(57)【要約】      （修正有）【課題】アルコールを必要としない、局所用途のため、好ましくは口腔用途のための組成物の提供。【解決手段】３〜８．５のｐＨを有し、（ａ）（該組成物の全重量に基づき）０．１〜１０重量％の、バイオフラボノイドと果実酸又はその塩との混合物を含んでなる原液、（ｂ）０．０５〜１０重量％のヒアルロン酸ナトリウム、及び（ｃ）水、及び、任意的に（ｄ）それらのための薬学的に許容されるキャリヤを含んでなり、しかも、該ヒアルロン酸ナトリウムが８０００００〜４００００００の平均分子量を有する組成物。該バイオフラボノイド混合物は、未熟な橙の果皮の内皮に由来する組成物で、水溶性である組成物である。前記果実酸塩がリンゴ酸塩、クエン酸塩及びアスコルビン酸塩から選ばれた物である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
３〜８．５のｐＨを有する組成物であって：
（ａ）該組成物の全重量に基づき０．１重量％から１０重量％未満の、バイオフラボノイドと果実酸又はその塩との混合物、を含んでなる原液、
（ｂ）ヒアルロン酸ナトリウム、及び
（ｃ）水、及び、任意に
（ｄ）薬学的に許容されるそれらのためのキャリヤ
を含んでなり、該ヒアルロン酸ナトリウムが８０００００〜４００００００の平均分子量を有する組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の組成物であって、該ヒアルロン酸ナトリウムの分子量が、１００００００〜２００００００である組成物。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の組成物であって、該全組成物の重量に基づき０．００５〜１０重量％のヒアルロン酸ナトリウムを含んでなる組成物。
【請求項４】
請求項３に記載の組成物であって、０．２〜１０重量％のヒアルロン酸ナトリウムを含んでなる組成物。
【請求項５】
請求項４に記載の組成物であって、０．２〜１重量％のヒアルロン酸ナトリウムを含んでなる組成物。
【請求項６】
請求項３に記載の組成物であって、０．００５〜０．１重量％のヒアルロン酸ナトリウムを含んでなる組成物。
【請求項７】
請求項６に記載の組成物であって、０．０１重量％のヒアルロン酸ナトリウムを含んでなる組成物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物であって、該バイオフラボノイド混合物が未熟なダイダイの果皮の内側の柔組織に由来する組成物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物であって、０．５又は１重量％のような、０．１〜５重量％の該原液を含んでなる組成物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物であって、該バイオフラボノイド混合物が水溶性である組成物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物であって、該原液が、リンゴ酸塩、クエン酸塩及びアスコルビン酸塩から選ばれた果実酸塩を含んでなる組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の組成物であって、該原液が、第四級アンモニウム塩基のような塩基との果実酸塩を含んでなる組成物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の組成物であって、該塩基が、アスコルビン酸コリンのようなコリン塩基である組成物。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物であって、果実酸を実質的に含まない組成物。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組成物であって、該原液及び／又は該組成物が、３．５〜８のｐＨを有する組成物。
【請求項１６】
請求項１５に記載の組成物であって、該原液及び／又は該組成物が、４〜７のｐＨを有する組成物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の組成物であって、該原液及び／又は該組成物が、５〜６．５のｐＨを有する組成物。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の組成物であって、該バイオフラボノイド混合物が、バイオフラボノイド混合物の重量に基づき４０〜６０重量％のような量でバイオマスを伴う組成物。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の組成物であって、該バイオフラボノイドが、イソクリオサーム（isocriocirm）、イソナリンギン、ナランギン、ヘスペリジン、ネオヘスペリジン、ネオジオミン、ナリンゲニン、ポンシリン及びリオフォレンから、例えば、ナランギン及びネオヘスペリジンから選ばれる組成物。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組成物であって、２０〜４０重量％の水を含んでなる練り歯磨き、又は６０〜８０重量％の水を含んでなる液体組成物のような、該組成物の重量に基づき２０〜８０重量％の水を含んでなる組成物。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか１項に記載の組成物であって、該組成物の重量に基づき０〜３０重量％のアルコールを含んでなる組成物。
【請求項２２】
請求項２１に記載の組成物であって、該アルコールがエタノールである組成物。
【請求項２３】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物であって、実質的にアルコールを含まない組成物。
【請求項２４】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物であって、５〜６．５のｐＨを有し、
（ａ）０．１重量％〜１０重量％未満（該組成物の全重量に基づく）の、バイオフラボノイドと果実酸又はその塩との混合物を含んでなる原液であって、該バイオフラボノイド混合物が、少なくとも７５％のナランギンとネオヘスペリジンとの混合物であって、未熟なダイダイの果皮の内側の柔組織から誘導される混合物を含んでなる原液、
（ｂ）ヒアルロン酸ナトリウム、及び
（ｃ）２０〜８０重量％の水、及び、０〜３０重量％のアルコール、及び、任意に
（ｄ）それらのための薬学的に許容されるキャリヤ
を含んでなる組成物。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか１項に記載の組成物であって、該成分（ｄ）が、フッ化物添加剤（fluoridating agents）、風味料、甘味料、着色剤及び防腐剤；歯石予防剤及び抗菌剤；湿潤剤、界面活性剤、増粘剤、ゴム、結合剤及び研磨剤；並びに、膜形成剤から選ばれる組成物。
【請求項２６】
請求項１〜２５のいずれか１項に記載の組成物であって、局所用組成物である組成物。
【請求項２７】
請求項１〜２６のいずれか１項に記載の組成物であって、口腔用組成物である組成物。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか１項に記載の組成物であって、ペースト、クリーム、軟膏、ゲル又は液体の形態である組成物。
【請求項２９】
請求項２８に記載の口腔用組成物であって、練り歯磨き、マウススプレー、口腔洗浄剤又はうがい薬の形態である口腔用組成物。
【請求項３０】
請求項２７〜２９のいずれか１項に記載の口腔用組成物であって、口腔内の細菌感染症のような微生物感染症、若しくは他の歯周疾患の影響を治療するか、予防するか又は改善するのに適しているか；口腔から歯苔を掃除するか、消毒するか若しくは除去するのに適しているか；口腔内の臭気若しくは味を清新にするか、新鮮にするか、除去するか又は改善するのに適しているか；又は、口腔の衛生、外観及び感触を手当するのに適している口腔用組成物。
【請求項３１】
請求項１〜３０のいずれか１項に記載の組成物の製造方法であって、成分（ａ）、（ｂ）、（ｃ）及び／又は（ｄ）を均質な物理的混合物にすることを含んでなる製造方法。
【請求項３２】
請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組成物の使用であって、口腔内の微生物感染症、特に細菌感染症を治療するための医薬品の製造における使用。
【請求項３３】
請求項３２に記載の使用であって、粘膜炎、アフター性潰瘍、扁平苔癬、口腔カンジダ症、歯肉炎、歯周炎又は歯槽骨炎を治療するための使用方法。
【請求項３４】
請求項３２に記載の使用であって、固定性若しくは可動性補綴物又は外科手術のような機械的原因に起因する歯肉炎、口内炎などの、歯肉組織の炎症性徴候により特徴づけられる歯肉疾患を治療するための、及び、幼少期の歯牙発生段階のための使用。
【請求項３５】
請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組成物の使用であって、アクネ、火傷及び創傷のような、感染した若しくは感染する恐れのある及び／又は炎症を起こしている皮膚を治療するための医薬品の製造における使用。
【請求項３６】
請求項３２〜３５のいずれか１項に記載の使用であって、該微生物感染症が、Actinomyces odontolyticus、Actinomyces viscosus、Porphyromonas gingivalis、Prevotella intermedia、Prevotella buccae、Prevotella dentalis、Streptococcus gordonii、Streptococcus sanguinis、S oralis、S sobrinus、S mutans、S intermedins、Lactobacillus acidophilus、Eubacterium nodatum、Actinomyces israelii、Actinomyces naeslundii、C albicans及びC tropicalisから選ばれる使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クリーム、ゲル、練り歯磨き、うがい薬又は口内洗浄剤のような組成物の製造において使用される高分子量ヒアルロン酸のナトリウム塩を含んでなるフラボノイド含有組成物に関する。とりわけ、それは、高分子量ヒアルロン酸のナトリウム塩と組み合わされて抗菌性バイオフラボノイド原液を含んでなる組成物、好ましくは口腔用組成物、それらの製造、及び使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗微生物活性、とりわけ抗菌活性、特に抗ウイルス活性を有するフラボノイド類を含んでなる一定の組成物は知られている。しかし、用語「フラボノイド」には、様々な天然供給源から抽出されることによって入手可能な多種多様な異なる化合物が包含される。その供給源と抽出の種類又は方法との両方に依存して、得られるフラボノイド混合物の全体的な化学組成はそれ自体大きく異なることがある。個々のフラボノイド類は、ウイルス及び細菌のような微生物に対する毒性と有効性との両方の点から、それらの生物活性（又は生物不活性）に大きなばらつきがあることがある。したがって、そのようなフラボノイド類は、組み合わされると、それらの生物活性が大きく異なることもある。
【０００３】
フラボノイド組成物に他の作用物質を添加することによって、一定の組合せのフラボノイド類の生物活性に相乗作用を与えるか、その生物活性を向上させるか、又は促進することが可能であることが見出された。従って、一定の微生物に対する所期の有効性を有するものの、使用において毒性又は他の不利な作用を伴わない、他の作用物質との又はそれなしのフラボノイド類の適切な組合せを見出すことに多くの努力が向けられてきた。そのような組合せの一例は、バイオフラボノイド類として知られているオレンジ抽出物とビタミンＣのような天然果実酸との組合せであって、E. coli及びSalmonellaのような食品関連微生物を殺すために養鶏業において使用されている組合せの中に見出すことができる。
【０００４】
しかし、本発明まで、口腔用途のようなパーソナル衛生のための配合物にオレンジム由来バイオフラボノイド／果実酸の組合せを使用することは提案されてこなかった。とりわけ、既知の組合せは、口腔用途としては過度に酸性であるようである。更に、フラボノイド類を練り歯磨き及びうがい薬のような組成物に使用することは提案されてきたが、これらの組成物は、それらのフラボノイド成分に関して特定されてこなかったか、及び／又は、特定のフラボノイド類に限定されてきた。例えば、ＷＯ０２／４７６１５には、感覚器官が感知し得るのに適したキャリヤとそのキャリヤ中に分散されるテルペノイド及び／又はフラボノイドとを含んでなる口腔用組成物が開示されており；ＤＥ１９９４９５７５には、歯科障害を治療し虫歯を予防するためのフッ化物とフラボノイドとの組合せが開示されており；また、ＪＰ６２０５１６１３は、フラボノール、クリシン、ヘスペレチン及びヘスペリジンから選ばれた１種類以上のフラボノイド化合物０．００１〜０．１重量％を含有する歯磨剤組成物に関する。従来技術の配合物はいずれも、バイオフラボノイド組成物（それ自体、複数種類の水溶性フラボノイド成分の特定の組合せを含有する）の１種類以上の水溶性果実酸との組合せであって、溶液剤としての経口投与に適した量及び形態であり且つ抗菌活性を有する組合せを開示していない。
【０００５】
ヒアルロン酸は、厳密に生化学的な観点と生理学的な観点との両方から、結合組織の基礎物質（fundamental matter）の最も重要な硫化ムコ多糖類の酸である。ヒトにおいて、ヒアルロン酸は、結合組織の中だけでなく、硝子体液、水様液等の重要な生体液の中、及び臍帯の中にも存在している。それは、毒性が実質的にゼロであり、ヒトに対する特定の禁忌は知られていない。
【０００６】
天然物質の他の諸成分の場合のように、ヒアルロン酸は、関連する天然物質からの抽出によって得ることができる。例えば、それは、ニワトリとさかから抽出されても、バイオ技術によって生成されてもよい。ヒアルロン酸は、非常に広い範囲の分子量を有し、それは、使用されるプロセスに依存して、３００００から１５００００００より大きい値まで変動する。前記酸は、ヒト治療と美容処置との両方において、ここしばらくの間、それのナトリウム塩の形態で使用されてきた。
【０００７】
この点において、ヒアルロン酸の外用は、結合組織をいたわることに対する有益な効果を有し、加えて、それは、ヒアルロニダーゼ産生細菌によって誘発される炎症過程に対峙し；それは、炎症性成分の分解を促進し、異常毛細血管透過性を低減し、組織修復過程を促進し；しかも、それは、その分子構造に遊離水を代謝的に結合させることにより抗浮腫作用を行う。ヒアルロン酸のための治療指標は、非常に多く、表皮剥離性皮膚病（abrasive-excoriative dermatopathies）、動脈硬化性血管障害に由来する潰瘍、静脈瘤性潰瘍、瘢痕化遅延（cicatrization delays）及び外科的切除を包含する。
【０００８】
ＥＰ０４４４４９２Ａ１から、８０００００〜４００００００の間、好ましくは１００００００〜２００００００の分子量によって特徴付けられるナトリウム塩形態のヒアルロン酸が、口腔の炎症性感染の治療及び予防における局所投与のための、並びに、口腔の美容処置及び衛生のための、医薬組成物の製造において、有効成分として使用されることが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】ＷＯ０２／４７６１５
【特許文献２】ＤＥ１９９４９５７５
【特許文献３】ＪＰ６２０５１６１３
【特許文献４】ＥＰ０４４４４９２Ａ１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
ヒアルロン酸と、クロルヘキシジン等の他の抗菌性物質とを含んでなる配合物、とりわけ口腔用配合物を製造するための試みは、得られる配合物が不安定で失敗に終わった。幾つかの組合せでは、その配合物を製造するのにアルコールを使用する必要があるが、それは一般に望ましくない。ナトリウム塩形態のヒアルロン酸のバイオフラボノイド類との組合せが、局所用途のため、好ましくは口腔用途のために配合され得、その組成物はアルコールを必要としない、ことが今回見出だされた。
【００１１】
特定のいかなる理論にも拘束されることを望む訳ではないが、フラボノイド混合物は、ヒアルロン酸のための最適環境を作り出しながら細菌及びウイルスを殺して、粘膜組織及び他の炎症性組織の治癒速度を改善し且つ加速するものと思われる。好都合なことに、成分は全て天然由来であり、しかも、それら製造物には、刺激性化学物質も合成化学物質も使用されない。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
したがって、本発明は、３〜８．５、好ましくは３．５〜８、好ましくは４〜７、より好ましくは５〜６．５のｐＨを有する組成物であって、
（ａ）該組成物の全重量に基づき、０．１重量％から１０重量％未満のバイオフラボノイド類と果実酸又はその塩との混合物を含んでなる原液、
（ｂ）ヒアルロン酸ナトリウム、及び
（ｃ）水、及び、任意に
（ｄ）薬学的に許容されるそれらのためのキャリヤ
を含んでなり、該ヒアルロン酸ナトリウムが８０００００〜４００００００の平均分子量を有し；該組成物はそれ自体で、投与、好ましくは経口投与に適する薬学的に許容されるか又は薬理学的に許容される他の成分を含んでなることができる組成物、を提供する。
【００１３】
好ましくは、ヒアルロン酸ナトリウムの分子量は、８０００００〜４００００００の間、最も好ましくは１００００００〜２００００００の間、例えば、１５０００００である。本発明の組成物は、概して、ヒアルロン酸ナトリウムを、組成物の全重量に基づき０．００５重量％〜１０重量％含有する。
【００１４】
治療用途のための本発明による組成物は、ヒアルロン酸ナトリウムを、その組成物の全重量に基づき、０．２〜１０重量％、好ましくは０．２〜１重量％、例えば、０．４重量％、０．６重量％又は０．８重量％含有する。
【００１５】
口腔の予防的用途、美容的用途及び衛生学的用途のための本発明による組成物は、ヒアルロン酸ナトリウムを、その口腔用組成物の全重量に基づき、０．００５〜０．１重量％、例えば０．０１重量％、０．０２重量％、０．０５重量％又は０．０８重量％含有し、最も好ましくは、ヒアルロン酸ナトリウムを０．０１重量％含有する。
【００１６】
好ましくは、本組成物は、前記原液を０．１〜５重量％、より好ましくは０．１〜２重量％の範囲で、例えば約１重量％含んでなることが好ましい。本組成物は、水を２０〜８０重量％の範囲で含んでなることが適切であり、練り歯磨きの場合はその範囲の下端付近であり、また、うがい薬／リンス剤／スプレー剤のような液体組成物に対しては上端付近である。例えば、とりわけ、成分（ｄ）にシリカが含有される場合は、ペーストは、水を２０〜４５重量％、例えば２０〜３０重量％の範囲で含んでなることができ、また、液体配合物は、水を６０〜８０重量％（全て、本組成物の全重量に基づく重量）の範囲で含んでなることができる。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
とりわけ好ましいのは、前記原液が、クエン酸、リンゴ酸及びアスコルビン酸のような果実酸と組み合わされた水溶性バイオフラボノイドから製造され得る場合である。それらの酸の１種類以上は、好ましくは、第四級アンモニウム塩基、例えば、炭酸コリン、重炭酸コリン、又は好ましくは水酸化コリンのようなコリン塩基のような適切な塩基、で中和されてもよい。より好ましくは、クエン酸、リンゴ酸及びアスコルビン酸の全てが本組成物の製造に使用され、特に好ましくは、これらが完全に中和されて、クエン酸塩、リンゴ酸塩及び／又はアスコルビン酸塩が与えられる場合である。とりわけ好ましいのは、アスコルビン酸コリンである。したがって、前記原液は、実質的に果実酸を含有せず、それによりそのｐＨがほぼ中性であることが意味されるのが好ましい。その原液のための例示的ｐＨ範囲は、３〜８．５、３．５〜８．５、３．５〜８、４〜８、４〜７．５、４．５〜７．５、４．５〜７、５〜６．５、５．５〜６．５、及び５．５〜６であり、そのｐＨは、例えば、約５、約５．５、約６、約６．５又は約７である。
【００１８】
特定のいかなる理論にも拘束されることを望む訳ではないが、本発明者らは、それら果実酸は、硬水へのキレート効果を有するだけでなく、活性剤、例えばバイオフラボノイド類及びアスコルビン酸コリン、の生物活性に相乗作用も与えるものと考える。したがって、好ましい原液は、水溶性バイオフラボノイド類及びアスコルビン酸コリン(コリン塩基（例えば水酸化物）とアスコルビン酸として存在するか又はそれら自体の塩として存在する)を含んでなる。
【００１９】
原液は、好ましくは更に、無毒の溶媒、例えば、水混和性溶媒又は親水性溶媒、を含んでなり、より好ましくは、水及び水混和性共溶媒（例えば、グリセリン、多価アルコール等）を含んでなる。とりわけ好ましいのは、溶媒が、水／グリセリンの混合物を、好ましくは２：１〜１：２（水：共溶媒）の比で含んでなる場合である。より好ましくは、成分（ｃ）及び（ｄ）(残部は、水、共溶媒及び賦形剤、及び／又はキャリヤを含んでなる）は、アルコール、特にエタノールを含まない。
【００２０】
したがって、原液は、好ましくは、下表のものから製造される。
【００２１】
【表１】
2014074062.tif 000002
【００２２】
したがって、本発明の組成物は、好ましくは（該組成物の重量に基づき）、下記の成分から製造可能である：
（ａ）(i) ０．０００２〜１．５重量％のバイオフラボノイド類〔好ましくは、別の０．０００２４〜１．８３重量％を構成するバイオマスが除かれる〕、
(ii) ０．００１〜２．０重量％のクエン酸、
(iii) ０．００１〜２．０重量％のリンゴ酸、
(iv) ０．００１〜２．０重量％のアスコルビン酸、
(v) ０．０００４５〜２．０３重量％のコリン塩基、及び
（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）水、共溶媒、及び賦形剤及び／又はキャリヤを含んでなる残部。
【００２３】
より好ましくは、本発明の組成物は、（その組成物の重量に基づき）下記の成分から製造可能である：
（ａ）(i) ０．０００４５〜０．９重量％のバイオフラボノイド類〔好ましくは、別の０．０００５５〜１．１重量％を構成するバイオマスが除かれる〕、
(ii) ０．００１〜２．０重量％のクエン酸、
(iii) ０．００１〜２．０重量％のリンゴ酸、
(iv) ０．００１〜２．０重量％のアスコルビン酸、
(v) ０．０００４５〜２．０３重量％のコリン塩基、及び
（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）水、共溶媒、及び賦形剤及び／又はキャリヤを含んでなる残部。
【００２４】
本発明の原液は、より好ましくは、上記の表に与えられるパーセンテージから製造可能であるので、本発明のより好ましい組成物は、下記の成分から製造可能である：
（ａ）(i) ０．０００６７５〜０．６７５重量％のバイオフラボノイド類〔バイオマスは除かれる〕、
(ii) ０．０１５〜１．５重量％のクエン酸、
(iii) ０．０１５〜１．５重量％のリンゴ酸、
(iv) ０．００５〜０．５重量％のアスコルビン酸、
(v) ０．０１５〜０．９重量％のコリン塩基、及び
（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）水、共溶媒、及び賦形剤及び／又はキャリヤを含んでなる残部。
【００２５】
本発明の好ましい組成物は、原液を１重量％のオーダーで含んでなるので、一態様においては、本発明の好ましい組成物は、下記の成分から製造可能である：
（ａ）(i) ０．０６７５重量％のオーダーのバイオフラボノイド類〔バイオマスは除かれる〕、
(ii) ０．１５重量％のオーダーのクエン酸、
(iii) ０．１５重量％のオーダーのリンゴ酸、
(iv) ０．０５重量％のオーダーのアスコルビン酸、
(v) ０．０９重量％のオーダーのコリン塩基、及び
（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）水、共溶媒、及び賦形剤及び／又はキャリヤを含んでなる残部。
【００２６】
別の態様において、本発明の最も好ましい組成物は、下記の成分から製造可能である：
（ａ）(i) ０．０１４８５重量％のオーダーのバイオフラボノイド類〔バイオマスは除かれる〕、
(ii) ０．０４５重量％のオーダーのクエン酸、
(iii) ０．０４５重量％のオーダーのリンゴ酸、
(iv) ０．０１５重量％のオーダーのアスコルビン酸、及び
（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）水、共溶媒、及び賦形剤及び／又はキャリヤを含んでなる残部。
【００２７】
別の態様において、本発明の最も好ましい組成物は、下記の成分から製造可能である：
（ａ）(i) ０．０１４８５重量％のオーダーのバイオフラボノイド類〔バイオマスは除かれる〕、
(ii) ０．０４５重量％のオーダーのクエン酸、
(iii) ０．０４５重量％のオーダーのリンゴ酸、
(iv) ０．０６重量％のオーダーのアスコルビン酸コリン、及び
（ｂ）、（ｃ）及び（ｄ）水、共溶媒、及び賦形剤及び／又はキャリヤを含んでなる残部。
【００２８】
好ましくは、本発明の組成物は、局所用組成物である。本明細書で言及される組成物は全て、好ましくは、局所投与のために適切な形態である。
【００２９】
より好ましくは、本発明の組成物は、口腔用組成物である。本明細書で言及される組成物は全て、より好ましくは、経口投与のために適切な形態である。
【００３０】
本原液は、当業者に知られている方法によって製造される。好ましくは、共溶媒は、周囲温度で水と混合され、次いで、アスコルビン酸のような中和工程で必要とされる酸は、高温でその溶媒と一緒に混合され、その温度は、諸成分のいずれもが分解されないように十分に低く維持される。約５５℃よりも高い温度で熱分解するアスコルビン酸の場合、その温度は、約２５℃から５５℃未満の範囲に、好ましくは約５０℃に維持される。好ましくは、その中和は、ブレンド物中のアスコルビン酸への水酸化コリンの添加（ｐＨ＝１．２で出発して、ｐＨ＝５．５〜６．０で終わる）を包含するか、又はアスコルビン酸コリン（即ち、アスコルビン酸は既に中和されている）自体が添加され得る。
【００３１】
次いで、残りの諸酸（好ましくは、クエン酸及びリンゴ酸）が添加され、次いで、バイオフラボノイド類が添加され、約２．０〜６．５の範囲であるが、典型的には２．２〜３．５の範囲、特に２．３〜３．０の範囲であるｐＨを有する溶液が得られる。中和されていない残りの酸も、例えば、水酸化コリンによって実質的に中和され、例えば、５〜８．５、好ましくは５．５〜７、より好ましくは５．５〜６．５のｐＨを有する実質的に中性の溶液が得られる。
【００３２】
バイオフラボノイドを含んでなる従来技術の配合物の抗菌効果は、ウイルス性ニューロアミダーゼ（neuroamidase）を阻害することによるような、微生物の細胞質膜の中への必須アミノ酸の取込みのバイオフラボノイドによる阻害に依る。しかし、本発明の配合物は、選定された可溶性バイオフラボノイドのアスコルビン酸コリンとの組合せが、微生物の被包化、フラボノン及びグルコシド成分の独立断片への破壊、及びそれらフラボノン断片とアスコルビン酸コリンによるその後の微生物の奪活をもいたらすので効果があるものと考えられる。
【００３３】
好ましくは、本バイオフラボノイド混合物は、抽出工程から生じるバイオマスと一緒に水溶性バイオフラボノイド類を含んでなり、従って、本バイオフラボノイド混合物は、（本バイオフラボノイド混合物の重量に基づき）４０〜６０重量％までの、好ましくは約５５重量％のバイオマスを伴ってもよい。バイオフラボノイド類は、好ましくは、グルコシド、特に、イソクリオサーム（isocriocirm）、イソナリンギン（isonaringin）、ナリンギン（naringin）、ヘスペリジン（hesperidin）、ネオヘスペリジン（neohesperidin）、ネオジオミン（neodiomin）、ナリンゲニン（naringenin）、ポンシリン（poncirin）及びリオフォレン（rhiofolen）から選ばれるものであり、より好ましくは、これらの各々は混合物中に存在する。特に好ましいのは、バイオフラボノイド混合物の大部分が、ナリンギン及びネオヘスペリジンを含んでなる場合、例えば、これらがバイオフラボノイド成分（バイオマスを除く）を７５％を超えて含んでなるような場合である。適する場合には、他のバイオフラボノイド類（フラボノール、クリシン、ヘスペレチンなど）がそのバイオフラボノイド混合物に実質的に存在せず、従って、そのバイオフラボノイド成分が、上に列挙した水溶性バイオフラボノイド類から本質的に成る。とは言え、微量の他のバイオフラボノイド類が存在してもよい。特に好ましいのは、水溶性バイオフラボノイド類が（全バイオフラボノイド成分中のバイオフラボノイドの重量に基づき）次のパーセンテージの成分を含んでなる場合である。
【００３４】
【表２】
2014074062.tif 000003
【００３５】
そのような水溶性バイオフラボノイド混合物の適する供給源は、本明細書において「ＨＰＬＣ４５」と言われ、その（ＨＰＬＣ４５の全組成の）約４５％は、そのようなバイオフラボノイド類を含んでなり、残部（約５５％）が、ペクチン、糖及び微量の有機酸のようなバイオマスを含んでなる。前述のように、特に好ましいのは、バイオフラボノイド混合物の大部分が、ナリンギン及びネオヘスペリジンを含んでなる場合であり、例えば、これらが、ＨＰＬＣ４５のようなバイオマスとの混合物中にバイオフラボノイド成分を３５％を超えて含んでなるような場合である。したがって、ＨＰＬＣ４５の全組成の重量によって、次のバイオフラボノイド類が好ましくは存在する。
【００３６】
【表３】
2014074062.tif 000004
【００３７】
ＨＰＬＣ４５は、Exquim（Grupo Ferrerの食品部門）からCitrus Bioflavonoid Complex４５％ＨＰＬＣとして入手可能である。それは、それからの種子、果肉及び油性外皮が実質的に除去されているか又は未成熟のままであるところの「食べれない」として分類されるSevilleオレンジのような未熟な（血液色／赤色）ダイダイの果皮の内側の柔組織から構成される出発原料から誘導される。この出発原料は、水、又は、水／アルコール混合液、好ましくは水／エタノールのような親水性イオン性溶媒の中で、約１：１０〜２０（溶媒：出発原料）の比で破砕される。得られる混合物は、濾過されて、保持される水溶性バイオマスと捨てられる不溶性バイオマスが残る。水溶性バイオマスは、次いで、微細濾過され、その後、それはフラッシュ蒸留されて、茶色の吸湿性粉末（ＨＰＬＣ４５）が残る。
【００３８】
好ましくは、本発明の組成物で使用されるバイオフラボノイド混合物は、水溶性グルコシドを含んでなることによって、特に、非水溶性フラボノイド類を含んでなるところの、グレープフルーツ若しくは他の柑橘系フルーツ又は他の植物源から得られる混合物から、より好ましくは、特に非水溶性フラボノイド類を含んでなるところの、かなりの量の種子、果皮の内側の柔組織及び／又は果肉が出発原料中に含まれている場合に得られる混合物から区別可能である。更に、従来技術のより成長／成熟した出発原料は、病虫害防除剤及び／又は化学肥料用基剤に曝されてきた可能性が高く、したがって、本来、本発明の溶液のバイオフラボノイド混合物より、あまり「オーガニック」又は純粋でない。
【００３９】
好ましくは、本原液は、１〜２０重量％、好ましくは２〜１５重量％、より好ましくは３〜１５重量％、例えば、３重量％、４重量％又は１５重量％、最も好ましくは３．３重量％のＨＰＬＣ４５を含んでなる。したがって、本原液は、好ましくは、０．４５〜９重量％、好ましくは０．９〜６．７５重量％、より好ましくは１．３５〜６．７５重量％、例えば、１．３５重量％、１．８重量％又は６．７５重量％、最も好ましくは１．４８５重量％のバイオフラボノイド混合物を含んでなる。
【００４０】
好ましくは、本発明の組成物は、とりわけ、水、原液を除く他の成分が存在しないときは、約３〜約８．５のｐＨを有し、より好ましくは約４〜約７．５の、例えば、約５〜７のｐＨを有し、特に好ましいのは、ｐＨが約５．５〜６．５である場合である。したがって、最も好ましくは、本組成物は、果実酸からののような水素イオンを実質的に含まない；したがって、原液及び／又は組成物を製造するのに使用される果実酸は、好ましくは、前述のように、原液に塩基を添加することによって実質的に中和されている。一方、本組成物が緩衝剤をも含んでなる場合、原液のｐＨは、緩衝剤がこれらの範囲内のｐＨを有する組成物を提供するのに有効な量で存在するという条件で、これら範囲外で変動することができる
したがって、本発明の組成物の成分（ｄ）は、緩衝剤〔例えば、アルカリ金属水酸化物若しくは水酸化アンモニウム、又は一塩基性リン酸塩、二塩基性リン酸塩若しくは三塩基性リン酸塩（例えば、三アルカリ金属リン酸塩）〕を含有して、最終組成物のｐＨを調整するか又は調節することができる。水酸化物の量は、二塩基性リン酸塩の量に比べて、測定がより困難であるので、一塩基性リン酸塩及び二塩基性リン酸塩を使用することが好ましい。別の代替法は、リン酸と二塩基性リン酸塩又は三塩基性リン酸塩（例えば、三アルカリ金属リン酸塩）との組合せを使用することである。これらのリン酸塩は、それらのナトリウム塩、カリウム塩又はアンモニウム塩の形態で組み入れられることが好ましく、ナトリウム塩を使用することがより好ましい。しかし、ナトリウムイオンの血圧上昇効果が憂慮される場合は、リン酸一カリウム、リン酸二カリウム又はリン酸三カリウムを使用することができる。緩衝剤がリン酸二ナトリウムである場合、それは、例えば、本組成物の約５重量％以下で、好ましくは０〜０．５重量％の範囲で、例えば、約０．０５重量％で存在することができる。
【００４１】
別の任意的成分である成分（ｄ）は、フッ化物の源、例えば、フッ化ナトリウム又はモノフルオロリン酸ナトリウムを、本発明の組成物の約０．５重量％以下で含有することができる。フッ化物の源は、本組成物が液体である場合、０〜０．１５重量％の範囲、例えば約０．０５重量％であることが好ましいが、練り歯磨きの場合、より多く、０〜０．３重量％の範囲、例えば約０．２４重量％であることが適当であり、又は（フッ化物イオンとして）０〜１５００ｐｐｍの範囲であることが適当である。
【００４２】
本発明の組成物に、香料添加剤、甘味剤、着色剤又は防腐剤のような他の添加剤が存在してもよい。ハッカ（例えば、ペパーミント又はスペアミント由来のハッカ）、シナモン、ユーカリプタス、シトリス（citrus）、カッシア（cassia）、アニス及びメントールは、適切な香料添加剤の例である。香料添加剤は、口腔用組成物中に０〜３重量％の量で存在することが好ましく；本組成物が液体である場合、好ましくは２重量％以下、例えば０．５重量％以下、好ましくは約０．２重量％の量で存在することが好ましいが；練り歯磨きの場合、任意的により多く、好ましくは０．５〜２重量％の範囲、より好ましくは約１重量％の量で存在することが好ましい。甘味料には、サッカリンナトリウムのような人工甘味剤又は天然甘味剤が包含され、それらは、口腔用組成物の０〜２重量％の範囲、好ましくは１重量％以下、例えば０．０５〜０．３重量％の量で存在することができる。着色剤は、二酸化チタン若しくはＣＩ４２０９０のような適切な天然着色剤又は合成着色剤、又はそれらの混合物である。着色剤は、本組成物中に０〜３重量％の量で存在することが好ましく；本組成物が液体である場合、好ましくは０．１重量％以下、例えば０．０５重量％以下、好ましくは約０．００５〜０．０００５重量％の量で存在することが好ましいが；練り歯磨きの場合、任意的により多く、好ましくは１重量％以下、より好ましくは約０．５重量％の量で存在することが好ましい。通常の防腐剤のうち安息香酸ナトリウムは、本組成物のｐＨを変えるためには実質的に不十分である濃度が好ましい。別の方法では、望ましいｐＨに到達するように、緩衝剤の量を調節する必要があることがある。
【００４３】
成分（ｄ）の他の任意的成分には、歯石予防剤及び／又は抗菌剤のような他の活性剤が包含されることがある。適切な活性剤には、臭化ドミフェンのような第四級アンモニウム化合物、塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）、フェノール化合物、エタノール、及び上述の防腐剤が包含される。そのような活性剤は、０〜４重量％の量で存在することができるが、エタノールの場合、７０％以下、例えば３０％以下の量であってもよい。例えば、ＣＰＣ等は、とりわけ、本発明の組成物が液体である場合、２重量％以下で、例えば約０．０５重量％で存在することが好ましい。エタノールは、本発明の組成物が液体である場合、７０重量％も、好ましくは０〜３０重量％で含有されてもよく、例えば、マウススプレーでは約１５重量％で含有されてもよいが、好ましい組成物、とりわけ口腔用組成物は、エタノールも他の如何なるアルコールも実質的に存在しない組成物である。
【００４４】
成分（ｄ）の他の任意的成分には、湿潤剤、界面活性剤（非イオン性、カチオン性又は両性）、増粘剤、ガム及び結合剤が包含されることがある。適切な湿潤剤には、グリセリン、キシリトール、グリセロール、及びプロピレングリコール等のグリコールが包含されることがあり、それらは、それぞれ５０重量％以下の量で存在することができるが、全湿潤剤は、本組成物の約６０〜８０重量％以下であることが好ましい。例えば、本組成物が液体である場合、グリセリン約３０重量％以下に加えて、キシリトール約５重量％以下、好ましくは約２重量％を含有することができる。界面活性剤は、アニオン性でないことが好ましく、ポリソルベート又はコカミドプロピルベタイン等を本組成物の約６重量％以下、好ましくは約１．５〜３重量％の量で含有することができる。
【００４５】
本発明の口腔用組成物がマウススプレーの形態である場合、それは、膜形成剤を、その口腔用組成物の約３重量％以下で、例えば、その口腔用組成物の０〜０．１重量％の範囲で、好ましくは０．００１〜０．０１重量％の範囲で、例えば約０．００５重量％含有することが好ましい。適切な膜形成剤には、（ヒアルロン酸ナトリウムの他に）商品名「ガントレッズ（Gantrez）」で販売されているものが包含される。
【００４６】
本発明の口腔用組成物が練り歯磨きの形態である場合、ガム、結合剤及び／又は増粘剤、例えば、コロイドシリカ、カラゲナン、及び、カルボキシルメチルセルロースナトリウム等のセルロース誘導体、を含有することが好ましい。そのような成分は、本口腔用組成物の約３重量％以下の量で、例えば、本口腔用組成物の約２重量％以下、好ましくは約０．５〜１重量％の量で存在することができる。
【００４７】
本発明の練り歯磨き組成物は、更に、研磨剤、例えば、含水シリカ、リン酸二カルシウム、又は非水溶性アルカリ金属メタリン酸塩、を本口腔用組成物の約２５重量％以下、好ましくは約１０〜約１５重量％の範囲で含有することができる。
【００４８】
本発明による組成物は、局所的に投与されることが可能であり、また、クリーム、ゲル、ペースト、練り歯磨き及びうがい薬の形態であることが可能である。そのような場合、本発明による医薬組成物は、通常、従来の賦形剤、例えば、ソルビトール及び／又はマルチトールのようなポリアルコール；ポリエチレングリコールのようなグリコール；カルボキシメチルセルロースのような増粘剤；パラオキシ安息香酸メチル又はパラオキシ安息香酸プロピルのような防腐剤；ペパーミントのような香料添加剤；サッカリンのような甘味料；並びに、着色剤を含有する。
【００４９】
練り歯磨き、うがい薬又はリンス剤、マウススプレー等の本発明の組成物は、類似組成物の配合物を得るための、当該技術分野で知られている如何なる方法によっても製造されることが可能である。あらゆる方法は、成分（ａ）と、（ｂ）と、（ｃ）と、存在する場合は（ｄ）とを一緒に均質な物理的混合物に結びつける工程を含んでなる。
【００５０】
好ましくは、本組成物は、取扱説明書と一緒にスプレー手段若しくは他の施用手段を備えているか、又は備えていない適切な包装材料、例えば、プラスチック製若しくは金属製のチューブ；プラスチック製若しくは金属製の透明な、半透明な又は不透明なボトル、ジャー（jar）又はディスペンサー（dispenser）、の中に包装される。そのような包装材料は、それ自体、段ボール箱又は他の適切な容器の中に更に包装されてもよいし、また、同一の若しくは更なる取扱説明書をその中に挿入するか、又はその上に記載してもよい。そのような取扱説明書は、添付文書又は小冊子に記載されてもよい。包装材料には、本組成物の活性成分、主要成分又は全成分が記載されることが好ましい。それらの取扱説明書は、組成物の分野の当業者に知られている取扱説明書、とりわけ抗菌用途のための取扱説明書を含んでもよい。したがって、それらの取扱説明書は、豆粒大の量の練り歯磨きを、１日に２〜３回の通常の間隔で歯群に施用すること；口いっぱいのうがい薬又はリンス剤を、１日に少なくとも１回、好ましくは食事の後、口腔の周辺に流すこと；等を推奨してもよい。
【００５１】
本発明の口腔用組成物は、従って、口腔内における微生物感染（とりわけ、細菌感染）若しくは他の歯周疾患の影響を治療するか、予防するか、又は改善するのに有用であり；口腔からの歯苔を清浄化するか、殺菌するか、又は除去するのに有用であり；口腔内の臭気若しくは味を清新にするか、新鮮にするか、除去するか、又は改善するのに有用であり；しかも、一般に、口腔の衛生、外観及び感触の手当てをするのに有用であるだろう。したがって、本発明は、高分子量のヒアルロン酸のナトリウム塩と組み合わさって、バイオフラボノイド類と果実酸との混合物（例えば、前述の混合物）を含んでなる原液であって、口腔内における微生物感染（とりわけ、細菌感染）を治療するための医薬品を製造するための原液を更に提供する。この場合、その医薬品は、とりわけ、その原液を（口腔用組成物の全重量に基づき）０．１〜１０重量％の範囲で含有する。本発明は、（ｂ）８０００００〜４００００００の平均分子量を有するヒアルロン酸ナトリウムと一緒に、（ａ）バイオフラボノイド類と果実酸との混合物を含んでなる原液、並びに、（ｄ）経口投与に適した、薬学的又は薬理学的に容認される他の成分（例えば、前述の成分）を含んでなる原液であって、口腔内における微生物感染（とりわけ、細菌感染）を治療するための医薬品を製造するための原液を提供することが好ましい。この場合、その医薬品は、とりわけ、その原液を（口腔用組成物の全重量に基づき）０．１重量％〜１０重量％の範囲で含有する。
【００５２】
治療用途のための本発明による組成物は、固定性補綴物、可動性補綴物又は外科手術、等の機械的原因に起因する歯肉組織の炎症性徴候（例えば、歯肉炎、口内炎、炎症）によって特徴付けられる歯肉疾患のために好都合に使用される。本発明による歯肉用ペーストは、幼少期における歯牙発生段階の間に使用されることも可能である。本発明の口腔用組成物は、粘膜炎、アフター性潰瘍、扁平苔癬、口腔カンジダ症、歯肉炎、歯周炎又は歯槽骨炎を治療するのに有用である。本発明の組成物は、感染した皮膚若しくは感染する恐れのある皮膚、及び／又は、炎症を起こしている皮膚、例えば、アクネ、火傷及び創傷、を治療するのに有用である。
【００５３】
本発明の口腔用組成物は、次の細菌：Actinomyces odontolyticus、Actinomyces viscosus、Porphyromonas gingivalis、Prevotella intermedia、Prevotella buccae、Prevotella dentalis、Streptococcus gordonii、Streptococcus sanguinis、S oralis、S sobrinus、S mutans、S intermedins、Lactobacillus acidophilus、Eubacterium nodatum、Actinomyces israelii、Actinomyces naeslundii、C albicans及びC tropicalis、に起因する感染症、疾患若しくは容態を治療するか、又は予防するのに有用である。
【００５４】
生物学的試験において、本発明の組成物を製造するために使用される原液（実施例１を参照されたい）は、１／１０希釈で上述の細菌の全てを抑制することが分かった。また、前述の非溶連菌（non-Streptococcal bacteria）も、１／１００希釈で抑制された。他の生物学データは、以下の実施例の中に提供される。
【００５５】
次に、下記の諸実施例によって、本発明を例示する。
【実施例】
【００５６】
実施例１：原液の製造
（ａ）ＨＰＬＣ４５の製造
出発原料は、それからの種子、果肉及び油性外皮が実質的に除去された「食べれない」として分類されるSevilleオレンジのような未熟な（血液色／赤色）ダイダイの果皮の内側の柔組織を含んでなる。その出発原料は、水、又は、水／エタノールの中、約１：１０〜２０（溶媒：出発原料）の比で磨砕されるか又は破砕される。得られる混合物は濾過されて、保持される水溶性バイオマスと捨てられる不溶性バイオマスが残る。水溶性バイオマスは、次いで、微細濾過され、その後、それはフラッシュ蒸留されて、茶色の吸湿性粉末（ＨＰＬＣ４５）が残る。
【００５７】
（ｂ）ＨＰＬＣ４５のバイオフラボノイド組成
工程（ａ）で得られたＨＰＬＣ４５の分析によって、ＨＰＬＣ４５の全組成の４５％はバイオフラボノイドを含み、残部（５５％）は、ペクチン、糖及び微量の有機酸を含むことが分かる。下記のバイオフラボノイド類のパーセンテージ（ＨＰＬＣ４５中のバイオフラボノイド類の重量による）が存在する。
【００５８】
【表４】
2014074062.tif 000005
【００５９】
したがって、ＨＰＬＣ４５の全組成中の重量により、下記のバイオフラボノイド類が存在する。
【００６０】
【表５】
2014074062.tif 000006
【００６１】
（ｃ）原液の製造
【００６２】
【表６】
2014074062.tif 000007
【００６３】
次いで、残りの酸（クエン酸及びリンゴ酸）を添加した後、ＨＰＬＣ４５を添加し、６．２〜７．２のｐＨを有し、バイオフラボノイド類を６．７５％（原液のｗ／ｗ）含んでなる原液を得る。
【００６４】
実施例２Ａ：マウススプレー
【００６５】
【表７】
2014074062.tif 000008
【００６６】
Ａ．実験室試料：  上記の諸成分を用いて、本発明によるマウススプレーを次の通りに製造した。容器（Ａ）中で、ヒアルロン酸ナトリウムを水に撹拌しながら分散させて、塊のない溶液(lump free solution)を提供する。サッカリンナトリウム、塩化セチルピリジニウム、リン酸二ナトリウム、キシリトール及び原液を添加し、それらの成分が全て完全に溶解するまで撹拌する。グリセリンを添加し、次いで、均質になるまで混合する。別の容器（Ｂ）の中で、ポリソルベート２０、風味料及びエタノールを混合する。風味料が完全に分散するまで、掻き混ぜる。容器（Ｂ）の内容物を撹拌しながら容器（Ａ）に添加して、均質な液体を提供する。
【００６７】
Ｂ．代替的（製造）方法：  上記の諸成分を用いて、本発明によるマウススプレーを次の通りに製造することができる。容器（Ａ）中で、ヒアルロン酸ナトリウムをグリセリンに分散させる。撹拌しながら水を添加して、塊のない溶液を提供する。キシリトール、原液、サッカリンナトリウム、塩化セチルピリジニウム及びリン酸二ナトリウムを添加し、次いで、それらの成分が全て完全に溶解するまで撹拌する。別の容器（Ｂ）の中で、ポリソルベート２０、風味料及びエタノールを混合する。風味料が完全に分散するまで、掻き混ぜる。容器（Ｂ）の内容物を撹拌しながら容器（Ａ）に添加して、均質な液体を提供する。
【００６８】
実施例２Ｂ：マウススプレー
【００６９】
【表８】
2014074062.tif 000009
【００７０】
上記の諸成分を用いて、本発明によるマウススプレーを上記のように製造することができる。
【００７１】
実施例３：口腔洗浄剤
【００７２】
【表９】
2014074062.tif 000010
【００７３】
Ａ．実験室試料：  上記の諸成分を用いて、本発明による口腔洗浄剤を次の通りに製造することができる。混合容器（Ａ）中で、ヒアルロン酸ナトリウムを水に、撹拌しながら分散させて、塊のない溶液を提供する。サッカリンナトリウム、フッ化ナトリウム、リン酸二ナトリウム、１種類以上の着色剤、キシリトール及び原液を添加し、成分が全て完全に溶解するまで撹拌する。グリセリンを添加し、次いで、均質になるまで混合する。別の容器（Ｂ）の中で、ポリソルベート２０及び風味料を混合する。風味料が完全に分散するまで、掻き混ぜる。容器（Ｂ）の内容物を撹拌しながら容器（Ａ）に添加して、均質な液体を提供する。
【００７４】
Ｂ．代替的（製造）方法：  上記の諸成分を用いて、本発明による口腔洗浄剤を次の通りに製造することができる。混合容器（Ａ）中で、ヒアルロン酸ナトリウムを水に、撹拌しながら分散させて、塊のない溶液を提供する。１種類以上の湿潤剤、原液、サッカリンナトリウム、フッ化ナトリウム、リン酸二ナトリウム及び着色剤を添加する。それらの成分が全て完全に溶解するまで撹拌する。別の容器（Ｂ）の中で、ポリソルベート２０、風味料及びエタノールを混合する。風味料が完全に分散するまで、掻き混ぜる。容器（Ｂ）の内容物を撹拌しながら容器（Ａ）に添加して、均質な液体を提供する。
【００７５】
実施例４：練り歯磨き
【００７６】
【表１０】
2014074062.tif 000011
【００７７】
Ａ．実験室試料：上記の諸成分を用いて、本発明による練り歯磨きを次の通りに製造することができる。混合容器（Ａ）中で、ヒアルロン酸ナトリウムを水に、撹拌しながら分散させて、塊のない溶液を提供し、次いで、グリセリンを添加する。これに、サッカリンナトリウム、フッ化ナトリウム、原液及びキシリトールを添加し、次いで、撹拌して溶解させる。容器（Ａ）の内容物を撹拌しながらバキュームミキサー（容器Ｂ）に移す。粉末類（含水シリカ、キサンタンガム及び二酸化チタン）を容器Ｃ中でプレブレンドし、次いで、バキュームミキサー（Ｂ）の液相に添加する。真空下、均質になるまで混合する。バキュームミキサー（Ｂ）に界面活性剤及び風味料を添加し、次いで、真空下で混合して、口当たりのよいペーストを形成する。
【００７８】
実施例５：原液の製造
前述の通りに、下記原液を製造した。
バイオフラボノイド混合物３．３％
リンゴ酸４．５％
クエン酸４．５％
グリセリン７．５％
アスコルビン酸１．５％
水７８．６％
溶液のｐＨ１．５〜１．７５。
【００７９】
実施例６
原液の製造
前述の通りに、下記原液を製造した。
バイオフラボノイド混合物３．３％
リンゴ酸４．５％
クエン酸４．５％
アスコルビン酸コリン６．０％
ＬＦＧ６１アルキルグリコシド１３．３％
プロピレングリコール７．５％
水６０．９％
溶液のｐＨ １．５〜１．７５。
【００８０】
抗菌活性
本発明の組成物が、歯周疾患に関与する一連の嫌気性菌及び通性細菌に対して活性であるか否かを確認するための試験は、次のように行うことができる。
【００８１】
方法及び材料
使用することのできる細菌には、Actinomyces odontolyticus、Actinomyces viscosus、Porphyromonas gingivalis、Prevotella intermedia、Prevotella buccae、Prevotella dentalis、Streptococcus gordonii及びStreptococcus sanguinis、とりわけＡＴＣＣ基準株、が包含される。嫌気性菌は全て、〔英国ヨークシャー（Yorkshire）のドン・ホワイトリー社（Don Whitely）から入手可能な〕ドン・ホワイトリー・嫌気性チャンバー（Don Whitely Anaerobic Chamber）において、偏性嫌気性ブイヨン（Fastidious Anaerobic Broth：ＦＡＢ）で、３７℃、２４時間で増殖させられることが可能である。通性細菌は、１０％（ｖ／ｖ）二酸化炭素中の普通ブイヨンで、３７℃、２４時間で増殖させられることが可能である。スタータ培養液（starter culture）は、約１０６ＣＦＵ（コロニー形成単位）／ｍｌを含有する、一晩増殖の１ｍｌである。その培養液に本発明の組成物を１／１００００（０．００１％）に至るまでの濃度で補足する。その希釈剤（diluent）は、適切なブイヨンである。６５０ｎｍで吸収される分光光度の増大量によって、増殖を評価することができる。
【００８２】
５％（ｖ／ｖ）血液寒天培地での増殖を使用して、練り歯磨き及びうがい薬の組成物を評価することができる。寒天培地に直径約０．５ｃｍのウェルを切り出し、次いで、各々の組成物の希釈物（dilutions）で充填することができる。その希釈剤は、適切なブイヨンである。それらの培地に、約１０６ＣＦＵ／ｍｌを含有するブイヨン約０．２ｍｌを予備接種する。増殖の抑制が全く見られない場合、最小阻害濃度をウェル濃度と解釈することができる。
【００８３】
追加試験
２種類の原液（実施例５及び実施例６）を試験した。それぞれ１．７５及び２．０のｐＨを有する各々の配合物に対する一連の倍数希釈物を、希釈剤としてブラッド・ハート・インフュージョン（Blood-Heart Infusion：ＢＨＩ）ブイヨン又はサブロー（Sabouraud’s）ブイヨンを使用しながら製造し、一連の濃度（８％ｖ／ｖ〜０．０１５６２５％ｖ／ｖ）を有する溶液を提供した。
【００８４】
一定の細菌種及びカンジダ種の株（表１１を参照されたい）を得、次いで、適切な条件下、４８時間培養した。各々の微生物のサスペンションを、ブイヨン（細菌に対してはＢＨＩブイヨン、カンジダ種に対してはサブローブイヨン）中で、マクファーランド標準３．０とほぼ同等のレベルの濁度まで製造した。
【００８５】
【表１１】
2014074062.tif 000012
【００８６】
各々の微生物サスペンションの１００μｌ容量を、微量定量プレートのウェルに入れた。（対応ブイヨンを含有する）実施例５又は実施例６の溶液の同等容量を、各々のウェルに入れて、原液の最終濃度４％（ｖ／ｖ）〜０．００７８１２５％（ｖ／ｖ）を提供した。対照としての役割を果たすための、原液及び／又は微生物を全く含有しないウェルをも製造した。各々の微量定量プレートを、適切な雰囲気条件の下、３７℃で２４時間定温放置した。定温放置の後、分光光度計を使用して５４４ｎｍの波長での吸光度を読み取り、各々のウェル中の抱く度を測定することによって、各々の細菌種の相対量を評価した。吸光度を読み取り値は、微生物の存在しない対照を使用して、ブランク補正した。
【００８７】
最小阻害濃度（ＭＩＣ）を、結果的に、原液の不存在下で微生物を増殖させた対照と比較して微生物が著しく減少した量（即ち、５０％を超える減少）となる、原液の最小濃度として定義した。実験を３回繰り返しで行い、実施例５及び実施例６の配合物について、各々の微生物種の存在の下、ＭＩＣを決定した。
【００８８】
結果
実施例５と実施例６との両方の配合物に対応する１３種類の微生物について観察された最小阻害濃度（ＭＩＣ）値を、以下の表１２にまとめる。
【００８９】
検討したそれら微生物の各々の増殖は、Candida glabrataは例外として、実施例５と実施例６との両方の配合物によって抑制された。この酵母種の増殖は、実施例６の配合物が、本研究で使用した最大濃度である、８％（ｖ／ｖ）の濃度で存在した場合でも、その配合物によって少しも抑制されないようであった。
【００９０】
実施例５及び実施例６の２種類の配合物からの最小阻害濃度（ＭＩＣｓ）を比較することによって、実施例５の配合物は、微生物の増殖を抑制する上で、実施例６の配合物よりも効果的であることが示唆された。各々の微生物に対するＭＩＣは、Porphyromonas gingivalisは例外として、実施例５の配合物を使用した場合、実施例６の配合物を使用した場合よりも小さい。Porphyromonas gingivalisに対する両方の配合物は、１％という同等の値を有した。更に、実施例５の配合物は、１％（ｖ／ｖ）の濃度で、たとえ増殖の減少が５０％（ＭＩＣを定義するために本研究で設定された基準）をあまり超えなかったとしても、各々の微生物の増殖を抑制した。このことによって、将来の生成物及び研究における好ましい使用濃度（working concentration）として、実施例５の原液の１％（ｖ／ｖ）を使用することが提案される。
【００９１】
【表１２】
2014074062.tif 000013