(57)【要約】【課題】安全性の高い天然物の中から育毛作用を有するものを見出し、それを有効成分とする育毛剤及び育毛用頭髪化粧料を提供する。【解決手段】本発明の育毛剤、抗男性ホルモン剤又は毛乳頭細胞増殖促進剤の有効成分として、甘草の葉部及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を含有させる。また、本発明の血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生促進剤、骨形成因子−２（ＢＭＰ−２）産生促進剤又は線維芽細胞増殖因子−１８（ＦＧＦ−１８）産生促進剤の有効成分として、甘草の葉部からの抽出物を含有させる。さらに、本発明の育毛用頭髪化粧料に、甘草の葉部及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を配合する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
甘草の葉部からの抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。
【請求項２】
甘草の葉部からの抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗男性ホルモン剤。
【請求項３】
前記甘草の葉部からの抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物が、テストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用及び／又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を有することを特徴とする請求項２に記載の抗男性ホルモン剤。
【請求項４】
甘草の葉部からの抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする毛乳頭細胞増殖促進剤。
【請求項５】
甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生促進剤。
【請求項６】
甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする骨形成因子−２（ＢＭＰ−２）産生促進剤。
【請求項７】
甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする線維芽細胞増殖因子−１８（ＦＧＦ−１８）産生促進剤。
【請求項８】
甘草の葉部及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を配合したことを特徴とする育毛用頭髪化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、育毛用頭髪化粧料に関するものである。より詳細には、本発明は育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生促進剤、骨形成因子−２（ＢＭＰ−２）産生促進剤、線維芽細胞増殖因子−１８（ＦＧＦ−１８）産生促進剤及び育毛用頭髪化粧料に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
多くのステロイドホルモンは産生臓器から分泌された分子型で受容体と結合してその作用を発現するが、アンドロゲンと総称される男性ホルモンの場合、例えば、テストステロンは標的臓器の細胞内に入ってテストステロン５α−レダクターゼにより５α−ジヒドロテストステロン（５α−ＤＨＴ）に還元されてから受容体と結合し、アンドロゲンとしての作用を発現する。
【０００３】
アンドロゲンは重要なホルモンであるが、それが過度に作用すると、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビなど）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等、さまざまな好ましくない症状を誘発する。そこで、従来から、これらの各種症状を改善するために過剰のアンドロゲンの作用を抑制する方法、具体的には、テストステロンを活性型５α−ＤＨＴに還元するテストステロン５α−レダクターゼの作用を阻害することにより、活性な５α−ＤＨＴが生じるのを抑制する方法や、テストステロンから生じた５α−ＤＨＴが受容体と結合するのを阻害することによりアンドロゲン活性を発現させない方法などが知られている。
【０００４】
テストステロン５α−レダクターゼ阻害作用を有するものとしては、例えば、ランタナ抽出物（特許文献１参照）、紅豆杉抽出物、鳥欖抽出物、幌傘楓抽出物、穿心蓮抽出物（以上、特許文献２参照）、五斂子葉部抽出物（特許文献３参照）、藤茶枝葉部抽出物（特許文献４参照）、及びコエロスポンディアス（Choerospond１ias）属に属する植物からの抽出物（特許文献５参照）等が知られている。
【０００５】
また、アンドロゲン受容体結合阻害作用を有するものとしては、例えば、紅豆杉抽出物、鳥欖抽出物、幌傘楓抽出物、穿心蓮抽出物（以上、特許文献２参照）、五斂子葉部抽出物（特許文献３参照）、藤茶枝葉部抽出物（特許文献４参照）、コエロスポンディアス（Choerospondias）属に属する植物からの抽出物（特許文献５参照）、ノビレチン及び柑橘類抽出物（特許文献６参照）等が知られている。
【０００６】
毛髪は、成長期、退行期及び休止期からなる周期的なヘアサイクル（毛周期）に従って成長及び脱落を繰り返している。このヘアサイクルのうち、休止期から成長期にかけての新たな毛包が形成されるステージが、発毛に最も重要であると考えられており、このステージにおける毛包上皮系細胞の増殖・分化に重要な役割を果たしているのが、毛乳頭細胞であると考えられている。毛乳頭細胞は、毛根近傍にある外毛根鞘細胞とマトリックス細胞とからなる毛包上皮系細胞の内側にあって、基底膜に包まれている毛根の根幹部分に位置する細胞であり、毛包上皮系細胞に働きかけてその増殖を促進する等、毛包上皮系細胞の増殖・分化及び毛髪の形成において重要な役割を担っている（非特許文献１参照）。
【０００７】
このように、毛乳頭細胞は、毛包上皮系細胞の増殖・分化及び毛髪の形成において重要な役割を果たしており、毛乳頭細胞の増殖を促進することで、脱毛症を予防・改善することができると考えられる。これまでに、毛乳頭細胞増殖促進作用を有するものとしては、例えば、ミズヒキ抽出物（特許文献７参照）、ハトムギ抽出物、ワイルドタイム抽出物及びスギナ抽出物等が知られている（以上、特許文献８参照）。
【０００８】
毛髪の成長が止まっている休止期の毛根周囲や毛乳頭細胞では、毛細血管の数が激減しているが、毛髪が成長している成長期の毛根周囲や毛乳頭細胞では、多数の毛細血管が新生していることが知られている。このことから、毛髪の成長、発毛、育毛等には、血管新生が密接に関連していると考えられている。
【０００９】
血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）は、分子量３４〜４６ｋＤａの糖蛋白質であり、血管内皮細胞に特異的な増殖因子として、脳下垂体の濾胞細胞の培養液から発見され、血管透過性因子（ＶＰＦ）と同一物質であることがわかった。下垂体細胞以外には、平滑筋細胞、マクロファージ、肺胞上皮細胞、肝細胞、毛乳頭細胞等の正常細胞で産生されるほか、グリオーマ（神経膠腫）、乳癌、胃癌、大腸癌等の多くの腫瘍細胞からも産生されることが知られている。ＶＥＧＦは、血管内皮細胞にはたらき、細胞の増殖、遊走を促進させたり、血管を新生させたりする作用がある。生体においてＶＥＧＦは、胎生期の心臓の形成時期に強く発現することが認められている。ＶＥＧＦ遺伝子が欠損すると血管系の異常が起こり、胎生期に死亡することが報告されており、ＶＥＧＦは、個体の発達、組織形成において極めて重要なはたらきを持つことが示唆されている。最近では、ＶＥＧＦファミリーの新しいメンバーであるＶＥＧＦ−Ｃが、強力なリンパ管新生因子として皮膚におけるリンパ管の成長を仲介していることが同定された。
【００１０】
ところで、毛包においては、外毛根鞘細胞と毛乳頭細胞とがＶＥＧＦを産生することが知られている（非特許文献２，３参照）。毛包におけるＶＥＧＦの産生阻害は、ヘアサイクルの成長期の遅れと毛包サイズの矮小化とに繋がることが見出され（非特許文献４参照）、このことから毛包の発達や再生にＶＥＧＦが重要であることが示された。これまでに、ＶＥＧＦの産生を促進させるものとしては、例えば、コロソリン酸（特許文献９参照）、冬虫夏草抽出物（特許文献１０参照）、及びチライト抽出物（特許文献１１参照）等が知られている。
【００１１】
骨形成タンパク質（ＢＭＰ）は、骨芽細胞等の分化を誘導し、骨、軟骨、腱、及び骨中に存在するその他の組織を形成させるタンパク質である。このタンパク質には特有の誘導活性があり、骨中に存在していることから、ＢＭＰが骨修復過程の重要な制御因子であり、骨組織の正常な維持に関与しているということが示唆されている。そのため、ＢＭＰの産生を促進することができれば、骨や軟骨等の組織が形成・再生・修復等されることにより、骨折や手術等により生じた骨・軟骨等の傷害・欠損の治療又は改善、骨粗鬆症の予防、治療又は改善等に有用であるものと期待されている。
【００１２】
ＢＭＰとしては約２０のファミリーが知られており、このうち、骨形成タンパク質−２（ＢＭＰ−２）は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーに属する骨形成タンパク質である。ＢＭＰ−２は、その組換えタンパク質について、骨折等の骨欠損における骨形成促進剤や、歯周病等に伴う骨欠損に対する歯周組織再建剤としての臨床応用が期待されている。さらに、ＢＭＰ−２は、近年、毛包形成との関わりが指摘され、このＢＭＰ−２の育毛・養毛作用に関心がもたれている（特許文献１２参照）。これまでに、ＢＭＰ−２の産生を促進するものとしては、例えば、コロソリン酸（特許文献９参照）、及びチライト抽出物（特許文献１１参照）等が知られている。
【００１３】
線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）は、線維芽細胞に対する増殖活性を有するだけではなく、様々な細胞に対する細胞増殖・分化活性を有する形態形成因子、組織障害のときに働く組織修復因子、生体の恒常性を維持するための代謝調節因子等として重要な役割を果たしている多機能性分泌因子である。
【００１４】
ＦＧＦには、２０種類以上のファミリーが存在することが知られており、このうち、線維芽細胞増殖因子−１８（ＦＧＦ−１８）は、骨と軟骨の形成や成長を制御することが知られている。また、ＦＧＦ−１８は、毛包の成長期を誘導して毛成長を促進することが報告されている（非特許文献５参照）。ＦＧＦ−１８は、７種類あるＦＧＦ受容体サブクラスのうち少なくとも４つと相互作用することによって、毛の成長をはじめとして、骨や軟骨の形成や成長、肺の形成等の生命現象に関与していると考えられている。
【００１５】
そのため、ＦＧＦ−１８の活性を制御することができれば、毛の成長を制御することができ、また骨や軟骨の形成・成長・修復等を制御することができると考えられる。これまでに、ＦＧＦ−１８様の活性を有するものとしては、例えば、ヤナギバルイラソウ又はシマチカラシバの抽出物（特許文献１３参照）等が知られており、またＦＧＦ−１８の産生を促進するものとしては、例えば、ゲンチオピクリン（特許文献１４参照）等が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】特開平１１−３３５２３２号公報
【特許文献２】特開２００２−０８７９７６号公報
【特許文献３】特開２００２−２４１２９６号公報
【特許文献４】特開２００２−３０８７９０号公報
【特許文献５】特開２００３−０５５１６２号公報
【特許文献６】特開２００５−２０６５４６号公報
【特許文献７】特開２００６−０８３０８４号公報
【特許文献８】特開２００６−２１９４０７号公報
【特許文献９】国際公開第２００６／０９０６１３号
【特許文献１０】特開２００８−１４３８６８号公報
【特許文献１１】特開２００８−２８０３０８号公報
【特許文献１２】特開２００５−００２０６８号公報
【特許文献１３】特開２００８−０１３４６７号公報
【特許文献１４】特開２００９−１９６９８９号公報
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Trends Genet，1992年，Vol.8，p.55-61
【非特許文献２】J. Invest. Dermatol.，1996年，Vol.106，p.17-23
【非特許文献３】Arch. Dermatol. Res.，1998年，Vol.290，p.661-668
【非特許文献４】J. Clin. Invest.，2001年，Vol.107，p.409-417
【非特許文献５】J. Invest. Dermatol.，2005年，Vo.124，p.877-885
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
本発明は、安全性の高い天然物の中から、優れた育毛作用、抗男性ホルモン作用、テストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とする育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤及びＦＧＦ−１８産生促進剤、並びに当該天然物を配合した育毛用頭髪化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
上記課題を解決するために、本発明の育毛剤、抗男性ホルモン剤又は毛乳頭細胞増殖促進剤は、甘草の葉部からの抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。前記抗男性ホルモン剤に有効成分として含有させる前記抽出物は、テストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用及び／又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を有することが好ましい。
【００２０】
また、本発明の血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）産生促進剤、骨形成因子−２（ＢＭＰ−２）産生促進剤又は線維芽細胞増殖因子−１８（ＦＧＦ−１８）産生促進剤は、甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。さらに、本発明の育毛用頭髪化粧料は、甘草の葉部からの抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物を配合したことを特徴とする。
【発明の効果】
【００２１】
本発明によれば、優れた育毛作用を有しかつ安全性の高い育毛剤、優れた抗男性ホルモン作用を有しかつ安全性の高い抗男性ホルモン剤、優れたＶＥＧＦ産生促進作用を有しかつ安全性の高いＶＥＧＦ産生促進剤、優れたＢＭＰ−２産生促進作用を有しかつ安全性の高いＢＭＰ−２産生促進剤、及び優れたＦＧＦ−１８産生促進作用を有しかつ安全性の高いＦＧＦ−１８産生促進剤を提供することができる。さらに、本発明によれば、育毛作用等に優れた育毛用頭髪化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤又は毛乳頭細胞増殖促進剤は、甘草の葉部からの抽出物（以下、「甘草葉部抽出物」ということがある。）及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物（以下、「ヒマラヤンラズベリー抽出物」ということがある。）を有効成分として含有するものである。また、本実施形態のＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤は、甘草の葉部からの抽出物を有効成分として含有するものである。さらに、本実施形態の育毛用頭髪化粧料は、甘草の葉部からの抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリーからの抽出物が配合されるものである。
【００２３】
ここで、本実施形態において「抽出物」には、上記植物を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００２４】
本実施形態において使用する抽出原料は、甘草又はヒマラヤンラズベリー（学名：Rubus ellipticus Smith）である。
【００２５】
甘草は、マメ科グリチルリーザ（Glycyrrhiza）属に属する多年生草本である。甘草には、グリチルリーザ・グラブラ（Glychyrrhiza glabra）、グリチルリーザ・インフラータ（Glychyrrhiza inflata）、グリチルリーザ・ウラレンシス（Glychyrrhiza uralensis）、グリチルリーザ・アスペラ（Glychyrrhiza aspera）、グリチルリーザ・ユーリカルパ（Glychyrrhiza eurycarpa）、グリチルリーザ・パリディフロラ（Glychyrrhiza pallidiflora）、グリチルリーザ・ユンナネンシス（Glychyrrhiza yunnanensis）、グリチルリーザ・レピドタ（Glychyrrhiza lepidota）、グリチルリーザ・エキナタ（Glychyrrhiza echinata）、グリチルリーザ・アカンソカルパ（Glychyrrhiza acanthocarpa）等、様々な種類のものがあり、これらのうち、いずれの種類の甘草を抽出原料として使用してもよいが、特にグリチルリーザ・グラブラ（Glychyrrhiza glabra）、グリチルリーザ・ウラレンシス（Glychyrrhiza uralensis）、及びグリチルリーザ・インフラータ（Glychyrrhiza inflata）を抽出原料として使用することが好ましい。
【００２６】
本実施形態において、抽出原料として使用する甘草の構成部位は、葉部である。ここで、甘草は、その根部が古代より薬用又は甘味料の原料として利用され、グリチルリチンその他の有用成分が含有されていることが知られており、一般に「甘草」といえばその根部を指す。しかし、本実施形態においては、根部を利用した後の残部に着目した結果、甘草の葉部が育毛作用、抗男性ホルモン作用、テストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用及びＦＧＦ−１８産生促進作用を有することを見出したものである。なお、根部に含まれるグリチルリチンその他の有用成分は、甘草の葉部には含有されていない。
【００２７】
ヒマラヤンラズベリー（Rubus ellipticus Smith）は、ヒマラヤから東南アジア、中国東南部で自生し又は栽培されているバラ科キイチゴ属に属する常緑低木であり、これらの地域から容易に入手することができる。ヒマラヤンラズベリーの新鮮な果実は香りがあり、食用にされている。抽出原料として使用し得る構成部位としては、例えば、葉部、幹部、地上部、花部、果実部、種子部、根部、全草又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは根部である。
【００２８】
甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物に含まれるテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を有する物質の詳細は不明であるが、天然物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、これらの天然物から上記作用を有する抽出物を得ることができる。
【００２９】
例えば、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、上記植物の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００３０】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００３１】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００３２】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００３３】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を抽出溶媒として使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比が９：１〜１：９（容量比）であることが好ましく、７：３〜２：８（容量比）であることがさらに好ましい。また、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族ケトンとの混合比が９：１〜２：８（容量比）であることが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水と多価アルコールとの混合比が５：５〜１：９（容量比）であることが好ましい。
【００３４】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００３５】
なお、上述のようにして得られた抽出液は、そのままでも育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００３６】
また、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００３７】
〔育毛剤，抗男性ホルモン剤，毛乳頭細胞増殖促進剤，ＶＥＧＦ産生促進剤，ＢＭＰ−２産生促進剤，ＦＧＦ−１８産生促進剤〕
以上のようにして得られる甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物は、優れた育毛作用、抗男性ホルモン作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を有しているため、育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤の有効成分として用いることができる。本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤及びＦＧＦ−１８産生促進剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品等の幅広い用途に使用することができる。
【００３８】
ここで、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物が有する育毛作用は、例えば、テストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用及びＦＧＦ−１８産生促進作用からなる群より選択される１種又は２種以上の作用に基づいて発揮される。ただし、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物が有する育毛作用は、上記作用に基づいて発揮される育毛作用に限定されるものではない。
【００３９】
また、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物が有する抗男性ホルモン作用は、例えば、テストステロン５α−レダクターゼ阻害作用及び／又はアンドロゲン受容体結合阻害作用に基づいて発揮される。ただし、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物が有する抗男性ホルモン作用は、これらの作用に基づいて発揮される抗男性ホルモン作用に限定されるものではない。
【００４０】
なお、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物は、これらが有するテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を利用して、それぞれテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害剤又はアンドロゲン受容体結合阻害剤の有効成分として利用してもよい。また、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物は、これらが有するテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を利用して、男性ホルモンが関与する疾患、例えば、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビなど）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等の疾患の予防、治療又は改善剤の有効成分として使用してもよい。
【００４１】
また、甘草葉部抽出物は、これらが有するＶＥＧＦ産生促進作用を利用して、血管内皮細胞の増殖・遊走促進剤、血管新生促進剤、血液凝固剤、血圧調節剤、皮膚におけるリンパ管の成長促進剤等の有効成分として使用してもよい。
【００４２】
さらに、甘草葉部抽出物は、これらが有するＢＭＰ−２産生促進作用を通じて、骨折、手術、歯周病等による骨や軟骨の欠損の治療・改善剤、骨粗鬆症の予防、治療又は改善剤の有効成分として使用してもよい。
【００４３】
なお、本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤又は毛乳頭細胞増殖促進剤においては、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物のうちのいずれか一つを上記有効成分として用いてもよいし、これらを混合して上記有効成分として用いてもよい。甘草葉部抽出物及びヒマラヤンラズベリー抽出物を混合して上記有効成分として用いる場合、その配合比は、甘草葉部抽出物及びヒマラヤンラズベリー抽出物が有する育毛作用、抗男性ホルモン作用又は毛乳頭細胞増殖促進作用の程度等により適宜調整すればよい。
【００４４】
本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤又は毛乳頭細胞増殖促進剤は、甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物又はこれらの混合物のみからなるものでもよいし、甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物又はこれらの混合物を製剤化したものでもよい。また、本実施形態のＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤は、甘草葉部抽出物のみからなるものでもよいし、甘草葉部抽出物を製剤化したものでもよい。
【００４５】
本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等を用いることができる。育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤は、他の組成物（例えば、皮膚外用剤、美容用飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００４６】
本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤を製剤化した場合、甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物又はこれらの混合物の含有量は、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定することができる。
【００４７】
なお、本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤は、必要に応じて、育毛作用、抗男性ホルモン作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を有する他の天然抽出物等を、甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物又はこれらの混合物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００４８】
本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤の患者に対する投与方法としては、経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。
【００４９】
また、本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００５０】
本実施形態の育毛剤は、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物からの抽出物が有するテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用及びＦＧＦ−１８産生促進作用からなる群より選択される１種又は２種以上の作用を通じて、脱毛症等を予防、治療又は改善することができ、特に男性型脱毛症の予防、治療又は改善に好適である。ただし、本発明の育毛剤は、これらの用途以外にもテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用及びＦＧＦ−１８産生促進作用からなる群より選択される１種又は２種以上の作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００５１】
本実施形態の抗男性ホルモン剤は、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物が有するテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用及び／又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を通じて、男性ホルモンが関与する疾患、例えば、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビなど）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明の抗男性ホルモン剤は、これらの用途以外にもテストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用及び／又はアンドロゲン受容体結合阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００５２】
本実施形態の毛乳頭細胞増殖促進剤は、甘草葉部抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリー抽出物が有する毛乳頭細胞増殖促進作用を通じて、毛乳頭細胞を活性化し、毛包上皮系細胞の増殖・分化及び毛髪の形成を促進することができるとともに、毛周期において成長期から退行期及び休止期へと移行するのを防ぎ、成長期を延長させることができる。これにより、脱毛症を予防・改善することができる。本実施形態の毛乳頭細胞増殖促進剤が予防・改善可能な脱毛症としては、例えば、男性型脱毛症、円形脱毛症、トリコチロマニア等が挙げられる。ただし、本発明の毛乳頭細胞増殖促進剤は、これらの用途以外にも、毛乳頭細胞増殖促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００５３】
本実施形態のＶＥＧＦ産生促進剤は、甘草葉部抽出物が有するＶＥＧＦ産生促進作用を通じて、毛乳頭細胞での血管内皮増殖因子の産生を促進し、毛乳頭細胞において毛細血管を新生することができる。これにより、毛髪の成長を促進し、脱毛症等を予防、治療又は改善することができる。また、本発明のＶＥＧＦ産生促進剤は、血管内皮細胞の増殖・遊走促進因子、血管新生促進因子、血液凝固因子、血圧調節因子、皮膚におけるリンパ管の成長因子等としても利用することができる。ただし、本発明のＶＥＧＦ産生促進剤は、これらの用途以外にもＶＥＧＦ産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００５４】
本実施形態のＢＭＰ−２産生促進剤は、甘草葉部抽出物が有するＢＭＰ産生促進作用を通じて、骨・軟骨等の傷害・欠損におけるこれらの組織の形成・再生・修復等を誘導することにより、骨折、手術、歯周病等による骨や軟骨の欠損を治療・改善できるとともに、骨粗鬆症を予防、治療又は改善することができる。また、本実施形態のＢＭＰ−２産生促進剤は、毛包や毛乳頭におけるＢＭＰ−２の産生を促進することにより、毛髪の成長を促進し、これにより男性型脱毛症等の脱毛症等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本実施形態のＢＭＰ−２産生促進剤は、これらの用途以外にもＢＭＰ−２産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００５５】
本実施形態のＦＧＦ−１８産生促進剤は、甘草葉部抽出物が有するＦＧＦ−１８産生促進作用を通じて、骨や軟骨の形成や成長、肺の形成好適に利用することができる。また、本実施形態のＦＧＦ−１８産生促進剤は、ＦＧＦ−１８の産生を促進することにより、毛の成長を促進し、これにより脱毛症等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本実施形態のＦＧＦ−１８産生促進剤は、これらの用途以外にもＦＧＦ−１８産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００５６】
また、本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤は、それぞれ優れた育毛作用、抗男性ホルモン作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を有するため、例えば、毛髪用外用剤、皮膚外用剤又は飲食品に配合するのに好適である。この場合に、甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物又はこれらの混合物をそのまま配合してもよいし、甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物又はこれらの混合物から製剤化した育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤を配合してもよい。
【００５７】
ここで、毛髪用外用剤としては、その区分に制限はなく、後述する育毛用頭髪化粧料のほか、頭皮、頭髪又は毛髪に適用される医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００５８】
皮膚外用剤としては、その区分に制限はなく、経皮的に使用される皮膚化粧料、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものであり、具体的には、例えば、軟膏、クリーム、乳液、美容液、ローション、パック、ファンデーション、リップクリーム、入浴剤、石鹸、ボディシャンプー等が挙げられる。
【００５９】
飲食品としては、その区分に制限はなく、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品等を幅広く含むものである。
【００６０】
また、本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤は、優れた育毛作用、抗男性ホルモン作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を有するので、毛乳頭細胞の増殖機構や、男性ホルモン、ＶＥＧＦ、ＢＭＰ−２、ＦＧＦ−１８等に関連する研究、例えば育毛、発毛の作用機序に関連する研究のための試薬としても好適に利用することができる。
【００６１】
〔育毛用頭髪化粧料〕
甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物は、育毛作用、抗男性ホルモン作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を有しており、頭髪又は頭皮に適用した場合の使用感と安全性とに優れているため、育毛、発毛又は養毛の用途に用いられる頭髪化粧料（以下、「育毛用頭髪化粧料」という。）に配合するのに好適である。この場合、育毛用頭髪化粧料には、甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物又はこれらの混合物がそのまま配合されていてもよいし、当該抽出物から製剤化した育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤が配合されていてもよい。甘草葉部抽出物、ヒマラヤンラズベリー抽出物、育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤又はＦＧＦ−１８産生促進剤を育毛用頭髪化粧料に配合することによって、頭髪化粧料に育毛作用、抗男性ホルモン作用、テストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を付与することができ、特に発毛、育毛又は養毛の用途に好適な育毛用頭髪化粧料とすることができる。
【００６２】
甘草葉部抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリー抽出物を配合し得る育毛用頭髪化粧料の種類は、特に限定されるものではなく、例えば、ヘアートニック、ヘアーローション、ヘアークリーム、整髪剤、シャンプー、リンス、トリートメント等が挙げられる。
【００６３】
甘草葉部抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリー抽出物を育毛用頭髪化粧料に配合する場合、その配合量は、頭髪化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約０．０００１〜１０質量％であり、特に好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約０．００１〜１質量％である。
【００６４】
本発明の頭髪化粧料は、甘草葉部抽出物及び／又はヒマラヤンラズベリー抽出物が有する育毛作用、抗男性ホルモン作用、テストステロン５α−レダクターゼ活性阻害作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、毛乳頭細胞増殖促進作用、ＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用又はＦＧＦ−１８産生促進作用を妨げない限り、通常の頭髪化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された上記成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた効果をもたらすことがある。
【００６５】
なお、本実施形態の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤、ＦＧＦ−１８産生促進剤及び育毛用頭髪化粧料は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば，マウス，ラット，ハムスター，イヌ，ネコ，ウシ，ブタ，サル等）に対して適用することもできる。
【実施例】
【００６６】
以下、試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。なお、本試験例においては、甘草葉部抽出物として甘草葉抽出液（丸善製薬社製，試料１）、ヒマラヤンラズベリー抽出物としてヒマラヤンラズベリー抽出液（丸善製薬社製，試料２）の凍結乾燥品を使用した。
【００６７】
〔試験例１〕テストステロン５α−レダクターゼ阻害作用試験
甘草葉部抽出物（試料１）及びヒマラヤンラズベリー抽出物（試料２）について、以下のようにしてテストステロン５α−レダクターゼ阻害作用を試験した。
【００６８】
蓋付Ｖ底試験管にて、プロピレングリコールで調製した４．２ｍｇ／ｍＬテストステロン（和光純薬工業社製）溶液２０μＬと、１ｍｇ／ｍＬのＮＡＤＰＨを含有する５ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．１３）緩衝液８２５μＬとを混合した。
【００６９】
さらに、５０％エタノールにて調製した被験試料（試料１及び２，試料濃度は下記表１を参照）溶液８０μＬと、Ｓ−９（ラット肝臓ホモジネート，オリエンタル酵母工業社製）７５μＬとを加えて混合し、３７℃にて３０分間インキュベートした。その後、塩化メチレン１ｍＬを加えて反応を停止させた。これを遠心分離し（１６００×ｇ，１０分間）、塩化メチレン層を分取して、分取した塩化メチレン層について、下記の条件にてガスクロマトグラフィー分析に供し、３α−アンドロスタンジオール、５α−ジヒドロテストステロン（５α−ＤＨＴ）及びテストステロンの濃度（μｇ／ｍＬ）を定量した。なお、コントロールとして、被験試料溶液の代わりに試料溶媒を同量（８０μＬ）用いて同様に処理し、ガスクロマトグラフィー分析に供した。
【００７０】
＜ガスクロマトグラフィー条件＞
使用装置：Shimadzu GC-7A（島津製作所社製）
カラム：ＤＢ−１７０１（内径：０．５３ｍｍ，長さ：３０ｍ，膜厚：１．０μｍ，J&W Scientific社製）
カラム温度：２４０℃
注入口温度：３００℃
検出器：ＦＩＤ
試料注入量：１μＬ
スプリット比：１：２
キャリアガス：窒素ガス
キャリアガス流速：３ｍＬ／ｍｉｎ
【００７１】
３α−アンドロスタンジオール、５α−ＤＨＴ及びテストステロンの濃度の定量は、下記の方法により行った。
３α−アンドロスタンジオール、５α−ＤＨＴ及びテストステロンの標準品を塩化メチレンに溶解し、当該溶液をガスクロマトグラフィー分析に供し、これらの化合物の濃度（μｇ／ｍＬ）及びピーク面積から、ピーク面積と化合物の濃度との対応関係を予め求めておいた。そして、テストステロンとＳ−９との反応後の３α−アンドロスタンジオール、５α−ＤＨＴ及びテストステロンのそれぞれのピーク面積あたりの濃度を、予め求めておいた対応関係を利用して、下記式（１）に基づいて求めた。
【００７２】
Ａ＝Ｂ×Ｃ／Ｄ・・・（１）
式中、Ａは「３α−アンドロスタンジオール、５α−ＤＨＴ又はテストステロンの濃度（μｇ／ｍＬ）」を表し、Ｂは「３α−アンドロスタンジオール、５α−ＤＨＴ又はテストステロンのピーク面積」を表し、Ｃは「標準品の濃度（μｇ／ｍＬ）」を表し、Ｄは「標準品のピーク面積」を表す。
【００７３】
式（１）に基づいて算出された化合物濃度を用いて、下記式（２）に基づき、変換率（テストステロン５α−レダクターゼによりテストステロンが還元されて生成した３α−アンドロスタンジオール及び５α−ＤＨＴの濃度と、テストステロンの初期濃度との濃度比）を算出した。
【００７４】
変換率＝(Ｅ＋Ｆ)／(Ｅ＋Ｆ＋Ｇ)・・・（２）
式中、Ｅは「３α−アンドロスタンジオールの濃度（μｇ／ｍＬ）」を表し、Ｆは「５α−ＤＨＴの濃度（μｇ／ｍＬ）」を表し、Ｇは「テストステロンの濃度（μｇ／ｍＬ）」を表す。
【００７５】
式（２）に基づいて算出された変換率を用いて、下記式（３）に基づき、テストステロン５α−レダクターゼ阻害率（％）を算出した。
テストステロン５α−レダクターゼ阻害率(％)＝(１−Ｈ／Ｉ)×１００・・・（３）
式中、Ｈは「被検試料添加での変換率」を表し、Ｉは「試料無添加での変換率」を表す。
結果を表１に示す。
【００７６】
【表１】
2014185130.tif 000002
【００７７】
表１に示すように、甘草葉部抽出物（試料１）及びヒマラヤンラズベリー抽出物（試料２）は、優れたテストステロン５α−レダクターゼ阻害作用を有することが確認された。また、テストステロン５α−レダクターゼ阻害作用の程度は、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００７８】
〔試験例２〕アンドロゲン受容体結合阻害作用試験
甘草葉部抽出物（試料１）及びヒマラヤンラズベリー抽出物（試料２）について、以下のようにしてアンドロゲン受容体結合阻害作用を試験した。
【００７９】
マウス自然発生乳癌（シオノギ癌；ＳＣ１１５）よりクローニングされたアンドロゲン依存性マウス乳癌細胞（ＳＣ−３細胞）を、２％ＤＣＣ−ＦＢＳを含む１０−８ｍｏｌ／Ｌテストステロン含有ＭＥＭ培地（ＭＥＭ／２）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１．０×１０５ｃｅｌｌｓ／μＬの細胞密度になるようにＭＥＭ／２培地で希釈した後、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。
【００８０】
その後、培地を除去し、１．０×１０−９ｍｏｌ／ＬのＤＨＴを添加した０．５％ＢＳＡ含有ＨａｍＦ１２＋ＭＥＭ培地（ＨＭＢ）に溶解させた被験試料（試料１及び２，試料濃度は下記表２を参照）含有培地１００μＬに交換し、さらに４８時間培養した。培養終了後、培地を除去し、０．４ｍｇ／ｍＬのＭＴＴを含む２％ＤＣＣ−ＦＢＳ含有ＭＥＭ／２培地１００μＬに交換し、さらに２時間培養した後、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール２００μＬで抽出した。この抽出液について、ブルーホルマザンの吸収極大点がある５７０ｎｍの吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。
【００８１】
なお、上記と並行して、試料単独でＳＣ−３細胞に及ぼす影響をみるため、ＨＭＢ培地にＤＨＴを添加せず被験試料のみを添加した場合についても、同様の培養及び測定を行った。また、コントロールとして、試料及びＤＨＴを添加しないＨＭＢ培地で培養した場合、並びに試料を添加せずＤＨＴのみを添加したＨＭＢ培地で培養した場合についても、同様の測定を行った。測定結果から、下記式によりアンドロゲン受容体結合阻害率（％）を算出した。
【００８２】
アンドロゲン受容体結合阻害率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
式中、Ａは「ＤＨＴ添加・被験試料添加でのブルーホルマザン生成量」を表し、Ｂは「ＤＨＴ無添加・被験試料添加でのブルーホルマザン生成量」を表し、Ｃは「ＤＨＴ添加・試料無添加でのブルーホルマザン生成量」を表し、Ｄは「ＤＨＴ無添加・試料無添加でのブルーホルマザン生成量」を表す。
結果を表２に示す。
【００８３】
【表２】
2014185130.tif 000003
【００８４】
表２に示すように、甘草葉部抽出物（試料１）及びヒマラヤンラズベリー抽出物（試料２）は、優れたアンドロゲン受容体結合阻害作用を有することが確認された。また、アンドロゲン受容体結合阻害作用の程度は、甘草葉部抽出物又はヒマラヤンラズベリー抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００８５】
〔試験例３〕毛乳頭細胞増殖促進作用試験
甘草葉部抽出物（試料１）及びヒマラヤンラズベリー抽出物（試料２）について、以下のようにして毛乳頭細胞増殖促進作用を試験した。
【００８６】
正常ヒト頭髪毛乳頭細胞（ＨＦＤＰＣ，男性頭頂部由来）を、１％ＦＣＳ及び増殖添加剤を含有する毛乳頭細胞増殖培地（ＰＣＧＭ，東洋紡績社製）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を、１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地を用いて１．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように希釈した後、コラーゲンコートした９６ウェルプレートに１ウェルあたり２００μＬずつ播種し、３日間培養した。
【００８７】
その後、培地を除去し、無血清ＤＭＥＭ培地に溶解させた被験試料（試料１及び２，試料濃度は表３を参照）含有培地２００μＬを各ウェルに添加し、さらに４日間培養した。培養終了後、ＭＴＴアッセイにより毛乳頭細胞増殖促進作用を測定した。すなわち、培地を除去し、０．４ｍｇ／ｍＬのＭＴＴを含む無血清ＤＭＥＭ培地に交換し、さらに２時間培養した後、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール１００μＬで抽出した。この抽出液について、ブルーホルマザンの吸収極大点がある５７０ｎｍの吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。なお、コントロールとして、被験試料含有培地に代えて無血清ＤＭＥＭ培地で培養した場合についても、同様の測定を行った。測定結果から、下記式に基づいて、毛乳頭細胞増殖促進率（％）を算出した。
【００８８】
毛乳頭細胞増殖促進率(％)＝Ａ／Ｂ×１００
式中、Ａは「被験試料添加でのブルーホルマザン生成量」を表し、Ｂは「試料無添加でのブルーホルマザン生成量」を表す。
結果を表３に示す。
【００８９】
【表３】
2014185130.tif 000004
【００９０】
表３に示すように、甘草葉部抽出物（試料１）及びヒマラヤンラズベリー抽出物（試料２）は、優れた毛乳頭細胞増殖促進作用を有することが確認された。
【００９１】
〔試験例４〕ＶＥＧＦ、ＢＭＰ−２及びＦＧＦ−１８ｍＲＮＡ発現促進作用試験
甘草葉部抽出物（試料１）について、以下のようにしてＶＥＧＦ、ＢＭＰ−２及びＦＧＦ−１８産生促進作用を試験した。なお、ＶＥＧＦ、ＢＭＰ−２及びＦＧＦ−１８の産生促進作用の評価は、ｍＲＮＡの発現を評価することによって行った。
【００９２】
正常ヒト頭髪毛乳頭細胞（ＨＦＤＰＣ，男性頭頂部由来）を６０ｍｍシャーレに７．５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度で播種し、コンフルエントになるまで培養した。その後、培地を除去し、新たな１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ培地５ｍＬに交換してさらに２時間培養した。
【００９３】
その後、無血清ＤＭＥＭ培地に溶解させた被験試料（試料１，試料濃度は表４を参照）含有培地３ｍＬを各シャーレに添加して６時間培養した。培養終了後、培地を除去し、ＩＳＯＧＥＮ  ＩＩ（ニッポンジーン社製，Cat.No.311-07361）にて総ＲＮＡを抽出し、それぞれのＲＮＡ量を分光光度計にて測定し、２００ｎｇ／μＬになるように総ＲＮＡを調製した。
【００９４】
この総ＲＮＡを鋳型とし、ＶＥＧＦ、ＢＭＰ−２及びＦＧＦ−１８、並びに内部標準であるＧＡＰＤＨのｍＲＮＡの発現量を測定した。検出はリアルタイムＰＣＲ装置Smart Cycler（Cepheid社製）を用いて、TaKaRa SYBR PrimeScript RT-PCR Kit（Perfect Real Time）（タカラバイオ社製，code No.RR063A）によるリアルタイム2 Step RT-PCR反応により行った。ＶＥＧＦ、ＢＭＰ−２及びＦＧＦ−１８のそれぞれのｍＲＮＡ発現量は、試料無添加、被験試料添加にてそれぞれ培養した細胞から調製した総ＲＮＡ標品を基にして、ＧＡＰＤＨｍＲＮＡの値で補正値を求め、さらに試料無添加の補正値を１００とした時の被験試料添加の補正値を算出した。得られた結果から、下記式により、ＶＥＧＦ、ＢＭＰ−２及びＦＧＦ−１８のそれぞれのｍＲＮＡ発現促進率（％）を算出した。
【００９５】
ｍＲＮＡ発現促進率(％)＝（Ａ／Ｂ）×１００
式中、Ａは「被験試料添加での補正値」を表し、Ｂは「試料無添加での補正値」を表す。
結果を表４に示す。
【００９６】
【表４】
2014185130.tif 000005
【００９７】
表４に示すように、甘草葉部抽出物（試料１）は、優れたＶＥＧＦ産生促進作用、ＢＭＰ−２産生促進作用及びＦＧＦ−１８産生促進作用を有することが確認された。
【００９８】
〔配合例１〕
下記組成の養毛ヘアートニックを常法により製造した。
甘草葉部抽出物                                            ０．５ｇ
塩酸ピリドキシン                                          ０．１ｇ
レゾルシン                                                ０．０１ｇ
Ｄ−パントテニルアルコール                                ０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１ｇ
Ｌ−メントール                                            ０．０５ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ４．０ｇ
ニンジンエキス                                            ０．２ｇ
エタノール                                              ２５．０ｇ
香料                                                    適量
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００９９】
〔配合例２〕
下記組成の養毛ヘアートニックを常法により製造した。
ヒマラヤンラズベリー抽出物                                ０．４ｇ
酢酸トコフェロール                                      適量
セファラチン                                              ０．００２ｇ
イソプロピルメチルフェノール                              ０．１ｇ
ヒアルロン酸ナトリウム                                    ０．１５ｇ
グリセリン                                              １５．０ｇ
エタノール                                              １５．０ｇ
香料                                                    適量
キレート剤（エデト酸ナトリウム）                        適量
防腐剤（ヒノキチオール）                                適量
可溶化剤（ポリオキシエチレンセチルエーテル）            適量
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【０１００】
〔配合例３〕
下記組成の育毛シャンプーを常法により製造した。
甘草葉部抽出物                                            ０．２ｇ
ヒマラヤンラズベリー抽出物                                ０．８ｇ
ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム                    １０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン                      １０．０ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム        ２０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                            ４．０ｇ
プロピレングリコール                                      ２．０ｇ
香料                                                    適量
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【０１０１】
〔配合例４〕
下記組成の育毛シャンプーを常法により製造した。
甘草葉部抽出物                                            ０．４ｇ
ヒマラヤンラズベリー抽出物                                １．５ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム        ３０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン                      ３０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム                    ２０．０ｇ
ヤシ油ジエタノールアミド                                  ３．０ｇ
ジステアリン酸エチレングリコール                          ２．０ｇ
香料                                                    適量
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                        ０．１５ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ３．０ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【産業上の利用可能性】
【０１０２】
本発明の育毛剤、抗男性ホルモン剤、毛乳頭細胞増殖促進剤、ＶＥＧＦ産生促進剤、ＢＭＰ−２産生促進剤、ＦＧＦ−１８産生促進剤及び育毛用頭髪化粧料は、脱毛症、特に男性型脱毛症の予防、治療又は改善に大きく貢献できる。