(57)【要約】真菌に対しても抗菌作用を発揮しうるバクテリオシンを有効成分とした抗菌剤を提供することを課題とする。（A）バクテリオシンと、（B）植物抽出物を含み、成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：2〜800である、ヘルスケア組成物を提供する。バクテリオシンは、好ましくはナイシンまたはラクティシンであり、植物は、好ましくはバラ科植物、ミカン科植物、シソ科植物、またはイネ科植物である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（A）バクテリオシンと、
（B）植物抽出物
を含み、
成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：2〜800である、ヘルスケア組成物。
【請求項２】
成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：10〜400である、請求項1に記載の組成物。
【請求項３】
ヘルスケア組成物が、ヒトまたは非ヒト動物用の、口腔用（オーラルケア）組成物、フェイスケア組成物、ボディケア組成物、アイケア組成物、ヘアケア組成物、浴用組成物、フレグランス組成物、およびハンドケア組成物からなる群より選択されるいずれかである、請求項1または2に記載の組成物。
【請求項４】
植物が、バラ科植物、イネ科植物、ミカン科植物、またはシソ科植物である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
【請求項５】
植物が、バラ、パルマローザ、ネロリ、グレープフルーツ、ペパーミント、またはスペアミントである、請求項4に記載の組成物。
【請求項６】
植物が、バラ、またはパルマローザである、請求項5に記載の組成物。
【請求項７】
成分（B）が、精油である、請求項1〜6のいずれか1項に記載の組成物。
【請求項８】
成分（A）が、ナイシンおよび/またはラクティシンである、請求項1〜7のいずれか1項に記載の組成物。
【請求項９】
成分（A）が、ラクティシンである、請求項1〜8のいずれか1項に記載の組成物。
【請求項１０】
（A）バクテリオシンと、
（B）植物抽出物
を、
成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：2〜800で用いる、ヘルスケア方法（医療行為を除く）。
【請求項１１】
（A）バクテリオシンと、
（B）植物抽出物
を有効成分として含む、抗真菌剤。
【請求項１２】
バクテリオシン0.05〜20mg/100g、および植物抽出物0.25mg〜4000mg/100gを含み、pHが3〜10である、ヘルスケア組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バクテリオシンおよび植物抽出物を有効成分として含む、ヘルスケア組成物に関する。本発明のヘルスケア組成物は抗菌作用を有する。
【背景技術】
【０００２】
バクテリオシンは細菌が生産する抗菌性ペプチドまたはタンパク質の総称であり、様々な細菌種が生産することが知られている。バクテリオシンの1種であるナイシンは、特定の乳酸菌によって生産される、34個アミノ酸残基からなる耐熱性のペプチドである。乳酸菌由来のバクテリオシン（乳酸菌バクテリオシン）は、一般に類縁のグラム陽性菌に対して抗菌性を示す。最初に発見されたナイシンは、現在ではナイシンAと称されており、それとは27番目のアミノ酸残基が異なるナイシンZ及びナイシンQが単離されている。ナイシンAは、欧米などの50カ国以上で食品添加物として既に使用されている。【０００３】
最近では、ナイシンと梅エキスとを含む抗菌用組成物が開発されている（特許文献1）。この組成物は、ナイシンが、グラム陽性菌であり、う蝕の原因菌であるミュータンス菌（Streptococcus  mutans）の除菌に有効であることに加えて、ウメ由来物を併用することにより、グラム陰性菌であり、歯周病原因菌であるポルフィロモナス・ジンジバリス（Porphyromonas  gingivalis）の除菌にも有効であることから、口腔ケア用として特に適している。この組成物はまた、ナイシンと梅エキス以外も可食性成分のみを使用して構成することができることから、誤嚥しやすく、また口腔内をすすいだり、口腔内のものを吐き出すことが困難な、要介護高齢者、重度心身障害者および乳幼児を対象とした利用が期待されている。【０００４】
一方、乳酸菌バクテリオシンであるラクティシンQ は、53個アミノ酸残基からなり、ナイシンと同様に広い抗菌スペクトルと高い抗菌力を有する（非特許文献1, 2）。またラクティシンQは、ナイシンの安定性が低下する中性〜弱アルカリ性領域において高い安定性を有するため、ナイシンが不利な条件においてナイシンに代わる利用が期待されている。ラクティシンQの類縁体として、ラクティシンQ から3 残基のアミノ酸が置換されたラクティシンZが知られている（非特許文献3）。ラクティシンQおよびZ は，他の一般的なバクテリオシンとは異なり、リーダーペプチドを有さないため、活性型として比較的単純な機構で合成・分泌されると考えられ、他の微生物種による大量生産が期待されている。【０００５】
他方、植物から得られる各種の精油および精油成分について、抗真菌作用が報告されている（非特許文献4）。真菌の一種であるカンジダ属の病原菌種は、しばしば常在菌としてヒトおよび非ヒト動物に定着し、通常は症状を起こすことはないが、ときに皮膚、口の粘膜等においてカンジダ症と呼ばれる感染症を起こすことがある。カンジダ症は免疫機能が正常な人にも起こるが、免疫機能が低下する糖尿病、癌、エイズ患者、高齢者、および妊婦等に多くみられ、長びく傾向がある。またカンジダ症は、抗生物質を使用する人にも比較的多くみられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開WO2014/077188
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】園元謙二: 浦上財団研究報告書, 18, 116-122(2011)
【非特許文献２】Fujita, K. et al.: Appl Environ Microbiol, 73, 2871-2877(2007)
【非特許文献３】Iwatani, S. et al.: Biosci Biotechnol Biochem, 71, 1984-1992（2007）
【非特許文献４】Nozaki, A. et al.: YAKUGAKU ZASSHI, 139(6), 895-902(2010)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
種々のバクテリオシンが広い抗菌スペクトルと高い抗菌力を示す一方で、カンジダ症の病原菌のような真菌に対しては効果がない。その一方で、バクテリオシンは他の抗生物質とは異なり、通常のタンパク質と同様の機構で生物内で合成され、ヒトや非ヒト動物の腸管内の消化酵素によって容易に分解される。そのため環境中に残存する可能性が極めて低く、耐性菌が出現する可能性も低いと考えられる。特に乳酸菌バクテリオシンは無味無臭であり、食経験が長いものもあり、安全性もよく知られていることから、食品、医薬品、化粧品等の成分として適しているといえる。したがって真菌に対しても抗菌作用を発揮しうるバクテリオシンを有効成分とした抗菌剤の開発が望まれる。そのような抗菌剤があれば、口腔内のみならず、皮膚、毛髪、身体、製品、環境などを微生物学的に清浄に保つために有用である。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、バクテリオシンの利用について鋭意検討してきた。その結果、バクテリオシンを植物抽出物と併用することにより、より広い菌に対して有効な抗菌剤が得られることを見出し、本発明を完成した。【００１０】
本発明は、以下を提供する。
[1]（A）バクテリオシンと、（B）植物抽出物を含み、
成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：2〜800である、ヘルスケア組成物。
[2]成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：10〜400である、1に記載の組成物。
[3]ヘルスケア組成物が、ヒトまたは非ヒト動物用の、口腔用（オーラルケア）組成物、フェイスケア組成物、ボディケア組成物、アイケア組成物、ヘアケア組成物、浴用組成物、フレグランス組成物、およびハンドケア組成物からなる群より選択されるいずれかである、1または2に記載の組成物。
[4]植物が、バラ科植物、イネ科植物、ミカン科植物、またはシソ科植物である、1〜3のいずれか1項に記載の組成物。
[5]植物が、バラ、パルマローザ、ネロリ、グレープフルーツ、ペパーミント、またはスペアミントである、4に記載の組成物。
[6]植物が、バラ、またはパルマローザである、5に記載の組成物。
[7]成分（B）が、精油である、1〜6のいずれか1項に記載の組成物。
[8]成分（A）が、ナイシンおよび/またはラクティシンである、1〜7のいずれか1項に記載の組成物。
[9]成分（A）が、ラクティシンである、1〜8のいずれか1項に記載の組成物。
[10]（A）バクテリオシンと、（B）植物抽出物を、
成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：2〜800で用いる、ヘルスケア方法（医療行為を除く）。
[11]（A）バクテリオシンと、（B）植物抽出物を有効成分として含む、抗真菌剤。
[12]バクテリオシン0.05〜20mg/100g、および植物抽出物0.25mg〜4000mg/100gを含み、pHが3〜10である、ヘルスケア組成物。
[13]植物抽出物を用いることを特徴とする、バクテリオシンの活性の調整方法。
[14]バクテリオシンを用いることを特徴とする、植物抽出物の活性の調整方法。
【発明の効果】
【００１１】
バクテリオシン単独では抗菌活性を有しない真菌に対しても抗菌活性を発揮しうる組成物を提供できる。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
％および部は、特に記載した場合を除き、質量を基準としている。数値範囲「X〜Y」は、特に記載した場合を除き、両端の値XおよびYを含む。「Aおよび/またはB」は、特に記載した場合を除き、A、Bのうち少なくとも一方が存在することを指し、AとBの双方が存在する場合も含む。
【００１３】
本発明を具体化した実施の形態につき説明する。
本発明は、（A）バクテリオシンと、（B）植物抽出物を含み、成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）が、1：2〜800である、ヘルスケア組成物を提供する。
【００１４】
[成分(A)、バクテリオシン]
本発明の組成物のために使用できるバクテリオシンは、目的の効果を有する限り特に限定されないが、本発明の組成物が口腔ケア用途等において使用されることから、無味無臭であるものが好ましい。無味無臭であり、また安全性の観点からは、好ましいバクテリオシンは、乳酸菌バクテリオシンである。乳酸菌バクテリオシンの例は、ナイシンA、ナイシンZ、ナイシンQ、ラクティシンQ、ラクティシンZ、ラクティシン481、ペディオシンPA-1、ムンジチシン、ラクトコッシンQ、ABP-118、ラクトサイクリシンQ、ロイコサイクリシンQ、およびエンテロシンBである。これらのうち、ナイシンA、ナイシンZ、ナイシンQ、ラクティシンQ、ラクティシンZ、およびラクティシン481がより好ましく、ナイシンAおよびラクティシンQがさらに好ましい。バクテリオシンは、一種のみ用いてもよく、二種以上を用いてもよい。
【００１５】
本発明でナイシンというときは、特に記載した場合を除き、ナイシンA、ナイシンZ、およびナイシンQを含む。本発明でラクティシンというときは、特に記載した場合を除き、ラクティシンQ、およびラクティシンZを含む。
【００１６】
バクテリオシンは、乳酸菌を公知の方法により培養し、精製することによって得ることができる。例えば、ナイシンAの場合、生産菌をMRS培地で培養後、培養上清を合成吸着剤で処理してナイシンを吸着させ、0.1％のトリフルオロ酢酸を含む70％イソプロピルアルコールでナイシンAを溶出させ、溶出画分を陽イオン交換カラムに供することによって、ナイシンAの精製品を得ることができる。必要な場合、逆相クロマトグラフィーに供することによって、さらに精製度を高めてもよい。ナイシンはまた、種々の製造者から入手可能である。
【００１７】
ラクティシンQは、生産菌を培養することによっても得られるが（例えば、国際公開WO2006/033352参照）、リーダーレスバクテリオシンであるので、構造遺伝子情報に基づき遺伝子工学的手法で形質転換された微生物により生産することができる。ラクティシンQの構造遺伝子情報はすでに公開されている（前掲非特許文献1参照）。
【００１８】
[成分(B)、植物抽出物]
植物抽出物とは、圧搾、蒸留、溶媒抽出等の各種の手段により調製される、植物に由来するものを指す。植物抽出物の形態は特に限定されず、液体、ペースト、または乾燥もしくは凍結乾燥した粉末であってよい。
【００１９】
本発明の組成物のために使用できる植物抽出物は、バクテリオシンとの併用により真菌に対して抗菌作用を発揮しうるものである。本発明者らの検討によると、バクテリオシンとの併用により真菌に対して抗菌作用を発揮しうる植物の例は、バラ科植物、ミカン科植物、シソ科植物、およびイネ科植物である。原料植物は一種のみ用いてもよく、二種以上用いてもよい。
【００２０】
バラ科植物としては、特に限定されないが、例えばバラ属（Rosa）、サクラ属（Prunus）、キンミズヒキ属（Agrimonia）、ピラカンサ属（Pyracantha）、シモツケ属（Spiraea）、キジムシロ属（Potentilla）、イチゴ属（Fragaria）、ダイコンソウ属（Geum）、ヘビイチゴ属（Duchesnea）、キイチゴ属（Rubus）、ワレモコウ属（Sanguisorba）、サンザシ属（Crataegus）、ビワ属（Eriobotrya）、ボケ属（Chaenomeles）またはリンゴ属（Malus）に属する植物を好適に用いることができる。これらのうち、バラ属に属する植物が特に好ましい。バラ属に属する植物（バラ属に属する植物を、単に「バラ」ということがある。）の例として、ダマスクローズ（Rosa damascena）、ノイバラ（Rosa multiflora Thunb）、ヤマイバラ（Rosa sambucina Koidz.）、ヤブイバラ （Rosa onoei Makino）、ミヤコイバラ （Rosa paniculigera (Koidz.) Makino ex Momiy.）、フジイバラ （Rosa fujisanensis (Makino) Makino）、テリハノイバラ （Rosa luciae Rochebr. et Franch. ex Crep.）、ハマナス （Rosa rugosa Thunb.）、カラフトイバラ （Rosa amblyotis C.A.Mey.）、オオタカネバラ （Rosa acicularis Lindl.）、タカネバラ （Rosa nipponensis Crep.）、サンショウバラ（ Rosa hirtula (Regel) Nakai）、ナニワイバラ（Rosa laevigata Michx.）、カカヤンバラ （Rosa bracteata H.Wendl.）が挙げられる。
【００２１】
ミカン科植物としては、特に限定されないが、例えばミカン属またはキンカン属に属する植物を好適に用いることができる。ミカン属に属する植物の例として、ビターオレンジ(別名ダイダイ、ネロリ) (Citrus aurantium)、グレープフルーツ（Citrus X paradisi）、レモン（Citrus limon）、キーライム(Citrus aurantiifolia) 、ペルシアライム(Citrus latifolia)、オレンジ（Citrus sinensis）、温州ミカン（Citrus unshiu）、カボス（Citrus sphaerocarpa）、スダチ（Citrus sudachi）、ユズ（Citrus junos）、紀州ミカン（Citrus kinokuni）、およびポンカン（Citrus tangerina）が挙げられる。キンカン属に属する植物の例として、ニンポウキンカン（Fortunella crassifolia）およびマルミキンカン（Furtunella Japonica）が挙げられる。
【００２２】
シソ科植物としては、特に限定されないが、例えばハッカ連（Mentheae）に属する植物を好適に用いることができる。ハッカ連に属する植物の例として、ハッカ（メンサ）属（Mentha）、ヤナギハッカ属（Hyssopus）、イヌハッカ属（Nepeta）、セイヨウヤマハッカ属（Melissa）、キダチハッカ属（Satureja）、カワミドリ属（Agastache）、オレガノ属（Origanum）、ムシャリンドウ属（Dracocephalum）、カキドオシ属（Glechoma）、ウツボグサ属（Prunella）（ウツボグサ）、シロネ属（Lycopus）、ラショウモンカズラ属（Meehania）、ヤグルマハッカ属（Monarda）、アキギリ属（サルビア属）（Salvia）、ローズマリー属（Rosmarinus）、イブキジャコウソウ属（Thymus）、またはトウバナ属（Clinopodium）に属する植物が挙げられる。これらのうち、ハッカ（メンサ）属（Mentha）に属する植物を特に好適に用いることができる。ハッカ属に属する植物の例として、ペパーミント（Mentha piperita L.）およびスペアミント（Mentha spicata L.）を挙げることができる。
【００２３】
イネ科植物としては、特に限定されないが、例えばキビ亜科（Panicoideae）に属する植物を好適に用いることができる。キビ亜科に属する植物の例として、オガルカヤ属（Cymbopogon）、メリケンカルカヤ属（Andropogon）、チガヤ属（Imperata）、カリマタガヤ属（Dimeria）、イタチガヤ属（Pogonatherum）、メガルカヤ属（Themeda）、アブラススキ属（Eccoilopus）、ヒメアブラススキ属（Bothriochloa）、ジュズダマ属（Coix）、エリアンサス属（Erianthus）、ウンヌケ属（Eulalia）、ウシノシッペイ属（Hemarthria）、カモノハシ属（Ischaemum）、アシボソ属（Microstegium）、ススキ属（Miscanthus）、アイアシ属（Phacelurus）、サトウキビ属（Saccharum）、モロコシ属（Sorghum）、トウモロコシ属（Zea）、またはムカデシバ属（Eremochloa）に属する植物が挙げられる。これらのうち、オガルカヤ属に属する植物を特に好適に用いることができる。オガルカヤ属に属する植物の例として、パルマローザ（パルマロサグラスということもある。）（Cymbopogon martini）を挙げることができる。
【００２４】
植物抽出物を得る際、植物の全部（草本植物について、全草ということもある。）または一部（部位または器官）が用いられる。部位または器官を用いる場合、目的の効果の高い抽出物が得られる限り特に限定されないが、例えば、花（花全体または花弁、萼、雌蕊、雄蕊等の花の一部）、茎（茎部全体または樹皮等の茎部の一部）、葉、種子、果実（種子を含む果実全体または果皮、果肉等の果実の一部）、根、地下茎を用いることができる。部位または器官は、一種のみ用いてもよく、二種以上用いてもよい。
【００２５】
植物抽出物の製造方法は、特に限定されず、圧搾、抽出溶媒を用いる方法、水蒸気蒸留法、または超臨界流体もしくは亜臨界流体を利用する方法であってよい。抽出効率の観点から、抽出に際し、攪拌を行ってもよいし、抽出溶媒中でホモジナイズしてもよい。さらに、植物抽出物の製造工程は、遠心分離、限外ろ過、カラムクロマトグラフ等による分離工程または精製工程を含んでいてもよい。
【００２６】
抽出溶媒を用いる場合、溶媒の例として、水、温湯、熱湯；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の低級1価アルコール；プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ブチレングリコール、グリセリン、1，3−ブタンジオール等の多価アルコール類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン等のエーテル類；ヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン等の炭化水素類を挙げることができる。溶媒は、一種のみ用いてもよく、二種以上用いてもよい。
【００２７】
好ましい態様においては、植物抽出物として、精油が用いられる。精油の好ましい例として、バラの花から水蒸気蒸留により得た精油（ローズ油）、ビターオレンジの花から水蒸気蒸留により得た精油（ネロリ油）、セイヨウハッカの全草から水蒸気蒸留により得た精油（ペパーミント油）、グレープフルーツの果皮から圧搾により得た精油（グレープフルーツ油）、およびパルマローザの全草または枝、葉から水蒸気蒸留により得た精油（パルマローザ油）が挙げられる。ローズ油とパルマローザ油は、geraniol、またはcitronellolを含む点で共通している。
【００２８】
[有効成分量]
組成物中のバクテリオシンの含有量（バクテリオシンを複数種類用いる場合は、その合計の含有量）は、目的の抗菌活性を示す限り特に限定されないが、例えば0.05〜20mg/100gであり、好ましくは0.1〜10mg/100gであり、より好ましくは0.3〜5mg/100gである。組成物中のバクテリオシンの含有量はまた、例えば、20〜8,000IU/100g、好ましくは40〜4,000IU/100g、より好ましくは120〜2,000IU/100gである。
【００２９】
組成物中の植物抽出物の含有量（植物抽出物を複数種類用いる場合は、その合計の含有量）は、目的の抗菌活性を示す限り特に限定されないが、例えば精油である場合は、好ましくは0.25mg〜4000mg/100gであり、より好ましくは1〜2000mg/100gであり、さらに好ましくは10〜1000mg/100gである。なお、植物由来成分として搾汁物や蒸留物等の濃縮物を用いる場合、濃縮前の量に換算した値が上記範囲であることが好ましい。
【００３０】
成分（A）と成分（B）との質量比（A）：（B）は、目的の抗菌活性を示す限り特に限定されないが、1：2〜800とすることができ、1：10〜400であることが好ましく、1：10〜200であることがより好ましく、1：10〜100であることがさらに好ましい。このような範囲であれば、真菌に対する抗菌活性が十分に発揮されるからである。成分（A）がナイシンまたはラクティシンであり、好ましくはナイシンAまたはラクティシンQである場合であって、成分（B）がバラ科植物、ミカン科植物、シソ科植物、またはイネ科植物の精油であり、好ましくはバラの花から水蒸気蒸留により得た精油（ローズ油）、ビターオレンジの花から水蒸気蒸留により得た精油（ネロリ油）、セイヨウハッカの全草から水蒸気蒸留により得た精油（ペパーミント油）、グレープフルーツの果皮から圧搾により得た精油（グレープフルーツ油）、またはパルマローザの全草または枝・葉から水蒸気蒸留により得られた精油（パルマローザ油）である場合、上記の質量比範囲が特に好ましいことが、本発明者により確認されている。
【００３１】
[抗菌作用]
本発明の組成物による抗菌作用の対象となる微生物は、有効成分であるバクテリオシンが作用可能なグラム陽性の細菌のほか、グラム陰性菌および真菌（菌類ということもある。）に対しても有効である。真菌は、真核生物であり、一般に酵母、キノコまたはカビと呼ばれる生物の総称であり、菌界（Regnum Fungi ）に属する生物を指す。
【００３２】
微生物は一般に、グラム陽性菌とグラム陰性菌に分類できる。グラム陽性菌とグラム陰性菌に属する微生物は、例えば、Bergey's Manual Of Systematic Bacteriology: The Proteobacteria; The Alpha-, Beta-, Delta-, and Epsilonproteobacteria (Bergey's Manual of Systematic Bacteriology (Springer-Verlag)) George Garrity、Don J. Brenner、Noel R. Krieg、 James T. Staleyに収載されている。本発明の組成物は、グラム陽性菌、例えば、バチルス属、スタフィロコッカス属（Staphylococcus）、ストレプトコッカス属（Streptococcus）、ラクトバチルス属（Lactobacillus）、クロストリジウム属、リステリア属、マイクロコッカス属、プロピオニバクテリウム属、好ましくは、バチルス・ズブチリス（Bacillus  subtilis）、スタフィロコッカス・オーレウス、スタフィロコッカス・エピデルミディス（Staphylococcus  epidermidis）、ストレプトコッカス・ミュータンス（Streptococcus  mutans）、ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus  plantarum）、およびプロピオニバクテリウム・アクネスに属する微生物に対して抗菌活性を発揮する。本発明の組成物は、グラム陰性菌、例えば、エッシェリヒア属（Escherichia）、シュードモナス属、エンテロバクター属（Enterobacter）、クレブシエラ属（Klebsiella）、シトロバクター属（Citrobacter）、プロテウス属（Proteus）、セラチア属、エルウィニア属（Erwinia）、ビブリオ属（Vibrio）、アシネトバクター属（Acinetobacter）、好ましくは、エッシェリヒア・コリ（Escherichia  coli）に属する微生物に対しても抗菌活性を発揮する。
【００３３】
本発明の組成物はまた、バクテリオシンが通常抗菌活性示さない真菌に対しても抗菌活性を発揮しうる。本発明の組成物が有効な真菌の例は、カンジダ属（Candida）、サッカロマイセス属（Saccharomyces）、シゾサッカロマイセス属（Shizosaccharomyces）、ピキア属（Pichia）、クリベロマイセス属（Kluyveromyces）、ウィリオプシス属（Williopsis）、デバリオマイセス属（Debaryomyces）、ガラクトマイセス属（Galactomyces）、トルラスポラ属（Torulaspora）、ロドトルラ属（Rhodotorula）、ヤロウィア属（Yarrowia）、ジゴサッカロマイセス属（Zygosaccharomyces）、アスペルギルス属（Aspergillus）、クリプトコッカス属（Cryptococcus）、トリコフィトン属（Trichophyton）、ミクロスポルム属（Microsporum）、プネウモキスチス(ニューモシスティス)属（Pneumocystis）に属する微生物である。本発明の組成物が有効な真菌の、より具体的な例としては、カンジダ・アルビカンス（Candida albicans）、カンジダ・グラブラタ、カンジダ・トロピカリス（Candida tropicalis）、カンジダ・クルセ、カンジダ・ズブリニエンシス、カンジダ・リポリティカ（Candida lypolitica）、カンジダ・ユーティリス（Candida utilis）、カンジダ・サケ（Candida sake）、サッカロマイセス・セレビジエ（Saccharomyces cerevisiae）、サッカロマイセス・サケ（Saccharomyces sake）、サッカロマイセス・ベティカス（Saccharomyces beticus）、アスペルギルス・フミガタス(Aspergillus fumigatus)、アスペルギルス・フラブス（A. flavus）、アスペルギルス・ニガー（A. niger）、クリプトコッカス・ネオホルマンス（Cryptococcus neoformans）、クリプトコッカス・アルビヅス（Cryptococcus albidus）、クリプトコッカス・ガティ（Cryptococcus gattii）、クリプトコッカス・ラウレンティ（Cryptococcus laurentii）、トリコフィトン・ルブルム（Trichophyton rubrum）、トリコフィトン・メンタグロフィテス（Trichophyton mentagrophytes）、トリコフィトン・トンスランス（Trichophyton tonsurans）、トリコフィトン・ベルコスム（Trichophyton verrucosum）、ミクロスポルム・カニス（Microsporum canis）、ミクロスポルム・ギプセウム（Microsporum gypseum）およびプネウモキスチス(ニューモシスティス)・ジロベシ（Pneumocystis jiroveci）が挙げられる。
【００３４】
好ましい態様の一つにおいては、組成物はヒトまたは非ヒト動物の口腔内の微生物に対して抗菌活性を有する。口腔内微生物とは、上記で定義された微生物のうち、特に口腔内に存在し、または存在し得る微生物を意味し、例えば、ストレプトコッカス属、ナイセリア属（Neiseria）、ミクロコッカス属（micrococcus）、ラクトバチルス属、スピロヘータ属（Spirochaetes）等に属する微生物、および一部の真菌が挙げられる。
【００３５】
口腔内ストレプトコッカス属としては、ストレプトコッカス・ミュータンス、ストレプトコッカス・ソブリナス（Streptococcus  sobrinus）ストレプトコッカス・サングイス（Streptococcus  sanguis）、ストレプトコッカス・ミチオール（Streptococcus  mitior）、ストレプトコッカス・サリバリウス（Streptococcus  salivarius）、ストレプトコッカス・ミレリ（Streptococcus  milleri）などがあげられる。ナイセリア属としては、ナイセリア・フラバ（Neiseria  flava）、ナイセリア・サブフラバ（Neiseria  subflava）、ナイセリア・シッカ（Neiseria  sicca）などがあげられる。口腔内ラクトバチルス属としては、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus  casei）およびラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus  acidophilus）などがあげられる。スピロヘータ属としては、トレポネマ・デンチコラ（Treponema  denticola）、トレポネマ・マクレデンチアム（Treponema  macredentium）トレポネマ・オラリス（Treponema  oralis）などが挙げられる。
【００３６】
口腔内微生物のうち、グラム陽性菌に属するものとしては、例えば、ストレプトコッカス属、ペプトコッカス属（Peptococcus）、ペプトストレプトコッカス属、（Peptostreptococcus）、ミクロコッカス属、アクチノマイセス属（Actinomyces）、ラクトバチルス属、バクテリオネマ属（Bacterionema）、アラクニア属（Arachnia）、ビフィドバクテリウム属（Bifidobacterium）に属する微生物が挙げられる。ストレプトコッカス属に属する微生物としては、例えばストレプトコッカス・ミュータンスおよびストレプトコッカス・ソブリナスが挙げられる。これらは、う蝕原因菌として知られている。
【００３７】
口腔内微生物のうち、真菌に分類されるものとしては、例えば、カンジダ属に属する微生物、より具体的には、カンジダ・グラブラタ、カンジダ・トロピカーリス、カンジダ・クルセイ、カンジダ・ズブリニエンシスが挙げられる。
【００３８】
抗菌とは、微生物の増殖が抑制された状態をいい、殺菌された状態、滅菌された状態を含む。抗菌はまた防腐された状態を含む。すなわち、本発明の組成物は抗菌剤または防腐剤として用いることができる。抗菌または防腐活性の有無および程度は、次の方法および基準で評価することができる。
【００３９】
＜方法＞
評価対象となる菌を、適切な培地で対数増殖期まで培養する。培養液を滅菌精製水で希釈し、菌数を105 CFU/mLとなるように調整する。他方、評価対象となる成分を滅菌精製水で適切な濃度に調整する。調整した培養液20μLを試験液1mLに添加し、室温で24時間、対象菌を対象成分に接触させる。次いで、該液を、必要に応じて希釈して寒天培地上にプレーティングし、24時間培養後、プレート上に形成されたコロニーの数をカウントすることにより、生菌数（CFU/mL）を求める。CFUとは、コロニー形成ユニット（colony  forming  unit）を意味し、寒天培地上で形成されたコロニー数と希釈倍数に基づいて算出できる。
【００４０】
＜基準＞
生菌数に基づき、10 CFU/mL未満をA、10 CFU/mL以上100 CFU/mL未満をB、100 CFU/mL以上をCとしたとき、抗菌活性があるとは、AまたはBと評価されることをいう。好ましくは、Aと評価されることをいう。AまたはBと評価される場合には、ヘルスケア組成物として有効な抗菌活性があるといえる。
【００４１】
[ヘルスケア組成物、ヘルスケア方法]
ヘルスケア組成物とは、生命、健康および身だしなみに関する組成物をいう。ヘルスケア方法とは、生命、健康および身だしなみに関する処置を行うことをいう。ヘルスケア方法は、目的の処置のために、他者に対して実施する場合を含む。ヘルスケア方法は、病気の治療を目的として行うこともでき、また病気の治療以外の目的で、例えば健康を維持・増進するために、身だしなみのために、美容のために、日常生活を快適に過ごすために、または身の回りや製品を清浄に保つために行うことができる。本発明の組成物および方法は、身の回りや製品の防腐のために用いることもできる。
【００４２】
本発明の組成物および方法は、ヒトのみならず、非ヒト動物（ペット、家畜等）を対象とする。すなわち、本発明の組成物は、ヒト用または非ヒト動物用のものであり、本発明の方法は、ヒトまたは非ヒト動物に対して行われる。
【００４３】
対象となるヒトの性別、成長段階、健康状態等には特に限定がなく、本発明の処置の対象は、例えば、乳児、幼児、児童、成人、高齢者、妊婦、産婦、患者であり得る。非ヒト動物には、イヌ、ネコ、ウサギ、ハムスター、モルモット、リス等のペット（愛玩動物、コンパニオンアニマルということもある。）、牛、豚等の家畜、マウス、ラット等の実験動物、動物園等で飼育されている動物が挙げられる。対象となる非ヒト動物の性別、成長段階および健康状態等にも特に限定はなく、本発明の処置の対象は、例えば、幼犬、成犬、高齢犬、幼猫、成猫、高齢猫等であり得る。対象となるヒトまたは非ヒト動物は、微生物による感染症に罹患しているもの、罹患するリスクの高いもの、予防する必要が高いもの、予防することがこのましいものであり得る。微生物による感染症の例として真菌症を挙げることができ、真菌症には、カンジダ症、白癬、クリプトコックス症、アスペルギルス症が含まれる。
【００４４】
また本発明の方法は、医師が行うこともでき、医師以外の者、例えば、化粧品または医薬品の製造者、販売者、薬剤師、栄養士、看護師、臨床検査技師、介護士、福祉士、健康管理師、ケアインストラクター、美容スタッフ、エステシャン、セラピスト、獣医、獣医看護師、アニマル・ヘルス・トレーナー（AHT）、コンパニオン・ドッグ・トレーナー（CDT）、ドッグセラピスト、ドッグライフカウンセラー、トリマー、トリミング技能師、ブリーディング技能師、ペット介護士、ペット・グルーミング（PGS）、ペットシッター、ペットトレーナー、ペット販売技能師、ペット美容師、愛玩動物飼養管理士、家畜人工授精師、家庭犬トレーニング技能師、家庭犬のしつけ訓練士、獣医師、初生雛鑑別師、動物衛生看護師、動物看護技能師、動物看護士、盲導犬訓練士、またはペットの飼い主等が行うことができる。
【００４５】
ヘルスケア組成物には、化粧料組成物、医薬組成物、食品組成物、トイレタリー（ビューティーケアということもある）組成物、または台所用、衣類用もしくは住居用洗浄剤組成物が含まれる。化粧料は、薬用のもの、または医薬部外品を含む。医薬は、予防または治療のためのもののほか、診断のためのものも含む。食品は、固形のもののみならず、飲料およびスープのような液状の経口摂取物も含む。また、そのまま摂取される形態のもの（例えば、調理済みの各種の食品、サプリメント、ドリンク剤）のみならず、食品添加物、飲料用濃縮物も含む。食品組成物はまた、一般食品（いわゆる健康食品を含む。）のほか、保健機能食品（機能性表示食品、栄養機能食品、および特定保健用食品を含む。）を含む。ヘルスケア組成物は、抗菌剤または防腐剤として用いてもよい。
【００４６】
ヘルスケア組成物には、具体的には、口腔用（オーラルケア）組成物、フェイスケア組成物、ボディケア組成物、スキンケア組成物、アイケア組成物、ヘアケア組成物、浴用組成物、フレグランス組成物、洗浄剤組成物が含まれる。これらのうち、抗真菌作用を有することが特に好ましいと考えられる、口腔用（オーラルケア）組成物、フェイスケア組成物、ボディケア組成物、アイケア組成物、ヘアケア組成物、浴用組成物、およびフレグランス組成物が好ましい。
【００４７】
ヘルスケア組成物は、より具体的には、洗口液（マウスウォッシュ）、洗口スプレー（マウススプレー）、練り歯磨き、歯磨き粉、歯磨きクリーム、チューインガム、液体充填ガム（liquid  center  filled  gums）、医薬品、化粧品、サプリメント、ドリンク剤、食品、点眼剤、コンタクトレンズ洗浄剤等がある。医薬品である場合、トローチ、口腔用フィルム、硬膏剤、軟膏剤、パップ剤、リニメント剤、ローション剤とすることができる。化粧品である場合、香水、制汗剤、デオドラント剤、スキンケア化粧品として洗顔石鹸、洗顔クリーム、洗顔フォーム、化粧水、美容液、パック、マッサージクリーム、乳液、モイスチャークリーム、リップクリーム等、メーキャップ化粧品としてファンデーション、白粉、口紅、ほほ紅、アイシャドウ等、ボディケア化粧品として石鹸、液体洗浄料、日焼け止めクリーム、入浴剤等、ヘアケア化粧品としてシャンプー、リンス、ヘアトリートメント、整髪料、ヘアトニック、育毛剤、スキャルプトリートメント等とすることができる。
【００４８】
組成物は、化粧料、医薬、または食品として許容される種々の添加物を含みうる。保湿剤としては、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、デキストリン、グルコース、マルトース、ラクトース、サッカロース、キシロース、フルクトース、マンニトール、ラクチトール等の糖類；エチレングリコール、プロピレングリコール、3−メチル−1，3−ブタンジオール、グリセリン、1，3−ブチレングリコール（BG）等の多価アルコール類；ピロリドンカルボン酸ナトリウム、グルタミン酸ナトリウム等のアミノ酸類；尿素が挙げられる。 防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エステル（例えば、メチルパラベン）、安息香酸、安息香酸塩、フェノキシエタノールが挙げられる。香料としては、ラベンダー油、ジャスミン油、レモン油等の天然香料、またはゲラニオール、シトロネロール、フェネチルアルコール等の合成香料が挙げられる。無機塩類としては、硫酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、チオ硫酸ナトリウム、酸化マグネシウム、硫酸アルミニウム、ミョウバン、メタケイ酸塩が挙げられる。油性成分としては、大豆油、ヌカ油、ホホバ油、アボガド油、アーモンド油、オリーブ油、カカオ脂、ゴマ油、パーシック油、ヒマシ油、ヤシ油、ミンク油、牛脂、豚脂等の天然油脂、これらの天然油脂を水素添加して得られる硬化油およびミリスチン酸グリセリド、2−エチルヘキサン酸グリセリド等の合成グリセリド、ジグリセリド等の油脂類；カルナウバロウ、鯨ロウ、ミツロウ、ラノリン等のロウ類；流動パラフィン、ワセリン、パラフィン、マイクロクリスタリンワックス、セレシン、スクワラン、プリスタン等の炭化水素類；ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ラノリン酸、イソステアリン酸等の高級脂肪酸類；ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、コレステロール、2−ヘキシルデカノール等の高級アルコール類；オクタン酸セチル、乳酸ミリスチル、乳酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、アジピン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、オレイン酸デシル、イソステアリン酸コレステロール等のエステル類；精油類；シリコーン油類が挙げられる。着色剤としては、リボフラビン（ビタミンB2）、カロチン、クロロフィルが挙げられる。
【００４９】
組成物が洗口液の場合には、基剤として精製水等の水が用いられ、グリセリン、ソルビトール等の湿潤剤、水添デンプン、キシリトール等の甘味料、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロック共重合体（ポロキサマー等）等の可溶化剤、ヒドロキシエチルセルロース等の粘結剤、香料、チモール、メントール、サリチル酸メチル、エタノール、塩化リゾチーム、ラクトフェリン、グルコースオキシターゼ、グルコースオキシターゼ等の助剤、乳酸カルシウム等の矯味剤を用いてもよい。また、練り歯磨きの場合、リン酸水素カルシウム、炭酸カルシウム、水酸化アルミニウム等の研磨剤、ラウロイルサルコシンソーダ、ラウリル硫酸ナトリウム、ショ糖脂肪酸エステル等の発泡剤、ソルビトール、グリセリン、プロピレングリコール等の保湿剤、キサンタンガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース等の結合剤、キシリトール等の甘味料、メントール等の香料、乳酸カルシウム等の矯味剤、エタノール等の助剤、フッ化物、デキストラナーゼ、グルコースオキシダーゼ、クロルヘキシジン、塩化リゾチーム等の薬効成分を添加剤として含んでいてもよい。
【００５０】
本発明の組成物は、天然由来のバクテリオシンおよび植物抽出物を有効成分としているため、その他の成分もすべて天然由来物であることが好ましい。
【実施例】
【００５１】
［試験例1：大腸菌に対する抗菌活性（ナイシン）］
グラム陰性菌である大腸菌（エッシュリヒア・コリ）NBRC3301株を、Tryptic Soy Broth（TSB）で対数増殖期まで培養した。培養液を滅菌精製水で希釈し、菌数を調整した（105 CFU/mL）。試験液は、滅菌精製水で希釈し、ナイシン（ナイシンA、オーム乳業株式会社製）（3.75 μg/mL）、ローズ油（バラ花の水蒸気蒸留法により得た精油、山本香料株式会社製）（200 μg/mL）、ナイシン（3.75 μg/mL）＋ローズ油（200 μg/mL）に調整した。該希釈した培養液（20 μL）を、試験液（1 mL）に添加した。室温で24時間接触させた後、該液をTSB寒天培地上にプレーティングして、24時間培養後、プレート上に形成されたコロニーの数を測定した。結果を、下記の表1に示す。【００５２】
【表１】
2017069227.tif 000002
【００５３】
［試験例2：酵母に対する抗菌活性（ナイシン）］
酵母（サッカロマイセス・セレビシエ）を、YPD培地で対数増殖期まで培養した。培養液を滅菌精製水で希釈し、菌数を調整した（105 CFU/mL）。試験液は、滅菌精製水で希釈し、ナイシン（3.75μg/mL）、ローズ油（200μg/mL）、ナイシン（3.75μg/mL）＋ローズ油（200μg/mL）に調整した。該希釈した培養液（20μL）を、試験液（1mL）に添加した。室温で24時間接触させた後、該液をサブローデキストロース寒天培地上にプレーティングして、48時間培養後、プレート上に形成されたコロニーの数を測定した。結果を、下記の表2に示す。【００５４】
【表２】
2017069227.tif 000003
【００５５】
［試験例3：大腸菌に対する抗菌活性（ラクティシン）]
グラム陰性菌である大腸菌（エッシュリヒア・コリ）NBRC3301株を、TrypticSoyBroth（TSB）で対数増殖期まで培養した。培養液を滅菌精製水で希釈し、菌数を調整した（105CFU/mL）。試験液として使用したサンプル（No.1〜9）の組成は、下記の表3に示すとおりであった。該希釈した培養液（60μL）を、試験液（3mL）に添加した。室温で24時間接触させた後、該液をTSB寒天培地上にプレーティングして、24時間培養後、プレート上に形成されたコロニーの数を測定した。結果を、下記の表4に示す。【００５６】
【表３】
2017069227.tif 000004
【００５７】
用いた精油の詳細
ネロリ油：ビターオレンジの花から水蒸気蒸留により得た精油、山本香料株式会社製
ペパーミント油：セイヨウハッカ全草から水蒸気蒸留により得た精油、山本香料株式会社製
グレープフルーツ油：グレープフルーツの果皮から圧搾により得た精油、山本香料株式会社製【００５８】
【表４】
2017069227.tif 000005
【００５９】
［試験例4：酵母に対する抗菌活性（ラクティシン）］
酵母（サッカロマイセス・セレビシエ）を、YPD培地で対数増殖期まで培養した。培養液を滅菌精製水で希釈し、菌数を調整した（105 CFU/mL）。試験液として使用したサンプル（No.1〜9）の組成は、表3に示すとおりであった。該希釈した培養液（60μL）を、試験液（3mL）に添加した。室温で24時間接触させた後、該液をTSB寒天培地上にプレーティングして、48時間培養後、プレート上に形成されたコロニーの数を測定した。結果を、下記の表5に示す。【００６０】
【表５】
2017069227.tif 000006
［試験例5：酵母に対する抗菌活性（ナイシン）］
酵母（サッカロマイセス・セレビシエ）を、YPD培地で対数増殖期まで培養した。培養液を滅菌精製水で希釈し、菌数を調整した（105〜6 CFU／mL）。試験液として使用したサンプル（No．1〜4）の組成は、下記の表6に示すとおりであった。該希釈した培養液（10 μL）を、試験液（2 mL）に添加した。室温で24時間接触させた後、該液をサブローデキストロース寒天培地上にプレーティングして、48時間培養後、プレート上に形成されたコロニーの数を測定した。結果を、下記の表7に示す。
【表６】
2017069227.tif 000007
【００６１】
用いた精油の詳細
ローズ油：ローズの花から水蒸気蒸留により得た精油、山本香料株式会社製
グレープフルーツ油：グレープフルーツの果皮から圧搾により得た精油、山本香料株式会社製
パルマローザ油：パルマローズ全草から水蒸気蒸留により得た精油、山本香料株式会社製【００６２】
【表７】
2017069227.tif 000008
【００６３】
［実施例1〜9：ヘルスケア組成物の調製］
各表に従い、成分（A）と（B）を秤量、混合、溶解した後、他全成分の混合溶解液に添加し、実施例1〜9の組成物を調製する。調製された組成物はいずれも、目的の抗菌効果を奏しうる。なお実施例1〜9には成分（A）として、特定のバクテリオシンを用い、成分（B）として特定の植物抽出物を用いた例を記載したが、それぞれは適宜、他のバクテリオシン、および植物抽出物に置き換えたものを同様に調製できる。また調製されたものは、同様の効果が期待できる。【００６４】
【表８】
2017069227.tif 000009
【００６５】
【表９】
2017069227.tif 000010
【００６６】
【表１０】
2017069227.tif 000011
【００６７】
【表１１】
2017069227.tif 000012
【００６８】
【表１２】
2017069227.tif 000013
【００６９】
【表１３】
2017069227.tif 000014
【００７０】
【表１４】
2017069227.tif 000015
【００７１】
【表１５】
2017069227.tif 000016
【００７２】
【表１６】
2017069227.tif 000017
【手続補正書】
【提出日】平成30年6月20日(2018.6.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）ラクティシンと、
（Ｂ）植物抽出物
を含み、
成分（Ａ）と成分（Ｂ）との質量比（Ａ）：（Ｂ）が、１：２〜８００である、ヘルスケア組成物。
【請求項２】
成分（Ａ）と成分（Ｂ）との質量比（Ａ）：（Ｂ）が、１：１０〜４００である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ヘルスケア組成物が、ヒトまたは非ヒト動物用の、口腔用（オーラルケア）組成物、フェイスケア組成物、ボディケア組成物、アイケア組成物、ヘアケア組成物、浴用組成物、フレグランス組成物、およびハンドケア組成物からなる群より選択されるいずれかである、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
植物が、バラ科植物、イネ科植物、ミカン科植物、またはシソ科植物である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
植物が、バラ、パルマローザ、ネロリ、グレープフルーツ、ペパーミント、またはスペアミントである、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
植物が、バラ、またはパルマローザである、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
成分（Ｂ）が、精油である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
（Ａ）ラクティシンと、
（Ｂ）植物抽出物
を、
成分（Ａ）と成分（Ｂ）との質量比（Ａ）：（Ｂ）が、１：２〜８００で用いる、ヘルスケア方法（医療行為を除く）。
【請求項９】
（Ａ）ラクティシンと、
（Ｂ）植物抽出物
を有効成分として含む、抗真菌剤。
【請求項１０】
ラクティシン０．０５〜２０ｍｇ／１００ｇ、および植物抽出物０．２５ｍｇ〜４０００ｍｇ／１００ｇを含み、ｐＨが３〜１０である、ヘルスケア組成物。
【国際調査報告】
2017069227.tif 000018
2017069227.tif 000019
2017069227.tif 000020
2017069227.tif 000021
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