(57)【要約】      （修正有）【課題】クロマトグラフィーシステムにおいて効率的に且つ効果的にサンプルを分析する方法およびサンプル画分を収集する方法を提供する。【解決手段】クロマトグラフィーの実行中に、クロマトグラフィーシステム４０でのサンプル流れ内における１つまたはそれ以上のサンプル要素を検出および収集する方法であって、少なくとも１つの蒸発性粒子検出器を含む少なくとも１つの破壊式検出器１３から、前記クロマトグラフィーの実行中に第１信号を生成するステップと、少なくとも１つの非破壊式検出器１６から、前記クロマトグラフィーの実行中に第２信号を生成するステップと、を有し、前記方法は、前記クロマトグラフィーの実行中の前記信号の変化に応じて、前記クロマトグラフィーの実行中に、画分収集器内に前記流れから前記１つまたはそれ以上のサンプル要素を収集するステップを有する、方法。【選択図】図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステム内の２つまたはそれ以上の検出器から複合信号を発生させるステップを有し、前記複合信号は各検出器からの検出応答成分を有し、
（ｂ）前記方法は、前記複合信号の変化に応じて、画分収集器内に新しいサンプル画分を収集するステップを有する、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、前記複合信号を発生させるステップは、
（ａ）（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜（すなわち、与えられた検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜の変化（すなわち、与えられた検出器応答の２次微分）、または（ｉｖ）各検出器からの（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を数学的に相関させるステップを有する、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、前記複合信号は、（ｉ）与えられた時間における各検出器の検出器応答時間の積、（ｉｉ）与えられた時間における検出器応答の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有する、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法であって、前記方法はさらに、
（ａ）２つまたはそれ以上の光学波長でサンプルを観察し、２つまたはそれ以上の光学波長における２つまたはそれ以上の検出器応答を生成するために、少なくとも１つの検出器を用いるステップを有し、前記複合信号は、２つまたはそれ以上の光学波長における２つまたはそれ以上の検出器応答からの、検出応答成分を有する、方法。
【請求項５】
請求項４に記載の方法であって、２つまたはそれ以上の光学波長を観察する少なくとも１つの検出器は、少なくとも１つのＵＶ検出器を有し、前記複合信号は、（ｉ）前記ＵＶ検出器の２つまたはそれ以上の光学波長における２つまたはそれ以上の検出器応答からの検出応答成分、および（ｉｉ）蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）からの検出応答成分、を有する、方法。
【請求項６】
請求項１に記載の方法であって、複合信号は、（ｉ）少なくとも１つのＵＶ検出器からの検出応答成分、および（ｉｉ）少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）からの検出応答成分、を有する方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法であって、さらに
（ａ）少なくとも１つの検出器と流体連通するように位置決めされる、（ｉ）スプリッタポンプ、（ｉｉ）シャトルバルブ、または（ｉｉｉ）（ｉ）と（ｉｉ）との両方、を介して、液体クロマトグラフィーシステム内の前記少なくとも１つの検出器へ流体流れを能動的に制御するステップ、を有する方法。
【請求項８】
請求項１に記載の方法であって、さらに
少なくとも１つの検出器と流体連通するように位置決めされるシャトルバルブを介して、液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するステップ、を有する方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、前記少なくとも１つの検出器は、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）を有する、方法。
【請求項１０】
請求項８に記載の方法であって、さらに、
（ａ）前記シャトルバルブから前記少なくとも１つの検出器へサンプルアリコットを輸送するために、空気を用いるステップを有する、方法。
【請求項１１】
請求項８に記載の方法であって、前記シャトルバルブは、前記少なくとも１つの検出器へ輸送するために、１０秒ごとに少なくとも１サンプルアリコットのサンプリング周波数で、サンプルからサンプルアリコットを取り除く、方法。
【請求項１２】
サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）２つまたはそれ以上の光学波長でサンプルを観察するために、少なくとも１つの検出器を用いるステップと、
（ｂ）（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）前記第１波長および前記第２波長における検出器応答により表現される複合応答の変化、に応じて、画分収集器に新しいサンプル画分を収集するステップと、を有する、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、さらに、
（ａ）（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、および（ｉｉｉ）前記第１波長および前記第２波長における検出器応答により表現される複合応答の変化、に応じて、前記画分収集器に新しい画分を収集するステップ、を有する、方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の方法であって、さらに、
（ａ）吸収スペクトルの範囲にわたってｎ個の波長でサンプルを観察するために、少なくとも１つの検出器内のｎ個のセンサを用いるステップを有し、ｎは１より大きい整数であり、
（ｂ）前記方法は、（ｉ）前記ｎ個のセンサからのｎ個の検出器応答のうちのいずれか１つの変化、または（ｉｉ）前記ｎ個の検出器応答により表現される複合応答の変化、に応じて、前記サンプル画分収集器内に新しいサンプル画分を収集するステップを、有する、方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、前記吸収スペクトルの範囲は、紫外（ＵＶ）領域である、方法。
【請求項１６】
請求項１４に記載の方法であって、前記システムは、ｎ個のセンサだけを有するまたは１つ以上の追加の検出器と組み合わされた、単一のＵＶ検出器を有する、方法。
【請求項１７】
請求項１４に記載の方法であって、さらに、
（ａ）少なくとも１つの検出器と流体連通するように位置決めされる、（ｉ）スプリッタポンプ、（ｉｉ）シャトルバルブ、または（ｉｉｉ）（ｉ）および（ｉｉ）の両方、を介して、液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器へ流体流れを能動的に制御するステップ、を有する、方法。
【請求項１８】
請求項１４に記載の方法であって、さらに、
（ａ）少なくとも１つの検出器に流体連通するように位置決めされるスプリッタポンプを介して、液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器へ流体流れを能動的に制御するステップ、を有する、方法。
【請求項１９】
サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）画分収集器、および（ｉｉｉ）第１
検出器、を有する液体クロマトグラフィーシステムを提供するステップと、
（ｂ）（ｉｖ）前記第１検出器と流体連通するように位置決めされる、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを介して、前記第１検出器への流体流れを能動的に制御するステップと、を有する、方法。
【請求項２０】
請求項１９に記載の方法であって、前記第１検出器へ流体流れを能動的に制御するステップは、
（ａ）（ｉ）前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブの１つまたはそれ以上の流量または圧力の設定を変更し、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行うために、前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブに駆動信号を送るステップ、を有する、方法。
【請求項２１】
請求項２０に記載の方法であって、１つまたはそれ以上の流量または圧力の設定は、（ｉ）バルブ位置、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力、（ｉｉｉ）バルブへの空気圧、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有する、方法。
【請求項２２】
請求項２０に記載の方法であって、前記駆動信号は、電気信号、気体信号、ディジタル信号、または無線信号を有する、方法。
【請求項２３】
請求項１９に記載の方法であって、前記第１検出器への流体流れを能動的に制御するステップは、前記スプリッタポンプを介して、前記第１検出器へ流体をポンプ輸送するステップを有する、方法。
【請求項２４】
請求項１９に記載の方法であって、前記第１検出器への流体流れを能動的に制御するステップは、前記スプリッタポンプを介して、前記第１検出器から流体を汲み上げるステップを有する、方法。
【請求項２５】
請求項１９に記載の方法であって、前記第１検出器への流体流れを能動的に制御するステップは、シャトルバルブを介して前記第１検出器へ１つまたはそれ以上のサンプルアリコットを提供するステップを有する、方法。
【請求項２６】
請求項１９に記載の方法であって、前記液体クロマトグラフィーシステムはさらに、（ｖ）第２検出器を有し、前記第１検出器への流体流れを能動的に制御するステップは、前記第１検出器と前記第２検出器との間で流体流れを分割するステップを有する、方法。
【請求項２７】
請求項１９に記載の方法であって、前記液体クロマトグラフィーシステムは、さらに、（ｖ）第２検出器を有し、前記方法はさらに、
（ａ）前記第検出器がサンプル内の成分を検出することに応じて、前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブに、前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブが前記第１検出器への流体流れを開始または停止させるように指示する信号を送るステップ、を有する、方法。
【請求項２８】
請求項１９に記載の方法であって、前記液体クロマトグラフィーシステムはさらに（ｖ）第２検出器、および（ｖｉ）第２スプリッタポンプまたは第２シャトルバルブを有し、前記方法はさらに、
（ａ）前記第２スプリッタポンプまたは前記第２シャトルバルブを介して、前記第２検出器への流体流れを能動的に制御するステップ、を有する、方法。
【請求項２９】
請求項１９に記載の方法であって、さらに、
（ａ）前記第１検出器からの１つまたはそれ以上の信号に応じて、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するステップを有する、方法。
【請求項３０】
請求項２６に記載の方法であって、さらに、
（ａ）（ｉ）前記第１検出器、（ｉｉ）前記第２検出器、または（ｉｉｉ）前記第１検出器および前記第２検出器の両方、からの１つまたはそれ以上の検出器信号に応じて、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するステップ、を有する方法。
【請求項３１】
請求項２６に記載の方法であって、前記液体クロマトグラフィーシステムは、１つまたはそれ以上の非破壊式検出器を備えて破壊式の検出器を備えない、非破壊式システムである、方法。
【請求項３２】
請求項１９に記載の方法であって、さらに、
（ａ）少なくとも１つの検出器から検出器信号を発生させるステップを有し、前記検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち、検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち、検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）少なくとも（ｉ）または（ｉｉ）を含む（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、に応答して発生させられる、方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法であって、前記少なくとも１つの検出器から検出器信号を発生させるステップは、
（ａ）（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の実際の変化を、検出器応答において起こり得るノイズから識別するために、（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、をローパス数値フィルタ処理するステップを有する、方法。
【請求項３４】
請求項２６に記載の方法であって、さらに、
（ａ）各検出器からの検出器応答成分を有する複合信号を発生させるステップと、
（ｂ）前記複合信号に応じて、新しいサンプル画分を収集するステップと、を有する、方法。
【請求項３５】
請求項３４に記載の方法であって、前記複合信号を発生させるステップは、
（ａ）（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜（すなわち、与えられた検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数としてい与えられた検出器応答の傾斜の変化（すなわち、与えられた検出器応答の２次微分）、または（ｉｉｉ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を数学的に相関させるステップを有する、方法。
【請求項３６】
請求項３５に記載の方法であって、前記複合信号は、（ｉ）与えられた時間における各検出器の検出器応答値の積、（ｉｉ）与えられた時間における検出器応答の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における検出器応答の２次微分の積、（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有する、方法。
【請求項３７】
請求項１９に記載の方法であって、前記液体クロマトグラフィーシステムは、（ｉ）検出器応答の検出と（ｉｉ）前記検出応答から発生させられる信号に基づいてサンプル画分を収集するステップとの間の最大時間遅れは、約２．０秒より小さい、方法。
【請求項３８】
サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）システム内に破壊式検出器を備えない２つまたはそれ以上の非破壊式検出器、及び（ｉｉｉ）前記２つまたはそれ以上の非破壊式検出器と流体連通する画分収集器、を有する、非破壊式システムの液体クロマトグラフィーシステムを提供するステップと、
（ｂ）前記２つまたはそれ以上の非破壊式検出器からの検出器信号に応じて、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するステップと、を有する方法。
【請求項３９】
請求項３８に記載の方法であて、さらに、
（ａ）各検出器からの検出応答成分を有する複合信号を発生させるステップと、
（ｂ）前記複合信号の変化に応じて、新しいサンプル画分を収集するステップと、を有する方法。
【請求項４０】
請求項３８に記載の方法であて、さらに、
（ａ）少なくとも１つの非破壊式検出器と流体連通するように位置決めされるスプリッタポンプを介して、少なくとも１つの非破壊式検出器への流体流れを能動的に制御するステップ、を有する方法。
【請求項４１】
サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器から検出器信号を発生させるステップを有し、前記検出器信号は、（ｉ）時間の関数と指定の検出器応答の傾斜（すなわち検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を含む、（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、に応じて発生させられ、
（ｂ）前記方法は、前記少なくとも１つの検出器からの少なくとも１つの検出器信号に応じて、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するステップ、を有する方法。
【請求項４２】
請求項４１に記載の方法であって、前記少なくとも１つの検出器から検出器信号を発生させるステップは、さらに、
（ａ）（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の実際の変化を、検出器応答中の発生しうるノイズから識別するために、（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を数値フィルタリング処理するステップ、を有する方法。
【請求項４３】
請求項４１に記載の方法であって、前記液体クロマトグラフィーシステムは、２つまたはそれ以上の検出器を有する、方法。
【請求項４４】
請求項４３に記載の方法であって、さらに、
（ａ）各検出器からの検出応答成分を含む複合信号を発生させるステップと、
（ｂ）前記複合信号の変化に応じて、新しいサンプル画分を収集するステップと、を有する方法。
【請求項４５】
請求項４１に記載の方法であって、さらに、
（ａ）少なくとも１つの検出器と流体連通するように位置決めされる、（ｉ）スプリッタポンプおよび（ｉｉ）シャトルバルブの少なくとも一方を介して、液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するステップを有
する、方法。
【請求項４６】
サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステムの画分収集器内にサンプル画分を収集するステップを有し、前記画分収集器は、少なくとも１つの検出器からの１つまたはそれ以上の信号を認識し、受信し、および処理して、前記１つまたはそれ以上の信号に基づいて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するように構成される、方法。
【請求項４７】
請求項１乃至４６のいずれか一項に記載の方法であって、液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル計、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、およびこれらの任意の組み合わせ、から選択される少なくとも１つの検出器を有する、方法。
【請求項４８】
請求項１乃至４７のいずれか一項に記載の方法のステップの１つまたはそれ以上を実行するための、コンピュータが実行可能な命令が格納された、コンピュータで読取り可能な媒体。
【請求項４９】
請求項１乃至４７のいずれか一項に記載の方法を用いてサンプルを分析することができる装置。
【請求項５０】
請求項１乃至４７のいずれか一項に記載の方法を用いるサンプルの分析に貢献することができる、装置または装置コンポーネント。
【請求項５１】
請求項４８に記載のコンピュータで読取り可能な媒体を用いて、サンプルの分析に貢献することができる装置または装置コンポーネント。
【請求項５２】
サンプルを分析する装置であって、前記装置は、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステム内の２つまたはそれ以上の検出器から複合信号を発生させるように構成されたシステムハードウェアを有し、前記複合信号は、各検出器からの検出応答成分を有し、
（ｂ）前記装置は、前記複合信号の変化に応じて、新しいサンプル画分を収集するように構成される画分収集器、を有する、装置。
【請求項５３】
請求項５２に記載の装置であって、前記複合信号は、（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜（すなわち与えられた検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜の変化（すなわち与えられた検出器応答の２次微分）、または（ｉｖ）各検出器からの（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の間の数学的な相関を有する、装置。
【請求項５４】
請求項５２に記載の装置であって、前記複合信号は、（ｉ）与えられた時間における各検出器の検出器応答値の積、（ｉｉ）与えられた時間における検出器応答の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有する、装置。
【請求項５５】
請求項５２に記載の装置であって、前記装置は、２つまたはそれ以上の波長でサンプルを観察するように構成される２つまたはそれ以上の検出器と、（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）前記第
１波長および前記第２波長における検出器応答により表現される複合応答の変化、に応じて前記サンプル画分収集器が新しいサンプル画分を収集することを可能にするシステムハードウェハと、を有する方法。
【請求項５６】
請求項５２に記載の装置であって、前記装置はさらに、少なくとも１つの検出器に流体連通するように位置決めされ且つ少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御する、スプリッタポンプまたはシャトルバルブ、を有する、装置。
【請求項５７】
請求項５２に記載の装置であって、前記装置はさらに、少なくとも１つの検出器に流体連通するように位置決めされ且つ少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御する、シャトルバルブ、を有する、装置。
【請求項５８】
請求項５７に記載の装置であって、前記少なくとも１つの検出器は、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）を有する、装置。
【請求項５９】
請求項５２に記載の装置であって、前記装置はさらに、ガスまたは液体供給部を有し、前記ガスまたは液体供給部は、シャトルバルブから少なくとも１つの検出器へサンプルアリコットを輸送するように構成される、装置。
【請求項６０】
請求項５９に記載の装置であって、前記シャトルバルブは、１０秒毎に少なくとも１サンプルのサンプリング周波数で、少なくとも１つの検出器へ輸送するために、サンプルからサンプルアリコットを取り除くようにプログラムされる、装置。
【請求項６１】
サンプルを分析する装置であって、前記装置は、
（ａ）２つまたはそれ以上の光学波長でサンプルを観察するように構成される少なくとも１つの検出器と、
（ｂ）（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）前記第１波長および前記第２波長で表現される複合応答の変化、に応じて、新しいサンプルを収集するように構成されるサンプル画分収集器と、を有する装置。
【請求項６２】
請求項６１に記載の装置であって、前記画分収集器は、（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、および（ｉｉｉ）前記第１波長および前記第２波長で表現される複合応答の変化、に応じて、新しいサンプルを収集するように構成される、装置。
【請求項６３】
請求項６１に記載の装置であって、前記少なくとも１つの検出器は、吸収スペクトルの範囲にわたるｎ個の波長でサンプルを観察するように構成されるｎ個のセンサを有し、ここでｎは１より大きい整数であり、前記画分収集器は、（ｉ）前記ｎ個のセンサからの検出器応答の任意の１つの変化、または（ｉｉ）ｎ個の検出器応答により表現される複合応答の変化、に応じて、新しいサンプルを収集するように構成される、装置。
【請求項６４】
請求項６３に記載の装置であって、前記吸収スペクトルの範囲は紫外（ＵＶ）領域である、装置。
【請求項６５】
請求項６３に記載の装置であって、前記システムは、ｎ個のセンサだけを備えるまたは１つまたはそれ以上の追加の検出器との組み合わせた、単一のＵＶ検出器を有する、装置。
【請求項６６】
請求項６１に記載の装置であって、さらに、液体クロマトグラフィーシステム内の少な
くとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するために、（ｉ）スプリッタポンプおよび（ｉｉ）シャトルバルブの少なくとも一方を有する、装置。
【請求項６７】
請求項６６に記載の装置であって、液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するために、少なくとも１つのシャトルバルブを有する、装置。
【請求項６８】
請求項６７に記載の装置であって、前記少なくとも１つの検出器は蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）を有する、装置。
【請求項６９】
サンプルを分析するための装置であって、前記装置は、
（ａ）クロマトグラフィーカラムと、
（ｂ）画分収集器と、
（ｃ）第１検出器と、
（ｄ）前記第１検出器と流体連通するように位置決めされるスプリッタポンプまたはシャトルバルブと、を有し、前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブは、前記第１検出器への流体流れを能動的に制御するように構成される、装置。
【請求項７０】
請求項６９に記載の装置であって、さらに、前記第１検出器が前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブに駆動信号を送り、（ｉ）前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブを駆動、（ｉｉ）前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブの１つまたはそれ以上の流量または圧力の設定を変更し、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行う、ことを可能にする、システムハードウェアを有する、装置。
【請求項７１】
請求項７０に記載の装置であって、前記１つまたはそれ以上の流量または圧力の設定は、（ｉ）バルブ位置、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力、（ｉｉｉ）バルブへの空気圧力、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有する、装置。
【請求項７２】
請求項７０に記載の装置であって、駆動信号は、電気信号、気体信号、ディジタル信号、または無線信号、を有する、装置。
【請求項７３】
請求項６９に記載の装置であって、前記スプリッタポンプは、Ｔ部と第１検出器との間に位置決めされる、装置。
【請求項７４】
請求項６９に記載の装置であって、前記第１検出器は、Ｔ部と前記スプリッタポンプとの間に位置決めされる、装置。
【請求項７５】
請求項６９に記載の装置であって、さらに、
（ｅ）第２検出器、を有する装置。
【請求項７６】
請求項７５に記載の装置であって、前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブは、前記第１検出器と前記第２検出器との間で流体流れの容積を分割する、装置。
【請求項７７】
請求項７５に記載の装置であって、サンプル中の検出成分に応じて、第２検出器は、前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブに、前記スプリッタポンプまたは前記シャトルバルブが前記第１検出器への流体流れを開始または停止させる信号を送るように構成される、装置。
【請求項７８】
請求項６９に記載の装置であって、さらに、
（ｆ）第２Ｔ部の第２出口に流体連通する第２検出器と、
（ｇ）（ｖｉ）第２スプリッタポンプまたは第２シャトルバルブと、を有し、前記第２スプリッタポンプまたは前記第２シャトルバルブは、前記第２検出器への流体流れを能動的に制御する、装置。
【請求項７９】
請求項６９に記載の装置であって、画分収集器は、第１検出器からの１つまたはそれ以上の信号に応じて、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するように構成される、装置。
【請求項８０】
請求項７５に記載の装置であって、画分収集器は、（ｉ）第１検出器、（ｉｉ）第２検出器、または（ｉｉｉ）第１検出器と第２検出器との両方、からの１つまたはそれ以上の検出器信号に応じて、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集する、装置。
【請求項８１】
請求項７５に記載の装置であって、前記装置は、１つまたはそれ以上の非破壊式検出器を備えシステム内に破壊式検出器を備えない、非破壊式システムである、装置。
【請求項８２】
請求項６９に記載の装置であって、さらに、システムハードウェアを有し、前記システムハードウェアは、少なくとも１つの検出器からの検出器信号の発生を可能にし、前記検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち、検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数と指定の検出器応答の傾斜の変化（すなわち、検出応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を有する（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、に応じて生成される、装置。
【請求項８３】
請求項８２に記載の装置であって、前記システムハードウェハは、（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜の変化、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の実際の変化を、検出器応答内の存在し得るノイズから識別するために、（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜の変化、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、をローパス数値フィルタリング処理することを可能にする、装置。
【請求項８４】
請求項７５に記載の装置であって、さらにシステムハードウェアは、各検出器からの検出器応答成分を有する複合信号の発生を可能にする、前記システムハードウェアは、前記複合信号の変化に応じて、画分収集器に新しいサンプル画分を収集させる命令を送るように構成される、装置。
【請求項８５】
請求項８５に記載の装置であって、前記複合信号は、（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜（すなわち与えられた検出応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として与えられた検出応答の傾斜の変化（すなわち与えられた検出応答の２次微分）、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、との間に数学的な相関を有する、装置。
【請求項８６】
請求項８４に記載の装置であって、前記複合信号は、（ｉ）与えられた時間における各検出器の検出器応答値の積、（ｉｉ）与えられた時間における検出器応答の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有する装置。
【請求項８７】
請求項６９に記載の装置であって、前記装置は、２つまたはそれ以上の光学波長でサン
プルを観察するように構成される少なくとも１つの検出器を有し、前記装置は、システムハードウェアを有し、前記システムハードウェアは、（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出応答の変化、または（ｉｉｉ）前記第１波長および前記第２波長により表現される複合検出応答の変化、に応じて、前記画分収集器が、新しいサンプル画分を収集することを可能にする、装置。
【請求項８８】
請求項６９に記載の装置であって、前記装置は、吸収スペクトルの範囲にわたってｍ個の波長でサンプルを観察するように構成されるｎ個のセンサを備える単一の検出器を有し、ｎは１より大きい整数であり、前記装置は、前記画分収集器が（ｉ）ｎ個のＵＶ波長におけるｎ個の検出器応答の任意の１つの変化、（ｉｉ）ｎ個の検出器応答により表現される複合信号の変化、に応じて新しいサンプル画分を収集することができるようにするシステムハードウェアを有する、装置。
【請求項８９】
請求項６９に記載の装置であって、前記画分収集器は、少なくとも１つの検出器からの１つまたはそれ以上の信号を認識し、受信し、処理して、前記１つまたはそれ以上の信号に基づいて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するように構成される、装置。
【請求項９０】
請求項７０に記載の装置であって、前記装置は、（ｉ）検出器応答の検出と（ｉｉ）前記検出器応答から生成される信号に基づくサンプル画分の収集のステップとの間の最大時間遅れが、約２．０秒未満である、装置。
【請求項９１】
サンプルを分析するための装置であって、前記装置は、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器からの検出器信号の生成を可能にするシステムハードウェアを有し、前記検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち、検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち、検出器応答の２次微分）、または（ｉｉｉ）少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を含む（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、に応じて、発生させられる、装置。
【請求項９２】
請求項９１に記載の装置であて、前記システムハードウェアは、（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意選択で、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を前記検出器応答の存在し得るノイズから識別するために、（ｉ）時間に関する傾斜データ、（ｉｉ）時間に関する傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意選択で、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、をローパス数値フィルタリング処理をする、装置。
【請求項９３】
請求項９１に記載の装置であって、前記装置はさらに、少なくとも１つの検出器からの検出器信号に応じて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するように構成される画分収集器を有する、装置。
【請求項９４】
請求項９１に記載の装置であって、前記装置は２つまたはそれ以上の検出器を有する、装置。
【請求項９５】
請求項９４に記載の装置であって、前記システムハードウェアは、各検出器からの検出器応答を有する複合信号を生成することができる、装置。
【請求項９６】
請求項９５に記載の装置であって、前記複合信号は、（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜（すなわち、与えられた検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜の変化（すなわち、与え
られた検出器応答の２次微分）、または（ｉｖ）各検出器からの（ｉ）から（ｉｉｉ）までに任意の組み合わせ、の間に数学的な相関がある、装置。
【請求項９７】
請求項９５に記載の装置であって、前記複合信号は、（ｉ）与えられた時間における各検出器の検出器応答値の積、（ｉｉ）与えられた時間における検出器応答値の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有する、装置。
【請求項９８】
請求項９５に記載の装置であって、前記装置はさらに、前記複合信号の変化におうじて新しいサンプル画分を収集する画分収集器を有する、装置。
【請求項９９】
請求項９１に記載の装置であって、前記装置は、（ｉ）クロマトグラフィーカラムと、（ｉｉ）２つまたはそれ以上の非破壊式検出器とを有し、前記装置は、システム内に破壊式検出器を含まず、前記装置は、（ｉｉｉ）２つまたはそれ以上の非破壊式検出器と流体連通する画分収集器を有する、装置。
【請求項１００】
請求項９４に記載の装置であって、前記装置は、少なくとも１つの検出器と流体連通するように位置決めされ、且つ、少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御する、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを有する、装置。
【請求項１０１】
サンプルを分析するための装置であって、前記装置は、
（ａ）液体クロマトグラフィーシステム内の画分収集器を有し、前記画分収集器は、少なくとも１つの検出器からの１つまたはそれ以上の信号を認識し、受信し、処理することができ、また、１つまたはそれ以上の信号に基づいて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するように構成される、装置。
【請求項１０２】
請求項５２乃至１０１のいずれか一項に記載の装置であって、前記装置は、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル計（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器（ＣＤＤ）、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、またはこれらの任意の組み合わせ、から選択される少なくとも１つの検出器を有する、装置。
【請求項１０３】
クロマトグラフィーを用いてサンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）少なくとも１つの非発色性の検出対象物質を有するサンプルを観察するための少なくとも１つの検出器を用いるステップと、
（ｂ）前記非発色性物質の検出器応答の変化に応じて、新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップと、を有する方法。
【請求項１０４】
請求項１０３に記載の方法であって、前記サンプルは非発色性の可動フェーズを有する、方法。
【請求項１０５】
クロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析するための装置であって、前記装置は、
（ａ）サンプル中の発色性物質および非発色性物質を検出することができる少なくとも１つの検出器と、
（ｂ）前記非発色性物質の検出器応答の変化に応答することができる画分収集器と、を有する装置。
【請求項１０６】
請求項１０５に記載の装置であって、前記サンプルは非発色性の可動フェーズを有する、装置。
【請求項１０７】
クロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）第１流体を提供するステップと、
（ｂ）前記第１流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなく、前記第１流体から流体のアリコットサンプルを取り除くためにシャトルバルブを用いるステップと、
（ｃ）流体の前記アリコットサンプルを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと、
（ｄ）検出器応答の変化に応じて、前記第１流体からの新しいサンプル画分を画分収集器に収集するステップと、を有する方法。
【請求項１０８】
請求項１０７に記載の方法であって、前記シャトルバルブを通る前記第１流体の流れは実質的に層流である、方法。
【請求項１０９】
請求項１０７に記載の方法であって、前記シャトルバルブを通る前記第１流体の圧力は、実質的に増加せず、または実質的に一定である、方法。
【請求項１１０】
請求項１０７に記載の方法であって、前記方法はさらに、流体のアリコットサンプルを前記検出器へ運ぶ第２流体を有する、方法。
【請求項１１１】
請求項１０７に記載の方法であって、前記シャトルバルブを通る前記第２流体の流れは実施的に層流である、方法。
【請求項１１２】
請求項１０７に記載の方法であって、前記シャトルバルブを通る前記第２流体の圧力は、実質的に増加せず、または実質的に一定である、方法。
【請求項１１３】
クロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析するための装置であって、前記装置は、
（ａ）第１流体通路と、
（ｂ）流体のサンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器と、
（ｃ）前記第１流体通路を通る流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなく、前記第１流体流れ通路から前記検出器へアリコットを輸送するシャトルバルブと、を有する装置。
【請求項１１４】
請求項１１３に記載の装置であって、前記シャトルバルブを通る前記第１流体通路の少なくとも一部は、実質的に線形または真っ直ぐである、装置。
【請求項１１５】
請求項１１３に記載の装置であって、前記第１流体通路を通る流体の圧力は、実質的に増加しない、または実質的に一定である、装置。
【請求項１１６】
請求項１１３に記載の装置であって、前記装置はさらに、前記検出器へ流体のアリコットサンプルを運ぶ第２流体通路を有する、装置。
【請求項１１７】
請求項１１６に記載の装置であって、前記シャトルバルブを通る前記第２流体通路の少なくとも一部は、実質的に線形または真っ直ぐである、装置。
【請求項１１８】
請求項１１６に記載の装置であって、前記第２流体通路を通る流体の圧力は、実質的に増加しない、または実質的に一定である、装置。
【請求項１１９】
請求項１１３に記載の装置であって、前記装置はアリコットディンプルを有し、前記第１流体通がアリコットディンプルに実質的に平行である、装置。
【請求項１２０】
クロマトグラフィーを用いた流体サンプルの分析のための装置であって、前記装置は、
（ａ）第１流体通路と、
（ｂ）第２流体通路と、
（ｃ）前記サンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器と、
（ｄ）シャトルバルブを通る連続な第２流体通路を維持しつつ、前記第１流体通路から前記第２流体通路へアリコットサンプルを輸送するシャトルバルブと、を有する装置。
【請求項１２１】
請求項１２０に記載の装置であって、前記シャトルバルブを通る前記第１流体通路内のおよび／または前記第２流体通路内の圧力は、実質的に増加せずおよび／または実質的に一定である、装置。
【請求項１２２】
請求項１２０に記載の装置であって、前記装置はアリコットディンプルを有し、前記第１流体通路は実質的に前記アリコットディンプルに平行である、装置。
【請求項１２３】
クロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）クロマトグラフィーカラムからの流出物の第１流体を提供するステップと、
（ｂ）サンプルを少なくとも１つの検出器へ運ぶための第２流体を提供するステップと、
（ｃ）シャトルバルブを通る第２流体の連続な流れ通路を維持しつつ、前記第１流体から前記第２流体へアリコットサンプルを取り除くためにシャトルバルブを用いるステップと、
（ｄ）前記アリコットサンプルを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと、
（ｅ）検出器応答の変化に応じて、前記第１流体から新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップと、を有する方法。
【請求項１２４】
請求項１２３に記載の方法であって、前記第１流体からアリコットサンプルが取り除かれて前記第２流体へ輸送されるときに、前記シャトルバルブを通る前記第１流体の連続な流れ通路が維持される、方法。
【請求項１２５】
請求項１２３に記載の方法であって、アリコットサンプルが第１流体から取り除かれて前記第２流体へ輸送されるときに、前記第１流体および前記第２流体の連続な流れ通路が維持される、方法。
【請求項１２６】
クロマトグラフィーを用いた流体サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）サンプルを含む流れを提供するステップと
（ｂ）一般的なキャリア流体を用いて前記流れからサンプルのアリコットを取り除くステップと、
（ｃ）前記一般的なキャリア流体中のアリコとを分析する少なくとも１つの検出器を用いるステップと、
（ｄ）前記一般的なキャリア流体は、有機溶媒および水に混和でき、揮発性でなく、また、非発色性である、ガスまたは液体を有する、方法。
【請求項１２７】
請求項１２６に記載の方法であって、前記キャリア流体は、イソプロピルアルコール、アセトン、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、イソブタノール、テトラヒドロフラン、またはこれらの混合物、を含む、方法。
【請求項１２８】
請求項１２６に記載の方法であって、前記キャリア流体はイソプロピルアルコールを有する、方法。
【請求項１２９】
フラッシュクロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析するための装置であって、前記装置は、
（ａ）サンプル内の個別の物質を検出することができる蒸発性粒子検出器と、
（ｂ）検出された物質の検出器応答の変化に応答することができる画分収集器と、を有し、
（ｃ）前記蒸発性粒子検出器は、前記装置中の唯一の検出器である、装置。
【請求項１３０】
請求項１２９に記載の装置であって、前記蒸発性粒子検出器は、化学組成、化学構造、分子量、またはこれらの組み合わせを検出することができる、装置。
【請求項１３１】
請求項１２９に記載の装置であって、前記蒸発性粒子検出器は、ＥＬＳＤ、ＣＮＬＳＤ、または質量スペクトル計を有する、装置。
【請求項１３２】
フラッシュクロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析する方法であって、前記方法は、
（ａ）サンプルを観察するための、個別の物質を検出することができる蒸発性粒子検出器を用いるステップと、
（ｂ）物質の検出器応答の変化に応じて、新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップと、を有し、
（ｃ）前記蒸発性粒子検出器は、サンプルを分析するために用いられる唯一の検出器である、方法。
【請求項１３３】
請求項１３２に記載の装置であって、前記蒸発性粒子検出器は、化学組成、化学構造、分子量、またはこれらの組み合わせを検出することができる、方法。
【請求項１３４】
請求項１３２に記載の装置であって、前記蒸発性粒子検出器は、ＥＬＳＤ、ＣＮＬＳＤ、または質量スペクトル計を有する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロマトグラフィーシステムにおいて、サンプルの画分を収集し、サンプルを分析するための方法および装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
本技術分野で、クロマトグラフィーシステムにおいて効率的に且つ効果的にサンプルを分析する方法およびサンプル画分を収集する方法へのニーズがある。また、本技術分野において、効果的にサンプルを分析しサンプル画分を収集することができる装置へのニーズがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、クロマトグラフィーシステムにおいて効率的に且つ効果的にサンプルを分析する方法およびサンプル画分を収集する方法を提供し、また、効果的にサンプルを分析しサンプル画分を収集することができる装置を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、サンプルを分析する方法およびクロマトグラフィーシステムにおいてサンプル画分を収集するための方法に関する。開示される方法は、サンプルを分析する公知の方法に優る多くの利点を提供する。たとえば、本発明の開示される方法は、少なくとも１つの検出器を通る流体流れを能動的に制御するために、プロセス変数（たとえば、流れ制限、全流量、温度、および／または溶媒組成）が少なくとも１つの検出器を通る流体流れに悪影響を与えないように、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを用いることができる。また、本発明の開示される方法は、２つ以上の検出器からの１つ以上の検出器信号に応答して１つ以上のサンプル画分を収集するとともに、与えられたサンプルのより完全な分析を提供するために、２つ以上の検出器を用いることができる。
【０００５】
本発明はサンプルを分析する方法に関し、また、サンプル画分を収集する方法に関する。例示的な一実施形態において、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステムにおいて２つ以上の検出器から複合信号を生成するステップを有し、この複合信号は、各検出器からの検出応答成分を有し、また、サンプルを分析する方法は、複合信号の変化に応答して、画分収集器内に新しいサンプル画分を収集するステップを有する。一実施形態において、複合信号は、（ｉ）少なくとも１つの光学吸収検出器（たとえばＵＶ検出器）からの検出応答成分と、（ｉｉ）少なくとも１つの蒸発性粒子検出器からの検出応答成分とを有することができる。一実施形態において、発色性または非発色性溶媒を、クロマトグラフィーシステムにおけるキャリア流体として使用することができる。他の実施形態において、複合信号は、（ｉ）２つ以上の特定の光学波長における光学吸収検出器（たとえばＵＶ検出器）からの２つ以上の検出応答を含む検出応答成分と、（ｉｉ）蒸発性粒子検出器からの検出応答成分と、を有する。
【０００６】
本発明によるさらなる例示的な実施形態において、クロマトグラフィーを用いてサンプルを分析する方法は、少なくとも１つの非発色性分析対象物を有するサンプルを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと、非発色性物質の検出器応答の変化に応じて、新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップと、を有する。このサンプルは、多数の異なる発色性物質または非発色性物質を含むことができる。さらに、サンプルを輸送する可動フェーズは、１つ以上の発色性物質または非発色性物質を含むことができる。
【０００７】
他の実施形態において、一般的なキャリア流体をクロマトグラフィーシステム内で用いることができ、キャリア流体は揮発性液体または様々なガスを含む。さらなる実施形態において、非破壊式検出器（たとえばＲＩ、ＵＶ検出器等）を、破壊式検出器（たとえば、蒸発性粒子検出器、質量スペクトル計、分光光度計、発光分光計、ＮＭＲ等）と組み合わせることができ、これは、たとえば関連するピークの化学物質の存在などの、サンプルの様々な化合物の特定を検出することを可能にする。
【０００８】
さらなる実施形態において、サンプルを分析する方法は、２つまたはそれ以上の光学波長でサンプルを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと、（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、（ｉｉｉ）第１波長および第２波長における検出器応答により表現される複合信号の変化、に応じて新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップと、を有する。与えられた検出器応答の変化は、限定するわけではないが、検出器応答値の閾値、時間に関する検出器応答の傾斜、時間に関する検出器応答値の傾斜の閾値、時間に関する検出器応答の傾斜の変化の閾値、またはこれらの任意の組み合わせ、への到達または超過を含むことができる。この実施形態において、本方法は、吸収スペクトルの範囲にわたるｎ個の波長を観察するために、少なくとも１つの検出器内のｎ個のセンサを用いるステップを有し、ここでｎは１より大きい整数である。また、本方法は、（ｉ）ｎ個のセンサからのｎ個の検出器応答の任意の１つの変化、または（ｉｉ）ｎ個の検出器応答により表現される複合信号の変化、に応じて、新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップを有する。
【０００９】
さらなる例示的な実施形態において、サンプルを分析する方法は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）第１入口、第１出口、および第２出口を備えるＴ部、（ｉｉｉ）Ｔ部の第１出口と流体連通する画分収集器、および（ｉｖ）Ｔ部の第２出口と流体連通する検出器、を備える液体クロマトグラフィーシステムを提供するステップを有し、また、本方法は、（ｖ）Ｔ部の第２出口と検出器とに流体連通するスプリッタポンプを介して、検出器を通る流体流れを能動的に制御するステップを有する。他の例示的な実施形態において、シャトルバルブをＴ部およびスプリッタポンプの代わりに用いて、少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御してもよい。例示的な一実施形態において、シャトルバルブは、サンプル流れから非常に少量の容積を取り除く能力を備える連続流れシャトルバルブである。
【００１０】
さらなる本発明の例示的な一実施形態において、クロマトグラフィーを用いてサンプル流体を分析する方法は、クロマトグラフィーカラムから流出する第１流体を提供するステップと；サンプル流体を少なくとも１つの検出器へ輸送するための第２流体を提供するステップと；シャトルバルブを通る連続な第２流体の通路を維持しつつ、第１流体から流体のアリコットサンプルを取り除き、このアリコットを第２流体へ輸送するためにシャトルバルブを用いるステップと；流体のアリコットサンプルを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと；検出器応答の変化に応じて、第１流体の新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップと；を有する。一実施形態において、流体のアリコットサンプルが第１流体から取り除かれるときに、シャトルバルブを通る第１流体の連続流れ通路が維持される。他の実施形態において、流体のサンプルアリコットが第１流体から取り除かれて第２流体へ輸送されるときに、シャトルバルブを通る第１流体および第２流体の両方の連続流れ通路が維持される。
【００１１】
本発明による他の例示的な実施形態において、クロマトグラフィーを用いた流体サンプルを分析する方法は、サンプルを含む第１流体を提供するステップと；シャトルバルブを通る第１流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなく、第１流体から流体のアリコットサンプルを取り除くためにシャトルバルブを用いるステップと；流体のアリコットサンプルを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと；少なくとも１つの検出器応答の変化に応じて、画分収集器内に、第１流体流れの新しいサンプル画分を収集するステップと；を有する。バルブの少なくとも一部を通る第１流体通路またはチャネルが実質的に線形または真っ直ぐであるので、シャトルバルブを通る第１流体流れは実質的に層流である。さらなる実施形態において、シャトルバルブを通る第１流体の圧力は実質的に一定および／または実質的に増加しない。他の実施形態において、シャトルバルブを通る第１流体の流量は、実質的に一定とすることができる。一代替実施形態において、第２流体は、流体のアリコットサンプルをシャトルバルブから検出器へ運ぶために用いられる。バルブの少なくとも一部を通る第２流体流れ通路またはチャネルは実質的に線形または真っ直ぐであるので、シャトルバルブを通る第２流体の流れは、実質的に層流とすることができる。例示的な一実施形態において、シャトルバルブを通る第２流体の圧力は、実質的に一定および／または実質的に増加しない。他の実施形態において、シャトルバルブを通る第２流体の流量は、実質的に一定とすることができる。
【００１２】
さらなる例示的な実施形態において、サンプルを分析する方法は、非破壊式システムの液体クロマトグラフィーシステムを提供するステップを有し、この液体クロマトグラフィーシステムは、（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）システム内に破壊式検出器（たとえば質量スペクトル計）が存在しない状態で、２以上の非破壊式検出器（たとえば、ＵＶ検出器のような光学吸収検出器）、および（ｉｉｉ）２つ以上の非破壊式検出器と流体連通する画分収集器、を有し、本方法はさらに、２つ以上の非破壊式検出器からの検出器信号に応じて、１つ以上のサンプル画分を収集するステップを有する。
【００１３】
本発明による他の例示的な実施形態において、フラッシュクロマトグラフィーを用いてサンプルを分析する方法は、サンプルを観察するために、個別的な物質を検出することができる蒸発性粒子検出器を用いるステップと；物質の検出器応答の変化に応じて新しいサンプル画分を画分収集器内に収集するステップと；を有し、ここで蒸発性粒子検出器は、サンプルを分析するために用いられる唯一の検出器である。蒸発性粒子検出器は、化学組成、化学構造、分子量、または他の化学的または物理的特性を検出することができる。この検出器はＥＬＳＤ、ＣＮＬＳＤ、または質量スペクトル計を含むことができる。
【００１４】
さらなる例示的な実施形態において、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器から検出器信号を発生させるステップを有し、この検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値への到達または超過、または（ｉｖ）望ましくは少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を含む（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、に応答して発生し、本方法はさらに、少なくとも１つの検出器からの少なくとも１つの検出器信号に応じて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集する。
【００１５】
他の例示的な実施形態において、サンプルを分析する方法は、液体クロマトグラフィーシステム内の画分収集器内にサンプル画分を収集するステップを有し、画分収集器は、(ｉ）少なくとも１つの検出器からの１つまたはそれ以上の信号を認識、受信、処理し、（ｉｉ）１つまたはそれ以上の信号に基づいて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集する、ように構成される。
【００１６】
また、本発明はサンプルを分析することができる装置に関する。例示的な一実施形態において、サンプルを分析する装置は、液体クロマトグラフィーシステム内の２つまたはそれ以上の検出器から複合信号を発生させるように構成されたシステムハードウェアを有し、この複合信号は、各検出器からの検出器応答成分を有し、本装置はさらに、複合信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集するように構成された画分収集器を有する。
【００１７】
他の例示的な実施形態において、サンプルを分析する装置は、２つまたはそれ以上の光学波長（たとえばＵＶ波長）を観察するように構成された少なくとも１つの検出器と；（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）第１波長および第２波長における検出器応答により表現される複合信号の変化、に応じて新しいサンプルを収集するように構成された画分収集器と、を有する。上述のように、与えられた検出器応答の変化は、限定するわけではないが、検出器応答値の変化、検出器応答値の閾値への到達または超過、時間に関する検出器応答値の傾斜、時間に関する検出器応答値の傾斜の閾値、時間に関する検出器応答値の傾斜の変化の閾値、またはこれらの任意の組み合わせを含むことができる。
【００１８】
少なくとも１つの検出器は、吸収スペクトルの範囲にわたってｎ個の波長で観察するためのｎ個のセンサを有することができ、ここでｎは１より大きい整数である。画分収集器は、（ｉ）ｎ個のセンサからのｎ個の検出器応答の任意の１つの変化、または（ｉｉ）ｎ個の検出器応答により表現される複合応答の変化、に応じて新しいサンプルを収集するように構成される。一実施形態において、本装置は、ｎ個のセンサだけを有する、または１つまたはそれ以上の追加の検出器と組み合わせられる、単一のＵＶ検出器を有する。
【００１９】
さらなる例示的な実施形態において、サンプルを分析する装置は、液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器から検出器信号を発生させることができるシステムハードウェアを有し、この検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意選択として、検出器応答値の閾値への到達または超過、または（ｉｖ）少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を含む（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、に応じて発生させられる。本装置はさらに、少なくとも１つの検出器からの検出器信号に応じて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するように構成された画分収集器を有することができる。
【００２０】
本発明による例示的な他の実施形態において、クロマトグラフィーを用いてサンプルを分析するための装置は、サンプル中の発色性のおよび非発色性の検出対象物質を検出することができる少なくとも１つの検出器と；非発色性物質の検出応答の変化に応じることができる画分収集器と、を有する。サンプルは、多数の異なる発色性物質および非発色性物質を含むことができる。さらに、サンプルを運ぶ可動フェーズは、１つまたはそれ以上の発色性物質または非発色性物質を含むことができる。
【００２１】
さらなる例示的な実施形態において、サンプルを分析するための装置は、（ｉ）クロマトグラフィーカラムと、（ｉｉ）第１入口、第１出口、および第２出口を備えるＴ部と、（ｉｉｉ）Ｔ部の第１出口と流体連通する画分収集器と、（ｉｖ）Ｔ部の第２出口と流体連通する第１検出器と、（ｖ）Ｔ部の第２出口および第１検出器と流体連通するように位置決めされるスプリッタポンプと、を有し、このスプリッタポンプは、第１検出器を通る流体流れを能動的に制御するように構成される。他の例示的な実施形態において、少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するために、シャトルバルブを、Ｔ部およびスプリッタポンプの代わりに用いることができる。
【００２２】
本発明のさらなる一実施形態において、クロマトグラフィーを用いた流体サンプルを分析するための装置は、クロマトグラフィーカラムまたはカートリッジから流出する第１流体通路；流体サンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器；および、第１流体通路を通る流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなく、流体のアリコットサンプルを第１流体通路から検出器へ輸送することができるシャトルバルブを含む。第１流体通路またはチャネルが少なくとバルブの一部を通るところにおいて実質的に線形または真っ直ぐであるので、第１流体通路を通る流体の流れは実質的に層流とすることができる。さらにある例示的な実施形態において、第１流体通路を通る流体の圧力は、実質的に一定であり、および／または実質的に増加しない。他の実施形態において、第１流体通路を通る流体の流量は、実質的に一定とすることができる。代替実施形態において、第２流体通路は、シャトルバルブから検出器へアリコットサンプルを輸送するために用いられる。第２流体通路またはチャネルが少なくともバルブの一部を通るところにおいて実質的に線形または真っ直ぐであるので、第２流体通路を通る流体流れは、実質的に層流とすることができる。例示的な実施形態において、第２流体通路を通る流体の圧力は実質的に一定であり、および／または実質的に増加しない。さらなる実施形態において、流体の流量は第２流体通路を通じて実質的に一定である。
【００２３】
さらなる例示的な実施形態において、クロマトグラフィーを用いて流体サンプルを分析するための装置は、クロマトグラフィーカラムから流出する第１流体通路と；サンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器へ流体サンプルを輸送する第２流体通路と；シャトルバルブを通る連続な第２流体通路を維持しつつ、第１流体通路から第２流体通路へ流体のアリコットサンプルを輸送するシャトルバルブと、を有する。一実施形態において、流体のアリコットサンプルが第１流体通路から取り除かれるときに、シャトルバルブを通る連続な第１流体通路は維持される。他の実施形態において、流体のアリコットサンプルが第１流体通路から取り除かれて第２流体通路へ輸送されるときに、シャトルバルブを通る連続な第１流体通路または第２流体通路は維持される。
【００２４】
さらなる実施形態において、サンプルを分析するための装置は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム、および（ｉｉ）システム内に破壊式検出器を備えない状態で２つまたはそれ以上の非破壊式検出器、を有し、本装置はさらに（ｉｉｉ）２つまたはそれ以上の非破壊式検出器と流体連通する画分収集器を有し、この画分収集器は、２つまたはそれ以上の非破壊式検出器からの１つまたはそれ以上の検出器信号に応じて、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集する。
【００２５】
本発明によるさらなる実施形態において、フラッシュクロマトグラフィーを用いるサンプルを分析するための装置は、サンプル中の個別の物質を検出することができる蒸発性粒子検出器と；検出された物質の検出器応答の変化に応答することができる画分収集器と、を含み、ここで蒸発性粒子検出器はサンプルを分析するための用いられる唯一の検出器である。蒸発性粒子検出器は、化学組成、化学構造、分子量、または他の物理的または化学的特性を検出することができる。検出器は、ＥＬＳＤ、ＣＮＬＳＤ、または質量スペクトル計を含むことができる。
【００２６】
他の例示的な実施形態において、サンプルを分析するための装置は、液体クロマトグラフィーシステム内の画分収集器を有し、この画分収集器は、（ｉ）少なくとも１つの検出器からの１つまたはそれ以上の信号を認識、受信、および処理し、また、（ｉｉ）この１つまたはそれ以上の信号に基づいて１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集する、ように構成される。
【００２７】
本発明の方法および装置は少なくとも１つの検出器を有する。適切な検出器は、限定するわけではないが、ＵＶ検出器、ＲＩ検出器、伝導率検出器、蛍光検出器、光散乱検出器、粘性検出器、および偏光検出器などの非破壊式検出器（すなわち、検出のときにサンプルを消費または破壊しない検出器）；および／または、たとえば蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）および凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）等の蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）、コロナ放電検出器、質量スペクトル計、原子吸光検出器等の破壊式検出器（すなわち検出するときにサンプルを消費または破壊する検出器）を含むことができる。たとえば、本発明の装置は、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル計、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、カイラル検出器（ＣＤ）、またはこれらの組み合わせを含むことができる。例示的な一実施形態において、検出器は、１つまたはそれ以上の蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）を有し、これは可動フェーズとして発色性溶媒または非発色性溶媒の使用を可能にする。さらなる実施形態において、非破壊式検出器を破壊式検出器と組み合わせることができ、これは、たとえばピークに関連する化学種の存在のような、様々な物質の特性、分子量、化学構造、元素組成、サンプルのカイラル性の検出を可能にする。
【００２８】
本発明はさらに、本明細書で説明される任意の例示的な方法のステップの１つ以上を実行するための、コンピュータが実行可能な命令が格納されたコンピュータで読取り可能な媒体に関する。このコンピュータで読取り可能な媒体は、装置または本明細書で説明されるような装置コンポーネントのような装置コンポーネント上にアプリケーションコードをロードするために用いることができ、（ｉ）操作者へのインターフェースを提供し、および／または（ｉｉ）本明細書で説明される方法のステップの１つ以上を実行するロジックを提供する。
【００２９】
本発明のこれらのおよびその他の特徴および利点は、以下に開示される実施形態の詳細な説明および添付の特許請求の範囲を参照することにより明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】検出器へ流れる流体を能動的に制御するためのスプリッタポンプを有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である。
【図２】スプリッタポンプおよび検出器を有する、本発明の液体クロマトグラフィーシステムの他の例を示す図である。
【図３Ａ】シャトルバルブおよび検出器を有する、本発明の液体クロマトグラフィーシステムの一例を示す図である。
【図３Ｂ】本発明に好適に使用できる例示的なシャトルバルブの動作を示す図である。
【図３Ｃ】本発明に好適に使用できる例示的なシャトルバルブの動作を示す図である。
【図４】スプリッタポンプおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である。
【図５】２つのスプリッタポンプおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である。
【図６】シャトルバルブおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である。
【図７】２つのシャトルバルブおよび２つの検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である。
【図８】スプリッタポンプ、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、および紫外線（ＵＶ）検出器を有する、本発明の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である。
【図９】スプリッタポンプ、ＥＬＳＤおよびＵＶ検出器を有する、本発明の他の例示的な液体クロマトグラフィーシステムを示す図である。
【図１０Ａ】本発明に好適に利用できるシャトルバルブの動作を示す図である。
【図１０Ｂ】本発明に好適に利用できるシャトルバルブの動作を示す図である。
【図１０Ｃ】本発明に好適に利用できるシャトルバルブの動作を示す図である。
【図１１】本発明の例示的なクロマトグラフィーシステムを用いて、２つの複合混合物の分離から生成されるクロマトグラムを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本発明の原理の理解を促進するために、本発明の特定の実施形態が説明され、実施形態を説明するために特定の文言が用いられる。しかし、特定の文言の使用により本発明の範囲を限定することを意図していないことを理解されたい。変形形態、さらなる修正形態、および議論される本発明の原理のさらなる応用は、本発明の技術分野における当業者に通常に起こり得るものであることを予期している。
【００３２】
本明細書および添付の特許請求の範囲で用いられる単数形の表現は、文脈から明らかでない限り複数の参照物を含む。従って、たとえば、「溶媒」との語は複数の溶媒を含み、当業者に知られた１つ以上の溶媒およびその均等物を含むことを意図している。
【００３３】
たとえば、複合物の成分の量、濃度、容積、プロセス温度、プロセス時間、回収率または産出率、流量、およびこれら類似の値、並びに範囲を修飾する本開示の実施形態の説明の中で用いられる「約」との語は、たとえば典型的な測定および処理手順を通じて生じうる数値的な量の変動を示し、これらの手順における誤差による変動、方法を実行するのに用いられる構成要素の相違による変動、および近似による変動を意味している。また、「約」との語は、特定の初期濃度および混合物での処方の時間経過による変化量、および特定の初期濃度または混合物で、処方を混合または処理することによる変化量を包含する。「約」との語で修飾されるかどうかに関わらず、添付の特許請求の範囲は、これらの量の均等の範囲を含む。
【００３４】
ここで用いられる、「クロマトグラフィー」との語は、物理的な分離方法を意味し、分離される成分が、２つのフェーズの間で分配され、これらの一方は静的（静的フェーズ）であり、他方は一定方向に移動する（可動フェーズ）。
【００３５】
ここで用いられる、「液体クロマトグラフィー」との語は、静止フェーズを有するカラムを通じて「可動フェーズ」内に溶解した液体混合物を通過させることによる混合物の分離を意味し、分析物（すなわち目標物質）を混合物内の他の分子から分離し、隔離されるようにする。
【００３６】
ここで用いられる、「可動フェーズ」との語は、分離および／または分析されるサンプル、および溶媒を含む液体流体、ガス、または超臨界流体を意味し、溶媒は、カラムを通る分析物を有するサンプルを移動させる。可動フェーズは、クロマトグラフィーカラムまたはカートリッジ（すなわち、静止フェーズを収容する容器）を通って移動し、ここでサンプル内の分析物が静止フェーズと相互作用してサンプルから分離される。
【００３７】
ここで用いられる、「静止フェーズ」との語は、カラムまたはカートリッジに固定された材料を意味し、これは、可動フェーズ内のサンプルから選択的に分析物を吸着し、静止フェーズを有するカラムを通して「可動フェーズ」内に溶解した流体混合物を通過させることにより混合物を分離し、混合物内の他の分子から測定される分析物を分離し、隔離するようにする。
【００３８】
ここで用いられる、「フラッシュクロマトグラフィー」との語は、圧力下で「可動フェーズ」内に溶解した混合流体を静止フェーズを有するカラムに通過させることによる分離を意味し、これは、混合物内の他の分子から分析物（すなわち目標物質）を分離し、隔離できるようにする。
【００３９】
ここで用いられる、「シャトルバルブ」との語は、１つ以上のソースから他の位置への流体供給を制御する制御バルブを意味する。シャトルバルブは、サンプルを流体から他方へ移動させるために回転運動または直線運動を利用することができる。
【００４０】
ここで用いられる、「流体」との語は、気体、液体、超臨界流体を意味する。
【００４１】
ここで用いられる、「層流」との語は、流体の滑らかな規則的な運動を意味し、層流では乱流が存在せず、与えられた任意の副流れは、他の近隣の副流れに概ね平行に移動する。
【００４２】
ここで用いられる、「実質的」との語は、合理的な量の範囲内であることを意味し、絶対値の約０％から約５０％、約０％から約４０％、約０％から約３０％、約０％から約２０％、または約０％から約１０％で変化する量を含む。
【００４３】
本発明は、サンプルを分析し、サンプル画分を収集する方法に関する。本発明はさらに、サンプルを分析し、サンプル画分を収集することができる装置に関する。本発明はさらに、サンプルを分析し、サンプル画分を収集することができる装置または装置部品内で用いるためにコンピュータソフトウェアに関し、このコンピュータソフトウェアは、装置が本明細書で説明される１つ以上の方法のステップを実行できるようにする。
【００４４】
以下に、サンプルを分析する例示的な方法およびサンプルを分析することができる例示的な装置の説明が提供される。
【００４５】
１．サンプルの分析方法
本発明はサンプルを分析し、サンプル画分を収集する方法に関する。このサンプルの分析方法は、多数のプロセスステップを有することができ、そのいくつかが以下に説明される。
【００４６】
Ａ．検出器への流体流れの能動的制御
本発明のいくつかの実施形態において、サンプルを分析する方法は、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを介して検出器への流体流れを動的に制御するステップを有する。このような方法ステップを示す一つの例示的な液体クロマトグラフィーシステムが図１に図示されている。図１に示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム１１と、（ｉｉ）第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２と、（ｉｉｉ）Ｔ部１２の第１出口と流体連通する画分収集器１４と、（ｉｖ）Ｔ部１２の第２出口２３と流体連通する第１検出器１３と、（ｖ）Ｔ部１２の第２出口２３と第１検出器１３とに流体連通するように位置決めされたスプリッタポンプ１５と、を有する。
【００４７】
この例示的なシステムにおいて、スプリッタポンプ１５は、能動的に、流体流れを第１検出器１３に制御する。ここで用いられる、「能動的に制御する」との表現は、たとえ液体クロマトグラフィーシステム内の他の部分で流量の変化が生じた場合にでも、与えられたスプリッタポンプまたはシャトルバルブの、与えられた検出器を通る流体流れを制御する能力のことである。単に流体流れを分割するだけの「受動的な」流れスプリッタとは異なり、本発明で用いられるスプリッタポンプおよびシャトルバルブは、たとえば、流れ制限、全流量、温度、および／または溶媒組成のような、液体クロマトグラフィーシステム内の流体流れ内の起こり得る変動に関係なく、少なくとも１つの検出器への流体流れを制御する。
【００４８】
流体流れを与えられた検出器に能動的に制御するステップは、たとえば、スプリッタポンプまたはシャトルバルブに駆動信号を送るステップを有し、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの駆動を停止し、（ｉｉｉ）１つ以上の流れを変更し、および／またはスプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力設定を変更し、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行う。適当な流れおよび圧力設定は、限定するわけではないが、（ｉ）バルブ位置、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力、（ｉｉｉ）バルブへの空気圧力、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを含む。典型的には、駆動信号は、たとえば、電気信号、気体信号、ディジタル信号、またはワイヤレス信号の形態である。
【００４９】
図１に示されているように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０において、流体流れを検出器１３に能動的に制御するステップは、流体をＴ部１２から検出器１３へポンプ輸送するためにスプリッタポンプ１５を用いるステップを有する。他の実施形態において、流体を検出器へ能動的に制御するステップは、検出器を通して流体を引き出すためにスプリッタポンプを用いるステップを有してもよい。
【００５０】
図２は、例示的な液体クロマトグラフィーシステム２０を示し、このシステム２０は、クロマトグラフィーカラム１１と；第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２と；Ｔ部１２の第１出口２２に流体連通する画分収集器１４と；Ｔ部１２の第２出口２３に流体連通する第１検出器１３と；Ｔ部１２の第２出口２３から検出器１３を通して流体を引き出すように位置決めされたスプリッタポンプ１５と、を有する。
【００５１】
いくつかの望ましい実施形態において、図３Ａ−３Ｃに示される例示的なシャトルバルブ１５１のようなシャトルバルブは、検出器１３１のような検出器へ流体流れを能動的に制御するために用いられる。図３Ａに示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム３０は、クロマトグラフィーカラム１１と；クロマトグラフィーカートリッジ入口１１１、画分収集器出口１１４、ガスまたは液体入口１１５、および検出器出口１１３を備えるシャトルバルブ１５１と；シャトルバルブ１５１の画分収集器出口１１４に流体連通する画分収集器１４と；シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第１検出器１３１と；シャトルバルブ１５１のガスまたは液体入口１１５に流体を提供する流体供給部１５２と、を有する。
【００５２】
本発明のさらなる実施形態において、クロマトグラフィーを用いてサンプルを分析する方法は、クロマトグラフィーカラムから流出する第１流体を提供するステップと；流体サンプルを少なくとも１つの検出器へ輸送するための第２流体を提供するステップと；第１流体からサンプルのアリコット（aliquot）を取り除き、このアリコットを第２流体へ輸送し、第２流体のシャトルバルブを通じた連続した通路を維持するために、シャトルバルブを用いるステップと；流体のサンプルのアリコットを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと；検出器の応答の変化に応じて、画分収集器内に第１流体の新しいサンプル画分を収集するステップと、を有する。一実施形態において、流体サンプルのアリコットが第１流体から取り除かれるときに、第１流体のシャトルバルブを通る連続流れ通路は維持される。他の実施形態において、第１流体および第２流体の両方のシャトルバルブを通る連続流れ通路は、流体サンプルのアリコットが第１流体から取り除かれて第２流体に輸送されるときに維持される。
【００５３】
本発明の他の例示的な実施形態において、クロマトグラフィーを用いる流体サンプルを分析する方法は、サンプルを含む第１流体を提供するステップと；シャトルバルブを通る第１流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなる、第１流体から流体サンプルのアリコットを取り除くために、シャトルバルブを用いるステップと；流体サンプルのアリコットを観察するために少なくとも１つの検出器を用いるステップと；少なくとも１つの検出器の応答の変化に応じて、第１流れの新しいサンプル画分を画分収集器に収集するステップと、を有する。第１流体通路またはチャネルが少なくともバルブの一部を通って実質的に線形または直線であることにより、シャトルバルブを通る第１流体の流れを、実質的に層流とすることができる。さらなる実施形態において、シャトルバルブを通る第１流体の圧力は、実質的に一定のままであり、および／または圧力は実質的に増加しない。他の実施形態において、第１流体の流量は、シャトルバルブを通じて実質的に一定にすることができる。代替実施形態において、シャトルバルブからの液体サンプルのアリコットを検出器（１つまたは複数可）へ輸送するのに、第２流体が用いられる。第２流体通路またはチャネルがバルブの少なくとも一部を通じて実質的に線形または直線であることにより、シャトルバルブを通る第２流体の流れは、実質的に層流とすることができる。例示的な実施形態において、シャトルバルブを通る第２流体の圧力は実質的に一定であり、および／または圧力は実質的に増加しない。他の実施形態において、第２流体の流量はシャトルバルブを通じて実質的に一定とすることができる。
【００５４】
図３Ｂおよび図３Ｃは、与えられた液体クロマトグラフィーシステム内での１つの例示的な実施形態におけるシャトルバルブの動作を示している。図３Ｂに示されるように、シャトルバルブ１５１は、クロマトグラフィーカラム（たとえばカラム１１）からシャトルバルブ１５１へ流体流れを提供するクロマトグラフィーカートリッジ入口１１１と；流入サンプルアリコット容積１１６と；シャトルバルブ１５１から画分収集器（たとえば画分収集器１４）へ流体流れを提供する画分収集器出口１１４と；シャトルバルブ１５１の一部を通じてガス（たとえば空気、窒素等）または液体（たとえばアルコール）流れを提供するガスまたは液体入口１１５と；流出サンプルアリコット容積１１７と；シャトルバルブ１５１から検出器（たとえばＥＬＳＤのような検出器１３１）へ流体流れを提供する検出器出口１１３と、を有する。
【００５５】
シャトルバルブ１５１を通じてクロマトグラフィーカートリッジ入口１１１から画分収集器出口１１４へ流体が流れるとき、流入サンプルアリコット容積１１６は、流体の特定の容積で満たされ、ここではこの流体はサンプルのアリコット１１８と言及される（図３Ｂの影付きの領域として示される）。所望の時間に、シャトルバルブ１５１は、流入サンプルアリコット容積１１６内のサンプルアリコット１１８を、図３Ｃに示す流出サンプルアリコット容積１１７内へ輸送する。サンプルアリコット１１８が流出サンプルアリコット容積１１７内に輸送されると、流出サンプルアリコット容積１１７を通る、入口１１５からのガスまたは液体は、サンプルアリコット１１８を検出器出口１１３を介して検出器１３１（たとえばＥＬＳＤ）へ輸送する。
【００５６】
シャトルバルブ１５１は、少なくとも１つの検出器への輸送のために、所望のサンプリング周波数で、サンプルからサンプルのアリコット（たとえばサンプルアリコット１１８）を取り除くようにプログラムできる。例示的な一実施形態において、サンプリング周波数は、１０秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット（または、５秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット、または３秒毎に少なくとも１つのサンプルのアリコット、または、２秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット、または、０．５秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット、または、０．１秒毎に少なくとも１つのサンプルアリコット）とすることができる。
【００５７】
図１０Ａ−１０Ｃは、本発明の例示的なシャトルバルブを示しており、また、与えられたクロマトグラフィーシステム内でのシャトルバルブの動作を示している。図１０Ａに示されるように、シャトルバルブ１５１は、クロマトグラフィーカラム（たとえばカラム１１）からシャトルバルブ１５１への流体流れを提供するクロマトグラフィーカートリッジ入口１１１と；入口１１１を出口１１４に接続するチャネル１１７と；動的な本体１１９のディンプル１１６内の流入サンプルアリコット容積１１８と；シャトルバルブ１５１から画分収集器（たとえば画分収集器１４）への流体流れを提供する画分収集器出口１１４と；シャトルバルブ１５１を通るガス（たとえば空気、窒素等）または液体（たとえばアルコール）の流れを提供するガスまたは液体入口１１５と；ディンプル１１６内の流出サンプルアリコット容積１１８と；入口１１５を出口１１３に接続するチャネル１２０と；シャトルバルブ１５１から検出器（たとえばＥＬＳＤのような検出器１３１）への流体流れを提供する検出器出口１１３と、を有する。
【００５８】
流体が、シャトルバルブ１５１を通って、クロマトグラフィーカートリッジから入口１１１へ、チャネル１１７を介して画分収集器出口１１４へ流れると、ディンプル１１６内の流入サンプルアリコット容積１１８は、サンプルアリコット１１８と言及される特定の流体の容積で満たされる（図１０Ａの影付きの領域で示される）。所望の時間において、シャトルバルブ１５１は、ディンプル回転通路１２１を介して動的本体１１９内のディンプル１１６を回転させることにより、チャネル１１７から取り出されたディンプル１１６内のサンプルアリコット１１８をチャネル１２０へ輸送する。サンプルアリコット１１８がチャネル１２０に輸送されると、入口１１５からチャネル１２０を通って流れるガスまたは液体は、サンプルアリコット１１８を検出器出口１１３を介して検出器１３１（たとえばＥＬＳＤ）に輸送する。本発明によるシャトルバルブの他の利点は、バルブを通るチャネルの流体工学的な設計に関わる。クロマトグラフィーシステム内の背圧を最小化するために、チャネル１１７およびチャネル１２０を通る流れは連続的である。これは、動的本体１１９がどこに位置していても、シャトルバルブ１５１を通る流れが連続になるように（図１０Ｂに示される）、チャネル１１７および１２０を静的な本体１２２内に配置することにより達成される。図１０Ａに示されるように、サンプル流れチャネル１１７および検出器流れチャネル１２０の少なくとも一部は、実質的に平面内または円周内にあり、これは、乱流を減らしさらにバルブを通る圧力の増加を最小化する。さらに、サンプル流れチャネル１１７および検出器流れチャネル１２０の少なくとも一部は、ディンプル１１６と隣接するときに実質的に平行であり、これは、さらに乱流を制限し、バルブ内の圧力増加を制限する。これは、バルブ内の圧力を増加させない構成を含み、５０ｐｓｉ以上、好ましくは３０ｐｓｉ以上、より好ましくは２０ｐｓｉ以上、さらに好ましくは１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１ｐｓｉ以上、圧力を増加させない構成を含む。ディンプル１１６は、動的本体１１９内に配置され、動的本体の面に流体連通し、動的本体は静的本体１２２に隣接する。これにより、動的本体１１９が第１位置にあるとき、ディンプル１１６は、サンプル流れチャネル１１７に流体連通し、動的本体１１９が第２位置に移動すると、ディンプル１１６は検出器流れチャネル１２０に流体連通する。ディンプル１１６は任意の形状とすることができるが、凹状の半球体として示されている。また、ディンプル１１６は任意の寸法とすることができる。例示的な一実施形態において、ディンプルは、極端に小さな寸法とすることができ（たとえば、２０００ｎＬ未満、好ましくは約５００ｎＬ未満、より好ましくは約１００ｎＬ未満、より好ましくは約１ｎＬ未満）、しかし１ｎＬから２０００ｎＬまでの任意の寸法を含むことができ、これは、迅速なサンプリングを可能にする。さらに、小さなディンプル１１６の寸法は、非常に短いディンプル回転通路１２１を可能にし、これは、動的本体１１９と静的本体１２２との表面の摩擦を有意に小さくし、シャトルバルブ１５１のメンテナンスが必要になる前の使用寿命が長くなる（たとえば一千万回がメンテナンスの前に可能になる）。回転運動シャトルバルブが図１０Ａ−１０Ｃに示されているが、直線運動シャトルバルブ、またはこれらに等価なシャトルバルブも本発明に利用できる。
【００５９】
シャトルバルブ１５１は、少なくとも１つの検出器へ輸送するために、所望のサンプリング周波数で、サンプルからサンプルアリコット（たとえばサンプルアリコット１１８）を取り除くようにプログラムできる。例示的な一実施形態において、サンプリング周波数は、１０秒毎に少なくとも１サンプルアリコット（または５秒毎に少なくとも１サンプルアリコット、または３秒毎に少なくとも１サンプルアリコット、または２秒毎に少なくとも１サンプルアリコット、または０．５秒毎に１サンプルアリコット、または０．１秒毎に少なくとも１サンプルアリコット）とすることができる。このシャトルバルブは、さらに、係属中の米国仮特許出願第＿＿＿＿号明細書に説明されており、この明細書の全体は参照により本明細書に組み込まれる。
【００６０】
他の実施形態において、サンプルを検出器へ運ぶために、クロマトグラフィーシステムにおいて、揮発性液体および様々なガスを含む一般的なキャリア流体を用いることができる。図３Ａに示されるように、流体供給部１５２からのキャリア流体は、シャトルバルブ１５１に入口１１５のところで入り、ここで、キャリア球体はサンプルアリコット１１８を取り出して、出口１１３を介して検出器１３１へ運ぶ。サンプルアリコットは、バルブのキャリア流体中で沈殿すべきでなく、関連する配管はブロックすることなく、サンプルが流れ経路の壁を覆いサンプルの一部または全部が検出器に到達しないようにすべきでない。フラッシュクロマトグラフィーにおけるサンプルの組成は非常に多様であり、無機分子、有機分子、ポリマー、ペプチド、プロテイン、およびオリゴヌクレオチドを含む様々な化学物質を包含する。様々な溶媒での溶解性は化合物のクラスにより異なる。また、検出器との適合性は、使用できるキャリア流体のタイプを制限する。たとえば、ＵＶ検出器の場合、溶媒は検出波長において非発色性とすべきである。蒸発粒子検出（ＥＰＤ）技術の場合（ＥＬＳＤ、ＣＮＬＳＤ、質量スペクトル等）、溶媒は、サンプルの融点よりも十分に低い温度で容易に蒸発するものとすべきである。さらに、キャリア流体は、バルブ入口１１１と画分収集器出口１１４との間を流れるサンプルと混和できるものであるべきである。たとえば、ある流れ通路でヘキサンが用いられる場合、他の流路で水を用いるべきではない。これは、両者が混和性ではないからである。上で提案したキャリア流体は、分離溶媒を変更するときに、カスタマイズすべきである。これは、時間を消費し実際的ではない。本発明の例示的な一実施形態によれば、有機溶媒および水に混和し、揮発性で、非発色性の溶媒を用いることでこの問題を回避できる。たとえば、イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）のような、揮発性で、非発色性で、中間的な極性の溶媒をキャリア流体として用いることができる。ＩＰＡは、ほとんど全ての溶媒に混和し、一般的なＵＶ検出波長において非発色性であり、低温で容易に蒸発する。さらに、ＩＰＡは、広範囲の化学物質および化学種を溶解させる。従って、ＩＰＡは、事実上あらゆるサンプルの種類のキャリア流体として適合的である。他のキャリア流体は、アセトン、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、イソブタノール、テトラヒドロフラン等を含むことができる。例示的な代替実施形態において、キャリア流体としてガスを用いることができる。サンプルは、シャトルバルブを通じておよびその後の検出器を通じて分離溶媒中または可動フェーズに残存しているので、沈殿は生じない。同様に、分離溶媒または可動フェーズは、他の溶媒に混合することはなく、そのため混和性の問題は生じない。キャリアはガスであるので、揮発性は問題とならない。さらに、多くのガスは、非発色性であり、ＵＶ検出に適合的である。ガスをキャリアとして用いるとき、サンプルアリコット１１８は、図１０Ｃに示されるように、ガスポケット１２３の間にサンドイッチされた別個のスラグとして、バルブ１５１から検出器１３１に供給される。キャリア流体としてガスを用いることは他の利点もある。たとえば、蒸発性光散乱検出器、または他の検出技術とともに用いる場合、ここでサンプルは霧状にされ、ガスはサンプルを輸送するのに用いることができ、またサンプルを霧状にするのに用いることができ、また、別個の霧形成ガス供給の必要をなくすことができる。さらに、ガスは蒸発させる必要がないので、周囲のドリフトチューブ温度は、ドリフトチューブ加熱器の必要性を取り除くのに用いることができる。高温度で蒸発するサンプルはドリフトチューブを通るときに固体または液体の状態であるので、広範囲のサンプルを検出することができる。様々なガスをキャリア流体として用いることができ、キャリアガスは空気、窒素、ヘリウム、水素、および二酸化炭素を含むことができる。超臨界二酸化炭素のような超臨界流体も用いることができる。
【００６１】
Ｂ．流体流れ内でのサンプル成分の検出
本発明の方法はさらに、流体流れ内の１つ以上のサンプル成分を検出するために少なくとも１つの検出器を用いることができる。本発明の液体クロマトグラフィーシステムに用いるのに好適な検出器は、限定するわけではないが、非破壊式および／または破壊式検出器を含む。適当な検出器は、限定するわけではないが、非破壊式の検出器（すなわち、検出中にサンプルを消費または破壊しない検出器）を含み、たとえばＵＶ検出器、ＲＩ検出器、伝導性検出器、蛍光検出器、光散乱検出器、粘度計、偏光計、等であり、また適当な検出器は、破壊式検出器（すなわち、検出中にサンプルを消費または破壊する検出器）を含み、たとえば、蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）および凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）等のような蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）、コロナ放電検出器、質量スペクトル検出器、原子吸光検出器等である。たとえば、本発明の装置は、少なくとも１つのＵＶ検出器、少なくとも１つの蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、少なくとも１つの質量スペクトル検出器（ＭＳ）、少なくとも１つの凝集核形成光散乱検出器（ＣＳＬＳＤ）、少なくとも１つのコロナ放電検出器、少なくとも１つの屈折率検出器（ＲＩＤ）、少なくとも１つの蛍光検出器（ＦＤ）、少なくとも１つのカイラル検出器（ＣＤ）、またはそれらの組み合わせを含むことができる。例示的な実施形態において、検出器は、１つ以上の蒸発粒子検出器（ＥＰＤ）を含むことができ、これは、流動層として発光性および非発光性の溶媒の使用を可能にする。さらなる実施形態において、非破壊式検出器は、破壊式検出器と組み合わせることができ、これは、たとえば、各クロマトグラフィーのピークに関連する、化学的性質、化学構造、分子量等のような、サンプルの様々な化合物の特性を検出することができる。質量スペクトル検出と組み合わせる場合、検出時に画分の化学構造および／または分子量を検出することができ、所望の画分の同定を連続的に行う。現在のシステムにおいて、画分の化学同一性および構造は、扱い難い過去の分離技術を用いなければならない。
【００６２】
使用する検出器のタイプに関わらず、与えられた検出器は、１つ以上の検出応答を提供し、検出応答は、信号を生成しまたここで説明される液体クロマトグラフィーシステム内の１つ以上の部品（たとえば画分収集器、他の検出器、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、Ｔ字部など）に伝達するのに用いられる。典型的には、与えられた検出器の応答の変化は、信号の生成および伝達をトリガーする。本発明において、信号を生成し１つ以上の部品に伝達するトリガーになる、与えられた検出器の応答の変化は、限定するわけではないが、検出器の応答値の変化、検出値の閾値への到達または超過、検出応答値の時間に対する傾斜、検出応答値の時間傾斜の閾値、検出応答値の時間傾斜の変化、検出応答値の時間傾斜の閾値の変化、またはこれらの組み合わせを含む。
【００６３】
いくつかの例示的な実施形態において、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、図４に示すように少なくとも２つの検出器を有する。図４に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４０は、クロマトグラフィーカラム１１；第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２；Ｔ部１２の第１出口２２に流体連通する画分収集器１４；Ｔ部１２の第２出口２３に流体連通する第１検出器１３；Ｔ部１２の第２出口２３から第１検出器１３への流体流れを能動的に制御するスプリッタポンプ１５；およびＴ部の第２出口２３に流体連通する第２検出器１６、を有する。
【００６４】
２つ以上の検出器が存在する場合、液体クロマトグラフィーシステムは、操作者に多くの解析オプションを提供する。たとえば、図４に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４において、サンプルを分析する方法は、第１検出器１３（たとえばＥＬＳＤ）および／または第２検出器１６（たとえばＵＶ検出器のような光学吸収検出器）から１つ以上の信号を画分収集器１４に伝達し、画分収集器１４に新しいサンプル画分を収集させる。第１検出器１３および／または第２検出器１６からの１つ以上の信号は、第１検出器１３または第２検出器１６からの単一の信号、第１検出器１３および第２検出器１６からの２つ以上の信号、または、第１検出器１３および第２検出器１６からの複合信号を含むことができる。図４に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４０において、サンプルを分析する方法は、さらに、第２検出器１６からの信号をスプリッタポンプ１５に伝達し、流体流れ内のサンプル成分を検出する第２検出器１６の応答により、第１検出器１３への流体流れを開始または中止させるステップを有することができる。
【００６５】
他の例示的な実施形態において、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、図５に示すように、少なくとも２つの検出器、および少なくとも２つのスプリッタポンプを有する。図５に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０は、クロマトグラフィーカラム１１；第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備える第１Ｔ部１２；第１Ｔ部１２の第２出口２３に流体連通する第１検出器１３；第１Ｔ部１２の第２出口２３から第１検出器１３への流体流れを能動的に制御する第１スプリッタポンプ１５；第１入口３１、第１出口３２、および第２出口３３を備える第２Ｔ部１８；第２Ｔ部１８の第２出口３３に流体連通する第２検出器１６；第２Ｔ部１８の第２出口３３から第２検出器１６への流体流れを能動的に制御する第２スプリッタポンプ１７；第２Ｔ部１８の第１出口３２に流体連通する画分収集器１４、を有する。
【００６６】
上述したように、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するために、図６および図７に示すように、所定位置に１つ以上のシャトルバルブを備えることができ、または１つ以上のＴ部／スプリッタポンプの組み合わせを備えることができる。図６に示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム６０は、クロマトグラフィーカラム１１；クロマトグラフィーカートリッジ入口１１１、画分収集器出口１１４、ガスまたは液体入口１１５、および検出器出口１１３を備えるシャトルバルブ１５１；シャトルバルブ１５１の画分収集器出口１１４に流体連通する画分収集器１４；シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第１検出器１３１；シャトルバルブ１５１のガスまたは液体入口１１５に流体を提供する流体供給部１５２；シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第２検出器１６１；を有する。
【００６７】
図７に示されるように、例示的な液体クロマトグラフィーシステム７０は、クロマトグラフィーカラム１１；クロマトグラフィーカートリッジ入口１１１、画分収集器出口１１４、ガスまたは液体入口１１５、および検出器出口１１３を備える第１シャトルバルブ１５１；シャトルバルブ１５１の検出器出口１１３に流体連通する第１検出器１３１；シャトルバルブ１５１のガスまたは液体入口に流体を提供する流体供給部１５２；クロマトグラフィーカートリッジ入口１２１、画分収集器出口１２４、ガスまたは液体入口１２５、および検出器出口１２３を備える第２シャトルバルブ１７１；シャトルバルブ１７１の検出器出口１２３に流体連通する第２検出器１６１；シャトルバルブ１７１のガスまたは液体入口１２５に流体を提供する流体供給部１７２；およびシャトルバルブ１７１の画分収集器出口１２４に流体連通する画分収集器１４；を有する。
【００６８】
これらの例示的な実施形態、すなわち例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０および７０において、サンプルを分析する方法はさらに、第２スプリッタポンプ１７（または第２シャトルバルブ１７１）を介して第２検出器１６（または第２検出器１６１）へ流体流れを能動的に制御するステップを有し、同様に、第１のスプリッタポンプ１５（または第１シャトルバルブ１５１）を介して第１検出器１３（または第１検出器１３１）へ流体流れを能動的に制御するステップを有する。図５には示されていないが、第１スプリッタポンプ１５および／または第２スプリッタポンプ１７は、例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０内で、第１検出器１３および第２検出器１６のそれぞれを通って流体を押し出すまたは引き出すように、位置決めすることができることを理解されたい。
【００６９】
いくつかの例示的な実施形態において、吸収スペクトルの１つ以上の波長における検出器応答および応答変化を観察するために、１つ以上のＵＶ検出器のような１つ以上の光学吸収検出器を用いることができる。これらの実施形態において、単一の検出器または複数の検出器内の複数のセンサと組み合わせて１つ以上の光源を用いることができ、複数の波長におけるサンプルによる光吸収を検出する。たとえば、ＵＶ吸収スペクトル全体にわたる１つ以上の波長における検出器応答および応答変化を観察するために、１つ以上のＵＶ検出器を用いることができる。
【００７０】
サンプルを分析する例示的な１方法において、この方法は、ＵＶ検出器のような光学吸収検出器を用いるステップを有し、光学吸収検出器は、ＵＶ吸収スペクトルの全波長のわたってｎ個の波長においてサンプルを観察するためのｎ個のセンサを有し、またこの方法は、（ｉ）ｎ個のＵＶ波長におけるｎ個の検出応答の任意の１つの変化、または（ｉｉ）ｎ個の検出応答により表される複合応答の変化、に応じて新しいサンプル画分を収集するステップを有する。ｎ個のセンサまたは複数の検出器が存在する場合、これらは、画分収集器および／または他のシステム要素（たとえば他のＵＶ検出器）に対する信号タイミングに影響を与えるように、互いに対して相対的に所望のように位置決めすることができる。
【００７１】
全スペクトルＵＶ（または他のスペクトル範囲の）分析を用いる場合、スペクトルは所望の数の関心領域に分割することができる（たとえば２００ｎｍから４００ｎｍを５ｎｍごとに分割する）。各スペクトル範囲の有意な時間変化を監視することができる。与えられた範囲内における受け取った光エネルギーの急な落ち込み（たとえば検出応答の１次微分および二次微分の落ち込み）は、与えられた関心範囲の波長の光を吸収する物質の到達を示す。この例示的な実施形態において、正確さを増加させるために各範囲をより小さくすることができ、代替的に、計算の負担を減らすために各範囲をより大きくすることができる（すなわち、時間あたりの計算が少なくなり、必要なメモリも小さくなる）。
【００７２】
他の例示的な実施形態において、様々な検出応答を観測するために、また、与えられたシステム内の検出応答の変化を観測するために、複数の異なるタイプの検出器を用いることができる。例示的な図８に示される液体クロマトグラフィーシステム８０において、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）（すなわち、第１検出器１３）のような蒸発性粒子検出器（ＥＰＤ）が単独でまたはＵＶ検出器（すなわち、第２検出器１６）と組み合わせて用いられる。例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０はさらに、クロマトグラフィーカラム１１と；第１入口２１、第１出口２２、および第２出口２３を備えるＴ部１２と；画分収集器１４と；Ｔ部１２の第２出口に流体連通するＥＰＤ１３と；能動的にＥＰＤ１３への流体流れを制御するスプリッタポンプ１５と；Ｔ部１２の第１出口２２に流体連通するＵＶ検出器と；を有する。この例示的な実施形態において、蒸発性粒子検出器の使用は、いくつかの利益をもたらす。非発色性の可動フェーズは、ＵＶ検出とともに用いられなければならず、さもなくば可動フェーズのバックグラウンド吸収がサンプル信号を隠してしまう。これは、トルエン、ピリジン、その他のような有意な発色性を備える溶媒を用いることを排除する。蒸発性粒子検出に関して、可動フェーズの発色性は重要でない。可動フェーズがよりサンプルよりも揮発性である限り、蒸発性粒子検出に発色性の溶媒を用いることができる。これは、高選択性発色性溶媒を可動フェーズとして用いることにより、分離を改善する機会を開く。さらに、ＵＶ検出器は、非発色性サンプル成分を検出しないであろう。ＵＶ検出のみに基づいて収集された画分は、１つまたはそれ以上の画定できない非発色性成分を含むことがあり、これは画分の純度を妥協させる。逆にいえば、非発色性サンプルは、ＵＶ検出器により完全に見落とされ、廃棄に直接送られ、またはサンプルフリー（空白の画分）として想定される画分内に収集される。正味の結果は、生産性の低下、汚染された画分、または、価値あるサンプル成分の損失をもたらす。フラッシュシステム内にＥＰＤ（たとえばＥＬＳＤ）が単独でまたはＵＶ検出とともに用いられる場合、発色性成分および非発色性成分は、検出され且つ収集され、画分の純度を改善する。ＵＶシステムを単独で用いるフラッシュシステムは、サンプル成分を見落とし、または不正確に純粋な画分を判断し、多くのフラッシュ使用者は、純度を確認し、また、空白の画分が本当に空白であるのかを確認するために、収集された画分を薄膜クロマトグラフィーによりスクリーンするであろう。これは、時間を消費する後の分離手順であり、作業を遅くする。１つ以上の成分を含むことが発見されたこれらの画分は、しばしば、成分を適切に分離するために第２クロマトグラフィーステップを要求する。
【００７３】
例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０において、検出器１３（たとえばＥＬＳＤ）およびＵＶ検出器１６からの信号３１および６１は、それぞれ画分収集器１４に送られ、たとえば新しいサンプル画分の収集のような画分収集器１４からのいくつかの活動を開始する。好ましい実施形態において、（ｉ）検出器ＥＬＳＤ１３、（ｉｉ）ＵＶ検出器１６、または（ｉｉｉ）ＥＬＳＤ１３およびＵＶ検出器１６の両方からの１つまたはそれ以上の検出器信号３１および６１に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプルを収集する。
【００７４】
例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０に類似して、例示的な図６に示される液体クロマトグラフィーシステム６０において、ＥＬＳＤ１３１およびＵＶ検出器１６１からの信号３１１および６１１は、それぞれ画分収集器１４へ送られ、たとえば新しいサンプル画分の収集のような画分収集器１４からのいくつかの活動を開始する。好ましい実施形態において、（ｉ）検出器ＥＬＳＤ１３１、（ｉｉ）ＵＶ検出器１６１、または（ｉｉｉ）ＥＬＳＤ１３１およびＵＶ検出器１６１の両方からの１つまたはそれ以上の検出器信号３１１および６１１に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプルを収集する。
【００７５】
上述のように、ＵＶ検出器１６（またはＵＶ検出器１６１）は、ｎ個のセンサを有し、サンプルをｎ個の特定の波長で、全ＵＶ吸収スペクトルの一部にわたって観察するように構成される。例示的な図８に示される液体クロマトグラフィーシステム８０において、（ｉ）ＥＬＳＤ１３またはＵＶ検出器１６のいずれか一方からの単一の信号、（ｉｉ）ＥＬＳＤ１３およびＵＶ検出器１６からの２つまたはそれ以上の信号、または（ｉｉｉ）２つまたはそれ以上の特定のＵＶ波長における２つ以上の検出応答を有する複合信号（ｎ個の検出応答まで）に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプルを収集する。同様に、例示的な図６に示される液体クロマトグラフィーシステム６０は、（ｉ）ＥＬＳＤ１３１またはＵＶ検出器１６１のいずれか一方からの単一の信号、（ｉｉ）ＥＬＳＤ１３１およびＵＶ検出器１６１からの２つまたはそれ以上の信号、または（ｉｉｉ）２つまたはそれ以上の特定のＵＶ波長における２つ以上の検出応答を有する複合信号（ｎ個の検出応答まで）に応じて、画分収集器１４は、新しいサンプルを収集する。
【００７６】
さらに、例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０において、ＵＶ検出器１６は、検出器信号（図示せず）を生成するために用いられてもよく、検出器信号は、（１）（ｉ）単一のセンサからの単一の検出信号応答から、または（ｉｉ）１より大きいｎ個の検出器のｎ個の検出器応答から生じ、また、検出信号は（２）少なくとも１つのスプリッタポンプ１５、ＥＬＳＤ１３およびＴ部１２に送られる。さらに、ＥＬＳＤ１３の検出器応答から生じる検出器信号（図示せず）は、ＵＶ検出器１６の１つ以上の設定を変更するために、ＵＶ検出器１６に送られてもよい。同様に、例示的な図６に示される液体クロマトグラフィーシステム６０において、ＵＶ検出器１６１は検出器信号（図示せず）を生成するために用いられてもよく、検出器信号は（１）（ｉ）単一のセンサからの単一の検出信号応答から、または（ｉｉ）１より大きいｎ個の検出器のｎ個の検出器応答から生じ、また、検出器信号は（２）少なくとも１つのシャトルバルブ１５１およびＥＬＳＤ１３に送られる。さらに、ＥＬＳＤ１３１の検出応答から生じる検出器信号（図示せず）は、ＵＶ検出器１６１の１つ以上の設定を変更するためにＵＶ検出器１６１に送られてもよい。
【００７７】
図９に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム９０に示されるように、与えられたシステム内の異なるタイプの検出器の位置は、システムプロ接の１つ以上の特徴を提供するために所望のように調節できる。例示的な液体クロマトグラフィーシステム９０において、ＥＬＳＤ１３は、ＵＶ検出器１６の下流に位置決めされる。このような構成において、ＵＶ検出器１６は、画分収集器１４のために、ＥＬＳＤ１３からの信号３１の発生の前に、検出器応答を提供し、信号６１（たとえば、（ｉ）単一のセンサから単一の検出器応答から生成され、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。また、ＵＶ検出器１６は、少なくとも１つのスプリッタポンプ１５、ＥＬＳＤ１３およびＴ部１２のために、スプリッタポンプ１５、ＥＬＳＤ１３および／またはＴ部１２が駆動または停止できるように、検出器応答を提供し且つ信号（図示せず）（たとえば、（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。
【００７８】
図示しないが、シャトルバルブは、類似のシステムプロセス特徴を提供するために、図９に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム９０内のＴ部１２およびスプリッタポンプ１５の代わりに用いることができることを理解されたい。このような構成において、ＵＶ検出器１６は、ＥＬＳＤ１３からの信号３１の発生の前に、画分収集器１４のために、検出器応答を提供し且つ信号６１（たとえば、（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。また、ＵＶ検出器１６は、少なくとも１つのシャトルバルブおよびＥＬＳＤ１３のために、シャトルバルブおよび／またはＥＬＳＤが駆動または停止できるように、検出器応答を提供し且つ信号（図示せず）（たとえば、（ｉ）単一のセンサからの単一の検出器応答、または（ｉｉ）１より大きいｎ個のセンサのｎ個の検出器応答から生じる信号）を発生させることができるように位置決めされる。システム６０、８０、および９０は、ＥＬＳＤおよびＵＶを検出器として言及したが、任意のＥＰＤのような破壊式検出器をＥＬＳＤのために用いることができ、また、任意の非破壊式検出器をＵＶ検出器の代わりに用いることができる。
【００７９】
他の例示的な実施形態において、本発明の液体クロマトグラフィーシステムは、２つ以上の非破壊式検出器（たとえば、上述のＵＶ検出器のような１つ以上の光学吸収検出器）を備える非破壊式システムを備えることができ、破壊式検出器（質量スペクトル計）はシステム内に存在しない。例示的な一実施形態において、液体クロマトグラフィーシステムは、ＵＶ検出器のような２つの光学吸収検出器を有し、サンプルを分析する方法は、２つ以上の特定の波長においてサンプルを観察するために２つ以上の検出器を用いるステップと；（ｉ）第１の波長における第１検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における第２検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）第１検出器応答および第２検出器応答により表現される合成応答の変化、に応じて、新しいサンプル画分を収集するステップと、を有する。
【００８０】
２つ以上のＵＶ検出器のような２つ以上の光学吸収検出器を用いる実施形態において、光学吸収検出器は、１つ以上のシステムの利点を提供するために、与えられた液体クロマトグラフィーシステム内に位置決めすることができる。２つ以上の光学吸収検出器は、サンプルが各検出器に実質的に同時に到達するように、互いに平行になるように位置決めでき、また、２つ以上の光学吸収検出器は、実質的に同時に信号（すなわち、第１検出器応答および第２検出器応答）を生成し、画分収集器に信号を送る。
【００８１】
さらなる実施形態において、非破壊式検出器（たとえば、ＲＩ検出器、ＵＶ検出器等）を単独で、または破壊式検出器（たとえば、ＥＰＤ、質量スペクトル計、分光光度計、放射分光計、ＮＭＲ等）と組み合わせて用いることができる。たとえば、質量スペクトル計のような破壊式検出器は、成分のピークの検出と、そのピークに関連する化学的性質を同時に検出することができる。これにより目標物を含む画分の迅速な決定が可能になる。他の検出技術に関しては、たとえば、分光光度計、質量スペクトル計、放射分光計、ＮＭＲなどによる、目標物を含む画分の後の分離決定が必要となる。２つ以上の化学的性質がフラッシュカートリッジから同時に抽出される場合（すなわち、同じ滞留時間を備える）、特定の検出器を用いるときに（すなわち化学的性質管の差異を同定できない検出器）、これらの検出器は化学組成を決定できないので、それらはシステムにより同じバイアルに堆積される。質量スペクトル検出器が破壊式検出器として用いられる例示的な実施形態において、同時に抽出される全ての成分は同定され得る。これは、分離後に純度を確認する必要性を無くす。
【００８２】
任意の上述の液体クロマトグラフィーシステムにおいて、少なくとも１つのＵＶ検出器のような少なくとも１つの検出器を、少なくとも１つのＵＶ検出器またはＥＬＳＤのような少なくとも１つの他の検出器の下流に（たとえば直列に）位置決めすることは有利となり得る。このような実施形態において、第１検出器における第１検出器応答は、信号を提供し、且つ（１）スプリッタポンプ、（２）シャトルバルブ、（３）第２検出器、および（４）Ｔ部の少なくとも１つに信号を送るために用いられる。たとえば、第１検出器の第１検出器応答は、信号を生成し、スプリッタポンプまたはシャトルバルブに信号を送るために用いられ、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの、１つ以上の流れまたは圧力設定を変更し、（ｉｖ）あるいは、（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の少なくとも１つを行う。適切な流れおよび圧力設定は、限定するわけではないが、上述の流れおよび圧力設定を含む。典型的には、信号は、たとえば電気信号、気体信号、ディジタル信号、ワイヤレス信号の形態である。
【００８３】
いくつかの実施形態において、複数の検出器（すなわち２つ以上の検出器）は、システム内の他の検出器から独立して、各検出器が、（１）スプリッタポンプ、（２）シャトルバルブ、（３）他の検出器、（４）Ｔ部、の少なくとも１つに信号を送ることができるように位置決めされる。たとえば、複数の光学吸収検出器（たとえばＵＶ検出器）は、与えられたシステム内で、シャトルバルブに独立した信号を提供するように位置決めでき、この信号により、シャトルバルブに能動的に制御された流体サンプルをＥＬＳＤのような他の検出器に提供させる。
【００８４】
他の実施形態において、第１検出器の第１検出応答は、信号を生成し、第２検出器へ信号を送るために用いられ、（ｉ）第２検出器を駆動し、（ｉｉ）第１検出器で用いられる第１波長に実質的に類似した波長で第２検出器を駆動し、（ｉｉｉ）第１検出器で用いられる第１波長以外の波長で第２検出器を駆動し、（ｉｖ）第２検出器を停止し、（ｖ）第２検出器の他のいくつかの設定を変更し（たとえば、第２検出器の観察される波長）、または、（ｖｉ）（ｉ）から（ｖ）までの任意の組み合わせを行う。
【００８５】
他の実施形態において、第１検出器の第１検出応答は、信号を生成し信号をＴ部に送るために用いることができ、（ｉ）バルブを開き、または、（ｉｉ）液体クロマトグラフィーシステムの一部を通る流体流れを開始または停止するようにバルブを閉じる。上述したように、典型的には、信号は、たとえば電気信号、気体信号、ディジタル信号、またはワイヤレス信号の形態である。
Ｃ．  検出器応答からの信号の生成
本発明による１つの方法はさらに、１つまたはそれ以上の検出器応答から信号を生成するステップを有することができる。図１に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０のようないくつかの実施形態において、単一の検出器は、サンプル成分の存在を検出し、流体流れ内のサンプル成分の存在および濃度に基づいて検出器応答を生成する。図６に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム５０のような他の実施形態において、２つ以上の検出器を、１つ以上のサンプル成分の存在を検出するために用いることができ、流体流れ内の１つ以上のサンプル成分の存在および濃度に基づいて２つ以上の検出応答を生成させることができる。
【００８６】
上述のように、与えられた検出器は、１つ以上の検出器応答を提供し、これは、信号を生成し、本明細書で説明されるような液体クロマトグラフィーシステム内の１つ以上の構成要素（たとえば、画分収集器、他の検出器、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、またはＴ部）に信号を送るのに用いることができる。典型的には、与えられた検出器応答の変化は、信号の生成および送信をトリガする。信号を生成および１つ以上の構成要素への信号の送信をトリガし得る、与えられた検出応答の変化は、限定するわけではないが、検出器応答値の変化、検出器応答値の閾値への到達または超過、検出器応答値の時間に関する傾斜、検出器応答値の時間傾斜の閾値、検出器応答値の時間傾斜の変化、検出器応答値の時間傾斜の閾値の変化、または、これらの組み合わせを含む。
【００８７】
例示的な一実施形態において、本発明の方法は、少なくとも１つの検出器から検出器信号を生成するステップを有し、この検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち、検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち、検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または、（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせおよび少なくとも（ｉ）または少なくとも（ｉｉ）を含む所望の組み合わせ、に応答して生成される。この例示的な実施形態において、検出器応答の形状から物質が認識され、特に、検出器応答の時間についての１次および／または２次微分（すなわち、それぞれ傾斜および傾斜の変化）から認識される。特に、コンピュータプログラムは、検出器応答値の時間シーケンスを解析し、その変化率（すなわち１次微分）および変化率の率（すなわち２次微分）を評価する。１次微分および２次微分の両方が増加している場合、物質が検出され始めている。同様に、１次微分および２次微分の両方が減少しているとき、物質の検出が終了してきている。
【００８８】
実際の検出器の値は典型的にはノイズを含み（たとえばギザギザである）、時間についての数値的なローパスフィルターを用いることが望ましい（たとえばスムージングする）。従って、少なくとも１つの検出器から検出器信号を生成するステップは、好ましくはさらに、（ｉ）時間傾斜データ、（ｉｉ）時間傾斜の変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせについて、数値的なローパスフィルターを行うステップを有し、（ｉ）時間傾斜、（ｉｉ）時間傾斜の変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の実際の変化を検出器応答の考えられるノイズから識別する。好ましい実施形態において、有限インパルス応答（ＦＩＲ）フィルターまたは無限インパルス応答（ＩＩＲ）フィルターを、時間に関するデータの数値的なローパスフィルターとして用いることができる（たとえば、いくつかの標本の単純平均）。典型的には、決定アルゴリズムは、ノイズではなく、実際の検出器応答／信号の確認として、時間における小さな数の逐次呼出しを用いる。
【００８９】
他の実施形態において、サンプルを分析する方法は、各検出器からの検出応答成分を有する複合信号を生成するステップと、複合信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集するステップとを有することができる。これらの実施形態において、複合信号を生成するステップは、（ｉ）検出応答値、（ｉｉ）時間の関数としていの与えられた検出応答の傾斜（すなわち、与えられた検出応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として与えら得Ｒ他検出応答の傾斜の変化（すなわち、与えられた検出応答の２次微分）、または（ｉｖ）各検出器（すなわち２以上の検出器のそれぞれ）からの（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを、数値的に補正するステップを含むことができる。たとえば、いくつかの実施形態において、複合信号は（ｉ）与えられた時間における各検出器（すなわち２以上の検出器の各々）の検出器応答値の積、（ｉｉ）与えられた時間における検出器応答の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有することができる。
【００９０】
複合信号が用いられる他の実施形態において、複合信号を生成するステップは、（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜（すなわち、与えられた検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜の変化（すなわち、与えられた検出器応答の２次微分）、または、（ｉｖ）１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）からの（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、または、（ｉｖ）システム内に存在する他の検出器応答との任意の組み合わせ、を数値的に補正するステップを有することができる。たとえば、いくつかの実施形態において、複合信号は、（ｉ）与えられた時間における、１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）の検出器応答値の積、および、他の検出器（たとえば、ＵＶ検出器と組み合わせて用いられるＥＬＳＤ）からの任意の追加的な検出器応答値との積、（ｉｉ）与えられた時間における、１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）の検出器応答、および他の検出器からの任意の追加的な検出応答、の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における、１つの検出器内の各センサ（すなわち、ｎ個の波長でサンプルを観察するｎ個のセンサ）の検出器応答、および、他の検出器からの任意に追加的な検出応答、の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を有することができる。
【００９１】
Ｄ．１つまたはそれ以上のサンプル画分の収集
与えられた液体クロマトグラフィーシステム内の少なくとも１つの検出器からの１つまたはそれ以上の信号に応答して、１つまたはそれ以上のサンプル画分を収集するために、本発明の方法はさらに、図１−３Ａおよび図４−９に示される例示的な画分収集器１４のような画分収集器を用いてもよい。たとえば、図１、２、３Ａにそれぞれ示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０、２０、３０において、サンプルを分析する方法は、さらに、第１検出器１３からの１つ以上の信号に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集するステップを備えることができる。図４、５、６にそれぞれ示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム４０、５０、６０において、サンプルを分析する方法はさらに、第１検出器１３（または第１検出器１３１）、第２検出器１６（または第２検出器１６１）、または第１検出器１３および第２検出器１６の両者（または第１検出器１３１および第２検出器１６１の両者）からの１つ以上の信号に応じて、１つ以上のサンプル画分を収集するステップを備えることができる。
【００９２】
本発明のいくつかの実施形態において、画分収集器は、少なくとも１つの検出器からの１つ以上の信号を認識、受信、処理するように構成され、また、１つ以上の信号に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集するように構成される。他の実施形態において、追加的なコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置が少なくとも１つの検出器からの１つ以上の信号を処理し、その後に、画分収集器に、認識可能な信号を提供するために用いられる、画分収集器への信号は、追加的なコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置からの１つ以上の信号に基づいて、画分収集器が１つ以上のサンプル画分を収集するように指示するものである。
【００９３】
上述のように、１つ以上のシステム特徴を与ええるために、システムコンポーネントは、与えられた液体クロマトグラフィーシステム内に位置決めすることができる。たとえば、少なくとも１つの検出器は、（ｉ）与えられた検出器応答の検出と、（ｉｉ）検出器応答から生成される信号に基づいてサンプル画分を収集するステップと、の間の時間遅れを最小化するように、与えられた液体クロマトグラフィーシステム内に位置決めすることができる。本発明の例示的な実施形態において、液体クロマトグラフィーシステムは、好ましくは、２．０秒より小さい（または１．５秒より小さい、または１．０秒より小さい、または０．５秒より小さい）、与えられた検出器信号の画分収集器への時間遅れ（すなわち、（ｉ）与えられた検出器の検出と、（ｉｉ）検出器から生成される信号に基づくサンプル画分の収集ステップと、の間の時間遅れ）の最大値を備える。
【００９４】
２つ以上の検出器またはｎ個のセンサを備える少なくとも１つの検出器（以下に説明される）を用いる本発明の例示的な実施形態において、液体クロマトグラフィーシステムは好ましくは、２．０秒より小さい（または１．５秒より小さい、または１．０秒より小さい、または０．５秒より小さい）、任意の検出器からの任意の検出器信号の画分収集器への時間遅れ（すなわち、（ｉ）与えられた検出器応答の検出と、（ｉｉ）検出器応答から生成される信号（たとえば単一信号または複合信号）に基づいてサンプル画分を収集するステップと、の間の時間遅れ）の最大値を示す。
【００９５】
Ｅ．  サンプル成分の分離ステップ
本発明の方法は、与えられたサンプル内の成分を分離するために液体クロマトグラフィー（ＬＣ）ステップを用いる。特定のサンプルに依存して、様々なＬＣカラム、可動フェーズ、および他のプロセスステップ条件（たとえば、供給速度、勾配など）を用いることができる。
【００９６】
本発明において、多くのＬＣカラムを用いることができる。一般に、本発明において、ポリマーまたは無機の通常相、反対相、イオン交換、親和力、疎水性相互作用、親水性相互作用、混合モード、および寸法除外カラム、を用いることができる。例示的な商業的に入手できるカラムは、限定するわけではないが、Ｇｒａｃｅ  Ｄａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から、ＶＹＤＡＣ（登録商標）、ＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）、ＤＡＶＩＳＩＬ（登録商標）、ＡＬＬＴＩＭＡ（商標）、ＶＩＳＩＯＮ（商標）、ＧＲＡＣＥＰＵＲＥ（商標）、ＥＶＥＲＥＳＴ（商標）、およびＤＥＮＡＬＩ（商標）の商標で入手できるもの、および他の類似の会社から入手できるものを含む。
【００９７】
本発明において、多くの可動フェーズ成分を用いることができる。適切な可動フェーズ成分は、限定するわけではないが、アセトニトリル、ジクロロメタン、エチルアセテート、ヘプタン、アセトン、エチルエーテル、テトラヒドロフラン、クロロホルム、ヘキサン、メタノール、イソプロピルアルコール、水、エタノール、緩衝材、およびこれらの組み合わせを含む。
【００９８】
Ｆ．  ユーザーインターフェースステップ
本発明におけるサンプルを分析する方法は、さらに、操作者または使用者が液体クロマトグラフィーシステムの１つ以上のシステムコンポーネントにアクセスする１つ以上のステップを備えることができる。たとえば、サンプルを分析する方法は、１つ以上の以下のステップを備えることができる。すなわち、試験のためにサンプルを液体クロマトグラフィーシステム内に入れるステップ；システム内の１つ以上の要素の１つ以上の設定（たとえば、流量または圧力設定、波長など）を調節するステップ；１つ以上のセンサおよび／または複数の検出器からの１つ以上の検出器応答を考慮する所望の数学的アルゴリズムに基づいて、信号を発生させるように少なくとも１つの検出器をプログラムするステップ；１つ以上の検出器応答を考慮する所望の数学的アルゴリズムに基づいて信号を生成するように１つ以上のシステムコンポーネント（検出器以外）をプログラムするステップ；少なくとも１つの検出器からの信号（たとえば、単一信号または複合信号）を認識し、受信した信号に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集するように、画分収集器をプログラムするステップ；画分収集器が１つ以上のシステムコンポーネント（画分収集器以外）からの入力に基づいて１つ以上のサンプルを収集できるように、少なくとも１つの検出器からの入力信号を認識し、この入力信号を画分収集器が認識でき且つ処理できる信号に変換するように１つ以上のシステムコンポーネント（画分収集器以外）をプログラムするステップ；および、所望の時間において、または、液体クロマトグラフィーシステム内の他の動作（たとえば、操作者または使用者に表示される検出器応答）に応答して、１つ以上のシステムコンポーネント（たとえば、Ｔバルブ、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、または検出器）を駆動または停止するステップ、を備えることができる。
【００９９】
ＩＩ．サンプルを分析するための装置
本発明はまた、上述の方法のステップの１つ以上を用いてサンプルを分析することができるまたはサンプルの分析に貢献することができる装置および装置コンポーネントに関する。
【０１００】
上述したように、本発明の例示的ないくつかの実施形態において、サンプルを分析する装置は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）第１入口、第１出口、および第２出口を備えるＴ部、（ｉｉｉ）Ｔ部の第１出口と流体連通する画分収集器、（ｉｖ）Ｔ部の第２出口と流体連通する第１検出器、および（ｖ）Ｔ部の第２出口および第１検出器と流体連通するように位置決めされる、第１検出器への流体流れを能動的に制御するように構成を備えることができる。本発明の他の例示的な実施形態において、第１検出器への流体流れを能動的に制御するために、Ｔ部／スプリッタポンプの組み合わせの代わりにシャトルバルブを用いることができる。
【０１０１】
図１−９には示されていないが、上述の任意の装置（たとえば例示的な液体クロマトグラフィーシステム１０−９０）または装置コンポーネントは、さらに、システムハードウェアを備えることができ、このシステムハードウェハは（ｉ）検出器応答値または検出器応答値の変化の認識、（ｉｉ）検出器応答値または検出器応答値の変化から信号の生成、（ｉｉｉ）１つ以上のシステムコンポーネントへの信号の伝達、（ｉｖ）受信コンポーネントにより生成された信号の認識、（ｖ）受信コンポーネント内で認識された信号の処理、および（ｖｉ）認識された信号に応じた受信コンポーネントの処理ステップの開始、を可能にする。
【０１０２】
一実施形態において、装置（たとえば、液体クロマトグラフィーシステム１０−９０）または与えられた装置コンポーネントは、さらに、システムハードウェアを備えることができ、このシステムハードウェハは、第１検出器が、スプリッタポンプまたはシャトルバルブに駆動信号を伝達するのを可能にし、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの流量または圧力設定の１つ以上を変更し、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを行う。適切な流量および圧力の設定は、限定するわけではないが、（ｉ）バルブ位置、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの圧力、（ｉｉｉ）バルブへの空気圧力、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を含む。
【０１０３】
いくつかの実施形態において、スプリッタポンプは、Ｔ部と第１検出器との間に位置決めすることができる（たとえば、図１におけるＴ部１２と第１検出器１３との間に位置決めされたスプリッタポンプ１５を参照されたい）。他の実施形態において、第１検出器は、Ｔ部とスプリッタポンプとの間に位置決めすることができる（たとえば図２におけるＴ部１２とスプリッタポンプ１５との間に位置決めされた第１検出器を参照されたい）。
【０１０４】
他の実施形態において、本発明の装置は、（ｉ）クロマトグラフィーカラム、（ｉｉ）２つ以上の検出器、および（ｉｉｉ）２つ以上の検出器に流体連通する画分収集器を有し、画分収集器は、２つ以上の検出器からの１つ以上の検出器信号に応答して、１つ以上のサンプル画分を収集するように構成される。いくつかの実施形態において、２つ以上の検出器は、２つ以上の非破壊式検出器（たとえば２つ以上のＵＶ検出器）を有し、システム内に破壊式検出器を備えない。
【０１０５】
２つ以上の検出器が存在する場合、第１検出器と第２検出器との間の流体流れの容積を分割するために、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを用いることができる。他の実施形態において、一方の検出器からの検出器応答に応じて、もう一方の検出器への流体流れを開始または停止するために、スプリッタポンプまたはシャトルバルブを用いることができる。さらに、与えられたシステムにおいて、２つ以上の検出器への流体流れを能動的に制御するために、複数のスプリッタポンプおよび／またはシャトルバルブを用いることができる。
【０１０６】
上述したように、装置はさらにシステムハードウェハを備えることができ、このシステムハードウェアは、１つ以上の検出器応答から検出器信号の生成を可能にする。例示的な一実施形態において、装置はシステムハードウェアを備え、このシステムハードウェアは、検出器信号の生成を可能にし、この検出器信号は、（ｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜（すなわち、検出器応答の１次微分）、（ｉｉ）時間の関数としての検出器応答の傾斜の変化（すなわち検出器応答の２次微分）、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉｖ）少なくとも（ｉ）または（ｉｉ）を含む（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、に応じて生成される。システムハードウェハは、望ましくは、さらに、ローパス数値フィルタリング能力を有し、（ｉ）傾斜データ、（ｉｉ）傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を時間に関してフィルタ処理し、与えられた検出器応答中の考えられるノイズから、ｉ）傾斜データ、（ｉｉ）傾斜データの変化、（ｉｉｉ）随意に、検出器応答値の閾値、または（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の実際の変化を区別する。
【０１０７】
複数検出器システムにおいて、システムハードウェハは、各検出器からの検出器応答成分、与えられた検出器内の複数のセンサからの検出応答成分、を含む、複合信号の生成を可能にするために用いることができる。これらの実施形態において、システムハードウェアは、画分収集器に、画分収集器が複合信号の変化に応じて新しいサンプル画分を収集するように指示する命令／信号を送るように構成される。複合信号は、各検出器からの（ｉ）検出器応答値、（ｉｉ）時間の関数として与えられた検出器応答の傾斜（すなわち与えられた検出器応答の１次微分）、（ｉｉｉ）時間の関数としてい与えられた検出器応答の傾斜の変化（すなわち与えられた検出器応答の２次微分）、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、の間に数学的な相関を備えるようにすることができる。たとえば、複合信号は、（ｉ）与えられた時間における各検出器の検出器応答値の積、（ｉｉ）与えられた時間における検出器応答値の１次微分の積、（ｉｉｉ）与えられた時間における検出器応答の２次微分の積、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせを含むことができる。
【０１０８】
望ましい一つの構成において、サンプルを分析するための装置は、２つ以上の特定の光学波長（たとえばＵＶスペクトル内）でサンプルを観察するように構成された少なくとも１つの検出器を有する。また、本装置はシステムハードウェアを有し、システムハードウェハは、画分収集器が、（ｉ）第１波長における検出器応答の変化、（ｉｉ）第２波長における検出器応答の変化、または（ｉｉｉ）第１および第２の波長における検出器応答により表される複合信号の変化、に応じて新しいサンプル画分を収集することを可能にする。各検出器は、同一の波長で、異なる波長で、または複数の波長で動作することができる。さらに、各検出器は、互いに並列、直列、あるいは並列と直列とのいくつかの組み合わせになるようにすることができる。
【０１０９】
上述したように、例示的な一実施形態において、装置は、ＵＶ吸収スペクトルの一部または全部（または他のタイプの検出器を用いる吸収スペクトルの任意の部分）にわたってｎ個の光学波長でサンプルを観察するように構成されたｎ個のセンサを有する単一の検出器を備えることができる。また、装置はシステムハードウェアを備えることができ、システムハードウェアは、画分収集器が、（ｉ）ｎ個の光学波長におけるｎ個の検出器応答の任意の１つの変化、（ｉｉ）ｎ個の検出器応答により表される複合応答の変化、に応じて、新しいサンプル画分を収集するのを可能にする。
【０１１０】
少なくとも１つの検出器への流体流れを能動的に制御するために、スプリッタポンプまたはシャトルバルブが存在する場合、サンプルを分析するための装置はさらに、スプリッタポンプまたはシャトルバルブへの駆動振動を生成することができ、（ｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを駆動し、（ｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブを停止し、（ｉｉｉ）スプリッタポンプまたはシャトルバルブの１つ以上の流量または圧力を変化させ、または（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）までの任意の組み合わせ、を行う。駆動信号は、たとえば、システム操作者または検出器のようなシステムコンポーネントにより生成することができる（すなわち、駆動信号は、上述したように、検出器応答値に応じて、または検出器の検出器応答値の変化に応じて、検出器により生成されて伝達される）。
【０１１１】
本発明のさらなる実施形態において、クロマトグラフィーシステムを用いて流体のサンプルを分析するための装置は、クロマトグラフィーカラムまたはカートリッジから流出する第１流体通路；流体のサンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器；および、第１流体通路を通る流体の流れ特性に実質的に影響を与えることなく、流体のサンプルアリコットを第１流体通路から検出器へ移動させるシャトルバルブ、を含む。第１流体通路またはチャネルは、少なくともバルブの一部を通るときにおいて、実質的に線形または真っ直ぐであるので、第１流体通路を通る流体の流れを実質的に層流とすることができる。さらなる例示的な実施形態において、第１流体通路を通る流体の圧力は、実質的に一定であり、および／または実質的に増加しない。他の実施形態において、流体の流量は第１流体通路を通るときに実質的に一定である。一代替実施形態において、シャトルバルブから検出器へ流体のアリコットサンプルを輸送するのに、第２流体通路が用いられる。少なくともバルブの一部を通るところで、第２流体通路またはチャネルは実質的に線形または真っ直ぐであるので、第２流体通路を通る流れを実質的に層流とすることができる。例示的な一実施形態において、第２流体通路を通る流体の圧力は実質的に一定であり、および／または実質的に増加しない。さらなる実施形態において、流体の流量は、第２流体通路を通るときに実質的に一定にすることができる。
【０１１２】
さらなる例示的な実施形態において、クロマトグラフィーを用いて流体のサンプルを分析するための装置は、クロマトグラフィーカラムから流出する第１流体通路；サンプルを分析することができる少なくとも１つの検出器へ流体のサンプルを輸送する第２流体通路；第１流体通路から第２流体通路へ、流体のアリコットサンプルを移動させるシャトルバルブであり、シャトルバルブを通る連続な第２流体通路を維持する、シャトルバルブ、を含む。一実施形態において、シャトルバルブを通る連続な第１流れ通路は、流体のアリコットサンプルが第１流体通路から取り除かれるときに維持される。他の実施形態において、シャトルバルブを通る連続な第１および第２流れ通路は、流体のアリコットサンプルが第１流体通路から取り除かれて第２流れ通路に移動させられるときに、維持される。
【０１１３】
本発明の例示的な実施形態において、サンプルを分析するための装置はさらに、１つ以上の検出器信号に応じて１つ以上のサンプル画分を収集するように構成される画分収集器を有し、検出器信号は、（ｉ）第１検出器、（ｉｉ）第２検出器（または任意の数の追加の検出器）、または（）第１検出器および第２検出器（または任意の数の追加の検出器）の両方から発される。複数の検出器が用いられる場合、本装置は、画分収集器を、上述のように各検出器からの１つ以上の検出器応答による複合信号の変化に応じて、新しいサンプル画分を収集するように構成することができる。
【０１１４】
上述したように、いくつかの例示的な実施形態において、サンプルを分析するための装置は、少なくとも１つの検出器からの信号を認識し、受信し、処理するように構成された画分収集器を有し、また、画分収集器は、１つ以上の信号に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集する。他の実施形態において、サンプルを分析する装置は、追加のコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置を有し、これは、少なくとも１つの検出器からの１つ以上の信号を処理し、入力信号を画分収集器が認識できる信号に変換することができる。この後者の実施形態において、画分収集器は、追加のコンピュータまたはマイクロプロセッサ装置からの１つ以上の信号に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集し、画分収集器の信号処理成分に基づかない。
【０１１５】
上述した例示的な液体クロマトグラフィーシステムの任意のものは、任意の数の検出器、スプリッタポンプ、Ｔ部、シャトルバルブを備えることができ、これらは１つ以上のシステム性能を提供するように与えられたシステム内に戦略的に配置される。たとえば、図６の例示的な液体クロマトグラフィーシステム６０には示されていないが、追加の検出器を、カラム１１とシャトルバルブ１５１との間、および／またはシャトルバルブ１５１と検出器１６１との間に位置決めすることができる。図７に示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム７０には示されていないが、追加の検出器を、カラム１１とシャトルバルブ１５１との間、および／またはシャトルバルブ１５１とシャトルバルブ１７１との間、および／またはシャトルバルブ１７１と画分収集器１４との間に位置決めすることができる。追加の検出器は、図８および図９にそれぞれ示される例示的な液体クロマトグラフィーシステム８０および９０内にも同様に位置決めすることができる。
【０１１６】
以下に説明するように、多数の商業的に入手できる部品を本発明の装置に用いることができる。
【０１１７】
Ａ．  クロマトグラフィーカラム
任意の公知のクロマトグラフィーカラムを本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適当なクロマトグラフィーカラムは、限定するわけではないが、Ｇｒａｃｅ  Ｄａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社（ディアフィールド、イリノイ州）から、ＧＲＡＣＥＰＵＲＥ（商標）、ＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）、ＶＹＤＡＣ（登録商標）、およびＤＡＶＩＳＩＬ（登録商標）の商標で入手できる。
【０１１８】
Ｂ．  検出器
任意の公知の検出器を本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切な検出器は、限定するわけではないが、Ｏｃｅａｎ  Ｏｐｔｉｃｓ社（ダニーディン、フロリダ州）からＵＳＢ２０００（商標）の商標で入手できるＵＶ検出器；Ｇｒａｃｅ  Ｄａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社（ディアフィールド、イリノイ州）から３３００ＥＬＳＤ（商標）の商標で入手できる蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤｓ）；Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社（ミルフォード、マサチューセッツ州）からＺＱ（商標）の商標で入手できる質量スペクトル計（ＭＳｓ）；Ｑｕａｎｔ社（ブレーン、ミネソタ州）からＱＴ−５００（商標）の商標で入手できる凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤｓ）；ＥＳＡ社（チェルムズフォード、マサチューセッツ州）からＣＯＲＯＮＡ  ＣＡＤ（商標）の商標で入手できるコロナ放電検出器（ＣＤＤｓ）；Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社（ミルフォード、マサチューセッツ州）から２４１４の標識で入手できる屈折率検出器（ＲＩＤｓ）；およびＬａｂａｌｌｉａｎｃｅ社（St. Collect、ペンシルバニア州）からＵＬＴＲＡＦＬＯＲ（商標）の商標で入手できる蛍光検出器（ＦＤｓ）を含む。
【０１１９】
いくつかの実施形態において、商業的に入手可能な検出器は、修正またはプログラムされる必要があるかもしれない。あるいはいくつかの検出器は、本発明の上述の方法のステップの１つまたはそれ以上を実行するために構築する必要があるかもしれない。
【０１２０】
Ｃ．  スプリッタポンプ
任意の公知のスプリッタポンプを本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切なスプリッタポンプは、限定するわけではないが、ＫＮＦ社（トレントン、ニュージャージー州）からＬＩＱＵＩＤ  ＭＩＣＲＯ（商標）の商標で入手できるスプリッタポンプを含む。
【０１２１】
Ｄ．  シャトルバルブ
任意の公知のシャトルバルブを本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切なシャトルバルブは、限定するわけではないが、Ｖａｌｃｏ社（ヒューストン、テキサス州）からＣＨＥＭＩＮＥＲＴ（商標）、Ｒｈｅｏｄｙｎｅ（登録商標）の商標で入手できるシャトルバルブ、Ｉｄｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ社からＭＲＡ（登録商標）の商標で入手できるシャトルバルブ、および本明細書で説明する連続流れシャトルバルブを含む。
【０１２２】
Ｅ．  画分収集器
任意の公知の画分収集器を本発明の装置に用いることができる。商業的に入手できる適切な画分収集器は、限定するわけではないが、Ｇｉｌｓｏｎ社（ミドルトン、ウィスコンシン州）から２１５の表示で入手することができる画分収集器を含む。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、商業的に入手できる画分収集器は、修正されおよび／またはプログラムされる必要があるかもしれない。または、いくつかの画分収集器は、本発明の上述の方法のステップの１つまたはそれ以上を実行するために構築される必要があるかもしれない。たとえば、少なくとも１つの検出器からの１つ以上の信号を認識し、受信し、処理して、１つ以上の信号に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集するように構成される画分収集器は、現時点では商業的には入手できないかもしれない。
【０１２４】
ＩＩＩ．  コンピュータソフトウェア
本発明はさらに、上述の方法のステップの１つまたはそれ以上を実行するための、コンピュータが実行可能な命令が格納された、コンピュータで読取り可能な媒体に関する。たとえば、コンピュータが実行可能な命令が格納されたコンピュータが読取り可能な媒体は、システム内の１つ以上の要素の１つ以上の設定（たとえば流れ設定、波長等）を調節し；１つ以上の検出器応答を考慮する所望の数学的アルゴリズムに基づいて信号を発生させ；少なくとも１つの検出器からの信号を認識し；受信信号に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集し；少なくとも１つの検出器からの入力信号を認識して、入力信号を画分収集器が認識および処理可能な信号に変換し、画分収集器が、所望の時間において、または液体クロマトグラフィーシステム内の他のいくつかの活動（たとえば検出器応答）に応じて、１つ以上のシステムコンポーネント（たとえばＴバルブ、スプリッタポンプ、シャトルバルブ、または検出器）からの入力に基づいて１つ以上のサンプル画分を収集することができるようにするための命令を格納する。
【０１２５】
ＩＶ．  応用／使用
上述の方法、装置およびコンピュータソフトウェアは、様々なサンプル内の１つ以上の成分の存在を検出するために用いることができる。上述の方法、装置、およびコンピュータソフトウェアは、液体クロマトグラフィーを用いる任意の産業に応用でき、限定するわけではないが、石油産業、製薬産業、分析研究分野などに応用できる。
【０１２６】
例
本発明はさらに、以下の例により説明される。これらの例はいかなる意味でも本発明の範囲を限定するものではない。本明細書の説明を参照することにより、様々な他の実施形態、修正形態、等価な形態が、本発明の趣旨および／または添付の特許請求の範囲から逸脱することなく明確に当業者に認識される。
【０１２７】
例１
この例において、フラッシュＲＥＶＥＬＥＲＩＳ（商標）システム（Ｇｒａｃｅ  Ｖａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から入手できる）が用いられた。スクロースおよびアスピリンを含む４ｍＬの混合物が、フラッシュシステム内に取り付けられた４ｇ  ＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）Ｃ１８フラッシュカラム（Ｇｒａｃｅ  Ｖａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から入手できる）内に注入された。ＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）ｍｏｄｅｌ  ３００ＬＣポンプを用いて、５０／５０のメタノール／水  可動フェーズがシステムを通じてポンプされた。カラム流出物はＫＮＦスプリッタポンプに導かれ、ＫＮＦスプリッタポンプは、カラム流出物を３００ｕＬ／ｍｉｎでＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）３３００ＥＬＳＤに導いた。流出物の残りは、Ｏｃｅａｎ  Ｏｐｔｉｃｓ  ＵＶ検出器を通して、Ｇｉｌｓｏｎ画分収集器に流れた。
【０１２８】
スクロースとアスピリンは、フラッシュカラム上で分離された。スクロースとアスピリンの両者は、ＥＬＳＤにより検出された。ＵＶ検出器だけがアスピリンを検出した。両方の検出器は、同時にアスピリンに応答した。画分収集器は、ＵＶ検出器およびＥＬＳＤ検出器からの複合信号に応答して、スクロースおよびアスピリンを分離収集バイアル内に堆積させた。
【０１２９】
例２
この例において、フラッシュＲＥＶＥＬＥＲＩＳ（商標）システム（Ｇｒａｃｅ  Ｖａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から入手できる）が用いられた。ジオクチルフタラートおよびブチルパラベンを含む４ｍＬの混合物が、フラッシュシステム内に取り付けられた４ｇ  ＧＲＡＣＥＲＥＳＯＬＶ（商標）  Ｃ１８フラッシュカートリッジ（Ｇｒａｃｅ  Ｖａｖｉｓｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ社から入手できる）内に注入された。ＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）ｍｏｄｅｌ  ３００ＬＣポンプを用いて、８０／２０のメタノール／水  可動フェーズがポンプされた。カラム流出物は、本明細書で説明されたシャトルバルブに導かれ、シャトルバルブは、カラム流出物を３００ｕＬ／ｍｉｎでＡＬＬＴＥＣＨ（登録商標）３３００ＥＬＳＤに導いた。流出物の残りは、Ｏｃｅａｎ  Ｏｐｔｉｃｓ  ＵＶ検出器を通して、Ｇｉｌｓｏｎ画分収集器に流れた。
【０１３０】
この２つの成分混合物は、非発色性化合物（ＵＶ光を吸収しない物質）と発色性化合物である。非発色性化合物は、フラッシュカートリッジから初めに抽出される。図１１は、クロマトグラムを示し、これはＥＬＳＤだけがサンプル中の全ての成分を同定することを示しており、クロマトグラム中の２つのピークに証拠付けられる。ＵＶ検出器は、２つの波長において、非発色性化合物を同定しない（ＥＬＳＤで最初のピークとして同定される）。ＥＬＳＤ信号だけが、画分収集器を適切に制御でき、両方の化合物を捕獲できるであろう。（従来のフラッシュシステムの場合のように、）ＵＶ検出器が画分収集器を駆動する場合、第１の化合物は廃棄部へ送られて不適切に収集容器に堆積させられ、これらの画分が所望のサンプルを含むという知見が得られない。従来のフラッシュ装置において、ＵＶ検出器が同定できなかった物質を探すために、クロマトグラフィー分離の後に、全ての画分は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によりスクリーニングされる。この例は、本発明によりＥＬＳＤを備えるフラッシュ装置は、分離後のＲＬＣスクリーニングを必要とせずに、発色性化合物および非発色性化合物の両方を同定して分離できることを示している。
【０１３１】
本発明が限られた数の実施形態とともに説明されてきたが、これらの特定の実施形態は、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲に記載されている。本明細書の例示的な実施形態を参照することにより、当業者は、さらなる修正形態、等価な形態、および変形例が可能であることを認識するであろう。例の中のあらゆる部分、パーセンテージは、明細書の他の部分と同様に、特に明示しないかぎり重量による。さらに、特定の性質、計測単位、条件、物理状態、割合を示すように明細書または請求項に記載された数値の範囲は、参照により文字通りに明示的に統合することを意図しており、この範囲内の数値は記載された範囲内の任意の部分集合を含む。たとえば、下限ＲＬおよび上限ＲＵをともなう数値範囲が開示されているときは、この範囲内の任意の数Ｒが明確に開示されている。特に、以下の範囲の数値Ｒが特に開示されている。すなわち、Ｒ＝ＲＬ＋ｋ（ＲＵ−ＲＬ）が開示されており、ここで、ｋは１％から１００％までの範囲の１％刻みの変数であり、たとえば、ｋは１％、２％、３％、４％、５％．．．５０％、５１％、５２％．．．９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％である。さらに、上述のように計算される、Ｒの任意の２つの値により示される任意の数値範囲が開示されている。これらの開示に加えて、本発明の任意の修正は、以上の説明および添付の図面から当業者に明らかである。このような修正形態は、添付の特許請求の範囲内にあることを意図している。本明細書で引用された文献はすべて本明細書に統合される。
【図１】
2014038105.tif 000003
【図２】
2014038105.tif 000004
【図３Ａ】
2014038105.tif 000005
【図３Ｂ】
2014038105.tif 000006
【図３Ｃ】
2014038105.tif 000007
【図４】
2014038105.tif 000008
【図５】
2014038105.tif 000009
【図６】
2014038105.tif 000010
【図７】
2014038105.tif 000011
【図８】
2014038105.tif 000012
【図９】
2014038105.tif 000013
【図１０Ａ】
2014038105.tif 000014
【図１０Ｂ】
2014038105.tif 000015
【図１０Ｃ】
2014038105.tif 000016
【図１１】
2014038105.tif 000017
【手続補正書】
【提出日】平成25年10月9日(2013.10.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロマトグラフィーの実行中に、クロマトグラフィーシステムでのサンプル流れ内における１つまたはそれ以上のサンプル要素を検出および収集する方法であって、
少なくとも１つの蒸発性粒子検出器を含む少なくとも１つの破壊式検出器から、前記クロマトグラフィーの実行中に第１信号を生成するステップと、
少なくとも１つの非破壊式検出器から、前記クロマトグラフィーの実行中に第２信号を生成するステップと、を有し、
前記非破壊式検出器は、１つ以上の波長を有する全体の吸収スペクトルまたは吸収スペクトルの一部を監視し、前記第２信号は、前記１つ以上の波長の各々からの少なくとも１つの検出応答値を有し、
前記方法はさらに、前記クロマトグラフィーの実行中の前記信号の変化に応じて、前記クロマトグラフィーの実行中に、画分収集器内に前記流れから前記１つまたはそれ以上のサンプル要素を収集するステップを有する、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、各信号は、
（ｉ）所与の時間におけるそれぞれの生成検出器のための検出応答値、
（ｉｉ）所与の時間における前記検出応答値の１次微分、
（ｉｉｉ）所与の時間における前記検出応答値の２次微分、または、
（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）の任意の組み合わせ、を有する、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、質量スペクトル検出器（ＭＳ）、凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、およびコロナ放電検出器からなるグループから選択される少なくとも１つの破壊式検出器を含む、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法であって、光学吸収検出器、屈折率検出器（ＲＩＤ）、蛍光検出器（ＦＤ）、カイラル検出器（ＣＤ）、および伝導率検出器からなるグループから選択される少なくとも１つの非破壊式検出器を含む、方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法であって、前記非破壊式検出器は、少なくとも１つの光学吸収検出器を有する、方法。
【請求項６】
請求項５に記載の方法であって、前記光学吸収検出器は、２つ以上の検出応答値を生成するように、２つ以上の波長を観察する、方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法であって、前記蒸発性粒子検出器は、蒸発性光散乱検出器を有する、方法。
【請求項８】
請求項１に記載の方法であって、前記蒸発性粒子検出器は、蒸発性光散乱検出器を有し、前記非破壊式検出器は、少なくとも１つの光学吸収検出器を有する、方法。
【請求項９】
請求項１に記載の方法であって、さらに、
スプリッタポンプ、
シャトルバルブ、または、
スプリッタポンプとシャトルバルブとの組み合わせ、を介して、前記少なくとも１つの破壊式検出器への流体の流れを能動的に制御するステップを有し、
前記スプリッタポンプ、前記シャトルバルブ、またはそれらの組み合わせは、前記少なくとも１つの破壊式検出器と流体連通する、方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、
前記能動的に制御するステップは、１０秒ごとに少なくとも１アリコットの周波数で、アリコットを前記破壊式検出器へ移動させるステップを有する、方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の方法を実行するための、コンピュータで実行可能な命令が格納された非過渡的なコンピュータで読取り可能な媒体。
【請求項１２】
請求項１に記載の方法を用いてサンプルを検出する装置。
【請求項１３】
クロマトグラフィーの実行中に、サンプル流れ内における１つまたはそれ以上のサンプル要素を検出および収集するためのクロマトグラフィー装置であって、  前記装置は、
クロマトグラフィーの実行中に応答値を生成するために、少なくとも１つの蒸発性粒子検出器を含む少なくとも１つの破壊式検出器と、
少なくとも１つの非破壊式検出器と、を有し、前記非破壊式検出器は、クロマトグラフィーの実行中に、１つ以上の波長を有する全体の吸収スペクトルまたは吸収スペクトルの一部を監視し、前記１つ以上の波長の各々から少なくとも１つの検出応答値を生成し、
前記装置は、前記応答値を受け取り、前記破壊式検出器から受け取る前記応答値から第１信号を生成し、前記非破壊式検出器から受け取る１つ以上の応答値から第２信号を生成するための、プロセッサと、
前記クロマトグラフィーの実行中に、前記信号の少なくとも１つの変化に応じて、前記要素の１つに対応する少なくとも１つの画分を収集するための、画分収集器と、を有する装置。
【請求項１４】
請求項１３に記載の装置であって、各信号は、
（ｉ）所与の時間におけるそれぞれの生成検出器のための検出応答値、
（ｉｉ）所与の時間における前記検出応答値の１次微分、
（ｉｉｉ）所与の時間における前記検出応答値の２次微分、または、
（ｉｖ）（ｉ）から（ｉｉｉ）の任意の組み合わせ、を有する、装置。
【請求項１５】
請求項１３に記載の装置であって、蒸発性光散乱検出器（ＥＬＳＤ）、質量スペクトル検出器（ＭＳ）、凝集核形成光散乱検出器（ＣＮＬＳＤ）、およびコロナ放電検出器からなるグループから選択される少なくとも１つの破壊式検出器を含む、装置。
【請求項１６】
請求項１３に記載の装置であって、光学吸収検出器、屈折率検出器（ＲＩＤ）、蛍光検出器（ＦＤ）、カイラル検出器（ＣＤ）、および伝導率検出器からなるグループから選択される少なくとも１つの非破壊式検出器を含む、装置。
【請求項１７】
請求項１３に記載の装置であって、前記非破壊式検出器は、少なくとも１つの光学吸収検出器を有する、装置。
【請求項１８】
請求項１７に記載の装置であって、前記光学吸収検出器は、２つ以上の検出応答値を生成するように、２つ以上の波長を観察するように構成される、装置。
【請求項１９】
請求項１３に記載の装置であって、前記蒸発性粒子検出器は、蒸発性光散乱検出器を有する、装置。
【請求項２０】
請求項１３に記載の装置であって、さらに、
スプリッタポンプ、
シャトルバルブ、または、
スプリッタポンプとシャトルバルブとの組み合わせ、を介して前記少なくとも１つの破壊式検出器への流体流れを能動的に制御するステップと有し、
前記スプリッタポンプ、前記シャトルバルブ、またはそれらの組み合わせは、前記少なくとも１つの破壊式検出器と流体連通する、装置。
【外国語明細書】
2014038105000001.pdf