(57)【要約】  本発明は、ＨＹＡ本来の優れた生理学的機能を有しつつ、摂取及び取扱いが容易な新規ＨＹＡ誘導体、及びその用途を提供する。  本発明は、グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する少なくとも一つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸であることを特徴とする、トリグリセリド又はその光学異性体、及びそれを含有する組成物（食用油脂、食品、医薬、化粧料等）に関する。
2016195016.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する少なくとも一つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸であることを特徴とする、トリグリセリド又はその光学異性体。
【請求項２】
グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する二つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸である、請求項１に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
【請求項３】
グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する三つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸である、請求項１に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
【請求項４】
グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する脂肪酸のうち、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸以外の脂肪酸が、炭素数が８〜２２の脂肪酸である、請求項１又は２に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
【請求項５】
グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する脂肪酸のうち、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸以外の脂肪酸が、食用油脂に由来する脂肪酸である、請求項４に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
【請求項６】
グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する脂肪酸のうち、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸以外の脂肪酸が、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、ステアリドン酸、オレイン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、アラキジン酸、パルミトレイン酸、エライジン酸、ミード酸及びジホモ−γ−リノレン酸からなる群から選択される１種以上である、請求項４に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
【請求項７】
常温で液体である、請求項１〜６のいずれか一項に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、食用油脂。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、食品又は食品添加物。
【請求項１０】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、肥満、糖尿病、脂質代謝異常、高脂血症、脂肪肝、潰瘍性大腸炎、クローン病、潰瘍、過敏性腸症候群及び炎症性疾患からなる群から選択される疾患の予防又は治療剤。
【請求項１２】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、化粧料又は化粧料添加物。
【請求項１３】
請求項１〜７のいずれか一項に記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、飼料又は飼料添加物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なトリグリセリド及びそれを含有する組成物、並びにその用途に関し、詳しくは、グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する少なくとも一つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸（以下、「ＨＹＡ」と略称することがある。）であるトリグリセリド又はその光学異性体に関する。
また、本発明は、当該トリグリセリド又はその光学異性体の食用油脂としての用途、及び当該トリグリセリド又はその光学異性体を含有する組成物（食品、医薬、化粧料、飼料等）にも関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、生体内に低い割合でしか存在しない、希少脂肪酸の生理学的機能が注目されている。例えば共役リノール酸等の共役脂肪酸（非特許文献１）、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸等のω３系多価不飽和脂肪酸（特許文献１）が、脂質代謝改善作用や糖尿病改善作用等を有することが報告されている。前記機能性脂質を食事において摂取することに高い関心が寄せられており、それらを含有する商品（食品等）が上市されている。【０００３】
希少脂肪酸の一つに、化合物内に水酸基を有する水酸化脂肪酸がある。これまで適当な供給源がなく、その生理学的機能については十分な解析が行われていなかったが、最近、植物油に多く含まれるリノール酸等を出発原料とし、酵素反応によって高効率、高選択的に製造する手段が見出だされた（特許文献２）。そして、各種水酸化脂肪酸の供給方法が確保されると共に、その生理学的機能に関する研究も活発に行われている。本発明者らは、水酸化脂肪酸の中でも、特に１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸（ＨＹＡ）に着目し、ＨＹＡが脂質代謝異常改善作用（特許文献３）、腸管免疫力を高める作用（特許文献４）、腸管の炎症の抑制作用（非特許文献２）等を有することを報告した。【０００４】
上記のように高純度のＨＹＡの入手が容易となったことから、ＨＹＡを容易に摂取することができれば、その生理学的機能を生かして、ＨＹＡの有効利用が促進されることが期待される。しかし、ＨＹＡの融点は約２５℃であり（ここでの「約」は±１℃を示す）、常温では固体（又は一部融解した状態）であることから、摂取のし易さ、及び、液体や固体の他の食品成分への添加や混合における取扱い性が、液体の成分と比較して劣る、という問題があった。また、ＨＹＡは、それ自体が刺激性の風味を有することも、摂取の際の障害となっている。【０００５】
一方、上記課題を解決し得るようなＨＹＡの誘導体については、これまでのところ報告されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特表２００６−５２１３６８号公報
【特許文献２】国際公開第２０１３／１６８３１０号
【特許文献３】国際公開第２０１４／０６９２２７号
【特許文献４】国際公開第２０１４／１２９３８４号
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Nagao, K., J. Biosci. Bioeng., 2005, vol.100, no.2, p.152-157
【非特許文献２】Miyamoto, J. et al., J. Biol. Chem., 2015, 290(5), 2902-2918
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明における課題は、ＨＹＡの優れた生理学的機能を有しつつ、摂取及び取扱いが容易な新規ＨＹＡ誘導体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題に鑑み鋭意研究を行なった結果、グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する少なくとも一つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸である新規トリグリセリド又はその光学異性体が、常温で液体であり、風味もよいことを明らかにし、本発明を完成するに至った。【００１０】
即ち、本発明は下記の通りである：
［１］グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する少なくとも一つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸であることを特徴とする、トリグリセリド又はその光学異性体。
［２］グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する二つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸である、上記［１］に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
［３］グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する三つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸である、上記［１］に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
［４］グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する脂肪酸のうち、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸以外の脂肪酸が、炭素数が８〜２２の脂肪酸である、上記［１］又は［２］に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
［５］グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する脂肪酸のうち、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸以外の脂肪酸が、食用油脂に由来する脂肪酸である、上記［４］に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
［６］グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する脂肪酸のうち、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸以外の脂肪酸が、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、ステアリドン酸、オレイン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、アラキジン酸、パルミトレイン酸、エライジン酸、ミード酸及びジホモ−γ−リノレン酸からなる群から選択される１種以上である、上記［４］に記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
［７］常温で液体である、上記［１］〜［６］のいずれかに記載のトリグリセリド又はその光学異性体。
［８］上記［１］〜［７］のいずれかに記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、食用油脂。
［９］上記［１］〜［７］のいずれかに記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、食品又は食品添加物。
［１０］上記［１］〜［７］のいずれかに記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、医薬組成物。
［１１］上記［１］〜［７］のいずれかに記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、肥満、糖尿病、脂質代謝異常、高脂血症、脂肪肝、潰瘍性大腸炎、クローン病、潰瘍、過敏性腸症候群及び炎症性疾患からなる群から選択される疾患の予防又は治療剤。
［１２］上記［１］〜［７］のいずれかに記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、化粧料又は化粧料添加物。
［１３］上記［１］〜［７］のいずれかに記載のトリグリセリド又はその光学異性体を含有する、飼料又は飼料添加物。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、新規なトリグリセリド又はその光学異性体を提供することができる。本発明のトリグリセリド又はその光学異性体はＨＹＡの誘導体であり、常温で液体であって、風味が良く、摂取及び取扱いが容易である。
また、本発明のトリグリセリド又はその光学異性体は、摂取後に体内でリパーゼ等によって、トリグリセリドのエステル結合が加水分解されて、ＨＹＡを遊離することから、ＨＹＡ自体を単独で摂取した場合と同様に、優れた生理学的機能（脂質代謝異常改善作用、腸管免疫力を高める作用、腸管の炎症の抑制作用等）を発揮することが期待される。
従って、上記機能を有する本発明のトリグリセリド又はその光学異性体は、食用油脂としての利用が可能であり、また、各種食品及び食品添加物としての利用、更には、医薬品、化粧料、飼料等の様々な分野での利用が可能であることから、産業上極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】実施例４において、１時間及び４時間リパーゼ交換反応させて得られた各トリグリセリド混合物について、全トリグリセリド中における化合物（Ｉ）の割合を示す図である。
【図２】実施例５において、各微生物から抽出した脂質のＴＬＣによる分析結果を示す図である。
【図３】実施例５において、各微生物から抽出した脂質の脂肪酸組成について、ガスクロマトグラフィーによる分析チャートを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明について詳細に説明する。
【００１４】
（定義）
【００１５】
本明細書中、「脂肪酸」とは、直鎖または分岐鎖脂肪族炭化水素の一価のカルボン酸を意味する。脂肪酸は、飽和脂肪酸であってもよく、一価不飽和脂肪酸又は多価不飽和脂肪酸であってもよい。また、その脂肪族炭化水素鎖の一部が水酸基やカルボニル基で置換されていてもよい。「脂肪酸」の炭素数の範囲は特に限定されないが、好ましくは６〜２６、より好ましくは８〜２４、最も好ましくは８〜２２である。
【００１６】
本明細書中、「飽和脂肪酸」とは、その脂肪族炭化水素鎖に不飽和結合を有しない脂肪酸を意味する。また、本明細書中、「一価不飽和脂肪酸」とは、その脂肪族炭化水素鎖に不飽和結合を一つ有する脂肪酸を意味する。更に、本明細書中、「多価不飽和脂肪酸」とは、その脂肪族炭化水素鎖に不飽和結合を二つ以上有する脂肪酸を意味する。
【００１７】
本明細書中、「アシル（基）」とは、脂肪酸由来のアルカノイル基又はアルケノイル基を意味する。
【００１８】
（本発明の化合物）
【００１９】
本発明の化合物は、グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する少なくとも一つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸であることを特徴とする、トリグリセリド又はその光学異性体であり、好ましくは、グリセリンの水酸基とエステル結合を形成する一つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸である、トリグリセリド又はその光学異性体であるか、又はグリセリンの水酸基とエステル結合を形成する二つの脂肪酸が、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸である、トリグリセリド又はその光学異性体である。
【００２０】
本発明の化合物は、具体的には、下記式（Ｉ）：
【００２１】
【化１】
2016195016.tif 000003
【００２２】
［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一又は異なってアシル基を示し、これらの少なくとも１つは、下記式（ＩＩ）：
【００２３】
【化２】
2016195016.tif 000004
【００２４】
（式中、＊は式（Ｉ）で示される化合物中の酸素原子との結合位置を示す。）で表される１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基である。]
で表されるトリグリセリド又はその光学異性体（以下、化合物（Ｉ）と称することもある。）である。
【００２５】
本発明の化合物（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基の少なくとも一つは、式（ＩＩ）で表される１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基である。前記１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基は、化合物（Ｉ）中、グリセリンの１位、２位および３位のいずれの水酸基に結合していてもよい。
本発明においては、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基の一つ又は二つが１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基であってもよく、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基のすべてが１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基であってもよいが、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基の一つ又は二つが１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基である化合物が好ましい。
【００２６】
本発明の化合物（Ｉ）において、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示される、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基以外のアシル基としては、その種類は特に限定されないが、炭素数６〜２６のアシル基が好ましく、炭素数８〜２４のアシル基がより好ましく、炭素数８〜２２のアシル基が特に好ましい。
具体的には、９，１２−オクタデカジエン酸（リノール酸）［１８：２，ω６］、６，９，１２−オクタデカトリエン酸（γ−リノレン酸）［１８：３，ω６］、８，１１，１４−エイコサトリエン酸（ジホモ−γ−リノレン酸）［２０：３，ω６］、５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸（アラキドン酸）［２０：４，ω６］、７，１０，１３，１６−ドコサテトラエン酸［２２：４，ω６］、４，７，１０，１３，１６−ドコサペンタエン酸［２２：５，ω６］、９，１２，１５−オクタデカトリエン酸（α−リノレン酸）［１８：３，ω３］、６，９，１２，１５−オクタデカテトラエン酸（ステアリドン酸）［１８：４，ω３］、１１，１４，１７−エイコサトリエン酸［２０：３，ω３］、８，１１，１４，１７−エイコサテトラエン酸［２０：４，ω３］、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸（エイコサペンタエン酸）［２０：５，ω３］、７，１０，１３，１６，１９−ドコサペンタエン酸［２２：５，ω３］、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸（ドコサヘキサエン酸）［２２：６，ω３］、６，９−オクタデカジエン酸［１８：２，ω９］、８，１１−エイコサジエン酸［２０：２，ω９］、５，８，１１−エイコサトリエン酸（ミード酸）［２０：３，ω９］、９,１１−共役リノール酸［１８：２］、１０,１２−共役リノール酸［１８：２］、９,１１,１３−共役リノレン酸［１８：３］、８,１０,１２−共役リノレン酸［１８：３］、９,１１,１５−共役リノレン酸［１８：３］、１０,１２,１５−共役リノレン酸［１８：３］、６,９,１１−共役リノレン酸［１８：３］、６,１０,１２−共役リノレン酸［１８：３］等の多価不飽和脂肪酸由来のアシル基；オレイン酸（１８：１，ω９）、パルミトレイン酸（１６：１，ω７）、エライジン酸（１８：１，ω９）、エイコセン酸（２０：１，ω９）、エルカ酸（２２：１，ω９）、ネルボン酸（２４：１，ω９）等の一価不飽和脂肪酸由来のアシル基；カプロン酸（６：０）、カプリル酸（８：０）、カプリン酸（１０：０）、ラウリン酸（１２：０）、ミリスチン酸（１４：０）、パルミチン酸（１６：０）、マルガリン酸（１７：０）、ステアリン酸（１８：０）、アラキジン酸（２０：０）、ベヘン酸（２２：０）、リグノセリン酸（２４：０）、セロチン酸（２６：０）等の飽和脂肪酸由来のアシル基が挙げられ、その中でも、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、オレイン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、アラキジン酸、パルミトレイン酸、エライジン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、ステアリドン酸及びミード酸等の炭素数が８〜２２の脂肪酸由来のアシル基が特に好適である。
【００２７】
また、本発明の化合物（Ｉ）における、１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基以外のアシル基としては、植物性油脂又は動物性油脂等の食用油脂に由来する脂肪酸由来のアシル基も、好ましいアシル基として挙げられる。
【００２８】
本明細書中、「植物性油脂又は動物性油脂等の食用油脂に由来する脂肪酸」とは、植物や魚等動物に含まれる脂肪を抽出・精製して得られる油脂に由来する脂肪酸を意味し、具体的には、例えば、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、ステアリドン酸、オレイン酸、ステアリン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、アラキジン酸、パルミトレイン酸、エライジン酸、ミード酸、ジホモ−γ−リノレン酸等が挙げられる。
【００２９】
本発明の化合物（Ｉ）が１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基以外のアシル基を二つ有する場合、それらは同一又は異なっていてもよく、また、それらは、グリセリンの１位、２位又は３位のいずれの水酸基に結合していてもよい。
【００３０】
本発明の化合物（Ｉ）は、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基の一つが１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基であるトリグリセリド、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基の二つが１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基であるトリグリセリド、及びＲ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基のすべてが１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基であるトリグリセリドの２種以上の混合物であってもよい。
また、Ｒ１、Ｒ２又はＲ３で示されるアシル基の一つ又は二つが１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基である２種以上のトリグリセリドの混合物であってもよい。
【００３１】
本発明の化合物（Ｉ）が、光学異性体、立体異性体、位置異性体等の異性体を有する場合には、いずれの異性体も、またそれらの混合物も、本発明の化合物（Ｉ）に包含される。
本発明の化合物（Ｉ）が光学異性体を有する場合、該光学異性体は、公知の合成手法、分離手法（結晶化法、光学活性カラムを用いた高速液体クロマトグラフィーによる分離、酵素法等）等により、それぞれを光学的に純粋な化合物として得ることができる。それら光学異性体は、混合した状態で用いても良く、それぞれ分離して得た光学的に純粋な化合物を単独で用いても良く、又はそれらを組み合わせて用いてもよい。
【００３２】
本発明の化合物（Ｉ）の融点は、ＨＹＡの融点（約２５℃）以下である。本発明の化合物（Ｉ）は、好ましくは、標準温度において液体であり、より好ましくは、常温において液体である。ここで、標準温度及び常温とは、第十六改正日本薬局方通則、第十七改正日本薬局方通則に規定されている標準温度（２０℃）及び常温（１５℃〜２５℃）をいう。また、ここでの「約」は±１℃を示す。
【００３３】
（本発明の化合物（Ｉ）の製造方法）
【００３４】
本発明の化合物（Ｉ）の製法は、特に限定されないが、例えば、トリグリセリドと、ＨＹＡ又はそのエステル体若しくはその活性化体（例、酸ハライド、活性エステル、酸無水物等）とをエステル交換反応させるか、或いはトリグリセリドと、ＨＹＡ及びそれ以外の脂肪酸、又はそれらのエステル体若しくはそれらの活性化体とを同時に、又は順次エステル交換反応させる製法（製法１）、並びに、グリセリンと、ＨＹＡ若しくはその活性化体（例、酸ハライド、活性エステル、酸無水物等）とを反応させるか、又はグリセリンと、ＨＹＡ及びそれ以外の脂肪酸、若しくはそれらの活性化体（例、酸ハライド、活性エステル、酸無水物等）とを同時に、又は順次反応させることにより、グリセリンの水酸基とエステル結合を形成（エステル化）させる製法（製法２）が挙げられる。上記の製法において、反応系中に水が存在すると、生成物である化合物（Ｉ）が加水分解し、収率が低下する可能性がある。それ故、製法１及び製法２のように、反応系中に水が無くても進行する反応が特に好適に用いられる。製法や反応条件の選択の際には、原料化合物や生成物の安定性等を考慮して好ましいものを選択することができ、また、複数の製法を組み合わせることもできる。更に保護、脱保護等の反応工程も適宜組み込むこともできる。更に、微生物が油脂を蓄積することを利用した油脂合成による製法（製法３）によっても、製造することができる。
【００３５】
上記各製法において使用するＨＹＡは、特許文献２に記載の方法等により調製することができる。上記各製法において使用するトリリノレインやグリセリンは、東京化成工業株式会社等の市販品をそのまま利用することができる。また、トリリノレイン以外のトリグリセリドは、市販品を利用してもよく、グリセリンの水酸基と、脂肪酸若しくはその活性化体（例、酸ハライド、活性エステル、酸無水物等）とのエステル形成反応により調製して利用することもできる。上記エステル形成反応は、製法２と同様の方法により実施することができる。
【００３６】
以下、本発明の化合物（Ｉ）の製法１について説明する。
【００３７】
製法１のエステル交換反応としては、酵素反応、化学反応のいずれも用いられるが、簡便かつ穏和な条件で高選択的に反応を行うことができる酵素反応が好ましい。
【００３８】
製法１のエステル交換反応に用いる酵素としては、トリグリセリドの少なくとも１つのアシル基を１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル基に変換し得る酵素であれば特に制限はないが、例えば、リパーゼ、エステラーゼ等が挙げられ、中でも、リパーゼが好ましい。リパーゼは、ノボザイムズ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）社、天野エンザイム株式会社、名糖産業株式会社、シグマ−アルドリッチ社等から市販品として入手することができる。
【００３９】
製法１の酵素反応では、反応基質や反応生成物であるトリグリセリドが加水分解しないように、反応基質や溶媒中の水分含有量は可能な限り少ないことが望ましい。反応は、無溶媒で行うか、又は種々の非水溶媒（例えば、ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサン、イソオクタン等の非極性溶媒）中で行うことができるが、無溶媒での反応がより好ましい。更に、使用する基質や溶媒への水分の混入を抑制するために、反応系の気体部分を窒素ガスやアルゴンガス等の不活性気体で置換することが好ましい。
【００４０】
製法１における反応温度は、溶媒の有無、溶媒を使用する場合は溶媒の種類、酵素の種類、反応基質であるトリグリセリドや脂肪酸の種類等により異なるが、通常４℃〜１００℃、好ましくは２０℃〜７０℃、より好ましくは３０℃〜５０℃である。
【００４１】
製法１における反応時間は、溶媒の有無、溶媒を使用する場合は溶媒の種類、酵素の種類、反応基質であるトリグリセリドや脂肪酸の種類等により異なるが、通常１時間〜１６８時間、好ましくは５時間〜４８時間である。
【００４２】
製法１で反応基質として用いるトリグリセリドとしては、ＨＹＡとのエステル交換反応によって本発明の化合物（Ｉ）が得られるものであれば、特に制限なく使用することができる。例えば、９，１２−オクタデカジエノイル基を３つ有するトリリノレイン、９−オクタデセノイル基を３つ有するトリオレイン等のトリグリセリドは市販されており、入手が容易であるので原料として好適に使用することができる。また、食用油脂も市販されており、入手が容易であるので原料として好適に使用することができる。
【００４３】
製法１で用いるＨＹＡの使用量、又はＨＹＡとそれ以外の脂肪酸の使用量の合計は、トリグリセリドに対して、１０重量％から５００重量％が好ましく、２０重量％から１００重量％が特に好ましい。また、ＨＹＡ、及びそれ以外の脂肪酸の各エステル体若しくは各活性化体を原料として使用する場合には、それぞれＨＹＡの量、又はそれ以外の脂肪酸の量に換算して、上記の量を使用することができる。
【００４４】
製法１で用いる酵素の使用量は、トリグリセリドに対して、１重量％から１００重量％が好ましく、１重量％から５０重量％がより好ましく、１重量％から２０重量％が特に好ましい。
【００４５】
以下、本発明の化合物（Ｉ）の製法２について説明する。
【００４６】
製法２のエステル化工程は、酵素反応又は化学反応を用いて行うことができるが、反応操作が簡便で、反応条件も穏和な酵素反応を用いるのが好ましい。
【００４７】
製法２のグリセリンのエステル化に用いる酵素としては、本発明の化合物（Ｉ）に変換し得るものであれば特に制限はないが、例えば、リパーゼ、エステラーゼ等が挙げられ、中でも、リパーゼが好ましい。
【００４８】
製法２のエステル化工程においては、反応生成物であるトリグリセリドが加水分解しないように、反応基質や溶媒中の水分含有量は可能な限り少ないことが望ましい。反応は、無溶媒で行うか、又は種々の非水溶媒（例えば、ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサン、イソオクタン等の非極性溶媒）中で行うことができるが、無溶媒での反応がより好ましい。更に、水を反応系から除いて反応の平衡を移動させ、エステル化反応を促進したり、使用する反応基質や溶媒中の水分含有量を低減させるために、減圧下で反応を行うこともできる。
【００４９】
製法２における反応温度は、溶媒の有無、溶媒を使用する場合は溶媒の種類、酵素の種類、反応基質である脂肪酸又はその活性化体の種類等により異なるが、通常４℃〜１００℃、好ましくは２０℃〜７０℃、より好ましくは３０℃〜５０℃である。
【００５０】
製法２における反応時間は、溶媒の有無、溶媒を使用する場合は溶媒の種類、酵素の種類、反応基質である脂肪酸又はその活性化体の種類等により異なるが、通常１時間〜１６８時間、好ましくは５時間〜１２０時間である。
【００５１】
製法２の反応基質として用いるＨＹＡの使用量、又はＨＹＡとそれ以外の脂肪酸の使用量の合計は、グリセリンに対して１０００重量％〜１００００重量％が好ましく、１５００重量％〜８０００重量％がより好ましく、２０００重量％〜５０００重量％が特に好ましい。また、ＨＹＡ、及びそれ以外の脂肪酸の各活性化体を原料として使用する場合には、それぞれＨＹＡの量、又はそれ以外の脂肪酸の量に換算して、上記の量を使用することができる。
【００５２】
製法２で反応基質として用いるグリセリンに対する酵素の使用量は、１重量％〜１００重量％が好ましく、１０重量％〜９０重量％がより好ましく、３０重量％〜８０重量％が特に好ましい。
【００５３】
上記製法１及び２において用いられる酵素反応に使用する酵素は、各種担体によって固定化されたものでもよく、遊離型のものでもよいが、固定化されたものは無水の反応系、又は水分が少ない反応系でも活性が高く、また回収して繰り返し使用することができる点でより好ましい。上記酵素は、いずれも精製されたものであっても、粗精製物であってもよい。あるいは、大腸菌等の菌体にて発現させて、その菌体自体を用いてもよく、その菌体の培養液を用いてもよい。
【００５４】
微生物を用いた油脂合成による製造方法（製法３）において、製造に使用する微生物としては、バシジオボルス属に属する接合菌（Basidiobolus magnus、Basidiobolus ranarum、Basidiobolus haptosporus等）、ヒラタケ（Pleurotus ostreatus）等の菌などが挙げられるが、トリグリセリド合成能のある微生物であれば、その種は問わない。
【００５５】
（本発明の食用油脂）
【００５６】
本発明は、本発明の化合物（Ｉ）を含有する食用油脂（以下、「本発明の食用油脂」ともいう）を提供する。
すなわち、本発明の化合物（Ｉ）は、単独で、又は他の食用油脂に配合して食用油脂とすることができる。本発明の食用油脂における本発明の化合物（Ｉ）の含有量は、特に限定されないが、食用油脂全量当たり通常５重量％以上であり、２０重量％以上とすることが好ましく、５０重量％以上とすることがより好ましく、優れた風味及び生理学的機能が得られるという点では、単独で食用油脂として使用することが特に好ましい。
【００５７】
本発明の食用油脂には、本発明の特徴を損なわない範囲で、例えば、食用油脂に用いられる一般的な成分（食品添加物等）を含有させることができる。これらの成分としては、例えば、乳化剤、酸化・劣化防止剤、消泡剤、結晶調整剤等が挙げられる。
【００５８】
乳化剤としては、例えば、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングルコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、有機酸モノグリセリド等が挙げられる。
酸化・劣化防止剤としては、例えば、トコフェロール類、フラボン誘導体、没食子酸誘導体、カテキン及びそのエステル、リグナン類（例えばセサミンなど）、フキ酸、セサモール、テルペン類等が挙げられる。
消泡剤としては、例えば、シリコーン油等が挙げられる。
結晶調整剤としては、例えば、本発明の化合物（Ｉ）以外のトリアシルグリセロール、ジアシルグルセロール、モノ脂肪酸グリセリル、ヘプタ脂肪酸デカグリセリル、デカ脂肪酸デカグリセリル、ワックス類、ステロールエステル類等が挙げられる。
また、香辛料や着色剤等も添加することができる。香辛料としては、例えば、カプサイシン、アネトール、オイゲノール、シネオール、ジンゲロン等が挙げられる。着色剤としては、例えば、カロテン、アスタキサンチン等が挙げられる。
【００５９】
さらに、本発明の食用油脂には、必要に応じて各種栄養素（糖質、タンパク質等）、各種ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ等）、各種ミネラル類（マグネシウム、亜鉛、鉄、ナトリウム、カリウム、セレン等）等を含有させることもできる、
【００６０】
（本発明の食品又は食品添加物）
【００６１】
本発明は、本発明の化合物（Ｉ）を含有する食品又は食品添加物（以下、本明細書において「本発明の食品又は食品添加物」ともいう）を提供する。
本発明の食品又は食品添加物は、溶液、懸濁物、乳化物、ゲル、粉末、固体成形物等、経口摂取可能な形態であればよく、特に限定されるものではない。
本発明の食品又は食品添加物の具体例としては、サプリメント（散剤、顆粒剤、ソフトカプセル、ハードカプセル、錠剤、チュアブル錠、速崩錠、シロップ、液剤等）、飲料（炭酸飲料、乳酸飲料、スポーツ飲料、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、栄養飲料、アルコール飲料等）、菓子（グミ、ゼリー、ガム、チョコレート、クッキー、キャンデー、キャラメル、和菓子、スナック菓子等）、即席食品類（即席麺、レトルト食品、缶詰、電子レンジ食品、即席スープ・みそ汁類、フリーズドライ食品等）、油脂食品（マヨネーズ、ドレッシング、バター、クリーム、マーガリン等）、小麦粉製品（パン、パスタ、麺、ケーキミックス、パン粉等）、調味料（ソース、トマト加工調味料、風味調味料、調理ミックス、つゆ類等）、畜産加工品（畜肉ハム・ソーセージ等）等が挙げられる。
【００６２】
本発明の食品又は食品添加物における本発明の化合物（Ｉ）の含有量は、食品又は食品添加物の全量に対し、５重量％〜９０重量％であり、好ましくは１０重量％〜８０重量％であり、より好ましくは２０重量％〜７０重量％である。
本発明の食品又は食品添加物の１日あたりの摂取量は、摂取させる対象者の年齢、摂取により改善等が期待される症状や状態及びその重篤度、食品等の剤形等に応じて適宜設定されるが、本発明の化合物（Ｉ）の摂取量が、ＨＹＡに換算した量として、後述する１日あたりの摂取量となるように設定されることが好ましい。
【００６３】
本発明の食品又は食品添加物には、必要に応じて各種栄養素（糖質、タンパク質等）、各種ビタミン類（ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ等）、各種ミネラル類（マグネシウム、亜鉛、鉄、ナトリウム、カリウム、セレン等）、食物繊維、生理学的機能の報告された食品（ロイヤルゼリー、プロポリス、アガリクス等）等を配合することができる。
また、本発明の食品又は食品組成物には、必要に応じて一般的な食品用添加剤、例えば乳化剤（グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル等）、増粘安定剤（ペクチン、カルボキシメチルセルロースナトリウム等）、酸化防止剤（混合ビタミンＥ、エリソルビン酸ナトリウム等）、保存料（安息香酸ナトリウム、ソルビン酸等）、光沢剤（セラック、ミツロウ等）、甘味料（キシリトール、アスパルテーム等）、酸味料（クエン酸、リンゴ酸等）、苦味料（カフェイン、ナリンジン等）、調味料（Ｌ−グルタミン酸ナトリウム、５’−イノシン酸二ナトリウム等）、着色料（クチナシ黄色素、赤色２号等）、香料（オレンジ香料、バニリン等）、製造用剤（かん水、結着剤等）等を添加することができる。
【００６４】
本発明の食品又は食品添加物は、本発明の化合物（Ｉ）に、必要に応じて、上記した各種栄養素、各種ビタミン類等や、一般的な食品用添加剤を加えて、一般的な製造方法により調製することができる。
【００６５】
なお、上記した本発明の食用油脂、及び食品又は食品添加物には、健康食品、機能性食品、保健機能食品（例えば、特定保健用食品、機能性表示食品等）、特別用途食品（例えば、病者用食品等）、疾病リスク低減表示を付した食用油脂及び食品等に分類されるものも包含される。
ここで、「疾病リスク低減表示」としては、例えば、ＨＹＡにより症状を改善し得る疾患を治療、改善、抑制、及び／又は予防するためのものである旨の表示が挙げられる。従って、本発明の食用油脂、食品又は食品添加物は、ＨＹＡにより症状を改善し得る疾患、例えば、肥満、糖尿病、脂質代謝異常、高脂血症、脂肪肝、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病、偽膜性腸炎等）、潰瘍、過敏性腸症候群、及びその他の種々の炎症性疾患（例えば、痛風、関節炎、多発性神経炎、多発性神経根炎、肝炎、気管支炎、肺炎、腎炎、膀胱炎、歯周病、皮膚炎、アトピー性皮膚炎等）を改善、及び／又は予防するためのものである旨の表示を付した食用油脂、食品又は食品添加物として提供することができる。
【００６６】
（本発明の医薬組成物）
【００６７】
本発明は、本発明の化合物（Ｉ）を含有する医薬組成物（以下、本明細書において「本発明の医薬組成物」ともいう）を提供する。
本発明の医薬組成物は、動物に対し、ＨＹＡにより症状を改善し得る疾患、例えば、肥満、糖尿病、脂質代謝異常、高脂血症、脂肪肝、炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎、クローン病、偽膜性腸炎等）、潰瘍、過敏性腸症候群、及びその他の種々の炎症性疾患（例えば、痛風、関節炎、多発性神経炎、多発性神経根炎、肝炎、気管支炎、肺炎、腎炎、膀胱炎、歯周病、皮膚炎、アトピー性皮膚炎等）を予防するための予防剤、又は治療、改善、抑制するための治療剤として用いることができる。
ここで、「動物」としては、ヒトをはじめ、イヌ、ネコ、ウサギ、ハムスター、ラット、マウス、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ、ロバ、ラクダ等の哺乳動物が挙げられる。
【００６８】
本発明の医薬組成物は、特に制限されることなく、例えば、散剤、顆粒剤、丸剤、ソフトカプセル、ハードカプセル、錠剤、チュアブル錠、速崩錠、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の各種剤形の経口製剤；坐剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤、吸入剤、注射剤等の非経口製剤として提供され得る。
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物（Ｉ）に、必要に応じて各種添加剤を加え、一般的な製剤化手段、例えば第十六改正日本薬局方製剤総則［２］製剤各条、第十七改正日本薬局方製剤総則［３］製剤各条等に記載された方法等に従って、製造することができる。
【００６９】
本発明において、製剤化のために用いることができる添加剤としては、特に制限されないが、例えば、大豆油、サフラワー油、オリーブ油、胚芽油、ひまわり油、牛脂、いわし油等の動植物性油脂；ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール等の多価アルコール；ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル等の界面活性剤；精製水、滅菌精製水、注射用水、生理食塩液、エタノール、イソプロパノール等の溶剤；乳糖、デンプン、結晶セルロース、Ｄ−マンニトール、大豆レシチン、アラビアガム、ソルビトール液、水飴等の賦形剤；アルファー化デンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、セラック等の結合剤；クロスポビドン、ポビドン、デキストリン等の崩壊剤；ケイ酸マグネシウム、ステアリン酸アルミニウム、タルク等の滑沢剤；アスパルテーム、カンゾウエキス、サッカリンナトリウム等の甘味剤；黄色酸化鉄、褐色酸化鉄、黒酸化鉄、食用青色１号、食用赤色２号等の着色剤；塩酸、クエン酸、クエン酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム等のｐＨ調整剤；ビターエッセンス等の香料等を挙げることができる。
なお、液体製剤とする場合は、用時に水又は他の適切な溶媒に溶解又は懸濁して用いる固形の製剤としてもよい。また、錠剤や顆粒剤には、周知の方法でコーティングを施してもよい。
【００７０】
本発明の医薬組成物においては、本発明の効果を損なわない範囲で、本発明の化合物（Ｉ）とともに、本発明の医薬組成物が改善又は予防し得る上記疾患に対する治療用薬物を併用してもよい。
本発明の医薬組成物において併用し得る薬物（以下、本明細書において「併用薬物」ともいう）としては、例えば、スルホニル尿素薬（トルブタミド、グリクロピラミド、グリブゾール、グリメピリド等）、ビグアナイド薬（塩酸メトホルミン等）、α−グルコシダーゼ阻害薬（ボグリボース、アカルボース等）、チアゾリジン誘導体（塩酸ピオグリタゾン等）等の糖尿病治療薬；スタチン類（プラバスタチンナトリウム、シンバスタチン、ピタバスタチンカルシウム等）、陰イオン交換樹脂（コレスチラミン、コレスチミド等）、フィブラート系薬（クロフィブラート、クリノフィブラート等）、ニコチン酸系薬（ニコチン酸トコフェロール、ニコモール等）等の高脂血症治療薬；サリチル酸製剤（メサラジン等）、持続性サルファ薬（サラゾスルファピリジン等）、副腎皮質ステロイド（ベタメタゾン、プレドニゾロン等）、分子標的治療薬（インフリキシマブ、アダリムマブ等）、免疫抑制剤（アザチオプリン等）等の炎症性腸疾患（クローン病、潰瘍性大腸炎、偽膜性腸炎等）治療薬；抗コリン薬（塩酸ピペタナート、臭化メペンゾラート等）、消化管運動調節薬（トリメブチン等）、合成高分子化合物（ポリカルボフィルカルシウム等）、乳酸菌製剤等の過敏性腸症候群治療薬；痛風発作予防薬（コルヒチン等）、尿酸排泄促進薬（プロベネシド、ブコローム、ベンズブロマロン等）、尿酸生成抑制薬（アロプリノール等）等の痛風治療薬；非ステロイド抗炎症薬（メフェナム酸、ケトプロフェン、ジクロフェナクナトリウム等）、生物活性薬（シクロスポリン等）等の関節炎、神経炎治療薬；インターフェロン製剤（インターフェロンβ、インターフェロンα−２ａ等）、抗肝炎ウイルス薬（リバビリン、ラミブジン等）、肝機能改善薬（グリチルリチン製剤、グルクロン酸、チオプロニン等）等の肝炎治療薬；β−刺激薬（塩酸エフェドリン、ｄｌ−塩酸メチルエフェドリン、塩酸トリメトキノール等）、テオフィリン薬（ジプロフィリン、アミノフィリン等）、抗コリン薬（臭化チオトロピウム水和物等）等の気管支炎治療薬；マクロライド系抗菌薬（クラリスロマイシン、アジスロマイシン等）、ニューキノロン系抗菌薬（レボフロキサシン、ガレノキサシン等）等の肺炎治療薬；アンジオテンシン変換酵素阻害薬（マレイン酸エナラプリル、塩酸デラプリル等）、アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬（ロサルタンカリウム、カンデサルタンシレキセチル等）等の腎炎治療薬；ニューキノロン系抗菌薬（オフロキサシン、レボフロキサシン、ノルフロキサシン等）、ペニシリン系抗菌薬（アモキシシリン、アンピシリン、クロキサシリン等）、セフェム系抗菌薬（塩酸セフカペンピボキシル、塩酸セフォチアムヘキセチル等）、漢方薬（八味地黄丸、猪苓湯等）等の膀胱炎治療薬；セフェム系抗菌薬（セファレキシン等）、殺菌剤（塩化ベンゼトニウム、塩酸クロルヘキシジン等）等の歯周病治療薬；非ステロイド抗炎症薬（ブフェキサマク、ウフェナマート等）、鎮痒薬（クロタミトン等）等の皮膚炎、アトピー性皮膚炎治療薬；免疫調整薬（タクロリムス水和物等）等のアトピー性皮膚炎治療薬等が挙げられる。
【００７１】
本発明の医薬組成物を注射剤等の非経口製剤とする場合には、該組成物は、特に制限されないが、例えば、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、経皮、関節内、滑液嚢内、骨膜内、舌下、口腔内等に投与することが好ましく、特に静脈内又は腹腔内に投与することが好ましい。静脈内投与は、点滴投与、ボーラス投与のいずれであってもよい。
【００７２】
本発明の医薬組成物における本発明の化合物（Ｉ）の含有量は、本発明の医薬組成物の全量に対し、５重量％〜１００重量％であり、好ましくは１０重量％〜９０重量％であり、より好ましくは２０重量％〜８０重量％である。
【００７３】
本発明の医薬組成物の投与量は、投与対象動物の種類、年齢及び体重、症状及び重篤度、医薬組成物の剤形、投与方法、併用薬物の種類等に応じて適宜決定することができる。例えば、本発明の医薬組成物をヒトに経口投与する場合、有効成分であるＨＹＡに換算した総量として、成人１日当たり０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．２ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与することができ、また、ヒトに非経口的に投与する場合は、０．００２ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．０２ｍｇ／ｋｇ体重〜５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与することができる。前記の量は、経口投与、非経口投与のいずれの場合も、１日１回もしくは数回（２〜５回）に分けて投与することができる。
また、本発明の医薬組成物の投与期間は、投与する動物の状態、症状および重篤度等に応じて、適宜決定することができ、通常１日間〜９０日間であり、好ましくは７日間〜３０日間である。
【００７４】
（本発明の化粧料又は化粧料添加物）
【００７５】
本発明は、本発明の化合物（Ｉ）を含有する化粧料又は化粧料添加物（以下、本明細書において、「本発明の化粧料又は化粧料添加物」ともいう）を提供する。
本発明の化粧料は、本発明の化合物（Ｉ）に、必要に応じて各種添加剤を加え、上記した医薬組成物の製造方法に準じて調製することができる。
本発明の化粧料は、クリーム、ゲル、乳液、美容液、ローション、マイクロエマルションエッセンス、パック等の皮膚用化粧料；ファンデーション、口紅、アイシャドー、チークカラー等のメイクアップ化粧料；クレンジングオイル、クレンジングクリーム等の洗浄用化粧料；シャンプー、コンディショナー等の毛髪用化粧料；入浴剤等の種々の形状の化粧料とすることができる。
本発明の化粧料には、本発明の特徴を損なわない範囲で、抗しわ・抗老化剤、抗炎症剤、肌荒れ防止剤、細胞賦活・創傷治癒剤、美白剤等の活性成分や、油剤（動植物性油脂、ロウ、エステル、高級脂肪酸、高級脂肪族アルコール等）、界面活性剤、溶剤、増粘剤、保湿剤、抗酸化剤、防腐剤、ｐＨ調整剤、顔料、香料等、化粧料に一般的に使用される添加剤を添加することができる。
【００７６】
本発明の化粧料添加物は、本発明の化合物（Ｉ）に、必要に応じて、上記した油剤、界面活性剤、溶剤、増粘剤、顔料等を加え、上記医薬組成物の製造方法に準じて、油状、懸濁液状、乳状、ペースト状、粉末状、顆粒状等の形態とすることができる。
【００７７】
本発明の化粧料又は化粧料添加物における本発明の合物（Ｉ）の含有量は、本発明の化粧料等の全量に対し、５重量％〜７０重量％であり、好ましくは１０重量％〜６０重量％であり、より好ましくは２０重量％〜５０重量％である。
【００７８】
（本発明の飼料又は飼料添加物）
【００７９】
本発明は、本発明の化合物（Ｉ）を含有する飼料又は飼料添加物（以下、本明細書において「本発明の飼料又は飼料添加物」ということもある）を提供する。
本発明の飼料又は飼料添加物は、油剤、懸濁剤、乳剤、ゲル、粉末、顆粒、錠剤等の形態とすることができる。
本発明の飼料又は飼料添加物としては、ペットフード、畜産又は水産養殖飼料添加物等が挙げられる。
本発明の飼料又は飼料用添加物は、本発明の化合物（Ｉ）を、飼料用賦形物質、希釈物質等と混合して、通常の方法に従って調製することができる。
飼料用賦形物質、希釈物質は、本発明の特徴を損なわない限り、特に制限なく用いることができ、例えば、アラビアゴム、カラギーナン、寒天、キサンタンガム、キトサン、セルロース、ローカストビーンガム等の多糖；ブドウ糖、乳糖、麦芽糖、白糖等の単糖または二糖；グリセリン、ソルビトール、Ｄ−マンニトール等の糖アルコール；アルブミン、カゼイン、グルテン、ゼラチン等のタンパク質；きな粉、小麦粉、大豆粉、トウモロコシ粉等の穀物粉；トルラ酵母、パン酵母、ビール酵母等の酵母；硬化油、植物性油脂、動物性油脂等の油脂；カオリン、ゼオライト、タルク、バーミキュライト、ベントナイト等の粘土鉱物；珪藻土、含水二酸化ケイ素、ケイ酸、軽質無水ケイ酸、無水ケイ酸、ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム等のケイ酸またはその塩；軽質流動パラフィン、流動パラフィン等の炭化水素；カルナウバロウ等のロウ等が挙げられる。
また、さらに、本発明の飼料又は飼料添加物には、本発明の特徴を損なわない限り、グリシン、ＤＬ−アラニン、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム等のアミノ酸；Ｌ−アスコルビン酸、エルゴカルシフェロール、塩酸チアミン、コレカルシフェロール、ビタミンＡ粉末、ビタミンＤ粉末、リボフラビン等のビタミン；塩化カリウム、クエン酸鉄、グルコン酸カルシウム等のミネラル；アスタキサンチン、カンタキサンチン等の色素等、栄養成分補給用の添加剤を添加することができる。
【００８０】
本発明の飼料又は飼料添加物における本発明の化合物（Ｉ）の含有量は、本発明の飼料等の全量に対し、１重量％〜７０重量％であり、好ましくは３重量％〜５０重量％であり、より好ましくは５重量％〜３０重量％である。
【実施例】
【００８１】
以下に実施例及び実験例を挙げて、本発明を更に具体的に説明するが、これによって本発明が限定されるものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。【００８２】
以下の実施例において、プロトン核磁気共鳴（１Ｈ  ＮＭＲ）スペクトルは、ブルカー（Ｂｒｕｋｅｒ）社製ＡＶＡＮＣＥ  ＩＩＩ  ５００を用い、重クロロホルムを溶媒として測定した。１Ｈ  ＮＭＲについてのデータは、化学シフト（δｐｐｍ）、多重度（ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｍ＝マルチプレット、ｄｄ＝ダブルダブレット、ｄｔ＝ダブルトリプレット、ｔｔ＝トリプルトリプレット、ｂｒｓ＝ブロードシングレット、ｓｅｐ＝セプテット）、カップリング定数（Ｈｚ）、積分及び割当てとして報告する。
高分解能質量スペクトル解析は、株式会社島津製作所製高速液体クロマトグラフ質量分析計（ＬＣＭＳ）（ＬＣＭＳ−２０２０）を用いて実施した。
融点（ｍｐ）測定は、株式会社アナテック・ヤナコ製融点測定器（ＭＰ−Ｊ３）を用いて行った。【００８３】
以下の実施例において、本発明の化合物（Ｉ）は、上記の製法１に基づいて製造した。本発明の化合物（Ｉ）の製造に反応基質として使用したトリリノレインは、市販品（東京化成工業株式会社製）を使用し、ＨＹＡは、特許文献２に記載の方法で調製して用いた。その他の原料化合物及び試薬は、市販品をそのまま使用するか、又は自体公知の方法、若しくはこれらに準ずる方法に従って製造することができる。【００８４】
［実施例１］ジ（シス、シス−９，１２−オクタデカジエノイル）（１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル）グリセロール
１００ｍＬの反応容器（メジウム瓶）にトリリノレイン（１０ｇ）、エステル交換酵素（リパーゼ）（ノボザイムズ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）社、リポザイム（Ｌｉｐｏｚｙｍｅ）  ＲＭＩＭ、１ｇ）、ＨＹＡ（５ｇ）を投入し、反応系の気相部分を窒素ガスで置換した後、４０℃で７２時間、撹拌した。反応液に０．５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を濃縮することにより、未反応のトリリノレインを含むトリグリセリド又はその光学異性体の混合物８．０ｇを得た。得られた混合物より、中圧シリカゲルクロマトグラフィー（「フラッシュ自動精製装置  Ｉｓｏｌｅｒａ Ｏｎｅ」、バイオタージ（Ｂｉｏｔａｇｅ）社製、カラム：「ＳＮＡＰ Ｕｌｔｒａ」、バイオタージ（Ｂｉｏｔａｇｅ）社製、ヘキサン：酢酸エチル＝９０：１０〜０：１００で溶出）で単離精製することにより、ジ（シス、シス−９，１２−オクタデカジエノイル）（１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル）グリセロール（３．５ｇ）を得た。
融点：−２０℃以下；
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：（δ）ｐｐｍ：０．８９（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．３０（ｍ，４４Ｈ），１．４６（ｍ，２Ｈ），１．６１（ｍ，６Ｈ），２．０５（ｄｔ，１０Ｈ，Ｊ＝６．８，７．０Ｈｚ），２．２１（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．６，６．６Ｈｚ），２．３１（ｍ，６Ｈ），２．７７（ｄｄ，４Ｈ，Ｊ＝６．６，６．６Ｈｚ），３．６１（ｍ，１Ｈ），４．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），５．２６（ｔｔ，１Ｈ，Ｊ＝４．４，５．８Ｈｚ），５．３６（ｍ，９Ｈ），５．５７（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．３，１０．９Ｈｚ）；
ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｍ＋８９７。【００８５】
［実施例２］ジ（１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル）（シス、シス−９，１２−オクタデカジエノイル）グリセロール
実施例１と同様に、エステル交換反応で得られた混合物（未反応のトリリノレインを含むトリグリセリド又はその光学異性体の混合物）８．０ｇより、中圧シリカゲルクロマトグラフィーにより単離精製して、ジ（１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル）（シス、シス−９，１２−オクタデカジエノイル）グリセロール（０．５３ｇ）を得た。
融点：７．２〜７．８℃；
１Ｈ  ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：（δ）ｐｐｍ：０．８９（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．３０（ｍ，４６Ｈ），１．４６（ｍ，４Ｈ），１．５９（ｍ，６Ｈ），２．０５（ｄｔ，８Ｈ，Ｊ＝７．１，７．３Ｈｚ），２．２１（ｄｄ，４Ｈ，Ｊ＝６．５，６．５Ｈｚ），２．３１（ｍ，６Ｈ），２．７７（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ＝６．６，６．６Ｈｚ），３．６１（ｍ，２Ｈ），４．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．２８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），５．２６（ｔｔ，１Ｈ，Ｊ＝４．４，５．９Ｈｚ），５．３６（ｍ，６Ｈ），５．５７（ｄｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．３，１０．９Ｈｚ）；
ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｍ＋９１５。【００８６】
［実施例３］トリ（１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル）グリセロール
実施例１と同様に、エステル交換反応で得られた混合物（未反応のトリリノレインを含むトリグリセリド又はその光学異性体の混合物）８．０ｇより、中圧シリカゲルクロマトグラフィーにより単離精製して、トリ（１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセノイル）グリセロール（０．０６８ｇ）を得た。
融点：２０．０〜２１．２℃；
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）：（δ）ｐｐｍ：０．８９（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．９Ｈｚ），１．３０（ｍ，４８Ｈ），１．４６（ｍ，６Ｈ），１．６１（ｍ，６Ｈ），２．０５（ｄｔ，６Ｈ，Ｊ＝７．３，７．５Ｈｚ），２．２１（ｄｄ，６Ｈ，Ｊ＝６．７，６．７Ｈｚ），２．３１（ｍ，６Ｈ），３．６１（ｔｔ，３Ｈ，Ｊ＝５．８，６．２Ｈｚ），４．１４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．１５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），４．３０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），５．２６（ｔｔ，１Ｈ，Ｊ＝４．４，５．９Ｈｚ），５．４０（ｄｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．５，１０．８Ｈｚ），５．５７（ｄｔ，３Ｈ，Ｊ＝７．３，１０．９Ｈｚ）；
ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｍ＋９９３。【００８７】
［比較例１］トリリノレイン
比較例１として、上記の市販品（東京化成工業株式会社製）のトリリノレインを使用した。【００８８】
［比較例２］１０−ヒドロキシ−シス−１２−オクタデセン酸（ＨＹＡ）
比較例２として、特許文献２に記載の方法により調製したＨＹＡを用いた。【００８９】
［実験例１］
実施例１〜３の本発明の化合物（Ｉ）、比較例１のトリリノレイン及び比較例２のＨＹＡが、標準温度（約２０℃）で液体であるか、または固体であるかについて、目視することにより確認した。【００９０】
その結果、下表１に示されるように、比較例２のＨＹＡ以外は、全て標準温度（約２０℃）で液体であり、ＨＹＡをトリグリセリド化することにより融点が低下し、１０−ヒドロキシ−１２−シス−オクタデセノイル基を少なくとも１つ有するトリグリセリドは、標準温度（約２０℃）では液体状態で存在することがわかった。【００９１】
［実験例２］
実施例１〜３の本発明の化合物（Ｉ）、比較例１のトリリノレイン及び比較例２のＨＹＡの風味について、パネラー（１０名）による官能評価（以下味覚試験という）を実施した。パネラーは５ｍｇの試料（試料名は試験時はパネラーに秘匿した）を摂取した後に、五味（旨味・苦味・酸味・塩味・甘味）のそれぞれ強さ、刺激性及び油臭を評価し、さらに総合評価を行った。
各評価は、次の通り５段階の評価とした。
五味（旨味・苦味・酸味・塩味・甘味）：強い（５点）〜弱い（１点）
刺激性：弱い（５点）〜強い（１点）
油臭：弱い（５点）〜強い（１点）
総合評価：うまい（５点）〜まずい（１点）【００９２】
その結果、下表１に示されるように、本発明の化合物（Ｉ）では、比較例１のトリリノレイン、及び比較例２のＨＹＡに比べて、旨味及び甘味が向上し、比較例２のＨＹＡより、苦味が低減された。また、ＨＹＡをトリグリセリド化することにより、刺激性が低減されることが示された。さらに、本発明の化合物（Ｉ）は、トリリノレインやＨＹＡに比べて油臭も弱く、総合評価においても優れることが示された。【００９３】
【表１】
2016195016.tif 000005
【００９４】
実験例１、２の結果より、本発明の化合物(Ｉ)が標準温度（約２０℃）で液体であり、刺激性を有さずに強い旨味を有することを確認することができた。【００９５】
［実施例４］食用油脂のトリグリセリドを基質とする本発明の化合物（Ｉ）の製造
１５ｍＬ用ねじ口試験管に各食用油脂（各０．４ｇ：亜麻仁油、キャノーラ油、サフラワー油、大豆油、コーン油、オリーブオイル、綿実油、ココナッツオイル）、エステル交換酵素（リパーゼ）（ノボザイムズ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ）社、ノボザイム（Ｎｏｖｏｚｙｍ）  ４００８６、０．１ｇ）、ＨＹＡ（０．６ｇ）、ヘキサン１ｍＬを投入し、反応系の気相部分を窒素ガスで置換した後、４０℃で１〜４時間、撹拌した。【００９６】
実施例４において、１時間反応させた後に、反応液の一部を高速液体クロマトグラフィー（システムコントローラ：「ＣＢＭ−２０Ａ」、ポンプ：「ＬＣ−１０ＡＤＶＰ」（２台）、カラムオーブン：「ＣＴＯ−１０ＡＶＰ」、オートサンプラ：「ＳＩＬ−２０ＡＣＨＴ」、検出器：「ＥＬＳＤ−ＬＴII」、以上株式会社島津製作所製、ヘキサン：酢酸エチル＝９０：１０〜５０：５０にて溶出）に供し、成分分析を行った。その結果、基質とした全ての食用油脂について、反応前には見られなかったピーク（ＨＹＡを一つ構成脂肪酸として含むトリグリセリドと同じ保持時間を有するピーク）が検出された。
４時間反応させた後のトリグリセリド混合物についても、上記と同様に高速液体クロマトグラフィーによる成分分析を行い、１時間反応させた後及び４時間反応させた後の各分析結果について、ＨＹＡを一つ構成脂肪酸として含むトリグリセリドと同じ保持時間を有するピークの全ピークに対するピーク面積比を算出し、図１に示した。反応時間を長くすることにより、前記ピークのピーク面積の占める割合（ＴＧ（Ｈ）％）が増加することが示され、ＨＹＡを一つ構成脂肪酸として含むトリグリセリドが生成されることが認められた。【００９７】
次いで、各食用油脂を基質として１時間反応させた後のトリグリセリドについて、薄層クロマトグラフ用ＴＬＣプレート（「ＴＬＣ  Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４」、メルク社製）を用いて反応生成物を掻き取り、けん化およびメチル化を行い、ガスクロマトグラフィー（「ＧＣ−１７００」、株式会社島津製作所製）を用いて、脂肪酸組成を解析した。
基質とした各油脂の反応前の脂肪酸組成を表２に、反応生成物の脂肪酸組成を表３に示した。
なお、表２及び表３中の数値は、ガスクロマトグラフィーにて検出された脂肪酸の各ピークの面積の、全ピークの面積に対する割合（％）を示す。【００９８】
【表２】
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【００９９】
【表３】
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【０１００】
表２および表３に示されるように、反応生成物には、基質として用いた全ての食用油脂について、構成脂肪酸にＨＹＡが含まれていることから、本発明の化合物（Ｉ）を含む油脂混合物であることが確認された。この結果より、化合物（Ｉ）のアシル基のうち、ＨＹＡに由来するもの以外は、各食用油脂に由来する物であることが示された。【０１０１】
以上の結果より、実施例１〜３で用いたトリリノレインのみならず、食用油脂のトリグリセリドを基質として用いた場合にも、上記製法１により、本発明の化合物（Ｉ）を製造することができることが示された。【０１０２】
[実施例５]製法３による化合物（Ｉ）の製造
２０ｍＬ用フラスコにＧＹ培地（グルコース２％、イースト１％）４ｍＬを入れ、ＨＹＡを１０ｍｇ／ｍＬとなるように加えた後、各微生物（Basidiobolus ranarum、Basidiobolus haptosporus及びPleurotus ostreatus）をそれぞれ植菌し、２８℃、撹拌速度１２０ｒｐｍで７日間培養した。培養後にナイロンネットフィルター(Filter Type ：３０μｍ、「ＮＹ３０」、メルクミリポア社製)で吸引ろ過にて集菌し、凍結乾燥した菌体を水と共にガラスビーズ粉砕し、Ｂｌｉｇｈ−ｄｙｅｒ法にて脂質を抽出した。抽出した脂質を、薄層クロマトグラフ用ＴＬＣプレート（「ＴＬＣ  Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ６０  Ｆ２５４」、メルク社製）を用いて分離した（ヘキサン：ジエチルエーテル：酢酸＝５０ｍＬ：２００ｍＬ：２．５ｍＬ、プリムリン発色、４０分展開）。Basidiobolus ranarumから抽出した脂質のサンプルをＳａｍｐｌｅ２、Basidiobolus haptosporusから抽出した脂質のサンプルをＳａｍｐｌｅ３、Pleurotus ostreatusから抽出した脂質のサンプルをＳａｍｐｌｅ６とし、それらのＴＬＣの分析結果を図２に示す。
ＴＬＣのスタンダードとしては、ＨＹＡと同様に水酸基を持つ脂肪酸であるリシノール酸をトリグリセリドの構成脂肪酸として有するヒマシ油、ヒマシ油より精製されたリシノール酸を２つ有するトリグリセリド（ＤｉＲＡ−ＴＧ）、及び遊離脂肪酸であるＨＹＡを用いた。ヒマシ油について確認できるスポットは、下から、構成脂肪酸としてリシノール酸を３つ有するトリグリセリド、リシノール酸を２つ有するトリグリセリド、リシノール酸を１つ有するトリグリセリドのスポットである。遊離脂肪酸であるＨＹＡのスポット及びヒマシ油について確認されるスポットの位置と、Ｓａｍｐｌｅ２、３、６について確認された各スポット（図２に示されるＴＬＣ１〜５の各スポット）を比較した結果、ＴＬＣ２〜ＴＬＣ５の各スポットは、トリグリセリドのスポットであると考えられる。
ＴＬＣプレートから各スポット（ＴＬＣ１〜５）を掻き取り、けん化およびメチル化を行い、ガスクロマトグラフィー（「ＧＣ−１７００」、株式会社島津製作所製）を用いて、脂肪酸組成を解析した。各微生物により得られた脂質の脂肪酸組成についての分析チャートを図３に示す。図３に示されるように、各微生物から抽出した脂質のトリグリセリド画分について、ＨＹＡが構成脂肪酸として含まれることが認められた。この結果より、製法３によっても、化合物(Ｉ)を製造できることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【０１０３】
本発明の化合物（Ｉ）は、常温で液体であり、風味も良く、摂取及び取扱いが容易であることを見出した。また、本発明のトリグリセリド又はその光学異性体は、摂取後に体内でリパーゼ等によって、エステル結合が加水分解され、ＨＹＡを遊離することから、ＨＹＡ自体を単独で摂取した場合と同様に、優れた生理学的機能（脂質代謝異常改善作用、腸管免疫力を高める作用、腸管の炎症の抑制作用等）を発揮することが期待されることから、上記機能を活かした食用油脂としての利用、各種食品及び食品添加物としての利用、更には、医薬品、化粧料、飼料等の様々な分野での利用が可能であるという点において、産業上極めて有用である。【０１０４】
本出願は、日本国で出願された特願２０１５−１１２６０４を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含されるものである。
【図１】
2016195016.tif 000008
【図２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図３−３】
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【国際調査報告】
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