(57)【要約】      （修正有）【課題】新規ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）モジュレータの提供。【解決手段】特定の１，３−ジオキサン誘導体。好ましくは、式ＸＩで表される化合物。2014240409.tif 000049［ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、トリフロオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシル及びＨ；ＹはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、トリフロオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシル、−Ｃ（Ｏ）−糖類及びＨ；Ｒｄは−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐か若しくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐か若しくは線状、好ましくは線状）、糖類又はＯＨ］【効果】当該化合物は、メタボリックシンドローム、肥満、インスリン抵抗性、糖尿病、異常脂質血症、自己免疫疾患、乾癬、アトピー性皮膚炎、喘息及び潰瘍性大腸炎、癌等に有効である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書中に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本願は、２００７年１１月２１日に出願された米国仮特許出願第６０／９８９，８０５号、２００７年１１月２１日に出願された米国仮特許出願第６０／９８９，８０６号、２００７年１１月２１日に出願された米国仮特許出願第６０／９８９，８０８号、および２００７年１月１８日に出願されたＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０７／６０７２４号の利益を請求し、これらの全体は、本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、ＰＰＡＲ活性を調節することができる２，４−ジフェニル−１，３−ジオキサン（本明細書では「ＰＰＡＲモジュレータ」とも呼ぶ）の特定の群に関する。本発明の置換１，３−ジオキサンは、ＰＰＡＲ調節に依存する疾病または状態、例えば、糖尿病、癌、炎症、神経変性疾患および感染の治療に有用である。本発明のジオキサンは、トロンボキサン受容体（トロンボキサンプロスタノイド受容体、すなわち、ＴＰ受容体）の活性の調節、特にその活性への拮抗、および／またはトロンボキサンシンターゼの阻害にも有用である。Ｔｈｅ  ＩＵＰＨＡＲ  ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  １９９８の２３９頁およびＴｈｅ  Ｓｉｇｍａ−ＲＢＩ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，２００６の１３８−１４０頁に記載されている規約に従って、本明細書では、トロンボキサン受容体、トロンボキサンＡ２受容体またはプロスタグランジンＨ２受容体を、それぞれ、「ＴＰ受容体」と呼ぶ。本発明の好ましい化合物を、ＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよびトロンボキサンシンターゼ（ＴＳ）阻害剤とも呼ぶ。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）は、核ホルモン受容体である。ＰＰＡＲ受容体は、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲとして公知）とのヘテロ二量体の形で、ペルオキシソーム増殖因子応答要素（ＰＰＲＥ）として公知のＤＮＡ配列の要素に結合することによって転写を活性化する。ヒトＰＰＡＲの３つのサブタイプが同定されており、以下に記載される：ＰＰＡＲ−アルファ、ＰＰＡＲ−ガンマおよびＰＰＡＲ−デルタ（またはＮＵＣＩ）。ＰＰＡＲ−アルファは、主として肝臓において発現されるが、ＰＰＡＲ−デルタは至るところに存在する。ＰＰＡＲガンマは、脂肪細胞分化の調整に関係し、脂肪組織において大いに発現される。それはまた、全身の脂質の恒常性に関しても重要な役割を果たす。糖尿病の治療に利用されているチアゾリジンジオンを含めて、ＰＰＡＲの活性を調節する多数の化合物が同定されている。
【０００４】
ＰＰＡＲ−ガンマサブタイプのＤＮＡ配列は、非特許文献１に記載されている。フィブラートおよび脂肪酸をはじめとするペルオキシソーム増殖因子は、ＰＰＡＲの転写活性を活性化する。
【０００５】
ＰＰＡＲが、これらの核受容体を発現する細胞に関連した多彩な疾病または病的状態に密接に関係していることを例証する非常に多くの例が文献に提供されている。より具体的には、ＰＰＡＲは、血糖、コレステロールおよびトリグリセリドレベルを低下させるための方法において薬物ターゲットとして有用であり、従って、肥満およびアテローム性動脈硬化症（非特許文献２）をはじめとするＸ症候群（「メタボリックシンドローム」とも呼ばれる）（特許文献１、特許文献２、特許文献３；非特許文献３も参照）に関連したインスリン抵抗性、異常脂質血症および他の疾患、冠動脈疾患および一定の他の心血管疾患の治療および／または予防のために調査されている。さらに、ＰＰＡＲは、一定の炎症性疾患、例えば、皮膚疾患（非特許文献４）、胃腸病（特許文献４）または腎臓病（腎炎、腎硬化症、ネフローゼ症候群および高血圧性腎硬化症を含む）の治療のための潜在的なターゲットであることが明らかになった。同様に、ＰＰＡＲは、神経疾患（非特許文献５）もしくは痴呆において認知機能を改善するために、乾癬、多嚢胞卵巣症候群（ＰＣＯＳ）を治療するために、または骨量減少、例えば骨粗しょう症（例えば、特許文献５もしくは特許文献６参照）を予防および治療するために有用である。
【０００６】
従って、ＰＰＡＲは、治療用化合物の開発のための刺激的なターゲットである。疾病または病的状態を治療および／または予防するための様々な方法に関連して観察される反応は、期待の持てるものである。例えば、チアゾリジンジオン、ＴＺＤ、薬物のクラス（例えば、ロシグリタゾンまたはピオグリタゾン）は、２型糖尿病を有する患者におけるインスリン感受性の改善に重要な役割を明白に果たす（非特許文献６参照）が、それらは、非常に多数の望ましくない副作用（例えば、体重増加、高血圧、心肥大症、血液希釈、肝毒性および浮腫；非特許文献７；非特許文献８；非特許文献９；非特許文献１０；非特許文献１１および非特許文献１２参照）の発生のため、十分に満足のいく治療薬でない。それ故、ＰＰＡＲ核受容体を発現する細胞タイプに関連した疾病または病的状態の治療および／または予防が可能である新規の改善された生成物および／または新規の方法を特定することが望ましい。より具体的には、ＴＺＤ誘導体で観察される副作用の大部分は、前記化合物の完全アゴニスト特性に起因し、従って、必ずしも完全アゴニストでない新規化合物を特定することが望ましい。
【０００７】
トロンボキサン受容体は、血小板凝集に関係しており、血管収縮ならびに気管支および気管平滑筋収縮に関与している。特許文献７；特許文献８および特許文献９は、一定の４−フェニル−１，３−ジオキサン−５−イルアルケン酸誘導体の名を挙げ、トロンボキサン受容体アンタゴニストとしてのそれらの潜在的有用性を記載している。トロンボキサン受容体および／またはペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）を調節するためのならびにそれらに関連した疾病を治療および予防するためのさらなる化合物が必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第９７／２５０４２号パンフレット
【特許文献２】国際公開第９７／１０８１３号パンフレット
【特許文献３】国際公開第９７／２８１４９号パンフレット
【特許文献４】国際公開第９８／４３０８１号パンフレット
【特許文献５】米国特許第５，９８１，５８６号明細書
【特許文献６】米国特許第６，２９１，４９６号明細書
【特許文献７】欧州特許出願公開第９４２３９号明細書
【特許文献８】欧州特許出願公開第０２６６９８０号明細書
【特許文献９】米国特許第４，８９５，９６２号明細書
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｅｌｂｒｅｃｈｔら、ＢＢＲＣ  ２２４；４３１−４３７（１９９６）
【非特許文献２】Ｄｕｅｚら，２００１，Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｉｓｋ，８，１８５−１８６
【非特許文献３】Ｋａｐｌａｎら，２００１，Ｊ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｒｉｓｋ，８，２１１−７
【非特許文献４】Ｓｍｉｔｈら、２００１，Ｊ．Ｃｕｔａｎ．Ｍｅｄ．Ｓｕｒｇ．，５，２３１−４３
【非特許文献５】Ｌａｎｄｒｅｔｈ  ａｎｄ  Ｈｅｎｅｋａ，２００１，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ  Ａｇｉｎｇ，２２，９３７−４４
【非特許文献６】Ｃｈｅｎｇ  ｌａｉ  ａｎｄ  Ｌｅｖｉｎｅ，２０００，Ｈｅａｒｔ  Ｄｉｓ．，２，３２６−３３３
【非特許文献７】Ｈａｓｋｉｎｓら，２００１，Ａｒｃｈ  Ｔｏｘｉｃｏｌ．，７５，４２５−４３８
【非特許文献８】Ｙａｍａｍｏｔｏら，２００１，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．，７０，４７１−４８２
【非特許文献９】Ｓｃｈｅｅｎ，２００１，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｍｅｔａｂ．，２７，３０５−３１３
【非特許文献１０】Ｇａｌｅ，２００１，Ｌａｎｃｅｔ，３５７，１８７０−１８７５
【非特許文献１１】Ｆｏｒｍａｎら，２０００，Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．，１３２，１１８−１２１
【非特許文献１２】Ａｌ  Ｓａｌｍａｎら，２０００，Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｒｎ．Ｍｅｄ．，１３２，１２１−１２４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、ＰＰＡＲ（特に、ＰＰＡＲガンマ）、ＴＰ受容体およびトロンボキサンシンターゼ（ＴＳ）のうちの１つ以上、好ましくは３つすべての活性を調節することができる化合物に関する。加えて、本発明は、本明細書において下に明記する多数の臨床条件の治療におけるこれらの化合物の様々な使用に関する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｘの化合物：
【化２８】
2014240409.tif 000002
［式中、
Ａは、１または２つの二重結合を任意に含有する、炭素数３から７の分岐または線状炭素鎖であり；および
Ｗは、ＣＯＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−  ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＯＳＯ３Ｈ、芳香族基（ＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ２で任意に置換されている）または−Ｃ（Ｏ）−Ｒｄであり、ここで、
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）または糖類であり；および
Ａｒは、フェニル、またはＯ−Ｒｃで任意に置換されている５もしくは６員複素環式芳香族基であり、ここで、
Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類または−Ｈであり；および
Ｒｂは、２〜６Ｃアルケニル、３個以下のハロゲノ置換基で任意に置換されている１〜８Ｃアルキル、糖類、ペンタフルオロフェニル、アリールまたはアリール（１〜４Ｃ）アルキルであり、これらのうちの後の２つは、ハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分岐または線状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフロオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび炭素原子数２から４のオキサポリメチレンから選択される５個以下の置換基を任意に有することがある］。
（項目２）
Ａが、１つのシス二重結合を含有する炭素数５の線状炭素鎖である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｗが、−Ｃ（Ｏ）Ｒｄであり、Ｒｄが、−ＯＨ、グリコシルまたは−Ｏ−ＣＨ３である、前記項目のいずれかに記載の化合物。
（項目４）
Ａｒが、そのオルト位において−Ｏ−Ｒｃで置換されているフェニルであり、Ｒｃが、メトキシ、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３、または−Ｈである、前記項目のいずれかに記載の化合物。（項目５）
Ｒｂが、そのオルト位においてハロゲノで置換されているフェニルである、前記項目のいずれかに記載の化合物。
（項目６）
式ＸＩの化合物：
【化２９】
2014240409.tif 000003
［式中、
Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシルおよび−Ｈから成る群より選択され；ならびに
Ｙは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシル、−Ｃ（Ｏ）−糖類および−Ｈから成る群より選択され；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、糖類または−ＯＨである］。
（項目７）
Ｘが、ハロゲノから成る群より選択される、項目６に記載の化合物。
（項目８）
Ｘが、クロロである、項目７に記載の化合物。
（項目９）
Ｘが、オルト位にある、項目７および８のいずれかに記載の化合物。
（項目１０）
Ｙが、−ＯＨ、メトキシおよび−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３から成る群より選択される、項目６から９のいずれかに記載の化合物。
（項目１１）
Ｙが、オルト位にある、項目１０に記載の化合物。
（項目１２）
Ｒｄが、−ＯＨまたは−Ｏ−ＣＨ３である、項目６から１１のいずれかに記載の化合物。（項目１３）
式ＸＩＩＩの化合物：
【化３０】
2014240409.tif 000004
［式中、
Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、任意に置換されているフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから成る群より選択され；ならびに
Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類または−Ｈであり；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、グリコシルまたは−ＯＨである］。
（項目１４）
Ｘが、ハロゲノである、項目１３に記載の化合物。
（項目１５）
Ｘが、クロロである、項目１４に記載の化合物。
（項目１６）
Ｘが、オルト位にある、項目１４および１５のいずれかに記載の化合物。
（項目１７）
Ｒｃが、メトキシ、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３または−Ｈから成る群より選択される、項目１３から１６のいずれかに記載の化合物。
（項目１８）
−Ｏ−Ｒｃが、オルト位にある、項目１７に記載の化合物。
（項目１９）
Ｒｄが、−Ｈまたは−Ｏ−ＣＨ３である、項目１３から１８のいずれかに記載の化合物。（項目２０）
前記糖類が、グリコシル部分である、１、２、３、６、７、８、９、１３、１４、１５および１６のいずれかに記載の化合物。
（項目２１）
前記化合物が、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸である、項目１に記載の化合物。
（項目２２）
前記化合物が、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン．エン酸である、項目１に記載の化合物。
（項目２３）
前記化合物が、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−アセトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン．エン酸である、項目１に記載の化合物。
（項目２４）
前記化合物が、メチル−（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エノエートである、項目１に記載の化合物。
（項目２５）
薬剤として使用するための、前記項目のいずれかに記載の化合物。
（項目２６）
ＰＰＡＲ−ガンマ反応性臨床状態の治療の必要がある個体において該状態の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目２７）
インスリン抵抗性の治療の必要がある個体においてインスリン抵抗性の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目２８）
糖尿病の治療の必要がある個体において糖尿病の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目２９）
肥満個体において糖尿病の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３０）
ＰＰＡＲ−ガンマによって媒介される慢性炎症性疾患の治療の必要がある個体において該疾患の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３１）
炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎またはクローン病の治療の必要がある個体において炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎またはクローン病の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３２）
関節炎、特に関節リウマチ、多発性関節炎または喘息の治療の必要がある個体において関節炎、特に関節リウマチ、多発性関節炎または喘息の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３３）
眼の炎症またはドライアイ疾患の治療の必要がある個体において眼の炎症またはドライアイ疾患の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３４）
皮膚疾患、特に乾癬、の治療の必要がある個体において皮膚疾患、特に乾癬、の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３５）
高脂血症の治療の必要がある個体において高脂血症の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３６）
癌の治療の必要がある個体において癌の治療のための薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目３７）
前記癌が、脂肪肉腫、骨肉腫、前立腺癌、子宮頚癌、乳癌、多発性骨髄腫、膵臓癌、神経芽腫または膀胱癌である、項目３６に記載の化合物。
（項目３８）
ＰＰＡＲ媒介疾患または状態である対象における臨床状態の治療または予防に有用な薬剤組成物を調製するための、項目１〜２４のいずれかにおいて定義した化合物の使用。
（項目３９）
糖尿病、癌；炎症、ＡＩＤＳ、メタボリックシンドローム、肥満、前糖尿病、高血圧症および異常脂質血症から成る群より選択される臨床状態の治療または予防用の薬剤を調製するための、項目３８に記載の化合物の使用。
（項目４０）
ＰＰＡＲ媒介疾患または状態である臨床状態の治療または予防の必要がある個体において該状態を治療または予防する方法であって、項目１から２４のいずれかに記載の化合物の治療有効量を該個体に投与することを含む方法。
（項目４１）
前記臨床状態が、糖尿病、癌；炎症；ＡＩＤＳ、メタボリックシンドローム、肥満、前糖尿病、高血圧および異常脂質血症から成る群より選択される、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
項目１から２４のいずれかに記載の化合物を活性成分として含む、ＰＰＡＲ媒介疾患または状態である臨床状態を治療または予防するための医薬組成物。
（項目４３）
前記臨床状態が、糖尿病、癌；炎症；ＡＩＤＳ、メタボリックシンドローム、肥満、前糖尿病、高血圧および異常脂質血症から成る群より選択される、項目４２に記載の医薬組成物。
（項目４４）
ＴＰに関連した臨床状態の治療または予防の必要がある個体においてＴＰに関連した臨床状態の治療または予防用の薬剤として使用するための、項目１から２４のいずれかに記載の化合物。
（項目４５）
前記薬剤が、前記臨床状態を治療するためのものである、項目４４に記載の化合物。
（項目４６）
前記臨床状態が、心筋梗塞、血栓症、血栓性疾患、肺高血圧症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、肺塞栓症、血栓形成、ステント誘発血栓形成、ステント誘発過形成、ステント誘導再狭窄、過形成、敗血性ショック、子癇前症、喘息、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移から成る群より選択される、項目４４および４５のいずれかに記載の化合物。
（項目４７）
前記臨床状態が、血栓症、肺高血圧症、糖尿病性腎症、網膜症、末梢動脈疾患、末梢動脈疾患、下肢循環、血栓形成、ステント誘発再狭窄、ステント誘発血栓形成、ステント誘発過形成、過形成、敗血性ショック、子癇前症、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移から成る群より選択される、項目４４から４６のいずれかに記載の化合物。
（項目４８）
前記臨床状態が、血栓症、肺高血圧症、糖尿病性腎症、網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、血栓形成および過形成から成る群より選択される、項目４４から４７のいずれかに記載の化合物。
（項目４９）
前記個体が、Ｉ型糖尿病およびＩＩ型糖尿病から選択される糖尿病に罹患している、項目４４から４８のいずれかに記載の化合物。
（項目５０）
ＴＰに関連した臨床状態の必要がある個体において該状態を治療または予防する方法であって、該個体へ項目１から２４のいずれかに記載の化合物の治療有効量を投与することを含む方法。
（項目５１）
前記臨床状態が、心筋梗塞、血栓症、血栓性疾患、肺高血圧症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、肺塞栓症、血栓形成、ステント誘発血栓形成、ステント誘発過形成、ステント誘導再狭窄、過形成、敗血性ショック、子癇前症、喘息、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移から成る群より選択される、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
項目１から２４のいずれかに記載の化合物を活性成分として含む、ＴＰに関連した臨床状態を治療または予防する必要がある個体において該状態を治療または予防するための医薬組成物。
（項目５３）
前記臨床状態が、心筋梗塞、血栓症、血栓性疾患、肺高血圧症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、肺塞栓症、血栓形成、ステント誘発血栓形成、ステント誘発過形成、ステント誘導再狭窄、敗血性ショック、子癇前症、喘息、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移から成る群より選択される、項目５２に記載の組成物。
（項目５４）
項目１から２４のいずれかに記載の化合物の遅延放出、調節放出、持続放出または制御放出のための医薬組成物。
（項目５５）
少なくとも１つの放出速度モジュレータを含む、項目５４に記載の組成物。
（項目５６）
前記放出速度モジュレータが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロース、ポリエチレンオキシド、クレモフォール、トウモロコシ油グリセリドおよびプロピレングリコール、キサンタンガム、カルボマー、アンモニオメタクリレートコポリマー、水素化ヒマシ油、カルナバワックス、パラフィンワックス、酢酸フタル酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸コポリマーおよびその混合物、ならびにクレモフォール、トウモロコシ油グリセリドおよびプロピレングリコール
から成る群より選択される、項目５５に記載の組成物。
（項目５７）
式ＸＩＶの結晶性質化合物：
【化３１】
2014240409.tif 000005
［式中、
Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、任意に置換されているフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから選択され；ならびに
Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類または−Ｈであり；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、グリコシルまたは−ＯＨであり；
Ｚ＋は、対イオンである］。
（項目５８）
Ｘが、ハロゲノである、項目５７に記載の結晶性化合物。
（項目５９）
Ｘが、クロロである、項目５８に記載の結晶性化合物。
（項目６０）
Ｘが、オルト位にある、項目５８および５９のいずれかに記載の結晶性化合物。
（項目６１）
Ｚ＋が、Ｍｅ３ＣＮＨ３＋である、項目５７に記載の結晶性化合物。
（項目６２）
前記塩が、溶媒和されておらず、銅放射線源から得たとき２θスケールで１１±０．２°および２０．９±０．２°から成る群より選択される少なくとも１つのピークを伴うＸ線粉末回折パターンを有する、項目５７に記載の結晶性化合物。
（項目６３）
式ＸＩＶの化合物：
【化３２】
2014240409.tif 000006
［式中、
Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、任意に置換されているフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから選択され；ならびに
Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類または−Ｈであり；
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、グリコシルまたは−ＯＨであり；
Ｚ＋は、ｔ−ブチルアミンである］
を含み；ならびに
ｔ−ブチルメチルエーテル、イソプロピルアルコール、ニトロメタン、およびそれらの組み合わせから成る群より選択される溶媒を含む、結晶溶媒和物。
（項目６４）
前記溶媒が、イソプロピルアルコールである、項目６４に記載の結晶溶媒和物。
（項目６５）
塩１モルあたり１モル未満のイソプロピルアルコールを含む、項目６４に記載の結晶溶媒和物。
（項目６６）
銅放射線源から得たとき２θスケールで１１±０．２°および２０．９±０．２°にピークを伴うＸ線粉末回折パターンを特徴とする、項目６５に記載の結晶溶媒和物。
【００１１】
１つの態様において、本発明は、式Ｘの化合物：
【００１２】
【化１】
2014240409.tif 000007
に関し、この式中、
Ａは、１または２つの二重結合を任意に含有する、炭素数３から７の分岐または線状炭素鎖であり；および
Ｗは、ＣＯＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＯＳＯ３Ｈ、芳香族基（ＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ２で任意に置換されている）または−Ｃ（Ｏ）−Ｒｄであり、ここで、Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、糖類、または−ＯＨであり；および
Ａｒは、フェニル、またはＯ−Ｒｃで任意に置換されている５もしくは６員複素環式芳香族基であり、ここで、Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類または−Ｈであり；および
Ｒｂは、２〜６Ｃのアルケニル、３個以下のハロゲノ置換基で任意に置換されている１〜８Ｃのアルキル、糖類、ペンタフルオロフェニル、アリールまたはアリール（１〜４Ｃ）アルキルであり、これらのうちの後の２つは、ハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分岐または線状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフロオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび炭素原子数２から４のオキサポリメチレンから選択される５個以下の置換基を任意に有することがある。
【００１３】
加えて、本発明は、式ＸＩの化合物：
【００１４】
【化２】
2014240409.tif 000008
に関し、この式中、
Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシルおよび−Ｈから成る群より選択され；ならびに
Ｙは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシル、−Ｃ（Ｏ）−糖類および−Ｈから成る群より選択され；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、糖類または−ＯＨである。
【００１５】
本発明は、さらに、式ＸＩＩＩの化合物：
【００１６】
【化３】
2014240409.tif 000009
に関し、この式中、
Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、任意に置換されているフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから成る群より選択され；ならびに
Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類または−Ｈであり；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、グリコシルまたは−ＯＨである。
【００１７】
これらの化合物は、例えば、メタボリックシンドローム、肥満、インスリン抵抗性、前糖尿病、糖尿病、異常脂質血症、自己免疫疾患、例えば多発性硬化症、乾癬、アトピー性皮膚炎、喘息および潰瘍性大腸炎、癌、例えば脂肪肉腫、神経芽腫、膀胱癌、乳癌、大腸癌、肺癌、膵臓癌および前立腺癌；炎症、感染、ＡＩＤＳおよび創傷治癒から成る群より選択される臨床状態の治療または予防において有用であり得る。
【００１８】
加えて、これらの化合物は、例えば、心筋梗塞、血栓症、血栓性疾患、肺高血圧症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、肺塞栓症、血栓形成、ステント誘発血栓形成、ステント誘導再狭窄、過形成、ステント誘発過形成、敗血性ショック、子癇前症、喘息、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移から成る群より選択される臨床状態の治療および予防に有用であり得る。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】完全アゴニストおよび部分アゴニスト、それぞれによるＰＰＡＲ活性化のモデルを図示する。
【図２】ＰＰＡＲ−デルタ、ＰＰＡＲ−アルファおよびＲｘＲと比較して、ロシグリタゾンおよび（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸によるＰＰＡＲガンマの選択的活性化を図示する。
【図３】ロシグリタゾンおよび（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸による完全長ＰＰＡＲ−ガンマの活性化を図示する。
【図４】（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸が、完全長ＰＰＡＲ−デルタのトランス活性化に対して効果を有さないことを図示する。
【図５】部分ＰＰＡＲ−ガンマ競合アッセイの結果を図示する。
【図６】ＰＰＡＲ−ガンマリガンド置換アッセイの結果を図示する。
【図７】グルコース取込みアッセイの結果を図示する。
【図８】化学式ＩＩ〜Ｖを図示する。
【図９】化学式ＶＩ〜ＶＩＩＩを図示する。
【図１０】化学反応スキームＩを図示する。
【図１１】（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸のＴＢＭＥ溶媒和物の１Ｈ  ＮＭＲを図示する。
【図１２】（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸のＴＢＭＥ溶媒和物のＸＲＰＤ回折図を図示する。
【図１３】（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸のエルブミン塩の１Ｈ  ＮＭＲを図示する。
【図１４】（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸のエルブミン塩のＸＲＰＤ回折図を図示する。
【図１５】（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸のエルブミン塩のＩＰＡ溶媒和物のＸＲＰＤ回折図を図示する。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
定義
一般に、本明細書において用いる用語は、製薬学、生物学および化学分野の通常の当業者が本発明を理解する上で利用するであろう標準的な定義に従うであろう。以下の用語は、与える意味を有し、ならびに他の用語を本明細書中で規定することもある。
【００２１】
アルキル：用語「アルキル」は、指示された数、一般には１から２２、の炭素原子を有する一価の飽和脂肪族炭化水素ラジカルを指す。例えば、「１〜８Ｃアルキル」または「炭素数１〜８のアルキル」または「アルク（Ａｌｋ）１〜８」は、その構造の中に１から８個の炭素を含有する任意のアルキル基を指すこととなる。アルキルは、直鎖（すなわち線状）である場合もあり、または分岐鎖である場合もある。低級アルキルは、炭素数１〜６のアルキルを指す。低級アルキルラジカルの代表例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、イソペンチル、アミル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｓ−アミル、ｔ−ペンチル、２−エチルブチル、２，３−ジメチルブチルなどが挙げられる。高級アルキルは、炭素数７以上のアルキルを指す。これらとしては、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ｎ−ドデシル、ｎ−テトラデシル、ｎ−ヘキサデシル、ｎ−オクタデシル、ｎ−エイコシルなどに加えて分岐したそれらの変型が挙げられる。炭素数３から７の線状炭素鎖は、分枝上に存する炭素を一切含まない鎖長を指すこととなる。このラジカルは、任意に置換されていることがある。
【００２２】
アルケニル：用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有し、且つ、指示された数の炭素原子を有する、一価の脂肪族炭化水素ラジカルを指す。例えば、「Ｃ２〜６アルケニル」または「炭素数１〜６のアルケニル」または「アルケニル１〜６」は、その構造の中に１から６個の炭素原子を含有するアルケニル基を指すこととなる。アルケニルは、直鎖（すなわち、線状）である場合もあり、または分岐鎖である場合もある。低級アルケニルは、炭素数１〜６のアルケニルを指す。低級アルケニルラジカルの代表例としては、エテニル、１−プロペニル、１−ブテニル、１−ペンテニル、１−ヘキセニル、イソプロペニル、イソブテニルなどが挙げられる。高級アルケニルは、炭素数７以上のアルケニルを指す。これらとしては、１−ヘプテニル、１−オクテニル、１−ノネニル、１−デセニル、１−ドデセニル、１−テトラデセニル、１−ヘキサデセニル、１−オクタデセニル、１−エイコセニルなどに加えて分岐したそれらの変型が挙げられる。このラジカルは、任意に置換されていることがある。
【００２３】
アルコキシ：用語「アルコキシ」は、式ＲＯ−−の一価ラジカルを指し、ここで、Ｒは、本明細書中で定義するとおりのアルキルである。低級アルコキシは、炭素原子数１〜６のアルコキシ、すなわち（１〜６）アルコキシを指す。代表的な低級アルコキシラジカルとしては、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｎ−ペンチルオキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、イソプロポキシ、イソブトキシ、イソペンチルオキシ、アミルオキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｔ−ペンチルオキシなどが挙げられる。このラジカルは、任意に置換されていることがある。
【００２４】
アリール：本明細書において用いる場合、用語「アリール」は、単一の環または１つ以上の縮合環（そのうち少なくとも１つの環が実際は芳香族環である）から成る、５から１５個の炭素原子を含有する一価芳香族炭素環式ラジカルを意味し、これは、特に他の指示がない限り、ヒドロキシ、チオ、シアノ、アルキル、アルコキシ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、オキソ、ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、およびジアルキルアミノアルキル、チオアルキル、アルキルスルホニル、アリールスルフィニル、アルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、カルバモイル、アルキルカルバモイルおよびジアルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノから独立して選択される１個以上、好ましくは１個または３個の置換基で任意に置換されていることがある。あるいは、アリール環の２個の隣接する原子が、メチレンジオキシまたはエチレンジオキシ基で置換されていることがある。従って、二環式アリール置換基がヘテロシクリルまたはヘテロアリール環と縮合していることもあるが、二環式アリール置換基の結合点は、炭素環式芳香族環上にある。アリールラジカルの例としては、フェニル、ナフチル、ベンジル、ビフェニル、フラニル、ピリジニル、インダニル、アントラキノリル、テトラヒドロナフチル、３，４−メチレンジオキシフェニル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−７−イル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−７−イル、１，３ジオキソランラジカル、安息香酸ラジカル、フラン−２−カルボン酸ラジカル、２−（イソオキサゾル−５−イル）酢酸ラジカル、３−ヒドロキシ−２−メチルピリジン−４−カルボン酸ラジカルなどが挙げられる。
【００２５】
ハロ：「ハロ」置換基は、クロロ、ブロモ、ヨードおよびフルオロから選択される一価ハロゲンラジカルである。「ハロゲン化」化合物は、１個以上のハロ置換基で置換されているものである。
【００２６】
フェニル：「フェニル」は、ベンゼン環から水素を除去することによって形成されるラジカルである。フェニルは、任意に置換されていることがある。
【００２７】
フェノキシ：「フェノキシ」基は、式ＲＯ−のラジカルであり、ここで、Ｒは、フェニルラジカルである。
【００２８】
ベンジル：「ベンジル」基は、式Ｒ−ＣＨ２−のラジカルであり、ここで、Ｒは、フェニルラジカルである。
【００２９】
ベンジルオキシ：「ベンジルオキシ」基は、式ＲＯ−のラジカルであり、ここで、Ｒは、ベンジルラジカルである。
【００３０】
複素環：「複素環」または「複素環エンティティー」は、炭素および少なくとも１個の他の元素、一般には窒素、酸素または硫黄を含有する５または６員の閉じた環の一価ラジカルであり、ならびに完全に飽和されている場合もあり、部分的に飽和されている場合もあり、または不飽和（すなわち、実際は芳香族）である場合もある。一般に、複素環は、２個以下のヘテロ原子を含有するであろう。ヘテロ原子を１個だけ有する不飽和５員複素環の代表例としては、２−または３−ピロリル、２−または３−フラニル、および２−または３−チオフェニルが挙げられる。対応する部分飽和または完全飽和ラジカルとしては、３−ピロリン−２−イル、２−または３−ピロリンジニル、２−または３−テトラヒドロフラニル、および２−または３−テトラヒドロチオフェニルが挙げられる。２個のヘテロ原子を有する代表的な不飽和５員複素環式ラジカルとしては、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリルなどが挙げられる。対応する完全飽和及び部分飽和ラジカルも挙げられる。ヘテロ原子を１個だけ有する不飽和６員複素環の代表例としては、２−、３−または４−ピリジニル、２Ｈ−ピラニル、および４Ｈ−ピラニルが挙げられる。対応する部分飽和または完全飽和ラジカルとしては、２−、３−または４−ピペリジニル、２−、３−または４−テトラヒドロピラニルなどが挙げられる。２個のヘテロ原子を有する代表的な不飽和６員複素環式ラジカルとしては、３−または４−ピリダジニル、２−、４−または５−ピリミジニル、２−ピラジニル、モルホリノなどが挙げられる。対応する完全飽和および部分飽和ラジカル、例えば２−ピペラジン、も挙げられる。複素環式ラジカルは、その複素環内の利用可能な炭素原子またはヘテロ原子によってそのエンティティーに直接結合されるか、メチレンまたはエチレンなどのアルキレンのようなリンカーによって結合される。複素環は、アリール基と同じように任意に置換されていることがある。
【００３１】
任意に置換されている：ラジカルを「任意に置換されている」と呼ぶ場合、それは、そのラジカルが非置換であること、またはそのラジカルの少なくとも１個のＨが除去され、別の置換基がその場所に挿入されていることを意味する。前記ラジカルは、本発明の範囲内に入る化合物の調製に有意に干渉しない、およびそれらの化合物の生物活性に有意に悪影響を及ぼさない位置で、置換基で任意に置換されていることがある。前記ラジカルは、ハロ、低級アルコキシ、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ハロ低級アルキル、ハロ低級アルコキシ、ヒドロキシカルボニル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキルカルボニルオキシおよび低級アルキルカルボニルアミノから独立して選択される１、２、３、４もしくは５個の置換基で、または上で言及したように、任意に置換されている。
【００３２】
用語「ヒドロキシカルボニル」は、式−Ｃ（Ｏ）ＯＨを有する一価ラジカルである。
【００３３】
用語「低級アルコキシカルボニル」は、式−Ｃ（Ｏ）Ｏアルクを有する一価ラジカルであり、ここで、アルクは、低級アルキルである。
【００３４】
用語「低級アルキルカルボキシルオキシ」は、式−ＯＣ（Ｏ）アルクを有する一価ラジカルであり、ここで、アルクは、低級アルキルである。
【００３５】
本明細書において用いる場合、用語「糖」または「糖類」は、交換可能に用いており、ならびに単糖類、二糖類または多糖類を意味する。適する単糖類としては、ペントース、ヘキソースまたはヘプトース残基が挙げられる。ペントースの非限定的な例としては、アラビノース、リボース、リブロース、キシロース、リキソースおよびキシルロースが挙げられる。ヘキソースの非限定的な例としては、グルコース、ガラクトース、フラクトース、フコース、マンノース、アロース、アルトロース、タロース、イドース、プシコース、ソルボース、ラムノースおよびタガトースが挙げられる。ヘプトースの非限定的な例としては、マンノヘプツロースおよびセドヘプツロースが挙げられる。糖部分は、アミドまたはエステル結合を形成することができるその糖環のいずれの位置で化合物に連結していてもよい。好ましい糖類は、ベータ−グリコシル糖類である。
【００３６】
ＰＰＡＲ調節は、自然な状況、すなわち、リガンド不在の状態でのターゲット遺伝子のＰＰＡＲ依存性転写の基礎レベルを参照することにより定義され、この場合、ＰＰＡＲ活性の調節は、ＰＰＡＲ活性を調節することができる化合物が存在する状態での前記基礎転写レベルの低下または増加によって表される。一般に、前記転写の増加は、ＰＰＡＲ活性の強化に随伴し、アクチベータまたはアゴニストという名で呼ばれている化合物に関係する。逆に、前記転写の減少は、ＰＰＡＲ活性の阻害に随伴し、阻害剤またはアンタゴニストという名で呼ばれている化合物に関係する。部分アゴニストは、ターゲット遺伝子のあるサブセットのＰＰＡＲ依存性転写を生じさせるが、他のＰＰＡＲターゲット遺伝子に対して効果がない化合物である。部分アゴニストは、生化学的または生理学的視点から考察することができる。部分アゴニストの生化学的視点は、完全アゴニストに競り勝つことができ、完全アゴニストに比べて低い転写活性レベルを有する化合物である。部分アゴニストの生理的視点は、遺伝子の異なるサブセットの活性化に関する（一部のターゲット遺伝子を完全に活性化したとしても、他のＰＰＡＲターゲット遺伝子を活性化しない）。これは、完全アゴニストの一部の生理作用だけをもたらす結果となり、これは非常望ましい。
【００３７】
化合物の「治療有効量」は、その必要がある対象に投与したとき、治療する状態について経時的に所望の結果を生じさせるであろう量を意味する。例えば、所望される効果は、ＰＰＡＲ調節およびそれに随伴する生物活性であり得る。
【００３８】
本発明において有用な化合物を本出願において様々な式によって示す。式を見ることにより、それらの化合物が、多くの場合、１つ以上のキラル中心、すなわち４つの異なる基が付いている炭素、を有するであろうこと、およびこれらがエナンチオマーおよびジアステレオ異性体として存在し得ることがわかるであろう。加えて、一部の事例では二重結合の存在のため、化合物は、回転制約を有するであろう。従って、前記化合物は、幾何異性、すなわち、原子の空間的な配向の仕方が互いに異なり得る２つの形態を示す。二重結合に関しては、ジアステレオマーと呼ばれる立体異性体が存在する。ジアステレオマー（またはジアステレオ異性体）は、エナンチオマー（互いに鏡像）でない立体異性体である。本出願における化合物の命名には、Ｒ、Ｓシステムでエナンチオマーを命名する場合にするように二重結合のそれぞれの末端に結合している２個の基に優先番号を与える、ケミカルアブストラクトサービスシステムを用いている。より高い優先番号の２個の基が同じ側にあるとき、その分子は、Ｚ異性体である。（ドイツ語−ｚｕｓａｍｍｅｎ、一緒に）。両側にあるとき、その分子はＥである（ドイツ語−ｅｎｔｇｅｇｅｎ、反対側の）。これらの式は、単独であろうと、または混合物の状態であろうと、可能なエナンチオマーおよびジアステレオマーのすべてを包含すると解釈するものと理解しなければならない。特定の立体化学を示す式は、示されている特定の立体異性体のみにあてはまると理解しなければならない。
【００３９】
本発明における有用な化合物
本発明は、少なくとも１つのＰＰＡＲサブタイプ、例えばＰＰＡＲガンマまたはＰＰＡＲベータ／デルタ、の活性を調節することができる化合物の同定に、一部、基づく。これらの化合物は、そのようなＰＰＡＲの機能によって媒介される、ヒトなどの哺乳動物における状態または疾病を治療するために有用である。もう１つの実施形態において、本発明の化合物は、ＴＰ受容体の活性を調節することができる、特に、ＴＰ受容体活性に拮抗することができる。ＰＰＡＲ調節とＴＰ受容体調節の両方を示す本発明の化合物を「ＰＰＡＲ／ＴＰ受容体モジュレータ」と呼ぶ。さらなる実施形態において、本発明の化合物は、トロンボキサンシンターゼ（ＴＳ）を阻害することができる。これらの活性のうちの２つまたは３つを示す化合物は、一部の用途、例えば、限定ではないが、糖尿病患者における心血管合併症の治療に、特に望ましい。
【００４０】
本発明において有用である化合物は、１，３−ジオキサン誘導体またはそれらの医薬的に許容される塩であり、前記誘導体は、式Ｉ：
【００４１】
【化４】
2014240409.tif 000010
によって表され、この式中、
Ａは、炭素数２から７、または３から７の、任意にそれぞれ１つまたは２つの二重結合（それぞれ、シスである場合もあり、またはトランスである場合もある）を含有する、分岐または線状炭素鎖であり；
Ｗは、ＣＯＯＨ、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＯＳＯ３Ｈ、芳香族基（例えば、ＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ２で任意に置換されている、フェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジン（しかし、これらに限定されない））または２つの位置により連結される１，３ジオキソラン基であり；
Ａｒは、フェニル、または５もしくは６員複素環式芳香族基、例えば、２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニル（しかし、これらに限定されない）であり、前記フェニルおよびナフチル部分は、オルト、メタおよび／またはパラ位においてＯＨまたはＯＭｅで任意に置換されており、好ましくは、置換されている場合にはオルト位においてＯＨまたはＯＭｅで一置換されており；ならびに
ＲａおよびＲｂは、独立して、水素、２〜６Ｃアルケニル、３個以下のハロゲノ置換基を任意に有する１〜８Ｃアルキル、ペンタフルオロフェニル、アリールまたはアリール（１〜４Ｃ）アルキルであり［これらのうちの後の２つは、ハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分岐または線状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフロオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび炭素原子数２から４のオキサポリメチレンから選択される５個以下の置換基を任意に有することがある］、またはＲａおよびＲｂは一緒に、１個または２個の（１〜４Ｃ）アルキル置換基を任意に有する炭素原子数２から７のポリメチレンを形成する。
【００４２】
一部の実施形態において、Ａは、炭素数３から７の線状炭素鎖であり、Ｗは、ＣＯＯＨである。このような炭素鎖は、例えばＣ２−Ｃ３またはＣ３−Ｃ４の間の二重結合を含むことがある。
【００４３】
１つの実施形態において、Ｒａは、Ｈであり、ならびにＲｂは、芳香族部分、例えば、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル、アミノ、Ｎ−モノアルキル、Ｎ−ジアルキル（分岐している、または線状）、ニトロおよびチオアルキル（分岐している、または線状）から成る群より選択される５個以下の異なる置換基を有する、フェニル、ベンジル、２−または３−または４−ピリジン、フラン、ビフェニル、１−または２−ナフチルである。
【００４４】
一部の実施形態において、誘導体は、２，４−ジフェニル−１，３−ジオキサン誘導体またはその医薬的に許容される塩であり、前記誘導体は、式ＩＩ：
【００４５】
【化５】
2014240409.tif 000011
によって表され、この式中、Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフルオロメチル、任意に置換されているフェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから選択され、またはフェニル−Ｘ基は、任意に置換されているクロメン誘導体であり；ならびにＹおよびＺは、個々に水素またはハロゲノである。
【００４６】
一般に、式Ｉによって表される誘導体中のジオキサン環の位置２、４および５の基は、シス相対立体化学を有するであろう。
【００４７】
特に興味深いＸを有するフェニル部分の他の特定の置換としては、例えば、Ｘが２−フルオロ−、２−クロロ−、２−ブロモ−、２−シアノ−、２−トリフルオロメチル−、３−フルオロ−、３−クロロ−、３−シアノ−、３−ニトロ−、３−メトキシ−、４−クロロ−、４−シアノ−、４−ニトロ−および４−メトキシ−フェニルである置換が挙げられる。
【００４８】
Ｙについての好ましい置換は、水素またはフルオロであり、Ｚについては水素である。
【００４９】
本発明において有用な化合物の好ましい群は、式ＩＩＩ（下に記載）の化合物に加えてそれらの医薬的に許容される塩を含む：
【００５０】
【化６】
2014240409.tif 000012
（式中、Ｘ１は、２−クロロ、３−クロロ、２−シアノ、４−シアノ、３−ニトロおよび４−ニトロから選択され；ならびにジオキサン環の位置２、４および５の基は、シス相対立体化学を有する）。従って、式ＩＩＩの化合物は、下のエナンチオマーの両方を含む：
【００５１】
【化７】
2014240409.tif 000013
本発明は、Ａ、ＷおよびＡｒが上で定義したとおりであり、Ｒａが、Ｈであり、およびＲｂが、アリール基または複素環、例えばそのアリール部分の１個の炭素原子が１個の酸素または窒素原子で置換されているもの、である、式Ｉの化合物も提供する。そのようなアリールおよび複素環基は、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−アルキル（分岐している、もしくは線状）、Ｏ−アリール、アミノまたはＮ−モノアルキルもしくはＮ−ジアルキル（分岐している、もしくは線状）もしくはＮ−モノアリールもしくはＮ−ジアリール、ニトロ、チオアルキル（分岐している、もしくは線状）、またはオキソ（例えば、表ＩＩ中のＳＮ１３）から成る群より選択される３個の異なる置換基で任意に置換されていることがある。ＲａがＨであり、およびＲｂが、Ｏ−アリールで置換されている複素環またはフェニル基である場合の、特に、Ａｒがｏ位でＯＨまたはＯＭｅによって置換されているフェニルであり、ＷがＣＯＯＨであり、およびＡが１つの二重結合を有する５炭素線状鎖であるときの、式Ｉの化合物は、特に興味深い。そのような化合物の実例となる例としては、ＲａがＨであり、Ｒｂが、そのフェニルの２もしくはオルト位によりジオキサン環に連結される（４−メトキシフェノキシ）−フェニルである式Ｉの化合物、例えば（Ｚ）−６−（−２−［４−メトキシフェノキシ−ｏ−フェニル］−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸］；またはＲｂが、６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オン（例えば、クロメン部分の３位によりジオキサン環に連結される）である式Ｉの化合物、例えば（Ｚ）−６−（２−３−［６−クロロ−４Ｈ−クロメン−４−オン  ６−クロロ−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−３−イル］−４−（２−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、またはＲｂが、ビフェニル（ビフェニルの２もしくはオルト位によりジオキサン環に連結される）である式Ｉの化合物が挙げられる。従って、本発明は、この実施形態に引用する化合物およびそれらの医薬的に関連のある塩を、単独で、ならびに医薬用担体とのおよび任意にさらなる治療活性成分との組み合わせで提供する。
【００５２】
式Ｉおよび式ＩＩの化合物が、不斉炭素原子を有すること、ならびにラセミ形態および光学活性形態で存在および単離できることは、理解されるであろう。本発明は、ＰＰＡＲ活性を調節することができる、ＴＰ受容体活性に拮抗することできる、および／またはＴＳを阻害することができる、ラセミ形態と任意の光学活性形態（またはそれらの混合物）の両方、ならびにそれらのそれぞれの使用を包含し、本明細書において後で言及するアッセイのうちの１つ以上を用いて生物学的特性を標定する方法は、当該技術分野において周知である。
【００５３】
文脈から別段明らかでない限り、本明細書において言及する化学式を特定の立体配置で示すことがあるが、これはその絶対配置に必ずしも対応しない。
【００５４】
式ＩまたはＩＩの酸の特定に医薬的に許容される塩は、例えば、アルカリ金属およびアルカリ土類金属塩（例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウムおよびカルシウム塩）、アルミニウムおよびアンモニウム塩、ならびに生理的に許容されるカチオンを形成する有機アミンおよび第四塩基との塩（例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチレンジアミン、ピペリジン、モルホリン、ピロリジン、ピペラジン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、水酸化テトラメチルアンモニウム、ｔ−ブチルアミンおよび水酸化ベンジルトリメチルアンモニウムとの塩である。
【００５５】
本発明の最も好ましい化合物は、ＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストもしくはＴＳ阻害剤、またはこれらの活性のうちの２つ以上を示す化合物である。従って、式ＩＸによって表される好ましい化合物は、これらの活性のうちの１つ以上で示すであろう。この場合、式ＩＸは、
【００５６】
【化８】
2014240409.tif 000014
であり、この式中の置換基Ｒａ、Ｒｂ、Ａ、ＷおよびＡｒは、式Ｉの化合物に関連して本明細書において上で定義したとおり、または上述のもののいずれかである。式ＩＸの化合物のこの特定の立体化学は重要であり、前記式に示すとおりである。
【００５７】
式ＩＸのさらに好ましい化合物は、Ｒａが−Ｈであるものを含み、ＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストもしくはＴＳ阻害剤であるか、これらの活性のうちの２つ以上を示す化合物である。従って、好ましい化合物は、式Ｘ：
【００５８】
【化９】
2014240409.tif 000015
の化合物であり、この式中の置換基Ｒｂ、Ａ、ＷおよびＡｒは、式Ｉの化合物に関連して本明細書において上で定義したとおりである。式Ｘの化合物のこの特定の立体化学は重要であり、前記式に示すとおりである。
【００５９】
好ましいＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、以下の置換基を有する式Ｘの化合物である：
好ましくは、Ｒｂは、ハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分岐または線状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび炭素原子数２から４のオキサポリメチレンから成る群より選択される５個以下、好ましくは４個、さらに好ましくは３個、さらにいっそう好ましくは２個、さらにいっそう好ましくは１個の置換基で任意に置換されているフェニルである。さらに好ましくは、Ｒｂは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフルオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシおよびニトロから成る群、好ましくは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびトリフルオロメチルから成る群より選択される１つの置換基で置換されているフェニルである。好ましくは、前記フェニルは、オルト位で置換されている。
【００６０】
好ましくは、Ａｒは、ハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分岐または線状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび炭素原子数２から４のオキサポリメチレンから成る群、さらに好ましくは、−ＯＨ、（１〜６）アルコキシおよびハロゲノから成る群より選択される５個以下の置換基、好ましくは４個、さらに好ましくは３個、さらにいっそう好ましくは２個、さらにいっそう好ましくは１個の置換基で任意に置換されているフェニルである。さらにいっそう好ましくは、Ａｒは、オルト、メタおよび／またはパラ位において−ＯＨまたは−ＯＭｅで置換されている、しかし、好ましくはオルト位においてＯＨまたはＯＭｅで一置換されているフェニルである。
【００６１】
Ａは、好ましくはシス二重結合である１つの二重結合を含有する炭素数３から７の、好ましくは炭素数５から６の、さらに好ましくは炭素数５の線状炭素鎖である。炭素数５から６の炭素鎖についての前記二重結合は、好ましくは、２位（すなわち、ジオキサン環から数えてＣ２とＣ３の間）に位置する。
【００６２】
１つの実施形態において、本発明の好ましい化合物は、式Ｘを有する、ＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニスト、ＴＳ阻害剤またはそのような活性を２つまたは３つ有する化合物であり、この式中、
Ａは、１つまたは２つの二重結合（それぞれ、シスである場合もあり、またはトランスである場合もある）を任意に含有する炭素数３から７の分岐または線状炭素鎖であり、好ましくは、Ａは、好ましくはシス二重結合である１つの二重結合を含有する炭素数５から６の線状炭素鎖であり、さらにいっそう好ましくは、Ａは、１つのシス二重結合を含有する炭素数５の線状炭素鎖であり；ならびに
Ｗは、ＣＯＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、ＯＨ、ＮＨ２、ＳＯ３Ｈ、ＯＳＯ３Ｈ、芳香族基（例えばＣＯＯＨ、ＯＨもしくはＮＨ２で任意に置換されている、フェニル、１−もしくは２−ナフチル、ピリジン、フラン、２−メチルピリジンなど（しかし、これらに限定されない））、２位により連結される１，３−ジオキサン基、または−Ｃ（Ｏ）−Ｒｄであり、この場合のＲｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）または糖類（好ましくは単もしくは多糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグリコシル）または−ＯＨであり、好ましくは、Ｗは、−Ｃ（Ｏ）−Ｒｄであり、この場合のＲｄは、−ＯＨ、グリコシルまたは−Ｏ−ＣＨ３、さらに好ましくは−ＯＨまたは−Ｏ−ＣＨ３であり；ならびに
Ａｒは、フェニル、または５もしくは６員複素環式芳香族基、例えば２−ピリジン、３−ピリジン、チオフェン、フラン、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニルおよび（４−メトキシフェノキシ）−フェニルであり、前記フェニルおよびナフチル部分は、オルト、メタおよび／またはパラ位においてＯ−Ｒｃで任意に置換されているが、好ましくは、置換されている場合にはオルト位においてＯ−Ｒｃで一置換されており、この場合のＲｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類（好ましくは単または二糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグリコシル）または−Ｈであり、好ましくは、Ａｒは、オルト位において−Ｏ−Ｒｃで置換されているフェニルであり、この場合のＲｃは、メトキシ、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３または−Ｈであり；ならびに
Ｒｂは、２〜６Ｃアルケニル、３個以下のハロゲノ置換基で任意に置換されている１〜８Ｃアルキル、糖類、ペンタフルオロフェニル、アリールまたはアリール（１〜４Ｃ）アルキルであり、これらのうちの後の２つは、ハロゲノ、（１〜６Ｃ）アルキル、分岐または線状（１〜６Ｃ）アルコキシ、（１〜４Ｃ）アルキレンジオキシ、トリフロオロメチル、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、（２〜６Ｃ）アルカノイルオキシ、（１〜６Ｃ）アルキルチオ、（１〜６Ｃ）アルカンスルホニル、（１〜６Ｃ）アルカノイルアミノおよび炭素原子数２から４のオキサポリメチレンから選択される５個以下の置換基を任意に有することがあり、好ましくは、Ｒｂは、ハロゲノで、さらにいっそう好ましくはクロロで、好ましくはオルト位において置換されているフェニルである。
【００６３】
本発明の好ましいＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、式ＸＩの化合物：
【００６４】
【化１０】
2014240409.tif 000016
であり、この式中、Ｘは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフルオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシルおよび−Ｈから成る群より選択することができ、好ましくは、Ｘは、ハロゲノから成る群より選択され、さらに好ましくは、Ｘは、クロロであり、この場合、Ｘは、オルト、メタおよび／またはパラ位、好ましくはオルト位にあってよく；ならびに
Ｙは、フルオロ、クロロ、ブロモ、トリフロオロメチル、置換フェニル、シアノ、メトキシ、ニトロ、ヒドロキシル、−Ｃ（Ｏ）−糖類（好ましくは単もしくは二糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグリコシル）および−Ｈから成る群より選択され、好ましくは、Ｙは、Ｃ１〜６アルキル−ＯＨ、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＯＣ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）および−Ｏ−ＣＨ（Ｏ）から成る群より選択することができ、さらに好ましくは、Ｙは、−ＯＨ、メトキシおよび−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３から成る群より選択され、この場合、Ｙは、オルト、メタおよび／またはパラ位、好ましくはオルト位にあってよく；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、糖類（好ましくは単もしくは二糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグリコシル）または−ＯＨであり、好ましくは、Ｒｄは、−ＯＨまたは−Ｏ−ＣＨ３である。
【００６５】
１つの好ましい実施形態において、本発明のＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、Ｒｄが−ＯＨである式ＸＩの化合物である。これらの化合物は、一般式ＸＩＩ：
【００６６】
【化１１】
2014240409.tif 000017
を有し、この式中、ＸおよびＹは、本明細書において上で式ＸＩの化合物について示したとおりである。式ＸＩＩの化合物のこの特定の立体化学は重要であり、前記式に示すとおりである。
【００６７】
本発明の非常に好ましいＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、式ＸＩＩＩの化合物：
【００６８】
【化１２】
2014240409.tif 000018
であり、この式中、
Ｘは、本明細書において上で式ＩＩの化合物について指定したとおりであり、好ましくは、Ｘは、ハロゲノであり、さらに好ましくは、Ｘは、クロロであり、この場合、Ｘは、オルト、メタおよび／またはパラ位、好ましくはオルト位にあってよく；ならびに
Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類（好ましくは単または二糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグリコシル）または−Ｈであり、好ましくは、Ｒｃは、メトキシ、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３または−Ｈであり；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、グリコシルまたは−ＯＨであり、好ましくは、Ｒｄは、−ＯＨ、グリコシルまたは−Ｏ−ＣＨ３であり、さらに好ましくは、Ｒｄは、−Ｈまたは−Ｏ−ＣＨ３である。
【００６９】
式ＸＩＩＩの化合物のこの特定の立体化学は重要であり、前記式に示すとおりである。
【００７０】
説明するために、（Ｚ）−６−（２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）は、二重結合ジアステレオ異性体、シスおよびトランスを有する。下の実施例において試験した両方のエナンチオマーは、シス配置で二重結合を有する。ジオキサンの周りの３つの基のそれぞれが、互いに対して相対的にシス位にある場合もあり、またはトランス位にある場合もあり、ならびに合計８つの可能な組み合わせを生じさせ、３つすべての基がシス位にある、すなわち、置換基がすべて上にあるか、すべて下にある場合には２つだけの組み合わせを生じさせる。
【００７１】
（Ｚ）−６−（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、３つの基をすべて下に有する：
【００７２】
【化１３】
2014240409.tif 000019
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、３つの基をすべて上に有し、これは、その生物活性に対して劇的な効果を有する：
【００７３】
【化１４】
2014240409.tif 000020
非常に好ましい実施形態において、−Ｏ−Ｒｃ基は、オルト位に位置する。この実施形態において、好ましいＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、式ＸＩＶの化合物：
【００７４】
【化１５】
2014240409.tif 000021
であり、この式中、
Ｘ、ＺおよびＹは、本明細書において上で式ＩＩの化合物について指定したとおりであり、好ましくは、Ｘは、ハロゲノであり、さらに好ましくは、Ｘは、クロロであり、この場合、Ｘは、オルト、メタおよび／またはパラ位、好ましくはオルト位にあってよく、ならびに好ましくは、ＺおよびＹは、両方とも−Ｈであり；ならびに
Ｒｃは、Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−ＣＨ（Ｏ）、糖類（好ましくは単または二糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグリコシル）または−Ｈであり、好ましくは、Ｒｃは、メトキシ、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３または−Ｈであり；ならびに
Ｒｄは、−ＮＨ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、−Ｏ−Ｃ１〜６−アルキル（分岐しているかもしくは線状、好ましくは線状）、糖類（好ましくは単または二糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグリコシル）または−ＯＨであり、好ましくは、Ｒｄは、−ＯＨ、グリコシルまたは−Ｏ−ＣＨ３であり、さらに好ましくは、Ｒｄは、−Ｈまたは−Ｏ−ＣＨ３である。
【００７５】
式ＸＩＶの化合物のこの特定の立体化学は重要であり、前記式に示すとおりである。
【００７６】
本発明の非常に好ましい化合物は、
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−アセトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、および
メチル−（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エノエート
から成る群より選択することができる。
【００７７】
従って、１つの好ましい化合物は、次の構造の化合物である：
【００７８】
【化１６】
2014240409.tif 000022
もう１つの好ましい化合物は、次の構造の化合物である：
【００７９】
【化１７】
2014240409.tif 000023
もう１つの好ましい化合物は、次の構造の化合物である：
【００８０】
【化１８】
2014240409.tif 000024
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エノエートメチル
もう１つの好ましい化合物は、次の構造の化合物である：
【００８１】
【化１９】
2014240409.tif 000025
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−４−（２−アセトキシフェニル）−２−（２−クロロフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸
本発明の有用なＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、上述の化合物のいずれかプロドラッグとして調製および投与することができる。本明細書に記載する本発明の化合物が、プロドラッグを作るためにプロ基（ｐｒｏｇｒｏｕｐｓ）でマスクすることができる官能基を含むことができることは、当業者には理解されるであろう。そのようなプロドラッグは、通常、それらの活性薬物形態に転化されるまでは薬理学的に不活性であるが、そうである必要はない。本発明のプロドラッグの場合、任意の利用可能な官能性部分をプロ基でマスクしてプロドラッグを生じさせることができる。所望の使用条件下で開裂可能なプロ部分（ｐｒｏｍｏｉｅｔｉｅｓ）を生じさせるそのような官能基のマスキングに適する無数のプロ基は、当該技術分野において公知である。
【００８２】
本明細書において用いる場合、用語「プロドラッグ」は、本発明の物質を生じさせるようにインビボで変換される物質を意味する。この変換は、血液中での加水分解によるものなどの様々なメカニズムによって発生し得る。例えば、本発明の化合物が、カルボン酸官能基を含有するとき、プロドラッグは、その酸基の水素原子を、例えば、（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、（Ｃ２〜Ｃ１２）アルカノイルオキシメチル、４から９個の炭素原子を有する１−（アルカノイルオキシ）エチル、５から１０個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルカノイルオキシ）−エチル、３から６個の炭素原子を有するアルコキシカルボニルオキシメチル、４から７個の炭素原子を有する１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、５から８個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、３から９個の炭素原子を有するＮ−（アルコキシカルボニル）アミノメチル、４から１０個の炭素原子を有する１−（Ｎ−（アルコキシカルボニル）アミノ）エチル、３−フタリジル、４−クロトノラクトニル、ガンマ−ブチロラクトン−４−イル、ジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルアミノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキル、カルバモイル−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルカルバモイル−（Ｃ１〜Ｃ２）アルキルおよびピペリジノ−、ピロリジノ−またはモルホリノ（Ｃ２〜Ｃ３）アルキルなどの基をはじめとする（しかし、これらに限定されない）基で置換することによって形成されるエステルを含むことができる。プロドラッグは、−ＣＯＯＨ基が糖類と反応してエステルを形成した化合物であってもよく、糖類は、好ましくは単または二糖類、さらに好ましくは単糖類、さらにいっそう好ましくはグルコースである。
【００８３】
誘導体化することができる官能基、例えばフェノール系官能基、カルボン酸系官能基、チオール官能基など、を有する本発明の化合物の一部をプロドラッグの合成に使用することができる。本発明の化合物の例示的プロドラッグとしては、
【００８４】
【化２０】
2014240409.tif 000026
が挙げられる。
【００８５】
このようにして、選択される投与方式に特に合わせて作ったプロドラッグを得ることができる。改善された受動的腸吸収、改善された輸送媒介腸吸収、急速な代謝に対する保護（徐放性プロドラッグ）、組織選択的送達、ターゲット組織での受動的濃縮、特定の輸送体へのターゲッティングなどのような他の特性をプロドラッグに付与するように、プロドラッグを設計することもできる。これらの特性をプロドラッグに付与することができる基は周知であり、例えば、Ｅｔｔｍａｙｅｒら（２００４）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４７：２３９３−２４０４に記載されている。これらの参考文献に記載されている様々な基のすべてを、本明細書に記載するプロドラッグに利用することができる。特に、フェノール基は、下に図示するように、リン酸エステル、アルキルエステルに転化させることができ、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルキルオキシカルボニルオキシメチル（ＡＯＣＯＭ）を使用して、もしくは立体障害アルコキシカルボニルメチルとして誘導体化することができる。
【００８６】
【数１】
2014240409.tif 000027
本発明の有用なＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤としては、上述の化合物のいずれかの溶媒和物も挙げられる。
【００８７】
本明細書において用いる場合、用語「溶媒和物」は、非共有結合性分子間力により結合された理論量または非理論量の溶媒をさらに含む本発明の任意の化合物またはその塩を意味する。好ましい溶媒は、揮発性であり、非毒性であり、および／または微量でのヒトへの投与に許容される。水和形態をはじめとする溶媒和形態は、非溶媒和形態と等価であり、本発明の範囲内に包含される。
【００８８】
本明細書において上で説明したように、本発明の好ましいＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、上に記載したような特定の立体化学を有する。本発明のいずれの組成物も実質的にエナンチオマー純粋性化合物を含むことが好ましい。従って、本発明のＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤は、少なくとも８０％の光学純度、さらに好ましくは少なくとも９０％、さらにいっそう好ましくは少なくとも９５％、さらにいっそう好ましくは少なくとも９８％、さらにいっそう好ましくは少なくとも９９％、さらにいっそう好ましくは少なくとも９９．５％、さらにいっそう好ましくは少なくとも９９．８％、例えば、少なくとも９９．９％、例えば本質的に１００％、例えば１００％の光学純度を有することが好ましい。
【００８９】
式Ｉ、式ＩＩ、式ＩＸ、式Ｘ、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩおよび式ＸＩＶの化合物は、構造的に類似している化合物の製造についての当該技術分野において周知である有機化学の従来の手順によって製造することができる。そのような手順は、例えば、ＥＰ  ０
０９４  ２３９の４〜１０頁（これは、本明細書に参照により特に取り入れている）に提供されており、ならびに本実施例セクションに記載する手順によっておよび以下ののプロセス（この場合、Ｘ、ＹおよびＺは、本明細書において上で定義した意味のいずれかを有する）によってそのような手順を提供する：
（Ａ）式ＩＶのアルデヒドデヒドを、式Ｒ１３Ｐ＝ＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯ２−Ｍ＋（この場合、Ｒ１は、（１〜６Ｃ）アルキルまたはアリール（特にフェニル）であり、Ｍ＋は、カチオン、例えば、アルカリ金属カチオン、例えばリチウム、ナトリウムまたはカリウムカチオンである）のウィッティヒ試薬と反応させる。一部の実施形態では、前記アルデヒドを、Ｐ＝ＣＨ（ＣＨ２）ｎＣＯＯ−Ｍ＋（この場合、ｎ＝０から４）に変更した式のウィッティヒ試薬と反応させることとなる。
【００９０】
一般に、このプロセスは、二重結合に隣接する置換基が主としてシス相対立体化学を有する（すなわち、「Ｚ」異性体）式ＩＩの必要化合物を生成する。しかし、このプロセスは、トランス相対立体化学を有する類似化合物も生成し、これは、所望される場合には、従来の手順、例えば、クロマトグラフィーまたは結晶化によって除去することができる。
【００９１】
この合成手順は、適する溶媒または希釈剤、例えば、芳香族溶媒、例えばトルエンもしくはクロロベンゼン、エーテル、例えば１，２−ジメトキシエタン、ｔ−ブチルメチルエーテル、ジブチルエーテルもしくはテトラヒドロフラン中で、ジメチルスルホキシドもしくはテトラメチレンスルホン中で、または１つ以上のそのような溶媒もしくは希釈剤の混合物中で、適便に行われる。一般に、このプロセスは、例えば−８０℃から４０℃の範囲の温度で行われるが、適便には、室温またはほぼ室温、例えば、０から３５℃の範囲で行われる。
【００９２】
（Ｂ）Ｒ１が、保護基、例えば（１〜６Ｃ）アルキル（例えば、メチルもしくはエチル）、アシル（例えば、アセチル、ベンゾイル、メタンスルホニルもしくはｐ−トルエンスルホニル）、アリル、テトラヒドロフラン−２−イル、トリメチルシリルであり、脱保護される、式Ｖのフェノール誘導体。
【００９３】
用いる脱保護条件は、その保護基Ｒ１の性質に依存する。従って、例えば、それがメチルまたはエチルであるとき、適する溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはＮ，Ｎ−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン）中、例えば５０から１６０℃の範囲の温度で、ナトリウムチオアルコキシド（水和物およびアルカンチオール）と共に加熱することによって脱保護を行うことができる。あるいは、適する溶媒（例えば、テトラヒドロフランまたはメチルｔ−ブチルエーテル）中、例えば０から６０℃の範囲の温度で、リチウムジフェニルホスファイドと反応させることによって、エチルまたはメチル保護基を除去することができる。保護基がアシルであるとき、例えば、塩基（例えば、水酸化ナトリウムまたはカリウム）の存在下、適する水性溶媒［例えば、水性（１〜４Ｃ）アルカノール］中、例えば０から６０℃の範囲の温度で加水分解することによって、それを除去することができる。保護基が、アリルまたはテトラヒドロピラン−２−イルであるとき、例えばトリフルオロ酢酸などの強酸で処理することによって、それを除去することができ、ならびにトリメチルシリルであるとき、例えば従来の手順を使用してフッ化テトラブチルアンモニウムまたはフッ化ナトリウム水溶液と反応させることによって、それを除去することができる。
【００９４】
（Ｃ）Ｑ１およびＱ２のうちの一方が水素であり、他方が、水素または式−−ＣＲａＲｂ．ＯＨ（この式中のＲａおよびＲｂは、同じまたは異なる（１〜４Ｃ）アルキルである）の基である、式Ｖのエリスロ−ジオール誘導体を、式ＶＩＩのベンズアルデヒド誘導体またはそのアセタール、ヘミアセタールもしくは水和物と反応させる。
【００９５】
ベンズアルデヒドＶＩＩ［あるいはその水和物、または（１〜４Ｃ）アルカノール（例えば、メタノールまたはエタノール）でのそのアセタールもしくはヘミアセタール］は、適便には、過剰に存在し得る。
【００９６】
一般に、この反応は、酸性触媒、例えば塩化水素、臭化水素、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、樟脳スルホン酸、クエン酸、ピリミジニウムｐ−トルエンスルホン酸（ＰＰＴＳ）またはｐ−トルエンスルホン酸、の存在下、適便には、適する溶剤または希釈剤、例えば、トルエン、キシレンまたはエーテル、例えばテトラヒドロフラン、ジブチルエーテル、メチルｔ−ブチルエーテルもしくは１，２−ジメトキシエタン、またはハロアルカン、例えばジクロロメタン（ＤＣＭ）の存在下、例えば０から８０℃の範囲の温度で行われる。
【００９７】
Ｑ１およびＱ２が両方とも水素である式ＶＩの出発原料は、例えば、ＲａおよびＲｂが両方ともアルキル、例えばメチルまたはエチルである式ＶＩＩＩの化合物（本明細書におけるプロセス（Ａ）に類似した手順によって得られる）のジオキサン環を、緩酸を触媒として用いて加水分解またはアルコール分解することによって、得ることができる。通常、この加水分解またはアルコール分解は、アルカノール（例えば、エタノールもしくは２−プロパノール）中の塩酸などの無機酸水溶液、またはエーテル（例えば、テトラヒドロフラン）を溶媒として使用して、１０から８０℃の範囲の温度で行うことができる。
【００９８】
Ｑ１およびＱ２のうちの一方が水素であり、他方が、式−−ＣＲａＲｂ．ＯＨである式ＶＩの出発原料は、Ｑ１およびＱ２が両方とも水素である式ＶＩの出発原料についての上述の形成における中間体である。しかし、前記中間体は、通常、単離および特性付けしない。従って、プロセス（Ｃ）の有用な変形形態は、ＲａおよびＲｂのうちの一方が、水素、メチルまたはエチルであり、他方が、メチルまたはエチルである式ＶＩＩＩの化合物を、酸性触媒（例えば、上に与えたもののうちの１つ）の存在下、適便には、例えば１０から８０℃の範囲の温度で、任意に適する溶媒または希釈剤（例えば、上に与えたもののうちの１つ）の存在下で、過剰な式ＶＩＩの化合物（またはその水和物、アセタールまたはヘミアセタール）と反応させることを含む。
【００９９】
上のプロセスにおいて使用するための出発原料は、構造的に関連した化合物の調製について知られている有機化学の一般手順によって作ることができる。従って、式ＩＶのアルデヒドは、例えば、スキームＩに示す方法によって得ることができる。式Ｖの保護フェノール誘導体は、例えば、式ＩＶのものに類似したアルデヒドを使用して上のプロセス（Ａ）に類似した手順を用いて作ることができるが、アルデヒドなどの基Ｒ１で保護されているフェノールは、例えば、脱保護段階（ｉｉ）を省いてスキームＩの手順を行うことによって作ってもよい。新規である式ＶＩＩＩの出発原料は、欧州特許出願、公開番号９４２３９に記載されているものに類似した手順を用いて得ることができる。
【０１００】
必要なウィッティヒ試薬は、従来の手順によって、例えば、対応するハロゲン化ホスホニウムを強塩基、例えば水素化ナトリウム、リチウムジイソプロピルアミド、カリウムｔ−ブトキシド、ＬｉＨＭＤＳまたはブチルリチウム、で処理することによって得ることができる。一般には、上の縮合プロセス（Ａ）を行う直前にインサイチューでそれらを形成する。
【０１０１】
式ＩおよびＩＩの化合物を、当該技術分野において周知の他の従来の手順によって、例えば、塩基を触媒として用いる対応するエステル、アミドまたはニトリルの加水分解によっても得ることができることは、理解されるであろう。
【０１０２】
式ＩまたはＩＩの化合物の塩が必要なとき、それは、生理的に許容されるカチオンをもたらす適切な塩基との反応によって、または他の従来の手順によって得られる。
【０１０３】
さらに、式Ｉもしくは式ＩＩの化合物の光学活性形態が必要なとき、または式ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩもしくはＸＩＶ（すべて、特定の光学活性形態である）のいずれかの化合物を調製するとき、光学活性出発原料を使用して、上述のプロセスの１つを行うことができる。あるいは、式ＩＩの化合物のラセミ形態、または式ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩもしくはＸＩＶのいずれかの化合物およびそのエナンチオマー（単数もしくは複数）のラセミ混合物を、光学活性形態の適する有機塩基と反応させ、その後、そのようにして得られた塩のジアステレオ異性体混合物を、従来どおり分離すること、例えば、適する溶媒、例えば（１〜４Ｃ）アルカノールから分別結晶させ、その後、例えば希塩酸などの無機酸水溶液を使用する従来の手順を用いて酸で処理することにより光学活性形態の前記式ＩまたはＩＩの化合物を遊離させることができる。
【０１０４】
加えて、実施例２９は、式ＩおよびＩＩの化合物のラセミ混合物をキラルクロマトグラフィーにより単離することができる方法を例証するものである。詳細には、実施例２９は、エナンチオマーをラセミ混合物から単離することができる方法を説明するものである。この方法は、本発明の他の化合物の特定のエナンチオマーの調製に容易に適用することができる。
【０１０５】
前に述べたように、本明細書に記載する化合物は、ＰＰＡＲ活性のモジュレータである。従って、上で略述した構造特性に加えて、本発明の方法で用いるために好ましい化合物は、ＰＰＡＲアゴニスト、ＰＰＡＲアンタゴニストまたはＰＰＡＲ部分アゴニスト、好ましくはＰＡＲ部分アゴニストでもある。ＰＰＡＲアゴニスト／アンタゴニスト／部分アゴニストとしての機能性を判定するための方法は、本明細書において下のセクション「化合物の機能性」で説明する。
【０１０６】
化合物の機能性
本発明の好ましい化合物は、ＰＰＡＲモジュレータ、詳細にはＰＰＡＲガンマ選択的モジュレータ（完全または部分アゴニストもしくはアンタゴニスト、好ましくはアゴニスト）、ＴＰ受容体アンタゴニストもしくはＴＳ阻害剤、またはこれらの特性のうちの２つ以上を示す化合物である、本明細書において上で説明した化合物のいずれかである。理論による拘束を望まないが、本発明者らは、ＴＰ受容体アンタゴニストであり、且つ、ＴＰ阻害剤である化合物が特に望ましいと考えている。これは、血小板凝集を阻害し、効力のある血管拡張剤として作用するＰＧＩ２のレベルを上昇させるからである。
【０１０７】
アゴニストおよびアンタゴニストは、効力／ＥＣ５０／ＩＣ５０値を左右するそれらの結合親和性によって、および化合物の飽和レベルの存在下で達成される活性のレベル、すなわち有効度によって特徴づけられる。部分アゴニスト／部分アンタゴニストも、その結合親和性および有効度によって特徴づけられる。従って、ＰＰＡＲの部分アゴニスト／部分アンタゴニストは、コグネイトＰＰＡＲを完全に活性化することはできず、競合的に受容体から完全アゴニストをはずし、それによってトランス活性化レベルを減少させることができる。さらに、ＰＰＡＲの完全および部分アゴニストは、補因子の異なる補体を補充することができ、ならびに所与のＰＰＡＲサブタイプに補充される補因子の性質は、所与のアゴニストによって活性化される遺伝子のパターンに大きな影響を及ぼし得る。
【０１０８】
ＰＰＡＲのリガンド結合ポケットは、他の核受容体と比較して大きく、これにより、ＰＰＡＲに結合することができ、ＰＰＡＲを活性化することができる化合物が非常に多様であることを、一部、説明することができる。３つのＰＰＡＲサブタイプ間のリガンド認識には相当な重複部分があり、厳密に言えば、いずれのサブタイプ特異的リガンドもまだ同定されていない。しかし、幾つかの天然および合成リガンドは、大きな選択度を示し、今日、大部分の選択的リガンドは、個々のＰＰＡＲサブタイプを活性化するために必要な濃度に関して３桁より大きく異なる。ステロイド核受容体についてのアゴニストに類似して、選択的ＰＰＡＲモジュレータ（ＳＰＰＡＲＭ）という用語が導入された（本明細書では、「部分アゴニストまたはアンタゴニスト」とも呼ぶ）。このクラスのリガンドは、ＰＰＡＲ（単数または複数）に結合すると、異なる配座を取り入れて、異なるコアクチベータセットの補充をもたらす、部分アゴニスト／アンタゴニストを含む。原則として、ＳＰＰＡＲＭは、ＰＰＡＲターゲット遺伝子のサブセットだけを活性化することができ、それにより、望ましい遺伝子セットの特異的発現をことによると促進するであろう。完全アゴニストおよび部分アゴニストによるＰＰＡＲ活性化のモデルを図１に与える。本発明の好ましい化合物は、部分ＰＰＡＲアゴニストである。
【０１０９】
ＰＰＡＲ調節活性は、当該技術分野において公知の任意の数の方法またはそれらの適応法によって容易に判定することができる。例えば、ＰＰＡＲ調節活性は、インビトロトランス活性化アッセイによって判定することができる。ＰＰＡＲガンマ調節活性を判定するための有用なトランス活性化アッセイの非限定的な例を本明細書において下の実施例２２で説明し、ならびにＰＰＡＲデルタ調節活性を判定するための有用なトランス活性化アッセイの非限定的な例を実施例２３で説明する。下の実施例２２は、ＰＰＡＲ−ＧＡＬ４（ＤＮＡ結合ドメイン）融合タンパク質をコードする構築物で、およびＧＡＬ４依存性レポーター構築物をコードする構築物でトランスフェクトした細胞に化合物を添加する方法を例証するものである。任意の数の可能な構築物を使用することができること、例えば、転写または異なるレポーター遺伝子（例えば、蛍光タンパク質、ベータ−ガラクトシダーゼ、ペルオキシダーゼ、もしくはルシフェラーゼなど）を活性化するための異なるＤＮＡ結合ドメインの使用、は通常の当業者には明らかであろう。判定が望まれるＰＰＡＲ活性次第で、その構築物がそのＰＰＡＲまたはそのリガンド結合ドメインを好ましくコードすることも、通常の当業者には明らかであろう。ＰＰＡＲの活性化に基づいて（すなわち、ＰＰＡＲアゴニストまたは部分アゴニストの存在下で）、ＰＰＡＲは、任意に定量的に、レポーター構築物をトランス活性化する。
【０１１０】
ＰＰＡＲモジュレータは、少なくとも１つのＰＰＲＥを含む第二の核酸の制御下で作動可能に第一の核酸を含むレポーター遺伝子を使用して同定することもできる。前記第一の核酸は、好ましくは、レポータータンパク質、例えば蛍光タンパク質、ベータ−ガラクトシダーゼ、ペルオキシダーゼ、またはルシフェラーゼなどをコードする。前記レポーター構築物を、１つ以上のＰＰＡＲ、例えばＰＰＡＲガンマおよび／またはデルタ、を発現する細胞に挿入すべきである。このようにして、ＰＰＡＲアゴニストを、第一の核酸の転写を活性化することができる化合物として同定することができる。
【０１１１】
本発明の特定の実施形態によると、好ましい化合物は、ＰＰＡＲおよび／またはＰＰＡＲ  ＬＢＤアゴニストまたは部分アゴニストである。用語「ＰＰＡＲ  ＬＢＤ」は、ＰＰＡＲのリガンド結合ドメインを指す。好ましい実施形態によると、本発明の化合物および組成物は、ＰＰＡＲガンマおよび／またはＰＰＡＲガンマＬＢＤアゴニストである。「アゴニスト」は、細胞内受容体と併せたときにその受容体に特有の反応、例えば転写活性化活性、を刺激または増加させる化合物または組成物を意味する。１つの実施形態において、前記アゴニストは、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、すなわち、ＰＰＡＲガンマ受容体の転写活性を、例えばその受容体の天然生理的リガンドを模倣することなどにより、強化、刺激、誘導あるいは増進させるＰＰＡＲリガンドである。
【０１１２】
前記ＰＰＡＲ調節活性は、本明細書において上で説明したトランス活性化アッセイを用いて判定することができる。適する標準的アゴニストとしては、ＰＰＡＲガンマについてはロシグリタゾン、およびＰＰＡＲデルタについては（４−［３−（２−プロピル−３−ヒドロキシ−４−アセチル）フェノキシ］プロピルオキシフェノキシ）酢酸（Ｌ１６５０４１、市販）が挙げられる。標準アゴニストの５０％未満のトランス活性化を示す潜在的アゴニストは、特に、新規化合物もしくは活性誘導体の開発のため、または部分アゴニストの存在の指標として、なお有用であり得る。
【０１１３】
好ましい実施形態によると、本発明の化合物および組成物は、ＰＰＡＲおよび／またはＰＰＡＲ  ＬＢＤ部分アゴニストであり、さらに詳細には、本発明の化合物および組成物は、ＰＰＡＲガンマおよび／またはＰＰＡＲガンマＬＢＤ部分アゴニストである。可能な最大作用（すなわち、完全アゴニストまたは基準分子が生ずる最大作用）より小さい作用を生じさせる薬物を部分アゴニストと呼ぶ。
【０１１４】
例えば、本発明の化合物および組成物の部分アゴニスト特性は、完全アゴニストであるロシグリタゾン（Ａｖａｎｄｉａ（商標）、Ｇｌａｘｏ−ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）を参照することによって定義することができる。これは、特に、ＰＰＡＲガンマ部分アゴニストについての場合である。本発明の部分ＰＰＡＲアゴニスト、特にＰＰＡＲガンマアゴニストは、望ましい治療を受けている患者に対して同様のまたはより良好な効能をもたらすであろうが、その患者にとって有害であろう少数の望ましくない副作用を有するであろう。例えば、ＳＮ１（ＤＰＤ）は、１ｍＭでのＡｖａｎｄｉａと同じグルコース取込みレベルを１０ｍＭで誘導するが、より低い脂肪細胞分化の結果として、より少ない副作用が予想される。
【０１１５】
本発明の化合物および組成物の部分アゴニスト特性は、Ｌ１６５０４１（市販）を参照することによって定義することもできる。これは、特に、ＰＰＡＲデルタ部分アゴニストについての場合である。例えば、１つのそのようなトランス活性化アッセイは、実施例２３において説明するトランス活性化アッセイである。
【０１１６】
１つの実施形態において、本発明の化合物は、ＰＰＡＲの活性に対して選択的であることが好ましい。そのような実施形態では、本化合物が、ＲｘＲおよび／またはＲｘＲ  ＬＢＤトランス活性化を有意に活性化しないことが好ましく、好ましくは、ＲｘＲ転写は、バックグラウンドレベルの２倍未満、例えば、バックグラウンドレベルの１．５倍未満、例えば、バックグラウンドレベルとほぼ等しいか、それより小さい。ＲｘＲトランス活性化は、例えば実施例２５において説明するような、ＲｘＲトランス活性化アッセイによって判定することができる。バックグラウンドレベルは、付加リガンド不在の状態でのトランス活性化である。
【０１１７】
本発明の１つの実施形態において、本化合物は、ＰＰＡＲアンタゴニストである。「アンタゴニスト」は、ＰＰＡＲと併せたときに該ＰＰＡＲに特有の反応、例えば転写活性化、に干渉するまたは反応を減少させる化合物を意味する。一般的な定義として、「ＰＰＡＲアンタゴニスト」は、対応するＰＰＡＲアゴニストの活性を阻害することができるＰＰＡＲリガンドを示す。さらに一般的には、これらのアゴニスト／アンタゴニスト／部分アゴニスト活性は、当業者に幅広く知られているアッセイ、例えば、ＷＯ９９／５０６６４またはＷＯ９６／４１０１３に開示されているものによって測定することができる。
【０１１８】
本発明の非常に好ましい実施形態において、ＰＰＡＲモジュレータは、ＰＰＡＲ結合に関して、多くとも２５μＭ、好ましくは多くとも２０μＭ、さらにいっそう好ましくは多くとも１０μＭ、例えば、多くとも５μＭのＩＣ５０を有する。本発明のこの実施形態の中で、好ましいＰＰＡＲは、ＰＰＡＲγであり、ならびに非常に好ましいＰＰＡＲモジュレータは、ＰＰＡＲγ結合に関して、多くとも２５μＭ、好ましくは多くとも２０μＭ、さらにいっそう好ましくは多くとも１５μＭ、例えば、多くとも１２μＭのＩＣ５０を有するＰＰＡＲγモジュレータである。ＩＣ５０は、当業者に公知の任意の適する方法によって決定することができる。
【０１１９】
本発明の化合物および組成物は、ＰＰＡＲ活性の調節による影響を受ける状態または疾病を有する患者に投与したときのそれらの生物活性によってさらに特徴づけられる。本発明の好ましい化合物は、その必要がある患者において次の生物学的エンティティー：グルコース、トリグリセリド、脂肪酸、コレステロール、および胆汁酸など、のうちの１つ以上を、当該技術分野において公知の分子（例えば、チアゾリジンジオン）と比較して、等価またはより良好な有効度および効力で、しかし、より低い毒性および／またはより少ない望ましくない副作用発生で、低下させることができる化合物である。特に、前記化合物は、好ましくは、脂肪細胞分化および体重増加をあまり誘導することとならない。そのような化合物は、特に、本明細書において上のセクションＣに記載した化合物のうちのいずれかであり得る。脂肪細胞分化を判定するために有用な方法は、本明細書において下の実施例２６で説明する。さらに具体的には、それらは、インスリン抵抗性に対して有益な活性をもたらし（血漿グルコースレベルを低下させるインスリンの有効性を減少させる）および／または脂肪生成に対して有益な活性をもたらす。ＰＰＡＲガンマを活性化する多くの化合物（例えば、チアゾリジンジオン）は、脂肪細胞の分化をさらに誘導し（すなわち、脂肪生成作用、すなわち脂質生成作用を示し）、それ故、治療する患者の体重を増加させる結果となることが明らかになった。従って、そのような化合物の次の世代が、活性減少を示す、好ましくはそのような活性を欠くことは、非常に望ましいことである。これらの活性は、当該技術分野において幅広く用いられている方法を用いて正当に評価することができる。さらに具体的には、これらの活性は、ロシグリタゾンなどの当該技術分野において既に同定されている分子を参照して正当に評価される。本発明の好ましい実施形態によると、好ましい化合物は、インスリン抵抗性に関してロシグリタゾン特性の少なくとも約５０％、好ましくは少なくとも約６０％、さらに好ましくは少なくとも約７０％、およびさらにいっそう好ましくは少なくとも８０％を示し、これは、例えば、インスリン抵抗性に罹患している患者におけるグルコースレベルを判定することによって判定することができる。理想的には、それは１００％以上であろう。本発明のもう１つの好ましい実施形態によると、好ましい化合物は、脂肪細胞分化に対するロシグリタゾン特性の約８０％未満、好ましくは約５０％未満、さらに好ましくは約４０％未満、およびさらにいっそう好ましくは約３０％未満を示す。理想的には、これは、脂肪細胞分化に対するロシグリタゾン特性の２０％未満であろう。脂肪細胞分化は、例えば、本明細書において下の実施例２６で説明するように判定することができる。非常に好ましい実施形態において、好ましい化合物は、上述の特性の両方を有する。あるいは、それらの化合物は、トランス活性化アッセイにおいて判定してロシグリタゾンのものの少なくとも５０％程度にＰＰＡＲ活性を誘導することができ、脂肪分化に対しては上述の特性を示す。
【０１２０】
本発明の非常に好ましい実施形態において、ＰＰＡＲモジュレータは、個体における次の生物学的エンティティーから成る群より選択される１つ以上の、例えば２つ、３つまたは４つの特性を低下させることができる：血清グルコース、グリコシル化ヘモグロビン（ＨｂＡ１Ｃ）、フルクトスアミン、インスリン、遊離脂肪酸（ＦＦＡ）、トリグリセリド（ＴＧ）、低い高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）および総コレステロール。さらにいっそう好ましくは、ＰＰＡＲモジュレータは、個体における次の生物学的エンティティーの１つ以上、好ましくは少なくとも２つ、さらに好ましくは３つすべてを低下させることができる：血清グルコース、グリコシル化ヘモグロビン（ＨｂＡ１Ｃ）および遊離脂肪酸（ＦＦＡ）。
【０１２１】
特に、好ましいＰＰＡＲモジュレータは、０．１から１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば、０．５から７０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば、０．５から７．５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば５ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量での個体へのそのＰＰＡＲモジュレータの投与が、投与後７から３６５日の範囲内、例えば、７から１８０日の範囲、例えば、７から９０日の範囲、例えば７から３０日の範囲、例えば１４日以内に、血清グルコースを少なくとも１０％、例えば、少なくとも１５％、例えば、少なくとも２０％、例えば、少なくとも２４％減少させる結果となるものである。
【０１２２】
加えて、好ましいＰＰＡＲモジュレータは、０．１から１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば、０．５から７０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば、０．５から７．５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば５ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量での個体へのそのＰＰＡＲモジュレータの投与が、投与後７から３６５日の範囲内、例えば、７から１８０日の範囲、例えば、７から９０日の範囲、例えば７から３０日の範囲、例えば１４日以内に、ＨｂＡ１Ｃを少なくとも０．２％、例えば少なくとも０．５％、例えば少なくとも１％、例えば少なくとも２％減少させる結果となるものである。健常な患者におけるＨｂＡ１ｃ値についての基準範囲は、約４％〜５．９％であり、治療の必要がある患者にＰＰＡＲモジュレータを投与するとき、６．５％〜７％より低い値が望まれる。
【０１２３】
加えて、好ましいＰＰＡＲモジュレータは、０．１から１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば、０．５から７０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば、０．５から７．５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲、例えば５ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量での個体へのそのＰＰＡＲモジュレータの投与が、投与後７から３６５日の範囲内、例えば、７から１８０日の範囲内、例えば、７から９０日の範囲、例えば７から３０日の範囲、例えば１４日以内に、ＦＦＡを少なくとも１０％、例えば少なくとも１５％、例えば少なくとも２０％、例えば少なくとも２２％減少させる結果となるＰＰＡＲモジュレータである。健康な患者におけるＦＦＡ値についての基準範囲は、約０．２８〜０．８９ｍｍｏｌ／リットルであり、治療の必要がある患者にＰＰＡＲモジュレータを投与すると、この範囲に対する低下／正規化が望まれる。
【０１２４】
加えて、好ましいＰＰＡＲモジュレータは、０．１から１００ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば、０．５から７０ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば、０．５から７．５ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば５ｍｇ／ｋｇの投薬量での個体へのそのＰＰＡＲモジュレータの投与が、投与後７から３６５日の範囲内、例えば、７から１８０日の範囲、例えば、７から９０日の範囲、例えば７から３０日の範囲、例えば１４日以内に個体における体重の有意な増加を生じさせないＰＰＡＲモジュレータである。「体重の有意な増加」は、１％より大きい、例えば２％より大きい、例えば３％より大きい、例えば４％より大きい、例えば５％より大きい、例えば６％より大きい、例えば７％より大きい体重増加である体重変化を意味する。
【０１２５】
加えて、好ましいＰＰＡＲモジュレータは、０．１から１００ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば、０．５から７０ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば、０．５から７．５ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば５ｍｇ／ｋｇの投薬量でのそのＰＰＡＲモジュレータの投与が、個体における１日あたりの食事摂取量を有意に変化させる結果とならないＰＰＡＲモジュレータである。「平均食事摂取量の有意な変化」は、体重によって判定した場合の１日の食事摂取量の１０％より大きい、例えば、１２％より大きい、例えば、１４％より大きい、例えば、１６％より大きい変化を意味する。
【０１２６】
加えて、好ましいＰＰＡＲモジュレータは、０．１から１００ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば、０．５から７０ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば、０．５から７．５ｍｇ／ｋｇの範囲、例えば５ｍｇ／ｋｇの投薬量での個体へのそのＰＰＡＲモジュレータの投与が、個体において次の生物学的エンティティーのうちの１つ以上、好ましくは少なくとも２つ、例えば少なくとも３つ、例えば４つすべてを有意に増加させる結果とならないＰＰＡＲモジュレータである：ヘマトクリット、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）およびアルカリンホスファターゼ（ＡＬＰ）。「有意な増加」は、３０％より大きい、例えば２０％より大きい、例えば１０％より大きい、例えば５％より大きい増加を意味する。健常な患者におけるヘマトクリットについての基準範囲は、０．４１〜０．５０（無単位）であり、ＡＳＴについては、１０〜３０Ｕ／Ｌ、１０〜４０Ｕ／Ｌ、およびＡＬＰについては３０〜１２０Ｕ／Ｌであり、治療の必要がある患者にＰＰＡＲモジュレータを投与するとき、これらの範囲に対するこれらの値の低下／正規化が望まれる。
【０１２７】
このセクションにおける上述のすべての個体は、任意の個体、例えば、ＰＰＡＲモジュレータの投与が必要な個体、例えば、本明細書中の他の箇所で述べるＰＰＡＲ関連臨床状態のうちの１つ以上に罹患しているヒトであり得る。しかし、前記個体は、検体検査用動物、例えばマウスであってもよい。このセクションにおける上述のすべての増加および減少は、一般に、前記ＰＰＡＲモジュレータを投与していない同様の個体で得られる値に関連して判定される。生物学的エンティティーの上述の減少および増加の判定に適する方法の非限定的な例は、本明細書において下の実施例３２で説明する。
【０１２８】
望ましくない副作用、例えば血液希釈、浮腫、脂肪細胞分化または肥満、のインビボでの発生は、例えばＥＰ１２６７１７１に記載されている方法を用いて、前記化合物の補因子補充プロフィールによる影響を受け得る。従って、本発明の１つの実施形態において、好ましい化合物は、望ましくない副作用のインビボでの発生が少ないと予測される化合物である。
【０１２９】
ＰＰＡＲガンマなどの核受容体が、ターゲット遺伝子のプロモーター領域におけるコグネイト配列に結合することにより、ならびに活性がクロマチンリモデリング、ヒストンおよび補因子修飾から塩基転写機械の補充にわたる非常に多数の補因子複合体を補充することによって、転写活性化または抑制を達成することは、広く認められている（Ｇｌａｓｓ，＆  Ｒｏｓｅｎｆｅｌｄ，２０００，Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．，１４，１２１−１４１）。これらの補因子は、核受容体の作用の特異性を大いに左右することがあり、ならびに固有の編成が特異的細胞応答をもたらす刺激のネットワークにそれらの作用を統合することができる。それ故、それぞれの核受容体が参加する多数の協力関係を時間および細胞タイプの関数として決定することにより、転写調節に関する核受容体の活性をより良好に理解することができよう。例えば、エストロゲンなどの一定のホルモンの場合、ホルモンの応答が、それぞれの核ホルモン受容体の存在により、その受容体と相互作用する補因子の存在によるのとほぼ同じ程度に決まることは公知である。様々なＰＰＡＲ補因子が同定されている。一部の補因子、例えば、ｐ３００／ＣＢＰ（Ｄｏｗｅｌｌら，１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２，３３４３５−３３４３３）、ＳＲＣ−１（Ｏｎａｔｅら，１９９５，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７０，１３５４−１３５７）、ＴＩＦ２（ＧＲＩＰ−２；Ｃｈａｋｒａｖａｒｔｉら，１９９６，Ｎａｔｕｒｅ，３８３，９９−１０３）、ＳＲＡ（Ｌａｎｚら，１９９９，Ｃｅｌｌ，９７，１７−２７）、ＡＩＢ−１（Ａｎｚｉｃｋら，１９９７，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７７，９６５−９６８）、ＴＲＡＰ２２０／ＤＲＩＰ２０５（すなわちＰＢＰ；Ｚｈｕら，１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２，２５５００−２５５０６；Ｒａｃｈｅｚら，１９９９，Ｎａｔｕｒｅ，３９８，８２４−８２８）、ＰＧＣ−１（Ｐｕｉｇｓｅｒｖｅｒら，１９９８，Ｃｅｌｌ  ９２，８２９−８３９）、ＰＲＩＰ（Ｚｈｕら，２０００，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７５，１３５１０−１３５１６）、ＰＧＣ−２（Ｃａｓｔｉｌｌｏら，１９９９，Ｅｍｂｏ  Ｊ，１８，３６７６−３６８７）、ＡＲＡ７０（Ｈｅｉｎｌｅｉｎら，１９９９，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７４，１６１４７−１６１５２）、ＲＩＰ１４０（Ｔｒｅｕｔｅｒら，１９９８，Ｍｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  １２，８６４−８８１）は、それらの転写活性を増進させ、これに対してＳＭＲＴ（Ｌａｖｉｎｓｋｙら，１９９８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５，２９２０−２９２５）およびＮ−ＣｏＲ（Ｄｏｗｅｌｌら，Ｊ
Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７４，１５９０１−１５９０７）は、それを抑制する。加えて、ＰＰＡＲガンマ補因子ファミリーのメンバー（例えば、１６０ｋＤａタンパク質（ＳＲＣ−１／ＴＩＦ２／ＡＩＢ−１）、ＣＢＰ／ｐ３００またはＴＲＡＰ２２０／ＤＲＩＰ２０５）は、ＰＰＡＲガンマと直接相互作用し、リガンド依存式に核受容体トランス活性化機能を強化して、生物学的作用または副作用（これは、使用するリガンドによって異なり得る）をもたらすことが明らかになった（Ａｄａｍｓら，１９９７，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１００，３１４９−３１５３）。Ｋｏｄｅｒａら（２０００，Ｊ  Ｂｉｏｌ
Ｃｈｅｍ．，２７５，３３２０１−３３２０４）は、ＰＰＡＲガンマと公知補因子との相互作用が、異なるクラスのＰＰＡＲガンマリガンド（天然または合成）によって同程度に誘導されるかどうかを試験し、ＰＰＡＲガンマと補因子の複合体の総合的構造は関与するリガンドによって異なり、その結果、異なる生物学的作用を発揮するターゲット遺伝子プロモータの特定のセットを活性化することができると結論づけた。
【０１３０】
ＰＰＡＲ部分アゴニストは、特定のコアクチベータ補充プロフィールを有するであろう。従って、特定のコアクチベータ補充プロフィールを有する化合物が好ましい。従って、特別な実施形態によると、本発明の化合物および組成物は、限られた補因子（単数または複数）補充パターンによってさらに特徴づけられる。好ましい実施形態において、前記パターンは、前記核受容体の転写活性の調節に対して特異な影響をもたらし、それによって、特定の代謝プロセスの活性化および望ましくない副作用の排除をもたらす超微調整調節が可能となる。より特異な実施形態において、本発明の化合物および組成物は、さらに、ＰＰＡＲ受容体、さらに好ましくはＰＰＡＲ受容体ＬＢＤと補因子ＴＩＦ２の相互作用を阻害することができる。もう１つの実施形態によると、加えて、本発明の化合物および組成物は、ＰＰＡＲ受容体、さらに好ましくはＰＰＡＲ受容体ＬＢＤ、と補因子ＳＲＣ−１との相互作用を増進させることができる。好ましくは、前記ＰＰＡＲ受容体は、ＰＰＡＲガンマ受容体である。
【０１３１】
リガンドによる補因子補充の阻害および／または増進を測定するための方法は、ＥＰ１２６７１７１において詳述されている。
【０１３２】
好ましい実施形態において、本発明の化合物は、ＰＰＡＲガンマに結合すると、そのＬＢＤにＳＲＣ１を補充することができ、このＥＣ５０は、ＴＩＦ２についてのものより少なくとも１ログ大きく、少なくとも２ログが好ましい。
【０１３３】
本発明の１つの実施形態において、ＰＰＡＲ受容体の天然生理的リガンド、特にＰＰＡＲガンマ受容体のもの、に対するそれらのアゴニスト、特に部分アゴニスト、またはアンタゴニスト特性に起因して好ましい化合物は、ＰＰＡＲ媒介転写制御の生物学的作用をおよびそれらによって生じる付随的生理作用を制御するための医薬として役立つことができる。より具体的には、それらは、随伴する病状を減少させるようにまたは予防をもたらすもしくは増進させるように細胞の生理機能を調節することができる。
【０１３４】
本発明のさらにもう１つの実施形態において、好ましい化合物は、１つより多くのＰＰＡＲ、例えばＰＰＡＲガンマとＰＰＡＲデルタの両方、のアゴニスト（または好ましくは部分アゴニスト）である化合物である。そのようなアゴニストは、例えば本明細書において説明するような、ＰＰＡＲガンマおよびＰＰＡＲデルタそれぞれについてのトランス活性化アッセイによって、同定することができる。ＰＰＡＲガンマおよびＰＰＡＲデルタ活性を判定するための非限定的な方法は、本明細書においてそれぞれ下の実施例２７および２８で説明する。
【０１３５】
本発明の１つの実施形態において、本発明の好ましい化合物は、トロンボキサン受容体（ＴＰ）に結合することができ、例えば、ヒト組換えＨＥＫ−２９３細胞におけるトロンボキサン受容体に結合することができる。特に、本発明の化合物は、トロンボキサン受容体に１００ｎＭ未満、さらに好ましくは５０ｎＭ未満、さらにいっそう好ましくは３０ｎＭ未満、例えば２０ｎＭ未満、例えば１０ｎＭ未満、例えば５ｎＭ未満、例えば１ｎＭ未満のＩＣ５０で結合することができ、好ましい。加えて、１００ｎＭ未満、さらに好ましくは５０ｎＭ未満、さらにいっそう好ましくは２０ｎＭ未満、例えば１０ｎＭ未満、例えば５ｎＭ未満、例えば１ｎＭ未満のＫｉでトロンボキサン受容体に結合することができる本発明の化合物が好ましい。好ましくは、上述のＩＣ５０およびＫｉは、本明細書において下の実施例３５で説明するように決定される。
【０１３６】
好ましいＴＰ受容体モジュレータは、ＴＰ受容体アンタゴニストである。ＴＰ受容体の生理機能としては、血小板凝集、血管収縮および気管支収縮の制御である（Ｔｈｅ  ＩＵＰＨＡＲ  ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ  ｏｆ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  １９９８，２３９頁、およびＴｈｅ
Ｓｉｇｍａ−ＲＢＩ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ５ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，２００６，１３８−１４０頁を参照のこと）。従って、ＴＰ受容体のアンタゴニストである、本発明の好ましいＰＰＡＲ／ＴＰモジュレータは、血小板凝集増加、血管収縮増加および気管支収縮増加、心筋梗塞、血栓症、血栓性疾患、肺高血圧症、アテローム性動脈硬化症、ＩｇＡ腎症、肝臓症候群、糖尿病性腎症、網膜症、糖尿病性網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、肺塞栓症、血栓形成、過形成、敗血性ショック、子癇前症、喘息、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移、ステント誘発血栓形成、ステント誘導再狭窄ならびにステント誘発過形成のうちの１つ以上によって特徴づけられる臨床状態の治療に有用である。
【０１３７】
さらなる実施形態において、本発明の化合物は、トロンボキサンシンターゼ（ＴＳ）活性の阻害剤である（すなわち減少させる）。トロンボキサンは、血小板凝集、血管収縮および気管支収縮の制御に関与し、従って、トロンボキサンシンターゼの阻害は、血小板凝集増加、血管収縮増加および気管支収縮増加のうちの１つ以上によって特徴づけられる臨床状態の治療にも有用である。トロンボキサンシンターゼ活性は、当業者に公知の任意の有用な方法によって判定することができる。１つの有用な方法を本明細書において下の実施例３４で説明する。本発明の非常に好ましい化合物は、本明細書において下の実施例３４で説明するヒト血小板トロンボキサンシンターゼアッセイを用いると、少なくとも１０μＭの濃度でトロンボキサンシンターゼを少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、例えば少なくとも５０％阻害することができる。また、本発明の非常に好ましい化合物は、本明細書において下の実施例３４で説明するヒト血小板トロンボキサンシンターゼアッセイを用いると、トロンボキサンシンターゼを、多くとも１０，０００ｎＭ、好ましくは多くとも９０００ｎＭ、さらにいっそう好ましくは多くとも８０００ｎＭ、さらにいっそう好ましくは多くとも７５００ｎＭ、例えば多くとも７１００ｎＭのＩＣ５０で阻害することができる。
【０１３８】
本発明の好ましい化合物は、血小板凝集を阻害することができる。特に、０．０１から１００μＭの範囲、好ましくは１から３０μＭの範囲、例えばおよそ１μＭ、例えばおよそ８μＭ、例えばおよそ１６μＭ、例えばおよそ３０μＭ、例えば約１μＭ、または約８μＭの濃度で、血小板凝集を少なくとも２０％、好ましくは少なくとも４０％、さらに好ましくは少なくとも５０％、さらにいっそう好ましくは少なくとも８０％、例えば少なくとも９０％、例えば少なくとも９４％、例えば少なくとも９５％、例えば少なくとも９７％、例えばおよそ１００％、例えば１００％阻害することができる（すなわち、血小板凝集が増加した状態でその化合物が血小板凝集を正規化するであろう）化合物が、好ましい。好ましくは、血小板凝集は、実施例３４において説明するようにして判定する。
【０１３９】
本発明の好ましい化合物は、血栓症の誘導後の閉塞時間（例えば、血栓症促進物質、例えばＦｅＣｌ３と接触している状態であってもよい）、すなわち、動脈が閉塞される（血流０％になる）前の時間、を増加させることができる。従って、本発明の化合物を投与すると、動脈が閉塞される前の閉塞時間が、化合物を投与しなかった場合の閉塞時間と比べて増加される。さらにいっそう好ましくは、本発明の化合物は、本明細書において下の実施例３３で説明するマウス血栓症モデルにおいて、閉塞時間を増加させることができる。本発明の好ましい化合物は、１００ｍｇ／ｋｇの投与後に閉塞時間を平均で少なくとも７分、好ましくは少なくとも８分、さらに好ましくは少なくとも９分、さらにいっそう好ましくは少なくとも１０分に増加させることができる。
【０１４０】
特に好ましい実施形態において、本発明の好ましい化合物は、本明細書において上で説明した特性のうちの１つより多くを示す。
【０１４１】
臨床状態
本発明は、上述の化合物（好ましくは、上述のＰＰＡＲ／ＴＰ受容体、ＴＳモジュレータ、好ましくは、式ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩまたはＸＩＶの化合物のいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）の投与を含む臨床状態の治療方法に、ならびに臨床状態の治療するための薬剤を調製するための前記化合物およびそれらの化合物の塩および溶媒和物の使用に関する。
【０１４２】
本明細書において上で説明したＰＰＡＲモジュレータ、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）は、体重管理に利用することができる。従って、前記臨床状態は、１つの実施形態において、摂食障害、例えば、神経性食欲不振（本明細書では「食欲不振」と略記する）または過食症である場合がある。本明細書において上で開示した化合物（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）は、体重を増加または減少させるための、特に、体重を減少させるための方法にも利用することができる。従って、前記臨床状態は、肥満である場合がある。肥満症は、脂肪組織の過剰蓄積である。最近の調査により、ＰＰＡＲ、特にＰＰＡＲガンマは、遺伝子発現および脂肪細胞分化に関して中心的な役割を果たすことが明らかになった。ＰＰＡＲガンマサブタイプは、脂肪細胞分化の活性化に関与するが、肝臓におけるペルオキシソーム増殖の刺激にはあまり重要な役割を果たさない。一般に、ＰＰＡＲガンマの活性化は、脂肪細胞特異的遺伝子発現を活性化することによって脂肪細胞分化に寄与する（Ｌｅｈｍａｎｎ，Ｍｏｏｒｅ，Ｓｍｉｔｈ−Ｏｌｉｖｅｒ，Ｗｉｌｋｉｓｏｎ，Ｗｉｌｌｓｏｎ，Ｋｌｉｅｗｅｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７０：１２９５３−１２９５６，１９９５）。従って、ＰＰＡＲアゴニストを使用して、脂肪組織を増すことができる。脂肪組織の過剰蓄積の治療に有用な特性のためにＰＰＡＲ部分アゴニストを選択してもよい。
【０１４３】
１つの好ましい実施形態において、本発明は、本明細書において上で説明した化合物のいずれか（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）をその必要がある個体に投与することによる、インスリン抵抗性を治療するための方法に関する。本発明は、インスリン抵抗性の治療のための薬剤を調製するための、前記化合物のいずれか（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）の使用にも関する。加えて、本発明は、前記化合物（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）の投与によるインスリン感受性を増加させるための方法、ならびにインスリン感受性を増加させるための薬剤を調製するための前記化合物の使用に関する。インスリン感受性の急性および一過性疾患、例えば、外傷、外科手術または心筋梗塞後に発生し得るものは、本明細書において教示するように治療することができる。
【０１４４】
インスリン抵抗性は、多くの臨床状態に関与する。インスリン抵抗性は、広範な濃度にわたってその生物学的作用を発揮するインスリンの能力の低下によって顕示される。インスリン抵抗性の初期段階の間、身体は、この欠陥を補うために異常に高いインスリン量を分泌する。たとえ血中インスリンレベルが慢性的に高かったとしても、インスリンに対する活性筋細胞の代謝応答障害のために、それらはグルコースを有効に吸収することができない。インスリン抵抗性および結果として生ずる高インスリン血症は、幾つかの臨床状態、例えば、メタボリックシンドローム（Ｘ症候群とも呼ばれる）の一因となり得る。メタボリックシンドロームは、高インスリン血症、異常脂質血症および耐糖能低下を引き起こす第一インスリン抵抗性段階によって特徴づけられる。メタボリックシンドロームを有する患者は、心血管疾患および／またはＩＩ型糖尿病を発現するリスクが高いことが明らかになった。
【０１４５】
以下の基準のうちの少なくとも３つにあてはまるとき、患者をメタボリックシンドロームに罹患していると述べる：
−ウエスト周囲によって測定される（男性の場合は１０２ｃｍより大きい、および女性の場合は９４ｃｍより大きい）ような中心性／腹部肥満
−１５０ｍｇ／ｄＬ（１．６９ｍｍｏｌ／Ｌ）以上の絶食時トリグリセリド
−ＨＤＬコレステロール［男性−４０ｍｇ／ｄＬ（１．０４ｍｍｏｌ／Ｌ）未満；女性−５０ｍｇ／ｄＬ（１．２９ｍｍｏｌ／Ｌ）未満］
−１３０／８５ｍｍＨｇ以上の血圧
−１１０ｍｇ／ｄＬ（６．１ｍｍｏｌ／Ｌ）以上の絶食時グルコース。
【０１４６】
インスリン抵抗性は、脂質生産に対して負の影響も及ぼし、血流中のＶＬＤＬ（超低密度リポタンパク質）、ＬＤＬ（低密度リポタンパク質）およびトリグリセリドレベルの増加、ならびにＨＤＬ（高密度リポタンパク質）低下の一因となる。これは、動脈内の脂肪性プラーク蓄積を招くことがあり、経時的にそれがアテローム性動脈硬化症につながることがある。従って、本発明の臨床状態は、高脂血症、例えば家族性高脂血症である場合がある。好ましくは、高脂血症は、高コレステロール血症および／または高トリグリセリド血症によって特徴づけられる。前記臨床状態は、異常脂質血症および糖尿病性異常脂質血症も包含し得る。ここに含まれる化合物（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）は、血清トリグリセリドレベルを低下させるために、またはＨＤＬの血漿中レベルを上昇させるために利用することもできる。
【０１４７】
インスリン抵抗性は、血液中の過剰なインスリンおよびグルコースレベルをもたらすことがある。過剰なインスリンは、腎臓によるナトリウム貯留を増加させることがあり、それ故、本発明の方法は、腎臓によるナトリウム貯留を減少させるために利用することができる。高いグルコースレベルは、血管および腎臓を損傷させることがある。それ故、本発明の方法は、血管および腎臓への傷害を予防するために利用することができる。
【０１４８】
本発明のもう１つの実施形態において、臨床状態は、ＰＰＡＲガンマによって媒介される炎症性疾患である。用語「ＰＰＡＲガンマによって媒介される」は、ＰＰＡＲガンマがその状態の発現に関してある役割を果たすと理解すべきである。例えば、ＰＰＡＲガンマは、急性炎症などの好中球活性化に関連した炎症に関しては役割を果たさないと考えられる。理論による拘束を望まないが、ＰＰＡＲガンマのアゴニストは、ＫＦκＢ媒介転写に直接関係し、それを阻害する、および従って、様々な炎症反応、例えば、誘導性亜酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）およびシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）の酵素経路などを調節することにより、有効な抗炎症薬である場合がある（Ｐｉｎｅｄａ−Ｔｏｒｒａ，Ｉ．ら，１９９９，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｌｉｐｉｄｏｌｏｇｙ，１０，１５１−９）。
【０１４９】
例えば眼の炎症（Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２０００  Ｊａｎ  ２８；２７５（４）：２８３７−４４）またはドライアイ疾患（Ｊ  Ｏｃｕｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．２００３  Ｄｅｃ；１９（６）：５７９−８７）などの炎症性疾患は、急性である場合もあり、または慢性である場合もある。慢性炎症性疾患の実例となる例としては、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、またはクローン病が挙げられる。慢性炎症性疾患は、関節炎、特に関節リウマチおよび多発性関節炎である場合もある。慢性炎症性疾患は、炎症性皮膚疾患、特に尋常性ざ瘡、アトピー性皮膚炎、バリア機能不全を伴う皮膚疾患、加齢または乾癬、特に乾癬の皮膚作用である場合もある。慢性炎症性疾患は、炎症性神経変性疾患、例えば、多発性硬化症またはアルツハイマー病である場合もある。前記臨床状態は、糸球体腎炎、糸球体硬化症、腎炎症候群、および高血圧性腎硬化症をはじめとする、胃腸疾患および腎疾患である場合もある。
【０１５０】
本発明のもう１つの実施形態において、前記臨床状態は、ＰＰＡＲガンマの活性化に反応する癌である。従って、前記臨床状態は、例えば、ＰＰＡＲ反応性細胞の異常細胞成長によって特徴づけられる疾患、例えば、脂肪組織において発生する増殖性または腫瘍性疾患、例えば、脂肪細胞腫瘍、例えば脂肪腫、線維脂肪腫、脂肪芽細胞腫、脂肪腫症、冬眠腺腫、血管腫、および／または脂肪肉腫である場合がある。さらに、前立腺、胃、肺および膵臓の一定の癌は、ＰＰＡＲガンマアゴニストでの治療に反応することが立証された。特に、一定の脂肪肉腫、前立腺癌、多発性骨髄腫および膵臓癌が、ＰＰＡＲガンマの活性化に反応することは証明されており、これに対して、少なくとも一部の結腸直腸癌および乳癌は、反応しない（Ｒｕｍｉら，２００４，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃ  Ａｇｅｎｔｓ，４：４６５−７７）。神経芽腫および膀胱癌はもちろん、他の乳癌および大腸癌がＰＰＡＲアゴニストに反応することが、他の研究によって立証された。癌の治療のためのＰＰＡＲリガンドの使用は、Ｌｅｖｙ  Ｋｏｐｅｌｏｖｉｃｈ，２００２，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，３５７によって概説されている。
【０１５１】
しかし、たとえ癌の一定のタイプがＰＰＡＲガンマでの活性化に反応することができたとしても、所与のタイプのすべての癌が反応するとは言えない。特に、癌ではＰＰＡＲガンマの機能欠失型突然変異が発生することが多く、そのような癌は、一般に、反応しない。それ故、癌が機能性ＰＰＡＲガンマを発現することは好ましいことである。
【０１５２】
前記臨床状態は、感染、例えば、ウイルス感染、特にＡＩＤＳまたはＨＩＶによる感染もしくはＣ型肝炎ウイルスによる感染である場合もある。加えて、本発明のＰＰＡＲリガンドは、神経疾患におけるもしくは痴呆症における認知機能の改善に、または多嚢胞性卵巣症候群の治療に、または骨量減少、例えば骨粗しょう症の予防もしくは治療に有用であり得る。
【０１５３】
前記臨床状態は、Ｃ型肝炎ウイルス感染に関係があろうと、なかろうと、しかし、好ましくはＰＰＡＲ調節に反応する、肝疾患、特にＣ型肝炎ウイルスによる感染、または脂肪肝、肝臓の炎症、肝臓障害、肝硬変、非アルコール性脂肪性肝炎、または肝後性癌である場合もある。
【０１５４】
前記臨床状態は、マルファン症候群である場合もある。
【０１５５】
説明の多くがＰＰＡＲガンマに関係しているが、本発明の化合物および方法は、ＰＰＡＲガンマの調節に限定されない。実際、他のＰＰＡＲサブタイプが疾病において重要な役割を果たすことは、当業者には明らかであろう。加えて、トロンボキサン受容体がＰＰＡＲ関連疾患において重要な役割を果たすことも当業者には明らかであろう。例えば、ＰＰＡＲデルタは、脂質代謝障害および創傷治癒、特に表皮創傷治癒に関連付けられている（Ｓｏｏｎ  Ｔａｎら，２００４，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔａｒｇｅｔｓ，３９）。それ故、前記臨床状態は、上皮創傷治癒をはじめとする創傷治癒である場合もある。
【０１５６】
インスリン増感剤、例えばグリタゾンは、インスリン抵抗性の治療に使用されているが、インスリン感受性を増進する一方で、それらは、体重を減少させるのではなく増加させもする。肥満および身体無活動状態は、インスリン抵抗性を悪化させる。グリタゾン（チアゾリジンジオンまたはＴＺＤ）は、脂肪組織、肝臓および筋肉におけるインスリン感受性を改善することによって作用する。前記薬剤での治療は、糖尿病の幾つかの動物モデルにおいて試験されており、血糖低下反応の発生を一切伴わずに高い血漿グルコース、トリグリセリドおよび非エステル化遊離脂肪酸レベルを完全に補正する結果となった（Ｃｈｅｎｇ  Ｌａｉ  ａｎｄ  Ｌｅｖｉｎｅ，２０００，Ｈｅａｒｔ  Ｄｉｓ．，２，３２６−３３３）。これらのチアゾリジンジオンの例は、ロシグリタゾン、ピオグリタゾンおよびトログリタゾンである。しかし、魅力的な治療効果をもたらす一方で、これらの化合物には、血液希釈（浮腫を含む）、肝毒性、体重増加（脂肪細胞分化増加からの体脂肪増加、血漿量増加、および心肥大症を含む）、小さいが有意なＬＤＬ−コレステロール増加および貧血をはじめとする非常に多数の重度の望ましくない副作用がある（論評については、Ｌｅｂｏｖｉｔｚ，２００２，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｍｅｔａｂ．Ｒｅｓ．Ｒｅｖ，１８，Ｓｕｐｐｌ  ２，Ｓ２３−９を参照のこと）。実際、多数の利用可能な糖尿病治療薬は、体重増加、この疾病の長期管理には非常に有意な問題、を随伴する。それ故、肥満、糖尿病ならびに通常随伴する疾患、例えば心血管疾患および肝臓病の管理に用いることができる、代替の、より有効な治療薬が、多いに必要とされている。
【０１５７】
従って、１つの実施形態において、本発明は、
ｉ．肥満および糖尿病に罹患している、または
ｉｉ．糖尿病になる、および肥満になるリスクがある、または
ｉｉｉ．肥満に罹患しており、糖尿病になるリスクがある、または
ｉｖ．糖尿病に罹患しており、肥満になるリスクがある、
個体に本発明の化合物（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）を投与することによる肥満と糖尿病の同時治療および／または予防に関する。
【０１５８】
本発明は、肥満と糖尿病の同時治療および／または予防のための薬剤を調製するための本発明の化合物（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）ならびにそれらの化合物の塩および溶媒和物の使用にも関する。前記化合物は、本明細書において上で説明した化合物のいずれか、好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータのいずれか、さらに好ましくは、式ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩまたはＸＩＶの化合物のいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸であり得る。この実施形態の中で、糖尿病は、好ましくはＩＩ型糖尿病である。前記糖尿病になるリスクがある個体は、例えば、本明細書において上で説明したメタボリックシンドロームに罹患している個体である。前記肥満になるリスクがある個体は、例えば、体重増加の副作用を有する抗糖尿病化合物での治療を受けている個体である場合もある。
【０１５９】
本発明は、その必要がある個体におけるトロンボキサンに関連した臨床状態の治療または予防、好ましくは治療のための薬剤を調製するための、上で説明した化合物のいずれか、さらに好ましくは、式ＩＸの化合物、例えば式Ｘの化合物、例えば式ＸＩの化合物、例えば式ＸＩＩの化合物、例えば式ＸＩＩＩの化合物、例えば式ＸＩＶの化合物のいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、ならびにそれらの化合物の塩および溶媒和物の使用にも関する。前記臨床状態は、血小板凝集、血管収縮および／または気管収縮の増加によって特徴づけられる臨床状態である場合がある。前記臨床状態は、例えば、心筋梗塞、血栓症、血栓性疾患、ステント誘発血栓形成、ステント誘導再狭窄、ステント誘発過形成、肺高血圧症、アテローム性動脈硬化症、家族性高コレステロール血症、川崎病、心室中隔欠損症、ＩｇＡ腎症、肝腎症候群、肝線維症、糖尿病性腎症、網膜症、糖尿病性網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、肺塞栓症、血栓形成、過形成、敗血性ショック、子癇前症、喘息、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移から成る群より選択することができる。トロンボキサン（ＴＰ）に関連した臨床状態は、心筋梗塞、アンギナ、不安定狭心症、卒中、一過性脳血管虚血、片頭痛、アテローム性動脈硬化症、細小血管障害、高血圧、血液凝固障害、ワルファリン節減状態（例えば、外科手術前）、肺塞栓症、気管支喘息、気管支炎、慢性気管支炎、肺炎、呼吸困難および肺気腫から成る群より選択することもできる。１つの好ましい実施形態において、前記臨床状態は、血栓症、肺高血圧症、糖尿病性腎症、腎障害の遅延（特に、糖尿病患者における）、網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、血栓形成、ステント誘発血栓形成、ステント誘導再狭窄、ステント誘発過形成、過形成、敗血性ショック、子癇前症、鼻炎、アレルギー性鼻炎、腫瘍血管新生および転移からなる群より、好ましくは、血栓症、肺高血圧症、糖尿病性腎症、網膜症、末梢動脈疾患、下肢循環、血栓形成および過形成から成る群より選択される。異なるメカニズムによって作用するアスピリン、クロピドロゲル、ワルファリンおよび他の類似の薬剤に耐性の個体は、本明細書において説明する化合物での治療による恩恵を特に受ける。さらに、前記個体は、ＴＰに関連した上述の臨床状態のいずれかに罹患しているまたは罹患するリスクがある任意の個体である場合があり、好ましくは、前記個体は、ＴＰに関連した上述の臨床状態のいずれかに罹患しているまたは罹患するリスクがあるヒトであり、さらにいっそう好ましくは、前記個体は、ＴＰに関連した上述の臨床状態のいずれかに罹患しているまたは罹患するリスクがあることに加えて糖尿病に罹患している個体である。
【０１６０】
１つの実施形態において、本発明は、血栓症を既に有する、１つ以上の血栓性事象に罹患した、または１つ以上の血栓性事象に罹患している個体における血栓症の治療に関し、前記方法は、上で説明した化合物のいずれか、さらに好ましくは式ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩまたはＸＩＶの化合物のうちのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸の前記個体への投与を含む。
【０１６１】
本発明は、臨床状態の治療または予防のための薬剤を調製するための、上で説明した特定の化合物のうちのいずれか（好ましくは、上で説明した化合物のいずれか、さらに好ましくは、式ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩまたはＸＩＶの化合物のうちのいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）の使用にも関する。前記臨床状態は、メタボリックシンドローム、異常脂質血症、肥満、真性糖尿病、インスリン抵抗性または上で説明したインスリン抵抗性に関連した状態のいずれか、高血圧、心血管疾患、冠動脈再狭窄、自己免疫疾患（例えば、喘息、多発性硬化症、乾癬、局所皮膚炎、および潰瘍性大腸炎）、癌、炎症、創傷治癒、脂質代謝障害、肝疾患（例えば、Ｃ型肝炎ウイルスによる感染、またはＣ型肝炎ウイルスに関係があろうと、なかろうと、脂肪肝、肝臓の炎症、肝臓障害、肝硬変または肝後性癌）、胃腸または腎疾患（例えば、糸球体腎炎、糸球体硬化症、腎炎症候群、または高血圧性腎硬化症）、感染（特に、ウイルス感染）、認知機能障害（例えば、神経障害または痴呆）、多嚢胞性卵巣症候群、骨量減少（例えば、骨粗しょう症）およびＡＩＤＳから成る群より選択することができる。
【０１６２】
癌は、任意の癌、例えば、次のうちのいずれであってもよい：癌腫、肉腫、骨肉腫、白血病およびリンパ腫；腫瘍血管新生および転移；骨格形成異常；肝疾患；ならびに造血性および／または骨髄増殖性疾患。例示的疾患としては、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛上皮腫、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頚癌、精巣腫瘍、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星上細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽腫、または網膜芽腫が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、前記癌は、ＰＰＡＲガンマの活性化に反応する上述の癌のうちの１つである。
【０１６３】
心血管疾患は、例えば、アテローム発生、アテローム性動脈硬化症またはアテローム硬化性疾患、血管再狭窄、心筋症もしくは心筋線維症、または上述の心血管疾患のいずれかであり得る。
【０１６４】
炎症は、例えば、慢性炎症、好ましくは、本明細書において上で述べた慢性炎症のいずれかであり得る。
【０１６５】
真性糖尿病は、多数の原因因子に由来する疾病プロセスを指し、高い血糖レベル、すなわち高血糖によって特徴付けられる。管理されていない高血糖は、罹患率および死亡率増加ならびに時期尚早の罹患率および死亡率を随伴する。少なくとも２つのタイプの真性糖尿病が特定されている：（ｉ）インスリン（正常生理条件下でグルコース利用を調節するホルモン）の完全欠如の結果である、Ｉ型糖尿病、またはインスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）、および（ｉｉ）ＩＩ型糖尿病、またはインスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）。ＮＩＤＤＭは、多数の原因因子に由来する複合疾患であり、任意に循環インスリンレベルを増加させることによりこれに対処することができる。
【０１６６】
医薬調合物および投与方法
本発明の方法および組成物に従って、本明細書において説明する化合物（好ましくは、上で説明したＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰアンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）のうちの１つ以上を、当業者にはわかるであろうが、選択された投与経路に依存する様々な形態で、哺乳動物に投与することができる。本発明の組成物は、経口的に、経鼻的に、局所的に、肺投与により、または非経口的に投与することができ、最後に述べた経路は、静脈内および皮下経路を含む。非経口投与は、選択された期間にわたる持続注入によるものであってもよい。
【０１６７】
注射可能な使用形態としては、滅菌水溶液または水性分散液、および滅菌注射用溶液または分散液の即時調製のための滅菌粉末が挙げられる。すべての場合、前記形態は無菌でなければならず、且つ、容易に注射できる程度に流動性でなければならない。
【０１６８】
患者による投与の容易さのため、経口または他の非観血的投与様式、例えば、パッチおよび坐剤などが好ましい。本化合物は、不活性希釈剤と共にもしくは同化性可食担体と共に経口投与することができ、またはハードもしくはソフトシェルゼラチンカプセルに封入することができ、錠剤に圧縮することができ、または食事の食べ物に直接混ぜることができる。経口治療投与については、化合物を賦形剤と混ぜ、経口摂取可能な錠剤、バッカル錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップおよびウェハースなどの形態で使用することができる。
【０１６９】
本発明の１つ以上の化合物を含有する組成物は、リポソームと呼ばれるリン脂質小胞内に収容された溶液またはエマルジョンの状態で投与することもできる。前記リポソームは、単相である場合もあり、または多層である場合もあり、ならびにホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、コレステロール、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ジミリストイルホスファチジルコリンおよびこれらの組み合わせから選択される成分で構成される。多層リポソームは、単相小胞に類似した組成の多層小胞を含むが、溶液またはエマルジョン中の化合物を捕捉する多数の区画を生じさせるように作製される。加えて、他のアジュバントおよび修飾剤、例えば、ポリエチレングリコールまたは他の材料をリポソーム製剤に含めてもよい。
【０１７０】
組成物を含有するリポソームは、リポソームの表面に固定された抗体をそれらの送達をターゲッティングするために有するといった修飾を有することもある。
【０１７１】
本発明の１つの実施形態には、上のセクション「臨床状態」で説明した臨床状態のうちの１つを治療するためのインビボでの投与に適する生体適合性形態で対象に投与するための医薬組成物があり、前記方法は、単独でまたは他の薬剤および／もしくは医薬用担体との組み合わせで化合物の安全で有効な量を含む。例えば、本発明の化合物を、異常脂質血症に対して有効な薬剤、例えば、フィブラートクラスの薬物、例えばベザフィブラートと併用して、インスリン抵抗性および／または糖尿病を治療することができる。一部の他の薬剤の例は、インスリン増感剤、ＰＰＡＲγアゴニスト、グリタゾン、トログリタゾン、ピオグリタゾン、エングリタゾン、ＭＣＣ−５５５、ＢＲＬ  ４９６５３、ビグアニド、メトホルミン、フェンホルミン、インスリン、インスリン模倣物、スルホニルウレア、トロブタミド、グリピジド、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、アカルボース、コレステロール低下剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ロバスタチン、シンバスタチン、パラバスタチン、フルバスタチン、アトロバスタチン、リバスタチン、他のスタチン、金属封鎖剤、コレスチラミン、コレスチポール、架橋デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体、ニコチニルアルコール、ニコチン酸：ニコチン酸塩、ＰＰＡＲアルファアゴニスト、フェノフィブリン酸誘導体、ゲムフィブロジル、クロフィブラート、フェノフィブラート、コレステロール吸収阻害剤、ベータ−シトステロール、アクリルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ阻害剤、メリナミド、プロブコール、ＰＰＡＲデルタアゴニスト、抗肥満化合物、フェンフルラミン、デクスフェンフルラミン、フェンチラミン、スルビトラミン、オルリスタット、神経ペプチドＹ５阻害剤、β３アドレナリン作動性受容体アゴニスト、および回腸胆汁酸輸送体阻害剤である。
【０１７２】
本組成物は、その組成物がインビボで効能を有するようなヒトおよび動物をはじめとする、そのような治療が必要な任意の生体に投与することができる。本明細書において用いる場合、安全で有効なは、重度の副作用を回避しつつ、対象が罹患している疾病を減少、予防、改善または治療するために十分な効力をもたらすことを意味する。安全で有効な量は、対象の年齢、治療する対象の健康状態、疾患の重症度、任意の併用療法の治療期間および性質によって変わるであろう。その決定は通常に医師の技能の範囲内である。本組成物は、本明細書において説明するのと同じ一般的な方法で調合され、投与される。本発明の化合物は、単独で有効に使用することができ、または１つ以上の追加の活性薬剤と有効に併用することができる。併用療法は、本発明の化合物と１つ以上の追加の活性薬剤とを含有する単一の医薬投薬組成物の投与、ならびに本発明の化合物およびそれぞれの活性成分のその固有の独立した医薬投薬量での投与を含む。例えば、本発明の化合物およびインスリン分泌促進物質、例えばスルホニルウレア、チアゾリジンジオン、ビグアニド、メグリチニド、インスリンまたはベータ−グルコシダーゼ阻害剤を一緒に、単一の経口投薬組成物、例えばカプセルもしくは錠剤で患者に投与することができ、またはそれぞれの薬剤を別個の経口投薬量で投与することができる。別個の投薬量を用いる場合、本発明の化合物および１つ以上の追加の活性薬剤は、本質的に同じ時に、すなわち同時に投与することができ、または別々に時間をずらして、すなわち逐次的に投与することができる。併用療法は、これらすべてのレジメンを含むと解釈する。
【０１７３】
本発明の医薬組成物の治療活性量も、疾病状態、対象の年齢、性別および体重、ならびに対象において所望の反応を惹起させる化合物の能力などの因子によって変わり得る。至適治療反応をもたらすように投薬レジメンを調整することができる。例えば、幾つかの分割された用量を毎日投与することができ、またはその用量を、治療状況の緊急性によって示されるとおりに比例して減少させることができる。
【０１７４】
約０．０１ｍｇ／ｋｇの用量が、哺乳動物の適切な初期投薬量になる可能性が高く、この投薬量を必要に応じて調整して安全で有効な量を提供する。従って、前記投薬量は、最初は一般に０．０１から１００ｍｇ／ｋｇ、例えば、０．１から５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１から１０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．５から５ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは１から５ｍｇ／ｋｇであろう。一般に、成人についての用量は、好ましくは１日１回または２回投与される、０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１から１０ｍｇ／ｋｇ、さらに好ましくは０．５から５ｍｇ／ｋｇ、例えば合計１から２００ｍｇの範囲、例えば合計で１から１２５ｍｇ、例えば合計で５ｍｇであろう。
【０１７５】
本明細書において用いる場合、医薬的に許容される担体は、対象に投与したときに無害な生理反応を有する１つ以上の相溶性固体または液体送達系を意味する。一部の例としては、デンプン、糖、セルロースおよびその誘導体、粉末トラガカントゴム、麦芽、ゼラチン、コラーゲン、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、硫酸カルシウム、植物油、ポリオール、寒天、アルギン酸、発熱物質不含の水、等張食塩水、リン酸緩衝液、および医薬の調合に用いられる他の適する非毒性物質が挙げられるが、これらに限定されない。他の賦形剤、例えば、湿潤剤および滑沢剤、錠剤形成剤、安定剤、抗酸化物質、および保存薬も考えられる。
【０１７６】
本明細書に記載する組成物は、有効量の化合物または類似体を医薬的に許容される担体との混合物に併せるような、対象に投与することができる医薬的に許容される組成物の調製のための公知の方法によって調製することができる。適する担体は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ，１９８５）に記載されている。これに基づき、本組成物は、排他的にではないが、１つ以上の医薬的に許容されるビヒクルまたは希釈剤と会合した状態であり、適するｐＨを有する緩衝溶液に含まれており、および生理液と等浸透圧である化合物の溶液を含む。
【０１７７】
本発明の１つの好ましい実施形態において、本発明の化合物（好ましくは、ＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤）、例えば式ＩＸの化合物のいずれか、例えば式Ｘの化合物のいずれか、例えば式ＸＩの化合物のいずれか、例えば式ＸＩＩの化合物のいずれか、例えば式ＸＩＩＩの化合物のいずれか、例えば式ＸＩＶの化合物のいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、適する医薬用賦形剤、希釈剤または担体との、特に、化合物の即時放出、遅延放出、調節放出、持続放出、二重放出、制御放出、または拍動送達に適する医薬用賦形剤、希釈剤または担体との混合物で、投与することができる。
【０１７８】
例えば、本発明に従って使用される化合物は、即時放出、遅延放出、調節放出、持続放出、二重放出、制御放出または拍動送達用途向けの、着香剤または着色剤を含有する、錠剤、カプセル（ソフトゲルカプセルを含む）、腔坐剤、エリキシル、溶液または懸濁液の形態で、経口、口腔内または舌下投与することができる。本発明の化合物は、急速分散または急速溶解剤形により投与することもできる。本発明の好ましい実施形態において、本化合物（好ましくは、ＰＰＡＲモジュレータ、ＴＰ受容体アンタゴニストおよび／またはＴＳ阻害剤、例えば式ＩＸの化合物のいずれか、例えば式Ｘの化合物のいずれか、例えば式ＸＩの化合物のいずれか、例えば式ＸＩＩの化合物のいずれか、例えば式ＸＩＩＩの化合物のいずれか、例えば式ＸＩＶの化合物のいずれか、例えば、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、遅延放出、調節放出、持続放出または制御放出用の医薬組成物で投与される。
【０１７９】
遅延放出、調節放出、持続放出または制御放出剤形は、上述の賦形剤と共に、放出速度調節剤として作用する追加の賦形剤（これらは、そのデバイスの本体上に被覆されている、および／または該本体に含まれている）を含有する場合がある。放出速度調節剤としては、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、酢酸セルロース、ポリエチレンオキシド、キサンタンガム、カルボマー、アンモニオメタクリレートコポリマー、水素化ヒマシ油、カルナバワックス、パラフィンワックス、酢酸フタル酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、メタクリル酸コポリマー、クレモフォール、トウモロコシ油グリセリド、プロピレングリコールおよびこれらの混合物が挙げられるが、それらに排他的に限定されない。調節放出および制御放出剤形は、放出速度調節性賦形剤の１つまたは組み合わせを含有し得る。放出速度調節性賦形剤は、その剤形中に、すなわちマトリックス内に存在する場合もあり、および／またはその剤形上に、すなわち表面またはコーティング上に存在する場合もある。
【０１８０】
上で説明した調合物に加えて、本発明に従って使用するための化合物を含有する薬剤は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  １９９５，ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａに記載されているような、従来の技術によって調製することができる。
【０１８１】
以下の実施例は、本発明を例証するために本発明の特定の態様を説明するものであり、ならびに本発明を限定するものと見なすべきではない。これらの実施例は本発明の理解および実施に有用な特定の方法論を提供するものであるからである。  
【実施例】
【０１８２】
実施例１
（Ｚ）−６−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸の合成
この実施例は、スキーム２に従って、本明細書ではＤＰＤとも呼ばれる（Ｚ）−６−［（２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル］ヘキサ−４−エン酸（表ＩＩ中のＳＮ１）の合成を説明するものである。
【０１８３】
【化２１】
2014240409.tif 000028
シス／トランス混合物としてのラセミ２−メトキシパラコン酸の合成（２−３）：２０Ｌ二重ジャケットガラス反応器に２６０ｇのｏ−メトキシベンズアルデヒド、２８６ｇのコハク酸無水物、５７２ｇの無水塩化亜鉛および２６００ｍＬの無水ＤＣＭを充填した。その混合物を攪拌し２℃に冷却した。５３３ｍＬのトリエチルアミン量を３０分の時間をかけて添加した。その後、その混合物を周囲温度で２４時間、攪拌させておいた。１６９０ｍＬの２Ｍ  ＨＣｌ量を添加し、続いて２６００ｍＬの酢酸エチルを添加した。その混合物を５分間、激しく攪拌した。水性相を２０００ｍＬの酢酸エチルで抽出した。併せた有機抽出物を６５０ｍＬの飽和ブラインで洗浄し、その後、３×２６００ｍＬの飽和重炭酸ナトリウムで洗浄した。その後、併せた水性抽出物を酢酸エチルで洗浄した。濃ＨＣｌを使用して、それらの水性抽出物をｐＨ２に酸性化した。黄色の油が分離した。２０００ｍＬの酢酸エチルを使用して、その混合物を２回抽出した。有機相を１０００ｍＬのブラインで４回洗浄し、４５℃の加熱浴温度を用いてＢｕｃｈｉ  Ｒ２２０  ｒｏｔａｖａｐで蒸発させた。残っている残留物に４０００ｍＬのトルエンを添加した。その混合物を１１０℃に加熱した。１Ｌのトルエンを蒸留除去した。残分を放置して室温に冷却し、４８時間放置し、この間に純粋な２−メトキシ−パラコン酸が晶出した。その結晶質材料を回収し、濾過し、真空オーブンにおいて真空下、４５℃で、一定重量になるまで乾燥させた。
収量：２２０ｇ（４９％）。シス／トランス比：４６／５４
シス−およびトランス−ラセミメトキシ−パラコン酸の全トランス−２−メトキシパラコン酸への転化（２−４）：１０２０ｇのメトキシパラコン酸を、１７２９ｍＬの濃硫酸と２５７０ｍＬの水の混合物に添加した。その混合物を室温で１８時間、攪拌させておいた。３３：６４のシス／トランス比を得た。その後、その混合物を２．５時間、６０℃に加熱した。１１：８９のシス／トランス比を得た（ＨＰＬＣにより分析）。その後、その混合物を放置して室温に冷却し、その後、濾過した。固形物を酢酸エチルに再び溶解し、水およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。６：９４のシス／トランス比が観察された。熱トルエンから固形物を再結晶させた。得られた結晶質材料を真空下、４０℃で４８時間乾燥させた。
収量：８５５ｇ（８４％）。シス／トランス比：８／９２．融点：１３２〜１３３℃
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、３００  ＭＨｚ）：２．９（２Ｈ，ｄ）、３．４（１Ｈ，ｍ）、３．８３（３Ｈ，ｓ）、５．８５（１Ｈ，ｄ）、６．８−７．４（４Ｈ，ｍ）
ラセミメトキシ−パラコン酸のエステル化（２−５）：１９３ｇのメトキシ−パラコン酸を６００ｍＬのＴＨＦに溶解した。その混合物に１４５ｇのＣＤＩ（８９９ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加し、その混合物を１０分間攪拌した。６５ｍＬの無水エタノール量（または、メチルエステルを作るためにメタノール）を添加し、完了するまで（〜１２０分）その混合物を攪拌した。その粗反応混合物を、酢酸エチルおよび飽和重炭酸ナトリウムを使用して抽出した。有機相を０．５ＮのＨＣｌおよびブラインで洗浄した。蒸発させた後、所望のエチルエスエルの１８８ｇの量を得た。
【０１８４】
ラセミメトキシ−パラコン酸・エチルエステルの還元（２−６）：ラセミラクトールの調製：５℃で７００ｍＬのトルエン中の１０５ｇのエチルエステル（３９７ｍｍｏｌ）に、３当量のＤＩＢＡＬ−Ｈ（１．１９ｍｏｌ、１．１９Ｌ  １Ｍ溶液）を添加した。その混合物を６０分間、室温で攪拌し、メタノールでクエンチした。酢酸エチル（２．５Ｌ）および水（７００ｍＬ）を添加した。相分離後、水性相をＥｔＯＡｃで再び抽出した。その後、有機層をブラインで洗浄し、濾過し、蒸発させた。油性残留物をクロロホルム／へキサンから再結晶させた。固体を濾過し、真空下で乾燥させた。
収量：５３ｇ（２３７ｍｍｏｌ、５９％）
ラセミラクトールを用いるウィッティヒ反応−ラセミジオールの合成（２−８）：１９１ｇの臭化カルボキシプロピルトリフェニルホスホニウム、１０００ｍＬの無水トルエンおよび１００ｇのカリウムｔ−ブトキシド量を８０℃で３０分間混合した。その混合物を室温に冷却した。１８０ｍＬの無水ＴＨＦに予め溶解した２５ｇの精製ラセミラクトール（１１４．５ｍｍｏｌ）量をゆっくりと添加した。反応を６０分間継続させた。その粗反応混合物を１５００ｍＬの氷水に注入し、３００ｍＬの酢酸エチルを添加した。水性相を３００ｍＬの酢酸エチルで再び抽出した。その後、水性相を２ＮのＨＣｌで酸性化し、３００ｍＬの酢酸エチルを使用して３回抽出した。形成した固体を濾過して除去した。有機相を蒸発させた。蒸発させた残留物に５００ｍＬのジエチルエーテルを添加した。そのフラスコを１０分間、渦攪拌し、固体を濾過して除去した。濾液を重炭酸ナトリウム飽和溶液で３回抽出した。その後、２ＭのＨＣｌを使用して、水性相をｐＨ４に酸性化した。その後、２００ｍＬの酢酸エチルを用いて水性相を３回抽出した。有機相を併せ、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、蒸発させて４５ｇの材料を得た。
【０１８５】
カラムクロマトグラフィー：ラセミジオールをシリカゲル（３５ｃｍのカラム長、４ｃｍの直径）で精製した。ラセミジオールを最少の酢酸エチルに溶解し、カラムに適用した。１Ｌの酢酸エチル（６０％）／ヘキサン（４０％）をメスシリンダーに添加した。３００ｍＬのＥｔＯＡｃ／へキサンをそのシリンダーから取り、カラムに添加した。シリンダーの中の残りの７００ｍＬのＥｔＯＡｃ／へキサンを、酢酸エチルを使用して１Ｌに希釈した。その後、３００ｍＬの新たなＥｔＯＡｃ／へキサン溶液をカラムに添加し、放置してカラムに通した。そのシリンダーの中の残りの７００ｍＬのＥｔＯＡｃ／へキサンを、酢酸エチルを使用して、再び１Ｌに希釈した。その後、３００ｍＬの新たなＥｔＯＡｃ／へキサン溶液をカラムに添加し、放置してカラムに通した。そのシリンダーの中の残りの７００ＬのＥｔＯＡｃ／へキサンを、酢酸エチルを使用して、もう１度、１Ｌに希釈した。その後、３００ｍＬの新たなＥｔＯＡｃ／へキサン溶液をカラムに添加し、放置してカラムに通した。ラセミジオールの純粋な画分を回収し、蒸発させて、２６ｇの純粋なラセミジオールを得た。
収量：２６ｇ（８８．３ｍｍｏｌ、７９％）
ラセミジオールのラセミアセトニドへの転化（２−１０）：２６ｇ（８８ｍｍｏｌ）の精製ジオールを２６０ｍＬのジメトキシプロパンおよび２６ｍｇのｐ−ＴｓＯＨと混合した。その混合物を周囲温度で一晩、攪拌させておいた。３滴のトリエチルアミンを添加し、その混合物を蒸発させた。残っている残留物に１５０ｍＬのヘキサンを添加し、その混合物を一晩攪拌した。固体を濾過して除去し、乾燥させて、２５ｇ（７５ｍｍｏｌ）のラセミアセトニドを得た。
収率：８５％
ラセミアセトニドの脱メチル化（２−１２）：３７５ｍＬのＤＭＰＵ中の２１．５ｇのＮａＨの混合物に１６．７ｇのエタンチオールを添加することにより、水素化ナトリウムおよびエタンチオールの懸濁液を調製した。その懸濁液を８０℃に加熱し、放置して周囲温度に冷却した。
【０１８６】
１５ｇのラセミアセトニドを７５ｍＬのＤＭＰＵに溶解し、ＥｔＳＨ／ＮａＨの懸濁液に添加した。その混合物を１３０℃で２時間加熱した。その後、その反応混合物を氷水に注入し、ＤＣＭで抽出した。２ＮのＨＣｌを使用して水性層を酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、蒸発乾固させた。
収量：１６．５ｇ（粗製）。
【０１８７】
ラセミ最終化合物の調製（２−１４）：２８ｍｍｏｌの脱メチル化ラセミアセトニド量を、１５ｍＬの２−クロロベンズアルデヒド、０．５ｇのｐ−ＴｓＯＨおよび６０ｍＬのトルエンと混合した。その混合物を２４時間攪拌し、蒸発させた。その粗反応混合物を、Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｈｏｒｉｚｏｎ（登録商標）クロマトグラフィー計器を利用するシリカゲルクロマトグラフィーを用いて精製した。ＤＣＭ（１９）／メタノール（１）を使用してその混合物を精製して、蒸発後、６．５ｇの固体を得た。
収量：６．５ｇ（１６．７ｍｍｏｌ、５９％）
【０１８８】
【化２２】
2014240409.tif 000029
【０１８９】
【表１−１】
2014240409.tif 000030
【０１９０】
【表１−２】
2014240409.tif 000031
実施例２
ＰＰＡＲモジュレータ２（ＳＮ２、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ２（ＳＮ２、表ＩＩ）の合成を説明するものである。実施例１において説明したようなラセミアセトニド（６−［４−（２−ヒドロキシフェニル）−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル］−ヘキサ−４−エン酸）２−１２の１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）量を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１０８ｍｇ）の２，３−ジクロロベンズアルデヒドを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用してシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４３５
実施例３
ＰＰＡＲモジュレータ６（ＳＮ６、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ６（ＳＮ６、表ＩＩ）の合成を説明するものである。１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）のラセミアセトニド量を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に２当量（０．６２ｍｍｏｌ、７０ｍｇ）のシクロヘキサノンを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用してシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝３５９
実施例４
ＰＰＡＲモジュレータ８（ＳＮ８、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ８（ＳＮ８、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０１９１】
Ｎ−Ｂｏｃ  ４−オキソピペリジンの調製：２ｇの４−オキソピペリジン量を２０ｍＬのジオキサン／水に溶解した。その混合物に２当量の重炭酸ナトリウムを添加し、続いて１．０当量のＢｏｃ２Ｏを添加した。その混合物を４時間攪拌した。酢酸エチル（１００ｍＬ）を添加した。０．２ＮのＨＣｌおよびブラインを使用して、有機相を２回洗浄した。その後、その有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させて油を得、それが結晶した。１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）のラセミアセトニド量を１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に、２当量（０．６２ｍｍｏｌ）のＮ−Ｂｏｃ−４−オキソピペリジンを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用して小型シリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４６０
スピロ−ピペリジン環上になお存在するＢｏｃ−保護基を含む反応生成物を用いて、本明細書において下で言及する生物学的アッセイを行った。
【０１９２】
実施例５
ＰＰＡＲモジュレータ９（ＳＮ９、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ９（ＳＮ９、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０１９３】
１−ナフタレンカルボキシアルデヒドの調製  ３．８７ｍＬの塩化オキサリル（４４．２４ｍｍｏｌ）量を１００ｍＬのＤＣＭに溶解した。その混合物を−６０℃に冷却した。注射器を使用して、５．６ｍＬのＤＭＳＯ量を滴下した。その混合物を１５分間攪拌した。７５ｍＬのＤＣＭ中の５ｇのナフタレン−１−メタノールの溶液を滴下した。その反応を１時間、−６０℃で継続した。２０ｍＬのトリエチルアミン量を添加した。その混合物を放置して１５℃にした。その混合物を抽出漏斗に移し、水、１ＭのＨＣｌ、水、そしてブラインで洗浄した。その後、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させた。その粗生成物は、さらに精製せずに次の段階で使用するために十分純粋であった。
【０１９４】
実施例１に従って調製した１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）のラセミアセトニド（２−１２、上に記載したとおり）量を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に２当量（０．６２ｍｍｏｌ、９７ｍｇ）の１−ナフタレンカルボキシアルデヒドを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用してシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４１７
実施例６
ＰＰＡＲモジュレータ１１（ＳＮ１１、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ１１（ＳＮ１１、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０１９５】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）のラセミアセトニド（実施例１からの２−１２）量を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に２当量（０．６２ｍｍｏｌ、６２ｍｇ）のヘキサナールを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用してシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝３６１
実施例７
ＰＰＡＲモジュレータ１３（ＳＮ１３、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ１３（ＳＮ１３、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０１９６】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）のラセミアセトニド量を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１３０ｍｇ）のｏ−２−オキソ−４ａ，８ａ−ジヒドロ−２Ｈ−クロメン−４−カルバルデヒドを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用して小型シリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４６９
実施例８
ＰＰＡＲモジュレータ１９（ＳＮ１９、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ１９（ＳＮ１９、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０１９７】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）のラセミアセトニド量を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１０３ｍｇ）の２，３−ジメトキシベンズアルデヒドを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用してシリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
ＨＰＬＣ：保持時間（勾配Ａ）：１５．２３、１５．３９分、９５％（異性体の１：１混合物の合計）
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４２７．２
実施例９
ＰＰＡＲモジュレータ１４（ＳＮ１４、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ１４（ＳＮ１４、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０１９８】
室温でＤＣＭ（１０ｍＬ）中のジオール（０．０８ｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、２，６−ジクロロベンズアルデヒド（０．０７ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）およびｐＴＳＡ（３ｍｇ）を添加した。その反応混合物を８時間攪拌し、トリエチルアミン（２〜３滴）でクエンチし、その後、真空下で濃縮した。残留物を、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ（８：２）で溶離するシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、アセタール（１００ｍｇ、収率４５％）を無色の油として得た。
１ＨＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．５５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、７．３７−７．１３（ｍ，４Ｈ）、７．００（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．８７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ）、６．４６（ｓ，１Ｈ）、５．５１−５．１５（ｍ，３Ｈ）、４．２４−４．１４（ｍ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、２．９９−２．８１（ｍ，１Ｈ）、２．４０−２．２７（ｍ，４Ｈ）、１．９３−１，８７（ｂｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ）、１．７３−１．６７（ｂｄ，１Ｈ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ）。ＭＳ：４５０（Ｍ＋）
実施例１０
ＰＰＡＲモジュレータ１５（ＳＮ１５、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム３によるＰＰＡＲモジュレータ１５（ＳＮ１５、表ＩＩ）の合成を説明するものである。実施例１のスキーム２からの化合物２−１２（１００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、触媒量のｐＴｓＯＨ（５ｍｇ）を室温で添加した。その反応混合物を室温で８時間、攪拌し続けた。２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンズアルデヒド（１５８ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）をその反応素材に添加した；もう１度、触媒量のｐＴｓＯＨを添加した。反応条件をさらに２４時間維持した。反応完了後、乾燥Ｅｔ３Ｎを添加して、ｐＨ＝７に調整した。真空下で溶媒を除去し、得られた粗製混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、最終生成物１５を得た。
【０１９９】
【化２３】
2014240409.tif 000032
【０２００】
【表３】
2014240409.tif 000033
実施例１１
ＰＰＡＲモジュレータ２３（ＳＮ２３、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム４によるＰＰＡＲモジュレータ２３（ＳＮ２３、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０２０１】
ウィッティヒ反応  １０ｇ（２２．５６ｍｍｏｌ）のＢｒＰＰｈ３（ＣＨ２）４ＣＯ２Ｈ量を６０ｍＬの乾燥トルエン中の５．０６ｇ（４５ｍｍｏｌ）のＫＯｔＢｕと混合した。その混合物を３０分間、８０℃に加熱し、放置して周囲温度に冷却した。１０ｍＬの無水ＴＨＦ中の１．２６ｇのラセミラクトール量を添加し、その反応を２時間継続させた。処理は、スキーム２の２−８の調製についてのものと同様である。
収率：３．３ｇ（粗製、次の段階でそのまま使用）。
【０２０２】
アセトニドの調製：前の段階で得られたジオールを、４０ｍＬのジメトキシプロパンに溶解した。２５ｍｇのｐ−ＴｓＯＨ量を添加し、その反応物を２４時間攪拌した。１滴のトリエチルアミンを添加し、その混合物を蒸発させた。その粗製混合物を小さなシリカゲルカラムで濾過した。
収量：１．６ｇ
アセトニドの脱メチル化  １．９１ｍＬのエタンチオール（２５．８３ｍｍｏｌ）量を５０ｍＬのＤＭＰＵと混合した。５１．７ｍｍｏｌのＮａＨ（２．０６ｇ、油中６０％分散物）量を添加し、その混合物を３０分間、８０℃に加熱した。その混合物を周囲温度に冷却した。７．５ｍＬのＤＭＰＵ中の１．５ｇのアセトニド（４．３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、その混合物を２時間、１２５℃で攪拌した。その粗製混合物を氷水に注入し、２×５０ｍＬのＤＣＭで抽出した。水性相を２ＮのＨＣｌで酸性化させ、その後、ＥｔＯＡｃで抽出し、最後にブラインで洗浄した。有機相を蒸発させて、１．６ｇのヒドロキシアセトニドを得た。
【０２０３】
２−クロロベンズアルデヒドとの反応  そのヒドロキシ−アセトニド（１．６ｇ、粗製）を２ｍＬの２−クロロベンズアルデヒド、８ｍＬの無水トルエンおよび５０ｍｇのｐＴｓＯＨと混合した。その混合物を２４時間攪拌し、蒸発させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって精製した。
質量スペクトル（エレクトロスプレー、ネガティブモード）：［Ｍ−Ｈ］−＝４１５
実施例１２
ＰＰＡＲモジュレータ１７（ＳＮ１７、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム４によるＰＰＡＲモジュレータ１７（ＳＮ１７、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０２０４】
１００ｍｇ（０．３１ｍｍｏｌ）のラセミアセトニド量を、１ｍＬのトルエンおよび１０ｍｇのｐ−トルエンスルホン酸と混合した。その混合物に２当量（０．６２ｍｍｏｌ、１２２ｍｇ）の４−フェニルアミノベンズアルデヒドを添加した。その混合物を２４時間攪拌し、窒素流を用いて蒸発させた。その粗反応混合物を、メタノール（１）／ＤＣＭ（１９）を使用して小型シリカゲルカラムで精製した。純粋な画分をＴＬＣによって同定し、回収し、蒸発させ、ＨＰＬＣおよび質量分析法によって分析した。
【０２０５】
ｏ−メトキシパラコン酸のメチルエステルの合成：ａ）乾燥ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の酸（５ｇ、２１．１８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、０℃で、Ｋ２ＣＯ３（２９．２ｇ、２１１．８ｍｍｏｌ）、続いてヨウ化メチル（６．０１ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を５時間、室温で攪拌した。その反応混合物を水（１０ｍＬ）、ＤＣＭ（３０ｍＬ）で希釈し、有機層を分離した。水性層をＤＣＭ（２×１５ｍＬ）で抽出し、併せた有機層をブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で蒸発させてエステルを得た。これは、さらなる反応で使用するために十分純粋であった（収量：４．３４ｇ、８１．９％）。
【０２０６】
ｂ）乾燥エーテル（６０ｍＬ）中の酸５（１０ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、新たに調製したジアゾメタン溶液（２００ｍＬ溶液、１０ｇのニトロソメチルウレアから生成したもの）を０℃で添加し、３０分間、室温で攪拌した。出発原料が完全に消失した後、エーテルを蒸発させてエステル６を得、それを精製せずにさらなる反応に使用した（収量：９．８ｇ、９８％）。黄色の粘稠油。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，２００ＭＨｚ）：δ７．３８−７．２２（２Ｈ，ｍ）、６．９４−６．８２（ｍ，２Ｈ）、５．７９（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、３．３６−３．２４（ｍ，１Ｈ）、２．９−２．８（ｍ，２Ｈ）。
【０２０７】
実施例１３
ＰＰＡＲモジュレータ３４（ＳＮ３４、表ＩＩ）の合成
この実施例は、ＰＰＡＲモジュレータ３４（ＳＮ３４、表ＩＩ）の合成を説明するものである。
【０２０８】
乾燥トルエン（２ｍＬ）中のジオール７（０．４ｇ、１．３６ｍｍｏｌ）およびクロロベンズアルデヒドジメチルアセタール（０．２８ｇ、１．６３ｍｍｏｌ）の混合物を、一晩、触媒量のｐ−トルエンスルホン酸（〜５ｍｇ）の存在下、窒素雰囲気下で攪拌した。出発原料が完全に消失した後、その反応混合物を固体ＮａＨＣＯ３で中和し、その反応混合物から溶液をデカントし、ロータリーエバポレータで濃縮した。その粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製してベンジリデンアセタールを得た。
収量：０．３１ｇ（５９％）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，２００ＭＨｚ）：δ７．８２（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．４２（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．３８−７．２（ｍ，３Ｈ）、６．８７（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．８２（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．０５（ｓ，１Ｈ）、５．７２（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．４５（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１（ｔ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，２Ｈ）、４．１（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、３．８３（ｓ，３Ｈ）、２．６８−２．５６（ｍ，１Ｈ）、１．２９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２０９】
ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（４ｍＬ、３：１）中のこの化合物（０．２ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（０．３ｇ、７．１５ｍｍｏｌ）、メタノール（０．５ｍＬ）を添加し、一晩、室温で攪拌した。その反応混合物をＮａＨＳＯ４の飽和水溶液で中和し、ＤＣＭ（２×１０ｍＬ）で抽出した。併せた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、ｒｏｔａｖａｐｏｕｒで蒸発させ、その粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製した。
収量：９５ｍｇ（５１％）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，２００ＭＨｚ）：δ７．８３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．３２（ｍ，１Ｈ）、７．２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．９（ｔ，Ｊ＝７．５，６．６Ｈｚ，１Ｈ）、６．６９（ｍ，１Ｈ）、６．０６（ｓ，１Ｈ）、５．６７（ｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．４２（ｓ，１Ｈ）、４．１８（ｄｄ，Ｊ＝１１．３２Ｈｚ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、２．５８（ｍ，１Ｈ）、２．０９（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ：４１１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０２１０】
【化２４】
2014240409.tif 000034
実施例１４
ＰＰＡＲモジュレータ２５（ＳＮ２５、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ２５の合成を説明するものである。
【０２１１】
エタンチオール（０．７ｍＬ、９．５ｍｍｏｌ）を、０〜５℃で乾燥ＤＭＦ（８ｍＬ）中の（油中６０％）ＮａＨ（０．３８ｇ、９．５ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に添加し、２０〜３０分間攪拌した。乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物４ａ−１（０．２５ｇ、０．９５ｍｍｏｌ）を、温度を維持しながら、上の混合物にゆっくりと滴下した。その反応素材温度を１２０〜１３０℃に上昇させ、６〜８時間維持した。反応完了後、その素材を０〜５℃に冷却し、１ＮのＨＣｌ（１ｍＬ）でそのｐＨを４〜５に調整することによってクエンチした。その化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水性層を分離した。併せた有機画分を回収し、ブライン、水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空下で濃縮した。その粗生成物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン、２．５：７．５で溶離）によって精製して、純粋な４ａ−２）を得た。
収量：１５５ｍｇ（６５．６％）。
【０２１２】
化合物４ａ−２（０．１５ｇ、０．６ｍｍｏｌ）を、８：２の比率のアセトンと水の混合物（１０ｍＬ）に溶解した。上の混合物に、ＯｓＯ４（触媒量、０．０５Ｍ）およびＮＭＯ（０．１４ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で８〜１０時間攪拌し続けた。反応の進行をＴＬＣによってモニターした。反応完了後、それをＮａ２Ｓ２Ｏ５飽和溶液（３ｍＬ）によってクエンチした。溶媒アセトンを真空下で除去し、化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出した。併せた有機画分を回収し、ブライン、水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空下で濃縮した。
【０２１３】
ＴＨＦ；Ｈ２Ｏ（８：２、１０ｍＬ）の混合物中のその粗生成物（スキームに描かれていないジオール）に、ＮａＩＯ４（０．２７ｇ、１．８ｍｍｏｌ）を室温で添加し、１時間、攪拌し続けた。反応完了後、それをＮａ２Ｓ２Ｏ５飽和溶液（３ｍＬ）によってクエンチした。化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水性層を分離した。併せた有機画分を回収し、ブライン、水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空下で濃縮した。その粗生成物４ａ−３をさらなる反応のために処理した。
【０２１４】
乾燥ベンゼン中の化合物４ａ−３の溶液（１０ｍＬ）に、Ｃ２−ウィッティヒイリド（０．１５ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を添加した。その反応素材を不活性条件下で２〜３時間、室温で攪拌し続けた。過剰なベンゼンをロータリーエバポレータで除去し、このようにして得られた粗製化合物４ａ−５をカラムクロマトグラフィーによる精製に付した。（酢酸エチル：ヘキサン、０．５：９．５）。
収量：０．１１ｇ（９５％）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ８．１（ｓ，１Ｈ）、７．２−７．１（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），６．８５−６．６（ｍ，４Ｈ）、５．８−５．６９（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．８５（ｍ，１Ｈ）、４．１５−４．０（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，８．７４，３Ｈ）、３．８０−３．７０（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、２．７−２．５５（ｍ，１Ｈ）、２．１５−２．０５（ｍ，１Ｈ）、１．７２−１．６５（ｍ，１Ｈ）、１．６０−１．４０（ｍ，６Ｈ）、１．２５−１．１１（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）、［Ｍ＋Ｎａ＋］＝３４３．１。
【０２１５】
ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（８：２、５ｍＬ）の混合物中の化合物４ａ−５（０．１１ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、室温でＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（０．１ｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加し、８〜１０時間、攪拌し続けた。反応完了後、ＮａＨＳＯ４飽和水溶液（１ｍＬ）でそのｐＨを４〜５に調整することによってクエンチした。その化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水性層を分離した。併せた有機画分を回収し、ブライン、水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空下で濃縮した。その粗生成物４ａ−６をさらなる反応のために処理した。
【０２１６】
化合物４ａ−６（８５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）をＴＨＦに溶解し、触媒量のｐＴＳＯＨを室温で添加した。その反応混合物を室温で６〜８時間、攪拌し続けた。ｏ−クロロベンズアルデヒド（８１ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）をその反応素材に添加し、もう１度、触媒量のｐＴＳＯＨを添加した。反応条件をさらに５〜６時間維持した。反応完了後、ｐＨ＝７に調整することにより乾燥Ｅｔ３Ｎを添加した。真空下で溶媒を除去し、得られた粗製混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、最終生成物２５（表ＩＩ）を得た。（酢酸エチル：ヘキサン；３．５：６．５）。
収量：３５ｍｇ（３２％）
上の化合物のＨＰＬＣ純度は、７９．２％であり、これを分取ＨＰＬＣによってさらに精製して、純粋な化合物（純度９８％、１５ｍｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．８５−７．６９（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．５−７．３０（ｍ，４Ｈ）、７．１９−７．０８（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．０８−７．０（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．９９−６．７０（ｍ，２Ｈ）、６．０５（ｓ，１Ｈ）、５．９５（ｓ，１Ｈ）、５．９−５．７５（ｄ，Ｊ＝１５．７Ｈｚ，１Ｈ）、５．５（ｓ，１Ｈ）、４．４−４．１（ｓ，ｂｒｏａｄ，２Ｈ）、２．４−２．１（ｍ，４Ｈ）、２．９−２．７（ｍ，１Ｈ）、２．３５−２．１９（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．１−１．９５（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）。［Ｍ＋＋Ｈ＋］＝３７４．１。ＨＰＬＣ：９８．９３％（ＲＴ：４．１２）
【０２１７】
【化２５】
2014240409.tif 000035
実施例１５
ＰＰＡＲモジュレータ３７（ＳＮ３７、表ＩＩ）の合成
この実施例は、スキーム５による表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ３７の合成を説明するものである。
【０２１８】
スキーム５におけるマロン酸水素エチル５−２の調製：
室温でエタノール（１００ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（２０ｇ、０．１２５ｍｏｌ）の攪拌溶液に、時々冷却しながら、エタノール（３０ｍＬ）中の８５％ＫＯＨ（７ｇ、０．１２５ｍｏｌ）の溶液を添加した。２０分後、その混合物を濃ＨＣｌで酸性化し、濾過した。フィルターケーキ（ＫＣｌ）をエタノール（５０ｍＬ）で洗浄した。併せた濾液を濃縮し、残留液をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８５：１５）に付して１（１４．７ｇ、８７％）を得た。
【０２１９】
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．２２（３Ｈ，ｔ）、３．３９（２Ｈ，ｓ）、４．３９−４．４１（２Ｈ，ｑ）。
【０２２０】
ケト−エステル５−４の調製
乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の１４．３４ｇのマグネシウムエトキシド（０．１３ｍｏｌ）の懸濁液に、１０．５ｇのマロン酸水素エチル１  ５−２（０．０８ｍｏｌ）を添加し、９０分間、還流させた。その反応混合物を０℃に冷却し、乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）中の塩化２−メトキシベンゾイル５−３（１４．５９ｇ；０．０８５ｍｏｌ）の溶液を、反応温度が５℃を超えないような速度で添加した。その反応混合物を室温で一晩攪拌し、２日間、放置した。塩化アンモニウムの飽和溶液を添加し、その反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）で抽出した。併せた有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を蒸発させて生成物を油として得、カラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：９５：５）によって精製して、生成物（４．３３ｇ、収率２５％）を得た。その生成物をスペクトルデータによって確認した。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．２３（３Ｈ，ｔ）、３．８５（５Ｈ，ｓ）、４．１０−４．２２（２Ｈ，ｑ）、６．９０−７．０５（２Ｈ，ｍ）、７．４２−７．５１（１Ｈ，ｍ）、７．６９−７．８０（１Ｈ，ｄ）。
【０２２１】
乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）中の水素化ナトリウム（６０％、０．９ｇ、０．０８ｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、アセチル化エステル（４．３３ｇ、０．０１９ｍｏｌ）を０〜１０℃で滴下し、１５分間攪拌した。臭化アリル５−５（２．３０ｇ、０．０１９ｍｏｌ）をその反応混合物に室温で添加し、その反応混合物を３〜４時間還流させた。反応混合物を冷却し、塩化アンモニウム溶液を添加し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。その粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ｎ−へキサン−ＥｔＯＡｃ：９５：５）によって精製して、５−６（２．５ｇ、収率５０％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．１５（３Ｈ，ｔ）、２．６１−２．７２（２Ｈ，ｍ）、３．９０（３Ｈ，ｓ）、４．０５−４．１１（２Ｈ，ｑ）、４．３０−４．３３（１Ｈ，ｍ）、４．９２−５．１０（２Ｈ，ｍ）、５．７８−５．８１（１Ｈ，ｍ）、６．９２−７．１５（２Ｈ，ｍ）、７．４０−７．４９（１Ｈ，ｍ）、７．７１−７．７５（１Ｈ，ｄ）。
【０２２２】
ジオールの調製（５−７）：
乾燥ＴＨＦ（１５ｍＬ）中の水素化ホウ素リチウム（０．８３ｇ、０．０３８ｍｏｌ）の冷却懸濁液に、乾燥ＴＨＦ（２５ｍＬ）中のアルキル化ケトエスエル５−６（２．５ｇ、０．００９５ｍｏｌ）の冷却溶液を、温度が１０℃を超えないような速度で添加した。４〜５時間、室温で攪拌を継続し、その反応の進行をＴＬＣによってモニターした。その反応混合物を、２ＮのＨＣｌの添加によってｐＨ２に酸性化し、その反応混合物に水を添加し、ＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。併せた有機層をブライン、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を蒸発させて、ジオール５−７のシスとトランスの反応混合物（２ｇ、収率９４％）を得、精製せずに次の段階に進めた。ＨＰＬＣ：シス
７７．３１８％、保持時間  ２０．２４４分；トランス  ２２．６８２％、保持時間  ２２．３３７分。（ＨＰＬＣ条件は、そのクロマトグラムにおいてで述べる）。
【０２２３】
アセトニド５−１０の調製：
ジオール５−７（２ｇ、０．００９ｍｏｌ）、２，２−ジメチルプロパン（１５ｍＬ、０．１２ｍｏｌ）、触媒量のｐＴＳＡ（１０ｍｇ）の溶液を室温で４〜５時間攪拌し、その反応の進行をＴＬＣによってモニターした。その反応混合物をＥｔ３Ｎで中和した。過剰なＤＭＰを真空下で除去し、その油性シス−トランス混合物をカラムクロマトグラフィーによって分離して、５−１０（０．９２５ｇ、収率４０％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．５１（３Ｈ，ｓ）、１．５３（３Ｈ，ｓ）、１．６２−１．８０（２Ｈ，ｍ）、２．２５−２．４１（１Ｈ，ｍ）、３．７５−３．８５（１Ｈ，ｍ）、３．８２（３Ｈ，ｓ）、４．０８−４．１１（１Ｈ，ｍ）、４．８５−４．９６（２Ｈ，ｍ）、５．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３）、５．４１−５．６２（１Ｈ，ｍ）、６．７５−６．８１（１Ｈ，ｄ）、６．９０−６．９７（１Ｈ，ｍ）、７．１５−７．２５（１Ｈ，ｍ）、７．３３−７．４１（１Ｈ，ｍ）。
【０２２４】
１，３−ジオキサンアルデヒドの調製（オゾン分解）５−１１：
−７８℃で乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のアセトニド５−１０（０．９３ｇ、０．００４ｍｏｌ）の溶液に、永久に青色になるまで、Ｏ３を通した。その反応混合物を、その青色が消えるまで、０℃で攪拌した。ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＴＰＰ（１．１ｇ、０．００４３ｍｏｌ）の溶液を０℃でその無色溶液に添加し、その反応混合物を室温に温め、１時間攪拌した。その反応混合物の進行をＴＬＣによってモニターした。溶媒を除去し、生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、アルデヒド５−１１（０．５ｇ、収率５４％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．５０（３Ｈ，ｓ）、１．５４（３Ｈ，ｓ）、２．２３（１Ｈ，ｄｄ）、２．４４（１Ｈ，ｍ）、２．７５−２．８０（１Ｈ，ｍ）、３．６５（１Ｈ，ｄｄ）、３．８１（３Ｈ，ｓ）、４．２１−４．２２（１Ｈ，ｄｄ）、５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）、６．９０（１Ｈ，ｄ）、６．９５−６．９７（１Ｈ，ｔ）、７．１８−７．２１（１Ｈ，ｍ）、７．３９−７．４０（１Ｈ，ｄ）、９．４５（１Ｈ，ｓ）。
ＩＲ（ｃｍ−１）：２９９２、２９３３、２７２０、１７２３、１５９５、１４９１、１４６２、１３７９、１２３９および１１９７。
【０２２５】
ウィッティヒ塩５−１２の調製：
乾燥アセトニトリル（５０ｍＬ）中の６−ブロモヘキサン酸（３ｇ、０．０５１２ｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４．８ｇ、０．０１８ｍｏｌ）の溶液を２０〜２４時間還流させ、過剰な溶媒を減圧下で除去して、無色の油を得、それを乾燥ベンゼンで研和し、乾燥ベンゼンおよびエーテルで順次洗浄した（それぞれ３回）。この洗浄手順中に材料が晶出し、それを減圧下で乾燥させてウィッティヒ塩を白色の微晶質粉末として得た（３．６ｇ、収率５５％）。
【０２２６】
２，４−置換（１，３−ジオキサン−５−イル）カルボン酸（ＳＮ３７、表ＩＩ）（ウィッティヒ生成物）５−１３の調製：
乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中の水素化ナトリウム（６０％、０．３６４ｇ、０．０１５２ｍｏｌ）の溶液を、Ｎ２雰囲気下、０℃で乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のウィッティヒ塩５−１２（０．９５ｇ、０．００２ｍｏｌ）の攪拌懸濁液に添加した。その混合物を３０分間攪拌した。その後、アルデヒド５−１１（０．５ｇ、０．００１９ｍｏｌ）の溶液を添加した。その反応を攪拌しながら３６時間継続した。反応完了後、水を添加し、溶媒を減圧下で除去した。その水溶液を酢酸エチルで洗浄し、５％ＨＣｌでｐＨ２に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。併せた有機抽出物を飽和ブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発させた。得られた油をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル−７５：２５）によって精製して、ウィッティヒ生成物５−１３（０．２ｇ、収率３５％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１．４９（３Ｈ，ｓ）、１．５１（３Ｈ，ｓ）、１．４０−１．４９（４Ｈ，ｍ）、１．５５−１．９５（４Ｈ，ｍ）、２．２２−２．４８（３Ｈ，ｍ）、３．７０−３．７５（１Ｈ，ｍ）、３．８０（３Ｈ，ｓ）、４．０５−４．１５（１Ｈ，ｍ）、５．１２−５．４２（２Ｈ，ｍ）、５．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３０Ｈｚ）、６．７５−６．８０（１Ｈ，ｄ）、６．９２−６．９９（１Ｈ，ｔ）、７．２１−７．２５（１Ｈ，ｍ）、７．４０−７．４７（１Ｈ，ｄ）。
ＬＣ／ＭＳ：純度９１％、およびＭＷ：３８５（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２２７】
実施例１６
ＰＰＡＲモジュレータ３６（ＳＮ３６、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ３６（２，２−ジメチル−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル−カルボン酸）（５−１５）の合成（メトキシ基の脱保護）を説明するものである：
エタンチオール（０．１３ｇ、０．００２０３ｍｏｌ）を、０℃、Ｎ２雰囲気下で、ＤＭＰＵ（５ｍＬ）中の水素化ナトリウム（６０％、１ｇ、０．００４１６７ｍｏｌ）の攪拌懸濁液に添加した。３０分後、ＤＭＰＵ中の化合物５−１３（０．０００５５ｍｏｌ）の溶液を添加した。その混合物を２〜３時間、１２０℃で加熱し、冷却し、氷水に注入し、その水性混合物をＤＣＭで洗浄した。水性層を５％ＨＣｌでｐＨ５に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。併せた有機抽出物を飽和ブラインで洗浄し、乾燥させ、蒸発させた。得られた油をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル−７５：２５）によって精製して、ウィッティヒ生成物５−１５（０．６ｇ、収率６６％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．５１（３Ｈ，ｓ）、１．５３（３Ｈ，ｓ）、１．２２−１．３４（４Ｈ，ｍ）、１．５２−２．００（４Ｈ，ｍ）、２．２１−２．３４（２Ｈ，ｔ）、２．５３−２．６９（１Ｈ，ｍ）、３．７９−４．１１（２Ｈ，ｍ）、５．１５−５．４０（２Ｈ，ｍ）、５．３８−５．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４０）、６．７０−６．９５（３Ｈ，ｍ）、７．０５−７．１５（１Ｈ，ｍ）、８．２０−８．３０（１Ｈ，ｂｒ）。ＬＣ／ＭＳ：純度９９％、およびＭＷ：３７１（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２２８】
実施例１７
ＰＰＡＲモジュレータ３５（ＳＮ３５、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ３５（Ｚ）−８−（２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）オクタ−６−エン酸−（５−２０  スキーム５）の合成を説明するものである：
２−クロロベンズアルデヒド（５０．４８ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）、ｐＴＳＡ（触媒量、５ｍｇ）およびアセトニド化合物５−１５（１３０ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）の混合物を４ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間攪拌した。減圧下で溶媒を蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に付して、生成物５−２０（５５ｍｇ、収率３４．３％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：１．２１−２．０３（８Ｈ，ｍ）；２．２５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；２．２８（１Ｈ，ｍ）；３．８３（３Ｈ，ｓ）；４．１６（２Ｈ，ｍ）；５．１３−５．３８（２Ｈ，ｍ）；５．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２６６Ｈｚ）；６．０３（１Ｈ，ｓ）；６．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；６．９３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５Ｈｚ）；７．１４−７．３６（４Ｈ，ｍ）；７．４３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０４３Ｈｚ）；７．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）。ＬＣ−ＭＳ：純度８９．１９％（７１．０５＋１８．１４、２つのジアステレオマー）およびＭＷ  ４６２（Ｍ＋１８）。
【０２２９】
実施例１８
ＰＰＡＲモジュレータ３８（ＳＮ３８、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ３８  ８−（２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−ｙｌ）オクタン酸（５−２１）の合成を説明するものである：
５ｍＬの乾燥酢酸エチル中のオレフィン化合物５−１３（１５０ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）の溶液に、１０ｍｏｌ％の１０％Ｐｄ−Ｃ（４４ｍｇ）を注意深く添加した。その反応混合物をＨ２雰囲気下で１．５〜２時間攪拌させておいた。反応完了後、その混合物をセライトによって濾過し、ケーキ（Ｐｄ−Ｃ）を乾燥酢酸エチル（２×５ｍＬ）で洗浄した。併せた濾液を濃縮し、残留液をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に付して、生成物５−２１（ＳＮ３８）（８０ｍｇ、収率５３．０５％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：１．０６−１．６０（１２Ｈ，ｍ）；１．４６（３Ｈ，ｓ）；１．５３（３Ｈ，ｓ）；１．６７（１Ｈ，ｍ）；２．２５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；３．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．００９Ｈｚ）；３．８１（３Ｈ，ｓ）；４．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．６８７Ｈｚ）；５．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４５５Ｈｚ）；６．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３６５Ｈｚ）；６．９２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；７．１６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．０４３Ｈｚ）；７．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．８５４Ｈｚ）。
【０２３０】
２−クロロベンズアルデヒド（３４．２５ｍｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（触媒量、３ｍｇ）およびアセトニド化合物１２  ５−２１（８０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の混合物を３ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間攪拌した。減圧下で溶媒を蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に付して、生成物５−２２（５０ｍｇ、収率４５％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：１．０８−１．９２（１３Ｈ，ｍ）；２．２６（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；３．８３（３Ｈ，ｓ）；４．２０（２Ｈ，ｍ）；５．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２６６Ｈｚ）；６．０２（１Ｈ，ｓ）；６．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；６．９２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；７．１５−７．３６（４Ｈ，ｍ）；７．４２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；７．８１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）。
ＬＣ−ＭＳ：純度８７．５３％、およびＭＷ  ４６４（Ｍ＋１８）。
【０２３１】
実施例１９
ＰＰＡＲモジュレータ２４（ＳＮ２４、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ２４  ｆ  （Ｚ）−８−（２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−ｙｌ）オクタ−６−エン酸（５−１７）の合成を説明するものである。
【０２３２】
２−クロロベンズアルデヒド（４８．４７ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（触媒量、５ｍｇ）およびアセトニド化合物（１２０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）の混合物を４ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間攪拌した。減圧下で溶媒を蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に付して、生成物５−１７（４０ｍｇ、収率２７％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：１．１３−２．８０（１１Ｈ，ｍ）；４．１０−４．３７（２Ｈ，ｍ）；５．１７−５．４１（２Ｈ，ｍ）；５．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３４０Ｈｚ）；６．００（１Ｈ，ｓ）；６．７４−７．７４（８Ｈ，ｍ）。
ＬＣ−ＭＳ：純度は、９４．４３％（２つのジアステレオマー、それぞれ、８０．１２＋１４．３１）であり、ＭＷは、４４８（Ｍ＋１８）である。
【０２３３】
実施例２０
ＰＰＡＲモジュレータ３１（ＳＮ３１、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ３１  ８−（２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）オクタン酸（５−１９）の合成を説明するものである。
【０２３４】
３ｍＬの乾燥酢酸エチル中のオレフィン５−１５（６０ｍｇ、０．１７２ｍｍｏｌ）の溶液に、１０ｍｏｌ％（１９ｍｇ、０．０１７２ｍｍｏｌ）の１０％Ｐｄ−Ｃを添加した。その反応混合物をＨ２雰囲気下で８時間、攪拌させておいた。反応が完了した後、その混合物をセライトによって濾過し、ケーク（Ｐｄ−Ｃ）を乾燥酢酸エチル（２×５ｍＬ）で洗浄した。併せた濾液を濃縮し、残留液をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に付して、生成物５−１８（４０ｍｇ、収率６６％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：１．０５−１．８８（１３Ｈ，ｍ）；１．５４（３Ｈ，ｓ）；１．５８（３Ｈ，ｓ）；２．２９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０３１Ｈｚ）；３．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７１９Ｈｚ）；４．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ）；５．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３４４Ｈｚ）；６．８２（３Ｈ，ｍ）；７．１２（１Ｈ，ｍ）；８．３２（１Ｈ，ｂｒｏａｄ）。
【０２３５】
２−クロロベンズアルデヒド（１６ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）、ｐ−ＴＳＡ（触媒量、３ｍｇ）およびアセトニド化合物５−１８（４０ｍｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）の混合物を３ｍＬの乾燥トルエン中で２４時間攪拌した。減圧下で溶媒を蒸発させ、混合物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ：８０：２０）に付して、生成物５−１９（２０ｍｇ、収率４０％）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：１．０７−２．３５（１３Ｈ，ｍ）；２．９８（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５５４Ｈｚ）；３．６５−４．４１（２Ｈ，ｍ）；４．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．５７５Ｈｚ）；５．９０（１Ｈ，ｓ）；６．７７−７．６６（８Ｈ，ｍ）。
ＬＣ−ＭＳ：純度８５％、およびＭＷ  ４５０（Ｍ＋１８）。
【０２３６】
【化２６】
2014240409.tif 000036
実施例２１
ＰＰＡＲモジュレータ３２（ＳＮ３２、表ＩＩ）の合成
この実施例は、表ＩＩのＰＰＡＲモジュレータ３２の合成を説明するものである。
【０２３７】
乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のアルケン６−１０（前の５−１０で説明）（１．２ｇ、４．５ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でＢＨ３・ＤＭＳ（０．３４ｇ、４．５）を添加し、その反応混合物を２時間、同じ温度で攪拌した。この混合物に、０℃で３ＮのＮａＯＨ（３ｍＬ）および３０％Ｈ２Ｏ２（１ｍＬ）を添加し、もう１時間、室温で攪拌し続けた。その反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル（２×３０ｍＬ）で抽出した。併せた有機層を真空下で蒸発させ、その粗生成物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン；２：８）で精製した。
収量：０．９ｇ（７０％）
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，２００ＭＨｚ）：δ７．５１−７．４５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３−７．２（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．０５−６．９５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．９−６．８２（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．５−５．４（ｓ１Ｈ）、４．２５−４．１９（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．９２−３．７８（ｍ，４Ｈ）、３．５３−３．４０（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、１．８５−１．７０（ｍ，１Ｈ），１．５１（ｄ，Ｊ＝１１．３Ｈｚ，６Ｈ）、１．３２−１．０（ｍ，４Ｈ）。
【０２３８】
６−１２の調製：ＩＢＸ（０．５２５ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解し、１０分間、室温で攪拌し、０℃に冷却した。これに、窒素雰囲気下で乾燥ＨＴＦ（９ｍＬ）中のアルコール６（０．３５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を添加し、１．５時間、室温で攪拌した。その反応混合物をエーテル（１０ｍＬ）で希釈し、２０分間攪拌し、濾過した。濾液を水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、エーテル層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ロータリーエバポレータで濃縮した。その生成物をフィルターカラム（酢酸エチル：ヘキサン；２：８）によって精製してアルデヒド６−１２を得た。
収量：３００ｍｇ（収率８６．４％）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，２００ＭＨｚ）：δ９．５９（ｓ，１Ｈ）、７．５４−７．４８（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８−７．２０（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．０８−６．９５（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．９０−６．８２（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．４２（ｓ，１Ｈ）、４．２６−４．２１（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、３．８０−３．７５（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４−１．７（ｍ，３Ｈ）、１．５１（ｓ，６Ｈ）、１．４５−１．４０（ｍ，２Ｈ）。
【０２３９】
６−１４の調製：臭化（３−カルボキシプロピル）トリフェニルホスホニウムを真空下、１００℃で２〜３時間乾燥させた。乾燥トルエン（１０ｍＬ）中の臭化（３−カルボキシプロピル）トリフェニルホスホニウム（１．４７ｇ、３．４３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、カリウムｔ−ブトキシド（０．７７４ｇ、６．８９ｍｍｏｌ）を室温、不活性条件下で少しずつ添加した。その混合物を８０℃に加熱し、温度を３０〜４０分間維持した。反応素材を５０℃に冷却し、乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）中のアルデヒド（化合物６−１２）（０．３ｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を上の混合物に滴下した。その反応の進行をＴＬＣによってモニターした。反応完了後、その素材を０〜５℃に冷却し、１ＮのＨＣｌ（１ｍＬ）でそのｐＨを４〜５に調整することによってクエンチした。その化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水性層を分離した。併せた有機画分を回収し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空下で濃縮した。その粗生成物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン；２：８）によって精製して、純粋な化合物６−１４を得た。
収量：３２５ｍｇ（８６％）。
【０２４０】
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．４５−７．４（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．２５−７．１０（ｔ，Ｊ＝７．１，１Ｈ）、６．９５−６．８５（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．８０−６．７０（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．４０−５．３０（ｓ，１Ｈ）、５．２５−５．１０（ｍ，２Ｈ）、４．２−４．１（ｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．８５−３．８（ｄ，Ｊ＝１４．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．７５（ｓ，３Ｈ）、２．３５−２．０５（ｍ，４Ｈ）、１．７５−１．５（ｍ，３Ｈ）、１．５０−１．４５（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，６Ｈ）、０．８５−０．７５（ｍ，２Ｈ）。
ＭＷ：３７１．１（Ｍ＋＋Ｎａ）。
【０２４１】
６−１６の調製：エタンチオール（０．４４ｇ、７．１７ｍｍｏｌ）を、０〜５℃で乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）中の６０％ＮａＨ（０．２８７ｇ、７．１７ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に添加し、２０〜３０分間攪拌した。乾燥ＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物６−１４（０．２５ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を、温度を維持しながら、上の混合物にゆっくりと滴下した。その反応素材温度を１２０〜１３０℃に上昇させ、６〜８時間維持した。反応完了後、その素材を０〜５℃に冷却し、１ＮのＨＣｌ（１ｍＬ）でそのｐＨを４〜５に調整することによってクエンチした。その化合物を酢酸エチル（３×１０ｍＬ）で抽出し、水性層を分離した。併せた有機画分を回収し、ブライン、水で洗浄し、硫酸ナトリウム（２ｇ）で乾燥させ、真空下で濃縮した。その粗生成物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン；２．５：７．５）によって精製して、純粋な化合物６−１６を得た。
収量：１５５ｍｇ（６５％）。
【０２４２】
化合物６−１６（１３０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（８ｍＬ）に溶解し、触媒量のｐＴｓＯＨを室温で添加した。その反応混合物を室温で６〜８時間、攪拌し続けた。ｏ−クロロベンズアルデヒド（１０９ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）をその反応素材に添加し、もう１度、触媒量のｐＴｓＯＨを添加した。反応条件をさらに５〜６時間維持した。反応完了後、ｐＨ＝７に調整することにより乾燥Ｅｔ３Ｎを添加した。真空下で溶媒を除去し、得られた粗製混合物をカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン；３．５：６．５）によって精製して、最終生成物ＳＮ３２（表ＩＩ）６−１９を得た。
収量：６５ｍｇ（４０％）
カラムクロマトグラフィー後のＨＰＬＣ純度は、より近い不純物を伴う８０．３％であった。これを分取ＨＰＬＣによってさらに精製して、９２．４％のＨＰＬＣ純度の化合物を得た（２０ｍｇ得られた）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，２００ＭＨｚ）：δ７．７−７．６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５−７．２０（ｍ，３Ｈ）、７．１０−７．０（ｓ，１Ｈ）、６．９９−６．９０（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．８０−６．６０（ｍ，２Ｈ）、５．９５（ｓ，１Ｈ）、５．８５−５．８０（ｓ，１Ｈ）、５．２５−５．１０（ｂｒｓ，２Ｈ）、４．２７−４．０５（ｄｄ，Ｊ＝６．４，９．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．４−２．１（ｍ，４Ｈ）、２．０−１．６５（ｍ，３Ｈ）、１．２９−１．１（ｍ，２Ｈ）。
ＭＷ：４１５．１（Ｍ＋−Ｈ）。
ＨＰＬＣ純度：９２％。さらなる類似体を次のとおり合成した：化合物６−１４（９０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：０．２Ｎ  ＨＣｌの混合物（１０ｍＬ、９：１）に溶解し、２時間、室温で攪拌した。反応完了後、その混合物を酢酸エチル（２×１０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ロータリーエバポレータで蒸発させて、６８ｍｇの粗生成物を得、それを精製せずにさらなる反応に利用した。
【０２４３】
上の粗製化合物（６８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ中に溶解し、この混合物に室温で２−クロロベンズアルデヒド（６１ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）および触媒量のｐＴＳＡ（〜４ｍｇ）を添加した。その反応混合物を５時間、同じ温度、窒素雰囲気下で攪拌した。出発原料が消失した後、その混合物を乾燥トリエチルアミンで（そのｐＨを７に調整することによって）中和し、溶媒を蒸発させた。その粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中２５％の酢酸エチル）によって精製して、化合物６−１８を得た。
収量：３２ｍｇ（３４％）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００ＭＨｚ）：δ７．９−７．８（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．４５−７．１５（ｍ，５Ｈ）、６．９５−６．８７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．８５−６．７７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ）、６．０５（ｓ，１Ｈ）、５．３６（ｓ，１Ｈ）、５．２５（ｂｒｓ，２Ｈ）、４．２（２，２Ｈ）、３．８５（ｓ，３Ｈ）、２．３５−２．１（ｍ，４Ｈ）、２．０５−１．８２（ｍ，３Ｈ）、１．３−１．１（ｍ，２Ｈ）。
ＭＷ：４２９．１（Ｍ＋−Ｈ）。
ＨＰＬＣ純度：９８％。
【０２４４】
実施例２２
ＰＰＡＲガンマトランス活性化アッセイ
細胞培養、プラスミドおよびトランスフェクション
これは、ＰＰＡＲガンマ調節活性を判定するためのトランス活性化アッセイの例である
これらのアッセイでは、Ｇａｌ４−ＰＰＡＲガンマＬＢＤ（Ｈｅｌｌｅｄｉｅら、２０００）、ＵＡＳｘ４−ＴＫ  ｌｕｃ（Ｃｈｅｎ  ａｎｄ  Ｅｖａｎｓ，１９９５）およびＣＭＶ−ベータ−ガラクトシダーゼ（市販、例えばＣｌｏｎｔｅｃｈ）を使用して、ＰＰＡＲガンマトランス活性化を証明した。ＵＡＳｘ４−ＴＫ−ｌｕｃレポーター構築物（この場合、ＵＡＳは、「上流アクチベータ配列」を指す）は、４つのＧａｌ４反応性要素を含有する。プラスミドＧａｌ４−ＰＰＡＲガンマＬＢＤは、ＵＡＳに結合することによってＵＡＳｘ４−ＴＫ−ｌｕｃレポータープラスミドをトランス活性化することができる、Ｇａｌ４−ＤＢＤ−ＰＰＡＲガンマ−ＬＢＤ融合タンパク質（すなわち、ＰＰＡＲガンマのリガンド結合ドメイン、ＬＢＤ、に融合したＧａｌ４のＤＮＡ結合ドメイン、ＤＢＤ）をコードする。ＣＭＶ−ベータ−ガラクトシダーゼプラスミド（この場合、ＣＭＶは、サイトメガロウイルスである）を実験値の正規化のために使用する。
【０２４５】
７．５％  Ａｍｉｎｏｍａｘ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  Ｃ−１００（Ｇｉｂｃｏ）、７．５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、２ｍＭのグルタミン、６２．５μｇ／ｍＬのペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを補足したＡｍｉｎｏＭａｘ基礎培地（Ｇｉｂｃｏ）（成長培地）においてマウス胚性線維芽細胞（ＭＥＦ）を成長させた。あるいは、１０％ウシ血清（ＣＳ）、６２．５μｇ／ｍＬのペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを補足したＤＭＥＭ（成長培地）においてＭＥ３細胞（Ｈａｎｓｅｎら、１９９９）を成長させた。それらの細胞を、一般には２４ウエルプレートに置き換えて、トランスフェクション時に細胞が５０〜７０％の集密度になるようにした。
【０２４６】
Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ  Ｐｌｕｓ（Ｉｎｖｔｒｏｇｅｎ）またはＭｅｔａｆｆｅｃｔａｎｅ（Ｂｉｏｎｔｅｘ）を製造業者の説示に従って使用して、Ｇａｌ４−ＰＰＡＲガンマＬＢＤ（Ｈｅｌｌｅｄｉｅら、２０００）、ＵＡＳｘ４−ＴＫ  ｌｕｃ（Ｃｈｅｎ  ａｎｄ  Ｅｖａｎｓ，１９９５）およびＣＭＶ−ベータ−ガラクトシダーゼ（市販、例えばＣｌｏｎｔｅｃｈ）でそれらの細胞をトランスフェクトした。簡単に言うと、２４ウエルプレートにおいて、１ウエルごとに、３０μＬのＤＭＥＭ（血清および抗生物質がないもの）中のＵＡＳｘ４ＴＫｌｕｃ（０．２μｇ）、Ｇａｌ４−ＰＰＡＲガンマＬＢＤ（またはｐＭ−ｈＰＰＡＲガンマ−ＬＢＤ；０．１μｇ）およびＣＭＶ−ベータ−ガラクトシダーゼ（０．０５μｇ）を、１μＬのメタフェクテネインを含有する３０μＬのＤＭＥＭ（血清および抗生物質がないもの）と混合する。その混合物を室温で２０分間インキュベートして、核酸−脂質複合体を形成させ、その後、およそ６０μＬを、５０〜６０％の集密度で細胞が入っているそれぞれのウエルに添加する。その後、それらの細胞を３７℃でＣＯ２インキュベータにおいて６から１２時間インキュベートし、その後、その培地を、抗生物質および関心のある物質（例えば、本明細書ではＤＰＤと呼ぶ４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）へキサン酸、または陽性対照としてロシグリタゾン（Ａｖａｎｄｉａ）、これらはすべて、ＤＭＳＯに溶解したもの）を補足した培地または匹敵する容積のＤＭＳＯ（全細胞培養容積の０．５％未満）で置換する。ＤＰＤは市販されており、または実施例１に従って合成することができる。１２〜２４時間後に細胞を回収し、標準的なプロトコルに従って、ルシフェラーゼおよびベータ−ガラクトシダーゼ活性を測定した。
【０２４７】
ＰＰＡＲトランス活性化は、ＤＭＳＯのみでより、ロシグリタゾン（公知ＰＰＡＲガンマアゴニスト）を伴うもののほうが４０倍高く、１０μＭの４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）へキサン酸を伴うもののほうが約１０倍高かった（図２における「ＤＰＤ」を参照のこと）。従って、４−（Ｚ）−６−（２−ｏ−クロロフェニル−４−ｏ−ヒドロキシフェニル−１，３−ジオキサン−シス−５−イル）へキサン酸は、ＰＰＡＲガンマアゴニストである。
【０２４８】
予備試験の結果は、キラルＨＰＬＣによって精製したＤＰＤエナンチオマーのいずれの間にもＰＰＡＲガンマトランス活性化活性に差がないことを示した。しかし、その後の分析は、有意な差を示した（本明細書における下の実施例３２を参照のこと）。例えば、一方のエナンチオマーは、ＰＰＡＲγに結合しないことが判明したが、他方は、４．９から１２μＭの範囲のＩＣ５０でＰＰＡＲγに結合する。
【０２４９】
表ＩＩは、ＤＰＤ（ＳＮ１）の様々な類似体で得られた結果をまとめ、それらの活性を比較するものである。「Ｐ」は、１０μＭのＤＰＤ（表ＩＩ中のＳＮ１）と比較した１０μＭでの同様のＰＰＡＲγ活性化活性を表し、「Ｐ−」は、１０μＭのＤＰＤと比較した試験した物質の３０μＭでの同じ活性レベル（すなわち、より少ない効力）を表し；「Ｐ＋」は、「Ｐ」より大きな活性レベル、および１０μＭのＤＰＤに匹敵する３μＭでの活性レベル（すなわち、より大きな効力）を表し；「Ｐ＋＋」は、３μＭでは１０μＭのＤＰＤのものより高いが、１μＭでは１０μＭのＤＰＤのものより低い活性レベルを表し；ならびに「Ｐ＋＋＋」は、１０μＭのＤＰＤに匹敵する１μＭでの活性レベルを表す。「−」は、試験を行わなかったことを意味する。
【０２５０】
このアッセイを、本質的には上で説明したとおりに、しかし、ＰＰＡＲガンマリガンド結合ドメインでではなく完全長ヒトＰＰＡＲガンマで行ったとき、完全長ｈＰＰＡＲｇ２の活性化がＡｖａｎｄｉａ陽性対照の６４％に見られた（図３）。
【０２５１】
実施例２３
ＰＰＡＲデルタトランス活性化アッセイ
この実施例は、ＰＰＡＲデルタ調節活性を判定するためのトランス活性化アッセイを説明するものである。
【０２５２】
ＤＰＤおよび他のリガンドを、本質的には実施例２２に記載したとおりに、ＰＰＡＲデルタをトランス活性化するそれらの能力について試験する。しかし、このトランス活性化構築物は、ｍＰＰＡＲデルタＬＢＤであり、この場合、ＰＰＡＲデルタリガンド結合ドメインをＰＰＡＲガンマのものの代わりに用い、Ｌ１６５０４１（市販）をロシグリタゾンの代わりに選択的ＰＰＡＲデルタアゴニストとして用いる。用いる条件下で、Ｌ１６５０４１は、ＰＰＡＲデルタトランス活性化を５０倍より大きく増加させることが明らかになり、これに対して、ＤＰＤは、結果として、トランス活性化をまったくまたは殆ど生じさせなかった（図２参照）。従って、ＤＰＤは、ＰＰＡＲガンマに対する選択性を示す。
【０２５３】
このアッセイを本質的には上で説明したとおりに、しかし、ＰＰＡＲデルタリガンド結合ドメインでではなく完全長ヒトＰＰＡＲデルタで行ったとき（完全長ｈＰＰＡＲデルタの活性化）、活性化は観察されなかった（図４）。これは、ＰＰＡＲガンマに対するＤＰＤの選択性を裏付ける。
【０２５４】
実施例２４
ＰＰＡＲアルファトランス活性化アッセイ
この実施例は、ＰＰＡＲアルファ調節活性を判定するためのトランス活性化アッセイを説明するものである。
【０２５５】
ＤＰＤおよび他のリガンドを、本質的には実施例２２において説明したとおりに、ＰＰＡＲアルファをトランス活性化するそれらの能力について試験した。しかし、このトランス活性化構築物は、ｍＰＰＡＲアルファＬＢＤであり、この場合、ＰＰＡＲアルファリガンド結合ドメインをＰＰＡＲガンマのものの代わりに用い、ＧＷ７６４７（市販）をロシグリタゾンの代わりに選択的ＰＰＡＲアルファアゴニストとして使用する。用いた条件下で、ＧＷ７６４７は、ＰＰＡＲアルファトランス活性化を２倍より大きく増加させることが明らかになり、これに対して、ＤＰＤは、結果として、トランス活性化を全く生じさせなかった（図２参照）。従って、ＤＰＤは、ＰＰＡＲガンマに対する選択性を示す。
【０２５６】
実施例２５
ＲＸＲトランス活性化アッセイ
この実施例は、レチノイン酸Ｘ受容体トランス活性化アッセイを説明するものである。
【０２５７】
化合物を、本質的には実施例２２において説明したとおりに、ＲＸＲをトランス活性化するそれらの能力について試験した。しかし、このトランス活性化構築物は、ｈＲＸＲαＬＢＤであり、この場合、ＲＸＲリガンド結合ドメインをＰＰＡＲガンマのものの代わりに用い、｛４−［１−（３，５，５，８，８−ペンタメチル−５，６，７，８−テトラヒドロ−２−ナフチル）エテニル］安息香酸｝（ＬＧ１０６９、市販）をロシグリタゾンの代わりに選択的ＲＸＲゴニストとして使用する。用いた条件下で、ＬＧ１０６９は、ＲＸＲトランス活性化を５倍より大きく増加させることが明らかになり、これに対して、ＤＰＤは、結果として、トランス活性化を全く生じさせなかった（図２参照）。従って、ＤＰＤは、また、ＰＰＡＲガンマに対する選択性を示す。
【０２５８】
実施例２６
脂肪細胞分化アッセイ
この実施例は、脂肪細胞分化を判定するためのアッセイを説明するものである。化合物を、それらが脂肪細胞分化を誘導するかどうか判断するために、およびまた、それらが脂肪細胞分化を阻害するかどうかを判断するために試験する。
【０２５９】
細胞培養および分化
７．５％  Ａｍｉｎｏｍａｘ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  Ｃ−１００（Ｇｉｂｃｏ）、７．５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、２ｍＭのグルタミン、６２．５μｇ／ｍＬのペニシリンおよび１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを補足したＡｍｉｎｏＭａｘ基礎培地（Ｇｉｂｃｏ）（成長培地）においてＭＥＦを成長させた。集密時、１μＭのデキサメタゾン（Ｓｉｇｍａ）、０．５ｍＭのイソブチルメチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ）、５μｇ／ｍＬのインスリン（Ｓｉｇｍａ）、およびＤＭＳＯに溶解した１０μＭの試験化合物またはＤＭＳＯのみを添加した成長培地において、ＭＥＦは成長培地の分化を誘導した。その後、４８時間毎に、培地を、５μｇ／ｍＬのインスリンおよびリガンドまたはＤＭＳＯを補足した成長培地と取り替えた。
【０２６０】
簡単に言うと、化合物を脂肪細胞の誘導剤として試験するために、一般に２４ウエル皿において、１０％ウシ血清（ＣＳ）を含有するＤＭＥＭ中で３Ｔ３−Ｌ１を集密に達するまで成長させる。集密に達した２日後（第０日）、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１μＭのデキサメタゾンおよび試験化合物（０．１、１および１０μＭ）を補足したＤＭＥＭで細胞の分化を誘導する。ＢＲＬ４９６５３（１００％ＤＭＳＯに溶解した１．０μＭ）を陽性対照として使用する。４８時間後、試験化合物または陽性対照を補足した１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭをそれらの細胞に再び供給する。第４日から、１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ中で細胞を成長させ、第８日まで１日おきに交換する。第８日に細胞を下で説明するようにＯｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏで染色する。
【０２６１】
試験化合物を脂肪細胞分化の阻害剤として試験するために、３Ｔ３−Ｌ１細胞を、集密に達した２日後（第０日と指定する）まで、上のとおり成長させ、その後、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、１μＭのデキサメタゾン（Ｓｉｇｍａ）、０．５ｍＭのメチルイソブチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ）、１μｇ／ｍＬのインスリン（Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｄａｌｓ）および試験化合物を含有するＤＭＥＭで細胞の分化を誘導する。試験化合物の溶媒の存在下で分化を誘導する細胞を陽性対照として使用する。４８時間後、試験化合物または陽性対照を補足した１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭをそれらの細胞に再び供給する。第４日から、１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ中で細胞を成長させ、第８日まで１日おきに交換する。第８日に細胞を下で説明するようにＯｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏで染色する。
【０２６２】
Ｏｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏ染色
上で説明したように培養した細胞をＯｉｌ  Ｒｅｄ染色に使用する。皿をＰＢＳ中で洗浄し、細胞を３．７％パラホルムアルデヒド中で１時間固定し、（Ｈａｎｓｅｎら、１９９９）に記載されているようにＯｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏで染色する。Ｏｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏ溶液原液は、１００ｍＬのイソプロパノールに０．５ｇのＯｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏ（Ｓｉｇｍａ）を溶解することによって調製する。Ｏｉｌ  Ｒｅｄ  Ｏ作業溶液は、原液を水で希釈し（６：４）、その後、濾過することによって調製する。
【０２６３】
誘導アッセイにおいて、ＤＰＤは、ほとんど赤色染色を誘導しなかった。赤色染色は、脂肪細胞の存在の指標であるので、ＤＰＤは、脂肪細胞分化を誘導しないと推断することができる。しかし、ＤＰＤは、脂肪細胞分化の阻害に関して有意な効果を示さないので、脂肪細胞を阻害しない。表ＩＩは、ＤＰＤ（ＳＮ１）の異なる類似体で得られた結果をまとめたものであり、「０」は、ＤＰＤに類似した結果を表し、「−１」は、もっと少ない脂肪細胞分化を表し、「＋１」は、より多い脂肪細胞分化を表し（両方とも、ＤＰＤを基準にして）、および「−」は、アッセイしなかったことを意味する。
【０２６４】
本質的には上で説明したとおりに、しかし、ヒト前駆脂肪細胞を使用して行ったアッセイも、ＤＰＤがＤＭＳＯと同様に殆んど赤色染色を誘導しないことを明示した。
【０２６５】
実施例２７
完全アゴニストに対する部分アゴニストの同定
この実施例は、医薬として特に望ましい部分ＰＰＡＲアゴニストを判定するためのアッセイを説明するものである。
【０２６６】
簡単に言うと、本質的には実施例２２において説明したとおりに、しかし、１００ｎＭのＡｖａｎｄｉａ（完全アゴニスト）を漸増濃度の試験化合物（または対照として試験化合物なし）と共にそれぞれのウエルに添加して、トランス活性化アッセイを行う。Ａｖａｎｄｉａによるトランス活性化を減少させる化合物がＰＰＡＲ部分アゴニストである。結果を図５に示す。
【０２６７】
この実施例では、ＰＰＡＲガンマ部分アゴニストを、ＰＰＡＲガンマへの結合から公知ＰＰＡＲガンマアゴニスト、例えばこの場合はＡｖａｎｄｉａ、をはずすそれらの能力によって同定する。あるいは、本質的には実施例２において説明したようなトランス活性化アッセイを用いてＰＰＡＲデルタの部分アゴニストを同定するために、他の公知完全アゴニスト、例えば、３００ｎＭのＬ１６５０４１を使用することができる。
【０２６８】
実施例２８
部分ＰＰＡＲガンマアゴニストリガンド置換アッセイ
ＰＰＡＲガンマリガンド結合ポケットへの結合を分析するために、以下のようなＩｎｖｔｒｏｇｅｎ  ＰＯＬＡＲＳＣＲＥＥＮ  ＰＰＡＲ  競合アッセイを用いて部分ＰＰＡＲガンマアゴニストを同定するためのさらなるアッセイを行う。
【０２６９】
１．２０マイクロリットルの２Ｘ試験化合物をキュベットに分取する
２．２０マイクロリットルの２Ｘ  ＰＰＡＲ−ＬＢＤ／Ｆｌｕｏｒｍｏｎｅ  Ｇｒｅｅｎ  Ｃｏｍｐｌｅｘを添加し、混合する
３．暗所で２時間、インキュベートする
４．蛍光偏光値を測定する
５．対照として、ロシグリタゾン（Ａｖａｎｄｉａ）を使用する
ＡＶＡＮＤＩＡを基準にしてＤＰＤでの結果を図６に示す。
【０２７０】
実施例２９
グルコース取込みアッセイ
この実施例は、ＰＰＡＲガンマアゴニストとして同定された化合物が、細胞アッセイにおいてＰＰＡＲガンマアゴニストの予想される生理作用、すなわち、グルコース取込みに対する作用、も誘導することを例証するものである。グルコース取込みアッセイは、インスリン抵抗性の治療のための化合物の適性を確立するために重要である。
【０２７１】
簡単に言うと、３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を１２ウエルプレートにおいて集密に達するまで成長させる。細胞を無血清ＤＭＥＭで洗浄し、１ｍＬの同培地と共に３７℃で１〜２時間インキュベートする。その後、それらの細胞をＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ−Ｈｅｐｅｓ（ＫＲＰ）バッファで洗浄し、その後、０．９ｍＬのＫＲＰバッファと共に３７℃で３０分間インキュベートする。インスリンをそれらの細胞に０、０．３、１および３ｎＭの最終濃度で添加し、１５分間、３７℃でインキュベートする。１０ｍＭの［３Ｈ］２−デオキシ−Ｄ−グルコース（１ｍＣｉ／Ｌ）を補足した０．１ｍＬのＫｒｅｂｓ−Ｒｉｎｇｅｒ−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＫＲＰ）バッファの添加によって、グルコース取込みを開始させる。３７℃での１０分のインキュベーション後、培地を吸引し、プレートを氷冷ＰＢＳで洗浄して、その誘導したグルコース取込みを停止させる。細胞を０．５ｍＬの１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００で溶解し、シンチレーションカウンタを用いて放射活性レベルを判定する。結果を図７に示す。
【０２７２】
要約すると、ＤＰＤおよび表ＩＩに引用する多数の類似体は、ＰＰＡＲガンマアゴニストであることが立証されたが、物質１０は、ＰＰＡＲガンマアンタゴニストであると思われる。物質７および１３は、特に興味深い類似体である。これらは、低水準の脂肪細胞分化を生じさせるまたは脂肪細胞分化を全く生じさせずに、より高い効力を示すからである。
【０２７３】
【表２−１】
2014240409.tif 000037
【０２７４】
【表２−２】
2014240409.tif 000038
【０２７５】
【表２−３】
2014240409.tif 000039
【０２７６】
【表２−４】
2014240409.tif 000040
【０２７７】
【表２−５】
2014240409.tif 000041
実施例３０
トロンボキサン受容体活性
この実施例は、物質１（ＳＮ１）の一方のエナンチオマーのみがＴＰ受容体に結合することを立証するものである。
【０２７８】
ＤＰＤ（表ＩＩのＳＮ１）のそれぞれのエナンチオマー、すなわち、化合物（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸（エナンチオマー１）および（Ｚ）−６−（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸（下のキラルカラムでの溶離に従って、エナンチオマー２）を、以下の条件下でのキラルクロマトグラフィーによって単離した：
カラム：２５０×４．６ｍｍ  Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ
移動相：８０／２０／０．１のｎ−ヘプタン／エタノール／トリフルオロ酢酸
流量：１ｍＬ／分
検出：２３０ｎｍでのＵＶ
温度：２５℃
サンプルを８０／２０のｎ−ヘプタン／エタノールに溶解した
エナンチオマー１が、このキラルカラムから最初に溶出し、エナンチオマー２がそのキラルカラムから二番目に溶出した。
【０２７９】
エナンチオマー１および２を、本質的にはＨｅｄｂｅｒｇら（１９８８）Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２４５：７８６−７９２およびＳａｕｓｓｙら（１９８６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６１：３０２５−３０２９によって説明されているように、トロンボキサン受容体結合について放射性リガンド結合アッセイで試験した。エナンチオマー（（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）は、効力あるトロンボキサン受容体結合剤（ＩＣ５０：０．８４１ｎＭ；Ｋｉ：０．５４９ｎＭ）であることが判明したが、エナンチオマー２は、結合しないようであった（ＩＣ５０＞１０ｎＭ）。
【０２８０】
実施例３１
癌細胞増殖の阻害
この実施例は、癌細胞の成長に対するＤＰＤの抗増殖効果を立証し、本明細書に記載する類似体の癌の治療のための有用性を例証するものである。
【０２８１】
組換えバイオセンサー受容体活性を安定して発現するように遺伝子操作されたヒト子宮頚癌細胞系統（ＨｅＬａ）および非癌細胞系統、ＨａＣａＴ（Ｂｏｕｋａｍｐら，１９８８，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ  １０６（３）：７６１−７７１）を、Ｃａｓｐａ  Ｔａｇ
ｋｉｔ（例えばＣｈｅｍｉｃｏｎから市販されている）で用いた。ハイコンテントスクリーニング自動フローサイトメータを使用して増殖の検出を行った。
【０２８２】
ＤＰＤ（物質１）を、１％ＤＭＳＯに合わせて血清不含の細胞培養基中２０μＭに希釈した。ＨＴＳフローサイトメータ（ＦＡＣＳ  Ｃａｌｉｂｕｒ  ＨＴＳ、Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｅｎｓｏｎ）のＦＬ２（増殖性マーカーの希釈）チャネルにおいて４８時間処理した後、９６ウエルプレートにおいて二重反復試験で細胞事象の検出を行った。第１日に細胞を９６ウエルプレートに接種した。第２日に細胞をＤＰＤおよび適切な対照で処理し、第４日に分析を行った。
【０２８３】
ＤＰＤは、２０マイクロＭでＨｅＬａ細胞の増殖を９０％阻害した。ＤＰＤは、非癌細胞系統ＨａＣａＴに対して効果を有さなかった。従って、これは、ＤＰＤ（表ＩＩ中のＳＮ１）による癌細胞に対する選択的抗増殖効果を明示している。
【０２８４】
実施例３２
この実施例は、マウスモデルにおける本発明のエナンチオマーのグルコース低下効果を例証するものである。
【０２８５】
材料および方法
ＫＫＡｙマウス
週齢６週の５２匹の雄ＫＫＡｙマウスを市場で（例えば、Ｃｌｅａ  Ｊａｐａｎから）入手し、到着し次第、高脂肪食を与えた。個々のマウスを、環境順化段階と実験段階の両方の間、ＩＶＣ  Ｔｙｐｅ  ＩＩケージに収容した。食餌（高脂肪食）と水の両方を無制限に供給した。
【０２８６】
ケージごとに動物１匹。昼１２時間、夜１２時間。午前０６：００に点灯。温度：２１〜２５℃。相対湿度目標範囲：５５〜６０％。
【０２８７】
マウスをそれらの４時間絶食時血糖に従って治療群に無作為に割り付けた。
【０２８８】
群：
ビヒクル、（（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸（５３ｍｇ／ｋｇ）、ロシグリタゾン（５ｍｇ／ｋｇ；陽性対照）。
【０２８９】
治療：
１４日の強制経口栄養、１日２回、１２時間ごと。
【０２９０】
完了：
最終投与の４時間後、非絶食状態。
【０２９１】
高脂肪食
ニュージャージー州、ニューブランズウィックのＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ，Ｉｎｃ．からガンマ線照射高脂肪食を入手した（製品番号Ｄ１２２６６ＢＩ）
血糖
Ｇｌｕｃｏｔｒｅｎｄ  ｓｔｉｃｋ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ａｒｔ  ＃  ２８０５０）を使用して全血中または血清中（下記参照）、いずれかのグルコースを測定した。
【０２９２】
ヘマトクリット
ヘパリンが入っているガラスキャピラリーに血液を採取し、その後、それを室温で１０分間、「Ｈａｅｍａｔｏｋｒｉｔ  ２４」遠心分離機（Ｈｅｔｔｉｃｈ）において１５’２００×ｇで遠心分離してヘマトクリット値を得た。
【０２９３】
血清パラメータ
以下の血清パラメータは、ＣＯＢＡＳ  ＩＮＴＥＧＲＡ  ８００自動分析装置（スイスのＲｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を用い、供給業者によって提供された試薬およびプロトコルを用いて判定した。
【０２９４】
【数２】
2014240409.tif 000042
ＨｂＡ１ｃ：Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｋ  ｋｉｔ（オーダー番号１１８２２０３９２１６）をその供給業者によって提供されたプロトコルに従って使用して、Ｈｉｔａｃｈｉ  ９１７自動分析装置で判定した。
【０２９５】
以下の血清パラメータは、マイクロタイタープレートフォーマットで測定した
インスリン：１マイクロリットルのサンプルにおいて、ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｍｅｒｃｏｄｉａ，Ｕｐｐｓａｌａ、オーダー番号１０−１１４９−０１）をその供給業者によって提供されたプロトコルに従って使用して判定した。
フルクトサミン：５マイクロリットルの血清において、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ｋｉｔ（オーダー番号１１９３００１０２１６）をその供給業者によって提供されたプロトコルに従って使用して、９６ウエルフォーマットで判定した。
ＦＡＡ：ＮＥＦＡ  Ｃ  ｋｉｔ（Ｗａｋｏ  Ｃｈｅｍｃａｌｓ  ＧｍｂＨ  Ｄ−４２４６８  Ｎｅｕｓｓ）をその供給業者のプロトコルに従って使用して、遊離脂肪酸を測定した。
【０２９６】
第１２日に行った食餌摂取量および体重測定を除き、すべての測定を投与第１４日目に行った。
【０２９７】
第１２日に、マウスの数は、１０匹（ビヒクル）、１４匹（（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、５３ｍｇ／ｋｇ）および１０匹（ロシグリタゾン）であった。
【０２９８】
第１４日に、マウスの数は、１０匹（ビヒクル）、１０匹（（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、５３ｍｇ／ｋｇ）および１０匹（ロシグリタゾン）であった。
【０２９９】
血清中化合物レベルを９匹の（（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸、５３ｍｇ／ｋｇ）マウスにおいて測定した。
【０３００】
結果
【０３０１】
【表４−１】
2014240409.tif 000043
【０３０２】
【表４−２】
2014240409.tif 000044
循環グルコースは、実際のレベルを反映するので、糖尿病の診断のために診療所で行われている主な測定の１つである。グルコース低下化合物の主目的は、循環グルコースを低下させることである。
【０３０３】
結論：（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸と陽性対照（ロシグリタゾン）の両方が、高血糖マウスにおいて循環グルコースレベルを低下させた（後者のほうがわずかに大きく低下させた）。これは、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸のグルコース低下効果を示している。
【０３０４】
フルクトサミン（グリコシル化血液タンパク質から形成される）およびＨｂＡ１ｃ（グリコシル化ヘモグロビン）は、長期間にわたって組み込まれた循環グルコースレベルを反映する。血液タンパク質は、非酵素的様式で不可逆的にグリコシル化される。赤血球と比較すると血清蛋白質の寿命のほうが短いため、フルクトサミンは、より短い範囲のパラメータであると考えられる。
【０３０５】
結論：ＨｂＡ１ｃレベルは、陽性対照（ロシグリタゾン）によっておよび（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸によって低下され、フルクトサミンレベルは、影響を受けなかった。ＰＰＡＲ−γアゴニストが、即効性を有さず、開始に多少の時間、ヒトでは２〜３週間、を要し、最大効果に達するためにさらに長い時間を要することは公知である。グルコースレベルは、ＨｂＡ１ｃおよびフルクトサミンレベルに対して一様な影響を及ぼすには低い規模のものであり得、十分に長い期間存在できなかった。
【０３０６】
インスリンは、循環から組織、例えば筋肉、脂肪組織および脂肪へのグルコース取込みを増加させるホルモンである。ＫＫＡｙマウスは、高インスリン血症モデルであり、すなわち、インスリン不足はない。
【０３０７】
結論：陽性対照のみがインスリンレベルを低下させた。これは、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸が、循環グルコースレベルに対する効果によって示されるように、より低い効能を有することを示唆している。高インスリンレベルは、高い循環グルコースレベルまたはインスリン抵抗性のいずれかを反映する。それ故、グルコースレベルは低下するが、インスリン抵抗性依然として低下しなかったようである。おそらく、グルコースの効果は、起こったばかりであり、より小さく、抵抗性のほうが長くかかるからであろう。
【０３０８】
トリグリセリド（ＴＧ）、総コレステロールおよび遊離脂肪酸（ＦＦＡ）の高い循環レベル、ならびに低い高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）コレステロースは、心血管疾患のリスク因子である。
【０３０９】
結論：（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、ＦＦＡを僅かに減少させた。陽性対照（ロシグリタゾン）は、ＨＤＬを増加させ、トリグリセリドおよびＦＦＡを減少させた。
【０３１０】
チオグリタゾンの副作用の１つは、マウスおよびヒトにおいて体重を増加させることであるので、マウスの体重を測定した。さらに、体重減少は、副作用の指標である。
【０３１１】
結論：以前の観察と一致して、陽性対照（ロシグリタゾン）によってしか体重は増加しなかった。（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、体重を変えなかった。
【０３１２】
心臓重量も測定した：
結論：ロシグリタゾン群では、おそらく最終時点での体重増加を補って、心臓重量が増加される。（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸治療は、心臓重量に影響を及ぼさなかった。
【０３１３】
ヘマトクリットの増加は、脱水症、すなわち水分摂取量の減少、の傾向を示す。
【０３１４】
結論：ヘマトクリットに対する影響はいずれの群においても観察されなかった。これは、脱水症がなかったことを示唆している。
【０３１５】
一般的な肝機能マーカー酵素であるアルパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）およびアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）を測定して、肝臓に対して副作用がないことを確かめる。
【０３１６】
結論：血清ＡＳＴ、ＡＬＴおよびＡＬＰは、増加されなかった。これは、使用した用量に副作用が全くなかったことを示唆している。
【０３１７】
血清（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸レベルを測定して、動物がその循環に所期の化合物を実際に有することを詳細に記録した。
【０３１８】
実施例３３
ヒト組換え（大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））ＰＰＡＲガンマ（ｈ）結合アッセイ：
この実施例は、組換えヒトＰＰＡＲガンマへの本発明の化合物の結合を例証するものである。
リガンド濃度：［３Ｈ］−ロシグリタゾン  １０ｎＭ
非特異的結合：ロシグリタゾン（１０μＭ）
インキュベーション：４℃で１２０分
試験化合物の存在下で得られた対照特異的結合のパーセント（（測定された特異的結合／対照特異的結合）×１００）として結果を表示する。ＩＣ５０値（対照特異的結合の最大阻害の半分を生じさせる濃度）およびヒル係数（ｎＨ）は、Ｈｉｌｌの式の曲線への当てはめ（Ｙ＝Ｄ＋［（Ａ−Ｄ）／（１＋（Ｃ／Ｃ５０）ｎＨ］、この式中、Ｙ＝特異的結合、Ｄ＝最小特異的結合、Ａ＝最大特異的結合、Ｃ＝化合物濃度、Ｃ５０＝ＩＣ５０、およびｎＨ＝傾き係数）を用いて平均反復値で生成した競合曲線の非線形回帰分析によって決定した。Ｃｅｒｅｐで開発されたソフトウェア（Ｈｉｌｌ  ｓｏｆｔｗａｒｅ）を用いてこの分析を行い、市販のソフトウェア  Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）用ＳｉｇｍａＰｌｏｔ（登録商標）４．０（（著作権）ＳＰＰＳ  Ｉｎｃ．により１９９７）によって生成したデータとの比較により確認した。阻害定数（Ｋｉ）は、Ｃｈｅｎｇ  Ｐｒｕｓｏｆｆの式（Ｋｉ＝ＩＣ５０／（１＋（Ｌ／ＫＤ））、この式中、Ｌ＝アッセイにおける放射性リガンドの濃度、およびＫＤ＝受容体に対する放射性リガンドの親和性）を用いて計算した。
【０３１９】
【表５】
2014240409.tif 000045
実施例３４
マウスモデルにおける動脈血栓症に対する効果
この実施例は、マウスモデルにおける血栓症に対する本発明の化合物の効果を例証するものである。
【０３２０】
材料
●ビヒクル（ＤＭＳＯ／ＰＥＧ  ４００、５／９５）
●ビヒクル中、１、３、１０、３０、１００および３００ｍｇ／ｋｇ（（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸）の用量
●食塩水
●アスピリン（ビヒクル中、１００ｍｇおよび６００ｍｇ／ｋｇの用量）
●アスピリン（Ｓａｎｏｆｉ  ＳｙｎｔｈｅｌａｂｏからのＡｓｐｅｇｉｃ；食塩水に溶解したもの）
●クロピドグレル（Ｓａｎｏｆｉ  ＰｈａｒｍａからのＰｌａｖｉｘ；Ｈ２Ｏに溶解したもの）
それらの溶液を食塩水中で３．３倍希釈し、１００μＬ／２５ｇを注射した。従って、（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸の１００および３００ｍｇ／ｋｇの上述の用量は、３０および１００ｍｇ／ｋｇの最終用量に対応する。
【０３２１】
ＰＥＧは非常に吸湿性であること、およびＤＭＳＯは非常に低濃度でエクスビボで血小板凝集に影響を及ぼすことに留意しなければならない。マウスにおける静脈内注射について、この用量は、好ましい溶媒でないようである。
【０３２２】
実験中、食塩水で希釈した薬物の可溶性カリウム塩を供給した。この調合物の１００μＬ／２５ｇを尾静脈に静脈内注射した（１００ｍｇ／ｋｇの用量）。
【０３２３】
血栓症モデル
溶液（１００μＬ／体重２５ｇ）を２分かけて尾静脈に静脈内注射して、３０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇの（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸の用量を達成する。２００ｍｇ／ｋｇのアスピリンを同じように与える。実験前６〜７時間の時点で２０ｍｇ／ｋｇの用量のクロピドグレルを強制経口栄養によって投与する。溶液をコード化し（クロピドグレル以外）、オペレータにはそのコードを知らせなかった。それぞれの群に割り付けた動物の体重を合わせた。使用したすべてのマウスは、週齢８〜１０週の雄であり、１００％Ｓｗｉｓｓ遺伝的背景のものであった。
【０３２４】
動脈血栓症モデルは、本質的にはＮａｇａｉら（Ｎａｇａｉ  Ｎ，Ｌｉｊｎｅｎ  ＨＲ，Ｖａｎ  Ｈｏｅｆ  Ｂ，Ｈｏｙｌａｅｒｔｓ  ＭＦ，Ｖａｎ  Ｖｌｉｊｍｅｎ  ＢＪＭ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｌｙ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｏｂｅｓｉｔｙ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｔｈｅ  ａｒｔｅｒｉａｌ  ｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ  ｔｅｎｄｅｎｃｙ  ｏｆ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｖ  Ｌｅｉｄｅｎ  ｍｉｃｅ．Ｔｈｒｏｍｂ  Ｈａｅｍｏｓｔ．２００７  Ｏｃｔ；９８（４）：８５８−８６３．（オンラインで発表したもの；ｄｏｉ：１０．１１６０／ＴＨ０７−０４−０３０６））によって記載されたとおりに行った。簡単に言うと、５％ＦｅＣｌ３溶液をいっぱいにしみ込ませたティッシュペーパーの小片をマウスの単独大腿動脈上に２分間置き、その後、食塩水で入念に洗浄する（静脈内注射後約１０分の時点で適用を開始する）。走査レーザードップラー流量計を使用して後脚の血流をモニターし、３０分間、１５秒間間隔でデジタル画像を収集する（ＦｅＣｌ３処置を止めた１分後に開始）。それぞれの画像中の流量を反対側でのものに対する百分率として表示し、データを１２０すべての画像について平均して、総流量を決定する。同じ分析を１０分間隔についても行う（これは、曲線下面積と本質的に同じ情報をもたらす）。流量０％を示した最初の画像として閉塞時間を記録する。処置前の流量を１００％として記録し、閉塞した動脈におけるものを０％として記録する。実験終了時、血球数の決定のために心臓穿刺により０．０１Ｍのクエン酸塩上に血液を回収する。遠心分離により血漿を準備し、薬物レベルの判定のために−２０℃で保管する。
【０３２５】
二群間の差についての統計解析は、非母数スチューデントｔ検定によって行う。統計解析のために、閉塞時間＞３０分を３０分に等しいと見なした。このアプローチは、統計的偏りを生じさせることがあり、異なる群では実験数が同じでないため、そうであることがいっそう多いことに留意しなければならない。ｐ＜０．０５で有意と設定した。
【０３２６】
結果
合計５９匹のマウスをこの試験で使用し、これらのうち４匹を、投薬スキームを至適化するための予備実験で使用した。１匹のマウス（Ｄ９４７）は、ビヒクル中１００ｍｇ／ｋｇの薬物用量での実験中に死亡した（薬物の注射の約１５分後に相当するＦｅＣｌ３適用の５分後；死因不明）。
【０３２７】
閉塞時間
●２００ｍｇ／ｋｇのアスピリンは、閉塞時間に対して効果を有さなかった；ビヒクルと比較して多少短い閉塞時間は、ビヒクル群において閉塞が遅れる２つの実験に起因する（これらなしで、平均±ＳＥＭ＝７’１８’’±０’３３’’）。
【０３２８】
●クロピドグレルは、６／７実験において３０分以内に閉塞を完全に防止する。１つの実験では、急速な閉塞が観察された。
【０３２９】
●ビヒクル中３０ｍｇ／ｋｇの用量での（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、アスピリンと比較して閉塞時間をわずかに延長する（ｐ＝０．０２４）が、ビヒクルと比較すると効果がない。
【０３３０】
●食塩水中１００ｍｇ／ｋｇの用量での（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸カリウムは、閉塞時間を延長した（アスピリンに対してｐ＝０．０００６；食塩水のみに対してｐ＝０．０１７）。
【０３３１】
これらの結果は、マウスモデルにおけるＦｅＣｌ３誘導閉塞形成の阻害を示している。
【０３３２】
血流
●２００ｍｇ／ｋｇでのアスピリンは、全血流量に対して有意な効果を有さなかった（ビヒクルに対してｐ＝０．５３）。
【０３３３】
●クロピドグレルは、全血流量を有意に改善した（実験Ｂ１３０を含めて、ビヒクルに対して、ｐ＝０．００８７）。
【０３３４】
●ビヒクル中３０ｍｇ／ｋｇの用量での（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、全血流量に対して効果を有さなかった（ビヒクルに対してｐ＝０．８４、およびアスピリンに対してｐ＝０．６５）。
【０３３５】
●ビヒクル中１００ｍｇ／ｋｇの用量での（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、アスピリンと比較して全血流量を改善した（ｐ＝０．０５５）が、ビヒクルと比較するとしなかった（ｐ＝０．４５）。
【０３３６】
●すべての群において、時間に伴う血流量の進展は、観察された閉塞時間に適合していた。０〜１０分の時間枠では、投与したビヒクル中１００ｍｇ／ｋｇの（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸は、アスピリンと比較して有意に高い流量を随伴した（ｐ＝０．０００２）が、ビヒクルのみと比較するとしなかった（ｐ＝０．１１）。同じ傾向が、もっと遅い時間点で観察された。
【０３３７】
●食塩水中１００ｍｇ／ｋｇの用量での（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸カリウムは、食塩水と比較しても（ｐ＝０．００３２）、アスピリンと比較しても（ｐ＝０．００２１）、全血流量を有意に改善した。さらに、同じ時間枠で、食塩水中１００ｍｇ／ｋｇの（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸カリウムは、食塩水のみと比較しても（ｐ＝０．００９）、アスピリンと比較しても（ｐ＝０．０００６）有意に高い血流量を随伴した。同じ傾向が、もっと遅い時間点で観察された。１０〜２０分間、食塩水中１００ｍｇ／ｋｇの（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸    で、食塩水に対してｐ＝０．００６６、およびアスピリンに対してｐ＝０．０２７；２０〜３０分間、食塩水に対してｐ＝０．０１６、およびアスピリンに対してｐ＝０．０３１。
【０３３８】
血球分析
表ＶＩは、観察期間の終わりに取ったサンプルに対して行った血球分析の結果をまとめたものである。（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸  
を表ＶＩではＥＶと呼ぶ。
【０３３９】
アスピリンおよびクロピドグレルと比較して、大きな変化は観察されなかった。幾つかの中等度の違いが白血球分布において観察された。
【０３４０】
【表６】
2014240409.tif 000046
実施例３５
実施例３０において説明したように、トロンボキサン受容体結合アッセイを行った。
【０３４１】
ＴＰ受容体放射性リガンド結合試験：
これらの実験条件［ヒト組換えＨＥＫ−２９３細胞、リガンド：５ｎＭ［３Ｈ］ＳＱ−２９５４８、ビヒクル：１％ＤＭＳＯ、インキュベーション時間、温度：２５℃で３０分、インキュベーションバッファ：５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１５４ｍＭ
ＮａＣｌ、非特異的リガンド：１μＭ  ＳＱ−２９５４８、ＫＤ：９．４ｎＭ、Ｂｍａｘ：５．１ｐｍｏｌ／ｍｇ  タンパク質、特異的結合：９３％］を用い、Ｈｅｄｂｅｒｇ
Ａ，Ｈａｌｌ  ＳＥ，Ｏｇｌｅｔｒｅｅ  ＭＬ，Ｈａｒｒｉｓ  ＤＮ  ａｎｄ  Ｌｉｕ
Ｅ  Ｃ−Ｋ（１９８８）Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ［５，６−３Ｈ］ＳＱ  ２９，５４８  ａｓ  ａ  ｈｉｇｈ  ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｒａｄｉｏｌｉｇａｎｄ，ｂｉｎｄｉｎｇ  ｔｏ  ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ  Ａ２／ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ
Ｈ２−ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｌａｔｅｌｅｔｓ．Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．２４５（３）：７８６−９２７９２、およびＳａｕｓｓｙ
ＤＬ  Ｊｒ，Ｍａｉｓ  ＤＥ，Ｂｕｒｃｈ  ＲＭ  ａｎｄ  Ｈａｌｕｓｈｋａ  ＰＶ（１９８６）Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｐｕｔａｔｉｖｅ  ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ  Ａ２／ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ  Ｈ２  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｌａｔｅｌｅｔ  ｍｅｍｂｒａｎｅｓ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２６１（７）：３０２５−９に従って、アッセイを行った。
【０３４２】
ヒト血小板トロンボキサンシンターゼアッセイ：
これらの実験条件［基質：１０μＭ  ＰＧＨ２、ビヒクル：１％ＤＭＳＯ、プレイインキュベーション時間、温度：２５℃で１５分、インキュベーション時間、温度：２５℃で３分、インキュベーションバッファ：１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４、定量法：ＴｘＢ２のＥＩＡ定量］を用い、Ｂｏｒｓｃｈ−Ｈａｕｂｏｌｄ  ＡＧ，Ｐａｓｑｕｅｔ  Ｓ，Ｗａｔｓｏｎ  ＳＰ．（１９９８）Ｄｉｒｅｃｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ
ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−１  ａｎｄ  −２  ｂｙ  ｔｈｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ＳＢ  ２０３５８０  ａｎｄ  ＰＤ  ９８０５９．ＳＢ  ２０３５８０  ａｌｓｏ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ．Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ．２７３（４４）：２８７６６−７２、およびＩｉｚｕｋａ  Ｋ，Ａｋａｈａｎｅ  Ｋ，Ｍｏｍｏｓｅ  Ｄ，Ｎａｋａｚａｗａ  Ｍ，Ｔａｎｏｕｃｈｉ  Ｔ，Ｋａｗａｍｕｒａ  Ｍ，Ｏｈｙａｍａ  Ｉ，Ｋａｊｉｗａｒａ  Ｉ，Ｉｇｕｃｈｉ  Ｙ，Ｏｋａｄａ  Ｔ，Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ  Ｋ，Ｍｉｙａｍｏｔｏ  Ｔ，Ｈａｙａｓｈｉ  Ｍ．（１９８１）Ｈｉｇｈｌｙ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ  ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ．１．Ｉｍｉｄａｚｏｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２４（１０）：１１３９−４８に従って、アッセイを行った。
【０３４３】
ＴＰ受容体血小板凝集−ウサギ：
これらの実験条件［ニュージーランドウサギ（２．７５±０．２５ｋｇ）血小板リッチ血漿、ビヒクル：０．３％ＤＭＳＯ、アッセイ：１．５μＭ  Ｕ−４６６１９誘導血小板凝集の阻害、インキュベーション時間、温度：３７℃で５分、インキュベーションバッファ：クエン酸三ナトリウム（０．１３Ｍ）で処理した血小板リッチ血漿、浴容量：０．５ｍＬ、標定時間：５分、定量法：光学密度変化］を用い、Ｐａｔｓｃｈｅｋｅ，Ｈ．，ａｎｄ  Ｓｔｒｅｇｍｅｉｅｒ，Ｋ．（１９８４）Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ  ｏｎ  ａ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｎｏｎ−ｐｒｏｓｔａｎｏｉｃ  ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ，ＢＭ１３，１７７，ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｌａｔｅｌｅｔｓ．Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３３：２７７−２８８に従って、アッセイを行った。
【０３４４】
ＴＰ受容体血小板凝集−ヒト：
これらの実験条件［ヒト（６０±１０ｋｇ）血小板リッチ血漿、ビヒクル：０．３％ＤＭＳＯ、アッセイ：３μＭ  Ｕ−４６６１９誘導血小板凝集の阻害、インキュベーション時間、温度：３７℃で５分、インキュベーションバッファ：クエン酸三ナトリウム（０．１３Ｍ）で処理した新鮮な血小板リッチ血漿、浴容量：０．５ｍＬ、標定時間：５分、定量法：光学密度変化］を用い、Ｐａｔｓｃｈｅｋｅ，Ｈ．，ａｎｄ  Ｓｔｒｅｇｍｅｉｅｒ，Ｋ．（１９８４）Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ  ｏｎ  ａ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｎｏｎ−ｐｒｏｓｔａｎｏｉｃ  ｔｈｒｏｍｂｏｘａｎｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ，ＢＭ１３，１７７，ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐｌａｔｅｌｅｔｓ．Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ３３：２７７−２８８に従って、アッセイを行った。
【０３４５】
ＩＣ５０計算：
データを半対数変換し、その後、応答に対するｌｏｇ（アゴニスト）を用いる４変数用量応答曲線  Ｙ＝最低値＋（最高値−最低値）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＥＣ５０−Ｘ）＊ヒルの傾き））への非線形回帰−−ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェア（ｈｔｔｐ：／／ｇｒａｐｈｐａｄ．ｃｏｍ／ｈｅｌｐ／ｐｒｉｓｍ５／ｐｒｉｓｍ５ｈｅｌｐ．ｈｔｍｌ？ｕｓｉｎｇｎｏｎｌｉｎｅａｒ＿ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ＿ｓｔｅｐ＿ｂｙ＿ｓ．ｈｔｍ）の可変傾き関数−−を用いて分析した。
【０３４６】
【数３】
2014240409.tif 000047
化合物Ａ：（Ｚ）−６−（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸（エナンチオマー２）
化合物Ｂ：（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−ｙｌ）ヘキサ−４−エン酸（エナンチオマー１）
化合物３：（Ｚ）−６−（−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸
化合物４：（Ｚ）−６−（（２Ｒ，４Ｒ，５Ｓ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸
化合物５：（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−メトキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸。
【０３４７】
実施例３６
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸の溶媒和物および塩の調製
（Ｚ）−６−（（２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−２−（２−クロロフェニル）−４−（２−ヒドロキシフェニル）−１，３−ジオキサン−５−イル）ヘキサ−４−エン酸（表ＩＩのＳＮ１）は、油のようなゴムである。この酸を、下のスキームに図示するように、様々な固体塩および溶媒和物に転化させることができる。
【０３４８】
【化２７】
2014240409.tif 000048
酸（１４．０８ｇ）をｔ−ブチルメチルエーテル（ＴＢＭＥ、３２ｍＬ、２．２５容量）で研和した。その溶液を室温で３０分間、そして氷浴内で３０分間攪拌した。このようにして得られた沈殿を濾過によって回収し、氷冷ＴＢＭＥ（２×１５ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて固体を得た（８．１７ｇ、５８％）。得られた固体を、Ｂｒｕｋｅｒ  ４００ＭＨｚ  ＮＭＲ計器を使用して特性付けし、Ｃｕ  Ｋα放射線を使用するＢｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ回折計（４０ｋＶ、４０ｍＡ）でＸ線粉末回折パターンを収集し、ＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ５００  ＴＧＡを用いて熱重量分析（ＴＧＡ）を行った。ＮＭＲおよびＸＰＲＤデータを、それぞれ、図１１および１２に示す。
【０３４９】
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルおよびＴＧＡトレースは、存在する０．７２ｍｏｌのＴＢＭＥと一致する。ＴＧＡおよびＤＳＣトレースは、２つの脱溶媒段階を含むことを示唆している。第一の脱溶媒吸熱は、５５℃で開始し、第二の脱溶媒吸熱は、７５℃で発生する。溶融吸熱の証拠はない。化合物の純度は、ＨＰＬＣにより９８．０％と判定された。
【０３５０】
可変温度ＸＲＰＤは、この材料が、７０℃の温度まで同じ結晶形であることを示す。より高い温度ではこの材料がゴムになり、非晶質パターンを与える。３０℃に冷却したとき、この材料は、非晶質ＸＲＰＤパターンを有するゴムのままである。
【０３５１】
エルブミン塩へのＴＢＭＥ溶媒和物の転化
結果として生じたＴＢＭＥ遊離酸溶媒和物（８．０７ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）をニトロメタン（１６μＬ）に溶解した。常時攪拌しながらｔ−ブチルアミン（２．５ｍＬ、１．２当量）を室温で添加し、その後、結果として生じた残留物をさらに３０分間、氷上で攪拌して、固体のようなゴムを得た。そのゴムをアセトニトリル（２０ｍＬ）で研和し、結果として生じた沈殿を濾過によって回収した。その固体を均一な粒径にし、真空下、室温で４８時間、その後、４０℃でさらに７２時間乾燥させて、７．４６ｇ（７８．５％）の白色固体材料を得た。その１Ｈ  ＮＭＲおよびＸＰＲＤ回折図を、それぞれ、図１３および１４に示す。１Ｈ  ＮＭＲは、ＨＰＬＣにより純度９７．８％であることが判明した固体中に０．１７ｍｏｌのニトロメタンおよび１ｍｏｌのｔ−ブチルアミンが存在することを示す。乾燥によってニトロメタン量をさらに減少させる。ＴＧＡからのデータは、〜１００℃での漸減的重量喪失開始（これは、ｔ−ブチルアミンの喪失と一致する）を示し、ならびにＤＳＣは、１３０℃での吸熱開始（これも、ｔ−ブチルアミンの喪失と一致する）を示す。
【０３５２】
もう１つの方法では、酸（４５２．２３ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を室温でＩＰＡ（２ｍＬ）に溶解した。その溶液を５０℃に加熱し、ｔ−ブチルアミンを添加した。１時間後、結晶質材料が沈殿した。ＩＰＡの体積を２３ｍＬに増加させ、その材料を熱で再び溶解し、４８時間かけて室温に冷却した。結晶質の白色材料が収率３４％で得られた。この材料の特性付けにより、それは、９５．４％の化学純度を有するＩＰＡ溶媒和物と同定された。回折図（図１５）は、ＩＰＡ溶媒和物としてのその化合物のエルブミン塩の形成を示す。
【０３５３】
本明細書に引用するすべての出版物および特許出願は、それぞれ個々の出版物または特許出願が参照により取り入れられていると具体的におよび個々に示されているがごとく、本明細書に参照により取り入れられている。
【０３５４】
明確に理解できるように図表および実施例により多少詳細に上の発明を説明したが、本発明の教示にかんがみて、添付の特許請求の範囲において定義する本発明の精神または範囲から逸脱することなく、本発明に一定の変更および修正をなすことができることは、通常の当業者には容易に理解されるであろう。
【図８】
2014240409.tif 000050
【図９】
2014240409.tif 000051
【図１】
2014240409.tif 000052
【図２】
2014240409.tif 000053
【図３】
2014240409.tif 000054
【図４】
2014240409.tif 000055
【図５】
2014240409.tif 000056
【図６】
2014240409.tif 000057
【図７】
2014240409.tif 000058
【図１０】
2014240409.tif 000059
【図１１】
2014240409.tif 000060
【図１２】
2014240409.tif 000061
【図１３】
2014240409.tif 000062
【図１４】
2014240409.tif 000063
【図１５】
2014240409.tif 000064
【外国語明細書】
2014240409000001.pdf