(57)【要約】      （修正有）【課題】アルツハイマー病および関連障害の処置のための組成物および投与方法の提供。【解決手段】前記疾患を処置するためにシナプス機能を調節する併用療法。ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも２つの化合物の組み合わせを含む組成物。【選択図】図１
2014205697.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも２つの化合物の組み合わせを含む組成物。
【請求項２】
ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも２つの化合物の組み合わせを含む組成物であって、組成物が、アルツハイマー病（ＡＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）および多発性硬化症（ＭＳ）からなる群より選択される神経変性障害において変化したシナプス機能を寛解させる、組成物。
【請求項３】
アルツハイマー病（ＡＤ）を処置するための、ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも２つの化合物の組み合わせを含む、請求項１記載の組成物。
【請求項４】
併用の、別々のまたは逐次的な投与のための、以下の薬物の組み合わせの少なくとも１つを含む組成物：
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびＧＡＢＡ作動性およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、
−  ＧＡＢＡ作動性およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）およびＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、
−  ＧＡＢＡ作動性およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびアデノシン受容体ＡＤＯＲＡ２Ｂのモジュレーター（好ましくは、ジフィリン）、
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびトロンビン受容体ＰＡＲ１のインヒビター（好ましくは、アルガトロバン）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびアデノシン受容体ＡＤＯＲＡ２Ｂのモジュレーター（好ましくは、ジフィリン）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、
−  ＰＤＥ１１ＡおよびＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ５Ａホスホジエステラーゼのインヒビター（好ましくは、タダラフィル）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）。
【請求項５】
それを必要とする対象におけるアルツハイマー病または関連障害を処置するための、請求項１記載の組成物であって、組成物が、併用の、別々のまたは逐次的な投与のための、以下の薬物の組み合わせの少なくとも１つを含む、組成物：
−  フェンホルミンおよびゾニサミド、
−  フェンホルミンおよびアカンプロセート、
−  フェンホルミンおよびスルフィソキサゾール、
−  アカンプロセートおよびスルフィソキサゾール、
−  ゾニサミドおよびスルフィソキサゾール、
−  アカンプロセートおよびシロスタゾール、
−  アカンプロセートおよびゾニサミド、
−  アカンプロセートおよびシロスタゾール、
−  ゾニサミドおよびジフィリン、
−  ゾニサミドおよびアルガトロバン、
−  フェンホルミンおよびジフィリン、
−  フェンホルミンおよびシロスタゾール、
−  タダラフィルおよびシロスタゾール、または
−  ゾニサミドおよびシロスタゾール。
【請求項６】
組成物が、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、シナプス機能を調節する薬物をさらに含む、請求項１〜５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
少なくとも１つの、シナプス機能を調節する薬物が、ＡＢＡＴのインヒビター、（好ましくは、ビガバトリン）；および／またはＡＢＬ１のインヒビター（好ましくは、イマチニブ）；および／またはＣＡＣＮＡ２Ｄ３のインヒビター（好ましくはプレガバリン）；および／またはＣＡＳＲのモジュレーター（好ましくは、シナカルセト）；および／またはＣＮＧＢ３のモジュレーター（好ましくは、アミロライド）、および／またはＤＨＦＲのインヒビター（好ましくは、トリアムテレン）、および／またはＥＰＨＡ３のインヒビター（好ましくは、ダサチニブ）、および／またはＧＡＢＲＡ２のモジュレーター（好ましくはフェノバルビタールおよびアズトレオナムから選択される）、および／またはＧＲＩＫ１のアンタゴニスト（好ましくは、トピラメート）、および／またはＨＴＲ１ＢおよびＨＴＲ１Ｄのモジュレーター（好ましくはエルゴタミンおよびエレトリプタンから選択される）、および／またはＫＣＮＤ２のアンタゴニスト（好ましくは、リドカイン）、および／またはＫＣＮＭＡ１のモジュレーター（好ましくは、クロルゾキサゾン）、および／またはＮＯＳ１のモジュレーター（好ましくはケトチフェンおよびプロピルチオウラシルから選択される）、および／またはＮＲＰ２のインヒビター（好ましくは、ペガプタニブ）、および／またはＯＰＣＭＬのモジュレーター（好ましくは、アルフェンタニル）、および／またはＯＰＲＫ１のモジュレーター（好ましくはブプレノルフィンおよびペンタゾシンから選択される）、および／またはＰＤＥ４Ｄのインヒビター（好ましくは、ミルリノン）、および／またはＰＲＫＧ１のアクチベーター（好ましくは、ニトロプルシド）、および／またはＲＨＯＡのモジュレーター（好ましくは、アレンドロネート）、および／またはＳＣＮ１Ａ／Ｂのインヒビター（好ましくは、ホスフェニトイン）、および／またはＳＬＣ６Ａ１のインヒビター（好ましくは、チアガビン）、および／またはＳＬＣ９Ａ１のモジュレーター（好ましくは、ブクリジン）、および／またはＳＬＣ１２Ａ１のインヒビター（好ましくは、ブメタニド）、および／またはトロンビンのインヒビター（好ましくは、デシルジン）、および／またはＴＳＰＯのモジュレーター（好ましくはフルニトラゼパムおよびテマゼパムから選択される）、および／またはＹＥＳ１のインヒビター（好ましくは、ダサチニブ）から選択される、請求項６記載の組成物。
【請求項８】
少なくとも１つの、シナプス機能を調節する薬物が、ＡＢＡＴ、ＡＢＩ１、ＡＢＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＫＴ、ＡＭＰＫ、ＡＮＫＲＡ、ＡＰＢＡ１、ＡＲＨＧＡＰ２６、ＡＴＧ５、ＢＡＳＳＯＯＮ、ＢＤＮＦ、ＢＥＣＬＩＮ１、ＢＩＮ１、ＢＫチャネル（ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＭＢ１）、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ２Ｄ３、ＣＡＣＮＡ２Ｄ４、ＣＡＤＰＳ２、ＣＡＬＣＩＮＥＵＲＩＮ、ＣＡＬＭＯＤＵＬＩＮ、ＣＡＳＫ、ＣＡＳＲ、ＣＡＳＴ、ＣＢＬ、ＣＤＣ２、ＣＤＣ４２、ＣＤＣ４２ＢＰＢ、ＣＤＣ４２ＥＰ３、ＣＤＨ１３、ＣＤＨ２、ＣＤＫ５、ＣＩＴＲＯＮ、ＣＮＧＢ３、ＣＯＲＴＡＣＴＩＮ、ＣＲＡＭ、ＣＲＥＢ、ＣＲＭＰ、ＣＴＮＮＢ１、ＤＡＢ１、ＤＣＣ、ＤＥＰＤＣ２、ＤＨＦＲ、ＤＬＧ２、ＤＹＮ１、ＤＹＮ３、ＥＮＤＯＰＨＩＬＩＮ、ＥＤＮＲＡ、ＥＰＨＡ３、ＥＰＨＢＲ、ＥＰＨＥＸＩＮ、ＥＰＨＲＩＮＡ、ＥＰＨＲＩＮＢ、ＥＲＢＢ４、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＦＥＳ、ＦＹＮ、ＧＡＢＢＲ１、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＴ１、ＧＬＲＡ１、ＧＥＰＨＹＲＩＮ、ＧＩＰＣ１、ＧＩＰＣ２、ＧＬＵＤ１、ＧＲＡＮＵＰＨＩＬＩＮ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＰ、ＧＲＭ３、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＨＯＭＥＲ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＫＡＬＩＲＩＮ、ＫＣＮＡ２、ＫＣＨＩＰ１、ＫＣＨＩＰ２．２、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ１２、ＫＴＮ１、ＫＹＮＵ、ＬＹＮ、ＭＡＭＬ３、ＭＩＮＴ１、ＭＵＣ１、ＭＵＮＣ１３、ＭＵＮＣ１８Ａ、ＭＹＯ６、ＭＹＯＬ、ＮＡＶ１、ＮＢＥＡ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＫ１、ＮＣＫ２、ＮＥＴＲＩＮ１、ＮＦＫＢ１、ＮＧＥＦ、ＮＧＦ、ＮＧＦＲ、ＮＩＬ１６、ＮＬＧＮ１、ＮＯＣ２、ＮＯＳ１、ＮＯＴＣＨ１、ＮＯＴＣＨ２、ＮＯＴＣＨ３、ＮＰＣ１、ＮＰＣ２、ＮＰＩＳＴ、ＮＲＧ３、ＮＲＰ１、ＮＲＰ２、ＮＲＸ３、ＮＴＦ３、ＮＴＦ５、ＮＷＡＳＰ、ＯＰＣＭＬ、ＯＰＲＫ１、ＰＡＫ６、ＰＡＫ７、ＰＡＲ１、ＰＡＲＫ２、ＰＤＥ１１Ａ、ＰＤＥ３Ａ／３Ｂ、ＰＤＥ４Ａ／４Ｂ／４Ｄ、ＰＩ３Ｋ、ＰＩＡＳ１、ＰＩＣＡＬＭ、ＰＩＣＫ１、ＰＩＰ５Ｋ、ＰＫＡ、ＰＫＣΑ、ＰＬＤ２、ＰＬＥＸＡ１、ＰＰ１Ｃ、ＰＰＦＩＢＰ１、ＰＲＫＧ１、ＰＳＤ９５、ＰＴＮ、ＰＴＰＲＦ、ＰＹＫ２、ＲＡＢ３Ｂ、ＲＡＢＰＨＩＬＩＮ、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１、ＲＡＳ、ＲＡＳＧＲＦ２、ＲＢＰＪ、ＲＥＥＬＩＮ、ＲＧＮＥＦ、ＲＨＯＡ、ＲＨＯＧ、ＲＩＭ２、ＲＩＭＳ１、ＲＩＭＳ２、ＲＯＢＯ２、ＲＯＣＫ２、ＲＰＨ３ＡＬ、ＳＡＣＭ１Ｌ、ＳＡＰＡＰ、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＥＣ２４Ｄ、ＳＥＭＡ３Ａ、ＳＥＭＡ３Ｃ、ＳＥＭＡ３Ｅ、ＳＥＭＡ４Ｃ、ＳＩＡＨ１Ａ、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＩＴ１、ＳＮＡＰ２５、ＳＯＲＢＳ２、ＳＲＣ、ＳＲＧＡＰ３、ＳＴＸ２、ＳＴＸＢＰ６、ＳＵＭ１、ＳＶ２Ｃ、ＳＹＮＡＰＴＯＪＡＮＩＮ、ＳＹＮＴＡＸＩＮ１Ａ、ＳＹＴ１２、ＴＡＣＥ、ＴＢＲ１、ＴＲＩＯ、ＴＲＫＢ、ＴＲＯＭＢＩＮ、ＴＳＰＯ、ＵＢＥ２Ａ、ＵＬＫ４、ＵＮＣ１３Ｃ、ＵＮＣ５Ｃ、ＶＡＭＰ２���ＶＡＭＰ５、ＶＥＬＩ、ＶＩＮＣＵＬＩＮ、ＷＡＳＰＩＰ、ＷＡＶＥ、ＷＷＯＸ、ＹＡＰ、およびＹＥＳ１から選択される遺伝子によってコードされるタンパク質に結合するかまたはその活性を調節する薬物から選択される、請求項６記載の組成物。
【請求項９】
組成物が、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、血管新生を調節する薬物をさらに含む、請求項１〜８のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１０】
少なくとも１つの、血管新生を調節する薬物が、アルブテロール、アレンドロネート、アンブリセンタン、アミノカプロン酸、バルサラジド、ベカプレルミン、カベルゴリン、クロピドグレル、ジヒドロエルゴタミン、エプレレノン、フェノルドパム、酢酸フルドロコルチゾン、ゲムフィブロジル、ヘスペレチン、レフルノミド、Ｌ−ヒスチジン、リオチロニン、マリマスタット、メロキシカム、メパクリン、メタゾラミド、メチマゾール、モンテルカスト、ネチルマイシン、ニトログリセリン、フェニルブチレート、ピリメタミン、スニチニブ、チエチルペラジン、チロフィバン、トポテカン、ビダラビンおよびワルファリンから選択される、請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
組成物が、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、細胞ストレス応答を調節する薬物をさらに含む、請求項１〜１０のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１２】
少なくとも１つの、細胞ストレス応答を調節する薬物が、アラビトール、マンニトール、メタラミノール、オメプラゾール、プリロカイン、ラパマイシン、リファブチン、チオグアニンおよびトレハロースから選択される、請求項１１記載の組成物。
【請求項１３】
薬学的に許容され得る担体または賦形剤を含む、請求項１〜１２のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１４】
組成物が対象に反復して投与される、請求項１〜１３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項１５】
アルツハイマー病または関連障害を処置するための薬物の製造方法であって、シナプス機能に対する活性について候補薬物を試験し、そしてシナプス機能を寛解させる候補薬物を選択する工程を含む、方法。
【請求項１６】
候補薬物が、請求項８に記載する遺伝子またはタンパク質に結合するか、またはその活性を調節するかどうかを決定することを含む、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
アルツハイマー病または関連障害を処置するための組成物の製造方法であって、それを必要とする対象への同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、シナプス機能を調節する薬物および血管新生または細胞ストレス応答を調節する薬物の組み合わせを調製することを含む、方法。
【請求項１８】
アルツハイマー病または関連障害の処置方法であって、シナプス機能を調節する薬物および血管新生または細胞ストレス応答を調節する薬物を、それを必要とする対象に同時に、別々にまたは逐次的に投与することを含む、方法。
【請求項１９】
同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、少なくともゾニサミドおよびアカンプロセート、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物を含む組成物。
【請求項２０】
アルツハイマー病または関連障害を処置するための、少なくともゾニサミドおよび／またはアカンプロセート、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物を含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アルツハイマー病（ＡＤ）および関連障害の処置のための組成物および方法に関する。
【０００２】
ＡＤは、皮質連合野の関与に起因し得る失語症（会話および会話の理解の機能障害が存在する言語障害）、統合運動障害（運動または感覚機能障害の非存在下で特定の目的のある動作および身振りを協調および実施することの能力障害）および失認（物体、人物、音、形状、または臭いを認識する能力）と一緒の記憶欠損によって特徴付けられる原型皮質認知症である。痙性対麻痺（下肢を冒す脱力）のような特殊な症候も関与し得る（１〜４）。
【０００３】
アルツハイマー病の発生率は年齢とともに劇的に増加する。ＡＤは、現在、認知症の最も一般的な原因である。それは、ゆっくりと進行し、そして末期患者をベッドに結びつけ、失調させ、そして療護に依存したたままにする認知機能の包括的な減退によって臨床的に特徴付けられる。死亡は、平均で、診断の９年後に起こる（５）。
【０００４】
ＡＤの発生率は年齢とともに劇的に増加する。国際連合人口予測は、８０歳より高齢の人々の数は２０５０年までに３億７千万に近づくと見積もっている。現在、８５歳より高齢の人々の５０％がＡＤに苦しんでいると見積もられている。それゆえ、世界中で１億人より多くの人々が５０年のうちに認知症に罹患する。不断の介護および他の奉仕を必要とする多数の人々が医学的、金銭的および人的資源に厳しい影響を及ぼす（６）。
【０００５】
記憶障害は、疾患の初期の特徴であり、そしてそれにはエピソード記憶（毎日の出来事のための記憶）が関与する。意味記憶（言語的および視覚的意味のための記憶）は、より後期に疾患に関与する。対照的に、作業記憶（情報を一時的に貯蔵および操作するために使用される構造およびプロセスが関与する短期記憶）および手続記憶（技術および手順の長期記憶である無意識記憶）は後期まで保存される。疾患が進行するにつれて、言語機能障害、視覚的知覚および空間欠損、失認および失行のさらなる特徴が出現する。
【０００６】
アルツハイマー病の古典的臨床像は、症例の約８０％における同定を可能にするために十分に特徴的である（７）。それにもかかわらず、臨床的不均一性が起こり、そしてこれは臨床管理のために重要であるだけでなく、機能的に異なる形態のための特定の薬物適用処置のさらなる意味を提供する（８）。
【０００７】
ＡＤの病理学的特徴は、βアミロイド（Ａβ）を含むアミロイド斑、タウを含む神経原線維変化（ＮＦＴ）ならびにニューロンおよびシナプスの機能障害および損失を含む（９〜１１）。この１０年間の間に、ＡＤの原因についての２つの主要な仮説が提唱されている：神経変性プロセスがアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の異常なプロセシングによって誘発される一連の事象であると述べる「アミロイドカスケード仮説」（１２）、および細胞骨格の変化が誘発事象であると提唱する「ニューロン細胞骨格変性仮説」（１３）。ＡＤの進行を説明する最も広く受け入れられている理論はアミロイドカスケード仮説に留まっており（１４〜１６）、そしてＡＤ研究者は主に、Ａβタンパク質に関連する毒性の基礎をなす機構の決定に集中している。反対に、タウタンパク質は、根本的および実用的の両方の懸念の故に、アミロイドよりもずっと少ない注目を製薬業界から受けている。さらに、シナプス密度の変化は、他の２つよりも認知機能障害に最も良好に相関する病理学的病変である。研究により、アミロイド病理が、コリン作動性終末が最も脆弱に見え、グルタミン酸作動性終末および最後にＧＡＢＡ作動性終末が続く、神経伝達物質特異的様式で進行するようであることが明らかになった（１１）。
【０００８】
発明の概要
本発明の目的は、ＡＤおよび関連障害を処置するための新たな治療アプローチを提供することである。
【０００９】
本発明者らは、ＡＤの起源に関与する分子経路を同定し、そしてＡＤおよび関連障害を寛解させるための新たな処置の開発のための、特に、新規の分子または他の適応症において以前に使用されている既存の分子を使用する併用療法の開発のための新規の標的を提供する。より特定すると、本発明者らは、単独でまたは組み合わせで、そのような経路に有効に影響を及ぼし、そしてＡＤおよび関連障害の処置のための新たなそして有効な治療を表すいくつかの薬物を同定した。
【００１０】
それゆえ、本発明は、ＡＤおよび関連障害を処置するための新規の組成物および方法を提供する。
【００１１】
より特定すると、本発明は、それを必要とする対象においてアルツハイマー病または関連障害を処置するために適切な組成物に関し、ここで組成物はシナプス機能を寛解させる薬物を含む。
【００１２】
本発明のさらなる目的は、それを必要とする対象においてアルツハイマー病または関連障害を処置するために適切な組成物に関し、ここで組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な投与のための、少なくとも２つの、シナプス機能を寛解させる薬物の組み合わせを含む。
【００１３】
より好ましくは、シナプス機能を寛解させる薬物（単数または複数）は、ＡＢＡＴ、ＡＢＩ１、ＡＢＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＫＴ、ＡＭＰＫ、ＡＮＫＲＡ、ＡＰＢＡ１、ＡＲＨＧＡＰ２６、ＡＴＧ５、ＢＡＳＳＯＯＮ、ＢＤＮＦ、ＢＥＣＬＩＮ１、ＢＩＮ１、ＢＫチャネル（ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＭＢ１）、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ２Ｄ３、ＣＡＣＮＡ２Ｄ４、ＣＡＤＰＳ２、ＣＡＬＣＩＮＥＵＲＩＮ、ＣＡＬＭＯＤＵＬＩＮ、ＣＡＳＫ、ＣＡＳＲ、ＣＡＳＴ、ＣＢＬ、ＣＤＣ２、ＣＤＣ４２、ＣＤＣ４２ＢＰＢ、ＣＤＣ４２ＥＰ３、ＣＤＨ１３、ＣＤＨ２、ＣＤＫ５、ＣＩＴＲＯＮ、ＣＮＧＢ３、ＣＯＲＴＡＣＴＩＮ、ＣＲＡＭ、ＣＲＥＢ、ＣＲＭＰ、ＣＴＮＮＢ１、ＤＡＢ１、ＤＣＣ、ＤＥＰＤＣ２、ＤＨＦＲ、ＤＬＧ２、ＤＹＮ１、ＤＹＮ３、ＥＤＮＲＡ、ＥＮＤＯＰＨＩＬＩＮ、ＥＰＨＡ３、ＥＰＨＢＲ、ＥＰＨＥＸＩＮ、ＥＰＨＲＩＮＡ、ＥＰＨＲＩＮＢ、ＥＲＢＢ４、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＦＥＳ、ＦＹＮ、ＧＡＢＢＲ１、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＴ１、ＧＬＲＡ１、ＧＥＰＨＹＲＩＮ、ＧＩＰＣ１、ＧＩＰＣ２、ＧＬＵＤ１、ＧＲＡＮＵＰＨＩＬＩＮ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＰ、ＧＲＭ３、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＨＯＭＥＲ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＫＡＬＩＲＩＮ、ＫＣＮＡ２、ＫＣＨＩＰ１、ＫＣＨＩＰ２．２、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ１２、ＫＴＮ１、ＫＹＮＵ、ＬＹＮ、ＭＡＭＬ３、ＭＩＮＴ１、ＭＵＣ１、ＭＵＮＣ１３、ＭＵＮＣ１８Ａ、ＭＹＯ６、ＭＹＯＬ、ＮＡＶ１、ＮＢＥＡ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＫ１、ＮＣＫ２、ＮＥＴＲＩＮ１、ＮＦＫＢ１、ＮＧＥＦ、ＮＧＦ、ＮＧＦＲ、ＮＩＬ１６、ＮＬＧＮ１、ＮＯＣ２、ＮＯＳ１、ＮＯＴＣＨ１、ＮＯＴＣＨ２、ＮＯＴＣＨ３、ＮＰＣ１、ＮＰＣ２、ＮＰＩＳＴ、ＮＲＧ３、ＮＲＰ１、ＮＲＰ２、ＮＲＸ３、ＮＴＦ３、ＮＴＦ５、ＮＷＡＳＰ、ＯＰＣＭＬ、ＯＰＲＫ１、ＰＡＫ６、ＰＡＫ７、ＰＡＲ１、ＰＡＲＫ２、ＰＤＥ１１Ａ、ＰＤＥ３Ａ／３Ｂ、ＰＤＥ４Ａ／４Ｂ／４Ｄ、ＰＩ３Ｋ、ＰＩＡＳ１、ＰＩＣＡＬＭ、ＰＩＣＫ１、ＰＩＰ５Ｋ、ＰＫＡ、ＰＫＣΑ、ＰＬＤ２、ＰＬＥＸＡ１、ＰＰ１Ｃ、ＰＰＦＩＢＰ１、ＰＲＫＧ１、ＰＳＤ９５、ＰＴＮ、ＰＴＰＲＦ、ＰＹＫ２、ＲＡＢ３Ｂ、ＲＡＢＰＨＩＬＩＮ、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１、ＲＡＳ、ＲＡＳＧＲＦ２、ＲＢＰＪ、ＲＥＥＬＩＮ、ＲＧＮＥＦ、ＲＨＯＡ、ＲＨＯＧ、ＲＩＭ２、ＲＩＭＳ１、ＲＩＭＳ２、ＲＯＢＯ２、ＲＯＣＫ２、ＲＰＨ３ＡＬ、ＳＡＣＭ１Ｌ、ＳＡＰＡＰ、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＥＣ２４Ｄ、ＳＥＭＡ３Ａ、ＳＥＭＡ３Ｃ、ＳＥＭＡ３Ｅ、ＳＥＭＡ４Ｃ、ＳＩＡＨ１Ａ、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＩＴ１、ＳＮＡＰ２５、ＳＯＲＢＳ２、ＳＲＣ、ＳＲＧＡＰ３、ＳＴＸ２、ＳＴＸＢＰ６、ＳＵＭ１、ＳＶ２Ｃ、ＳＹＮＡＰＴＯＪＡＮＩＮ、ＳＹＮＴＡＸＩＮ１Ａ、ＳＹＴ１２、ＴＡＣＥ、ＴＢＲ１、ＴＲＩＯ、ＴＲＫＢ、ＴＲＯＭＢＩＮ、ＴＳＰＯ、ＵＢＥ２Ａ、ＵＬＫ４、ＵＮＣ１３Ｃ、ＵＮ���５Ｃ、ＶＡＭＰ２、ＶＡＭＰ５、ＶＥＬＩ、ＶＩＮＣＵＬＩＮ、ＷＡＳＰＩＰ、ＷＡＶＥ、ＷＷＯＸ、ＹＡＰ、およびＹＥＳ１から選択される遺伝子によってコードされるタンパク質に結合するかまたはその活性を調節する。
【００１４】
そのような薬物の特定のそして好ましい例としては、限定するものではないが、アカンプロセート、アレンドロネート、アルフェンタニル、アミロライド、アムロジピン、アルガトロバン、アズトレオナム、バクロフェン、ブクリジン、ブメタニド、ブプレノルフィン、リドカイン、クロルゾキサゾン、シロスタゾール、シナカルセト、ダサチニブ、デシルジン、ジフィリン、エレトリプタン、エルゴタミン、フルニトラゼパム、ホスフェニトイン、イマチニブ、ケトチフェン、ミルリノン、ニトロプルシド、ペガプタニブ、ペンタゾシン、フェノバルビタール、フェンホルミン、プレガバリン、プロピルチオウラシル、スルフィソキサゾール、タダラフィル、テマゼパム、テルビナフィン、チアガビン、トピラメート、トリアムテレン、ビガバトリンおよびゾニサミド、またはその組み合わせから選択される化合物が挙げられる。
【００１５】
特定の実施態様において、本発明の組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、血管新生を調節する薬物をさらに含む。
【００１６】
あるいは、またはさらに、本発明の組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、細胞ストレス応答を調節する薬物をさらに含んでもよい。
【００１７】
本発明の組成物は、典型的には、薬学的に許容され得る担体または賦形剤をさらに含む。
【００１８】
本発明のさらなる目的は、アルツハイマー病または関連障害を処置するための薬物の製造方法であって、シナプス機能に対する活性について候補薬物を試験し、そしてシナプス機能を寛解させる候補薬物を選択する工程を含む、方法にある。
【００１９】
本発明はまた、アルツハイマー病または関連障害を処置するための組成物の製造方法であって、それを必要とする対象への同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、シナプス機能を調節する薬物および血管新生または細胞ストレス応答を調節する薬物の組み合わせを調製すること、および薬物の組み合わせを処方することを含む、方法に関する。
【００２０】
本発明はさらに、アルツハイマー病または関連障害の処置方法であって、シナプス機能を寛解させる薬物または薬物の組み合わせを、それを必要とする対象に同時に、別々にまたは逐次的に投与することを含む、方法に関する。
【００２１】
本発明はさらに、アルツハイマー病または関連障害の処置方法であって、シナプス機能を調節する薬物および血管新生を調節する薬物および／または細胞ストレス応答を調節する薬物を、それを必要とする対象に同時に、別々にまたは逐次的に投与することを含む、方法に関する。
【００２２】
本発明はさらに、アルツハイマー病または関連障害を処置するための医薬の製造のための、シナプス機能を寛解させる薬物の使用に関する。
【００２３】
本発明はさらに、アルツハイマー病または関連障害を処置するための医薬の製造のための、少なくとも２つの、シナプス機能を寛解させる薬物の組み合わせの使用に関し、ここで少なくとも２つの薬物は一緒に、別々にまたは逐次的に投与される。
【００２４】
本願において考察するように、上記の治療および併用療法は、ヒト対象においてＡＤを処置するための新規のそして有効なアプローチを提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】βアミロイド中毒ラット初代皮質ニューロン培養物における神経突起成長に対する選択した薬物の効果。◇◇：ｐ＜０．０１；◇◇◇◇：ｐ＜０．００００１：ビヒクルとは有意に異なる。＊：ｐ＜０．０５；＊＊＊＊：ｐ＜０．０００１：Ａβ２５−３５とは有意に異なる。両側スチューデントｔ検定。
【図２】βアミロイド中毒ラット初代皮質ニューロン培養物における神経突起成長に対するフェンホルミン薬物の効果。◇◇：ｐ＜０．０１：ビヒクルとは有意に異なる。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．００１：Ａβ２５−３５とは有意に異なる。両側スチューデントｔ検定。  Ａβ２５−３５  ２０μＭは、ビヒクル処理ニューロンに比較して、有意な中毒（２５％より高い）を生じる（図１−ＡおよびＢならびに図２、赤色）。この中毒は、神経保護のためのポジティブコントロールとみなされる、１０ｎｇ／ｍｌのＢＤＮＦによって効果的に防止される。  この中毒はまた、薬物アカンプロセート（図１Ａ）またはゾニサミド（図１Ｂ）のいずれかおよびフェンホルミン（図２）によって有意に防止される。
【００２６】
発明の詳細な説明
本発明は、ＡＤまたは関連障害を処置するための新たな治療アプローチを提供する。本発明は、そのような疾患の有効な矯正を可能にし、そして患者の処置のために使用され得る薬物または薬物の組み合わせの新規の使用を開示する。
【００２７】
用語「ＡＤ関連障害」は、アルツハイマー病（ＡＤ）、ＡＤ型老年認知症（ＳＤＡＴ）、パーキンソン病、レビー小体型認知症（Lewis body dementia）、血管性認知症、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）、加齢性記憶障害（ＡＡＭＩ）および加齢に関連する問題、脳炎後パーキンソニズム、ＡＬＳおよびダウン症候群を指す。
【００２８】
本明細書において使用する障害の「処置」は、障害によって誘発される症候の治療、防止、予防、遅延または低下を含む。処置なる用語は、特に、疾患の進行および関連する症候の制御を含む。
【００２９】
シナプス機能に言及する場合の用語「寛解」は、対象における既存の機能に比較してのシナプス機能の任意の増加を含む。そのような寛解は、回復（すなわち、正常レベルへの）、または、患者の状態を改善するためになお十分であるより低い増加を含み得る。そのような寛解を、実験の節において記載するような、公知の生物学的試験を使用して評価または検証することができる。
【００３０】
また、本発明の関連内での特定の化合物の指摘は、具体的に指名された分子だけでなく、その任意の薬学的に許容され得る塩、水和物、エステル、エーテル、異性体、ラセミ体、複合物、またはプロドラッグも含むことが意味される。
【００３１】
用語「組み合わせ」は、少なくとも２つ以上の薬物が対象に共投与されて、生物学的効果を引き起こす処置を指す。本発明による併用療法において、少なくとも２つの薬物を、一緒にまたは別々に、同時にまたは逐次的に投与してもよい。また、少なくとも２つの薬物を、異なる経路およびプロトコルを通して投与してもよい。その結果、それらは一緒に処方されてもよいが、組み合わせの薬物は別々に処方されてもよい。
【００３２】
上記で考察するように、本発明は、シナプス機能を寛解させる薬物または薬物の組み合わせを使用する、それを必要とする対象におけるアルツハイマー病または関連障害を処置するための組成物および方法に関する。
【００３３】
アルツハイマー病の様々な局面ならびに細胞シグナル伝達および機能的経路に存在する関連を描写する、細胞生物学研究、発現プロファイリング実験および遺伝子関連研究の結果をカバーする実験データの包括的統合により、本発明者らは、シナプス機能が、ＡＤを有する対象において変化した重要な機構を表すこと明らかにした。機能的ネットワーク中に位置し、そしてアルツハイマー病に関係付けられる遺伝子を以下の基準によって選択した：
（１）  −  アルツハイマー病の家族性症例を原因として担う遺伝子との直接的相互作用（ＡＰＰ、ＡｐｏＥ、プレセニリン、タウタンパク質）、
（２）  −  基準（１）によって選択される遺伝子の機能的パートナー；
（３）  −  基準（２）によって選択される遺伝子の最も近い機能的パートナー。
【００３４】
このプロセスを通して、本発明者らは、シナプス機能障害を担うネットワークがアルツハイマー病において冒されている主要な機能的ネットワークであることを確立することができた。
【００３５】
本発明者らは、シナプス損失が、進行性認知減退、記憶喪失および認知症を最終的に導くアルツハイマー病の機能的に関連する特徴であることをより具体的に確立した。重要なことに、シナプス損失は、神経原線維変化の発達またはアミロイド斑の沈着において顕在化される他のＡＤ特異的細胞病変マーカーと比較して、アルツハイマー病理に特徴付けられる認知障害とより良好に相関する。結果的に、シナプス組織化およびシナプス可塑性は、アルツハイマー病の関連での治療介入のための重要な標的を表す。
【００３６】
ＡＰＰタンパク質は、軸索輸送され、そしてシナプス前終末においてプロセシングされ、シナプスにおけるＡβの高蓄積を導く。Ａβ４２のオリゴマーならびにアミロイド斑自体は、長期増強の阻害のために重要であり、そしてＡＤ患者における記憶障害を主に担っている。
【００３７】
本発明者らのデータ統合手順は、ＡＤにおけるシナプス歪みに関係付けられ、そして形式上３つの主な機能群に分けることができる一群の遺伝子を明らかにした：シナプス後肥厚部（「ＰＳＤ」）の組織化およびシナプス後膜における正しい神経シグナル伝達に関与するタンパク質；神経伝達分子放出を保証するタンパク質；ならびに軸索成長およびシナプス機構の発達成熟に関与するタンパク質。
【００３８】
特定の実施態様において、本発明は、従って、シナプス後肥厚部に関与するタンパク質の活性を寛解させる薬物を使用する組成物および方法に関する。
【００３９】
興奮性シナプスの求心性部分（シナプス後肥厚部）は、足場タンパク質の堅固に組み込まれたネットワークおよび、記憶形成および学習を含む広範な認知機能を果たす神経伝達物質受容体から構成される。
【００４０】
本発明者らの分析によって同定された遺伝子のうち、ＤＬＧ２遺伝子は、クラスター化膜結合受容体、細胞接着分子およびアクチンに基づく細胞骨格の間の界面を作るＭＡＧＵＫファミリータンパク質をコードする。本発明者らはまた、興奮性シナプスにおいてＤＬＧ２タンパク質またはＤＬＧ２／ＰＳＤ９５タンパク質複合体と直接相互作用するグルタミン酸および増殖因子受容体の大きな群、すなわち、プレセニリンによってプロセシングされそして機能的に調節されるＥｒｂＢ４およびＴｒｋＢ受容体（１７〜１８）、カイニン酸のイオンチャネル型グルタミン酸受容体（ＧＲＩＫ２）およびＮＭＤＡ型（ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＮ２Ｂ）、δ型（ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２）グルタミン酸受容体、およびＧタンパク質共役型代謝型グルタミン酸受容体（ＧＲＭ３、ＧＲＭ７、およびＧＲＭ８）、を同定した。また、本発明者らは、シナプス受容体の下流シグナル伝達に関与するいくつかのエフェクター／モジュレータータンパク質（Ｒｈｏ／Ｒａｃエフェクタータンパク質であるシトロン、ＡＭＰＡ受容体をＲＡＳ／ＥＲＫキナーゼ、ＰＡＲＫ２およびＹＥＳ１キナーゼの活性化につなぐＲＡＳＧＦＲ２）を同定した。
【００４１】
本発明者らの分析によって明らかになった他のＡＤ関連の機能的に重要な遺伝子としては、興奮性シナプスにおけるシナプス前およびシナプス後膜の動的同時調節に関与する機能的複合体を形成するシナプス前γ−ニューレキシン（ＮＸＲ３）およびシナプス後ニューロリギン１（ＮＬＧＮ１）タンパク質が挙げられる。
【００４２】
一般に、アルツハイマー病に潜在的に関係付けられるＰＳＤタンパク質の集団は、興奮性グルタミン酸作動性シナプスの組織化に関与する受容体によって富化される；少しの抑制性ニューロン受容体（ＧＡＢＡ（Ａ）およびＧＡＢＡ（Ｂ））のみが本発明者らのデータマイニングスクリーニングによって検出された。
【００４３】
別の特定の実施態様において、本発明は、好ましくはシナプス前膜における、神経伝達物質放出の調節に関与するタンパク質の活性を寛解させる薬物を使用する組成物および方法に関する。
【００４４】
シナプス前形質膜の制限されそして高度に特殊化された活性ゾーンにおける神経伝達物質の放出は、活動電位によって誘発され、そして電位依存性カルシウム選択性Ｃａｖチャネル（神経伝達物質放出の正のモジュレーター）、ならびに大コンダクタンス電位およびカルシウム感受性カリウムチャネルであるＭａｘｉＫチャネル（神経伝達物質放出の負のモジュレーター）の組み合わせのそして反対の作用によって制御されている。両方の型のチャネルが、本発明者らの分析によって、アルツハイマー病の処置のための関連する治療標的として選択された。さらに、シナプス前膜における神経伝達物質放出は、ＰＲＫＧ１キナーゼおよび／またはシナプス前ＧＡＢＡ（Ｂ）受容体の活性に影響を及ぼす薬物の同時適用によって調節され得る。
【００４５】
本発明者らの分析により、活性ゾーンを構成するタンパク質とのシナプス小胞の成熟、結合および融合を担う神経伝達物質放出機構の構造的組織化に関与する一群のタンパク質（シナプス小胞融合に関与するＳＴＸ２およびＳＴＸＢＰ６タンパク質、シナプス小胞の成熟およびプライミングのために重要なＢＩＮ１、ＲＡＢ３Ｂ、ＵＮＣ１３Ｃタンパク質、およびＲＩＭＳ１／２足場タンパク質）も明らかとなった。本発明らの分析によって同定されたタンパク質は、シナプス小胞のエキソサイトーシス／エンドサイトーシスおよびリサイクリングに直接関与する構造タンパク質、およびその機能的活性依存性モジュレーターの両方を表す。
【００４６】
別の特定の実施態様において、本発明は、軸索成長およびガイダンスの調節に関与するタンパク質の活性を寛解させる薬物を使用する組成物および方法に関する。
【００４７】
軸索成長およびガイダンスの調節に関与するタンパク質は、正しい位置および結合性を確実にするようにニューロン前駆細胞および軸索が正しい目的地に向かって移動することを可能にする；それらはまた、新たに確立されたシナプスの発達成熟ならびにＡＤにおける軸索およびシナプスの分解に関与する。これらのプロセスは、認知機能の遂行のための根本的な役割を果たし、そしてＡβ沈着の毒性効果に対して非常に脆弱であるようである。
【００４８】
軸索成長およびガイダンスの継続的段階は、細胞外または膜繋留のネトリン、セマフォリン、エフリン、ＤＬＬおよびスリット分子ならびにそれらのそれぞれの機能的受容体（その大部分は本発明者らのデータマイニングアプローチによって明らかにされた）の組み合わせの作用によって堅固に制御されている。軸索成長受容体の大部分の活性化の機能的帰結は、低分子ＧＴＰａｓｅであるＲｈｏＡ、Ｒａｃ１およびＣｄｃ４２の活性をディファレンシャルに調節するそれらの能力に堅固に結びつけられ、ＲｈｏＡ  ＧＴＰａｓｅは神経突起退縮および成長円錐崩壊を主に担っている（１９）。
【００４９】
選択された遺伝子のうち、ＤＣＣ軸索ガイダンスネトリン受容体は、ニューロンの誘引および反発の両方に関与し、一方、ＵＮＣ５Ｃネトリン受容体はむしろニューロン反発活性を有する（２０）；セマフォリンおよびエフリンは、発達の間の神経系における成長円錐崩壊および反発を媒介し、そして成体ＣＮＳにおけるシナプス可塑性において重要な役割を果たしている（２１〜２５）。スリットタンパク質は、２つの堅固に関連するプロセスである軸索の反発および分枝に同時に関与し、そしてネトリン受容体の活性を調節する（２６）。最後に、ノッチ受容体は、アクチン細胞骨格の組織化を制御するＲＢＰＪ依存性およびＲＢＰＪ依存性の両方のＡＢＬ１／ＤＡＢ１／ＴＲＩＯ経路を通して軸索ガイダンスに影響を及ぼすようである（２７）。
【００５０】
本発明において、本発明者らは、アルツハイマー病および他の神経変性障害において変化したシナプス機能を寛解させるために使用することができる新規の組成物を提唱する。特定の実施態様において、本発明の組成物および方法は、上記で列挙するような１つの遺伝子またはタンパク質とのその相互作用またはその調節を通してシナプス機能を寛解させる薬物を使用する。
【００５１】
より具体的には、本発明の組成物は、ＡＢＡＴ、ＡＢＩ１、ＡＢＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＫＴ、ＡＭＰＫ、ＡＮＫＲＡ、ＡＰＢＡ１、ＡＲＨＧＡＰ２６、ＡＴＧ５、ＢＡＳＳＯＯＮ、ＢＤＮＦ、ＢＥＣＬＩＮ１、ＢＩＮ１、ＢＫチャネル（ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＭＢ１）、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ２Ｄ３、ＣＡＣＮＡ２Ｄ４、ＣＡＤＰＳ２、ＣＡＬＣＩＮＥＵＲＩＮ、ＣＡＬＭＯＤＵＬＩＮ、ＣＡＳＫ、ＣＡＳＲ、ＣＡＳＴ、ＣＢＬ、ＣＤＣ２、ＣＤＣ４２、ＣＤＣ４２ＢＰＢ、ＣＤＣ４２ＥＰ３、ＣＤＨ１３、ＣＤＨ２、ＣＤＫ５、ＣＩＴＲＯＮ、ＣＮＧＢ３、ＣＯＲＴＡＣＴＩＮ、ＣＲＡＭ、ＣＲＥＢ、ＣＲＭＰ、ＣＴＮＮＢ１、ＤＡＢ１、ＤＣＣ、ＤＥＰＤＣ２、ＤＨＦＲ、ＤＬＧ２、ＤＹＮ１、ＤＹＮ３、ＥＤＮＲＡ、ＥＮＤＯＰＨＩＬＩＮ、ＥＰＨＡ３、ＥＰＨＢＲ、ＥＰＨＥＸＩＮ、ＥＰＨＲＩＮＡ、ＥＰＨＲＩＮＢ、ＥＲＢＢ４、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＦＥＳ、ＦＹＮ、ＧＡＢＢＲ１、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＴ１、ＧＬＲＡ１、ＧＥＰＨＹＲＩＮ、ＧＩＰＣ１、ＧＩＰＣ２、ＧＬＵＤ１、ＧＲＡＮＵＰＨＩＬＩＮ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＰ、ＧＲＭ３、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＨＯＭＥＲ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＫＡＬＩＲＩＮ、ＫＣＮＡ２、ＫＣＨＩＰ１、ＫＣＨＩＰ２．２、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ１２、ＫＴＮ１、ＫＹＮＵ、ＬＹＮ、ＭＡＭＬ３、ＭＩＮＴ１、ＭＵＣ１、ＭＵＮＣ１３、ＭＵＮＣ１８Ａ、ＭＹＯ６、ＭＹＯＬ、ＮＡＶ１、ＮＢＥＡ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＫ１、ＮＣＫ２、ＮＥＴＲＩＮ１、ＮＦＫＢ１、ＮＧＥＦ、ＮＧＦ、ＮＧＦＲ、ＮＩＬ１６、ＮＬＧＮ１、ＮＯＣ２、ＮＯＳ１、ＮＯＴＣＨ１、ＮＯＴＣＨ２、ＮＯＴＣＨ３、ＮＰＣ１、ＮＰＣ２、ＮＰＩＳＴ、ＮＲＧ３、ＮＲＰ１、ＮＲＰ２、ＮＲＸ３、ＮＴＦ３、ＮＴＦ５、ＮＷＡＳＰ、ＯＰＣＭＬ、ＯＰＲＫ１、ＰＡＫ６、ＰＡＫ７、ＰＡＲ１、ＰＡＲＫ２、ＰＤＥ１１Ａ、ＰＤＥ３Ａ／３Ｂ、ＰＤＥ４Ａ／４Ｂ／４Ｄ、ＰＩ３Ｋ、ＰＩＡＳ１、ＰＩＣＡＬＭ、ＰＩＣＫ１、ＰＩＰ５Ｋ、ＰＫＡ、ＰＫＣΑ、ＰＬＤ２、ＰＬＥＸＡ１、ＰＰ１Ｃ、ＰＰＦＩＢＰ１、ＰＲＫＧ１、ＰＳＤ９５、ＰＴＮ、ＰＴＰＲＦ、ＰＹＫ２、ＲＡＢ３Ｂ、ＲＡＢＰＨＩＬＩＮ、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１、ＲＡＳ、ＲＡＳＧＲＦ２、ＲＢＰＪ、ＲＥＥＬＩＮ、ＲＧＮＥＦ、ＲＨＯＡ、ＲＨＯＧ、ＲＩＭ２、ＲＩＭＳ１、ＲＩＭＳ２、ＲＯＢＯ２、ＲＯＣＫ２、ＲＰＨ３ＡＬ、ＳＡＣＭ１Ｌ、ＳＡＰＡＰ、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＥＣ２４Ｄ、ＳＥＭＡ３Ａ、ＳＥＭＡ３Ｃ、ＳＥＭＡ３Ｅ、ＳＥＭＡ４Ｃ、ＳＩＡＨ１Ａ、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＩＴ１、ＳＮＡＰ２５、ＳＯＲＢＳ２、ＳＲＣ、ＳＲＧＡＰ３、ＳＴＸ２、ＳＴＸＢＰ６、ＳＵＭ１、ＳＶ２Ｃ、ＳＹＮＡＰＴＯＪＡＮＩＮ、ＳＹＮＴＡＸＩＮ１Ａ、ＳＹＴ１２、ＴＡＣＥ、ＴＢＲ１、ＴＲＩＯ、ＴＲＫＢ、ＴＲＯＭＢＩＮ、ＴＳＰＯ、ＵＢＥ２Ａ、ＵＬＫ４、ＵＮＣ１３Ｃ、ＵＮＣ５Ｃ、ＶＡＭＰ２、ＶＡＭＰ５、���ＥＬＩ、ＶＩＮＣＵＬＩＮ、ＷＡＳＰＩＰ、ＷＡＶＥ、ＷＷＯＸ、ＹＡＰ、およびＹＥＳ１から選択される遺伝子によってコードされるタンパク質への結合またはその活性の調節を通してシナプス機能を寛解させる薬物（単数または複数）を含む。
【００５２】
上記に列挙する遺伝子およびタンパク質の全ての配列は、遺伝子ライブラリーから入手可能であり、そして当技術分野において公知の技術によって単離され得る。さらに、これらの遺伝子およびタンパク質の活性を、実験の節において考察するような当技術分野において自体公知の技術によって評価することができる。
【００５３】
本発明はさらに、これらの標的遺伝子およびタンパク質を調節するために使用することができる薬物を記載する。本発明は、単独で、しかし好ましくは組合せで、上記の経路を調節し、そして前記疾患を処置するために使用され得る特定の薬物の同定および活性を開示する。特に、本発明者らは、文献中に既に存在するが、ヒト対象における異なる疾患を処置するために使用されている低分子を同定した。
【００５４】
この点で、最も好ましい実施態様において、本発明の組成物は、少なくともＡＢＡＴのインヒビター（好ましくは、ビガバトリン）；および／またはＡＢＬ１のインヒビター（好ましくは、イマチニブ）；および／またはＡＤＯＲＡ２Ｂのモジュレーター（好ましくは、ジフィリン）；および／またはＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）および／またはＣＡＣＮＡ１Ｃのインヒビター（好ましくは、アムロジピン）；および／またはＣＡＣＮＡ２Ｄ３のインヒビター（好ましくは、プレガバリン）；および／またはＣＡＳＲのモジュレーター（好ましくは、シナカルセト）；および／またはＣＮＧＢ３のモジュレーター（好ましくは、アミロライド）、および／またはＤＨＦＲのインヒビター（好ましくは、トリアムテレン）、および／またはＥＰＨＡ３のインヒビター（好ましくは、ダサチニブ）、および／またはＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、および／またはＧＡＢＢＲ２およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくはバクロフェンおよびアカンプロセートから選択される）、および／またはＧＡＢＲＡ２のモジュレーター（好ましくはフェノバルビタールおよびアズトレオナムから選択される）、および／またはＧＲＩＫ１のアンタゴニスト（好ましくは、トピラメート）、および／またはＧＲＩＮ２ＢおよびＧＲＩＮ３Ａのモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）、および／またはＨＴＲ１ＢおよびＨＴＲ１Ｄのモジュレーター（好ましくはエルゴタミンおよびエレトリプタンから選択される）、および／またはＫＣＮＤ２のアンタゴニスト（好ましくは、リドカイン）、および／またはＫＣＮＭＡ１のモジュレーター（好ましくは、クロルゾキサゾン）、および／またはＮＯＳ１のモジュレーター（好ましくはケトチフェンおよびプロピルチオウラシルから選択される）、および／またはＮＲＰ２のインヒビター（好ましくは、ペガプタニブ）、および／またはＯＰＣＭＬのモジュレーター（好ましくは、アルフェンタニル）、および／またはＯＰＲＫ１のモジュレーター（好ましくはブプレノルフィンおよびペンタゾシンから選択される）、および／またはトロンビン受容体ＰＡＲ１のインヒビター（好ましくは、アルガトロバン）、および／またはＰＤＥ１１ＡおよびＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ５Ａホスホジエステラーゼのインヒビター（好ましくは、タダラフィル）、および／またはＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、および／またはＰＤＥ４Ｄのインヒビター（好ましくは、ミルリノン）、および／またはＰＲＫＧ１のアクチベーター（好ましくはニトロプルシド、タダラフィルおよびシロスタゾールから選択される）、および／またはＲＨＯＡのモジュレーター（好ましくはアレンドロネートおよびテルビナフィンから選択される）、および／またはナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）、および／またはＳＣＮ１Ａ／Ｂのインヒビター（好ましくは、ホスフェニトイン）、および／またはＳＬＣ６Ａ１のインヒビター（好ましくは、チアガビン）、および／またはＳＬＣ９Ａ１のモジュレーター（好ましくは、ブクリジン）、および／またはＳＬＣ１２Ａ１のインヒビター（好ましくは、ブメタニド）、および／またはトロンビンのインヒビター（好ましくは、デシルジン）、および／またはＴＳＰＯのモジュレーター（好ましくはフルニトラゼパムおよびテマゼパムから選択される）、および／またはＹＥＳ１のインヒビター（好ましくは、ダサチニブ）を含む。
【００５５】
上記で考察するように、本発明は、特に、ＡＤおよび関連障害の機構に取り組むための併用療法をデザインすることを提唱する。この点で、最も好ましい標的および薬物の組み合わせの例を以下に開示する。
【００５６】
より好ましくは、本発明の組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な投与のための、以下の薬物の組み合わせの少なくとも１つを含む：
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびＧＡＢＡ作動性およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、
−  ＧＡＢＡ作動性およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）およびＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、
−  ＧＡＢＡ作動性およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびアデノシン受容体ＡＤＯＲＡ２Ｂのモジュレーター（好ましくは、ジフィリン）、
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびトロンビン受容体ＰＡＲ１のインヒビター（好ましくは、アルガトロバン）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびアデノシン受容体ＡＤＯＲＡ２Ｂのモジュレーター（好ましくは、ジフィリン）、
−  ＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、
−  ＰＤＥ１１ＡおよびＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ５Ａホスホジエステラーゼのインヒビター（好ましくは、タダラフィル）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、または
−  ナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）およびＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）。
【００５７】
本発明の組成物の最も好ましい例は、アカンプロセート、アレンドロネート、アルフェンタニル、アミロライド、アムロジピン、アルガトロバン、アズトレオナム、バクロフェン、ブクリジン、ブメタニド、ブプレノルフィン、リドカイン、クロルゾキサゾン、シロスタゾール、シナカルセト、ダサチニブ、デシルジン、ジフィリン、エレトリプタン、エルゴタミン、フルニトラゼパム、ホスフェニトイン、イマチニブ、ケトチフェン、ミルリノン、ニトロプルシド、ペガプタニブ、ペンタゾシン、フェンホルミン、フェノバルビタール、プレガバリン、プロピルチオウラシル、スルフィソキサゾール、タダラフィル、テマゼパム、テルビナフィン、チアガビン、トピラメート、トリアムテレン、ビガバトリンおよびゾニサミド、またはその組み合わせから選択される化合物を含む。
【００５８】
本発明の併用療法の最も好ましい例は、少なくとも以下の化合物の併用を含む：
−  フェンホルミンおよびゾニサミド、
−  フェンホルミンおよびアカンプロセート、
−  フェンホルミンおよびスルフィソキサゾール、
−  アカンプロセートおよびスルフィソキサゾール、
−  ゾニサミドおよびスルフィソキサゾール、
−  アカンプロセートおよびシロスタゾール、
−  アカンプロセートおよびゾニサミド、
−  アカンプロセートおよびシロスタゾール、
−  ゾニサミドおよびジフィリン、
−  ゾニサミドおよびアルガトロバン、
−  フェンホルミンおよびジフィリン、
−  フェンホルミンおよびシロスタゾール、
−  タダラフィルおよびシロスタゾール、または
−  ゾニサミドおよびシロスタゾール。
【００５９】
本発明の最も好ましい組成物は、同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも１つの化合物を含む。
【００６０】
より好ましい実施態様において、本発明の組成物は、同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも２つの化合物の組み合わせを含む。
【００６１】
別の実施態様において、本発明による組成物は、ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも２つの化合物の組み合わせを含み、ここで、組成物は、アルツハイマー病（ＡＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）および多発性硬化症（ＭＳ）からなる群より選択される神経変性障害において変化したシナプス機能を寛解させる。
【００６２】
別の好ましい実施態様において、本発明の組成物は、アルツハイマー病（ＡＤ）を処置するための、ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、フェンホルミン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物からなる群より選択される少なくとも２つの化合物の組み合わせを含む。
【００６３】
好ましくは、それを必要とする対象におけるアルツハイマー病または関連障害を処置するための組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な投与のための、以下の薬物の組み合わせの少なくとも１つを含む：
−  フェンホルミンおよびゾニサミド、
−  フェンホルミンおよびアカンプロセート、
−  フェンホルミンおよびスルフィソキサゾール、
−  アカンプロセートおよびスルフィソキサゾール、
−  ゾニサミドおよびスルフィソキサゾール、
−  アカンプロセートおよびシロスタゾール、
−  アカンプロセートおよびゾニサミド、
−  アカンプロセートおよびシロスタゾール、
−  ゾニサミドおよびジフィリン、
−  ゾニサミドおよびアルガトロバン、
−  フェンホルミンおよびジフィリン、
−  フェンホルミンおよびシロスタゾール、
−  タダラフィルおよびシロスタゾール、または
−  ゾニサミドおよびシロスタゾール。
【００６４】
最も好ましい実施態様において、本発明による組成物は、同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、少なくともゾニサミドおよびアカンプロセート、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物を含む。
【００６５】
別の好ましい実施態様において、本発明の組成物は、アルツハイマー病または関連障害を処置するための、少なくともゾニサミドおよび／またはアカンプロセート、またはその塩もしくはプロドラッグもしくは誘導体もしくは徐放性処方物を含む。
【００６６】
別の実施態様において、組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、シナプス機能を調節する薬物をさらに含む。
【００６７】
好ましくは、シナプス機能を調節するさらなる薬物は、ＡＢＡＴのインヒビター（好ましくは、ビガバトリン）；および／またはＡＢＬ１のインヒビター（好ましくは、イマチニブ）；および／またはＡＤＯＲＡ２Ｂのモジュレーター（好ましくは、ジフィリン）；および／またはＡＭＰＫのモジュレーター（好ましくは、フェンホルミン）および／またはＣＡＣＮＡ１Ｃのインヒビター（好ましくは、アムロジピン）；および／またはＣＡＣＮＡ２Ｄ３のインヒビター（好ましくはプレガバリン）；および／またはＣＡＳＲのモジュレーター（好ましくは、シナカルセト）；および／またはＣＮＧＢ３のモジュレーター（好ましくは、アミロライド）、および／またはＤＨＦＲのインヒビター（好ましくは、トリアムテレン）、および／またはＥＰＨＡ３のインヒビター（好ましくは、ダサチニブ）、および／またはＥＤＮＲＡエンドセリン受容体のアンタゴニスト（好ましくは、スルフィソキサゾール）、および／またはＧＡＢＢＲ２およびグルタミン酸作動性受容体のモジュレーター（好ましくはバクロフェンおよびアカンプロセートから選択される）、および／またはＧＡＢＲＡ２のモジュレーター（好ましくはフェノバルビタールおよびアズトレオナムから選択される）、および／またはＧＲＩＫ１のアンタゴニスト（好ましくは、トピラメート）、および／またはＧＲＩＮ２ＢおよびＧＲＩＮ３Ａのモジュレーター（好ましくは、アカンプロセート）、および／またはＨＴＲ１ＢおよびＨＴＲ１Ｄのモジュレーター（好ましくはエルゴタミンおよびエレトリプタンから選択される）、および／またはＫＣＮＤ２のアンタゴニスト（好ましくは、リドカイン）、および／またはＫＣＮＭＡ１のモジュレーター（好ましくは、クロルゾキサゾン）、および／またはＮＯＳ１のモジュレーター（好ましくはケトチフェンおよびプロピルチオウラシルから選択される）、および／またはＮＲＰ２のインヒビター（好ましくは、ペガプタニブ）、および／またはＯＰＣＭＬのモジュレーター（好ましくは、アルフェンタニル）、および／またはＯＰＲＫ１のモジュレーター（好ましくはブプレノルフィンおよびペンタゾシンから選択される）、および／またはトロンビン受容体ＰＡＲ１のインヒビター（好ましくは、アルガトロバン）、および／またはＰＤＥ１１ＡおよびＰＤＥ４Ａ、ＰＤＥ５Ａホスホジエステラーゼのインヒビター（好ましくは、タダラフィル）、および／またはＰＤＥ３Ａ／３ＢおよびＰＤＥ４Ａ／４ＢホスホジエステラーゼのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、シロスタゾール）、および／またはＰＤＥ４Ｄのインヒビター（好ましくは、ミルリノン）、および／またはＰＲＫＧ１のアクチベーター（好ましくはニトロプルシド、タダラフィルおよびシロスタゾールから選択される）、および／またはＲＨＯＡのモジュレーター（好ましくはアレンドロネートおよびテルビナフィンから選択される）、および／またはナトリウムチャネルＳＣＮ１ＡのインヒビターおよびＢＫチャネルのアクチベーター（好ましくは、ゾニサミド）、および／またはＳＣＮ１Ａ／Ｂのインヒビター（好ましくは、ホスフェニトイン）、および／またはＳＬＣ６Ａ１のインヒビター（好ましくは、チアガビン）、および／またはＳＬＣ９Ａ１のモジュレーター（好ましくは、ブクリジン）、および／またはＳＬＣ１２Ａ１のインヒビター（好ましくは、ブメタニド）、および／またはトロンビンのインヒビター（好ましくは、デシルジン）、および／またはＴＳＰＯのモジュレーター（好ましくはフルニトラゼパムおよびテマゼパムから選択される）、および／またはＹＥＳ１のインヒビター（好ましくは、ダサチニブ）から選択される。
【００６８】
他の実施態様において、シナプス機能を調節するさらなる薬物は、以下から選択される遺伝子によってコードされるタンパク質に結合するかまたはその活性を調節する薬物（単数または複数）から選択される：
ＡＢＡＴ、ＡＢＩ１、ＡＢＬ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＫＴ、ＡＭＰＫ、ＡＮＫＲＡ、ＡＰＢＡ１、ＡＲＨＧＡＰ２６、ＡＴＧ５、ＢＡＳＳＯＯＮ、ＢＤＮＦ、ＢＥＣＬＩＮ１、ＢＩＮ１、ＢＫチャネル（ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＭＢ１）、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ２Ｄ３、ＣＡＣＮＡ２Ｄ４、ＣＡＤＰＳ２、ＣＡＬＣＩＮＥＵＲＩＮ、ＣＡＬＭＯＤＵＬＩＮ、ＣＡＳＫ、ＣＡＳＲ、ＣＡＳＴ、ＣＢＬ、ＣＤＣ２、ＣＤＣ４２、ＣＤＣ４２ＢＰＢ、ＣＤＣ４２ＥＰ３、ＣＤＨ１３、ＣＤＨ２、ＣＤＫ５、ＣＩＴＲＯＮ、ＣＮＧＢ３、ＣＯＲＴＡＣＴＩＮ、ＣＲＡＭ、ＣＲＥＢ、ＣＲＭＰ、ＣＴＮＮＢ１、ＤＡＢ１、ＤＣＣ、ＤＥＰＤＣ２、ＤＨＦＲ、ＤＬＧ２、ＤＹＮ１、ＤＹＮ３、ＥＤＮＲＡ、ＥＮＤＯＰＨＩＬＩＮ、ＥＰＨＡ３、ＥＰＨＢＲ、ＥＰＨＥＸＩＮ、ＥＰＨＲＩＮＡ、ＥＰＨＲＩＮＢ、ＥＲＢＢ４、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＦＥＳ、ＦＹＮ、ＧＡＢＢＲ１、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＴ１、ＧＬＲＡ１、ＧＥＰＨＹＲＩＮ、ＧＩＰＣ１、ＧＩＰＣ２、ＧＬＵＤ１、ＧＲＡＮＵＰＨＩＬＩＮ、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＰ、ＧＲＭ３、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＨＯＭＥＲ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＫＡＬＩＲＩＮ、ＫＣＮＡ２、ＫＣＨＩＰ１、ＫＣＨＩＰ２．２、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ１２、ＫＴＮ１、ＫＹＮＵ、ＬＹＮ、ＭＡＭＬ３、ＭＩＮＴ１、ＭＵＣ１、ＭＵＮＣ１３、ＭＵＮＣ１８Ａ、ＭＹＯ６、ＭＹＯＬ、ＮＡＶ１、ＮＢＥＡ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＫ１、ＮＣＫ２、ＮＥＴＲＩＮ１、ＮＦＫＢ１、ＮＧＥＦ、ＮＧＦ、ＮＧＦＲ、ＮＩＬ１６、ＮＬＧＮ１、ＮＯＣ２、ＮＯＳ１、ＮＯＴＣＨ１、ＮＯＴＣＨ２、ＮＯＴＣＨ３、ＮＰＣ１、ＮＰＣ２、ＮＰＩＳＴ、ＮＲＧ３、ＮＲＰ１、ＮＲＰ２、ＮＲＸ３、ＮＴＦ３、ＮＴＦ５、ＮＷＡＳＰ、ＯＰＣＭＬ、ＯＰＲＫ１、ＰＡＫ６、ＰＡＫ７、ＰＡＲ１、ＰＡＲＫ２、ＰＤＥ１１Ａ、ＰＤＥ３Ａ／３Ｂ、ＰＤＥ４Ａ／４Ｂ／４Ｄ、ＰＩ３Ｋ、ＰＩＡＳ１、ＰＩＣＡＬＭ、ＰＩＣＫ１、ＰＩＰ５Ｋ、ＰＫＡ、ＰＫＣΑ、ＰＬＤ２、ＰＬＥＸＡ１、ＰＰ１Ｃ、ＰＰＦＩＢＰ１、ＰＲＫＧ１、ＰＳＤ９５、ＰＴＮ、ＰＴＰＲＦ、ＰＹＫ２、ＲＡＢ３Ｂ、ＲＡＢＰＨＩＬＩＮ、ＲＡＣ１、ＲＡＰ１、ＲＡＳ、ＲＡＳＧＲＦ２、ＲＢＰＪ、ＲＥＥＬＩＮ、ＲＧＮＥＦ、ＲＨＯＡ、ＲＨＯＧ、ＲＩＭ２、ＲＩＭＳ１、ＲＩＭＳ２、ＲＯＢＯ２、ＲＯＣＫ２、ＲＰＨ３ＡＬ、ＳＡＣＭ１Ｌ、ＳＡＰＡＰ、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＥＣ２４Ｄ、ＳＥＭＡ３Ａ、ＳＥＭＡ３Ｃ、ＳＥＭＡ３Ｅ、ＳＥＭＡ４Ｃ、ＳＩＡＨ１Ａ、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＩＴ１、ＳＮＡＰ２５、ＳＯＲＢＳ２、ＳＲＣ、ＳＲＧＡＰ３、ＳＴＸ２、ＳＴＸＢＰ６、ＳＵＭ１、ＳＶ２Ｃ、ＳＹＮＡＰＴＯＪＡＮＩＮ、ＳＹＮＴＡＸＩＮ１Ａ、ＳＹＴ１２、ＴＡＣＥ、ＴＢＲ１、ＴＲＩＯ、ＴＲＫＢ、ＴＲＯＭＢＩＮ、ＴＳＰＯ、ＵＢＥ２Ａ、ＵＬＫ４、ＵＮＣ１３Ｃ、ＵＮＣ５Ｃ、ＶＡＭＰ２、ＶＡＭＰ５、ＶＥＬＩ、ＶＩＮＣＵＬＩＮ、ＷＡＳ���ＩＰ、ＷＡＶＥ、ＷＷＯＸ、ＹＡＰ、およびＹＥＳ１。
【００６９】
本発明者らは、上記の薬物および薬物の組み合わせが有効な矯正を導く改善されそして相乗的な生物学的効果またはＡＤおよび関連障害に導く機能的調節不全の正常化を提供することを確立した。
【００７０】
上記の指名した化合物を以下の表１に、そのＣＡＳ番号と一緒に列挙する。上記で考察したように、本発明が上記の化合物ならびにその任意の薬学的に許容され得る塩、水和物、エステル、エーテル、異性体、ラセミ体、複合物、またはプロドラッグの使用を包含することを理解すべきである。プロドラッグは、処置の薬物動態パラメーターに対するより良好な制御を与えるように（例えば、薬物を適切な担体に結合することによって）調製され得る。
【００７１】
【表１】
2014205697.tif 000003
【００７２】
薬学的に許容され得る塩の例としては、薬学的に許容され得る酸付加塩、薬学的に許容され得る塩基付加塩、薬学的に許容され得る金属塩、アンモニウムおよびアルキル化アンモニウム塩が挙げられる。酸付加塩としては、無機酸および有機酸の塩が挙げられる。適切な無機酸の代表的な例としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、硫酸、硝酸などが挙げられる。適切な有機酸の代表的な例としては、ギ酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、安息香酸、ケイ皮酸、クエン酸、フマル酸、グリコール酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、シュウ酸、ピクリン酸、ピルビン酸、サリチル酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、酒石酸、アスコルビン酸、パモ酸、ビスメチレンサリチル酸、エタンジスルホン酸、グルコン酸、シトラコン酸、アスパラギン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、ＥＤＴＡ、グリコール酸、ｐ−アミノ安息香酸、グルタミン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、過塩素酸塩、ホウ酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、グリセロリン酸塩、ケトグルタル酸塩などが挙げられる。薬学的に許容され得る無機または有機酸付加塩のさらなる例は、例えば、J. Pharm. Sci. 1977, 66, 2（本明細書に参照により組み入れる）に列挙されている。金属塩の例としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム塩などが挙げられる。アンモニウムおよびアルキル化アンモニウム塩の例としては、アンモニウム、メチルアンモニウム、ジメチルアンモニウム、トリメチルアンモニウム、エチルアンモニウム、ヒドロキシエチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム、ブチルアンモニウム、テトラメチルアンモニウム塩などが挙げられる。有機塩基の例としては、リジン、アルギニン、グアニジン、ジエタノールアミン、コリンなどが挙げられる。
【００７３】
本発明による治療を、単独で、または薬物の組み合わせとして、そして／または、同じ経路を標的化するかまたは異なる作用様式を有する、任意の他の治療と共同で行ってもよい。それは、家、医師のオフィス、クリニック、病院の外来、または病院で、医師が治療の効果を綿密に観察でき、そして必要とされる任意の調整を行えるように、提供され得る。
【００７４】
特定の実施態様において、本発明の組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、血管新生を調節する、好ましくは血管新生を増加させる薬物をさらに含む。より好ましくは、少なくとも１つの、血管新生を調節する薬物は、アルブテロール、アレンドロネート、アンブリセンタン、アミノカプロン酸、バルサラジド、ベカプレルミン、カベルゴリン、クロピドグレル、ジヒドロエルゴタミン、エプレレノン、フェノルドパム、酢酸フルドロコルチゾン、ゲムフィブロジル、ヘスペレチン、レフルノミド、Ｌ−ヒスチジン、リオチロニン、マリマスタット、メロキシカム、メパクリン、メタゾラミド、メチマゾール、モンテルカスト、ネチルマイシン、ニトログリセリン、フェニルブチレート、ピリメタミン、スニチニブ、チエチルペラジン、チロフィバン、トポテカン、ビダラビンおよびワルファリンから選択される（以下の表２参照）。
【００７５】
【表２】
2014205697.tif 000004
【００７６】
あるいは、または先行する実施態様に加えて、本発明の組成物は、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、細胞ストレス応答を調節する、好ましくは細胞ストレス応答を阻害する薬物をさらに含んでもよい。最も好ましい細胞ストレス応答を調節する薬物は、アラビトール、マンニトール、メタラミノール、オメプラゾール、プリロカイン、ラパマイシン、リファブチン、チオグアニンおよびトレハロースから選択される（以下の表３参照）。
【００７７】
【表３】
2014205697.tif 000005
【００７８】
特定の実施態様において、本発明は、同時の、別々のまたは逐次的な投与のための、シナプス機能を寛解させる薬物、血管新生を増加させる薬物、および細胞ストレス応答を阻害する薬物を含む組成物に関する。
【００７９】
本発明の組成物は、典型的には、１つまたはいくつかの薬学的に許容され得る担体または賦形剤を含む。治療の持続期間は、処置される疾患のステージ、使用される組み合わせ、患者の年齢および状態、ならびに患者が処置にどのように応答するかに依存する。
【００８０】
組み合わせの各成分の投与量、頻度および投与様式を独立して制御することができる。例えば、１つの薬物を経口投与し、第２の薬物を筋肉内投与してもよい。患者の身体が任意の不測の副作用から回復する機会を有するように、併用療法を、休息期間を含む断続（on-and-off）サイクルで与えてもよい。１つの投与が全ての薬物を送達するように、薬物を一緒に処方してもよい。
【００８１】
組み合わせの各々の薬物の投与は、他の成分と組み合わせて、ＡＤに関係付けられる経路の機能を矯正できる薬物の濃度を生じる任意の適切な手段により得る。
【００８２】
組み合わせの活性成分を純粋な化学薬品として投与することは可能であるが、それらを医薬組成物（この関連で医薬処方物ともいう）として提供することが好ましい。可能な組成物としては、経口、直腸、局所（経皮、頬側および舌下を含む）、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内および皮内を含む）投与に適切なものが挙げられる。
【００８３】
より一般的には、これらの医薬処方物は、単一の包装、通常ブリスター包装中に別個の処置期間の間の使用のための計量された単位用量の投与のための数投薬単位（number dosing unit）または他の手段を含む「患者パック（patient pack）」中で患者に処方される。患者パックは、伝統的な処方を上回る利点を有する。ここで、薬剤師は医薬の患者の供給を原体供給から分け、その中で、患者は常に患者パック中に含まれる包装挿入物（伝統的な処方においては通常紛失される）を利用できる。包装挿入物を含めることは、医師の指示についての患者のコンプライアンスを改善することが示されている。従って、本発明はさらに、処方物に適切な包装材料と組み合わせた、本明細書において上記したような医薬組成物を含む。そのような患者パックにおいて、併用処置のための処方物の意図される使用を、処置のために最も適切な処方物の使用を助ける説明書、設備、規定、適用および／または他の手段によって推量することができる。そのような基準は、患者パックを、本発明の組み合わせでの処置のための使用に特に適切にしそしてそれに適合させる。
【００８４】
薬物は、任意の適切な量で任意の適切な担体物質中で含まれ得、そして組成物の全重量の１〜９９重量％の量で存在し得る。組成物は、経口、非経口（例えば、静脈内、筋肉内）、直腸、皮膚、鼻、膣、吸入、皮膚（パッチ）、または眼投与経路に適切な投与形態で提供され得る。従って、組成物は、例えば、錠剤、カプセル、丸剤、散剤、顆粒剤、懸濁液、乳濁液、溶液、ゲル（ヒドロゲルを含む）、ペースト、軟膏、クリーム、プラスター、水薬、浸透圧送達デバイス、坐薬、浣腸、注射剤、インプラント、スプレー、またはエアロゾルの形態であり得る。
【００８５】
医薬組成物は、従来の医薬習慣に従って処方され得る（例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy (20th ed.), ed. A. R. Gennaro, Lippincott Williams & Wilkins, 2000およびEncyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick and J. C. Boylan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York参照）。
【００８６】
本発明による医薬組成物は、投与に際して実質的に即時に、または投与後の任意の所定の時点もしくは期間に、活性薬物を放出するように処方され得る。
【００８７】
放出制御処方物としては、（ｉ）延長された期間にわたって身体内で実質的に一定の薬物濃度を生じる処方物；（ｉｉ）所定の時間経過後に、延長された期間にわたって身体内で実質的に一定の薬物濃度を生じる処方物；（ｉｉｉ）活性薬物物質の血漿レベルの変動に関連する所望されない副作用の同時の最小化をともなって、身体における相対的に一定の有効な薬物レベルを維持することによって所定期間、薬物作用を持続させる処方物；（ｉｖ）例えば疾患組織または器官の近くまたはその中への放出制御組成物の空間的配置によって、薬物作用を局在化させる処方物；および（ｖ）特定の標的細胞型に薬物を送達するために担体または化学誘導体を使用することによって薬物作用を標的化する処方物が挙げられる。
【００８８】
放出制御処方物の形態の薬物の投与は、薬物（単独または組み合わせのいずれか）が、（ｉ）狭い治療指数（すなわち、有害な副作用または有毒な反応を導く血漿濃度と、治療効果を導く血漿濃度との間の差が小さい；一般に、治療指数（ＴＩ）は半有効量（ＥＤ５０）に対する半致死量（ＬＤ５０）の比として定義される）；（ｉｉ）胃腸管における狭い吸収ウインドウ（absorption window）；または（ｉｉｉ）治療レベルで血漿レベルを持続させるために１日の間の頻繁な投薬が必要とされるような非常に短い生物学的半減期を有する場合、特に好ましい。
【００８９】
問題の薬物の代謝の速度に放出の速度がまさる放出制御を得るために、いくつかのストラテジーの任意のものを実行することができる。放出制御を、例えば、種々の型の放出制御組成物およびコーティングを含む種々の処方パラメーターおよび成分の適切な選択によって得てもよい。従って、薬物は、投与に際して、制御された様式で薬物を放出する医薬組成物（単または多単位錠剤またはカプセル組成物、油溶液、懸濁液、乳濁液、マイクロカプセル、マイクロスフェア、ナノ粒子、パッチ、およびリポソーム）に、適切な賦形剤を用いて処方される。
【００９０】
経口使用のための固体投与形態
経口使用のための処方物としては、非毒性の薬学的に許容され得る賦形剤との混合物中に活性成分を含む錠剤が挙げられる。これらの賦形剤は、例えば、不活性な希釈剤または充填剤（例えば、スクロース、微結晶セルロース、デンプン（バレイショデンプンを含む）、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、またはリン酸ナトリウム）；造粒および崩壊剤（例えば、セルロース誘導体（微結晶セルロースを含む）、デンプン（バレイショデンプンを含む）、クロスカルメロースナトリウム、アルギン酸塩、またはアルギン酸）；結合剤（例えば、アカシア、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、デンプン、アルファ化デンプン、微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、またはポリエチレングリコール）；ならびに潤滑剤、滑剤（glidant）、および抗接着剤（例えば、ステアリン酸、シリカ、またはタルク）であり得る。他の薬学的に許容され得る賦形剤は、着色料、香料、可塑化剤、湿潤剤、緩衝剤などであり得る。
【００９１】
錠剤は無コーティングであってもよく、またはそれは、場合により、胃腸管における崩壊および吸収を遅延させ、それにより長期間にわたる持続性の作用を提供するように、公知の技術によってコーティングされてもよい。コーティングを、所定のパターンで活性薬物物質を放出するように適合させてもよく（例えば、放出制御処方物を達成するために）またはそれを、胃の通過後まで活性薬物物質を放出しないように適合させてもよい（腸溶コーティング）。コーティングは、糖衣、フィルムコーティング（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルソース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリレートコポリマー、ポリエチレングリコール、および／またはポリビニルピロリドンに基づく）、または腸溶コーティング（例えば、メタクリル酸コポリマー、酢酸フタル酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、ポリビニルアセテートフタレート、シェラック、および／またはエチルセルロースに基づく）であってもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリンまたはグリセリルジステアレートのような時間遅延材料を用いてもよい。
【００９２】
固体錠剤組成物としては、所望されない化学的変化（例えば、活性薬物物質の放出前の化学的分解）から組成物を保護するように適合させられたコーティングが挙げられ得る。コーティングは、Encyclopedia of Pharmaceutical Technologyに記載されるのと同様に固体投与形態上に適用され得る。
【００９３】
いくつかの薬物を、錠剤中で一緒に混合してもよく、または分割してもよい。例えば、第２の薬物の実質的部分が第１の薬物の放出前に放出されるように、第１の薬物は錠剤の内側に含まれ、そして第２の薬物は外側である。
【００９４】
経口使用のための処方物を、咀嚼錠として、または活性成分が不活性固体希釈剤（例えば、バレイショデンプン、微結晶セルロース、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリン）と混合されている硬ゼラチンカプセルとして、または活性成分が水または油媒質（例えば、流動パラフィン、またはオリーブ油）と混合されている軟ゼラチンカプセルとして提供してもよい。散剤および顆粒剤を、従来の方法で錠剤およびカプセルについて上記した成分を使用して調製してもよい。
【００９５】
経口使用のための放出制御組成物を、例えば、活性薬物物質の溶解および／または拡散を制御することによって活性薬物を放出するように構築してもよい。
【００９６】
溶解または拡散放出制御を、薬物の錠剤、カプセル、ペレット、もしくは顆粒剤処方物の適切なコーティングによって、または適切なマトリックス中に薬物を組み込むことによって達成することができる。放出制御コーティングは、上記のコーティング物質、および／または、例えば、シェラック、ミツロウ、グリコワックス、ヒマロウ、カルナウバロウ、ステアリルアルコール、モノステアリン酸グリセリン、グリセリルジステアレート、パルミトステアリン酸グリセロール、エチルセルロース、アクリル樹脂、ｄｌ−ポリ乳酸、セルロースアセテートブチレート、ポリ塩化ビニル、ポリ酢酸ビニル、ビニルピロリドン、ポリエチレン、ポリメタクリレート、メチルメタクリレート、２−ヒドロキシメタクリレート、メタクリレートヒドロゲル、１，３ブチレングリコール、エチレングリコールメタクリレート、および／またはポリエチレングリコールの１つ以上を含んでもよい。放出制御マトリックス処方物において、マトリックス材料は、例えば、水和メチルセルロース、カルナウバロウおよびステアリルアルコール、カルボポール９３４、シリコーン、三ステアリン酸グリセリン、メチルアクリレート−メチルメタクリレート、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、および／またはハロゲン化フルオロカーボンを含んでもよい。
【００９７】
本発明の組み合わせの薬物の１つ以上を含む放出制御組成物は、浮揚性の錠剤またはカプセル（すなわち、経口投与に際して、特定の期間、胃内容物の上部に浮かぶ錠剤またはカプセル）の形態であってもよい。薬物の浮揚性錠剤処方物を、薬物の、賦形剤および２０〜７５％ｗ／ｗの親水コロイド、例えば、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、またはヒドロキシプロピルメチルセルロースとの混合物を造粒することによって調製することができる。次いで、得られた顆粒を錠剤に圧縮することができる。胃液と接触して、錠剤は実質的に水不透過性のゲルバリアをその表面の周囲に形成する。このゲルバリアは、１未満の密度の維持に関与し、それにより錠剤が胃液中に浮揚したままになることを可能にする。
【００９８】
経口投与のための液剤
水の添加による水性懸濁液の調製に適切な粉末、分散粉末、または顆粒は、経口投与のための好都合な投与形態である。懸濁液としての処方物は、活性成分を、分散または湿潤剤、懸濁剤、および１つ以上の保存料との混合物中で提供する。適切な懸濁剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、アルギン酸ナトリウムなどである。
【００９９】
非経口組成物
医薬組成物を、注射、注入または埋め込みによって（静脈内、筋肉内、皮下など）、従来の非毒性の薬学的に許容され得る担体および佐剤を含む投与形態、処方物中で、または適切な送達デバイスもしくはインプラントを介して非経口で投与してもよい。そのような組成物の処方および調製は医薬処方物の当業者に周知である。
【０１００】
非経口使用のための組成物を、単位投与形態で（例えば、単一用量アンプル中で）、またはいくつかの用量を含みそして適切な保存料を添加してもよいバイアル中で提供してもよい（下記参照）。組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液、注入デバイス、もしくは埋め込みのための送達デバイスの形態であってもよく、またはそれは、使用前に水または別の適切なビヒクルで再構成されるべき乾燥粉末として提供されてもよい。活性薬物のほかに、組成物は適切な非経口的に許容され得る担体および／または賦形剤を含んでもよい。活性薬物を、放出制御のために、マイクロスフェア、マイクロカプセル、ナノ粒子、リポソームなどに組み入れてもよい。組成物は、懸濁剤、可溶化剤、安定化剤、ｐＨ調整剤、および／または分散剤を含んでもよい。
【０１０１】
本発明による医薬組成物は、無菌注射のために適切な形態であってもよい。そのような組成物を調製するために、適切な活性薬物は、非経口的に許容され得る液体ビヒクル中に溶解または懸濁される。用いられ得る許容され得るビヒクルおよび溶媒の中には、水、適切な量の塩酸、水酸化ナトリウムまたは適切な緩衝剤の添加によって適切なｐＨに調整された水、１，３−ブタンジオール、リンゲル液、および等張塩化ナトリウム溶液がある。水性処方物は、１つ以上の保存料（例えば、メチル、エチルまたはｎ−プロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸）を含んでもよい。薬物の１つが乏しくまたはわずかにのみ水中に可溶性である場合、溶解増強剤または可溶化剤を添加することができるか、または溶媒に１０〜６０％ｗ／ｗのプロピレングリコールなどを含めてもよい。
【０１０２】
放出制御非経口組成物は、水性懸濁液、マイクロスフェア、マイクロカプセル、磁性マイクロスフェア、油溶液、油懸濁液、または乳濁液の形態であってもよい。あるいは、活性薬物を、生体適合性担体、リポソーム、ナノ粒子、インプラント、または注入デバイス中に組み入れてもよい。マイクロスフェアおよび／またはマイクロカプセルの調製における使用のための材料は、例えば、生分解性／生物腐食性ポリマー、例えば、ポリガラクチン、ポリ（イソブチルシアノアクリレート）、ポリ（２−ヒドロキシエチル−Ｌ−グルタミン）である。放出制御非経口処方物を処方する場合に使用し得る生体適合性担体は、炭水化物（例えば、デキストラン）、タンパク質（例えば、アルブミン）、リポタンパク質、または抗体である。インプラントにおける使用のための材料は、非生分解性（例えば、ポリジメチルシロキサン）または生分解性（例えば、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（グリコール酸）もしくはポリ（オルトエステル））であることができる。
【０１０３】
直腸組成物
直腸適用について、組成物に適切な投与形態としては、坐薬（乳濁液または懸濁液型）、および直腸ゼラチンカプセル（溶液または懸濁液）が挙げられる。典型的な坐薬処方物において、活性薬物は、適切な薬学的に許容され得る坐薬基材、例えばカカオバター、エステル型脂肪酸、グリセリン化ゼラチン、および種々の水溶性または分散性基材、例えば、ポリエチレングリコールと組み合わされる。種々の添加物、増強剤または界面活性剤を組み込んでもよい。
【０１０４】
経皮および局所組成物
医薬組成物を、マイクロスフェアおよびリポソームを含む、従来の非毒性の薬学的に許容され得る担体および賦形剤を含む投与形態または処方物中で経皮吸収のために皮膚上に局所的に投与してもよい。処方物としては、クリーム、軟膏、ローション、リニメント、ゲル、ヒドロゲル、溶液、懸濁液、スティック、スプレー、ペースト、プラスター、および他の種類の経皮薬物送達システムが挙げられる。薬学的に許容され得る担体または賦形剤は、乳化剤、抗酸化剤、緩衝剤、保存料、湿潤剤、浸透増強剤、キレート剤、ゲル形成剤、軟膏基材、香料、および皮膚保護剤を含んでもよい。
【０１０５】
乳化剤は天然ガム（例えば、アカシアガムまたはトラガカントガム）であってもよい
保存料、湿潤剤、浸透増強剤は、パラベン、例えば、メチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸、および塩化ベンザルコニウム、グリセリン、プロピレングリコール、尿素などであってもよい。
【０１０６】
皮膚上の局所投与について上記した医薬組成物を、処置しようとする身体の部分上へのまたはその近くの局所投与に関連して使用してもよい。組成物を、直接適用のために、または、ドレッシングあるいはプラスター、パッド、スポンジ、ストリップ、または他の形態の適切な可動性材料のような特殊な薬物送達デバイスによる適用のために適合させてもよい。
【０１０７】
投与量および処置の持続期間
組み合わせの薬物が同時に（同じかまたは異なるかのいずれかの医薬処方物中で）または逐次的に投与され得ることが理解される。逐次的な投与が存在する場合、第２の（または、追加の）活性成分の投与の遅延は、活性成分の組み合わせの有効な効果の利益が失われるようにすべきでない。本説明に従う組み合わせのための最小の要件は、組み合わせが、活性成分の組み合わせの有効な効果の利益を有して併用のために意図されるべきであるということである。意図される組み合わせの使用を、本発明による組み合わせの使用を助ける設備、規定、適用および／または他の手段によって推量することができる。
【０１０８】
本発明の活性薬物を分割用量で（例えば、１日に２回または３回）投与してもよいが、組み合わせ中の各薬物の単一１日用量が好ましく、単一の医薬組成物中の全ての薬物の単一１日用量（単位投与形態）が最も好ましい。
【０１０９】
用語「単位投与形態」は、各々の単位が、必要とされる医薬担体と共同で所望の治療効果を生じるように算出された所定量の活性材料（単数または複数）を含む、ヒト対象のための単位投薬として適切な物理的に分離した単位（例えば、カプセル、錠剤、またはロードしたシリンジシリンダー）を指す。
【０１１０】
投与は、１日に１回〜数回、数日間〜数年間であることができ、そして患者の生涯にわたりさえし得る。慢性のまたは少なくとも定期的に反復される長期投与の必要が大部分の症例において示される。
【０１１１】
さらに、特定の患者についての薬理ゲノミクス（治療の薬物動態、薬力学または効力プロファイルに対する遺伝子型の効果）情報が、使用される投与量に影響を及ぼし得る。
【０１１２】
より高い投与量が必要とされ得る特に損なわれているＡＤ疾患症例に応答する場合以外、組み合わせ中の各薬物の好ましい投与量は通常、長期維持処置のために通常処方されるかまたは大きな第３相臨床試験において安全であると判明した用量を上回らない範囲内にある。
【０１１３】
最も好ましい投与量は、長期維持処置のために通常処方されるものの１％〜１０％の量に対応する。例えば：
・ダサチニブ、経口、１日当たり約１〜１０ｍｇ、およびアカンプロセート、経口、約７〜７０ｍｇ、１日３回、
・アズトレオナム、経口、４分割用量で１日当たり約２０〜１４００ｍｇ、およびチアガビン、経口、１日当たり約０．３〜３ｍｇ、
・クロルゾキサゾン、経口、約５〜５０ｍｇ、１日当たり３または４回、およびタダラフィル、経口、１日当たり約０．０５〜０．５ｍｇ、
・クロルゾキサゾン、経口、約５〜５０ｍｇ、１日当たり３または４回、およびシロスタゾール、経口、１日当たり約１〜１０ｍｇ、
・クロルゾキサゾン、経口、約５〜５０ｍｇ、１日当たり３または４回、およびテルビナフィン、経口、約２．５〜２５ｍｇ、１日１回または２回、
・クロルゾキサゾン、経口、約５〜５０ｍｇ、１日当たり３または４回、およびダサチニブ、経口、１日当たり約１〜１０ｍｇ、
・ダサチニブ、経口、１日当たり約１〜１０ｍｇ、およびテルビナフィン、経口、約２．５〜２５ｍｇ、１日１回または２回、
・シナカルセト、経口、１日当たり約０．３〜３ｍｇ、およびアカンプロセート、経口、約７〜７０ｍｇ、１日３回、
・アズトレオナム、経口、４分割用量で１日当たり約２０〜１４００ｍｇ、およびビガバトリン、経口、約２０〜２００ｍｇ、１日当たり１回または２回、
・トピラメート、経口、１日当たり約２〜６０ｍｇ、およびジフィリン、経口、２または３分割用量で１日当たり約６〜６０ｍｇ。
【０１１４】
実際に投与される薬物の量が、処置しようとする状態（単数または複数）、投与しようとする正確な組成物、個々の患者の年齢、体重、および応答、患者の症候の重症度、および選択された投与経路を含む関連事情の見地から、医師よって決定されることが理解される。それゆえ、上記の投与量範囲は、本明細書における教示のための一般的な案内および支持を提供することが意図され、本発明の範囲を限定することは意図されない。
【０１１５】
以下の実施例は、例証の目的のために与えられ、そして限定としては与えられない。
【０１１６】
実施例
１．インビトロアッセイを使用する薬物検証
インビトロアッセイは、ＡＤに関係付けられる経路に作用する薬物およびその組み合わせの改良のための強力なツールである。本発明の薬物およびその組み合わせを、本発明において同定されたＡＤネットワークに従って適合させた特異的インビトロアッセイに対する作用によって最適化する。その後、これらの分子またはその組み合わせを、ＡＤのインビボモデルにおいて試験する。
【０１１７】
これらのインビトロ試験は、ＡＰＰ遺伝子発現のレベルの研究、およびそれに続く、Ａβタンパク質の毒性効果に曝露された細胞に対する薬物の神経保護潜在力のアッセイで開始する。関係付けられる経路における薬物を個々に試験し、続いてその組み合わせの作用のアッセイを行う。その後の段階で、個々の経路における標的に対して作用する最も効率的な組み合わせを、組み合わせそして神経保護試験において試験する。
【０１１８】
ＡＤにおいて、タンパク質は、原線維Ａβタンパク質（アミロイド）の不溶性βプリーツシートの凝集物を形成する。可溶性形態から原線維形態への立体構造変化は、Ａβのより高い濃度とともに増加する自発性事象であるようであり、いずれもの、正常より多量のＡβの産生（またはＡβのより大きな、より可溶性でない形態の産生）が斑形成を増加させる傾向にある。一旦Ａβ斑が形成され始めると、他の分子は新生斑と相互作用して、その付随するニューロン細胞死領域を伴って最終的に成熟斑を生じさせることができる。これを考慮して、本発明者らは、アミロイドβタンパク質に曝露された細胞の生存率に対する薬物の効果の試験に優先順位を与えた。
【０１１９】
細胞培養
初代ラット皮質ニューロンを、Singer et al., 1999によって記載されるように培養する。簡潔には、妊娠１５日の妊娠雌性ラットを頸部脱臼によって屠殺し（Wistarラット；Janvier）、そして胎児を子宮から取り出す。皮質を取り出し、そして１％のペニシリン−ストレプトマイシン（ＰＳ；Invitrogen）および１％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ；Sigma）を含むLeibovitzの氷冷培地（Ｌ１５；Invitrogen）中に入れる。２０分間３７℃でのカルシウムおよびマグネシウム不含ＰＢＳ中で希釈したトリプシン処理によって（Trypson EDTA 1X；Invitrogen）皮質を解離させる。反応を、ＤＮａｓｅＩグレードＩＩ（０．１ｍｇ／ｍｌ；Roche Diagnostic）および１０％のウシ胎仔血清（ＦＣＳ；Invitrogen）を含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ；Invitrogen）の添加によって停止する。次いで、細胞を、１０ｍｌピペットを３回通過させることによって機械的に解離させる。次いで、細胞を１８０×ｇで１０分間１０℃で遠心分離する。上清を捨て、そしてペレットの細胞を、Ｂ２７（２％；Invitrogen）、Ｌ−グルタミン（０．２ｍＭ；Invitrogen）、１％のＰＳ溶液および１０ｎｇ／ｍｌの脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ、Pan Biotech）を補充したNeurobasal（Invitrogen）からなる規定培養培地中に再懸濁する。生存細胞をNeubauer血球計数盤中でトリパンブルー排除試験を使用して計数する。細胞を９６ウェルプレート（ウェルはポリ−Ｌ−リジンで事前コーティングされている（１０μｇ／ｍｌ；Sigma））中３００００細胞／ウェルの密度で播種し、そして３７℃で湿潤空気（９５％）／ＣＯ２（５％）雰囲気中で培養する。
【０１２０】
６日間の培養の後、細胞を薬物（５つの濃度）とともにインキュベートする。１時間後に、ＢＤＮＦ不含であるが薬物と一緒の規定培地中、２０μＭのβアミロイド（２５−３５；Sigma）によって細胞を中毒させる。皮質ニューロンを２日間中毒させる。ＢＤＮＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）をポジティブ（神経保護）コントロールとして使用する。条件当たり２回の独立した培養を行う（条件当たり６つのウェル）。
【０１２１】
神経突起長定量
細胞を、エタノール（５％）および酢酸（５％）の冷溶液を用いて１０分間固定する。０．１％のサポニンを用いる透過処理の後、細胞を２時間１０％ヤギ血清を含むＰＢＳを用いてブロックする。次いで、細胞を、微小管結合タンパク質２に対するモノクローナル抗体とともにインキュベートする（ＭＡＰ−２；Sigma）。この抗体は、細胞体および神経突起を特異的に明らかにする。使用する二次抗体はAlexa Fluor 488ヤギ抗マウスＩｇＧ（Molecular probe）である。ニューロンの核を、蛍光色素（Hoechst溶液、SIGMA）によって明らかにする。InCell Analyzer（商標）1000（GE Healthcare）を拡大率２０×で使用して、ウェル当たり２０の像を取る。全ての像を同じ条件で取る。Developerソフトウェア（GE Healthcare）を使用して神経突起長を定量する。
【０１２２】
結果
図１に示す結果は、２つの独立した培養物（条件当たり６つのウェル）から抽出されている。全ての値を平均±ｓ．ｅ．平均で表す。両側スチューデントｔ検定分析が生データに対して行われている。結果を、コントロール（ビヒクル）と比較した、神経突起長の百分率で表す。
【０１２３】
薬物を、２日間続くＡβ２５−３５  ２０μＭ中毒の１時間前にラット初代皮質ニューロンとともにインキュベートする（４０）。
【０１２４】
このインキュベーションの２日後に、軸索細胞成長を反映する、神経突起のネットワークの長さを定量した。本発明者らは、３つの薬物が、このＡβ２５−３５中毒に対する神経保護効果を明らかに発揮することを観察した（図１および２）。
【０１２５】
インビボ試験
インビトロ試験において活性な化合物およびその組み合わせを、アルツハイマー病のインビボモデルにおいて試験した。アルツハイマー病関連変異ヒトアミロイドβタンパク質前駆体（ＡＰＰ）トランスジーンの過剰発現は、多数の研究においてＡＤ疾患モデルとして作用するトランスジェニックマウスの脳におけるＡβの沈着を促進する最も信頼できる手段であった。加齢とともに、これらの変異ＡＰＰマウスは強いアミロイド病理および他のＡＤ様特徴（減少したシナプス密度、反応性グリオーシス、およびいくらかの認知障害を含む）を発達させる。多くの変異ＡＰＰマウスモデルは、明白なニューロン損失および神経原線維変化（ＮＦＴ）病理の証拠をほとんど示さない。このＢＲＩ−Ａβ４２トランスジーンについてヘミ接合型のマウスは、正常な寿命を有して生存可能でありそして繁殖性である。トランスジェニックＢＲＩ−Ａβ４２  ｍＲＮＡは、マウスプリオンタンパク質プロモーターに特徴的なパターンで発現される；最高のトランスジーン発現レベルは小脳顆粒細胞および海馬、続いて皮質、脳橋、視床、および中脳において検出される。トランスジェニック融合タンパク質において、Ａβ１−４２はフューリン様切断部位でＢＲＩタンパク質のＣ末端に融合されており、その結果、切断によって管腔または細胞外空間中への効率的なＡβ１−４２分泌が生じる。それゆえ、これらのマウスはＡβ１−４２アイソフォームを特異的に発現する。ヘミ接合型ＢＲＩ−Ａβ４２マウスは、加齢とともに界面活性剤不溶性アミロイドβを蓄積し、そして３月齢ほどの早期に小脳においてコア斑（cored plaque）を発達させる。前脳病理の発達が後に起こり、１２月齢まで海馬および嗅内／梨状葉皮質中に細胞外Ａβ斑は一貫して存在しない。アミロイドβ沈着（コア斑）は、３ヶ月ほどの早期にトランスジェニックマウスの小脳の分子層において観察され得、そして加齢とともにより明白になる；ところどころの細胞外斑が６月齢で嗅内／梨状葉皮質および海馬において見られるが、＞１２月齢まで一貫して見出されない。最高齢のマウスは、小脳、皮質、海馬、および嗅球におけるコアおよび拡散斑を有して広範な病理を示す。細胞外アミロイド斑は、放射型原線維を有して密なアミロイドコアを示す；多くの異栄養性神経突起の束がこれらの斑の末梢において観察される。反応性グリオーシスが斑に付随する。
【０１２６】
薬物処置
トランスジェニックＴｇ（Ｐｒｎｐ−ＩＴＭ２Ｂ／ＡＰＰ６９５＊４２）Ａ１２Ｅ  ｍｃマウス（３１）をJackson Laboratoryから得た（http://jaxmice.jax.org/strain/007002.html）。最高のＡβ４２血漿レベルを有するマウス樹立系統ＢＲＩ−Ａβ４２Ａ（１２ｅ）を混合Ｂ６Ｃ３バックグラウンド上で維持した。成体雄性トランスジェニックマウスは食物および水への自由な接近を有する。承認されたInstitutional Animal Care and Use Committeeプロトコルに従って、マウスを秤量し、そしてコントロール溶液（プラセボ）または様々な用量で調製したＰＸＴ薬物のいずれかを１０〜２０週間連続して１日に１回ｉ．ｐ．注射するかまたは強制摂取した。
【０１２７】
生存分析
Kaplan-Meier方法を使用して生存率を分析した。Holm-Sidak方法（post hoc）を全ての多重対比較検定のために使用した。外来性の死亡を検閲する。いずれもの、バックグラウンド系統の差異からの潜在的に混乱させる効果を制限するために、全ての比較を同腹仔間で行った。
【０１２８】
行動試験
行動試験を数人の著者らによって公開された方法に従ってデザインしそして実施した（３２〜３５）。
【０１２９】
モーリス水迷路（ＭＷＭ）における空間学習および記憶
この実験を、白色プラスチックで作製され、そして乳白色の水を満たした直径９０ｃｍの円形プール中で行う。透明プラスチックで作製された直径８ｃｍの避難プラットフォームを水面下０．５ｃｍに水没させた。Ａ４サイズの文字で印刷し、そして４つの周囲の壁（プールからの距離は５０〜７０ｃｍであった）に配置した様々な幾何学形態によって視覚的目印を提供する。各々のマウスに４日間１日に４回の試行を与えた（試行の間５〜７分間隔、合計１６回の試行）。各々の試行を４つの異なる開始点の１つから行った。マウスの移動をVideotrack Software（View Point）を使用してモニターする。避難プラットフォームを位置付けるためにかかった時間（避難潜伏期；６０秒まで）を決定した。プラットフォームを位置付けた後、マウスをその上に１５秒間座らせた。６０秒以内にプラットフォームを見出せなかったマウスを、それに導き、そしてその上に１５秒間留めた。６０秒の潜伏期をそのような出来事について記録に入れる。１日目の１回目の試行以外、１日当たりの４回の試行の全てを統計分析のために平均した。９日目（最後の訓練の５日後）に、マウスを、プラットフォームを取り外しそしてマウスにそれを探索させる６０秒間探索試行に供した。各動物が各四分円において費やした時間を記録した（四分円探索時間）。雄性マウスのいくつかの群を３、７、１０、および１２月で使用した。
【０１３０】
いくつかの少しのマウスは試験を強く妨害するすくみ行動（例えば、水中で動かないで横たわり、そして泳ぎを拒む）を示し、これらの動物をデータ分析から除外した。
【０１３１】
全ての行動試験を静かな減光環境下で行う。
【０１３２】
放射状水迷路における作業記憶試験
この認識に基づく作業記憶の高感度の測定を、６つの放射状に分布した水泳アームを作製するようにアルミニウムインサートを装着した直径１００ｃｍの水を満たしたプール（モーリス水迷路およびプラットフォーム認識課題のためにも使用）からなる器具の助けで得た。試験は、連続した９〜１２日間、１日のセッション当たり５回の１分間試行からなる。各セッションの開始時に、透明な水没させたプラットフォームを６つの水泳アームの１つの末端に配置する（ランダムに選択、毎日変更）。最初の４回の獲得試行の各々について、動物を非プラットフォーム含有アームの１つに配置し（ランダム化した順序）、そしてプラットフォームを探索させる。６０秒間試行の間、動物が別の非プラットフォーム含有アームに入る毎に、静かにそれをその出発位置に戻し、そしてエラーを記録する。第４の試行の後、動物を３０分間休ませ、続いて最後の非プラットフォーム含有水泳アームにおいて始める第５の（保持）試行を行う。エラー（正しくないアームの選択）の数および避難潜伏期（プラットフォームに到達する時間、最大６０秒）を各試行について記録する。
【０１３３】
円形プラットフォーム試験における空間参照学習および記憶
この認識に基づく課題試験を、外周の周りに等距離間隔で配置した１６個の「避難」孔を有する直径６９ｃｍの円形プラットフォームからなる器具の助けで行う。避難所は孔の１つの下に取り付けられており、そしてその上に種々の視覚的合図が配置されている黒色のカーテンがプラットフォームを取り囲んでいる。動物を単一の５分間試行の開始時にプラットフォームの中央に配置し、そして嫌悪刺激（明光、ファンの風）を与える。エラー（非避難孔中へ頭を突くこと）の総数および避難潜伏期（避難孔に到達する時間）を記録する。
【０１３４】
プラットフォーム認識試験における認識能力
この認識に基づく探索課題は、物体同定および認識能力を評価する。標的物体は、直径１００ｃｍの円形プール中の水表面の０．８ｃｍ上に配置されている１０ｃｍ×４０ｃｍ黒色の旗を装着した直径９ｃｍの円形プラットフォームからなる。試験は、連続した４日間の各々の日当たり４回の６０秒間試行からなる。各々の日に、標的物体を各試行についてプールの異なる四分円中に配置し、そして動物を４回全ての試行についてプールの外周に沿った同じ位置で放す。全潜伏期（最大６０秒）を各試行について記録する。
【０１３５】
改変Irwin検査
Irwinから改変した包括的スクリーニングを、マウスのいずれかがその遺伝子型に関連する生理的な、行動の、または感覚運動の機能障害を示したかどうかを決定するために使用する。運動習熟、協調、および筋力を調査するために、マウスを２つの高さ３０ｃｍの柱の間に張ったワイヤー上に配置し、そしてワイヤー上でバランスを取るその能力を評価する。さらに、少なくとも５秒間４つ全部の足でワイヤーを掴みそしてそれにぶら下がり、そしてワイヤー上に登って戻るその能力を決定する。
【０１３６】
血管アミロイド沈着の定量
脳アミロイドアンギオパチー（ＣＡＡ）の定量のために、頭頂葉皮質または小脳皮質軟膜を通した３０μｍ間隔の５μｍパラフィン包埋切片を、一晩４℃でビオチン化Ａｂ９抗体（抗Ａβ１−１６、１：５００）を用いて免疫染色する（各齢群における遺伝子型当たりｎ＝５〜７匹のマウス、マウス当たりｎ＝６切片）。陽性に染色された血管を、改変Vonsattelスコアリングシステムを使用して視覚的に評価する（３６）。ＣＡＡ重症度スコアを、ＣＡＡ血管数にＣＡＡ重症度グレードを掛けることによって算出する。
【０１３７】
組織学：免疫組織化学および免疫蛍光
３〜１２月のＴｇおよびＷＴマウスを麻酔し、そして０．１ｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）（ｐＨ７．４）中の０．９％ＮａＣｌおよび４％パラホルムアルデヒドまたは０．１ｍｏｌ／Ｌ  ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中の１０％ホルマリンおよび４％パラホルムアルデヒドで順次経心的に灌流する。脳および脊髄を取り出し、そして４％パラホルムアルデヒド中で貯蔵する。いくつかの試料をパラフィン中に包埋し、そしてスライディングミクロトーム上で１０μｍの厚さで切断する。凍結切片（１４μｍ）をクリオスタット上で切断し、そしてクロムミョウバンコーティングしたスライド上にマウントする。内在性ペルオキシダーゼを、切片を０．３％Ｈ２Ｏ２を含むメタノールで３０分間処理することによってクエンチする。切片を１０％ウマ血清中でブロックする。一次抗体を使用し、そして一晩４℃で１％ウマ血清の存在下でインキュベートする。全ての二次ビオチン化またはフルオレセイン、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、およびＡＭＣＡ結合抗体、蛍光色素、ＡＢＣキット、およびペルオキシダーゼ活性用の色素原としての３，３’−ジアミノベンジジンは、Vector Laboratoriesからである。二次抗体とのインキュベーションを室温で１時間保持する。全ての洗浄工程（３〜１０分）および抗体希釈をリン酸緩衝食塩水（０．１ｍｏｌ／Ｌ  ＰＢＳ、ｐＨ７．４）またはＴｒｉｓ緩衝食塩水（０．０１ｍｏｌ／Ｌ  Ｔｒｉｓ、０．１５ｍｏｌ／Ｌ  ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）を使用して行う。ＡＢＣ複合体とのインキュベーションおよび３，３’−ジアミノベンジジンを用いる検出を、製造業者のマニュアルに従って行う。ヘマトキシリン対比染色を標準的手順に従って行う。遺伝子型、齢および性別当たり最小３匹のマウスを各々の決定のために使用する（３７）。
【０１３８】
脳抽出物の調製
脳を迅速に氷上で最終注射後９０〜１２０分の間に回収し、そして−８０℃で凍結する。各マウスからの右大脳半球を、凍結後秤量する。中央絶対偏差による半球質量の分析により、本発明者らがセットの残りから４中央絶対偏差を超える試料を除外することが可能になる。大脳半球をホモジナイズし、そして全タンパク質を含む細胞溶解物を、酵素アッセイキットのための製造業者の説明書に従って調製する（R&D Systems, Inc.）。簡潔には、脳皮質を８００μｌの低塩含有１×抽出緩衝液（R&Dキット）中でホモジナイズし、そして氷上で１０分間インキュベートする。次いで、ホモジネートを１３，０００ｇで１５分間４℃で遠心分離する。各試料中のタンパク質濃度をビウレット由来アッセイに従って見積もる（Pierce）。ＡＰＰ、Ａβ４０、およびＡβ４２のレベルを、記載されるようにそれぞれウエスタンイムノブロッティングおよびサンドイッチＥＬＩＳＡ技術により測定する（２８）。さらに、α、β、およびγセクレターゼの活性を同じ抽出物から測定し得る。
【０１３９】
マウス大脳皮質抽出物における全ＡＰＰのレベルのアッセイ
等タンパク質量の脳抽出物を各ゲルにおいてロードする（試料当たりレーン当たり３０μｇ）。各ゲルは８つの処置を含んだ：コントロール；薬物１  ７．５ｍｇ／ｋｇ用量；およびいくつかの用量の薬物２。ゲル内変動を最小にするために、各ゲルは３セットの全ての処置群を含んだ。各ブロットを２２Ｃ１１抗体を用いてプローブする。また、各ブロットを、トランスファー効率の規準化のためにβアクチン抗体用いてプローブする。ＡＰＰバンドシグナルの強度をβアクチンのものを用いて規準化する。ブロット−ブロット変動について試験するために、２つの試料「コントロール」を各ゲル／ブロットにおいてロードする。記載されるように、ブロットの分析を２つの方法で行う：ゲル−ゲル変動について試験するためのブロット式（blot-wise）（ｎ＝３）；および組み合わせのブロット（ｎ＝９または１０）（３８〜３９）。ｎ＝３でのブロット式分析は、ｎ＝９または１０用量での最終分析と同じ傾向を示す。組み合わせの分析の結果を示す。
【０１４０】
ＡβサンドイッチＥＬＩＳＡ
脳Ａβ  ＥＬＩＳＡのために、前脳および後脳のＡβレベルを独立して決定し、そして嗅球を分析から除外する。血漿Ａβ分析のために、心臓穿刺の後に血液をＥＤＴＡコーティングしたチューブ中に収集する。血液試料を３０００ｒｐｍで１０分間４℃で遠心分離し、そして血漿を小分けしそして使用するまで−８０℃で貯蔵する。Ａβレベルを、Ａβ４０用の捕捉ＡｂとしてのＡｂ９（抗Ａβ１−１６  Ａｂ）、Ａβ４０用の検出Ａｂとしての１３．１．１−ＨＲＰ（抗Ａβ３５−４０  Ａｂ）、Ａβ４２用の捕捉Ａｂとしての２．１．３（抗Ａβ３５−４２  Ａｂ）、およびＡβ４２用の検出ＡｂとしてのＡｂ９−ＨＲＰを使用する末端特異的サンドイッチＥＬＩＳＡによって決定する（各齢群において遺伝子型当たりｎ＝５〜７マウス）。記載されるように、可能なＥＬＩＳＡ変動を最小にするためにマウスの同じセットを内部コントロールとして使用してＡβレベルを以前の結果に対して規準化する（２８）。
【０１４１】
ウエスタンブロッティング
急速冷凍した前脳試料を、１％プロテアーゼインヒビター混合物（Roche）を含む放射性免疫沈降アッセイ（ＲＩＰＡ）緩衝液（Boston BioProducts, Worcester, MA）中でホモジナイズする。ホモジネートを１００，０００×ｇで１時間４℃で遠心分離する。上清中のタンパク質濃度をＢＣＡタンパク質アッセイを使用して決定する（Pierce）。タンパク質試料（２０μｇ）をＢｉｓ−Ｔｒｉｓ  １２％ＸＴゲルまたはＢｉｓ−Ｔｒｉｓ  ４−１２％ＸＴゲル（Bio-Rad, Hercules, CA）上で泳動し、そして０．２μｍニトロセルロースメンブランにトランスファーする。ブロットを、２分間０．１Ｍ  ＰＢＳ中で２回マイクロ波に供し、そして記載されるようにＡｂ  ８２Ｅ１（抗Ａβ１−１６、１：１０００；IBL, Gunma, Japan）および抗ＡＰＰ  Ｃ末端２０アミノ酸（１：１０００）を用いてプローブする（２８）。ブロットをストリップし、そしてローディングコントロールとしての抗βアクチン（１：１０００；Sigma）を用いて再プローブする。相対的バンド強度をImageJソフトウェアを使用して測定する。
【０１４２】
実質アミロイド沈着の定量
半脳を１０％ホルマリン中で浸漬固定し、そしてパラフィン包埋のために加工する。脳組織切片（５μｍ）を抗全Ａβ抗体（Ａｂ）を用いて免疫染色した。切片をヘマトキシリンで対比染色する。海馬、梨状葉皮質（ブレグマ、−１．７０〜−２．８０ｍｍ）、または小脳（傍片葉、係蹄状脚（crus ansiform）、および単小葉；ブレグマ、−５．４０〜−６．３６ｍｍ）を通した、脳当たり６つの切片を定量のために使用する（各齢群において遺伝子型当たりｎ＝５〜７マウス）。Ａβ斑負担を、MetaMorphソフトウェア（Molecular Devices, Palo Alto, CA）を使用して決定する。コア斑の定量のために、Ａβ負担について分析したものの連続した切片をチオフラビンＳ（ThioS）で染色し、そして海馬、嗅内／梨状葉皮質、または小脳におけるThioS陽性斑の数を計数する。上記の分析の全てを盲検法で行う。
【０１４３】
インビボデータの統計分析
全ての実験からの結果をSTATISTICA 8.0（Statsoft）を用いて分析する。
【０１４４】
Ａβレベル、アミロイド斑負担、およびＣＡＡ重症度を、post hoc Holm-Sidak多重比較検定または両側スチューデントｔ検定とともにＡＮＯＶＡを使用することによって分析する。データのセットがパラメトリックな検定仮定を満たさない場合は、Kruskal-Wallis検定およびそれに続くpost hoc Dunn多重比較またはMann-Whitney順位和検定のいずれかを行う。２トランスジェニック（bitransgenic）マウスにおけるＡβレベルが単一トランスジェニック同腹仔におけるＡβレベルの加算合計と一致するかどうかを試験するために、切片検定なしの多重線形回帰を使用する。全ての比較を同腹仔間で行う。
【０１４５】
コントロール（０ｍｇ／ｋｇ）試料を除外して薬物応答モデリングを行う。ＥＤ５０は、実験における最大薬物誘導応答の５０％を誘導するために必要とされる用量（ｍｇ／ｋｇ）に対応する。それをＥＤ５０の対数についてHill式モデルを使用して算出する。
【０１４６】
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【図１】
2014205697.tif 000006
【図２】
2014205697.tif 000007
【手続補正書】
【提出日】平成26年7月17日(2014.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フェンホルミン、またはその塩もしくはプロドラッグを含む、アルツハイマー病（ＡＤ）の処置における使用のための組成物。
【請求項２】
フェンホルミンとの併用の、別々のまたは逐次的な投与のための、ゾニサミド、ジフィリン、タダラフィル、アルガトロバン、アカンプロセート、シナカルセト、テルビナフィン、シロスタゾール、バクロフェン、アムロジピンおよびスルフィソキサゾール、またはその塩もしくはプロドラッグからなる群より選択される少なくとも１つの化合物をさらに含む、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
組成物が、以下の薬物の組み合わせの少なくとも１つを含み、組み合わせ中の薬物が、併用の、別々のまたは逐次的な投与のためのものである、請求項２記載の組成物：
−  フェンホルミンおよびゾニサミド、
−  フェンホルミンおよびアカンプロセート、
−  フェンホルミンおよびスルフィソキサゾール、
−  フェンホルミンおよびジフィリン、または
−  フェンホルミンおよびシロスタゾール。
【請求項４】
組成物が、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、シナプス機能を調節する薬物をさらに含む、請求項１〜３のいずれか１項記載の組成物。
【請求項５】
組成物が、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、血管新生を調節する薬物をさらに含む、請求項１〜４のいずれか１項記載の組成物。
【請求項６】
組成物が、併用の、別々のまたは逐次的な使用のための、少なくとも１つの、細胞ストレス応答を調節する薬物をさらに含む、請求項１〜５のいずれか１項記載の組成物。
【請求項７】
薬学的に許容され得る担体または賦形剤を含む、請求項１〜６のいずれか１項記載の組成物。
【請求項８】
組成物が対象に反復して投与される、請求項１〜７のいずれか１項記載の組成物。
【請求項９】
以下の薬物の組み合わせの少なくとも１つを含み、組み合わせ中の薬物が併用の、別々のまたは逐次的な投与のためのものである、組成物：
−  フェンホルミンおよびゾニサミド、
−  フェンホルミンおよびアカンプロセート、
−  フェンホルミンおよびスルフィソキサゾール、
−  フェンホルミンおよびジフィリン、または
−  フェンホルミンおよびシロスタゾール。
【請求項１０】
それを必要とする対象においてＡβペプチドによる毒性から神経を保護するための医薬の製造における使用のための、フェンホルミン、またはその塩もしくはプロドラッグを含む組成物。
【外国語明細書】
2014205697000001.pdf