(57)【要約】      （修正有）【課題】哺乳類を対象とする、ＶＥＧＦ促進性血管新生疾患の処置において有効な化合物の使用方法及び該化合物を含む医薬製剤の提供。【解決手段】式（Ｉ）又は式（ＩＩ）で表わされるイミダゾキノリン誘導体又はピリジン誘導体からなる化合物の使用及び該化合物を含む医薬製剤。該化合物は温血動物、特にヒトの、前記疾患の処置に有用であり、滑膜炎、骨及び軟骨破壊、骨髄炎、パンヌス成長、骨棘形成、肺炎、ぜんそく、鼻ポリープ、肝臓形成、未熟児網膜症、加齢黄斑変性症、脈絡膜及び硝子体の疾患、白質軟化症、甲状腺炎、甲状腺肥大、リンパ増殖性疾患、カボジ肉腫、血液性悪性腫瘍、脊髄損傷、肺浮腫、脳浮腫及び網膜浮腫又は、更にこれらの組合せから選択される、ＶＥＧＦ促進性血管新生疾患の治療に有効である。2014141515.tif 000004【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
滑膜炎、骨および軟骨破壊、骨髄炎、パンヌス成長、骨棘形成、肺炎、ぜんそく、鼻ポ
リープ、肝臓形成、未熟児網膜症、加齢黄斑変性症、脈絡膜および硝子体の疾患、白質軟
化症、甲状腺炎、甲状腺肥大、リンパ増殖性疾患、カボジ肉腫、血液性悪性腫瘍、脊髄損
傷、肺浮腫、脳浮腫および網膜浮腫、または、さらにこれらの組合せから選択される、Ｖ
ＥＧＦ促進性血管新生疾患を処置する医薬製剤を製造するための、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルまたは８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン、または薬学上許容されるその塩の使用。
【請求項２】
滑膜炎、骨および軟骨破壊、骨髄炎、パンヌス成長、骨棘形成、肺炎、ぜんそく、鼻ポ
リープ、肝臓形成、未熟児網膜症、加齢黄斑変性症、脈絡膜および硝子体の疾患、白質軟
化症、甲状腺炎、甲状腺肥大、リンパ増殖性疾患、カボジ肉腫、血液性悪性腫瘍、脊髄損
傷、肺浮腫、脳浮腫および網膜浮腫、または、さらにこれらの組合せから選択される、Ｖ
ＥＧＦ促進性血管新生疾患を処置する医薬製剤であって、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルまたは８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン、または薬学上許容されるその塩、および薬学上許容される担体を含む医薬製剤。
【請求項３】
滑膜炎、骨および軟骨破壊、骨髄炎、パンヌス成長、骨棘形成、肺炎、ぜんそく、鼻ポ
リープ、肝臓形成、未熟児網膜症、加齢黄斑変性症、脈絡膜および硝子体の疾患、白質軟
化症、甲状腺炎、甲状腺肥大、リンパ増殖性疾患、カボジ肉腫、血液性悪性腫瘍、脊髄損
傷、肺浮腫、脳浮腫および網膜浮腫、または、さらにこれらの組合せから選択される、Ｖ
ＥＧＦ促進性血管新生疾患を処置するための、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルまたは８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン、また
は薬学上許容されるその塩の使用。
【請求項４】
前記血液性悪性腫瘍が血管腫である、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルまたは８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オンと、ベバシズマブ、抗ＶＥＧＦ、ラニビズマブ  ＡＶＥ０００５、抗ＶＥＧＦであるＨｕＭＶ８３３、抗ＶＥＧＦである２Ｃ３、抗ＶＥＧＦであるＣＢＯ−Ｐ１１、スーテント、ソラフェニブ、バタラニブ、ザクチマ、ミドスタウリン、アンジオザイム、ＡＧ−０１３７３６、レスタウチニブ、ＣＰ−５４７，６３２、ＣＥＰ−７０５５、ＫＲＮ６３３、ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８、ＩＭＣ−１２１１、ＺＫ２６０２５３、セマキサニブ、Ｅ−７１０７、ＡＳ−３、Ｃａｎｄ５およびＰＴＣ−２９９、ならびに、ＨＳＰ９０阻害剤である、ＣＮＦ１０１０、ＣＮＦ２０２４、タネスピマイシン、アルベスピマイシン、ＩＰＩ５０４、ＳＮＸ５４２２またはＮＶＰ−ＡＵＹ９２２から選択される、ＶＥＧＦまたはＶＥＧＦＲ標的化薬剤と、任意選択で少なくとも１種の薬学上許容される担体との組合せであって、活性成分が、各場合において遊離の形態もしくは薬学上許容される塩の形態で存在しており、滑膜炎、骨および軟骨破壊、骨髄炎、パンヌス成長、骨棘形成、肺炎、ぜんそく、鼻ポリープ、肝臓形成、未熟児網膜症、加齢黄斑変性症、脈絡膜および硝子体の疾患、白質軟化症、甲状腺炎、甲状腺肥大、リンパ増殖性疾患、カボジ肉腫、血液性悪性腫瘍、脊髄損傷、肺浮腫、脳浮腫および網膜浮腫、または、さらにこれらの組合せから選択される、ＶＥＧＦ促進性血管新生疾患を処置するために、同時に、個別に、または連続的に使用される組合せ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＶＥＧＦ依存性疾患の処置における、または前記疾患の処置に使用する医薬
組成物を製造するための、特定のイミダゾキノリン誘導体およびピリジン誘導体の使用、
温血動物、とりわけヒトでの、前記疾患の処置における特定のイミダゾキノリン誘導体お
よびピリジン誘導体の使用方法、前記疾患を処置するための特定のイミダゾキノリン誘導
体およびピリジン誘導体を含む医薬製剤、ならびに前記疾患の処置に使用するための、特
定のイミダゾキノリン誘導体およびピリジン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
国際公開第２００６／１２２８０６号および国際公開第０７／０８４７８６号に、それ
ぞれ記載されている、ＰＩ３キナーゼの生物学的活性を調節するための、特定のイミダゾ
キノリン誘導体およびピリミジン誘導体は、その同族リガンドによる、ＶＥＧＦ受容体の
活性化に伴う生物学的影響を遮断できることが見出された。したがって、前記化合物は、
ＶＥＧＦ促進性血管新生疾患の処置に有用である。
【０００３】
ＶＥＧＦＲ／ＶＥＧＦ軸との分子的関係が確立されたまたはその可能性がある症候群は
、例えば、「P. Carmeliet and RKJain; Angiogenesis in cancer and other diseases,
Nature 2000; 407: 249-257」、およびSM Weiss and DA Cheresh; Pathophysiological 
consequences of VEGF-induced vascularpermeability Nature 2005, 437:4697-50」（
その中に引用されている参考文献を含めて、参照により本出願に全て組み込まれる）に記
載されており、以下のものが挙げられる：
・関節リウマチ
・滑膜炎
・骨および軟骨破壊
・骨髄炎
・パンヌス成長
・骨棘形成
・肝炎
・肺炎
・糸球体腎炎
・ぜんそく
・鼻ポリープ
・移植
・肝臓形成
・未熟児網膜症
・加齢黄斑変性症
・糖尿病性網膜症
・脈絡膜および硝子体の疾患
・白質軟化症
・甲状腺炎
・甲状腺肥大
・リンパ増殖性疾患
・カポジ肉腫
・血液性悪性腫瘍（例えば、血管腫）
・肥満症
・脊髄損傷
・急性心筋梗塞
・肺浮腫、脳浮腫、および網膜浮腫、
または、さらに、これらの任意の組合せ。
【０００４】
現在の抗血管新生治療は、血管を構成する内皮細胞表面に発現される同族受容体に対す
るリガンドの結合（拮抗剤との競合、もしくは内因性リガンドの捕捉、もしくは可溶型受
容体の発現による）（例えば、ＶＥＧＦＲ１、２および３に結合するＶＥＧＦ）、または
チロシンキナーゼ受容体のキナーゼ活性を阻止する低分子質量阻害剤を使用した、該受容
体の活性化の妨害（例えば、ＶＥＧＦＲ１、２もしくは３の活性化の遮断）を目標とする
ことを狙っている。内皮細胞において、ＶＥＧＦ誘発経路の内因性の天然阻害剤を上方調
節する、またはＶＥＧＦ−毒素コンジュゲートにより、既存の血管構造を攻撃することを
目的とする、他の戦略も既に記載されている。ＰＩ３Ｋ阻害剤は、ＶＥＧＦＲ１、２もし
くは３に結合したとき、ＶＥＧＦ誘発シグナルの伝播を遮断することにより、抗血管新生
特性を発揮する。ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ経路は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏにお
いて内皮細胞の生存および増殖に必要とされるので、ＶＥＧＦＲの重要な下流エフェクタ
ーである（HP Gerber et al,Vascular Endothelial Growth Factor Regulates Endothel
ial Cell Survival through thePhosphatidylinositol 3'-Kinase/Akt Signal Transduc
tion Pathway. J Biol Chem 1998;273(46):30336-30343; Y Fujio Y, and K Walsh. Akt
Mediates Cytoprotection ofEndothelial Cells by Vascular Endothelial Growth Fac
tor in an Anchorage-dependent Manner. JBiol Chem 1999; 274(23):16349-16354; LE 
Benjamin, and E Keshet E. Conditionalswitching of vascular endothelial growth f
actor (VEGF) expression in tumors:Induction of endothelial cell shedding and re
gression of hemangioblastoma-like vesselsby VEGF withdrawal. PNAS 1997; 94(16):
8761-8766; TL Phung et al. Pathologicalangiogenesis is induced by sustained Akt
signaling and inhibited by rapamycin.Cancer Cell 2006; 10(2):159-170）。ＰＩ３
Ｋ阻害剤は、ＶＥＧＦに誘発された増殖および生存を抑止することが示されており(「V D
ayanir et al. Identification of TyrosineResidues in Vascular Endothelial Growth
Factor Receptor-2/FLK-1 Involved inActivation of Phosphatidylinositol 3-Kinase
and Cell Proliferation. J Biol Chem2001; 276(21):17686-17692」)、したがって、
ＰＩ３Ｋ経路の妨害は、調節を失った血管機能に大きな効果を及ぼすと考えられる (AK O
lsson et al, Nature Review MolecularCellular Biology, 2006; Vol 7, 359-371)。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明に適切な特定のイミダゾキノリン誘導体、その調製、および該誘導体を含有する
適切な医薬製剤は、国際公開第２００６／１２２８０６号に記載されており、かつ式Ｉ
【０００６】
【化１】
2014141515.tif 000002
（式中、Ｒ１は、ナフチルもしくはフェニルであり、前記フェニルは、ハロゲン；無置換
低級アルキル、またはハロゲン、シアノ、イミダゾリルもしくはトリアゾリルで置換され
た低級アルキル；シクロアルキル；低級アルキル、低級アルキルスルホニル、低級アルコ
キシおよび低級アルコキシ低級アルキルアミノからなる群から独立して選択される、１つ
もしくは２つの置換基で置換されているアミノ；無置換ピペラジニル、または低級アルキ
ルおよび低級アルキルスルホニルからなる群から独立して選択される、１つもしくは２つ
の置換基で置換されているピペラジニル；２−オキソ−ピロリジニル；低級アルコキシ低
級アルキル；イミダゾリル；ピラゾリル；およびトリアゾリルからなる群から独立して選
択される、１つもしくは２つの置換基で置換されており、
Ｒ２はＯまたはＳであり、
Ｒ３は低級アルキルであり、
Ｒ４は無置換ピリジル、またはハロゲン、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、もし
くは、無置換もしくは低級アルキルで置換されたピペラジニルで置換されているピリジル
；無置換ピリジミニルもしくは低級アルコキシで置換されているピリミジニル；無置換キ
ノリニル、もしくはハロゲンで置換されているキノリニル；キノキサリニル；あるいはア
ルコキシで置換されているフェニルであり、
Ｒ５は水素もしくはハロゲンであり、
ｎは０もしくは１であり、
Ｒ６はオキシドであり、
ただし、ｎ＝１のときは、基Ｒ６を有するＮ原子は正電荷を有し、
Ｒ７は水素またはアミノである。）
の化合物、またはその互変異性体、または薬学上許容される塩、またはその水和物もしく
は溶媒和物を含む。
【０００７】
式Ｉの化合物の定義に使用される基および記号は、国際公開第２００６／１２２８０６
号に開示されている意味であり、その公報は、参照により本出願に組み込まれている。
【０００８】
本発明の好ましい化合物は、国際公開第２００６／１２２８０６号に記載されている、
以下からなる群から選択される化合物；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−４−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリ
ル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリ
ル；
２−｛４−［８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−２−メチ
ル−プロピオニトリル；
２−｛４−［８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−２−メチ
ル−プロピオニトリル；
２−メチル−２−｛４−［３−メチル−２−オキソ−８−（６−ピペラジン−１−イル−
ピリジン−３−イル）−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル
］−フェニル｝−プロピオニトリル；
２−メチル−２−（４−｛３−メチル−８−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル
）−ピリジン−４−イル］−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キ
ノリン−１−イル｝−フェニル）−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリ
ル；
２−｛４−［８−（２−フルオロ−キノリン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−２−メチ
ル−プロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−６−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリ
ル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−５−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリ
ル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノキサリン−６−イル−２，
３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニ
トリル；
２−エチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−ブチロニトリル
；
２−エチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−ブチロニトリル
；
１−［３−フルオロ−４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−３−メ
チル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−
２−オン；
１−［３−フルオロ−４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−３−メ
チル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−
２−オン；
３−メチル−１−［４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−８−ピリ
ジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−フェニル］−８−キノ
リン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノ
リン−２−オン；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノ
リン−２−オン；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−フェニル｝−３−メチル−８
−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン
；
１−｛４−［ビス−（２−メトキシ−エチル）−アミノ］−フェニル｝−３−メチル−８
−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン
；
３−メチル−１−ナフタレン−２−イル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−
イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−ナフタレン−２−イル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−
イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒド
ロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒド
ロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−ｏ−トリル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［
４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−ｏ−トリル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［
４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−エチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒド
ロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−エチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒド
ロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−１
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（２−トリフルオロメチル−フェニル）−１
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−フルオロ−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−
１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−フルオロ−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−
１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−
１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（２−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−
１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒド
ロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒド
ロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−メトキシメチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３
−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−メトキシメチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３
−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリ
ジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−キノ
リン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−キノリン−３−イ
ル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（２−メトキシ−エチル）−フェニル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イ
ル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−５−オキシ−８−ピリジン−３−イ
ル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プ
ロピオニトリル；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−５−オキシ−８−キノリン−３−イ
ル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プ
ロピオニトリル；
２−［４−（７−フルオロ−３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３
−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−
プロピオニトリル；
２−［４−（７−フルオロ−３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３
−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−
プロピオニトリル；
Ｎ−メチル−Ｎ−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−メタンスルホン
アミド；
メチル−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ
−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−
ブチルエステル；
エタンスルホン酸メチル−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−
２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−アミド
；
エタンスルホン酸メチル−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−
２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−アミド
；
Ｎ−エチル−Ｎ−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−メタンスルホン
アミド；
Ｎ−エチル−Ｎ−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−メタンスルホン
アミド；
２−［４−（３−エチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イ
ミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−プロピオニトリ
ル；
１−［３−フルオロ−４−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イル）−フェニル
］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
１−［３−フルオロ−４−（４−メタンスルホニル−ピペラジン−１−イル）−フェニル
］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
１−（３−フルオロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノリ
ン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−フルオロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジ
ン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−キノ
リン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−ピリ
ジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチ
ル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチ
ル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチ
ル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチ
ル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリ
ン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−２−メチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジ
ン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−フェニル）−８−キノリン−３−イル−
１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−フェニル）−８−ピリジン−３−イル−
１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イ
ル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イ
ル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチ
ル−フェニル］−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチ
ル−フェニル］−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン
−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン
−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（６−メトキシ−ピリ
ジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−
２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（５−メトキシ−ピリ
ジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−
２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピ
ペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−１，３−ジヒドロ−イミ
ダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−［４−（４−メチル−ピ
ペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル］−１，３−ジヒドロ−イミ
ダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（６
−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５
−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［２−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（５
−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５
−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノキサ
リン−６−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−
８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オ
ン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−
８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オ
ン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−
イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ
］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−
イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ
］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−
８−キノキサリン−６−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニ
ル］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ
］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニ
ル］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ
］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチ
ル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチ
ル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３
−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリ
ン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３
−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリ
ン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３
−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリ
ン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−イソプロピル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３
−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリ
ン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル
］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル
］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル
］−３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
１−［４−（４−エチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメチル−フェニル
］−３−メチル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
３−メチル−８−（６−ピペラジン−１−イル−ピリジン−３−イル）−１−（３−トリ
フルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（３−トリフルオロメチ
ル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（３−トリフルオロメチ
ル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−イミダゾール−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジ
ン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−イミダゾール−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−キノリ
ン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
２−メチル−２−［４−（３−メチル−８−キノリン−３−イル−２−チオキソ−２，３
−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニト
リル；
２−メチル−２−｛４−［３−メチル−８−（２−メチル−ピリジン−４−イル）−２−
オキソ−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝
−プロピオニトリル；
５−｛１−［４−（シアノ−ジメチル−メチル）−フェニル］−３−メチル−２−オキソ
−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−８−イル｝−ピリジン−
２−カルボニトリル；
２−［４−（４−アミノ−３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−２−メチル−プ
ロピオニトリル；
１−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−ピリジン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イ
ミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−シクロプロパンカルボニトリ
ル；
１−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イ
ミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−シクロプロパンカルボニトリ
ル；
１−｛４−［８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−２−オキソ−２
，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル］−フェニル｝−シクロプ
ロパンカルボニトリル；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（６
−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５
−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−８−（５
−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５
−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−３−メチ
ル−８−キノキサリン−６−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン
−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（２−メトキシ−ピリ
ミジン−５−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン
−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリミジ
ン−５−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−８−（２−メトキシ−ピリ
ミジン−５−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン
−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−ピリミジ
ン−５−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−ピペラジン−１−イル−フェニル）−３−メチル−８−（２−メ
チル−ピリジン−４−イル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニ
ル］−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イ
ミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［３−クロロ−４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−フェニ
ル］−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イ
ミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメ
チル−フェニル］−８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
１−［４−（ｃｉｓ−３，５−ジメチル−ピペラジン−１−イル）−３−トリフルオロメ
チル−フェニル］−８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−
ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（２−メトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１
−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−
ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−
８−ピリミジン−５−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−
オン；
５−［３−メチル−２−オキソ−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメ
チル−フェニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−８−イ
ル］−ピリジン−２−カルボニトリル；
３−メチル−８−（２−メチル−ピリジン−４−イル）−１−（４−ピペラジン−１−イ
ル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
８−（３，４−ジメトキシ−フェニル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル
−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キ
ノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イ
ル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イ
ル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−２−オン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］ト
リアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミ
ダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］ト
リアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミ
ダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
５−［３−メチル−２−オキソ−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−３
−トリフルオロメチル−フェニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−８−イル］−ピリジン−２−カルボニトリル；
８−（６−フルオロ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］ト
リアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミ
ダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（２，６−ジメトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，
４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ
−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリミジン−５−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−
イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ
］キノリン−２−オン；
８−（２−メトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２，４］
トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イ
ミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
８−（２，４−ジメトキシ−ピリミジン−５−イル）−３−メチル−１−（４−［１，２
，４］トリアゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒド
ロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−
８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オ
ン；
３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−
８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オ
ン；
８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−
イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ
］キノリン−２−オン；
８−（５−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピラゾール−１−
イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ
］キノリン−２−オン；
１−（３−クロロ−４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−フェニル）−３−メチ
ル−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−（３−クロロ−４−［１，２，４］トリアゾール−１−イル−フェニル）−３−メチ
ル−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−３−メチル
−８−ピリジン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−
オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−３−メチル
−８−キノリン−３−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−
オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−（６−
メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−
ｃ］キノリン−２−オン；
１−（４−イミダゾール−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−８−（５−
メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−
ｃ］キノリン−２−オン；
３−メチル−８−ピリジン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イ
ルメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン
；
３−メチル−８−キノリン−３−イル−１−（４−［１，２，４］トリアゾール−１−イ
ルメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン
；
１−（４−イミダゾール−１−イルメチル−フェニル）−３−メチル−８−ピリジン−３
−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；および
１−（４−イミダゾール−１−イルメチル−フェニル）−３−メチル−８−キノリン−３
−イル−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン；
またはその互変異性体、または薬学上許容されるその塩、またはその水和物もしくは溶媒
和物である。
【０００９】
本発明の特に好ましい化合物は、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−
８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イ
ル）−フェニル］−プロピオニトリルである。２−メチル−２−［４−（３−メチル−２
−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリ
ン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリルの合成は、例えば、国際公開第２００６
／１２２８０６号の実施例１（化合物Ａ）に記載されている。
【００１０】
本発明の、別の特に好ましい化合物は、８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−
３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−
１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オンである。８−（６−メト
キシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリ
フルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２
−オンの合成は、例えば、国際公開第２００６／１２２８０６号の実施例８６（化合物Ｂ
）に記載されている。
【００１１】
本発明に適切な特定のピリミジン誘導体、その調製、および該誘導体を含有する適切な
医薬製剤は、国際公開第０７／０８４７８６号に記載されており、かつ式ＩＩ
【００１２】
【化２】
2014141515.tif 000003
の化合物、またはその立体異性体、互変異性体もしくは薬学上許容される塩であり、Ｗは
Ｃ、Ｒｗ、もしくはＮであり、Ｒｗは、
（１）水素
（２）シアノ
（３）ハロゲン
（４）メチル
（５）トリフルオロメチル
（６）スルホンアミド
からなる群から選択され、
Ｒ１は、
（１）水素
（２）シアノ
（３）ニトロ
（４）ハロゲン
（５）置換および無置換のアルキル
（６）置換および無置換のアルケニル
（７）置換および無置換のアルキニル
（８）置換および無置換のアリール
（９）置換および無置換のヘテロアリール
（１０）置換および無置換のヘテロシクリル
（１１）置換および無置換のシクロアルキル
（１２）−ＣＯＲ１ａ
（１３）−ＣＯ２Ｒ１ａ
（１４）−ＣＯＮＲ１ａＲ１ｂ
（１５）−ＮＲ１ａＲ１ｂ
（１６）−ＮＲ１ａＣＯＲ１ｂ
（１７）−ＮＲ１ａＳＯ２Ｒ１ｂ
（１８）−ＯＣＯＲ１ａ
（１９）−ＯＲ１ａ
（２０）−ＳＲ１ａ
（２１）−ＳＯＲ１ａ
（２２）−ＳＯ２Ｒ１ａ、および
（２３）−ＳＯ２ＮＲ１ａＲ１ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ１ａおよびＲ１ｂは
（ａ）水素
（ｂ）置換もしくは無置換のアルキル
（ｃ）置換および無置換のアリール
（ｄ）置換および無置換のヘテロアリール
（ｅ）置換および無置換のヘテロシクリル、および
（ｆ）置換および無置換のシクロアルキル
からなる群から独立に選択され、
Ｒ２は、
（１）水素
（２）シアノ
（３）ニトロ
（４）ハロゲン
（５）ヒドロキシ
（６）アミノ
（７）置換および無置換のアルキル
（８）−ＣＯＲ２ａ、および
（９）−ＮＲ２ａＣＯＲ２ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、
（ａ）水素、および
（ｂ）置換もしくは無置換のアルキル
からなる群から独立に選択され、
Ｒ３は、
（１）水素
（２）シアノ
（３）ニトロ
（４）ハロゲン
（５）置換および無置換のアルキル
（６）置換および無置換のアルケニル
（７）置換および無置換のアルキニル
（８）置換および無置換のアリール
（９）置換および無置換のヘテロアリール
（１０）置換および無置換のヘテロシクリル
（１１）置換および無置換のシクロアルキル
（１２）−ＣＯＲ３ａ
（１３）−ＮＲ３ａＲ３ｂ
（１４）−ＮＲ３ａＣＯＲ３ｂ
（１５）−ＮＲ３ａＳＯ２Ｒ３ｂ
（１６）−ＯＲ３ａ
（１７）−ＳＲ３ａ
（１８）−ＳＯＲ３ａ
（１９）−ＳＯ２Ｒ３ａ、および
（２０）−ＳＯ２ＮＲ３ａＲ３ｂ
からなる群から選択され、
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、
（ａ）水素
（ｂ）置換もしくは無置換のアルキル
（ｃ）置換および無置換のアリール
（ｄ）置換および無置換のヘテロアリール
（ｅ）置換および無置換のヘテロシクリル、および
（ｆ）置換および無置換のシクロアルキル
からなる群から独立して選択され、
Ｒ４は、
（１）水素、および
（２）ハロゲン
からなる群から選択される。
【００１３】
式ＩＩの化合物の定義に使用される基および記号は、国際公開第０７／０８４７８６号
に開示されている意味であり、その公報は、参照により本出願に組み込まれている。
【００１４】
本発明の好ましい化合物は、国際公開第０７／０８４７８６号に具体的に記載されてい
る化合物である。本発明の特に好ましい化合物は、５−（２，６−ジ−モルホリン−４−
イル−ピリジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン（化
合物Ｃ）である。５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−
４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミンの合成は、国際公開第０７／０８４
７８６号の実施例１０に記載されている。
【００１５】
本発明によれば、式Ｉおよび式ＩＩの化合物を使用して、以下の処置をするのが特に好
ましい：
・関節リウマチ
・滑膜炎
・骨および軟骨破壊
・骨髄炎
・パンヌス成長
・骨棘形成
・肝炎
・肺炎
・糸球体腎炎
・ぜんそく
・鼻ポリープ
・移植
・肝臓形成
・未熟児網膜症
・加齢黄斑変性症
・糖尿病性網膜症
・脈絡膜および硝子体の疾患
・白質軟化症
・甲状腺炎
・甲状腺肥大
・リンパ増殖性疾患
・カボジ肉腫
・血液性悪性腫瘍（例えば、血管腫）
・肥満症
・脊髄損傷
・急性心筋梗塞
・肺浮腫、脳浮腫、および網膜浮腫、
または、さらに、これらの任意の組合せ。
【００１６】
特に、本発明は、ＶＥＧＦ促進性血管新生疾患を処置する方法に関し、式Ｉの、特定の
イミダゾキノリン誘導体、特に好ましくは、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−
オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン
−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）、もしくは８−（６−メトキ
シ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフ
ルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−
オン（化合物Ｂ）、あるいは式ＩＩの、特定のピリジン誘導体、特に好ましくは、５−（
２，６−ジ−モルホリン−４−イル−ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル
−ピリジン−２−イルアミン（化合物Ｃ）を、治療上有効な量、それを必要とする温血動
物に投与することを含む方法に関する。
【００１７】
さらに、本発明は、ＶＥＧＦ促進性血管新生疾患または悪性腫瘍、あるいはＶＥＧＦお
よび／またはＶＥＧＦＲファミリーメンバーを標的とする薬剤に対し、耐性を獲得した疾
患を処置する医薬製剤を製造するための、式Ｉの特定のイミダゾキノリン誘導体、特に好
ましくは、２−メチル−２−［４−（３−メチル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル
−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−イル）−フェニル］−プロ
ピオニトリル（化合物Ａ）、もしくは８−（６−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−
メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，
３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−２−オン（化合物Ｂ）、または式ＩＩ
の特定のピリジン誘導体、特に好ましくは、５−（２，６−ジ−モルホリン−４−イル−
ピリミジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イルアミン（化合物
Ｃ）の使用に関する。
【００１８】
ＶＥＧＦおよび／またはＶＥＧＦＲのモジュレーターによる処置に対する耐性は、ＶＥ
ＧＦおよび／またはＶＥＧＦＲの前記モジュレーターによる治療中に、異なるメカニズム
により獲得される可能性がある。
【００１９】
特に、本発明は、式Ｉの化合物、特に好ましくは、２−メチル−２−［４−（３−メチ
ル−２−オキソ−８−キノリン−３−イル−２，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］
キノリン−１−イル）−フェニル］−プロピオニトリル（化合物Ａ）、もしくは８−（６
−メトキシ−ピリジン−３−イル）−３−メチル−１−（４−ピペラジン−１−イル−３
−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３−ジヒドロ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリ
ン−２−オン（化合物Ｂ）、または式ＩＩの化合物、特に好ましくは、５−（２，６−ジ
−モルホリン−４−イル−ピリジン−４−イル）−４−トリフルオロメチル−ピリジン−
２−イルアミン（化合物Ｃ）、あるいは薬学上許容されるそれらの塩を使用する、ＶＥＧ
Ｆ依存性である、またはＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ軸のモジュレーターによる治療中に耐性を
獲得した、疾患または悪性腫瘍の処置に関する。ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ軸を標的とする可
能性のある薬剤には、例えば、ベバシズマブ（Bevacizumab）、ラニビズマブ（Ranibizum
ab）、ＡＶＥ０００５、ＨｕＭＶ８３３、２Ｃ３、ＣＢＯ−Ｐ１１、スーテント（Sutent
）、ソラフェニブ（Sorafenib）、バタラニブ（Vatalanib）、ザクチマ（Zactima）、ミ
ドスタウリン（Midostaurin）、アンジオザイム（Angiozyme）、ＡＧ−０１３７３６、レ
スタウチニブ（Lestautinib）、ＣＰ−５４７，６３２、ＣＥＰ−７０５５、ＫＲＮ６３
３、ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８、ＩＭＣ−１２１１、ＫＺ２６０２５３、セマキサニブ（Sema
xanib）、Ｅ−７１０７、ＡＳ−３、Ｃａｎｄ５、およびＰＴＣ−２９９がある。
【００２０】
式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物はまた、ＶＥＧＦ促進性血管新生疾患を処置するた
めに、他の活性化合物、例えば、国際公開第２００６／１２２８０６号および国際公開第
０７／０８４７８６号に開示されるような組合せパートナー、より好ましくは、以下に限
定されないが、例えば、抗ＶＥＧＦであるベバシズマブ、抗ＶＥＧＦ、ラニビズマブ、Ａ
ＶＥ０００５、抗ＶＥＧＦであるＨｕＭＶ８３３、抗ＶＥＧＦである２Ｃ３、抗ＶＥＧＦ
であるＣＢＯ−Ｐ１１、スーテント、ソラフェニブ、バタラニブ、ザクチマ、ミドスタウ
リン、アンジオザイム、ＡＧ−０１３７３６、レスタウチニブ、ＣＰ−５４７，６３２、
ＣＥＰ−７０５５、ＫＲＮ６３３、ＮＶＰ−ＡＥＥ７８８、ＩＭＣ−１２１１、ＺＫ２６
０２５３、セマキサニブ、Ｅ−７１０７、ＡＳ−３、Ｃａｎｄ５、およびＰＴＣ−２９９
、ならびに、ＨＳＰ９０阻害剤である、ＣＮＦ１０１０、ＣＮＦ２０２４、タネスピマイ
シン（tanespimycinm）、アルベスピマイシン（alvespimycin）、ＩＰＩ５０４、ＳＮＸ
５４２２およびＮＶＰ−ＡＵＹ９２２などのＶＥＧＦまたはＶＥＧＦＲ標的化薬剤を、組
み合わせて使用してもよい。
【００２１】
本発明による「組合せ」によるとは、１回用量単位形態の固定した組合せ、または併用
投与向けのキットオブパーツ（a kit ofparts）のいずれかを意味し、後者の場合、式（
Ｉ）の化合物と組合せパートナーを同時に独立して投与してもよく、または、組合せパー
トナーが、協同効果、例えば相乗効果を示すことが特に可能な時間間隔内に個別投与して
もよい。
【００２２】
式Ｉの化合物は、単独で、または１つもしくは複数の他の治療用化合物と組み合わせて
投与することができ、可能な併用療法としては、固定した組合せの形態とする、または、
本発明の化合物と１つまたは複数の他の治療用化合物を時間差を設けて、もしくは互いに
独立に投与する、または、固定した組合せと１つまたは複数の他の治療用化合物の併用投
与とすることができる。
【００２３】
活性成分の投与量は、患者のタイプ、人種、年齢、体重、性別、および医療状態、処置
すべき病態の重篤度、投与経路、患者の腎臓、肝臓機能、ならびに使用される特定の化合
物を含めた種々の要因で決まる。通常の技能を有する医師、臨床医師、獣医師は、病態の
進行を予防する、反撃する、または抑止するために必要な薬の有効量を、容易に決め、処
方することができる。有効性を示す範囲内の薬物濃度を達成する最適精度を得るには、標
的部分への薬物利用率に関する動態に基づいた投薬計画が必要である。これには、薬物分
布、薬物平衡、および薬物放出に関する検討が必要である。
【００２４】
本発明の化合物は、任意の従来の経路、特に非経口的に、例えば注射可能な溶液や懸濁
液の形態で、経腸的に、例えば経口的に、例としては錠剤やカプセルの形態で、局所的に
、例としてはローション、ゲル、軟膏もしくはクリームの形態で、または、経鼻もしくは
座薬の形態で投与してもよい。局所投与としては、例えば、皮膚への投与がある。局所投
与の別の形態としては、眼への投与がある。少なくとも１種の薬学上許容される担体また
は希釈剤と共に、本発明の化合物を含む医薬組成物は、薬学上許容される担体または希釈
剤と共に混合することによって、従来通りに製造してもよい。
【００２５】
医薬組成物は、局所投与、経腸投与、例えば、経口投与や直腸投与、あるいは非経腸投
与に適し、かつ無機物でも有機物であってもよく、固体でも液体でもあってよい薬学上許
容される担体と共に、上記の疾患の１つの治療に有効な量の式Ｉの化合物、またはそのＮ
−オキシド体またはその互変異性体を含んでいる。経口投与用途には、希釈剤、例えばラ
クトース、デキシトロース、マニトール、および／またはグリセロール、および／または
潤沢剤、および／またはポリエチレングリコールと共に、活性成分を含有する医薬組成物
、特に、錠剤あるいはゼラチンカプセルがある。錠剤は、結合剤、例えばマグネシウムア
ルミニウムシリケート、コーンスターチ、小麦スターチ、米スターチなどのでんぷん類、
ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／または
ポリビニルピロリドン、必要に応じて、崩壊剤、例えばでんぷん類、寒天、アルギン酸ま
たはアルギン酸ナトリウムなどのその塩、および／または発泡剤混合物、または吸着剤、
着色料、着香料および甘味料を含んでもよい。本発明の薬理活性化合物を、非経口的に投
与可能な組成物の形態、もしくは輸液の形態で用いることも可能である。医薬組成物は、
滅菌してもよく、かつ／または賦形剤、例えば、防腐剤、安定化剤、湿潤化合物、および
／または乳化剤、溶解剤、浸透圧および／または緩衝液を調節するための塩を含んでもよ
い。本発明の医薬組成物は、必要に応じて、他の薬理活性物質を含んでよく、それ自体既
知の方法、例を挙げると、従来の混合法、顆粒化法、糖剤化法、溶解法または凍結乾燥法
で調製され、活性成分を約１〜９９％、特に約１〜約２０％含む。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】ＶＥＧＦに誘発された増殖に対する、化合物Ａの効果を示す図である。ＢｒＤＵを含有し、かつＶＥＧＦを含む（Ｖ）、もしくは含まない（０）低血清培地中で、ＨＵＶＥＣ細胞を、播種、飢餓させて、化合物Ａの濃度を向上させながら、２４時間インキュベートした。導入されたＢｒＤＵを定量することにより、内皮細胞の増殖を測定した。群あたりｎ＝３のウエルで、４回の独立実験を実施した（＊ｐ＝＜０．０５（ＡＮＯＶＡ−Ｄｕｎｎｅｔ’ｓ）、ＶＥＧＦ処置対照群がベースライン（横線で表示））。Ｘ線回折図
【図２】ｉｎ  ｖｉｖｏでの、ＶＥＧＦに誘発された血管新生に対する、化合物Ａの効果を示す図である。寒天単独（ａｇａｒ）、もしくは２ｍｇ／ｍＬのＶＥＧＦ１６５（ａｇａｒ＋ＶＥＧＦ）を充填したテフロン製寒天チャンバーを埋め込んだＦＶＢマウスを、図示した用量濃度の化合物Ａ、もしくはビヒクル対照（Ｖｅｈ.、両図）の投薬計画で、４日間経口的に処置した。ＶＥＧＦに誘発された血管新生組織（左図）、およびＥＬＩＳＡ法によるＴｉｅ−２濃度（右図）を定量するために、マウスは最後の投薬の２４時間後に犠牲となった（＊ｐ＝＜０．０５（ＡＮＯＶＡ−Ｄｕｎｎｅｔｔ’ｓ）、対ＶＥＧＦ処置群）。
【図３】ｉｎ  ｖｉｖｏでの、ＶＥＧＦに誘発された透過性に対する、化合物Ａ、Ｂ、およびＣの効果を示す図である。化合物Ａ（３０ｍｇ／ｋｇ）、化合物Ｂ（７．５ｍｇ／ｋｇ）もしくは化合物Ｃ（５０ｍｇ／ｋｇ）のいずれかで、図示した時間、経口的に事前処置したＦＶＢマウスに、エバンスブルー（Ｅｖａｎｓ  Ｂｌｕｅ）を静脈注射し、３０分後、耳にＶＥＧＦをチャレンジ接種した。次いで、マウスを犠牲にし、色素の滲出面積を測定した（＊ｐ＝＜０．０５）。
【図４】腫瘍の間質液圧力に対する、化合物ＡおよびＣの効果を示す図である。腫瘍内に圧力感知カテーテルが挿入された、同所性ＢＮ４７２腫瘍を有するラットを、化合物Ａ（３０ｍｇ／ｋｇ  上図、暗線）、もしくは化合物Ｃ（２．５ｍｇ／ｋｇ  下図、暗線）、あるいはビヒクル対照（両図、グレー線）のいずれかで、一度、経口的に処置した。ＩＰＦを２４時間記録し、変動値（デルタ値）をプロットした（上図：暗線は未処置ラット、グレー線はグラフに示した処置適用）。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【００２７】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物、ならびにそれらの塩の有効性は、以下に実証するこ
とができる。
【実施例１】
【００２８】
ＨＵＶＥＣ増殖アッセイ
ＨＵＶＥＣのＶＥＧＦ誘発増殖に関する効果をＢｒｄＵ取込キット（Ｂｉｏｔｒａｃ  
Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ｅｌｉｓａ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｖ．２、Ａｍｅｒ
ｓｈａｍ、英国）を用いて試験した。１．５％ゼラチンで被覆した９６ウエルプレートに
、集密前のＨＵＶＥＣを、ウエルあたり５×１０３個の細胞密度で播種し、次いで、５％
ＦＢＳ（ＰｒｏｍｏＣｅｌｌ、スイス）を含む成長培地中、３７℃、５％ＣＯ２下でイン
キュベートした。２４時間後、培地を１．５％ＦＢＳを含有する基本培地に交換した。さ
らに２４時間後、培地を更新し、化合物または媒体対照を添加した。ヒトＶＥＧＦ１６５
を同時に加えた（１０ｎｇ／ｍｌ）。２４時間のインキュベーション後、ＢｒｄＵで標識
した溶液を加え、細胞をさらに２４時間インキュベートした後、固定化、ブロッキング、
およびペルオキシダーゼで標識した抗ＢｒｄＵ抗体を添加した。次に、分光光度計を用い
て４５０ｎｍで定量される着色反応生成物を形成する、３，３’５，５’−テトラメチル
ベンジジン基質を用いて、結合抗体を検出した。
【実施例２】
【００２９】
Ｉｎ  ｖｉｖｏでのチャンバーインプラント血管新生アッセイ
パーフルオロ−アルコキシ−テフロン（登録商標）製の無菌組織チャンバーに、成長因
子（ＶＥＧＦ１６５、２μｇ／ｍＬ）を含むまたは含まない、２０Ｕ／ｍＬヘパリン（Ｎ
ｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ａ／Ｓ、Ｂａｇｓｖａｅｒｄ、デンマーク）を含有する０．８
％（ｗ／ｖ）溶融寒天５００μｌを充填し、このチャンバーを、雌マウス（ＦＶＢ、Ｃｈ
ａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ｌｅｓ  Ｏｎｃｉｎｓ  フランス
）の背面側腹に、無菌で皮下に埋め込んだ。処置を開始して４〜６時間後に、チャンバー
を埋め込み、次いで毎日、表記した用量の投薬計画で３日間処置を行った。次に、マウス
からチャンバーを回収し、形成した血管新生組織を取り、重量を測定した。組織検体は、
ＲＩＰＡ緩衝液中（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１２１ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤ
ＴＡ、６  ｍＭ  ＥＧＴＡ、１％  ＮＰ−４０、２０ｍＭ  ＮａＦ、１  ｍＭ  Ｐｅｆａ
ｂｌｏｃ  ＳＣ、１  ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４）でホモジナイズし、７０００ｒｐｍで１時間
、遠心分離にかけ、０．４５μｍのシリンジフィルター（Ａｃｒｏｄｉｓｃ（登録商標）
ＧＦ、Ｇｅｌｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ、  ＭＩ、米国）を用いて
、上澄み液をろ過した。Ｔｉｅ−２濃度を決定するために、捕捉抗体である抗Ｔｉｅ−２
ＡＢ３３（ＵＢＩ、Ｈａｕｐｐａｕｇｅ、ＮＹ）を、２μｇ／ｍＬの濃度（１００μＬ
／ウエル）で、Ｎｕｎｃ（Ｎａｐｅｒｖｉｌｌｅ、ＩＬ）Ｍａｘｉｓｏｒｐ  ９６ウエル
プレートに、４℃で一晩かけて被覆した。ウエルをＴＰＢＳ（Ｔｗｅｅｎ  ８０  ＰＢＳ
）中で洗浄し、３％のＴｏｐ−Ｂｌｏｃｋ（Ｊｕｒｏ、Ｌｕｃｅｒｎｅ、スイス）を用い
て、室温、２時間インキュベートすることによりブロッキングした。タンパク質の溶解物
３００μｇを添加して２時間インキュベートし、ウエルをＴＰＢＳ＋０．１％Ｔｏｐ−Ｂ
ｌｏｃｋ中で、室温、１時間で３回洗浄した後、ヤギ抗マウスＴｉｅ−２抗体（Ｒ＆Ｄ  
Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ、０．５μｇ／ｍＬ）、およびアルカリ
ホスフェートコンジュゲート抗ヤギ抗体（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、１：６
，０００希釈体）を加えた。Ｔｉｅ−２抗体複合体は、ｐ−ニトロフェニルリン酸基質（
Ｓｉｇｍａ）と共にインキュベートした後、検出した。分光光度性反応産物の吸光度は、
ＥＬＩＳＡ読取装置を用いて、４０５ｎｍで測定した。ヒトＩｇＧ１の定常領域に融合し
た、Ｔｉｅ−２の組み換えヒト細胞外領域（ｓＴｉｅ−２Ｆｃ）のＲＩＰＡ緩衝液中の溶
液を、０．１〜３００ｎｇ／ウエルの濃度範囲の標準として用いた。
【実施例３】
【００３０】
ｉｎ  ｖｉｖｏでのＶＥＧＦ誘発透過性アッセイ（Ｍｉｌｅｓアッセイ）
２００μｌのエバンスブルー（０．５％）を、雌ＦＶＢマウスの尾部静脈に注射した。
３０分後、マウスに麻酔をかけ（Ｏ２下、３％イソフルランＦｏｒｅｎｅ（登録商標）、
Ａｂｂｏｔｔ  ＡＧ、Ｃｈａｍ、スイス）、次に、３９℃の温度に維持した手術台に置い
た。両面テープで取り付けたスチール製コーン上に、マウスの耳を伸ばし広げ、背部表面
を露出させた。次に、顕微鏡下、耳の第１神経維管束と第２神経維管束の間の皮膚に、３
０Ｇの皮下注射用針を挿入し、４〜５ｍｍ貫通させた。マイクロリッターシリンジ（２５
０μｌ、Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｂｏｎａｄｕｚ、スイス）を用いて、２μｌのＶＥＧＦ１６
４（１０ｎｇ／μｌ）を注入し、２×２ｍｍの皮下水泡を形成させた。血清アルブミンに
結合したエバンスブルーは、微小血管の透過性が亢進した部位に、滲出することになり、
血管の透過性の測定ができる目視可能な青いスポットを生成する。全マウスにおいて、注
入後３０分に、皮下注入部位の写真を撮影した。ＶＥＧＦにより媒介された、血管からの
漏れは、コンピュータ補助画像解析ソフトウエア（ＫＳ−４００  ３．０ｉｍａｇｉｎｇ
ｓｙｓｔｅｍ、Ｚｅｉｓｓ、ドイツ）の画素ベースによる閾値を利用して、ＶＥＧＦ注
入部位に滲出した色素の面積（ｍｍ２）を測定することにより定量する。
【実施例４】
【００３１】
腫瘍の間質液圧力
４つの基本構成品（ラット体内からの情報を常に感知、かつ送信する埋込型送信器（Ａ
Ｍ  ｕｎｉｔ、ｍｏｄｅｌ  ＴＬＭ−ＰＡＣ１０、体積：１．１ｃｃ、重量：１．４ｇ）
、ホームケージ下に配置した受信器一器、シグナル調整用のマトリックスインターフェー
ス、およびデータ収集、解析、保存用のコンピュータベースのデータ取得システム）から
なり、改良を加えて完全に埋込可能に小型化した、無線遠隔測定システムを利用して、ホ
ームケージ内に維持されている、知覚があり、自由に運動しているラットで、ＢＮ４７２
腫瘍のＩＦＰを測定した。イソフルオラン（ｉｓｏｆｌｕｏｒａｎｅ）による麻酔下（Ｏ
２下、３％イソフルラン）、送信器の本体を、皮下、無菌状態で、ラットの側腹内に埋め
込んだ。手短に言えば、ラットが一旦、完全に意識を失うと、暖めた毛布の上に置き、腹
部領域を悌毛する。次に、ポビドンヨードの手術用洗浄液で、腹部の腹側表面の皮膚を消
毒することにより、準備する。ラットを背臥位状態にして、腹部の中央に沿って、約３０
ｍｍの皮膚切開を行い、筋組織壁から皮膚を分離してエアポケットを作る。次に、無菌の
送信器を、このポケット内に配置し、感知カテーテルを腫瘍部位（一番低い乳房脂肪パッ
ド）方向に向けて、皮下に通した。圧力感知カテーテルを、腫瘍体中に挿入し（４〜５ｍ
ｍ深さ）、組織接着剤（Ｖｅｔｂｏｎｄ、３Ｍ社）で、入口部位を固定した。圧力カテー
テルの先端と腫瘍間の液体の流通は、無線遠隔測定用変換器に連結したチューブを、クラ
ンプを用いて緩やかに圧迫、除圧することにより試験した。カテーテル埋込みは、本試験
前後の読取値が、１ｍｍＨｇ以下の差であれば、良好とした。しかし、注入した腫瘍の大
部分において、感知カテーテルが適切な位置取りとなっているのを確実に確認しながら、
腫瘍内のＩＦＰパルス圧の波形曲線を存分に高感度に記録することができた。無線遠隔送
信器の埋込みの総手術時間は、約２０分であった。術後の鎮痛は、手術直後および８〜１
２時間後の２回、０．０５ｍｇ／ｋｇのブプレノルフィン（Ｂｕｐｒｅｎｏｒｐｈｉｎ）
（Ｔｅｍｇｅｓｉｃ（登録商標）、Ｒｅｃｋｉｔｔ  ａｎｄ  Ｃｏｌｍａｎ）の皮下注射
で行った。術後、無意識のラットを、水を自由摂取できるクリーンケージ内の柔らかい物
質の上に置く。外部の熱ランプを用いて、体温を維持する。ラットには、手術の回復に２
日間を与えた後、生理学的データの取得を開始した。ＩＦＰを、全てのラットについて、
１０日間まで、２４時間にわたり常時記録し、５００Ｈｚのサンプリング速度で、周期時
間１分間中、１０秒間解析した。処置後２４時間記録された曲線下面積（ＡＵＣ）は、台
形法則法を用いて決定した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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