(57)【要約】  本発明は、薬効、効能の効果発現が早く寛解維持期間が長い新規ペプチド、これを含む医薬や外用剤、特に皮膚炎、肌荒れ、鼻炎、脱毛症、薄毛に対する予防または治療剤や発毛剤、育毛剤、鎮痒剤、スキンケア用品などを提供することを目的とする。本発明は、式Ｉで表されるアミノ酸配列を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩を提供することにより、上記目的が達された。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：【化１】
2017022728.tif 000075
式中、Ｘ１は、ＧｌｙまたはＡｌａを示し、Ｘ２は、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＭｅｔを示し、Ｘ３は、ＩｌｅまたはＶａｌを示し、Ｘ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕを示し、Ｘ５は、Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＡｌａを示し、Ｘ６は、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ＭｅｔまたはＰｈｅを示し、２つのＣｙｓを結ぶ線は、ジスルフィド結合を表す、で表されるアミノ酸配列を有し、  当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
配列番号６０〜６２から選択される、請求項１に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
配列番号２２〜３１、４２〜４７および５４〜５６から選択される、請求項１に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
配列番号６〜２１、３２〜４１、４８〜５３および５７〜５９から選択される、請求項１に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
誘導体が環状ペプチド中の水素原子、水酸基、カルボキシ基、アミノ基、イミノ基に対して置換可能な置換基で置換されたものである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
請求項４に記載の環状ペプチド中のアミノ酸の１以上６以下を欠失させるか、他のアミノ酸で置換または付加することにより形成され、かつ前記各式で表される環状ペプチドと同等の機能を有する環状ペプチドもしくはその誘導体またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を１種以上含む、外用剤。
【請求項８】
皮膚炎治療剤、皮膚炎予防剤、鎮痒剤、消炎剤、表皮再生促進剤またはスキンケア用品の材料である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項９】
スキンケア用品が、保湿用および／または肌荒れ防止・改善用および／または敏感肌防止・改善用および／または乾燥肌防止・改善用および／または皮脂改善・ニキビケア用および／または刺激緩和・抗炎症用および／または美白用および／または老化防止用および／またはシワ・たるみおよび／またはくすみ・くま防止・改善用および／または光線過敏症防止・改善用および／または紫外線傷害予防・緩和用および／またはスリミング用および／または皮膚清浄用である、請求項８に記載の外用剤。
【請求項１０】
入浴剤、身体洗浄剤、頭髪用洗浄剤、リンス・トリートメント、トニック、ヘヤオイル、ヘアローション、スカルプケア剤である、請求項８に記載の外用剤。
【請求項１１】
脱毛症治療剤、脱毛症予防剤、育毛剤および／または発毛剤および／または抜け毛予防剤・防止剤、抜け毛予防化粧料、である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１２】
フケやかゆみの予防・改善用および／または毛髪、頭皮の乾燥改善・予防用および／または頭皮の脂漏性の改善・予防用のスカルプケア剤である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１３】
鼻炎治療剤および／または鼻炎予防剤および／または副鼻腔炎治療剤および／または副鼻腔炎予防剤である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１４】
化粧料である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１５】
剤形が、固形剤、半固形剤、粉末剤、液剤、スプレー剤、軟膏剤、クリーム剤、乳液剤、ゲル剤または貼付剤である、請求項７〜１４のいずれか一項に記載の外用剤。
【請求項１６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の環状ペプチド／およびもしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容な塩を０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬの濃度で含む、請求項７〜１５のいずれか一項に記載の外用剤。
【請求項１７】
医薬品、医薬部外品または化粧品として用いられる、請求項７〜１６のいずれか一項に記載の外用剤。
【請求項１８】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩の外用剤の製造のための使用。
【請求項１９】
請求項７〜１７のいずれか一項に記載の外用剤を、対象の皮膚および／または粘膜に適用することを含む、外用剤の使用方法。
【請求項２０】
粘膜が口唇、口腔、鼻腔、眼または膣である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２１】
皮膚炎の治療および／もしくは予防方法、痒みの軽減もしくは消失方法、びらん、潰瘍の治療方法またはスキンケア方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２２】
湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、光線過敏症、乾癬、ざ瘡、嚢胞性ざ瘡、脂漏性湿疹、および痒みからなる群から選択される皮膚炎の治療および／または予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２３】
肌荒れ、敏感肌、乾燥肌、脂性肌、光線過敏症、しわ、たるみ、くすみ、ふけおよび痒みの改善、および予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２４】
薄毛、脱毛症の治療および／もしくは予防方法ならびに／または発毛方法ならびに／または育毛方法、抜け毛防止および／もしくは予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２５】
フケやかゆみの防止・予防方法、および／もしくは毛髪、頭皮の乾燥を改善・予防方法、および／もしくは頭皮の脂漏性の予防・改善方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２６】
鼻炎、副鼻腔炎の治療および／または予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２７】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩を１種以上含む、医薬。
【請求項２８】
高血圧症、不安定狭心症、急性心筋梗塞、浮腫性疾患、腎不全、心不全、免疫疾患、自己免疫疾患、アレルギー疾患、癌、消化器系疾患、クローン病 、潰瘍性大腸炎、肥満、メタボリックシンドロームの治療薬である、請求項２７に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、ＣＮＰ環状ペプチド並びに該環状ペプチドを含む医薬品、外用剤および化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】  ヒトＮＰファミリーであるＣＮＰ（Ｃ型ナトリウム利尿ペプチド：C-type natriuretic peptide）は、同じファミリーに分類されるＡＮＰやＢＮＰとは異なり、心臓では産生されず、脳で特異的に産生されていることが知られている。またＡＮＰやＢＮＰに比べてナトリウム利尿利用および血圧降下作用は弱いが、血管平滑筋細胞等における細胞内の環状グアノシン一リン酸（Cyclic guanosine monophosphate、ｃＧＭＰ）を上昇させる効果が強いことが知られており（非特許文献１）、その生理的な役割については、体液量や血圧のホメオスタシス維持以外の別の役割を担っていると考えられている。【０００３】  ＣＮＰは、構成されるアミノ酸が個体種において、高度に保存され、その差がほぼなく、またその構造は、環状部分と尾部とを共通構造として有していることが知られている。この点、血管平滑筋細胞内のｃＧＭＰを上昇せるための最小活性構造は、ＣＮＰの環状部分（以下、単にＣ環と称することがある）であることが示されており、種々のＣＮＰ変異体、誘導体が報告されている（特許文献１および６）。  近時、こうしたＣＮＰを利用した治療薬や治療方法がいくつか知られているところであり（特許文献１〜５）、中にはＣＮＰ環状ペプチドが関節炎に有効であるとの報告もされている（特許文献６）。【０００４】  しかるに、皮膚炎において、その治療法にはステロイドやタクロリムスなどの使用が現在でも主流であるが、長期外用による皮膚萎縮、皮疹が広範囲な症例では副腎機能不全を来す可能性が高まることや、免疫抑制効果により感染症のリスク増加などの強い副作用があることから、幼児や人によってはその使用がためらわれるものの、結局のところ、そうした強い副作用に耐え忍びつつ、病状を抑えるため使用させざるを得ないという実情がある。この点、ＣＮＰを含む皮膚炎治療剤は、こうした副作用もなく、さらにその症状をてきめんに抑えることができることが報告されている（特許文献２〜４）。また、鼻炎においても、ステロイドが多用されているところ、その副作用の割には、治療効果が短く、期待していたほどの効果が得られない症例が散見される一方で、ＣＮＰを含む鼻炎治療剤では、効果持続時間が長く、またその副作用がないことが報告されている（特許文献２〜４）。さらに、脱毛症においても、種々の薬剤が用いられているが、いずれも、期待される以上の効果を発揮することができないものの、ＣＮＰを含む脱毛症治療剤においては、有意な発毛や育毛効果があることが実証されている（特許文献２〜４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許２８０９５３３号公報
【特許文献２】国際公開第２０１０／０６２４５９号
【特許文献３】国際公開第２０１１／０６４６４４号
【特許文献４】国際公開第２０１１／０２４９７３号
【特許文献５】米国特許第７２７６４８１号明細書
【特許文献６】米国特許出願公開第２００７／０１９７４３４号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Furuya M, Takehisa M, Minamitake Y, Kitajima Y, Hayashi Y, Ohnuma N, Ishihara T, Minamino N, Kangawa K, Matsuo H Biochem Biophys Res Commun. 1990 Jul 16;170(1):201-8.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】  上述したようにＣＮＰおよびＣＮＰ環状ペプチドは、関節炎などの各種疾患の治療等に有用な物質であると考えられている。しかしながら、従来に比べ高い治療、処置効果を得るために、より一層薬効、効能の強い物質や、さらに即効性や持続性に優れた物質の開発が求められる。また、従来に比べより安価な製剤が求められている。【０００８】  ところで、薬効、効能の持続性、即効性をより一層高めることは、必要な処置回数・頻度を減らす、患者や使用者の苦痛を和らげ、生活の質を向上させ、日常における精神的・身体的・社会的・な満足度を改善する（ＱＯＬ：quality of life）といった観点から、非常に有意義である。例えば、皮膚炎は、患部に痒み、紅斑、ほてりといった症状を伴う場合や、乾癬のように厚い鱗屑を伴う紅斑が全身に見られる疾患では、外見上の問題とともに鱗屑が剥がれ落ちＱＯＬが著しく損なわれる場合が多いが、迅速にこれらの症状を緩和することができれば、患者の苦痛が軽減される。また、鼻炎は、鼻閉、鼻漏症状を伴うことが多く、迅速にこれらの症状を抑えることができれば、稔鼻回数の減少などにつながり、患者の不快感の減少をもたらす。さらに、薄毛改善剤、脱毛症治療剤、育毛剤、発毛剤を使用する場合、迅速に治療、発毛、育毛効果、抜け毛抑制効果が発現すれば、使用者のＱＯＬを高めることが可能である。【０００９】  本発明者らは、これらの点に着目し、ＣＮＰの構造を参考に新規の物質および新規の用途の探索を試みた。  したがって、本発明の目的は、新規物質の提供と、従来に比べ薬効、効能の強い新規ペプチド、これを含む医薬や外用剤、特に皮膚炎、鼻炎、脱毛症に対する予防または治療剤や発毛剤、育毛剤、鎮痒剤、化粧料、スキンケア用品などを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】  従来、平滑筋細胞において、環状ＣＮＰがｃＧＭＰの最小活性構造であることは知られていたが、当該環状ＣＮＰの物性値は明らかではない。また、ＣＮＰに種々の改変を加えた治療薬が存在するが、本発明者は、必ずしも活性値が高くはないとされるＣＮＰの環部のみに敢えて着目し、尾部を欠失させて得られる環状ペプチドについて鋭意研究を行う中で、ＣＮＰ環状をベースにした新規物質を創製し、かかる環状ペプチドによる効能、薬効が高いこと、効果の発現が早いこと、効果の持続性が上がること等の全く新しい知見を得ることができ、さらに研究をつづけた結果、本発明を完成するに至った。  すなわち、本発明は以下に関する。【００１１】［１］  式Ｉ：【化１】
2017022728.tif 000002
式中、Ｘ１は、ＧｌｙまたはＡｌａを示し、Ｘ２は、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＭｅｔを示し、Ｘ３は、ＩｌｅまたはＶａｌを示し、Ｘ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕを示し、Ｘ５は、Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＡｌａを示し、Ｘ６は、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ＭｅｔまたはＰｈｅを示し、２つのＣｙｓを結ぶ線は、ジスルフィド結合を表す、で表されるアミノ酸配列を有し、  当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。［２］  配列番号６０〜６２から選択される、［１］に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。［３］  配列番号２２〜３１、４２〜４７および５４〜５６から選択される、［１］に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。［４］  配列番号６〜２１、３２〜４１、４８〜５３および５７〜５９から選択される、［１］に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。［５］  誘導体が環状ペプチド中の水素原子、水酸基、カルボキシ基、アミノ基、イミノ基に対して置換可能な置換基で置換されたものである、［１］〜［４］のいずれか一項に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【００１２】［６］  ［４］に記載の環状ペプチド中のアミノ酸の１以上６以下を欠失させるか、他のアミノ酸で置換または付加することにより形成され、かつ前記各式で表される環状ペプチドと同等の機能を有する環状ペプチドもしくはその誘導体またはその薬学的に許容可能な塩。［７］  ［１］〜［６］のいずれか一項に記載の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を１種以上含む、外用剤。［８］  皮膚炎治療剤、皮膚炎予防剤、鎮痒剤、消炎剤、表皮再生促進剤またはスキンケア用品の材料である、［７］に記載の外用剤。［８］  スキンケア用品が、保湿用および／または肌荒れ防止・改善用および／または敏感肌防止・改善用および／または乾燥肌防止・改善用および／または皮脂改善・ニキビケア用および／または刺激緩和・抗炎症用および／または美白用および／または老化防止用および／またはシワ・たるみおよび／またはくすみ・くま防止・改善用および／または光線過敏症防止・改善用および／または紫外線傷害予防・緩和用および／またはスリミング用および／または皮膚清浄用である、［８］に記載の外用剤。［１０］  入浴剤、身体洗浄剤、頭髪用洗浄剤、リンス・トリートメント、トニック、ヘヤオイル、ヘアローション、スカルプケア剤である、［８］に記載の外用剤。【００１３】［１１］  脱毛症治療剤、脱毛症予防剤、育毛剤および／または発毛剤および／または抜け毛予防剤・防止剤、抜け毛予防化粧料、である、［７］に記載の外用剤。［１２］  フケやかゆみの予防・改善用および／または毛髪、頭皮の乾燥改善・予防用および／または頭皮の脂漏性の改善・予防用のスカルプケア剤である、［７］に記載の外用剤。［１３］  鼻炎治療剤および／または鼻炎予防剤および／または副鼻腔炎治療剤および／または副鼻腔炎予防剤である、［７］に記載の外用剤。［１４］  化粧料である、［７］に記載の外用剤。［１５］  剤形が、固形剤、半固形剤、粉末剤、液剤、スプレー剤、軟膏剤、クリーム剤、乳液剤、ゲル剤または貼付剤である、［７］〜［１４］のいずれか一項に記載の外用剤。［１６］  ［１］〜［５］のいずれか一項に記載の環状ペプチド／およびもしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容な塩を０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬの濃度で含む、［７］〜［１５］のいずれか一項に記載の外用剤。［１７］  医薬品、医薬部外品または化粧品として用いられる、［７］〜［１６］のいずれか一項に記載の外用剤。【００１４】［１８］  ［１］〜［５］のいずれか一項に記載の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩の外用剤の製造のための使用。［１９］  ［７］〜［１７］のいずれか一項に記載の外用剤を、対象の皮膚および／または粘膜に適用することを含む、外用剤の使用方法。【００１５】［２０］粘膜が口唇、口腔、鼻腔、眼または膣である、［１８］に記載の外用剤の使用方法。［２１］  皮膚炎の治療および／もしくは予防方法、痒みの軽減もしくは消失方法、びらん、潰瘍の治療方法またはスキンケア方法である、［１８］に記載の外用剤の使用方法。［２２］  湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、光線過敏症、乾癬、��瘡、嚢胞性ざ瘡、脂漏性湿疹、および痒みからなる群から選択される皮膚炎の治療および／または予防方法である、［１８］に記載の外用剤の使用方法。［２３］  肌荒れ、敏感肌、乾燥肌、脂性肌、光線過敏症、しわ、たるみ、くすみ、ふけおよび痒みの改善、および予防方法である、［１８］に記載の外用剤の使用方法。［２４］  薄毛、脱毛症の治療および／もしくは予防方法ならびに／または発毛方法ならびに／または育毛方法、抜け毛防止および／もしくは予防方法である、［１８］に記載の外用剤の使用方法。［２５］  フケやかゆみの防止・予防方法、および／もしくは毛髪、頭皮の乾燥を改善・予防方法、および／もしくは頭皮の脂漏性の予防・改善方法である、［１８］に記載の外用剤の使用方法。［２６］  鼻炎、副鼻腔炎の治療および／または予防方法である、［１８］に記載の外用剤の使用方法。【００１６】［２７］  ［１］〜［５］のいずれか一項に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩を１種以上含む、医薬。［２８］  高血圧症、不安定狭心症、急性心筋梗塞、浮腫性疾患、腎不全、心不全、免疫疾患、自己免疫疾患、アレルギー疾患、癌、消化器系疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、肥満、メタボリックシンドロームの治療薬である、［２７］に記載の医薬。【００１７】  本発明により、新規な環状ペプチド、これを含む組成物を提供することができる。かかる組成物は、皮膚炎、鼻炎、脱毛症に対する予防または治療用の外用剤、さらには発毛剤、育毛剤、抜け毛予防剤、鎮痒剤などに適用され、いずれも医薬、医薬部外品、スキンケア用品、化粧品などとして提供される。【００１８】  本発明の外用剤は、皮膚炎に対する有効性が概して従来のステロイド外用剤やＣＮＰよりも顕著であり、しかも、症状が概して３分以内に改善され始める等のこれらの製剤・物質より優れた即効性を有し、その効果もより大きく、かつ持続性が有りより寛解期間が長い。【００１９】  また、本発明の外用剤は、皮膚炎に罹患した対象の皮膚または粘膜上に適用した場合において、皮膚炎によって生じるまたは生じ得る掻痒感、痛み（疼痛）、熱感、突っ張り感、浸潤、紅斑等の知覚可能な各種症状、状態を迅速に軽快もしくは消失させつつ、他覚的な皮膚炎の症状を改善することができる。【００２０】  さらに、本発明の外用剤は、適用部位において保湿効果を発揮するとともに、適用部位に角質層が存在する場合には適用部位の肌理を整える効果を発揮し、肌理が整い、乾燥肌や肌荒れが改善され、肌質が柔らかく、しっとりとし、しわが浅くなって目立たなくなる、光線過敏症を予防する、しわやたるみを防止・改善する、くすみ・くまを防止・改善する、さらには唇の荒れを改善するといった効果を発揮することができる。【００２１】  また、本発明の外用剤は、頭皮に適用した場合において、適用部位における脱毛を防止するとともに発毛または育毛を促進させ、抜け毛を予防し、毛を太くする効果を有する。この場合において、発毛する毛髪は硬毛となりやすく、白髪ではない髪となりやすい傾向にある。また、これらの効果は、従来脱毛症治療剤において用いられた他の活性成分、例えばＣＮＰと比較して早期に発現し、得られる効果も大きい。さら���、男性型脱毛症、女性型脱毛症のＭ型、Ｏ型のいずれの症状においても、毛を太くし、早く育毛し、薄毛が改善されるという効果も顕著である【００２２】  さらにまた、本発明の外用剤は、鼻炎に対しても即効性を有し、その効果も大きく、かつ持続性が有り寛解期間が長い。【００２３】  なお、本発明の環状ペプチドは、もともと体内に備わるホルモンであるＣＮＰとその構造に共通部分を有するペプチドであることから、副作用の心配が少ないと考えられ、副作用は今まで発見・報告されていない。また、主に皮膚投与であるため、分子量の大きく（＞５００Ｄ）疎水性ではないＣＮＰ環が体内に吸収される量は、ごく少量であると考えられる。すなわち、適正な使用量である限りあるいは皮膚などに外用する際には全身性副作用や血行動態に対する影響が軽微であると推測される。そのため、長期に亘って投与が必要な患者、例えば慢性的皮膚炎患者などに対しても長期的に投与することができる。また、本発明の外用剤は、外用した際に刺激感が少ないことから、皮膚が敏感な人に対し、特に過敏な部位である顔面や首などにも適用することができる。また、妊婦や授乳中の人にも適応できる。【００２４】  また、上記環状ペプチドは、皮膚炎治療／予防剤、鼻炎治療／予防剤、脱毛症治療／予防剤、育毛剤、発毛剤、抜け毛治療剤／予防剤、鎮痒剤等の外用剤の成分としても用いることができる。さらに、スキンケア用品、医薬部外品、化粧品の材料としても用いることができる。なお、上記ＣＮＰの活性を利用する医薬、例えば、高血圧症、不安定狭心症、急性心筋梗塞、浮腫性疾患、腎不全、心不全、免疫疾患、自己免疫疾患、アレルギー疾患、癌、消化器系疾患、肥満、メタボリックシンドロームの治療のための医薬において、ＣＮＰの代替として上記環状ペプチドを使用することにも、もちろん可能である。さらに、上記環状ペプチドは、ＣＮＰよりも小さいペプチドのため、製造費用が定価で、これを利用した製剤をＣＮＰに比べ安価に提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】乾癬を発症する患者（Ｐ６）の下腿に左右塗り分け法によりＣ環とＣＮＰゲル製剤をそれぞれぬり分けた結果を示す図である。
【図２】男性型ＡＧＡ（Ｍ型およびＯ型）を発症する患者（Ａ１１）に、Ｃ環ゲル製剤を塗布する前と塗布した後の結果を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【００２６】  以下、本発明を好適な実施形態に基づき詳細に説明する。なお、本明細書でいうＣＮＰ環状ペプチド（以下、「ＣＮＰ環状ペプチド」、「Ｃ環」または「Ｃ環化合物」ということがある）は、前記のとおり野生型ＣＮＰから誘導されるものであるが、野生型ＣＮＰとしては、ヒト由来のそればかりでなく、ヒト野生型ＣＮＰと同一の配列を有する種、例えば限定されないが、サル、ブタ、トリ、ラット由来などのものが包含される。したがって、Ｃ環ペプチドとしても、ヒト由来のそればかりでなく、例えば限定されないが、サル、ブタ、トリ、ラット由来などのものも包含され、それらは当然に本発明の効果を代用できることはいうまでもない。  さらに、本発明の環状ペプチドは、前記環状ペプチドを変異させたものも含む。すなわち、本発明の変異体は、ＣＮＰ活性を有する限り、環状ペプチド中のアミノ酸を欠失させるか、他のアミノ酸で置換または付加することより得ることができる。
【００２７】１．環状ペプチド、その誘導体およびこれらの薬学的に許容可能な塩  まず、本発明の環状ペプチド、その誘導体およびこれらの薬学的に許容可能な塩について説明する。
【００２８】    式Ｉ：【化２】
2017022728.tif 000003
（配列番号１）式中、Ｘ１は、ＧｌｙまたはＡｌａを示し、Ｘ２は、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＭｅｔを示し、Ｘ３は、ＩｌｅまたはＶａｌを示し、Ｘ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕを示し、Ｘ５は、Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＡｌａを示し、Ｘ６は、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ＭｅｔまたはＰｈｅを示し、２つのＣｙｓを結ぶ線は、ジスルフィド結合を表す、で表されるアミノ酸配列を有し、  当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドである。
【００２９】  さらに本発明の別の態様において、本発明は、ＣＮＰ活性有する、配列番号１のアミノ酸配列であり、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドである。なお、配列番号１のアミノ酸配列から、配列番号３のアミノ酸配列を除くこともできる。
【００３０】  このような環状ペプチドは、ＣＮＰと同様に、グアニル酸シクラーゼドメインを有する受容体ＮＰＲ−Ｂ（別名ＧＣ−Ｂ）と結合してｃＧＭＰの産生を促進することから、例えば、利尿作用、血管拡張作用、レニン・アルドステロン分泌抑制、交感神経抑制、肥大の抑制などの作用を有するものと推測される。
【００３１】  また本発明の別の態様は、    式Ｉ：【化３】
2017022728.tif 000004
（配列番号１）式中、Ｘ１は、ＧｌｙまたはＡｌａを示し、Ｘ２は、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＭｅｔを示し、Ｘ３は、ＩｌｅまたはＶａｌを示し、Ｘ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕを示し、Ｘ５は、Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＡｌａを示し、Ｘ６は、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ＭｅｔまたはＰｈｅを示し、２つのＣｙｓを結ぶ線は、ジスルフィド結合を表す、で表されるアミノ酸配列を有し、  ただし、式ＩＩ：
【化４】
2017022728.tif 000005
式中、２つのＣｙｓを結ぶ線は、ジスルフィド結合を表す、で表されるアミノ酸配列からなる、環状ペプチド（配列番号３）を除き、  当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩である。
【００３２】  また、上記環状ペプチドは、上記式（Ｉ）において、Ｘ１は、Ｇｌｙを示し、かつ、  Ｘ３は、Ｉｌｅを示す環状ペプチド（配列番号２）であることが好ましい。  さらに、本発明の環状ペプチドは、式（Ｉ）で表されるアミノ酸配列が、【化５】
2017022728.tif 000006
（配列番号３）式中、２つのＣｙｓを結ぶ線は、ジスルフィド結合を表す、で表されるアミノ酸配列からなる、環状ペプチドであることがより好ましい。式（ＩＩ）で表されるアミノ酸配列は、ＣＮＰの環状部分である（以下、ＣＮＰ−１７と称することがある）。すなわち、ヒト野生型ＣＮＰ（以下、ＣＮＰ−２２と称することがある）である、Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（配列番号４）であるところ、当該ペプチドは、ヒト野生型ＣＮＰのＮ末端から数えて６番目のＣｙｓから２２番目のＣｙｓまでのペプチドに該当するものである。
【００３３】  なお、本発明の別の態様において、式（ＩＩ）で表されるアミノ酸配列（配列番号３）を、式（Ｉ）で表されるアミノ酸配列からなるペプチド（配列番号１）から除くこともできる。
【００３４】  また本発明の別の態様において、配列番号６０〜６２から選択されるアミノ酸配列を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。なお、本発明の別の態様において、配列番号６０〜６２から選択されるアミノ酸配列（但し、配列番号３のアミノ酸配列を除く）を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３５】  さらに本発明の別の態様において、配列番号５４〜５６から選択されるアミノ酸配列を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。なお、本発明の別の態様において、配列番号５４〜５６から選択されるアミノ酸配列（但し、配列番号３のアミノ酸配列を除く）を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３６】  さらに本発明の別の態様において、配列番号４２〜４７から選択されるアミノ酸配列を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。なお本発明の別の態様において、配列番号４２〜４７から選択されるアミノ酸配列（但し、配列番号３のアミノ酸配列を除く）を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３７】  さらには本発明の別の態様において、配列番号２２〜３１から選択されるアミノ酸配列を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。なお本発明の別の態様において、配列番号２２〜３１から選択されるアミノ酸配列（但し、配列番号３のアミノ酸配列を除く）を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３８】  また本発明の別の態様において、配列番号６〜２１、配列番号３２〜４１、配列番号４８〜５３および配列番号５７〜５９から選択されるアミノ酸配列を有し、当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３９】  また、本発明の環状ペプチド中のアミノ酸の欠失、他のアミノ酸で置換または付加は、それぞれ独立して、同時に起こってもよいのは言うまでもない。
【００４０】  なお、以上の環状ペプチド変異体は、ＣＮＰ受容体への結合を維持し、またはさらに強くなるような構造的変化を起こすものであれば、該環状ペプチド中のアミノ酸をさらに欠失、置換または付加することができるが、その数は、例えば１、２、３、４、５、６、さらに６以上でも、ＣＮＰ活性を保持していればよい。  
【００４１】  また、前記欠失、置換または付加によるアミノ酸配列の相同性は、上記の変異体の環状ペプチドに対して、７０％、好ましくは８０％、より好ましくは９０％以上の相同性を有する環状ペプチドであってもよい。さらに、活性を保持する限り、その相同性は、この範囲に限らない。
【００４２】  さらに、置換可能なアミノ酸としては、ＣＮＰの機能（活性）を保持していれば、本発明のＣ環ペプチドを構成する任意のアミノ酸を、任意のアミノ酸へ置換してもよい。なお、置換可能なアミノ酸としては、Ｃ環ペプチドを構成するグリシン、ロイシン、アスパラギン酸、イソロイシン、グリシン、セリンであり、これらをアラニン、メチオニン、バリン、トレオニン、イソロイシン、ロイシン、フェニルアラニンへ置換することが可能である。
【００４３】  また、他のアミノ酸で置換し得る、アミノ酸は、環状ペプチド（式Ｉ）でいえば、以下の表２７、表２８のように例示することができるがこれらに限定されるものではない
【００４４】  なお、１アミノ酸が置換された環状ペプチドは、例えば配列番号６〜２１等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。また２アミノ酸が置換された環状ペプチドは、例えば配列番号３２〜４１等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。さらに３アミノ酸が置換された環状ペプチドは、例えば配列番号４８〜５３等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。さらには、４アミノ酸が置換された環状ペプチドは、例えば配列番号５７〜５９等が挙げられるが、これらに限定されるものではない。また、配列番号１または６０〜６２等の環状ペプチドに対し、上記したアミノ酸を適宜組み合わせることで、５以上のアミノ酸を置換することができる。なお配列番号１等に記載された、変異してもよいアミノ酸箇所にとらわれずに、適宜他のアミノ酸を改変することもできる。
【００４５】  さらに、本発明は、上記の変異体であって、なおかつそれらの誘導体であってもよい。したがって、本発明の効果を有する限り、いかなる変異体またはその誘導体も、本発明に係る環状ペプチドに包含される。また別の態様では、少なくともＣＮＰ活性を有する環状ペプチドであってもよい。なお、ＣＮＰ活性を有するとは、ナトリウム利尿ペプチド受容体（例えば、ＧＣ−Ａ、ＧＣ−Ｂ）に２０％以上結合活性を有する場合をいう。また、上記ＣＮＰ活性測定は常法に従うことができる。
【００４６】  なお、本発明の環状ペプチドの活性を向上させること、本発明の効果を持続させること、および／または本発明の環状ペプチドの保存安定性を増加させること等を目的として、本発明の環状ペプチドまたはこれを構成するアミノ酸を適宜改変することができる。例えば、本発明の環状ペプチドのアミノ酸等への化学修飾等を行うこと、環状ペプチドを構成する一部のアミノ酸を欠失させること、他のアミノ酸等へ置換することおよび／または新たなアミノ酸を付加させることができる。
【００４７】  本発明の環状ペプチドは、前記の環状ペプチドを誘導体化したものを含むが、このような誘導体は、活性物質としてそのまま用いることができる他、プロドラッグとしても用いることができる。
【００４８】  また、本発明の誘導体は、環状ペプチド中のアミノ酸の特定の基、例えば、水素原子、水酸基、カルボキシ基、アミノ基、イミノ基等に対し、公知の置換基を付加（修飾）または置換可能な公知の置換基で置換することにより得ることができる。修飾には、環状ペプチド内のアミノ酸へ、例えば、糖鎖付加、アセチル化、リン酸化、脂質付加などの化学修飾が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４９】  また、環状ペプチド中のアミノ酸の基への付加（修飾）または置換は、１または２以上の基で同時に起こっても、それ以上であってもよい。なおこのような置換基としては、以下に述べるもののほか、上記の基に対し置換可能であれば特に限定されず公知の置換基を用いることができ、例えば、下記に述べるとおりＢＯＣ等の保護基も当然含まれるのは言うまでもない。
【００５０】  さらに、例えば、環状ペプチドの一方のＣｙｓのＣ末端基を、−ＣＯＯＨに代えて、−ＣＯＯＲ１、−ＣＯＮＨＲ１または−ＣＯＮＲ１２に、および／または環状ペプチドの他方のＣｙｓのＮ末端基を、ＮＨ２に代えて、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ１または−Ｎ（Ｃ（Ｏ）Ｒ１）２とすることができる。ここで、Ｒ１は、出現毎に独立して、炭素数１〜２０の分岐もしくは直鎖の炭化水素基またはアルキレングリコール鎖または糖鎖である。なお、Ｒ１の炭素数は、好ましくは１〜１０、より好ましくは１〜５、さらに好ましくは１〜２である。
【００５１】  また、薬学的に許容可能な塩としては、特に限定されないが、本発明の環状ペプチドまたは誘導体として、例えば、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性、中性、または酸性アミノ酸との塩などがあげられる。無機塩基との塩の好適な例としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ならびにアルミニウム塩、アンモニウム塩などがあげられる。有機塩基との塩の好適な例としては、例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミンなどのアルキルアミンとの塩；ピリジン、ピコリンなどの複素環式アミンとの塩；エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミンなどのアルカノールアミンとの塩；シクロへキシルアミン、ジシクロヘキシルアミンなどのシクロアルキルアミンとの塩；Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミンなどのアルキレンジアミン誘導体との塩等が挙げられる。無機酸との塩の好適な例としては、例えば塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸等との塩があげられる。有機酸との塩の好適な例としては、例えばギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸等のモノカルボン酸との塩；フマル酸、シュウ酸、マレイン酸等の多価カルボン酸との塩；酒石酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸等のオキシカルボン酸との塩；メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等のスルホン酸との塩；安息香酸との塩等が挙げられる。中性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えば、グリシン、バリン、ロイシン等との塩が挙げられ、塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、例えば、アルギニン、リジン、オルニチン等との塩が挙げられ、酸性アミノ酸との好適な例としては、例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸等との塩が挙げられる。
【００５２】  上述した中でも、式（Ｉ）で表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチドまたはこの薬学的に許容可能な塩が好ましい。すなわち、式（Ｉ）で表されるアミノ酸配列は、置換されていないことが好ましい。
【００５３】  本発明の環状ペプチド、誘導体、およびこれらの薬学的に許容可能な塩の製造方法としては、特に限定されず、例えば、公知の化学合成法や遺伝子工学的合成法を用いることができる。
【００５４】  上記のアミノ酸配列の合成を化学合成法により行う場合には、いかなる化学合成法により合成してもよく、公知のペプチドの合成方法、例えば固相合成法や液相合成法によって合成することができる。また、合成に当たり、市販のペプチド合成装置（例えば、島津製作所製：ＰＳＳＭ−８など）を使用してもよい。
【００５５】  また、アミノ酸配列中のジスルフィド結合は、特に限定されないが、例えばＤＭＳＯ酸化法、ヨウ素酸化法などにより形成することができる。この場合、遊離のスルフヒドリル基または保護基で保護されたスルフヒドリル基をＤＭＳＯまたはヨウ素（Ｉ２）処理することにより、分子内ジスルフィド結合を形成することができ、この結果、環状ペプチドを得ることができる。
【００５６】  なお、保護基としては、例えば、４−メチルベンジル基（Ｂｚｌ（４Ｍｅ））、トリチル基（Ｔｒｔ）、ｔｅｒｔ−ブチル基、Ｎ−（アセチル）アミノメチル基（Ａｃｍ）等が挙げられる。また、脱保護は、これらの保護基に対応する適切な処理により、例えば、４−メチルベンジル基については強酸で、Ｎ−（アセチル）アミノメチル基についてはヨウ素で処理することにより、行うことができる。
【００５７】  次に、必要に応じて環状ペプチドの誘導体化を行い、誘導体を得る。なお、誘導体化は、公知の方法により行うことが可能である。また、環状ペプチドを構成するアミノ酸に予め置換基を導入することにより、ペプチド合成とともに環状ペプチドの誘導体を製造してもよい。
【００５８】  次に、必要に応じて、環状ペプチドまたは誘導体の塩交換を行うことにより、薬学的に許容可能な塩を製造する。塩交換は、例えば、環状ペプチドまたは誘導体を所望の酸または塩基と接触させることにより行うことができる。
【００５９】  一方で、ペプチドを遺伝子工学的に合成する場合、公知の方法、例えば、Sambrook J. et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (4th edition)（Cold Spring Harbor Laboratory Press (2012)）に記載されるような方法により合成できる。例えば、まず、式（Ｉ）で表されるアミノ酸配列をコードしたＤＮＡ断片を調製する。ＤＮＡ断片の調製は、例えば、式（Ｉ）で表されるアミノ酸配列をコードするＤＮＡ断片の場合、全長ヒトＣＮＰ遺伝子を含むベクター等を鋳型とし、所定のＤＮＡ領域を合成するように設計したプライマーを用いて、ＰＣＲ法によりＤＮＡ断片を増幅することにより行うことができる。なお、ＤＮＡ断片を化学的に合成してもよい。
【００６０】  次に、増幅したＤＮＡ断片を適当なベクターに連結し、タンパク質発現用組換えベクターを得る。次にタンパク質発現用組換えベクターをターゲットとなる細胞に取り込ませ、取り込んだ細胞を選別する。最後に、細胞から産生されたタンパク質（式（Ｉ）で表されるアミノ酸配列からなるタンパク質）を回収する。  回収されたタンパク質におけるジスルフィド結合の形成、誘導体化、塩の形成は、上述したように行うことができる。
【００６１】  なお、目的とする環状ペプチド等の化合物が得られたことの確認は、例えば逆相ＨＰＬＣ、質量分析等の公知手法により行うことができる。  また、得られた化合物のＣＮＰ活性の有無については、公知の手段によって容易に確認することが可能であり、例えばＮＰＲ−Ｂ受容体発現細胞におけるｃＧＭＰ産生活性を試験することにより確認することなどができる。
【００６２】２．外用剤  次に、本発明の外用剤について説明する。なお、本発明において単に「外用剤」という場合、医薬、医薬部外品、スキンケア用品、化粧品などの用途に限定されない、皮膚、粘膜に適用する剤を意味する。
【００６３】本発明の外用剤は、１種以上の上述したような環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を含む。なお、２種以上の環状ペプチドを用いる場合、混合する環状ペプチドの種類に特に上限はないが、調製コストや簡便性の点から、２〜３種程度が好ましい。例えば、配列番号５０、５８、１５および９等が挙げられるが、本発明の効果を害するものでなければ、これらに限定されず、適用対象等に合わせて、適宜これらの環状ペプチドを組み合わせることができる。
【００６４】２．１  用途  本発明の外用剤は、特に限定されないが、例えば、以下のような用途に用いることができ、それぞれの場合において、従来にない顕著な効果を発揮する。なお、本発明の外用剤は、いずれの用途においても、特に限定されず、その薬効、効能に応じて、医薬品、医薬部外品および／または化粧品として使用することができる。
【００６５】  以下、用途毎に詳細に説明する。（１）皮膚炎治療剤、皮膚炎予防剤  本発明の外用剤は、皮膚炎治療剤および／または皮膚炎予防剤であることができる。
【００６６】  本発明の外用剤は、皮膚炎に罹患した対象の皮膚または粘膜上に適用した場合において、皮膚炎によって生じるまたは生じ得る掻痒感、痛み（疼痛）、熱感、突っ張り感、紅斑、浸潤、丘疹、苔癬化、痂皮、浸出、皮膚乾燥等の知覚可能な各種症状、状態を迅速に軽快もしくは消失させつつ、他覚的な皮膚炎の症状を改善することができる。また、本発明の外用剤は、適用部位において刺激感を生じさせない。
【００６７】  そして、本発明の環状ペプチドを含む外用剤のこのような作用は、尾部を有するＣＮＰを含む外用剤の作用と比較して、より迅速に発現し、その持続時間もより長いものである。このようなＣＮＰと比較した環状ペプチドの有利な効果の原因は定かではないが、本発明の環状ペプチドがＣＮＰと比較して、その受容体であるＮＰＲ−Ｂ受容体に対し結合に有利な構造を有していることが考えられ、これにより、患部付近のＮＰＲ−Ｂ受容体により迅速に結合することができるとともに、その結合時間がより長いものとなっていることが考えられる。また、比較的迅速に患部付近のＮＰＲ−Ｂ受容体に結合することにより、環状ペプチドが血流等により患部外に拡散することを防止することができ、環状ペプチドを比較的長時間にわたり患部付近に留めることができるものと考えられる。
【００６８】  また、本発明の外用剤は、皮膚炎の炎症を抑制または予防するのみならず、皮膚のバリア機能を回復させるまたは維持する作用を有する。ここで、皮膚のバリア機能は、外部環境からの刺激や雑菌等の皮膚への侵入を防止する機能や保湿機能を有するが、外用剤によってバリア機能を回復させることにより、炎症の進行、悪化を防止することができる。なお、皮膚のバリア機能は、角質層の角質細胞の整列状態、すなわち肌理の状態や、保湿状態などに大きく影響されるところ、本発明の外用剤は、肌理を整え、肌をしっとりさせる作用を有することから、当該外用剤の皮膚のバリア機能の回復作用、維持作用も明らかである。
【００６９】  また、本発明の外用剤はいわゆるニキビとも呼ばれる面皰、紅色丘疹、膿疱、嚢腫・結節などの皮膚症状に対しても有効である。
【００７０】  また、知覚可能な症状、状態が迅速に軽快または消失することにより、対象（患者）の負担が減り、患者のＱＯＬが向上するとともに、痒み、痛みを気にして患部に触れる、掻き毟るといった患部を損傷させる患者の動作を防止することができる。このような本発明の外用剤の知覚可能な症状、状態の軽快、消失効果は、一般に適用後１０分以内、好ましくは、５分以内、より好ましくは３分以内に発現する。
【００７１】  加えて、本発明の外用剤は、ステロイド皮膚症を生じた皮膚炎や、ステロイド、タクロリムス等の他の一般的な皮膚炎治療用の薬剤で治療できない皮膚炎、例えば、満足な治療効果が得られない、それらの製剤に抵抗性がある、使用が適さないまたは望ましくない皮膚炎などについても治療可能である。また、従来から汎用されているステロイド外用剤の場合は、外用を中止すると、すぐに外用前の重症度に戻るか、あるいはリバウンド現象が起こって外用前よりも増悪するという大きな問題があったが、本発明の外用剤については、このようなリバウンド現象といった問題がない。
【００７２】  皮膚炎は、一般に、皮膚または粘膜上に炎症を生じさせる疾患である。皮膚炎は、通常、紅斑、浸潤性紅斑、丘疹、小水疱、膿疱、浸潤、結痂、落屑等の急性湿疹症状、苔癬化、色素沈着等の慢性湿疹症状や、鱗屑、痂皮（かさぶた）付着、掻破、掻破痕、痒疹結節、びらん、浮腫、じくじく感、鱗状化からなる群から選択される１以上の症状を伴う。
【００７３】  ここで、皮膚炎としては、皮膚または粘膜上に炎症を伴う疾患であれば特に限定されないが、例えば、慢性湿疹、異汗性湿疹、小児性乾燥湿疹等の湿疹、アトピー性皮膚炎；アレルギー性接触皮膚炎、一次刺激性接触皮膚炎等の接触性皮膚炎；脂漏性皮膚炎；皮脂欠乏性皮膚炎；自家感作性皮膚炎；うっ滞性皮膚炎；アレルギー性蕁麻疹（例えば、食物性蕁麻疹、薬剤性蕁麻疹）、非アレルギー性蕁麻疹（例えば、物理性蕁麻疹、日光蕁麻疹、コリン性蕁麻疹）等の蕁麻疹；虫刺症；薬疹；尋常性乾癬、滴状乾癬、乾癬性紅皮症、膿疱性乾癬、関節症性乾癬等の乾癬；慢性痒疹、急性痒疹、妊娠性痒疹、結節性痒疹等の痒疹；酒さ；酒さ様皮膚炎；皮膚アレルギー性血管炎等の皮膚血管炎；全身性皮膚掻痒症、限局性皮膚掻痒症、老人性皮膚掻痒症、妊娠掻痒症等の皮膚掻痒症；日光皮膚炎；紅皮症；貨幣状皮膚炎；限局性掻破皮膚炎；口囲皮膚炎；汗疱；毛孔性角化症；扁平苔癬、異汗性湿疹、異汗症、汗疹、尋常性座瘡、光線皮膚症等が挙げられ、本発明の外用剤は、いずれの疾患の治療および予防にも適用可能である。
【００７４】  本発明の外用剤は、特に湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、虫刺症、アレルギー性もしくは非アレルギー性蕁麻疹、乾癬、に対して、好ましくは、湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、虫刺症、光線皮膚症に対して、より好ましくは、湿疹、アトピー性皮膚炎に対して、優れた効果を発揮する。したがって、本発明の外用剤は、上述の群から選択される少なくとも１種以上の皮膚炎の治療または予防を目的として用いることができる。
【００７５】（２）化粧料またはスキンケア用品の材料
本発明の外用剤は、化粧料またはスキンケア用品の材料であることができる。
本発明の外用剤は、皮膚および／または粘膜に適用した場合に、適用部位において潤いを与え保湿効果を発揮して乾燥を防ぐとともに、肌荒れ、敏感肌を防ぐ。適用部位に角質層が存在する場合には適用部位の肌理を整える効果を発揮する。また、皮膚および粘膜に適度な弾力性と柔軟性が付与・保持され、肌が柔らかくなり、皮膚、粘膜にハリが生じ、ひきしまる。また、適用部位において小じわ、大じわを含むしわやたるみが改善され、さらにくすみ、しみが目立たないものとなる。また、くすみ、しみが目立たなくなることから、結果的に美白効果が得られる。さらに光線過敏症を予防することができる。
【００７６】  結果として、本発明の外用剤は、皮膚および／または粘膜の状態の維持または改善を目的として、特に限定されないが、例えば、乾燥肌、肌荒れ、敏感肌、唇荒れ、たるみ、小じわおよび大じわの発生防止、進行防止または改善ならびに、皮膚または粘膜の状態の維持、光線過敏症予防、アンチエイジングおよび美白からなる群から選択される少なくとも１種を目的として、あるいは上記の効果から選択される少なくとも１種の効果を得ることを目的として用いることができる。  なお、本明細書中において、肌荒れは、あせも、しもやけ、ひび、あかぎれ、にきび、おしめ（おむつ）かぶれ、ただれ、股ずれおよび剃刀まけを含む。
【００７７】  本発明の外用剤の化粧料またはスキンケア用品の材料としての具体的な用途としては、特に限定されないが、例えば、化粧水、乳液、美容液、クリーム、コールドクリーム、ジェル、マスク、パック、パウダー、ハンドクリーム、ボデイパウダー、アフターシェーブローション、プレシェーブローション、香水、デオドラント、また、ファンデーション、白粉、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、アイブロー、チーク、メーキャップベース、口紅、リップクリーム、ネイルカラー等のメイクアップ化粧料、さらに、シャンプー、リンス、コンディショナー、ヘアカラー、ヘアトニック、セット剤、パーマネント剤等の頭髪化粧料等、洗顔料、クレンジング、ボディーソープ、ハンドソープ等の身体洗浄料、浴用剤（入浴剤）、が挙げられる。
【００７８】  本発明の外用剤の上記効果は、迅速に発現するものであり、その効果の種類によって異なるが、一般に適用後１０分以内、好ましくは、５分以内、より好ましくは３分以内に発現する。  また、本発明の外用剤の上記効果は、比較的長く持続するものであり、その効果の種類によって異なるが、一般に効果発現後４時間以上、好ましくは、８時間以上、より好ましくは２４時間以上持続する。
【００７９】（３）鎮痒剤  本発明の外用剤は、鎮痒剤であることができる。  上述したように、本発明の外用剤は、皮膚または粘膜上に適用した際に、適用部位において優れた鎮痒効果を迅速に発揮するため、鎮痒剤として適している。  また、上述したような本発明の外用剤の鎮痒効果は、一般に適用後１０分以内、好ましくは、５分以内、より好ましくは３分以内に発現する。
【００８０】（４）脱毛症治療剤、脱毛症予防剤、育毛剤、発毛剤または抜け毛予防剤  また、本発明の外用剤は、脱毛症治療剤、脱毛症予防剤、育毛剤、発毛剤および／または抜け毛予防剤であることができる。  本発明の外用剤は、脱毛部位または発毛部位等の部位に適用した場合において、適用部位における脱毛・抜け毛を防止するとともに、発毛または育毛を促進し、毛を太くする効果を有する。また適用部位においては、養毛効果、毛生促進効果、薄毛改善・予防などの効果がある。この場合において、発毛する毛髪は硬毛となりやすく、白髪ではない髪となりやすい傾向にある。また、これらの効果は、従来脱毛症治療剤において用いられた他の活性成分、例えばＣＮＰと比較して比較的早期に発現し、得られる効果も顕著である。
【００８１】  また、本発明の外用剤は、上述したように皮膚炎の改善、予防効果を有する。したがって、脱毛症に伴う皮膚の炎症を改善または予防することができる。このような効果は、特に、頭皮等の適用部位の皮膚の状態に起因して脱毛症が悪化している場合に有利である。
【００８２】  さらに、本発明の外用剤は、上述したように皮膚に適用した場合に、適用部位において保湿効果および肌理を整える効果を発揮する。フケやかゆみを取り、これらの発生を抑制することができるとともに、毛髪、頭皮に潤いを与え乾燥を改善し、防ぎ、脂漏性を改善し、頭皮や頭髪を健やかに保つことができる。また、脂漏状態を改善できる。
【００８３】  また、本発明の外用剤は、上述したように知覚可能な症状、状態の軽快、消失効果を有する。これにより、対象（患者）の負担が減り、患者のＱＯＬが向上する。さらに、痒み、痛みを気にして患部に触れる、掻き毟るといった患部を損傷させる患者の動作を防止することができ、この結果、脱毛症を引き起こす皮膚状態の悪化を防止することができる。
【００８４】  本発明の外用剤を、脱毛症治療剤または脱毛症予防剤として使用する場合、適用可能な脱毛症としては、特に限定されないが、例えば、以下のような脱毛症が挙げられ、これらのうち１種以上の治療または予防を目的として使用可能である。
【００８５】（後天性脱毛症）（ｉ）瘢痕または皮膚病変を伴わない脱毛症（円形脱毛症、男性型脱毛症、脂漏性脱毛症、粃糠性脱毛症、女性型脱毛症、妊娠性脱毛症、悪性脱毛症、老人性脱毛症、全頭脱毛症、多発性脱毛症、蛇行性脱毛症、薬物による脱毛症、癌化学療法剤性脱毛症及び放射線被爆による脱毛症、外傷性・機械的脱毛症、栄養障害・代謝障害に伴う脱毛症、内分泌異常に伴う脱毛症、休止期脱毛（分娩後脱毛症、高熱後脱毛症））
【００８６】（ｉｉ）皮膚病変ないし病的皮膚にみられる脱毛症（感染による脱毛、腫瘍による脱毛、炎症による脱毛）（ｉｉｉ）瘢痕性脱毛症（皮膚感染症による脱毛、炎症性細胞浸潤による脱毛）
【００８７】（先天性脱毛症）瀰漫性脱毛、先天性無毛症、遺伝性の症候群における脱毛、限局性脱毛、母斑性、ａｐｌａｓｉａ  ｃｕｔｉｓ、先天性三角形脱毛
【００８８】  上述した中でも、本発明の外用剤は、特に後天性脱毛症に対して、好ましくは、瘢痕または皮膚病変を伴わない脱毛症に対して、より好ましくは、円形脱毛症、男性型脱毛症、脂漏性脱毛症、粃糠性脱毛症、女性型脱毛症、妊娠性脱毛症、悪性脱毛症、老人性脱毛症、全頭脱毛症、多発性脱毛症、蛇行性脱毛症、薬物による脱毛症、癌化学療法剤性脱毛症及び放射線被爆による脱毛症、外傷性・機械的脱毛症、栄養障害・代謝障害に伴う脱毛症、内分泌異常に伴う脱毛症、休止期脱毛に対して、優れた効果を発揮する。したがって、本発明の外用剤は、上述の群から選択される少なくとも１種以上の脱毛症の治療または予防を目的として用いることができる。
【００８９】（５）鼻炎治療剤および／または鼻炎予防剤  また、本発明の外用剤は、鼻炎治療剤および／または鼻炎予防剤であることができる。  鼻炎は、鼻腔および／または副鼻腔の粘膜の炎症に起因する疾患であり、鼻閉、鼻漏、突発反復性のくしゃみといった主症状の他、掻痒感等の症状を引き起こす。なお、本発明において、「鼻炎」は、狭義の意味での鼻腔粘膜の炎症を伴う鼻炎のみならず、副鼻腔粘膜の炎症を伴う副鼻腔炎も含むものとする。
【００９０】  本発明の外用剤は、鼻腔粘膜および／または副鼻腔粘膜に適用した場合において、鼻閉、鼻漏、くしゃみ、掻痒感といった鼻炎に伴う各種症状を改善または予防することができる。特に、これらの効果は、尾部を有するＣＮＰを含む鼻炎治療剤と比較して、迅速に発現し、またその持続時間も長いものである。
【００９１】  このような本発明の外用剤の鼻炎に対する効果は一般に適用後８分以内、好ましくは、５分以内、より好ましくは３分以内に発現する。さらに特に好ましくは、１分以内に発現する。  また、上述したような本発明の外用剤の鼻炎に対する効果は、一般に効果発現後４時間以上、好ましくは、８時間以上、より好ましくは２４時間以上持続する。
【００９２】  本発明の外用剤を、鼻炎治療剤および／または鼻炎予防剤として使用する場合、適用可能な鼻炎としては、特に限定されず、例えば、急性鼻炎、慢性鼻炎を含む感染性鼻炎；複合型（花過敏症）鼻炎、鼻漏型鼻炎、うっ血型鼻炎、浮腫型鼻炎および乾燥型鼻炎を含む過敏性非感染性鼻炎；物理性鼻炎、化学性鼻炎および放射線性鼻炎を含む刺激性鼻炎；ならびに萎縮性鼻炎および特発性肉芽腫性鼻炎；急性副鼻腔炎、慢性副鼻腔炎（蓄膿症）、好酸球性副鼻腔炎、副鼻腔真菌症等の副鼻腔炎等が挙げられ、上記のうち１種以上の治療または予防を目的として使用可能である。
【００９３】  また、複合型鼻炎としては、例えば、通年性アレルギー性鼻炎および季節性アレルギー性鼻炎を含むアレルギー性鼻炎と、血管運動性（本態性）鼻炎および好酸球増多性鼻炎を含む非アレルギー性鼻炎とが挙げられる。  鼻漏型鼻炎としては、例えば、味覚性鼻炎、冷気吸入性鼻炎および老人性鼻炎が挙げられる。
【００９４】  うっ血型鼻炎としては、例えば、薬物性鼻炎、心因性鼻炎、妊娠性鼻炎、内分泌性鼻炎および寒冷性鼻炎が挙げられる。  浮腫型鼻炎としては、例えば、アスピリン過敏性鼻炎が挙げられる。
【００９５】  上述した中でも、本発明の外用剤は、特に過敏性非感染性鼻炎、刺激性鼻炎、副鼻腔炎に対して、好ましくは、過敏性非感染性鼻炎、慢性副鼻腔炎に対して、より好ましくは、複合型（花過敏症）鼻炎、鼻漏型鼻炎、うっ血型鼻炎、浮腫型鼻炎および乾燥型鼻炎、慢性副鼻腔炎に対して、優れた効果を発揮する。したがって、本発明の外用剤は、上述の群から選択される少なくとも１種以上の鼻炎の治療または予防を目的として用いることができる。
【００９６】  また、症状の観点からは、本発明の外用剤は、上述したような効果を有することから、くしゃみ・鼻漏型鼻炎、鼻閉型鼻炎および充全型鼻炎のいずれに対しても用いることができる。  さらに、本発明の外用剤は、ステロイド薬といった従来用いられてきた鼻炎治療剤によって治療困難な鼻炎に対しても症状の改善効果を示す。
【００９７】（６）その他の外用剤  また、本発明の外用剤は、上記環状ペプチドの効果を目的として、上述した以外の用途にも用いることができる。この場合において、本発明の外用剤は、上記環状ペプチドの効果以外の効果を主目的としてもよい。この場合、本発明の環状ペプチド、その誘導体および／または薬学的に許容可能な塩は、外用剤の主たる効果を補助するまたは主たる効果以外の効果を追加する目的で用いられる。
【００９８】  このような用途としては、特に限定されないが、例えば、消臭、制汗、脱毛、洗浄、血行促進・賦香、紫外線障害予防、紫外線防御、殺菌、防腐、抗酸化、経皮吸収促進等が挙げられる。
【００９９】２．２  剤形  本発明の外用剤は、皮膚または粘膜の目的とする部位（例えば患部）に局所的に投与されることにより、有効成分たる環状ペプチド、その誘導体および／または薬学的に許容可能な塩の効果を適用部位付近においてより確実かつ迅速に発現させることができる。  このような外用剤は、特に限定されないが、例えば、外皮用剤、点眼剤、点耳剤、点鼻剤、口腔剤、または坐剤であることができる。これらのうち、本発明の外用剤が、皮膚炎治療剤、皮膚炎予防剤、鎮痒剤、スキンケア用品、脱毛症治療剤、脱毛症予防剤、育毛剤または発毛剤である場合には、外皮用剤であることが好ましい。一方で、本発明の外用剤が鼻炎治療剤および／または鼻炎予防剤である場合、点鼻剤であることが好ましい。さらに角膜疾患治療および／予防剤である場合、点眼剤であることが好ましい。
【０１００】  本発明の外用剤は、外皮用剤である場合、特に限定されないが、例えば、外用固形剤、外用液剤、スプレー剤、軟膏剤、乳液、クリーム剤、ゲル剤または貼付剤であることができる。
【０１０１】  外用固形剤は、皮膚等に対し塗布または散布するための固形の製剤である。このような外用固形剤としては、例えば粉末状の外用散剤が挙げられる。  外用液剤は、皮膚等に対し塗布するための液状の製剤である。このような外用液剤としては、例えばローション剤およびリニメント剤が挙げられる。
【０１０２】  スプレー剤は、有効成分を霧状、粉末状、泡沫状またはペースト状等として皮膚に噴霧する製剤である。このようなスプレー剤としては、例えば、外用エアゾール剤およびポンプスプレー剤等が挙げられる。  軟膏剤は、皮膚に塗布する、有効成分を基剤に溶解または分散させた半固形の製剤である。また、軟膏剤は、唇等の局所に塗布するためのリップクリームであってもよい。  クリーム剤は、皮膚に塗布する、水中油型または油中水型に乳化した半固形の製剤である。
【０１０３】  ゲル剤は、皮膚に塗布するゲル状の製剤である。ゲル剤としては、例えば水性ゲル剤および油性ゲル剤が挙げられる。  貼付剤は、皮膚に貼付する製剤である。貼付剤としては、例えばテープ剤およびパップ剤が挙げられる。  点鼻剤は、鼻腔または鼻粘膜に投与する製剤である。点鼻剤としては、例えば、点鼻粉末剤および点鼻液剤が挙げられる。このうち、点鼻液剤が好ましい。
【０１０４】  上述したいずれの剤形においても、本発明の外用剤は、少なくとも、上述したような本発明の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を含む。
【０１０５】  剤形が、外用液剤、軟膏剤、クリーム剤またはゲル剤である場合には、本発明の外用剤は、環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を、例えば、０．０００１〜１００００００μｇ／ｇ、好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｇ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｇ、さらに好ましくは０．１〜１００μｇ／ｇの濃度で含む。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｇ、１〜５００μｇ／ｇの濃度で含んでよい。
【０１０６】  また、剤形が、スプレー剤である場合には、本発明の外用剤は、スプレー剤の原液中に、環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を、例えば、０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬ、好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬの濃度で含む。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１０７】  剤形が、貼付剤である場合には、本発明の外用剤は、環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を、例えば、０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬ、好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、特に好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬの濃度で含む。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１０８】  また、剤形が点鼻剤、特に液体点鼻剤である場合には、本発明の外用剤は、点鼻剤の液体（点鼻液）中において、環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を、例えば、０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬの濃度で含む。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１０９】  本発明の外用剤は、上述したようないずれの剤形である場合であっても、当業者に知られた方法および構成材料を用いて製剤することができる。
【０１１０】  利用可能な構成材料としては、特に限定されないが、例えば、増粘ゲル化剤、油性成分、アルコール、脂肪酸、有機酸、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、粉体、顔料、界面活性剤、多価アルコール・糖、高分子、生理活性成分、溶媒、酸化防止剤、キレート剤、香料、防腐剤、動植物エキス等が挙げられる。
【０１１１】  増粘ゲル化剤としては、有機、無機化合物の各種ゲル化剤を用いることができる。  無機化合物のゲル化剤としては、例えば、含水性又は吸水性のケイ酸塩、例えばケイ酸アルミニウム（例えばベントナイト）、ケイ酸マグネシウム−アルミニウム、コロイドシリカ等が挙げられる。  有機化合物のゲル化剤としては、天然、半合成又は合成のポリマーの使用が可能である。天然および半合成ポリマーとしては、例えば、セルロース等の多糖類、デンプン、トラガカント、アラビアゴム、キサンタンガム、寒天、ゼラチン、アルギン酸及びその塩（例えばアルギン酸ナトリウム及びその誘導体）、低級アルキルセルロース（例えばメチルセルロース又はエチルセルロース）、カルボキシ−又はヒドロキシ−低級−アルキルセルロース（例えばカルボキシメチルセルロース又はヒドロキシプロピルセルロース）等が挙げられる。合成ポリマーとしては、例えば、カルボキシルビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、（ビニルメチルエーテル／マレイン酸エチル）コポリマー、ポリメタクリレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸又はポリメタクリル酸等が挙げられる。なお、ゲル剤として、例えば、ルブラジェルＮＰ、ルブラジェルＣＧ、ルブラジェルＤＶ、ルブラジェルＭＳ、ルブラジェルＯＩＬ、ルブラジェルＴＷ、ルブラジェルＤＳ等（アシュランド社）等の市販のゲル化剤を用いることもできる。
【０１１２】  油分としては、例えば、エステル系、エーテル系、炭化水素系、シリコーン系およびフッ素系の各種油相成分の他、動植物油とその硬化油、および天然由来のロウを用いることができる。
【０１１３】  エステル系の油相成分としては、例えば、トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル、２−エチルヘキサン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ブチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸エチル、パルミチン酸オクチル、イソステアリン酸イソセチル、ステアリン酸ブチル、ミリスチン酸ブチル、リノール酸エチル、リノール酸イソプロピル、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソセチル、ミリスチン酸イソステアリル、パルミチン酸イソステアリル、ミリスチン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、セバシン酸ジエチル、アジピン酸ジイソプロピル、ネオペンタン酸イソアルキル、トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリル、トリ２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリトール、カプリル酸セチル、ラウリン酸デシル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸デシル、ミリスチン酸ミリスチル、ミリスチン酸セチル、ステアリン酸ステアリル、オレイン酸デシル、リシノレイン酸セチル、ラウリン酸イソステアリル、ミリスチン酸イソトリデシル、ミリスチン酸イソセチル、ミリスチン酸イソステアリル、パルミチン酸イソセチル、パルミチン酸イソステアリル、ステアリン酸オクチル、ステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、オレイン酸オクチルドデシル、リノール酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソプロピル、２−エチルヘキサン酸セトステアリル、２−エチルヘキサン酸ステアリル、イソステアリン酸ヘキシル、ジオクタン酸エチレングリコール、ジオレイン酸エチレングリコール、ジカプリン酸プロピレングリコール、ジ（カプリル・カプリン酸）プロピレングリコール、ジカプリル酸プロピレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジオクタン酸ネオペンチルグリコール、
【０１１４】トリカプリル酸グリセリル、トリウンデシル酸グリセリル、トリイソパルミチン酸グリセリル、トリイソステアリン酸グリセリル、ネオペンタン酸オクチルドデシル、オクタン酸イソステアリル、イソノナン酸オクチル、ネオデカン酸ヘキシルデシル、ネオデカン酸オクチルドデシル、イソステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソステアリル、イソステアリン酸オクチルデシル、ポリグリセリンオレイン酸エステル、ポリグリセリンイソステアリン酸エステル、炭酸ジプロピル、炭酸ジアルキル（Ｃ１２−１８）、クエン酸トリイソセチル、クエン酸トリイソアルキル、クエン酸トリイソオクチル、乳酸ラウリル、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、乳酸オクチルデシル、クエン酸トリエチル、クエン酸アセチルトリエチル、クエン酸アセチルトリブチル、クエン酸トリオクチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ヒドロキシステアリン酸２−エチルヘキシル、コハク酸ジ２−エチルヘキシル、アジピン酸ジイソブチル、セバシン酸ジイソプロピル、セバシン酸ジオクチル、ステアリン酸コレステリル、イソステアリン酸コレステリル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、オレイン酸コレステリル、オレイン酸ジヒドロコレステリル、イソステアリン酸フィトステリル、オレイン酸フィトステリル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソセチル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸ステアリル、１２−ステアロイルヒドロキシステアリン酸イソステアリル等が挙げられる。
【０１１５】  炭化水素系の油相成分としては、例えば、スクワラン、流動パラフィン、α−オレフィンオリゴマー、イソパラフィン、セレシン、パラフィン、流動イソパラフィン、固形パラフィン、ポリブテン、マイクロクリスタリンワックス、ワセリン等が挙げられる。
【０１１６】  シリコーン系の油相成分としては、例えば、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン、メチルシクロポリシロキサン、オクタメチルポリシロキサン、デカメチルポリシロキサン、ドデカメチルシクロシロキサン、メチルハイドロジェンポリシロキサン、ポリエーテル変性オルガノポリシロキサン、ジメチルシロキサン・メチルセチルオキシシロキサン共重合体、ジメチルシロキサン・メチルステアロキシシロキサン共重合体、アルキル変性オルガノポリシロキサン、末端変性オルガノポリシロキサン、アミノ変性シリコーン油、アミノ変性オルガノポリシロキサン、ジメチコノール、シリコーンゲル、アクリルシリコーン、トリメチルシロキシケイ酸、シリコーンＲＴＶゴム等が挙げられる。  フッ素系の油相成分としては、例えば、パーフルオロポリエーテル、フッ素変性オルガノポリシロキサン、フッ化ピッチ、フルオロカーボン、フルオロアルコール、フルオロアルキル・ポリオキシアルキレン共変性オルガノポリシロキサン等が挙げられる。
【０１１７】  動植物油とその硬化油、および天然由来のロウとしては、例えば、牛脂、硬化牛脂、豚脂、硬化豚脂、馬油、硬化馬油、ミンク油、オレンジラフィー油、魚油、硬化魚油、卵黄、ホホバ油等の動植物油およびその硬化油、アボカド油、アルモンド油、オリブ油、カカオ脂、杏仁油、ククイナッツ油、ゴマ油、小麦胚芽油、コメ胚芽油、コメヌカ油、サフラワー油、シアバター、大豆油、月見草油、ツバキ油、トウモロコシ油、ナタネ油、硬化ナタネ油、パーム核油、硬化パーム核油、パーム油、硬化パーム油、ピーナッツ油、硬化ピーナッツ油、ヒマシ油、硬化ヒマシ油、ヒマワリ油、ブドウ種子油、ホホバ油、硬化ホホバ油、マカデミアナッツ油、メドホーム油、綿実油、硬化綿実油、ヤシ油、硬化ヤシ油、ローズヒップ油等の植物油およびその硬化油、ミツロウ、高酸価ミツロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬化ラノリン、液状ラノリン、カルナバロウ、モンタンロウ等のロウ等が挙げられる。
【０１１８】  高級アルコールとしては、例えば、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、オレイルアルコール、ベヘニルアルコール、２−エチルヘキサノール、ヘキサデシルアルコール、オクチルドデカノール等が挙げられる。
【０１１９】  脂肪酸としては、例えば、カプリル酸、カプリン酸、ウンデシレン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキン酸、アラキドン酸、ベヘン酸、エルカ酸、２−エチルヘキサン酸等が挙げられる。
【０１２０】  紫外線吸収剤としては、例えば、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸エチルジヒドロキシプロピル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラアミノ安息香酸エチル、パラアミノ安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸オクチルジメチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸オクチル、サリチル酸トリエタノールアミン、サリチル酸フェニル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、パラメトキシケイ皮酸２−エチルヘキシル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ２−エチルヘキサン酸グリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、パラメトキシヒドロケイ皮酸ジエタノールアミン塩、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸及びその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルホン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、ジヒドロキシジメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシオクトキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、ブチルメトキシジベンゾイルメタン、２，４，６−トリアニリノ−ｐ−（カルボ−２−エチルヘキシル−１−オキシ）−１，３，５−トリアジン、２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、メチル−Ｏ−アミノベンゾエート、２−エチルヘキシル−２−シアノ−３，３−ジフェニルアクリレート、フェニルベンゾイミダゾール硫酸、３−（４−メチルベンジリデン）カンフル、イソプロピルジベンゾイルメタン、４−（３，４−ジメトキシフェニルメチレン）−２，５−ジオキソ−１−イミダゾリジンプロピオン酸２−エチルヘキシル等、およびこれらの高分子誘導体やシラン誘導体、酸化チタンや酸化亜鉛およびその分散物等が挙げられる。なお、酸化亜鉛や酸化チタン等は表面処理がなされたものであっても良い。
【０１２１】  経皮吸収助剤としては、例えば、酢酸、酢酸ナトリウム、リモネン、メントール、サリチル酸、ヒアルロン酸、オレイン酸、Ｎ，Ｎ−ジエチル−ｍ−トルアミド（Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−メチルベンズアミド）、ステアリン酸ｎ−ブチル、ベンジルアルコール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ポリプロピレングリコール、クロタミトン、ジエチルセバケート、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ−エチルピロリドン、ラウリルアルコールなどが挙げられる。
【０１２２】  粉体、顔料としては、例えば、赤色１０４号、赤色２０１号、黄色４号、青色１号、黒色４０１号、塩基性染料、ＨＣカラー、分散染料、直接染料等の色素、黄色４号ＡＬレーキ、黄色２０３号ＢＡレーキ等のレーキ色素、ナイロンパウダー、シルクパウダー、ウレタンパウダー、シリコーンパウダー、ポリメタクリル酸メチルパウダー、セルロースパウダー、デンプン、シリコーンエラストマー球状粉体、ポリエチレン末等の高分子、黄酸化鉄、赤色酸化鉄、黒酸化鉄、酸化クロム、カーボンブラック、群青、紺青等の有色顔料、酸化亜鉛、酸化チタン、酸化セリウム等の白色顔料、タルク、マイカ、セリサイト、カオリン、板状硫酸バリウム等の体質顔料、雲母チタン等のパール顔料、硫酸バリウム、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、珪酸アルミニウム、珪酸マグネシウム等の金属塩、シリカ、アルミナ等の無機粉体、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、パルミチン酸亜鉛、ミリスチン酸亜鉛、ミリスチン酸マグネシウム、ラウリン酸亜鉛、ウンデシレン酸亜鉛等の金属セッケン、ベントナイト、スメクタイト、窒化ホウ素等が挙げられる。これらの粉体の形状（球状、棒状、針状、板状、不定形状、燐片状、紡錘状等）および粒子径に特に制限はない。
【０１２３】  なおこれらの粉体および顔料は、従来公知の表面処理、例えばフッ素化合物処理、シリコーン処理、シリコーン樹脂処理、ペンダント処理、シランカップリング剤処理、チタンカップリング剤処理、油剤処理、Ｎ−アシル化リジン処理、ポリアクリル酸処理、金属セッケン処理、アミノ酸処理、レシチン処理、無機化合物処理、プラズマ処理、メカノケミカル処理等によって事前に表面処理されていてもよい。
【０１２４】  界面活性剤としては、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤およびノニオン性界面活性剤のいずれをも適宜用いることができる。  アニオン性界面活性剤としては、例えば、脂肪酸セッケン、α−アシルスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩、ＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、アルキルアミド硫酸塩、アルキルリン酸塩、ＰＯＥアルキルリン酸塩、アルキルアミドリン酸塩、アルキロイルアルキルタウリン塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩、ＰＯＥアルキルエーテルカルボン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルスルホ酢酸ナトリウム、アシルイセチオン酸塩、アシル化加水分解コラーゲンペプチド塩、パーフルオロアルキルリン酸エステル等が挙げられる。
【０１２５】  カチオン性界面活性剤としては、例えば、塩化アルキルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、臭化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化セトステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム、塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウム、臭化ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベヘニン酸アミドプロピルジメチルヒドロキシプロピルアンモニウム、ステアリン酸ジエチルアミノエチルアミド、ステアリン酸ジメチルアミノプロピルアミド、ラノリン誘導体第四級アンモニウム塩等が挙げられる。また、脂肪酸アミドジアルキルアミン等の第３級アミン及びその塩も挙げられる。
【０１２６】  両性界面活性剤としては、例えば、カルボキシベタイン型、アミドベタイン型、スルホベタイン型、ヒドロキシスルホベタイン型、アミドスルホベタイン型、ホスホベタイン型、アミノカルボン酸塩型、イミダゾリン誘導体型、アミドアミン型の各種両性系面活性剤が挙げられる。  ノニオン性界面活性剤としては、例えば、プロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル、ＰＯＥアルキルエーテル、ＰＯＥ脂肪酸エステル、ＰＯＥ硬化ヒマシ油、ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ・ＰＯＰ共重合体、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル、ポリエーテル変性シリコーンラウリン酸アルカノールアミド、アルキルアミンオキシド、水素添加大豆リン脂質、水酸化大豆リン脂質、高分子系界面活性剤、バイオサーファクタント等が挙げられる。  なお、天然系界面活性剤も用いることができ、このような界面活性剤としては、例えば、レシチン、サポニン、糖系界面活性剤等が挙げられる。
【０１２７】  多価アルコールおよび糖としては、例えば、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン、３−メチル−１，３−ブタンジオール、１，３−ブチレングリコール、ソルビトール、マンニトール、ラフィノース、エリスリトール、グルコース、ショ糖、果糖、キシリトール、ラクトース、マルトース、マルチトール、トレハロース、アルキル化トレハロース、混合異性化糖、硫酸化トレハロース、プルラン等が挙げられる。またこれらの化学修飾体等も使用可能である。
【０１２８】  高分子としては、例えば、アクリル酸エステル／メタクリル酸エステル共重合体、酢酸ビニル／クロトン酸共重合体、酢酸ビニル／クロトン酸／ビニルネオデカネート共重合体、メチルビニルエーテルマレイン酸ハーフエステル、Ｔ−ブチルアクリレート／アクリル酸エチル／メタクリル酸共重合体、ビニルピロリドン／ビニルアセテート／ビニルプロピオネート共重合体、ビニルアセテート／クロトン酸共重合体（ルビセットＣＡ：ＢＡＳＦ社製）、ビニルアセテート／クロトン酸／ビニルピロリドン共重合体、ビニルピロリドン／アクリレート共重合体、アクリレート／アクリルアミド共重合体、ビニルアセテート／ブチルマレエート／イソボルニルアクリラート共重合体、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体等のアニオン性高分子化合物や、ジアルキルアミノエチルメタクリレート重合体の酢酸両性化物、アクリル酸オクチルアクリルアミド／アクリル酸ヒドロキシプロピル／メタクリル酸ブチルアミノエチル共重合体等の両性高分子化合物、ビニルピロリドン／ジメチルアミノエチルメタクリレートの４級化物、メチルビニルイミダゾリウムクロリド／ビニルピロリドン共重合体等のカチオン性高分子化合物、ポリビニルピロリドン、ビニルピロリドン／酢酸ビニル共重合体、ビニルピロリドン／ジメチルアミノエチルメタクリレート共重合体、ビニルカプロラクタム／ビニルピロリドン／ジメチルアミノエチルメタクリレート共重合体等のノニオン性高分子化合物等がある。また、セルロースまたはその誘導体、ケラチン及びコラーゲンまたはその誘導体、アルギン酸カルシウム、プルラン、寒天、ゼラチン、タマリンド種子多糖類、キサンタンガム、カラギーナン、ハイメトキシルペクチン、ローメトキシルペクチン、グアーガム、アラビアゴム、結晶セルロース、アラビノガラクタン、カラヤガム、トラガカントガム、アルギン酸、アルブミン、カゼイン、カードラン、ジェランガム、デキストラン等の天然由来高分子化合物や、グルコオリゴ糖、フコース含有多糖体、ラムノース含有多糖体なども好適に配合することができる。
【０１２９】  生理活性成分としては、皮膚に塗布した場合に皮膚に何らかの生理活性を与える物質が挙げられる。例えば、美白、抗炎症、老化防止、紫外線防御、スリミング、ひきしめ、抗酸化、発毛・育毛、抑毛、保湿、血行促進、抗菌・殺菌、冷感・温感、創傷治癒促進、刺激緩和、鎮痛、細胞賦活等の効果を有する成分であり、植物エキス、海藻エキス、ビタミン及びその誘導体、アミノ酸、環状ペプチド以外の各種ペプチド、ヒアルロン酸ナトリウム、ムコ多糖等の生体高分子、セラミド、フィトスフィンゴシン、コレステロール、フィトステロールなどの細胞間脂質構成成分またはその類似成分、酵素成分等が挙げられる。これらの好適な配合成分の例としては、例えばアシタバエキス、アボカドエキス、アマチャエキス、アルテアエキス、アルニカエキス、アロエエキス、アンズエキス、アンズ核エキス、イソフラボン、イチョウエキス、ウイキョウエキス、ウコンエキス、ウーロン茶エキス、エイジツエキス、エチナシ葉エキス、オウゴンエキス、オウバクエキス、オウレンエキス、オオムギエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、オランダカラシエキス、オレンジエキス、カカオエキス、海水乾燥物、海藻エキス、加水分解エラスチン、加水分解コムギ末、加水分解シルク、カボチャ種子エキス、カモミラエキス、カロットエキス、カワラヨモギエキス、甘草エキス、カルカデエキス、カキョクエキス、キウイエキス、キナエキス、キューカンバーエキス、グアノシン、クチナシエキス、クマザサエキス、クララエキス、クランベリーエキス、クルミエキス、グレープフルーツエキス、クレマティスエキス、クロレラエキス、クワエキス、ゲンチアナエキス、紅茶エキス、酵母エキス、ゴボウエキス、コメヌカ発酵エキス、
【０１３０】コメ胚芽油、コンフリーエキス、コラーゲン、コケモモエキス、サイシンエキス、サイコエキス、サイタイ抽出液、サルビアエキス、サボンソウエキス、ササエキス、サンザシエキス、サンショウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、シコンエキス、シソエキス、シナノキエキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、ショウブ根エキス、シラカバエキス、スギナエキス、セイヨウキズタエキス、セイヨウサンザシエキス、セイヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、セイヨウハッカエキス、セージエキス、ゼニアオイエキス、センキュウエキス、センブリエキス、ダイズエキス、タイソウエキス、大豆発酵エキス、タイムエキス、茶エキス、チョウジエキス、チガヤエキス、チンピエキス、月見草エキス、ツボクサエキス、テルミナリアエキス、トウキエキス、トウキンセンカエキス、トウニンエキス、トウヒエキス、ドクダミエキス、トマトエキス、納豆エキス、ニンジンエキス、ニンニクエキス、ノバラエキス、ハイビスカスエキス、バクモンドウエキス、パセリエキス、蜂蜜、バナナ花エキス、ハマメリスエキス、パリエタリアエキス、ヒキオコシエキス、ビサボロール、ビワエキス、フキタンポポエキス、フキノトウエキス、ブクリョウエキス、ブッチャーブルームエキス、ブドウエキス、プロポリス、ヘチマエキス、ベニバナエキス、ペパーミントエキス、ボダイジュエキス、ボタンエキス、ホップエキス、マツエキス、マロニエエキス、ミズバショウエキス、ムクロジエキス、メリッサエキス、モモエキス、ヤグルマギクエキス、ユーカリエキス、ユキノシタエキス、ユズエキス、ヨクイニンエキス、ヨモギエキス、ラベンダーエキス、リンゴエキス、ライチ（レイシ）エキス、レタスエキス、レモンエキス、レンゲソウエキス、ローズエキス、ローズマリーエキス、ローマカミツレエキス、ローヤルゼリーエキス等を挙げることができる。
【０１３１】また、デオキシリボ核酸、ムコ多糖類、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、コラーゲン、エラスチン、キチン、キトサン、加水分解卵殻膜などの生体高分子、アミノ酸、加水分解ペプチド、乳酸ナトリウム、尿素、ピロリドンカルボン酸ナトリウム、ベタイン、ホエイ、トリメチルグリシン、リシン・アルギニン縮合物などのポリペプチドなどの保湿成分、スフィンゴ脂質、セラミド、フィトスフィンゴシン、コレステロール、コレステロール誘導体、フィトステロール誘導体、リン脂質などの細胞間脂質構成成分またはその類似物、ε−アミノカプロン酸、グリチルリチン酸、β−グリチルレチン酸、塩化リゾチーム、グアイアズレン、ヒドロコールチゾン、ティーツリー油等の抗炎症剤、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＢ２及びその誘導体、ビタミンＢ６及びその誘導体、ビタミンＣ及びその誘導体、ビタミンＤ及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、パントテン酸カルシウム、ビオチン、ニコチン酸アミド等のビタミン類、アラントイン、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、４−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸等の活性成分、トコフェロール、カロチノイド、フラボノイド、タンニン、リグナン、サポニン等の抗酸化剤、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸などの細胞賦活剤、γ−オリザノール、ビタミンＥ誘導体などの血行促進剤、レチノール、レチノール誘導体等の創傷治癒剤、アルブチン、コウジ酸、プラセンタエキス、イオウ、エラグ酸、リノール酸、トラネキサム酸、グルタチオン等の美白剤、セファランチン、カンゾウ抽出物、トウガラシチンキ、ヒノキチオール、ヨウ化ニンニクエキス、塩酸ピリドキシン、ＤＬ−α−トコフェロール、酢酸ＤＬ−α−トコフェロール、ニコチン酸、ニコチン酸誘導体、パントテン酸カルシウム、Ｄ−パントテニルアルコール、アセチルパントテニルエチルエーテル、ビオチン、アラントイン、イソプロピルメチルフェノール、エストラジオール、エチニルエストラジオール、塩化カプロニウム、塩化ベンザルコニウム、塩酸ジフェンヒドラミン、タカナール、カンフル、サリチル酸、ノニル酸バニリルアミド、ノナン酸バニリルアミド、ピロクトンオラミン、ペンタデカン酸グリセリル、Ｌ−メントール、モノニトログアヤコール、レゾルシン、γ−アミノ酪酸、塩化ベンゼトニウム、塩酸メキシレチン、オーキシン、女性ホルモン、カンタリスチンキ、シクロスポリン、ジンクピリチオン、ヒドロコールチゾン、ミノキシジル、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ハッカ油、ササニシキエキス等の育毛剤などが挙げられる。
【０１３２】  酸化防止剤としては、例えば、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、エリソルビン酸、エリソルビン酸ナトリウム、チオジプロピオン酸ジラウリル、トコフェロール、トリルビグアナイド、ノルジヒドログアヤレチン酸、パラヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルヒドロキシトルエン、ステアリン酸アスコルビル、パルミチン酸アスコルビル、没食子酸オクチル、没食子酸プロピル、カロチノイド、フラボノイド、タンニン、リグナン、サポニン、リンゴエキスやチョウジエキスなどの酸化防止効果の認められる植物エキス等が挙げられる。
【０１３３】  溶媒としては、生理食塩水、精製水、エタノール、低級アルコール、エーテル類、ＬＰＧ、フルオロカーボン、Ｎ−メチルピロリドン、フルオロアルコール、揮発性直鎖状シリコーン、次世代フロン等が挙げられる。
【０１３４】  なお、本発明の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩は、上述したように外用剤の製造のために使用できるものであるから、本発明はまた、本発明の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩の外用剤の製造のための使用にも関する。
【０１３５】３．外用剤の使用方法  次に、本発明の外用剤の使用方法について説明する。  本発明の外用剤の使用方法は、上述した本発明の外用剤を、対象の皮膚および／または粘膜に適用することを含む。
【０１３６】  対象としては、特に限定されないが、例えば、鳥類、哺乳動物等の脊椎動物が挙げられる。特に哺乳動物としては、例えば、マウス、ラット、スナネズミ、ハムスター、モルモット等のげっ歯類やウサギ等の実験動物、ブタ、ウシ、ヤギ、ウマ、ヒツジ、ミンク等の家畜、イヌ、ネコ等のペット、ヒト、サル、カニクイザル、アカゲザル、マーモセット、オランウータン、チンパンジーなどの霊長類等を挙げられる。なかでも、ヒトが特に好ましい。一方で、対象からヒトを除くこともできる。
【０１３７】  また、外用剤が適用される対象の皮膚および／または粘膜としては、対象のいかなる部位の皮膚、粘膜であってもよく、例えば、頭（頭皮）、顔面、首、腕、胴体、腕、手、足等の皮膚または粘膜に適用可能である。  本発明の外用剤のより具体的な使用方法は、以下のとおりである。
【０１３８】（１）皮膚炎の治療および予防方法  本発明の外用剤を、皮膚炎治療剤または皮膚炎予防剤として用いる場合、当該外用剤を目的とする皮膚および／または粘膜部位（例えば皮膚炎が発症した患部）に対し直接適用することができる。
【０１３９】  適用頻度としては、特に限定されないが、例えば、１〜１０回／日、好ましくは１〜５回／日、さらに好ましくは１〜３回／日である。なお、本発明の外用剤は、その効果の持続時間が長いため、比較的少ない頻度、例えば、１回／日で適用した場合であっても、十分な効果を発揮する。  また、用量としては特に限定されないが、例えば、適用１回につき、本発明の環状ペプチドおよびその誘導体ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩の合計量を０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬ、好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、特に好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬとすることができる。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１４０】（２）痒みの軽減もしくは消失方法  本発明の外用剤を、鎮痒剤として用いる場合、当該外用剤を目的とする皮膚および／または粘膜部位に対し直接適用することができる。  適用頻度としては、特に限定されないが、例えば、１〜１０回／日、好ましくは１〜５回／日、さらに好ましくは１〜３回／日である。  また、用量としては特に限定されないが、例えば、適用１回につき、本発明の環状ペプチドおよびその誘導体ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩の合計量を０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬ、好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、特に好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬとすることができる。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１４１】（３）化粧料使用方法  本発明の外用剤を、化粧料として用いる場合、当該外用剤を目的とする皮膚および／または粘膜部位に対し直接適用することができる。  適用頻度としては、特に限定されないが、例えば、１〜１０回／日、好ましくは１〜５回／日、さらに好ましくは１〜３回／日である。  また、用量としては特に限定されないが、例えば、適用１回につき、本発明の環状ペプチドおよびその誘導体ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩の合計量を０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬ、好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、特に好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬとすることができる。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１４２】（４）脱毛症の治療および予防方法ならびに発毛方法ならびに育毛方法  本発明の外用剤を、脱毛症治療剤、脱毛症予防剤、発毛剤または育毛剤ならびに／または抜け毛防止法として用いる場合、当該外用剤を目的とする部位（例えば、頭皮、皮膚の脱毛部位）に対し直接適用することができる。
【０１４３】  適用頻度としては、特に限定されないが、例えば、１〜１０回／日、好ましくは１〜５回／日、さらに好ましくは１〜３回／日である。  また、用量としては特に限定されないが、例えば、適用１回につき、本発明の環状ペプチドおよびその誘導体ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩の合計量を０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬ、好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、特に好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬとすることができる。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１４４】（５）鼻炎の治療および予防方法  本発明の外用剤を、鼻炎治療剤または鼻炎予防剤として用いる場合、当該外用剤を目的とする部位（例えば、鼻腔粘膜）に対し直接適用することができる。適用頻度としては、特に限定されないが、例えば、１〜１０回／日、好ましくは１〜５回／日、さらに好ましくは１〜３回／日である。  また、用量としては特に限定されないが、例えば、適用１回各鼻腔につき、本発明の環状ペプチドおよびその誘導体ならびにこれらの薬学的に許容可能な塩の合計量を好ましくは０．００１〜１００００μｇ／ｍＬ、より好ましくは０．０１〜１０００μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは０．１〜１００μｇ／ｍＬ、特に好ましくは１〜１００μｇ／ｍＬとすることができる。また、別の態様において、０．１〜８００μｇ／ｍL、１〜５００μｇ／ｍLの濃度で含んでよい。
【０１４５】４．医薬  次に、本発明の医薬について説明する。  本発明の医薬は、１種以上の本発明の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩を含む。
【０１４６】  上述したように、本発明の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩は、ＣＮＰと同様に、グアニル酸シクラーゼドメインを有する受容体ＮＰＲ−Ｂと結合してｃＧＭＰの産生を促進し、例えば、利尿作用、血管拡張作用、レニン・アルドステロン分泌抑制、交感神経抑制、肥大の抑制などの作用を有するものと考えられる。また、これらの本発明の化合物は、ＣＮＰと比較して、優れた薬効、効能、特に優れた即効性を有すると考えられる。
【０１４７】  したがって、本発明の医薬は、従来ＣＮＰを有効成分として含む医薬と同様の目的に用いることができる。  本発明の医薬が適用可能な疾患としては、特に限定されないが、例えば、上述した各種疾患の他、高血圧症、不安定狭心症、急性心筋梗塞、浮腫性疾患、腎不全、心不全、免疫疾患、肥満、メタボリックシンドローム等が挙げられる。
【０１４８】  また、本発明の医薬の剤形は、特に限定されず、上述したような外用剤の他、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、経口液剤、シロップ剤、経口ゼリー剤等の経口投与用製剤、口腔用錠剤、口腔用スプレー剤、口腔用半固形剤、含漱剤等の口腔適用用製剤、注射剤、輸液剤等の注射投与用製剤、透析用剤等の透析用製剤、吸入剤、点眼剤、眼軟膏剤、点耳剤、膣錠、膣用坐剤等とすることができる。
【実施例】
【０１４９】  以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。但し、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。【０１５０】１．  環状ペプチドの製造  まず、式Ｉで表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチドを合成した。  具体的には、ペプチド合成機を用いて、ペプチド固相合成法により、アミノ酸を順次結合して１７個のアミノ酸からなる直鎖状のペプチドを形成した。その後、Ｎ末端から数えて１番目のＣｙｓおよび１７番目のＣｙｓにある保護基を脱離させた。その後、ヨウ素（Ｉ２）処理を行って、酸化的に同アミノ酸残基間のシステイン結合を形成し、環状ペプチドを形成した。  得られ環状ペプチドを含む組成物について、逆相液体高速クロマトグラフィー（逆相ＨＰＬＣ）による精製を行い、その後凍結乾燥を行って、白色粉末としての環状ペプチドの精製物を得た。【０１５１】  また、得られた環状ペプチドの質量分析を行った。  ＨＰＬＣの条件を以下に示す。装置：Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ溶離液Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸／水溶離液Ｂ：０．１％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル勾配：８０％溶離液Ｂ  アイソクラティック  質量分析（ＭＳ）の条件を以下に示す。装置：Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ  Ａｄｖａｎｔａｇｅイオン化法：エレクトロスプレーイオン化分析法：イオントラップ法【０１５２】  その結果、ｍ／ｚ＝８７８．４１（［Ｍ＋２Ｈ］２＋）、ｍ／ｚ＝８７８．４１（［Ｍ＋Ｈ］＋）が観測され、上記ペプチドは、目的とする環状ペプチドの組成式（Ｃ７４Ｈ１２３Ｎ２１Ｏ２２Ｓ３）から算出した理論値の分子量（１７５５．１０）および質量数（１７５３．８３１４）と一致することが確認された。【０１５３】  さらに、上記ペプチドの純度を測定するためにＨＰＬＣで以下の条件で計測した。カラム：Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｃ１８、４．６ｍｍ×２５０ｍｍ、粒径５ミクロンカラム温度：室温溶離液Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸／水溶離液Ｂ：０．１％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル勾配：２０〜４０％溶離液Ｂ／２０分流量：１．２ｍｌ／分温度：室温注入量：２０μｌ検出器：ＵＶ検出器（検出波長２１５ｎｍ）  測定の結果、得られたタンパク質の純度は、９９．２％であることが確認された。【０１５４】２．  製剤の製造２．１  ゲル製剤の製造  式Ｉで表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド（以下の実施例において「Ｃ環」という場合、式Ｉで表される環状ペプチドを意味する）を含むゲルベース製剤（Ｃ環ゲル製剤、実施例）およびヒトＣＮＰを含むゲルベース製剤（ＣＮＰゲル製剤、比較例）を以下のようにして製造した。  パラオキシ安息香酸メチルエステル（商品名：メッキンスＭ、上野製薬製）０．１ｇ、フェノキシエタノール０．２ｇ、１，２−ペンタンジオール３．０ｇを同一容器中に秤量し、６０〜７０℃に加熱して均一な溶液とし、混合釜に投入した。  次に、混合釜に、濃グリセリン６．０ｇを投入し、その後、カルボキシビニルポリマー（商品名：カーボポール９４０、ルーブリゾール・アドバンスト・マテリアルズ社製）０．４４ｇとキサンタンガム（商品名：ケルトロールＴ、ＣＰ  ＫＥＬＣＯ社製）０．０８ｇの混合物を加えてパドルで撹拌し、これらを十分に分���させた。【０１５５】  次にパドルで撹拌しつつ精製水８３．９５ｇを徐々に投入し、釜温を７０〜８０℃に加熱しつつ、パドル、デイスパーで撹拌し、分散した内容物を溶解させて溶液を得た。その後、デイスパーを停止させて溶液中の内容物が溶解したことを確認して直ちに冷却を開始した。釜温が４０℃付近に到達した時点で、アシュランド社製のルブラジェルＮＰ６．０ｇ（グリセリン２．７ｇ、カルボキシビニルポリマー０．０６ｇ、ポリアクリル酸ナトリウム０．０１８ｇ、水３．２２２ｇ）を溶液に加えてパドルで均一に混合した。その後、更に水酸化カリウム０．２３０ｇを加えて溶液を中和し、釜温が２５℃に達した時点で、パドルの回転を停止してゲルベースを製造した。【０１５６】  次に、式ＩＩで表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド（Ｃ環）１ｍｇを、１ｍＬの精製水に溶解して得られたＣ環溶液１７μｌを上記で得られたゲルベース１０ｇに均一に撹拌混合して上記Ｃ環の濃度が約１μＭ（約１．７μｇ／ｇ）のゲルベース製剤（Ｃ環ゲル製剤）を製造した。同様にして、Ｃ環の濃度が約２．０μＭ（約３．４μｇ／ｇ）、約５．０μＭ（約８．５μｇ／ｇ）のゲルベース製剤を製造した。なお、以下の実施例において、特に記載しない限り、「Ｃ環ゲル製剤」は、約１μＭのＣ環濃度のものを使用した。  次に、ヒトＣＮＰ−２２：１ｍｇ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｏｍｐａｎｙ社）を、１ｍＬの精製水に溶解して得られたＣＮＰ溶液２２μｌを上記で得られたゲルベース１０ｇに均一に撹拌混合してＣＮＰ−２２の濃度が約１μＭのゲルベース製剤（ＣＮＰゲル製剤）を製造した。同様にして、ＣＮＰ−２２の濃度が約２．０μＭ、５．０μＭのゲルベース製剤を製造した。なお、以下の実施例において、特に記載しない限り、「ＣＮＰゲル製剤」は、約１μＭのＣＮＰ濃度のものを使用した。【０１５７】２．２  点鼻剤の製造  式ＩＩで表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド（Ｃ環）を含む点鼻剤（Ｃ環点鼻剤、実施例）およびヒトＣＮＰを含む点鼻剤（ＣＮＰ点鼻剤、比較例）を以下のようにして製造した。【０１５８】  まず、式ＩＩで表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド（Ｃ環）を、生理食塩水に溶解し、濃度を調節して、約１μｍｏｌ／ｌ（約１．７μｇ／ｇ）のＣ環濃度のＣ環点鼻液を得た。  次に、Ｃ環点鼻液を、定量式の点鼻用噴霧容器（アズワン株式会社製）に充填し、さらに１回あたりの噴霧量を１００μｌ（０．１ｍｌ）となるように調節して、Ｃ環点鼻剤を得た。【０１５９】  同様にして、ヒトＣＮＰ（American Peptide Company社）についても、１μｍｏｌ／ｌ（μＭ）のＣＮＰ濃度のＣＮＰ点鼻液を得、これを定量式の点鼻用噴霧容器（アズワン社製）に充填し、さらに１回あたりの噴霧量を１００μｌ（０．１ｍｌ）となるように調節して、ＣＮＰ点鼻剤を得た。【０１６０】３．  皮膚炎治療効果の確認３．１  Ｃ環ゲル製剤の効果確認  種々の皮膚炎に罹患した被験者について、前記のＣ環ゲル製剤を患部に塗布し、塗布前後の症状の変化を観察した。なお、可能な場合、比較例として同一の被験者に対し、Ｃ環ゲル製剤を塗布していない患部に前記のＣＮＰゲル製剤を塗布し、塗布前後の症状の変化を観察した。なお、掻痒感については、患部毎にＶＡＳ（Visual analogue scale）を用いて１０段階で評価した。  試験結果を、被験者の年齢、性別、症状および被験者に対する処方とともに以下の表に示す。【０１６１】
【表１】
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【０１６２】
【表２】
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【０１６３】
【表３】
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【０１６４】
【表４】
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【０１６５】
【表５】
2017022728.tif 000011
【０１６６】
【表６】
2017022728.tif 000012
【０１６７】  上の表に示されるように、いずれの被験者においても、いずれの症状の皮膚炎においてもＣ環ゲル製剤を適用した部位において、皮膚炎の各種症状の軽快、消失が観察された。  特に、Ｃ環ゲル製剤を適用した場合には、適用直後から掻痒感の軽快、消失が観察された。皮膚炎においては、一般に、患者は掻痒感を覚えると、掻痒感を覚えた部位を掻きむしる傾向にあり、これが皮膚炎の重症化の一因となり得る。しかしながら、このように掻痒感が顕著に軽快、消失することにより、結果的に皮膚炎の重症化を防止することが可能となる。【０１６８】  また、Ｃ環ゲル製剤の効果は、いずれの症例においても、ＣＮＰゲル製剤を適用した場合の効果と比較して優れていた。特に、Ｃ環ゲル製剤は、ＣＮＰゲル製剤と比較して、即効性と持続性に優れ、より強力な鎮痒効果を有していた。なお、これらの効果はゲルベースでは得られない事が確認された。【０１６９】３．２  左右ぬりわけ法による、Ｃ環ゲル製剤とゲルベースとの比較  種々の皮膚炎に罹患した被験者について、Ｃ環ゲル製剤およびゲルベースを患部に塗布し、塗布前後の症状の変化を観察した。これらの効果を以下の表にまとめた。【０１７０】
【表７】
2017022728.tif 000013
【０１７１】３．３  乾癬におけるＣ環ゲル製剤の効果確認  以下に乾癬の症例についての治療効果についてまとめた。上記同様に、Ｃ環ゲル製剤を乾癬の患部に塗布し、塗布前後の症状の変化を観察した。なお、可能な場合、比較例として同一の被験者に対し、Ｃ環ゲル製剤を塗布していない患部に前記のＣＮＰゲル製剤を塗布し、塗布前後の症状の変化を観察した。  試験結果を、被験者の年齢、性別、症状および被験者に対する処方とともに下の表に示す。【０１７２】
【表８】
2017022728.tif 000014
【０１７３】
【表９】
2017022728.tif 000015
【０１７４】
【表１０】
2017022728.tif 000016
【０１７５】  また、図１に乾癬を発症する患者（Ｐ６）の下腿に、左右塗り分け法によりＣ環とＣＮＰゲル製剤をそれぞれぬり分け、塗布後３日目の結果を示す。右下腿Ｃ環塗布側では、鱗屑がほぼ消失し、赤みが抑えられているのが観察された。しかし、比較対象としての左下腿ＣＮＰ塗布では、鱗屑は目立たなくなるが残存し、紅斑、浸潤は少し改善しただけで、Ｃ環ほどの効果は得られなかった。【０１７６】  Ｃ環は、乾癬に対して、従来のステロイド外用薬やビタミンＤ３外用薬よりも即効性が認められ、生物学的製剤に比べ、施行の手間も少なく、治療満足度、ＱＯＬが向上するという結果が得られた。また、Ｃ環はＣＮＰよりも、顕著な治療効果と低濃度での薬効が認められ、驚くべきは、ＣＮＰでは十分効果が得られない厚い鱗屑に対して、高い治療効果がみられ、数分以内に軽快する即効性と、その後の寛解維持効果がみられた。乾癬は厚い鱗屑を伴う紅斑が全身に多発し、鱗屑が剥がれ落ちるので、外見上の問題などのため、ＱＯＬが著しく障害されるが、Ｃ環外用療法では、乾癬患者のＱＯＬを早期に向上させることができる。乾癬は慢性の炎症性皮膚疾患の一つで、難治性であり、現在、乾癬に対する治療薬剤の選択肢には、ステロイド外用薬とビタミンＤ３外用薬による外用療法と、紫外線照射、シクロスポリン、エトレチナートを用いた治療、近年では、中等症以上の症例に対して使用されている生物学的製剤があげられる。しかし、生物学的製剤の薬効が評価される一方で、高い費用負担、長期使用による副作用の懸念、皮下注射による施行の手間が指摘されている。外用療法による治療では、ビタミンＤ３単独で寛解できる症例は少なく、ステロイド併用継続が避けられないことが多い。しかし、ステロイド長期外用による皮膚萎縮や副腎機能不全が起こりやすいほか、ビタミンＤ３では、ステロイド長期外用やエトレチネート使用により皮膚が菲薄化して外用薬の吸収が亢進している人や腎機能低下症例に使用する場合は、高カルシウム血症に注意が必要である。これに対し、本発明のＣ環は、上記したように、従来の治療法に比べ、優れた効果を奏するだけでなく、上記懸念を解消するものである。【０１７７】４．化粧料としての効果の確認  Ｃ環を含む化粧料による効果は、Ｃ環を含んだゲル剤、入浴剤および頭髪化粧品（シャンプー、リンス）またはボディーソープとして使用した結果を評価し、その効果を確認した。４．１．１  肌質改善効果の確認（Ｃ環ゲル製剤とＣＮＰゲル製剤との比較）  被験者に対し、上記のＣ環ゲル製剤、ＣＮＰゲル製剤を処方した。そして、各被験者の頬や目元に、Ｃ環ゲル製剤を右側に、ＣＮＰゲル製剤を左側に塗布して、肌状態の変化を観察し比較した。またその症例と評価を以下の表にまとめた。なお、肌状態の変化は、被験者の体感的な評価と、医師としての本発明者による客観的な観察とに基づいて判定した。【０１７８】
【表１１】
2017022728.tif 000017
【０１７９】
【表１２】
2017022728.tif 000018
【０１８０】  また、左右塗り分けをせずに、Ｃ環ゲル製剤を塗布した例を以下にまとめた。なお、肌状態の変化は、上記と同様の方法で行った。【０１８１】
【表１３】
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【０１８２】  以上、本発明のＣ環は、皮膚の保湿効果を有するとともに肌理を整えることができ、さらに、美白、しみ、くすみ、アンチエイジング（たるみ、はり、大しわ）等の肌質改善について有効であるとともに、唇荒れといった粘膜の状態の改善にも有効であることが示された。【０１８３】  いずれの被験者においても、ＣＮＰゲル製剤を塗布した部位と比較して、Ｃ環ゲル製剤を塗布した部位について、肌質の著しい改善効果と、その維持が認められた。具体的には、肌が整う、肌が潤う、肌のキメが整う、肌にはりが出てひきしまる、肌が柔らかくなる、皮膚の乾燥が抑えられる、小じわが目立たなくなる、肌の水分、油分が補われ保たれる、目尻のしわが浅く、目立たなくなる、肌のヒリヒリ感がなくなる、かゆみがとれ、おさえられる、肌のかさつきが緩和される、肌の健やかな状態が保たれる等の効果が、Ｃ環ゲル製剤を塗布した部位についてＣＮＰゲル製剤を塗布した部位と比較して、有意に認められた。【０１８４】  また、２０代から６０代まで被検者を対象とした結果、年齢を問わず、しわが改善する・消える、頬のたるみが改善され皮膚にうるおい、水分、油分を補い保つなどの効果がみられた。また、肌が引き締まりピンとし、頬が上がり、また、肌のヒリヒリ感がなくなり、肌のかさつきが緩和されるという効果もみられた。これらの効果は、ＣＮＰゲル製剤と比較して、Ｃ環ゲル製剤を塗布した部位について顕著に認められ、ＣＮＰゲル塗布部位と比較してもその効果はより大きかった。  さらに、４０歳代〜６０歳代の被験者では、Ｃ環ゲル製剤塗布後迅速に、たるみ、シワ、乾燥が改善され、肌が引きしまり、くすみ、シミ、たるみ、くまが目立たなくなるなどという効果が顕著に見られ、その効果はＣＮＰゲル剤塗布した際の効果より大きかった。【０１８５】  なお、効果の発現は、ＣＮＰゲル製剤と比較してＣ環ゲル製剤のほうが著しく早かった。ほとんどの場合、Ｃ環ゲル製剤塗布２分後前後にしわが消え始め、目立たなくなり、肌がふっくらしてはりが出る等の効果が確認された。また、この効果は、その後少なくとも数時間後も持続した。Ｃ環ゲル製剤塗布に伴う刺激症状はなかった。【０１８６】４．１．２  肌質改善効果の確認（Ｃ環ゲル製剤とゲルベースとの比較）  Ｃ環ゲル製剤とＣＮＰゲル製剤の効果におけるゲルベースの寄与の有無を検討するために、１名の被験者の右顔面にＣ環ゲル製剤を、左顔面にゲルベースを塗布し、被験者の顔面の肌状態の変化について観察した。【０１８７】
【表１４】
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【０１８８】  ゲルベースを塗布した部分では、皮膚の乾燥感や、ヒリヒリした感じが改善されなかった。一方で、Ｃ環ゲル製剤を塗布した部分では、塗布２分後に、肌が柔らかく、しっとりするようになり、ヒリヒリした感じが改善された。また、肌理が整い、小じわが目立たなくなった。【０１８９】４．２  Ｃ環ゲル製剤を塗布した粘膜の状態の観察  唇荒れの症状を有する正常被験者に対し、Ｃ環ゲル製剤を塗布し、唇の粘膜の状態の変化を観察し、以下の表にまとめた。なお、粘膜の状態の変化は、被験者の体感的な評価と、医師としての本発明者による客観的な観察とに基づいて判定した。【０１９０】
【表１５】
2017022728.tif 000021
【０１９１】  以上のように本発明の環状ペプチドは、粘膜の状態を改善する作用も有し、さらに上記のような作用に関して即効性を有することも確認できた。【０１９２】４．３  Ｃ環ゲル製剤を塗布した頭皮・毛髪の状態の観察  頭皮・毛髪の症状を有する正常被験者に対し、Ｃ環ゲル製剤を塗布し、頭皮および毛髪の状態の変化を観察し、以下の表にまとめた。なお、頭髪・毛髪の状態の変化は、被験者の体感的な評価と、医師としての本発明者による客観的な観察とに基づいて判定した。【０１９３】
【表１６】
2017022728.tif 000022
【０１９４】  以上、本発明のＣ環は、頭皮や頭髪に潤いを与え保つととともに適度な水分、油分を補い保ち、乾燥を改善し、防ぐことができ、脂漏を改善し、頭皮や毛髪を清浄にすることができる。さらに、頭皮のかゆみやふけを抑えることに対しても有効であるとともに、毛髪においても、薄毛や脱毛の予防、育毛、抜け毛防止および予防、毛生促進、発毛、促毛に対して有効であり、病後・産後の脱毛、養毛等の改善にも有効であることが示された。【０１９５】４．４  Ｃ環を含む入浴剤を使用したときの皮膚状態の観察  Ｃ環を０．０１μＭになるように溶解した３７〜４１℃のお湯（お湯２００Ｌに対してＣ環２０μＭ溶液を１００ｍｌ溶解）に、１回／日、１４日間、被験者を入浴させ、被験者の皮膚状態をさら湯（お湯のみ）のときと比較した。またその症例と評価を以下の表にまとめた。なお、皮膚状態の変化は、被験者の体感的な評価と、医師としての本発明者による客観的な観察とに基づいて判定した。【０１９６】
【表１７】
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【０１９７】  以上、本発明のＣ環を含む入浴剤は、あせも、肌のひびわれやあかぎれが軽快するだけでなく、湿疹についても改善効果がみとめられた。さらに肌の乾燥や肌の痛痒さの改善がみられ、皮膚状態の改善に有効であることが示された。【０１９８】４．５  Ｃ環を含む頭髪化粧料（シャンプー、リンス）またはボディーソープを使用したときの頭皮および頭髪状態または皮膚状態の観察【０１９９】４．５．１  Ｃ環を含むシャンプーを、以下の組成で配合、製造を行った。【表１８】
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ＡとＢを７０℃で加温溶解した後、ＡにＢを加え、撹拌、混合した。さらに撹拌しながら４０〜３５℃でＣを添加し、撹拌したまま室温まで冷却した。
【０２００】４．５．２  Ｃ環を含むトリートメントを、以下の組成で配合、製造を行った。【表１９】
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ＡとＢを８０℃で加温溶解した後、ＡとＢを８０℃に保ったまま、Ａをホモミキサーで撹拌しながら、Ｂを徐々にＡに加え乳化した。さらにＣを添加し、撹拌したまま３５℃まで冷却した。
【０２０１】４．５．３  Ｃ環を含むボディソープを、以下の組成で配合、製造を行った。【表２０】
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ＡとＢを８０℃で加温溶解した後、撹拌しながら、徐々にＡにＢを加える。さらに、撹拌しながら４０〜３５℃でＣを添加し、撹拌したまま室温まで冷却した。
【０２０２】  上記に従って製造したシャンプー、リンスまたはボディーソープを１回／日、１４日間使用し、被験者の頭皮および頭髪状態または皮膚状態における結果を評価した。またその症例と評価を以下の表にまとめた。なお、皮膚状態の変化は、頭皮のふけ、紅斑などは、被験者の目視により評価し、頭皮のかゆみ、しっとり感、毛髪の櫛通り、つや、はり・こしは、被験者の体感的な評価とした。【０２０３】
【表２１】
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【０２０４】  以上、本発明のＣ環を含む頭髪料の使用は、頭皮の痒み、紅斑、乾燥に対しては、即効性の改善効果がみられた。または薄毛や抜け毛に対しては、２週間以上連続して使用すると、その症状の改善に有効であることが示された。さらに、本発明のＣ環を含むボディーソープの使用は、乾燥肌や敏感肌に対して、改善効果があることが示された。【０２０５】５．脱毛症治療効果の確認  Ｃ環ゲル製剤、ＣＮＰゲル製剤を塗布し、種々の脱毛に関する症状に対する効果を観察した。またその症例と評価を以下の表にまとめた。なお、症状の変化は、被験者の体感的な評価と、医師としての本発明者による客観的な観察とに基づいて判定した。【０２０６】
【表２２】
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【０２０７】
【表２３】
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【０２０８】５．１  ＡＧＡ治療効果の確認  Ｃ環ゲル製剤、ＣＮＰゲル製剤を塗布し、ＡＧＡにおける症状に対する効果を観察した。またその症例と評価を以下の表にまとめた。なお、症状の変化は、被験者の体感的な評価と、医師としての本発明者による客観的な観察とに基づいて判定した。【０２０９】
【表２４】
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【０２１０】  図２は、男性型ＡＧＡ（Ｍ型およびＯ型）を発症する患者（Ａ１１）に、Ｃ環ゲル製剤を塗布する前と塗布した後の結果を示す図である。塗布開始７週間後には、髪の毛のコシが強く、髪の毛が太くなり、抜け毛が劇的に減少した。その結果、毛の密度が濃くなり、薄毛が目立たなくなった。これらの現象は、ＣＮＰよりも、Ｃ環を含むゲル製剤の方が、発毛、育毛効果がより顕著にみられた。特にＭ型薄毛で生え際が後退していたが、生え際が前進して、Ｍ型薄毛に対する発毛、増毛、育毛効果がＣＮＰよりも非常に顕著に確認された。【０２１１】５．２  症例まとめ  上記の女性型脱毛症、男性型脱毛症、汎発性脱毛症、蛇行状脱毛症、多発性脱毛症を有する被験者の症例においても、実施例に係るＣ環ゲル製剤を適用した場合、抜け毛が顕著に減少し、硬毛の発毛範囲が拡大し、その成長も早かった。さらに、既存の毛髪のハリが生じ、そのコシが強くなった。いずれも比較例にかかるＣＮＰゲル製剤を適用した場合と比較して、その症状の改善が顕著に表れた。すなわち、Ｃゲル製剤は、ＣＮＰゲル製剤と比較して、上記症状に対する効能が優れていた。  さらに、Ｃ環ゲル製剤は、脂漏性を改善し、頭皮を清浄にし、フケを抑えることができた。また、白髪を予防し、黒い毛を生やし、薄毛の改善をもたらすものであった。さらには、かゆみを抑える効果は１０分後には抑えることができ、その即効性の効果が高いことがわかった。【０２１２】６．鼻炎の治療効果の確認６．１  症例  Ｃ環点鼻剤、ＣＮＰゲル点鼻剤を噴霧し、被験者の鼻炎等に対する効果を観察した。またその症例と評価を以下の表にまとめた。なお、症状の変化は、被験者の体感的な評価と、医師としての本発明者による客観的な観察とに基づいて判定した。【０２１３】
【表２５】
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【０２１４】
【表２６】
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【０２１５】６．２  症例まとめ  上記いずれの症例においても、実施例に係るＣ環点鼻剤を適用した場合、鼻漏、鼻閉ともに比較例にかかるＣＮＰ点鼻剤を適用した場合と比較して、その改善、解消が迅速に行われていた。すなわち、Ｃ環点鼻剤は、ＣＮＰ点鼻剤と比較して即効性に優れていた。また、Ｃ環点鼻剤の効能はＣＮＰ点鼻点鼻剤の効能と比較して同等以上であり、また、その効能の持続時間が長く、症状の再発を抑える事ができるものであった。【０２１６】７．  ヒトＣＮＰのＢ型受容体との結合状態の解析    本発明のＣ環化合物が従来のＣＮＰに比べて各疾病等に対する薬理効果に優れることについては、以上のとおり、各臨床例に基づきデータをもって説明したが、かかる薬理効果は発明者らが行った、化合物の立体構造解析の結果からも裏付けられるものであることについて参考のため以下の実験レポートをもって説明する。  ヒトＣＮＰ（ＣＮＰ−２２）と、同ＣＮＰの受容体であるＢ型受容体（ＮＰＲ−Ｂ）との結合状態を検討するため、立体構造を用いた、ホモロジーモデリングによるｉｎ  ｓｉｌｉｃｏ解析を行った。モデリングには、Ｓｗｉｓｓ−Ｐｄｂ  ｖｉｅｗｅｒおよびＳＷＩＳＳ−ＭＯＤＥＬを使用した。【０２１７】７．１  テンプレート構造  まず、上記解析に先立ち、ヒトＣＮＰとＢ型受容体との間の結合状態の検討のためのテンプレート構造を選定した。このテンプレート構造として、ラットＮＰＲ−ＡとラットＡＮＰペプチドとの複合体の立体構造（ＰＤＢ  ＩＤ：１Ｔ３４）を使用した。ラットＮＰＲ−Ａは、Ａ鎖、Ｂ鎖からなるホモ二量体である。そして、このようなラットＮＰＲ−Ａは、ラットＡＮＰのＣｙｓ７〜Ａｒｇ２７の２１残基が結合した状態でＸ線結晶構造解析により立体構造が決定されている。また、ラットＮＰＲ−Ａの立体構造は、タンパク質立体構造データベースであるProtein Data Bankから入手した。また、ヒトＮＰＲ−ＢとラットＮＰＲ−Ａのアミノ酸一致度は４５％である。【０２１８】  なお、本明細書において、アミノ酸残基の記号とともに表記する数字は、ペプチド中におけるそのアミノ酸残基のＮ末端から数えた順番を指す。したがって、例えば、ヒトＣＮＰにおいて、「Ｃｙｓ６」の表記は、ヒトＣＮＰのアミノ酸配列のＮ末端から数えた第６番目のシステインを意味する。他の位置におけるアミノ酸残基の表記法も同様である。【０２１９】７．２  ＣＮＰペプチドモデル  今回、ＣＮＰのペプチドモデルとして、ヒトＣＮＰ（ＣＮＰ−２２）のＣｙｓ６〜Ｃｙｓ２２の領域のアミノ酸配列である、Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｍｅｔ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ（配列番号：５）を使用した。なお、当然ながら、当該ＣＮＰペプチドモデルの領域は本発明のＣ環と一致する。【０２２０】７．３  ホモロジーモデリング  ヒトＮＰＲ−ＢのヒトＣＮＰ結合に関与するアミノ酸残基を推察するため、ＣＮＰペプチドがヒトＮＰＲ−Ｂに結合した複合体モデルをホモロジーモデリングにより構築した。具体的には、ホモロジーモデリングにより、テンプレート構造のラットＡＮＰペプチドに基づいてヒトＣＮＰペプチドモデルを、テンプレート構造のラットＮＰＲ−��に基づいてヒトＮＰＲ−Ｂのモデル構造をモデリングした。  次に、ヒトＣＮＰペプチドモデルとヒトＮＰＲ−Ｂとの間で検出されたアミノ酸残基から、相互作用に直接関与する残基を推測した。【０２２１】  この結果、ＣＮＰペプチドモデルはヒトＮＰＲ−Ｂの二量体と、そのＡ鎖とＢ鎖とに挟まれた状態で結合していることが示された。  構築した複合体モデルでは、ＣＮＰペプチドモデルとＮＰＲ−ＢのＡ鎖との間に、Ｐｈｅ２およびＬｅｕ４の側鎖による疎水性結合、Ｃｙｓ１の主鎖、Ｌｙｓ５およびＡｒｇ８の側鎖による水素結合が推測された。また、ＣＮＰペプチドモデルとＮＰＲ−ＢのＢ鎖との間には、Ｍｅｔ１２の側鎖による疎水性結合、Ｇｌｙ１６の主鎖、Ａｒｇ８の側鎖による水素結合が推測された。なお、ＣＮＰペプチドモデルのＣｙｓ１、Ｐｈｅ２、Ｌｅｕ４、Ｌｙｓ５、Ａｒｇ８、Ｍｅｔ１２、Ｇｌｙ１６は、それぞれ、ヒトＣＮＰ（ＣＮＰ−２２）のＣｙｓ６、Ｐｈｅ７、Ｌｅｕ９、Ｌｙｓ１０、Ａｒｇ１３、Ｍｅｔ１７、Ｇｌｙ２１に対応する。ヒトＣＮＰのうち、これらのアミノ酸残基が、ＮＰＲ−Ｂの活性化に寄与する残基であると考えられる。【０２２２】７．４  考察  以上より、ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏ解析による立体構造解析から、ヒトＣＮＰのＮＰＲ−Ｂ活性化に寄与する残基は、その環状部分、すなわちＣ環に存在することが推測された。【０２２３】  さらに、ＮＭＲによる解析から、ＡＮＰは水溶液中で特定の立体構造をとらず、大きく揺らいでいることが明らかになっており、ＣＮＰも同様と考えられている。この点、ヒトＣＮＰにおいては、その環状部分のアミノ酸残基がヒトＮＰＲ−Ｂとの結合に寄与しているとすると、尾部のアミノ酸残基は、むしろその大きな揺らぎにより、ヒトＣＮＰがヒトＮＰＲ−ＢのＡ鎖とＢ鎖に挟まれた狭いＣＮＰ結合部位へ入り込みにくくすると推測された。したがって、ヒトＣＮＰの環状部分は、ヒトＣＮＰ等と異なり、ＣＮＰと比較してより低分子であり、ＮＰＲ−ＢのＣＮＰ結合部位により容易かつ迅速に入り込むことが可能であると考えられる。【０２２４】  すなわち、ヒトＣＮＰの環状部分は、ＣＮＰよりもヒトＮＰＲ−Ｂに対する親和性が高いと推測される。とすると、本発明の環状ペプチドが、ＣＮＰと比較して、優れた薬効、効能を有する分子生物学的なメカニズムは、必ずしも明らかにされているわけではないが、ＮＰＲ−Ｂ受容体（ＧＣ−Ｂ）に対し、ＣＮＰと比して結合しやすくなることや親和性が高くなることが示唆されることから、ＣＮＰ環状構造がＮＰＲ−Ｂの活性化に寄与し、さらにＣＮＰによりも容易にかつ迅速に結合できるという、ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏ解析の結果は、本発明のＣ環化合物が従来のＣＮＰに比べて各疾病等に対する薬理効果に優れるという、上述の各臨床例を裏付けるものである。【０２２５】  また、ヒトと同様のアミノ酸配列を有する他の種に由来するＣ環であっても、同様の構造を有することから、ヒト由来のＣ環と同様の効果を奏することが推測される。【０２２６】８．  ＣＮＰ環状部分における置換可能なアミノ酸残基の推定  構築した複合体のモデル構造を使用して、相互作用が推察されたアミノ酸残基以外のアミノ酸残基の置換可能性について検討を行った。  具体的には、相互作用が推察されたアミノ酸残基以外のアミノ酸残基を他のアミノ酸に置換した際に、置換ペプチドが、ＮＰＲ−Ｂに対して結合可能か否かを検討するために、ＣＮＰの変異体モデルを作製し、相互作用について解析した。モデリングには、Ｓｗｉｓｓ−Ｐｄｂ  ｖｉｅｗｅｒを使用した。【０２２７】  具体的には、ヒトＣＮＰのアミノ酸残基のうち、Ｇｌｙ８、Ｌｅｕ１１、Ａｓｐ１２、Ｉｌｅ１４、Ｇｌｙ１５、Ｓｅｒ１６、Ｓｅｒ１８、Ｇｌｙ１９およびＬｅｕ２０を対象とし、他のアミノ酸に置換可能か否かを、以下の点から検討した。・ＮＰＲ−Ｂに結合する際に立体障害を起こさない。ＮＰＲ−ＢとＣＮＰ変異体モデル構造において、原子間の衝突が見られない。・表面の静電ポテンシャルに影響を与えない。・分子内エネルギーの値が大きく増加しない（原子間の結合に無理な角度やねじれを生じない）。・ＮＰＲ−ＢとＣＮＰとの鎖間およびＣＮＰの鎖内で本来見られない水素結合を形成しない。・Ｃａｖｉｔｙ（空洞、すき間）を生じない。【０２２８】  なお、上記のうち、分子内エネルギーの値は、Ｓｗｉｓｓ−Ｐｄｂ  ｖｉｅｗｅｒのＣｏｍｐｕｔｅ  Ｅｎｅｒｇｙコマンドによって算出した。分子内エネルギーは、原子間の結合の長さ、結合角、ねじれ、結合エネルギー等の合計により、単位キロジュール／ｍｏｌ（Ｋｊ／ｍｏｌ）で算出した。【０２２９】  解析の結果、Ｇｌｙ８、Ｌｅｕ１１、Ｉｌｅ１４、Ｓｅｒ１６、Ｓｅｒ１８およびＬｅｕ２０において、置換可能なアミノ酸残基が示された。その結果を以下の表にまとめた。【表２７】
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【０２３０】  以上より、ヒトＣＮＰの環状部分、すなわち、式ＩＩで表されるペプチドにおいて上記表に記載の置換に対応するアミノ酸残基の置換が行われた場合であっても、このような置換が行われたペプチドが式ＩＩで表されるアミノ酸配列からなるペプチドと同様の効果を奏することが示唆された。【０２３１】  ８．アミノ酸を置換した環状ペプチドの治療効果の確認  次に、一部のアミノ酸を置換した環状ペプチドについて、その効果を確認すべく以下の試験に供した。なお、上記環状ペプチドの製造方法および製造されたペプチドのアミノ酸配列の確認方法は、上記した環状ペプチドの製造方法および質量分析方法と同様であった。なお、試験に用いた環状ペプチドの変異体などは下表の環状ペプチドを用いた。また、下表は、本発明の環状ペプチドの一例であり、これらに限定されるものではない。下表おいて、変異させる数で例えば「０〜２」との記載は、配列中、任意に０、１、２個のアミノ酸を変異させてもよいことを示す。なお、配列番号２２〜３１、４２〜４７、５４〜５６、６０〜６２の場合において、いずれの場合においても、配列番号３（すなわち、アミノ酸変異が０）の場合を除くこともできる。 【０２３２】
【表２８−１】
2017022728.tif 000034
【０２３３】
【表２８−２】
2017022728.tif 000035
【０２３４】８．１  肌への効果の確認  得られた環状ペプチドを、精製水で１、５、３０、１００、５００μｇ／ｍｌに配合し患部に塗布した。なお、表中の処方Ａ〜Ｅは、それぞれ１、５、３０、１００、５００μｇ／ｍｌの環状ペプチド濃度を指す。なお、ペプチドを配合しない、精製水で処置した場合は、効果がないことから、プラセボ効果ではないことが確認された。【０２３５】
【表２９−１】
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【０２３６】
【表２９−２】
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【０２３７】
【表２９−３】
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【０２３８】
【表２９−４】
2017022728.tif 000039
【０２３９】
【表２９−５】
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【０２４０】
【表２９−６】
2017022728.tif 000041
【０２４１】
【表２９−７】
2017022728.tif 000042
【０２４２】
【表２９−８】
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【０２４３】
【表２９−９】
2017022728.tif 000044
【０２４４】
【表２９−１０】
2017022728.tif 000045
【０２４５】
【表２９−１１】
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【０２４６】
【表２９−１２】
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【０２４７】
【表２９−１３】
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【０２４８】
【表２９−１４】
2017022728.tif 000049
【０２４９】
【表２９−１５】
2017022728.tif 000050
【０２５０】
【表２９−１６】
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【０２５１】
【表２９−１７】
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【０２５２】
【表２９−１８】
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【０２５３】   上記結果より、本発明の環状ペプチドの一部のアミノ酸を置換した環状ペプチドであっても、式ＩIで表される環状ペプチド（配列番号３）と同等以上の効果を奏することが実証された。また、置換した環状ペプチドを混合して適用した場合においても、有効量の環状ペプチドを適用することで、同様の効果を得ることができた。【０２５４】   特に、アトピー性皮膚炎、湿疹などを有する被験者に、１μｇ／ｍｌ〜５００μｇ／ｍｌを患部に１回の単純塗布直後から、痒みを消失する、紅斑、浸潤、丘疹、掻き傷が上皮化、浸出液が止まる、亀裂が上皮化する等の即効性がみられた。また、わずか１回の塗布で、１週間以上その効果が続く持続性がみられた。なお、健常肌や肌荒れに適用した場合、塗布直後から数分以内に保湿効果を発揮して乾燥を改善し、皮膚および粘膜に適度な弾力性と柔軟性が付与・保持され、肌が柔らかくなり、皮膚、粘膜にハリが生じ、ひきしまる。また、適用部位において小じわややたるみが改善され、さらにくすみ、しみが目立たないものとなる。さらに光線過敏症、光線皮膚症を予防し、光線による炎症症状が起きない、または起きにくくなる効果がある。これらは、１回の塗布で１週間以上の効果の持続性がみられた。【０２５５】  特に、左右塗分け法で行った試験例Ｓ１１９〜Ｓ１２９（同一人に対し、片側をＣＮＰ環状ペプチド、もう片側を４アミノ酸置換した環状ペプチド（例えば配列番号５８など）による試験）では、配列番号５８などの環状ペプチドは、わずか１μｇ／ｍｌの低濃度であっても、アトピー性皮膚炎、乾癬および湿疹に対して、使用開始時から数分で、炎症症状、すなわち、痒み、紅斑、鱗屑、浸潤などを抑える効果があるほか、掻き傷の乾燥、上皮化が促進される。効果の持続性に優れ、塗布中止後も、痒みが出ない。乾癬ではアミノ酸置換したＣＮＰ環状ペプチド塗布数分で、境界明瞭な紅斑と鱗屑を主体とした硬い局面が、滑らかで柔らかく平坦になり正常皮膚との境界が不明瞭になりはじめ、７、８分後にはさらに紅斑、鱗屑が軽快し、ほぼ正常皮膚色となり、鱗屑もほとんど目立たなくなって、平坦化することが確認された。さらに効果の持続性が高く、滑らかで鱗屑、紅斑が改善した状態が、塗布しなくても３週間後も再発しなかった。【０２５６】  なお、ＣＮＰ環状ペプチドを１μＭ適用した効能は、ＣＮＰを１０μＭ〜５０μＭよりも同等以上の効能が得られるものである。さらに、今回我々が新規に開発した一部のアミノ酸置換をしたＣＮＰ環状ペプチドは、ＣＮＰやアミノ酸置換させていないＣＮＰ環状ペプチドと比較すると、治療効果が高いだけでなく、即効性があり、さらに非常に低濃度で作用する効果が確認された。【０２５７】８．２  頭皮または頭髪への効果の確認  得られた環状ペプチドを、精製水で１、５、３０、１００、５００μｇ／ｍｌに配合し患部に塗布した。なお、表中の処方Ａ〜Ｅは、それぞれ１、５、３０、１００、５００μｇ／ｍｌの環状ペプチド濃度を指す。なお、ペプチドを配合しない、精製水で処置した場合は、効果がないことから、プラセボ効果ではないことが確認された。【０２５８】
【表３０−１】
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【０２５９】
【表３０−２】
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【０２６０】
【表３０−３】
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【０２６１】
【表３０−４】
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【０２６２】
【表３０−５】
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【０２６３】
【表３０−６】
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【０２６４】
【表３０−７】
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【０２６５】
【表３０−８】
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【０２６６】
【表３０−９】
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【０２６７】
【表３０−１０】
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【０２６８】
【表３０−１１】
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【０２６９】
【表３０−１２】
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【０２７０】
【表３０−１３】
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【０２７１】  上記結果より、本発明の環状ペプチドの一部のアミノ酸を置換した環状ペプチドであっても、式ＩIで表される環状ペプチド（配列番号３）と同等以上の効果を奏することが実証された。また、置換した環状ペプチドを混合して適用した場合においても、有効量の環状ペプチドを適用することで、同様の効果を得ることができた。【０２７２】  特に、左右塗分け法で行った試験例Ｕ８７〜Ｕ８８（同一人に対し、片側をＣＮＰ環状ペプチド、もう片側を４アミノ酸置換した環状ペプチド（例えば配列番号５８など）による試験）では、配列番号５８などの環状ペプチドは、わずか１μｇ／ｍｌの低濃度であっても、アトピー性皮膚炎、乾癬および湿疹に対して、使用開始時から数分で、痒みなどを抑える効果があることが確認された。【０２７３】  なお、ＣＮＰ環状ペプチドを１μＭ適用した効能は、ＣＮＰを１０μＭ〜５０μＭよりも同等以上の効能が得られるものであり、ＣＮＰやアミノ酸置換させていないＣＮＰ環状ペプチドと比較すると、治療効果が高いだけでなく、即効性があり、さらに非常に低濃度で作用する効果が確認された。【０２７４】  特に、脱毛部位または発毛部位等の部位に適用した場合において、適用部位における脱毛を防止するとともに、発毛または育毛を促進させる効果、髪にハリとコシを与え、髪のボリュームが増し、抜け毛を劇的に減らす効果を有した。ま、養毛効果、毛生促進効果、薄毛改善・予防などの効果がみられた。特に、発毛する毛髪は硬毛となりやすく、白髪ではない髪となりやすい傾向にあった。また、これらの効果は、従来脱毛症治療剤において用いられた、例えばＣＮＰなどにはみられないこうかであった。すなわち、例えば難治性の多発性脱毛症や、蛇行状脱毛症であっても、一回の塗布だけで翌日には発毛が確認できるなど、著しく早期に発現し、かかる効果は、塗布中止後も発毛が持続した。また、ＡＧＡや健常者においては塗布後、翌日から、髪にハリとコシを与え、髪のボリュームが増し、抜け毛を劇的に減らす即効性の効果がみられ、その効果は塗布中止後も持続した。さらに、上記の効果だけでなく、頭皮にある皮膚炎などの改善、予防効果が見られた。【０２７５】  したがって、脱毛症に伴う皮膚の炎症を改善または予防することができる。かかる効果は、特に頭皮等の適用部位の皮膚の状態に起因して脱毛症が悪化している場合に有用である。さらに、外用剤として使用する場合は、上述したように、適用部位において保湿効果および肌理を整える効果を発揮する。すなわち、フケやかゆみを取り、これらの発生を抑制することができるとともに、毛髪、頭皮に潤いを与え乾燥を改善し、防ぎ、脂漏性も改善し、頭皮や頭髪を健やかに保つことができる。【０２７６】８．３  鼻への効果の確認  得られた環状ペプチドを、精製水で１、５、３０、１００、５００μｇ／ｍｌに配合し患部に塗布した。なお、表中の処方Ａ〜Ｅは、それぞれ１、５、３０、１００、５００μｇ／ｍｌの環状ペプチド濃度を指す。なお、ペプチドを配合しない、精製水で処置した場合は、効果がないことから、プラセボ効果ではないことが確認された。【０２７７】
【表３１−１】
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【０２７８】
【表３１−２】
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【０２７９】
【表３１−３】
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【０２８０】
【表３１−４】
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【０２８１】
【表３１−５】
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【０２８２】
【表３１−６】
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【０２８３】
【表３１−７】
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【０２８４】
【表３１−８】
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【０２８５】  上記結果より、本発明の環状ペプチドの一部のアミノ酸を置換した環状ペプチドであっても、式ＩIで表される環状ペプチド（配列番号３）と同等以上の効果を奏することが実証された。また、置換した環状ペプチドを混合して適用した場合においても、有効量の環状ペプチドを適用することで、同様の効果を得ることができた。【０２８６】   １μｇ／ｍｌ〜５００μｇ／ｍｌ、０．１ｍｌを各鼻腔、患部に１回点鼻した直後から鼻汁を止め、鼻閉を改善し、鼻腔粘膜の痒みやくしゃみを止める即効性と、わずか１回の点鼻塗布で、１日持続し、症例によっては１週間以上その効果が続く持続性がみられた。ＣＮＰ投与と比較すると、治療効果が高いだけでなく、即効性があり、さらに非常に低濃度で作用する効果があった。【０２８７】  特に、左右塗分け法で行った試験例Ｔ４１〜Ｔ４４（同一人に対し、片側をＣＮＰ環状ペプチド、もう片側を４アミノ酸置換した環状ペプチド（例えば配列番号５８など）による試験）では、配列番号５８などの環状ペプチドは、わずか１μｇ／ｍｌの低濃度であっても、アトピー性皮膚炎、乾癬および湿疹、接触性皮膚炎に対して、使用開始時から数分で、紅斑、鱗屑、丘疹、浮腫、痒みなどを抑える効果があることが確認された。【０２８８】  なお、ＣＮＰ環状ペプチドを１μＭ適用した効能は、ＣＮＰを１０μＭ〜５０μＭよりも同等以上の効能が得られるものであり、ＣＮＰやアミノ酸置換させていないＣＮＰ環状ペプチドと比較すると、治療効果が高いだけでなく、即効性があり、さらに非常に低濃度で作用する効果が確認された。さらに、今回新規に開発した一部アミノ酸置換したＣＮＰ環状ペプチドでは、アミノ酸置換していないＣＮＰ環状ペプチドでは効果が得られないさらに低濃度でも、効果がみられ、その効果は即効性で鼻漏、鼻閉の顕著な改善と、粘膜の痒みとくしゃみも止めることができる。  本発明は、従来のステロイド薬といった従来用いられてきた鼻炎治療剤によって、局所刺激が強く、点鼻薬使用を希望されない被験者でも、全く局所刺激がないので、安心して使うことができる。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成29年10月30日(2017.10.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
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式中、
Ｘ１は、Ａｌａを示し、
Ｘ２は、Ｌｅｕ、ＡｌａまたはＭｅｔを示し、
Ｘ３は、ＩｌｅまたはＶａｌを示し、
Ｘ４は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、ＩｌｅまたはＬｅｕを示し、
Ｘ５は、Ｓｅｒ、ＴｈｒまたはＡｌａを示し、
Ｘ６は、Ｌｅｕ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、ＭｅｔまたはＰｈｅを示し、
２つのＣｙｓを結ぶ線は、ジスルフィド結合を表す、
で表されるアミノ酸配列を有し、
当該アミノ酸配列が、当該アミノ酸配列を構成するアミノ酸同士以外のペプチド結合を有さない、
環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
配列番号６１に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
配列番号３０、４６および５５から選択される、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
配列番号６、８、１２〜２０、３２〜４１、４８〜５３および５７〜５９から選択される、環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
誘導体が環状ペプチド中の水素原子、水酸基、カルボキシ基、アミノ基、イミノ基に対して置換可能な置換基で置換されたものである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
請求項４に記載の環状ペプチド中のアミノ酸の１以上６以下を欠失させるか、他のアミノ酸で置換または付加することにより形成され、かつ前記各式で表される環状ペプチドと同等の機能を有する環状ペプチドもしくはその誘導体またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩を１種以上含む、外用剤。
【請求項８】
皮膚炎治療剤、皮膚炎予防剤、鎮痒剤、消炎剤、表皮再生促進剤またはスキンケア用品の材料である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項９】
スキンケア用品が、保湿用および／または肌荒れ防止・改善用および／または敏感肌防止・改善用および／または乾燥肌防止・改善用および／または皮脂改善・ニキビケア用および／または刺激緩和・抗炎症用および／または美白用および／または老化防止用および／またはシワ・たるみおよび／またはくすみ・くま防止・改善用および／または光線過敏症防止・改善用および／または紫外線傷害予防・緩和用および／またはスリミング用および／または皮膚清浄用である、請求項８に記載の外用剤。
【請求項１０】
入浴剤、身体洗浄剤、頭髪用洗浄剤、リンス・トリートメント、トニック、ヘヤオイル、ヘアローション、スカルプケア剤である、請求項８に記載の外用剤。
【請求項１１】
脱毛症治療剤、脱毛症予防剤、育毛剤および／または発毛剤および／または抜け毛予防剤・防止剤、抜け毛予防化粧料、である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１２】
フケやかゆみの予防・改善用および／または毛髪、頭皮の乾燥改善・予防用および／または頭皮の脂漏性の改善・予防用のスカルプケア剤である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１３】
鼻炎治療剤および／または鼻炎予防剤および／または副鼻腔炎治療剤および／または副鼻腔炎予防剤である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１４】
化粧料である、請求項７に記載の外用剤。
【請求項１５】
剤形が、固形剤、半固形剤、粉末剤、液剤、スプレー剤、軟膏剤、クリーム剤、乳液剤、ゲル剤または貼付剤である、請求項７〜１４のいずれか一項に記載の外用剤。
【請求項１６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の環状ペプチド／およびもしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容な塩を０．０００１〜１００００００μｇ／ｍＬの濃度で含む、請求項７〜１５のいずれか一項に記載の外用剤。
【請求項１７】
医薬品、医薬部外品または化粧品として用いられる、請求項７〜１６のいずれか一項に記載の外用剤。
【請求項１８】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の環状ペプチドおよび／もしくはその誘導体ならびに／またはこれらの薬学的に許容可能な塩の外用剤の製造のための使用。
【請求項１９】
請求項７〜１７のいずれか一項に記載の外用剤を、対象の皮膚および／または粘膜に適用することを含む、外用剤の使用方法。
【請求項２０】
粘膜が口唇、口腔、鼻腔、眼または膣である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２１】
皮膚炎の治療および／もしくは予防方法、痒みの軽減もしくは消失方法、びらん、潰瘍の治療方法またはスキンケア方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２２】
湿疹、アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、光線過敏症、乾癬、ざ瘡、嚢胞性ざ瘡、脂漏性湿疹、および痒みからなる群から選択される皮膚炎の治療および／または予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２３】
肌荒れ、敏感肌、乾燥肌、脂性肌、光線過敏症、しわ、たるみ、くすみ、ふけおよび痒みの改善、および予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２４】
薄毛、脱毛症の治療および／もしくは予防方法ならびに／または発毛方法ならびに／または育毛方法、抜け毛防止および／もしくは予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２５】
フケやかゆみの防止・予防方法、および／もしくは毛髪、頭皮の乾燥を改善・予防方法、および／もしくは頭皮の脂漏性の予防・改善方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２６】
鼻炎、副鼻腔炎の治療および／または予防方法である、請求項１８に記載の外用剤の使用方法。
【請求項２７】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の環状ペプチドもしくはその誘導体またはこれらの薬学的に許容可能な塩を１種以上含む、医薬。
【請求項２８】
高血圧症、不安定狭心症、急性心筋梗塞、浮腫性疾患、腎不全、心不全、免疫疾患、自己免疫疾患、アレルギー疾患、癌、消化器系疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、肥満、メタボリックシンドロームの治療薬である、請求項２７に記載の医薬。
【国際調査報告】
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