，フィルムもまた滑らかである；やや凹んでいる補助体がより好ましい。被膜が基部に接触するように接触層を配置し（すなわち被膜の大部分を基部に向ける），１０×１０cm四方の１４０g/m2ポリエステル製不織布（第１吸収層）をその上に配置する。第１吸収層上に，ポリエステル及びビスコース１：１から形成される１０×１０cm四方の１４０g/m2不織布である第２吸収層を配置する。第２吸収層上に，寸法１３×１３cmの３０g/m2の不織ポリエステルから形成された表面層を配置する。熱による損傷を避けるために吸収層から好ましい距離をとり，接触層と表面層を接合させることで被覆剤を仕上げる。次いで，表面層と接触層の余分な端部を切断し，（約１１×１１cm四方の）最終製品を製作する。
実施例１と同様に，接触層を体に向けるようにして，得られた被覆剤を創傷に当てる。フィルムと凍結乾燥物との違いは，フィルムは気体用の孔が少なく，より速く溶解することである。したがって，慢性的創傷を標準的治療プロセスに転用する場合，特に治療プロセスの第１段階ではフィルムを使用することが好ましい。肉芽組織が被覆剤に相互浸透する場合，第２段階が始まるときに，すなわち肉芽組織が大量に形成され始めるときに，凍結乾燥被覆剤，又は代わりになる他の被覆剤を使用することが可能である。
【００１９】
実施例３
ヒアルロナン，オクテニジン二塩酸塩，及び２つの異なる吸収体層を含む線維状の被覆剤
水酸化ナトリウム（６mg）を１００mlの滅菌水に溶解し，その後，分子量１，６５０，０００ｇ／molのヒアルロナンナトリウム８ｇを攪拌しながら徐々に添加し，その溶液を１２時間攪拌する。得られた粘性溶液をシリンジに充填し，４００mlの濃酢酸（約９８％）及び１００mlのイソプロパノール（約９９％）から成る沈殿槽内に押出する。得られた繊維を槽内に放置し，その長さは例えば高速回転ナイフ（例えば一般的なミキサーに類似した機械）で変更することが可能である。その後，より短い繊維の溶液を接触生地及び好適な多孔性半透膜（例えば，生地を配置する貫通孔を有する固体パネル）でろ過し，約１５g/m2の容量を有する生地の層を形成する。適宜，多孔性半透膜上に繊維の被膜を調製し，その後それを転写する（例えば接触層上で「再印刷」により）ことが可能である。接触生地上の繊維層を，好適な液体，例えばイソプロパノールと水との混合液で洗浄する（確実に繊維を溶解させないように，イソプロパノール濃度を６０％超にする必要がある）。その後，繊維を基部に貼付け，かつ繊維同士を付着させるために，多孔構造を損傷させないように洗浄した層を規定の方法で押圧する。寸法１０×１０cmの繊維の被膜を有する１３×１３cm四方の接触層が得られるように，支持体又は接触生地及び繊維の層の寸法を最終的に修正する。オクテニジン二塩酸塩（１０mg）を１mlの無水エタノールに溶解し，その後，この溶液３０μｌを採取し，注射用滅菌水及びイソプロパノール１：１（すなわちイソプロパノール５０％溶液）の混合液で２mlにする。その後，オクテニジン二塩酸塩溶液を，例えばスプレーコーティングにより繊維被膜の全域に均一に塗布し，適宜，繊維を押圧する（繊維表面が僅かに溶解し，これにより繊維同士の付着及び繊維の接触生地への付着が改善される）。このように，オクテニジン二塩酸塩，すなわち抗菌物質は多糖繊維構造を透過し，多糖（単数又は複数）及び抗菌物質の物理的混合物が形成される。好適な支持体に付着させた繊維被膜を有する接触層を４０℃で２．５時間オーブン乾燥させるか，又は好適な乾燥プロファイルを利用する（例えば，４０℃で６０分間乾燥させ，７０℃で３０分間加熱し，７０℃で１５分間経過した後，４０℃に冷却する）。創傷被覆剤を得る更なる過程及びその使用は実施例１と同様である。繊維被膜は実施例２で調製したフィルムより多孔だが，同時に，孔の構造は実施例１に記載した凍結乾燥物のものとは異なる。繊維被膜を有する被覆剤の性質は，フィルムのそれよりも，凍結乾燥物の性質に類似している。
【００２０】
実施例４
ヒアルロナンの一部と他の物質又は物質の混合物との代替
実施例１，２又は３と類似のプロセスを利用するが，０．１〜９９．９％のヒアルロナンを，他の多糖類，例えばセルロース誘導体，キサンタン，アルギン酸塩，シゾフィラン，キトサン，グルカン，又は糖類，例えばブドウ糖，果糖，ショ糖，或いは電解質，例えば塩化ナトリウム，塩化カリウム，ヨウ化カリウム，塩化マグネシウム，リン酸水素ナトリウム，リン酸二水素ナトリウム，硫化亜鉛，又は植物エキス又は好適な天然産物，例えばプロポリス，オリーブ油，ティーツリー油，オーク樹木，キンセンカ，ミント，又は柑橘系のエキス，或いは前記物質の任意の組み合わせによる混合物に置換する。初期ヒアルロナン量を０．１〜９９．９％に，また別の物質又は物質の混合物を元のヒアルロナン量より多く使用して，調合を僅かに変更することも可能である。例えば，実施例１による調合では，ヒアルロナンを僅か１０mgではなく，代わりにヒアルロナンを１５０mg使用し，そこにキサンタン１５０mgを添加し，そうすることで多糖類の総量はヒアルロナンの元の量より多くなる（元の１５０mgと比較すると，混合物は１６０mg）。他の物質又は物質の混合物はその飽和溶液に相当する濃度まで使用可能である。この変更の目的は，高張環境を得ることであり，これは特定の創傷，大部分は慢性創傷（特に壊死溶解）の治療のいくつかの段階に有効である。
【００２１】
実施例５
オクテニジン二塩酸塩と他の物質又は物質の混合物との代替
実施例１，２，３又は４と類似のプロセスを利用するが，オクテニジン二塩酸塩を好適な濃度で（面積１０×１０cm当たりで計算する）別の好適な抗菌物質に置換する。例えば，１．５mgの塩化ベンザルコニウムが使用できる；３．５mgのクロルヘキシジン；０．５mgのＰＨＭＢ；又は様々な量の前記物質とオクテニジン二塩酸塩との任意の組み合わせ（場合によりオクテニジン二塩酸塩は含まない）の混合物。
【００２２】
実施例６
製剤の有効性の評価（抗菌有効性試験，前臨床評価）
使用のモデル，簡単な説明
抗菌有効性をin vitroで試験した。数日後，その試料をバッチ式で試験した。試料を滅菌ピンセットで滅菌ガラス管に移し（固体被覆剤の場合），液体混合物をピペットで管に移した。１５mlの培地ＢＨＩ（ブレインハートインフュージョン培地  ；ハイ-メディア(Hi-Media)）を各管に添加し，試料に以下の微生物を植菌した：黄色ブドウ球菌亜種アウレウスＣＣＭ４５１６（グラム陽性球菌），大腸菌ＣＣＭ４５１７（グラム陰性桿菌），緑膿菌ＣＣＭ１９６１（グラム陰性非発酵桿菌），枯草菌亜種（Bacillus subtilis subsp. spizizenii）ＣＣＭ１９９９（胞子形成グラム陽性桿菌），アスペルギルスニガーＣＣＭ８２２２（真菌）。培地の生育特性を試験した。金属栓で管に蓋をして，培養のために恒温室に移した。液体試料を２４〜４８時間培養し，固体被覆剤試料を３０〜３５℃の範囲の温度で１週間培養し，その翌週は２０〜２５℃で培養した。その期間の後，混濁の有無を調べた。存在する微生物の培養を検証するために，血液寒天ＫＡ（メルク株式会社(Merck)）を入れたペトリ皿に滅菌接種ループを用いて混濁した試料を播種した。そのインキュベーションは３０〜３５℃で５日間行った。
健常ラット（雄ＺＤＦラット）の切除創傷モデルを使用して治療効果を評価した。創傷２×２cmを調製し，創傷の写真記録のコンピュータ評価により，その治癒を１週間に２回，創傷縮小に基づいて測定した。
また，各体側に２５×２５mmの５個所の深部フルプロファイル切除をし，麻酔で調製したミネソタ型ミニブタモデルで，Van Dorp Verhoeven MC,Koerten HK,Van Der Nat-Van Der Meij TH,Van Blitterswijk CA,Ponec M:Dermal regeneration in full-thickness wounds in Yucatan miniature pigs using a biodegradable copolymer,Wound Repair Regen,１９８８年；６（６）：５５６−６８に記載された方法により，治療効果を評価した。その後，治療が完了するまで対照実験被覆剤で創傷を被覆した。１週間に２回，微生物試験を行うために定期的に包帯交換，写真記録(fotodocumentation)及び剥離を行った。画像分析に基づき，創傷閉鎖（縮小，上皮化）の速さを測定し，培養試験に基づいて創傷微生物コロニー形成に対する被覆剤の効果も測定した。
【００２３】
活性混合物の微生物効率（実施例１による液体）
実施例１による被膜用液体混合物（粘性溶液）の試料では，オクテニジン二塩酸塩含有量が４mgのとき，大腸菌株増殖（初期懸濁液  ２０，０００ＣＦＵ／ml），黄色ブドウ球菌（２０，０００ＣＦＵ／ml），緑膿菌（４０，０００ＣＦＵ／ml及び枯草菌（１，０００ＣＦＵ／ml）は完全に（すなわち１００％）阻害されていた。１mgのオクテニジン二塩酸塩を使用した場合，枯草菌及び黄色ブドウ球菌株でのみ阻害が１００％で，大腸菌株では９９．５％，緑膿菌株では９０％であった。
仕上げた被覆剤の試料では，接触層の周辺に阻害領域が見られたが，被覆剤から大幅に離間した場所では，微生物の増殖は阻害されていなかった。他方，このことは抗菌物質が被覆剤から周囲環境へ放出されず，よって患者が悪影響を受けない証拠となっている。
【００２４】
活性混合物の微生物効率（実施例５による液体）
実施例５による被膜用液体混合物（粘性溶液）の試料では，塩化ベンザルコニウム（ＢＡＣ）含有量が１６mg；又はクロルヘキシジンが４０mgもしくはＰＨＭＢが４０mgのとき，大腸菌株増殖（初期懸濁液  １，８００ＣＦＵ／ml），黄色ブドウ球菌（６００ＣＦＵ／ml）及びアスペルギルスニガー（６５ＣＦＵ／ml）は完全に（すなわち１００％）阻害されていた。１．６mgのＢＡＣを使用した場合，黄色ブドウ球菌株でのみ阻害が１００％で，大腸菌株では１６％，アスペルギルスニガー株では８９％であった。４mgのクロルヘキシジンを使用した場合，大腸菌増殖では阻害が６１％で，黄色ブドウ球菌では９５％，アスペルギルスニガーでは３２％であった。４mgのポリヘキサメチレンビグアニド（ＰＨＭＢ）を使用した場合，大腸菌増殖の阻害は４４％で，アスペルギルスニガーでは５７％であった。
仕上げた被覆剤の試料では，実施例１の調製で記載されたものと類似の方法で阻害領域が見られた。したがって，適量の好適な抗菌物質を使用する場合，被覆剤は，特定の抗菌物質のみならず被覆剤の全体的な構造及び調製プロセスに基づいた類似の微生物阻害特性を有する。
【００２５】
実施例１の被覆剤，治療効果，健常ラットモデル
実施例１の被覆剤を使用した場合，創傷縮小が有意に促進され，ここでは，使用したモデルは治療の規模又は治療有効性を表している。治療していない対照の創傷（図３参照）と比較して，実施例１による被覆剤の使用により，特に創傷治療プロセスを損傷直後に開始すると創傷治療の時間が短縮されることは明らかである。治療していない創傷の場合，治療プロセスは損傷から約３日後に開始する。その後，それに続く創傷治癒の程度は，図３の両機能の類似したスロープに見られるように両ケースで類似している。健常ラットを使用したことから，慢性創傷での効果は評価できない。
【００２６】
実施例１の被覆剤，治療効果，健常ミニブタモデル
実施例１の被覆剤は，創傷閉鎖の速度（図４），及び減少した創傷における総細菌量（図５）に良好に影響を与えることが見出され，特にグラム陰性細菌でそれが観察された（図６）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】平成26年3月18日(2014.3.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】実用新案登録請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
創傷と接触する面に生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩とオクテニジン二塩酸塩との重量比５００：１の混合物から形成される被膜（Ｐ）を含む接触層（Ｋ）を含むことを特徴とする抗菌効果を有する創傷治療補助用被覆貼付剤。
【請求項２】
多層形態であり，１以上の吸収層（Ａ）及び表面層（Ｒ）を更に含み，全層が創傷から：前記創傷と接触する面又は両面において前記被膜（Ｐ）を含む前記接触層（Ｋ）；１以上の吸収層（Ａ）及び表面層（Ｒ）の順に配列されていることを特徴とする請求項１記載の被覆貼付剤。
【請求項３】
前記接触層が好ましくはポリアミド（ＰＡＤ）モノフィラメント，ステープル繊維製の織地又は編地から；不織布又は多孔膜，ポリウレタン，ポリエステル，ビスコース，ポリプロピレン，前記繊維の混合物から形成されることを特徴とする請求項１又は２記載の被覆貼付剤。
【請求項４】
前記被膜（Ｐ）が凍結乾燥物又は乾燥被膜の形態とすることを特徴とする請求項１〜３いずれか１項記載の被覆貼付剤。
【請求項５】
前記被膜（Ｐ）が化学的混合物の凍結乾燥又は乾燥した層，又は，物理的混合物の層であることを特徴とする請求項１〜４いずれか１項記載の被覆貼付剤。
【請求項６】
ポリエステル，ビスコース，ポリアミド，ポリエチレン，ポリプロピレン，多糖類，超吸収材料，これらの混合物，又は織布又は不織布繊維と超吸収体との組み合わせから成る群より選択される材料から調製された１以上の吸収層（Ａ）を含むことを特徴とする請求項２〜５いずれか１項記載の被覆貼付剤。
【請求項７】
前記創傷から吸収能が高い順に配列された吸収層（Ａ）を更に含むことを特徴とする請求項２〜６いずれか１項記載の被覆貼付剤。
【請求項８】
第１吸収層（Ａ‐１）及び第２吸収層（Ａ‐２）を含み，前記第１吸収層（Ａ‐１）は前記創傷に隣接し，１００％ポリエステルから成り，前記第２吸収層（Ａ‐２）は前記創傷から更に離間しており，ポリエステルとビスコースとの１：１の混合物から形成されていることを特徴とする請求項７記載の被覆貼付剤。
【請求項９】
前記表面層（Ｒ）が不織布ポリエステル生地から調製され，好適な抗菌物質による含浸により抗菌繊維の含有により，又は銀微粒子の含有により抗菌処理されていることを特徴とする請求項２〜８いずれか１項記載の被覆貼付剤。
【請求項１０】
前記被膜（Ｐ）が沈殿ヒアルロナン繊維層から成り，その層上に，オクテニジン二塩酸塩溶液の層を塗布し，ヒアルロナン被膜の量は少なくとも０．１mg/m2であり，オクテニジン二塩酸塩被膜の量は少なくとも０．０００１mg/m2であることを特徴とする請求項１〜９いずれか１項記載の被覆貼付剤。
【請求項１１】
前記ヒアルロナン被膜の量は１〜５０g/m2の範囲内にあり，前記オクテニジン二塩酸塩被膜の量は０．００１〜０．５g/m2の範囲内にあることを特徴とする請求項１０記載の被覆貼付剤。
【請求項１２】
前記ヒアルロナン被膜の量が５〜２０g/m2の範囲内にあり，前記オクテニジン二塩酸塩被膜の量が１０〜４０mg/m2の範囲内にあることを特徴とする請求項１１記載の被覆貼付剤。
【請求項１３】
前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）との間で１又は複数の吸収層（Ａ）を閉止するために，前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）とをその縁部で互いに接合することを特徴とする請求項２〜１２いずれか１項記載の被覆貼付剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術的解決策は，抗菌効果を有し，抗菌物質として生理学的に許容可能なヒアルロン酸塩とオクテニジン二塩酸塩とを含み，表層創傷，特に慢性的創傷，例えば静脈瘤性潰瘍を治療するために使用可能な表層創傷治療用被覆貼付剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
創傷治療，特に異常創傷治療は複雑なプロセスであり，その治療は，適切な治療条件を提供し，及び／又は活性化合物を含有する被覆剤により補助することが可能である。異常創傷治療には，過剰な創傷治療（線維症，癒着及び拘縮等），又は更に頻度の高い不十分な創傷治療（慢性静脈瘤性潰瘍又は糖尿病創傷等）の状態が挙げられる。近年，当技術分野では目覚ましい進歩が多くあるにもかかわらず，異常創傷治療は依然としてコスト，罹病率及び死亡率を上昇させる原因の代表例である。このことは全面的に，治療プロセスに良い影響を与え得る創傷治療に最適な環境を提供するための重要度に悪影響を与える（Stephanie R.Goldberg, Robert F.Diegelmann:Wound Healing Primer, Surgical Clinics of North America,第９０巻，第６号，２０１０年１２月，１１３３〜１１４６ページ）。
【０００３】
創傷治療の話題を扱った文献を概略した書評が発表されている：例えば，James R.Hanna,Joseph A.Giacopelliの出版物：A review of wound healing and wound dressing products,  The Journal of Foot and Ankle Surgery,第３６巻，第１号，１９９７年１〜２月，２〜１４ページ。著者らは創傷治療のために最適な環境を確保する適切な創傷被覆剤の重要性を特に論じている。そこでは，現行の被覆剤は通常，複数層から成り，接触層は最も大きく治療に影響を与えることが記述されている。
【０００４】
今日，多くの市販製品が市場に出ているが，それらは創傷被覆剤に課せられた重要な要件を十分に満たすものではないか，又は製造コストが高く，それにより大量使用に限界が生じるものである。通常，水分を調節し得る様々なゲル形成性の天然又は合成物質が使用されている。しかし，これらの物質は殆ど，創傷内の水分を調節するだけであり，身体の自己調節能を補助するものではない。更に，このような物質を利用すると気体透過性が低下し，よって創傷の呼吸が遮断される。包帯をする前に消毒薬を塗布することで感染を防止するが，これは消毒効果が短期間に過ぎないことを意味している。湿潤環境が感染の増強を促進し，よって患者の症状を大幅に悪化させるリスクがあることから，これらの創傷被覆剤は慢性的創傷には適用することができない。
【０００５】
多くの特許文書や出版物が創傷被覆剤の主成分としてヒアルロナンの応用を述べているが，これら製剤は高額であることから，さほど多くは市販されていない。したがってヒアルロナンの実用的用途は体内（関節内注射）のみを目的としており，場合により特別な用途（眼科，コンタクトレンズ着用患者のための眼表面湿潤用点眼薬）に使用しているのが現状である。
【０００６】
ヒアルロナンの商業的応用は，米国特許第４７３６０２４号に記載されている他の活性物質と組み合わせたヒアルロナンをベースとした製剤で説明されている。製品は特に眼科に指定されており，使用する薬理学的活性物質には例えば，カナマイシン，ネオマイシン，テトラサイクリン，クロラムフェニコール及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０００７】
米国特許第５１２８１３６号には，創傷脱水及び感染の予防用，すなわち既存の製剤と同様の目的で使用する製剤が記載されている。しかし本考案による製剤とは異なり，その製剤は創傷治療に影響を与えない主成分として可溶コラーゲンを含有しており，ヒアルロン酸又はその塩は含有していない。米国特許第５１２８１３６号の短所は，コラーゲンが炎症等の望ましくない反応を引き起こす可能性を有することである。別の短所としては，その液体は塗布後に固体ゲルへと相が変わり，気体透過を遮断することである。
【０００８】
本考案の内容
現存する創傷治療補助用化合物の前記短所は，多層構成の形態である創傷治療補助用の被覆貼付剤によって解消される。多層構成は創傷側から順に以下のように配列した層から成る：片側面が創傷と接触するように付与された接触層（Ｋ），抗菌物質含有多糖類，すなわち本考案による前記混合物（化学的又は物理的混合物）から形成される被膜（Ｐ），次に，１層以上の吸収層（Ａ）及び表面層（Ｒ）を付与する。したがって下方の接触層（Ｋ）は，創傷と接触する目的の片側（下側）で，ヒアルロン酸塩とオクテニジン二塩酸塩とを５００：１の重量比で含む混合物から形成される被膜（Ｐ）を含み，他方（上側）の面は１層以上の吸収層（Ａ又はＡ‐１，Ａ‐２等）と隣接している。創傷から最も離間した最上吸収層の上面は表面層（Ｒ）と接触している。全層はその縁部で接合することが可能であり，例えば１０×１０cmの寸法の所謂ティーバッグを形成する。１層の被覆貼付剤の場合，その構成は，ヒアルロン酸塩とオクテニジン二塩酸塩との混合物から形成された被膜（Ｐ）を有する接触層（Ｋ）のみから成るものであり，ここでは接触層（Ｋ）は高吸収能を有する生地（超吸収体にもなり得る）から構成できる。
【０００９】
接触層はポリアミド（ＰＡＤ）モノフィラメント，場合によりステープル繊維製の織地又は編地から；不織布又は多孔膜，ポリウレタン，ポリエステル，ビスコース，これら繊維又は他の材料の混合物，例えばポリプロピレン等の合成繊維から形成されることが好ましい。被膜（Ｐ）は好ましくは，凍結乾燥物又は乾燥被膜の形態であること，より具体的には，化学的混合物の凍結乾燥層もしくは乾燥層，又は物理的混合物の層の形態とし得る。１又は複数の吸収層（Ａ）は，ポリエステル，ビスコース，ポリアミド，ポリエチレン，ポリプロピレン，多糖類，例えばキサンタン又はセルロース誘導体，超吸収材料，織布又は不織布繊維と超吸収体との組み合わせ，又はこれらの混合物から成る群より選択される材料から形成することが好ましい。吸収層（Ａ）が更に第１吸収層（Ａ−１）及び第２吸収層（Ａ−２）を含む場合，創傷から吸収能が高い順にそれらを配列することが好ましく，例えば前記第１吸収層（Ａ‐１）は創傷に隣接し，１００％ポリエステルから形成され，前記第２吸収層（Ａ‐２）は前記創傷から更に離間しており，ポリエステルとビスコースとの１：１混合物から成る。前記表面層（Ｒ）が好ましくは不織布ポリエステル生地から調製され，場合により好適な抗菌物質による含浸により，例えば竹から得られた抗菌繊維の含有により，又は銀微粒子の含有により抗菌処理され得る。
【００１０】
前記被膜（Ｐ）が沈殿ヒアルロナン繊維層から成り得て，その層上に，オクテニジン二塩酸塩溶液の層を塗布し，ヒアルロナン被膜の量は少なくとも０．１mg/m2であり，オクテニジン二塩酸塩被膜の量は少なくとも０．０００１mg/m2である。好ましくは，ヒアルロナン被膜の量が１〜５０g/m2の範囲内にあり，オクテニジン二塩酸塩の被膜の量は０．００１〜０．５g/m2の範囲内である。より好ましくは，前記ヒアルロナン被膜の量が５〜２０g/m2の範囲内にあり，前記オクテニジン二塩酸塩被膜の量が１０〜４０mg/m2の範囲内にある。
【００１１】
前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）との間で１又は複数の吸収層（Ａ）を閉止するために，前記接触層（Ｋ）と前記表面層（Ｒ）とをその端部で互いに接合する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】被覆貼付剤の断面図であり，下側面は，多糖類と抗菌物質との混合物の被膜Ｐを有して１００％ポリアミドから成る接触層Ｋであり，次に，１００％ポリエステルから成る第１吸収層Ａ‐１，５０％ポリエステル及び５０％ビスコースの混合物から成る第２吸収層Ａ‐２，この上に１００％ポリエステルから成る表面層Ｒが付与される。層Ｋと層Ｒとは「ティーバッグ」のように接合し，その内部には茶葉ではなく吸収層が入っている。
【図２】多糖被膜の方向から見た被覆領域の図。端部Ｓは接合部により形成され（図１でＫ及びＲと符号を付与した層を接合する），部位Ｎは多糖及び抗菌物質の混合物からなる被膜である。
【図３】健常ラットモデルにおける創傷治療の有効性を示すグラフであり，ここでは実施例１の被覆貼付剤，及び製剤を全く含まない（すなわち多糖類も抗菌物質も含まない）ガーゼから成る包帯を使用し，創傷の治癒面積を治療時間に対して測定した。
【図４】健常ミニブタモデルにおける創傷治療の有効性を示すグラフであり，ここでは実施例１の被覆貼付剤，及び同じ生地材料から成る同じ構造の対照包帯を使用したが製剤被膜は全く使用せずに（すなわち多糖及び抗菌物質を使用せずに），創傷の治癒面積を治療時間に対して測定した。
【図５】ミニブタモデルにおける，実施例１の貼付剤及び対照包帯（図４に関する記述を参照）の抗菌効果全体の有効性を示すグラフである。
【図６】ミニブタモデルにおける，「Ｇ」桿菌上での実施例１の貼付剤及び対照包帯（図４に関する記述を参照）の抗菌効果を示すグラフである。
【００１３】
実施例
実施例１
ヒアルロナン，オクテニジン二塩酸塩，及び２つの異なる吸収体層を含む凍結乾燥させた被覆貼付剤
オクテニジン二塩酸塩（１０mg）を１mlの無水エタノールに溶解し，その後，この溶液３０μｌを採取し，注射用滅菌水で１０mlにする。この溶液に，分子量１，６５０，０００ｇ／molのヒアルロナンナトリウム（１５０mg）を攪拌しながら徐々に添加し，１２時間攪拌する。得られた粘性溶液を，１mmの幅及び１０×１０cmの孔を有するテンプレートを使用して，寸法１３×１３cmの補助生地（接触層）上に均一に塗布する。この補助生地は２２dtexのポリアミド「Ｍ」のモノフィラメントから成る４０g/m2編み込み格子である。好適な支持体に塗布された被膜を有する接触層を急速に−７０℃まで凍結させた後，凍結乾燥機に移し（被膜は凍結したままでなければならない），凍結乾燥させる。得られたスポンジ状の白色多孔弾性凍結乾燥物を接触層に緊密に接着し，一部が生地の材料の内部にあるが，堆積した材料の大部分は生地の片側にある。載置する基部，例えば生地を伸長させるテーブル又はフレームと凍結乾燥物が接触するように接触層を配置し（すなわち被膜の大部分を基部に向ける），１０×１０cm四方の１４０g/m2ポリエステル製不織布（第１吸収層）をその上に配置する。第１吸収層上に，第２吸収層を配置する（ポリエステル及びビスコース１：１から成る１０×１０cm四方の１４０g/m2不織布）。第２吸収層上に，寸法１３×１３cmの３０g/m2不織ポリエステルから形成された表面層を配置する。熱による損傷を避けるために吸収層から好ましい距離をとり，接触層と表面層を接合させることで被覆貼付剤を仕上げる。次いで，表面層と接触層の余分な端部を切断し，約１１×１１cm四方の最終製品を製作する。
接触層を創傷に向けるようにして，得られた四角形の被覆貼付剤を創傷に当て，その後第２被覆貼付剤で固定する。高滲出性の創傷に，乾燥した被覆貼付剤を当てる。低滲出性の創傷では，使用前に５〜１０mlの生理溶液，滅菌水又は飲料水により前記接触層に水分を与える。乾燥した創傷では常に，１０mlの好適な液体（上記の例）により被覆貼付剤に水分を与えることが必要である。この被覆貼付剤は最長で３又は４日間，創傷に当てておき，その後，包帯交換することが可能である。滲出が大量である場合，必要な時は何度でも第２被覆貼付剤のみを交換し，第１の被覆貼付剤は交換しない。市販の超吸収体又は別の適切な系を使用することで第２被覆貼付剤の吸収能が高まる。
【００１４】
実施例２
ヒアルロナン，オクテニジン二塩酸塩，及び２つの異なる吸収体層を含む乾燥させた被覆貼付剤
オクテニジン二塩酸塩（１０mg）を１mlの無水エタノールに溶解し，この溶液３０μｌを採取し，注射用滅菌水及びイソプロパノール１：１（すなわちイソプロパノール５０％溶液）で１０mlにする。この溶液に，分子量１，６５０，０００ｇ／molのヒアルロナンナトリウム（１５０mg）を攪拌しながら徐々に添加し，３０分間攪拌する。得られた粘性溶液を，１mmの幅及び１０×１０cmの孔を有するテンプレートを使用して，寸法１３×１３cmの補助生地（接触層）上に均一に塗布し，この補助生地は２２dtexのポリアミド「Ｍ」のモノフィラメントから成る４０g/m2の編み込み格子である。好適な支持体に堆積させた溶液を有する接触層を４０℃で２．５時間オーブン乾燥させるか，又は好適な乾燥プロファイルを利用する（例えば，４０℃で６０分間乾燥させ，７０℃で３０分間加熱し，７０℃で１５分間経過した後，４０℃に冷却する）。得られたガラス状の弾性透明（無色）フィルムを接触層に緊密に接着させ，一部が生地材料の内部にあるが，堆積した材料の大部分は生地の片側面にあり，生地を固定する支持体の表面と同じ構造を有する；支持体が滑らかであれば，フィルムもまた滑らかである；やや凹んでいる補助体がより好ましい。被膜が基部に接触するように接触層を配置し（すなわち被膜の大部分を基部に向ける），１０×１０cm四方の１４０g/m2ポリエステル製不織布（第１吸収層）をその上に配置する。第１吸収層上に，ポリエステル及びビスコース１：１から形成される１０×１０cm四方の１４０g/m2不織布である第２吸収層を配置する。第２吸収層上に，寸法１３×１３cmの３０g/m2の不織ポリエステルから形成された表面層を配置する。熱による損傷を避けるために吸収層から好ましい距離をとり，接触層と表面層を接合させることで被覆貼付剤を仕上げる。次いで，表面層と接触層の余分な端部を切断し，（約１１×１１cm四方の）最終製品を製作する。
実施例１と同様に，接触層を体に向けるようにして，得られた被覆貼付剤を創傷に当てる。フィルムと凍結乾燥物との違いは，フィルムは気体用の孔が少なく，より速く溶解することである。したがって，慢性的創傷を標準的治療プロセスに転用する場合，特に治療プロセスの第１段階ではフィルムを使用することが好ましい。肉芽組織が被覆貼付剤に相互浸透する場合，第２段階が始まるときに，すなわち肉芽組織が大量に形成され始めるときに，凍結乾燥被覆貼付剤，又は代わりになる他の被覆貼付剤を使用することが可能である。
【００１５】
実施例３
ヒアルロナン，オクテニジン二塩酸塩，及び２つの異なる吸収体層を含む線維状の被覆貼付剤
水酸化ナトリウム（６mg）を１００mlの滅菌水に溶解し，その後，分子量１，６５０，０００ｇ／molのヒアルロナンナトリウム８ｇを攪拌しながら徐々に添加し，その溶液を１２時間攪拌する。得られた粘性溶液をシリンジに充填し，４００mlの濃酢酸（約９８％）及び１００mlのイソプロパノール（約９９％）から成る沈殿槽内に押出する。得られた繊維を槽内に放置し，その長さは例えば高速回転ナイフ（例えば一般的なミキサーに類似した機械）で変更することが可能である。その後，より短い繊維の溶液を接触生地及び好適な多孔性半透膜（例えば，生地を配置する貫通孔を有する固体パネル）でろ過し，約１５g/m2の容量を有する生地の層を形成する。適宜，多孔性半透膜上に繊維の被膜を調製し，その後それを転写する（例えば接触層上で「再印刷」により）ことが可能である。接触生地上の繊維層を，好適な液体，例えばイソプロパノールと水との混合液で洗浄する（確実に繊維を溶解させないように，イソプロパノール濃度を６０％超にする必要がある）。その後，繊維を基部に貼付け，かつ繊維同士を付着させるために，多孔構造を損傷させないように洗浄した層を規定の方法で押圧する。寸法１０×１０cmの繊維の被膜を有する１３×１３cm四方の接触層が得られるように，支持体又は接触生地及び繊維の層の寸法を最終的に修正する。オクテニジン二塩酸塩（１０mg）を１mlの無水エタノールに溶解し，その後，この溶液３０μｌを採取し，注射用滅菌水及びイソプロパノール１：１（すなわちイソプロパノール５０％溶液）の混合液で２mlにする。その後，オクテニジン二塩酸塩溶液を，例えばスプレーコーティングにより繊維被膜の全域に均一に塗布し，適宜，繊維を押圧する（繊維表面が僅かに溶解し，これにより繊維同士の付着及び繊維の接触生地への付着が改善される）。このように，オクテニジン二塩酸塩，すなわち抗菌物質は多糖繊維構造を透過し，多糖（単数又は複数）及び抗菌物質の物理的混合物が形成される。好適な支持体に付着させた繊維被膜を有する接触層を４０℃で２．５時間オーブン乾燥させるか，又は好適な乾燥プロファイルを利用する（例えば，４０℃で６０分間乾燥させ，７０℃で３０分間加熱し，７０℃で１５分間経過した後，４０℃に冷却する）。創傷被覆貼付剤を得る更なる過程及びその使用は実施例１と同様である。繊維被膜は実施例２で調製したフィルムより多孔だが，同時に，孔の構造は実施例１に記載した凍結乾燥物のものとは異なる。繊維被膜を有する被覆貼付剤の性質は，フィルムのそれよりも，凍結乾燥物の性質に類似している。
【００１６】
実施例４
ヒアルロナンの一部と他の物質又は物質の混合物との代替
実施例１，２又は３と類似のプロセスを利用するが，０．１〜９９．９％のヒアルロナンを，他の多糖類，例えばセルロース誘導体，キサンタン，アルギン酸塩，シゾフィラン，キトサン，グルカン，又は糖類，例えばブドウ糖，果糖，ショ糖，或いは電解質，例えば塩化ナトリウム，塩化カリウム，ヨウ化カリウム，塩化マグネシウム，リン酸水素ナトリウム，リン酸二水素ナトリウム，硫化亜鉛，又は植物エキス又は好適な天然産物，例えばプロポリス，オリーブ油，ティーツリー油，オーク樹木，キンセンカ，ミント，又は柑橘系のエキス，或いは前記物質の任意の組み合わせによる混合物に置換する。初期ヒアルロナン量を０．１〜９９．９％に，また別の物質又は物質の混合物を元のヒアルロナン量より多く使用して，調合を僅かに変更することも可能である。例えば，実施例１による調合では，ヒアルロナンを僅か１０mgではなく，代わりにヒアルロナンを１５０mg使用し，そこにキサンタン１５０mgを添加し，そうすることで多糖類の総量はヒアルロナンの元の量より多くなる（元の１５０mgと比較すると，混合物は１６０mg）。他の物質又は物質の混合物はその飽和溶液に相当する濃度まで使用可能である。この変更の目的は，高張環境を得ることであり，これは特定の創傷，大部分は慢性創傷（特に壊死溶解）の治療のいくつかの段階に有効である。
【００１７】
実施例５
オクテニジン二塩酸塩と他の物質又は物質の混合物との代替
実施例１，２，３又は４と類似のプロセスを利用するが，オクテニジン二塩酸塩を好適な濃度で（面積１０×１０cm当たりで計算する）別の好適な抗菌物質に置換する。例えば，１．５mgの塩化ベンザルコニウムが使用できる；３．５mgのクロルヘキシジン；０．５mgのＰＨＭＢ；又は様々な量の前記物質とオクテニジン二塩酸塩との任意の組み合わせ（場合によりオクテニジン二塩酸塩は含まない）の混合物。
【００１８】
実施例６
製剤の有効性の評価（抗菌有効性試験，前臨床評価）
使用のモデル，簡単な説明
抗菌有効性をin vitroで試験した。数日後，その試料をバッチ式で試験した。試料を滅菌ピンセットで滅菌ガラス管に移し（固体被覆剤の場合），液体混合物をピペットで管に移した。１５mlの培地ＢＨＩ（ブレインハートインフュージョン培地；ハイ-メディア(Hi-Media)）を各管に添加し，試料に以下の微生物を植菌した：黄色ブドウ球菌亜種アウレウスＣＣＭ４５１６（グラム陽性球菌），大腸菌ＣＣＭ４５１７（グラム陰性桿菌），緑膿菌ＣＣＭ１９６１（グラム陰性非発酵桿菌），枯草菌亜種（Bacillus subtilis subsp. spizizenii）ＣＣＭ１９９９（胞子形成グラム陽性桿菌），アスペルギルスニガーＣＣＭ８２２２（真菌）。培地の生育特性を試験した。金属栓で管に蓋をして，培養のために恒温室に移した。液体試料を２４〜４８時間培養し，固体被覆剤試料を３０〜３５℃の範囲の温度で１週間培養し，その翌週は２０〜２５℃で培養した。その期間の後，混濁の有無を調べた。存在する微生物の培養を検証するために，血液寒天ＫＡ（メルク株式会社(Merck)）を入れたペトリ皿に滅菌接種ループを用いて混濁した試料を播種した。そのインキュベーションは３０〜３５℃で５日間行った。
健常ラット（雄ＺＤＦラット）の切除創傷モデルを使用して治療効果を評価した。創傷２×２cmを調製し，創傷の写真記録のコンピュータ評価により，その治癒を１週間に２回，創傷縮小に基づいて測定した。
また，各体側に２５×２５mmの５個所の深部フルプロファイル切除をし，麻酔で調製したミネソタ型ミニブタモデルで，Van Dorp Verhoeven MC,Koerten HK,Van Der Nat-Van Der Meij TH,Van Blitterswijk CA,Ponec M:Dermal regeneration in full-thickness wounds in Yucatan miniature pigs using a biodegradable copolymer,Wound Repair Regen,１９８８年；６（６）：５５６−６８に記載された方法により，治療効果を評価した。その後，治療が完了するまで対照実験被覆剤で創傷を被覆した。１週間に２回，微生物試験を行うために定期的に包帯交換，写真記録(fotodocumentation)及び剥離を行った。画像分析に基づき，創傷閉鎖（縮小，上皮化）の速さを測定し，培養試験に基づいて創傷微生物コロニー形成に対する被覆貼付剤の効果も測定した。
【００１９】
活性混合物の微生物効率（実施例１による液体）
実施例１による被膜用液体混合物（粘性溶液）の試料では，オクテニジン二塩酸塩含有量が４mgのとき，大腸菌株増殖（初期懸濁液  ２０，０００ＣＦＵ／ml），黄色ブドウ球菌（２０，０００ＣＦＵ／ml），緑膿菌（４０，０００ＣＦＵ／ml及び枯草菌（１，０００ＣＦＵ／ml）は完全に（すなわち１００％）阻害されていた。１mgのオクテニジン二塩酸塩を使用した場合，枯草菌及び黄色ブドウ球菌株でのみ阻害が１００％で，大腸菌株では９９．５％，緑膿菌株では９０％であった。
仕上げた被覆貼付剤の試料では，接触層の周辺に阻害領域が見られたが，被覆貼付剤から大幅に離間した場所では，微生物の増殖は阻害されていなかった。他方，このことは抗菌物質が被覆貼付剤から周囲環境へ放出されず，よって患者が悪影響を受けない証拠となっている。
【００２０】
活性混合物の微生物効率（実施例５による液体）
実施例５による被膜用液体混合物（粘性溶液）の試料では，塩化ベンザルコニウム（ＢＡＣ）含有量が１６mg；又はクロルヘキシジンが４０mgもしくはＰＨＭＢが４０mgのとき，大腸菌株増殖（初期懸濁液  １，８００ＣＦＵ／ml），黄色ブドウ球菌（６００ＣＦＵ／ml）及びアスペルギルスニガー（６５ＣＦＵ／ml）は完全に（すなわち１００％）阻害されていた。１．６mgのＢＡＣを使用した場合，黄色ブドウ球菌株でのみ阻害が１００％で，大腸菌株では１６％，アスペルギルスニガー株では８９％であった。４mgのクロルヘキシジンを使用した場合，大腸菌増殖では阻害が６１％で，黄色ブドウ球菌では９５％，アスペルギルスニガーでは３２％であった。４mgのポリヘキサメチレンビグアニド（ＰＨＭＢ）を使用した場合，大腸菌増殖の阻害は４４％で，アスペルギルスニガーでは５７％であった。
仕上げた被覆貼付剤の試料では，実施例１の調製で記載されたものと類似の方法で阻害領域が見られた。したがって，適量の好適な抗菌物質を使用する場合，被覆貼付剤は，特定の抗菌物質のみならず被覆貼付剤の全体的な構造及び調製プロセスに基づいた類似の微生物阻害特性を有する。
【００２１】
実施例１の被覆貼付剤，治療効果，健常ラットモデル
実施例１の被覆貼付剤を使用した場合，創傷縮小が有意に促進され，ここでは，使用したモデルは治療の規模又は治療有効性を表している。治療していない対照の創傷（図３参照）と比較して，実施例１による被覆貼付剤の使用により，特に創傷治療プロセスを損傷直後に開始すると創傷治療の時間が短縮されることは明らかである。治療していない創傷の場合，治療プロセスは損傷から約３日後に開始する。その後，それに続く創傷治癒の程度は，図３の両機能の類似したスロープに見られるように両ケースで類似している。健常ラットを使用したことから，慢性創傷での効果は評価できない。
【００２２】
実施例１の被覆貼付剤，治療効果，健常ミニブタモデル
実施例１の被覆貼付剤は，創傷閉鎖の速度（図４），及び減少した創傷における総細菌量（図５）に良好に影響を与えることが見出され，特にグラム陰性細菌でそれが観察された（図６）。