(57)【要約】  本発明は、筋強直性ジストロフィーの原因であるスプライシング異常を抑制し、正常スプライシング産物を増加させることにより、筋強直性ジストロフィーの症状を改善することができると共に、安全性が高く、長期投与可能な筋強直性ジストロフィーの治療薬として、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とする筋強直性ジストロフィー治療薬を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とする筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項２】
筋強直を改善する請求項１に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項３】
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常を抑制する請求項１または２に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項４】
哺乳動物に対して、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの有効量を投与することを特徴とする筋強直性ジストロフィーの治療方法。
【請求項５】
筋強直性ジストロフィーの治療に用いるための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグ。
【請求項６】
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常の抑制剤であって、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とするスプライシング異常抑制剤。
【請求項７】
ＡＴＰ２Ａ１、ＣＬＣＮ１、ＩＮＳＲ、ＤＭＤ、ＭＢＮＬ１およびＢＩＮ１からなる群より選ばれる少なくとも１つの遺伝子のスプライシング異常を抑制する請求項６に記載のスプライシング異常抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は筋強直性ジストロフィー治療薬に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
筋強直性ジストロフィー（Ｍｙｏｔｏｎｉｃ Ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ、以下、「ＭｙＤ」と略記する場合がある。）は、成人で最も多い筋疾患である。ＭｙＤは、骨格筋、平滑筋とともに眼球、心臓、内分泌系、中枢神経系に影響する常染色体優性多臓器障害であり、その症状は、筋萎縮、筋力低下、筋強直（ミオトニア）、白内障、インスリン抵抗性、性腺機能低下、心伝導系障害、前部禿頭、知能障害等多岐にわたる（非特許文献１）。ＭｙＤにはミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子の３’ＵＴＲ（３’側非翻訳領域）のＣＴＧ繰り返し配列の異常伸長によるＩ型（ＭｙＤ１）（非特許文献２−４）と、Ｚｎフィンガー蛋白質９（ＺＮＦ９）遺伝子イントロン１のＣＣＴＧ繰り返し配列の異常伸長によるＩＩ型（ＭｙＤ２）（非特許文献５）がある。いずれも異常伸長した繰り返し配列を持つ転写産物（ｍＲＮＡ）に特定のスプライシング制御因子が結合し、結果として正常なスプライシングに必要なスプライシング制御因子が不足することによりスプライシング異常を惹起する。【０００３】
特許文献１には、ゲンチアナバイオレット等の１８種類の化合物が、筋強直性ジストロフィーにおいてスプライシング異常が認められる遺伝子のうち、少なくとも一つのスプライシング異常を抑制できたことが開示されている。しかしながら、これらの化合物が実際に筋強直性ジストロフィーの症状を改善したことは開示されていない。筋強直性ジストロフィーに対する有効かつ安全性の高い治療法は未だ存在せず、患者には各種徴候に応じた食事療法等の対症療法が施されているのが現状である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２０１１／００７８６６号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Harper, PS and Monckton, DG: Myotonic dystrophy. In Engel AG, Franzini-Armstrong C (eds) Myology, 3rd edn. McGraw-Hill, New York, 2: 1039-1076, 2004
【非特許文献２】Aslanidis C, et al: Cloning of the essential myotonic dystrophy region and mapping of the putative defect, Nature, 355: 548-551, 1992
【非特許文献３】Brook JD, et al: Molecular basis of myotonic dystrophy: expansion of a trinucleotide (CTG) repeat at the 3’ end of a transcript encoding a protein kinase family member, Cell, 68: 799-808, 1992
【非特許文献４】Buxton J, et al: Detection of an unstable fragment of DNA specific to individuals with myotonic dystrophy, Nature, 355, 547-548, 1992
【非特許文献５】Liquori CL, et al: Myotonic dystrophy type 2 caused by a CCTG expansion in intron 1 of ZNF9, Science, 293, 864-867, 2001
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、ＭｙＤの原因であるスプライシング異常を抑制し、正常スプライシング産物を増加させることにより、ＭｙＤの症状を改善することができると共に、安全性が高く、長期投与可能なＭｙＤの治療薬を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、上記の課題を解決するために以下の各発明を包含する。
［１］エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とする筋強直性ジストロフィー治療薬。
［２］筋強直を改善する前記［１］に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
［３］ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常を抑制する前記［１］または［２］に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
［４］哺乳動物に対して、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの有効量を投与することを特徴とする筋強直性ジストロフィーの治療方法。
［５］筋強直性ジストロフィーの治療に用いるための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグ。
［６］ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常の抑制剤であって、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とするスプライシング異常抑制剤。
［７］ＡＴＰ２Ａ１、ＣＬＣＮ１、ＩＮＳＲ、ＤＭＤ、ＭＢＮＬ１およびＢＩＮ１からなる群より選ばれる少なくとも１つの遺伝子のスプライシング異常を抑制する前記［６］に記載のスプライシング異常抑制剤。
【発明の効果】
【０００８】
本発明により、ＭｙＤの症状を改善でき、かつ長期投与可能な安全性の高いＭｙＤ治療薬を提供することができる。また、本発明により、ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常を顕著に抑制するスプライシング異常抑制剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】ＭｙＤモデル細胞におけるＲＮＡ凝集体形成に対するエリスロマイシンの効果を検討した結果を示す図である。
【図２】ＭｙＤモデル細胞におけるＡｔｐ２ａ１遺伝子のスプライシング異常に対するエリスロマイシンの効果を検討した結果を示す図であり、（Ａ）はＲＴ−ＰＣＲ産物の電気泳動の結果、（Ｂ）はＲＴ−ＰＣＲ産物における正常型の割合を示す図である。
【図３】ＭｙＤモデルマウスにエリスロマイシンを８日間腹腔内投与し、投与後の大腿四頭筋における骨格筋クロライドチャネル（Ｃｌｃｎ１）遺伝子のスプライシング異常に対する効果を検討した結果を示す図である。
【図４】ＭｙＤモデルマウスにエリスロマイシンを８日間腹腔内投与し、投与後の大腿四頭筋における筋強直（ミオトニア）を解析した結果を示す図である。
【図５】ＭｙＤモデルマウスに高用量エリスロマイシンを５日間経口投与し、投与後の大腿四頭筋における骨格筋クロライドチャネル（Ｃｌｃｎ１）遺伝子のスプライシング異常に対する効果を検討した結果を示す図である。
【図６】ＭｙＤモデルマウスに通常用量エリスロマイシンを２１日間経口投与し、投与後の大腿四頭筋における骨格筋クロライドチャネル（Ｃｌｃｎ１）遺伝子のスプライシング異常に対する効果を検討した結果を示す図である。
【図７】ＭｙＤモデルマウスに通常用量エリスロマイシンを２１日間経口投与し、投与後の大腿四頭筋における筋強直（ミオトニア）を解析した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とする筋強直性ジストロフィー治療薬を提供する。
【００１１】
エリスロマイシンは、主としてグラム陽性菌に強い抗菌力を示す１４員環のマクロライド系抗生物質で、１９５２年ＭｃＧｕｉｒｅらによりＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｅｒｙｔｈｒｅｕｓの培養液から分離抽出された。エリスロマイシンは以下の化学構造を有し、化学名は (2R, 3S, 4S, 5R, 6R, 8R, 10R, 11R, 12S, 13R)-5-(3, 4, 6-Trideoxy-3-dimethylamino-β-D-xylo-hexopyranosyloxy)-3-(2, 6-dideoxy-3-Cmethyl-3-O-methyl-α-L-ribo-hexopyranosyloxy)-6, 11, 12-trihydroxy-2, 4, 6, 8, 10, 12-hexamethyl-9-oxopentadecan-13-olide である。
【００１２】
【化１】
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【００１３】
エリスロマイシンは医療用医薬品として承認され、販売されており、本発明においてこれらのエリスロマイシンを購入して使用することができる。市販のエリスロマイシン製剤では、エリスロマイシンステアリン酸塩、エリスロマイシンラクトビオン酸塩等の塩、エリスロマイシンエチルコハク酸エステル等のプロドラッグが有効成分として使用されており、これらを本発明のエリスロマイシンとして、好適に用いることができる。
【００１４】
クラリスロマイシンは、エリスロマイシンのラクトン環の６位水酸基をＯ−メチル化した半合成マクロライド系抗生物質（６−Ｏ−メチルエリスロマイシンＡ）で、その化学構造上、エリスロマイシンに比べて酸に対して安定な物質といわれている。クラリスロマイシンは以下の化学構造を有し、化学名は (2R, 3S, 4S, 5R, 6R, 8R, 10R, 11R, 12S, 13R)-5-(3, 4, 6 -Trideoxy-3-dimethylamino-β-D-xylo-hexopyranosyloxy)-3-(2, 6-dideoxy-3-C-methyl-3-O-methyl-α-L-ribo-hexopyranosyloxy)-11, 12-dihydroxy-6-methoxy-2, 4, 6, 8, 10, 12-hexamethyl-9-oxopentadecan-13-olide である。クラリスロマイシンは医療用医薬品として承認され、販売されており、本発明においてこれらのクラリスロマイシンを購入して使用することができる。
【００１５】
【化２】
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【００１６】
アジスロマイシンは、エリスロマイシンから誘導された１４員環のマクロライド系抗生物質である。アジスロマイシンは以下の化学構造を有し、化学名は (2R, 3S, 4S, 5R, 6R, 8R, 11R, 12R, 13S, 14R)-5-(3, 4, 6-Trideoxy-3-dimethylamino-β-D-xylo-hexopyranosyloxy)-3-(2,6-dideoxy-3-C-methyl-3-O-methyl-α-L-ribo-hexopyranosyloxy)-10-aza-6, 12, 13-trihydroxy-2, 4, 6, 8, 10, 11, 13-heptamethylhexadecan-14-olide dihydrate である。アジスロマイシンは医療用医薬品として承認され、販売されており、本発明においてこれらのアジスロマイシンを購入して使用することができる。アジスロマイシンは水和物として使用されることが好ましい。
【００１７】
【化３】
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【００１８】
エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンは経口投与可能な抗生物質であり、既に長年にわたり臨床で使用されている薬剤であるので、長期間投与の安全性も確立されている。したがって、ＭｙＤ患者に対して、安価で、忍容性および安全性の高い治療薬を提供することができる。
【００１９】
本発明において、薬学的に許容される塩は、活性成分の効能を維持し、かつ人体に対して悪影響を与えない限り特に限定されないが、例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ギ酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、ステアリン酸、コハク酸、エチルコハク酸、マロン酸、ラクトビオン酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラトルエンスルホン酸（トシル酸）、ラウリル硫酸、リンゴ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、アジピン酸、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、ヨウ化水素酸、ニコチン酸、シュウ酸、ピクリン酸、チオシアン酸、ウンデカン酸、アクリル酸ポリマー、カルボキシビニルポリマー等の酸との塩、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩等の無機塩基との塩、モルホリン、ピペリジン等の有機アミンとの塩、アミノ酸との塩などを挙げることができる。
【００２０】
本発明において、プロドラッグは、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応によりエリスロマイシン、クラリスロマイシンまたはアジスロマイシンに変換される化合物を意味する。例えば、生体内で加水分解を受けてこれらの化合物を遊離するエステル等が挙げられる。
【００２１】
本発明の治療薬は、ＭｙＤの症状を有効に改善することができる。ＭｙＤにはミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子の３’ＵＴＲのＣＴＧ繰り返し配列の異常伸長が認められるＩ型（ＭｙＤ１）と、Ｚｎフィンガー蛋白質９（ＺＮＦ９）遺伝子イントロン１のＣＣＴＧ繰り返し配列の異常伸長が認められるＩＩ型（ＭｙＤ２）が知られているが、本発明の治療薬の治療対象は、ＭｙＤと診断される全ての疾患を含み、これらに限定されない。好ましくは、Ｉ型（ＭｙＤ１）である。
【００２２】
本発明の治療薬により改善される症状は、特に限定されず、例えば筋強直（ミオトニア）、筋萎縮、筋力低下、心病変（心伝導障害、心筋障害）、中枢神経症状（認知症状、性格変化、傾眠）、眼症状（白内障、網膜変性症）、内分泌異常（耐糖能障害、高脂血症）などが挙げられる。好ましくは、筋強直（ミオトニア）、筋萎縮および筋力低下であり、より好ましくは筋強直（ミオトニア）である。
【００２３】
本発明の治療薬は、ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常を抑制することができる。スプライシング異常とは、ｍＲＮＡ前躯体からイントロンを切り除きエクソンを連結させる過程であるスプライシングが正常に行われず、異常スプライシング産物が生成されることをいう。スプライシング異常を抑制するとは、異常スプライシング産物の生成を部分的または完全に抑制し、正常スプライシング産物（正常ｍＲＮＡ）の生成を増加させることをいう。
【００２４】
ＤＭＰＫ遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常が生じる遺伝子としては、以下の表１に示した遺伝子が挙げられる（Nakamori M, et al: ANN NEUROL 2013; 74: 862-872）。
【表１】
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【００２５】
本発明の治療薬は、上記の有効成分に薬学的に許容される担体、さらに添加剤を適宜配合して製剤化することができる。具体的には錠剤、被覆錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の経口剤；注射剤、輸液、坐剤、軟膏、パッチ剤等の非経口剤とすることができる。担体または添加剤の配合割合については、医薬品分野において通常採用されている範囲に基づいて適宜設定すればよい。配合できる担体または添加剤は特に制限されないが、例えば、水、生理食塩水、その他の水性溶媒、水性または油性基剤等の各種担体；賦形剤、結合剤、ｐＨ調整剤、崩壊剤、吸収促進剤、滑沢剤、着色剤、矯味剤、香料等の各種添加剤が挙げられる。
【００２６】
賦形剤としては、例えば乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、デンプン、結晶セルロース、軽質無水ケイ酸が挙げられ、結合剤としては、例えば、結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等の高分子化合物等が挙げられ、滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカ等が挙げられ、崩壊剤としては、例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム等が挙げられ、湿潤剤としては、例えば、グリセリン、ブチレングリコール、プロピレングリコール、ソルビトール、トリアセチン等が挙げられるが、これらに限られない。必要に応じて、コーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。
【００２７】
注射剤の場合、有効成分を生理食塩水等の水性基剤または注射用に許容される油性基剤に溶解または分散させて、静脈内投与用、筋肉内投与用または皮下投与用の注射剤とすればよい。必要に応じて、緩衝剤、ｐＨ調整剤、等張化剤、溶解補助剤、懸濁化剤、安定化剤等の添加剤を適宜加えることができる。
【００２８】
注射剤の場合、水性基剤としては、例えば、生理食塩水、注射用水、リンゲル液等の輸液が挙げられる。油性基剤としては、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ゴマ油、ダイズ油、トウモロコシ油、ラッカセイ油、綿実油、オリーブ油、プロピレングリコール脂肪酸エステル等が挙げられる。緩衝剤としては、例えば、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、ホウ酸塩、グルタミン酸塩、イプシロンアミノカプロン酸塩、トリス緩衝液等の緩衝液等が挙げられる。ｐＨ調整剤としては、例えば、塩酸、リン酸、硫酸、炭酸等の無機酸、酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸等の有機酸、水酸化ナトリウム等の無機塩基、クエン酸ナトリウム、酒石酸ナトリウム等の有機塩基が挙げられる。等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム等の無機塩類、Ｄ−マンニトール、ソルビトール、キシリトール等の糖アルコール、フルクトース、グルコース、ガラストース、リボース、キシロース、マンノース、マルトトリオース、マルトテトラオース等の糖類、グリシン、アルギニン等のアミノ酸が挙げられる。溶解補助剤としては、例えば、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、レシチンや、ポリソルベート８０等の非イオン界面活性剤が挙げられる。懸濁化剤としては、例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、モノステアリン酸グリセリン等の界面活性剤や、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース等が挙げられる。安定化剤としては、例えば、アルブミン、グロブリン、ゼラチン、ソルビトール、エチレングルコール、プロピレングリコール、アスコルビン酸等が挙げられる。
【００２９】
本発明の治療薬の有効成分は、既に長年にわたり臨床で使用されているので、本発明の治療薬は、ヒトや他の哺乳動物（例えば、ラット、マウス、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ネコ、イヌ、サルなど）に対して、安全に投与することができる。
本発明の医薬組成物の１日当たりの投与量は、ＭｙＤの治療に有効な量であって副作用の少ない量であれば特に限定されない。本発明の医薬組成物の１日当たりの投与量は、市販のエリスロマイシン、クラリスロマイシンまたはアジスロマイシンの１日当たりの投与量に準じて設定することが好ましい。
【００３０】
本発明は、ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常の抑制剤を提供する。本発明のスプライシング異常抑制剤は、上記本発明の治療薬と同じく、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とすることができる。
【００３１】
本発明のスプライシング異常抑制剤により、スプライシング異常が抑制される遺伝子としては、前記表１に示した遺伝子が挙げられる。なかでも、ＡＴＰ２Ａ１、ＣＬＣＮ１、ＩＮＳＲ、ＤＭＤ、ＭＢＮＬ１およびＢＩＮ１等のスプライシング異常を抑制することが好ましく、ＡＴＰ２Ａ１およびＣＬＣＮ１のスプライシング異常を抑制することが好ましい。
【００３２】
本発明には、以下の各発明が含まれる。
哺乳動物に対して、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの有効量を投与することを特徴とする筋強直性ジストロフィーの治療方法。
筋強直性ジストロフィーの治療に用いるための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグ。
筋強直性ジストロフィー治療薬を製造するための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの使用。
哺乳動物に対して、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの有効量を投与することを特徴とするミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常の抑制方法。
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常の抑制に用いるための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグ。
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常抑制剤を製造するための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの使用。
【実施例】
【００３３】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００３４】
〔実施例１：ＭｙＤモデル細胞におけるＲＮＡ凝集体形成に対するエリスロマイシンの効果〕
ＭｙＤモデル細胞にエリスロマイシンを作用させ、ＦＩＳＨ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）法にてＲＮＡ凝集体の数を測定した。【００３５】
＜実験材料および方法＞
（１）ＭｙＤモデル細胞
ＭｙＤ細胞モデルとして、Ｃ２Ｃ１２細胞に８００ＣＴＧリピートを含むＤＭＰＫ遺伝子領域を導入した細胞（Ｃ２Ｃ１２−ＤＭＰＫ８００Ｒ、Nucleic Acids Research, 2014, 42(10), 6591-6602）を使用した。Ｃ２Ｃ１２−ＤＭＰＫ８００は以下の手順で作製した。すなわち、ＤＭＰＫ遺伝子３’非翻訳領域に８００ＣＴＧを挿入した配列を含むプラスミド（ｐＬＣ１６）とＰｈｉＣ３１インテグラーゼを発現するするプラスミドとを、共にマウス筋芽細胞株Ｃ２Ｃ１２にＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ（商品名、Ｌｏｎｚａ社）を用いてトランスフェクションした後、ピューロマイシンを添加した選択培地を用いて安定発現株を選択した。続いて、安定発現株にＣｒｅリコンビナーゼを発現するプラスミドをトランスフェクションし、ハイグロマイシンを添加した選択培地を用いて、８００ＣＵＧの転写が誘導されるクローンを選択した。【００３６】
（２）エリスロマイシン
エリスロマイシンとして「エリスロシン（登録商標）静注用５００ｍｇ（注射用エリスロマイシンラクトビオン酸塩）」（アボット）を使用した。超純水１０ｍｌで溶解し、生理食塩水で１５ｍｇ／ｍｌとなるように希釈して使用した。【００３７】
（３）ＲＮＡ凝集体形成数の計測
ＭｙＤモデル細胞は、１０％ＦＢＳ、ペニシリン／ストレプトマイシン含有ＤＭＥＭ培地を用いて、３７℃、５％ＣＯ２条件下で培養した。培地にエリスロマイシンを０、２５または５０μＭになるように添加し、７２時間後に３％パラホルムアルデヒドで１５分間室温にて固定した。固定後、ＰＢＳで２回洗浄した後に、０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００含有ＰＢＳで５分間透過処理した。次に３０％ホルムアミド含有の２×ＳＳＣバッファーで１０分間プレハイブリダイゼーション処理した。その後、３０％ホルムアミド、２μｇ／ｍＬ ＢＳＡ、６６μｇ／ｍＬ ｙｅａｓｔ ｔＲＮＡ、２ｍＭバナジル複合体（ｖａｎａｄｙｌ ｃｏｍｐｌｅｘ）、１ｎｇ／μＬ Ｔｅｘａｓ Ｒｅｄ ＣＡＧ ｐｒｏｂｅ含有の２×ＳＳＣバッファーで３７℃、１時間ハイブリダイゼーション処理した。３０％ホルムアミド含有の２×ＳＳＣバッファーで４２℃、３０分間ポストハイブリダイゼーション処理した後に、１×ＳＳＣバッファーで１回洗浄し、その後にＰＢＳで２回洗浄した。Ｖｅｃｔａｓｈｉｅｌｄ ｗｉｔｈ ＤＡＰＩ（商品名、Vector Laboratories社）を用いて固定した後、蛍光顕微鏡（Ｋｅｙｅｎｃｅ ＰＺ−９０００）で核内のＲＮＡ凝集体の数を計測した。【００３８】
＜結果＞
結果を図１に示した。図１から明らかなように、エリスロマイシンを添加していない培地で培養したＭｙＤモデル細胞では、ＲＮＡ凝集体陽性細胞率が６０％を超えていたが、エリスロマイシンを培地に添加することにより、ＲＮＡ凝集体陽性細胞率は、用量依存的に有意に低下した。【００３９】
〔実施例２：ＭｙＤモデル細胞におけるスプライシング異常に対するエリスロマイシンの効果〕
ＭｙＤモデル細胞にエリスロマイシンを作用させ、Ａｔｐ２ａ１遺伝子のｅｘｏｎ ２２におけるスプライシング異常が改善するか否かを検証した。【００４０】
＜実験材料および方法＞
（１）ＭｙＤモデル細胞
実施例１と同じＭｙＤモデル細胞（Ｃ２Ｃ１２−ＤＭＰＫ８００Ｒ）を使用した。
（２）エリスロマイシン
実施例１と同じエリスロマイシンを使用した。
（３）スプライシング産物の定量
ＭｙＤモデル細胞の培地に、エリスロマイシンを０、２５、５０μＭとなるように添加し、７２時間後にＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｐｌｕｓ Ｋｉｔ（商品名、Ｑｉａｇｅｎ）を用いてｔｏｔａｌ ＲＮＡを抽出した。コントロールとして、エリスロマイシンを含有しない培地で培養した正常Ｃ２Ｃ１２細胞を用い、同様にｔｏｔａｌ ＲＮＡを抽出した。続いて、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ III Ｆｉｒｓｔ Ｓｔｒａｎｄ Ｓｙｍｔｈｅｓｉｓ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてｃＤＮＡを調製した。ｃＤＮＡをＲＮａｓｅＨ処理した後、以下のＡｔｐ２ａ１ ｅｘｏｎ ２２ ＲＴプライマーを用いてＲＴ−ＰＣＲを行った。ＲＴ−ＰＣＲ産物を２％アガロースゲルで電気泳動し、ＧｅｌＲｅｄを用いて染色した後、イメージアナライザー（Ｔｙｐｈｏｏｎ ９４１０、ＧＥ）で正常型のＰＣＲ産物と異常型のＰＣＲ産物をそれぞれ定量した。
Ａｔｐ２ａ１ ｅｘｏｎ ２２ ＲＴプライマー
Fw: GCTCATGGTCCTCAAGATCTCAC（配列番号１）
Rv: GGGTCAGTGCCTCAGCTTTG（配列番号２）【００４１】
＜結果＞
結果を図２（Ａ）、（Ｂ）に示した。（Ａ）はＲＴ−ＰＣＲ産物の電気泳動の結果であり、（Ｂ）はＲＴ−ＰＣＲ産物における正常型の割合を示すグラフである。図２（Ａ）から、正常Ｃ２Ｃ１２細胞では正常型が多数を占め、エリスロマイシンを含有しない培地で培養したＭｙＤモデル細胞では異常型の比率が正常型より多かった。エリスロマイシンを培地に添加することにより、ＭｙＤモデル細胞における正常型の比率が有意に増加し、正常Ｃ２Ｃ１２細胞と同程度まで、スプライシング異常が改善することが示された。【００４２】
〔実施例３：ＭｙＤモデルマウスにおけるエリスロマイシン腹腔内投与の効果〕
ＭｙＤモデルマウスにエリスロマイシンを腹腔内投与し、大腿四頭筋における筋強直症状に対する効果、および骨格筋クロライドチャネル（Ｃｌｃｎ１）遺伝子のスプライシング異常に対する効果を検証した。【００４３】
＜実験材料および方法＞
（１）使用動物
ＭｙＤモデルマウスとしてＨＳＡＬＲマウス（Ｄｒ． Ｃｈａｒｌｅｓ Ｔｈｏｒｎｔｏｎ（University of Rochester）より譲渡され、大阪大学の実験動物施設で繁殖させたもの）を使用した。ＨＳＡＬＲマウスはｈＡＣＴＡ遺伝子（筋細胞で恒常的に発現するヒト遺伝子）３’側ＣＴＧ反復配列を２２０回に増幅したものをゲノム中に組み込んだトランスジェニック動物で、筋細胞でＣＵＧ配列が増幅したｍＲＮＡが発現することによって、ＭｙＤの症状が現れる（Science, 2000, 289(5485), 1769-73）。コントロールとして、野生型マウス（ＦＶＢ／ＮＪｃｌマウス、日本クレアより購入）を使用した。実験には、８週齢の雌雄マウスを用いた。【００４４】
（２）エリスロマイシン
エリスロマイシンとして「エリスロシン（登録商標）静注用５００ｍｇ（注射用エリスロマイシンラクトビオン酸塩）」（アボット）を使用した。生理食塩水で５０ｍｇ／ｍｌになるように溶解して使用した。
（３）群分け、投与スケジュール
エリスロマイシン投与ＭｙＤ群、生理食塩水投与ＭｙＤ群、コントロール（野生型マウス）群の３群を設けた（各群ｎ＝３（♂１、♀２））。エリスロマイシンの投与量は１５０ｍｇ／ｋｇとし、一日一回８日間連続投与した。生理食塩水投与ＭｙＤ群には、生理食塩水を、一日一回８日間連続投与した。コントロール（野生型マウス）群には、何も投与しなかった。【００４５】
（４）筋強直（ミオトニア）の測定
最終投与の２４時間後に、麻酔下にてマウス大腿四頭筋の電気的筋強直現象を針筋電図で解析した。具体的には、マウス大腿四頭筋へ１０回以上針電極を刺入した時の電気的筋強直現象の発生頻度を次の４段階に分けて評価した。
重症度０：電気的筋強直現象が全くみられない。
重症度１：全体の５０％未満に電気的筋強直現象がみられる。
重症度２：全体の５０％以上、９０％未満に電気的筋強直現象がみられる。
重症度３：電気的筋強直現象が９０％以上みられる。
（５）スプライシング産物の定量
最終投与の２４時間後に、マウスから大腿四頭筋を採取した。ＴＲＩ Ｒｅａｇｅｎｔ（商品名、ＭＲＣ）を用いてｔｏｔａｌ ＲＮＡを抽出した後、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ III Ｆｉｒｓｔ Ｓｔｒａｎｄ Ｓｙｍｔｈｅｓｉｓ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてｃＤＮＡを調製した。ｃＤＮＡをＲＮａｓｅＨ処理した後、以下のＣｌｃｎ１ ｅｘｏｎ ７ａ ＲＴプライマーを用いてＲＴ−ＰＣＲを行った。ＲＴ−ＰＣＲ産物を２％アガロースゲルで電気泳動し、ＧｅｌＲｅｄを用いて染色した後、イメージアナライザー（Ｔｙｐｈｏｏｎ ９４１０、ＧＥ）で正常型のＰＣＲ産物と異常型のＰＣＲ産物をそれぞれ定量し、ＲＴ−ＰＣＲ産物における正常型の割合を算出した。統計解析にはｔ−ｔｅｓｔを用いた。
Ｃｌｃｎ１ ｅｘｏｎ ７ａ ＲＴプライマー
Fw: TGAAGGAATACCTCACACTCAAGG（配列番号３）
Rv: CACGGAACACAAAGGCACTG（配列番号４）【００４６】
＜結果＞
スプライシング異常の評価結果を図３に示した。コントロール群（図中ＷＴ）では、９０％超のＲＴ−ＰＣＲ産物が正常型であったが、生理食塩水投与ＭｙＤ群（図中−）では、正常型の割合が約６０％に減少し、異常型ＲＴ−ＰＣＲ産物の割合が増加していることが示された。エリスロマイシン投与ＭｙＤ群では、正常型ＲＴ−ＰＣＲ産物の割合が有意に増加したことから、エリスロマイシン投与によりＣｌｃｎ１遺伝子のスプライシング異常が改善されることが明らかになった。【００４７】
筋強直の解析結果を図４に示した。コントロール群（図中ＷＴ）は３匹とも筋強直が検出されなかった。生理食塩水投与ＭｙＤ群（図中−）は３匹とも重症度３の筋強直が検出された。エリスロマイシン投与ＭｙＤ群は、１匹が重症度１、残りの２匹は筋強直が検出されなかった。これらの結果から、エリスロマイシン投与により、ＣＴＧ反復配列の異常伸長に基づくスプライシング異常が改善され、その結果ＭｙＤにおける筋強直症状が改善されることが示された。【００４８】
〔実施例４：ＭｙＤモデルマウスにおける高用量エリスロマイシン経口投与の効果〕
ＭｙＤモデルマウスに高用量のエリスロマイシンを経口投与し、大腿四頭筋における骨格筋クロライドチャネル（Ｃｌｃｎ１）遺伝子のスプライシング異常に対する効果を検証した。【００４９】
＜実験材料および方法＞
（１）使用動物
実施例３と同じＭｙＤモデルマウス（ＨＳＡＬＲマウス）および野生型マウスを使用した。
（２）エリスロマイシン
エリスロマイシンとして「エリスロシン（登録商標）ドライシロップＷ２０％（エリスロマイシンエチルコハク酸エステルドライシロップ）」（アボット）を使用した。純水で１００ｍｇ／ｍｌになるように溶解して使用した。
（３）群分け、投与スケジュール
エリスロマイシン３００ｍｇ／ｋｇ投与ＭｙＤ群、エリスロマイシン６００ｍｇ／ｋｇ投与ＭｙＤ群、エリスロマイシン９００ｍｇ／ｋｇ投与ＭｙＤ群、生理食塩水投与ＭｙＤ群、コントロール（野生型マウス）群の５群を設けた（各群ｎ＝３）。投与は強制経口投与とし、一日一回５日間連続で行った。
（４）スプライシング産物の定量
最終投与日にマウスから大腿四頭筋を採取し、実施例３と同じ方法でＲＴ−ＰＣＲを行い、正常型および異常型のスプライシング産物を定量し、ＲＴ−ＰＣＲ産物における正常型の割合を算出した。統計解析にはｔ−ｔｅｓｔを用いた。【００５０】
＜結果＞
結果を図５に示した。図５から明らかなように、高用量エリスロマイシンの経口投与により、Ｃｌｃｎ１遺伝子のスプライシング異常が、用量依存的に有意に改善されることが明らかになった。【００５１】
〔実施例５：ＭｙＤモデルマウスにおける通常用量エリスロマイシン経口投与の効果〕
ＭｙＤモデルマウスに通常用量のエリスロマイシンを経口投与し、大腿四頭筋における筋強直症状に対する効果、および骨格筋クロライドチャネル（Ｃｌｃｎ１）遺伝子のスプライシング異常に対する効果を検証した。【００５２】
＜実験材料および方法＞
（１）使用動物
実施例３と同じＭｙＤモデルマウス（ＨＳＡＬＲマウス）および野生型マウスを使用した。
（２）エリスロマイシン
実施例４と同じく、エリスロマイシンとして「エリスロシン（登録商標）ドライシロップＷ２０％（エリスロマイシンエチルコハク酸エステルドライシロップ）」（アボット）を、純水で１００ｍｇ／ｍｌになるように溶解して使用した。
（３）群分け、投与スケジュール
エリスロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ投与ＭｙＤ群、生理食塩水投与ＭｙＤ群、コントロール（野生型マウス）群の３群を設けた（各群ｎ＝３）。投与は強制経口投与とし、一日一回２１日間連続で行った。
（４）筋強直（ミオトニア）の測定
最終投与日に、麻酔下にてマウス大腿四頭筋の電気的筋強直現象を針筋電図で解析した。
（５）スプライシング産物の定量
最終投与日にマウスから大腿四頭筋を採取し、実施例３と同じ方法でＲＴ−ＰＣＲを行い、正常型および異常型のスプライシング産物を定量した。統計解析にはｔ−ｔｅｓｔを用いた。【００５３】
＜結果＞
スプライシング異常の評価結果を図６に示した。図６から明らかなように、エリスロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ投与ＭｙＤ群は生理食塩水投与ＭｙＤ群と比較して、正常型ＲＴ−ＰＣＲ産物の割合が有意に増加した。すなわち、通常用量（５０ｍｇ／ｋｇ）のエリスロマイシンを２１日間経口投与することにより、Ｃｌｃｎ１遺伝子のスプライシング異常が改善されることが明らかになった。【００５４】
筋強直の解析結果を図７に示した。生理食塩水投与ＭｙＤ群では３匹とも重症度３の筋強直が検出されたが、エリスロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ投与ＭｙＤ群では２匹が重症度２に、１匹が重症度１に改善していた。これらの結果から、通常用量（５０ｍｇ／ｋｇ）のエリスロマイシンの２１日間経口投与により、ＣＴＧ反復配列の異常伸長に基づくスプライシング異常が改善され、その結果ＭｙＤにおける筋強直症状が改善されることが示された。【００５５】
なお本発明は上述した各実施形態および実施例に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考として援用される。
【図１】
2017010382.tif 000007
【図２】
2017010382.tif 000008
【図３】
2017010382.tif 000009
【図４】
2017010382.tif 000010
【図５】
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【図６】
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【図７】
2017010382.tif 000013
【配列表】
2017010382000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成29年1月4日(2017.1.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とし、筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状を改善する筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項２】
筋強直を改善する請求項１に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項３】
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常を抑制する請求項１または２に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項４】
哺乳動物に対して、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの有効量を投与し、筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状を改善することを特徴とする筋強直性ジストロフィーの治療方法。
【請求項５】
筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状の治療に用いるための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグ。
【請求項６】
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常の抑制剤であって、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とするスプライシング異常抑制剤
【請求項７】
ＡＴＰ２Ａ１、ＣＬＣＮ１、ＩＮＳＲ、ＤＭＤ、ＭＢＮＬ１およびＢＩＮ１からなる群より選ばれる少なくとも１つの遺伝子のスプライシング異常を抑制する請求項６に記載のスプライシング異常抑制剤。
【請求項８】
エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とし、筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状を改善する筋強直性ジストロフィー症状改善剤。
【手続補正書】
【提出日】平成29年3月23日(2017.3.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とし、筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状を改善するための筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項２】
筋強直を改善するための請求項１に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項３】
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常を抑制するための請求項１または２に記載の筋強直性ジストロフィー治療薬。
【請求項４】
哺乳動物に対して、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグの有効量を投与し、筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状を改善するための筋強直性ジストロフィーの治療方法。
【請求項５】
筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状の治療に用いるための、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグ。
【請求項６】
ミオトニンプロテインキナーゼ（ＤＭＰＫ）遺伝子異常伸長に起因するスプライシング異常の抑制剤であって、エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その医薬上許容される塩、溶媒和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とするスプライシング異常抑制剤。
【請求項７】
ＡＴＰ２Ａ１、ＣＬＣＮ１、ＩＮＳＲ、ＤＭＤ、ＭＢＮＬ１およびＢＩＮ１からなる群より選ばれる少なくとも１つの遺伝子のスプライシング異常を抑制する請求項６に記載のスプライシング異常抑制剤。
【請求項８】
エリスロマイシン、クラリスロマイシンおよびアジスロマイシンからなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、その薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらのプロドラッグを有効成分とし、筋強直、筋萎縮、筋力低下、心伝導障害、心筋障害、認知症状、性格変化、傾眠、白内障、網膜変性症、耐糖能障害、高脂血症からなる群より選ばれる少なくとも１つの筋強直性ジストロフィー症状を改善するための筋強直性ジストロフィー症状改善剤。
【国際調査報告】
2017010382.tif 000014
2017010382.tif 000015
2017010382.tif 000016
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