(57)【要約】【課題】本発明は、新たな作用機序を有する抗ウイルス剤、特に抗ＨＩＶ剤を提供することを課題とする。【解決手段】一般式（Ｉ）で表される化合物、又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗ウイルス剤であって、ＨＩＶに対する増殖阻害作用、細胞膜の流動性低下作用、細胞膜融合阻害作用等を有する薬剤。2014058495.tif 000055（式中、各記号の定義は明細書中に記載の通りである）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）：
【化１】
2014058495.tif 000037
{式（Ｉ）中、
Ｒ１は、水素、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアルケニル基、置換基を有していてもよいアルキニル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよい複素環基、置換基を有していてもよいアミノ基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、置換基を有していてもよい複素環カルボニル基、シクロアルキルカルボニル基、シクロアルケニルカルボニル基、アルコキシカルボニル基、置換基を有していてもよいカルボキシル基、置換基を有していてもよいアミノカルボニル基又は一般式（１）：
【化２】
2014058495.tif 000038
［式（１）中、
Ｒ１６、Ｒ１７及びＲ１８は同一又は異なって水素、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよい複素環基、ジアルキルアミノ基、又は置換基を有していてもよいアルケニル基を意味する］
で表される構造を意味し；
Ｒ２は、水素、アルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、ハロゲン原子、シアノ基、シクロアルキル基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、チオール基、アルキルチオ基、置換基を有していてもよいアリールチオ基、アルキルスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールスルホニル基、置換基を有していてもよいアミノカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールオキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アシルアミノ基、アルキルスルホニルアミノ基又は置換基を有していてもよいアリールスルホニルアミノ基、或いはＯＲ２ａ（式中、Ｒ２ａは、水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する）を意味し、ＯＲ２ａはＲ１とともに一般式（２）：
【化３】
2014058495.tif 000039
（式中、Ｒ１９及びＲ２０は、同一又は異なって、水素、アルキル基、シクロアルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味し、或いは、Ｃ−Ｒ１９Ｒ２０はＣ＝Ｏを意味し、Ｒ２１及びＲ２２は、同一又は異なって、水素、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基又はアシルアミノ基を意味し、破線は、ベンゼン環との縮合部分を示す）
で表される環を形成し；
Ｒ３は、水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、又はアリール基を意味し；
Ｒ４は、水素又はＯＲ４ａ（式中、Ｒ４ａは、水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又はアリール基を意味する）を意味し、ＯＲ４ａはＲ３とともに一般式（２）：
【化４】
2014058495.tif 000040
（式中、Ｒ１９及びＲ２０は、同一又は異なって、水素、アルキル基、シクロアルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味し、或いは、Ｃ−Ｒ１９Ｒ２０はＣ＝Ｏを意味し、Ｒ２１及びＲ２２は、同一又は異なって、水素、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基又はアシルアミノ基を意味し、破線は、ベンゼン環との縮合部分を示す）
で表される環を形成し；
Ｒ４が水素である場合Ｒ２はＯＲ２ａであり、
Ｒ４がＯＲ４ａである場合Ｒ２はＯＲ２ａではない；
式：
【化５】
2014058495.tif 000041
で表される基は、
式（ａ）：
【化６】
2014058495.tif 000042
（式中、Ｘ１はＯ、ＮＨ又はＮＲ１５（式中、Ｒ１５は、アルキル基、シクロアルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する）を意味し、Ｒ５ａ及びＲ５ｂは同一又は異なって、水素、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシ基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールオキシ基、チオール基、アルキルチオ基、置換基を有していてもよいアリールチオ基、アルキルスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールスルホニル基、置換基を有していてもよいアミノカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールオキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アシルアミノ基、アルキルスルホニルアミノ基又は置換基を有していてもよいアリールスルホニルアミノ基を意味する）で表される基を意味するか、
式（ｂ）：
【化７】
2014058495.tif 000043
（式中、Ｒ６及びＲ７は、同一又は異なって水素又は置換基を有していてもよいアルキル基を意味するか、Ｃ−Ｒ６Ｒ７はＣ＝Ｏを意味し、Ｒ８はオキソ基又はアルキル基を意味し、
【化８】
2014058495.tif 000044
で表される結合は単結合又は二重結合を意味する）で表される基を意味するか、
式（ｃ）：
【化９】
2014058495.tif 000045
（式中、Ｒ９は、水素又はアルキル基を意味し、Ｒ１０は、水素又はアルキル基を意味し、Ｒ１１は置換基を有していてもよいアリールカルボニル基を意味する）で表される基を意味するか、
式（ｄ）：
【化１０】
2014058495.tif 000046
（式中、Ｘ２はＮ又はＣＨを意味し、Ｒ１２は、水素又は置換基を有していてもよいアミノ基を意味する）で表される基を意味するか、又は
式（ｅ）：
【化１１】
2014058495.tif 000047
（式中、Ｒ１３は、水素又は置換基を有していてもよいアリール基を意味し、Ｒ１４は、水素又は置換基を有していてもよいアルキル基を意味する）で表される基を意味する｝で表される化合物、又は
その薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗ウイルス剤。
【請求項２】
一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記一般式（ＩＩ）で表される化合物である、請求項１記載の抗ウイルス剤：
【化１２】
2014058495.tif 000048
{式（ＩＩ）中、
Ｒ１’は、水素、複素環基、置換基を有していてもよいアミノ基、複素環カルボニル基、シクロアルキルカルボニル基、シクロアルケニルカルボニル基又は一般式（１’）：
【化１３】
2014058495.tif 000049
［式（１’）中、
Ｒ１６’、Ｒ１７’及びＲ１８’は同一又は異なって水素、アルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する］
で表される構造を意味し；
Ｒ２’は、アルコキシ基を意味し；
Ｒ３’は、水素又はアルキル基を意味し；
Ｒ４’は、ＯＲ４ａ’（式中、Ｒ４ａ’はアルキル基を意味する）を意味し、ＯＲ４ａ’はＲ３’とともに一般式（２’）：
【化１４】
2014058495.tif 000050
［式中、Ｒ１９’及びＲ２０’は、同一又は異なってアルキル基を意味し、破線は、ベンゼン環との縮合部分を示す］
で表される環を形成し；
式：
【化１５】
2014058495.tif 000051
で表される基が、
式（ａ’）：
【化１６】
2014058495.tif 000052
（式中、Ｒ５ａ’及びＲ５ｂ’は同一又は異なって、水素又は置換基を有していてもよいアルキル基を意味する）で表される基を意味するか、又は
式（ｂ’）：
【化１７】
2014058495.tif 000053
（式中、Ｒ８’はアルキル基を意味する）で表される基を意味する｝。
【請求項３】
一般式（Ｉ）で表される化合物が、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−（２−メチルブタノイル）−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−（２−メチルブタノイル）−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
４−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）ブタン酸、
４−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルブタンアミド、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−［４−オキソ−４−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）ブチル］−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−１０−プロピル−２，７−ジヒドロ−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］キノリン−８−オン、
６−アセチル−５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−ペンタノイル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−イソブチリル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
１０−（３−ブロモフェニル）−５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）プロピオン酸エチルエステル、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）プロピオン酸、
５−ヒドロキシ−８，８−ジメチル−４−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−２−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパンアミド、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−１０−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
６−シクロブチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
６−シクロヘキシルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、又は
６−シクロペンチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン
である、請求項１記載の抗ウイルス剤。
【請求項４】
一般式（Ｉ）で表される化合物が、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
６−シクロブチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、又は
６−シクロヘキシルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン
である、請求項１記載の抗ウイルス剤。
【請求項５】
一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記構造式を有する、５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オンである、請求項１記載の抗ウイルス剤。
【化１８】
2014058495.tif 000054
【請求項６】
ウイルスがレトロウイルスである、請求項１記載の抗ウイルス剤。
【請求項７】
レトロウイルスがＨＩＶである、請求項６記載の抗ウイルス剤。
【請求項８】
少なくとも一種の他の抗ＨＩＶ剤を含む請求項１記載の抗ウイルス剤。
【請求項９】
他の抗ＨＩＶ剤が、逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤及びＤＮＡ合成阻害剤からなる群から選択される少なくとも1種である請求項８記載の抗ウイルス剤。
【請求項１０】
ＨＩＶ感染患者におけるＨＩＶ複製を阻害するための薬剤を製造するための、請求項１〜４のいずれか一項記載の化合物の使用。
【請求項１１】
患者ががん、他の感染症又は免疫疾患を患っている、請求項１０記載の使用。
【請求項１２】
がんが、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、カポジ肉腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、平滑筋肉腫、絨毛癌、多発性骨髄腫、軟部腫瘍、小細胞肺癌、慢性骨髄性白血病、甲状腺癌、骨肉腫、頭頸部癌、食道癌、非小細胞肺癌、乳癌、大腸癌、胃癌、胆道癌、脳腫瘍、悪性黒色腫、腎臓癌、膵臓癌、肝臓癌、子宮頚癌、睾丸癌、皮膚癌又は肛門癌からなる群より選択される請求項１１記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗ウイルス作用を有する薬剤に関する。より詳細には、本発明は、抗ＨＩＶウイルス作用を有する３環系クマリン化合物（ＧＵＴ−７０）及びその誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
世界三大感染症の一つである後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）がＣＤ４及びケモカイン受容体であるＣＸＣＲ４又はＣＣＲ５を受容体とし、これらを発現しているヘルパーＴ細胞やマクロファージに感染し、該免疫細胞を破壊して後天的に免疫不全を起こす深刻な感染症である。近年、合成３’−デオキシヌクレオシド類である３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）がＨＩＶの感染を阻害することが報告されて以来、２’，３’−ジデオキシイノシン（ｄｄＩ）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ｄｄＣ）、３’−フルオロ−３’−デオキシチミジン（ＦＬＴ）、サキナビル（ＳＱＣ）等、２０種類を超える様々な化合物が、抗ＨＩＶ剤として使用されている。そして、複数の抗ＨＩＶ剤を組み合わせてＡＩＤＳ患者に投与する多剤併用療法（Ｈｉｇｈｌｙ  Ａｃｔｉｖｅ  Ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉａｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ；ＨＡＡＲＴ）が導入され、ＨＩＶ感染は慢性疾患と捉えられるようにもなっている。
【０００３】
現在使用されている抗ＨＩＶ剤は、ＨＩＶのＤＮＡ合成を阻害する、あるいは、ＨＩＶが宿主細胞に侵入するのを防止する等、ＨＩＶの生活環には有効ではあるものの、ＨＩＶの潜伏感染には効果が認められない。また、これらの抗ＨＩＶ剤による副作用や薬剤耐性ウイルスの出現等の問題から、ＨＡＡＲＴの長期継続が困難な症例も増加している。しかも、慢性化したＡＩＤＳ患者が、悪性腫瘍を合併して致死となる症例も増加している。しかしながら、既存の市販の抗ＨＩＶ剤の中に抗がん作用を有すものは報告されておらず、異なる作用機序を有する新たな抗ＨＩＶ剤の開発が急務となっている。
【０００４】
本発明者らは、ブラジルオトギリ草から抽出した３環系クマリン化合物、下記のＧＵＴ−７０が抗がん作用を有することを報告している（非特許文献１、特許文献１）。さらに、ＧＵＴ−７０をリード化合物として化学修飾を加えた種々の誘導体を合成し、それらががん細胞の増殖抑制活性を有すること、癌、神経変性疾患、自己免疫疾患及び感染症等の予防・治療等に有効であることを報告している（特許文献２）。
【０００５】
【化１】
2014058495.tif 000002
【０００６】
しかしながら、ＧＵＴ−７０等の抗ウイルス作用、特に抗ＨＩＶ作用については報告されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２００４／０６６９９４号
【特許文献２】国際公開第２００９／０６０８３５号
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｋｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，２００５，１１３（１），ｐ．１５８−１６５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、新たな作用機序を有する抗ウイルス剤、特に抗ＨＩＶ剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記課題に鑑み鋭意研究を行なった結果、ＧＵＴ−７０がＨＩＶ−１の複製又は転写を抑制することでＨＩＶ−１の増殖を阻害する増殖阻害作用を有すること、さらに、ＧＵＴ−７０が、細胞膜の流動性を低下させること、ＨＩＶ−１  ｅｎｖ発現細胞の膜融合を阻害する細胞融合阻害作用を併せ持ち、ＨＩＶ−１の細胞内侵入を阻害することを見出した。加えて、ＧＵＴ−７０はＣＸＣＲ４及びＣＣＲ５両方の受容体に対するＨＩＶ−１感染を阻害することも見出した。本発明者らは、これらの知見に基づき本発明を完成させるに至った。
【００１１】
即ち、本発明は下記のとおりである：
［１］下記一般式（Ｉ）：
【００１２】
【化２】
2014058495.tif 000003
【００１３】
{式（Ｉ）中、
Ｒ１は、水素、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアルケニル基、置換基を有していてもよいアルキニル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよい複素環基、置換基を有していてもよいアミノ基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、置換基を有していてもよい複素環カルボニル基、シクロアルキルカルボニル基、シクロアルケニルカルボニル基、アルコキシカルボニル基、置換基を有していてもよいカルボキシル基、置換基を有していてもよいアミノカルボニル基又は一般式（１）：
【００１４】
【化３】
2014058495.tif 000004
【００１５】
［式（１）中、
Ｒ１６、Ｒ１７及びＲ１８は同一又は異なって水素、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよい複素環基、ジアルキルアミノ基、又は置換基を有していてもよいアルケニル基を意味する］
で表される構造を意味し；
Ｒ２は、水素、アルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、ハロゲン原子、シアノ基、シクロアルキル基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、チオール基、アルキルチオ基、置換基を有していてもよいアリールチオ基、アルキルスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールスルホニル基、置換基を有していてもよいアミノカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールオキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アシルアミノ基、アルキルスルホニルアミノ基又は置換基を有していてもよいアリールスルホニルアミノ基、或いはＯＲ２ａ（式中、Ｒ２ａは、水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する）を意味し、ＯＲ２ａはＲ１とともに一般式（２）：
【００１６】
【化４】
2014058495.tif 000005
【００１７】
（式中、Ｒ１９及びＲ２０は、同一又は異なって、水素、アルキル基、シクロアルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味し、或いは、Ｃ−Ｒ１９Ｒ２０はＣ＝Ｏを意味し、Ｒ２１及びＲ２２は、同一又は異なって、水素、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基又はアシルアミノ基を意味し、破線は、ベンゼン環との縮合部分を示す）
で表される環を形成し；
Ｒ３は、水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アルコキシ基、又はアリール基を意味し；
Ｒ４は、水素又はＯＲ４ａ（式中、Ｒ４ａは、水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又はアリール基を意味する）を意味し、ＯＲ４ａはＲ３とともに一般式（２）：
【００１８】
【化５】
2014058495.tif 000006
【００１９】
（式中、Ｒ１９及びＲ２０は、同一又は異なって、水素、アルキル基、シクロアルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味し、或いは、Ｃ−Ｒ１９Ｒ２０はＣ＝Ｏを意味し、Ｒ２１及びＲ２２は、同一又は異なって、水素、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシ基、アルキル基、シクロアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基又はアシルアミノ基を意味し、破線は、ベンゼン環との縮合部分を示す）
で表される環を形成し；
Ｒ４が水素である場合Ｒ２はＯＲ２ａであり、
Ｒ４がＯＲ４ａである場合Ｒ２はＯＲ２ａではない；
式：
【００２０】
【化６】
2014058495.tif 000007
【００２１】
で表される基は、
式（ａ）：
【００２２】
【化７】
2014058495.tif 000008
【００２３】
（式中、Ｘ１はＯ、ＮＨ又はＮＲ１５（式中、Ｒ１５は、アルキル基、シクロアルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する）を意味し、Ｒ５ａ及びＲ５ｂは同一又は異なって、水素、置換基を有していてもよいアルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、ハロゲン原子、シアノ基、ヒドロキシ基、シクロアルキル基、アルコキシ基、アルキルカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールカルボニル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、置換基を有していてもよいアリールオキシ基、チオール基、アルキルチオ基、置換基を有していてもよいアリールチオ基、アルキルスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールスルホニル基、置換基を有していてもよいアミノカルボニル基、置換基を有していてもよいアミノスルホニル基、置換基を有していてもよいアリールオキシカルボニル基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アシルアミノ基、アルキルスルホニルアミノ基又は置換基を有していてもよいアリールスルホニルアミノ基を意味する）で表される基を意味するか、
式（ｂ）：
【００２４】
【化８】
2014058495.tif 000009
【００２５】
（式中、Ｒ６及びＲ７は、同一又は異なって水素又は置換基を有していてもよいアルキル基を意味するか、Ｃ−Ｒ６Ｒ７はＣ＝Ｏを意味し、Ｒ８はオキソ基又はアルキル基を意味し、
【００２６】
【化９】
2014058495.tif 000010
【００２７】
で表される結合は単結合又は二重結合を意味する）で表される基を意味するか、
式（ｃ）：
【００２８】
【化１０】
2014058495.tif 000011
【００２９】
（式中、Ｒ９は、水素又はアルキル基を意味し、Ｒ１０は、水素又はアルキル基を意味し、Ｒ１１は置換基を有していてもよいアリールカルボニル基を意味する）で表される基を意味するか、
式（ｄ）：
【００３０】
【化１１】
2014058495.tif 000012
【００３１】
（式中、Ｘ２はＮ又はＣＨを意味し、Ｒ１２は、水素又は置換基を有していてもよいアミノ基を意味する）で表される基を意味するか、又は
式（ｅ）：
【００３２】
【化１２】
2014058495.tif 000013
【００３３】
（式中、Ｒ１３は、水素又は置換基を有していてもよいアリール基を意味し、Ｒ１４は、水素又は置換基を有していてもよいアルキル基を意味する）で表される基を意味する｝で表される化合物、又は
その薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗ウイルス剤。
［２］一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記一般式（ＩＩ）で表される化合物である、［１］記載の抗ウイルス剤：
【００３４】
【化１３】
2014058495.tif 000014
【００３５】
{式（ＩＩ）中、
Ｒ１’は、水素、複素環基、置換基を有していてもよいアミノ基、複素環カルボニル基、シクロアルキルカルボニル基、シクロアルケニルカルボニル基又は一般式（１’）：
【００３６】
【化１４】
2014058495.tif 000015
【００３７】
［式（１’）中、
Ｒ１６’、Ｒ１７’及びＲ１８’は同一又は異なって水素、アルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する］
で表される構造を意味し；
Ｒ２’は、アルコキシ基を意味し；
Ｒ３’は、水素又はアルキル基を意味し；
Ｒ４’は、ＯＲ４ａ’（式中、Ｒ４ａ’はアルキル基を意味する）を意味し、ＯＲ４ａ’はＲ３’とともに一般式（２’）：
【００３８】
【化１５】
2014058495.tif 000016
【００３９】
［式中、Ｒ１９’及びＲ２０’は、同一又は異なってアルキル基を意味し、破線は、ベンゼン環との縮合部分を示す］
で表される環を形成し；
式：
【００４０】
【化１６】
2014058495.tif 000017
【００４１】
で表される基が、
式（ａ’）：
【００４２】
【化１７】
2014058495.tif 000018
【００４３】
（式中、Ｒ５ａ’及びＲ５ｂ’は同一又は異なって、水素又は置換基を有していてもよいアルキル基を意味する）で表される基を意味するか、又は
式（ｂ’）：
【００４４】
【化１８】
2014058495.tif 000019
【００４５】
（式中、Ｒ８’はアルキル基を意味する）で表される基を意味する｝。
［３］一般式（Ｉ）で表される化合物が、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−（２−メチルブタノイル）−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−（２−メチルブタノイル）−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
４−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）ブタン酸、
４−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルブタンアミド、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−［４−オキソ−４−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）ブチル］−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−１０−プロピル−２，７−ジヒドロ−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］キノリン−８−オン、
６−アセチル−５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−ペンタノイル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−イソブチリル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
１０−（３−ブロモフェニル）−５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）プロピオン酸エチルエステル、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）プロピオン酸、
５−ヒドロキシ−８，８−ジメチル−４−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−２−オン、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパンアミド、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−１０−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
６−シクロブチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
６−シクロヘキシルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、又は
６−シクロペンチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン
である、［１］記載の抗ウイルス剤。
［４］一般式（Ｉ）で表される化合物が、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
６−シクロブチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、又は
６−シクロヘキシルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン
である、［１］記載の抗ウイルス剤。
［５］一般式（Ｉ）で表される化合物が、下記構造式を有する、５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オンである、［１］記載の抗ウイルス剤。
【００４６】
【化１９】
2014058495.tif 000020
【００４７】
［６］ウイルスがレトロウイルスである、［１］記載の抗ウイルス剤。
［７］レトロウイルスがＨＩＶである、［６］記載の抗ウイルス剤。
［８］少なくとも一種の他の抗ＨＩＶ剤を含む［１］記載の抗ウイルス剤。
［９］他の抗ＨＩＶ剤が、逆転写酵素阻害剤、プロテアーゼ阻害剤、インテグラーゼ阻害剤、ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤及びＤＮＡ合成阻害剤からなる群から選択される少なくとも１種である［８］記載の抗ウイルス剤。
［１０］ＨＩＶ感染患者におけるＨＩＶ複製を阻害するための薬剤を製造するための、［１］〜［４］記載の化合物の使用。
［１１］患者ががん、他の感染症又は免疫疾患を患っている、［１０］に記載の使用。
［１２］がんが、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、カポジ肉腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、平滑筋肉腫、絨毛癌、多発性骨髄腫、軟部腫瘍、小細胞肺癌、慢性骨髄性白血病、甲状腺癌、骨肉腫、頭頸部癌、食道癌、非小細胞肺癌、乳癌、大腸癌、胃癌、胆道癌、脳腫瘍、悪性黒色腫、腎臓癌、膵臓癌、肝臓癌、子宮頚癌、睾丸癌、皮膚癌又は肛門癌からなる群より選択される［１１］に記載の使用。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１−１はＧＵＴ−７０が、ＨＩＶ−１を感染させた細胞内でＨＩＶ−１の複製を阻害したフローサイトメーターの結果を示す。図１−２はＧＵＴ−７０が、ＨＩＶ−１を感染させた細胞内でＨＩＶ−１の複製を阻害した結果を示す。縦軸はｐ２４陽性細胞の割合（％）、横軸は培養日数を示す。図１−３は、ＧＵＴ−７０が、ＨＩＶ−１を感染させた細胞内でＨＩＶ−１の複製を阻害した結果を示す。ＨＩＶ−１を感染させた細胞を７日間培養後、当該細胞培養上清中のｐ２４の濃度を測定した結果を示す。縦軸は、ｐ２４の濃度（ｎｇ／ｍｌ）、横軸は、ＧＵＴ−７０の濃度を示す。
【図２】図２は、ＧＵＴ−７０が、細胞膜の流動性を低下させたことを示す。縦軸は、蛍光偏光Ｐ値、横軸は時間（分）を示す。
【図３】図３−１はＧＵＴ−７０が、ＨＩＶ−１  ｅｎｖ発現細胞の膜融合を阻害したフローサイトメーターの結果を示す（培養２４時間後）。図３−２はＧＵＴ−７０が、ＨＩＶ−１  ｅｎｖ発現細胞の膜融合を阻害した結果を示す。縦軸は細胞融合の割合（％）、横軸はＧＵＴ−７０の濃度（μＭ）を示す。
【図４】図４はＧＵＴ−７０が、ＨＩＶ−１  ｅｎｖ発現細胞の膜融合を阻害した蛍光顕微鏡像を示す（培養４８時間後）。
【図５】図５−１は、ＧＵＴ−７０が、ＨＵＴ７８細胞へのＨＩＶ−１感染を阻害したフローサイトメーターの結果を示す（感染４８時間後）。図５−２は、ＨＩＶ−１を感染させたＨＵＴ７８細胞の細胞内ｐ２４（ＨＩＶ−１  ｇａｇ）の発現が、ＧＵＴ−７０を添加すると低下したことを示す。図５−３は、ＧＵＴ−７０が、ＴＺＭ−ｂｌ細胞へのＨＩＶ−１感染を阻害したフローサイトメーターの結果を示す（感染４８時間後）。図５−４は、ＨＩＶ−１を感染させたＴＺＭ−ｂｌ細胞の細胞内ｐ２４（ＨＩＶ−１  ｇａｇ）の発現が、ＧＵＴ−７０を添加すると低下したことを示す。
【図６】図６−１はＰＭＡ又はＴＮＦ−α添加によりＨＩＶ−１産生が誘導されたＨＩＶ−１潜伏細胞株Ｕ１に、ＧＵＴ−７０を添加すると、容量依存的にＨＩＶ−１産生が抑制されたフローサイトメーターの結果を示す。図６−２は、前記細胞でのｐ２４陽性細胞の割合が、ＧＵＴ−７０を添加すると、容量依存的に低下したことを示す。図６−３は、前記細胞培養上清中のｐ２４（ＨＩＶ−１  ｇａｇ）の発現が、ＧＵＴ−７０を添加すると容量依存的に低下したことを示す。
【図７】図７−１はＴＺＭ−ｂｌ細胞をＧＵＴ−７０で前処理した後に、ＨＩＶ−１株ＮＬ−４．３を感染させて２４時間培養後、ＧＵＴ−７０がＨＩＶ−１感染を抑制した図を示す。発光シグナルデータを相対発光量(ＲＬＵ)で示す。＊＊Ｐ＜０．０１  図７−２は、ＴＮＦ−α添加によりＨＩＶ−１産生が誘導されたＨＩＶ−１潜伏細胞株Ｕ１に、ＧＵＴ−７０（１０μＭ）を添加すると、ＨＩＶ−１の転写が抑制された結果を示す。ＧＵＴ−７０、又は、ＮＦ−κＢ阻害剤（１０μＭ  Ｂａｙ  １１−７０８５、又は、２０ｎＭ  Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ）を添加し、２４時間培養後のＴａｔ−Ｒｅｖ  ｍＲＮＡを、定量ＲＴ−ＰＣＲで測定した結果を示す。図７−３は、ＨＩＶ−１株ＮＬ４−３を感染させたＭｏｌｔ−４細胞に、ＧＵＴ−７０（１０μＭ）を添加すると、ＨＩＶ−１の転写が抑制された結果を示す。
【図８】図８はＧＵＴ−７０が、ＮＦ−ｋａｐｐａＢ  ｐ６５のリン酸化を抑制したウエスタンブロット像を示す。
【図９】図９−１は、ＴＮＡ−α添加によるＮＦ−ｋａｐｐａＢのＤＮＡ結合活性をＧＵＴ−７０が阻害したゲルシフトアッセイ像を示す。図９−２は、ＧＵＴ−７０によるＮＦ−ｋａｐｐａＢ抑制により、ＨＩＶ−１転写を阻害した図を示す。縦軸は、ｃｏｎを１とした場合の相対的ルシフェラーゼ活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
以下、本明細書で用いられる各記号の定義について詳述する。
【００５０】
本明細書中の「ハロゲン」としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素が挙げられる。
【００５１】
本明細書中の「アルキル基」は、直鎖状或いは分岐状のアルキル基を意味し、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ヘキシル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、ヘプチル、オクチル等が挙げられ、なかでもＣ１−Ｃ６アルキル基が好ましい。
本明細書中の「置換基を有していてもよいアルキル基」とは、置換可能な位置に１から５個、好ましくは１から３個の置換基を有していてもよいアルキル基を意味する。このような置換基としては、例えばカルボキシル基、ジアルキルアミノカルボニル基（例、ジメチルアミノカルボニル）、置換基を有していてもよい複素環カルボニル基（後述）、置換基を有していてもよいアリール基（後述）、アルキルオキシカルボニル基（例、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル）、アルケニルカルボニルオキシ基（例、イソブテニルカルボニルオキシ）等が挙げられる。
【００５２】
本明細書中の「アルケニル基」としては、直鎖状或いは分岐状のアルケニル基であり、例えば、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、ブタ−３−エン−１−イル、ペンタ−４−エン−１−イル、へキサ−５−エン−１−イル等が挙げられ、なかでもＣ２−Ｃ６アルケニル基が好ましい。
本明細書中の「置換基を有していてもよいアルケニル基」としては、置換可能な位置に１から５個、好ましくは１から３個の置換基を有していてもよいアルケニル基を意味する。このような置換基としては、例えばヒドロキシ基、ジアルキルアミノ基（後述）、置換基を有していてもよいアリール基（後述）等が挙げられる。
【００５３】
本明細書中の「アルキニル基」は、直鎖状或いは分岐状のアルキニル基であり、例えば、エチニル、プロパ−２−イン−１−イル、ブタ−３−イン−１−イル、ペンタ−４−イン−１−イル、へキサ−５−イン−１−イル等が挙げられ、なかでもＣ２−Ｃ６アルキニル基が好ましい。
本明細書中の「置換基を有していてもよいアルキニル基」とは、置換可能な位置に１から５個、好ましくは１から３個の置換基を有していてもよいアルキニル基を意味する。このような置換基としては、例えばヒドロキシ基等が挙げられる。
【００５４】
本明細書中の「シクロアルキル基」としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等が挙げられ、なかでもＣ３−Ｃ６シクロアルキル基が好ましい。
【００５５】
本明細書中の「アリール基」としては、例えば、フェニル、ナフチル（例、１−ナフチル、２−ナフチル）、ビフェニリル、アントリル、フェナントリル等が挙げられ、なかでもＣ６−Ｃ１４アリール基が好ましく、Ｃ６−１０アリール基がより好ましく、例えば、フェニル基等が汎用される。
本明細書中の「置換基を有していてもよいアリール基」とは、置換可能な位置に１から５個、好ましくは１から３個の置換基を有していてもよいアリール基を意味する。このような置換基としては、例えばハロゲン（例、臭素、塩素）、シアノ基、ニトロ基、ヒドロキシ基、アミノカルボニル基、アセチル基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基（後述）、置換基を有していてもよいアミノ基（後述）、アルコキシ基（後述）、置換基を有していてもよいアルキル基（前述）等が挙げられる。
【００５６】
本明細書中の「アルコキシ基」としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、イソペンチルオキシ、ネオペンチルオキシ、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、２−エチルブトキシ等が挙げられ、なかでもＣ１−Ｃ６アルコキシ基が好ましい。
【００５７】
本明細書中の「複素環基」としては、特に断りのない限り、芳香族複素環基および非芳香族複素環基が挙げられる。
【００５８】
ここで、芳香族複素環基としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に酸素原子、硫黄原子および窒素原子から選ばれるヘテロ原子を１から４個含有する４から７員（好ましくは５又は６員）の単環式芳香族複素環基および縮合芳香族複素環基が挙げられる。該縮合芳香族複素環基としては、例えば、これら４から７員の単環式芳香族複素環基に対応する環と、１又は２個の窒素原子を含む５又は６員の芳香族複素環（例、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピラジン、ピリジン、ピリミジン）、１個の硫黄原子を含む５員の芳香族複素環（例、チオフェン）およびベンゼン環から選ばれる１又は２個が縮合した環から誘導される基等が挙げられる。
「芳香族複素環基」としては、例えば、フリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、フラザニル、１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル等の単環式芳香族複素環基；およびベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、ベンゾ［ｂ］チエニル、インドリル、イソインドリル、１Ｈ−インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾ［ｄ］イソオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾ［ｄ］イソチアゾリル、１Ｈ−ベンゾトリアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、ナフチリジニル、プリニル、プテリジニル、カルバゾリル、α−カルボリニル、β−カルボリニル、γ−カルボリニル、アクリジニル、フェノキサジニル、フェノチアジニル、フェナジニル、フェノキサチイニル、チアントレニル、フェナトリジニル、フェナトリジニル、フェナントロリニル、インドリジニル、ピロロ［１，２−ｂ］ピリダジニル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジル、イミダゾ［１，５−ａ］ピリジル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリダジニル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリミジニル、１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジル、１，２，４−トリアゾロ［４，３−ｂ］ピリダジニル等の縮合芳香族複素環基；が挙げられる。
【００５９】
非芳香族複素環基としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に酸素原子、硫黄原子および窒素原子から選ばれるヘテロ原子を１から４個含有する４から７員（好ましくは５又は６員）の単環式非芳香族複素環基および縮合非芳香族複素環基が挙げられる。該縮合非芳香族複素環基としては、例えば、これら４から７員の単環式非芳香族複素環基に対応する環と、１又は２個の窒素原子を含む５又は６員の芳香族複素環（例、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、ピラジン、ピリジン、ピリミジン）、１個の硫黄原子を含む５員の芳香族複素環（例、チオフェン）およびベンゼン環から選ばれる１又は２個の環が縮合した環から誘導される基、ならびに該基の部分飽和により得られる基等が挙げられる。
「非芳香族複素環基」としては、例えば、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ピロリジニル、テトラヒドロフリル、チオラニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジル、テトラヒドロピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル等の単環式非芳香族複素環基；およびイソクロマニル、ジヒドロベンゾピラニル、ジヒドロキノリル、イソクロメニル、クロメニル（２Ｈ−クロメニル、４Ｈ−クロメニル）、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソリル等の縮合非芳香族複素環基；が挙げられる。
【００６０】
本明細書中の「置換基を有していてもよい複素環基」とは、置換可能な位置に１から５個、好ましくは１から３個の置換基を有していてもよい複素環基を意味する。このような置換基としては、例えばハロゲン（上述）、アルキル基（上述）、アラルキル基（例、ベンジル）、複素環基（上述）、アルコキシ基（後述）等が挙げられる。
【００６１】
本明細書中の「置換基を有していてもよいアミノ基」としては、アルキル基（好ましくはＣ１−Ｃ６アルキル基）でモノ置換されたアミノ基（モノアルキルアミノ基、単にアルキルアミノ基ともいう）あるいはジ置換されたアミノ基（ジアルキルアミノ基）、置換基（例、ハロゲン化されたアルキル基）を有していてよいアリール基（好ましくはＣ６−Ｃ１４アリール基）でモノ置換されたアミノ基（モノアリールアミノ基）あるいはジ置換されたアミノ基（ジアリールアミノ基）、置換基を有していてもよいアミノカルボニル基（後述）で置換されたアミノ基、アルケニルカルボニル基（後述）で置換されたアミノ基、複素環カルボニル基（後述）で置換されたアミノ基等が例示される。ハロゲン化されたアルキル基としてはトリフルオロメチル基等が例示される。
「置換基を有していてもよいアミノ基」の具体例としては、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、イソブチルアミノ、ｓｅｃ−ブチルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルアミノ、ペンチルアミノ、イソペンチルアミノ、ネオペンチルアミノ、ｔｅｒｔ−ペンチルアミノ、ヘキシルアミノ等のＣ１−Ｃ６アルキルアミノ基、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ等のジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ基、フェニルアミノ、１−ナフチルアミノ、２−ナフチルアミノ、トリフルオロフェニルアミノ等のＣ６−Ｃ１４アリールアミノ基、ジフェニルアミノ、ジナフチルアミノ等のジ（Ｃ６−Ｃ１４）アリールアミノ基、フェニルアミノカルボニル、ブテニルカルボニル、ベンゾジオキソリルカルボニル等が挙げられる。
【００６２】
本明細書中の「アルキルアミノ基」及び「ジアルキルアミノ基」は、それぞれ上記した「置換基を有していてもよいアミノ基」として例示されたものと同義である。
【００６３】
本明細書中の「アルキルカルボニル基」、「アルケニルカルボニル基」、「アルコキシカルボニル基」、「置換基を有していてもよいアリールカルボニル基」、「シクロアルキルカルボニル基」及び「置換基を有していてもよいアミノカルボニル基」は、それぞれ前記した「アルキル基」、「アルケニル基」、「アルコキシ基」、「置換基を有していてもよいアリール基」、「シクロアルキル基」及び「置換基を有していてもよいアミノ基」で置換されたカルボニル基を意味する。
【００６４】
「アルキルカルボニル基」は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６アルキル−カルボニル基であり、具体的には、アセチル、プロパノイル、ブタノイル、２−メチルプロパノイル、ペンタノイル、３−メチルブタノイル、２，２−ジメチルプロパノイル等が挙げられる。
「アルケニルカルボニル基」は、好ましくはＣ２−Ｃ６アルケニル−カルボニル基であり、具体的には、ビニルカルボニル、１−プロペニルカルボニル、２−プロペニルカルボニル、２−ブテニルカルボニル、３−ブテニルカルボニル等が挙げられる。
「アルコキシカルボニル基」は、好ましくはＣ１−Ｃ６アルコキシ−カルボニル基であり、具体的には、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル等が挙げられる。
「シクロアルキルカルボニル基」は、好ましくはＣ３−Ｃ６シクロアルキル−カルボニル基であり、具体的には、シクロプロピルカルボニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボニル、シクロヘキシルカルボニル、シクロヘプチルカルボニル、シクロオクチルカルボニル等が挙げられる。
「置換基を有していてもよいアリールカルボニル基」は、好ましくは、Ｃ６−Ｃ１４アリール−カルボニル基であり、具体的には、ベンゾイル、１−ナフトイル、２−ナフトイル等が挙げられる。
本明細書中において、「置換基を有していてもよいアミノカルボニル基」とは、例えばアルキルアミノ基（好ましくはＣ１−Ｃ６アルキルでモノ又はジ置換されたアミノ基）あるいはアリールアミノ基（好ましくはＣ６−Ｃ１４アリール基でモノ又はジ置換されたアミノ基）で置換されたカルボニル基を意味し、具体的には、メチルアミノカルボニル、エチルアミノカルボニル、ｎ−プロピルアミノカルボニル、イソプロピルアミノカルボニル、ｎ−ブチルアミノカルボニル、イソブチルアミノカルボニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、ｎ−ペンチルアミノカルボニル、イソペンチルアミノカルボニル、ヘキシルアミノカルボニル、ジメチルアミノカルボニル、ジエチルアミノカルボニル、ジｎ−プロピルアミノカルボニル、ジイソプロピルアミノカルボニル、ジｎ−ブチルアミノカルボニル、ジイソブチルアミノカルボニル、ジｔｅｒｔ−ブチルアミノカルボニル、ジｎ−ペンチルアミノカルボニル、ジイソペンチルアミノカルボニル、ジヘキシルアミノカルボニル、フェニルアミノカルボニル、ナフチルアミノカルボニル等が挙げられる。
【００６５】
本明細書中において「シクロアルケニルカルボニル基」とは、例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル等のＣ３−Ｃ６シクロアルケニル基で置換されたカルボニル基を意味する。
【００６６】
本明細書中の「複素環カルボニル基」とは、前記した「複素環基」で置換されたカルボニル基を意味する。「複素環カルボニル基」の「複素環基」としては、例えば、前記複素環基として例示した芳香族又は非芳香族複素環基に対応する環が挙げられる。「複素環カルボニル基」の具体例としては、ベンゾフラニルカルボニル、チエニルカルボニル、ベンゾイミダゾリルカルボニル、ピリミジニルカルボニル、１−ピロリジニルカルボニル、ピペリジノカルボニル、１−ピペラジニルカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル等が挙げられる。
本明細書中の「置換基を有していてもよい複素環カルボニル基」とは、カルボニル基の他に、置換可能な位置に１〜３個の置換基を有していてもよい複素環カルボニル基を意味する。そのような置換基としては、ハロゲン（上述）、アルキル基（上述）、アラルキル基（例、ベンジル）、複素環基（上述）、アルコキシ基（後述）等が挙げられる。
【００６７】
本明細書中の「置換基を有していてもよいカルボキシル基」における「置換基」としては、例えばアルキル基（上述）、アリール基（上述）、アラルキル基（例、ベンジル、フェネチル）等が挙げられる。
【００６８】
本明細書中の「アルキルチオ基」及び「置換基を有していてもよいアリールチオ基」は、それぞれ前記した「アルキル基」及び「置換基を有していてもよいアリール基」で置換されたチオ基を意味する。
「アルキルチオ基」は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオ基であり、具体的には、メチルチオ、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、イソブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ等が挙げられる。
「置換基を有していてもよいアリールチオ基」は、好ましくは、置換基を有していてもよいＣ６−Ｃ１４アリールチオ基であり、具体的には、フェニルチオ、ナフチルチオ等が挙げられる。
【００６９】
本明細書中の「アルキルスルホニル基」及び「置換基を有していてもよいアリールスルホニル基」は、それぞれ前記した「アルキル基」及び「置換基を有していてもよいアリール基」で置換されたスルホニル基を意味する。
「アルキルスルホニル基」は、好ましくは、Ｃ１−Ｃ６アルキルスルホニル基であり、具体的には、メチルスルホニル、エチルスルホニル、ｎ−プロピルスルホニル、イソプロピルスルホニル、ｎ−ブチルスルホニル、イソブチルスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルスルホニル等が挙げられる。
「置換基を有していてもよいアリールスルホニル基」は、好ましくは、置換基を有していてもよいＣ６−Ｃ１４アリールスルホニル基であり、具体的には、フェニルスルホニル、ナフチルスルホニル等が挙げられる。
【００７０】
「置換基を有していてもよいアミノスルホニル基」としては、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ−スルホニル基、ジ（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ−スルホニル基、（Ｃ６−Ｃ１４）アリールアミノ−スルホニル基、ジ（Ｃ６−Ｃ１４）アリールアミノ−スルホニル基等が挙げられ、具体的には、メチルアミノスルホニル、エチルアミノスルホニル、ｎ−プロピルアミノスルホニル、イソプロピルアミノスルホニル、ｎ−ブチルアミノスルホニル、イソブチルアミノスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルアミノスルホニル、ｎ−ペンチルアミノスルホニル、イソペンチルアミノスルホニル、ヘキシルアミノスルホニル、ジメチルアミノスルホニル、ジエチルアミノスルホニル、ジｎ−プロピルアミノスルホニル、ジイソプロピルアミノスルホニル、ジｎ−ブチルアミノスルホニル、ジイソブチルアミノスルホニル、ジｔｅｒｔ−ブチルアミノスルホニル、ジｎ−ペンチルアミノスルホニル、ジイソペンチルアミノスルホニル、ジヘキシルアミノスルホニル、フェニルアミノスルホニル、ナフチルアミノスルホニル等が挙げられる。
【００７１】
本明細書中の「置換基を有していてもよいアリールオキシ基」としては、例えばフェノキシ、１−ナフチルオキシ、２−ナフチルオキシ等が挙げられる。
【００７２】
本明細書中の「置換基を有していてもよいアリールオキシカルボニル基」としては、例えば、フェノキシカルボニル、１−ナフチルオキシカルボニル、２−ナフチルオキシカルボニル等が挙げられる。
【００７３】
本明細書中の「アシルアミノ基」としては、−ＮＨＣＯＲ’’’（式中、Ｒ’’’は、前記「アルキル基」、又は前記「置換基を有していてもよいアリール基」を意味する）で表される基が挙げられ、例えばアセチルアミノ、プロピオニルアミノ、ブチリルアミノ、ベンゾイルアミノ等が挙げられる。
【００７４】
本明細書中の「アルキルスルホニルアミノ基」は、前記「アルキル基」で置換されたスルホニルアミノ基を意味し、具体的には、例えばメチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ、ｎ−プロピルスルホニルアミノ、イソプロピルスルホニルアミノ、ｎ−ブチルスルホニルアミノ、イソブチルスルホニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブチルスルホニルアミノ、ｎ−ペンチルスルホニルアミノ、イソペンチルスルホニルアミノ、ヘキシルスルホニルアミノ等が挙げられる。
【００７５】
本明細書中の「置換基を有していてもよいアリールスルホニルアミノ基」は、前記「置換基を有していてもよいアリール基」で置換されたスルホニルアミノ基を意味し、具体的にはフェニルスルホニルアミノ、ナフチルスルホニルアミノ等が挙げられる。
【００７６】
【化２０】
2014058495.tif 000021
【００７７】
式（Ｉ）中、Ｒ１として好ましくは、(i)水素、(ii)置換基を有していてもよいアルケニル基、(iii)置換基を有していてもよいアルキニル基、(iv)置換基を有していてもよい複素環基、(v)置換基を有していてもよいアミノ基、(vi)アルコキシ基、(vii)アルキルカルボニル基、(viii)置換基を有していてもよい複素環カルボニル基、(ix)シクロアルキルカルボニル基、(x)シクロアルケニルカルボニル基、(xi)置換基を有していてもよいアミノカルボニル基、及び(xii)一般式（１）で表される構造が例示される。
【００７８】
【化２１】
2014058495.tif 000022
【００７９】
（式中、各記号の定義は上述と同義）
式（１）中、Ｒ１６は好ましくは、水素又はアルキル基であり、Ｒ１７及びＲ１８は、好ましくは、同一又は異なって、水素、アルキル基、置換基を有していてもよいアリール基、置換基を有していてもよい複素環基、ジアルキルアミノ基又は置換基を有していてもよいアルケニル基である。
【００８０】
式（Ｉ）中、Ｒ２は、好ましくは、水素、ヒドロキシ基又はアルコキシ基である。さらにＲ２がＯＲ２ａ（式中、Ｒ２ａは水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する）である場合は、Ｒ１とともに置換基を有していてもよい一般式（２）で表される環を形成する。ただし、Ｒ２がＯＲ２ａである場合、Ｒ４はＯＲ４ａ（式中、Ｒ４ａは水素、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基又はアリール基を意味する）ではない。
【００８１】
【化２２】
2014058495.tif 000023
【００８２】
（式中、各記号の定義は上述と同義）
式（２）中、Ｒ１９及びＲ２０はアルキル基であることが好ましく、Ｒ２１及びＲ２２は水素であることが好ましい。
ＯＲ２ａがＲ１とともに置換基を有していてもよい一般式（２）で表される環を形成する場合には式（Ｉ）で表される化合物は下記一般式で表される化合物である。
【００８３】
【化２３】
2014058495.tif 000024
【００８４】
（式中、各記号の定義は上述と同義）
式（Ｉ）中、Ｒ３は、好ましくは、水素、アルキル基又はアルコキシ基である。
式（Ｉ）中、Ｒ４は、好ましくは、水素、ヒドロキシ基又はアルコキシ基である。さらにＲ４がＯＲ４ａ（式中、Ｒ４ａは、上述と同義）である場合は、Ｒ３とともに置換基を有していてもよい一般式（２）で表される環を形成する。ただし、Ｒ４が水素である場合Ｒ２はＯＲ２ａ（式中、Ｒ２ａは上述と同義）であり、Ｒ４がＯＲ４ａである場合Ｒ２はＯＲ２ａではない。
【００８５】
【化２４】
2014058495.tif 000025
【００８６】
（式中、各記号の定義は上述と同義）
式（２）中、Ｒ１９及びＲ２０はアルキル基であることが好ましく、Ｒ２１及びＲ２２は水素であることが好ましい。
ＯＲ４ａがＲ３とともに置換基を有していてもよい一般式（２）で表される環を形成する場合には式（Ｉ）で表される化合物は下記一般式で表される化合物である。
【００８７】
【化２５】
2014058495.tif 000026
【００８８】
（式中、各記号の定義は上述と同義）
【００８９】
式（Ｉ）中、
【００９０】
【化２６】
2014058495.tif 000027
【００９１】
で表される基は、下記一般式（ａ）〜（ｅ）で表される基を意味する。
【００９２】
【化２７】
2014058495.tif 000028
【００９３】
（式中、各記号の定義は上述と同義）
式（ａ）において、Ｘ１は好ましくはＯ又はＮＨであり、Ｒ５ａ及びＲ５ｂは好ましくは、同一又は異なって水素、置換基を有していてもよいアルキル基、又は置換基を有していてもよいアリール基である。
式（ｂ）において、Ｒ６及びＲ７は好ましくは、同一又は異なってアルキル基を意味する。Ｃ−Ｒ６Ｒ７がＣ＝Ｏを形成することも又好ましい。Ｒ８は好ましくはオキソ基又はアルキル基であり、
【００９４】
【化２８】
2014058495.tif 000029
【００９５】
で表される結合は単結合又は二重結合である。
式（ｃ）において、Ｒ９は好ましくは水素であり、Ｒ１０は好ましくは水素であり、Ｒ１１は好ましくは置換基を有していてもよいアリールカルボニル基である。
式（ｄ）において、Ｘ２は、好ましくはＮであり、Ｒ１２は好ましくは置換基を有していてもよいアミノ基である。
式（ｅ）において、Ｒ１３は好ましくはアリール基であり、Ｒ１４は好ましくはアルキル基である。
【００９６】
式（Ｉ）で表される化合物のうち、特に好ましくは下記一般式（ＩＩ）で表される化合物である。
【００９７】
【化２９】
2014058495.tif 000030
【００９８】
{式（ＩＩ）中、
Ｒ１’は、水素、複素環基、置換基を有していてもよいアミノ基、複素環カルボニル基、シクロアルキルカルボニル基、シクロアルケニルカルボニル基又は一般式（１’）：
【００９９】
【化３０】
2014058495.tif 000031
【０１００】
［式（１’）中、
Ｒ１６’、Ｒ１７’及びＲ１８’は同一又は異なって水素、アルキル基又は置換基を有していてもよいアリール基を意味する］
で表される構造を意味し；
Ｒ２’は、アルコキシ基を意味し；
Ｒ３’は、水素又はアルキル基を意味し；
Ｒ４’は、ＯＲ４ａ’（式中、Ｒ４ａ’はアルキル基を意味する）を意味し、ＯＲ４ａ’はＲ３’とともに一般式（２’）：
【０１０１】
【化３１】
2014058495.tif 000032
【０１０２】
［式中、Ｒ１９’及びＲ２０’は、同一又は異なってアルキル基を意味し、破線は、ベンゼン環との縮合部分を示す］
で表される環を形成し；
式：
【０１０３】
【化３２】
2014058495.tif 000033
【０１０４】
で表される基が、
式（ａ’）：
【０１０５】
【化３３】
2014058495.tif 000034
【０１０６】
（式中、Ｒ５ａ’及びＲ５ｂ’は同一又は異なって、水素又は置換基を有していてもよいアルキル基を意味する）で表される基を意味するか、又は
式（ｂ’）：
【０１０７】
【化３４】
2014058495.tif 000035
【０１０８】
（式中、Ｒ８’はアルキル基を意味する）で表される基を意味する。｝
【０１０９】
このような化合物としては、例えば、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＧＵＴ-７０）、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−（２−メチルブタノイル）−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−１）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−（２−メチルブタノイル）−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−２）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−３）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−４）、
４−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）ブタン酸（ＢＮＳ−６）、
４−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルブタンアミド（ＢＮＳ−８）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−［４−オキソ−４−（４−ピリジン−２−イルピペラジン−１−イル）ブチル］−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−９）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−１０−プロピル−２，７−ジヒドロ−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］キノリン−８−オン（ＢＮＳ−１０）、
６−アセチル−５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−１２）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−ペンタノイル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−１３）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−イソブチリル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−１４）、
１０−（３−ブロモフェニル）−５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−１５）、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）プロピオン酸エチルエステル（ＢＮＳ−１６）、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）プロピオン酸（ＢＮＳ−１８）、
５−ヒドロキシ−８，８−ジメチル−４−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−２−オン（ＢＮＳ−１９）、
５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−２０）、
３−（５−ヒドロキシ−２，２−ジメチル−８−オキソ−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−１０−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパンアミド（ＢＮＳ−２１）、
５−メトキシ−２，２−ジメチル−１０−（３−オキソ−３−ピロリジン−１−イルプロピル）−６−プロピオニル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−２４）、
６−シクロブチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−２６）、
６−シクロヘキシルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−２７）、及び
６−シクロペンチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン（ＢＮＳ−２９）等が挙げられ、好ましくは
５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、
６−シクロブチルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン、及び
６−シクロヘキシルカルボニル−２，２−ジメチル−５−メトキシ−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オン
であり、特に好ましくは下記構造式を有する化合物５−メトキシ−２，２−ジメチル−６−［（２Ｅ）−２−メチルブテ−２−ノイル］−１０−プロピル−２Ｈ，８Ｈ−ピラノ［２，３−ｆ］クロメン−８−オンである。
【０１１０】
【化３５】
2014058495.tif 000036
【０１１１】
上述の一般式（Ｉ）で表される化合物は、特許文献１又は特許文献２に開示されている方法で製造することができる。
【０１１２】
本明細書中では、一般式（Ｉ）で表される化合物を化合物（Ｉ）あるいは本発明化合物とも称する場合がある。
【０１１３】
「薬学的に許容されるその塩」とは、本発明化合物から形成されるあらゆる非毒性の塩を示す。例えばそれは：塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸などのような無機酸；シュウ酸、マロン酸、クエン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、グルコン酸、アスコルビン酸、メチルスルホン酸、ベンジルスルホン酸などのような有機酸；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化アンモニウムなどのような無機塩基；メチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、グアニジン、コリン、シンコリンなどのような有機塩基；またはリジン、アルギニン、アラニンなどのようなアミノ酸との反応によって得られうる。本発明は、化合物（Ｉ）の、水和物のような含水生成物および溶媒和物、などを包含する。
【０１１４】
化合物（Ｉ）が、光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体等の異性体を有する場合には、いずれか一方の異性体も、異性体の混合物も化合物（Ｉ）に包含される。例えば、化合物（Ｉ）に光学異性体が存在する場合には、ラセミ体から分割された光学異性体も化合物（Ｉ）に包含される。これらの異性体は、自体公知の合成手法、分離手法（濃縮、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィー、再結晶等）によりそれぞれを単品として得ることができる。
【０１１５】
化合物（Ｉ）は、結晶であっても無晶形であってもよい。化合物（Ｉ）が結晶である場合、結晶形が単一であっても結晶形混合物であっても化合物（Ｉ）に包含される。結晶は、自体公知の結晶化法を適用して、結晶化することによって製造することができる。
【０１１６】
化合物（Ｉ）は、同位元素（例、３Ｈ，１４Ｃ，３５Ｓ，１２５Ｉ等）等で標識されていてもよい。
【０１１７】
本発明化合物は、抗ウイルス作用を有し、抗ウイルス剤として有用である。本発明化合物が対象とするウイルスとして、好ましくはレトロウイルスである。該レトロウイルスとしては、ＲＮＡの転写により生命維持をしているウイルス類を包含するものであり、例えば、ヒト免疫不全ウイルス１型（ＨＩＶ−１）等のヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶ）、肝炎ウイルス（ＨＢＶ、ＨＣＶ等）等が挙げられる。好ましくはＨＩＶである。特に本発明の抗ウイルス剤はＨＩＶ感染症に対して有用である。ＨＩＶ感染症とはエイズ、症候性又は無症候性のＨＩＶ感染症（エイズ関連症候群：ＡＲＣを含む）を含めてＨＩＶに感染している病態をいう。本発明の抗ウイルス剤は、ＨＩＶ感染症をはじめとした各種レトロウイルス感染症の治療用の薬剤として用いることができる。「治療」とは症状の改善、緩和又は治癒を目的とする処置を含む。例えばＨＩＶ感染症の治療とは、ＨＩＶ感染による症状の改善、緩和又は治癒、エイズ発症の予防又は遅延を目的とした処置を含む。具体的には、ＣＤ４陽性リンパ球数の増加又は減少の抑制、ＮＫ細胞活性の増加又は低下の抑制、ＡＲＣの予防、改善、緩和又は治癒、エイズ発症の予防又は遅延、日和見感染症の予防、改善、緩和又は治癒、エイズの症状の改善、緩和又は治癒を目的とした処置を含む。ＡＲＣの症状には、リンパ節腫脹、食欲不振、下痢、体重減少、発熱、倦怠感、発疹、気管支喘息等が含まれる。
【０１１８】
本発明化合物は、ＨＩＶ−１の複製及び／又は転写を抑制することにより、ＨＩＶ−１の増殖を抑制することができる。より詳細には、本発明化合物は、ＮＦ−ｋａｐｐａＢ  ｐ６５の活性化（リン酸化）を抑制することができる。また、本発明化合物は、ＮＦ−ｋａｐｐａＢのＤＮＡ結合を阻害することで、ＨＩＶ−１の転写を抑制し、その複製を抑制することができる。しかも、本発明化合物は、ＨＩＶ−１潜伏感染細胞株において前記抑制作用を発揮することができるため、ＨＩＶ−１の潜伏感染の治療に有用である。さらに、ＨＩＶ−１はＨＩＶ−１の表面に発現するｅｎｖが宿主細胞に結合することで感染が起きるが、本発明化合物は、細胞膜の流動性を低下させること、ＨＩＶ−１のｅｎｖを発現する細胞が膜融合することを阻害すること、ＨＩＶ−１の細胞内侵入を阻害すること、並びに、ＣＸＣＲ４及びＣＣＲ５両方の受容体に対するＨＩＶ−１感染を阻害することができるため、既知の抗ＨＩＶ剤とは異なる作用機序を有する抗ＨＩＶ剤として有用である。
【０１１９】
さらに、本発明化合物は、抗がん作用も有することから、がん（例、悪性リンパ腫（ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫等）、白血病（急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病等）、肉腫（カポジ肉腫、平滑筋肉腫等の軟部肉腫、悪性末梢神経性腫瘍、骨肉腫等の悪性骨腫瘍）、多発性骨髄腫、絨毛癌、軟部腫瘍、肺癌（小細胞肺癌、非小細胞肺癌等）、甲状腺癌、頭頸部癌、食道癌、乳癌、大腸癌、胃癌、胆道癌、脳腫瘍、悪性黒色腫、腎臓癌、膵臓癌、肝臓癌、子宮頚癌、睾丸癌、黒色腫、皮膚癌又は肛門癌等）に罹患した患者に対して好適に適用することができる。さらに、自己免疫疾患（例、全身性エリテマトーデスや関節リウマチ等）、感染症（例、日和見感染等）等の予防又は治療効果を有することから、これらの疾患に罹患した患者に対しても好適に適用することができる。
【０１２０】
本発明化合物を有効成分として含有する医薬（例えばＨＩＶ剤等）中における本発明化合物の含有量は製剤全体に対して通常、約０．０１〜約９９．９重量％、好ましくは約０．１〜約５０重量％である。
【０１２１】
本発明化合物は、薬学的に許容される担体と配合し、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の固形製剤；シロップ剤、注射剤等の液状製剤；貼付剤、軟膏剤、硬膏剤等の経皮吸収剤；吸入剤；坐剤として、適宜製剤化することができる。
また、静脈内滴下、皮膚用パッチ剤、皮下ポンプ、ポリマーインプラント；あるいはナノスフェア製剤を使用した投与のように、治療的に効果的な任意の長さの時間中、連続して実行され得る形態にて投与されても良い。
【０１２２】
本発明化合物を含有する医薬は、経口又は非経口投与され、上記した化合物を１種単独で用いてもよく、又は２種以上を併用して用いてもよい。
【０１２３】
薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用されている各種有機あるいは無機担体物質を用いることができる。具体的には、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等を配合することができる。又、必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の製剤添加物を用いることもできる。
【０１２４】
賦形剤の例としては、乳糖、白糖、ブドウ糖、でんぷん、蔗糖、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等が挙げられる。
【０１２５】
滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、精製タルク、コロイドシリカ等が挙げられる。
【０１２６】
結合剤の例としては、結晶セルロース、白糖、マンニトール、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。
【０１２７】
崩壊剤の例としては、でんぷん、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム等が挙げられる。
【０１２８】
溶剤の好適な例としては、例えば注射用水、アルコール、プロピレングリコール、マクロゴール、ゴマ油、トウモロコシ油等が挙げられる。
【０１２９】
溶解補助剤の好適な例としては、例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。
【０１３０】
懸濁化剤の例としては、例えばステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリン等の界面活性剤；ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。
【０１３１】
等張化剤の好適な例として、例えば塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトール等が挙げられる。
【０１３２】
緩衝剤の好適な例として、例えばリン酸塩、酢酸塩、炭酸塩及びクエン酸塩等の緩衝液等が挙げられる。
無痛化剤の好適な例として、例えばベンジルアルコール等が挙げられる。
【０１３３】
防腐剤の好適な例として、例えばパラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸等が挙げられる。
抗酸化剤の好適な例として、例えば亜硫酸塩、アスコルビン酸等が挙げられる。
着色剤の好適な例として、例えばタール色素、カラメル、三二酸化鉄、酸化チタン、リボフラビン類等が挙げられる。
甘味剤の好適な例として、ブドウ糖、果糖、転化糖、ソルビトール、キシリトール、グリセリン、単シロップ等が挙げられる。
【０１３４】
本発明化合物はヒト、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、ブタなどを含む哺乳類、好ましくはヒトに投与することができる。
【０１３５】
本発明化合物の投与量は、年令、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与時間、投与方法、排泄速度、薬物の組み合わせ、患者のその時に治療を行なっている病状の程度に応じ、それらあるいはその他の要因を考慮して決められる。
投与量は対象疾患、症状、投与対象、投与方法等によって異なるが、例えば、本発明化合物を１日量約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）程度、好ましくは約１〜１０ｍｇ／ｋｇ（体重）程度、更に好ましくは約１〜３ｍｇ／ｋｇ（体重）程度を１回又は２ないし３回に分けて投与するのが好ましい。
【０１３６】
本発明化合物は、所望の効果を得るために、単独で投与することもでき、又他の抗ウイルス剤（例、他の抗ＨＩＶ剤）やウイルス感染の治療に有用な他の薬剤と併用することができる。本発明化合物は従来の抗ウイルス剤と作用機序を異にするため、従来の抗ウイルス剤で得られなかった効果を得られる可能性があり、また、併用することにより従来の抗ウイルス剤で懸念されていた副作用等の問題を回避することが可能となる。例えば従来の他の抗ＨＩＶ剤のいずれかへの耐性株の存在下でさえも、本発明化合物は、ウイルスの増殖を効果的に調節することができる。
【０１３７】
本発明の本発明化合物との併用に用いることができる他の薬剤としては、ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤、ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤またはＤＮＡ合成阻害剤、インターフェロンまたはインターフェロン作動薬、ＨＩＶアンチセンス薬、抗ＨＩＶ抗体または他の抗体、ＨＩＶワクチンまたは他のワクチン、インターフェロンまたはインターフェロン作動薬、ＣＣＲ５拮抗剤、ＨＩＶ ｐ２４に対して作用する医薬、ＨＩＶ融合阻害剤、ＩＬ−２作動薬または拮抗剤、プリンヌクレオシドリン酸化酵素阻害剤、アポトーシス作動薬または阻害剤、コリンエステラーゼ阻害剤、免疫調節剤等から選択される。二つまたは三つ、あるいはより多数の薬剤を併用することができる。異なる作用機構を有する医薬の併用は、本発明の一つの実施態様である。加えて、副作用の重複のない医薬の選択は、本発明の他の実施態様である。
【０１３８】
ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤の特定の例としては、レトロビル（登録商標）（ジドブジンまたはＡＺＴ）、エピビル（登録商標）（ラミブジンまたは３ＴＣ）、ゼリット（登録商標）（サニルブジン）、ヴァイデックス（登録商標）（ジダノシン）、ハイビット（登録商標）（ザルシタビン）、ザイアジェン（登録商標）（硫酸アバカビル）、ビラムン（登録商標）（ネビラピン）、ストクリン（登録商標）（エファビレンツ）、レスクリプトール（登録商標）（メシル酸デラビルジン）、コンビビル（登録商標）（ジドブジン＋ラミブジン）、トリジビル（登録商標）（硫酸アバカビル＋ラミブジン＋ジドブジン）、コアクチノン（登録商標）（エミビリン）、フォスフォノビル（Phosphonovir）（登録商標）、コビラシル（登録商標）、アロブジン（３’−フルオロ−３’−デオキシチミジン）、チオビル（Thiovir）(チオホスホノギ酸)、カプラビリン（カルバミン酸５−［（３，５−ジクロロフェニル）チオ］−４−イソプロピル−１−（４−ピリジルメチル）イミダゾール−２−メタノール）、テノフォビル（ＰＭＰＡ）、フマル酸テノフォビルジソプロキシル（フマル酸（Ｒ）−［［２−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−１−メチルエトキシ］メチル］ホスホン酸ビス（イソプロポキシカルボキシルオキシメチル）エステル）、ＤＰＣ−０８３（（４Ｓ）−６−クロロ−４−［（１Ｅ）−シクロプロピルエテニル］−３，４−ジヒドロ−４−トリフルオロメチル−２（１Ｈ）−キナゾリノン）、ＤＰＣ−９６１（（４Ｓ）−６−クロロ−４−（シクロプロピルエチニル）−３，４−ジヒドロ−４−（トリフルオロメチル）−２（１Ｈ）−キナゾリノン）、ＤＡＰＤ（（−）−β−Ｄ−２，６−ジアミノプリンジオキソラン）、イミュノカル、ＭＳＫ−０５５、ＭＳＡ−２５４、ＭＳＨ−１４３、ＮＶ−０１、ＴＭＣ−１２０、ＤＰＣ−８１７、ＧＳ−７３４０、ＴＭＣ−１２５、ＳＰＤ−７５４、Ｄ−Ａ４ＦＣ、カプラビリン、ＵＣ−７８１、エムトリシタビン、アロブジン、フォスファジド（Phosphazid）、ＵＣ−７８１、ＢＣＨ−１０６１８、ＤＰＣ−０８３、エトラビリン（Etravirine）、ＢＣＨ−１３５２０、ＭＩＶ−２１０、硫酸アバカビル／ラミブジン、ＧＳ−７３４０、ＧＷ−５６３４、ＧＷ−６９５６３４などが挙げられる。
【０１３９】
ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤の特定の例としては、クリキシバン（登録商標）（硫酸インジナビルエタノレート）、サクイナビル、インビラーゼ（登録商標）（メシル酸サクイナビル）、ノルビル（登録商標）（リトナビル）、ビラセプト（登録商標）（メシル酸ネルフィナビル）、ロピナビル、プローゼ（登録商標）（アンプレナビル）、カレトラ（登録商標）（リトナビル＋ロピナビル）、ジメシル酸モゼナビル（mozenavir）（二メタンスルホン酸［４Ｒ−（４α，５α，６β）］−１−３−ビス［（３−アミノフェニル）メチル］-ヘキサヒドロ−５，６−ジヒドロキシ−４，７−ビス（フェニルメチル）−２Ｈ−１，３−ジアゼピン−２−オン）、チプラナビル（３’−［（１Ｒ）−１−［（６Ｒ）−５，６−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２−オキソ−６−フェニルエチル−６−プロピル−２Ｈ−ピラン−３−イル］プロピル］−５−（トリフルオロメチル）−２−ピリジン硫酸アミド）、ラシナビル（Ｎ−［５（Ｓ）−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４（Ｓ）−ヒドロキシ−６−フェニル−２（Ｒ）−（２，３，４−トリメトキシベンジル）ヘキサノイル］−Ｌ−バリン ２−メトキシエチレンアミド）、ＫＮＩ−２７２（（Ｒ）−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチル−３−［（２Ｓ，３Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−Ｎ−［（Ｒ）−２−Ｎ−（イソキノリン−５−イルオキシアセチル）アミノ−３−メチルチオプロパノイル］アミノ−４−フェニルブタノイル］−５，５−ジメチル−１，３−チアゾリジン−４−カルボキサミド）、ＧＷ−４３３９０８、ＴＭＣ−１２６、ＤＰＣ−６８１、バックミンスターフラーレン、ＭＫ−９４４Ａ（ＭＫ９４４（Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−ヒドロキシ−５−［４−（２−ベンゾ［ｂ］フラニルメチル）−２（Ｓ）−（ｔｅｒｔ−ブチルカルバモイル）ピペラジン−１−イル］ペンタンアミド）＋硫酸インジナビル）、ＪＥ−２１４７（［２（Ｓ）−オキソ−４−フェニルメチル−３（Ｓ）−［（２−メチル−３−オキシ）フェニルカルボニルアミノ］−１−オキサブチル］−４−［（２−メチルフェニル）メチルアミノ］カルボニル−４（Ｒ）−５，５−ジメチル−１，３−チアゾール）、ＢＭＳ−２３２６３２（（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１２Ｓ）−３，１２−ビス（１，１−ジメチルエチル）−８−ヒドロキシ−４，１１−ジオキソ−９−（フェニルメチル）−６−［［４−（２−ピリジニル）フェニル］メチル］−２，５，６，１０，１３−ペンタアザテトラデカン二カルボン酸ジメチルエステル）、ＤＭＰ−８５０（（４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ，７Ｒ）−１−（３−アミノ−１Ｈ−インダゾール−５−イルメチル）−４，７−ジベンジル−３−ブチル−５，６−ジヒドロキシパーヒドロ−１，３−ジアゼピン−２−オン）、ＤＭＰ−８５１、ＲＯ−０３３４６４９、Ｎａｒ−ＤＧ−３５、Ｒ−９４４、ＶＸ−３８５、ＴＭＣ−１１４、チプラナビル、ホスアンプレナビルナトリウム、ホスアンプレナビルカルシウム、ダルナビル、ＧＷ−０３８５、Ｒ−９４４、ＲＯ−０３３−４６４９、ＡＧ−１８５９などが挙げられる。
【０１４０】
ＨＩＶインテグラーゼ阻害剤は、Ｓ−１３６０、Ｌ−８７０８１０などであり得る。ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤またはＤＮＡ合成阻害剤は、ホスカビル（登録商標）、ＡＣＨ−１２６４４３（Ｌ−２’，３’−ジデヒドロ−ジデオキシ−５−フルオロシチジン）、エンテカビル（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−９−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−２−メチレンシクロペンチル］グアニン）、カラノライドＡ（［１０Ｒ−（１０α，１１β，１２α）］−１１，１２−ジヒドロ−１２−ヒドロキシ−６，６，１０，１１−テトラメチル−４−プロピル−２Ｈ，６Ｈ，１０Ｈ−ベンゾ［１，２−ｂ：３，４−ｂ’：５，６−ｂ”］トリピラン−２−オン）、カラノライドＢ、ＮＳＣ−６７４４４７（１，１’−アゾビスホルムアミド）、イスカドール（ヤドリギ抽出物（viscum alubm extract））、ルブテカン（Rubutecan）などであり得る。ＨＩＶアンチセンス薬は、ＨＧＴＶ−４３、ＧＥＭ−９２などであり得る。抗ＨＩＶ抗体または他の抗体は、ＮＭ−０１、ＰＲＯ−３６７、ＫＤ−２４７、シトリン（登録商標）、ＴＮＸ−３５５（ＣＤ４抗体）、ＡＧＴ−１、ＰＲＯ−１４０（ＣＣＲ５抗体）、抗ＣＴＬＡ−４ Ｍａｂなどであり得る。ＨＩＶワクチンまたは他のワクチンは、ＡＬＶＡＣ（登録商標）、ＡＩＤＳＶＡＸ（登録商標）、レミューン（登録商標）、ＨＩＶ ｇｐ４１ワクチン、ＨＩＶ  ｇｐ１２０ワクチン、ＨＩＶ  ｇｐ１４０ワクチン、ＨＩＶ  ｇｐ１６０ワクチン、ＨＩＶ ｐ１７ワクチン、ＨＩＶ ｐ２４ワクチン、ＨＩＶ ｐ５５ワクチン、ＡｌｐｈａＶａｘベクター系、キャナリーポックスｇｐ１６０ワクチン、ＡｎｔｉＴａｔ、ＭＶＡ−Ｆ６  Ｎｅｆワクチン、ＨＩＶ revワクチン、Ｃ４−Ｖ３ペプチド、ｐ２２４９ｆ、ＶＩＲ−２０１、ＨＧＰ−３０Ｗ、ＴＢＣ−３Ｂ、ＰＡＲＴＩＣＬＥ−３Ｂなど、アンチフェロン（インターフェロン−αワクチン）などであり得る。
【０１４１】
インターフェロンまたはインターフェロン作動薬は、スミフェロン（登録商標）、マルチフェロン（登録商標）、インターフェロン-τ、Reticulose、ヒト白血球インターフェロンαなどであり得る。ＣＣＲ５拮抗剤はＳＣＨ−３５１１２５などであり得る。ＨＩＶ  ｐ２４に対して作用する医薬は、ＧＰＧ−ＮＨ２（グリシル−プロリル−グリシンアミド）などであり得る。ＨＩＶ融合阻害剤は、ＦＰ−２１３９９（１，４−ビス［３−［（２，４−ジクロロフェニル）カルボニルアミノ］−２−オキソ−５，８−硫酸二ナトリウム（disodium sulfonyl）]ナフチル−２，５−ジメトキシフェニル−１，４−ジヒドラゾン）、Ｔ−１２４９、Synthetic Polymeric Construction No3、ペンタフジド（pentafuside
）、ＦＰ−２１３９９、ＰＲＯ−５４２、エンフビルチドなどであり得る。ＩＬ−２作動薬または拮抗剤は、インターロイキン−２、イムネース（登録商標）、プロロイキン（登録商標）、ムルチキン（Multikine）（登録商標）、オンタック（登録商標）などであり得る。ＴＮＦ−α拮抗剤は、サロミド（登録商標）（サリドマイド）、レミケード（登録商標）（インフリキシマブ）、カードラン硫酸などであり得る。α−グルコシダーゼ阻害剤は、ブキャスト（Bucast）（登録商標）などであり得る。
【０１４２】
プリンヌクレオシドリン酸化酵素阻害剤は、ペルデシン（２−アミノ−４−オキソ−３Ｈ，５Ｈ−７−［（３−ピリジル）メチル］ピロロ［３，２−ｄ］ピリミジン）などであり得る。アポトーシス作動薬または阻害剤は、アーキンＺ（登録商標）、パナビル（Panavir）（登録商標）、補酵素Ｑ１０（２−デカ（３−メチル−２−ブテニレン）−５，６−ジメトキシ−３−メチル−ｐ−ベンゾキノン）などであり得る。コリンエステラーゼ阻害剤は、コグネックス（登録商標）などであり得、免疫調節剤は、イムノックス（Imunox）（登録商標）、プロキン（Prokine）（登録商標）、Ｍｅｔ−エンケファリン（６−ｄｅ−Ｌ−アルギニン−７−ｄｅ−Ｌ−アルギニン−８−ｄｅ−Ｌ−バリンアミド−アドレノルフィン）、ＷＦ−１０（１０倍希釈テトラクロロデカオキシド溶液）、Perthon、ＰＲＯ−５４２、ＳＣＨ−Ｄ、ＵＫ−４２７８５７、ＡＭＤ−０７０、ＡＫ−６０２などであり得る。
【０１４３】
加えて、ニューロトロフィン（登録商標）、リダコール（Lidakol）（登録商標）、アンサー２０（登録商標）、アンプリゲン（登録商標）、アンチコート（Anticort）（登録商標）、イナクチビン（Inactivin）（登録商標）など、ＰＲＯ−２０００、Rev M10遺伝子、ＨＩＶ特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ免疫治療、ＨＶＴＮプロトコール０８０治療等）、ＳＣＡ結合タンパク質、ＲＢＣ−ＣＤ４複合体、モテキサフィンガドリニウム、ＧＥＭ−９２、ＣＮＩ−１４９３、（±）−ＦＴＣ、Ushercell、Ｄ２Ｓ、ＢｕｆｆｅｒＧｅｌ（登録商標）、ＶｉｖａＧｅｌ（登録商標）、Glyminox vaginal gel、ラウリル硫酸ナトリウム、２Ｆ５、２Ｆ５／２Ｇ１２、ＶＲＸ−４９６、Ａｄ５ｇａｇ２、ＢＧ−７７７、ＩＧＩＶ−Ｃ、ＢＩＬＲ−２５５などが本発明化合物との併用治療に用いられ得る。
【０１４４】
本発明化合物と、上記した各種薬剤との併用（以下、本発明の併用剤とも称する）において、それぞれの用量は、年齢、体重、症状、治療効果、投与方法などに依存して変化するが、各薬剤について臨床的に用いられている用量とすることができるが、併用により、相加乃至相乗効果が期待できるので一般的に各薬剤の用量を減じることができる。
【０１４５】
さらに、本発明化合物は、抗がん作用を有し、さらに、炎症、自己免疫疾患や感染症等にも有効であることから、癌、炎症、自己免疫疾患、感染症等に罹患したＨＩＶ感染患者に好適に投与することができる。そのような場合、本発明化合物を抗癌剤、抗炎症剤又は免疫療法剤等と適宜組み合わせて用いることができる。
【０１４６】
他の抗癌剤としては、例えば、代謝拮抗剤（例、メソトレキセート、５−フルオロウラシル等）、アルキル化剤（例、サイクロフォスファミド、イフォスファミド等）、白金系抗癌剤（例、シスプラチン、カルボプラチン等）、トポイソメラーゼ阻害剤（例、エトポシド等）、抗癌性抗生物質（例、マイトマイシン、アドリアマイシン等）、植物由来抗癌剤（例、ビンクリスチン、ビンデシン、タキソール等）、チロシンキナーゼ阻害剤（例、ゲフィニチブ、イマニチブ等）、ヒト化抗体（例、ハーセプチン等）等が挙げられる。
【０１４７】
抗炎症剤としては、アセトアミノフェン、フェナセチン、エテンザミド、スルピリン、アンチピリン、ミグレニン、アスピリン、メフェナム酸、フルフェナム酸、ジクロフェナックナトリウム、ロキソプロフェンナトリウム、フェニルブタゾン、インドメタシン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、フルルビプロフェン、フェンブフェン、プラノプロフェン、フロクタフェニン、エピリゾール、塩酸チアラミド、ザルトプロフェン、メシル酸ガベキサート、メシル酸カモスタット、ウリナスタチン、コルヒチン、プロベネジド、スルフィンピラゾン、ベンズブロマロン、アロプリノール、金チオリンゴ酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、塩酸モルヒネ、サリチル酸、アトロピン、スコポラミン、モルヒネ、ペチジン、レボルファイノール、ケトプロフェン、ナプロキセン、オキシモルフォン又はその塩等の非ステロイド性抗炎症剤等が挙げられる。
【０１４８】
免疫療法剤としては、例えば、微生物又は細菌成分（例、ムラミルジペプチド誘導体、ピシバニール等）、免疫増強活性のある多糖類（例、レンチナン、シゾフィラン、クレスチン等）、遺伝子工学的手法で得られるサイトカイン（例、インターフェロン、インターロイキン（ＩＬ）等）、コロニー刺激因子（例、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポエチン等）等が挙げられ、中でもＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−１２等が好ましい。
【０１４９】
本発明化合物と併用する薬剤の投与は本発明化合物と同時に投与することができるが、別々に投与してもよい。同時に投与する場合、一つの医薬製剤として製することもできる。医薬製剤として用いられる場合、薬学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤、増量剤、崩壊剤、安定化剤、防腐剤、緩衝剤、乳化剤、香料添加剤、着色剤、甘味剤、増粘剤、矯正剤、溶解補助剤、他の添加剤などと混合され、それは一般に水、植物油、アルコール（例、エタノールまたはベンジルアルコールなど）、ポリエチレングリコール、グリセロール三酢酸、ゼラチン、糖質（例、ラクトース、デンプンなど）、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ラノリン、ワセリンを含むことが知られており、常法により錠剤、ピル、粉末剤、顆粒剤、坐剤、注射剤、点眼剤、液剤、カプセル剤、トローチ剤、エアロゾル剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤などに形成され、次いで全身的もしくは局所的、および経口的もしくは非経口的に投与される。
【０１５０】
また、別の実施態様としては、本発明化合物と併用する薬剤とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、本発明化合物と併用する薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与、本発明化合物と併用する薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、本発明化合物と併用する薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与などが挙げられる。
【０１５１】
本発明化合物はまた、インビトロの溶液中におけるレトロウイルスの増殖を予防するのにも効果的である。Ｔリンパ球細胞培養のような、ヒト、動物および微生物の細胞培養は、キャリブレータおよびコントロールを含む研究および診断手順のような種々のよく知られた目的で活用される。細胞培養類の増殖および保存の前ならびにそれらの間において、不注意にもしくは知らずに細胞培養中に存在し得るレトロウイルスの、不測もしくは望外の複製を防止する有効濃度で、本発明化合物が細胞培養液中に添加され得る。ウイルスはもともと細胞培養中に存在し得、例えばＨＩＶは、血液中で検出され得るずっと以前にヒトＴリンパ球中に、あるいはウイルスへの曝露を通じて存在し得ることが知られている。本発明化合物の使用は、無意識のまたは不慮の、研究者もしくは医者への、致死的となり得るレトロウイルスの曝露を防止する。
【０１５２】
さらに、本発明化合物はまた、ＨＩＶ感染を治療するための本発明化合物との併用治療に有益であり得るさらなる抗ＨＩＶ剤を同定するための、インビトロにおけるスクリーニング方法に有効に用いることができる。
例えば試験化合物を、本発明化合物と組み合わせて、ＨＩＶ感染細胞培養物中に添加し、細胞培養物中のレトロウイルスの複製を測定し、標準サンプル（例、試験化合物を含まないサンプル、試験化合物のみ含むサンプル、または他のそれらのバリアント）と比較することができる。結果の比較によって、例えば本発明化合物との併用治療において有益に用いられ得る試験化合物が示される。さらに同様の手法で、本発明化合物と他の薬剤との併用治療において有益に用いられる試験化合物を得ることもできる。
【０１５３】
以下の実施例により本発明をより具体的に説明するが、実施例は本発明の単なる例示にすぎず、本発明の範囲を何ら限定するものではない。
【実施例】
【０１５４】
細胞株と試薬
Ｔ細胞株Ｍｏｌｔ−４（ＲＩＫＥＮ  ＣＥＬＬ  ＢＡＮＫより入手）、Ｔ細胞株ＨＵＴ７８、Ｔ細胞株Ｊｕｒｋａｔ−ＨＸＢｃ２及びＪｕｒｋａｔ−５２２Ｆ／Ｙ（いずれもＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍより入手)、ＨＩＶ−１潜伏細胞株Ｕ１（ＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍより入手）、ＴＺＭ−ｂｌ細胞（ＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍより入手）を使用した。
ＨＩＶ−１株ＮＬ４−３（ＮＩＨ  ＡＩＤＳ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ＆  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｐｒｏｇｒａｍより入手）を使用した。
ＧＵＴ−７０（佐賀大学から提供）、ＰＭＡ(ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ，ＳＴ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ)及びＴＮＦ−α（Ｐｅｐｒｏ  Ｔｅｃｈ）を使用した。
Ｍｏｌｔ−４細胞は、ＲＰＭＩ−１６４０（和光純薬）に１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｓｏｕｔｈ  Ｌｏｇａｎ，  Ｕｔａｈ，  ＵＳＡ）を添加した培地で培養した。
Ｔ細胞株ＨＵＴ７８は、ＲＰＭＩ−１６４０（和光純薬）に１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｓｏｕｔｈ  Ｌｏｇａｎ，  Ｕｔａｈ，  ＵＳＡ）、１００Ｕ／ｍＬ ペニシリン及び５０μｇ／ｍＬ ストレプトマイシンを添加した培地で培養した。
Ｊｕｒｋａｔ−ＨＸＢｃ２細胞及びＪｕｒｋａｔ−５２２Ｆ／Ｙ細胞は、ＲＰＭＩ−１６４０（和光純薬）に１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｓｏｕｔｈ  Ｌｏｇａｎ，  Ｕｔａｈ，  ＵＳＡ）、２００μｇ／ｍＬ Ｇ４１８、２００μｇ／ｍＬ ハイグロマイシン及び１μｇ／ｍＬ テトラサイクリンを添加した培地で培養した。
Ｕ１細胞は、ＲＰＭＩ−１６４０（和光純薬）に１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｓｏｕｔｈ  Ｌｏｇａｎ，  Ｕｔａｈ，  ＵＳＡ）、１００Ｕ／ｍＬ ペニシリン及び１００μｇ／ｍＬ ストレプトマイシンを添加した培地で培養した。
ＴＺＭ−ｂｌ細胞は、ＤＭＥＭ（和光純薬）に１０％ウシ胎仔血清（ＦＣＳ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ＨｙＣｌｏｎｅ，Ｓｏｕｔｈ  Ｌｏｇａｎ，  Ｕｔａｈ，  ＵＳＡ）、１００Ｕ／ｍＬ ペニシリン及び１００μｇ／ｍＬ ストレプトマイシンを添加した培地で培養した。
【実施例１】
【０１５５】
ＨＩＶ−１複製の抑制
Ｔ細胞株Ｍｏｌｔ−４に、ｓｐｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ法(Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，ｖｏｌ．７４，  ｐ．１００７４−１００８０，２０００)で、ＨＩＶ−１株ＮＬ４−３を感染させた。１２穴マイクロプレートに１×１０5個／ウエルに前記細胞を播種し３日間培養した。前記細胞にＧＵＴ−７０を、０、１０μＭ添加した。さらに前記細胞を４−７日間培養し、ＦＩＴＣ標識抗ｐ２４抗体（Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ社、以下同様）で定法通り染色し、ＬＳＲ−ＩＩ  ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，  ＣＡ、以下同様）を用いてｐ２４の発現細胞の割合を解析した。ｐ２４抗原はＨＩＶ−１ウイルスの構造タンパク質であり、当該タンパク質を検出することによりＨＩＶ−１の複製の程度を測定することができる。結果を図１に示す。図中、ｍｏｃｋは、（ＨＩＶ−１及びＧＵＴ−７０添加なし）、ｃｏｎは（ＨＩＶ−１添加あり、ＧＵＴ−７０添加なし）を示す。ＧＵＴ−７０添加により、ＨＩＶ−１の複製は抑制された。さらに、それを裏付けるために、前記培養７日目の細胞培養上清中のｐ２４  Ｇａｇタンパク質量をＥＬＩＳＡ法により、ＨＩＶ−１  ｐ２４  ａｎｔｉｇｅｎ  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｔｒｏｐｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｅｎｔｅｒ，  Ｏｋｉｎａｗａ，  Ｊａｐａｎ）を使用して定量した。結果を図１−３に示す。
【実施例２】
【０１５６】
細胞膜の流動性に対するＧＵＴ−７０の効果
ＧＵＴ−７０の細胞膜の流動性に対する効果を検討した。Ｔ細胞ＨＵＴ７８（２．５×１０６個）を、最終濃度２×１０−６Ｍ  ＤＰＨ（１，６−ジフェニル−１，３，５−ヘキサトリエン；和光純薬）で標識し、３７℃で培養後、３０分間遮光した。ＤＰＨでの標識後、ＰＢＳで当該細胞を洗浄し、ＰＢＳで２．５×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるよう調製した。当該細胞に、最終濃度が、０、１０、５０μＭとなるようにＧＵＴ−７０を添加し、添加から１０分間の蛍光偏光を分光蛍光光度計（Ｆ４５００；日立）により測定した。結果を図２に示す。仮に、蛍光分子の回転が大きく、細胞膜の流動性が高い場合、蛍光偏光Ｐ値は低くなり、逆に、蛍光分子の回転が小さく、細胞膜の流動性が低い場合、蛍光偏光Ｐ値は高くなる。当該Ｔ細胞では、容量依存的にＧＵＴ−７０の添加により、細胞膜の流動性が低下した。
【実施例３】
【０１５７】
ＨＩＶ−１  ｅｎｖ発現細胞の膜融合阻害
ＧＵＴ−７０の細胞膜融合に対する抑制効果を検討した。テトラサイクリン存在下で培養しておいたＴ細胞株Ｊｕｒｋａｔ−ＨＸＢｃ２及びＪｕｒｋａｔ−５２２Ｆ／ＹをＰＢＳ洗浄によりテトラサイクリンを除去し、３日間培養した。２×１０6個のＪｕｒｋａｔ−ＨＸＢｃ２及びＪｕｒｋａｔ−５２２Ｆ／Ｙ細胞をＰＫＨ  ２６  Ｒｅｄ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｋｅｒ  Ｋｉｔ(ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ，ＳＴ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ)を用いて染色し、対照となるＴ細胞株(Ｍｏｌｔ−４)をＰＫＨ  ６７  Ｇｒｅｅｎ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｋｅｒ  Ｋｉｔ(ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ，ＳＴ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ) を用いて染色した（Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，  ｖｏｌ．４７，  ｐ．１００−１０６，２００２）。
【０１５８】
細胞を染色後、最終濃度が０、 ５、７．５、１０μＭ になるようにＧＵＴ−７０を添加し、等量の両細胞を共培養して、２４穴マイクロプレートに各サンプル３つ、５００μＬずつ播種した。２４時間後、細胞を回収し遠心してペレットをＦＡＣＳ ｗａｓｈｉｎｇ  ｂｕｆｆｅｒで洗浄及び懸濁し、ＬＳＲ−ＩＩ  ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｅｒで解析を行った。ＰＫＨ  ２６  Ｒｅｄ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｋｅｒ  Ｋｉｔで染色した細胞はＦＬ２ (５８５ｎｍ) で検出し、ＰＫＨ  ６７  Ｇｒｅｅｎ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｋｅｒ  Ｋｉｔで染色した細胞はＦＬ１(５３０ｎｍ) で検出した。データはＦｌｏｗＪｏソフトウェア（Ｔｒｅｅ  Ｓｔａｒ，Ｓｃａｎ  Ｃａｒｌｏｓ，ＣＡ)で解析した。結果を図３に示す。また、４８時間後、Ｂｉｏｚｅｒｏ（ＫＥＹＥＮＣＥ，Ｊａｐａｎ）で蛍光顕微鏡観察を行った。結果を図４に示す。ＧＵＴ−７０は、ＨＩＶ−１  ｅｎｖ発現細胞の膜融合を阻害した。
【実施例４】
【０１５９】
ＧＵＴ−７０によるＨＩＶ−１感染阻害
ＧＵＴ−７０のＨＩＶ−１感染に対する阻害効果を検討した。Ｔ細胞ＨＵＴ７８（５×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）に、ＧＵＴ−７０を、０、１０、３０、５０μＭ添加して、３７℃で１時間培養した。当該細胞にＨＩＶ−１株ＮＬ４−３（ＨＩＶ−１  ｇａｇ  タンパク質  ｐ２４濃度；２００ｎｇ／ｍＬ）を感染させ、１時間後、ＰＢＳで洗浄し、さらに前記細胞を４８時間培養した。当該細胞をＦＩＴＣ標識抗ｐ２４抗体（Ｂｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ社、以下同様）で定法通り染色し、ＬＳＲ−ＩＩ  ｆｌｏｗ  ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，  Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，  ＣＡ、以下同様）を用いて、ＧＵＴ−７０処理後の細胞内ｐ２４を検出した。結果を図５−１及び図５−２に示す。同様の手法で、ＴＺＭ−ｂｌ細胞（３．５×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）にＨＩＶ−１株ＮＬ４−３（ＨＩＶ−１  ｇａｇ  タンパク質  ｐ２４濃度；５０ｎｇ／ｍＬ）を感染させ、前記同様のＧＵＴ−７０処理後の細胞内ｐ２４を検出した。結果を図５−３及び図５−４に示す。
【実施例５】
【０１６０】
ＨＩＶ−１潜伏感染細胞株Ｕ１におけるＨＩＶ−１増殖抑制
６穴マイクロプレートに１×１０6個／ウエルにＵ１細胞を播種し、１００ｎｇ／ｍＬのＰＭＡ及び１０ｎｇ／ｍＬのＴＮＦ−αを添加して２４時間培養し、ＨＩＶ−１産生を誘導した（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，ｖｏｌ．１４０，ｐ．１１１７−１１２２，１９８８、Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｏｌ．３１，ｐ．２３３４−２３３７，２００８）。本系に、最終濃度１、３、１０μＭになるようにＧＵＴ−７０を添加した。結果を図６−１及び図６−２に示す。ＧＵＴ−７０の容量依存的にＨＩＶ−１の産生が抑制された。さらに、それを裏付けるために、前記細胞培養上清中のｐ２４  Ｇａｇタンパク質量を、上述同様、ＨＩＶ−１  ｐ２４  ａｎｔｉｇｅｎ  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔ（Ｔｒｏｐｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｅｎｔｅｒ，  Ｏｋｉｎａｗａ，  Ｊａｐａｎ）を使用して定量した。結果を図６−３に示す。
【実施例６】
【０１６１】
ＨＩＶ−１の転写抑制
６穴マイクロプレートに１×１０6個／ウエルにＵ１細胞を播種し、ＴＺＭ−ｂｌ細胞（ＨｅＬａ細胞株にＣＤ４とＣＣＲ５とを遺伝子導入し、更にＨＩＶ−１プロモーター下にルシフェラーゼ及びβ−ガラクトシダーゼ遺伝子を別々に遺伝子導入した細胞株）に、前処理として０．２時間後に１０μＭのＧＵＴ−７０を添加した。ｓｐｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ法(Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，ｖｏｌ．７４，  ｐ．１００７４−１００８０，２０００)により、２ｎｇ／ｍＬ又は１０ｎｇ／ｍＬのＨＩＶ−１株ＮＬ４−３を感染させ、２４穴マイクロプレートに前記細胞を播種した。前記細胞がサブコンフルエントな状態で、０．５μｇのＮＦ−ｋａｐｐａＢ  ルシフェラーゼ  レポータープラスミド（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ，  Ｌａ  Ｊｐｌｌａ，  ＣＡ，  Ｕ.Ｓ.Ａ.）及び０．０５μｇのＲｅｎｉｌｌａ  ルシフェラーゼ構築物を、ＨｉｌｙＭａｘ（Ｄｏｊｉｎｄｏ）を用いて遺伝子導入し、２４時間後にルシフェラーゼ活性を公知の手法により測定した（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｏｌ．３１，ｐ．２３３４−２３３７，２００８）。ＧＵＴ−７０添加により、ＨＩＶ−１感染は著しく抑制された。結果を図７−１に示す。さらに、ＧＵＴ−７０によるＨＩＶ−１の転写抑制効果を裏付けるために、Ｔａｔ−Ｒｅｖに対するプライマー（配列番号１：atggcaggaa gaagcggag、配列番号２：attccttcgg gcctgtcg）を用いて、定量ＲＴ−ＰＣＲを行った（Nat Immunol. 2010;11(5):419-426）。ＴＮＦ−α添加によりＨＩＶ−１産生が誘導されたＨＩＶ−１潜伏細胞株Ｕ１に、１０μＭ  ＧＵＴ−７０、１０μＭ Ｂａｙ  １１−７０８５、又は、２０ｎＭ  Ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ（いずれもＮＦ−κＢ阻害剤）を添加し、２４時間培養後のＴａｔ−Ｒｅｖ  ｍＲＮＡを定量ＲＴ−ＰＣＲで測定した。ＧＵＴ−７０及びＮＦ−κＢ阻害剤の添加により、Ｔａｔ−Ｒｅｖ転写が阻害された。結果を図７−２に示す。加えて、ＨＩＶ−１株ＮＬ４−３を感染させたＭｏｌｔ−４細胞に、ＧＵＴ−７０有／無で２４時間培養後のＴａｔ−Ｒｅｖ  ｍＲＮＡを定量ＲＴ−ＰＣＲで測定した。ＧＵＴ−７０の添加により、Ｔａｔ−Ｒｅｖ転写が阻害された。結果を図７−３に示す。
【実施例７】
【０１６２】
ＨＩＶ−１のＮＦ−ｋａｐｐａＢの活性化抑制
ＨＩＶ−１のＬＴＲ領域には、２カ所のＮＦ−ｋａｐｐａＢ結合領域が存在することが知られている。そこで、実施例３と同様の方法でＨＩＶ−１潜伏感染細胞株Ｕ１を調製した。前記細胞に、１０μＭのＧＵＴ−７０を添加し、ＧＵＴ−７０添加（＋）及び非添加（−）後の細胞から、それぞれ核抽出液を分離し、１０％ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲルに１０μｇの核タンパク質をロードして電気泳動で分離後、ゲルをＰＶＤＦ膜に転写した。該膜を、抗ｐ−６５モノクローナル抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，ＣＡ）、抗ｐｐ−６５モノクローナル抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，ＣＡ）、抗ＨＳＣ７０抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ，ＣＡ）で反応させ、０．５、２、４、６、１２、２４時間後のＮＦ−ｋａｐｐａＢの活性化を検出した（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｏｌ．３１，ｐ．２３３４−２３３７，２００８）。ＧＵＴ−７０は、１０ｎｇ／ｍＬのＴＮＦ−α添加によるＮＦ−ｋａｐｐａＢの活性化（リン酸化）を抑制した。結果を図８に示す。
【実施例８】
【０１６３】
ＮＦ−ｋａｐｐａＢのＤＮＡ結合阻害及び転写抑制
実施例５と同様の方法で、ＨＩＶ−１潜伏感染細胞株Ｕ１を調製し、１０ｎｇ／ｍＬのＴＮＦ−α及び１０μＭのＧＵＴ−７０を添加した。０．５、１時間、４時間後、ＧＵＴ−７０添加（＋）及び非添加（−）後のＵ１細胞から、それぞれ核抽出液を分離し、ＮＦ−ｋａｐｐａＢのＤＮＡ結合活性をゲルシフトアッセイにより検出した（Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，ｖｏｌ．１２５，p.１４６４−１４７２，２００９）。さらに、２、４時間後の前記細胞の転写活性を実施例４と同様に、ルシフェラーゼアッセイで測定した（Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，ｖｏｌ．３１，ｐ．２３３４−２３３７，２００８）。ＧＵＴ−７０は、ＮＦ−ｋａｐｐａＢのＤＮＡ結合を阻害し、転写を抑制することが示唆された。結果を図９に示す。
【０１６４】
以上のとおり、ＧＵＴ−７０は、ＨＩＶ−１の複製及び転写を阻害する効果を有する上に、細胞膜の流動性を低下させ、細胞膜融合阻害作用と同様、ＨＩＶ−１の細胞内侵入を阻害する効果も有することが示された。このような作用機序を有する抗ＨＩＶ剤は知られておらず、新たな作用機序を有する本発明化合物は、ＡＩＤＳ治療に新たな可能性をもたらすものである。
【産業上の利用可能性】
【０１６５】
本発明化合物は、ＨＩＶに対する増殖阻害作用、細胞膜の流動性低下作用、細胞膜融合阻害作用等を有し、ＡＩＤＳ治療分野への適用が可能となる。しかも、本発明化合物は抗癌作用も有することから、ＨＩＶ感染のみならず、悪性腫瘍が合併した患者への適用も可能となるため、臨床上極めて有用である。
【図１−２】
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【図１−３】
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【図３−２】
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【図５−２】
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【図５−４】
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【図６−２】
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【図６−３】
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【図７−１】
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【図７−２】
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【図７−３】
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【図９−２】
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【図１−１】
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【図２】
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【図３−１】
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【図４】
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【図５−１】
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【図５−３】
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【図６−１】
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【図８】
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【図９−１】
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【配列表】
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