(57)【要約】【課題】皮膚の炎症の原因菌に対して優れた抗菌活性を示す抗菌剤、及び皮膚外用剤を提供する。【解決手段】マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有する抗菌剤及び皮膚外用剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有する抗菌剤。
【請求項２】
ニキビ原因菌に対する抗菌剤である、請求項１記載の抗菌剤。
【請求項３】
アクネ菌（Propionibacterium acnes）に対する抗菌剤である、請求項１又は２記載の抗菌剤。
【請求項４】
アトピー性皮膚炎原因菌に対する抗菌剤である、請求項１記載の抗菌剤。
【請求項５】
黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）に対する抗菌剤である、請求項１又は４記載の抗菌剤。
【請求項６】
フケ原因菌に対する抗菌剤である、請求項１記載の抗菌剤。
【請求項７】
マラセチア属（Malassezia）真菌に対する抗菌剤である、請求項１又は６記載の抗菌剤。
【請求項８】
マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有する皮膚外用剤。
【請求項９】
マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するニキビ予防・改善剤。
【請求項１０】
マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するアトピー性皮膚炎予防・改善剤。
【請求項１１】
マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するフケ予防・改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌剤及び皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトの皮膚には皮膚常在菌と呼ばれる様々な微生物が存在する。皮膚常在菌は、病原菌の侵入を防いで皮膚のバリア機能を維持する等の点で有用である一方、中には皮膚炎等の皮膚疾患に関与することが指摘されているものもある。
グラム陽性菌の１種であるアクネ菌（Propionibacterium acnes）は、皮脂をグリセリンと脂肪酸に分解して皮膚を弱酸性に保つことで病原菌の侵入や繁殖を抑える役割を担っている。しかし、皮脂が毛穴等に詰まった状態が続くと、皮脂を栄養源としてアクネ菌が増殖し、これが原因となってニキビ等の炎症が引き起こされる。
同じくグラム陽性菌の１種であるブドウ球菌（Staphylococcus属細菌）は、ヒトの皮膚や鼻腔等に存在し、通常は無害の細菌である。しかし、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）のように毒性の強いものは、傷口の化膿やとびひ等の原因になることが知られている。黄色ブドウ球菌は、炎症を起こした傷口から体内に侵入して髄膜炎、肺炎、腹膜炎、敗血症等を引き起こすこともある。また、アトピー性皮膚炎を悪化させる原因であるとの指摘もなされている（例えば、非特許文献１〜５等参照）。
真菌の１種であるマラセチア真菌（Malassezia属真菌）は、動物やヒトの体表に広く常在し、癜風、マラセチア毛包炎、脂漏性皮膚炎、アトピー性皮膚炎の原因になるといわれている。また、頭皮に存在するマラセチア真菌は、リパーゼを産生して頭皮の皮脂を分解し消費しており、このリパーゼが皮脂を分解する際に産生される脂肪酸は、頭皮炎症の原因となるといわれている。そのため、マラセチア真菌が増殖するとリパーゼが過剰に産生されて脂肪酸の量が増え、それによって頭皮の炎症が進行し、その結果としてフケが発生すると考えられている（例えば、非特許文献６〜８等参照）。
【０００３】
皮膚の炎症の予防・改善には、炎症の原因菌の増殖を効果的に制御することが重要であり、皮膚の健康の維持・改善に有用な新たな抗菌剤及び皮膚外用剤の開発が望まれている。例えば、特許文献１及び非特許文献９には、抗アクネ菌活性や抗黄色ブドウ球菌活性を有する化合物を含有する皮膚外用剤が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１０−６５０１４号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Journal  of  Allergy  and  Clinical  Immunology,  2000,  Vol.  105  p．814.
【非特許文献２】日本皮膚科学会雑誌,  2000,  Vol.  110,  p．19.
【非特許文献３】British  Journal  of  Dermatology,  1974,  Vol.  90,  p．525.
【非特許文献４】皮膚（新：皮膚の科学）,1988,  Vol.  40,  p．9.
【非特許文献５】皮膚の科学,  2008,  Vol.  10,  p.  24.
【非特許文献６】Journal  of  Clinical  Microbiology,  2002,  Vol.  40,  p．3350.
【非特許文献７】Japanese  Journal  of  Medical  Mycology,  2007,  Vol.  48,  p．179.
【非特許文献８】Microbiology,  2011,  Vol.  157,  p.  3492.
【非特許文献９】Phytochemistry，2010,  Vol．71，p．104.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、植物抽出物を用いた抗菌剤及び皮膚外用剤、特に、皮膚の炎症の原因菌に対して優れた抗菌活性を示す抗菌剤及び皮膚外用剤の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は上記課題に鑑み、鋭意検討を行った。その結果、マルバテイショウソウの植物抽出物が皮膚炎症等の原因菌に対して優れた抗菌活性を有することを見出した。本発明はこの知見に基づき完成されたものである。
【０００８】
本発明は、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有する抗菌剤に関する。
また、本発明は、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有する皮膚外用剤に関する。
また、本発明は、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するニキビ予防・改善剤に関する。
また、本発明は、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するアトピー性皮膚炎予防・改善剤に関する。
また、本発明は、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するフケ予防・改善剤に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の抗菌剤及び皮膚外用剤は、優れた抗菌活性、特に皮膚炎症の原因菌に対して優れた抗菌活性を示す。特に、本発明の抗菌剤及び皮膚外用剤は、ニキビ、アトピー、フケ等を発生させる皮膚炎症の原因となる菌に対して優れた抗菌活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明の抗菌剤及び皮膚外用剤は、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分とする。
マルバテイショウソウは、キク科（Compositae）モミジハグマ属の植物である。
抽出には、マルバテイショウソウの任意の部位（全草、根、茎、葉、花等）を用いることができ、各部位を複数組み合わせて用いてもよい。中でも、全草、又は根を含む部位を用いることが好ましく、根を用いることがさらに好ましい。また、マルバテイショウソウを基原植物として得られた生薬（金辺兔耳（キンペントジ））を用いることもでき、好ましい。この生薬金辺兔耳は、清熱、解毒を示すことが知られている。
抽出には上記植物を生のまま用いてもよく、抽出効率を高めるために、乾燥、細断、粉砕等の処理を施したものを用いることも好ましい。
【００１１】
抽出方法については特に限定はなく、通常の植物の抽出方法により行うことができる。具体的には、上記植物を乾燥させた乾燥物、その粉砕物等を圧搾抽出することにより得られる搾汁、水蒸気蒸留物、各種抽出溶剤による粗抽出物、粗抽出物を分配又はカラムクロマトなどの各種クロマトグラフィーなどで精製して得られた抽出物画分などを本発明における抽出物として用いることができる。また、これらの抽出物、水蒸気蒸留物、圧搾物等を、単独或いは２種以上組み合わせたものを抽出物として用いてもよい。
【００１２】
本発明では、上記植物を乾燥させた乾燥物又はその粉砕物から、抽出溶剤を用いて得られた抽出物を用いることがより好ましい。
抽出溶剤としては、極性溶剤、非極性溶剤のいずれをも使用することができ、これらを混合して用いることもできる。例えば、水；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール類；エチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール等の多価アルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等の鎖状及び環状エーテル類；ポリエチレングリコール等のポリエーテル類；ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の炭化水素類；ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類；ピリジン類；超臨界二酸化炭素；油脂、ワックス、その他オイル等が挙げられる。あるいは、上記溶剤の２種以上を組み合わせた混合物を、抽出溶剤として用いることができる。このうち、水、アルコール類、アルコール水溶液、プロピレングリコール、ブチレングリコールを用いるのが好ましく、水、アルコール類、アルコール水溶液を用いるのがより好ましく、アルコール水溶液を用いるのがさらに好ましく、エタノール水溶液を用いることが特に好ましい。エタノール水溶液の濃度は、０．１〜１００（ｖ／ｖ）％であることが好ましく、２０〜１００（ｖ／ｖ）％であることがより好ましく、５０〜１００％であることがさらに好ましい。
これらの溶剤中に、抽出原料である上記植物を浸漬又は加熱還流し、抽出物を得ることが好ましい。
【００１３】
溶剤抽出の条件は、使用する溶剤によって異なり特に制限はないが、例えば、溶剤として水、アルコール類、アルコール水溶液、プロピレングリコール、ブチレングリコールを用いる場合、植物１質量部に対して１容量部以上５０容量部以下の溶剤を用いることが好ましい。抽出温度は、好ましくは３℃以上、より好ましくは２０℃以上である。そして、好ましくは１００℃以下、より好ましくは８０℃以下である。抽出時間は、好ましくは１時間以上、より好ましくは１日以上である。そして、好ましくは数週間程度以下、より好ましくは３０日間程度以下である。また、抽出効率を上げる為、併せて攪拌を行ったり、溶媒中でホモジナイズ処理を行ってもよい。
【００１４】
本発明で用いるマルバテイショウソウ抽出物は、上述のような手法で得られた抽出物をそのまま使用してもよく、さらに適当な分離手段、例えばゲル濾過、クロマトグラフィー、精密蒸留等により活性の高い画分を分画して用いることもできる。また、上記抽出物や画分を希釈又は濃縮したものであってもよいし、凍結乾燥等により乾燥した後、粉末又はペースト状にしたものであってもよい。本発明で用いるマルバテイショウソウ抽出物には、上述のような手法で得られた各種抽出物、その希釈液、その濃縮液、その精製物、又はそれらの乾燥末等が包含される。
【００１５】
後述の実施例に示すように、マルバテイショウソウから得られた植物抽出物は優れた抗菌作用を示し、抗菌剤として使用することができる。本発明において「抗菌」とは、菌の増殖を抑制すること、菌を死滅させること、の両概念が包含され、菌には、細菌類、真菌類の両方が包含される。また、上記使用は、治療的使用（即ち医療行為）であっても非治療的使用（非医療的な行為）であってもよい。上記使用の対象は、ヒト、非ヒト動物、又はそれらに由来する検体であり得る。
【００１６】
特に、マルバテイショウソウ抽出物は、皮膚の炎症の原因菌に対し優れた抗菌活性を示す。皮膚の炎症の原因菌としては、ニキビの原因菌、アトピー性皮膚炎の原因菌、フケの原因菌が挙げられる。より具体的には、ニキビ原因菌としてはアクネ菌（Propionibacterium acnes）が、アトピー性皮膚炎原因菌としては黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）やマラセチア（Malassezia）属真菌が、フケ原因菌としてはマラセチ属真菌が挙げられる。本発明の抗菌剤は、これらの菌に対する抗菌剤として好適に用いることができる。
【００１７】
本発明の抗菌剤は、治療的用途（医療用途）、非治療用途（非医療用途）のいずれにも適用することができ、その使用形態も、人や動物の皮膚、爪、粘膜、毛髪等に適用されうるすべての形態が含まれる。具体的には、医薬品、医薬部外品、化粧料等としての使用が挙げられ、化粧料や医薬部外品、医薬品の場合は皮膚外用剤の形態で、医薬品の場合は投与形態で、使用することができる。
【００１８】
本発明の抗菌剤は、有効成分である上記のマルバテイショウソウ抽出物のみを含有するものであってもよいし、効果に影響を与えない範囲で他の成分を含有するものであってもよい。
有効成分以外の他の成分は、剤の形態や用途等に応じて適宜選択できる。例えば、剤として成形しやすいよう、酸化チタン、炭酸カルシウム、蒸留水、乳糖、デンプン等の適当な液体または固体の賦形剤または増量剤を加えてもよい。また、他の薬効成分（美白剤、保湿剤など）、酸化防止剤、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、色材等を加えてもよい。
【００１９】
剤に他の成分を配合する場合、マルバテイショウソウ抽出物の含有量は特に制限されないが、上記抽出物が剤中に固形分濃度（固形分換算）で、０．０００１質量％以上含まれることが好ましく、０．００５質量％以上含まれることがより好ましく、０．０１質量％以上含まれることが特に好ましい。また、上記抽出物が剤中に固形分濃度で、２０質量％以下含まれることが好ましく、１０質量％以下含まれることがより好ましい。
【００２０】
本発明の抗菌剤を皮膚外用剤の形態で使用する場合、当該「皮膚外用剤」には、皮膚化粧料、外用医薬品、外用医薬部外品等として皮膚に適用されるものが含まれ、その剤型も水溶液系、可溶化系、乳化系、粉末系、ゲル系、軟膏系、クリーム、水−油２層系、水−油−粉末３層系など、幅広い形態をとり得る。より具体的には、洗顔料、化粧水、ローション、乳液、クリーム、ジェル、エッセンス（美容液）、パック、マスク、マッサージ剤、ファンデーション、口紅、入浴剤、シャンプー、ヘアコンディショナー、ヘアトニック、軟膏、ペースト、シート状製品（サニタリー用品等の吸収性物品、おしり拭き、ウェットティッシュ等）等の形態が挙げられる。
また、これらの剤型とするにあたって、各種油剤、界面活性剤、ゲル化剤、防腐剤、酸化防止剤、溶剤、アルコール、水、キレート剤、増粘剤、紫外線吸収剤、乳化安定剤、pH調整剤、色素、香料等を適宜配合することができる。
【００２１】
本発明の抗菌剤を医薬品としてヒトや動物に投与する形態で使用する場合、例えば、錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の経口用固形製剤、内服液剤、シロップ剤等の経口用液体製剤、注射剤、外用剤、坐剤、経皮吸収剤等の非経口用製剤などの形態とすることができる。
これらの製剤を調製するに際しては、賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等を適宜配合することができる。
【００２２】
本発明の抗菌剤を皮膚外用剤の形態で使用する場合、当該皮膚外用剤の使用量は、剤中の有効成分の含有量により異なるが、皮膚面１ｃｍ２当たり０．０００１ｍｇ以上、２０ｍｇ以下とすることが好ましい。
また、本発明の抗菌剤を医薬品等の形態で使用する場合、その使用量は、適用対象者の状態、体重、性別、年齢等の条件により異なるが、通常、成人１人（体重６０kg）当たり１日に、マルバテイショウソウ抽出物を乾燥固形分換算で、０.００１ｍｇ以上、１０００ｍｇ以下使用することが好ましい。
【００２３】
本発明の抗菌剤及び皮膚外用剤は、マルバテイショウソウ抽出物を有効成分とし、皮膚炎の原因菌、特にニキビ原因菌、アトピー性皮膚炎原因菌、フケ原因菌に対して優れた抗菌作用を示す。この抗菌作用により、本発明の抗菌剤や皮膚外用剤は、これらの原因菌によって引き起こされる皮膚炎症に起因する種々の症状、すなわち、ニキビや化膿、アトピー、フケ等を予防、緩和、改善することができる。この観点から、本発明の抗菌剤及び皮膚外用剤は、ニキビの発症を予防する又はニキビの症状を緩和・改善するためのニキビ予防剤又は改善剤として、アトピー性皮膚炎の発症を予防する又はアトピー性皮膚炎の症状を緩和・改善するためのアトピー性皮膚炎予防剤又は改善剤として、フケの発生を予防する又はフケの症状を緩和・改善するためのフケ予防剤又は改善剤として用いることができる。
【００２４】
上述した実施形態に関し、本発明はさらに以下の抗菌剤、皮膚外用剤、方法及び用途を開示する。
【００２５】
＜１＞  マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有する抗菌剤。
＜２＞  ニキビ原因菌に対する抗菌剤である、＜１＞項記載の抗菌剤。
＜３＞アクネ菌（Propionibacterium acnes）に対する抗菌剤である、＜１＞又は＜２＞項記載の抗菌剤。
＜４＞  アトピー性皮膚炎原因菌に対する抗菌剤である、＜１＞項記載の抗菌剤。
＜５＞  黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）に対する抗菌剤である、＜１＞又は＜４＞項記載の抗菌剤。
＜６＞  フケ原因菌に対する抗菌剤である、＜１＞項記載の抗菌剤。
＜７＞  マラセチア属（Malassezia属）真菌に対する抗菌剤である、＜１＞又は＜６＞項記載の抗菌剤。
＜８＞  前記抽出物が、アルコール水溶液を溶媒として抽出されたものである、＜１＞項記載の抗菌剤。
＜９＞  マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を含む化粧料を皮膚に適用することを特徴とする、抗菌方法（医療行為を除く）。
【００２６】
＜１０＞マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を、抗菌剤として使用する方法。
＜１１＞抗菌剤としての、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物の使用。
＜１２＞抗菌のための、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物の非医薬的な使用。
＜１３＞抗菌剤の製造のための、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物の使用。
＜１４＞抗菌のために用いる、マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物。
＜１５＞マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を投与又は皮膚に適用することを含む、抗菌方法。
【００２７】
＜１６＞  マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有する皮膚外用剤。
＜１７＞前記抽出物が、アルコール水溶液を溶媒として抽出されたものである、＜１６＞項記載の皮膚外用剤。
【００２８】
＜１８＞マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するニキビ予防・改善剤。
＜１９＞マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するアトピー性皮膚炎予防・改善剤。
＜２０＞マルバテイショウソウ（Ainsliaea fragrans  Champ）の抽出物を有効成分として含有するフケ予防・改善剤。
【実施例】
【００２９】
以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００３０】
製造例  マルバテイショウソウ抽出物の調製
マルバテイショウソウを基原植物とする生薬、金辺兔耳（キンペントジ）（新和物産製、マルバテイショウソウの全草）１６０ｇを細切し、９５体積％エタノール水溶液１６００ｍＬに７日間、室温で浸漬した。この浸漬液をろ過した後、溶媒を除去し、固形分２．８９ｇを得た。この固形分を蒸発残分１．０ｗ／ｖ％となるよう、９５％エタノール水溶液で希釈し、マルバテイショウソウ抽出物を調製した。
【００３１】
試験例１  アクネ菌に対する抗菌試験
上記製造例で調製したマルバテイショウソウ抽出物を用いて、アクネ菌に対する抗菌活性を評価した。抗菌活性は、ルシフェラーゼを利用してＡＴＰ量を定量するための市販キット（商品名：BacTiter-GloTM  Microbial  Cell  Viability  Assay、Proｍega社製）を用いて評価した。
変法ＧＡＭ培地（日水製薬社製）を用いて３７℃で３日間嫌気培養したアクネ菌JCM6425株の培養液１０μＬと、変法ＧＡＭ培地８０μＬ、及びマルバテイショウソウ抽出物１０μＬを９６穴プレートのウェル内で混合し、３７℃で２４時間嫌気培養した。この培養液中のマルバテイショウソウ抽出物の濃度は０．１ｗ／ｖ％である。培養後、BacTiter-GloTM  試薬１００μＬをウェルに添加し、1420  Multilabel  Counter（Wallac社製）を用いて、５３０ｎｍの蛍光強度（励起光：４８８ｎｍ）を定量した。
マルバテイショウソウ抽出物の代わりに９５％エタノールを混合した系を陰性コントロールとして同様の試験を行った。また、マルバテイショウソウ抽出物に代えて、イソプロピルメチルフェノール（ＩＰＭＰ）を終濃度１ｍＭとなるよう混合したものを陽性コントロールとして同様の試験を行った。イソプロピルメチルフェノール（ＩＰＭＰ）は、幅広い抗菌スペクトルを示すことが知られる化合物で、各種の殺菌消毒剤やにきび治療薬の有効成分として一般的に用いられている。
結果を表１に示す。
【００３２】
【表１】
2014062058.tif 000002
【００３３】
表１に示すように、マルバテイショウソウ抽出物を含有する系では、陰性コントロールに比べて蛍光強度がはるかに低く、アクネ菌の増殖が著しく抑制されていた。この増殖抑制効果は、陽性コントロールに比べても優れていた。以上の結果から、マルバテイショウソウ抽出物がアクネ菌に対して優れた抗菌活性を示すことがわかった。
【００３４】
試験例２  黄色ブドウ球菌に対する抗菌試験
上記製造例で調製したマルバテイショウソウ抽出物を用いて、黄色ブドウ球菌に対する抗菌活性を評価した。抗菌活性は、ルシフェラーゼを利用してＡＴＰ量を定量する市販キット（商品名：BacTiter-GloTM  Microbial  Cell  Viability  Assay、Progega社製）を用いて評価した。
ＳＣＤ培地（ダイゴ社製）を用いて３７℃で１日間好気培養した黄色ブドウ球菌IFO13276株の培養液１０μＬと、ＳＣＤ培地８０μＬ、及びマルバテイショウソウ抽出物１０μＬを９６穴プレートのウェル内で混合し、３７℃で２４時間好気培養した。この培養液中のマルバテイショウソウ抽出物の濃度は０．１ｗ／ｖ％である。培養後、BacTiter-GloTM  試薬１００μＬをウェルに添加し、1420  Multilabel  Counter（Wallac社製）を用いて、５３０ｎｍの蛍光強度を定量した。
マルバテイショウソウ抽出物の代わりに９５％エタノールを混合した系を陰性コントロールとして同様の試験を行った。また、マルバテイショウソウ抽出物に代えて、イソプロピルメチルフェノール（ＩＰＭＰ）を終濃度１ｍＭとなるよう混合したものを陽性コントロールとして同様の試験を行った。イソプロピルメチルフェノール（ＩＰＭＰ）は、幅広い抗菌スペクトルを示すことが知られる化合物で、黄色ブドウ球菌に対しても抗菌効果を示すことが知られている。また、殺菌消毒剤の有効成分としても一般的に用いられている。
結果を下記表２に示す。
【００３５】
【表２】
2014062058.tif 000003
【００３６】
表２に示すように、マルバテイショウソウ抽出物を含有する系では、陰性コントロールに比べて蛍光強度がはるかに低く、黄色ブドウ球菌の増殖が著しく抑制されていた。この増殖抑制効果は、陽性コントロールに比べても非常に優れていた。以上の結果から、マルバテイショウソウ抽出物が黄色ブドウ球菌に対して優れた抗菌活性を示すことがわかった。
【００３７】
試験例３  マラセチア属真菌に対する抗菌試験
上記製造例で調製したマルバテイショウソウ抽出物を用いて、マラセチア属真菌に対する抗菌活性を評価した。抗菌活性は、ルシフェラーゼを利用してＡＴＰ量を定量するための市販キット（商品名：BacTiter-GloTM  Microbial  Cell  Viability  Assay、Proｍega社製）を用いて評価した。
ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ＬＮＡ培地（Japanese  Journal  of  Medical  Mycology  2007,  Vol.  48,  p．179、参照）を用いて、３２℃で７日間静置培養して得られたマラセチア菌：Malassezia globosa  ＣＢＳ７８７４株を９６穴プレートの各ウェルに０．５％のＴｗｅｅｎ６０（関東化学社製）水溶液に分散したもの９０μＬと、及びマルバテイショウソウ抽出物１０μＬとを添加・混合し、３２℃で２４時間振盪培養した。この培養液中のマルバテイショウソウ抽出物の濃度は０．１ｗ／ｖ％である。培養後、BacTiter-GloTM  試薬１００μＬをウェルに添加し、1420  Multilabel  Counter（Wallac社製）を用いて、５３０ｎｍの蛍光強度を定量した。
マルバテイショウソウ抽出物の代わりに９５％エタノールを混合した系を陰性コントロールとして同様の試験を行った。また、マルバテイショウソウ抽出物に代えて、硝酸ミコナゾールを終濃度０．４ｍＭとなるよう混合したものを陽性コントロールとして同様の試験を行った。硝酸ミコナゾールは、フケの発生を抑制する効果が知られている化合物で、抗フケシャンプーの有効成分として用いられている。
結果を下記表３に示す
【００３８】
【表３】
2014062058.tif 000004
【００３９】
表３に示すように、マルバテイショウソウ抽出物を含有する系では、陰性コントロールに比べて蛍光強度がはるかに低く、マラセチア属真菌の増殖が著しく抑制されていた。この増殖抑制効果は、陽性コントロールに比べても非常に優れていた。以上の結果から、マルバテイショウソウ抽出物がマラセチア属真菌に対して優れた抗菌活性を示すことがわかった。
【００４０】
（処方例）
本発明の抗アクネ菌剤の使用形態の一例として、下記に示す組成のローション、クリーム、軟膏を常法により各々調製できる。
【００４１】
１．ローションの調製
（組成）                                        （配合量：質量％）
マルバテイショウソウ抽出物                              ０．１
グリセリン                                            １０
1,3-ブチレングリコール                                  ６
クエン酸                                                ０．１
クエン酸ナトリウム                                      ０．３
エチルアルコール                                        ８
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（60EO）                  ０．５
香料                                                  適量
水                                                    残量    
合計                                                １００
【００４２】
２．クリームの調製
（組成）                                        （配合量：質量％）
マルバテイショウソウ抽出物                              １
モノステアリン酸グリセリド                              ２
モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20EO）      ２
セタノール                                              ７
スクワレン                                            ４０
プロピレングリコール                                  １０
流動パラフィン                                        １０
香料                                                  適量
水                                                    残量
合計                                                １００
【００４３】
３．軟膏の調製
（組成）                                        （配合量：質量％）
マルバテイショウソウ抽出物                              ２
サラシミツロウ                                        １１
流動パラフィン                                        ２２
ラノリン                                              １０
ポリソルベート８０                                      ２
オリーブ油                                            １５
防腐剤                                                適量
水                                                    残量
合計                                                １００