(57)【要約】【課題】結腸癌発生を予防または低減する方法の提供。【解決手段】2014156485.tif 000013本発明は一部、結腸癌発生を予防するまたは結腸癌発生を軽減する方法であって、結腸直腸癌のリスクのある患者に開示する化学予防薬を含む医薬品を投与することを含む方法を対象とする。他の態様では、本発明は、酸素フリーラジカルを弱める方法であって、酸素フリーラジカルを弱めることを必要とする患者に抗酸化的に有効な量の本明細書で開示する式（Ｉ）、（ＩＩａ）または（ＩＩｂ）で表される化合物を投与することを含む方法を対象とする。【選択図】図１
2014156485.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２００８年１２月５日に出願されたＥＰ０８４２５７７５．７、２００９年３月５日に出願された米国特許出願第６１／１５７６７４号および２００９年７月１日に出願された米国特許出願第６１／２２２，２８１号に対する優先権を主張し、これらの全ては、本明細書において参照として援用される。
【背景技術】
【０００２】
背景
結腸直腸癌は、潰瘍性大腸炎またはクローン病を有する患者における重大な合併症である。結腸疾患の診断での初期段階、その程度および重症度、原発性硬化性胆管炎の存在および／または癌の家族歴は、結腸直腸癌の発症に対する独立した危険因子を代表する。アスピリンは、結腸癌において化学予防効果を発揮することが分かっているが、これがそうした効果を発揮するその機序は複雑なようである。
【０００３】
結腸直腸癌および固形腫瘍癌ならびに腺癌（乳癌、前立腺癌、肺癌および肝細胞癌（ｈｅｐｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）など）などの癌に対する化学予防薬の活性のための１つの標的はＤＮＡ複製の改善である。ＤＮＡ複製の忠実度は、ポリメラーゼの正確さ、そのプルーフリーディング活性および／または複製後ミスマッチ修復系の精度の産物である。忠実複製の非効率性は、ヒト癌の発症のカギである可能性がある。結腸直腸細胞における効率を増進させる化学予防薬は、癌の生命に関わる症状を著しく軽減し、癌死亡を減少させる可能性がある。
【０００４】
活性酸素種（ＲＯＳ）がタンパク質、脂質およびＤＮＡを含む様々な細胞成分に損傷を与えることが分かっているので、活性酸素種（ＲＯＳ）の過剰生成は、多くの病理の下に共通的にある機序である。フリーラジカル、特にスーパーオキシド（Ｏ（２）＊−）は、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）などの内因性保護酵素系を圧倒するのに十分に多い量で生成され得る。ＲＯＳの過剰生成は、酸化的ストレスとしても公知である酸化促進状態ももたらす。増加したレベルのＲＯＳおよび酸化的ストレスのマーカーが、アテローム性動脈硬化症または高血圧症のような循環器疾患において一貫して見出されており、動物モデルを含む研究により、抗酸化スーパーオキシドジスムターゼ模倣剤も、慢性閉塞性肺疾患の予防および治療に対する潜在的な新規治療アプローチを提供することが示唆されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
損なわれた抗酸化状態、酸化的損傷の兆候と、真性糖尿病、虚血などの心臓障害、様々な変性疾患（例えば、老化）および脱毛のような他の臨床症状との間の関係も文献に記載されている。スーパーオキシドなどのフリーラジカルは、光損傷、皮膚の一般的な老化、接触皮膚炎および皺を含む多くの皮膚の状態にも関わっている。しかし、例えば酸化的損傷を治療するのに利用できる薬剤は限られている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
要旨
本明細書は、本明細書で開示する化合物を患者に投与することを含む酸素フリーラジカルを弱めるための方法も提供する。例えば、以下の処置、保護および／または改善することを必要とするまたは皮膚の小皺（ｆｉｎｅ  ｌｉｎｅ）、皺またはむら、または皮膚に対するフリーラジカル損傷に苦しむ被験体または患者における皮膚の小皺（ｆｉｎｅ  ｌｉｎｅ）、皺またはむら（ｓｕｒｆａｃｅ  ｉｒｒｅｇｕｌａｒｉｔｙ）を処置し、皮膚に対するフリーラジカル損傷から被験体または患者を保護するおよび／または皮膚に対するフリーラジカル損傷を改善する方法、あるいは、望ましくない脱毛に苦しむ患者を治療する方法であって、式Ｉ：
【０００７】
【化１】
2014156485.tif 000003
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、またはＲ１とＲ２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５または６個の原子を有する芳香族環または脂肪族環を形成しており、
ＹおよびＺは、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨ、−ＯＲ３、−ＣＨ（ＯＲ３）ＣＯＯＨからなる群から選択され、
Ｒ３は、Ｈ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１〜６アルキルまたは１つもしくは複数のハロゲンで置換されたＣ１〜６アルキルからなる群から選択される）
、式ＩＩａまたは式ＩＩｂ：
【０００８】
【化２】
2014156485.tif 000004
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、またはＲ１とＲ２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５または６個の原子を有する芳香族環または脂肪族環を形成しており、
Ｒ６は、−ＮＲ９ＯＨ、ＯＨおよび−ＯＲ９からなる群から選択され、
Ｒ９はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１〜６アルキルまたは１つもしくは複数のハロゲンで置換されたＣ１〜６アルキルから選択され、
Ｒ５およびＲ７は、それぞれ独立に、水素またはハロであり、あるいは
Ｒ４とＲ５、またはＲ４とＲ６は一緒になって、ハロまたはＣ１〜６アルキルで任意に置換された５または６個の原子を有する縮合複素環を形成しており、Ａは縮合複素環である）
を有する化学予防剤、またはその薬学的に許容される塩を（例えば、局所的に）投与することを含む、医薬品を投与することを含む方法を提供する。
【０００９】
他の実施形態では、酸素フリーラジカルを弱めるまたは低酸素症を治療する方法であって、酸素フリーラジカルを弱めるまたは低酸素症を治療することを必要とする患者に抗酸化的に有効な量の上記に定義したような式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂで表される化合物を投与することを含む方法を提供する。
【００１０】
本明細書は、血管または心臓の障害を治療する方法であって、前記障害に苦しむまたは前記障害を発症するリスクのある患者を特定するステップと、前記患者に有効量の上記に定義したような式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂで表される化合物を投与するステップとを含む方法も提供する。例えば、治療を受ける心臓障害は、慢性冠動脈虚血、動脈硬化症、うっ血性心不全、虚血性または再かん流関連損傷、アンギナ、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、発作および心筋肥大から選択することができる。他の実施形態では、自己免疫障害を治療する方法を提供する。その自己免疫障害は、例えばアジソン病、慢性甲状腺炎、皮膚筋炎、グレーブス病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、乾癬または関節リウマチから選択することができ、その方法は、自己免疫障害を治療することを必要とする患者に有効量の上記に定義したような式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物を投与することを含むことができる。例えば、本明細書で開示する方法は、その患者がヒトである方法を含むことができる。
【００１１】
本開示は一部、患者、例えばヒトに本明細書で開示する化合物を投与することを含む、結腸、固形腫瘍および／または腺癌の発生を予防および／または低減する、例えば、結腸癌の症状を最少化するまたは結腸癌の症状を引き延ばす方法を対象とする。そうした患者は、例えば検出可能な結腸直腸癌を有していても有していなくてもよい。いくつかの実施形態では、投与の際またはその前に、患者において、自然変異頻度の結腸癌細胞が存在する。他の実施形態では、その患者はクローン病、炎症性腸疾患または潰瘍性大腸炎を有する。
【００１２】
結腸直腸癌のリスクがある患者における結腸直腸腫瘍（または、例えば固形腫瘍または腺癌）の臨床症状を遅延させる方法であって、患者に有効量の開示化合物の化学予防化合物を投与することを含む方法も提供する。例えば、その遅延は、化学予防化合物を投与されていない患者と比較して少なくとも１年である。他の実施形態では、患者は、その患者の中に存在する結腸癌細胞の変異率の少なくとも約３０％の減少を得ることができる。
【００１３】
本明細書は、糖尿病、白内障、アルツハイマー病、パーキンソン病、黄斑変性症、網膜潰瘍（ｒｅｔｉｎａｌ  ｕｌｃｅｒ）または網膜血管炎からなる群から選択される加齢に伴う障害を治療する方法であって、上記に定義したような式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物を含む有効量の組成物を投与することを含む方法も提供する。
【００１４】
本発明の上記および他の態様および利点は、以下の図面、詳細な説明および特許請求の範囲を考慮すれば明らかになるであろう。
【００１５】
以下の図面を参照すれば、本発明をより完全に理解することができる。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
酸素フリーラジカルを弱めるまたは酸素フリーラジカルに関係する状態を治療する方法であって、酸素フリーラジカルを弱めるまたは酸素フリーラジカルに関係する状態を治療することを必要とする患者に抗酸化的に有効な量の式Ｉで表される化合物：
【化８】
2014156485.tif 000005
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、またはＲ１とＲ２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５または６個の原子を有する芳香族環または脂肪族環を形成しており、
ＹおよびＺは、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨ、−ＯＲ３、−ＣＨ（ＯＲ３）ＣＯＯＨからなる群から選択され、
Ｒ３は、Ｈ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１〜６アルキルまたは１つもしくは複数のハロゲンで置換されたＣ１〜６アルキルからなる群から選択される）
、式ＩＩａで表される化合物、または式ＩＩｂで表される化合物：
【化９】
2014156485.tif 000006
（式中、Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、またはＲ１とＲ２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５または６個の原子を有する芳香族環または脂肪族環を形成しており、
Ｒ６は、−ＮＲ９ＯＨ、ＯＨおよび−ＯＲ９からなる群から選択され、
Ｒ９はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１〜６アルキルまたは１つもしくは複数のハロゲンで置換されたＣ１〜６アルキルから選択され、
Ｒ５およびＲ７は、それぞれ独立に、水素またはハロであり；あるいは
Ｒ４とＲ５、またはＲ４とＲ６は一緒になって、ハロまたはＣ１〜６アルキルで任意に置換された５または６個の原子を有する縮合複素環を形成しており、
Ａは縮合複素環である）
あるいはその薬学的に許容される塩または立体異性体を投与することを含む方法。
（項目２）
皮膚の小皺、皺またはむらを治療する方法、あるいは皮膚に対するフリーラジカル損傷から保護するおよび／または皮膚に対するフリーラジカル損傷を改善する方法であって、治療、保護および／または改善することを必要とする患者に、項目１に記載の式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物を含む、有効量の組成物を局所的に投与することを含む方法。
（項目３）
望ましくない脱毛に苦しむ患者の脱毛を治療する方法であって、項目１に記載の式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物を含む、有効量の組成物を投与することを含む方法。
（項目４）
前記組成物を局所的に投与する、項目２または３に記載の方法。
（項目５）
糖尿病、白内障、アルツハイマー病、パーキンソン病、黄斑変性症、網膜潰瘍または網膜血管炎からなる群から選択される加齢に伴う障害を治療する方法であって、治療することを必要とする患者に、項目１に記載の式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物を含む、有効量の組成物を投与することを含む方法。
（項目６）
低酸素症を治療する方法であって、低酸素症を治療することを必要とする患者に抗酸化的に有効な量の項目１に記載の式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂで表される化合物を投与することを含む方法。
（項目７）
血管または心臓の障害を治療する方法であって、前記障害に苦しむまたは前記障害を発症するリスクのある患者を特定するステップと、前記患者に有効量の項目１に記載の式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂで表される化合物を投与するステップとを含む方法。
（項目８）
前記心臓の障害が、慢性冠動脈虚血、動脈硬化症、うっ血性心不全、虚血性または再かん流関連損傷、アンギナ、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、発作および心筋肥大から選択される、項目７に記載の方法。
（項目９）
アジソン病、慢性甲状腺炎、皮膚筋炎、グレーブス病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、乾癬または関節リウマチから選択される自己免疫障害を治療する方法であって、自己免疫障害を治療することを必要とする患者に有効量の項目１に記載の式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物を投与することを含む方法。
（項目１０）
前記化合物が式Ｉで表される、項目１から９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
ＹがＨであり、Ｚが−ＣＨ（ＯＲ３）ＣＯＯＨである、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
ＹがＣＯＯＨであり、Ｚが−ＯＲ３である、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
Ｒ３が、メチル、エチル、プロピルまたはイソプロピルである、項目１０から１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
前記化合物が式ＩＩａで表される、項目１から９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記化合物が、
【化１０】
2014156485.tif 000007
（式中、ｐは１または２であり、Ｒ６はＯＨであり、Ｒ１０は、その出現ごとに独立に、Ｈ、ハロまたはＣ１〜６アルキルからなる群から選択される）
で表される、項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記化合物が、２−メトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）；２−エトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３９）；６−アミノ−２，２−ジメチル−４Ｈ−ベンゾ［１，３］ジオキシン−４−オン（化合物２８）；５−アミノ−Ｎ−ヒドロキシ−２−メトキシベンズアミド（化合物１４）；および５−アミノ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−カルボン酸（化合物１７）からなる群から選択される、項目１から９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
結腸癌発生を予防または軽減する方法であって、結腸直腸癌のリスクのある患者に、２−メトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）；２−エトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３９）；６−アミノ−２，２−ジメチル−４Ｈ−ベンゾ［１，３］ジオキシン−４−オン（化合物２８）；および５−アミノ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−カルボン酸（化合物１７）からなる群から選択される化学予防剤を含む医薬品を投与することを含む方法。
（項目１８）
前記患者がヒトである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記患者が検出可能な結腸直腸癌を有していない、項目１７または１８に記載の方法。
（項目２０）
投与の際またはその前に、前記患者の中に自然変異頻度の結腸癌細胞が存在する、項目１７から１９のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記患者が、クローン病、炎症性腸疾患または潰瘍性大腸炎を有する、項目１７から２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
結腸直腸癌のリスクのある患者における結腸直腸腫瘍の臨床症状を遅延させる方法であって、前記患者に、２−メトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）；２−エトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３９）；６−アミノ−２，２−ジメチル−４Ｈ−ベンゾ［１，３］ジオキシン−４−オン（化合物２８）；および５−アミノ−２，３−ジヒドロベンゾフラン−７−カルボン酸（化合物１７）からなる群から選択される、有効量の化学予防化合物を投与することを含む方法。
（項目２３）
前記遅延が、化学予防化合物を投与されていない患者と比較して少なくとも１年である、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記患者が、前記患者に存在する結腸癌細胞の変異率の少なくとも約３０％の減少を有する、項目２２または２３に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、本明細書で開示する化合物のスーパーオキシド捕捉特性を表す。
【図２】図２は、本明細書で開示する化合物のスーパーオキシド捕捉特性を表す。
【図３Ａ】図３は、様々な濃度（ｍＭ）の本明細書で開示する化合物でインキュベートした場合のＨＣＴ１１６Ａ２．１細胞の変異率の変化を表す。
【図３Ｂ】図３は、様々な濃度（ｍＭ）の本明細書で開示する化合物でインキュベートした場合のＨＣＴ１１６Ａ２．１細胞の変異率の変化を表す。
【図３Ｃ】図３は、様々な濃度（ｍＭ）の本明細書で開示する化合物でインキュベートした場合のＨＣＴ１１６Ａ２．１細胞の変異率の変化を表す。
【図４】図４は、様々な濃度（ｍＭ）の本明細書で開示する化合物でインキュベートした場合のＨＣＴ１１６Ａ２．１細胞の変異率の変化を表す。
【図５】図５は、本明細書で開示する化合物で処理した場合のＨＣＴ１１６およびＨＴ２９細胞における細胞周期の変化を表す。
【図６】図６は、本明細書で開示する化合物を用いた、ＨＣＴ１１６、ＨＣＴ１１６＋ｃｈｒ３、ＨＴ２９およびＬｏｖｏ細胞における細胞増殖に対する効果を表す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明は一部、本明細書で開示する特定の化合物が、スーパーオキシド捕捉潜在性を有する、および／または癌細胞、例えば結腸直腸癌細胞における複製忠実度を改善する能力を有することを発見したことによるものである。一態様では、その開示は、例えば結腸癌を発症するリスクのある、および／または結腸癌を発症しやすいことを示す危険因子を有する患者の癌、例えば結腸癌、を予防するまたはその発生率を低減する方法を対象とする。他の態様では、本開示は、患者における酸素フリーラジカルを弱める（ａｔｔｅｎｕａｔｅ）方法および／またはそうしたフリーラジカルの過剰と関連する疾患を治療する方法を対象とする。本開示の方法は、本明細書で開示する化合物を投与することを含む。
【００１８】
本発明をさらに説明する前に、本明細書、実施例および添付の特許請求の範囲で使用する具体的な用語をここに集める。これらの定義は、本開示の残りの部分に照らして読まれるべきであり、当業者によるのと同様に理解されるべきである。別段の定義のない限り、本明細書で用いるすべての技術的および科学的用語は、当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有するものとする。
【００１９】
対象とする方法で扱われる「患者」、「被験体」または「宿主」は、ヒトまたは、例えばマウスもしくはラットなどの小動物およびウマ、ウシ、イヌ、ネコ等を含むヒト以外の動物を意味する。
【００２０】
「治療薬」という用語は、当技術分野で認識されており、被験体において局所および／または全身で作用する生物学的、生理学的または薬理学的に活性な物質である任意の化学的部分を指す。「薬物」とも称される治療薬の例は、Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ、ｔｈｅ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  ＲｅｆｅｒｅｎｃｅおよびＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓなどの周知の文献に記載されており、それらには、これらに限定されないが、医薬品；ビタミン；ミネラルサプリメント；疾患または病気の治療、予防、診断、治癒または緩和のために使用される物質；身体の構造または機能に影響を及ぼす物質；あるいは生理学的環境に置かれた後、生物学的に活性になるまたはより活性になるプロドラッグが含まれる。
【００２１】
「治療効果」という用語は、当技術分野で認識されており、これは、動物、特に哺乳動物、より具体的にはヒトにおける薬理学的に活性な物質によって引き起こされる局所的および／または全身的な効果を指す。したがって、この用語は、疾患の診断、治癒、緩和、治療または予防において、あるいは動物またはヒトにおける望ましい肉体的または精神的な成長および／または状態の増進において使用するための任意の物質を意味する。「治療有効量」という語句は、任意の治療に適用できる妥当な利益／リスク比で、何らかの所望の局所的または全身的効果をもたらす物質の量を意味する。そうした物質の治療有効量は、治療を受ける被験体および疾患の状態、被験体の体重および年齢、その病状の重症度、投与の様式などに応じて変わることになるが、当業者はそれを容易に決定することができる。例えば、本発明の特定の組成物は、そうした治療に適用できる妥当な利益／リスク比をもたらすのに十分な量で投与することができる。
【００２２】
「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、当技術分野で認識されており、これは、任意の状態または疾患の少なくとも１つの症状を治癒させ、また改善することを指す。
【００２３】
「アルキル」という用語は、当技術分野で認識されており、それらには、直鎖アルキル基、分枝鎖アルキル基、シクロアルキル（脂環式）基、アルキル置換シクロアルキル基およびシクロアルキル置換アルキル基を含む飽和脂肪族基が含まれる。特定の実施形態では、直鎖または分枝鎖アルキルは、その主鎖中に約３０個以下の炭素原子（例えば、直鎖の場合Ｃ１〜Ｃ３０、分枝鎖の場合Ｃ３〜Ｃ３０）、あるいは約２０個以下、例えば１〜６個の炭素を有する。同様に、シクロアルキルは、その環構造中に約３〜約１０個の炭素原子、あるいは環構造中に約５、６もしくは７個の炭素を有する。「アルキル」という用語は、ハロ置換アルキルも含むように定義される。
【００２４】
さらに、「アルキル」（または「低級アルキル」）という用語は、炭化水素主鎖の１つまたは複数の炭素上の水素を置き換える置換基を有するアルキル部分を指す「置換アルキル」を含む。そうした置換基は、例えば、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミルまたはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセテートまたはチオホルメートなど）、アルコキシル、ホスホリル、ホスホネート、ホスフィネート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキルまたは芳香族もしくは複素芳香族部分を含むことができる。当業者は、適切な場合、炭化水素鎖上で置換された部分が、それ自体置換されていてよいことを理解されよう。例えば、置換アルキルの置換基は、置換および非置換形態のアミノ、アジド、イミノ、アミド、ホスホリル（ホスホネートおよびホスフィネートを含む）、スルホニル（スルフェート、スルホンアミド、スルファモイルおよびスルホネートを含む）およびシリル基ならびにエーテル、アルキルチオ、カルボニル（ケトン、アルデヒド、カルボキシレートおよびエステルを含む）、−ＣＮなどを含むことができる。置換アルキルの例を以下に示す。シクロアルキルは、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルキルチオ、アミノアルキル、カルボニル−置換アルキル、−ＣＮなどでさらに置換されていてよい。
【００２５】
オルト、メタおよびパラという用語は、当技術分野で認識されており、それぞれ１，２−、１，３−および１，４−ジ置換ベンゼンを指す。例えば、１，２−ジメチルベンゼンとオルト−ジメチルベンゼンという名称は同義語である。
【００２６】
任意の構造において２回以上出現する場合、各表現、例えばアルキル、ｍ、ｎなどの定義は、同一構造内において他の所でのその定義から独立であるものとする。
【００２７】
本発明の組成物に含まれる特定の化合物は、特定の幾何異性体または立体異性体で存在することができる。さらに、本発明の化合物は光学的に活性であってよい。本発明では、シスおよびトランス異性体、ＲおよびＳ鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）−異性体、（Ｌ）−異性体、そのラセミ混合物およびそれらの他の混合物を含むそうしたすべての化合物が本発明の範囲内に含まれるものとする。追加の不斉炭素原子が、アルキル基などの置換基に存在することができる。そうしたすべての異性体ならびにその混合物は本発明に含まれるものとする。
【００２８】
「置換」または「で置換された（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  ｗｉｔｈ）」ということは、そうした置換が置換原子および置換基の許容される原子価に従っており、そして、その置換が安定な化合物、例えば自然発生的に転位、環化、脱離または他の反応などの変換を受けない化合物を生じるという暗黙の条件が含まれるを理解されよう。
【００２９】
「置換された（ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）」という用語は、有機化合物のすべての許容される置換基を含むことも考慮される。幅広い態様においては、その許容される置換基は、有機化合物の非環式および環状、分枝状および非分枝状の、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族置換基を含む。例示的な置換基には、例えば本明細書で上記したものが含まれる。許容される置換基は、適切な有機化合物について１つもしくは複数であってよく、またそれは同じであっても異なっていてもよい。本発明のために、窒素などのヘテロ原子は、ヘテロ原子の原子価を満足する本明細書で説明する有機化合物の水素置換基および／または許容される任意の置換基を有していてよい。本発明は、どんな様式でも、有機化合物の許容される置換基によって限定されるものではない。
【００３０】
本発明のために、化学元素は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、６７ｔｈ  Ｅｄ．、１９８６〜８７年の表紙裏の元素周期表、ＣＡＳ版によって特定される。また、本発明のために、「炭化水素」という用語は、少なくとも１個の水素と１個の炭素原子を有する許容されるすべての化合物を含むものとする。幅広い態様では、その許容される炭化水素は、置換されていても置換されていなくてもよい非環式および環状、分枝状および非分枝状の、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族有機化合物を含む。
【００３１】
「薬学的に許容される塩」という用語は、当技術分野で認識されており、例えば、本発明の組成物中に含まれるものを含む化合物の比較的非毒性の無機酸付加塩および有機酸付加塩を指す。
【００３２】
「薬学的に許容される担体」という用語は、当技術分野で認識されており、これは、任意の対象組成物またはその成分を１つの器官または身体の一部から他の器官または身体の一部へ運ぶまたは輸送するのに関わる、液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶媒もしくはカプセル化材料などの薬学的に許容される物質、組成物またはビヒクルを指す。各担体は、対象組成物およびその成分と適合し、かつ患者に対して有害でないという意味で「許容される」ものでなければならない。薬学的に許容される担体として働く物質のいくつかの例には、（１）ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖類；（２）トウモロコシデンプンおよびバレイショデンプンなどのデンプン；（３）カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのセルロースおよびその誘導体；（４）粉末トラガカント；（５）モルト；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）ココアバターおよび坐剤用ワックスなどの賦形剤；（９）ピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油および大豆油などの油類；（１０）プロピレングリコールなどのグリコール；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；（１２）オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；（１５）アルギン酸；（１６）パイロジェン除去水；（１７）等張食塩水；（１８）リンガー溶液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液ならびに（２１）製剤において使用される他の非毒性の適合物質が含まれる。
【００３３】
化合物
本開示の方法の１つまたは複数において使用するのに考慮される化合物は、式Ｉで表される化合物
【００３４】
【化３】
2014156485.tif 000008
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、またはＲ１とＲ２はそれらが結合している窒素原子と一緒になって、任意に置換されていてよい５または６個の原子を有する芳香族環または脂肪族環を形成しており、
ＹおよびＺは、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨ、ＣＯＯＨ、−ＯＲ３、−ＣＨ（ＯＲ３）ＣＯＯＨからなる群から選択され、
Ｒ３は、Ｈ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１〜６アルキルまたは１個もしくは複数のハロゲンで置換されたＣ１〜６アルキルからなる群から選択される）
またはその薬学的に許容される塩、鏡像異性体または立体異性体を含む。
【００３５】
一実施形態では、ＹはＨまたはＣＯＯＨであってよい。例えば、ＹはＨであってよく、ＺはＣＨ（ＯＲ３）ＣＯＯＨであってよく、またＹはＣＯＯＨであってよく、Ｚは−ＯＲ３であってよい。いくつかの実施形態では、Ｒ３はメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであってよい。
【００３６】
他の実施形態では、ＮＲ１Ｒ２部分は４’位にあっても３’位にあってもよい。特定の実施形態では、Ｒ１およびＲ２はＨである。
【００３７】
例示的化合物は、式ＩＩａもしくは式ＩＩｂで表される化合物
【００３８】
【化４】
2014156485.tif 000009
（式中、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立に、ＨおよびＣ１〜６アルキルからなる群から選択され、またはＲ１とＲ２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、５または６個の原子を有する芳香族環または脂肪族環を形成しており、
Ｒ６は、−ＮＨＯＨ、ＯＨおよび−ＯＲ９からなる群から選択され、
Ｒ９はＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ４は、Ｈ、フェニル、ベンジル、ビニル、アリル、Ｃ１〜６アルキルまたは１つもしくは複数のハロゲンで置換されたＣ１〜６アルキルから選択され、
Ｒ５およびＲ７は、それぞれ独立に、水素またはハロであり、あるいは
Ｒ４とＲ５、またはＲ４とＲ６は一緒になって、ハロまたはＣ１〜６アルキルで任意に置換された５または６個の原子を有する縮合複素環を形成しており、
Ａは縮合複素環である）
またはその薬学的に許容される塩、鏡像異性体もしくは立体異性体、またはその薬学的に許容される塩も含む。
【００３９】
特定の実施形態では、式ＩＩａのＮＲ１Ｒ２部分は４’位にあってもまた３’位にあってもよい。特定の実施形態では、Ｒ１およびＲ２はＨである。
【００４０】
いくつかの実施形態では、Ｒ９はメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであってよい。
【００４１】
いくつかの実施形態では、化合物は、
【００４２】
【化５】
2014156485.tif 000010
（式中、ｐは１または２であり、Ｒ６はＯＨまたは−ＯＲ９であり、Ｒ９は上記定義通りであり、Ｒ１０は、その出現ごとに独立に、Ｈ、ハロまたはＣ１〜６アルキル、例えばメチルもしくはエチルからなる群から選択される）
で表すことができる。
【００４３】
本明細書で考慮される例示的化合物は、
【００４４】
【化６】
2014156485.tif 000011
またはその薬学的に許容される塩を含むものとする。
【００４５】
いくつかの実施形態では、考慮される化合物は、４−アミノ−Ｎ−ヒドロキシ−２−メトキシベンズアミド（化合物１３）；６−メトキシキノリン−５−カルボン酸（化合物３６）；６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−５−カルボン酸（化合物３７）；５−ジイソプロピルアミノサリチル酸（化合物３８）を含む。
【００４６】
他の例示的化合物は、
【００４７】
【化７】
2014156485.tif 000012
で表される化合物を含む。
【００４８】
本明細書で考慮される化合物は、化合物のラセミ混合物および鏡像異性体、例えば、（±）−２−ヒドロキシ−３−（３’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物２０）；（±）−２−メトキシ−２−（４’−アミノフェニル）酢酸（化合物２３）；（±）−２−エトキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物３２）；（±）−２−エトキシ−２−（４’−アミノフェニル）酢酸（化合物３３）；（±）−２−メトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）「±３４」（ラセミ体）；（±）−２−エトキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３９）；（±）−２−エトキシ−３−（３’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物４０）を含む。
【００４９】
例えば、本発明の方法において使用する化合物は以下のラセミ混合物：（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−（３−アミノフェニル）酢酸（化合物１０）；（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−２−（４−アミノフェニル）酢酸（化合物１１）；（Ｒ，Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物２１）；（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物２２）；（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−３−（３’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３５）；（Ｒ，Ｓ）−２−メトキシ−３−（４−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）の鏡像異性体、ならびに鏡像異性体、例えば、（＋）２−Ｓ−メトキシ−３−（４−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）；（−）２−Ｒ−メトキシ−３−（４−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物３４）であってよい。
【００５０】
考慮される化合物の他のラセミ型混合物には、例えば、（±）−２−ヒドロキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物１０）；（±）−２−ヒドロキシ−２−（４’−アミノフェニル）酢酸（化合物１１）；（±）−２−ヒドロキシ−３−（４’−アミノフェニル）プロピオン酸（化合物２１）および（±）−２−メトキシ−２−（３’−アミノフェニル）酢酸（化合物２２）が含まれる。
【００５１】
本開示の方法において使用するのに考慮される他の化合物：５−アミノサリチロ−ヒドロキサム酸（５−ａｍｉｎｏｓａｌｉｃｙｌｏ−ｈｙｄｒｏｘａｍｉｃ  ａｃｉｄ）（化合物５）；３−ジメチルアミノサリチル酸（化合物６）；２−メトキシ−４−アミノ安息香酸（化合物７）；２−メトキシ−５−アミノ安息香酸（化合物８）；５−メチルアミノサリチル酸（化合物９）；４−メチルアミノサリチル酸（化合物１２）；４−アセチルアミノサリチル酸（化合物１６）；２−エトキシ−４−アミノ安息香酸（化合物１８）；２−エトキシ−５−アミノ安息香酸（化合物１９）；４−ジメチルアミノサリチル酸（化合物２４）；２−エトキシ−４−アミノベンゾイルヒドロキサム酸（化合物２５）；６−ヒドロキシキノリン−５−カルボン酸（化合物２７）；２−（２−プロピル）オキシ−４−アミノ安息香酸（化合物３０）；４−（１−ピペラジニル）サリチル酸（化合物４１）；（Ｒ，Ｓ）５−オキサ−キノリン−６−カルボン酸（化合物１５）；６−メトキシキノリン−５−カルボン酸（化合物３６）；６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−５−カルボン酸（化合物３７）；５−ジイソプロピルアミノサリチル酸（化合物３８）；および４−ジイソプロピルアミノサリチル酸（化合物４２）。
【００５２】
考慮される化合物を作製するための方法は、例えばＷＯ２００７／０１０５１６およびＷＯ２００７／０１０５１４に見ることができる。そのそれぞれの全体を参照により本明細書に組み込む。
【００５３】
治療への応用
結腸癌発生（ｃｏｌｏｎ  ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ）または結腸癌を予防または低減する方法は本開示の一部を形成する。そうした方法は、患者、例えば結腸直腸癌のリスクのある患者に本明細書で開示するもの、例えば化合物１７、２９、３９または３４などの化学予防剤を含む医薬品を投与することを含むことができる。結腸癌または結腸癌発生のリスクのある患者は、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患もしくはクローン病を有する患者を含むことができる。リスクのある患者は、診断で初期段階のクローン病もしくは大腸炎、広範および／または重篤な結腸疾患を有する患者、原発性硬化性胆管炎を有する患者および／または癌の家族歴を有する患者も含むことができる。
【００５４】
上記方法を用いて治療される患者は検出可能な結腸直腸癌を有していても有していなくてもよい。別の実施形態では、患者において、本明細書で開示する化合物の最初の投与の前またはその投与過程の間に自然変異頻度の結腸癌細胞が存在していてもいなくてもよい。いくつかの実施形態では、患者は、開示化合物を投与して、例えば１日、２日、１週間、１カ月または６カ月またはそれ以上の後、患者の中に存在する結腸癌細胞の変異率の少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、さらには５０％またはそれ以上の減少を有する。理論に拘束されるわけではないが、本明細書で開示する化合物は、細胞周期を通して進行に関係する細胞機構と相互作用することによって、変異率を低減することができる。そうした進行は、細胞周期チェックポイントの開始によってＤＮＡ複製（Ｓ期）および／または細胞分裂（有糸分裂）などのその過程の減速をもたらすことができ、これは、ＤＮＡが遭遇する可能性のある損傷を修復するか、またはアポトーシスを受ける機会を細胞に与える。両方の場合、これは、変異または損傷した細胞の蓄積を防止し、ＤＮＡの完全性の維持をもたらす。
【００５５】
患者、例えば結腸直腸癌のリスクのある患者における結腸直腸腫瘍または固形腫瘍（例えば、乳癌、前立腺癌、肺癌または肝細胞癌）の臨床症状を遅延させる方法であって、その患者に有効量の本明細書で開示する化学予防化合物、例えば化合物１７、２９、３９または３４を投与することを含む方法も本明細書で考慮される。そうした化合物の投与は、例えば少なくとも毎日であってよい。本明細書で開示する化合物の投与の結果としての患者の結腸直腸腫瘍の臨床症状の遅延は、本明細書で開示するものなどの化学予防化合物を投与されていない患者と比較して、少なくとも、例えば６カ月、１年、１８カ月、さらには２年またはそれ以上であってよい。
【００５６】
乳癌、頸癌（ｃｅｒｖｉｘ）、膵臓癌、前立腺腺癌および／または肝細胞癌などの固形腫瘍または腺癌を予防または軽減する方法も本開示の一部を形成する。そうした方法は、患者、例えば、そうした癌のリスクのある患者に、本明細書で開示するもの、例えば本明細書で開示する化合物１７、２９、３９または３４などの化学予防剤を含む医薬品を投与することを含むことができる。
【００５７】
開示化合物（例えば、式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂ）を投与することを含む、酸素フリーラジカルを弱めることが有用である疾患、例えば、自己免疫、心臓血管および皮膚および／または毛髪の障害に苦しむ患者の治療方法も本明細書で考慮する。
【００５８】
例えば、望ましくない脱毛に苦しむ患者の脱毛を治療する方法を考慮する。その方法は、開示化合物、例えば式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物（例えば、化合物１７、２８、２９、３４または１４）を含む、有効量の組成物を投与することを含む。そうした組成物は、局所的に投与することができる。スーパーオキシドジスムターゼは脱毛の治療に用いられており、一実施形態では、スーパーオキシドジスムターゼ特性を有する開示化合物は、髪の成長を処置するおよび／または脱毛を低減する方法で使用するために考慮される。例えばそうした化合物は、患者に、例えば局所的に投与した場合、毛包のサイズを増大させ、および／または髪の成長速度を増加させることができる。円形脱毛症、アンドロゲン性脱毛症（ａｎｄｒｏｇｅｎｅｔｉｃ  ａｌｏｐｅｃｉａ）および／または休止期脱毛症（ｔｅｌｏｇｅｎｉｃ  ｄｅｆｌｕｖｉｕｍ）を治療する方法を考慮する。
【００５９】
皮膚に対するフリーラジカル損傷から保護する、および／または皮膚に対するフリーラジカル損傷を改善する方法であって、本明細書で開示する化合物、例えば式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物、例えば化合物１７、２８、２９、３４または１４を含む、有効量の組成物を投与する（例えば、局所的に投与する）方法を開示する。スーパーオキシドジスムターゼは、例えば、そうした治療用として公知である（例えば、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．８巻（１号）：１０９〜１１６頁（２００７年）：「Ｔｏｐｉｃａｌ  ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  ｄｉｓｍｕｔａｓｅ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｐｏｓｔ−ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ」；  Ｊ．  Ｄｅｒｍ  Ｓｃｉ．  Ｓｕｐｐｌ  ２巻（１号）Ｓ６５〜Ｓ７４頁（２００６年）を参照されたい）。
【００６０】
例えば、開示化合物は、皮膚の瘢痕組織を軽減もしくは改善する、創傷や熱傷を治癒させる、紫外線に対して皮膚を保護する、および／または紫外線への曝露により損傷を受けた皮膚を治癒させるのに使用することができる。例えば、開示化合物は、放射線による線維症を軽減するのに使用することができる。皮膚の小皺、皺またはむらを処置する方法であって、本明細書で開示する化合物、例えば式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂ（例えば、化合物１７、２８、２９、３４または１４）を含む、有効量の組成物を局所的に投与することを含む方法も考慮する。
【００６１】
尋常性座瘡、面皰型座瘡（ｃｏｍｅｄｏ−ｔｙｐｅ  ａｃｎｅ）、多形性座瘡、酒さ性座瘡、嚢胞性座瘡（ｎｏｄｕｌｏｃｙｓｔｉｃ  ａｃｎｅ）、集簇性座瘡、老人性座瘡、二次的座瘡、日光性座瘡、薬物性座瘡または職業性座瘡、魚鱗癬、ダリエー病、手掌または足底の角化症、皮膚、粘膜または爪の乾癬、紫外線放射への曝露に起因する皮膚疾患、皮膚の老化、光誘発性または経時的または化学線性の色素沈着および角化症、過脂漏症座瘡（ａｃｎｅ  ｈｙｐｅｒｓｅｂｏｒｒｈｏｅａ）、単純性脂漏症または脂漏性皮膚炎、瘢痕形成障害あるいは皮膚線条の少なくとも１つの治療などの皮膚病変を治療する方法であって、有効量の開示化合物を投与することを含む方法も提供する。アトピー性皮膚炎を治療する方法も考慮する。その組成物は、経口でも局所でも投与することができる。
【００６２】
スーパーオキシドは、加齢に伴う疾患、例えば糖尿病、白内障、アルツハイマー病およびパーキンソン病などの神経変性疾患、黄斑変性症、網膜潰瘍および／または網膜血管炎ならびに前立腺癌に関係している（例えば、「Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ，  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ａｎｄ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ」、Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、４７巻（３号）４５７〜４６４頁、２０００年；  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ａｎｔｉ−ｏｘｉｄａｎｔ  ｅｎｚｙｍｅｓ  ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  ｄｉｓｍｕｔａｓｅ  ａｎｄ  ｃａｔａｌａｓｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃａｔａｒａｃｔ：  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｓｅｒｕｍ  ｌｅｖｅｌｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｓｅｎｉｌｅ  ａｎｄ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｃａｔａｒａｃｔｓ）、Ｊ  Ｉｎｄｉａｎ  ｍｅｄ  Ａｓｓｏｃ．  １０４巻（７号）：３９４巻、３９６〜７頁、２００６年；「Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ」、Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２３巻（１号）：１３４〜１４７頁、１９９７年；「Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｉｎ  ｎｉｇｒａｌ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  ｉｎ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ」、Ｍｏｖ  Ｄｉｓｏｒｄ．  １９９８年；「Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ａｎｄ  ｎｉｔｒｏｓａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｉｎ  ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ  ｒｅｔｉｎａｌ  ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｅａｌｅｓ’  ｄｉｓｅａｓｅ」、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３６巻（５号）：３７７〜３８５頁、２００３年を参照されたい。本明細書では、開示化合物を含む、加齢に伴う障害、例えば糖尿病、白内障、アルツハイマー病およびパーキンソン病などの神経変性疾患、黄斑変性症、網膜潰瘍および／または網膜血管炎を治療する方法を考慮する。例えば、本明細書では、黄斑変性症の影響を改善する、軽減する、または黄斑変性症を予防する方法であって、式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂで表される化合物（例えば、化合物１７、２８、２９または３４）を投与することを含む方法を提供する。
【００６３】
一実施形態では、酸化的ストレスを治療することを必要とする患者の酸化的ストレスを治療する方法であって、本明細書で開示する化合物を投与することを含む方法を提供する。例えば、低酸素症を治療することを必要とする患者に本明細書で開示する化合物を投与することを含む低酸素症を治療する方法を提供する。
【００６４】
酸化的ストレスは、例えば、酸素を使用する代謝反応からもたらされ得、いくつかの実施形態では、それは、損なわれていない（ｉｎｔａｃｔ）細胞における酸化促進系／酸化防止系の平衡状態の乱れと説明することができる。酸化的ストレスは、例えば、慢性冠動脈虚血、動脈硬化症、うっ血性心不全、アンギナ、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、発作および心筋肥大などの心臓および血管の障害および疾患に関係している。例えば、虚血性または再かん流関連の損傷を治療または阻害することを必要とする患者の虚血性または再かん流関連の損傷を治療または阻害する方法であって、患者に、式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂの化合物を含む有効量の組成物を投与することを含む方法を提供する。本明細書では、心臓および／または血管の障害を治療することを必要とする患者の心臓および／または血管の障害を治療する方法であって、開示化合物、例えば式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂで表される化合物を投与することを含む方法を提供する。慢性閉塞性肺障害を治療する方法であって、開示化合物、例えば式Ｉ、式ＩＩａまたは式ＩＩｂで表される化合物、例えば化合物１７、２８、２９、３４または１４を投与することを含む方法も提供する。
【００６５】
自己免疫障害を治療する方法、例えばアジソン病、慢性甲状腺炎、皮膚筋炎、グレーブス病、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、乾癬または関節リウマチを治療する方法であって、自己免疫障害を治療することを必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物、または例えば化合物１７、２８、２９、３４もしくは１４を投与することを含む方法も考慮する。
【００６６】
一般に、活性成分の治療有効量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、任意に約１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、任意に約１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲となる。投与される量は、治療を受ける疾患または適応症の種類および程度、具体的な患者の全体的健康状態、送達される結合タンパク質の相対的な生物学的効能、結合タンパク質の処方、処方物中の賦形剤の存在およびその種類ならびに投与経路などの変数に依存することになる。所望の血中濃度または組織内濃度を迅速に達成するため、投与される最初の投薬量を上記の上限値を超えて増加させることができ、また、最初の投薬量を最適値より少なくすることができる。１日用量は、具体的な状態に応じて治療の過程で漸増させることができる。ヒトへの投薬量は、例えば、０．５ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇで実施するように設計された慣用的な第Ｉ期用量漸増試験（Ｐｈａｓｅ  Ｉ  ｄｏｓｅ  ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｙ）で最適化することができる。投薬頻度は、投与経路、投薬量および治療を受ける病状などの因子に応じて変えることができる。投薬頻度の例は、１日１回、１週間に１回および２週間に１回である。
【００６７】
考慮される処方物または組成物は、開示化合物を含み、典型的には化合物および薬学的に許容される担体を含む。
【００６８】
本発明の組成物は、その目的とする用途に応じて、当技術分野で周知の様々な手段で投与することができる。例えば、本発明の組成物を経口で投与する場合、それらは錠剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤またはシロップ剤として処方することができる。あるいは、本発明の処方物を、注射剤（静脈内、筋肉内または皮下）、点滴製剤または坐剤として非経口で投与することができる。眼の粘膜経路で施すために、本発明の組成物を点眼剤または眼軟膏剤として処方することができる。これらの処方物は慣用的な手段で調製することができ、望むなら、その組成物を、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、可溶化剤、懸濁助剤、乳化剤またはコーティング剤などの慣用的な任意の添加剤と混合することができる。
【００６９】
対象発明の処方物では、湿潤剤、乳化剤および滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムならびに着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤および芳香剤、防腐剤および酸化防止剤が処方される剤中に存在していてよい。
【００７０】
対象組成物は、経口、経鼻、局所（頬側および舌下を含む）、経直腸、経膣、エアゾールおよび／または非経口投与に適している。処方物は、単位剤形で存在することが好都合であり、製薬技術分野で周知の任意の方法で調製することができる。単一用量を得るために担体材料と混合できる組成物の量は、治療を受ける被験体および具体的な投与方法によって変わる。
【００７１】
これらの処方物を調製する方法は、本発明の組成物と担体および任意の１つまたは複数の副成分を一緒にするステップを含む。一般に、処方物は、剤を液体担体もしくは微粉化された固体担体またはその両方と均一かつ密に一緒にし、次いで、必要なら、その生成物を成形することによって調製する。
【００７２】
経口投与に適した処方物は、それぞれが所定量のその対象組成物を活性成分として含むカプセル剤、カシェ剤、丸薬、錠剤、ロゼンジ剤（香味付けベース、通常スクロースおよびアカシアまたはトラガカントを用いて）、粉剤、顆粒剤の形態であってよく、あるいは水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液として、水中油型もしくは油中水型の乳濁液として、エリキシル剤もしくはシロップ剤として、または香錠（ゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアカシアなどの不活性ベースを用いて）としてであってよい。本発明の組成物は、ボーラス投与、舐剤またはペーストとして投与することもできる。
【００７３】
経口投与用の固体剤形（カプセル剤、錠剤、丸薬、フィルムコート錠剤、糖衣錠剤、粉剤、顆粒剤など）では、対象組成物を、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなどの１つもしくは複数の薬学的に許容される担体および／または以下：（１）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよび／またはケイ酸などの充填剤もしくは増量剤；（２）、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアカシアなどの結合剤；（３）グリセロールなどの保湿剤；（４）寒天、炭酸カルシウム、バレイショデンプンもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のシリケートおよび炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；（５）パラフィンなどの溶解遅延剤；（６）四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；（７）、例えば、アセチルアルコール（ａｃｅｔｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）およびグリセロールモノステアレートなどの湿潤剤；（８）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤；（９）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよびその混合物などの滑沢剤；ならびに（１０）着色剤のいずれかと混合する。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合、組成物は緩衝剤も含むことができる。同種の固体組成物は、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量のポリエチレングリコールなどの賦形剤を用いた軟質および硬質充填ゼラチンカプセル剤の充填剤として用いることもできる。
【００７４】
処方物および組成物は、開示化合物の微粉化結晶を含むことができる。微粉化は、化合物単独の結晶で実施しても、また、結晶と薬学的賦形剤または担体の一部もしくは全体との混合物で実施してもよい。開示化合物の微粉化結晶の平均粒径は、例えば約５〜約２００ミクロンまたは約１０〜約１１０ミクロンであってよい。
【００７５】
錠剤は、任意に１つもしくは複数の副成分と一緒に圧縮または成形して作製することができる。圧縮錠剤は、結合剤（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、滑沢剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウムまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散剤を用いて調製することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿潤させた対象組成物の混合物を適切な機械で成形することによって作製することができる。フィルムコート錠剤または糖衣錠剤、カプセル剤、丸薬および顆粒剤などの錠剤および他の固体剤形は、任意に、割線を入れるか、または腸溶コーティングや製剤処方技術分野で周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。
【００７６】
経口投与用の液体剤形には、薬学的に許容される乳剤、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。対象組成物に加えて、液体剤形は、当技術分野で一般に使用される不活性希釈剤、例えば水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油類（特に、綿実油、ラッカセイ油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、シクロデキストリンおよびその混合物を含むことができる。
【００７７】
対象組成物に加えて懸濁液は、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶性セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天およびトラガカントならびにその混合物のような懸濁化剤を含むことができる。
【００７８】
経直腸または経膣投与のための処方物は坐剤として存在することができる。その坐剤は対象組成物を、室温では固体であるが体温では液体であり、したがって体腔内で溶融して活性剤を放出する、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、坐剤用ワックスまたはサリチレートを含む１つもしくは複数の適切な非刺激性の賦形剤または担体と混合することによって調製することができる。経膣投与に適した処方物には、当技術分野で適切であることが公知である担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡状または噴霧処方物も含まれる。
【００７９】
対象組成物の経皮または局所投与のための剤形には、粉剤、噴霧剤、軟膏剤、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、溶液、パッチおよび吸入剤が含まれる。活性成分を滅菌状態下で、薬学的に許容される担体および必要とされる任意の防腐剤、緩衝剤または噴射剤と混合することができる。
【００８０】
軟膏剤、ペースト、クリームおよびゲルは、対象組成物に加えて、動物性および植物性脂肪、油類、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タルクおよび酸化亜鉛またはその混合物などの賦形剤を含むことができる。
【００８１】
粉剤および噴霧剤は、対象組成物に加えて、ラクトース、タルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウムおよびポリアミド粉末またはこれらの物質の混合物などの賦形剤を含むことができる。噴霧剤は、慣用的な噴射剤、例えばクロロフルオロ炭化水素および揮発性非置換炭化水素、例えばブタンおよびプロパンを追加的に含むことができる。
【００８２】
あるいは、本発明の組成物および化合物はエアゾールで投与することもできる。これは、化合物を含む水性エアゾール、リポソーム製剤または固体粒子を調製することによって実施される。非水性（例えば、フルオロカーボン噴射剤）懸濁剤を使用することができる。対象組成物中に含まれる化合物の分解をもたらし得る、せん断にその剤を曝すことを最少にするので、超音波噴霧器を使用することができる。
【００８３】
通常、水性エアゾールは、対象組成物の水溶液または水性懸濁液を慣用的な薬学的に許容される担体および安定剤と一緒に処方することによって作製する。担体および安定剤は、具体的な対象組成物の要件によって変わってくるが、一般に非イオン性界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ、Ｐｌｕｒｏｎｉｃまたはポリエチレングリコール）、血清アルブミンのような無害なタンパク質、ソルビタンエステル、オレイン酸、レシチン、グリシンなどのアミノ酸、緩衝剤、塩、糖または糖アルコールを含む。エアゾールは一般に等張液から調製する。
【００８４】
非経口投与に適した本発明の医薬組成物は、対象組成物を、酸化防止剤、緩衝剤、静菌薬、対象レシピエントの血液と等張性の処方物を付与する溶質、懸濁化剤または増粘剤を含むことができる、１つまたは複数の薬学的に許容される滅菌した等張性の水溶液もしくは非水性溶液、分散液、懸濁液もしくは乳液、または使用直前に滅菌注射用溶液もしくは分散液に再構成することができる滅菌粉末と一緒に含む。
【００８５】
本発明の医薬組成物で使用できる適切な水性および非水性担体の例には、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）およびその適切な混合液、オリーブ油などの植物油ならびにオレイン酸エチルおよびシクロデキストリンなどの注入可能な有機エステルが含まれる。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング材料を用いることによって、分散液の場合は所要粒径を維持することによって、および界面活性剤を使用することによって維持することができる。対象組成物を用いた治療の効能は、当業者に公知の多数の様式で判定することができる。
【００８６】
組成物が特定の成分を有する、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）、または含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）と記載されている説明を通して、組成物は、言及されている成分からも本質的になる、または言及されている成分からもなるものとする。同様に、特定のプロセスステップを有する、含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）、または含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）と記載されている場合、そのプロセスは、言及されているプロセスステップからも本質的になる、または言及されているプロセスステップからもなるものとする。別段の指定のない限り、本発明が使用可能であるならば、そのステップの順番または具体的な作業を行う順番は重要ではない。さらに、別段の記載のない限り、２つ以上のステップまたは作業は同時に行うことができる。
【実施例】
【００８７】
（実施例１）
スーパーオキシド捕捉
化合物１７および３９を、標準化されたＯ２−アッセイを用いて、活性好中球（ＰＭＮ）によって放出されたスーパーオキシド（Ｏ２−）を捕捉するその潜在性について試験した。簡単に述べると、１×１０６個の新鮮分離した好中球を、化合物の非存在下または存在下（それぞれ５ｍＭ）、ホルボール−ミリステート−アセテート（ＰＭＡ）を用いて活性化させた。活性化の３０分後、Ｏ２−放出を、ルミノメーターを用いてルシゲニン増幅した化学発光で測定した。対照として５−ＡＳＡ（５−アミノサリチル酸）およびスーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）を使用した。実験は３通り実施した。
【００８８】
化合物１７は、５ｍＭでスーパーオキシド（対照の５％）の強力な捕捉剤として作用し、スーパーオキシドジスムターゼとカタラーゼの混合物と同じように活性である。図１に示すように、化合物３９は５−ＡＳＡと同様の捕捉特性を有する。
【００８９】
（実施例２）
スーパーオキシド捕捉
化合物１４および３４を、実施例１と同様に標準化されたＯ２−アッセイを用いて、活性好中球（ＰＭＮ）によって放出されたスーパーオキシド（Ｏ２−）を捕捉するその潜在性について試験した。Ｏ２−供与体として活性好中球（ＰＭＮ）を使用した。簡単に述べると、１×１０６個の新鮮分離した好中球を、１００ｎＭホルボール−ミリステート−アセテート（ＰＭＡ）を用いて活性化させた。Ｏ２−放出を、ルミノメーターを用いたルシゲニン増幅した化学発光によって、１５分毎に９０分間測定した。スーパーオキシドジスムターゼ（２０００Ｕ／ｍｌ、ＳＯＤ）でインキュベートした非活性化ＰＭＮまたは活性化ＰＭＮのいずれかを対照として使用した。実験は３通り実施した。
【００９０】
検討した濃度で、どちらの化合物も有意な捕捉特性を示した。図２Ａは化合物１４の結果を表し、図２Ｂは化合物３４の結果を表す。
【００９１】
（実施例３）
複製忠実度
様々な濃度の化合物でインキュベートした際の変異率の変化を判定するためのＥＧＦＰに基づいたアッセイを用いて、化合物が複製忠実度を改善するかどうかを試験した。簡単に述べると、１×１０３個のＥＧＦＰ陰性のＨＣＴ１１６Ａ２．１細胞を、ＦＡＣＳ  Ａｒｉａ上の２４ウェルプレートにソーティングした。２４時間後、細胞をその化合物で７日間処理し、フローサイトメトリーにより変異画分（ｍｕｔａｎｔ  ｆｒａｃｔｉｏｎ）を測定した。
【００９２】
化合物１７は、１．２５ｍＭから出発してすでに低い濃度で細胞成長に影響を及ぼしている。驚くべきことに、化合物１７は、５ｍＭの濃度で中間的変異細胞（Ｍ１個体群）の５０％の減少をもたらす。さらに、化合物１７は、２．５〜５ｍＭの濃度で最終的変異細胞（Ｍ２個体群）の約３０％の減少をもたらした（図３Ａ）。
【００９３】
図３Ｂは、化合物２８は最大で１ｍＭの濃度で有意の変化を引き起こさないようであることを示している。化合物３９は、２０ｍＭで細胞成長を低下させたが、変異画分Ｍ１またはＭ２を減少させなかった。その代わり、２０ｍＭの化合物３９での処理はＭ１の増大をもたらす（図３Ｃ）。これはアスピリンの効果に匹敵する。
【００９４】
化合物１７、２８および３９の中で、化合物１７は、（ＣＡ）１３リピートをもつＨＣＴ１１６細胞における複製忠実度に対してプラス効果を示す。この効果は、中間的変異画分Ｍ１において見られるだけでなく、最終的変異Ｍ２においても見られる。化合物１７は最も強力な捕捉剤である。Ｍ１またはＭ２のこの減少は、Ｓ期停止に依存するようには見えない（５−ＡＳＡについては見られたように；Ｌｕｃｉａｎｉ  Ｇ、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ２００７年）。
【００９５】
（実施例４）
実施例３と同様のＥＧＦＰに基づいたアッセイを用いて、様々な濃度の開示化合物でインキュベートした際の変異率の変化を判定し、化合物が複製忠実度を改善するかどうかを試験した。ＥＧＦＰに基づいたアッセイを用いて、様々な濃度の化合物でインキュベートした際の（ＣＡ）１３リピートでの変異率の変化を判定した。簡単に述べると、１×１０３個のＥＧＦＰ陰性のＨＣＴ１１６Ａ２．１細胞を、ＦＡＣＳ  Ａｒｉａ上の２４ウェルプレートにソーティングした。２４時間後、細胞をその化合物で７日間処理した。合計細胞数（ｃ）およびＥＧＦＰ陽性画分（変異画分（ＭＦ））をフローサイトメトリーで分析した。変異率（ｍ／（ＣＡ）１３／世代（ｇｅｎ）を、ｍ＝ＭＦ／（ｇｅｎ＋１）およびｇｅｎ＝ｌｏｇ２（ｃ／１０００×クローニング効率）により推定した。過渡的変異（Ｍ１）と最終的変異（Ｍ２）細胞は識別された。
【００９６】
図４に示すように、化合物３９はＭ１細胞の数を有意に低下させた。これは、１０ｍＭから最大で４０ｍＭ（ｐ＜０．０５）の濃度で開始する、ＭＭＲ機能異常ＨＣＴ１１６細胞におけるポリメラーゼエラー直後の細胞個体群を反映している。４０ｍＭでの永久的変異Ｍ２個体群の有意の減少も認められた。
【００９７】
（実施例５）
細胞周期分析
ＢｒｄＵ染色を用いて、化合物３９で７２時間処理した際のＨＣＴ１１６およびＨＴ２９細胞における細胞周期変化を分析した。データは３つの独立した実験の平均値で表す（＊は対照と比較してｐ＜０．０５を示す）
化合物３９（１０ｍＭ〜４０ｍＭ）は、ＨＣＴ１１６細胞の細胞周期分布において有意の変化を誘発しなかった。ＨＴ２９細胞は、Ｇ２期において軽度の増加を示した（６．７％〜１３．６％の範囲、ｐ＜０．０５）。これは、Ｇ１個体群の減少とパラレルであった（５２．７％〜４４．９％の範囲、ｐ＜０．０５）（図５Ａおよび図５Ｂ）。
【００９８】
（実施例６）
細胞増殖
ＭＴＴアッセイを用いて、化合物３４の細胞増殖に対する阻害効果を検討した。簡単に述べると、５×１０３個のＨＣＴ１１６、ＨＣＴ１１６＋ｃｈｒ３、ＨＴ２９およびＬｏｖｏ細胞を、様々な濃度で、９６ウェルプレート中で７２時間インキュベートした。化合物３４はＩＭＤＭに可溶性である。１００ｍＭのストック液を調製し、ｐＨを７．４に調節した。
【００９９】
図６は、化合物３４が、細胞型に応じて３０〜４０ｍＭでＩＣ５０を有することを示している。
【０１００】
（参照による援用）
本明細書で参照した特許文献および科学論文のそれぞれの開示全体をすべての目的のために参照により本明細書に援用する。
【０１０１】
（等価物）
本発明は、その趣旨または本質的特徴から逸脱することなく、他の特定の形態において具体化することができる。したがって、上記実施形態は、本明細書で説明する本発明を限定するものではなく、あらゆる点で例示的なものであると考えられるべきである。したがって、本発明の範囲は、上記説明によってではなく添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の等価の意味および範囲内にあるすべての変更は本発明に包含されるものとする。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【外国語明細書】
2014156485000001.pdf