(57)【要約】      （修正有）【課題】スタンプスプレード法による検査器具に関するものであり、ふき取り検体中のサルモネラ属菌や腸炎ビブリオのような病原菌は食品検体と同様に汚染菌量が少ないか損傷を受けている可能性があり、より高い検出率を得るためには損傷菌を修復し、細菌を増加させるための増菌培養検査容器を提供する。【解決手段】検査対象部位をスタンプして増菌培養後、寒天培地に塗布して培養し、微生物の有無を判定するサンプリング器具であり、サンプリング器具は、先端面に単包性合成ゴムなどからなる捕捉部１を有するキャップ部２と、キャップ部を覆うように閉蓋する本体部３と、その内側底部に増菌液部を有する培地部４とからなることを特徴とする。【選択図】図１
0003198876.tif 000002
【実用新案登録請求の範囲】
【請求項１】
検査対象部位をスタンプして増菌培養後、寒天培地に塗布して培養し、微生物の有無を判定するサンプリング器具であり、該サンプリング器具は、先端面に単包性合成ゴムなどからなる捕捉部を有するキャップ部と、該キャップ部を覆うように閉蓋する本体部と、その内側底部に増菌液部を有する培地部とからなることを特徴とする増菌培養検査容器。
【考案の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本考案は、本来スタンプスプレード法による検査器具に関するものであり、検査対象をスタンプして増菌培養後、寒天培地に塗布して培養し、微生物の有無を判定するサンプリング器具に関するものである。さらに詳しくは検査対象部位をスタンプして増菌培養後、寒天培地に塗布して培養し、微生物の有無を判定するスタンプスプレード器具であり、該スタンプスプレード器具は、先端面に単包性合成ゴムなどからなる捕捉部を有するキャップ部と、該スタンプスプレード部を覆うように閉蓋する本体部と、その内側底部に増菌液部を有する培地部とからなることを特徴とする増菌培養検査容器に関するものである。
【背景技術】
【０００２】  従来、ふき取り検査とは、物体表面に付着している細菌を捕捉・測定し、環境中の細菌の汚染を把握するための検査法である。そのサンプリング器具の一つである滅菌スタンプスプレードは、本来単包性合成ゴムなどからなる捕捉部でまな板や手・指などの検査対象をスタンプした後、目的の細菌に適した寒天培地に塗布し、その寒天培地を培養して細菌の有無を判定するのに用いられる。このスタンプスプレードを用いたふき取り検査を実施するにあたり、ふき取り検体中のサルモネラ・パラティフィやサルモネラ・エンテリティディスなどのサルモネラ属菌や腸炎ビブリオのような病原菌は食品検体と同様に汚染菌量が少ないか損傷を受けている可能性があり、より高い検出率を望むには損傷菌を修復し、細菌を増加させるための増菌培養が必要であった。
この方法は特開２００６−５０９１１号公報（特許文献１）のように乳頭パックに利用され大腸菌の検査に利用されたり、特開２００１−２３５４２３号公報（特許文献２）に開示されているように食品製造設備の硬表面、例えば、ステンレス製の充填機、配管、殺菌プレート等の硬表面、あるいは圧延鋼板等、各種鋼板等を洗浄剤で洗浄の際、洗浄後の被洗浄面が充分に洗浄されているかどうか、洗い残しが無いかどうかを検知して洗浄効果を判定する器具として利用されている。
また、特開２０００−２６２５９３号公報（特許文献３）に示されているように、室内にある被処理物を適用自在に殺菌することができる殺菌装置における殺菌効果を確認するためにも利用されている。
これらはいずれも従来の上記した課題であるふき取り検体中のサルモネラ属菌や腸炎ビブリオのような病原菌は食品検体と同様に汚染菌量が少ないか損傷を受けている可能性があり、より高い検出率を望むには損傷菌を修復し、細菌を増加させるための増菌培養が必要である点の考慮はされていない。【０００３】
【特許文献１】特開２００６−５０９１１号公報
【特許文献２】特開２００１−２３５４２３号公報
【特許文献３】特開２０００−２６２５９３号公報
【考案の開示】
【考案が解決しようとする課題】
【０００４】  本考案は、従来の問題点に鑑み案出されたものであり、ふき取り検体中のサルモネラ属菌や腸炎ビブリオのような病原菌は食品検体と同様に汚染菌量が少ないか損傷を受けている可能性があり、より高い検出率を望むには損傷菌を修復し、細菌を増加させるための増菌培養が必要であったが、これらを解決するものであり、構造が簡単で安価であり、検査対象をキャップ部の先端部にある捕捉部によってスタンプ後、増菌培地を加えた本体部により閉蓋し増菌培養後、寒天培地に塗布して培養後細菌の有無を判定する。増菌培地とは特定の細菌が優位に発育してくるように工夫されている液体培地のことであり、目的とする細菌に応じて加える増菌培地を変えることにより、サルモネラ属菌や腸炎ビブリオだけでなく様々な細菌にも対応することが可能となるものである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】  本考案は、検査対象部位をスタンプして増菌培養後、寒天培地に塗布して培養し、微生物の有無を判定するスタンプスプレード器具であり、図１に示すように該スタンプスプレード器具は、先端面に単包性合成ゴムなどからなる捕捉部１を有するキャップ部２（図１右側）と、該キャップ部を覆うように閉蓋する本体部３と、その内側底部に増菌液部を有する培地部４（図１左側）とからなることを特徴とする増菌培養検査容器Ａである。
【考案の実施の形熊】
【０００６】  本考案の増菌培養検査容器は、ふき取り検査に用いられるものであり、ふき取り検査とは、物体表面に付着している細菌を捕捉・測定し、環境中の細菌の汚染を把握するための検査法である。そのサンプリング器具の一つであるスタンプスプレードは、先端面に単包性合成ゴムからなる捕捉部を有するキャップ部と、該キャップ部を覆うように閉蓋する本体部からなり、本来捕捉部でまな板や手・指などの検査対象をスタンプした後、目的の細菌に適した寒天培地に塗布し、その寒天培地を培養して細菌の有無を判定するのに用いられる。このスタンプスプレードを用いて、検査対象を捕捉部でスタンプ後、内側底部に特定の細菌が優位に発育してくるように工夫されている液体培地である増菌培地を加えた本体部により閉蓋し増菌培養後、寒天培地に塗布して培養後細菌の有無を判定する。
【０００７】  以上のようにしてなる増菌培養検査容器は、このスタンプスプレードを用いたふき取り検査を実施するにあたり、検体中のサルモネラ属菌や腸炎ビブリオのような汚染菌量が少ないか損傷を受けている可能性のある病原菌の検出率を高めるために、損傷菌を修復し、細菌を増加させるための増菌培養を同時に行えるようになしたものである。また、目的とする細菌に応じて加える増菌培地を変えることにより、サルモネラ属菌や腸炎ビブリオだけでなく様々な細菌にも対応することが可能となるものである。
【０００８】  この増菌培養検査容器の有効性を検証するためサルモネラ属菌と腸炎ビブリオについて図２及び図３のような比較検討をした。各菌液の希釈系列を作成し、増菌を実施しない直接法としてあらかじめ生理食塩水を加えたスタンプスプレードに各希釈段階より０．１ｍｌずつ滴下後すぐに分離培地に塗布し培養して菌数を測定した。一方、増菌培養検査容器を用いて増菌を実施する増菌法としてあらかじめ増菌培地を加えたスタンプスプレードに各希釈段階より０．１ｍｌずつ滴下後、２４時間培養してから分離培地に塗布し培養して菌数を測定した。サルモネラ属菌の増菌培地としてラパポート・バシリアディス培地（以下ＲＶ培地と略称する）、分離培地として白糖加シゲラ・サルモネラ寒天培地（以下ＳＳ寒天培地と略称する）、腸炎ビブリオは増菌培地としてアルカリペプトン水、分離培地としてＴＣＢＳ寒天培地（ＴＨＩＯＳＵＬＦＡＴＥ  ＣＩＴＲＡＴＥ  ＢＩＬＥ  ＳＡＬＴＳ  ＳＵＣＲＯＳＥ寒天培地）を用いた。容器に加える液量は、キャップをしても容器内に少量の空気が残り嫌気状態とならない適正量として１．０ｍｌとした。結果、サルモネラ属菌、腸炎ビブリオ共にスタンプスプレード内での増菌が認められ、この増菌培養検査容器の有効性が示唆された。
【０００９】  さらに詳しくは、サルモネラ属菌については、トリプトソイブイヨンにて３５℃２４時間培養した菌液を生理食塩水により希釈し、１０１〜１０１０までの希釈系列を作成する。増菌を実施しない直接法として、スタンプスプレードの本体部の内側底部に生理食塩水を１．０ｍｌ加えたものを６個準備し、菌液の希釈系列のうち１０２〜１０７の６系列より０．１ｍｌずつを各スタンプスプレードの本体部の内側底部に滴下しキャップ部により閉蓋して攪拌後、ＳＳ寒天培地に塗布し３５℃２４時間培養後菌数を計測した。一方、増菌培養検査容器を用いて増菌を実施する増菌法として、スタンプスプレードの本体部の内側底部にＲＶ培地を１．０ｍｌ加えたものを６個準備し、菌液の希釈系列のうち１０５〜１０１０の６系列より０．１ｍｌずつを各スタンプスプレードの本体部の内側底部に滴下しキャップ部により閉蓋して攪拌後、４２℃２４時間増菌培養後、ＳＳ寒天培地に塗布し３５℃２４時間培養後菌数を計測した。結果を表１に示す。
【００１０】
【表１】
0003198876.tif 000003
【００１１】  腸炎ビブリオについては、３％ＮａＣｌ加ペプトン水にて３５℃２４時間培養した菌液を生理食塩水により希釈し、１０１〜１０１０までの希釈系列を作成する。増菌を実施しない直接法として、スタンプスプレードの本体部の内側底部に生理食塩水を１．０ｍｌ加えたものを６個準備し、菌液の希釈系列のうち１０２〜１０７の６系列より０．１ｍｌずつを各スタンプスプレードの本体部の内側底部に滴下しキャップ部により閉蓋して攪拌後、ＴＣＢＳ寒天培地に塗布し３５℃２４時間培養後菌数を計測した。一方、増菌培養検査容器を用いて増菌を実施する増菌法として、スタンプスプレードの本体部の内側底部にアルカリペプトンを１．０ｍｌ加えたものを６個準備し、菌液の希釈系列のうち１０５〜１０１０の６系列より０．１ｍｌずつを各スタンプスプレードの本体部の内側底部に滴下しキャップ部により閉蓋して攪拌後、３５℃２４時間増菌培養後、ＴＣＢＳ寒天培地に塗布し３５℃２４時間培養後菌数を計測した。結果を表２に示す。
【００１２】
【表２】
0003198876.tif 000004
【００１３】  表１、表２より、サルモネラ属菌、腸炎ビブリオ共に増菌培養検査容器を用いた方が菌量の増加が認められた。スタンプスプレード法による従来の増菌培養は検査法が煩雑であったが、この増菌培養検査容器を用いることにより、操作が簡便でかつ有効に増菌培養が行えるものとなり、使用する増菌培地の量も従来より少量で行えるため、コスト的にも有益となる。だが、直接法に比べ、増菌培養を行う分判定までにかかる時間が１日長くなるが、直接法では検出率が低かった菌が増菌法では検出率が高くなる可能性があるため、１日判定が遅れても検査の有益性は高くなると考えられる。また、サルモネラ属菌や腸炎ビブリオ共に増菌が認められた場合においても、いずれも非常に増菌量が多く、塗布した培地上では判別は困難と考えられる。このような場合には、疑わしいコロニーが発育した場合には、再度分離・同定を行えばよいこととなる。
【考案の効果】
【００１４】  本考案の増菌培養検査容器は、増菌培地により特定の細菌が優位に発育してくるように工夫されている。また、目的とする細菌に応じて加える増菌培地の種類を変えることにより、サルモネラ属菌や腸炎ビブリオだけでなく、黄色ブドウ球菌や大腸菌群等についても勿論のこと様々な細菌にも対応することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本考案の増菌培養検査容器の分解斜視図である。
【図２】本考案の増菌培養検査容器の有効性を確認するためのサルモネラ属菌における試験のフロー図である。
【図３】本考案の増菌培養検査容器の有効性を確認するための腸炎ビブリオにおける試験のフロー図である。
【符号の説明】
【００１６】Ａ  増菌培養検査容器
１  捕捉部
２  キャップ部
３  本体部
４  培地部
【図１】
0003198876.tif 000005
【図２】
0003198876.tif 000006
【図３】
0003198876.tif 000007