(57)【要約】      （修正有）【課題】皮膚に局所適用したときに、コラーゲン合成を促進せずに、コラーゲンを構造化することによって皮膚の弾力を向上させる組成物及びその使用方法の提供。【解決手段】カゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む、ヨーグルト又はヨーグルト由来物質ベースの発酵乳製品を、局所に適用する方法。発酵乳製品が１０重量％以下の乳脂肪を含み、発酵乳製品が乾燥状態であり、生細菌を含まず、１０重量％以下の乳脂肪を含む、噴霧乾燥した加工ヨーグルト製品である発酵乳製品【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚に局所適用したときに、皮膚の弾力を向上させることを目的とする、実質的にカゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む発酵乳製品の使用。
【請求項２】
皮膚に局所適用したときに、コラーゲン合成を促進せずに、コラーゲンを構造化することを目的とする、実質的にカゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む発酵乳製品の使用。
【請求項３】
コラーゲン構造化を目的とする、傷んだ皮膚への適用のための、実質的にカゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む発酵乳製品の使用。
【請求項４】
乳製品が１０重量％以下の乳脂肪を含む、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
乳製品がヨーグルトまたはヨーグルト由来物質を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
発酵乳製品が乾燥状態である、請求項１〜５のいずれかに記載の使用。
【請求項７】
発酵乳製品が実質的に生細菌を含まない、請求項１〜６のいずれかに記載の使用。
【請求項８】
発酵乳製品が、実質的に生細菌を含まず、１０重量％以下の乳脂肪を含む、噴霧乾燥した加工ヨーグルト製品である、請求項１〜７のいずれかに記載の使用。
【請求項９】
発酵乳製品が局所適用製品にて適用される、請求項１〜８のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚、特にヒトの皮膚の処置のための、加水分解されていない乳清タンパク質を含む発酵乳製品の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
乳および乳製品は、皮膚の状態を整え、潤いを与えるために、水分および油脂を皮膚に加える手段として何百年もの間、美容スキンケア用途に用いられてきた。発酵乳（例えばヨーグルト）も歴史的にスキンケア用途のために用いられてきた。かかるヨーグルトは、典型的にはカゼイン含量が高い。
【０００３】
日光への暴露が皮膚構造にダメージを与えることは十分に立証されている。このダメージに応答して、皮膚は、コラーゲンおよび他の関連する皮膚要素、例えば多糖などの迅速な生成を介して自ら修復する。残念ながら、この迅速な形成は、弾性線維症と称する状態である、構造化されていない、線維の「混乱」（’mess’ of fibres）をもたらし得る。コラーゲンを構造化する能力を示す成分は、一般的に、必ずしも望ましいとは限らない結果である、コラーゲン合成をも誘発する。
【０００４】
WO 2004/098632（雪印）は、乳塩基性タンパク質画分またはその加水分解物を含む、皮膚コラーゲン形成を促進する阻害剤を含む美容組成物を開示する。
【０００５】
US 6,203,805（Color Access）は、皮膚におけるコラーゲンの生成を強化するための乳清タンパク質の使用を開示する。
【０００６】
EP 0046326 Aは、加水分解されていない乳清製品の化粧品における使用を開示する。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、皮膚に局所適用したときに、皮膚の弾力（firmness）を向上させることを目的とする、実質的にカゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む発酵乳製品の使用に関する。
【０００８】
本発明において用いられる特定の発酵乳製品は、コラーゲン合成を促進せずに、コラーゲンを構造化することに効果的であることが見出された。この驚くべき異例な特性は、当該製品が皮膚に局所適用されたときに皮膚の弾力が向上するという結果をもたらす。
【０００９】
実質的にカゼインタンパク質を含まないとは、当該製品が５重量％未満、好ましくは３重量％未満、さらに好ましくは２重量％未満、またはさらに１重量％未満のカゼインタンパク質を含むことを意味する。
【００１０】
したがって、さらなる側面において、本発明は、皮膚に局所適用したときに、コラーゲン合成を促進せずに、コラーゲンを構造化することを目的とする、実質的にカゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む発酵乳製品の使用に関する。
【００１１】
当該発酵乳製品の新規特性は、皮膚がその修復過程の一部として自然にコラーゲンを生成するときの、傷んだ皮膚への使用において当該製品を特に適したものとする。
【００１２】
したがって、さらなる側面において、本発明は、コラーゲン構造化を目的とする、傷んだ皮膚への適用のための、実質的にカゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む発酵乳製品の使用に関する。
【００１３】
好ましくは、当該乳製品は低脂肪または無脂肪であり、典型的にはスキムミルクの発酵によって達成される。低脂肪または無脂肪は、一般的には、乳製品が、１０重量％以下の乳脂肪、好ましくは５重量％以下の乳脂肪、さらに好ましくは２重量％以下の乳脂肪を含むか、または乳脂肪を含まないことを意味する。
【００１４】
当該発酵乳製品は、典型的にはヨーグルトベースである。本発明は、ヨーグルト、好ましくはセミスキムミルクまたはスキムミルクから製造されたヨーグルトを用いてもよい。しかしながら、どのヨーグルトも実質的にカゼインタンパク質を含まない必要がある。本発明は、代替的に、さまざまなヨーグルト由来タンパク質性物質を用いてもよい。特に、本発明は、実質的に全てのカゼインタンパク質を除去する処理によって加工した加工（modified）ヨーグルトを好都合に用いる。かかる加工は、低アレルギー性の物質を生成する利点（アレルギー誘発効果は、一般的にカゼインタンパク質に起因するため）、また脂質分の一部を除去する利点、および臭う傾向の少ない物質を生成する利点（乳および乳ベース製品に関連する酸敗臭は、一般的にカゼインタンパク質および／または脂質により引き起こされるため）を有する。ヨーグルトを、カゼインタンパク質の除去を補うために乳清タンパク質の添加によってさらに加工してもよい。かかる加工は、好適には、ヨーグルト製造のための従来方法における発酵段階の前に行う。
【００１５】
当該発酵乳製品は、組成物への含有のために、望ましくは液体状態よりも、乾燥状態（例えば粉末または顆粒の形態）で用いる。乾燥発酵乳製品の局所適用製品における成分としての使用は、液体状態のそれと比較して、特に乾燥成分の長い保存期間、微生物の低含有量および微生物増殖のリスク回避の点において、特定の実益を有する。乾燥状態の物質は、粉末または無水製品に組み入れることもできる。
【００１６】
当該発酵乳製品は、好ましくは噴霧乾燥技術によって、都合よく乾燥される。好ましい乾燥技術は、当業者に周知である。
【００１７】
Yogurteneの商標で知られ、Quest Internationalからフードサプリメントとして入手可能な、噴霧乾燥した加工ヨーグルト製品を用いることが特に好ましい。Yogurteneは、選択された乳画分：乳清、濃縮乳清（乳の乳清相の成分）および無脂肪粉乳（２％）を、典型的なヨーグルト菌（Streptococcus thermophilusおよびLactobacillus bulgaricus）で発酵したものからなる。カゼインタンパク質はアレルギー反応に関連するので、乳清が好ましいタンパク質源である。発酵が完了すると、液体ヨーグルトを噴霧乾燥し、自由流動性で、若干吸湿性の、低臭の白からオフホワイトの粉末を製造する。
【００１８】
当該発酵乳製品は、好ましくは実質的に生細菌を含まず、すなわち、１０００ｃｆｕ／ｇ以下の、好ましくは、５００ｃｆｕ／ｇ以下の、さらに好ましくは、２００ｃｆｕ／ｇ以下の生細菌を含むか、または全く生細菌を含まない。細菌は、当業者に周知の方法での乳製品の加熱処理によって、都合よく破壊することができる。
【００１９】
本発明において用いられる発酵乳製品は、典型的には、局所適用製品にて、皮膚、特にヒトの皮膚に適用される。好適な製品の例は、ボディーウォッシュ組成物、石鹸ベースの製品、スキンクリームおよびローション、日焼け止めおよびアフターサン製品、ならびに特にアンチエイジング組成物であり、これはセルライト、たるみ、しわ、しみなどの処置のための組成物も含んでもよい。他の好適な製品は、口紅、ファンデーションなどの化粧品である。
【００２０】
局所適用製品における発酵乳製品の量は、適用に依存して異なるが、一般的には、０．００５〜２０重量％の範囲内である。
【００２１】
本発明を以下の例において、例として、さらに詳細に説明する：
【００２２】
例１：コラーゲン線維組織
コラーゲンは、ヒト皮膚の主な構成要素であり、皮膚の弾力性および物理的特性の大部分を担っている。コラーゲンを正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）とともにin vitroでインキュベートすると、ＮＨＤＦは自然に可溶性コラーゲンに結合し、構造化した格子に組織化する。このプロセスが生じると、得られた構造物は目に見えて収縮し、収縮のレベルは、生じた構造化の量に正比例する。
【００２３】
コラーゲン組織化の速度は、系への異なる成分の添加によって影響され得る。したがって、ある物質が格子形成の速度を促進し、皮膚に局所適用された場合に「硬化させる」効果を有し得ることを示すことができる。
【００２４】
コラーゲン溶液は、in vitroで調製し（１．３ｍｇ／ｍｌ）、ＮＨＤＦ（１００，０００ＮＨＤＦ／ｍｌ）とともに１６８時間インキュベートした（対照）。「格子収縮」の量は、２４時間、７２時間、１４４時間および１６８時間において観察した。この期間中、同じ濃度のコラーゲン／ＮＨＤＦを、０．０８ｍｇ／ｍｌ、０．４％ｍｇ／ｍｌおよび２ｍｇ／ｍｌのYogurteneTMとともにインキュベートした。陽性対照である、トランスフォーミング増殖因子（ベータ−ＴＧＦ）を用いて、YogurteneTMの格子促進効果と比較した。それぞれの試験は、トリプリケートで行い、平均収縮を計算した。
表１（下記）は、実験期間中に測定した、コラーゲン溶液の表面積を示す。
【００２５】
【表１】
2014208672.tif 000002
【００２６】
このように、YogurteneTMは、顕著なコラーゲン構造化を示す。
【００２７】
例２：皮膚細胞外マトリックス合成
正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）を放射性標識［３Ｈ］プロリンとともにin-vitroで培養した。コラーゲンはプロリンリッチなタンパク質である。ＮＨＤＦの培養後に、タンパク質中に見出される放射性標識プロリンのレベルは、コラーゲン合成の速度の尺度である。YogurteneTMを細胞培養物に加え、プロリン取り込み（コラーゲン合成）の速度へのYogurteneTMの効果を測定することができる。
【００２８】
この研究では、放射性標識プロリンの増加を：（ｉ）可溶性／分泌タンパク質、および（ｉｉ）細胞内および細胞外マトリックス（ＥＣＭ）タンパク質において調査した。
【００２９】
ベータ−トランスフォーミング増殖因子（β−ＴＧＦ）およびアスコルビン酸は、周知のコラーゲン合成促進物質であり、両方の研究において対照として用いた。
【００３０】
表2および表3は、関連するタンパク質において見出されたプロリンのレベルを示す。
【００３１】
【表２】
2014208672.tif 000003
【００３２】
【表３】
2014208672.tif 000004
【００３３】
このデータは、YogurteneTMがコラーゲンの合成を増加させないことを立証する。
【手続補正書】
【提出日】平成26年6月18日(2014.6.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚の弾力を向上させる方法であって、
カゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む、ヨーグルトまたはヨーグルト由来物質ベースの発酵乳製品を皮膚に局所適用する
ステップを含む、前記方法。
【請求項２】
コラーゲン合成を促進せずに、コラーゲンを構造化する方法であって、
カゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む、ヨーグルトまたはヨーグルト由来物質ベースの発酵乳製品を皮膚に局所適用する
ステップを含む、前記方法。
【請求項３】
傷んだ皮膚をコラーゲン構造化する方法（医療行為を除く）であって
カゼインタンパク質を含まない、加水分解されていない乳清タンパク質を含む、ヨーグルトまたはヨーグルト由来物質ベースの発酵乳製品を傷んだ皮膚に局所適用する
ステップを含む、前記方法。
【請求項４】
発酵乳製品が１０重量％以下の乳脂肪を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
発酵乳製品がヨーグルトまたはヨーグルト由来物質から本質的になる、請求項１または４に記載の方法。
【請求項６】
発酵乳製品が乾燥状態である、請求項１、４および５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
発酵乳製品が生細菌を含まない、請求項１および４〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
発酵乳製品が、生細菌を含まず、１０重量％以下の乳脂肪を含む、噴霧乾燥した加工ヨーグルト製品である、請求項１および４〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
発酵乳製品が局所適用製品にて適用される、請求項１および４〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
発酵乳製品が１０重量％以下の乳脂肪を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
発酵乳製品がヨーグルトまたはヨーグルト由来物質から本質的になる、請求項２または１０に記載の方法。
【請求項１２】
発酵乳製品が乾燥状態である、請求項２、１０および１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
発酵乳製品が生細菌を含まない、請求項２および１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
発酵乳製品が、生細菌を含まず、１０重量％以下の乳脂肪を含む、噴霧乾燥した加工ヨーグルト製品である、請求項２および１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
発酵乳製品が１０重量％以下の乳脂肪を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項１６】
発酵乳製品がヨーグルトまたはヨーグルト由来物質から本質的になる、請求項３または１５に記載の方法。
【請求項１７】
発酵乳製品が乾燥状態である、請求項３、１５および１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
発酵乳製品が生細菌を含まない、請求項３および１５〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
発酵乳製品が、生細菌を含まず、１０重量％以下の乳脂肪を含む、噴霧乾燥した加工ヨーグルト製品である、請求項３および１５〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【外国語明細書】
2014208672000001.pdf