(57)【要約】【課題】タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーを粉末化することなく、液体または凍結の状態で保存可能な新しい技術を提供し、さらに該技術により製造されたローヤルゼリーを提供すること。【解決手段】ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する第一工程、酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを調整する第二工程を含む方法により製造された、液体または凍結の状態で保存可能なタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー、および該タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを含有する組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する第一工程、タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを４．５〜５．５に調整する第二工程、および冷蔵または冷凍保存する工程を含む方法により製造された、タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー。
【請求項２】
ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する第一工程、タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを４．５〜５．５に調整する第二工程、エタノールを添加する第三工程、および冷蔵または冷凍保存する工程を含む方法により製造された、タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー。
【請求項３】
濃縮工程を第二工程の後に行うことを特徴とする請求項１または２に記載のタンパク質分解酵素ローヤルゼリー。
【請求項４】
エタノール濃度が０．５〜３０ｗ／ｗ％である請求項２に記載のタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー。
【請求項５】
請求項１から４のいずれか１項に記載のタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを含有するローヤルゼリー組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体または凍結の状態で保存可能なタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーの製造方法、該方法によって得られるタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー、および該タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを含有するローヤルゼリー組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ローヤルゼリーとは、若い働き蜂の咽頭腺により分泌される乳白色のペースト状物質であり、その成分は必須アミノ酸をはじめとするアミノ酸が豊富に含まれ良質なタンパク質などから構成されている。さらに、ビタミン類、ミネラル類、炭水化物などの微量成分を含んでいる。ビタミン類では、例えばビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ナイアシン、成長促進や老化防止に効果のあるパントテン酸、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥなどが挙げられる。ミネラル類では、カリウム、マグネシウム、カルシウム、銅、鉄、リンなどが挙げられる。炭水化物ではブドウ糖、果糖などが挙げられる。さらに、アセチルコリン様物質、有機酸（１０−ヒドロキシデセン酸など）、脂肪、タンパク質性の抗菌物質であるロイアリシンなどが含まれている。
【０００３】
このようにローヤルゼリーは様々な栄養成分を含んでおり、例えば、抗菌作用、免疫増強作用、抗炎症作用、老化防止作用、更年期障害の予防・治療作用、抗がん作用など数多くの効果が知られている。
【０００４】
ローヤルゼリーは様々な食品に利用されているが、生ローヤルゼリーには粘稠であることや、不溶性の物質とくにタンパク質が多いため水に溶けにくいことなど、飲料や食料品に添加する上での問題があった。このような問題の解決のため、ローヤルゼリーに酵素処理を行って不溶性物質を可溶化する技術（特許文献１および２）や、含有されるタンパク質をプロテアーゼなどの酵素で処理を行い低アレルゲン化する技術などが報告されている（特許文献３）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平８−５９４９９号公報
【特許文献２】特開平５−１２３１１９号公報
【特許文献３】特開２００２−１１２７１５号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーには、液体または凍結の状態で長期間保存すると沈殿が生じるという問題があった。タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーは、例えば凍結乾燥やスプレードライなどの乾燥処理により粉末化して保存することができるが、粉末化には費用がかかるという問題がある。
【０００７】
本発明は、タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーを粉末化することなく、液体または凍結の状態で保存可能にする新しい技術を提供し、該技術により製造されたローヤルゼリーを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは鋭意検討を行った結果、ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する第一工程、および酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを調整する第二工程を含む方法により、前記課題が解決できることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００９】
すなわち本発明は、
１．ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する第一工程、タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを４．５〜５．５に調整する第二工程、および冷蔵または冷凍保存する工程を含む方法により製造された、タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー、
２．ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する第一工程、タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを４．５〜５．５に調整する第二工程、エタノールを添加する第三工程、および冷蔵または冷凍保存する工程を含む方法により製造された、タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー、
３．濃縮工程を第二工程の後に行うことを特徴とする前記１．または２．のタンパク質分解酵素ローヤルゼリー、
４．エタノール濃度が０．５〜３０ｗ／ｗ％である前記２．のタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー、
５．前記１．から４．のいずれかのタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを含有するローヤルゼリー組成物、
からなる。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によると、液体または凍結の状態で長期間保存しても沈殿を生じることのないタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを提供できる。
【００１１】
このように本発明により、タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを粉末化することなく、液体または凍結の状態で保存可能となり、そのためより低価格のタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明は、ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する第一工程、タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを調整する第二工程を含む、液体または凍結の状態で保存可能なタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーの製造方法、並びに該方法で製造された液体または凍結の状態で保存可能なタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーに関する。
【００１３】
ローヤルゼリーの原産国は、例えば日本、中国、台湾、タイ、ブラジル、ヨーロッパ諸国、オセアニア諸国、およびアメリカなどを挙げることができ、いずれの原産国のローヤルゼリーを用いてもよい。また、複数の原産国のローヤルゼリーを適宜混合して用いてもよい。ローヤルゼリーは液体であることが好ましく、凍結乾燥状態のローヤルゼリーを用いる場合は精製水、水道水または適当な緩衝液などで溶解して用いることができる。また、凍結状態のローヤルゼリーは融解して用いることができる。
【００１４】
さらに、ローヤルゼリーは加熱、遠心分離、アルコール抽出、ろ過、フリーズドライまたは熱風乾燥などの加工がされたものであってよく、また各種栄養素などが添加されたものであってもよい。
【００１５】
ローヤルゼリーに作用させるタンパク質分解酵素としては、タンパク質のペプチド結合を加水分解する酵素を用いる。タンパク質分解酵素は微生物由来、動物由来または植物由来のものを例示できる。微生物由来のタンパク質分解酵素は微生物を培養することにより得られ、植物または動物由来のタンパク質分解酵素は植物または動物の臓器をホモジネートすることにより得られる。これらタンパク質分解酵素はさらに精製を行ったものであってもよく、またポリエチレングリコールなどで修飾されたものであってもよい。さらに、２種類以上のタンパク質分解酵素を組み合わせて用いてもよい。
【００１６】
これら微生物、植物または動物由来のタンパク質分解酵素のうち、植物由来のタンパク質分解酵素としてパパイン、ブロメリンなどを例示できる。また、動物由来酵素として、トリプシン、キモトリプシン、パンクレアチンなどを例示できる。微生物由来のタンパク質分解酵素としてバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、パエニバチルス（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属）、リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属またはストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）属の微生物に由来するタンパク質分解酵素を挙げることができ、また、これら微生物の具体的な例としてバチルス  サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、バチルス  ステアロサーモフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）、バチルス  リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス  アルカロフィルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｌｃａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、パエニバチルス  ポリミキサ（Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｏｌｙｍｙｘａ）、アスペルギルス  オリーゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）、アスペルギルス  メレウス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｍｅｌｌｅｕｓ）、アスペルギルス  ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス  ホエニシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ）、アスペルギルス  ソウヤ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓｏｊａｅ）、リゾプス  ニベウス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｎｉｖｅｕｓ）、ストレプトマイセス  グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｒｉｓｅｕｓ）を好適に挙げることができる。
【００１７】
タンパク質分解酵素でローヤルゼリーを処理するときのｐＨは、ローヤルゼリーの成分の安定性、並びにタンパク質分解酵素の反応至適ｐＨおよび安定性を考慮して適宜決定することができる。
【００１８】
タンパク質分解酵素でローヤルゼリーを処理するときの温度は、ローヤルゼリーの成分の安定性、並びにタンパク質分解酵素の反応至適温度および安定性を考慮して適宜決定することができる。
【００１９】
また、タンパク質分解酵素でローヤルゼリーを処理するとき、反応溶液に金属塩、キレート剤、無機塩類などを適宜加えてもよい。
【００２０】
タンパク質分解酵素と混合した後のローヤルゼリーの固形分濃度は、好ましくは０．１〜３０ｗ／ｗ％（重量比）であり、より好ましくは１〜１５ｗ／ｗ％、さらに好ましくは４〜１０ｗ／ｗ％である。ここで、例えば１０ｗ／ｗ％は、１００ｇのローヤルゼリーを凍結乾燥などにより乾燥させたとき１０ｇの乾燥品が得られることを意味している。
【００２１】
本発明に係るローヤルゼリーの製造方法においては、ローヤルゼリーのタンパク質を分解する工程の他に、多糖類を分解する工程を含んでもよい。多糖類を分解する工程は、多糖分解酵素でローヤルゼリーを処理することにより行われる。多糖分解酵素は糖と糖の結合を加水分解する酵素であり、α−アミラーゼ、β−アミラーゼ、ブルラナーゼ、グルコアミラーゼ、グルコシダーゼ、セルラーゼ、およびグルカナーゼを例示することができる。多糖分解酵素は、これら例示したものに限らず、微生物由来、動物由来または植物由来のものをいずれも使用できる。微生物由来の多糖分解酵素は微生物を培養することにより得られ、植物または動物由来の多糖分解酵素は植物または動物の臓器をホモジネートすることにより得られる。これら多糖分解酵素はさらに精製を行ったものであってもよく、またポリエチレングリコールなどで修飾されたものであってもよい。さらに、２種類以上の多糖分解酵素を組み合わせて用いてもよい。多糖分解酵素でローヤルゼリーを処理する条件、例えば温度やｐＨは、ローヤルゼリーの成分の安定性、並びに多糖分解酵素の反応至適温度および安定性を考慮して適宜決定することができる。
【００２２】
多糖類を分解する工程は、タンパク質を分解する工程の前に行ってもよいし、タンパク質を分解する工程の後に行ってもよいし、タンパク質を分解する工程と同時に行ってもよい。
【００２３】
タンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを調整する第二工程において、上記のようにタンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを４．５〜５．５に調整する。ｐＨの調整は塩酸、リン酸、クエン酸、酢酸、およびリンゴ酸などの酸性を示す物質、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、および炭酸ナトリウムなどのアルカリ性を示す物質を適宜選択して用い、公知のｐＨ調整方法により実施できる。
【００２４】
エタノールを添加する際のエタノール濃度は０．５〜３０ｗ／ｗ％、好ましくは１〜２０ｗ／ｗ％、さらに好ましくは２．５〜１０ｗ／ｗ％が適当である。エタノール濃度が低いと防腐効果が低く、エタノール濃度が高いとタンパク質が沈殿する。ただ、ローヤルゼリーには抗菌性があり、そのためエタノールの添加は必要に応じて行われる。
【００２５】
ｐＨ調整されたタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーは、液体の状態で、冷凍または冷蔵保存される。冷凍保存とは−４℃以下、好ましくは−１７℃以下で保存することをいい、冷蔵保存とは１０℃〜−３℃で保存することをいう。
【００２６】
また、本発明に係る方法は、酵素を用いてローヤルゼリーのタンパク質の分解や多糖類の分解を行った後に、該酵素を失活させる工程を含んでもよい。酵素を失活させる方法は、酵素処理ローヤルゼリーが食品として問題がない程度に酵素が失活されればいずれの方法でもよい。酵素を失活させる方法として、加熱により失活させる方法、酵素の阻害剤を用いて失活させる方法、限外ろ過またはゲルろ過などにより酵素を取除く方法を例示でき、これら方法を単独で用いてもよいし、二種類以上を組み合わせて用いてもよい。好ましくは、加熱により酵素を失活させる。加熱温度は６０℃以上、好ましくは８０℃以上である。酵素を失活させる工程は酵素処理を行った後またはｐＨを調整した後に行うことができる。
【００２７】
ローヤルゼリーをタンパク質分解酵素で処理する工程、およびタンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを４．５〜５．５に調整する工程を含む方法により製造された、タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーは、輸送コスト、保存性、他の素材と混合するときの混合の容易性などを考慮して濃縮を行うことが好ましい。濃縮は減圧濃縮、限外ろ過による濃縮、加熱濃縮などを例示できる。生ローヤルゼリーを用いた場合の濃縮の度合いは、酵素処理に用いた生ローヤルゼリーの量に対して０．５〜３倍の量まで濃縮を行うのが好ましい。生ローヤルゼリーを乾燥させた乾燥ローヤルゼリーを用いた場合は、乾燥により減じた水分を考慮して上記の濃縮度合いが考慮される。つまり、生ローヤルゼリーの約６７％が水分であることから、乾燥ローヤルゼリーの場合は、用いた乾燥ローヤルゼリーの量に対して１．５〜９倍の量まで濃縮を行うのが好ましい。また、濃縮工程を行う際のタンパク質分解酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを調整する第二工程は濃縮工程の前に行うことが好ましい。濃縮工程の後にｐＨの調整を行うと沈殿が生じる恐れがある。
【００２８】
また、本発明に係る方法により製造されたタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーは、各種成分を添加することによりタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー組成物として供することができる。各種成分としては、例えば食品、糖、脂質、乳化剤、増粘剤、調味料、香料、酸味調整剤、保存料、果汁、香料、各種栄養成分などを挙げることができる。また、各種成分は単独で用いてもよいし、二種以上を混合して用いてもよい。糖としては、蔗糖、異性化糖、グルコース、フラクトース、パラチノース、トレハロース、ラクトース、キシロースなどを例示できる。乳化剤としては、蔗糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチンなどを例示できる。増粘剤としてはカラギーナン、アラビアガム、キサンタンガム、グァーガム、ペクチン、ローカストビーンガム、ジェランガム、澱粉などを例示できる。酸味調整剤としては、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、フマル酸、グルコン酸、酒石酸などを例示できる。保存料としては、安息香酸およびその塩、ソルビン酸およびその塩、パラベン、亜硫酸ナトリウム、ペクチン分解物、グリシンなどを例示できる。果汁としては、トマト果汁、梅果汁、リンゴ果汁、レモン果汁、オレンジ果汁、ベリー系果汁などを例示できる。香料としては、ハーブ、スパイスなどの香辛料、フルーツ系香料、バニラなどの香料などを例示できる。この他、好ましい他の栄養成分として、ビタミンＤなどのビタミン類やカルシウム、マグネシウム、鉄、マンガン、亜鉛などのミネラル類などを挙げることができる。
【００２９】
タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリー組成物として、本発明に係るタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーを添加または配合して調製した食品を好ましく例示できる。そのような食品の具体的形態としては、例えば、飲料類、菓子、キャンディ、ガム、パン、畜肉製品、乳製品、レトルト食品、即席食品、冷凍食品、ゼリー状食品、養蜂産品、漬物、調味料などを挙げることができる。これらの食品は、いわゆる健康食品、機能性食品、特定保健用食品、栄養機能食品、栄養補助食品、サプリメントなどとしても有用である。また、それらの食品としての形状としては、顆粒、粉末、タブレット、カプセル、チュアブル、ドリンク、ゼリー、ペースト、粒などを挙げることができる。
【００３０】
以下、本発明の実施例について説明するが、本発明はこの実施例に何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００３１】
生ローヤルゼリー  １００ｇを水に懸濁し、２Ｎ  水酸化ナトリウム溶液を用いてｐＨを７．０に調整し、１Ｋｇにして、生ローヤルゼリー溶液を調製した。この溶液にバチルス  サブチリス由来のタンパク質分解酵素を１ｇ添加し、４５℃で６時間酵素処理を行った。次にこの処理液を２０％  水酸化ナトリウム溶液を用いてｐＨを８に調整し、パンクレアチンを１ｇ添加し、４５℃で６時間酵素処理を行った。その後、８０℃で１０分間加熱することにより酵素を失活させ、さらにろ過を行って不溶性残渣を除き、酵素処理ローヤルゼリー溶液を得た。
【００３２】
本酵素処理ローヤルゼリー溶液を１００ｇ分取し、２０％  クエン酸溶液でｐＨ６．５〜３．５に調整を行い、減圧濃縮により２０ｇまで濃縮を行い−２０℃で凍結保存した。１年後に、凍結保存した酵素処理ローヤルゼリーを融解し、沈殿の有無を観察した。その結果を表１に示す。
【００３３】
【表１】
2014183842.tif 000002
【００３４】
表１中、＋は沈殿が生じたことを示し、±は沈殿が若干生じたが使用には問題がないことを示す。
【００３５】
表１に示すように示すように、酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを５．５〜４．５に調整することで沈殿が若干生じたが使用には問題ないレベルであった。
【実施例２】
【００３６】
生ローヤルゼリー  １００ｇを水に懸濁し、２Ｎ  水酸化ナトリウム溶液を用いてｐＨを７．０に調整し、１Ｋｇにして、生ローヤルゼリー溶液を調製した。この溶液にバチルス  サブチリス由来のタンパク質分解酵素を１ｇ添加し、４５℃で６時間酵素処理を行った。次にこの処理液を２０％  水酸化ナトリウム溶液を用いてｐＨを８に調整し、パンクレアチンを１ｇ添加し、４５℃で６時間酵素処理を行った。その後、８０℃で１０分間加熱することにより酵素を失活させ、さらにろ過を行って不溶性残渣を除き、酵素処理ローヤルゼリー溶液を得た。
【００３７】
本酵素処理ローヤルゼリー溶液を１００ｇ分取し、２０％  クエン酸溶液でｐＨ６．５〜３．５に調整を行い、減圧濃縮により１８ｇまで濃縮を行いさらに、２ｇのエタノールを加え（最終濃度１０ｗ／ｗ％）、５℃で冷蔵保存した。１年後に、冷蔵保存した酵素処理ローヤルゼリー溶液の沈殿の有無を観察した。その結果を表２に示す。
【００３８】
【表２】
2014183842.tif 000003
【００３９】
表２中、＋は沈殿が生じたことを示し、±は沈殿が若干生じたが使用には問題がないことを示す。
【００４０】
表２に示すように酵素処理したローヤルゼリーのｐＨを４．５〜５．５に調整することで沈殿が若干生じたが使用には問題ないレベルであった。
【実施例３】
【００４１】
実施例２と同様に操作を行い、酵素処理ローヤルゼリー溶液を得た。本酵素処理ローヤルゼリー溶液を１００ｇ分取し、２０％  クエン酸溶液でｐＨ５．５、５．０、４．５に調整を行い、減圧濃縮により１８ｇまで濃縮を行い、さらに、エタノールを、最終濃度０〜１０ｗ／ｗ％になるように加え、５℃で冷蔵保存した。１年後に、冷蔵保存した酵素処理ローヤルゼリー溶液の沈殿の有無を観察した。その結果を表３に示す。
【００４２】
【表３】
2014183842.tif 000004
【００４３】
表３中、±は沈殿が若干生じたが使用には問題がないことを示し、−は沈殿が生じなかったことを示す。
【００４４】
表３に示すように酵素処理したローヤルゼリーにエタノールを最終濃度０〜１０ｗ／ｗ％になるように添加したが、沈殿は使用には問題ないレベルであった。なお、エタノールを添加しなくても腐敗は生じなかった。
【実施例４】
【００４５】
実施例１と同様に操作を行い、酵素処理ローヤルゼリー溶液を得た。本酵素処理ローヤルゼリー溶液を１００ｇ分取し、減圧濃縮により２０ｇまで濃縮を行い、２０％  クエン酸溶液でｐＨ５．５、５．０、４．５に調整を行った。実施例１のようにｐＨ調整後に減圧濃縮を行うことにより減圧濃縮直後は沈殿が生じなかったが、本実施例のように減圧濃縮後にｐＨ調整を行うといずれのｐＨでも沈殿が生じ、ｐＨ調整後に減圧濃縮を行うとが好ましいことが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明により製造されるタンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーは、液体または凍結の状態で保存可能であり、粉末化する必要がないため、粉末化タンパク質分解酵素処理ローヤルゼリーより低価格で提供できる。そのため、ローヤルゼリー組成物として飲食物など、特に健康食品などに好適に用いることができる。