(57)【要約】【課題】レスベラトロールの経皮吸収作用に優れ、塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができる皮膚外用剤の提供。【解決手段】本発明の皮膚外用剤は、レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末と、サクラ抽出物とを含有する。前記皮膚外用剤は、レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）が、０．５μｍ〜５．０μｍであることが好ましい。【選択図】図２
2014101312.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末と、サクラ抽出物とを含有することを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項２】
微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）が、０．５μｍ〜５．０μｍである請求項１に記載の皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、ポリフェノールは、天然物、特に植物に含まれる有用な物質として注目を集め、その研究開発が続けられており、様々な種類を有することが知られている。
【０００３】
前記ポリフェノールの種類としては、例えば、マリグナン類、クルクミン類、クマリン類、カテキン、タンニン、アントシアニン、プロアントシアニジン、ルチン、ケルセチン、レスベラトロール等のフラボノイド類などが知られている。しかしながら、前記レスベラトロール等のポリフェノールは、その分子量が大きく、水にも有機溶媒にも溶解しにくい化合物であるため、皮膚への吸収性が低く、塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができないという問題がある。
【０００４】
一方、前記ポリフェノールの経皮吸収を高めるために、乳化させたポリフェノールを用いることが提案されている（例えば、非特許文献１及び２参照）。しかしながら、前記ポリフェノールの皮膚吸収の機序は、その種類や性質に応じて異なるものであり、前記ポリフェノールの一種であるレスベラトロールを単に乳化させたものを皮膚へ塗布しても、レスベラトロールの皮膚への吸収性が格段に高まるものではない。そのため、乳化以外の他の方法により前記ポリフェノールの経皮吸収を高めることが求められている。
【０００５】
したがって、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れ、塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができる皮膚外用剤の速やかな開発が強く望まれているのが現状である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，６１，８５５−８６０，２００９．
【非特許文献２】Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，５８，３９８−４０１，２０１０．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、従来における前記諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れ、かつ塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができる皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、前記目的を達成するため鋭意検討を行った結果、レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末と、サクラ抽出物とを含有する皮膚外用剤を用いると、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れ、塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができる皮膚外用剤となることを見出し、本発明の完成に至った。
【０００９】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞  レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末と、サクラ抽出物とを含有することを特徴とする皮膚外用剤である。
＜２＞  微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）が、０．５μｍ〜５．０μｍである前記＜１＞に記載の皮膚外用剤である。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、従来における前記諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れ、かつ塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができる皮膚外用剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、試験例１の経皮吸収性試験の結果を示すグラフである。
【図２】図２は、試験例２の経皮吸収性試験の結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
（皮膚外用剤）
本発明の皮膚外用剤は、レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末と、サクラ抽出物とを含んでなり、更に必要に応じて乳化剤及びその他の成分を含んでなる。
【００１３】
＜レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末＞
前記レスベラトロールは、スチルベノイド（スチルベン誘導体）ポリフェノールの一種であり、系統名は、３，５，４’−トリヒドロキシ−ｔｒａｎｓ−スチルベンであり、下記構造式（１）で表される化合物である。
【化１】
2014101312.tif 000003
【００１４】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末としては、前記レスベラトロールを含有する植物抽出物の微粉末であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。なお、前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末として、前記レスベラトロールの化合物（前記構造式１で表される化合物）の微粉末を使用してもよく、前記レスベラトロールを含有する組成物（レスベラトロール含有組成物）の微粉末を使用してもよく、前記レスベラトロールの化合物及び前記レスベラトロール含有組成物を併用した微粉末を使用してもよい。
【００１５】
前記レスベラトロール含有植物抽出物としては、植物の抽出に一般に用いられる方法を利用することによって、容易に得ることができるが、市販品を使用してもよい。
【００１６】
前記レスベラトロール含有植物抽出物には、レスベラトロール含有植物の抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を使用してもよい。前記レスベラトロール含有植物抽出物は、後述する調製方法により、その後微粉末化される。
【００１７】
前記レスベラトロール含有植物としては、前記レスベラトロールを含有する植物であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、コケモモ（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｖｉｔｉｓ−ｉｄａｅａ  Ｌ．）、ブドウ（Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ  Ｌ．）、インドキノ木（Ｐｔｅｒｏｃａｒｐｕｓ ｍａｒｓｕｐｉｕｍ）、メリンジョ（Ｇｎｅｔｕｍ ｇｎｅｍｏｎ  Ｌｉｎｎ．）などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、コケモモ又はブドウが好ましい。
【００１８】
前記レスベラトロール含有植物であるコケモモの亜種としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、リンゴンベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｖｉｔｉｓ−ｉｄａｅａ  ｖａｒ．  ｍｉｎｕｓ  Ｌｏｄｄ．）、カウベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｖｉｔｉｓ−ｉｄａｅａ  ｖａｒ．  ｖｉｔｉｓ−ｉｄａｅａ  Ｌ．）などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、レスベラトロールの効果を十分に発揮することができる点で、リンゴンベリー（Ｖａｃｃｉｎｉｕｍ ｖｉｔｉｓ−ｉｄａｅａ  ｖａｒ．  ｍｉｎｕｓ  Ｌｏｄｄ．）が好ましい。
【００１９】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の抽出部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記レスベラトロールを多く含有する部位が好ましく、前記コケモモ及び前記リンゴンベリーから抽出する場合、前記レスベラトロールを多く含有する点で、果実及び果皮部がより好ましく、前記ブドウから抽出する場合、前記レスベラトロールを多く含有する点で、茎部がより好ましい。
【００２０】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の抽出部位の調製方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記レスベラトロールの抽出効率向上及び製造安定性の点で、前記抽出部位を細分乃至圧搾して調製する方法が好ましく、具体的には、前記抽出部位を機械（ミキサー等）により細分乃至圧搾して調製する方法、前記抽出部位を手作業により細分乃至圧搾して調製する方法などが挙げられる。
【００２１】
前記レスベラトロール含有植物の抽出方法としては、特に制限はなく、目的に応じて公知の方法を用いることができ、例えば、前記調製された前記抽出部位に抽出溶媒を加えて攪拌した後、遠心分離機（デカンター連続式横型遠心分離機、自動バスケット型遠心分離機等）にて固液分離することにより抽出する方法などが挙げられる。これらの抽出は、１種類の遠心分離機を用いて行ってもよいし、種々の組成を有するレスベラトロール含有抽出物を得るために、２種類以上の遠心分離機を併用して行ってもよい。
【００２２】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の抽出溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、有機溶媒、水と有機溶媒との混合溶媒などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
【００２３】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の抽出溶媒である水としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水道水、蒸留水、ミネラル水、アルカリイオン水等の冷水、温水、熱水などが挙げられる。これらの中でも、熱水が好ましい。前記熱水（水温が５０℃以上の水）の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、生理活性物質の抽出効率に優れる点で、５０℃〜１２０℃が好ましく、７０℃〜１００℃がより好ましい。
【００２４】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の抽出溶媒である有機溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、アルコール、食用油脂等の食品又は薬剤の製造に許容される有機溶媒などが挙げられる。これらの中でも、エタノールが好ましい。
【００２５】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の抽出溶媒である水と有機溶媒との混合溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、含水アルコール（アルコール水溶液等）などが挙げられる。これらの中でも含水エタノールが好ましい。前記含水アルコールのアルコール濃度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００２６】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の形態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、溶液状、懸濁液状、半固体状（ゲル状、ペースト状等）、固体状（粉末状、顆粒状等）などが挙げられる。これらの中でも、前記レスベラトロールの経皮吸収性に優れる点及び後述する微粉末の調製がしやすい点で、粉末状が好ましい。
【００２７】
前記レスベラトロール含有植物抽出物は、前記レスベラトロールの含有量を増加させる目的で、精製してもよい。前記精製する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、溶媒を使用して精製する方法、溶媒を使用しないで精製する方法（例えば、限外濾過、吸着性担体（ダイヤイオン（登録商標）ＨＰ−２０、セファデックス（登録商標）ＬＨ２０等の合成吸着剤、キチン等の天然吸着剤）を用いたカラム法、バッチ法等）などが挙げられる。
【００２８】
＜＜レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の調製方法＞＞
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の調製方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記レスベラトロール含有植物抽出物を凍結乾燥させた粉粒体を溶媒に溶解させて微細化する湿式法；前記レスベラトロール含有植物抽出物を凍結乾燥させた粉粒体を更に微細化する乾式法などが挙げられる。これらの中でも、前記レスベラトロールの抽出効率に優れる点、及び前記レスベラトロール含有植物抽出物を乾燥する等の製造工程を省略できる点で、乾式法が好ましい。
【００２９】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末を調製する際に行う凍結乾燥にかかる時間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３０】
前記レスベラトロール含有植物抽出物を微細化する際に用いる粉砕装置としては、特に制限はなく、目的に応じて市販のものを適宜選択することができ、例えば、高圧雰囲気下において１以上の小径穴と特定流路とを有するノズル内を流体が高速移動することにより対象物を粉砕する高圧ホモジナイザー；超音波を用いて対象物を粉砕する超音波粉砕機；粉砕室内で超高速の空気の旋回渦流を発生し、衝撃、剪断、圧縮、摩砕、高周波振動等の作用をもって対象物を微粒化する気流式粉砕機；高速撹拌又は衝撃により対象物を粉砕する高速回転衝撃粉砕機；粉砕媒体を使用するボールミル又はビーズミルなどが挙げられる。
【００３１】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微細化条件としては、前記レスベラトロール含有植物抽出物を微細化できる条件であれば、特に制限はなく、前記粉砕装置、前記粉砕装置のノズルの種類、微粉砕処理前の前記抽出物の粒径等に応じて適宜選択することができる。
【００３２】
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉砕処理の回数としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）が好ましい範囲内となるよう、１回であってもよいし、必要に応じて２回以上であってもよい。
【００３３】
−レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）−
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０：積算値が９０％のときの粒径）としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．５μｍ〜５．０μｍが好ましい。なお、前記個数平均粒径（Ｄ９０）は、レーザー回折散乱式粒度分布測定装置を用いて測定できる。
【００３４】
＜＜レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の含有量＞＞
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の前記皮膚外用剤における含有量としては、特に制限はなく、使用する皮膚外用剤の目的に応じて適宜選択することができるが、０．００００１質量％以上が好ましく、０．１質量％以上がより好ましく、０．５質量％以上が特に好ましい。
【００３５】
＜＜レスベラトロールの含有量＞＞
前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末における前記レスベラトロールの含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３６】
＜サクラ抽出物＞
前記サクラ抽出物は、サクラからの抽出物であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３７】
前記サクラ抽出物としては、植物の抽出に一般に用いられる方法を利用することによって、容易に得ることができるが、市販品を使用してもよい。
【００３８】
前記サクラ抽出物には、前記サクラの抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を使用してもよい。
【００３９】
前記サクラは、バラ科サクラ属の植物のうち、ウメ、モモ、アンズ等を除いた総称であり、一般にサクラ亜属（Ｓｕｂｇｅｎｕｓ  Ｃｅｒａｓｕｓ）に属する植物を指す。
前記サクラの群としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヤマザクラ群、エドヒガン群、マメザクラ群、チョウジザクラ群、ミヤマザクラ群、シナミザクラ群などが挙げられ、前記サクラの種としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、Ｐｒｕｎｕｓ ｌａｎｎｅｓｉａｎａ、Ｐｒｕｎｕｓ ａｖｉｕｍ、Ｐｒｕｎｕｓ ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｐｒｕｎｕｓ ｃｅｒａｓｕｓ、Ｐｒｕｎｕｓ ｊａｍａｓａｋｕｒａ、Ｐｒｕｎｕｓ ｌｅｖｅｉｌｌｅａｎａ、Ｐｒｕｎｕｓ ｐｅｎｄｕｌａ、Ｐｒｕｎｕｓ ｐｓｅｕｄｏｃｅｒａｓｕｓ、Ｐｒｕｎｕｓ ｓｐｅｃｉｏｓａ、Ｐｒｕｎｕｓ ｖｅｒｅｃｕｎｄａなどが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
【００４０】
前記サクラ抽出物の抽出部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記レスベラトロールの経皮吸収作用を高めることができる点で、花部が好ましい。
【００４１】
前記サクラ抽出物の抽出部位の調製方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記サクラ抽出物の抽出効率向上及び製造安定性の点で、前記抽出部位を細分乃至圧搾して調製する方法が好ましく、具体的には、前記抽出部位を機械（ミキサー等）により細分乃至圧搾して調製する方法、前記抽出部位を手作業により細分乃至圧搾して調製する方法などが挙げられる。
【００４２】
前記サクラ抽出物の抽出方法としては、特に制限はなく、植物の抽出に用いられる一般的な方法を目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記サクラから溶媒で抽出する方法、超臨界流体で抽出する方法などが挙げられる。
【００４３】
前記サクラ抽出物を溶媒で抽出する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記調製された前記抽出部位を、室温乃至還流加熱下において、連続抽出、浸漬抽出、向流抽出等で任意の装置を用いて抽出する方法などが挙げられ、具体的には、抽出溶媒を満たした処理槽に前記調製された前記抽出部位を投入し、攪拌しながら溶媒中に有効成分を溶出させた後、濾過して抽出残渣を除き、前記サクラ抽出物を得る方法などが挙げられる。これらの抽出は、１種類の抽出方法により抽出してもよいし、２種類以上の抽出方法を併用して抽出してもよく、抽出回数としては、１回でもよいし、２回以上であってもよい。
【００４４】
前記サクラ抽出物の抽出溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、有機溶媒、水と有機溶媒との混合溶媒などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
【００４５】
前記サクラ抽出物の抽出溶媒である水としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水道水、蒸留水、ミネラル水、アルカリイオン水等の冷水、温水、熱水などが挙げられる。これらの中でも、温水、熱水が好ましい。前記水の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４６】
前記サクラ抽出物の抽出溶媒である有機溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、アルコール、食用油脂等の食品又は薬剤の製造に許容される有機溶媒などが挙げられる。
【００４７】
前記サクラ抽出物の抽出溶媒である水と有機溶媒との混合溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、含水アルコール（アルコール水溶液等）などが挙げられる。前記含水アルコールのアルコール濃度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４８】
前記サクラの溶媒抽出における抽出条件としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４９】
前記サクラ抽出物を超臨界流体で抽出する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて公知の方法を適宜選択することができ、例えば、前記調製された前記抽出部位を、超臨界状態の超臨界流体に溶解させることにより、抽出する方法などが挙げられる。
【００５０】
前記サクラの抽出に用いる超臨界流体としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、二酸化炭素、窒素などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
【００５１】
前記サクラ抽出物は、前記サクラの有効成分の含有量を増加させる目的で、精製してもよく、前記精製方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、活性炭処理、樹脂吸着処理、シリカゲル処理、イオン交換樹脂、液−液向流分配、膜分離等による精製方法などが挙げられる。
【００５２】
前記サクラ抽出物の形態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、溶液状、懸濁液状、半固体状（ゲル状、ペースト状等）、固体状（微粉末状、顆粒状等）などが挙げられる。
【００５３】
＜＜サクラ抽出物の含有量＞＞
前記サクラ抽出物の前記皮膚外用剤における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、０．００００１％以上であることが好ましく、０．１質量％以上であることがより好ましく、０．５質量％以上であることが更に好ましい。
【００５４】
＜＜サクラ抽出物の有効成分＞＞
前記サクラ抽出物の有効成分としては、例えば、ケルセチン−３−グルコシド、ケルセチン−３，４’−ジグルコシド、ケルセチン−３−アラビノグルコシド（ペルタトシド）、ケルセチン−３−ルチノシド（ルチン）、ケルセチン−３−グルコシド（イソケルシトリン）、ケルセチン−３−Ｌ−ラムノシド（ケルシトリン）、ケルセチン−３−アラビノシド（アビクラリン）等のケルセチン配糖体、ケンフェロール配糖体、カフェオイルグルコース、クマロイルグルコース、シンナモイルグルコース、ケルセチンマロニルグルコース、ケンフェロールマロニルグルコースなどが挙げられる。
【００５５】
＜乳化剤＞
前記乳化剤は、前記皮膚外用剤を乳化（エマルション化）させるために使用する添加剤である。前記乳化剤を用いることにより、レスベラトロールの経皮吸収作用に更に優れた水中油滴型（Ｏ／Ｗ型）の皮膚外用剤となる。
【００５６】
前記乳化剤としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水中油滴型（Ｏ／Ｗ型）の乳化剤、油中水滴型（Ｗ／Ｏ型）の乳化剤などが挙げられる。これらの中でも、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れる点で、水中油滴型（Ｏ／Ｗ型）の乳化剤が好ましい。
【００５７】
前記乳化剤の前記皮膚外用剤における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れる点で、１．０質量％〜５．０質量％が好ましく、２．５質量％〜３．５質量％がより好ましい。
【００５８】
前記乳化剤としては、前記皮膚外用剤を乳化させることができる乳化剤であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れる点で、アルコール類、脂肪酸エステル類、炭化水素類、及びレシチン類を少なくとも含有することが好ましく、更に水を含有してもよい。
【００５９】
＜＜アルコール類＞＞
前記アルコール類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、セタノール、ペンチレングリコール、グリセリン、イソプロピルアルコール、エチレングリコール、カプリルアルコール、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、リノリルアルコールなどが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れる点で、セタノール、ペンチレングリコール、グリセリンが好ましい。
前記アルコール類の前記乳化剤における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６０】
＜＜脂肪酸エステル類＞＞
前記脂肪酸エステル類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ラウリン酸ポリグリセリル−１０、トリ（カプセル酸／カプリン酸）グリセリル、マカデミアナッツ脂肪酸フィトステリル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステルなどが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れる点で、ラウリン酸ポリグリセリル−１０、トリ（カプセル酸／カプリン酸）グリセリル、マカデミアナッツ脂肪酸フィトステリルが好ましい。
前記脂肪酸エステル類の前記乳化剤における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６１】
＜＜炭化水素類＞＞
前記炭化水素類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、スクワラン、流動パラフィン、α−オレフィンオリゴマー、イソパラフィン、セレシン、パラフィン、流動イソパラフィン、ポリブテン、マイクロクリスタリンワックス、ワセリンなどが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れる点で、スクワランが好ましい。
前記炭化水素類の前記乳化剤における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６２】
＜＜レシチン類＞＞
前記レシチン類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水素添加レシチン、分別レシチン、酵素分解レシチンなどが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れる点で、水素添加レシチンが好ましい。
前記レシチン類の前記乳化剤における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６３】
＜＜水＞＞
前記水としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
前記水の乳化剤における含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６４】
＜その他の成分＞
前記その他の成分としては、本発明の効果を損なわない限り、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、多価アルコール類（グリセリン、１，３−ブチレングリコール等）、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、キレート剤、乳化安定剤などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよいし、２種以上を併用してもよい。
【００６５】
＜皮膚外用剤の製造方法＞
前記皮膚外用剤の製造方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末及び前記サクラ抽出物を含む組成物に対して、前記乳化剤を添加する方法が好ましく、具体的には、前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末と、前記サクラ抽出物と、前記その他の成分とを混合した組成物（溶液）に対し、前記乳化剤を添加して乳化させることにより製造する方法などが挙げられる。
【００６６】
＜皮膚外用剤の使用方法＞
前記皮膚外用剤の使用対象となる動物種としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、ヒトに対して好適に適用することができ、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物、例えば、マウス、ラット、ハムスター、トリ、イヌ、ネコ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ブタ、サルなどに対して適用することもできる。
前記皮膚外用剤の使用部位としては、皮膚を有する部位であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、手、足、顔、背中、頭皮などが挙げられる。
前記皮膚外用剤の使用方法としては、前記皮膚外用剤を皮膚に浸透させるために使用できる方法であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記皮膚外用剤の使用量としては、特に制限はなく、塗布対象個体の年齢、体重、体質等の様々な要因を考慮して適宜選択することができるが、前記皮膚外用剤は前記レスベラトロールの経皮吸収性に優れるため、従来の塗布量よりも少量であってもよい。
【００６７】
＜用途＞
本発明の皮膚外用剤は、レスベラトロールの経皮吸収性に優れ、塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができるため、レスベラトロールを含有する軟膏、クリーム、ピーリング剤、乳液、ローション、美容液、パック、リップクリーム、スプレー、リキッドファンデーション、口紅等の皮膚化粧料、整髪料、洗浄剤、クレンジング剤、入浴剤等の医薬部外品、医薬品などに好適に利用することができる。
【実施例】
【００６８】
以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００６９】
［試験例１：皮膚外用剤の経皮吸収作用試験］
製造した各皮膚外用剤の経皮吸収作用試験を行った。
試験例１では、レスベラトロール含有植物抽出物について、その形態を微粉末とするか否かにより、経皮吸収効果にどの程度違いが生じるのかを試験した。
【００７０】
＜皮膚外用剤の製造＞
各皮膚外用剤は、表１に示す組成となるよう、レスベラトロール含有植物抽出物（「微粉末」又は「粉末」）と、水とを混合乃至溶解させて水溶液を調製することにより皮膚外用剤を製造した。
ここで、前記レスベラトロール含有植物抽出物（微粉末）は、リンゴンベリー抽出物（ＢＧＧ  Ｊａｐａｎ株式会社製）をホモジナイザーにより微粉砕処理したものを使用した。前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）は、１．６６μｍであった。
また、レスベラトロール含有植物抽出物（粉末）は、参考例１で用いたレスベラトロール含有植物抽出物において、前記微粉砕処理していないものを使用した。前記レスベラトロールの粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）は、８．９５μｍであった。
なお、前記個数平均粒径（Ｄ９０）は、レーザー回折散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した。
【００７１】
＜試験方法＞
経皮吸収作用試験は、製造した各皮膚外用剤を３次元皮膚モデル（Ｌａｂ  Ｃｙｔｅ  ＥＰＩＭＯＤＥＬ２４、株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング社製、皮膚モデル直径６．４ｍｍ）の上層に５０μＬ滴下して３時間経過した後の３次元皮膚モデルの下部に位置するリン酸緩衝生理食塩水中のポリフェノール量を、Ｆｏｌｉｎ−Ｄｅｎｉｓ法により測定することにより行った。
前記Ｆｏｌｉｎ−Ｄｅｎｉｓ法によるポリフェノール量の測定は、以下のようにして行った。まず、被試験物質２５μＬ、リン酸緩衝生理食塩水２５μＬを加え、１０質量％炭酸ナトリウム５０μＬを加えて３分間放置した。次に、Ｆｏｌｉｎ試薬５０μＬを加え、１時間室温で発色させた。そして、発色した前記被試験物質を遠心分離（１３，０００ｒｐｍ、５分間）した後、上清１００μＬを９６ウェルマイクロプレートに移し、吸光度（波長７３０ｎｍ）を測定した。得られた吸光度の値から、前記被試験物質１ｍＬ中に含まれるポリフェノール量（μｇ）を、検量線に基づき換算した。
なお、前記検量線は、１１．１μｇ／ｍＬ、３．７０μｇ／ｍＬ、１．２４μｇ／ｍＬ、０．４１２μｇ／ｍＬに調製した各リンゴンベリー抽出物（溶液）を使用した。結果を表１及び図１に示す。
【００７２】
【表１】
2014101312.tif 000004
【００７３】
＜試験例１の結果＞
以上より、レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末を含有する皮膚外用剤（参考例１）を用いることにより、レスベラトロールの経皮吸収が高まることが示唆された。
【００７４】
［試験例２：皮膚外用剤の経皮吸収作用試験］
製造した各皮膚外用剤の経皮吸収作用試験を行った。
試験例２では、試験例１において良好な結果を示したレスベラトロール含有植物抽出物の微粉末を用いて皮膚外用剤を製造し、前記皮膚外用剤において、サクラ抽出物を併用するか否かの違いにより、経皮吸収効果にどの程度違いが生じるのかを試験した。
＜乳化剤の製造＞
乳化剤（Ｏ／Ｗ型）は、表２−１に示す組成となるよう、表２−１に記載の各成分を混合乃至溶解させた後、湿式微粒化装置（アルティマイザーシステム）を用いて、各成分を分散させることにより製造した。
【００７５】
【表２−１】
2014101312.tif 000005
【００７６】
＜皮膚外用剤の製造＞
各皮膚外用剤は、表２−２に示す組成となるよう、レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末と、サクラ抽出物（ただし、実施例のみ使用）と、多価アルコール（グリセリン及び１，３−ブチレングリコール）と、水とを混合乃至溶解させて水溶液を調製した。そして、前記水溶液に対して、前記製造した乳化剤を添加し、ホモジナイザーを用いて乳化させることにより、Ｏ／Ｗ型エマルション化された皮膚外用剤（乳濁液状の皮膚外用剤）を製造した。
ここで、前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末は、リンゴンベリー抽出物（ＢＧＧ  Ｊａｐａｎ株式会社製）をホモジナイザーにより微粉砕処理したものを使用した。前記レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末の個数平均粒径（Ｄ９０）は、１．６６μｍであった。なお、前記個数平均粒径（Ｄ９０）は、レーザー回折散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した。
【００７７】
＜試験方法＞
経皮吸収作用試験は、製造した各皮膚外用剤を３次元皮膚モデル（Ｌａｂ  Ｃｙｔｅ  ＥＰＩＭＯＤＥＬ２４、株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング社製、皮膚モデル直径６．４ｍｍ）の上層に滴下する前の皮膚外用剤中のポリフェノール量と、前記皮膚外用剤を３次元皮膚モデルの上層に滴下して３時間経過した後の３次元皮膚モデルの下部に位置するリン酸緩衝生理食塩水（被験物質）中のポリフェノール量とを、Ｆｏｌｉｎ−Ｄｅｎｉｓ法により測定することにより行った。
前記Ｆｏｌｉｎ−Ｄｅｎｉｓ法によるポリフェノール量の測定は、以下のようにして行った。まず、前記被試験物質をエバポレーター中で乾燥させ、１００μＬの精製水に溶解後、５０μLを１．５ｍＬチューブに測り取り、１０質量％炭酸ナトリウム５０μＬを加えて３分間放置した。次に、Ｆｏｌｉｎ−Ｄｅｎｉｓ試薬５０μＬを加え、１時間室温で発色させた。そして、発色した前記被試験物質を遠心分離（１３，０００ｒｐｍ、５分間）した後、上清１００μＬを９６ウェルマイクロプレートに移し、吸光度（波長７３０ｎｍ）を測定した。得られた吸光度の値から、前記被試験物質１ｍＬ中に含まれるポリフェノール量（μｇ）を、検量線に基づき換算した。
なお、前記検量線は、定量用標準溶液として、１１．１μｇ／ｍＬ、３．７０μｇ／ｍＬ、１．２４μｇ／ｍＬ、０．４１２μｇ／ｍＬに調製したリンゴンベリー抽出物（溶液）を使用した。結果を表２−２及び図２に示す。
【００７８】
【表２−２】
2014101312.tif 000006
【００７９】
＜試験例２の結果＞
以上より、レスベラトロール含有植物抽出物の微粉末、及びサクラ抽出物の２成分を含有する実施例の皮膚外用剤を用いることにより、ポリフェノールの経皮吸収が高まることから、レスベラトロールの経皮吸収が高まることが示唆された。
更に、皮膚外用剤中に含まれるポリフェノール量は、実施例と比較例とでほとんど変動がないのに対し（例えば、実施例２の「１．０９倍」参照）、前記被験物質中に含まれるポリフェノール量は、比較例よりも実施例のほうが最大２倍程度まで増加することがわかった（例えば、実施例２の「１．９４倍」参照）。
よって、本発明の皮膚外用剤は、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れ、塗布時に期待されるレスベラトロールの効果を十分に発揮することができることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００８０】
本発明の皮膚外用剤は、レスベラトロールの経皮吸収作用に優れるため、レスベラトロールを含有する軟膏、クリーム、ピーリング剤、乳液、ローション、美容液、パック、リップクリーム、スプレー、リキッドファンデーション、口紅等の皮膚化粧料、整髪料、洗浄剤、クレンジング剤、入浴剤等の医薬部外品、医薬品などに好適に利用することができる。
【図２】
2014101312.tif 000007
【図１】
2014101312.tif 000008