(57)【要約】      （修正有）【課題】生理活性作用を有する複数の生薬由来の抽出物を単独で、あるいは組み合わせて配合することにより、優れた機能を有する皮膚外用組成物を提供すること。【解決手段】桜皮、厚朴、垣通、松葉より選択された１種、又は２種以上より得られた生薬抽出物を含む皮膚外用組成物、および、松葉抽出物を含み、さらに垣通、厚朴、桜皮より選択された１種又は２種以上の生薬抽出物を含む皮膚外用剤組成物。該組成物は、メイラード反応阻害剤、インボルクリン産生促進剤、抗酸化剤、エラスターゼ阻害剤、ヒアルロニターゼ阻害剤、線維芽細胞賦活剤としての生理活性作用を有し、化粧品又は薬用化粧品として有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
桜皮、厚朴、垣通、松葉より選択された１種、又は２種以上より得られた生薬抽出物を含む皮膚外用組成物。
【請求項２】
松葉抽出物を含み、さらに垣通、厚朴、桜皮より選択された１種又は２種以上の生薬抽出物を含む、請求項１記載の皮膚外用組成物。
【請求項３】
桜皮抽出物、松葉抽出物、厚朴抽出物のいずれかを有効成分として含有するメイラード反応阻害剤。
【請求項４】
請求項３記載の抽出物のいずれかを有効成分とするメイラード反応阻害剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物。
【請求項５】
松葉抽出物、桜皮抽出物、厚朴抽出物、垣通抽出物のいずれかを有効成分として含有するインボルクリン産生促進剤。
【請求項６】
請求項５記載の抽出物のいずれかを有効成分とするインボルクリン産生促進剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物。
【請求項７】
桜皮抽出物、厚朴抽出物、松葉抽出物のいずれかを有効成分として含有する抗酸化剤。
【請求項８】
請求項７記載の抽出物のいずれかを有効成分とする抗酸化剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物。
【請求項９】
桜皮抽出物又は松葉抽出物のいずれかを有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤。
【請求項１０】
請求項９記載の抽出物のいずれかを有効成分とするエラスターゼ活性阻害剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物。
【請求項１１】
桜皮抽出物又は松葉抽出物のいずれかを有効成分として含有するヒアルロニダーゼ活性阻害剤。
【請求項１２】
請求項１１記載の抽出物のいずれかを有効成分とするヒアルロニダーゼ活性阻害剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物。
【請求項１３】
桜皮抽出物又は垣通抽出物のいずれかを有効成分として含有する線維芽細胞賦活剤。
【請求項１４】
請求項１３記載の抽出物のいずれかを有効成分とする線維芽細胞賦活剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物。
【請求項１５】
化粧品又は薬用化粧品である、請求項１、４、６、８、１０、１２又は１４に記載の皮膚外用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は化粧料組成物に関する。具体的には、日常生活に伴って発生する各種の症状の予防・改善に有用な各種作用を有する生薬抽出物、並びにそれらを配合した皮膚外用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
生薬抽出物等の植物由来天然物の生理活性作用に着目し、化粧品に配合する試みが行われている。
桜皮（オウヒ）はバラ科のヤマザクラ等の樹皮を用いた生薬であり、主要成分はフラボノイド及びフラボノイド配糖体である。経口摂取による薬理効果として、解毒・解熱・鎮咳・去痰・排膿作用、並びに収れん作用等が知られており、皮膚外用剤としては湿疹・蕁麻疹の治療に使用される。化粧品への利用としては、美白化粧料や養毛化粧料に配合する試みが記載されている（特許文献１〜３）。また、ヒアルロン酸分解阻害剤としての利用についても報告されており、肌あれや小ジワ、かさつきを防止する効果を期待して、化粧料に配合する試みがなされている（特許文献４）。
【０００３】
厚朴（コウボク）は、モクレン科モクレン属のホオノキの樹皮を原料とする生薬であり、主要成分は精油成分、セスキテルペン、フェニルプロパノイド、アルカロイドである。経口摂取による薬理効果として、抗菌作用、鎮痙作用、健胃作用等が知られる。
【０００４】
外用剤又は化粧品への利用としては、美白化粧料（特許文献５〜７、１４、１６）、ニキビ用皮膚改善剤（特許文献８）、抗酸化剤（特許文献９）、光老化防御剤（特許文献１０）、エラスターゼ活性阻害剤（特許文献１１）、ヒスタミン遊離抑制剤（特許文献１２）、コラゲナーゼ活性阻害剤（特許文献１５）、前駆脂肪細胞分化誘導剤（特許文献１７）としての用途が報告されている。また、類縁のオガタマノキ属のキンコウボクの花の溶媒抽出物を抗酸化剤として、肌あれを防ぎ、肌のつや、はりを保つ効果を期待して、化粧料に配合する試みがなされている（特許文献１３）。
【０００５】
垣通（カキドオシ）は、連銭草、金銭草、疳取草の別名でも知られるシソ科カキドオシの薬用植物の全草を用いた生薬である。主要成分は、セスキテルペン、フラボノイド、サポニン、タンニンである。日本原産であるが、ヨーロッパでも古くから民間薬（メディカルハーブ）として利用されている。経口摂取による薬理効果として、強壮、収斂、解熱、利尿、血糖降下作用等が知られている。
【０００６】
化粧品への利用としては、保湿効果・肌あれ改善効果を期待してエタノール、プロピレングリコール又は精製水による抽出物を配合したモニター試験を実施したことが報告されているが、特に顕著な効果は観察されなかったようである（特許文献１８）。
【０００７】
松葉（マツバ）は、マツ科のアカマツの葉を用いた生薬であり、主要成分は精油成分、蝋質成分、松ヤニである。経口摂取による薬理効果として、血流促進作用、去痰・鎮痛・健胃作用等が知られる。
【０００８】
化粧品への利用としては、まつやに抽出物、赤松葉抽出物及び赤松根抽出物を含有する皮膚保湿用化粧料組成物（特許文献１９）、松の生葉のアルコール抽出物を配合した養毛化粧料（特許文献２０）が記載されている。
【０００９】
生薬等の植物由来の天然物は、ヒトが長年にわたって経口で使用した実績があることから安全性が保証されており、化粧品、医薬部外品又は医薬品の原料として人間の皮膚に使用する場合にも安心である。しかしながら、天然物を単独で使用する場合は合成品と比べて生理活性作用が弱いものが多い。また、化粧品は、シミ・シワや肌荒れを防止する、うるおいや柔軟性を保つ、肌のキメを整える、はり・ツヤ・滑らかさを与える等、一つの商品に複数の効果を期待されることが多い。さらに、最近では、手早く簡単に化粧ができる「時短化粧品」が人気となっており、一つの商品で美容液、乳液と化粧下地など複数の効能を持つことが以前にも増して求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特許第２７９９６０３号
【特許文献２】特許第２９６２５５８号
【特許文献３】特許第２８７１７６３号
【特許文献４】特開平１０−１３０１６２
【特許文献５】特許３５９２９１８号
【特許文献６】特許３６９６２７１号
【特許文献７】特開平８−９２０５５
【特許文献８】特開２００５−８５７２
【特許文献９】特開２００２−１５４９２２
【特許文献１０】特開２００２−１０４９２４
【特許文献１１】特開２０００−１７８１６８
【特許文献１２】特開２０００−１６９３８３
【特許文献１３】特許第３２６８９６５号
【特許文献１４】特許第２９５７３３４号
【特許文献１５】特開２００３−１４６８７６
【特許文献１６】特公平７−９１１７９
【特許文献１７】特開２００２−１３８０４５
【特許文献１８】特許第４０５７１７０号
【特許文献１９】特表２０１２−５１９１６５
【特許文献２０】特開平２−１６４８１１
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本出願人らは、これまで天然物由来の物質の化粧品用原料としての利用について検討してきた（特許第４７９５４７５号「ウメ抽出物を含む剤」、他）。そして、今回、特定の複数の生薬から得られた抽出物について、肌に使用した場合に、日常生活に伴って発生する各種の症状の予防・改善に有用な各種作用を見出した。そのような抽出物を単独であるいは組み合わせて配合することにより、優れた機能を有する皮膚外用組成物を提供することが本発明の課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、各種の生薬から得られた抽出物の生理活性について鋭意検討した。そして、桜皮（オウヒ）、厚朴（コウボク）、垣通（カキドオシ）、松葉（マツバ）のそれぞれの生薬の溶媒抽出液について、高いメイラード反応阻害作用、及びインボルクリン産生促進作用に加えて、抗酸化作用、エラスターゼ活性阻害作用、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、線維芽細胞賦活作用等、従来知られていなかった複数の作用を見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、桜皮、厚朴、垣通、松葉より選択された１種、又は２種以上より得られた生薬抽出物を含む皮膚外用組成物を提供するものである。
２種以上の生薬抽出物を含む、本発明の皮膚外用組成物の好ましい態様は、松葉抽出物に加えて、垣通、厚朴、桜皮より選択された１種又は２種以上の抽出物を含む皮膚外用組成物である。別の好ましい態様は、松葉及び桜皮より得られた抽出物を含む皮膚外用組成物である。別の好ましい態様は、松葉及び垣通より得られた抽出物を含む皮膚外用組成物である。さらに別の好ましい態様は、松葉及び厚朴より得られた抽出物を含む皮膚外用組成物である。さらに別の好ましい態様は、松葉、厚朴、及び垣通より得られた抽出物を含む皮膚外用組成物である。さらに別の好ましい態様は、松葉、厚朴、垣通、及び桜皮より得られた抽出物を含む皮膚外用組成物である。
【００１４】
本発明の皮膚外用組成物は、桜皮、厚朴、垣通、松葉より選択された１種、又は２種以上より得られた生薬抽出物に加えて、別の天然物由来の物質を含んでいてもよい。
また、本発明は、桜皮抽出物を有効成分として含有するメイラード反応阻害剤を提供する。
【００１５】
また、本発明は、松葉抽出物を有効成分として含有するメイラード反応阻害剤を提供する。
また、本発明は、厚朴抽出物を有効成分として含有するメイラード反応阻害剤を提供する。
【００１６】
また、本発明は上記のいずれかのメイラード反応阻害剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物を提供する。
また、本発明は、松葉抽出物を有効成分として含有するインボルクリン産生促進剤を提供する。
【００１７】
また、本発明は、桜皮抽出物を有効成分として含有するインボルクリン産生促進剤を提供する。
また、本発明は、厚朴抽出物を有効成分として含有するインボルクリン産生促進剤を提供する。
【００１８】
また、本発明は、垣通抽出物を有効成分として含有するインボルクリン産生促進剤を提供する。
また、本発明は上記のいずれかのインボルクリン産生促進剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物を提供する。
【００１９】
また、本発明は、桜皮抽出物を有効成分として含有する抗酸化剤を提供する。
また、本発明は、厚朴抽出物を有効成分として含有する抗酸化剤を提供する。
また、本発明は、松葉抽出物を有効成分として含有する抗酸化剤を提供する。
【００２０】
また、本発明は上記のいずれかの抗酸化剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物を提供する。
また、本発明は、桜皮抽出物を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤を提供する。
【００２１】
また、本発明は、松葉抽出物を有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤を提供する。
また、本発明は上記のいずれかのエラスターゼ活性阻害剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物を提供する。
【００２２】
また、本発明は、桜皮抽出物を有効成分として含有するヒアルロニダーゼ活性阻害剤を提供する。
また、本発明は、松葉抽出物を有効成分として含有するヒアルロニダーゼ活性阻害剤を提供する。
【００２３】
また、本発明は上記のいずれかのヒアルロニダーゼ活性阻害剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物を提供する。
また、本発明は、桜皮抽出物を有効成分として含有する線維芽細胞賦活剤を提供する。
【００２４】
また、本発明は、垣通抽出物を有効成分として含有する線維芽細胞賦活剤を提供する。
また、本発明は上記のいずれかの線維芽細胞賦活剤を単独で、あるいは組み合わせて含有する皮膚外用組成物を提供する。
【００２５】
上記の皮膚外用組成物は、化粧品又は薬用化粧品として特に有用である。
【発明の効果】
【００２６】
本発明による皮膚外用組成物は、抗酸化作用、老化防止作用、抗炎症作用、及び表皮と真皮の健全な構造を維持する作用を持つ有効成分を含有し、日常生活の中で加齢、ストレス、紫外線等により引き起こされた皮膚のバリア機能の低下、キメの粗さ、肌荒れなどを予防・改善する効果に優れる。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】試料を4.0%で作用させた時のメイラード反応生成物の泳動結果を示す。
【図２−１】試料を2.0%で作用させた時のメイラード反応生成物の泳動結果を示す。
【図２−２】図２−１の続き。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明で用いられる桜皮（オウヒ）、厚朴（コウボク）、垣通（カキドオシ）、及び松葉（マツバ）は、いずれも、それ自体はいわゆる生薬（日本薬局方若しくは局外規収載品、又は食品）として公知である。
【００２９】
桜皮（オウヒ）とは、バラ科ヤマザクラの樹皮を乾燥させたものを指す。
厚朴（コウボク）とは、モクレン科ホオノキの樹皮を乾燥させたものを指す。
垣通（カキドオシ）とは、シソ科カキドオシの全草を乾燥させたものを指す。
【００３０】
松葉（マツバ）とは、マツ科アカマツの葉を乾燥させたものを指す。
桜皮、厚朴、垣通、松葉の生薬抽出物には、上述したそれぞれの材料を抽出原料として得られる抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００３１】
桜皮、厚朴、垣通、松葉のそれぞれの生薬の抽出液の調製法は特に限定されるものではなく、植物の抽出に一般に用いられる抽出方法によって、前記の各材料から得ることができる。本発明に用いる調製法の一例としては、例えば、適当な溶媒を用いて室温から加温下で抽出することができる。抽出に用いる溶媒としては、例えば水、親水性有機溶媒などを、１種単独で、又は２種以上を組み合わせた混合溶媒を使用することができる。
【００３２】
前記抽出溶媒として使用し得る水としては、例えば、精製水、蒸留水、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、加熱、殺菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。なお、前記抽出溶媒として使用し得る水には、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００３３】
前記親水性有機溶媒としては、例えば、低級アルコール類（メタノール、エタノール、1-プロパノール、2-プロパノール、1-ブタノール、2-ブタノール等）、多価アルコール類（グリセリン、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、1,3-プロパンジオール等）、ケトン類（アセトン、メチルケトン等）、エーテル類（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン等）が挙げられ、これら親水性有機溶媒と水との混合溶媒などを用いることができる。好ましい抽出溶媒の例は、エタノール又はブチレングリコール又は1,3-プロパンジオールと水との混合溶媒である。
【００３４】
前記各抽出原料から、生薬の抽出液を得るにあたって特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温又は還流加熱下で、任意の抽出装置を用いて抽出することができる。
例えば、室温で抽出を行う場合、抽出溶媒を満たした処理槽内に、各抽出原料を溶媒の１．５〜１０％（質量比）となるように投入し、更に必要に応じて時々攪拌しながら、１〜３日間静置して可溶性成分を溶出した後、ろ過して固形物を除去することによって、抽出液を得ることができる。なお、得られる抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るため、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００３５】
また、前記抽出物は、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、未精製のままでも実用上支障はない。そのような精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができる。脱臭のための手段としては、特に制限はなく、同様の目的で用いられる既存の技術を適用することができる。典型的な方法の一つは、活性炭を用いることである。
【００３６】
また、前記抽出物は、常法にしたがって製剤化することができ、製剤化したものをメイラード反応阻害剤、インボルクリン産生促進剤、抗酸化剤、エラスターゼ活性阻害剤、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤、線維芽細胞賦活剤として使用してもよい。
【００３７】
さらに、本発明のメイラード反応阻害剤、インボルクリン産生促進剤、抗酸化剤、エラスターゼ活性阻害剤、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤、線維芽細胞賦活剤は、その他の組成物に配合して使用できる。そのような組成物としては、皮膚外用組成物が好ましい。
【００３８】
本発明の皮膚外用組成物は、常法に従って製造することができる。また、本発明の皮膚外用組成物は、一般の化粧品に限定されるものではなく、医薬部外品（例えば薬用化粧品又はその他の医薬部外品）、指定医薬部外品、外用医薬品等の皮膚外用剤を包含するものであり、その剤形も目的に応じて任意に選択することができる。
【００３９】
本発明の皮膚外用組成物において、メイラード反応阻害剤、インボルクリン産生促進剤、抗酸化剤、エラスターゼ活性阻害剤、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤、線維芽細胞賦活剤に加えて配合する他の成分としては、化粧品又は医薬品のそれぞれにおいて通常使用できるものなら全て使用でき、効能・効果に応じ適宜選択すればよい。
【００４０】
本発明の組成物または剤においては、上述の各生薬抽出物の含量は、目的の効果が発揮される範囲であれば特に制限はないが、本発明の実施例１に記載した方法で得た溶媒抽出液に相当する量として、通常、約0.01質量（w/w）％（以下、％で表わす）以上を配合することができる。オウヒ抽出液の含有範囲としては、0.01％〜50％、好ましくは0.1％〜10％、より好ましくは0.3％〜4％である。コウボク抽出液の含有範囲としては、0.01％〜50％、好ましくは0.02％〜10％、より好ましくは0.05％〜1％である。カキドオシ抽出液の含有範囲としては、0.01％〜50％、好ましくは0.1％〜10％、より好ましくは0.2％〜2％である。マツバ抽出液の含有範囲としては、0.01％〜50％、好ましくは0.1％〜10％、より好ましくは0.5％〜1.5％である。本発明で生薬抽出物の含量をいうときは、別途記載した場合を除き、本明細書の実施例１に記載した方法で得た抽出液に相当する量を意味する。
【００４１】
本発明の組成物または剤には、桜皮、厚朴、垣通、松葉より選択された１種、又は２種以上より得られた生薬抽出物に加えて、別の天然物由来の物質を含んでいてもよい。そのような物質の例として以下のものが挙げられる。特許第4795475号に記載されたウメ抽出物、例えば、ウメ根抽出物やウメ果実水。特開2012-116761号に記載された植物由来水蒸気蒸留水、例えば、パッションフルーツ、シマミカン、バナナ、アテモヤ、ウメ、タンカン、レモンライム、ジンジャーから選択される１種又は２種以上の植物の水蒸気蒸留水。特開2000-290159号に記載された海洋深層水。特開2007-217356号に記載された海洋深層水濃縮物。特許第3544505号に記載されたトウキ抽出物。特開2009-029788号に記載された海水由来酵母培養物。特許第2526362号に記載された梅果汁醗酵液。特許第3967357号に記載された、湯の花及び／又は湯の花の抽出物もしくは酸化処理物。しかしながら、本発明の組成物または剤に含有させることができる天然物由来の物質はこれらに限定されるわけではなく、他の任意の物質が使用可能である。
【００４２】
本発明の組成物または剤には、所望の効果を損なわない範囲で、通常の外用組成物または剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、アミノ酸類、ビタミン類、界面活性剤、pH調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、抗炎症剤、抗しわ剤、肌荒れ改善剤、ニキビ用薬剤、アルカリ類、キレート剤、金属封鎖剤等の成分を配合することもできる。さらに、通常の浴用添加剤に用いられる成分である硫酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、塩化カリウム、油性成分、乳化剤、コハク酸、生薬、無機顔料、香料、及び色素等の成分を配合することもできる。
【００４３】
本発明の組成物はまた、その使用目的に応じて、固形剤、半固形剤、液剤等の各種剤形の組成物に調製することが可能である。本発明の組成物はまた、化粧品、医薬部外品、医薬品のいずれの形態にもできる。
【００４４】
医薬品としての形態は、例えば、硬膏剤、軟膏剤、パップ剤、リニメント剤、ローション剤とすることができる。
化粧品としての形態は特に限定されるものではないが、例えばスキンケア化粧品として洗顔料、クレンジング料、化粧水、美容液、パック、マッサージクリーム、乳液、モイスチャークリーム、リップクリーム等、メーキャップ化粧品としてファンデーション、白粉、口紅、ほほ紅、アイシャドウ等、ボディケア化粧品として石鹸、液体洗浄料、入浴剤等、ヘアケア化粧品としてシャンプー、リンス、ヘアトリートメント、整髪料、ヘアトニック、育毛剤、スキャルプトリートメント等とすることができる。上記化粧品には、一般に化粧品に用いられている各種化粧品成分を適宜配合することができる。
【００４５】
本発明の組成物が乳液、クリーム、ローションまたは美容液の形態である場合、各生薬抽出液の好ましい含量は約0.05％〜10％であり、より好ましくは約0.1〜5％、より好ましくは約0.2〜2％である。本発明の組成物がクレンジングオイルの形態である場合は、他の形態の化粧品よりも少ない配合量で効果を奏し、各生薬抽出液の好ましい含量は0.005％〜0.05％であり、例えば、約0.01％である。
【００４６】
本発明のメイラード反応阻害剤、インボルクリン産生促進剤、抗酸化剤、エラスターゼ活性阻害剤、ヒアルロニダーゼ活性阻害剤、線維芽細胞賦活剤を含有する化粧品又は薬用化粧品は、皮膚の肌荒れやバリア機能の低下、キメの粗さなどを予防・改善する効果に優れることから、そのような効果を訴求する皮膚外用形態の化粧品が好適である。
【００４７】
本発明で「メイラード反応」というときは、特に記載した場合を除き、糖とタンパク質等から、アミノカルボニル反応により、褐色物質（メラノイジン）が生じる反応をいう。メイラード反応は、通常、還元糖とタンパク質のアミノ基とが反応してシッフ塩基を形成した後、アマドリ転位産物（アマドリ化合物）が生成する非酵素的反応である。そして、酸化、脱水、縮合、分子内及び分子間における架橋等の複雑な反応を経て、次第に黄褐色化すると共に、メイラード反応後期段階生成物であるAGEs（advanced glycation endproducts）が産生される。
【００４８】
生体内で起きるメイラード反応は、糖尿病患者等に見られる皮膚の褐色斑の形成に関与すると考えられている。褐色斑の原因となる色素にはAGEが含まれている。生体内のメイラード反応はまた、生活習慣病、老化で促進される疾患（例えば、糖尿病合併症、アルツハイマー病、動脈硬化症）にも関連していることが明らかにされつつある。AGEは、アマドリ転位産物から酸化、脱水、縮合などの複雑な反応を経て生成した種々の構造体の総称であり、これには、カルボキシメチルリジン、ピラリン、ペントシジン、クロスリン、イミダゾロン等が含まれ、また、タンパク質の二量体以上の重合体も、AGEとして知られている。皮膚においてはメイラード反応が進行することでコラーゲンやエラスチンなど真皮構成タンパク質の架橋、変性により、しわ、くすみ、たるみ等が認められるようになるものと考えられている。
【００４９】
メイラード反応抑制能力の有無及び／又は程度は、当業者であれば適宜、公知の手段を用いて、例えばアマドリ転位産物の生成の阻害、又はAGE生成の阻害を指標として、確認・測定することができる。詳細な条件は、本明細書の実施例の項を参照することができる。本発明でメイラード反応抑制能力の有無及び／又は程度をいうときは、特に記載した場合を除き、本明細書の実施例に記載した方法に拠る。
【００５０】
本発明で「インボルクリン産生」というときは、特に記載した場合を除き、ヒトケラチノサイト（ヒト皮膚表皮角化細胞）によるインボルクリンの産生を意味する。インボルクリンは、角層の周辺帯の形成に関わる前駆体タンパク質の一つであり、肌表皮のバリア機能に重要な役割を担っている。角層は、ケラチンや脂質等、様々な物質から構成され、生体を被覆し、水分の保持や侵入物に対する防御を行う。周辺帯は角質細胞の細胞膜を裏打ちする不溶性構造物であり、有棘層のケラチノサイト（有棘細胞）で作られるインボルクリンが、顆粒層で作られるロリクリンと、トランスグルタミナーゼ等の酵素によって架橋することで生じる。また、インボルクリンの一部はセラミドと結合し、細胞間脂質ラメラ構造の形成に関与する。ケラチノサイトのインボルクリン産生を促進することにより、肌表皮のバリア機能を正常にする効果が期待できる。
【００５１】
インボルクリン産生を促進する能力の有無及び／又はその程度は、当業者であれば適宜、公知の手段を用いて確認・測定することができる。詳細な条件は、本明細書の実施例の項を参照することができる。
【００５２】
「抗酸化」とは、活性酸素を抑える（発生させない、消去する、働きを抑える）ことをいう。試験物質の抗酸化能力の有無及び／又は程度は、当業者であれば適宜、公知の手段を用いて確認・測定することができる。例えば、DPPH（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl）ラジカル消去、スーパーオキシドディスムターゼ（SOD, Superoxide dismutase）様作用、過酸化水素（H2O2）消去、TRAP（Total Radical-trapping Antioxidant Parameter）、FRAP（Ferric Reducing Ability of Plasma）、β-カロテン退色等を指標とすることができる。
【００５３】
本発明で抗酸化能の有無及び／又は程度をいうときは、特に記載した場合を除き、本明細書の実施例に記載した方法（DPPHラジカル消去効果試験）に拠る。試験のための詳細な条件は、本明細書の実施例の項を参照することができる。
【００５４】
DPPHラジカル消去効果の存在は、酸素から作られるラジカルの不対電子も取り除くことができる可能性を示す。つまり、酸素から作られるラジカルが細胞内で他の物質を酸化させることがなくなり、活性酸素に起因する疾患や老化を抑制する効果が期待できる。
【００５５】
本発明で「エラスターゼ」というときは、特に記載した場合を除き、エラスチンを典型的な基質とするプロテアーゼをいう。エラスチンは、高等動物の結合組織、腱、大動脈外皮、頚索などを構成する、弾力に富む硬蛋白質の一種である。この蛋白質を構成しているペプチド鎖間には架橋が多く、これが弾性をもたらす。
【００５６】
真皮において、エラスチンは、網目状に構成されるコラーゲンを結びつけ、コラーゲンとともに肌のハリを維持している。そのため、加齢や紫外線、活性酸素、ストレス、エラスチン分解酵素（エラスターゼ）などによってエラスチンが減少すると、シワやたるみなど老化の原因となる。このことから、エラスターゼを阻害する成分には、肌のハリを回復または維持させ、その結果肌を若々しく保たせる効果が期待できる。
【００５７】
エラスターゼ活性を阻害する能力の有無及び／又はその程度は、当業者であれば適宜、公知の手段を用いて確認・測定することができる。詳細な条件は、本明細書の実施例の項を参照することができる。本発明でエラスターゼ活性の阻害の有無及び／又は程度をいうときは、特に記載した場合を除き、本明細書の実施例に記載した方法に拠る。
【００５８】
「ヒアルロニダーゼ」は、ヒアルロン酸を低分子化する酵素であって、ヒアルロン酸のN-アセチル-D-ヘキソサミニド結合を加水分解する酵素である。ヒアルロン酸は、O-β-D-グルクロノシル(1→3)-N-アセチル-β-D-グルコサミニル(1→4)単位の二糖だけの繰返し構造を有するグリコサミノグリカンの一種である。ヒアルロン酸は、動物の関節液や真皮表層などの結合組織に多く存在し、関節の潤滑、皮膚の柔軟化などに関与する。ヒアルロニダーゼは、皮膚に存在し、ヒアルロン酸を分解することにより、結合組織の再構築における細胞活動の一環を担っていると考えられている。したがって、結合組織中のヒアルロン酸を分解するヒアルロニダーゼに対する阻害剤には、ヒアルロン酸の分解が亢進した皮膚の状態を改善する作用が期待される。また、ヒアルロニダーゼは炎症時に活性化され、組織の構造を破壊し、炎症系細胞の透過性を亢進させるとも考えられている。また、マスト細胞からのヒスタミンの放出に関与しており、Ｉ型アレルギーの発生にも関わっていると考えられている。したがって、ヒアルロニダーゼ活性阻害効果を測定することで、試験物質の抗炎症作用または抗アレルギー作用について予測することも可能となる。
【００５９】
ヒアルロニダーゼ活性を阻害する能力の有無及び／又は程度は、当業者であれば適宜、公知の手段を用いて確認・測定することができる。詳細な条件は、本明細書の実施例の項を参照することができる。本発明でヒアルロニダーゼ活性の阻害の有無及び／又は程度をいうときは、特に記載した場合を除き、本明細書の実施例に記載した方法に拠る。
【００６０】
本発明で「線維芽細胞賦活（活性、効果）」というときは、正常ヒト真皮線維芽細胞（NHDF）の増殖能を高めることができることをいう。細胞の増殖の有無・程度は、生細胞数を計数することにより判定することができる。生細胞数の判定のためには、種々の方法が知られている。
【００６１】
線維芽細胞を賦活する能力の有無及び／又は程度は、当業者であれば適宜、公知の手段を用いて確認・測定することができる。詳細な条件は、本明細書の実施例の項を参照することができる。本発明で線維芽細胞賦活活性の有無及び／又は程度をいうときは、特に記載した場合を除き、本明細書の実施例に記載した方法に拠る。
【００６２】
線維芽細胞は、真皮に存在し、コラーゲンやエラスチン、ヒアルロン酸といった成分を作り出している。年齢を重ねるにつれ、細胞の増殖スピードが落ちるとともに、細胞から作り出される成分も少なくなると、肌の弾力性が失われ、たるみやシワなど、いわゆる老化といわれる症状が現れてくる。線維芽細胞賦活は、このような老化現象に対応する手段であるといえる。
【実施例】
【００６３】
〔実施例１：評価用試料の製造例〕
オウヒ抽出液の調製
桜皮を、精製水とブチレングリコールの30%(w/w)混合溶媒、または精製水とエタノールの50%(w/w)混合溶媒に3%(w/w)となるように浸漬し、25℃、3日間抽出を行った。抽出後に0.45μmフィルターで無菌ろ過を行い、オウヒ抽出液を得た。
【００６４】
コウボク抽出液の調製
厚朴を、精製水とブチレングリコールの30%(w/w)混合溶媒、または精製水とエタノールの50%(w/w)混合溶媒に3%(w/w)となるように浸漬し、25℃、3日間抽出を行った。抽出後に0.45μmフィルターで無菌ろ過を行い、コウボク抽出液を得た。
【００６５】
カキドオシ抽出液の調製
垣通を、精製水とブチレングリコールの30%(w/w)混合溶媒、または精製水とエタノールの50%(w/w)混合溶媒、または精製水とエタノールの95%(w/w)混合溶媒、または精製水に1%(w/w)となるように浸漬し、25℃、1日間抽出を行った。抽出後に0.45μmフィルターで無菌ろ過を行い、カキドオシ抽出液を得た。
【００６６】
マツバ抽出液の調製
松葉を、精製水とブチレングリコールの30%(w/w)混合溶媒、または精製水とエタノールの50%(w/w)混合溶媒に5%(w/w)となるように浸漬し、25℃、3日間抽出を行った。抽出後に0.45μmフィルターで無菌ろ過を行い、マツバ抽出液を得た。
【００６７】
また、これら抽出液については、脱臭処理も行った。上記と同様に抽出液を作成後、5%(w/w)となるように活性炭を加え、室温下、110rpmで3時間振盪し脱臭処理とした。振盪後は同様にフィルターで無菌ろ過を行い、活性炭を除去したマツバ抽出液を得た。
【００６８】
〔実施例２：抽出液の評価〕
試験方法：
（１）エラスターゼ活性阻害効果試験（膵臓由来）
96 well plateに精製水を用いて濃度を調製した評価試料 50μL、 0.1M Tris-HCl緩衝液 35μL、1mM Suc-Ala-Ala-Ala-pNA 100μL、0.25U/mL エラスターゼ 15μLを加え、37℃、30分間反応後、マイクロプレートリーダーにて405nmの吸光度を測定した。精製水を対照とし、次式を用いて阻害率を算出した。
【００６９】
エラスターゼ活性阻害率（％）＝  {１−(A−B) / (C−D)}×100
A：試料添加時の吸光度、  B：試料添加、エラスターゼ無添加時の吸光度
C：精製水添加時の吸光度、  D：精製水添加、エラスターゼ無添加時の吸光度
（２）エラスターゼ活性阻害効果試験（線維芽細胞由来）
ヒト真皮線維芽細胞を96ウェルマイクロプレートに20×104 cell/mLの濃度で100μL/wellで播種した。播種培地は5％ウシ胎児血清（FBS）を含むDMEM培地を使用して、CO2インキュベーター(5％CO2、37℃)内で24時間培養した。24時間後、0.5%TritonX-100/精製水を添加し、粗酵素液を作成した。粗酵素液に評価試料50μL、0.1M Tris-HCl緩衝液で2mMに調製した Suc-Ala-Ala-Ala-pNA 150μLを加え、40℃、2時間反応後、マイクロプレートリーダーにて405nmの吸光度を測定した。精製水対照とし次式を用いて阻害率を算出した。
【００７０】
エラスターゼ活性阻害率（％）＝  {１−(A−B) / (C−D)}×100
A：試料添加時の吸光度、  B：試料添加、エラスターゼ無添加時の吸光度
C：精製水添加時の吸光度、  D：精製水添加、エラスターゼ無添加時の吸光度
（３）DPPHラジカル消去効果試験
96 well plateに精製水を用いて濃度を調製した評価試料 15μL、0.2M MES緩衝液 60μL、95％ エタノール 50μLを添加し、0.6mM DPPHラジカル 25μLを加え、30℃で30分間反応させマイクロプレートリーダーにて540nmの吸光度を測定した。精製水を対照とし次式を用いて消去率を算出した。
【００７１】
DPPHラジカル消去率(％) = {１−(A−B) / (C−D)}×100
A：試料添加時の吸光度、  B：試料添加、DPPHラジカル無添加時の吸光度
C：精製水添加時の吸光度、  D：精製水添加、DPPHラジカル無添加時の吸光度
（４）ヒアルロニダーゼ活性阻害効果試験
96 well plateに精製水を用いて濃度を調製した評価試料 12μL、400U/mL ヒアルロニダーゼ12μLを混合し40℃で20分間インキュベーションし、0.1mg/mL Compound 48/80 12μLを加え40℃で20分間反応し、1mg/mL ヒアルロン酸カリウム 12μLを加え、40℃で40分間反応させた。
【００７２】
その後0.4N NaOH 12μLを添加し、氷水で5分間冷却し反応を停止させ、0.8M ホウ酸カリウム溶液 12μLを加え、沸水で3分間加熱後、氷水で10分間冷却した。20mg/mL p-DMAB 180μLを加え、96well plateに180μL分注後、40℃で20分間 反応し、マイクロプレートリーダーにて540nmにおける吸光度を測定した。精製水を対照とし次式を用いて阻害率を算出した。
【００７３】
ヒアルロニダーゼ活性阻害効果の算出：
以下の式を用いてヒアルロニダーゼ活性阻害効果を算出する。
ヒアルロニダーゼ阻害効果（％）＝  1  −（C−D）／（A−B）×100
A：精製水添加時の吸光度、  B：精製水添加、酵素無添加時の吸光度
C：試料添加時の吸光度、  D：試料添加、酵素無添加時の吸光度
（５）線維芽細胞賦活効果試験
ヒト真皮線維芽細胞を96ウェルマイクロプレートに7×104 cell/mLの濃度で100μL/wellで播種した。播種培地は5％ウシ胎児血清（FBS）を含むα-MEM培地を使用して、CO2インキュベーター(5％CO2、37℃)内で24時間培養した。24時間後、各試料を添加した5％FBSを含むα-MEM培地に置換し、72時間培養した。上清を除いた後、MTT(3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド)を1.0 mg/mL添加したDMEM培地に交換し、4時間培養した。その後、生成したホルマザンを酸性イソプロパノールにより抽出し、波長570 nm、630 nmの吸光度をプレートリーダーで測定した。両測定値の差(570 nmの吸光度−630 nmの吸光度)から、コントロールである各抽出溶媒添加時を賦活率100％とする以下の式を用いて細胞賦活効果を評価した。
【００７４】
式：  細胞賦活率(％)＝A／A0×100
A＝試料添加の吸光度の差
A0＝精製水添加の吸光度の差
（６）メイラード反応阻害効果試験
サンプルチューブに0.1M リン酸緩衝液（pH 7.4）800μL、0.1M リン酸緩衝液（pH 7.4）800μL で調製した0.5M リボース40μL、50mg/mL リゾチーム100μLを加え、精製水を用いて濃度を調製した評価試料 60μLを添加した。クリーンベンチ内で0.45μmのフィルターを用いてろ過滅菌し、40℃のインキュベーターで7日間反応させた。反応後、SDS-PAGEにて電気泳動を行い0.1％ Coomassie Brilliant Blue  R-250にて染色し脱色後リゾチームの2量体を目視により判定した。判定は評価試料の代わりに30%BG、50%EtOHを用いたものをネガティブコントロールし、硫酸アミノグアニジンを加えた時の様子をポジティブコントロールとして判定した。
【００７５】
（７）インボルクリン産生促進試験
ヒトケラチノサイトを5×104cell/cm2の密度で96ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地は10％ウシ胎児血清（FBS）を含むDMEM培地を使用して、CO2インキュベーター(5％CO2、37℃)内で24時間培養した。24時間後、各試料を添加した10％FBSを含むDMEM培地に置換し、72時間培養した。4%パラホルムアルデヒド含有PBSで固定した後、浸透化処理を行い、抗原抗体反応によりインボルクリンを免疫蛍光染色した。蛍光プレートリーダーにより各wellについて12点の蛍光強度を測定した。試料未作用のコントロールを100%としてインボルクリン産生率を以下の式より算出した。また併せて、Hoechstで細胞核を染色し、生細胞数の比較も行った。生細胞率の算出も以下の式を用いた。
【００７６】
式：  インボルクリン産生率、生細胞率（％）＝（B1-B0）／（A1-A0B1-B0）×100
A1＝試料未添加の蛍光強度
A0＝試料未添加で一次抗体未作用の蛍光強度
B1＝試料添加の蛍光強度
B0＝試料添加で一次抗体未作用の蛍光強度
試験結果：
（１）エラスターゼ活性阻害効果試験（膵臓由来）
実施例１の方法で得た抽出液（原液）を100％として、精製水で希釈して試験に供した。以下の表に、試料を2.5%で作用させた時の膵臓由来エラスターゼの活性阻害効果と阻害率の高かった試料の50%阻害濃度を示した。
【００７７】
【表１】
2014221740.tif 000002
【００７８】
（２）エラスターゼ活性阻害効果試験（線維芽細胞由来）
以下の表に、試料を5%で作用させた時の線維芽細胞由来エラスターゼの活性阻害効果と阻害率の高かった試料の50%阻害濃度を示した。
【００７９】
表中、30%BGは精製水とブチレングリコールの30%(w/w)混合溶媒、50%EtOHは精製水とエタノールの50%(w/w)混合溶媒、95%EtOHは精製水とエタノールの混合溶媒を指す。また、30%BG（脱臭）と50%EtOH（脱臭）は、抽出液に活性炭により脱臭処理を施したことを意味する。
【００８０】
【表２】
2014221740.tif 000003
【００８１】
桜皮、垣通、松葉の抽出液に高いエラスターゼ活性阻害効果が認められた。特に、桜皮及び松葉に関しては、膵臓由来エラスターゼと線維芽細胞由来エラスターゼの両方に対して阻害効果が認められた。また、松葉については脱臭処理により効果が著しく低下することのないことが明らかとなった。
【００８２】
（３）DPPHラジカル消去効果試験
以下の表に、試料を0.4%で作用させた時のDPPHラジカル消去効果と消去効果の高かった試料の50%消去濃度を示した。
【００８３】
【表３】
2014221740.tif 000004
【００８４】
桜皮、松葉の抽出液に高いDPPHラジカル消去効果が認められ、厚朴の抽出液についてもDPPHラジカル消去効果が認められた。また、松葉については脱臭処理により効果が著しく低下することのないことが明らかとなった。
【００８５】
（４）ヒアルロニダーゼ活性阻害効果試験
以下の表に、試料を2.5%で作用させた時のヒアルロニダーゼの活性阻害効果と阻害率の高かった試料の50%阻害濃度を示した。
【００８６】
【表４】
2014221740.tif 000005
【００８７】
桜皮、松葉の抽出液に高いヒアルロニダーゼ活性阻害効果が認められた。また、松葉については脱臭処理により効果が著しく低下することのないことが明らかとなった。
（５）線維芽細胞賦活効果試験
以下の表に、試料を1%と2%で作用させた時の細胞賦活効果を示した。
【００８８】
【表５】
2014221740.tif 000006
【００８９】
桜皮の50%EtOH抽出液、及び垣通の95%EtOH抽出液で、顕著な細胞賦活効果が認められた。また、ほぼ全ての生薬抽出液について濃度を高くすることにより細胞賦活効果も高まることが分かった。
【００９０】
（６）メイラード反応阻害効果試験
試料を4.0%で作用させた時のメイラード反応生成物の泳動結果を図１に、試料を2.0%で作用させた時のメイラード反応生成物の泳動結果を図２に示す。上側のバンドの強弱がリゾチームの二量体の生成を反映し、バンドが薄いものほど、リゾチームの二量体の生成、つまりメイラード反応が抑制されていることになる。硫酸アミノグアニジンのレーンがポジティブコントロールである。
【００９１】
以下の表にレーンの番号と試料の対応関係を示す。
【００９２】
【表６】
2014221740.tif 000007
【００９３】
桜皮、厚朴、松葉の抽出液に高いメイラード反応阻害効果が認められた。また、松葉については脱臭処理により効果が著しく低下することのないことが明らかとなった。
（７）インボルクリン産生促進効果
以下の表に、試料を3%、1%、0.5%で作用させた時のインボルクリン産生率と生細胞率を示した。
【００９４】
【表７】
2014221740.tif 000008
【００９５】
桜皮、厚朴、垣通、松葉の４種の生薬抽出液の全てに高いインボルクリン産生効果が認められた。特に、松葉抽出液は効果が顕著であり、脱臭処理により効果が著しく低下することのないことが明らかとなった。
【００９６】
〔実施例３：化粧品の製造〕
上記の評価結果に従い、以下に化粧品の処方例を示すが、本発明はこれらに限定されるわけではない。
【００９７】
マツバ抽出液、カキドオシ抽出液を含む乳液（さっぱりタイプ）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、ORGANIC乳液（さっぱりタイプ）前処理を得た。
【００９８】
【表８】
2014221740.tif 000009
【００９９】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、乳液（さっぱりタイプ）前処理を加えて攪拌し、ORGANIC乳液（さっぱりタイプ）を得た。
【０１００】
【表９】
2014221740.tif 000010
【０１０１】
マツバ抽出液、コウボク抽出液を含むクリーム（さっぱりタイプ）の製造
水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、ORGANICクリーム（さっぱりタイプ）前処理を得た。
【０１０２】
【表１０】
2014221740.tif 000011
【０１０３】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、ORGANICクリーム（さっぱりタイプ）前処理を加えて乳化機で乳化し、ORGANICクリーム（さっぱりタイプ）を得た。
【０１０４】
【表１１】
2014221740.tif 000012
【０１０５】
カキドオシ抽出液、マツバ抽出液を含む乳液（普通タイプ）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、ORGANIC乳液（普通タイプ）前処理を得た。
【０１０６】
【表１２】
2014221740.tif 000013
【０１０７】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、A相を加えて攪拌し、ORGANIC乳液（普通タイプ）を得た。
【０１０８】
【表１３】
2014221740.tif 000014
【０１０９】
マツバ抽出液、カキドオシ抽出液を含む乳液（しっとりタイプ）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、ORGANIC乳液（しっとりタイプ）前処理を得た。
【０１１０】
【表１４】
2014221740.tif 000015
【０１１１】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、A相を加えて攪拌し、ORGANIC乳液（しっとりタイプ）を得た。
【０１１２】
【表１５】
2014221740.tif 000016
【０１１３】
マツバ抽出液、コウボク抽出液を含むクリーム（しっとりタイプ）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、ORGANICクリーム（しっとりタイプ）前処理を得た。
【０１１４】
【表１６】
2014221740.tif 000017
【０１１５】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解し、A相を加えて攪拌する。D相を80℃まで加熱し、攪拌溶解し、B相/A相に加え乳化機で乳化する。更にC相を加えて35℃まで冷却し、ORGANICクリーム（しっとりタイプ）を得た。
【０１１６】
【表１７】
2014221740.tif 000018
【０１１７】
オウヒ抽出液、マツバ抽出液を含む美容液（しみ・くすみ対策）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、ORGANIC美容液（しみ・くすみ対策）前処理を得た。
【０１１８】
【表１８】
2014221740.tif 000019
【０１１９】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、A相をを加えて攪拌し、ORGANIC美容液（しみ・くすみ対策）を得た。
【０１２０】
【表１９】
2014221740.tif 000020
【０１２１】
オウヒ抽出液、マツバ抽出液を含む美容液（しわ・たるみ対策）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、ORGANIC美容液（しわ・たるみ対策）前処理を得た。
【０１２２】
【表２０】
2014221740.tif 000021
【０１２３】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、A相をを加えて攪拌し、ORGANIC美容液（しわ・たるみ対策）を得た。
【０１２４】
【表２１】
2014221740.tif 000022
【０１２５】
マツバ抽出液、カキドオシ抽出液、コウボク抽出液を含むアイクリームの製造
下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解し、A相（前述の「ORGANICクリーム（さっぱりタイプ）前処理」及び「ORGANIC乳液（しっとりタイプ）前処理」）を加えて攪拌する。D相を80℃まで加熱し、攪拌溶解し、B相/A相に加え乳化機で乳化する。更にC相を加えて35℃まで冷却し、ORGANICアイクリームを得た。
【０１２６】
【表２２】
2014221740.tif 000023
【０１２７】
マツバ抽出液、カキドオシ抽出液、コウボク抽出液、オウヒ抽出液を含むクレンジングオイルの製造
下表のA相を80℃まで加熱し、攪拌溶解する。40℃まで冷却し、B相を加えて乳化機で攪拌し、ORGANICクレンジングオイルを得た。
【０１２８】
【表２３】
2014221740.tif 000024
【０１２９】
〔実施例４：化粧品の製造（比較例）〕
比較例として、桜皮、厚朴、垣通、松葉のいずれの抽出物も添加されていない化粧品を製造した。
【０１３０】
比較例 美容液（しみ・くすみ対策）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、比較例 美容液（しみ・くすみ対策）前処理を得た。
【０１３１】
【表２４】
2014221740.tif 000025
【０１３２】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、A相を加えて攪拌し、比較例 美容液（しみ・くすみ対策）を得た。
【０１３３】
【表２５】
2014221740.tif 000026
【０１３４】
本比較例は、実施例３のオウヒ抽出液及びマツバ抽出液を含む「ORGANIC美容液（しみ・くすみ対策）」に対する比較例である。
比較例 美容液（しわ・たるみ対策）の製造
下表の水相Aと油相Bをそれぞれ80℃に過熱し、溶解する。AをBに加え、乳化機で乳化し、35℃まで冷却する。乳化物を高圧処理（25℃、200MPa、5Pass）を行い、比較例 美容液（しわ・たるみ対策）前処理を得た。
【０１３５】
【表２６】
2014221740.tif 000027
【０１３６】
次いで、下表のB相を70℃まで加熱し、攪拌溶解する。35℃まで冷却し、A相をを加えて攪拌し、比較例 美容液（しわ・たるみ対策）を得た。
【０１３７】
【表２７】
2014221740.tif 000028
【０１３８】
本比較例は、実施例３のオウヒ抽出液及びマツバ抽出液を含む「ORGANIC美容液（しわ・たるみ対策）」に対する比較例である。
〔実施例５：化粧品の官能試験〕
製造された化粧品の官能試験をパネラー20名（20代〜60代の女性）によって実施した。製造された美容液を適量（0.2〜0.5ml）手に取った後、洗顔後の肌に右と左の顔に半分ずつ塗布してなじませた。約一カ月間、一日2回、連続使用し、比較例と比べたところ、炎症やシワ、シミ、くすみが改善しアンチエイジング効果が見られた。
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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