(57)【要約】  本発明の送液方法は、微細流路内に第１の液体を供給し、前記第１の液体を前記微細流路内から回収した後に、ピペットチップ挿入孔を密閉せずに第２の液体を第１量吐出してから、前記ピペットチップ挿入孔を密閉して第２の液体を第２量吐出して前記第２の液体を前記微細流路内に供給する。
2017073601.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
送液部に挿入したノズルから前記送液部と接続している微細流路に液体を供給する送液方法であって、
前記微細流路内に第１の液体を供給する第１工程と、
前記微細流路内に供給された前記第１の液体を前記微細流路内から回収する第２工程と、
前記送液部が密閉されていない状態で前記送液部の中に第２の液体を第１量吐出する第３工程と、
前記第２の液体を前記第１量吐出した後、前記送液部が密閉された状態で前記送液部の中に第２の液体を第２量吐出し前記第２の液体を前記微細流路内に供給する第４工程と、
を有する送液方法。
【請求項２】
前記送液部の開口に貼付された密閉シールを貫通して前記送液部に前記ノズルを挿入して前記微細流路に液体を供給する請求項１に記載の送液方法。
【請求項３】
前記送液部の中に第２の液体を第１量吐出する際、前記ノズルは前記密閉シールに密着しない第１の位置に配置され、前記送液部の中に第２の液体を第２量吐出する際、前記ノズルは前記密閉シールに密着する第２の位置に配置される請求項２に記載の送液方法。
【請求項４】
前記第１工程と、
前記第２工程と、
前記第１の液体が前記微細流路内から回収された後、前記ノズルを、前記密閉シールに密着しない第１の位置から前記密閉シールに密着する第２の位置まで移動させると同時に、前記第２の液体を第１量吐出する第３工程と、
前記ノズルが前記密閉シールに密着した状態で、前記第２の液体を第２量吐出する第４工程と、
を有する請求項２に記載の送液方法。
【請求項５】
前記第２の液体を前記第２量吐出する際、前記ノズルの先端が、前記送液部の内部にある液体の液面以下に配置される請求項１から４のいずれか一項に記載の送液方法。
【請求項６】
送液部と前記送液部と接続している微細流路とを有する分析チップを着脱自在に搭載可能で、前記送液部に挿入したノズルから前記微細流路に液体を供給する送液装置であって、
第１の液体を前記微細流路内に供給し、前記第１の液体を前記微細流路内から回収した後、前記送液部が密閉されていない状態で前記送液部の中に第２の液体を第１量吐出し、前記第２の液体を前記第１量吐出した後、前記送液部が密閉された状態で前記送液部の中に第２の液体を第２量吐出して前記第２の液体を前記微細流路内に供給する送液制御部を有する送液装置。
【請求項７】
前記ノズルを所定位置に移動させるノズル移動制御部をさらに有する請求項６に記載の送液装置。
【請求項８】
前記ノズル移動制御部は、前記送液部の開口に貼付された密閉シールを貫通して前記送液部に前記ノズルを挿入する請求項７に記載の送液装置。
【請求項９】
前記ノズル移動制御部は、前記送液部を密閉状態にする際、前記ノズルを前記密閉シールに密着させることで前記送液部を密閉する請求項８に記載の送液装置。
【請求項１０】
前記ノズル移動制御部は、前記第２の液体を前記第２量吐出する際、前記ノズルの先端が、前記送液部の内部にある液体の液面以下に位置しているように、前記ノズルを配置する請求項７から９のいずれか一項に記載の送液装置。
【請求項１１】
送液部と前記送液部と接続している微細流路とを有する分析チップを着脱自在に搭載可能な分析装置であって、
前記送液部に挿入したノズルから前記微細流路に液体を供給する送液手段であって、第１の液体を前記微細流路内に供給し、前記第１の液体を前記微細流路内から回収した後、前記送液部が密閉されていない状態で前記送液部の中に第２の液体を第１量吐出し、前記第２の液体を前記第１量吐出した後、前記送液部が密閉された状態で前記送液部の中に第２の液体を第２量吐出し前記第２の液体を前記微細流路内に供給する送液手段と、
前記微細流路の内部に固定されている反応場の反応結果を検出する検出手段と、
を有する分析装置。
【請求項１２】
入射光を照射する入射光照射手段をさらに有し、
前記検出手段は、前記反応場から放射された反射光又は励起光を検出する光学検出器である請求項１１に記載の分析装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生化学検査装置で使用される分析チップ内の微細流路に液体を供給する送液技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
生化学検査において抗原抗体反応等の生化学反応が利用される。これらの生化学反応は、分析チップ等を用いて行われる。分析チップには微細流路が形成されており、微細流路内には生化学反応の反応場となる抗原捕捉膜が定着されている。反応を進行させる際、ターゲット抗原を含んだ試料液が微細流路の一方の開口から微細流路へ供給される。抗原捕捉膜にはターゲット抗原を捕捉する固相抗体が固定されているため、微細流路に試料液が満たされることで試料液が抗原捕捉膜と接触し、ターゲット抗原が固相抗体と結合し捕捉される。反応に充分な時間が経過した後、微細流路から試料液が回収され、次に蛍光標識液が微細流路へ供給される。微細流路に蛍光標識液が満たされた場合に、蛍光標識液が抗原捕捉膜と接触し、抗原捕捉膜に捕捉されたターゲット抗原が、蛍光標識液に含まれる蛍光標識抗体と結合し蛍光標識される。反応に充分な時間が経過した後、微細流路から蛍光標識液が回収され反応が終了する。その後、前記ターゲット抗原を捕捉する固相抗体への、ターゲット抗原の結合の有無又は結合量等は、表面プラズモン共鳴法（ＳＰＲ）又は表面プラズモン共鳴励起増強蛍光分光法（ＳＰＦＳ）等により特定される。【０００３】
上記の生化学検査において、試料液と蛍光標識液はピペットによる吸引／吐出により微細流路に供給又は微細流路から回収される。また、反応が開始する前、又は各液体の回収後に、洗浄液を微細流路に供給して流路内を洗浄することもある。その場合も、洗浄液はピペットによる吸引／吐出により微細流路に供給され、そして微細流路から回収される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１３−１８５９６７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上述のように、分析チップを用いた生化学検査装置において、生化学反応で使用される試料液、蛍光標識液や洗浄液等が順に微細流路に供給され、一定時間後にまた回収されるが、微細流路から前記各液体を完全に回収することは困難である。例えば、特許文献１には、液体回収時に、検査チップ（以下、分析チップとも呼ぶ）の挿入孔にノズルを送液時よりも深く挿入して流路から液体をなるべく完全に回収しようとする生化学検査装置が開示されている。しかしながら、特許文献１の生化学装検査置を使用しても、微少量の液体が流路内に残存することがある。【０００６】
また、液体を微細流路へ供給する際、流路が密閉状態でないと流路抵抗により適切な送液を行うことができないため、送液の際に、例えば図７Ａに示すように、ピペットチップ４００１と挿入孔密閉シール３１１１が接触することで、ピペットチップ挿入孔３１０１を密閉する必要がある。そこで、微細流路３１００内に前工程の液体１０が残存したままピペットチップ挿入孔３１０１が密閉された状態で、次工程の送液のためにピペットチップ４００１を下降させたり、又は次工程の液体をピペットチップ挿入孔３１０１に注入したりすると、ピペットチップ挿入孔３１０１内に圧力がかかって前工程の残液１０が微細流路３１００の下流側へ押し出される（図７Ｂ参照）。次に、図７Ｂの状態で次工程の送液が開始されると、次工程の液体と前工程の残液１０の間に気泡２０が挟まれてしまい、次工程の液体と共に微細流路３１００の下流側へ進行していく（図７Ｃ参照）。【０００７】
前述したように、前記気泡２０が前記微細流路３１００の下流側へ進行し続けると、前記気泡２０が、微細流路内に定着された、反応場となる抗原捕捉膜と接触し抗原捕捉膜に付着してしまう。図８Ａ、Ｂに示すように、抗原捕捉膜に気泡２０が付着した場合、固相抗体１２へのターゲット抗原１３の結合（図８Ａ）、固相抗体１２に捕捉されたターゲット抗原１３への蛍光標識抗体１４の結合（図８Ｂ）、又は表面プラズモン励起蛍光の発生等の工程が阻害され、正確な計測ができない一因となる。【０００８】
本発明は、このような現状に鑑みてなされたものである。本発明によれば、前工程の液体が流路内に残存した場合においても気泡発生のない次工程の送液が実現できる。このことにより、生化学反応の進行、又は表面プラズモン励起蛍光の発生等の工程が気泡により阻害されることなく、正確かつ安定な測定が可能となる。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の送液方法は、送液部に挿入したノズルから前記送液部と接続している微細流路に液体を供給する送液方法であって、前記微細流路内に第１の液体を供給する第１工程と、前記微細流路内に供給された前記第１の液体を前記微細流路内から回収する第２工程と、前記送液部が密閉されていない状態で前記送液部の中に第２の液体を第１量吐出する第３工程と、前記第２の液体を前記第１量吐出した後、前記送液部が密閉された状態で前記送液部の中に第２の液体を第２量吐出し前記第２の液体を前記微細流路内に供給する第４工程と、を有する。【００１０】
また、本発明の送液装置は、送液部と前記送液部と接続している微細流路とを有する分析チップを着脱自在に搭載可能で、前記送液部に挿入したノズルから前記微細流路に液体を供給する送液装置であって、第１の液体を前記微細流路内に供給し、前記第１の液体を前記微細流路内から回収した後、前記送液部が密閉されていない状態で前記送液部の中に第２の液体を第１量吐出し、前記第２の液体を前記第１量吐出した後、前記送液部が密閉された状態で前記送液部の中に第２の液体を第２量吐出して前記第２の液体を前記微細流路内に供給する送液制御部を有する。【００１１】
また、本発明の分析装置は、送液部と前記送液部と接続している微細流路とを有する分析チップを着脱自在に搭載可能な分析装置であって、前記送液部に挿入したノズルから前記微細流路に液体を供給する送液手段であって、第１の液体を前記微細流路内に供給し、前記第１の液体を前記微細流路内から回収した後、前記送液部が密閉されていない状態で前記送液部の中に第２の液体を第１量吐出し、前記第２の液体を前記第１量吐出した後、前記送液部が密閉された状態で前記送液部の中に第２の液体を第２量吐出し前記第２の液体を前記微細流路内に供給する送液手段と、前記微細流路の内部に固定されている反応場の反応結果を検出する検出手段と、を有する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、前工程の液体が流路内に残存した場合においても気泡発生のない次工程の送液が実現できる。このことにより、反応や測定の各工程が気泡により阻害されることなく、安定した測定が可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、生化学検査装置の構成を示す模式図である。
【図２】図２は、分析チップの断面図である。
【図３】図３は、試薬チップを説明するための説明図である。
【図４】図４は、制御演算部のブロック図である。
【図５】図５は、生化学検査の手順を示すフローチャートである。
【図６】図６Ａ〜Ｅは、送液方法を示す模式図である。
【図７】図７Ａ〜Ｃは、気泡形成に係るメカニズムを示す模式図である。
【図８】図８ＡとＢは、抗原捕捉膜に気泡が付着した状態を示す説明図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、図面を参照しながら本発明の実施形態について詳細に説明する。本実施形態は、表面プラズモン共鳴励起増強蛍光分光法（ＳＰＦＳ）によりターゲット抗原の結合を検出する生化学検査装置に関する。
【００１５】
（生化学検査装置の概略）
図１は、生化学検査装置の構成を示す模式図である。
【００１６】
図１に示すように、生化学検査装置１０００は、励起光光学系２１００、計測部２３００、フォトダイオード２２００、搬送機構２４００、ポンプユニット２５００、分析チップ３０００、試薬チップ４０００、及び制御演算部５０００を備える。
【００１７】
励起光光学系２１００は、光源であるレーザーダイオード等を備え、分析チップ３０００の反射面３１２３への入射角が角度θになるように励起光９０００を照射する。
【００１８】
計測部２３００は、受光素子である光電子増倍管等を備え、表面プラズモン励起蛍光９２００の光路上に配置され、表面プラズモン励起蛍光９２００及び散乱光９３００の光量を測定する。表面プラズモン励起蛍光９２００の光量は、ターゲット抗原の結合の有無、又はターゲット抗原の結合量の特定に用いられる。散乱光９３００の光量は、後述する電場増強度が極大になる入射角（共鳴角）θｒの検出に用いられる。その場合、散乱光９３００の光量が極大になる入射角の角度θが共鳴角θｒとして検出される。ただし、共鳴角θｒを、下記フォトダイオード２２００を用いて検出しても良い。その場合、散乱光９３００の光量による共鳴角θｒの検出を行う必要はない。
【００１９】
フォトダイオード２２００は、励起光９０００の反射光９４００の光路上に配置され、反射光９４００の光量を測定する。反射光９４００の光量は、前記共鳴角θｒの検出に用いられる。この場合、反射光９４００の光量が極小になる入射角の角度θが共鳴角θｒとして検出される。反射光９４００の光量による共鳴角θｒの検出を行わない場合、フォトダイオード２２００を省略し、光吸収体等のものに置き換えても良い。
【００２０】
搬送機構２４００には、分析チップ３０００が装着される。搬送機構２４００は、分析チップ３０００を、反応進行時の反応位置Ｂと測定光路上の測定位置Ａとの間を往来させる。ポンプユニット２５００は、ピペットチップを所定の位置に移動させる移動機構、及び、液体を吐出又は吸引する送液機構を備える。試薬チップ４０００は、生化学反応において使用する各液体をそれぞれ収容する各液体収容部を備える。
【００２１】
制御演算部５０００は、前記各部の動作を制御する制御演算ブロック群を備える。
【００２２】
（分析チップ）
図２は、分析チップ３０００の断面図である。
【００２３】
図２に示すように、分析チップ３０００には、微細流路３１００が形成されている。微細流路３１００の一方端は、ピペットチップを挿入するためのピペットチップ挿入孔３１０１と接続され、他方端は、液体を流路内を往復させる時に液体を受けるための液だめ３１０２と接続される。ピペットチップ挿入孔３１０１と液だめ３１０２の、微細流路３１００と接続しない開口には、挿入孔密閉シール３１１１及び液だめシール３１１２がそれぞれ貼り付けられる。挿入孔密閉シール３１１１の貼付によりピペットチップ挿入孔３１０１の微細流路３１００と接続しない開口が密閉されるが、液だめシール３１１２には通気孔３１１３が設けられている。ピペットチップは、ピペットチップ挿入孔３１０１に初めて挿入される際には、挿入孔密閉シール３１１１を突き破って挿入される。
【００２４】
微細流路３１００内には、反応場となる抗原捕捉膜３３００が定着されている。生化学反応が進行する際、ポンプユニット２５００により試料液、蛍光標識液又は洗浄液等の液体が微細流路３１００に順次供給され、抗原捕捉膜３３００と接触させられる。各液の送液制御については後に説明する。
【００２５】
分析チップ３０００の底面には、表面プラズモン共鳴を発生させるための導電体膜３２００とプリズム３４００が備わる。導電体膜３２００は、金からなる薄膜である。ただし、導電体膜３２００が銀、銅、アルミニウム等の金属又はこれらの金属を含む合金からなっても良い。プリズム３４００は、励起光９０００に対して透明な材質からなる誘電体媒体である。
【００２６】
（試薬チップ）
図３は、試薬チップ４０００を説明するための説明図である。
【００２７】
図３に示すように、試薬チップ４０００は、洗浄液収容部４１００、検体収容部４２００、希釈液収容部４３００、試料液収容部４４００、蛍光標識液収容部４５００、測定液収容部４６００及び廃液収容部４７００を備える。前記各液体収容部４１００〜４７００には、洗浄液、検体、希釈液、試料液、蛍光標識液、測定液及び廃液がそれぞれ収容される。生化学反応を進行させる際、前記各液体収容部４１００〜４６００から分析チップ３０００の微細流路３１００へ各液体がポンプユニット２５００により供給される。また、微細流路３１００から回収された使用済みの液体は廃液収容部４７００に収容される。
【００２８】
微細流路３１００へ液体を供給する際に、制御演算部５０００の制御に従って、ピペットチップ４００１がポンプユニット２５００に装着される。ポンプユニット２５００は、ピペットチップを所定の位置（位置Ｐ１からＰ６のいずれか）に移動させ、所定の液体収容部の中にピペットチップを下降させ所定の液体を吸引する。例えば、試料液を微細流路３１００へ供給する場合は、ポンプユニット２５００はピペットチップを試料液収容部４４００の上方の位置Ｐ４に移動させ、試料液に浸漬するようにピペットチップを下降させ試料液を吸引する。次に、所定量の液体を吸引した後、ポンプユニット２５００はピペットチップを上昇させ、分析チップ３０００のピペットチップ挿入孔３１０１の上方の位置Ｐ８にピペットチップを移動させ、ピペットチップ挿入孔３１０１の中にピペットチップを挿入する。ここで、ピペットチップ挿入孔３１０１へのピペットチップの挿入深さは段階的に調節され、それぞれの段階ごとに液体を吐出するように制御される。この送液方法の詳細については後に説明する。
【００２９】
液体を微細流路３１００から回収する場合、ポンプユニット２５００は流路内の液体を吸引する。流路内の液体の大部分が吸引された後、制御演算部５０００の制御に従って、ポンプユニット２５００はピペットチップを上昇させ、試薬チップ４０００の廃液収容部４７００の上方の位置Ｐ７に移動させる。次に、ポンプユニット２５００はピペットチップを廃液収容部４７００の中に下降させ、吸引した液体を全て吐出する。
【００３０】
（制御演算部）
図４は、制御演算部のブロック図である。
【００３１】
図４に示すように、制御演算部５０００は、ＣＰＵ５１００、励起光制御部５３００、フォトダイオード動作制御部５４００、搬送機構制御部５５００、ポンプユニット移動制御部５２０１、液体供給・回収制御部５２０２及び計測制御・演算部５６００を備える。
【００３２】
ＣＰＵは、生化学検査全体の制御を行う。励起光制御部は、励起光の照射に関する制御を行う。フォトダイオード動作制御部は、フォトダイオード２２００の動作を制御する。搬送機構制御部は、分析チップ３０００を所定の位置に搬送するように搬送機構２４００を制御する。ポンプユニット移動制御部は、ピペットチップの位置及び高さを決定し、ピペットチップを所定の位置及び高さに移動させるようにポンプユニット２５００の移動機構を制御する。液体供給・回収制御部は、液体の吐出又は吸引の動作を決定し、所定の量の液体を吐出又は吸引するように、ポンプユニット２５００の送液機構を制御する。計測制御・演算部は、表面プラズモン励起蛍光の光量の測定等、測定に関する制御を行う。
【００３３】
（生化学検査の概略）
生化学検査とは、生化学反応により検出対象であるターゲット抗原を捕捉し、その後捕捉したターゲット抗原に蛍光標識を付加し、付加された蛍光標識に由来する蛍光の光量から検出対象の有無や捕捉量等を特定する検査方法である。図５は、生化学検査の手順を示すフローチャートである。以下、図５を参照しながら、生化学検査の手順について説明する。
【００３４】
検査を開始する際に、まずは測定液を微細流路３１００へ供給する（ステップＳ１０１）。この時、分析チップ３０００は反応位置Ｂに配置される。前記測定液は、洗浄液としての機能も兼ねている。前述したように、微細流路３１００内には固相抗体が固定された、反応場となる抗原捕捉膜３３００が定着されている。抗原捕捉膜３３００には、固相抗体の捕捉能力を長期間維持するための保護層が塗布されている。そのため、測定液が微細流路３１００へ供給された後には、測定液を流路内を往復させて保護層を除去する。上述の洗浄は、前記測定液の代わりに専用の洗浄液を使用して行っても良い。なお、微細流路３１００及び抗原捕捉膜３３００が清浄であり、且つ、保存用の保護層等が抗原捕捉膜３３００に塗布されていない場合は、洗浄する必要はない。
【００３５】
保護層が除去された後、測定液を回収せず、測定液が微細流路３１００に満たされたまま次の増強測定を行う（ステップＳ１０２）。この際、分析チップ３０００が測定光路上の測定位置Ａに配置され、散乱光９３００の光量が極大になる入射角の角度θ、若しくは反射光９４００の光量が極小になる入射角の角度θが共鳴角θｒとして検出される。増強測定終了後、ポンプユニット２５００の吸引により測定液は微細流路３１００から回収され、試薬チップ４０００の廃液収容部４７００に収容される。
【００３６】
次に、ターゲット抗原と固相抗体とが結合する１次反応を行う（ステップＳ１０３）。この際、分析チップ３０００が反応位置Ｂに配置され、試料液が微細流路３１００へ供給される。試料液は、受検者から直接に採取した検体を希釈液で希釈したものである。試料液が微細流路３１００に満たされた場合、試料液と抗原捕捉膜３３００とが接触し、試料液に含まれるターゲット抗原が、抗原捕捉膜３３００に固定された固相抗体と結合し捕捉される。反応に充分な時間が経過した後、試料液は微細流路３１００から回収され、試薬チップ４０００の廃液収容部４７００に収容される。
【００３７】
次に、流路内の洗浄を行う（ステップＳ１０４）。非特異的に吸着したターゲット抗原を除去するため、洗浄液を微細流路３１００へ供給し、往復させることで微細流路３１００を洗浄する。洗浄終了後、洗浄液は微細流路３１００から回収され、試薬チップ４０００の廃液収容部４７００に収容される。
【００３８】
次に、蛍光標識のための２次反応を行う（ステップＳ１０５）。この場合、蛍光標識液が微細流路３１００へ供給される。微細流路３１００に蛍光標識液が満たされた際に、蛍光標識液と抗原捕捉膜３３００とが接触し、蛍光標識液に含まれる蛍光標識抗体が、前記捕捉されたターゲット抗原と結合し、前記捕捉されたターゲット抗原に蛍光標識が付加される。反応に充分な時間が経過した後、蛍光標識液は微細流路３１００から回収され、試薬チップ４０００の廃液収容部４７００に収容される。その後、洗浄液が微細流路３１００内へ供給され、ステップＳ１０４と同様に流路内の洗浄を行う（ステップＳ１０６）。
【００３９】
最後に、固相抗体への、ターゲット抗原の結合の有無又は結合量等を特定するため、ターゲット抗原に付加された蛍光標識の強度、すなわち蛍光の光量を測定する（ステップＳ１０７）。この際、分析チップ３０００は測定位置Ａに配置され、分析チップ３０００の反射面３１２３に励起光光学系２１００からの励起光９０００が照射される。励起光９０００は反射面３１２３で反射され、反射する際に反射面３１２３から導電体膜３２００側にエバネッセント波がしみだす。しみだしたエバネッセント波の電場は、導電体膜３２００の表面プラズモンに共鳴し増強される。その増強された電場は、抗原捕捉膜３３００に捕捉されたターゲット抗原に付加された蛍光標識を励起する。励起された蛍光標識からは、表面プラズモン励起蛍光９２００が放射される。計測部２２００は、前記表面プラズモン励起蛍光９２００の光量を測定し、ターゲット抗原の結合の有無又は結合量等を特定する。
【００４０】
前述した生化学検査の手順の中で、特にステップＳ１０３の１次反応、ステップＳ１０５の２次反応、及び、ステップＳ１０７の光量測定の場合においては、抗原捕捉膜３３００に気泡が付着していると、反応が進まなかったり、或いは励起蛍光が散乱してしまったりというように、各工程の進行が阻害され、計測の結果に誤りが生じる。そこで、以下に説明するように送液を制御することにより気泡発生を抑制することにより、正確かつ安定な測定が可能となる。
【００４１】
（送液方法）
図６Ａ〜Ｅは、送液方法を示す模式図である。
【００４２】
図６Ａ〜Ｅに示すように、本送液方法により液体を微細流路３１００へ供給する場合に、液体は２段階に分かれて、それぞれ異なる挿入深さで吐出される。
【００４３】
第１段階の送液において、ピペットチップ４００１は図６Ａに示すように、ピペットチップ挿入孔３１０１を密閉しないように、比較的に浅い第１の挿入深さｈ１にまで挿入される。これにより、ピペットチップ４００１と挿入孔密閉シール３１１１の間に空気の逃げ道が確保される。次に、この第１の挿入深さｈ１で、第１回の液体吐出を行う。図６Ｂに示すように、この状態では空気の逃げ道が確保されるため、液体を吐出してもピペットチップ挿入孔３１０１内に圧力がかからなく前工程の残液１０が微細流路３１００の下流側へ押し出されることはない。更に、図６Ｃに示すように、吐出された液体は前工程の残液１０と一体化し、ピペットチップ挿入孔３１０１内に溜まる。このことにより、吐出された液体と前工程の残液との間に気泡が挟まれることがなくなり、気泡の発生が解消される。第１段階の送液においては、後述する第２の挿入深さｈ２までピペットチップ４００１を挿入した際に、ピペットチップ４００１の先端が液面以下に存在するように、約３５μＬの液体が吐出される。
【００４４】
次に、制御演算部５０００の制御に従って、ピペットチップ４００１は図６Ｄに示すように、挿入孔密閉シール３１１１と接触しピペットチップ挿入孔３１０１を密閉するように、第１の挿入深さｈ１よりも深い第２の挿入深さｈ２にまで挿入される。これにより、ピペットチップ挿入孔３１０１側に空気の逃げ道がなくなる。次に、この状態で液体が吐出されると流路内に圧力がかかるため、図６Ｅに示すように、液体を微細流路３１００内に供給することができる。第２段階の送液においては、微細流路３１００全体を液体が往復できるように、約４５μＬの液体が吐出される。その後、制御演算部５０００の制御に従って、ポンプユニット２５００は液体を７０μＬ吸引しては吐出することで液体を流路内を往復させ、抗原捕捉膜３３００と充分に接触させる。
【００４５】
上述したように、本送液方法は、通気性を確保しつつ一部の液体をピペットチップ挿入孔３１０１に注入した後に、ピペットチップ挿入孔３１０１を密閉して残りの液体を注入するとともに液体を微細流路３１００内に供給するように、送液の制御を行う。本送液方法によれば、気泡発生のない送液の実現が可能となる。
【００４６】
本実施形態は、ピペットチップ挿入孔３１０１の通気性の有無により、送液を二段階に分けて行うこととしたが、必ずしも二段階に限定する必要はない。本来ならば、気泡発生のリスクをなくすために、ピペットチップ挿入孔３１０１の通気性が確保された状態で、且つ前工程の残液と一体化できるように液体が注入されれば良い。その後も、液体を微細流路３１００内に供給することができ、且つ、送液の動作等により気泡を再度発生させなければ良い。例えば、送液を二以上の段階に分けて行っても良いし、又は異なる段階に分けずにピペットチップを下降させながら液体を徐々に吐出しても良い。
【００４７】
本出願は、２０１５年１０月３０日出願の特願２０１５−２１４７８２に基づく優先権を主張する。当該出願明細書および図面に記載された内容は、すべて本願明細書に援用される。
【符号の説明】
【００４８】
１０  液体（残液）
１２  固相抗体
１３  ターゲット抗原
１４  蛍光標識抗体
２０  気泡
１０００  生化学検査装置
２１００  励起光光学系
２２００  フォトダイオード
２３００  計測部
２４００  搬送機構
２５００  ポンプユニット
３０００  分析チップ
３１００  微細流路
３１０１  ピペットチップ挿入孔
３１０２  液だめ
３１１１  挿入孔密閉シール
３１１２  液だめシール
３１１３  通気孔
３１２３  反射面
３２００  導電体膜
３３００  抗原捕捉膜
３４００  プリズム
４０００  試薬チップ
４００１  ピペットチップ
４１００  洗浄液収容部（液体収容部）
４２００  検体収容部（液体収容部）
４３００  希釈液収容部（液体収容部）
４４００  試料液収容部（液体収容部）
４５００  蛍光標識液収容部（液体収容部）
４６００  測定液収容部（液体収容部）
４７００  廃液収容部（液体収容部）
５０００  制御演算部
５１００  ＣＰＵ
５２０１  ポンプユニット移動制御部
５２０２  液体供給・回収制御部
５３００  励起光制御部
５４００  フォトダイオード動作制御部
５５００  搬送機構制御部
５６００  計測制御・演算部
９０００  励起光
９２００  表面プラズモン励起蛍光
９３００  散乱光
９４００  反射光
【図１】
2017073601.tif 000003
【図２】
2017073601.tif 000004
【図３】
2017073601.tif 000005
【図４】
2017073601.tif 000006
【図５】
2017073601.tif 000007
【図６】
2017073601.tif 000008
【図７】
2017073601.tif 000009
【図８】
2017073601.tif 000010
【国際調査報告】
2017073601.tif 000011
2017073601.tif 000012