(57)【要約】【課題】非臨床試験の段階で、薬物による房室ブロックの発現を予測するための、房室ブロックモデル用ブタ、房室ブロックモデル用サル、房室ブロックモデル用モルモット、並びに、ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法、房室ブロックの発現を効率よく簡便に評価する評価方法、並びに、房室ブロックの病態解析に利用可能な房室ブロックモデル及びその製造方法の提供。【解決手段】房室ブロックモデル用ブタ、房室ブロックモデル用サル、房室ブロックモデル用モルモット、並びに、ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法、房室ブロックの発現を評価する評価方法、並びに、房室ブロックモデル及びその製造方法などである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ブタであって、房室ブロックモデルの作製に用いられることを特徴とする房室ブロックモデル用ブタ。
【請求項２】
ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とするブタに房室ブロックを発現させる方法。
【請求項３】
ブタであることを特徴とする房室ブロックモデル。
【請求項４】
ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与して得られる請求項３に記載の房室ブロックモデル。
【請求項５】
ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とする房室ブロックモデルの製造方法。
【請求項６】
サルであって、房室ブロックモデルの作製に用いられることを特徴とする房室ブロックモデル用サル。
【請求項７】
サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とするサルに房室ブロックを発現させる方法。
【請求項８】
サルであることを特徴とする房室ブロックモデル。
【請求項９】
サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与して得られる請求項８に記載の房室ブロックモデル。
【請求項１０】
サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とする房室ブロックモデルの製造方法。
【請求項１１】
モルモットであって、房室ブロックモデルの作製に用いられることを特徴とする房室ブロックモデル用モルモット。
【請求項１２】
モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とするモルモットに房室ブロックを発現させる方法。
【請求項１３】
モルモットであることを特徴とする房室ブロックモデル。
【請求項１４】
モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与して得られる請求項１３に記載の房室ブロックモデル。
【請求項１５】
モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とする房室ブロックモデルの製造方法。
【請求項１６】
ブタ、サル、及びモルモットの少なくともいずれかを用い、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価することを特徴とする評価方法。
【請求項１７】
ブタ及びサルの少なくともいずれかを用いてスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する１次評価工程と、
モルモットを用いてスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する２次評価工程と、
を含む請求項１６に記載の評価方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、房室ブロックモデル用ブタ、房室ブロックモデル用サル、房室ブロックモデル用モルモット、並びに、ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法、房室ブロックの発現を評価する評価方法、並びに、房室ブロックモデル及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
フィンゴリモド（ｆｉｎｇｏｌｉｍｏｄ、「ＦＴＹ７２０」とも称する）〔商品名：イムセラ（登録商標）、田辺三菱製薬株式会社製（非特許文献１参照）又は商品名：ジレニア（ノバルティスファーマ株式会社製）〕は、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする多発性硬化症に対する薬物である。第３回ＤＩＡカーディアック・セイフティ・ワークショップ（２０１２年５月２８日、東京）でのＳｔｒｎａｄｏｖａ博士（Ｈｅａｌｔｈ  Ｃａｎａｄａ，  Ｃａｎａｄａ）の報告によれば、臨床試験（フェーズＩＩＩ）において、フィンゴリモドを１．２５ｍｇ／日の用量で３６６名に投与し、ホルター心電図を測定したところ、投与の１日後において、６．６％に第２度房室ブロック（Ｍｏｂｉｔｚ  Ｉ型又はＩＩ型）が発生し、３．４％に高度房室ブロック（２：１房室ブロック）が発生し、０．３％に第３度房室ブロック（完全房室ブロック）が発生した。完全房室ブロックの発生頻度は稀ではあるものの、フィンゴリモドの投与から１日で発生し、突然死する可能性があるため非常に危険であり、早急に解決すべき問題である。
【０００３】
なお、フィンゴリモドは、非臨床試験において、マウス、イヌ等の実験動物を用いて、ヒトに対する投与量の１０倍用量〜３０倍用量を投与して、その安全性の評価が実施されたが、これらの動物では、房室ブロックは報告されておらず、ヒトに投与して初めて房室ブロックの発生が確認された。
また、ラットにスフィンゴシン−１−リン酸を投与してもＰＲ間隔の延長が認められないことも報告されている（非特許文献２参照）。
【０００４】
前記房室ブロックは、不整脈の１種であり、その種類としては、第１度房室ブロック、第２度房室ブロック、高度房室ブロック、第３度房室ブロックがある。前記第１度房室ブロックは、ヒトではＰＲ間隔が０．２秒間以上に延長した状態をいう。前記第２度房室ブロックは、更に、第１型（Ｍｏｂｉｔｓ  Ｉ型（「Ｗｅｎｃｋｂａｃｈ型」とも称する））と第２型（Ｍｏｂｉｔｓ  ＩＩ型）に分けられる。前記Ｗｅｎｃｋｂａｃｈ型は、ＰＲ間隔が徐々に延長し、その後ＱＲＳ（心室収縮）が脱落するというパターンを繰り返す状態をいう。前記Ｍｏｂｉｔｓ  ＩＩ型は、ＰＲ間隔が延長することなく、突然、心室収縮脱落が起こる状態をいう。前記高度房室ブロックは、心房の興奮が心室に２：１（心房：心室）あるいは３：１（心房：心室）以下の頻度でしか伝わらなくなった状態をいう。前記第３度房室ブロックは、心房と心室が相互に全く無関係に独自のリズムで動く状態をいう。
【０００５】
致死性心室不整脈の副作用を有するにも拘らず、非臨床試験においてそれを予測することができず、市販された薬物の一例としてフィンゴリモドを挙げたが、全てのスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤には、フィンゴリモドと同様に、非臨床試験では房室ブロックを発生する副作用は確認されず、ヒトに投与して初めて房室ブロックの発生が確認されるというリスクがある。
【０００６】
したがって、完全房室ブロックにより突然死する可能性を排除するため、更に、医師の管理下ではなく、自宅で簡便に投薬できる免疫調節剤の開発のためにも、非臨床試験の段階で、副作用としての房室ブロックの発現を予測することが強く望まれているのが現状である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】「多発性硬化症治療剤  イムセラ（登録商標）カプセル０．５ｍｇ」、医薬品インタビューフォーム、２０１２年４月改定（第３版）
【非特許文献２】Ｓｕｇｉｙａｍａ  Ａ，  ｅｔ  ａｌ．，  ２０００，  Ｊｐｎ.Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ８２（４），  ｐ．３３８−３４２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、従来における前記諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、非臨床試験の段階で、薬物による房室ブロックの発現を予測するための、房室ブロックモデル用ブタ、房室ブロックモデル用サル、房室ブロックモデル用モルモット、並びに、ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法、房室ブロックの発現を効率よく簡便に評価する評価方法、並びに、房室ブロックの病態解析に利用可能な房室ブロックモデル及びその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
前記課題を解決するため、本発明者らは鋭意検討した結果、以下のような知見を得た。即ち、ブタ、サル、及びモルモットの少なくともいずれかを用いることで、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を確実に予測できることを知見し、本発明の完成に至った。
【００１０】
本発明は、本発明者による前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下のとおりである。
【００１１】
即ち、本発明の房室ブロックモデル用ブタは、ブタであって、房室ブロックモデルの作製に用いられる房室ブロックモデル用ブタである。
【００１２】
本発明のブタに房室ブロックを発現させる方法は、ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含む方法である。
【００１３】
本発明の房室ブロックモデルは、ブタである房室ブロックモデルである。
【００１４】
本発明の房室ブロックモデルの製造方法は、ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含む房室ブロックモデルの製造方法である。
【００１５】
本発明の房室ブロックモデル用サルは、サルであって、房室ブロックモデルの作製に用いられる房室ブロックモデル用サルである。
【００１６】
本発明のサルに房室ブロックを発現させる方法は、サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含む方法である。
【００１７】
本発明の房室ブロックモデルは、サルである房室ブロックモデルである。
【００１８】
本発明の房室ブロックモデルの製造方法は、サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含む房室ブロックモデルの製造方法である。
【００１９】
本発明の房室ブロックモデル用モルモットは、モルモットであって、房室ブロックモデルの作製に用いられる房室ブロックモデル用モルモットである。
【００２０】
本発明のモルモットに房室ブロックを発現させる方法は、モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含む方法である。
【００２１】
本発明の房室ブロックモデルは、モルモットである房室ブロックモデルである。
【００２２】
本発明の房室ブロックモデルの製造方法は、モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含む房室ブロックモデルの製造方法である。
【００２３】
本発明の評価方法は、ブタ、サル、及びモルモットの少なくともいずれかを用い、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する評価方法である。
【発明の効果】
【００２４】
本発明によれば、従来における前記諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、非臨床試験の段階で、薬物による房室ブロックの発現を予測するための、房室ブロックモデル用ブタ、房室ブロックモデル用サル、房室ブロックモデル用モルモット、並びに、ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法、房室ブロックの発現を効率よく簡便に評価する評価方法、並びに、房室ブロックの病態解析に利用可能な房室ブロックモデル及びその製造方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１Ａ】図１Ａは、試験例１における超小型ミニブタの薬物投与前の心電図のトレースの一例を示す図である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、試験例１における超小型ミニブタへの薬物の投与（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）開始から１０分間後の心電図のトレースの一例を示す図である。
【図１Ｃ】図１Ｃは、試験例１における超小型ミニブタへの薬物の投与（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）開始から６０分間後の心電図のトレースの一例を示す図である。
【図２Ａ】図２Ａは、試験例２におけるサルの薬物投与前の心電図のトレースの一例を示す図である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、試験例２におけるサルへの薬物投与（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）開始から５０分間後の心電図のトレースの一例を示す図である。
【図３Ａ】図３Ａは、試験例３におけるモルモットの薬物投与前の心電図、及び大動脈圧のトレースの一例を示す図である。
【図３Ｂ】図３Ｂは、試験例３におけるモルモットへの薬物の高用量投与（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）開始から４５分間後の心電図、及び大動脈圧のトレースの一例を示す図である。
【図４Ａ】図４Ａは、試験例３におけるモルモットの薬物低用量投与群（０．０１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、薬物高用量投与群（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、及び溶媒投与群の平均動脈圧（ＭＢＰ）を示す図である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、試験例３におけるモルモットの薬物低用量投与群（０．０１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、薬物高用量投与群（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、及び溶媒投与群の心房拍動数（Ａｔｒｉａｌ  ｒａｔｅ）を示す図である。
【図４Ｃ】図４Ｃは、試験例３におけるモルモットの薬物低用量投与群（０．０１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、薬物高用量投与群（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、及び溶媒投与群の心室拍動数（Ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｒａｔｅ）を示す図である。
【図４Ｄ】図４Ｄは、試験例３におけるモルモットの薬物低用量投与群（０．０１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、薬物高用量投与群（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、及び溶媒投与群の房室ブロック（ＡＶ  Ｂｌｏｃｋ）の発現の有無を示す図である。
【図４Ｅ】図４Ｅは、試験例３におけるモルモットの薬物低用量投与群（０．０１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、薬物高用量投与群（０．１ｍｇ／ｋｇ／１０分間）、及び溶媒投与群のＰＲ間隔、ＱＲＳ幅、及びＱＴ間隔を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
（房室ブロックモデル用ブタ、房室ブロックモデル用サル、又は房室ブロックモデル用モルモット）
本発明の房室ブロックモデル用ブタは、ブタであって、房室ブロックモデルの作製に用いられる房室ブロックモデル用ブタである。
本発明の房室ブロックモデル用サルは、サルであって、房室ブロックモデルの作製に用いられる房室ブロックモデル用サルである。
本発明の房室ブロックモデル用モルモットは、モルモットであって、房室ブロックモデルの作製に用いられる房室ブロックモデル用モルモットである。
【００２７】
＜ブタ＞
前記ブタの体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記ブタの種類としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、体重が１０ｋｇ以下の超小型ミニブタであることが、実験動物として取扱い易い点で好ましい。前記体重が１０ｋｇ以下の超小型ミニブタは、富士マイクラ株式会社（商品名：ｍｉｃｒｏｍｉｎｉｐｉｇ、マイクロミニピッグ）より入手できる。
【００２８】
前記房室ブロックモデル用ブタは、前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤の投与により、心電図における電気生理学的パラメータ（ＰＲ間隔、ＡＨ間隔など）の延長が生じるため、非臨床試験段階において、第１度房室ブロックの発現のリスクの評価に好適に用いられる。
【００２９】
＜サル＞
前記サルの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３０】
前記房室ブロックモデル用サルは、前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤の投与により、心電図における電気生理学的パラメータ（ＰＲ間隔、ＡＨ間隔など）の延長が生じるため、非臨床試験段階において、第１度房室ブロックの発現のリスクの評価に好適に用いられる。
【００３１】
＜モルモット＞
前記モルモットの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００３２】
前記房室ブロックモデル用モルモットは、前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤の投与により、心電図における電気生理学的パラメータ（ＰＲ間隔、ＡＨ間隔など）の延長が生じるだけでなく、完全房室ブロックも発現する。そのため、非臨床試験段階において、第１度房室ブロックの発現のリスクの評価だけでなく、第２度房室ブロック、高度房室ブロック及び第３度房室ブロックの発現のリスクの評価にも好適に用いられる。
【００３３】
前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体は、Ｔ細胞、マスト細胞、マクロファージ、樹状細胞、ＮＫ細胞等の多くの免疫細胞に発現している。前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体に、スフィンゴシン−１−リン酸が結合することによって、細胞遊走などが引き起こされ、免疫活性が惹起される。
【００３４】
前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤は、前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体に結合することで、スフィンゴシン−１−リン酸受容体に対する機能的アンタゴニストとして作用し、前記スフィンゴシン−１−リン酸による作用を抑制するものである。
【００３５】
前記房室ブロックモデル用ブタ、前記房室ブロックモデル用サル、又は房室ブロックモデル用モルモットは、前記スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤の全てにおける房室ブロックの発現のリスクの評価に好適に用いることができる。
【００３６】
（ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法）
本発明のブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法は、投与工程を少なくとも含み、必要に応じて、麻酔工程などのその他の工程を含む。
【００３７】
＜投与工程＞
前記投与工程は、ブタ、サル、又はモルモットにスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を投与する工程である。
【００３８】
前記ブタの体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記ブタの種類としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記超小型ミニブタであることが、実験動物として取扱い易い点で好ましい。
【００３９】
前記サルの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４０】
前記モルモットの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００４１】
前記免疫調節剤としては、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とするものであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０）、ｓｉｐｏｎｉｍｏｄ（ＢＡＦ３１２）などが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
【００４２】
前記免疫調節剤を投与する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、薬物を確実に循環血中に到達させる観点から、静脈内投与が好ましい。
【００４３】
前記免疫調節剤の投与量としては、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。前記投与量が、０．１ｍｇ／ｋｇ未満であると、房室ブロックが発現しないことがある。
【００４４】
＜麻酔工程＞
前記麻酔工程は、ブタ、サル、又はモルモットに、麻酔する工程である。前記麻酔工程は、前記投与工程の前に行われることが好ましい。
【００４５】
前記麻酔工程で用いる麻酔薬の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ハロセン、ペントバルビタール、チオペンタール、ウレタン、ケタミン、抱水クロラール、トリブロモエタノール、フェノチアジン類、クロールプロマジン、アセプロマジン、プロマジン、ベンゾジアゼピン類、ジアゼパム、ミダゾラム、α−２アドレナリン作動性トランキライザ類、キシラジン、メデトミジンなどが挙げられる。これらは、１種単独で使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
これらの中でも、ハロセンが、ブタ、サル、又はモルモットにおいて、心房から心室への電気信号の伝達が抑制され、予めＰＲ間隔を少し延長させることができるため、房室ブロックモデル、特に第２度房室ブロックあるいは第３度房室ブロックのモデルを製造し易い点で有利である。
【００４６】
前記麻酔薬の投与量及び投与方法としては、特に制限はなく、該麻酔薬の種類、対象個体の種類、体重、年齢、性別などに応じて、適宜選択することができる。
例えば、ハロセンの場合、気化したハロセンを濃度１体積％〜２体積％で吸引させることが好ましい。
【００４７】
前記麻酔工程は、呼吸を安定させる目的で挿管して人工呼吸器等の酸素乃至大気供給手段から一定量の酸素乃至大気を供給することが好ましい。
前記酸素乃至大気の供給量としては、特に制限はなく、対象個体の体重などに応じて適宜選択することができるが、１０ｍＬ／ｋｇ〜２０ｍＬ／ｋｇが好ましい。
これらの中でも、ブタの場合は、１０ｍＬ／ｋｇが好ましく、サルの場合は、２０ｍＬ／ｋｇが好ましく、モルモットの場合は、１０ｍＬ／ｋｇが好ましい。
【００４８】
（評価方法）
本発明の評価方法は、ブタ、サル、及びモルモットの少なくともいずれかを用い、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する評価方法である。
【００４９】
前記評価方法では、前記ブタ、前記サル、及び前記モルモットのいずれかを用いてもよく、全てを用いてもよいが、前記ブタ及び前記サルの少なくともいずれかと、前記モルモットとを組み合わせて用いることが、房室ブロックの発現を確実に評価できる点で好ましく、前記ブタ及び前記サルの少なくともいずれかと、前記モルモットとをこの順で用いることが、特に好ましい。
【００５０】
通常、薬物の非臨床試験では、安全性薬理試験において、副作用等を評価し、そこで副作用が認められなかった場合であってもなお、ヒトへの安全性が懸念される場合は、これらを適切に評価するため、フォローアップ試験が行われる。
前記ブタ又は前記サルは、コアバッテリー試験としての１次評価工程に好適に用いられ、前記モルモットは、フォローアップ試験としての２次評価工程に好適に用いられる。
【００５１】
＜１次評価工程＞
前記１次評価工程は、前記ブタ及び前記サルの少なくともいずれかを用いてスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する工程である。前記１次評価工程によれば、第１度房室ブロックの発現のリスクを好適に評価できる。
【００５２】
前記ブタの体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記ブタの種類としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記超小型ミニブタであることが、実験動物として取扱い易い点で好ましい。
【００５３】
前記サルの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００５４】
前記１次評価工程における評価方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、心電図を測定し、電気生理学的パラメータ（ＰＲ間隔、ＡＨ間隔など）の延長の有無を評価する方法などが挙げられる。
【００５５】
＜２次評価工程＞
前記２次評価工程は、前記モルモットを用いてスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する工程である。前記２次評価工程によれば、第１度房室ブロックの発現のリスクに加え、第２度房室ブロック及び第３度房室ブロックの発現のリスクを好適に評価できる。
【００５６】
前記モルモットの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００５７】
前記２次評価工程における評価方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、心電図を測定し、電気生理学的パラメータ（ＰＲ間隔、ＡＨ間隔など）の延長の有無を評価する方法、心電図より第２度房室ブロック及び／又は第３度房室ブロック房室ブロックの発現の有無を評価する方法などが挙げられる。
【００５８】
前記評価方法は、非臨床試験段階で、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を予測するために好適に利用できる。
【００５９】
（房室ブロックモデル）
本発明の房室ブロックモデルは、ブタ、サル、又はモルモットである。前記房室ブロックモデルは、房室ブロックが発現したモデルである。
【００６０】
＜ブタ＞
前記ブタの体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記ブタの種類としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記超小型ミニブタであることが、実験動物として取扱い易い点で好ましい。
【００６１】
＜サル＞
前記サルの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６２】
＜モルモット＞
前記モルモットの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６３】
前記房室ブロックモデルは、前記ブタ、前記サル、又は前記モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与して得られたものであることが好ましい。
【００６４】
＜用途＞
前記房室ブロックモデルは、房室ブロックの病態解析などに好適に利用し得る。
【００６５】
（房室ブロックモデルの製造方法）
本発明の房室ブロックモデルの製造方法は、投与工程を少なくとも含み、必要に応じて、麻酔工程などのその他の工程を含む。
【００６６】
＜投与工程＞
前記投与工程は、前記ブタ、前記サル、又は前記モルモットにスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を投与する工程である。
【００６７】
前記ブタの体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
前記ブタの種類としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、前記超小型ミニブタであることが、実験動物として取扱い易い点で好ましい。
【００６８】
前記サルの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００６９】
前記モルモットの種類、体重、年齢、性別などとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
【００７０】
前記免疫調節剤としては、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とするものであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法の投与工程で挙げたものなどが挙げられる。
【００７１】
前記免疫調節剤を投与する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、静脈内投与が好ましい。
【００７２】
前記免疫調節剤の投与量としては、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。前記投与量が、０．１ｍｇ／ｋｇ未満であると、房室ブロックが発現しないことがある。
【００７３】
＜麻酔工程＞
前記麻酔工程は、ブタ、サル、又はモルモットに、麻酔する工程である。前記麻酔工程は、前記投与工程の前に行われることが好ましい。前記麻酔工程は、前記ブタ、サル、又はモルモットに房室ブロックを発現させる方法の麻酔工程と同様の方法で行うことができる。
【実施例】
【００７４】
以下に本発明の実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。
【００７５】
（実施例１）
超小型ミニブタ（ｍｉｃｒｏｍｉｎｉｐｉｇ、体重：約１０ｋｇ、雄、富士マイクラ株式会社より入手）に１００体積％酸素と共に、気化した４体積％ハロセン（武田薬品工業株式会社製）を吸引させ麻酔を導入した。気管カニューレを挿入後は、人工呼吸器を用いて１００体積％酸素と共に、気化した１体積％ハロセンで換気した。このとき、前記実験動物用人工呼吸器は、１回換気量１０ｍＬ／ｋｇ、呼吸速度２０ストローク／分間に設定した。次いで、左大腿静脈に薬物投与のためのカニューレを挿入した。ＥＣＧ標準四肢第ＩＩ誘導を連続記録した。
【００７６】
（試験例１）
−ベースコントロール評価−
実施例１の超小型ミニブタ（ｎ＝２）において、薬物を投与する前に、心電図の測定を行った。
【００７７】
−薬物の投与−
フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０、シグマアルドリッチ製）を、０．１ｍｇ／ｍＬの濃度になるように生理食塩水（株式会社大塚製薬工場製）に溶解した。
前記ベースコントロール評価の後、薬物投与のためのカニューレを通して、前記ＦＴＹ７２０の溶解液を、実施例１の超小型ミニブタ（ｎ＝２）に０．１ｍｇ／ｋｇの用量で１０分間静脈内投与した。前記ＦＴＹ７２０の溶解液の投与開始から６０分間、心電図の測定を行った。
なお、ＦＴＹ７２０の日本における臨床推奨用量は、０．５ｍｇ（経口投与／個体／日）であることから、０．１ｍｇ／ｋｇの投与量は、十分量である。
【００７８】
＜結果＞
図１Ａに、ベースコントロール評価（薬物投与前）の心電図のトレースの一例を示す。また、図１Ｂに、ＦＴＹ７２０の投与開始から１０分間後の心電図のトレースの一例を、図１Ｃに、ＦＴＹ７２０の投与開始から６０分間後の心電図のトレースの一例を示す。なお、図１Ａ〜図１Ｃより、心拍数（ＨＲ）、ＰＲ間隔、ＱＴ間隔、及びＲＲ間隔は、下記表１のとおりであった。なお、＃１及び＃２は、各個体を示す。
【００７９】
【表１】
2014060985.tif 000002
【００８０】
図１Ａ〜図１Ｃ及び表１の結果より、ＦＴＹ７２０の投与１０分間後において、ＱＴ間隔の延長が認められた。ＦＴＹ７２０の投与６０分間後では、ＰＲ間隔の延長も認められた。
これらの結果より、超小型ミニブタは、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤における房室ブロックの発現、特に、第１度房室ブロックの発現を評価するためのモデルとして使用し得ることがわかった。
【００８１】
（実施例２）
サル（カニクイザル、体重：約３ｋｇ、雄、中国産、国内ブリーダーを介して購入）にチオペンタールナトリウム（田辺三菱製薬株式会社製）を２５ｍｇ/ｋｇで静脈内投与して麻酔を導入した。気管カニューレを挿入後は、人工呼吸器を用いて１００体積％酸素と共に、気化した１体積％ハロセンで換気した。このとき、前記実験動物用人工呼吸器は、１回換気量２０ｍＬ／ｋｇ、呼吸速度１５ストローク／分間に設定した。次いで、左大腿静脈に薬物投与のためのカニューレを挿入した。ＥＣＧ標準四肢第ＩＩ誘導を連続記録した。
【００８２】
（試験例２）
−ベースコントロール評価−
実施例２のサル（ｎ＝２）において、薬物を投与する前に、心電図の測定を行った。
【００８３】
−薬物の投与−
フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０、シグマアルドリッチ製）を、０．１ｍｇ／ｍＬの濃度になるように生理食塩水（株式会社大塚製薬工場製）に溶解した。
前記ベースコントロール評価の後、薬物投与のためのカニューレを通して、前記ＦＴＹ７２０の溶解液を、実施例２のサル（ｎ＝２）に０．１ｍｇ／ｋｇの用量で１０分間静脈内投与した。前記ＦＴＹ７２０の溶解液の投与開始から６０分間、心電図の測定を行った。
【００８４】
＜結果＞
図２Ａに、ベースコントロール評価（薬物投与前）の心電図のトレースの一例を示す。また、図２Ｂに、ＦＴＹ７２０の投与開始から５０分間後の心電図のトレースの一例を示す。なお、図２Ａ及び図２Ｂより、心拍数（ＨＲ）及びＰＲ間隔は、下記表２のとおりであった。なお、＃１及び＃２は、各個体を示す。
【００８５】
【表２】
2014060985.tif 000003
【００８６】
図２Ａ及び図２Ｂ及び表２の結果より、５０分間後において、ＰＲ間隔の延長が認められた。
これらの結果より、サルは、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤における房室ブロックの発現、特に、第１度房室ブロックの発現を評価するためのモデルとして使用し得ることがわかった。
【００８７】
（実施例３）
モルモット（Ｈａｒｔｌｅｙ、体重：４２０ｇ〜６５０ｇ、雄、日本エスエルシー株式会社より入手）にチオペンタールナトリウム（田辺三菱製薬株式会社製）を５０ｍｇ／ｋｇで腹腔内投与して麻酔した。次いで、このモルモットに気管カニューレを挿入した後、加温パッドを用いて体温を３７℃に維持しながら、実験動物用人工呼吸器（ＳＮ−４８０−７；株式会社シナノ製作所製）を用いて、１００体積％酸素と共に、気化した１体積％ハロセン（武田薬品工業株式会社製）を吸引させた。このとき、前記実験動物用人工呼吸器は、１回換気量１０ｍＬ／ｋｇ、呼吸速度６０ストローク／分間に設定した。次いで、左頸静脈に薬物投与のためのカニューレを挿入した。また、左頸静脈を通して大動脈に、血圧を監視するためのヘパリン化カテーテルを挿入した。ＥＣＧ標準四肢第ＩＩ誘導を連続記録した。
【００８８】
（試験例３）
−ベースコントロール評価−
実施例３のモルモット（ｎ＝１２）において、薬物又は溶媒を投与する前に、心電図の測定を行った。
【００８９】
−薬物低用量投与群−
ＦＴＹ７２０（シグマアルドリッチ製）を、０．０３ｍｇ／ｍＬの濃度になるように生理食塩水（株式会社大塚製薬工場製）に溶解した。
前記ベースコントロール評価の後、薬物投与のためのカニューレを通して、前記ＦＴＹ７２０の溶解液を、実施例３のモルモット（ｎ＝４）に０．０１ｍｇ／ｋｇの用量で１０分間静脈内投与した。前記ＦＴＹ７２０の溶解液の投与開始後、５分間、１０間、１５分間、２０分間、３０分間、４５分間、又は６０分間で下記評価方法に示す各パラメータについて評価した。
【００９０】
−薬物高用量投与群−
ＦＴＹ７２０（シグマアルドリッチ製）を、０．３ｍｇ／ｍＬの濃度になるように生理食塩水（株式会社大塚製薬工場製）に溶解した。
前記ベースコントロール評価の後、薬物投与のためのカニューレを通して、前記ＦＴＹ７２０の溶解液を、実施例３のモルモット（ｎ＝４）に０．１ｍｇ／ｋｇの用量で１０分間静脈内投与した。前記ＦＴＹ７２０の溶解液の投与開始後、５分間、１０間、１５分間、２０分間、３０分間、４５分間、又は６０分間で下記評価方法に示す各パラメータについて評価した。
【００９１】
−溶媒投与群−
前記ベースコントロール評価の後、薬物投与のためのカニューレを通して、ＦＴＹ７２０を含まない生理食塩水を、実施例３のモルモットに０．３３ｍＬ／ｋｇの用量で１０分間静脈内投与した。前記生理食塩水の投与開始後、５分間、１０間、１５分間、２０分間、３０分間、４５分間、又は６０分間で下記評価方法に示す各パラメータについて評価した。
【００９２】
＜評価方法＞
大動脈圧及び心電図を、ポリグラフシステム（ＲＭ−６０００、日本光電株式会社製）を用いて監視し、リアルタイムでの完全自動分析システム（ＷｉｎＶＡＳ  ３版  １．１Ｒ０３；株式会社フィジオテック製）で分析した。
【００９３】
心電図の各パラメータの測定は、それぞれ３回行い、その平均値を算出した。心房拍動数（Ａｔｒｉａｌ  ｒａｔｅ）は、心電図のＰＰ間隔より算出した。また、心室拍動数（Ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｒａｔｅ）は、心電図のＲＲ間隔より算出した。
【００９４】
＜結果＞
図３Ａに、ベースコントロール評価（薬物投与前）の心電図（ＥＣＧ）、及び大動脈圧（ＡｏＰ）のトレースの一例を、図３Ｂに、ＦＴＹ７２０高用量投与開始から４５分間後の心電図（ＥＣＧ）、及び大動脈圧（ＡｏＰ）のトレースの一例を示す。
図３Ａより、薬物投与前の心電図では、Ｐ波とＲ波が対応しており、正常なＰＲ間隔を示していた。一方、図３Ｂより、高用量投与開始から４５分間後の心電図では、Ｐ波とＲ波が対応していなかった。即ち、ＦＴＹ７２０高用量投与群では、心房の収縮と心室の収縮とが相互に全く無関係に独自のリズムで収縮していることが確認された。
【００９５】
図４Ａに平均動脈圧（ＭＢＰ）、図４Ｂに心房拍動数（Ａｔｒｉａｌ  ｒａｔｅ）、図４Ｃに心室拍動数（Ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ  ｒａｔｅ）、図４Ｄに房室ブロック（ＡＶ  Ｂｌｏｃｋ）の発現の有無及び種類、図４ＥにＰＲ間隔、ＱＲＳ幅、及びＱＴ間隔の結果を示す。
なお、図４Ａ〜図４Ｅにおいて、測定値は、平均値±ＳＥ（ｎ＝４）で表す。各パラメータ内の差異は、１要因の反復測定分散分析（ＡＮＯＶＡ）で評価した。ｐ＜０．０５を統計学的に有意と判断した。図４Ａ〜図４Ｃ及び図４Ｅにおいて、○、□、又は△は、ベースコントロール評価（Ｃ）の値に対して、有意差がないことを示し、●、■、又は▲は、ベースコントロール評価（Ｃ）の値に対して、有意差を有することを示す。
また、図４Ｄにおいて、○は、房室ブロックが発現していない又は第１度房室ブロックを発現したことを示し、□は、第２度房室ブロック（Ｗｅｎｃｋｅｂａｃｈ型）が発現したことを示し、△は、高度房室ブロックが発現したことを示し、×は、第３度房室ブロック（完全房室ブロック）が発現したことを示し、＃１〜４は、各個体を示す。
【００９６】
図４Ａ〜図４Ｅの結果より、溶媒投与群における生理食塩水投与前後の各時点において有意な変化を認めなかったので、０．３３ｍｌ／ｋｇの生理食塩水は、本評価系に影響を及ぼさないことがわかった。また、ＦＴＹ７２０低用量投与群及びＦＴＹ７２０高用量投与群におけるＦＴＹ７２０の投与前における各パラメータの値と、ベースコントロール評価（Ｃ）における各パラメータの値との間にも統計的に有意な差は認められなかった。
【００９７】
ＦＴＹ７２０の投与前のベースコントロール評価（Ｃ）における血圧及び心房拍動数は、下記表３に示す値であった。図４Ａ及び図４Ｂに示すとおり、ＦＴＹ７２０の投与開始から６０分間まで、血圧及び心房拍動数に有意な変化は認められなかった。
【００９８】
【表３】
2014060985.tif 000004
【００９９】
図４Ｃに示すとおり、ＦＴＹ７２０の投与開始後における心室拍動数は、溶媒投与群、ＦＴＹ７２０低用量投与群、及びＦＴＹ７２０高用量投与群において、同程度であった。
投与開始から６０分間、ＦＴＹ７２０低用量投与群では、心室拍動数に有意な変化は認められなかった。一方、ＦＴＹ７２０高用量投与群では、完全房室伝導ブロックが発現した２０分間〜６０分間で、心室拍動数の有意な減少が認められた。
【０１００】
図４Ｄに示すとおり、ＦＴＹ７２０高用量投与群では、４個体のうち、３個体に完全房室ブロックが発現し、１個体にＷｅｎｃｋｅｂａｃｈ型の房室ブロックが発現した。
【０１０１】
図４Ｅに示すとおり、ＦＴＹ７２０の投与前のベースコントロール評価（Ｃ）におけるＰＲ間隔、ＱＲＳ幅、及びＱＴ間隔は、下記表４に示す値であった。
【０１０２】
【表４】
2014060985.tif 000005
【０１０３】
図４Ｅの結果より、ＦＴＹ７２０低用量投与群では、投与開始から６０分間において、いずれの電気生理学的パラメータにも有意な変化は認められなかった。一方、ＦＴＹ７２０高用量投与群では、ＱＲＳ幅には、有意な変化は認められなかったが、ＰＲ間隔が、房室ブロックの発現前に延長した。また、ＱＴ間隔が４５分間〜６０分間において延長した。
【０１０４】
これらの結果より、モルモットは、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤における房室ブロックの発現、特に、完全房室ブロックの発現を評価するためのモデルとして使用し得ることがわかった。
【０１０５】
（比較例１）
イヌ（体重：１０ｋｇ、雄、日本農産工業株式会社より入手）にチオペンタールナトリウム（田辺三菱製薬株式会社製）３０ｍｇ／ｋｇを静脈内投与することで麻酔を導入した。気管カニューレを挿入後は、人工呼吸器を用いて１００体積％酸素と共に、気化した１体積％ハロセンで換気した。このとき、前記実験動物用人工呼吸器は、１回換気量２０ｍＬ／ｋｇ、呼吸速度１５ストローク／分間に設定した。次いで、左大腿静脈に薬物投与のためのカニューレを挿入した。ＥＣＧ標準四肢第ＩＩ誘導を連続記録した。
【０１０６】
（比較試験例１）
−ベースコントロール評価−
比較例１のイヌ（ｎ＝４）において、薬物を投与する前に、心電図の測定を行った。
【０１０７】
−薬物低用量投与群−
フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０、シグマアルドリッチ製）を、０．３ｍｇ／ｍＬの濃度になるように１質量％乳酸溶液（シグマアルドリッチ製）に溶解した。
前記ベースコントロール評価の後、薬物投与のためのカニューレを通して、前記ＦＴＹ７２０の溶解液を、比較例１のイヌ（ｎ＝４）に０．３ｍｇ／ｋｇの用量で１０分間静脈内投与した。前記ＦＴＹ７２０の溶解液の投与開始から３０分間、心電図の測定を行った。
【０１０８】
−薬物高用量投与群−
フィンゴリモド（ＦＴＹ７２０、シグマアルドリッチ製）を、３ｍｇ／ｍＬの濃度になるように１質量％乳酸溶液（シグマアルドリッチ製）に溶解した。
前記ベースコントロール評価の後、薬物投与のためのカニューレを通して、前記ＦＴＹ７２０の溶解液を、比較例１のイヌ（ｎ＝４）に３ｍｇ／ｋｇの用量で１０分間静脈内投与した。前記ＦＴＹ７２０の溶解液の投与開始から３０分間、心電図の測定を行った。
【０１０９】
＜結果＞
ＦＴＹ７２０低用量は心拍数（ＨＲ）及びＰＲ間隔に有意な変化を示さなかった。ＦＴＹ７２０高用量はＨＲを有意に増加させたが、ＰＲ間隔には変化を認めなかった。
【０１１０】
これらの結果より、イヌは、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤における房室ブロックを評価するためのモデルとしては使用できず、試験例１〜３に示すように、ブタ、サル、又はモルモットで特異的に房室ブロックを評価することができることがわかった。
【０１１１】
本発明の態様としては、例えば、以下のものなどが挙げられる。
＜１＞  ブタであって、房室ブロックモデルの作製に用いられることを特徴とする房室ブロックモデル用ブタである。
＜２＞  ハロセンで麻酔されたブタである前記＜１＞に記載の房室ブロックモデル用ブタである。
＜３＞  ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とするブタに房室ブロックを発現させる方法である。
＜４＞  ブタであることを特徴とする房室ブロックモデルである。
＜５＞  ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与して得られる前記＜４＞に記載の房室ブロックモデルである。
＜６＞  ブタに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とする房室ブロックモデルの製造方法である。
＜７＞  ハロセンで麻酔する工程を更に含む前記＜６＞に記載の房室ブロックモデルの製造方法である。
＜８＞  サルであって、房室ブロックモデルの作製に用いられることを特徴とする房室ブロックモデル用サルである。
＜９＞  ハロセンで麻酔されたサルである前記＜８＞に記載の房室ブロックモデル用サルである。
＜１０＞  サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とするサルに房室ブロックを発現させる方法である。
＜１１＞  サルであることを特徴とする房室ブロックモデルである。
＜１２＞  サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与して得られる前記＜１１＞に記載の房室ブロックモデルである。
＜１３＞  サルに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とする房室ブロックモデルの製造方法である。
＜１４＞  ハロセンで麻酔する工程を更に含む前記＜１３＞に記載の房室ブロックモデルの製造方法である。
＜１５＞  モルモットであって、房室ブロックモデルの作製に用いられることを特徴とする房室ブロックモデル用モルモットである。
＜１６＞  ハロセンで麻酔されたモルモットである前記＜１５＞に記載の房室ブロックモデル用サルである。
＜１７＞  モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とするモルモットに房室ブロックを発現させる方法である。
＜１８＞  モルモットであることを特徴とする房室ブロックモデルである。
＜１９＞  モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与して得られる前記＜１８＞に記載の房室ブロックモデルである。
＜２０＞  モルモットに、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤を少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ投与する工程を含むことを特徴とする房室ブロックモデルの製造方法である。
＜２１＞  ハロセンで麻酔する工程を更に含む前記＜２０＞に記載の房室ブロックモデルの製造方法である。
＜２２＞  ブタ、サル、及びモルモットの少なくともいずれかを用い、スフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価することを特徴とする評価方法である。
＜２３＞  ブタ及びサルの少なくともいずれかを用いてスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する１次評価工程と、モルモットを用いてスフィンゴシン−１−リン酸受容体を標的とする免疫調節剤による房室ブロックの発現を評価する２次評価工程と、を含む前記＜２２＞に記載の評価方法である。
【産業上の利用可能性】
【０１１２】
本発明の房室ブロックモデル用ブタ、房室ブロックモデル用サル、及び房室ブロックモデル用モルモットは、非臨床試験の段階における、薬物による房室ブロックの発現の予測に好適に利用可能である。
【図１Ａ】
2014060985.tif 000006
【図１Ｂ】
2014060985.tif 000007
【図１Ｃ】
2014060985.tif 000008
【図２Ａ】
2014060985.tif 000009
【図２Ｂ】
2014060985.tif 000010
【図３Ａ】
2014060985.tif 000011
【図３Ｂ】
2014060985.tif 000012
【図４Ａ】
2014060985.tif 000013
【図４Ｂ】
2014060985.tif 000014
【図４Ｃ】
2014060985.tif 000015
【図４Ｄ】
2014060985.tif 000016
【図４Ｅ】
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