(57)【要約】【解決手段】カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される、少なくとも一種を有効成分として含む、エラスチン産生促進剤。【効果】本発明のエラスチン産生促進剤は、エラスチン産生を効果的に促進することができ、加齢とともに進行する皮膚のシワ、クスミ、弾力性低下等の老化現象の予防、改善が期待できるため、医薬品、医薬部外品、化粧料等の皮膚外用剤等に幅広く適用することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される、少なくとも一種を有効成分として含む、エラスチン産生促進剤。
【請求項２】
前記カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩が、下記一般式（１）で表わされる化合物および一般式（２）で表わされる化合物であることを特徴とする、請求項１に記載のエラスチン産生促進剤。
【化１】
2014221729.tif 000018
（式中、Ｒ0は炭素数１〜３７の脂肪族炭化水素基、水素原子、−ＣＯＲ1のいずれかを表す。Ｒ1は炭素数１〜３６の脂肪族炭化水素基を示す）
【化２】
2014221729.tif 000019
（式中、Ｒ0は前記式（１）と同様であり、Ｘ-はｍ価の無機アニオンまたは有機アニオンを表し、Ｙ+はｎ価の無機カチオンまたは有機カチオンを表す。ｍおよびｎはそれぞれ独立に１〜４の整数を表す）
【請求項３】
前記一般式（１）で表わされる化合物が下記一般式（３）で表わされる化合物であり、前記一般式（２）で表わされる化合物が下記一般式（４）で表わされる化合物である、請求項２に記載のエラスチン産生促進剤。
【化３】
2014221729.tif 000020
（式中、Ｒ1は炭素数１〜３６の脂肪族炭化水素基を表す）
【化４】
2014221729.tif 000021
（式中、Ｒ1は前記式（３）と同様であり、Ｘ-およびＹ+は前記一般式（２）と同様である）
【請求項４】
前記一般式（３）で表わされる化合物が下記一般式（５）で表わされる化合物であり、前記一般式（４）で表わされる化合物が下記一般式（６）で表わされる化合物である、請求項３に記載のエラスチン産生促進剤。
【化５】
2014221729.tif 000022
（式中、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立に、炭素数１〜１８の脂肪族炭化水素基を表す）
【化６】
2014221729.tif 000023
（式中、Ｒ2およびＲ3は一般式（５）と同様であり、Ｘ-およびＹ+は前記一般式（２）と同様である）
【請求項５】
前記式（５）および式（６）中の、Ｒ2およびＲ3がそれぞれ独立に、炭素数３〜１６の脂肪族炭化水素基であることを特徴とする請求項４に記載のエラスチン産生促進剤。
【請求項６】
前記式（５）および式（６）のそれぞれにおいて、Ｒ2およびＲ3のいずれか一方がｎ−ヘキシル基であり、他方がｎ−オクチル基であることを特徴とする請求項４に記載のエラスチン産生促進剤。
【請求項７】
前記式（２）、（４）および（６）中のＸ-が、水酸化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオン、炭酸イオン、炭酸水素イオン、ハロゲン化物イオン、蟻酸イオン、酢酸イオン、クエン酸イオン、酒石酸イオン、シュウ酸イオン、フマル酸イオン、炭素数３〜２０の脂肪酸のアニオン、カルニチンおよびその誘導体のアニオン、アスコルビン酸のアニオン、アスコルビルリン酸およびその誘導体のアニオンからなる群より選ばれるアニオンであることを特徴とする、請求項２〜６のいずれかに記載のエラスチン産生促進剤。
【請求項８】
前記式（２）、（４）および（６）中のＹ+が、水素イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、アンモニウムイオン、カルニチンおよびその誘導体のカチオンからなる群より選ばれるものであることを特徴とする、請求項２〜７のいずれかに記載のエラスチン産生促進剤。
【請求項９】
カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される少なくとも一種の含有量が０．２〜５００ ｍＭであることを特徴とする、請求項１〜８のいずれかに記載のエラスチン産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エラスチン産生促進剤に関する。より詳しくは、カルニチン等を含有し、化粧料等の皮膚外用剤に利用できるエラスチン産生促進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は外側から角層、表皮、基底膜および真皮より構成されている。その中で真皮は細胞外マトリックスと呼ばれる巨大分子の網目構造によって満たされている。この細胞外マトリックスは、真皮内の線維芽細胞等において産生され、ヒアルロン酸やデルマタン硫酸等の酸性ムコ多糖と呼ばれる多糖類と、コラーゲン、エラスチン等の線維性タンパク質で構成されている。細胞外マトリックスは、皮膚の弾力性、はり、みずみずしさ、新陳代謝等に直接的に関わっており、線維芽細胞等における細胞外マトリックスの産生が鈍ると、皮膚の弾力性やみずみずしさが失われ、シワ、小ジワ、肌荒れが発生しやすくなり、皮膚老化がもたらされる一因になる。
【０００３】
線維性タンパク質はコラーゲンと弾性線維から成り、皮膚のしわやはり、たるみに密接に関係している。たとえば、コラーゲンは皮膚に張り強度を与え、他方、弾性線維は、加圧により一時的に変形した皮膚を復元させる弾性を与えるものである。このような機能を有する弾性線維は、横紋のない線維状構造（micro-fibril)とその間隙を充填する無定形構造を持ち、それぞれフィブリリン（fibrillin）とエラスチン（elastin）とからなっている。このうち、エラスチンは真皮の総タンパク質の約２％を占め、ゴムのように伸縮自在なネットワーク構造を作っている。このように皮膚の弾性は、真皮層に存在する弾性線維の中のエラスチンに依存する度合いが大きい。このため、皮膚におけるエラスチンの減少、変質は、皮膚の柔軟性や弾力性を損なう要因であり、しわ、たるみの発生、肌のはりの低下等の皮膚老化の原因となる。また、加齢により線維芽細胞のエラスチン産生は減少することが知られている。
【０００４】
従って、皮膚の老化を抑制し、皮膚の弾力を改善するために、エラスチンを増大させるエラスチン産生促進剤等に対する需要が増している。
現在、報告されているエラスチン産生促進剤としては、グリコーゲン(特許文献１)や植物抽出物等（特許文献２）があるが、その効果は十分ではなく、より強力はエラスチン産生促進剤が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１２−０６２２７３号公報
【特許文献２】特開２０１２−０５６９３３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、上述のような状況をふまえ、優れたエラスチン産生促進剤を提供する
ことにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、エラスチン産生促進剤に関する研究を重ねた結果、カルニチンやカルニチン誘導体等に優れたエラスチン産生促進能があることを見出し、本発明を完成させるに至った。すなわち、本発明は以下に示す[１]〜[９]の事項を含むものである。
［１］カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される、少なくとも一種を有効成分として含む、エラスチン産生促進剤。
［２］前記カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩が、下記一般式（１）で表わされる化合物および一般式（２）で表わされる化合物であることを特徴とする、前記［１］に記載のエラスチン産生促進剤。
【０００８】
【化１】
2014221729.tif 000002
（式中、Ｒ0は炭素数１〜３７の脂肪族炭化水素基、水素原子、−ＣＯＲ1のいずれかを表す。Ｒ1は炭素数１〜３６の脂肪族炭化水素基を示す）
【０００９】
【化２】
2014221729.tif 000003
（式中、Ｒ0は前記式（１）と同様であり、Ｘ-はｍ価の無機アニオンまたは有機アニオンを表し、Ｙ+はｎ価の無機カチオンまたは有機カチオンを表す。ｍおよびｎはそれぞれ独立に１〜４の整数を表す）
【００１０】
［３］前記一般式（１）で表わされる化合物が下記一般式（３）で表わされる化合物であり、前記一般式（２）で表わされる化合物が下記一般式（４）で表わされる化合物である、前記［２］に記載のエラスチン産生促進剤。
【００１１】
【化３】
2014221729.tif 000004
（式中、Ｒ1は炭素数１〜３６の脂肪族炭化水素基を表す）
【００１２】
【化４】
2014221729.tif 000005
（式中、Ｒ1は前記式（３）と同様であり、Ｘ-およびＹ+は前記一般式（２）と同様である）
【００１３】
［４］前記一般式（３）で表わされる化合物が下記一般式（５）で表わされる化合物であり、前記一般式（４）で表わされる化合物が下記一般式（６）で表わされる化合物である、前記［３］に記載のエラスチン産生促進剤。
【００１４】
【化５】
2014221729.tif 000006
（式中、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立に、炭素数１〜１８の脂肪族炭化水素基を表す）
【００１５】
【化６】
2014221729.tif 000007
（式中、Ｒ2およびＲ3は一般式（５）と同様であり、Ｘ-およびＹ+は前記一般式（２）と同様である）
【００１６】
［５］前記式（５）および式（６）中の、Ｒ2およびＲ3がそれぞれ独立に、炭素数３〜１６の脂肪族炭化水素基であることを特徴とする前記［４］に記載のエラスチン産生促進剤。
［６］前記式（５）および式（６）のそれぞれにおいて、Ｒ2およびＲ3のいずれか一方がｎ−ヘキシル基であり、他方がｎ−オクチル基であることを特徴とする前記［４］に記載のエラスチン産生促進剤。
［７］前記式（２）、（４）および（６）中のＸ-が、水酸化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオン、炭酸イオン、炭酸水素イオン、ハロゲン化物イオン、蟻酸イオン、酢酸イオン、クエン酸イオン、酒石酸イオン、シュウ酸イオン、フマル酸イオン、炭素数３〜２０の脂肪酸のアニオン、カルニチンおよびその誘導体のアニオン、アスコルビン酸のアニオン、アスコルビルリン酸およびその誘導体のアニオンからなる群より選ばれるアニオンであることを特徴とする、前記［２］〜［６］のいずれかに記載のエラスチン産生促進剤。
【００１７】
［８］前記式（２）、（４）および（６）中のＹ+が、水素イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、アンモニウムイオン、カルニチンおよびその誘導体のカチオンからなる群より選ばれるものであることを特徴とする、前記［２］〜［７］のいずれかに記載のエラスチン産生促進剤。
［９］カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される少なくとも一種の含有量が０．２〜５００ ｍＭであることを特徴とする、前記［１］〜［８］のいずれかに記載のエラスチン産生促進剤。
【発明の効果】
【００１８】
本発明のエラスチン産生促進剤は、エラスチン産生を効果的に促進することができ、加齢とともに進行する皮膚のシワ、クスミ、弾力性低下等の老化現象の予防、改善が期待できるため、医薬品、医薬部外品、化粧料等の皮膚外用剤等に幅広く適用することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下、本発明について具体的に説明する。
本発明のエラスチン産生促進剤は、カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される少なくとも一種を有効成分として含有する。すなわち、本発明のエラスチン産生促進剤は、カルニチン、カルニチン誘導体、カルニチンの塩、およびカルニチン誘導体の塩のうちのいずれか１つを含有してもよく、あるいはこれらのうちの２つ以上を含有していてもよい。また、２種以上のカルニチン誘導体、２種以上のカルニチンの塩、２種以上のカルニチン誘導体の塩を含有してもよい。
＜カルニチンおよびその誘導体＞
本発明のエラスチン産生促進剤に用いられるカルニチンおよびカルニチンの誘導体は特に限定されず、合成されたものであっても、天然より抽出されたものであってもよい。
カルニチンは下記の構造を有する化合物である。
【００２０】
【化７】
2014221729.tif 000008
カルニチンの誘導体としては限定されないが、例えばカルニチンの炭素原子に結合した水素原子がアルキル基、水酸基、ニトロ基、アミノ基、スルホニル基等の置換基で置換されたもの、水酸基の水素原子が脂肪族炭化水素基等で置換されたものなどが挙げられる。中でも、水酸基の水素原子が脂肪族炭化水素基等で置換された誘導体が好ましい。
【００２１】
カルニチンおよびカルニチン誘導体は、好ましくは下記一般式（１）の構造で示される。
【００２２】
【化８】
2014221729.tif 000009
式（１）中、Ｒ0は炭素数１〜３７の脂肪族炭化水素基、水素原子、−ＣＯＲ1のいずれかを表す。Ｒ1は炭素数１〜３６の脂肪族炭化水素基を示す。Ｒ0が表す脂肪族炭化水素基およびＲ1は、分岐を有していてもいなくてもよく、飽和でも不飽和でもよい。中でもＲ0は、水素または−ＣＯＲ1であることが好ましい。
【００２３】
Ｒ0が脂肪族炭化水素基である場合、炭素数は１〜２５であることが好ましく、５〜１８であることがより好ましい。またＲ0は脂肪族炭化水素基である場合、飽和の脂肪族炭化水素基であることが好ましく、アルキレン基であることがより好ましい。アルキレン基は、分岐と直鎖いずれでも良い。またＲ0は、置換基を有さない方が好ましいが、化合物の物性に影響を与えない範囲において、置換基を有してもよい。
【００２４】
Ｒ1が脂肪族炭化水素基である場合については、Ｒ0において説明した脂肪族炭化水素基と特徴は同様である。
上記一般式（１）は、さらに好ましくは下記一般式（３）で示される。
【００２５】
【化９】
2014221729.tif 000010
式（３）中、Ｒ1は式（１）におけるものと同様である。
上記一般式（３）は、さらに好ましくは下記一般式（５）で示される。
【００２６】
【化１０】
2014221729.tif 000011
式（５）中、Ｒ2およびＲ3はそれぞれ独立に炭素数１〜１８の脂肪族炭化水素基を表す。Ｒ2およびＲ3は、分岐を有していてもいなくてもよく、飽和でも不飽和でもよい。前記Ｒ2およびＲ3は、いずれか一方が炭素数１〜１６ の脂肪族炭化水素基であり、他方が炭素数３〜１６の脂肪族炭化水素基であることが好ましい。さらに、前記Ｒ2およびＲ3は、それぞれ独立に炭素数３〜１６の脂肪族炭化水素基であることがより好ましく、それぞれ独立に炭素数４〜１２の脂肪族炭化水素基であることがさらに好ましい。
【００２７】
なお、カルニチン誘導体のカルニチン部位は通常Ｌ型である。さらに、一般式（５）で表わされるカルニチン誘導体は、Ｒ2およびＲ3を備えたα−分岐型のアシル基を有しているため、Ｒ2およびＲ3が相互に異なる場合には分岐点のα炭素原子が不斉炭素原子となり、光学異性体が存在する。本発明のカルニチン誘導体においては、前記α炭素原子に基づく光学異性体については特に限定されず、そのいずれであってもよく、それら光学異性体の混合物であってもよい。
【００２８】
一般式（５）で表わされるカルニチン誘導体は、Ｒ2およびＲ3を備えたα−分岐型のアシル基を有しているため、水性媒体存在下においても、分岐鎖によるエステル結合部位への電子供与性の低減効果によりアシル基が加水分解され難く、長期間にわたって安定に存在できるものと考えられる。
【００２９】
Ｒ2およびＲ3は具体的には、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、s e c−ブチル基、t e r t−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、４−メチルペンチル基、２−エチルブチル基、ｎ−へプチル基、２−メチルヘキシル基、３−メチルヘキシル基、４−メチルヘキシル基、２−エチルペンチル基、３−エチルペンチル基、ｎ−オクチル基、２−メチルヘプチル基、３−メチルヘプチル基、４−メチルヘプチル基、５−メチルヘプチル基、６−メチルヘプチル基、２−エチルヘキシル基、３−エチルヘキシル基、４−エチルヘキシル基、２−プロピルペンチル基、ｎ−ノニル基、ｎ−デシル基、ｎ−ウンデシル基、ｎ−ドデシル基、ｎ−トリデシル基、ｎ−テトラデシル基、ｎ−ペンタデシル基、ｎ−ヘキサデシル基、ｎ−へプタデシル基、ｎ−オクタデシル基、イソステアリル基などの直鎖または分岐のアルキル基が挙げられる。
【００３０】
またＲ2およびＲ3として具体的には、例えば、１０−ウンデセニル基、９−ヘキサデセニル基、シス− ９−オクタデセニル基、１１−オクタデセニル基、シス，シス−９ ，１２−オクタデカジエニル基、９，１２ ，１５−オクタデカトリエニル基、６ ，９ ，１２−オクタデカトリエニル基、９ ，１１ ，１３−オクタデカトリエニル基などの直鎖または分岐のアルケニル基が挙げられる。
【００３１】
これらのうち、好ましいＲ2およびＲ3の組合せとしては、Ｒ2とＲ3とが、メチル基とメ
チル基、メチル基とエチル基、メチル基とｎ−プロピル基、メチル基とイソプロピル基、
メチル基とｎ−ブチル基、メチル基とｎ−ペンチル基、メチル基とｎ−ヘキシル基、メチ
ル基とｎ−オクチル基、メチル基とｎ−デシル基、メチル基とｎ−テトラデシル基、メチ
ル基とｎ−ヘキサデシル基、エチル基とエチル基、エチル基とｎ−プロピル基、エチル基
とイソプロピル基、エチル基とｎ−ブチル基、エチル基とイソプロピル基、エチル基とｎ
− ブチル基、エチル基とｎ−ペンチル基、エチル基とｎ−ヘキシル基、エチル基とｎ−オクチル基、エチル基とｎ−デシル基、エチル基とｎ−テトラデシル基、エチル基とｎ−ヘキサデシル基、ｎ−プロピル基とｎ−プロピル基、ｎ−プロピル基とｎ−ブチル基、ｎ−プロピル基とｎ−ペンチル基、ｎ−プロピル基とｎ−ヘキシル基、ｎ−ブチル基とｎ−ヘキシル基、ｎ−ブチル基とｎ−オクチル基、ｎ−ヘキシル基とｎ−オクチル基である組合せが挙げられる。中でも、ｎ−ヘキシル基とｎ−オクチル基の組み合わせが最も好ましい。
なお、本発明の糖化反応抑制剤には、上記Ｒ2とＲ3との組合せによって特定されるカルニチン誘導体を１ 種単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００３２】
＜カルニチンおよびその誘導体の塩＞
本発明のエラスチン産生促進剤は、カルニチンの塩および前記カルニチン誘導体の塩の少なくともいずれか一方を含有することができる。前記塩は、具体的には下記式（２）で示される化合物であり、さらに好ましくは式（４）で示される化合物であり、さらに好ましくは式（６）で示される化合物である。
【００３３】
【化１１】
2014221729.tif 000012
（式中、Ｒ0は前記式（１）と同様であり、Ｘ-はｍ価の無機アニオンまたは有機アニオンを表し、Ｙ+はｎ価の無機カチオンまたは有機カチオンを表す。ｍおよびｎはそれぞれ独立に、１〜４の整数である）
【００３４】
【化１２】
2014221729.tif 000013
（式中、Ｒ1は前記式（３）と同様であり、Ｘ-およびＹ+は前記式（２）と同様である）
【００３５】
【化１３】
2014221729.tif 000014
（式中、Ｒ1は前記式（５）と同様であり、Ｘ-およびＹ+は前記式（２）と同様である）
【００３６】
式（２）、（４）および（６）中、Ｘ-はｍ価の無機アニオンまたは有機アニオンを表し、医学的に許容されるアニオンであることが好ましい。ｍは１〜４の整数である。例えばｍが２の場合においては、ひとつのＸ-イオンと２分子のカルニチンのカチオン部が対をなす形をとる。ｍが３および４の場合においても同様である。その具体例としては、例えば、水酸化物イオン、硝酸イオン、硫酸イオン、炭酸イオン、炭酸水素イオン及びハロゲン化物等の無機イオン； 蟻酸イオン、酢酸イオン、クエン酸イオン、酒石酸イオン、シュウ酸イオン、フマル酸イオン、分岐を有していてもよい炭素数３〜２０の飽和もしくは不飽和脂肪酸のアニオン、カルニチンおよびその誘導体のアニオン、アスコルビン酸のアニオン、アスコルビルリン酸およびその誘導体のアニオン等の有機イオン；が挙げられる。これらの中でも、皮膚外用剤、とくに化粧料としての配合性の点からは、水酸化物イオン、ハロゲン化物イオン、クエン酸イオン、ハロゲン化クエン酸イオン、カルニチンおよびその誘導体のアニオンが好ましく、ハロゲン化物イオンが最も好ましい。
【００３７】
また式（２）、（４）および（６）中、Ｙ+はｎ価のカ無機カチオンまたは有機カチオンを表し、ｎは１〜４の整数である。例えばｎが２の場合においては、ひとつのＹ+イオンと２分子のカルニチンのアニオン部が対をなす形をとる。ｎが３および４の場合においても同様である。Ｙ+は医学的に許容されるカチオンであることが好ましく、その具体例としては、例えば、水素イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、亜鉛イオン、アンモニウムイオン、カルニチンおよびその誘導体のカチオンが挙げられる。これらの中でも、皮膚外用剤、特に化粧料としての配合性の点から水素イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、カルニチンおよびその誘導体のカチオンが好ましく、水素イオンが最も好ましい。
【００３８】
本発明のエラスチン産生促進剤には、上記Ｘ-、Ｙ+、Ｒ1およびＲ2との組合せによって特定されるカルニチンおよびその誘導体の塩を１ 種単独で用いてもよく、２ 種以上を組み合わせて用いてもよい。またカルニチン塩を含む製剤において、Ｘ-およびＹ+はそれぞれ一種単独のイオンでもよいし、複数種のイオンの混合物でもよい。Ｘ-とＹ+の価数は必ずしも一致している必要はない。
【００３９】
本発明のエラスチン産生促進剤において、カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される少なくとも一種の含有量は、エラスチン産生促進剤全量中、通常０．２〜５００ ｍＭ、好ましくは１．０〜２５０ｍＭ、より好ましくは２．０〜１００ ｍＭ、さらに好ましくは１０〜５０ｍＭである。なお、上記含有量は、カルニチンまたはその誘導体を単独で使用する場合にはカルニチンまたはその誘導体の量を、またカルチニンの塩またはカルニチン誘導体の塩を単独で使用する場合にはカルチニンの塩またはカルニチン誘導体の塩の量を、これらを併せて用いる場合には併用されるこれら成分の合計量を意味している。
【００４０】
このような量で、カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩の中から選択される少なくとも一種がエラスチン産生促進剤に含まれていると、エラスチン産生を効果的に促進することができ、このエラスチン産生促進剤を例えば化粧料等の皮膚外用剤に使用した場合には、皮膚外用剤に求められる効能効果を十分に発揮でき好ましい。
【００４１】
本発明のエラスチン産生促進剤には、上記カルニチンおよびその塩ならびにカルニチンの誘導体およびその塩のほか、エラスチン産生促進効果が損なわれない限り、一般にエラスチン産生促進剤に用いられる成分が含有されていてもよい。また、水やアルコール等の溶媒にカルニチンの誘導体およびその塩が分散された状態で用いてもよい。本発明のエラスチン産生促進剤を化粧料等の皮膚外用剤に用いる場合には、一般に化粧料等の皮膚外用剤に用いられる成分を本発明の効果を損なわない範囲で配合してもよい。
【００４２】
＜処方例＞
本発明のエラスチン産生促進剤を用いて化粧料等を調製することができる。例えば、表１に示す成分を基に、化粧料を調製することができる。（表中の値は全量を１００％とする質量％である）
【００４３】
例えば、表１に示すＡ、Ｂ、Ｃの各組成物をそれぞれ８５℃に加温し均一に混合し組成物Ａ〜Ｃを調製するついで、組成物Ａをホモミキサーに掛けながら該組成物Ａに組成物Ｂ（エラスチン産生促進剤）、組成物Ｃをこの順序で徐々に添加する。次いで３０℃付近まで氷冷しながら攪拌を続けた後、室温まで放冷し、化粧料１〜５を得ることができる。
【００４４】
【表１】
2014221729.tif 000015
表中、単位はｗｔ％である。
【００４５】
そのほか、特開２００７−１１９４４１号公報の実施例に記載の方法などによっても化粧料を調製することができる。
【実施例】
【００４６】
［実施例１］
以下の試験によって、ヘキシルデカン酸-Ｌ-カルニチンのエラスチン産生促進剤としての効果を、線維芽細胞を用い確認した。
【００４７】
ヒト正常線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を、１．５×１０4ｃｅｌｌｓ／ｃｍ2となるように、２４  ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅの各ｗｅｌｌに注入したＧｌｃ含有ＤＭＥＭ培地（１０ｗｔ％ＦＢＳ、１ｗｔ％ＰＳ溶液）に播種し、３日間、３７℃のインキュベーター（５ｖｏｌ％ ＣＯ2）で培養した。培養終了後、アスピレーターにより培地を除去し、得られた細胞に、ヘキシルデカン酸Ｌ−カルニチン（ＨＬＣ）（以下、被験試料ともいう）を１０μＭ濃度で含む脂肪酸添加培地（５％ＦＢＳ、１０％アルブミン、４ｍＭパルミチン酸ナトリウム）を１００μＬ添加し、上記と同様に２日間培養した。培養終了後、アスピレーターにより培地を除去し、得られた細胞に、脂肪酸添加培地（５％ＦＢＳ、１０％アルブミン、４ｍＭパルミチン酸ナトリウム）を１００ｕＬ添加し、上記と同様に２日間培養した。培養終了後、アスピレーターにより培地を除去し、採取された細胞に対して、ＦＡＳＴＩＮ ＥＬＡＳＴＩＮ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（Ｂｉｏｃｏｌｏｒ製）を用い、以下に示す方法で細胞内エラスチン量Ａを測定した。
【００４８】
培地を除去して採取された細胞（以下、測定用細胞という）に対し、５００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ溶液）での洗浄を２回行い、細胞剥離液（Ｃ１４１９、ＳＩＧＭＡ）を１５０μＬ加え細胞を回収した。回収した細胞含有液に対し、１．００ Ｍのシュウ酸水溶液を５０μＬ加えて（混合後のシュウ酸濃度：０．２５ Ｍ）、１００℃で１時間加熱し、エラスチン可溶化溶液を得た。
【００４９】
室温まで冷却した上記エラスチン可溶化溶液１００μＬを１．５ｍＬチューブに入れ、４℃に冷却しておいたＰｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔを１００ｕＬ加え、ボルテックスミキサーで撹拌し１５分間静置した。これを１００００ｇの遠心力で１０分間遠心した後、上清を除去した。このチューブに１ｍＬのＤｙｅ Ｒｅａｇｅｎｔを加えボルテックスミキサーで撹拌した後、チューブシェーカーで９０分間インキュベートした。インキュベート後、１００００ｇで１０分間遠心した。遠心後に上清を除去し、２５０μＬのＤｙｅ Ｄｅｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔを加えてボルテックスミキサーで撹拌後、１０分間静置した。静置後、再度撹拌し、溶液を９６ ｗｅｌｌ ｐｌａｔｅに移したのち、５１３ ｎｍの吸光度をプレートリーダー（Ｉｎｆｉｎｉｔｅ Ｍ２００、TECAN）で測定した。
【００５０】
上記のエラスチン可溶化溶液の替わりに、標準エラスチン溶液に対して上記と同様の操作を行い、吸光度を測定し、検量線を得た。得られた検量線から、エラスチン可溶化溶液のエラスチン量を算出し、エラスチン量Ａを得た。
【００５１】
また、上記測定用細胞に対して、Ｎｅｕｔｒａｌ Ｒｅｄ法により細胞数相対値Ｂを以下に示す方法によって計測した。
測定用細胞に対し、Ｎｅｕｔｒａｌ １５０μｇ／ｍＬのＰＢＳ溶液（０．５％ＦＢＳ）を１００μＬ添加し、１時間、３７℃のインキュベーター（５％ ＣＯ2）でインキュベートした後、溶液を除去し、４wt％パラホルムアルデヒドリン酸緩衝液を２００ｕＬ加え、1分間静置した。静置後、溶液を除去し、５０％エタノール水溶液に酢酸を１wt％混合して得られた溶液を１００μＬ加え、室温で２０分間インキュベートした。インキュベート後、上記プレートリーダーで５４０ ｎｍの吸光度を測定した。この吸光度を細胞数相対値Ｂとした。
【００５２】
また、被験試料を含む脂肪酸添加培地の替わりに被験試料を含まない脂肪酸添加培地を用いて上記と同様の操作を行い、上記と同様にエラスチン量Ａおよび細胞数相対値Ｂを測定した。
【００５３】
得られた結果から次に示す式（１）により、細胞あたりのエラスチン産生率（％）を算出した。算出結果を表２に示す。
【００５４】
【数１】
2014221729.tif 000016
但し、式（１）中、エラスチン値α、エラスチン値βおよびエラスチン値は以下のとおりである。
エラスチン値α: 被験試料を用いた場合に得られたエラスチン値
エラスチン値β: 被験試料を用いなかった場合（コントロール）に得られたエラスチン値
エラスチン値  : エラスチン量Ａ／細胞相対値Ｂ
【００５５】
［実施例２］
ヘキシルデカン酸Ｌ−カルニチンを含む脂肪酸添加培地中のヘキシルデカン酸Ｌ−カルニチンの濃度を１００μＭにしたこと以外は実施例１と同様にして、エラスチン産生率を測定した。結果を表２に示す。
【００５６】
［比較例１］
ヘキシルデカン酸Ｌ−カルニチンを含む脂肪酸添加培地を、ヘキシルデカン酸Ｌ−カルニチンを含まない脂肪酸添加培地に変更したこと以外は実施例１と同様にして、エラスチン産生率を測定した。結果を表２に示す。
【００５７】
【表２】
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ＨＬＣ：ヘキシルデカン酸L-カルニチン  （昭和電工株式会社製）