(57)【要約】【課題】迅速にパラゴムノキ根白腐病菌を感染させる方法を提供することを課題とする。【解決手段】本発明は、パラゴムノキ根白腐病菌が培養された土壌にキャッサバの根を配置することを特徴とするパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法、土壌にキャッサバの根を配置した後に、該キャッサバの根をパラゴムノキ根白腐病菌の感染の有無を診断することを特徴とする土壌調査方法、土壌にキャッサバの根を配置することにより、該土壌中に存在するパラゴムノキ根白腐病菌を該キャッサバの根に人工感染させ、パラゴムノキ根白腐病菌を人工感染させた該キャッサバの根を該土壌から除去することを特徴とする土壌浄化方法である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
パラゴムノキ根白腐病菌が培養された土壌にキャッサバの根を配置することを特徴とするパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法。
【請求項２】
前記キャッサバの根は、無毒化されている根である請求項１に記載のパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法。
【請求項３】
土壌にキャッサバの根を配置した後に、該キャッサバの根のパラゴムノキ
根白腐病菌の感染の有無を診断することを特徴とする土壌調査方法。
【請求項４】
キャッサバの根の菌糸束の形成を確認することにより前記感染の有無を
診断する請求項３に記載の土壌調査方法。
【請求項５】
土壌にキャッサバの根を配置することにより、該土壌中に存在するパラゴムノキ根白腐病菌を該キャッサバの根に人工感染させ、パラゴムノキ根白腐病菌を人工感染させた該キャッサバの根を該土壌から除去することを特徴とする土壌浄化方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、パラゴムノキ根白腐病菌リジドポラス・マイクロポラス（Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ  ｍｉｃｒｏｐｏｒｕｓ）が培養された土壌にキャッサバの根を配置することを特徴とするパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法、土壌にキャッサバの根を配置した後に、該キャッサバの根のパラゴムノキ根白腐病菌の感染の有無を診断することを特徴とする土壌調査方法、及び土壌にキャッサバの根を配置することにより、該土壌中に存在するパラゴムノキ根白腐病菌を該キャッサバの根に人工感染させ、パラゴムノキ根白腐病菌を人工感染させた該キャッサバの根を該土壌から除去することを特徴とする土壌浄化方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
パラゴムノキ根白腐病は、原因菌であるリジドポラス・マイクロポラスが植物の根に感染することにより引き起こされる土壌病害の一種である（例えば、非特許文献１参照。）。病症が進行すると、感染した植物は枯れてしまう。特に、ゴムノキのプランテーションにおいては、最も深刻な土壌病害の１つであり、パラゴムノキ根白腐病の早期発見とパラゴムノキ根白腐病菌の防除が重要な課題となっている。
近年、土壌中に存在するパラゴムノキの根白腐病の病原菌を遺伝子により特定する研究がおこなわれている。病原菌を特定した後には、該病原菌をパラゴムノキに人工感染させ、実際に該病原菌が根白腐病を発症するか否かの検証が行われている。
従来、このような人工感染を行う方法としては、爪楊枝や割り箸に病原菌を付着させ、苗木人工的に感染させる方法や、病原菌を繁殖させた培地に苗木を植える方法などが知られている（例えば、非特許文献２参照。）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｓ．Ｋａｅｗｃｈａｉ，ｅｔ．ａｌ．，Ａｆｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  （２００９）ｖｏｌ．３，ｐｐ．６４１−６４８．
【非特許文献２】Ｓ．Ｋａｅｗｃｈａｉ，ｅｔ．ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２０１０  Ｖｏｌ．６（２）：３４９−３６３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかし従来の方法では、パラゴムノキ根白腐病の人工感染が成功したか否かを確認するまでに3か月程度かかり、また、苗木も1年以上経過した台木でなければ感染が成功しない場合がある等、迅速にパラゴムノキ根白腐病の人工感染の成否を確認することができなかった。
【０００５】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、迅速にパラゴムノキ根白腐病菌を感染させる方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、かかる課題を解決するため鋭意検討した結果、本発明を完成するに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は、下記の特徴を有するパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法、土壌調査方法、パラゴムノキ根白腐病菌減少方法を提供するものである。
（１）パラゴムノキ根白腐病菌が培養された土壌にキャッサバの根を配置することを特徴とするパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法。
（２）前記キャッサバの根は、無毒化されている根である（１）に記載のパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法。
（３）土壌にキャッサバの根を配置した後に、該キャッサバの根のパラゴムノキ根白腐病菌の感染の有無を診断することを特徴とする土壌調査方法。
（４）キャッサバの根の菌糸束の形成を確認することにより前記感染の有無を診断する（３）に記載の土壌調査方法。
（５）土壌にキャッサバの根を配置することにより、該土壌中に存在するパラゴムノキ根白腐病菌を該キャッサバの根に人工感染させ、パラゴムノキ根白腐病菌を人工感染させた該キャッサバの根を該土壌から除去することを特徴とする土壌浄化方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明のパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法によれば、迅速にパラゴムノキ根白腐病菌を感染させる方法を提供することができる。本発明の人工感染方法により、短時間でパラゴムノキ根白腐病菌であるか否かを確認することができる。また、本発明の土壌調査方法により、植林前の土壌にパラゴムノキ根白腐病菌が存在するか否かを確認でき、植林に適した土壌であるか否かを判別することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】キャッサバの根の配置を示す図。
【図２】パラゴムノキ根白腐病を人工感染させたキャッサバの根を示す図。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の第一の態様は、パラゴムノキ根白腐病菌が培養された土壌にキャッサバの根を配置することを特徴とするパラゴムノキ根白腐病菌の人工感染方法である。
【００１１】
≪パラゴムノキ根白腐病菌の培養≫
本発明において、パラゴムノキ根白腐病菌は、おが屑・木屑・籾殻等の有機物を主体とする培地にパラゴムノキ根白腐病菌リジドポラス・ミクロポラスを接種して培養することが好ましい。
【００１２】
培地はおが屑等を主体とし、おが屑等に米ぬかや石灰などの栄養物を添加してもよい。これを通気性のある袋等に入れ、１０日〜２０日間培養させることが好ましい。
【００１３】
本発明において、上記のように培養したパラゴムノキ根白腐病菌を含む培地を培地ごと土壌に混合することにより、パラゴムノキ根白腐病菌を培養した土壌（以下、「混合土壌」ということがある。）を調整することが好ましい。
【００１４】
≪パラゴムノキ根白腐病菌の人工感染≫
上記のように調整した混合土壌に、キャッサバ属各種（Ｍａｎｉｈｏｔｅａｅ  ｓｐ．）（例えば、Ｍａｎｉｈｏｔ  ｅｓｃｕｌｅｎｔａ：キャッサバ）の根を配置することにより、パラゴムノキ根白腐病菌をキャッサバの根に人工的に感染させる。
【００１５】
パラゴムノキ根白腐病菌をキャッサバの根に人工的に感染させる方法としては、例えば、混合土壌３ｋｇを長さ３０ｃｍ×幅×３０ｃｍ×深さ１０ｃｍのプランターに入れ、直径約３ｃｍ大のキャッサバの根を５ｃｍ間隔で配置し、３０日間おき、キャッサバの根にパラゴムノキ根白腐病菌を人工感染させる方法が挙げられる。
【００１６】
本発明の人工感染方法によれば、キャッサバの根を土壌に配置したのち、３０日後にはパラゴムノキ根白腐病の感染の成否を確認することができる。
【００１７】
本発明に用いるキャッサバの根は、無毒の根であることが好ましい。キャッサバには、有毒のキャッサバと、無毒のキャッサバがあるが、本発明では無毒のキャッサバの根を用いることが好ましい。
【００１８】
本発明の第二の態様は、土壌にキャッサバの根を配置した後に、該キャッサバの根のパラゴムノキ根白腐病菌の感染の有無を診断することを特徴とする土壌調査方法である。
【００１９】
本発明の土壌調査方法は、パラゴムノキを植林する前の土壌を対象とすることができる。本発明の土壌調査方法により、植林前の土壌に病原菌が存在するか否かを確認でき、植林に適した土壌であるか否かを判別することができる。
【００２０】
本発明の土壌調査方法は、パラゴムノキの植林位置にキャッサバ根を１個配置することにより、植林前の土壌に病原菌が存在するか否かを確認できる。パラゴムノキの植林間隔は、例えば３ｍ×７ｍ、または４．７５ｍ×４．２５ｍ等であるため、調査対象とする土壌において、該間隔にキャッサバの根を１個ずつ配置することが好ましい。
【００２１】
前記のように土壌に配置したキャッサバ根を３０日間放置し、キャッサバの根に病原菌を人工的に感染させることにより、土壌中の病原菌の有無を確認することができる。
【００２２】
病原菌の確認方法としては、釣菌等が挙げられる。
【００２３】
本発明の土壌調査方法において、パラゴムノキ根白腐病菌を人工感染の有無をキャッサバの根に菌糸束の形成を確認することにより、診断することが好ましい。菌糸束は例えば、図２の４に示すように、キャッサバの根に形成されるため、菌糸束の形成を目視で確認することができる。
【００２４】
本発明の第三の態様は、土壌にキャッサバの根を配置することにより、該土壌中に存在するパラゴムノキ根白腐病菌を該キャッサバの根に人工感染させ、パラゴムノキ根白腐病菌を人工感染させた該キャッサバの根を該土壌から除去することを特徴とする土壌浄化方法である。
【００２５】
本発明の土壌調査方法等により、土壌中にパラゴムノキ根白腐病菌の存在が判明した場合、本発明の土壌浄化方法を用いて土壌中に存在するパラゴムノキ根白腐病菌を減少させることができる。具体的には、植林前の土壌にキャッサバの根を配置し、該キャッサバの根にパラゴムノキ根白腐病菌を人工感染させ、３０日経過後にキャッサバの根を取り除くことにより、キャッサバの根に感染したパラゴムノキ根白腐病菌を土壌中から除去することができる。
【実施例】
【００２６】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００２７】
〈実施例１〉
培地（おが屑：米ぬか：石灰＝８５：１４：１）で、リジドポラス・ミクロポラスを、２週間、培養した。土壌１ｋｇに対して０．０２〜０．１ｋｇの割合となるように、リジドポラス・ミクロポラスを培地ごと土壌と混合した。
【００２８】
かかる混合土壌３ｋｇを長さ３０ｃｍ×幅３０ｃｍ×深さ１０ｃｍのプランターに入れ、直径約３ｃｍ大のキャッサバの根を図１に示すように５ｃｍ間隔で配置した。その後、室温（２５〜３０℃）で３０日間放置し、人工感染の有無を確認した。
【００２９】
キャッサバ根に、図２に示すような菌糸束が形成されていたため、パラゴムノキ根白腐病菌を短期間で人工感染させることができた。
【００３０】
〈参考例１〉
実施例１と同様の条件でリジドポラス・ミクロポラスを培養し、パラゴムノキの種を播種後、３か月経過した実生苗にリジドポラス・ミクロポラスを接種したところ、３０日経過しても感染が確認できなかった。
【符号の説明】
【００３１】
１…キャッサバの根、２…混合土壌、３…パラゴムノキ根白腐病を人工感染させたキャッサバの根、４…キャッサバの根に形成された菌糸束。
【図１】
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【図２】
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