(57)【要約】【課題】前立腺がんを診断可能な新たなプローブの提供。【解決手段】式(I)で表される化合物又は式(I)で表される化合物の製薬上許容される塩。下記式(I)中、Ｒは、放射性同位元素又はその同位体を含む置換基を示す。Ｌは、リンカー、又は結合手を示す。Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示す。ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。2014051442.tif 000028【選択図】図３
2014051442.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)で表される化合物又は式(I)で表される化合物の製薬上許容される塩。
【化１】
2014051442.tif 000025
式(I)中、Ｒは、放射性同位元素又はその同位体を含む置換基を示し、
Ｌは、リンカー、又は結合手を示し、
Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示し、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
【請求項２】
式(II)で表される化合物又は式(II)で表される化合物の製薬上許容される塩。
【化２】
2014051442.tif 000026
式(II)中、Ｒ’は、ハロゲン置換されたＣ6-12アリール、ハロゲン置換されたＣ4-12へテロアリール、又はハロゲン置換されたＣ1-6アルキルを示し、
Ｐは、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し、
Ｘ及びＹは、それぞれ独立して、Ｃ1-8アルキレン、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、Ｃ1-8ヘテロアルキル、Ｃ2-8ヘテロアルケニル、Ｃ2-8ヘテロアルキニル、Ｃ1-8アルコキシ、又は結合手を示し、
Ｑは、天然アミノ酸、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し、
Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示し、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
【請求項３】
前記ハロゲンは、123Ｉ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、18Ｆ、75Ｂｒ、76Ｂｒ、又は77Ｂｒである、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
式(III)〜(VIII)のいずれかで表される化合物又はそれらの化合物の製薬上許容される塩。
【化３】
2014051442.tif 000027
式(III)〜(VIII)中、*Iは、放射性ヨウ素原子を示す。
【請求項５】
請求項１から４のいずれかに記載の化合物を含む、イメージング用組成物。
【請求項６】
ＰＳＭＡ（Prostate Specific Membrane Antige）のイメージング方法であって、
請求項１から４のいずれかに記載の化合物を投与された被検体から前記化合物の放射性シグナルを検出することを含む、イメージング方法。
【請求項７】
前記検出されたシグナルを再構成処理して画像に変換し表示することを含む、請求項６記載のイメージング方法。
【請求項８】
前立腺がんのイメージング方法であって、
請求項１から４のいずれかに記載の化合物を投与された被検体から前記化合物の放射性シグナルを検出することを含む、イメージング方法。
【請求項９】
治療上有効な放射性同位元素又はその同位体を含む請求項１から４のいずれかに記載の化合物を、治療有効量投与することを含む、腫瘍の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、前立腺がんを診断可能な核医学イメージングプローブに関する。
【背景技術】
【０００２】
前立腺がんは、世界中で多くの男性が罹患しているがん種である。前立腺がんの診断方法としてはＰＳＡ(Prostate Specific Antigen)検査があるが、この方法は確定診断に侵襲的な生検を必要とする。また、その他の診断方法として、ＳＰＥＣＴ（Single Photon Emission Computed Tomography）や、ＰＥＴ（Positoron Emission Tomography）等といった核医学イメージングプローブを用いたイメージング法を用いた方法が提案されている。
【０００３】
ＰＳＭＡ（Prostate Specific Membrane Antige）は、前立腺がん、特にアンドロゲン非依存性の前立腺がん細胞の表面に大量に発現するII型内在性膜タンパク質である。このため、ＰＳＭＡを標的とするイメージング剤及び癌の治療のための薬剤が提案されている（例えば、非特許文献１、２及び３）。非特許文献１には、N-[N-[(S)-1,3-dicarboxypropyl]carbamoyl]-S-3-[125I]iodo-L-tyrosine([125I]DCIT)が記載されている。非特許文献２には、(S)-2-(3-((S)-1-carboxy-5-(3-(4-[125I]iodophenyl)ureido)pentyl)ureido)pentanedioic acid([125I]MIP-1095)及び(S)-2-(3-((S)-1-carboxy-5-(4-[125I]iodobenzylamino)pentyl)ureido)pentanedioic acid([125I]MIP-1072)が記載されている。非特許文献３には、N-[N-[(S)-1,3-Dicarboxypropyl]carbamoyl]-4-[18F]fluorobenzyl-Lcysteine([18F]DCFBC)が記載されている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Clin Cancer Res 2005, 11, 4022-8
【非特許文献２】Cancer Res 2009, 69, 6932-40
【非特許文献３】Clin Cancer Res 2008, 14, 3036-43
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
前立腺がんは、アメリカにおいて男性が罹りやすいがんであり、また日本においてもその罹患率が年々増加している。このため、前立腺がんを診断可能な新たなプローブが求められている。本開示は、前立腺がんを診断可能な新たなプローブを提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示は、一又は複数の態様において、式(I)で表される化合物又は式(I)で表される化合物の製薬上許容される塩に関する。
【化１】
2014051442.tif 000003
式(I)中、Ｒは、放射性同位元素又はその同位体を含む置換基を示し、
Ｌは、リンカー、又は結合手を示し、
Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示し、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
【０００７】
本開示は、一又は複数の態様において、式(II)で表される化合物又は式(II)で表される化合物の製薬上許容される塩に関する。
【化２】
2014051442.tif 000004
式(II)中、Ｒ’は、ハロゲン置換されたＣ6-12アリール、ハロゲン置換されたＣ4-12へテロアリール、又はハロゲン置換されたＣ1-6アルキルを示し、
Ｐは、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し、
Ｘ及びＹは、それぞれ独立して、Ｃ1-8アルキレン、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、Ｃ1-8ヘテロアルキル、Ｃ2-8ヘテロアルケニル、Ｃ2-8ヘテロアルキニル、Ｃ1-8アルコキシ、又は結合手を示し、
Ｑは、天然アミノ酸、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し、
Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示し、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
【発明の効果】
【０００８】
本開示によれば、一又は複数の態様において、前立腺がんを診断可能な新たなプローブを提供できる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、in vitro実験による安定性の結果の一例を示すグラフである。
【図２】図２は、Blocking実験の結果の一例を示すグラフである。
【図３】図３は、SPECT/CT撮像の結果の一例を示す画像である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
ＰＳＭＡはＧＣＰ−ＩＩ（glutamate carboxypeptidase-II）活性を有している。ＧＣＰ−ＩＩは腎臓に高発現しているため、ＰＳＭＡイメージングプローブは腎臓に多く集積する。従来のプローブは、腎臓に集積した後、時間経過とともに膀胱へ流出する傾向が見られる。膀胱は前立腺の近傍臓器であることから、膀胱へのプローブの集積は、前立腺がんのイメージングに影響を及ぼす恐れがある。本開示は、プローブのＰＳＭＡに対する親和性を向上させることができれば、前立腺がん組織への迅速且つ高い集積が期待できるとともに、腎臓での滞留時間を延長させて膀胱へのプローブの流出を遅らせることができる、との知見に基く。
【００１１】
本開示によれば、ＰＳＭＡとの親和性が向上された化合物を提供できる。本開示の化合物はＰＳＭＡに対して優れた親和性を示すことから、本開示によれば、一又は複数の態様において、前立腺がんのイメージングプローブ及び又は治療用の薬剤を提供できる。また、ＰＳＭＡは、前立腺がん細胞以外の腫瘍に発現していること、及び血管形成等に関与すること等が知られている。このため、本開示によれば、一又は複数の態様において、前立腺がん以外のＰＳＭＡが発現するがんのイメージングプローブ及び又は治療用の薬剤を提供できる。
【００１２】
本開示の化合物により、ＰＳＭＡとの親和性が向上された化合物を提供できる理由は明らかではないが、式(I)又は(II)で表される化合物における３−チオ−２，５−ジオキソピロリジン（例えば、下記式において破線で囲まれた部分の構造）がＰＳＭＡに対する親和性に何らかの影響を及ぼし、これによりＰＳＭＡに対する親和性が向上しているものと考える。但し、本開示はこれらのメカニズムに限定されるものではない。
【化３】
2014051442.tif 000005
【００１３】
本明細書において、式(I)〜(VIII)で表される化合物は少なくとも１又は２個の不斉炭素原子をもっており、各々少なくとも２、３又は４種の光学異性体が存在する。このため、式(I)〜(VIII)で表される化合物は、いずれも、これらの光学異性体の全て及びこれらの混合物の全てを包含するものである。
【００１４】
本明細書において「製薬上許容される塩」とは、薬理上及び／又は医薬上許容される塩を含有し、例えば、無機酸塩、有機酸塩、無機塩基塩、有機塩基塩、酸性又は塩基性アミノ酸塩等が挙げられる。
【００１５】
本明細書において「放射性同位元素又はその同位体」は、放射性同位元素及び非放射性同位元素を含む。放射性同位元素としては、特に限定されないが、一又は複数の実施形態において、11Ｃ、13Ｎ、15Ｏ、18Ｆ、64Ｃｕ、67Ｇａ、68Ｇａ、75Ｂｒ、76Ｂｒ、77Ｂｒ、82Ｒｂ、99mＴｃ、111Ｉｎ、123Ｉ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、186Ｒｅ、188Ｒｅ、及び90Ｙ等が挙げられる。非放射性同位元素は、一又は複数の実施形態において、上述する放射性同位元素の非放射性同位元素であり、例えば、13Ｃ、14Ｎ、16Ｏ、17Ｆ、63Ｃｕ、70Ｇａ、80Ｂｒ、99mＴｃ、115Ｉｎ、及び127Ｉ等が挙げられる。
【００１６】
本明細書において「Ｃ1-4アルキル」、又は「Ｃ1-6アルキル」とは、炭素数が１〜４個、又は１〜６個の直鎖、分岐、又は環状の飽和脂肪族炭化水素をいう。これらのアルキルとしては、一又は複数の実施形態において、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第３級ブチル、ペンチル、及びヘキシル等が挙げられる。Ｃ1-4アルキル及びＣ1-6アルキルは、一又は複数の実施形態において、１以上の置換基によって置換されていてもよい。
【００１７】
本明細書において「Ｃ6-12アリール」とは、共役π電子系を有する少なくとも１つの環を有する炭素数が６〜１２個の芳香族基をいう。Ｃ6-12アリールとしては、一又は複数の実施形態において、フェニル、ナフチル、及び１，２，３，４−テトラヒドロナフチル等があげられる。本明細書において「ハロゲン置換されたＣ6-12アリール」は、少なくとも１つの炭素原子がハロゲンによって置換されている炭素数が６〜１２のアリールをいう。ハロゲンは、放射性ハロゲンであってもよいし、非放射性ハロゲンであってもよい。放射性ハロゲンとしては、一又は複数の実施形態として、123Ｉ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、18Ｆ、75Ｂｒ、76Ｂｒ、及び77Ｂｒが挙げられる。非放射性ハロゲンとしては、17Ｆ、80Ｂｒ、及び127Ｉ等が挙げられる。ハロゲン置換されたＣ6-12アリールは、一又は複数の態様において、ハロゲン以外の１以上の置換基によって置換されていてもよい。置換基としては、一又は複数の態様において、トリハロメチル、ヒドロキシメチル、ＳＨ、ＯＨ、ＮＯ2、アミン、シアノ、アルキル、アルコキシ、及びアミノ等が挙げられる。
【００１８】
本明細書において「Ｃ4-12へテロアリール」とは、少なくとも１つのヘテロ原子を含む炭素数が４〜１２のアリールをいう。ヘテロ原子としては、一又は複数の実施形態として、酸素、硫黄、及び窒素が上げられる。Ｃ4-12へテロアリールとしては、一又は複数の実施形態として、チオフェン、フラン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、フラニル、ピリジル、ピロリル、イミダゾリル、キノリン、及びベンゾフラン等が挙げられる。本明細書において、「ハロゲン置換されたＣ4-12へテロアリール」は、少なくとも１つの炭素原子がハロゲンによって置換されている炭素数が６〜１２のヘテロアリールをいう。ハロゲン置換されたＣ6-12アリールは、一又は複数の態様において、ハロゲン以外の１以上の置換基によって置換されていてもよい。置換基は、上記の通りである。
【００１９】
本明細書において「ハロゲン置換されたＣ1-6アルキル」は、少なくとも１つの炭素原子がハロゲンによって置換されている炭素数が１〜６のアルキルをいう。ハロゲン置換されたＣ1-6アルキルは、一又は複数の実施形態において、１以上の置換基によって置換されていてもよい。
【００２０】
本明細書において「Ｃ2-8アルケニル」とは、炭素数が２〜８個のアルケンをいう。Ｃ2-8アルケニルとしては、一又は複数の実施形態において、ビニル、アリル、プロペニル、２−メチルー１−プロペニル、及び２−ブテニル等が挙げられる。本明細書において「Ｃ2-8ヘテロアルケニル」とは、少なくとも１つのヘテロ原子を含む炭素数が２〜８のアルケニルをいう。
【００２１】
本明細書において「Ｃ2-8アルキニル」とは、炭素数が２〜８個のアルキンをいう。Ｃ2-8アルキニルとしては、一又は複数の実施形態において、エチニル、プロピニル、及びブチニル等が挙げられる。本明細書において「Ｃ2-8ヘテロアルキニル」とは、少なくとも１つのヘテロ原子を含む炭素数が２〜８のアルキニルをいう。
【００２２】
本明細書において「Ｃ1-8ヘテロアルキル」とは、炭素原子の少なくとも１つがヘテロ原子に置換された炭素数が１〜８のアルキルをいう。
【００２３】
本明細書において「Ｃ1-8アルコキシ」とは、直鎖又は分岐鎖状の炭素数が１〜８個の環を含むアルキルオキシをいう。Ｃ1-8アルコキシとしては、一又は複数の実施形態において、メトキシ、メトキシ、プロピルオキシ、イソプロピルオキシ、及びブチルオキシ等が挙げられる。
【００２４】
本明細書において「Ｃ1-8アルキレン」とは、直鎖又は分岐鎖状の炭素数が１〜８個を含むアルキレンをいう。Ｃ1-8アルキレンとしては、一又は複数の実施形態において、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、ブチレン基、ペンチル基、及びヘキシル基が挙げられる。
【００２５】
本明細書において「天然アミノ酸」としては、一又は複数の実施形態において、グリシン、リジン、グルタミン酸、チロシン、及びシステイン等が挙げられる。
【００２６】
［式(I)で表される化合物］
本開示は、一又は複数の実施形態において、式(I)で表される化合物又は式(I)で表される化合物の製薬上許容される塩（以下、「本開示の化合物(I)」という）に関する。
【化４】
2014051442.tif 000006
【００２７】
式(I)において、Ｒは、放射性同位元素又はその同位体を含む置換基を示す。放射性同位元素又はその同位体を含む置換基は、少なくとも放射性同位元素又はその同位体を含んでいればよい。置換基としては、一又は複数の実施形態において、公知の放射性標識基、及び放射性金属同位元素を含むキレート化合物等が挙げられる。置換基としては、一又は複数の実施形態において、ハロゲン置換されたＣ6-12アリール等が挙げられる。
【００２８】
式(I)において、Ｌは、リンカー、又は結合手を示す。リンカーとしては、一又は複数の実施形態において、−ＣＯＮＲ2（ＣＨ2）n1ＣＯＮＲ3（ＣＨＲ1）n2（ＣＨ2）n3−、−ＣＯＮＲ2（ＣＨ2）n1ＣＯＮＲ3（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1ＣＯＮＲ2（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1ＮＲ2ＣＯ（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1ＮＲ3ＣＯＮＲ2（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1ＣＯＮＲ3（ＣＨ2）n3ＣＯＮＲ2（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1ＣＯＮＲ3（ＣＨ2）n3（ＣＨＲ4）n4ＣＯＮＲ2（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1−、−（ＣＨ2）n1Ｓ（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1Ｏ（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1ＮＲ2（ＣＨ2）n2−、−（ＣＨ2）n1ＣＯ２（ＣＨ2）n2−等が挙げられる。前記式中、ｎ１、ｎ２、ｎ３及びｎ４はそれぞれ０又は１〜５の整数であり、Ｒ1は、水素原子、低級アルキル基。カルボキシル基、又はフェニル基であり、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4は、それぞれ、水素原子、低級アルキル基又はフェニル基である。
【００２９】
式(I)において、Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示す。式(I)において、ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
【００３０】
[式(II)で表される化合物]
本開示は、一又は複数の実施形態において、式(II)で表される化合物又は式(II)で表される化合物の製薬上許容される塩（以下、「本開示の化合物(II)」という）に関する。
【化５】
2014051442.tif 000007
【００３１】
式(II)中、Ｒ’は、ハロゲン置換されたＣ6-12アリール、ハロゲン置換されたＣ4-12へテロアリール、又はハロゲン置換されたＣ1-6アルキルを示し、中でも、ハロゲン置換されたＣ6-12アリールが好ましい。
【００３２】
式(II)中、Ｐは、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示す。
【００３３】
式(II)中、Ｘ及びＹは、それぞれ独立して、Ｃ1-8アルキレン、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、Ｃ1-8ヘテロアルキル、Ｃ2-8ヘテロアルケニル、Ｃ2-8ヘテロアルキニル、Ｃ1-8アルコキシ、又は結合手を示す。
【００３４】
式(II)中、Ｑは、天然アミノ酸、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示す。
【００３５】
式(II)中、Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示す。
【００３６】
式(II)中、ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
【００３７】
本開示の化合物(II)としては、一又は複数の実施形態において、式(III)〜(VIII)のいずれかで表される化合物又はそれらの化合物の製薬上許容される塩等が挙げられる。式(III)〜(VIII)中、*Iは、放射性ヨウ素原子を示す。
【化６】
2014051442.tif 000008
【００３８】
[イメージング用組成物]
本開示は、一又は複数の実施形態において、本開示の化合物を含むイメージング用組成物（以下、「本開示のイメージング用組成物」ともいう）に関する。本開示のイメージング用組成物は、一又は複数の実施形態において、ＰＳＭＡ及び／又はＧＣＰ−ＩＩのイメージングに用いることができる。また、本開示のイメージング用組成物は、一又は複数の実施形態において、前立腺がん、又は前立腺がん以外のＰＳＭＡが発現するがんのイメージングに用いることができる。
【００３９】
本開示のイメージング用組成物の形態は、特に限定されるものではないが、一又は複数の実施形態において、溶液又は粉末が挙げられる。イメージング用組成物は、担体等の医薬品添加物を含んでいてもよい。本開示において医薬品添加物は、日本薬局方、アメリカ薬局方及び／又はヨーロッパ薬局方等で医薬品添加物として許認可を受けている化合物をいう。担体としては、例えば、水性溶媒及び非水性溶媒が使用できる。水性溶媒としては、例えば、リン酸カリウム緩衝液、生理食塩水、リンゲル液、及び蒸留水等が挙げられる。非水性溶媒としては、例えば、ポリエチレングリコール、植物性油脂、エタノール、グリセリン、ジメチルスルホキサイド、及びプロピレングリコール等が挙げられる。
【００４０】
[医薬組成物]
本開示は、一又は複数の実施形態において、本開示の化合物を含む医薬組成物に関する。本開示の医薬組成物は、一又は複数の実施形態において、前立腺がん、又は前立腺がん以外のＰＳＭＡが発現するがんの治療に用いることができる。
【００４１】
［イメージング方法］
本開示は、一又は複数の実施形態において、本開示の化合物を用いたＰＳＭＡのイメージング方法に関する。本開示は、一又は複数の実施形態において、本開示の化合物を投与された被検体から前記化合物の放射性シグナルを検出することを含む、イメージング方法に関する。被検体は、特に限定されないが、一又は複数の実施形態において、ヒト、ヒト以外の哺乳類、培養細胞、及びＰＳＭＡが存在しうる対象から選択される。
【００４２】
本開示にかかるイメージング方法は、第１の態様として、本開示の化合物を予め投与された被検体から該ポリペプチドの放射性シグナルを検出することを含む。シグナルの検出は、例えば、本開示の化合物を投与後、シグナルの検出に十分な時間が経過後に行うことが好ましい。本開示にかかるイメージング方法は、一又は複数の実施形態において、検出されたシグナルを再構成処理して画像に変換し表示すること、及び／又は検出されたシグナルを数値化して集積量を提示することを含む。本開示において「表示すること」は、一又は複数の実施形態において、モニタに表示すること、及び／又は印字することを含む。本開示において「提示すること」は、一又は複数の実施形態において、算出した集積量を保存すること、及び／又は外部に出力することを含む。
【００４３】
シグナルの検出は、使用する本開示の化合物に含まれる放射性同位元素の種類に応じて適宜決定でき、例えば、PET及びSPECT等を用いて行うことができる。SPECTは、例えば、本開示の化合物を投与された被検体から放出されるγ線をガンマカメラにより測定することを含む。ガンマカメラによる測定は、例えば、本開示の化合物の放射性同位元素から放出される放射線（γ線）を一定時間単位で測定することを含み、好ましくは放射線が放出される方向及び放射線数量を一定時間単位で測定することを含む。本開示にかかるイメージング方法は、放射線の測定により得られた測定されたオ本開示の化合物の分布を断面画像として表すこと、及び得られた断面画像を再構成することをさらに含んでいてもよい。PETは、例えば、オリゴペプチドを投与された被検体から、ポジトロンと電子との対消滅により生成するガンマ線をPET用検出器で同時計数することを含み、さらに、計測した結果に基づきポジトロンを放出する放射性核種の位置の三次元分布を描写することを含んでいてもよい。
【００４４】
SPECT又はPETによる測定にあわせて、X線CT及び／又はMRIの測定を行ってもよい。これにより、例えば、SPECT又はPETにより得られた画像（機能画像）と、CT又はMRIにより得られた画像（形態画像）とを融合させた融合画像を得ることができる。
【００４５】
本開示にかかるイメージング方法は、第２の形態として、本開示の化合物を被検体に投与すること、及び投与された被検体から本開示の化合物の放射性シグナルを検出することを含む。シグナルの検出、及び再構成処理等は、第１の態様と同様に行うことができる。
【００４６】
被検体への本開示の化合物の投与は、局所的であってもよく、全身的であってもよい。投与経路は、被検体の状態等に応じて適宜決定できるが、例えば、静脈、動脈、皮内、腹腔内への注射又は輸液等が挙げられる。本開示の化合物の投与量（用量）は、特に制限されず、イメージングのために所望のコントラストを得るために十分な量を投与すればよく、一又は複数の実施形態において、１μｇ以下とすることができる。本開示の化合物は、一又は複数の実施形態において、担体等の医薬品添加物とともに投与される。医薬品添加物は上述のとおりである。投与から測定までの時間は、例えば、本開示の化合物のＰＳＭＡへの結合時間、本開示の化合物の種類及び本開示の化合物の分解時間等に応じて適宜決定できる。
【００４７】
［治療方法］
本開示は、一又は複数の実施形態において、治療上有効な放射性同位元素又はその同位体を含む本開示のいずれかに記載の化合物を、治療有効量投与することを含む、腫瘍の治療方法（以下、「本開示の治療方法」という）に関する。本開示の治療方法は、一又は複数の実施形態において、前立腺がん、又は前立腺がん以外のＰＳＭＡが発現するがんの治療に用いることができる。
【００４８】
本開示は、以下の一又は複数の実施形態に関しうる；
〔１〕  式(I)で表される化合物又は式(I)で表される化合物の製薬上許容される塩。
【化７】
2014051442.tif 000009
式(I)中、Ｒは、放射性同位元素又はその同位体を含む置換基を示し、
Ｌは、リンカー、又は結合手を示し、
Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示し、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
〔２〕  式(II)で表される化合物又は式(II)で表される化合物の製薬上許容される塩。
【化８】
2014051442.tif 000010
式(II)中、Ｒ’は、ハロゲン置換されたＣ6-12アリール、ハロゲン置換されたＣ4-12へテロアリール、又はハロゲン置換されたＣ1-6アルキルを示し、
Ｐは、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し、
Ｘ及びＹは、それぞれ独立して、Ｃ1-8アルキレン、Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、Ｃ1-8ヘテロアルキル、Ｃ2-8ヘテロアルケニル、Ｃ2-8ヘテロアルキニル、Ｃ1-8アルコキシ、又は結合手を示し、
Ｑは、天然アミノ酸、−ＮＨ−、−Ｏ−、−ＣＯ−ＮＨ−、−ＣＯ2−ＮＨ−、−Ｓ−、−ＳＯ2―、―ＣＯ2−、−ＮＨ−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＯ2−、又は−ＣＨ＝ＣＨ−を示し、
Ｚは、それぞれ独立して、水素原子又はＣ1-4アルキルを示し、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５である。
〔３〕  前記ハロゲンは、123Ｉ、124Ｉ、125Ｉ、131Ｉ、18Ｆ、75Ｂｒ、76Ｂｒ、又は77Ｂｒである、〔２〕記載の化合物。
〔４〕  前記Ｒ’は、ハロゲン置換されたＣ6-12アリールであり、好ましくはハロゲン置換されたフェニルである、〔２〕又は〔３〕記載の化合物。
〔５〕  前記Ｐは、−ＣＯ−ＮＨ−である、〔２〕から〔４〕のいずれかに記載の化合物。
〔６〕  前記Ｑは、グリシン、リジン、又は−ＣＯ−ＮＨ−である、〔２〕から〔５〕のいずれかに記載の化合物。
〔７〕  前記Ｘは、メチレン、エチレン、又はプロピレンである、〔２〕から〔６〕のいずれかに記載の化合物。
〔８〕  前記Ｙは、プロピレン、ブチレン、ペンチル、又はヘキシルである、〔２〕から〔７〕のいずれかに記載の化合物。
〔９〕  前記Ｚは、水素原子である、〔２〕から〔８〕のいずれかに記載の化合物。
〔１０〕  式(III)〜(VIII)のいずれかで表される化合物又はそれらの化合物の製薬上許容される塩。
【化９】
2014051442.tif 000011
式(III)〜(VIII)中、*Iは、放射性ヨウ素原子又は非放射性ヨウ素原子を示す。
〔１１〕  〔１〕から〔１０〕のいずれかに記載の化合物を含む、イメージング用組成物。
〔１２〕  ＰＳＭＡのイメージング方法であって、
〔１〕から〔１０〕のいずれかに記載の化合物を投与された被検体から前記化合物の放射性シグナルを検出することを含む、イメージング方法。
〔１３〕  前記検出されたシグナルを再構成処理して画像に変換し表示することを含む、〔１２〕記載のイメージング方法。
〔１４〕  前立腺がんのイメージング方法であって、
〔１〕から〔１０〕のいずれかに記載の化合物を投与された被検体から前記化合物の放射性シグナルを検出することを含む、イメージング方法。
〔１５〕  ＰＳＭＡ及び又はＧＣＰ−ＩＩをイメージングするための〔１〕から〔１０〕のいずれかに記載の化合物の使用。
〔１６〕  治療上有効な放射性同位元素又はその同位体を含む〔１〕から〔１０〕のいずれかに記載の化合物を、治療有効量投与することを含む、腫瘍の治療方法。
【００４９】
以下に、実施例を用いて本発明をさらに説明する。但し、本発明は以下の実施例に限定して解釈されない。
【００５０】
本明細書の記載において、以下の略語を使用する。
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド
ＰＭＢ：ｐ−メトキシベンジル
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＷＳＣＤ：水溶性カルボジイミド
ＤＭＤ：ジメチルジオキシラン
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
【実施例】
【００５１】
（製造例１）式(III’)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(III’)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１０】
2014051442.tif 000012
【００５２】
化合物(1-2)の合成
氷冷した化合物(1-1)(5.0g)のDMF溶液(20mL)に、０℃で1,1,4,4-tetramethylguanidine(7.9g)を滴下した。2時間攪拌したあと、ethyl acetoacetate(4.5g)を加え、化合物(1-1)が溶解するまで室温で攪拌した。p-methoxybenzyl chloride(10.7g)及びpotassium carbonateを加え、室温で12時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチルを加えて希釈し、水、1N NaHCO3及び乾燥Na2SO4で順次洗浄し、化合物(1-2)（Bis-4-methoxybenzylglutamate hydrochloride、10.9g、74.9％）を得た。TLC Rf=0.16(1/1 hexane/ethyl acetate)
1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ; 2.13-2.18 (m, 2H), 2.42-2.56 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 4.10 (t, J = 6.87 Hz, 1H), 5.04 (dd, J =12.03, 13.17 Hz, 2H), 5.15-5.21 (m, 2H), 6.88-6.90 (m, 4H), 7.27 (dd, J = 2.29, 6.87 Hz, 2H), 7.31-7.33 (m, 2H). 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ； 25.3, 29.8, 52.5, 55.11, 55.13, 66.3, 68.0, 113.8, 113.9, 126.7, 127.8, 129.9, 130.3, 159.5, 159.7, 169.1, 172.1. ESI-MS; 388 [M + H]+ for C21H26NO6. [α]D; 1.03 (MeOH, c = 1.00, 21 ℃).
【００５３】
化合物(1-4)の合成
化合物(1-3)(Nα-Fmoc-S-tert-butyl-L-cysteine（1.0g)のDMF溶液(8mL)に、p-methoxybenzyl chloride(0.4g)及びpotassium carbonate(0.35g)を加えた。懸濁液を室温で窒素気流下４時間攪拌した。懸濁液を濾過後、固体をCH2Cl2で洗浄した。酢酸エチルを加え、水で抽出した。有機層を水で2回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濾過してロータリーエバポレータで一晩濃縮し、ヘキサン／酢酸エチルで再結晶化し、化合物(1-4)((R)-4-Methoxybenzyl 2-((((9H-fluoren-9-yl)methoxy)carbonyl)amino)-3-(tert-butylthio)propanoate、0.76g、57.5％)を得た。TLC Rf=0.56(2/1 hexane/ethyl acetate)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 1.25 (s, 9H), 2.79 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 4.24 (m, 4H), 5.06 (s, 2H), 6.88 (d, J = 8.59 Hz, 2H), 7.29 (d, J = 8.59 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 7.45 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.45 Hz, 2H), 7.71 (d, J = 7.45 Hz, 2H), 7.89 (d, J = 7.45 Hz, 2H), 7.91 (s, 1H). 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ； 30.8, 39.3, 42.6, 47.1, 53.7, 55.3, 67.2, 67.4, 114.0, 119.9, 125.1, 127.1, 127.2, 127.7, 130.3, 141.3, 143.7, 155.7, 159.8, 170.6. ESI-MS; 542 [M + Na]+ for C30H33NO5NaS.
【００５４】
化合物(1-5)の合成
20% piperidineのDMF溶液(4.9mL)を、化合物(1-4)(0.56g)に加えた。室温で1.6時間攪拌した後、酢酸エチルを加えて分液し、水で3回、飽和NaClで1回洗浄した。有機層を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥後、ろ過して濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：W-Prep 2XY、展開溶媒：hexane/ethyl acetate)にて精製し、化合物(1-5)((R)-4-Methoxybenzyl 2-amino-3-(tert-butylthio)propanoate、0.29g、90.6％)を得た。TLC Rf=0.16(1/1 hexane/ethyl acetate)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 1.23 (s, 9H), 2.69 (m, 1H), 2.75 (m, 1H), 3.50 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 5.04 (s, 2H), 6.92 (d, J = 8.59 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.59 Hz, 2H). 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ； 30.9, 33.4, 42.4, 54.6, 55.2, 66.7, 113.9, 127.6, 130.2, 159.7, 173.9. ESI-MS; 298 [M + H]+ for C15H24NO3S.
【００５５】
化合物(1-6)の合成
化合物(1-2)(0.56g)をCH2Cl2(4mL)に溶解し、ついで窒素気流下-78℃に冷却した。triphosgene(0.14g)を加え、ついでtriethylamine(0.61mL)を慎重に加えた。反応物を-78℃で0.5時間攪拌した後、室温まで昇温させ、室温で2時間攪拌した。化合物(1-5)(0.43g)のCH2Cl2溶液(4mL)を加え、室温で一晩攪拌後、CH2Cl2で抽出し、水で2回洗浄し、鹹水で1回洗浄した。有機層を回収し、硫酸ナトリウムで乾燥後、濾過し、濃縮した。組成生物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：W-Prep 2XY、展開溶媒：hexane/ethyl acetate)にて精製し、化合物(1-6)((S)-Bis(4-methoxybenzyl) 2-(3-((R)-3-(tert-butylthio)-1-((4-methoxybenzyl)
oxy)-1-oxopropan-2-yl)ureido)pentanedioate、0.97g、93.8％)を得た。TLC Rf=0.50(1/1 hexane/ethyl acetate)
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6)δ; 1.22 (s, 9H), 1.85 (broad m, 2H), 2.
33 (m, 2H), 2.79 (m, 2H), 3.74 (m, 9H), 4.21 (dd, J = 8.02, 5.73 Hz, 1H), 4.42 (dd, J = 8.02, 5.73 Hz, 1H), 5.02 (m, 6H), 6.43 (d, J = 8.02 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.02 Hz, 1H), 6.90 (m, 6H), 7.28 (m, 6H). 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ; 28.1, 30.3, 30.8, 31.1, 42.5, 52.5, 52.8, 55.2, 676.2, 67.1, 67.2, 113.9, 114.0, 127.4, 128.0, 130.0, 130.1, 130.2, 156.2, 159.6, 159.7, 171.4, 172.6, 172.8. ESI-MS; 733 [M + Na]+ for C37H46N2O10NaS. FAB-HRMS. [α]D. IR (/cm); 721, 827, 959, 1113, 1227, 1304, 1348, 1366, 1383, 1464, 1516, 1680, 1736, 2338, 2359, 2940, 2963, 3009, 3422.
【００５６】
化合物(1-7)の合成
TFA(1mL)とAnisole(80μL)とを含む溶液を化合物(1-6)(0.16g)に加え、化合物(1-6)が溶解するまで0℃で攪拌した。得られた溶液にHg(OAc)2(88mg)を加え、0℃で1時間攪拌した後、室温で減圧濃縮した。水銀付加物をエチルエーテルを添加することによって抽出し、濾過後、減圧乾燥した。これをさらに精製することなく、水銀付加物をDMFに溶解した後、H2Sを室温で12時間撹拌した。得られたスラリーを濾過し、メタノール及び水で洗浄した。減圧下で濃縮後、生成物をメタノールに溶解し、濾過後、濾過物を濃縮した。このプロセスを水で繰り返した。得られた濾過物を逆相HPLCで精製し、化合物(1-7)((S)-2-[3-[(R)-1-carboxy-2-mercaptoethyl]ureido]-pentanedioic acid、60mg、88.9%)を得た。
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 1.72 (dt, J = 8.59, 14.3 Hz, 1H), 1.92 (m, 1H), 2.17 (m, 1H), 2.20-2.30 (m, 2H), 2.83 (dd, J = 5.16, 13.7 Hz,), 4.10 (m, 1H), 4.36 (m, 1H), 6.44 (d, J = 8.02 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8.02 Hz, 1H). 13C-NMR (125 MHz, CD3CN) δ; 26.7, 27.2, 30.1, 52.6, 54.9, 158.3, 173.2, 175.1, 175.7. ESI-MS; 294 [M]+ for C9H14N2O7S.
【００５７】
既知の合成法(J Med Chem 1997, 40, 2643-52)に従い、上記スキームに示す順序で化合物(1-19)((S)-6-(2,5-Dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl)-2-(2-(3-iodobenzamido)acetamido)hexanoic acid)を合成した。
【００５８】
化合物(1-9)の合成
化合物(1-8)(3.0g)のDMF懸濁液(12mL)に、N,N,N',N'-tetramethylguanidine(4.7g)を0℃で加え、0℃で2時間攪拌した後、ethyl acetoacetate(5.3g)を添加した。室温で一晩攪拌した後、p-methoxybenzyl chloride(6.7g)を加え、室温で一晩攪拌した。酢酸エチルによって抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下で除去し、10%HCl/methanol(35mL)を加え、残渣が溶解するまで穏やかに振盪した。減圧下で溶媒を除去後、化合物(1-9)をジエチルエーテルで再結晶化した(6.8g,72.8%). TLC Rf=0.58(80/20 chloroform/methanol)。
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 3.76 (s,3H), 3.84 (s, 2H), 5.17 (s, 2H), 6.95 (d, J = 8.59 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.59 Hz, 2H), 8.28 (bs, 3H). 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ; 41.1, 55.8, 68.8, 115.0, 128.4, 131.6, 161.5, 168.4. EI-MS; 195 [M]+ for C10H13NO3.
【００５９】
化合物(1-11)の合成
化合物(1-10)(3.0g)のDMF溶液に、化合物(1-9)(3.0g)、トリエチルアミン（5.mL）及びWSCD/HCl(2.5g)を室温で加え、室温で一晩攪拌した。酢酸エチルによって抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下で除去し、化合物(1-11)をヘキサン/酢酸エチルで再結晶化した(3.7g,68.4%). TLC Rf=0.35(2/1 hexane/ethyl acetate).
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 3.75 (s, 3H), 4.03 (d, J = 5.73 Hz, 2H), 5.08 (s, 2H), 6.91-6.94 (m, 2H), 7.29-7.33 (m, 3H), 7.87 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 8.20 (m, 1H), 9.06 (m, 1H). 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ; 41.9, 55.3, 67.3, 94.2, 114.0, 126.2, 127.1, 130.2, 130.3, 135.6, 136.1, 140.6, 159.9, 165.8, 169.8. EI-MS; 425 [M]+ for (C17H16NO4I).
【００６０】
化合物(1-12)の合成
化合物(1-11)(2.1g)のジクロロメタン溶液(17mL)に、TFA(3.7mL)を室温で加え、室温で15分間攪拌した後、溶媒を減圧下で除去し、化合物(1-12)をクロロホルムで再結晶化した(1.5g,96.3%). TLC Rf=0.37(10/1/1 chloroform/methanol/acetic acid).
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 3.92 (d, J = 5.73 Hz, 2H), 7.30 (t, J = 8.02 Hz, 1H), 7.87 (m, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.91 (m, 1H), 7.93 (m, 1H), 8.22 (t, J = 1.72 Hz, 1H), 8.95 (m, 1H). 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ; 42.3, 94.7, 127.7, 131.4, 137.1, 137.5, 141.8, 168.7, 173.0. ESI-MS; 304 [M - H]- for C9H7NO3I.
【００６１】
化合物(1-13)の合成
化合物(1-12)(1.1g)のDMD溶液(8mL)に、N-hydroxysuccinimide(0.4g)及びDIC(0.44g)を室温で加え、室温で8時間攪拌した。酢酸エチル及び炭化水素ナトリウムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で溶媒を除去後、化合物(1-13)をクロロホルムで再結晶化した(0.81g,57.9%)。TLC Rf=0.46(10/1 chloroform/methanol).
1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 2.81 (s, 4H), 4.42 (d, J = 5.73 Hz, 2H), 7.31 (t, J = 8.02 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.92 (m, 1H), 8.22 (m, 1H), 9.27 (t, J = 5.73 Hz, 1H). 13C-NMR (125 MHz, ACETN-d6) δ; 26.2, 39.8, 94.4, 127.5, 131.4, 136.7, 137.1, 141.4, 166.2, 166.9, 170.1. EI-MS; 402 [M]+ for C13H11N2O5I.
【００６２】
化合物(1-16)の合成
化合物(1-14)(4.1g)の酢酸エチル溶液(12mL)に、N-methylmorpholine(4.0mL)を0℃で加えた後、攪拌し、化合物(1-15)(3.3mL)を0℃で滴下した。室温で一晩攪拌した後、濾過して沈殿物を除去し、ろ過して濃縮し、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：W-Prep 2XY、展開溶媒：hexane/ethyl acetate)にて精製し、化合物(1-16)(1.9g,88.7%).TLC Rf=0.54(2/1 toluene/THF).
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ;  3.99 (s, 3H), 6.84 (s, 2H). 13C NMR (125 MHz, CDCl3) δ; 54.3, 135.2, 148.1, 165.6. EI-MS; 155 [M]+ for C6H5NO4.
【００６３】
化合物(1-17)の合成
化合物(1-16)(1.0g)及びBoc-Lys-OH(1.6g)の混合物に、飽和炭酸ナトリウム溶液を室温で加え、0℃で1時間攪拌した後、室温で2時間攪拌し、ついでその混合物に6N HClを加えpH2〜4に調整した。クロロホルムで抽出後、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去した後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(シリカゲル：W-Prep 2XY、展開溶媒：hexane/methanol)にて精製し、化合物(1-17)( 1.7 g, 76.1 %). TLC Rf = 0.23 (10/1 chloroform/methanol). 
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ; 1.40 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.64 (m, 2H), 1.70-1.90 (m, 2H), 3.53 (m, 2H), 4.27 (bs, 1H), 5.00 (bs, 1H), 6.69 (s, 2H). 13C-NMR (125 MHz, CDCl3) δ; 22.5, 28.0, 28.3, 31.8, 37.4, 53.1, 80.2, 134.1, 155.6, 170.8, 176.7. ESI-MS; 325 [M - H]- for C15H21N2O6.
【００６４】
化合物(1-18)の合成
化合物(1-17)(0.97g)と4N HCl/酢酸エチル(4.5mL)とを室温で混合した後、濾過し、白色の沈殿物をジエチルエーテルで洗浄した。減圧下で乾燥後、得られた組成生物(化合物1-18)をさらに精製することなく使用した(0.51g,65.5%). TLC Rf=0.69(RP-18 F254S, 1/2 methanol/water).
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ; 1.24-1.40 (m, 2H), 1.51 (m, 2H), 1.77 (m, 2H), 3.39 (t, J = 6.87 Hz, 2H), 3.86 (bs, 1H), 7.02 (s, 2H), 8.25 (bs, 3H). 13C-NMR (125MHz, CD3OD) δ; 23.1, 29.0, 30.9, 37.9, 53.7, 135.4, 171.7, 172.6.
【００６５】
化合物(1-19)の合成
化合物(1-13)(0.44mg)のアセとニトリル溶液(5mL)に、化合物(1-18)(0.29mg)及びジイソプロピレンアミン(0.38mL)を室温で加え、室温で1時間攪拌した。減圧下で溶媒を除去後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって化合物(1-19)((S)-6-(2,5-Dioxo-2,5-dihydro-1H-pyrrol-1-yl)-2-(2-(3-iodobenzamido)acetamido)
hexanoic acid)を得た(57mg,10.1%). TLC Rf=0.54 (50/10/1 chloroform/methanol/acetic acid).
1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ; 1.37 (m, 2H), 1.54-1.65 (m, 2H), 1.70-1.94 (m, 2H), 3.49 (t, J = 7.16 Hz, 2H), 4.08 (m, 2H), 4.41 (m, 2H), 6.78 (s, 2H), 7.23 (t, J = 7.74 Hz, 1H), 7.72 (m, 2H), 8.24 (m, 1H). 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ; 23.9, 29.0, 32.1, 38.2, 43.8, 53.5, 94.7, 127.8, 131.4, 135.3, 137.2, 137.6, 141.8, 168.7, 171.5, 172.6, 175.2. ESI-MS; 514 [M + H]+ for C19H21N3O5I. HPLC保持時間 (tR); 25.2min.
【００６６】
化合物(III’)の合成
化合物(1-7)(6.8mg)の水溶液(0.2mL)と、化合物(1-19)(11.9mg)のアセトニトリル(0.15mL)溶液を混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で2時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物(III’)を得た。HPLCの分析にはCosmosil(R) 5C18-AR-II 4.6x150mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速1mL/min、B濃度30%一定（0-10min）、30%-60%（10-20min）、60%一定（20-30min）とした。
1H-NMR (500 MHz, D2O) δ; 1.21 (t, J = 7.45 Hz, 2H), 1.48 (m, 2H), 1.65 (m, 1H), 1.83 (m, 2H), 2.05 (m, 1H), 2.38 (dt, J = 2.86, 7.45 Hz, 2H), 2.56 (m, 1H), 2.95-3.35 (m, 3H), 3.39 (t, J = 6.87 Hz, 2H), 3.93 (m, 1H), 3.99-4.07 (m, 2H), 4.15 (m, 1H), 4.28 (broad s, 1H), 4.39 (t, J = 5.73 Hz, 1H), 7.21 (dd, J = 7.45, 8.02 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.45 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.02 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H). ESI-MS; 808 [M + H]+ for C28H35N5O13SI.
【００６７】
（製造例２）式(IV’)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(IV’)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１１】
2014051442.tif 000013
【００６８】
化合物（2-3）の合成
既知化合物（2-2, J Org Chem 1999, 64, 7094-7100）（280mg,0.84mmol）のDMF溶液（5mL）にN-hydroxysuccinimide（97mg,0.84mmol）とN,N'-diisopropylcarbodiimide（131μL,0.84mmol）を加え、室温で1時間攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（カラム：Hi FlashTM 40 mm 60 Å (Yamazen)、展開溶媒：chloroform/methanol=10/1）で精製し、化合物（2-3）（240mg,62.0%）を得た。
【００６９】
化合物（2-4）の合成
化合物（2-3）（58mg,0.13mmol）のアセトニトリル溶液（2mL）に化合物（1-18）（35mg,0.13mmol）とN,N'-diisopropylethylamine（46μL,0.27mmol）を加えた。室温で3.5時間攪拌した後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をpreparative TLC（TLC：Kieselgel 60 F-254 plats 0.5mm（Merck）、展開溶媒：chloroform/methanol=10/1）とHPLCにより精製して、化合物（2-4）（12mg,17%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、62.0minであった。
【００７０】
化合物（IV'）の合成
化合物（1-7）（6mg,20.4μmol）の水溶液（0.9mL）と、化合物（2-4）（11mg,20.3mmol）のアセトニトリル（0.9mL）溶液を混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で1時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物（IV'）（12.1mg,72.5%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20x250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、42.8minであった。
【００７１】
（製造例３）式(V’)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(V’)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。なお、化合物(3-2)の合成は、既知の合成法（J Am Chem Soc 1964, 86,1839-42）を参考に行った。
【化１２】
2014051442.tif 000014
【００７２】
化合物（3-1）の合成
化合物（2-1）（600 mg,1.74mmol）のアセトニトリル溶液（6 mL）にβ-aranine（170mg,1.91mmol）とN,N'-diisopropylethylamine（0.33mL,1.91mmol）を加え、室温で11時間攪拌した。反応終了後、反応液を塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を留去した。得られた粗生成物をchloroformで洗浄し、化合物（3-1）（214mg,39%）を得た。
【００７３】
化合物（3-2）の合成
化合物（3-1）（186mg,0.58mmol）のDMF溶液（4mL）にN-hydroxysuccinimide（67mg,0.58mmol）とN,N'-diisopropylcarbodiimide（90μL,0.58mmol）を加え、室温で14時間攪拌した。反応終了後、反応液を水に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（カラム：Hi FlashTM 40mm 60Å(Yamazen)、展開溶媒：chloroform/methanol=10/1）で精製し、化合物（3-2）（112mg,46%）を得た。
【００７４】
化合物（3-3）の合成
化合物（3-2）（110mg,0.26mmol）のアセトニトリル溶液（4mL）に化合物（1-18）（69mg,0.26mmol）とN,N'-diisopropylethylamine（91μL,0.53mmol）を加えた。室温で3.5時間攪拌した後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をpreparative TLC（TLC：Kieselgel 60 F-254 plats 0.5mm（Merck）、展開溶媒：chloroform/methanol=9/1）とHPLCにより精製して、化合物（3-3）（19mg,14%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、60.3minであった。
【００７５】
化合物（V'）の合成
化合物（1-7）（6.1mg,20.7μmol）の水溶液（0.6mL）と、化合物（3-3）（11mg,20.9mmol）のアセトニトリル（0.4mL）溶液を混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で1.5時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物（V'）（9.9mg,57.6%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、51.7minであった。
【００７６】
（製造例４）式(VI’)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(VI’)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１３】
2014051442.tif 000015
【００７７】
化合物（4-2）の合成
N-(Tert-butoxycarbonyl)-1,5-diaminopentane（488mg,2.41mmol）を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（10mL）と1,4-dioxane（2mL）の混合溶液に溶解した後、氷冷下N-methoxycarbonyl maleimide（412mg,2.66 mmol）を加えた。室温で2時間攪拌した後、反応液をchloroformで抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（カラム：Hi FlashTM 40 mm 60 Å(Yamazen)、展開溶媒：n-hexane/ethyl acetate=2/1）で精製し、化合物（4-2）（390mg,57%）を得た。
【００７８】
化合物（4-3）の合成
化合物（4-2）（390mg,1.38mmol）に4N 塩酸/dioxane溶液（10mL）を加えた。徐々に析出した沈殿物をろ取、ethyl acetateで洗浄し、化合物（4-3）（125mg,41%）を得た。
【００７９】
化合物（4-4）の合成
化合物（4-3）（52mg,0.24mmol）のアセトニトリル懸濁液（3mL）に化合物（1-13）（96mg,0.24mmol）とN,N'-diisopropylethylamine（41μL,0.24mmol）を加えた。室温で1時間攪拌した後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（カラム：Hi FlashTM 40 mm 60Å(Yamazen)、展開溶媒：chloroform/methanol=10/1）で精製し、化合物（4-4）（51mg,45%）を得た。
【００８０】
化合物（VI'）の合成
化合物（1-7）（14mg,47.6μmol）の水溶液（0.3mL）と、化合物（4-4）（23mg,49.0mmol）のアセトニトリル（0.3mL）溶液を混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で1時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物（VI'）（16mg,42.8%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度40%-90%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、41〜43minであった。
ESI-MS m/z; 764 [M + H]+. 1H-NMR (CD3OD) δ; 1.32 (m, 2H), 1.56 (m, 4H), 1.89 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 2.42 (m, 2H), 2.50 (m, 1H), 3.20 (m, 4H), 3.48 (m, 3H), 3.98 (m, 3H), 4.31 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 7.25 (t, J = 8.02 Hz, 1H), 7.89 (m, 2H), 8.26 (t, J = 1.72 Hz, 1H).
【００８１】
（製造例５）式(VII’)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(VII’)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１４】
2014051442.tif 000016
【００８２】
化合物（5-3）の合成
上記のスキームにしたがい既知の合成法で作製した化合物（5-2）（100mg,0.23mmol）のアセトニトリル溶液（2mL）に化合物（1-18）（59mg,0.22mmol）とN,N'-diisopropylethylamine（77μL,0.45mmol）を加えた。室温で2時間攪拌した後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をpreparative TLC（TLC：Kieselgel 60 F-254 plats 0.5mm（Merck）、展開溶媒：chloroform/methanol= 10/1）とHPLCにより精製して、化合物（5-3）（30mg,25%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、63.1minであった。
【００８３】
化合物（VII'）の合成
化合物（1-7）（9mg,30.6μmol）の水溶液（0.6mL）と、化合物（5-3）（17mg,30.6mmol）のアセトニトリル（1mL）溶液を混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で2時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物（VII'）（6mg,23.1%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、54.9minであった。
【００８４】
（製造例６）式(IX)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(IX)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１５】
2014051442.tif 000017
【００８５】
化合物（6-4）の合成
既知化合物（6-3, Aust J Chem 1978, 31, 439-43）（100mg,0.36mmol）を、化合物（1-18）（95mg,0.36mmol）とN,N'-diisopropylethylamine（125μL,0.73mmol）のアセトニトリル溶液（3mL）に加えた。室温で3時間攪拌した後、反応液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、ethyl acetateで抽出した。得られた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過後、溶媒を留去して得られた粗生成物をpreparative TLC（TLC：Kieselgel 60 F-254 plats 0.5mm（Merck）、展開溶媒：chloroform/methanol=9/1）とHPLCにより精製して、化合物（6-4）（6mg,4%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、44.0minであった。
【００８６】
化合物（IX）の合成
化合物（1-7）（4.8mg,16.3μmol）の水溶液（0.4mL）と、化合物（6-4）（6.3mg,16.3mmol）のアセトニトリル（0.6mL）溶液を混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で1時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物（IX）（5.9mg,54.1%）を得た。分取HPLCには、YMC-Pack ODS 20×250mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速5ml/min、B濃度30%-80%（0-60min）とした。HPLCの保持時間は、37.4minであった。
ESI-MS m/z;  682 [M + H]+. 1H-NMR (CD3OD) δ;  1.39 (m, 2H), 1.61 (m, 2H), 1.73 (m, 1H), 1.89 (m, 2H), 2.14 (m, 1H), 2.40 (m, 2H), 2.48 (m, 1H), 3.19 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 4.01 (m, 1H), 4.11 (m, 2H), 4.32 (m, 1H), 4.42 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 7.47 (t, J = 7.45 Hz, 2H), 7.55 (t, J = 7.73 Hz, 1H), 7.88 (m, 2H).
【００８７】
（製造例７）式(X)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(X)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１６】
2014051442.tif 000018
【００８８】
化合物(1-7)(6.2mg)の水溶液(0.5mL)と化合物(7-1)のメタノール(0.6mL)溶液とを混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で1時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物(X)((2S)-2-(3-((1R)-1-carboxy-2-((1-(3-iodophenyl)-2,5-dioxopyrrolidin-3-yl)thio)ethyl)ureido)pentanedioic acid)を得た(2.4mg、収量18%)。HPLCの分析には化合物(III')と同じ条件とした。
ESI-MS; 594 [M + H]+ for C19H20N3O9SI.
【００８９】
（製造例８）式(XI)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(XI)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１７】
2014051442.tif 000019
【００９０】
既知の合成法に従い、上記スキームに示す順番で化合物(8-7)を合成した（放射化学的純度(未精製)：74.9±3.7%、HPLC保持時間(tR);25.4min）。化合物(1-7)(6.8mg)の水溶液(0.2mL)と、化合物(8-7)(11.9mg)のアセトニトリル(0.15mL)溶液を混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で2時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物(XI)を放射化学的収率63.3％、放射科学的純度＞95％で得た。HPLCの分析にはCosmosil(R) 5C18-AR-II 4.6x150mmカラムを使用し、移動相には0.1%トリフルオロ酢酸を加えた水（移動相A）とメタノール（移動相B）を用い、タイムプログラムは流速1mL/min、B濃度30%一定（0-10min）、30%-60%（10-20min）、60%一定（20-30min）とした。
【００９１】
（製造例９）式(XII)で表される化合物の製造
下記スキームにしたがい、式(XII)で表される化合物を製造した。以下に、当該スキームを具体的に説明する。
【化１８】
2014051442.tif 000020
【００９２】
化合物(1-7)(6.2mg)の水溶液(0.5mL)と化合物(9-1)のメタノール(0.6mL)溶液とを混合し、ついでその混合物に2N NaOHを加えpH7に調整した。室温で1時間攪拌し、HPLCにより精製して、目的とする化合物(XII)((2S)-2-(3-((1R)-1-carboxy-2-((1-(3-[125I]iodophenyl)-2,5-dioxopyrrolidin-3-yl)thio)ethyl)ureido)pentanedioic acid)を放射化学的収率36.5％、放射科学的純度＞95％で得た。HPLCの分析には化合物(X)と同じ条件とした。
【００９３】
［in vitro安定性］
C.B.-17/Icr +/+ Jclマウス(雄性、20〜20g)より採取した血漿サンプル(100μL)に、20μLの化合物(XI)又は化合物(XII)を加え、37℃で1,3,又は6時間インキュベートした。インキュベート後、150μLのメタノールを加え、5,000×gで遠心分離した。上清を回収し、Cosmonice Filter(R) (S)(0.45μm,4mm)で濾過紙、濾過物をHPLCで分析した。
【００９４】
図１に示すように、化合物(XII)は時間依存的な分解が観察され、1時間後には化合物の50％、3時間後には72％、6時間後には89％が分解した。これに対し、化合物(XI)は6時間インキュベートしても分解物はほとんど見られなかった。よって、化合物(XI)は、化合物(XII)と比較して血漿中で優れた安定性を示すことが確認できた。
【００９５】
[in vitro細胞結合アッセイ]
化合物(XI)、及び既知のPSMA阻害剤である[125I]DCIT(N-[N-[(S)-1,3-dicarboxypropyl]carbamoyl]-S-3-[125I]iodo-L-tyrosine)と[125I]MIP-1072((S)-2-(3-((S)-1-carboxy-5-((4-[125I]idobenzyl)amino)pentyl)ureido)pentanedionic acid)について、PSMAに対する親和性を細胞結合アッセイによりKd値として評価した。
【００９６】
測定には、PSMA発現ヒト前立腺がん細胞としてLNCaPを用いた。LNCaPを12wellディッシュに播いて(4x105cells/well)、CO2インキュベーターにて48時間培養した。培地を除去し、下記表1の化合物を種々の濃度加えて37℃で1時間インキュベートした。非特異的結合は過剰量の2-PMPAを加えることで評価した。インキュベート後にウェルを洗浄して0.2N NaOHで細胞を溶解させ、結合放射能を測定した。その結果を下記表１に示す。
【００９７】
【表１】
2014051442.tif 000021
【００９８】
表１に示すように、化合物(XI)は、既知のPSMA阻害剤であるDCIT及びMIP-1072よりも高い親和性を示した。このように、化合物(XI)は、臨床試験が進んでいるMIP-1072よりも高い親和性を有しており、効果的なPSMAイメージングプローブとして機能する可能性が示唆された。
【００９９】
また、既知のGCP-II阻害剤である2-PMPA（(2RS,4S)-2-fluoro-4-phosphonomethyl-pentanedioic acid）、化合物(1-7)、化合物(III')、(IV')、（V'）、（VI'）、（VII'）及び(IX)について、同様にPSMAに対する親和性を評価した。その結果を下記表２に示す。
【０１００】
【表２】
2014051442.tif 000022
【０１０１】
表２に示すように、化合物(III')、(IV')、（V'）、（VI'）、（VII'）及び(IX)は、既知のGCP-II阻害剤である2-PMPAよりも高い親和性を示した。
【０１０２】
［体内分布実験］
化合物(XI)を用いてマウスの体内分布実験を行った。PC-3及びLNCaPをC.B-17 Icr scid/scidマウスの肩に移植したモデルマウスを作製した。100μLの化合物(XI)を無麻酔のモデルマウス（22〜24g）に静脈注射(尾静脈)により投与した。投与２分後、３０分後、６０分後、１８０分後、３６０分後に各臓器を摘出した。各臓器の放射能を測定し、各臓器あたりの放射能の集積量（%dose/g）を算出した（n＝3〜6）。その結果の一例を下記表３に示す。
【０１０３】
【表３】
2014051442.tif 000023
【０１０４】
表３に示すように、化合物(XI)は血液クリアランスに優れ、筋肉への集積も低かった。また、化合物(XI)は、PSMAが発現しているLNCaP腫瘍及び腎臓を含む臓器に特異的に集積したが、PSMAが発現していないPC-3腫瘍への集積は少なかった。この特異的な臓器への集積は、少なくとも６時間にわたって維持された。また、LNCaP/PC-3比が時間の経過に伴い上昇したことから、化合物(XI)はPSMAを特異的に認識して、結合・集積していることが確認できた。さらに、腎臓への高い集積が少なくとも６時間にわたって維持されていることから、化合物(XI)は腎臓での滞留時間が長く、膀胱への流出を遅らせることができることが示唆された。
【０１０５】
［Blocking Study］
100μLの化合物(XI)と、GCP-II阻害剤である2-PMPA(50mg/kg weight)とを、腫瘍を有するマウス(22〜24g)に尾静脈より同時投与した。注射30分後、各臓器を摘出し、各臓器の放射能を測定し、各臓器あたりの放射能の集積量（%dose/g）を算出した。また、化合物(XI)のみを投与した以外は、上記と同様にして測定を行い、各臓器あたりの放射能の集積量（%dose/g）を算出した。それらの結果の一例を図２に示す。
【０１０６】
図２に示すように、LNCaP腫瘍及び腎臓は、過剰の2-PMPAによって集積が抑制された。また、2-PAMAを同時に投与したグループ（図２の2-PAMA(+)）でのLNCaP腫瘍における集積(0.55±0.05%ID/g)は、2-PAMAを同時に投与していないグループ(図２の2-PAMA(-))でのPC-3腫瘍における集積(0.94±0.26%ID/g)と同程度のレベルまで阻害されていた。この結果により、体内分布実験において得られたLNCaP腫瘍及び腎臓への化合物(XI)の集積は非特異的なものではなく、化合物(XI)はPSMAに特異的に結合していることが確認できた。
【０１０７】
[SPECT/CT撮像]
下記化合物(XIII)を用いて、SPECT/CT撮像を行った。
【化１９】
2014051442.tif 000024
【０１０８】
LNCaP及びPC-3腫瘍を肩に移植したマウス(20〜25g)を麻酔し、化合物(XIII)(25.9MBq in 生理食塩水(0.10mL))を静脈注射(尾静脈)により投与した。SPECT/CT撮像は、FX3300(SII NanoTechnology Inc., USA)を用いて行った。SPECT撮像は投与後30〜64分にわたって行い、ついでCT撮像を行った(spatial resolution, 50μm; 60kV; 310μA)。SPECT撮像は、回転半径（ROR）35mm、収集角度360°、1方向あたりの収集時間60秒、32投影角で行い、シングルピンホールコリメータ（直径：1.0mm、焦点距離：9.0mm）を用いた。得られたSPECT画像は、3D-OSEM(３D ordered subsets expectation maximization)を用いて再構築した。得られたCT画像は、改変した3D cone beam Feldkamp algorithmを用いて再構築した。得られたSPECTデータ及びCTデータをAMIRA software (version 5.1)を用いて処理した。また、競合実験として、2-PMPA(50mg/kg weight in 生理食塩水(0.10mL))と同時注入した以外は、上記と同様にして、SPECT/CT撮像を行った。比較例として、化合物(XIII)に代えて[123I]DCITを投与した以外は、上記と同様にして、SPECT/CT撮像を行った。これらにより得られた画像を図３に示す。画像は、投与30分後のものである。
【０１０９】
図３Ａは化合物(XIII)のみを投与して得られた横断像のSPECT/CT画像であり、図３Ｂは化合物(XIII)と2-PAMAを同時に投与して得られた横断像のSPECT/CT画像であり、図３Ｃは化合物(XIII)のみを投与して得られた冠状断像のSPECT/CT画像であり、図３Ｄは[123I]DCITを投与して得られた冠状断像のSPECT/CT画像である。図３ＡからＤにおいて、白丸がLNCaP腫瘍の位置を示し、破線の白丸がPC-3腫瘍の位置を示す。図３Ａ及びＢに示すように、化合物(XIII)は、LNCaP腫瘍に非常に特異的に取り込まれ、この取り込みは2-PMPAの同時投与によって完全に抑制された。また、図３Ｃ及びＤに示すように、化合物(XIII)を投与して得られた画像では、既知のPSMA阻害剤である[123I]DCITと同等又はそれ以上にLNCaP腫瘍を明瞭に描出できた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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