(57)【要約】  ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７等の、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を有効成分とする、神経細胞死抑制剤。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を含む、神経細胞死抑制剤。
【請求項２】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌である、請求項１に記載の神経細胞死抑制剤。
【請求項３】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７である、請求項２に記載の神経細胞死抑制剤。
【請求項４】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を有効成分とする、神経細胞死抑制用の飲食品組成物。
【請求項５】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌である、請求項４に記載の飲食品組成物。
【請求項６】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７である、請求項５に記載の飲食品組成物。
【請求項７】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の神経細胞死抑制剤を含む飼料。
【請求項８】
神経細胞死抑制用の医薬の製造における、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物の使用。
【請求項９】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌である、請求項８に記載の使用。
【請求項１０】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
神経細胞死抑制用に用いられるビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物。
【請求項１２】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌である、請求項１１に記載の細菌又はその培養物。
【請求項１３】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７である、請求項１２に記載の細菌又はその培養物。
【請求項１４】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物、又はビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物を含む神経細胞死抑制剤を哺乳動物に投与する、神経細胞死を抑制する方法。
【請求項１５】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物、又はビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物を含む神経細胞死抑制剤を哺乳動物に投与する、神経細胞死の抑制によって予防又は治療され得る疾患の予防方法又は治療方法。
【請求項１８】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌である、請求項１７に記載の予防方法又は治療方法。
【請求項１９】
前記細菌が、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７である、請求項１８に記載の予防方法又は治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、神経細胞死抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代のストレス社会において、うつ病の患者数は増加傾向にあり、その予防および治療対策が望まれている。
慢性的なストレスによって体内の糖質コルチコイドが長期間上昇していると、その曝露により神経細胞が死に至り、うつ病などの神経疾患につながる。パーキンソン病治療薬であるラサギリン（Rasagiline）及びセレギリン（Selegiline）のほか、1-R-アミノインダンは、神経細胞死を防ぐ物質として報告されている（非特許文献１）。
しかし、同文献では、乳酸菌などのプロバイオティクスが神経細胞死を抑制するとの報告はされていない。【０００３】
一方で、乳酸菌など一部のプロバイオティクスが、ストレスによる神経細胞死を抑制するとの報告がされている（非特許文献２、３、４）。【０００４】
また、慢性ストレスによるマウスの不安行動が、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）PS128の摂取により改善されたことが報告されている（非特許文献５）。【０００５】
さらに、ラクトバチルス・ヘルベティカス（Lactobacillus helveticus）R0052とビフィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium longum）R0175をヒトに摂取させると、ストレス、不安、怒りなどにおける改善がみられたとの報告がある（非特許文献６）。また、うつ病モデルラットにラクトバチルス・ヘルベティカスNS8を摂取させると、ストレスによる行動異常や、脳内セロトニン、ノルアドレナリン、BDNFなどの因子が、改善されたと報告されている（非特許文献７）。さらに、高アンモニア血症のモデルマウスにラクトバチルス・ヘルベティカスNS8を摂取させると、認知記憶やうつ様の症状が改善したことが報告されている（非特許文献８）。
しかし、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium longum）に属する細菌が神経細胞死を抑制することができることは、これまで報告されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Tazik, S. et al., Neurotox Res 15(3):284-290, 2009
【非特許文献２】Liu, J. et al., BioMed Research International Volume 2015 (2015), Article ID 412946, 12 pages
【非特許文献３】Girard, S.A. et al., British Journal of Nutrition 102:1420-1425, 2009
【非特許文献４】Ait-Belgnaoui, A. et al., Neurogastroenterol Motil 26(4):510-520, 2014
【非特許文献５】Liu, Y.W. et al. Brain Research 1631:1-12, 2016
【非特許文献６】Messaoudi, M. et al. British Journal of Nutrition 105:755-764, 2011
【非特許文献７】Liang, S. et al. Neuroscience 310:561-577, 2015
【非特許文献８】Luo, J. et al. Sci China Life Sci 57(3):327-335, 2014
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ストレスにより引き起こされる神経細胞死を抑制できる神経細胞死抑制剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物が、神経細胞死を抑制できることを見出し、本発明を完成するに至った。【０００９】
すなわち、本発明は、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を含む、神経細胞死抑制剤を提供する。
前記神経細胞死抑制剤は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌であることを好ましい態様としている。
また、前記神経細胞死抑制剤は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７であることをより好ましい態様としている。【００１０】
本発明はまた、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を有効成分とする、神経細胞死抑制用の飲食品組成物を提供する。
前記飲食品組成物は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌であることを好ましい態様としている。
また、前記飲食品組成物は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７であることをより好ましい態様としている。【００１１】
本発明はまた、前記神経細胞死抑制剤を含む飼料を提供する。【００１２】
本発明はまた、神経細胞死抑制用の医薬の製造における、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物の使用を提供する。
前記使用は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌であることを好ましい態様としている。
また、前記使用は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７であることをより好ましい態様としている。【００１３】
本発明はまた、神経細胞死抑制用に用いられるビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を提供する。
前記細菌又はその培養物は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌であることを好ましい態様としている。
前記細菌又はその培養物は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７であることをより好ましい態様としている。【００１４】
本発明はまた、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物、又はビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物を含む神経細胞死抑制剤を哺乳動物に投与する、神経細胞死を抑制する方法を提供する。
前記方法は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌であることを好ましい態様としている。
前記方法は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７であることをより好ましい態様としている。【００１５】
本発明はまた、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物、又はビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物を含む神経細胞死抑制剤を哺乳動物に投与する、神経細胞死の抑制によって予防又は治療され得る疾患の予防方法又は治療方法を提供する。
前記予防方法又は治療方法は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムに属する細菌であることを好ましい態様としている。
前記予防方法又は治療方法は、前記細菌がビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７であることをより好ましい態様としている。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の神経細胞死抑制剤は、ストレスにより引き起こされる神経細胞死を抑制することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の神経細胞死抑制剤（以下、「本発明の薬剤」と記載することがある。）は、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を含む。【００１８】
ビフィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium longum）に属する細菌は、グラム陽性の偏性嫌気性桿菌である。
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌は、その細菌又はその培養物を哺乳動物に摂取させたときに神経細胞死を抑制し得るものであれば特に制限されないが、例えば、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス（Bifidobacterium longum subsp. infantis）に属する細菌及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）に属する細菌等が好ましく、その中でも、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８（「ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  Ｍ−６３」とも言う。）及び／又はビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７等がより好ましい。【００１９】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８は、ベルギーの保存機関であるベルジアン  コーディネイテッド  コレクションズ  オブ  マイクロオーガニズムズ（Belgian Coordinated Collections of Microorganisims）（BCCM）（http://bccm.belspo.be/、Universiteit Gent, Laboratorium voor Microbiologie, K.L.Ledeganckstraat, 35 9000 Gent Belgium）に一般寄託（Public deposit）として保存されており、同機関からＬＭＧ２３７２８の菌株番号で入手することができる。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８は、上記寄託菌に制限されず、上記寄託菌と実質的に同等の細菌であってもよい。【００２０】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ATCC）（American Type Culture Collection、住所  P.O. Box 1549, Manassas, VA 20108, United States of America）に一般寄託（Public deposit）として保存されており、同機関からＡＴＣＣ１５７０７の菌株番号で入手することができる。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７は、上記寄託菌に制限されず、上記寄託菌と実質的に同等の細菌であってもよい。【００２１】
ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス  ＬＭＧ２３７２８について、上記寄託菌と実質的に同等の細菌とは、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌であって、その細菌又はその培養物を哺乳動物に摂取させたときに神経細胞死を抑制することができ、さらにその１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列が、上記寄託菌の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子の塩基配列に対して、好ましくは９９．８６％以上、さらに好ましくは９９．９３％以上、より好ましくは１００％の相同性を有し、且つ、好ましくは上記寄託菌と同一の菌学的性質を有する細菌である。また、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスに属する細菌には、同細菌を親株とする変異株及び遺伝子組換え株も含まれる。
このことは、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム  ＡＴＣＣ１５７０７にも同様に適用される。【００２２】
本発明の薬剤の有効成分は、上記のような細菌の菌体であってもよく、細菌の培養物であってもよい。細菌は、生菌であっても死菌であってもよく、生菌及び死菌の両方であってもよいが、生菌であることが好ましい。死菌は、破砕物であってもよい。また、本発明の効果を損なわない限り、培養後に加熱、及び凍結乾燥等の種々の追加操作を行うことができる。追加の操作は、生菌の生残性が高いものであることが好ましい。【００２３】
細菌の培養物としては、細菌を培養した培地もしくはその濃縮物、乾燥物、又は、前記培地から神経細胞死を抑制し得る画分又は成分を分画又は精製したものが挙げられる。培地は、菌体を含んでいてもよく、菌体を除いた培地上清であってもよい。【００２４】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌は、同細菌を培養することにより容易に増殖させることができる。培養する方法は、前記細菌が増殖できる限り特に限定されず、ビフィドバクテリウム属細菌（ビフィズス菌）の培養に通常用いられる方法を必要により適宜修正して用いることができる。例えば、培養温度は２５〜５０℃でよく、３０〜４０℃であることが好ましい。また、培養は好ましくは嫌気条件下で行われ、例えば、炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら培養することができる。また、液体静置培養等の微好気条件下で培養しても良い。【００２５】
培養に用いる培地としては、特に限定されず、ビフィドバクテリウム細菌の培養に通常用いられる培地を必要により適宜修正して用いることができる。すなわち、炭素源としては、例えば、ガラクトース、グルコース、フルクトース、マンノース、セロビオース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デンプン、デンプン加水分解物、廃糖蜜等の糖類を資化性に応じて使用できる。窒素源としては、例えば、アンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩類や硝酸塩類を使用できる。また、無機塩類としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、塩化マンガン、硫酸第一鉄等を用いることができる。また、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粕、肉エキス、酵母エキス等の有機成分を用いてもよい。また、調製済みの培地としては、例えばＭＲＳ培地を好適に用いることができる。【００２６】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を哺乳動物に摂取させると、神経細胞死を抑制することができる。したがって、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物は、そのまま神経細胞死抑制剤として利用することが可能である。神経細胞としては、脳の神経細胞が挙げられる。【００２７】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌もしくはその培養物、又は本発明の薬剤を含む組成物は、医薬、飲食品、及び飼料として広く用いることができる。たとえば、神経細胞死抑制用医薬、神経細胞死抑制用飲食品、神経細胞死抑制用飼料を提供することができる。【００２８】
本発明の薬剤は、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を含有する限り特に制限されない。本発明の薬剤は、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物をそのまま使用してもよく、生理的に許容される液体又は固体の製剤担体を配合し製剤化して使用してもよい。【００２９】
本発明の薬剤の製剤形態は特に限定されず、錠剤（糖衣錠、腸溶性コーティング錠、バッカル錠を含む。）、散剤、カプセル剤（腸溶性カプセル、ソフトカプセルを含む。）、顆粒剤（コーティングしたものを含む。）、丸剤、トローチ剤、封入リポソーム剤、液剤、又はこれらの製剤学的に許容され得る徐放製剤等を例示することができる。製剤化にあたっては、製剤成分として通常の経口薬剤に汎用される、担体、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤、界面活性剤、溶剤等の添加剤を使用できる。また、本発明の効果を損わない限り、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物と、公知の、もしくは将来的に見出される神経細胞死抑制作用を有する薬剤、又は医薬組成物とを併用してもよい。例えば、本発明者らは、ラクトバチルス・ヘルベティカスに属する細菌又はその培養物が、脳内のGABAの産生促進作用、及び、神経細胞死抑制作用を有することを見出しており、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物と、ラクトバチルス・ヘルベティカスに属する細菌又はその培養物を併用してもよい。併用する医薬組成物は、本発明の薬剤中に有効成分の一つとして含有させてもよいし、本発明の薬剤中には含有させずに別個の薬剤として組み合わせて商品化してもよい。【００３０】
上記の製剤に用いる担体及び賦形剤としては、乳糖、ブドウ糖、白糖、マンニトール、馬鈴薯澱粉、トウモロコシ澱粉、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、結晶セルロース、カンゾウ末、ゲンチアナ末等を、結合剤としては例えば澱粉、ゼラチン、シロップ、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース等を、それぞれ例示することができる。【００３１】
また、崩壊剤としては、澱粉、寒天、ゼラチン末、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、結晶セルロース、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、及びアルギン酸ナトリウム等を例示することができる。【００３２】
更に、滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、水素添加植物油、及びマクロゴール等を、着色剤としては医薬品に添加することが許容されている赤色２号、黄色４号、及び青色１号等を例示することができる。【００３３】
錠剤及び顆粒剤は、必要に応じ白糖、ヒドロキシプロピルセルロース、精製セラック、ゼラチン、ソルビトール、グリセリン、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、フタル酸セルロースアセテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メチルメタクリレート、及びメタアクリル酸重合体等により被膜することもできる。【００３４】
また、本発明の他の態様は、神経細胞死抑制用の医薬の製造における、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物の使用である。また、本発明の他の態様は、神経細胞死抑制用に用いられるビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物である。また、本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物、又はビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物を含む神経細胞死抑制剤を哺乳動物に投与する、神経細胞死を抑制する方法である。また、本発明の他の態様は、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物、又はビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌若しくはその培養物を含む神経細胞死抑制剤を哺乳動物に投与する、神経細胞死の抑制によって予防又は治療され得る疾患の予防方法又は治療方法である。哺乳動物としては、ヒト、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、イヌ、ネコ、ウマ等が挙げられる。【００３５】
本発明の薬剤中に含まれるビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物の量は、剤形、用法、対象の年齢、性別、疾患の種類、疾患の程度、及びその他の条件等により適宜設定されるが、例えば、細菌の場合は、通常、１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｇまたは１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇまたは１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍｌの範囲内であることがより好ましい。細菌が死菌の場合、ｃｆｕ／ｇまたはｃｆｕ／ｍｌは、個細胞／ｇまたは個細胞／ｍｌと置き換えることができる。また、細菌の培養物の場合は、培養物が上記範囲の量の細菌を含む培地又はその加工物であればよい。【００３６】
本発明の薬剤は、神経細胞死を抑制するのに有用である。神経細胞死としては、ストレスにより引き起こされる神経細胞死が挙げられる。神経細胞死を引き起こすストレスとしては、特に制限されないが、例えば、物理的ストレス、環境ストレス、化学的ストレス、生物的ストレス等の身体的ストレス、及び、精神的ストレスが挙げられる。本発明の薬剤が有効な疾患、又は、神経細胞死の抑制によって予防又は治療され得る疾患としては、うつ、睡眠障害、不安障害、アルツハイマー病などを含む認知障害、統合失調症等が挙げられる。【００３７】
本発明の薬剤の投与量は、投与対象の年齢、性別、状態、その他の条件等により適宜選択され得る。ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物の量は、細菌の量に換算して、好ましくは２×１０4〜２×１０9ｃｆｕ／ｋｇ／日、より好ましくは２×１０6〜２×１０9ｃｆｕ／ｋｇ／日の範囲となる量を目安とするのが良い。
本発明の薬剤の投与時期は特に限定されず、投与対象の状態に応じて適宜選択することが可能である。また、予防的に投与してもよく、維持療法に用いてもよい。また、投与形態は製剤形態、患者の年齢、性別、その他の条件、患者の症状の程度等に応じて決定されることが好ましい。
なお、本発明の薬剤は、いずれの場合も１日１回又は複数回に分けて投与することができ、また、数日又は数週間に１回の投与としてもよい。【００３８】
本発明の薬剤、又はその有効成分であるビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物は、飲食品（飲料又は食品）に含有させることもできる。【００３９】
また、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌もしくはその培養物、又は本発明の薬剤を有効成分として飲食品に含有させ、神経細胞死抑制剤の一態様として、神経細胞死抑制作用を有する飲食品として加工することも可能である。すなわち、本発明は、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌又はその培養物を有効成分とする、神経細胞死抑制用の飲食品組成物を提供する。【００４０】
飲食品としては、神経細胞死抑制効果を損なわず、経口摂取できるものであれば形態や性状は特に制限されず、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌もしくはその培養物を含有させること以外は、通常飲食品に用いられる原料を用いて通常の方法によって製造することができる。【００４１】
上記のような食品としては、液状、ペースト状、ゲル状固体、粉末等の形態を問わず、錠菓、流動食等のほか、例えば、パン、マカロニ、スパゲッティ、めん類、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等の小麦粉製品；即席めん、カップめん、レトルト・調理食品、調理缶詰め、電子レンジ食品、即席スープ・シチュー、即席みそ汁・吸い物、スープ缶詰め、フリーズ・ドライ食品、その他の即席食品等の即席食品類； 農産缶詰め、果実缶詰め、ジャム・マーマレード類、漬物、煮豆類、農産乾物類、シリアル（穀物加工品）等の農産加工品； 水産缶詰め、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品、水産珍味類、つくだ煮類等の水産加工品；畜産缶詰め・ペースト類、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品；加工乳、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料類、チーズ、アイスクリーム類、調製粉乳類、クリーム、その他の乳製品等の乳・乳製品；バター、マーガリン類、植物油等の油脂類；しょうゆ、みそ、ソース類、トマト加工調味料、みりん類、食酢類等の基礎調味料；調理ミックス、カレーの素類、たれ類、ドレッシング類、めんつゆ類、スパイス類、その他の複合調味料等の複合調味料・食品類；素材冷凍食品、半調理冷凍食品、調理済冷凍食品等の冷凍食品；キャラメル、キャンディー、チューインガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、米菓子、豆菓子、デザート菓子、ゼリー、その他の菓子などの菓子類；炭酸飲料、天然果汁、果汁飲料、果汁入り清涼飲料、果肉飲料、果粒入り果実飲料、野菜系飲料、豆乳、豆乳飲料、コーヒー飲料、お茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、スポーツ飲料、栄養飲料、アルコール飲料、その他の嗜好飲料等の嗜好飲料類、ベビーフード、ふりかけ、お茶潰けのり等のその他の市販食品等；育児用調製粉乳；経腸栄養食；機能性食品（特定保健用食品、栄養機能食品）等が挙げられる。【００４２】
本発明の飲食品には、飲食品製造のための原料、及び食品添加物等、飲食品の製造工程又は製造後に飲食品に添加されるものも含まれる。例えば、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌もしくはその培養物は、発酵乳製造用スターターとして使用することができる。また、ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌もしくはその培養物を、製造された発酵乳に後から添加することもできる。【００４３】
本発明の飲食品は、神経細胞死抑制用との用途が表示された飲食品として販売することができる。また、そのような飲食品には、「神経細胞死抑制用」等の表示をすることができる。また、これ以外でも、神経細胞死の抑制によって二次的に生じる効果を表す文言であれば、使用できることはいうまでもない。【００４４】
前記「表示」とは、需要者に対して上記用途を知らしめるための全ての行為を意味し、上記用途を想起・類推させうるような表示であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物及び媒体等の如何に拘わらず、すべて本発明の「表示」に該当する。しかしながら、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により表示することが好ましい。
具体的には、本発明の飲食品に係る商品又は商品の包装に上記用途を記載する行為、商品又は商品の包装に上記用途を記載したものを譲渡し、引渡し、譲渡若しくは引渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が例示でき、特に包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等への表示が好ましい。【００４５】
また、表示としては、行政等によって許可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示）であることが好ましい。例えば、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、栄養機能食品、医薬用部外品等としての表示を例示することができ、その他厚生労働省によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、これに類似する制度にて認可される表示を例示できる。後者の例としては、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク低減表示等を例示することができる。さらに詳細には、健康増進法施行規則（平成１５年４月３０日日本国厚生労働省令第８６号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）、及びこれに類する表示等を例示することができる。【００４６】
ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌もしくはその培養物を有効成分として飼料中に含有させ、神経細胞死抑制剤の一態様として、神経細胞死抑制作用を有する飼料として加工することも可能である。【００４７】
飼料の形態としては特に制限されず、例えば、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦、マイロ等の穀類；大豆油粕、ナタネ油粕、ヤシ油粕、アマニ油粕等の植物性油粕類；フスマ、麦糠、米糠、脱脂米糠等の糠類；コーングルテンミール、コーンジャムミール等の製造粕類；魚粉、脱脂粉乳、ホエイ、イエローグリース、タロー等の動物性飼料類；トルラ酵母、ビール酵母等の酵母類；第三リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料；油脂類；単体アミノ酸；糖類等を配合することにより製造できる。飼料の形態としては、例えば、ペットフード、家畜飼料、養魚飼料等が挙げられる。【００４８】
本発明の飲食品（飼料を含む）中に含まれるビフィドバクテリウム・ロンガムに属する細菌もしくはその培養物の量は、特に限定されず適宜選択すればよいが、好ましくは、前記した本発明の薬剤と同様である。
【実施例】
【００４９】
以下に、実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。【００５０】
〔実施例１〕デキサメタゾンによる神経細胞死へのビフィドバクテリウム・ロンガムの効果
ヒト神経芽細胞SH-SY5Y細胞の培養液にデキサメタゾン（Dexamethasone）を添加し、細胞の生存率をＭＴＴ法により測定した。具体的には、以下のようにして行った。
10％ウシ胎児血清含有ダルベッコ変法イーグル培地（DMEM）を入れた96ウェルプレートに、ヒト神経芽細胞SH-SY5Y細胞を106 cells/cm2の濃度にて播種した。24時間後に、デキサメタゾン処理群は、3μMのデキサメタゾン（Dexamethasone）を含む培地100μlに培地交換した。非処理群は、デキサメタゾンを含まない培地に培地交換した。デキサメタゾン処理群には、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスLMG23728、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムATCC15707、ビフィドバクテリウム・アリマリス・サブスピーシーズ・アニマリス（Bifidobacterium animalis subsp. animalis）ATCC25527、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）DSM10140、又は、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）ATCC15700の培養上清を20μl加えて48時間培養した。非処理群及びデキサメタゾン処理群に培養上清を加えないものを、それぞれ陽性対照及び陰性対照とした。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスM-63の培養上清は、ＭＲＳ培地で３７℃、１６時間、静置条件下で培養した培養液をＯＤ600（600nmの吸光度）が１となるように調整後、２４００×ｇ、２０分遠心分離して得た。他の細菌の培養上清も、同様にして得た。
ビフィドバクテリウム・アリマリス・サブスピーシーズ・アニマリスATCC25527、及びビフィドバクテリウム・ブレーベATCC15700は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ATCC）（American Type Culture Collection、住所  P.O. Box 1549, Manassas, VA 20108, United States of America）より分譲を受けることが出来る。ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティスDSM10140は、ドイチェ・ザムルング ・フォン・ミクロオルガニスメン・ウント・ツェルクルトゥレン・ゲーエムベーハー（DSMZ）（Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH、住所：Inhoffenstrasse 7B、38124 Braunschweig、Germany）から入手することができる。【００５１】
培養後の細胞生存数を、Johnson, S. et al., Front Neurosci. 4:180 (2010)に記載のMTT法により測定した。その結果を表１に示す。ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティスLMG23728及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムATCC15707の培養上清に顕著な細胞死抑制効果が認められた。【００５２】
【表１】
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【国際調査報告】
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