(57)【要約】【課題】  人体に害を及ばす虞のない抽出溶媒を用いて、より高濃度でβ−クリプトキサンチン（エステル体）を含有する抽出物を得る方法を提供する。【解決手段】  抽出原料である温州みかん果汁を珪藻土に吸着させる工程（１）、得られた果汁が吸着した珪藻土を、８５％未満、好ましくは５０％のエタノールで洗浄する工程（２）、得られた洗浄後の珪藻土から、８５％以上、好ましくは９５％以上のエタノールを用いて抽出する工程（３）、得られた抽出液からエタノールを除去し濃縮する工程（４）、得られた濃縮物を、５０を超え８５％未満、好ましくは６０〜７０％のエタノール中に懸濁させる工程（５）、得られた懸濁液を５℃以下で３時間以上静置する工程（６）、遠心分離によって沈殿物を分離・回収する工程（７）からなる、β−クリプトキサンチン（エステル体）を含有するみかん抽出物の製造方法。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の（１）〜（５）の工程からなることを特徴とするβ−クリプトキサンチンを含有するみかん抽出物の製造方法。
（１）温州みかん果汁を珪藻土で濾過処理して、β−クリプトキサンチン（エステル体）を珪藻土に吸着させる工程
（２）この珪藻土を、８５％未満のエタノールで洗浄する工程
（３）洗浄後の珪藻土から、８５％以上のエタノールを用いてβ−クリプトキサンチン（エステル体）を溶出する工程
（４）溶出液を減圧濃縮する工程
（５）得られた濃縮物を、５０％を超え８５％未満のエタノール中に懸濁させる工程
（６）得られた懸濁液を５℃以下で３時間以上静置して、β−クリプトキサンチン（エステル体）を高濃度に含有する沈殿を析出させる工程
（７）遠心分離によって沈殿物を回収する工程
【請求項２】
前記工程（２）において、５０％以下のエタノールを用いることを特徴とする請求項１に記載の、β−クリプトキサンチンを含有するみかん抽出物の製造方法。
【請求項３】
前記工程（３）において、９５％以上のエタノールを用いることを特徴とする請求項１又は２に記載の、β−クリプトキサンチンを含有する抽出物の製造方法。
【請求項４】
前記工程（５）において、６０〜７０％のエタノールを用いることを特徴とする請求項１〜３のいずれか1項に記載の、β−クリプトキサンチンを含有する抽出物の製造方法。
【請求項５】
前記工程（６）において、１８時間以上静置することを特徴とする請求項１〜４のいずれか1項に記載の、β−クリプトキサンチンを含有する抽出物の製造方法。
【請求項６】
前記工程（７）の後に、前記工程（５）及び前記工程（７）を繰り返すことを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の、β−クリプトキサンチンを含有する抽出物の製造方法。
【請求項７】
前記みかん果汁に代えて、以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を経て得られる調製液を用いることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項に記載の、β−クリプトキサンチンを含有するみかん抽出物の製造方法。
（ａ）温州みかんの搾汁工程で発生する搾汁残渣又は果皮（チンピ）に８５％以上（好ましくは９５％以上のエタノール）のエタノールを加えて抽出する工程
（ｂ）得られた抽出液をメッシュ濾過により残渣を分離する工程
（ｃ）得られた濾液に又は該濾液を減圧濃縮した濃縮液に、水又は５０％以下のエタノール水溶液を加えて、８５％未満のエタノールの溶液に調製する工程
【請求項８】
前記工程（ａ）及び前記工程（ｂ）を、パルプの橙色が薄くなるまで数回繰り返すことを特徴とする請求項６に記載の、β−クリプトキサンチンを含有するみかん抽出物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、β−クリプトキサンチンを高濃度に含有するみかん抽出物の製造方法に関し、特に温州みかん果汁又は果汁残渣からβ−クリプトキサンチンを高濃度で抽出する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
β−クリプトキサンチンはカロテノイド色素に属する主に橙色を呈する色素であり、以下に示すような構造である。植物体内では水酸基がエステル化された状態で存在している。
【化１】
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【０００３】
β−クリプトキサンチンは、栄養成分としてビタミンＡの機能を有しているばかりでなく、アルコール性肝障害、骨粗鬆症、糖尿病等の生活習慣病の予防作用や、抗癌作用を有することが明らかになり、機能性食品素材として注目されている。そのため、機能性食品素材に適した、高純度化したβ−クリプトキサンチンを高濃度に含有する素材を製造することが切望されている。
【０００４】
β−クリプトキサンチンは、温州みかんや、ポンカンなどの柑橘類、柿、マンゴー、パパイア、ビワ、赤ピーマン等に多く含まれているが、このうち温州みかん果肉中には１００ｇあたり１〜２ｍｇと特に多く含まれることから、温州みかん果汁或いは果汁の搾汁工程で発生する残渣（以下、「果汁残渣」という）を用いて、β−クリプトキサンチン高含有素材を製造する技術の開発が進められている。
【０００５】
例えば、特許文献１には、搾汁工程で得られる主生産物である果汁にβ−クリプトキサンチンが最も多く含まれることに注目し、搾汁機で搾汁して得た粗汁をろ過又は篩別処理して得た果汁を、遠心分離処理して上清部と沈降部に分離し、上清部の果汁を、ＭＦ（精密ろ過）膜及び／又はＵＦ（限外ろ過）膜装置に供することにより、β−クリプトキサンチンを糖度換算で５〜１０倍に高濃度化したβ−クリプトキサンチン高含有素材を製造できることが記載されている。
【０００６】
また、β−クリプトキサンチンは、搾汁工程で得られる副生産物である搾汁粕やパルプにも含まれており、β−クリプトキサンチンの抽出原料として用いられている。
たとえば、特許文献２には、果汁を搾汁、ろ過又は篩別後、遠心分離して得られる沈殿物に、酵素剤を添加して凍結し、解凍した後、脱水することにより、原材料の沈殿物の５〜１２倍に増強された粉末を得ることができることが記載されている。
また、特許文献３には、果汁を圧搾して得られた原料沈澱物等からβ-クリプトキサンチンを含有するアセトン抽出分を得、これを加水分解した後、異なる充填剤が充填された２種類のカラムを用いて、高純度β−クリプトキサンチンを製造することが記載されている。
さらに、特許文献４には、搾汁時に発生する果皮又はパルプ等を乾燥させて水分含量を５％以下とした粉末に、ヘキサンを加えて可溶部中のヘキサン抽出物を取得し、このヘキサン抽出物を濃縮し、さらに、濃縮物に所定量のヘキサンを加えて再溶解し、−２０〜−３０℃程度に冷却した後、遠心処理して可溶部を回収し濃縮して低濃度組成物を取得し、この低濃度組成物に所定量のエタノールを加え、−２０〜−３０℃程度に冷却し、遠心分離して不溶部を取得することで、高濃度組成物を製造することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１１−１０３７７３号公報
【特許文献２】特開２０００−２３６３７号公報
【特許文献３】特開２０００−１３６１８１号公報
【特許文献４】特開２０１１−２４１１９７号公報
【特許文献５】特開２０１２−２１３３５９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、特許文献１の方法では、膜装置が高価であるばかりでなく、膜処理により糖質は除去されても、その他の不純物が残存するため、クリプトキサンチンの高純度化を妨げている。また、膜処理にかなりの時間を要し、多量の果汁を処理した場合には、長時間処理により品質が劣化するおそれがある。
また、特許文献２の方法では、得られるβ−クリプトキサンチンの濃度は非常に低いという問題がある。
また、特許文献３の方法では、純度の高いβ−クリプトキサンチンが得られるものの、高速液体クロマトグラフを用いるため、装置及び充填剤が高価であるばかりでなく、アセトンなどの有機溶剤を使用しなければならず、有機溶剤の残留の問題がある。
さらに、特許文献４の方法では、コストのかかる高度なクロマトグラフ法を必要としないものの、溶剤としてヘキサンを用いるため、同様に残留の問題がある。
そのため、簡便で、且つ、人体に害を及ばす虞のない抽出溶媒を用いて、高濃度でβ−クリプトキサンチンを含有する抽出物を得る方法が望まれている。
【０００９】
そこで、出願人は、人体にとって安全性が高い水及びエタノールのみを使用して、β−クリプトキサンチンを抽出する方法をすでに提案している（上記特許文献５参照）。具体的には、温州みかんの果汁残渣をペースト状にしたものに５０％エタノールを加えて洗浄ろ過し、ろ過残渣を乾燥した後、エタノールを加えて抽出し、得られた抽出物からエタノールを除去濃縮し、得られた濃縮物に水又は濃度５０％以下のエタノールを加えた後、遠心分離によって油状抽出物を分離回収し、得られた油状抽出物を乾燥するというものである。
しかしながら上述の遠心分離工程において、エタノール含量が５０％以下の場合には、たとえ加温したとしても不純物を効果的に除去することは出来ず、β-クリプトキサンチン含量を高めるのに限界があった。
【００１０】
本発明は、以上のような事情に鑑みてなされたものであって、人体に害を及ばす虞のない抽出溶媒を用いて、より高濃度でβ−クリプトキサンチンを含有する抽出物を得る方法を提供することを目的とするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者等は、上記目的を達成すべく、鋭意検討を重ねた結果、抽出原料を、珪藻土を用いて処理して、溶液中のβ-クリプトキサンチン（エステル体）を選択的に吸着させた後、８５％以上、好ましくは９５％のエタノール溶出部の濃縮物を、５０％を超え８５％以下の濃度、好ましくは６０〜７０％濃度のエタノール溶液に懸濁させ、５℃以下の温度条件下で３時間以上静置した液を遠心分離することにより、より高濃度のβ−クリプトキサンチン含有抽出物を得られることが判明した。
【００１２】
本発明は、これらの知見に基づいて完成に至ったものであり、以下のとおりのものである。
すなわち、温州みかん果汁、例えば６倍濃縮冷凍果汁を原料に使用する場合には、果汁を解凍して２倍量以上の水で希釈した後、
（１）該温州みかん果汁を珪藻土で濾過処理して、β−クリプトキサンチン（エステル体）を珪藻土に吸着させる工程
（２）この珪藻土を、８５％未満、好ましくは５０％のエタノールで洗浄する工程
（３）洗浄後の珪藻土から、８５％以上、好ましくは９５％以上のエタノールを用いてβ−クリプトキサンチン（エステル体）を溶出する工程
（４）溶出液を減圧濃縮する工程
（５）得られた濃縮物を、５０％を超え８５％未満、好ましくは６０〜７０％のエタノール中に懸濁させる工程
（６）得られた懸濁液を５℃以下で３時間以上、好ましくは１８時間以上静置して、β−クリプトキサンチン（エステル体）を高濃度に含有する沈殿を析出させる工程
（７）遠心分離によって沈殿物を回収する工程
を経て、β−クリプトキサンチンを含有する抽出物を製造することを特徴とするものである。
【００１３】
また、温州みかん果汁の搾汁工程で発生する果汁残渣（フィニッシャーパルプ、遠心パルプおよび外果皮、内果皮など）又は果皮（チンピ）を原料とする場合には、前記（１）工程におけるみかん果汁に代えて、以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を経て得られる調製液を用いることを特徴とする、β−クリプトキサンチンを含有するみかん抽出物を製造方法である。
（ａ）温州みかんの搾汁工程で発生する搾汁残渣又は果皮（チンピ）に８５％以上、好ましくは９５％以上のエタノールを加えて抽出する工程
（ｂ）得られた抽出液をメッシュ濾過により残渣を分離する工程
（ｃ）得られた濾液に又は該濾液を減圧濃縮した濃縮液に、水又は５０％以下のエタノール水溶液を加えて、８５％未満のエタノールの溶液に調製する工程
【発明の効果】
【００１４】
本発明により得られたβ−クリプトキサンチン含有みかん抽出物は、人体に害を及ぼさないエタノールを用いて製造されるため、得られた食品素材は、食品や飲料に添加されても、安全、安心である。また、本発明により得られたβ-クリプトキサンチン含有食品素材は、従来の市場品（０．２％以下）に比べて高い含有量を有しているので、健康機能を期待したサプリメントなどへ効果的に配合することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】抽出原料に温州みかん果汁を用いた実施形態の１つを示すフロー図
【図２】抽出原料に温州みかんの遠心パルプを用いた実施形態の１つを示すフロー図
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、抽出原料を、珪藻土を用いて処理すること、抽出溶媒として人体に害を及ぼさないエタノールを用いること、及び低温処理した後に遠心分離すること、を特徴とするものである。
ラヂオライト等の珪藻土は、通常、液体中の浮遊物を除去する目的で主としてろ過助剤として使用されているが、β−クリプトキサンチン（エステル体）を選択的に吸着保持することができ、さらに８５％以上のエタノール抽出で洗浄した際に、β−クリプトキサンチン（エステル体）が溶出することが判明した。したがって、高純度のβ−クリプトキサンチン（エステル体）を得るためには、前工程として、８５％未満、好ましくは５０％以下のエタノールでの洗浄工程が必要となる。
【００１７】
また、遠心分離の前工程として、溶出液の減圧濃縮物に、５０％を超え８５％未満、好ましくは６０〜７０％のエタノールを加え懸濁させた後、５℃以下で３時間以上、好ましくは１８時簡以上静置させ、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有する沈殿を析出させ、その後の遠心分離により、上清部分の冷エタノール中に溶解した不純物を効率的に除去しつつ、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有させることができる。
遠心分離によって得られる沈殿物に含有されるエステル体は、アルカリで鹸化処理することにより、遊離体のβ-クリプトキサンチンとすることができる。
【００１８】
β−クリプトキサンチンは、温州みかんの果肉、果皮のいずれにも含まれるため、本発明においては、搾汁後の果皮、果汁、及び搾汁工程における残渣（以下、果汁残渣という）もしくは果皮（チンピ）のいずれも、抽出原料とすることができる。すなわち、搾汁により、果皮が取り除かれ、搾汁直後の粗果汁は篩別処理されて、粗いものはフィニッシャーパルプとなる。さらに篩別後の果汁は遠心分離処理されて、重くて沈みやすい部分が遠心パルプとなるが、これらのパルプにはβ−クリプトキサンチンが吸着しており、抽出原料となる。
【００１９】
以下、本発明に係るβ−クリプトキサンチンを含有する抽出物の製造方法について、フロー図を用いて詳述する。
【００２０】
図１は、本発明の一つの実施形態を示すものであり、抽出原料に温州みかんの果汁を用いる場合の一例を示しており、
（１）温州みかん果汁を珪藻土で濾過処理して、β−クリプトキサンチン（エステル体）を珪藻土に吸着させる工程
（２）この珪藻土を、８５％未満のエタノールで洗浄する工程
（３）洗浄後の珪藻土から、８５％以上のエタノールを用いてβ−クリプトキサンチン（前駆体物質）を溶出する工程
（４）溶出液を減圧濃縮する工程
（５）得られた濃縮物を、５０％を超え８５％未満のエタノール中に懸濁させる工程
（６）得られた懸濁液を５℃以下で３時間以上静置して、β−クリプトキサンチン（エステル体）を高濃度に含有する沈殿を析出させる工程
（７）遠心分離によって沈殿物を回収する工程
からなり、本実施形態では、引き続き、工程（５）及び工程（７）を繰り返すものである。
【００２１】
工程（１）は、ろ材として珪藻土を用いて濾過処理する工程であり、これで、果汁中のβ−クリプトキサンチン（エステル体）が珪藻土に吸着される。
工程（１）に用いる温州みかん果汁は、搾汁工程で得られた果汁のみならず、該果汁を還元濃縮したものであってもよい。また、例えば６倍濃縮冷凍果汁であってもよく、その場合には、果汁を解凍後、２倍量以上の水で希釈したものを用いる。
また、珪藻土としては、単なる乾燥品ではなく、食品添加物として使用されている白色の融剤焼成品あるいは鮭肉色の焼成品が好適に使用され、具体例としてはラヂオライト、セライトなどが用いられる。使用する量は、処理液に対して、重量比で３〜５０％、好ましくは５〜１０％の添加が望ましい。
また、濾過処理の温度は、常温〜４０℃であり、ろ過時間は、特に限定されない。
【００２２】
工程（２）は、抽出の前工程として、０％（すなわち水）以上８５％未満、好ましくは５０％以下のエタノールで、珪藻土を洗浄するものであり、本発明においては、該工程を経ることにより、高純度のβ−クリプトキサンチンを得ることが可能となる。
洗浄に用いられる量は、処理液に対して重量比で半量〜３倍量であり、洗浄温度は、常温〜４０℃である。
【００２３】
工程（１）で得られるろ液、及び工程（２）の抽出液を減圧濃縮することにより、β−クリプトキサンチンを含まないエキスを得ることができる。
また、工程（１）で得られるろ液、及び工程（２）の抽出液は、β−クリプトキサンチン濃度の調製を目的として、以下の工程（３）で得られる抽出部に添加することが可能である。
【００２４】
工程（３）は、人体に害を及ぼさないエタノールを用いて、珪藻土に吸着されたβ−クリプトキサンチンを抽出する工程である。
該工程（３）に用いられるエタノール量は抽出に際して十分な量であれば良いが、例えば抽出対象物の重量に対して重量比０．５〜１００であることが好ましい。０．５未満であると十分な抽出が行えず、１００を超えてもそれ以上の抽出が行われずいずれの場合も好ましくない。
また、抽出の際の温度は、室温でも十分に抽出可能であるが、１０℃〜８０℃であることが好ましく、前記の温度範囲であると効率よく抽出を行うことができる。溶媒抽出に用いる抽出溶媒は、一般的に沸点の高くないものが用いられるので、８０℃を超えると抽出溶媒が蒸発する虞があり好ましくない。１０℃未満であっても抽出は可能であるが、効率的に抽出が行えず好ましくない。
抽出時間は限定されないが、十分な抽出を行うために３０分〜７２０分であることが望
ましい。
【００２５】
工程（４）の工程は、エタノール除去及び濃縮操作の工程であり、減圧下で行われる。減圧濃縮することで、エタノール除去及び濃縮時の温度を低下させることができる。この時の温度は８０℃以下であることが好ましく、８０℃を超えると、β−クリプトキサンチンが変質し、収率が低下する虞がある。減圧濃縮装置として、具体的には例えばロータリーエバポレーターを用いることができる。
【００２６】
工程（５）においては、工程（４）で得られた濃縮物を、懸濁溶媒となる８５％未満のエタノールに加えて懸濁させる。
用いる懸濁溶媒の量は、濃縮物に対して３倍重量以上であり、好ましくは７倍重量以上である。
【００２７】
工程（６）において、工程（５）で得られた懸濁液を５℃以下で３時間以上、好ましくは１８時間以上静置させる。
本発明においては、工程（６）を経ることにより、冷エタノール中に不純物を溶解させたまま、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有する沈殿を析出させることができる。
【００２８】
工程（７）で得られる前記懸濁液から抽出物を分離する方法としては、遠心分離が用いられる。遠心分離することで、簡便且つ効率的に前記懸濁液から沈殿物（油状抽出物）を分離して回収することができる。
遠心分離の条件としては、回転数を８００ｒｐｍ〜３０００ｒｐｍ（好ましくは、２０００ｒｐｍ、７６０×g、１５分間）とすることが好ましい。
また、沈殿物（油状抽出物）を十分に分離するために遠心分離の処理時間は１秒〜３０分であることが好ましい。
【００２９】
回収した沈殿物（油状抽出物）中のβ−クリプトキサンチン（エステル体）の純度を高めるため、必要に応じて、得られた沈殿物（油状抽出物）を用いて、前記工程（５）及び（７）を繰り返す。すなわち、工程（７）で得られた沈殿物（油状抽出物）を、５０％を超え８５％未満のエタノール中に懸濁させた後、遠心分離によって、沈殿物（油状抽出物）を回収する。
このようにして得られた沈殿物(油状抽出物)は、必要に応じて、減圧濃縮することにより、残存するエタノールと水が留去される。
【００３０】
図２は、本発明の他の実施形態を示すものであり、抽出原料に温州みかんの搾汁工程で得られる遠心沈殿パルプを用いる場合の一例を示している。
本実施形態では、前記の実施形態におけるみかん果汁の代わりに、
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を経て得られる調製液を製造し、該調製液を用いて、前記の実施形態における工程（１）〜（７）に供する。
（ａ）遠心パルプに８５％以上、好ましくは９５％以上のエタノールを加えて抽出する工程
（ｂ）得られた抽出液をメッシュ濾過により残渣を分離する工程
（ｃ）得られた濾液又は該濾液を減圧濃縮した濃縮液に、水又は５０％以下のエタノール水溶液を加えて、８５％未満のエタノールの溶液に調製する工程
【００３１】
工程（ａ）は、遠心パルプに含有されるβ−クリプトキサンチンを抽出するための工程であるが、該工程（ａ）におけるエタノール量は抽出に際して十分な量であれば良く、例えば抽出対象物の重量に対して重量比で等量以上であることが好ましい。重量比で０．５未満であると十分な抽出が行えず、１００を超えてもそれ以上の抽出が行われず、いずれの場合も好ましくない。
また、抽出温度は、室温で十分抽出可能であるが、好ましくは２０℃〜８０℃である。
抽出時間は、１５〜３０分間で十分であるが、好ましくは３０分〜５時間である。
なお、工程（ａ）に用いる抽出原料は、遠心パルプに限られず、フィニッシャーパルプ、或いはこれらの混合物であってもよい。
【００３２】
工程（ｂ）において、濾液と残渣に分離する。
前記工程（ａ）及び前記工程（ｂ）を、パルプの橙色が薄くなるまで数回繰り返すことが好ましく、それらの濾液を集めて、工程（ｃ）に供する。
【００３３】
工程（ｃ）は、得られた濾液又は該濾液を減圧濃縮した濃縮液に、水又は５０％以下のエタノール水溶液を加えて、８５％未満のエタノールの溶液に調製する工程である。
減圧濃縮は、アルコール臭がなくなるまででよい
工程（ｃ）で、加える水又は５０％以下のエタノール水溶液の量は、濾液又は濃縮液中に含有されるエタノール量及び加えるエタノール濃度によって異なるが、濾液又は濃縮液の等量以上であって、終濃度で８５％未満、好ましくは５０％近くとなる量が好ましく、濃縮せずに濾液をそのまま用いる場合には、水を加えて、終濃度で５０％近くとするのが好ましい。
【００３４】
以降は、工程（ａ）〜工程（ｃ）で得られた調製液を用い、前述の工程（１）〜（７）と同様にして行う。
【００３５】
以上、抽出原料として、果汁を用いた実施形態、及び遠心パルプを用いた実施形態について説明したが、抽出原料として、果皮を用いる場合には、８５％以上のエタノールを用いた抽出物を、水でエタノール濃度が５０％以下となるように希釈後、図１に示す珪藻土処理を行い、以下、同様の処理を行う。
【実施例】
【００３６】
以下、実施例を用いて本発明について説明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。
【００３７】
〈β-クリプトキサンチン含量の測定法〉
以下の実施例において得られたβ−クリプトキサンチンを含有する抽出物に含まれるβ−クリプトキサンチン量については、ＵＶ検出器を有する高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により、以下の条件で定量した。
（分析条件）
高速液体クロマトグラフ：島津製作所製ＬＣ−２０１０Ａ
カラム：ナカライテスク社製Cosmosil Cholester（４．６ｍｍＩ．Ｄ．×２５０ｍｍ）
移動層：アセトニトリル：メタノール：テトラヒドロフラン＝５５：４０：５（０．１％酢酸およびα-トコフェロール５０ｐｐｍ含有）
流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ
カラムオーブン温度：60℃
検出波長：４５５ｎｍ
【００３８】
実施例で得られた抽出物０．５ｇを１００ｍｌのメスフラスコに秤量し、ピロガロール２．０ｇおよびヘキサン：アセトン：エタノール：トルエン（１０：７：６：７、α-トコフェロール５０ｐｐｍ含有）からなる混液４０ｍｌを加えて溶解させた後、エタノールでメスアップした。本液１０ｍｌに水酸化カリウム1ｇを加え、常法により、７０℃、３０分間、ケン化処理を行い、ヘキサン：酢酸エチル混液（９：１）で抽出した後、溶媒を留去し、上記条件下で高速液体クロマトグラフ法により、β-クリプトキサンチン含量を測定した。
【００３９】
（実施例１：冷凍みかん濃縮果汁からの抽出）
冷凍温州みかん６倍濃縮果汁１．０ｋｇを解凍後、水１．０ｋｇを加え希釈した。この溶液に珪藻土（商品名：ラヂオライト＃３０００）３０ｇを添加（ボディーフィード）し、ステンレス鍋中で攪拌（１５０ｒｐｍ、室温、30分間）した。つぎに珪藻土７０ｇをプレコートしたステンレス製ビフネル漏斗に上述の処理液を注加、吸引濾過し、溶液中に存在するβ-クリプトキサンチン（エステル体）を珪藻土に吸着保持させた。
ついで処理液を通液した後の珪藻土に５０％エタノール１．０ｋｇを注ぎ、洗浄することで不純物を取り除いた。最後に珪藻土を９５％エタノール３．０ｋｇで抽出し、吸着保持されていたβ-クリプトキサンチン（エステル体）を溶出させた。９５％エタノール溶出物を減圧濃縮した後、濃縮物を７０％エタノールに懸濁、5℃以下で約18時間冷蔵させ、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有する沈殿物を析出させ、遠心分離（２０００ｒｐｍ、１５分間）を行った。沈殿を７０％エタノールに懸濁した後、再度遠心分離（２０００ｒｐｍ、１５分間）を繰り返し、回収した沈殿物を減圧濃縮して残存するエタノールと水を留去することにより、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有（３．０９％）する抽出物を得ることが出来た。
【００４０】
（実施例２：フィニッシャーパルプと遠心パルプの混合物からの抽出）
温州みかん果汁搾汁時に生じるフィニッシャーパルプと遠心パルプの混合物６．０ｋｇにエタノール４．５ｋｇを加え、室温で５０分間攪拌抽出した。メッシュ（目開き１８０μｍ、線径１２５μｍ）濾過した後、メッシュ上のパルプを回収し、再度エタノール９．０ｋｇを加え、抽出、メッシュ濾過を計3回反復した。濾過液を減圧濃縮し、得られた濃縮物に５０％エタノール２．０ｋｇおよび珪藻土（商品名：ラヂオライト＃３０００）６０ｇを添加（ボディーフィード）し、ステンレス鍋中で攪拌（１５０ｒｐｍ、室温、30分間）した。つぎに珪藻土１４０ｇをプレコートしたステンレス製ビフネル漏斗に上述の処理液を注加、吸引濾過し、溶液中に存在するβ-クリプトキサンチン（エステル体）を吸着保持させた。
ついで処理液を通液した後の珪藻土に５０％エタノール２．０ｋｇを注ぎ、洗浄することで不純物を取り除いた。最後に珪藻土を９５％エタノール３．０ｋｇで抽出し、吸着保持されていたβ-クリプトキサンチン（エステル体）を溶出させた。９５％エタノール溶出物を減圧濃縮した後、濃縮物を７０％エタノールに懸濁、5℃以下で約18時間冷蔵し、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有する沈殿物を析出させ、遠心分離（２０００ｒｐｍ、１５分間）を行った。沈殿を７０％エタノールに懸濁した後、再度遠心分離（２０００ｒｐｍ、１５分間）を繰り返し、回収した沈殿物を減圧濃縮して残存するエタノールと水を留去することにより、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有（１．３６％）する抽出物を得ることが出来た。
【００４１】
（実施例３：チンピからの抽出）
チンピ（乾燥温州みかん果皮）１．０ｋｇに９５％エタノール３．０ｋｇを加え、６０℃で１．５時間抽出し、メッシュろ過した（本操作を計４回反復）。得られた抽出液を１／１８量まで濃縮した後、等量の水および珪藻土（商品名：ラヂオライト＃３０００）２０ｇを添加（ボディーフィード）し、ステンレス鍋中で攪拌（５０ｒｐｍ、室温、30分間）した。つぎに珪藻土２５ｇをプレコートしたステンレス製ビフネル漏斗に上述の処理液を注加、吸引濾過し、溶液中に存在するβ-クリプトキサンチン（エステル体）を吸着保持させた。
ついで処理液を通液した後の珪藻土に５０％エタノール１．０ｋｇを注ぎ洗浄することで不純物を取り除いた。最後に珪藻土を９５％エタノール１．２ｋｇで抽出し、吸着保持されていたβ-クリプトキサンチン（エステル体）を溶出させた。９５％エタノール溶出物を減圧濃縮した後、濃縮物を７０％エタノールに懸濁、5℃以下で約18時間冷蔵し、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有する沈殿物を析出させ、遠心分離（２０００ｒｐｍ、１５分間）を行った。沈殿を７０％エタノールに懸濁した後、再度遠心分離（２０００ｒｐｍ、１５分間）を繰り返し、回収した沈殿物を減圧濃縮して残存するエタノールと水を留去することにより、β-クリプトキサンチン（エステル体）を高含有（１．８９％）する抽出物を得ることが出来た。
【図１】
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【図２】
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