(57)【要約】      （修正有）【課題】細胞毒性の副作用を最小限にして、低濃度の界面活性剤を用いて上皮組織中への高濃度の難溶性薬物の送達を可能とするシステムの提供。【解決手段】薬物の送達のための媒体としてのマイクロエマルションであって、特定量の（ａ）レシチン化合物、（ｂ）親油性リンカー、（ｃ）親水性リンカー、及び（ｄ）薬物を含み、前記親油性リンカーは９を超える炭素を有するアルキル鎖を有し、５以下のＨＬＢを有する両親媒性分子を含み、前記親水性リンカーは６から９の炭素を含むアルキル基を有する両親媒性化合物を含み、該マイクロエマルションはＣ２〜Ｃ６アルコールを含まずポリエチレングリコールを含まない、マイクロエマルション。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
薬物の送達のための媒体としてのマイクロエマルションであって、
（ａ）０．１％ｗ／ｗから８．０％ｗ／ｗのレシチン化合物、
（ｂ）０．１％ｗ／ｗから２４．０％ｗ／ｗの親油性リンカー、
前記親油性リンカーは９を超える炭素を有するアルキル鎖を有し、５以下のＨＬＢを有する両親媒性分子を含み、
（ｃ）０．１％ｗ／ｗから２４．０％ｗ／ｗの親水性リンカー、
前記親水性リンカーは６から９の炭素を含むアルキル基を有する両親媒性化合物を含み、及び
（ｄ）薬物
を含み、前記マイクロエマルションはＣ２〜Ｃ６アルコールを含まずポリエチレングリコールを含まない、マイクロエマルション。
【請求項２】
前記マイクロエマルションは生体適合性であり、前記送達は局所的、経皮的、経口的、経鼻的又は静脈内送達である、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項３】
前記マイクロエマルションは油中水型であり、局所的又は経皮的な送達により持続放出特徴がもたらされる、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項４】
前記レシチン化合物は、少なくとも９０％ｗ／ｗのモノ又はジ−アルキルホスファチジルコリン類を含む、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項５】
前記レシチン化合物は動物、野菜又は化学合成の原料から得られる、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項６】
前記親油性リンカーは、アルコール類、脂肪酸類、モノグリセリド及びソルビタンエステルから成る群より選択される１又は複数の成分から成る、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項７】
前記親油性リンカーは、ドデシル・アルコール、オレイル・アルコール、コレステロール、ラウリン酸、パルミチン酸、オレイン酸、オメガ６−脂肪酸類、オメガ３−脂肪酸類、これら脂肪酸類のソルビトール、マルチトール、キシリトール、イソマルト、ラクチトール、エリスリトール、ペンタエリスリトール、グリセロールとのエステル類；モノオレイン酸ソルビタン及びモノオレイン酸グリセロールから成る群より選択される１又は複数の成分から成る、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項８】
前記親水性リンカーは、部分的に鹸化されたＣ６〜Ｃ９脂肪酸類を含む、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項９】
前記親水性リンカーは、Ｃ６〜Ｃ９アルキル・サルフェート類、スルホネート類、フォスフェイト類、ホスホネート類、カルボキシレート類、スルホサクシネート類；オクタノエート類、オクチル・スルホネート類、ジブチル・スルホサクシネート類、Ｃ６〜Ｃ９カルボン酸類、アルファ−ハイドロキシ酸類、多価アルコール類のエステル類、グルコシド類、二級エトキシ化アルコール類、ピロリドン類、オクタン酸、２−ヒドロキシオクタン酸、ヘキシル及びオクチル・ポリグルコシド類、オクチルピロリドン、Ｃ６〜Ｃ９アミン類、四級アンモニウム塩類、アミン・オキシド類、オクチルアミン；Ｃ６〜Ｃ９アルキルアミノプロピオン酸類、ベタイン類、スルホベタイン類、ホスファチジルコリン類、オクチル・スルホベタイン、及びジブチリル・ホスファチジルコリンから成る群より選択される１又は複数の成分から成る、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項１０】
前記親水性リンカーはオクタン酸とオクタン酸ナトリウムの混合物である、  請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項１１】
更にキャリア・オイルを含む、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項１２】
前記キャリア・オイルは０〜９５％ｗ／ｗである、請求項１１に記載のマイクロエマルション。
【請求項１３】
前記キャリア・オイルは、脂肪酸類のアルキルエステル類、テルペン類、又はモノグリセリド類、ジグリセリド類若しくはトリグリセリド類の混合物から成る群より選択される、請求項１１に記載のマイクロエマルション。
【請求項１４】
更に９０％ｗ／ｗ以下の水を含む、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【請求項１５】
更に等浸透圧の調合物を作製するために電解質を含む、請求項１４に記載のマイクロエマルション。
【請求項１６】
前記薬物は室温で等浸透圧溶液中１％ｗ／ｗ未満の水性可溶性を有し、前記薬物はキャリア・オイルに可溶性である、請求項１に記載のマイクロエマルション。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放出が制御された薬物送達の応用のために設計されたマイクロエマルション・システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
マイクロエマルションには、（１）水溶性及び油溶性薬物のいずれについても高い可溶化能力を有する点、（２）熱力学的に安定である点、（３）透明である点、及び（４）外部エネルギーを加えることなく自然に形成される点を含む多くの利点がある。マイクロエマルション薬物送達の技術分野の状態に関する１９９８年のレビューには、他のシステムよりもマイクロエマルションが際立って優れている点は、媒体において（水に）難溶性の薬物の可溶性を高め、（粒子サイズが小さいので）大量に移動するための界面積が増加し、結果的に上皮組織を介する薬物透過性を高める能力に由来すると述べられている（Malmstem, Handbook of Microemulsion Science and Technology. Kumar, P. Ed. Marcell Dekker, Inc.: New York, 1999）。同レビューにおいて、非イオン界面活性剤はマイクロエマルションと組み合せると毒性を激減するが、充分に無毒で生体適合性のあるマイクロエマルションが可能となるのは、短鎖及び中鎖アルコールを使用することなく、天然の界面活性剤（例えば、レシチン）を用いてマイクロエマルションを調合したときのみであろうと述べられている。
【０００３】
より近年のレビュー（Prausnitz, M.R.; Mitragotri, S. and Langer, R. Nat Rev Drug Discovery, 2004, 3(2):115-24）では、界面活性剤システムを含む異なる薬物送達方法が比較された。筆者は、界面活性剤に基づく媒体が脂質を可溶化し角質層のケラチンを変性することによって典型的に薬物の浸透性を増加するが、結果的に皮膚紅斑や湿疹等の毒性の副作用が増加すると述べている。前記筆者は、界面活性剤に基づく、及び他の化学的促進性剤形における新しいブレイクスルーは、媒体−薬物−皮膚の相互作用をさらに理解することによってのみ可能であろうと記している。
【０００４】
Roentsch らの米国特許第5,654,337号では、皮膚を通して薬学的に活性な薬剤を送達するために使用される剤形が記載されている。前記剤形は生体適合性のある有機溶媒（ミリスチン酸イソプロピル）、極性脂質（レシチン）、界面活性剤、水及び尿素から成る。本特許により、オルガノゲル（マイクロエマルションに基づくゲル）に類似するが、マイクロエマルションとは異なる「スピード−ゲル」製品が生産される。マイクロエマルションとは異なる理由は、前記スピード−ゲルは（高い粘性のため）メタ安定性であるのに対して、マイクロエマルションは熱力学的に安定であり、低粘性で調合できるからである。この低粘性によりマイクロエマルションはより広範囲に応用可能となる。
【０００５】
Owenらの米国特許第5,688,761号に水中油型マイクロエマルションが記載されている。このマイクロエマルションは水溶性タンパク薬物の投与に適している。水性流体を添加することによって、容易に水中油型エマルションは油中水型マイクロエマルションに変換され活性薬剤が放出される。しかしながら、その請求項に記載された量まで界面活性剤の含有量を低下させるために界面活性調整剤（surfactant modifiers）を要するので、実際の応用においては有効ではない。
【０００６】
Ekwuribe らの米国特許第6,191,105号には、親水性と親油性のバランス（ＨＬＢ）値が３〜７の間である油中水型マイクロエマルションが、ポリマーと共有結合したインシュリンタンパク質の経口又は非経口送達用として記載されている。この特定の製剤において、ポリエチレングリコール又はプロピレングリコールの使用（製剤の粘性を増加させすぐに代謝されない）がマイクエマルション・システムを調合するために必要不可欠である。
【０００７】
von Corswant の米国特許第6,602,511号において、親油性薬物の非経口、経口及び経皮的投与に適した、水中油型又は生体適合性のあるマイクロエマルションが記載されている。このシステムは、親水性の界面活性剤、疎水性の界面活性剤（レシチン）、界面活性フィルム調整剤（surfactant film modifiers）、及びマイクロエマルションの極性を調整するための１又は複数の成分から成る。そのようなシステムは、薬学的に許容しうる非毒性の媒体を提供すると述べられている。しかし、この特許に記載される製剤は投与が反復投薬の後に組織の炎症と感作を生み出しうる３〜１３％のエタノールを含む。米国特許第 6,191,105号と同様に、この特許はポリエチレングリコール等の親水性ポリマーの使用も必要とする。
【０００８】
最近では、Dennis らの米国特許第6,638,537号に、油溶性薬物の静脈内送達のための水中油型マイクロエマルションが記載されている。このマイクロエマルションは、共同界面活性剤として長いポリマー鎖の界面活性剤と短い脂肪酸（Ｃ８〜Ｃ１２）の界面活性剤から成る。マイクロエマルション・ミセルからの薬物放出率は、市販の薬物の製剤と比較して簡単に開示されている。前記マイクロエマルションはアルコールを含有せずないにもかかわらず、満足のいく結果を出している。しかし、前記製剤の問題は、マイクロエマルション・システムを形成するために、少なくとも２５％ｗ／ｖの界面活性剤を必要とする点であり、これにより粘性、コスト及び潜在的な毒性の副作用が増える。
【０００９】
オレイル・アルコール（５以下のＨＬＢ及びアルキル基中に９を超える炭素を有する両親媒性分子）等の親油性リンカーと、ヘキシル・グルコシド（アルキル基中に６〜９の炭素を有する両親媒性分子）等の親水性リンカーと、レシチン製品マイクロエマルションとの混合物は、広い範囲の油を用いて短鎖又は中鎖アルコールを必要としないことがわかっている(Acosta, E.; Nguyen, T.; Witthayapanyanon, A.; Harwell, J.H. and Sabatini, D.A. Linker-based bio-compatible microemulsions, Enviro. Sci. Technol. 2005, 39: 1275-1282)。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
薬物送達システムにおけるリンカー・マイクロエマルションの使用やそれらの細胞毒性効果は知られていない。そこで必要とされるのが、細胞毒性副作用を最小限にして上皮組織における薬物吸収向上による薬物取り込みを増加させる薬物送達システムのためのリンカーに基づくレシチン調合物である。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、局所的、経皮的、経口的、経鼻的及び静脈内の送達において、難溶性の有効成分の放出を制御する送達媒体としての、生体適合性のあるマイクロエマルションの調合物（formulation）に関する。前記調合物は、（１）レシチン（大豆やその他の原料から抽出される）；（２）その末端基において９以上の炭素原子を有し、５以下の親水性と親油性のバランス（ＨＬＢ）を有する親油性の両親媒性物質；（３）６〜９の炭素原子を含む陰イオン性、非イオン性、陽イオン性又は双性イオン性の頭部基及び末端基を有する親水性の両親媒性物質；（４）有効成分を希釈するために必要となりうるキャリア又は油溶媒（脂肪酸のアルキルエステル又はテルペン）；及び（５）水の組み合わせである。特定の比率でのこの組合せによると、疎水性薬物（例えば、リドカイン、又はα−酢酸トコフェロール）の（等張液中での）可溶性を２０倍を超えて増加できる熱力学的に安定なマイクロエマルションが得られる。このように可溶性が増加することによって、（ヒト及び動物の）上皮組織、及び葉のろう状外皮を通して、他の界面活性剤に基づく媒体でよく観られる重篤な細胞毒性の副作用なしに有効成分の吸収及び浸透性が高められる。
【００１２】
界面活性剤としてレシチンを使用している製剤のうち報告されたものの大部分は、高濃度（５％ｗ／ｗ又はそれを超える濃度）のC2〜C6アルコール又はポリエチレングリコールを共溶媒として必要とした。しかし、多くの場合において、これらの高濃度の共溶媒はアレルギー反応を引き起こす。本明細書で開示される調合物は、そのような共溶媒の使用を必要としない。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
好ましい実施形態の詳細な説明を以下に例示としてのみ提供し、以下の図を参照する。
【図１】図１は、MATTEKTM ヒト皮膚を通してリドカインを送達するための様々な媒体のインビトロ細胞毒性を表す。
【図２】図２は、蓄積されたリドカインの浸透量を表す。
【図３】図３は、放出されたリドカインの画分を表す。
【００１４】
図において、本発明の一実施形態を例示として表す。前記説明及び図は説明の目的のみに、かつ理解を助けるものとして示されたものであり、本発明の範囲を定義する意図はないことは明確に理解される。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明は、局所的、経皮的、経口的、経鼻的、及び静脈内のルートを介した（水に）難溶性の有効成分のための送達媒体として親水性と親油性のリンカー分子を用いて調合されるレシチンに基づくマイクロエマルションに関する。脱脂した大豆抽出レシチンを、モノオレイン酸ソルビタン等の親油性リンカー（９以上炭素と５以下のHLBを有する両親媒性物質）及び部分的に鹸化したオクタン酸等の親水性リンカー（６〜９の炭素を有する両親媒性物質）と組み合わせることによって、（水に）難溶性の有効成分を可溶化できる、水中油型（タイプI）、油中水型（タイプII）及び二連続型（bicontinuous）（タイプIII、IV）のマイクロエマルションを生産でき、最小限の細胞毒性副作用で上皮組織へ及び／又は通して前記有効成分を送達することができる。このようなマイクロエマルションは、短鎖（C１からC３）及び／若しくは中鎖（C4からC８）のアルコール、又はポリマーの添加剤を要することなく、塩化ナトリウムを含む等浸透圧環境中で生産され、脂肪酸のエステルや精油等の溶媒又は薬学的に許容可能なキャリア・オイルを含んでもよい。
【００１６】
リンカー・マイクロエマルション媒体を用いた（水に）難溶性の有効成分の経皮的な流動／局所的な吸収における増加は、（１）有効成分の可溶性における増加、（２）皮膚の浸透性の増加、及び（３）皮膚上での薬物吸収の予想以上の増加によってもたらされた結果である。さらに、これらのリンカー調合物は、他の媒体（水、ミリスチン酸イソプロピル及び中鎖アルコールで調合されたレシチン・マイクロエマルション）に比べて多くの場合、１００％以上で難溶性薬物の皮膚での吸収性を向上でき、かつ重大な細胞毒性作用を引き起こさないことがわかった。さらに、通常のレシチン・マイクロエマルションとは逆に、油中水型（タイプII）リンカー・マイクロエマルションは、（水に）難溶性の薬物にとって最高の媒体であることもわかった。その理由は、水中油型（タイプI）及び二連続型（タイプIII又はIV）のマイクロエマルションと比較してより向上した薬物吸収性及び経皮的流動、並びにより低い細胞毒性を有するからである。これらの水中油型（タイプII）調合物の明確な特徴は、それらが２％ｗ／ｗという低いレシチン濃度で調合が可能であり、８％ｗ／ｗのレシチンを含む調合物と比べて同程度の皮膚吸収性と経皮的送達を維持することができる点である。
【００１７】
タイプIIレシチン・リンカー・マイクロエマルションがリドカイン（薬物の例として用いられた）の局所投与に使われるとき、前記マイクロエマルションにより経皮的なパッチ調合物で得られるものと同様に、１２時間を超える期間、持続放出の特徴がもたらされた。
【００１８】
レシチン・リンカー・マイクロエマルションの調合は、０．１％ｗ／ｗから８％ｗ／ｗの濃度範囲で、主要な乳化剤としてレシチンを使用することが必要である。レシチン（リゾレシチンを含む）という用語は、概してホスファチジルコリンと他の脂質との化合物又は混合物を意味し、少なくとも９０％ｗ／ｗのモノ又はジ−アルキル・ホスファチジルコリンを含んでおり、動物（例えば、卵）、野菜（例えば、大豆）原料から得ることができ、又は化学合成によっても得ることができる。
【００１９】
親油性リンカーは、ホスファチジルコリン分子を油相に橋渡しするのを助け、０．１から２４％ｗ／ｗの濃度で使用される。親油性リンカーは概して、アルキル鎖中に９以上の炭素を有し、５以下のHLBを有する両親媒性分子である。親油性リンカーの例示としては、ドデシル・アルコール、オレイル・アルコール、コレステロール等のアルコール；ラウリン酸、パルミチン酸、オレイン酸；オメガ６−脂肪酸、オメガ３−脂肪酸等の脂肪酸；モノオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸グリセロール等の多価アルコール（ソルビトール、マルチトール、キシリトール、イソマルト、ラクチトール、エリスリトール、ペンタエリスリトール、グリセロール）の脂肪酸エステル、その他が含まれる。
【００２０】
親水性リンカーは、アルキル基において６から９の炭素原子を含む両親媒性化合物であり、０．１から２４％ｗ／ｗの濃度で使用され、その名称の示すとおり高親水性である。これらのリンカーの親水性のグループは、オクタノエート類（octanoates）、オクチル・スルホネート類（octyl sulfonates）、ジブチル・スルホサクシネート類（dibuthyl sulfosuccinates）等の陰イオン性（サルフェート類（sulfates）、スルホネート類（sulfonates）、フォスフェイト類（phosphates）、ホスホネート類（phosphonates）、カルボキシレート類（carboxylates）、スルホサクシネート類（sulfosuccinates））；オクタン酸、２−ヒドロキシオクタン酸、ヘキシル・ポリグルコシド、オクチル・ポリグルコシド、オクチルピロリドン等の非イオン性（カルボン酸類、アルファ−ヒドロキシ酸類、多価アルコール類のエステル類、又はグルコシド類、二級エトキシ化アルコール類、ピロリドン類）；オクチルアミン等の陽イオン性（アミン類、四級アンモニウム塩類、アミン・オキシド類）；オクチル・スルホベタイン、ジブチリル・ホスファチジルコリン等の双性イオン性（アルキルアミノプロピオン酸類、ベタイン類、スルホベタイン類、ホスファチジルコリン類）、並びにその他であり得る。
【００２１】
キャリア（溶剤）・オイルは、０〜９５％ｗ／ｗの濃度範囲で、これらのマイクロエマルションを調合するために必要とするかもしれない。好ましい溶剤（キャリア・オイル）は、ミリスチン酸イソプロピル、カプリン酸エチル、オレイン酸メチル等の脂肪酸類のアルキルエステル類；リモネン、ピネン等のテルペン類；並びにモノ−、ジ−及びトリ−グリセリドの混合物を含む。キャリア・オイルは、調合物中に疎水性の有効成分を溶解するために使われる。
【００２２】
他の必要な成分には、水（０〜９０％ｗ／ｗ）、及び等浸透圧の調合物を調製するための塩化ナトリウム、塩化ナトリウムとカルシウムの混合物等の電解質が含まれる。
【００２３】
これらの調合物を用いた送達に適した（水に）難溶性な薬物は、通常、室温で等張液中に１％ｗ／ｗ未満の水溶性を有し、前記有機（キャリア）溶媒に溶解する。適した薬物のリストには、ペリレン、ナフタセン、クリセン、３−メチルコラントレン、３，４−ベンゾピレン、ヘキサクロロベンゼン、ベンズアントラセン、エトミデート、トリフェニレン、アントラセン、フェンブコナゾール、ピレン、ロバスタチン、チオリダジン、クロファジミン、ダナゾール、葉酸、フェンブフェン、エキリン、エキレニン、クロルピリホス、フルジオキソニル、ダントロン、フェナントレン、ジクロフェナク、フェンピクロニル、スリンダク、エストリオール、アルファ−トコフェロール、アルファ−酢酸トコフェロール、フルオレン、エストラジオール、インドプロフェン、インドメタシン、スタノロン、フェノキシカルブ、テルフェナジン、ジヒドロエキレニン、ノルエチステロン、フルフェナム酸、G-BHC（リンデン）、アセナフテン、イオパノ酸、グラフェニン、１７アルファ−エチニルエルトラジオール、ジフルニサル、５−エチル−５−ノニルバルビツール酸、アミトリプチリン、１，３，５−トリクロロベンゼン、ハロペリドール、プロゲステロン、イプロジオン、ジヒドロエキリン、プロクロルペラジン、ジフェニル、ベンペリドール、プロメタジン、フェニトイン、５，５−ジフェニルバルビツール酸、スピロノラクトン、ナプロキセン、パーフェナジン、シンバスタチン、トリアゾラム、１，４−ジブロモベンゼン、テストステロン、プラステロン、メチルテストステロン、エストロン、オキサゼパム、トリアムテレン、５−エチル−５−オクチルバルビツール酸、フェンクロルホス、テノキシカム、フェンクロフェナク、ペンタゾシン、インダパミド、メチクロチアジド、ベタメタゾン、メフェナム酸、１，２，３−トリクロロベンゼン、ジウロン、ジアゼパム、フルルビプロフェン、サリドマイド、トリアムシノロン、ナフタレン、ロラゼパム、デキサメタゾン、グアニン、ブメタニド、５−t−ブチル−５−（３−メチルブタ−２−エニル）バルビツール酸、スルファジアジン、リニュロン、アトラジン、メルファラン、ニトロフラントイン、イソプロツロン、フルオメツロン、クロルタリドン、デオキシコルチコステロン、アザチオプリン、フルドロコルチゾン、イブプロフェン、尿酸、イソグアニン、ジレウトン、ナリジクス酸、ストリキニーネ、カルバマゼピン、コルチゾン、グリセオフルビン、コルチコステロン、５−エチル−５−へプチルバルビツール酸、プレドニゾロン、メトクロプラミド、シクロヘキサン−スピロバルビツール酸、ケトプロフェン、モルヒネ、ブタンベン、アルクロフェナク、ブチルパラベン、ヒドロコルチゾン、ダプソーン、シクロロペンタン−スピロバルビツール酸、ノルフロキサシン、ヘキセタール、ヒドロフルメチアジド、ケリン、へプタバルビタール、ジスルフィラム、シクロヘプタン−スピロバルビツール酸、オキサムニキン、ブリンゾラミド、クロルテトラサイクリン、メタカロン、フェノールフタレイン、プラジカンテル、スルピリド、トリメトプリム、クロルゾキサゾン、ジクロロプロップ、キニジン、スルファチアゾール、ヘロイン、キニーネ、ジアトリゾ酸、レポサール、５，５−ジ−ｉ−プロピルバルビツール酸、エピネフリン、チバメート、６−ヒドロキシプテリジン、プテリジン−７−チオール、スルファメトキサゾール、ヒドロクロロチアジド、テバイン、プテリジン−４−チオール、フェニルブタゾン、プリミドン、プテリジン−２−チオール、ジオスゲニン、セファゾリン、４−アミノ安息香酸エチル（ベンゾカイン）、５−メチル−５−（３−メチルブタ−２−エニル）バルビツール酸、５−ｉ−プロピル−５−（３−メチルブタ−２−エニル）バルビツール酸、マイトマイシンＣ、プロピルパラベン、テオブロミン、ロメフロキサシン、５，５−ジプロピルバルビツール酸、カルボフラン、アセタゾールアミド、キサンチン、アモバルビタール、プロスタグランジン、イソカルボキサジド、ビンバルビタール、アロプリノール、アデニン、ペントバルビタール、ヘプトバルビタール、フェナセチン、フェノバルビタール、プテリジン−４−メチル−チオール、シクロブタン−スピロバルビツール酸、５−アリル−５−フェニルバルビツール酸、エチルパラベン、６−アミノプテリジン、５−エチル−５−ペンチルバルビツール酸、グルテチミド、セクブタバルビツール酸、セコバルビタール、ヨードアミド、４−アミノプテリジン、７−アミノプテリジン、２−アミノプテリジン、ヒポキサンチン、シクロバルビタール、スルファメタジン、ブスルファン、コカイン、５−アミノサリチル酸、５−エチル−５−（３−メチルブタ−２−エニル）バルビツール酸、プロピルチオウラシル、クロルジアゼポキシド、ヨードブタル、２−ナフトール、チアンフェニコール、プロバルビタール、７−ヒドロキシプテリジン、アトロピン、ブタルビタール、クロラムフェニコール、テトロキソプリム、ショウノウ、セフタジジム、プロポクサー、タルブタール、ミノキシジル、パラ−アミノサリチル酸、２−ヒドロキシプテリジン、ヒヨスチアミン、シプロヘプタジン、シクロエタン−スピロバルビツール酸、サリチルアミド、Ｌ−ＤＯＰＡ、メプロバメート、７−ブチルテオフィリン、サリチル酸、アロバルビタール、リドカイン、プテリジン−２−メチル−チオール、７−ブチル−８−メチルテオフィリン、５，５−ジメチルバルビツール酸、アスピリン、アデノシン、サッカリン、アジンタアミド、アプロバルビタール、パラヒドロキシ安息香酸メチル、ジソピラミド、トロピカミド、バクロフェン、ブトバルビトン（ブテタール）、シクロプロパン−スピロバルビツール酸、アズトレオナム、１−ブチルテオブロミン、５−エチル−５−アリルバルビツール酸、シメチジン、７−イソブチル−８−メチルテオフィリン、安息香酸、プテリジン−７−メチル−チオール、過酸化ベンゾイル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レチノール（ビタミンＡ）、カロテノイド類（リコピン、ルテイン、カロチン類、オイゲノール）が含まれる。
【００２４】
マイクロエマルションは、熱力学的な平衡におけるシステムであるから、調合物の自由度の程度は相律によって決定される。所定の温度と圧力において、これらの調合物は多数の成分−２自由度（a number of ingredients - 2 degrees of freedom）を有する。所望の調合物を得るために、レシチンの濃度、リンカーのうち一つ（典型的には親油性リンカー）の濃度、電解質濃度、油／水の体積率（典型的には１：１）、及び全体積を固定する必要がある。次に、残りのリンカー（典型的には親水性リンカー）の濃度を、系統的に（異なるテストチューブ内で）増加して、相スキャン（phase scan）を生じる。親水性リンカー濃度を増加すると、システムはタイプII（油中水型）システムからタイプIII又はIV（二連続型）システムへ、タイプI（水中油型）システムへと相転移を行う。従って、親水性リンカーの必要な濃度は、特定の送達投与に適したマイクロエマルションのタイプ（タイプI、III−IV、II）によって決定する。好ましい親水性リンカーは、オクタン酸とオクタン酸ナトリウムの混合物である。各々の相が異なるレベルの油及び水を取り込むので、最終的な調合組成物は相分離の後、（油又は水の）マスバランスによって得られる。
【００２５】
レシチン濃度は、送達システムの特定の必要性に従って変えることができ、典型的には０．１％ｗ／ｗ ｗｔ． から８％ｗ／ｗの間で選択される。この範囲に満たない濃度では薬物可溶性が低く、この範囲を超える濃度では望ましくない液体結晶相が形成される傾向がある。タイプＩＩのマイクロエマルションに関する最適レベルは、２％ｗ／ｗ前後のレシチンであり、タイプＩとタイプＩＶマイクロエマルションについては６％ｗ／ｗ前後である。親油性リンカーの濃度も調合媒体の明確な必要性に従って変えることができる。クリアーな（clear）マイクロエマルション相の調合を促進するために、親油性リンカーのレシチンに対する質量比は、１：１〜３：１の間で維持される。好ましい質量比は３：１であり、好ましい親油性リンカーはモノオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸グリセロール、及びオレイン酸である。
【００２６】
マイクロエマルションの全てのタイプは上皮組織に、又は介して、ある程度薬物送達を促進するが、二連続型（タイプIII、IV）マイクロエマルションへの転移に近い油中水型（タイプII）マイクロエマルション及び二連続型（タイプIV）マイクロエマルションが、最小限の細胞毒性副作用で最大限に薬物が吸収され経皮的に流動するので、好ましい。経口的及び静脈内送達等の選択された投与には、水中油型（タイプI）マイクロエマルション・システムが調合物の好ましい形態である。
【００２７】
本明細書に開示された調合物は、経口的、経鼻的及び静脈内投与と同様に、経皮的及び局所的投与における薬物送達媒体として使うことができる。好ましい適用分野は、経皮的及び局所的投与を介した分野である。キサンタンゴム又はカルボキシメチルセルロース等の粘性調整剤を加えると、低粘性調合物（４〜４０ｃｐ）は、スプレー式、回転塗布式、フォーム及びゲル状生産物として使用できる。これらの調合物の凝集体サイズ（油膨潤ミセル又は水膨潤逆ミセル）が３〜１０ｎｍの範囲にあることにより、これらの調合物が光学的に透明で高い界面積を有し、腸や肺胞の上皮を通して浸透できるようになる。
【００２８】
加えて、本明細書に開示された調合物は、植物の葉のろう状外皮（waxy cuticle）を通して農薬の送達のための浸透促進剤及び湿潤剤として使うことができる。
【００２９】
一般的に、ポリエチレングリコール等の従来の溶媒キャリアに優るマイクロエマルション調合物の有利な点は、油共溶媒が存在し、浸透促進剤として働く表面活性分子が存在することにより、油可溶化が顕著に増加する点である。大部分の界面活性剤や短鎖・中鎖アルコールの共界面活性剤は、角質層の一部の脂質成分を可溶化することで皮膚浸透性を増加させる。この脂質可溶化プロセスにより、界面活性剤自身を含む様々な成分を皮膚を通して浸透させることができる。一般的な陰イオン性の界面活性剤及びアルコールはサイトカイン反応を引き起こすので、既存の調合物は皮膚の炎症及び皮膚感作性を生じる傾向がある。レシチンのような天然脂質を使用し、中鎖・短鎖アルコールを含まず、植物油由来のリンカー及び油溶剤を使用するので、前記調合物は上皮細胞に対して低刺激となる。実施例６及び図１に示されるように、タイプI、II及びIVのリンカー・マイクロエマルションは、５．５時間の暴露後、３５％よりも優れた生存性を有する（軽度−皮膚腐食性の欧州基準を超えている）。これらの調合物が３０％までの界面活性剤総量と８％までのリドカインを含むことを考慮すればこれは注目に値する結果である。これらの結果をわかりやすくするためには、図１の「水」と表示したバーは０．４％のリドカインを有する等張液を含むことを明確にする必要がある。言い換えると、２０倍を超える（細胞毒性がある）リドカインを、前記調合物の低刺激性を損なうことなく、マイクロエマルション・システムに溶解させることができたのである。
【００３０】
驚くべき新規な薬物吸収／送達メカニズムがこれらのレシチン―リンカー・マイクロエマルションについて発見された。このメカニズムによって、リンカーとレシチンの組合せは、（細胞構造を「溶解する」ことなく）上皮組織に吸収され、この組合せとともに高濃度の有効成分が運ばれる。実際に、リンカー・レシチン・マイクロエマルションは、従来の界面活性剤ベースの送達システム（１０倍以上の増加）と比較して皮膚の浸透性において比較的小さな増加を示す（２倍の増加）。しかし、これらのリンカー・システムは、油溶剤と比較したとき、皮膚中への分配が３〜４倍増加する。
【００３１】
皮膚内への有効成分の吸収増加と皮膚への浸透性における比較的少ない増加（低い細胞毒性）の組合せによって、制御された放出メカニズムとして使用することができる全体として「隠れた」送達効果がもたらされる。局所的な投薬量（dosage）を包含したリンカー・レシチン・マイクロエマルション調合物は、経皮的なパッチ製品についての送達特徴と同様に、１２時間の間に有効成分をゆっくりと放出することが確認された。既存のパッチに優るこの隠れた送達手法の利点は、（皮膚領域に適用される）投薬量を調整することができ、粘着剤を使用しないのでコストを削減でき、適用しても目につかず（レシチン―リンカー製剤は透明であり、油脂残基を生じない）、そして適用の柔軟性がある（前記製剤は、体のほとんどの部分に使うことができる）点である。
【００３２】
リンカーとレシチン及び油溶剤は、様々な疎水性及び極性を示すであろう包括的な組成物を提供するために様々な比率で組み合わせてもよい。要するに、記載されたマイクロエマルション送達媒体の物理的な特性は「プログラム可能である」ことを意味する。油溶剤は、高い疎水性／親油性で非極性の薬物を可溶化するために相応しい環境を提供する；親油性リンカーは極性の親油性分子を可溶化するために相応しい環境を提供する；リン脂質界面活性剤は、すべての環境をまとめて、界面活性薬物の可溶性を促進する。加えて、リン脂質界面活性剤は、生体粘着剤として作用し上皮組織上での吸収作用を向上させる。最後に、より高い親水性の薬物が親水性リンカーと水分子の周囲で適した可溶化区分を見つける。このことによりは、有効成分の送達媒体として、リンカー・マイクロエマルションは広範囲に適用可能となる。
【００３３】
これらのリンカー・マイクロエマルションについてのもう一つの驚くべき発見は、タイプＩＩマイクロエマルションがリドカイン等の（水中での）難溶性の薬物に関して最も優れたシステムであると決定されたことである。従来の（非リンカーの）マイクロエマルションに関する先の報告によると、リドカインはタイプＩ（水中油型）マイクロエマルションを使って最もよく経皮的に送達される。レシチン−リンカー製剤に関しては、タイプＩＩ（油中水型）マイクロエマルションが、そのタイプＩ対照物よりも、優れた薬物可溶化能力、優れた皮膚浸透性、優れた薬物吸収性及び低細胞毒性を示す。
【実施例１】
【００３４】
実施例１．リドカイン−ミリスチン酸イソプロピル調合物
これらの調合物において、大豆から抽出されるレシチンを主な界面活性剤として最初の水溶液中に８％ｗ／ｗの濃度で用いた。オクタン酸ナトリウムとオクタン酸を親水性リンカーとして用いた。オクタン酸の最初の水性濃度は６％ｗ／ｗであった。オクタン酸ナトリウムの最初の水性濃度は各々の試験管中で１％ｗ／ｗの間隔で１％ｗ／ｗから１４％ｗ／ｗまで増加させた。モノオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８０）は親油性リンカーとして働き、２４％ｗ／ｗの最初の水性濃度で用いた。これらのマイクロエマルション調合物は、室温で穏やかに混合しながら、適当な量の成分を混合することで自然に形成された。全てのマイクロエマルション・システムを完全に攪拌し少なくとも２週間の間３７度で平衡に至らせ相平衡とした。また、共界面活性剤としてリンカーの代わりにペンタノールを伴う通常のタイプＩＩのマイクロエマルション調合物（Ｐ）は、リンカーに基づく調合物と通常の調合物を比較するために作製した。
【００３５】
相挙動試験は、５ｍＬの水溶液（上記の組成物）と５ｍＬの１０％ｗ／ｗリドカイン溶液をミリスチン酸イソプロピル中で混合することによって行った。オクタン酸ナトリウムの精査は、一定温度、水性電解質濃度（０．９％ＮａＣｌ）及び圧力（１気圧）にて、オクタン酸ナトリウム濃度を変えて実施した。相体積は、試験管内の各々の相の高さを測定することによって決定した。リドカイン（例示薬物として）は、１０％ｗ／ｗの濃度までミリスチン酸イソプロピル（ＩＰＭ）中で事前に溶解した。
【００３６】
薬物が負荷されたマイクロエマルションの粘性は、室温でCV-2200 落球粘度計（Falling Ball viscometer） (Gilmont Instruments, Barrington, Illinois, U.S.A.)を使用して測定した。
【００３７】
o/w及びw/oマイクロエマルションの液滴の平均サイズは、２５℃で、BI-200SM 動的レーザー光散乱（dynamic laser light scattering） (Brookhaven Instruments Corporation, Holtsville, New York, U.S.A.)によって決定した。測定は９０度の永久角度にて行った。
【００３８】
各相におけるリドカイン濃度は、逆相カラム(Genesis, C18, 4 μm, 150x4.6 mm)上で、高圧液体クロマトグラフィー(Shimadzu model HPLC, PerkinElmer LC235C ダイオードアレイ検出器（Diode Array Detector）, SIL-10AP自動サンプラー  20 μl ループ（loop）付き, 200 LC ポンプ, クラス D-7500 一体型ソフトウェア) によって定量した。移動相はアセトニトリル−0.05 M NaH2PO4 (30:70, v/v)から構成され測定はアイソクラチック条件（１．０ｍＬ／ｍｉｎ）下で、２３０ｎｍで検出を行った。これらの条件下でのリドカインの保持時間は、２．０から３．０分であった。ピークエリアは、１００〜１０００μg/mLの範囲にてリドカイン濃度と線形的な相関性があった。
【００３９】
表１に、マイクロエマルション凝集体の組成、マイクロエマルションタイプ、相体積、粘性と滴径のサイズ（drop size）を要約する。（ここで、(a)はレシチン; (b) はモノオレイン酸ソルビタン; (c)はオクタン酸; (d)はオクタン酸ナトリウム; (e)は水; (f)はリドカイン; (g)はミリスチン酸イソプロピル;そして(v)はマイクロエマルション体積である。濃度は重量パーセント基準(w/w)で表す。）
【表１】
2014196333.tif 000002
【実施例２】
【００４０】
実施例２．リドカイン−カプリン酸エチル調合物
キャリア・オイルである、ミリスチン酸イソプロピルをカプリン酸エチルにかえた以外は実施例１と同様の調合手順を用いた。表２に、これらの調合物の組成と特性を要約する。（ここで、(a)はレシチン; (b) はモノオレイン酸ソルビタン; (c)はオクタン酸; (d)はオクタン酸ナトリウム; (e)は水; (f)はリドカイン; (g)はカプリン酸エチル;そして(v)はマイクロエマルション体積である。濃度は重量パーセント基準(w/w)で表す。）
【表２】
2014196333.tif 000003
【実施例３】
【００４１】
実施例３．親油性リンカーとしてモノオレイン酸グリセロールを使用したリドカイン−ミリスチン酸イソプロピル（ＩＰＭ）
親油性リンカーである、モノオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８０）をモノオレイン酸グリセロールにかえた以外は実施例１と同様の調合手順を用いた。（ここで、(a)はレシチン; (b) はモノオレイン酸グリセロール; (c)はオクタン酸; (d)はオクタン酸ナトリウム; (e)は水; (f)はリドカイン; (g)はミリスチン酸イソプロピル;そして(v)はマイクロエマルション体積である。濃度は重量パーセント基準(w/w)で表す。）
【表３】
2014196333.tif 000004
【実施例４】
【００４２】
実施例４．α−酢酸トコフェロール（ビタミンＥの一形態）−ミリスチン酸イソプロピル（ＩＰＭ）調合物
有効成分（リドカイン）を高疎水性のα−酢酸トコフェロールにかえた以外は実施例１と同様の調合手順を用いた。（ここで、(a)はレシチン; (b) はモノオレイン酸ソルビタン; (c)はオクタン酸; (d)はオクタン酸ナトリウム; (e)は水; (f)はα−酢酸トコフェロール; (g)はミリスチン酸イソプロピル;そして(v)はマイクロエマルション体積である。濃度は、重量パーセント基準(w/w)で表す。）
【表４】
2014196333.tif 000005
【実施例５】
【００４３】
実施例５．レシチン−リンカー調合物のリドカイン・インビトロ浸透実験
リドカインの浸透性は、実施例１〜３の選択された調合物を使用し、背面側のブタの耳の皮膚と再構成されたヒト皮膚EpiDermTM EPI-200を介してインビトロで測定した。モデル皮膚を市販のMATTEKTM 透過装置（Permeation Device） (MPD)に配置した。テスト調合物（０．４ｍＬ）は、ドナー区画に適用した。受容区画を５ｍＬのＰＢＳ（0.01Mリン酸塩、 0.137M NaCl、pH 7.4）で満した。所定時間で、受容溶液を完全に前記受容区画から抜き、直ちに新鮮な緩衝溶液に交換した。シンク状態（sink conditions）は常時維持された。５．５時間で実験を終了した。全ての浸透実験は室温で３回ずつ実施した。
【００４４】
実施例１〜３の選択された調合物に加えて、３つの他の調合物を基準とする目的で評価した。これらは以下の１）から４）を含む。
１）水のみ：蒸留水に４０００ｍｇ／Ｌのリドカインを添加した（飽和条件）。
２）ＩＰＭのみ：１０％ｗ／ｗリドカインを含むミリスチン酸イソプロピル。
３）ＥＣのみ：１０％ｗ／ｗリドカインを含むカプリン酸エチル。
４）ペンタノール・マイクロエマルション：５．７％ｗ／ｗレシチン、１７．２％ｗ／ｗモノオレイン酸ソルビタン、１１．５％ｗ／ｗペンタノール、１０．９％ｗ／ｗ水（０．９％ｗ／ｗＮａＣｌを含む）、７．２％ｗ／ｗリドカイン、４７％ｗ／ｗイソプロパノール。
【００４５】
ドナー溶液中のリドカインは、逆相カラム(Genesis, C18, 4 μm, 150x4.6 mm)上で、高圧液体クロマトグラフィー(Shimadzu model HPLC, PerkinElmer LC235C ダイオードアレイ検出器（Diode Array Detector）, SIL-10AP自動サンプラー 20 μlループ（ loop）付き, 200 LC ポンプ, Class D-7500一体型ソフトウェア) によって定量した。移動相はアセトニトリル−0.05 M NaH2PO4 (30:70, v/v)から構成され測定はアイソクラチック条件（１．０ｍＬ／ｍｉｎ）下で、２３０ｎｍで検出を行った。これらの条件下でのリドカインの保持時間は、２．０から３．０分であった。ピークエリアは、１００〜１０００μg/mLの範囲にてリドカイン濃度と線形的な相関性があった。
【００４６】
受容溶液中のリドカインは、UV 分光光度計(ULTRASPEC PLUSTM, Amersham Pharmacia Biotech, U.S.A.)で解析した。受容溶液はメタノールで希釈し、２３０ｎｍでの吸光度を測定した。リドカイン用の直線的な検量線は、230 nmにて、0〜100 μg/mLの範囲で、０．９９９の線形性で得られた。
【００４７】
皮膚を通過して浸透したリドカインの蓄積量を時間（ｈ）の関数としてプロットし、平均的な安定化状態の流量（J, μg/h/ cm2）を曲線の直線部分由来の勾配を、曝された皮膚表面上の面積（０．２５６cm2）で割ることで算出した。表５に、MATTEKTMとブタの耳の皮膚を通して、異なる調合物で得られたリドカイン流量の要約を表す。
【００４８】
ブタの耳の皮膚におけるリドカインの濃度を測定するために、組織をMATTEKTM浸透装置から取り出し、ＰＢＳ溶液ですすぎ、余分な流体を取り除くために糸屑の出ないティッシュペーパーで吸い取った。前記組織を２４時間２ｍＬのメタノールに浸した。その後、リドカインの濃度を前記のＨＰＬCの手法を使って測定した。抽出されたリドカインの量を前記組織の体積（組織の厚み×断面積）で割って、皮膚におけるリドカインの濃度に相当する値が得られる。皮膚浸透性は、経皮的な流量を皮膚のリドカインの濃度で割ることによって算出される。
【表５】
2014196333.tif 000006
【実施例６】
【００４９】
実施例６．リドカイン調合物の細胞毒性
細胞の生存率アッセイは、標準的なMATTEKTMの MTT-ET-50に記載されるような再構成されたヒト皮膚EPIDERMTM EPI-200上で行った。この方法は、一般に使用されており、生きた細胞の活性ミトコンドリア・デヒドロゲナーゼによって、黄色がかかったＭＴＴが不溶性の紫色のホルマザンに変化して減少することに基づき確立されている。浸透実験における暴露期間（５．５ｈ）の終りに、EPIDERMTM皮膚モデルは、ＭＰＤから取り外し  、ホルマザンの形成のために３時間1 mg/ml  MTTと共にインキュベートした。その後、水不溶性ホルマザンを抽出し、分光光度計で解析した。このアッセイで、１（ｗ／ｖ）（％）TRITONTM X-100をポジティブコントロールとして、ＰＢＳをネガティブ（細胞毒性がない）コントロールとして使用した。相対的な生存率は、ネガティブコントロールの光学濃度で割った抽出サンプルの光学濃度の割合として算出できる。図１に、実施例５において評価した選択調合物において得られた細胞生存率の要約を表す。
【実施例７】
【００５０】
実施例７．リンカー・マイクロエマルションにおけるリドカイン送達のためのレシチン用量反応曲線
調合物ＬＯ−３２（タイプＩＩレシチン・リンカー・マイクロエマルション）をより低いレシチン濃度を使って再調合した。背面側のブタの耳の皮膚を通る経皮的な流量も、選択された調合物について評価し、その後前記の手順を行った。表６にこれらの知見を要約する。（ここで、(a)はレシチン; (b) はモノオレイン酸ソルビタン; (c)はオクタン酸; (d)はオクタン酸ナトリウム; (e)は水; (f)はリドカイン; (g)はミリスチン酸イソプロピル;そして(v)はマイクロエマルション体積である。濃度は重量パーセント基準(w/w)で表す。）
【表６】
2014196333.tif 000007
【００５１】
同様の希釈と評価の手順をＬＯ−３１４（タイプＩリンカー・マイクロエマルション）のために使用した。表７にこれらの知見を要約する。（ここで、(a)はレシチン; (b) はモノオレイン酸ソルビタン; (c)はオクタン酸; (d)はオクタン酸ナトリウム; (e)は水; (f)はリドカイン; (g)はミリスチン酸イソプロピル;そして(v)はマイクロエマルション体積である。濃度は重量パーセント基準(w/w)で表す。）
【表７】
2014196333.tif 000008
【実施例８】
【００５２】
実施例８．タイプＩＩレシチン・リンカー・マイクロエマルションを用いたリドカインの持続放出
先の実施例において、０．４ｍＬのドナー溶液を薬物の継続的な放出を提供するために、皮膚表面に配置する。しかしながら、表５で示されるように、レシチン・リンカー調合物において投与されるとき、有意な量のリドカインが吸収される。リドカインの持続放出を提供するためのこれらの調合物の性能をテストするために、切除されたブタの耳の３つの皮膚片（直径０．７４ｃｍ）を、３０分間、５ｍＬの調合物ＬＯ−３２（タイプＩＩマイクロエマルション、表１参照）中に沈めた。その後、前記皮膚片を余分な液体を取り除くために糸屑の出ないティッシュで吸い取った。前記皮膚片をMATTEKTM浸透装置内に集め持続放出の検討を行った。ドナー溶液を添加せず、受容溶液を１、２、３、６、１２及び２４時間後に新鮮な溶液と交換したこと以外は、実施例５に記載された手順と同様の手順であった。図２において、この持続放出システムに関して得られる浸透したリドカインの蓄積量と、同じＬＯ−３２に含まれるドナー溶液が存在する時に得られる前記蓄積量とを比較する。図３に、皮膚から放出されるリドカインの画分（ＬＯ−３２持続放出）を表す。
【００５３】
好ましい実施の形態について他の種々の変形態様が本発明の範囲から逸脱することなく実施できることは、当業者によって容易に認識できるであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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