(57)【要約】  所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができるサンプリングフィルター、サンプリング装置およびそれを用いたサンプリング方法を提供する。本発明のサンプリングフィルター（１０）は、細胞凝集塊をサンプリングするためのフィルターであって、細胞凝集塊を含む液体が通過する領域（Ａ１）を画定する枠部（１１）と、前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔（１３）が形成されたフィルター部（１２）と、を備える。このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
2018042943.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞凝集塊をサンプリングするためのフィルターであって、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備える、サンプリングフィルター。
【請求項２】
前記サンプリングフィルターの第１主面から見た前記領域の面積に対して、前記フィルター部の占める面積の割合は、１％以上１０％以下である、請求項１に記載のサンプリングフィルター。
【請求項３】
前記フィルター部の前記複数の貫通孔は、第１貫通孔と、前記第１貫通孔より小さい第２貫通孔と、を含む、請求項１又は２に記載のサンプリングフィルター。
【請求項４】
前記フィルター部は、前記枠部の内壁に沿って設けられた、請求項１〜３のいずれか一項に記載のサンプリングフィルター。
【請求項５】
更に、前記枠部から延びて、前記フィルター部を保持する保持部を備える、請求項１〜４のいずれか一項に記載のサンプリングフィルター。
【請求項６】
金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載のサンプリングフィルター。
【請求項７】
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置されたサンプリングフィルターと、
を備え、
前記サンプリングフィルターは、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備える、サンプリング装置。
【請求項８】
前記サンプリングフィルターの第１主面から見た前記領域の面積に対して、前記フィルター部の占める面積の割合は、１％以上１０％以下である、請求項７に記載のサンプリング装置。
【請求項９】
前記フィルター部の前記複数の貫通孔は、第１貫通孔と、前記第１貫通孔より小さい第２貫通孔と、を含む、請求項７又は８に記載のサンプリング装置。
【請求項１０】
前記フィルター部は、前記枠部の内壁に沿って設けられた、請求項７〜９のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１１】
前記サンプリングフィルターは、前記枠部から延びて前記フィルター部を保持する保持部を備える、請求項７〜１０のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１２】
前記サンプリングフィルターは、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする、請求項７〜１１のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１３】
更に、前記サンプリングフィルターより前記容器部の前記流入口側に、複数の貫通孔が形成された濾過フィルターを備え、
前記濾過フィルターの前記貫通孔は、前記サンプリングフィルターの前記貫通孔より大きい、請求項７〜１２のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１４】
前記濾過フィルターは、第１細胞凝集塊を捕捉し、
前記サンプリングフィルターは、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉する、請求項１３に記載のサンプリング装置。
【請求項１５】
前記サンプリングフィルターを複数備え、
複数のサンプリングフィルターは、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された第１サンプリングフィルターと、
前記第１サンプリングフィルターより前記容器部の排出口側に配置された第２サンプリングフィルターと、
を含み、
前記第２サンプリングフィルターでは、前記第１サンプリングフィルターの第１貫通孔より小さい第３貫通孔が形成された、請求項７〜１４のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１６】
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、を備える、サンプリングフィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップ、
を含む、サンプリング方法。
【請求項１７】
更に、
前記サンプリングフィルターより上流側に配置される、複数の貫通孔が形成された濾過フィルターを準備するステップ、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させて、第１細胞凝集塊を捕捉するステップ、
を含み、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップは、前記サンプリングフィルターによって第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉すること、を含む、請求項１６に記載のサンプリング方法。
【請求項１８】
前記サンプリングフィルターを準備するステップは、第１サンプリングフィルターと、第２サンプリングフィルターと、を準備すること、を含み、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップは、第１サンプリングフィルターで第２細胞凝集塊を捕捉し、前記第２サンプリングフィルターで第２細胞凝集塊より小さい第３細胞凝集塊を捕捉すること、を含む、請求項１７に記載のサンプリング方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サンプリングフィルター、サンプリング装置およびそれを用いたサンプリング方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞の培養において、培養液に浸した細胞の培養状態を確認するために、培養液に含まれる細胞をサンプリングするサンプリング装置が開発されている（例えば、特許文献１参照。）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００９−１８０５９４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許文献１のサンプリング装置では、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができないという課題を有する。【０００５】
本発明は、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができるサンプリングフィルター、サンプリング装置およびそれを用いたサンプリング方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一態様のサンプリングフィルターは、
細胞凝集塊をサンプリングするためのフィルターであって、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備える。【０００７】
本発明の一態様のサンプリング装置は、
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置されたサンプリングフィルターと、
を備え、
前記サンプリングフィルターは、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備える。【０００８】
本発明の一態様のサンプリング方法は、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、を備える、サンプリングフィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップ、
を含む。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明に係る実施の形態１におけるサンプリングフィルターの概略図である。
【図２】図１のサンプリングフィルターにおけるフィルター部の一部の拡大斜視図である。
【図３】図２のサンプリングフィルターにおけるフィルター部の一部を厚み方向から見た概略図である。
【図４】本発明に係る実施の形態１のサンプリング装置の概略図である。
【図５】本発明に係る実施の形態１の変形例のサンプリングフィルターの概略図である。
【図６】本発明に係る実施の形態１の別の変形例のサンプリングフィルターの概略図である。
【図７】本発明に係る実施の形態１の別の変形例のサンプリングフィルターの概略図である。
【図８】本発明に係る実施の形態１の別の変形例のサンプリングフィルターの概略図である。
【図９】本発明に係る実施の形態２のサンプリング装置の概略図である。
【図１０】本発明に係る実施の形態２のサンプリング装置で使用される濾過フィルターの概略図である。
【図１１】本発明に係る実施の形態２のサンプリング装置の変形例である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（本発明に至った経緯）
近年、薬効調査などに用いる細胞凝集塊等を培養する場合、薬効データのばらつきを低減するために、所望のサイズの細胞凝集塊を培養することが求められている。このため、所望のサイズの細胞凝集塊の培養状態を把握するために、所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることが求められている。しかしながら、特許文献１の装置では、培養液導出配管を介して培養液を培養槽から外部へ導出することによってサンプリングを行っているため、サンプリングした細胞凝集塊には異なるサイズの細胞凝集塊が含まれる。
【００１２】
ここで、培養液から所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングするには、少なくとも２回以上のフィルタリングが必要となる。具体的には、（ｉ）培養液から所望のサイズより大きい細胞凝集塊を除去するためのフィルタリングと、（ｉｉ）所望のサイズより小さい細胞凝集塊を除去するためのフィルタリングと、が行われる。このように、培養液から所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングするためには、複数の工程を行う必要があり、手間がかかる。
【００１３】
本発明者らは、鋭意研究したところ、細胞凝集塊を含む液体が通過する領域の一部に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部を設けたサンプリングフィルターを見出し、本発明に至った。
【００１４】
本発明の一態様のサンプリングフィルターは、
細胞凝集塊をサンプリングするためのフィルターであって、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備える。
【００１５】
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００１６】
前記サンプリングフィルターにおいて、前記サンプリングフィルターの第１主面から見た前記領域の面積に対して、前記フィルター部の占める面積の割合は、１％以上１０％以下であってもよい。
【００１７】
このような構成により、フィルター部による液体の通路抵抗の増加を抑えることができる。
【００１８】
前記サンプリングフィルターにおいて、前記フィルター部の前記複数の貫通孔は、第１貫通孔と、前記第１貫通孔より小さい第２貫通孔と、を含んでもよい。
【００１９】
このような構成により、異なるサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００２０】
前記サンプリングフィルターにおいて、前記フィルター部は、前記枠部の内壁に沿って設けられてもよい。
【００２１】
このような構成により、枠部の内壁に沿って流れる液体から細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００２２】
前記サンプリングフィルターにおいて、前記枠部から延びて前記フィルター部を保持する保持部を備えてもよい。
【００２３】
このような構成により、フィルター部を保持部で保持することによって、フィルター部の強度を高めることができる。また、保持部によりフィルター部を保持することによって、液体が通過する領域のいずれの場所にもフィルター部を配置することができる。
【００２４】
前記サンプリングフィルターにおいて、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としてもよい。
【００２５】
このような構成により、サンプリングフィルターの機械強度を向上させることができる。
【００２６】
本発明の一態様のサンプリング装置は、
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置されたサンプリングフィルターと、
を備え、
前記サンプリングフィルターは、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備える。
【００２７】
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００２８】
前記サンプリング装置において、前記サンプリングフィルターの第１主面から見た前記領域の面積に対して、前記フィルター部の占める面積の割合は、１％以上１０％以下であってもよい。
【００２９】
このような構成により、フィルター部による液体の通路抵抗の増加を抑えることができる。
【００３０】
前記サンプリング装置において、前記フィルター部の前記複数の貫通孔は、第１貫通孔と、前記第１貫通孔より小さい第２貫通孔と、を含んでもよい。
【００３１】
このような構成により、異なるサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００３２】
前記サンプリング装置において、前記フィルター部は、前記枠部の内壁に沿って設けられてもよい。
【００３３】
このような構成により、枠部の内壁に沿って流れる液体から細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００３４】
前記サンプリング装置において、前記サンプリングフィルターは、前記枠部から延びて前記フィルター部を保持する保持部を備えてもよい。
【００３５】
このような構成により、フィルター部を保持部で保持することによって、フィルター部の強度を高めることができる。また、保持部によりフィルター部を保持することによって、液体が通過する領域のいずれの場所にもフィルター部を配置することができる。
【００３６】
前記サンプリング装置において、前記サンプリングフィルターは、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としてもよい。
【００３７】
このような構成により、サンプリングフィルターの機械強度を向上させることができる。
【００３８】
前記サンプリング装置において、前記サンプリングフィルターより前記容器部の前記流入口側に、複数の貫通孔が形成された濾過フィルターを備え、
前記濾過フィルターの前記貫通孔は、前記サンプリングフィルターの前記貫通孔より大きくてもよい。
【００３９】
このような構成により、濾過フィルターによって所望のサイズより大きい細胞凝集塊を効率良く濾過しつつ、サンプリングフィルターによって所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００４０】
前記サンプリング装置において、前記濾過フィルターは、第１細胞凝集塊を捕捉し、
前記サンプリングフィルターは、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉してもよい。
【００４１】
このような構成により、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を濾過フィルターで捕捉しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊をサンプリングフィルターで容易に捕捉することができる。
【００４２】
前記サンプリング装置において、前記サンプリングフィルターを複数備え、
複数のサンプリングフィルターは、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された第１サンプリングフィルターと、
前記第１サンプリングフィルターより前記容器部の排出口側に配置された第２サンプリングフィルターと、
を含み、
前記第２サンプリングフィルターでは、前記第１サンプリングフィルターの第１貫通孔より小さい第３貫通孔が形成されてもよい。
【００４３】
このような構成により、異なるサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００４４】
本発明の一態様のサンプリング方法は、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、を備える、サンプリングフィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップ、
を含む。
【００４５】
このような構成により、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００４６】
前記サンプリング方法において、更に、前記サンプリングフィルターより上流側に配置される、複数の貫通孔が形成された濾過フィルターを準備するステップ、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させて、第１細胞凝集塊を捕捉するステップ、
を含み、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップは、前記サンプリングフィルターによって第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉すること、を含んでもよい。
【００４７】
このような構成により、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を濾過フィルターで捕捉しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊をサンプリングフィルターで容易に捕捉することができる。
【００４８】
前記サンプリング方法において、前記サンプリングフィルターを準備するステップは、第１サンプリングフィルターと、第２サンプリングフィルターと、を準備すること、を含み、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップは、第１サンプリングフィルターで第２細胞凝集塊を捕捉し、前記第２サンプリングフィルターで第２細胞凝集塊より小さい第３細胞凝集塊を捕捉すること、を含んでもよい。
【００４９】
このような構成により、異なるサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００５０】
以下、本発明に係る実施の形態１について、添付の図面を参照しながら説明する。また、各図においては、説明を容易なものとするため、各要素を誇張して示している。
【００５１】
（実施の形態１）
［サンプリングフィルター］
図１は、本発明に係る実施の形態１のサンプリングフィルター１０の概略図である。図１中のＸ、Ｙ、Ｚ方向は、それぞれサンプリングフィルター１０の縦方向、横方向、厚み方向を示している。
【００５２】
図１に示すように、サンプリングフィルター１０は、細胞凝集塊を含む液体が通過する領域Ａ１を画定する枠部１１と、領域Ａ１の一部に設けられたフィルター部１２と、を備える。
【００５３】
図２は、図１のサンプリングフィルター１０におけるフィルター部１２の拡大斜視図である。図２に示すように、フィルター部１２には、サンプリングフィルター１０の第１主面ＰＳ１と、第１主面ＰＳ１に対向する第２主面ＰＳ２とを貫通する複数の貫通孔１３が形成されている。
【００５４】
サンプリングフィルター１０は、細胞凝集塊を含む培養液（液体）を、枠部１１の内側の領域Ａ１を通過させることによって、領域Ａ１の一部に設けられたフィルター部１２で所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングするものである。
【００５５】
本明細書において、「細胞凝集塊」とは、複数の細胞が接着することによって形成される細胞の集合塊を意味する。集合塊を構成する細胞は、例えば、がん化細胞、幹細胞、人工多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）、ＥＳ細胞、間葉系幹細胞、再生医療用細胞などである。本明細書において、液体としては、例えば、アミノ酸、タンパク質、血清、などを含んだ培養液、リン酸緩衝生理食塩水、又は水である。細胞凝集塊を含む液体には、細胞凝集塊と液体の他に、樹脂製粒子などの非生物由来物質、骨片又は肉片などの組織の一部、死細胞などを含んでいてもよい。
【００５６】
実施の形態１では、サンプリングフィルター１０は、例えば、円形である。サンプリングフィルター１０の寸法は、例えば、直径８ｍｍ、厚さ１５μｍである。また、サンプリングフィルター１０は、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする。サンプリングフィルター１０を構成する材料は、例えば、金、銀、銅、白金、ニッケル、パラジウム、これらの合金及びこれらの酸化物であってもよい。なお、サンプリングフィルター１０は、円形に限定されず、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、又は楕円等の形状であってもよい。
【００５７】
＜枠部＞
枠部１１は、内側に細胞凝集塊を含む液体が通過する領域Ａ１を画定するように形成されている。実施の形態１では、枠部１１は、第１主面ＰＳ１側から見てリング状に形成されている。枠部１１は、フィルター部１２に比べて単位面積当たりの貫通孔１３の数が少ない部分である。枠部１１における貫通孔１３の数は、フィルター部１２における貫通孔１３の数の１％以下である。枠部１１の厚みは、フィルター部１２の厚みよりも厚くてもよい。このような構成により、サンプリングフィルター１０の機械強度を高めることができる。
【００５８】
サンプリングフィルター１０を装置に接続して使用する場合、枠部１１は、サンプリングフィルター１０と装置とを接続する接続部（後述する図４の符号「１８」）として機能してもよい。また、枠部１１には、サンプリングフィルター１０の情報（貫通孔１３の寸法など）を表示してもよい。
【００５９】
なお、枠部１１は、液体が通過する領域Ａ１を画定する形状であればよく、リング形状に限定されない。枠部１１の形状は、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、又は楕円等の形状であってもよい。
【００６０】
＜フィルター部＞
図１及び図２に示すように、フィルター部１２は、複数の貫通孔１３が形成されたフィルター基体部１４からなる板状構造体である。フィルター部１２は、枠部１１によって画定された領域Ａ１の一部に設けられている。実施の形態１では、フィルター部１２は、枠部１１の内壁に沿って形成されている。即ち、フィルター部１２は、枠部１１の内壁に沿ってリング状に形成されている。このため、領域Ａ１の中央付近、即ちサンプリングフィルター１０の中心付近には、フィルター部１２が形成されていない領域が存在する。なお、フィルター部１２は、領域Ａ１の一部に設けられていればよく、その形状はリング形状に限定されない。フィルター部１２は、例えば、長方形、正方形等の矩形形状、又は楕円等の形状であってもよい。なお、枠部１１によって画定された領域Ａ１の一部にフィルター部１２が設けられているとは、第１主面ＰＳ１側（Ｚ方向）から見て、領域Ａ１において、フィルター部１２の占める面積が、フィルター部１２が設けられていない部分の面積よりも小さくなるように、フィルター部１２を設けることを意味する。
【００６１】
図３は、フィルター部１２の一部を厚み方向（Ｚ方向）から見た概略図である。図３に示すように、複数の貫通孔１３は、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１及び第２主面ＰＳ２上に周期的に配置されている。具体的には、複数の貫通孔１３は、フィルター部１２においてマトリクス状に等間隔で設けられている。言い換えると、複数の貫通孔１３は、格子状に配列されている。
【００６２】
実施の形態１では、貫通孔１３は、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１側、即ちＺ方向から見て、正方形の形状を有する。なお、貫通孔１３は、Ｚ方向から見た形状が正方形に限定されず、例えば長方形をはじめとする多角形、円形、又は楕円などの形状であってもよい。
【００６３】
実施の形態１では、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１に対して垂直な面に投影した貫通孔１３の形状（断面形状）は、長方形である。具体的には、貫通孔１３の断面形状は、サンプリングフィルター１０の半径方向の一辺の長さがサンプリングフィルター１０の厚み方向の一辺の長さより長い長方形である。なお、貫通孔１３の断面形状は、長方形に限定されず、例えば、平行四辺形又は台形等のテーパー形状であってもよいし、対称形状であってもよいし、非対称形状であってもよい。
【００６４】
実施の形態１では、複数の貫通孔１３は、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１側（Ｚ方向）から見て正方形の各辺と平行な２つの配列方向、即ち図３中のＸ方向とＹ方向に等しい間隔で設けられている。このように、複数の貫通孔１３を正方格子配列で設けることによって、開口率を高めることが可能であり、サンプリングフィルター１０に対する細胞凝集塊を含む培養液の通路抵抗を低減することができる。このような構成により、液体がフィルター部１２を通過するときに細胞凝集塊へかかるストレスを低減することができる。また、複数の貫通孔１３の配列の対称性が向上するため、フィルターの観察が容易になる。
【００６５】
なお、複数の貫通孔１３の配列は、正方格子配列に限定されず、例えば、準周期配列、又は周期配列であってもよい。周期配列の例としては、方形配列であれば、２つの配列方向の間隔が等しくない長方形配列でもよく、三角格子配列又は正三角格子配列などであってもよい。なお、貫通孔１３は、フィルター部１２に複数設けられていればよく、配列は限定されない。
【００６６】
貫通孔１３の間隔は、培養液から分離する細胞凝集塊の種類（大きさ、形態、性質、弾性）又は量に応じて適宜設計されるものである。ここで、貫通孔１３の間隔とは、図３に示すように、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１側から見て、任意の貫通孔１３の中心と隣接する別の貫通孔１３の中心との間の距離ｂを意味する。実施の形態１では、貫通孔１３の中心とは、正方形である貫通孔１３の２つの対角線が交差する点である。周期配列の構造体の場合、貫通孔１３の間隔ｂは、例えば、貫通孔１３の一辺ｄの１倍より大きく１０倍以下であり、好ましくは貫通孔１３の一辺ｄの３倍以下である。
【００６７】
貫通孔１３は、所望のサイズの細胞凝集塊を捕捉できる寸法に設計されている。即ち、貫通孔１３は、異なるサイズの細胞凝集塊を含む液体の中から所望のサイズの細胞凝集塊を捕捉することができる。また。複数の貫通孔１３の寸法は、略同一に設計されている。ここで、「略同一に設計されている」とは、寸法誤差が１０％以下の範囲内で設計されていることを意味する。
【００６８】
貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口と第２主面ＰＳ２側の開口とが連続した壁面を通じて連通している。具体的には、貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口が第２主面ＰＳ２側の開口に投影可能に設けられている。即ち、フィルター部１２を第１主面ＰＳ１側から見た場合に、貫通孔１３は、第１主面ＰＳ１側の開口が第２主面ＰＳ２側の開口と重なるように設けられている。実施の形態１において、第１貫通孔１３は、その内壁が第１主面ＰＳ１及び第２主面ＰＳ２に対して垂直となるように設けられている。
【００６９】
サンプリングフィルター１０の第１主面ＰＳ１から見た（Ｚ方向から見た）領域Ａ１の面積に対して、フィルター部１２の占める面積の割合は、例えば、１％以上１０％以下であることが好ましい。このような構成により、フィルター部１２による細胞凝集塊を含む液体の通路抵抗の増加を抑えることができる。
【００７０】
フィルター部１２の厚みは、貫通孔１３の大きさ（一辺ｄ）の０．０１倍より大きく１０倍以下が好ましい。より好ましくは、フィルター部１２の厚みは、貫通孔１３の大きさ（一辺ｄ）の０．０２倍より大きく５倍以下である。このような構成により、サンプリングフィルター１０の機械強度を確保した上で、細胞凝集塊を含む液体の通路抵抗を低減することができる。その結果、細胞凝集塊にかかるストレスを低減することができる。
【００７１】
フィルター部１２において、細胞凝集塊を含む培養液が接触する第１主面ＰＳ１は、平滑に形成されていてもよい。具体的には、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１は、凹凸がなく均一な平面で形成されていてもよい。言い換えると、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１上の複数の貫通孔１３の開口が同一平面上に形成されている。また、フィルター部１２のうち貫通孔１３が形成されていない部分、即ちフィルター基体部１４は、繋がっており、一体に形成されている。このような構成により、貫通孔１３で捕捉した細胞凝集塊を容易に回収することができる。また、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１が平滑に構成されていることで、顕微鏡での観察が容易になる。例えば、細胞凝集塊を捕捉したサンプリングフィルター１０をそのまま顕微鏡に持って行き、第１主面ＰＳ１上に捕捉されている細胞凝集塊を観察することができる。このとき、第１主面ＰＳ１上には凹凸がなく均一平面で形成されているため、高倍率にしてもピント合わせなどの作業を容易に行うことができる。
【００７２】
［サンプリング装置］
サンプリング装置５０について図４を用いて説明する。
【００７３】
図４は、本発明に係る実施の形態１のサンプリング装置５０の概略図である。図４に示すように、サンプリング装置５０は、容器部１５と、容器部１５の内部に配置されるサンプリングフィルター１０と、を備える。実施の形態１では、サンプリングフィルター１０は、接続部１８を介して容器部１５と接続されている。
【００７４】
＜容器部＞
容器部１５は、細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口１６と、液体を排出する排出口１７とを有する筒体である。実施の形態１では、容器部１５は、円筒状の筒体である。なお、容器部１５は、内部に液体が流れる流路を備えていればよく、円筒状に限定されない。容器部１５は、例えば、流入口１６側から見て、楕円、正方形、長方形などの形状であってもよい。
【００７５】
容器部１５は、例えば、ガンマ滅菌可能な材料で構成することができる。容器部１５は、例えば、ポリエチレン、ポリエチレンテレフタレート、ポリウレタン、ポリスチレン、シリコンゴム、ＡＢＳ樹脂、ポリアミド、ポリアミドイミド、ポリスルフォン、天然ゴム、ラテックス、ウレタンゴム、シリコンゴム、エチレン酢酸ビニル、ポリエステル類、エポキシ類、フェノール類、シリカ、アルミナ、金、白金、ニッケル、ステンレス、チタン、などを含む材料で形成されていてもよい。このような材料で容器部１５を構成することにより、細胞凝集塊へのストレスを低減することができる。
【００７６】
実施の形態１では、容器部１５は、２つの部材、即ち、第１部材１５ａと第２部材１５ｂとで構成されている。例えば、第１部材１５ａと第２部材１５ｂとは、それぞれ端部に形成されたネジ部で螺合することによって接続される。第１部材１５ａ及び第２部材１５ｂの内壁には、サンプリングフィルター１０の枠部１１を保持するための第１突起部１５ａａ及び第２突起部１５ｂａが形成されている。第１部材１５ａと第２部材１５ｂとが接続されると、サンプリングフィルター１０の枠部１１は、接続部１８を介して、第１突起部１５ａａと第２突起部１５ｂａとの間で保持される。このような構成により、サンプリングフィルター１０は、容器部１５の流入口１６と排出口１７との間に配置される。これにより、容器部１５の流入口１６から細胞凝集塊を含む液体を導入すると、液体は容器部１５内部に配置されたサンプリングフィルター１０を通過した後、排出口１７から排出される。
【００７７】
実施の形態１では、サンプリング装置５０は、サンプリングフィルター１０の第１主面ＰＳ１に対して鉛直下方向にかかる重力、即ち、液体の自重によって、細胞凝集塊を含む液体をサンプリングフィルター１０に通過させている。なお、サンプリング装置５０は、サンプリングフィルター１０に細胞凝集塊を含む液体を通過させるために、容器部１５の流入口１６から排出口１７への方向６０に向かって液体に圧力を加える押圧部を備えてもよい。あるいは、サンプリング装置５０は、排出口１７から方向６０に液体を吸引する吸引部を備えてもよい。サンプリング装置５０は、押圧部又は吸引部を備えることによって、処理時間を短縮することができる。なお、圧力を加える場合又は吸引する場合は、細胞凝集塊が変形しない程度の力とすることが好ましい。
【００７８】
サンプリング装置５０では、サンプリングフィルター１０で細胞凝集塊をサンプリングした後、第１部材１５ａを第２部材１５ｂから取り外すことができる。そして、細胞凝集塊を捕捉したサンプリングフィルター１０を第２部材１５ｂに取り付けたまま、顕微鏡にセットすることができる。このため、サンプリングフィルター１０で捕捉された細胞凝集塊を容易に観察することができる。その結果、サンプリング装置５０では、貫通孔１３で捕捉した所望のサイズの細胞凝集塊の培養状態を容易に確認することができる。
【００７９】
［サンプリング方法］
サンプリングフィルター１０を用いたサンプリング方法について説明する。
【００８０】
まず、サンプリングフィルター１０を準備する。この工程では、例えば、サンプリングフィルター１０が、容器部１５に取り付けられる。具体的には、サンプリングフィルター１０の枠部１１に接続部１８を取り付けた後、サンプリングフィルター１０を第２部材１５ｂの第２突起部１５ｂａ上に配置する。次に、第１部材１５ａの第１突起部１５ａａが接続部１８に接触するように、第１部材１５ａを第２部材１５ｂに接続する。実施の形態１では、第１部材１５ａは、第２部材１５ｂとネジ部で螺合されることによって接続される。これにより、第１突起部１５ａａと第２突起部１５ｂａとによって、サンプリングフィルター１０の枠部１１に取り付けられた接続部１８が挟持される。
【００８１】
次に、細胞凝集塊を含む液体をサンプリングフィルター１０に通過させる。この工程では、容器部１５の流入口１６から排出口１７に向かって容器部１５の内部に液体を流すことによって、サンプリングフィルター１０の枠部１１によって画定される領域Ａ１に液体が流れる。これにより、細胞凝集塊を含む液体の一部が、領域Ａ１の一部に設けられたフィルター部１２を通過する。このとき、所望のサイズの細胞凝集塊がフィルター部１２の貫通孔１３に捕捉される。一方、領域Ａ１において、フィルター部１２が設けられていない部分では、細胞凝集塊を含む液体が抵抗を受けることなくサンプリングフィルター１０を通過する。
【００８２】
細胞凝集塊を含む液体をサンプリングフィルター１０に通過させる方法としては、例えば、フィルター部１２の第１主面ＰＳ１に対して略鉛直上方から重力を利用して液体を通過させる方法がある。この他に、容器部１５の流入口１６から排出口１７への方向６０に向かって液体に圧力を加える方法、又は第２主面ＰＳ２から方向６０に液体を吸引する方法などがある。なお、細胞凝集塊を含む液体をフィルター部１２に通過させる工程においては、細胞凝集塊にストレスをなるべく与えないことが好ましい。例えば、圧力を加える場合、細胞凝集塊が変形しない程度の圧力とすることが好ましい。より好ましくは、圧力を加えずに、液体の自重により、液体をフィルター部１２に通過させることである。あるいは、フィルター部１２の開口率を高めることによって処理時間を短縮し、細胞凝集塊にストレスがかかっている時間を少なくすることが好ましい。
【００８３】
実施の形態１では、フィルター部１２の貫通孔１３は、所望のサイズの細胞凝集塊を捕捉できる寸法で設計されている。したがって、細胞凝集塊を含む液体の一部がフィルター部１２を通過することによって、所望のサイズの細胞凝集塊の一部を貫通孔１３で捕捉することができる。
【００８４】
［効果］
実施の形態１に係るサンプリングフィルター１０によれば、以下の効果を奏することができる。
【００８５】
サンプリングフィルター１０は、枠部１１によって細胞凝集塊を含む液体が通過する領域Ａ１を画定し、領域Ａ１の一部に複数の貫通孔１３が形成されたフィルター部１２を設けている。このような構成により、細胞凝集塊を含む液体が領域Ａ１を通過する際に、液体の一部がフィルター部１２を通過することによって、液体中から所望のサイズの細胞凝集塊を容易に捕捉することができる。即ち、サンプリングフィルター１０によれば、複数回のフィルタリングを行わなくても、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００８６】
サンプリングフィルター１０において、第１主面ＰＳ１から見た（Ｚ方向から見た）領域Ａ１の面積に対して、フィルター部１２の占める面積の割合は、１％以上１０％以下である。このような構成により、細胞凝集塊を含む液体の９０％以上は、領域Ａ１においてフィルター部１２の設けられていない部分を通過する。一方、残りの液体は、フィルター部１２を通過する。このため、フィルター部１２が存在することによる液体の通路抵抗の増加を抑えることができる。即ち、サンプリングフィルター１０によれば、処理時間を短くしつつ、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【００８７】
フィルター部１２は、第１主面ＰＳ１側から見て、枠部１１の内壁に沿ってリング状に設けられている。このような構成により、サンプリングしたい細胞凝集塊をフィルター部１２で更に捕捉しやすくなる。例えば、容器部１５内にサンプリングフィルター１０を取り付ける場合、容器部１５内部を流れる液体は、容器部１５の内壁に沿って流れる。そのため、容器部１５の内壁に近い位置にフィルター部１２を設けることによって、液体がフィルター部１２を通過しやすくなる。例えば、粘性の大きい液体に含まれる細胞凝集塊をサンプリングする場合、液体は枠部１１の内壁に沿って流れやすいため、細胞凝集塊をより容易にサンプリングすることができる。
【００８８】
サンプリングフィルター１０は、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としている。このような構成により、メンブレンなどの樹脂フィルターに比べて、サンプリングフィルター１０の機械強度を向上させることができる。サンプリングフィルター１０によれば、例えば、細胞凝集塊を含む液体がフィルター部１２を通過する際において、貫通孔１３が変形しにくいため、所望のサイズの細胞凝集塊がフィルター部１２を通過してしまうのを抑制することができる。
【００８９】
サンプリング装置５０及びサンプリング方法においても、上述したサンプリングフィルター１０の効果と同様の効果を奏することができる。特に、サンプリング装置５０を用いることで、サンプリングフィルター１０の取り扱い性を向上させることができる。例えば、サンプリングフィルター１０を容器部１５の第２部材１５ｂに取り付けたままで、サンプリングフィルター１０の第１主面ＰＳ１上に捕捉された細胞凝集塊を顕微鏡で容易に観察することができる。
【００９０】
なお、実施の形態１では、サンプリングフィルター１０は、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分としている構成について説明したが、これに限定されない。サンプリングフィルター１０は、多孔膜であればよく、例えば、ナイロン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリエーテルエーテルケトン、ポリエチレンテレフタレート、ポリ塩化ビニリデン等であってもよい。
【００９１】
実施の形態１では、サンプリングフィルター１０は、所望のサイズの細胞凝集塊を捕捉する例について説明したが、これに限定されない。サンプリングフィルター１０は、細胞凝集塊以外のものを捕捉してもよい。即ち、サンプリングフィルター１０は、液体中に存在する物体を捕捉することによって、液体中に含まれる物体の存在情報を得るために使用されてもよい。サンプリングフィルター１０は、例えば、単離細胞、死細胞、樹脂ビーズなどの存在情報を得るために使用されてもよい。
【００９２】
実施の形態１では、フィルター部１２を枠部１１の内壁に沿ってリング状に設けた例について説明したが、これに限定されない。フィルター部１２は、枠部１１で画定される領域Ａ１の一部に設けられていればよく、その形状は限定されない。フィルター部１２は、領域Ａ１を通過する液体の流れに応じて、設計することができる。フィルター部１２は、例えば、領域Ａ１において液体が集中して流れる位置に設けられてもよいし、あるいは、領域Ａ１において液体の流れを可能な限り阻害しない位置に設けられてもよい。
【００９３】
図５は、本発明に係る実施の形態１の変形例のサンプリングフィルター１０Ａの概略図である。図５に示すように、サンプリングフィルター１０Ａにおいて、フィルター部１２ａは、枠部１１の内壁の一部に沿って、例えば、アーチ状に設けられてもよい。言い換えると、サンプリングフィルター１０Ａは、第１主面ＰＳ１側から見て、枠部１１の右側の内壁に沿った曲線形状のフィルター部１２ａを設け、枠部１１の左側の内壁にフィルター部１２ａを設けなくてもよい。領域Ａ１においてフィルター部１２ａは、図５に示す例に限定されず、例えば、第１主面ＰＳ１側から見て、枠部１１の内壁の左側に設けられてもよい。また、サンプリングしたい細胞凝集塊の数に応じて、第１主面ＰＳ１側から見た領域Ａ１の面積に対してフィルター部１２ａの占める面積の割合を変更してもよい。
【００９４】
図６は、本発明に係る実施の形態１の別の変形例のサンプリングフィルター１０Ｂの概略図である。図６に示すように、サンプリングフィルター１０Ｂにおいて、フィルター部１２ｂは、保持部１９によって保持されてもよい。保持部１９は、枠部１１の内壁から延びてフィルター部１２ｂを保持している。保持部１９は、例えば、フィルター基体部１４と同じ材料で構成されている。このような構成により、フィルター部１２ｂの機械的強度を高めることができる。なお、保持部１９は、フィルター部１２ｂのフィルター基体部１４と枠部１１と一体で形成されていてもよい。保持部１９が、フィルター基体部１４と枠部１１と一体で形成されることにより、機械的強度を更に高めることができる。
【００９５】
図７は、本発明に係る実施の形態１の別の変形例のサンプリングフィルター１０Ｃの概略図である。図７に示すように、サンプリングフィルター１０Ｃにおいて、フィルター部１２ｃは、複数の保持部１９によって保持されることによって、第１主面ＰＳ１側から見て、領域Ａ１の中央に設けられてもよい。具体的には、枠部１１の内壁からＹ方向に延びる２つの保持部１９と、Ｘ方向に延びる２つの保持部１９とを、第１主面ＰＳ１側（Ｚ方向）から見て、領域Ａ１の中央で交差させるように設けている。そして、これらの保持部１９が交差する部分でフィルター部１２ｃを保持している。このように、保持部１９によってフィルター部１２ｃを領域Ａ１内の任意の場所に設けることができる。このような構成により、液体の流れに応じて、サンプリングしやすい位置、又は液体の流れを阻害しにくい位置にフィルター部１２ｃを設けることができる。
【００９６】
図８は、本発明に係る実施の形態１の別の変形例のサンプリングフィルター１０Ｄの概略図である。図８に示すサンプリングフィルター１０Ｄでは、図７に示すサンプリングフィルター１０Ｃの構成に加えて、フィルター部１２ｄに異なるサイズの貫通孔１３ａ、１３ｂが形成されている。図８に示すように、フィルター部１２ｄには、複数の第１貫通孔１３ａと、第１貫通孔１３ａより小さい複数の第２貫通孔１３ｂと、が形成されている。このような構成により、１回のサンプリングで異なるサイズの細胞凝集塊を捕捉することができる。なお、フィルター部１２ｄは、貫通孔１３ａ、１３ｄは２つのサイズに限定されるものではなく、２つ以上の異なるサイズの貫通孔が形成されていてもよい。
【００９７】
上述したサンプリングフィルター１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃ、１０Ｄは例示であり、本発明のサンプリングフィルター１０は、これらの例に限定されるものではない。サンプリングフィルター１０は、細胞凝集塊を含む液体が通過する領域Ａ１の一部に、細胞凝集塊を捕捉する貫通孔１３が形成されたフィルター部１２を設けていればよい。フィルター部１２が設けられる位置、面積などは、サンプリングしたい細胞凝集塊の数、液体の流れなどに応じて適宜設計されてもよい。
【００９８】
実施の形態１では、サンプリング装置５０の容器部１５は、２つの部材、即ち第１部材１５ａと第２部材１５ｂとで構成される例について説明したが、これに限定されない。また、実施の形態１では、第１部材１５ａと第２部材１５ｂとがネジ部で螺合されることによって接続される例について説明したが、これに限定されない。例えば、容器部１５において、第１部材１５ａと第２部材１５ｂとが一体形成されていてもよい。このような構成により、容器部１５の強度を高めることができる。
【００９９】
実施の形態１では、サンプリング装置５０において、サンプリングフィルター１０は、容器部１５の流入口１６と排出口１７との間に配置される例について説明したが、これに限定されない。サンプリングフィルター１０は、細胞凝集塊を含む液体が通過できる位置に配置されていればよい。例えば、サンプリングフィルター１０は、容器部１５の流入口１６に配置されていてもよいし、容器部１５の排出口１７に配置されていてもよい。
【０１００】
実施の形態１では、サンプリング装置５０は、サンプリングフィルター１０を１つ備える例について説明したが、これに限定されない。サンプリング装置５０は、複数のサンプリングフィルター１０を備えてもよい。例えば、サンプリング装置５０が同じサンプリングフィルター１０を複数備える場合、所望のサイズの細胞凝集塊のサンプリング数を増やすことができる。特に、第１主面ＰＳ１側から見た領域Ａ１の面積に対して、フィルター部１２の占める面積の割合を抑えたい場合に、複数のサンプリングフィルター１０を段階的に配置する。これにより、サンプリングフィルター１０による液体の通過抵抗の増加を抑えつつ、サンプリング数を増やすことができる。このほかに、貫通孔１３のサイズが異なるサンプリングフィルター１０を複数備えてもよい。このような構成により、１回のサンプリングで異なるサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることができる。
【０１０１】
サンプリング方法においても、上述したように複数のサンプリングフィルター１０に、細胞凝集塊を含む液体を通過させることによって、サンプリング数を増やしたり、異なるサイズの細胞凝集塊をサンプリングしてもよい。
【０１０２】
（実施の形態２）
［サンプリング装置］
本発明に係る実施の形態２のサンプリング装置について図９を用いて説明する。図９は、本発明に係る実施の形態２のサンプリング装置５０Ａの概略図を示す。
【０１０３】
実施の形態２では、主に実施の形態１と異なる点について説明する。実施の形態２においては、実施の形態１と同一又は同等の構成については同じ符号を付して説明する。また、実施の形態２では、実施の形態１と重複する記載は省略する。
【０１０４】
図９に示すように、実施の形態２のサンプリング装置５０Ａは、実施の形態１と比べて、サンプリングフィルター１０の上流側に濾過フィルター２０を備えている点、及び容器部１５が３つの部材１５ａ、１５ｂ、１５ｃで構成されている点が異なる。
【０１０５】
サンプリング装置５０Ａでは、細胞凝集塊を含む液体を濾過フィルター２０に通過させることによって所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を液体から除去する。次に、液体をサンプリングフィルター１０に通過させることによって第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊をサンプリングする。
【０１０６】
＜濾過フィルター＞
図１０は、本発明に係る実施の形態２のサンプリング装置５０Ａに用いられる濾過フィルター２０の概略図である。図１０中のＸ、Ｙ、Ｚ方向は、それぞれ濾過フィルター２０の縦方向、横方向、厚み方向を示している。
【０１０７】
図１０に示すように、濾過フィルター２０は、円形の金属メッシュである。濾過フィルター２０は、細胞凝集塊を含む液体が通過する領域Ａ２を画定する枠部２１と、領域Ａ２に設けられたフィルター部２２とを備える。具体的には、枠部２１は、フィルター部２２の外周に設けられている。フィルター部２２は、互いに対向する第１主面ＰＳ３と第２主面ＰＳ４とを有している。フィルター部２２は、第１主面ＰＳ３と第２主面ＰＳ４とを貫通する複数の貫通孔２３が形成されたフィルター基体部２４を備える。濾過フィルター２０の貫通孔２３は、サンプリングフィルター１０の貫通孔１３より大きく設計されている。濾過フィルター２０では、第１主面ＰＳ３側（Ｚ方向）から見て、枠部２１によって画定される領域Ａ２全体にフィルター部２２が設けられている。
【０１０８】
実施の形態２において、濾過フィルター２０は、フィルター部２２を除いて、サンプリングフィルター１０の構成と同じである。言い換えると、濾過フィルター２０は、サンプリングフィルター１０と比べて、フィルター部２２がＺ方向から見て枠部２１の領域Ａ２全体に設けられている点、及び濾過フィルター２０の貫通孔２３のサイズがサンプリングフィルター１０の貫通孔１３と比べて大きく設計されている点が異なる。
【０１０９】
＜容器部＞
容器部１５は、第１部材１５ａと、第２部材１５ｂと、第３部材１５ｃとを備える。即ち、実施の形態２のサンプリング装置５０Ａの容器部１５は、実施の形態１の容器部１５と比べて、第３部材１５ｃを備える点が異なる。
【０１１０】
第３部材１５ｃは、第１部材１５ａと第２部材１５ｂとの間に接続される。第３部材１５ｃは、円筒状の筒体である。第３部材１５ｃの両端には、ネジ部が設けられている。第３部材１５ｃの一方の端部が第１部材１５ａと螺合され、他方の端部が第２部材１５ｂと螺合される。第３部材１５ｃの内壁には、濾過フィルター２０を保持するための第３突起部１５ｃａと、サンプリングフィルター１０を保持するための第４突起部１５ｃｂと、が形成されている。具体的には、第１部材１５ａと第３部材１５ｃとが接続されると、濾過フィルター２０の枠部２１に取り付けられた接続部１８が、第１部材１５ａの第１突起部１５ａａと第３部材１５ｃの第３突起部１５ｃａとの間に保持される。一方、第２部材１５ｂと第３部材１５ｃとが接続されると、サンプリングフィルター１０の枠部１１に取り付けられた接続部１８が、第２部材１５ｂの第２突起部１５ｂａと第３部材の第４突起部１５ｃｂとの間に保持される。このような構成により、容器部１５の流入口１６と排出口１７との間に濾過フィルター２０とサンプリングフィルター１０とを配置することができると共に、濾過フィルター２０をサンプリングフィルター１０よりも流入口１６側に配置することができる。
【０１１１】
［サンプリング方法］
次に、本発明に係る実施の形態２のサンプリング方法について説明する。
【０１１２】
実施の形態２のサンプリング方法は、実施の形態１のサンプリング方法に加えて、サンプリングフィルター１０よりも上流側に濾過フィルター２０を準備するステップと、細胞凝集塊を含む液体を濾過フィルター２０に通過させて、第１細胞凝集塊を捕捉するステップと、を含む。これにより、異なるサイズの細胞凝集塊を含む液体から所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を、濾過フィルター２０で除去することができる。
【０１１３】
また、実施の形態２のサンプリング方法では、濾過フィルター２０で濾過された液体を、サンプリングフィルター１０に通過させることによって、第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉する。具体的には、第１細胞凝集塊が除去された液体の一部を、サンプリングフィルター１０のフィルター部１２に通過させることによって、貫通孔１３で所望のサイズの第２細胞凝集塊を捕捉する、即ち所望のサイズの第２細胞凝集塊をサンプリングすることができる。
【０１１４】
［効果］
実施の形態２に係るサンプリング装置５０Ａによれば、以下の効果を奏することができる。
【０１１５】
サンプリング装置５０Ａは、サンプリングフィルター１０の上流側に配置される濾過フィルター２０を備えている。濾過フィルター２０は、異なるサイズの細胞凝集塊を含む液体から、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を捕捉する。また、サンプリングフィルター１０は、濾過フィルター２０で第１細胞凝集塊を除去された液体から、所望のサイズの第２細胞凝集塊を捕捉する。このような構成により、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を濾過しつつ、所望のサイズの第２細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【０１１６】
サンプリング方法においても、上述したサンプリング装置５０Ａの効果と同様の効果を奏することができる。特に、所望のサイズの細胞凝集塊を得るために、濾過フィルター２０を用いてフィルタリングする際に、サンプリングフィルター１０で所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることができる。このため、本発明のサンプリング方法によれば、複数回のフィルタリングを行わなくても、異なるサイズの細胞凝集塊を含む液体の中から、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。
【０１１７】
なお、実施の形態２では、濾過フィルター２０は、円形の金属メッシュである例を説明したが、これに限定されない。濾過フィルター２０は、異なるサイズの細胞凝集塊を含む液体から、所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を捕捉することができるフィルターであればよい。濾過フィルター２０は、例えば、メンブレン、樹脂製メッシュなどのフィルターであってもよい。また、濾過フィルター２０の寸法及び形状は、容器部１５の形状等に応じて適宜設計変更可能である。
【０１１８】
実施の形態２では、サンプリング装置５０Ａは、濾過フィルター２０を１つだけ備える例について説明したが、これに限定されない。サンプリング装置５０Ａは、濾過フィルター２０を複数備えてもよい。同様に、サンプリング装置５０Ａは、サンプリングフィルター１０を１つだけ備える例について説明したが、これに限定されない。サンプリング装置５０Ａは、サンプリングフィルター１０を複数備えてもよい。
【０１１９】
図１１は、本発明に係る実施の形態２の変形例のサンプリング装置５０Ｂである。図１１に示すように、サンプリング装置５０Ｂは、濾過フィルター２０の下流に２つのサンプリングフィルター１０Ｅ、１０Ｆを備えている。具体的には、濾過フィルター２０の下流に第１サンプリングフィルター１０Ｅが配置され、第１サンプリングフィルター１０Ｅの下流に第２サンプリングフィルター１０Ｆが配置されている。第１サンプリングフィルター１０Ｅと第２サンプリングフィルター１０Ｆとは、同じフィルターであってもよいし、異なるフィルターであってもよい。
【０１２０】
第１サンプリングフィルター１０Ｅと第２サンプリングフィルター１０Ｆとが同じフィルターである場合、所望のサイズの細胞凝集塊のサンプリング数を増やすことができる。
【０１２１】
第１サンプリングフィルター１０Ｅと第２サンプリングフィルター１０Ｆとが異なるフィルターである場合、それぞれのフィルターにおいて異なるサイズの細胞凝集塊をサンプリングすることができる。サンプリング装置５０Ｂでは、例えば、第２サンプリングフィルター１０Ｆに、第１サンプリングフィルター１０Ｅの貫通孔１３よりも小さい貫通孔を設けてもよい。このような構成により、濾過フィルター２０で所望のサイズより大きい第１細胞凝集塊を除去しつつ、第１サンプリングフィルター１０Ｅで所望のサイズの第２細胞凝集塊を抽出し、第２サンプリングフィルター１０Ｆで第２細胞凝集塊より小さい第３細胞凝集塊を抽出することができる。
【０１２２】
また、サンプリング装置５０Ｂの容器部１５は、４つの部材、即ち、第１部材１５ａと、第２部材１５ｂと、第３部材１５ｃと、第４部材１５ｄと、で構成されていてもよい。第４部材１５ｄは、第３部材１５ｃと同じ部材で構成されていてもよい。
【０１２３】
実施の形態２では、濾過フィルター２０は第１細胞凝集塊を捕捉し、サンプリングフィルター１０は第２細胞凝集塊を捕捉する例について説明したが、これらに限定されない。濾過フィルター２０及びサンプリングフィルター１０は、細胞凝集塊以外のものを捕捉してもよい。例えば、濾過フィルター２０は、細胞膜を捕捉してもよい。また、サンプリングフィルター１０は、細胞凝集塊以外に濾過フィルター２０を通過したものを捕捉することによって、液体に含まれる物体の存在情報を得るために使用されてもよい。
【０１２４】
本発明は、添付図面を参照しながら好ましい実施形態に関連して充分に記載されているが、この技術の熟練した人々にとっては種々の変形や修正は明白である。そのような変形や修正は、添付した特許請求の範囲による本発明の範囲から外れない限りにおいて、その中に含まれると理解されるべきである。
【産業上の利用可能性】
【０１２５】
本発明の濾過フィルターは、所望のサイズの細胞凝集塊を容易にサンプリングすることができる。このため、培養液から所望のサイズの細胞凝集塊をサンプリングする用途に有用である。
【符号の説明】
【０１２６】
１０、１０Ａ、１０Ｂ、１０Ｃ，１０Ｄ、１０Ｅ、１０Ｆ  サンプリングフィルター
１１  枠部
１２  フィルター部
１３  貫通孔
１４  フィルター基体部
１５  容器部
１５ａ  第１部材
１５ａａ  第１突起部
１５ｂ  第２部材
１５ｂａ  第２突起部
１５ｃ  第３部材
１５ｃａ  第３突起部
１５ｃｂ  第４突起部
１５ｄ  第４部材
１６  流入口
１７  排出口
１８  接続部
２０  濾過フィルター
２１  枠部
２２  フィルター部
２３  貫通孔
２４  フィルター基体部
５０、５０Ａ、５０Ｂ  サンプリング装置
６０  方向
ＰＳ１  第１主面
ＰＳ２  第２主面
ＰＳ３  第１主面
ＰＳ４  第２主面
【図１】
2018042943.tif 000003
【図２】
2018042943.tif 000004
【図３】
2018042943.tif 000005
【図４】
2018042943.tif 000006
【図５】
2018042943.tif 000007
【図６】
2018042943.tif 000008
【図７】
2018042943.tif 000009
【図８】
2018042943.tif 000010
【図９】
2018042943.tif 000011
【図１０】
2018042943.tif 000012
【図１１】
2018042943.tif 000013
【手続補正書】
【提出日】平成30年9月19日(2018.9.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞凝集塊をサンプリングするためのフィルターであって、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備え、
前記フィルターの第１主面から見た前記領域の面積に対して、前記フィルター部の占める面積の割合は、１％以上１０％以下である、サンプリングフィルター。
【請求項２】
前記フィルター部の前記複数の貫通孔は、第１貫通孔と、前記第１貫通孔より小さい第２貫通孔と、を含む、請求項１に記載のサンプリングフィルター。
【請求項３】
前記フィルター部は、前記枠部の内壁に沿って設けられた、請求項１又は２に記載のサンプリングフィルター。
【請求項４】
更に、前記枠部から延びて、前記フィルター部を保持する保持部を備える、請求項１〜３のいずれか一項に記載のサンプリングフィルター。
【請求項５】
金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載のサンプリングフィルター。
【請求項６】
細胞凝集塊を含む液体を導入する流入口と前記液体を排出する排出口とを有する容器部と、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置されたサンプリングフィルターと、
を備え、
前記サンプリングフィルターは、
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、
前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、
を備え、
前記サンプリングフィルターの第１主面から見た前記領域の面積に対して、前記フィルター部の占める面積の割合は、１％以上１０％以下である、サンプリング装置。
【請求項７】
前記フィルター部の前記複数の貫通孔は、第１貫通孔と、前記第１貫通孔より小さい第２貫通孔と、を含む、請求項６に記載のサンプリング装置。
【請求項８】
前記フィルター部は、前記枠部の内壁に沿って設けられた、請求項６又は７に記載のサンプリング装置。
【請求項９】
前記サンプリングフィルターは、前記枠部から延びて前記フィルター部を保持する保持部を備える、請求項６〜８のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１０】
前記サンプリングフィルターは、金属及び金属酸化物の少なくとも一方を主成分とする、請求項６〜９のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１１】
更に、前記サンプリングフィルターより前記容器部の前記流入口側に、複数の貫通孔が形成された濾過フィルターを備え、
前記濾過フィルターの前記貫通孔は、前記サンプリングフィルターの前記貫通孔より大きい、請求項６〜１０のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１２】
前記濾過フィルターは、第１細胞凝集塊を捕捉し、
前記サンプリングフィルターは、前記第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉する、請求項１１に記載のサンプリング装置。
【請求項１３】
前記サンプリングフィルターを複数備え、
複数のサンプリングフィルターは、
前記容器部の前記流入口と前記排出口との間に配置された第１サンプリングフィルターと、
前記第１サンプリングフィルターより前記容器部の排出口側に配置された第２サンプリングフィルターと、
を含み、
前記第２サンプリングフィルターでは、前記第１サンプリングフィルターの第１貫通孔より小さい第３貫通孔が形成された、請求項６〜１２のいずれか一項に記載のサンプリング装置。
【請求項１４】
細胞凝集塊を含む液体が通過する領域を画定する枠部と、前記領域の一部に設けられると共に、複数の貫通孔が形成されたフィルター部と、を備え、フィルターの第１主面から見た前記領域の面積に対して、前記フィルター部の占める面積の割合は、１％以上１０％以下である、サンプリングフィルターを準備するステップ、
細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップ、
を含む、サンプリング方法。
【請求項１５】
更に、
前記サンプリングフィルターより上流側に配置される、複数の貫通孔が形成された濾過フィルターを準備するステップ、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記濾過フィルターに通過させて、第１細胞凝集塊を捕捉するステップ、
を含み、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップは、前記サンプリングフィルターによって第１細胞凝集塊より小さい第２細胞凝集塊を捕捉すること、を含む、請求項１４に記載のサンプリング方法。
【請求項１６】
前記サンプリングフィルターを準備するステップは、第１サンプリングフィルターと、第２サンプリングフィルターと、を準備すること、を含み、
前記細胞凝集塊を含む液体を前記サンプリングフィルターに通過させるステップは、第１サンプリングフィルターで第２細胞凝集塊を捕捉し、前記第２サンプリングフィルターで第２細胞凝集塊より小さい第３細胞凝集塊を捕捉すること、を含む、請求項１５に記載のサンプリング方法。
【国際調査報告】
2018042943.tif 000014
2018042943.tif 000015
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