(57)【要約】      （修正有）【課題】有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソームを提供する。【解決手段】リポソーム１は、少なくとも１つの内包層１０を含み、各内包層が二重膜で構成される中空球体構造を有し、二重膜が、第１リン脂質層１０１と第２リン脂質層１０２を含み、第１リン脂質層が中空球体構造の外層を構成し、第２リン脂質層が中空球体構造の内層を構成し、かつ第１リン脂質層と第２リン脂質層が並列しており、リポソームはさらに有効成分を少なくとも１つの内層空間２０に内包するために用いることができ、リポソームの構造が安定しており、有効成分を安定的に内包できるだけでなく、内包する有効成分の生物吸収率を高めるために用いることができる。【選択図】図１
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【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソームであって、少なくとも１つの内包層を含み、各前記内包層が二重膜で構成される中空球体構造を有し、そのうち、前記二重膜が、第１リン脂質層と、第２リン脂質層を含み、前記第１リン脂質層が前記中空球体構造の外層を構成し、前記第２リン脂質層が前記中空球体構造の内層を構成し、かつ前記第１リン脂質層と前記第２リン脂質層が並列していることを特徴とする、有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム。
【請求項２】
前記少なくとも１つの内包層の外径の長さが２００ナノメートル〜４００ｎｍである、ことを特徴とする、請求項１に記載の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム。
【請求項３】
前記少なくとも１つの内包層の内側に形成された少なくとも１つの内層空間に配置された有効成分を含む、ことを特徴とする、請求項１に記載の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム。
【請求項４】
前記少なくとも１つの内包層の数量が１層であるとき、前記少なくとも１つの内包層が第１内包層であり、かつ前記第１内包層の内側に第１内層空間が形成される、ことを特徴とする、請求項１に記載の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム。
【請求項５】
前記少なくとも１つの内包層の数量が２層であるとき、前記少なくとも１つの内包層が、第１内包層と第２内包層であり、かつ前記第２内包層が前記第１内包層の内側に配置され、そのうち、前記第１内包層の内側と前記第２内包層の外側の間に第１内層空間が形成され、かつ前記第２内包層の内側に第２内層空間が形成される、ことを特徴とする、請求項１に記載の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム。
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本考案はリポソームに関し、特に、有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソームに関するものである。
【背景技術】
【０００２】
飲食文化の変化によって、外食や加工食品を利用する人が増加している。人体に必要な基本的栄養を十分に摂取するために、天然食品の飲食のみから必要な養分を取得していたこれまでとは異なり、栄養補助剤が人々の生活の中に徐々に浸透している。
【０００３】
栄養補助剤は種類が非常に多く、その形態、剤形、摂取方式にも様々な選択肢がある。例えば、栄養補助剤には水溶性ビタミン、脂溶性ビタミン、ミネラル、コラーゲン等がある。また、よくある栄養補助剤の形態としては、粉末、カプセル、錠剤（例：内服錠、チュアブル錠）、液体（例：発泡錠、水で溶いて服用する粉薬）等があり、異なる形態または剤形の栄養補助剤は人体の消化管における吸収率と吸収速度に影響を与える。理論上、吸収が早いものから遅いものの順に、液体、粉末、カプセル、錠剤、となっている。このほか、近年栄養補助剤は吸収力の面から速放剤と徐放剤に発展している。
【０００４】
ビタミンＣ（Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ）を例とすると、野菜や果物から摂取するビタミンＣのほか、栄養補助剤からビタミンＣを摂取することもできる。また、よくあるビタミンＣの剤形には、内服錠、チュアブル錠、発泡錠、水で溶いて服用する粉薬、粉末等がある。
【考案の概要】
【考案が解決しようとする課題】
【０００５】
本考案の目的は、有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソームを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
一部の実施例において、有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソームは、少なくとも１つの内包層を含み、各内包層が二重膜で構成される中空球体構造を有し、二重膜が、第１リン脂質層と第２リン脂質層を含み、第１リン脂質層が中空球体構造の外層を構成し、第２リン脂質層が中空球体構造の内層を構成し、かつ第１リン脂質層と第２リン脂質層が並列している。
【考案の効果】
【０００７】
上述をまとめると、任意の一実施例の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソームは、少なくとも１つの内包層を含み、かつ各内包層が二重膜で構成される中空球体構造を有する。そのうち、二重膜が、第１リン脂質層と第２リン脂質層を含み、第１リン脂質層が中空球体構造の外層を構成し、第２リン脂質層が中空球体構造の内層を構成し、かつ第１リン脂質層と第２リン脂質層が並列している。かつ、任意の一実施例の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソームはさらに有効成分を少なくとも１つの内層空間に内包するために用いることができる。リポソームの構造が安定しており、有効成分を安定的に内包できるだけでなく、内包する有効成分の生物吸収率を高めるために用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】一部の実施例におけるリポソームの断面図である。
【図２】別の一実施例におけるリポソームの断面図である。
【図３】また別の一実施例におけるリポソームの断面図である。
【図４】リポソームの懸濁静置実験図である。
【図５】一実施例のリポソームの電子顕微鏡写真である。
【図６】別の一実施例のリポソームの電子顕微鏡写真である。
【図７】被験者の血液中のビタミンＣ含有量のデータ図である。
【考案を実施するための形態】
【０００９】
一部の実施例において、まず、混合液を撹拌した後、３００バール（Ｂａｒ）〜４００バールの均質な混合液で複数個のリポソーム１を含むリポソーム懸濁液を形成する。そのうち、混合液は、０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、６３．９１２５重量％〜９７．９重量％の溶媒を含む。
【００１０】
一部の実施例において、レシチンは大豆レシチン（ＳＯＬＥＣ  Ｆ）とすることができるが、これに限らない。一部の実施例において、溶媒は水とすることができるが、これに限らない。一部の実施例において、混合液は、０．１重量％の大豆レシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、６３．９１２５重量％〜９７．９重量％の水を含む。例えば、アラビアガムの濃度は２重量％、３重量％、４重量％、５重量％とすることができる。
【００１１】
一部の実施例において、混合液はさらに有効成分を含む。これにより、形成したリポソーム１中にこの有効成分が内包される。例えば、有効成分はビタミンＣ（Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｃ）、アスタキサンチン、コエンザイムＱ１０等とすることができる。一部の実施例において、混合液は０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、５重量％〜３０重量％の有効成分、６３．９１２５重量％〜９２．９重量％の溶媒を含む。例えば、有効成分の濃度は１０重量％である。
【００１２】
一部の実施例において、混合液はさらに増粘剤を含む。この増粘剤はリポソーム１の構造を保護するために役立つ。例えば、増粘剤はグアーガム、キサンタンガム（Ｘａｎｔｈａｎ  ｇｕｍ）またはその組み合わせとすることができる。一部の実施例において、混合液は０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、５重量％〜３０重量％の有効成分、０．３１７５重量％〜０．６１７５重量％の増粘剤、６３．９１２５重量％〜９２．５８２５重量％の溶媒を含む。例えば、０．３１７５重量％〜０．６１７５重量％の増粘剤は０．０６７５重量％のグアーガム及び０．２５重量％〜０．５５重量％のキサンタンガムを含む。
【００１３】
一部の実施例において、混合液はさらに食品添加物を含むことができる。食品添加物は甘味料、酸性化剤、防腐剤等とすることができる。そのうち、甘味料はスクラロース、酸性化剤はクエン酸一水和物、防腐剤はソルビン酸カリウムとすることができる。一部の実施例において、混合液は０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、５重量％〜３０重量％の有効成分、０．３１７５重量％〜０．６１７５重量％の増粘剤、０．０７重量％〜０．３７重量％の食品添加物、６３．９１２５重量％〜９２．５１２５重量％の溶媒を含む。例えば、０．３５重量％の食品添加物は０．３重量％の酸性化剤と０．０５重量％の防腐剤の組み合わせとすることができ、または０．０７重量％の食品添加物は０．０２重量％の甘味料と０．０５重量％の防腐剤の組み合わせとすることができる。
【００１４】
一部の実施例において、混合液の作製は、次の工程を含む。０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム及び６３．９１２５重量％〜９７．９重量％の溶媒を撹拌して予混合液を形成し、８０メッシュ（ｍｅｓｈ）の網目で予混合液を濾過して混合液を形成する。
【００１５】
ここで、一部の実施例において、実際の必要に応じて、力が比較的強い撹拌設備を利用し、溶媒以外のすべての成分（以下、溶質という）を溶媒中に完全に溶解させることができる。例えば、すべての溶質を一度に溶媒中に加える、または異なる溶質を順に溶媒中に加えて逐一溶解させることができる。一部の実施態様において、０．１重量％のレシチン及び２重量％〜５重量％のアラビアガムを６３．９１２５重量％〜９７．９重量％の溶媒中に加え、均一に撹拌して予混合液を形成する。
【００１６】
ここで、別の一部の実施例において、撹拌設備（例えば、振とう機）の力が比較的弱いとき、実際の必要に応じて、溶質の１つであるレシチンを先に一部の溶媒と重量パーセント（ｗ／ｗ）１：５０で混合し、室温（２５℃）下で撹拌してレシチンを一部の溶媒中に溶解させ、予混合液（以下、第１予混合液という）を形成することができる。かつ、レシチン以外の溶質を残りの溶媒中に溶解させ、予混合液（以下、第２予混合液という）を形成する。レシチンが一部の溶媒に完全に溶解し、かつその残りの溶質がその残りの溶媒に完全に溶解したことを確認した後、第１予混合液と第２予混合液の二者を混合し、均一に撹拌して予混合液（以下、第３予混合液という）を形成する。つまり、溶質（例えば、レシチン、アラビアガム等）をそれぞれ溶媒（例えば、水）中に溶解させて第１予混合液及び第２予混合液を形成し、続いて第１予混合液と第２予混合液を混合して第３予混合液を形成する。これにより、溶質を溶媒に充分に溶解させることができる。
【００１７】
一部の実施態様において、０．１重量％のレシチンを少なくとも５重量％の溶媒に溶解させて第１予混合液を形成し、その残りの溶質（例えば、２重量％〜５重量％のアラビアガム）をその残りの溶媒中（多くとも９２．９重量％の溶媒）に溶解させて第２予混合液を形成した後、第１予混合液と第２予混合液を混合し、第３予混合液を形成する、または０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガムをそれぞれ６３．９１２５重量％〜９７．９重量％の溶媒中に溶解させ、逐一混合する。
【００１８】
かつ、混合液を形成した後、３００バール〜４００バールで混合液を均質にしてリポソーム懸濁液を形成する。ここで、混合液を均質にする工程（即ち、均質処理）の前または後にそれぞれ滅菌工程を行うことができる。一部の実施例において、滅菌工程の設定値は、８７℃±２℃〜９５℃±５℃で３０分間滅菌する。例えば、生産ライン上で、滅菌工程の設定値は８７℃±２℃で３０分間滅菌する。
【００１９】
一部の実施例において、９５℃で混合液を３０分間滅菌し、３００バール〜４００バールで滅菌後の混合液を均質にしてリポソーム懸濁液を形成する。そのうち滅菌後の混合液の温度は４０℃〜６０℃である。例えば、混合液に対して滅菌設備で滅菌工程を行い、滅菌後の混合液の温度が５０℃まで下がったとき、均質処理を行い、リポソーム懸濁液を形成することができる。
【００２０】
一部の実施例において、室温下で、３００〜４００バールで混合液を均質にしてリポソーム懸濁液を形成し、９５℃でリポソーム懸濁液を３０分間滅菌する。例えば、混合液を室温（２５℃）下で均質処理し、リポソーム懸濁液を形成する。リポソーム懸濁液を形成した後、滅菌工程を行う。
【００２１】
ここで、３００バール〜４００バールの圧力で均質処理を行い、０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、６３．９１２５重量％〜９７．９重量％の溶媒を含有する混合液を充分に乳化してリポソーム懸濁液を形成することができる。かつ、リポソーム懸濁液は構造が安定した複数個のリポソーム１を含有する。かつ、作製したリポソーム１の構造が安定しているため、リポソーム１は有効成分を安定的に内包する能力を備えている。
【００２２】
図１から図３を参照する。一部の実施例において、リポソーム１は少なくとも１つの内包層１０を含み、各内包層１０は二重膜構成の中空球体構造を有する。二重膜は第１リン脂質層１０１と第２リン脂質層１０２を含み、第１リン脂質層１０１が中空球体構造の外層を構成し、第２リン脂質層１０２が中空球体構造の内層を構成し、かつ第１リン脂質層１０１と第２リン脂質層１０２が並列している。そのうち、第１リン脂質層１０１と第２リン脂質層１０２はそれぞれ複数個のリン脂質で構成され、かつ各リン脂質が親水基と疎水基を有する。例えば、内包層１０の内外両側は主に各リン脂質の親水基で組成され、二重膜構造の中段部は主に疎水基で組成される。つまり、第１リン脂質層１０１の複数個のリン脂質の親水基が外側に向かい、内包層１０の外側表面を構成し、かつ第２リン脂質層１０２の複数個のリン脂質の親水基が内側に向かい、内包層１０の内側表面を構成する。かつ、第１リン脂質層１０１の複数個のリン脂質の疎水基が第２リン脂質層１０２の複数個のリン脂質の疎水基と相互に相隣して並列される。
【００２３】
一部の実施例において、リポソーム１は１つの内包層１０と１つの内層空間２０を含む（図１に示す）。一部の実施態様において、リポソーム１は、内包層１０と内層空間２０を含む。ここで、内包層１０の数量は１層であり、かつこの内包層１０の内側に内層空間２０が形成される。
【００２４】
一部の実施例において、リポソーム１は複数個の内包層１０と複数個の内層空間２０を含む（図２及び図３に示す）。図２に示すように、一部の実施態様において、リポソーム１は２つの内包層（以下、第１内包層１０及び第２内包層１１という）及び２つの内層空間（以下、第１内層空間２０及び第２内層空間２１という）を含む。最も外側の層である第１内包層１０は、外径長さが比較的小さい第２内包層１１を被覆し、かつ第１内包層１０及び第２内包層１１の間に第１内層空間２０が形成され、かつ第２内包層１１の内側に第２内層空間２１が形成される。そのうち、第１内包層１０の二重膜は、第１リン脂質層１０１及び第２リン脂質層１０２を含み、かつ第２内包層１１の二重膜は、第１リン脂質層１１１及び第２リン脂質層１１２を含む。
【００２５】
図３に示すように、一部の実施態様において、リポソーム１は３つの内包層（以下、第１内包層１０、第２内包層１１、第３内包層１３という）及び３つの内層空間（以下、第１内層空間２０、第２内層空間２１、第３内層空間２３という）を含む。最も外側の層である第１内包層１０は、外径長さが比較的小さい第２内包層１１を被覆し、かつ第１内包層１０と第２内包層１１の間が第１内層空間２０である。かつ、第２内包層１１は外径長さがより小さい第３内包層１３を被覆し、かつ第２内包層１１と第３内包層１３の間が第２内層空間２１であり、第３内包層１３の内側に第３内層空間２３が形成される。そのうち、第１内包層１０の二重膜は、第１リン脂質層１０１及び第２リン脂質層１０２を含み、第２内包層１１の二重膜は、第１リン脂質層１１１及び第２リン脂質層１１２を含み、かつ第３内包層１３の二重膜は、第１リン脂質層１３１及び第２リン脂質層１３２を含む。
【００２６】
特に説明すべきは、内包層１０及び内層空間２０の数量は、２、３、４つとすることができるが、これらに限らず、ここでは例として示すことで説明しているが、これに限らない点である。
【００２７】
一部の実施例において、少なくとも１つの内包層１０の内側に少なくとも１つの内層空間２０が形成され、かつ有効成分を内包するために用いることができる。このため、リポソーム１がさらに有効成分を含むとき、有効成分は内層空間２０中に配置することができる。
【００２８】
一部の実施例において、リポソーム１は中空状球体構造であり、かつ内層空間２０を備え、有効成分を内包するために用いられる。一部の実施例において、リポソーム１は、複数個の中空状球体構造の内包層１０を備え、かつ各内包層１０が体積の大きさに基づき小さいものから大きいものへ順に内包される。かつ、各内包層１０がいずれも中空状であるため、各内包層１０の間に複数個の内層空間２０が形成される。ここで、各内層空間２０は有効成分を内包するために用いることができる。
【００２９】
一部の実施例において、少なくとも１つの内包層１０の外径Ｌの長さは２００ナノメートル（ｎｍ）〜４００ｎｍである。例えば、リポソーム１の外径Ｌは、２００ｎｍ、２５０ｎｍ、３００ｎｍ、３５０ｎｍ、４００ｎｍとすることができる。
【００３０】
ここで、一部の実施例において、５重量％〜３０重量％の有効成分、０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、６３．９１２５重量％〜９２．９重量％の溶媒を含有する混合液を用い、３００バール〜４００バールの均質処理を経て構造が安定した複数個のリポソーム１を含有するリポソーム懸濁液が形成されたとき、得られるリポソーム１は、その構造が安定しており、有効成分を安定的に内包することができ、それによりその内部の有効成分を効果的に保護し、外在要因（例えば、消化液）の影響を受けないようにすることができる。
【００３１】
かつ、一部の実施例において、有効成分を安定的に内包した複数個のリポソーム１を含有するリポソーム懸濁液は、食品（例えば、栄養補助剤）、医薬品等としたり、食品または医薬品を製作するための材料としたりすることができる。
【００３２】
ここで、被験者が内部に有効成分（例えば、ビタミンＣ、アスタキサンチン、コエンザイムＱ１０）を内包したリポソーム１を含有するリポソーム懸濁液で製造された栄養補助剤を服用すると、リポソーム１の安定的な内包構造により、被験者の消化環境の有効成分に対する影響（例えば、破壊や分解）を効果的に減少でき、かつリポソーム１の二層リン脂質構造によりリポソーム１を被験者の細胞膜に結合させ、リポソーム１内の有効成分を被験者の腸管に効果的に吸収させることができる。
【００３３】
一部の実施態様において、０．１重量％のレシチン、２重量％〜５重量％のアラビアガム、１０重量％のビタミンＣ、８４．９重量％〜８７．９重量％の水を混合し、均一に撹拌して予混合液を形成する。続いて、予混合液を８０メッシュの網目で濾過し、混合液を形成する。
【００３４】
一実施態様において、混合液を９５℃±５℃で３０分間滅菌し、かつ３００バール〜４００バールで滅菌後の混合液を均質にしてリポソーム懸濁液を形成する。このリポソーム懸濁液はビタミンＣを内包した複数個のリポソーム１を含有する。
【００３５】
別の一実施態様において、３００バール〜４００バールで混合液を均質にしてリポソーム懸濁液を形成する。続いて、リポソーム懸濁液を９５℃±５℃で３０分間滅菌する。ここで、リポソーム懸濁液はその中にビタミンＣを安定的に内包した複数個のリポソーム１を含有する。
【００３６】
例１：ビタミンＣを含有するリポソーム１の作製
ここでは、表１の配合成分及び配合割合に従い、６組の混合液を調製した。そのうち、対照群がＣ１組〜Ｃ４組まで、実験群がＥ１組〜Ｅ２組までである。かつ、Ｃ１〜Ｃ４組及びＥ１〜Ｅ２組の滅菌工程は、均質処理の前に行われた。
【００３７】
【表１】
0003231036.tif 000003
【００３８】
ここで、混合液の総重量は１００グラムである。まず、大豆レシチンと一部の水を重量パーセント（ｗ／ｗ）１：５０で混合し、室温（２５℃）下で撹拌してレシチンが一部の水に溶解したことを確認し、第１予混合液を形成した。かつ、アラビアガム、グアーガム、キサンタンガム、スクラロース、ソルビン酸カリウム、ビタミンＣ及び残りの水を混合し、第２予混合液を形成した。かつ、第１予混合液と第２予混合液を混合し、均一に撹拌して大豆レシチン、アラビアガム、グアーガム、キサンタンガム、スクラロース、ソルビン酸カリウム、ビタミンＣを完全に水に溶解させ、水で定量し総重量を１００グラムとして、第３予混合液を形成した。続いて、定量後の第３予混合液を８０メッシュの網目で濾過し、混合液を形成した。ここで、すべてのグループの各混合液には、いずれも１０重量％のビタミンＣが含有される。
【００３９】
続いて、混合液の滅菌工程を行った。滅菌工程の設定値は９５℃±５℃で３０分間滅菌した。滅菌後の混合液の温度が５０℃まで下がったら、ホモジナイザー（ブランド：ＧＥＡ  Ｎｉｒｏ  Ｓｏａｖｉ、型番：Ｐａｎｄａ  Ｐｌｕｓ）で温度が低下した後の混合液に対して均質処理を行い、リポソーム懸濁液を形成した。そのうち、均質処理中で設定する圧力値は３５０バールであった。ここで、リポソーム懸濁液はその中にビタミンＣを内包した複数個のリポソーム１を含有する。
【００４０】
例２：リポソーム１の静置安定性試験
ここでは、例１で調製した各組のリポソーム懸濁液を室温（２５℃）下で１日静置し、リポソーム懸濁液に層分離現象が現れるか否かを観察した。リポソーム懸濁液が均一で層分離のない液体であれば、その中のリポソーム１の構造が比較的安定していることを表す。逆に、リポソーム懸濁液に明らかな層分離があり、かつ色が比較的混濁して不均一である場合、その含有するリポソーム１の構造が比較的不安定であることを表す。つまり、リポソーム１の内包層１０が破裂し、リポソーム１を形成しておらず、リポソーム懸濁液に明らかな層分離の現象が発生している。
【００４１】
図４を参照する。Ｃ１組及びＣ３組のリポソーム懸濁液は明らかな層分離が発生しており、混合液中に１重量％の大豆レシチンを含有するとき、３重量％または５重量％のアラビアガムのいずれも大豆レシチンと水を均一に混合することができず、即ち乳化作用が顕著でなく、得られるリポソーム１の構造は不安定であった。Ｃ２組及びＣ４組は明らかな層分離はないが、Ｅ１及びＥ２組と比較して、Ｃ２組及びＣ４組のリポソーム懸濁液は比較的混濁していた。Ｅ１組及びＥ２組のリポソーム懸濁液は明らかな層分離はなく、混合液中に０．１重量％の大豆レシチンを含有するとき、３重量％または５重量％のアラビアガムが大豆レシチンと水を効果的に均一に混合でき、即ち乳化作用が顕著であった。このことから、混合液が０．１重量％〜０．５重量％の大豆レシチンと３重量％〜５重量％のアラビアガムを含有するとき、混合液の滅菌工程後均質処理を経て得られるリポソーム懸濁液に明らかな層分離はないことが分かった。つまり、０．１重量％の大豆レシチンと３重量％〜５重量％のアラビアガムで得られるリポソーム１の構造安定性は比較的優れている。
【００４２】
例３：ビタミンＣ含有量試験
ここでは、例１で調製した各組のリポソーム懸濁液をそれぞれ１ミリリットル微量遠心管に取った。そして２０℃±５℃下において、回転速度２０００ｒｐｍで１時間遠心分離し、リポソーム懸濁液を上清液と沈殿物に分離した後、検体に対してそれぞれビタミンＣ含有量試験を実施した。
【００４３】
まず、ビタミンＣ（Ｌ−Ａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ  ｓｏｄｉｕｍ；ブランド：ＳＩＧＭＡ−ＡＬＯＲＩＣＨ）標準品を１０ｐｐｍ、２５ｐｐｍ、５０ｐｐｍ、１００ｐｐｍ、２００ｐｐｍの各標準溶液として調製した。
【００４４】
続いて、各組の上清液（検体）それぞれ１ミリリットルを１００ミリリットル定容瓶に取り、各組の沈澱物（検体）それぞれ０．１グラムを１００ミリリットル定容瓶に取り、かつ検体と１００ミリリットルの純水を混合した後、超音波振盪（ブランド：ＤＥＬＴＡ、型番：ＤＣ６００Ｈ）を実施した。続いて、超音波振盪後、再度純水で１００ミリリットルに定量し直し、被測定物を形成し、被測定物を０．２２μｍのフィルターで濾過した後、検液（即ち、上清液（検液）と沈澱物（検液））を形成した。
【００４５】
それぞれ２μＬの各標準溶液及び各組の検液を取り、超高性能液体クロマトグラフ（ブランド：ＷＡＴＥＲＳ、型番：Ｈ−ｃｌａｓｓ）で分析を実施した。そのうち、超高性能液体クロマトグラフのカラム管はＣ１８カラム（Ａｓｃｅｎｔｉｓ（登録商標）  Ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｃ１８  ｃｏｌｕｍｎ、２  μｍ、２．１＊１００ｍｍ（カラム番号１７０２５−ＬＣ−０３７））であり、超高性能液体クロマトグラフ内で使用した移動相は０．１％シュウ酸水溶液（シュウ酸（Ｏｘａｌｉｃ  ａｃｉｄ；純度≧９８％）で調製）；ブランドＳＩＧＭＡ−ＡＬＯＲＩＣＨ）であった。また、超高性能液体クロマトグラフの設定は、流速０．２ミリリットル／分、試料注入量２μＬ、検出波長２４５ナノメートル（ｎｍ）、カラム温度３０℃で、試料注入回数は３回繰り返しとした。
【００４６】
続いて、標準溶液と検液で得られた波高滞留時間と吸収スペクトルを比較して、検液中のビタミンＣの含有量を得ることができ、かつ以下の公式（１）を利用して、表２に示すように、上清液（検体）と沈澱物（検体）中のビタミンＣの含有量が得られた。
【００４７】
【数１】
0003231036.tif 000004
【００４８】
そのうち、Ｃは標準曲線から求めて得た検液中のビタミンＣの濃度（ｐｐｍ）、Ｖは検体の最後の定容体積（ｍＬ）、Ｍはサンプリング分析検体の沈澱物重量（ｇ）または上清液体積（ｍｌ）を表す。
【００４９】
【表２】
0003231036.tif 000005
【００５０】
表２から分かるように、Ｃ１組〜Ｃ４組とＥ１組〜Ｅ２組の上清液（検液または検体）内で測定されたビタミンＣの含有量は差異がいずれも大きくなかった。続いて、各組の沈澱物（検液または検体）を比較した。実験群（Ｅ１組〜Ｅ２組）の沈澱物内で測定されたビタミンＣの含有量はいずれも対照群（Ｃ１組〜Ｃ４組）の沈澱物内で測定されたビタミンＣの含有量より高かった。このことから分かるように、実験群の沈澱物で測定されたビタミンＣの含有量は、対照群の沈澱物で測定されたビタミンＣの含有量より明らかに高かった。
【００５１】
ここで、０．１重量％の大豆レシチンと３重量％〜５重量％のアラビアガムで得られたリポソーム懸濁液中には、安定的にビタミンＣを内包するリポソーム１が含まれ、かつこのリポソーム１の構造安定性はより優れていることが分かる。かつ、含有されるリポソーム１はより多くの有効成分（例えば、ビタミンＣ）を内包することができる。
【００５２】
例４：電子顕微鏡
ここで、表３の配合に従い、２組の混合液を調製し、それぞれ実験群１と実験群２とした。そのうち、実験群１と実験群２の違いは、実験群１の混合液が含有するアラビアガムが５グラム（５重量％）、水が８４．５１２５グラムであるのに対し、実験群２の混合液が含有するアラビアガムが２グラム（２重量％）、水が８７．５１２５グラムである点である。その他成分の含有量はいずれも同じである。続いて、室温下で調製後の混合液を３５０バールの圧力値により均質処理を行い、かつ滅菌工程等の工程を実施して、リポソーム懸濁液を形成した。そのうち、滅菌工程の設定値は９５℃±５℃で３０分間であった。
【００５３】
【表３】
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【００５４】
続いて、低温透過型電子顕微鏡（ｃｒｙｏ−ｅｌｅｃｔｒｏｎ  ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ、ｃｒｙｏ−ＴＥＭ；ブランド：ＪＥＯＬ、型番：ＪＥＭ−１４００）を利用して２組のリポソーム懸濁液中のリポソーム１を観察した。結果を図５と図６に示す。図５に示すリポソーム１は、実験群１の配合で調製した混合液（５重量％のアラビアガムを含有）で得たものであり、その外形は球状で、外径Ｌの長さは約２００ｎｍ〜４００ｎｍであった。かつ、図５から分かるように、同一組のリポソーム懸濁液中には外径Ｌの長さが異なる複数個のリポソーム１が含有された。図６に示すリポソーム１は、実験群２の配合で調製した混合液（２重量％アラビアガムを含有）で得たものであり、その外形は球状で、内包層１０と内層空間２０がはっきりと観察された。つまり、リポソーム１の構造は中空状球体構造であった。かつ、内層空間２０中に含有される濃い色の物質はビタミンＣであった。このことから分かるように、実験群１と実験群２で得られたリポソーム懸濁液中にはいずれもビタミンＣを安定的に内包するリポソーム１が含有され、かつこのリポソーム１の構造は安定していた。
【００５５】
ここで、０．１重量％の大豆レシチンと２重量％〜５重量％のアラビアガムで得られたリポソーム懸濁液中には、いずれも安定的にビタミンＣを内包するリポソーム１が含まれ、かつこのリポソーム１の構造は中空状球体構造であることが分かった。
【００５６】
例５：人体試験
ここでは、表４の配合に従い実験群と対照群のビタミンＣ補助剤（以下、被測定試料という）を調製した。そのうち、実験群の被測定試料はリポソーム形式でビタミンＣを内包したものであり、対照群の被測定試料は単純なビタミンＣ溶液（リポソーム形式でビタミンＣを内包していない）である。
【００５７】
【表４】
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【００５８】
そのうち、実験群の調製の流れは次の通りである。１０ｍｇのレシチン、５００ｍｇのアラビアガム、６．７５ｍｇのグアーガム、５５ｍｇのキサンタンガム、３０ｍｇのクエン酸、５ｍｇのソルビン酸カリウム、１０００ｍｇのビタミンＣを８３９３．２５ｍｇの水中に溶解させ、均一に撹拌して混合液を形成した。混合液を室温（２５℃）下において３５０バールで均質処理し、リポソーム懸濁液を形成した後、リポソーム懸濁液を９５℃±５℃で３０分間滅菌した。ここで、リポソーム懸濁液を液体パック（１０ｍＬ／パック）とし、実験群の被測定試料として被験者による服用に提供した。
【００５９】
そのうち、対照群の調製の流れは次の通りである。５００ｍｇのアラビアガム、６．７５ｍｇのグアーガム、５５ｍｇのキサンタンガム、３０ｍｇのクエン酸、５ｍｇのソルビン酸カリウム、１０００ｍｇのビタミンＣを８４０３．２５ｍｇの水中に溶解させ、均一に撹拌して混合液を形成した。続いて、混合液を９５℃±５℃で３０分間滅菌した。これに基づき、滅菌後の混合液を液体パック（１０ｍＬ／パック）とし、対照群の被測定試料として被験者による服用に提供した。
【００６０】
被験者の条件：２０〜６０歳の健康な成人。
【００６１】
被験者の人数：１０人。
【００６２】
試験の設計：被験者自身の対照交差試験。そのうち１つの被測定試料（実験群または対照群の液体パック）を服用した後、１回目の測定を行い、続いて１４日後再度別の被測定試料（対照群または実験群の液体パック）を服用し、２回目の測定を行った。そのうち、毎回の測定の１日前に被験者は８時間空腹にする必要があり、測定当日被測定試料を服用する前を０時間とみなし、被測定試料服用後の０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、８時間にそれぞれ採血して血液中のビタミンＣ濃度を測定した。
【００６３】
測定方法：被測定試料を服用した後の０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、８時間の６つの時間点で、抗凝固剤入り緑栓採血管を使用して被験者の４ミリリットルの静脈血を採取し、検体とした。検体は光を避けて室温（２５℃）下で３０分間静置した。続いて静置後の検体を４℃、回転速度３５００ｒｐｍで１０分間遠心分離にかけ、検体の上清液（血漿）を収集し、生化学比色法で収集した血漿中のビタミンＣ含有量を測定した。
【００６４】
図７を参照する。被験者が実験群の被測定試料を服用してから８時間後、測定された血液中のビタミンＣ含有量は８６．２９μｇ×ｈｒ／ｍＬであり、被験者が対照群の被測定試料を服用してから８時間後、測定された血液中のビタミンＣ含有量は３７．０８μｇ×ｈｒ／ｍＬであった。つまり、被験者が吸収した実験群の被測定試料中のビタミンＣ含有量は対照群より１３３％多く、リポソーム形式でビタミンＣを内包したビタミンＣ補助剤は生物吸収率を高めることができることが示された。
【００６５】
このことから、リポソーム１で有効成分を内包し、有効成分の栄養補助剤を製造すると、リポソーム１の内包層１０が内層空間２０に含有される有効成分を保護することができ、かつ二層のリン脂質で構成された内包層１０は被験者の有効成分に対する生物吸収率を高めるために役立つことが分かる。
【００６６】
上述をまとめると、本考案の任意の一実施例の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム１は、安定した構造を有し、良好かつ安定した内包能力を備えている。かつ、任意の一実施例の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム１はさらに有効成分を安定的に内包するために用いることができる。これにより、任意の一実施例の有効成分を安定的に内包する能力を備えたリポソーム１に内包される有効成分の含有量を高め、かつ被験者のこの有効成分に対する生物吸収率も高めることができる。
【００６７】
本考案の技術的内容は、好ましい実施例で上記通り開示され、そのような実施例により本考案の保護範囲が限定されるべきものではなく、当業者が本考案の精神から離れることなく種々の変更及び改変を為し得ることは、本考案の範囲に含めるものであるのが勿論である。よって本考案の保護範囲は、本明細書に添付する実用新案登録請求の範囲で定義しているものを基準とする。
【符号の説明】
【００６８】
１リポソーム
１０内包層／第１内包層
１０１第１リン脂質層
１０２第２リン脂質層
２０内層空間／第１内層空間
１１第２内包層
１１１第１リン脂質層
１１２第２リン脂質層
２１第２内層空間
１３第３内包層
１３１第１リン脂質層
１３２第２リン脂質層
２３第３内層空間
Ｌ外径
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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