(57)【要約】【課題】魚病に強い魚を育て、魚の嗜好にも合う、低魚原料の魚用飼料、魚病防除剤、及び魚病防除方法を提供する。【解決手段】（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満、（Ｂ）魚代替タンパク質原料、及び（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を含有する魚用飼料。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満、（Ｂ）魚代替タンパク質原料、及び（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を含有する魚用飼料。
【請求項２】
（Ｂ）魚代替タンパク質原料の含有量が１０〜５０質量％である請求項１記載の魚用飼料。
【請求項３】
さらに、（Ｄ）タウリンを含有する請求項１又は２記載の魚用飼料。
【請求項４】
さらに、（Ｅ）ミネラル及び（Ｆ）アミノ酸を含有する請求項１〜３のいずれか１項記載の魚用飼料。
【請求項５】
（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を有効成分とする、（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満及び（Ｂ）魚代替タンパク質原料を含有する魚用飼料配合用の魚病防除剤。
【請求項６】
（Ｂ）魚代替タンパク質原料の含有量が１０〜５０質量％である請求項５記載の魚病防除剤。
【請求項７】
（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満及び（Ｂ）魚代替タンパク質原料を含有する魚用飼料に、（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を配合することを特徴とする魚病防除方法。
【請求項８】
（Ｂ）魚代替タンパク質原料の含有量が１０〜５０質量％である請求項７記載の魚病防除方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の甘草抽出物を含有する、いわゆる低魚原料の魚用飼料、魚病防除剤及び魚病防除方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
近年、養殖等に用いる魚用飼料の原料の大部分を占める魚粉等の魚介の漁獲量が不安定であること、その価格の高騰が懸念されており、魚粉等に代わる魚代替タンパク質原料を配合した魚用飼料が望まれていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００４−５７１５６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
魚粉等の魚由来タンパク質原料が５０質量％未満であり、その代わりとして植物由来タンパク質等の魚代替タンパク質原料を配合した飼料（以下、「低魚原料の魚用飼料」という場合がある。）を与えた魚は、成長が不十分という問題があった。この問題に対してはタウリンを配合することで成長を促すことができたが、一方で魚病にかかりやすく、魚の嗜好にも合わないという問題が見出された。本発明は上記事情に鑑みなされたもので、魚病に強い魚を育て、魚の嗜好にも合う、低魚原料の魚用飼料、魚病防除剤、及び魚病防除方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、上記目的を達成するため鋭意検討した結果、低魚原料の魚用飼料に特定の甘草抽出物を配合することにより、魚病に強い魚を育てることができると共に、魚の嗜好にも合うようになり、結果として成長促進できることを知見し、本発明をなすに至ったものである。具体的には、例えば、ビタミンＣや酵母エキス等は魚病防除効果、免疫賦活作用が知られているが、本発明のような、魚粉等の魚由来タンパク質原料の代わりに魚代替タンパク質原料を配合した低魚原料の魚用飼料の場合では、魚病防除効果は十分に得られない現状にある。一方、上記魚原料の魚用飼料に、本発明の特定の甘草抽出物を配合することで顕著な魚病防除効果が得られた。つまり、本発明のような低魚原料の魚用飼料の場合は特殊であり、抗菌成分、魚病防除成分、免疫賦活成分等の安易な転用では、本発明の効果が得られるものではなく、本願発明の特定の甘草抽出物を配合することによって、目的とする効果が得られたものである。
【０００６】
従って、本発明は下記発明を提供する。
［１］．（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満、（Ｂ）魚代替タンパク質原料、及び（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を含有する魚用飼料。
［２］．（Ｂ）魚代替タンパク質原料の含有量が１０〜５０質量％である［１］記載の魚用飼料。
［３］．さらに、（Ｄ）タウリンを含有する［１］又は［２］記載の魚用飼料。
［４］．さらに、（Ｅ）ミネラル及び（Ｆ）アミノ酸を含有する［１］〜［３］のいずれかに記載の魚用飼料。
［５］．（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を有効成分とする、（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満及び（Ｂ）魚代替タンパク質原料を含有する魚用飼料配合用の魚病防除剤。
［６］．（Ｂ）魚代替タンパク質原料の含有量が１０〜５０質量％である［５］記載の魚病防除剤。
［７］．（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満及び（Ｂ）魚代替タンパク質原料を含有する魚用飼料に、（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を配合することを特徴とする魚病防除方法。
［８］．（Ｂ）魚代替タンパク質原料の含有量が１０〜５０質量％である［７］記載の魚病防除方法。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、魚病に強い魚を育てることができ、魚の嗜好にも合う、低魚原料の魚用飼料、魚病防除剤、及び魚病防除方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】累積死亡率を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明について詳細に説明する。
Ｉ．魚用飼料
本発明の魚用飼料は、（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満、（Ｂ）魚代替タンパク質原料、及び（Ｃ）特定の甘草抽出物を含有する魚用飼料である。本発明の魚用飼料は、魚粉等の魚由来タンパク質原料の代わりに魚代替タンパク質原料を配合したものである。
【００１０】
（Ａ）魚由来タンパク質原料
魚由来タンパク質原料としては、魚由来であれば特に限定されず、例えば、アジ、マイワシ、イワシ、サバ、ニシン、カペリン、イカナゴ、タラ等の魚粉が挙げられ、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。中でも、カタクチイワシ、アジ、サバが好ましい。本発明の魚用飼料は、魚由来タンパク質原料の含有量が５０質量％未満を前提とした低魚原料の魚用飼料であり、４０質量％以下であっても、３０質量％以下でもよく、下限は１０質量％以上でもよく、２０質量％以上が好ましい。
【００１１】
（Ｂ）魚代替タンパク質原料
魚代替タンパク質原料は、上記魚由来タンパク質原料の不足部分を補うもので、例えば、大豆油粕、濃縮大豆タンパク質、コーングルテンミール等の植物由来原料、チキンミールやフェザーミール等が挙げられ、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。中でも、大豆油粕、コーングルテンミールが好ましい。
【００１２】
（Ｂ）魚代替タンパク質原料の含有量は、魚由来タンパク質原料の含有量にもよるが、魚用飼料中１０〜７０質量％が好ましく、１０〜５０質量％がより好ましく、３０〜５０質量％がさらに好ましい。また、魚由来タンパク質原料と魚代替タンパク質原料との合計含有量は、魚用飼料中３０〜８０質量％が好ましく、４０〜７０質量％がより好ましい。さらに、（Ａ）魚由来タンパク質原料：（Ｂ）魚代替タンパク質原料で表される含有質量比が、１：１〜５が好ましく、１：２〜４が好ましい。
【００１３】
（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部
本発明の甘草抽出物の原料となる甘草は、マメ科グリチルリイザ（Ｇｌｙｃｙｒｒｉｈｉｚａ）属に属する植物で、例えば、グリチルリイザ  グラブラ（Ｇ．ｇｌａｂｒａ）、グリチルリイザ  ウラレンシス（Ｇ．ｕｒａｌｅｎｓｉｓ）、グリチルリイザ  インフラータ（Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ）等が使用可能であるが、グリチルリイザ  グラブラ（Ｇ．ｇｌａｂｒａ）及びグリチルリイザ  インフラータ（Ｇ．ｉｎｆｌａｔａ）を使用することが好ましい。また、使用部位は根、根茎、葉、茎のいずれの部位でも原料として使用することができるが、根及び／又は根茎を原料として使用することが好ましい。また、これらは生のものを使用しても乾燥させたものを使用してもよいが、工業的に製造されているグリチルリチンの抽出原料となっている乾燥根及び乾燥根茎を原料として使用することができ、粉砕物を用いてもよい。なお、甘草は生産地の名前を冠して呼ばれることが多く、例えば、東北甘草、西北甘草、新疆甘草、モンゴル産甘草、ロシア産甘草、アフガニスタン産甘草等を挙げることができる。
【００１４】
抽出条件としては、上記の甘草に対し中性乃至アルカリ性下で水抽出するが、通常、水抽出液のｐＨは７〜１４、特に９〜１１が好ましく、抽出温度は、冷水、温水及び熱水いずれでもよいが、５〜１００℃、特に２０〜８０℃が好ましい。ｐＨの調整には、アンモニア、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等を用いることができる。抽出時間は抽出温度によって異なるが、通常１〜７２時間であり、特に２〜２４時間が好ましい。
【００１５】
次に、上記抽出液を酸処理することにより酸析出させ、沈殿物を除いた上澄み部を得る。酸処理は、硫酸、塩酸、硝酸等の酸性溶液にて、ｐＨ１．５〜４．０の酸性で析出処理を行い、グリチルリチン酸等を沈殿させる。
【００１６】
本発明の甘草抽出物は上記上澄み部からなるものであり、上澄み部をそのまま使用することができ、中和や精製して使用することもできる。また、濃縮して使用することもできる。さらに、常法により乾燥させることができ、黒色〜褐色の甘草抽出物の液状、ペーストや粉末又は固形物として使用することができる。このようにして得られた甘草抽出物の全糖含量は、水産飼料用で使われている甘草末及び従来の甘草抽出物と比較して２〜５０倍程度の高含量であり、本発明の上澄み部の全糖含有量は、固形分として２〜５０質量％が好ましく、５〜２０質量％がより好ましい。なお、全糖含有量の測定にはフェノール硫酸法を用いた。すなわち、得られた甘草抽出物の溶液０．５ｍＬにフェノール溶液０．５ｍＬを添加し、攪拌後、濃硫酸２．５ｍＬを加え攪拌し、３０分間放置し、４９０ｎｍにおける吸光値を測定し、グルコースを用いた標準線により算出（固形分換算）した。
【００１７】
（Ｃ）上澄み部の含有量は、固形分として魚用飼料中０．０１〜５．０質量％が好ましく、０．０２〜１．０質量％がより好ましい。（Ｂ）魚代替タンパク質原料１００質量％に対する（Ｃ）成分の割合が、０．０３〜１５．０質量％が好ましく、０．１〜５．０質量％がより好ましい。この範囲とすることで、魚病防除効果、魚の嗜好等の効果をより得ることができる。
【００１８】
（Ｄ）タウリン
本発明の魚用飼料は、（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満であることから、成長促進が不十分となるため、成長を促進する点からタウリンを配合することが好ましい。タウリンの含有量は、魚用飼料中０．１〜５．０質量％が好ましく、０．３〜２．０質量％がより好ましい。
【００１９】
（Ｅ）ミネラル
本発明の魚用飼料には、成長の点から、ミネラルを配合することが好ましい。ミネラルとしては、カルシウム、マグネシウム、ナトリウム、リン等が挙げられ、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。ミネラルの含有量は、魚用飼料中０．１〜５．０質量％が好ましく、０．５〜３．０質量％がより好ましい。
【００２０】
（Ｆ）アミノ酸
本発明の魚用飼料は、（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満であることから、成長促進が不十分となるため、成長促進及び嗜好性の点から、アミノ酸を配合することが好ましい。アミノ酸としては、リジン、メチオニン、プロリン、アルギニン等が挙げられ、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。アミノ酸の含有量は、魚用飼料中０．０１〜５．０質量％が好ましく、０．１〜２．０質量％がより好ましい。
【００２１】
本発明の魚用飼料には、魚用飼料に通常配合する成分を、１種単独で又は２種以上を適宜組み合わせて配合することができる。例えば、炭水化物、脂肪、タンパク質、各種栄養素、ビタミンＡ、Ｂ1、Ｂ2、Ｄ等のビタミン等（魚用飼料中の含有量０．３〜３．０質量％）が挙げられ、これらを含む原料を適宜選択して配合することができる。
【００２２】
原料の具体例及びその魚用飼料中の含有量としては、下記が挙げられる。トウモロコシ、小麦、大麦、小麦粉、脱脂米糠、タピオカデンプン、大豆等の穀類（３〜３０質量％）、油粕、ナタネ油粕、ヤシ油粕、アマニ油粕等の植物性油粕（３〜３０質量％）、フスマ、麦糠、米糠、脱脂米糠等の糠（３．０〜３０質量％）、トルラ酵母、ビール酵母等の酵母（０．３〜１．０質量％）、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等の鉱物質飼料（０．３〜１．０質量％）、香料（０．１〜０．５質量％）、油脂（２〜２０質量％）、糖類（０．５〜５．０質量％）等が挙げられる。
【００２３】
本発明の対象となる魚類の種類は特に限定されるものではなく、その具体例としては、コイ、ウナギ、アユ、ニジマス、ドジョウ、キンギョ、ティラピア、ヒラメ、キャットフィッシュ等の淡水魚、ブリ、カンパチ、マダイ、クロダイ、フグ、アジ、シマアジ、ギンザケ、マス、ヒラメ、クロマグロ、アイゴ、チダイ、イシダイ等の海水魚が挙げられる。
【００２４】
魚病としては、連鎖球菌症：エンテロコッカス種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）、ストレプトコッカス  イニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｉｎｉａｅ）、ストレプトコッカス  ディスガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス  パラウベリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐａｒａｕｂｅｒｉｓ）、カラムナリス病：フラボバクテリウム  カラムナレ（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）、乳酸桿菌症：カーノバクテリウム  ピシコラ（Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐｉｓｃｉｃｏｌａ）、ブドウ球菌症：スタフィロコッカス  エピデルミデス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｅｉｓ）、菌血症：ラクトコッカス  ガービア（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇａｒｖｉｅａｅ）、せっそう病：エロモナス  サルモニシダ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）、冷水病：フレキシバクター  サイクロフィラム（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ  ｐｓｙｃｈｒｏｐｈｉｌｕｍ）、滑走細菌症：フレキシバクター  マリティマス（Ｆｌｅｘｉｂａｃｔｅｒ  ｍａｒｉｔｉｍｕｓ）、テナチバキュラム  マリティマム（Ｔｅｎａｃｉｂａｃｕｌｉｍ  ｍａｒｉｔｉｍｕｍ）、ビブリオ病：ビブリオ  ダムセラ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｄａｍｓｅｌａ）、ビブリオ  ハーベイ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｈａｒｖｅｙｉ）、ビブリオ  オーダリー（Ｖｉｂｒｉｏ  ｏｒｄａｌｌｉ）、ビブリオ  ペネイシダ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐｅｎａｅｉｃｉｄａ）、ビブリオ  スプレンディダス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｓｐｌｅｎｄｉｄｕｓ）、ビブリオ  バルニフィカス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ）、ビブリオ  アンギラルム（Ｖｉｂｒｉｏ  ａｎｇｕｉｌａｒｕｍ）、細菌性腸管白濁症：ビブリオ  イチオエンテリー（Ｖｉｂｒｉｏ  ｉｃｈｔｈｙｏｅｎｔｅｒｉ）、潰瘍病：ビブリオ  パラヘモリティカス（Ｖｉｂｒｉｏ  ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）、桿菌性懐死症：ビブリオ  トゥビアッシ（Ｖｉｂｒｉｏ  ｔｕｂｉａｓｈｉｉ）、エドワジェラ症：エドワジェラ  タルダ（Ｅｄｗａｒｄｓｉｅｌｌａ  ｔａｒｄａ）、ノカルジア症：ノカルディア  アステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）、ノカルジア  セリオラエ（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ｓｅｒｉｏｌａｅ）、類結節症：フォトバクテリウム  ダムセラ（Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄａｍｓｅｌａ）等が挙げられる。
【００２５】
本発明の魚用飼料は、稚魚から成魚に投与することができ、その大きさ等に応じて適宜その量は選択される。
【００２６】
ＩＩ．魚病防除剤
本発明の魚病防除剤は、（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を有効成分とする、（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満及び（Ｂ）魚代替タンパク質原料を含有する魚用飼料に配合するための魚病防除剤である。好適な成分、量、対象等、全て上記魚用飼料と同じである。
【００２７】
本発明の魚病防除剤は、稚魚から成魚に投与することができ、上記魚用飼料として経口投与することが可能である。また、その投与量は、通常、魚体重１ｋｇあたり１〜１００ｍｇであり、投与期間は特に限定されないが、７〜２８日間で効果を得ることができる。本発明の魚病防除剤は、甘草抽出物を用いるため、抗生物質による薬剤耐性菌の出現や副作用の問題がなく、安心して投与することができる。
【００２８】
ＩＩＩ．魚病防除方法
本発明の魚病防除方法は、（Ａ）魚由来タンパク質原料５０質量％未満及び（Ｂ）魚代替タンパク質原料を含有する魚用飼料に、（Ｃ）甘草の中性乃至アルカリ性水抽出液を酸析出させた上澄み部を配合することを特徴とする魚病防除方法である。好適な成分、量、対象等、全て上記魚用飼料と同じである。
【実施例】
【００２９】
以下、実施例及び比較例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。なお、下記の例において特に明記のない場合は、組成の「％」は質量％、比率は質量比を示す。
【００３０】
［調製例１］
下記方法で上澄み部を得た。
甘草（グリチルリイザ  グラブラ：Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ）の根茎を粉砕し、チップ状にした。この甘草チップ１．０ｋｇを１０Ｌの３％アンモニア水（ｐＨ１０）で一晩抽出した後、固液分離した。得られた抽出液に対し、１％硫酸溶液により酸性析出処理（ｐＨ１．８）を行い、グリチルリチン等を沈殿させて、これを除去した上澄み部を得た。上澄み部を中和し乾燥させることで、１３３ｇの黒〜褐色抽出物粉末である上澄み部（甘草抽出物）を得た。この上澄み部（甘草抽出物）の全糖含量は８．５％であった。得られた上澄み部（甘草抽出物）について、魚病防除効果確認試験として、ニシキゴイでの水槽試験を実施し、カラムナリス病原因菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃｏｌｕｍｎａｒｅ）による感染試験での累積死亡へい死率にて評価を行った。表１に供試飼料を示す。
【００３１】
［魚粉５０％区、魚粉１５％区（低魚原料区）]
下記表１に示す組成の粒大３ｍｍ飼料を調製した。魚粉１５％区には魚粉５０％区と同等の成長をさせるためタウリンを配合し、魚粉５０％区とアミノ酸量を同じにするためアミノ酸を配合した。
【００３２】
［魚粉１５％区＋上澄み部（甘草抽出物）］
魚粉１５％区に上澄み部（甘草抽出物）を魚体重１ｋｇあたり１０ｍｇ添加した。上澄み部（甘草抽出物）の含有量は、魚用飼料中に０．０５％（固形分）、上澄み部（甘草抽出物）の全糖含有量は、固形分として８．５％、（Ｂ）魚代替タンパク質原料１００％に対する（Ｃ）成分の割合が０．１１％であった。各試験区について、下記評価を行った。
【００３３】
【表１】
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【００３４】
［飼育試験］
供試魚：２０１１年に養殖場で購入したニシキゴイ当歳魚を市販の飼料を与えて養成したもの。
２７０Ｌ（幅５０×長さ８５×高さ５６ｃｍ）の実験水槽に、供試魚各２８尾を収容し、土日を除く１日１回各飼料を週５回給餌して（飽食給餌）４０日間飼育した。水替えは１週間に１回実施した。飼育結果を表２に示す。
【００３５】
【表２】
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【００３６】
魚粉１５％区＋上澄み部には、タウリン等が別途配合されているため、魚粉５０％区と同程度の体重増加を示した。なお、魚粉１５％区はへい死率が多いので、全体として増体率がマイナスになっているが、生存魚の体重増加については、ほぼ同程度である。
【００３７】
［魚病防除効果の評価］
供試魚を下記方法で、Ｆ．ｃｏｌｕｍｎａｒｅに感染させた。累積へい死率について表３に、推移について図１に示す。
各区の飼料組成および調製例１で得られた甘草抽出物の配合量については表１に示したとおりである。
供試魚として市販の飼料を用い、２７０Ｌの試験水槽（幅５０×長さ８５×高さ５６ｃｍ）で予備飼育されたニシキゴイ（平均体重７５ｇ）を各試験区に２８尾ずつ収容し、表１の供試験飼料を日間給餌率（（給餌量（ｋｇ）／魚体重（ｋｇ））×１００／試験期間（日））２．０％で給餌して試験環境に１４日間馴致させた。
その後、カラムナリス病に感染しているニシキゴイを各試験水槽に１尾、１日間収容させ、感染させた。感染後も、表１の供試飼料を日間給餌率２．０％で給餌し、２６日間観察した。
【００３８】
【表３】
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【００３９】
魚粉１５％区＋上澄み部は、魚粉５０％区と比べても、へい死率が低く、魚粉１５％区では高かったへい死率が、甘草抽出物を添加することにより低くなった。なお、甘草抽出物区は魚粉５０％区と同様に、魚粉１５％区に比べ飼料への食いつきが良かった。
【図１】
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