(57)【要約】【課題】肌の保湿性に優れており、副作用が無く、安全で、安価な皮膚外用剤を提供すること。【解決手段】穀類に麹菌を接種して製麹し、この製麹処理による生成物に加水することにより当該生成物中の組成要素を加水分解した固体組成物であって、糖セラミド類を含有する固体組成物を含有することを特徴とする。【選択図】図１
2014205634.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
穀類に麹菌を接種して製麹し、この製麹処理による生成物に加水することにより当該生成物中の組成要素を加水分解した固体組成物であって、糖セラミド類を含有する固体組成物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項２】
前記固体生成物は、前記生成物に対する麹菌による代謝物を含むことを特徴とする請求項１に記載の皮膚外用剤。
【請求項３】
穀類に麹菌を接種して製麹し、この製麹処理による生成物に加水することにより当該生成物中の組成要素を加水分解した固体組成物であって、糖セラミド類および乳酸菌を含有する固体組成物を含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項４】
前記固体生成物は、前記生成物に対する麹菌および乳酸菌による代謝物を含むことを特徴とする請求項３に記載の皮膚外用剤。
【請求項５】
前記代謝物は、黄色ブドウ球菌および大腸菌の増殖を抑制するバクテリオシンを含むことを特徴とする請求項４に記載の皮膚外用剤。
【請求項６】
前記代謝物は、Ｔｈ２サイトカインの生産を抑制する機能を備えた麹多糖類を含むことを特徴とする請求項４に記載の皮膚外用剤。
【請求項７】
皮膚外用剤が化粧品であることを特徴とする請求項１から請求項６のいずれか１項に記載の皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚外用剤に係り、特に皮膚の保湿に好適な皮膚外用剤に関する。
【０００２】
本発明において、穀類とは、大豆、米、麦、とうもろこしやこれらの粕等を意味し、本発明はこれらの穀類の少なくとも１種を原料基質として使用する。
【背景技術】
【０００３】
本出願人は、すでに穀物由来の生成物について、その製造方法を特許第２６９６０５７号公報において提案している。この製造方法によれば、穀類を原料として麹菌によって製麹させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物においては、穀類の状態を固形状にしたままで穀類中のフィチン酸が除去され、生成物中に含有されているビタミンＢ類等の活性が高く維持され、生成物中に含有されているミネラルの吸収も容易とされ、更にその吸収も促進可能とされている。このような穀類由来の生成物は人の健康によく作用するものである。
【０００４】
また、本出願人は、すでに穀類の１種である大豆由来のイソフラボンアグリコンについて、その製造方法を特許第３０１４１４５号公報において、豆類を原料として麹菌によって発酵させて蛋白質を分解し、その後に加水分解することによって得られた生成物には大豆イソフラボングリコシドが麹菌の酵素（β−グリコシダーゼ）でイソフラボンアグリコンに変化されるため、イソフラボンアグリコンがリッチに含有されており、この生成物が人間や哺乳類に対して薬効等の生体活性を促進する作用をなすことを提案している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第２６９６０５７号掲載公報
【特許文献２】特許第３０１４１４５号掲載公報
【特許文献３】特開２０１２−１８４１８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
近年、健康的で豊かな生活を送るために肌の健康を維持することが注目されている。そこで、シワの防止、肌のハリやツヤの改善に効果を発揮し、保湿性を向上させることを目的とした種々の皮膚外用剤が提案されている（例えば、特許文献３参照）。
【０００７】
しかしながら、種々の改善策が提案されているが、肌の保湿性に優れており、副作用が無く、安全で、安価な皮膚外用剤は未だに得られていない。
【０００８】
本発明はこれらの点に鑑みてなされたものであり、肌の保湿性に優れており、副作用が無く、安全で、安価な皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は鋭意研究し、本出願人が特許第２６９６０５７号および特許第３０１４１４５号において既に提案している生成物（「イムバランス」（登録商標））について、その成分と作用とを究明し、当該生成物並びに更に乳酸菌を含有している生成物内に糖セラミド類が含有されていることを発見して本発明を完成させた。
【００１０】
このようにしてなされた本発明の皮膚外用剤は、穀類に麹菌を接種して製麹し、この製麹処理による生成物に加水することにより当該生成物中の組成要素を加水分解した固体組成物であって、糖セラミド類を含有する固体組成物を含有することを特徴とする。
【００１１】
また、前記固体生成物は、前記生成物に対する麹菌による代謝物を含むことを特徴とする。
【００１２】
また、本発明の皮膚外用剤は、穀類に麹菌を接種して製麹し、この製麹処理による生成物に加水することにより当該生成物中の組成要素を加水分解した固体組成物であって、糖セラミド類および乳酸菌を含有する固体組成物を含有することを特徴とする。
【００１３】
この糖セラミド類および乳酸菌を含有する固体組成物は、前記生成物に対する麹菌および乳酸菌による代謝物を含むものであり、当該代謝物としては、黄色ブドウ球菌および大腸菌の増殖を抑制するバクテリオシンや、Ｔｈ２サイトカインの生産を抑制する機能を備えた麹多糖類を含むことを特徴とする。
【００１４】
また、皮膚外用剤が化粧品であることを特徴とする。
【００１５】
このようにして形成されている本発明の皮膚外用剤は、糖セラミド類による保湿作用が発揮されて、肌の保湿性に優れており、副作用が無く、安全で、安価な皮膚外用剤を得ることができる。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の皮膚外用剤によれば、肌の保湿性に優れており、副作用が無く、安全で、安価な皮膚外用剤を提供することができるという優れた効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】本発明の皮膚外用剤を生成する製造方法の１実施形態を示す工程図
【図２】本発明の皮膚外用剤によるＴｈ２サイトカインの生産を抑制度合いを示す棒グラフ
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、図１および図２を用いて本発明の皮膚外用剤の実施形態について説明する。
【００１９】
本実施形態においては、本出願人が特許第２６９６０５７号および特許第３０１４１４５号において既に提案している生成物（イムバランス）であって、「原料となる穀類の１種である大豆等の豆類に対して麹菌を用いて製麹処理を施すとともにその生成物に対して加水分解処理を施して、蛋白質が分解されており、イソフラボンアグリコンを多量に含有する生成物やフイチン酸が完全に分解除去された固体組成物または当該固体生成物に乳酸菌を含有するものであって糖セラミド類を含有している固体組成物含有する皮膚外用剤」を発明品とする。
【００２０】
図１は前記特許第２６９６０５７号および特許第３０１４１４５号において提案している生成物であって、豆類の１種である脱脂大豆のイソフラボン化合物の配糖体を分解して、アグリコンを多量に含むイソフラボン化合物を生成した生成物の製造方法の１実施形態および同時に脱脂大豆中のフィチン酸を除去した生成物の製造方法の１実施形態を示す工程図である。
【００２１】
図１の工程に沿って説明すると、先ず脱脂大豆を蒸煮する。この蒸煮を施すことにより、麹菌の増殖が容易となる。また、この脱脂大豆の蒸煮は製造目的等に応じてバッチ式や連続式で行うと良い。
【００２２】
そして、この蒸煮が終了した脱脂大豆を一旦冷却して、脱脂大豆中の水分量を麹菌が増殖可能な量（例えば、３７重量％）とさせる。
【００２３】
このようにして水分量を整えられた脱脂大豆に対して、本発明方法が以下のようにして行なわれる。
【００２４】
即ち、蒸煮が終了した脱脂大豆を殺菌し、冷却した後、脱脂大豆と麹菌との配合割合を、例えば脱脂大豆を４００ｋｇに対して麹菌胞子を８×１０7  個／ｇに調整した種麹（精白米にて調整）を２００ｇを混合した。更に、製麹のスタート時には３２℃に冷却した後、品温が４０℃になるまで通風しないで４０℃になった時点で通風しながら、温度上昇を抑えた。スタートから約１７時間後の最初の撹拌（盛工程）を行った。脱脂大豆の熱を冷まし、撹拌後品温が３５℃前後になるように通風しながら、温度をコントロールをした。次いで約８時間後に２回目の撹拌（仲工程）を行い、熱を冷ました。再び品温を通風で３５℃前後にコントロールし、更に約１６時間後に３回目の撹拌（仕舞工程）を前回同様に行った。その後は品温が約３８℃になるように通風しながら、温度コントロールし、スタートから４８時間後に製麹を終了させた。製麹終了後、水分含量が５０％になるように撹拌しながら、水分調整を行い、品温が約５０℃になるように加温後、４８時間以上麹菌の酵素で脱脂大豆中のイソフラボン化合物の大部分がアグリコン体になるまで加水分解した。表１に示す通り本発明による処理により脱脂大豆のイソフラボン化合物はアグリコン体のダイゼインが主体となるように多量に得られた。
【００２５】
【表１】
2014205634.tif 000003
【００２６】
この製麹に用いる麹菌としては、古くからの日本独特の発酵食品やテンペに用いられている麹菌であり、食品として安全なアスペルギルス・ウサミ、アスペルギルス・カワチ、アスペルギルス・アワモリ、アスペルギルス・サイトイ、アスペルギルス・オリゼー、アスペルギルス・ニガー等アスペルギルス属およびリゾープス属等からなる麹菌を用いるとよい。
【００２７】
この発酵時間については、使用する麹菌の種類に応じて、少なくとも２４時間以上であり、脱脂大豆中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に分解させるに十分な発酵時間とするとよい。
【００２８】
この蛋白質の加水分解については、使用する麹菌の種類に応じて、脱脂大豆中のイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させるに十分な加水分解時間ならびに加水分解温度とするとよい。
【００２９】
このようにすれば、発酵の初期において有機酸を生成して脱脂大豆中の雑菌の増殖を抑制し、２次汚染の心配がなくなり、脱脂大豆を原料とした固形生成物を大量生産することができる。また、低水分としなくともイソフラボン化合物の配糖体を十分に低減させる処理を施すことができる。
【００３０】
加水分解の終了後には、組成物を乾燥させ、必要に応じて粉砕若しくは滅菌することにより固形生成物を得る。
【００３１】
この固形生成物には、前記の一連の生産工程を経ることにより糖セラミド類が０．５５ｍｇ／ｇの割合で含有されていることがわかった。
【００３２】
更に、この固形生成物には前記の一連の生産工程を経ることにより乳酸菌が増殖されている固体生成物があることがわかった。
【００３３】
その乳酸菌の種類を各種の検出培地を用いて増殖させて検出したところ、乳酸菌はペディオコッカス属（Pediococcus sp.）とエントロコッカス属（Entrococcus sp.）とを含み、当該ペディオコッカス属およびエントロコッカス属の菌数の比が約３：１であることが判明した。
【００３４】
また、更に本実施形態の固形生成物には、麹菌および乳酸菌が増殖することによる固形組成物の代謝成分として、例えば、麹多糖類（アラビノース（含有量：４１．４％）、キシロース（含有量：１０．４％）、マンノース（含有量：４．０％）およびその他の成分）、ペプチド等が産生されていることがわかった。
【００３５】
これらの麹多糖類は、後述するように、Ｔｈ２サイトカインの生産を抑制する機能を備えており、また、ペプチドには黄色ブドウ球菌および大腸菌の増殖を抑制するバクテリオシンが含まれていることがわかった。
【００３６】
本発明の皮膚外用剤は、前記のようにして生成された固形生成物を皮膚外用剤の基剤に対して所定重量（例えば、０．３〜１．０％）含有させることにより生成される。
【００３７】
この皮膚外用剤の基剤としては、例えばクリームやジェル等を挙げることができ、外用剤を化粧品とする場合には、例えば、ナノスフェアクリーム、キサンタンガム、ジェル等を挙げることができる。
【００３８】
このようにして形成されている本発明の皮膚外用剤（化粧品を含む）を、複数の被検者の顔に塗布してその効能を試験したところ、全被検者において、保湿効果の向上を検出し、肌の健康が促進されたことを確認した。
【００３９】
更に、皮膚外用剤を、複数の被検者の足の踵のひび割れ部分（長さ１０ｍｍ×幅０．５ｍｍ×深さ１．５ｍｍ）に塗布してその効能を試験したところ、２週間後にひび割れ部分がほぼ半分に治癒され、５週間後には全快されたことを確認した。
【００４０】
本発明の組成の特性と効果の説明
説明１（糖セラミド類の検出）
原料として脱脂大豆を用い、麹菌としてアスペルギルス・オリゼーを用いて前記の生産工程に従って本発明の皮膚外用剤に用いる固形生成物を春夏秋冬の各季節において生産して製品春、製品夏、製品秋、製品冬とした。これらの製品に対して、高速液体クロマトグラフ質量分析法により糖セラミド類（大豆糖セラミドを指標とする）の含有量を測定したところ、０．５５ｍｇ／ｇの割合で含有されていることがわかった。
【００４１】
この糖セラミド類が含有されることにより、本発明の皮膚外用剤（化粧品を含む）には肌の保湿作用に優れたものとなることがわかった。
【００４２】
説明２（固形生成物のｐＨの検出）
前記実施例１に用いた固形生成物のｐＨを測定したところ、弱酸性（ｐＨ５．０〜６．０）であった。
この固形生成物が弱酸性を呈することにより、本発明の皮膚外用剤を肌に塗ると、肌の常在菌（例えば、表皮ブドウ球菌）のバランスを整えることとなり、肌の表面のバリア機能を向上させて、肌の健全性を高めることがわかった。
【００４３】
説明３（固形生成物の麹多糖類によるＴｈ２サイトカインへの耐性）
前記実施例１に用いた固形生成物のＴｈ２サイトカインへの耐性を検証するためにＤ１０．Ｇ４．１（Ｄ１０）細胞を利用して確認した。
このＤ１０細胞は、ＡＫＲマウス由来のコンアルブミン（ＣＡ：卵白アレルゲン）特異的Ｔｈ２細胞クローンであり、花粉症、喘息、アトピー性皮膚炎、アナフィラキシーショック等のＩｇＥ誘導性アレルギーにおけるメカニズム検討に利用されているものである。
細胞株・微生物株・遺伝子バンク（ＡＴＣＣ：米国）よりＤ１０細胞（ＴＩＢ２２４）を得て、ＡＫＲマウスＢ細胞（脾臓の細胞）と混合培養することによりＤ１０細胞の継体を得た。
５０万Ｄ１０細胞を３組用意し、前記固形生成物の最終濃度を１組：０％、２組：５０ｎｇ／ｍｌ、３組：２００ｎｇ／ｍｌを投与し、各組とも１００μｇ／ｍｌのＣＡ（卵白アレルゲン）を１回与えて刺激し、気温３７℃、５％ＣＯ２雰囲気７２時間培養後、上澄を採取して、各種のＴｈ２サイトカイン（１組：ＩＬ−４、２組：ＩＬ−５、３組：ＩＬ−１３）をＥＬＩＳＡ法によって測定した。
その測定結果は図２に示す通りとなり、前記固形生成物を投与した２組および３組が、投与しない１組に比較して、投与量が多くなるに従ってＴｈ２細胞サイトカイン（ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１３）の生産をより大きく抑制することができることが確認された。
この固形生成物がＴｈ２サイトカインへの耐性を呈することにより、本発明の皮膚外用剤を肌に塗ると、固形生成物中の前記麹多糖類の機能によってアトピー性皮膚炎の軽減や治癒がなされて、肌の健全性を高めることがわかった。
【００４４】
説明４（大腸菌およびブドウ球菌への耐性の検出）
前記実施例１に用いた固形生成物に対する抗菌力試験を日本食品分析センターに依頼して下記の結果を得た。
Ａ  試験方法
１）試験菌
Escherichia coli NBRC 3972（大腸菌）
Stphylicoccus aureus subsp. aureus NBRC 12732（黄色ブドウ球菌）
２）菌数測定用培地及び培養条件
SCDLP 寒天培地（日本製薬株式会社）、混釈平板培養法、３５℃±１℃、２日間
３）試験菌液の調整
試験菌を普通ブイヨン培地（栄研化学株式会社）で３５℃±１℃、１８〜２４時間培養した後、普通ブイヨン培地を用いて、菌数が１０４〜１０５／ｍＬとなるように調整し、試験菌数とした。
４）試験操作
検体１０ｍＬに試験菌液１ｍＬを接種し、試験液とした。試験液を３５℃±１℃で保存し、２４時間後に試験液をSCDLP 寒天培地（日本製薬株式会社）で直ちに１０倍に希釈し、試験液中の生菌数を菌数測定用培地を用いて測定した。
なお、対照としてリン酸緩衝生理食塩水を用いて同様に試験し、開始時についても生菌数を測定した。
【００４５】
Ｂ  試験結果
試験結果は表２に示す通りとなった。
【００４６】
【表２】
2014205634.tif 000004
【００４７】
この抗菌性試験結果より、２４時間の大腸菌増殖は対照に対してイムバランス抽出液を与えると６／１０００に抑えられることがわかった。
この抗菌性試験結果より、２４時間の黄色ブドウ球菌増殖は対照に対してイムバランス抽出液を与えると１／２００００に抑えられることがわかった。
この固形生成物が黄色ブドウ球菌および大腸菌の増殖を抑制する機能を呈することにより、固形生成物中に含まれるペプチドにバクテリオシンが含まれることがわかった。
【００４８】
このことより本発明の固形生成物は悪玉菌に対する天然抗菌物として作用することがわかり、肌の湿疹や皮膚炎症を抑えることができることがわかった。
【００４９】
なお、本発明は、前述した実施の形態に限定されるものではなく、必要に応じて種々の変更が可能である。
【図１】
2014205634.tif 000005
【図２】
2014205634.tif 000006