(57)【要約】【課題】  酸化老化特性等の特性が安定且つ優れている天然ゴムラテックス、その処理方法、及び天然ゴムを提供。【解決手段】  本発明の天然ゴムラテックスの処理方法は、ラテックス中のリン脂質を５０％以上分解して処理する方法であり、例えば、リパーゼ及び／又はホスホリパーゼの酵素処理するものであり、リン脂質の５０％以上の分解により、天然ゴムラテックス中の未分解リン脂質を０．６５ｗｔ％以下にすると共に、得られる天然ゴムの酸化老化特性（ＰＲＩ）を９０以上にする。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラテックス中のリン脂質の５０％以上が分解されている天然ゴムラテックス。
【請求項２】
得られたラテックス中の未分解リン脂質が０．６５ｗｔ％以下である請求項１記載の天然ゴムラテックス。
【請求項３】
天然ゴムラテックスの処理方法において、リパーゼ及び／又はホスホリパーゼ酵素処理を行うことを特徴とする請求項１又は２に記載の天然ゴムラテックスの処理方法。
【請求項４】
請求項３記載の酵素処理をｐＨ５以上から１１以下で、温度７０℃以下で行う天然ゴムラテックスの処理方法。
【請求項５】
原料ラテックスは採取後１時間以内にｐＨ７以上に調整されたものである請求項３又は４記載の天然ゴムラテックスの処理方法。
【請求項６】
酵素処理をしないときに得られる天然ゴムの酸化老化特性（ＰＲＩ）が８５以下である原料ラテックスを使用する請求項３〜５の何れかに記載の天然ゴムラテックスの処理方法。
【請求項７】
酵素処理に加えて、界面活性剤で処理する請求項３〜６の何れかに記載の天然ゴムラテックスの処理方法。
【請求項８】
請求項１又は２に記載の天然ゴムラテックスから得られる天然ゴム。
【請求項９】
酸化老化特性（ＰＲＩ）が８５あるいはそれ以下である天然ゴムラテックス中のリン脂質を分解する処理方法において、天然ゴムラテックスをリパーゼ及び／又はホスホリパーゼ及び界面活性剤で処理することを含み、その処理をｐＨ５からｐＨ１１の範囲で、温度が２５℃から７０℃の範囲で行い、その中で得られたラテックスのリン脂質が少なくとも５０％が分解され、未分解リン脂質が０．６５ｗｔ％以下であり、得られた天然ゴムの酸化老化特性が９０あるいはそれ以上である処理方法。
【請求項１０】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中のリン脂質が少なくとも６０％である請求項９記載の処理方法。
【請求項１１】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中のリン脂質が少なくとも７０％である請求項９記載の処理方法。
【請求項１２】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中のリン脂質が少なくとも８０％である請求項９記載の処理方法。
【請求項１３】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中のリン脂質が少なくとも９０％である請求項９記載の処理方法。
【請求項１４】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中の未分解リン脂質量が０．５０ｗｔ％以下である請求項９記載の処理方法。
【請求項１５】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中の未分解リン脂質量が０．３０ｗｔ％以下である請求項９記載の処理方法。
【請求項１６】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中の未分解リン脂質量が０．２０ｗｔ％以下である請求項９記載の処理方法。
【請求項１７】
リパーゼ及び／又はホスホリパーゼで分解された天然ゴムラテックス中の未分解リン脂質量が０．１０ｗｔ％以下である請求項９記載の処理方法。
【請求項１８】
原料として使用される天然ゴムラテックスは採取後１時間以内にｐＨ７あるいはそれ以
上に調整されたものである請求項９〜１７の何れか一つに記載の処理方法。
【請求項１９】
チューバ(Tuber)、ベルチシリウム（Verticillium)、ニューロスポラ(Neurospora)、ヘリコスポルム(Helicosporium)、アスペルギルス(Aspergillus)、あるいはフザリウム(Fusarium)から得られるリパーゼ及び/又はホスホリパーゼである請求項９〜１８の何れか一つに記載の処理方法。
【請求項２０】
チュ一バ・アルビヅム(T.albidum)、チューバー・ボルキイ(T.borchii)、ベルチシリウム・テネルム(V.tenerum)、ベルチシリウム・ダヒリアエ(V.dahliae)、ニューロスポラ・クラッサ(N.crassa)、アスペルギルス・オリザエ(A.oryzae)又は、フザリウム・ベネナツム(F.venenatum)から得られるリパーゼ及び/又はホスホリパーゼである請求項１９記載の処理方法。
【請求項２１】
プロテアーゼで天然ゴムラテックスを処理する処理方法を更に含む請求項９〜２０の何れか一つに記載の処理方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、天然ゴムラテックス、その処理方法及び天然ゴムに関するものであり、特に、特性を向上させた天然ゴムラテックス、その処理方法及び天然ゴムに関するものである。
【背景技術】
【０００２】
天然ゴムはタイヤ、ゴムベルト、ゴムロール、プラダー、防舷材等の工業用品、さらにテニスボール、バスケットボール、サッカーボール、バレーボール等のスポーツ用品類等の多くの分野で頻用され、また最近では医療分野、バイオ分野にも頻用されてきている。
また、タイヤにおいてはトレッド、サイドウォール、プライコーティングゴム、ビードフィラー等のゴムタイヤを構成するあらゆるコンポーネンツの材料として使用されている。
近年、天然ゴムラテックスを化学処理、酵素処理して、天然ゴムに含まれるゴム成分以外のものを分解或いはそれを除去して、天然ゴムの特性向上をさせることが提案されている。
【０００３】
例えば、天然ゴム中の総窒素量を化学的に低減すること（特許文献１参照）や蛋白分解酵素等使用して低減すること（特許文献２及び特許文献３参照）等が提案されている。
また、本願出願人は、ラテックスをリパーゼ及び／又はホスホリパーゼの酵素処理をして、天然ゴムの改質を試みている（特許文献４参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平６−３２９８３８号公報
【特許文献２】特開平６−５６９０２号公報
【特許文献３】特開平６−５６９０６号公報
【特許文献４】ＷＯ２００４／０５２９３５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、天然ラテックスをリパーゼ及び／又はホスホリパーゼで単純に酵素処理しただけでは、安定した品質の天然ゴムラテックスは得られず、天然ゴムラテックスの２次製品以降の天然ゴム、及び製品などに関しての安定した品質が容易に得られなかった。
【０００６】
本発明は、酸化老化特性が安定且つ優れている天然ゴムラテックス、そのラテックスを得るための処理方法、及び天然ゴムを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、ラテックス中のリン脂質を５０％以上が分解されていることを特徴とする天然ゴムラテックスを提供することによって、上記課題を解決するものである。また、得られる天然ゴムラテックス中の未分解リン脂質は０．６５ｗｔ％以下であることが好ましい。
本発明はまた、天然ゴムラテックスの処理方法において、原料ラテックス中のリン脂質の分解は、そのリン脂質のエステル結合を解いてオレイン酸、パルミチン酸等の脂肪酸を分離するものである。ラテックス中のリン脂質のエステル分解処理は、化学的処理も可能であるが、リパーゼ及び／又はホスホリパーゼの酵素処理である。
リン脂質の分解量（％）は、反応性の指標設定（リン脂質からエステル分解して生じる脂肪酸のラテックス溶液中での脂肪酸増加を指標とする。）により求める。
【０００８】
酵素処理は、至適ｐＨ及び至適温度で行うことが好ましく、本発明では、ｐＨ５以上から１１以下で、温度７０℃以下であることが好ましく、例えば、室温（２５℃）から７０℃以下であることが望ましい。
【０００９】
使用する原料ラテックスは採取後１時間以内にｐＨ７以上に調整したものを使用することが好ましい。また、未処理原料ラテックスの天然ゴムにおける酸化老化特性（ＰＲＩ）が８５以下、好ましくは８０以下の原料ラテックスを使用することが処理方法に有効である。また、酵素処理に加えて、界面活性剤で処理することが好ましい。
本発明は更に、上記天然ゴムラテックスから得られる天然ゴムを提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明に係る天然ゴムラテックスの処理方法によれば、得られる天然ゴムラテックス及び天然ゴムは、安定した特性を示し、その酸化老化特性が向上する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ホスホリパーゼ処理によって分解される天然ゴムラテックス中のリン脂質の分解反応を示した図である。
【図２】図１に示す酵素量に対する、酵素分解によって生じるラテックス中の脂肪酸の増加量を示す反応性指標のグラフ図である。
【図３】図１の酵素分解によって生じるラテックス中のエステル結合の減少及び脂肪酸の増加を示すＦＴ−ＩＲのチャート図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明は、ラテックスのリン脂質を５０％以上分解してなる天然ゴムラテックス、その処理方法である。
図１に示すように、ラテックス中にはリン脂質が含まれる。リン脂質はエステル分解によってオレイン酸、パルミチン酸等の遊離脂肪酸を生じる。
図２に示すように、本発明では、分解によって生じる脂肪酸量をリン脂質分解の反応性の指標として設定する。
図３に示すように、酵素の分解によって生じるラテックス溶液中の脂肪酸量は、ＦＴ−ＩＲ測定装置（Ｖａｒｉａｎ社製）による１７１０［ｃｍ−１］付近での［−ＣＯＯＨ］のピーク量を測定する。
【００１３】
反応性の指標設定は、予め使用する原料ラテックス溶液中に初期脂肪酸量を測定し、この値をリン脂質の分解率０％とし、ラテックス溶液に、固形分としてのラテックス１００質量に対して０．１、０．２、０．５、１．０、及び５．０質量部の割合でホスホリパーゼをそれぞれ添加する。図３に示すように、反応後のラテックス溶液中での脂肪酸のピークの変化量を測定して、図２に示すように、基準曲線の脂肪酸量の推移から最大脂肪酸量を求め、このときをリン脂質の分解率１００％とする。最大値の推定は、基準曲線特性に基づいて、無限大の酵素添加量のときの値を推測する。
従って、原料ラテクッス中のリン脂質の分解率（％）＝｛（実測された脂肪酸量）−（初期脂肪酸量）｝／｛（指標設定した最大脂肪酸量）−（初期脂肪酸量）｝×１００である。尚、原料ラテクッス（１００ｇ）中の未分解リン脂質量（脂肪酸量を指標としたもの）（ｗｔ％）は、（最大脂肪酸量ｇ）−（初期脂肪酸量ｇ）であり、所定反応処理後のラテックス中の未分解リン脂質量（ｗｔ％）は、（最大脂肪酸量ｇ）−（実測された脂肪酸量ｇ）である。
ここで、指標設定における使用酵素は、2000LEU/g（ノボザイムス社規格単位）のホスホリパーゼ  NS44151（ノボザイムス社製造）を使用した。反応条件は、ラテックス固形分濃度が２０ｗｔ％のラテックス溶液を使用し、ｐＨを８として、室温（２５℃）で、１６時間反応させたものである。
【００１４】
原料となる天然ゴムラテックスは、天然のゴムの木から得られたフィールドラテックスを意味し、ラテックスは市販のアンモニア処理ラテックスでも新鮮なフィールドラテックスのいずれをも使用することができる。
本発明において、ラテックスは採取後１時間以内にｐＨ７あるいはそれ以上に調整されたものであることが好ましい。このようなラテックスの使用では、ラテックス溶液に添加酵素を均一に分散させることが容易である。添加酵素として、例えば、ホスホリパーゼNS44151（2000 LEU／g)が挙げられる。
通常、リン脂質の多いラテックスは、酸化老化特性（ＰＲＩ）が低く好ましくない。しかし、本発明の天然ゴムラテックスの処理方法によって、天然ゴムラテックスは改質され、酸化老化特性の高い安定した特性を示す。
本発明の処理により、ＰＲＩが８５以下、好ましくは８０以下の天然ゴムラテックスは、酵素処理によりＰＲＩが９０以上まで向上させることができるが、既に、９０以上の天然ゴムラテックスでは酵素処理による向上が十分に期待できない。
【００１５】
天然ゴムラテックスのリン脂質を分解する酵素は、上述のように測定指標として使用したトリアシルグリセロール加水分解酵素であるリパーゼ及び／又はホスホリパーゼを挙げることができる。
トリアシルグリセロール加水分解酵素は、多方面にわたる酵素群であり、多くの場合一つ以上の活性を持つ、例えばリパーゼ、ホスホリパーゼ、リゾホスホリパーゼ、コレステロールエステラーゼ、クチナーゼ、アミダーゼ、ガラクトリパーゼそしてその他エステラーゼタイプの活性を持つ酵素が挙げられる。どの活性が主たる活性になるかは、酵素の応用とその条件に依存する。トリグリセロール加水分解酵素は、IUBMB Enzyme Nomenclature 3.1.1.に属する。EC3は加水分解酵素を表す。EC3.1はエステル結合に働くことを表す。EC3.1.1はカルボン酸エステル加水分解酵素を表す。本発明に関する酵素は、リン酸ジエステル加水分解酵素を表すEC3.1.4に分類される。エステラーゼ(EC3.1.1.1)は短鎖脂肪酸トリグリセリド類を含む水溶性カルボン酸エステルを加水分解して、アルコールとカルボン酸陰イオンの生成を触媒する酵素である。
リパーゼ及びホスホリパーゼとしては、特に限定されず、細菌由来のもの、糸状菌由来のもの、酵母由来のものいずれでも構わない。
リパーゼ(EC3.1.1.3)は広い範囲のカルボキシル基を持つエステルの加水分解を触媒する酵素であり、例えば、トリグリセリドを分解して脂肪酸を放出する。いくつかのリパーゼはホスホリパーゼ活性及び/又はガラクトリパーゼ活性を持つ(例として米国特許番号6，103，605及び米国特許番号6，852，346)、またステロ一ルエステラーゼ活性(EC3.1.1.13)を持つことがありうる。
ホスホリパーゼは、グリセロール骨格のsn１位とsn２位にそれぞれ脂肪酸を持ち、sn３位がリン酸でエステル化されたリン脂質の加水分解を触媒する酵素である。リン酸は、順番にアミノアルコールにエステル化されることがある。ホスホリパーゼにはいくつかのタイプがあり、脂肪アシル部分の加水分解を触媒する。これらのホスホリパ一ゼは、ホスホリパーゼＡ１(EC3.1.1.32)、ホスホリパーゼＡ２(EC3.1.1.4)及びリゾホスホリパーゼ(EC3.1.1.5)を含む。ホスホリパーゼＣ(EC3.1.4.3)及びホスホリパーゼＤ(EC3.1.4.4)は、リン脂質からリン酸基を加水分解するが、ホスホリパーゼＡ１、ホスホリパーゼＡ２及びホスホリパーゼＢのように脂肪酸を分解しない。ホスホリパーゼＡ１(EC3.1.1.32)はsn１位にある脂肪酸アシル基の脱アシル化を触媒し、ジアシルグリセロリン脂質からリゾリン脂質と脂肪酸を生成する。ホスホリパーゼＡ２（EC3.1.1.4)は、sn２位の脂肪酸アシル基の脱アシル化を触媒し、ジアシルグリセロリン酸からリゾリン脂質と脂肪酸を生成する。リゾホスホリパーゼ(EC3.1.1.5)は、ホスホリパーゼＢとして知られており、リゾリン脂質の脂肪酸アシル基の加水分解を触媒する。ホスホリパーゼＣ(EC3.1.4.3)はホスホチジルコリンを１，２−ジアシルグリセロールとコリンリン酸に加水分解することを触媒する。ホスホリパーゼＤ(EC3.1.4.4)はホスホチジルコリンの末端にあるリン酸ジエステル結合を加水分解することを触媒し、コリンとホスホチジン酸を生成する。
使用されうるホスホリパーゼは、セイヨウショウロ(Tuber)、ベルチシリウム(Verticillium)、ニューロスポラ(Neurospora)、ヘリコスポルム(Helicosporium)、アスペルギルス(Aspergillus)又はフザリウム(Fusarium)、特にチューバー・ボルキイ(T.Borchii)、チューバー・アルビヅム(T.albidum)、ベルチシリウム・ダヒリアエ(V.dahliae)、ベルチシリウム・テネルム(V.tenerum)、ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)、ヘリコスポリウム(Helicosporium)種ＨＮ１、アスペルギルス・オリザエ(A.oryzae)、またはフザリウム・ベネナツム(F.venenatum)に由来するホスホリパーゼを含む。
特に使用されるホスホリパーゼは、米国特許7，396，807 B2に記述されているホスホリパーゼであり、SEQ ID NO:1〔チューバー・ボルキイ(T.borchii)〕、SEQ ID NO:3〔ベルチシリウム・ダヒリアエ(V.dahliae)〕、SEQ ID NO:4〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕、SEQ ID NO:5〔ヘリコスポリウム(Helicosporium)種ＨＮ１〕、SEQ ID NO:7〔アスペルギルス・オリザエ(A.oryzae)〕、SEQ ID NO;8〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕、SEQ ID NO:9 〔チューバー・アルビヅム(T.albidum)〕、SEQ ID NO:10〔チューバー・アルビヅム(T.albidum)〕、SEQ ID NO:12〔ベルチシリウム・テネルム(V.tenerum)〕、及びSEQ ID NO：16〔フザリウム・ベネナツム(F.venenatum)〕としてアミノ酸配列によって示される米国特許7，396，807 B2 に特定されるホスホリパーゼを含んでいる。
詳細にはホスホリパーゼは、SEQ ID NO:1〔チューバー・ボルキイ(T.borchii)〕のアミノ酸配列92〜211、SEQ ID NO:3〔ベルチシリウム・ダヒリアエ(V.dahliae)〕のアミノ酸配列38〜145、SEQ ID NO:4〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕のアミノ酸配列44〜151、SEQ ID NO:7〔アスペルギルス・オリザエ(A.oryzae)〕のアミノ酸配列37〜157、SEQ ID NO;8〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕のアミノ酸配列58〜168、SEQ ID NO:10〔チューバー・アルビヅム(T.albidum)〕のアミノ酸配列91〜210、SEQ ID NO:12〔ベルチシリウム・テネルム(V.tenerum)〕のアミノ酸配列30〜137、SEQ ID NO：16〔フザリウム・ベネナツム(F.venenatum)〕のアミノ酸配列29〜149からなる群から選択されたアミノ酸配列を持つポリペプチドである。
また、使用されうるホスホリパーゼは、SEQ ID NO:10〔チューバー・アルビヅム(T.albidum)〕のアミノ酸配列91〜210、SEQ ID NO:1〔チューバー・ボルキイ(T.borchii)〕のアミノ酸配列92〜211、SEQ ID NO:12〔ベルチシリウム・テネルム(V.tenerum)〕のアミノ酸配列30〜137、SEQ ID NO:3〔ベルチシリウム・ダヒリアエ(V.dahliae)〕のアミノ酸配列38〜145、SEQ ID NO:4〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕のアミノ酸配列44〜151、SEQ ID NO:7〔アスペルギルス・オリザエ(A.oryzae)〕のアミノ酸配列37〜157、SEQ ID NO:8〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕のアミノ酸配列58〜168、あるいはSEQ ID NO：16〔フザリウム・ベネナツム(F.venenatum)〕のアミノ酸配列29〜149からなる群から選択されたアミノ酸配列を持つポリペプチドと少なくとも６０％同一であるホスホリパーゼである。本発明の目的に応じて二つのアミノ酸配列の同一の度合いは、Needleman-Wunschのアルゴリズム(Needleman and Wunsch，1970，J.MOl.Biol，48:443-453)をＥＭＢＯＳＳパッケージのNeedleプログラム(ＥＭＢＯＳＳ:The European Molecular Biology Open Software Suite，Rice et al，2000，Trends Genet.16:276-277)、好ましくはバージョン5.0.0あるいはそれ以降を用いて決定される。使用されるパラメーターは、ギャップ開始ペナルティー(gap open penalty)が10、ギャップ伸長ペナルティー(gap extension penalty)が0.5、及びＥＢＬＯＳＵＭ62(BLOSUM62のＥＭＢＯＳＳバージョン) 置換マトリクスである。「最長の同一(longest identity)」と(-nobrif option を用いて得られる)と分類されたNeedleの出力は、同一の割合として使用され、以下の通りに計算される。
〔同一な残基(Identical residues)×IOO)／(配列の長さ(Length of Alignment)−配列中のギャップ総数(Total Number of Gaps in A1ignmet)〕
また、使用されうるホスホリパーゼは、SEQ ID NO:10〔チューバー・アルビヅム(T.albidum)〕のアミノ酸配列91〜210、SEQ ID NO:1〔チューバー・ボルキイ(T.borchii)〕のアミノ酸配列92〜211、SEQ ID NO:12〔ベルチシリウム・テネルム(V.tenerum)〕のアミノ酸配列30〜137、SEQ ID NO:3〔ベルチシリウム・ダヒリアエ(V.dahliae)〕のアミノ酸配列38〜145、SEQ ID NO:4〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕のアミノ酸配列44〜151、SEQ ID NO:7〔アスペルギルス・オリザエ(A.oryzae)〕のアミノ酸配列37〜157、SEQ ID NO:8〔ニューポラスポラ・クラッサ(N.crassa)〕のアミノ酸配列58〜168、あるいはSEQ ID NO：16〔フザリウム・ベネナツム(F.venenatum)〕のアミノ酸配列29〜149からなる群から選択されたアミノ酸配列を持つポリペプチドと少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、又は少なくとも９９％同一であるホスホリパーゼである。
リパーゼ及びホスホリパーゼは、天然ゴムラテックス中のリン脂質を５０％あるいはそれ以上分解する効果的な量を加えられる。これらの酵素の具体的な効果のあるは、例中に示される。
また、リパーゼ及びホスホリパーゼは、100(LU/g又はLEU/g)あるいはそれ以上、好ましくは10，000(LU/g又はLEU/g)あるいはそれ以上、更に好ましくは100，000(LU/g又はLEU/g)あるいはそれ以上であることが良い。リパーゼ活性単位は、リパーゼ(LU)分析を用いて測定できる。この中で１LU(リパーゼ単位)は、材料と方法項目のリパーゼ(LU)分析条件下において１分間当たり滴定可能な酪酸1マイクロモルを避難する酵素量である。同様にホスホリパーゼ活性単位は、ホスホリパーゼ(LEU)分析を用いて測定できる。この中で１LEU(ホスホリパーゼ単位)は材料と方法項日のホスホリパーゼ(LEU)分析中に記述されている分析条件下において、１分当たり１LEUの標準酵素によって遊離される滴定可能な脂肪酸をレシチンから避難する酵素量である。
このようなリパーゼ及びホスホリパーゼとしては、NS44151（ノボザイムス社製造）、リパーゼＭ「アマノ」１０（天野エンザイム株式会社製の商品）、リパーゼＯＦ（名糖株式会社製の商品）、ホスホリパーゼＡ１（三共株式会社製の商品）等を挙げることができる。
尚、上述の指標酵素の使用にあっては、2，000LEU／ｇ（ノボザイムス社規格単位）のホスホリパーゼ（ノボザイムス社製）以上の高純度の酵素の使用が好ましい。
このような酵素処理に際してのリパーゼ及び／又はホスホリパーゼの添加量は、天然ゴムラテックス中の固形成分１００質量部に対して０．０１〜１０質量部、特に０．１〜５質量部の範囲であることが好ましい。上記範囲の添加量であれば、天然ゴムラテックス中のリン脂質の５０％以上の分解率が達成できる。
【００１６】
本発明に係る天然ゴムラテックスは、リパーゼ及び／又はホスホリパーゼに加えて更にプロテアーゼによる酵素処理をしても良い。
上記プロテアーゼもリパーゼ及びホスホリパーゼと同様に、特に限定されず、細菌由来のもの、糸状菌由来のもの、酵母由来のものいずれでも構わない。また、プロテアーゼの力価は、好ましくは、50(KNPU/g)あるいはそれ以上、100(KNPU/g)あるいはそれ以上、好ましくは1，000(KNPU/g)あるいはそれ以上、更に好ましくは10，000(KNPU/g)あるいはそれ以上、そして更に好ましくは100，000(KNPU/g)あるいはそれ以上が良い。プロテアーゼ活性の単位は、材料と方法項目のプロテアーゼ(KNPU)分析中で記述されている分析条件において１ｇのサンプル当たりのキロ・ノボ・プロテア一ゼ単位(KNPU/g)として測定できうる。このようなプロテアーゼとしては市販品のアルカラーゼ２．５Ｌ−タイプＤＸ（ノボザイムズ社製）、プロレザーＦＧ−Ｆ（天野エンザイム株式会社製）等を挙げることができる。
尚、本発明においては、上述の酵素の他(プロテアーゼに加えて)、ペプチターゼ、セルラーゼ、ペクチナーゼ、エステラーゼ、アミラーゼ等を組み合わせて用いることができる。
【００１７】
また、このような酵素を添加するにあたり、他の添加剤、例えばｐＨ調整剤としてリン酸第一カリウム、リン酸第二カリウム、リン酸ナトリウム等の燐酸塩や酢酸カリウム、酢酸ナトリウム等の酢酸塩、さらに硫酸、酢酸、塩酸、硝酸、クエン酸、コハク酸等の酸類またはその塩、あるいはアンモニア、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等を使用することができる。
本発明において、上記酵素処理は、至適ｐＨで行うことが好ましいが、ラテックス中での分散性をも考量すると、ｐＨ５〜１１が好ましく、特に好ましくは、ｐＨ７〜１０の範囲が好ましい。
【００１８】
本発明において、上記酵素処理は、室温（２５℃）から温度７０℃以下でなされること、好ましくは温度６０℃以下でなされること、更に好ましくは５０℃以下でなされる。
上記酵素処理温度が７０℃を超えると、天然ゴムラテックスの安定性が低下し、酵素処理中にラテックスが凝固する。凝固後は酵素による分解効果が低下する。このため、加工性に優れている天然ゴムの製造が困難になる。
【００１９】
本発明において、上記酵素処理時間は、１２時間以上、より好ましくは１６時間以上４８時間以下である。このような反応時間であれば、ラテックス中のリン脂質は十分に分解される。リン脂質の分解は、５０％以上、好ましくは、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％であることが望ましい。また、分解された天然ゴムラテックス中の未分解リン脂質量は０．６５％以下、好ましくは、０．５０ｗｔ％以下、更に好ましくは、０．３０ｗｔ％以下、更に、０．２０ｗｔ％以下、特に、０．１０ｗｔ％以下とすることが望ましい。このため、上記好ましい処理時間であれば、十分に反応を達成することができ、リン脂質の十分な分解、並びに、未分解リン脂質量を極力少なくすることができる。
【００２０】
本発明に係る天然ゴムラテックスは上記酵素処理と共に、界面活性剤を併用して処理することが良い。界面活性剤としては、非イオン界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、両イオン性界面活性剤等が使用でき、特に、非イオン界面活性剤、陰イオン性界面活性剤等を使用することが好ましい。
非イオン界面活性剤としては、例えばポリオキシアルキレンエーテル系、ポリオキシアルキレンエステル系、多価アルコール脂肪酸エステル系、糖脂肪酸エステル系、及びアルキルポリグリコシド系などが好適である。
陰イオン界面活性剤には、例えばカルボン酸系、スルホン酸系、硫酸エステル系、及びリン酸エステル系などが好適である。
カルボン酸系界面活性剤としては、例えば、脂肪酸塩、多価カルボン酸塩、ロジン酸塩、ダイマー酸塩、ポリマー酸塩、トール油脂肪酸塩等が挙げられる。スルホン酸系界面活性剤としては、例えばアルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、ジフェニルエーテルスルホン酸塩等が挙げられる。硫酸エステル系界面活性剤としては、例えば、アルキル硫酸エステル塩、ポリオキシアルキレンアルキル硫酸エステル塩、ポリオキシアルキレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、トリスチレン化フェノール硫酸エステル塩、ポリオキシアルキレンジスチレン化フェノール硫酸エステル塩等が挙げられる。リン酸エステル系界面活性剤としてはアルキルリン酸エステル塩、ポリオキシアルキレンリン酸エステル塩等が挙げられる。
【００２１】
上記の如く酵素処理された天然ゴムラテックスは、非ゴム成分を完全に分離することなく、凝固する。非ゴム成分を分離した場合には、耐老化性が劣る。上記処理ラテックスを凝固して得られたゴム成分は洗浄後、真空乾燥機、エアドライヤー、ドラムドライヤー等の通常の乾燥機を用いて乾燥することにより、本発明における天然ゴムを得ることができる。
【００２２】
本発明の天然ゴムは、タイヤ用途を始め、防振ゴム、ベルト、ホースその他の工業品、医療分野及びバイオ分野の材料製品等の用途にも用いることができる。
【実施例】
【００２３】
以下に、本発明を、実施例及び比較例を示す試験例に基づいて説明するが、本発明の構成は、以下の実施例に限定されるものではない。
〔試験例１〕
〈材料と方法〉
リパーゼ(LU)分析
１LU(リパーゼ単位)は、後述する分析条件下において１分当たり滴定可能な酪酸１マイクロモルを遊離する酵素量である。１ＫＬＵ(キロリパーゼ単位)＝1，000LUである。0.16Mトリブチリン(glycerol tributyrate，Merck，1.01958.000)を３０℃、ｐＨ７．０においてリパーゼで分解し、続けてｐＨスタットにより遊離脂肪酸を脱炭酸化した0.025Ｍ水酸化ナトリウム(Sodium hydroxide titrisol，Merck 9956)で滴定する。滴定剤の消費量を時間相関として記録する。
基質は0.6％(w/v)アラビアゴム乳化剤(20gアラビアゴム、89.5g 食塩(NaCl)、2.06gリン酸水素カリウム(KH2PO4)、イオン交換水１．５Ｌを加えて完全に溶解するまで放置し、グリセロールを2700ml加え、ｐＨを４．５に調整する。)で乳化され、90mlのトリブチリンは300mlのアラビアゴム乳化剤と1410mlのイオン交換水と混合し３分間、例えばSilverson emulsifier LT4RTを用いて7000rpmで均質化し、次にｐＨを4.75に調整する。リパーゼ試料は、始に0.1Ｍグリシン緩衝液(ｐＨ1O.8)で希釈する。次にイオン交換水で目的とする活性レベルである1.5〜4.OLU/mlに希釈する。15mlの乳化した基質溶液を滴定容器に入れる。１．０mlの試料溶液を加え、滴定の間ｐＨを7.0に維持する。ｐＨを維持するために加えられた滴定剤の１分間当たりの量を測定する。酵素活性の計算は、滴定曲線における直線範囲の平均勾配に基づいて計算する。レベルチェックとして活性が既知であるスタンダードが使用できる。詳細分析記載のEB-SM-0095.02はNovozymes A/S，Krogshoejvej 36，DK-2880 Bagsvaerd，Denmark から請求すれば入手が可能である。
ホスホリパーゼ(LEU)アッセイ
ホスホリパーゼ活性は、ダイズレシチン(ダイズ由来L-α-ホスホチジルコリン、Sigma P5638)の加水分解によって決められる。20g/L レシチンと3.2mMデオキシコール酸ナトリウム、6.4mM塩化カルシウムを混合した溶液を40℃で反応(２分間)する間、ｐＨ8.0を維持する。ホスホリパーゼ活性は、スタンダードと比較して遊離した脂肪酸を中和する間、一定のｐＨを保つために必要な滴定剤(0.1M 水酸化ナトリウム)の消費量の割合として表される。
プロテアーゼ(KNPU)アッセイ
蛋白質分解活性は、キロ・ノボ・プロテアーゼ単位(KNPU)で表される。活性は、酵素スタンダード(SAVINASER、市販プロテアーゼ、Novozymes A/S，Krogshoejvej36，DK-2880 Bagsvaerd，Denmarkより入手可能)と相対的に決められ、その決定は50℃、ｐＨ8.3で9分間反応し、3分間測定する条件で蛋白質分解酵素によるジメチルカゼイン(DMC)溶液の消化力である。試料AF220/1は、Novozymes A/S Krogshoejvej36，DK-2880 Bagsvaerd，Denmarkより請求すれば入手が可能である。この試料は、参照として含まれる。
（１）天然ゴムラテックスの酵素処理工程
クローン種ＧＴ−１より集められる天然ゴムラテックス（採取後１時間以内のもの）と０．４ｗｔ％のＮＨ３に水を加えて固形分濃度２０ｗｔ％に調整したラテックス溶液１０００ｇに、ホスホリパーゼNS44151（2，000LEU/g、ノボザイムス社製造）を、それぞれに、ラテックス固形分１００質量部に対して、０、０．２、１．０、５．０質量部の割合で添加して撹拌し、分散させた後、２４時間静置した。尚、ラテックス溶液はｐＨ８に調整され、室温（２５℃）で反応させた。
（２）凝固・乾燥工程
次に、得られたラテックスにギ酸を加えてｐＨを４．７に調整し凝固させた。この固形物をクレーパー５回、シュレッダーを通してクラム化した後、熱風乾燥機で１１０℃、２１０分間、乾燥することで天然ゴムを得た。
下記表１に、処理酵素量、リン脂質の分解率、得られた天然ゴムのＰＲＩを示した。
【００２４】
【表１】
2014234471.tif 000003
【００２５】
〔試験例２：実施例１〜４及び比較例１〜２）
（１）天然ゴムラテックスの酵素処理工程
クローン種ＧＴ−１より集められる天然ゴムラテックス（採取後１時間以内のもの）と０．４ｗｔ％のＮＨ３に水を加えて固形分濃度２０ｗｔ％に調整したラテックス溶液１０００ｇに、実施例１〜４にホスホリパーゼNS44151（2，000LEU/g、ノボザイムス社製造）を、比較例２にはホスホリパーゼＡ１（三共社製）を、ラテックス固形分１００質量部に対して、下記表２に示す各酵素量の割合で添加して撹拌し、分散させた後、２４時間静置した。尚、ラテックス溶液はｐＨ８に調整され、室温（２５℃）で反応させた。
（２）凝固・乾燥工程
次に得られたラテックスにギ酸を加えてｐＨを４．７に調整し凝固させた。この固形物をクレーパー５回、シュレッダーを通してクラム化した後、熱風乾燥機で１１０℃、２１０分間、乾燥することで天然ゴムを得た。
処理酵素量、リン脂質の分解率、得られた天然ゴムの未分解リン脂質量、ＰＲＩを表２に示した。
【００２６】
【表２】
2014234471.tif 000004
【００２７】
（評価方法）
酸化老化特性（ＰＲＩ）
酸化老化特性（ＰＲＩ）とは、可塑度残留率とも言われ、高温（１４０℃）で３０分間加熱した試料の可塑度と室温で可塑度から算出する。可塑度は、円盤状の試料を一定荷重１００Ｎ・時間１５秒で圧縮し、（圧縮後の厚さ／圧縮前の厚さ）×１００から求める（ＩＳＯ  ２９３０）。
【００２８】
上記表２の結果をみると、本発明となる実施例１〜４は、比較例１〜２に較べて、安定した特性（リン脂質の分解率、未分解リン脂質）を示し、酸化老化特性が向上する天然ゴムラテックスであることが判った。
【産業上の利用可能性】
【００２９】
本発明に係る天然ゴムラテックスの処理方法は、得られる天然ゴムラテックス及び天然ゴムは、安定した特性を示し、酸化老化特性が向上する産業上の利用可能性が高いものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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