(57)【要約】【課題】キナーゼカスケードを調節するための組成物および方法の提供。【解決手段】本発明は、Ｎ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトアミド（ＫＸ２‐３９１）の組成物と、キナーゼカスケードの１つ以上の構成要素を調節するための方法とに関する。本発明の化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの構成要素のモジュレーションにおいて有用である。いくつかの化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの２つ以上の構成要素のモジュレーションにおいて有用であり得る。本発明の化合物は、医薬品として有用である。本発明の化合物は、正常な細胞シグナル伝達経路（例、細胞増殖、分化、生存、接着、移動等）に関与する可能性があるキナーゼ、または病気もしくは疾患に関与するキナーゼの調節を調節するのに有用であり得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２００６年１２月２８日に出願された米国仮特許出願第６０／８７７，７６２号に対する優先権を主張する。この開示は、その全体が参考として援用される。
本発明は、実質的に純粋なＮ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトアミド（ＫＸ２‐３９１）、およびその塩の合成のための組成物およびプロセスに関する。本発明は、そのような組成物の使用の方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
シグナル伝達は、それによって、ある細胞が１種類のシグナルまたは刺激を別のものに変換するあらゆるプロセスである。シグナル伝達と呼ばれるプロセスは、酵素によって行われセカンドメッセンジャーを介してつながる、細胞内部の一連の生化学的反応を伴うことが多い。多くの伝達プロセスでは、最初の刺激から生じるイベントに関与するようになる酵素および他の分子の数は増加している。そのような場合、一連のステップは「シグナル伝達カスケード」または「セカンドメッセンジャー経路」と呼ばれ、大きな反応を誘発する小さな刺激をもたらすことが多い。シグナル伝達に関与する分子の１つのクラスは、酵素のキナーゼファミリーである。キナーゼの最も大きなグループはプロテインキナーゼであり、これらは特異的なタンパク質の活性に対して作用し、これを修飾する。これらは細胞内において、シグナルを伝達し、複雑なプロセスを制御するために広く用いられる。
【０００３】
プロテインキナーゼは、酵素の大きなクラスであり、タンパク質およびペプチド中のＳｅｒ／ＴｈｒまたはＴｙｒの側鎖上でのＡＴＰからヒドロキシル基へのγ‐リン酸の転移を触媒し、各種の重要な細胞機能、恐らく最も注目に値するものとして：シグナル伝達、分化、および増殖の制御に深く関与する。人体には約２，０００種類のプロテインキナーゼが存在すると推定され、これらはそれぞれ特定のタンパク質／ペプチド基質をリン酸化するものの、それらは全て高度に保存されたポケット内で同じ二次基質、ＡＴＰと結合する。プロテインホスファターゼは、リン酸の反対方向の移動を触媒する。
【０００４】
チロシンキナーゼは、リン酸基をＡＴＰからタンパク質中のチロシン残基に転移することができる酵素である。キナーゼによるタンパク質のリン酸化は、酵素活性の調節に関するシグナル伝達における重要な機構である。チロシンキナーゼは２つのグループに分けられる：細胞質タンパク質であるグループおよび膜貫通受容体連結型キナーゼである。ヒトにおいては、３２種類の細胞質タンパク質チロシンキナーゼと５８種類の受容体連結型タンパク質チロシンキナーゼが存在する。細胞表面のチロシンキナーゼ連結型受容体に対して作用するホルモンおよび成長因子は、通常は成長促進性であり、細胞分裂を刺激するように働く（例、インスリン、インスリン様成長因子１、上皮増殖因子）。
【０００５】
各種の既知のプロテインキナーゼまたはプロテインホスファターゼの阻害剤は、様々な治療用途がある。プロテインキナーゼまたはプロテインホスファターゼ阻害剤の有望な治療上の利用の可能性の１つは、抗癌剤としてのものである。既知の癌遺伝子産物の約５０％はプロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）であり、それらのキナーゼ活性が細胞形質転換をもたらすことが示されている。
【０００６】
ＰＴＫは、２つのカテゴリー、膜受容体型ＰＴＫ（例、成長因子受容体ＰＴＫ）および非受容体型ＰＴＫ（例、プロトオンコジーン産物のＳｒｃファミリー）に分類可能である。非受容体型ＰＴＫのＳｒｃファミリーの少なくとも９種類のメンバーが存在し、ｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃ（以後、単純に「Ｓｒｃ」と呼ぶ）はファミリーのプロトタイプＰＴＫであり、およそ３００のアミノ酸触媒ドメインが高度に保存されている。Ｓｒｃの過剰な活性化は、大腸、乳房、肺、膀胱、および皮膚の癌をはじめとする多くのヒトの癌だけでなく、胃癌、有毛細胞白血病、および神経芽細胞種において報告されている。膜貫通受容体（例、ＥＧＦＲおよびｐ１８５ＨＥＲ２／Ｎｅｕ）から細胞内部への過剰に刺激された細胞増殖シグナルも、Ｓｒｃを通るようである。結果として、多くの重要なヒトの腫瘍型で、腫瘍の発生、進行、および転移に過剰活性化（変異なし）が関わっていることから、Ｓｒｃが癌治療の普遍的なターゲットであると近年提唱されている。
【０００７】
幅広い種類の正常な細胞シグナル伝達経路（例、細胞増殖、分化、生存、接着、移動等）の調節にキナーゼが関与することから、キナーゼは様々な病気および疾患において役割を担うものと考えられる。故に、キナーゼシグナル伝達カスケードのモジュレーションは、そのような病気および疾患を治療するまたは予防するための重要な手段であり得る。
【０００８】
ＫＸ２‐３９１のスモールスケール合成は発表されている（特許文献１）。しかし、多量の化合物の産生にはこの合成は非実用的であり、得られる産物は、弱いアルキル化剤として知られる塩化エチルのコンタミネーションを被る。故に、塩化エチルが十分に高いレベルで存在すると、ＫＸ２‐３９１組成物の薬学的な有効性が制限される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許第７，３００，９３１号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
従って、安全かつ容易な、ラージスケールでＫＸ２‐３９１を高収率で産生し、塩化エチルを実質的に含まない、高純度ＫＸ２‐３９１の合成のための組成物およびプロセスが求められている。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの構成要素のモジュレーションにおいて有用である。いくつかの化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの２つ以上の構成要素のモジュレーションにおいて有用であり得る。本発明の化合物は、医薬品として有用である。本発明の化合物は、正常な細胞シグナル伝達経路（例、細胞増殖、分化、生存、接着、移動等）に関与する可能性があるキナーゼ、または病気もしくは疾患に関与するキナーゼの調節を調節するのに有用であり得る。
【００１２】
例えば、本発明の化合物によって調節されるキナーゼカスケードの構成要素（１つまたは複数）は、病気または疾患、例えば、過剰増殖性疾患、癌、前癌状態、骨粗しょう症、心臓血管疾患、免疫系機能障害、２型糖尿病、肥満、眼疾患、黄斑浮腫、慢性神経因性疼痛、聴力損失、および移植拒絶反応の発現に関与する。
【００１３】
本発明の化合物は、チロシンキナーゼ阻害によって調節される病気および疾患の治療において有用である。例えば、本発明の化合物は、Ｓｒｃキナーゼによって調節される病気および疾患の治療において有用である。本発明の化合物は、焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ）によって調節される病気および疾患の治療においても有用であり得る。
【００１４】
例えば、化合物は、哺乳類の治療、例えばヒトおよび動物の治療のための抗増殖剤として有用であってよい。化合物は、例えば、抗癌剤、抗血管新生剤、抗転移剤、抗微生物剤、抗細菌剤、抗真菌剤、抗寄生虫剤、および／または抗ウイルス剤として限定されずに使用されてよい。本発明の化合物は、例えば肺癌の治療において有用である。本発明の化合物は、例えば大腸癌の治療においても有用である。本発明の化合物は、例えば乳癌の治療においても有用である。
【００１５】
本発明は、実質的に純粋なＮ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトアミド（化合物１）、およびその塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグに関する：
【００１６】
【化１】
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【００１７】
本発明は、安全かつ容易で、ラージスケール（＞１００ｇ）でＫＸ２‐３９１を高収率（＞８０％）で産生し、限られた塩化エチルを有する（ヘッドスペースガスクロマトグラフィー残存溶媒解析による判定で＜２５０ｐｐｍ）、高純度ＫＸ２‐３９１（ＨＰＬＣによる判定で＞９８．０％）の合成のための組成物およびプロセスに関する。
【００１８】
好ましい実施形態では、本発明の組成物中の化合物１は、９８％を超える純度を持つ。例えば、本発明の組成物中の化合物１の純度は、９８．５％、９９．０％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、または９９．９％である。
【００１９】
好ましい実施形態では、本発明の組成物および製剤は、２％未満の不純物を含有する。例えば、本発明の組成物および製剤は、２％未満の下記の不純物のいずれか１つ、またはそれらの組み合わせを含有する：塩化エチル、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、アニソール、およびパラジウム。
【００２０】
他の好ましい実施形態では、組成物は、ヘッドスペースガスクロマトグラフィー残存溶媒解析によって判定される、２５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約２５０ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）の塩化エチルを含有する。例えば、組成物は、２００ｐｐｍ未満、２００ｐｐｍ未満、１５０ｐｐｍ未満、１００ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。
【００２１】
本発明の化合物および製剤は、約１００ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）のパラジウムを含有する。例えば、組成物は、７５ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ未満、３０ｐｐｍ未満、２０ｐｐｍ未満、１０ｐｐｍ未満、または５ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。
【００２２】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の溶媒和物を含む組成物に関する。
【００２３】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の水和物を含む組成物にも関する。
【００２４】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の酸付加塩も含む。例えば、塩酸塩である。酸付加塩は、例えば二塩酸塩でありうる。
【００２５】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の酸付加塩を含む組成物に関する。
【００２６】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の塩酸塩を含む組成物に関する。
【００２７】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の二塩酸塩を含む組成物に関する。
【００２８】
本発明は、化合物１のプロドラッグも含む。
【００２９】
本発明は、実質的に純粋な、化合物１の薬学的に許容される塩も含む。
【００３０】
本発明は、実質的に純粋な化合物１、またはその溶媒和物、水和物、もしくは塩と、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む組成物にも関する。
【００３１】
本発明は、キナーゼシグナル伝達カスケードの構成要素を調節するための、そのような実質的に純粋な化合物および組成物の使用にも関する。いくつかの化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの２つ以上の構成要素のモジュレーションに有用であってよい。本発明の化合物は医薬品として有用である。
【００３２】
本発明の特定の化合物は、非ＡＴＰ競合型キナーゼ阻害剤である。
【００３３】
本発明は、細胞増殖性疾患を治療するための化合物と化合物を使用する方法とに関する。
【００３４】
本発明は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグと、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を、それを必要とする被験体に投与することによって、細胞増殖性疾患を予防または治療する方法も含む。
【００３５】
例えば、細胞増殖性疾患は前癌状態または癌である。本発明の化合物によって治療または予防される細胞増殖性疾患は、癌、例えば大腸癌または肺癌であってよい。
【００３６】
本発明の化合物によって治療または予防される細胞増殖性疾患は、過剰増殖性疾患であってよい。
【００３７】
本発明の化合物によって治療または予防される細胞増殖性疾患は、乾癬であってよい。
【００３８】
例えば、増殖性疾患の治療または予防は、チロシンキナーゼの阻害を通じて生じてよい。例えば、チロシンキナーゼはＳｒｃキナーゼまたは焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ）でありうる。
【００３９】
本発明は、チロシンキナーゼ阻害によって調節される病気または疾患を、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグと、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を投与することによって治療または予防する方法に関する。例えば、チロシンキナーゼ阻害によって調節される病気または疾患は、癌、前癌状態、過剰増殖性疾患、または微生物感染である。
【００４０】
本発明の医薬組成物は、キナーゼ経路を調節してよい。例えば、キナーゼ経路は、Ｓｒｃキナーゼ経路、または焦点接着キナーゼ経路である。
【００４１】
本発明の医薬組成物は、キナーゼを直接調節してよい。例えば、キナーゼは、Ｓｒｃキナーゼ、または焦点接着キナーゼである。
【００４２】
本発明の特定の医薬組成物は、非ＡＴＰ競合型キナーゼ阻害剤である。
【００４３】
本発明の化合物は、微生物感染、例えば細菌、真菌、寄生虫、またはウイルス感染を治療または予防するのにも有用である。
【００４４】
本発明の化合物は医薬品として使用されてよい。例えば、本発明の化合物は、抗増殖剤として、ヒトおよび／または動物の治療、例えばヒトおよび／または他の哺乳類の治療のために用いられる。化合物は、例えば、抗癌剤、抗血管新生剤、抗微生物剤、抗細菌剤、抗真菌剤、抗寄生虫剤、および／または抗ウイルス剤として限定されずに使用されてよい。さらに、化合物は、その他の細胞増殖関連疾患、例えば糖尿病性網膜症、黄斑変性、および乾癬に使用されてよい。抗癌剤には、抗転移剤が含まれる。
【００４５】
医薬品として使用される本発明の化合物には、実質的に純粋な化合物１、およびその塩、溶媒和物、水和物が含まれる。
【００４６】
本発明の一態様では、本発明の化合物、例えば本発明の化合物はキナーゼカスケードを調節するために使用される。例えば、化合物は、病気または疾患の発現の原因となるキナーゼカスケードの構成要素を調節するために使用される。
【００４７】
そのような病気および疾患には、癌、骨粗しょう症、心臓血管疾患、免疫系機能障害、２型糖尿病、肥満、および移植拒絶反応が含まれる。
【００４８】
例えば、本発明の化合物は、被験体における細胞増殖性疾患を治療または予防するために使用されてよい。本実施形態の一態様では、細胞増殖性疾患は、前癌状態または癌である。本実施形態の別の態様では、細胞増殖性疾患は過剰増殖性疾患である。別の実施形態では、細胞増殖性疾患、癌、または過剰増殖性疾患の予防または治療は、キナーゼの阻害を通じて生じる。別の実施形態では、細胞増殖性疾患、癌、または過剰増殖性疾患の予防または治療は、チロシンキナーゼの阻害を通じて生じる。別の実施形態では、細胞増殖性疾患、癌、または過剰増殖性疾患の予防または治療は、Ｓｒｃキナーゼまたは焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ）の阻害を通じて生じる。別の実施形態では、被験体は哺乳類である。一実施形態では、被験体はヒトである。
【００４９】
本発明は、被験体における癌または増殖性疾患を治療または予防する方法にも関し、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む効果的な量の組成物の投与を含む。例えば、本発明の化合物はキナーゼ阻害剤であってよい。本発明の化合物は、非ＡＴＰ競合型キナーゼ阻害剤であってよい。本発明の化合物は、キナーゼを直接阻害してよい、または本発明の化合物はキナーゼ経路に作用してよい。
【００５０】
本発明の別の態様は、被験体における聴力損失を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。一実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、プロテインキナーゼに結合しているＡＴＰを阻害しない。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。一実施形態では、Ｓｒｃファミリープ
ロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００５１】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、例えば、点耳剤を耳の中に投与することによって、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。別の実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。
【００５２】
一実施形態では、化合物は、聴力損失発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は聴力損失発症後に投与される。
【００５３】
一実施形態では、化合物は、聴力損失を引き起こす薬、例えばシスプラチンまたはアミノグリコシド系抗生物質と組み合わせて投与される。別の実施形態では、化合物は、有毛細胞を標的する薬と組み合わせて投与される。
【００５４】
本発明の別の態様は、被験体における骨粗しょう症を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００５５】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、骨粗しょう症発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は骨粗しょう症発症後に投与される。
【００５６】
本発明の別の態様は、被験体における眼疾患、例えば黄斑変性症、網膜症、黄斑浮腫等を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。別の実施形態では、化合物はＶＥＧＦ経路における１つ以上の構成要素を阻害する。
【００５７】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に（例、点眼薬を眼に投与することによって）、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、眼疾患発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は眼疾患発症後に投与される。
【００５８】
本発明の別の態様は、被験体における糖尿病を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケー
ドの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００５９】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、糖尿病発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は糖尿病発症後に投与される。
【００６０】
本発明の別の態様は、被験体における肥満を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００６１】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、被験体が肥満になる前に投与される。別の実施形態では、化合物は、対照が肥満になった後に投与される。
【００６２】
本発明の別の態様は、被験体における脳卒中を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００６３】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、脳卒中が起こる前に投与される。別の実施形態では、化合物は、脳卒中が起こった後に投与される。
【００６４】
本発明の別の態様は、被験体におけるアテローム性動脈硬化症を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００６５】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。
【００６６】
本発明の別の態様は、被験体における免疫系の活性を調節する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００６７】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。
【００６８】
本発明の別の態様は、被験体における慢性神経因性疼痛を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００６９】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、慢性神経因性疼痛発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は、慢性神経因性疼痛発症後に投与される。
【００７０】
本発明の別の態様は、被験体におけるＢ型肝炎を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００７１】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、Ｂ型肝炎発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は、Ｂ型肝炎発症後に投与される。
【００７２】
本発明の別の態様は、細胞増殖性疾患を予防するまたは治療する方法であり、この方法は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグを含む組成物の、それを必要とする被験体への投与を含む。一実施形態では、化合物は、プロテインキナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。別の実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。別の実施形態では、化合物は、プロテインキナーゼに結合しているＡＴＰを阻害しない。一実施形態では、化合物はＳｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。別の実施形態では、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【００７３】
本発明は、チロシンキナーゼ阻害によって調節される病気または疾患を治療または予防する方法に関し、増殖性疾患は、癌、前癌状態、過剰増殖性疾患、および微生物感染から選択される。
【００７４】
例えば、微生物感染は、細菌、真菌、寄生虫、またはウイルス感染である。別の例では、増殖性疾患は、乾癬、糖尿病性網膜症、および黄斑変性症から選択される過剰増殖性疾患である。特定の例では、増殖性疾患は癌である。例えば、癌は、固形腫瘍、例えば肺、乳房、大腸、卵巣、脳、肝臓、膵臓、または前立腺の癌、悪性黒色腫、または黒色腫以外の皮膚癌でありうる。特定の例では、癌は、乳癌、大腸癌、または肺癌である。特定の例では、癌は血液腫瘍、血液悪性疾患、小児白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキン病、リンパ球または皮膚起源のリンパ腫、急性または慢性白血病、リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、形質細胞腫、リンパ系腫瘍、またはＡＩＤＳに併う癌である。
【００７５】
いくつかの例では、増殖性疾患は、表皮嚢腫、皮様嚢腫、脂肪腫、腺腫、毛細血管腫、皮膚血管腫、リンパ管腫、母斑病変、奇形腫、腎腫、筋線維腫症、骨形成性腫瘍、または異形成腫瘤である。
【００７６】
本発明の特定の方法では、本発明の化合物で治療される被験体はヒトである。
【００７７】
上記の記述は、下記に続くその詳細な記述が理解されるように、また当該技術分野への今回の貢献がさらに認識されるように、本発明のより重要な特徴を広く説明するものである。本発明のその他の目的および特徴は、実施例とともに考慮される下記の詳細な記述から明らかになるであろう。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
ＨＰＬＣによって判定される場合に９８．０％を超える純度を持つ、ＫＸ２‐３９１、その塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグを有する組成物。
（項目２）
前記ＫＸ２‐３９１は、９９．０％の純度を持つ、項目１の組成物。
（項目３）
前記ＫＸ２‐３９１は、９９．５％の純度を持つ、項目１の組成物。
（項目４）
前記ＫＸ２‐３９１は、９９．６％の純度を持つ、項目１の組成物。
（項目５）
前記ＫＸ２‐３９１は、９９．７％の純度を持つ、項目１の組成物。
（項目６）
前記組成物は、塩化エチル、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、アニソール、パラジウム、およびこれらの組み合わせから選択される、２％未満の不純物を含有する、項目１の組成物。
（項目７）
薬学的に許容される担体または賦形剤をさらに有する、項目１に記載の組成物。
（項目８）
プロテインキナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を調節するための薬剤の製造における、項目１〜項目７のいずれか１項に記載の組成物の使用。
（項目９）
キナーゼは、セリンキナーゼ、焦点接着キナーゼ、およびチロシンキナーゼから選択される、項目８に記載の使用。
（項目１０）
前記チロシンキナーゼは、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼである、項目９に記載の使用。
（項目１１）
前記化合物は、経口的に投与されるものである、項目８に記載の使用。
（項目１２）
前記化合物は、局所的に投与されるものである、項目８に記載の使用。
（項目１３）
前記キナーゼカスケードの前記構成要素は、過剰増殖性疾患、癌、前癌状態、骨粗しょう症、心臓血管疾患、免疫系機能障害、２型糖尿病、肥満、眼疾患、黄斑浮腫、慢性神経因性疼痛、聴力損失、および移植拒絶反応から選択される病気または疾患の発現に関与する、項目８に記載の使用。
（項目１４）
チロシンキナーゼ阻害によって調節される病気または疾患の治療または予防のための薬剤の製造における、項目１〜項目７のいずれか１項に記載の組成物の使用であって、項目１に記載の化合物、またはその塩、溶媒和物、水和物、あるいはプロドラッグと、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを有する医薬組成物を、それを必要とする被験体に投与するステップを含む、該治療または予防は、項目１に記載の化合物、またはその塩、溶媒和物、水和物、あるいはプロドラッグと、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを有する医薬組成物を、それを必要とする被験体に投与するステップを含むことを特徴とする、使用。
（項目１５）
チロシンキナーゼ阻害によって調節される前記病気または疾患は、癌、前癌状態、過剰増殖性疾患、および微生物感染から選択される細胞増殖性疾患である、項目１４に記載の使用。
（項目１６）
前記微生物感染は、細菌、真菌、寄生虫、またはウイルス感染である、項目１５に記載の使用。
（項目１７）
前記細胞増殖性疾患は、乾癬、糖尿病性網膜症、および黄斑変性症から選択される過剰増殖性疾患である、項目１５に記載の使用。
（項目１８）
前記細胞増殖性疾患は癌である、項目１５に記載の使用。
（項目１９）
前記癌は固形腫瘍である、項目１８に記載の使用。
（項目２０）
前記癌は、肺、乳房、大腸、卵巣、脳、肝臓、膵臓、もしくは前立腺の癌、または悪性黒色腫、または黒色腫以外の皮膚癌である、項目１８の使用。
（項目２１）
前記癌は、乳癌、大腸癌、または肺癌である、項目２０の使用。
（項目２２）
前記癌は、血液腫瘍、血液悪性疾患、小児白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキン病、リンパ球または皮膚起源のリンパ腫、急性もしくは慢性白血病、リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、形質細胞腫、リンパ系腫瘍、またはＡＩＤＳに併う癌である、項目１８の使用。
（項目２３）
前記細胞増殖性疾患は、表皮嚢腫、皮様嚢腫、脂肪腫、腺腫、毛細血管腫、皮膚血管腫、リンパ管腫、母斑病変、奇形腫、腎腫、筋線維腫症、骨形成性腫瘍、または異形成腫瘤である、項目１５の使用。
（項目２４）
ＨＰＬＣによって判定される場合９８．０％を超える純度を持つ、ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物。
【図面の簡単な説明】
【００７８】
【図１】ＫＸ２‐３９１・２ＨＣｌロット０２ＢＰ１１１ＦのＤＳＣを示すグラフである。
【図２】ＫＸ２‐３９１・２ＨＣｌロット０２ＢＰ１１１ＥのＤＳＣを示すグラフである。
【図３】ＫＸ２‐３９１・２ＨＣｌロット０２ＢＰ１１１ＥのＸＲＰＤを示すグラフである。
【図４】ＫＸ２‐３９１・２ＨＣｌロット０２ＢＰ１１１ＦのＸＲＰＤを示すグラフである。
【図５】ＫＸ２‐３９１（ロット０２ＢＰ０９６Ｋ）のＮＭＲスペクトルである。
【発明を実施するための形態】
【００７９】
本発明の１つ以上の実施形態の詳細を、下記に添付する記述において説明する。本明細書で説明するものと類似するまたは同等のあらゆる方法および材料を本発明の実施または検査において使用できるが、好ましい方法および材料をここで説明する。本発明のその他の特徴、目的、および利点は記述から明らかになるであろう。本明細書では、文脈による明らかな別段の指示がない限り、単数形には複数形も含まれる。別段の定めがない限り、本明細書で用いる全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を持つ。疑義が生じた場合は、本明細書が優先される。本明細書で言及する全ての出版物、特許出願、特許、およびその他の参考文献は、その開示内容全体が参考として本明細書で援用される。
【００８０】
幅広い種類の正常な細胞シグナル伝達経路（例、細胞増殖、分化、生存、接着、移動等）の調節にキナーゼが関与することから、キナーゼは様々な病気および疾患において役割を担うと考えられる。故に、キナーゼシグナル伝達カスケードのモジュレーションは、そのような病気および疾患を治療または予防するための重要な手段であり得る。そのような病気および疾患には、例えば、癌、骨粗しょう症、心臓血管疾患、免疫系機能障害、２型糖尿病、肥満、および移植拒絶反応が含まれる。
【００８１】
本発明の化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの構成要素のモジュレーションにおいて有用である。いくつかの化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの２つ以上の構成要素のモジュレーションに有用であってよい。用語「プロテインキナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を調節する」は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素が、細胞の機能が変化するように影響を受けることを意味する。プロテインキナーゼシグナル伝達カスケードの構成要素には、セカンドメッセンジャーならびに上流および下流の標的を含む、キナーゼシグナル伝達経路に直接または間接的に関与するあらゆるタンパク質が含まれる。
【００８２】
多くのプロテインキナーゼおよびホスファターゼが知られており、治療薬開発のターゲットである。例えば、それぞれ参考として本明細書で援用される、Ｈｉｄａｋａ  ａｎｄ
Ｋｏｂａｙａｓｈｉ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ，１９９２，３２：３７７‐３９７、Ｄａｖｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，２０００，３５１：９５‐１０５を参照されたい。
【００８３】
キナーゼの１つのファミリーであるプロテインチロシンキナーゼは、２つの大きなファミリー：受容体型チロシンキナーゼ、すなわちＲＴＫ（例、インスリン受容体キナーゼ（ＩＲＫ）、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）、塩基性線維芽細胞増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）、血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）、血管内皮細胞増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ‐２またはＦｌｋ１／ＫＤＲ）、および神経成長因子受容体（ＮＧＦＲ））および非受容体型チロシンキナーゼ、すなわちＮＲＴＫ（例、Ｓｒｃファミリー（Ｓｒｃ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｂｌｋ、Ｙｒｋ、Ｆｇｒ、Ｈｃｋ、Ｌｃｋ、およびＬｙｎ）、Ｆａｋ、Ｊａｋ、Ａｂｌ、およびＺａｐ７０）に分けられる。例えば、参考として本明細書で援用される、Ｐａｒａｎｇ  ａｎｄ  Ｓｕｎ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，２００５，１５：１１８３‐１２０７を参照されたい。
【００８４】
様々な癌におけるＳｒｃキナーゼの役割のため、これらのキナーゼは、高転移性の癌細胞増殖をはじめとする、癌治療薬としてのＳｒｃ阻害剤の開発に関する数多くの研究の対象となっている。例えば大腸癌、前癌性大腸病変、卵巣癌、乳癌、上皮性癌、食道癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、等の様々な癌に対する治療薬として、Ｓｒｃ阻害剤が求められている。例えば、Ｆｒａｍｅ，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，２００２，１６０２：１１４‐１３０およびＰａｒａｎｇ  ａｎｄ  Ｓｕｎ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，２００５，１５：１１８３‐１２０７を参照されたい。
【００８５】
その他のキナーゼの阻害は、その他の種類の病気および疾患の治療およびモジュレーションに有用であり得る。例えば、各種の眼疾患は、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤の投与によって抑制または予防されるかもしれない。チロシンホスファターゼＰＴＰ‐１Ｂおよび／またはグリコーゲンホスホリラーゼの阻害剤は、２型糖尿病または肥満の治療をもたらすかもしれない。ｐ５６ｌｃｋの阻害剤は、免疫系疾患の治療に有用であり得る。その他の標的には、ＨＩＶ逆転写酵素、トロンボキサンシンターゼ、ＥＧＦＲＴＫ、ｐ５５  ｆｙｎ等が含まれる。
【００８６】
本発明の化合物は、Ｓｒｃペプチド基質部位内で結合するＳｒｃシグナル伝達阻害剤であってよい。本発明の各種化合物の活性は、ｃ‐Ｓｒｃ（５２７Ｆ、恒常的に活性で形質転換能を持つ）で形質転換したＮＩＨ３Ｔ３細胞およびヒト大腸癌細胞（ＨＴ２９）において研究されている。例えば、これらの細胞株においては、ＫＸ２‐３９１が、用量依存的に、増殖阻害効果とよく相関して、既知のＳｒｃタンパク質基質のリン酸化レベルを低下させることが示された。故に、いくつかの実施形態では、本発明の化合物は、直接Ｓｒｃを阻害してよく、ペプチド結合部位中に結合することによって（アロステリック部位における結合とは対照的に）それを行ってもよい。
【００８７】
本発明の化合物がモデルＳｒｃ基質部位に適合することを示す分子モデリング実験が実施されている（例えば、米国特許第７００５４４５号および同第７０７０９３６号を参照）。その他のキナーゼを標的するために、分子上に存在する異なる側鎖のセットを単純に使用することによっておよび／または骨格そのものを修飾することによって、Ｓｒｃキナーゼ阻害剤の骨格を再構成する目的でもモデリングが用いられる。
【００８８】
理論に拘束されることなく、細胞内では多くのキナーゼが多タンパク質シグナル伝達複合体中に埋まっているため、細胞外でのいくつかのキナーゼ（例、Ｓｒｃ）の配座は、細胞内での配座と比べて著しく異なると考えられている。故に、分離されたキナーゼ内ではペプチド基質結合部位がきちんと形成されないため（ＳｒｃのＸ線構造で示されるように）、ペプチド基質結合阻害剤の、分離されたキナーゼに対する活性は弱くなるであろうと考えられている。分離キナーゼのアッセイにおけるこの部位への結合では、細胞内部に存在する配座と同じ、分離酵素アッセイ中に存在する全タンパク質の非常に少ない割合を阻害剤が捕らえる必要がある。これは、検出可能となるために、アッセイ中の触媒サイクルから著しい量の酵素を除くための大過剰量の阻害剤を必要とする。
【００８９】
しかし、細胞ベースのアッセイでは、ペプチド結合部位が形成されることが予想されるため過剰量の阻害剤は必要ではない。細胞ベースのＳｒｃアッセイでは、ペプチド基質結合部位が完全に形成されるように、ＳＨ２＆ＳＨ３ドメイン結合タンパク質によってＳｒｃコンホメーションがすでにシフトされている。故に、全ての酵素が堅固な結合配座状態にあるため、低濃度の阻害剤で触媒サイクルから酵素を除くことができる。
【００９０】
大部分の既知のキナーゼ阻害剤はＡＴＰ競合型であり、分離キナーゼアッセイのパネルにおいて低い選択性を示す。しかし、本発明の化合物の多くはペプチド基質結合阻害剤であると考えられる。故に、分離酵素、例えばＳｒｃに対する化合物の伝統的なハイスループットスクリーニングは、本発明の化合物の発見にはつながらないであろう。
【００９１】
重篤な毒性を引き起こすことなく、癌治療に対する広く有用なアプローチとしてｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃ（Ｓｒｃ）を標的することは、最近の多くの文献によって裏付けられている。例えば、ＥＧＦ受容体ＰＴＫシグナル伝達の上昇を示す腫瘍、または関連するＨｅｒ‐２／ｎｅｕ受容体を過剰発現する腫瘍は、恒常的にＳｒｃを活性化し、腫瘍浸潤性を高めている。これらの細胞におけるＳｒｃの阻害は、増殖の停止を誘導し、アポトーシスを誘発し、形質転換された表現型を元に戻す（Ｋａｒｎｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １８（３３）：４６５４‐４６６２）。異常なＳｒｃ活性の上昇が、足場非依存的に形質転換細胞を増殖させることが知られている。これは明らかに、ＦＡＫ／Ｓｒｃ経路中のＳｒｃ活性を細胞外マトリックスシグナル伝達が細胞増殖シグナル伝達と協調して上昇させ、これによって、通常であれば活性化されているはずのアポトーシス機序をブロックするという事実に起因している。結果として、細胞外マトリックスからの遊離の際に通常であれば活性化されているはずのアポトーシス機序が誘発されるであろうことから、腫瘍細胞中のＦＡＫ／Ｓｒｃ阻害は、アポトーシスを誘導する可能性がある（Ｈｉｓａｎｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ａｎｎｕ．Ｍｅｅｔ．Ａｍ．Ａｓｓｏｃ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．３８：Ａ１９２５（１９９７））。さらに、Ｓｒｃ阻害の際にＶＥＧＦ  ｍＲＮＡ発現の低下が認められ、これらのＳｒｃ阻害細胞株由来の腫瘍は血管新生の発達の低下を示した（Ｅｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７３（２）：１０５２‐１０５７（１９９８））。
【００９２】
例えば、マウスにおいてＳｒｃ遺伝子をノックアウトすると、わずか１つの欠陥、つまり、波状縁を形成できず、結果的に骨を吸収しない破骨細胞がもたらされる。しかし、これらのマウスにおける破骨細胞の骨吸収機能は、キナーゼ欠損Ｓｒｃ遺伝子を挿入することによって回復した（Ｓｃｈｗａｒｔｚｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  １１：２８３５‐２８４４）。これは、Ｓｒｃタンパク質の存在が、破骨細胞の必須シグナル伝達複合体中の他のＰＴＫ（破骨細胞機能の維持に不可欠である）を動員し活性化させるのに明らかに十分であるために、唯一知られている毒性を引き起こすことなく、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいてＳｒｃキナーゼ活性が阻害されうることを示唆していた。
【００９３】
Ｓｒｃは、ますます多くのヒトの腫瘍において過剰に活性化されていることが見出されて以来、癌治療の「普遍的な」標的であると提唱されている（Ｌｅｖｉｔｚｋｉ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，８，２３９‐２４４（１９９６）、Ｌｅｖｉｔｚｋｉ，Ａｎｔｉ‐Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１１、１７５‐１８２（１９９６））。癌治療にとってのＳｒｃ阻害の利点の可能性としては、自己分泌増殖因子のループ効果によって生じる無制限の細胞増殖の４倍の阻害、細胞マトリックスからの遊離の際のアポトーシスの誘発による転移の阻害、ＶＥＧＦレベルの低下を介した腫瘍血管形成の阻害、および低い毒性であるように思われる。
【００９４】
前立腺癌細胞は、パキシリンおよびｐ１３０ｃａｓ両方の過剰発現があると報告されており、高度にリン酸化されており（Ｔｒｅｍｂｌａｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６８，１６４‐１７１，１９９６）、故にＳｒｃ阻害の第１の標的であってよい。
【００９５】
故に、本発明は、細胞増殖性疾患を治療するための化合物と化合物を使用する方法とに関する。
【００９６】
本発明の化合物は、医薬品として、例えばヒトおよび動物を治療するための医薬品として有用である。化合物は、例えば、抗癌剤、抗血管新生剤、抗転移剤、抗微生物剤、抗細菌剤、抗真菌剤、抗寄生虫剤、および／または抗ウイルス剤として制限なく使用されてよい。化合物は、その他の細胞増殖関連疾患、例えば乾癬に用いられてよい。
【００９７】
本明細書で説明されるように、本発明の化合物は、被験体における聴力損失を防ぐまたは予防するために使用されてよい。聴力損失を防ぐために、化合物は、騒音暴露または聴力損失を誘発する薬物への暴露の前に投与されてよい。そのような薬物には、化学療法薬（例、有毛細胞を標的する白金ベースの薬剤）およびアミノグリコシド系抗生物質が含まれてよい。本発明の化合物は、特定の癌治療薬との協力効果をもたらしてよい。例えば、特に、その他既知の抗癌薬との協力効果を探索するために、有望な阻害剤がヒト原発腫瘍組織アッセイにおいてスクリーニングされうる。さらに、プロテインキナーゼ阻害剤は、特定の癌治療薬（例、蝸牛および腎臓に対して毒性を有する白金ベースの薬剤）の毒性を低下させ、それによって投与量の増加が可能となるかもしれない。
【００９８】
あるいは、本発明の化合物は、被験体における聴力損失を治療するために使用されてよい。この実施形態では、化合物は、聴力損失のレベルを低下させるため、聴力損失発症後に被験体に投与される。本発明の化合物は、キナーゼカスケード、例えば、キナーゼ阻害剤、非ＡＴＰ競合型阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、Ｓｒｃ阻害剤、または焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ）モジュレーターの調節に関与してよい。理論に拘束されるものではないが、キナーゼ阻害剤の投与が、蝸牛有毛細胞のアポトーシスを阻止し、それによって聴力損失を防ぐと考えられている。一実施形態では、本発明の化合物の投与は、さらなる聴力損失を防ぐために、聴力損失に罹患している被験体に対して行われる。別の実施形態では、本発明の化合物の投与は、失われた聴力を回復させるために聴力損失に罹患している被験体に対して行われる。特に、騒音暴露後、蝸牛有毛細胞間の堅固な細胞接合だけでなく、細胞‐細胞外マトリックス相互作用も損傷およびストレスを受ける。これらの堅固な細胞接合にストレスが加わると、チロシンキナーゼが分子スイッチとして働く複雑なシグナル伝達経路を介して細胞におけるアポトーシスが始まり、焦点接着キナーゼと相互作用して細胞‐マトリックス破壊のシグナルを核に伝える。キナーゼ阻害剤の投与が、このカスケードにおけるアポトーシスの開始を防ぐと考えられている。
【００９９】
騒音に暴露された蝸牛におけるアポトーシスの確認は、騒音性聴力損失（ＮＩＨＬ）の予防に対して数多くの新たな可能性を生みだした（Ｈｕ，ｅｔ  ａｌ．；２０００，Ａｃｔａ．Ｏｔｏｌａｒｙｎｇｏｌ．，１２０，１９‐２４）。例えば、耳の正円窓への抗酸化薬の投与によって、耳がＮＩＨＬから保護されうる（Ｈｉｇｈｔ，ｅｔ  ａｌ．；２００３，Ｈｅａｒ．Ｒｅｓ．，１７９，２１‐３２、Ｈｕ，ｅｔ  ａｌ．；Ｈｅａｒ．Ｒｅｓ．１１３，１９８‐２０６）。具体的には、ＦＤＡに認可された抗酸化化合物（Ｎ‐Ｌ‐アセチルシステイン（Ｌ‐ＮＡＣ）およびサリチル酸塩）のチンチラへの投与によってＮＩＨＬが低下している（Ｋｏｐｋｅ，ｅｔ  ａｌ．；２０００，Ｈｅａｒ．Ｒｅｓ．，１４９，１３８‐１４６）。さらに、最近ではＨａｒｒｉｓらが、Ｓｒｃ‐ＰＴＫ阻害剤によるＮＩＨＬの予防を述べている（Ｈａｒｒｉｓ，ｅｔ  ａｌ．；２００５，Ｈｅａｒ．Ｒｅｓ．，２０８，１４‐２５）。故に、キナーゼの活性を調節する本発明の化合物の投与が、聴力損失の治療に有用であるとの仮説が立つ。
【０１００】
細胞接着の変化または細胞ストレスは、インテグリンの活性化を通じて、およびチロシンキナーゼのＳｒｃファミリーをはじめとするＰＴＫのリン酸化を通じて様々なシグナルを活性化しうる。Ｓｒｃの相互作用は、細胞骨格を修飾し、細胞の生存および遺伝子転写を調節する様々なプロテインキナーゼカスケードを活性化する、シグナル伝達経路と関連付けられている（Ｇｉａｎｃｏｔｔｉ  ａｎｄ  Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ；１９９９，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８５，１０２８‐１０３２でレビューされている）。実際、激しい騒音暴露後に細胞基底部で剥離した外有毛細胞（ＯＨＣ）が、アポトーシス性の細胞死に至ったことを最近の結果は示している。具体的には、蝸牛の感覚細胞において代謝的および機械的に誘発されたアポトーシスの開始に、Ｓｒｃ  ＰＴＫシグナル伝達カスケードが関与すると考えられている。最近の研究では、Ｓｒｃ阻害剤は、４時間にわたる１０６ｄＢでの４ｋＨｚオクターブ帯域の騒音からの保護をもたらし、これは、騒音暴露後の外有毛細胞においてＳｒｃ‐ＰＴＫが活性化される可能性を示唆している（Ｈａｒｒｉｓ，ｅｔ  ａｌ．；２００５，Ｈｅａｒ．Ｒｅｓ．，２０８，１４‐２５）。故に、Ｓｒｃの活性を調節する本発明の化合物は、聴力損失の治療において有用である。
【０１０１】
本発明は、被験体における骨粗しょう症を防ぐまたは治療するための方法に関する。この方法は、骨粗しょう症を防ぐまたは治療するために、効果的な量の本発明の化合物を被験体に投与するステップを伴う。骨粗しょう症を防ぐために、化合物は、骨粗しょう症の進行前に投与されてよい。あるいは化合物は、被験体における骨粗しょう症を治療するために使用されてよい。この実施形態では、骨粗しょう症のレベルを低下させるため、骨粗しょう症発症後に被験体に化合物が投与される。
【０１０２】
本発明の化合物は、例えば非ＡＴＰ競合型阻害剤でありうる。本発明の化合物は、選択される特定の側鎖および足場修飾に応じて、キナーゼシグナル伝達カスケードを調節できる。本発明の化合物は、キナーゼ阻害剤でありうる。例えば、化合物は、プロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）阻害剤でありうる。プロリンリッチチロシンキナーゼ（ＰＹＫ２、細胞接着キナーゼβ、関連接着斑チロシンキナーゼ、またはカルシウム依存性チロシンキナーゼとしても知られる）および焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ）は、様々な細胞外刺激によって調節される非受容体型プロテインチロシンキナーゼの異なるファミリーのメンバーである（Ａｖｒａｈａｍ，ｅｔ  ａｌ．；２０００，Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌ．，１２，１２３‐１３３、Ｓｃｈｌａｅｐｆｅｒ，ｅｔ  ａｌ．；１９９９，Ｐｒｏｇ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，７１，４３５‐４７８）。本発明の化合物はＳｒｃ阻害剤でありうる。破骨細胞機能の欠如のために、Ｓｒｃ欠損がマウスにおける骨粗しょう症と関連があることが示されている（Ｓｏｒｉａｎｏ，ｅｔ  ａｌ．；１９９１，Ｃｅｌｌ，６４，６９３‐７０２）。あるいは、本発明の化合物は、インターロイキン‐１受容体関連キナーゼＭ（ＩＲＡＫ‐Ｍ）の発現を調節できる。ＩＲＡＫ‐Ｍを欠くマウスは、重篤な骨粗しょう症を発症し、これは破骨細胞の分化の促進、破骨細胞の半減期の増加、およびそれらの活性化と関連がある（Ｈｏｎｇｍｅｉ，ｅｔ  ａｌ．；２００５，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，２０１，１１６９‐１１７７）。
【０１０３】
多核化破骨細胞は、単核食細胞が融合することで生じ、骨の吸収を介して骨の成長およびリモデリングにおいて主要な役割を担う。破骨細胞は石灰化マトリックスを分解する、多核の最終分化細胞である。正常な骨組織では、骨芽細胞による骨の形成と破骨細胞による骨の吸収の間にバランスが存在する。この動的な高度に調節されたプロセスのバランスが崩れるとき、骨の吸収が骨の形成を上回り、骨の量的な損失をもたらしうる。骨の成長およびリモデリングに破骨細胞が欠かせないことから、それらの数および／または活性の増加は、全身の骨の損失を伴う病気（例、骨粗しょう症）および局所的な骨の損失を伴うその他もの（例、関節リウマチ、歯周病）につながる。
【０１０４】
破骨細胞および骨芽細胞はともに、プロテインキナーゼが関わる数多くの細胞シグナル伝達経路に指令を出す。破骨細胞の活性化は、骨への接着、細胞骨格再構築、明帯の形成、および極性化した波状の膜の形成によって始まる。プロテイン‐チロシンキナーゼ２（ＰＹＫ２）は、それが破骨細胞内の接着で開始されたシグナル伝達によってチロシンリン酸化され、活性化されることから、細胞表面から細胞骨格へのシグナルの伝達に参加すると考えられている（Ｄｕｏｎｇ，ｅｔ  ａｌ．；１９９８，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０２，８８１‐８９２）。最近のエビデンスでは、ＰＹＫ２タンパク質レベルの低下が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの破骨細胞形成および骨の吸収の阻害をもたらすことが示唆されている（Ｄｕｏｎｇ，ｅｔ  ａｌ．；２００１，Ｊ．Ｂｉｏ．Ｃｈｅｍ．，２７６，７４８４‐７４９２）。従って、ＰＹＫ２またはその他のプロテインチロシンキナーゼの阻害は、破骨細胞の形成および骨の吸収を低下させることによって、骨粗しょう症のレベルを低下させる可能性がある。故に、理論に拘束されることなく、本発明の化合物の投与が、キナーゼ（例、ＰＴＫ）活性を調節し、従って破骨細胞の形成および／または骨の吸収の阻害をもたらし、これによって骨粗しょう症を治療するとの仮説が立つ。
【０１０５】
Ｓｒｃチロシンキナーゼは、Ｓｒｃノックアウトマウス研究およびｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞実験によって確認されているように、骨疾患に対する有望な治療標的として注目されており、破骨細胞（ポジティブ）および骨芽細胞（ネガティブ）両方におけるＳｒｃに対する調節的役割が示唆されている。破骨細胞では、Ｓｒｃは、各種のシグナル伝達経路、特にサイトカインおよびインテグリンシグナル伝達を仲介することによって、運動性、極性化、生存、活性化（波状縁形成）、および接着において重要な役割を果たしている（Ｐａｒａｎｇ  ａｎｄ  Ｓｕｎ；２００５，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，１５，１１８３‐１２０７）。さらに、マウスにおけるｓｒｃ遺伝子の標的破壊は、他の組織または細胞に明らかな形態学的または機能的異常を示すことなく、骨の吸収の低下を特徴とする疾患である大理石骨病を誘発する（Ｓｏｒｉａｎｏ，ｅｔ  ａｌ．；１９９１，Ｃｅｌｌ，６４，６９３‐７０２）。ｓｒｃ−／−マウスの大理石骨病の表現型は、細胞自律的であり、正常では高レベルのＳｒｃタンパク質を発現する成熟破骨細胞の異常に起因する（Ｈｏｒｎｅ，ｅｔ  ａｌ．；１９９１，Ｃｅｌｌ，１１９，１００３‐１０１３）。破骨細胞の活動を誘発し骨芽細胞を抑制するＳｒｃチロシンキナーゼの有効性を制限することによって、Ｓｒｃ阻害剤が骨の分解を減らし、骨の形成を促進すると考えられる。破骨細胞は正常では高レベルのＳｒｃを発現することから、Ｓｒｃキナーゼ活性の阻害は骨粗しょう症の治療において有用である可能性がある（Ｍｉｓｓｂａｃｈ，ｅｔ  ａｌ．；１９９９，Ｂｏｎｅ，２４，４３７‐４４９）。故に、Ｓｒｃの活性を調節する本発明のＰＴＫ阻害剤は、骨粗しょう症の治療に有用である。
【０１０６】
本明細書で説明されるように、本発明の化合物は、被験体における肥満を防ぐまたは予防するために使用されてよい。肥満を防ぐために、化合物は、被験体において肥満が進行する前に投与されてよい。あるいは、化合物は、被験体における肥満を治療するために使用されてよい。本発明の化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケード、例えば、キナーゼ阻害剤、非ＡＴＰ競合型阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、プロテインチロシンホスファターゼ阻害剤、またはプロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ阻害剤のモジュレーションに関与していてよい。
【０１０７】
肥満は、糖尿病およびインスリン応答性組織、例えば骨格筋、肝臓、および白色脂肪組織中のインスリン抵抗性の増加と関連がある（Ｋｌａｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．；２０００，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，２０，５４７９‐５４８９）。インスリンは、グルコース恒常性、脂質代謝、およびエネルギーバランスの調節において重要な役割を担っている。インスリンシグナル伝達は、受容体型チロシンキナーゼであるインスリン受容体（ＩＲ）にインスリンが結合することによって始まる。インスリンの結合は、多数のチロシン残基上のＩＲの自己リン酸化で始まるリン酸化イベントのカスケードを惹起する。自己リン酸化は、ＩＲキナーゼ活性を高め、下流のシグナル伝達イベントを誘発する。プロテインチロシンキナーゼの刺激作用およびプロテインチロシンホスファターゼの阻害作用が、インスリンの作用を主に定める。適切なインスリンシグナル伝達は、血中グルコース濃度の大きな変動を最小限に抑え、細胞へのグルコースの十分な送達を確実なものにする。インスリン刺激が多様なチロシンリン酸化イベントにつながることから、１つ以上のプロテイン‐チロシンホスファターゼ（ＰＴＰ）の活性の増強がインスリン抵抗性をもたらす可能性があり、これが肥満につながるかもしれない。実際に、ＰＴＰ活性の上昇は、肥満をはじめとするいくつかのインスリン抵抗状態で報告されている（Ａｈｍａｄ，ｅｔ  ａｌ．；１９９７，Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，４６，１１４０‐１１４５）。故に、理論に拘束されることなく、本発明の化合物の投与は、キナーゼ（例、ＰＴＰ）活性を調節し、それによって被験体における肥満を治療する。
【０１０８】
インスリンシグナル伝達は、チロシンリン酸化を介するＩＲの活性化とともに始まり、グルコース輸送体、ＧＬＵＴ４によるグルコースの細胞への取り込みによって終わる（Ｓａｌｔｉｅｌ  ａｎｄ  Ｋａｈｎ；２００１，Ｎａｔｕｒｅ，４１４，７９９‐８０６）。次に、活性化されたＩＲは不活性化されて基礎的状態に戻らなくてはならず、これはプロテイン‐チロシンホスファターゼ‐１Ｂ（ＰＴＰ‐１Ｂ）が関与すると考えられているプロセスである（Ａｈｍａｄ，ｅｔ  ａｌ．；１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７０，２０５０３‐２０５０８）。マウスにおけるＰＴＰ‐１Ｂをコードする遺伝子の破壊は、インスリンへの感受性および食餌性肥満に対する抵抗性の増加をもたらす（Ｅｌｃｈｅｂｌｙ，ｅｔ  ａｌ．；１９９９，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８３，１５４４‐１５４８、Ｋｌａｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．；２０００，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，２０，５４７９‐５４８９）。ＰＴＰ‐１Ｂ欠損マウスにおける脂肪蓄積の低下は、脂肪細胞の数の減少を伴わない脂肪細胞量の著しい減少によるものであった（Ｋｌａｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．；２０００，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，２０，５４７９‐５４８９）。さらに、ＰＴＰ‐１Ｂ欠損マウスにおける痩せは、基礎代謝率と総エネルギー消費量の増加を伴うものであり、脱共役タンパク質ｍＲＮＡ発現の著しい変化はなかった。ＰＴＰ‐１Ｂ遺伝子の破壊は、ＰＴＰ‐１Ｂの活性を変化させることで、インスリンシグナル伝達およびｉｎ
ｖｉｖｏにおける食餌性肥満を調節できることを示した。故に、理論に拘束されることなく、インスリンシグナル伝達（例、ＰＴＰ‐１Ｂ活性）を調節する本発明の化合物の投与は、被験体における肥満の治療において有用である。
【０１０９】
本明細書で説明されるように、本発明の化合物は、被験体における糖尿病を防ぐまたは予防するために使用されてよい。糖尿病を防ぐため、化合物は、被験体における糖尿病の発症前に投与されてよい。あるいは、化合物は、被験体における糖尿病を治療するために使用されてよい。本発明の化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケード、例えばキナーゼ阻害剤、非ＡＴＰ競合型阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、ＰＴＥＮ（第１０染色体から欠失しているホスファターゼ・テンシンホモログ）阻害剤、またはＳＨＩＰ２（ＳＨ２含有イノシトール５’−ホスファターゼ２）阻害剤のモジュレーションに関与していてよい。
【０１１０】
２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）は、エネルギー代謝の調節異常の疾患である。タンパク質、炭水化物、および脂質の合成と貯蔵を促進し、それらが分解され、放出されて循環血液中に戻るのを抑制する、強力なタンパク質同化剤であるホルモンインスリンによってエネルギー代謝が主に制御される。インスリンの作用は、そのチロシンキナーゼ受容体への結合によって始まり、これが自己リン酸化およびキナーゼの触媒活性の増加をもたらす（Ｐａｔｔｉ，ｅｔ  ａｌ．；１９９８，Ｊ．Ｂａｓｉｃ  Ｃｌｉｎ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．９，８９‐１０９）。チロシンリン酸化は、インスリン受容体基質（ＩＲＳ）タンパク質をホスファチジルイノシトール３‐キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）のｐ８５調節性サブユニットと相互作用させ、細胞種に応じて、酵素の活性化および特異的な細胞内部位へのその標的化をもたらす。酵素は、脂質産物ホスファチジルイノシトール‐３，４，５‐トリスリン酸（ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３）を生成し、これが多くのタンパク質の局在化および活性を調節する（Ｋｉｄｏ，ｅｔ  ａｌ．；２００１，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，８６，９７２‐９７９）。ＰＩ３Ｋは、インスリン刺激性のグルコース取り込みおよび貯蔵、脂肪分解の阻害、および肝臓での遺伝子発現の調節において重要な役割を担う（Ｓａｌｔｉｅｌ，ｅｔ  ａｌ．；２００１，Ｎａｔｕｒｅ，４１４，７９９‐８０６）。優性阻害型のＰＩ３Ｋの過剰発現は、グルコースの取り込みおよびグルタミン酸輸送体４、ＧＬＵＴ４の原形質膜への移行をブロックしうる（Ｑｕｏｎ，ｅｔ  ａｌ．；１９９５，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１５，５４０３‐５４１１）。故に、キナーゼ（例、ＰＩ３Ｋ）活性を調節し、従ってグルコース取り込みの増加をもたらす本発明の化合物の投与は、糖尿病の治療において有用である。
【０１１１】
ＰＴＥＮは、多くの細胞種におけるＰＩ３Ｋシグナル伝達の主要な調節物質であり、ＰＩ３Ｋ経路の抗アポトーシス、増殖、および肥大活性の拮抗作用のため、腫瘍抑制因子として働く（Ｇｏｂｅｒｄｈａｎ，ｅｔ  ａｌ．；２００３，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．，１２，Ｒ２３９‐Ｒ２４８、Ｌｅｓｌｉｅ，ｅｔ  ａｌ．；２００４，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，３８２，１‐１１）。理論に拘束されるものではないが、ＰＴＥＮは、ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３分子の脱リン酸化によってＰＩ３Ｋ経路を減衰させ、この重要な脂質セカンドメッセンジャーをＰｔｄＩｎｓ（４，５）Ｐ２に分解すると考えられている。最近の研究では、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）を使用した内因性ＰＴＥＮタンパク質の５０％の減少が、ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３レベルのインスリン依存性の増加およびグルコースの取り込みを促進した（Ｔａｎｇ，ｅｔ  ａｌ．；２００５，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８０，２２５２３‐２２５２９）。故に、理論に拘束されることなく、ＰＴＥＮ活性を調節し、従ってグルコース取り込みの増加をもたらす本発明の化合物の投与が、糖尿病の治療に有用であるとの仮説が立つ。
【０１１２】
ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３レベルは、ＳＲＣホモロジー２（ＳＨ２）‐含有イノシトール５’‐ホスファターゼ（ＳＨＩＰ）タンパク質のファミリー、ＳＨＩＰ１およびＳＨＩＰ２によっても制御される（Ｌａｚａｒ  ａｎｄ  Ｓａｌｔｉｅｌ；２００６，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，５，３３３‐３４２）。インスリン感受性組織の中でも特に骨格筋に発現するＳＨＩＰ２は、ＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３のＰｔｄＩｎｓ（３，４）Ｐ２への変換を触媒する（Ｐｅｓｅｓｓｅ，ｅｔ  ａｌ．；１９９７；Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２３９，６９７‐７００、Ｂａｃｋｅｒｓ，ｅｔ  ａｌ．；２００３，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．，４３，１５‐２８、Ｃｈｉ，ｅｔ  ａｌ．；２００４，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７９，４４９８７‐４４９９５、Ｓｌｅｅｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．；２００５，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．，１１，１９９‐２０５）。ＳＨＩＰ２の過剰発現は、インスリン刺激性のＰｔｄＩｎｓ（３，４，５）Ｐ３レベルを著しく低下させ、これは、ＰＩ３Ｋの下流のエフェクターの活性化を減弱化すると提唱されているＳＨＩＰの能力と一致する（Ｉｓｈｉｈａｒａ，ｅｔ  ａｌ．；１９９９，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２６０，２６５‐２７２）。故に、理論に拘束されることなく、ＳＨＩＰ２活性を調節し、従ってグルコース取り込みの増加をもたらす本発明の化合物の投与は、糖尿病の治療において有用である。
【０１１３】
本明細書で説明するように、本発明の化合物は、被験体における眼疾患を防ぐまたは予防するために使用されてよい。眼疾患を防ぐために、化合物は被験体における眼疾患発症前に投与されてよい。あるいは、化合物は、被験体における眼疾患、例えば黄斑変性症、網膜症、および黄斑浮腫を治療するために使用されてよい。本発明の化合物は、キナーゼカスケード、例えばキナーゼ阻害剤、非ＡＴＰ競合型阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）受容体チロシンキナーゼ阻害剤のモジュレーションに関与していてよい。
【０１１４】
生理学的に無血管性である、角膜の視力を脅かす血管新生が発生しうる。増殖性網膜症、主に糖尿病性網膜症および加齢性黄斑変性症は、網膜浮腫および網膜下液貯留につながる血管透過性の増加および易出血性の新血管増殖を特徴とする。既存の毛細血管からの新たな血管の形成である血管形成は、正常な発達および多くの病的プロセス両者の不可欠な要素である。血管形成の複雑なカスケードの中心的な仲介物質であり、強力な透過性因子であるＶＥＧＦは、新規の治療薬の魅力的なターゲットである。ＶＥＧＦは、２つの膜結合チロシンキナーゼ受容体、ＶＥＧＦＲ‐１およびＶＥＧＦＲ‐２に対するリガンドである。リガンド結合は、ＶＥＧＦＲの二量体化およびトランスリン酸化を誘発し、続いて細胞内チロシンキナーゼドメインが活性化される。続いて起こる細胞内シグナル伝達軸は、血管内皮細胞の増殖、移動、および生存をもたらす。故に、理論に拘束されることなく、キナーゼ活性、例えばチロシンキナーゼ活性を調節し、血管形成および／または血管新生の阻害をもたらす本発明の化合物の投与は、眼疾患、例えば黄斑変性症、網膜症、および／または黄斑浮腫の治療に有用であるとの仮説が立つ。
【０１１５】
黄斑変性症は、ＶＥＧＦによって仲介される網膜漏出（血管透過性の増加）および眼底小血管の異常な成長（血管形成）を特徴とする。ＶＥＧＦは、糖尿病性網膜症および加齢性黄斑変性症両者の新生血管膜中に同定されており、この因子の眼内レベルは、糖尿病性網膜症における血管新生の重篤度と相関関係がある（Ｋｖａｎｔａ，ｅｔ  ａｌ．；１９９６，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．，３７，１９２９‐１９３４．、Ａｉｅｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３３１，１４８０‐１４８７）。これらのモデルにおけるＶＥＧＦの治療上の拮抗作用は、網膜血管新生および脈絡膜血管新生の著しい阻害だけでなく、血管透過性の低下をもたらす（Ａｉｅｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．，９２，１０４５７‐１０４６１、Ｋｒｚｙｓｔｏｌｉｋ，ｅｔ  ａｌ．；２００２，Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌ．，１２０，３３８‐３４６、Ｑｕａｍ，ｅｔ  ａｌ．；２００１，Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．，４２，２４０８‐２４１３）。故に、理論に拘束されることなく、ＶＥＧＦ活性を調節し、血管形成および／または血管新生の阻害をもたらす本発明の化合物の投与は、眼疾患、例えば黄斑変性症、網膜症、および／または黄斑浮腫の治療に有用であるとの仮説が立つ。
【０１１６】
本発明の化合物は、脳卒中に罹患するリスクがある被験体、脳卒中に罹患している被験体、または脳卒中に罹患したことがある被験体において、脳卒中を治療、予防、軽減する方法において使用される。本発明の化合物は、脳卒中後のリハビリテーションを行っている患者の治療方法において有用である。
【０１１７】
脳卒中は、脳血管障害（ＣＶＡ）としても知られている、動脈閉塞または血管破裂のいずれかのために脳の一部への血液供給が妨げられる急性の神経系の損傷である。血液供給が妨げられている脳の部分は、血液によって運ばれる酸素および／または栄養素をもはや受け取ることができない。脳細胞は損傷を受け、または壊死に陥り、これによって脳のその部分の内部のまたはその部分からの機能が障害される。脳組織は、６０〜９０秒を超える時間酸素を奪われると機能を停止し、数分後には、組織の死、すなわち梗塞につながる可能性がある不可逆的損傷を受けることになる。
【０１１８】
脳卒中は、２つの主要な種類に分類される：虚血性のもの、すなわち脳に供給する血管の閉塞、および出血性のもの、すなわち脳内また脳周囲への出血である。全ての脳卒中の大部分は虚血性脳卒中である。虚血性脳卒中は一般的に、血栓性脳卒中、塞栓性脳卒中、全身の低灌流（分水界脳卒中）、または静脈血栓症に分けられる。血栓性脳卒中では、罹患した動脈内で血栓形成プロセスが進行し、血栓、すなわち凝血塊が動脈の内腔を徐々に狭めていき、これによって遠位組織への血流を妨げる。これらの凝血塊は通常、アテローム性動脈硬化プラークの周囲に形成される。２種類の血栓性脳卒中が存在し、これらは血栓が形成される血管の種類に応じて分類される。大血管血栓性脳卒中は、総頸動脈および内頸動脈、椎骨動脈、およびウィリス輪に関わる。小血管血栓性脳卒中は、脳内動脈、ウィリス輪の分枝、中大脳動脈基部、および椎骨動脈遠位部および脳底動脈から生じる動脈に関わる。
【０１１９】
血栓はたとえ閉塞性でなかったとしても、この血栓が剥離し、その時点でこの血栓が塞栓となれば塞栓性脳卒中を引き起こしうる。塞栓は、他の箇所から発生して、動脈血流内を移動する粒子または残屑を意味する。塞栓性脳卒中は、脳の一部分への動脈アクセスが塞栓によって閉塞することを意味する。塞栓は多くの場合凝血塊であるが、アテローム性動脈硬化血管から剥離したプラークまたは脂肪、空気、場合によっては癌細胞をはじめとする多くの他の物質でもありうる。塞栓は他の箇所で発生するため、局所治療は一時的な問題の解決にしかならない。故に、塞栓の源を特定しなくてはならない。塞栓性脳卒中の４つのカテゴリー：既知の心臓起源のもの、心臓または大動脈起源の可能性があるもの（経胸郭または経食道心エコーによる）、動脈起源のもの、および起源が不明のものが存在する。
【０１２０】
全身の低灌流は、身体の全ての部位への血流量の低下である。これは最も一般的には、心停止もしくは心不整脈に起因する、または心筋梗塞、肺塞栓症、心嚢液貯留、もしくは出血の結果として心拍出量が低下することに起因する心拍出不全によるものである。低酸素血症（すなわち、低血中酸素含有量）は、低灌流を引き起こす可能性がある。血流量の低下は広範囲にわたるため、脳の全ての部位に影響が出る可能性があり、特に主要な脳動脈から供給を受ける境界領域である「分水界」領域が影響を受ける。これらの領域への血流は必ずしも止まってはいないが、そのかわり脳障害が生じる程度まで低下している可能性がある。
【０１２１】
脳内の静脈は、血液を体に送り返す働きをする。血栓症のために静脈が閉塞すると血液の排出は妨げられ、血液が逆流し、脳浮腫を引き起こす。この脳浮腫は、虚血性および出血性両方の脳卒中をもたらしうる。これは一般に、珍しい病気である静脈洞血栓症において生じる。
【０１２２】
脳卒中は、当該技術分野で知られる様々なテクニック、例えば神経学的検査、血液検査、ＣＴスキャン（コントラスト促進なし）、ＭＲＩスキャン、ドップラー超音波検査、および動脈造影（すなわち、血流に放射線不透過物質を注入した後の動脈のＸ線撮影）のうちの１つ以上を用いて、被験体または患者において診断される。画像化で脳卒中が確認されると、周囲に塞栓源が存在するかどうかを判定するためにその他各種の検査が行われる。これらの検査には、例えば、頸動脈の超音波／ドップラー検査（頸動脈狭窄症を検出するため）、心電図（ＥＣＧ）および心エコー検査（不整脈と、その結果として生じる、血流を介して脳血管に広がる可能性がある心臓内の凝血塊を確認するため）、間欠性不整脈を確認するためのホルター心電図検査および脳血管系の血管造影（出血が動脈瘤または動静脈奇形に起因するものと考えられる場合）が含まれる。
【０１２３】
脳卒中または脳卒中に伴う症状を治療、予防、または軽減するこれらの方法において有用な化合物は、脳卒中の最中に、または脳卒中後に進行するキナーゼシグナル伝達カスケードを調節する化合物である。いくつかの実施形態では、化合物はキナーゼ阻害剤である。例えば、化合物はチロシンキナーゼ阻害剤である。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤はＳｒｃ阻害剤である。例えば、本明細書で説明される、脳卒中または脳卒中に伴う症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、脳卒中の最中に、または脳卒中後に進行するキナーゼシグナル伝達カスケードのアロステリック阻害剤である。好ましくは、本明細書で説明される、脳卒中または脳卒中に伴う症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、脳卒中の最中に、または脳卒中後に進行するキナーゼシグナル伝達カスケードの非ＡＴＰ競合型阻害剤である。
【０１２４】
Ｓｒｃ活性の阻害は、脳卒中の最中の脳の保護をもたらすことが示されている（その開示内容全体が参考として本明細書で援用される、Ｐａｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｖｏｌ．７（２）：２２２‐２２７（２００１）を参照）。虚血性傷害に応えて産生される血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、血管透過性を促進することが示されている。Ｓｒｃキナーゼが、脳卒中後の脳においてＶＥＧＦ仲介性のＶＰを調節することが研究で示されており、脳卒中前後のＳｒｃ阻害剤の投与は、浮腫を減少させ、脳かん流を改善し、傷害発生後の梗塞量を減少させた。（Ｐａｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００１）。故に、Ｓｒｃ阻害は、脳卒中後の二次障害の予防、治療、または軽減において有用であり得る。
【０１２５】
本発明の化合物は、脳卒中または脳卒中に伴う症状を予防、治療、または軽減する。脳卒中の症状には、突然のしびれまたは衰弱、特に体の片側のもの、突然の錯乱もしくは発話困難もしくは言語理解障害、突然の片目もしくは両目の視力低下、突然の歩行困難、めまい、または平衡感覚もしくは協調の喪失、あるいは原因不明の突然の激しい頭痛が含まれる。
【０１２６】
通常、脳卒中には３つの治療段階がある：予防、脳卒中直後の治療、および脳卒中後のリハビリテーションである。初めてのまたは再発性の脳卒中を予防するための治療は、脳卒中の基礎的なリスク因子、例えば、高血圧、高コレステロール、心房細動、および糖尿病の治療に基づく。急性脳卒中治療は、虚血性脳卒中の原因となっている凝血塊を直ちに溶解することによって、または出血性脳卒中の出血を止めることによって、脳卒中をそれが生じている間に抑えようと試みる。脳卒中後のリハビリテーションは、脳卒中のダメージによって生じた障害を個人が克服する手助けをする。投薬または薬物療法は、脳卒中に対する最も一般的な治療法である。脳卒中を予防するまたは治療するために使用される最も一般的なクラスの薬は、抗血栓薬（例えば、抗血小板薬および抗凝固薬）および血栓溶解薬である。化合物は、脳卒中に罹患するリスクがある患者、脳卒中に罹患している患者、または脳卒中に罹患したことがある患者に、脳卒中が発生する前、最中、後の時点で、またはこれらの任意の組み合わせで投与される。本発明の化合物は、医薬組成物の状態で単独で投与される、または様々な既知の治療薬、例えば抗血小板薬（例、アスピリン、クロピドグレル、ジピリダモール）、抗凝固薬、（例、ワルファリン）、または血栓溶解薬（例、組織プラスミノゲン活性化因子（ｔ‐ＰＡ）、レテプラーゼ、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、テネクテプラーゼ、ラノテプラーゼ、またはアニストレプラーゼ）のいずれかとの組み合わせで投与される。
【０１２７】
本発明の化合物は、アテローム性動脈硬化症のリスクがある被験体、またはアテローム性動脈硬化症に罹患している被験体において、アテローム性動脈硬化症またはその症状を治療、予防、軽減する方法において使用される。
【０１２８】
アテローム性動脈硬化症は、動脈血管を侵す病気であり、一般に動脈の「硬化」と呼ばれる。これは動脈内における多数のプラーク形成が原因となる。アテローム性動脈硬化性プラークは動脈の拡張によって代償されるものの、最終的にはプラークの破裂および動脈の狭窄（すなわち、狭くなる）に至り、これが今度はその動脈が栄養を供給している臓器への不十分な血液供給につながる。あるいは、代償的な動脈拡張プロセスが過剰であると、網動脈瘤が生じる。これらの合併症は慢性的なものであり、ゆっくりと進行し、蓄積される。最も一般的には、軟らかいプラークが突然破裂し、血流を急速に遅延させるまたは止める凝血塊（すなわち血栓）の形成をもたらし、続いてその動脈によって栄養が供給されている組織の死につながる。この重篤なイベントは梗塞と呼ばれる。例えば、冠動脈の冠動脈血栓症は、一般に心臓発作として知られる心筋梗塞を引き起こす。心筋梗塞は、冠動脈の内層にアテローム性動脈硬化性プラークがゆっくりと形成され、その後突然破裂し、動脈を完全に閉塞し、下流の血流を妨げた場合に発生する。
【０１２９】
アテローム性動脈硬化症および急性心筋梗塞は、様々な臨床的および／または検査室検査、例えば、理学的検査、放射線または超音波検査、および血液分析のいずれかを使用して、患者において診断される。例えば、医師または臨床医は、被験体の動脈を聴診し、雑音と呼ばれる、異常なヒューヒューという音を検出することができる。雑音は、罹患している動脈上に聴診器を当てると聞くことができる。あるいは、またはこれに加えて、臨床医または内科医は、微弱化または消失といった異常について、例えば脚または足の脈拍を確認することができる。内科医または臨床医は、異常を発見するために、コレステロール値をチェックするための、または心筋酵素、例えばクレアチンキナーゼ、トロポニン、および乳酸脱水素酵素のレベルをチェックするための血液検査を行ってもよい。例えば、心筋に非常に特異的なトロポニンサブユニットＩまたはＴは、恒久的な傷害が進行する前に上昇する。胸痛の状況においてトロポニンが陽性であるということは、近い将来心筋梗塞が発生する可能性が高いことを正確に予測している可能性がある。アテローム性動脈硬化症および／または心筋梗塞を診断するためのその他の検査には、例えば、被験体の心拍の速さと規則性を測定するためのＥＫＧ（心エコー検査）、足首の血圧を腕の血圧と比較する、足関節・上腕血圧比を測定する胸部Ｘ線撮影、動脈の超音波検査、関心領域のＣＴスキャン、血管造影、運動負荷検査、心臓核医学検査、および心臓の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）およびポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）スキャンが含まれる。
【０１３０】
アテローム性動脈硬化症またはその症状を治療、予防、または軽減するこれらの方法において有用な化合物は、アテローム性動脈硬化症のリスクがある患者、またはアテローム性動脈硬化症に罹患している患者におけるキナーゼシグナル伝達カスケードを調節する化合物である。いくつかの実施形態では、化合物はキナーゼ阻害剤である。例えば、化合物はチロシンキナーゼ阻害剤である。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤はＳｒｃ阻害剤である。好ましくは、本明細書で説明される、アテローム性動脈硬化症またはその症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、アテローム性動脈硬化症に関与するキナーゼシグナル伝達カスケードのアロステリック阻害剤である。好ましくは、本明細書で説明される、アテローム性動脈硬化症またはアテローム性動脈硬化症に伴う症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、アテローム性動脈硬化症に関与するキナーゼシグナル伝達カスケードの非ＡＴＰ競合型阻害剤である。
【０１３１】
Ｓｒｃによる細胞シグナル伝達は、血管透過性（ＶＰ）として知られる、血管の透過性の増加において重要な役割を担うと考えられている。例えば、心筋梗塞をはじめとする虚血性傷害に応えて産生される、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、血管透過性を促進することが示されている。Ｓｒｃキナーゼの阻害が、ＶＥＧＦ仲介性のＶＰを減少させることが研究で示されている（その開示内容全体が参考として本明細書で援用される、Ｐａｒａｎｇ  ａｎｄ  Ｓｕｎ，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，ｖｏｌ．１５（９）：１１８３‐１２０６（２００５）を参照）。Ｓｒｃ阻害剤で治療されたマウスは、未治療のマウスと比べて、心筋梗塞後の血管に対する外傷または傷害に伴う組織障害が低下することを示した（例えば、その開示内容全体が参考として本明細書で援用される、Ｃｈｅｒｅｓｈらによる米国特許出願公開第２００４０２１４８３６号および同第２００３０１３０２０９号を参照）。故に、Ｓｒｃ阻害は、アテローム性動脈硬化症に起因する傷害、例えば心筋梗塞に続いて起こる二次損傷の予防、治療、または軽減において有用であり得る。
【０１３２】
本発明の化合物は、脳卒中またはアテローム性動脈硬化症に伴う症状を予防、治療、または軽減する。アテローム性動脈硬化症は通常、それによって著しく動脈が狭窄し、血流を妨げられるまで、またはそれによって突然の閉塞が生じるまでは症状を呈さない。症状は、プラークおよび狭窄が発生する場所、例えば心臓内、脳内、その他の重要な臓器内、および脚または体内のほぼあらゆる場所に応じて変わる。アテローム性動脈硬化症の初期症状は、体が多くの酸素を必要とする場合、例えば運動の最中における疼痛またはけいれんの可能性があり、心臓への酸素が不足するために胸痛を感じる（狭心症）または脚への酸素が不足するために脚のけいれんを感じる可能性がある。脳へ血液を供給する動脈の狭窄は、めまいまたは一過性虚血性発作（ＴＩＡ）の原因となりえ、脳卒中の症状および徴候は２４時間未満継続する。典型的には、これらの症状は徐々に進行する。
【０１３３】
心筋梗塞の症状は、様々な程度の胸痛、不快感、発汗、衰弱、悪心、嘔吐、および不整脈を特徴とし、時に意識消失を来たす。胸痛は急性心筋梗塞に最もよく見られる症状であり、締め付けられるような、圧迫されるような、または絞られるような感覚と説明されることが多い。疼痛は、顎、首、腕、背中、および上腹部まで、最も多くは左腕または首まで広がりうる。胸痛は、３０分以上にわたって続く場合心筋梗塞が原因である可能性が高い。心筋梗塞患者は、梗塞に起因する心筋収縮能の低下が、肺うっ血または場合によっては肺水腫を伴う左室不全を引き起こすのに十分である場合は特に、息切れ（呼吸困難）を示す可能性がある。
【０１３４】
本発明の化合物は、医薬組成物の状態で単独で投与される、またはアテローム性動脈硬化のための様々な既知の治療薬、例えば、コレステロール降下薬（例、スタチン）、抗血小板薬、または抗凝固薬のいずれかとの組み合わせで投与される。
【０１３５】
本発明の化合物は、神経因性疼痛に罹患するリスクがある被験体、神経因性疼痛に罹患している被験体、または神経因性疼痛に罹患したことがある被験体において、神経因性疼痛、例えば慢性神経因性疼痛、またはその症状を治療、予防、軽減する方法において使用される。
【０１３６】
神経因性疼痛は神経痛としても知られ、通常の侵害受容性疼痛とは質的に異なるものである。神経因性疼痛は通常、一定の焼けるような感覚および／または「しびれてピリピリする」感覚および／または「電気ショック」の感覚として現れる。侵害受容性疼痛と神経因性疼痛との違いは、「通常の」侵害受容性疼痛が、痛覚神経だけを刺激するのに対し、ニューロパシーは多くの場合、同じ部位にある痛覚神経および非痛覚神経（例えば、接触、温覚、冷感に反応する神経）両方の刺激をもたらし、これによって脊髄および脳が正常では受け取ると予想されないシグナルが生成されるという事実に起因する。
【０１３７】
神経因性疼痛は、通常組織傷害を伴う、複合的な慢性疼痛状態である。神経因性疼痛があると、神経線維それ自体が損傷を受ける、機能不全となる、または傷害される可能性がある。これらの損傷神経線維は、他の疼痛の中枢へ正しくないシグナルを送る。神経線維傷害の影響には、傷害の部位および傷害周辺領域両方における神経機能の変化が含まれる。
【０１３８】
神経因性疼痛は、当該技術分野で知られている様々な検査室および／または臨床技術、例えば理学的検査の１つ以上を使用して被験体または患者において診断される。
【０１３９】
神経因性疼痛、例えば慢性神経因性疼痛、または神経因性疼痛に伴う症状を治療、予防、または軽減するこれらの方法において有用な化合物は、神経因性疼痛に関与するキナーゼシグナル伝達カスケードを調節する化合物である。いくつかの実施形態では、化合物はキナーゼ阻害剤である。例えば、化合物はチロシンキナーゼ阻害剤である。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤はＳｒｃ阻害剤である。好ましくは、神経因性疼痛またはその症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、神経因性疼痛に関与するキナーゼシグナル伝達カスケードのアロステリック阻害剤である。好ましくは、神経因性疼痛またはその症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、神経因性疼痛に関与するキナーゼシグナル伝達カスケードの非ＡＴＰ競合型阻害剤である。
【０１４０】
ｃ‐Ｓｒｃは、Ｎ‐メチル‐Ｄ‐アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体の活性を調節することが示されている（その開示内容全体が参考として本明細書で援用される、Ｙｕ  ｅｔ
ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，ｖｏｌ．９６：７６９７‐７７０４（１９９９）を参照）。低分子量のＳｒｃキナーゼ阻害剤であるＰＰ２が、ＮＭＤＡ受容体ＮＭ２サブユニットのリン酸化を低下させることが研究で示されている（その開示内容全体が参考として本明細書で援用される、Ｇｕｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏ．，ｖｏｌ．２２：６２０８‐６２１７（２００２）を参照）。故に、続いてＮＭＤＡ受容体の活性を阻害するＳｒｃの阻害は、神経因性疼痛、例えば慢性神経因性疼痛の予防、治療、または軽減において有用であり得る。
【０１４１】
本発明の化合物は、神経因性疼痛、例えば慢性神経因性疼痛、または神経因性疼痛に伴う症状を予防、治療、または軽減する。神経因性疼痛の症状には、刺すような痛みおよび焼けるような痛み、うずき、ならびにしびれが含まれる。
【０１４２】
本発明の化合物は、医薬組成物の状態で単独で投与される、または様々な既知の治療薬、例えば鎮痛薬、オピオイド、三環系抗うつ薬、抗けいれん薬、およびセロトニンノルエピネフリン再取り込み阻害剤のいずれかとの組み合わせで投与される。
【０１４３】
本発明の化合物は、Ｂ型肝炎のリスクがある被験体またはＢ型肝炎に罹患している被験体において、Ｂ型肝炎またはその症状を治療、予防、軽減する方法において使用される。
【０１４４】
Ｂ型肝炎ウイルスはヘパドナウイルス科のメンバーであり、一本鎖領域を持つ二本鎖ＤＮＡの形態のウイルスゲノムを含むタンパク質性のコア粒子と、タンパク質が埋めこまれた外側の脂質ベースのエンベロープからなる。エンベロープタンパク質は、ウイルス結合と感受性細胞への放出に関与する。内側のカプシドは、ウイルスｍＲＮＡが転写される場所である細胞の核にＤＮＡゲノムを移す。エンベロープタンパク質をコードする３つのサブゲノム転写体が、Ｘタンパク質をコードする転写体とともに作られる。４つ目のプレゲノムＲＮＡが転写され、これが細胞質ゾルにエクスポートされ、ウイルスポリメラーゼおよびコアタンパク質を翻訳する。ポリメラーゼおよびプレゲノムＲＮＡは、自己集合するコア粒子内へとカプシドで包まれ、ここでポリメラーゼタンパク質によってプレゲノムＲＮＡのゲノムＤＮＡへの逆転写が起こる。次に、成熟したコア粒子は正常の分泌経路を介して細胞を脱出し、途中でエンベロープを獲得する。
【０１４５】
Ｂ型肝炎は、複製プロセスの一部として逆転写を用いる、数少ない既知の非レトロウイルス型ウイルスの１つである。逆転写を用いるその他のウイルスには、例えばＨＴＬＶまたはＨＩＶが含まれる。
【０１４６】
ＨＢＶ感染の際、宿主の免疫応答が、肝細胞の損傷およびウイルス排除の両方に関与する。先天性免疫応答はこれらのプロセスにおいて重要な役割を持たない一方で、適応的免疫応答、特にウイルス特異的細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）は、ＨＢＶ感染に付随する肝臓傷害のほぼ全ての一因となる。感染細胞を死滅させることによって、またＨＢＶを生存幹細胞から排除する能力を持つ抗ウイルス性サイトカインを産生することによって、ＣＴＬはウイルスも排除する。肝臓障害はＣＴＬによって始まり、これによって仲介されるが、抗原非特異的炎症細胞がＣＴＬ誘発性の免疫病理反応を悪化させる可能性があり、肝臓内のＣＴＬの蓄積を血小板が促進するかもしれない。
【０１４７】
Ｂ型肝炎は、様々な臨床的および／または検査室検査、例えば理学的検査、および血液または血清分析のいずれかを使用して患者において診断される。例えば、血液または血清を、ウイルス抗原および／または宿主によって産生された抗体の存在について解析する。Ｂ型肝炎の一般的な検査では、感染の存在をスクリーニングするためにＢ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）の検出が使用される。これは、このウイルスの感染の際に出現する最初の検出可能なウイルス抗原であるが、感染の初期段階では、この抗原は存在しない可能性があり、またこの抗原は、宿主によって排除されて感染の後期では検出不能となる可能性がある。この、宿主が依然として感染しているものの、ウイルスの排除に成功している「ウインドウ」期では、Ｂ型肝炎コア抗原に対するＩｇＭ抗体（抗ＨＢｃ  ＩＧＭ）が、病気の唯一の血清学的エビデンスとなるかもしれない。
【０１４８】
ＨＢｓＡｇの出現のすぐ後に、Ｂ型肝炎ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）の名を持つ別の抗原が出現する。伝統的に、宿主血清中のＨＢｅＡｇの存在は、非常に高いウイルスの複製率と関係があるが、Ｂ型肝炎ウイルスのいくつかのバリアントは「ｅ」抗原を全く産生しない。感染の自然経過中にＨＢｅＡｇが排除される可能性があり、「ｅ」抗原に対する抗体（抗ＨＢｅ）がその直後に上昇する。この変換は通常、ウイルス複製の劇的な低下と関係がある。宿主が感染を除去できるならば、最終的にはＨＢｓＡｇは検出不能となり、Ｂ型肝炎表面抗原に対する抗体（抗ＨＢｓ）が続いて現れる。ＨＢｓＡｇが陰性であるが抗ＨＢｓが陽性の人は、感染が除去されたか、以前にワクチン接種を受けているかのどちらかである。ＨＢｓＡｇが陽性である多くの人々ではウイルス増殖がほとんどない可能性があり、故に長期的な合併症のリスクまたは他人に感染を伝播するリスクは少ないかもしれない。
【０１４９】
Ｂ型肝炎またはその症状を治療、予防、または軽減するこれらの方法において有用な化合物は、Ｂ型肝炎のリスクがある患者、またはＢ型肝炎に罹患している患者において、キナーゼシグナル伝達カスケードを調節する化合物である。いくつかの実施形態では、化合物はキナーゼ阻害剤である。例えば、化合物はチロシンキナーゼ阻害剤である。一実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤はＳｒｃ阻害剤である。好ましくは、本明細書で説明されるＢ型肝炎またはその症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、Ｂ型肝炎に関与するキナーゼシグナル伝達カスケードのアロステリック阻害剤である。好ましくは、本明細書で説明されるＢ型肝炎またはＢ型肝炎に伴う症状を治療、予防、または軽減する方法において使用される化合物は、Ｂ型肝炎に関与するキナーゼシグナル伝達カスケードの非ＡＴＰ競合型阻害剤である。
【０１５０】
Ｓｒｃは、Ｂ型肝炎ウイルスの複製において役割を担う。ウイルスによってコードされた転写因子ＨＢｘは、ＨＢＶウイルスの増殖で必要とされるステップにおいてＳｒｃを活性化する。（例えば、それぞれその開示内容全体が参考として本明細書で援用される、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，ｖｏｌ．１８：５０１９‐５０２７（１９９９）、Ｋｌｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，ｖｏｌ．１７：６４２７‐６４３６（１９９７）を参照）。故に、続いてＨＢＶウイルスのＳｒｃ仲介性増殖を阻害するＳｒｃ阻害は、Ｂ型肝炎またはその症状の予防、治療、または軽減において有用であり得る。
【０１５１】
本発明の化合物は、Ｂ型肝炎またはＢ型肝炎に伴う症状を予防、治療、または軽減する。Ｂ型肝炎の症状は典型的に、ウイルスへの暴露の３０日〜１８０日以内に発現する。しかし、Ｂ型肝炎ウイルスに感染した全ての人のうち、最大で半数が症状を示さない。Ｂ型肝炎の症状はインフルエンザと比較されることが多く、例えば食欲不振、倦怠感、悪心および嘔吐、全身の痒み、肝臓上部の痛み（例、腹部の右側、下部胸郭）黄疸、および排せつ機能の変化が含まれる。
【０１５２】
本発明の化合物は、医薬組成物の状態で単独で投与される、またはＢ型肝炎に対する様々な既知の治療薬、例えばインターフェロンα、ラミブジン（Ｅｐｉｖｉｒ‐ＨＢＶ）、およびバラクルード（エンテカビル）のいずれかとの組み合わせで投与される。
【０１５３】
本明細書で説明するように、本発明の化合物は、被験体における免疫系の活性を調節し、それによって自己免疫疾患、例えば関節リウマチ、多発性硬化症、敗血症、および狼瘡だけでなく、移植拒絶反応およびアレルギー疾患を防ぐまたは予防するために使用されてよい。あるいは、化合物は、被験体において自己免疫疾患を治療するために使用されてよい。例えば、化合物は、被験体において、自己免疫疾患の症状の重症度を低下し、または近い将来の進行を抑制しうる。本発明の化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケード、例えばキナーゼ阻害剤、非ＡＴＰ競合型阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、例えばＳｒｃ阻害剤、ｐ５９ｆｙｎ（Ｆｙｎ）阻害剤、またはｐ５６ｌｃｋ（Ｌｃｋ）阻害剤のモジュレーションに関与するかもしれない。
【０１５４】
自己免疫疾患は、自己免疫寛容が破綻し、適合的免疫系が自己抗原に反応して細胞および組織の損傷を仲介することによって生じる病気である。自己免疫疾患は、臓器特異的（例、甲状腺炎または糖尿病）でありうる、または全身性（例、全身性エリテマトーデス腎炎）でありうる。Ｔ細胞は、適合的免疫系において細胞性免疫応答を調節する。正常な条件下では、Ｔ細胞は、自己の主要組織適合複合体分子に結合した異種タンパク質のペプチド断片を認識する抗原受容体（Ｔ細胞受容体）を発現する。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）刺激後の初期の認識可能なイベントは、ＬｃｋおよびＦｙｎの活性化であり、これは免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ内のチロシン残基上のＴＣＲリン酸化をもたらす（Ｚａｍｏｙｓｋａ，ｅｔ  ａｌ．；２００３，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，１９１，１０７‐１１８）。チロシンキナーゼ、例えばＬｃｋ（プロテインチロシンキナーゼのＳｒｃファミリーのメンバーである）は、ペプチドおよびタンパク質のチロシン残基をリン酸化することによって、細胞シグナル伝達および細胞増殖の調節において重要な役割を担う（Ｌｅｖｉｔｚｋｉ；２００１，Ｔｏｐ．Ｃｕｒｒ．Ｃｈｅｍ．，２１１，１‐１５、Ｌｏｎｇａｔｉ，ｅｔ  ａｌ．；２００１，Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｓ，２，４１‐５５、Ｑｉａｎ，ａｎｄ  Ｗｅｉｓｓ；１９９７，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．，９，２０５‐２１１）。故に、理論に拘束されるものではないが、チロシンキナーゼ（例、Ｓｒｃ）活性を調節する本発明の化合物の投与は、自己免疫疾患の治療において有用であるとの仮説が立つ。
【０１５５】
チロシンキナーゼｌｃｋおよびｆｙｎは共にＴＣＲ経路において活性化されるため、ｌｃｋおよび／またはｆｙｎの阻害剤は、自己免疫薬としての利用可能性を有している（Ｐａｌａｃｉｏｓ  ａｎｄ  Ｗｅｉｓｓ；２００４，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２３，７９９０‐８０００）。ＬｃｋおよびＦｙｎは、主にＴ細胞によって、その寿命の大部分にわたって発現される。Ｔ細胞成長、恒常性、および活性化におけるＬｃｋおよびＦｙｎの役割は、動物および細胞株研究によって示されている（Ｐａｒａｎｇ  ａｎｄ  Ｓｕｎ；２００５，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅ．Ｐａｔｅｎｔｓ，１５，１１８３‐１２０７）。Ｌｃｋ活性化は、自己免疫疾患および移植拒絶反応に関与する（Ｋａｍｅｎｓ，ｅｔ  ａｌ．；２００１，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ，２，１２１３‐１２１９）。ｌｃｋ（−）Ｊｕｒｋａｔ細胞株が、Ｔ細胞受容体刺激に応えて、増殖できず、サイトカインを産生できず、細胞内カルシウム、リン酸イノシトール、およびチロシンリン酸化の増加をもたらすことができないことを結果は示している（Ｓｔｒａｕｓ  ａｎｄ  Ｗｅｉｓｓ；１９９２，Ｃｅｌｌ．，７０，５８５‐５９３、Ｙａｍａｓａｋｉ，ｅｔ  ａｌ．；１９９６，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，１６，７１５１−７１６０）。従って、ｌｃｋを阻害する物質は、Ｔ細胞の機能を効果的にブロックし、免疫抑制剤として作用し、自己免疫疾患、例えば関節リウマチ、多発性硬化症、および狼瘡だけでなく移植拒絶反応およびアレルギー疾患の領域においても利用可能性を有するであろう（Ｈａｎｋｅ  ａｎｄ  Ｐｏｌｌｏｋ；１９９５，Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ  Ｒｅｓ．，４４，３５７‐３７１）。故に、理論に拘束されるものではないが、プロテインチロシンキナーゼのＳｒｃファミリーの１つ以上のメンバー（例、ｌｃｋおよび／またはｆｙｎ）を調節する本発明の化合物の投与は、自己免疫疾患の治療において有用であるとの仮説が立つ。
【０１５６】
本発明は、実質的に純粋なＮ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトアミド（化合物１）、およびその塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグに関する：
【０１５７】
【化２】
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本発明は、安全かつ容易で、ラージスケール（＞１００ｇ）でＫＸ２‐３９１を産生する、高純度ＫＸ２‐３９１（ＨＰＬＣによる判定で＞９８．０％）の合成のための組成物およびプロセスに関する。好ましくは、合成によって、限られた不純物を有する化合物が高収率（＞８０％）で産生される。
【０１５８】
好ましい実施形態では、本発明の組成物中の化合物１は、９８％を超える純度を持つ。例えば、本発明の組成物中の化合物１の純度は、９８．５％、９９．０％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、または９９．９％である。
【０１５９】
好ましい実施形態では、本発明の組成物および製剤は、２％未満の不純物を含有する。例えば、本発明の組成物および製剤は、２％未満の下記の不純物のいずれか、またはこれらの組み合わせを含有する：塩化エチル、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、アニソール、およびパラジウム。
【０１６０】
いくつかの不純物は、溶質の重量／溶液の重量×１，０００，０００、例えば塩化エチルの重量／ＫＸ２‐３９１  ２ＨＣｌサンプルの重量×１，０００，０００と等しい、相対的な重量の測定値であるパーツ・パー・ミリオンで測定される。
【０１６１】
他の好ましい実施形態では、組成物は、ヘッドスペースガスクロマトグラフィーの残存溶媒解析によって判定される２５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約２５０ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）の塩化エチルを含有する。例えば、組成物は、２００ｐｐｍ未満、２００ｐｐｍ未満、１５０ｐｐｍ未満、１００ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。
【０１６２】
本発明の化合物および製剤は、約１００ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）のパラジウムを含有する。例えば、組成物は、７５ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ未満、３０ｐｐｍ未満、２０ｐｐｍ未満、１０ｐｐｍ未満、または５ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。
【０１６３】
ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約５０００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）のエタノールを含有する。例えば、組成物は、４５００ｐｐｍ未満、４０００ｐｐｍ未満、３５００ｐｐｍ未満、３０００ｐｐｍ未満、２５００ｐｐｍ未満、または２０００ｐｐｍ未満のエタノールを含有する。
【０１６４】
ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約５０，０００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）の酢酸エチルを含有する。例えば、組成物は、４８，０００ｐｐｍ未満、４５，０００ｐｐｍ未満、４０，０００ｐｐｍ未満、３５，０００ｐｐｍ未満、３０，０００ｐｐｍ未満、または２５，０００ｐｐｍ未満の酢酸エチルを含有する。
【０１６５】
ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約７，５００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）のヘプタンを含有する。例えば、組成物は、７，０００ｐｐｍ未満、６，５００ｐｐｍ未満、６，０００ｐｐｍ未満、５，０００ｐｐｍ未満、３，０００ｐｐｍ未満、または１，０００ｐｐｍ未満のヘプタンを含有する。
【０１６６】
ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）のアニソールを含有する。例えば、組成物は、８０ｐｐｍ未満、７５ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ未満、２５ｐｐｍ未満、１０ｐｐｍ未満、または５ｐｐｍ未満のアニソールを含有する。
【０１６７】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の溶媒和物を含む組成物に関する。
【０１６８】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の水和物を含む組成物にも関する。
【０１６９】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の酸付加塩も含む。例えば、塩酸塩である。酸付加塩は、例えば二塩酸塩でありうる。
【０１７０】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の酸付加塩を含む組成物に関する。
【０１７１】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の塩酸塩を含む組成物に関する。
【０１７２】
本発明は、実質的に純粋な化合物１の二塩酸塩を含む組成物に関する。
【０１７３】
本発明は、化合物１のプロドラッグも含む。
【０１７４】
本発明は、実質的に純粋な、化合物１の薬学的に許容される塩も含む。
【０１７５】
本発明は、実質的に純粋な化合物１またはその溶媒和物、水和物、もしくは塩と、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む組成物にも関する。
【０１７６】
本発明は、実質的に純粋なＮ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトアミド二塩酸塩にも関する：
【０１７７】
【化３】
2014037439.tif 000004
本発明は、安全かつ容易で、ラージスケール（＞１００ｇ）でＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを高収率（＞８０％）で産生し、限られた塩化エチル（ヘッドスペースガスクロマトグラフィー残存溶媒解析で判定される＜２５０ｐｐｍの塩化エチル）を有する、高純度ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌ（ＨＰＬＣによる判定で＞９８．０％）の合成のための組成物およびプロセスに関する。
【０１７８】
好ましい実施形態では、本発明の組成物中のＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌは、９８％を超える純度を持つ。例えば、本発明の組成物中のＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌの純度は、９８．５％、９９．０％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、または９９．９％である。
【０１７９】
好ましい実施形態では、本発明の組成物および製剤は、２％未満の不純物を含有する。例えば本発明の組成物および製剤は、２％未満の下記の不純物のいずれか、またはこれらの組み合わせを含有する：塩化エチル、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、アニソール、およびパラジウム。
【０１８０】
他の好ましい実施形態では、組成物は、ヘッドスペースガスクロマトグラフィーの残存溶媒解析によって判定される２５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約２５０ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）の塩化エチルを含有する。例えば、組成物は、２００ｐｐｍ未満、２００ｐｐｍ未満、１５０ｐｐｍ未満、１００ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。
【０１８１】
本発明の化合物および製剤は、約１００ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）のパラジウムを含有する。例えば、組成物は、７５ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ未満、３０ｐｐｍ未満、２０ｐｐｍ未満、１０ｐｐｍ未満、または５ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。
【０１８２】
本発明は、実質的に純粋なＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌと、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む組成物にも関する。
【０１８３】
本発明の特定の化合物は、非ＡＴＰ競合型キナーゼ阻害剤である。
【０１８４】
本発明は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグと、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を、それを必要とする被験体に投与することによって、細胞増殖性疾患を予防または治療する方法も含む。
【０１８５】
例えば、細胞増殖性疾患は前癌状態または癌である。本発明の化合物によって治療されるまたは予防される細胞増殖性疾患は、癌、例えば大腸癌または肺癌であってよい。
【０１８６】
本発明の化合物によって治療されるまたは予防される細胞増殖性疾患は、過剰増殖性疾患であってよい。
【０１８７】
本発明の化合物によって治療されるまたは予防される細胞増殖性疾患は、乾癬であってよい。
【０１８８】
例えば、増殖性疾患の治療または予防は、チロシンキナーゼの阻害を通じて生じてよい。例えば、チロシンキナーゼは、Ｓｒｃキナーゼまたは焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ）でありうる。
【０１８９】
本発明は、実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグと、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を投与することによって、キナーゼ阻害によって調節される病気または疾患を治療するまたは予防する方法に関する。例えば、チロシンキナーゼ阻害によって調節される病気または疾患は、癌、前癌状態、過剰増殖性疾患、または微生物感染である。
【０１９０】
本発明の医薬組成物は、キナーゼ経路を調節してよい。例えば、キナーゼ経路は、Ｓｒｃキナーゼ経路、または焦点接着キナーゼ経路である。
【０１９１】
本発明の医薬組成物は、キナーゼを直接調節してよい。例えば、キナーゼは、Ｓｒｃキナーゼ、または焦点接着キナーゼである。
【０１９２】
本発明の特定の医薬組成物は、非ＡＴＰ競合型キナーゼ阻害剤である。
【０１９３】
例えば、本発明の化合物は、微生物感染、例えば細菌、真菌、寄生虫、またはウイルス感染を治療するまたは予防するのに有用である。
【０１９４】
本発明の特定の医薬組成物には、実質的に純粋なＫＸ２‐３９１.２ＨＣｌが含まれる
。
【０１９５】
本発明の化合物は医薬品として使用されてよい。例えば、本発明の化合物は、抗増殖剤として、ヒトおよび／または動物の治療、例えばヒトおよび／または他の哺乳類の治療のために使用される。化合物は、例えば、抗癌剤、抗血管新生剤、抗微生物剤、抗細菌剤、抗真菌剤、抗寄生虫剤、および／または抗ウイルス剤として限定されずに使用されてよい。さらに、化合物は、その他の細胞増殖関連疾患、例えば糖尿病性網膜症、黄斑変性症、および乾癬のために使用されてよい。抗癌剤には、抗転移剤が含まれる。
【０１９６】
医薬品として使用される本発明の化合物は、例えば、実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌであってよい。
【０１９７】
本発明の一態様では、本発明の組成物、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物は、被験体における細胞増殖性疾患を治療または予防するために使用される。本実施形態の一態様では、細胞増殖性疾患は、前癌状態または癌である。本実施形態の別の態様では、細胞増殖性疾患は過剰増殖性疾患である。別の実施形態では、細胞増殖性疾患、癌、または過剰増殖性疾患の予防または治療は、キナーゼの阻害を通じて生じる。別の実施形態では、細胞増殖性疾患、癌、または過剰増殖性疾患の予防または治療は、チロシンキナーゼの阻害を通じて生じる。別の実施形態では、細胞増殖性疾患、癌、または過剰増殖性疾患の予防または治療は、Ｓｒｃキナーゼまたは焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ）の阻害を通じて生じる。別の実施形態では、被験体は哺乳類である。一実施形態では、被験体はヒトである。
【０１９８】
本発明は、被験体における癌または増殖性疾患を治療または予防する方法にも関し、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。例えば、本発明の化合物はキナーゼ阻害剤であってよい。本発明の化合物は、非ＡＴＰ競合型キナーゼ阻害剤であってよい。本発明の化合物はキナーゼを直接阻害してよい、または本発明の化合物はキナーゼ経路に影響を与えてよい。
【０１９９】
本発明の別の態様は、被験体における聴力損失を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。一実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、プロテインキナーゼに結合しているＡＴＰを阻害しない。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。一実施形態では、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２００】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、例えば、点耳剤を耳の中に投与することによって、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。別の実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。
【０２０１】
一実施形態では、化合物は、聴力損失発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は聴力損失発症後に投与される。
【０２０２】
一実施形態では、化合物は、聴力損失を引き起こす薬、例えばシスプラチンまたはアミノグリコシド系抗生物質と組み合わせて投与される。別の実施形態では、化合物は、有毛細胞を標的する薬と組み合わせて投与される。
【０２０３】
本発明の別の態様は、被験体における骨粗しょう症を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２０４】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、骨粗しょう症発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は骨粗しょう症発症後に投与される。
【０２０５】
本発明の別の態様は、被験体における眼疾患、例えば黄斑変性症、網膜症、黄斑浮腫等を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。別の実施形態では、化合物はＶＥＧＦ経路における１つ以上の構成要素を阻害する。
【０２０６】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に（例、点眼薬を眼に投与することによって）、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、眼疾患発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は眼疾患発症後に投与される。
【０２０７】
本発明の別の態様は、被験体における糖尿病を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２０８】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、糖尿病発症前に投与される。別の実施形態では、化合物は糖尿病発症後に投与される。
【０２０９】
本発明の別の態様は、被験体における肥満を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２１０】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、被験体が肥満になる前に投与される。別の実施形態では、化合物は、被験体0
が肥満になった後に投与される。
【０２１１】
本発明の別の態様は、被験体における脳卒中を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２１２】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、脳卒中が起こる前に投与される。別の実施形態では、化合物は、脳卒中が起こった後に投与される。
【０２１３】
本発明の別の態様は、被験体におけるアテローム性動脈硬化症を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２１４】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。
【０２１５】
本発明の別の態様は、被験体における免疫系の活性を調節する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロ
ドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２１６】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。
【０２１７】
本発明の別の態様は、被験体におけるＢ型肝炎を防ぐまたは治療する方法を含み、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の投与を含む。一実施形態では、化合物は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。一実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。一実施形態では、化合物は、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。例えば、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２１８】
一実施形態では、化合物の投与は、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内注入によって、腔内もしくは膀胱内注入によって、局所的に、動脈内に、病巣内に、定量ポンプによって、または粘膜に塗布することによって行われる。一実施形態では、化合物は薬学的に許容される担体とともに投与される。一実施形態では、化合物は、被験体がＢ型肝炎に罹患する前に投与される。別の実施形態では、化合物は、被験体がＢ型肝炎に罹患した後に投与される。
【０２１９】
本発明の別の態様は、細胞増殖性疾患を予防するまたは治療する方法であり、この方法は、効果的な量の実質的に純粋な化合物１、またはその塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグ、例えば実質的に純粋なＫＸ２‐３９１またはＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを有する組成物の、それを必要とする被験体への投与を含む。一実施形態では、化合物は、プロテインキナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する。別の実施形態では、化合物はアロステリック阻害剤である。別の実施形態では、化合物はペプチド基質阻害剤である。別の実施形態では、化合物は、プロテインキナーゼに結合しているＡＴＰを阻害しない。一実施形態では、化合物はＳｒｃファミリープロテインキナーゼを阻害する。別の実施形態では、Ｓｒｃファミリープロテインキナーゼはｐｐ６０ｃ‐ｓｒｃチロシンキナーゼである。
【０２２０】
本発明は、限られた不純物を含有する組成物および製剤を提供する。本発明の化合物および製剤は、当該技術分野で既知の方法、例えばＨＰＬＣで決定されるように約９８．０％を超える純度を有する。一実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約９９．０％〜約１００％の範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）の純度を有する。例えば、そのような化合物、組成物、または製剤は、９８．１％、９８．２％、９８．３％、９８．４％、９８．５％、９８．６％、９８．７％、９８．８％、９８．９％、９９．０％、９９．１％、９９．２％、９９．３％、９９．４％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、または９９．９％の純度を有しうる。
【０２２１】
本発明の組成物および製剤の最大の薬力学的効果および治療効果を発揮するために、塩化エチルおよびパラジウムのような不純物のレベルを制限することが有益である。これらの不純物は、望ましくない毒性をもたらしうる。
【０２２２】
好ましい実施形態では、本発明の組成物および製剤は、２％未満の不純物を含有する。例えば、本発明の組成物および製剤は、２％未満の下記の不純物のいずれか、またはこれらの組み合わせを含有する：塩化エチル、エタノール、酢酸エチル、ヘプタン、アニソール、およびパラジウム。
【０２２３】
他の好ましい実施形態では、組成物は、ヘッドスペースガスクロマトグラフィーの残存溶媒解析によって判定されるように２５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約２５０ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）の塩化エチルを含有する。例えば、組成物は、２００ｐｐｍ未満、２００ｐｐｍ未満、１５０ｐｐｍ未満、１００ｐｐｍ未満、または５０ｐｐｍ未満の塩化エチルを含有する。
【０２２４】
本発明の化合物および製剤は、約１００ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。ある実施形態では、本発明の化合物および製剤は、約０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの範囲（または前述の範囲内にあるあらゆる値）のパラジウムを含有する。例えば、組成物は、７５ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ未満、３０ｐｐｍ未満、２０ｐｐｍ未満、１０ｐｐｍ未満、または５ｐｐｍ未満のパラジウムを含有する。
【０２２５】
定義
便宜上、明細書、実施例、および付属の請求項において使用される特定の用語をここにまとめる。
【０２２６】
プロテインキナーゼは、酵素の大きなクラスであり、タンパク質およびペプチド中のＳｅｒ／ＴｈｒまたはＴｙｒの側鎖上のヒドロキシル基へのＡＴＰからのγ‐リン酸の転移を触媒し、各種の重要な細胞機能、恐らく最も注目に値するものとして：シグナル伝達、分化、および増殖の制御に深く関与する。人体には約２，０００種類のプロテインキナーゼが存在すると推定され、これらはそれぞれ特定のタンパク質／ペプチド基質をリン酸化する一方で、それらは全て高度に保存されたポケット内で同じ二次基質、ＡＴＰと結合する。既知の癌遺伝子産物の約５０％はプロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）であり、それらのキナーゼ活性が細胞の形質転換をもたらすことが示されている。
【０２２７】
ＰＴＫは、２つのカテゴリー、膜受容体型ＰＴＫ（例、成長因子受容体ＰＴＫ）および非受容体型ＰＴＫ（例、プロトオンコジーン産物のＳｒｃファミリーおよび焦点接着キナーゼ（ＦＡＫ））に分類可能である。Ｓｒｃの過剰な活性化は、大腸、乳房、肺、膀胱、および皮膚の癌をはじめとする多くのヒトの癌だけでなく、胃癌、有毛細胞白血病、および神経芽細胞種でも報告されている。
【０２２８】
「プロテインキナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素を阻害する」は、キナーゼシグナル伝達カスケードの１つ以上の構成要素が、細胞の機能が変化するように影響を受けることを意味する。プロテインキナーゼシグナル伝達カスケードの構成要素には、セカンドメッセンジャーならびに上流および下流の標的を含むキナーゼシグナル伝達経路に直接的または間接的に関与するあらゆるタンパク質が含まれる。
【０２２９】
「治療すること」には、状態、病気、疾患等の改善をもたらすあらゆる効果、例えば低下させること、減少させること、調節すること、または排除することが含まれる。病的状態の「治療すること」または「治療」には、病的状態を抑制すること、すなわち病的状態またはその臨床症状の進行を抑えること、あるいは病的状態を回復させること、すなわち、病的状態またはその臨床症状の一時的なまたは恒久的な退行をもたらすことが含まれる。
【０２３０】
病的状態を「予防すること」には、その病的状態に暴露される可能性がある、またはその病的状態に罹患しやすい可能性があるが、その病的状態の臨床症状をまだ経験していないまたは呈していない被験体において、病的状態の臨床症状を発症させないようにすることが含まれる。
【０２３１】
「病的状態」は、あらゆる病気、疾患、状態、症状、または徴候を意味する。
【０２３２】
本明細書で使用されるように、用語「細胞増殖性疾患」は、細胞の未制御のおよび／または異常な増殖が、癌性または非癌性でありうる望ましくない状態または病気、例えば乾癬状態の発症をもたらしうる状態を意味する。本明細書で使用されるように、用語「乾癬状態」または「乾癬」は、ケラチノサイトの過剰増殖、炎症細胞浸潤、およびサイトカインの変化を伴う疾患を意味する。
【０２３３】
一実施形態では、細胞増殖性疾患は癌である。本明細書で使用されるように、用語「癌」には、固形癌、例えば肺癌、乳癌、大腸癌、卵巣癌、脳腫瘍、肝臓癌、膵臓癌、前立腺癌、悪性黒色腫、黒色腫以外の皮膚癌だけでなく、血液の腫瘍および／または悪性疾患、例えば小児白血病およびリンパ腫、多発性骨髄腫、ホジキン病、リンパ球および皮膚起源のリンパ腫、急性および慢性白血病、例えば急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、または慢性骨髄性白血病、形質細胞腫、リンパ系腫瘍、およびＡＩＤＳに伴う癌が含まれる。
【０２３４】
乾癬状態のほかに、本発明の組成物を使用して治療されてよい増殖性疾患の種類は、表皮嚢腫および皮様嚢腫、脂肪腫、腺腫、毛細血管腫および皮膚血管腫、リンパ管腫、母斑病変、奇形腫、腎腫、筋線維腫症、骨形成性腫瘍およびその他の異形成腫瘤などである。増殖性疾患は、異形成および同様のものの疾患を含みうる。
【０２３５】
開示される発明の化合物の「効果的な量」は、病気または疾患に罹患している被験体に投与されたときに、その被験体においてその病気または疾患の退行をもたらす量である。故に、開示される発明の化合物の効果的な量は、細胞増殖性疾患に罹患している被験体に投与されたときに、その被験体において細胞増殖の退行をもたらす量である。ある被験体に投与される開示される化合物の量は、特定の疾患、投与方式、あるとすれば同時投与される化合物、およびその被験体の特性、例えば全身状態、その他の病気、年齢、性別、遺伝子型、体重、および薬剤への耐性によって変化する。これらの因子およびその他の因子に応じて、当業者は適切な投与量を決定することができるだろう。    
【０２３６】
本明細書で使用されるように、用語「効果的な量」は、単独で、または組み合わせで抗増殖薬として投与されたときに効果的な本発明の化合物、または本発明の化合物の組み合わせの量を意味する。例えば、効果的な量は、生物学的活性、例えば抗増殖活性、例えば抗癌活性または抗腫瘍活性を発揮するのに十分な、レシピエントである患者または被験体に与えられる製剤中にまたは医療器具に存在する化合物の量を意味する。化合物の組み合わせは、場合により、協力作用のある組み合わせである。例えばＣｈｏｕ  ａｎｄ  Ｔａｌａｌａｙ，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．ｖｏｌ．２２，ｐｐ．２７‐５５（１９８４）によって説明されるような協力作用は、組み合わせで投与されたときの化合物の効果が、単剤として単独で投与されたときの化合物の相加効果を上回るときに生じる。一般に、協力作用は、化合物の次善最適濃度において最もはっきりと現れる。協力作用は、個々の成分と比較した、低い細胞毒性度、または抗増殖効果の上昇、または併用のその他いくつかの有益な効果でありうる。
【０２３７】
「治療上効果的な量」は、ある病気を治療するために哺乳類に投与されたときに、その病気に対してそのような治療を効かせるのに十分な化合物の量を意味する。「治療上効果的な量」は、化合物、病気とその重症度、および治療される哺乳類の年齢、体重等に応じて変化する。
【０２３８】
治療上効果的な量の１つ以上の化合物は、ヒトまたは動物への投与用に、薬学的に許容される担体とともに製剤化されうる。従って、化合物または製剤は、効果的な量の化合物を提供するために、例えば経口的に、非経口的に、または局所経路で投与されうる。他の実施形態では、本発明に従って調製される化合物は、医療用器具、例えばステントをコーティングするため、または含漬させるために使用されうる。
【０２３９】
用語「予防上効果的な量」は、望ましくない細胞増殖のリスクを防ぐまたは低下させるために投与される、本発明の化合物（１つまたは複数）の効果的な量を意味する。
【０２４０】
本明細書で使用されるような「薬理効果」は、意図された治療目的を達成する、被験体において生み出される効果を包含する。一実施形態では、薬理効果は、治療されている被験体の最初の徴候が防がれる、軽減される、または低下することを意味する。例えば、薬理効果は、治療される被験体における最初の徴候の予防、軽減、または低下をもたらす効果であろう。別の実施形態では、薬理効果は、治療されている被験体の疾患または最初の徴候の症状が防がれる、軽減される、または低下することを意味する。例えば、薬理効果は、治療される被験体における最初の徴候の予防または低下をもたらす効果であろう。
【０２４１】
窒素を含有する本発明の化合物は、酸化剤（例、３‐クロロペルオキシ安息香酸（ｍ‐ＣＰＢＡ）および／または過酸化水素）での処理によってＮ‐オキシドに変換されて、本発明の他の化合物を生成できる。故に、全ての示される、また請求される窒素含有化合物は、原子価と構造が許す場合に、示されるような化合物とそのＮ‐オキシド誘導体（Ｎ→ＯまたはＮ＋‐Ｏ−と表すことができる）の両方を含むと考えられる。さらに、他の例では、本発明の化合物中の窒素は、Ｎ‐ヒドロキシまたはＮ‐アルコキシ化合物に変換されうる。例えば、Ｎ‐ヒドロキシ化合物は、ｍ‐ＣＰＢＡのような酸化剤による親アミンの酸化によって調製されうる。全ての示される、また請求される窒素含有化合物は、原子価と構造が許す場合に、示されるような化合物とそのＮ‐ヒドロキシ（すなわちＮ‐ＯＨ）およびＮ‐アルコキシ（すなわちＮ‐ＯＲ、Ｒは置換または未置換のＣ１‐６アルキル、Ｃ１‐６アルケニル、Ｃ１‐６アルキニル、Ｃ３‐１４炭素環、または３〜１４員のヘテロ環）誘導体の両方を含むとも考えられる。
【０２４２】
「対イオン」は、小さな、負に荷電した種、例えばクロリド、ブロミド、ヒドロキシド、アセタート、およびスルファートを表すために使用される。
【０２４３】
本明細書で用いられるような「陰性基」は、生理学的ｐＨにおいて負に荷電する基を意味する。陰性基には、カルボキシラート、スルファート、スルホナート、スルフィナート、スルファマート、テトラゾリル、ホスファート、ホスホナート、ホスフィナート、もしくはホスホロチオアート、またはこれらの機能的等価体が含まれる。陰性基の「機能的等価体」は、生物学的等価体、例えばカルボキシラート基の生物学的等価体を含むことを意図する。生物学的等価体は、古典的な生物学的に等価な等価体および非古典的な生物学的に等価な等価体の両方を包含する。古典的および非古典的な生物学的等価体は当該技術分野で既知である（例えば、Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ，Ｒ．Ｂ．Ｔｈｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．：Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．，１９９２，ｐｐ．１９‐２３を参照）。一実施形態では、陰性基はカルボキシラートである。
【０２４４】
本発明は、本化合物中に生じる全ての原子の同位元素を含むことを意図する。同位元素には、同じ原子番号を持つが、異なる質量数を持つ原子が含まれる。限定するものではないが一般的な例として、水素の同位元素には、三重水素および重水素が含まれ、炭素の同位元素にはＣ‐１３およびＣ‐１４が含まれる。
【０２４５】
本明細書で説明される化合物は、不斉中心を有していてよい。非対称に置換された原子を含有する本発明の化合物は、光学活性体またはラセミ体として単離されてよい。光学活性体の調製のしかた、例えばラセミ体の分割によるもの、または光学的に活性な出発材料からの合成によるものは当該技術分野で周知である。オレフィン、Ｃ＝Ｎ二重結合などの多くの幾何異性体も本明細書で説明される化合物中に存在でき、全てのそのような安定した異性体が本発明において意図される。本発明の化合物のシスおよびトランス幾何異性体が説明され、異性体の混合物として、または別々の異性体として単離されてよい。特定の立体化学または異性体が具体的に示されない限り、ある構造の全てのキラル型、ジアステレオマー体、ラセミ体、および幾何異性体が意図される。示されるまたは説明される化合物の全ての互変異性体も、本発明の一部であると考えられる。
【０２４６】
本明細書では、化合物の構造式は一部の例では便宜上特定の異性体を表すが、本発明には、全ての異性体、例えば、構造的に生じる、幾何異性体、不斉炭素に基づく光学異性体、立体異性体、互変異性体など、ならびに異性体の混合物が含まれ、便宜上の式の説明に限定されず、異性体または混合物のいずれかであってよい。従って、不斉炭素原子は分子中に存在していてよく、光学的に活性な化合物およびラセミ化合物が本化合物中に存在していてよいが、本発明はそれらに限定されるものではなく、あらゆるものを含む。さらに、結晶多形は存在してよいが限定するものではなく、あらゆる結晶形は単独のものもしくは結晶形の混合物、または無水物または水和物であってよい。さらに、ｉｎ  ｖｉｖｏでの本化合物の分解によって生じるいわゆる代謝産物は本発明の範囲に含まれる。
【０２４７】
「異性」は、全く同じ分子式を持つが、性質またはそれらの原子の結合の順序、または空間におけるそれらの原子の配置が異なる化合物を意味する。空間におけるそれらの原子の配置が異なる異性体は「立体異性体」と呼ばれる。互いに鏡像ではない立体異性体は「ジアステレオ異性体」と呼ばれ、重ね合わせることができない鏡像である立体異性体は「鏡像異性体」、または時に光学異性体と呼ばれる。同一でない４つの置換基と結合する炭素原子を「キラル中心」と呼ぶ。
【０２４８】
「キラル異性体」は、少なくとも１つのキラル中心を持つ化合物を意味する。これは、反対のキラリティーの２つの鏡像異性体を持ち、個々の鏡像異性体または鏡像異性体の混合物のいずれかとして存在していてよい。等量の反対のキラリティーの個々の鏡像異性体を含む混合物は「ラセミ混合物」と呼ばれる。２つ以上のキラル中心を持つ化合物は、２ｎ−１の鏡像異性ペアを有し、ｎはキラル中心の数である。２つ以上のキラル中心を持つ化合物は、個々のジアステレオマーまたは「ジアステレオマー混合物」と呼ばれるジアステレオマーの混合物のいずれかとして存在していてよい。１つのキラル中心が存在するとき、立体異性体は、そのキラル中心の絶対配置（ＲまたはＳ）によって特徴付けられてよい。絶対配置は、キラル中心に結合した置換基の空間における配置を意味する。検討中のキラル中心に結合した置換基は、Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｒｕｌｅ  ｏｆ  Ｃａｈｎ，Ｉｎｇｏｌｄ  ａｎｄ  Ｐｒｅｌｏｇ．（Ｃａｈｎ  ｅｔ  ａｌ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｅｒ．Ｅｄｉｔ．１９６６，５，３８５；ｅｒｒａｔａ  ５１１、Ｃａｈｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．１９６６，７８，４１３、Ｃａｈｎ  ａｎｄ  Ｉｎｇｏｌｄ，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９５１（Ｌｏｎｄｏｎ），６１２、Ｃａｈｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ  １９５６，１２，８１、Ｃｈａｎ，Ｊ．，Ｃｈｅｍ．Ｅｄｕｃ．１９６４，４１，１１６）に従って順位付けされる。
【０２４９】
「幾何異性体」は、それらの存在が、二重結合周囲の回転に妨げられていることによるジアステレオマーを意味する。これらの構造は、カーン・インゴルド・プレローグ順位則によると、分子中の二重結合の同一側または反対側に基があることを示す、接頭辞シスおよびトランス、またはＺおよびＥによって、それらの名前において識別される。
【０２５０】
さらに、本願で取り上げる構造およびその他の化合物には、それらの全てのアトロプ異性体が含まれる。「アトロプ異性体」は、２つの異性体の原子が空間において異なって配置されている立体異性体の１種である。アトロプ異性体の存在は、中心の結合の周囲の大型基の回転が妨げられることで回転が制限されることによる。そのようなアトロプ異性体は典型的に混合物として存在するが、近年のクロマトグラフィー技術の向上の結果、特定の例においては、２つのアトロプ異性体の混合物を分離することが可能となっている。
【０２５１】
用語「結晶多形」または「多形」または「結晶形」は、ある化合物（またはその塩もしくは溶媒和物）が、異なる結晶充填配置で結晶化でき、その全てが同じ元素組成を持つ結晶構造を意味する。異なる結晶形は通常、異なるＸ線回折パターン、赤外スペクトル、融点、密度、硬度、結晶形状、光学的および電気的特性、安定性、および溶解性を持つ。再結晶溶媒、結晶化速度、保存温度、および他の因子によって、１つの結晶形が優勢になる可能性がある。化合物の結晶多形は、異なる条件下での結晶化によって調製されうる。
【０２５２】
さらに、本発明の化合物、例えば化合物の塩は、水和物または非水和（無水）物のいずれか、またはその他の溶媒分子との溶媒和物として存在できる。水和物の非限定例には、一水和物、二水和物等が含まれる。溶媒和物の非限定例には、エタノール溶媒和物、アセトン溶媒和物等が含まれる。
【０２５３】
「溶媒和物」は、化学量論的なまたは非化学量論的な量のいずれかの溶媒を含有する溶媒付加形態を意味する。いくつかの化合物は、一定のモル比の溶媒分子を結晶性固体状態中に閉じ込める傾向があり、そのように溶媒和物を形成する。溶媒が水であれば、形成される溶媒和物は水和物であり、溶媒がアルコールであれば、形成される溶媒和物はアルコラートである。水和物は、１つ以上の水の分子と、その内部において水がその分子状態をＨ２Ｏとして保持する物質のうちの１つとの組み合わせによって形成され、そのような組み合わせは１つ以上の水和物を形成することができる。
【０２５４】
「互変異性体」は、その構造が原子の配置において著しく異なるが、容易かつ速い平衡にある化合物を意味する。本発明の化合物が異なる互変異性体として表示されてよいことが理解される。化合物が互変異性体形態を持つとき、全ての互変異性体形態が本発明の範囲内に含まれることが意図され、化合物の名称はいずれの互変異性体形態も除外するものではないことも理解される必要がある。
【０２５５】
本発明のいくつかの化合物は、互変異性体形態で存在することができる。互変異性体も、本発明の範囲内に包含されるように意図されている。
【０２５６】
本発明の化合物、塩、およびプロドラッグは、複数の互変異性体形態で存在でき、エノールおよびイミン形態、ならびにケトおよびエナミン形態、ならびにそれらの幾何異性体および混合物が含まれる。全てのそのような互変異性体は、本発明の範囲内に含まれる。互変異性体は、溶液中で互変異性セットの混合物として存在する。固体形態では、通常は１つの互変異性体が優勢である。たとえ１つの互変異性体が説明される可能性があるとしても、本発明は本化合物の全ての互変異性体を含む。
【０２５７】
互変異性体は、平衡状態にあり、１つの異性体から別のものへと容易に変換される２つ以上の構造異性体のうちの１つである。この反応は、水素原子の形式の移動をもたらし、隣接する共役二重結合の入れ替わりを伴う。互変異性化が可能である溶液中では、互変異性体の化学平衡に達する。互変異性体の正確な比は複数の因子に依存し、これには、温度、溶媒、およびｐＨが含まれる。互変異性化によって相互交換が可能である互変異性体の概念は、互変異性と呼ばれる。
【０２５８】
各種タイプの可能な互変異性の中で、２つが一般的に観察される。ケト‐エノール互変異性では、電子と水素原子の同時シフトが起こる。環‐鎖互変異性は、グルコースによって表される。これは、糖鎖分子中のアルデヒド基（‐ＣＨＯ）が、同じ分子中のヒドロキシ基（‐ＯＨ）の１つと反応して、これに環（リング形状）の形態を与えた結果として生じる。
【０２５９】
互変異性化は、塩基：１．脱プロトン化、２．非局在化アニオン（例、エノラート）の形成、３．異なる位置でのアニオンのプロトン化、酸：１．プロトン化、２．非局在化カチオンの形成、３．カチオンに隣接する異なる位置での脱プロトン化、によって触媒される。
【０２６０】
一般的な互変異性ペアは：ケトン‐エノール、アミド‐ニトリル、ラクタム‐ラクチム、ヘテロ環中のアミド‐イミド酸互変異性（核酸塩基グアニン、チミン、およびシトシン中）、アミン‐エナミン、ならびにエナミン‐エナミンである。
【０２６１】
従って、別段の記載がない限り、不斉炭素原子から生じる異性体（例、全ての鏡像異性体およびジアステレオマー）が本発明の範囲内に含まれることが理解されるものである。そのような異性体は、古典的な分離テクニックによって、また立体化学的にコントロールされた合成によって実質的に純粋な形態で得ることができる。さらに、本出願においてとりあげる構造ならびに他の化合物および部分は、それらの全ての互変異性体も含む。アルケンは、適切な場合、Ｅ‐またはＺ形状のいずれかを含みうる。本発明の化合物は立体異性形態で存在してよく、従って、個々の立体異性体または混合物として産生されうる。
【０２６２】
「医薬組成物」は、被験体への投与に適した形態の開示される化合物を含有する製剤である。一実施形態では、医薬組成物はバルクの状態か、単位剤形の状態である。投与を簡単にし、投与量を均一にするのに、組成物を単位剤形に製することは有利でありうる。本明細書で使用されるような単位剤形は、治療される被験体用の単一の投与量として適している物理的に個別の単位を意味し、各単位は、必要な医薬担体と協同して所望の治療効果をもたらすように計算された、既定量の活性試薬を含有する。本発明の単位剤形の規格は、活性試薬特有の特性および達成される特定の治療効果、ならびにそのような活性物質を個人の治療のために化合する分野に内在する制限によって決まり、これらに直接的に依存する。
【０２６３】
単位剤形は、例えば、カプセル剤、ＩＶバッグ、錠剤、エアゾール吸入器のシングルポンプ、またはバイアルをはじめとする様々な形態のいずれかである。組成物の単位用量中の活性成分（例、開示される化合物、またはその塩、水和物、溶媒和物、もしくは異性体の製剤）の量は、効果的な量であり、関与する特定の治療法に従って変化する。患者の年齢および状態に応じて、投与量に日常的な変化をつけることが必要な場合があることを当業者は理解するであろう。投与量は、投与の経路にも依存する。様々な経路が意図され、経口的、肺内、直腸内、非経口的、経皮的、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、吸入、頬側、舌下、胸膜内、髄腔内、鼻腔内などが含まれる。本発明の化合物の局所または経皮的投与用の剤形には、散剤、スプレー剤、軟膏、ペースト、クリーム、ローション剤、ゲル、液剤、パッチ、および吸入剤が含まれる。一実施形態では、活性化合物は、滅菌条件下において薬学的に許容される担体、および必要なあらゆる保存剤、緩衝剤、または噴射剤と混合される。
【０２６４】
用語「フラッシュ用量」は、急速に分散する剤形である化合物製剤を意味する。
【０２６５】
用語「即時放出」は、比較的短い時間、通常は最大約６０分間の剤形からの化合物の放出として定められる。用語「調節放出」は、遅延放出、延長放出、およびパルス放出を含むものと定められる。用語「パルス放出」は、剤形からの薬の一連の放出として定められる。用語「持続放出」または「延長放出」は、長期間にわたる剤形からの化合物の継続的な放出として定められる。
【０２６６】
「被験体」には、哺乳類、例えばヒト、コンパニオンアニマル（例、犬、猫、鳥など）、家畜動物（例、牛、羊、豚、馬、家禽など）、および実験動物（例、ラット、マウス、モルモット、トリなど）が含まれる。一実施形態では、被験体はヒトである。
【０２６７】
本明細書で用いられるように、表現「薬学的に許容される」は、健全な医学的判断の範囲内において、理にかなった利益／リスク比に見合った、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題あるいは合併症を引き起こすことなくヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適した、化合物、材料、組成物、担体、および／または剤形を意味する。
【０２６８】
「薬学的に許容される賦形剤」は、一般に安全で、毒性を持たず、生物学的またはその他の点でも望ましくないものでない、医薬組成物の調製に有用な賦形剤を意味し、家畜への使用だけでなくヒトへの薬学的使用に許容される賦形剤が含まれる。明細書および請求項で使用されるような「薬学的に許容される賦形剤」には、１つのおよび２つ以上のそのような賦形剤がともに含まれる。
【０２６９】
本発明の化合物は、さらに塩を形成することができる。これらの形態の全ても、請求される発明の範囲内に含まれるように意図される。
【０２７０】
化合物の「薬学的に許容される塩」は、薬学的に許容され、親化合物の所望の医薬活性を有する塩を意味する。
【０２７１】
本明細書で用いられるように、「薬学的に許容される塩」は、開示される化合物の誘導体を意味し、その酸性塩または塩基性塩を作ることで親化合物が修飾される。薬学的に許容される塩の例には、塩基性残基、例えばアミンの鉱酸塩または有機酸塩、酸性残基、例えばカルボン酸等の酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが含まれるがこれらに限定されない。薬学的に許容される塩には、例えば、非毒性の無機酸または有機酸から形成される親化合物の伝統的な非毒性塩または４級アンモニウム塩が含まれる。例えば、そのような伝統的な非毒性塩には、２‐アセトキシ安息香酸、２‐ヒドロキシエタンスルホン酸、酢酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、重炭酸、炭酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、１，２‐エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、グリコールリアルサニン酸、ヘキシルレゾルシン酸、ヒドラバム酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフトエ酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ナプシリン酸、硝酸、シュウ酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、ポリガラクツロン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、スバセチン酸、コハク酸、スルファミン酸、スルファニル酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、および一般に生じるアミン酸、例えばグリシン、アラニン、フェニルアラニン、アルギニン等から選択される無機酸および有機酸由来のものが含まれるがこれらに限定されない。
【０２７２】
その他の例には、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、ピルビン酸、マロン酸、３‐（４‐ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、４‐クロロベンゼンスルホン酸、２‐ナフタレンスルホン酸、４‐トルエンスルホン酸、カンファースルホン酸、４‐メチルビシクロ‐［２．２．２］‐オクト‐２‐エン‐１‐カルボン酸、３‐フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、ｔｅｒｔ‐ブチル酢酸、ムコン酸などが含まれる。本発明は、親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えばアルカリ金属イオン、アルカリ土類イオン、またはアルミニウムイオンによって置換されているか、または有機塩基、例えばエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ‐メチルグルカミンなどと配位しているかのいずれかである場合に形成される塩も包含する。
【０２７３】
薬学的に許容される塩への全ての言及が、同一の塩の、本明細書で定められるような溶媒付加形態（溶媒和物）または結晶形（多形）を含むことが理解される必要がある。
【０２７４】
本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法によって、塩基性部分または酸性部分を含む親化合物から合成されうる。一般に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸形態または遊離塩基形態を化学量論的な量の適切な塩基または酸と、水または有機溶媒中、あるいはこれら２つの混合物中で反応させることによって調製可能であり、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水性媒体が使用されうる。適当な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）に認められる。例えば、塩には、本発明の脂肪族アミン含有化合物、ヒドロキシルアミン含有化合物、およびイミン含有化合物の塩酸塩および酢酸塩が含まれうるがこれらに限定されない。
【０２７５】
本発明の化合物は、プロドラッグ、例えば薬学的に許容されるプロドラッグとして調製されうる。用語「プロ‐ドラッグ」および「プロドラッグ」は、本明細書において互換可能に用いられ、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて活性な親薬剤を放出するあらゆる化合物を意味する。プロドラッグは医薬品の多くの望ましい品質（例、溶解性、バイオアベイラビリティ、製造等）を高めることが知られているため、本発明の化合物はプロドラッグ形態で送達されうる。故に、本発明は、ここで請求されている化合物、そのようなものおよびそのようなものを含有する組成物を送達する方法を含むことを目的とする。「プロドラッグ」は、そのようなプロドラッグが被験体に投与されたときに、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて本発明の活性な親薬剤を放出する、あらゆる共有結合した担体を含むことを目的とする。本発明のプロドラッグは、ルーチンの操作、またはｉｎ  ｖｉｖｏのいずれかにおいて修飾が切断されて親化合物になるようなやり方で、化合物中に存在する官能基を修飾することによって調製される。プロドラッグには、本発明の化合物が含まれ、ヒドロキシ基、アミノ基、スルフヒドリル基、カルボキシ基、またはカルボニル基は、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて切断されて、それぞれ遊離ヒドロキシル基、遊離アミノ基、遊離スルフヒドリル基、遊離カルボキシ基、または遊離カルボニル基を形成してよい、あらゆる基と結合している。
【０２７６】
プロドラッグの例には、化合物中のヒドロキシ官能基のエステル（例、アセタート、ジアルキルアミノアセタート、ホルマート、ホスファート、スルファート、およびベンゾアート誘導体）ならびにカルバマート（例、Ｎ，Ｎ‐ジメチルアミノカルボニル）、カルボキシル官能基のエステル基（例、エチルエステル、モルホリノエタノールエステル）、アミノ官能基のＮ‐アシル誘導体（例、Ｎ‐アセチル）Ｎ‐マンニッヒ塩基、シッフ塩基、およびエナミノン、ケトンおよびアルデヒド官能基のオキシム、アセタール、ケタール、およびエノールエステルなど含まれるがこれらに限定されず、例えば、Ｂｕｎｄｅｇａａｒｄ，Ｈ．「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」ｐ１‐９２，Ｅｌｅｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ‐Ｏｘｆｏｒｄ（１９８５）を参照されたい。
【０２７７】
「保護基」は、分子中の反応基と結合したとき、その反応性をマスクする、低下させる、または妨げる原子の集団を意味する。保護基の例は、Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，（Ｗｉｌｅｙ，２ｎｄ  ｅｄ．１９９１）、Ｈａｒｒｉｓｏｎ  ａｎｄ  Ｈａｒｒｉｓｏｎ
ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖｏｌｓ．１‐８（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９７１‐１９９６）、およびＫｏｃｉｅｎｓｋｉ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ，（Ｖｅｒｌａｇ，３ｒｄ  ｅｄ．２００３）に見つけることができる。
【０２７８】
「安定した化合物」および「安定した構造」は、反応混合物からの有用な純度までの単離、および有効な治療薬への製剤化に耐えるよう十分堅固な化合物を示すものである。
【０２７９】
本明細書では、文脈による明らかな別段の記載がない限り、単数形は複数形も含む。別段の定めがない限り、本明細書で用いられる全ての技術用語および科学用語は、本明細書が属する分野の業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を持つ。疑義が生じた場合には、本明細書が優先される。
【０２８０】
本明細書で使用される全ての割合および比は、別段の記載がない限り、重量によるものである。
【０２８１】
「併用療法」（またはｃｏ‐ｔｈｅｒａｐｙ）には、本発明の化合物と少なくとも１つの第２の物質の、これらの治療薬の相互作用から有益な効果をもたらすことを目的とする特定の治療レジメンの一部としての投与が含まれる。組み合わせの有益な効果には、治療薬の組み合わせから生じる薬物動態学的または薬物力学的相互作用が含まれるがこれらに限定されない。これらの治療薬の組み合わせでの投与は典型的に、定められた時間（通常は、選択される組み合わせに応じて数分間、数時間、数日、または数週）にわたって行われる。通常はそうではないが、「併用療法」は、本発明の組み合わせを偶発的におよび任意にもたらす個別の単剤療法レジメンの一部としての、これらの治療薬の２つ以上の投与を包含することを目的としてよい。
【０２８２】
「併用療法」は、これらの治療薬の逐次での投与、すなわち、各治療薬が異なる時点で投与されるものだけでなく、これらの治療薬または治療薬の少なくとも２つの実質的に同時の投与を包含することを目的とする。実質的に同時の投与は、例えば、一定の比率の各治療薬を有する単一のカプセルを、または治療薬のそれぞれについて多数の単一のカプセルを被験体に投与することで達成されうる。各治療薬の逐次投与または実質的に同時の投与は、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路、および粘膜組織を介した直接吸収を含むがこれらに限定されないあらゆる適切な経路によって行われうる。治療薬は、同じ経路によって、または異なる経路によって投与されうる。例えば、選択された組み合わせの第１の治療薬が静脈内注入によって投与されてよい一方で、組み合わせのもう１つの治療薬は経口的に投与されてよい。あるいは、例えば、全ての治療薬は経口的に投与されてよい、または全ての治療薬は静脈内注入によって投与されてよい。治療薬が投与される順番は、狭義において重要ではない。
【０２８３】
「併用療法」は、その他の生物学的に活性な成分および非薬剤療法（例、外科手術または放射線治療）とさらに組み合わされた、上述のような治療薬の投与も包含する。併用療法が非薬剤療法をさらに含む場合、治療薬と非薬剤療法の組み合わせの相互作用から有益な効果が達成される限りは、非薬剤療法は任意の適当な時点において実施されてよい。例えば、適切な例では、恐らくは数日間または場合によっては数週間、治療薬の投与から非薬剤療法が一時的に取り除かれた場合、それでも有益な効果が達成される。
【０２８４】
説明全体を通して、組成物が特定の成分を持つ、含む、または有するものとして説明される場合、組成物が言及された成分のみから実質的になる、または言及された成分のみからなることも意図される。同様に、プロセスが特定のプロセスステップを持つ、含む、または有するものとして説明される場合、そのプロセスはさらに、言及されたプロセスステップのみから実質的になる、または言及されたプロセスステップのみからなる。さらに、本発明が実施可能である限りは、ステップの順番または特定の行為を行う順番は重要でないことが理解される必要がある。さらに、２つ以上のステップまたは行為は同時に行われてよい。
【０２８５】
化合物、またはその薬学的に許容される塩は、経口的に、鼻腔内に、経皮的に、肺内に、吸入で、頬側に、舌下に、腹腔内に、皮下に、筋肉内に、静脈内に、直腸内に、胸膜内に、髄腔内に、および非経口的に投与される。一実施形態では、化合物は経口的に投与される。当業者は、特定の投与経路の利点を理解するであろう。
【０２８６】
化合物を利用する投与レジメンは、患者の種別、種、年齢、体重、性別、および医学的状態、治療される状態の重症度、投与経路、患者の腎臓および肝臓機能、用いられる特定の化合物またはその塩をはじめとする様々な因子に従って選択される。通常の技術を持つ内科医または獣医は、状態の進行を防ぐ、歯止めをかける、または抑えるのに必要な、薬物の効果的な量を容易に決定し処方することができる。
【０２８７】
開示される本発明の化合物の製剤化および投与のための技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，１９ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９９５）に認められる。ある実施形態では、本明細書で説明される化合物、およびその薬学的に許容される塩は、薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせた医薬製剤として使用される。適当な薬学的に許容される担体には、不活性な固形充填剤または希釈剤および滅菌済み水溶液または有機溶液が含まれる。化合物は、本明細書で説明される範囲にある所望の投与量をもたらすのに十分な量で、そのような医薬組成物中に存在するであろう。
【０２８８】
一実施形態では、化合物は経口投与用に調製され、開示される化合物またはその塩は、適当な固形もしくは液体担体または希釈剤と混合されて、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤などを形成する。
【０２８９】
錠剤、丸剤、カプセル剤などは、約１〜約９９重量％の活性成分と、結合剤、例えばトラガカントガム、アカシア、トウモロコシデンプン、またはゼラチン、賦形剤、例えば第二リン酸カルシウム、崩壊剤、例えばトウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、またはアルギン酸、滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、および／または甘味剤、例えば白糖、乳糖、サッカリン、キシリトールなどを含有する。単位剤形がカプセル剤である場合、それは、上記の種類の材料のほかに、液体担体、例えば脂肪油を含むことが多い。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、各種他の材料は、コーティングとして、または剤形の物理的形態を修飾するために存在する。例えば、いくつかの実施形態では、錠剤は、セラック、糖、または両方でコーティングされる。いくつかの実施形態では、シロップ剤またはエリキシル剤は、活性成分の他に白糖を甘味剤として、メチルおよびプロピルパラベンを保存剤として、色素および着香剤、例えばチェリーまたはオレンジフレーバーなどを含有する。
【０２９１】
非経口投与に関するいくつかの実施形態については、開示される化合物、またはその塩、溶媒和物、互変異性体、もしくは多形は、注射用溶液または懸濁液を形成するために滅菌済み水性媒体または有機媒体と混合されうる。一実施形態では、注射用組成物は、水性等張液または懸濁液である。組成物は滅菌されてよい、および／またはアジュバント、例えば保存剤、安定化剤、湿潤剤、または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧の調節のための塩類および／または緩衝剤を含有する。さらに、それらは、その他の治療上有用な物質も含有してよい。組成物はそれぞれ、従来の混合、造粒、またはコーティング方法に従って調製され、約０．１〜７５％の活性成分を含有する、別の実施形態では組成物は約１〜５０％の活性成分を含有する。
【０２９２】
例えば、注射用溶液は、溶媒、例えばゴマ油もしくはラッカセイ油または水性プロピレングリコールだけでなく、水溶性の化合物の薬学的に許容される塩の水溶液を使用して作製される。いくつかの実施形態では、分散液は、油に含まれるグリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびそれらの混合物に調製される。通常の保存および使用の条件下では、これらの製剤は微生物の増殖を防ぐために保存剤を含有する。本明細書で使用されるような用語「非経口投与」および「非経口的に投与される」は、腸内および局所投与以外の投与の形式、通常は注射によるものを意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、および胸骨内注射および注入が限定されずに含まれる。
【０２９３】
直腸内投与では、適当な医薬組成物は、例えば局所用製剤、坐剤、または浣腸である。坐剤は、脂肪エマルションまたは懸濁液から有利に調製される。組成物は、滅菌されてよい、および／またはアジュバント、例えば保存剤、安定化剤、湿潤剤、または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧の調節のための塩類および／または緩衝剤を含有する。さらに、それらは、その他の治療上有用な物質も含有してよい。組成物はそれぞれ、従来の混合、造粒、またはコーティング方法に従って調製され、約０．１〜７５％の活性成分を含有する、別の実施形態では組成物は約１〜５０％の活性成分を含有する。
【０２９４】
いくつかの実施形態では、組成物は、肺内投与、例えば活性物質を含有するエアゾール製剤の、例えば手動式ポンプスプレー、ネブライザー、または高圧定量噴霧式吸入器からの投与によって活性物質を送達するために製剤化される。いくつかの実施形態では、この種の適当な製剤は、開示される化合物を効果的なエアゾール剤として保つために、その他の物質、例えば帯電防止剤も含む。
【０２９５】
エアゾール剤を送達するための薬物送達器具は、説明されるような医薬用エアゾール製剤を含有する、定量バルブを備える適当なエアゾール缶と、缶を保持し、薬物送達を可能にするために適合されたアクチュエーターハウジングを有する。薬物送達器具内のキャニスターは、キャニスターの全容積の約１５％を超える量に相当するヘッドスペースを有する。多くの場合、肺内投与用のポリマーは、溶媒、界面活性剤、および噴射剤の混合物に溶解、懸濁、または乳化される。混合物は、定量バルブでシールされた缶内に圧力下で維持される。
【０２９６】
鼻腔内投与では、固形または液体担体のいずれかが使用されうる。固形担体には、例えば約２０〜約５００ミクロンの範囲にある粒子径を持つ粗粉末が含まれ、そのような製剤は、鼻腔経路を介した急速な吸入によって投与される。いくつかの実施形態では、液体担体が使用される場合、製剤は鼻腔内スプレーまたは点鼻剤として投与され、活性成分の油性または水性溶液を含む。
【０２９７】
活性試薬は、体内からの急速な排出を防ぐ担体と一緒に調製されうる。例えば、制御放出製剤が使用可能であり、これにはインプラントおよびマイクロカプセル化送達システムが含まれる。生分解性、生体適合性ポリマー、例えばエチレンビニルアセタート、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸が使用されうる。そのような製剤の調製のための方法は、当業者には明らかであろう。材料は、Ａｌｚａ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＮｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から商業的にも入手可能である。リポソーム懸濁液（ウイルス抗原に対するモノクローナル抗体を持つ、感染細胞を標的するリポソームを含む）も、薬学的に許容される担体として使用されうる。これらは、例えば米国特許第４５２２８１１号で説明されているような、当業者に既知の方法に従って調製されうる。
【０２９８】
本発明の組成物および製剤は、１つ以上の乾燥剤も有しうる。本発明で使用されうる適当な乾燥剤は薬学的に安全なものであり、例えば医薬品グレードのシリカゲル、結晶ナトリウム、カリウム、またはカルシウムアルミノケイ酸塩、コロイド状シリカ、無水硫酸カルシウムなどが含まれる。乾燥剤は、約１．０％〜２０．０％、または約２％〜１５％ｗ／ｗ（または前述の範囲内にあるあらゆる値）の量で存在してよい。
【０２９９】
「フラッシュ用量」形態としても知られる、急速に分散する剤形である製剤も意図される。特に、本発明のいくつかの実施形態は、それらの活性成分を短時間のうちに、例えば典型的には約５分未満、別の実施形態では、約９０秒未満、別の実施形態では約３０秒未満、および別の実施形態では約１０または１５秒未満のうちに放出する組成物として製される。そのような製剤は、様々な経路、例えば体腔への挿入による、または湿潤性の体表面または開放性創傷への塗布による被験体への投与に適している。
【０３００】
典型的には、「フラッシュドセージ」は、口腔内で急速に分散する、経口的に投与される固形剤形であり、故に飲み込むのに多大な労力は必要ではなく、口腔粘膜を介して化合物が急速に摂取されるまたは吸収される。いくつかの実施形態では、適当な急速に分散する剤形は他の応用でも使用され、これには、外部から供給される水分による薬剤の放出が可能でない、創傷および他の身体の損傷ならびに病的状態の治療が含まれる。
【０３０１】
「フラッシュ用量」形態は当該技術分野で既知であり、例えば、米国特許第５５７８３２２号および同５６０７６９７号の発泡性の剤形および不溶性ミクロ粒子の迅速放出コーティング、米国特許第４６４２９０３号および同５６３１０２３号の凍結乾燥発泡体および液体、米国特許第４８５５３２６号、同５３８０４７３号、および同５５１８７３０号の剤形の溶融紡糸、米国特許第６４７１９９２号の固体、遊離形態作製、米国特許第５５８７１７２号、同５６１６３４４号、同６２７７４０６号、および同５６２２７１９号のサッカライドベースの担体マトリックスおよび液体結合剤、ならびに当該技術分野に既知のその他の形態を参照されたい。
【０３０２】
本発明の化合物は、一連の放出（すなわち、パルス）において化合物が医薬組成物から放出される「パルス放出」製剤としても製される。化合物は、長時間にわたって化合物が医薬組成物から継続的に放出される「持続性放出」製剤としても製される。
【０３０３】
製剤、例えば、環状または非環状カプセル化剤または溶媒和化剤、例えばシクロデキストリン、ポリエーテル、またはポリサッカライド（例、メチルセルロース）、または別の実施形態では、アルキルエーテルスペーサー基またはポリサッカライドによって親油性の空孔から分離されるスルホン酸ナトリウム塩基を有するポリアニオン系βシクロデキストリン誘導体を含む、液体製剤も意図される。一実施形態では、物質はメチルセルロースである。別の実施形態では、物質は、ブチルエーテルスペーサー基によって親油性の空孔から分離されるスルホン酸ナトリウム塩を有するポリアニオン系のβ‐シクロデキストリン誘導体、例えばＣＡＰＴＩＳＯＬ（登録商標）（ＣｙＤｅｘ、カンザス州オーバーランド）である。当業者は、物質を含む水の溶液、例えば重量で４０％の溶液を調製することによって、例えば、２０％、１０、５％、２．５％、０％（コントロール）などの溶液を作製するために連続希釈を行うことによって、過剰な（物質によって溶解されうる量と比べて）開示される化合物を添加することによって、適当な条件、例えば、加熱、攪拌、超音波処理などの下で混合することによって、得られる混合物を遠心分離またはろ過して、透明な溶液を得ることによって、開示される化合物の濃度について溶液を解析することによって、適当な物質／開示される化合物製剤比を評価できる。
【０３０４】
本明細書で言及される全ての出版物および特許文書は、あたかもそのような出版物または文書のそれぞれが参考として本明細書に具体的かつ個別に援用されることが示されるかのように、参考として本明細書で援用される。出版物および特許文書の引用は、任意のものを関連する先行技術であると認めることを意図するものではなく、またそうしたものの内容または日付に関していずれを認めるものでもない。記述による説明によって本発明を説明したが、本発明は様々な実施形態において実施可能であり、これまでの説明および下記の実施例は説明のためのものであって、下記に続く請求項を限定するものではないことを当業者は理解するであろう。
【実施例】
【０３０５】
実施例１：ＫＸ２‐３９１のスモールスケール合成
【０３０６】
【化４】
2014037439.tif 000005
下記で説明する予備合成は、米国特許第７３００９３１号で説明されている。この手順は、スモールスケールの反応、例えば最大５０ｇの生成物を産生する反応に有用である。この合成は、例えば研究グレードの材料を産生するのに有用である。
【０３０７】
下記の合成では、別段の記載がない限り、試薬および溶媒は、商業的供給業者から受け取った状態で使用した。プロトンおよびカーボン核磁気共鳴スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ
ＡＣ３００またはＢｒｕｋｅｒ  ＡＶ３００スペクトロメーターで、プロトンは３００ＭＨｚ、カーボンは７５ＭＨｚで得た。スペクトルは、ｐｐｍ（δ）で与えられ、カップリング定数Ｊはヘルツで報告される。プロトンスペクトル用の内部標準としてテトラメチルシランを使用し、溶媒ピークを、カーボンスペクトル用の基準ピークとして使用した。質量スペクトルおよびＬＣ‐ＭＳ質量データを、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｓｃｉｅｘ１００大気圧イオン化（ＡＰＣＩ）マススペクトロメーター上で取得した。ＬＣ‐ＭＳ解析は、Ｌｕｎａ  Ｃ８（２）カラム（１００×４．６ｍｍ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）を使用して、標準的な溶媒グラジエントプログラム（方法Ｂ）を使用した２５４ｎｍにおけるＵＶ検出で取得した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、Ａｎａｌｔｅｃｈシリカゲルプレートを使用して実施し、紫外線（ＵＶ）光、ヨウ素、または２０ｗｔ％リンモリブデン酸を含むエタノールによって可視化した。ＨＰＬＣ解析を、Ｐｒｅｖａｉｌ  Ｃ１８カラム（５３×７ｍｍ、Ａｌｌｔｅｃｈ）を使用して、標準的な溶媒グラジエントプログラム（方法ＡまたはＢ）を使用した２５４ｎｍにおけるＵＶ検出によって取得した。
【０３０８】
【化５】
2014037439.tif 000006
Ｎ‐ベンジル‐２‐（５‐ブロモピリジン‐２‐イル）アセトアミドの合成：
【０３０９】
【化６】
2014037439.tif 000007
フラスコに５‐（５‐ブロモピリジン‐２（１Ｈ）‐イリデン）‐２，２‐ジメチル‐１，３‐ジオキサン‐４，６‐ジオン（１．０３９ｇ、３．４６ミリモル）、ベンジルアミン（０．５０ｍＬ、４．５８ミリモル）、およびトルエン（２０ｍＬ）を入れた。窒素雰囲気下で反応物を１８時間還流させ、冷却し、冷えるまで冷凍庫内に静置した。ろ過によって生成物を集め、ヘキサンで洗浄して明るい白色の結晶の塊を得た（１．０１８ｇ、９６％）。
４‐（２‐（４‐（４，４，５，５‐テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラン‐２‐イル）‐フェノキシ）エチル）モルホリンの合成：
【０３１０】
【化７】
2014037439.tif 000008
０℃の４‐（４，４，５，５‐テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラン‐２‐イル）‐フェノール（２．５５ｇ、１１．５８ミリモル）、２‐モルホリン‐４‐イルエタノール（１．６０ｍＬ、１．７３ｇ、１３．２ミリモル）、およびトリフェニルホスフィン（３．６４ｇ、１３．９ミリモル）を含む塩化メチレン（６０ｍＬ）の攪拌溶液に、ＤＩＡＤ（２．８２ｇ、１３．９ミリモル）を滴下しながら加えた。反応物を室温まで昇温し、一晩攪拌した。１８時間後、追加のポーションのトリフェニルホスフィン（１．５１ｇ、５．８ミリモル）、２‐モルホリン‐４‐イルエタノール（０．７０ｍＬ、５．８ミリモル）、およびＤＩＡＤ（１．１７ｇ、５．８ミリモル）を加えた。室温でさらに２時間で攪拌した後、反応物を濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（５％〜２５％ＥｔＯＡｃを含むＣＨＣｌ３）で精製して、生成物を白色固体として得た（２．８５５ｇ、７４％）。
【０３１１】
セプタム栓と攪拌子を備える１０ｍＬの反応チューブに、Ｎ‐ベンジル‐２‐（５‐ブロモピリジン‐２‐イル）アセトアミド（１２３ｍｇ、０．４０３ミリモル）、４‐（２‐（４‐（４，４，５，５‐テトラメチル［１，３，２］ジオキサボロラン‐２‐イル）‐フェノキシ）エチル）モルホリン（１７１ｍｇ、０．５１３ミリモル）、およびＦｉｂｒｅＣａｔ１００７１（３０ｍｇ、０．０１５ミリモル）を入れた。エタノール（３ｍＬ）を加えた後、炭酸カリウム水溶液（０．６０ｍＬ、１．０Ｍ、０．６０ミリモル）を加えた。チューブを密封し、マイクロ波条件下で１５０℃、１０分間加熱した。反応物を冷却し、濃縮して大部分のエタノールを除去し、１０ｍＬの酢酸エチルに取り、水および飽和塩化ナトリウム溶液で相次いで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、ろ過し、濃縮して白色固体とした。この白色固体をエチルエーテルで粉砕し、ＫＸ２‐３９１を白色固体として得た（１３７ｍｇ、７９％）：ｍｐ１３５‐１３７℃。
【０３１２】
【化８】
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１ポリマー結合ジ（アセタト）ジシクロヘキシルフェニルホスフィンパラジウム（ＩＩ）、Ｊｏｈｎｓｏｎ  Ｍａｔｔｈｅｙ，Ｉｎｃ．製造、Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能（カタログ♯５９０２３１）。
【０３１３】
実施例２：ＫＸ２‐３９１の中間スケール合成
この実施例で概説する合成は、中間スケール反応で使用されうる。少なくとも５０ｇのバッチのＫＸ２‐３９１の二塩酸塩の調製をスキーム１に示す。線形合成は６ステップで構成され、７番目のステップは試薬の１つである６‐フルオロピリジン‐３‐イルボロン酸（商業的にも入手可能である）の調製である。シークエンスの総収率は３５％で、平均収率は８３％、最も低い収率ステップの収率は６８％であった。７つのステップのうち、クロマトグラフィーを必要としたものは１つだけであった。下記に示す手順は、７０ｇスケールで実施した。
【０３１４】
【化９】
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第１のステップは、Ｋ２ＣＯ３粉末（３〜３．５当量）を塩基として使用し、アセトニトリルを溶媒として有する、４‐ブロモフェノール（１３１ｇ）およびＮ‐クロロエチルモルホリン（ＨＣｌ塩としての１、１４１ｇ）の間のウィリアムソンエーテル合成である。材料を混合し、一晩還流しながら攪拌したが、変換率は高かった（９６．３〜９９．１％）。ジクロロメタンおよびヘプタンで希釈後、反応混合物をろ過し、蒸発させて、所望の生成物２を実質的に定量的収率で得た（２１６ｇ）。類似の基質（例、４‐ブロモ‐３‐フルオロフェノール）を用いると、変換（かなり加熱しても）は必ずしもそれほど高くはなかった（例、５９．９〜９８．３％）ことに注目されたい。塩化アルキルおよびＫ２ＣＯ３はともに、好ましくはＡｌｄｒｉｃｈから購入する。加熱を続けても反応が完了しない場合は、粗製の反応混合物を４部のトルエンに溶解し、４部の１５％ＮａＯＨ水溶液でフェノールを洗い出すことで、未反応のブロモフェノールを容易に除去できる。
【０３１５】
第２のステップ（鈴木カップリング）に必要な試薬の１つは、６‐フルオロピリジン‐３‐イルボロン酸（４）であった。商業的にも入手可能であるが、この試薬は、低温（＜−６０℃）においてＴＢＭＥ中においてｎ‐ブチルリチウム（１．２当量）で５‐ブロモ‐２‐フルオロピリジン（３、１０２ｇ）のリチウム‐ブロミド変換を行い、続いてトリイソプロピルボラート（１．６５当量）を添加することによって容易に調製された。反応の両ステージは短く、総反応時間（添加時間を含む）は約３時間である。クエンチは２４％ＮａＯＨ水溶液で行われ、これは有機層に不純物を残し生成物も抽出する。水層を除去したら、ＨＣｌでこれを中性とし、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機物質を乾燥させていくらかのヘプタンで希釈した後、濃縮すると生成物の沈殿／結晶化が起こる。ろ過によって、ボロン酸４を比較的高純度（９６．４％ＡＵＣ）かつ良好な収率（６９ｇ、７９〜９０％、実験セクションの収率の概算に関する注記参照）で得、これはさらなる精製を行わずに使用可能であった。
【０３１６】
線形シークエンスにおける第２の反応ステップ（鈴木カップリング）は設定が単純な反応であり、全ての試薬［２（１１１ｇ）、Ｎａ２ＣＯ３水溶液、ＤＭＥ、およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．０４当量）］を反応フラスコに入れ、混合物を還流加熱したが、酸素を除去するために反応混合物を脱気したことに留意されたい。反応が完了したら（７時間以内）、ワークアップとしてフラスコの側面上の有機塩から反応溶液をデカンテーション（または吸引する）し（目に見える水層はなかった）、フラスコをリンスし、乾燥し、集めた有機物質から溶媒を除去した。イソプロパノール／ヘプタンからの粗生成物５の結晶化によって、粗生成物と比較すると純度が高い材料を得たが、十分な純度（＞９８％）の材料を得るにはやはりクロマトグラフィー（粗生成物に対するシリカゲルの割合は約８．５：１であった）が必要であり、収率は６８％（７９．５ｇ）であった。他の物質が混入していない５を使用することで、次のステップであるフッ素原子のアセトニトリル置換においてクロマトグラフィーを使用する必要がなくなった。
【０３１７】
アセトニトリルでのフッ化物の置換も単純な反応であり、粗生成物の室温での単純な結晶化によって、他の物質が混入していない６が高い収率および純度で得られた。この反応では、−１０℃においてカリウムヘキサメチルジシランＫＨＭＤＳ（８当量）／ＴＨＦを使用してアセトニトリル（６．５当量）から「エノラート」を最初に形成し、直後にフッ化物５（７９ｇ）を添加した。反応は迅速で、１時間後に飽和食塩水でクエンチを行った。乾燥し、有機物質の溶媒を蒸発させた後、得られた粗製混合物は、２つの成分、所望の生成物とアセトニトリルの明らかな自己縮合に由来する極性が非常に低い生成物のみで構成されていた。粗製混合物を、イソプロパノール／ヘプタン中で振り混ぜ、一晩静置すると、生成物の完全な結晶化がもたらされ、これをろ別し洗浄して、高純度の６（９９．３％ＡＵＣ）を良好な収率（６４ｇ、７６％）で得た。
【０３１８】
６（６４ｇ）の加メタノール分解を、反応が完了するまで（２５時間）４０％のＨ２ＳＯ４（ＭｅＯＨ中）中で加熱することによって行った。次に反応物を冷却し、ＭｇＳＯ４とともに攪拌して少量の加水分解産物（ＡｒＣＨ２‐ＣＯ２Ｍｅ）を変換して生成物に再度戻し、その後、冷却したＫ２ＣＯ３水溶液に加えて、同時にジクロロメタンへ抽出した。大部分のＤＣＭを乾燥し蒸発させた後、５％のＥｔＯＡｃ（ヘプタン中）を添加し、さらに濃縮すると生成物の結晶化がもたらされた。固体のろ過と洗浄によって、高純度（９８．９％ＡＵＣ）の７を良好な収率（８２％）で得、さらなる高純度の生成物（４ｇ）を母液から得、総収率は６１．７ｇ（８７％）となった。
【０３１９】
アミド化ステップも、反応容器に材料（７（６１ｇ）、ベンジルアミン（３当量）、および高沸点アニソール）を入れ、反応が完了するまで還流加熱するステップを伴うものであった。反応混合物の冷却によって、高純度（９８．９％）および良好な収率（８１％）で標的化合物の完全な結晶化がもたらされた。
【０３２０】
最終ステップは、標的化合物の二塩酸塩の形成であった。両塩基性部位における完全なプロトン化を確実にするために無水エタノール中で反応を行ったが、これは自由に二塩酸塩を溶解した。ほぼ乾燥するまで蒸発させた後、反応混合物をエタノールで２回「チェーシング」して過剰な塩化水素を除去した。得られた粘調性の油をエタノール（２部）に溶解し、急速に攪拌しながら多量（２０部）のＥｔＯＡｃ（酢酸エチル）に加えた。ろ過、酢酸エチル（ヘプタンなし）での洗浄、および真空乾燥によって、ＫＸ２‐３９１の二塩酸塩を乳白色の粉末として得た。合計６８ｇ（収率９７％）が最終的な塩として高純度（９９．６％ＡＵＣ）で得られ、これは少量のＥｔＯＡｃ（４．８％ｗ／ｗ）、ＥｔＯＨ（０．３％ｗ／ｗ）、およびヘプタン（０．６％ｗ／ｗ、真空乾燥前のヘプタンでの最終洗浄から）を含んでいた。さらにこの塩を加熱ＥｔＯＨ／ＥｔＯＡｃから結晶化させて（上述の沈殿法の代わりに）、取り込まれる溶媒のレベルがかなり低く（わずか０．２６％ｗ／ｗのＥｔＯＡｃと０．４５％ｗ／ｗのＥｔＯＨ）、自由に流動する結晶ビーズを得た。
【０３２１】
実験
【０３２２】
【化１０】
2014037439.tif 000011
４‐（２‐（４‐ブロモフェノキシ）エチル）モルホリン（２）の調製：
機械式攪拌装置、アダプター付き温度計、冷却器、および窒素流入口（冷却器の上部）を備えた５Ｌ容量の三つ口丸底フラスコに、１（１４０．７ｇ、０．７５６モル）、４‐ブロモフェノール（１３０．６ｇ、０．７５５モル）、無水Ｋ２ＣＯ３粉末（３６７．６ｇ、２．６６モル、３．５当量）、およびアセトニトリル（１．３Ｌ）を入れた。混合物を８０℃で（一晩）激しく攪拌し（フラスコの底にブレードが触れるように）、その後ＤＣＭ（５００ｍＬ）およびヘプタン（２００ｍＬ）で希釈して、セライトでろ過した。蒸発乾固（回転エバポレーター後、高真空）して、２を淡黄色の油として得た（２１６．００ｇ、１００％の収率、９６．３％ＡＵＣ、３．７％の未反応のブロモフェノールを含有）。この材料を、さらなる精製を行わずに使用することができた。
【０３２３】
【化１１】
2014037439.tif 000012
まずサンプルをトルエン（８ｇ）に溶解し、８ｇの１５％ＮａＯＨ水溶液で洗浄することによって、ブロモフェノールが容易に除去されうることが２ｇのサンプルで示された。液体クロマトグラフィーは、回収された生成物（１．９７ｇ、９８．５％回収）中に未反応のブロモフェノールの痕跡を示さなかった。
【０３２４】
【化１２】
2014037439.tif 000013
６‐フルオロピリジン‐３‐イルボロン酸（４）の調製：
攪拌し冷却（ドライアイス‐アセトン浴）した無水［ＴＢＭＥ］（６２０ｍＬ、機械式攪拌装置、アダプター付き温度プローブ、および窒素流入口を備えた３Ｌ容量の三つ口丸底フラスコ中の）に、２ＭのＢｕＬｉ（３５２ｍＬ、０．７０４モル、１．２当量）を（シリンジで）加えた。この急速に攪拌し冷却（＜−７５℃）した混合物に、３（１０２．２ｇ、０．５８１モル）を含む無水ＴＢＭＥ（１００ｍＬ）の溶液を１３分間にわたって加え、この間内部温度は−６２℃に上昇した。反応物をさらに４５分間攪拌し（温度を−６２℃から−８０℃の間に維持した）、その後、４ポーションのトリイソプロピルボラート（全量１８０ｇ、０．９５７モル、１．６５当量）を急速に連続添加した。添加終了時、内部温度は−３３℃に上昇した。冷水浴でさらに４５分間攪拌した後（内部温度は−３３℃から−６５℃に低下）、冷水浴を取り除き、５０分間の間に攪拌混合物は自然に−２２℃まで上昇した。１５分間にわたって６℃まで昇温した（水浴で）後で、攪拌反応混合物を氷水浴内に静置し、窒素雰囲気下でＮａＯＨ（１６０ｇ）を含む冷却水溶液（５００ｍＬ）でクエンチした。添加が終了すると、内部温度は２０℃であった。この混合物を室温で１．５時間攪拌した。水層を除去し、約３５０ｍＬの濃ＨＣｌでｐＨ７の中性とした後、ＥｔＯＡｃで抽出した（３×１Ｌ）。ここでｐＨは８〜９であるため、約１５ｍＬの濃ＨＣｌを使用して水層をｐＨ７に調節し、酢酸エチルでさらに抽出した（２×１Ｌ）。集めたＥｔＯＡｃ抽出物を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、濃縮して約１５０ｍＬの量にした。濃縮物を振り混ぜながら、ヘプタンをポーションで加え（全量は３００ｍＬ）、生成物の沈殿／結晶化がもたらされた。ろ過、ヘプタンでの固体の洗浄（１００ｍＬ、３００ｍＬ、その後さらに３００ｍＬ）、風乾によって、オフホワイトの固体として表題化合物を得て（６８．６ｇ、収率７９〜９０％＊、ＬＣ純度９６．４％、ＮＭＲでは、およそ５．５％ｗ／ｗのヘプタンが示された）、これをさらなる精製を行わずに使用した。ＬＣ／ＭＳは、これが下記の２つの構成要素の混合物であることを示しており、分子量が大きい構成成分の強度が大きかった（＊注：反応物の収率は、ボロン酸が唯一の構成成分であると仮定すれば７９％であり、環状ボレートが唯一の成分であると仮定すれば９０％である）。
【０３２５】
【化１３】
2014037439.tif 000014
４‐（２‐（４‐（６‐フルオロピリジン‐３‐イル）フェノキシ）エチル）モルホリン（５）の調製：
機械式攪拌装置、温度計およびアダプター、冷却器、ならびに窒素流入口（冷却器の上部に）を備えた２Ｌ容量の三つ口丸底フラスコに、２（１１０．７ｇ、０．３８７モル）、４（７１．０５ｇ、０．４７７モル、１．２３当量）、およびＤＭＥ（７００ｍＬ）を入れた。得られた攪拌溶液を、攪拌溶液に窒素の急速気流を５分間通すことによって脱気し、その後、Ｎａ２ＣＯ３（１２１．０６ｇ、１．１４２モル、３当量）を含むＨ２Ｏの脱気溶液（２５０ｍＬ）および固形Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１９．８ｇ、０．０４４当量）を加えた。最後の添加の直後に、反応混合物上部のヘッドスペースを窒素でパージし、その後混合物を８０〜８５℃（内部温度）で７時間攪拌し、次いで室温まで冷却した。水層がないため、上清をデカンテーションし、無機塩が残った（吸着水とともに）。無機塩が入った反応フラスコを５０％のジクロロメタン／酢酸エチル（２×２５０ｍＬ）で洗浄し、洗浄液をデカンテーションした上清に加えた。これらの集めた有機物質を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、蒸発乾固して暗褐色の油とした（１４８ｇ）。この油に、１５０ｇの５０％ヘプタン／イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）を加え、振り混ぜて冷却した（氷水浴で）後、結晶化が始まった。さらなるヘプタン（５０ｇ）を加えて、得られた固体をろ過し、洗浄し、風乾して４８ｇの淡褐色の固体を得た。ろ液を蒸発乾固した後、得られた混合物を１００ｍＬの５０％ヘプタン／ＩＰＡ中で振り混ぜ、その後さらにヘプタン（約１００ｍＬ）を添加し、栓をして冷凍庫内に静置して結晶化させた。得られた固体を濾過し、ヘプタンで洗浄し、風乾して６１ｇの粘着性の固体を得た。得られたろ液を蒸発させて油（３４ｇ）を得たが、これは、Ｐｈ３Ｐ＝Ｏをはじめとする著しく極性の低い不純物を含有していたため、２ＮのＨＣｌ（２４０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２２０ｍＬ）の間にこれを分配した。底部の水層を除去して、Ｋ２ＣＯ３でｐＨ７〜８に中性化しながらＥｔＯＡｃとともに攪拌した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥し、ろ過し、蒸発乾固した（２２ｇ）。４８ｇ、６１ｇ、および２２ｇのポーションについて、ＤＣＭに充填したシリカゲル（１．１Ｋｇ）でクロマトグラフィーを行った。ＤＣＭ（４００ｍＬ）、５０％ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（５Ｌ）、次いで漸増する量のＭｅＯＨ／Ｅｔ３Ｎ（１．５％ＭｅＯＨ／１％Ｅｔ３Ｎから始まり、５％ＭｅＯＨ／３％Ｅｔ３Ｎで終了）を含む５０％ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃ（８Ｌ）で溶出して、７７．６８ｇの粘調性の油（純度９８．０％）を得て、これをヘプタン（３００ｍＬ）中で振り混ぜるとすぐに結晶化した。ろ過、ヘプタンでの洗浄、および風乾によって７５．５５ｇ（９８．７％ＡＵＣ）の固体５を得た。上記の３４ｇのサンプルについて行ったようにそれらを洗浄し、その後蒸発結晶化することによって、Ｐｈ３Ｐ＝Ｏを含む初期のクロマトグラフィー画分からさらなる純粋な５（全量で３．９ｇ、９８．６〜９９．３％ＡＵＣ）を得た。５の総収率は７９．５ｇ（６８％）であった。
【０３２６】
【化１４】
2014037439.tif 000015
【０３２７】
【化１５】
2014037439.tif 000016
２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトニトリル（６）の調製：
３Ｌ容量の三つ口丸底フラスコに、機械式攪拌装置、温度計およびアダプター、追加の漏斗、および窒素流入口（追加の漏斗の上部、バブラーで陽圧に）を取り付けた。バブラーを通過する窒素の急速気流下で、ストッパーを取り除き、フラスコにＫＨＭＤＳ（４１５．８ｇ、２．０８モル）、次いで無水ＴＨＦ（１Ｌ）を入れた。攪拌し冷却した（氷／メタノール浴、溶液の内部温度は−８℃であった）ＫＨＭＤＳ／ＴＨＦ溶液に、ＭｅＣＮ（７０ｇ）を含むＴＨＦ（１１０ｍＬ）の溶液を２２分間にわたって滴下しながら加え、その直後に５（７９．０６ｇ、０．２６２モル）を含むＴＨＦ（４００ｍＬ）の溶液を比較的急速（４分間）に加え、その後、反応混合物の内部温度は１０℃に達した。引き続き冷却すると（１時間）、内部温度は−６℃となり、ＴＬＣでは、反応は完了したようであった。さらに３０分後（内部温度は−３℃）、反応混合物を飽和食塩水（１Ｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。水層を除去した後、有機溶液を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、蒸発乾固（油になる）に続いて、ＩＰＡ（１５０ｍＬ）に完全に溶解し、ヘプタン（３００ｍＬ）で希釈し、種結晶（約１００ｍｇの粗製油をＩＰＡ（約１５０ｍｇ）に溶解することで調製した）を加え、ヘプタン（約２．５ｍＬ）で希釈し、一晩静置した。結晶固体を崩すように攪拌した後、固体をろ過し、２５０ｍＬの２：１ヘプタン／ＩＰＡで洗浄した後ヘプタンで複数回洗浄し、風乾して６４．３８ｇ（収率７６％）の表題化合物６を結晶性褐色固体として得た（ＬＣ純度は９９．３％）。純度が低い別の５．８８ｇの材料をろ液から得た。
【０３２８】
【化１６】
2014037439.tif 000017
メチル２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセタート（７）の調製：
２Ｌ容量の１つ口の丸底フラスコに、６（６４．００ｇ、０．１９８モル）およびＭｅＯＨ（３６０ｇ）を入れた後で、ゆっくりと注意深くＨ２ＳＯ４（２４０ｇ）を滴下しながら加え、得られた均一な溶液を反応が完了するまで（２５時間で未反応の出発原料は０．８％）、３．５％のＡｒＣＨ２ＣＯ２Ｈとともに還流しながら（１１５℃の油浴）攪拌した。短時間の冷却後、ＭｇＳＯ４（７５ｇ）を加えて混合物を振り混ぜ、さらに４５分間静置した（この時点の組成は、９６．３％の生成物、０．８％の未反応の出発原料、および２．５％のＡｒＣＨ２ＣＯ２Ｈ）。次いで反応混合物を、急速に攪拌して冷却した（氷水浴）ＤＣＭ（２Ｌ）およびＫ２ＣＯ３（４５０ｇ）を含む水（６００ｍＬ）の溶液の混合物にゆっくりと加えた。得られたエマルションを一晩静置した。有機溶液の透明部分を吸引し、残りの部分を水とＤＣＭで繰り返し処理し、透明な有機物質を吸引したもとの部分と合わせる。集めた有機物質を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、約１．２Ｌの量に濃縮し、続いて３００ｍＬの５％ＥｔＯＡｃ（ヘプタン中）、次にヘプタン（３００ｍＬ）を加え、混合物を再度濃縮（回転エバポレーターで加熱して）してＤＣＭを除去した。この時点で１５ｍＬのＥｔＯＡｃを加えて、結晶化が始まるまで熱い混合物を振り混ぜ、結晶化がほぼ完了するまでひきつづき振り混ぜた後、静置して室温まで冷却して完全に結晶化させた。次に固体をろ過し、３００ｍＬの５％ＥｔＯＡｃ（ヘプタン中）およびヘプタン（１００ｍＬ）で洗浄した後で完全に風乾して、５７．７４ｇ（８２％収率）の７を淡黄色の固体として得た（９８．９％ＡＵＣ）。別の３．９４ｇの他の物質が混入していない生成物（９７．９％ＡＵＣ）をろ液から得た（合計収率８７％）。
【０３２９】
【化１７】
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Ｎ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトアミド（ＫＸ２‐３９１遊離塩基）の調製：
１Ｌ容量の１つ口の丸底フラスコに、７（６１．４ｇ、０．１７２モル）、ベンジルアミン（５５．６ｇ、０．５１９モル、３当量）、および無水アニソール（３００ｇ）を入れ、反応が実質的に完了するまで還流しながら攪拌し（２３時間、１６５℃油浴温度、内部温度は１４７℃であった）、ほぼ室温まで冷却した。反応混合物の１ポーション（１ｍＬ）をトルエン（１ｍＬ）で希釈すると、そのポーションの完全な結晶化がもたらされた。次にこの種を反応混合物に加え、反応混合物全体が単一のブロックに結晶化するまで静置した。トルエン（１５０ｍＬ）を加えて、混合物を振り混ぜて固体を崩した。ヘプタン／トルエン（１：１、１００ｍＬ）を加えて、固体混合物をさらに崩した。最後に、ヘプタン（５０ｍＬ、次に２５ｍＬ）を加えて、より一層混合物を崩し、固体をろ過する前にさらに３０分間静置した。固体のろ過、２：１トルエン／ヘプタン（３００ｍＬ）、１：２トルエン／ヘプタン（３００ｍＬ）、次いでヘプタン（２×３００ｍＬ）での洗浄、その後乾燥（風乾、次に高真空）して、６０．１６ｇ（収率８１％）の表題生成物を白色固体として得た（≧９８．９％ＡＵＣ）。別の２．５ｇの純度が低い（９７．４％）材料を母液から得た。
【０３３０】
【化１８】
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４‐（２‐（４‐（６‐（２‐（ベンジルアミノ）‐２‐オキソエチル）ピリジニウム‐３‐イル）フェノキシ）エチル）‐モルホリン‐４‐イウムクロリド（ＫＸ２‐３９１、二ＨＣｌ塩）の調製：
ＫＸ２‐３９１（遊離塩基、６０．００ｇ）を含む無水ＥｔＯＨ（６００ｍＬ）の攪拌懸濁液に、１７０ｍＬの２．５Ｍ  ＨＣｌ（エタノール中）を加えて、フラスコの側面を洗い流すために２５ｍＬのＥｔＯＨを加えた。得られた均一な溶液を室温で攪拌した後（２０分間）、ほぼ乾燥するまで蒸発させた（泡立つまで）。ＥｔＯＨでチェーシングした後（２×１５０ｍＬ）、残渣を再びＥｔＯＨ（１５０ｍＬ）に取り、混合物が飽和したように見えるまでヘプタンをゆっくりと加えた（濁りが残るためには３３ｍＬが必要であった）。一晩攪拌後、２つの層が形成された。さらなるヘプタン（２５０ｍＬ）を添加後、やはり結晶化を誘発できなかったため、反応混合物を約２００ｍＬの量に濃縮したが、この時点で混合物は均一であった。この濃縮した均一な溶液を、非常に急速に攪拌した（機械的に）ＥｔＯＡｃ（２Ｌ）に滴下しながら加えた。添加完了後、元のフラスコの２５ｍＬのＥｔＯＨすすぎ液と、添加用漏斗を急速に攪拌した混合物に加えた。急速な攪拌をさらに約１時間継続した後、混合物をろ過し、固体（部分的に粘着性）をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で、次いでヘプタンで洗浄した。ヘプタンで洗浄を始めた途端に、固体の粘着性が増した。フリット付きブフナー漏斗とその内容物を覆い（ペーパータオル／ゴムバンド）、すばやく真空オーブン内に静置した。約４５℃、真空で一晩置いた後、窒素雰囲気下で真空を開放し、生成物（泡状の固体）が入ったブフナー漏斗をただちにジップロックバックに入れ、窒素雰囲気下（グローブバッグ）で瓶に移し、泡状固体を粉末に崩した（へら）。高真空下（約４５℃）における２晩目では、わずか１．３ｇのさらなる重量減少が起こった。高真空（約４５℃）の３晩目でも一定の重量が実質的に得られ、重量のわずか０．２ｇが失われただけであった。材料の最終的な重量は６８．０５ｇ（収率９７％）で、０．２９当量（４．８％ｗ／ｗ）のＥｔＯＡｃ、０．０３５当量（０．３％ｗ／ｗ）のＥｔＯＨ、および０．０３当量（０．６％ｗ／ｗ）のヘプタンを含有していた。純度は９９．６％であった。
【０３３１】
【化１９】
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元素分析（Ｃ２６Ｈ２９Ｎ３Ｏ３・２ＨＣｌ・０．０３５ＥｔＯＨ・０．２９ＥｔＯＡｃ・０．０３ヘプタン・０．８Ｈ２Ｏについて）：
ａ．計算されたもの（％）：Ｃ，６０．０３、Ｈ，６．５４、Ｎ，７．６５、Ｃｌ，１２．９１
ｂ．観察されたもの（％）：Ｃ，５９．８５／５９．９７、Ｈ，６．５４／６．４７、Ｎ，７．６７／７．６７、Ｃｌ，１３．１０／１３．２４
計算されたＦＷ：５３４．６３（１Ｈ  ＮＭＲではＨ２Ｏのエビデンスが示されていないため、非常に吸湿性の高いこの粉末の取り扱い中に恐らく上昇した０．８Ｈ２Ｏを考慮していない）。
【０３３２】
この材料中の塩化エチルレベルを測定し、９８ｐｐｍであることがわかった。サンプルも解析し、５，８００ｐｐｍのヘプタンを含有することがわかった。
【０３３３】
このサンプルの別のポーションの解析によって下記の結果が得られた：９９．６％ＡＵＣ、１６４０ｐｐｍエタノール、４１，４８０ｐｐｍ酢酸エチル、５６００ｐｐｍヘプタン、アニソール未検出、および１２０ｐｐｍ塩化エチル。
【０３３４】
上記の乾燥塩を使用して、塩を再結晶させるための手順も開発した。この手順は、ＨＣｌ塩形成反応混合物の濃縮から得られた高純度の粗製塩（残存ＥｔＯＨを含有）に対してと同じように良好に機能するであろう。
【０３３５】
塩（５７５ｍｇ）を、２倍の質量の無水ＥｔＯＨ（１．１５７ｇ）に溶解後、窒素雰囲気下で加熱した。この加熱溶液（攪拌したもの）に、１．６ｇの２５％ＥｔＯＨ（ＥｔＯＡｃ中）を加え、続いてＥｔＯＡｃ（０．２５ｍＬ）を加えると濁りが生じ、これは残存した。混濁した加熱溶液を室温まで冷却し、この間に結晶化が起こった。結晶化が完了した後（２時間）、結晶性固体をろ過し、無水ＥｔＯＡｃ（約４０ｍＬ）で洗浄し、真空乾燥して、わずか０．０５当量（０．４５％ｗ／ｗ）のＥｔＯＨおよび０．０１５当量（０．２６％ｗ／ｗ）のＥｔＯＡｃを含有する、４２４ｍｇのＫＸ２‐３９１の二塩酸塩を自由に流動する固体として得た（小さなビーズ、９９．８％ＡＵＣ）。イソプロパノール／ＥｔＯＡｃを使用すると回収は若干改善した（５８６ｍｇから４６０ｍｇ）が、溶媒取り込みのレベルは高くなった［０．０８５当量（１．０％ｗ／ｗ）のイソプロパノールおよび０．０２３当量（０．４％ｗ／ｗ）のＥｔＯＡｃ］。
【０３３６】
実施例３：ＫＸ２‐３９１のラージスケール合成
この実施例では、ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌの少なくとも１００ｇスケールでの調製のための合成経路の開発を説明する。この手順は、例えばキログラム量の材料を産生するために使用されうる。最終経路をスキーム１に示す。この経路は６つのステップであり、エーテル形成、鈴木カップリング、フッ化物置換、および酸触媒溶媒和化が含まれる。この手順を、１０５ｇのデモンストレーションバッチスケールでテストした。
【０３３７】
スキーム２．ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌの調製
【０３３８】
【化２０】
2014037439.tif 000021
ステップ１：４‐（２‐（４‐ブロモフェノキシ）エチル）モルホリン（２）の調製
実施例２でエーテル合成について説明した手順に対するいくつかの変更を開発した。アセトニトリル溶媒中でエーテル合成を行うとき、反応混合物は非常に濃いスラリーであり、攪拌が困難であった。従って、溶媒をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に変更し、これによってより扱いやすい白色の薄いスラリーが生成した。厳密な乾燥条件が不可欠でないことも決定した。例えば、０．３容の脱イオン（ＤＩ）水は、反応の純度または収率に不利な影響を与えない。反応溶媒をＤＭＦに変えたため、ワークアップも変更した。変更したワークアップは、ＤＩ水での希釈およびＭＴＢＥでの抽出を伴うものとなった。残存する４‐ブロモフェノールを除去するために、水酸化ナトリウム水溶液で基本的な洗浄を行うのも好都合であった。
【０３３９】
３４３５ｇの４‐（３‐クロロプロピル）モルホリン塩酸塩を４８００ｇの４‐（２‐（４‐ブロモフェノキシ）エチル）モルホリン（２）に変換するためにエーテル合成をスケールアップした。ＨＰＬＣによる純度（ＡＵＣ％）は９９．９％であった。
【０３４０】
ステップ２：６‐フルオロピリジン‐３‐イルボロン酸（４）の調製
ボロン酸４の形成を、添加の順番および溶媒を変更することによっていくつかのやり方において改善した。最初の手順は、ｎ‐ＢｕＬｉ溶液を含むヘキサンの冷ＭＴＢＥ溶液への添加を必要とした。次にアニオン性溶液を−７５℃未満まで冷却し、５‐ブロモ‐２‐フルオロピリジンを含むＭＴＢＥの第２溶液をゆっくりと加えた。得られた混合物に、トリイソプロピルボラートをポーションで立て続けに加えた。このプロセスは、トリイソプロピルボラートを急速に加えるため、スケールアップに修正することはできなかった。この手順の開発は、発表済みの手順（Ｌｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００２，６７，５３９４‐５３９７）に従うことによって先行していた。１つの改善は、５‐ブロモ‐２‐フルオロピリジンとトリイソプロピルボラートを、トルエンとＴＨＦの溶液に予め混ぜておくことであった。混合物を−５０〜−３５℃に冷却し、次にｎ‐ＢｕＬｉ溶液を添加してアリールアニオンを形成した後で、これをトリイソプロピルボラートによってｉｎ  ｓｉｔｕでクエンチして、アリールボラートを形成した。この手順は、発熱イベントを制御しただけでなく、前述のように−７５℃未満よりも高い温度で実施された。反応の最中により高い温度が得られれば、ブロモブタンからのＨＢｒの排除の競合的反応が認められると考えられた。ｎ‐ＢｕＬｉまたはアリールアニオンが副反応中の塩基であるかどうかは探索しなかった。単なる塩酸水溶液の代わりに、水酸化ナトリウム水溶液での抽出を加えることによってワークアップを変更した。水性抽出物を注意深く集め、これによって若干のｐＨ調節が必要となったのみであった。
【０３４１】
６‐フルオロピリジン‐３‐イルボロン酸（４）の調製は良好に進行し、５０５０ｇの５‐ブロモ‐２‐フルオロピリジンを変換して、３５１５ｇのボロン酸４を３バッチで得た。詳細は表３に認められる。
【０３４２】
ステップ３：４‐（２‐（４‐（６‐フルオロピリジン‐３‐イル）フェノキシ）エチル）モルホリン（５）の調製
より小さいスケールのパラジウムカップリング反応の実施において、固体が反応装置のガラス壁上に形成されることに気付いた。固体は絶縁体として機能するであろうから、この反応をスケールアップすると反応装置の異常加熱をもたらす可能性がある。異常加熱を防ぐために２種類のアプローチを行った。反応物に加える水の量を２．３〜４．０容に増やし、反応をキログラムスケールで実施した場合には、閾値温度に達すれば加熱を制御するために、反応装置とマントルヒーターの間に追加の熱電対を使用した。カップリング反応は２バッチで完了し、合計５２６９ｇの４‐（２‐（４‐ブロモフェノキシ）エチル）モルホリンが５７３５ｇの４‐（２‐（４‐（６‐フルオロピリジン‐３‐イル）フェノキシ）エチル）モルホリンに変換され、バッチのＨＰＬＣによる純度は９４．９および９０．３（ＡＵＣ％）であった。
【０３４３】
ステップ３ａ：４‐（２‐（４‐（６‐フルオロピリジン‐３‐イル）フェノキシ）エチル）モルホリン（５）の精製
パラジウムカップリング由来の粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィーで精製した。材料（５７３５ｇ）を７つのカラムで精製して、化合物５を淡褐色の固体（４２２０ｇ、ＨＰＬＣで９７．６ＡＵＣ）として得て、パラジウムレベルは０．２ｗｔ％であった。毒性学のバッチでは、精製された化合物５の段階において、７および１１ｐｐｍのパラジウムレベルが観察された。
【０３４４】
ステップ４：２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトニトリル（６）の調製
スケールアップ可能なフッ化物置換反応の開発においていくつかの変更を行った。置換反応には、ＴＨＦに含まれる溶液として商業的に入手できない、カリウムヘキサメチルジシラン（ＫＨＭＤＳ）が必要であった。従って、反応には、固体から混合物を調製するステップが必要であった。この操作は、ラージスケール反応には望ましくないものであろう。３種類のカチオン（ＬｉＨＭＤＳ、ＫＨＭＤＳ、およびＮａＨＭＤＳ）を評価した。ＬｉＨＭＤＳは暗褐色の反応混合物をもたらし、変換は認められなかった。ＮａＨＭＤＳは、ＫＨＭＤＳと等しく機能した。ＮａＨＭＤＳのＴＨＦ溶液は容易に入手可能である。
【０３４５】
より小さいスケールの反応における大過剰量の塩基（ＫＨＭＤＳ、８当量）および求核試薬（アセトニトリル、６．５当量）の使用は、同様の系に関する文献において報告されているものと一致しなかった（２当量の塩基および１当量の求核試薬：Ｋｌａｐａｒｓ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００５，７０，１０１８６‐１０１８９を参照）。ＮａＨＭＤＳとアセトニトリルの当量を比例して減らすと、不完全な変換につながった。しかし、さらなる当量の塩基およびアセトニトリルを添加した場合、反応を完了させることが可能であることがわかった。開発の初期段階では、ＴＨＦに含まれる化合物５をアセトニトリルおよび塩基の溶液に急速に加えた。スケール上での急速な添加は許容できないまたは妥当ではないであろう。より大きなスケールで必要となる保持時間および添加時間をシミュレートするために、スモールスケールでの保持時間および添加時間を延長した。添加時間および保持時間を延長すると変換は大幅に妨げられ、それぞれ４３から５％となった。５の溶液を急速に添加する前に、塩基およびアセトニトリルの溶液を２時間保持すると、変換は不良となった（５％）。塩基とアセトニトリルは適合せず、試薬の分解をもたらす。従って、塩基および化合物５を予め混合し、アセトニトリルをゆっくりと加えられるように試薬の添加の順番を変更した。新たな手順を使用して実施した反応は、９０台後半の変換が常にもたらされた。使用に成功したＮａＨＭＤＳおよびアセトニトリルの最小の当量は、それぞれ５当量および４当量であった。塩基およびアセトニトリル両者の当量の４０％の低下が達成された。
【０３４６】
ステップ５：メチル２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセタート（７）の調製
ニトリル６の酸触媒加メタノール分解は典型的に、少量のカルボン酸７ａをもたらした。恐らくは７ａのソースである好都合な水を除去するために採ったアプローチは、メタノールと濃硫酸の反応混合物に発煙硫酸を加えることであった。濃硫酸は、通常は９５〜９８％溶液として供給される。発煙硫酸は、硫酸に含まれる２〜５％の水を除去する。濃硫酸と発煙硫酸の混合物を使用することで、６％未満のカルボン酸７ａが副産物として常に生じ、これは水性ワークアップで容易に除去可能であった。
【０３４７】
水性条件下で反応をクエンチするステップは、カルボン酸７ａの生成を避けるのに細心の注意を払う必要があった。メタノールおよび水の中でそれぞれ１８時間攪拌することで、ｐＨ１、９、および１３〜１４においてエステル７の安定性を判定した。１８時間後、ｐＨ１では７ａへの１９％の変換、ｐＨ９では３７％の変換、ｐＨ１３〜１４では１００％の変換であった。温度を２０℃未満に必ず保つ、飽和重炭酸ナトリウムとジクロロメタンの攪拌混合物への添加によって反応をクエンチした。
【０３４８】
注目点は、不注意によってメタノールが蒸発してしまったスモールスケール反応の最中に、ＬＣ／ＭＳデータによってアミド７ｂと決定された新たな不純物が形成されたことである。ニトリルからアミドを調製するための先行手順は、濃硫酸で処理することである（Ｓａｒｅｌ，Ｓ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９５６，７９，５４１６）。
【０３４９】
【化２１】
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ステップ６：ＫＸ２‐３９１の調製
中間スケール反応で説明したアミド形成のための手順は、ラージスケールでも良好に機能した。メチルエステル７およびベンジルアミン（３当量）をアニソールに溶解し、１５０℃でほぼ２日間加熱した。しかし、中間スケールの手順を使用した生成物の単離は、固体の塊の生成物をもたらしうる。この問題を回避するため、抗溶媒を添加する前に、反応混合物を室温まで冷却せず、４５〜５０℃に冷却した。元の手順では抗溶媒としてトルエンおよびヘプタンを使用した。ｎ‐ヘプタンを単独で使用すると、純分な純度が得られ、収率は８１〜９０％に増加した。さらに、ヘプタンの単一異性体の使用は、残存溶媒を十分に定量するのに不可欠であった。
【０３５０】
ステップ７：ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌの調製
ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌが吸湿性であることから、再現性よくビス‐ＨＣｌ塩を調整するためにさらなる注意を払った。無水エタノールに塩化アセチルを添加することにより、無水ＨＣｌ溶液を含むエタノールを作製した。次に、窒素雰囲気下で、ＫＸ２‐３９１遊離塩基をこの溶液で処理した。続いて濃縮および共沸乾燥を用いた。しかし、ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌの結晶化を再現性よく得ることはできなかった。複数種類の溶媒、例えばＩＰＡ（イソプロピルアルコール）、酢酸エチル／ＩＰＡ、エタノール、プロパノール、およびブチルアルコール（表１）を使用した。表１の実験は、様々な結晶化および沈殿条件を探索するための最初の試みであった。報告した２つのロット（ＥおよびＦ）をもたらした最後の実験条件は、この情報に基づいて選択された。
【０３５１】
【表１−１】
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【０３５２】
【表１−２】
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ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌを含むエタノールの濃縮溶液を、多量の急速に攪拌する酢酸エチルに逆に添加することによって沈殿が成功した。この沈殿手順はデモンストレーションバッチ用に行われ、２つの識別可能な固体の種類が形成された。２つの識別可能な固体の種類を物理的に分離し、別々にろ過した。密度の低い褐色固体（ロット０２ＢＰ１１１Ｅ、７４ｇ、ＨＰＬＣで９９．１％ＡＵＣ）が最初にろ過され、続いてより密度の高いさらに色の濃い固体（ロット０２ＢＰ１１１Ｆ、４３ｇ、ＨＰＬＣで９９．１％ＡＵＣ）がろ過された。真空オーブン内で乾燥した後、２つの固体をブレンドする前にそれぞれのサンプルを解析用に確保した。目的とするデータは、示差走査熱量測定（ＤＳＣ、図１および２）およびＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ、図３および４）であった。２つのサンプルのＨＰＬＣデータは類似していたが、ＤＳＣおよびＸＲＰＤは異なっていた。
【０３５３】
両ＨＰＬＣ試料とも、９９．０％の純度（エリア％で）より高く、ロット０２ＢＰ１１１Ｅサンプルはおよそ１９８℃における単一の吸熱イベントを示したが、ロット０２ＢＰ１１１Ｆサンプルは、１１７℃および１８９℃における２つの吸熱イベントを示した。２つのサンプルに関するＸＲＰＤデータも異なり、ロット０２ＢＰ１１１Ｅサンプルは結晶性のようであったが、ロット０２ＢＰ１１１Ｆサンプルはアモルファスのようであった。ＨＰＬＣデータ、ＸＲＰＤデータ、およびＤＳＣデータは、２つのサンプルが同一材料の異なる形態であることを裏付けるものであった。
【０３５４】
ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌの２つのロット（ロット０２ＢＰ１１１Ｅおよび０２ＢＰ１１１Ｆ）を乾式ブレンドし、ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌの新たなロット（ロット０２ＢＰ１１１Ｇ）を得た。ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌ（ロット０２ＢＰ１１１Ｇ）は１７０ｐｐｍの塩化エチルを含有していた。
【０３５５】
実験
試薬および溶媒は、商業的供給業者から受領した状態で使用した。反応の進行は、ＨＰＬＣ、ＧＣ／ＭＳ、または１Ｈ  ＮＭＲでモニタリングした。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、Ａｎａｌｔｅｃｈシリカゲルプレートを使用して行い、ＵＶ光（２５４ｎｍ）で可視化した。高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を、Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズ機器で実施した。プロトンおよびカーボン核磁気共鳴スペクトルを、プロトンでは３００ＭＨｚで、カーボンでは７５ＭＨｚにおいてＢｒｕｋｅｒ  ＡＶ３００を使用して得た。プロトンおよびカーボンスペクトルでは、溶媒ピークを基準ピークとして使用した。
【０３５６】
４‐（２‐（４‐ブロモフェノキシ）エチル）モルホリン（２）の調製
還流用冷却器および温度プローブを備えた５０Ｌ容量のジャケット付き反応容器に、４‐（３‐クロロプロピル）モルホリン（２．４４ｋｇ、０．５４モル）、４‐ブロモフェノール（２．２７ｋｇ、０．５４モル、１．０当量）、粉末状炭酸カリウム（６．３３１ｋｇ、１．８８モル、３．５０当量）、およびＤＭＦ（１２．２Ｌ）を入れて攪拌した。次に反応混合物を６０〜６５℃に加熱し、一晩攪拌した。１７．５時間後、反応混合物を２０〜２５℃に冷却した。ワークアップ用の底部バルブを備えた別の反応容器に反応混合物を入れた。温度を２０〜３０℃の間に保ちながら、ＤＩ水（４８．７Ｌ）を反応容器に入れた。相が分離した。水層をＭＴＢＥで抽出した（３×２４．４Ｌ）。集めた有機物質に、ＤＩ水（１８．３Ｌ）、次いで６Ｍの水酸化ナトリウム（１８．２Ｌ）を加えた。２〜５分間混合物を攪拌し、相が分離した。有機相を水（２４．４Ｌ）および食塩水（２４．４Ｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮して、３７７０ｇの黄色い油（８９％粗収率、ＨＰＬＣで９９．４％ＡＵＣ）を得た。
【０３５７】
６‐フルオロピリジン‐３‐イルボロン酸（４）の調製
還流用冷却器および温度プローブを備えた７２Ｌ容量の反応容器。反応容器に、５‐ブロモ−２‐フルオロピリジン（１．１７Ｌ、０．５６８モル）、トルエン（１８．２Ｌ）、およびトリイソプロピルボラート（３．１３Ｌ、０．６８モル、１．２当量）を入れて攪拌した。テトラヒドロフラン（４．４Ｌ）を反応容器に加えて、反応混合物を−３５〜−５０℃の間に冷却した。−３５〜−４５℃の温度を保ちながら、ｎ‐ブチルリチウム（ヘキサンの２．５Ｍ溶液、５．４４Ｌ、０．６８モル、１．２当量）を慎重に反応容器に加えた。５時間後、反応が完了したと判断し、反応混合物を−１５〜−２０℃に昇温した。−１５℃〜０℃の温度を保ちながら、反応物に２ＭのＨＣｌ（１１．８０Ｌ）を反応容器に加えた。１８〜２３℃で反応混合物を１６時間攪拌し、相が分離した。次に有機物質を６Ｍの水酸化ナトリウム（６．０Ｌ）で抽出した。酸性および塩基性の水相を反応容器内で混合し、ｐＨが７．５になるまで６ＭのＨＣｌ（２．５Ｌ）を加えた。次に塩化ナトリウム（６．０ｋｇ）を水相に加えた。次いで水相をＴＨＦで抽出した（３×２０Ｌ）。集めた有機物質を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して１３００ｇの褐色固体（８１％粗収率）を得た。
【０３５８】
４‐（２‐（４‐（６‐フルオロピリジン‐３‐イル）フェノキシ）エチル）モルホリン（５）の調製
還流用冷却器、スパージチューブ、バブラー、および温度プローブを備えた７２Ｌ容量の反応容器に、６‐フルオロピリジン−３‐イルホウ酸（２．８４ｋｇ、１．２４当量）、４‐（２‐（４‐ブロモフェノキシ）エチル）モルホリン（４．２７ｋｇ、１．０当量）、およびＤＭＥ（２７Ｌ）を入れた。攪拌を始め、次に、炭酸ナトリウム（４．７４ｋｇ、３．０当量）をＤＩ水（１７．１Ｌ）中の溶液として反応混合物に加えた。アルゴンを気泡化して反応混合物に５０分間通した。アルゴン雰囲気下で、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（７５０ｇ、０．０４当量）を、ＤＭＥ（１．０Ｌ）中のスラリーとして反応混合物に加えた。反応混合物を７５〜８５℃に加熱し、一晩（１７時間）加熱した。反応混合物を１８〜２２℃に冷却した。ＤＩ水（２６．６８１ｋｇ）およびＭＴＢＥ（２６．６８１Ｌ）を反応容器に入れ、５分間攪拌した。相が分離し、水相をＭＴＢＥ（２×２６．７Ｌ）で抽出した。集めた有機物質を２ＭのＨＣｌで抽出した（１×１５．０Ｌ、３×２１．８Ｌ）。次に水相を反応容器に戻して、酢酸エチル（２６．７Ｌ）を加えた。１５〜２５℃の温度を保ちながら、６Ｍ水酸化ナトリウム（２６．７Ｌ）を使用してｐＨを６．２に調整した。相が分離し、水相を酢酸エチルで抽出した（２×２６．７Ｌ）。集めた有機物質を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して４５５５ｇの残渣を得た（１０１％粗収率、ＨＰＬＣで６７．１％ＡＵＣ）。
【０３５９】
４‐（２‐（４‐（６‐フルオロピリジン‐３‐イル）フェノキシ）エチル）モルホリン（５）の精製
粗生成物（５７５ｇ）を、メタノール／酢酸エチル／ヘプタン（３０％酢酸エチル／ヘプタン、５０％酢酸エチル／ヘプタン、７５％酢酸エチル／ヘプタン、１００％酢酸エチル、および５％メタノール／酢酸エチル）で溶離することによって、シリカゲルクロマトグラフィーで精製した。ＴＬＣ（１０％メタノール／ジクロロメタン、Ｒｆ＝０．３）による純粋な画分の濃縮によって、４２０ｇの淡褐色の固体（７３％回収、ＨＰＬＣで＞９９．９％ＡＵＣ）を得た。
【０３６０】
２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセトニトリル（６）の調製
５Ｌ容量のフラスコに、ＴＨＦ中のＮａＨＭＤＳ（２．０Ｌ、５．０当量）の１Ｍ溶液を入れ、−２０〜−１５℃に冷却した。−１０℃未満の温度を保ちながら、フッ化物（１１９．７ｇ、１．０当量）を含むＴＨＦ（５００ｍＬ）を、２０分間にわたってフラスコに入れた。−１０℃未満の温度を保ちながら、アセトニトリル（８２．５ｍＬ、４．０当量）を含むＴＨＦ（１７０ｍＬ）を２０分間にわたってフラスコに加えた。次に反応混合物を１時間攪拌した。反応物に、食塩水（１．５Ｌ、１２．６ｖｏｌ）を、１０℃未満の温度を保てる速さで加えた。次に、溶液を室温まで昇温し、層を分離させた。混合物をセライトでろ過し、ＴＨＦで洗浄した（１×２００ｍＬ、１×１００ｍＬ）。水相をトルエン（７５０ｍＬ）で抽出した。集めた有機物質を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、トルエンで洗浄し（２×２５０ｍＬ）、乾燥するまで濃縮した。トルエン（１Ｌ）を加え、乾燥するまで溶液を再度濃縮して、１６９．８ｇの油を得た。ＭＴＢＥ（１１９０ｍＬ、７ｖｏｌ）を５０℃で油に加え、１５分間攪拌した。ヘプタン（８５０ｍＬ、５ｖｏｌ）を５０℃で１０分間にわたって加えた。次に、１．５時間で混合物を室温まで冷却し、２時間攪拌した。スラリーをろ過し、１：４ＭＢＴＥ／ヘプタン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、４５℃のオーブン内で一晩乾燥して、１０２．３ｇのオフホワイトの固体を得た（８０％収率、ＨＰＬＣで９８．８％ＡＵＣ）。
【０３６１】
メチル２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン‐２‐イル）アセタート（７）の調製
攪拌子および熱電対を備えた３Ｌ容量のフラスコに、ニトリル６（１０１ｇ）およびメタノール（１．０１Ｌ、１０ｖｏｌ）を入れた。６０℃未満の温度を保ちながら、濃Ｈ２ＳＯ４（１７５ｍＬ、１０．０当量）を１５分間にわたって溶液に滴下しながら加えた。次いで、６０℃未満の温度を保ちながら、３０％発煙硫酸（１２４ｍＬ）を溶液に滴下しながら加えた。次に、マントルヒーターで溶液を還流加熱し、一晩攪拌した。反応が終了したと判断されたら、これを２０℃に冷却した。２つめのフラスコ（２２Ｌ容量）に、飽和重炭酸ナトリウム（１０．７Ｌ）およびジクロロメタン（１．１Ｌ）を入れ、１５℃に冷却した。２０℃未満の温度を保ちながら、反応混合物を重炭酸ナトリウム／ジクロロメタン混合物に加えた。クエンチを１５分間攪拌し、相が分離した。水相をジクロロメタンで抽出した（１×５５０ｍＬ、１×３００ｍＬ）。集めた有機物質を硫酸マグネシウムで乾燥し、乾燥するまで濃縮して１０５ｇの橙色の固体を得た（９４％粗収量、ＨＰＬＣで９７．７％ＡＵＣ）。
【０３６２】
Ｎ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン−２‐イル）アセトアミド（ＫＸ２‐３９１）の調製
エステル７（１０３ｇ）、アニソール（５１３ｍＬ、５ｖｏｌ）、およびベンジルアミン（９４ｍＬ、３．０当量）を、熱電対および攪拌翼を備えた３Ｌ容量のフラスコに入れた。次に、反応混合物を１４２℃に加熱し、２日間攪拌した。反応混合物を４５〜５０℃に冷却し、２時間攪拌した。混合物に、ｎ‐ヘプタン（１．５Ｌ）を１時間にわたって滴下しながら加えた。３時間で溶液を室温に冷却した後、一晩攪拌した。得られたスラリーをろ過し、４：１アニソール／ｎ‐ヘプタン（２００ｍＬ）およびｎ‐ヘプタン（３×１００ｍＬ）で洗浄した。オーブン内で一晩乾燥すると、得られた生成物は１１２．１ｇの褐色固体であった（９０％収率、ＨＰＬＣで９９．６％ＡＵＣ）。ＫＸ２‐３９１の１Ｈ
ＮＭＲについては図５を参照されたい。
【０３６３】
Ｎ‐ベンジル‐２‐（５‐（４‐（２‐モルホリノエトキシ）フェニル）ピリジン−２‐イル）アセトアミド二塩酸塩（ＫＸ２‐３９１．２ＨＣｌ）の調製
ＥｔＯＨ（１．０Ｌ）を２Ｌ容量のフラスコに入れ、塩化アセチル（６２．５ｍＬ、３．０当量）をフラスコにゆっくりと加えて４０分間攪拌した。温度を３０℃に保ちながら、得られた溶液を３０分間にわたってＫＸ２‐３９１（１００ｇ）に加えた。溶液を質量２７０ｇまで濃縮した。急速に攪拌しながら、濃縮溶液を２０分間にわたって酢酸エチル（２Ｌ）に加えた。混合物を一晩攪拌した後、窒素雰囲気下でろ過して、２つの識別可能な固体生成物、褐色固体（７３．５ｇ）および色の濃い固体（４２．２ｇ）を得た。固体を乾式ブレンドして、合計収率９９％を得た。ＨＰＬＣ解析は９９．０％の純度（ＡＵＣ）を示していた。
【０３６４】
解析は、エタノールが２５３０ｐｐｍで、酢酸エチルが４８，１１０ｐｐｍで、塩化エチルが１７０ｐｐｍで存在していたことを示し、ヘプタンおよびアニソールは検出されなかった。パラジウム含有量を３回分析し、２９ｐｐｍ、２ｐｐｍ、および１ｐｐｍ未満と測定された。
【０３６５】
その他の実施形態
本発明を、その詳細な説明とともに説明したが、これまでの説明は例示を目的とするものであって、添付の請求項の範囲によって定められる本発明の範囲を限定するものではない。その他の態様、利点、および変更は、下記の請求項の範囲内に含まれる。添付の請求項によって包含される本発明の範囲から逸脱せずに、その形態および詳細に各種の修正が加えられてよいことが当業者に理解されるであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【外国語明細書】
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