(57)【要約】【課題】ＳＩＲＳに代表されるサイトカイン・ケモカイン類が介在して発症または悪化する疾患によって生じる、臓器炎症の抑制に有効な基材及びデバイスを提供する。【解決手段】水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持された所定のビタミンＥ誘導体とを備え、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置される臓器炎症抑制用基材及びこの基材を備えるデバイス。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持された下記式（１）で表されるビタミンＥ誘導体とを備え、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置される臓器炎症抑制用基材。
【化１】
2014062091.tif 000013
［式（１）中、Ｒ１〜Ｒ３はそれぞれ独立に水素又はメチル基であり、Ｒ４は下記式（２）〜（４）で表されるいずれかの基であり、下記式（３）中、Ｍは金属元素であり、下記式（４）中、Ｒ５及びＲ７はそれぞれ独立に水素及び下記式（５）〜（１０）で表される基からなる群より選択されるいずれかの基又はこれらの基のカルボキシル基がエステル化された基であり、Ｒ６は水酸基及び下記式（１１）〜（２０）で表される基からなる群より選択されるいずれかの基又はこれらの基のカルボキシル基若しくは水酸基がエステル化された基であり、下記式（１１）及び（１２）中、ｎは１〜５のいずれかの整数を示す。］
【化２】
2014062091.tif 000014
【請求項２】
水不溶性担体が、ポリスルホン系ポリマーである、請求項１に記載の基材。
【請求項３】
水不溶性担体が、中空糸、粒子又は不織布である、請求項１又は２に記載の基材。
【請求項４】
水不溶性担体が、中空糸である、請求項３に記載の基材。
【請求項５】
前記治療対象の血液中のＧＲＯの濃度が、３５００［ｐｇ／ｍＬ］以上又はＭＩＰ−１αの濃度が５１００［ｐｇ／ｍＬ］以上である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の基材。
【請求項６】
前記治療対象の血液中のＧＲＯの濃度が、３５００〜１０００００［ｐｇ／ｍＬ］又はＭＩＰ−１αの濃度が５１００〜１０００００［ｐｇ／ｍＬ］である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の基材。
【請求項７】
血液を流入させる入口ポート及び血液を流出させる出口ポートを有する容器と、該容器に充填された請求項１〜６のいずれか一項に記載の基材とを備えるデバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、基材及びデバイスに関する。
【背景技術】
【０００２】
全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ：ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）は集中治療領域において、未だに致死率が高い疾患であるが有効な治療法は少ない。
【０００３】
１９９１年の米国胸部疾患学会（ＡＣＣＯ）／米国集中治療学会（ＳＣＣＭ）合同カンファレンスでは、感染、外傷、熱傷、膵炎、その他の生体侵襲が引き金となって各種サイトカインが過剰に放出され、全身の炎症反応が亢進した状態を全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、感染を合併したＳＩＲＳを敗血症（ｓｅｐｓｉｓ）と定義された。これらの状態は、さらに、サイトカインを中心とした各種ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒが関与して、侵襲後の重傷病態から臓器不全に陥ることが明らかにされている。侵襲後に臓器障害が発生する過程は、小川によってｓｅｃｏｎｄ  ａｔｔａｃｋ  ｔｈｅｏｒｙで説明されている。直接臓器障害には至らない程度の過大侵襲の場合、好中球がｐｒｉｍｉｎｇされて重要臓器へ集積した状態下に、感染等のｓｅｃｏｎｄ  ａｔｔａｃｋが契機となって臓器障害が生じ多臓器不全に陥る。そのため、複数の臓器が直接、同時に障害される多臓器不全の場合とは異なり、ｓｅｃｏｎｄ  ａｔｔａｃｋによる多臓器不全への移行を防止または治療できる可能性が指摘されている。
【０００４】
多臓器不全を防ぐために、早期に治療を開始しようという試みが行われ始めているが、ＳＩＲＳのすべてが多臓器不全に陥るわけではない。したがって、いくつかの重症度判定や診断基準が提唱されている。ＡＣＣＯ／ＳＣＣＭ合同カンファレンスでは、ＳＩＲＳと敗血症に関する診断基準は示されているが、多臓器不全（ＭＯＤＳ、ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｏｒｇａｎ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）の診断基準は示されていない。ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｏｒｇａｎ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｓｃｏｒｅ（ＭＯＤ  スコア）では、測定項目として、呼吸器（ＰａＯ２／ＦｉＯ２  ｒａｔｉｏ）、腎臓（クレアチニン値［μｍｏｌ／Ｌ］）、肝臓（ビリルビン値［μｍｏｌ／Ｌ］）、心血管（Ｐａｒ：ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ａｄｊｕｓｔｅｄ  ｈｅａｒｔ  ｒａｔｅ）、血液（血小板数［個／ｍＬ×１０−３］）、神経（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）があり、点数と死亡率が相関するように設定されている。また、１９９４年に欧州集中治療学会（ＥＳＩＣＭ）が作成したＳＯＦＡ（Ｓｅｐｓｉｓ−ｒｅｌａｔｅｄ  Ｏｒｇａｎ  Ｆａｉｌｕｒｅ  Ａｓｓｅｓｍｅｎｔ）スコアは、測定項目として、呼吸機能（ＰａＯ２／ＦｉＯ２  ［ｔｏｒｒ］）、凝固機能（血小板数［×１０３／ｍｍ２］）、肝機能（ビリルビン値［ｍｇ／ｄＬ］）、循環機能（血圧低下）、中枢神経機能（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）、腎機能（クレアチニン値［ｍｇ／ｄＬ］）があり、敗血症に合併するＭＯＤＳに焦点を絞ったものとして作られたが、その後敗血症に限定したものではないことから、今ではＳＯＦＡはＳｅｑｕｅｎｔｉａｌ  Ｏｒｇａｎ  Ｆａｉｌｕｒｅ  Ａｓｓｅｓｍｅｎｔの略とされ、広く用いられている。
【０００５】
感染を合併したＳＩＲＳ、すなわち敗血症から、さらにサイトカインを中心とした各種ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒが関与して、侵襲後の重傷病態から多臓器不全になっていくが、これに対する集学的治療の要点としては、手術や抗生物質投与等による組織酸素代謝の維持や、血液浄化法を用いた各種ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒ除去による細胞障害の治療、栄養管理等による自己防衛機能の増強等の治療が考えられてきている。
【０００６】
多臓器不全患者は、腎臓や肝臓での代謝・排泄能等の機能が著しく低下し、体内に病因物質や代謝産物等が蓄積したり、輸液スペースの確保が困難な状態にあるので、このような悪条件を打破するため、近年、有効な治療法の１つとして血液浄化法が注目され行われてきている。
【０００７】
例えば、非特許文献１には、多臓器不全に用いられる主な血液浄化法として、持続的血液濾過（ＣＨＦ：ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｈｅｍｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）／持続的血液ろ過透析（ＣＨＤＦ：ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｈｅｍｏｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）、間歇的血漿交換（ＩＰＥ：ｉｎｔｅｒｍｉｔｔｅｎｔ  ｐｌａｓｍａ  ｅｘｃｈａｎｇｅ）／持続的血漿交換（ＣＰＥ：ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｐｌａｓｍａ  ｅｘｃｈａｎｇｅ）、エンドトキシン吸着療法（ＰＭＸ）が挙げられると記載されている。
【０００８】
多臓器不全に対するＣＨＦ／ＣＨＤＦの最大の利点は、中分子量領域および一部低分子量タンパク領域の物質除去といった本来の意義の他に、水分・電解質・酸塩基平衡の管理のしやすさが挙げられる。重症病態ほど投与薬剤が増え、十分な栄養投与が必要となるが、ＣＨＦ／ＣＨＤＦを導入することによって安全に水分管理を行うことが可能となる。ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒの除去に関するＣＨＦ／ＣＨＤＦの効果には、未だ一定の見解は得られていないが、サイトカインに関しては有効な除去は行い得ないという説が支持されつつある。但し、現在未測定の物質がＣＨＦ／ＣＨＤＦによって除去され、循環動態や酸素化の改善効果に寄与している可能性も否定できないとしている。
【０００９】
急性肝不全に対して施行されてきた血漿交換がエンドトキシンやサイトカインの除去に対して有用であるとの報告もみられるが、クリアランスは低いため、短時間の血漿交換（ＩＰＥ）では分布容量の大きなｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒの除去には大きな期待はできない。血漿交換の施行時間を長くすることや（ＣＰＥ）、アルブミンに結合した毒素の除去を目的に透析液にアルブミンを添加するＣｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  Ａｌｂｕｍｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＣＡＰＳ）等の工夫も行われている。
【００１０】
しかし、上記のＣＨＦ／ＣＨＤＦとＩＰＥ／ＣＰＥは、量的には少なくても複雑なサイトカインネットワークに関与するｍｅｄｉａｔｏｒすべてを除去しようとするコンセプトであるため、多臓器不全に対するサイトカインのモノクローナル抗体投与とは異なった機序による有効性も考えられている。
【００１１】
一方、ＰＭＸはグラム陰性桿菌の敗血症性ショックに保険適用があり、特に発症後早期（ｈｙｐｅｒｄｙｎａｍｉｃ  ｓｔａｔｅ時）で、感染巣に対する処置後の改善に有用であるとの報告がある。また、エンドトキシンはグラム陽性菌の毒性（ＴＳＳＴ−１）を増強する作用もあることから、グラム陽性菌感染症症例に対する効果も期待されている、しかし、エンドトキシンの測定法が確立されていないこと、エンドトキシン除去のメカニズムでは説明のできない早期の昇圧効果が見られること等不明な点も多い。
【００１２】
エンドトキシンショックに関する知見としては、ＬＰＳ／ＬＢＰ複合体がＣＤ１４／ＴＬＲ４と結合し、シグナルが細胞内に伝達されることによって、サイトカインが放出されるが、このサイトカイン放出前に細胞膜で放出されるｅａｒｌｙ  ｍｅｄｉａｔｏｒである内因性大麻（ｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄ：マクロファージからａｎａｎｄａｍｉｄｅ（ＡＮＡ）、血小板から２−ａｒａｃｈｉｄｏｎｙｌ  ｇｌｙｃｅｒｉｄｅ（２−ＡＧ）の２種類）とサイトカイン放出後にマクロファージの核内から放出されるｌａｔｅ  ｍｅｄｉａｔｏｒであるｈｉｇｈ  ｍｏｂｉｌｉｔｙ  ｇｒｏｕｐ−１（ＨＭＧＢ−１）  ｐｒｏｔｅｉｎといった２つのｍｅｄｉａｔｏｒが発見された。ＡＮＡはＣＢ１、ＣＢ２受容体を介して、血圧低下や精神神経症状を呈する。一方、ＨＮＧＢ−１  ｐｒｏｔｅｉｎは自身は致死性で、血清ＨＭＧＢ−１  ｐｒｏｔｅｉｎ濃度は敗血症生存群に比べ死亡群で優位に高いことが報告されている。ｃａｎｎａｂｉｎｏｉｄは、ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｉｃ  ａｃｉｄやａｒａｃｈｉｄｏｎｉｃ  ａｃｉｄから生成される代謝産物で、分子量はわずか数百ダルトンであるが、ＨＭＧＢ−１  ｐｒｏｔｅｉｎの分子量は３０ｋＤである。ＡＮＡは、ｐｏｌｙｍｉｘｉｎ−Ｂを介してＰＭＸに吸着されることが報告されている。
【００１３】
また、非特許文献２では、心大血管術後の血液浄化法として、急性腎不全（ＡＲＦ）、急性肝不全、敗血症性ショックに対して、ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒをも考慮したＣＨＤＦ、ＣＰＥ、ＰＭＸ治療が行われている。ＡＲＦを対象にしたＣＨＤＦによる治療成績は、原因病態別予後では、低心拍出量症候群（ＬＯＳ）の死亡率が７５％、敗血症の死亡率が８３％と高く、急性肝不全を対象に、ＣＨＤＦとＩＰＥ、ＣＨＤＦとＣＰＥとの併用療法を比較したところ、生命予後の改善が得られるようになってきたが、敗血症に伴う急性肝不全の予後は依然として不良であったとしている。また、心大血管術後の敗血症の原因である肺炎や縦隔洞炎に起因する胸部感染巣群に対して敗血症性ショックとＰＭＸ治療との関係を検討したところ、やはり予後が不良であったとしている。
【００１４】
また、非特許文献３〜６では、敗血症や敗血症性多臓器不全に対して、各種膜素材によるＣＨＦやＣＨＤＦによる施行の試みが行われている。
【００１５】
非特許文献３では、著者らは、Ｐｏｌｙａｃｒｙｌｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＰＡＮ）膜を用いたＣＨＦを敗血症性多臓器不全１０例に行い濾液側および血液側それぞれの炎症性サイトカインであるＩＬ−６、ＩＬ−８、及び抗炎症性サイトカインであるＩＬ−１０のクリアランスを算出して検討している。その結果、８００〜１０００［ｍＬ／時］の濾過量ではＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０の濾液から求めたクリアランスはそれぞれ１１．９±０．６、８．１±１．９、２．２±０．５［ｍＬ／分］であり、内因性クリアランスに比べると比較にならない程少なかったとしている。また、ｐｏｌｙｍｅｔｈｙｌ  ｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ（ＰＭＭＡ）膜は他の膜に比較して吸着能が高くＰＭＭＡ膜を用いたＣＨＤＦでのサイトカインの除去は有効であるとされているが、著者らは、敗血症多臓器不全９例で検討したところ吸着によるクリアランスの高々１０［ｍＬ／分］程度で有意な差はなかったと報告している。
【００１６】
非特許文献４には、ＰＭＭＡ膜によるＣＨＤＦが、重症敗血症、敗血症性ショックやＡＲＤＳ等のような高ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｅａｔｏｒ血症に対して有効であると記載されている。
【００１７】
非特許文献５には、周術期におけるＣＨＤＦ／ＣＨＤの施行について記載されている。
【００１８】
非特許文献６には、ＰＭＭＡ膜によるＣＨＤＦの施行時において、各種ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒの除去について記載されている。
【００１９】
また、非特許文献７〜９では、敗血症患者及びＳＩＲＳモデルラットにおける血液中のサイトカイン・ケモカイン類が検討されている。
【００２０】
非特許文献７には、腹膜炎と診断された敗血症手術２５症例を対象として、術前、術後にヘパリン加全血採血を行い、遠心分離した血漿を−８０℃にて凍結保存後、サスペンジョンアレイシステムであるＣｙｔｏｋｉｎｅ  １７−ｐｌｅｘ  ｐａｎｅｌＴＭ（米国、ＢＩＯ−ＲＡＤ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）をもちい血漿３０μｌで各種サイトカイン・ケモカイン類が測定されている。具体的には、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１βの項目が測定されている。
【００２１】
また、４名の健常人の血清中のサイトカイン類についても測定されており、その結果、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−４，ＩＬ−５，ＩＬ−７、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２は低値であった（グラフから読み取れる数値は、せいぜい１０［ｐｇ／ｍＬ］以下）。一方、ＩＬ−６、ｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ  ｃｈｅｍｏｔａｃｉｃ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１（ＭＣＰ−１）、ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１（ＭＩＰ−１β）は高値であり、グラフから読み取れるそれぞれのｍａｘの値は、約１００［ｐｇ／ｍＬ］、約３００［ｐｇ／ｍＬ］、約１００［ｐｇ／ｍＬ］であったことが記載されている。
【００２２】
非特許文献８には、ＩＣＵに入ってから２４時間以内に重症敗血症又は敗血症性ショックとなった２９名の患者に対して、１７種類のサイトカイン・ケモカイン類をＣｙｔｏｋｉｎｅ  １７−ｐｌｅｘ  ｐａｎｅｌＴＭ（米国、ＢＩＯ−ＲＡＤ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）を用いて測定したという報告がある。具体的には、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７、Ｇ−ＣＳＦ、ＣＭ−ＣＳＦ、ＩＦＮ−γ、ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１βの項目が測定されている。その結果、死亡した患者のＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０及びＭＣＰ−１の値は、生存した患者に比べて高値であり、なかでも、死亡した患者のＩＬ−１０値は、生存した患者の値に比べて極めて高かったことが記載されている。
【００２３】
非特許文献９には、ＬＰＳを投与して６時間後に、全身性炎症を起こしたモデルラットに、ポリスルホン膜からなる小膜面積のダイアライザーを用いてＣＨＦ／ＣＨＤＦによる血液浄化法を行うと、ＬＰＳを投与した後に何もしなかったコントロール群に比較して、ＣＨＤＦ群＞ＣＨＦ群＞コントロール群の順に生存率が向上することが報告されている。
【００２４】
また、非特許文献１０〜２０及び特許文献１〜３には、ビタミンＥ誘導体やリポ酸誘導体の抗酸化能や抗炎症作用について記載されている。
【００２５】
非特許文献１０には、ビタミンＥの誘導体であるＥＴＳ−ＧＳ（γ−Ｌ−ｇｌｕｔａｍｙｌ−Ｓ−［２−［［［３，４−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，５，７，８−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ−２−（４，８，１２−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｔｒｉ−ｄｅｃｙｌ）−２Ｈ−１−ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ−６−ｙｌ］ｏｘｙ］ｃａｒｂｏｎｙｌ］−３−ｏｘｏ−３−［（２−ｓｕｌｆｏｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ］ｐｒｏｐｙｌ］−Ｌ−ｃｙｓｔｅｉｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｄｉｕｍ  ｓａｌｔ）を虚血再灌流時の腎障害（ＡＫＩ）モデルラットに静注（静脈投与）すると、投与していないコントロールラット群に比べて、生存率が向上することを報告している。その理由としては、虚血再灌流時に腎臓から血清中に産生されるＮＯがＥＴＳ−ＧＳによって抑制され、また、ＥＴＳ−ＧＳ投与された腎臓中のＭＤＡ（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ）のレベルは、ＥＴＳ−ＧＳで処理されていないものに比べて極めて低いことが記載されている。また、ＲＡＷ２６４．７細胞を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏの実験において、ＥＴＳ−ＧＳで処理された細胞は、活性酸素のレベルを低減させることから、ＥＴＳ−ＧＳは、新しい抗酸化物質であり、虚血再灌流時の障害を軽減する薬剤になりうることが記載されている。
【００２６】
非特許文献１１には、リポポリサッカライドで誘導されたラットの肺や肝臓の急性障害に対して、ビタミンＥの誘導体であるＥＴＳ−ＧＳを投与すると、肺組織の浮腫や白血球の浸潤が低減され、また、肝臓組織の出血や白血球の浸潤が低減されることが報告されている。また、リポポリサッカライド投与後のＴＮＦ−α、ＩＬ−６、ＮＯｘの産生も追跡しているが、ＥＴＳ−ＧＳで処理されたラットでは、その産生が抑制されていることから、ＥＴＳ−ＧＳがこれまでにない新しい抗酸化物質であり、リポポリサッカライドで誘導された炎症反応をブロックし、エンドトキシンが関与する急性肺障害、急性肝障害に対しても防御するということを報告している。そして、ＥＴＳ−ＧＳは、敗血症のための潜在的な治療薬になりうることが記載されている。
【００２７】
非特許文献１２には、ビタミンＥの誘導体であるＥＴＳ−ＧＳが、虚血再灌流時の肝臓障害モデルラットに投与すると、肝臓組織の変化（肝臓細胞の壊死や溶血等）、肝臓からの酵素（ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＬＤＨ）やＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＨＭＧＢ１の産生が、投与しないものに比べて少ないことが記載されており、ＥＴＳ−ＧＳが、虚血再灌流時の肝臓障害に対する治療薬となりうることが報告されている。
【００２８】
非特許文献１３には、ビタミンＥの誘導体であるＥＴＳ−ＧＳが、腸結紮穿刺によって誘導された敗血症由来の全身性炎症が誘発されたモデルラットに経口投与すると、肺組織の変化（肺細胞の壊死や溶血等）や血中のＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＨＭＧＢ１の産生が、投与しないものに比べて少ないことが記載されており、ＥＴＳ−ＧＳは、敗血症のための潜在的な治療薬になりうることが記載されている。
【００２９】
非特許文献１４には、ビタミンＥの誘導体であるＥ−Ａｎｔ−Ｓ−ＧＳ（ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ，ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ，５−ＯＨ−ａｎｔｈｒａｎｉｌｉｃ  ａｃｉｄ，ｓｕｃｃｉｎｉｃ  ａｃｉｄが化学結合した化合物）が、腸結紮穿刺によって全身性炎症である敗血症を起こし、肺障害が誘発されたモデルラットに静注（静脈投与）すると、投与していないラットに比べて、血中のＩＬ−６産生が抑制され、また、肺組織の炎症度合いも低く、肺組織内のＭＰＯ活性も抑制されていることが記載されている。したがって、Ｅ−Ａｎｔ−Ｓ−ＧＳが、抗炎症作用を持つ物質であり、全身性炎症に対する治療薬になることが示唆されている。
【００３０】
非特許文献１５には、ビタミンＥの誘導体（ａｎｔｈｒａｎｉｌｉｃ  ａｃｉｄの誘導体）であるＥＡｎｔＳ−ＧＳ（ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ，ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ，５−ＯＨ−ａｎｔｈｒａｎｉｌｉｃ  ａｃｉｄ，ｓｕｃｃｉｎｉｃ  ａｃｉｄが化学結合した化合物）が、フロインド完全アジュバントで誘導された急性疼痛のモデルラットに皮下投与すると、投与していないラットに比べて、疼痛の低減やｍｙｅｌｏｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ、ｉＮＯＳ、ＰＡＲ２のレベルを低減させるため、ＥＡｎｔＳ−ＧＳが、急性疼痛や慢性疼痛に対する新しい治療ツールとして考慮すべきであると報告している。
【００３１】
非特許文献１６には、ビタミンＥの誘導体であるＥＳｅｒｏＳ−ＧＳ（γ−Ｌ−ｇｌｕｔａｍｙｌ−Ｓ−［２−［［［３，４−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，５，７，８−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ−２−（４，８，１２−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｔｒｉｄｅｃｙｌ）−２Ｈ−１−ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ−６−ｙｌ］ｏｘｙ］ｃａｒｂｏｎｙｌ］−３−［［２−（１Ｈ−ｉｎｄｏｌ−３−ｙｌ）ｅｔｈｙｌ］ａｍｉｎｏ］−３ｏｘｏｐｒｏｐｙｌ］−Ｌ−ｃｙｓｔｅｉｎｙｌ−ｇｌｙｃｉｎｅ  ｓｏｄｉｕｍ  ｓａｌｔ）が、新しい抗酸化剤であり、虚血再灌流時の腎障害モデルラットに静注（静脈投与）すると、投与していないラットに比べて、ＢＵＮやクレアチニンの値が改善され、腎組織の障害度合いや腎組織中のＭＰＯの値も低減し、さらには、血中のＩＬ−６やＴＮＦ−αの産生が抑制されることを報告している。したがって、ＥＳｅｒｏＳ−ＧＳが、種々のヒトの虚血再灌流による障害に対して治療効果があると示唆されるとしている。
【００３２】
非特許文献１７には、ビタミンＥの誘導体であるＥＰＣ−Ｋ１（Ｌ−ａｓｃｏｒｂｉｃ  ａｃｉｄ  ［２−［３，４−ｄｉｈｙｄｒｏ−２，５，７，８−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ−２−（４，８，１２−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｔｒｉｄｅｃｙｌ）−２Ｈ−１−ｂｅｎｚｏｐｙｒａｎ−６−ｙｌ−ｈｙｄｒｏｇｅｎ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ］ｐｏｔａｓｓｉｕｍ  ｓａｌｔ）が、新しい抗酸化剤であり、肝臓の虚血再灌流時の障害モデルラットに皮下投与すると、投与していないラットに比べて、肝機能障害の程度を示す酵素であるＡＳＴ，ＡＬＴやＬＤＨの活性が抑制され、また、血中のＩＬ−６、ＴＮＦ−α、ＨＭＧＢ１の産生が抑制され、さらに、肝臓組織細胞のアポトーシスを防御することが報告されている。すなわち、ＥＰＣ−Ｋ１が、肝臓の虚血再灌流時における障害に対して、抗炎症作用を持つ物質であり、アポトーシスを防ぐということから、新しい治療薬になることが示唆されている。
【００３３】
特許文献１には、肝障害抑制剤、抗白内障剤、脳代謝改善剤、抗酸化剤、及び化粧品成分として有用なビタミンＥを骨格とする種々の化合物に関する合成法や薬剤としての用途が開示されている。
【００３４】
特許文献２には、ビタミンＥを骨格とする種々の化合物における抗サイトカイン介在疾患剤が開示されている。
【００３５】
非特許文献１８には、リポ酸の誘導体であるＤＨＬＨＺｎ（ｓｏｄｉｕｍ  Ｚｉｎｃ  ｄｉｈｙｄｒｏｌｉｐｏｙｌｈｉｓｔｉｄｉｎａｔｅ）が、新しい抗酸化剤であり、心臓の虚血再灌流時の障害モデルラットに投与すると、投与していないラットに比べて、心筋機能の障害や心筋細胞のミトコンドリア機能障害が投与量に依存して抑制されることを報告している。したがって、ＤＨＬＨＺｎは、心臓の虚血再灌流時の障害に対する治療に使用できることが示唆されるとしている。
【００３６】
非特許文献１９には、リポ酸の誘導体であるＤＨＬＨＺｎ（ｓｏｄｉｕｍ  Ｚｉｎｃ  ｄｉｈｙｄｒｏｌｉｐｏｙｌｈｉｓｔｉｄｉｎａｔｅ）が、新しい抗酸化剤であり、腎臓の虚血再灌流時の障害モデルラットに静脈投与すると、投与していないラットに比べて、ＢＵＮやクレアチニンの値が改善され、腎組織の障害度合いや腎組織中のＭＤＡの値も低減されることを報告している。したがって、ＤＨＬＨＺｎが、種々のヒトの虚血再灌流による障害に対して治療効果があると示唆されるとしている。
【００３７】
特許文献３には、α−リポ酸がミトコンドリアに存在する補酵素で、抗酸化能を有し、酸化ストレスによる種々の病態の治療、例えば動脈硬化症および白内障の治療薬として知られていること、新規のα−リポイルアミノ酸の還元体（ジハイドロ体）の金属キレート化合物及びそれらの薬理学的に許容される塩の合成に成功し、これらの化合物がチロシナーゼ阻害作用、メラニン産生抑制作用及びエラスターゼ阻害作用を有することが記載されており、これらが、抗しわ剤や美肌剤として有効であることが記載されている。
【００３８】
非特許文献２０には、ビタミンＥとリポ酸が結合した化合物であるリポイルビタミンＥが、新しい抗酸化剤であり、ＬＰＳを投与して、全身性炎症を起こしたモデルラットに経口投与すると、投与していないラットやビタミンＥ投与のラットに比べて、血清サイトカインの顕著な減少、肺や肝臓の組織障害の軽減が認められたことを報告している。したがって、リポイルビタミンＥは、ビタミンＥよりも強力な抗炎症作用を示すことから、急性肺障害を含めた呼吸器疾患に対する、新しい予防、治療薬としての可能性が示唆されたとしている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００３９】
【特許文献１】ＷＯ９９／３３８１８号公報
【特許文献２】特許公開２０１１−１５３１３９号公報
【特許文献３】ＷＯ２００２／０７６９３５号公報
【非特許文献】
【００４０】
【非特許文献１】奈良  理、今泉  均、浅井康文、「多臓器不全の血液浄化」、腎と透析、Ｖｏｌ．４８、Ｎｏ．５（２０００）、ｐ．６５３−６５９
【非特許文献２】今泉  均、金子正光、「循環器術後合併症に対するアフェレシス」、日本アフェレシス学会雑誌、１８巻、１号（１９９９）、ｐ．６２−６６
【非特許文献３】中  敏夫、篠崎正博、森永俊彦、那須英紀、乾  晃造、阿部富彌、「持続血液濾過（ＣＨＦ）・持続血液濾過透析（ＣＨＤＦ）によるサイトカインの除去―その機序および効果について―」、日本アフェレシス学会雑誌、１８巻、１号（１９９９）、ｐ．４８−５２
【非特許文献４】松田兼一、平澤博之、織田成人、志賀英敏、中西加寿也、仲村将高、「持続的血液濾過透析（ＣＨＤＦ）のＮｏｎ−Ｒｅｎａｌ  Ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ」、医工学治療、Ｖｏｌ．１４、Ｎｏ．２（２００２）、ｐ．１０７−１１４
【非特許文献５】松田兼一、平澤博之、志賀英敏、仲村将高、「周術期のＣＨＤＦ」、集中治療、ｖｏｌ．１０、ｎｏ．１１（１９９８）、ｐ．１２１７−１２２７
【非特許文献６】松田兼一、平澤博之、志賀英敏、仲村将高、「ＣＨＤＦによるｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒの除去」、集中治療、ｖｏｌ．１０、ｎｏ．１２（１９９８）、ｐ．１３４１−１３５５
【非特許文献７】箱崎将規、佐藤信博、小鹿雅博、小川雅彰、高橋  学、鈴木  泰、前沢千早、若林  剛、「敗血症における血中サイトカイン・ケモカイン多項目同時定量―サスペンションアレイシステムを用いた検討―」、岩手医誌、５９巻、２号（平成１９年６月）、ｐ．１２７−１３８
【非特許文献８】Ｄａｖｉｄ  Ａｎｄａｕｌｕｚ−Ｏｊｅｄａ，Ｆｅｌｉｐｅ  Ｂｏｂｉｌｌｏ，Ｖｅｒｏｎｉｃａ  Ｉｇｌｅｓｉａｓ，Ｒａｑｕｅｌ  Ａｌｍａｎｓａ，Ｌｕｃｉａ  Ｒｉｃｏ，Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ  Ｇａｎｄｉａ，Ｓａｖａｄｏｒ  Ｒｅｓｉｎｏ，Ｅｄｕａｒｄｏ  Ｔａｍａｙｏ，Ｒａｕｌ  Ｏｒｔｉｚ  ｄｅ  Ｌｅｊａｒａｚｕ，Ｊｅｓｕｓ  Ｆ．Ｂｅｒｍｅｊｏ−Ｍａｒｔｉｎ，「Ａ  ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｓｃｏｒｅ  ｏｆ  ｐｒｏ−  ａｎｄ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｉｋｉｎｓ  ｉｍｍｐｒｏｖｅｓ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｓｅｖｅｒｅ  ｓｅｐｓｉｓ」、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ５７（２０１２）、ｐ．３３２−３３６
【非特許文献９】Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｈｉｄｅｏ  Ｉｗａｓａｋａ，Ａｋｉｒａ  Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｓｅｉｇｏ  Ｈｉｄａｋａ，Ａｙａ  Ｕｎｏ，Ｋａｏｒｉ  Ｕｅｎｏ，Ｔｏｍｏｈｉｓａ  Ｕｃｈｉｄａ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  Ｈｅｍｏｄｉａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ  ＬＰＳ−ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ａ  Ｒａｔ  Ｍｏｄｅｌ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．１７１．Ｎｏ．２，ｐ．７９１−７９６（２０１１）
【非特許文献１０】Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，  Ｈｉｒｏｎｏｒｉ  Ｋｏｇａ，Ｈｉｄｅｏ  Ｉｗａｓａｋａ，Ｋｙｏｓｕｋｅ  Ｋｕｄｏ，Ａｋｉｒａ  Ｈａｓｅｇａｗａ，Ｊｙｕｎｙａ  Ｋｕｓａｋａ，Ｉｓａｏ  Ｙｏｋｏｉ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「ＥＴＳ−ＧＳ，  ａ  Ｎｅｗ  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ，  Ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ  Ｒｅｎａｌ  Ｉｓｃｈｅｍｉａ−Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  ａ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｍｏｄｅｌ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７１，ｐ．２２６−２３３（２０１１）
【非特許文献１１】Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，  Ｈｉｒｏｎｏｒｉ  Ｋｏｇａ，Ｈｉｄｅｏ  Ｉｗａｓａｋａ，Ｊｙｕｎｙａ  Ｋｕｓａｋａ，Ｔｏｍｏｈｉｓａ  Ｕｃｈｉｄａ，Ｋｏｊｉ  Ｇｏｔｏ，Ｉｓａｏ  Ｙｏｋｏｉ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「ＥＴＳ−ＧＳ，  ａ  Ｎｅｗ  Ａｎｔｉ−ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  Ｄｒｕｇ，Ｐｒｏｔｅｃｔｓ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｃｕｔｅ  Ｌｕｎｇ  ａｎｄ  Ｌｉｖｅｒ  Ｉｎｊｕｒｙ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７１，ｐ．７３４−７４１（２０１１）
【非特許文献１２】Ｈｉｒｏｎｏｒｉ  Ｋｏｇａ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｍａｓａｆｕｍｉ  Ｉｎｏｍａｔａ，Ｊｙｕｎｙａ  Ｋｕｓａｋａ，Ｎｏｂｕｈｉｋｏ  Ａｓａｉ，Ｍａｓａｙｏｓｈｉ  Ｏｙａｍａ，Ｋａｎａｋｏ  Ｋｉｔａ，Ｋｅｎｊｉ  Ｋａｓｈｉｍａ，Ｉｓａｏ  Ｙｏｋｏｉ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ  ＥＴＳ−ＧＳ  Ｒｅｄｕｃｅｓ  Ｌｉｖｅｒ  Ｉｓｃｈｅｍｉａ−Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  Ｒａｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７５，ｐ．１１８−１２２（２０１２）
【非特許文献１３】Ｈｉｒｏｎｏｒｉ  Ｋｏｇａ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｍａｓａｆｕｍｉ  Ｉｎｏｍａｔａ，Ｙｏｕｈｅｉ  Ｋｏｎｏ，Ｙｏｓｈｉｍａｓａ  Ｏｙａｍａ，Ｓｈｉｎｙａ  Ｋａｉ，Ｔａｉｃｈｉ  Ｎｉｓｈｉｄａ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，ＥＴＳ−ＧＳ，Ｐｒｏｔｅｃｔｓ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｃｅｃａｌ  Ｌｉｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｕｎｃｔｕｒｅ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｒａｔｓ」，Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．２，ｐ．５４５−５５３，Ａｐｒｉｌ（２０１２）
【非特許文献１４】Ｙｏｕｈｅｉ  Ｋｏｎｏ，Ｍａｓａｆｕｍｉ  Ｉｎｏｍａｔａ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｎｏｒｉｏ  Ｓｈｉｒａｉｓｈｉ，Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，ａｎｄ  Ｓｅｉｇｏ  Ｋｉｔａｎｏ，「Ａ  ｎｅｗｌｙ  ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，Ｅ−Ａｎｔ−Ｓ−ＧＳ，ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｌｕｎｇ  ｉｎｊｕｒｙ  ｃａｕｓｅｄ  ｂｙ  ｃｅｃａｌ  ｌｉｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｐｕｎｃｔｕｒｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｅｐｓｉｓ  ｉｎ  ｒａｔｓ」，Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｖｏｌ．１５１，Ｎｏ．３，ｐ．４２０−４２６，Ｍａｒｃｈ（２０１２）
【非特許文献１５】Ｋｅｎｔａｒｏ  Ｏｋｕｄａ，Ｎａｏｚｕｍｉ  Ｔａｋｅｓｈｉｍａ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｊｕｎｊｉ  Ｔａｋａｔａｎｉ，Ｔｅｔｓｕｙａ  Ｕｃｈｉｎｏ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｎｅｗ  Ａｎｔｈｒａｎｉｌｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，ＥＡｎｔＳ−ＧＳ，Ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  Ｆｒｅｕｎｄ‘ｓ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ａｄｊｕｖａｎｔ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｃｕｔｅ  Ｐａｉｎ  ｉｎ  Ｒａｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７５，ｐ．２６５−２７０（２０１２）
【非特許文献１６】Ｈｉｒｏｎｏｒｉ  Ｋｏｇａ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｈｉｄｅｔｏ  Ｍｅｉ，Ｎｏｚｏｍｉ  Ｈｉｒａｏｋａ，Ｊｙｕｎｙａ  Ｋｕｓａｋａ，Ｋｏｊｉ  Ｇｏｔｏ，Ｋｅｎｊｉ  Ｋａｓｈｉｍａ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，ＥＳｅｒｏＳ−ＧＳ，Ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  Ｒｅｎａｌ  Ｉｓｃｈｅｍｉａ−Ｒｅｐｕｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  Ｒａｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｐ．１−６（２０１２；ｉｎ  ｐｒｅｓｓ）
【非特許文献１７】Ｋａｚｕｓｈｉｇｅ  Ｏｉｓｈｉ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｓａｔｏｋｏ  Ｋｏｇａ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｋａｗａｂｅ，Ｔａｋａｈｉｒｏ  Ｕｎｏ，Ｈｉｄｅｏ  Ｉｗａｓａｋａ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｔｈｅ  Ｖｉｔａｍｉｎ  Ｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，ＥＰＣ−Ｋ１，Ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  Ｄｕｒｉｎｇ  Ｈｅｐａｔｉｃ  Ｉｓｃｈｅｍｉａ−Ｒｅｐｕｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  ａｎｄ  Ｅｘｅｒｔｓ  Ｈｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  Ｒａｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｐ．１−７（２０１２；ｉｎ  ｐｒｅｓｓ）
【非特許文献１８】Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｙａｓｕｓｈｉ  Ｔｅｓｈｉｍａ，Ｎａｏｈｉｋｏ  Ｔａｋａｈａｓｈｉ，Ｈｉｒｏｎｏｒｉ  Ｋｏｇａ，Ｔｅｔｓｕｎｏｒｉ  Ｓａｉｋａｗａ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｎｅｗ  Ｌｉｐｏｉｃ  ａｃｉｄ  ｄｅｒｉｂａｔｉｖｅ  ｄｒｕｇ  ｓｏｄｉｕｍ  ｚｉｎｃ  ｄｉｈｙｄｒｏｌｉｐｏｙｌｈｉｓｔｉｄｉｎａｔｅ  ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｃａｒｄｉａｃ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ａｎ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｐｅｒｆｕｓｅｄ  ｒａｔ  ｈｅａｒｔ  ｍｏｄｅｌ」，Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ，Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．３，ｐ．５０６−５１１，（２０１１）
【非特許文献１９】Ｈｉｒｏｎｏｒｉ  Ｋｏｇａ，Ｓａｔｏｓｈｉ  Ｈａｇｉｗａｒａ，Ｊｙｕｎｙａ  Ｋｕｓａｋａ，Ｋｏｊｉ  Ｇｏｔｏ，Ｔｅｔｓｕｙａ  Ｕｃｈｉｎｏ，Ｃｈｉｈｉｒｏ  Ｓｈｉｎｇｕ，  Ｓｈｉｎｙａ  Ｋａｉ，ａｎｄ  Ｔａｋａｙｕｋｉ  Ｎｏｇｕｃｈｉ，「Ｎｅｗ  α−Ｌｉｐｏｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ，ＤＨＬ−ＨｉｓＺｎ，Ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓ  Ｒｅｎａｌ  Ｉｓｃｈｅｍｉａ−Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ  Ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  Ｒａｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７４，ｐ．３５２−３５８（２０１２）
【非特許文献２０】古賀寛教、萩原  聡、山本俊介、野口隆之、「Ｐ２−２  新規抗酸化物質リポイルビタミンＥのラットＬＰＳモデルにおける抗炎症作用の検討」、日本呼吸療法医学会学術総会プログラム・抄録集、３３巻、ｐ１６５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００４１】
本邦では、１９９０年日本救命医療研究会が血液凝固系を含めた７臓器ないしは系を対象に、広義のＭＯＦ（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｏｒｇａｎ  ｆａｉｌｕｒｅ）と狭義のＭＯＦを定義し、１９９８年からスコア化のための議論がなされてきた。しかしながら、いずれのスコアにおいても、ＳＩＲＳをひきおこすサイトカインを中心とした各種ｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒについては、言及されていない。したがって、血中のどのサイトカインがどの程度あるときに、どのような治療をすればよいのか、明確ではなかった。
【００４２】
また、非特許文献１や２に記載された血液浄化法は、多臓器不全を含むＳＩＲＳに対する集学的治療法として、極めて重要な位置を占めつつあるが、残念ながら、未だに、完全な治療法といえるまでにはなっていないのが現状である。その理由としては、（ｉ）血液浄化法では、血液を一旦、体外に出し血液濾過、濾過透析や吸着を行うことから、血液（血球と血漿）成分が、異物であるデバイス材料との接触を避けることは難しく、より生体適合性の高い（ＳＩＲＳ治療に適した）素材でできた適切なデバイスでないこと、（ｉｉ）患者の血液状態（サイトカイン類の濃度）が治療に適した状態で処置されていない、すなわち、血液中のサイトカイン・ケモカイン類の適正な濃度領域での治療処置が施されていないためであると考えられる。
【００４３】
ところで、サイトカインは炎症局所で免疫担当細胞の細胞表面受容体に結合するほか、一旦血中に入るとα２マクログロブリンや可溶性受容体との結合により免疫複合体となり不活化される。血液中のサイトカインの半減期は５〜１０分と極めて短く、例えばＩＬ−６は３〜７分、ＴＮＦ−αは５〜１０分であるといわれている。血中に入ったサイトカインは指数関数的に低下するが、ＳＩＲＳにおいてサイトカインが高値を示し続けているのは炎症局所においてめまぐるしく産生され続けられているためと考えられている。例えば、体重６０Ｋｇの成人の循環血液量を約４６００ｍＬとした場合、サイトカインが５〜１０分で半減するとなると、５〜１０分で４６００ｍＬの半分つまり２３００ｍＬ中のサイトカインが除去されることになり生体がもつサイトカインの内因性クリアランスは２３０〜４６０［ｍＬ／分］ということになる。したがって、上述したようにＣＨＦ／ＣＨＤＦによるクリアランスは高々１０［ｍＬ／分］であるので、サイトカインのクリアランスは、そのほとんどが生体内の消去機構により除去されていることになる。すなわち、これまでの単なるＣＨＦ／ＣＨＤＦによるサイトカインの除去による効果のみでは、ＳＩＲＳや多臓器不全の治療は難しいことがわかる。
【００４４】
上述したように、非特許文献３〜６では、敗血症や敗血症性多臓器不全に対して、各種膜素材によるＣＨＦやＣＨＤＦによる施行の試みが行われている。
【００４５】
しかしながら、非特許文献３では、サイトカイン類としては、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０しか測定されておらず、患者が感染してからの時間や治療のタイミング、治療した時点のサイトカイン・ケモカイン類の濃度等の血液状態については、一切、触れられていない。
【００４６】
また、非特許文献４では、血中のＩＬ−６のクリアランスの結果を示しているが、せいぜい２０［ｍＬ／分］程度であり、上述したようにＰＭＭＡ膜によるＩＬ−６の除去だけでは、治療の有効性については十分な説明は全くできない。さらに、血中のＩＬ−６の濃度が１００［ｐｇ／ｍＬ］以上の高値症例に対して、ＰＭＭＡ膜、ＣＴＡ（ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ｔｒｉ  ａｃｅｔａｔｅ）膜、ＰＥＰＡ膜、ＥＶＡＬ膜、ＰＡＮ膜、ＰＳ膜によるＣＨＤＦの３日間施行によって、ＩＬ−６の濃度が下がるとの結果が開示されている。しかしながら、実際にこれらの膜によるＣＨＤＦが行われた症例のＩＬ−６以外のサイトカイン・ケモカイン類の血中濃度がどの程度であったか等、その正確な治療のタイミングや、それらの治療効果がどの程度であったかについては、言及されていていない。
【００４７】
非特許文献５には、ＰＭＭＡ膜やＥＶＡＬ膜を用いた施行例が開示されており、ＥＶＡＬ−ＣＨＤが、ＳＩＲＳの範疇に入る敗血症性ショックの症例に施行された例も含まれている。しかしながら、施行のタイミングや、施行時の血中のサイトカイン・ケモカイン類の血中濃度がどの程度であったかは記載されておらず、その症例の転帰は死に至っている。
【００４８】
非特許文献６では、ＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８、Ｃ３ａ、過酸化脂質、ＩＩ型ＰＬＡ２、顆粒球エラスターゼの血中濃度とそれらのクリアランスについてのデータが開示されている。しかしながら、対象となった患者の原疾患や上述のｈｕｍｏｒａｌ  ｍｅｄｉａｔｏｒ以外のサイトカイン・ケモカイン類については、触れられていない。また、ＰＭＭＡ膜のＣＨＤＦによる治療効果についても一切触れられていない。また、非特許文献６には、ＰＡＮ膜によるＣＨＤＦの施行時のＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８の除去について、その血中濃度とクリアランスの関係を示すデータも開示されている。しかしながら、これについても、ＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８以外のサイトカイン・ケモカイン類については、触れられておらず、また、ＰＡＮ膜のＣＨＤＦによる治療効果についても一切触れられていない。また、非特許文献６には、ＥＶＡＬ膜のＣＨＤによる施行時のＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８の除去について、その血中濃度とクリアランスの関係を示すデータも開示されているが、やはり、ＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８以外のサイトカイン・ケモカイン類については、触れられておらず、また、ＥＶＡＬ膜のＣＨＤによる治療効果についても一切触れられていない。
【００４９】
一方、ＰＭＭＡ膜によるＣＨＤＦをＭＯＦ患者に対して３日間施行した際のＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８、Ｃ３ａ、過酸化脂質、ＩＩ型ＰＬＡ２、顆粒球エラスターゼの血中濃度変化について、それぞれの高値群と低値群とで調べられている。その結果、ＴＮＦやＩＬ−６等については、高値群では、ＣＨＦＤ施行前と施行３日後で比較すると、施行３日後のデータは、優位に低下していたことが報告されているが、低値群は、ほとんど変化がなかったとしている。また、その他の膜素材として、ＥＶＡＬ膜群とＰＡＮ膜でも施行前と施行３日後の上述したサイトカイン類のデータが検討されている。ＰＭＭＡ膜では、ＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８は低下していたが、ＥＶＡＬ膜やＰＡＮ膜では変化しなかったというデータを記載している。しかしながら、いずれにしても、これらの膜を用いた治療効果については、記載されておらず、さらには、ＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８、Ｃ３ａ、過酸化脂質、ＩＩ型ＰＬＡ２、顆粒球エラスターゼ以外のサイトカイン・ケモカイン類については、調べられておらず、ＣＨＤＦ施行の正確なタイミング等についても一切記載されていない。
【００５０】
また、上述したように、非特許文献７〜９では、敗血症患者及びＳＩＲＳモデルラットにおける血液中のサイトカイン・ケモカイン類が検討されている。
【００５１】
しかしながら、非特許文献７では、手術前に上述したサイトカイン類を測定しているものの、これらの患者に対して、ＣＨＦ／ＣＨＤＦ等のような、血液を一旦体外に出して血液処理デバイスと接触させる血液浄化法は行われていない。
【００５２】
また、非特許文献８においても、患者に対してどのような処置がなされたかとか、ＣＨＦ／ＣＨＤＦ等のような、血液を一旦体外に出して血液処理デバイスと接触させる血液浄化法が行われたか否かについて記載されていない。
【００５３】
また、非特許文献９においても、ＩＬ−６及びＴＮＦ−α以外のサイトカイン類については記載されていない。
【００５４】
また、非特許文献１０〜２０や特許文献１〜３に記載されているように、ビタミンＥ誘導体やリポ酸誘導体に関しては、薬剤としての抗酸化能や抗炎症作用についての多くの知見がある。しかしながら、これらの化合物を担体に固定化した基材や、この基材を用いた血液体外循環による血液浄化法については検討されていない。
【００５５】
このように、ＳＩＲＳを治療するための血液浄化法を行うに際して、その治療タイミングを推し量る血中の有効なサイトカイン・ケモカインの種類やその濃度に関する知見はなかった。また、血液浄化法に最適な基材やデバイスは、これまで存在しなかった。
【００５６】
このような現状に鑑み、本発明は、ＳＩＲＳに代表されるサイトカイン・ケモカイン類が介在して発症または悪化する疾患によって生じる、臓器炎症の抑制に有効な基材及びデバイスを提供することを目的とする。本発明はまた、上記の疾患によって生じる臓器炎症の治療タイミングを決定するためのサイトカイン・ケモカイン類を特定し、治療に適した血中濃度を明らかにすることを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００５７】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、ＬＰＳ投与後にＳＩＲＳの状態を示したラット（全身炎症性反応症候群モデルラット）の血液中のサイトカイン・ケモカイン類を測定し、ある特定のケモカイン類が、特定の濃度以上のラットに対して、所定の基材を用いて血液体外循環による血液浄化法を行うと、従来の透析膜や持続緩徐式血液濾過器に使用されているポリスルホン膜を使用して血液浄化法を行った場合と比較して、生存率が上がることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００５８】
上述したように、ビタミンＥ誘導体やリポ酸誘導体を投与することにより抗酸化能や抗炎症作用が奏されることが知られているが、ビタミンＥ誘導体を、臓器と直接接触させることなく、血液体外循環回路で血液と接触させることにより、臓器の炎症を抑えるという効果が得られるというのは全く意外なことである。
【００５９】
本発明は、水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持された下記式（１）で表されるビタミンＥ誘導体とを備え、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置される（接続される）基材を提供する。
【００６０】
【化１】
2014062091.tif 000002
【００６１】
式（１）中、Ｒ１〜Ｒ３はそれぞれ独立に水素又はメチル基であり、Ｒ４は下記式（２）〜（４）で表されるいずれかの基であり、下記式（３）中、Ｍは金属元素であり、下記式（４）中、Ｒ５及びＲ７はそれぞれ独立に水素及び下記式（５）〜（１０）で表される基からなる群より選択されるいずれかの基又はこれらの基のカルボキシル基がエステル化された基であり、Ｒ６は水酸基及び下記式（１１）〜（２０）で表される基からなる群より選択されるいずれかの基又はこれらの基のカルボキシル基若しくは水酸基がエステル化された基であり、下記式（１１）及び（１２）中、ｎは１〜５のいずれかの整数を示す。
【００６２】
【化２】
2014062091.tif 000003
【００６３】
このような基材を用いて血液体外循環による血液浄化法を行うことにより、ＳＩＲＳに代表されるサイトカイン・ケモカイン類が介在して発症または悪化する疾患によって生じる臓器炎症を抑制することができる。すなわち、上記の基材は臓器炎症抑制用として好適である。また、上記式（１）で表されるビタミンＥ誘導体は、血液体外循環による血液浄化法における体外での使用のための臓器炎症抑制剤として好適である。
【００６４】
上記の水不溶性担体は、ポリスルホン系ポリマーであることが好ましい。また、上記の水不溶性担体は、中空糸、粒子又は不織布であってもよく、中空糸であることが好ましい。このような水不溶性担体を使用することにより、効率よく血液浄化法を行うことができる。
【００６５】
上記の治療対象は、血液中のＧＲＯの濃度が３５００［ｐｇ／ｍＬ］以上又はＭＩＰ−１αの濃度が５１００［ｐｇ／ｍＬ］以上であることが好ましい。また、血液中のＧＲＯの濃度は１０００００［ｐｇ／ｍＬ］以下であることがより好ましく、ＭＩＰ−１αの濃度は１０００００［ｐｇ／ｍＬ］以下であることがより好ましい。すなわち、上記の基材は、血液中のＧＲＯの濃度が上記の範囲である治療対象用である。
【００６６】
上記の基材を用いた血液浄化法は、ＧＲＯ及びＭＩＰ−１αの濃度が上記の範囲である治療対象の治療効果が高い。
【００６７】
本発明はまた、血液を流入させる入口ポート及び血液を流出させる出口ポートを有する容器と、該容器に充填された上記の基材とを備えるデバイスを提供する。
【００６８】
このようなデバイスは、ＳＩＲＳに代表されるサイトカイン・ケモカイン類が介在して発症または悪化する疾患によって生じる臓器炎症を抑制する血液浄化法に好適に用いることができる。
【００６９】
本発明はまた、水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持された上記一般式（１）で表されるビタミンＥ誘導体とを備え、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置される基材を、治療対象の血液と接触させるステップを含む、臓器炎症の治療方法を提供する。
【００７０】
本発明はまた、水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持された上記一般式（１）で表されるビタミンＥ誘導体とを備え、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置される基材の、臓器炎症抑制剤としての使用を提供する。
【００７１】
本発明はまた、水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持された上記一般式（１）で表されるビタミンＥ誘導体とを備え、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置される基材からなる臓器炎症抑制剤を提供する。
【発明の効果】
【００７２】
本発明によれば、ＳＩＲＳに代表されるサイトカイン・ケモカイン類が介在して発症または悪化する疾患、特に敗血症性ショック、急性臓器障害や臓器不全、虚血再還流によって生じる臓器炎症の治療に有効な基剤及びデバイスが提供される。
【図面の簡単な説明】
【００７３】
【図１】サイトカイン・ケモカイン類の血中濃度を示すグラフである。
【図２】実施例２の肺の組織観察の結果を示す写真である。
【図３】実施例４、比較例２及び比較例４の肺の組織観察評価の結果を示すグラフである。
【図４】実施例４及び比較例２の肺組織中のＭＤＡの濃度の測定結果を示すグラフである。
【図５】実施例４及び比較例２の肝臓組織中のＭＤＡの濃度の測定結果を示すグラフである。
【図６】比較例１の肺の組織観察の結果を示す写真である。
【図７】比較例３の肺の組織観察の結果を示す写真である。
【図８】比較例５の肺の組織観察の結果を示す写真である。
【図９】デバイスの一実施形態を示す断面図である。
【図１０】デバイスの別の実施形態を示す断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００７４】
本発明は、水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持されたビタミンＥ誘導体とを備え、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置される基材を提供する。
【００７５】
（ビタミンＥ誘導体）
ビタミンＥ誘導体としては下記式（１）で表される化合物を使用することができる。
【００７６】
【化３】
2014062091.tif 000004
【００７７】
式（１）中、Ｒ１〜Ｒ３はそれぞれ独立に水素又はメチル基であり、Ｒ４は下記式（２）〜（４）で表されるいずれかの基であり、下記式（３）中、Ｍは金属元素であり、下記式（４）中、Ｒ５及びＲ７はそれぞれ独立に水素及び下記式（５）〜（１０）で表される基からなる群より選択されるいずれかの基又はこれらの基のカルボキシル基がエステル化された基であり、Ｒ６は水酸基及び下記式（１１）〜（２０）で表される基からなる群より選択されるいずれかの基又はこれらの基のカルボキシル基若しくは水酸基がエステル化された基であり、下記式（１１）及び（１２）中、ｎは１〜５のいずれかの整数を示す。
【００７８】
【化４】
2014062091.tif 000005
【００７９】
上記式（３）中、Ｍが示す金属元素は、２価の金属元素である亜鉛若しくはコバルト、２価若しくは３価の金属元素である鉄、又は４価の金属元素であるゲルマニウムであることが好ましい。なかでも、精製が容易で安定した化合物が得られることから、２価の金属元素であることが好ましく、亜鉛であることがより好ましい。
【００８０】
より具体的には、ビタミンＥ誘導体は、例えば、下記式（２１）〜（２６）のいずれかの化合物であってよい。
【００８１】
【化５】
2014062091.tif 000006
【００８２】
（担体）
水不溶性担体とは、水に不溶性の担体を意味する。水に不溶性であることにより、基材が血液に接触した際の血液中への溶出を防止することができる。
【００８３】
水不溶性担体としては、中空糸状、粒子状、不織布状、繊維状、シート状、スポンジ状等の任意の形状のものを用いることができる。
【００８４】
中空糸とは、中空繊維でストロー状の繊維壁面に目的に応じた大きさの細孔を有し、中空糸内外での物質交換が可能である中空状の膜である。中空糸膜の素材には、特に限定はなく、例えば、ポリスルホン、ポリスルホンとポリビニルピロリドンとからなる共重合体等のポリスルホン系ポリマー、エチレンビニルアルコール、ポリアクリルニトリル、ポリエチレン、再生セルロース、セルロースジアセテート、セルローストリアセテート、ポリエーテルスルホン、ポリメチルメタクリレート等が挙げられる。
【００８５】
水不溶性担体として、中空糸状のものを用いる場合には、中空糸内部に血液を流すこと、及び物質交換効率の観点から、中空糸の内径は１００〜３００μｍが好ましい。
【００８６】
水不溶性担体として、粒子状のものを用いる場合には、粒子状担体の平均粒径は、２５〜２５００μｍのものを利用できる。粒子は球状であってもよい。ここで、粒径とは、顕微鏡で観察した場合の担体の輪郭上の任意の２点を結ぶ直線のうち最も長い直線の長さをいう。また、平均粒径とは、無作為に選択した１００個の粒子状担体の粒径の算術平均値をいう。
【００８７】
粒子状担体は、その比表面積と体液の流通性を考慮すると、平均粒径５０〜１５００μｍのものが好ましく、全血を通過させることを考慮すると、１００〜１０００μｍのものが更に好ましい。
【００８８】
粒子状担体としては、セルロース系ゲル、デキストラン系ゲル、アガロース系ゲル、ポリアクリルアミド系ゲル、多孔質ガラス、ビニルポリマーゲル等の有機または無機の多孔体が使用でき、通常のアフィニティクロマトグラフィーに用いられる担体用の材料は全て用いることができる。
【００８９】
具体的な粒子状担体としては、旭化成マイクロキャリア（旭化成（株）社製）、ＣＭ−セルロファイン（登録商標）ＣＨ（商品名、排除限界タンパク質分子量：約３×１０６、生化学工業（株）販売）等のセルロース系担体、特公平１−４４７２５号公報記載の全多孔質活性化ゲルや、ＣＭ−トヨパール（登録商標）６５０Ｃ（商品名、排除限界タンパク質分子量：５×１０６、東ソー（株）製）等のポリビニルアルコール系担体、ＣＭ−トリスアクリルＭ（ＣＭ−Ｔｒｉｓａｃｒｙｌ  Ｍ、商品名、排除限界タンパク質分子量：１×１０７、スウェーデン国ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製）等のポリアクリルアミド系担体、セファロースＣＬ−４Ｂ（ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ−４Ｂ、商品名、排除限界タンパク質分子量：２×１０７、スウェーデン国ファルマシア−ＬＫＢ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ−ＬＫＢ）社製）等のアガロース系担体等の有機質担体、及びＣＰＧ−１０−１０００（商品名、排除限界タンパク質分子量：１×１０８、平均細孔径１００ｎｍ、米国エレクトロ−ニュークレオニクス（Ｅｌｅｃｔｒｏ−ｎｕｃｌｅｏｎｉｃｓ）社製）等の多孔性ガラス等の無機質担体が挙げられる。
【００９０】
粒子状担体の組成は、ポリアミド系、ポリエステル系、ポリウレタン系、ビニル化合物の重合体等、多孔性構造をとりうる公知の重合体であってよい。
【００９１】
不織布とは、繊維を熱、機械的若しくは化学的な作用によって接着又は絡み合わせる事で布にしたものをいう。不織布の厚みや繊維径には特に制限はなく、血液が通過できる形態であれば使用できる。また、不織布状担体の組成についても特に限定はないが、例えば、ポリエステル、ポリプロピレン、再生セルロース等が挙げられる。
【００９２】
（担体の表面積の測定方法）
担体の表面積は、担体が中空糸膜の場合には、中空糸膜内径×３．１４×中空糸長さ×中空糸本数により算出して求めることができる。また、中空糸膜の内径は中空糸一定本数をパラフィンブロックへ包埋させた後、任意の厚さにミクロトームを用いてスライスした後、パラフィン薄片を光学顕微鏡（１００倍）で観察し、中空糸膜内径を測定して求めることができる。
【００９３】
担体が不織布の場合は、日本国（株）島津製作所製『アキュソーブ２１００Ｅ』又はこれと同等仕様機を用いて、０．５０ｇ〜０．５５ｇの範囲で秤量した担体を試料管に充填し、上記アキュソーブ本体で１×１０−４ｍｍＨｇの減圧度（室温下）にて２０時間脱気処理した後、吸着ガス：窒素ガス、吸着温度：液体窒素温度にて測定して表面積を求めることができる。
【００９４】
担体が粒子の場合においても、不織布と同様に、日本国（株）島津製作所製『アキュソーブ２１００Ｅ』又はこれと同等仕様機を用いて、０．５０ｇ〜０．５５ｇの範囲で秤量した担体を試料管に充填し、上記アキュソーブ本体で１×１０−４ｍｍＨｇの減圧度（室温下）にて２０時間脱気処理した後、吸着ガス：窒素ガス、吸着温度：液体窒素温度にて測定して表面積を求めることができる。
【００９５】
（基材）
本発明の基材は、上記の水不溶性担体と、該水不溶性担体に担持された上記のビタミンＥ誘導体とを備える。
【００９６】
ビタミンＥ誘導体の水不溶性担体への担持方法（固定化方法）としては、その様式を問わないが、ビタミンＥ誘導体が、アミノ基やカルボキシル基等のような官能基を持つ場合には、共有結合が好ましい。例えば、水不溶性担体がカルボキシル基を有する場合には、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドと反応させることによって、スクシンイミドオキシカルボニル基に変換し、これにビタミンＥ誘導体をアミノ基の部分で反応させる方法（活性エステル法）が挙げられる。水不溶性担体がアミノ基またはカルボキシル基を有する場合には、ジシクロヘキシルカルボジイミド等の縮合試薬の存在下で、ビタミンＥ誘導体のカルボキシル基またはアミノ基を縮合反応させる方法（縮合法）、水不溶性担体とビタミンＥ誘導体とをグルタルアルデヒド等の２個以上の官能基を有する化合物を用いて結合する方法等が挙げられる。また、水不溶性担体が水酸基を有する場合には、臭化シアン等のハロゲン化シアンを水不溶性担体に作用させ、ビタミンＥ誘導体のアミノ基の部分で反応させる方法やエピクロロヒドリン等のエポキシドを水不溶性担体に作用させ、ビタミンＥ誘導体のアミノ基の部分や水酸基の部分で反応させる方法等が挙げられる。
【００９７】
必要に応じて、水不溶性担体とビタミンＥ誘導体との間に任意の長さの分子（スペーサー）を導入することもできる。スペーサー分子としては、ポリメチレン鎖、ポリエチレングリコール鎖等が挙げられる。例えば、アガロースの水酸基とヘキサメチレンジイソシアナートの一方のイソシアナート基を反応、結合させ、他方のイソシアナート基とビタミンＥ誘導体のアミノ基、水酸基、カルボキシル基等を反応、結合させることができる。
【００９８】
ビタミンＥ誘導体がアミノ基やカルボキシル基等の官能基を持たない場合には、水不溶性担体を溶解せずに、ビタミンＥ誘導体を溶解することができる溶媒、例えば、エタノール等でビタミンＥ誘導体を溶解し、この溶解物を水不溶性担体の表面にコーティングすることで担持（固定化）させることができる。以上の方法により、基材を製造することができる。上記の基材は、血液体外循環回路に、治療対象の血液と接触するように配置するものである。すなわち、上記の基材は、血液体外循環回路配置用基材ということもできる。血液体外循環回路としては、透析装置、持続緩徐式血液濾過装置、血漿分離（交換）装置、白血球除去装置、全血及び血漿分離吸着型血液浄化装置、二重濾過血漿交換装置等が挙げられる。
【００９９】
（ビタミンＥ誘導体固定化量測定方法）
ビタミンＥ誘導体の固定化量の測定については、担体が中空糸膜の場合は、中空糸膜に担持されたビタミンＥ誘導体の量を測定するために、ハウジングを解体し中空糸膜７５ｍｍ×１０５本（膜面積：４５ｃｍ２、膜面積は、中空糸内径×３．１４×中空糸長さ×中空糸本数で算出した。）を取り出し、８５％（ｗ／ｗ）エタノール５０ｍＬ中へ浸漬させた後、３０℃、５０回／分で６時間震盪抽出を行った抽出液中のビタミンＥ誘導体の濃度を、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ：島津製作所  ２０Ａシリーズ、ＣＢＭ−２０ＡＴ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｂｕｓ  Ｍｏｄｕｌｅ，  ＤＧＵ２０ＡＴ３  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｄｅｇａｓｓｅｒ，  ＬＣ−２０ＡＴ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ，  ＳＩＬ−２０Ａ  Ａｕｔｏ−Ｓａｍｐｌｅｒ，  ＳＰＤ−２０Ａ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  ＵＶ／ＶＩＳ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ，  ＣＴＯ−２０Ａ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｃｏｌｕｍ  Ｏｖｅｎ）を用いて波長２８５ｎｍの紫外線の吸収に基づいて測定、算出することができる。
【０１００】
担体が不織布及び粒子の場合については、０．５０ｇ〜０．５５ｇの範囲で秤量し表面積を測定したフィルター基材又は粒子基材を８５％（ｗ／ｗ）エタノール５０ｍＬ中へ浸漬させた後、３０℃、５０回／分で６時間震盪抽出を行った抽出液中のビタミンＥ誘導体の濃度を、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ：島津製作所  ２０Ａシリーズ、ＣＢＭ−２０ＡＴ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｂｕｓ  Ｍｏｄｕｌｅ，  ＤＧＵ２０ＡＴ３  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｄｅｇａｓｓｅｒ，  ＬＣ−２０ＡＴ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ，  ＳＩＬ−２０Ａ  Ａｕｔｏ−Ｓａｍｐｌｅｒ，  ＳＰＤ−２０Ａ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  ＵＶ／ＶＩＳ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ，  ＣＴＯ−２０Ａ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｃｏｌｕｍ  Ｏｖｅｎ）を用いて波長２８５ｎｍの紫外線の吸収に基づいて測定、算出することができる。
【０１０１】
（ビタミンＥ誘導体の固定化量の適正範囲）
ビタミンＥ誘導体の固定化量の範囲については、特に制限はないが、固定化量が低すぎると、臓器炎症抑制の効果がなくなり、また、固定化量が大きすぎると溶出の懸念があるので好ましくない。したがって、固定化量の範囲としては、１０〜１０００ｍｇ／ｍ２が適正であり、５０〜５００ｍｇ／ｍ２がより好ましく、１００〜３００ｍｇ／ｍ２が更に好ましい。
【０１０２】
（デバイス）
本発明はまた、血液を流入させる入口ポート及び血液を流出させる出口ポートを有する容器と、該容器に充填された上記の基材とを備えるデバイスを提供する。図９はデバイスの一実施形態を示す断面図である。図９において、デバイス１００は、血液体外循環回路に接続するモジュールである。円筒１１０の一端開口部に、内側にフィルター１２０を張ったパッキン１３０を介して入口ポート１４０を有するキャップ１５０をネジ嵌合し、円筒１１０の他端開口部に内側にフィルター１２０’を張ったパッキン１３０’を介して出口ポート１６０を有するキャップ１７０をネジ嵌合して容器を形成し、フィルター１２０及び１２０’の間隙に上記の基材を充填保持させて臓器炎症抑制用基材層１８０を形成している。
【０１０３】
臓器炎症抑制用基材層１８０には、上記の基材を単独で充填してもよく、他の基材を混合又は積層してもよい。他の基材としては、例えばＤＮＡ等の他の悪性物質（抗原）の吸着材や、幅広い吸着能を有する活性炭等を用いることができる。これにより基材の相乗効果による広範な臨床効果が期待できる。臓器炎症抑制用基材層１８０の容積は、血液体外循環による血液浄化法に用いる場合、５０〜４００ｍＬ程度が適当である。
【０１０４】
図１０はデバイスの別の実施形態を示す断面図である。図１０において、デバイス２００は、血液体外循環回路に接続するモジュールである。円筒２１０の両端に、上記の基材（中空糸）２２０がポッティング剤２３０によって保持されている。中空糸の両端面は、開口している。入口ポート２４０を有するキャップ２５０及び出口ポート２６０を有するキャップ２５０’を円筒２１０に嵌合し、基材（中空糸）２２０を充填保持させている。また、円筒２１０の側面には、透析液導入口２７０と透析液導出口２８０が具備されている。
【０１０５】
血液体外循環による血液浄化法に使用する際には、治療対象の体内から導出させた血液を入口ポート２４０から導入させ、基材（中空糸）２２０の内空を通過させ、出口ポート２６０を通して、治療対象の体内へと戻すことで、血液体外循環による血液浄化法を行うことができる。その際に、透析液導入口２７０から透析液を導入させ、透析液導出口２８０から透析液を導出して、デバイス２００内の透析液を循環させることによって、血液体外循環中に透析を行うことができる。また、この透析液の循環は行わなくてもよく、透析液導入口２７０、透析液導出口２８０を開放してもよい。この場合、血液の濾過が行われる。また、透析液導入口２７０と透析液導出口２８０を栓等で塞ぐことによって、血液の濾過を抑制して血液体外循環による血液浄化法を行うこともできる。
【０１０６】
血液体外循環による血液浄化法における血液の通過速度は、基材が中空糸の場合には中空糸の内径を変化させることにより調節することができる。この場合、内径が大きいほど高い通過速度を得ることができる。また、基材が粒子や不織布の場合には、粒子径や繊維径を大きくし、また、基材の充填度を低くすることにより、高い通過速度を得ることができる。血液の通過速度が高いほど多量の体液処理を行うことができる。血液体外循環は、臨床上の必要等に応じて、連続的に行ってもよいし、断続的に行ってもよい。
【０１０７】
上記のデバイスは、サイトカイン・ケモカイン類が介在する疾患において、臓器炎症を抑制又は治療するために有効に使用することができる。具体的な疾患名としては、敗血症、敗血症性ショック、毒素ショック症候群、虚血再還流障害、成人呼吸促進症候群（ＡＲＤＳ）、パジェット病、骨粗鬆症、多発性骨髄腫、急性及び慢性骨髄性白血病、膵臓β細胞破壊、炎症性腸疾患、乾癬、クローン病、潰瘍性大腸炎、アナフィラキシー、接触性皮膚炎、喘息、筋変性症、悪液質、ライター症候群、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病、骨吸収症、移植片対宿主反応、アテローム性動脈硬化、脳外傷、多発性硬化症、大脳マラリア、発熱、及び感染による筋肉痛等が挙げられる。
【０１０８】
上記の基材を用いた血液対外循環による血液浄化法により、炎症を抑制する対象臓器としては、肺、腎臓、肝臓、大腸、小腸、十二指腸、胃、脾臓、すい臓、脳、心臓、血管等が挙げられる。ケモカイン類による白血球遊走性の働きによって、白血球がより集積しやすい臓器であることから、対象臓器は、肺、腎臓、肝臓であることがより好ましい。
【０１０９】
（サイトカイン・ケモカイン）
上述したように、治療対象の血液体外循環による血液浄化法において、上記の基材を治療対象の血液と接触させることにより、治療対象の臓器炎症を抑制することができる。ここで、治療対象は、血液中のＧＲＯの濃度が３５００［ｐｇ／ｍＬ］以上、ＭＩＰ−１αの濃度が５１００［ｐｇ／ｍＬ］以上、ＲＡＮＴＥＳの濃度が５００［ｐｇ／ｍＬ］以上、又はＭＩＰ−３αの濃度が１５０［ｐｇ／ｍＬ］以上のいずれかであれば、臓器炎症の抑制効果が高いが、とりわけ、血液中のＧＲＯの濃度が３５００［ｐｇ／ｍＬ］以上又はＭＩＰ−１αの濃度が５１００［ｐｇ／ｍＬ］以上であると、より臓器炎症の抑制効果が高い。
【０１１０】
ＧＲＯとは、サイトカインの一群であるケモカインの一つである。ケモカインとは、Ｇタンパク質共役受容体を介してその作用を発現する塩基性タンパク質であり、白血球等の遊走を引き起こし炎症の形成に関与することが知られている。ケモカインはその構造上の違いからＣＣケモカイン、ＣＸＣケモカイン、Ｃケモカイン及びＣＸ３Ｃケモカインに分類される。ＧＲＯは、ＣＸＣケモカインに分類される。ＧＲＯの濃度は、種々のＧＲＯ分子の合計値の濃度である。後述する実施例で測定された、ラットのＧＲＯ／ＫＣもＣＸＣケモカインに分類されるＧＲＯ分子であり、ラットのＧＲＯの濃度はこの濃度で示される。ＧＲＯ分子は、ヒトではＧＲＯ１、ＧＲＯ２及びＧＲＯ３の３種類あり、これらの合計値がＧＲＯの濃度となる。ヒトのＧＲＯとラットのＧＲＯは、ともに臓器の炎症性を判断でき、生体としての炎症性のレベルはほぼ同等といえるため、治療対象のＧＲＯの濃度としては同じ水準で判断することができる。
【０１１１】
ＭＩＰ−１α、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−３αも、サイトカインの一群であるケモカインの一つであり、ＣＣケモカインに分類される。これまで、これらのケモカイン類については、ＳＩＲＳにおける発現状態や機能等が十分には知られていなかった。本発明者らにより、ＧＲＯ、ＭＩＰ−１α、ＲＡＮＴＥＳ及びＭＩＰ−３αが、ＳＩＲＳの治療タイミングを決定するマーカーとして有用であり、とりわけＧＲＯ及びＭＩＰ−１αが重要であることが初めて見出された。また、ＧＲＯと同様に、ヒトのＭＩＰ−１αとラットのＭＩＰ−１αは、ともに臓器の炎症性を判断でき、生体としての炎症性のレベルはほぼ同等といえるため、治療対象のＭＩＰ−１αの濃度としては同じ水準で判断することができる。
【０１１２】
生体内において、軽度から中程度の炎症反応が惹起されると、血中のサイトカイン・ケモカイン濃度は、そのサイトカイン・ケモカイン類の種類によって、その上昇時期や濃度レベルは異なるが、一般的に、ある特定の閾値を超えた後、経時的に徐々に上昇し、ピークを迎え、その後、徐々に低下し、ある特定の閾値を経てさらに低下していく。
【０１１３】
この場合、サイトカイン・ケモカイン濃度が上昇するときの閾値と下降するときの閾値との間の期間（ピリオド）内に、治療すると治療効果が高い。つまり、ＧＲＯであれば、その閾値を３５００［ｐｇ／ｍＬ］以上、また、ＭＩＰ−１αであれば、その閾値を５１００［ｐｇ／ｍＬ］以上とすることで、一義的に治療に効果的な期間（ピリオド）が決まることになる。
【０１１４】
一方、中程度以上の強い炎症反応が起こる場合においては、血中のサイトカイン・ケモカインは、そのサイトカイン・ケモカイン類の種類によって、その上昇時期は異なるが、その濃度の上昇動態は、ある特定の閾値を超えた後、個体の死に至るまで経時的に上昇し続けていくか、又は、ある高濃度のレベルで頭打ちとなって維持された状態が継続することによって最終的には個体の死に至ってしまう。したがって、炎症が起こって血中のサイトカイン・ケモカインが上昇し、ある閾値を超えたら、なるべく早い段階で処置することが好ましく、さらには、その閾値を超えて上昇していくサイトカイン・ケモカインの血中レベルが可能な限り低いうちに処置することが好ましい。
【０１１５】
すなわち、ＧＲＯであれば、その濃度範囲は３５００〜１０００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲が好ましく、３５００〜５００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲がより好ましい。また、ＭＩＰ−１αであれば、その濃度範囲は５１００〜１０００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲が好ましく、５１００〜５００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲がより好ましい。また、ＲＡＮＴＥＳであれば、その濃度範囲は５００〜５００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲が好ましく、５００〜３００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲がより好ましい。また、ＭＩＰ−３αであれば、その濃度範囲は２００〜５００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲が好ましく、２００〜３００００［ｐｇ／ｍＬ］の範囲がより好ましい。
【０１１６】
なお、上述した一連の血中のケモカイン類の測定は、一般的に抗原抗体反応の原理に基づく、酵素免疫測定法や多種類のケモカインを同時に測定するために、後述する実施例に記載される、Ｂｉｏ−Ｐｌｅｘ（商標）サスペンションアレイシステム（米国、ＢｉｏＲａｄ社）に代表されるようなマルチプレックスビーズテクノロジーを利用した方法等で測定することができる。
【０１１７】
血液浄化法（血液浄化療法）による臓器の炎症制御効果を評価する一つの指標として、試験動物の臓器の炎症状態の評価が挙げられる。とりわけ、肺組織は正常な状態においても好中球が豊富に存在し、感染、外傷、熱傷等の生体侵襲が引き金となって放出されたサイトカインによりこれら好中球が活性化されるため、炎症反応の影響を反映しやすいとされている。血液浄化法の実施後の肺組織を摘出し、ホルマリン固定後パラフィンへ包埋・薄切した後、ヘマトキシリン及びエオシンで染色することにより、肺組織の炎症状態の評価を行うことができる。
【０１１８】
血液浄化法による臓器の炎症抑制効果を評価する指標として、試験動物の臓器中のＭＤＡ（Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ）の定量が挙げられる。炎症反応を亢進させる一つの要因は、炎症初期段階で放出されるサイトカインであるＴＮＦ−αにより、顆粒球から放出された活性酸素である。この活性酸素により、α１−ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎやα２−ｍｉｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉｎと結合して活性発現を抑制されていたＥｌａｓｔａｓｅが活性化される。活性化されたＥｌａｓｔａｓｅにより周囲の組織が損傷され、炎症反応が加速することが知られている。臓器中のＭＤＡの濃度の測定は、上記の過程における活性酸素の産生量を示す指標であることから、炎症反応の亢進度合いを示す指標となる。
【実施例】
【０１１９】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれら実施例により何ら限定されるものではない。
【０１２０】
〔実施例１〕
Ｗｉｓｔｅｒ系雄性ラット（体重２５０〜３００ｇ）に、リポポリサッカライド（ＬＰＳ）１０［ｍｇ／ｋｇ］を投与することで、全身炎症性反応症候群モデルラットを作製し、被験ラットとした。ＬＰＳ投与後ラットは、ＬＰＳを投与しない正常ラットと混合し、食物と水を無制限に摂取できるようにした。ＬＰＳ投与後６時間の被験ラット（２７匹）と正常ラット（３匹）より採血した血液中の４種類のケモカイン類（ＧＲＯ／ＫＣ、ＭＩＰ−１α、ＲＡＮＴＥＳ、ＭＩＰ−３α）をＢｉｏ−Ｐｌｅｘシステム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ社製  Ｂｉｏ−Ｐｌｅｘ  Ｐｒｏ  ラットサイトカインプレミックスパネル  ２３−Ｐｌｅｘパネル）を用いて測定した。結果を表１及び図１に示す。その結果、被験ラットのＧＲＯ／ＫＣ、ＭＩＰ−１α、ＲＡＮＴＥＳ及びＭＩＰ−３αの血中濃度は、正常ラットと比較して高く、とりわけ、ＧＲＯ／ＫＣ及びＭＩＰ−１αが極めて高く、ＧＲＯ／ＫＣ及びＭＩＰ−１αが、血液体外循環の治療タイミングを推し量る有効なマーカーになることが明らかとなった。また、この結果及び後述する実施例２、４等の結果から、血液体外循環による血液浄化法において本発明の基材を治療対象の血液と接触させる場合に、治療対象の血液中のＧＲＯの濃度が３５００［ｐｇ／ｍＬ］以上又はＭＩＰ−１αの濃度が５１００［ｐｇ／ｍＬ］以上であると、臓器炎症を抑制する効果が高いことが示された。
【０１２１】
【表１】
2014062091.tif 000007
【０１２２】
〔実施例２〕
（ビタミンＥ誘導体）
下記化学式（２１）で示されるビタミンＥ誘導体を、（有）オガリサーチ（大阪府豊中市）より入手した。
【０１２３】
【化６】
2014062091.tif 000008
【０１２４】
（基材及びデバイスの作製）
ポリスルホン及びポリビニルピロリドンからなる中空糸膜（中空糸内径１８５μｍ、膜厚４５μｍ、水の限外濾過性能（ＵＦＲ）２５０［ｍＬ／時／０．１３ｋＰａ／ｍ２］）５０ｃｍ２を、透析液の導入口及び導出口を備えたポリカーボネート樹脂性ハウジングに内包したのち、両端をウレタン樹脂によりハウジングへ固定した。ウレタン樹脂硬化後、ハウジング端面にて切断し中空糸を開口させた後、血液の入口ポート及び出口ポートを備えた蓋をハウジング両端面に接着することにより、デバイスを得た。このデバイスの血液の入口ポートより０．５質量％の上記化学式（２）で示されるビタミンＥ誘導体の２−プロパノール溶液を５［ｍＬ／分］で２０秒間流通させて、中空糸内表面にビタミンＥ誘導体をコーティングし、基材及びデバイスを作製した。
【０１２５】
（血液体外循環による血液浄化法の実施）
実施例１と同様に被験ラット１２匹を作製した。被験ラットの外頸静脈及び大腿動脈にカテーテルを挿入して、血液体外循環の血液の出入り口を確保すると共にラット血液を採血し、実施例１と同様の方法で血液中のＧＲＯ／ＫＣ、ＭＩＰ−１αを測定した。結果を表２に示す。上記のデバイスを用いて血液流量１［ｍＬ／分］で血液体外循環による血液浄化法を３０分間実施した。この際、透析液の導入口に、８［ｍＬ／時］の流量で血液ろ過用補充液ＢＳＧ（扶桑薬品工業）を供給した。３０分間の積算補液量から、血液中より濾過された水分量を算出し、血液体外循環後、同量の生理食塩水を被験ラット体内に補充した。血液体外循環後、被験ラットを無制限に飲食可能な環境下に置き、血液体外循環３時間後（ＬＰＳ投与より９時間後）及び１８時間後（ＬＰＳ投与より２４時間後）の生存判定を実施した。ＬＰＳ投与後２４時間の生存率を算出した結果８３％であった（生存ラット数１０匹／被験ラット数１２匹）。血液体外循環１８時間後（ＬＰＳ投与より２４時間後）に生存していた被験ラットを儀死させ、肺の組織標本を採取した。採取した肺の組織標本をホルマリン固定し、パラフィン内に包埋し、ミクロトームで切片を作成した。作成した切片をヘマトキシン及びエオシンで染色して観察した。図２は、肺の組織観察の結果を示す写真である。肺組織内に鬱血、浮腫、出血は見られず、炎症も非常に軽度であった。
【０１２６】
【表２】
2014062091.tif 000009
【０１２７】
〔実施例３〕
（中空糸膜に担持されたビタミンＥ誘導体の定量）
実施例２にて作製したデバイスの中空糸膜に担持されたビタミンＥ誘導体の量を測定する為に、ハウジングを解体し中空糸膜７５ｍｍ×１０５本（膜面積：４５ｃｍ２、膜面積は、中空糸内径×３．１４×中空糸長さ×中空糸本数で算出した。）を取り出し、８５％（ｗ／ｗ）エタノール５０ｍＬ中へ浸漬させた後、３０℃、５０回／分で６時間震盪抽出を行った。抽出液中のビタミンＥ誘導体の濃度を、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ：島津製作所  ２０Ａシリーズ、ＣＢＭ−２０ＡＴ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｂｕｓ  Ｍｏｄｕｌｅ，  ＤＧＵ２０ＡＴ３  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｄｅｇａｓｓｅｒ，  ＬＣ−２０ＡＴ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ，  ＳＩＬ−２０Ａ  Ａｕｔｏ−Ｓａｍｐｌｅｒ，  ＳＰＤ−２０Ａ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  ＵＶ／ＶＩＳ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ，  ＣＴＯ−２０Ａ  Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ  Ｃｏｌｕｍ  Ｏｖｅｎ）を用いて波長２８５ｎｍの紫外線の吸収に基づいて測定し、算出した。ビタミンＥ誘導体の量の測定結果を表３に示す。
【０１２８】
【表３】
2014062091.tif 000010
【０１２９】
〔実施例４〕
（血液浄化法の実施後の炎症状態の評価）
実施例２の血液浄化法の実施後２４時間生存したラットを犠死させ、臓器をヘマトキシリン及びエオシンで染色したサンプル（ＨＥ染色サンプル）の評価、並びに臓器中のＭＤＡ（Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ）の濃度の評価により、臓器の炎症状態を評価した。
【０１３０】
（ＨＥ染色サンプルの評価）
実施例２の血液浄化法の実施後２４時間生存したラットを犠死させた後、肺を摘出し、ホルマリン固定の後、パラフィンへ包埋させ、ミクロトームを用いて約６μｍに薄切し、薄切サンプルをヘマトキシリン及びエオシンで染色した。続いて、次のようにして、後述する比較例２、４のサンプルと共に肺組織の炎症度合いを評価した。
【０１３１】
後述する比較例２において、ビタミンＥ誘導体がコーティングされていないデバイスを用いてラットに血液浄化法を実施し、上記と同様にして肺組織のＨＥ染色サンプルを作製した。また、後述する比較例４において、回路のみを用いてラットに血液体外循環を実施し、上記と同様にして肺組織のＨＥ染色サンプルを作製した。
【０１３２】
これらの実施例４、比較例２及び比較例４の肺組織のＨＥ染色サンプルについて、光学顕微鏡を用いて１００〜４００倍にてそれぞれ６視野ずつ臓器観察を行った。そして、うっ血、浮腫、炎症細胞、大出血の４項目のそれぞれについて、炎症度合いの軽い視野から順位付けを行い、各項目の順位の合計を各ＨＥ染色サンプルの組織学スコアとした。
【０１３３】
結果を図３に示す。ビタミンＥ誘導体でコーティングされた基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（実施例４、図３中、「ビタミンＥ誘導体コーティング」と示す。）は、コーティング無しの基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（比較例２、図３中、「コーティング無」と示す。）、血液体外循環回路のみで血液浄化法を実施したラットの肺組織（比較例４、図３中、「回路のみ」と示す。）と比較して、全ての評価項目について、組織学スコアが改善されていた。
【０１３４】
（臓器中のＭＤＡの濃度の測定）
肺、肝臓中のＭＤＡ（Ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ）の濃度の測定は以下の方法で実施した。実施例２の血液浄化法の実施後２４時間生存したラットを犠死させた後、肺、肝臓を摘出し、液体窒素中で凍結させた後に各組織を塩化カリウム溶液中で粉砕し、溶解させた。この溶解液をサンプルとし、ＭＤＡ測定キット（ＴＢＡＲＳ法）（日本老化制御研究所製）にてＭＤＡの濃度を測定した。また同時に、サンプル中の総タンパク量をＢＣＡプロテインアッセイキット（Ｔｈｅｒｍｏ社製）を用いて定量し、各組織のＭＤＡの濃度を単位タンパク質量当たりの値で規格化した。
【０１３５】
結果を図４、５に示す。ビタミンＥ誘導体でコーティングされた基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺（実施例４、図４、「ビタミンＥ誘導体」と示す。）、肝臓組織（実施例４、図５、「ビタミンＥ誘導体」と示す。）の炎症状態は、後述するコーティング無しの基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺（比較例２、図４、「コーティング無」と示す。）、肝臓組織（比較例２、図５、「コーティング無」と示す。）と比較して、顕著に改善されていた。
【０１３６】
〔比較例１〕
（基材及びデバイスの作製）
基材がビタミンＥ誘導体でコーティングされていない点以外は実施例２と同様にしてデバイスを作製した。
【０１３７】
（血液体外循環による血液浄化法の実施）
実施例１と同様に被験ラット１２匹を作成した。被験ラットの外頸静脈及び大腿動脈にカテーテルを挿入して、血液体外循環の血液の出入り口を確保すると共にラット血液を採血し、実施例１と同様の方法で血液中のＧＲＯ／ＫＣ、ＭＩＰ−１αを測定した。結果を表４に示す。上記の基材がビタミンＥ誘導体でコーティングされていないデバイスを用いて血液流量１［ｍＬ／分］で体外循環による血液浄化法を３０分間実施した。この際、透析液の導入口に、８［ｍＬ／時］の流量で血液ろ過用補充液ＢＳＧ（扶桑薬品工業）を供給した。３０分間の積算補液量から、血液中より濾過された水分量を算出し、血液体外循環後、同量の生理食塩水を被験ラット体内に補充した。血液体外循環後、被験ラットを無制限に飲食可能な環境下に置き、血液体外循環３時間後（ＬＰＳ投与より９時間後）及び１８時間後（ＬＰＳ投与より２４時間後）の生存判定を実施した。ＬＰＳ投与後２４時間の生存率を算出した結果５０％であった（生存ラット数６匹／被験ラット数１２匹）。血液体外循環１８時間後（ＬＰＳ投与より２４時間後）に生存していた被験ラットを儀死させ、肺の組織標本を採取した。採取した肺の組織標本をホルマリン固定し、パラフィン内に包埋し、ミクロトームで切片を作成した。作成した切片をヘマトキシリン及びエオシンで染色して観察した。図６は、肺の組織観察の結果を示す写真である。肺組織内に鬱血、浮腫は見られないが、肺組織が肥大し、軽度の炎症を起こしている部分がみられた。
【０１３８】
【表４】
2014062091.tif 000011
【０１３９】
〔比較例２〕
（血液浄化法の実施後の臓器の炎症状態の評価）
比較例１の血液浄化法の実施後２４時間生存したラットを犠死させ、臓器のＨＥ染色サンプルの評価、及び、臓器中のＭＤＡの濃度の評価により、臓器の炎症状態を評価した。
【０１４０】
（ＨＥ染色サンプルの評価）
実施例４と同様にして、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した肺の組織を６視野観察し、うっ血、浮腫、炎症細胞、大出血の４項目についてビタミンＥ誘導体コーティング基材での肺組織観察結果、回路のみでの肺組織観察結果と合わせて、炎症度合いの軽い視野から順位付けを行った後、ビタミンＥ誘導体コーティング基材を備えたデバイス、コーティング無し基材、回路のみのそれぞれの順位の合計を算出した。結果を図３に示す。コーティング無しの基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図３中、「コーティング無」と示す。）は、後述する血液体外循環回路のみで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図３中、「回路のみ」と示す。）と比較して、組織学スコアが改善されていた。しかしながら、上述した、ビタミンＥ誘導体でコーティングされた基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図３中、「ビタミンＥ誘導体コーティング」と示す。）と比較すると、全ての評価項目について組織学スコアが悪化していた。
【０１４１】
（臓器中のＭＤＡの濃度の測定）
実施例４と同様にして、肺、肝臓の組織の溶解液を作成し、ＭＤＡの濃度を測定した。結果を図４、５に示す。コーティング無しの基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図４、「コーティング無」と示す。）、肝臓組織（図５、「コーティング無」と示す。）は、上述した、ビタミンＥ誘導体でコーティングされた基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図４、「ビタミンＥ誘導体」と示す。）、肝臓組織（図５、「ビタミンＥ誘導体」と示す。）と比較すると、ＭＤＡの濃度が高かった。
【０１４２】
〔比較例３〕
（回路のみでの血液体外循環の実施）
実施例１と同様に被験ラット１２匹を作製した。被験ラットの外頸静脈及び大腿動脈にカテーテルを挿入して、血液体外循環の血液の出入り口を確保すると共にラット血液を採血し、実施例１と同様の方法で血液中のＧＲＯ／ＫＣ、ＭＩＰ−１αを測定した。結果を表５に示す。デバイスを接続せずに血液体外循環回路のみを接続し、血液流量１［ｍＬ／分］で血液体外循環を３０分間実施した。血液体外循環後、被験ラットを無制限に飲食可能な環境下に置き、血液体外循環３時間後（ＬＰＳ投与より９時間後）及び１８時間後（ＬＰＳ投与より２４時間後）の生存判定を実施した。ＬＰＳ投与後２４時間の生存率を算出した結果３３％であった（生存ラット数３匹／被験ラット数１２匹）。血液体外循環１８時間後（ＬＰＳ投与より２４時間後）に生存していた被験ラットを儀死させ、肺の組織標本を採取した。採取した肺の組織標本をホルマリン固定し、パラフィン内に包埋し、ミクロトームで切片を作成した。作成した切片をヘマトキシリン及びエオシンで染色して観察した。図７は、肺の組織観察の結果を示す写真である。肺組織内に鬱血がみられ、組織肥大が激しく、重度の炎症がみられた。
【０１４３】
【表５】
2014062091.tif 000012
【０１４４】
〔比較例４〕
（血液浄化法の実施後の炎症状態の評価）
比較例３の血液浄化法の実施後２４時間生存したラットを犠死させ、臓器のＨＥ染色サンプルの評価により、臓器の炎症状態を評価した。
【０１４５】
（ＨＥ染色サンプルの評価）
実施例４と同様にして、ヘマトキシリン及びエオシンで染色した肺の組織を６視野観察し、うっ血、浮腫、炎症細胞、大出血の４項目について、ビタミンＥ誘導体コーティング基材での肺組織観察結果、コーティング無し基材での肺組織観察結果と合わせて、炎症度合いの軽い視野から順位付けを行った後、ビタミンＥ誘導体コーティング基材を備えたデバイス、コーティング無し基材、回路のみのそれぞれの順位の合計を算出した。結果を図３に示す。血液体外循環回路のみで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図３中、「回路のみ」と示す。）は、上述した、ビタミンＥ誘導体でコーティングされた基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図３中、「ビタミンＥ誘導体コーティング」と示す。）、コーティング無しの基材を備えたデバイスで血液浄化法を実施したラットの肺組織（図３中、「コーティング無」と示す。）と比較すると、全ての評価項目について組織学スコアが悪化していた。
【０１４６】
〔比較例５〕
（回路のみでの血液体外循環の実施）
ＬＰＳを投与しない正常ラットの外頸静脈及び大腿動脈にカテーテルを挿入した。
デバイスを接続せずに血液体外循環回路のみを接続し、血液流量１［ｍＬ／分］で血液体外循環を３０分間実施した。血液体外循環後、ラットを無制限に飲食可能な環境下に置き、血液体外循環１８時間後に儀死させ、肺の組織標本を採取した。採取した肺の組織標本をホルマリン固定し、パラフィン内に包埋し、ミクロトームで切片を作成した。作成した切片をヘマトキシリン及びエオシンで染色して観察した。図８は、肺の組織観察の結果を示す写真である。肺組織内に鬱血、浮腫、出血は皆無であり、肺組織の肥大等の炎症も見られなかった。
【産業上の利用可能性】
【０１４７】
本発明の基材及びデバイスは、ＳＩＲＳに代表されるサイトカイン・ケモカイン類が介在して発症または悪化する疾患によって生じる臓器炎症の治療に有用である。
【符号の説明】
【０１４８】
１００，２００…デバイス、１１０，２１０…円筒、１２０，１２０’…フィルター、１３０，１３０’…パッキン、１４０，２４０…入口ポート、１５０，１７０，２５０，２５０’…キャップ、１６０，２６０…出口ポート、１８０…臓器炎症抑制用基材層、２２０…基材（中空糸）、２３０…ポッティング剤、２７０…透析液導入口、２８０…透析液導出口。
【図１】
2014062091.tif 000015
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図９】
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【図１０】
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【図２】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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