(57)【要約】【課題】MC4受容体アゴニストとして使用し得る化合物を提供する。【解決手段】本発明者らは、MC4受容体アゴニストについて検討し、ピペラジン誘導体が作用を有することを確認し、本発明を完成した。すなわち、本発明のピペラジン誘導体はMC4受容体アゴニスト作用を有し、膀胱・尿路系疾患、殊に、低活動膀胱、低緊張性膀胱、無収縮膀胱、排尿筋低活動、神経因性膀胱、尿道弛緩不全、排尿筋-外尿道括約筋協調不全及び前立腺肥大症における排尿障害の予防及び／又は治療剤として使用しうる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物又はその塩。
【化１８】
2017022733.tif 000095
（式中、
R1は、H、OHで置換されていてもよいC1-6アルキル、R00で置換されていてもよいC3-8シクロアルキル、R00で置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、R00で置換されていてもよいフェニル、R00で置換されていてもよいヘテロアリール、-CO-C1-6アルキル、又は、-CO-C3-8シクロアルキルであり、
ここで、R00は、C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基であり、
R2aは、R01で置換されていてもよいC1-6アルキルであり、
ここで、R01は、C3-8シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-N(C1-6アルキル)2、-NH(C1-6アルキル)、及び、-NH2からなる群より選択される基であり、
R2bは、H又はC1-6アルキルであり、
ここで、R2a及びR2bは、ピペラジン環の同一の炭素原子と一体となりC3-8シクロアルキルを形成してもよく、
R3は、H又はC1-6アルキルであり、
R4は、H又はC1-6アルキルであり、
Xは、*-CR7=CR8-、*-CR7=N-、*-N=CR8-、又はSであり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示し、
R5、R6、及びR7は、それぞれ同一又は互いに異なってH、C1-6アルキル、-O-(C1-6アルキル)、ハロゲン、又は、CNであり、
R5とR6は一体となってC5-7シクロアルケニルを形成してもよく、
R8は、H又はFであり、
環Aは、R02で置換されていてもよいアリール、R02で置換されていてもよいC5-7シクロアルケニル縮合フェニル、R02で置換されていてもよいヘテロアリール、又は、R02で置換されていてもよいC6-8シクロアルキルであり、
ここで、R02は、C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、C3-8シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-O-(ハロゲノC1-6アルキル)、ハロゲン、及び、-CN からなる群より選択される基である。）
【請求項２】
R1は、
i．OHで置換されていてもよいtert-ブチル、
ii．C1-6アルキルで置換されていてもよいC3-5シクロアルキル、
iii．C1-6アルキルで置換されていてもよい4-テトラヒドロピラニル、
iv．ハロゲンで置換されていてもよいフェニル、
v．C1-6アルキル、及び、ハロゲノC1-6アルキルからなる群より選択される基で置換されていてもよいヘテロアリール、
vi．-CO- C1-6アルキル、又は
vii．-CO- C3-5シクロアルキルであり、
R2aは、R03で置換されていてもよいC1-6アルキルであり、
ここで、R03は、C3-5シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、及び、-N(C1-6アルキル)2からなる群より選択される基であり、
R2bは、H、又はC1-6アルキルであり、
R5、R6、及びR7は、それぞれ同一又は互いに異なってH、C1-6アルキル、又は、ハロゲンであり、
環Aは、
i．C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-O-(ハロゲノC1-6アルキル)、ハロゲン、及び、-CNからなる群より選択される基で置換されていてもよいアリール、
ii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいC5-7シクロアルケニル縮合フェニル、
iii．ハロゲンで置換されていてもよいヘテロアリール、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいC6-8シクロアルキルである、
請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
R1は、
i．tert-ブチル、
ii．4-テトラヒドロピラニル、
iii．ハロゲノC1-6アルキルで置換されていてもよいピリジル、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよい1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニルであり、
R2aは、C1-6アルキルであり、
R2bは、Hであり、
R3は、H又はメチルであり、
R4は、H又はメチルであり、
Xは、*-CR7=CR8-、又は、*-N=CR8-であり、
R5は、H又はハロゲンであり、
R6は、ハロゲンであり、
R7は、H又はハロゲンであり、
R8は、Fであり、
環Aは、
i．C1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、
iii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよい2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル、
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘキシル、又は
v．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘプチルである、
請求項２に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
式（Ｉ）は、以下の式（Ｉａ）であり、
【化１９】
2017022733.tif 000096
R1は、
i．tert-ブチル、
ii．4-テトラヒドロピラニル、
iii．ジフルオロメチルで置換されていてもよいピリジル、又は
iv．メチルで置換されていてもよい1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニルであり、
R2aは、メチル、エチル又はn-プロピルであり、
Xは、*-CR7=CR8-であり、
R5は、Hであり、
R6は、F又はClであり、
R7は、Hであり、
環Aは、
i．C1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、
iii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよい2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘキシルである、
請求項３に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
式（Ｉａ）は、以下の式（Ｉｂ）であり、
【化２０】
2017022733.tif 000097
R1は、
i．tert-ブチル、又は
ii．4-テトラヒドロピラニルであり、
R3は、Hであり、
R4は、Hであり、
環Aは、
i．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、又は
iii．2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イルである、
請求項４に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
化合物が下記群から選択される化合物である、請求項１に記載の化合物又はその塩、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4,6-ジメチルフェニル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-メシチルプロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-プロピルピペラジン-1-イル]-3-(2-ナフチル)プロパン酸及び、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(4-メチルフェニル)プロパン酸。
【請求項７】
請求項１に記載の化合物又はその塩、及び、製薬学的に許容される賦形剤を含有する医薬組成物。
【請求項８】
膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物の製造のための請求項１に記載の化合物又はその塩の使用。
【請求項１０】
膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療のための請求項１に記載の化合物又はその塩の使用。
【請求項１１】
膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療のための請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項１２】
請求項１に記載の化合物又はその塩の有効量を対象に投与することからなる、膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はメラノコルチン4受容体（以下、MC4受容体）アゴニスト作用を有し、医薬組成物、殊に膀胱・尿路系疾患の予防用若しくは治療用医薬組成物の有効成分として使用し得るピペラジン誘導体またはその塩に関する。
【背景技術】
【０００２】
下部尿路の重要な役割は蓄尿と排尿であるが、これらは膀胱と尿道の協調作用によって調節されている。すなわち、蓄尿時には膀胱平滑筋は弛緩し、尿道平滑筋及び外尿道括約筋が収縮することで尿道抵抗の高い状態が維持され尿禁制が保たれる。一方、排尿時には膀胱平滑筋が収縮すると共に、尿道平滑筋は弛緩し、外尿道括約筋の収縮も抑制される。下部尿路の障害には、蓄尿時に尿を保持できない過活動膀胱などの蓄尿障害と、尿道抵抗の増加や膀胱収縮力の低下によって排尿時に十分に尿を排出できない排尿障害とがある。この2つの障害は併発する場合もある。【０００３】
排尿障害は、排尿時の尿道抵抗の増加や膀胱収縮力の低下により引き起こされ、排尿困難、排尿時のいきみ、尿線の減弱、排尿時間の延長、残尿の増加、排尿効率の低下などの症状を伴う。尿道抵抗の増加を引き起こす原因としては、前立腺肥大症に伴う排尿障害がよく知られており、これは前立腺組織の結節性肥大によって尿道が部分閉塞されることを特徴とする。現在、α1アドレナリン受容体拮抗薬が前立腺肥大症を伴う排尿障害の治療薬として使用されている（Pharmacology, 65, 119-128 (2002)）。尿道抵抗の増加は他にも、神経疾患や神経障害による排尿筋-外尿道括約筋協調不全などの機能的閉塞も要因となる。これら疾患の患者ではα1アドレナリン受容体拮抗薬の有効性が不明瞭である（Journal of Pharmacological Sciences, 112, 121-127 (2010)）。【０００４】
一方、排尿時膀胱収縮力を低下させる要因としては、加齢、糖尿病、前立腺肥大症、パーキンソン病や多発性硬化症などの神経疾患、脊髄損傷、骨盤内手術による神経障害などが知られている（Reviews in Urology, 15, 11-22 (2013)）。排尿時膀胱収縮力低下に対する治療薬は、非選択的ムスカリン受容体刺激薬であるベタネコール塩化物やコリンエステラーゼ阻害薬であるジスチグミン臭化物が知られている。しかしながら、これらの薬剤では、下痢、腹痛、発汗などのコリン作動性の副作用が知られている。また、重大な副作用としてコリン作動性クリーゼが発現する場合があり、使用には注意が必要とされる（ウブレチド（登録商標）錠5 mg添付文書、鳥居薬品株式会社、ベサコリン（登録商標）散5% 添付文書、エーザイ株式会社）。【０００５】
以上のような尿道抵抗の増加や膀胱収縮力の低下により引き起こされる排尿障害においては、排尿後の残尿が認められることがある。増加した残尿は有効膀胱容量の低下を引き起こし、頻尿などの過活動膀胱症状や、水腎症といった重篤な症状を引き起こすことがある。よって、排尿時の尿道抵抗の増加や膀胱収縮力低下に起因するこれらの膀胱・尿路系疾患やその症状に対するさらに有効な治療薬が望まれている（Reviews in Urology, 15, 11-22 (2013)）。【０００６】
メラノコルチン類はプロオピオメラノコルチンからプロセシングにより生成されるペプチドであり、副腎皮質刺激ホルモンおよびα-、β-、γ-メラニン細胞刺激ホルモン（α-、β-、γ-MSH）が含まれる。これまで、メラノコルチン受容体として5つのサブタイプ（MC1〜MC5）が報告されている。いずれのサブタイプもクラスAのGタンパク質共役型受容体に属し、Gsタンパク質を介してアデニル酸シクラーゼを活性化させ、cAMP量を増加させる。MC4受容体は中枢神経系に広く分布しており、摂食行動やエネルギー代謝調節、性機能などにおいて重要な役割を担うことが知られている（日本薬理学雑誌，128, 53-55 (2006)）。【０００７】
代表的なMC4受容体アゴニストとしては、以下のものが報告されている。【０００８】
特許文献１には、下記一般式で表されるMC受容体リガンドが、摂食障害、性機能不全、皮膚障害、慢性疼痛、不安、うつ病及び肥満等に有用であることが開示されている。
【化１】
2017022733.tif 000002
（式中、AはC5-7シクロアルキル、アリール又はヘテロアリールを示す。他の記号は特許文献１を参照のこと。）【０００９】
特許文献２には、下記一般式で表されるMC4受容体アゴニストが、肥満、糖尿病、女性性機能不全、勃起不全等に有用であることが開示されている。
【化２】
2017022733.tif 000003
（式中、R1はC1-6アルキル基を、Xは-(CH2)n-フェニル又は-(CH2)nC(R5)(R6)(R7)を示し、ここで(CH2)はC1-4アルキル等の置換基を有していてもよく、R5は-(CH2)n-フェニル等を、R6はHを、R7は-(CH2)nN(R8)2等を、mは0を示す。他の記号は特許文献２を参照のこと。）【００１０】
特許文献３には、下記一般式で表されるMC4受容体モジュレーターが、肥満、糖尿病、男性勃起不全等に有用であることが開示されている。
【化３】
2017022733.tif 000004
（式中の記号は特許文献３を参照のこと。）【００１１】
特許文献４には、下記一般式で表されるMC4受容体アゴニストが、肥満、糖尿病、女性性機能不全、勃起不全等に有用であることが開示されている。
【化４】
2017022733.tif 000005
（式中の記号は特許文献４を参照のこと。）【００１２】
特許文献５には、MC4受容体アゴニストが下部尿路障害、特に尿失禁に有用であること、及び下記一般式で表されるMC4受容体アゴニストが開示されている。
【化５】
2017022733.tif 000006
（式中の記号は特許文献５を参照のこと。）
特許文献５において薬理データとして実施例８の化合物が尿道内圧を上昇させる作用が記載されている。【００１３】
特許文献６には、下記一般式で表されるMC4受容体アゴニストが、性機能不全、肥満、糖尿病、下部尿路障害等に有用であることが開示されている。
【化６】
2017022733.tif 000007
（式中の記号は特許文献６を参照のこと。）【００１４】
特許文献７には、下記一般式で表されるMC4受容体アゴニストが、性機能不全、肥満、糖尿病、下部尿路障害等に有用であることが開示されている。
【化７】
2017022733.tif 000008
（式中、R3はフェニル又はピリジルを、nは0又は1を示す。他の記号は特許文献７を参照のこと。）
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】国際公開第２００５／０４０１０９号
【特許文献２】国際公開第２００４／０７８７１６号
【特許文献３】国際公開第２００８／０３９４１８号
【特許文献４】国際公開第２００５／０７７９３５号
【特許文献５】国際公開第２００７／０１５１５７号
【特許文献６】国際公開第２００７／０９６７６３号
【特許文献７】国際公開第２０１０／０１５９７２号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
本発明の課題はMC4受容体アゴニスト作用を有し、膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物の有効成分として使用し得るピペラジン誘導体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明者らは、新規な膀胱・尿路系疾患治療薬の創製について鋭意検討を行った結果、MC4受容体アゴニストが尿道を弛緩させ、尿道内圧を低下させることを見出した。さらに、薬物誘発排尿障害モデルラットにおいて、排尿効率の低下抑制作用ならびに残尿量の増加抑制作用を持つことを見出した。
一方、公知のMC4受容体アゴニストは、いずれも摂食障害や肥満、性機能障害等の中枢神経系疾患に対する作用を有しており、これらを膀胱・尿路系疾患予防又は治療に用いる場合、その有効投与量投与時に中枢神経系疾患に対する作用（例えば勃起誘発作用が挙げられる）が発現することは好ましくないことから、本発明者らは膀胱・尿路系疾患に対する作用と中枢神経系疾患に対する作用とを分離することが好ましいと考えた。そこで、本発明者らは膀胱・尿路系疾患に対する作用が強い化合物の創製を目指してさらに鋭意検討を行った。【００１８】
その結果、本発明者らは式（Ｉ）のピペラジン誘導体が、優れたMC4受容体アゴニスト活性を有することを見出し、膀胱・尿路系疾患予防又は治療薬として有用であることを知見して本発明を完成した。【００１９】
即ち、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその塩、並びに、式（Ｉ）の化合物又はその塩及び製薬学的に許容される賦形剤を含有する医薬組成物に関する。
【化８】
2017022733.tif 000009
（式中、
R1は、H、OHで置換されていてもよいC1-6アルキル、R00で置換されていてもよいC3-8シクロアルキル、R00で置換されていてもよいヘテロシクロアルキル、R00で置換されていてもよいフェニル、R00で置換されていてもよいヘテロアリール、-CO-C1-6アルキル、又は、-CO-C3-8シクロアルキルであり、
ここで、R00は、C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基であり、
R2aは、R01で置換されていてもよいC1-6アルキルであり、
ここで、R01は、C3-8シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-N(C1-6アルキル)2、-NH(C1-6アルキル)、及び、-NH2からなる群より選択される基であり、
R2bは、H又はC1-6アルキルであり、
ここで、R2a及びR2bは、ピペラジン環の同一の炭素原子と一体となりC3-8シクロアルキルを形成してもよく、
R3は、H又はC1-6アルキルであり、
R4は、H又はC1-6アルキルであり、
Xは、*-CR7=CR8-、*-CR7=N-、*-N=CR8-、又はSであり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示し、
R5、R6、及びR7は、それぞれ同一又は互いに異なってH、C1-6アルキル、-O-(C1-6アルキル)、ハロゲン、又は、CNであり、
R5とR6は一体となってC5-7シクロアルケニルを形成してもよく、
R8は、H又はFであり、
環Aは、R02で置換されていてもよいアリール、R02で置換されていてもよいC5-7シクロアルケニル縮合フェニル、R02で置換されていてもよいヘテロアリール、又は、R02で置換されていてもよいC6-8シクロアルキルであり、
ここで、R02は、C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、C3-8シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-O-(ハロゲノC1-6アルキル)、ハロゲン、及び、CNからなる群より選択される基である。）【００２０】
なお、特に記載がない限り、本明細書中のある式中の記号が他の式においても用いられる場合、同一の記号は同一の意味を示す。【００２１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその塩を含有する医薬組成物、殊に膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物に関する。なお、当該医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物又はその塩及び製薬学的に許容される賦形剤を含有する医薬組成物、殊に、膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物、及び、式（Ｉ）の化合物又はその塩を含有する膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療剤を包含する。
本発明は、膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物の製造のための式（Ｉ）の化合物又はその塩の使用、式（Ｉ）の化合物又はその塩の膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療のための使用、膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療のための式（Ｉ）の化合物又はその塩、及び、式（Ｉ）の化合物又はその塩の有効量を対象に投与することからなる膀胱・尿路系疾患予防若しくは治療方法に関する。なお、「対象」とは、その治療又は予防を必要とするヒト又はその他の動物であり、ある態様としては、その治療又は予防を必要とするヒトである。
また、本発明は、MC4受容体アゴニストを有効成分として含有する尿道内圧低下作用を有する膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物を包含する。
【発明の効果】
【００２２】
式（Ｉ）の化合物又はその塩は、MC4受容体アゴニスト活性を有する化合物であり、膀胱・尿路系疾患予防用若しくは治療用医薬組成物の有効成分として使用できる。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
以下、本発明を詳細に説明する。
本明細書において、「膀胱・尿路系疾患」とは、殊に、膀胱・尿路系疾患における排尿障害であり、例えば、低活動膀胱、低緊張性膀胱、無収縮膀胱、排尿筋低活動、神経因性膀胱、尿道弛緩不全、排尿筋-外尿道括約筋協調不全、過活動膀胱、頻尿、夜間頻尿、尿失禁、前立腺肥大症、間質性膀胱炎、慢性前立腺炎及び尿路結石等における排尿障害であり、好ましくは、低活動膀胱、低緊張性膀胱、無収縮膀胱、排尿筋低活動、神経因性膀胱、尿道弛緩不全、排尿筋-外尿道括約筋協調不全及び前立腺肥大症における排尿障害である。
【００２４】
「C1-6アルキル」とは、直鎖又は分枝状の炭素数が１から６（以後、C1-6と略す）のアルキルである。例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル等である。ある態様としては、C1-4アルキルであり、ある態様としては、メチル、エチル、n-プロピル、又はtert-ブチルであり、ある態様としては、メチル又はtert-ブチルであり、ある態様としては、メチルであり、ある態様としては、tert-ブチルである。
【００２５】
「ハロゲノC1-6アルキル」とは、１個以上のハロゲンで置換されたC1-6アルキルである。ある態様としては、１〜５個のハロゲンで置換されたC1-6アルキルであり、ある態様としては、ジフルオロメチル又はトリフルオロメチルであり、ある態様としては、トリフルオロメチルである。
【００２６】
「C3-8シクロアルキル」とは、C3-8の飽和炭化水素環基であり、架橋を有していてもよく、スピロ環を形成していてもよい。例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、ビシクロ[2,2,1]ヘプチル、ビシクロ[3,1,0]ヘキシル、ビシクロ[3,1,1]ヘプチル、スピロ[2,5]オクチル、等である。ある態様としては、C3-5シクロアルキルであり、ある態様としては、C6-8シクロアルキルである。C3-5シクロアルキルのある態様としては、シクロプロピルである。C6-8シクロアルキルのある態様としては、シクロヘキシル又はシクロヘプチルであり、ある態様としてはシクロヘキシルであり、ある態様としてはシクロヘプチルである。また、「C6-8シクロアルキル」とは、前記「C3-8シクロアルキル」に包含される、C6-8の飽和炭化水素環基である。
【００２７】
「C5-7シクロアルケニル」とは、C5-7の1以上の不飽和結合を有する炭化水素環基であり、架橋を有していてもよく、スピロ環を形成してもよい。例えば、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル等である。また、「C5-7シクロアルケニル縮合フェニル」とは、C5-7シクロアルケニルの不飽和結合部位で縮合したフェニルであり、例えば、1-テトラヒドロナフチル、2-テトラヒドロナフチル、ジヒドロインデン-4-イル、2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル、1-インデニル、2-インデニル等である。ある態様としては、2-テトラヒドロナフチルであり、ある態様としては2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イルである。
【００２８】
「アリール」とは、炭素数6〜14の単環乃至三環式芳香族炭化水素環基である。例えば、フェニル、ナフチル、又はアントラセニル等が挙げられる。ある態様としては、フェニルであり、ある態様としてはナフチルである。
【００２９】
「ヘテロアリール」とは、O、N及びSから選択される1つ以上のヘテロ原子を環構成原子として含む、5〜6員の単環式ヘテロアリール、並びに、当該単環式ヘテロアリールがベンゼン環と縮合した2環式ヘテロアリールである。また、一部の結合が不飽和であってもよい。さらに、環構成原子である炭素原子はオキソで置換されていてもよい。例えば、当該５員ヘテロアリールとしては、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チエニル、フリル、ピロリル等が挙げられ、当該６員ヘテロアリールとしては、例えば、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニル等が挙げられ、当該単環式ヘテロアリールがベンゼン環と縮合した2環式ヘテロアリールとしては、インドリル、イソインドリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル等が挙げられる。ある態様としては、チアゾリル、チエニル、ピリジル、ピリダジニル、1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニル、又はインドリルであり、ある態様としては、ピリジルであり、ある態様としてはピリダジニルであり、ある態様としては1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニルである。
【００３０】
「ヘテロシクロアルキル」とは、O、N及びSから選択される１つ以上のヘテロ原子を環構成原子として含む、３〜７員の単環ヘテロシクロアルキルである。例えば、アジリジニル、アゼチジニル、オキセタニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、テトラヒドロフラニル、オキサゾリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、4-テトラヒドロピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、オキサゾリジニル、アゼパニル、ジアゼパニル等が挙げられる。ある態様としては、テトラヒドロフラニル又は4-テトラヒドロピラニルであり、ある態様としては、4-テトラヒドロピラニルである。
【００３１】
本明細書において、「置換されていてもよい」とは、無置換又は置換基を１〜５個有していることを意味し、また、複数個の置換基を有する場合、それらの置換基は同一であっても、互いに異なっていてもよい。
【００３２】
R00は、C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基であり、ある態様としては、メチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、及び、-Fからなる群より選択される基が挙げられる。またある態様としては、メチル、及び、ジフルオロメチルからなる群より選択される基が挙げられる。
【００３３】
R01は、C3-8シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-N(C1-6アルキル)2、-NH(C1-6アルキル)、及び、-NH2からなる群より選択される基であり、ある態様としては、R03からなる群より選択される基が挙げられる。
【００３４】
R02は、C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、C3-8シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-O-(ハロゲノC1-6アルキル)、ハロゲン、及び、-CNからなる群より選択される基であり、ある態様としては、メチル、tert-ブチル、トリフルオロメチル、シクロプロピル、メトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、ハロゲン、及び、-CNからなる群より選択される基が挙げられる。またある態様としては、メチル、tert-ブチル、シクロプロピル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基が挙げられる。またある態様としては、メチル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基が挙げられる。
【００３５】
R03は、C3-5シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、及び、-N(C1-6アルキル)2からなる群より選択される基であり、ある態様としては、シクロプロピル、メトキシ、及び、-N-ジメチルからなる群より選択される基が挙げられる。
【００３６】
「ハロゲン」とは、F、Cl、Br、Iであり、ある態様としてはF又はClである。
【００３７】
前記式（Ｉ）のある態様としては、以下の式（Ｉａ）で規定される化合物又はその塩である。
【化９】
2017022733.tif 000010
前記式（Ｉ）及び（Ｉａ）のある態様としては、以下の式（Ｉｂ）で規定される化合物又はその塩である。
【化１０】
2017022733.tif 000011
【００３８】
本発明の式（Ｉ）、（Ｉａ）、及び（Ｉｂ）の化合物のある態様を以下に示す。
（１−１）R1が、
i．OHで置換されていてもよいtert-ブチル、
ii．C1-6アルキルで置換されていてもよいC3-5シクロアルキル、
iii．C1-6アルキルで置換されていてもよい4-テトラヒドロピラニル、
iv．ハロゲンで置換されていてもよいフェニル、
v．C1-6アルキル、及び、ハロゲノC1-6アルキルからなる群より選択される基で置換されていてもよいヘテロアリール、
vi．-CO- C1-6アルキル、又は
vii．-CO- C3-5シクロアルキルである、化合物又はその塩。
（１−２）R1が、
i．tert-ブチル、
ii．4-テトラヒドロピラニル、
iii．ハロゲノC1-6アルキルで置換されていてもよいピリジル、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよい1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニルである、化合物又はその塩。
（１−３）R1が、
i．tert-ブチル、
ii．4-テトラヒドロピラニル、
iii．ジフルオロメチルで置換されていてもよいピリジル、又は
iv．メチルで置換されていてもよい1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニルである、化合物又はその塩。
（１−４）R1が、
i．tert-ブチル、又は
ii．4-テトラヒドロピラニルである、化合物又はその塩。
【００３９】
（２−１）R2aが、R03で置換されていてもよいC1-6アルキルであり、
ここで、R03が、C3-5シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、及び、-N(C1-6アルキル)2からなる群より選択される基である、化合物又はその塩。
（２−２）R2aが、C1-6アルキルである、化合物又はその塩。
（２−３）R2aが、メチル、エチル又はn-プロピルである、化合物又はその塩。
（２−４）R2aが、メチルである、化合物又はその塩。
【００４０】
（３−１）R2bが、H又はC1-6アルキルである、化合物又はその塩。
（３−２）R2bが、Hである、化合物又はその塩。
【００４１】
（４−１）R3が、H又はC1-6アルキルである、化合物又はその塩。
（４−２）R3が、H又はメチルである、化合物又はその塩。
（４−３）R3が、Hである、化合物又はその塩。
【００４２】
（５−１）R4が、H又はC1-6アルキルである、化合物又はその塩。
（５−２）R4が、H又はメチルである、化合物又はその塩。
（５−３）R4が、Hである、化合物又はその塩。
【００４３】
（６−１）Xが、*-CR7=CR8-、*-CR7=N-、*-N=CR8-、又はSであり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示す、化合物又はその塩。
（６−２）Xが、*-CR7=CR8-、又は、*-N=CR8-であり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示す、化合物又はその塩。
（６−３）Xが、*-CR7=CR8-であり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示す、化合物又はその塩。
【００４４】
（７−１）R5、R6、及びR7が、それぞれ同一又は互いに異なってH、C1-6アルキル、又は、ハロゲンである、化合物又はその塩。
【００４５】
（８−１）R5が、H又はハロゲンである、化合物又はその塩。
（８−２）R5が、Hである、化合物又はその塩。
【００４６】
（９−１）R6が、ハロゲンである、化合物又はその塩。
（９−２）R6が、F又はClである、化合物又はその塩。
（９−３）R6が、Fである、化合物又はその塩。
（９−４）R6が、Clである、化合物又はその塩。
【００４７】
（１０−１）R7が、H又はハロゲンである、化合物又はその塩。
（１０−２）R7が、Hである、化合物又はその塩。
【００４８】
（１１−１）R8が、H又はFである、化合物又はその塩。
（１１−２）R8が、Fである、化合物又はその塩。
【００４９】
（１２−１）環Aが、
i．C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-O-(ハロゲノC1-6アルキル)、ハロゲン、及び、-CNからなる群より選択される基で置換されていてもよいアリール、
ii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいC5-7シクロアルケニル縮合フェニル、
iii．ハロゲンで置換されていてもよいヘテロアリール、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいC6-8シクロアルキルである、化合物又はその塩。
（１２−２）環Aが、
i．C1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、
iii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよい2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル、
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘキシル、又は
v．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘプチルである、化合物又はその塩。
（１２−３）環Aが、
i．C1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、
iii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよい2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘキシルである、化合物又はその塩。
（１２−４）環Aが、
i．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、又は
iii．2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イルである、化合物又はその塩。
（１２−５）環Aが、
i．メチル、及び、Fからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、又は
iii．2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イルである、化合物又はその塩。
（１２−６）環Aが、C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニルである、化合物又はその塩。
【００５０】
（１３）前記、式（Ｉ）、（Ｉａ）、及び（Ｉｂ）において、（１−１）〜（１２−６）に記載の態様のうち、任意の二以上の矛盾しない組み合わせである、化合物又はその塩。
【００５１】
本発明の態様（１３）の例としては以下に示す化合物又はその塩が挙げられる。
【００５２】
（１４−１）
R1が、
i．OHで置換されていてもよいtert-ブチル、
ii．C1-6アルキルで置換されていてもよいC3-5シクロアルキル、
iii．C1-6アルキルで置換されていてもよい4-テトラヒドロピラニル、
iv．ハロゲンで置換されていてもよいフェニル、
v．C1-6アルキル、及び、ハロゲノC1-6アルキルからなる群より選択される基で置換されていてもよいヘテロアリール、
vi．-CO- C1-6アルキル、又は
vii．-CO- C3-5シクロアルキルであり、
R2aが、R03で置換されていてもよいC1-6アルキルであり、
ここで、R03が、C3-5シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、及び、-N(C1-6アルキル)2からなる群より選択される基であり、
R2bが、H又はC1-6アルキルであり、
R3が、H又はC1-6アルキルであり、
R4が、H又はC1-6アルキルであり、
Xが、*-CR7=CR8-、*-CR7=N-、*-N=CR8-、又はSであり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示し、
R5、R6、及びR7が、それぞれ同一又は互いに異なってH、C1-6アルキル、又は、ハロゲンであり、
R8が、H又はFであり、
環Aが、
i．C1-6アルキル、ハロゲノC1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、-O-(C1-6アルキル)、-O-(ハロゲノC1-6アルキル)、ハロゲン、及び、-CNからなる群より選択される基で置換されていてもよいアリール、
ii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいC5-7シクロアルケニル縮合フェニル、
iii．ハロゲンで置換されていてもよいヘテロアリール、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいC6-8シクロアルキルである、
式（Ｉ）の化合物又はその塩。
【００５３】
（１４−２）
R1が、
i．tert-ブチル、
ii．4-テトラヒドロピラニル、
iii．ハロゲノC1-6アルキルで置換されていてもよいピリジル、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよい1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニルであり、
R2aが、C1-6アルキルであり、
R2bが、Hであり、
R3が、H又はメチルであり、
R4が、H又はメチルであり、
Xが、*-CR7=CR8-、又は、*-N=CR8-であり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示し、
R5が、H又はハロゲンであり、
R6が、ハロゲンであり、
R7が、H又はハロゲンであり、
R8が、Fであり、
環Aが、
i．C1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、
iii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよい2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル、
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘキシル、又は
v．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘプチルである、
式（Ｉ）の化合物又はその塩。
【００５４】
（１４−３）
式（Ｉ）が、以下の式（Ｉａ）であり、
【化１１】
2017022733.tif 000012
R1が、
i．tert-ブチル、
ii．4-テトラヒドロピラニル、
iii．ジフルオロメチルで置換されていてもよいピリジル、又は
iv．メチルで置換されていてもよい1, 6-ジヒドロ-6-オキソピリダジニルであり、
R2aが、メチル、エチル又はn-プロピルであり、
R3が、H又はメチルであり、
R4が、H又はメチルであり、
Xが、*-CR7=CR8-であり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示し、
R5が、Hであり、
R6が、F又はClであり、
R7が、Hであり、
R8が、Fであり、
環Aが、
i．C1-6アルキル、C3-5シクロアルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、
iii．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよい2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル、又は
iv．C1-6アルキルで置換されていてもよいシクロヘキシルである、（１４−２）に記載の化合物又はその塩。
【００５５】
（１４−４）
式（Ｉａ）が、以下の式（Ｉｂ）であり、
【化１２】
2017022733.tif 000013
R1が、
i．tert-ブチル、又は
ii．4-テトラヒドロピラニルであり、
R2aが、メチル、エチル又はn-プロピルであり、
R3が、Hであり、
R4が、Hであり、
Xが、*-CR7=CR8-であり、
ここで、*はR6が置換している炭素原子との結合を示し、
R5が、Hであり、
R6が、F又はClであり、
R7が、Hであり、
R8が、Fであり、
環Aが、
i．C1-6アルキル、及び、ハロゲンからなる群より選択される基で置換されていてもよいフェニル、
ii．ナフチル、又は
iii．2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イルである、（１４−３）に記載の化合物又はその塩。
【００５６】
本発明に包含される具体的化合物の例として、以下の化合物又はそれらの塩が挙げられる。
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4,6-ジメチルフェニル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-メシチルプロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-プロピルピペラジン-1-イル]-3-(2-ナフチル)プロパン酸及び、
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(4-メチルフェニル)プロパン酸、
からなる群より選択される化合物又はそれらの塩。
【００５７】
以下の式（Ｉ）の化合物に関する記載は、特に断りのない限り式（Ｉａ）及び式（Ｉｂ）の化合物にも同様に適用される。
式（Ｉ）の化合物には、置換基の種類によって、互変異性体や幾何異性体が存在しうる。本明細書中、式（Ｉ）の化合物が異性体の一形態のみで記載されることがあるが、本発明は、それ以外の異性体も包含し、異性体の分離されたもの、あるいはそれらの混合物も包含する。
また、式（Ｉ）の化合物には、立体化学を明記していない不斉炭素原子や軸不斉を有する場合があり、これに基づく光学異性体が存在しうる。本発明は、式（Ｉ）の化合物の前記に基づく光学異性体の分離されたもの、あるいはそれらの混合物も包含する。
【００５８】
さらに、本発明は、式（Ｉ）で示される化合物の製薬学的に許容されるプロドラッグも包含する。製薬学的に許容されるプロドラッグとは、加溶媒分解により又は生理学的条件下で、アミノ基、水酸基、カルボキシル基等に変換されうる基を有する化合物である。プロドラッグを形成する基としては、例えば、Prog. Med., 5, 2157-2161 (1985)や、「医薬品の開発」（廣川書店、1990年）第7巻  分子設計163-198に記載の基が挙げられる。
【００５９】
また、式（Ｉ）の化合物の塩とは、式（Ｉ）の化合物の製薬学的に許容される塩であり、置換基の種類によって、酸付加塩又は塩基との塩を形成する場合がある。具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、マンデル酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等の有機酸との酸付加塩、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩基、メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン、リシン、オルニチン等の有機塩基との塩、アセチルロイシン等の各種アミノ酸及びアミノ酸誘導体との塩やアンモニウム塩等が挙げられる。
式（Ｉ）の化合物の塩は、常法により製造することもできる。
【００６０】
単離、精製は、抽出、分別結晶化、各種分画クロマトグラフィー等、通常の化学操作を適用して行われる。
各種の異性体は、適当な原料化合物を選択することにより製造でき、あるいは異性体間の物理化学的性質の差を利用して分離することができる。例えば、光学異性体は、ラセミ体の一般的な光学分割法（例えば、光学活性な塩基又は酸とのジアステレオマー塩に導く分別結晶化や、キラルカラム等を用いたクロマトグラフィー等）により得られ、また、適当な光学活性な原料化合物から製造することもできる。
【００６１】
さらに、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその塩の各種の水和物や溶媒和物、結晶多形及び共結晶の物質も包含する。また、本発明は、種々の放射性又は非放射性同位体でラベルされた化合物も包含する。
【００６２】
本明細書に記載される粉末Ｘ線回折パターンにおいて、各種パターンから得られる数値は、その結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件等によって多少の誤差が生じる場合がある。粉末Ｘ線回折における回折角（２θ（°））の誤差範囲は、ある態様としては±０．２°である。また、例えば、医薬品添加物との混合物の状態で測定した場合、医薬品添加物由来のピークの近傍に存在しベースラインの傾き上にあるピークでは、見かけ上、ピークが±０．３°程度でシフトする場合がありうる。なお、粉末Ｘ線回折パターンはデータの性質上、結晶の同一性認定においては、結晶格子間隔や全体的なパターンが重要であり、回折角及び回折強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変わりうるものであるから、厳密に解されるべきではない。
【００６３】
（製造法）
式（Ｉ）の化合物又はその塩は、その基本構造あるいは置換基の種類に基づく特徴を利用し、種々の公知の合成法を適用して製造することができる。その際、官能基の種類によっては、当該官能基を原料から中間体へ至る段階で適当な保護基（容易に当該官能基に転化可能な基）に置き換えておくことが製造技術上効果的な場合がある。このような保護基としては、例えば、ウッツ(P. G. M. Wuts)及びグリーン(T. W. Greene)著、「Greene's Protective Groups in Organic Synthesis(第4版、2006年)」に記載の保護基等を挙げることができ、これらの反応条件に応じて適宜選択して用いればよい。このような方法では、当該保護基を導入して反応を行ったあと、必要に応じて保護基を除去することにより、所望の化合物を得ることができる。
また、式（Ｉ）の化合物のプロドラッグは、上記保護基と同様、原料から中間体へ至る段階で特定の基を導入、あるいは得られた式（Ｉ）の化合物を用いてさらに反応を行うことで製造できる。反応は通常のエステル化、アミド化、脱水等、当業者に公知の方法を適用することにより行うことができる。
【００６４】
以下、式（Ｉ）の化合物の代表的な製造法を説明する。各製法は、当該説明に付した参考文献を参照して行うこともできる。なお、本発明の製造法は以下に示した例には限定されない。
【００６５】
（第１製法）
【化１３】
2017022733.tif 000014
（式中、Rは保護基を示す。以下同様。）
本製法は、本発明化合物である式（Ｉ）の化合物を製造する方法である。
ここで、保護基Rとしては例えばメチル基、エチル基、tert-ブチル基等が挙げられる。
【００６６】
（第一工程）
本工程は式(a)の化合物と式(b)の化合物とをアミド化反応に付すことにより、式(c)の化合物を得る反応である。
この反応では、式(a)の化合物と式(b)の化合物とを等量若しくは一方を過剰量用い、これらの混合物を、縮合剤の存在下、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱下、好ましくは-20℃〜60℃において、通常0.1時間から5日間撹拌する。ここで用いられる溶媒の例としては、特に限定はされないが、ベンゼン、トルエン若しくはキシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン若しくはクロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、1,2-ジメトキシエタン等のエーテル類、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、アセトニトリル又は水、及びこれらの混合物が挙げられる。縮合剤の例としては、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド又はその塩酸塩、ジシクロヘキシルカルボジイミド、1,1’-カルボニルジイミダゾール、ジフェニルリン酸アジド、オキシ塩化リン、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（HATU）等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。添加剤（例えば1-ヒドロキシベンゾトリアゾール）を用いることが反応に好ましい場合がある。トリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン若しくはN-メチルモルホリン等の有機塩基、又は炭酸カリウム、炭酸ナトリウム若しくは水酸化カリウム等の無機塩基の存在下で反応を行うことが、反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。
また、カルボン酸(a)を反応性誘導体へ変換した後にアミン(b)と反応させる方法も用いることができる。カルボン酸の反応性誘導体の例としては、オキシ塩化リン、塩化チオニル等のハロゲン化剤と反応して得られる酸ハロゲン化物、クロロギ酸イソブチル等と反応して得られる混合酸無水物、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール等と縮合して得られる活性エステル等が挙げられる。これらの反応性誘導体と化合物(b)との反応は、ハロゲン化炭化水素類、芳香族炭化水素類、エーテル類等の反応に不活性な溶媒中、冷却下〜加熱下、好ましくは、-20℃〜60℃で行うことができる。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」16巻(2005年)(丸善)
【００６７】
（第二工程）
本工程は、式（c）の化合物の脱保護を行うことで、本発明化合物である式（Ｉ）の化合物を製造する方法である。
本反応は、冷却下から加熱還流下、通常0.1時間から5日間撹拌することによって行われる。ここで用いられる溶媒の例としては、特に限定はされないが、メタノール、エタノール等のアルコール類、ベンゼン、トルエン若しくはキシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン若しくはクロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン等のエーテル類、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、アセトニトリル又は水、及びこれらの混合物が挙げられる。脱保護試薬の例としては、特に限定はされないが、水酸化ナトリウム水溶液、水酸化カリウム水溶液、水酸化リチウム水溶液等の塩基、塩酸、トリフルオロ酢酸等の酸が挙げられる。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」16巻(2005年)(丸善)
（原料化合物の製造）
上記製造法における原料化合物は、例えば下記の方法、後述の製造例に記載の方法、公知の方法、あるいはそれらの変法を用いて製造することができる。
【００６８】
（原料合成１）
【化１４】
2017022733.tif 000015
（式中、L1は脱離基を示す。以下、同様。）
本製法は式(c)の化合物の原料である式(a)の化合物の製造方法である。
ここで、脱離基L1としては例えばクロロ基等が挙げられる。
【００６９】
（第一工程）
本工程は、式(d)の化合物の還元反応により式(e)の化合物を製造する工程である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱還流下、好ましくは-20℃から40℃で、式(d)の化合物を等量若しくは過剰量の還元剤と通常0.1時間から5日間反応させることにより行われる。ここで用いられる溶媒の例としては、特に限定はされないが、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジエチルエーテル、メチルtert-ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、1,2-ジメトキシエタン等のエーテル類、メタノール、エタノール等のアルコール類又は水、及びこれらの混合物が挙げられる。還元剤としては例えば、水素化ホウ素ナトリウム、ボラン‐N,N-ジエチルアニリン錯体等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。また、様々な添加剤を用いることが反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。さらに、還元剤と共に不斉触媒（例えば、ボラン‐N,N-ジエチルアニリン錯体と(S)-5,5-ジフェニル-2-メチル-3,4-プロパノ-1,3,2-オキサザボロリジン（（S）-MeCBS））を用いることが、光学活性体として式(e)の化合物を得るのに好ましい場合がある。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」14巻(2005年)(丸善)
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」19巻(2005年)(丸善)
J. Org. Chem. 70, 3592-3601 (2005)
【００７０】
（第二工程）
本工程は、式(e)の化合物と式(f)の化合物から、式(g)の化合物を製造する工程である。
本反応は、式(e)の化合物と式(f)の化合物とを等量若しくは式(f)の化合物を過剰量用い、これらの混合物を、塩基の存在下、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱還流下、好ましくは0℃から80℃において、通常0.1時間から5日間反応させることにより行われる。ここで用いられる溶媒としては、特に限定はされないが、例えばベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、メタノール、エタノール等のアルコール類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、1,2-ジメトキシエタン等のエーテル類、ジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、N,N-ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、アセトニトリル及びこれらの混合物が挙げられる。塩基の例としては、特に限定されないが、例えばトリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]-7-ウンデセン、n-ブチルリチウム等の有機塩基、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、水素化ナトリウム、カリウムtert-ブトキシド等の無機塩基が挙げられる。塩化テトラ-n-ブチルアンモニウム等の相間移動触媒の存在下で反応を行うことが有利な場合がある。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」14巻(2005年)(丸善)
【００７１】
（第三工程）
本工程は、式(g)の化合物とアクリロニトリルとの共役付加反応により式(h)の化合物を製造する工程である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱下、好ましくは40℃から80℃で、式(g)の化合物を過剰量のアクリロニトリルと通常12時間〜5日程度反応させることにより行われる。また、無溶媒下で反応を行うことが好ましい場合がある。また、添加剤としてエタノール、ホルムアミド等を用いることが、反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。
本反応の参考文献としては、例えば前述のJ. Org. Chem. 70, 3592-3601 (2005)を参照して実施することができる。
【００７２】
（第四工程）
本工程は、式(h)の化合物の環化反応により式(i)の化合物を製造する工程である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中、冷却下、好ましくは-78℃から氷冷下で、式(h)の化合物を塩基の存在下、p-トルエンスルホン酸無水物, メタンスルホン酸無水物又はクロロリン酸ジエチル等と通常0.1時間から5日間反応させることにより行われる。塩基としては例えば、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、ナトリウムビス（トリメチルシリルアミド）又はカリウムビス（トリメチルシリル）アミド等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
本反応の参考文献としては、例えば前述のJ. Org. Chem. 70, 3592-3601 (2005)を参照して実施することができる。
【００７３】
（第五工程）
本工程は、式(i)の化合物のアルカリ加水分解により式(a)の化合物を製造する工程である。
本反応は、冷却下から加熱還流下、通常0.1時間から5日間撹拌することによって行われる。ここで用いられる溶媒の例としては、特に限定はされないが、アルコール類、アセトン、N,N-ジメチルホルムアミドやテトラヒドロフラン等が挙げられる。また、上記溶媒と水との混合溶媒にすることで反応に好適な場合がある。加水分解試薬の例としては、特に限定はされないが、水酸化ナトリウム水溶液、水酸化カリウム水溶液等の塩基が挙げられる。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」16巻(2005年)(丸善)
【００７４】
（原料合成２）
【化１５】
2017022733.tif 000016
本製法は式(c)の化合物の原料である式(a)の化合物の製造方法である。
【００７５】
（第一工程）
本工程は、式(j)の化合物と式(k)の化合物とをアミド化反応に付すことにより、式(l)の化合物を得る反応である。
本反応は、前述の第1製法の第一工程と同様の方法で行うことができる。また、式(k)の化合物として光学活性体を用いることにより、次工程以降の反応生成物を例えば式（Ｉｂ）の化合物のような光学活性体として得ることが可能な場合もある。
【００７６】
（第二工程）
本工程は、式(l)の化合物と式(m)の化合物とを1, 3-双極子環化付加反応に付すことにより、式(n)の化合物を得る反応である。
本反応は、式(l)の化合物と式(m)の化合物とを等量若しくは一方を過剰量用い、これらの混合物を、酸の存在下、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱下、好ましくは-20℃〜60℃において、通常0.1時間から5日間撹拌する。ここで用いられる溶媒の例としては、特に限定はされないが、ベンゼン、トルエン若しくはキシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン、1,2-ジクロロエタン若しくはクロロホルム等のハロゲン化炭化水素類が挙げられる。酸としては例えば、トリフルオロ酢酸等が挙げられる。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
Tetrahedron: Asymmetry, 8, 883-887 (1997)
【００７７】
（第三工程）
本工程は、式(n)の化合物のアルカリ加水分解により式(a)の化合物を製造する工程である。
本反応は、前述の原料合成１の第五工程と同様の方法で行うことができる。
【００７８】
（原料合成３）
【化１６】
2017022733.tif 000017
（式中、L2、L3はハロゲン、P1又はP2は保護基、L4は脱離基を示す。以下、同様。）
本製法は式(c)の化合物の原料である式(b-1)の化合物の製造方法である。
ここで、ハロゲンL2、L3は例えばブロモ基、ヨード基が挙げられる。保護基P1は例えばtert-ブトキシカルボニル基等が挙げられる。保護基P2は例えば2-ニトロベンゼンスルホニル基等が挙げられる。脱離基L4としては例えばブロモ基等が挙げられる。
【００７９】
（第一工程）
本工程は、式(o)の化合物と式(p)の化合物から、式(q)の化合物を製造する工程である。
本反応では、金属試薬として亜鉛粉末等を用い有機亜鉛化合物と有機ハロゲン化合物をクロスカップリングする、いわゆる根岸反応が利用でき、これらは当業者によく知られた反応である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱還流下、好ましくは-20℃から80℃において、通常0.1時間から5日間反応させることにより行われる。ここで用いられる溶媒としては、例えばテトラヒドロフラン、N,N-ジメチルホルムアミド等が挙げられる。また、用いられる触媒としてはニッケル触媒又はパラジウム触媒が挙げられる。また、ホスフィン配位子等の存在下で反応を行うことが有利な場合がある。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」13巻(2005年)(丸善)
J. Org. Chem. 75, 245-248 (2010)
【００８０】
（第二工程）
本工程は、式(q)の化合物の保護基P1を脱保護した後、式(r)の化合物とアミド化反応に付すことにより、式(s)の化合物を製造する工程である。
本反応は、前述のグリーン(Greene)及びウッツ(Wuts)著、「Protective Groups in Organic Synthesis」、第4版、John Wiley & Sons Inc.、2006年を参照して保護基P1を脱保護した後、前述の第1製法の第一工程と同様の方法で行うことができる。
【００８１】
（第三工程）
本工程は、式(s)の化合物と式(t)の化合物から、式(u)の化合物を製造する工程である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱還流下、好ましくは0℃から80℃において、通常0.1時間から5日間反応させることにより行われる。ここで用いられる溶媒としては、例えばアセトニトリル、N,N-ジメチルホルムアミド等が挙げられる。塩基としては、例えば、炭酸カリウム等の無機塩基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００８２】
（第四工程）
本工程は、式(u)の化合物の還元反応により式(v)の化合物を製造する工程である。
本反応は、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱還流下、好ましくは-20℃から40℃で、式(u)の化合物を等量若しくは過剰量の還元剤と通常0.1時間から5日間反応させることにより行われる。ここで用いられる溶媒の例としては、特に限定はされないが、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、1,2-ジメトキシエタン等のエーテル類が挙げられる。還元剤としては例えば、水素化アルミニウムリチウム、ボラン‐テトラヒドロフラン錯体、ジボラン等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」14巻(2005年)(丸善)
【００８３】
（第五工程）
本工程は、式(v)の化合物の保護基P2を脱保護し式(b-1)の化合物を製造する工程である。
本反応は、前述のグリーン(Greene)及びウッツ(Wuts)著、「Protective Groups in Organic Synthesis」、第4版、John Wiley & Sons Inc.、2006年を参照して行うことができる。
【００８４】
（原料合成４）
【化１７】
2017022733.tif 000018
（式中、L5はハロゲン、P3は保護基を示す。以下、同様。）
本製法は式(c)の化合物の原料である式(b-1)の化合物の製造方法である。
ここで、保護基P3は例えばジフェニルメチリデン基等が挙げられる。
【００８５】
（第一工程）
本工程は、式(w)の化合物と式(x)の化合物から、式(y)の化合物を製造する工程である。
本反応は、式(w)の化合物と式(x)の化合物とを等量若しくは一方を過剰量用い、これらの混合物を、塩基の存在下、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱下、好ましくは冷却化において、通常1日間から10日間撹拌する。ここで用いられる溶媒の例としては、特に限定はされないが、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、1,2-ジメトキシエタン等のエーテル類又は水、及びこれらの混合物が挙げられる。塩基としては例えば、リチウムジイソプロピルアミド、トリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン、カリウムヘキサメチレンジシラジド、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]-7-ウンデセン、n-ブチルリチウム等の有機塩基、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、水素化ナトリウム、水酸化カリウム、カリウムtert-ブトキシド等の無機塩基が含まれる。
また、光学活性な相関移動触媒を用いることにより光学活性体として式(y)の化合物を得ることが可能な場合もある。
本反応の参考文献としては、例えば以下を参照することができる。
日本化学会編「実験化学講座(第5版)」14巻(2005年)(丸善)
Angew. Chem. Int. Ed. 44, 1549-1551 (2005)
【００８６】
（第二〜第五工程）
本工程は、式(y)の化合物の保護基P3を脱保護した後、前述の原料合成３の第二〜第五工程と同様の方法で行うことができる。
【００８７】
（試験例）
式（Ｉ）の化合物の薬理活性は、以下の試験により確認した。なお、本明細書において、被験化合物の用量はフリー体の重量に換算して表示する。
本試験例は特に断りがない場合は、公知の方法に従って実施可能である。また、市販の試薬やキット等を用いる場合には市販品の指示書に従って実施可能である。
【００８８】
試験例１：ヒトMC4、MC1およびMC3受容体発現細胞を用いた、ヒトMC受容体活性化を評価する試験
実験方法
(1) ヒトMC受容体発現ベクターの構築
ヒトMC4受容体遺伝子（GenBank登録番号：NM_005912.2）、ヒトMC1受容体遺伝子（GenBank登録番号：NM_002386.3）もしくはヒトMC3受容体遺伝子（GenBank登録番号：NM_019888.3）を、発現ベクターpcDNATM3.1/V5-His TOPO（登録商標）（Thermo Fisher Scientific Inc.）に導入した。
(2) ヒトMC受容体一過性発現細胞の構築
ヒトMC4、MC1もしくはMC3受容体の発現ベクターを、FreeStyleTM 293-F細胞（Thermo Fisher Scientific Inc.、製品番号：R790-07）に導入した。導入には、電気穿孔法（electroporation）を用いた。すなわち、FreeStyleTM 293-F細胞1x107個をElectroporation Buffer（Thermo Fisher Scientific Inc.、製品番号：B201-100）80 μLに懸濁しさらに20 μgの発現ベクターを添加し、キュベット（OC-100 Processing Assembly、MaxCyte社）に入れ、MaxCyte STX（登録商標）（MaxCyte社）にてエレクトロポレートした。細胞を一日培養し、セルバンカー（登録商標）１（十慈フィールド社、製品番号：BLC-1）に懸濁し、使用するまで冷凍保存した。
(3) cAMP産生量測定
LANCE（登録商標）Ultra cAMP Kit（PerkinElmer社）を用い，添付の説明書に準じて実施した。すなわち、DMSOで溶解後アッセイバッファー（ハンクスバランス塩溶液、5 mM 4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラジンエタンスルホン酸(HEPES）、0.5 mM 3-イソブチル-1-メチルキサンチン（IBMX）、0.1%ウシ血清アルブミン、pH 7.4）で希釈した被験化合物（最終濃度1 pM〜30 μM）もしくはα-MSH（Bachem社、最終濃度1 pM〜30 μM）をOptiPlate-384（PerkinElmer社）に添加した。さらに、アッセイバッファーを用いて調製したヒトMC4、MC1もしくはMC3受容体一過性発現細胞懸濁液を、1ウェルあたり1000個となるように添加し、約1時間室温で静置した。その後、Eu-cAMP tracer溶液及びULightTM-anti-cAMP溶液を添加し、約1時間室温で静置した。EnVision（登録商標）（PerkinElmer社）を用いて、cAMP量を算出した。
アゴニスト活性は、α-MSHによる最大反応を100%、溶媒のみの反応を0%とし、Sigmoid-Emaxモデル非線形回帰法により効力（EC50（μM））を算出した。
【００８９】
本発明のいくつかの実施例化合物のEC50値を表１及び表2に示す。Exは被験化合物の実施例番号を示す。また、NA はNot Applicableを、NTはNot Testedを表す。
【００９０】
【表１】
2017022733.tif 000019
【００９１】
【表２】
2017022733.tif 000020
上記の結果から、上記の本発明の実施例化合物がヒトMC4受容体に対してアゴニスト活性を有することが確認された。また、上記の本発明の実施例化合物のうち、ヒトMC1およびMC3受容体に対する評価を実施した実施例化合物においては、ヒトMC1およびMC3受容体に対するEC50値がヒトMC4受容体に対するそれと比較して高濃度であり、MC4受容体に対して選択的に作用することが確認された。
【００９２】
試験例２：ラットMC4受容体発現細胞を用いた、ラットMC4受容体活性化を評価する試験
実験方法
(1) ラットMC4受容体発現ベクターの構築
ラットMC4受容体遺伝子（GenBank登録番号：NM_013099.2）を、発現ベクターpcDNATM3.1/V5-His TOPO（登録商標）（Thermo Fisher Scientific Inc.）に導入した。
(2) ラットMC4受容体一過性発現細胞の構築
ラットMC4受容体の発現ベクターを、FreeStyleTM 293-F細胞（Thermo Fisher Scientific Inc.）に導入した。導入には、電気穿孔法（electroporation）を用いた。すなわち、FreeStyleTM 293-F細胞1x107個をElectroporation Buffer（Thermo Fisher Scientific Inc.）80 μLに懸濁しさらに20 μgの発現ベクターを添加し、キュベット（OC-100 Processing Assembly、MaxCyte社）に入れ、MaxCyte STX（登録商標）（MaxCyte社）にてエレクトロポレートした。細胞を一日培養し、セルバンカー（登録商標）１（十慈フィールド社）に懸濁し、使用するまで冷凍保存した。
(3) cAMP産生量測定
LANCE（登録商標）Ultra cAMP Kit（PerkinElmer社）を用い，添付の説明書に準じて実施した。すなわち、DMSOで溶解後アッセイバッファー（ハンクスバランス塩溶液、5 mM HEPES、0.5 mM IBMX、0.1% ウシ血清アルブミン、pH 7.4）で希釈した被験化合物（最終濃度1 pM〜30 μM）もしくはα-MSH（Bachem社、最終濃度1 pM〜30 μM）をOptiPlate-384（PerkinElmer社）に添加した。さらに、アッセイバッファーを用いて調製したラットMC4受容体一過性発現細胞懸濁液を、1ウェルあたり1000個となるように添加し、約1時間室温で静置した。その後、Eu-cAMP tracer溶液及びULightTM-anti-cAMP溶液を添加し、約1時間室温で静置した。EnVision（登録商標）（PerkinElmer社）を用いて、cAMP量を算出した。
アゴニスト活性は、α-MSHによる最大反応を100%、溶媒のみの反応を0%とし、Sigmoid-Emax非線形回帰法により効力（EC50（μM））を算出した。
【００９３】
本発明のいくつかの実施例化合物のEC50値を表３に示す。Exは被験化合物の実施例番号を示す。
【００９４】
【表３】
2017022733.tif 000021
上記の結果から、上記の本発明の実施例化合物がラットMC4受容体に対してアゴニスト活性を有することが確認された。
【００９５】
試験例３：ラット尿道内圧に対する作用
実験方法
本試験例は、尿道抵抗低下作用を評価する試験系として報告されている手法（European Journal of Pharmacology, 679, 127-131 (2012)）を、一部改変して実施した。Wistar系雄性ラット（日本チャールス・リバー社）をウレタンで麻酔し（1.2 g/kg ip）、仰臥位に固定した。下腹部を正中切開し、膀胱を露出させた。膀胱頂部を切開し、その切開創からマイクロチップ圧トランスデューサーカテーテル（3.5 Fr、Millar社）を尿道内へ挿入、留置した。また、大腿静脈に薬物投与用のカニューレを留置した。尿道内圧安定後、フェニレフリン塩酸塩（Sigma-Aldrich社、30 μg/kg）を静脈内投与し、尿道内圧上昇を惹起した。約30分おきに2回以上繰り返し、フェニレフリン塩酸塩誘発尿道内圧上昇反応の安定性を確認した。その後、被験化合物（20%ジメチルアセトアミド、10%クレモフォール（登録商標）、70%生理食塩液に溶解）を静脈内投与し、その5分後にフェニレフリン塩酸塩を投与した。上記の被験化合物投与ならびにフェニレフリン塩酸塩投与の手順を約30分おきに繰り返し，3〜5用量の被験化合物を評価した（被験化合物は増加用量にて投与）。反応はPowerLab（登録商標）（ADInstruments社）を介してパーソナルコンピューターに取り込み、LabChart（登録商標）（ADInstruments社）にて解析した。評価は、フェニレフリン塩酸塩投与前後各1分間の尿道内圧下面積値（mmHg・s）を求め、フェニレフリン塩酸塩投与前後の差（ΔAUC値）を算出した。被験化合物投与前に得られたΔAUC値を100%として、被験化合物各用量のΔAUC値の比（反応率）を算出した。得られた反応率が60%（抑制率として40%）になる用量をID40と定義し、非直線回帰により被験化合物のID40値を算出した。
【００９６】
本発明のいくつかの実施例化合物投与時のID40値を表４に示す。Exは被験化合物の実施例番号を示す。
【００９７】
【表４】
2017022733.tif 000022
上記の結果から、上記の本発明の実施例化合物がフェニレフリン誘発尿道内圧上昇抑制作用を持つことが示された。
【００９８】
試験例４：ラット薬物誘発排尿障害モデルにおける作用
実験方法
Sprague Dawley（SD）系雄性ラット（日本エスエルシー社）をイソフルラン麻酔下に、膀胱、胃および頚静脈にカニューレを留置した後、ボールマンケージ（夏目製作所社）内で覚醒させた。術後安定期間をおいた後、膀胱に生理食塩液をインフュージョンポンプ（テルモ社、製品番号：TE-331S）にて持続注入し、排尿を惹起させた。排尿と同時に生理食塩液の注入を中断し、排出された尿量をボールマンケージの下に設置した電子上皿天秤を用いて測定した。排尿終了後、膀胱に留置したカニューレを介し、残尿を自然落下により採取し、重量を測定し残尿量とした。また、膀胱内圧は膀胱カニューレを介して圧トランスデューサー（日本光電工業、製品番号：TP-400、TDX-100）により測定した。被験化合物または溶媒を胃内投与し、抗コリン薬であるアトロピン硫酸塩（Sigma-Aldrich社、0.01 mg/kg）およびα1アドレナリン受容体刺激薬であるミドドリン塩酸塩（Sigma-Aldrich社、0.3 mg/kg）を静脈内投与することにより排尿障害を惹起した。被験化合物または溶媒投与前後における排尿効率（＝[排尿量/（排尿量＋残尿量）]x100）ならびに残尿量を測定し、その変化量を評価した。溶媒投与値と被験化合物投与値をDunnettの多重比較検定で比較し、統計的有意差（P<0.05）をもって排尿効率の低下抑制作用あるいは残尿量の増加抑制作用が認められた最小用量を最小有効用量とした（一群3〜12匹）。
【００９９】
本発明のいくつかの実施例化合物投与時の最小有効用量を表５に示す。Exは被験化合物の実施例番号を示す。
【０１００】
【表５】
2017022733.tif 000023
上記の結果から、上記の本発明の実施例化合物が排尿効率の低下抑制作用あるいは残尿量の増加抑制作用を持つことが示された。
【０１０１】
試験例５：ラット勃起誘発作用
実験方法
SD系雄性ラット（日本チャールス・リバー社）を用いた。被験化合物（10 mg/kg）もしくは溶媒（20%ジメチルアセトアミド、10%クレモフォール（登録商標）、70%生理食塩液）を尾静脈より静脈内投与した。投与後、ラットをプラスチック製で透明な観察ケージに移し、投与後1時間までの勃起回数を測定した。測定は溶媒群、実施例化合物群（Ex 87, 88, 89）及び陽性対照としてMC4受容体アゴニストとして知られているTHIQ（J. Med. Chem., 45, 4589-4593(2002)）群を加えた5群（一群3〜7匹）で実施し、有意差検定は溶媒群に対するDunnettの多重比較検定を行い、統計的有意差（P<0.05）をもって勃起誘発作用の有無を判断した。その結果、陽性対照であるTHIQは有意な勃起誘発作用を示したが、実施例化合物（Ex 87, 88, 89）はいずれも有意な勃起誘発作用を示さなかった。
【０１０２】
上記各試験の結果に示すように、式（Ｉ）の化合物は、ヒトMC4受容体選択的アゴニスト活性を有することが確認され、また、in vivoにおいてフェニレフリン誘発尿道内圧上昇抑制作用を有することが確認された。さらに、排尿障害モデルラットにおいて、排尿効率の低下抑制ならびに残尿量の増加抑制作用を有することが確認された。さらに、式（Ｉ）の化合物のいくつかは中枢神経系に対する作用である勃起誘発作用を示さないことが確認された。従って、式（Ｉ）の化合物は膀胱・尿路系疾患、殊に、膀胱・尿路系疾患における排尿障害の予防又は治療に使用できる。例えば、低活動膀胱、低緊張性膀胱、無収縮膀胱、排尿筋低活動、神経因性膀胱、尿道弛緩不全、排尿筋-外尿道括約筋協調不全、過活動膀胱、頻尿、夜間頻尿、尿失禁、前立腺肥大症、間質性膀胱炎、慢性前立腺炎及び尿路結石等における排尿障害の予防又は治療に使用できる。特に、低活動膀胱、低緊張性膀胱、無収縮膀胱、排尿筋低活動、神経因性膀胱、尿道弛緩不全、排尿筋-外尿道括約筋協調不全及び前立腺肥大症における排尿障害の予防又は治療に使用できる。
【０１０３】
式（Ｉ）の化合物又はその塩の１種又は２種以上を有効成分として含有する医薬組成物は、当分野において通常用いられている賦形剤、即ち、薬剤用賦形剤や薬剤用担体等を用いて、通常使用されている方法によって調製することができる。
投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、又は、関節内、静脈内、筋肉内等の注射剤、坐剤、経皮用液剤、軟膏剤、経皮用貼付剤、経粘膜液剤、経粘膜貼付剤、吸入剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
【０１０４】
経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、1種又は2種以上の有効成分を、少なくとも1種の不活性な賦形剤と混合される。組成物は、常法に従って、不活性な添加剤、例えば滑沢剤や崩壊剤、安定化剤、溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要により糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤又はエリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水又はエタノールを含む。当該液体組成物は不活性な希釈剤以外に可溶化剤、湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
【０１０５】
非経口投与のための注射剤は、無菌の水性又は非水性の溶液剤、懸濁剤又は乳濁剤を含有する。水性の溶剤としては、例えば注射用蒸留水又は生理食塩液が含まれる。非水性の溶剤としては、例えばエタノールのようなアルコール類がある。このような組成物は、さらに等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、又は溶解補助剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。また、これらは無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解又は懸濁して使用することもできる。
【０１０６】
外用剤としては、軟膏剤、硬膏剤、クリーム剤、ゼリー剤、パップ剤、噴霧剤、ローション剤等を包含する。一般に用いられる軟膏基剤、ローション基剤、水性又は非水性の液剤、懸濁剤、乳剤等を含有する。
【０１０７】
吸入剤や経鼻剤等の経粘膜剤は固体、液体又は半固体状のものが用いられ、従来公知の方法に従って製造することができる。例えば公知の賦形剤や、更に、pH調整剤、防腐剤、界面活性剤、滑沢剤、安定剤や増粘剤等が適宜添加されていてもよい。投与は、適当な吸入又は吹送のためのデバイスを使用することができる。例えば、計量投与吸入デバイス等の公知のデバイスや噴霧器を使用して、化合物を単独で又は処方された混合物の粉末として、もしくは医薬的に許容し得る担体と組み合わせて溶液又は懸濁液として投与することができる。乾燥粉末吸入器等は、単回又は多数回の投与用のものであってもよく、乾燥粉末又は粉末含有カプセルを利用することができる。あるいは、適当な駆出剤、例えば、クロロフルオロアルカン又は二酸化炭素等の好適な気体を使用した加圧エアゾールスプレー等の形態であってもよい。
【０１０８】
通常経口投与の場合、1日の投与量は、体重当たり約0.001〜100 mg/kg、好ましくは0.1〜30 mg/kg、更に好ましくは0.1〜10 mg/kgが適当であり、これを1回であるいは2回〜4回に分けて投与する。静脈内投与される場合は、1日の投与量は、体重当たり約0.0001〜10 mg/kgが適当で、1日1回〜複数回に分けて投与する。また、経粘膜剤としては、体重当たり約0.001〜100 mg/kgを1日1回〜複数回に分けて投与する。投与量は症状、年令、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。
【０１０９】
投与経路、剤形、投与部位、賦形剤や添加剤の種類によって異なるが、本発明の医薬組成物は0.01〜100重量%、ある態様としては0.01〜50重量%の有効成分である１種またはそれ以上の式（Ｉ）の化合物又はその塩を含有する。
【０１１０】
式（Ｉ）の化合物は、前述の式（Ｉ）の化合物が有効性を示すと考えられる疾患の種々の治療剤又は予防剤と併用することができる。当該併用は、同時投与、或いは別個に連続して、若しくは所望の時間間隔をおいて投与してもよい。同時投与製剤は、配合剤であっても別個に製剤化されていてもよい。
【実施例】
【０１１１】
以下、実施例に基づき、式（Ｉ）の化合物の製造法をさらに詳細に説明する。なお、本発明は、下記実施例に記載の化合物に限定されるものではない。また、原料化合物の製法を製造例に示す。また、式（Ｉ）の化合物の製造法は、以下に示される具体的実施例の製造法のみに限定されるものではなく、式（Ｉ）の化合物はこれらの製造法の組み合わせ、あるいは当業者に自明である方法によっても製造されうる。【０１１２】
また、後記表中において、以下の略号を用いることがある。
PEx：製造例番号、Ex:実施例番号、PSyn：製造例化合物の製造方法（PSyn欄の番号は、当該化合物が、その番号を製造例化合物番号として有する化合物と同様の方法により、対応する原料を用いて製造したことを示す。例えばPSyn欄が３である化合物は製造例３の化合物と同様の方法で製造したことを意味する）、Syn：実施例化合物の製造方法（Syn欄の番号は、当該化合物が、その番号を実施例化合物番号として有する化合物と同様の方法により、対応する原料を用いて製造したことを示す。例えばSyn欄が１である化合物は実施例１の化合物と同様の方法で製造したことを意味する）、Str：化学構造式、DAT：物理化学的データを示す。
ESI+：質量分析におけるm/z値（イオン化法ESI、断りのない場合[M+H]+）、ESI-：質量分析におけるm/z値（イオン化法ESI、断りのない場合[M-H]-）、APCI/ESI+：APCI/ESI-MS(大気圧化学イオン化法APCI、APCI/ESIはAPCIとESIの同時測定を意味する。断りのない場合[M+H]+）、APCI/ESI-：APCI/ESI-MS(大気圧化学イオン化法APCI、APCI/ESIはAPCIとESIの同時測定を意味する。断りのない場合[M-H]-）、EI：質量分析におけるm/z値（イオン化法EI、断りのない場合[M]+）、CI：質量分析におけるm/z値（イオン化法CI、断りのない場合[M+H]+）を意味する。
1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6)：DMSO-d6中の1H-NMRにおけるシグナルのδ値(ppm)、1H-NMR(400 MHz, CDCl3)：CDCl3中の1H-NMRにおけるシグナルのδ値(ppm)、1H-NMR(500 MHz, pyridine-d5, 90℃)：pyridine-d5中、測定温度90℃での1H-NMRにおけるシグナルのδ値(ppm)、s:一重線、d:二重線、t:三重線、q:四重線、br:幅広線、m:多重線を示す。【０１１３】
特に断りがない限り、化合物は化学構造式に記載の絶対立体配置を有する光学異性体であることを示す。「＊＊」が付与された化合物は、化学構造式に記載の絶対立体配置を有し、更に立体配置の記載のない不斉炭素部分における立体配置が単一であるが未決定である、光学異性体であることを示す。「＄」が付与された化合物は標記の立体配置を有し、更に立体配置の記載のない不斉炭素部分における立体は単一であるが未決定であり、かつ同一の構造式で示されるもう１つの化合物と当該不斉炭素の立体配置が逆の関係にあることを示す。「#」が付与された化合物は、標記の立体配置を有し、更に立体配置の記載のない不斉炭素部分における立体はRS混合であることを示す。構造式中のHClは、その化合物が一塩酸塩であることを、2HClはその化合物が二塩酸塩であること、3HClはその化合物が三塩酸塩であることをそれぞれ示す。また、構造式中にHCl及びHBrを併記している化合物は、一塩酸一臭化水素酸塩であることを示す。【０１１４】
なお、本明細書において、化合物の命名にACD/Name（登録商標、Advanced Chemistry Development, Inc.）等の命名ソフトを使用している場合がある。【０１１５】
粉末Ｘ線回折の測定は、ＲＩＮＴ−ＴＴＲＩＩを用い、管球：Ｃｕ、管電流：３００  ｍＡ、管電圧：５０  ｋＶ、サンプリング幅：０．０２０°、走査速度：４°／ｍｉｎ、波長：１．５４０５６Å、測定回折角範囲（２θ）：２．５〜４０°の条件で測定した。なお、データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順に従った。【０１１６】
また、便宜上、濃度mol/LをMとして表す。例えば、1M水酸化ナトリウム水溶液は1mol/Lの水酸化ナトリウム水溶液であることを意味する。【０１１７】
製造例１
窒素雰囲気下、ボラン-N,N-ジエチルアニリン錯体 (46.2 g)、(S)-5,5-ジフェニル-2-メチル-3,4-プロパノ-1,3,2-オキサザボロリジン(1Mトルエン溶液, 5 mL)及びtert-ブチルメチルエーテル(250 mL)の混合物を35℃に加熱した。次いで、2-クロロ-1-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)エタノン (51 g)のtert-ブチルメチルエーテル(300 mL)溶液を40℃にて2時間かけて滴下した。滴下終了後、室温に放冷しながら終夜撹拌した。反応混合物を氷冷し、メタノール(150 mL)を滴下して加えた。その後、濃塩酸(80 mL)と水(220 mL)の混合物を滴下して加え、氷冷のまま1時間撹拌した。反応混合物を分液後、水層をtert-ブチルメチルエーテルにて抽出した。有機層を合わせ、飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸マグネシウムにて乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣にヘキサン(100 mL)を加え、室温にて1時間撹拌後、氷冷にて1時間撹拌した。生じた固体を濾取し、氷冷したヘキサンで洗浄した。得られた固体を室温にて減圧下乾燥することにより(1S)-2-クロロ-1-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)エタノール(42.4 g)を固体として得た。【０１１８】
製造例２
(1S)-2-クロロ-1-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)エタノール(8 g)とメタノール(4 mL)の混合物を氷冷し、テトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミン(20 mL)と水酸化ナトリウム(1.7 g)を加えた。反応混合物を60℃にて終夜撹拌した。
反応混合物を室温に冷却後、水(320 mL)に注ぎ、室温にて1時間撹拌した。生じた固体を濾取し、得られた固体を50℃にて減圧下乾燥した。得られた固体をヘキサン(160 mL)とジイソプロピルエーテル(16 mL)の混合液に加え、70℃にて4時間撹拌後、室温に放冷しながら終夜撹拌した。固体を濾取し、50℃にて減圧下乾燥することで(1S)-1-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-2-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イルアミノ)エタノール(7.90 g)を固体として得た。【０１１９】
製造例３
窒素雰囲気下、(1S)-1-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-2-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イルアミノ)エタノール(7.9 g)とアクリロニトリル(34 mL)の混合物を、70℃にて47時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン:酢酸エチル=6:4〜0:10)で精製し、3-{[(2S)-2-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-2-ヒドロキシエチル](テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)アミノ}プロパンニトリル(9.38 g)を油状物として得た。【０１２０】
製造例４
アルゴン雰囲気下、3-{[(2S)-2-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-2-ヒドロキシエチル](テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)アミノ}プロパンニトリル(9.38 g)とテトラヒドロフラン(47 mL)の混合物に、クロロりん酸ジエチル(4.33 mL)を-15℃で加えた。次いで、反応混合物にリチウムビス(トリメチルシリル)アミド(1.1Mテトラヒドロフラン溶液, 60 mL)を-5℃以下を維持しつつ滴下した。反応混合物を-7℃から-15℃の範囲で1.5時間撹拌後、水(110 mL)を加え、ジイソプロピルエーテルにて抽出した。有機層を飽和食塩水にて洗浄後、氷冷し、3M塩酸を用いて抽出した。得られた水層に50%水酸化ナトリウム水溶液を加え塩基性とし、ジイソプロピルエーテルにて抽出した。有機層を飽和食塩水にて洗浄後、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮し、3-ambo-(3R,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-カルボニトリル (8.96 g)を油状物として得た。【０１２１】
製造例５
窒素雰囲気下、3-ambo-(3R,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-カルボニトリル(8.96 g)のエタノール(40 mL)溶液に50％水酸化ナトリウム水溶液(4.30 mL)を加え、100℃にて5時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却後、エタノール(45 mL)及びメタノール(80 mL)を加えた。混合物を氷冷し、濃硫酸(2.20 mL)を加えた。混合物に無水硫酸ナトリウム及びセライトを加えた後、不溶物をセライト濾過にて除去した。固体をエタノール：メタノール(1:1)の混合液にて洗浄し、得られた濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣に2-プロパノール(25 mL)を加え室温にて10分撹拌後、tert-ブチルメチルエーテル(80 mL)を加えた。混合物を70℃にて4時間撹拌後、室温にて終夜撹拌した。生じた固体を濾取し、2-プロパノール: tert-ブチルメチルエーテル(1:3)の混合液にて洗浄後、50℃にて減圧下乾燥することにより、(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-カルボン酸(5.55 g)を固体として得た。【０１２２】
製造例６
亜鉛粉末(9 g)を減圧下ヒートガンにて15分乾燥し、室温まで放冷した。次いで、アルゴン雰囲気下N,N-ジメチルホルムアミド(50 mL)を加えた。ヨウ素(250 mg)を室温で加え、撹拌した後、反応混合物にヨウ素(250 mg)とメチル  N-(tert-ブトキシカルボニル)-3-ヨード-L-アラニナート(15.5 g)を室温で加え、35分間撹拌した。反応混合物に、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0) (2.2 g)、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',6'-ジメトキシビフェニル(2.0 g)と1-ブロモ-2-フルオロ-4-メチルベンゼン(9 mL)を室温で加えた後、60℃で18時間撹拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、セライト濾過した。濾液を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン:酢酸エチル=97:3〜83:17)、ついで塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン:酢酸エチル=97:3〜83:17)で精製し、メチル  N-(tert-ブトキシカルボニル)-2-フルオロ-4-メチル-L-フェニルアラニナート(10 g)を固体として得た。【０１２３】
製造例７
メチル  N-(tert-ブトキシカルボニル)-2-フルオロ-4-メチル-L-フェニルアラニナート(10 g)のジオキサン(10 mL)溶液に、塩化水素（4M ジオキサン溶液、100 mL）を室温で加え、1.5時間撹拌した。減圧下溶媒を留去し、生じた固体をN,N-ジメチルホルムアミド(100 mL)に懸濁した。懸濁溶液に、N-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニン(9.69 g)とO-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート(13.4 g)を室温で加え、次いでN,N-ジイソプロピルエチルアミン(18 mL)を室温で加えて3時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=100:0〜95:5)で精製し、メチル  N-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニル-2-フルオロ-4-メチル-L-フェニルアラニナート(13.6 g)を固体として得た。【０１２４】
製造例８
メチル  N-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニル-2-フルオロ-4-メチル-L-フェニルアラニナート(13.6 g)のN,N-ジメチルホルムアミド溶液(100 mL)に、1,2-ジブロモエタン(20 mL)と炭酸カリウム(32.1 g)を室温で加えた後、60℃で終夜撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルおよび水を加え分液し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=100:0〜95:5)で精製し、固体を得た。得られた固体をトルエンで粉末化し、 (2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-2-オキソピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(13.6 g)を固体として得た。【０１２５】
製造例９
(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-2-オキソピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(13.6 g)のテトラヒドロフラン溶液(200 mL)に、窒素雰囲気下、ボラン‐テトラヒドロフラン錯体（0.85M テトラヒドロフラン溶液、26 mL）を-14℃以下で20分かけて加えた後、0℃で1時間撹拌した。反応混合物を室温まで昇温し、室温で終夜撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルにて抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン:酢酸エチル=90:10〜50:50)で精製し、(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(8.45 g)を固体として得た。【０１２６】
製造例１０
(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(8.45 g)のN,N-ジメチルホルムアミド(100 mL)溶液に、炭酸カリウム(4.87 g)、および4-tert-ブチルベンゼンチオール(4.74 mL)を加え終夜撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、得られた残渣に酢酸エチル、および1M塩酸を加え撹拌した。水層を酢酸エチルで洗浄し、水酸化ナトリウムを加えpH=8とした。クロロホルムで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、塩化水素(4M酢酸エチル溶液, 9.25 mL)を加え撹拌した。析出した固体を濾過し、(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸メチル二塩酸塩(6.02 g)を固体として得た。【０１２７】
製造例１１
(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-カルボン酸(1.35 g)のN,N-ジメチルホルムアミド溶液(20 mL)に、(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸メチル二塩酸塩(1.47 g)とO-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート(1.72 g)を氷冷下で加えた後、次いでN,N-ジイソプロピルエチルアミン(3.0 mL)を加えて氷冷下1.5時間撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルにて抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=100:0〜95:5)で精製し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸メチル(2.28 g)を固体として得た。【０１２８】
製造例１２
(2-フルオロ-4,6-ジメチルフェニル)メタノール(2 g)のジクロロメタン(20 mL)溶液に氷冷下三臭化リン(1.28 mL)を加えた。反応混合物を室温で1時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。ジクロロメタンで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、2-(ブロモメチル)-1-フルオロ-3,5-ジメチルベンゼン(2.52 g)を油状物として得た。【０１２９】
製造例１３
tert-ブチル N-(ジフェニルメチリデン)グリシナート(3.43 g)のトルエン(25 mL)懸濁液に氷冷下2-(ブロモメチル)-1-フルオロ-3,5-ジメチルベンゼン(2.52 g)、(R)-4,4-ジブチル-2,6-ビス(3,4,5-トリフルオロフェニル)-4,5-ジヒドロ-3H-ジナフト[2,1-c:1',2'-e]アゼピニウムブロミド (44 mg)、及び水酸化カリウム(12.5 g)の水(25 mL)溶液を加えた。反応混合物を0℃で4日間撹拌した。反応混合物に水を加えた。ジエチルエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、tert-ブチル N-(ジフェニルメチリデン)-2-フルオロ-4,6-ジメチル-L-フェニルアラニナート(5.91 g)を油状物として得た。【０１３０】
製造例１４
tert-ブチル N-(ジフェニルメチリデン)-2-フルオロ-4,6-ジメチル-L-フェニルアラニナート(5.91 g)、テトラヒドロフラン(60 mL)、および水(30 mL)の混合物に室温でクエン酸(10.9 g)を加えた。反応混合物を室温で1時間撹拌した。反応混合物にジイソプロピルエーテル、水を加え、水層を分離した。水層をジイソプロピルエーテルで洗浄し、炭酸カリウムを加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、tert-ブチル 2-フルオロ-4,6-ジメチル-L-フェニルアラニナート(3.1 g)を油状物として得た。【０１３１】
製造例１５
tert-ブチル 2-フルオロ-4,6-ジメチル-L-フェニルアラニナート(3.1 g)のN,N-ジメチルホルムアミド(47 mL)溶液に室温でN-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニン(3.3 g)、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート(5.7 g)、及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(6 mL)を加えた。反応混合物を室温で一日間撹拌した。反応混合物に水を加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、tert-ブチル N-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニル-2-フルオロ-4,6-ジメチル-L-フェニルアラニナート(7.78 g)を油状物として得た。【０１３２】
製造例１６
(2S)-3-メシチル-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(28.9 g)のN,N-ジメチルホルムアミド(185 mL)溶液に氷冷下炭酸カリウム(16.3 g)、および4-tert-ブチルベンゼンチオール(16 mL)を加えた。反応混合物を室温で一日間撹拌した。反応混合物に水、酢酸エチルを加え、有機層を分離した。有機層を1M塩酸で抽出し、水層に炭酸カリウムを加えた。水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、(2S)-3-メシチル-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸メチル(16.9 g)を油状物として得た。【０１３３】
製造例１７
メチル 2,4,6-トリメチル-L-フェニルアラニナート 塩酸塩 (47.8 g)のN,N-ジメチルホルムアミド(717 mL)溶液に10℃でN-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニン(51.4 g)、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩(42.7 g)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(30.1 g)、及びトリエチルアミン(77.5 mL)を加えた。反応混合物を室温で2時間撹拌した。反応混合物に水を加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、メチル N-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニル-2,4,6-トリメチル-L-フェニルアラニナート(74.8 g)を油状物として得た。【０１３４】
製造例１８
(2S)-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)-2-[(ジフェニルメチリデン)アミノ]プロパン酸 tert-ブチル (971 mg)のテトラヒドロフラン(11.7 mL)溶液に室温でクエン酸(2.19 g)の水(5.8 mL)溶液を加えた。反応混合物を室温で6時間撹拌した。反応混合物にジエチルエーテルを加えて水層を分離した。水層に氷冷下、炭酸カリウムを加え、水層をクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣にジオキサン(10 mL)、塩化水素(4Mジオキサン溶液, 0.7 mL)を加えて室温で撹拌した。析出した固体を濾取後、ジオキサンで洗浄し、減圧下乾燥した。固体をアセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥し、(2S)-2-アミノ-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸 tert-ブチル一塩酸塩 (251 mg)を固体として得た。【０１３５】
製造例１９
(2S)-3-(4-ブロモフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-2-オキソピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(500 mg)、トルエン(10 mL)、および水(0.25 mL)の混合物に室温でシクロプロピルボロン酸(397 mg)、リン酸三カリウム(982 mg)、酢酸パラジウム(II) (41.5 mg)、および2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',6'-ジメトキシビフェニル(152 mg)を加えた。反応混合物をアルゴン雰囲気下、90℃に昇温し、15時間撹拌した。反応混合物をセライト濾過し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:酢酸エチル=5:1〜3:2)で精製し、(2S)-3-(4-シクロプロピルフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-2-オキソピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(196 mg)を油状物として得た。【０１３６】
製造例２０
(2R)-2-ブロモ-3-(2-ナフチル)プロパン酸メチル (500 mg)、cis-2,6-ジメチルピペラジン (1.90 g) 及びN,N-ジメチルホルムアミド (10 mL) の混合物を、室温で終夜撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム:メタノール=98:2〜90:10) で精製して、(2S)-2-[(3R,5S)-3,5-ジメチルピペラジン-1-イル]-3-(2-ナフチル)プロパン酸メチル (107 mg) を油状物として得た。【０１３７】
製造例２１
(3R)-4-(2-メトキシ-2-オキソエチル)-3-メチルピペラジン-1-カルボン酸tert-ブチル(818 mg)およびテトラヒドロフラン(8.00 mL)の混合物を-78℃に冷却した。反応混合物に-78℃にてカリウムビス(トリメチルシリル)アミド（1M テトラヒドロフラン溶液、6.00 mL）を加え、同温で40分間撹拌した。反応混合物に-78℃にて4-(ブロモメチル)-1,2-ジクロロベンゼン(2.15 g)を加え、同温で30分間撹拌した。その後、30分かけて室温まで昇温し、続いて室温で2時間撹拌した。反応混合物に塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン:酢酸エチル=85:15)で精製し、 (3R)-4-[3-(3,4-ジクロロフェニル)-1-メトキシ-1-オキソプロパン-2-イル]-3-メチルピペラジン-1-カルボン酸 tert-ブチル (267 mg、製造例２１、先に溶出した画分)を油状物として得た。またエステル基のα位の立体配置が異なる単一異性体(70.0 mg、製造例３３５、後で溶出した画分)を油状物として得た。【０１３８】
製造例２２
(3R)-4-[3-(3,4-ジクロロフェニル)-1-メトキシ-1-オキソプロパン-2-イル]-3-メチルピペラジン-1-カルボン酸 tert-ブチル (246 mg,製造例２１、先に溶出した画分)のジオキサン(984μL)溶液に氷冷下塩化水素(4Mジオキサン溶液, 712μL)を加え、室温下終夜撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=95: 5)で精製し、3-(3,4-ジクロロフェニル)-2-[(2R)-2-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸メチル(153 mg)を固体として得た。【０１３９】
製造例２３
(2S)-3-(4-ブロモフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル (484 mg)、シアン化亜鉛 (550 mg)、ビス（トリ-tert-ブチルホスフィン）パラジウム (0) (180 mg)、亜鉛粉末 (15 mg) 及びN,N-ジメチルアセトアミド (10 mL) の混合物を、アルゴン雰囲気下90℃で2時間撹拌した。反応混合物を130℃に昇温し、5.5時間加熱撹拌した。反応混合物を室温まで放冷した後、水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン:酢酸エチル=80:20〜40:60) で精製して、(2S)-3-(4-シアノフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル (88 mg) を油状物として得た。【０１４０】
製造例２４
(2S)-2-[(3S)-3-(2-アミノエチル)-4-{[(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)-1-(1-メチル-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}ピペラジン-1-イル]-3-(2-ナフチル)プロパン酸メチル二塩酸塩 (210 mg)、ホルムアルデヒド(37％水溶液、140 mg)及びジクロロメタン(6.00 mL)の混合物に室温にてトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム (184 mg)を加えた。室温にて12時間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた後、クロロホルムで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=99:1)で精製し、(2S)-2-{(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)-1-(1-メチル-6-オキソ-1,6-ジヒドロピリダジン-3-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-[2-(ジメチルアミノ)エチル]ピペラジン-1-イル}-3-(2-ナフチル)プロパン酸メチル (82.0 mg)を油状物として得た。【０１４１】
製造例２５
(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-カルボン酸メチル(275 mg)のジオキサン(3.0 mL)溶液にアルゴン雰囲気下で2-クロロ-5-(ジフルオロメチル)ピリジン(225 mg)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(0) (21 mg)、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',6'-ジイソプロポキシ-1,1'-ビフェニル(22 mg)、およびナトリウム tert-ブトキシド(275 mg)を加えた。反応混合物を100℃にて終夜攪拌した。室温まで放冷した後に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=10:0〜9:1)で精製し、(3S,4R)-1-[5-(ジフルオロメチル)ピリジン-2-イル]-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-カルボン酸(118 mg)を固体として得た。【０１４２】
製造例２６
(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)-1-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピロリジン-3-カルボン酸メチル(2.80 g)のテトラヒドロフラン(25 mL)-水(6 mL)混合溶液に水酸化リチウム一水和物(554 mg)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に氷冷下1M塩酸(14.0 mL)を加えた後に酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮し、(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)-1-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピロリジン-3-カルボン酸(2.69 g)を固体として得た。【０１４３】
製造例２７
(2S)-2-[(3R)-4-{[(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-(メトキシメチル)ピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸 tert-ブチル (90 mg)、1-ブロモ-4-フルオロベンゼン (33μL)、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム (0) (5 mg)、2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',6'-ジイソプロポキシ-1,1'-ビフェニル(5 mg)、ナトリウム tert-ブトキシド (37 mg) 及びジオキサン(2 mL)の混合物を、アルゴン雰囲気下100℃で終夜撹拌した。反応混合物を室温まで放冷した後、水を加え酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン:酢酸エチル=9:1〜1:1) で精製して、(2S)-2-[(3R)-4-{[(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)-1-(4-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-(メトキシメチル)ピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸 tert-ブチル (68 mg) を固体として得た。【０１４４】
製造例２８
2-ブロモ-1,3-チアゾール (555 mg)、(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-カルボン酸メチル (400 mg)、炭酸カリウム (459 mg)及びN,N-ジメチルホルムアミド (5 mL) の混合物を、100℃で2日間撹拌した。室温にて反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン:酢酸エチル=90:10〜50:50) で精製して、(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)-1-(1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-カルボン酸メチル(171 mg) を油状物として得た。【０１４５】
製造例２９
tert-ブチル 3-(4,4-ジメチルシクロヘキサ-1-エン-1-イル)-L-アラニナート(2.68 g)のエタノール(53.0 mL)溶液に室温で窒素雰囲気下、10%水酸化パラジウム担持炭素(540 mg)を加えた。反応懸濁液を室温で水素雰囲気下5時間撹拌した。反応懸濁液にセライトを加えた後、室温で15分撹拌した。反応混合物をセライト濾過し、濾液を減圧下濃縮した。残渣に室温で窒素雰囲気下エタノール(53.0 mL)、10%水酸化パラジウム担持炭素(540 mg)を加えた。反応懸濁液を室温で3気圧の水素雰囲気下15時間撹拌した。反応混合物をセライト濾過し、濾液を減圧下濃縮して、tert-ブチル 3-(4,4-ジメチルシクロヘキシル)-L-アラニナート一塩酸塩 (2.67 g)を固体として得た。【０１４６】
製造例３０
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸 tert-ブチル(70.0 mg)のテトラヒドロフラン(1.40 mL)溶液に氷冷下でトリエチルアミン(53μL)、および塩化シクロプロパンカルボニル(18μL)を加えた。反応混合物を室温に昇温し、1時間撹拌した。氷冷下で反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた後、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=10:0〜9:1)で精製し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-(シクロプロピルカルボニル)-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸 tert-ブチル (70.0 mg)を油状物として得た。【０１４７】
製造例３１
3-シクロプロピル-L-アラニン(2 g)のテトラヒドロフラン(5 mL)-水(17 mL)懸濁液に、氷冷下トリエチルアミン(7 mL)と2-ニトロベンゼンスルホニルクロリド(4.4 g)を加えた。反応混合物を室温に昇温し、22.5時間撹拌した。反応混合物を氷冷し、濃塩酸をpHが1程度になるまで加えた後に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール=10:0〜9:1)で精製し、3-シクロプロピル-N-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-L-アラニン(4.75 g)を固体として得た。【０１４８】
製造例３２
4-tert-ブチル-L-フェニルアラニン(1.00 g)の酢酸tert-ブチル(13 mL)懸濁液に氷冷下、過塩素酸(0.62 mL)を加えた。反応混合物を室温で15時間撹拌した。反応混合物に氷冷下1M水酸化ナトリウム水溶液(6.00 mL)を加えた後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えた。酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、tert-ブチル4-tert-ブチル-L-フェニルアラニナート(1.17 g)を油状物として得た。【０１４９】
製造例３３
テトラヒドロフラン(1.70 mL)-水(550μL)の混合液に、室温で1-tert-ブチル-4-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)ピロリジン-3-カルボン酸メチル(138 mg、製造例３５０)と水酸化リチウム一水和物(43 mg)を加えて室温で終夜撹拌した。反応混合物に室温で1M塩酸(1.1 mL)を加えた後に、反応混合物を減圧下濃縮した。得られた残渣とN,N-ジメチルホルムアミド(2 mL)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(322μL)、(2S)-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸tert-ブチル二塩酸塩(216 mg)、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート(233 mg)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート(44 mg)、(2S)-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸tert-ブチル二塩酸塩(50 mg)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(161μL)を加えて室温で1時間撹拌した。反応混合物に水を加えて酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール=10:0〜9:1)で精製し、(2S)-2-[(3S)-4-{[1-tert-ブチル-4-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸tert-ブチル(102 mg)を固体として得た。【０１５０】
製造例３４
氷冷した{2-[(4S)-4-ベンジル-2-オキソ-1,3-オキサゾリジン-3-イル]-2-オキソエチル}ホスホン酸ジエチル(2.10 g)、塩化リチウム(315 mg)及びアセトニトリル(42.0 mL)の混合物に、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(1.20 mL)を加え、同温にて10分間撹拌した。反応混合物に5-クロロ-2-ピリジンカルボキシアルデヒド (840 mg)を加えた後、室温に昇温し終夜撹拌した。反応混合物を水に注ぎ、室温にて1時間撹拌した。生じた固体を濾取し、水にて洗浄した。得られた固体を60℃にて減圧下乾燥することにより(4S)-4-ベンジル-3-[(2E)-3-(5-クロロピリジン-2-イル)プロパ-2-エノイル]-1,3-オキサゾリジン-2-オン(1.65 g)を固体として得た。【０１５１】
製造例３５
(4S)-4-ベンジル-3-{[1-tert-ブチル-4-(5-クロロピリジン-2-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-1,3-オキサゾリジン-2-オン(925 mg、製造例３５６)のメタノール(15.0 mL)溶液に、トリフルオロメタンスルホン酸サマリウム(III)(100 mg)を加え、室温にて終夜撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮した。得られた残渣を塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルムのみ)にて精製し、1-tert-ブチル-4-(5-クロロピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボン酸メチル(504 mg)を油状物として得た。【０１５２】
製造例３６
1-tert-ブチル-4-(5-クロロピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボン酸メチル(500 mg、製造例３５)とジオキサン(6.00 mL)の混合物に、室温にて濃塩酸(6.00 mL)を加えた。反応混合物を60℃にて6時間撹拌した。反応混合物を室温まで放冷後、減圧下濃縮した。得られた残渣にトルエンを加え、減圧下濃縮した。得られた残渣を2-プロパノールに溶解し、ジイソプロピルエーテルにて希釈した。混合物を室温にて1時間撹拌後、生じた固体を濾取した。得られた固体を50℃にて減圧下乾燥することで、1-tert-ブチル-4-(5-クロロピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボン酸一塩酸塩(493 mg)を固体として得た。【０１５３】
製造例３７
(2E)-3-(4-メトキシフェニル)アクリル酸(2.00 g)のジクロロメタン(35 mL)懸濁液に、室温でN,N-ジメチルホルムアミド(40μL)を加えた。アルゴン雰囲気下、氷冷した反応混合物に、オキサリルクロリド(2 mL)のジクロロメタン(10 mL)溶液を10分程度かけて滴下して加えた。反応混合物を室温に昇温し、終夜撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、得られた残渣をジクロロメタン（10 mL）に溶解した。この溶液を、アルゴン雰囲気下、氷冷した(4S)-4-ベンジル-1,3-オキサゾリジン-2-オン(2 g)と塩化リチウム(2.4 g)とトリエチルアミン(8 mL)のジクロロメタン(35 mL)の懸濁液に10分程度かけて滴下して加えた。反応混合物を室温に昇温し終夜撹拌した。反応混合物に、5％クエン酸水溶液を加えて、水層と有機層を分離した。水層をクロロホルムで抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール=100:0〜95:5)で精製し、(4S)-4-ベンジル-3-[(2E)-3-(4-メトキシフェニル)プロパ-2-エノイル]-1,3-オキサゾリジン-2-オン(2.93 g)を固体として得た。【０１５４】
製造例３８
(4S)-4-ベンジル-3-[(2E)-3-(4-メトキシフェニル)プロパ-2-エノイル]-1,3-オキサゾリジン-2-オン(400 mg)のジクロロメタン(4 mL)溶液に、室温でトリフルオロ酢酸(100μL)を加えた後、N-(メトキシメチル)-2-メチル-N-[(トリメチルシリル)メチル]プロパン-2-アミン(500 mg)のジクロロメタン(2 mL)溶液を加えて3日間撹拌した。反応混合物にN-(メトキシメチル)-2-メチル-N-[(トリメチルシリル)メチル]プロパン-2-アミン(200 mg)のジクロロメタン(2 mL)溶液を加えて終夜撹拌した。反応混合物にクロロホルムと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて、水層と有機層を分離した。水層をクロロホルムで抽出し、合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム:メタノール=10:0〜9:1)で精製し、(4S)-4-ベンジル-3-{[1-tert-ブチル-4-(4-メトキシフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-1,3-オキサゾリジン-2-オン(225 mg、先に溶出した画分)を固体として得た。また、ピロリジン３位と４位の立体配置が異なる単一異性体 (235 mg、製造例３８、後で溶出した画分)を固体として得た。【０１５５】
製造例３９
(4S)-4-ベンジル-3-{[1-tert-ブチル-4-(4-メトキシフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-1,3-オキサゾリジン-2-オン(231 mg、製造例３８、後で溶出した画分)のテトラヒドロフラン(3 mL)-水(1 mL)混合溶液に、氷冷下、水酸化リチウム一水和物(46 mg)を加えた。反応混合物を室温に昇温し2日間撹拌した。反応混合物を水で希釈して酢酸エチルを加えて水層と有機層を分離した。水層に1M塩酸(1.1 mL)を加えた後に水層を減圧下濃縮し、得られた残渣をエタノールで共沸し、1-tert-ブチル-4-(4-メトキシフェニル)ピロリジン-3-カルボン酸（252 mg）を固体として得た。【０１５６】
製造例４０
(2S)-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸 tert-ブチル(30.9 g)と酢酸エチル(200 mL)の混合物に氷冷下、塩化水素(４Mジオキサン溶液, 46.0 mL)を加えた。反応混合物を室温に昇温し、2時間撹拌した。生じた固体を濾過し、(2S)-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸 tert-ブチル二塩酸塩 (37.4 g)を固体として得た。【０１５７】
製造例４１
{2-[(4S)-4-ベンジル-2-オキソ-1,3-オキサゾリジン-3-イル]-2-オキソエチル}ホスホン酸ジエチル(548 mg)のテトラヒドロフラン(10 mL)溶液に氷冷下水素化ナトリウム(55% oil dispersion, 69 mg)を加え、同温で10分間撹拌した。反応混合物に3-フルオロ-4-ホルミルベンゾニトリル(209 mg)を同温で加えた後、室温まで昇温し、1時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチル、および水を加え分液し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=100:0〜95:5)で精製し、4-{(1E)-3-[(4S)-4-ベンジル-2-オキソ-1,3-オキサゾリジン-3-イル]-3-オキソプロパ-1-エン-1-イル}-3-フルオロベンゾニトリル(387 mg)を固体として得た。【０１５８】
製造例４２
4-クロロ-2-メチル-L-フェニルアラニン(1.00 g)のメタノール(10.0 mL)溶液に氷冷下で塩化チオニル(500μL)を加えた。反応混合物を60℃で、4時間撹拌した。反応混合物を室温まで放冷した後、減圧下濃縮した。得られた残渣にジエチルエーテルを加え、固体を濾取し、メチル 4-クロロ-2-メチル-L-フェニルアラニナート一塩酸塩(1.05 g)を固体として得た。【０１５９】
製造例４３
1-(ブロモメチル)-2,3-ジフルオロ-4-メチルベンゼン(1 g)のトルエン(10 mL)溶液に-50℃でtert-ブチル (E)-N-(4-クロロベンジリデン)-L-アラニナート(1.2 g)、  (R)-4,4-ジブチル-2,6-ビス(3,4,5-トリフルオロフェニル)-4,5-ジヒドロ-3H-ジナフト[2,1-c:1',2'-e]アゼピニウムブロミド(34 mg)、及び水酸化セシウム一水和物(3.8 g)を加えた。反応懸濁液を-17℃で20時間撹拌した。反応懸濁液に水を加えた。水層をジエチルエーテルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮して、tert-ブチル (E)-N-(4-クロロベンジリデン)-2,3-ジフルオロ-α,4-ジメチル-L-フェニルアラニナート(1.90 g)を油状物として得た。【０１６０】
製造例４４
(1S)-2-クロロ-1-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)エタノール(514 mg)のテトラヒドロフラン(5 mL)溶液に、10%水酸化ナトリウム水溶液(5 mL)を氷冷下加え、室温まで昇温し、3時間撹拌した。水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムにて乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン:酢酸エチル=10:1)で精製し、(2S)-2-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)オキシラン(316 mg)を油状物として得た。【０１６１】
製造例４５
2,2,2-トリフルオロエタノール(12 mL)に、氷冷下水素化ナトリウム(60% oil dispersion, 340 mg)を加え、20分撹拌した。反応混合物に、1-メチルシクロプロパンアミン一塩酸塩(1 g)を同温で加えた後、(2S)-2-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)オキシラン(1.39 g)の2,2,2-トリフルオロエタノール(5 mL)溶液を加えた。反応混合物を7日間撹拌した後、濃縮した。得られた残渣に酢酸エチル、および水を加え分液し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン:酢酸エチル=100:0〜0:100)で精製し、(1S)-1-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-2-[(1-メチルシクロプロピル)アミノ]エタノール(473 mg)を固体として得た。【０１６２】
製造例４６
6-ブロモ-5-フルオロインダン-1-オン (885 mg) 及びトリフルオロ酢酸 (10 mL) の混合物に、室温でトリエチルシラン (1.8 mL) を加え、80℃で3.5時間加熱撹拌した。反応混合物にトリエチルシラン (0.6 mL) を加え、80℃で更に1時間撹拌した後、室温で3日間撹拌した。反応混合物に水を加えヘキサンで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン:酢酸エチル=100:0〜90:10) で精製して、5-ブロモ-6-フルオロインダン (902 mg) を油状物として得た。【０１６３】
製造例４７
(2S)-2-[(tert-ブトキシカルボニル)アミノ]-3-(6-フルオロ-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸メチル (873 mg) 及び塩化水素(4Mジオキサン溶液, 10 mL)の混合物を室温で1時間撹拌した。溶媒を減圧下濃縮して、(2S)-2-アミノ-3-(6-フルオロ-2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸メチル一塩酸塩 (708 mg) を固体として得た。【０１６４】
製造例４８
(3R)-4-[3-(3,4-ジクロロフェニル)-1-メトキシ-1-オキソプロパン-2-イル]-3-メチルピペラジン-1-カルボン酸 tert-ブチル (266 mg、製造例２１、先に溶出した画分)とエタノール(10 mL)の混合物に、10%パラジウム担持炭素(50%含水、70 mg)をアルゴン雰囲気下にて加えた。反応混合物を3 atm水素雰囲気下、室温にて40時間撹拌した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣とエタノール(10 mL)の混合物に5%ロジウム担持炭素(50%含水、170 mg) をアルゴン雰囲気下にて加えた。反応混合物を3 atm水素雰囲気下、室温にて15時間撹拌した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (ヘキサン:酢酸エチル=10:0〜7:3)で精製し、油状物を得た。得られた油状物とジオキサン(500μL)の混合物に塩化水素(4Mジオキサン溶液, 500μL)を加え、室温で一日間撹拌した。反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮し、3-シクロヘキシル-2-[(2R)-2-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸メチル(49 mg)を油状物として得た。【０１６５】
製造例４９
4-メチルテトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミン一塩酸塩(2.5 g)とアセトニトリル(130 mL)の混合物に(クロロメチル)トリメチルシラン(8 mL)、炭酸カリウム(9.1 g)、ヨウ化カリウム(5.5 g)を加え、60℃にて2日間撹拌した。反応混合物を室温に冷却後、固体を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=19:1〜9:1)にて精製し、4-メチル-N-[(トリメチルシリル)メチル]テトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミン(1.74 g)を油状物として得た。
氷冷した37％ホルムアルデヒド水溶液(1.4 mL)に、炭酸カリウム(60 mg)を加えた後、メタノール(700μL)を加えた。反応混合物に4-メチル-N-[(トリメチルシリル)メチル]テトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミン(1.74 g)を10〜15分かけて滴下して加えた。反応混合物を氷冷にて1時間撹拌後、10〜15℃にて3時間撹拌した。反応混合物を再び氷冷し、炭酸カリウム(2.4 g)を加え氷冷にて1時間撹拌後、室温にて終夜撹拌した。反応混合物にジエチルエーテルを加え、飽和食塩水にて洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムにて乾燥し、不溶物を濾別した。濾液を減圧下濃縮(水浴21℃、100mbarまで)することで、N-(メトキシメチル)-4-メチル-N-[(トリメチルシリル)メチル]テトラヒドロ-2H-ピラン-4-アミンを含む油状物(1.48 g)を得た。
得られた油状物(1.47 g)、(4S)-4-ベンジル-3-[(2E)-3-(2,4-ジフルオロフェニル)プロパ-2-エノイル]-1,3-オキサゾリジン-2-オン(1 g)、及びジクロロメタン(10 mL)の混合物に、アルゴン雰囲気下トリフルオロ酢酸(350μL)のジクロロメタン (5 mL)溶液を室温にて滴下して加え、その後室温にて終夜撹拌した。反応混合物に飽和重曹水を加えた後、クロロホルムにて抽出し、有機層を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム:メタノール=10:0〜23:2)にて精製し、(4S)-4-ベンジル-3-{[4-(2,4-ジフルオロフェニル)-1-(4-メチルテトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-1,3-オキサゾリジン-2-オン(542 mg、先に溶出した画分)を油状物として得た。またピロリジン３位、４位の立体配置が異なる単一異性体(550 mg, 製造例４９、後に溶出した画分)を固体として得た。製造例３７２を得る反応には製造例４９を使用した。【０１６６】
製造例４１６
(4S)-4-ベンジル-3-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-1,3-オキサゾリジン-2-オン(135 mg)、テトラヒドロフラン(3 mL)、および水(0.6 mL)の混合物に、氷冷下水酸化リチウム一水和物(25 mg)を加えた。室温まで昇温後、1時間撹拌した。反応混合物に1M塩酸(0.61 mL)を加えた後、濃縮した。別の反応容器に(4S)-4-ベンジル-3-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-1,3-オキサゾリジン-2-オン(3.55 g)、テトラヒドロフラン(78 mL)、および水(15 mL)を加えた後、氷冷下水酸化リチウム一水和物(660 mg)を加えた。室温まで昇温後、1.5時間撹拌した。反応混合物に1M塩酸(16 mL)を加えた後、濃縮した。それぞれの反応で得られた残渣を合わせ、ODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー(水:アセトニトリル=9:1〜0:10)で精製した。得られた残渣にエタノールを加え、濃縮した。得られた残渣に塩化水素(4Mジオキサン溶液、5.8  mL)を加えた後、ジイソプロピルエーテルを加え、析出した固体を濾過した。得られた固体を40℃で減圧下乾燥し、(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-カルボン酸一塩酸塩(2.67 g)を固体として得た。【０１６７】
製造例４１７
(2S)-3-(4-ブロモ-2-フルオロフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-2-オキソピペラジン-1-イル}プロパン酸 tert-ブチル(2 g)、ジオキサン(20 mL)、および水(2.4 mL)の混合物にメチルボロン酸(206 mg)、リン酸三カリウム(2.06 g)、[1,1'-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]パラジウム(II)ジクロリド ジクロロメタン付加物(280 mg)を加え、アルゴン雰囲気中、マイクロウェーブ照射下100℃で1時間撹拌した。反応混合物をセライト濾過し、濾液を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:酢酸エチル=89:11〜20:80)で精製した。得られた油状物に酢酸エチル(1 mL)、ヘキサン(2 mL)を加え1時間撹拌後、ヘキサン(5 mL)を加えた。固体を濾過した後、減圧下乾燥し、(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]-2-オキソピペラジン-1-イル}プロパン酸 tert-ブチル(1.41 g)を固体として得た。【０１６８】
上記製造例に記載の方法と同様にして、後記表に示す製造例５０〜４１５、４１８〜４２１の化合物を製造した。
製造例化合物の構造を表６〜表４８に、物理化学的データ及び製造法を表４９〜６１にそれぞれ示す。【０１６９】
実施例１
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸メチル(2.28 g)のテトラヒドロフラン(40 mL)溶液に、水酸化リチウム一水和物(396 mg)の水(10 mL)溶液を室温で加え、室温で終夜撹拌した。1M塩酸（9.45 mL）を室温で加えた後、減圧下濃縮した。残渣に水（約5 mL）とエタノール（約5 mL）を加え撹拌し、得られた懸濁液に水(150 mL)を加え室温で2時間撹拌した。生じた固体を濾取した後、水で洗浄し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸(1.95 g)を結晶として得た。【０１７０】
実施例２
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4,6-ジメチルフェニル)プロパン酸 tert-ブチル(33.3 g)のジオキサン(60 mL)溶液に、濃塩酸（60 mL）を加え、50℃で2時間撹拌した。減圧下溶媒を留去し、残渣を酢酸エチルと水で希釈した。5M水酸化ナトリウム水溶液を加えpH=7.3 に調整し、酢酸エチルで抽出した。有機層をpH=7.3 に調整した飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた固体を90℃でエタノール:水(3:7)の混合溶媒(185 mL)に懸濁した後、エタノール(33 mL)を加え溶液とした。溶液を室温まで放冷し、生じた固体を濾取した。得られた固体をエタノール:水(1:2)の混合溶媒で洗浄した後、減圧下乾燥し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4,6-ジメチルフェニル)プロパン酸(27.5 g)を結晶として得た。【０１７１】
実施例３
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-メシチルプロパン酸メチル(29.8 g)のテトラヒドロフラン(595 mL)溶液に氷冷下水酸化リチウム一水和物(5.33 g)の水(149 mL)溶液を加えた。反応混合物を室温で1日間撹拌した。反応混合物に水酸化リチウム一水和物(3.2 g)を加えた。反応混合物を室温で4日間撹拌した。反応混合物を静置させ、有機層を分離した。有機層を減圧下濃縮し、残渣と水層を合わせた。水層に水(800 mL)を加えジエチルエーテル(300 mL)で洗浄した。水層に1M塩酸(200 mL)を加えてpH=6とし、反応混合物を室温で30分撹拌した。不溶物を濾別した後、濾液にエタノール(75 mL)、水(75 mL)を加え、室温で1日間撹拌した。析出した固体を濾別し、エタノール-水(1:1)の混合溶媒で洗浄後、減圧下乾燥して、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-メシチルプロパン酸(26 g)を結晶として得た。【０１７２】
実施例４
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸メチル(250 mg)のテトラヒドロフラン(3 mL)-水(0.7 mL)混合溶液に水酸化リチウム一水和物(45 mg)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に1M塩酸(1.08 mL)を加えた後に水を加え、クロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル(5 mL)に溶解し、塩化水素(4M酢酸エチル溶液, 0.3 mL)を加えた。反応混合物にヘキサンを加え撹拌した。析出した固体を濾取後、減圧下乾燥し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸二塩酸塩(215 mg)を固体として得た。【０１７３】
実施例５
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸 tert-ブチル(0.84 g)のジオキサン(7.4 mL)溶液に濃塩酸(7.4 mL)を加え、室温にて6時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、得られた残渣をジイソプロピルエーテルを用いて粉末化した。固体を濾過した後、減圧下乾燥し、 (2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2,3-ジヒドロ-1H-インデン-5-イル)プロパン酸二塩酸塩(0.77 g)を固体として得た。【０１７４】
実施例６
(2S)-2-[(3R,5S)-3,5-ジメチルピペラジン-1-イル]-3-(2-ナフチル)プロパン酸メチル(102 mg)、(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-カルボン酸 (89 mg)、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート(160 mg)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン (160μL) 及びN,N-ジメチルホルムアミド (2 mL) の混合物を、室温で3日間撹拌した。反応混合物にO-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート (80 mg) を加え、室温で更に4日間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム:メタノール=99:1〜90:10) で精製した。得られた油状物 (21 mg) とテトラヒドロフラン (2 mL) 及び水 (400μL) の混合物を氷冷した後、撹拌しながら水酸化リチウム一水和物 (10 mg) を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に水酸化リチウム一水和物 (10 mg) を加え、更に室温で終夜撹拌した。反応混合物に1M塩酸 (0.5 mL) を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム:メタノール=94:6〜80:20) で精製した。得られた残渣 (13 mg) にテトラヒドロフラン及び塩化水素(4Mジオキサン溶液, 100μL) を加え、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチル及びヘキサンを加え粉末化し、固体を濾取後、減圧下40℃で乾燥して、(2S)-2-[(3R,5S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3,5-ジメチルピペラジン-1-イル]-3-(2-ナフチル)プロパン酸二塩酸塩 (7.2 mg) を固体として得た。【０１７５】
実施例７
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(4-クロロ-2-メチルフェニル)プロパン酸二塩酸塩(100 mg)のエタノール(15 mL)混合溶液に10%パラジウム担持炭素(50%含水、100 mg)をアルゴン雰囲気下にて加えた。反応混合物を4 atm水素雰囲気下、室温にて24時間撹拌した。アルゴン雰囲気下へと置換した後、不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣にテトラヒドロフラン(4 mL)、塩化水素(4Mジオキサン溶液, 0.5 mL)を加えた。溶媒を減圧下濃縮し、得られた残渣にジエチルエーテルを加え粉末化した後、固体を濾取し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-メチルフェニル)プロパン酸二塩酸塩(93 mg)を固体として得た。【０１７６】
実施例８
3-ambo-(2S,3R)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(4-メチルフェニル)ブタン酸 tert-ブチル(504 mg)のジオキサン(4 mL)溶液に濃塩酸（4 mL）を加え、50℃で1時間撹拌した。反応混合物を1M水酸化ナトリウム水溶液でpH=7に中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥した。不溶物を濾別し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣をODSシリカゲルカラムクロマトグラフィー（水:メタノール=90:10〜20:80)で精製した。先に溶出した画分を濃縮し、ジオキサン(5 mL)及び塩化水素(4Mジオキサン溶液, 633μL) を加え、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチル及びヘキサンを加え、析出した固体を濾取後、減圧下乾燥して、(2S,3S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(4-メチルフェニル)ブタン酸 二塩酸塩 (190mg, 実施例８)を固体として得た。後で溶出した画分を濃縮し、ジオキサン(5 mL)及び塩化水素(4Mジオキサン溶液, 633μL) を加え、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチル及びヘキサンを加え、析出した固体を濾取後、減圧下乾燥して、(2S,3R)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-1-tert-ブチル-4-(2,4-ジフルオロフェニル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(4-メチルフェニル)ブタン酸二塩酸塩 (33 mg)を固体として得た。【０１７７】
実施例８７
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸(110 mg)のテトラヒドロフラン(5 mL)溶液に塩化水素(4Mジオキサン溶液, 107μL)を加え、室温で2時間撹拌した。析出した固体を濾取し、酢酸エチルで洗浄した。減圧下乾燥し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸二塩酸塩(102 mg)を固体として得た。【０１７８】
実施例１０１
(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-{(3S)-3-メチル-4-[(2-ニトロフェニル)スルホニル]ピペラジン-1-イル}プロパン酸メチル(23.47 g)、炭酸セシウム(47.8 g)、1-ドデカンチオール(35.2 mL)のアセトニトリル(188 mL)溶液を60℃にて16時間35分撹拌した。不溶物を濾過後、アセトニトリル(281.6 mL)にて洗浄した。濾洗液にn-ヘプタン(187.8 mL)、水(70.4 mL)を加え、1M 塩酸でpH 3.99に調整した。分液し、水層を分取した。水層をn-ヘプタン(187.8 mL)で4回洗浄後、酢酸イソプロピル(187.8 mL)、20%塩化ナトリウム水溶液(140.8 mL)を加え、20%炭酸カリウム水溶液でpH 9.03に調整した。分液し、有機層を20%塩化ナトリウム水溶液(140.8 mL)で洗浄後、減圧濃縮した。アセトニトリル(234.7 mL)を加えて減圧濃縮を行った後，再度アセトニトリル(234.7 mL)を加え、減圧濃縮を行った。(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸メチルをアセトニトリル濃縮液として得た。
得られた(2S)-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)-2-[(3S)-3-メチルピペラジン-1-イル]プロパン酸メチルのアセトニトリル濃縮液にアセトニトリル(211 mL)を加え、5℃にて(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-カルボン酸(17.65 g)、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(20.1 mL)、O-(7-アザ-1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-N,N,N',N'-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート(21.41 g)を加え、21時間30分撹拌した。トルエン(234.7 mL)と水(234.7 mL)を加えて分液し、有機層を分取した。有機層を水(234.7 mL)で2回、5%炭酸水素ナトリウム水溶液(234.7 mL)溶液で2回、20%塩化アンモニウム水溶液(234.7 mL)で2回、20%塩化ナトリウム水溶液(234.7 mL)で1回洗浄後、有機層を減圧濃縮した。濃縮液にメタノール(234.7 mL)を加え減圧濃縮を行った後，再度メタノール(234.7 mL)を加え、減圧濃縮を行った。(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸メチルをメタノール濃縮液として得た。
得られた(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸メチルのメタノール濃縮液に、メタノール(117 mL)、水酸化リチウム一水和物(5.14 g)の水(47 mL)溶液を加え、23.8〜24.3℃にて12時間40分撹拌した。トルエン(187.8 mL)を加え、分液し、水層を分取した。水層をトルエン(187.8 mL)で3回洗浄後、酢酸イソプロピル(187.8 mL)を加え，1M 塩酸でpH 6.51に調整後、20%塩化ナトリウム水溶液(117.4 mL)を加え、分液し、有機層を分取した。水層は酢酸イソプロピル(187.8 mL)で2回抽出し、得られた有機層は先の有機層と合わせた後、減圧濃縮した。濃縮液にエタノール(234.7 mL)を加え減圧濃縮を行った後，再度エタノール(234.7 mL)を加え、減圧濃縮を行った。濃縮液にエタノール(117.4 mL)、水(46.9 mL)を加え加熱溶解後、水(93.9 mL)を加え55℃で2時間30分撹拌した。水(187.8 mL)を加え50〜60℃にて1時間撹拌後、25℃に冷却し18時間55分撹拌後、1M 水酸化ナトリウム水溶液を加え、pH 6.48に調整した。5℃に冷却し3時間15分撹拌後、固体を濾取し、エタノールと水の混合溶液で洗浄した。減圧乾燥し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸(24.68 g)を固体として得た。
(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸(22.00 g)に1-プロパノール(211.2 mL)と水(52.8 mL)の混合液を加え、加熱溶解した。不溶物を濾去後、1-プロパノール(8.8 mL)と水(35.2 mL)の混合液で洗浄した。濾洗液に62℃にて水(352 mL)を滴下後、種晶を加え，61.5〜61.9℃にて37時間撹拌した。冷却し20℃で24時間撹拌後、水(220 mL)を滴下した。20℃で68時間撹拌後、10℃にて26時間撹拌した。固体を濾取し、1-プロパノール(8.8mL)と水(35.2 mL)の混合液で洗浄後、減圧乾燥し、(2S)-2-[(3S)-4-{[(3S,4R)-4-(4-クロロ-2-フルオロフェニル)-1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-4-イル)ピロリジン-3-イル]カルボニル}-3-メチルピペラジン-1-イル]-3-(2-フルオロ-4-メチルフェニル)プロパン酸(20.23 g)を結晶として得た。
２θ（°）＝13.7, 14.7, 16.0, 17.3, 18.4, 19.6, 20.4, 21.0, 21.6, 24.7, 26.1
なお、実施例１０１で用いた種晶は、種晶を用いずに同様の操作を行うことにより得ることができる。【０１７９】
上記実施例に記載の方法と同様にして、後記表に示す実施例９〜８６、８８〜１００の化合物を製造した。
実施例化合物の構造を表６２〜表７１に、物理化学的データ及び製造法を表７２〜７６にそれぞれ示す。【０１８０】
これらは、上記の製造法や実施例に記載の方法、及び当業者にとって自明である方法、又はこれらの変法を用いることにより、容易に製造することができる。
【０１８１】
【表６】
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【０１８２】
【表７】
2017022733.tif 000025
【０１８３】
【表８】
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【０１８４】
【表９】
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【０１８５】
【表１０】
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【０１８６】
【表１１】
2017022733.tif 000029
【０１８７】
【表１２】
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【０１８８】
【表１３】
2017022733.tif 000031
【０１８９】
【表１４】
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【０１９０】
【表１５】
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【０１９１】
【表１６】
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【０１９２】
【表１７】
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【０１９３】
【表１８】
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【０１９４】
【表１９】
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【０１９５】
【表２０】
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【０１９６】
【表２１】
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【０１９７】
【表２２】
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【０１９８】
【表２３】
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【０１９９】
【表２４】
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【０２００】
【表２５】
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【０２０１】
【表２６】
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【０２０２】
【表２７】
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【０２０３】
【表２８】
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【０２０４】
【表２９】
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【０２０５】
【表３０】
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【０２０６】
【表３１】
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【０２０７】
【表３２】
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【０２０８】
【表３３】
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【０２０９】
【表３４】
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【０２１０】
【表３５】
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【０２１１】
【表３６】
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【０２１２】
【表３７】
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【０２１３】
【表３８】
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【０２１４】
【表３９】
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【０２１５】
【表４０】
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【０２１６】
【表４１】
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【０２１７】
【表４２】
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【０２１８】
【表４３】
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【０２１９】
【表４４】
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【０２２０】
【表４５】
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【０２２１】
【表４６】
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【０２２２】
【表４７】
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【０２２３】
【表４８】
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【０２２４】
【表４９】
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【０２２５】
【表５０】
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【０２２６】
【表５１】
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【０２２７】
【表５２】
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【０２２８】
【表５３】
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【０２２９】
【表５４】
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【０２３０】
【表５５】
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【０２３１】
【表５６】
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【０２３２】
【表５７】
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【０２３３】
【表５８】
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【０２３４】
【表５９】
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【０２３５】
【表６０】
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【０２３６】
【表６１】
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【０２３７】
【表６２】
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【０２３８】
【表６３】
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【０２３９】
【表６４】
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【０２４０】
【表６５】
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【０２４１】
【表６６】
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【０２４２】
【表６７】
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【０２４３】
【表６８】
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【０２４４】
【表６９】
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【０２４５】
【表７０】
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【０２４６】
【表７１】
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【０２４７】
【表７２】
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【０２４８】
【表７３】
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【０２４９】
【表７４】
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【０２５０】
【表７５】
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【０２５１】
【表７６】
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【産業上の利用可能性】
【０２５２】
式（Ｉ）の化合物又はその塩は、MC4受容体アゴニスト活性を有する化合物であり、膀胱・尿路系疾患、殊に、低活動膀胱、低緊張性膀胱、無収縮膀胱、排尿筋低活動、神経因性膀胱、尿道弛緩不全、排尿筋-外尿道括約筋協調不全及び前立腺肥大症における排尿障害の予防又は治療用医薬組成物の有効成分として使用できる。
【国際調査報告】
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