(57)【要約】少ない試薬を均一に検体に供給して染色する。検体（Ａ）を載せたスライドガラス（２）の検体（Ａ）の搭載面（２ａ）の上方に毛管現象を生じさせる程度の厚さ寸法を有している隙間を空けて配置される隙間形成部材（９）と、該隙間形成部材（９）と搭載面（２ａ）との間の隙間に、検体（Ａ）を染色するための薬液を供給して、薬液を毛管現象によって隙間内に広げ、搭載面（２ａ）に乗っている検体（Ａ）に均一に供給する薬液供給部（１０）とを備える検体染色装置（１）を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
検体を載せたスライドガラスの前記検体の搭載面の上方に毛管現象を生じさせる隙間を空けて配置される隙間形成部材と、
該隙間形成部材と前記搭載面との間の隙間に、前記検体を染色するための薬液を供給する薬液供給部とを備える検体染色装置。
【請求項２】
前記隙間形成部材と前記搭載面との間の隙間に洗浄用流体を供給する洗浄流体供給手段と、
該洗浄流体供給手段により供給された洗浄用流体を前記隙間から排出する洗浄流体排出手段とを備える請求項１に記載の検体染色装置。
【請求項３】
前記スライドガラスに載せられた前記検体を加温する加温手段を備える請求項２に記載の検体染色装置。
【請求項４】
前記隙間形成部材に、前記薬液を収容する１以上のタンクと、各該タンク内の前記薬液を加圧する加圧手段とが設けられ、
前記タンクは、前記薬液が加圧されたときに、内部の前記薬液を前記隙間に放出する放出口を備える請求項１から請求項３のいずれかに記載の検体染色装置。
【請求項５】
前記隙間を減圧する減圧手段を備える請求項１から請求項４のいずれかに記載の検体染色装置。
【請求項６】
検体を載せたスライドガラスの前記検体の搭載面との間に毛管現象を生じさせる隙間を空けて隙間形成部材を配置し、該隙間形成部材と前記搭載面との間の隙間に、前記検体を染色するための薬液を供給する検体染色方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、検体染色装置および検体染色方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、標本毎に試薬をパッケージした試薬モジュールから染色に必要な試薬を順次標本に供給する装置が知られている（例えば、特許文献１参照。）。
この装置は、標本の上に空間を画定し、空間上から試薬を散布することにより標本に供給するものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第８３５４０５８号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、特許文献１の装置では、標本上に画定される大きな空間の上部において試薬を封入している袋を押し潰して試薬を空間内に押し出すことにより散布するので、試薬を標本に均一に散布し、標本に十分に行き渡らせるには、多量の試薬を供給しなければならないという不都合がある。
本発明は上述した事情に鑑みてなされたものであって、少ない試薬を均一に検体に供給して染色することができる検体染色装置および検体染色方法を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明の一態様は、検体を載せたスライドガラスの前記検体の搭載面の上方に毛管現象を生じさせる隙間を空けて配置される隙間形成部材と、該隙間形成部材と前記搭載面との間の隙間に、前記検体を染色するための薬液を供給する薬液供給部とを備える検体染色装置である。【０００６】
本態様によれば、検体を搭載面に載せたスライドガラスの搭載面に対向して隙間形成部材を配置すると、隙間形成部材と搭載面との間に隙間が形成される。
形成された隙間は毛管現象を発生させる程度の厚さ寸法を有しているので、薬液供給部の作動により、検体を染色するための薬液を隙間に供給すると、薬液が毛管現象によって隙間内に広がり、搭載面に乗っている検体に均一に供給される。すなわち、隙間内に供給される薬液の総量が少なくても、毛管現象によって、薄く広く、かつ、素早く広げられるので、薬液を節約し、かつ、少ない薬液でも検体に迅速に行き渡らせることができる。【０００７】
上記態様においては、前記隙間形成部材と前記搭載面との間の隙間に洗浄用流体を供給する洗浄流体供給手段と、該洗浄流体供給手段により供給された洗浄用流体を前記隙間から排出する洗浄流体排出手段とを備えていてもよい。
このようにすることで、検体を固めているパラフィンを溶解させる溶媒であるキシレン等の洗浄用流体を洗浄流体供給手段によって供給し、パラフィンを溶解させた洗浄用流体を洗浄流体排出手段によって排出することができる。また、検体の染色には複数の薬剤が用いられるが、１つの薬剤を供給して検体に作用させた後、洗浄流体供給手段によってアルコールや空気等の洗浄用流体を供給して検体を洗浄し、洗浄流体排出手段によって洗浄後の洗浄用流体を排出することにより、続けて他の薬剤を隙間に供給することができる。【０００８】
また、上記態様においては、前記スライドガラスに載せられた前記検体を加温する加温手段を備えていてもよい。
このようにすることで、加温手段の作動によりスライドガラスに載せられた検体を加温して染色処理を促進することができる。また、パラフィンを溶解させる洗浄処理においても検体を加温することによりパラフィンを溶け易くして洗浄処理を促進することができる。【０００９】
また、上記態様においては、前記隙間形成部材に、前記薬液を収容する１以上のタンクと、各該タンク内の前記薬液を加圧する加圧手段とが設けられ、前記タンクは、前記薬液が加圧されたときに、内部の前記薬液を前記隙間に放出する放出口を備えていてもよい。
このようにすることで、加圧手段を作動させてタンク内の薬液を加圧すると、薬液が放出口から押し出されて、搭載面と蓋体との間の隙間に供給される。これにより、簡易に薬液を隙間に供給することができる。【００１０】
また、上記態様においては、前記隙間を減圧する減圧手段を備えていてもよい。
このようにすることで、減圧手段の作動により隙間を減圧状態としてから薬液を供給することにより、さらに迅速に薬液を隙間内に広げることができる。【００１１】
また、本発明の他の態様は、検体を載せたスライドガラスの前記検体の搭載面との間に毛管現象を生じさせる隙間を空けて隙間形成部材を配置し、該隙間形成部材と前記搭載面との間の隙間に、前記検体を染色するための薬液を供給する検体染色方法を提供する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、少ない試薬を均一に検体に供給して染色することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の一実施形態に係る検体染色装置を示す分解斜視図である。
【図２】図１の検体染色装置を示す斜視図である。
【図３】図１の検体染色装置の装置本体の裏面を示す図である。
【図４】図１の検体染色装置の縦断面図である。
【図５】図４の検体染色装置の一の薬剤容器部から薬剤を供給した状態を説明する縦断面図である。
【図６】図５の状態から洗浄用流体により隙間を洗浄した状態を説明する縦断面図である。
【図７】図４の検体染色装置の他の薬剤容器部から薬剤を供給した状態を説明する縦断面図である。
【図８】図１の検体染色装置の変形例を示す分解斜視図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の一実施形態に係る検体染色装置１および検体染色方法について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る検体染色装置１は、図１および図２に示されるように、検体Ａを載せたスライドガラス２を載置するベース部３と、該ベース部３に載置されたスライドガラス２の上面（搭載面）２ａに載置される装置本体４とを備えている。
【００１５】
ベース部３は、受け皿部５と、該受け皿部５内に固定されるヒータ保持部材６と、該ヒータ保持部材６の上面に固定されるヒータ（加温手段）７と、該ヒータ７の上面に固定され、ヒータ７の熱を拡散させる熱拡散板８とを備えている。
装置本体４は、スライドガラス２の上面２ａに接触させられるプレート（隙間形成部材）９と、該プレート９の上面に固定される薬液供給部１０とを備えている。
【００１６】
ヒータ保持部材６の上面に支持されるヒータ７は、薄板状のプレートヒータであり、発生した熱は熱拡散板８によって上方に拡散されるようになっている。熱拡散板８は、スライドガラス２の裏面を密着状態に配置する平坦な上面を有している。熱拡散板８により拡散されたヒータ７からの熱は、スライドガラス２を介して、スライドガラス２の上面２ａに載せられている検体Ａを加温することができるようになっている。
【００１７】
装置本体４のプレート９は、図３に示されるように、その裏面にスライドガラス２の上面２ａに接触させられる接触部１１と、該接触部１１に対して凹んだ凹部１２とを備えている。接触部１１は、プレート９の２つの長辺と１つの短辺に沿う縁部に設けられ、１つの短辺を除き、凹部１２の三方を取り囲む位置に配置されている。
【００１８】
凹部１２は、接触部１１に対して、１００μｍから２００μｍだけ凹んでいる。これにより、プレート９がスライドガラス２の上面２ａに載置されると、接触部１１がスライドガラス２の上面２ａに接触し、凹部１２がスライドガラス２の上面２ａに対して、１００μｍから２００μｍのほぼ均一な間隔の隙間を空けて配置されるようになっている。
【００１９】
凹部１２には、後述する薬液供給部１０の薬剤（薬液）Ｘの放出口１３が複数開口している。また凹部１２には、洗浄用流体を隙間に供給する洗浄液等放出口１４も設けられている。
プレート９の凹部１２とは反対側の面には、図４に示されるように、放出口１３に対応する位置に薬剤Ｘを貯留する複数の薬剤容器部（タンク）１５と、洗浄液等放出口１４に配管２０を接続する接続部１６とが設けられている。各薬剤容器部１５は、一定の横断面形状を有する円筒状に形成されている。
【００２０】
薬剤容器部１５が設けられている側の面を上方に、凹部１２が設けられた面を下方に向けてプレート９を配置すると、図４に示されるように、薬剤容器部１５は上方に開口部１７を有し、底面に放出口１３が開口した容器となる。各薬剤容器部１５には、染色に必要な薬剤Ｘ、例えば、１次抗体、２次抗体、ＤＡＢにリンカが付属した試薬、ヘマトキシリン等が収容されるようになっている。
【００２１】
薬液供給部１０は、図４に示されるように、プレート９の各薬剤容器部１５に一致する位置に固定される円筒状のピストン保持部１８と、各ピストン保持部１８に軸方向に移動可能に挿入されたピストン部材（加圧手段）１９とを備えている。ピストン保持部１８の内径は、薬剤容器部１５の内径とほぼ一致し、ピストン部材１９の外径に対して若干大きく形成されている。
【００２２】
各ピストン保持部１８に支持されたピストン部材１９の下端は、ピストン保持部１８に一致する薬剤容器部１５内に挿入されている。これにより、ピストン保持部１８に対してピストン部材１９を押下すると、薬剤容器部１５をシリンダとして、薬剤容器部１５内に収容されている薬剤Ｘがピストン部材１９によって加圧され、プレート９に設けられている放出口１３から凹部１２内に放出されるようになっている。
【００２３】
各放出口１３，１４は、十分に小さく形成され、ピストン部材１９が押下されない状態では、薬剤Ｘは表面張力によって薬剤容器部１５内に収容状態に保持され、放出口１３から漏れ出ないようになっている。なお、さらに確実に漏洩を防止するために、加圧によって開放される弁を放出口１３に設けてもよい。
【００２４】
洗浄用流体としては、パラフィンを溶解させるためのキシレン、抗原を賦活化するためのＥＤＴＡあるいはＣｉｔｒａｔｅ、ＰＢＳ、アルコールおよび空気を挙げることができる。これらの洗浄用流体は、図示しないバルブあるいはポンプの切替によって、同一の配管２０を経由して別個に洗浄液等放出口１４に供給することができるようになっている。
配管２０を介して洗浄用流体を供給するバルブやポンプにより洗浄流体供給手段（図示略）が構成され、配管２０を介して空気を供給するバルブやポンプにより洗浄流体排出手段（図示略）が構成されている。
【００２５】
このように構成された本実施形態に係る検体染色装置１を用いた検体染色方法について、図面を参照して説明する。
本実施形態に係る検体染色装置１を用いて検体Ａを免疫染色するには、パラフィンで埋包された検体Ａを搭載面２ａに載せたスライドガラス２を、熱拡散板８の上面に載せ、さらに、スライドガラス２の上に装置本体４を載せる。
【００２６】
この状態で、配管２０を経由してキシレンを洗浄液等放出口１４から放出させると、キシレンは、スライドガラス２の上面２ａとプレート９の凹部１２との間の隙間に供給され、検体を浸潤させる。スライドガラス２の上面２ａとプレート９の凹部１２との間の隙間は、１００μｍから２００μｍの極めて薄い間隔を空けているので、隙間に供給されたキシレンは、毛管現象によって隙間内に迅速にかつ満遍なく広がって検体Ａを浸潤させる。したがって、大量のキシレンは不要である。
【００２７】
この状態で、ヒータ７を作動させ、ヒータ７からの熱によって検体Ａを６０℃に加温する。これによりパラフィンの溶解が促進されるので、所定時間経過後に、キシレンに代えてＰＢＳを洗浄液等放出口１４から放出させ、検体Ａを洗浄する。その後、空気を洗浄液等放出口１４から放出させ、ＰＢＳをパージする。パージされたキシレンやＰＢＳ等は、プレート９とスライドガラス２の上面２ａとが接触せずに開放されている部分から外部に放出され、下方の受け皿部５に収容された後に外部に排出される。
【００２８】
次に、ＥＤＴＡまたはＣｉｔｒａｔｅを洗浄液等放出口１４から放出させ、さらにヒータ７により９０℃まで加温することにより、賦活化する。その後、ＰＢＳを洗浄液等放出口１４から放出させ、検体Ａを洗浄する。その後、空気を洗浄液等放出口１４から放出させ、ＰＢＳをパージする。
【００２９】
次いで、ヒータ７によって検体Ａを３７℃に加温した状態で、図５に示されるように、１次抗体が収容されている薬剤容器部１５のピストン部材１９を押下する。これにより、押下されたピストン部材１９に対応する薬剤容器部１５に収容されている１次抗体が加圧されて、放出口１３から凹部１２内に放出される。この場合においても、放出された１次抗体は、１００μｍから２００μｍの極めて薄い間隔を空けているスライドガラス２の上面２ａとプレート９の凹部１２との間の隙間において、毛管現象によって迅速にかつ満遍なく広がって検体Ａに供給される。
【００３０】
すなわち、隙間に供給される１次抗体は少ない量でも、毛管現象によって、迅速にかつ満遍なく広がるので、高価な薬剤Ｘの使用量を節約することができるという利点がある。また、広い空間で散布する場合と比較して、より確実に薬剤Ｘを検体Ａに供給することができるという利点がある。
所定時間（例えば、２０分）経過後に、図６に示されるように、配管２０を介して洗浄液等放出口１４からＰＢＳおよび空気を隙間に供給して、検体Ａを洗浄する。
【００３１】
次に、図７に示されるように、２次抗体が収容されている他の薬剤容器部１５のピストン部材１９を押下し、ヒータ７により３７℃に加温する。この場合にも、押下されたピストン部材１９に対応する薬剤容器部１５に収容されている２次抗体が加圧されて、放出口１３から凹部１２内に放出される。放出された２次抗体は、毛管現象によって迅速にかつ満遍なく隙間内に広がって検体Ａに供給される。
そして、所定時間（例えば、２０分）経過後に、洗浄液等放出口１４からＰＢＳおよび空気を隙間に供給して、検体Ａを洗浄する。
【００３２】
次に、ＤＡＢにリンカが付属した試薬が収容されている薬剤容器部１５のピストン部材１９を押下し、ヒータ７により３７℃に加温する。
１０分程度の時間経過後に、洗浄液等放出口１４からＰＢＳおよび空気を隙間に供給して、検体Ａを洗浄する。
【００３３】
さらに、ヘマトキシリンが収容されている薬剤容器部１５のピストン部材１９を押下し、ヒータ７により３７℃に加温する。
３０秒程度の時間経過後に、洗浄液等放出口１４からＰＢＳおよび空気を隙間に供給して、検体Ａを洗浄する。
【００３４】
そして、洗浄液等放出口１４から空気を放出して、検体Ａ上の試薬をパージした後、アルコールの洗浄液等放出口１４からの供給と空気によるパージとを繰り返す。
最後に、洗浄液等放出口１４からキシレンを導入し、３分間浸すことにより、染色を終了する。
【００３５】
本実施形態に係る検体染色装置１および検体染色方法によれば、検体Ａ付近に１００μｍから２００μｍの間隔をあけた隙間を形成し、その隙間に薬剤Ｘを供給することで毛管現象によって隙間内に薬剤Ｘを広げるので、少ない量の薬剤Ｘで、より確実に検体Ａに薬剤Ｘを作用させることができるという効果を奏する。
【００３６】
なお、本実施形態に係る検体染色装置１は、上記構造に限定されるものではなく、例えば、図８に示されるように、検体Ａを載せたスライドガラス２を収容する容器本体（隙間形成部材）２１と、該容器本体２１の上部開口２２を閉塞する蓋体２３とを備えるものであってもよい。
【００３７】
図８に示す例では、容器本体２１には、洗浄用流体または空気を供給または排出する配管２０が接続されており、容器本体２１の縁部の高さは蓋体２３を載せたときに蓋体２３の裏面とスライドガラス２の上面２ａとの間に１００μｍから２００μｍの間隔の隙間が形成されるように構成されていればよい。
【００３８】
また、蓋体２３に設けられた薬液供給部２５は、柔軟な材質からなる袋状の薬剤容器部２４内に薬剤Ｘを収容していて、薬剤容器部２４を潰すように加圧したときに、蓋体２３の下面に開口する放出口から薬剤Ｘが放出されるようになっていてもよい。蓋体２３は透明な材質により構成されていてもよい。
【００３９】
また、本実施形態に係る検体染色装置１は、スライドガラス２の上面２ａとプレート９または蓋体２３との間の隙間を減圧する減圧手段（図示略）を備えていてもよい。
このようにすることで、減圧手段の作動により隙間を減圧状態としてから薬剤Ｘを供給することにより、さらに迅速に薬剤Ｘを隙間内に広げることができる。
【符号の説明】
【００４０】
１  検体染色装置
２  スライドガラス
２ａ  上面（搭載面）
７  ヒータ（加温手段）
９  プレート（隙間形成部材）
１０，２５  薬液供給部
１３  放出口
１５，２４  薬剤容器部（タンク）
１９  ピストン部材（加圧手段）
２１  容器本体（隙間形成部材）
Ａ  検体
Ｘ  薬剤（薬液）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【国際調査報告】
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