(57)【要約】      （修正有）【課題】腫瘍性疾患の処置にて治療相乗作用を示す医薬組成物の提供。【解決手段】血管内皮増殖因子の阻害剤である、ＶＥＧＦ阻害剤（ＶＥＧＦトラップ）と既知の腫瘍性疾患の処置に有用なトポイソメラーゼ阻害剤であるイリノテカンの組み合わせであって、特に大腸癌または胃癌の処置を対象とする。ＶＥＧＦトラップは、ＶＥＧＦＲ１レセプターのＤ２Ｉｇドメインに融合したＶＥＧＦＲ１のシグナル配列を含む融合タンパク質である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍性疾患の処置にて治療に有用なＶＥＧＦ阻害剤とイリノテカンとを含有する組み合わせ。
【請求項２】
ＶＥＧＦトラップ阻害剤とイリノテカンとを含有する、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項３】
１０重量％から８０重量％のＶＥＧＦトラップを含有することを特徴とする、請求項１および２のいずれかに記載の組み合わせ。
【請求項４】
抗癌治療における同時、別々または連続使用のために組み合わせた調製物としての、腫瘍性疾患の処置におけるＶＥＧＦ阻害剤およびイリノテカンを含有する製品。
【請求項５】
腫瘍性疾患の処置にて治療的に相乗作用を有する、任意の他の化学毒性誘導体を含まないＶＥＧＦトラップ阻害剤とイリノテカンとを含有する組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＶＥＧＦ阻害剤と、腫瘍性疾患の処置に有用なトポイソメラーゼ阻害剤クラスの化学毒性剤との組み合わせに関する。
【０００２】
血管内皮増殖因子の阻害剤であるＶＥＧＦ阻害剤は、大抵の場合、可溶性レセプター、アンチセンス、ＲＮＡアプタマーおよび抗体から選択される生物由来物質である。既知の腫瘍性疾患の処置に有用なトポイソメラーゼ阻害剤は、ＣＰＴ１１を含むカンプトセシン、トポテカンおよびピリドベンゾインドールから選択される。本発明の組み合わせは、特に大腸癌または胃癌の処置を対象とする。
【背景技術】
【０００３】
ＶＥＧＦトラップのキメラタンパク質である、本発明に使用されるのが好ましいＶＥＧＦ阻害剤の説明およびこの調製は、特許出願ＷＯ  ００／７５３１９に記載されている。キメラタンパク質について幾つかの実施形態がある。
【０００４】
ＶＥＧＦトラップに対応する実施形態は、図２４（配列）に記載されているものである。本発明に使用されるＶＥＧＦトラップは、ＶＥＧＦＲ１レセプターのＤ２Ｉｇドメインに融合したＶＥＧＦＲ１のシグナル配列を含む融合タンパク質であり、レセプター自体はＶＥＧＦＲ２レセプターのＤ３Ｉｇドメインに融合し、次いでＩｇＧ１のＦｃドメインに融合しており、ＶＥＧＦＲ１Ｒ２−ＦｃΔＣ１またはＦ１ｔＤ２．Ｆｌｋ１Ｄ３．ＦｃΔＣ１としても知られている。
【０００５】
一般に、ヒトに使用されるＶＥＧＦトラップの用量は、処置されるべき個人に特異な因子に依存し、投与が皮下または静脈内で行なわれる場合は１キロあたり１から１０ミリグラムである。
【０００６】
トポイソメラーゼ阻害剤のうち、一般名ＣＰＴ−１１としても既知のイリノテカンを使用するのが好ましい。
【０００７】
イリノテカンは、一般に投与スキームに依存して１００ｍｇ／ｍ２から５００ｍｇ／ｍ２の用量にて静脈内で使用される。１５０ｍｇ／ｍ２の用量は、例えば毎週のスキームに使用され、２００から４００ｍｇ／ｍ２の用量は、例えば３週間毎のスキームに使用される。
【０００８】
「Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」に公開されたＨ  Ｈｕｒｗｉｔｚ、Ｌ  Ｆｅｈｒｅｎｂａｃｈｅｒ、Ｗ  Ｎｏｖｏｔｎｙ、Ｔ  Ｃａｒｔｗｒｉｇｈｔ、Ｊ  Ｈａｉｎｓｗｏｒｔｈ、Ｗ  Ｈｅｉｍ、Ｊ  Ｂｅｒｌｉｎ、Ａ  Ｂａｒｏｎ、Ｓ  Ｇｒｉｆｆｉｎｇ、Ｅ  Ｈｏｌｍｇｒｅｎ、Ｎ  Ｆｅｒｒａｒａ、Ｇ  Ｆｙｆｅ、Ｂ  Ｒｏｇｅｒｓ、Ｒ  Ｒｏｓｓ、Ｆ  Ｋａｂｂｉｎａｖａｒによる論文では、ベバシズマブと、イリノテカン、５ＦＵおよびロイコボリンとの組み合わせが使用される場合に、ベバシズマブを含有していない同じ組み合わせと比較すると良好な生存率を与える臨床治験について記載している。この臨床治験において、生存率の改善がイリノテカンとベバシズマブとの組み合わせに由来するという証拠はないが、５ＦＵまたはロイコボリンとベバシズマブとの組み合わせに由来するというのが最も適当であり得、または４種の組み合わせに由来する可能性もある。ここで、抗癌剤それぞれがこの治療作用と共に毒性の副作用をもたらすことが知られているので、特にこれらの少なくとも１つの非存在下にて同じ作用を得ることができる場合には、出来る限りこれらの存在を制限することが望ましいことは明らかである。さらに、この論文では、Ｃｏｒｂｅｔｔの意味内で相乗作用については全く証明されていない、即ちこの作用は、使用される組み合わせの元素それぞれを単独で、この最大耐用量にて用いることでは得ることができないものである。
【０００９】
ＶＥＧＦトラップは、ＶＥＧＦＲ−１の第２のＩｇドメインとＶＥＧＦＲ−２の第３のＩｇドメインとの融合により生じた可溶性レセプターであり、これが続いてヒトＩｇＧ１のＦｃ部分に融合する。ＶＥＧＦＲ−１レセプターと同様に、アフリベルセプト（ＶＥＧＦトラップ）は、ｋｄが０．５ピコＭであり、ＶＥＧＦ−Ａに対する非常に高い親和性を有する。ＶＥＧＦトラップとＶＥＧＦ−Ａとの高い親和結合により、細胞表面にてＶＥＧＦがこのレセプターと結合および活性化するのを防止する複合体を形成する。
【００１０】
アバスチン（またはベバシズマブ）と比較して、ＶＥＧＦトラップは可溶性のレセプターであるが、アバスチンはＶＥＧＦ−Ａに対する抗体である。ＶＥＧＦトラップはアバスチンの場合よりＶＥＧＦ−Ａに対する親和性が非常に高く、ＶＥＧＦトラップがＶＥＧＦＲ１−２レセプターの他のリガンド、即ちＰＩＧＦ（胎盤増殖因子）およびＶＥＧＦ−Ｂとも結合するため、異なる選択率プロファイルを有する。さらに、ＶＥＧＦトラップは、アバスチンの場合よりも実質的に小さい分子量を有し（アバスチンが１６０ｋＤａであるのに対し、アフリベルセプトでは１１５ｋＤａ）、これは固体腫瘍への浸透により望ましい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】国際公開第００／７５３１９号
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】「Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ」に公開されたＨ  Ｈｕｒｗｉｔｚ、Ｌ  Ｆｅｈｒｅｎｂａｃｈｅｒ、Ｗ  Ｎｏｖｏｔｎｙ、Ｔ  Ｃａｒｔｗｒｉｇｈｔ、Ｊ  Ｈａｉｎｓｗｏｒｔｈ、Ｗ  Ｈｅｉｍ、Ｊ  Ｂｅｒｌｉｎ、Ａ  Ｂａｒｏｎ、Ｓ  Ｇｒｉｆｆｉｎｇ、Ｅ  Ｈｏｌｍｇｒｅｎ、Ｎ  Ｆｅｒｒａｒａ、Ｇ  Ｆｙｆｅ、Ｂ  Ｒｏｇｅｒｓ、Ｒ  Ｒｏｓｓ、Ｆ  Ｋａｂｂｉｎａｖａｒによる論文
【発明の概要】
【００１３】
今般、ＶＥＧＦ阻害剤の有効性は、ＶＥＧＦ阻害剤とは異なる作用機構を有する抗癌処置での治療に有用な少なくとも１つの物質と組み合わせて投与する場合に顕著に改善できることを見出し、およびこれが本発明の主題である。
【００１４】
さらに、製品の活性は使用される用量に依存するので、ＶＥＧＦ阻害剤または造血性タイプの増殖因子である他の治療活性物質のこれらの類縁体、例えばＧ−ＣＳＦもしくはＧＭ−ＣＳＦ、または特定のインターロイキンとを組み合わせることで、毒性現象を低減することによって、またはこの出現を遅延することによって、高用量で使用でき、活性を増大できる。
【００１５】
より詳細には、本発明は、ＶＥＧＦトラップとイリノテカンとの組み合わせに関する。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明に従う組み合わせの改善された有効性は、治療相乗作用を測定することによって示すことができる。
【００１７】
組み合わせは、最適な用量で使用される構成成分それぞれよりも治療的に優れている場合に、治療相乗作用を示す。
【００１８】
組み合わせの有効性を示すために、検討中の調査にて単離した構成成分それぞれについての最大耐用量と、組み合わせの最大耐用量とを比較する必要がある場合がある。この有効性は、例えばｌｏｇ１０細胞死滅によって定量でき、次の式に従って測定される。
【００１９】
ｌｏｇ１０細胞死滅＝Ｔ−Ｃ（日）／３．３２×Ｔｄ
式中、Ｔ−Ｃは、細胞の増殖における遅延を表し、これは処置される群（Ｔ）の腫瘍およびコントロール群（Ｃ）の腫瘍が所定の値（例えば１ｇ）に到達した日単位の平均時間であり、Ｔｄは、コントロール動物における腫瘍の体積が２倍になるのに必要な日単位の時間を表す［Ｔ．Ｈ．Ｃｏｒｂｅｔｔら、Ｃａｎｃｅｒ，４０，２６６０．２６８０（１９７７）；Ｆ．Ｍ．Ｓｃｈａｂｅｌら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｐａｒｔ  Ｂ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１７，３−５１、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ  Ｉｎｃ．（１９７９）］。製品は、ｌｏｇ１０細胞死滅が０．７以上である場合に活性であると考えられる。製品は、ｌｏｇ１０細胞死滅が２．８を超える場合に非常に活性であると考えられる。
【００２０】
これ自体の最大耐用量で使用される組み合わせでは、各構成成分が一般にこの最大耐用量以下の用量で存在しているが、ｌｏｇ１０細胞死滅が、構成成分単独で投与される場合の最良構成成分のｌｏｇ１０細胞死滅の値より大きく、特にｌｏｇ細胞死滅が少なくとも１である優位性を有する場合に相乗作用を示す。
【００２１】
固体腫瘍に対する組み合わせの有効性は次の方法で実験的に測定できる。
【００２２】
実験に供する動物は、一般にマウスであり、０日目にＨＣＴ１１６ヒト腫瘍フラグメント３０から６０ｍｇを両側に皮下移植する（Ｂｒａｔｔａｉｎ，Ｍ．Ｇ．，Ｆｉｎｅ，Ｗ．Ｄ．，Ｋｈａｌｅｄ，Ｆ．Ｍ．，Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｊ．およびＢｒａｔｔａｉｎ，Ｄ．Ｅ．，Ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ  ｏｆ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ａ  ｈｕｍａｎ  ｃｏｌｏｎｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，１９８１，４１，１７５１−１７５６）。腫瘍をもつ動物を種々の処置およびコントロールに供する前にランダム化する。本発明の腫瘍の処置の場合、腫瘍を４８から２９４ｍｇの大きさに発達させることで、群あたりの腫瘍中央値を１２９から１６２ｍｇとすることができた。ＶＥＧＦトラップ単独の処置を受けた動物は１７．１から２２．７ｇの体重を有し、イリノテカン単独の処置を受けた動物は１７．５から２２．３ｇの体重を有しており、組み合わせの処置を受けた動物は、１７．５から２３．６ｇの体重を有していた。腫瘍を有する動物はまた、腫瘍に対する化学療法の実際の作用から賦形剤の毒性作用を切り離すことができるように賦形剤単独での同じ処理に供した。化学療法は、腫瘍移植後１２日目に開始した。ＶＥＧＦトラップ注射を皮下に行なうのと同時に１日２回イリノテカン注射を静脈内に行なった。これらの注射は、腫瘍の移入後１２、１５および１８日目に行なった。種々の群の動物は、最大体重減少に到達するまで毎週３から４回計量し、次いでこの群を治験の終わりまで１週間に少なくとも１回計量する。
【００２３】
腫瘍は、これが約２ｇに到達するまで、または腫瘍が２ｇに到達する前に死んでしまった場合は動物が死ぬまで、１週間に２または３回測定する。動物は屠殺時に解剖する。
【００２４】
抗腫瘍活性は、記録された種々のパラメータに従って決定される。
【００２５】
例として次の表には、ＶＥＧＦトラップおよびイリノテカンの組み合わせをこれらの最適な用量で用いて得られた結果を示す。
【００２６】
本発明はまた、本発明に従う組み合わせに使用される製品を含有する医薬組成物のキットに関する。
【００２７】
この組み合わせを構成する製品は、組み合わせの最大有効性が得られるような方法で、同時に、別々にまたは続けて投与されてもよい。それぞれの投与は、迅速な総投与から持続注入に及ぶ変更可能な期間を有することができる。
【００２８】
この結果として、本発明の目的のためには、組み合わせは、構成成分の物理的な会合によって得られるものだけでなく、同時または連続であることができる別々の投与が可能なものでもある。
【００２９】
本発明に従う組成物は、非経口で投与できる組成物が好ましい。
【００３０】
非経口投与のための組成物は一般に、場合により使用時に即座に調製できる医薬的に許容される滅菌溶液または懸濁液である。非水性溶液または懸濁液の調製に関して、天然植物油、例えばオリーブ油、ゴマ油もしくは液体パラフィンまたは注射可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチルを使用してもよい。滅菌水溶液は、水中の製品溶液で構成されてもよい。水溶液は、例えば十分な量の塩化ナトリウムまたはグルコースを用いてｐＨが好適に調節され、等張性を生じる限り、静脈内投与に好適である。滅菌は、加熱により、または有害に組成物を変更しないいずれかの他の手段によって行なうことができる。組み合わせはまた、リポソームの形態またはシクロデキストリンまたはポリエチレングリコールのような担体と会合した形態であってもよい。
【００３１】
本発明に従う組み合わせにおいて、構成成分の適用は同時に、別々にまたは連続的であることができ、ＶＥＧＦトラップ誘導体の量は組み合わせの１０重量％から８０重量％を示すのが特に有利であり、この含量は、会合する物質の特質、所望の有効性および処置されるべき癌の特質によって変更できる。
【００３２】
本発明に従う組み合わせは、大腸癌および／または胃癌の処置に特に有用である。特に、構成成分を単独で使用する場合よりも非常に低い用量で構成成分を使用できるという利点を有することができる。
【００３３】
次の実施例は本発明に従う組み合わせを示す。
【実施例】
【００３４】
５ｍＭリン酸塩、５ｍＭクエン酸ナトリウム、１００ｍＭ塩化ナトリウム、ポリソルバート２０および２０％スクロースの緩衝液中に希釈したＶＥＧＦトラップ２５ｍｇを含有するバイアル瓶１ｃｍ３を、皮下投与用に通常の技術に従って調製する。マウスあたりの投与体積は０．１ｍｌである。ＶＥＧＦトラップは、腫瘍移入後１２日、１５日および１８日目に１日１回投与される。
【００３５】
市販の溶液から、イリノテカン２０ｍｇ／ｍｌにて水中の５％デキストロースで希釈される通常の技術に従ってマウスあたり０．３ｍｌを静脈内投与用に調製する。
【００３６】
これらの溶液を好適な希釈後に同時に投与する。
【００３７】
イリノテカンでの処理を、腫瘍の移入後１２、１５および１８日目に１日に２回４時間の間隔で繰り返す。
【００３８】
治験の結果を添付の表に示す。
【００３９】
腫瘍倍加時間＝３．２日
使用される略記：腫瘍の増殖における（Ｔ−Ｃ）遅延、ｌｃｋ＝ｌｏｇ細胞死滅。
【００４０】
毒性は、イリノテカン単独に関しては５２．４、３２．５および２０．２ｍｇ／ｋｇ／注射の用量にて観測されたが、これは５２．４投与量での死および２つの低投与量での２０％を超える体重減少によるものであった。故に、イリノテカンの最大耐用量は１２．５ｍｇ／ｋｇ／注射（総注射用量７５．０ｍｇ／ｋｇ）であった。１２．５ｍｇ／ｋｇ／注射の用量は、ｌｃｋが１．８で活性であることがわかった。
【００４１】
ＶＥＧＦトラップに関しては、製品は試験された全ての投与量にてよく認容され、４０ｍｇ／ｋｇ／投与および２５ｍｇ／ｋｇ／投与にてｌｃｋが１．７で活性であることがわかった。１０ｍｇ／ｋｇ／投与の低用量でも、ｌｃｋが１．３で活性である。２．５ｍｇ／ｋｇ／投与の用量は不活性である。
【００４２】
３２．５ｍｇ／ｋｇ／注射でのイリノテカンの組み合わせに関して、ＶＥＧＦトラップの用量に拘わらず、組み合わせは、毒性に近い１８％体重減少を伴い毒性であることがわかった。低用量のイリノテカン２０．２ｍｇ／ｋｇ／注射とＶＥＧＦトラップ４０ｍｇ／ｋｇとが、最大耐用量であると見なされた。この用量はｌｃｋが３．０であり、非常に活性であると判断された。同じレベルの活性は、低用量のＶＥＧＦトラップ、例えば２５、１０、２．５ｍｇ／ｋｇ／投与（それぞれｌｃｋが２．９、３．０および２．９）を用いても見られた。
【００４３】
４０ｍｇ／ｋｇ／投与のＶＥＧＦトラップと組み合わせた１２．５ｍｇ／ｋｇ／注射でのイリノテカンは、ｌｃｋが２．７で活性である。この抗腫瘍活性は、ＶＥＧＦトラップ２５および１０ｍｇ／ｋｇで維持される（それぞれｌｃｋが２．９および２．７）。ＶＥＧＦトラップ２．５ｍｇ／ｋｇ／投与との組み合わせはｌｃｋが２．０で活性を有する。
【００４４】
結論として、ＶＥＧＦトラップとイリノテカンとの組み合わせの活性は、ｌｏｇ細胞死滅が１．８および１．７（それぞれ１２．５ｍｇ／ｋｇ／注射のイリノテカン、および４０ｍｇ／ｋｇ／注射のＶＥＧＦトラップに関する。）を示すような単独使用される各化合物の活性と比較した場合にｌｏｇ細胞死滅が１超過に対応する組み合わせの最大耐用量にて、ｌｏｇ細胞死滅が３．０の相乗作用を示す。抗腫瘍活性は、組み合わせの最大耐用量未満である幾つかの用量レベルにて維持される。
【００４５】
【表１】
2014240422.tif 000002
【００４６】
【表２】
2014240422.tif 000003