(57)【要約】  本発明が解決しようとする課題は、肝細胞癌の予防又は治療のための医薬を提供する。本発明は、下記一般式（Ｉ）【化１】 2016175092.tif 000006 （式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ、水素原子、トリフルオロメチル基、又はC1-3アルキル基を示す。）で表わされる化合物又はその塩を有効成分として含有する、肝細胞癌の予防又は治療に用いる医薬である。中でも、化合物としては、(S)-N-(2-(2-(2-シアノピロリジン-1-イル)-2-オキソエチルアミノ)-2-メチルプロピル)-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-6-カルボキサミド（一般名：アナグリプチン）が好ましい。
2016175092.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、肝細胞癌の予防又は治療に用いる医薬。
【化１】
2016175092.tif 000005
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ、水素原子、トリフルオロメチル基、又はC1-3アルキル基を示す。）
【請求項２】
前記有効成分がN-[2-({2-[(2S)-2-シアノピロリジン-1-イル]-2-オキソエチル}アミノ)-2-メチルプロピル]-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-6-カルボキサミド又はその塩である、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
前記有効成分がN-[2-({2-[(2S)-2-シアノピロリジン-1-イル]-2-オキソエチル}アミノ)-2-メチルプロピル]-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-6-カルボキサミド（アナグリプチン）である、請求項１記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピラゾロピリミジン誘導体を有効成分とする、肝細胞癌の予防又は治療のための医薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
肝細胞癌とは、肝臓に発生する悪性腫瘍の一つで、肝臓の細胞が癌化する原発性の肝癌である。肝細胞癌の発生原因としては、C型肝炎、B型肝炎、NASH、アルコール性肝炎等が挙げられる。【０００３】
CD26は免疫調節作用等の多様な機能を有した膜タンパクであるが、細胞外ペプチダーゼとしても作用し、ジペプチジルペプチダーゼ4(DPP4)とも言われている。CD26は様々な癌細胞における発現が報告されている。近年、CD26蛋白の過剰発現は、様々な悪性腫瘍の増殖・浸潤に影響を及ぼすことが指摘されている（非特許文献１、２、３）。しかし、肝細胞癌(HCC)の増殖に対するCD26の影響については文献的報告がされていない。【０００４】
現在、肝細胞癌の治療としては、例えば、外科的肝切除、経皮的局所療法（経皮的エタノール注入療法や、経皮的ラジオ波焼灼療法等）、栄養動脈を塞栓し腫瘍を阻血壊死に陥らせる肝動脈塞栓療法、肝動脈に抗癌剤を注入する肝動注化学療法、栄養動脈を塞栓するとともに抗癌剤を投与する肝動脈化学塞栓療法、経口または経静脈的に抗癌剤を投与する全身化学療法などが行われている。抗癌剤としては、アルキル化剤（シクロホスファミド）、代謝拮抗剤（フルオロウラシル、テガフール・ウラシル配合剤）、抗生物質（マイトマイシンＣ、ドキソルビシン、エピルビシン、ミトキサントロン）、白金製剤（シスプラチン）等が、単独又は併用で用いられている。しかしながら、これらの抗癌剤が肝細胞癌の治療薬として必ずしも満足されているとは言えず、新たな肝細胞癌治療薬が望まれている。【０００５】
DPP-IV阻害作用を有する化合物の癌に対する予防又は治療効果については、例えば、DPP-IV阻害剤である、ペプチド化合物、ペプチジルケトン、及びアミノケトン誘導体等が腫瘍転移増殖の治療に有用であることが報告されている（特許文献１）。一方、縮合イミダゾール誘導体（特許文献２）、１，３−ジヒドロ−イミダゾール縮合環化合物（特許文献３）、ピロリジン及びチアゾリジンDPP-IV阻害化合物（特許文献４）については、癌に対する有効性について報告されているが、データに基づく具体的な開示は一切ない。【０００６】
ところで、WO2004/067509（特許文献５）に記載された本発明にかかる化合物であるＮ−［２−（｛２−［（２Ｓ）−２−シアノピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル｝アミノ）−２−メチルプロピル]−２−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−６−カルボキサミド（一般名：アナグリプチン）及びその周辺の化合物は、DPP-IV阻害作用を有する化合物として知られているが、このものがどのような癌に対しどのような影響を及ぼすかについてはまったく知られておらず、更に肝細胞癌に対する有効性についても知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特表2004521149公報
【特許文献２】国際公開第2003/104229号公報
【特許文献３】国際公開第2004/050656号公報
【特許文献４】特表2008-538574公報
【特許文献５】国際公開第2004/067509号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Oncol Lett. 20159(2):542-550
【非特許文献２】Clin Cancer Res. 2012 Mar 1;18(5):1447-56
【非特許文献３】J Andorol 2000 21(2):220-6
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明が解決しようとする課題は、肝細胞癌の予防又は治療に用いる新たな医薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の発明者らは、上記の課題を解決すべく研究を行った結果、DPPIV阻害薬である下記ピラゾロピリミジン誘導体が、肝細胞癌の予防又は治療に有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。【００１１】
即ち、本発明は、次の通りである。
＜１＞  下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩を有効成分として含有する、肝細胞癌の予防又は治療に用いる医薬。
【化１】
2016175092.tif 000003
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ、水素原子、トリフルオロメチル基、又はC1-3アルキル基を示す。）
＜２＞  前記有効成分が、N-[2-({2-[(2S)-2-シアノピロリジン-1-イル]-2-オキソエチル}アミノ)-2-メチルプロピル]-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-6-カルボキサミド又はその塩である、＜１＞に記載の医薬。
＜３＞  前記有効成分がN-[2-({2-[(2S)-2-シアノピロリジン-1-イル]-2-オキソエチル}アミノ)-2-メチルプロピル]-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-6-カルボキサミド（アナグリプチン）である、＜１＞に記載の医薬。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の医薬は、肝細胞癌の予防又は治療に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】投与開始21日目の各群各個体の腫瘍の写真。
【図２】投与開始後の各群の腫瘍体積（平均値±標準偏差）の経時的推移を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下に、本発明を更に詳細に説明する。本発明の肝細胞癌の予防又は治療に用いる医薬は、以下の一般式（Ｉ）で表わされる化合物又はその塩を有効成分として含有する。中でも、N-[2-({2-[(2S)-シアノピロリジン-1-イル]-2-オキソエチル}アミノ)-2-メチルプロピル]-2-メチルピラゾロ[1,5-a]ピリミジン-6-カルボキサミド（一般名：アナグリプチン（anagliptin））が好ましい。これらの化合物は、特許文献５（WO2004/067509）記載の化合物であり、その実施例１の化合物の製造法又は実施例２の化合物の製造法等により製造することができる。
【００１５】
【化２】
2016175092.tif 000004
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ、水素原子、トリフルオロメチル基、又はC1-3アルキル基を示す。）
【００１６】
塩を形成する場合、該塩としては、薬理学的に許容される塩が好ましく、例えば無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性又は酸性アミノ酸との塩等が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等との塩が挙げられる。有機酸との塩の好適な例としては、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、安息香酸、トルエンスルホン酸塩等との塩が挙げられる。塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、アルギニン等との塩が挙げられる。酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸等との塩が挙げられる。
【００１７】
本発明の医薬は肝細胞癌に対して有効である。すなわち、本発明の医薬は、肝細胞癌の予防又は治療のための医薬としての用途を有している。肝細胞癌とは、肝臓に発生する悪性腫瘍の一つで、肝臓の細胞が癌化する原発性の肝癌である。肝細胞癌の原因としては、B型肝炎、C型肝炎、NASH、アルコール性肝炎等が挙げられるが、ほとんどはB型あるいはC型肝炎を背景に発生する。
【００１８】
一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩の投与量は、症状、年齢、性別、投与法、剤形等により異なるが、通常の場合には、成人に対し本発明化合物として１日当たり0.1〜1000mgの範囲内、好ましくは1〜400mgを１日当たり１回又は数回に分けて連日投与するのが好ましい。
【００１９】
本発明の医薬は、通常の製剤技術により、例えば、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤、若しくはシロップ剤として経口的に、又は注射剤若しくは点耳剤等として非経口的に投与することができる。
【００２０】
製剤化については、固形剤の場合には、製剤化に際して薬理学的に認容し得る賦形剤、例えば、澱粉、乳糖、精製白糖、グルコース、結晶セルロース、カルボキシセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、燐酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、及び／又はアラビアゴム等を用いることができ、必要であれば、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、及び／又は着色剤等を配合することができる。また、液剤の場合には、安定剤、溶解助剤、懸濁化剤、乳化剤、緩衝剤、及び／又は保存剤等を用いることができる。
【００２１】
本発明の医薬には、その有効成分たる一般式（Ｉ）で表わされる化合物又はその塩に加えて、さらに、肝細胞癌の既存薬であるアルキル化剤（シクロホスファミド）、代謝拮抗剤（フルオロウラシル、テガフール・ウラシル配合剤）、抗生物質（マイトマイシンＣ、ドキソルビシン、エピルビシン、ミトキサントロン）、及び白金製剤（シスプラチン）からなる群より選ばれる１種以上を組み合わせることができる。これら既存薬は、前記一般式（Ｉ）で表わされる化合物又はその塩と同時に投与してもよく、また、別のタイミングで投与してもよい。
【００２２】
既存薬と組み合わせた本発明の医薬の形態としては、一般式（Ｉ）で表わされる化合物又はその塩と既存薬の両成分を共に含有する単一製剤（いわゆる配合剤）の形態、既存薬と一般式（Ｉ）で表わされる化合物又はその塩を別々に投与するための形態、及び、既存薬と一般式（Ｉ）で表わされる化合物又はその塩を単一包装中に含む組み合わせキット製剤の形態が挙げられる。
【００２３】
肝細胞癌の既存薬の投与量は、薬物によって異なり、それぞれの薬剤で規定されている通常の用法および用量に従って投与するのが好ましい。
【実施例】
【００２４】
次に、実施例を挙げて本発明を更に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
試験例１：nude mouse xenograftを用いた抗腫瘍効果の検討
（試験方法）
６週齢のnude mouse（BALBc-nu/nu，雄性）に肝細胞癌株Huh-7を2×106個皮下移植した。移植した細胞の生着・増殖を確認するために、腫瘍サイズをノギスで計測し、腫瘍の体積が100〜150mm2となった時点で、以下の3群（1群5匹）に群分けした。
（１）対照群：MF固型飼料を21日間与えた。
（２）アナグリプチン低用量群：アナグリプチンをMF飼料に混合した固形飼料を100mg/kg/日となるように21日間与えた。
（３）アナグリプチン高用量群：アナグリプチンをMF飼料に混合した固形飼料を300mg/kg/日となるように21日間与えた。
投与開始から3日毎に腫瘍体積を計測し、腫瘍体積の経時的推移を評価した。また、投与開始21日後にマウスを安楽死させて腫瘍を採取し、腫瘍の肉眼的観察等を行った。【００２５】
（結果）
投与開始21日後の各群の各個体の腫瘍の写真を図１に、各群の腫瘍体積（平均値±標準偏差）の経時的推移を図２に示した。このように、アナグリプチンの投与群では、無投与群と比較して、移植された肝細胞癌の腫瘍サイズを抑制する効果が見られ、特に高用量群では、統計的に有意な効果を示した。従って、アナグリプチンは、肝細胞癌の予防又は治療剤として有用であることがわかった。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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