(57)【要約】  この出願の発明は、家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを含むことを特徴とする、家禽類の飼育方法または飼料要求率（ＦＣＲ）改善方法、ならびに、バチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株を含む家禽類のＦＣＲ改善用飼料添加組成物を提供する。
2016163388.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを含むことを特徴とする、家禽類の飼育方法。
【請求項２】
家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを含むことを特徴とする、家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）を改善する方法。
【請求項３】
バチルス・コアギュランスを５．０×１０２ｃｆｕ／ｇ飼料またはそれ以上給与する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
バチルス・コアギュランスを後期（Ｆｉｎｉｓｈｅｒ）飼料または仕上げ（Ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ）飼料に加えて給与する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
家禽類が、食肉用家禽類である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
バチルス・コアギュランスを他の生菌剤と併せて給与する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
生菌剤が、バチルス・ズブチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
バチルス・ズブチルスが、バチルス・ズブチルスＣ−３１０２株（国際寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６）またはその派生株もしくは変異株である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
バチルス・ズブチルスあるいはバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株またはその派生株もしくは変異株を生産後期以前から継続的に給与する、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
バチルス・ズブチルスあるいはバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株またはその派生株もしくは変異株を初生雛から給与する、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１１】
バチルス・コアギュランスが、バチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
バチルス・コアギュランスが、バチルス・コアギュランスを給与しない対照と比べてＦＣＲを１〜１０％もしくはそれ以上改善する能力を有する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
バチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株を含むことを特徴とする、家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）改善用飼料添加組成物。
【請求項１４】
バチルス・ズブチルスをさらに含む、請求項１３に記載の飼料添加組成物。
【請求項１５】
バチルス・ズブチルスが、バチルス・ズブチルスＣ−３１０２株（国際寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６）またはその派生株もしくは変異株である、請求項１４に記載の飼料添加組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法で使用される、請求項１３〜１５のいずれか１項に記載の飼料添加組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バチルス・コアギュランスを給与することを含む、家禽類の飼料要求率（Ｆｅｅｄ  Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  Ｒａｔｉｏ；ＦＣＲ）改善方法および飼育方法に関する。【０００２】
本発明はまた、家禽類のＦＣＲ改善用飼料添加組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
家禽類の生産性能の向上（飼料要求率の改善を含む。）に関する文献として例えば特許文献１〜４を挙げることができる。【０００４】
特許文献１には、直接給与微生物をシトロバクター（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）属菌種に由来するフィターゼと組み合わせて含む、飼料添加用組成物が記載されている。【０００５】
特許文献２には、直接給与生菌をプロテアーゼ及びフィターゼと混合することを含む飼料添加用組成物が記載されている。【０００６】
特許文献３には、直接給与生菌をプロテアーゼ、キシラナーゼ、アミラーゼ、及びフィターゼと組み合わせて含む飼料添加用組成物が記載されている。【０００７】
特許文献１〜３では、直接給与微生物のうちバチルス属細菌として、バチルス・ズブチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）が例示されている。【０００８】
特許文献４には、肉用家禽類の成長方法に関し、肉用家禽類に家禽類飼料としてトウモロコシ−ダイズミール飼料を給与し、トウモロコシ−ダイズミール飼料が、上記肉用家禽類の体重増加の促進に有効な量のバチルス・リケニフォルミスＰＷＤ−１ケラチナーゼをさらに含むようにしたことを特徴とする肉用家禽類の成長方法が記載されている。【０００９】
非特許文献１には、Ｇｕａｎｇｘｉ  Ｙｅｌｌｏｗ  ｃｈｉｃｋｅｎにバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）ＺＪＵ０６１６を種々の濃度で給与したときの成長能力（ｇｒｏｗｔｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ）、飼料要求率（ｆｅｅｄ  ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｒａｔｉｏ）、生存率（ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｒａｔｅ）などに対する効果が記載されており、濃度が２．０×１０６ｃｆｕ／ｇ飼料及び５．０×１０６ｃｆｕ／ｇ飼料のとき対照と比べて飼料要求率が有意に低くなり、かつ生存率が高くなったことが記載されている。【００１０】
非特許文献２には、ブロイラーの成長能力と腸内菌叢に対するバチルス・コアギュランスの効能について記載されており、０．００５％及び０．０４％のＢ．コアギュランスが２１〜４２日にわたり、また全４２日にわたりＦＣＲを有意に改善したことが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特表２０１４−５０９８４６号公報
【特許文献２】特表２０１４−５０８５１９号公報
【特許文献３】特表２０１４−５０７９４６号公報
【特許文献４】特表２００６−５０６９８２号公報
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｘ．  Ｚｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｏｕｌｔｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０１０，  ８９：  ５８８−５９３
【非特許文献２】Ｓ．Ｙ．  Ｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｎｉｍａｌ  ａｎｄ  Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ２０１１，  １０（１）：  １１１−１１４
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、バチルス属細菌を用いて家禽類の飼料要求率及び体重増加率を従来技術に比して改善することを目的とする。
【００１４】
本発明者らは、鋭意研究を行ったところ、ある種のバチルス属細菌の１種または２種を組み合わせて家禽類に給与することによって有意に高い飼料要求率および体重増加率を達成することを見出した。
【００１５】
したがって、本発明は、以下の特徴を含む。
【００１６】
（１）家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを含むことを特徴とする、家禽類の飼育方法。
【００１７】
（２）家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを含むことを特徴とする、家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）を改善する方法。
【００１８】
（３）バチルス・コアギュランスを５．０×１０２ｃｆｕ／ｇ飼料またはそれ以上給与する、上記（１）または（２）に記載の方法。
【００１９】
（４）バチルス・コアギュランスを後期（Ｆｉｎｉｓｈｅｒ）飼料または仕上げ（Ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ）飼料に加えて給与する、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の方法。
【００２０】
（５）家禽類が、食肉用家禽類である、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の方法。
【００２１】
（６）バチルス・コアギュランスを他の生菌剤と併せて給与する、上記（１）〜（５）のいずれかに記載の方法。
【００２２】
（７）生菌剤が、バチルス・ズブチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）である、上記（６）に記載の方法。
【００２３】
（８）バチルス・ズブチルスが、バチルス・ズブチルスＣ−３１０２株（国際寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６）またはその派生株もしくは変異株である、上記（７）に記載の方法。
【００２４】
（９）バチルス・ズブチルスあるいはバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株またはその派生株もしくは変異株を生産後期以前から継続的に給与する、上記（７）または（８）に記載の方法。
【００２５】
（１０）バチルス・ズブチルスあるいはバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株またはその派生株もしくは変異株を初生雛から給与する、上記（７）または（８）に記載の方法。
【００２６】
（１１）バチルス・コアギュランスが、バチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株である、上記（１）〜（１０）のいずれかに記載の方法。
【００２７】
（１２）バチルス・コアギュランスが、バチルス・コアギュランスを給与しない対照と比べてＦＣＲを１〜１０％もしくはそれ以上改善する能力を有する、上記（１）〜（１１）のいずれかに記載の方法。
【００２８】
（１３）バチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株を含むことを特徴とする、家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）改善用飼料添加組成物。
【００２９】
（１４）バチルス・ズブチルスをさらに含む、上記（１３）に記載の飼料添加組成物。
【００３０】
（１５）バチルス・ズブチルスが、バチルス・ズブチルスＣ−３１０２株（国際寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６）またはその派生株もしくは変異株である、上記（１４）に記載の飼料添加組成物。
【００３１】
（１６）上記（１）〜（１２）のいずれかに記載の方法で使用される、上記（１３）〜（１５）のいずれかに記載の飼料添加組成物。
【図面の簡単な説明】
【００３２】
【図１】この図は、実施例（後述）でニワトリ（ブロイラー）に対し０日齢から４２日齢までの間で、異なる給与条件でサンプルを給与するための手順を示す。ＤＯＴ０、ＤＯＴ１９、ＤＯＴ３５およびＤＯＴ４２はそれぞれ日齢０日、１９日、３５日、４２日を表す。飼料（Ｄｉｅｔｓ）は、ニワトリの日齢に応じて変更する３種類の飼料、すなわちＳｔａｒｔｅｒ、ＧｒｏｗｅｒおよびＦｉｎｉｓｈｅｒを表し、飼料のみからなる試験対照である。Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５、Ｔ６は、図２に示す処理を表す。重量測定（Ｗｅｉｇｈｔ）は、表示の日齢で各ニワトリの体重および消費飼料の重量を測定したことを示す。
【図２】この図は、実施例（後述）で行った試験においてＦＣＲおよび体重増加率の効果を調べるための処理条件（Ｔ１〜Ｔ６）を示す。Ｔ４、Ｔ５およびＴ６が本発明である。
【図３】この図は、図１に示した手順で、および、Ｔ１〜Ｔ６の処理条件（図２）で試験を行ったときのニワトリの経日的なＷｅｉｇｈｔ  Ｇａｉｎ（体重増加）の変化を示すグラフである。
【図４】この図は、図１に示した手順で、および、Ｔ１〜Ｔ６の処理条件（図２）で試験を行ったときのニワトリの経日的なＦＣＲの変化を示すグラフである。
【図５】この図は、図１に示した手順で、および、Ｔ１〜Ｔ６の処理条件で試験を行ったときの日齢１９日、３５日、４２日での飼料摂取量（ｋｇ）、ＦＣＲ、体重増加（Ｗｅｉｇｈｔ  Ｇａｉｎ、ｋｇ）およびＤ３５−４２のＦＣＲ変化量（Ｖａｒｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＦＣＲ  ｉｎ  Ｄ３５−４２）の測定結果を示す。データの統計的な評価等は次のように行った。最小有意差検定（Ｔｕｋｅｙ  ＨＳＤ）を用いる平均の比較とＡＮＯＶＡを用いる一般的線形法によってデータの統計的な評価を行った。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
本発明をさらに具体的に説明する。
１．家禽類の飼育方法およびＦＣＲ改善方法
本発明は、家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを含むことを特徴とする、家禽類の飼育方法を提供する。
【００３４】
本発明はまた、家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを含むことを特徴とする、家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）を改善する方法を提供する。
【００３５】
本明細書中で使用する「飼料要求率（ＦＣＲ）」とは、一般に、動物の体重増加と消費飼料の量との比、すなわち体重増加（ｋｇ）／飼料摂取（ｋｇ）、あるいは体重を１ｋｇ増加させるために動物に給餌する飼料量を指す。たとえばＦＣＲ２は、２ｋｇの飼料量が必要であることを示す。したがって、ＦＣＲの値が小さいほど飼料利用率がよいことを示している。ＦＣＲは、家禽類の種類や飼育環境によって大きく異なることが知られている。また、ＦＣＲは単純に飼料量を表しているので、数値が大きい場合には、ＦＣＲの改善率が小さくとも、飼料の削減量は大きくなる。通常は、ＦＣＲ値を０．０１、好ましくは、０．１以上改善すれば経済効果は非常に大きく、改善率としては、ＦＣＲ値にもよるが、１％以上、好ましくは、５％以上、さらに好ましくは、７％以上あれば、非常に大きな改善効果と認められる。
【００３６】
本明細書中で使用する「家禽類」は、人が飼育する商用のトリを指し、好ましくは、ブロイラー、ターキー、ガチョウ、キジ、アヒル（ペキンダック等）などの食用に供するための（すなわち、食肉用の）トリである。
【００３７】
家禽類の飼育日数は、生後０日（誕生）から出荷日までの日数であり、家禽類の種類によって異なるし、また出荷時期により変動するが、非限定的に、約２５日〜約１７０日である。具体的には、飼育日数は、例えば、ブロイラーでは約３５日〜約６０日であり、ターキーでは約１４０日〜約１７０日であり、ペキンダックでは約４０〜約５０日であり、ガチョウでは約２５日〜約３０日であり、ならびに、キジでは約１２０日である。
【００３８】
家禽類の飼料（Ｄｉｅｔs）は、家禽類の飼育期間の例えば約３〜４週間ごとに栄養組成を変えることが通常行われている。家禽類のなかでブロイラーやターキーでは、生後０日から給与される飼料が、Ｓｔａｒｔｅｒ飼料、Ｇｒｏｗｅｒ飼料、およびＦｉｎｉｓｈｅｒ飼料に区分されており、これらの飼料の栄養組成および飼料を与える時期は異なっている。飼育期間の日齢に応じた家禽類の飼料の栄養組成は、例えばＮａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｕｎｃｉｌ（ＮＲＣ１９９４、米国）のＮｕｔｒｉｅｎｔ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｏｆ  Ｐｏｕｌｔｒｙ、Ａｎｉｍａｌ  Ｎｕｔｒｉｅｎｔ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ（２０１４、米国）のＳｅｃｔｉｏｎ  １２：  Ｐｏｕｌｔｒｙ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｆｅｅｄｉｎｇ，  ｐｐ．  ４１０−４２５、Ｅ．Ａ．  Ｓａｌｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｐｏｕｌｔｒｙ  Ｒｅｓ．  ６：  ２９０−２９７，  １９９７などに記載されており、本発明において使用しうる。
【００３９】
具体的には、ブロイラーの場合、例えば、０〜３週齢でＳｔａｒｔｅｒ飼料（エネルギー３２００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク２２％）、４〜５週齢でＧｒｏｗｅｒ飼料（エネルギー３２００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク２０％）、６〜７週齢でＦｉｎｉｓｈｅｒ飼料（エネルギー３２００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク１８％）である。
【００４０】
また、ターキーの場合、例えば、０〜４週齢（雄および雌）でＳｔａｒｔｅｒ飼料（エネルギー２８００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク２８％）、４〜８週齢（雄および雌）でＧｒｏｗｅｒ飼料（エネルギー２９００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク２６％）、８〜１２週齢（雄）、８〜１１週齢（雌）で別のＧｒｏｗｅｒ飼料（エネルギー３０００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク２２％）、１２〜１６週齢（雄）、１１〜１４週齢（雌）でさらに別のＧｒｏｗｅｒ飼料（エネルギー３１００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク１９％）、１６〜２０週齢（雄）、１４〜１７週齢（雌）でＦｉｎｉｓｈｅｒ飼料（エネルギー３２００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク１６．５％）、２０〜２４週齢（雄）、１７〜２０週齢（雌）で別のＦｉｎｉｓｈｅｒ飼料（エネルギー３３００ｋｃａｌ／ｋｇ、タンパク１４％）である。
【００４１】
なお、上記のブロイラーおよびターキーの飼料の例は、ＮＲＣ１９９４（米国、上記）に基づいている。
【００４２】
栄養は、タンパク／アミノ酸源として、ダイズミール、コットンシードミール、リンシードミール、アルファルファミール、コーングルテンミールなどの植物源、フィッシュミール、動物副産物のようなミート産物などの動物源、などが挙げられ、炭水化物源として、イエローコーンなどが挙げられ、その他として、油脂、ミネラル類、ビタミン類などを含む。
【００４３】
家禽類の飼料は、市販されているので、それらを飼育の間に使用することができる。
【００４４】
家禽類の飼育では、一定の区画の囲い（ｐｅｎ）のなか、自動調節された温度下で、上記のような飼育期間に応じて栄養組成が異なる飼料を毎日与えながら飼育する。飼育の間には、水を自由に飲めるようにすることが必要である。
【００４５】
後述の実施例では、家禽類としてブロイラーを例示するが、その飼育において、０〜１９日齢までの期間にＳｔａｒｔｅｒ飼料を与え、１９〜３５日齢までの期間にＧｒｏｗｅｒ飼料を与え、そして、約３５〜４２日齢までの期間にＦｉｎｉｓｈｅｒ飼料を与えた。
【００４６】
本発明の方法（飼育および飼料要求率改善）では、家禽類の飼育においてバチルス・コアギュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ）を家禽類の生産後期に給与することを特徴とする。
【００４７】
本明細書中で使用する「生産後期」について、ブロイラーの飼育においては、栄養を十分に与えても飼料要求率が悪くなるという現象が知られており、一般にこのような現象は、日齢（場合により、「週齢」で表現されてもよい。）が進んだ家禽類に見られる。本明細書では、このような現象が起きる時期から出荷までの期間を「生産後期」と称する。生産後期の一例は、飼料「Ｆｉｎｉｓｈｅｒ」が給与される期間であってよい。例えば、ブロイラーの飼育での生産後期は、例えば約３５日齢から出荷（例えば４２日齢）までの期間（図１参照）または約４２日齢から出荷（例えば５６日齢）までの期間である。あるいは、他の食用家禽類の生産においては、出荷前約３０〜６０日から出荷までの期間を生産後期としうる。ターキーの場合、生産後期は、例えば１６週齢〜２４週齢（１１２日齢〜１６８日齢）の期間であり、キジ（ｐｈｅａｓａｎｔ）の場合、生産後期は、例えば９週齢〜１７週齢（６３日齢〜１１９日齢）の期間である。
【００４８】
本発明の方法では、バチルス・コアギュランスの給与時期として、少なくとも生産後期に給与すれば十分な効果が得られる（例えば図４および図５中のＴ５およびＴ６参照）が、生産後期以前から、あるいは初生雛の段階から、給与（図４および図５のＴ４参照）していてもよい。
【００４９】
本発明では、１．０×１０３ｃｆｕ／ｇ飼料〜４．０×１０３ｃｆｕ／ｇ飼料程度の低い濃度のバチルス・コアギュランスの給与であっても、かつ、生産後期の給与のみで優れた飼料利用率を提供することに特徴がある（後述の実施例の「８．結果」参照）。
【００５０】
給与に際して、バチルス・コアギュランスを、家禽類用飼料として通常用いられる飼料、あるいは一般に生産後期に給与する飼料として知られる例えば「Ｆｉｎｉｓｈｅｒ」（後期）飼料（または「Ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ」（仕上げ）飼料ともいう。）、に混ぜて家禽類に給与する。
【００５１】
家禽類用飼料の成分は、通常使用されるものであれば特に制限されないものとし、例えば、ダイズミール、魚粉、肉粉、小麦全粒粉、ナタネ、カノーラなどのタンパク源、トウモロコシ、カラスムギ、オオムギ、モロコシ、コムギ、ライコムギ、ライムギ、コメなどの炭水化物源、その他、ビタミン、ミネラル、油脂（油および脂肪）、などの添加物などである。
【００５２】
給与量について、飼料へのバチルス・コアギュランスの添加量は、約５．０×１０２ｃｆｕ／ｇ飼料もしくはそれ以上、例えば約（１．０〜４．０）×１０３ｃｆｕ／ｇ飼料もしくはそれ以上であり、好ましくは約３．０×１０３ｃｆｕ／ｇ飼料もしくはそれ以上、または約４．０×１０３ｃｆｕ／ｇ飼料もしくはそれ以上であり、上限は特に制限するものではないが例えば約１．０×１０７ｃｆｕ／ｇ飼料〜約１．０×１０９ｃｆｕ／ｇ飼料程度であり得る。
【００５３】
バチルス・コアギュランスの培養は、文献等に記載の条件で行うことができる。例示的な培養方法は以下のとおりである。
【００５４】
バチルス・コアギュランスは、炭素源、窒素源、無機物等を含む液体培地（ｐＨ７．２〜７．４）中で好気的条件下、３７〜３８℃で緩やかに攪拌しながら約１２時間〜約３日、もしくはそれ以上の時間培養したのち、遠心分離によって菌体を回収することによって得ることができる（例えば、Ｈ  Ｋ  Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｆｏｏｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  ５１（１）：７８-８３（２０１３）参照）。炭素源としては、資化可能な炭素源、例えばグルコース、フラクトース、スクロース、澱粉、糖蜜などが挙げられる。また窒素源としては、例えばペプトン、肉エキス、酵母エキス、カゼイン水解物、硫安などを挙げることができる。更に必要に応じて無機成分として、燐酸塩、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、鉄、マンガン等の塩類、ビタミン、アミノ酸、消泡剤、界面活性剤等を添加することもできる。
【００５５】
回収された菌体は、培養物、濃縮物、乾燥物、液状、粒状、粉末状、ペレット状、棒状、球状などの任意の形態としうる。
【００５６】
バチルス・コアギュランスについては、本発明の効果、すなわち家禽類の生産後期に給与することによって家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）を改善する効果を提供するものであればいずれの菌株も包含する。そのような菌株は、以下のものに限定されないが、例えばＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５株またはその派生株もしくは変異株である。
【００５７】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５株は、ブダペスト条約下の国際寄託機関である独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター（郵便番号２９２−０８１８日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８  １２２号室）に２０１３年８月１３日に寄託され、国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３が付与されている。
【００５８】
上記の派生株もしくは変異株は、親株を、ニトロソグアニジン、ニトロソウレア、エタンスルホン酸メチル、それらの誘導体などの化学変異原の存在下に培養するか、培養親株に、紫外線、Ｘ線などの高エネルギー線を照射するなどの方法によって得ることができる。得られた株の中から、家禽類の生産後期に給与することによって家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）を改善する効果を提供するものを選抜する。
【００５９】
本発明はさらに、別の実施形態において、上記バチルス・コアギュランスに、他の生菌剤と併せて給与させることを含む。
【００６０】
他の生菌剤には、好ましくは、ラクトバチルス属細菌、バチルス属細菌などの生菌剤が含まれる。より好ましくは、バチルス属細菌である。
【００６１】
バチルス属細菌は、バチルス・ズブチルス、バチルス・リケニフォルミス、バチルス・アミロリケファシエンス、バチルス・セレウスなどであり、好ましくはバチルス・ズブチルスである。
【００６２】
ラクトバチルス属細菌は、ラクトバチルス・ブルガリクス、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・デルブリュック、ラクトバチルス・ブーフナー、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ラクトバチルス・ファーメンタムなどである。
【００６３】
バチルス属細菌やラクトバチルス属細菌は、炭素源、窒素源、無機物等を含む液体培地又は固体培地等を用いることができる。炭素源としては、資化可能な炭素源、例えばグルコース、フラクトース、スクロース、澱粉、糖蜜などが挙げられる。また窒素源としては、例えばペプトン、肉エキス、カゼイン水解物、硫安などを挙げることができる。更に必要に応じて無機成分として、燐酸塩、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、鉄、マンガン等の塩類、ビタミン、アミノ酸、消泡剤、界面活性剤等を添加することもできる。培養は好気的条件下で行うのが好ましく、培地の初発ｐＨは５〜９、好ましくはｐＨ６〜８、培養温度は２０〜５０℃、好ましくは３５〜４０℃とし、培養時間は、例えば１２時間〜７日である。培養後、遠心分離などの分離法によって菌体を回収することによって得ることができる。回収された菌体は、培養物、濃縮物、乾燥物、液状、粒状、粉末状、ペレット状、棒状、球状などの任意の形態としうる。
【００６４】
バチルス・ズブチルスの好適例は、バチルス・ズブチルスＣ−３１０２株またはその派生株もしくは変異株である。
【００６５】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  Ｃ−３１０２株（国際寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６）は、１９８５年１２月２５日に、日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１（寄託時；日本国茨城県筑波郡谷田部町東１丁目１番地３）の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（寄託時；通商産業省工業技術院微生物工業技術研究所）に寄託番号  微工研寄第８５８４号として原寄託し、１９８６年６月２８日に、同機関にて寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６（移管時；微工研条寄第１０９６号）として国際寄託に移管された。この菌株はまた、特開昭６３（１９８８年）−２０９５８０号公報、特開昭６２（１９８７年）−２３２３４３号公報などにも記載されている。
【００６６】
上記の派生株もしくは変異株は、上記の作製方法にしたがって同様に得ることができる。
【００６７】
本発明はさらに、別の実施形態において、上記生菌剤、上記バチルス属細菌、上記バチルス・ズブチルス、またはバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株を家禽類の生産後期以前から継続的に給与することを含む。或いは、上記生菌剤、上記バチルス属細菌、上記バチルス・ズブチルス、またはバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株を初生雛から給与することを含む。なお、バチルス・ズブチルスＣ−３１０２株の給与に関しては、市販品である「ＣＡＬＳＰＯＲＩＮＴＭ」(アサヒカルピスウェルネス社、東京、日本国)などを使用できる。
【００６８】
給与量について、飼料への上記生菌剤、上記バチルス属細菌、上記バチルス・ズブチルス、または上記バチルス・ズブチルスＣ−３１０２株の添加量は、約３．０×１０５ｃｆｕ／ｇ飼料もしくはそれ以上、例えば約（３．０〜１０．０）×１０５ｃｆｕ／ｇ飼料もしくはそれ以上であり、好ましくは約５．０×１０５ｃｆｕ／ｇ飼料もしくはそれ以上であり、上限は特に制限するものではないが例えば約１．０×１０７ｃｆｕ／ｇ飼料〜約１．０×１０９ｃｆｕ／ｇ飼料程度であり得る。
【００６９】
本発明の好適な例は、上記のバチルス・コアギュランスが、バチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株と、上記のバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株またはその派生株もしくは変異株とを家禽類に給与することである。
【００７０】
図５の結果から、本発明で使用されるバチルス・コアギュランスは、バチルス・コアギュランスを給与しない対照と比べてＦＣＲを１〜１０％もしくはそれ以上改善する能力を有する。
２．飼料添加組成物（Ｆｅｅｄ  Ａｄｄｉｔｉｖｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ）
本発明はさらに、上記のバチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株を含むことを特徴とする家禽類の飼料要求率（ＦＣＲ）改善用飼料添加組成物を提供する。
【００７１】
本発明の一実施形態において、上記の飼料添加組成物にはさらにバチルス・ズブチルスを含むことが好ましい。ここで、バチルス・ズブチルスはそれ自体、家禽類のＦＣＲ改善作用を有するものである。
【００７２】
好ましいバチルス・ズブチルスは、上記のバチルス・ズブチルスＣ−３１０２株（国際寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６）またはその派生株もしくは変異株である。
【００７３】
本発明の別の実施形態において、上記飼料添加組成物は、上記（１）に記載した本発明の方法で使用されうる。
【００７４】
本発明の飼料添加組成物は、固体状または液体状のいずれの形態でもよい。固体状の形態には、例えば粉末、顆粒、ペレット、などが含まれる。また、液体状の形態には、例えば懸濁液などが含まれる。このような形態に仕上げるために、家禽類用として承認されている物質を含む、担体、賦形剤、補助剤などを適宜含有させることによって上記の組成物形態としうる。
【００７５】
上記の飼料添加組成物には、有効成分としてバチルス・コアギュランスＣＰ３４２５（国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３）またはその派生株もしくは変異株を含有させる。その含有量は、非限定的に、例えば約１．０×１０４ｃｆｕ／ｇ組成物〜１．０×１０１２ｃｆｕ／ｇ組成物またはそれ以上である。
【００７６】
さらにまた、上記の飼料添加組成物中のバチルス・ズブチルスの含有量は、非限定的に、例えば約１．０×１０３ｃｆｕ／組成物（ｇ）〜１．０×１０１２ｃｆｕ／組成物（ｇ）またはそれ以上である。
【００７７】
本発明の飼料添加組成物は、上記（１）に記載したような飼料に添加して、家禽類に摂取させるために使用される。好ましい添加量は、飼料に対し０．００１重量％〜１重量％の範囲であるが、この範囲に限定されないものとする。
【実施例】
【００７８】
以下の実施例によって本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は、それらの実施例によって制限されないものとする。
＜Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５を給与したブロイラーの性能比較試験＞
１．実験の目的
この実験では、４２日齢まで飼育された雄ブロイラーの給餌変更、体重増加に及ぼすＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５の効果を評価することを目的とした。
２．処理の説明
実験で使用した動物は、４８実験ユニット（囲い）のなかの１実験ユニットあたり２０羽の雄ブロイラーからなる。８つのブロック内での処理を複製的に行い、各ブロック内で６つの処理（図２）をランダムに行った。処理及びブロックの実験ユニットへの割付けについてのランダム化については、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｐｏｕｌｔｒｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  Ｉｎｃ．（米国）が行った。また、実験ユニットのダイアグラムと処理の割付けはソースデータに含めた。すべての実験ユニットが連続的に番号付けられ、実験ユニットカード上で識別できるようにした。
３．材料と方法
期日：  開始日  ２０１４年１２月１１日
終了日  ２０１５年１月２２日
動物：  総数９６０羽、１日齢のＣｏｂｂ  Ｘ  Ｃｏｂｂ雄ブロイラー
２０羽／実験ユニット、８実験ユニット／処理、０．８３ｆｔ２／羽
敷きわら：  厚さ約４インチに敷いた新しい木削りくず片
飼料：  飼料中に抗コクシジウム症薬又はＡＧＰは添加されなかった
試験物質：  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  Ｃ−３１０２
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５
４．実験手法
図１に手法を示した。
処理（Ｔ）：
Ｔ１：  陰性対照
Ｔ２：  菌株：Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  Ｃ−３１０２  ３．０×１０５ｃｆｕ／ｇ飼料、給与期間：０〜４２日
Ｔ３：  菌株：Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  Ｃ−３１０２  ６．０×１０５ｃｆｕ／ｇ飼料、給与期間：０〜４２日
Ｔ４：  菌株：Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５  ４．０×１０３ｃｆｕ／ｇ飼料、給与期間：０〜４２日
Ｔ５：  菌株：Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５  ３．３×１０４ｃｆｕ／ｇ飼料、給与期間：３５〜４２日
Ｔ６：  菌株：Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  Ｃ−３１０２  ３．０×１０５ｃｆｕ／ｇ飼料、給与期間：０〜４２日；ならびに、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５  ３．３×１０４ｃｆｕ／ｇ飼料、給与期間：３５〜４２日目
また、図２にＴ１〜Ｔ６について示した。
５．実験ユニットフロアの説明と管理
実験ユニットフロアの鶏ハウスは、温度管理された建物であり、明確なフロアとしっかりした側壁を有している。【００７９】
実験に使用した鶏ハウスを等サイズの実験ユニットに分割し、ユニットを中央の島に沿って配置した。鶏を４８個の実験ユニットフロアに入れた。各実験ユニットは４．５ｆｔ×４．５ｆｔ＝２０ｆｔ２（１．８６ｍ２）の面積を有し、約４インチの厚さに木削りくず片を敷いた。機器を置いた面を引き算したあとの敷設密度は０．８３ｆｔ２／鶏であった。各実験ユニットは高さ２．５フィートの側壁を有し、１枚の鶏ネットを張って鶏の移動を防止した。【００８０】
建物の温度を監視し、試験の間の環境条件を動物の日齢にふさわしいものとした。実験ユニットの上部に蛍光灯を設置し、照明を取れるようにした。１日目から４２日目まで毎日２４時間照明した。【００８１】
各実験ユニットあたり１つの管状の餌入れの中の飼料を自由に与えた。また、各実験ユニットあたり１つのニップル・ドリンカー・ラインを用いて水を自由に与えた。【００８２】
全実験の間、標準の実験ユニットフロア管理基準を使用した。動物と建物設備は、１日２回、試験担当管理者とブロイラーハウス作業者による検査を受け、一般的な健康状態、定常飼料と水の供給、及び温度を観察し記録し、死んだ鶏をすべて取り除き、予期しない事象を認識するようにした。実験の間に死んだ鶏はＤａｉｌｙ  Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  Ｒｅｃｏｒｄに記録し、替わりの補充はしなかった。実験ユニット、死亡日、性別、体重、及び診断結果を記録した。
６．鶏
ブロイラー（Ｄａｙ  ｏｆ  ｈａｔｃｈ  ｍａｌｅ  Ｃｏｂｂ  ５００）をＣｏｂｂ−Ｖａｎｔｒｅｓｓ  ｈａｔｃｈｅｒｙ，Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，ＧＡ（米国）から入手した。総数９６０羽の鶏を収容した。全試験動物と余分の鶏を動物処分書式に記録した。ブロイラーは収容前にはコクシジウム症ワクチン投与を受けていなかった。実験ユニットあたり１２羽の鶏を収容した。実験ユニットの鶏の体重を、０日目、１９日目、３５日目、及び４２日目にそれぞれ記録した。
７．飼料
飼料はすべＳＰＲ  ＣＥＮＴＲＥ（ＵＫ）の製品を使用した。また、飼料には抗コクシジウム症薬又はＡＧＰを加えなかった。飼料はすべてクランブル／ペレットの形状で与えた。【００８３】
実験ユニットの全飼料の重量を測った。初期飼料（Ｓｔａｒｔｅｒ）を、０日目から１９日目まで給与した、１９日目に消費されずに残った飼料の重量を測り廃棄した。成長期飼料（Ｇｒｏｗｅｒ）を３５日目まで給与した。３５日目に、消費されずに残った成長期飼料の重量を測り廃棄した。後期飼料（Ｆｉｎｉｓｈｅｒ）を４２日目まで給与した。４２日目に、消費されずに残った後期飼料の重量を測り廃棄した。
８．結果
結果を図３、図４及び図５に示した。【００８４】
結果をまとめると次のようになる。【００８５】
（１）Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５株は通期（全期間）給与によりＦＣＲを改善した。【００８６】
（２）Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５株はＤ３５−４２（生産後期）の給与によりＦＣＲを改善した。【００８７】
（３）Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５株は他のＢａｃｉｌｌｕｓ属生菌剤（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  Ｃ−３１０２株）を組み合わせることによりＤ３５−４２（生産後期）のＦＣＲを改善した。【００８８】
上記の実験の結果から、図５中のＤ３５−４２間（生産後期）のＦＣＲの変化量はＤａｙ３５のＦＣＲとＤａｙ４２のＦＣＲの差を表しており、この期間（すなわち、「生産後期」）におけるＦＣＲの変化量がより小さい、すなわちＦＣＲ上昇が抑制される処理法が、家禽類の肉生産成績の向上に寄与することが判明した。上記６つの処理法（Ｔ１〜Ｔ６）の中で、Ｔ５の変化量が最も小さく、そして、Ｔ６、Ｔ４、Ｔ３、Ｔ１＝Ｔ２の順番に変化量が大きくなった。特にＴ５およびＴ６は、Ｂ．コアギュランスを生産後期にのみ給与する処理法であり、ＦＣＲ上昇抑制を高め、肉生産成績の向上に寄与することが今回初めて明らかになった。ここでＴ５はＢ．コアギュランスを家禽類の飼育の生産後期にのみ給与する処理法であり、Ｔ６は、Ｂ．コアギュランス（生産後期にのみ給与）とＢ．ズブチルス（通期給与）を併用する処理法である。【００８９】
さらにまた、上記の実験で使用したＢ．コアギュランスＣＰ３４２５株、ならびに、Ｂ．コアギュランスＣＰ３４２５株とＢ．ズブチルスＣ−３１０２株の組合せは、Ｔ４、Ｔ５およびＴ６での結果が示すとおり、家禽類の飼育においてＦＣＲを有意に改善する効果を有していることが判明した。
【産業上の利用可能性】
【００９０】
食肉用家禽類の飼育においてＦＣＲを有意に改善するため、産業上の有用性が高い。
【寄託菌】
【００９１】
「バチルス・ズブチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）Ｃ−３１０２株」は、１９８５年１２月２５日に、日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１つくばセンター中央第６（郵便番号３０５−８５６６）［寄託時；日本国茨城県筑波郡谷田部町東１丁目１番地３（郵便番号３０５）］の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに寄託番号微工研菌寄第８５８４号として国内寄託し、１９８６年６月２８日に、同機関にて寄託番号ＦＥＲＭ  ＢＰ−１０９６（移管時；微工研条寄第１０９６号）としてブダペスト条約下の国際寄託に移管された。この寄託菌株は、現在、独立行政法人製品評価技術基盤機構のＮＩＴＥ特許生物寄託センター（ＮＩＴＥ−ＩＰＯＤ）（日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８  １２０号室（郵便番号２９２−０８１８）にて保管されている。
【００９２】
「Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏａｇｕｌａｎｓ  ＣＰ３４２５株」は、ブダペスト条約下の国際寄託機関である独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター（上記）に２０１３年８月１３日に寄託され、国際寄託番号ＮＩＴＥ  ＢＰ−０１６９３が付与されている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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