(57)【要約】  【課題】ＡＩ−２の活性を阻害し、感染症、特に細菌性口腔疾患を予防、治療若しくは改善するための医薬品又は食品として有用なＡＩ−２阻害剤の提供。  【解決手段】α−テルピネオールを有効成分とするＡＩ−２阻害剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
α−テルピネオールを有効成分とするＡＩ−２阻害剤。
【請求項２】
α−テルピネオールを有効成分とする歯周病の予防又は治療剤。
【請求項３】
α−テルピネオールを有効成分とする齲蝕の予防又は治療剤。
【請求項４】
α−テルピネオールを０．００１質量％以上、０.０１質量％以下で含有する請求項１記載のＡＩ−２阻害剤、請求項２記載の歯周病の予防又は治療剤、又は請求項３記載の齲蝕の予防又は治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、感染症の予防又は治療に有用なオートインデューサー−２（以下、「ＡＩ−２」と称する）阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
自然界において、微生物は様々な環境下で生存しなければならない。貧栄養、低温度、高温、ｐＨ変化はもちろんのこと、生体内においては貪食細胞または抗菌性液性因子（補体、抗体、リゾチーム等）が存在する環境での生存を余儀なくされる。このような状況下で、細菌は自らの存在環境の変化を敏感に感知する機構を獲得してきた。そのような機構の１つとして、微生物は特異的な情報伝達物質を介して環境における自らの濃度を感知し、その濃度に応じて自らの様々な生物活性を巧妙に制御していることが明らかとなっている。このような細胞間の情報伝達機構は、クオラムセンシングシステムと称される。
【０００３】
クオラムセンシングは、発光性海洋細菌であるビブリオ・フィシェリおよびビブリオ・ハーベイにおいて最初に報告された。しかし、最近では、多くの細菌における一般的な遺伝子調節機構であると認識されている。この現象により、細菌は、生物発光、スウォーミング、バイオフィルム形成、タンパク質分解酵素の産生、抗生物質の合成、遺伝子受容能の発達、プラスミド接合伝達、病原因子産生および胞子形成等といった活動を一斉に行うことができる。
【０００４】
クオラムセンシングシステムを有する細菌は、オートインデューサーと呼ばれるシグナル伝達分子を合成し、放出し、細胞密度の増減によりシグナル伝達分子の応答性が変化することで、そのシグナル伝達分子に応答して遺伝子発現を制御する。これまで、アシルホモセリンラクトンがオートインデューサー−１（ＡＩ−１）として、４，５−ジヒドロキシ−２，３−ペンタンジオンがＡＩ−２として同定されている。
【０００５】
ビブリオ属細菌、緑膿菌、セラチア、エンテロバクター等臨床上重要な細菌がクオラムセンシングにＡＩ−１を利用することが報告されている。また、ビブリオ・ハーベイが、種内情報伝達には種特異性の高いＡＩ−１を利用し、種間情報伝達には種特異性の低いＡＩ−２を利用することが報告されている（非特許文献１）。さらに最近の研究では、ＡＩ−２による病原性細菌の種間でのクオラムセンシングが、病原因子の産生を調節していることも示されている。
【０００６】
例えば、胃潰瘍および胃ガンを惹起すると言われているヘリコバクター・ピロリのＬｕｘＳ（ＡＩ−２合成酵素）欠損株では、細菌運動性が低下し、マウス胃粘膜への感染率が低下すること（非特許文献２）が報告されている。また、食中毒、ガス壊疽、出血性腸炎等の原因菌であるウェルシュ菌のＬｕｘＳ（ＡＩ−２合成酵素）欠損株において、α−、κ−、θ−毒素の産生が低下すること（非特許文献３）が報告されている。
【０００７】
また、近年、歯周病や齲蝕に関わる口腔内細菌からＡＩ−２が産生されていることが報告されていること（非特許文献４）、歯周病原性細菌であるポルフィロモナス・ジンジバリスのＬｕｘＳ欠損株において、ジンジパイン活性が低下すること（非特許文献５）、同菌へのＡＩ−２添加によってバイオフィルム形成が促進されること（非特許文献６）、齲蝕原性細菌であるストレプトコッカス・ミュータンスのＬｕｘＳ欠損株において、バイオフィルム形成が低下する（非特許文献７）こと等が報告されている。
【０００８】
従って、ＡＩ−２の活性を阻害する物質は、各種感染症の予防又は治療に有用であると考えられ、これまでに、フラノン化合物（特許文献１、特許文献２）、シクロペンテン化合物（特許文献３）等が報告されている。
【０００９】
一方、パイン油、ネロリ油、オレンジ油、リナロエ油、ブチグレン油、ひのき油等の精油中に含まれるモノテルペンアルコールの一種であるα−テルピネオール (terpineol)は、ライラックに似た芳香を持ち、香料や化粧品、石鹸などへの添加物として使われている。また、血行促進作用があること（特許文献４）、ネズミに対する忌避効果があること（特許文献５）等が報告されている。
しかしながら、α−テルピネオールにＡＩ−２阻害作用があること、また抗菌作用を示さない濃度で、齲蝕や歯周病等の口腔疾患に対して有用であることはこれまでに知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２００９−１１４１２０号公報
【特許文献２】特表２００３−５３２６９８号公報
【特許文献３】特表２００５−５０６９５３号公報
【特許文献４】特開２００９−１３９３７１号公報
【特許文献５】特開２００８−１６２９０６号公報
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Bassler et al., Bacteriol.179:4043-4045,1997
【非特許文献２】Osaki T. et al., J. Med. Microbiol., 55(Pt11), 1477-1485, 2006
【非特許文献３】Ohtani K. et al., Mol. Microbiol., 44(1), 171-179, 2002
【非特許文献４】Frias J. et al., Infect.Immun., 69(5), 3431-3434, 2001
【非特許文献５】Burgess N. et al., Microbiology, 148, 763-772, 2002
【非特許文献６】Jang Y.J. et al., Arch. Oral Biol., 58(1), 17-27, 2013
【非特許文献７】Merritt J. et al., Infect.Immun., 71(4), 1972-1979, 2003
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、ＡＩ−２の活性を阻害し、感染症を予防、治療若しくは改善するための医薬品又は食品として有用なＡＩ−２阻害剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、上記課題に鑑み検討したところ、α−テルピネオールがＡＩ−２阻害活性を有し、ＡＩ−２を認識する病原細菌による各種感染症の予防、治療若しくは改善に有効であることを見出した。
【００１４】
すなわち、本発明は、以下の１）〜３）に係るものである。
１）α−テルピネオールを有効成分とするＡＩ−２阻害剤。
２）α−テルピネオールを有効成分とする歯周病の予防又は治療剤。
３）α−テルピネオールを有効成分とする齲蝕の予防又は治療剤。
【発明の効果】
【００１５】
本発明のＡＩ−２阻害剤は、ＡＩ−２を認識する病原細菌による各種感染症、例えば、ポリフィロモナス・ジンジバリス等が原因となる歯周病、ストレプトコッカス・ミュータンス等が原因となる齲蝕、ヘリコバクター・ピロリが原因となる胃炎、ウェルシュ菌が原因となる食中毒、ガス壊疽、出血性腸炎等の感染症等を予防、治療若しくは改善するための医薬品、食品として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明におけるＡＩ−２としては、下記式で表される４，５−ジヒドロキシ−２,３−ペンタンジオン（本明細書において、ＤＰＤともいう）、及びＤＰＤが有するＡＩ−２活性と同等のＡＩ−２活性を有する化合物が挙げられる。
【化１】
2014136694.tif 000002
【００１７】
前記ＤＰＤは、細菌のＡＩ−２受容体と結合するときにボロンを取り込んで、フラノシルボレートジエステルに変換される。本発明におけるＡＩ−２には、前記フラノシルボレートジエステルが包含される。また、ＤＰＤはリン酸化されてリン酸化ＤＰＤ（Phospho-DPD）となり、ＡＩ−２活性を発現することが知られていることから（例えば、Taga  M．et  al.，Mol．Microbiol.，2001，42，p．777-793参照）、本発明におけるＡＩ−２には、リン酸化ＤＰＤも包含される。
【００１８】
前記フラノシルボレートジエステル及びPhospho-DPDの化学構造式を以下に示す。
【００１９】
【化２】
2014136694.tif 000003
【００２０】
本発明においてＡＩ−２を阻害することは、ＡＩ−２がクオラムセンシングを介して細菌に及ぼす影響を阻害することをさし、ＡＩ−２活性を阻害すること、ＡＩ−２を分解すること、ＡＩ−２のＡＩ−２受容体への結合を阻害することなどが包含される。
ここで、ＡＩ−２活性は、ＡＩ−２がクオラムセンシングシステムを有する細菌に影響を及ぼす活性、すなわち、ＡＩ−２よりもたらされる細菌の機能を促進する活性をさす。細菌は、ＡＩ−２により発光、スウォーミング、バイオフィルム形成、タンパク質分解酵素の産生、抗生物質の合成、遺伝子受容能の発達、プラスミド接合伝達、病原因子産生および胞子形成を行うことが知られている。従って、ＡＩ−２活性は、換言すれば、ＡＩ−２を認識する細菌、すなわちＡＩ−２受容体を有する細菌による生物発光、スウォーミング、バイオフィルム形成、タンパク質分解酵素の産生、抗生物質の合成、遺伝子受容能の発達、プラスミド接合伝達、病原因子産生および胞子形成の活性ということができ、本発明においては、ＡＩ−２活性は、特に、細菌の病原因子産生活性をさす。
【００２１】
細菌の病原因子としては、例えば、エンテロトキシン、アデニル酸シクラーゼ毒素、アドヘシン、アルカリプロテアーゼ、溶血毒、炭疽毒素、ＡＰＸ毒素、α毒素、β毒素、δ毒素、Ｃ２毒素、Ｃ３毒素、ボツリヌス毒素、束状線毛構造サブユニット、Ｃ５Ａペプチダーゼ、心臓毒、走化性、コレラ毒素、毛様体毒素、クロストリジウム細胞毒、クロストリジウム神経毒、コラーゲン接着遺伝子、細胞溶解素、嘔吐毒素、内毒素、表皮剥脱毒素、外毒素、細胞外エラスターゼ、フィブリノゲン、フィブロネクチン結合タンパク質、線維状赤血球凝集素、フィンブリア、ゼラチナーゼ、赤血球凝集素、ロイコトキシン、リポタンパク質シグナルペプチダーゼ、リステリオリシンＯ、Ｍタンパク質、神経毒、非フィンブリアアドヘシン類、浮腫因子、透過酵素、百日咳毒素、ホスホリパーゼ、線毛、孔形成毒素、プロリンパーミアーゼ、セリンプロテアーゼ、志賀毒素、破傷風毒素、チオール活性化細胞溶解素、気管細胞溶解素、ウレアーゼ等が挙げられるがこれに制限されない。
【００２２】
本発明のＡＩ−２阻害剤で影響を及ぼすことができる細菌、換言すれば、本発明のＡＩ−２阻害剤で病原性を抑制できる細菌は、ＡＩ−２によりその機能が促進される細菌である。例えば、ＡＩ−２受容体を有する細菌、好ましくはＡＩ−２受容体を有し、ＡＩ−２を産生する細菌が挙げられる。斯かる細菌としては、例えば、ビブリオ（Vibrio）属細菌、シュードモナス（Pseudomonas）属細菌、ポルフィロモナス（Porphyromonas）属細菌、トレポネマ（Treponema）属細菌、タネレラ(Tannerella)属細菌、エルシニア（Yersinia）属細菌、エシェリキア（Escherichia）属細菌、サルモネラ（Salmonella）属細菌、ヘモフィルス（Haemophilus）属細菌、ヘリコバクター（Helicobacter）属細菌、バシルス（Bacillus）属細菌、ボレリア（Borrelia）属細菌、ナイセリア（Neisseria）属細菌、カンピロバクター（Campylobacter）属細菌、デイノコックス（Deinococcus）属細菌、ミコバクテリウム（Mycobacterium）属細菌、エンテロコッカス（Enterococcus）属細菌、ストレプトコッカス（Streptococcus）属細菌、シゲラ（Shigella）属細菌、エロモナス（Aeromonas）属細菌、エイケネラ（Eikenella）属細菌、クロストリジウム（Clostridium）属細菌、スタフィロコッカス（Staphylococcus）属細菌、ラクトバチルス（Lactobacillus）属細菌、アクチノバチルス（Actinobacillus）属細菌、アクチノマイセス（Actinomyces）属細菌、アグリゲティバクター（Aggregatibacter）属細菌、バクテロイデス（Bacteroides）属細菌、カプノサイトファガ（Capnocytophaga）属細菌、クレブシエラ（Klebsiella）属細菌、ハロバチルス（Halobacillus）属細菌、フゾバクテリウム（Fusobacterium）属細菌、エルウィニア（Erwinia）属細菌、エルベネラ（Elbenella）属細菌、ラクトバチルス（Lactobacillus）属細菌、リステリア（Listeria）属細菌、マンヘイミア（Mannheimia）属細菌、ペプトコッカス（Peptococcus）属細菌、プレボテラ（Prevotella）属細菌、プロテウス（Proteus）属細菌、セラチア（Serratia）属細菌およびベイロネラ（Veillonella）属細菌等が挙げられる。
【００２３】
より具体的には、ビブリオ・ハーベイ（Vibrio harveyi）、ビブリオ・フィシェリ（Vibrio fischeri）、コレラ菌（Vibrio cholerae）、腸炎ビブリオ（Vibrio parahaemolyticus）、ビブリオ・アルギノリチカス（Vibrio alginolyticus）、シュードモナス・ホスホレウム（Pseudomonas phosphoreum）、ポリフィロモナス・ジンジバリス（Porphyromonas gingivalis）、タネレラ・フォーサイシア(Tannerella forsythia)、トレポネマ・デンティコラ(Treponema denticola)、エルシニア・エンテロコリチカ（Yersinia enterocolitica）、大腸菌（Escherichia coli）、ネズミチフス菌（Salmonella typhimurium）、インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）、ヘリコバクター・ピロリ（Helicobacter pylori）、枯草菌（Bacillus subtilis）、ボレリア・ブルグドルフェリ（Borrelia burgfdorferi）、髄膜炎菌（Neisseria meningitidis）、淋菌（Neisseria gonorrhoeae）、ペスト菌（Yersinia pestis）、カンピロバクター・ジェジュニ（Campylobacter jejuni）、デイノコックス・ラジオデュランス（Deinococcus radiodurans）、結核菌（Mycobacterium tuberculosis）、エンテロコッカス・フェカリス（Enterococcus faecalis）、肺炎レンサ球菌（Streptococcus pneumoniae）、化膿レンサ球菌（Streptococcus pyogenes）、ストレプトコッカス・ミュータンス（Streptococcus mutans）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）、箕田赤痢菌（Shigella flexneri）、シゲラ・ボイデイ（Shigella boydii）、セレウス菌（Bacillus cereus）、バチルス・クブチリス（Bacillus cubtilis）、エロモナス・ハイドロフィラ（Aeromonas hydrophila）、チフス菌（Salmonella enterica）、エイケネラ・コロデンス（Eikenella corrodens）、ヘリコバクター・ヘパティカス（Helicobacter hepaticus）、ウェルシュ菌（Clostridium perfringens）、スタフィロコッカス・ハエモリティカス（Staphylococcus haemolyticus）、ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri）、ラクトバチルス アシドフィラス（Lactobacillus acidophilus）、ラクトバチルス・ロイテリ（Lactobacillus reuteri）、ラクトバチルス・サリバリウス（Lactobacillus salivarius）、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ストレプトコッカス・サンギニス（Streptococcus sanguinis）、ストレプトコッカス・アンギノーサス（Streptococcus anginosus）、ストレプトコッカス・オラリス（Streptococcus oralis）、ストレプトコッカス・ボビス（Streptococcus bovis）、ストレプトコッカス・ゴルドニ（Streptococcus gordonii）、ストレプトコッカス・ミティス（Streptococcus mitis）、アグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス (Aggregatibacter actinomycetemcomitans)、ビブリオ・ブルニフィカス（Vivrio vulnificus）、ビブリオ・ミミクス（Vibrio mimicus）、ビブリオ・アングイラルム（Vibrio anguillarum）、ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）、エルウィニア・アミロボラ（Erwinia amylovora）、エルウィニア・カロトバラ（Erwinia carotovara）、ハロバチルス・ハロフィラス（Halabacilus halophilus）、セラチア・ピムチカ（Serratia pymuthica）、セラチア・マルセセンス（Serratia marcescens）、バクテロイデス・フラジリス（Bacteroides fragilis）、バクテロイデス・ブルガタス（Bacteroides vulgatus）、バクテロイデス・ディスタソニス（Bacteroides distasonis）、リステリア・モノサイトジェネス（Listeria monocytogenes）、スタフィロコッカス・エピデルミディス（Staphylococcus epidermidis）、クロストリジウム・ディフィシル（Clostridium difficile）、アエロモナス・ハイドロフィリア（Aeromonas hydrophilia）、マンヘイミア・ハエモライティカ（Mannhemia haemolytica）、クレブシエラ・ニューモニアエ（Klebsiella pneumoniae）、バチルス・アンスラシス（Bacillus anthracis）、カンピロバクター・コリ（Campylobacter coli）、カンピロバクター・レクタス（Campylobacter rectus）、プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）、アクチノマイセス・ナエスランディ（Actinomyces naeslundii）、アクチノマイセス・イスラエリ（Actinomyces israelii）、アクチノマイセス・ビスコーサス（Actinomyces viscosus）、ペプトコッカス・アナエロビウス（Peptococcus anaerobius）、フゾバクテリウム・ヌクレアタム（Fusobacterium nucleatum）、ベイロネラ・パルラ（Veillonella parvula）、カプノサイトファガ・スプティゲナ（Capnocytophaga sputigena）およびプレボテラ・インタメディア（Prevotella intermedia）等が挙げられる。
【００２４】
ＡＩ−２活性は、ＡＩ−２を認識することにより発光するレポーター細菌、好ましくはＡＩ−２受容体およびルシフェラーゼを有する細菌を用いるバイオアッセイにより測定することができる（Keersmaecker S.C.J. et al., J. Biol. Chem., 280(20), 19563-19568, 2005）。具体的には、ビブリオ・ハーベイＢＢ１７０株をレポーター細菌とし、被検化合物の存在下で培養し、培養後の発光強度をケミルミネッセンス計等で測定することにより、ＡＩ−２活性を測定することができる。
【００２５】
本発明におけるα−テルピネオールは、下記式（１）：
【００２６】
【化３】
2014136694.tif 000004
【００２７】
で表される環状モノテルペン化合物である。斯かるα−テルピネオールには、立体異性体が存在し、本発明では、純粋な立体異性体又はそれらの混合物を用いることができる。
【００２８】
α−テルピネオールは、市販品を使用することができる他、パイン油等の各種精油の分留によって得ることができる。一般的にはα-ピネン、テレビン油（主成分：α-ピネン，β-ピネン，3-カレン）、ジペンテン等を原料とする化学合成が用いられている。例えば、α-ピネン、テレビン油、ジペンテン等を希硫酸、ギ酸、リン酸等を用いて加水反応を行い、生成したテルピン（トランス体）又は抱水テルピン（シス体）をリン酸、シュウ酸溶液、希硫酸、ベンゼンスルホン酸、o-キノリンスルホン酸等の脱水剤で処理してα-テルピネオールを得る製造法が知られている。また、触媒として硫酸等のpKaが2.5〜-10であるブレンステッド酸を用いて、α-ピネン、β-ピネン又は3-カレンにモノクロロ酢酸と水を反応させることにより、製造することもできる（特開平9-278692号公報）。
【００２９】
α−テルピネオールは、後記実施例に示すように、ビブリオ・ハーベイにおけるＡＩ−２活性を抑制し、また歯周病モデルの歯槽骨吸収を有意に抑制する。従って、α−テルピネオールは、ＡＩ−２を利用するクオラムセンシングシステムを有する細菌に関連する感染症、例えば齲蝕、歯周病等の口腔感染症の予防、治療又は改善のために使用できる。当該使用は、ヒト若しくは非ヒト動物、又はそれらに由来する検体における使用であり得、また治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。ここで、「非治療的」とは、医療行為、すなわち治療による人体への処理行為を含まない概念である。
また、α−テルピネオールは、ＡＩ−２阻害剤、歯周病や齲蝕の予防又は治療剤（以下、ＡＩ−２阻害剤等と称する）として使用することができ、さらにこれらの剤を製造するために使用することができる。
【００３０】
また、下記実施例に記載のとおり、ＡＩ−２阻害剤は、α−テルピネオールの濃度が０．００１〜０．０１質量％の場合、Porphyromonas gingivalis（P.g）、Fusobacterium nucleatum（F.n）、Streptococcus mutans（S.m）のような歯周病・齲蝕関連細菌に対する抗菌作用をほとんど示さない。従って、この場合の、本発明のＡＩ−２阻害剤等は、非抗菌性のＡＩ−２阻害剤等であり、抗菌作用によらず、ＡＩ−２を認識する病原細菌による各種感染症、特に歯周病や齲蝕の予防、治療若しくは改善を可能とするものである。したがって、抗菌性の歯周病又は齲蝕の予防又は治療剤とは区別される。
尚、「非抗菌性」とは、細菌の増殖及び／又は生育を抑制しないことをさす。
【００３１】
当該ＡＩ−２阻害剤等は、ＡＩ−２阻害、歯周病や齲蝕等の感染症の予防、治療又は改善効果を発揮する、ヒト若しくは動物用の医薬品、医薬部外品又は食品として使用できる。このとき、当該ＡＩ−２阻害剤等には、本発明のα−テルピネオールを単独で、又はこれ以外に、必要に応じて、後述の配合すべき対象物において許容される担体等を配合してもよい。なお、当該製剤は配合すべき対象物に応じて常法により製造することができる。
また、食品としては、ＡＩ−２阻害、歯周病、齲蝕等の感染症の予防又は治療、改善等の生理機能をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した飲食品、機能性飲食品、病者用飲食品、特定保健用食品等を包含する。
【００３２】
ここで、感染症とは、例えば、日和見生物により引き起こされる日和見感染症、肺炎レンサ球菌およびインフルエンザ菌等により引き起こされる急性中耳炎（ＡＯＭ）および滲出性中耳炎（ＯＭＥ）、インフルエンザ菌により引き起こされるインフルエンザ、ヘリコバクター・ピロリにより引き起こされる十二指腸潰瘍および胃潰瘍、コレラ菌により引き起こされるコレラ、ペスト菌により引き起こされるペスト、髄膜炎菌により引き起こされる髄膜炎、ネズミチフス菌等のサルモネラ属細菌により引き起こされるサルモネラ中毒、および大腸菌等により引き起こされる下痢症、ポリフィロモナス・ジンジバリス等が原因となる歯周病、ストレプトコッカス・ミュータンス等により引き起こされる齲蝕等が挙げられる。
【００３３】
尚、本明細書において、歯周病又は齲蝕の予防には、歯周病又は齲蝕の発症を抑えること及び遅延させることが含まれ、歯周病又は齲蝕になる前の予防だけではなく、治療後の歯周病又は齲蝕の再発に対する予防も含まれる。本明細書において歯周病又は齲蝕の治療には、歯周病又は齲蝕を治癒すること、症状を改善すること及び症状の進行を抑えることが包含される。
【００３４】
上記医薬品（医薬部外品も含む）の剤形は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、静脈内注射、筋肉注射剤、坐剤、吸入剤、経皮吸収剤、点眼剤、点鼻剤、湿布剤、パップ剤、軟膏、ローション、クリーム、口腔用製剤等の何れでもよく、投与形態も、経口投与（内用）、非経口投与（外用、注射）の何れであってもよいが、好ましい形態は経口投与である。
このような種々の剤型の医薬製剤は、α−テルピネオールを単独で、又は他の薬学的に許容される賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等を適宜組み合わせることにより調製することができる。
【００３５】
上記食品の形態は、固形、半固形又は液状であり得、例えば、パン類、ケーキ類、麺類、菓子類、ゼリー類、冷凍食品、アイスクリーム類、乳製品、飲料等の各種食品の他、上述した経口投与製剤と同様の形態（錠剤、カプセル剤、シロップ等）が挙げられる。また、飲料は、例えば、果汁飲料、炭酸飲料、茶系飲料、ニアウオーター、スポーツ飲料、乳飲料、アルコール飲料、清涼飲料等が挙げられる。
種々の形態の食品は、α−テルピネオールを単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせることにより調製することができる。
【００３６】
本発明のＡＩ−２阻害剤等におけるα−テルピネオールの濃度は、０．００１質量％以上、０.０１質量％以下であるが、より好ましくは０．００５質量％以上である。具体的には、０．００５質量％〜０．０１質量％が挙げられる。
【００３７】
本発明のＡＩ−２阻害剤の投与量（有効摂取量）は、α−テルピネオールとして、１日あたり０．０１ｍｇ／ｋｇ以上、好ましくは０．０５ｍｇ／ｋｇ以上であり、そして好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ以下である。例えば０．０１ｍｇ〜０．１ｍｇ／ｋｇ／日が挙げられる。
【００３８】
本発明のＡＩ−２阻害剤等の投与対象は、好ましくは温血脊椎動物であり、より好ましくは哺乳動物である。本明細書において哺乳動物は、例えば、ヒト、並びにサル、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタなどの非ヒト哺乳動物が挙げられる。本発明のＡＩ−２阻害剤等は、ヒト、サルなどの霊長類、特にヒトへの投与に好適である。歯周病又は齲蝕に罹患しているヒト、歯周病又は齲蝕と診断されているヒト、歯周病又は齲蝕に罹患する可能性があるヒト、歯周病又は齲蝕を予防する必要があるヒトに投与することが特に好ましい。
【００３９】
上述した実施形態に関し、本発明においては更に以下の態様が開示される。
＜１＞α−テルピネオールを有効成分とするＡＩ−２阻害剤。
＜２＞α−テルピネオールを有効成分とする口腔感染症の予防又は治療剤。
＜３＞ＡＩ−２阻害剤を製造するための、α−テルピネオールの使用。
＜４＞口腔感染症の予防又は治療剤を製造するための、α−テルピネオールの使用。
＜５＞ＡＩ−２阻害に使用するためのα−テルピネオール。
＜６＞口腔感染症の予防又は治療に使用するためのα−テルピネオール。
＜７＞α−テルピネオールを、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取するＡＩ−２阻害方法。
＜８＞α−テルピネオールを、それらを必要とする対象に有効量で投与又は摂取する口腔感染症の予防又は治療方法。
＜９＞非治療的な方法である前記＜７＞〜＜８＞の方法。
＜１０＞上記＜２＞、＜４＞、＜６＞及び＜８＞における口腔感染症は、好ましくは齲蝕又は歯周病である。
＜１１＞上記＜１＞、＜２＞、＜３＞及び＜４＞において、α−テルピネオールの濃度は、０．００１質量％以上、０.０１質量％以下であり、より好ましくは０．００５質量％以上である。
＜１２＞上記＜５＞、＜６＞、＜７＞及び＜８＞において、α−テルピネオールの使用量は、１日あたり０．０１ｍｇ／ｋｇ以上、好ましくは０．０５ｍｇ／ｋｇ以上であり、そして好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ以下である。
【実施例】
【００４０】
実施例１  ＡＩ−２阻害活性
（１）AI-2測定用菌株・培地作成
AI-2バイオアッセイ系のためのレポーター菌株はビブリオ・ハーベイVibrio harveyi BB170株（ATCC BAA-1117）を用いた。AB（Autoinducer Bioassay）培地はBasslerらの方法を参照し調製した（Mol Microbiol,9(4),773-786,1993）。0.2% Vitamin-free casamino acids（Difco、和光）、0.3M NaCl（和光）、0.05M MgSO4・7H2O（和光）の溶液を任意の濃度のKOH溶液（和光）でpH7.5に調整し、オートクレーブ後室温で保存した。1M リン酸カリウムバッファー（1M KH2PO4 21.1ml+1M K2HPO4 28.9ml）10ml、0.1M L-arginine(free-base、和光) 10ml、1mg/ml thiamine HCl（和光） 1ml、10μg/ml riboflavin（和光）1ml、glycerol（和光）20mlをよく混和後、濾過滅菌したもの42mlを上記溶液1Lに対し添加した。
【００４１】
（２）レポーター菌の調製及びAI-2阻害活性の測定
Marine Agar2216（Difco）で30℃、好気条件下で培養したレポーター菌株を、3mlのMarine Broth2216（Difco）に一白金耳植菌し、これを好気条件下8時間、30℃、200rpmで振盪培養を行った。またAB培地に上記菌液200μl植菌し、更に好気条件下16時間、30℃、200rpmで振盪培養を行った。この菌液をAB培地で5000倍に希釈し、レポーター菌液とした。このレポーター菌液と、α−テルピネオール溶液を、9：1の割合で混和し、室温で10分プレインキュベートした後、AI-2（4,5-dihydroxy-2,3-pentanedione、OMM Scientific、終濃度10μM）を添加し、30℃にて好気振盪培養し、4時間後の発光強度をケミルミネッセンス計（ベルトールド）で測定した。
AI-2阻害活性は10μM AI-2が惹起する発光強度を完全に抑制した場合を100とした相対値で示した。α−テルピネオール（日本テルペン）は終濃度が0.001、0.005、0.01％になるように調製した。結果を表１に示す。
表１より、α−テルピネオールは濃度依存的なAI-2阻害活性を示した。
【００４２】
【表１】
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【００４３】
実施例２  歯周病モデルにおける歯槽骨吸収抑制作用
シリアンハムスター（7週齢、雄）の下顎左右第一臼歯歯頚部に絹糸を結紮し、当日より同結紮部位に、0.01％α−テルピネオール溶液またはコントロール（溶媒のみ）である陰性対照  200μlを1日2回、10日間滴下し、各群8匹にて飼育した。飼育終了後、麻酔下にて下顎骨を摘出し、摘出下顎骨の舌側面における第一臼歯近心咬頭頂から歯槽骨頂上までの垂直距離を測定し、歯槽骨吸収量とした。結果を表２に示す。
表２より、α−テルピネオール（0.01％濃度）は、歯周病モデルの歯槽骨吸収を抑制した。
【００４４】
【表２】
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【００４５】
実施例３  歯周病・齲蝕関連細菌に対する抗菌作用
終濃度が0.01％になるように調製したα−テルピネオール400μlと任意の菌濃度に調製した菌液100μlを30秒攪拌混合し、任意濃度に希釈後、GAM寒天培地（日水製薬）またはBHI寒天培地（Difco）に播種した。37℃で嫌気培養後、生育コロニー数をカウントした。コントロールは溶媒のみとした。評価菌はPorphyromonas gingivalis（P.g）、Fusobacterium nucleatum（F.n）、Streptococcus mutans（S.m）とした。結果を表３に示す。
表３より、α−テルピネオールには、代表的な歯周病・齲蝕関連細菌に対する抗菌作用は認められないことが示された。したがって、α−テルピネオールのAI-2阻害作用は、抗菌作用に基づくものではないと云える。
【００４６】
【表３】
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