(57)【要約】【課題】糖尿病および他の関連する障害を治療するための安全かつ有効な剤を提供する。【解決手段】アブラヤシ属の果実からの水溶性抽出物を有効成分として含む血糖降下剤。真性糖尿病および他の関連疾患または障害を含めた代謝不均衡の治療および予防に使用する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アブラヤシ属の果実からの水溶性抽出物を有効成分として含む血糖降下剤。
【請求項２】
前記水溶性抽出物が、バニリン酸、クロロゲン酸、カテキン、カフェイン酸、プロトカテク酸、ゲンチシン酸、４−ヒドロキシ安息香酸エステル、クマル酸、フェルラ酸、およびルチン水和物よりなる群から選択されるフェノール類を含むことを特徴とする請求項１記載の血糖降下剤。
【請求項３】
前記水溶性抽出物が、ヤシ油をミリング処理した植物液から得られるヤシ果汁であることを特徴とする請求項１記載の血糖降下剤。
【請求項４】
インスリン分泌または感受性を増強することを特徴とする請求項１記載の血糖降下剤。
【請求項５】
請求項１から４いずれか１項記載の血糖降下剤を含む、代謝不均衡を有する対象に投与するための組成物。
【請求項６】
医薬組成物である請求項５記載の組成物。
【請求項７】
栄養補助組成物である請求項５記載の組成物。
【請求項８】
哺乳動物における代謝不均衡の予防または治療に使用するためのものであり、代謝不均衡の予防または治療に使用する旨の表示が付されていることを特徴とする請求項５から７いずれか１項記載の組成物。
【請求項９】
前記代謝不均衡が、真性糖尿病、妊娠性糖尿病、β細胞機能の遺伝子異常、インスリン作用の遺伝子異常、膵外分泌疾患、内分泌障害、糖尿病に関連する他の遺伝的症候群、前糖尿病状態、およびメタボリック・シンドロームからなる群より選択されることを特徴とする請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
前記代謝不均衡が真性糖尿病であることを特徴とする請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
真性糖尿病がＩ型であることを特徴とする請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
真性糖尿病がＩＩ型であることを特徴とする請求項１０記載の組成物。
【請求項１３】
真性糖尿病が成人における潜在性自己免疫性糖尿病であることを特徴とする請求項１０記載の組成物。
【請求項１４】
哺乳動物における真性糖尿病の治療によって、真性糖尿病の二次的な内科的合併症を予防することを特徴とする請求項１０記載の組成物。
【請求項１５】
前記真性糖尿病の二次的な内科的合併症が、心臓疾患、脳卒中、高血圧、網膜症、白内障、腎症、神経障害、末梢血管疾患、歯の疾病、胃不全麻痺、性機能不全、または妊娠中の合併症を含むことを特徴とする請求項１４記載の組成物。
【請求項１６】
前記代謝不均衡がメタボリック・シンドロームであることを特徴とする請求項９記載の組成物。
【請求項１７】
メタボリック・シンドロームの治療が、１つ以上の診断基準を改善することを含むことを特徴とする請求項１６記載の組成物。
【請求項１８】
前記診断基準が、胴囲、トリグリセリド、ＨＤＬ、血圧、随時血糖値および空腹時血糖値からなる群より選択されることを特徴とする請求項１７記載の組成物。
【請求項１９】
前記代謝不均衡が前糖尿病状態であり、前記哺乳動物が、真性糖尿病のリスク因子を１つ以上有することを特徴とする請求項９記載の組成物。
【請求項２０】
前記前糖尿病状態が、空腹時血糖値異常またはグルコース不耐性を含むことを特徴とする請求項１９記載の組成物。
【請求項２１】
前記真性糖尿病のリスク因子の１つ以上が、年齢、身体不活動、ＢＭＩの異常、遺伝学的疾病素質、民族性、高血圧、多嚢胞性卵巣症候群、循環器疾患、以前の空腹時血糖値またはグルコース耐性の異常、およびインスリン抵抗性に関連する他の臨床症状からなる群より選択されることを特徴とする請求項１９記載の組成物。
【請求項２２】
利尿を誘発する作用を有する請求項５から２１いずれか１項記載の組成物。
【請求項２３】
（ａ）アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の水溶性抽出物を含む、代謝不均衡を有する対象に投与するための組成物を含むパッケージと、
（ｂ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の水溶性抽出物を、代謝不均衡の治療に使用するための使用説明書と、
を含むキット。
【請求項２４】
前記代謝不均衡が真性糖尿病であることを特徴とする請求項２３記載のキット。
【請求項２５】
前記抽出物が、粉末、液体、または固体であることを特徴とする請求項７記載の栄養補助組成物。
【請求項２６】
前記粉末が再構成可能な濃縮物であることを特徴とする請求項７記載の栄養補助組成物。
【請求項２７】
必須脂肪酸、抗酸化物質、ビタミン、またはミネラルをさらに含むことを特徴とする請求項７記載の栄養補助組成物。
【請求項２８】
γ−リノレン酸、リノール酸、亜鉛、銅、セレン、ヨウ化物、ピリドキシン、葉酸、コバラミン、ビタミンＣ、ビタミンＢ1、ビタミンＥ、チアミン二リン酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ12、ビタミンＤ、マンガン、ビタミンＡ、リボフラビン、ナイアシン、ナイアシンアミド、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、酒石酸水素コリン、ベタイン、ビタミンＫ、モリブデン、クロム、カリウム、シトラスバイオフラボノイド、混合カロチノイド、緑茶抽出物、またはＮ−アセチルシステインをさらに含むことを特徴とする請求項７記載の栄養補助組成物。
【請求項２９】
ショウガ、ボスウェリア、フルーツ香味剤、着色剤、または保存料をさらに含むことを特徴とする請求項７記載の栄養補助組成物。
【請求項３０】
ゼラチン、アジュバント、水、ピーナッツ油、ミネラルオイル、大豆油、ゴマ油、化学合成油、安定剤、または緩衝剤をさらに含むことを特徴とする請求項７記載の栄養補助組成物。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本願は、２００８年４月２日出願の米国特許出願第１２／０８０，３６１号の優先権の利益を主張する。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、油ヤシ果汁を使用する、真性糖尿病、前糖尿病状態、および他の関連する障害の治療および予防方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
真性糖尿病は、脂肪、炭水化物、およびタンパク質の慢性の代謝疾患である。それはインスリン産生、インスリン作用、またはその両方の異常から生じる高い血糖値を特徴とし、これがグルコースの輸送および代謝障害につながり、結果として高血糖症が生じる。世界保健機関（ＷＨＯ）は、１憶８０００万人を超える人々が糖尿病を患っていると推定しており、糖尿病は最も一般的な非伝染性疾病の１つであり、２０３０年までには倍増すると予想されている。
【０００４】
米国では、人口のおよそ７％に相当する２０８０万人が糖尿病を有している。推定１４６０万人が糖尿病と診断されている；しかしながら、１２０万人は、彼らが疾患を有していることに気づいていない。成人（２０歳以上）の１０％よりも多くが糖尿病を有しており、６０歳以上のアメリカ人の２０％よりも多くが疾患を有している。糖尿病と診断されたすべての人々のおよそ９０〜９５％が、成人発症型または２型の糖尿病を有している。糖尿病を有する残りの５〜１０％の人々（一般に子どもおよび若年成人）は、インスリン依存性または１型の糖尿病を有する。糖尿病の進行の危険性は、通常はボディマスインデックスで測定するが、これは年齢および体重と共に増大する。毎年、成人に対し、約１５０万の新たな症例が診断される。２００２年において、糖尿病は米国における死因の第６番目であり、しかも実際より少なく報告されている可能性が非常に高い。
【０００５】
心臓疾患、脳卒中、高血圧、眼合併症（網膜症、白内障）、腎疾患（腎症）、神経系疾患（神経障害）、末梢血管疾患、歯の疾病、胃不全麻痺、性機能不全、および妊娠中の合併症を包含する糖尿病を引き起こす、深刻な内科的合併症が存在する。年齢をマッチングさせた糖尿病を有する人々の死亡の危険性は、概ね、糖尿病を有しない人々の約２倍である。
【０００６】
１型の糖尿病を有する人々は、ポンプまたは注入によって送達することによって、インスリンを補充しなければならない。２型の糖尿病を有する人々は、注意深い食餌および運動プログラム、減量、および／または経口薬の摂取に従って、血糖を調節することができる場合がある。糖尿病を有する人々の多くは、コレステロールおよび血圧を調節するために経口薬の摂取も必要とする。糖尿病と診断された成人のうち約１１％がインスリンおよび経口薬の両方を摂取し、２２％がインスリンのみを摂取し、４９％が経口薬のみを摂取し、１７％はインスリンと経口薬のどちらも摂取していない。殆どの非インスリン療法は、血糖値を低下させるか、食後の血糖値に対する感受性を向上させるか、あるいはインスリンの膵臓分泌を増大させるように設計された経口薬である。経口の抗糖尿病は、抗糖尿病用医薬品販売全体の約６３％を占める。例えばメトホルミンは、肝臓が過剰量の糖を作るのを防ぐことによって作用するが、すべての患者に有効ではなく、有効性は典型的には経時によって低下する。別の種類の薬物であるインスリン抵抗性改善剤、すなわちグリタゾンは、インスリン抵抗性を低減させて、糖尿病のインスリン値の低下をさらに有効にする手助けをする。しかしながら、グリタゾンは肝臓毒性および死亡と関連付けられており、したがって医師はこれらの薬物の使用に対して依然として慎重である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、糖尿病および他の関連する障害を治療するために、さらにより安全かつ有効な治療が、非常に広範な臨床において必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、少なくとも、真性糖尿病および他の代謝不均衡を治療および予防するための方法およびキットを対象とする。
【０００９】
１つの実施の形態では、本発明は、アブラヤシ属の果実から得られる抽出物を治療に有効な量で哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における代謝不均衡の治療方法を提供する。
【００１０】
１つの態様では、抽出物は、栄養補助組成物または医薬組成物におけるものである。別の態様では、抽出物は水溶性の成分である。さらに別の態様では、水溶性の抽出物はフェノール類である。特定の態様では、フェノール類はケイヒ酸および安息香酸の誘導体を含む。別の実施の形態では、抽出物は、ヤシ油をミリング処理した植物液から得られる、ヤシ果汁である。
【００１１】
別の実施の形態では、本方法は、さらに、インスリン分泌および／または感受性を増強することを含む。さらに別の実施の形態では、本方法は、さらに、血糖値を低減することを含む。
【００１２】
本発明のある態様では、代謝不均衡は、真性糖尿病、妊娠性糖尿病、β−細胞機能の遺伝子異常、インスリン作用に関する遺伝子異常、膵外分泌疾患、内分泌障害、薬物または化学物質誘発性、感染、糖尿病に関連する他の遺伝的症候群、前糖尿病状態、およびメタボリック・シンドロームからなる群より選択される。１つの態様では、代謝不均衡はＩ型および／またはＩＩ型を含めた真性糖尿病である。別の態様では、代謝不均衡は、成人における潜在性の自己免疫性糖尿病（例えば１．５型糖尿病）である。
【００１３】
さらに別の態様では、哺乳動物における真性糖尿病の治療は、真性糖尿病の二次的な内科的合併症を予防する。さらに別の態様では、真性糖尿病の二次的な内科的合併症は、心臓疾患、脳卒中、高血圧、網膜症、白内障、腎症、神経障害、末梢血管疾患、歯の疾病、胃不全麻痺、性機能不全、または妊娠中の合併症を含む。
【００１４】
本発明によれば、代謝不均衡はメタボリック・シンドロームでありうる。１つの態様では、メタボリック・シンドロームの治療には、１つ以上の診断基準を治療することが含まれる。さらに別の実施の形態では、診断基準は、胴囲、トリグリセリド、ＨＤＬ、血圧、および空腹時血糖値からなる群より選択される。さらに別の実施の形態では、代謝不均衡は前糖尿病状態であり、哺乳動物は真性糖尿病のリスク因子を１つ以上有する。別の態様では、前糖尿病状態は、空腹時血糖値異常またはグルコース不耐性を含む。さらに別の態様では、真性糖尿病の１つ以上のリスク因子は、年齢、身体不活動、ＢＭＩの異常、遺伝学的疾病素質、民族性、高血圧、多嚢胞性卵巣症候群、循環器疾患、以前の空腹時血糖値またはグルコース耐性の異常、およびインスリン抵抗性に関連する他の臨床症状からなる群より選択される。
【００１５】
本発明はさらに、キットの使用を含む。１つの実施の形態では、キットは、（ａ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物の組成物を含むパッケージと、（ｂ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物を代謝不均衡の治療に使用するための使用説明書とを含む。別の実施の形態では、代謝不均衡は真性糖尿病である。
【００１６】
ある実施の形態では、本発明は、アブラヤシ属の果実から得られる抽出物を治療に有効な量で含む、哺乳動物が摂取するための栄養補助組成物に関する。
【００１７】
ある実施の形態では、本発明は前述の栄養補助組成物のいずれか１つに関し、ここで前記抽出物は粉末、液体、または固体である。ある実施の形態では、本発明は前述の栄養補助組成物のいずれか１つに関し、ここで前記粉末は再構成可能なな濃縮物である。
【００１８】
ある実施の形態では、本発明は前述の栄養補助組成物のいずれか１つに関し、さらに、必須脂肪酸、抗酸化物質、ビタミン、またはミネラルを含む。
【００１９】
ある実施の形態では、本発明は前述の栄養補助組成物のいずれか１つに関し、さらに、γ−リノレン酸、リノール酸、亜鉛、銅、セレン、ヨウ化物、ピリドキシン、葉酸、コバラミン、ビタミンＣ、ビタミンＢ１、ビタミンＥ、チアミン二リン酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ12、ビタミンＤ、マンガン、ビタミンＡ、リボフラビン、ナイアシン、ナイアシンアミド、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、酒石酸水素コリン、ベタイン、ビタミンＫ、モリブデン、クロム、カリウム、シトラスバイオフラボノイド、混合カロチノイド、緑茶抽出物、またはＮ−アセチルシステインを含む。
【００２０】
ある実施の形態では、本発明は前述の栄養補助組成物のいずれか１つに関し、さらに、ショウガ、ボスウェリア、フルーツ香味剤、着色剤、または保存料を含む。
【００２１】
ある実施の形態では、本発明は前述の栄養補助組成物のいずれか１つに関し、さらに、ゼラチン、アジュバント、水、ピーナッツ油、ミネラルオイル、大豆油、ゴマ油、化学合成油、安定剤、または緩衝剤を含む。
【００２２】
ある実施の形態では、本発明は、前述の栄養補助組成物のうち１つ以上を含む調理済み食品に関する。
【００２３】
ある実施の形態では、本発明は、アブラヤシ属の果実から得られる抽出物を治療に有効な量で哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における利尿を誘発する方法に関する。
【００２４】
ある実施の形態では、本発明は、アブラヤシ属の果実から得られる抽出物を治療に有効な量で哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における高血圧を治療する方法に関する。
【００２５】
ある実施の形態では、本発明は前述の方法のいずれか１つに関し、ここで前記抽出物は栄養補助組成物または医薬組成物におけるものである。
【００２６】
ある実施の形態では、本発明は前述の方法のいずれか１つに関し、ここで前記抽出物は水溶性の成分である。ある実施の形態では、本発明は前述の方法のいずれか１つに関し、ここで前記水溶性の抽出物はフェノール類を含む。ある実施の形態では、本発明は前述の方法のいずれか１つに関し、ここで前記フェノール類はケイヒ酸および安息香酸の誘導体を含む。
【００２７】
ある実施の形態では、本発明は前述の方法のいずれか１つに関し、ここで前記抽出物はアブラヤシ属から得られるものである。
【００２８】
ある実施の形態では、本発明は前述の方法のいずれか１つに関し、ここで前記抽出物は、ヤシ油をミリング処理した植物液から得られるヤシ果汁である。
【００２９】
ある実施の形態では、本発明は、
（ａ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物の組成物を含むパッケージと、
（ｂ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物を、それらを必要とする哺乳動物における利尿の誘発に使用するための使用説明書と、
を含むキットに関する。
【００３０】
ある実施の形態では、本発明は、
（ａ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物の組成物を含むパッケージと、
（ｂ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物を、それらを必要とする哺乳動物における高血圧の治療に使用するための使用説明書と、
を含むキットに関する。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】ナイルサバンナネズミ（Nile rat；Arvicanthis niloticus）の写真。
【図２】週齢５２週までのオスおよびメスのナイルサバンナネズミの成長グラフ。
【図３】週齢別のオスおよびメスのナイルサバンナネズミの食物消費を示す、２つのパネルグラフ。
【図４】月齢８ヶ月までのナイルサバンナネズミの随時血糖値（血中グルコース値）のグラフ。
【図５】月齢１２ヶ月までのナイルサバンナネズミの空腹時血糖値（血中グルコース値）のグラフ。５０週まで生存した動物は少数であり、それらは比較的低度の高血糖症（糖尿病）を有していた。
【図６】自然発症性糖尿病が進行するオスのナイルサバンナネズミの異なる随時血糖（血中グルコース）の測定値における水分摂取のグラフ。測定は、週齢２０〜３２週の２３匹のオスのナイルサバンナネズミから採取して行った。
【図７】２型の糖尿病が進行するオスのナイルサバンナネズミについての食物摂取、水分摂取、および体重を示すグラフのパネル。オスのナイルサバンナネズミは、食物および水分摂取の増大は、２型の糖尿病の初発症候のうち、血糖の上昇に関連することを実証している。体重（脂肪）過剰は糖尿病の発病にとって必須条件ではない；ｎ＝１３。
【図８】２００ｍｇ／ｄＬを超える随時血糖値を有するオスおよびメスのナイルサバンナネズミの週齢別の割合を示す棒グラフ。ラットには、ＢｅｔａＣｈｉｐ上に敷き詰めた市販の食餌５００８を与えた（ｎ＝１７５の観察記録）。
【図９】非糖尿病および糖尿病のナイルサバンナネズミの食物および水分摂取の表。非糖尿病の空腹時血糖は、１２週および５２週のオスおよびメスを合わせて平均約６５ｍｇ／ｄＬであったのに対し、糖尿病の場合は約１６０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖を有していた；「*」で表示。「**」は、スチューデントのｔ検定において、糖尿病の場合に著しく大きいことを示す（Ｐ＜０．０５）。本質的に、糖尿病の場合はカロリーを浪費する。
【図１０】ナイルサバンナネズミにおけるトリグリセリド値に対する空腹時血糖値（血中グルコース値）のグラフ。
【図１１】自然発症糖尿病ナイルサバンナネズミにおけるトリグリセリド値に対する非空腹時または空腹時血糖値（血中グルコース値）のグラフ。
【図１２】非糖尿病の絶食した対照および糖尿病のナイルサバンナネズミにおけるリポタンパク分析の図表。「ａ，ｂ，ｃ」の共通の上付き文字を共有する平均値は、一元配置分散分析法およびフィッシャーの多重比較検定で、有意である（ｐ＜０．０５）。
【図１３】糖尿病が進行しているラットにおける空腹時血糖値（血中グルコース値）および肝臓重量のグラフ。
【図１４】空腹時血糖値（血中グルコース値）の変化における、ナイルサバンナネズミの平均インスリン値の表。＊は、アッセイに＞１２ｎｇ／ｄＬのカットオフ値を含めたことを示しており、したがって、１２ｎｇ／ｄＬの任意数が割り当てられた。
【図１５】ｉｐＧＴＴの際のオスおよびメスのナイルサバンナネズミにおけるインスリン反応の表。
【図１６】糖尿病および非糖尿病のナイルサバンナネズミにおける腹腔内グルコース負荷試験（ｉｐＧＴＴ）に対する絶対および相対応答性を示す２つのグラフのパネル。
【図１７】糖尿病および非糖尿病のナイルサバンナネズミにおける腹腔内インスリン抵抗性試験に対する絶対および相対非空腹時グルコース応答性を示す２つのグラフのパネル。
【図１８】高脂肪または低脂肪の食餌を与えたメスのナイルサバンナネズミについてのボディマスインデックス（ＢＭＩ）およびリーンマスインデックス（ＬＭＩ）の表。
【図１９】３種類の異なる食餌を５ヶ月間与えた５週齢のオスのナイルサバンナネズミにおける体重および臓器重量、血糖プロファイル、およびカロリー摂取の表。ａ，ｂ，ｃ…の共通の上付き文字を共有する平均値は、一元配置分散分析法およびフィッシャーの多重比較検定で有意である（ｐ＜０．０５）。「*」は、２４週齢の１５時間絶食後の血糖（血中グルコース）を示す（ｎ＝５／群）。
【図２０】３種類の異なる食餌を５ヶ月間与えた５週齢のオスのナイルサバンナネズミにおける血漿および肝臓脂質の表。ａ，ｂ，ｃ…の共通の上付き文字を共有する平均値は、一元配置分散分析法およびフィッシャーの多重比較検定で有意である（ｐ＜０．０５）。「*」は、２４週齢の１５時間絶食後の血糖（血中グルコース）を示す。
【図２１】３種類の異なる食餌を５ヶ月間与えた５週齢のオスのナイルサバンナネズミにおける臓器重量の表。ａ，ｂ，ｃ…の共通の上付き文字を共有する平均値は、一元配置分散分析法およびフィッシャーの多重比較検定で有意である（ｐ＜０．０５）。「*」は、２４週齢の１５時間絶食後の血糖（血中グルコース）を示す。実験２。
【図２２】３種類の異なる食餌（半純化した食餌(semi-purified diets)）を与えたナイルサバンナネズミにおける、５ヶ月後のグルコース負荷試験のグラフ。実験２。
【図２３】ラットの食餌を不断給餌または８０％の不断給餌で与えたオスのナイルサバンナネズミにおける腹腔内グルコース負荷試験のグラフ。８０％まで食物制限した不断給餌では、自然発症糖尿病オスのナイルサバンナネズミにおけるｉｐＧＴＴが改善する（実験５）。
【図２４】水またはヤシ果汁のいずれかを与えた糖尿病および非糖尿病のナイルサバンナネズミにおける血糖値（血中グルコース値）および血漿トリグリセリド値の棒グラフ。１群あたりｎ＝４。ラットは、開始時に２０週齢であり、さらに追加で１２週間、水またはＰＦＪを与えた。
【図２５】ヤシ果汁または水を与えたナイルサバンナネズミにおける、空腹時リポタンパクのプロファイルの棒グラフ。１群あたりｎ＝４。ラットは２０週齢であり、さらに追加で１２週間、水またはＰＦＪを与えた。
【図２６】水またはヤシ果汁のいずれかを与えた月齢３ヶ月のナイルサバンナネズミにおける、１ヶ月および９ヶ月後の食物摂取および血糖値（血中グルコース値）の棒グラフ。ナイルサバンナネズミ、実験７（ＧＡＥ１５００ｐｐｍ）。
【図２７】９ヶ月間、水またはヤシ果汁を与えた月齢３ヶ月のナイルサバンナネズミにおける血漿脂質の棒グラフ。*ｐ＜０．０５。
【図２８】９ヶ月間、水またはヤシ果汁を与えた、開始時の月齢３ヶ月のナイルサバンナネズミにおける臓器重量（％体重）の棒グラフ。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
開示する説明、方法、および実施例は、油ヤシの果実を使用して、代謝不均衡、真性糖尿病、前糖尿病状態、メタボリック・シンドローム、および他の関連する障害の治療および予防を促進する。
【００３３】
それはまた、心臓疾患、脳卒中、高血圧、眼合併症（網膜症、白内障）、腎疾患（腎症）、神経系疾患（神経障害）、末梢血管疾患、歯の疾病、胃不全麻痺、性機能不全、および妊娠中の合併症を併発した糖尿病を結果的に生じる二次的な内科的合併症の治療および予防にも関する。
【００３４】
「包含する」、「有する」、「含む」および「含有する」と言う用語は、他に断りのない限り、制限のない用語（すなわち「含むが限定されない」ことを意味する）と解釈されるべきである。明細書における数値の範囲の記述は、本明細書に別記されない限り、単に、個別に、その範囲内に含まれる各区切られた値に関する簡潔な表現方法としての役割をし、各区切られた値は、それが本明細書に個別に記述されているかのごとく、本明細書内に取り込まれることが意図されている。本明細書に記載されるすべての方法は、本明細書に別記されるか、あるいは文脈と矛盾することが明白にされない限り、任意の適切な順番で行うことができる。本明細書に記載される任意およびすべての例または例示的表現（例えば「など（のような）」）の使用は、単に、本発明をより明らかにすることを意図しており、他に主張しない限り、本発明の範囲における限定を提供するものではない。本明細書における表現のいずれも、特許請求の範囲に記載されない任意の要素が本発明の実施に必須であることを示唆すると解釈されるべきではない。
【００３５】
本明細書では、ナイルサバンナネズミにおける「糖尿病」という用語は、一般に、＞２２５ｍｇ／ｄＬの随時血糖値、または＞１１０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を意味する。
【００３６】
本明細書ではヒトにおける「糖尿病」という用語は、一般に、および現在のところ、経口のグルコース負荷試験の際の、≧２００ｍｇ／ｄＬ（≧１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ）の随時血漿血糖または血糖濃度、または≧１２６ｍｇ／ｄＬ（≧７．０ｍｍｏｌ／Ｌ）の空腹時血漿血糖濃度、または≧２００ｍｇ／ｄＬ（≧１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ）の２時間負荷後血糖濃度を意味する。
【００３７】
本明細書では、ナイルサバンナネズミにおける「非糖尿病」という用語は、一般に、≦８０ｍｇ／ｄＬの空腹時血漿血糖値、また＜２００ｍｇ／ｄＬのは随時の血漿血糖値を意味する。
【００３８】
本明細書では、ヒトにおける「非糖尿病」という用語は、一般におよび現在のところ、経口のグルコース負荷試験の際の、＜１００ｍｇ／ｄＬ（５．６ｍｍｏｌ／ｄＬ）の空腹時血漿血糖値、または＜１４０ｍｇ／ｄＬ（＜７．８ｍｍｏｌ／ｄＬ）の２時間負荷後血糖値を意味する。
【００３９】
本明細書では、ナイルサバンナネズミにおける「前糖尿病」という用語は、一般に、約８０〜約１１０ｍｇ／ｄＬの空腹時血漿血糖値を意味する。
【００４０】
本明細書では、ヒトにおける「前糖尿病」という用語は、一般におよび現在のところ、経口のグルコース負荷試験の際の、１００〜１２５ｍｇ／ｄＬ（５．６〜６．９ｍｍｏｌ／Ｌ）の空腹時血漿血糖値、または１４０〜１９９ｍｇ／Ｌ（７．８〜１１．１ｍｍｏｌ／Ｌ）の２時間負荷後血糖値を意味する。
【００４１】
これらの定義は、施術者が一般に米国糖尿病学会（ＡＤＡ）に照らして従う、現在認められている指針であることが認識されよう。指針は、時間とともに変化し、また地域または国によっても変化するであろうし、また当業者に既知の、指針を提示するグループまたは機関（例えばＡＤＡ、世界保健機関、ＮＩＤＤＫ／ＮＩＨ、ＣＤＣなど）に応じて決まるであろう。医師はまた、診断および治療を決定する際に、臨床経験、患者の既往歴、および／または他の情報を使用して差し支えない。したがって、これらの定義は、科学および医薬の進歩にしたがい、時間とともに変化しうる。
【００４２】
本発明はまた、成人における潜在性の自己免疫性糖尿病（１．５型糖尿病としても知られる）の治療および予防にも適用できることが理解されよう。
【００４３】
本明細書では「随時」および「非空腹時」という用語は、一般に、最後の食事後の経過時間を気にせずに、昼夜を問わず随時であることを意味する。
【００４４】
本明細書では「空腹時」という用語は、一般に、少なくとも１２時間はカロリー摂取していないことを意味する。
【００４５】
本明細書では「代謝不均衡」という用語は、一般に、血漿血糖の上昇に関連する任意の障害または疾患の状態または状況を意味する。代謝不均衡には、例えば、真性糖尿病、妊娠性糖尿病、β−細胞機能の遺伝子異常、インスリン作用に関する遺伝子異常、膵外分泌、内分泌障害、薬物または化学物質誘発性の疾患、感染、糖尿病に関連する他の遺伝的症候群、前糖尿病状態、およびメタボリック・シンドロームが含まれる。
【００４６】
本明細書では「栄養補助」という用語は、一般に、栄養学的な利益の他に、追加の利益を提供する食物のことを意味する。
【００４７】
メタボリック・シンドローム
メタボリック・シンドロームは、米国心臓協会（ＡＨＡ）が述べる通り、ひとりの人における代謝性のリスク因子群によって特徴づけられる。メタボリック・シンドロームは、メタボリック・シンドロームＸ、シンドロームＸ、インスリン抵抗症候群、Ｒｅａｖｅｎシンドローム、またはＣＨＡＯＳの別称でも知られている。リスク因子としては、限定はしないが、腹部肥満、アテローム性脂質異常血症、高血圧、インスリン抵抗性またはグルコース不耐性、血栓症前の状態（高フィブリノゲンまたはプラスミノゲン活性化因子阻害剤−１）、および炎症促進状態（Ｃ反応性タンパクの上昇）が挙げられる。
【００４８】
今のところ、メタボリック・シンドロームを診断するための広く受け入れられている基準はない。最も一般的に用いられるのは、米国コレステロール教育プログラム（ＮＣＥＰ）の成人治療パネルＩＩＩ（ＡＴＰ ＩＩＩ）である。ＡＨＡおよび米国心臓、肺、血液研究所は、現在、次の要素：胴囲の増加（男性：≧４０インチ、女性：≧３５インチ）、空腹時トリグリセリド≧１５０ｍｇ／ｄＬ、ＨＤＬの低下（男性：＜４０ｍｇ／ｄＬ、女性＜５０ｍｇ／ｄＬ）、血圧≧１３０／８５ｍｍＨｇ、および空腹時血糖≧１００ｍｇ／ｄＬのうち、３つ以上に該当する場合にメタボリック・シンドロームと認定することを推奨している。これは、施術者が採用するであろう、現在の多くの指針の１つであることが理解されよう。指針は時間とともに、また地域または国によって、また指針を提示するグループまたは機関（例えば世界保健機関、ＮＣＥＰ、ＡＨＡなど）によっても変化するであろう。
【００４９】
ナイルサバンナネズミ（Arvicanthis niloticus）
ナイルサバンナネズミ（図１）は、アフリカグラスネズミ、縞のない（unstriped）グラスマウス、またはクズ（Kuzu）ラットという別名でも知られ、ナイル川デルタ地帯およびアラビア半島の一部に生息する。本明細書では、これらの名称のいずれも、ナイルサバンナネズミ（Arvicanthis niloticus）のことを指す。齧歯動物は、粗い、灰色がかった茶色の毛皮を有する。成熟した、頭部と体部の長さは〜１３ｃｍであり、加えて尾部がさらに１０ｃｍある。成熟ラットの体重は、メスで１１０〜１３０ｇであり、オスよりもやや軽い（図２）。標準的なラット用の食餌および水を与えた非糖尿病のメスおよびオスのナイルサバンナネズミの成長は、週齢４〜３０週の間は安定かつ非線形であり、その時点で、それ以上成長することなくプラトーに達する。オスは１３０〜１４０ｇで落ち着くが、メスの最終体重は１１５〜１２５ｇになる。ナイルサバンナネズミには、脂肪の付加重量が発生しうるが、ほとんどの場合は過度ではない。付加脂肪に起因して、時々、オスでは１６０ｇ、メスでは１５０ｇに達する場合がある。食餌および水を与えた週齢５２週までのオスおよびメスのラットについての発育データを採取した。各時点における観察記録の数ｎは、オスで３〜６７匹、およびメスで２〜７０匹の範囲で変化した。生存動物の総数Ｎは、オスが２０６匹、メスが２００匹であった。
【００５０】
オスおよびメスのナイルサバンナネズミによって、ラブダイエットとして消費される食物の量を図３に示す。食物消費を、２９匹のメスおよび１９匹のオスのナイルサバンナネズミについて３５週間測定した。各時点ｎは、１〜１２匹のオスおよび１〜１７匹のメスで表される。メスのナイルサバンナネズミは経時による食物摂取の増大と直線関係を示したが、オスのナイルサバンナネズミは、３０週目以降、グルコース不耐性の進行につれて摂取量が減った。
【００５１】
最適条件下では、ナイルサバンナネズミは、６〜１２ヶ月の間、３〜４週間ごとに４〜８匹の子どもを、継続的に飼育下繁殖させることができる。子どもは、生後２１日で離乳することができる。離乳から約６週齢まで、ナイルサバンナネズミは約４０〜６０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を有する。月齢３〜４ヶ月までは、血糖は約７０〜８０ｍｇ／ｄＬに上昇する。飼育において、これらのラットは約２年間生存する。ハツカネズミ属またはクマネズミ属に由来する種とは異なり、ナイルサバンナネズミは昼行性の動物であり、日中に最も活動的になる。ナイルサバンナネズミは日周期およびその調節機構における研究に利用されている。
【００５２】
本発明に用いたナイルサバンナネズミの飼育株は、ミシガン州立大学のＬａｕｒａ Ｓｍａｌｅ氏から得た６対のつがいを起源とするものであった（ＭｃＥｌｈｉｎｎｙ，Ｔ．Ｌ、１９９７）。
【００５３】
ナイルサバンナネズミにおける糖尿病の進行
飼育において、ナイルサバンナネズミは、ヒトの２型糖尿病と関係するメタボリック・シンドロームと多くの類似点を有するプロファイルを含む、ヒトに見られるのと同様の臨床症状を伴う、予期しない自然発症性糖尿病を発現する（Ｌａｋｋａら，２００２）。ナイルサバンナネズミの疾病は、進行性の高血糖症、高トリグリセリド血症、多飲症および多尿症を伴う過食症を特徴とし、最終的にはケトアシドーシス、ケトン尿症、および末期の腎炎および腎硬化症につながる腎肥大を生じる結果となる。インスリン感受性および分泌は経時とともに衰えるのに対し、カロリー制限は本質的に糖尿病の発現を防止し、これらの観察記録はヒトの状態と似ている。糖尿病が進行したナイルサバンナネズミの約１０％は、白内障も進行する。
【００５４】
標準的なラット用の食餌（ラブダイエット（LabDiet）社（米国ミズーリ州セントルイス所在）製のＦｏｒｍｕｌａｂ Ｄｉｅｔ＃５００８（脂肪１７％、タンパク質２７％））を与えた場合、ナイルグラスネズミは、成熟し、かつ糖尿病を有しない時点において、典型的には、１日当たり１４ｇの食物（４０〜５０ｋｃａｌ／日）を消費し、おおよそ１０〜２０ｍＬの水を飲む。食餌を与えた、感受性のラットにおける糖尿病の発病は、典型的には、早ければ、多くのオスで生後８〜１２週間、メスでは１６〜２２週間で進行し始める。
【００５５】
図４は、標準的な食餌および水食を与えたオスおよびメスのナイルサバンナネズミにおける、多重実験の経時による複数の実験から採取した、随時血糖のプロットである。いずれの時点においても、オスのラットはメスよりも高い血糖値を有していた。早くも８週間で、オスは１５０ｍｇ／ｄＬに達し、８ヶ月ではおよそ４００ｍｇ／ｄＬに達しうるが、メスでは幾分低い。各時点における観察記録の数ｎは、オスで４〜４８匹、メスで４〜５７匹の範囲であった。動物の総数Ｎは、オスで１２０匹、メスで１１４匹であった。
【００５６】
図５は、食餌と水を１２ヶ月間与えたオスおよびメスのナイルサバンナネズミにおける空腹時血糖の増加を実証している。オスの空腹時血糖は平均２５０〜３００ｍｇ／ｄＬに達し、メスでは１５０ｍｇ／ｄＬであった。図５のデータは、複数の実験を基に作成した。各時点における観察記録の数ｎは、オスが８〜２２匹、メスが２〜１６匹の範囲であった。調査対象となった動物の総数Ｎは、オスは７６匹、メスが８６匹であった。
【００５７】
図６は、週齢２０〜３２週のオスのナイルサバンナネズミにおける随時血糖と水の消費の相関関係を示している。すべての動物に標準的な食餌（chow diet）を与え、水分摂取量を週２回測定した。結果は、血糖の増加につれてラットが多渇症を示し、水分摂取は、このモデルにおける糖尿病の進行を追跡するための手段として示されている。
【００５８】
図７および図９は、糖尿病が進行している週齢１２週〜４０週のオスのナイルサバンナネズミにおける食物摂取（食餌（chow）として）、水分摂取、および体重を示している。これらの割合は、食物および水分摂取が血糖値の上昇と関係していることを実証している。脂肪としての過剰の体重は、必ずしも糖尿病の発病および進行のための必須条件ではない。
【００５９】
図８は、月齢８ヶ月までに、９０％を超えるオスおよび５０％を超えるメスが、血糖に基づいて糖尿病を発現することを実証している。糖尿病の発病は、メスよりもオスの方に早く現れるように思われる。これらのラットは、高血糖症に併発して、多尿症、多渇症、および多食症も示す。多くのラットは、無治療で放置すると、７〜１２ヶ月までに、白内障、悪液質、糖尿病ケトアシドーシス、および昏睡も発現する。自然発症性糖尿病の進行に加えて、ナイルサバンナネズミは、前述の代謝性のリスク因子群を特徴とするメタボリック・シンドロームの兆候および症状も発現する。
【００６０】
糖尿病を研究する方法として、生理的変化の測定および血液または血漿の分析が挙げられる。これらには、限定はしないが、成長動力学、ボディマスインデックス（ＢＭＩ）、リーンマスインデックス（ＬＭＩ）、食物および水分摂取、性差、空腹時および随時血糖、トリグリセリド（ＴＧ）、リポタンパク、コレステロール、肝臓重量および肝臓脂質、腎臓の大きさおよび機能、グルコース負荷試験（ＧＴＴ）、インスリン抵抗性試験（ＩＴＴ）、血中インスリン濃度、膵島細胞の形態、高脂肪食、およびカロリー制限が含まれる。
【００６１】
糖尿病のナイルサバンナネズミは、多くの場合、高トリグリセリド血症を発現する。空腹時血糖を空腹時トリグリセリド値と比較した場合（図１０）、＞１２５ｍｇ／ｄＬのＴＧ値は、多くの場合、血糖の上昇と関係していた。図１１は、随時および空腹時血糖値の低い動物は、典型的には、血糖値の高い範囲のものと比較して低いトリグリセリド値を有することを示している。データは、空腹時血糖値の上昇と高いトリグリセリド値（すなわち＞１２５ｍｇ／ｄＬの空腹時トリグリセリド）の組合せが、糖尿病の最良の指標であることを示唆している。高トリグリセリド群ではオスが大多数だったのに対し、低トリグリセリド群の動物の大多数がメスであった。中間値のトリグリセリド群のオスおよびメスのラットを各カテゴリに均等に分配した。
【００６２】
糖尿病のナイルサバンナネズミは、多くの場合、リポタンパクの大幅上昇を示す（図１２）。高血糖症と関連して、超低密度リポタンパク（ＶＬＤＬ）、低比重リポタンパク質（ＬＤＬ）、トリグリセリド（ＴＧ）、および総コレステロール（ＴＣ）に著しい増大が見られた。本実験の時点で、雌雄混合の１８匹のナイルサバンナネズミを、それらの空腹時血糖に応じて３つの群に分けた：非糖尿病６０ｍｇ／ｄＬ未満；前糖尿病６１〜１５０ｍｇ／ｄＬ；糖尿病１５０ｍｇ／ｄＬよりも大きい。血漿の超遠心分離後にリポタンパクを単離した。同様の脂質プロファイルを有する傾向にある非糖尿病および前糖尿病の動物と比較して、糖尿病ラットでは、ＴＧ、ＴＣ、ＶＬＤＬ−ＣおよびＬＤＬ−Ｃのすべてにおいて著しい増加が見られた。群間のＬＤＬ−Ｃのパーセンテージにはほとんど差異は見られなかったが、非糖尿病および前糖尿病の動物のＨＤＬ−Ｃ（それぞれ５０％および６７％）は、糖尿病のナイルサバンナネズミ（６％）に比べて、およそ１０倍であった。しかしながら、糖尿病において低下傾向にあったものの、ＨＤＬ−Ｃの絶対値の間には有意差は観察されなかった。ＬＤＬ−Ｃ／ＨＤＬ−Ｃの比は、糖尿病の動物においてより高く現れたが、群間の相違は有意に達するほどの差異ではなかった。対照的に、ＴＣ／ＨＤＬ−Ｃの比は、過量のＶＬＤＬ−Ｃに起因して、非糖尿病および前糖尿病の群と比較して糖尿病の群でおよそ１０倍高かった（ｐ＜０．０５）。
【００６３】
糖尿病における食餌の脂肪の影響を試験した実験では、肝臓重量と空腹時血糖のプラスの相関関係が見られた（図１３）。肝臓重量が大きくなると、空腹時血糖も上昇を示し、逆もまた同様であった。肝臓重量の増大は、すべてではないが、一部の実験において肝臓ＴＧの蓄積と関係していた。
【００６４】
ナイルサバンナネズミ（７〜５週齢のオスおよびメス）を空腹時血糖に基づいて４つの群に分け、それらの空腹時インスリン濃度を決定した（図１４）。一般に、インスリンは、糖尿病が進行し、血糖が１００ｍｇ／ｄＬよりも高く上昇するにつれて、増大する傾向にあった。＞１５０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値は、初期にはインスリン抵抗性に関連しており、異常に高い血糖値を有する動物のインスリン濃度は最終的には低下した。このことは、糖尿病が進行するにつれて、β細胞が完全に消耗し、インスリン分泌が低下したことを示唆している。しかしながら、インスリンの大きい標準偏差は、各群内の変動を実証している。
【００６５】
腹腔内（ＩＰ）グルコース負荷試験を受けたナイルサバンナネズミにおけるグルコースチャレンジに対するインスリン反応の変化を定量化した（図１５）。エリートＸＬグルコメーターを用いて、注入後０分および６０分の尾部の血液を採取し、測定した。ラットインスリンに対する抗体に基づくＥＬＩＳＡ法によってインスリン濃度を測定した。一般に、これらのラットは、インスリン抵抗性およびインスリン分泌異常と一致する態様で反応した。例えば、ラット番号２０６Ｍの動物は、６０分でインスリンの９倍の増加を有し、それにもかかわらず血糖は４９１ｍｇ／ｄＬで上昇し続け、インスリン抵抗性を示した。インスリン分泌の欠陥は、ラット番号９７Ｍの動物に見られ、最初の血糖値は４５４ｍｇ／ｄＬであり、インスリンが不十分にわずか０．６ｎｇ／ｍＬだけしか増加しなかったため、さらに７３８ｍｇ／ｄＬまで増加した。ラット番号ｍ５８Ｍのような健康なラットは、４０ｍｇ／ｄＬの最初の空腹時血糖値を有し、最小限のインスリン上昇を伴って、８９ｍｇ／ｄＬまでしか上昇しなかった。ラット番号１１４Ｍのラットは、６０分においてわずか９０ｍｇ／ｄＬの比較的低い血糖値を維持するのにインスリンの５倍の増加を必要とし、インスリン抵抗性の初期段階の可能性を示唆した。
【００６６】
週齢５〜４７週の１９匹のオスのナイルサバンナネズミ（糖尿病６匹、正常１３匹）にグルコース負荷試験を行った（図１６）。すべての動物を、一晩かけて１５時間絶食させ、２．５ｇ／ｋｇ体重のグルコース溶液を注入した。その後、エリートＸＬグルコメーターを用いて、注入後０、１、３および５時間の尾部血液の血糖を測定した。それらの応答に応じて、ラットを糖尿病または非糖尿病にグループ分けした。糖尿病群は２００ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値から開始し、１時間後に５５０ｍｇ／ｄＬのピーク値に達した。５時間後、これらの糖尿病動物の血糖は、まだ初期値を上回っていた。非糖尿病群は、わずか５５ｍｇ／ｄＬの初期空腹時血糖値を有し、１時間後に２００ｍｇ／ｄＬのピーク値に達した。ちょうど３時間後に、血糖値は初期値に戻り、５時間後には４４ｍｇ／ｄＬまで低下した。相対応答（％変化）は、非糖尿病ラットが、糖尿病ラットと比較してグルコース用量に対してより動的に反応し、急上昇するが、初期の正常血糖値まで急速に戻ることを実証している。
【００６７】
インスリン抵抗性試験（ＩＴＴ）（図１７）は、血糖に基づいて糖尿病または非糖尿病に分類された非空腹時のナイルサバンナネズミに注入した腹腔内インスリンに対する絶対および相対グルコース応答性を示している。これらの８匹の糖尿病および７匹の非糖尿病のナイルサバンナネズミ（週齢９〜５５週）には、食餌および水が与えられた。それらに、０．５ＩＵ／ｋｇ体重のインスリンの腹腔内注射を与えた。エリートＸＬグルコメーターを用いて、注射後１５分、次に３０分間隔で、尾部血液の血糖を測定した。血糖は、非糖尿病ラットでは６０分で底打ちし、１２０分後にはインスリン投与からほとんど完全に回復した。対照的に、糖尿病群における血糖は、注入後１２０分においてさえも、ゆっくりと最小限に低下した。このことは、糖尿病の動物のインスリン抵抗性が、インスリン値の上昇の存在下であっても、高い血糖値を維持することを示唆している。
【００６８】
相対グルコース応答性（図１７）は、生理学的機序が働いていることを明示している。非糖尿病ラットの血糖値は、インスリン注射後に急速に低下し、６０分後にグルコースの回復が始まる。他方では、糖尿病群は正常に応答せず、注入後１２０分まで継続して、血糖のゆっくりとした低下を見せた。
【００６９】
空腹時血糖に基づいて、前糖尿病になっていない８匹の４０週齢のメスのナイルサバンナネズミを選択し（平均値＝１１７ｍｇ／ｄＬ）、異なる脂肪レベルの食餌を１２週間与えた。この時点において、空腹時血糖は、高脂肪食餌群では２２３ｍｇ／ｄＬだったが、低脂肪群では８２ｍｇ／ｄＬに低下した（ｐ＜０．０５）。終了時点において、体重、枝肉重量、および長さを測定し、ＢＭＩおよびＬＭＩの計算に用い、糖尿病の状態との潜在的関連性についてこれらの肥満指数を調べた。鼻先から尾基底部までを測定した長さを用いて、メートルを２乗した長さでｋｇ体重を割ることにより、ＢＭＩ値を計算した。全体重の代わりに枝肉重量（すべての臓器および体脂肪のプールの除去後）を使用したこと以外は同じ方式で、ＬＭＩ値を計算した。データ（図１８）は、群間におけるＢＭＩ値およびＬＭＩ値は同程度であったものの、糖尿病（血糖）において著しい差異を示している。言い換えれば、肥満の有無はこのモデルにおける糖尿病の進行の必須条件ではなく、食餌に応じて、または１２週間にわたる血糖の変化に関係する関数として、ＢＭＩまたはＬＭＩと血糖の差異との間には相関関係は見られなかった。このことはまた、ナイルサバンナネズミの糖尿病の病状の改善（すなわち、食事療法による前糖尿病から正常（非糖尿病）へのシフト）が、ボディマスまたはリーンマスの差異を誘発することなく進行することを示唆している。
【００７０】
別の研究では、１５匹の離乳したオスのナイルサバンナネズミに、３種類の食餌：低脂肪／高繊維、高脂肪／低繊維、または食餌＃５００８のうちの１つを５ヶ月間与えた（ｎ＝５／群）（図１９〜２２）。低脂肪食餌のラットの体重増加は最も小さい傾向にあったものの、いずれの食餌群についても体重に有意な差異はなかった。低脂肪の食餌を与えたラットは、終了時に最も低い空腹時血糖値を有していた（図１９）。高脂肪・低繊維群では、肝臓脂質ならびに血漿総コレステロールおよびトリグリセリド値に著しい増加が見られた（図２０）。高脂肪・低繊維食餌群では、５ヶ月の期間の終了時には肝腫脹および腎肥大も見られた（図２１）。高脂肪／低繊維の食餌のナイルサバンナネズミはまた、５ヶ月の期間の終了時における腹腔内グルコース負荷試験（ｉｐＧＴＴ）後に、血糖値の最小の制御を示した（図２２）。これは、高脂肪の食餌が、別の２つの食餌と比較して、メタボリック・シンドロームおよび糖尿病の幾つかの側面を誘発したことを示唆した。
【００７１】
他の食事療法
上記のことから示唆されるように、ナイルサバンナネズミ、特にオスは、栄養療法に関する実験に適している。何ヶ月もの間、健康への有害な影響のない、工場内で作った純化した食餌(purified diets)を動物に与えた。
【００７２】
カロリー制限
成熟ナイルサバンナネズミについて、糖尿病の状態におけるカロリー制限の影響を、糖尿病ラットを用いた第１実験および糖尿病の発病前の第２の実験において研究した。第１の実験では、３２週齢のオスのナイルサバンナネズミ（空腹時血糖約３００ｍｇ／ｄＬ）に、不断給餌の実験食餌 (ad lib lab chow)または不断給餌群の８０％のカロリー摂取のいずれかを与えた。どちらの群も１４週間の実験の間に体重は変化せず、本質的に同一の最終体重（平均値約１２０ｇ）を有していたが、空腹時血糖は、１４週間後、対照群ではわずかに２００ｍｇ／ｄＬを超えたのに対し、制限群では顕著に改善した（約１５０ｍｇ／ｄＬまで）。実験終了時におけるグルコース負荷試験は、制限群のはるかに良好なグルコース制御を実証するとともに、血糖におけるカロリー制限の好ましい効果を裏付けた。
【００７３】
第２の制限実験は、１８週間行われ、１１匹の２０週齢の非糖尿病群（６匹のオスおよび５匹のメス）を含み、６匹の動物には制限食（restricted chow diet）（不断給餌群の７５％）を１８週間与えた。殺処分の時点で、不断給餌群の空腹時血糖は初期の５６ｍｇ／ｄＬから２１１ｍｇ／ｄＬまで上昇したのに対し、制限群では本研究の開始から終了までの間に６０ｍｇ／ｄＬから７２ｍｇ／ｄＬへの微増しか見られなかった。群間のこれらの最終の血糖値の比較は、統計的に有意であった。ｉｐＧＴＴの間、制限群では１時間で７２ｍｇ／ｄＬから２２６ｍｇ／ｄＬに上昇したのに対し、不断給餌群では血糖値は２１１ｍｇ／ｄＬから制限群のほぼ２倍の５１７ｍｇ／ｄＬに上昇した。グルコース注射の５時間後、不断給餌群および制限群は、それぞれ２３３ｍｇ／ｄＬおよび１８４ｍｇ／ｄＬの血糖値を有し、不断給餌群におけるインスリン抵抗性が制限群のものよりも悪化したことを示唆した。肝臓は、不断給餌の対照群と比較して、制限群において有意に軽かった（２５％、ｐ＜０．０５）。
【００７４】
これら２つの研究結果は、軽い制限では体重を低下させなかったけれども、高齢のナイルサバンナネズミにおける食餌（chow diet）によるカロリー制限が、空腹時血糖に有益な効果を有することを示唆している。同様に、ヒトにおけるカロリー制限および減量も、典型的には、２型の糖尿病を有する患者におけるインスリン抵抗性を改善する（Ａｕｃｏｔｔら，２００４）。
【００７５】
油ヤシ（Elaeis）
油ヤシは、ヤシ科（Arecaceaeまたはpalm）の２つの品種、すなわち、ギニアアブラヤシ（Elaeis guineensis）（西アフリカ原産）とアメリカアブラヤシ（Elaeis oleifera）（中央および南アメリカ原産）を含む。最も一般的にヤシ油の生産における商業的農業に使用される成木は、２０ｍもの高さに育つ。果実は受粉から成熟まで５〜６ヶ月を要し、単一の種子（核）を有する油性かつ多肉質の外皮（果皮）を含む。油ヤシは側枝を生じず、伝播は播種による。ひと塊りの果実は４０〜５０ｋｇもの重さになりうる。
【００７６】
アフリカの油ヤシは、１９００年代の初頭にスマトラおよびマレーシアに持ち込まれた。今や世界生産の大部分がマレーシアからもたらされている。研究によって、油ヤシおよびその果実のさまざまな用途が見出されており、食用油および水溶性の抽出物の両方を提供する（参照することにより本明細書に取り込まれる、Ａｂｅｙｗａｒｄｅｎａら（Asia Pacific J Clin Nutr，２００２）、Ｔａｎら（Eur J Lipid Sci Technol，２００７）、Ｚｕｎｉｎｏら（J Nutr，２００７）、およびＨａｙｅｓおよびＫｈｏｓｌａ（Eur J Lipid Sci Technol，２００７））。ヤシ果汁は、パームバタースープなどのアフリカの料理に用いられている。パームバターは果実から作られ、さらに精製可能なレッドパーム油も含む。熱帯地方以外に居住し、新鮮なパームナッツが入手できない場合には、缶詰のパームスープの素またはパームナッツパルプ（シードソース（sauce graine）、ヤシの実（noix de palme）、またはヤシの実のクリーム（cream of palm fruit）ともいう）も同じであり、下記料理法を含めた料理に使用することができる。缶詰のパームスープの素は、国際的な食料品店またはアフリカの食料品店で見つかるであろう。基本的なパームバターソースは、およそ１００個の新鮮な完熟のパームナッツ（熱帯地方でのみ入手可能）を使用して作られる。料理法は次のとおりである：（１）２〜３カップの水を片手鍋で沸騰させる；（２）沸騰水にパームナッツを入れる（水を上までかぶせる必要はない）；（３）蓋をして、果皮が剥がれてくるまでパームナッツを数分間煮る；（４）鍋の水を切り、ポテトマッシャー（または乳鉢と乳棒）を用いて、パームナッツをパルプになるまで押しつぶす；（５）パームナッツパルプと１〜２クオート（またはリットル）の冷水を合わせ；攪拌し；パームナッツを手で搾ってパームナッツからすべての果実および油を取り出す；（６）パルプを、ろ過器を通して片手鍋（最初に濯いでおく）の中に押し出す；（７）ろ過器に残ったナッツの皮および核種を廃棄する；（８）パルプを２回裏ごししてすべてのナッツ核種および皮のかけらを排除し、最終的に油および果実がすべて片手鍋に入るようにする；（９）パルプをわずかに沸騰させて加熱し、たいていの場合は攪拌し、ソースにとろみが出るまで煮る（およそ１時間）；（１０）ソースの加熱後、他の構成成分を加えることができる。パームバターは大量に作って差し支えなく、後で使用するために冷凍してもよい。
【００７７】
他の研究は、他の天然植物源から得られる抽出物およびジュースの抗糖尿病効果を示しており、例えば、Ｘｉｅら（J Food Sci，２００７）、Ａｔｔｅｌｅ（Diabetes，２００２）、Ｅｌ−Ａｌｆｙら（Pharma Res，２００５）、Ａｖｉｒａｍら（Am J Clin Nutr，２０００）、Ｗｕら（Eur J Nutr，２００４）、Ｚｕｎｉｎｏら（J Nutr，２００７）、およびＳｉｎｇｈら（Clinical Chimeica Acta，２００５）が挙げられ、参照することにより本明細書に取り込まれる。
【００７８】
ヤシ油のミリング処理から得られる植物液の水溶性抽出物（本明細書ではヤシ果汁と称される）は、抗糖尿病および抗高血糖性の特性を有すると考えられるフェノール類を含む。ヤシ果汁に見られるフェノール類としては、限定はしないが、バニリン酸、クロロゲン酸、カテキン、カフェイン酸、プロトカテク酸、ゲンチシン酸、４−ヒドロキシ安息香酸エステル、クマル酸、フェルラ酸、およびルチン水和物などのケイヒ酸および安息香酸の誘導体が挙げられる。
【００７９】
一般に、本方法は、糖尿病の治療または予防に有効な任意の投与計画を包含する。ある実施の形態では、ヤシ果汁源は、単回用量または複数回用量で患者に与えられる。単回用量は、毎日、または１日に複数回、または１週間に複数回、または毎月、または１ヶ月に複数回投与して差し支えない。ある実施の形態では、ヤシ果汁源は一連の用量で投与される。一連の用量は、毎日、または１日に複数回、毎週、または１週間に複数回、または毎月、または１ヶ月に複数回投与して構わない。
【００８０】
ヤシ果汁を含む製剤は、任意の従来の方式で治療のために患者に投与して差し支えない。ヤシ果汁を含む製剤は、原液で投与することができるが、栄養のある果汁または製剤として存在してもよい。本発明に従った天然飲料または製剤は、ヤシ果汁を含む複合体を単独で、またはそれらの薬学的に許容される塩を、１つ以上の薬学的に許容される担体または賦形剤および随意的に他の治療薬とともに、含む。担体は、製剤の他の構成成分と相溶性であるという意味で許容されるべきであり、受容者にとって有害であってはならない。組合せの個別の成分が別々に投与される場合には、それらは栄養補助剤および／または製剤として存在して構わない。
【００８１】
本発明の栄養補助剤または製剤は、１つ以上の他の薬剤、医薬品、担体、アジュバント、および／または希釈剤を含みうる。例えば、ヤシ果汁源は、本明細書に記載される糖尿病および他の疾患および／または障害の治療のための他の活性薬剤と併用して差し支えない。適切な経口の抗糖尿病剤としては、スルホニル尿素、メグリチニド、ビグアニド、チアゾリジンジオン、およびα−グルコシダーゼ阻害剤が挙げられる。
【００８２】
経口投与のための担体または賦形剤の例としては、コーンスターチ、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、微結晶性セルロースおよびステアリン酸、ポビドン、リン酸水素カルシウムおよびカルボキシメチルスターチナトリウムが挙げられる。本発明では、所望の投与経路に適した任意の担体が意図されている。
【００８３】
本発明の組成物は、固体の投与形態（例えば、丸薬、カプセル、または錠剤）、半固体の投与形態または液体の投与形態で含まれて差し支えなく、それぞれ、所定の量の活性成分を含む。ある実施の形態では、固体の投与形態は容易に飲めるようにコーティングされている。本発明の組成物は、粉末または顆粒の形態；あるいは溶液または懸濁液でありうる。経口投与では、微粉末または顆粒は、希釈剤、分散剤、および／または界面活性剤を含んでいて差し支えなく、水またはシロップ中に溶液または懸濁液で、カプセルまたは小袋中に乾燥状態で、懸濁剤が含まれうる非水溶液または懸濁液で、または結合剤および滑剤が含まれうる錠剤の形態で存在していてもよい。成分に、香味剤、保存料、懸濁剤、濃化剤または乳化剤などを添加してもよい。
【００８４】
経口の送達方法は、多くの場合、消化管のｐＨ変化、酵素への曝露、および胃腸膜の不浸透性など、身体によって課せられる化学的および物的障壁によって制限される。栄養補給剤または製剤を経口投与するための本発明の方法は、本発明の組成物とアジュバントとの同時投与も含みうる。例えば、ポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテルなどの非イオン界面活性剤は、本発明の製剤とともに投与するか、あるいは本発明の製剤に取り込んで、腸壁の浸透性を人為的に増大させることができる。他の方法は、本発明の製剤と酵素阻害剤の同時投与を含む。活性成分は、ボーラスまたはペーストとして存在して差し支えなく、あるいはリポソームおよび乳剤中に含めてもよい。
【００８５】
直腸投与用の製剤は、坐剤または浣腸剤として提供されてもよい。
【００８６】
水溶液の形態で投与する場合、製剤にはヤシ果汁源および水が含まれる。溶液中の随意的な成分としては、適切な溶媒、緩衝剤、甘味料、抗菌性の保存料、香味剤、他の果汁、およびそれらの混合物が挙げられる。製剤の成分は、２つ以上の機能を果たしうる。例えば、適切な緩衝剤は、香味剤および甘味料としても作用しうる。
【００８７】
本発明に用いる溶液において適切な溶媒としては、例えば、ソルビトール、グリセリン、プロピレン・グリコール、および水が挙げられる。随意的に、２つ以上の溶媒の混合物を使用してもよい。溶媒または溶媒系は、典型的には、全液剤の約１％〜約９０重量％の量で存在する。
【００８８】
適切な緩衝剤としては、例えば、クエン酸、クエン酸ナトリウム、リン酸、リン酸カリウム、およびさまざまな他の酸および塩が挙げられる。２つ以上の緩衝剤混合物を随意的に使用してもよい。緩衝剤またはそれらの混合物は、典型的には、約０．００１重量％〜約４重量％の量で存在する。
【００８９】
適切な甘味料としては、例えば、サッカリンナトリウム、スクロース、およびマンニトールが挙げられる。２つ以上の甘味料の混合物を随意的に使用してもよい。甘味料またはそれらの混合物は、典型的には、約０．００１重量％〜約７０重量％の量で存在する。
【００９０】
適切な抗菌性の保存料としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸ナトリウム、および塩化ベンザルコニウムが挙げられる。随意的に、２つ以上の保存料の混合物を使用してもよい。保存料またはそれらの混合物は、典型的には約０．０００１重量％〜約２重量％の量で存在する。
【００９１】
患者が溶液をより摂取し易くするために、チェリー香味剤、綿菓子の香味剤、または他の適切な香味剤など、適切な香味剤を溶液に使用してもよい。香味剤またはそれらの混合物は、典型的には、約０．０００１重量％〜約５重量％の量で存在する。
【００９２】
栄養補助剤
本発明は、アブラヤシ属（Elaeis）の果実抽出物でできた自然食品製剤を提供する。本発明は、粉末化、液体、または固体の形態で存在しうる、抽出物を提供する。本セクションでは、望ましい、本発明の教示に照らして容易に生産される、製剤の形態および成分について論じる。
【００９３】
抽出物は、例えば、水、ミルク、果汁または幾つかの他の同様の液体で再構成する場合に、抗高血糖活性を必要とする対象に提供するのに用いられうる飲料を提供する、再構成可能な濃縮物または粉末組成物でありうる。患者、特に延長治療の状態にある者にとって、より魅力のある、したがって、より効果的な支援を提供するために、ある期間にわたり、様々に組み合わせて作られうるさまざまな形態、すなわち、シェイク、スープ、果実飲料、スナック・バーおよび、錠剤、ジェルカプセルなどの他の固体形態の、注意深く設計された多くの製品を利用する糖尿病の管理プログラムにおいて、本濃縮物または粉末化した組成物、およびそれらから調製される飲料は、経腸投与される成分として、特に有用である。
【００９４】
飲料に加えて、本発明の抽出物は食品にも使用して差し支えない。これらの抽出物は、任意の他の食品と組み合わせてもよく、例えば、本発明の抽出物を含む水溶性の食品が使用されうる。本発明の化合物で強化した粒粉を、焼成食品、シリアル、パスタおよびスープなどの食品に使用して差し支えない。有利には、これらの食品は、低脂肪、低コレステロールまたは他の制限食事療法に含めてもよい。
【００９５】
栄養補助食品には、栄養飲料、ダイエット飲料、ならびにスポーツ、ハーブおよび他の強化飲料が含まれうる。本発明は、抗糖尿病薬として用いられうる栄養補助組成物を提供する。よって、それは、限定はしないが、真性糖尿病、妊娠性糖尿病、β−細胞機能の遺伝子異常、インスリン作用の遺伝子異常、膵外分泌の疾患、内分泌障害、薬物または化学物質誘発性の疾患、感染、糖尿病に関連する他の遺伝的症候群、前糖尿病状態、メタボリック・シンドロームなど、血糖の上昇を引き起こす、任意の代謝条件または不均衡を緩和するのに使用することができる。
【００９６】
精製した抽出物に加えて、栄養補助食品または食料品はまた、限定はしないが、必須脂肪酸、ビタミンおよびミネラルなどのさまざまな他の有益な成分も含みうる。これらの成分は当業者に周知であるべきであるが、しかしながら、任意の特定の製剤または含量に縛られることなく、本セクションは、本発明の補助食品の一部を形成しうる成分の簡潔な説明を提供する。栄養補給剤の含量及び生産を説明する追加の開示は、例えば米国特許第５，９０２，７９７号；同第５，８３４，０４８号；同第５，８１７，３５０号；同第５，７９２，４６１号；同第５，７０７，６５７号および同第５，６５６，３１２号の各明細書に見出すことができよう（それぞれ参照することにより本明細書に援用される）。γ−リノレン酸（ω−３）およびリノール酸（ω−６）などの必須脂肪酸を、本発明の補助食品に加えてもよい。必須脂肪酸は、心臓血管の健康および免疫システムの支援に関与している。これらの必須脂肪酸のバランスが崩れると、コレステロール代謝の悪化を生じうる。
【００９７】
ミネラルである亜鉛と銅は、両方とも、心臓血管の健康に関与しており、亜鉛：銅が５：１の比で供給されるべきである。これら２種類のミネラルのバランスが崩れると、銅における亜鉛の拮抗作用を生じうる。この影響は、心臓血管の健康を支えるための銅を利用する身体能力を妨げうる。銅と比較して過剰量の亜鉛は、重要な心臓を守る酵素であるＳＯＤ（スーパーオキシドジスムターゼ）を作る身体能力も妨げうる。また、適切な亜鉛：銅の比は、ＨＤＬのＬＤＬに対する適性バランスを達成するためにも必要とされる。典型的な米国人男性の食餌における亜鉛の摂取は、ＲＤＡのわずかに３３〜７５パーセントであり、したがって、亜鉛を含む栄養補助食品が意図されている。
【００９８】
セレンおよびヨウ化物もまた、それらが最も効果的に機能する比、約２：１のセレン：ヨウ化物の比を有する。これらのミネラルは、甲状腺機能に作用し、したがって、甲状腺機能における変化によって生じた、代謝において結果的に生じる効果を有する。不均衡になった甲状腺機能は、身体に、食物からの栄養素の吸収不良を生じうる、過度のストレスをかけてしまう。これは、言い換えれば、成長および発達を遅延させうる。
【００９９】
ピリドキシン、葉酸およびコバラミンもまた、それらが血管障害の予防において最も効果的に機能する比を有する。ピリドキシン（ビタミンＢ6）：葉酸：コバラミン（ビタミンＢ１２）の最適な比は、約１００：４：１である。これらのビタミンＡは、潜在的に毒性のアミノ酸ホモシステインの値を低減するそれらの能力を通じて、心臓血管機能に作用する。この比は、食餌による心臓疾患の危険性において、個別に消費するこれらビタミンの不均衡かつ不適切なレベルを認識する。
【０１００】
加えて、ビタミンＣ、ビタミンＢ1（チアミン）、およびビタミンＥも提供されうる。ビタミンＣの必要量は喫煙者で増大し、喫煙は肺癌の主要原因である。ビタミンＢ1は、エネルギー転換において重要な役割を果たす。チアミン二リン酸（ＴＤＰ）は、炭水化物のエネルギーへの転換に必要な補酵素である。米国の男性は、現在、全カロリーの約４５％を炭水化物から摂取しているため、食餌におけるビタミンＢ1の最適化が望ましい。
【０１０１】
ビタミンＢ6およびビタミンＢ12と一緒に葉酸を補給すると、血中のホモシステイン値の調節を助け、したがって本発明の栄養補助食品製剤における有用な成分である。ビタミンＤ（カルシフェロール）は、骨格の形成およびミネラルのホメオスタシスにとって必須である。ビタミンＤなしでは、小腸は、カルシウムが吸収にどのくらい使用可能であるかにかかわらず、十分なカルシウムを吸収することができない。従って、ビタミンＤは、強靭な骨の形成を補助するための栄養補給剤の成分として望ましい。
【０１０２】
金属酵素マンガン−スーパーオキシドジスムターゼ（Ｍｎ−ＳＯＤ）の駆動におけるマンガンの役割は、他の金属酵素系（グルタミン合成酵素、アルギナーゼ、およびピルビン酸カルボキシラーゼ）における同様の役割とともに、はっきりと確認されている。多くの酵素系も、マンガンの金属酵素ではないにもかかわらず、マンガン活性化を受けることが示されている。マンガン−ＳＯＤ結合は、この形態の金属酵素が細胞のミトコンドリア膜内における唯一の作用形態であると思われることから、臨床上特に重要であり、従って、ミトコンドリアの保護および身体の酸化エネルギー生産システムの確実性における独特の役割を果たしうる。栄養補助食品にマンガンを含めることは望ましいであろう。
【０１０３】
補助食品に含まれうる追加の微量栄養素としては、限定はしないが、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、リボフラビン、ナイアシン、ナイアシンアミド、パントテン酸、ピリドキシン、コバラミン、ビオチン、イノシトール、酒石酸水素コリン、ベタイン、およびビタミンＫなどのビタミン、ならびにモリブデン、クロムおよびカリウムなどのミネラルが挙げられる。
【０１０４】
ストレス、運動、および他の条件は、体内成分に損傷を与えうるフリーラジカルを体内に発生させる。フリーラジカルを打ち消すため、本発明は、上述のビタミンＣおよびＥに加えて次の抗酸化物質を含みうる：シトラスバイオフラボノイド、混合カロチノイド、緑茶抽出物、およびＮ−アセチルシステイン。
【０１０５】
さらには、製剤をより良好な味にするために、製剤に当業者に周知の他の香味剤および添加剤を加えてもよい。例えば、製剤は、ショウガ、ボスウェリア、フルーツ香味剤、着色剤、保存料などを含みうる。
【０１０６】
固体形態で摂取する場合、本発明の栄養補助組成物は、さらに、ゼラチンなどの固体担体またはアジュバントを含みうる。液体形態で摂取する場合には、液体担体、すなわち、水、石油、動物油またはピーナッツ油、ミネラルオイル、大豆油、またはゴマ油などの植物油、または化学合成油などを加えてもよい。本発明の栄養補助組成物は、安定剤、保存料、緩衝剤、抗酸化物質、または当業者に既知の他の添加剤含みうる。
【実施例】
【０１０７】
本発明について一般的に述べてきたが、単に本発明の特定の態様および実施の形態の例証の目的で含まれるのであって、本発明を限定することは意図されていない、次の実施例を参照することにより、より容易に理解されよう。下記実施例と共に、図２４〜２８も参照されたい。
【０１０８】
実施例１
ナイルサバンナネズミを用いて、糖尿病の進行における、ヤシ果汁（ＰＦＪ）の効果を決定した。１つの研究では、８匹のオスの糖尿病ラットおよび４匹のオスの非糖尿病ラットを、１２週間、研究した。ラットは、実験開始時にはおよそ２０週齢であり、およそ３２週齢で終了した。４匹の糖尿病ラットおよび２匹の非糖尿病ラットには、実験期間を通して水を与え、残りのラット（４匹の糖尿病、２匹の非糖尿病）には１５００ｐｐｍの没食子酸当量（ＧＡＥ）のＰＦＪを与えた。
【０１０９】
体重増加および食物摂取は正常かつ同程度であった、ＰＦＪを与えられたラットはわずかに摂取量が少ない傾向にあったが、成長はＰＦＪを与えられない糖尿病ラットよりもわずかに良好であった（表１）。月齢８ヶ月のナイルサバンナネズミ（実験開始１２週間後）のそれぞれについて、血漿脂質プロファイルを確立した。浅麻酔（ＣＯ2＋Ｏ2、１：１混合物）した後に、尾部血液から血液サンプル（５０μｌ）を採取し、ＥＤＴＡを含む試験管に入れた。血漿の分離後、Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＴＭキットを使用して、分光光度法でＴＧおよびＴＣを決定した。加えて、一晩絶食したラットからプールしたナイルサバンナネズミの血漿２〜３サンプルを合わせて、より大きい末梢血液サンプルから血漿リポタンパクを単離した。ベックマン・ウルトラクリア・チューブ（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製（米国カリフォルニア州パロアルト所在））に、２ｍＬのｄ＝１．２４ｇ／ｍＬ溶液、３ｍＬの血漿のｄ＝１．２１ｇ／ｍＬ溶液、２ｍＬのｄ＝１．０６３ｇ／ｍＬ溶液、２．５ｍＬのｄ＝１．０１９ｇ／ｍＬ、および２．５ｍＬのｄ＝１．００６ｇ／ｍＬ溶液を順次積層することによって、密度勾配を調製した。Ｂｅｃｋｍａｎ Ｌ−６０オプティマ超遠心分離機を使用して、チューブを、Ｂｅｃｋｍａｎ ＳＷ４１ローター内で、３７，０００ｒｐｍで４８時間、１５℃で回転させた。回転後、あらかじめ設定された密度でリポタンパク画分を回収した：ＶＬＤＬ ｄ＜１．００６ｇ／ｍＬ、ＬＤＬ １．００６＜ｄ＜１．０６３ｇ／ｍＬおよびＨＤＬ １．０６３＜ｄ＜１．２１ｇ／ｍＬ。Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＴＭキットを用いて各画分のコレステロール値を決定した。
【０１１０】
０週および１１週の時点で非空腹時の血糖（血中グルコース）を測定し、空腹時の値は、ラットを殺処分した第１２週に得た。他の血液化学および臓器重量は、表１に示すように、第１２週に行った。
【０１１１】
【表１−１】
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【０１１２】
【表１−２】
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【０１１３】
実験開始時における非空腹時の血糖値は、糖尿病ラット群が非糖尿病対照群の約３倍高かった（３００＋に対して１００＋ｍｇ／ｄＬ）。１２週間後、空腹時血漿血糖（血漿グルコース）は、水を与えた糖尿病ラット（糖尿病対照群）で６５０ｍｇ／ｄＬであったのに対し、ＰＦＪを与えた糖尿病ラット群ではわずか１２０ｍｇ／ｄＬであった。非糖尿病ラットにおいては、水およびＰＦＪの両群で空腹時血糖の値が＜１００ｍｇ／ｄＬと、互いに大きな差異はなかった。
【０１１４】
１２週間の実験の終了時における血漿脂質およびリポタンパクは、水またはＰＦＪを与えた糖尿病ラットの間で異なっていた。水を与えた糖尿病ラットでは、トリグリセリド値およびＶＬＤＬ−Ｃ値が大幅に上昇し、ＨＤＬ−Ｃ値が低下した。ＰＦＪを与えた糖尿病ラットは、本質的に正常であり、非糖尿病対照群とほぼ同じ血漿脂質値を有していた。
【０１１５】
剖検では、水を与えたラットにおける糖尿病の進行に関連する貯蔵脂肪の消耗は、ヤシ果汁群には見られず、非糖尿病ラットと同様であった。さらには、水を与えた糖尿病群の肝臓および腎臓の大きさの増大は、糖尿病群にＰＦＪを補給することによって正常化した（表１）。
【０１１６】
従って、血糖および脂質プロファイルの改善（特にＶＬＤＬおよびＨＤＬ）からも分かるように、唯一の水源としてＧＡＥ１５００ｐｐｍのヤシ果汁を与えることで、より高齢（２０週齢）の中程度の糖尿病のオスのナイルサバンナネズミにおける糖尿病の進行を阻むことができた。ヤシ果汁を与えなかった糖尿病ラットは、腎臓および肝臓の肥大とともに重度の多尿症／多渇症へと進行し（水分摂取群で６倍に上昇）、最終の血糖、ＴＧ、およびＴＣの上昇とともに、ＨＤＬの低下を示した。
【０１１７】
実施例２
長期間のＰＦＪの摂取が発病を抑止するか否か、または糖尿病を防止するか否かについて判断するため、正常な血糖値（５０〜５５ｍｇ／ｄＬ）を有する１６匹の若年（１２週齢）の健康なオスのナイルサバンナネズミを用いて、実験を行った。動物に、水またはヤシ果汁（ＧＡＥ１５００ｐｐｍ）のいずれかとともに、標準的なラット用の食餌＃５０２０を９ヶ月間与えた。９ヶ月の期間の終了時に、空腹時血糖値は、＜８０ｍｇ／ｄＬ正常な平均値を有したＰＦＪを与えたラットと比較して、水を与えたラットでは２．５倍に上昇した（表２）。
【０１１８】
【表２−１】
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【０１１９】
【表２−２】
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【０１２０】
研究の終了時点において、ＰＦＪを与えたラットと比較して、水を与えたラットのみが、血糖の増大に加えてトリグリセリド値および総コレステロール値の上昇を示した。水を与えたラットは、肝腫脹および腎肥大も示した。水を与えた群は、多渇症および多食症を含む他の糖尿病の症状を示した。
【０１２１】
９ヶ月間の全カロリー摂取は、糖尿病で２０％多く、水分摂取量は９ヶ月の期間にわたり、２倍であった。それにもかかわらず、ＰＦＪを与え、カロリーを少なめに消費した群は、糖尿病群と同じく成長し（体重、体長、ＢＭＩ、ＬＭＩ）、多くの場合、これらのラットの糖尿病と関連する、カロリーの過剰消費（消耗）が露呈した。ヤシ果汁を補給されたナイルサバンナネズミは、恐らくはＰＦＪの糖含量に起因して、最初から水分を多く摂取した（その後の実験で、ラットが砂糖で甘くした飲料を好むことが示されている）。しかしながら、この群は、対照（糖尿病）群で進行した糖尿病の多渇症とは異なり、経時による水分摂取において、最小限の増加を示した。ＰＦＪを与えたラットは、糖尿病が進行したＰＦＪを与えないラットよりも小さい腎臓および肝臓を有していた。
【０１２２】
ＧＡＥ１５００ｐｐｍの常習的なＰＦＪは、成長または臓器重量に有害作用がないことを示した。いずれの群においても体脂肪全体には影響がなく、実施例１のラットと比較して、これら８匹の水を与えたラットでは疾患は重症ではなかったことから、全貯蔵脂肪は糖尿病による枯渇は見られなかった。
【０１２３】
血漿トリグリセリドは７ヶ月までに上昇し、水を与えたラットでは糖尿病が進行したことから、７〜９ヶ月の間に劇的に上昇し、この群の数匹のラットは進行疾患に達し始めたことを示唆した。従って、１５００ｐｐｍのＰＦＪを長期間、健康的に摂取することで、血糖、血中脂質、および肝臓および腎臓の重量から判断すると、若年のナイルサバンナネズミは、糖尿病の発病から保護された。
【０１２４】
実施例３
ナイルサバンナネズミの糖尿病の進行における、段階的な濃度のＰＦＪの摂取の効果を判定するための実験を行った。２８匹の若い（１２週齢）健康なオスのナイルサバンナネズミを４つの群に分けた。第１群（対照）には、１７週の実験期間中、水のみを与えた。第２、第３、および第４群には、研究全体を通じて、それぞれ、４５０ｐｐｍ、９００ｐｐｍ、および１８００ｐｐｍのＧＡＥのヤシ果汁を与えた。すべての群に、標準的なラット用の食餌＃５０２０を与えた。１７週間後、ラットを殺処分し、その測定結果を、研究期間を通じて採取した体重および食物摂取の測定結果に加えた。結果を表３に示す。
【０１２５】
【表３−１】
2014193930.tif 000006
【０１２６】
【表３−２】
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【０１２７】
すべての群のラットは、およそ同じ体長および体重に成長した（ＢＭＩおよびＬＭＩを計算）が、対照（水）群は、終了時点で体重がわずかに少なく、第１２週までに判明した水分摂取の増加に関連して、腎肥大を有していた。恐らくは尿中のグルコースの減少または組織のグルコース利用の機能不全を相殺するため、対照ラットの方がよりたくさん食餌を摂取した。腎臓重量はＰＦＪの摂取と反比例の関係を有していたが、９００ｇのＡＥでは水平状態に達しているように見えた。各群で脂肪重量についての差異は見られなかった。対照ラットに見られた血糖値の上昇は、糖尿病の発病が第９週より前であったことを示唆した。先の研究で観察されたように、水を与えた群では末期的な肝腫脹が見られ、肝臓重量および血糖値はＰＦＪの濃度が増加するにつれて低下し、９００ｇのＡＥ以上では正常値が測定された。４５０ｇのＡＥでも血漿総コレステロールおよびトリグリセリドに顕著な低下効果を有し、９００ｇおよび１８００ｇのＡＥではほんの少しだけ改善した。
【０１２８】
データは、ＰＦＪが２型の糖尿病の発達および進行からの保護を補助することを実証しており、その保護効果は９００ｇのＡＥで本質的に達成される。一部の血液化学における用量依存性の影響が生じたが、すべての測定値についてではない。
【０１２９】
実施例４
初期の糖尿病（＞１１０ｍｇ／ｄＬの平均血糖値）を有する１１匹の高齢（２８週齢）のオスのナイルサバンナネズミにおけるＰＦＪの影響を調べるため、第４の研究を行った。ラットの１つの群には水のみの食餌を与え、他の群にはＧＡＥ１５００ｐｐｍのＰＦＪを２０週間（５ヶ月）与えた。標準的なラット用の食餌＃５０２０を両群に与えた（表４）。
【０１３０】
【表４−１】
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【０１３１】
【表４−２】
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【０１３２】
先の研究で見られたように、ＰＦＪラットの食物摂取は少なく、ラットはわずかに小さく、実験期間中に重量が減少したのに対し、糖尿病群では重量が増加した。しかしながら、カロリーの低減はジュース中の天然の糖分によって幾分相殺されたため、エネルギー摂取の低減（１５％）は大きく影響しなかった。最終的な分析では、ＰＦＪを与えたラットはＢＭＩおよびＬＭＩが低い傾向にあるとともに、体長が短かった。２０週間後、ＰＦＪを与えたラットは多渇症および多食症の程度が低く、糖尿病の症状の改善を示唆した。肝臓はＰＦＪを補給されたラットで著しく小さかったが、腎臓が小さい傾向は、水を与えたラットのみと比較して、統計的に有意ではなかった。加えて、水を与えた群は、２０週間にわたり、ほぼ２００ｍｇ／ｄＬの血糖値の増大を示したのに対し、ＰＦＪ群では血糖値は変化しなかった。空腹時血漿総コレステロール（ＴＣ）には、さらに顕著な結果が見られ、２０週間にわたり、水およびＰＦＪ群で、それぞれ、２２％および４６％低下した。さらに顕著であったのは、水を与えた群の血漿トリグリセリド値が３倍に増大したのに対し、ＰＦＪ群が正常値まで、ほぼ７０％低下したことである。
【０１３３】
従って、糖尿病の発病を示した高齢のオスのナイルサバンナネズミにおいても、ＧＡＥ１５００ｐｐｍのＰＦＪの補給は、糖尿病のさらなる進行を防ぎ、あるいは、さまざまな糖尿病の指標、特に血糖および血漿トリグリセリドの値を実際に改善することができた。
【０１３４】
フェノール類が豊富なＰＦＪを４５０〜１８００ｐｐｍのＧＡＥで補給することにより、ナイルサバンナネズミのモデルにおける２型の糖尿病の発症に対し、用量依存性の保護効果を示した。特に、ＰＦＪは、低い血糖値を維持し、若年のナイルサバンナネズミにおける血糖の増大を防ぎ、ナイーブラットにおけるトリグリセリド値の増大を防ぎ、一部の例では、軽度の糖尿病を有するラットにおいてもトリグリセリド値が低下した。ＰＦＪは、結果的に、食物および水分の摂取を低減し、腎肥大および末期の腎炎を防いだ。理論に縛られるわけではないが、ＰＦＪの１種類以上のフェノール類（または一部の他の未確認の成分）が膵β細胞において潜在的な水溶性の抗酸化物質として作用し、非補給ラットにおいては究極的にβ細胞を破壊することとなる活性酸素種（ＲＯＳ）からミトコンドリアを保護したと仮定される。本質的に、ナイルサバンナネズミは、市販の食餌または純化した食餌の十分なエネルギー供給を前にした場合に、インスリン産生において、異常なほど過剰に消耗しがちである。
【０１３５】
実施例５
ＡｐｏＥ-/-マウス（アポリポタンパクＥ欠損）は、高い血中脂質および血糖を発現し、病勢が進展するにつれてアテローム性動脈硬化症を発症することから、これらマウスについて研究した。ＰＦＪが脂質プロファイルの危険性を有利に改善するか否かについて判断するため、マウスに、１０５０ｐｐｍの没食子酸当量（ＧＡＥ）での食餌および水へのＰＦＪの添加の有無の条件下で、１０週間、純化した食餌を与えた（表５）。
【０１３６】
【表５】
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【０１３７】
殺処分時において、空腹時血糖値に差異は見られなかった（成長するにつれて、両群の差異は実質的に２倍になった）。総血漿コレステロール（ＴＣ）の影響もなかったが、血漿トリグリセリド（ＴＧ）の測定値は、ＰＦＪを与えたマウスにおいて約５０％低かった。さらには、脂肪プールは、ＰＦＪを与えなかった対照群と比較して、ＰＦＪ−マウスでは、重量が３０％低いことと関連して（ｐ＜０．０５）、４０％の低減を示した（ｐ＜０．０５）。このことは、ＰＦＪが、ａｐｏＥマウスの成長におけるエネルギーの処分（損失）を促進し、低い空腹時ＴＧを生じ、これが低脂肪および低体重に反映したことを示唆している。他の臓器には影響はなかった。このＰＦＪ誘発性のプロファイルは、インスリン抵抗性および２型の糖尿病に関連したメタボリック・シンドローム（高いＴＧおよび血糖値および脂肪症の増大）とは正反対である（表６）。
【０１３８】
【表６】
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【０１３９】
実施例６
ＢＡＬＢ−ｃ系マウス（オスおよびメスの離乳マウス）にラブダイエット＃５０２０を８週間与えた（表８）。毎日の最終的な摂取量が約３００ｍｇＧＡＥ／ｋｇ体重／日となるように、飲料水にＰＦＪを補充した。
【０１４０】
ＰＦＪを与えたマウスは、食物を著しく多く消費したにもかかわらず（ｐ＜０．０５）、体重増加が３０％減少し（ＮＳの傾向）、したがって、摂食効率（ｇ増加／ｋｃａｌ）はかなり低い（４０％）（表７）。脂肪プールはＰＦＪ−マウス（ＮＳの傾向）で３０％低く、空腹時の最終的な血糖は大幅に、２５％も低かった（ｐ＜０．０５）。大きさの違うメスおよびオスの混合は観察する実際の重量に幅広いバリエーションを生じることから、臓器重量の有意性は妨げられたが、傾向は一致しており、疑う余地はなかった。理論に縛られるわけではないが、データは、この系では、オスのａｐｏＥ-/-マウスに見られるように、ＰＦＪの補給がエネルギーの処分を促進し、血糖および貯蔵脂肪に好ましい影響を与え、体重の低下および全般的な抗糖尿病プロフィールをもたらすことを示唆している。
【０１４１】
【表７】
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【０１４２】
実施例７
従来のラットモデル（スプラーグ−ドーリーラットのオス）では、実施例５および６と同様の傾向が見られた（表８）。離乳ラットに、食餌自体に取り込んだ０または３０００ｐｐｍのＰＦＪ ＧＡＥを含む、純化した食餌を４週間与えた。食物摂取および体重増加は各群間で同様であったが、ＰＦＪを与えたラットでは低い傾向にあった。水分摂取はＰＦＪを与えたラット群の方が多く、腎臓もこの群の方が重かった（両方ともｐ＜０．０５）。ＰＦＪ補給群の盲腸の方が大きく、脂肪のプールは著しく小さく、他の臓器重量に影響はなかった。血糖およびコレステロール値は両群同様であり、かつ正常値であった。データは、ＰＦＪが貯蔵脂肪を低減することができ、余分な尿流量を処理する際に拡大を引き起こす腎臓に利尿効果を有することを示唆している。この結果は、ヒトの血圧低下を誘発するのに用いられる臨床の利尿薬と似ており、ヒトの臨床背景におけるＰＦＪの転帰および用途が示唆されている。
【０１４３】
【表８−１】
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【０１４４】
【表８−２】
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【０１４５】
等価物
当業者は、日常的な実験のみを利用して、本明細書に記載される発明の特定の実施の形態についての多くの等価物を得ることを認識し、あるいは得ることができよう。したがって、前述の実施の形態は単に例示の目的で提示され、添付の特許請求の範囲およびそれらの等価物の範囲内において、本発明が、明確に記載され、特許請求の範囲に定義される以外にも、実施されうることが理解されるべきである。
参照による取り込み
本明細書で引用されるすべての米国特許公報および米国特許出願公開公報は、参照することにより本明細書に取り込まれる。
【０１４６】
他の実施態様
１．アブラヤシ属の果実から得られる抽出物を治療に有効な量で哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における代謝不均衡を治療する方法。
２．前記抽出物が栄養補助組成物または医薬組成物に含まれることを特徴とする実施態様１記載の方法。
３．前記抽出物が水溶性の成分であることを特徴とする実施態様１記載の方法。
４．前記水溶性の抽出物がフェノール類を含むことを特徴とする実施態様３記載の方法。
５．前記フェノール類がケイヒ酸および安息香酸の誘導体を含むことを特徴とする実施態様４記載の方法。
６．前記抽出物が、ヤシ油をミリング処理した植物液から得られる、ヤシ果汁であることを特徴とする実施態様１記載の方法。
７．前記代謝不均衡の治療が、インスリン分泌または感受性を増強することをさらに含むことを特徴とする実施態様１記載の方法。
８．前記代謝不均衡の治療が、血糖値を低減することをさらに含むことを特徴とする実施態様１記載の方法。
９．前記代謝不均衡が、真性糖尿病、妊娠性糖尿病、β細胞機能の遺伝子異常、インスリン作用に関する遺伝子異常、膵外分泌、内分泌障害、薬物または化学物質誘発性の疾患、感染、糖尿病に関連する他の遺伝的症候群、前糖尿病状態、およびメタボリック・シンドロームからなる群より選択されることを特徴とする実施態様１記載の方法。
１０．前記代謝不均衡が真性糖尿病であることを特徴とする実施態様９記載の方法。
１１．真性糖尿病がＩ型であることを特徴とする実施態様１０記載の方法。
１２．真性糖尿病がＩＩ型であることを特徴とする実施態様１０記載の方法。
１３．真性糖尿病が成人における潜在性の自己免疫性糖尿病であることを特徴とする実施態様１０記載の方法。
１４．哺乳動物における真性糖尿病の治療によって、真性糖尿病の二次的な内科的合併症を予防することを特徴とする実施態様１０記載の方法。
１５．前記真性糖尿病の二次的な内科的合併症が、心臓疾患、脳卒中、高血圧、網膜症、白内障、腎症、神経障害、末梢血管疾患、歯の疾病、胃不全麻痺、性機能不全、または妊娠中の合併症を含むことを特徴とする実施態様１４記載の方法。
１６．前記代謝不均衡がメタボリック・シンドロームであることを特徴とする実施態様９記載の方法。
１７．メタボリック・シンドロームの治療が、１つ以上の診断基準を治療することを含むことを特徴とする実施態様１６記載の方法。
１８．前記診断基準が、胴囲、トリグリセリド、ＨＤＬ、血圧、および空腹時血糖値からなる群より選択されることを特徴とする実施態様１７記載の方法。
１９．前記代謝不均衡が前糖尿病状態であり、前記哺乳動物が、真性糖尿病のリスク因子を１つ以上有することを特徴とする実施態様９記載の方法。
２０．前記前糖尿病状態が、空腹時血糖値異常またはグルコース不耐性を含むことを特徴とする実施態様１９記載の方法。
２１．前記真性糖尿病のリスク因子の１つ以上が、年齢、身体不活動、ＢＭＩの異常、遺伝学的疾病素質、民族性、高血圧、多嚢胞性卵巣症候群、循環器疾患、以前の空腹時血糖またはグルコース耐性の異常、およびインスリン抵抗性に関連する他の臨床症状からなる群より選択されることを特徴とする実施態様１９記載の方法。
２２．アブラヤシ属の果実から得られる抽出物を治療に有効な量で哺乳動物に投与することを含む、哺乳動物における利尿を誘発する方法。
２３．（ａ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物の組成物を含むパッケージと、
（ｂ）前記アブラヤシ属の果実のミリング処理から得られる植物液の抽出物を、代謝不均衡の治療に使用するための使用説明書と、
を含むキット。
２４．前記代謝不均衡が真性糖尿病であることを特徴とする実施態様２３記載のキット。
２５．
アブラヤシ属の果実から得られる抽出物を治療に有効な量で含む、哺乳動物が摂取するための栄養補助組成物。
２６．前記抽出物が、粉末、液体、または固体であることを特徴とする実施態様２５記載の栄養補助組成物。
２７．前記粉末が再構成可能な濃縮物であることを特徴とする実施態様２６記載の栄養補助組成物。
２８．必須脂肪酸、抗酸化物質、ビタミン、またはミネラルをさらに含むことを特徴とする実施態様２５記載の栄養補助組成物。
２９．γ−リノレン酸、リノール酸、亜鉛、銅、セレン、ヨウ化物、ピリドキシン、葉酸、コバラミン、ビタミンＣ、ビタミンＢ1、ビタミンＥ、チアミン二リン酸、ビタミンＢ6、ビタミンＢ12、ビタミンＤ、マンガン、ビタミンＡ、リボフラビン、ナイアシン、ナイアシンアミド、パントテン酸、ビオチン、イノシトール、酒石酸水素コリン、ベタイン、ビタミンＫ、モリブデン、クロム、カリウム、シトラスバイオフラボノイド、混合カロチノイド、緑茶抽出物、またはＮ−アセチルシステインをさらに含むことを特徴とする実施態様２５記載の栄養補助組成物。
３０．ショウガ、ボスウェリア、フルーツ香味剤、着色剤、または保存料をさらに含むことを特徴とする実施態様２５記載の栄養補助組成物。
３１．ゼラチン、アジュバント、水、ピーナッツ油、ミネラルオイル、大豆油、ゴマ油、化学合成油、安定剤、または緩衝剤をさらに含むことを特徴とする実施態様２５記載の栄養補助組成物。
３２．実施態様２５〜３１いずれか１項記載の栄養補助組成物を１つ以上含む、調理済み食品。
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図１】
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