(57)【要約】  脳機能の保護、認知能力の低下の予防または改善、認知症の予防または改善等の各作用を有効に発揮することができ、かつ安全な成分を見出すことを解決課題とする。カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする。カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種はサンルージュであることが好ましい。カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の茶葉抽出物を含むことが好ましい。
2016190307.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする脳機能保護剤。
【請求項２】
認知能力の低下改善、認知症の予防または改善、もしくは脳神経保護のための請求項１に記載の剤。
【請求項３】
βアミロイドの蓄積、ＢＡＣＥ発現、ＢＣＬ発現、及びネプリライシン発現からなる群より選ばれる１以上を調節する請求項１又は２に記載の剤。
【請求項４】
認知症は、アルツハイマー型認知症である、請求項２または３に記載の剤。
【請求項５】
カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種がサンルージュである請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の剤。
【請求項６】
カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の茶葉抽出物を含む請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載の剤。
【請求項７】
カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする剤を対象に有効量投与することを含む、対象の脳機能の保護方法。
【請求項８】
脳機能保護剤の製造における、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脳機能保護剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、高齢化社会において健康寿命を延伸させることが社会における重要な課題となっている。認知症は加齢に伴い脳機能が低下することで発症するが、認知症の大部分を占めるアルツハイマー型認知症や脳血管性認知症は、生活習慣との関連が指摘されている。【０００３】
例えば、アルツハイマー病の治療剤として、ホスファチジルコリンやホスファチジルセリンを有効成分とする脳機能改善剤（特許文献１）、デフェロキサミンの塩を有効成分とする治療剤（特許文献２）、ドコサヘキサエン酸誘導体のエステル、アミド、トリグリセリド、リン脂質誘導体などを有効成分とする脳機能改善組成物（特許文献３）などが開示されている。しかし、これら薬剤は、ヒトが日常的に摂取できるものとは言い難い。【０００４】
一方、茶の主要成分であるカテキン類は、生体内で抗酸化作用を発揮することが報告されており、認知機能の低下予防または改善効果が期待されている。例えば、ドコサヘキサエン酸および／またはカテキンをマウスへ摂取させると、記憶および学習能が増強されたこと（非特許文献１）、ヒト観察試験により、緑茶を頻回に飲む習慣のある人は、飲む習慣がない人に比べて、認知機能の低下を抑制できることや認知症になるリスクが低下すること（非特許文献２）が報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平０７−０１７８５５号公報
【特許文献２】特開昭５８−１２１２１３号公報
【特許文献３】特開平０２−０４９７２３号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ａｎｎ．Ｎｕｔｒ．Ｍｅｔａｂ．Ｖｏｌ．４８，ｐｐ．５１−５８，２００４
【非特許文献２】ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．２０１４  Ｍａｙ  １４；９（５）：ｅ９６０１３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、いまだ十分な脳機能保護剤、認知能力の低下を予防するまたは認知能力を改善する剤は得られていない。本発明の目的は、脳機能の保護、認知能力の低下を予防または改善、認知症の予防または改善等の各作用を有効に発揮することができ、かつ安全な成分を見出すことにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、チャノキであるカメリアシネンシスとその近縁種であるカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分に、認知能力の低下を予防する作用を見出し、本発明に達した。【０００９】
すなわち、本発明は以下を提供する。
［１］  カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする脳機能保護剤。
［２］  認知能力の低下改善、認知症の予防または改善、もしくは脳神経保護のための［１］に記載の剤。
［３］  βアミロイドの蓄積、ＢＡＣＥ発現、ＢＣＬ発現、及びネプリライシン発現からなる群より選ばれる１以上を調節する［１］または［２］に記載の剤。
［４］  認知症は、アルツハイマー型認知症である、［２］または［３］に記載の剤。
［５］  カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種がサンルージュである［１］〜［４］のいずれか１つに記載の剤。
［６］  カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の茶葉抽出物を含む［１］〜［５］のいずれか１つに記載の剤。
［７］  カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする剤を対象に有効量投与することを含む、対象の脳機能の保護方法。
［８］  脳機能保護剤の製造における、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分の使用。【００１０】
本発明はまた、以下の態様を提供する。
［１−１］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする脳機能保護剤。
［１−２］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする認知能力の低下予防または改善剤。
［１−３］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする認知症の予防または改善剤。
［１−４］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とするアルツハイマー型認知症の予防または改善剤。
［１−５］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とする脳神経保護剤。
［１−６］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とするβアミロイド蓄積の予防または改善剤。
［１−７］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とするＢＡＣＥ発現調節剤。
［１−８］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とするＢＣＬ発現調節剤。
［１−９］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種がサンルージュである［１−１］〜［１−８］のいずれか１つに記載の剤。
［１−１０］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の茶葉抽出物を含む［１−１］〜［１−８］のいずれか１つに記載の剤。【００１１】
［２−１］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とするβアミロイドの分解促進剤。
［２−２］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とするネプリライシンの発現調節剤。
［２−３］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種がサンルージュである［２−１］または［２−２］に記載の剤。
［２−４］カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の茶葉抽出物を含む［２−１］〜［２−３］のいずれか１つに記載の剤。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、脳機能保護剤、認知能力の低下予防または改善剤、認知症の予防または改善剤が提供される。本発明の剤は、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を有効成分とするため、長期間に亘って摂取しても安全性が高く、日常的に摂取することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、試験例１における記憶力の評価を示すグラフである。
【図２】図２は、試験例１における空間認識能力と学習能力の評価を示すグラフである。
【図３】図３は、試験例１における摘出マウス脳中の、βアミロイドの定量結果を示すグラフである。
【図４】図４は、試験例１における摘出マウス脳中の、ＢＡＣＥ１発現量の定量結果を示すグラフである。
【図５】図５は、試験例１における摘出マウス脳中の、ＢＣＬ−２発現量の定量結果を示すグラフである。
【図６】図６は、実施例２、および比較例４〜６における、ネプリライシン（Ｎｅｐｒｉｌｙｓｉｎ）発現量の定量結果を示すグラフである。
【図７】図７は、実施例３および比較例７における、ＢＡＣＥ１発現量の定量結果を示すグラフである。
【図８】図８は、実施例４および比較例８における、βアミロイドの定量結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の剤は、カメリアシネンシス（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ）とカメリアタリエンシス（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｔａｌｉｅｎｓｉｓ）との交配種の植物体の成分を有効成分とする。
【００１５】
カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種は、カメリアシネンシスに属する植物体とカメリアタリエンシスに属する植物体とを繁殖させて得られる品種である。繁殖は、人為的繁殖であってもよいし自家受粉等自然繁殖でもよい。１代目（雑種第１代）およびその子孫（例えば、雑種第１代の自然交配種）のいずれであってもよい。カメリアシネンシスはチャノキとも呼ばれる。カメリアシネンシスは、緑茶用品種（やぶきた、おくむさし等）であることが好ましく、おくむさしであることがより好ましい。カメリアタリエンシスは、ツバキ科の植物でカメリアシネンシスの近縁種であり、赤芽とも呼ばれる。
【００１６】
カメリアタリエンシスとカメリアタリエンシスの交配種は、交配種としては、「サンルージュ」（Ｃａｍｅｌｌｉａ  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  （Ｌ．）  Ｋｕｎｔｚｅ  ｓｐ  Ｓｕｎｒｏｕｇｅ）（農林水産省  品種登録番号：２１２６２）、Ｆ９５１８１（茶中間母本農６号）が好ましく、「サンルージュ」がより好ましい。
【００１７】
本発明の剤としては、脳機能保護剤、認知能力の低下の予防または改善剤、認知症の予防または改善剤、アルツハイマー型認知症の予防または改善剤、脳神経保護剤、βアミロイド蓄積の予防または改善剤、ＢＡＣＥ発現調節剤（ＢＡＣＥ１発現抑制剤）、ＢＣＬ発現調節剤（ＢＣＬ−２発現促進剤）、βアミロイドの分解促進剤、および、ネプリライシン発現調節剤（ネプリライシン発現促進剤）が例示される。
【００１８】
本発明の剤は、脳機能を保護することができる。
【００１９】
脳機能を保護することには、脳機能が正常状態から低下することを抑制すること、正常状態から低下した脳機能からさらに低下することを抑制すること、が含まれる。
【００２０】
脳機能が保護されていることは、例えば、認知能力の低下が予防または改善されていること、脳機能の低下に関連する物質（例、後述する認知能力の低下または認知症の発症に関連する物質）の量を測定すること、対象の脳内にβアミロイドが蓄積されている程度、脳内のβアミロイドの蓄積程度を予測できる指標物質を測定すること、脳神経が保護されていることにより、評価することができる。
【００２１】
脳内のβアミロイドの蓄積程度を予測できる指標としては、例えば、脳脊髄液中の、Ａβ４２値、総タウ値、リン酸化タウ値が挙げられる。
【００２２】
認知能力の低下が予防または改善されていること、脳神経が保護されていることの評価方法については、以下で詳しく述べる。
【００２３】
本発明の剤は、認知能力の低下を予防または改善することができる。
【００２４】
認知能力の低下を予防することには、認知能力を維持すること、病的に低下した認知能力がさらに低下することを抑制すること、加齢により正常の範囲内で低下した認知能力が、さらに低下することを抑制すること、が含まれる。
【００２５】
認知能力を改善することには、病的または正常の範囲内で低下した認知能力を、向上させることが含まれる。
【００２６】
認知能力としては、例えば、記憶力、理解力、判断力、集中力、見当識力が挙げられる。本発明の剤は、一部の認知能力の低下を予防または改善するものであっても、全ての認知能力の低下を予防または改善するものであってもよい。
【００２７】
認知能力は、従前公知公用の方法によって評価することができる。評価の方法に制限はなく、例えば、心理学的検査、脳波測定、ＭＲＩ、認知症診断テストが挙げられる。マウスにおける認知能力は、例えば、新奇物体認識試験、またはモリス水迷路試験により評価することができる。
【００２８】
本発明の剤は、認知症を予防または改善することができる。認知症を予防することには、り患を抑制することが含まれる。認知症にり患していることは、例えば、世界保健機関による国際疾病分類（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｐｒｏｂｌｅｍｓ，１０ｔｈ  Ｒｅｖｉｓｉｏｎ：ＩＣＤ−１０）、米国精神医学会による精神疾患の診断・統計マニュアル、改訂第３版（Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒｅｖｉｓｅｄ：ＤＳＭ−ＩＩＩ−Ｒ）、第４版テキスト改訂版（ＤＳＭ  Ｆｏｕｒｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｔｅｘｔ  Ｒｅｖｉｓｉｏｎ：ＤＳＭ−ＩＶ−ＴＲ）にしたがって診断することができる。り患を抑制することには、認知症に至っていないが異常に認知能力が低下した者の、認知能力の低下の進行を遅くすること、認知能力を維持すること、もしくは認知能力を向上させること、認知能力が正常の範囲内で低下した者の、認知能力の低下の進行を遅くすること、認知能力を維持すること、もしくは認知能力を向上させること、が含まれる。
【００２９】
認知症は原因などによりさまざまに分類されるが、本発明で対象とする認知症は特に限定されない。認知症としては、例えば、アルツハイマー病、脳血管障害（脳梗塞、脳出血、くも膜下出血など）などが挙げられる。本発明の剤は、原因が明らかとなっていない認知症の改善に対して適用してもよい。本発明の剤は、アルツハイマー型認知症を効率的に予防または改善することができる。
【００３０】
認知症を改善することには、既にり患しているが症状を改善、緩和または悪化を抑制することが含まれる。症状が改善、緩和、または悪化が抑制されていることは、認知症患者の、認知能力が維持されていること、認知能力が向上していること、認知能力の低下の進行が遅くなったことにより確認することができる。
【００３１】
認知症が予防または改善されていることを確認するに際しての認知能力の評価は、上記のように、従前公知公用の方法によることができる。
【００３２】
アルツハイマー型認知症が予防または改善されていることを評価するには、例えば、従前公知公用の方法によることができる。例えば、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）による脳の画像解析、単一光子放出コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）による脳血流状態の解析、ポジトロン放出断層撮影法（ＰＥＴ）による脳の画像解析、認知能力の低下または認知症の発症に関連する物質（例、βアミロイド、βアミロイド前駆体、以下同様）の蓄積量が減少していることの確認、認知能力の低下または認知症の発症に関連する物質の蓄積量の増加の速さが減少していることの確認（分解が促進されていることの確認を含む。以下同様）、認知能力の低下または認知症の発症に関連する物質の蓄積程度を予測できる指標物質の量が変化していることの確認、認知能力の低下または認知症の発症に関連する物質の生成の促進に関連する物質（例、ＢＡＣＥ１、ＢＡＣＥ２等のＢＡＣＥ、以下同様）の減少、脳神経の再生に関連する物質（例、ＢＣＬ−２等のＢＣＬ、以下同様）の発現の増加、認知能力の低下または認知症の発症に関連する物質の分解に関連する物質（例、ネプリライシン、以下同様）の発現の増加の確認により、評価することができる。
【００３３】
本発明の剤は、脳神経を保護することができる。脳神経を保護することには、脳神経を維持すること、脳神経組織の一部または全部が死滅することを抑制することが含まれる。
【００３４】
脳神経が保護されていることを評価するには、例えば、従前公知公用の方法によることができる。脳神経が保護されていることを、例えば、脳神経の損傷に関与する物質（例、βアミロイド、βアミロイド前駆体、以下同様）の蓄積量が減少していることの確認、脳神経の損傷に関与する物質の蓄積量の増加の速さが減少していることの確認、脳神経の損傷に関与する物質の蓄積程度を予測できる指標物質を測定すること、脳神経の損傷に関連する物質の生成を促進する物質（例、ＢＡＣＥ１、ＢＡＣＥ２等のＢＡＣＥ、以下同様）の減少、脳神経の再生に関与する物質（例、ＢＣＬ−２等のＢＣＬ、以下同様）の発現の増加、脳神経の損傷に関連する物質の分解に関連する物質（例、ネプリライシン、以下同様）の発現の増加の確認により、評価することができる。
【００３５】
本発明の剤は、βアミロイドの蓄積を予防または改善することができる。蓄積を予防または改善することには、蓄積量を減少させること、蓄積量を維持すること、蓄積量の増加の速さを減少させること、蓄積したβアミロイドの分解を促進することが含まれる。βアミロイドの蓄積が予防または改善されていることを評価するには、例えば、従前公知公用の方法によることができ、例えば、脳内のβアミロイドの蓄積量が減少していることの確認、蓄積量の増加の速さが減少していることの確認、脳内のβアミロイドの蓄積程度を予測できる指標物質を測定することにより、評価することが出来る。指標物質としては、βアミロイドの生成を促進する物質（例、ＢＡＣＥ１、ＢＡＣＥ２等のＢＡＣＥ、以下同様）、βアミロイドの分解に関連する物質（例、ネプリライシン、以下同様）が挙げられる。
【００３６】
本発明の剤は、βアミロイドの分解を促進することができる。本発明の剤は、βアミロイドの分解を促進することにより、脳内におけるβアミロイドの蓄積を予防または改善し、認知症（例、アルツハイマー型認知症）を予防または改善することができる。βアミロイドの分解が促進されていることを評価するには、例えば、従前公知公用の方法によることができ、例えば、βアミロイドの分解に関連する物質の量を測定することにより、評価することができる。
【００３７】
本発明の剤が投与される対象は、特に限定されない。ヒト以外の動物（愛玩動物（例：イヌ、ネコ、インコ）、家畜（例：ウシ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、ウマ）、家禽（例：ニワトリ、ウズラ、シチメンチョウ）、実験動物（例：マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ））であってもよい。
【００３８】
本発明の剤の対象の健康状態は、特に限定されず、対象は、認知能力が維持されている者、認知能力が正常の範囲内で低下した者、認知症の疑いのある者、認知症患者、脳機能が正常に維持されている者、脳機能が正常の範囲内で低下した者、脳機能が異常に低下した者、脳内のβアミロイド蓄積量が正常の範囲内であるまたは異常である者、認知症または認知能力に関連する物質の蓄積量が正常の範囲内であるまたは異常である者、該物質の生成の促進に関連する物質、該物質の分解に関連する物質、および脳神経の再生に関連する物質から選ばれる物質の発現量が正常の範囲内であるまたは異常である者、などのいずれであってもよい。また、対象の年齢も特に限定されず、未成年者、成人、高齢者などのいずれであってもよいが、成人が好ましく、高齢者がより好ましい。対象は、ヒトに限定されず、ヒト以外の動物であってもよい。認知症患者またはその疑いがある者には、例えば、アルツハイマー型認知症患者またはその疑いがある者、血管性認知症患者またはその疑いがある者が含まれる。本発明の剤の対象は、好ましくは認知症患者またはその疑いがある者であり、より好ましくはアルツハイマー型認知症患者またはその疑いがある者である。
【００３９】
植物体の成分は、植物体の少なくとも一部に含まれている成分であればよい。植物体の一部としては例えば、根、茎、葉、花、実、枝、種子、芽などが挙げられる。これらのうち茎および／または葉を含む部分であることが好ましく、茎および／または葉であることがより好ましい。カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の成分の調製方法は、特に限定されず、植物体の破砕物、植物体からの抽出、精製等が例示される。本発明の剤は、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の成分を、該植物体の葉粉砕物または葉抽出物として含むことが好ましい。
【００４０】
本発明の剤は、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の成分を有効成分とする。本発明の剤に含まれていてもよい、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の成分としては、ポリフェノール、アントシアニン、デルフィニジン、デルフィニジンの配糖体、カテキン型化合物（例えばエピガロカテキンガレート）、カフェイン、アミノ酸、アミノ酸の塩、加水分解型タンニン（例えばストリクチニン）、テオガリン、テオガリン誘導体等が例示される。
【００４１】
本明細書において、カテキン型化合物とは、３−ヒドロキシ−２−フェニルクロマンを母核とし、該母核の水素原子が一つ以上のヒドロキシ基によって置換された化合物を意味する。本発明の剤がカテキン型化合物を含む場合、カテキン型化合物を１種含んでいてもよく、２種以上含んでいてもよい。
【００４２】
成分は１種単独であってもよく、２種以上の組み合わせであってもよい。本発明の剤は、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の成分を、該植物体の抽出物として含むことが好ましい。本発明の剤は、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の成分として、該植物体の抽出物から分離された１種または２種以上の成分を含んでいてもよい。本発明の剤は、該植物体の抽出物に加えて、該植物体の抽出物から分離された１種または２種以上の成分を含んでいてもよい。
【００４３】
本発明の剤に含まれていてもよいポリフェノールとしては、例えば、フラボノイド（カテキン、アントシアニン、タンニン、ルチン、イソフラボン）、フェノール酸、エラグ酸、リグナン、クルクミン、クマリン、未同定ポリフェノールが挙げられる。
【００４４】
本発明の剤におけるポリフェノールの含有量の合計は、有効成分（本発明の剤が茶葉抽出物を含む場合には、茶葉抽出物）の乾燥重量に対して好ましくは１００．０重量％以下であり、９０．０重量％以下であることがより好ましく、８０．０重量％以下であることがさらにより好ましい。
【００４５】
ポリフェノールの含有量は、ＨＰＬＣ、フォーリンチオカルト（Ｆｏｌｉｎ−Ｃｉｏｃａｌｔｅｕ）法、または比色法により測定することができる。
【００４６】
本発明の剤は、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の成分として、少なくとも１種のカテキン型化合物を含むことが好ましく、少なくとも１種のカテキン型化合物と、カフェイン、アミノ酸、アミノ酸の塩、加水分解型タンニン、テオガリンおよびテオガリン誘導体から選ばれる１種以上を含むことが好ましい。本発明の剤が２種以上の成分を含む場合は、本発明の剤は組成物と言い換えることができる。
【００４７】
カテキン型化合物としては、例えば、カテキン（Ｃ）、ガロカテキン（ＧＣ）、カテキンガレート（ＣＧ）、ガロカテキンガレート（ＧＣＧ）、エピカテキン（ＥＣ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣＧ）およびエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）、エピガロカテキン−３−（３”−Ｏ−メチル）ガレート（ＥＧＣＧ３”Ｍｅ）、エピカテキン−３−（３”−Ｏ−メチル）ガレート（ＥＣＧ３”Ｍｅ）が挙げられる。
【００４８】
本発明の剤におけるカテキン型化合物の含有量は、有効成分（本発明の剤が茶葉抽出物を含む場合には、茶葉抽出物）の乾燥重量に対して好ましくは５０．０重量％以下であり、４０．０重量％以下であることがより好ましく、３５．０重量％以下であることが更に好ましく、３０．０重量％以下、または２５．０重量％以下であることがさらにより好ましい。下限は特に特定されないが、通常は１４．０重量％以上である。この範囲であると、苦味および渋味が少なく嗜好性に優れている。
【００４９】
本発明の剤は、カテキン型化合物のうちエピガロカテキンガレート（ＥＧＣＧ）を含む場合、ＥＧＣＧの含有量は、有効成分（本発明の剤が茶葉抽出物を含む場合には、茶葉抽出物）の乾燥重量に対して３０．０重量％以下であることが好ましく、２０．０重量％以下であることがより好ましく、１５．０重量％以下であることが更に好ましい。
【００５０】
カテキン型化合物の含有量は、ＨＰＬＣまたは比色法により測定することができる。
【００５１】
カフェインは、プリン環を持つプリンアルカロイドの一種である。カフェインはコーヒー、コーラ、緑茶、紅茶、ウーロン茶、ココア、チョコレート、栄養ドリンクなどの飲食品に含まれ、茶に含まれるカフェインはタンニンと結びつくためにその効果が抑制されることから、コーヒーのような興奮作用は弱く緩やかに作用する。
【００５２】
本発明の剤におけるカフェインの含有量は、有効成分（本発明の剤が茶葉抽出物を含む場合には、茶葉抽出物）の乾燥重量に対して５．４重量％以下であることが好ましく、５．２重量％以下であることがより好ましく、５．１重量％以下であることが更に好ましい。下限は特に特定されないが、低カフェイン処理をしない場合は、通常は２．５重量％以上である。
【００５３】
カフェインの含有量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
【００５４】
アミノ酸は、アミノ基とカルボキシル基を両方有する化合物である。アミノ酸の例としては、テアニン、グリシン、アルギニン、リジン、アラニン、グルタミン、グルタミン酸、ヒスチジン、スレオニン、アスパラギン、アスパラギン酸、フェニルアラニン、ロイシン、バリン、トリプトファン、プロリン、システイン、セリン、チロシン、イソロイシン、メチオニンが挙げられる。アミノ酸の塩の例としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、無機酸塩、有機酸塩などが挙げられる。
【００５５】
本発明の剤におけるアミノ酸またはその塩の含有量は、有効成分（本発明の剤が茶葉抽出物を含む場合には、茶葉抽出物）の乾燥重量に対して１．０重量％以上であることが好ましく、１．３重量％以上であることが好ましく、１．５重量％以上であることがより好ましい。上限は特に特定されないが、通常は４．５重量％以下である。
【００５６】
本発明の剤の乾燥重量に対するアミノ酸またはその塩の含有量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
【００５７】
本発明の剤は、加水分解型タンニンを含むことが好ましい。加水分解型タンニンを含むことにより、本発明の剤は、抗アレルギーの効果を発揮することができる。加水分解型タンニンの例としてはストリクチニンなどを挙げることができ、ストリクチニンであることが好ましい。ストリクチニンは、１，２−ジ−Ｏ−ガロイル−４，６−Ｏ−（Ｓ）−ヘキサヒドロキシジフェノイル−β−Ｄ−グルコピラノースである。
【００５８】
本発明の剤における加水分解型タンニンの含有量は、有効成分（本発明の剤が茶葉抽出物を含む場合には、茶葉抽出物）の乾燥重量に対して５．０重量％以下であることが好ましく、１．５重量％以下であることがより好ましく、３．５重量％以下であることが更に好ましい。下限は特に特定されないが、通常は０．６重量％以上である。
【００５９】
ストリクチニン等の加水分解型タンニンの含有量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
【００６０】
本発明の剤は、テオガリンまたはその誘導体を含むことが好ましい。テオガリンまたはその誘導体を含むことにより、抗アレルギーの効果が得られる。テオガリンはトリヒドロキシ安息香酸の配糖体であり、（１Ｓ）−１β，３β，４β−トリヒドロキシ−５α−（ガロイルオキシ）シクロヘキサンカルボン酸とも呼ばれる。
【００６１】
テオガリンまたはその誘導体の含有量は、有効成分（本発明の剤が茶葉抽出物を含む場合には、茶葉抽出物）の乾燥重量に対して１０．０重量％以下であることが好ましく、３．０重量％以下であることがより好ましく、１．６重量％以下であることが更に好ましい。下限は特に特定されないが、通常は０．７重量％以上である。
【００６２】
テオガリンの含有量は、ＨＰＬＣにより測定することができる。
【００６３】
本発明の剤は、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種植物体の茶葉を含むことが好ましく、茶葉抽出物を含むことがより好ましく、該茶葉抽出物を有効成分として含むことが更に好ましい。これにより、上記の有効成分をバランスよく含むことができ、各種効能を顕著に発揮することができる。
【００６４】
茶葉抽出物の抽出条件は、特に問わない。例えば、カメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の茶葉を抽出して得ることができる。
【００６５】
茶葉は、抽出前に通常製茶される。製茶された茶葉の例としては、緑茶、紅茶、ウーロン茶等が挙げられ、緑茶が好ましい。緑茶の茶葉の例としては、煎茶、玉露、番茶、茎茶、芽茶、粉茶、ほうじ茶、玄米茶、碾茶、釜炒茶、包種茶等が挙げられる。
【００６６】
抽出前に茶葉のうちの少なくとも一部に粉砕処理が行われてもよい。粉砕処理には、破砕機（例えば、マルチビーズショッカー（登録商標、安井器械株式会社）、石臼、セラミックミル、ボールミル、ハンマーミルなどを用いることができる。
【００６７】
抽出溶媒としては、水またはエタノール水溶液が挙げられ、水が好ましい。また、エタノール水溶液におけるエタノールの濃度は、本発明の効果を害さない範囲で定めることができ、通常はエタノール水溶液全体に対し７０重量％以下である。水で抽出する場合、抽出温度は３０〜１５０℃が好ましい。抽出時間は１〜６０分であることが好ましい。水と茶葉との重量比は、茶葉１に対し、茶葉乾燥重量の１０倍以上の水を用いることが好ましく、茶葉乾燥重量の１０倍〜３００倍量の水を用いることがより好ましい。また、酢酸のような有機溶媒で抽出すると、抽出効率は良いが、カテキン類（カテキン型化合物）の含有量が多くなるため、苦味および渋味が強く嗜好性が悪くなるおそれがある。抽出の際には撹拌を行ってもよい。
【００６８】
抽出処理後、ろ過、遠心分離、篩過等の処理により固形分を除去（固液分離）してもよい。ろ過は１回でもよいし２回以上行ってもよい。ろ過の際にはろ紙、ラインフィルター等の手段を用いることができる。遠心分離は、５００〜１００００Ｇで行うことができ、時間は１〜６０分間とすることができる。さらに、濃縮（減圧濃縮、逆浸透膜処理など）、乾燥（噴霧乾燥、凍結乾燥など）等の処理を行ってもよい。これらの処理は、剤の形態に応じて選択すればよい。
【００６９】
本発明の剤の形態は、特に限定されない。形態の例としては、液体（カプセル、ソフトカプセルなど）、スラリー（シロップなど）、半固体（クリーム、ペーストなど）、固体（錠、粉末（顆粒、細粒など））が挙げられ、固体であることが好ましく、粉末であることが好ましい。本発明の剤の剤形に限定はない。剤形の例として、丸剤、錠剤、顆粒剤、懸濁剤、乳剤、散剤、シロップ剤、トローチ剤が挙げられる。
【００７０】
本発明の剤の投与形態に特に限定はなく、経口投与、非経口投与（経肺投与、皮下投与、静脈内投与、髄腔内投与、経皮投与など）、舌下投与、吸入投与などがあるが、通常は経口投与である。
【００７１】
本発明の剤の投与時期に特に限定はない。投与時期は、例えば、起床後、食前（例えば、食事前３０分から食事開始時まで）、食後（例えば、食事終了時から食後３０分まで）、食間（例えば、食事終了時から２〜３時間後）、就寝前、食事と同時であってもよい。
【００７２】
本発明の剤には、有効成分以外の成分を含んでいてもよい。本発明の剤が有効成分以外の成分を含む場合、本発明の剤は、組成物と言い換えてもよい。有効成分以外の成分としては、各種添加剤が例示される。添加剤の具体例としては、以下のものが挙げられる：調味料；酸味料（クエン酸、コハク酸など）；保存剤（アスコルビン酸、酢酸塩、ε−ポリリジンなど）；ｐＨ調整剤；乳化剤（ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、有機酸モノグリセリド、レシチンなど）；香料；色素；増粘剤（カラギーナン、キサンタンガムなど）；膨張剤；タンパク質（大豆タンパク質、乳タンパク質など）；糖類（デンプン、ショ糖、果糖、還元デンプン糖化物、エリスリトール、キシリトールなど）；甘味料（スクラロース、ソーマチンなど）；ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫなど）；ミネラル類（鉄、カルシウムなど）。
【００７３】
本発明の剤は、飲食品、または飲食品添加物として利用することができる。飲食品の例としては、飲料（清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、粉末飲料、果実飲料、乳飲料、ゼリー飲料、ビール、日本酒、洋酒、中国酒、薬味酒など）；米飯類（ご飯、お粥など）；パン類；調味料（ソース、味噌、醤油、マヨネーズ、ショートニング、ドレッシング、たれ、香辛料等）；大豆食品（納豆、豆腐、油揚げなど）；水産加工食品（かまぼこ、はんぺん、ちくわ、練り製品など）；食肉加工品（ハム、ソーセージ、ウィンナーなど）；農産加工食品（野菜、果物など）；漬物類；麺類（うどん、そば、スパゲッティなど）；スープ類（粉末スープ、液体スープなど）；乳製品（チーズ、ヨーグルト、クリームなど）；菓子類（ゼリー、スナック菓子、チューインガム、キャンディー、チョコレート、ケーキなど）；健康食品（機能性食品、栄養補助食品（サプリメント）、特定保健用食品）；対象者が特定されている飲食品（医療用食品、病者用食品、乳児用食品、介護用食品、高齢者用食品）等が挙げられる。飲食品添加物が対象とする飲食品の例も、上記具体例と同様である。さらに本発明の剤は、飼料または飼料用添加物として利用することができる。飼料の対象はヒト以外の動物であればよい。
【００７４】
本発明の剤の投与時期は、特に限定されないが、日常的に摂取することが好ましい。
本発明の剤の投与量は、特に限定されず、投与対象の年齢、体重、健康状態などに応じて適宜投与することができる。本発明の剤はカメリアシネンシスの成分を有効成分とする剤よりも認知能力の低下を効果的に抑制し得るので、本発明の剤の一日あたりの投与量の下限を、カメリアシネンシスの成分を有効成分とする剤よりも少ない量とすることができる。したがって、本発明の剤の一日あたりの投与量は、５０ｍｇ以上が好ましく、１００ｍｇ以上がより好ましく、１５０ｍｇ以上がさらに好ましい。本発明の剤の一日あたりの投与量に上限はないが、通常１００００ｍｇ以下である。
【実施例】
【００７５】
以下に実施例および比較例を挙げて、本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されない。【００７６】
試験例１  認知能力の低下を予防する効果および脳機能保護効果の評価
［実施例１］
茶葉として、２０１４年産サンルージュ茶葉を採取後、蒸し葉乾燥して得られるサンルージュ乾燥茶葉を用いた。蒸留水１４００ｍＬを沸騰させ、そこにサンルージュ乾燥茶葉７０ｇを添加した。１０分間沸騰水中で抽出した後、ガーゼを用いて液を濾過した。濾液を７００Ｇで１０分間遠心分離し、上澄みを茶葉抽出液とした。茶葉抽出液を真空凍結乾燥機（ＬＡＢＣＯＮＣＯ社製、ＦＺ−１２ＣＳ型，ＢＴＤ棚式乾燥チャンバ）で処理し、フリーズドライ粉末を得た。サンルージュ茶葉抽出物のフリーズドライ粉末中のカテキン類（カテキン型化合物）および総ポリフェノールの含有量を分析した結果を表１に示す。なお、表１に示された「総カテキン」の量は、試料中に含まれるカテキン型化合物の合計量を意味する。また、サンルージュ茶葉抽出物のフリーズドライ粉末中の各種成分の含有量を以下に示す。
カフェイン        ５．１重量％
アミノ酸          １．５重量％
加水分解型タンニン    １．４重量％
テオガリン        １．５重量％【００７７】
得られたサンルージュ茶葉抽出物のフリーズドライ粉末を、飼料（オリエンタル酵母社製、ＡＩＮ−９３Ｍ）に０．２重量％添加し混合した。飼料組成を表２に示す。【００７８】
サンルージュ茶葉抽出物のフリーズドライ粉末投与群として、老化促進モデルマウスＳＡＭＰ８（日本ＳＬＣ社製）の雄性マウス６匹を用いた。１５週齢のＳＡＭＰ８を４週間予備飼育した後に、サンルージュ茶葉抽出物のフリーズドライ粉末を添加した飼料を１匹あたり１日５グラムとなるように自由摂取させ２１週間飼育した。飼育期間終了後に、以下の行動解析テストを行った。【００７９】
行動解析テスト（１）として、記憶力の指標となる新奇物体認識試験を行った。透明の２５ｃｍ×３０ｃｍの飼育ケージ内の環境にマウスを２時間慣れさせた。その後、ケージ内に二つの同じ物体Ａ，Ａを入れ、１０分間それぞれの物体に対する接触回数を計測し、計測後に物体Ａ，Ａを取り除いた。物体Ａ，Ａを取り除いてから１８時間後に、飼育ケージ内に二つの互いに異なる物体Ａ，Ｂを入れ、１０分間それぞれの物体に対する接触回数を計測し、物体Ａの接触回数および物体Ｂの接触回数の合計回数に対する物体Ｂの接触回数の比率を求めた。結果を図１に示す。有意差の有無を、Ｔｕｋｅｙのテストにより判定し、図１中に結果を示した。記憶力が衰えていないマウスは物体Ａ，Ａを覚えているため、１８時間後にケージに入れた物体Ａ，Ｂのうち、物体Ｂを新奇物体と認識して物体Ａよりも多く接触する。一方、記憶力が衰えたマウスは物体Ａ，Ａを忘れるため、１８時間後にケージに入れた物体Ａ，Ｂをどちらも新奇物体と認識して同程度接触する。したがって、物体Ａの接触回数および物体Ｂの接触回数の合計回数に対する物体Ｂの接触回数の比率が高いほど、より記憶力が高いことを意味する。【００８０】
行動解析テスト（２）として、空間認知能力と学習能力の指標となるモリス水迷路試験を行った。景色が変わらないように周囲を囲った直径１２０ｃｍ×高さ３０ｃｍの円形プール（室町機械社製）に２３℃±１℃の水を高さ２０ｃｍまで入れた。円形のプールを十字に４つの区画に分け、４分の１円区画をそれぞれＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄとした。Ａ区画に直径１０ｃｍのゴールとなる足場（室町機械社製）を水面下１ｃｍの高さとなるように設置した。設置環境はカメラで上方から撮影し、行動解析ソフト（Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ社製、ＡＮＹ−ｍａｚｅ）で記録した。【００８１】
トレーニングとして、Ｂ区画にマウスを投入し、２分間プールを遊泳させた。２分以内にゴールにたどり着いた場合は、そのまま２０秒間マウスをゴール上に置き、周辺の景色を記憶させた。２分以内にゴールにたどり着けない場合は、強制的にマウスをゴール上に移動し、そのまま２０秒間周辺の景色を記憶させた。Ｂ区画の次は、Ｃ区画にマウスを投入し、同様の作業を行った。Ｃ区画の次は、Ｄ区画にマウスを投入し、同様の作業を行った。以上の作業を１日のトレーニングとした。２日目はＣ区画、Ｄ区画、Ｂ区画の順番でトレーニングを行った。３日目はＤ区画、Ｂ区画、Ｃ区画の順番でトレーニングを行った。４日目はＢ区画、Ｃ区画、Ｄ区画の順番でトレーニングを行った。【００８２】
５日目はゴールとなる足場を取り除き、ゴールと対角線に位置するＣ区画にマウスを投入し、２分間プールを遊泳させた。マウスの遊泳軌道を行動解析ソフトで記録し、ゴールを設置していたエリア上を通過した回数を測定した。結果を図２に示す。有意差の有無は、Ｔｕｋｅｙのテストにより判定し、図２中に結果を示した。空間認知能力と学習能力が衰えていないマウスは、ゴールの位置と周辺の景色を覚えているため、２分間の遊泳時間内にゴールを探し続け、ゴール上を多く通過する。一方、空間認知能力と学習能力が衰えたマウスは、ゴールの位置を記憶・学習できないため、２分間の遊泳時間内にゴール上を通過する回数が減少する。したがって、ゴール上を通過する回数が多いほど、より空間認知能力および学習能力が高い。【００８３】
以下の手順により、マウス脳のタンパク質を分析した。行動解析テスト（１）および（２）の終了後に、マウスを１６時間絶食させて屠殺し、脳を摘出した。摘出した脳に、オートクレーブ滅菌したバッファーＡ：１ｍｌ、２μｇ／ｍＬ  Ａｐｒｏｔｉｎｉｎ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）：１μＬ、１ｍＭ  Ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ  Ｆｌｕｏｒｉｄｅ（和光純薬工業社製）：１０μＬ、１ｍＭ  ｐｅｒｖａｎａｄａｔｅ（和光純薬工業社製）：５０μＬの混合液を添加して、滅菌済みバイオマッシャーＩＩ（ｎｉｐｐｉ社製）でホモジナイズした。脳ホモジネートを４℃、１２，０００Ｇで１０分間遠心分離し、上清を回収してタンパク質分析サンプルを得た。バッファーＡの組成を表３に示す。【００８４】
タンパク質分析サンプル中の総タンパク質量をＢｉｃｉｎｃｈｏｎｉｎｉｃ  Ａｃｉｄ  （ＢＣＡ）  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）とＳＰＥＣＴＲＡ  ＦＬＵＯＲ（ＴＡＣＡＮ社）を用いて測定した。【００８５】
タンパク質分析サンプル中のβアミロイド４２（１−４２）をＨｕｍａｎ／Ｒａｔ  βＡｍｙｌｏｉｄ（４２）  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（和光純薬工業社製）で定量した。結果を図３に示す。有意差の有無を、Ｔｕｋｅｙのテストにより判定し、図３中に結果を示した。アルツハイマー病の原因は、脳内でβアミロイドタンパク質（Ａβ）が凝集して老人斑（アミロイド斑）として沈着し、やがて神経細胞が死滅するためであると考えられている。したがって、脳のβアミロイド量が少ないほど、アルツハイマー型認知症の抑制効果が高い。【００８６】
以下の手順により、マウス脳における遺伝子発現を分析した。摘出した脳のＴｏｔａｌ  ＲＮＡをＰＵＲＥＬＩＮＫ  ＲＮＡ  ＭＩＮＩ  ＫＩＴ（Ｌｉｆｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）で抽出し、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ（登録商標）  ＲＴ  ｒｅａｇｅｎｔ  Ｋｉｔ（タカラバイオ社製）でｃＤＮＡを合成して遺伝子発現分析サンプルを得た。【００８７】
遺伝子発現分析サンプルのｃＤＮＡを鋳型として、ＢＡＣＥ１遺伝子（Ｆｏｒｗａｒｄ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＡＧＧＧＣＴＴＧＣＡＣＣＴＧＴＡＧＧＡＣ−３’：配列番号１、Ｒｅｖｅｒｓｅ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＧＣＣＴＧＡＧＴＡＴＧＡＣＧＣＣＡＧＴＡ−３’：配列番号２）の遺伝子発現量を、Ｓｓｏ  ＡｄｖａｎｃｅｄＴＭ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＳＹＢＲ(登録商標）  Ｇｒｅｅｎ  Ｓｕｐｅｒｍｉｘ（ＢＩＯ−ＲＡＤ社）とＣ１０００ＴＭ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ｃｙｃｌｅｒ（ＣＦＸ９６ＴＭ  Ｏｐｔｉｃｓ  Ｍｏｄｕｌｅ、ＢＩＯ−ＲＡＤ社）を用いてリアルタイムＰＣＲ法で測定した。内部標準としてはβアクチン遺伝子（Ｆｏｒｗａｒｄ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＣＡＴＣＣＧＴＡＡＡＧＡＣＣＴＣＴＡＴＧＣＣＡＡＣ−３’：配列番号３、Ｒｅｖｅｒｓｅ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＡＴＧＧＡＧＣＣＡＣＣＧＡＴＣＣＡＣＡ−３’：配列番号４）を用いた。結果を図４に示す。有意差の有無を、Ｔｕｋｅｙのテストにより判定し、図４中に結果を示した。ＢＡＣＥ１は、βアミロイド前駆体蛋白質（ＡＰＰ）のＮ末端側を切断する酵素である。ＢＡＣＥ１によりＡＰＰから切り出されたβアミロイドは凝集性が高く、アミロイドを形成し、アルツハイマー型認知症の原因となる。ＢＡＣＥ１の発現量が少ないほど、βアミロイドの切り出しが抑制されるため、アルツハイマー型認知症の抑制効果が高い。【００８８】
遺伝子発現分析サンプルのｃＤＮＡを鋳型として、ＢＣＬ−２遺伝子（Ｆｏｒｗａｒｄ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＣＡＴＴＧＴＣＧＧＧＣＣＣＡＴＧＡＡＧ−３’：配列番号５、Ｒｅｖｅｒｓｅ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＣＡＣＣＣＴＧＧＣＣＣＡＡＴＣＴＡＧＧＡ−３’：配列番号６）の遺伝子発現量を、Ｓｓｏ  ＡｄｖａｎｃｅｄＴＭ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＳＹＢＲ(登録商標）  Ｇｒｅｅｎ  Ｓｕｐｅｒｍｉｘ（ＢＩＯ−ＲＡＤ社）とＣ１０００ＴＭ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ｃｙｃｌｅｒ（ＣＦＸ９６ＴＭＯｐｔｉｃｓ  Ｍｏｄｕｌｅ、ＢＩＯ−ＲＡＤ社）を用いてリアルタイムＰＣＲ法で測定した。内部標準としてはβアクチン遺伝子を用いた。結果を図５に示す。有意差の有無を、Ｔｕｋｅｙのテストにより判定し、図５中に結果を示した。ＢＣＬ−２は抗アポトーシスタンパク質であり、脳内でのＢＣＬ−２の発現量が多いほど、神経保護作用が高く、アルツハイマー型認知症の抑制効果が高い。【００８９】
［比較例１］
ポジティブコントロール群として、通常マウスであるＳＡＭＲ１（日本ＳＬＣ社製）の雄性マウス６匹を用いた。１５週齢のＳＡＭＲ１を４週間予備飼育した後に、飼料（オリエンタル酵母社製、ＡＩＮ−９３Ｍ）を１匹あたり１日５グラムとなるように自由摂取させ２１週間飼育した。飼料組成を表２に示す。飼育期間終了後に、実施例１と同様に行動解析テスト（１）および（２）を行った。行動解析テスト終了後に、実施例１と同様にタンパク質分析と遺伝子発現分析を行った。【００９０】
［比較例２］
ネガティブコントロール群として、老化促進モデルマウスであるＳＡＭＰ８（日本ＳＬＣ社製）の雄性マウス６匹を用いた以外は、比較例１と同様に飼育した。飼育期間終了後に、実施例１と同様に行動解析テスト（１）および（２）を行った。行動解析テスト終了後に、実施例１と同様にタンパク質分析と遺伝子発現分析を行った。【００９１】
［比較例３］
２０１４年産やぶきた茶葉を採取後、蒸し葉乾燥して得られるやぶきた乾燥茶葉をサンルージュ乾燥茶葉の代わりに用い、老化促進モデルマウスであるＳＡＭＰ８（日本ＳＬＣ社製）の雄性マウス６匹を用いた以外は、実施例１と同様に飼育した。飼育期間終了後に、実施例１と同様に行動解析テスト（１）および（２）を行った。比較例３で得られたやぶきた茶葉抽出物のフリーズドライ粉末成分を分析した結果を表１に示す。比較例３で用いた飼料の組成を表２に示す。【００９２】
【表１】
2016190307.tif 000003
【００９３】
【表２】
2016190307.tif 000004
【００９４】
【表３】
2016190307.tif 000005
【００９５】
表１に示したように、認知症予防の関与成分として報告がある総カテキン類（カテキン型化合物）は、やぶきたと比較してサンルージュで低かった。また、認知症予防の関与成分として報告があるエピガロカテキンガレートは、やぶきたとサンルージュとで同等であった。総ポリフェノールは、やぶきたとサンルージュで同等であった。【００９６】
図１に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例１のマウスは、茶葉抽出物を摂取していない比較例２のマウス及びやぶきた茶葉抽出物を摂取した比較例３のマウスと比較して、新奇物体への接触率が有意に上昇した。このことは、本発明の剤が効果的に記憶力の低下を抑制することを示している。【００９７】
図２に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例１のマウスは、茶葉抽出物を摂取していない比較例２のマウスと比較して、ゴールエリアの通過回数が有意に増加した。一方、やぶきた茶葉抽出物を摂取した比較例３のマウスは、茶葉抽出物を摂取していない比較例２のマウスと比較して、ゴールエリアの通過回数に変化は無かった。このことは、本発明の剤が効果的に空間認知能力と学習能力の低下を抑制することを示している。【００９８】
図３に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例１のマウスは、茶葉抽出物を摂取していない比較例２のマウスと比較して、βアミロイド量が有意に低下した。このことは、本発明の剤が効果的にβアミロイドの蓄積を抑制することを示している。また、本発明の剤が、脳機能を保護しうること、アルツハイマー型認知症を予防または改善しうること、脳神経を保護しうることも示している。【００９９】
図４に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例１のマウスは、比較例１の通常マウスと、茶葉抽出物を摂取していない比較例２のマウスと比較して、ＢＡＣＥ１遺伝子の発現量が有意に低かった。このことは、本発明の剤が効果的にＢＡＣＥ１の発現を抑制することを示している。また、本発明の剤が、脳機能を保護しうること、アルツハイマー型認知症を予防または改善しうること、脳神経を保護しうることも示している。【０１００】
図５に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例１のマウスは、比較例１の通常マウスと、茶葉抽出物を摂取していない比較例２のマウスと比較して、ＢＣＬ−２遺伝子の発現量が有意に高かった。このことは、本発明の剤が効果的にＢＣＬ−２の発現を促進することを示している。また、本発明の剤が、脳機能を保護しうること、アルツハイマー型認知症を予防または改善しうること、脳神経を保護しうることも示している。【０１０１】
以上の実施例の結果は、本発明の剤が、認知能力の低下を抑制することができること、脳機能を保護し得ることを示している。また、この結果は、本発明の剤が、認知症（特にアルツハイマー型認知症）の予防または改善剤として効果を発揮し得ることも示している。【０１０２】
［実施例２］
実施例１の遺伝子発現分析サンプルのｃＤＮＡを鋳型として、ネプリライシン遺伝子（Ｆｏｒｗａｒｄ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＣＣＡＡＡＣＴＴＡＡＧＣＣＴＡＴＴＣＴＴＡＣ−３’：配列番号７、Ｒｅｖｅｒｓｅ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＣＣＡＴＴＡＴＧＡＡＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣ−３’：配列番号８）の遺伝子発現量を、Ｓｓｏ  ＡｄｖａｎｃｅｄＴＭ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＳＹＢＲ(登録商標）  Ｇｒｅｅｎ  Ｓｕｐｅｒｍｉｘ（ＢＩＯ−ＲＡＤ社）とＣ１０００ＴＭ  Ｔｈｅｒｍａｌ  Ｃｙｃｌｅｒ（ＣＦＸ９６ＴＭ  Ｏｐｔｉｃｓ  Ｍｏｄｕｌｅ、ＢＩＯ−ＲＡＤ社）を用いてリアルタイムＰＣＲ法で測定した。内部標準としてはβアクチン遺伝子（Ｆｏｒｗａｒｄ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＣＡＴＣＣＧＴＡＡＡＧＡＣＣＴＣＴＡＴＧＣＣＡＡＣ−３’：配列番号３、Ｒｅｖｅｒｓｅ  ｐｒｉｍｅｒ：５’−ＡＴＧＧＡＧＣＣＡＣＣＧＡＴＣＣＡＣＡ−３’：配列番号４）を用いた。結果を図６に示す。有意差の有無を、Ｔｕｋｅｙのテストにより判定し、図６中に結果を示した。Ｎｅｐｒｉｌｙｓｉｎはペプチダーゼであり、βアミロイドを分解することが報告されている。βアミロイドの蓄積やアルツハイマー病のアミロイド病態の進行と脳内のネプリライシンレベルの低下とが関連することも報告されている。ネプリライシン発現量が多いほど、βアミロイドの蓄積が抑制されるため、アルツハイマー型認知症の抑制効果が高い。【０１０３】
［比較例４］
比較例１の遺伝子発現分析サンプルを用いて、実施例２と同様にネプリライシン遺伝子の発現解析を行った。結果を図６に示す。【０１０４】
［比較例５］
比較例２の遺伝子発現分析サンプルを用いて、実施例２と同様にネプリライシン遺伝子の発現解析を行った。結果を図６に示す。【０１０５】
［比較例６］
比較例３の遺伝子発現分析サンプルを用いて、実施例２と同様にネプリライシン遺伝子の発現解析を行った。結果を図６に示す。【０１０６】
［実施例３］
マウス９匹を用いた以外は実施例１と同様にして得られた遺伝子発現分析サンプルのｃＤＮＡを鋳型として、実施例１と同様にＢＡＣＥ１遺伝子の発現解析を行った。結果を図７に示す。有意差の有無を、ｔ検定により判定し、図７中に結果を示した。【０１０７】
［比較例７］
マウス７匹を用いた以外は比較例３と同様にして得られた遺伝子発現分析サンプルを用いて、実施例１と同様にＢＡＣＥ１遺伝子の発現解析を行った。結果を図７に示す。【０１０８】
［実施例４］
マウス８匹を用いた以外は実施例１と同様にして得られたタンパク質分析サンプルを用いて、実施例１と同様に総タンパク質とβアミロイド４２を定量した。結果を図８に示す。有意差の有無を、ｔ検定により判定し、図８中に結果を示した。【０１０９】
［比較例８］
比較例３のマウス７匹を用いて、実施例１と同様に総タンパク質とβアミロイド４２を定量した。結果を図８に示す。【０１１０】
図６に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例２のマウスは、比較例４の通常マウスと、茶葉抽出物を摂取していない比較例５のマウスと比較して、ネプリライシン遺伝子の発現量が有意に高かった。このことは、本発明の剤が効果的にネプリライシン遺伝子の発現を促進することを示している。また、本発明の剤がβアミロイドの分解を促進しうることも示している。【０１１１】
図７に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例３のマウスは、やぶきた茶葉抽出物を摂取した比較例７のマウスと比較して、ＢＡＣＥ１遺伝子の発現量が有意に低下した。このことは、本発明の剤がＢＡＣＥ１遺伝子の発現を効果的に抑制する要因が、本発明の剤特有の成分組成に因ることを示している。【０１１２】
図８に示したように、サンルージュ茶葉抽出物を摂取した実施例４のマウスは、やぶきた茶葉抽出物を摂取した比較例８のマウスと比較して、βアミロイド４２（Ａβ４２）の蓄積量が有意に低かった。このことは、本発明の剤がβアミロイドの蓄積を効果的に抑制する要因が、本発明の剤特有の成分組成に因ることを示している。【０１１３】
以上の実施例の結果は、本発明の剤が、ネプリライシン遺伝子の発現を調節し、βアミロイドの分解を促進することで、脳機能を保護し得ること、脳神経を保護しうること、アルツハイマー型認知症を予防または改善しうること、を示している。また、本発明の剤のネプリライシン遺伝子の発現を促進する作用、βアミロイドの分解を促進する作用、ＢＡＣＥ１遺伝子の発現を抑制する作用、βアミロイド４２（Ａβ４２）の蓄積を抑制する作用が、やぶきた茶葉抽出物とは異なる、本発明の剤の特徴的な成分組成に因ることを示している。【０１１４】
以下に、本発明の剤の配合例を示す。配合例は例示であり、例えば、サンルージュ茶葉抽出物を、他のカメリアシネンシスとカメリアタリエンシスとの交配種の植物体の成分を含む組成物と置き換えてもよい。
配合例１  錠剤
（処方）  （％）
（１）乳糖  ２４．０％
（２）結晶セルロース  ２０．０％
（３）コーンスターチ  １５．０％
（４）デキストリン  残量
（５）グリセリン脂肪酸エステル  ５．０％
（６）サンルージュ茶葉抽出物  ０．２％【０１１５】
配合例２  飲料
（処方）  （％）
（１）果糖ブドウ糖液糖  ３０．０％
（２）乳化剤  ０．５％
（３）サンルージュ茶葉抽出物  ０．２％
（４）香料  適量
（５）精製水  残量【０１１６】
配合例３  ゼリー
（処方）  （％）
（１）還元水飴  ４０．０％
（２）グラニュー糖  ２０．０％
（３）ブトウ糖  ２０．０％
（４）ゼラチン  ３．０％
（５）サンルージュ茶葉抽出物  ０．２％
（６）精製水  残量
【配列表フリーテキスト】
【０１１７】
配列番号１：ＢＡＣＥ１  フォワードプライマー
配列番号２：ＢＡＣＥ１  リバースプライマー
配列番号３：βアクチン  フォワードプライマー
配列番号４：βアクチン  リバースプライマー
配列番号５：ＢＣＬ−２  フォワードプライマー
配列番号６：ＢＣＬ−２  リバースプライマー
配列番号７：ネプリライシン  フォワードプライマー
配列番号８：ネプリライシン  リバースプライマー
【図１】
2016190307.tif 000006
【図２】
2016190307.tif 000007
【図３】
2016190307.tif 000008
【図４】
2016190307.tif 000009
【図５】
2016190307.tif 000010
【図６】
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【図７】
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【図８】
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【配列表】
2016190307000001.app
【国際調査報告】
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2016190307.tif 000015
2016190307.tif 000016
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