(57)【要約】  複数の目的化合物についてＭＲＭトランジションと実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が保存された記憶部４１と、分析者の入力に基づいて複数のＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部４２と、分析者の入力に基づいて複数のＭＲＭトランジションの印加電圧の最適化のために実行する予備測定の回数を決定する予備測定回数決定部４３と、複数のＭＲＭトランジションと複数の印加電圧候補値の全組み合わせに対応する複数の単位測定を、実行時間の重複が最も少なくなるように予備測定と同数のグループに分割する単位測定分割部４５と、複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル測定部４７を備える質量分析装置を提供する。
2017046867.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する機能を有する質量分析装置であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が少なくとも１つずつ保存された記憶部と、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部と、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションの印加電圧の最適化のために実行する、２以上の予備測定の回数を決定する予備測定回数決定部と、
d) 前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定を前記予備測定の回数と同数のグループに分割する単位測定分割部であって、各グループにおける実行時間の重複の数の最大値が最も小さくなるように、全単位測定を複数のグループに分割する単位測定分割部と、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル作成部と
を備えることを特徴とする質量分析装置。
【請求項２】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する機能を有する質量分析装置であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が少なくとも１つずつ保存された記憶部と、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部と、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の開裂印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定について、実行時間の重複を許容する単位測定の最大数を決定する許容数決定部と、
d) 実行時間が重複する単位測定の数が前記最大数を超えないという条件の下で、前記複数の単位測定を、最小数である複数のグループに分割する単位測定分割部と、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル作成部と、
を備えることを特徴とする質量分析装置。
【請求項３】
前記単位測定分割部が、ＭＲＭトランジション及び実行時間のいずれもが同一であり印加電圧候補値が異なる単位測定が同一のグループに属するように、前記複数の単位測定を最小数のグループに分割することを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項４】
前記単位測定分割部が、各グループにおいて、異なるＭＲＭトランジションの単位測定の実行時間の重なりの総和が最も短くなるように前記複数の単位測定を分割することを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項５】
f) 分析者の入力に基づき、付加実行時間を決定する付加実行時間決定部と、
g) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれに対して規定された実行時間帯の前後の少なくとも一方に前記付加実行時間を追加した修正実行時間を予備測定における実行時間に決定する修正実行時間決定部と
を備えることを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項６】
h) 前記作成した複数の予備測定実行ファイルをそれぞれ実行し、前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記複数の印加電圧候補値にそれぞれ対応するマスクロマトグラムデータを取得する予備測定実行部と、
i) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて取得した複数のマスクロマトグラムデータを前記分析者に提示するクロマトグラムデータ提示部と、
j) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記複数のマスクロマトグラムデータのいずれかを前記分析者に選択させるクロマトグラムデータ選択部と、
k) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記選択されたマスクロマトグラムデータに対応する印加電圧候補値を対応付けて、前記多重反応モニタリング測定を実行する本測定実行ファイルを作成する本測定実行ファイル作成部と
を備えることを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項７】
前記クロマトグラムデータ提示部が、前記複数のマスクロマトグラムデータのそれぞれからマスクロマトグラムを作成して表示部に表示することを特徴とする請求項６に記載の質量分析装置。
【請求項８】
前記予備測定実行部が、前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、時々刻々と変化するマスクロマトグラムデータから、所定の基準に基づいてピークの開始時間及び終了時間を決定し、
前記本測定実行ファイル作成部が、前記ピークの開始時間及び終了時間に基づいて前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれの実行時間を決定する
ことを特徴とする請求項６に記載の質量分析装置。
【請求項９】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化するための質量分析方法であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を作成し、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定し、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションの印加電圧の最適化のために実行する、２以上の予備測定の回数を決定し、
d) 前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定を前記予備測定の回数と同数のグループに分割する単位測定分割部であって、各グループにおける実行時間の重複の数の最大値が最も小さくなるように、全単位測定を複数のグループに分割し、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する
ことを特徴とする質量分析方法。
【請求項１０】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する質量分析方法であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を作成し、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定し、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定について、実行時間の重複を許容する単位測定の最大数を決定し、
d) 実行時間が重複する単位測定の数が前記最大数を超えないという条件の下で、前記複数の単位測定を、最小数である複数のグループに分割し、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する
ことを特徴とする質量分析方法。
【請求項１１】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化するために用いられる質量分析用プログラムであって、
前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を少なくとも１つずつ保存可能な記憶部を有するコンピュータを、請求項９又は１０に記載の質量分析方法を実行する装置として機能させることを特徴とする質量分析用プログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物を分析する質量分析装置に関し、特に、多重反応モニタリング（ＭＲＭ）測定する条件を最適化するために用いられる質量分析方法、及び質量分析用プログラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
試料に含まれる目的化合物の同定や定量を行うための質量分析の手法にＭＳ／ＭＳ分析（タンデム分析）と呼ばれる手法がある。ＭＳ／ＭＳ分析は、例えばプリカーサイオンを選別する前段質量分離部、プリカーサイオンを開裂させてプロダクトイオンを生成するコリジョンセル等の開裂部、及びプロダクトイオンを選別する後段質量分離部を有する質量分析装置（タンデム四重極型質量分析装置等）を用いて行われる。【０００３】
ＭＳ／ＭＳ分析における測定の１つにＭＲＭ測定がある。ＭＲＭ測定では、前段質量分離部と後段質量分離部を通過させるイオンの質量電荷比をそれぞれ固定し、特定のプリカーサイオンに対する特定のプロダクトイオンの強度を測定する。このプリカーサイオンとプロダクトイオンの組はＭＲＭトランジションと呼ばれる。ＭＲＭ測定では、前後の２段の質量分離部によって非測定対象の化合物や夾雑成分由来のイオン、及びイオン化されなかった中性粒子が除去されるため、高いＳ／Ｎ比でイオン強度信号を得ることができる。【０００４】
このような特長から、ＭＲＭ測定は、例えば、土壌から採取した試料や生体由来の試料のように、複数の目的化合物を含む試料の分析に用いられている。複数の目的化合物を含む試料を分析する場合には、クロマトグラフ（ガスクロマトグラフや液体クロマトグラフ）と上述の構成を有する質量分析装置を組み合わせたクロマトグラフ質量分析装置が用いられる。試料に含まれる複数の目的成分は、クロマトグラフのカラムで時間的に分離され、質量分析装置に導入されて個別にＭＲＭ測定される。【０００５】
クロマトグラフ質量分析装置におけるＭＲＭ測定では、分析者が、質量分析ソフトウェア上で該複数の目的化合物のそれぞれに対応する１乃至複数のＭＲＭトランジションと、各ＭＲＭトランジションを用いたＭＲＭ測定を実行する時間帯をそれぞれ入力して一連の測定の内容（メソッド）を決定し、それらを記載した測定実行ファイル（メソッドファイル）を作成する。また、個々の測定条件（ＭＲＭトランジションと実行時間の組み合わせ）に対し、それらを識別する名称（イベント名）を付与する。50種類の目的化合物をそれぞれ2個のＭＲＭトランジションにより測定する場合のメソッドの一例を図１に示す。【０００６】
開裂エネルギーの大きさによってプリカーサイオンの開裂の態様が異なる。しかし、上述のメソッドファイルでは、開裂部におけるイオン開裂エネルギーの大きさが予め決められた値（既定値）であり、設定した各ＭＲＭトランジションでプロダクトイオンを最も高感度で検出できる衝突エネルギーの値には設定されていない。そのため、目的化合物を高感度で測定するためには各ＭＲＭトランジションについて開裂エネルギーの大きさを最適化する必要がある（例えば特許文献１、２参照）。なお、開裂部がコリジョンセルである場合、一般に開裂エネルギーは衝突エネルギー（ＣＥ）と呼ばれる。【０００７】
目的化合物の純物質である標準試料を入手可能な場合には、該標準試料を直接質量分析装置に導入し、ＣＥ値を順次変更して最も高感度でプロダクトイオンが検出されるＣＥ値を決定することができる。しかし、土壌から採取した試料や生体由来の試料に含まれる目的化合物の標準試料を入手することは困難である。こうした場合には、クロマトグラフ質量分析装置を使用し、図３に示す手順でＣＥ値を最適化している。【０００８】
まず、質量分析ソフトウェア上で作成した上述のメソッドファイル（これを「親メソッドファイル」と呼ぶ。）をcsv形式等の所定のファイル形式でエクスポートし（ステップＳ１０１）、表計算ソフトウェア等で読み込む。そして、親メソッドファイルに記載されたメソッド（これを「親メソッド」と呼ぶ。）を構成する、個々のＭＲＭトランジションを用いた測定（これを「親イベント」と呼ぶ。）を複数のグループに分割して（ステップＳ１０２）、各グループにそれぞれ対応するメソッド（これを「子メソッド」と呼ぶ。）を作成する（ステップＳ１０３）。【０００９】
続いて、複数の子メソッドのそれぞれにおいて、ＭＲＭトランジションごとに異なる複数のＣＥ候補値を設定し（ステップＳ１０４）、ＭＲＭトランジションとＣＥ候補値の組み合わせにそれぞれ対応する複数のイベント（これを「子イベント」と呼ぶ。）を作成する。そして、子イベントの作成によって更新された複数の子メソッドをcsv等のファイル形式で保存し、質量分析ソフトウェアにインポートして子メソッドファイルを作成する（ステップＳ１０５）。図１のメソッドにおける10個の親イベントを１つのグループとして10個の子メソッドを作成し、各ＭＲＭトランジションについて5V〜60Vまで5V単位で計12個のＣＥ候補値を設定して子イベントを作成した例を図２に示す。【００１０】
そして、試料をクロマトグラフに導入して子メソッドの１つを実行し、該子メソッドに記載された各ＭＲＭトランジションについて、異なる複数のＣＥ候補値でプロダクトイオンの強度を測定する（ステップＳ１０６）。その後、分析者がその結果を確認し、各ＭＲＭトランジションについて最も高感度でプロダクトイオンが測定されたＣＥ候補値を１つ選出し、当該ＭＲＭトランジションのＣＥ値に決定する（ステップＳ１０７）。【００１１】
全ての子メソッドファイルを実行し、全てのＭＲＭトランジションのＣＥ値を決定すると、続いて、それらＣＥ値を親メソッドファイルに書き込んでファイルを更新する（ステップＳ１０８）。【００１２】
上述した従来の方法では、親メソッドファイルのエクスポート、親メソッドの分割（子メソッドの作成）、複数のＣＥ値の入力（子イベントの作成）、子メソッドの更新、及び質量分析ソフトウェアへのインポート（子メソッドファイルの作成）を、全て分析者自身が行わなければならず、時間と手間がかかるという問題があった。【００１３】
そこで、分析者の作業量を軽減するために、親メソッドファイルに記載された親メソッドを記載順に所定個ずつ抽出して子メソッドファイルを自動的に作成することが可能なソフトウェアが提案されている（例えば非特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】特開2013-15485号公報
【特許文献２】特開2012-104389号公報
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】ワシントン大学, "Skyline Targeted Proteomics Environment", [online], [平成27年1月26日検索], インターネット<URL:https://skyline.gs.washington.edu/labkey/project/home/software/Skyline/begin.view>
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
複数の目的化合物についてそれぞれ１乃至複数のＭＲＭトランジションを用いた測定（親イベント）が設定された１つの親メソッドから複数の子メソッドを作成し、それぞれの子メソッドに対応する子メソッドファイルを作成する際、一般に、目的化合物が異なると親イベントの実行時間が異なるが、非特許文献１に記載のソフトウェアでは、各親イベントの実行時間を考慮することなく機械的に（例えば親メソッドファイルにおける記載順に）抽出して複数の子メソッドを作成する。そのため、各子メソッドにおいてそれぞれ複数のＣＥ候補値を設定して子イベントを作成すると、多数の子イベントの実行時間が重複する場合がある。【００１７】
ある時間帯Ａにおいて複数の子イベントが重複して設定されている場合、それら複数の子イベントを次のように実行する。まず、複数の子イベントのうちの１つを１回実行し、終了すると別の１つの子イベントを実行する。そして、全ての子イベントを１回ずつ実行すると、再び最初に実行した子イベントから順に、全ての子イベントを１回ずつ実行する。このように全ての子イベントを１回ずつ実行する動作を、時間帯Ａが終了するまで繰り返す。全ての子イベントを１回ずつ実行するために要する時間は、ループタイムと呼ばれる。ループタイムは、各子イベントのデータを取得する時間間隔に相当する。【００１８】
多数の子イベントの実行時間が重複すると、ループタイムが長くなり、各子イベントのデータを取得する間隔が長くなる。すると、クロマトグラフで分離された目的化合物が質量分析装置に導入されている間に取得されるデータの点数が少なくなる。その結果、不十分なデータ点数でマスクロマトグラムのピークを表さなければならず、マスクロマトグラムの精度が悪くなってしまう、という問題があった。子イベントを１回実行する時間を短くすればループタイムを短縮することができるものの、その場合には各回の測定精度が悪くなり、やはりマスクロマトグラムの精度が悪くなってしまう、という問題があった。【００１９】
ここでは、ＭＲＭ測定における代表的なパラメータである衝突エネルギーの値を最適化する場合を例に挙げて説明したが、ＭＲＭ測定における他のパラメータ（前段質量分離部や後段質量分離部に印加する電圧の大きさ等）を最適化する場合にも上記同様の問題があった。【００２０】
本発明が解決しようとする課題は、個別に実行時間帯、及びプリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションが予め決められた複数のＭＲＭ測定のそれぞれについて質量分析装置の各部への印加電圧の値を最適化するための予備測定用の予備測定実行ファイルを簡便に作成することができ、かつ、該ファイルを実行することにより高精度でマスクロマトグラムを取得することができる質量分析装置、質量分析方法、及び質量分析用プログラムを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
上記課題を解決するために成された本発明の第１の態様は、クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する機能を有する質量分析装置であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が少なくとも１つずつ保存された記憶部と、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部と、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションの印加電圧値の最適化のために実行する、２以上の予備測定の回数を決定する予備測定回数決定部と、
d) 前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定を前記予備測定の回数と同数のグループに分割する単位測定分割部であって、各グループにおける実行時間の重複の数の最大値が最も小さくなるように、全単位測定を複数のグループに分割する単位測定分割部と、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル作成部と
を備えることを特徴とする。【００２２】
上記印加電圧値は、質量分析装置の各部に印加する電圧の大きさであり、その中でも特にプリカーサイオン及び／又はプロダクトイオンの通過効率や生成効率に影響を与える電圧の大きさを意味する。例えば、上記印加電圧値は、コリジョンセルに印加される衝突エネルギーや、前段質量分離部に印加するバイアス電圧、後段質量分離部に印加するバイアス電圧などの値であり、これらのうちの１つであってもよく、複数の組み合わせであってもよい。【００２３】
本発明の第１の態様に係る質量分析装置では、分析者が印加電圧候補値と予備測定回数を予め決めておく。そして、実行時間が重複する単位測定の数が最小になるように、単位測定（ＭＲＭトランジションと印加電圧値の組み合わせ）を複数のグループに分割して、各グループに対応する予備測定実行ファイルを作成する。これにより、各予備測定において、重複する単位測定を各１回実行するために要する時間（ループタイム）をできるだけ短くし、必要十分な数のデータを取得してマスクロマトグラムの精度を高めることができる。あるいは、ループタイムが一定である場合には、各回の単位測定をできるだけ長く実行して測定精度を高めることができる。また、分析者は印加電圧候補値と予備測定の回数（即ち、予備測定実行ファイルの数）を決定するだけで、簡便に予備測定実行ファイルを作成することができる。【００２４】
また、上記課題を解決するために成された本発明の第２の態様は、クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する機能を有する質量分析装置であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が少なくとも１つずつ保存された記憶部と、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部と、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定について、実行時間の重複を許容する単位測定の最大数を決定する許容数決定部と、
d) 実行時間が重複する単位測定の数が前記最大数を超えないという条件の下で、前記複数の単位測定を、最小数である複数のグループに分割する単位測定分割部と、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル作成部と、
を備えることを特徴とする。【００２５】
本発明の第２の態様に係る質量分析装置では、分析者が、実行時間の重複を許容する単位測定の最大数を予め決めておく。そして、その範囲内で複数の単位測定を最小数のグループに分割し、各グループに対応する予備測定実行ファイルを作成する。これにより、ループタイムが長くなりすぎたり、各単位測定の実行時間が短くなりすぎたりすることを防止して、マスクロマトグラムを高い精度に維持しつつ、予備測定回数を最小限に抑えることができる。また、分析者は上記最大数を決定するだけで、簡便に予備測定実行ファイルを作成することができる。【００２６】
上記第１の態様及び第２の態様に係る質量分析装置では、
前記単位測定分割部が、ＭＲＭトランジション及び実行時間のいずれもが同一であり印加電圧候補値が異なる単位測定が同一のグループに属するように、前記複数の単位測定を最小数のグループに分割する
ことが望ましい。【００２７】
クロマトグラフ質量分析装置を用いた測定では、測定ごとに移動相のｐＨやカラムの状態等が少しずつ異なり、目的化合物がカラムから溶出する時間が前後したり長短したりする場合がある。そのため、同一のＭＲＭトランジションを用いる測定を一連の予備測定において実行することにより、より正確に印加電圧値を最適化することができる。【００２８】
上記第１の態様及び第２の態様に係る質量分析装置では、また、
前記単位測定分割部が、各グループにおいて、異なるＭＲＭトランジションの単位測定の実行時間の重なりの総和が最も短くなるように前記複数の単位測定を分割する
ことが望ましい。これにより、全測定時間にわたってループタイムを最小限に抑え、また、各単位測定の実行時間を十分に確保することができる。【００２９】
上記第１の態様及び第２の態様に係る質量分析装置では、さらに、
f) 分析者の入力に基づき、付加実行時間を決定する付加実行時間決定部と、
g) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれに対して規定された実行時間帯の前後の少なくとも一方に前記付加実行時間を追加した修正実行時間を予備測定における実行時間に決定する修正実行時間決定部と
を備えるように構成することができる。これにより、個々の予備測定において移動相のｐＨやカラムの状態に多少のばらつきが生じ、目的化合物の溶出時間が事前に予測した保持時間からずれた場合でも、マスクロマトグラムのピークを構成する全てのデータを取得することができる。【００３０】
ところで、多数の目的化合物を一斉分析する際には数百に及ぶＭＲＭトランジションを用いることがある。上述した従来の方法では、予備測定後、各ＭＲＭトランジションについて決定した印加電圧値を分析者が手作業で親メソッドファイルに書き込む必要があるため、分析者がＭＲＭトランジションと印加電圧値の対応関係を誤って入力してしまう場合がある、という問題もあった。【００３１】
そこで、上記第１の態様及び第２の態様に係る質量分析装置は、さらに、
h) 前記作成した複数の予備測定実行ファイルをそれぞれ実行し、前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記複数の印加電圧候補値にそれぞれ対応するマスクロマトグラムデータを取得する予備測定実行部と、
i) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて取得した複数のマスクロマトグラムデータを前記分析者に提示するクロマトグラムデータ提示部と、
j) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記複数のマスクロマトグラムデータのいずれかを前記分析者に選択させるクロマトグラムデータ選択部と、
k) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記選択されたマスクロマトグラムデータに対応する印加電圧候補値を対応付けて、前記多重反応モニタリング測定を実行する本測定実行ファイルを作成する本測定実行ファイル作成部と
を備えることが望ましい。【００３２】
上記クロマトグラムデータ提示部は、例えば、複数のマスクロマトグラムデータからマスクロマトグラムを作成し、それを表示部に表示することにより分析者に提示するものとすることができる。あるいは、クロマトグラムデータをプリントアウトして分析者に提示するものとしてもよい。
予備測定実行部、クロマトグラムデータ提示部、クロマトグラムデータ選択部、及び本測定実行ファイル作成部を備えた質量分析装置を用いると、各ＭＲＭトランジションについて、分析者が複数のマスクロマトグラムの中から最も高感度でイオンが検出されたものを選択するのみで、簡便に本測定実行ファイルを作成することができる。また、本測定実行ファイルが自動的に作成されるため、分析者がＭＲＭトランジションと印加電圧値の対応を誤って入力する心配がない。【００３３】
また、この態様の質量分析装置は、さらに、
前記予備測定実行部が、前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、時々刻々と変化するマスクロマトグラムデータから、所定の基準に基づいてピークの開始時間及び終了時間を決定し、
前記本測定実行ファイル作成部が、前記ピークの開始時間及び終了時間に基づいて前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれの実行時間を決定する
ように構成することができる。
この態様の質量分析装置を用いると、本測定において、各ＭＲＭトランジションを用いた測定（イベント）においてマスクロマトグラムのピーク範囲のデータを確実に取得しつつ、各イベントの実行時間の長さを最小限に抑えることができる。これにより、本測定において実行時間が重複するＭＲＭ測定の数を少なくしてループタイムを短縮することができる。【００３４】
本発明の第３の態様は、クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化するための質量分析方法であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を作成し、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定し、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションの印加電圧の最適化のために実行する、２以上の予備測定の回数を決定し、
d) 前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定を前記予備測定の回数と同数のグループに分割する単位測定分割部であって、各グループにおける実行時間の重複の数の最大値が最も小さくなるように、全単位測定を複数のグループに分割し、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する
ことを特徴とする。【００３５】
本発明の第４の態様は、クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する質量分析方法であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を作成し、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定し、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定について、実行時間の重複を許容する単位測定の最大数を決定し、
d) 実行時間が重複する単位測定の数が前記最大数を超えないという条件の下で、前記複数の単位測定を、最小数である複数のグループに分割し、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する
ことを特徴とする。【００３６】
本発明の第５の態様は、クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化するために用いられる質量分析用プログラムであって、
前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を少なくとも１つずつ保存可能な記憶部を有するコンピュータを、前記第３の態様又は前記第４の態様の質量分析方法を実行する装置として機能させることを特徴とする。
【発明の効果】
【００３７】
本発明に係る質量分析装置、質量分析方法、あるいは質量分析用プログラムを用いることにより、個別に実行時間帯及びＭＲＭトランジションが予め決められた複数のＭＲＭ測定のそれぞれについて質量分析装置の各部への印加電圧値を最適化するための予備測定を実行するための予備測定実行ファイルを簡便に作成することができ、かつ、該ファイルを実行することにより高精度でマスクロマトグラムを取得することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】親メソッドファイルの例。
【図２】従来の方法により親メソッドファイルから作成した子メソッドファイルの例。
【図３】従来の質量分析方法のフローチャート。
【図４】実施例１の質量分析装置を液体クロマトグラフと組み合わせて構成した液体クロマトグラフ質量分析装置の要部構成図。
【図５】実施例１の質量分析方法のフローチャート。
【図６】実施例１における付加実行時間について説明する図。
【図７】従来の質量分析方法を用いた場合の予備測定について説明する図。
【図８】実施例１における予備測定について説明する図。
【図９】実施例１における予備測定について説明する別の図。
【図１０】実施例１における表示画面の例。
【図１１】実施例２の質量分析装置を液体クロマトグラフと組み合わせて構成した液体クロマトグラフ質量分析装置の要部構成図。
【図１２】実施例２の質量分析方法のフローチャート。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
以下、本発明に係る質量分析装置、質量分析方法、及び質量分析用プログラムの一実施例について、図面を参照して説明する。
【実施例１】
【００４０】
図４は実施例１の質量分析装置を液体クロマトグラフと組み合わせた、液体クロマトグラフ質量分析装置（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）の要部構成図、図５は本実施例の質量分析方法に関するフローチャートである。【００４１】
本実施例のクロマトグラフ質量分析装置は、液体クロマトグラフ部１、質量分析部２、電源部３、及びこれらの動作を制御する制御部４から構成されている。液体クロマトグラフ部１は、移動相が貯留された移動相容器１０と、移動相を吸引して一定流量で送給するポンプ１１と、移動相中に所定量の試料液を注入するインジェクタ１２と、試料液に含まれる各種化合物を時間方向に分離するカラム１３と、を備える。【００４２】
質量分析部２は、略大気圧であるイオン化室２０と真空ポンプ（図示なし）により真空排気された高真空の分析室２３との間に、段階的に真空度が高められた第１、第２中間真空室２１、２２を備えた多段差動排気系の構成を有している。イオン化室２０には、試料溶液に電荷を付与しながら噴霧するエレクトロスプレイイオン化用プローブ（ＥＳＩプローブ）２０１が設置されている。イオン化室２０と後段の第１中間真空室２１との間は細径の加熱キャピラリ２０２を通して連通している。第１中間真空室２１と第２中間真空室２２との間は頂部に小孔を有するスキマー２１２で隔てられ、第１中間真空室２１と第２中間真空室２２にはそれぞれ、イオンを収束させつつ後段へ輸送するためのイオンガイド２１１、２２１が設置されている。分析室２３には、多重極イオンガイド（ｑ２）２３３が内部に設置されたコリジョンセル２３２を挟み、イオンを質量電荷比に応じて分離する前段四重極マスフィルタ（Ｑ１）２３１と、同じくイオンを質量電荷比に応じて分離する後段四重極マスフィルタ（Ｑ３）２３４、及びイオン検出器２３５が設置されている。【００４３】
コリジョンセル２３２の内部には、アルゴン、窒素などのＣＩＤガスを連続的又は間欠的に供給することができる。電源部３は、ＥＳＩプローブ２０１、イオンガイド２１１、２２１、２３３、四重極マスフィルタ２３１、２３４などにそれぞれ所定の電圧を印加する。なお、四重極マスフィルタ２３１、２３４はそれぞれ、メインロッド電極の前段に、入口端での電場の乱れを補正するためのプリロッド電極を有しており、プリロッド電極にはメインロッド電極とは異なる電圧が印加できるようになっている。【００４４】
質量分析部２では、ＳＩＭ（選択イオンモニタリング）測定、プロダクトイオンスキャン測定、ＭＲＭ（多重反応モニタリング）測定等を行うことができる。ＳＩＭ測定では、前段四重極マスフィルタ（Ｑ１）２３１ではイオンを選別せず（マスフィルタとして機能させず）、後段四重極マスフィルタ（Ｑ３）２３４を通過させるイオンの質量電荷比を固定してイオンを検出する。【００４５】
一方、ＭＳ／ＭＳスキャン測定（プロダクトイオンスキャン測定）及びＭＲＭ測定では、前段四重極マスフィルタ（Ｑ１）２３１及び後段四重極マスフィルタ（Ｑ３）２３４の両方をマスフィルタとして機能させる。前段四重極マスフィルタ（Ｑ１）２３１ではプリカーサイオンとして設定されたイオンのみを通過させる。また、コリジョンセル２３２の内部にＣＩＤガスを供給し、プリカーサイオンを開裂させてプロダクトイオンを生成する。ＭＳ／ＭＳスキャン測定では後段四重極マスフィルタ（Ｑ３）２３４を通過するイオンの質量電荷比を走査し、ＭＲＭ測定では後段四重極マスフィルタ（Ｑ３）２３４を通過するイオンの質量電荷比を固定する。【００４６】
制御部４は、記憶部４１を有するとともに、機能ブロックとして、印加電圧候補値決定部４２、予備測定回数決定部４３、付加実行時間決定部４４、単位測定分割部４５、修正実行時間決定部４６、予備測定実行ファイル作成部４７、予備測定実行部４８、クロマトグラムデータ提示部４９、クロマトグラムデータ選択部５０、及び本測定実行ファイル作成部５１を備えている。制御部４の実体はパーソナルコンピュータであり、該コンピュータに予めインストールされた質量分析用プログラム（本実施例における質量分析用プログラムに相当）を実行することにより上記各部として機能させるようにすることができる。また、制御部４には、入力部６、表示部７が接続されている。【００４７】
以下、実施例１における質量分析方法について、図５のフローチャートを参照して説明する。実施例１では、試料に含まれる複数の目的化合物をＭＲＭ測定する条件を最適化する。具体的には、各ＭＲＭトランジションを用いたＭＲＭ測定における開裂エネルギーを最適化する。ＭＲＭ測定において最適化される印加電圧には、開裂エネルギーのほかに、前段四重極マスフィルタ２３１や後段四重極マスフィルタ２３４に印加するバイアス電圧、イオンガイド２１１、２２１への印加電圧等もあるが、ここでは説明を容易するため、開裂エネルギーのみを最適化する場合を例に挙げて説明する。【００４８】
実施例１における開裂エネルギーは、プリカーサイオンを加速してコリジョンセル２３２内のＣＩＤガスに衝突させるための電圧の大きさであり、衝突エネルギー（ＣＥ：Collision Energy）値と呼ぶこともできる。【００４９】
分析者は、まず、記憶部４１に予め保存された分析実行ファイルを読み出す。この分析実行ファイル（これを「親メソッドファイル」と呼ぶ。）には、50種類の目的化合物名のそれぞれについて、2つずつ対応付けられたＭＲＭトランジション、及び該ＭＲＭトランジションを用いるＭＲＭ測定（これを「親イベント」と呼ぶ。）の実行時間が、一連のＭＲＭ測定（これを「親メソッド」と呼ぶ。）の実行条件として記載されている。各親イベントの分析条件は、化合物データベースを参照するなどして決められている。【００５０】
親メソッドファイルが読み出されると、印加電圧候補値決定部４２は、各ＭＲＭトランジションに対して設定する複数の印加電圧（本実施例では開裂エネルギー）候補値の入力を分析者に促す画面を表示部７に表示する。分析者が開裂エネルギーの最小値（5V）と最大値（60V）、及びその間隔（5V）を入力すると、開裂エネルギー候補値決定部４２は、全てのＭＲＭトランジションに対して開裂エネルギー候補値12個ずつを決定する（ステップＳ２）。これにより、100個の親イベントが12個ずつに分割され、予備測定において実行する1200個のＭＲＭ測定（これを「子イベント」と呼ぶ。本発明の単位測定に相当。）が決定する。ここでは、全ての親イベントに共通のＣＥ候補値を用いて子イベントを作成したが、親イベントごとに異なるＣＥ候補値を分析者に入力させ、親イベントごとに異なるＣＥ候補値を決定して子イベントを作成するようにしてもよい。【００５１】
次に、予備測定回数決定部４３が、分析者に予備測定の実行回数の入力を促す画面を表示する。本実施例における予備測定は、複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについてＣＥ値を最適化するための測定である。予備測定回数決定部４３は、分析者による入力（10回）に基づいて予備測定回数を決定する（ステップＳ３）。【００５２】
また、付加実行時間決定部４４が、分析者に付加実行時間の入力を促す画面を表示し、その入力（1.0min）に基づき付加実行時間を決定する（ステップＳ４）。付加実行時間については後述する。なお、付加実行時間の設定は必須ではなく、分析者は、表示された画面でスキップを選択することにより、付加実行時間を使用せず予備測定を行うこともできる。【００５３】
印加電圧（開裂エネルギー）候補値（ＣＥ候補値）、予備測定回数、及び付加実行時間（使用する場合のみ）がそれぞれ決定すると、単位測定分割部４５は、上述した120個の子イベントを、同一の親イベントから生成された子イベントが同一のグループに属し、実行時間が重複する子イベントの数が最小になるように、予備測定回数と同数（10個）のグループに分割する（ステップＳ５）。これにより、グループごとに、複数の子イベントを含む一連の予備測定（これを「子メソッド」と呼ぶ。）が決定する。なお、実行時間が重複する子イベントの数が最小になる、子イベントの分割の形態が複数ある場合には、単位測定分割部４５は、異なるＭＲＭトランジション（即ち、異なる親イベントから生成された子イベントに相当）の間で重複する実行時間の総和が最も短くなるように、子イベントを分割する。【００５４】
子メソッドが決まると、修正実行時間決定部４６は、図６に示すように、各子イベントに予め設定された実行時間の前後に、分析者により入力された付加実行時間を付加して実行時間を修正する（ステップＳ６）。上述したように、親イベントの実行時間は、化合物データベース等に記載された各目的化合物の保持時間に基づいて決められている。しかし、測定の条件（移動相のｐＨやカラムの状態など）が変動すると、目的化合物の溶出時間がデータベースに記載された保持時間からずれる場合がある。本実施例では、こうした場合を考慮して付加実行時間を分析者に入力させ、目的化合物の溶出時間が多少変動した場合でも確実にマスクロマトグラムのピーク全体を取得できるようにしている。【００５５】
修正実行時間決定部４６による、各子メソッドファイルの実行時間の修正が完了すると、ＭＲＭトランジション、（修正後の）実行時間、及びＣＥ候補値を１組とする子イベントの実行条件を確定し、各グループにそれぞれ対応する予備測定実行ファイル（これを「子メソッドファイル」と呼ぶ。）を１つずつ作成し、記憶部４１に保存する（ステップＳ７）。【００５６】
ここで、複数の目的化合物を含む試料について、本実施例において作成される予備測定実行ファイルと、従来（非特許文献１）の方法により作成される予備測定実行ファイルを比較する。図７(a)は、この試料について、親イベントを実行して取得したマスクロマトグラムである。なお、説明を容易にするため、ここでは予備測定回数を３回とする。【００５７】
上述したように、非特許文献１の方法では、機械的に（例えば親メソッドファイルにおける記載順に）親イベントを抽出して複数の子メソッドを作成し、予備測定実行ファイル１〜３を作成する。この方法では、例えば、図７(a)に破線で示すように、実行時間が早い方から順に、同数ずつ親イベントを抽出して予備測定実行ファイルが作成される。すると、図７(b)に予備測定１の拡大図（時間0〜t1）を示すように、ＭＲＭトランジションが異なるＭＲＭ測定（親イベントに相当）の実行時間の重なりが最大で4個（具体的には、ＭＲＭ４〜ＭＲＭ７の実行時間が重複）生じる。また、2個あるいは3個の異なるＭＲＭ測定の実行時間が重なる時間帯も多く存在する。本実施例では1つの親イベントから12個の子イベントを生成するため、予備測定において最大48個の子イベントの実行時間が重複することになる。48個もの子イベントの実行時間が重複すると、それらを各1回ずつ実行するために要する時間（ループタイム）が長くなり、マスクロマトグラムを作成するために必要十分な点数のデータを取得することができなくなってしまう。【００５８】
これに対し、実施例１の方法では、実行時間が重複する数が最小になるように予備測定実行ファイル１〜３を作成する（図８参照）。図９に、予備測定１〜３の拡大図（時間0〜t1の拡大図）を示す。この方法では、時間0〜t1において実行時間が重複するＭＲＭ測定は最大でも2個であり、その重複箇所も1箇所のみ（予備測定１におけるＭＲＭ４とＭＲＭ７の重複のみ）である。従って、従来の方法に比べてループタイムを短縮することができ、各子イベントにおいて十分な点数のデータを取得して高精度のマスクロマトグラムを作成することができる。【００５９】
予備測定実行ファイルの作成後、分析者による所定の操作により予備測定開始が指示されると、予備測定実行部４８は、記憶部４１から予備測定実行ファイルを１つずつ読み出し、該ファイルに記載された子メソッドを実行して各子イベントのマスクロマトグラムデータを取得して記憶部４１に保存する（ステップＳ８）。このとき、予備測定実行部４８は、マスクロマトグラムデータを取得しつつ、該データに基づいてマスクロマトグラムにおけるピークの開始時間と終了時間を決定する（ステップＳ９）。【００６０】
ピークの開始時間と終了時間の決定は、例えば、マスクロマトグラムデータにおける強度値が予め設定された閾値を上回った時点をピーク開始時間とし、下回った時間をピーク終了時間とすることにより行うことができる。あるいは、強度の変化が予め設定された性の値の傾きを超えた時点をピーク開始時間とし、強度値の変化が予め設定された負の値の傾きを下回った時点をピーク終了時点とすることもできる。【００６１】
全ての予備実行ファイルを実行し、全ての子イベントのマスクロマトグラムデータを取得すると、クロマトグラムデータ提示部４９は、それらのマスクロマトグラムデータからマスクロマトグラムを作成し、図１０に示すような画面を表示部７に表示する（ステップＳ１０）。即ち、ＭＲＭトランジションと実行時間が同じでありＣＥ候補値が異なるマスクロマトグラムを画面下部に並べて表示する。分析者は、表示されたマスクロマトグラムを比較し、画面上部に表示された複数のＣＥ候補値の中から、最も高感度でプロダクトイオンが検出されているマスクロマトグラムを１つ選択し、対応するＣＥ候補値のチェックボックスにチェックを入れる（ステップＳ１１）。【００６２】
全てのＭＲＭトランジションについて、分析者により１つのマスクロマトグラム（ＣＥ候補値）が選択されると、本測定実行ファイル作成部５１は、各ＭＲＭトランジションについて、マスクロマトグラムに基づき決定したピーク開始時間の前とピーク終了時間の後に、上記ステップＳ４において分析者により設定された付加実行時間を付与して測定実行時間を決定し、本測定実行ファイルを作成する（ステップＳ１２）。これにより、予備測定実行時と本測定実行時で測定条件（カラムの状態等）に多少の変化が生じた場合でも、本測定において確実にマスクロマトグラムのピーク全体のデータを取得することができる。【００６３】
以上、説明したように、実施例１の質量分析装置、質量分析方法、あるいは質量分析用プログラムを用いると、分析者は、ＣＥ候補値、予備測定回数、及び付加実行時間（使用する場合のみ）を入力するだけで、各ＭＲＭトランジションの印加電圧値を最適化する予備測定実行ファイル（子メソッドファイル）を作成することができる。また、各子メソッドにおけるループタイムをできるだけ短くし、必要十分な数のデータを取得して高精度のマスクロマトグラムを作成することができる。さらに、各ＭＲＭトランジションについて異なる印加電圧値で取得したマスクロマトグラムの中から１つを選択するだけで、本測定実行ファイルも作成することができる。
【実施例２】
【００６４】
次に、実施例２の質量分析装置、質量分析方法、及び質量分析用プログラムについて説明する。図１１は実施例２の質量分析装置を液体クロマトグラフと組み合わせた、液体クロマトグラフ質量分析装置（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）の要部構成図、図１２は実施例２の質量分析方法に関するフローチャートである。なお、上記実施例１と共通の構成やステップについては、同一の符号を付して適宜説明を省略する。【００６５】
実施例２の質量分析装置では、制御部４’が機能的に許容数決定部４３’を備えている。実施例２のステップＳ１及びステップＳ２は実施例１と同じである。実施例２では、複数の印加電圧候補値を決定（ステップＳ２）した後、許容数決定部４３’が、予備測定において実行時間が重複することを許可する子イベントの最大数の入力を分析者に促す画面を提示し、分析者の入力に基づいて最大許容数を決定する（ステップＳ３’）。また、実施例１と同様に、付加実行時間決定部４４が、分析者の入力に基づいて付加実行時間を決定する（ステップＳ４）。【００６６】
実施例２においても、上述した120個の子イベントを、同一の親イベントから生成された子イベントが同一のグループに属し、予備測定回数と同数（10個）のグループに分割する（ステップＳ５’）。ただし、実施例１では、実行時間が重複する子イベントの数が最小になるように子イベントを分割したのに対し、実施例２では、分割後の各グループにおいて実行時間が重複する子イベントの数の最大値が、分析者により設定された最大許容数を超えないという条件の下で、1200個の子イベントを最小数のグループに分割する。子イベントの分割後の各ステップＳ６〜Ｓ１２は実施例１と同じである。【００６７】
実施例２では、上述したように、分析者の入力に基づいて決定した最大許容数を、子イベントを分割する際の条件とし、その条件の下で子イベントを最小数のグループに分割する。そのため、予備測定において実行時間が重複する子イベントの数が過度に多くなり、ループタイムが長くなりすぎることがない。従って、予備測定（ステップＳ８）において高精度のマスクロマトグラムを取得することができる。また、最小数のグループに分割する（即ち最小数の予備測定実行ファイルを作成する）ため、予備測定回数を最小数に抑えることができる。【００６８】
上記実施例１及び２はいずれも一例であって、本発明の趣旨に沿って適宜に変更することができる。
上記実施例では、液体クロマトグラフにより時間的に分離された複数の目的化合物をＭＲＭ測定する条件を最適化したが、目的化合物がガスクロマトグラフにより分離される場合に同様の構成を採ることができる。【００６９】
また、上記実施例１及び２では、最適化する印加電圧の種類をＣＥ値のみとしたが、複数種類の印加電圧を最適化する場合にも上記同様に行うことができる。例えば、前段四重極マスフィルタ２３１に印加するバイアス電圧、コリジョンセル２３２に印加する衝突エネルギー（ＣＥ）、及び後段四重極マスフィルタ２３４に印加するバイアス電圧について、それぞれ複数の候補値を設定し、各ＭＲＭトランジションについて、それらの全通りの組み合わせにそれぞれ対応する子イベントを作成することにより、これら３種類の印加電圧を全て最適化することができる。【００７０】
さらに、同一の親イベントから生成された子イベントが同一のグループに属するように、子イベントを分割したが、同一の親イベントから生成された子イベントが異なるグループに属するように、子イベントを分割することもできる。同一の親イベントから生成された子イベントの実行時間は同一であるため、これらを異なるグループに属するように分割すると、ループタイムをより短くすることができる。ただし、上述したように、測定回ごとにわずかに測定条件（カラムの状態や温度等）が異なる可能性がある場合には、測定条件の変動が取得データに影響を及ぼす。そのため、実施例１及び２のように、同一の親イベントから生成された子イベントが同一のグループに属するように、子イベントを分割することが好ましい。【００７１】
その他、上記実施例１及び２では、クロマトグラムデータ提示部４９が、予備測定により取得したマスクロマトグラムデータから作成したクロマトグラムを表示部７の画面に表示したが、マスクロマトグラムあるいはマスクロマトグラムデータをプリントアウトして分析者に確認させ、各ＭＲＭトランジションについてマスクロマトグラム（データ）を特定する番号等を入力させるようにしてもよい。
【符号の説明】
【００７２】
１…液体クロマトグラフ部
２…質量分析部
３…電源部
４、４’…制御部
４１…記憶部
４２…印加電圧候補値決定部
４３…予備測定回数決定部
４３’…許容数決定部
４４…付加実行時間決定部
４５…単位測定分割部
４６…修正実行時間決定部
４７…予備測定実行ファイル作成部
４８…予備測定実行部
４９…クロマトグラムデータ提示部
５０…クロマトグラムデータ選択部
５１…本測定実行ファイル作成部
６…入力部
７…表示部
【図１】
2017046867.tif 000003
【図２】
2017046867.tif 000004
【図３】
2017046867.tif 000005
【図４】
2017046867.tif 000006
【図５】
2017046867.tif 000007
【図６】
2017046867.tif 000008
【図７】
2017046867.tif 000009
【図８】
2017046867.tif 000010
【図９】
2017046867.tif 000011
【図１０】
2017046867.tif 000012
【図１１】
2017046867.tif 000013
【図１２】
2017046867.tif 000014
【手続補正書】
【提出日】平成30年1月31日(2018.1.31)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する機能を有する質量分析装置であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が少なくとも１つずつ保存された記憶部と、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部と、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションの印加電圧値の最適化のために実行する、２以上の予備測定の回数を決定する予備測定回数決定部と、
d) 前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定を前記予備測定の回数と同数のグループに分割する単位測定分割部であって、各グループにおける実行時間の重複の数の最大値が最も小さくなるように、全単位測定を複数のグループに分割する単位測定分割部と、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル作成部と
を備えることを特徴とする質量分析装置。
【請求項２】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する機能を有する質量分析装置であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が少なくとも１つずつ保存された記憶部と、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部と、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定について、実行時間の重複を許容する単位測定の最大数を決定する許容数決定部と、
d) 実行時間が重複する単位測定の数が前記最大数を超えないという条件の下で、前記複数の単位測定を、最小数である複数のグループに分割する単位測定分割部と、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル作成部と、
を備えることを特徴とする質量分析装置。
【請求項３】
前記単位測定分割部が、ＭＲＭトランジション及び実行時間のいずれもが同一であり印加電圧候補値が異なる単位測定が同一のグループに属するように、前記複数の単位測定を最小数のグループに分割することを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項４】
前記単位測定分割部が、各グループにおいて、異なるＭＲＭトランジションの単位測定の実行時間の重なりの総和が最も短くなるように前記複数の単位測定を分割することを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項５】
f) 分析者の入力に基づき、付加実行時間を決定する付加実行時間決定部と、
g) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれに対して規定された実行時間帯の前後の少なくとも一方に前記付加実行時間を追加した修正実行時間を予備測定における実行時間に決定する修正実行時間決定部と
を備えることを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項６】
h) 前記作成した複数の予備測定実行ファイルをそれぞれ実行し、前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記複数の印加電圧候補値にそれぞれ対応するマスクロマトグラムデータを取得する予備測定実行部と、
i) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて取得した複数のマスクロマトグラムデータを前記分析者に提示するクロマトグラムデータ提示部と、
j) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記複数のマスクロマトグラムデータのいずれかを前記分析者に選択させるクロマトグラムデータ選択部と、
k) 前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、前記選択されたマスクロマトグラムデータに対応する印加電圧候補値を対応付けて、前記多重反応モニタリング測定を実行する本測定実行ファイルを作成する本測定実行ファイル作成部と
を備えることを特徴とする請求項１又は２に記載の質量分析装置。
【請求項７】
前記クロマトグラムデータ提示部が、前記複数のマスクロマトグラムデータのそれぞれからマスクロマトグラムを作成して表示部に表示することを特徴とする請求項６に記載の質量分析装置。
【請求項８】
前記予備測定実行部が、前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれについて、時々刻々と変化するマスクロマトグラムデータから、所定の基準に基づいてピークの開始時間及び終了時間を決定し、
前記本測定実行ファイル作成部が、前記ピークの開始時間及び終了時間に基づいて前記複数のＭＲＭトランジションのそれぞれの実行時間を決定する
ことを特徴とする請求項６に記載の質量分析装置。
【請求項９】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化するための質量分析方法であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を作成し、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定し、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションの印加電圧の最適化のために実行する、２以上の予備測定の回数を決定し、
d) 前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定を前記予備測定の回数と同数のグループに分割する単位測定分割部であって、各グループにおける実行時間の重複の数の最大値が最も小さくなるように、全単位測定を複数のグループに分割し、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する
ことを特徴とする質量分析方法。
【請求項１０】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する質量分析方法であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を作成し、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定し、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定について、実行時間の重複を許容する単位測定の最大数を決定し、
d) 実行時間が重複する単位測定の数が前記最大数を超えないという条件の下で、前記複数の単位測定を、最小数である複数のグループに分割し、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する
ことを特徴とする質量分析方法。
【請求項１１】
クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化するために用いられる質量分析用プログラムであって、
前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件を少なくとも１つずつ保存可能な記憶部を有するコンピュータを、請求項９又は１０に記載の質量分析方法を実行する装置として機能させることを特徴とする質量分析用プログラム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
上記課題を解決するために成された本発明の第１の態様は、クロマトグラフによって相互に分離された複数の目的化合物をそれぞれ多重反応モニタリング測定する条件を最適化する機能を有する質量分析装置であって、
a) 前記複数の目的化合物のそれぞれについて、プリカーサイオンとプロダクトイオンの組み合わせであるＭＲＭトランジションと、全測定時間内で該ＭＲＭトランジションを用いた測定を実行する実行時間帯を規定したＭＲＭ測定条件が少なくとも１つずつ保存された記憶部と、
b) 分析者の入力に基づき、複数の前記ＭＲＭトランジションのそれぞれに対して複数の印加電圧候補値を決定する印加電圧候補値決定部と、
c) 分析者の入力に基づき、前記複数のＭＲＭトランジションの印加電圧値の最適化のために実行する、２以上の予備測定の回数を決定する予備測定回数決定部と、
d) 前記複数のＭＲＭトランジションと前記複数の印加電圧候補値の全ての組み合わせに個々に対応する複数の単位測定を前記予備測定の回数と同数のグループに分割する単位測定分割部であって、各グループにおける実行時間の重複の数の最大値が最も小さくなるように、全単位測定を複数のグループに分割する単位測定分割部と、
e) 前記複数のグループのそれぞれに対応する予備測定実行ファイルを作成する予備測定実行ファイル作成部と
を備えることを特徴とする。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３２】
上記クロマトグラムデータ提示部は、例えば、複数のマスクロマトグラムデータのそれぞれからマスクロマトグラムを作成して表示部に表示することにより分析者に提示するものとすることができる。あるいは、クロマトグラムデータをプリントアウトして分析者に提示するものとしてもよい。
予備測定実行部、クロマトグラムデータ提示部、クロマトグラムデータ選択部、及び本測定実行ファイル作成部を備えた質量分析装置を用いると、各ＭＲＭトランジションについて、分析者が複数のマスクロマトグラムの中から最も高感度でイオンが検出されたものを選択するのみで、簡便に本測定実行ファイルを作成することができる。また、本測定実行ファイルが自動的に作成されるため、分析者がＭＲＭトランジションと印加電圧値の対応を誤って入力する心配がない。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６０】
ピークの開始時間と終了時間の決定は、例えば、マスクロマトグラムデータにおける強度値が予め設定された閾値を上回った時点をピーク開始時間とし、下回った時間をピーク終了時間とすることにより行うことができる。あるいは、強度の変化が予め設定された正の値の傾きを超えた時点をピーク開始時間とし、強度値の変化が予め設定された負の値の傾きを下回った時点をピーク終了時点とすることもできる。
【国際調査報告】
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