(57)【要約】【課題】  筋肉量の低下を防止する、あるいは、筋肉量を増加させることにより、生体内の筋肉の萎縮を抑制し、サルコペニアや廃用性筋萎縮等の種々の筋疾患の予防や治療に有用である筋萎縮防止剤及び、該筋萎縮防止剤を配合した筋萎縮防止用飲食品、筋萎縮防止用栄養組成物、筋萎縮防止用飼料を提供することを課題とする。【解決手段】  乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を有効成分として含有することを特徴とする筋萎縮防止剤。本発明の筋萎縮防止剤は、筋肉量の低下を防止する効果や筋肉量を増加させる効果が顕著であるため、サルコペニアや廃用性筋萎縮等の種々の筋疾患の予防や治療に有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を有効成分とする筋萎縮防止剤。
【請求項２】
前記乳由来塩基性タンパク質画分分解物が、乳由来塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で処理して得られるものであることを特徴とする請求項1に記載の筋萎縮防止剤。
【請求項３】
前記タンパク質分解酵素が、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン、パンクレアチン、パパインなる群から選択される少なくとも１種以上であることを特徴とする請求項２に記載の筋萎縮防止剤。
【請求項４】
前記乳由来塩基性タンパク質画分が、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を１５重量％以上含有していることを特徴とする請求項１から請求項３のいずれかに記載の筋萎縮防止剤。
【請求項５】
前記乳由来塩基性タンパク質画分が、乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度０．１Ｍ〜１．０Ｍの溶出液で溶出して得られる画分である請求項１から請求項３のいずれかに記載の筋萎縮防止剤。
【請求項６】
請求項１から請求項４のいずれかに記載の筋萎縮防止剤を含むことを特徴とする筋萎縮防止用飲食品、筋萎縮防止用栄養組成物又は筋萎縮防止用飼料。
【請求項７】
乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を１日あたり５ｍｇ以上摂取することによる筋萎縮の防止方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内での筋肉の萎縮を防止し、サルコペニアや廃用性筋萎縮等の種々の筋疾患の予防や治療に有用な筋萎縮防止剤に関する。本発明はまた、筋萎縮防止剤を配合した筋萎縮防止用飲食品、筋萎縮防止用栄養組成物、筋萎縮防止用飼料に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、日本人の平均寿命は８０歳に迫り、およそ４人に１人は６５歳以上という、超高齢社会を迎えた。これに伴って、運動器の障害の罹患率も増加の一途を辿り、２００７年に日本整形外科学会は、運動器の健康維持・増進、介護についての国民ならびに医師の意識改革を推進するために、「ロコモティブシンドローム（運動器症候群）」という新しい言葉を提唱した。ロコモティブシンドロームは、運動器の機能不全により要介護状態および要介護リスクが高まった状態を示し、運動器には骨・関節・靱帯、脊椎・脊髄、筋肉・腱、末梢神経など、体を支え、動かす役割をする器官が総じて含まれる。これら運動器で見られる代表的な疾患および機能障害として、骨粗鬆症やサルコペニア、変形性関節症などが挙げられる。
【０００３】
サルコペニアは、進行性および全身性の骨格筋量および骨格筋力の低下を特徴とする症候群である。サルコペニアは、狭義には加齢に関連して生じるものとして定義されるが、広義にはあらゆる原因による筋肉量と筋力の低下を意味する。広義のサルコペニアの場合、加齢以外に明らかな原因がないものを一次性（加齢性）サルコペニア、加齢以外の１つ以上の原因が明らかなものを二次性サルコペニアと分類している。二次性サルコペニアは、活動量の低下に起因するもの、疾患によるもの、栄養素の摂取不足によるものの大きく３つに分けられる。つまり、二次性サルコペニアの患者は高齢者に限らず、例えば、入院などによって、長期間筋肉を使わない状態が続いた場合に生じる廃用性筋萎縮も二次性サルコペニアのひとつとされる。
サルコペニアの発病と進行には、骨格筋タンパク質の代謝が関連している。骨格筋の量は、筋タンパク質合成と筋タンパク質分解のバランスにより調整されているが、そのバランスが崩れて合成量が分解量を下回る、あるいは、分解量が合成量を上回ると、筋肉の萎縮が生じて筋肉量が低下する。高齢者においては、タンパク質の合成促進作用および分解抑制作用を有する成長ホルモンの分泌量が低下することや、タンパク質合成抑制作用を有する副腎皮質ホルモン（グルココルチコイド）の血中濃度が上昇することなどによって、合成量が分解量を下回り、これが筋萎縮の原因となる。一方、二次性サルコペニアでは、骨格筋への運動刺激がないことで、タンパク質合成が低下した結果、分解量が合成量を上回り、筋萎縮が生じる。
サルコペニアなどの筋疾患の予防や改善には、運動面における高強度のレジスタンストレーニングが有効であることが確認されている。しかし、高齢者や病後の療養生活において、高強度の運動を積極的に実施することは身体的な負担が大きく、また実施の際にも、専門家による適切な指導が必要となる。このため、サルコペニアの予防や改善には、基礎体力や運動機能が低下した人でも手軽に実施できる栄養面からのアプローチが望まれている。
サルコペニアなどの筋疾患の予防や改善に有効な、筋肉機能を改善させる効果を有する食品成分としては、例えば、果実ポリフェノールによる筋萎縮抑制（特許文献１）、リコピンによるタンパク質分解抑制（特許文献２）、カテキン類による筋肉老化抑制（特許文献３）等が開示されている。また、タンパク質やアミノ酸の摂取による骨格筋萎縮の予防と早期回復に関する検討についても行なわれている。特に、牛乳中に含まれる乳清タンパク質は、大豆タンパク質と比較して筋肉の合成に関わる分岐鎖アミノ酸（ｂｒａｎｃｈｅｄ-ｃｈａｉｎ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ；ＢＣＡＡ）含量が高い上、ＮＰＵ（Ｎｅｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ；正味タンパク質利用率）も高いことが知られており、運動時における筋肉の増強および回復のためのサプリメントとして利用が進んでいる。しかしながら、これら成分は有効摂取量が多いため、日常的な摂取が負担となるほか、飲食品へ応用する場合には、それらの成分特有の風味あるいは呈色が飲食品の官能へ悪影響を及ぼす可能性があるといった問題がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００１−８９３８７号公報
【特許文献２】特開２００４−５９５１８号公報
【特許文献３】特開２００８−６３３２１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、生体内での筋肉の萎縮を抑制する作用を有する筋萎縮防止剤及び筋萎縮防止剤を配合した筋萎縮防止用飲食品、筋萎縮防止用栄養組成物又は筋萎縮防止用飼料を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記の課題を解決するため鋭意検討を進めたところ、乳由来の塩基性タンパク質画分やその分解物に筋萎縮防止効果があることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００７】
すなわち、本発明は以下の構成によるものである。
（１）乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を有効成分とする筋萎縮防止剤。
（２）前記乳由来塩基性タンパク質画分分解物が、乳由来塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で処理して得られるものであることを特徴とする（１）に記載の筋萎縮防止剤。
（３）前記タンパク質分解酵素が、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン、パンクレアチン、パパインなる群から選択される少なくとも１種以上であることを特徴とする（２）に記載の筋萎縮防止剤。
（４）前記乳由来塩基性タンパク質画分が、そのアミノ酸組成中に塩基性アミノ酸を１５重量％以上含有していることを特徴とする（１）から（３）のいずれかに記載の筋萎縮防止剤。
（５）前記乳由来塩基性タンパク質画分が、乳または乳由来の原料を陽イオン交換樹脂に接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した画分を塩濃度０．１Ｍ〜１．０Ｍの溶出液で溶出して得られる画分である（１）から（３）のいずれかに記載の筋萎縮防止剤。
（６）（１）から（４）のいずれかに記載の筋萎縮防止剤を含むことを特徴とする筋萎縮防止用飲食品、筋萎縮防止用栄養組成物又は筋萎縮防止用飼料。
（７）乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を１日あたり５ｍｇ以上摂取することによる筋萎縮の防止方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の筋萎縮防止剤は、生体内での筋肉の萎縮を抑制する効果を有し、サルコペニアや廃用性筋萎縮等の種々の筋疾患の予防や治療に有用である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明の特徴は、乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を有効成分とすることにある。本発明で用いる乳由来塩基性タンパク質画分は、牛乳、人乳、山羊乳、羊乳など哺乳類の乳から得られるものであり、また、本発明で用いる乳由来塩基性タンパク質画分分解物は、乳由来塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で処理して得ることができる。
【００１０】
本発明の有効成分である乳由来塩基性タンパク質画分は、次の性質を有している。
１)ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）によると分子量３，０００〜８０，０００の範囲の数種のタンパク質よりなる。
２)９５重量％以上がタンパク質であって、その他少量の脂肪、灰分を含む。
３)タンパク質は主としてラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼよりなる。
４)タンパク質のアミノ酸組成は、リジン、ヒスチジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸を１５重量％以上含有する。
【００１１】
本発明の有効成分である乳由来塩基性タンパク質画分は、例えば、脱脂乳や乳清などの乳原料を陽イオン交換樹脂と接触させて塩基性タンパク質を吸着させ、この樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を０．１Ｍ〜１．０Ｍの塩濃度の溶出液で溶出し、この溶出画分を回収して、逆浸透（ＲＯ）膜や電気透析（ＥＤ）法などにより脱塩及び濃縮し、必要に応じて乾燥することにより得ることができる。
また、本発明の乳由来塩基性タンパク質画分を得る方法としては、乳または乳由来の原料を陽イオン交換体に接触させて塩基性タンパク質を吸着させた後、この陽イオン交換体に吸着した塩基性タンパク質画分を、ｐＨ５を越え、イオン強度０．５を越える溶出液で溶出して得る方法（特開平５−２０２０９８号公報）、アルギン酸ゲルを用いて得る方法（特開昭６１−２４６１９８号公報）、無機の多孔性粒子を用いて乳清から得る方法（特開平１−８６８３９号公報）、硫酸化エステル化合物を用いて乳から得る方法（特開昭６３−２５５３００号公報）などが知られており、本発明では、このような方法で得られた乳由来塩基性タンパク質画分を用いることができる。
さらに、乳由来塩基性タンパク質画分分解物は、乳由来塩基性タンパク質画分と同様のアミノ酸組成を有しており、上記の方法で得られた乳由来塩基性タンパク質画分をタンパク質分解酵素で処理して平均分子量４，０００以下の乳由来塩基性タンパク質画分分解物として得ることができる。なお、タンパク質分解酵素としては、市販されているプロテアーゼＡ「アマノ」ＳＤ（商品名）、サモアーゼＰＣ１０Ｆ（商品名）、プロチンＳＤ−ＡＹ１０（商品名）等の食品・工業用プロテアーゼが使用できるほか、ペプシン、トリプシン、キモトリプシン、パンクレアチン、パパイン等の酵素を挙げることができる。また、これらのタンパク質分解酵素を適宜組み合わせて使用してもよい。
【００１２】
上述の方法によって得られた乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物は、そのまま本発明の筋萎縮防止剤として使用してもよいが、必要に応じて、常法に従い、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤等に製剤化することもできる。
【００１３】
本発明の有効成分である乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を製剤化あるいは飲食品等へ添加する場合、添加方法、配合方法等に特に制限はなく、例えば、溶液中で添加、配合するには、乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を脱イオン水に懸濁あるいは溶解し、撹拌混合した後、製剤化、あるいは飲食品や飼料の形態に調製して使用すればよい。
撹拌混合の条件としては、乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物が均一に混合されればよく、ウルトラディスパーサーやＴＫホモミクサー等を使用して撹拌混合することも可能である。また、その溶液は、製剤化、あるいは飲食品や飼料に使用しやすいように、必要に応じて、ＲＯ膜等での濃縮や、凍結乾燥して使用することができる。本発明では、医薬品、飲食品や飼料の製造に通常使用される殺菌処理が可能であり、粉末状であっては乾熱殺菌も可能である。
以上により、本発明の筋肉防止剤は、液状、ゲル状、粉末状、顆粒状等様々な形態とすることが可能であり、また、製剤化した後に栄養剤やヨーグルト、乳飲料、ウエハース等の飲食品や栄養組成物に配合することも可能である。
【００１４】
本発明の筋萎縮防止剤は、有効成分として乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を含む他、製剤化に際して、通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤等の希釈剤又は賦形剤を用いることができる。賦形剤としては、例えば、ショ糖、乳糖、デンプン、結晶性セルロース、マンニット、軽質無水珪酸、アルミン酸マグネシウム、合成珪酸アルミニウム、メタ珪酸アルミン酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸水素カルシウム、カルボキシルメチルセルロースカルシウム等を１種又は２種以上組み合わせて用いることが可能である。
また、本発明の筋萎縮防止剤では、安定剤や糖類、脂質、フレーバー、ビタミン、ミネラル、フラボノイド、ポリフェノール等を併用することも可能であり、飲食品や飼料を調製する際に、適宜これらを配合して使用することができる。また、他の筋肉機能を改善させる効果を示す成分、例えば、果実プリフェノールやリコピン、カテキン類、分岐鎖アミノ酸（ｂｒａｎｃｈｅｄ-ｃｈａｉｎ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ；ＢＣＡＡ）、大豆タンパク質等とともに使用することも可能である。
【００１５】
本発明の筋萎縮防止剤は、後述する試験例に示すように、マウスやラットに体重１ｋｇあたり５ｍｇ以上経口摂取させることにより、生体内での筋肉の萎縮を防止することが可能である。実験動物における摂取量は、血中薬物濃度において、成人一人あたりの摂取量に該当することから（中島光好（１９９３）「第８巻  薬効評価」  廣川書店  ２−１８頁）、通常、成人一人一日あたり、本発明の筋萎縮防止剤を５ｍｇ以上摂取することにより、生体内での筋肉の萎縮、特にサルコペニアや廃用性筋萎縮等に対する予防や治療の効果が期待できる。したがって、乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を、この必要量を確保できるように製剤化あるいは飲食品等に配合すればよい。例えば、成人一人一日あたり、乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を５ｍｇ以上摂取させるためには、医薬、飲食品、飼料の形態にもよるが、最終製品として、１００ｇあたり乳由来塩基性タンパク質画分及び／又は乳由来塩基性タンパク質画分分解物を０．０５〜２００ｍｇ含有させればよい。
【００１６】
以下に実施例及び試験例を示し、本発明について詳細に説明するが、これらは単に例示するのみであり、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００１７】
陽イオン交換樹脂のスルホン化キトパール（富士紡績株式会社製）４００ｇを充填したカラム（直径５ｃｍ×高さ３０ｃｍ）を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに未殺菌脱脂乳４０リットル（ｐＨ６．７）を流速２５ｍｌ／ｍｉｎで通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、０．９８Ｍ塩化ナトリウムを含む０．０２Ｍ炭酸緩衝液（ｐＨ７．０）で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。この操作を１０回繰り返して、溶出液を逆浸透（ＲＯ）膜により脱塩して、濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の乳由来塩基性タンパク質画分２１０ｇを得た（実施例品１）。得られた乳由来塩基性タンパク質画分について、ソジウムドデシルサルフェート−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）により測定したところ、分子量は３,０００〜８０,０００の範囲に分布しており、成分組成は表１に示すとおりであった。また、６Ｎ塩酸で１１０℃、２４時間加水分解した後、アミノ酸分析装置（Ｌ−８５００型、日立製作所製）でそのアミノ酸組成を分析した結果、表２に示したように塩基性アミノ酸が１５重量％以上含まれていた。さらに、ＥＬＩＳＡ法により、そのタンパク質組成を分析したところ、表３に示すように、４０％以上のラクトフェリン及びラクトパーオキシダーゼが含まれていた。
【００１８】
【表１】
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【００１９】
【表２】
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【００２０】
【表３】
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【実施例２】
【００２１】
陽イオン交換樹脂のＳＰトーヨーパール（東ソー株式会社製）３０ｋｇを充填したカラム（直径１００ｃｍ×高さ１０ｃｍ）を脱イオン水で十分洗浄した後、このカラムに１２１℃で３０秒間加熱殺菌したチーズホエー３ｔ(ｐＨ６．２)を流速１０リットル／ｍｉｎで通液した。通液後、このカラムを脱イオン水で十分洗浄し、０．９Ｍ塩化ナトリウムを含む０．１Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ５．７）で樹脂に吸着した塩基性タンパク質画分を溶出した。そして、この溶出液を電気透析（ＥＤ）法により脱塩し、濃縮した後、凍結乾燥して粉末状の乳由来塩基性タンパク質画分１８３ｇを得た（実施例品２）。
【実施例３】
【００２２】
実施例１で得られた乳由来塩基性タンパク質画分５０ｇを蒸留水１０リットルに溶解した後、１％パンクレアチン（シグマ社製）を添加し、３７℃で２時間反応させた。反応後、８０℃で１０分間加熱処理して酵素を失活させた後、凍結乾燥して乳由来塩基性タンパク質画分分解物４８．３ｇを得た（実施例品３）。
【実施例４】
【００２３】
実施例２で得られた乳由来塩基性タンパク質画分１２０ｇを精製水１．８リットルに溶解した後、４５℃に保持してプロテアーゼＡ「アマノ」ＳＤ（天野エンザイム社製）を２０ｇ添加し、２時間反応させた。８０℃で１０分間加熱して酵素を失活させた後、凍結乾燥して乳由来塩基性タンパク質画分分解物を９５ｇ得た（実施例品４）。
【００２４】
［試験例１］
（筋肉量低下防止試験）
実施例品１の乳由来塩基性タンパク質画分と実施例品３の乳由来塩基性タンパク質画分分解物を使用して、筋肉量低下防止効果を評価した。
実験動物として、２０週齢のＳＡＭ−Ｐ系雌マウスを使用した。マウスを体重が等しくなるように６群に分け（各群ｎ=７、２９．８±１．９ｇ）、生理食塩水を投与する群（コントロール群）、実施例品１、実施例品３をマウス体重１ｋｇあたり、それぞれ５ｍｇ〜１０ｍｇ投与する群（実施例品１（５ｍｇ／ｋｇ）群、実施例品１（１０ｍｇ／ｋｇ）群、実施例品３（５ｍｇ／ｋｇ）群）、マウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇの乳清タンパク質単離物（Ｗｈｅｙ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｉｓｏｌａｔｅ；ＷＰＩ、Ｆｏｎｔｅｒｒａ社製）を投与する群（ＷＰＩ（１２０mｇ／ｋｇ）群）、マウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇの緑茶由来のカテキン混合物（長良サイエンス株式会社製）を投与する群（カテキン混合物（１２０ｍｇ／ｋｇ）群）を設けた。それぞれの試料を毎日１回ゾンデで経口投与して、４５週齢まで飼育した。なお、実施例品１、３、ＷＰＩおよびカテキン混合物はそれぞれ生理食塩水に懸濁して、経口投与した。試験終了時に、ペントバルビタールナトリウム（５０ｍｇ／ｋｇ）麻酔下で、マウスの右後足から長指伸筋（ＥＤＬ）、前脛骨筋（ＴＡ）、ヒラメ筋（ＳＯＬ）、腓腹筋（ＧＡＳ）を摘出し、それぞれの筋肉の重量を測定し、体重あたりの相対重量（ｍｇ／１００ｇ体重）として算出した。その結果を表４に示す。
【００２５】
【表４】
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【００２６】
表４の結果から、体重あたりの相対筋重量は、長指伸筋、前脛骨筋、ヒラメ筋および腓腹筋すべてにおいて、実施例品１の乳由来塩基性タンパク質画分をマウス体重１ｋｇあたり５ｍｇまたは１０ｍｇ投与した群、実施例品３の乳由来塩基性タンパク質画分分解物をマウス体重１ｋｇあたり５ｍｇ投与した群、カテキン混合物をマウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇ投与した群が、コントロール群に比べ有意に高かった。一方、ＷＰＩをマウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇ投与した群の体重あたりの相対筋重量は、長指伸筋、前脛骨筋、ヒラメ筋および腓腹筋すべてにおいて、コントロール群と差は認められなかった。
試験に用いたＳＡＭ−Ｐ系マウスは老化促進マウスであることから、コントロール群では老化に伴って筋肉が萎縮して筋肉量が低下したが、実施例品１、３およびカテキン混合物を投与した群では、老化による筋肉の萎縮を抑制し、筋肉量の低下が抑制されたものの、ＷＰＩを投与した群では効果が認められなかった。
また、実施例品１、３をマウス体重１ｋｇあたり５ｍｇ投与した場合の長指伸筋と前脛骨筋、ヒラメ筋の重量は、カテキン混合物をマウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇ投与した場合と同等であったが、実施例品１、３をマウス体重１ｋｇあたり５ｍｇ投与した場合の腓腹筋の重量は、カテキン混合物をマウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇ投与した場合に比べ有意に高かった。また、実施例品１をマウス体重１ｋｇあたり１０ｍｇ投与した場合の体重あたりの相対筋重量は、長指伸筋、前脛骨筋、ヒラメ筋および腓腹筋すべてにおいて、カテキン混合物をマウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇ投与した場合に比べ有意に高かった。
したがって、本発明の乳由来塩基性タンパク質画分と乳由来塩基性タンパク質画分分解物には、ＷＰＩやカテキン混合物よりも優れた筋肉量低下防止効果があり、その効果は、マウス体重１ｋｇあたり５ｍｇ以上投与した場合に認められることが明らかとなった。
【００２７】
［試験例２］
(筋肉量増加試験)
実施例品２の乳由来塩基性タンパク質画分と実施例品４の乳由来塩基性タンパク質画分分解物を使用して、筋肉量増加効果を評価した。
実験動物として、６週齢のＷｉｓｔａｒ系雌ラットを使用した。ラットを各群の体重が等しくなるように７群に分け（各群ｎ＝７、１４５．４±６．５ｇ）、尾部懸垂を行わず通常通りに飼育する群（通常飼育群）、尾部懸垂後の回復期間に生理食塩水を投与する群（生理食塩水群）、尾部懸垂後の回復期間に実施例品２、４をラット体重１ｋｇあたり、５〜１０ｍｇ投与する群（実施例品２（５ｍｇ／ｋｇ）群、実施例品２（１０ｍｇ／ｋｇ）群、実施例品４（５ｍｇ／ｋｇ）群）、尾部懸垂後の回復期間にマウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇの乳清タンパク質単離物（ＷＰＩ、Ｆｏｎｔｅｒｒａ社製）を投与する群（ＷＰＩ（１２０mｇ／ｋｇ）群）、尾部懸垂後の回復期間にラット１ｋｇあたり１２０ｍｇの緑茶由来のカテキン混合物（長良サイエンス株式会社製）を投与する群（カテキン混合物（１２０ｍｇ／ｋｇ）群）を設けた。群分け後、通常飼育群は通常飼育用ケージ内での飼育を継続し、残りの６群は尾部懸垂により後肢が非荷重状態になるようにして１週間飼育した。尾部懸垂終了後、全ての群を通常飼育用のケージに移して回復期間を設け、それぞれの群に前述の試料を、毎日１回、ゾンデにより経口投与して１週間飼育した。なお、通常飼育群には、尾部懸垂した群の回復期間に相当する間（１週間）、毎日１回、ゾンデにより生理食塩水を経口投与した。また、実施例品２、４、ＷＰＩおよびカテキン混合物は、それぞれ生理食塩水に懸濁して、経口投与した。試験終了後、ペントバルビタールナトリウム（５０ｍｇ／ｋｇ）麻酔下で、下腿骨格筋（ヒラメ筋：ＳＯＬ）を摘出し、筋重量を測定し、体重あたりの相対筋重量（ｍｇ／１００ｇ体重）を算出した。その結果を表５に示す。
【００２８】
【表５】
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【００２９】
表５の結果から、体重あたりのヒラメ筋重量は、尾部懸垂をした生理食塩水群で、通常飼育群に比べて有意に低下した。しかし、実施例品２をラット体重１ｋｇあたり５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇの投与量で投与した群、ならびに実施例品４の乳由来塩基性タンパク質画分分解物をラット体重１ｋｇあたり５ｍｇ投与した群では、生理食塩水群に比較して有意にヒラメ筋重量が増加し、その程度は通常飼育群と同等であった。一方、ＷＰＩをマウス体重１ｋｇあたり１２０ｍｇ投与した群では、体重あたりのヒラメ筋重量に、コントロール群と差は認められなかった。また、カテキン混合物をラット体重１ｋｇあたり１２０ｍｇ投与した群では、生理食塩水群に比べ、有意にヒラメ筋重量が増加したが、その効果は、実施例品１または４をラット体重１ｋｇあたり５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ投与した群より低かった。したがって、本発明の乳由来塩基性タンパク質画分と乳由来塩基性タンパク質画分分解物には、ＷＰＩやカテキン類より優れた筋肉量増加効果があり、その効果は、ラット体重１ｋｇあたり５ｍｇ以上投与した場合に認められることが明らかとなった。
【実施例５】
【００３０】
（筋萎縮防止用錠剤の調製）
表６に示す配合で原材料を混合後、常法により１ｇに成型、打錠して筋萎縮防止用錠剤を製造した。
【００３１】
【表６】
2014193821.tif 000007
【実施例６】
【００３２】
（筋萎縮防止用栄養組成物の調製）
実施例品３の乳由来塩基性タンパク質画分分解物２５ｇを４，９７５ｇの脱イオン水に溶解し、５０℃まで加熱後、ＴＫホモミクサー（ＴＫ  ＲＯＢＯ  ＭＩＣＳ；特殊機化工業社製）にて、６，０００ｒｐｍで３０分間撹拌混合して、実施例品３の乳由来塩基性タンパク質画分分解物を２５ｇ／５ｋｇを含有する溶液を得た。この溶液５．０ｋｇに、カゼイン５．０ｋｇ、大豆タンパク質５．０ｋｇ、魚油１．０ｋｇ、シソ油３．０ｋｇ、デキストリン１７．０ｋｇ、ミネラル混合物６．０ｋｇ、ビタミン混合物１．９５ｋｇ、乳化剤２．０ｋｇ、安定剤４．０ｋｇ、香料０．０５ｋｇを配合し、２００ｍｌのレトルトパウチに充填し、レトルト殺菌機（第１種圧力容器、ＴＹＰＥ:ＲＣＳ−４ＣＲＴＧＮ、日阪製作所製）で１２１℃、２０分間殺菌して、本発明の筋萎縮防止用液状栄養組成物５０ｋｇを製造した。なお、この筋萎縮防止用液状栄養組成物には、１００ｇあたり、実施例品３の乳由来塩基性タンパク質画分分解物が５０ｍｇ含まれていた。
【実施例７】
【００３３】
（筋萎縮防止用飲料の調製）
脱脂粉乳３００ｇを４０９．５ｇの脱イオン水に溶解した後、実施例品２の乳由来塩基性タンパク質画分０．５ｇを溶解し、５０℃まで加熱後、ウルトラディスパーサー（ＵＬＴＲＡ−ＴＵＲＲＡＸ  Ｔ−２５；ＩＫＡジャパン社製）にて、９，５００ｒｐｍで３０分間撹拌混合した。マルチトール１００ｇ、酸味料２ｇ、還元水飴２０ｇ、香料２ｇ、脱イオン水１６６ｇを添加した後、１００ｍｌのガラス瓶に充填し、９５℃、１５秒間殺菌後、密栓し、本発明の筋萎縮防止用飲料１０本（１００ｍｌ入り）を調製した。なお、この筋萎縮防止用飲料には、１００ｍｌあたり実施例品２の乳由来塩基性タンパク質画分が５０ｍｇ含まれていた。
【実施例８】
【００３４】
（イヌ用筋萎縮防止用飼料の調製）
実施例品４の乳由来塩基性タンパク質画分分解物１ｋｇを９９ｋｇの脱イオン水に溶解し、５０℃まで加熱後、ＴＫホモミクサー（ＭＡＲＫ  ＩＩ  １６０型；特殊機化工業社製）にて、３，６００ｒｐｍで４０分間撹拌混合して、実施例品４の乳由来塩基性タンパク質画分分解物を１ｇ／１００ｇ含有する溶液を得た。この乳由来塩基性タンパク質画分分解物溶液１０ｋｇに大豆粕１２ｋｇ、脱脂粉乳１４ｋｇ、大豆油４ｋｇ、コーン油２ｋｇ、パーム油２３．２ｋｇ、トウモロコシ澱粉１４ｋｇ、小麦粉９ｋｇ、ふすま２ｋｇ、ビタミン混合物５ｋｇ、セルロース２．８ｋｇ、ミネラル混合物２ｋｇを配合し、１２０℃、４分間殺菌して、本発明のイヌ用筋萎縮防止用飼料１００ｋｇを製造した。なお、このイヌ用筋萎縮防止用飼料には、１００ｇあたり、実施例品４の乳由来塩基性タンパク質画分分解物が１００ｍｇ含まれていた。