(57)【要約】【課題】  本発明は、桑白皮抽出物に由来する優れた育毛作用を有し且つ日常の継続使用に好適に用いることができる頭皮用育毛剤を提供することを目的とする。【解決手段】  桑白皮から、エタノール、含水エタノール、メタノール、含水メタノール、アセトン、又は含水アセトンを用いて抽出して抽出物を得、；当該抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解させた状態にしてイオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなり、最頻度半径が50〜500Åの細孔を有する多孔性構造を有する合成吸着樹脂に吸着させ、；エタノール又はエタノール濃度90％以上の含水エタノールにて当該吸着成分を溶出させて得られた溶出物を含有してなる頭皮用育毛剤、を提供する。【選択図】  図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
桑白皮から、下記(A)に示す溶媒を用いて抽出して抽出物を得、；当該抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解させた状態にして下記(B)に示す合成吸着樹脂に吸着させ、；下記(C)に示す溶媒にて当該吸着成分を溶出させて得られた溶出物を含有してなる頭皮用育毛剤。
(A): エタノール、含水エタノール、メタノール、含水メタノール、アセトン、又は含水アセトン。
(B): イオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなり、最頻度半径が50〜500Åの細孔を有する多孔性構造を有する合成吸着樹脂。
(C): エタノール又はエタノール濃度90％以上の含水エタノール。
【請求項２】
前記溶出物が、下記(D)及び(E)に示す成分を含み, 且つ, 下記(F)に示す成分を実質的に含まない溶出物である、請求項1に記載の頭皮用育毛剤。
(D): β-トコフェノール。
(E): 前記桑白皮から上記(A)に示す溶媒を用いて抽出して得た抽出物について、下記(G)に示すカラムを用いて流速0.9 mL/分及びカラム温度45℃にてメタノール濃度60％の含水メタノールから100％メタノールへ移動させる条件で高速液体クロマトグラフィーにて展開した場合に、保持時間22〜28分の間に測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分。
(F): 前記桑白皮から上記(A)に示す溶媒を用いて抽出して得た抽出物について、下記(G)に示すカラムを用いて流速0.9 mL/分及びカラム温度45℃にてメタノール濃度60％の含水メタノールから100％メタノールへ移動させる条件で高速液体クロマトグラフィーにて展開した場合に、保持時間19分までの間に測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分。
(G): 下記(H)に示すオクタデシルシリル化シリカゲル担体が充填されてなるカラムであって、カラム内径4.6mm及びカラム長25cmのカラム。
(H): 平均細孔径8nm及び平均粒子径5μmである球状担体であって、表面に下記構造式(1)に示す構造を有する、炭素含量が15％(w/w)のオクタデシルシリル化シリカゲル担体。
【化１】
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【請求項３】
前記育毛剤が、頭皮に外用塗布して使用した際に下記(I)〜(L)に示す特徴を有するものである、請求項1又は2に記載の頭皮用育毛剤。
(I): 休止期毛を成長期毛に変換する作用を促す特徴。
(J): 毛髪に不快臭を付与しない特徴。
(K): 毛髪の滑り易さを保持する特徴。
(L): 毛髪の弾力性を保持する特徴。
【請求項４】
上記(B)に記載の合成吸着樹脂が、半径200〜300Åの細孔を有する合成吸着樹脂である、請求項1〜3のいずれかに記載の頭皮用育毛剤。
【請求項５】
前記抽出物を含水エタノールに溶解する状態にする時のエタノール濃度が、64〜66％である、請求項1〜4のいずれかに記載の頭皮用育毛剤。
【請求項６】
請求項1〜5のいずれかに記載の頭皮用育毛剤を配合してなる頭髪化粧料、整髪料、又は洗髪料。
【請求項７】
桑白皮から、下記(A)に示す溶媒を用いて抽出して抽出物を得、；当該抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解させた状態にして下記(B)に示す合成吸着樹脂に吸着させ、；下記(C)に示す溶媒にて当該吸着成分を溶出させ、；得られた溶出物を含有させる、；ことを特徴とする、頭皮用育毛剤の製造方法。
(A): エタノール、含水エタノール、メタノール、含水メタノール、アセトン、又は含水アセトン。
(B): イオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなり、最頻度半径が50〜500Åの細孔を有する多孔性構造を有する合成吸着樹脂。
(C): エタノール又はエタノール濃度90％以上の含水エタノール。
【請求項８】
桑白皮から、下記(A)に示す溶媒を用いて抽出して抽出物を得て頭皮用育毛剤を製造するにあたり、；当該抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解させた状態にして下記(B)に示す合成吸着樹脂に吸着させ、；下記(C)に示す溶媒にて当該吸着成分を溶出させ、；得られた溶出物を回収する、；ことを特徴とする、前記頭皮用育毛剤の使用感を向上させる方法。
(A): エタノール、含水エタノール、メタノール、含水メタノール、アセトン、又は含水アセトン。
(B): イオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなり、最頻度半径が50〜500Åの細孔を有する多孔性構造を有する合成吸着樹脂。
(C): エタノール又はエタノール濃度90％以上の含水エタノール。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、桑白皮抽出物に含まれる毛周期変換促進成分を有効成分として含有してなる頭皮用育毛剤であって、日常の継続使用に好適に用いることが可能な使用感が顕著に向上した頭皮用育毛剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
毛髪は人間にとって容姿を左右する重要な要素であるが、現代社会において、高齢化、食生活の変化、社会的ストレス等により、脱毛症になる人々は増加している。
脱毛症には、多くの種類があるが、主なものとしては男性型脱毛症、びまん性脱毛症（女性にみられる脱毛症）、円形脱毛症（一過性）が挙げられる。
このうち一過性の円形脱毛症は皮膚科での治療により完治されることが多いが、前二者は難治性であり治療が困難な脱毛症である。
「男性型脱毛症」は、遺伝的要因が強く、その成因については、男性ホルモン、末梢循環障害等が主な要因と考えられる。また、主因ではないが皮脂分泌異常、フケの過剰発生、栄養不良なども影響するものと考えられる。
また、女性にみられる「びまん性脱毛症」は、毛包への血流不全、洗髪・ブラッシングなどによる過度のヘアケアなどが原因と考えられている。
【０００３】
正常のヒト毛髪は、約90％は成長期（毛が伸びる時期）の状態にあり、約10％が休止期（毛の成長が止まり脱落する時期）の状態にある。
脱毛症は、毛包細胞の増殖が抑制され、本来成長期にあるはずの毛が休止期に入ることで引き起こされる症状である。
そこで、本願発明者らは、脱毛症を改善するためには、毛包細胞の増殖を促進する物質、或いは休止期毛を成長期毛に変換する物質こそ有効な育毛剤になりうると考え、検討を重ねたところ、桑白皮抽出物に休止期から成長期への毛周期変換を促進する作用を見出した（例えば、特許文献1 参照）。
【０００４】
しかし、桑白皮抽出物には、毛周期変換を促進する成分に加えて、強烈な熟柿様の不快臭があり、育毛剤として日常的に頭皮につけて継続使用するには、極めて困難なものであった。
また、毛髪への使用後に髪がざらつく（滑らかさが失われる）、軟毛化する（剛さが失われる）など、育毛剤としての使用感にも多くの課題があった。
また、桑白皮抽出物における毛周期変換促進成分は特定されておらず、毛周期変換促進成分と使用感阻害する成分とを特異的に分離することは、極めて困難であった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第3505200号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】西日皮膚科 vol.58 (1996) No.4 p619-624
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、上記課題を解決し、桑白皮抽出物に由来する優れた育毛作用を有し且つ日常の継続使用に好適に用いることができる頭皮用育毛剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、鋭意検討を重ねたところ、桑白皮抽出物を特定エタノール濃度範囲の含水エタノールに溶解してから特定種類の合成吸着樹脂に吸着させ、吸着成分を溶出することによって、‘毛周期変換促進成分’と‘頭皮用育毛剤の使用感を阻害する成分’とを極めて容易で且つ安全に分離して、毛周期変換促進成分を特異的に回収できることを見出した。
【０００９】
本発明は、これらの知見に基づいてなされたものである。
［請求項1］に係る本発明は、桑白皮から、下記(A)に示す溶媒を用いて抽出して抽出物を得、；当該抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解させた状態にして下記(B)に示す合成吸着樹脂に吸着させ、；下記(C)に示す溶媒にて当該吸着成分を溶出させて得られた溶出物を含有してなる頭皮用育毛剤に関する。
(A): エタノール、含水エタノール、メタノール、含水メタノール、アセトン、又は含水アセトン。
(B): イオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなり、最頻度半径が50〜500Åの細孔を有する多孔性構造を有する合成吸着樹脂。
(C): エタノール又はエタノール濃度90％以上の含水エタノール。
［請求項2］に係る本発明は、前記溶出物が、下記(D)及び(E)に示す成分を含み, 且つ, 下記(F)に示す成分を実質的に含まない溶出物である、請求項1に記載の頭皮用育毛剤に関する。
(D): β-トコフェノール。
(E): 前記桑白皮から上記(A)に示す溶媒を用いて抽出して得た抽出物について、下記(G)に示すカラムを用いて流速0.9 mL/分及びカラム温度45℃にてメタノール濃度60％の含水メタノールから100％メタノールへ移動させる条件で高速液体クロマトグラフィーにて展開した場合に、保持時間22〜28分の間に測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分。
(F): 前記桑白皮から上記(A)に示す溶媒を用いて抽出して得た抽出物について、下記(G)に示すカラムを用いて流速0.9 mL/分及びカラム温度45℃にてメタノール濃度60％の含水メタノールから100％メタノールへ移動させる条件で高速液体クロマトグラフィーにて展開した場合に、保持時間19分までの間に測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分。
(G): 下記(H)に示すオクタデシルシリル化シリカゲル担体が充填されてなるカラムであって、カラム内径4.6mm及びカラム長25cmのカラム。
(H): 平均細孔径8nm及び平均粒子径5μmである球状担体であって、表面に下記構造式(1)に示す構造を有する、炭素含量が15％(w/w)のオクタデシルシリル化シリカゲル担体。
【００１０】
【化１】
2014218479.tif 000003
【００１１】
［請求項3］に係る本発明は、前記育毛剤が、頭皮に外用塗布して使用した際に下記(I)〜(L)に示す特徴を有するものである、請求項1又は2に記載の頭皮用育毛剤に関する。
(I): 休止期毛を成長期毛に変換する作用を促す特徴。
(J): 毛髪に不快臭を付与しない特徴。
(K): 毛髪の滑り易さを保持する特徴。
(L): 毛髪の弾力性を保持する特徴。
［請求項4］に係る本発明は、上記(B)に記載の合成吸着樹脂が、半径200〜300Åの細孔を有する合成吸着樹脂である、請求項1〜3のいずれかに記載の頭皮用育毛剤に関する。
［請求項5］に係る本発明は、前記抽出物を含水エタノールに溶解する状態にする時のエタノール濃度が、64〜66％である、請求項1〜4のいずれかに記載の頭皮用育毛剤に関する。
［請求項6］に係る本発明は、請求項1〜5のいずれかに記載の頭皮用育毛剤を配合してなる頭髪化粧料、整髪料、又は洗髪料に関する。
［請求項7］に係る本発明は、桑白皮から、下記(A)に示す溶媒を用いて抽出して抽出物を得、；当該抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解させた状態にして下記(B)に示す合成吸着樹脂に吸着させ、；下記(C)に示す溶媒にて当該吸着成分を溶出させ、；得られた溶出物を含有させる、；ことを特徴とする、頭皮用育毛剤の製造方法に関する。
(A): エタノール、含水エタノール、メタノール、含水メタノール、アセトン、又は含水アセトン。
(B): イオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなり、最頻度半径が50〜500Åの細孔を有する多孔性構造を有する合成吸着樹脂。
(C): エタノール又はエタノール濃度90％以上の含水エタノール。
［請求項8］に係る本発明は、桑白皮から、下記(A)に示す溶媒を用いて抽出して抽出物を得て頭皮用育毛剤を製造するにあたり、；当該抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解させた状態にして下記(B)に示す合成吸着樹脂に吸着させ、；下記(C)に示す溶媒にて当該吸着成分を溶出させ、；得られた溶出物を回収する、；ことを特徴とする、前記頭皮用育毛剤の使用感を向上させる方法に関する。
(A): エタノール、含水エタノール、メタノール、含水メタノール、アセトン、又は含水アセトン。
(B): イオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体からなり、最頻度半径が50〜500Åの細孔を有する多孔性構造を有する合成吸着樹脂。
(C): エタノール又はエタノール濃度90％以上の含水エタノール。
【発明の効果】
【００１２】
本発明は、桑白皮抽出物に含まれる‘毛周期変換促進成分’と‘頭皮育毛剤としての使用感を阻害する成分’とを、極めて容易で且つ安全な手法のみで分離することを可能とする。
本発明は、従来の桑白皮エキスを直接育毛剤に配合して使用した場合の強烈な熟柿様の不快臭がなく、使用後の髪の滑らかさの消失、軟毛化等が改善された頭皮用育毛剤を提供することを可能とする。
これにより、本発明は、毛周期変換促進作用による優れた育毛作用を有しつつ且つ日常の継続使用可能な頭皮用育毛剤を提供することを可能とする。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】試験例3において、桑白皮エキス（70％EtOH抽出した後、ジエチルエーテル処理して得た抽出物）をHPLC解析した結果を示す図である。
【図２】試験例5において、桑白皮エキス（70％EtOH抽出した後、酢酸エチル処理して得た抽出物）をHPLC解析した結果を示す図である。
【図３】(A) 試験例6において、桑白皮エキス（70％EtOH抽出した後、EtOH濃度65％に調製し、合成吸着樹脂カラムを通過させた液）をHPLC解析した結果を示す図である。  (B) 試験例6において、桑白皮エキス精製物（前記合成吸着樹脂カラムから、99％EtOHで溶出した液）をHPLC解析した結果を示す図である。
【図４】(A) 試験例7において、桑白皮エキス（未精製物）の液色を撮影した写真像図である。(B) 桑白皮エキスの精製物の液色を撮影した写真像図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、桑白皮抽出物に含まれる毛周期変換促進成分を有効成分として含有してなる育毛剤であって、日常の継続使用に好適に用いることが可能な使用感が顕著に向上した頭皮用育毛剤に関する。
【００１５】
［原料］
本発明は、桑白皮を原料とするものである。ここで、桑白皮とは、クワ属（Morus）に属する植物の根皮を指す。ここで、クワ属の植物としては、例えば、M.lhou（ログワ）、M.bombycis（ヤマグワ）、M.laevigata（ナガミグワ）、M.tiliaefolia（ケグワ）、M.boninensis（オガサワラグワ）、M.serrata（テンジクグワ）、M.rubra（レッドマルベリー）、M.alba（カラヤマグワ、マグワ、ホワイトマルベリー）、M.nigra（クロミグワ）、M.mesozygia（ブラックマルベリー）などを挙げることできる。
これらの中でも特には、マグワ（M. alba）、ログワ（M.lhou）の根皮を指すものである。
【００１６】
桑白皮の原料は、適度に細断又は粉砕した状態にして抽出に用いることが望ましい。また、磨砕、擂潰、粉末化等した状態にして抽出に用いても良い。
【００１７】
［抽出］
本発明では、上記桑白皮原料から抽出溶媒を用いて抽出物（桑白皮エキス：粗抽出物）を得ることを要する。
ここで抽出溶媒としては、エタノール、メタノール、及びアセトンから選ばれた1種以上の親水性有機溶媒又はその水溶液（含水有機溶媒）を用いることができる。抽出溶媒として好ましくは、有機溶媒濃度65〜99％、好ましくは68〜95％、さらに好ましくは70〜90％の有機溶媒水溶液（含水有機溶媒）を用いることが望ましい。
抽出溶媒の使用量としては、桑白皮原料（重量）に対して前記抽出溶媒を5〜20倍量、好ましくは8〜15倍量が好適である。
【００１８】
抽出時間としては、常温（10〜30℃）で行う場合は、1日以上、好ましくは2日以上、より好ましくは3日以上、さらに好ましくは5日以上、特に好ましくは7日以上行うことが望ましい。上限としては、14日以内、好ましくは10日以内が目安である。
加熱条件（例えば40〜80℃）で抽出を行う場合は、0.5〜48時間、好ましくは1〜24時間、より好ましくは1.5〜12時間、さらに好ましくは2〜10時間、特に好ましくは3〜8時間かけて行うことが好ましい。
当該抽出操作は静置で十分であるが、好ましくは撹拌や混合を行うことが望ましい。
また、メタノール又は含水メタノールを抽出溶媒として用いる場合は、高温加熱還流させて行うことが望ましい。
【００１９】
当該抽出後には、濃縮等を行って親水性溶媒や水分を除去した後、親油性有機溶媒を用いて液-液抽出を行ってもよい。ここで親油性有機溶媒としては、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ベンゼン、トルエン、キシレンなどを用いることが可能である。
親油性有機溶媒の使用量としては、原料桑白皮（重量）に対して0.1〜3倍量、好ましくは0.2〜2倍量、より好ましくは0.3〜1倍量が好適である。当該操作は撹拌混合した後に静置して行えば良い。
分配操作としては、例えば、液-液向流分配が適当である。当該有機溶媒層を分取し、溶媒を留去して乾燥すると、育毛作用のある成分が得られる。
【００２０】
［特定エタノール濃度の含水エタノールへの溶解］
本発明においては、上記抽出後、抽出物をエタノール濃度63〜67％の含水エタノールに溶解した状態にすることを要する。ここで、含水エタノール中のエタノール濃度の下限としては、63％以上、好ましくは63.5％以上、より好ましくは64％以上、さらに好ましくは64.5％以上を挙げることができる。エタノール濃度が低い場合、水溶性が強い夾雑物の除去が不十分でなくなり、頭皮用育毛剤としての使用感が低下し好ましくない。
含水エタノール中のエタノール濃度の上限としては、67％以下、好ましくは66.5％以下、より好ましくは66％以下、さらに好ましくは65.5％以下を挙げることができる。エタノール濃度が高い場合、毛周期変換促進成分（有効成分）が合成樹脂に吸着されずに流出する傾向があり、頭皮用育毛剤としての力価が低下し好ましくない。
これらの点を踏まえると、当該エタノール濃度としては、63〜67％、好ましくは63.5〜66.5％、より好ましくは64〜66％、さらに好ましくは64.5〜65.5％、最も好ましくは65％程度が好適である。
当該含水エタノールへの溶解操作では、エタノール濃度を正確に調製することが必要となる。
【００２１】
含水エタノールの量としては、原料桑白皮（重量）に換算して5〜20倍量、好ましくは8〜15倍量が好適である。
【００２２】
ここで、上記抽出操作にてエタノール以外の溶媒を用いた場合や、親油性有機溶媒を用いた液-液抽出を行った場合は、濃縮乾固等を行ってこれらの溶媒を除去し、上記エタノール濃度の溶媒を添加する操作が必要となる。
この点、上記抽出操作で用いる抽出溶媒としては、エタノール又は含水エタノールを用いることが好適である。
【００２３】
［合成吸着樹脂への吸着及び回収］
・合成吸着樹脂
本発明では、上記含水エタノールに溶解した状態にした後、当該溶液を特定構造の合成吸着樹脂に接触させて、当該溶解成分の一部を吸着させる操作を行う。
ここで、合成吸着樹脂としては、イオン交換基を持たないスチレン-ジビニルベンゼン共重合体（構造式(2)参照：構造式中の‘n’及び‘m’は重合度である正の整数を表す。）からなる合成吸着樹脂を用いることを要する。
【００２４】
【化２】
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【００２５】
当該合成吸着樹脂の細孔の最頻度半径としては、50〜500Åのものを用いることを要するが、好ましくは200〜300Åのものを用いることが望ましい。
合成吸着樹脂の平均粒度としては0.2〜1mm、好ましくは0.25〜0.8mmのものが望ましい。また、粒度分布としては、0.25mm以上のものが80％以上のもの、より好ましくは85％以上のもの、さらに好ましくは90％以上の含むものを用いることが望ましい。
このような合成樹脂の具体的な製品としては、ダイヤイオンHP-20（三菱化学社製）等を挙げることができる。
【００２６】
・吸着処理
合成吸着樹脂への吸着処理は、吸着前に樹脂を平衡化処理することが望ましい。具体的には、合成吸着樹脂を上記含水エタノール溶解液と同じエタノール濃度の含水エタノールで洗浄（リンスやカラム通液等）を行うことが望ましい。
【００２７】
当該吸着処理は、‘合成吸着樹脂’と‘上記抽出物を含水エタノールに溶解させた溶液’を接触した状態にすれば良い。具体的には、合成吸着樹脂をカラムに充填して、上記含水エタノール溶解液をカラムに通液する態様で行うことが望ましい。
また、合成吸着樹脂をカラム充填しない場合でも、合成吸着樹脂を当該溶液に浸漬することで行うことが可能である。
合成吸着樹脂（容量）の使用量としては、桑白皮原料（重量）に対して0.1倍量以上、好ましくは0.2倍量以上、より好ましくは0.4倍量以上、さらに好ましくは0.5倍量以上、特に好ましくは0.8倍量以上、一層好ましくは1倍量以上であることが望ましい。合成吸着樹脂の使用量が少なすぎる場合、吸着が十分に起こらない場合があり好ましくない。使用量の上限としては特に制限はないが、経済性を考慮すると桑白皮原料（重量）に対して10倍量以下、好ましくは5倍量以下を挙げることができる。
カラム通液した後は、上記含水エタノール溶解液と同じエタノール濃度の含水エタノールで洗浄処理（リンスやカラム通液等）を行うことが望ましい。
【００２８】
・回収処理
合成吸着樹脂からの有効成分の回収は、高いエタノール濃度の含水エタノールを用いて溶出させることができる。ここで、エタノール濃度としては、90％以上、好ましくは95％以上、より好ましくは98％以上、さらに好ましくは99％以上、特に好ましくは99.5％以上のものが好適である。最も好ましくは100％エタノールを用いることが望ましい。
エタノール濃度が低い場合、合成吸着樹脂からの毛周期変換促進成分（有効成分）の樹脂からの分離が十分でなくなり、育毛剤としての力価が低下し好ましくない。
【００２９】
合成吸着樹脂をカラム充填して吸着させる態様を採用した場合、エタノール又は含水エタノールをカラム通液させることで、当該有効成分を含む溶出液を回収することが可能となる。
また、カラム充填しない態様を採用した場合であっても、合成吸着樹脂を当該抽出物溶解溶液に浸漬することで、浸漬液中に溶出した有効成分を回収することが可能である。
【００３０】
エタノール又は含水エタノールの使用量としては、合成吸着樹脂（容量）に対してエタノール又は含水エタノールを0.5倍量以上、好ましくは1倍量以上、より好ましくは2倍量以上であることが望ましい。使用量が少なすぎると有効成分が十分に回収できず好ましくない。また、使用量の上限としては、有効成分を濃縮する労力を考慮すると、40倍量以下、好ましくは30倍量以下、より好ましくは20倍量以下、さらに好ましくは10倍量以下、特に好ましくは5倍量以下であることが望ましい。
【００３１】
ここで得られたカラム溶出液は、桑白皮エキス精製物として回収される。ここで溶液中に固形残渣やゴミ等が浮遊する場合は、濾過等を行って除去することが望ましい。
また、当該カラム溶出液は、乾燥処理を行うことにより乾燥物とすることもできる。乾燥処理としては、例えば、エバポレーター等を用いた減圧乾固処理で行うことができる。
また、当該乾燥物は、親水性有機溶媒又は65％以上の含水親水性有機溶媒を用いて再溶解させることができる。ここで、親水性有機溶媒又は含水親水性有機溶媒としては、エタノール又は含水エタノールが好適である。
【００３２】
［桑白皮エキス精製物］
上記工程にて得られた桑白皮エキス精製物（上記カラム溶出液、乾燥物、再溶解液など）は、毛周期変換促進成分を消失することなく多く含み、且つ、育毛剤としての使用感を低下させる夾雑成分含量が著しく低減された組成物である。
【００３３】
・毛周期変換促進作用成分
当該桑白皮エキス精製物には、毛周期変換促進作用を有する成分を少なくとも2以上含むものである。ここで、毛周期変換促進作用とは、休止期毛を成長期毛に変換する作用を指す。毛周期変換促進作用が奏される最終的な効果としては、育毛（毛髪成長、養毛）が顕著に促進される。
【００３４】
当該毛周期変換促進作用成分は、上記桑白皮から上記抽出溶媒を用いて抽出して得た抽出物（桑白皮エキス：粗抽出物）について、オクタデシルシリル化シリカゲル担体が充填されてなるカラム内径（φ）4.6mm及びカラム長25cmのカラムを用いて、流速0.9 mL/分及びカラム温度45℃にてメタノール濃度60％の含水メタノールから100％メタノールへ移動させる条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC）にて展開した場合に、親水性の高い順に分画して得られる‘8番目の画分’と‘10番目の画分’に含まれる。
ここで、オクタデシルシリル化シリカゲル担体とは、平均細孔径8nm及び平均粒子径5μmである球状担体であって、表面に下記構造式(1)に示す構造を有し、炭素含量が15％(w/w)であるオクタデシルシリル化シリカゲル担体である。
【００３５】
【化３】
2014218479.tif 000005
【００３６】
ここで、‘8番目の画分’に含まれる成分とは、具体的には、上記条件にて高速液体クロマトグラフィー（HPLC）にて展開した場合に、保持時間22〜28分の間に測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分である。
また、‘10番目の画分’に含まれる成分とは、具体的には、上記条件にて高速液体クロマトグラフィー（HPLC）にて展開した場合に、保持時間29〜34分の間に測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分である。当該画分に含まれる成分の具体的な化合物名は、β-トコフェノールである。
【００３７】
当該桑白皮エキス精製物は、上記桑白皮エキス（粗抽出物）に含まれていた毛周期変換促進作用成分のほとんどが回収されたものである。
ここで‘ほとんどが回収された’とは、具体的には、上記保持時間22分以降に測定波長210nmにて検出されるピークの総面積が、上記桑白皮エキス（粗抽出物）に含まれていた当該成分の検出ピークの総面積の8割5分以上、好ましくは9割以上、さらに好ましくは9割5分以上となっていることをいう。
【００３８】
・夾雑物
当該桑白皮エキス精製物には、頭皮用育毛剤としての使用感を低下させる夾雑成分を実質的に含まないものである。
当該夾雑成分とは、具体的には、上記桑白皮から上記抽出溶媒を用いて抽出して得た抽出物（桑白皮エキス：粗抽出物）について、上記オクタデシルシリル化シリカゲル担体が充填されてなるカラム内径（φ）4.6mm及びカラム長25cmのカラムを用いて、流速0.9 mL/分及びカラム温度45℃にてメタノール濃度60％の含水メタノールから100％メタノールへ移動させる条件で高速液体クロマトグラフィー（HPLC）にて展開した場合に、保持時間19分までの間に測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分を指す。
【００３９】
当該桑白皮エキス精製物は、当該保持時間19分までの間に、好ましくは18分までの間に、より好ましくは17分までの間に、さらに好ましくは16分までの間に、測定波長210nmにて検出されるピークに含まれる成分を実質的に含まないものである。
なお、ここで‘実質的に含まない’とは、上記桑白皮エキス（粗抽出物）に含まれていた当該夾雑成分の検出ピークの総面積が、1/5以下、好ましくは1/10以下、より好ましくは1/20以下のピークになっていることをいう。
【００４０】
［頭皮用育毛剤］
・特徴
本発明の頭皮用育毛剤は、上記工程にて得られた桑白皮エキス精製物（上記カラム溶出液、乾燥物、再溶解液など）を含有してなるものである。
ここで、当該頭皮用育毛剤は、上記毛周期変換促進作用を有する成分の作用により、頭皮に外用塗布することで顕著な育毛（毛髪成長、養毛）効果が発揮される。
【００４１】
さらに当該頭皮用育毛剤は、上記桑白皮エキス精製物が上記夾雑物を実質的に含まない特徴により、日常の継続使用に好適に用いることができる優れた使用感を有するものとなる。
(i) ここで該頭皮用育毛剤の優れた使用感として具体的には、頭皮に外用塗布した場合に、不快臭がしないことを挙げることができる。なお、桑白皮エキス（粗抽出物）を直接育毛剤に配合して使用した場合、熟柿様の強烈な不快臭のため、日常の使用に耐えるものではなくなる。
(ii) また、当該頭皮用育毛剤は、頭皮に外用塗布した場合に、毛髪がザラツクことなく毛髪の滑り易さ（サラサラ感）を維持する効果を奏する。これにより、毛髪全体を物理的に滑らかな髪にしたい場合に適した作用が奏される。なお、桑白皮エキス（粗抽出物）を直接育毛剤に配合して使用した場合、毛髪がザラついてしまい、滑り易さ（サラサラ感）が失われてしまう。
(iii) さらに、当該頭皮用育毛剤は、頭皮に外用塗布した場合に、毛髪の弾力性（曲げた時の弾力性）を維持する作用を奏するものである。これにより、毛髪全体を物理的にボリュームアップした髪にしたい場合に適した作用が奏される。なお、桑白皮エキス（粗抽出物）を直接育毛剤に配合して使用した場合、毛髪の弾力性が失われて軟毛化してしまう。
【００４２】
・剤形態
本発明の頭皮用育毛剤は、エタノール濃度65％以上の含水エタノール、エタノール、つばき油などの油脂類、クリームなどに溶解して、育毛剤として使用することができる。
桑白皮エキス精製物の配合量としては、固形分換算で、育毛剤重量の全体の0.001％(w/w)以上、好ましくは0.01(w/w)以上、より好ましくは0.1％(w/w)以上の割合で配合することが好適である。配合量が少なすぎる場合、育毛効果が十分に得られず好ましくない。
上限としては、例えば、5％(w/w)以下、好ましくは2％(w/w)以下を挙げることができる。
【００４３】
また、当該育毛剤に配合する他の原料成分としては、通常の育毛剤に適用されるものを用いることができる。例えば、炭化水素類、ロウ類、油脂類、エステル類、高級脂肪酸類、高級アルコール類、界面活性剤、香料、色素、防腐剤、保存剤、賦形剤、清涼剤、湿潤剤、抗酸化剤、紫外線防御剤、アルコール類、pH調整剤、香料などを配合することができる。また、他の育毛薬効成分である表皮の角質溶解剤、血行促進剤、細胞賦活剤、局所刺激剤などを配合することができる。また、殺菌剤、消炎剤、抗脂漏剤、止痒剤などを配合することができる。
【００４４】
本発明の頭皮用育毛剤は、頭皮に対して外用塗布が可能な形態であれば如何なる形態とすることができる。例えば、医薬品又は医薬部外品として、クリーム、軟膏、ローション等の形態とすることができる。
【００４５】
［頭髪用化粧品、整髪料、洗髪料］
本発明の頭皮用育毛剤は、頭髪用化粧品、整髪料、又は洗髪料の成分として配合することができる。例えば、ヘアクリーム、ヘアトニック、ヘアローション、ヘアーリキッド、ヘアコンディショナー、ヘアトリートメント、ヘアスプレー、シャンプー、リンス、シャンプーアンドリンスなどに配合することができる。
この場合の含有量としては、上記育毛剤で挙げた配合量の範囲に準じて調整することが望ましい。配合量が少なすぎる場合、育毛効果が十分に得られず好ましくない。
なお、頭髪用化粧品、整髪料、洗髪料に配合するその他の原料成分としては、通常の製造に用いる原料成分を配合することができる。
【実施例】
【００４６】
以下、実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明の範囲はこれらにより限定されるものではない。
【００４７】
［試験例1］『抽出溶媒の検討』
原料である桑白皮から、毛周期変換促進成分（以下のHPLC解析で示されたF-8画分及びF-10画分）が抽出可能な溶媒を検討した。
【００４８】
(1) 「エタノール水溶液抽出物の調製」
桑白皮の細断物500gを、5Lの70％EtOH中にて7日間室温で浸漬することで、70％EtOH可溶成分を抽出し、4.4Lの抽出液を得た。
次に、当該抽出液のEtOHを留去し、液量を500mLにした後、親油性有機溶媒であるジエチルエーテル500mLを加えて15分間激しく攪拌し、次いで静置して、ジエチルエーテル層を分取した。
得られたジエチルエーテル層からジエチルエーテルを留去し、さらに乾燥して褐色の乾燥物9.1ｇを得た。そのうちの7.0gを、1Lの70％EtOHに溶解した後、冷所で3日間放置し、さらに濾過することで、桑白皮エキス（試料1-1）得た。
【００４９】
(2) 「桑白皮エキス（90％メタノール抽出物）の調製」
桑白皮の細切物200gを、2Lの90％MeOHとともに還流下で2時間加熱して、90％MeOH可溶成分を抽出した。
次に、当該抽出液のMeOHを留去し、水を加えて200mLとし、これに親油性有機溶媒である酢酸エチル200mLを加えて15分間攪拌した後、静置し、酢酸エチル層を分取した。
得られた酢酸エチル層から酢酸エチルを留去し、さらに乾燥して褐色の乾燥物4.4ｇを得た。そのうちの3.0gを、600mLの70％EtOHに溶解した後、冷所で3日間放置し、さらに濾過することで、桑白皮エキス（試料1-2）得た。
【００５０】
(3) 「桑白皮エキス（70％アセトン抽出物）の調製」
桑白皮の細切物500gを、5Lの70％アセトンとともに、3日間室温で浸漬することで、70％アセトン可溶成分を抽出し、4.5Lの抽出液を得た。
次に、当該抽出液のアセトンを留去し、液量を500mLにした後、親油性有機溶媒であるトルエン500mLを加えて15分間激しく攪拌し、次いで静置し、トルエン層を分取した。
得られたトルエン層からトルエンを留去し、さらに乾燥して淡褐色の乾燥物10.0gを得た。そのうちの5.0gを、1Lの70％EtOHに溶解した後、冷所で3日間放置し、さらに濾過することで、桑白皮エキス（試料1-3）得た。
【００５１】
(4) 「毛周期変換能の評価」
上記調製した各桑白皮エキス（試料1-1〜試料1-3）について、ウサギ（ニュージーランドホワイト種）の毛周期変換能をみる試験を、以下の如くして行った。
なお、生後24週齢前後のウサギ（ニュージーランドホワイト種）の背部体毛は、全て休止期となる。そこで、この時期に薬剤を塗布することで、育毛効果のある薬剤塗布部の毛のみが成長期になって伸長し、育毛効果の判定を明確に行う試験が可能となる。
【００５２】
まず、20〜21週齢のウサギの背部を電気バリカンを用いて剪毛し、以後、同部の毛が伸びないこと（即ち成長期から休止期になったこと）を確認した。
この背部毛が休止期に変換した直後のウサギ6羽を1群として選び、その背部剪毛部位を4cm角に区分し、その中央部位に、各桑白皮エキスを1日1回の割合で0.2mL塗布した。当該操作は、無処置部が成長期に変換するまで継続した。
なお、対照として、何も塗布しない群を同様にして飼育した（無塗布群）。
そして、被験部位の毛についての育毛状態を評価し、結果を表1に示した。なお、表における育毛状況の評価を示す各符号は、「+++」：毛の密生が顕著、「++」：毛の密生が明瞭、「+」：わずかに育毛が認められる、「-」：全く育毛が認められない、を示す。
【００５３】
その結果、各桑白皮エキスを塗布した試験群では、休止期から成長期に変換される期間が、無塗布群と比べて大幅に短縮されることが示された。
このことから、桑白皮をエタノール水溶液、メタノール水溶液、アセトン水溶液で抽出した抽出物には、休止期から成長期に毛周期変換を促進する成分（育毛効果を有する成分）が含まれることが示された。
【００５４】
【表１】
2014218479.tif 000006
【００５５】
［試験例2］『ヒトにおける桑白皮エキスの育毛効果の検討』
上記桑白皮エキス（試料1-1：70％EtOH抽出物）の育毛作用について、実際にヒトの脱毛症に対する効果を検討した。
【００５６】
(1) 「男性型脱毛症患者における脱毛状態の改善効果試験」
38〜60才までの男性型脱毛症患者23人に対して、桑白皮エキス（試料1-1：70％EtOH抽出物）を6ケ月間毎日頭皮に塗布した。なお、頭部への外用回数は1日に2回とした。
育毛状態は、3ケ月後と6ケ月後に観察した。結果を表2に示す。
【００５７】
その結果、3ケ月後には23人中10名に脱毛部位に若干の軟毛が生えることが確認された。そして、6ケ月後には23人中8名に硬毛が生じ、6名に軟毛が生じ、残りの9名も抜け毛が減った。即ち、6ヶ月の継続使用により、被験者全員（100％）の育毛状態の改善が認められ、61.0％の症例では新生毛がみられ、極めて良好な‘育毛効果’が確認された。
【００５８】
【表２】
2014218479.tif 000007
【００５９】
(2) 「びまん性脱毛症患者における脱毛状態の改善効果試験」
35〜63才までのびまん性脱毛症患者16人に対して、桑白皮エキス（試料1-1：70％EtOH抽出物）を6ケ月間毎日頭皮に塗布した。なお、頭部への外用回数は1日に2回とした。
育毛状態は、3ケ月後と6ケ月後に観察した。結果を表3に示す。
【００６０】
その結果、3ケ月後には16人中6名に脱毛部位に若干の軟毛が生えることが確認された。そして、6ケ月後には16人中6名に硬毛が生じ、4名に軟毛が生じ、残りの6名も抜け毛が減った。即ち、6ヶ月の継続使用により、被験者全員（100％）の育毛状態の改善が認められ、63.0％の症例では新生毛がみられ、極めて良好な‘育毛効果’が確認された。
【００６１】
【表３】
2014218479.tif 000008
【００６２】
［試験例3］『桑白皮エキスに含まれる毛周期変換を促進する画分』
上記毛周期変換能について、桑白皮エキス（70％EtOH抽出物）に含まれる成分を明らかにするため、HPLC解析を行った。
上記桑白皮エキス（試料1-1：70％EtOH抽出物）について、HPLC（高速液体クロマトグラフィー）にて展開した。カラムとしては、TSKgel ODS-80TM（TOSOH製、φ4.6mm×L 250mm、充填担体(平均細孔径8nm, 平均粒子径5μm, 炭素含量15％(w/w), 表面に上記構造式(1)に示す構造を有するオクタデシルシリル化シリカゲル)）を用い、測定条件としては、測定波長：210nm、流速：0.9 mL/min.、カラム温度：45℃、移動相：60%MeOH → 100% MeOH (22min.) → 100% MeOH (22min.)、の条件にて行った。
その結果、図1に示すピークを有するクロマトグラムの結果が得られた。
【００６３】
図1に示すクロマトグラムについて、水相性の強い順にF-1〜F-11の画分に分け、各画分を1％(w/w)濃度となるように70％EtOHに溶解した。
そして、各画分について、試験例1(4)に記載の方法と同様にしてウサギ（ニュージーランドホワイト種）の毛周期変換能を調べる試験を行った。
なお、対照として、70％EtOHのみを塗布した群（70％EtOH塗布群）、何も塗布しない群（無塗布群）、を同様に飼育し評価に供した。
【００６４】
その結果、‘F-8画分’と‘F-10画分’を塗布した試験群では、休止期から成長期に変換される期間が、無塗布群と比べて大幅に短縮されることが示された。
一方、残りのF-1〜F-7, F-9, F-11画分では、無塗布群と比べて全く差異が認められなかった。
このことから、桑白皮に含まれる毛周期変換を促進する成分は、F-8及びF-10に含まれる成分であることが示された。また、F-10に含まれる成分は、β-トコフェノールであると同定された。
【００６５】
【表４】
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【００６６】
［試験例4］『桑白皮エキス（未精製物）の使用感』
上記桑白皮エキスには、毛周期変換促進成分（F-8画分及びF-10画分）が含まれることが確認された。そこで、上記桑白皮エキス（試料1-1：70％EtOH抽出物）を頭皮用育毛剤として使用した際の使用感を検討した。
【００６７】
その結果、当該桑白皮エキスには、熟柿臭に近い不快臭いがあり、日常的な継続使用には難があるという評価であった。また、髪がざらつくため滑り易さが悪くなるという評価であった。
このことから、試験例3における図1のクロマトグラフに示す多くのピークの中には、使用感を大幅に低下させている成分が多く含まれると推定された。
【００６８】
［試験例5］『毛周期変換促進成分の精製方法（液-液抽出）の検討』
上記使用感を向上させるため、前記毛周期変換促進成分（F-8画分及びF-10画分）を流出することなく、且つ、使用感を低下させている成分のみを除去する液-液抽出方法を検討した。
【００６９】
(1) 「酢酸エチル処理の検討」（比較例）
試験例1(1)の方法を改変し、70％EtOH抽出後の「ジエチルエーテル」処理に代えて、「酢酸エチル」処理を行うことを試みた。
桑白皮の細切物1kgを、10Lの70％EtOH中で、45℃で4時間攪拌して、70％EtOH可溶成分を抽出し、濾過することで8Lの抽出液を得た。
次に、当該抽出液を0.5Lまで減圧濃縮し、酢酸エチル（0.5L）を加えて攪拌抽出し、酢酸エチル相を分液回収した。また、残った水相に対して、再度酢酸エチル（0.5L）を加えて再び攪拌抽出し、酢酸エチル相を分液回収した。
これらの酢酸エチル相を混液したものを減圧乾固し、乾燥物（38g）を得た。
そこに、EtOH（2.1kg）および精製水（0.9kg）を加えて攪拌することで溶解させ、4℃で7日間保存した。
当該溶液を濾過することで、桑白皮エキス（試料5-1：EtOH濃度70％、固形分1.1 ％(w/w)）を得た。
【００７０】
得られた桑白皮エキス（試料5-1：酢酸エチル処理物）について、試験例3に記載の方法と同様にして、HPLC解析を行った。得られたクロマトグラムの結果を図2に示す。
その結果、図2のクロマトグラムにおいても、F-8及びF-10画分の存在が確認されたが、夾雑物を示すピークも多く確認された。
従って、酢酸エチル処理を行った場合では、図1のクロマトグラム（試料1-1：試験例1(1)のジエチルエーテル処理物）で確認された夾雑物（使用感阻害成分）を、減少させる効果は全く確認できなかった。
【００７１】
(2) 「n-ヘキサン-メタノール処理の検討」（比較例）
上記(1)の方法における酢酸エチル処理の代わりに、「メタノール飽和n-ヘキサン溶液」を用いて70％エタノール抽出後の液-液抽出を行ったことを除いては同様にして、桑白皮エキス（試料5-2：EtOH濃度70％）を調製した。
【００７２】
得られた桑白皮エキス（試料5-2：n-ヘキサン-メタノール処理物）について、試験例3に記載の方法と同様にして、HPLC解析を行った。
その結果、n-ヘキサン-メタノール処理を行った場合では、F-10画分の存在は確認されたが、F-8画分が失われてしまうことが示された。これは、F-8画分がn-ヘキサンに不溶性を示すためと考えられる。
【００７３】
［試験例6］『毛周期変換促進成分の精製方法（合成吸着樹脂カラム処理）の検討』
合成吸着樹脂カラムを用いた精製によって、前記毛周期変換促進成分（F-8画分及びF-10画分）を流出することなく、且つ、使用感を低下させている成分のみを除去できるかを検討した。
【００７４】
(1) 「EtOH濃度65％での合成吸着樹脂への通液の検討」（実施例）
桑白皮の細断物50gを、500mLの70％EtOH中で、45℃で4時間攪拌して、濾過することで70％EtOH可溶成分を抽出し、抽出液（固形分0.80％(w/w)）を得て、水を加えて「EtOH濃度65％」に調製した。
次に、当該抽出液を、ダイヤイオンHP-20カラム（φ2.2cm×L 13cm, カラム容量50mL：三菱化学社製）に100mL/hrの流速で通液し、カラムを65％EtOH（100mL）にて洗浄した。
ここで、洗浄液は回収しておき、減圧乾固し乾燥物とした。そこに、70％EtOH（120mL）を加えて攪拌することで溶解した溶液を得た（試料6-1：固形分0.44％(w/w)）。
【００７５】
次いで、カラムに99％EtOH（150mL）を通液することで吸着成分を溶出させ、溶出液を減圧乾固し、乾燥物（0.58g）を得た。そこに、70％EtOH（120mL）を加えて攪拌することで溶解し、桑白皮エキス精製物（試料6-2：EtOH濃度70％、固形分0.48％(w/w)）を得た。
【００７６】
得られた桑白皮エキス精製物（試料6-2）およびカラム通過液（試料6-1）について、試験例3に記載の方法と同様にして、HPLC解析を行った。得られたクロマトグラムの結果を図3(A), (B)に示す。
その結果、図3(B)が示すように、当該桑白皮エキス精製物（試料6-2）では、F-8及びF-10画分の存在が確認され、さらに図1のクロマトグラム（試料1-1：試験例1(1)のジエチルエーテル処理物）で確認された夾雑物が、大幅に減少されていることが確認された。一方、図3(A)が示すように、カラム通過液中には当該夾雑物のみが分離されていることが確認された。
【００７７】
(2) 「EtOH濃度70％での合成吸着樹脂への通液の検討」（比較例）
上記(1)の精製法において、桑白皮の70％EtOH可溶成分の抽出後、EtOH濃度70％のまま合成吸着樹脂に通液したこと（及び、カラム前処理を70％EtOHで行ったこと）を除いては、上記(1)と同様にして桑白皮エキス精製物（試料6-3）を調製した。
HPLC解析を行った結果、当該桑白皮エキス精製物（試料6-3）では、F-8及びF-10画分の多くが失われたものとなった。
【００７８】
(3) 「EtOH濃度60％での合成吸着樹脂への通液の検討」（比較例）
上記(1)の精製法において、桑白皮の70％EtOH可溶成分の抽出後、水を加えて「EtOH濃度60％」に調製して合成吸着樹脂へ通液したこと（及び、カラム前処理を60％EtOHで行ったこと）を除いては、上記(1)と同様にして桑白皮エキス精製物（試料6-4）を調製した。
HPLC解析を行った結果、当該桑白皮エキス精製物（試料6-4）では、図1のクロマトグラム（試料1-1：試験例1(1)のジエチルエーテル処理物）で確認された夾雑物の除去が不十分であり、精製が不十分であることが確認された。
【００７９】
［試験例7］『桑白皮エキス精製物の使用感の検討（液色及び臭いの評価）』
上記検討の結果、EtOH濃度65％で合成吸着樹脂（ダイヤイオンHP-20）に通液させて精製した場合、前記毛周期変換促進成分（F-8画分及びF-10画分）を流出することなく、且つ、他の夾雑成分を大幅に低減できることが明らかになった。
そこで、当該桑白皮エキス精製物を頭皮用育毛剤として使用する際の使用感の影響についての評価を行った。
【００８０】
まず、試験例6(1)の桑白皮エキス精製物（試料6-2：カラム精製物）の液色及び臭いについて、試験例5(1)の桑白皮エキス（試料5-1：カラム未精製物）との対比を行った。結果を表5に示す。また、図4に両液体の外観を示した写真像図を示す。
その結果、両液は同程度の毛周期変換促進成分（F-8画分及びF-10画分）を含むにも関わらず、‘液色’はカラム未精製物（試料5-1：図4A）よりもカラム精製物（試料6-2：図4B）の方が、大幅に薄くなることが明らかになった。
また、‘臭い’についても、カラム未精製物（試料5-1：図4A）では熟柿のような不快臭を感じさせるものであったが、カラム精製物（試料6-2：図4B）ではほとんど不快臭がせずに使用感に影響を与えるものではなかった。
【００８１】
このことから、桑白皮エキスを試験例6(1)の方法でカラム精製することによって、特に熟柿臭様の不快臭によって日常的な継続使用は困難であった問題を、解消できることが示された。
【００８２】
【表５】
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【００８３】
［試験例8］『桑白皮エキス精製物の使用感の検討（毛髪への吸着量の評価）』
桑白皮エキス精製物を頭皮用育毛剤として用いた場合において、毛髪への吸収のしやすさを評価した。なお、毛髪への吸収量は、頭皮用育毛剤として使用した場合、薬効の効き方に影響する重要な要因である。
【００８４】
中国人女性の同一人の人毛（ビューラックス社）の毛束（2g、15cm）を、ブリーチ処理、パーマ処理、超音波洗浄を行い乾燥させた。この工程を合計3回行った後、精製水でリンスして自然乾燥し、損傷毛とした。
当該損傷毛を、恒温・恒湿の環境下（15〜16℃の55〜57％(RH)）に3時間放置した後、精密電子上皿天秤（Ay-220:島津製作所）にて重量を測定し、「初期重量(a)」した。
次いで、‘試料6-2（カラム精製物）’、‘試料5-1（カラム未精製物）’、又は‘70％EtOH’の液中で浸漬し、一晩自然乾燥した。そして、同様に恒温・恒湿の環境下に3時間放置した後、重量を測定し、その値を「吸着重量(b)」とした。
なお、各試料の吸着量を算出するために、70％EtOHで処理（対照）した場合の値を同様にして測定した。
そして、以下の数式(1)を用いて、各試料で処理した場合の「吸着量(c)」（mg/g：毛髪1gあたりのエキス成分吸着量のmg）を算出した。当該値は、70％EtOH処理によって毛髪内部の成分が流出した重量からの増加重量に相当する。結果を表6に示す。
【００８５】
【数１】
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【００８６】
その結果、カラム精製物（試料6-2）で処理した場合でも、カラム未精製物（試料5-1）で処理した場合に比べて、毛髪への吸着量に大きな差異は見られなかった。このことから、カラム精製工程によって吸着量が抑制されないことが示された。
【００８７】
【表６】
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【００８８】
［試験例9］『桑白皮エキス精製物の使用感の検討（摩擦係数の評価）』
桑白皮エキス精製物を頭皮用育毛剤として用いた場合において、毛髪表面の特性（摩擦係数）に与える影響を評価した。
【００８９】
スライドガラスの上2cm間に40本の毛髪（試験例8で用いた各試料処理後に乾燥させた毛髪）を、等間隔で並べて両端を接着剤で固定し、その上に摩擦センサー（摩擦感テスター：KES-SE-DC：カトーテック社）をすべらせて摩擦係数を測定した。
なお、摩擦係数の測定条件は、SNES：H（力計20g/V）、滑らす速度：1.0mm/sec.、摩擦静荷重：25g、摩擦センサー：シリコンセンサー、測定場所：21〜22℃, 66％(RH)、にて行った。
そして、3ヶ所の摩擦係数を測定して平均値を出し、「MIU（平均摩擦係数」を算出した。また、対照として、70％EtOHで処理した値を同様にして測定した。結果を表7に示す。
【００９０】
その結果、対照である70％EtOHで処理した場合、MIU値は高い値となり、「髪の滑り易さ（サラサラ感）」が完全に失われた。一方、カラム精製物（試料6-2）で処理した場合、MIU値は大幅に低い値を示し、その値はカラム未精製物（試料5-1）で処理した場合よりも低い値であった。
このことから、桑白皮エキスを試験例6(1)の方法でカラム精製して調製した育毛剤は、「髪の滑り易さ（サラサラ感）」を維持する性質を有することが示された。
【００９１】
【表７】
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【００９２】
［試験例10］『桑白皮エキス精製物の使用感の検討（曲げこし感の評価）』
桑白皮エキス精製物を頭皮用育毛剤として用いた場合において、毛髪特性（曲げこし感）に与える影響を評価した。
【００９３】
台紙上5cm間に50本の毛髪（試験例8で用いた各試料処理後に乾燥させた毛髪）を根元を揃えて均一に並べ接着剤で固定し、毛髪こし感テスター（KES-FB2-S-DC：カトーテック製）を用いて「2HB値（曲げ回復性）」を測定した。
なお、当該測定条件は、SNES：20g、曲げ曲率：1.0、サンプルサイズ：5cm、測定場所：22℃, 55〜57％(RH)、にて行った。
そして、3ヶ所の値を測定して平均値を算出した。また、対照として、70％EtOHで処理した値を同様にして測定した。結果を表8に示す。
【００９４】
その結果、対照である70％EtOHで処理した場合、2HB値が大幅に高い値となり、「弾力性（曲げた時の回復性）」が完全に失われた。一方、カラム精製物（試料6-2）で処理した場合、2HB値は大幅に低い値を示し、その値はカラム未精製物（試料5-1）で処理した場合よりも低い値であった。
このことから、桑白皮エキスを試験例6(1)の方法でカラム精製して調製した育毛剤は、「弾力性（曲げた時の回復性）」を維持する性質を有することが示され、毛髪自体を物理的にボリュームアップした髪にするために適していることが示された。
【００９５】
【表８】
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【００９６】
［試験例7〜10の総括］
上記検討結果から、桑白皮エキスを合成吸着樹脂を用いて精製することで、未精製の桑白皮エキスが有していた不快臭が大幅に低減されたものとなった。また、液色も薄く好ましいものとなった。また、当該精製物は、頭皮用育毛剤として使用した際に、髪の滑り易さ（サラサラ感）及び弾力性（曲げた時の回復性）を維持する性質を有するものであった。
【００９７】
以上により、当該桑白皮エキス精製物を頭皮用育毛剤と使用することで、日常の継続使用の上で極めて重要な使用感が、全体的に大幅に向上したものとなることが示された。
さらには、毛周期変換能を有する成分による育毛効果に加えて、髪の滑らかさを維持し、毛髪自体を物理的にボリュームアップした髪にしたい場合に適したものであることが示された。
【００９８】
［製造例1］『頭皮用育毛剤製造における桑白皮エキス精製物の調製』
上記試験例の検討で明らかになった条件にて、実際に頭皮用育毛剤の製造に用いる桑白皮エキス精製物を大規模に製造した。
【００９９】
桑白皮の細断物1kgを、10Lの65％EtOH中で、45℃で4時間攪拌して、濾過することで65％EtOH可溶成分を抽出し、8Lの抽出液を得た。次に、当該抽出液を、ダイヤイオンHP-20カラム（φ8cm×L 25cm, カラム容量:1.26L, 三菱化学社製）に1.5L/hrの流速で通液し、カラムを65％EtOH（2.5L）にて洗浄した。そして、99％EtOH（4L）をカラムに通液することで吸着成分を溶出させ、溶出液を減圧乾固し、乾燥物（18g）を得た。そこに、EtOH（2688mL）を加えて攪拌することで溶解させ、精製水（1152mL）を加えてさらに攪拌し、4℃で7日間保存した。そして、得られた溶液を濾過した。
その結果、桑白皮エキス精製物（EtOH濃度70％、固形分0.44％(w/w)）が得られた。
【産業上の利用可能性】
【０１００】
本発明は、従来では治療が困難な男性型脱毛症やびまん性脱毛症に対して、日常的な継続使用が可能な頭皮用育毛剤として有効に活用されることが期待される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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