(57)【要約】  分離ステップと、検出ステップと、同定ステップとを備えるマイコトキシンの分析方法を提供する。分離ステップでは、液体試料に含まれる各成分をカラム３で分離させる。検出ステップでは、分離ステップにより分離された各成分をＰＤＡ７及び蛍光検出器８で検出する。同定ステップでは、蛍光検出器８からの検出信号に基づいて総アフラトキシンを同定するとともに、ＰＤＡ７からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体試料に含まれる各成分をカラムで分離させる分離ステップと、
前記分離ステップにより分離された各成分を少なくとも２つの検出器で検出する検出ステップと、
前記検出ステップによる検出結果に基づいて各成分を同定する同定ステップとを備え、
前記少なくとも２つの検出器には、蛍光検出器が含まれており、
前記同定ステップでは、前記蛍光検出器からの検出信号に基づいて総アフラトキシンを同定するとともに、前記蛍光検出器以外の検出器からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定することを特徴とするマイコトキシンの分析方法。
【請求項２】
前記少なくとも２つの検出器には、フォトダイオードアレイ検出器が含まれており、
前記同定ステップでは、前記フォトダイオードアレイ検出器からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定することを特徴とする請求項１に記載のマイコトキシンの分析方法。
【請求項３】
前記検出ステップでは、前記蛍光検出器で検出する蛍光の波長を予め設定されたタイミングで切り替えることを特徴とする請求項１に記載のマイコトキシンの分析方法。
【請求項４】
前記分離ステップでは、緩衝液と有機溶媒との混合液を移動相として前記カラムに供給することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のマイコトキシンの分析方法。
【請求項５】
前記分離ステップでは、前記混合液における有機溶媒の混合率を時間経過とともに上昇させながら移動相として前記カラムに供給することを特徴とする請求項４に記載のマイコトキシンの分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品や飲料などに産生されるマイコトキシン（かび毒）の分析方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
例えば食品や飲料などには、人又は動物に対して毒性を有するマイコトキシンが産生される場合がある。マイコトキシンは、カビが産生する二次代謝産物の中で人又は動物に健康被害を及ぼす化合物であり、その分析方法として種々の方法が提案されている（例えば、下記特許文献１参照）。特に、マイコトキシンの一種であるアフラトキシンは、天然物質の中で最も強い発がん性を有する物質の１つとして知られており、世界中の多くの国や地域で厳しい規制が行われている。【０００３】
小麦などの穀類には、上記アフラトキシンの５成分（Ｂ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２，Ｍ１）のうちの４成分（Ｂ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２）の他、オクラトキシン、ゼアラレノン、トリコテセン系（デオキシニバレノール、ニバレノール）といったマイコトキシンが産生される場合がある。アフラトキシンの５成分のうち、Ｂ１、Ｂ２、Ｇ１、Ｇ２の４成分は、総アフラトキシンと呼ばれている。【０００４】
上記のようなマイコトキシンの各成分については、それぞれ個別の分析方法が確立されている。例えば、総アフラトキシンの分析方法としては、蛍光検出器又は質量分析計を備えた高速液体クロマトグラフを使用して液体試料を分析する方法が、厚生労働省や国際食品規格委員会から通知されている。また、デオキシニバレノールの分析方法としては、紫外分光光度型検出器を備えた高速液体クロマトグラフを使用して液体試料を分析する方法が、同じく厚生労働省や国際食品規格委員会から通知されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１５−２５６８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述したマイコトキシンの各成分の分析方法は、いずれも異なる条件下で行われる。そのため、複数種類の成分について分析を行う場合には、条件を変更して複数回の分析を行う必要があり、作業が煩雑であった。【０００７】
また、上述したマイコトキシンの各成分の分析方法は、液体試料中の各成分の同定だけでなく、定量も行うことができる方法である。そのため、液体試料中にマイコトキシンの各成分が含まれているか否かを確認できれば十分であるような場合でも、各成分の定量まで行う詳細な分析を行う必要があり、作業に時間がかかるという問題があった。【０００８】
本発明は、上記実情に鑑みてなされたものであり、液体試料中におけるマイコトキシンの複数成分の有無を短時間で容易に確認することができるマイコトキシンの分析方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（１）本発明に係るマイコトキシンの分析方法は、分離ステップと、検出ステップと、同定ステップとを備える。前記分離ステップでは、液体試料に含まれる各成分をカラムで分離させる。前記検出ステップでは、前記分離ステップにより分離された各成分を少なくとも２つの検出器で検出する。前記同定ステップでは、前記検出ステップによる検出結果に基づいて各成分を同定する。前記少なくとも２つの検出器には、蛍光検出器が含まれている。前記同定ステップでは、前記蛍光検出器からの検出信号に基づいて総アフラトキシンを同定するとともに、前記蛍光検出器以外の検出器からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定する。【００１０】
このような構成によれば、少なくとも２つの検出器からの検出信号に基づいて、総アフラトキシン及びデオキシニバレノールの同定を１回の分析で行うことができる。総アフラトキシンは、感度が高い蛍光検出器からの検出信号に基づいて、少ない含有量であっても良好に同定することができる。また、デオキシニバレノールは、総アフラトキシンとは分離して、蛍光検出器以外の検出器からの検出信号に基づいて良好に同定することができる。【００１１】
これにより、液体試料中におけるマイコトキシンの複数成分（総アフラトキシン及びデオキシニバレノール）の有無を１回の分析で確認することができる。したがって、成分ごとに条件を変更して複数回の分析を行う場合と比較して、液体試料中におけるマイコトキシンの複数成分の有無を短時間で容易に確認することができる。【００１２】
（２）前記少なくとも２つの検出器には、フォトダイオードアレイ検出器が含まれていてもよい。この場合、前記同定ステップでは、前記フォトダイオードアレイ検出器からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定してもよい。【００１３】
このような構成によれば、フォトダイオードアレイ検出器からの検出信号に基づいて、波長と吸光度との関係をスペクトルとして得ることができる。したがって、得られたスペクトルを予め作成されたスペクトルライブラリと比較することにより、デオキシニバレノールなどの各種成分を良好に同定することができる。【００１４】
（３）前記検出ステップでは、前記蛍光検出器で検出する蛍光の波長を予め設定されたタイミングで切り替えてもよい。【００１５】
このような構成によれば、特定の波長の蛍光を蛍光検出器で検出することにより総アフラトキシンを良好に同定することができるとともに、蛍光検出器で検出する蛍光の波長を切り替えることにより、別の成分も蛍光検出器からの検出信号に基づいて良好に同定することができる。したがって、液体試料中のより多くの成分の有無を確認することができる。【００１６】
（４）前記分離ステップでは、緩衝液と有機溶媒との混合液を移動相として前記カラムに供給してもよい。【００１７】
このような構成によれば、緩衝液と有機溶媒との混合液を移動相として用いることにより、液体試料がカラムを通過する過程で総アフラトキシン及びデオキシニバレノールを良好に分離することができる。したがって、液体試料中における総アフラトキシン及びデオキシニバレノールの有無をより精度よく確認することができる。【００１８】
（５）前記分離ステップでは、前記混合液における有機溶媒の混合率を時間経過とともに上昇させながら移動相として前記カラムに供給してもよい。【００１９】
このような構成によれば、移動相としてカラムに供給される混合液における有機溶媒の混合率を時間経過とともに上昇させることにより、液体試料がカラムを通過する過程で総アフラトキシン及びデオキシニバレノールをさらに良好に分離することができる。したがって、液体試料中における総アフラトキシン及びデオキシニバレノールの有無をさらに精度よく確認することができる。
【発明の効果】
【００２０】
本発明によれば、液体試料中におけるマイコトキシンの複数成分（総アフラトキシン及びデオキシニバレノール）の有無を１回の分析で確認することができるため、短時間で容易に確認することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明の一実施形態に係る分析方法に用いられる液体クロマトグラフの構成例を示したブロック図である。
【図２】分析中の制御部による処理の一例を示したフローチャートである。
【図３Ａ】実施例において蛍光検出器の検出信号から得られたクロマトグラムである。
【図３Ｂ】実施例においてＰＤＡの検出信号から得られたクロマトグラムである。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
１．液体クロマトグラフの構成
図１は、本発明の一実施形態に係る分析方法に用いられる液体クロマトグラフ１の構成例を示したブロック図である。この液体クロマトグラフ１は、高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）であり、ポンプ２を用いてカラム３内に移動相を供給しながら、カラム３内に液体試料を導入することにより、液体試料がカラム３内を通過する過程で液体試料中の各成分が分離される。
【００２３】
液体クロマトグラフ１には、上述のポンプ２及びカラム３の他、例えば複数の移動相容器４、混合器５、インジェクタ６、フォトダイオードアレイ検出器（ＰＤＡ）７、蛍光検出器８、制御部９及び表示部１０などが備えられている。
【００２４】
複数の移動相容器４には、それぞれ異なる移動相が収容されている。移動相としては、例えば緩衝液及び有機溶媒が用いられる。緩衝液としては、リン酸ナトリウムの水溶液からなるものを例示することができるが、これに限らず、他のリン酸塩を含むものであってもよいし、リン酸塩以外の緩衝作用のある溶液からなるものであってもよい。また、有機溶媒としては、アセトニトリル及びメタノールなどを例示することができるが、これらに限られるものではない。
【００２５】
この例では、リン酸ナトリウム緩衝液、アセトニトリル及びメタノールがそれぞれ収容された３つの移動相容器４が設けられている。そして、これらの移動相容器４に収容されている移動相が、混合器５において設定された混合率で混合され、ポンプ２によりカラム３へと送られる。カラム３は、例えば逆相カラムからなり、ＯＤＳ（オクタデシルシリル）基で表面が修飾されたシリカゲルを固定相とするＣ１８カラムなどを例示することができるが、これに限られるものではない。
【００２６】
インジェクタ６は、例えばマイクロシリンジなどを用いて、ポンプ２からカラム３へと送られる移動相中に分析対象となる液体試料を注入する。液体試料に含まれる各成分は、移動相とともにカラム３を通過する過程で分離され（分離ステップ）、カラム３の下流側に設けられたＰＤＡ７及び蛍光検出器８により検出される（検出ステップ）。このように、本実施形態では、分離された液体試料中の各成分が２つの検出器７，８で検出されるようになっている。
【００２７】
ポンプ２、混合器５、インジェクタ６、ＰＤＡ７及び蛍光検出器８は、それぞれ制御部９に対して電気的に接続されている。制御部９は、設定された分析条件に基づいて、ポンプ２、混合器５及びインジェクタ６の動作を制御する。本実施形態では、混合器５における複数の移動相の混合率を時間経過とともに変化させながら分析を行うことにより、グラジエント分析が行われる。
【００２８】
また、制御部９は、ＰＤＡ７及び蛍光検出器８からの検出信号に基づいて、その検出結果を表示部１０に表示させる。表示部１０は、例えば液晶表示器からなり、作業者は、表示部１０に表示された検出結果に基づいて、液体試料中の各成分を同定することができる（同定ステップ）。
【００２９】
ＰＤＡ７からの検出信号によれば、各波長における吸光度をスペクトルとして得ることができ、そのスペクトルの時間的変化が時間、波長及び吸光度を３軸とする３次元データとして得られる。したがって、目的成分のスペクトルライブラリを予め作成しておけば、そのスペクトルライブラリと分析により得られたスペクトルとの一致度を求めることにより、目的成分を同定することができる。
【００３０】
蛍光検出器８は、特定の励起波長の励起光で液体試料中の成分を励起させることにより蛍光させ、特定の蛍光波長の蛍光を検出する。励起波長及び蛍光波長は切替可能となっており、これらの波長を適切なタイミングで切り替えることにより、励起波長及び蛍光波長が異なる複数の成分を１回の分析で検出することができる。
【００３１】
２．分析中の液体クロマトグラフの動作
図２は、分析中の制御部９による処理の一例を示したフローチャートである。分析中は、予め設定された分析条件に基づいて制御部９が各部の動作を制御することにより、ＰＤＡ７及び蛍光検出器８からの検出信号が同時並行で取得される。
【００３２】
分析中、制御部９は、まず、各移動相容器４内の移動相を初期混合率として予め設定された混合率で混合させ、その混合液をカラム３に対して連続的に供給させる（ステップＳ１０１）。その後、制御部９は、移動相の混合率を切り替えるタイミングであるか否か（ステップＳ１０２）、及び、蛍光検出器８の波長を切り替えるタイミングであるか否か（ステップＳ１０４）を監視する。
【００３３】
そして、移動相の混合率を切り替えるタイミングとして予め設定されたタイミングになった場合には（ステップＳ１０２でＹｅｓ）、制御部９は、そのタイミングにおける混合率として予め設定された混合率に切り替える（ステップＳ１０３）。これにより、その後に移動相の混合率を切り替えるタイミングとなるまでは、切り替えられた混合率で混合された混合液が、カラム３に対して連続的に供給されることとなる。
【００３４】
本実施形態では、制御部９は、複数のタイミングで移動相の混合率を切り替えるようになっている。具体的には、制御部９は、移動相の混合率を切り替えるタイミング（ステップＳ１０２でＹｅｓ）となるたびに混合率を切り替えることにより（ステップＳ１０３）、混合液における有機溶媒の混合率を時間経過とともに上昇させながら移動相としてカラム３に供給させるようになっている。
【００３５】
一方、蛍光検出器８の励起波長及び蛍光波長を切り替えるタイミングとして予め設定されたタイミングになった場合には（ステップＳ１０４でＹｅｓ）、制御部９は、蛍光検出器８の波長（励起波長及び蛍光波長）を予め設定された波長に切り替える（ステップＳ１０５）。これにより、液体試料中の成分が異なる波長の励起光で励起され、その波長に対応する成分が蛍光するとともに、当該蛍光を検出することができるように、蛍光検出器８で検出する蛍光の波長が切り替えられる。
【００３６】
３．液体試料中の各成分の同定
上記のようなグラジエント分析が終了すると（ステップＳ１０６でＹｅｓ）、ＰＤＡ７及び蛍光検出器８からの検出信号に基づいて、検出結果としてのクロマトグラムが表示部１０に表示される。ＰＤＡ７からの検出信号に基づくクロマトグラム、及び、蛍光検出器８からの検出信号に基づくクロマトグラムは、それぞれ個別に表示部１０に表示され、それらのクロマトグラムを用いて作業者が液体試料中の各成分を同定する。
【００３７】
このとき、作業者は、ＰＤＡ７からの検出信号に基づくクロマトグラムを用いて、液体試料中のデオキシニバレノールを同定する。また、作業者は、蛍光検出器８からの検出信号に基づくクロマトグラムを用いて、液体試料中の総アフラトキシンを同定する。
【００３８】
デオキシニバレノールの同定は、ＰＤＡ７からの検出信号に基づく各波長のクロマトグラム、すなわち時間、波長及び吸光度を３軸とする３次元データを用いて行われる。具体的には、各ピークにおける波長と吸光度との関係を表わすスペクトルが、予め作成されている目的成分（デオキシニバレノール）のスペクトルライブラリと比較され、その一致度が求められることにより、求められた一致度に基づいて目的成分のピークであるか否かが判定される。上記スペクトルライブラリには、デオキシニバレノールだけでなく、マイコトキシンに分類される他の各種成分（ニバレノール、パツリンなど）のスペクトルが登録されている。
【００３９】
総アフラトキシンの同定は、蛍光検出器８により検出される特定の蛍光波長におけるピークの有無を判定することにより行われる。具体的には、標準試料から得られた総アフラトキシンの各成分の保持時間と、分析対象となる液体試料から得られた各ピークの保持時間とが比較されることにより、液体試料中における総アフラトキシンの各成分の有無が判定される。
【００４０】
４．作用効果
（１）本実施形態では、ＰＤＡ７及び蛍光検出器８からの検出信号に基づいて、総アフラトキシン及びデオキシニバレノールの同定を１回の分析で行うことができる。総アフラトキシンは、感度が高い蛍光検出器８からの検出信号に基づいて、少ない含有量であっても良好に同定することができる。また、デオキシニバレノールは、総アフラトキシンとは分離して、ＰＤＡ７からの検出信号に基づいて得られたスペクトルを予め作成されたスペクトルライブラリと比較することにより、良好に同定することができる。
【００４１】
これにより、液体試料中におけるマイコトキシンの複数成分（総アフラトキシン及びデオキシニバレノール）の有無を１回の分析で確認することができる。したがって、成分ごとに条件を変更して複数回の分析を行う場合と比較して、液体試料中におけるマイコトキシンの複数成分の有無を短時間で容易に確認することができる。
【００４２】
（２）また、本実施形態では、特定の波長の蛍光を蛍光検出器８で検出することにより総アフラトキシンを良好に同定することができるとともに、蛍光検出器８で検出する蛍光の波長を切り替えることにより（図２のステップＳ１０４及びＳ１０５）、例えばゼアラレノン又はオクラトキシンなどの別の成分も蛍光検出器８からの検出信号に基づいて良好に同定することができる。したがって、液体試料中のより多くの成分の有無を確認することができる。
【００４３】
（３）また、本実施形態では、緩衝液と有機溶媒との混合液を移動相として用いることにより、液体試料がカラム３を通過する過程で総アフラトキシン及びデオキシニバレノールを良好に分離することができる。したがって、液体試料中における総アフラトキシン及びデオキシニバレノールの有無をより精度よく確認することができる。
【００４４】
（４）また、本実施形態では、移動相としてカラム３に供給される混合液における有機溶媒の混合率を時間経過とともに上昇させることにより（図２のステップＳ１０２及びＳ１０３）、液体試料がカラム３を通過する過程で総アフラトキシン及びデオキシニバレノールをさらに良好に分離することができる。したがって、液体試料中における総アフラトキシン及びデオキシニバレノールの有無をさらに精度よく確認することができる。
【００４５】
５．実施例
以下では、上記実施形態に係る液体クロマトグラフ１を用いて、液体試料中におけるマイコトキシンの各成分の有無をスクリーニングした結果について説明する。スクリーニングの対象成分は、アフラトキシンの５成分（Ｂ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２，Ｍ１）、ニバレノール、デオキシニバレノール、オクラトキシン、ゼアラレノン及びパツリンである。
【００４６】
液体クロマトグラフ１としては、ＰＤＡ７を備えた「Ｎｅｘｅｒａ−ｉ  ３Ｄ」（株式会社島津製作所製）を使用し、蛍光検出器８として「ＲＦ−２０Ａｘｓ」（株式会社島津製作所製）を追加した。また、カラム３としては、逆相カラムである「Ｓｈｉｍ−ｐａｃｋ  ＧＩＳＴ」（株式会社島津製作所製）を使用した。カラム３は、固定相がＣ１８であり、長さ５０ｃｍ、内径３．０ｍｍ、充填物粒子径２μｍである。
【００４７】
移動相としては、リン酸ナトリウム緩衝液、アセトニトリル及びメタノールを用いた。リン酸ナトリウム緩衝液は、リン酸の濃度が２０ｍｍｏｌ／Ｌであり、ｐＨ２．５である。カラム３における移動相の流速は１．０ｍＬ／ｍｉｎ、カラム３の温度は５５℃、インジェクタ６からの液体試料の注入量は５μＬである。なお、カラム３の温度は、分析時間の短縮化の観点から、一般的な分析よりも高い温度に設定されており、例えば５０〜８０℃の範囲内で設定されることが好ましい。
【００４８】
グラジエント分析における各移動相の混合率の時間的変化は以下の通りである。
リン酸ナトリウム緩衝液：９０％（０．００−０．５０ｍｉｎ）→７０％（０．５１ｍｉｎ）→６０％（２．６５ｍｉｎ）→５０％（２．６６−５．１０ｍｉｎ）→９０％（５．１１−７．００ｍｉｎ）
アセトニトリル：１０％（０．００−０．５０ｍｉｎ）→１５％（０．５１−２．６５ｍｉｎ）→３５％（２．６６−５．１０ｍｉｎ）→１０％（５．１１−７．００ｍｉｎ）
メタノール：０％（０．００−０．５０ｍｉｎ）→１５％（０．５１ｍｉｎ）→２５％（２．６５ｍｉｎ）→１５％（２．６６−５．１０ｍｉｎ）→０％（５．１１−７．００ｍｉｎ）
【００４９】
ＰＤＡ７において検出される波長は、ニバレノール及びデオキシニバレノールに対応する２２０ｎｍ、及び、パツリンに対応する２７６ｎｍの２チャンネルである。蛍光検出器８においては、アフラトキシンの５成分に対応して３６５ｎｍの励起波長で４５０ｎｍの蛍光波長を検出する期間（０．００−４．２９ｍｉｎ）から、オクラトキシン及びゼアラレノンに対応して３２０ｎｍの励起波長で４６５ｎｍの蛍光波長を検出する期間（４．３０−７．００ｍｉｎ）に切り替えられる。
【００５０】
図３Ａは、実施例において蛍光検出器８の検出信号から得られたクロマトグラムである。図３Ｂは、実施例においてＰＤＡ７の検出信号から得られたクロマトグラムである。これらのクロマトグラムは、１回の分析により同時並行で取得されたものであり、それぞれ異なる目的成分のピークが現れている。
【００５１】
図３Ａのクロマトグラムには、アフラトキシンの５成分（ＡＦＢ１，ＡＦＢ２，ＡＦＧ１，ＡＦＧ２，ＡＦＭ１）、オクラトキシン（ＯＴＡ）及びゼアラレノン（ＺＯＮ）のピークが現れている。このように、蛍光検出器８からの検出信号に基づいて総アフラトキシンを同定することができる。なお、図３Ａのクロマトグラムにおいて、４．３０ｍｉｎのタイミングＴで励起波長及び蛍光波長が切り替えられている。
【００５２】
また、図３Ｂのクロマトグラムには、波長２２０ｎｍにおいてニバレノール（ＮＩＶ）及びデオキシニバレノール（ＤＯＮ）のピークが現れており、波長２７６ｎｍにおいてパツリン（ＰＡＴ）のピークが現れている。このように、ＰＤＡ７からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定することができる。
【００５３】
図３Ａ及び図３Ｂの例では、保持時間の長い成分が蛍光検出器８からの検出信号に基づいて同定され（図３Ａ参照）、保持時間の短い成分が蛍光検出器８以外の検出器（ＰＤＡ７）からの検出信号に基づいて同定される（図３Ｂ参照）。図３Ａ及び図３Ｂの通り、各目的成分が検出されるまでの時間は５〜６分であり、短時間でスクリーニングを行うことができた。
【００５４】
６．変形例
以上の実施形態では、蛍光検出器８からの検出信号に基づいて総アフラトキシンを同定し、ＰＤＡ７からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定するようなマイコトキシンの分析方法について説明した。しかし、このような方法に限らず、例えばＰＤＡ７以外の検出器からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定してもよい。また、ＰＤＡ７及び蛍光検出器８の２つの検出器を用いるような構成に限らず、蛍光検出器８を含む３つ以上の検出器からの検出信号に基づいて総アフラトキシン及びデオキシニバレノールを同定してもよい。さらに、各検出器を配置する順序は、図１に示すような順序に限られるものではない。
【符号の説明】
【００５５】
１    液体クロマトグラフ
２    ポンプ
３    カラム
４    移動相容器
５    混合器
６    インジェクタ
７    ＰＤＡ（フォトダイオードアレイ検出器）
８    蛍光検出器
９    制御部
１０  表示部
【図１】
2017037802.tif 000003
【図２】
2017037802.tif 000004
【図３Ａ】
2017037802.tif 000005
【図３Ｂ】
2017037802.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】平成30年1月15日(2018.1.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体試料に含まれる各成分をカラムで分離させる分離ステップと、
前記分離ステップにより分離された各成分を同一分析条件で少なくとも２つの検出器で検出する検出ステップと、
前記検出ステップによる検出結果に基づいて各成分を同定する同定ステップとを備え、
前記少なくとも２つの検出器には、蛍光検出器が含まれており、
前記同定ステップでは、前記同一分析条件による１回の前記検出ステップの結果に基づいて、前記蛍光検出器からの検出信号に基づいて総アフラトキシンを同定するとともに、前記蛍光検出器以外の検出器からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定することを特徴とするマイコトキシンの分析方法。
【請求項２】
前記少なくとも２つの検出器には、フォトダイオードアレイ検出器が含まれており、
前記同定ステップでは、前記フォトダイオードアレイ検出器からの検出信号に基づいてデオキシニバレノールを同定することを特徴とする請求項１に記載のマイコトキシンの分析方法。
【請求項３】
前記検出ステップでは、前記蛍光検出器で検出する蛍光の波長を予め設定されたタイミングで切り替えることを特徴とする請求項１に記載のマイコトキシンの分析方法。
【請求項４】
前記分離ステップでは、緩衝液と有機溶媒との混合液を移動相として前記カラムに供給することを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載のマイコトキシンの分析方法。
【請求項５】
前記分離ステップでは、前記混合液における有機溶媒の混合率を時間経過とともに上昇させながら移動相として前記カラムに供給することを特徴とする請求項４に記載のマイコトキシンの分析方法。
【国際調査報告】
2017037802.tif 000007
2017037802.tif 000008
2017037802.tif 000009
2017037802.tif 000010