(57)【要約】【課題】従来不明確であったナチュラルチーズの熟成品質分析方法を提供することを目的とする。【解決手段】チーズの熟成品質を分析する方法は、熟成品質既知のチーズを前処理して分析サンプルを得る前処理工程；該分析サンプルを機器分析に供して、機器分析データを得る機器分析工程；複数のチーズについての機器分析データを数値データに変換して多変量解析を行い、多変量解析を行った結果に基づいて熟成条件が成分プロファイルに及ぼす影響を解析し、解析した結果に基づいて該チーズの熟成条件を決定する熟成品質分析工程；を有する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
チーズの熟成品質を分析する方法であって、
熟成品質既知のチーズを前処理して分析サンプルを得る前処理工程；
該分析サンプルを機器分析に供して、機器分析データを得る機器分析工程；
複数の前記チーズについての機器分析データを数値データに変換して多変量解析を行い、前記多変量解析を行った結果に基づいて熟成条件が成分プロファイルに及ぼす影響を解析し、前記解析した結果に基づいて該チーズの熟成条件を決定する熟成条件決定工程；
を有する、チーズの熟成品質分析方法。
【請求項２】
チーズの熟成品質を分析する方法であって、
熟成品質既知のチーズを前処理して分析サンプルを得る前処理工程；
該分析サンプルを機器分析に供して、機器分析データを得る機器分析工程；
複数の前記チーズについての機器分析データと該チーズのそれぞれの熟成品質を表す熟成品質データとをおのおの数値データに変換して多変量解析を行い、前記多変量解析を行った解析結果に基づいて、該チーズにおける熟成の指標となる熟成マーカー化合物を抽出し決定する熟成品質分析工程；
を有する、チーズの熟成品質分析方法。
【請求項３】
前記多変量解析が、潜在的構造に対する射影の直交部分最小自乗によるＯＰＬＳ回帰分析である、
請求項１または請求項２に記載のチーズの熟成品質分析方法。
【請求項４】
前記多変量解析が、潜在的構造に対する射影によるＰＬＳ回帰分析である、
請求項１から請求項３のいずれか１項に記載のチーズの熟成品質分析方法。
【請求項５】
前記機器分析が、ガスクロマトグラフィーと質量分析との組み合わせである、
請求項１から請求項４のいずれか１項に記載のチーズの熟成品質分析方法。
【請求項６】
前記前処理が、前記チーズから親水性化合物を抽出して抽出物を得る工程を含む、
請求項１から請求項５のいずれか１項に記載のチーズの熟成品質分析方法。
【請求項７】
前記機器分析が、ガスクロマトグラフィーと質量分析との組み合わせであり、そして前記前処理がさらに前記抽出物をメトキシ化およびシリル化する工程を含む、
請求項６に記載のチーズの熟成品質分析方法。
【請求項８】
前記前処理が、前記チーズを粉砕して粉末を得る工程および該粉末を溶媒でペースト状にする工程を含む、
請求項１から請求項７のいずれか１項に記載のチーズの熟成品質分析方法。
【請求項９】
前記チーズは、チェダーチーズであり、
前記分析した結果の中で、前記チェダーチーズのマーカー化合物としてプロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンのデータに対する熟成への影響が解析される、
請求項７に記載のチーズの熟成品質分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、チーズの熟成品質分析方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
チーズは、世界中で嗜好されている食品であり、牛乳など乳から製造される。チーズは、乳等省令によって製造方法に基づいて、ナチュラルチーズ、プロセスチーズ、およびチーズフードの３つの種類に分類される。このうちナチュラルチーズは、直接食するのみならず、プロセスチーズの原料としても重要である。ナチュラルチーズは、産地、乳酸菌スターター、製法、熟成期間などにより様々なバリエーションが存在し、風味も様々である。
【０００３】
現在、ナチュラルチーズの熟成品質は、熟練者によるチーズの外観、香り、色、および味に基づく官能検査により決定されている。これらの技能を獲得するには経験年数がかかる。また、場合により客観性や再現性が不透明であるという欠点がある。チーズ産業においては、チーズの複雑な成分とそのダイナミックな変化を包括的且つ科学的に捉えることが未だ困難であるため、品質や製造の管理に際しては長年の経験に基づく職人的な技能が現在も必要とされている。
そのため、製造工程管理や製品熟成品質管理のためには、簡便な機械化された熟成品質予測方法の必要性が強く望まれている。そのような状況下、これまでナチュラルチーズの熟成期間中における特定の成分の変化については数多く研究されてきており、熟成中に起こる生化学的な現象に関わる化合物として、蛋白質の分解に着目した研究（非特許文献１）や脂肪由来の揮発性香気成分に着目した研究（非特許文献２）などを例示することができる。
【０００４】
近年、機器分析法とコンピュータ駆動パターン認識技術とを組み合わせて、品質制御または特徴づけを行う方法が提案されている。
例えば、下記特許文献１には、緑茶の機器分析により得られる分析結果を、数値データに変換して多変量解析し、得られた解析結果から緑茶の品質（ランキング）を予測する方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−１４７００号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄａｉｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ、第１０巻、  ２４９−２５３ページ、２０００年
【非特許文献２】Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄａｉｒｙ  Ｊｏｕｒｎａｌ、第１５巻、７３３−７４０ページ、２００５年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ナチュラルチーズの味は、原料乳に含まれる蛋白質、脂肪、糖などが酵素や乳酸菌により分解された代謝産物であるアミノ酸、ペプチド、脂肪酸、有機酸などに主に起因する。また、生成される揮発性化合物は、主としてチーズの香りの差に寄与する。
原料乳の産地、乳酸菌スターター、製法、熟成期間などにより、中間経路代謝物の見かけの定常状態の量および／若しくは最終代謝物の末端蓄積が変動し、ナチュラルチーズの味に影響を与える。したがって、チーズ中の代謝物や分解物を、空間的および時間的の両方でモニターすることは、熟成品質の評価に重要である。
【０００８】
しかしながら、従来のチーズの機器分析は、アミノ酸や脂肪酸など特定の群の化合物に焦点が当てられていた。しかし、チーズの特徴づけは、単一の代謝物に由来するのではなく組み合わせに由来し得るため、従来の方法では熟成に関する品質分析や熟成条件を決定することが難しい。
【０００９】
上述の課題を鑑み、従来不明確であったナチュラルチーズの熟成品質分析方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
上述の課題を解決するために、本発明は、チーズの熟成品質を分析する方法であって、熟成品質既知のチーズを前処理して分析サンプルを得る前処理工程；該分析サンプルを機器分析に供して、機器分析データを得る機器分析工程；複数の前記チーズについての機器分析データを数値データに変換して多変量解析を行い、前記多変量解析を行った結果に基づいて熟成条件が成分プロファイルに及ぼす影響を解析し、前記解析した結果に基づいて該チーズの熟成条件を決定する熟成条件決定工程；を有する、チーズの熟成品質分析方法を提供する。
上述の課題を解決するために、本発明は、チーズの熟成品質を分析する方法であって、熟成品質既知のチーズを前処理して分析サンプルを得る前処理工程；該分析サンプルを機器分析に供して、機器分析データを得る機器分析工程；複数の前記チーズについての機器分析データと該チーズのそれぞれの熟成品質を表す熟成品質データとをおのおの数値データに変換して多変量解析を行い、前記多変量解析を行った解析結果に基づいて、該チーズにおける熟成の指標となる熟成マーカー化合物を抽出し決定する熟成品質分析工程；を有する、チーズの熟成品質分析方法を提供する。
【００１１】
また、本発明の一態様に係るチーズの熟成品質を分析する方法であって、前記多変量解析が、潜在的構造に対する射影の直交部分最小自乗によるＯＰＬＳ回帰分析であることが好ましい。
また、本発明の一態様に係るチーズの熟成品質を分析する方法であって、前記多変量解析が、潜在的構造に対する射影によるＰＬＳ回帰分析であることが好ましい。
【００１２】
また、本発明の一態様に係るチーズの熟成品質を分析する方法であって、前記機器分析が、ガスクロマトグラフィーと質量分析との組み合わせであることが好ましい。
また、本発明の一態様に係るチーズの熟成品質を分析する方法であって、前記前処理が、前記チーズから親水性化合物を抽出して抽出物を得る工程を含むことが好ましい。
【００１３】
また、本発明の一態様に係るチーズの熟成品質を分析する方法であって、前記機器分析が、ガスクロマトグラフィーと質量分析との組み合わせであり、そして前記前処理がさらに前記抽出物をメトキシ化およびシリル化する工程を含むことが好ましい。
また、本発明の一態様に係るチーズの熟成品質を分析する方法であって、前記前処理が、前記チーズを粉砕して粉末を得る工程および該粉末を溶媒でペースト状にする工程を含むことが好ましい。
【００１４】
また、本発明の一態様に係るチーズの熟成品質を分析する方法であって、前記チーズは、チェダーチーズであり、前記分析した結果の中で、前記チェダーチーズのマーカー化合物としてプロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンのデータに対する熟成への影響が解析されることが好ましい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明のチーズの熟成品質分析方法によれば、従来不明確であったナチュラルチーズの熟成品質を、より精度良くかつ簡便な方法で分析することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】第１実施形態に係る熟成品質分析装置のブロック図である。
【図２】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果であって、同じ乳酸菌スターターを用い食塩含量が異なるチーズＡとチーズＢの判別モデルのスコアプロットを示す図である。
【図３】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果であって、同じ乳酸菌スターターを用い食塩含量が異なるチーズＡとチーズＢの判別モデルのＳ−プロットを示す図である。
【図４】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果であって、同じ食塩含量であり乳酸菌スターターが異なるチーズＡとチーズＣの判別モデルのスコアプロットを示す図である。
【図５】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果であって、同じ食塩含量であり乳酸菌スターターが異なるチーズＡとチーズＣの判別モデルのＳ−プロットを示す図である。
【図６】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果から抽出された各化合物の熟成工程中のピーク強度の存在範囲を示す箱ひげ図を示す図である。
【図７】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果から抽出された各化合物の熟成工程中のピーク強度の存在範囲を示す箱ひげ図を示す図である。
【図８】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果から抽出された各化合物の熟成工程中のピーク強度の存在範囲を示す箱ひげ図を示す図である。
【図９】第１実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果から抽出された各化合物の熟成工程中のピーク強度の存在範囲を示す箱ひげ図を示す図である。
【図１０】第１実施形態に係るＰＣＡ解析結果であって、チェダーチーズサンプルの熟成工程サンプルに対してＧＣ／ＭＳ分析を行いＰＣＡを行った結果のスコアプロットを示す図である。
【図１１】第２実施形態に係る熟成品質分析装置のブロック図である。
【図１２】第２実施形態に係るＰＬＳ解析結果であって、機器分析による代謝物プロファイルから予測した官能属性「味の濃さ」のスコアと実際の官能評価パネルによる官能属性「味の濃さ」の実測スコアの関係を示す図である。
【図１３】第２実施形態に係るＰＣＡ解析結果であって、チェダーチーズサンプルの熟成工程サンプルに対してＧＣ／ＭＳ分析を行いＰＣＡを行った結果のローディングプロットを示す図である。
【図１４】第２実施形態に係るＰＬＳおよびＰＣＡの解析によって抽出されたマーカー候補化合物について、熟成期間におけるピーク強度の推移を示す図である。
【図１５】第２実施形態に係るＰＬＳおよびＰＣＡの解析によって抽出されたマーカー候補化合物について、熟成期間におけるピーク強度の推移を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
＜チーズ＞
本発明における熟成品質分析、及び熟成条件決定の対象はチーズであり、好ましくはナチュラルチーズである。本発明におけるチーズは、製造工程中に熟成工程を含むチーズであり、好ましくは熟成工程を経て製造されるナチュラルチーズである。
一般的に熟成タイプのナチュラルチーズの製造方法は、原料である牛乳にスターター乳酸菌およびレンネット(凝乳酵素)を添加して凝乳させ、細切、加温、攪拌、圧搾、加塩などの離漿促進操作を経た後、成型し、加塩するチーズカード製造工程と、その後の熟成工程とからなる。また製造後の流通保管工程中にも熟成は進行し得る。
チーズの熟成は、乳の蛋白質、脂肪、炭水化物などが酵素、微生物などの作用すなわち発酵により腐敗することなく分解し、特殊な風味を帯びることを意味する。したがって、熟成が生じる条件や進行の度合いによってチーズの風味が変化する。本発明における、チーズの熟成品質とは、熟成に伴って変化する風味の状態を意味する。かかる風味の状態は、好ましくは官能評価の結果（官能評価スコア）によって評価される。
本明細書において、チーズの代謝物とはチーズの熟成に伴って生じる成分を意味する。
本発明は、熟成による風味の変化が進行しつつある状態のナチュラルチーズを熟成品質分析の対象とすることが好ましく、熟成工程途中のナチュラルチーズ（製造中間品）を熟成品質分析の対象とすることが好ましい。
【００１８】
本発明において、チーズは、以下で述べる機器分析工程に応じて適切に前処理され、前処理により得られた分析サンプルが種々の機器分析に供される。
【００１９】
［第１実施形態］
＜機器分析工程＞
本実施形態において、機器分析工程とは、分析機器を用いて分析・測定を行う工程をいう。分析の手法としては、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）（例えば、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、超高速液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ））、質量分析（ＭＳ）、赤外分光分析（ＩＲ）（例えば、フーリエ変換赤外分光分析（ＦＴ−ＩＲ））、近赤外分光分析（ＮＩＲ）（例えば、フーリエ変換近赤外分光分析（ＦＴ−ＮＩＲ））、核磁気共鳴分析（ＮＭＲ）（例えば、フーリエ変換核磁気共鳴分析（ＦＴ−ＮＭＲ））などが挙げられる。
ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）の検出器は特に限定されず公知のものを適宜使用できる。例えば、水素炎イオン化検出器（ＦＩＤ）を好適に用いることができる。
また、これらの機器分析の手法は組み合わせてもよく、例えば、ＧＣ／ＭＳ、ＬＣ／ＭＳ（特に、ＨＰＬＣ／ＭＳ、ＵＰＬＣ／ＭＳ）などの組み合わせが挙げられる。
機器分析工程に用いられる装置は、特に限定されず、チーズ中に含まれる代謝物（例えば、アミノ酸、有機酸、糖など）を測定することが可能であればよく、通常用いられている装置が用いられ得る。また、測定条件は、これらの物質の測定に適切なように適宜設定され得る。
特にＧＣ／ＭＳ（ガスクロマトグラフィーと質量分析との組み合わせ）が好ましい。
例えばチーズを抽出して得られる、親水性低分子代謝物を含む抽出物について、あるいはチーズの熱分解物について、ＧＣ／ＭＳにより定量分析を行う。
【００２０】
＜前処理工程＞
本実施形態において、チーズの前処理は、チーズ中の分析対象物質を機器分析に供するに適した形態にするために、用いる機器分析に応じて行われる。前処理としては、乾燥、切断、粉砕、抽出などの処理が挙げられる。例えば、粉砕については、ブレンダー、ボールミルなどの適切な器具を用いて行われ得る。また、抽出については、水、有機溶媒、またはこれらの溶媒の混合液を用いて行われ得る。抽出に使用され得る有機溶媒としては、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、アセトン、クロロホルムなどが挙げられる。これらの単位操作を単独でまたは組み合わせて適切な前処理条件を設定する。
本実施形態では、前処理が、チーズから親水性化合物を抽出して抽出物を得る工程を含むことが好ましい。また、本実施形態では、前処理が、チーズを粉砕して粉末を得る工程および該粉末を溶媒でペースト状にする工程を含むことが好ましい。
【００２１】
また、機器分析としてＧＣを行う場合、好ましくは、前処理は、チーズからの抽出物をシリル化およびメトキシ化する工程を含む。シリル化およびメトキシ化は、当業者が通常用いるＧＣ用のシリル化試薬およびメトキシ化試薬（誘導体化剤）を、それぞれ用いて行われ得る。
あるいは、前処理として、ナチュラルチーズを、例えば、粉砕した後、熱分解処理のみ施したものも、分析対象試料となり得る。この場合、熱分解物を、抽出することなく直接ＧＣに導入することができる。熱分解は、市販の熱分解装置を用いて行うことができる。
【００２２】
＜熟成品質分析工程；多変量解析＞
本実施形態において、前処理が施されたチーズサンプル（分析サンプル）は、機器分析に供され、分析結果が得られる。得られた分析結果は、ピーク情報であり得る。このピーク情報をアライメントおよびベースライン補正などに付し、数値データに変換して多変量解析を行う。分析により得られる結果（変数）としては、保持時間、波長（若しくは波数）、ならびにシグナル強度（若しくはイオン強度）、吸光度などのスペクトルデータが挙げられる。さらに、変数としては、ナチュラルチーズサンプルの官能評価が挙げられる。
【００２３】
多変量解析としては、機器分析データに基づく二対のチーズサンプルの化合物レベルでの比較の解析に、特にケモメトリックス(ｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｓ；計量化学)において通常用いられる解析ツールが採用される。
例えば、ＰＬＳ（潜在的構造に対する射影；Ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｌａｔｅｎｔ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）回帰分析、ＯＰＬＳ（潜在的構造に対する射影の直交部分最小自乗；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｐａｒｔｉａｌ  ｌｅａｓｔ  ｓｑｕａｒｅ  ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ  ｔｏ  ｌａｔｅｎｔ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）回帰分析などの種々の多変量ツールが挙げられる。
【００２４】
本実施形態において好適に採用されるＰＬＳ回帰分析およびＯＰＬＳ回帰分析は、変数（例えば、波数、波長）間に相関を有するスペクトルデータからの検量線作成に有効な手法である。通常、変数間に相関があると、用いる変数の組み合わせによっては回帰精度が著しく低下するが、これを避けるためにＰＬＳ回帰分析では、変数を互いに無相関な変数（潜在変数）に変換し、この潜在変数を用いて回帰を行う。すなわち、ＰＬＳ回帰分析およびＯＰＬＳ回帰分析とはデータの変数を直交変換し、その新たな変数を用いて（重）回帰分析を行う解析手法である。
【００２５】
＜熟成品質分析工程；熟成条件決定＞
本実施形態では、機器分析データに対してＰＣＡ（主成分分析；ｐｒｉｎｃｉｐａｌ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓ）に代表される情報集約手法で新たな情報軸（主成分軸）を作成し、成分プロファイルの相違をスコアプロット上の距離により視覚化する。ＰＬＳ回帰分析若しくはＯＰＬＳ回帰分析を用いて、異なる原料や熟成温度および／または熟成期間の２群間の関係；例えば、チーズの代謝物とその熟成品質との間の関係、が確認できる。必要に応じて、スペクトルフィルタリング法、例えば、妨害成分を取り除くための直交シグナル補正（ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ  ｓｉｇｎａｌ  ｃｏｒｒｅｃｔｉｏｎ：ＯＳＣ）と組み合わせて多変量解析を行うようにしてもよい。また、多変量解析は、得られた全データではなく、熟成品質予測に重要な一定の範囲のデータを選択して行ってもよい。なお、これらの解析ツールは、ソフトウエアとして多数市販されている任意のものを用いるようにしてもよい。
【００２６】
本実施形態における多変量解析、及び熟成品質分析工程は、熟成品質分析装置１を用いて行われる。図１は、本実施形態に係る熟成品質分析装置１のブロック図である。図１に示すように、熟成品質分析装置１は、処理部１１、記憶部１２、解析部１３、および熟成条件決定部１４を備える。
【００２７】
処理部１１は、分析装置が出力した機器分析データを、記憶部１２に記憶させる。記憶部１２には、分析装置により分析された機器分析データが記憶される。
解析部１３は、記憶部１２に記憶されている機器分析データを数値データに変換し、変換した数値データを用いて多変量解析を行う。解析部１３は、ＰＬＳ回帰分析若しくはＯＰＬＳ回帰分析等を用いて判別分析を行う。また、解析部１３は、ＰＣＡ等により成分プロファイルの相違を解析する。
熟成条件決定部１４は、解析部１３により多変量解析された解析結果に基づいて、熟成条件決定工程を行う。なお、熟成条件決定部１４は、不図示の入力部がユーザにより入力された設定を検出し、検出した設定に応じて熟成条件を決定するようにしてもよい。ユーザにより入力される設定は、例えば、食塩濃度を示す値、乳酸菌スターターの種類を示す情報等である。
【００２８】
以下に、複数の熟成品質が既知のナチュラルチーズサンプルから親水性低分子代謝物を抽出して、あるいはナチュラルチーズの熱分解物についてＧＣ／ＭＳにより定量解析を行う場合の各機能部が行う処理について説明する。
【００２９】
解析部１３は、機器分析データであるＧＣ／ＭＳクロマトグラムから保持時間インデックスと質量分析シグナル強度を抽出し、抽出した保持時間インデックスと質量分析シグナル強度から、ピークごとの強度に関するマトリクスデータを作成する。なお、この際、質量分析によって、ピークの具体的な化合物名を同定することも可能である。
次に、解析部１３は、作成したマトリクスデータに対して、回帰分析による判別分析法と情報集約法とによる２つの多変量解析を実施する。次に、解析部１３は、チーズサンプルの種類を目的変数、ＧＣ／ＭＳピーク強度データを説明変数として、ＰＬＳ回帰分析もしくはＯＰＬＳ回帰分析により判別モデルを構築する。次に、解析部１３は、当該判別モデルを用い、判別モデル構築において判別に寄与する重要な代謝物をＳ−プロットを用いて抽出する。次に、解析部１３は、Ｓ−プロットによって抽出された化合物によって、２種類のチーズ間における熟成工程中の変動の様子を、箱ひげ図により可視化する。なお、本実施形態では、ＰＬＳ回帰分析による判別分析をＰＬＳ判別分析ともいい、ＯＰＬＳ回帰分析による判別分析をＯＰＬＳ判別分析ともいう。
【００３０】
ここで、Ｓ−プロットについて説明する。Ｓ−プロットでは、横軸を（Ｃｏｖ（ｔ，Ｘ））として絶対値の大きな化合物が判別に寄与が大きいこと、縦軸を（Ｃｏｒｒ（ｔ，Ｘ））として絶対値の大きな化合物が信頼区間が狭く信頼性が大きいことをそれぞれ意味する。本実施形態では、Ｓプロットにおける縦軸（Ｃｏｒｒ（ｔ，Ｘ））は、−１から１までに規格化する。そして、本実施形態では、縦軸（Ｃｏｒｒ（ｔ，Ｘ））については、例えば暫定的にＣｏｒｒ（ｔ，Ｘ）＞｜０．５｜（１９  Ｌｌｏｒａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０）を閾値とし、また横軸（Ｃｏｖ（ｔ，Ｘ））についてはＣｏｖ（ｔ，Ｘ）＞｜０．１５｜を閾値とする。本実施形態によれば、これらの閾値を満たす化合物をリストアップすることで、２種類のチーズ間の違い、すなわち条件を変更した場合に、変更条件が成分プロファイルに及ぼす影響を詳細に把握することができる。なお、これらの閾値は、チーズに応じて、決定するようにしてもよい。
【００３１】
次に、熟成条件決定部１４は、ＰＣＡによってＧＣ／ＭＳピーク強度データを集約する。次に、熟成条件決定部１４は、ＰＣＡのスコアプロットによって熟成経時サンプルのスコア位置から熟成の進行する方向を決定する。次に、熟成条件決定部１４は、条件が異なる場合のサンプルの位置間の距離を調べることによって、近似した成分プロファイルを得るための熟成条件を決定する。ここで、熟成条件とは、例えば熟成温度、熟成期間、食塩濃度、乳酸菌スターターの種類等である。
【００３２】
＜実施例＞
以下に実施例を用いて本実施形態をさらに詳しく説明するが、本実施形態はこれら実施例に限定されるものではない。
＜例１：ＧＣ／ＭＳ用の分析サンプルの調製（前処理工程）＞
３種類のチェダーチーズを常法により作成した。これら３種類のチーズサンプルを、以下、それぞれチーズＡ、Ｂ、Ｃという。チーズＡ、Ｂ、Ｃは、同様の原料乳を用いて同じ製造場所で製造した。これらのサンプルの相違点は、チーズＡとＢは、同一の乳酸菌スターターを使用しているが、チーズＡは有塩タイプ、チーズＢは無塩タイプである。また、チーズＣは有塩タイプであるが、チーズＡ及びＢとは異なる乳酸菌スターターを使用した。チーズＡ、Ｂ、Ｃそれぞれについて、熟成前のサンプル１検体と、熟成温度と熟成期間の異なる熟成サンプル１２検体の計１３検体を採取した。熟成条件は、熟成温度を５℃、１０℃、１５℃、熟成期間を１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月にそれぞれ設定した。サンプルの熟成条件を表１に示す。
【００３３】
【表１】
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【００３４】
表１に示すように、例えばサンプル記号Ａ−０は、サンプルがＡ、熟成期間が熟成前を表す。また、サンプル記号Ａ−５℃−１Ｍは、サンプルがＡ、熟成温度が５℃、熟成期間が１ヶ月を表す。
【００３５】
表１に示したチーズ試料を液体窒素で凍結させながら粉砕した後、凍結乾燥した。当該凍結乾燥チーズ１００ｍｇを２ｍＬ容エッペンドルフチューブにとり、溶媒混合液（ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ：ＣＨＣｌ３＝２．５：１：１（ｖ／ｖ／ｖ））１０００μＬを用いて抽出した。この混合液には、内部標準として０．２ｍｇ／ｍＬのｒｉｂｉｔｏｌ  ６０μＬを加え、５ｍｍジルコニアビーズを入れてボルテクスミキサーにて混合し、続けてボールミル(２０Ｈｚ、１分、室温)とソニケーション(１．５分×３回)により懸濁した。
次に遠心分離(３分、４℃、１６０００ｇ)を行い、上清８００μＬを１．５ｍＬ容エッペンドルフチューブに移した。そこに、ミリＱ水４００μＬを加え、ボルテクス、遠心分離（３分、４℃、１６０００ｇ）を行い、上清５００μＬを別の１．５ｍＬ容エッペンドルフチューブに移した。それを約２時間遠心濃縮した後、１晩凍結乾燥した。
【００３６】
次いで、この抽出物に５０μＬの塩酸メトキシアミン（Ｓｉｇｍａ社製）のピリジン溶液（２０ｍｇ／ｍＬ）を、第１の誘導体化剤として添加した。混合物を３０℃にて９０分間インキュベートした。
さらに、第２の誘導体化剤である１００μＬのＮ−メチル−Ｎ−（トリメチルシリル）トリフルオロアセタミド（ＭＳＴＦＡ：ＧＬ  ｓｃｉｅｎｃｅ社製）を添加して、３０℃にて３０分間インキュベートすることにより抽出物を誘導体化して、分析サンプルを得た。
【００３７】
＜例２：ＧＣ／ＭＳによるナチュラルチーズサンプルの分析（機器分析工程）＞
上記例１で得られた１μＬの分析サンプルを、スプリットモードでＧＣ／ＭＳに注
入した（２５：１、ｖ／ｖ）。本例で使用したＧＣ／ＭＳ装置は、ＧＣＭＳ-ＱＰ２０１０Ｕｌｔｒａ（島津製作所社製）でＣＰ−ＳＩＬ８ＣＢ低ブリードフィルム（膜厚：０．２５μｍ）でコーティングしたフューズドシリカキャピラリーカラム（内径：３０ｍ×０．２５ｍｍ）（Ｖａｒｉａｎ社）を装着し、オートサンプラーとしてＡＯＣ−２０ｉシリーズインジェクター（島津製作所社製）を接続した。注入温度は２３０℃であった。
カラムを通るヘリウムガスの流速は、約１ｍＬ／分であった。カラム温度は、２分間８０℃で等温に保ち、次いで１５℃／分で３３０℃まで上昇させ、そして６分間等温に保った。搬送ラインおよびイオンソース温度は、それぞれ２５０℃および２００℃であった。
イオンを、７０ｅＶ電子衝撃（ＥＩ）によって生成し、そして１秒当たり１００００スキャンを、ｍ／ｚ８５〜５００の質量範囲にわたって記録した。
【００３８】
＜例３：ＧＣ／ＭＳによるデータの解析およびナチュラルチーズの代謝物プロファイリング＞
［データ前処理］
本例では、下記によって、機器分析データの前処理を行った後に、多変量解析を行った。
すなわち、上記例２においてＧＣ／ＭＳにより得られたデータの前処理についてＧＣＭＳｓｏｌｕｔｉｏｎ（島津製作所社製）を用いて自動ピーク検出及びマススペクトルのスムージング、ベースライン補正などを行った後、ＡＮＤＩファイル（分析データ交換プロトコル、ＣＤＦデータファイル形式；＊．ｃｄｆ）に変換した。ＡＮＤＩフォーマットを用いると、異なるマススペクトルデータシステム間のデータの変換および転送を行うことができる。続いて、内部標準物質であるリビトールを基準にしてＭｅｔＡｌｉｇｎソフトウエア(Lommen, A.: MetAlign: interface-driven, versatile metabolomics tool for hyphenated full-scan mass spectrometry data preprocessing. Anal. Chem., 81, 3079-3086(2009).)を用いてピークの強度の標準化及び保持時間のアライメントを行った。
【００３９】
［成分の同定］
データ前処理した結果をＣＳＶ（ｃｏｍｍａ−ｓｅｐａｒａｔｅｄ  ｖａｌｕｅｓ）ファイル形式で出力し、ＡＩｏｕｔｐｕｔ(Tsugawa, H., Bamba, T., Shinohara, M., Nishiumi, S., Yoshida, M., and Fukusaki, E.: Practical non-targeted gas chromatography/mass spectrometry-based metabolomics platform for metabolic phenotype analysis. J. Biosci. Bioeng., 112, 292-298(2011).)を用いてピーク同定を行った。化合物の同定は、標準化学物質を用いて作成したインハウスライブラリ及び ＮＩＳＴ（National Institute of Standards and Technology）ライブラリのマススペクトルパターンと保持時間と照合することによって実施した。
【００４０】
［主成分分析（ＯＰＬＳ）］
次いで、市販のソフトウエアであるＳＩＭＣＡ−Ｐ（登録商標）（Ｕｍｅｔｒｉｃｓ社製）を用いて以下の分析を行った。直交部分最小二乗法による潜在的構造に対する射影（ＯＰＬＳ）回帰分析を用いて、代謝物ピークに基づいて２種類のチーズ間の判別モデルを構築した。すなわち、得られたＧＣ／ＭＳクロマトグラムから保持時間インデックスと、質量分析シグナル強度から構成されるマトリクスデータを作成して説明変数とし、２種類のチーズの種類を目的変数として、ＯＰＬＳ回帰分析により原料を変更した場合のチーズについての判別モデルを作成した。
【００４１】
次に、サンプルの代謝物プロファイル（マトリクスＸ）とそのチーズ種類（マトリクスＹ）との間の関係を以下のように確認した。
［乳酸菌スターターが同じチーズＡ（有塩タイプ）とＢ（無塩タイプ）との比較］
まず、チーズＡ（有塩タイプ）とＢ（無塩タイプ）とを比較することにより、食塩含量がメタボリックプロファイルに及ぼす影響を、ＯＰＬＳ回帰分析を用いた判別分析（ＯＰＬＳ−ＤＡ）によって確認した。なお、メタボリックプロファイルとは、代謝物パターン（プロファイル）である。このモデルは、１個の予測成分と１個の直交成分を生成し、Ｒ２（Ｘ）＝０．９２１、Ｒ２（Ｙ）＝０．７２７、Ｑ２（Ｙ）＝０．７１１が得られた。ここで、Ｒ２（Ｘ）およびＲ２（Ｙ）は、このＯＰＬＳ−ＤＡモデルの予測部分によってＸおよびＹがどのくらい良く説明されるかを示す指標である。ここでは、Ｘにおける全分散の９２．１％がモデルによって説明され、当該Ｘ分散が、Ｙにおける全分散の７２．７％を説明するために用いられていることを意味する。また、Ｑ２（Ｙ）はクロスバリデーションによって見積もられた予測能力、すなわち新たなサンプルに対して、チーズＡかチーズＢかに判別する能力の指標である。Ｒ２（Ｙ）及びＱ２（Ｙ）は、チーズＡとチーズＢの判別に関するモデル性能の指標となるが、Ｒ２（Ｙ）及びＱ２（Ｙ）が共に０．７をやや超える程度であることから、比較的良好な指標である。
【００４２】
図２は、本実施形態に係るＯＰＬＳ分析結果であって、同じ乳酸菌スターターを用い食塩含量が異なるチーズＡとチーズＢの判別モデルのスコアプロットを示す図である。図２において、横軸ｔｐは、モデルにおける予測的なスコアであり、群間の変動（ｃｌａｓｓ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ）を意味し、縦軸ｔｏは、同等直交スコアであり群内の変動を意味する。なお、図２において、例えばＡ−１０−９Ｍのように、表１に示したサンプル記号Ａ−１０℃−９Ｍのうち“℃”を省略して示している。
図２のスコアプロットより、サンプルのチーズＡとＢの両者はほぼ判別はされている。しかしながら、図２のスコアプロットでは、群内においても予測スコアに変動が見られる上、チーズＡの一部のサンプル（Ａ−１５−３Ｍ）のスコアが、チーズＢのスコア群の中に混在している。そして、Ｒ２（Ｙ）及びＱ２（Ｙ）が、０．７程度という判別性能に示される通り、極めて良好な判別を与えるほどチーズＡとチーズＢの間でメタボリックプロファイルに大きな違いがあるわけではないことを、図２のスコアプロットは示している。
【００４３】
図３は、本実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果であって、同じ乳酸菌スターターを用い食塩含量が異なるチーズＡとチーズＢの判別モデルのＳ−プロットを示す図である。図３において、横軸Ｃｏｖ（ｔｐ，Ｘ）であり、縦軸はＣｏｒｒ（ｔｐ，Ｘ）であり、縦軸（Ｃｏｒｒ（ｔ，Ｘ））は、−１から１までに規格化してある。チーズＡとチーズＢのクラス分類に寄与する化合物を、図３のＳ−プロットの点線で囲まれた領域２０１の属する化合物として抽出した結果、チーズＡに多くチーズＢに少ない化合物として乳糖（Ｌａｃｔｏｓｅ）及びガラクトース（Ｇａｌａｃｔｏｓｅ）が得られた。また、図３のＳ−プロットの点線で囲まれた領域２０２の属する化合物として抽出した結果、チーズＢに多くチーズＡに少ない化合物として乳酸（Ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ）、４−アミノ酪酸（４−Ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ  ａｃｉｄ）、リン酸塩（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）が得られた。
【００４４】
以上のように、本実施形態では、メタボリックプロファイルに食塩濃度が異なるチーズの判別モデルを、熟成品質分析工程の多変量解析によって可視化することができる。すなわち、本実施形態では、ＯＰＬＳ判別分析のスコアプロット（図２）の可視化によって食塩含量が異なるチーズを判別できる。さらに、本実施形態では、ＯＰＬＳ判別分析のＳ−プロット（図３）によって食塩含量が異なるチーズのクラス分類に寄与する化合物を可視化できる。
【００４５】
［有塩タイプで乳酸菌スターターが異なるチーズＡとＣとの比較］
次に、有塩タイプで乳酸菌スターターが異なるチーズＡとチーズＣを比較することにより乳酸菌スターターがメタボリックプロファイルに及ぼす影響を、ＯＰＬＳ判別分析を用いた判別分析によって確認した。このモデルは、1個の予測成分と３個の直交成分を生成し、Ｒ２（Ｘ）＝０．９７４、Ｒ２（Ｙ）＝０．９８９、Ｑ２（Ｙ）＝０．９７７と極めて良好なモデル性能を示した。
図４は、本実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果であって、同じ食塩含量であり乳酸菌スターターが異なるチーズＡとチーズＣの判別モデルのスコアプロットを示す図である。図４における横軸ｔｐと横軸ｔｏは、図２と同様である。図４のスコアプロットより、チーズＡとチーズＣのクラス分類が明確であることが示されている。また、図４のスコアプロットは、乳酸菌スターターの違いが、メタボリックプロファイルに明確な違いをもたらすことを示している。
【００４６】
図５は、本実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果であって、同じ食塩含量であり乳酸菌スターターが異なるチーズＡとチーズＣの判別モデルのＳ−プロットを示す図である。図５における横軸Ｃｏｖ（ｔｐ，Ｘ）と横軸Ｃｏｒｒ（ｔｐ，Ｘ）は、図３と同様である。チーズＡとチーズＣのクラス分類に寄与する化合物を図５のＳ−プロットの点線で囲まれた領域２１１の属する化合物として抽出した結果、チーズＡに多くチーズＣに少ない化合物としてＬａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ、Ｌａｃｔｏｓｅ、尿素（Ｕｒｅａ）、４−Ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ  ａｃｉｄ、Ｇａｌａｃｔｏｓｅ及びＰｈｏｓｐｈａｔｅが得られた。また、チーズＡとチーズＣのクラス分類に寄与する化合物を図５のＳ−プロットの点線で囲まれた領域２１２の属する化合物として抽出した結果、チーズＣに多くチーズＡに少ない化合物としてプロリン（Ｐｒｏｌｉｎｅ）、グリシン（Ｇｌｙｃｉｎｅ）、アラニン（Ａｌａｎｉｎｅ）、リシン（Ｌｙｓｉｎｅ）が閾値（点線）内に存在したほか、縦軸で｜０．５｜には満たないものの、横軸で｜０．１５｜より大きい値を示したものとしてイソロイシン（Ｉｓｏｌｅｕｃｉｎｅ）、ロイシン（Ｌｅｕｃｉｎｅ）、バリン（Ｖａｌｉｎｅ）及びピログルタミン酸（Ｐｙｒｏｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｃｉｄ）などが得られた。
【００４７】
以上のように、本実施形態では、メタボリックプロファイルに乳酸菌スターターが異なる２つのチーズの判別モデルを、熟成品質分析工程の多変量解析によって可視化することができる。すなわち、本実施形態では、ＯＰＬＳ判別分析のスコアプロット（図４）の可視化によって乳酸菌スターターが異なるチーズを判別できる。さらに、本実施形態では、ＯＰＬＳ判別分析のＳ−プロット（図５）によって乳酸菌スターターが異なるチーズのクラス分類に寄与する化合物を可視化できる。
【００４８】
［メタボリックプロファイルの相違の度合いとその相違に関する特徴的な化合物］
次に、原料を変えた場合のサンプル間（ＡとＢ、あるいはＡとＣ）のメタボリックプロファイルの相違の度合いとその相違に関する特徴的な化合物を、判別分析であるＯＰＬＳ−ＤＡを用いて抽出した。ＯＰＬＳ−ＤＡのＳ−プロットによって、いくつかの特徴的な化合物が抽出されたが、更に、これらの化合物の存在分布についてどの程度実際にサンプル間で違いがあるかを、図６〜図９に示すように箱ひげ図で比較した。図６〜図９は、本実施形態に係るＯＰＬＳ判別分析結果から抽出された各化合物の熟成工程中のピーク強度の存在範囲を示す箱ひげ図を示す図である。図６〜図９において、縦軸は、ピーク強度を示している。また、図６〜図９のサンプルＡの各成分には、表１に示したサンプル記号Ａ−０〜Ａ−１５℃−９Ｍの１３個のデータがプロットされ、サンプルＣの各成分には、表１に示したサンプル記号Ｃ−０〜Ｃ−１５℃−９Ｍの１３個のデータがプロットされている。また、図６〜図９において、長方形の下側の辺は第1四分位数、長方形の上側の辺は第３四分位数であり、長方形の中央の線は中央値である。また、長方形の下側の辺から伸びる点線の先端は、第１四分位数−１．５×四分範囲より大きいデータ点であり、長方形の上側の辺から伸びる点線の先端は、第３四分位数＋１．５×四分範囲より小さいデータ点である。
【００４９】
図６（Ａ）は、Ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄに対する箱ひげ図であり、図６（Ｂ）は、Ｌａｃｔｏｓｅに対する箱ひげ図であり、図６（Ｃ）は、Ｕｒｅａに対する箱ひげ図であり、図６（Ｄ）は、４−Ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ  ａｃｉｄに対する箱ひげ図である。
図７（Ａ）は、Ｇａｌａｃｔｏｓｅに対する箱ひげ図であり、図７（Ｂ）は、Ｐｈｏｓｐｈａｔｅに対する箱ひげ図であり、図７（Ｃ）は、Ｐｒｏｌｉｎｅに対する箱ひげ図であり、図７（Ｄ）は、Ｇｌｙｃｉｎｅに対する箱ひげ図である。
図８（Ａ）は、Ａｌａｎｉｎｅに対する箱ひげ図であり、図８（Ｂ）は、Ｌｙｓｉｎｅに対する箱ひげ図であり、図８（Ｃ）は、Ｉｓｏｌｅｕｃｉｎｅに対する箱ひげ図であり、図８（Ｄ）は、Ｌｅｕｃｉｎｅに対する箱ひげ図である。
図９（Ａ）は、Ｖａｌｉｎｅに対する箱ひげ図であり、図９（Ｂ）は、Ｐｙｒｏｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｃｉｄに対する箱ひげ図である。
【００５０】
例えばチーズＡとチーズＣを比較した結果、チーズＡに多くチーズＣに少ない化合物として抽出されたＬａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ（図６（Ａ））、Ｌａｃｔｏｓｅ（図６（Ｂ））、Ｕｒｅａ（図６（Ｃ））、４−Ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ  ａｃｉｄ（図６（Ｄ））、Ｇａｌａｃｔｏｓｅ（図７（Ａ））及びＰｈｏｓｐｈａｔｅ（図７（Ｂ））については、チーズＡとチーズＣで熟成期間におけるピークの相対強度分布が全く重なっていないか、少なくとも四分位点の範囲が重なっておらず、両サンプル群の識別マーカーとなり得る特徴的な化合物であるといえる。
一方、チーズＣに多くチーズＡに少ない化合物として抽出されたＰｒｏｌｉｎｅ（図７（Ｃ））、Ｇｌｙｃｉｎｅ（図７（Ｄ））、Ａｌａｎｉｎｅ（図８（Ａ））、Ｌｙｓｉｎｅ（図８（Ｂ））、Ｉｓｏｌｅｕｃｉｎｅ（図８（Ｃ））、Ｌｅｕｃｉｎｅ（図８（Ｄ））、Ｖａｌｉｎｅ（図９（Ａ））及びＰｙｒｏｇｌｕｔａｍｉｃ  ａｃｉｄ（図９（Ｂ））などのアミノ酸群は、サンプル群間で熟成期間におけるピークの相対強度分布の四分位範囲が重なってはいるが中央値や最大値に明らかな相違が認められ、チーズＡとチーズＣの判別マーカーとして、特に熟成が進んだ場合において特徴的な化合物であるといえる。
【００５１】
以上のように、本実施形態では、メタボリックプロファイルが異なる２つのチーズの判別モデルを、熟成品質分析工程の多変量解析によって可視化することができる。すなわち、本実施形態では、原料を変えた場合のサンプル間のメタボリックプロファイルの相違の度合いとその相違に関する特徴的な化合物を、化合物毎に箱ひげ図（図６〜図９）のように可視化できる。
このように、利用者は、本実施形態における熟成品質分析工程の多変量解析によって可視化された結果を用いることで、食塩濃度や乳酸菌スターターの種類がチーズのメタボリックプロファイルに及ぼす影響を知ることができる。また、本実施形態によれば、利用者は、原料を変えた場合のサンプル間のメタボリックプロファイルの相違の度合いとその相違に関する特徴的な化合物を知ることができる。さらに、本実施形態によれば、利用者は、２つのチーズを判別できる判別マーカーとなる特徴的な化合物を知ることができる。
なお、本実施形態では、図６〜図９に示したように、箱ひげ図を用いて解析結果を化合物毎に可視化する例を説明したが、可視化に用いるツールは他のグラフ等を用いるようにしてもよい。
【００５２】
［熟成条件（温度と期間）の決定］
上述したように、化学的な成分プロファイル（メタボリックプロファイル）と多変量解析と組み合わせることによって、複数のナチュラルチーズの熟成度合いを総合的にかつ的確に表現し比較することができる。このような根拠により、本実施形態の熟成条件決定工程により、熟成条件（温度と期間）の決定することができる。
【００５３】
各熟成条件における経時サンプルのメタボリックプロファイルプロットを用いて、例えば熟成条件において温度を高くすることで、熟成期間を短縮化することを意図した場合、近似（すなわち近接した位置）の成分プロファイルを得るための熟成条件（温度と期間）の決定することができる。このようにメタボリックプロファイリングまたはメタボリックフィンガープリンティングの技術を用いることによって確固たる根拠をもった熟成条件の決定が可能である。
例えば、なるべく短期間で長期熟成品と同等の熟成度合いを得るために、同一のメタボロームが得られることを根拠として熟成条件の決定や熟成工程における終点の決定などを行う。
【００５４】
図１０は、本実施形態に係るＰＣＡ解析結果であって、チェダーチーズサンプルの熟成工程サンプルに対してＧＣ／ＭＳ分析を行いＰＣＡを行った結果のスコアプロットを示す図である。また、図１０は、サンプルのチーズＣについてのＰＣＡ解析結果である。図１０において、横軸は、第１主成分、縦軸は、第２主成分を表している。図１０に示されるように、第１主成分には約９３％、第２主成分には３％がそれぞれ寄与率として算出された。
【００５５】
チーズＣの場合、例えば、主成分分析ＰＣＡのスコアプロットの結果を示した図１０において、メタボリックプロファイルの情報量のうち約９３％が集約されている第１主成分（横軸）のスコアを見ると、熟成温度が１０℃かつ熟成期間が９ヶ月のサンプル（Ｃ−１０−９Ｍ）のスコア２２１と、熟成温度が１５℃かつ熟成期間が３ヶ月のサンプル（Ｃ−１５−３Ｍ）のスコア２２２と位置が近似していることが分かる。
すなわち、図１０は、チーズＣにおいては、１０℃で熟成させると９ヶ月を要する成分構成を、１５℃で熟成させることによって３ヶ月で得ることができることを示している。
【００５６】
以上のように、本実施形態のチーズの熟成品質を分析する方法は、熟成品質既知のチーズを前処理して分析サンプルを得る前処理工程、該分析サンプルを機器分析に供して、機器分析データを得る機器分析工程、複数のチーズについての機器分析データを数値データに変換して多変量解析を行い、多変量解析を行った結果に基づいて熟成条件が成分プロファイルに及ぼす影響を解析し、解析した結果に基づいて該チーズの熟成条件を決定する熟成条件決定工程、を有する。
【００５７】
このように、本実施形態では、上記前処理工程と機器分析工程の後、熟成条件決定工程により、メタボリックプロファイルの近似度合いを指標にして、熟成温度を調整することで熟成期間をどの程度、短縮することができるのかを定量的に明示することが可能となる。これにより、本実施形態によれば、利用者は、熟成温度を調整することで熟成期間をどの程度、短縮することができるのかを知ることができるので、チーズの熟成期間を短縮することができる。
【００５８】
なお、図１０では、チーズＣについて主成分分析ＰＣＡのスコアプロットした例を説明したが、チーズＡ及びＢについても、同様に主成分分析ＰＣＡのスコアプロットすることで、熟成温度を調整することで熟成期間をどの程度、短縮することができるのかを定量的に明示することが可能となる。
また、本実施形態では、成分として食塩濃度、乳酸菌スターターが異なるチーズＡ、Ｂ、Ｃの例を説明したが、これに限られない。牛乳など乳が異なる場合、レンネットが異なる場合であっても、本実施形態で説明した熟成品質分析工程および熟成条件決定工程を適用することができる。また、乳を凝乳する前または後に乳酸菌スターターを添加する、乳を殺菌するまたは殺菌しない等のチーズ製造における条件を変えた場合についても、本実施形態で説明した熟成品質分析工程および熟成条件決定工程を適用することができる。
【００５９】
これにより、本実施形態によれば、各種の製造条件を変えた場合であっても、メタボリックプロファイルに及ぼす影響、原料を変えた場合のサンプル間のメタボリックプロファイルの相違の度合いとその相違に関する特徴的な化合物、および２つのチーズを判別できる判別マーカーとなる特徴的な化合物を可視化することができる。さらに本実施形態によれば、各種の製造条件を変えた場合であっても、メタボリックプロファイルの近似度合いを指標にして、熟成温度を調整することで熟成期間をどの程度、短縮することができるのかを定量的に明示することが可能となる。
【００６０】
［第２実施形態］
第１実施形態では、熟成品質分析工程の多変量解析によって、２つのチーズを判別できる判別マーカーとなる特徴的な化合物を知ることができることを説明した。
本実施形態では、熟成の程度を代表するような「熟成マーカー」となる化合物を、簡便にかつ正確に決定する方法について説明する。
なお、本実施形態において、機器分析工程、及び前処理工程は、第１実施形態と同様に行う。
【００６１】
＜多変量解析・熟成マーカー決定工程＞
前処理が施されたチーズサンプル（分析サンプル）は、機器分析に供され、分析結果が得られる。得られた分析結果は、ピーク情報である。熟成品質分析工程では、このピーク情報をアライメントおよびベースライン補正などに付し、数値データに変換して多変量解析を行う。分析により得られる結果（変数）としては、保持時間、波長（若しくは波数）、ならびにシグナル強度（若しくはイオン強度）、吸光度などのスペクトルデータが挙げられる。さらに、本実施形態の多変量解析では、変数としてさらに変数として熟成品質を用いる。具体的にはチーズの官能評価スコアが好適に用いられる。
【００６２】
多変量解析としては、機器分析データおよび官能評価スコアデータの関係づけに、特にケモメトリックスにおいて通常用いられる解析ツールが採用される。
例えば、ＰＬＳ回帰分析、ＯＰＬＳ回帰分析などの種々の多変量ツールが挙げられる。
さらに機器分析データに対してＰＣＡに代表される情報集約手法で新たな情報軸（主成分軸）を作成し、成分プロファイルの相違をスコアプロット上の距離により可視化する。なお、本実施形態では、ＰＬＳ回帰分析による判別分析をＰＬＳ判別分析ともいい、ＯＰＬＳ回帰分析による判別分析をＯＰＬＳ判別分析ともいう。ＰＬＳ判別分析若しくはＯＰＬＳ判別分析を用いて、関連の変量の２群間の関係；例えば、チーズの代謝物とその熟成品質との間の関係、が確認される。必要に応じて、スペクトルフィルタリング法、例えば、妨害成分を取り除くための直交シグナル補正（ＯＳＣ）と組み合わせて多変量解析が行われてもよい。また、多変量解析は、得られた全データではなく、熟成品質予測に重要な一定の範囲のデータを選択して行ってもよい。
【００６３】
本実施形態における熟成品質分析工程多変量解析および熟成マーカー決定工程は、熟成品質分析装置１Ａを用いて行われる。図１１は、本実施形態に係る熟成品質分析装置１Ａのブロック図である。図１１Ａに示すように、熟成品質分析装置１Ａは、処理部１１Ａ、記憶部１２Ａ、解析部１３Ａ、および熟成マーカー決定部１５を備える。なお、第１実施形態で説明した熟成品質分析装置１と同じ機能を有する機能部については、同じ符号を用いて説明を省略する。
【００６４】
処理部１１Ａは、分析装置が出力した機器分析データと熟成品質データ（好ましくは官能評価スコア）とを、記憶部１２Ａに記憶させる。記憶部１２Ａには、分析装置により分析された機器分析データが記憶される。
解析部１３Ａは、記憶部１２Ａに記憶されている機器分析データと官能評価スコアデータとを数つデータに変換し、変換した数値データを用いて多変量解析工程を行う。解析部１３Ａは、ＰＬＳ回帰分析若しくはＯＰＬＳ回帰分析等を用いて判別分析を行う。また、解析部１３Ａは、ＰＣＡ等により成分プロファイルの相違を解析する。
熟成マーカー決定部１５は、解析部１３Ａにより多変量解析された解析結果に基づいて、熟成マーカー化合物を抽出し決定する熟成マーカー決定部工程を行う。
【００６５】
以下に、複数の熟成品質既知のナチュラルチーズサンプルから親水性低分子代謝物を抽出して、あるいはナチュラルチーズの熱分解物についてＧＣ／ＭＳにより定量解析を行う場合の各機能部が行う処理について説明する。
【００６６】
解析部１３Ａは、得られたＧＣ／ＭＳクロマトグラムから保持時間インデックスと質量分析シグナル強度から、ピークごとの強度に関するマトリクスデータを作成する。この際、質量分析によって、ピークの具体的な化合物名を同定することも可能である。処理部１１Ａは、対象ナチュラルチーズについての熟成経時サンプルの官能評価スコアを取得する。
解析部１３Ａは、ＧＣ／ＭＳのマトリクスデータと官能評価スコアデータに対して、判別分析法と情報集約法とによる２つの多変量解析を実施する。次に、解析部１３Ａは、熟成に伴ってスコアが単純増加若しくは単純減少する官能属性についてのスコアを目的変数、ＧＣ／ＭＳピーク強度データを説明変数として、ＰＬＳ判別分析により官能スコア予測モデルを構築する。次に、解析部１３Ａは、当該モデルを用い、官能予測モデル構築において重要な代謝物をＶａｒｉａｂｌｅ  Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎ（ＶＩＰ）を指標として抽出する。ここで、ＶＩＰは、ＰＬＳモデルにおけるそれぞれのＸ項（説明変数；ここでは各代謝物ピーク）がＹ変数（目的変数；ここでは官能属性）に及ぼす影響を算出した指標である。また、ＶＩＰは、Ｘ項相互に比較することが可能で、１を超えるＶＩＰを有するＸ項はＹ変数を説明するのに最も相応しいと解釈することができる。
【００６７】
次に、熟成マーカー決定部１５は、情報集約手法で頻用されるＰＣＡによってＧＣ／ＭＳピーク強度データを集約する。次に、熟成マーカー決定部１５は、ＰＣＡのスコアプロットによって熟成経時サンプルの位置から熟成の進行する方向を決定する。次に、熟成マーカー決定部１５は、ＰＣＡのローディングプロットで当該方向に寄与する化合物を抽出する。このように、本実施形態では、ＰＬＳ判別分析の官能予測モデルに基づく化合物抽出と、ＰＣＡに基づく化合物抽出の結果を合わせることによって、熟成工程のマーカーとなる化合物候補を絞り込む。その後、本実施形態では、熟成マーカー決定部１５は、絞り込まれたマーカー化合物候補について個別に熟成期間中の増減をグラフ化して、実際にマーカーとする化合物を決定する。
【００６８】
例えばナチュラルチーズから抽出された、代謝物を含む抽出物（分析サンプル）をＧＣ／ＭＳで分析した場合、得られる分析結果は、種々の代謝物の保持時間、マススペクトル、イオン強度などがある。
この場合、以下に説明するように、特に、プロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンのデータは、チェダーチーズの熟成マーカーとして重要な役割を果たす。また、以下に説明するように、高い熟成度のチェダーチーズサンプル中には、代謝物として、プロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンの量が熟成の進行につれて単純増加するため、熟成マーカーとして用いることができる。
【００６９】
＜実施例＞
以下に実施例を用いて本実施形態をさらに詳しく説明するが、本実施形態はこれら実施例に限定されるものではない。
＜ナチュラルチーズサンプル＞
チェダーチーズを常法により作成した。このチーズサンプルを、以下、チーズＣという。Ｃについて、熟成前のサンプル１検体と、熟成温度と熟成期間の異なる熟成サンプル１２検体の計１３検体を採取した。熟成条件は、熟成温度を５℃、１０℃、１５℃、熟成期間を１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月にそれぞれ設定した。サンプルの熟成条件を表２に示す。
【００７０】
【表２】
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【００７１】
表２に示すように、例えば、サンプル記号Ｃ−０は、熟成期間が熟成前を表し、サンプル記号サンプル記号Ｃ−５℃−１Ｍは、熟成温度が５℃、熟成期間が１ヶ月を表す。
【００７２】
＜官能評価方法＞
熟成品質に関する官能評価は、定量的記述分析法による官能試験のスコア（官能評価スコア）によって決定され、官能評価用語としては「味の濃さ」であり、専門の官能評価パネルによって決定された。
官能評価の方法は、両端から１３ｍｍの位置に指示用語（左側が弱い、右側が強い）が記載された１５ｃｍの線尺度を用いて行った。官能評価スコアの値が大きいほど、所定の風味または味が強いことを示す。
評価は、３０歳から４０歳（女性４名、男性６名）の１０名からなる訓練されたパネルを用いて行った。パネルは、基本５味(塩味、甘味、酸味、苦味、旨味)を検出でき、３点比較法を用いたチーズ間の違いを認識することができる能力に基づいて選抜した。
【００７３】
定量的記述分析法の方法論を用い、チーズサンプルの評価用語はパネル自身により定義した。定量的記述分析は、６つの風味、外観、テクスチャー、および後味の合計９つの官能属性について実施した。定量的記述分析は、外観、テクスチャー、後味なども含めて実施したが、本実施形態で機器分析と対応させる官能属性としては、「味の濃さ」と「酸味」を選んだ。評価用紙の作成とパネリストの訓練は、各９０分間の６回の作業セッションで確立した。ここで、「酸味」と「味の濃さ」は、以下のように定義した。
味の濃さ：濃くてコクがあり、旨味や醤油のような風味。
酸味：基本味の１つ。代表的には乳酸やクエン酸の味。
【００７４】
定量的記述分析は、１３種類のチーズサンプルのそれぞれについて、１．５ｃｍ×１．５ｃｍ×１．０ｃｍのチーズ片６個をプラスチックカップ（７０ｍＬ容）に入れ、蓋をして温度約５℃で供与した。順序効果を回避するよう計画に従ってサンプルとパネリストを配置した。すべてのサンプルについて３回の評価を実施した。サンプルをパネルに配布する際には３桁のランダムな数を付した。すべての評価は、空調が完備し、外部からの臭気、騒音、邪魔などが入らない専用の官能評価室において行った。
官能評価スコアの値は、１０名のパネリストの３回の評価の平均値とした。
【００７５】
＜例１：ＧＣ／ＭＳ用の分析サンプルの調製（前処理工程）＞
ＧＣ／ＭＳ用の分析サンプルの調製（前処理工程）は、第１実施形態と同様に行う。
＜例２：ＧＣ／ＭＳによる分析（機器分析工程）＞
ＧＣ／ＭＳによる分析（機器分析工程）は、第１実施形態と同様に行う。
【００７６】
＜例３：ＧＣ／ＭＳで得られたデータの解析（１）＞
［データ前処理］
データ前処理は、第１実施形態と同様に行う。
［成分の同定］
成分の同定は、第１実施形態と同様に行う。
［官能評価と代謝物ピークの間をモデル化］
次いで、市販のソフトウエアであるＳＩＭＣＡ−Ｐ（登録商標）（Ｕｍｅｔｒｉｃｓ社製）を用いて以下の分析を行った。ＰＬＳ回帰分析によって、官能評価と代謝物ピークの間をモデル化した。すなわち、得られたＧＣ／ＭＳクロマトグラムから保持時間インデックスと、質量分析シグナル強度から構成されるマトリクスデータを作成して説明変数とし、各サンプルの官能評価スコアを目的変数として、ＰＬＳ法により官能評価スコア予測モデルを作成した。以下、ＰＬＳ回帰分析によりモデル化されたモデルを、ＰＬＳモデルともいう。
【００７７】
次に、サンプルの代謝物プロファイル（マトリクスＸ）とそのチーズ種類（マトリクスＹ）との間の関係を以下のように確認した。
熟成中の各官能属性の推移を確認し、熟成感と関係の強い官能属性である「味の濃さ」の官能評価スコアを用いた。モデルの完全性、すなわち、ＰＬＳモデルにおける潜在的ファクターの最適なＰＬＳ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ数は、（モデルに対する）適合度Ｒ２と交差検証予測能Ｑ２との間のバランスで決定した。さらに、ＰＬＳモデルのサンプルデータへの適合性は、適合値の誤差の標準偏差（ＲＭＳＥＥ）を計算した。このモデルは、ＰＬＳ  ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ数＝２、Ｒ２＝０．９５９、Ｑ２＝０．９２９、ＲＭＳＥＥ＝０．３７４と良好な当てはまりを示した。図１２は、本実施形態に係るＰＬＳ解析結果であって、機器分析による代謝物プロファイルから予測した官能属性「味の濃さ」のスコアと実際の官能評価パネルによる官能属性「味の濃さ」の実測スコアの関係を示す図である。図１２において、横軸は、「味の濃さ」の予測スコア、縦軸は、「味の濃さ」の実測スコアである。「味の濃さ」の予測スコアとは、機器分析による代謝物プロファイルから予測した官能属性「味の濃さ」のスコアである。
【００７８】
［熟成品質分析工程；ＰＬＳ判別分析による官能属性に基づく熟成マーカー候補の抽出］
次に、当該官能予測モデル構築において重要な代謝物の抽出は、ＶＩＰを指標として行った。熟成の進行とともに官能スコアが増加する官能属性「味の濃さ」について、モデル構築に重要な寄与をする化合物、すなわち、このモデルについてＶＩＰが１を超える化合物を表３に示す。
【００７９】
【表３】
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【００８０】
表３に示すように、多くのアミノ酸類及び乳酸が、モデル構築に寄与する化合物としてリストアップされた。それらは上から順に、プロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、乳酸、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンであった。このように、本実施形態では、ＶＩＰを指標とすることで、熟成に関連の深い官能属性に即した熟成マーカー候補をリストアップすることができる。
【００８１】
［熟成品質分析工程；ＰＣＡに基づく機器分析に基づく熟成マーカー候補の抽出］
次に、機器分析データのみからの熟成マーカー候補リストアップを行うために主成分分析（ＰＣＡ）を行った。市販のソフトウエアであるＳＩＭＣＡ−Ｐ（登録商標）（Ｕｍｅｔｒｉｃｓ社製）をこの目的に適用した。チェダーチーズサンプルの熟成工程サンプルに対してＧＣ／ＭＳ分析を行い、ＰＣＡを行った結果（スコアプロット）は、図１０である。図１０に示すように、第１主成分には９２．９％、第２主成分には３．０％がそれぞれ寄与率として算出された。この２つの主成分で約９６％の情報が集約されたが、特に第１主成分のみでほとんどの分散を表現することができた。図１０のスコアプロットから、このサンプルにおいては、熟成期間に依存して、第１主成分軸に対して負から正の方向にかけてサンプルが存在していることが明らかとなった。すなわち、熟成温度にかかわらず、第１主成分軸に対して負から正の方向にかけて、熟成期間順に１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、９ヶ月のサンプルが存在する。
【００８２】
図１３は、本実施形態に係るＰＣＡ解析結果であって、チェダーチーズサンプルの熟成工程サンプルに対してＧＣ／ＭＳ分析を行いＰＣＡを行った結果のローディングプロットを示す図である。図１３において、横軸は、第１主成分、縦軸は、第２主成分を表している。
図１３に示すように、第１主成分軸の正の方向に寄与する化合物には、プロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンなど、アミノ酸が列挙された。一方、第１主成分の負の方向に寄与する化合物として乳酸が挙げられた。第１主成分の寄与率が約９３％を示すことから、スコアプロット（図１０）とローディングプロット（図１３）とを対応させたとき、ローディングプロットで抽出されたプロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンなどのアミノ酸が、熟成工程で多量に生成されていることが示唆された。
【００８３】
[熟成品質分析工程；熟成マーカー化合物の決定]
ＰＬＳ判別分析による官能属性に基づく熟成マーカー候補とＰＣＡに基づく機器分析に基づく熟成マーカー候補を合わせると、プロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、乳酸、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンが抽出された。これらのマーカー候補化合物について、熟成期間におけるピーク強度の推移を図１４及び図１５に示した。
【００８４】
図１４及び図１５は、本実施形態に係るＰＬＳおよびＰＣＡの解析によって抽出されたマーカー候補化合物について、熟成期間におけるピーク強度の推移を示す図である。図１４及び図１４において、横軸は、サンプル記号、縦軸は、ピーク強度である。また、横軸のサンプル番号は、左から右に表２に示した順に並べてある。また、図１４（Ａ）〜図１４（Ｈ）は、プロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシンについて、熟成期間におけるピーク強度の推移を示す図である。図１５（Ａ）〜図１５（Ｈ）は、リジン、乳酸、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンについて、熟成期間におけるピーク強度の推移を示す図である。
【００８５】
図１４（Ａ）の示すプロリン（Ｐｒｏｌｉｎｅ）をはじめとするアミノ酸群は、熟成期間が長くなるにつれて縦軸で示されるピーク強度が増加しており、相互にグラフ形状の傾向が類似している。なお、アミノ酸群とは、プロリン（図１４（Ａ））、ロイシン（図１４（Ｂ））、バリン（図１４（Ｃ））、イソロイシン（図１４（Ｄ））、ピログルタミン酸（図１４（Ｅ））、アラニン（図１４（Ｆ））、グルタミン酸（図１４（Ｇ））、グリシン（図１４（Ｈ））、リジン（図１５（Ａ））、チロシン（図１５（Ｂ））、セリン（図１５（Ｃ））、フェニルアラニン（図１５（Ｄ））、メチオニン（図１５（Ｅ））、アスパラギン酸（図１５（Ｆ））、及びオルニチン（図１５（Ｇ））である。また、熟成温度が高いほど、同じ熟成期間でもピーク強度が大きい。
【００８６】
これに対して乳酸（図１５（Ｈ））は、相対ピーク強度は大きいが、熟成期間や熟成温度による変化はあまり顕著ではない。
これらの結果から、実施例で使用したチーズＣに対しては、プロリン、ロイシン、バリン、イソロイシン、ピログルタミン酸、アラニン、グルタミン酸、グリシン、リジン、チロシン、セリン、フェニルアラニン、メチオニン、アスパラギン酸、オルニチンを、熟成工程モニタリングのマーカーとして決定した。
【００８７】
このことから、本実施形態によれば、例３で得られたケモメトリクスと組み合わせたＧＣ／ＭＳを用いるメタボロミクス解析が、ナチュラルチーズの熟成工程管理において有用な情報を提供することができる。
【００８８】
以上のように、本実施形態のチーズの熟成品質を分析する方法は、熟成品質既知のチーズを前処理して分析サンプルを得る前処理工程、該分析サンプルを機器分析に供して、機器分析データを得る機器分析工程、複数のチーズについての機器分析データと該チーズのそれぞれの熟成品質を表す熟成品質データとをおのおの数値データに変換して多変量解析を行い、多変量解析を行った解析結果に基づいて、該チーズにおける熟成の指標となる熟成マーカー化合物を抽出し決定する熟成品質分析工程、を有する。
【００８９】
このように、本実施形態では、上記前処理工程と機器分析工程の後、熟成品質分析工程により、熟成の指標となる熟成マーカー化合物を抽出して決定することができる。
これにより、本実施形態によれば、従来不明確であった製品ナチュラルチーズの総合熟成品質マーカー化合物の探索において、的確な方法で抽出し決定することが可能である。すなわち、ナチュラルチーズを、クロマトグラフィーなどの種々の機器分析により熟成経過を調査することによって、的確かつ有益に熟成マーカーを決定し得る。
【００９０】
なお、本実施形態では、官能予測モデル構築において重要な代謝物をＶＩＰを指標として抽出する例を説明したが、他の指標を用いて抽出するようにしてもよい。
【００９１】
なお、熟成品質分析装置１（含む１Ａ）の全部または一部の機能を実現するためのプログラムをコンピュータ読み取り可能な記録媒体に記録して、この記録媒体に記録されたプログラムをコンピュータシステムに読み込ませ、実行することにより各部の処理を行ってもよい。なお、ここでいう「コンピュータシステム」とは、ＯＳや周辺機器等のハードウェアを含むものとする。
また、「コンピュータシステム」は、ＷＷＷシステムを利用している場合であれば、ホームページ提供環境（あるいは表示環境）も含むものとする。
また、「コンピュータ読み取り可能な記録媒体」とは、フレキシブルディスク、光磁気ディスク、ＲＯＭ、ＣＤ−ＲＯＭ等の可搬媒体、コンピュータシステムに内蔵されるハードディスク等の記憶装置のことをいう。さらに「コンピュータ読み取り可能な記録媒体」とは、インターネット等のネットワークや電話回線等の通信回線を介してプログラムを送信する場合の通信線のように、短時間の間、動的にプログラムを保持するもの、その場合のサーバやクライアントとなるコンピュータシステム内部の揮発性メモリのように、一定時間プログラムを保持しているものも含むものとする。また上記プログラムは、前述した機能の一部を実現するためのものであっても良く、さらに前述した機能をコンピュータシステムにすでに記録されているプログラムとの組み合わせで実現できるものであっても良い。
【００９２】
以上、本発明の実施形態について図面を参照して詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、この発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。
【産業上の利用可能性】
【００９３】
第１実施形態によれば、従来不明確であった製品ナチュラルチーズの総合熟成品質を考慮した熟成条件決定において、成分プロファイルに基づき的確な方法で条件変更の影響を定量化し、条件決定に活用することが可能である。すなわち、ナチュラルチーズを、クロマトグラフィーなどの種々の機器分析により熟成経過を調査することによって、的確かつ有益に熟成条件を決定できる。
【００９４】
従来のナチュラルチーズの製造工程における熟成度の評価は経験に基づく熟練者の官能評価に大きく依存していた。しかし、熟練者を育成するには時間とコストがかかり、熟練者が何かの事情でいなくなってしまうリスクなどもある。また熟練者といえども体調などによって評価基準が安定しない可能性も否定できない。したがって、誰もが同様に操作して同様のデータを得ることができる機器分析による第１実施形態の方法を用いれば、上述の産業的リスクを軽減した的確な熟成度計測が可能であり、ナチュラルチーズ製造工程における熟成条件決定のさらなる改善ができる。
【００９５】
また、誰もが同様に操作して同様のデータを得ることができる機器分析による第２実施形態の方法を用いれば、上述の産業的リスクを軽減した的確な熟成度計測が可能であり、ナチュラルチーズ製造工程あるいはナチュラルチーズ最終製品における熟成度管理のさらなる改善が期待できる。
【符号の説明】
【００９６】
１、１Ａ…熟成品質分析装置、１１、１１Ａ…処理部、１２、１２Ａ…記憶部、１３、１３Ａ…解析部、１４…熟成条件決定部、熟成マーカー決定部１５
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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