(57)【要約】      （修正有）【課題】既知の複合体の欠点を克服し、低リガンド濃度における改善されたラベル能、複合体構造の安定化、良好な生体内分布、標的組織中への取り込みの増加、並びに非標的組織及び臓器からの良好なクリアランスなどの複数の利点を示す葉酸複合体、並びに腫瘍イメージング剤として、腫瘍組織の画像形成法および放射線治療に使用できる放射線核種複合体としての金属キレート錯体の提供。【解決手段】一般式Ｉで表わされる葉酸複合体及び薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物。2014193889.tif 000072［Ｆは葉酸又はその誘導体；Ｚ１〜Ｚ３は互いに独立して、Ｃ又はＮ；Ｓ１〜Ｓ３は互いに独立して、単結合又はスペーサー；Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、供与基であり及び又は他のＦ基；Ｒｃは、任意に他のＦ基；そしてｎは１又は２］【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物であって、
【化１】
2014193889.tif 000043
式中、
Ｆは、葉酸又はその誘導体であり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくは−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＮＯ２、−ＣＯＲ’若しくは−ＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、そして、
ｎは、１又は２である上記化合物。
【請求項２】
式ＩＩ又はＩＩ’を有する請求項１に記載の化合物であって、
【化２】
2014193889.tif 000044
【化３】
2014193889.tif 000045
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくは−ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、
ｎは、１又は２であり、
ｐは、０、１、又は２であり、
ｑは、１〜７であり、そして、
ｒは、０又は１である上記化合物。
【請求項３】
式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩｄ及びＩＩｅを有する請求項１又は２に記載の化合物であって、
【化４】
2014193889.tif 000046
【化５】
2014193889.tif 000047
【化６】
2014193889.tif 000048
【化７】
2014193889.tif 000049
【化８】
2014193889.tif 000050
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル及び（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロゲン置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル及び（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくは−ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン又は複素環基であり、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｎは、１又は２であり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、並びに、
ｒは、０は１である上記化合物。
【請求項４】
Ｓ１は、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＨ、ＳＯ３Ｈ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、そして、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香環で置換されてよく、ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１〜３の何れか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｓ２及びＳ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、そして、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−で置換されてよく、ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１〜４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｚ１はＮであり、Ｚ３はＣであり、Ｚ２はＣ又はＮである、請求項１〜５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｚ１はＣであり、Ｚ２及びＺ３はＮである、請求項１〜５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項８】
ｍが０又は１である、請求項１〜７の何れか一項に記載の化合物。
【請求項９】
式ＩＩＩを有する請求項１に記載の化合物であって、
【化９】
2014193889.tif 000051
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ１、及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、並びに、
ｒは、０は１であり、
Ｒ６及びＲ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、式ＩＶの基であり、
【化１０】
2014193889.tif 000052
式中、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、そして、
ｎは、１又は２であり、
ただし、Ｒ６及びＲ７の少なくとも一つは式ＩＶの基である上記化合物。
【請求項１０】
Ｚ１はＮ、Ｚ３はＣ、そしてＺ２はＣ又はＮである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｚ１はＣ、Ｚ２及びＺ３はＮである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ６は、Ｈ、又は非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ７は、式ＩＶの基である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ６は、式ＩＶの基であり、Ｒ７は、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｒ６及びＲ７の両方が式ＩＶの基である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１５】
式ＩＩＩの請求項９に記載の化合物であって、
Ｒ６及びＲ７の少なくとも一つは、式ＩＶａ、ＩＶｂの基及び／又は式ＩＶｂ’の基であり、
【化１１】
2014193889.tif 000053
式中、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ａは、互いに独立して、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＮＨ２、又は−ＳＨであり、
Ｒａ、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ｎは、１又は２である上記化合物。
【請求項１６】
式Ｖ及びＶ’、Ｖａ及びＶａ’、Ｖｂ及びＶｂ’の化合物を有する請求項１に記載の化合物であって、
【化１２】
2014193889.tif 000054
【化１３】
2014193889.tif 000055
【化１４】
2014193889.tif 000056
【化１５】
2014193889.tif 000057
【化１６】
2014193889.tif 000058
【化１７】
2014193889.tif 000059
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり；
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり；
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６及びＲ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３又は４であり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、そして、
ｒは、０又は１である上記化合物。
【請求項１７】
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ８アルキルであり、ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−で置換されてよく、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
ｍが０である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１９】
ｍが１である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項２０】
式ＶＩ及びＶＩ’、式ＶＩａ及びＶＩａ’並びに式ＶＩｂ及びＶＩｂ’の化合物を有する請求項１に記載の化合物であって、
【化１８】
2014193889.tif 000060
【化１９】
2014193889.tif 000061
【化２０】
2014193889.tif 000062
【化２１】
2014193889.tif 000063
【化２２】
2014193889.tif 000064
【化２３】
2014193889.tif 000065
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４及びＸ５は、互いに独立して、Ｎ又はＣであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂは、互いに独立して、供与基であり、例えば、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、又は、（ピリジル、ピロリル、及びチアゾリルから選択される）複素環基であり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、
ｓは、１〜８であり、そして、
ｏは、１〜６である上記化合物。
【請求項２１】
Ｚ１はＮ、Ｚ３はＣ、そしてＺ２はＣ又はＮである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｚ１はＣ、Ｚ２及びＺ３はＮである、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２３】
式ＶＩＩ及びＶＩＩ’、式ＶＩＩａ及びＶＩＩａ’、並びに式ＶＩＩｂ及びＶＩＩｂ’の化合物を有する請求項１に記載の化合物であって、
【化２４】
2014193889.tif 000066
【化２５】
2014193889.tif 000067
【化２６】
2014193889.tif 000068
【化２７】
2014193889.tif 000069
【化２８】
2014193889.tif 000070
【化２９】
2014193889.tif 000071
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４及びＸ５は、互いに独立して、Ｎ又はＣであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６は、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂは、互いに独立して、供与基であり、例えば、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、又は、（ピリジル、ピロリル、及びチアゾリルから選択される）複素環基であり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、
ｓは、１〜８であり、そして、
ｏは、１〜６である上記化合物。
【請求項２４】
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである、請求項１〜２３の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
Ｒａは、−ＮＨ２、Ｒｂは、−ＯＨ、そしてＲｃは、Ｈである、請求項１〜２４の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
Ｒ６はＨ、又は直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである、請求項１〜２５の何れか一項に記載の化合物。
【請求項２７】
請求項１〜２６の何れか一項に記載の化合物及び放射線核種を含む錯体。
【請求項２８】
放射線核種が、９９ｍＴｃ、１８６／１８８Ｒｅ、１１１Ｉｎ＋３、６７／６８Ｇａ＋３、９０Ｙ＋３、１０９Ｐｄ＋２、１０５Ｒｈ＋３、１７７Ｌｕ、６４／６７Ｃｕ、１６６Ｈｏ、２１３Ｂｉから選択される請求項２７に記載の錯体。
【請求項２９】
（ｉ）放射性核種のための複素環リガンド部位を合成するステップ、（ｉｉ）適切な保護プテロイン酸または葉酸誘導体に適切なリンカーを介して結合させるステップ、及び（ｉｉｉ）化合物を単離するステップを含む請求項１〜２６の何れか一項に記載の化合物の製造方法。
【請求項３０】
（ｉ）１，３−環状付加によりアジド誘導体化葉酸を１８Ｆで標識化されたアルキン又はアルキン置換基と反応させるステップ及び（ｉｉ）化合物を単離するステップを含む請求項１〜２６の何れか一項に記載の化合物の製造方法。
【請求項３１】
（ｉ）１，３−環状付加によりアルキン又はアルキン置換基による誘導体化葉酸を１８Ｆで標識化されたアジドと反応させるステップ及び（ｉｉ）化合物を単離するステップを含む請求項１〜２６の何れか一項に記載の化合物の製造方法。
【請求項３２】
任意に還元剤の存在下で、前記化合物を放射線核種と反応させ、前記錯体を形成するステップを含む、請求項２７又は２８に記載の錯体の製造方法。
【請求項３３】
画像診断量又は治療上の有効量の少なくとも一つの請求項２７又は２８に記載の錯体、及びそのための薬学的に許容できるキャリアを含む医薬組成物。
【請求項３４】
画像診断が必要な被験者に簡便に有効量投与するために有益な診断剤の製造における、請求項２７又は２８に記載の錯体又は請求項３３に記載の医薬品組成物の使用。
【請求項３５】
放射線治療が必要な被験者に簡便に有効量投与するために有益な放射線治療剤の製造における、請求項２７又は２８に記載の錯体又は請求項３３に記載の医薬品組成物の使用。
【請求項３６】
葉酸レセプターが発現している細胞又は細胞集団の画像診断の方法であって、当該方法は、請求項２７又は２８に記載の錯体又は請求項３３に記載組成物を少なくとも一つ画像診断量で投与し、そして、前記の細胞又は細胞集団の診断画像を得るステップを含む。
【請求項３７】
それを必要とする被験者に少なくとも一つの請求項２７又は２８に記載の錯体又は請求項３３の組成物を治療上の有効量投与し、そして、前記の少なくとも一つの錯体又は組成物が所望の組織に局在した後、組織に放射線照射し、所望の治療効果を得るステップを含む放射線治療方法。
【請求項３８】
組織サンプルにおいて葉酸レセプターを発現している細胞を生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で検出する方法であって、請求項２７又は２８に記載の錯体又は請求項３３の組成物を
有効量で十分な時間と条件で前記組織サンプルと接触させ、結合を生じさせ、画像形成技術によりその結合を検知することを含む前記方法。
【請求項３９】
一つ又は別々のバイアル中に、請求項１〜２５の何れか一項に記載の化合物、薬学的に許容できる還元剤の供給源、及び、錫塩などの任意の添加剤を含むシングル又はマルチバイアルキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規の葉酸複合体及び対応する金属キレート複合体とその医薬組成物、その製造方法、及び、画像診断及び放射線治療などの診断及び治療薬用途への使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
診断薬又は治療薬送達のための細胞特異的なターゲティングは、幅広く研究されている分野であり、非侵襲の診断薬及び／又は治療薬用途の開発につながるものである。特に、ガンマ線又は光子として電磁放射線を放射する放射性物質を使用する核医学治療及び治療法分野においては、病原の評価及び／又は治療効果のモニタが可能となる特定の組織を可視化するための強いシグナルを達成するために、又、他の組織への放射線障害の危険を忌避しつつ特定の疾患部位を電離放射させるのに必要な量を送達させるための高放射線量を達成させるために、ターゲット細胞又は組織へのこれらの放射性物質の選択的局在が必要となる。
【０００３】
葉酸受容体（ＦＲ）は高親和性を有する膜結合性タンパク質であり、正常細胞においては限定的に発現するが、多くの種類の特定の細胞にしばしば過剰に発現する。特定の細胞としては、例えば、上皮腫瘍細胞（卵巣、子宮内膜、胸部、結腸直腸、腎臓、肺、鼻咽頭など）、及び活性化（しかし静止していない）マクロファージなどであり、これらは、炎症及び自己免疫性疾患を引き起こす。このため、正常細胞と比較してそれらの特定の細胞中において医薬品及び／又は診断用薬剤の選択的濃縮を達成させるために、医薬品及び／又は診断用薬剤のこれらの特異的な細胞集団への送達のための葉酸及びその誘導体の標的薬剤としての使用が必要となる。そのような葉酸複合体としては、葉酸放射性医薬品（Ｌｅａｍｏｎ  ａｎｄ  Ｌｏｗ，  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｔｏｄａｙ  ２００１；  ６：４４−５１）、化学療法薬の葉酸複合体（Ｌｅａｍｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｄｄｙ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１１２７−４１；  Ｌｅａｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２００５；  １６：８０３−１１）、タンパク質及びタンパク毒素（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ，．  Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．  ２０００；  ８：１１９−２３；  Ｌｅａｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  １９９３；  ２６８：２４８４７−５４；  Ｌｅａｍｏｎ  ａｎｄ  Ｌｏｗ，  Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．  １９９４；  ２：１０１−１２）、アンチセンスオリゴヌクレオチド（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ，  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．  １９９８；  １５：１５４０−４５；  Ｚｈａｏ  ａｎｄ  Ｌｅｅ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１１９３−２０４）、リポソーム（Ｌｅｅ  ａｎｄ  Ｌｏｗ，  Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ−Ｂｉｏｍｅｍｂｒ．  １９９５；  １２３３：１３４−４４）；  Ｇａｂｉｚｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１１７７−９２）、ハプテン分子（Ｐａｕｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１２０５−１７）；ＭＲＩ造影剤  （Ｋｏｎｄａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｍａｇｎ．  Ｒｅｓｏｎ．  Ｍａｔ．  Ｐｈｙｓ．  Ｂｉｏｌ．  Ｍｅｄ．  ２００１；  １２：１０４−１３）などがある。
【０００４】
周知の葉酸放射性医薬品としては、例えば、１２５Ｉでラベルされたヒスタミンとの複合体（米国特許第４，１３６，１５９号明細書）、小金属キレートとの複合体、例えば、デフェロキサミン（米国特許第５，６８８，４８８号明細書）、非環状又は環状のポリアミノカルボキシレート（例えば、ＤＴＰＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＯＴＡ及びＤＯ３Ａ；米国特許第６，２２１，３３４号明細書）、ビスアミノチオール（米国特許第５，９１９，９３４号明細書）、６−ヒドラジノニコチンアミド−ヒドラジド（Ｓｈｕａｎｇ  Ｌｉｕ，  Ｔｏｐｉｃｓ  ｉｎ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ｖｏｌ  ２５２  （２００５），  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｂｅｒｌｉｎ／Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）、及びエチレンジシステイン（米国特許第７，０６７，１１１号明細書）など、並びに、小ペプチド（米国特許第７，１２８，８９３号明細書）などが挙げられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第４，１３６，１５９号明細書
【特許文献２】米国特許第５，６８８，４８８号明細書
【特許文献３】米国特許第６，２２１，３３４号明細書
【特許文献４】米国特許第５，９１９，９３４号明細書
【特許文献５】米国特許第７，０６７，１１１号明細書
【特許文献６】米国特許第７，１２８，８９３号明細書
【非特許文献１】Ｌｅａｍｏｎ  ａｎｄ  Ｌｏｗ，  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  Ｔｏｄａｙ  ２００１；  ６：４４−５１
【非特許文献２】Ｌｅａｍｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｄｄｙ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１１２７−４１
【非特許文献３】Ｌｅａｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．  ２００５；  １６：８０３−１１
【非特許文献４】Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ，．  Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．  ２０００；  ８：１１９−２３
【非特許文献５】Ｌｅａｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｃｈｅｍ．  １９９３；  ２６８：２４８４７−５４
【非特許文献６】Ｌｅａｍｏｎ  ａｎｄ  Ｌｏｗ，  Ｊ．  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔ．  １９９４；  ２：１０１−１２
【非特許文献７】Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ，  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．  １９９８；  １５：１５４０−４５
【非特許文献８】Ｚｈａｏ  ａｎｄ  Ｌｅｅ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１１９３−２０４
【非特許文献９】Ｌｅｅ  ａｎｄ  Ｌｏｗ，  Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ａｃｔａ−Ｂｉｏｍｅｍｂｒ．  １９９５；  １２３３：１３４−４４
【非特許文献１０】Ｇａｂｉｚｏｎ  ｅｔ  ａｌ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１１７７−９２
【非特許文献１１】Ｐａｕｌｏｓ  ｅｔ  ａｌ，  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．  Ｒｅｖ．  ２００４；  ５６：１２０５−１７
【非特許文献１２】Ｋｏｎｄａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｍａｇｎ．  Ｒｅｓｏｎ．  Ｍａｔ．  Ｐｈｙｓ．  Ｂｉｏｌ．  Ｍｅｄ．  ２００１；  １２：１０４−１３
【非特許文献１３】Ｓｈｕａｎｇ  Ｌｉｕ，  Ｔｏｐｉｃｓ  ｉｎ  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  ｖｏｌ  ２５２  （２００５），  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｂｅｒｌｉｎ／Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、容易に合成でき、非標的組織比に対して最適な標的（例えば、腫瘍細胞、活性化マクロファージなど）を提示し、腎臓で消化され、高い選択性を有し、腫瘍細胞、活性化マクロファージ（及び高いＦＲ発現を示し、依然同定されていない他の標的細胞）の早期の発見と治療を可能にする非侵襲的な手法における腫瘍イメージング剤として使用するための、さらなる高い選択性を有する放射性核種複合体への需要は依然存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
出願人らは、今回、既知の複合体の欠点を克服し、低リガンド濃度における改善されたラベル能、複合体構造の安定化、良好な生体内分布、標的組織中への取り込みの増加、並びに非標的組織及び臓器からの良好なクリアランスなどの複数の利点を示すことにより現在の需要を満たした新規の葉酸複合体を見出した。これらの新規の葉酸複合体は、キレート部位及び薬理学的送達／結合部位を含む。新規の葉酸複合体は、画像診断法及び放射線治療用途に適した種々の放射性核種と安定なキレートを形成することができる。より具体的には、新規の複合体は、複素５員環をベースとし、少なくとも一つの放射性核種の結合によりそのレセプターとしての薬理学的実体のアフィニティーが失われないように設計されている。
【０００８】
本発明は、第一の態様において新規の葉酸複合体に関連し、これ以後、本発明の化合物とも示す。そして、少なくとも一つの放射性核種を有するこれらの錯体（複合体）は上記で議論した関連技術の欠点の一つか二つ以上を解決することができる。
【０００９】
特定の実施形態において、本発明は、式Ｉの化合物を対象とし、
【化１】
2014193889.tif 000002
式中、
Ｆは、葉酸又はその誘導体であり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ（ハロゲン）、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくは−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＮＯ２、−ＣＯＲ’若しくは−ＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基である。
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、そして、
ｎは、１又は２である。
【００１０】
ある実施形態において、本発明は式Ｉの化合物を対象とし、ここで、Ｆは、式ＩＩ又はＩＩ’の化合物で示されるプテロイル誘導体で示される。
【化２】
2014193889.tif 000003
【化３】
2014193889.tif 000004
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、
ｎは、１又は２であり、
ｐは、０、１、又は２であり、
ｑは、１〜７であり、そして、
ｒは、０又は１である。
【００１１】
本発明の範囲は、以下でもさらに示されるように、Ｆ基が式ＩＩ又はＩＩ’の化合物の範囲内であれば、基Ｒａ、Ｒａ、及びＲｂのすべての可能な置換（示す示さないに関わらず）を含むものとする。
【００１２】
他の実施形態においては、本発明は式Ｉの化合物を対象とし、ここで、Ｆは、式ＩＩＩで示されるような葉酸（例えば、プテロイル−グルタミン酸）誘導体で示される。
【化４】
2014193889.tif 000005
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ１〜Ｒ４並びにｐ、ｑ及びｒは、上記で定義された通りであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６及びＲ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、式ＩＶの基であり、
【化５】
2014193889.tif 000006
式中、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、そして、
ｎは、１又は２であり、
ただし、Ｒ６及びＲ７の少なくとも一つは式ＩＶの基である。
【００１３】
ある好ましい実施形態において、ｍは０である。他の好ましい実施形態において、ｍは１である。
【００１４】
他の態様において、本発明は、本発明の化合物、及び、９９ｍＴｃ、１８６／１８８Ｒｅ、１１１Ｉｎ＋３、６７／６８Ｇａ＋３、９０Ｙ＋３、１０９Ｐｄ＋２、１０５Ｒｈ＋３、１７７Ｌｕ、６４／６７Ｃｕ、１６６Ｈｏ、２１３Ｂｉを含んだ錯体を提供する。
【００１５】
さらなる態様において、本発明は、本発明の化合物、及び、それに対応する金属キレート錯体の製造方法を提供する。
【００１６】
さらに、さらなる態様において、本発明は、本発明の錯体を少なくとも一つを画像診断量又は治療上の有効量及び薬学的に許容できるそれらのキャリアを含む医薬組成物を提供する。好ましい実施形態においては、医薬組成物はＴｃ−９９ｍ、Ｒｅ−１８６又はＲｅ−１８８を含有する錯体を少なくとも一つ含む。
【００１７】
さらなる態様において、本発明は、画像診断又は放射線治療が必要な被験者に簡便に有効量投与するための本発明の錯体及び／又は医薬品組成物の使用を提供する。本発明の方法の被験者としては好ましくは動物又はヒトなどの哺乳類であり、好ましくはヒトである。
【００１８】
さらなる態様において、本発明は、本発明の化合物の製造に必要な組成であって放射性核種それ自体以外のすべてを含むシングルバイアルキット又はマルチバイアルキットを提供する。
【００１９】
本発明のさらなる特徴と利点については、本発明の下記の詳細な説明と特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本発明の化合物である式ＩＩＩ（４）とその錯体（５）の一般化された合成図であり、ここでＺ１はＮ、Ｚ２及びＺ３はＣである（ＬＧは適切な脱離基を示し、ＰＧは適切な保護基を示す）。
【図２】本発明の化合物である式ＩＩＩ（９）とその錯体（１０）の一般化された合成図であり、ここでＺ１及びＺ２はＮ、Ｚ３はＣである。
【図３】（Ａ）４時間及び２４時間ｐ．ｉ．の９９ｍＴｃ−Ｈｉｓ−葉酸の生体内分布；（Ｂ）ペメトレキセドを予め注射した場合の４時間ｐ．ｉ．の９９ｍＴｃ−Ｈｉｓ−葉酸の生体内分布。
【図４】（Ａ）１時間、４時間及び２４時間ｐ．ｉ．の９９ｍＴｃ（ＣＯ）３−トリアゾール−葉酸の生体内分布；（Ｂ）ペメトレキセドを予め注射した場合の４時間及び２４時間ｐ．ｉ．の９９ｍＴｃ（ＣＯ）３−トリアゾール−葉酸の生体内分布。
【図５】ペメトレキセドがある場合とない場合の９９ｍＴｃ−Ｈｉｓ−葉酸を使用したＫＢ腫瘍と腎臓の（Ａ）生体外（Ｅｘ  ｖｉｖｏ）及び（Ｂ）生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）オートラジオグラム
【図６−１】９９ｍＴｃ−Ｈｉｓ−葉酸を使用した胸腺欠損ヌードマウスにおける生体内分布研究におけるＳＰＥＣＴ／ＣＴ図。
【図６−２】９９ｍＴｃ−Ｈｉｓ−葉酸を使用した胸腺欠損ヌードマウスにおける生体内分布研究におけるＳＰＥＣＴ／ＣＴ図。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、最初の形態において、新規の葉酸複合体に関連し、これ以後、本発明の化合物ともいい、又、少なくとも一つの放射性核種を有する複合体は関連技術の欠点の一つか二つ以上を解決することができる。
【００２２】
特定の実施形態において、本発明は、式Ｉの化合物を対象とし、
【化６】
2014193889.tif 000007
式中、
Ｆは、葉酸又はその誘導体であり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくは−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＮＯ２、−ＣＯＲ’若しくは−ＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯＯＲ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３、又は４であり、そして、
ｎは、１又は２である。
【００２３】
当業者であれば、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂ（及びＲｃ）の位置に一つか二つ以上のＦ基を組み合わせた式Ｉの化合物の組み合わせが本発明の一部であることが認識できるであろう（図式１に示したようにＤＧは供与基を示す）：
（ｉ）式Ｉの化合物のある具体的な組み合わせとしては、例えば、ｍ＝０であり、残りの置換基Ｒａ及びＲｂのみが、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基から選択される２つの近接供与基を示し、ＲｃがＦを示しても良い。
【００２４】
（ｉｉ）式Ｉの化合物の他の組み合わせとしては、例えば、Ｒａ及びその近接のＲａ’が（すなわちｍ≧１）、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基から選択される２つの近接供与基を示し、一つか二つ以上のＲａ’（ｍ＞１に対して）、Ｒｂ及びＲｃが、互いに独立して、Ｆ基を示しても良い。
【００２５】
（ｉｉｉ）式Ｉの化合物のさらなる具体的な組み合わせとしては、例えば、Ｒｂ及びその近接のＲａ’が（すなわちｍ≧１）、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基から選択される２つの近接供与基を示し、Ｒａ、一つか二つ以上のＲａ’（ｍ＞１に対して）、及びＲｃが、互いに独立して、Ｆ基を示しても良い。
【００２６】
式Ｉの化合物のさらなる具体的な組み合わせとしては（図式１には示していない）、例えば、二つの近接するＲａ’（すなわちｍ≧２）が、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は複素環基から選択される２つの近接供与基を示し、Ｒａ、一つか二つ以上のＲａ’（ｍ＞２に対して）、Ｒｂ、及びＲｃが、互いに独立して、Ｆ基を示しても良い。
【００２７】
これらの組み合わせのすべては同じ化学的結合構造を必要としており、それ故、これらはすべて合成化学的に当業者により合成可能である。したがって、Ｆ基及び２つの近接供与基を有する式Ｉの化合物のすべての可能な組み合わせ（示す示さないに関わらず）は本発明の一部であると理解される。
【００２８】
【化７】
2014193889.tif 000008
【００２９】
好ましい実施形態において、葉酸とその誘導体は（これ以後単に「葉酸」とも示される）、本発明における使用のために、ベンゾイル部分を介して（以下に定義される）リンカーＳ１と結合した縮合ピリミジン複素環をベースとした化合物を含む。ここで使用される「縮合ピリミジン複素環」としては、例えば、プテリジン又は二環式ピロロピリミジンなど５若しくは６員環の複素環をさらに融合させたピリミジンが挙げられる。
【００３０】
ここで使用される葉酸の好ましい典型例は、葉酸（プテロイル−グルタミン酸）骨格をベースとし、任意に、置換葉酸、ホリニン酸、プテロポリグルタミン酸、及び葉酸レセプター結合プテリジン、例えば、テトラヒドロプテリン、ジヒドロ葉酸、テトラヒドロ葉酸並びにデアザ（ｄｅａｚａ）及びジデアザ（ｄｉｄｅａｚａ）アナログを含む。葉酸は本発明の化合物のために使用される好ましい共役形成リガンドである。「デアザ」及び「ジデアザ」アナログという用語は、天然に存在する葉酸構造において一つか二つの窒素原子に置換された炭素原子を有すると当該技術分野で認識されるアナログを指す。例えば、デアザアナログとしては、１−デアザ、３−デアザ、５−デアザ、８−デアザ及び１０−デアザアナログが挙げられる。ジデアザアナログとしては、例えば、１，５−ジデアザ、５，１０−ジデアザ、８，１０−ジデアザ及び５，８−ジデアザアナログが挙げられる。好ましいデアザアナログ化合物としては、Ｎ−［４−［２−［（６Ｒ）−２−アミノ−１，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−４−オキソピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］エチル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（Ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ；ロメトレキソール）及びＮ−［４−［１−［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］プロピル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸（Ｅｄａｔｒｅｘａｔｅ；エダトレキサート）が挙げられる。
【００３１】
特定の実施形態において、本発明は式ＩＩ及びＩＩ´の化合物を対象とし、
【化８】
2014193889.tif 000009
【化９】
2014193889.tif 000010
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル及び（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロゲン置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル及び（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３又は４であり、
ｎは、１又は２であり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、並びに、
ｒは、０は１である。
【００３２】
本発明の範囲は、式ＩＩ及びＩＩ´の化合物のうち上記で定義されたＦ基である基Ｒａ、Ｒａ’及びＲｂの可能なすべての組み合わせについても含まれることが理解される：
第一に、これらの組み合わせは、さらに一つのＦ基を有する式ＩＩ及びＩＩ´の化合物を含む。これらは、（ｉ）ＲａがＦ基、又は（ｉｉ）ＲｂがＦ基、又は（ｉｉｉ）Ｒａ’がＦ基である式ＩＩ及びＩＩ´の化合物を含む。
【００３３】
第二に、これらの組み合わせは、さらに二つのＦ基を有する式ＩＩ及びＩＩ´の化合物をさらに含む。これらは、（ｉ）Ｒａ及びＲａ’がＦ基、又は（ｉｉ）Ｒａ及びＲｂがＦ基、又は（ｉｉｉ）Ｒａ’及びＲｂがＦ基である式ＩＩ及びＩＩ´の化合物を含む。
【００３４】
これらの組み合わせすべてにおいて、「ｍ」は、２つの近接する供与基を有しているという要件を依然満たすように、調整されなければならないことが理解される。
【００３５】
本発明によれば上記の組み合わせのうち選択された実施形態は、例えば、式ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩｃ、ＩＩｄ及びＩＩｅの化合物である。
【００３６】
【化１０】
2014193889.tif 000011
【００３７】
【化１１】
2014193889.tif 000012
【００３８】
【化１２】
2014193889.tif 000013
【００３９】
【化１３】
2014193889.tif 000014
【００４０】
【化１４】
2014193889.tif 000015
【００４１】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル及び（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロゲン置換Ｃ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル及び（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン又は複素環基であり、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ若しくはＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｎは、１又は２であり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、並びに、
ｒは、０は１である。
【００４２】
本発明の範囲は式ＩＩ及びＩＩａ´のすべての可能な組み合わせ（示す示さないに関わらず）を含むと理解される。
【００４３】
ある実施形態においては、Ｚ１はＮであり、Ｚ３はＣであり、Ｚ２はＣ又はＮである。  別の実施形態においては、Ｚ１はＣであり、Ｚ２及びＺ３はＮである。
【００４４】
Ｓ１は、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＨ、ＳＯ３Ｈ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであることが好ましく、そして、ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’若しくはその組み合わせで置換された５若しくは６員環の芳香環で置換されてよく、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００４５】
より好ましくは、Ｓ１は、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、そして、ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−で置換されてよく、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００４６】
Ｓ２及びＳ３は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであることが好ましく、そして、ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置換されてよく、
ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００４７】
より好ましくは、Ｓ２及びＳ３は、互いに独立して、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ８アルキルであり、そして、ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−で置換されてよく、ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、最も好ましくは、Ｓ２及びＳ３は、互いに独立して、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ６アルキルである。
【００４８】
ある好ましい実施形態においては、ｍ＝０であり、別の好ましい実施形態においては、ｍ＝１である。
【００４９】
さらなる好ましい実施形態においては、Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＮＨＲ’又は非置換のＣ１−Ｃ６アルキルであり、ここでＲ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００５０】
Ｓ１及びＲｃの好ましい実施形態としては、アミノ酸、短いペプチド、糖分子が挙げられる。当業者であれば選択方法は既知であろう。
【００５１】
このように、さらなる好ましい実施形態において、本発明は、式ＩＩの化合物を対象とし、ここで、Ｓ１は、アミノ酸部分であり、すなわち、ここで、Ｆはアミノ酸部分と結合するプテロイル部分を含む葉酸構造を示している。ここで使用される「アミノ酸」という用語は、アミノ基（例えば、ＮＨ２又はＮＨ３＋）とカルボン酸基（例えば、ＣＯＯＨ又はＣＯＯ−）の両方を含む化合物である。特定の実施形態においては、アミノ酸としては、α−アミノ酸、β−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸又はＬ−アミノ酸でよい。アミノ酸は天然に存在するアミノ酸で良く（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、メチオニン、グリシン、セリン、トレオニン、システイン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、又はヒスチジンなど）、また、これらの誘導体でも良い。誘導体の例としては、任意に置換されたアミノ酸、例えば、ＣＮ、Ｈａｌ及び／又はＮＯ２から選択された一つか二つ以上の置換基を有するアミノ酸が挙げられる。また、アミノ酸としては、天然に存在しないあらゆるアミノ酸であっても良く、例えば、ノルロイシン、ノルバリン、Ｌ−若しくはＤ−ナフトアラニン、オルニチン、ホモアルギニン、及びべプチド分野で既知の他のペプチド（Ｍ．  Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，  ”Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”  １ｓｔ  ａｎｄ  ２ｎｄ  ｒｅｖｉｓｅｄ  ｅｄ．，  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−  Ｖｅｒｌａｇ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ＮＹ，  １９８４  ａｎｄ  １９９３、及び、Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｙｏｕｎｇ，  ”Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”  ２ｎｄ  ｅｄ．，  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，  Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，  ＩＬ，  １９８４を参照されたい、これらは両方とも引例として本出願に組み込まれる）である。アミノ酸及びアミノ酸アナログ／誘導体は商業的に購入することができ（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．；  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｔｅｃｈ）、また、当分野で周知の方法で合成することもできる。別の特定の実施形態においては、アミノ酸はポリアミノ酸（又はポリペプチドと呼ぶ）の一部であっても良く、ここでは、上記に定義した複数の同一の若しくは異なるアミノ酸が共有結合により結合、すなわち慣用のペプチド結合又は他の結合によって結合している。
【００５２】
好ましいアミノ酸としては、例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、アスパルチン（ａｓｐａｒｔｉｎｅ）、リジン、アルギニン、システイン及びこれらの誘導体が挙げられ、好ましいポリアミノ酸としては、これらの個々のホモポリマー（すなわち、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸など）が挙げられる。最も好ましいのは、任意に置換されたアスパラギン酸及びグルタミン酸である。
【００５３】
このように、より特定の実施形態においては、本発明は式ＩＩの化合物を対象とし、ここで、Ｆは、式ＩＩＩの化合物で示される２つの結合部位を有するプテロイルグルタミン酸（若しくは葉酸）骨格を示し、
【００５４】
【化１５】
2014193889.tif 000016
【００５５】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３、及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、並びに、
ｒは、０は１であり、
Ｒ６及びＲ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、式ＩＶの基であり、
【００５６】
【化１６】
2014193889.tif 000017
【００５７】
式中、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３又は４であり、そして、
ｎは、１又は２であり、
ただし、Ｒ６及びＲ７の少なくとも一つは式ＩＶの基である。
【００５８】
ある特定の実施形態においては、（ｉ）Ｚ１はＮ、Ｚ３はＣ、そしてＺ２はＣ又はＮであり、又は（ｉｉ）Ｚ１はＣ、Ｚ２及びＺ３はＮである。
【００５９】
好ましい実施形態においては、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、ＮＨ２若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−で置換されてよく、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００６０】
より好ましくは、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ８アルキルであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−で置換されてよく、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００６１】
最も好ましくは、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ６アルキルである。
【００６２】
さらなる好ましい実施形態においては、Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又はＣ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００６３】
特定の実施形態においては、本発明は式ＩＩＩの化合物を対象とし、ここで、（ａ）Ｒ６はＨ、又は非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、Ｒ７は式ＩＶの基であり、（ｂ）Ｒ６は式ＩＶの基であり、Ｒ７はＨ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、又は、（ｃ）Ｒ６及びＲ７の両方が式ＩＶの基である。さらなる特定の実施形態においては、ｍは０又は１である。
【００６４】
このように本発明は、式ＩＩＩの化合物を対象とし、ここで、Ｒ６及びＲ７の少なくとも一つは、式ＩＶａ、ＩＶｂの基及び／又は式ＩＶｂ’の基である。
【化１７】
2014193889.tif 000018
【００６５】
式中、Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ａは、互いに独立して、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＮＨ２、又は−ＳＨであり、
Ｒａ、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ｎは、１又は２である。
【００６６】
Ｆ基と２つの隣接する供与基の組み合わせにおいて式ＩＶの基と共に式ＩＩＩの化合物の（示す示さないに関わらず）すべての可能な組み合わせは、本発明の一部であることが理解される。これらは、式ＩＩＩの化合物を含み、ここで、Ｒ６若しくはＲ７の何れか一つ、又はその両方は式ＩＶの基であり、そして、ここで、これらの各化合物において、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂ及び／又はＲｃはＦ基を示しても良い（そのために、例えば、式ＩＶａ、ＩＶｂ及びＩＶｂ’の基の特定の実施例に示すようにＲａ、Ｒａ’、Ｒｂの二つは隣接供与基である）。選択された化合物を式Ｖ及びＶ’、Ｖａ及びＶａ’、Ｖｂ及びＶｂ’により示され、ここでＲｃがＦ基となる可能性を示した。ここで示されないがＲａ、Ｒａ’、ＲｂがＦ基となる他のすべての組み合わせもまた発明の範囲内であることが理解される。
【００６７】
【化１８】
2014193889.tif 000019
【００６８】
【化１９】
2014193889.tif 000020
【００６９】
【化２０】
2014193889.tif 000021
【００７０】
【化２１】
2014193889.tif 000022
【００７１】
【化２２】
2014193889.tif 000023
【００７２】
【化２３】
2014193889.tif 000024
【００７３】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４及びＸ５は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり；
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり；
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６及びＲ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、
ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ここで、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのうち少なくとも２つの近接する基は、供与基−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、ホスフィン、又は、複素環基であり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｍは、０、１、２、３又は４であり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、そして、
ｒは、０又は１である。
【００７４】
より好ましい実施形態においては、本発明は、Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ、ＯＨ、若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ８アルキルであり、そして、ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−で置換されてよく、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである化合物を意図する。さらに特定の実施形態においては、ｍは０又は１である。
【００７５】
さらなる好ましい実施形態において、このように本発明は、例えば、式ＶＩ及びＶＩ’、式ＶＩａ及びＶＩａ’並びに式ＶＩｂ及びＶＩｂ’の化合物を対象とする。
【化２４】
2014193889.tif 000025
【００７６】
【化２５】
2014193889.tif 000026
【００７７】
【化２６】
2014193889.tif 000027
【００７８】
【化２７】
2014193889.tif 000028
【００７９】
【化２８】
2014193889.tif 000029
【００８０】
【化２９】
2014193889.tif 000030
【００８１】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４及びＸ５は、互いに独立して、Ｎ又はＣであり、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６、Ｒ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｒａ、Ｒｂは、互いに独立して、供与基であり、例えば、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、又は、（ピリジル、ピロリル、及びチアゾリルから選択される）複素環基であり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、
ｓは、１〜８であり、そして、
ｏは、１〜６である。
【００８２】
好ましくは、（ｉ）Ｚ１はＮ、Ｚ３はＣ、そしてＺ２はＣ若しくはＮ、又は、（ｉｉ）Ｚ１はＣ、Ｚ２及びＺ３はＮである。
【００８３】
このように、さらなる好ましい実施形態において、本発明は式ＶＩＩ及びＶＩＩ’、式ＶＩＩａ及びＶＩＩａ’、並びに式ＶＩＩｂ及びＶＩＩｂ’の化合物を対象とする。
【化３０】
2014193889.tif 000031
【００８４】
【化３１】
2014193889.tif 000032
【００８５】
【化３２】
2014193889.tif 000033
【００８６】
【化３３】
2014193889.tif 000034
【００８７】
【化３４】
2014193889.tif 000035
【００８８】
【化３５】
2014193889.tif 000036
【００８９】
式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４及びＸ５は、互いに独立して、Ｎ又はＣであり、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、Ｈａｌ、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒ３及びＲ４は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、イミノメチル、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６は、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｒａ及びＲｂは、互いに独立して、供与基であり、例えば、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、又は、（ピリジル、ピロリル、及びチアゾリルから選択される）複素環基であり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ｐは、０、１又は２であり、
ｑは、１〜７であり、
ｓは、１〜８であり、そして、
ｏは、１〜６である。
【００９０】
さらなる好ましい実施形態においては、Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。最も好ましい実施形態においては、Ｒａは、−ＮＨ２、Ｒｂは、−ＯＨ、そしてＲｃは、Ｈである。好ましくは、ｏは１、２、３又は４である。
【００９１】
略称「Ｎ」及び「Ｃ」は、すべての可能な飽和度を示し、例えば、Ｎは−ＮＨ−及び−Ｎ＝結合を含み、Ｃは、−ＣＨ２−及び−ＣＨ＝結合を含むことが理解される。
【００９２】
略称（Ｈ）ｑは、示されている環（例えば、Ｘ３、Ｃ６、Ｃ７及びＸ４）おけるすべてのＨ置換を示すと理解される。例えば、ｑ＝５は完全飽和の非置換アナログ（Ｘ３＝Ｘ４＝Ｎ，ｐ＝０）であり、また、ｑ＝７は完全飽和の非置換５，８−ジデアザアナログ（Ｘ３＝Ｘ４＝Ｃ，ｐ＝０）であり、そして、ｑ＝１は完全に不飽和のアナログでＸ３＝Ｘ４＝Ｎ，ｐ＝０である。
【００９３】
ある好ましい実施形態においては、Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、Ｈ、アルキル、−ＯＲ’、−ＮＨＲ’で良く、より好ましくは−ＯＲ’、−ＮＨＲ’で良い。
【００９４】
ある好ましい実施形態においては、Ｒ３はＨ、ホルミル、Ｃ１−Ｃ１２アルキル又はＣ１−Ｃ１２アルカノイルである。
【００９５】
別の好ましい実施形態においては、Ｒ４はＨ、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ又はＣ１−Ｃ１２アルカノイルである。
【００９６】
ある好ましい実施形態においては、Ｒ６は、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、より好ましくは、Ｒ６はＨ、又は直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルである。最も好ましい実施形態においては、Ｒ６はＨである。
【００９７】
別の好ましい実施形態においては、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、又は（ピリジル、ピロリル、及びチアゾリルから選択される）複素環基であり、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。さらに好ましくは、Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００９８】
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのための好ましい供与基としては、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨ、又は、（ピリジル、ピロリル、及びチアゾリルから選択される）複素環基であり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂのためのさらに好ましい供与基としては、互いに独立して、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨ２、−ＳＨであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００９９】
さらなる好ましい実施形態としては以下のものが挙げられる：
（ｉ）Ｘ１〜Ｘ５はＮ、Ｒ１はＮＨ２、Ｒ２はＯ、Ｒ４はＨ、ｓは１、３又は５、そして他のすべてのパラメータは、式ＶＩＩ、ＶＩＩａ又はＶＩＩｂで定義された通りである、（ｉｉ）Ｘ１〜Ｘ５はＮ、ＹはＯ、Ｒ１はＮＨ２、Ｒ２はＯ、Ｒ３はＨ、メチル又はホルミル、Ｒ４はＨ、メチル又はホルミル、Ｒ６はＨ、メチル又はエチル、ｓは１、３又は５、そして他のすべてのパラメータは、式ＶＩＩ、ＶＩＩａ又はＶＩＩｂで定義された通りである、
（ｉｉｉ）Ｘ１〜Ｘ５はＮ、ＹはＯ、Ｒ１はＮＨ２、Ｒ２はＯ、Ｒ３はＨ、メチル又はホルミル、Ｒ４はＨ、Ｒ６はＨ、ｓは１、３又は５、Ｒａ及びＲｂは−ＯＨ、そして他のすべてのパラメータは、式ＶＩＩ、ＶＩＩａ又はＶＩＩｂで定義された通りである。
【０１００】
このようにさらなる特定の実施形態において、本発明は式ＶＩＩＩの化合物を対象とする。
【化３６】
2014193889.tif 000037
式中、
Ｙ１、Ｙ２は、互いに独立して、Ｃ、Ｏ、又はＮであり、
Ｒ８、Ｒ９は、互いに独立して、Ｈ、ホルミル、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキルであり、
Ｒ４は、Ｈ、ニトロソ、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、ハロ置換されたＣ１−Ｃ１２アルカノイルであり、そして、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、Ｃ１−Ｃ１２アルキル、Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ、Ｃ１−Ｃ１２アルカノイル、Ｃ２−Ｃ１２アルケニル、Ｃ２−Ｃ１２アルキニル、（Ｃ１−Ｃ１２アルコキシ）カルボニル、及び、（Ｃ１−Ｃ１２アルキルアミノ）カルボニルであり、
Ｒ６及びＲ７は、互いに独立して、Ｈ、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、式ＩＶａ、ＩＶｂの基、及び／又は式ＩＶｂ’の基であり、
【０１０１】
【化３７】
2014193889.tif 000038
【０１０２】
式中、
Ｚ１、Ｚ２、Ｚ３は、互いに独立して、Ｃ又はＮであり、
Ｓ２、Ｓ３、Ｓ４は、互いに独立して、単結合、又は、非置換若しくは少なくとも一つの−ＣＮ、−Ｈａｌ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ、−ＳＯ３Ｈ若しくは−ＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル等のスペーサーであり、
ここで、一つか二つ以上の非近接のＣＨ２基は、独立して、−Ｏ−、−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−ＮＲ’−、−Ｎ＝、−ＮＲ’−ＣＯ−、−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＮＲ’−ＣＯ−ＮＲ’−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｓ−、−ＳＯ３Ｒ’−、−ＰＲ’−、又は、非置換若しくはＣＮ、Ｈａｌ、ＮＯ２、ＣＯＲ’若しくはＣＯＯＲ’で置換された５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環で置換されてよく、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ａは、互いに独立して、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＮＨ２、又はＳＨであり、
Ｒａ、Ｒｂは、互いに独立して、Ｈ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＨＲ’、−ＣＯＮＨＲ’、−ＳＲ’、ホスフィン又は複素環基であり、
又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、Ｒｃは、Ｈ、ＣＯ２Ｒ’、ＣＯＲ’、−ＳＯ３Ｒ’、−ＮＨＲ’、又は、非置換若しくは少なくとも一つのＣＮ、Ｈａｌ若しくはＮＯ２で置換された直鎖若しくは分岐Ｃ１−Ｃ１２アルキル、又は、上記で定義されたＦであり、ここで、Ｒ’は、Ｈ又はＣ１−Ｃ６アルキルであり、そして、
ｎは、１又は２である。
【０１０３】
好ましくは、（ｉ）Ｚ１はＮ、Ｚ３はＣ、そしてＺ２はＣ若しくはＮ、又は、（ｉｉ）Ｚ１はＣ、Ｚ２及びＺ３はＮである。
【０１０４】
「アルキル」という用語は、単独で又は組み合わせで使用される時、１〜１２の炭素原子を含んだ直鎖若しくは分岐アルキル基を指し、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチルイソペンチル、ネオペンチル、へキシル及びその類似物である。好ましいアルキル基は１〜８の炭素原子を、より好ましくは１〜４の炭素原子を含有する。
【０１０５】
ここで使用される「アルケニル」という用語は、単独で又は他の基との組み合わせで使用される時、２〜１２の炭素原子を含んだ直鎖若しくは分岐アルキレンを指し、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、ブチレン、ｔ−ブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、イソブチレン、アミレン、イソアミレン、ペンチレン、イソペンチレン、ヘキシレン及びその類似物である。好ましいアルケニル基は２〜６の炭素原子を含有する。
【０１０６】
ここで使用される「アルキニル」という用語は、一つか二つ以上の炭素−炭素三重結合を含む直鎖若しくは分岐を有する炭素原子鎖を指す。好ましいアルキニル基は２〜１２の炭素原子を、より好ましくは２〜６の炭素原子を含有する。
【０１０７】
ここで使用される「アルコキシ」という用語は、酸素で置換された上記で定義したアルキルを指し、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ及びその類似物である。
【０１０８】
ここで使用される「アルカノイル」という用語は、カルボニルで末端が置換された上記で定義したホルミル又はアルキルを指し、例えば、アセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイル及びその類似物である。
【０１０９】
ここで使用される「アルキルアミノ」という用語は、窒素で置換された上記で定義したアルキルを指し、モノアルキルアミノ（例えば、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ及びその類似物）とジアルキルアミノ（例えば、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、メチルプロピルアミノ及びその類似物）の両方が挙げられる。
【０１１０】
ここで使用される「ハロ」という用語は、すべての７属元素を指し、そして、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヨード及びアスタチン（ｏ）を含む。
【０１１１】
「５若しくは６員環の芳香族炭素環若しくは複素環」という用語は、５若しくは６員環の芳香族炭素環、例えば、フェニル、シクロヘプチル、シクロへキシル及びシクロペンチル、並びに、Ｎ、Ｓ、Ｏ及びＰから選択されるヘテロ原子を少なくとも一つ含有する５若しくは６員環の芳香族複素環、例えば、ピリジル、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピロリジニル及びピラゾリルを指す。
【０１１２】
ここで使用される「複素環」という用語は、Ｎ、Ｓ、Ｏ、及びＰ、好ましくはＮ又はＳから選択される少なくとも一つのヘテロ原子を含む飽和複素環又は不飽和複素環を指す。飽和複素環の例としては、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジル、モルホリニル、チアモルホリニル及びピペラジニルが挙げられる。不飽和複素環の例としては、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、及びピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、及びピリダジニルが挙げられる。
【０１１３】
これらの複素環基は、アルキル、例えばメチル若しくはエチル、ハロゲン原子、又はフェニルで置換されても良い。複素環基がフェニルで置換される場合、複素環基中の２つの近接の炭素原子がフェニル基と結合することで縮合環を形成すれば良い。縮合環の例としては、ベンゾチアゾリル、ベンゾフリル、キアノゾリニル、及びキノキサリニルが挙げられる。好ましい複素環基としては、ピリジル、ピロリル、及びチアゾリルが挙げられる。
【０１１４】
ここで使用される「ホスフィン」という用語は、例えば、トリアリールホスフィン、トリアルキルホスフィン及びトリス（ジアルキルアミノ）ホスフィンで置換基を有していいても良く、並びにその類似物が挙げられる。これらの具体的な例としては、例えば、１，２−ビス（ジメチルホスフィノ）エタン及びトリス−ヒドロキシメチレンホスフィンが挙げられる。
【０１１５】
ここで使用される「任意に置換される」という用語は、Ｃ（１−６）アルキル、Ｃ（１−６）アルケニル、Ｃ（１−６）アシル、アリールＣ（１−６）アルキルアリール、シアノ、ニトロ及びハロ、好ましくはＣ（１−６）アルキル、シアノ、ニトロ及びハロ、最も好ましくはＣ（１−４）アルキルが挙げられる。
【０１１６】
他の態様において、本発明は、本発明の化合物、及び９９ｍＴｃ、１８６／１８８Ｒｅ、１１１Ｉｎ＋３、６７／６８Ｇａ＋３、９０Ｙ＋３、１０９Ｐｄ＋２、１０５Ｒｈ＋３、１７７Ｌｕ、６４／６７Ｃｕ、１６６Ｈｏ、２１３Ｂｉを含む錯体も提供し、今後、本発明の錯体とも示す。好ましくは、本発明の錯体は、９ｍＴｃ、１８６Ｒｅ又は１８６Ｒｅを含む。テクネチウムは、画像診断剤に特に有効であり、好ましくは一つか二つ以上の放射性核種、９９ｍＴｃ、９４ｍＴｃ又は９６Ｔｃである。上記にも示したとおり、医学画像のための好ましい放射性同位体は９９ｍＴｃである。その１４０ｋｅＶガンマ光子が、広く利用されているガンマカメラとの使用に理想的である。それは短い半減期（６時間）を有し、患者の線量測定を考慮すると好ましい。レニウムは、放射線治療剤として特に有効であり、好ましくは、放射性核種、１８６Ｒｅ若しくは１８８Ｒｅ、又はこれらの混合物である。
【０１１７】
さらなる態様において、本発明は、また、本発明の化合物の合成方法を提供する。合成の第一の方法においては、放射性核種のための複素環リガンド部位を最初に合成し、その後、適切な保護されたプテロイン酸または葉酸誘導体に適切なリンカーを介して結合させ、最適な最終化合物を得る（例えば、図１を参照）。
【０１１８】
ある特定の実施形態例においては、例えば、この合成方法においては、アミノ末端、カルボキシ末端において適切に保護されるヒスチジン断片の、適切な離脱基ＬＧを有したリンカーＳ３との第一のステップにおけるカップリングを含む。第一にグルタミン酸残基との、その後の葉酸残基とのその後のカップリングにより、脱保護した上で適切な放射性核種と複合体化できる最終の葉酸複合体が得られる。
【０１１９】
多くのカップリングステップのための適切な条件を選択すること、並びに、適切な保護基ＰＧ（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ，  Ｅｄｓ．，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  ２ｎｄ
Ｅｄ．，  １９９１，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  ＮＹを参照）及び離脱基ＬＧ（例えば、ハロゲン、トシ
レート、メシラート、トリフレート、カーボネート基）を選択することは、当業者にとって周知である。
【０１２０】
合成の第二の方法においては、葉酸又はプテロイン酸部分、及びリガンド部位部分を最初に合成し、ここで葉酸又はプテロイン酸部分はアジド基を有し、リガンド部位部分はアルキン基を有し（又はその逆）、その後、熱的条件下若しくは触媒の存在下で付加環化によりカップリングされ、最適な最終化合物を得る（Ｋｏｌｂ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ２００３，  ８，  １１２８；  Ｋｏｌｂ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  ２００１，  ４０，  ２００４；  Ｒｏｓｔｏｖｔｓｅｖ，  Ｖ．  Ｖ．  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．２００２，  ４１，  ２５９６；米国出願公開第２００５／０２２２２４２７号明細書；国際公開第０６／１１６６２９号）。
【０１２１】
これらの反応は、Ｈｕｉｓｇｅｎ  １，３−双極性環状付加（熱的条件）及びＣｌｉｃｋ反応（触媒条件）として周知であり、文献に記載されている（Ｋｏｌｂ  ａｎｄ  Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ２００３，  ８，  １１２８；  Ｋｏｌｂ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  ２００１，  ４０，  ２００４；  Ｒｏｓｔｏｖｔｓｅｖ  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．２００２，  ４１，  ２５９６；米国出願公開第２００５／０２２２２４２７号明細書；国際公開第０６／１１６６２９号）。より具体的には、、複素５員環が、アジドＲａ−Ｎ３のアルキンＲｂ−Ｃ≡Ｃ−Ｒｃとの環状付加により得られたトリアゾールである式Ｉの化合物であり、並びに、アジドＲａ−Ｎ３のシアン化物Ｒｂ−Ｃ≡Ｎとの環状付加により得られたトリアゾールである式Ｉの化合物である。すべての可能な組み合わせがここで意図され、例えば、Ｒａが葉酸誘導体、Ｒｂがキレート部位又はその前駆体、並びに、Ｒｂが葉酸誘導体、Ｒａがキレート部位又はそれら前駆体である場合などである。このように、反応のモジュールと多様な性質により、放射性同位体を葉酸へ結合させるための多くの種類のリンカーの使用が可能となる。
【０１２２】
ある特定の実施形態においては、環状付加は熱的条件、例えば１０〜２００℃、好ましくは１０〜１００℃の範囲の温度で行われる。
【０１２３】
別の実施形態においては、環状付加は、例えば遷移金属錯体（Ｒｕ及びＣｕ（Ｉ）など）の触媒存在下で行われる。好ましい触媒は、Ｃｕ（Ｉ）塩であり、例えば、塩化Ｃｕ（Ｉ）、臭化Ｃｕ（Ｉ）、沃化Ｃｕ（Ｉ）である。若しくは代わりに、Ｃｕ（Ｉ）は、Ｃｕ（ＩＩ）のその場還元（ｉｎ  ｓｉｔｕ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）により得ることができる。この反応は例えば、メタノール、エタノール、２−プロパノール、第３級ブタノール、ｎ−ブタノール、及び／又は水、又は、これらの緩衝液などの、プロトン性溶媒又は非プロトン性溶媒中で、広い温度範囲（例えば、１０〜１００℃、好ましくは室温）で、様々なｐＨで（例えば４〜１２）、酸化又は還元条件で、保護基の必要なしに他の官能基の存在下で、行うことができる。
【０１２４】
適切な条件を選択することは当業者にとり周知である（例えば、また、引例として本出願に組み込まれる米国出願公開第２００５／０２２２２４２７号明細書を参照）。
【０１２５】
したがって、ある反応例においては、アルキニル誘導体化キレート部位又はその前駆体（例えば、プロパルギルグリシン）は、標準的な条件下（例えば、アスコルビン酸ナトリウム、Ｃｕ（ＯＡｃ）２、ｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１）、室温）でアジド葉酸と結合する。その代わりに、標準的な条件下で、Ｃｕ（Ｉ）触媒による環状付加で、アジドにより官能化されたキレート部位又はその前駆体は、最適なアルキン置換葉酸又はその誘導体と結合する。その後、両方のクリック（ｃｌｉｃｋ）生成物は［９９ｍＴｃ（ＣＯ）３（Ｈ２Ｏ）３］＋により標識化され、ＳＰＥＣＴトレーサーを供給する。
【０１２６】
明らかに、両方のルートがあることで、異なるキレート部位（及び、それ故、放射性金属）と結合するための多くの種類のリンカーを葉酸に組み込むことができる。
具体的な実施形態については実施例の項で議論する。
【０１２７】
本発明は、本発明の化合物の標識化を含み、最初に本発明の化合物を得て、そして、一般的に還元剤の存在下で、上記で特定した放射性核種、好ましくはＴｃ−９９ｍ、Ｒｅ−１８６又はＲｅ−１８８と、化合物を反応させ本発明の化合物と放射性核種の間に金属キレート錯体を形成するステップを含む本発明の錯体の合成方法もさらに提供する。還元剤としては、周知の還元剤で良いが、亜ジチオン酸イオン又は錫イオンが好ましい。特定の実施形態においては、金属としてレニウムを含有した本発明の錯体の製造は、酸化状態が＋５〜＋７のレニウムを使用してなされると良い。レニウムがＲｅ（ＶＩＩ）状態の化合物の例としては、ＮａＲｅＯ４又はＫＲｅＯ４である。Ｒｅ（Ｖ）は、グルコン酸レニウム、グルコヘプタン酸レニウム、酒石酸レニウム、クエン酸レニウムとして利用可能である。レニウム錯体を形成することができる他のレニウム試薬もまた使用して良い。
【０１２８】
さらなる態様において、本発明は、画像診断量又は治療上の有効量の少なくとも一つの本発明の錯体、及びそのための薬学的に許容できるキャリアを含む医薬組成物を提供する。好ましい実施形態においては、医薬組成物は、Ｔｃ−９９ｍ、Ｒｅ−１８６又はＲｅ−１８８を含有する錯体を少なくとも一つ含む。
【０１２９】
ここで使用される薬学的に許容できるキャリアは、適切な用量で存在し、溶媒、分散媒、抗菌剤、抗真菌剤、等張剤、及び薬学的に許容できるこれらの類似物を含む。このような媒及び剤の使用は当分野で周知である。
【０１３０】
さらなる態様において、本発明は、画像診断又は放射線治療が必要な被験者に簡便に有効量投与するための本発明の錯体及び／又は医薬品組成物の使用を提供する。本発明の方法の被験者としては好ましくは動物又はヒトなどの哺乳類であり、好ましくはヒトである。
【０１３１】
このように、特定の実施形態においては、本発明は、葉酸レセプターが発現している細胞又は細胞集団の画像診断の方法を提供し、当該方法は、画像診断量の本発明の錯体又は組成物を少なくとも一つ投与し、そして、前記の細胞又は細胞集団の診断画像を得るステップを含む。
【０１３２】
本発明の錯体及び／又は組成物は、また、それを必要とする被験者の治療に有効な放射線治療剤として使用されても良い。
【０１３３】
このように、他の特定の実施形態においては、本発明は、それを必要とする被験者に少なくとも一つの本発明の錯体又は組成物を治療上の有効量投与し、そして、前記の少なくとも一つの本発明の錯体又は組成物が所望の組織に局在した後、組織に放射線照射し、所望の治療効果を得るステップを含む放射線治療方法を提供する。
【０１３４】
さらなる別の実施形態において、本発明は、それを必要とする被験者に少なくとも一つの本発明の錯体又は組成物を画像診断上又は治療上の有効量投与し、前記の少なくとも一つの本発明の錯体又は組成物が所望の組織に局在した後、組織に放射線照射し、前記組織の診断画像を得て治療の進行を追跡するステップを含む並行する画像診断と放射線治療の方法を提供する。
【０１３５】
少なくとも一つの本発明の錯体又は組成物により標識化された葉酸レセプターが発現する細胞又は組織（すなわち、腫瘍細胞と腫瘍組織）の画像は、放射線検出器、例えば、γ−放射線検出器で検出することができる。そのような手順は、シンチグラフィーを利用する。単一光子放射コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）などの断層撮影イメージングも、また、視覚化改善のために利用することができる。このような放射線検出器の選択と使用は、当分野の通常の技術を有するものの技術的範囲内である。それ故、投与される本発明の錯体又は組成物の画像診断量は、上記で述べた被験者の臓器又は他の部位の診断画像を得られるのに十分な量となるように選択されれば良い。投与される本発明の錯体又は組成物の治療上の有効量は、所望の放射線治療効果が得られるのに十分な量となるように選択されれば良い。より具体的には、治療上の有効量は、錯体が十分に癌に局在化し癌の成長又はサイズを停止及び／又は消失させるであろう少なくとも一つの本発明の錯体の量である。ここで示された癌の成長又はサイズは、本発明の方法又は他の周知の画像診断手順によりモニタすることができる。画像診断又は放射線治療のための投与量を決定する際、明らかに、最適な放射線核種、例えば、９９ｍＴｃ、１８６／１８８Ｒｅ、１１１Ｉｎ＋３、６７／６８Ｇａ＋３、９０Ｙ＋３、１０９Ｐｄ＋２、１０５Ｒｈ＋３、１７７Ｌｕ、６４／６７Ｃｕ、１６６Ｈｏ、２１３Ｂｉ、好ましくは、Ｔｃ−９９ｍ、Ｒｅ−１８６又はＲｅ−１８８の比放射能が考慮される。
【０１３６】
一般に、投与される単位用量は、約０．０１ｍＣｉ〜約３００ｍＣｉ、好ましくは１０  ｍＣｉ〜約２００ｍＣｉの放射能を有している。注入する溶液としては、好ましい単位投与量は、約０．０１ｍＬ〜約１０ｍＬである。例えば、静脈投与の後、放射線同位体で標識化した試薬を被験者に投与した後、必要であれば、数分から数時間又はもう少し長い時間内で、臓器又は腫瘍の生体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ）の画像形成を行うことができる。典型的には、投与された用量のうち十分な量が蓄積し、約０．１〜１時間以内に画像形成される。
【０１３７】
本発明の錯体及び／又は組成物は、適切な手段、例えば、非経口的により（例えば、静脈内投与）、筋肉注射で、若しくは腹腔内に、又はあらゆる他の適切な方法により投与されれば良い。例えば、本発明の錯体及び／又は組成物は、ボーラス投与又は注入速度が遅い静脈注射により被験者に投与すれば良い。注入のための適切な形態としては、上記に述べた本発明の錯体及び／又は組成物の消毒された水性溶液又は分散体及び無消毒された粉末が挙げられる。
【０１３８】
錯体又は医薬組成物は消毒されていることが好ましい。消毒は慣用技術のあらゆる方法で行うことができ、これに制限されないが、抗菌の抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサール及びその類似物などの添加が挙げられる。
【０１３９】
本発明の錯体及び／又は組成物は、また、被験者から取得した組織生検において葉酸レセプターが発現している細胞の、生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）の検知に使用されても良い。それ故、さらなる実施形態において、本発明は、本発明の錯体及び／又は組成物を有効量で十分な時間と条件で組織サンプルと接触させ、結合を生じさせ、画像形成技術によりその結合を検知することを含む、組織サンプル中の葉酸レセプターを発現している細胞、例えば、腫瘍細胞を、生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で検出する方法を提供する。
【０１４０】
サンプルは、当業者に周知の手順、例えば、組織生検又は体液からの単離、気管吸引、又は肺サンプル、及びその類似手順により、単離することができる。
【０１４１】
試験される組織サンプルは、葉酸レセプターが発現する細胞を含有すると疑われるあらゆる組織が挙げられ、例えば、腫瘍細胞、上皮細胞、腎臓、胃腸又は肝胆道系などである。サンプルは、例えば、薄切により、断片化することができ、顕微鏡検査と結合した錯体の観察を促進する。また、本発明の錯体又は組成物とのインキュベーションの前又は後に、サンプルを適切な固定剤により固定することもでき、これによりサンプル組織の組織学的特質が改善される。
【０１４２】
細胞上での本発明の錯体の葉酸レセプターへの結合に十分な時間と条件としては、標準的な組織培養条件、すなわち、生理学的媒体中で本発明の錯体又は組成物の一つと共に、サンプルを生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）で培養させ、インキュベートさせる。このような条件は、当業者に周知である。その代わりに、サンプルを固定することができ、その後、等張性又は生理学的緩衝液中で本発明の錯体又は組成物とインキュベートさせる。
【０１４３】
腫瘍細胞の生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）検知のための前記の本発明の錯体の典型的な量は、約１ｎｇ／ｌ〜約１０００μｇ／ｌの範囲とすることができる。好ましい量としては、約１μｇ／ｌ〜約１００μｇ／ｌである。腫瘍細胞の生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）診断に使用される好ましい錯体は、生体内用と同様のもの、及び、９９ｍＴｃ、８６／１８８Ｒｅ、１１１Ｉｎ＋３、６７／６８Ｇａ＋３、９０Ｙ＋３、１０９Ｐｄ＋２、１０５Ｒｈ＋３、１７７Ｌｕ、６４／６７Ｃｕ、１６６Ｈｏ、２１３Ｂｉが挙げられ、好ましくは、Ｔｃ−９９ｍ、Ｒｅ−１８６又はＲｅ−１８８である。
【０１４４】
存在する化合物の一つの細胞結合を検知するためには、サンプルを、選択された錯体の存在中でインキュベートすることができ、その後、洗浄し、その後、シンチレーション・カウンタでカウントする。代わりとなる方法は適用され、それは当業者に周知である。
【０１４５】
診断又は放射線治療用途のためには、それが使用される部位又はその近くで本発明の錯体を製造すると都合が良い。したがって、さらなる態様において、本発明は、本発明の錯体又は組成物の製造に必要な組成であって放射性核種それ自体以外のすべてを含むシングルバイアルキット又はマルチバイアルキットを提供する。したがって、好ましい本発明のシングルバイアルキットは、本発明の化合物及び薬学的に許容できる還元剤の供給源、例えば、錫塩などを含む。さらに、任意に、キットはさらに添加剤を含む。例えば、キットは、薬学的に許容できる酸又は塩基により緩衝化され、ｐＨが錯体形成に必要な値に調整される。このようなシングルバイアルキットは、任意に、交換リガンド、例えば、グルコヘプタン酸、グルコン酸、マンニトール、マレイン酸、クエン酸又は酒石酸を含んでも良く、そして、又は、反応修飾剤、例えば、ジエチレントリアミンペンタ酢酸又はエチレンジアミンテトラ酢酸もまた含んでも良い。さらなる添加剤、例えば、可溶化剤（例えば、シクロデキストリン）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸）及び／又はフィラー（例えば、ＮａＣｌ）が使用されても良く、これにより、最終生成物の放射化学的純度及び安定性が改善され、キットの生産を補助することとなる。放射性核種、例えば、Ｔｃ又はＲｅは、溶液の形態、例えば、過テクネチウム酸又は過レニウム酸溶液で別に添加される。
【０１４６】
好ましい本発明のマルチバイアルキットは、一つのバイアル中に、放射性核種それ自体以外の不安定な放射性核種錯体の製造に必要な組成、すなわち、交換リガンド及び薬学的に許容できる還元剤、例えば、錫塩などを含む。本発明の化合物は、第二のバイアル中に、任意の添加剤、例えば、ｐＨを適切な値に調整するのに適当な緩衝液と共に、含まれる。任意に、放射性核種は、添加される溶液の形態で与えられる、例えば、過テクネチウム酸又は過レニウム酸溶液である。
【０１４７】
キットのすべての組成は、液体形態、凍結状態又は乾燥形態で良い。好ましい実施形態においては、キットの組成は凍結乾燥形態で提供される。
【０１４８】
ここで開示され請求された化合物、錯体（複合体）、組成物及び／又は方法のすべては、本発明の開示の範囲内で必要以上の実験をすることなしに作成され実施されることができる。本発明の範囲を逸脱することなく、本発明に変形を加えても良いことは当業者にとって明白である。ここで与えられる実施例は網羅することでなく例示を意図したものである；したがって、ここに示された実施例により本は発明を如何なる方法であっても制限するべきではない。
【実施例】
【０１４９】
材料と方法
融点はＢｕｃｈｉ−５３５装置で測定し、補正を行っていない。赤外スペクトルは、Ｊａｓｃｏ製のＦＴ／ＩＲ−６２００  ＡＴＲ−ＩＲに記録した。核磁気共鳴スペクトルは内部標準として対応する溶媒と共に、Ｂｒｕｋｅｒ製の３００ＭＨｚ、４００ＭＨｚ又は５００ＭＨｚのスペクトロメータにより記録した。化学シフトδは、テトラメチルシラン（０．００ｐｐｍ）に対して百万分の一（ｐｐｍ）で記録した。結合定数の値ｎＪは、ヘルツ（Ｈｚ）で与えられ；１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示すために実施例の項では以下の記号が使用される：一重線（ｓ）、ブロード一重線（ｂｓ）、二重線（ｄ）、三重線（ｔ）、多重線（ｍ）、二重線の二重線（ｄｄ）。複雑な多重線の化学シフトについては、その多重線の範囲として与えられる。低分解能質量スペクトル（ＬＲ−ＭＳ）は、Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  Ｑｕａｔｔｒｏ  ｍｉｃｒｏ（登録商標）ＡＰＩ  ＬＣ−ＥＳＩで記録し、高分解能質量スペクトル（ＨＲ−ＭＳ）は、Ｂｒｕｋｅｒ製のＦＴＭＳ４．７Ｔ  ＢｉｏＡＰＥＸＩＩ（ＥＳＩ）で記録した。
【０１５０】
すべての水に鋭敏な反応は、炎熱乾燥させたガラス製品中でアルゴン雰囲気中で行った。反応は薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ、シリカゲル６０  Ｆ−２５４がプレコートされたガラスでサポートされたプレートであるＥＭ  Ｓｃｉｅｎｃｅ０．２５ｍｍ厚さ上で行った）又はＨＰＬＣでモニタした。ＨＰＬＣは、調整可能な吸収検出器Ｌ−７４００を備えたＭｅｒｃｋ−ＨｉｔａｃｈｉのＬ−７０００システムで行った。ＨＰＬＣ分析のために以下のシステムを使用した：ＨＰＬＣシステム１：ＸＢｒｉｄｇｅ（登録商標）カラム（Ｃ１８、５μｍ、４．６ｘ１５０ｍｍ、水）；０．１％ＴＦＡａｑ（溶媒Ａ）、アセトニトリル（溶媒Ｂ）、１ｍＬ／分；０〜１分、９５％Ａ；１〜１５分、９５→５％Ａ；１５〜２０分、５％Ａ；２０→２２分、５→９５％Ａ；２２→２５分、９５％Ａ；ＨＰＬＣシステム２：ＸＴｅｒｒａ（登録商標）カラム（ＭＳＣ１８、５μｍ、４．６ｘ１５０ｍｍ、水）；０〜１５分５→８０％Ｂ；１５〜２０分９５％Ｂ。セミプレップＨＰＬＣ（Ｓｅｍｉｐｒｅｐ  ＨＰＬＣ）は、個々の実験の項で示す溶媒系を使用して、ＸＢｒｉｄｇｅカラム（Ｃ１８、５μｍ、１０ｘ１５０ｍｍ、水）で行った。
【０１５１】
［Ｒｅ（Ｂｒ）３（ＣＯ）３］［Ｅｔ４Ｎ］２は、ＡｌｂｅｒｔｏらのＪ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｄａｌｔｏｎ．  Ｔｒａｎｓ．  １９９４，  ２８１５に従い製造した。［９９ｍＴｃ（Ｈ２Ｏ）３（ＣＯ）３］＋は、Ａｌｂｅｒｔｏ  らのＪ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ２００１，  １２３，  ３１３５に従い製造した。
【０１５２】
［Ｎａ］［９９ｍＴｃＯ４］は、９９Ｍｏ／９９ｍＴｃ−発生器（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ−Ｔｙｃｏ、Ｐｅｔｔｅｎ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）より０．９  ％生理食塩水と共に溶出させた。前駆体［１８８Ｔｃ（ＯＨ２）３（ＣＯ）３］＋は、Ｉｓｏｌｉｎｋ（登録商標）キット（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ−Ｔｙｃｏ、Ｐｅｔｔｅｎ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を使用して合成した。生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）の研究及び生体内分布の実験には、最大の比放射能を得るために、ＨＰＬＣを使用して、標識化されていない葉酸リガンドから放射性葉酸を単離した。精製していない錯体をＳＰＥＣＴ／ＣＴの研究に使用した。
【０１５３】
実施例１：Ｐｔｅ−Ｇｌｕ（Ｈ−Ｈｉｓ（ｔ−（４−Ｎ−ブチル））−ＯＨ）−ＯＨ（５−（４−（４−（２−アミノ−２−カルボキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ブチルアミノ）−２−（４−（（２−アミノ−４−オキソ−３，４−ジヒドロプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−５−オキソペンタン酸）の合成
（ａ）Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ（４−ＮＨ２Ｂｕ））−ＯＭｅの合成
１−アジド−４−クロロブタンは、Ｙａｏ，  Ｌ．  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ２００４，  ６９，  １７２０をベースとし修正し、合成した。そこで、７．８７ｇ（１２１ｍｍｏｌ）のＮａＮ３をアルゴン雰囲気下で２２０ｍｌのジオキサンに懸濁させた。懸濁液に、１８．８６ｇの１−ブロモ−４−クロロブタンを添加し、混合物を室温で１８時間攪拌した。５５０ｍｌの水を添加した後、３３０ｍｌのジエチルエーテルで混合物を２回抽出した。合わせたエーテル抽出物を、３３０ｍｌの水及び３３０ｍｌ塩化ナトリウム水溶液（１０％）で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濃縮し、１４．１１ｇの黄白色の油分として、１−アジド−４−クロロブタンを約９５％の純度で得た。（１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ＝  １．６５〜１．９５（ｍ、Ｃ（２）Ｈ２、Ｃ（３）Ｈ２、４Ｈ）；３．３３（ｔ、３Ｊ＝３．３、Ｃ（１）Ｈ２、２Ｈ）；３．５７（ｔ、３Ｊ＝６．２、Ｃ（４）Ｈ２、２Ｈ）。
【０１５４】
５０ｍｌアセトン中の２４．２４ｇ（９０ｍｍｏｌ、１．０当量）Ｂｏｃ−Ｈｉｓ−ＯＭｅ（Ｂａｃｈｅｍより購入）のアルゴン雰囲気下の懸濁液に、１３．６８ｇの（９９ｍｍｏｌ、１．１当量）炭酸カリウム、１３．２２ｇの（９９ｍｍｏｌ、１．１当量）１−アジド−４−クロロブタン及び３．７５ｇの（２５ｍｍｏｌ、０．２８当量）ヨウ化ナトリウムを添加し、ＴＬＣが完全な変換を示すまで、混合物を加熱し還流した（ＴＬＣ：ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール／９：１、Ｒｆ（生成物）＝０．５８、Ｒｆ（出発物質）＝０．３７）。二日後、約８５％の出発物質が消費された。生成物はクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、酢酸エチル／ｎ−ヘキサン／４：１）で単離し、１１．７４ｇのＢｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ（４−Ｎ３Ｂｕ））−ＯＭｅを黄茶色の樹脂として得た（１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ＝１．４４（ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３、９Ｈ）；１．５〜１．６（ｍ、ＣＢｕ（３）Ｈ２、２Ｈ）；１．８〜１．９（ｍ、ＣＢｕ（２）Ｈ２、２Ｈ）；３．００（ｄｄ、２Ｊ＝１４．４、３Ｊ＝４．７、Ｃβ−ＨｉｓＨＡ、１Ｈ）；３．０８（ｄｄ、２Ｊ＝１４．８；３Ｊ＝５．５、Ｃβ−ＨｉｓＨＢ、１Ｈ）；３．３１（ｔ．３Ｊ＝６．６、Ｎ３ＣＢｕ（４）Ｈ２、２Ｈ）；３．７０（ｓ、ＣＨ３、３Ｈ）；３．９０（ｔ、３Ｊ＝７．０、ＣＢｕ（１）Ｈ２、２Ｈ）；４．５３（ｄｄｄ、Ｃα−ＨｉｓＨ、１Ｈ）；５．９９（ｄ、３Ｊ＝８．２、ＮＨ、１Ｈ）；６．６８（ｓ、Ｃｉｍ（５）Ｈ、１Ｈ）；７．３７（ｓ、Ｃｉｍ（２）Ｈ、１Ｈ））。
【０１５５】
３２０ｍｌテトラヒドロフラン中の１１．７３ｇ（３２ｍｍｏｌ、１．０当量）の上記で得られた中間体Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ（４−Ｎ３Ｂｕ））−ＯＭｅのアルゴン雰囲気下の溶液に、１０．４９ｇ（４０ｍｍｏｌ、１．２５当量）のトリフェニルホスフィンを添加した。混合物を室温で１９時間攪拌した。３２ｍｌの水を添加した後、さらに４時間攪拌し、真空下で混合物を濃縮し、約５０％のトリフェニルホスフィンオキシドを含有した黄色がかった樹脂として、２１．７０ｇの所望の複素環リガンド部位のＢｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ（４−ＮＨ２Ｂｕ））−ＯＭｅが得られた。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ＝  １．４３（ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３、９Ｈ）；１．４〜１．５５（ｍ、ＣＢｕ（３）Ｈ２、２Ｈ）；１．７−１．９（ｍ、ＣＢｕ（２）Ｈ２、２Ｈ）；）；２．６９（ｔ、３Ｊ＝６．９、ＣＢｕ（４）Ｈ２、２Ｈ）；３．００（ｄｄ、Ｃβ−ＨｉｓＨＡ、１Ｈ）；３．０８（ｄｄ、Ｃβ−ＨｉｓＨＢ、１Ｈ）；３．７０（ｓ、ＣＨ３、３Ｈ）；３．８８（ｔ、３Ｊ＝７．０、ＣＢｕ（１）Ｈ２、２Ｈ）；４．５２（ｄｄｄ、Ｃα−ＨｉｓＨ、１Ｈ）；５．９５（ｄ、３Ｊ＝７．９、ＮＨ、１Ｈ）；６．６７（ｓ、Ｃｉｍ（５）Ｈ、１Ｈ）；７．２０〜７．７５（ｓ、Ｃｉｍ（２）Ｈ、１Ｈ）。
トリフェニルホスフィン酸化物：δ＝７．２０−７．７５（ｍ、Ｐｈ３）。
【０１５６】
（ｂ）Ｈ−Ｇｌｕ（ＮＨ（Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ−Ｂｕ−４−イル）ＯＭｅ）−ＯｔＢｕの合成
４０ｍｌのモノグリム（１，２−ジメトキシエタン）中の４．２６ｇ（１０ｍｍｏｌ、１．０当量）Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（Ｂａｃｈｅｍより購入）溶液に、１．３８ｇ（１２ｍｍｏｌ、１．２当量）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドを添加した。混合物を５℃に冷却し、２．４８ｇ（１２ｍｍｏｌ、１．２当量）のＮ，Ｎ’−ジシクロへキシル−カルボジイミド（ＤＣＣ）を添加した。室温で２２時間攪拌の後、すべての出発物質が消費され（ＴＬＣ、ＳｉＯ２、酢酸エチル／ヘキサン／１：１、Ｒｆ生成物＝０．４３、Ｒｆ出発物質＝０．３５）、次のステップに直接的に使用する溶液が形成された。
【０１５７】
次に、上記で得られた４０ｍｌのモノグリム（１，２−ジメトキシエタン）中のＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＳｕ）−ＯｔＢｕの溶液に、６．８８ｇ（１０ｍｍｏｌ、純度〜５０％、１．０当量）のＢｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ（４−ＮＨ２Ｂｕ））−ＯＭｅ（ステップ（ａ）を参照）を添加した。大気温度中で２時間攪拌した後、混合物を約１５ｇまで濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール／２５：１、ＴＬＣ、ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール９：１、Ｒｆ生成物＝０．４６、Ｒｆ出発物質＝０．０５）で生成物を精製し、黄色がかった発泡体として、２．２９ｇのＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＮＨ（Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ−Ｂｕ−４−イル）ＯＭｅ）−ＯｔＢｕが得られた。（１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ＝１．３９（ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３、９Ｈ）；１．３〜１．５（ｍ、ＣＢｕ（３）Ｈ２、２Ｈ）；１．４４  （ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３、９Ｈ）；１．６３〜１．７５（ｍ、ＣＢｕ（２）Ｈ２、２Ｈ）；１．８５〜１．９５（ｍ、Ｃβ−ＧｌｕＨＡ、１Ｈ）；２．１〜２．３（ｍ、Ｃβ−ＧｌｕＨＢ、１Ｈ）；２．２４（ｍ、Ｃγ−ＧｌｕＨ２、２Ｈ）；２．９７（２ｄｄ、Ｃβ−ＨｉｓＨ２、２Ｈ）；３．１〜３．３（ｍ、ＣＢｕ（４）Ｈ２、２Ｈ）；３．６４（ｓ、ＣＨ３、３Ｈ）；３．７９（ｔ、ＣＢｕ（１）Ｈ２、２Ｈ）；４．１〜４．２５（ｔ、Ｃα−ＧｌｕＨ；ｔ、Ｃβ−ＦｍｏｃＨ、２Ｈ）；４．２５〜４．４５（ｍ、Ｃα−ＦｍｏｃＨ２、２Ｈ）；４．５２（ｑ、Ｃα−ＨｉｓＨ、１Ｈ）；５．８２（ｄ、３Ｊ＝７．６、Ｎα−ＧｌｕＨ、１Ｈ）；５．９５（ｄ、３Ｊ＝８．１、Ｎα−ＨｉｓＨ、１Ｈ）；６．３６（ｓ、Ｎγ−ＧｌｕＨ、１Ｈ）；６．６１（ｓ、Ｃｉｍ（５）Ｈ、１Ｈ）；７．２０〜７．３０（ｓ、Ｃｉｍ（２）Ｈ、１Ｈ）；７．２０〜７．８０（ｍ、ＣＦｍｏｃＨ８、８Ｈ）））。
【０１５８】
２．２９ｇ（３．０６ｍｍｏｌ、１．０当量）のＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＮＨ（Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ−Ｂｕ−４−イル）ＯＭｅ）−ＯｔＢｕと５０ｍｌジクロロメタンの混合物に、３．０ｍｌのピペリジンを添加した。室温で３時間攪拌した後、フラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール４：１、ＴＬＣ、ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール９：１、Ｒｆ生成物＝０．２０、Ｒｆ出発物質＝０．５１）で生成物を精製し、ピンク色の発泡体として、８９２ｍｇのＨ−Ｇｌｕ（ＮＨ（Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ−Ｂｕ−４−イル）ＯＭｅ）−ＯｔＢｕを得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ＝１．４２（ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３）；１．３５〜１．５５（ｍ、ＣＢｕ（３）Ｈ２）；１．４６（ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３）；１．７５〜１．９（ｍ、ＣＢｕ（２）Ｈ２；ｍ、Ｃｂ−ＧｌｕＨＡ）；２．０５〜２．２（ｍ、Ｃβ−ＧｌｕＨＢ）；２．３５（”ｔ”、Ｃγ−ＧｌｕＨ２）；２．９５〜３．１（２ｄｄ、Ｃβ−ＨｉｓＨ２）；３．２２（ｑ、ＣＢｕ（４）Ｈ２）；３．４１（”ｄｄ”、Ｃα−ＧｌｕＨ）；３．６７（ｓ、ＣＨ３）；３．９０（ｔ、ＣＢｕ（１）Ｈ２）；４．５３（ｄｄｄ、Ｃα−ＨｉｓＨ）；５．９４（ｄ、３Ｊ＝８．４、Ｎα−ＨｉｓＨ）；６．６５〜６．７（ｓ、ＮＨ；ｓ、Ｃｉｍ（５）Ｈ）；７．４２（ｓ、Ｃｉｍ（２）Ｈ）．
【０１５９】
（ｃ）Ｐｔｅ−Ｇｌｕ（Ｈ−Ｈｉｓ（ｔ−（４−Ｎ−ブチル））−ＯＨ）−ＯＨ（５−（４−（４−（２−アミノ−２−カルボキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ブチルアミノ）−２−（４−（（２−アミノ−４−オキソ−３，４−ジヒドロプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−５−オキソペンタン酸）の合成
２５．３ｇのプテロイン酸と１１７５ｍｌのギ酸の混合物を３時間還流した。室温まで冷却した後、２３５０ｍｌのメチル−ｔｅｒｔ．ブチルエーテルを添加した。結果として生じた懸濁液を室温で２時間攪拌し、沈殿物を濾別し、１６００ｍｌの水で洗浄し、真空下４０℃で乾燥させ、２７．２８ｇの１０−ホルミルプテロイン酸を得た。（１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ＝１２．９０（ｂｓ、ＣＯＯＨ、１Ｈ）；１１．４０（ｂｓ、Ｎ（３）Ｈ、１Ｈ）；８．８５（ｓ、ＣＨＯ、１Ｈ）；８．６５（ｓ、Ｃ（７）Ｈ、１Ｈ）；７．９５（ｄ、Ｐｈ、２Ｈ）；７．５６（ｄ、Ｐｈ、２Ｈ）；６．９０  （ｂｓ、ＮＨ２、２Ｈ））．
【０１６０】
１２８ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルミアミド中の上記で得られた８．５ｇの１０−ホルミルプテロイン酸の懸濁液に、５２ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルミアミド−ジイソプロピルアセタールを添加した。混合物を室温で１８時間攪拌した。形成された沈殿物は濾別し、４ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホルミアミドと５０ｍｌのアセトンで洗浄し、４０℃、真空下で乾燥させ、８．７ｇの保護されたＮ２，Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミルプテロイン酸を得た（１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６＋Ｄ２Ｏ）：δ  ＝８．７０（ｓ、ＣＨＮ、１Ｈ）；８．６３（ｓ、Ｃ（７）−Ｈ、ＣＨＯ、２Ｈ）；７．８１（ｄ、Ｐｈ、２Ｈ）；７．３０（ｄ、Ｐｈ、２Ｈ）；５．１８（Ｃ（６）ＣＨ２、２Ｈ）；３．１９（ｓ、ＮＣＨ３、３Ｈ）；３．０８（ｓ、ＮＣＨ３，３Ｈ））。
【０１６１】
３ｍｌのテトラヒドロフラン中の３９１ｍｇ（０．９０ｍｍｏｌ、１．０当量）の上記で得られたＮ２，Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミル−プテロイン酸の、アルゴン雰囲気下の溶液に、Ｋｕｎｉｓｈｉｍａ  ｅｔ  ａｌ，  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ４０，  ５３２７−５３３０，  １９９９に従って合成した２７４ｍｇ（０．９９ｍｍｏｌ、１．１当量）のＤＭＴＭＭ（４−（４，６−ジメトキシ［１，３，５］トリアジン−２−イル）−４−メチル−モリホニウムクロライドと、４７３ｍｇ（０．９９ｍｍｏｌ、１．１当量）のＨ−Ｇｌｕ（ＮＨ（Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ−Ｂｕ−４−イル）ＯＭｅ）−ＯｔＢｕ（ステップ（ｂ）を参照）を添加した。懸濁液を室温で３時間攪拌し、その後、真空下で約１．５ｇまで濃縮した。２ｍｌの水を添加した後、遠心分離により溶液から分離し、沈殿物を形成した。沈殿物を０．５ｍｌの水に再懸濁し、遠心分離で分離し、真空下で乾燥させ、黄色の発泡体として、５２６ｍｇのＮ２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミル−Ｐｔｅ−Ｇｌｕ（ＮＨ（Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ−Ｂｕ−４−イル）ＯＭｅ）−ＯｔＢｕを得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ＝１．３９（ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３）；１．３〜１．４５（ｍ、ＣＢｕ（３）Ｈ２）；１．４６（ｓ、Ｃ（ＣＨ３）３）；〜１．７〜１．８（ｍ、ＣＢｕ（２）Ｈ２）；１．８〜１．９（ｍ、Ｃβ−ＧｌｕＨＡ）；２．１〜２．４（ｍ、Ｃβ−ＧｌｕＨＢ；ｍ、Ｃγ−ＧｌｕＨ２）；２．９５〜３．０５（２ｄｄ、Ｃβ−ＨｉｓＨ２）；３．１４（ｓ、ＣＤＭＡＭＨ３Ａ）；３．２２（ｓ、ＣＤＭＡＭＨ３Ｂ）；３．２〜３．３（ｍ、ＣＢｕ（４）Ｈ２）；３．６９（ｓ、ＣＨ３）；３．８〜３．９（ｍ、ＣＢｕ（１）Ｈ２）；４．４〜４．６（ｍ、Ｃα−ＨｉｓＨ；ｍ、Ｃα−ＧｌｕＨ）；５．２９（ｓ、ＣＰｔｅ（９）Ｈ２）；５．６０（ｄ、ＮＨ）；５．９４（ｄ、ＮＨ）；６．７０（ｓ、Ｃｉｍ（５）Ｈ）；６．９５（ｓ、ＮＨ）；７．４０（ｄ、３Ｊ＝８．６、２ｘＣＰｔｅ（５’）Ｈ）；７．４８（ｓ、Ｃｉｍ（２）Ｈ）；７．８７（ｄ、３Ｊ＝８．６、２ｘＣＰｔｅ（６’）Ｈ）；８．７０（ｓ、ＣＤＭＡＭＨ）；８．８０（ｓ、ＣＦｏｒＨ）；８．９３（ｓ、ＣＰｔｅ（７）Ｈ）．
【０１６２】
２００ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ、１当量）の上記で得られたＮ２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミル−Ｐｔｅ−Ｇｌｕ（ＮＨ（Ｂｏｃ−Ｈｉｓ（ｔ−Ｂｕ−４−イル）ＯＭｅ）−ＯｔＢｕに２２ｍｌの１ＭのＨＣｌを添加した。混合物を５０℃で２時間攪拌した。約１５℃に冷却した後、１．７６ｇの固体水酸化ナトリウムを添加した。室温で、１時間攪拌した後、ｐＨをギ酸の添加によりｐＨ＝２．５に調整した。逆相中圧液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＭＰＬＣ、固相：Ｅｕｒｏｐｒｅｐ６０−６０Ｃ−１８；６０Ａ；３５−７０μｍ、１４０ｇ；３６ｃｍｘ２６ｍｍ、液相：０−１０分、９９．９％Ｈ２Ｏ、０．１％ＨＣＯＯＨ、１０〜４０分、３４．９％ＭｅＯＨ、６５％Ｈ２Ｏ、０．１％ＨＣＯＯＨ）により生成物を単離し、黄色がかった樹脂として１２０ｇのＰｔｅ−Ｇｌｕ（Ｈ−Ｈｉｓ（ｔ−（４−Ｎ−ブチル））−ＯＨ）−ＯＨを得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ２Ｏ及びＤ２ＳＯ４、ｃａｌ．：δ（Ｈ２Ｏ）＝４．７９）：δ＝０．４〜０．６（ｍ、ＣＢｕ（３）Ｈ２）；０．７５〜０．９（ｍ、ＣＢｕ（２）Ｈ２）；〜１．１〜１．２５（ｍ、Ｃβ−ＧｌｕＨＡ）；１．２５〜１．４（ｍ、Ｃβ−ＧｌｕＨＢ）；１．５０（ｔ、３Ｊ＝７．１、Ｃγ−ＧｌｕＨ２）；２．１〜２．３（ｍ、ＣＢｕ（４）Ｈ２）；２．４５（２ｄｄ、Ｃβ−ＨｉｓＨ２）；３．１〜３．３（ｔ、ＣＢｕ（１）Ｈ２）；３．４〜３．５（ｔ、Ｃα−ＨｉｓＨ）；３．５〜３．６（ｑ、３ＪＥ＝４．６、３ＪＺ＝９．４４、Ｃα−ＧｌｕＨ）；４．０８（ｓ、ＣＰｔｅ（９）Ｈ２）；〜６．４９（ｓ、Ｃｉｍ（５）Ｈ）；６．６５（ｄ、３Ｊ＝６．７、２ｘＣＰｔｅ（５’）Ｈ）；６．９５（ｄ、３Ｊ＝６．１、２ｘＣＰｔｅ（６’）Ｈ）；７．６８（ｓ、Ｃｉｍ（２）Ｈ）；７．８３（ｓ、ＣＰｔｅ（７）Ｈ）。
【０１６３】
実施例２：Ｒｅ（ＣＯ）３−Ｈｉｓ−葉酸錯体の合成
実施例１で得られたＰｔｅ−Ｇｌｕ（Ｈ−Ｈｉｓ（ｔ−（４−Ｎ−ブチル））−ＯＨ）−ＯＨ（５−（４−（４−（２−アミノ−２−カルボキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ブチルアミノ）−２−（４−（（２−アミノ−４−オキソ−３，４−ジヒドロプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−５−オキソペンタン酸）（１５．０ｍｇ、２３μｍｏｌ）と、［Ｒｅ（Ｂｒ）３（ＣＯ）３］［Ｅｔ４Ｎ］２（２０．０ｍｇ、２６μｍｏｌ）をＨ２Ｏ／ＭｅＯＨ（４ｍＬ、１：１）中に懸濁し、ｐＨを希釈ＮａＨＣＯ３でｐＨ８に調整した。ＨＰＬＣで出発物質が完全に変換していると示されるまで、その結果生じた黄色の溶液を５０℃で１．５時間攪拌した。混合物を室温まで冷却し、希釈ＨＣｌ（０．１Ｍ）を添加してｐＨを２〜３に調整した。沈殿物を遠心分離（１０分、３５００ｒｐｍ）により単離し、減圧下で乾燥させ、茶色固体としてＲｅ−錯体（５）を得たＨＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝９２０．２１３１（計算値、Ｃ３２Ｈ３５Ｎ１１Ｏ１０Ｒｅ：  ９２０．２１２６）、ＨＰＬＣ純度：＞７０％。
【０１６４】
実施例３：９９ｍＴｃ（ＣＯ）３−Ｈｉｓ−葉酸錯体の合成
実施例２と同じく、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中の実施例１で得られたＰｔｅ−Ｇｌｕ（Ｈ−Ｈｉｓ（ｔ−（４−Ｎ−ブチル））−ＯＨ）−ＯＨ（５−（４−（４−（２−アミノ−２−カルボキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ブチルアミノ）−２−（４−（（２−アミノ−４−オキソ−３，４−ジヒドロプテリジン−６−イル）メチルアミノ）ベンズアミド）−５−オキソペンタン酸）の原液を［Ｎａ］［９９ｍＴｃＯ４］に添加し、９９ｍＴｃ（ＣＯ）３−Ｈｉｓ−葉酸を製造し、最終濃度１０−５Ｍとなった。密閉反応バイアルを６０分、１００℃で加熱し、対応物を良好な収率（＞９８％）で形成した。
【０１６５】
実施例４：トリアゾール−葉酸の合成
ａ）４−アジド−ブタン−アミンの合成
Ｂｏｃ保護された中間体アジド（０．４２ｇ、２．０ｍｍｏｌ；  Ｌｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ  Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ２００４，  １２６，  １０５９８に従い製造した）を、ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、１．０ｍＬ）を添加した。混合物を室温で一晩放置し、その後、減圧下で濃縮し、無色の油分として、アジド−アミンに対応するアミンのＴＦＡ塩を生じた（４５０ｍｇ、定量的）：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝８．１９〜７．８０（ｂｓ、３Ｈ）、４．７６〜４．５０（ｂｓ、１Ｈ）、３．３２（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．５）、３．３０〜２．９２（ｍ、２Ｈ）、１．８１〜１．７０（ｍ、２Ｈ）、１．７０〜１．５８（ｍ、２Ｈ）；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝１１５．１０（計算値Ｃ４Ｈ１０Ｎ４：１１４．１５）。
【０１６６】
ｂ）Ｇｌｕ（４−アジド−ブチルアミド）ＯＭｅの合成
アルゴン雰囲気下、炎熱乾燥させたフラスコ中で、乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ、４Ａを超える分子篩）中に、ＢｏｃＧｌｕＯＭｅ（２６１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を溶解させ、そして、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５当量）を添加した。ＨＢＴＵ（３８０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、混合物を半時間攪拌した。活性化された酸の溶液を、カニューレを介して、０℃で、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５当量）を含有する乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）中のａ）で得られたアジド−アミンＴＦＡ塩（２２８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の溶液に移した。２時間後、混合物を室温に暖め、一晩中攪拌した。減圧下で揮発性成分を除去し、残留物をシリカゲル上でＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（６０：１→３０：１）によるフラッシュクロマトグラフィーで精製し、無色の油分として対応するＢｏｃ保護されたアミド生成物を得た（３３０ｍｇ、９２％）：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝６．３２〜６．１９（ｂｓ、１Ｈ）、５．３５〜５．２４（ｂｓ、１Ｈ）、４．３０〜４．２１（ｍ，１Ｈ）、３．７２（ｓ，３Ｈ），３．３５〜３．２１（ｍ，４Ｈ）、２．２４（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８）、２．２１〜２．１０（ｍ，１Ｈ）、１９５〜１．８０（ｍ，１Ｈ）、１．６７〜１．５２（ｍ，４Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３５８．２０（計算値Ｃ１５Ｈ２７Ｎ５Ｏ５：３５７．４１）。
【０１６７】
上記で得られたＢｏｃ保護された中間体（０．７２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に溶解させ、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、１．５ｍＬ）を添加した。混合物を室温で一晩中放置し、その後、減圧下で濃縮し、黄白色の油分として対応するアミンのＴＦＡ塩を得た（７４０ｍｇ、定量的）：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝１０．１５〜８．６０（ｂｓ、３Ｈ）、６．７４（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．６）、４．１４（ｄｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．７及び３．７）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、３．３１〜３．２６（ｍ、２Ｈ）、３．２５〜３．１８（ｍ、２Ｈ）、２．５９〜２．４５（ｍ、２Ｈ）、２．３８〜２．２７（ｍ、１Ｈ）、２．２４〜２．１３（ｍ、１Ｈ）、１．６３〜１．５０（ｍ、４Ｈ）；ＬＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝２５８．２３（計算値Ｃ１０Ｈ１９Ｎ５Ｏ３：２５７．２９）。
【０１６８】
ｃ）保護されたａ−（４−アジド−ブタノイル）−葉酸アミドの合成
アルゴン雰囲気下、炎熱乾燥させたフラスコ中で、乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ、４Ａを超える分子篩）中に、Ｎ２−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチレン−１０−ホルミル−プテロイン酸（１９８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を懸濁させ、そして、Ｅｔ３Ｎ（１０４μＬ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加した。ＨＢＴＵ（３８０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、混合物を１時間攪拌した。結果として生じたオレンジ色の溶液に、０℃で、Ｅｔ３Ｎ（２１０μＬ、１．５ｍｍｍｏｌ）を含有する乾燥ＤＭＦ（９ｍＬ）中のｃ）で得られたアミンＴＦＡ塩（１８６ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。結果として生じた透明の黄色溶液を０℃で１時間攪拌し、その後室温まで温めた。減圧下で揮発性成分を除去し、残留物をシリカゲル上でＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ（１７：１→１０：１）によるフラッシュクロマトグラフィーで精製し、黄色固体として対応する保護されたアジド葉酸（２９０ｍｇ、９２％）を得た：融点１２５〜１３０℃；ＨＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋＝６５７．２６１７（計算値Ｃ９Ｈ１５Ｎ４Ｏ４Ｎａ：６５７．２６２４）。
【０１６９】
ｄ）で得られた生成物（６３ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を１ＭのＮａＯＨ（３ｍＬ）に溶解させ、室温で一晩中攪拌した。結果として生じた不透明の溶液をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）を通す濾過により透明にした。その黄色溶液のｐＨをＨＣｌ（最初３７％ＨＣｌ、その後１ＭのＨＣｌ）を添加することでｐＨ〜２に調整し、結果として生成物の沈殿が生じた。懸濁液を遠心分離し（１０分、３５００ｒｐｍ）、黄白色の上澄みをデカンテーションし、固体の生成物を減圧下で乾燥させ、黄色の粉末として、アジド葉酸のペンタ−塩酸塩を得た（７５ｍｇ、定量的）：融点＞２００℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δδ＝１２．２１〜１１．９５（ｂｓ、１Ｈ）、８．６４（ｓ、１Ｈ）、８．１８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．２）、７．８５（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝５．７）、７．６５（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝９．０）、７．００〜６．８２（ｂｓ、２Ｈ）、６．９３（ｔ、１Ｈ、Ｊ＝６．２）、６．６４（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝９．０）、４．４９（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝５．９）、４．３２〜４．２２（ｍ、１Ｈ）、３．２９（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝６．８）、３．０３（ｑ、２Ｈ、Ｊ＝６．５）、３．０９〜２．９６（ｍ、２Ｈ）、２．１２〜１．８３（ｍ、２Ｈ）、１．５５〜１．４５（ｍ、２Ｈ）、１．４５〜１．３５（ｍ、２Ｈ）（１ＮＨ観察されず）；ＨＲ−ＭＳ：［Ｍ］＋＝５３７．２１２７（計算値Ｃ２３Ｈ２７Ｎ１１Ｏ５：５３７．２１９７）；元素分析（計算％値Ｃ２３Ｈ２７Ｎ１１Ｏ５（ＨＣｌ）５括弧内）Ｃ３９．１６（３８．３８）、Ｈ４．０９（４．４８）、Ｎ２１．４３（２１．４０）、Ｏ（１１．１１）、Ｃｌ（２４．６３）。
【０１７０】
ｆ）トリアゾール−葉酸の合成
合成Ａ：保護されたアジド葉酸（９５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、ｄ）で得られたもの）を、ｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１、６ｍＬ）に溶解し、Ｌ−プロパルギルグリシン（１７ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（５．５ｍｇ、２０ｍｏｌ％）及びアスコルビン酸ナトリウム（１２ｍｇ、４０ｍｏｌ％）を添加した。ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣシステム１）で物質が完全に変換されたのが示されるまで、茶色の溶液を室温で一晩中攪拌した。金属捕捉樹脂ＱｕａｄｒａＰｕｒｅ  ＩＤＡ（登録商標）（０．３ｇ）を添加し、時に振盪しつつ、混合物を一日室温に保った。結果として生じた黄色の溶液をデカンテーションし、減圧下で濃縮した。残留物を１ＭのＮａＯＨ（４ｍＬ）にいれ、中間体Ｘの完全な脱保護がＨＰＬＣで確認されるように、一晩中室温で攪拌した。黄色の溶液のｐＨをＨＣｌ（最初３７％ＨＣｌ、その後１ＭのＨＣｌ）を添加することでｐＨ〜２に調整し、結果として生成物の沈殿が生じた。懸濁液を遠心分離し（１０分、３５００ｒｐｍ）、黄白色の上澄みをデカンテーションし、固体の生成物を減圧下で乾燥させた。粗生成物のＨＰＬＣ精製により（（ＸＢｒｉｄｇｅセミプレップカラム、定組成（ｉｓｏｃｈｒａｔｉｃ）１０％ＣＨ３ＣＮ、９０％水、ＴＦＡ（０．１％））、黄色粉末として、所望のトリアゾール−葉酸の一水和物のトリス−ＴＦＡ塩が得られた（１１３ｍｇ、２ステップで７５％）：１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６、水シグナル抑制プログラム使用）δ＝８．６８（ｂｓ、１Ｈ）、８．２７（ｂｓ、２Ｈ、Ｄ２Ｏ交換）、８．２０（ｄ、１Ｈ、Ｄ２Ｏ交換、Ｊ＝６．８）、７．９２（ｓ、１Ｈ）、７．８５（ｔ、１Ｈ、Ｄ２Ｏ交換、Ｊ＝５．７）、７．６５（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．１）、７．５〜７．０（多重ｂｓ、２Ｈ、Ｄ２Ｏ交換）、６．６４（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝８．１）、４．５０（ｓ、２Ｈ）、４．３５〜４．２０（ｍ、５Ｈ、１プロトンをＤ２Ｏ交換）、３．２３〜３．１３（ｍ、２Ｈ）、３．０９〜２．９４（ｍ、２Ｈ）、２．１８（ｔ、２Ｈ、Ｊ＝８．２）、２．１０〜１．９８（ｍ、１Ｈ）、１．９３〜８４（ｍ、１Ｈ）、１．８０〜１．７２（ｍ、２Ｈ）、１．４５〜１．２７（ｍ、２Ｈ）；ＨＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝６５１．２７３８（計算値Ｃ２８Ｈ３４Ｎ１２Ｏ７：６５０．２６７３）；元素分析（計算％値Ｃ２８Ｈ３４Ｎ１２Ｏ７（ＴＦＡ）３（Ｈ２Ｏ）括弧内）Ｃ  ４０．３０（４０．４０）、Ｈ４．２０（３．９８）、Ｎ１６．８６（１６．６３）、Ｏ（２２．１６）；滴定で測定したフッ化物含有量（計算値：１６．６３）。
【０１７１】
合成Ｂ：脱保護されたアジド葉酸（３６ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ；ｅ）で得られたもの）をｔＢｕＯＨ／Ｈ２Ｏ（１：１、３ｍＬ）に懸濁させ、Ｌ−プロパルギルグリシン（６ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（２ｍｇ、２０ｍｏｌ％）及びアスコルビン酸ナトリウム（４ｍｇ、４０ｍｏｌ％）を添加した。ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣシステム１）で出発物質が完全に変換されたのが示されるまで、混合物を８０℃で２０分間攪拌した。茶色の懸濁液を１ＭのＮａＯＨを添加し溶解させ、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）を通す濾過により透明にした。溶液のｐＨを１ＭのＨＣｌを添加することでｐＨ〜２に調整し、生成物を沈殿させた。懸濁液を遠心分離し（１０分、３５００ｒｐｍ）、上澄みをデカンテーションし、固体の生成物を減圧下で乾燥させ、オレンジ色固体として、所望のトリアゾール−葉酸のペンタ−塩酸塩（４２ｍｇ、定量的）を得た。
【０１７２】
実施例５：９９ｍＴｃ（ＣＯ）３−トリアゾール−葉酸錯体の合成
合成Ａ：トリアゾール−葉酸リガンドの５０μＬの原液（生理学的（０．１５Ｍ）リン酸緩衝液ｐＨ＝７．４中で１０２Ｍ〜１０−７Ｍ）を［９９ｍＴｃ（ＣＯ）３（ＯＨ２）３］＋（Ａｌｂｅｒｔｏ  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ２００１，  １２３，  ３１３５に従い合成した；１００μＬ；〜１ＧＢｑ／ｍＬ）の溶液に添加した。リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、３５０  μＬ）を添加し最終濃度を調整した。反応物を１００℃で５０分加熱した。放射線同位元素標識の収率はＨＰＬＣを介して決定した。錯体はＨＰＬＣを介して分析し、同一性は、慣用の方法に従って、ＨＰＬＣシステム２を使って対応するＲｅ−錯体のＵＶトレース比較して確認した（実施例６を参照）。
【０１７３】
ワンポット合成Ｂ：脱保護されたアジド葉酸（ステップ４ｅ）で得られたもの；４０μＬ、ＭｅＯＨ／ＰＢＳ、ｐＨ７．４（５：１）中で約１０−３Ｍ）を、Ｌ−プロパルギルグリシン（２０μＬ、水中１０−２Ｍ）、Ｃｕ（ＯＡｃ）２（５μＬ、水中１０−２Ｍ）及びアスコルビン酸ナトリウム（２０μＬ、水中１０−２Ｍ）と混合した。１００℃で３０分間加熱した後、混合物を室温に冷却し、ＰＢＳ（０．６ｍＬ、０．１５Ｍ、ｐＨ７．４）中の［Ｐ９９ｍＴｃ（Ｈ２Ｏ）３Ｂ（ＣＯ）３Ｂ］＋（１００μＬ、〜１ＧＢｑ／ｍＬ）に添加した。さらなる１００℃、６０分の加熱の後、所望の錯体のクリーンな形成をＨＰＬＣ（ＨＰＬＣシステム２）で確認した。
【０１７４】
実施例６：Ｒｅ（ＣＯ）３−トリアゾール−葉酸錯体の合成
トリアゾール−葉酸（上記で得られたもの）；  トリ−トリフルオロ酢酸一水和物（ｔｒｉ−ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｔｅｔａｔｅ  ｍｏｎｏ−ｈｙｄｒａｔｅ；０．７ｍｇ、０．７μｍｏｌ）及び［Ｒｅ（Ｂｒ）３（ＣＯ）３］［Ｅｔ４Ｎ］２（１．０ｍｇ、１．４μｍｏｌ）を水（０．５ｍＬ）中に懸濁させた。ＮａＯＨ（０．１Ｍ）を添加し、最終ｐＨを８とし、ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣシステム１）で出発アジド葉酸の完全な変換が示されるまで、５０℃で１時間攪拌して、黄色の溶液を生じた。この溶液を室温まで冷却し、ｐＨを希釈ＨＣｌ水溶液を添加することでｐＨ〜２に調整した。沈殿物を遠心分離（３分、１６０００ｒｐｍ）で分離し、ＮａＯＨ（０．１Ｍ）中に溶解させ、ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣシステム１）で精製し、ＣＨ３ＣＮ／０．１％ＴＦＡ中に冷Ｒｅ−錯体の標準溶液を得た。ＨＲ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝９２１．２０７４（計算値Ｃ３１Ｈ３４Ｎ１２Ｏ１０Ｒｅ：９２１．２０７８）、ＨＰＬＣ純度＞９５％。
【０１７５】
実施例７：生体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ）実験
生体内分布の研究を４〜５週年齢の雄の胸腺欠損ヌードマウス（ＮＭＲＩ、ｎｕ／ｎｕ；Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ、Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を使用して行った。動物を順化させ、腫瘍細胞接種の前５日より、葉酸が欠損している齧歯目の規定食を食べさせた。マウスには、各々の肩の皮下組織に、ＫＢ−腫瘍細胞懸濁液（５×１０６細胞）を皮下接種した。腫瘍サイズがおよそ０．５〜１．５ｃｍ３のサイズに達したとき、放射性葉酸生体内分布の研究を、腫瘍細胞接種の後、約１４日行った。実験は、３重で行った。９９ｍＴｃ（ＣＯ）３−Ｈｉｓ−葉酸、及び９９ｍＴｃ（ＣＯ）３−トリアゾール−葉酸（１００μＬ中１．５ＭＢｑ）を、各々、側尾部静脈（ｌａｔｅｒａｌ  ｔａｉｌ  ｖｅｉｎ）より投与した。抗葉酸と組み合わせた実験のために、ペメトレキセド（ＰＭＸ；  Ａｌｉｍｔａ（登録商標）；Ｌｉｌｌｙ、Ｂａｄ  Ｈｏｍｂｕｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を製造者の指示に従いＮａＣｌ０．９％で希釈した。放射性トレーサーの１時間前に側尾部静脈を介してそれを投与した（１００μＬ中４００μｇ）。９９ｍＴｃ−放射性葉酸単独又は予め注射されたＰＭＸと共に投与された後、１時間、４時間及び２４時間で動物を屠殺した。選択した組織を分離し、秤量し、ａ−カウンターで放射能を測定し、組織のｇあたりの注入活性（ｉｎｊｅｃｔｅｄ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）の割合（％ＩＡ／ｇ）を決定した。
【０１７６】
雄のヌードマウスによるＫＢ−腫瘍における抗葉酸ペメトレキセドの予めの注射がある場合（表１ｂ、２ｂ）とない場合の９９ｍＴｃ−Ｈｉｓ−葉酸（表１ａ、ｂ）と９９ｍＴｃ−トリアゾール−葉酸（表２ａ、ｂ）の得られた生体内分布のデータを表１〜４に示した。値は、組織のｇあたりの注入活性の割合（％ＩＡ／ｇ）で示した。表１ａ及び２ａの結果は、本発明の化合物が良好な腫瘍血液値を達成したことを、明確に示している。
【０１７７】
抗葉酸ペメトレキセドと組み合わせた実験は、表１ｂ及び２ｂに示した。この結果は、予め行う抗葉酸ペメトレキセドの投与でさらにより高い特異性が観察できることを示している。
【０１７８】
【表１】
2014193889.tif 000039
【０１７９】
【表２】
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【０１８０】
【表３】
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【０１８１】
【表４】
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【０１８２】
実施例８：生体外（Ｅｘ  ｖｉｖｏ／Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）オートラジオグラフィー
生体外（ｅｘ  ｖｉｖｏ）オートラジオグラフィー：安楽死させた後、腫瘍と腎臓を分離し、凍結し、ＴｉｓｓｕｅＴｅｋに−８０℃で埋め込んだ。凍結させた腫瘍と腎臓は切片作成機（Ｃｒｙｏ−Ｓｔａｒ  ＨＭ  ５６０Ｍ、Ｗａｌｌｄｏｒｆ、Ｇｅｒｍａｎｙ）で１０μｍのセクションに切り、スライド（Ｓｕｐｅｒｆｒｏｓｔ  ｐｌｕｓ、Ｍｅｎｚｅｌ、Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）上にマウントした。一晩中Ｘ線カセット中の蛍光イメージスクリーン（Ｍｕｌｔｉｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｓｃｒｅｅｎ、  Ｐａｃｋａｒｄ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｃｏ．、  Ｍｅｒｉｄｅｎ、  ＵＳＡ）に露出した。その後、スクリーンを蛍光撮像装置（Ｃｙｃｌｏｎｅ、  Ｐａｃｋａｒｄ、  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｃｏ．、  Ｇｒｏｎｉｎｇｅｎ、  Ｔｈｅ  Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）により読み取った。
【０１８３】
生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）オートラジオグラフィー：生体外（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）オートラジオグラフィーは、生体外（ｅｘ  ｖｉｖｏ）オートラジオグラフィーのための腫瘍と腎臓の近接のセクションで行った。腫瘍セクションのスライドを、室温で、１０分間、Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ緩衝液、（８１７０ｍＭ、ｐＨ７．６、５ｍＭのＭｇＣｌ２と共に）中に０．２５（ｗ／ｖ）ＢＳＡと共に、プレインキュベートした。その後、そのセクションを９９ｍＴｃ−Ｈｉｓ−葉酸又は９９ｍＴｃ−トリアゾール−葉酸（１％ＢＳＡ含有Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液中の０．５ＭＢｑ／ｍＬ）の溶液に６０分室温でインキュベートした。インキュベーションの後、セクションを５分間、冷Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（２５％ＢＳＡ）中で２回、リンスし、その後、純粋Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液中で５分間洗浄し、最終的には冷ミリＱ水でリンスした。セクションは空気乾燥させ、蛍光イメージングスクリーンに露出した。その結果を図５に示した。
【０１８４】
実施例９：ＳＰＥＣＴ／ＣＴ研究
ＳＰＥＣＴ／ＣＴ画像形成は、４ヘッド多重化マルチ−ピンホールＮａｎｏＳＰＥＣＴ  （Ｂｉｏｓｃａｎ  Ｉｎｃ．、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．）により行った。各々のヘッドは９つの直径１．４ｍｍのピンホールのタングステンコリメータを備え、直径３７ｍｍで長さ１６ｍｍの円筒形の部分を画像形成する。軸方向のＦＯＶは、ユーザが画像形成する範囲に従い１６〜１８０ｍｍの範囲で定義する動物のステップとシュート（ｓｔｅｐ−ａｎｄ−ｓｈｏｏｔ）のヘリカル走査により広げられる。この研究で使用される口径であれば、１４０ｋｅＶで、復元解像度がミリメータ未満で与えられた。１ビューあたりの捕捉時間は１０００ｓを選択した。ＣＴは、管電圧４５ｋＶ、１ビューあたりの露光時間１０００ｍｓで積算ＣＴ（ｔｈｅ  ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ＣＴ）により形成した。捕捉の後、ＳＰＥＣＴ及びＣＴのデータは、ＨｉＳＰＥＣＴソフトウエア（Ｂｉｏｓｃａｎ  Ｉｎｃ．、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．、ＵＳＡ）で反復して再構築した。ＳＰＥＣＴ及びＣＴの融合は、ＭＩＰｔｏｏｌソフトウエア（ｖｅｒｓｉｏｎ  １．２０、Ｂｉｏｓｃａｎ  Ｉｎｃ．）を使用して行った。
その結果は図６に示した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【外国語明細書】
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