(57)【要約】【課題】ＩＣＳＩにおける観察法の切り替え時間をより短縮することができる顕微鏡を提供する。【解決手段】顕微鏡１は、円盤状をなし、各々が光学素子を保持可能な複数の穴部が主面の周方向に沿って形成され、所定の軸を回転軸として回転することによって複数の穴部のいずれか一つを光路上に配置可能なコンデンサターレット１３と、各々が対物レンズ１８を保持可能な複数の保持部が主面の周方向に沿って形成され、この複数の保持部のいずれかを光路上に配置可能なレボルバ１７と、を備える。【選択図】図２
2014197091.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標本を照射する光を発生する光源と、各々が前記光の光路上に配置可能であり、入射した前記光の光学特性を変化させる複数の光学ユニットと、を備え、卵細胞質内精子注入法で用いる複数の観察法それぞれに応じて前記光路上における前記複数の光学ユニットそれぞれの配置を切り替える顕微鏡であって、
円盤状をなし、各々が光学素子を保持可能な複数の穴部が主面の周方向に沿って形成され、所定の軸を回転軸として回転することによって前記複数の穴部のいずれか一つを前記光路上に配置可能なコンデンサターレットと、
各々が対物レンズを保持可能な複数の保持部が主面の周方向に沿って形成され、該複数の保持部のいずれかを前記光路上に配置可能なレボルバと、
を備え、
前記コンデンサターレットは、前記複数の穴部のうち光学素子を保持しない所定の空穴を基準に見たときに主面の周方向に沿って適用倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用開口板がそれぞれ前記複数の穴部に保持され、
前記レボルバは、前記複数の保持部のいずれか一つに保持された最小倍率の第１対物レンズを基準に見たときに主面の周方向に沿って倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズがそれぞれ前記複数の保持部に保持されていることを特徴とする顕微鏡。
【請求項２】
前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板の後に、ＤＩＣプリズムが前記穴部によってさらに保持され、
前記レボルバは、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡。
【請求項３】
前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で偏光観察法を行う場合、前記第１対物レンズの後に、前記第１対物レンズより倍率が高い偏光観察法用対物レンズが前記保持部によって保持されていることを特徴とする請求項２に記載の顕微鏡。
【請求項４】
前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板は、第１レリーフコントラスト観察用開口板および第２レリーフコントラスト観察用開口板を有し、
前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズは、第１レリーフコントラスト観察用対物レンズおよび第２レリーフコントラスト観察用対物レンズを有し、
前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記空穴の後に、前記第１レリーフコントラスト観察用開口板より開口数が小さい第２レリーフコントラスト観察用開口板が前記穴部によってさらに保持され、
前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記第１対物レンズの後に、前記第１対物レンズより倍率が高く、かつ、前記第１レリーフコントラスト観察用対物レンズより倍率が低い第２レリーフコントラスト観察用対物レンズがさらに前記保持部によって保持されていることを特徴とする請求項２に記載の顕微鏡。
【請求項５】
前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板のうち最も開口数が小さい第１レリーフコントラスト観察用開口板の後に、ＤＩＣプリズムが前記穴部によってさらに保持され、
前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズのうち最も倍率が低い第１レリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ステージ上に載置された標本を観察する顕微鏡の技術に関し、特に、顕微授精に好適な顕微鏡に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、顕微鏡の一用途として、高度生殖医療の分野における顕微授精が知られている。顕微授精は、顕微鏡下で精子と卵子とを授精させる方法であり、一般に、精子が納められたマイクロピペットをホールディングピペットで固定された卵子に突き刺して卵子に精子を注入する卵細胞質内精子注入法（Intracytoplasmic  Sperm  Injection：以下、「ＩＣＳＩ」という）により行われる。このＩＣＳＩでは、ステージ上で標本を操作するため、ステージの上方に大きな作業空間を有する倒立顕微鏡を用いることが一般的である。
【０００３】
また、顕微授精の分野では、卵子の授精率を向上させるため、卵子を立体的に観察可能なレリーフコントラスト観察法（以下、「ＲＣ観察法」という）が知られている（特許文献１参照）。
【０００４】
また、近年、顕微授精の分野では、授精率を向上させるため、複数の観察法を適宜切り替えながら顕微鏡を使用する顕微授精の方法が注目されている。たとえば、ＲＣ観察法、微分干渉観察法（以下、「ＤＩＣ観察法」という）および偏光観察法（以下、「ＰＯ観察法」という）を観察目的に応じて切り替えながら使用する方法が普及しつつある。
【０００５】
ＤＩＣ観察法は、ＲＣ観察法に比べて高倍率で対象物を観察することができ、卵子に比べて小さな精子の観察に適しているため、良質な精子を選別する際に用いられる。
【０００６】
また、ＰＯ観察法は、複屈折性を有する卵子の紡錘体の観察に適しているため、卵子に精子を注入する際に、紡錘体を誤って傷つけてしまうことを防止しつつ、紡錘体の位置を確認する際に用いられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開昭５１−２９１４９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ところで、従来のＩＣＳＩを行う顕微鏡では、各光学ユニットの切り替えを電動化することにより、観察方法を切り替えるまでの作業時間の短縮を図っている。しかしながら、レボルバに装着された各対物レンズとコンデンサターレットの各光学素子とが実際に切り替わるまでにかかる時間については考慮されていなかった。このため、ＩＣＳＩを行う顕微鏡では、レボルバ内における対物レンズまたはコンデンサターレット内における光学素子の配置によっては、レボルバまたはコンデンサターレットの回転量が大きくなり、観察方法を切り替えるまでに時間がかかるという問題点があった。
【０００９】
本発明は、上記に鑑みてなされたものであって、ＩＣＳＩにおける観察法の切り替え時間をより短縮することができる顕微鏡を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上述した課題を解決し、目的を達成するために、本発明にかかる顕微鏡は、標本を照射する光を発生する光源と、各々が前記光の光路上に配置可能であり、入射した前記光の光学特性を変化させる複数の光学ユニットと、を備え、卵細胞質内精子注入法で用いる複数の観察法それぞれに応じて前記光路上における前記複数の光学ユニットそれぞれの配置を切り替える顕微鏡であって、円盤状をなし、各々が光学素子を保持可能な複数の穴部が主面の周方向に沿って形成され、所定の軸を回転軸として回転することによって前記複数の穴部のいずれか一つを前記光路上に配置可能なコンデンサターレットと、各々が対物レンズを保持可能な複数の保持部が主面の周方向に沿って形成され、該複数の保持部のいずれかを前記光路上に配置可能なレボルバと、を備え、前記コンデンサターレットは、前記複数の穴部のうち光学素子を保持しない所定の空穴を基準に見たときに主面の周方向に沿って適用倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用開口板がそれぞれ前記複数の穴部に保持され、前記レボルバは、前記複数の保持部のいずれか一つに保持された最小倍率の第１対物レンズを基準に見たときに主面の周方向に沿って倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズがそれぞれ前記複数の保持部に保持されていることを特徴とする。
【００１１】
また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板の後に、ＤＩＣプリズムが前記穴部によってさらに保持され、前記レボルバは、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする。
【００１２】
また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で偏光観察法を行う場合、前記第１対物レンズの後に、前記第１対物レンズより倍率が高い偏光観察法用対物レンズが前記保持部によって保持されていることを特徴とする。
【００１３】
また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板は、第１レリーフコントラスト観察用開口板および第２レリーフコントラスト観察用開口板を有し、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズは、第１レリーフコントラスト観察用対物レンズおよび第２レリーフコントラスト観察用対物レンズを有し、前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記空穴の後に、前記第１レリーフコントラスト観察用開口板より開口数が小さい第２レリーフコントラスト観察用開口板が前記穴部によってさらに保持され、前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で倍率が異なる複数のレリーフコントラスト観察法を行う場合、前記第１対物レンズの後に、前記第１対物レンズより倍率が高く、かつ、前記第１レリーフコントラスト観察用対物レンズより倍率が低い第２レリーフコントラスト観察用対物レンズがさらに前記保持部によって保持されていることを特徴とする。
【００１４】
また、本発明にかかる顕微鏡は、上記発明において、前記コンデンサターレットは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用開口板のうち最も開口数が小さい第１レリーフコントラスト観察用開口板の後に、ＤＩＣプリズムが前記穴部によってさらに保持され、前記レボルバは、当該顕微鏡が前記卵細胞質内精子注入法で明視野観察法、レリーフコントラスト観察法および微分干渉観察法の順で行う場合、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズのうち最も倍率が低い第１レリーフコントラスト観察用対物レンズの後に、前記複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズそれぞれの倍率より高い対物レンズが前記保持部によってさらに保持されていることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１５】
本発明にかかる顕微鏡によれば、コンデンサターレットに空穴から周方向に沿って複数のレリーフコントラスト観察用開口板が設けられ、レボルバに最小倍率の第１対物レンズを基準に見たときに周方向に沿って倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用対物レンズが設けられている。これにより、ＩＣＳＩにおける観察方法の切り替え時間をより短縮することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の概略構成を示す概念図である。
【図２】図２は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の構成を示すブロック図である。
【図３】図３は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡のコンデンサターレットの構成を模式的に示す図である。
【図４】図４は、標本を含むシャーレの平面図である。
【図５】図５は、図５のＡ−Ａ線断面図である。
【図６】図６は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡のレボルバの構成を模式的に示す図である。
【図７】図７は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の操作入力部の構成を示す図である。
【図８】図８は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の設定情報記録部が記録する設定情報を示す図である。
【図９】図９は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡が実行するコンデンサターレットおよびレボルバの切替処理の概要を示すフローチャートである。
【図１０Ａ】図１０Ａは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１０Ｃ】図１０Ｃは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１０Ｄ】図１０Ｄは、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１１】図１１は、本発明の一実施の形態の変形例１にかかる顕微鏡のコンデンサターレットの各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。
【図１２】図１２は、本発明の一実施の形態の変形例１にかかる顕微鏡のレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。
【図１３Ａ】図１３Ａは、本発明の一実施の形態の変形例１にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合に、精子の不動化および吸引に２０倍ＲＣ観察を用いるときの手順を示す図である。
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、本発明の一実施の形態の変形例１にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合に、精子の不動化および吸引に２０倍ＲＣ観察を用いるときの手順を示す図である。
【図１４Ａ】図１４Ａは、本発明の一実施の形態の変形例１にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合に、精子の不動化および吸引にＤＩＣ観察を用いるときの手順を示す図である。
【図１４Ｂ】図１４Ｂは、本発明の一実施の形態の変形例１にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合に、精子の不動化および吸引にＤＩＣ観察を用いるときの手順を示す図である。
【図１５】図１５は、本発明の一実施の形態の変形例２にかかる顕微鏡のレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。
【図１６】図１６は、本発明の一実施の形態の変形例２にかかる顕微鏡の記録部の設定情報記録部が記録する設定情報を示す図である。
【図１７Ａ】図１７Ａは、本発明の一実施の形態の変形例２にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１７Ｂ】図１７Ｂは、本発明の一実施の形態の変形例２にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１７Ｃ】図１７Ｃは、本発明の一実施の形態の変形例２にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１７Ｄ】図１７Ｄは、本発明の一実施の形態の変形例２にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図１８】図１８は、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡のコンデンサターレットの各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。
【図１９】図１９は、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡のレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。
【図２０】図２０は、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡の記録部の設定情報記録部が記録する設定情報を示す図である。
【図２１Ａ】図２１Ａは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図２１Ｂ】図２１Ｂは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図２１Ｃ】図２１Ｃは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図２１Ｄ】図２１Ｄは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図２２Ａ】図２２Ａは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図２２Ｂ】図２２Ｂは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図２２Ｃ】図２２Ｃは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【図２２Ｄ】図２２Ｄは、本発明の一実施の形態の変形例３にかかる顕微鏡において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、図面を参照して、本発明を実施するための形態（以下、「実施の形態」という）について説明する。なお、以下に説明する実施の形態によって本発明が限定されるものではない。さらに、図面の記載において、同一の部分には同一の符号を付して説明する。
【００１８】
図１は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の概略構成を示す概念図である。図２は、本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡の構成を示すブロック図である。図１および図２において、顕微鏡１が載置される平面をＸＹ平面とし、ＸＹ平面と垂直な方向をＺ方向として説明する。
【００１９】
図１および図２に示す顕微鏡１は、標本Ｓｐが収容されたシャーレ１００を観察する顕微鏡本体部２と、顕微鏡１の各種の操作の入力を受け付ける操作入力部３と、顕微鏡本体部２が撮像した画像データに対応する画像を表示する表示部４と、顕微鏡１を駆動する各種プログラムやパラメータ等を記録する記録部５と、顕微鏡本体部２および表示部４を制御する制御部６と、を備える。顕微鏡本体部２、操作入力部３、表示部４、記録部５および制御部６は、データが送受信可能に有線または無線で接続されている。
【００２０】
まず、顕微鏡本体部２について詳細に説明する。顕微鏡本体部２は、光源１０と、ポラライザ１１と、コンペンセータ１２と、コンデンサターレット１３と、コンデンサレンズ１４と、ステージ１５と、ターレット位置検出部１６と、レボルバ１７と、対物レンズ１８と、レボルバ位置検出部１９と、ＤＩＣプリズム２０と、アナライザ２１と、結像レンズ２２と、光路分割プリズム２３と、撮像部２４と、ミラー２５と、接眼レンズ２６と、駆動制御部２７と、を備える。
【００２１】
光源１０は、制御部６の制御のもと、標本Ｓｐを照射する光を発生する。光源１０は、ハロゲンランプ、キセノンランプまたはＬＥＤ（Light  Emitting  Diode）等によって構成される。
【００２２】
ポラライザ１１は、光源１０とコンペンセータ１２との間の光路上に配置され、光源１０が照射する照明光の１方向の偏光成分のみを透過させる。ポラライザ１１は、光軸ＸＡを回転軸として回転可能に光路上に配置される。ポラライザ１１は、光学素子の１つである偏光板を用いて構成される。また、ポラライザ１１は、駆動制御部２７の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはＤＣモータ等によって構成されたモータ１１ａによって光軸ＸＡを中心にして回転させられる。なお、本実施の形態１では、ポラライザ１１が第１偏光板として機能する。
【００２３】
コンペンセータ１２は、標本Ｓｐの異方性による位相差を測定するための光学素子であり、リタデーションを可変する構造を有する。コンペンセータ１２は、ポラライザ１１を透過した光のリタデーションを変化させる。コンペンセータ１２は、ポラライザ１１とコンデンサターレット１３との間の光路上に配置される。コンペンセータ１２は、光軸ＸＡを回転軸として回転可能に光路上に配置される。
【００２４】
コンペンセータ１２は、液晶または波長板を用いて構成される。具体的には、コンペンセータ１２は、ベレークコンペンセータ、セナルモン式コンペンセータ、ブレースケーラコンペンセータ、石英楔コンペンセータおよび液晶変調素子を用いて構成される。コンペンセータ１２としては、卵子の紡錘体を観察するＰＯ観察を行う際に視野のリタデーションがほぼ均一となることが望ましいため、液晶変調素子、セナルモン式コンペンセータ、ブレースケーラコンペンセータが好ましい。なお、コンペンセータ１２として、液晶変調素子を用いる場合、液晶分子を電気的に制御することによって、リタデーションを変化させることができる。
【００２５】
また、コンペンセータ１２として、セナルモン式コンペンセータを用いる場合、コンペンセータ１２内の波長板に対するポラライザ１１の回転によって、コンペンセータ１２のリタデーションを変化させることができる。さらに、コンペンセータ１２として、ブレースケーラコンペンセータを用いる場合、コンペンセータ１２内のプリズムの回転によって、コンペンセータ１２のリタデーションを変化させることができる。さらにまた、コンペンセータ１２は、駆動制御部２７の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはＤＣモータ等によって構成されたモータ１２ａによって光軸ＸＡを中心にして回転させられる。
【００２６】
コンデンサターレット１３は、円盤状をなし、各々が光学素子を保持可能な複数の穴部が主面の周方向に沿って形成され、所定の軸を回転軸として回転することによって複数の穴部のいずれか一つを光路上に配置する。コンデンサターレット１３は、観察方法や対物レンズ１８の倍率に応じて切り替えて用いられる複数の光学素子をそれぞれ複数の穴部に保持する。コンデンサターレット１３は、ポラライザ１１とコンデンサレンズ１４との間の光路上に回転可能に配置される。コンデンサターレット１３は、観察法に応じて回転させられることによって、いずれかの光学素子を光路上に挿脱可能に配置する。また、コンデンサターレット１３は、駆動制御部２７の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはＤＣモータ等によって構成されたモータ１３ａによって回転させられる。
【００２７】
図３は、コンデンサターレット１３の構成を模式的に示す図である。図３に示すように、コンデンサターレット１３は、円盤状をなし、複数の穴部１３０のうち光学素子を保持しない所定の空穴１３０を基準に見たときに主面の周方向に沿って適用倍率を順次高くした複数のレリーフコントラスト観察用開口板を保持する。具体的には、コンデンサターレット１３は、複数の穴部１３０それぞれによって２０倍ＲＣ用開口板１３１（第１ＲＣ用開口板）と、４０倍ＲＣ用開口板１３２（第２ＲＣ用開口板）と、６０倍ＤＩＣ用プリズム１３３と、を保持する。より詳細には、コンデンサターレット１３は、空穴１３０（１番）を基準に見たときに周方向に沿って２０倍ＲＣ用開口板１３１（２番）、４０倍ＲＣ用開口板１３２（３番）および６０倍ＤＩＣ用プリズム（４番）の順で各穴部１３０に保持される。
【００２８】
空穴１３０は、コンデンサターレット１３の回転により光路上に配置される。空穴１３０は、コンデンサターレット１３とともに開口板を構成する。空穴１３０は、光源１０からの照明光を遮らない十分な大きさで形成され、開口数の高い照明を実現する。空穴１３０は、たとえば、顕微鏡１が明視野観察法（以下、「ＢＦ観察法」という）またはＰＯ観察法を行う際に用いられる。具体的には、空穴１３０は、顕微鏡１がＢＦ観察法を行う場合、ユーザが顕微授精の準備のため、４倍または１０倍の対物レンズ１８を用いてシャーレ１００内における場所探しやマニピュレータによって操作されるマイクロピペットの針先の位置決め等を行う際に用いられる。
【００２９】
ＲＣ観察用開口板１３１は、コンデンサターレット１３の回転により光路上に配置される。ＲＣ観察用開口板１３１は、ＲＣ観察に用いられる開口板であり、光路上に配置された際に光軸ＸＡからずれた（偏心した）位置に形成された開口１３１ａの一部に偏光板１３１ｂを有する。開口１３１ａは、ＲＣ観察用開口板１３１の中心からずれた位置に形成されることによって偏斜照明を実現する。このように構成されたＲＣ観察用開口板１３１は、たとえば、ユーザが顕微鏡１で２０倍のＲＣ観察法を行う場合に用いられる。
【００３０】
ＲＣ観察用開口板１３２は、コンデンサターレット１３の回転により光路上に配置される。ＲＣ観察用開口板１３２は、ＲＣ観察に用いられる開口板であり、光路上に配置された際に光軸ＸＡからずれた（偏心した）位置に形成された開口１３２ａの一部に偏光板１３２ｂを有する。開口１３２ａは、ＲＣ観察用開口板１３２の中心からずれた位置に形成されることによって偏斜照明を実現する。このように構成されたＲＣ観察用開口板１３２は、たとえば、ユーザが顕微鏡１で４０倍のＲＣ観察法を行う場合に用いられる。
【００３１】
ＤＩＣプリズム１３３は、コンデンサターレット１３の回転により光路上に配置される。ＤＩＣプリズム１３３は、後述する対物レンズ１８側の像側に配置されたＤＩＣプリズム２０と対をなし、微分干渉光学系を構成する。ＤＩＣプリズム１３３は、ノマルスキープリズム等を用いて構成される。ＤＩＣプリズム１３３は、たとえば、ユーザが顕微鏡１で６０倍のＤＩＣ観察法を行う際に用いられる。
【００３２】
このように構成されたコンデンサターレット１３は、観察法に応じて、コンデンサターレット１３がモータ１３ａによって回転させられることによって、光路上に配置される光学素子が切り替えられる。具体的には、コンデンサターレット１３は、ＲＣ観察法を行う場合、ＲＣ観察用開口板１３１またはＲＣ観察用開口板１３２が光路上に配置され、ＤＩＣ観察法を行う場合、ＤＩＣプリズム１３３が光路上に配置され、ＢＦ観察法またはＰＯ観察法を行う場合、空穴１３０が光路上に配置される。
【００３３】
コンデンサレンズ１４は、光源１０から出射された照明光を集光し、シャーレ１００内の標本Ｓｐを含む領域に対して均一に照射する。なお、コンデンサレンズ１４は、光源１０から出射された照明光の光量を調整可能な視野絞りと、視野絞りの径を変化させる視野絞り操作部とを設けてもよい。
【００３４】
ステージ１５は、ＸＹＺ方向に移動自在に構成される。ステージ１５は、駆動制御部２７の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはＤＣモータ等によって構成されたモータ１５ａによってＸＹ平面内またはＺ方向に移動する。ステージ１５は、標本Ｓｐが配置されたシャーレ１００が載置される。ステージ１５は、制御部６の制御のもと、ＸＹ平面における所定の原点位置を基点としてモータ１５ａの駆動量が算出されることによって、標本Ｓｐ上の所望の観察箇所（観察領域）に移動する。また、ステージ１５は、制御部６の制御のもと、標本Ｓｐに対するコンデンサレンズ１４および対物レンズ１８のピントが合う位置（合焦位置）に移動する。なお、ステージ１５に、シャーレ１００を一定温度に保持する加温部を設けてもよい。また、ステージ１５は、電動である必要はなく、手動で移動可能であってもよい。
【００３５】
ここで、標本Ｓｐが配置されたシャーレ１００について詳細に説明する。図４は、標本Ｓｐを含むシャーレ１００の平面図である。図５は、図４のＡ―Ａ線断面図である。
【００３６】
図４および図５に示すように、顕微授精で用いられるシャーレ１００は、卵子Ｓｐ１１に精子Ｓｐ１２を授精させるＩＣＳＩ用ドロップＲ１（培養液）および精子Ｓｐ１２を選別する精子選別用ドロップＲ２（培養液）が形成され、各ドロップが空気に触れて細菌に感染することを防止するミネラルオイルＷａによって覆われている。なお、シャーレ１００内におけるドロップの数は、適宜変更することができる。
【００３７】
ターレット位置検出部１６は、光路上に配置されたコンデンサターレット１３の光学素子（穴番号）を検出し、この検出結果を制御部６に出力する。ターレット位置検出部１６は、エンコーダや光フォトインタラプタ等を用いて構成される。なお、ターレット位置検出部１６は、駆動制御部２７からモータ１３ａに出力される駆動信号に応じて駆動するモータ１３ａのパルス数に基づいて、光路上に配置されたコンデンサターレット１３の光学素子を検出し、この検出結果を制御部６に出力してもよい。
【００３８】
レボルバ１７は、標本Ｓｐを挟んでコンデンサターレット１３と対向する光路上に配置される。レボルバ１７は、各々が対物レンズ１８を保持可能な複数の保持部１７０（穴部）が主面の周方向に沿って形成される。レボルバ１７は、複数の保持部１７０のいずれかを光路上に配置する。レボルバ１７は、駆動制御部２７の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはＤＣモータ等によって構成されたモータ１７ａによって回転させられることによって、光路上に観察法に応じた対物レンズ１８を配置する。レボルバ１７は、スイングレボルバ等を用いて構成される。
【００３９】
図６は、レボルバ１７の複数の保持部１７０それぞれ保持される各対物レンズの配置を模式的に示す図である。図６に示すように、レボルバ１７は、最小倍率の対物レンズ１８１（１番）を基準に見たときに周方向に沿って倍率を高くした２０倍のＲＣ用対物レンズ１８２（２番）、４０倍のＲＣ用対物レンズ１８３（３番）および最大倍率の対物レンズ１８４（４番）がそれぞれ各保持部１７０によって保持される。
【００４０】
対物レンズ１８１は、マイクロピペットの針先の観察に適した倍率、たとえば、４倍の低倍率を有する対物レンズであり、ＢＦ観察法に用いられる。
【００４１】
対物レンズ１８２は、卵子または精子の観察に適した２０倍のＲＣ用対物レンズであり、２０倍ＲＣ観察法に用いられる。対物レンズ１８２は、対物レンズ１８２の瞳位置に、透過率の異なる３つの領域を有するモジュレータ１８２１を有する。モジュレータ１８２１は、１００％の透過率を有する領域１８２１ａと、２５％程度の透過率を有する領域１８２１ｂと、０％の透過率を有する領域１８２１ｃと、を有する。モジュレータ１８２１は、コンデンサレンズ１４の瞳位置に配置された２０倍ＲＣ観察用開口板１３１と光学的に共役な関係を有する。また、対物レンズ１８２は、卵子の紡錘体を主な観察対象とし、ほぼ同程度の倍率が要求されるＰＯ観察法にも適用される。
【００４２】
対物レンズ１８３は、卵子または精子の観察に適した４０倍のＲＣ用対物レンズであり、４０倍ＲＣ観察法に用いられる。対物レンズ１８３は、対物レンズ１８３の瞳位置に、透過率の異なる３つの領域を有するモジュレータ（図示せず）を有する。
【００４３】
対物レンズ１８４は、良質な精子の選別に適した倍率、たとえば６０倍または１００倍等の高倍率を有する対物レンズであり、ＤＩＣ観察法に用いられる。
【００４４】
レボルバ位置検出部１９は、光路上に配置された対物レンズ１８（レボルバ１７の穴番号）を検出し、この検出結果を制御部６に出力する。レボルバ位置検出部１９は、エンコーダや光フォトインタラプタ等を用いて構成される。なお、レボルバ位置検出部１９は、駆動制御部２７からモータ１７ａに出力される駆動信号に応じて駆動するモータ１７ａのパルス数に基づいて、光路上に配置された対物レンズ１８（レボルバ１７の穴番号）を検出し、この検出結果を制御部６に出力してもよい。
【００４５】
ＤＩＣプリズム２０は、ＤＩＣプリズム１３３と対を成し、微分干渉光学系を構成する。ＤＩＣプリズム２０は、ノマルスキープリズム等を用いて構成される。ＤＩＣプリズム２０は、対物レンズ１８とアナライザ２１との間の光路上に対して挿脱可能に配置される。また、ＤＩＣプリズム２０は、駆動制御部２７の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはＤＣモータ等によって構成されたモータ２０ａによって光路上に配置される。
【００４６】
アナライザ２１は、対物レンズ１８の後段の観察側の光路上に配置される。アナライザ２１は、光軸ＸＡを回転軸として回転可能に光路上に配置される。アナライザ２１は、ポラライザ１１との相対的な位置関係に応じて標本Ｓｐを透過した光の１方向の偏光成分のみを透過させる。また、ポラライザ１１およびアナライザ２１は、顕微鏡１がＰＯ観察を行う場合、互いに偏光方向が直交するクロスニコルの状態になるように配置される。また、アナライザ２１は、駆動制御部２７の駆動制御のもと、ステッピングモータまたはＤＣモータ等によって構成されたモータ２１ａによって光軸ＸＡを回転軸として回転させられる。なお、アナライザ２１は、光路上に挿脱可能に配置されてもよい。なお、本実施の形態１では、アナライザ２１が第２偏光板として機能する。
【００４７】
結像レンズ２２は、対物レンズ１８から出射された光を集光して観察像を結像する。結像レンズ２２は、一または複数のレンズを用いて構成される。
【００４８】
光路分割プリズム２３は、結像レンズ２２で結像された観察像の光を撮像部２４とミラー２５に分割する。光路分割プリズム２３は、接合面に光を分割するためのコーティングが施されたプリズムを用いて構成される。
【００４９】
撮像部２４は、結像レンズ２２および光路分割プリズム２３を経て入射された標本Ｓｐの観察像を撮像して画像データを生成し、この画像データを制御部６へ出力する。撮像部２４は、ＣＣＤ（Charge  Coupled  Device）またはＣＭＯＳ（Complementary  Metal  Oxide  Semiconductor）等の撮像素子を用いて構成される。
【００５０】
ミラー２５は、結像レンズ２２から出射された観察像を接眼レンズ２６へ向けて反射する。なお、ミラー２５と接眼レンズ２６との光路上に、複数のリレーレンズを設けてもよい。
【００５１】
接眼レンズ２６は、結像レンズ２２、光路分割プリズム２３およびミラー２５を介して入射された観察像を拡大する。接眼レンズ２６は、一または複数のレンズを用いて構成される。
【００５２】
駆動制御部２７は、駆動ドライバおよびＣＰＵ（Central  Processing  Unit）等を用いて構成され、制御部６の制御のもと、顕微鏡本体部２の各光学ユニットを移動または回転させる。具体的には、駆動制御部２７は、制御部６の制御のもと、モータ１１ａ、モータ１２ａ、モータ１３ａ、モータ１５ａ、モータ１７ａ、モータ２０ａ、モータ２１ａそれぞれを駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、ステージ１５、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を所定の位置に回転または移動させる。
【００５３】
操作入力部３は、顕微鏡１の各種の操作の入力を受け付ける。操作入力部３は、キーボード、マウス、ジョイスティック、タッチパネルおよび各種ボタン等を用いて構成され、各種スイッチの操作に応じた指示信号を制御部６に出力する。
【００５４】
図７は、操作入力部３の構成を示す図である。図７に示すように、操作入力部３は、各観察法を指示する指示信号の入力を受け付けるボタンＢ１〜Ｂ５と、コントラストを調整する指示信号の入力を受け付けるボタンＢ６，Ｂ７と、対物レンズ１８の倍率を指示する指示信号の入力を受け付けるボタンＢ８〜Ｂ１３と、を有する。
【００５５】
表示部４は、制御部６を介して撮像部２４から入力される画像データに対応する画像を表示する。表示部４は、液晶または有機ＥＬ（Electro  Luminescence）等からなる表示パネルを用いて構成される。
【００５６】
記録部５は、顕微鏡１に実行させる各種プログラム、プログラムの実行中に使用される各種データを記録する。記録部５は、フラッシュメモリおよびＲＡＭ（Random  Access  Memory）等の半導体メモリを用いて構成される。また、記録部５は、観察法毎に光路上における各光学ユニットそれぞれの位置情報を対応付けた設定情報を記録する設定情報記録部５１を有する。
【００５７】
図８は、設定情報記録部５１が記録する設定情報を示す図である。図８に示すように、設定情報Ｔ１には、各観察法に応じたレボルバ１７の対物レンズ１８とコンデンサターレット１３の光学素子の組み合わせが記録されている。図８に示すように、ＢＦ観察法を行う場合、第１対物レンズ１８１と空穴１３０との組み合わせが記載されている。
【００５８】
制御部６は、ＣＰＵ等を用いて構成され、顕微鏡１を構成する各部の動作を統括的に制御する。制御部６は、操作入力部３から入力される操作信号に応じて、駆動制御部２７を駆動することによって顕微鏡１を構成する各光学ユニットを移動させる。具体的には、制御部６は、設定情報記録部５１が記録する設定情報Ｔ１を参照し、駆動制御部２７に複数の光学ユニットをそれぞれ観察法毎に応じた光路上の位置へ移動させることによって観察法を変更する。
【００５９】
このように構成された顕微鏡１は、制御部６の制御のもと、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１それぞれの光路上における位置や角度を切り替えることで、ＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を行うことができる。
【００６０】
つぎに、顕微鏡１が実行するコンデンサターレット１３およびレボルバ１７の駆動処理について説明する。図９は、顕微鏡１が実行するコンデンサターレット１３およびレボルバ１７の切替処理の概要を示すフローチャートである。なお、以下においては、レボルバ１７の駆動を例に説明する。
【００６１】
図９に示すように、操作入力部３から観察法を指示する指示信号が入力された場合、制御部６は、レボルバ位置検出部１９を介して光路上におけるレボルバ１７の現在の穴番号を取得する（ステップＳ１０１）。
【００６２】
続いて、観察法に応じた対物レンズ１８が装着された指示の穴番号から現在の穴番号を引いた値が負（（指示の穴番号−現在の穴番号）＜０）の場合（ステップＳ１０２：Ｙｅｓ）において、顕微鏡１は、後述するステップＳ１０３へ移行する。これに対して、観察法に応じた対物レンズ１８が装着された指示の穴番号から現在の穴番号を引いた値が負でない場合（ステップＳ１０２：Ｎｏ）、顕微鏡１は、後述するステップＳ１０６へ移行する。
【００６３】
ステップＳ１０３において、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さい（（指示の穴番号−現在の穴番号）＜（最大の穴番号÷２））場合（ステップＳ１０３：Ｙｅｓ）、顕微鏡１は、後述するステップＳ１０４へ移行する。これに対して、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さくない場合（ステップＳ１０３：Ｎｏ）、顕微鏡１は、後述するステップＳ１０５へ移行する。
【００６４】
ステップＳ１０４において、制御部６は、駆動制御部２７によって指示の穴番号へレボルバ１７を反時計回りに移動させる。その後、顕微鏡１は、本処理を終了する。
【００６５】
ステップＳ１０５において、制御部６は、駆動制御部２７によって指示の穴番号へレボルバ１７を時計周りに移動させる。その後、顕微鏡１は、本処理を終了する。
【００６６】
ステップＳ１０６において、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さい（（指示の穴番号−現在の穴番号）＜（最大の穴番号÷２））場合（ステップＳ１０６：Ｙｅｓ）、顕微鏡１は、後述するステップＳ１０７へ移行する。これに対して、指示の穴番号と現在の穴番号との差の絶対値が最大の穴番号の半分よりも小さくない場合（ステップＳ１０６：Ｎｏ）、顕微鏡１は、後述するステップＳ１０８へ移行する。
【００６７】
ステップＳ１０７において、制御部６は、駆動制御部２７によって指示の穴番号へレボルバ１７を時計周りに移動させる。その後、顕微鏡１は、本処理を終了する。
【００６８】
ステップＳ１０８において、制御部６は、駆動制御部２７によって指示の穴番号へレボルバ１７を反時計回りに移動させる。その後、顕微鏡１は、本処理を終了する。
【００６９】
このように制御部６は、駆動制御部２７を介して上述した切替処理をレボルバ１７に実行することにより、現在の穴番号と指示の穴番号との関係からレボルバ１７を回転させる回転方向を決定してレボルバ１７を時計回りまたは反時計回りに回転させる。これにより、操作入力部３から入力された指示信号の観察法に応じた穴番号を光路上に挿入する場合であっても、レボルバ１７の移動量（回転量）を最小にすることができる。なお、制御部６は、コンデンサターレット１３の場合であっても、同様の切替処理を行う。これにより、コンデンサターレット１３の移動量を最小にすることができる。
【００７０】
つぎに、顕微鏡１においてＩＣＳＩを実施する場合において、観察法を切り替えたときのコンデンサターレット１３およびレボルバ１７の移動について詳細に説明する。図１０Ａは、本実施の形態１にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。図１０Ｂは、本実施の形態１にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。図１０Ｃは、本実施の形態１にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。図１０Ｄは、本実施の形態１にかかる顕微鏡１において、顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す図である。
【００７１】
まず、ユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合を説明する。この場合、図１０Ａに示すように、ユーザによって顕微鏡１の電源が投入されると、顕微鏡１は、初期化処理を実行する（Ａ１）。
【００７２】
続いて、図１０Ａ（１）に示すように、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１をＢＦ観察法の位置に移動させる（Ａ２）。この場合、制御部６は、レボルバ１７の１番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット１３の１番を光路上に挿入する。ユーザは、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動完了後、マニュピュレータ（図示せず）に装着されたホールディングピペットの位置の調整を行う（Ａ３）。
【００７３】
その後、操作入力部３のボタンＢ２から２０倍のＲＣ観察法を指示する指示信号が入力された場合（Ａ４）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を２０倍のＲＣ観察法の位置に移動させる（Ａ５）。この場合、図１０Ａ（２）に示すように、制御部６は、レボルバ１７の２番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット１３の２番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３それぞれの移動量は、１穴分となる。ユーザは、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動完了後、精子Ｓｐ１２が入った精子選別用ドロップＲ２を観察するため、ステージ１５を手動または電動で移動させる（Ａ６）。ステージ１５の移動後、ユーザは、インジェクションする精子Ｓｐ１２の選別を行う（Ａ７）。
【００７４】
続いて、操作入力部３のボタンＢ３から４０倍のＲＣ観察法を指示する指示信号が入力された場合（Ａ８）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を２０倍のＲＣ観察法の位置に移動させる（Ａ９）。この場合、図１０Ａ（３）に示すように、制御部６は、レボルバ１７の３番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット１３の３番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３それぞれの移動量は、１穴分となる。ユーザは、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動完了後、インジェクションピペットで精子Ｓｐ１２の尾部に損傷を与え、精子Ｓｐ１２を不動化し、不動化させた精子Ｓｐ１２をインクジェクションピペットで吸引する（Ａ１０）。
【００７５】
その後、操作入力部３のボタンＢ２から２０倍のＲＣ観察法を指示する指示信号が入力された場合（Ａ１１）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を２０倍のＲＣ観察法の位置に移動させる（Ａ１２）。この場合、図１０Ａ（４）に示すように、制御部６は、レボルバ１７の２番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット１３の２番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３それぞれの移動量は、１穴分となる。ユーザは、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動完了後、卵子Ｓｐ１１が入ったＩＣＳＩ用ドロップＲ１を観察するため、ステージ１５を手動または電動で移動させる（Ａ１３）。ステージ１５の移動後、ユーザは、授精させる卵子Ｓｐ１１をホールディングピペットで固定し（Ａ１４）、インジェクションピペットを卵子Ｓｐ１１に刺し、卵子Ｓｐ１１内に精子Ｓｐ１２を注入する（Ａ１５）。
【００７６】
続いて、ユーザは、精子Ｓｐ１２が入った精子選別用ドロップＲ２を観察するため、ステージ１５を手動または電動で移動させる（Ａ１６）。この場合、図１０Ａ（５）に示すように、制御部６は、レボルバ１７の２番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット１３の２番を光路上に挿入した状態で維持させる。このため、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３それぞれは、移動しない。その後、顕微鏡１は上述した図１０Ａ（２）〜図１０Ａ（５）（Ａ７〜Ａ１５）を繰り返す。
【００７７】
このようにユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、最大で１穴分となる。
【００７８】
つぎに、ユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合について説明する。この場合、図１０Ｂに示すように、図１０Ｂ（１）〜図１０Ｂ（４）は、図１０Ａ（１）〜図１０Ａ（４）にそれぞれ対応する。
【００７９】
続いて、図１０Ｂ（５）に示すように、操作入力部３のボタンＢ４から２０倍のＰＯ観察を指示する指示信号が入力された場合（Ｂ１５）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を２０倍のＰＯ観察法の位置に移動させる（Ｂ１６）。この場合、制御部６は、レボルバ１７の２番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット１３の１番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット１３の移動量は、１穴分となる一方、対物レンズ１８は、移動しない。コンデンサターレット１３の移動後、ユーザは、卵子Ｓｐ１１内にある紡錘体を探索し、紡錘体の位置を特定する（Ｂ１７）。
【００８０】
その後、図１０Ｂ（６）に示すように、操作入力部３のボタンＢ２から２０倍のＲＣ観察を指示する指示信号が入力された場合（Ｂ１８）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を２０倍のＲＣ観察法の位置に移動させる（Ｂ１９）。この場合、制御部６は、レボルバ１７の２番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット１３の２番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット１３の移動量は、１穴分となる一方、対物レンズ１８は、移動しない。コンデンサターレット１３の移動後、ユーザは、卵子Ｓｐ１１の紡錘体を避けてインジェクションピペットを卵子Ｓｐ１１に刺し、卵子Ｓｐ１１内に精子Ｓｐ１２を注入する。続いて、顕微鏡１は、上述した図１０Ｂ（２）〜図１０Ｂ（６）を繰り返す。
【００８１】
このようにユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３それぞれの移動量は、最大で１穴分となる。
【００８２】
つぎに、ユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合について説明する。この場合、図１０Ｃに示すように、図１０Ｃ（１）〜図１０Ｃ（２）は、図１０Ａ（１）〜図１０Ａ（２）にそれぞれ対応する。
【００８３】
図１０Ｃ（３）に示すように、操作入力部３のボタンＢ５からＤＩＣ観察法を指示する指示信号が入力された場合（Ｃ８）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１をＤＩＣ観察法の位置に移動させる（Ｃ９）。この場合、制御部６は、レボルバ１７の４番を光路上に挿入するとともに、コンデンサターレット１３の４番を光路上に挿入する。このとき、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、それぞれ２穴分となる。レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動後、ユーザは、精子Ｓｐ１２頭部内の状態を観察し、精子Ｓｐ１２頭部内に空胞がない精子Ｓｐ１２を選別する（Ｃ１０）。
【００８４】
図１０Ｃ（４）に示すように、操作入力部３のボタンＢ３から４０倍のＲＣ観察法を指示する指示信号が入力された場合（Ｃ１１）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を４０倍のＲＣ観察法の位置に移動させる（Ｃ１２）。このとき、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、それぞれ１穴分となる。レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動後、ユーザは、インジェクションピペットで精子Ｓｐ１２の尾部に損傷を与え、精子Ｓｐ１２を不動化させて吸引する（Ｃ１３）。その後、顕微鏡１は、上述した図１０Ｃ（２）〜図１０Ｃ（６）を繰り返す。
【００８５】
このようにユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合、レボルバ１７の移動量およびコンデンサターレット１３の移動量は、それぞれ最大で２穴分となる。
【００８６】
つぎに、ユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合について説明する。この場合、図１０Ｄに示すように、図１０Ｄ（１）〜図１０Ｄ（５）は、上述した図１０Ｃ（１）〜図１０Ｃ（５）にそれぞれ対応する。
【００８７】
続いて、図１０Ｄ（６）に示すように、操作入力部３のボタンＢ４から２０倍のＰＯ観察を指示する指示信号が入力された場合（Ｄ１９）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を２０倍のＰＯ観察法の位置に移動させる（Ｄ２０）。この場合、制御部６は、レボルバ１７の２番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット１３の１番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット１３の移動量は、１穴分となる一方、対物レンズ１８は、移動しない。コンデンサターレット１３の移動後、ユーザは、卵子Ｓｐ１１内にある紡錘体を探索し、紡錘体の位置を特定する（Ｄ２１）。
【００８８】
その後、図１０Ｄ（７）に示すように、操作入力部３のボタンＢ２から２０倍のＲＣ観察を指示する指示信号が入力された場合（Ｄ２２）、制御部６は、駆動制御部２７を駆動することによって、ポラライザ１１、コンペンセータ１２、コンデンサターレット１３、レボルバ１７、ＤＩＣプリズム２０およびアナライザ２１を２０倍のＲＣ観察法の位置に移動させる（Ｄ２３）。この場合、制御部６は、レボルバ１７の２番を光路上に挿入した状態で維持させるとともに、コンデンサターレット１３の２番を光路上に挿入する。このとき、コンデンサターレット１３の移動量は、１穴分となる一方、対物レンズ１８は、移動しない。コンデンサターレット１３の移動後、ユーザは、卵子Ｓｐ１１の紡錘体を避けてインジェクションピペットを卵子Ｓｐ１１に刺し、卵子Ｓｐ１１内に精子Ｓｐ１２を注入する。続いて、顕微鏡１は、図１０Ｃ（２）〜図１０Ｃ（７）を繰り返す。
【００８９】
このようにユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３それぞれの移動量は、最大で２穴分となる。
【００９０】
以上説明した本発明の一実施の形態によれば、レボルバ１７の各穴に装着される対物レンズの配置およびコンデンサターレット１３の各穴に設けられた光学素子をＩＣＳＩに最適な配置にする。これにより、ＩＣＳＩにおける観察方法の切り替え時間を最小限に抑えることができる。この結果、ＩＣＳＩの作業時間を短縮することができるので、卵子をインキュベーター外へ取り出しておく時間を最小にすることができる。
【００９１】
（変形例１）
本発明の一実施の形態では、レボルバ１７の各穴に装着する対物レンズの配置およびコンデンサターレットの各穴に設けられた光学素子の配置を変更することもできる。なお、上述した本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡１と同一の構成には同一の符号を付して説明する。
【００９２】
図１１は、本発明の一実施の形態の変形例１にかかるコンデンサターレットの各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。
【００９３】
図１１に示すように、コンデンサターレット１３には、空穴１３０（１番）から周方向に沿って２０倍ＲＣ用開口板１３１（２番）と、４０倍ＲＣ用開口板１３２（４番）とが設けられている。さらに、コンデンサターレット１３には、２０倍ＲＣ用開口板１３１と４０倍ＲＣ用開口板１３２との間に６０倍ＤＩＣ用プリズム１３３（３番）が設けられている。
【００９４】
図１２は、本発明の一実施の形態の変形例１にかかるレボルバの各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。
【００９５】
図１２に示すように、レボルバ１７には、４倍対物レンズ１８１（１番）を基準に周方向に沿って２０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８２（２番）と、４０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８３（４番）と、が設けられている。さらに、レボルバ１７には、２０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８２と、４０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８３との間の周回上に６０倍対物レンズ１８４（３番）が設けられている。
【００９６】
このように構成された顕微鏡１においてＩＣＳＩを実施する場合において、観察法を切り替えたときのコンデンサターレット１３およびレボルバ１７の移動について詳細に説明する。
【００９７】
図１３Ａは、本実施の形態１の変形例１にかかる顕微鏡１において、ユーザが顕微鏡１でＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合において、精子の不動化および吸引に２０倍ＲＣ観察を用いるときの手順を示す図である。図１３Ｂは、本実施の形態１の変形例１にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合において、精子の不動化および吸引に２０倍ＲＣ観察を用いるときの手順を示す図である。
【００９８】
図１３Ａ（４）および図１３Ｂ（４）に示すように、ユーザが顕微鏡１でＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合において、精子Ｓｐ１２の不動化およびインジェクションピペットで吸引するとき、４０倍ＲＣ観察でなく、２０倍ＲＣ観察を行う。この場合、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、最大で１穴分となる。たとえば、顕微鏡１が設定された観察法から２０倍ＲＣ観察法またはＤＩＣ観察法に切り替える場合、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、１穴分となる。
【００９９】
図１４Ａは、本実施の形態１の変形例１にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合において、精子の不動化および吸引にＤＩＣ観察を用いるときの手順を示す図である。図１４Ｂは、本実施の形態１の変形例１にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合において、精子の不動化および吸引にＤＩＣ観察を用いるときの手順を示す図である。
【０１００】
図１４Ａ（４）および図１４Ｂ（４）に示すように、ユーザが顕微鏡１でＤＩＣ観察法を用いる場合において、精子Ｓｐ１２の不動化およびインジェクションピペットで吸引するとき、４０倍ＲＣ観察でなく、ＤＩＣ観察を行う。この場合、レボルバ１７およびコンデンサターレット１３は移動しない。
【０１０１】
以上説明した本発明の一実施の形態にかかる変形例１によれば、顕微鏡１でＩＣＳＩにＤＩＣ観察法を用いる場合において、精子の不動化およびインジェクションピペットで吸引するときの観察法を４０倍ＲＣ観察法に変えて２０倍ＲＣ観察法またはＤＩＣ観察法を用いるとき、ＩＣＳＩにおける観察法の切り替え時間を最小限に抑えることができるので、ＩＣＳＩの作業時間を短縮することができる。
【０１０２】
（変形例２）
本発明の一実施の形態では、レボルバ１７の各穴に装着する対物レンズの配置をさらに変更することができる。
【０１０３】
図１５は、本発明の一実施の形態の変形例２にかかるレボルバ１７の各穴に装着される対物レンズの配置を模式的に示す図である。
【０１０４】
図１５に示すように、レボルバ１７には、４倍対物レンズ１８１（１番）から周方向に沿って２０倍ＰＯ観察用対物レンズ１８５（２番）、２０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８２（３番）、４０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８３（４番）および６０倍対物レンズ１８４（５番）が設けられている。
【０１０５】
図１６は、記録部５の設定情報記録部５１が記録する設定情報を示す図である。図１６に示すように、設定情報Ｔ２には、各観察法に応じたレボルバ１７の対物レンズ１８とコンデンサターレット１３の光学素子の組み合わせが記録されている。本発明の実施の形態１の変形例２では、ＰＯ観察法の場合、２０倍ＰＯ観察用対物レンズ１８５と空穴１３０との組み合わせが記載されている。
【０１０６】
このように構成された顕微鏡１において、ＩＣＳＩに実施した場合において、観察法を切り替えたときのコンデンサターレット１３およびレボルバ１７の移動について詳細に説明する。図１７Ａは、本実施の形態１の変形例２にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図１７Ｂは、本実施の形態１の変形例２にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図１７Ｃは、本実施の形態１の変形例２にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図１７Ｄは、本実施の形態１の変形例２にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法おびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。
【０１０７】
図１７Ａ（２）、図１７Ｂ（２）、図１７Ｃ（２）および図１７Ｄ（２）に示すように、ユーザが顕微鏡１でＰＯ観察法を行う場合において、第２対物レンズ１８２とは別の対物レンズ１８を用いるとき、観察法毎に切り替えるレボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、ＢＦ観察法から２０ＲＣ観察法に切り替えるときのみ２穴分となり、それ以外が１穴分または移動しない。なお、図１７Ａ〜図１７Ｄは、上述した図１０Ａ〜図１０Ｄにそれぞれ対応する。
【０１０８】
以上説明した本発明の一実施の形態の変形例２によれば、ユーザがＰＯ観察法において２０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８２と別の対物レンズ１８５を用いる場合、ＩＣＳＩにおける観察法の切り替え時間を最小限に抑えることができるので、ＩＣＳＩの作業時間を短縮することができる。
【０１０９】
（変形例３）
本発明の一実施の形態では、コンデンサターレット１３の各穴に配置する光学素子およびレボルバ１７の各穴に装着する対物レンズ１８の配置をさらに変更することができる。なお、上述した本発明の一実施の形態にかかる顕微鏡１と同一の構成には同一の符号を付して説明する。
【０１１０】
図１８は、本発明の一実施の形態の変形例３にかかるコンデンサターレット１３の各穴に装着される光学素子の配置を模式的に示す図である。
【０１１１】
図１８に示すように、コンデンサターレット１３には、空穴１３０（１番）から周方向に沿って１０倍ＲＣ用開口板１３４（２番）と、２０倍ＲＣ用開口板１３１（３番）と、４０倍ＲＣ用開口板１３２（４番）と、６０倍ＤＩＣ用プリズム１３３（５番）との順で配置されている。
【０１１２】
図１９は、本発明の一実施の形態の変形例３にかかるレボルバ１７の各穴に装着される対物レンズ１８の配置を模式的に示す図である。
【０１１３】
図１９に示すように、レボルバ１７には、４倍対物レンズ１８１（１番）を基準に周方向に沿って１０倍ＲＣ用対物レンズ１８５（２番）と、２０倍ＲＣ用対物レンズ１８２（３番）と、４０倍ＲＣ用対物レンズ１８３（４番）と、６０倍対物レンズ１８４（５番）とが配置されている。
【０１１４】
図２０は、記録部５の設定情報記録部５１が記録する設定情報を示す図である。図２０に示すように、設定情報Ｔ３には、各観察法に応じたレボルバ１７の対物レンズ１８とコンデンサターレット１３の光学素子との組み合わせが記載されている。本発明の一実施の形態の変形例３では、１０倍ＲＣ観察法の場合、１０倍ＲＣ観察用対物レンズ１８５と１０倍ＲＣ用開口板１３４との組み合わせが記載されている。
【０１１５】
このように構成された顕微鏡１のＩＣＳＩに用いる各観察法の組み合わせにおいて、マニピュレータの針合わせで１０倍ＲＣ観察法を用いる場合のコンデンサターレット１３およびレボルバ１７の移動について詳細に説明する。図２１Ａは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図２１Ｂは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図２１Ｃは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図２１Ｄは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。
【０１１６】
図２１Ａ（１）、図２１Ｂ（１）、図２１Ｃ（１）および図２１Ｄ（１）に示すように、顕微鏡１がマニピュレータの位置合わせを行う場合において、１０倍ＲＣ観察法を用いるとき、観察法毎に切り替えるレボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、最大で２穴分となる。なお、図２１Ａ〜図２１Ｄは、上述した図１０Ａ〜図１０Ｄにそれぞれ対応する。
【０１１７】
また、顕微鏡１のＩＣＳＩに用いる各観察法の組み合わせにおいて、卵子のホールディングおよびインジェクションに１０倍ＲＣ観察を用いる場合のコンデンサターレット１３およびレボルバ１７の移動について詳細に説明する。図２２Ａは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法およびＲＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図２２Ｂは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＰＯ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図２２Ｃは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。図２２Ｄは、本実施の形態１の変形例３にかかる顕微鏡１において、ユーザがＢＦ観察法、ＲＣ観察法、ＰＯ観察法およびＤＩＣ観察法を用いてＩＣＳＩを実施する場合の手順を示す。
【０１１８】
図２２Ａ（４），（５）、図２２Ｂ（４），（５）、図２２Ｃ（４），（５）および図２２Ｄ（４），（５）に示すように、ユーザが顕微鏡１で卵子Ｓｐ１１のホールディングおよびインジェクションを行う際に１０倍ＲＣ観察法を行う場合、観察法毎に切り替えるレボルバ１７およびコンデンサターレット１３の移動量は、最大で２穴分となる。なお、図２１Ａ〜図２１Ｄは、上述した図１０Ａ〜図１０Ｄにそれぞれ対応する。
【０１１９】
以上説明した本発明の一実施の形態の変形例３によれば、ユーザがマニピュレータの針合わせ、または卵子Ｓｐ１１のホールディングおよびインジェクションにおいて、ＢＦ観察法または２０倍ＲＣ観察法に代えて、１０倍ＲＣ観察法を行う場合に、ＩＣＳＩにおける観察法の切り替え時間を最小限に抑えることができるので、ＩＣＳＩの作業時間を短縮することができる。
【０１２０】
さらに、本発明の一実施の形態の変形例３によれば、ＩＣＳＩにおいて１０倍ＲＣ観察法を用いるので、標本Ｓｐに対して様々な対応を行うことができる。
【０１２１】
また、本発明では、顕微鏡本体部、操作入力部、表示部、記録部および制御部を備えた顕微鏡を例に説明したが、たとえば試料を拡大する対物レンズ、対物レンズを介して試料を撮像する撮像機能、および画像を表示する表示機能を備えた撮像装置、たとえばビデオマイクロスコープ等であっても、本発明を適用することができる。
【０１２２】
また、本発明では、コンデンサターレットに設けられた光学素子およびレボルバに設けられた対物レンズそれぞれの配置を時計回りで説明していたが、たとえば空穴および第１対物レンズを基準に周方向に反時計周りに配置しても適用することができる。
【０１２３】
また、本発明では、ポラライザとアナライザとをクロスニコルの状態にするため、ポラライザを回転させていたが、たとえばアナライザを回転させる場合であっても適用することができる。もちろん、ポラライザとアナライザとをそれぞれ回転させる場合であっても適用することができる。
【符号の説明】
【０１２４】
１  顕微鏡
２  顕微鏡本体部
３  操作入力部
４  表示部
５  記録部
６  制御部
１０  光源
１１  ポラライザ
１１ａ，１２ａ，１３ａ，１５ａ，１７ａ，２０ａ，２１ａ  モータ
１２  コンペンセータ
１３  コンデンサターレット
１４  コンデンサレンズ
１５  ステージ
１６  ターレット位置検出部
１７  レボルバ
１８  対物レンズ
１９  レボルバ位置検出部
２０  ＤＩＣプリズム
２１  アナライザ
２２  結像レンズ
２３  光路分割プリズム
２４  撮像部
２５  ミラー
２６  接眼レンズ
２７  駆動制御部
５１  設定情報記録部
１００  シャーレ
１３０  空穴
１３１，１３２  ＲＣ観察用開口板
１３１ｂ，１３２ｂ  偏光板
１３３  ＤＩＣプリズム
１８１，１８２，１８３  対物レンズ
４０１  リタデーション情報記録部
Ｓｐ  標本
Ｓｐ１１  卵子
Ｓｐ１２  精子
ＸＡ  光軸
【図１】
2014197091.tif 000003
【図２】
2014197091.tif 000004
【図３】
2014197091.tif 000005
【図４】
2014197091.tif 000006
【図５】
2014197091.tif 000007
【図６】
2014197091.tif 000008
【図７】
2014197091.tif 000009
【図８】
2014197091.tif 000010
【図９】
2014197091.tif 000011
【図１０Ａ】
2014197091.tif 000012
【図１０Ｂ】
2014197091.tif 000013
【図１０Ｃ】
2014197091.tif 000014
【図１０Ｄ】
2014197091.tif 000015
【図１１】
2014197091.tif 000016
【図１２】
2014197091.tif 000017
【図１３Ａ】
2014197091.tif 000018
【図１３Ｂ】
2014197091.tif 000019
【図１４Ａ】
2014197091.tif 000020
【図１４Ｂ】
2014197091.tif 000021
【図１５】
2014197091.tif 000022
【図１６】
2014197091.tif 000023
【図１７Ａ】
2014197091.tif 000024
【図１７Ｂ】
2014197091.tif 000025
【図１７Ｃ】
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【図１７Ｄ】
2014197091.tif 000027
【図１８】
2014197091.tif 000028
【図１９】
2014197091.tif 000029
【図２０】
2014197091.tif 000030
【図２１Ａ】
2014197091.tif 000031
【図２１Ｂ】
2014197091.tif 000032
【図２１Ｃ】
2014197091.tif 000033
【図２１Ｄ】
2014197091.tif 000034
【図２２Ａ】
2014197091.tif 000035
【図２２Ｂ】
2014197091.tif 000036
【図２２Ｃ】
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【図２２Ｄ】
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