(57)【要約】  既存の薬剤とは作用機序（標的分子）が異なる、新たな抗ＨＢＶ薬を提供する。式（Ｉ）：［化１］2017010330.tif 000026（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は同一又は異なり、置換又は無置換のＣ１−６−アルキル基、又は置換又は無置換の芳香族基である。）で示される化合物、その互変異性体、それらの塩又はそれらの溶媒和物を含有する抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
2017010330.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）：
【化１】
2017010330.tif 000023
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は同一又は異なり、置換又は無置換のＣ１−６−アルキル基、又は置換又は無置換の芳香族基である。）
で示される化合物、その互変異性体、それらの塩又はそれらの溶媒和物を含有する抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
【請求項２】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１がＣ１−６−アルキル基、ニトロ基及びハロゲン原子から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基であり、Ｒ２がＣ１−６−アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−６−アルコキシ基及びＣ１−６−ハロアルキル基から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である請求項１記載の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
【請求項３】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１が４−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、４−ｎ−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、４−ｎ−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、２−ニトロフェニル基、４−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−クロロフェニル基又は３−クロロフェニル基であり、Ｒ２が４−メチルフェニル基、２，３−ジメチルフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、４−メトキシフェニル基又は２，３−ジクロロフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である請求項１記載の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
【請求項４】
前記式（Ｉ）において、Ｒ１が４−イソプロピルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ニトロフェニル基又は２−ニトロフェニル基であり、Ｒ２が２，３−ジクロロフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である請求項１記載の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
【請求項５】
下記式（Ｉ−１）：
【化２】
2017010330.tif 000024
（式中、Ｒ１ａは４−エチルフェニル基、４−ｎ−プロピルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、２−ニトロフェニル基又は４−ニトロフェニル基である。）
で示される化合物、その互変異性体、それらの塩又はそれらの溶媒和物。
【請求項６】
下記式（Ｉ−２）：
【化３】
2017010330.tif 000025
で示される化合物、その互変異性体、それらの塩又はそれらの溶媒和物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗Ｂ型肝炎ウイルス薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）による慢性肝炎は肝硬変や肝臓癌の主要な原因の１つである。現在、日本人の０．９％（約１１０万人）がＨＢＶのキャリアであると推定されており、世界では約３億人のキャリアが存在すると考えられている。ＨＢＶ感染予防にはワクチンが開発されており、また既にいくつかの抗ＨＢＶ薬も存在し、ラミブジン、アデホビル、そしてエンテカビルが上市されている。これらはすべて核酸アナログであり、逆転写機能を有するＨＢＶのＤＮＡポリメラーゼを標的としている。これらの使用により、血中のＨＢＶは消失する。しかしながら、ＨＢＶは肝細胞内で安定な形のＤＮＡとして存在するため、抗ウイルス薬による化学療法を中断すると、肝炎が再燃するおそれがある。また、既存の抗ＨＢＶ薬に対する薬剤耐性ウイルスの出現も報告されている。このようなことから、既存の薬剤とは作用機序（標的分子）が異なる、新たな抗ＨＢＶ薬の開発が望まれている。【０００３】
一方、ピリミド［１，２−ａ］［１，３，５］トリアジン−６−オン誘導体としては、多くの化合物が報告されている（非特許文献１及び非特許文献２）。しかしながら、ピリミド［１，２−ａ］［１，３，５］トリアジン−６−オン誘導体と抗ＨＢＶ活性との関係についてはこれまで報告されたことはない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Sachdeva, Nikhil and Dolzhenko, Anton and Chui, Wai Keung. 2012. Regioselective synthesis of pyrimido[1,2-a][1,3,5]triazin-6-ones via reaction of 1-(6-oxo-1,6-dihydropyrimidin-2-yl)guanidines with triethylorthoacetate: Observation of an unexpected rearrangement. Organic & Biomolecular Chemistry. 10 (23): pp. 4586-4596.
【非特許文献２】Nikhil Sachdeva, Anton V. Dolzhenko, Seow Joo Lim, Wee Ling Ong and Wai Keung Chui. An efficient synthesis of 2,4,7-trisubstituted pyrimido[1,2-a][1,3,5]triazin-6-ones. New J. Chem., 2015, Advance Article, DOI: 10.1039/C5NJ00405E
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、既存の薬剤とは作用機序（標的分子）が異なる、新たな抗ＨＢＶ薬を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
前記課題を解決するため、本発明者らは、ＨＢＶのカプシドタンパクの形成を標的とした新たな抗ＨＢＶ薬の開発を目指し、コンピューターを用いたin silicoスクリーニングアッセイ系を確立した。そのアッセイ系を用い、薬剤ライブラリーから候補化合物を選択するとともに、それらについて、培養細胞におけるＨＢＶ遺伝子複製の抑制を指標とした抗ＨＢＶ活性試験を行うことで、一連の誘導体に選択的な抗ＨＢＶ活性を同定することに成功し、本発明を完成するに至った。【０００７】
すなわち、本発明の要旨は以下のとおりである。
（１）下記式（Ｉ）：【０００８】
【化１】
2017010330.tif 000003
【０００９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は同一又は異なり、置換又は無置換のＣ１−６−アルキル基、又は置換又は無置換の芳香族基である。）
で示される化合物、その互変異性体、それらの塩又はそれらの溶媒和物を含有する抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
（２）前記式（Ｉ）において、Ｒ１がＣ１−６−アルキル基、ニトロ基及びハロゲン原子から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基であり、Ｒ２がＣ１−６−アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−６−アルコキシ基及びＣ１−６−ハロアルキル基から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である前記（１）に記載の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
（３）前記式（Ｉ）において、Ｒ１が４−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、４−ｎ−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、４−ｎ−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、２−ニトロフェニル基、４−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−クロロフェニル基又は３−クロロフェニル基であり、Ｒ２が４−メチルフェニル基、２，３−ジメチルフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、４−メトキシフェニル基又は２，３−ジクロロフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である前記（１）に記載の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
（４）前記式（Ｉ）において、Ｒ１が４−イソプロピルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ニトロフェニル基又は２−ニトロフェニル基であり、Ｒ２が２，３−ジクロロフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である前記（１）に記載の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬。
（５）下記式（Ｉ−１）：【００１０】
【化２】
2017010330.tif 000004
【００１１】
（式中、Ｒ１ａは４−エチルフェニル基、４−ｎ−プロピルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、２−ニトロフェニル基又は４−ニトロフェニル基である。）
で示される化合物、その互変異性体、それらの塩又はそれらの溶媒和物。
（６）下記式（Ｉ−２）：【００１２】
【化３】
2017010330.tif 000005
【００１３】
で示される化合物、その互変異性体、それらの塩又はそれらの溶媒和物。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の抗ＨＢＶ薬は、既存の抗ＨＢＶ薬とは作用機序（標的分子）が異なる。従って、既存の抗ＨＢＶ薬に対する薬剤耐性ウイルスに対しても有効であると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】式（Ｉ）で示される化合物の代表的化合物についての抗ＨＢＶアッセイの結果を示すグラフである。
【図２】本発明の抗ＨＢＶ薬のカプシドタンパクの形成阻害効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１７】
前記式（Ｉ）で示される化合物には、互変異性体が存在する。本発明において、互変異性体とは、分子内の１個の水素原子が移動することにより形成しうる構造の化合物であればいずれでもよい。本発明の有効成分としては、互変異性体の混合物及びそれらを分離したもののいずれを用いてもよい。
【００１８】
前記式（Ｉ）で示される化合物の互変異性体としては、例えば、下記の式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）で示されるものが挙げられる。
【００１９】
【化４】
2017010330.tif 000006
【００２０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は前記と同義である。）
前記式（Ｉ）、（Ｉａ）及び（Ｉｂ）においてＲ１、Ｒ２又はＲ３で表されるＣ１−６−アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等のＣ１−６−アルキル基が挙げられる。
【００２１】
前記Ｃ１−６−アルキル基は、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基等のＣ１−６−アルコキシ基；メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ペンチルオキシカルボニル基、イソペンチルオキシカルボニル基、シクロプロピルオキシカルボニル基、シクロブチルオキシカルボニル基、シクロペンチルオキシカルボニル基等のＣ１−６−アルコキシ−カルボニル基；水酸基；フェニル基、トリル基、ナフチル基等の芳香族炭化水素基；フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子；ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基（プロパノイル基）、ブチリル基（ブタノイル基）、バレリル基（ペンタノイル基）、ヘキサノイル基等のＣ１−６−脂肪族アシル基；ベンゾイル基、トルオイル基等の芳香族アシル基（アロイル基）；アラルキルオキシ基、カルボキシル基、アミノ基、Ｃ１−６−アルキルアミノ基、ジＣ１−６−アルキルアミノ基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００２２】
前記式（Ｉ）、（Ｉａ）及び（Ｉｂ）においてＲ１、Ｒ２又はＲ３で表される芳香族基としては、例えばフェニル基、トリル基、ナフチル基等の芳香族炭化水素基；フリル基、チエニル基、ピロリル基、オキサゾリル基、イソオキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、ピラジニル基、キノリル基、イソキノリル基等の芳香族複素環基が挙げられる。
【００２３】
前記芳香族基は、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ヘキシル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等のＣ１−６−アルキル基；トリフルオロメチル基等のＣ１−６−ハロアルキル基；メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基等のＣ１−６−アルコキシ基；メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ペンチルオキシカルボニル基、イソペンチルオキシカルボニル基、シクロプロピルオキシカルボニル基、シクロブチルオキシカルボニル基、シクロペンチルオキシカルボニル基等のＣ１−６−アルコキシ−カルボニル基；水酸基；ニトロ基；フェニル基、トリル基、ナフチル基等の芳香族炭化水素基；フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等のハロゲン原子；ベンジル基、フェネチル基等のアラルキル基；ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基（プロパノイル基）、ブチリル基（ブタノイル基）、バレリル基（ペンタノイル基）、ヘキサノイル基等のＣ１−６−脂肪族アシル基；ベンゾイル基、トルオイル基等の芳香族アシル基（アロイル基）；アラルキルオキシ基、カルボキシル基、アミノ基、Ｃ１−６−アルキルアミノ基、ジＣ１−６−アルキルアミノ基から選ばれる１以上の置換基で置換されていてもよい。
【００２４】
置換された芳香族基としては、例えば４−アミノフェニル基、３−アミノフェニル基、２−アミノフェニル基、２−アミノ−４−フルオロフェニル基、２−アミノ−４−クロロフェニル基、２−アミノ−５−フルオロフェニル基、２−アミノ−５−クロロフェニル基、４−メチルフェニル基（ｐ−トリル基）、３−メチルフェニル基（ｍ−トリル基）、２−メチルフェニル基（ｏ−トリル基）、４−エチルフェニル基、３−エチルフェニル基、２−エチルフェニル基、４−ｎ−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、２−イソプロピルフェニル基、４−ｎ−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、２−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、３−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、２−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ｎ−ペンチルフェニル基、４−イソペンチルフェニル基、２−ネオペンチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ペンチルフェニル基、４−ｎ−ヘキシルフェニル基、４−（２−エチルブチル）フェニル基、４−ｎ−ヘプチルフェニル基、４−ｎ−オクチルフェニル基、４−（２−エチルヘキシル）フェニル基、４−ｔｅｒｔ−オクチルフェニル基、４−ｎ−デシルフェニル基、４−ｎ−ドデシルフェニル基、４−ｎ−テトラデシルフェニル基、４−シクロペンチルフェニル基、４−シクロヘキシルフェニル基、４−（４−メチルシクロヘキシル）フェニル基、４−（４−ｔｅｒｔ−ブチルシクロヘキシル）フェニル基、３−シクロヘキシルフェニル基、２−シクロヘキシルフェニル基、２，３−ジメチルフェニル基、２，４−ジメチルフェニル基、２，５−ジメチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３，５−ジメチルフェニル基、２，６−ジメチルフェニル基、２，４−ジエチルフェニル基、２，３，５−トリメチルフェニル基、２，３，６−トリメチルフェニル基、３，４，５−トリメチルフェニル基、２，６−ジエチルフェニル基、２，５−ジイソプロピルフェニル基、２，６−ジイソブチルフェニル基、２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、２，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メチルフェニル基、５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−メチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチル−２，６−ジメチルフェニル基、４−トリフルオロメチルフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、２−トリフルオロメチルフェニル基、４−メトキシフェニル基、３−メトキシフェニル基、２−メトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、３−エトキシフェニル基、２−エトキシフェニル基、４−ｎ−プロポキシフェニル基、３−ｎ−プロポキシフェニル基、４−イソプロポキシフェニル基、２−イソプロポキシフェニル基、４−ｎ−ブトキシフェニル基、４−イソブトキシフェニル基、２−ｓｅｃ−ブトキシフェニル基、４−ｎ−ペンチルオキシフェニル基、４−イソペンチルオキシフェニル基、２−イソペンチルオキシフェニル基、４−ネオペンチルオキシフェニル基、２−ネオペンチルオキシフェニル基、４−ｎ−ヘキシルオキシフェニル基、２−（２−エチルブチル）オキシフェニル基、４−ｎ−オクチルオキシフェニル基、４−ｎ−デシルオキシフェニル基、４−ｎ−ドデシルオキシフェニル基、４−ｎ−テトラデシルオキシフェニル基、４−シクロヘキシルオキシフェニル基、２−シクロヘキシルオキシフェニル基、２−メチル−４−メトキシフェニル基、２−メチル−５−メトキシフェニル基、３−メチル−４−メトキシフェニル基、３−メチル−５−メトキシフェニル基、３−エチル−５−メトキシフェニル基、２−メトキシ−４−メチルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルフェニル基、２，４−ジメトキシフェニル基、２，５−ジメトキシフェニル基、２，６−ジメトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３，５−ジメトキシフェニル基、３，５−ジエトキシフェニル基、３，５−ジ−ｎ−ブトキシフェニル基、２−メトキシ−４−エトキシフェニル基、２−メトキシ−６−エトキシフェニル基、３，４，５−トリメトキシフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシフェニル基、２−ヒドロキシフェニル基、４−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、２−ニトロフェニル基、４−メトキシカルボニルフェニル基、３−メトキシカルボニルフェニル基、２−メトキシカルボニルフェニル基、４−ビフェニリル基、３−ビフェニリル基、２−ビフェニリル基、４−（４−メチルフェニル）フェニル基、４−（３−メチルフェニル）フェニル基、４−（４−メトキシフェニル）フェニル基、４−（４−ｎ−ブトキシフェニル）フェニル基、２−（２−メトキシフェニル）フェニル基、４−（４−クロロフェニル）フェニル基、３−メチル−４−フェニルフェニル基、３−メトキシ−４−フェニルフェニル基、ターフェニル基、３，５−ジフェニルフェニル基、４−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、２−フルオロフェニル基、４−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、２−クロロフェニル基、４−ブロモフェニル基、２−ブロモフェニル基、２，３−ジフルオロフェニル基、２，４−ジフルオロフェニル基、２，５−ジフルオロフェニル基、２，６−ジフルオロフェニル基、３，４−ジフルオロフェニル基、３，５−ジフルオロフェニル基、２，３−ジクロロフェニル基、２，４−ジクロロフェニル基、２，５−ジクロロフェニル基、３，４−ジクロロフェニル基、３，５−ジクロロフェニル基、２，５−ジブロモフェニル基、２，４，６−トリクロロフェニル基、２−フルオロ−４−メチルフェニル基、２−フルオロ−５−メチルフェニル基、３−フルオロ−２−メチルフェニル基、３−フルオロ−４−メチルフェニル基、２−メチル−４−フルオロフェニル基、２−メチル−５−フルオロフェニル基、３−メチル−４−フルオロフェニル基、２−クロロ−４−メチルフェニル基、２−クロロ−５−メチルフェニル基、２−クロロ−６−メチルフェニル基、２−メチル−３−クロロフェニル基、２−メチル−４−クロロフェニル基、３−クロロ−４−メチルフェニル基、３−メチル−４−クロロフェニル基、２−クロロ−４，６−ジメチルフェニル基、２−メトキシ−４−フルオロフェニル基、２−フルオロ−４−メトキシフェニル基、２−フルオロ−４−エトキシフェニル基、２−フルオロ−６−メトキシフェニル基、３−フルオロ−４−エトキシフェニル基、３−クロロ−４−メトキシフェニル基、２−メトキシ−５−クロロフェニル基、３−メトキシ−６−クロロフェニル基、５−クロロ−２，４−ジメトキシフェニル基等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００２５】
Ｒ１としては、Ｃ１−６−アルキル基、ニトロ基及びハロゲン原子から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基が好ましい。
【００２６】
Ｒ２としては、Ｃ１−６−アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−６−アルコキシ基及びＣ１−６−ハロアルキル基から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基が好ましい。
【００２７】
Ｒ３としては、Ｃ１−６−アルキル基が好ましく、メチル基が更に好ましい。
【００２８】
前記式（Ｉ）で示される化合物としては、前記式（Ｉ）において、Ｒ１がＣ１−６−アルキル基、ニトロ基及びハロゲン原子から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基であり、Ｒ２がＣ１−６−アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−６−アルコキシ基及びＣ１−６−ハロアルキル基から選ばれる１以上の置換基で置換されたフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である化合物が好ましく、Ｒ１が４−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、４−ｎ−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、４−ｎ−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−ｓｅｃ−ブチルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、２−ニトロフェニル基、４−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−クロロフェニル基又は３−クロロフェニル基であり、Ｒ２が４−メチルフェニル基、２，３−ジメチルフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、４−メトキシフェニル基又は２，３−ジクロロフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である化合物が更に好ましく、Ｒ１が４−イソプロピルフェニル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル基、４−ニトロフェニル基又は２−ニトロフェニル基であり、Ｒ２が２，３−ジクロロフェニル基であり、Ｒ３がＣ１−６−アルキル基である化合物が最も好ましい。
【００２９】
前記式（Ｉ）で示される化合物のうち、前記式（Ｉ−１）又は前記式（Ｉ−２）で示される化合物は新規化合物である。
【００３０】
前記式（Ｉ）で示される化合物及びその互変異性体の塩としては、薬学的に許容される塩が好ましく、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、ピロ硫酸、メタリン酸等の無機酸、又はクエン酸、安息香酸、酢酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、スルホン酸（例えば、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸）等の有機酸との塩が挙げられる。
【００３１】
前記式（Ｉ）で示される化合物及びその互変異性体、又はそれらの塩の溶媒和物としては、例えば水和物が挙げられる。
【００３２】
前記式（Ｉ）で示される化合物は、公知の方法、例えば、Nikhil Sachdeva, Anton V. Dolzhenko, Seow Joo Lim, Wee Ling Ong and Wai Keung Chui. An efficient synthesis of 2,4,7-trisubstituted pyrimido[1,2-a][1,3,5]triazin-6-ones. New J. Chem., 2015, Advance Article, DOI: 10.1039/C5NJ00405E（非特許文献２）に記載の方法に従って、以下に示すようにして製造することができる。
【００３３】
【化５】
2017010330.tif 000007
【００３４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は前記と同義である。）
すなわち、ピリミジニルグアニジン類（II）と対応するアルデヒド類（III）を酢酸中で加熱して反応させることにより、目的とする化合物（Ｉｂ）及びその互変異性体を製造することができる。
【００３５】
前記のようにして得られる生成物を精製するには、通常用いられる手法、例えばシリカゲル等を担体として用いたカラムクロマトグラフィーやメタノール、エタノール、クロロホルム、ジメチルスルホキシド、ｎ−ヘキサン−酢酸エチル、水等を用いた再結晶法によればよい。カラムクロマトグラフィーの溶出溶媒としては、メタノール、エタノール、クロロホルム、アセトン、ヘキサン、ジクロロメタン、酢酸エチル、及びこれらの混合溶媒等が挙げられる。
【００３６】
前記の化合物は、抗ＨＢＶ薬として、慣用の製剤担体と組み合わせて製剤化することができる。投与形態としては、特に限定はなく、必要に応じ適宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、徐放性製剤、液剤、懸濁剤、エマルジョン剤、シロップ剤、エリキシル剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられる。
【００３７】
経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、無機塩類等を用いて常法に製造される。また、これらに加えて、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を適宜添加することができる。
【００３８】
結合剤としては、例えばデンプン、デキストリン、アラビアゴム、ゼラチン、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴール等が挙げられる。
【００３９】
崩壊剤としては、例えばデンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。
【００４０】
界面活性剤としては、例えばラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、ポリソルベート８０等が挙げられる。
【００４１】
滑沢剤としては、例えばタルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコール等が挙げられる。
【００４２】
流動性促進剤としては、例えば軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム等が挙げられる。
【００４３】
注射剤は、常法に従って製造され、希釈剤として一般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、オリーブ油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等を用いることができる。更に必要に応じて、殺菌剤、防腐剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤等を加えてもよい。また、注射剤は、安定性の観点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することもできる。前記式（Ｉ）の化合物の注射剤中における割合は、５〜５０重量％の間で変動させ得るが、これに限定されるものではない。
【００４４】
その他の非経口剤としては、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って製造される。
【００４５】
製剤化した抗ＨＢＶ薬は、剤形、投与経路等により異なるが、例えば、１日１〜４回を１週間から３ヶ月の期間、投与することが可能である。
【００４６】
経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人の場合、前記式（Ｉ）の化合物の重量として、例えば０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜５００ｍｇを、１日数回に分けて服用することが適当である。
【００４７】
非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人の場合、前記式（Ｉ）の化合物の重量として、例えば０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜５００ｍｇを、静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射により投与することが適当である。
【００４８】
また、本発明の化合物は、ＨＢＶ感染に対して有効な他の薬剤と組み合わせて使用してもよい。これらは、治療の過程において別々に投与されるか、例えば錠剤、静脈用溶液、又はカプセルのような単一の剤形において、本発明の化合物と組み合わせられる。このような他の薬剤としては、例えば、インターフェロン、ペグインターフェロン、ラミブジン、アデホビル、エンテカビル、テノホビル、Telbivudine、Clevudine等が挙げられる。
【００４９】
本明細書は、本願の優先権の基礎である特願２０１５−１３８７７３の明細書に記載される内容を包含する。
【実施例】
【００５０】
以下、実施例により本発明を更に具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。
［実施例１］
ＨｅｐＧ２．２．１５．７細胞（肝芽細胞腫（hepatoblastoma）細胞株ＨｅｐＧ２に、ＨＢＶ遺伝子がトランスフェクションされ、持続的にウイルスを産生するＨｅｐＧ２．２．１５細胞（Journal of Virology, Aug. 1988, 62, 2836-2844）由来で、国立感染症研究所において樹立されたクローン細胞であり、親株であるＨｅｐＧ２．２．１５細胞よりも効率よくウイルスを産生するクローン細胞）を用いて、各試験化合物の抗ＨＢＶアッセイを以下のようにして行った。
１）ＨｅｐＧ２．２．１５．７細胞を９６穴マイクロタイタープレートに撒いた。（１×１０４細胞／ｗｅｌｌ，培地１００μｌ）（培地：ＤＭＥＭ／Ｆ１２＋ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＃１０５６５−０１８）＋５μｇ／ｍｌインスリン＋５０μＭヒドロコルチゾン＋ＨＥＰＥＳ＋ペニシリン／ストレプトマイシン＋１０％ＦＢＳ）
２）細胞をＣＯ２インキュベーター内、３７℃で２４時間インキュベートした。
３）各試験化合物を様々な濃度で含有する新鮮な培地１００μｌをプレートに加えた。
４）細胞をＣＯ２インキュベーター内、３７℃で３日間インキュベートした。
５）培地を、各化合物を含有する新たな培地で完全に置き換えた。
６）細胞をＣＯ２インキュベーター内、３７℃で３日間インキュベートした。
７）培地を、各化合物を含有する新たな培地で完全に置き換えた。
８）細胞をＣＯ２インキュベーター内、３７℃で３日間インキュベートした。
９）培養上清１００μｌを新たな９６穴マイクロタイタープレートに移した。
１０）細胞をＭＴＴアッセイにより分析し、細胞生存率を測定した。
１１）各培養上清１０〜２０μｌに同容量のＳｉｄｅＳｔｅｐＴＭ溶解・安定化緩衝液（Agilent Technologies #400900）を加えて、１分間ボルテックスして培地中の粗ＤＮＡを抽出した。
１２）ＤＮＡ溶液を使用するまで、ディープフリーザーで保存した。
１３）リアルタイムＰＣＲ法を用いて、培地中のＨＢＶ  ＤＮＡを定量した。【００５１】
試験化合物は、ＭｏｌＰｏｒｔ（モルポート）から購入した。試験化合物の構造式を表１に示す。【００５２】
【表１】
2017010330.tif 000008
【００５３】
2017010330.tif 000009
【００５４】
試験化合物の培養上清中のＨＢＶ  ＤＮＡ値を５０％抑制する化合物濃度（すなわち、５０％有効濃度：ＥＣ５０）及び５０％の細胞増殖抑制率を付与する化合物濃度（すなわち、５０％細胞毒性濃度：ＣＣ５０）を表２に示す。【００５５】
【表２】
2017010330.tif 000010
【００５６】
また、代表的化合物（化合物番号４及び１）についてのＥＣ５０、ＣＣ５０及び選択係数ＳＩ（ＳＩ＝ＣＣ５０／ＥＣ５０）を図１に、前記代表的化合物、及び市販の核酸アナログであるラミブジン（３ＴＣ）のカプシドタンパクの形成阻害効果を図２に示す。【００５７】
本発明の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬は、カプシド形成、カプシド内ＨＢＶ  ＤＮＡを抑制した。一方、ＨＢｃタンパク質は抑制していなかった。【００５８】
以上の結果から、本発明の抗Ｂ型肝炎ウイルス薬は、カプシド形成を阻害することで抗ＨＢＶ効果を示すことが示唆された。
［実施例２］
実施例１と同様の抗ＨＢＶアッセイを表３に示す試験化合物について行った。試験化合物は、実施例３に従って合成した。結果を表３に示す。【００５９】
【表３】
2017010330.tif 000011
【００６０】
2017010330.tif 000012
【００６１】
［実施例３］
（１）2,3-Dichlorophenylbiguanide (1a)及びPhenylbiguanide (1b)の合成【００６２】
【化６】
2017010330.tif 000013
【００６３】
Biguanide (2.86 g, 34.0 mmol)と2,3-DichloroanillineもしくはAnilline (34.0 mmol)の混合物を3規定の塩酸水溶液(11.2 mL) で溶解させ、約11時間90℃で加熱撹拌させた。その後0℃へと冷却し、析出した固体をヌッチェにて吸引ろ過した。分取した固体をメタノール(100 mL)に溶解させ、28%ナトリウムメトキシド/メタノール溶液(7.0 mL)を加え室温にて1時間撹拌させた。析出した塩化ナトリウムをろ過した後、メタノールを減圧溜去した。次に熱エタノールにて析出した固体を溶解させ、約1時間撹拌させた後、析出した塩化ナトリウムをろ過した。溶媒を減圧溜去した後、ヘキサン/酢酸エチルエステルの混合溶媒にて再結晶し、析出した固体を桐山ろ過にて分取することで、白色結晶として2,3-Dichlorophenylbiguanide (1a) (5.52 g, 22.4 mmol, 66 %)及びPhenylbiguanide (1b) (4.70 g, 26.5 mmol, 78 %)を得た。
（２）N-(4-Methyl-6-oxo-1,6-dihydropyrimidin-2-yl)-N’-2,3-dichlorophenylbiguanide (2a)及びN-(4-Methyl-6-oxo-1,6-dihydropyrimidin-2-yl)-N’-phenylbiguanide (2b)の合成【００６４】
【化７】
2017010330.tif 000014
【００６５】
2,3-Dichlorophenylbiguanide (1a) (3.81 g, 15.5 mmol)もしくはPhenylbiguanide (1b) (3.45 g, 19.0 mmol)をメタノール(2a: 30.0 mL, 2b: 40.0 mL) に溶解させ、室温で1日撹拌させた。その後、析出した白色沈殿を桐山ろ過した後、メタノールにて再結晶することで、それぞれ白色結晶として目的物(2a) (2.55 g, 8.2 mmol, 53 %)及び (2b) (3.70 g, 15.2 mmol, 80 %)を得た。
（３）2-[(2,3-Dichlorophenyl)amino]-3,4-dihydro-4-(substituted-phenyl)-8-methyl-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one（化合物番号２４〜２８及び３０）及び3,4-Dihydro-4-[4-(tert-butyl)phenyl]-8-methyl-2-phenylamino-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one（化合物番号２９）の合成【００６６】
【化８】
2017010330.tif 000015
【００６７】
Biotage社製の0.5-2.0 mL専用バイアルに化合物2aもしくは2b (0.30 mmol)、酢酸(0.8 mL)及び対応する置換型ベンズアルデヒド(0.45 mmol)を入れ、150℃にて30分マイクロウェーブを照射させた。反応後、炭酸水素ナトリウム水溶液で中和させ、酢酸エチルエステルで抽出し、続いて飽和食塩水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧溜去した。その後、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で分離精製し、それぞれの目的物（化合物番号２４〜３０）を得た。【００６８】
合成した化合物のスペクトルデータを以下に示す。【００６９】
【化９】
2017010330.tif 000016
【００７０】
2-[(2,3-Dichlorophenyl)amino]-3,4-dihydro-4-[4-(tert-butyl)phenyl]-8-methyl-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one (24)
Yield 39%; white solid; 1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 7.58 (1H, d, J 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.25 (2H, d, J 8.4, 4-tBu-Ar-H), 7.18 (1H, dd, J 8.0 and 1.2, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.13 (2H, d, J 8.4, 4-tBu-Ar-H), 7.05 (1H, dd, J 8.0 and 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 6.80 (1H, s, H-4), 5.79 (1H, s, H-7), 2.01 (3H, s, 8-CH3), 1.14 (9H, s, 4-tBu-H); 13C NMR (100MHz, CD3OD): δ 165.8, 161.7, 154.5, 153.6, 152.2, 136.1, 135.9, 132.7, 127.3, 127.3, 126.9, 126.6, 125.4, 125.4, 125.0, 125.0, 124.9, 103.9, 34.0, 30.1, 22.1.【００７１】
【化１０】
2017010330.tif 000017
【００７２】
2-[(2,3-Dichlorophenyl)amino]-3,4-dihydro-4-[4-(propyl)phenyl]-8-methyl-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one (25)
Yield 70%; white solid; 1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 7.73 (1H, d, J 7.2, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.32 (1H, dd, J 8.0 and 1.6, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.18-7.30 (5H, m, 4-Pr-Ar-H and 2,3-Cl2-Ar-H), 6.95 (1H, s, H-4), 5.94 (1H, s, H-7), 2.62 (2H, t, J 7.6, 4-Pr-H), 2.18 (3H, s, 8-CH3), 1.60 (2H, m, 4-Pr-H), 0.92 (3H, t, J 7.2, 4-Pr-H); 13C NMR (100MHz, CD3OD): δ 167.3, 163.2, 155.1, 145.3, 137.7, 134.3, 130.7, 130.1, 129.3, 128.9, 128.6, 128.3, 126.7, 126.5, 105.4, 63.3, 38.6, 25.5, 23.6, 14.0.【００７３】
【化１１】
2017010330.tif 000018
【００７４】
2-[(2,3-Dichlorophenyl)amino]-3,4-dihydro-4-[4-(ethyl)phenyl]-8-methyl-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one (26)
Yield 54%; white solid; 1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 7.73 (1H, d, J 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.32 (1H, dd, J 8.0 and 1.2, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.26 (2H, d, J 8.0, 4-Et-Ar-H), 7.18-7.23 (3H, m, 4-Et-Ar-H and 2,3-Cl2-Ar-H), 6.94 (1H, s, H-4), 5.93 (1H, s, H-7), 2.62 (2H, q, J 7.6, 4-Et-H), 2.16 (3H, s, 8-CH3), 1.19 (3H, t, J 7.6, 4-Et-H); 13C NMR (100MHz, CD3OD): δ 167.4, 163.2, 156.1, 155.1, 146.9, 137.7, 137.7, 134.3, 131.0, 129.7, 129.4, 128.9, 128.4, 128.1, 126.8, 126.4, 105.4, 63.2, 29.5, 23.6, 16.1.【００７５】
【化１２】
2017010330.tif 000019
【００７６】
2-[(2,3-Dichlorophenyl)amino]-3,4-dihydro-4-[4-(isobutyl)phenyl]-8-methyl-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one (27)
Yield 76%; white solid; 1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 7.72 (1H, d, J 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.39 (1H, d, J 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.25-7.31 (3H, m, 4-iBu-Ar-H and 2,3-Cl2-Ar-H), 7.17 (2H, d, J 8.0, 4-iBu-Ar-H), 6.95 (1H, s, H-4), 5.94 (1H, s, H-7), 2.47 (2H, d, J 7.2, 4-iBu-H), 2.19 (3H, s, 8-CH3), 1.84 (1H, m, 4-iBu-H), 0.88 (6H, d, J 6.8, 4-iBu-H); 13C NMR (100MHz, CD3OD): δ 167.6, 163.3, 155.1, 148.1, 144.3, 137.8, 137.8, 134.3, 130.7, 130.7, 128.9, 128.6, 128.3, 126.6, 105.3, 63.3, 46.0, 31.4, 23.6, 22.6.【００７７】
【化１３】
2017010330.tif 000020
【００７８】
2-[(2,3-Dichlorophenyl)amino]-3,4-dihydro-4-(2-nitrophenyl)-8-methyl-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one (28)
Yield 69%; pale yellow solid; 1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.19 (1H, d, J 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.98 (1H, d, J 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.74 (1H, m, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.65 (1H, m, 2-NO2-Ar-H), 7.49 (1H, s, H-4), 7.23-7.38 (3H, m, 2-NO2-Ar-H), 5.92 (1H, s, H-7), 2.22 (3H, s, 8-CH3); 13C NMR (100MHz, CD3OD): δ185.8, 173.7, 163.0, 149.1, 135.9, 135.8, 135.3, 134.1, 134.0, 131.8, 131.6, 128.8, 127.9, 127.6, 126.8, 125.8, 105.5, 60.9, 23.6.【００７９】
【化１４】
2017010330.tif 000021
【００８０】
3,4-Dihydro-4-[4-(tert-butyl)phenyl]-8-methyl-2-phenylamino-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one (29)
Yield 49%; white solid; 1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 7.27-7.34 (4H, m,Ar-H and 4-tBu-Ar-H), 7.14-7.24 (4H, m, Ar-H and 4-tBu-Ar-H), 7.00-7.06 (1H, m, Ar-H), 6.82 (1H, s, H-4), 5.82 (1H, s,H-7), 2.10 (3H, s, 8-CH3), 1.18 (9H, s, 4-tBu-H); 13C NMR (100MHz, CD3OD): δ166.5, 163.1, 156.3, 155.5, 153.7, 138.5, 137.4, 130.3, 126.9, 126.5, 126.3, 124.0, 104.9, 62.8, 31.6, 23.2.【００８１】
【化１５】
2017010330.tif 000022
【００８２】
2-[(2,3-Dichlorophenyl)amino]-3,4-dihydro-4-(4-nitrophenyl)-8-methyl-6H-pyrimido[1,2-a]-1,3,5-triazin-6-one (30)
Yield 61%; yellow solid; 1H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.27 (2H, d, J 7.2, 4-NO2-Ar-H), 7.77 (1H, d, J 8.0, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.64 (2H, d, J 7.2, 4-NO2-Ar-H), 7.42 (1H, d, J 8.0,2,3-Cl2-Ar-H), 7.32 (1H, m, 2,3-Cl2-Ar-H), 7.10 (1H, s, H-4), 5.97 (1H, s, H-7), 2.22 (3H, s, 8-CH3); 13C NMR (100MHz, CD3OD): δ166.2, 161.5, 160.2, 159.1, 155.2, 148.3, 145.9, 132.9, 127.5, 127.2, 126.8, 125.0, 123.7, 121.1, 103.9, 63.2, 22.1.
本明細書中で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明細書中にとり入れるものとする。
【図１】
2017010330.tif 000027
【図２】
2017010330.tif 000028
【国際調査報告】
2017010330.tif 000029
2017010330.tif 000030
2017010330.tif 000031
2017010330.tif 000032