(57)【要約】【課題】ナルコレプシーまたは摂食障害の根本治療薬を提供する。【解決手段】Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを含有してなる、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療剤。ここで、オレキシンニューロンの誘導は視床下部外側野におけるものであることが好ましい。摂食障害としては拒食症が代表例として挙げられる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを含有してなる、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療剤。
【請求項２】
オレキシンニューロンの誘導が視床下部外側野におけるものである、請求項１に記載の治療剤。
【請求項３】
摂食障害が拒食症である、請求項１または２に記載の治療剤。
【請求項４】
保健機能食品または食品添加物である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の治療剤。
【請求項５】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの有効量および医薬として許容されうる担体を含有してなり、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づいてナルコレプシーまたは摂食障害を治療するための医薬組成物。
【請求項６】
オレキシンニューロンの誘導が視床下部外側野におけるものである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
摂食障害が拒食症である、請求項５または６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療用医薬を製造するためのＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの使用。
【請求項９】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの有効量をそれを必要とする対象に投与する工程を含む、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療方法。
【請求項１０】
オレキシンニューロンの誘導が視床下部外側野におけるものである、請求項９に記載の治療方法。
【請求項１１】
摂食障害が拒食症である、請求項９または１０に記載の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療剤に関し、オレキシンニューロン再生により改善される疾患の治療分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
オレキシンは、覚醒を促す脳内ペプチドで、広く脳内に分布するオレキシン受容体を介して、オレキシン制御系を形成し、覚醒-睡眠の調節の中心的な機能を果たしている（非特許文献１）。実験的には、オレキシン欠損は、ナルコレプシー（突然発作的に短い睡眠に陥る病態）を来たす（非特許文献２および３）。さらに、ナルコレプシー患者の脳脊髄液中のオレキシンの濃度は、健常者の約1/3程度と低く、オレキシンニューロンの数の減少も認められる。オレキシン系の機能低下は、覚醒-睡眠サイクルに影響を及ぼし、恒常性の維持にも悪影響を及ぼすことが明らかになっている。正常な覚醒-睡眠の維持や恒常
性の維持には、適切なオレキシン系の活動が欠かせない（非特許文献４）。そのため、オレキシン作用促進剤（アゴニスト）や阻害剤（アンタゴニスト）の開発に関心が集まっている。一方、オレキシン産生細胞（オレキシンニューロン）が欠損もしくは減少した場合、促進剤や阻害剤の有効性は限定的である。しかし、これまでに、オレキシンニューロンの誘導は、in vivo実験で成功した報告はない。
【０００３】
Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの異性体であるＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、例えば、医薬品や医薬品原料となるシアル酸（Ｎ−アセチルノイラミン酸）の酵素合成原料として知られている。また、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、その誘導体から、シアル酸誘導体を酵素合成することが可能であり、産業上、重要な物質である。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの製造方法として、Ｎ−アセチルグルコサミンをアルカリ条件下で異性化する際に、ホウ酸またはホウ酸塩を添加することにより、Ｎ−アセチルマンノサミンへのモル変換収率を増大させる方法が知られている（特許文献１）。また、シアル酸を基質としてＮ−アセチルノイラミン酸リアーゼを反応させることにより、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを製造する方法も知られている（特許文献２）。Ｎ−マンノサミンのアシル化体を細胞に接触させることにより、細胞表面へのレクチン結合を調節する方法または神経細胞の増殖を調節する方法が提案されている（特許文献３）。
【０００４】
本発明者らは、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンが脳機能低下の改善や睡眠障害の改善に有効であることを見出している（特許文献４および５）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開平１０−１８２６８５号公報
【特許文献２】特開２００１−７８７９４号公報
【特許文献３】米国特許第６２７４５６８号公報
【特許文献４】国際公開第２０１０／０２７０２８号公報
【特許文献５】特開２０１１−１７８７０２号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Pharmacological Reviews 61:162-176, 2009
【非特許文献２】Cell 98: 365-376, 1999
【非特許文献３】Cell 98: 437-451, 1999
【非特許文献４】Neuroscience 178: 82-88, 2011
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
ナルコレプシーは、世界の人口の０．２％が罹患しているとされる。実験的にはオレキシン遺伝子またはその受容体遺伝子欠損でナルコレプシー症状を呈するが、患者でオレキシン遺伝子またはその受容体遺伝子の変異や欠損は稀である。ナルコレプシーの根本療法はなく、精神賦活剤（メチルフェニデート（リタリン）、ぺモリン（ベタナミン）、モダフィニル（モディオダール）等）治療の他、向精神薬や麻酔薬が使われているが、薬物依存の問題がある。ナルコレプシーの原因は、オレキシン産生細胞の減少または欠損である。よって、ナルコレプシーの根本治療薬の開発が望まれており、本発明の目的は、ナルコレプシーの根本治療薬を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、ナルコレプシーの治療または予防にはオレキシン細胞が減少することを防ぐか、オレキシン細胞を増加させることが必要であると考え、鋭意検討した結果、意外にもＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを動物に投与することで、視床下部外側野においてオレキシン遺伝子を発現する細胞が増加することを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は以下の通りである。
〔１〕  Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを含有してなる、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療剤。
〔２〕  オレキシンニューロンの誘導が視床下部外側野におけるものである、〔１〕に記載の治療剤。
〔３〕  摂食障害が拒食症である、〔１〕または〔２〕に記載の治療剤。
〔４〕  保健機能食品または食品添加物である、〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の治療剤。
〔５〕  Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの有効量および医薬として許容されうる担体を含有してなり、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づいてナルコレプシーまたは摂食障害を治療するための医薬組成物。
〔６〕  オレキシンニューロンの誘導が視床下部外側野におけるものである、〔５〕に記載の医薬組成物。
〔７〕  摂食障害が拒食症である、〔５〕または〔６〕に記載の医薬組成物。
〔８〕  生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療用医薬を製造するためのＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの使用。
〔９〕  Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの有効量をそれを必要とする対象に投与する工程を含む、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療方法。
〔１０〕  オレキシンニューロンの誘導が視床下部外側野におけるものである、〔９〕に記載の治療方法。
〔１１〕  摂食障害が拒食症である、〔９〕または〔１０〕に記載の治療方法。
【発明の効果】
【０００９】
オレキシンニューロンの減少または欠損による症状を呈するナルコレプシーに対して、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは有効であり、安全性も高い。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを用いて、オレキシンニューロンの減少を防止、あるいは回復を目指した医療に貢献することができる。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの投与により、本来食欲の制御に関する神経ペプチドとして見出されたオレキシンの産生も誘導されるので、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、摂食障害の治療薬としても有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】若齢マウス、老齢マウスおよびManNAc投与老齢マウスの視床下部外側野におけるオレキシン遺伝子の発現状態を示す図である。
【図２】ManNAc誘導体添加培地を用いた神経分化細胞におけるHcrt遺伝子の発現を示す図である。
【図３】ManNAc誘導体添加培地を用いた神経分化細胞におけるHcrt遺伝子の発現およびオレキシンニューロンの誘導を示す図である。
【図４】ManNFAcの脳室内投与実験の概要を示す。
【図５】若齢マウス、老齢マウスおよびManNFAc投与老齢マウスの視床下部外側野におけるオレキシンニューロンの数を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明において、オレキシンニューロンとは、オレキシン（hypocretin: Hcrt）遺伝子を発現している神経細胞をいう。オレキシンニューロンは、生体内では主に視床下部の外側核に分布している。神経細胞がオレキシンニューロンであるか否かは、当該細胞におけるHcrt遺伝子の発現の有無をＰＣＲ法、in situハイブリダイゼーション、抗体を用いた免疫学的検出（免疫染色、ウェスタンブロッティング、酵素免疫アッセイ（ELISA））、さらに該ニューロンの各種刺激に対する反応を検出する等の公知の手法により調べ、同定することにより確認することができる。
【００１２】
Hcrtは、ヒトHcrtのmRNAおよびタンパク質が、NCBI Reference Sequence: NM_001524.1として、およびマウスHcrtのmRNAおよびタンパク質がNCBI Reference Sequence: NM_010410.2として公表されている。
【００１３】
本発明において、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンとは、下記式（Ｉ）：
【００１４】
【化１】
2014208625.tif 000002
【００１５】
で示される、Ｄ−マンノサミンのＮ−アセチル体であってもよい。式（Ｉ）で示される化合物を「ManNAc」と省略する場合がある。
【００１６】
本発明において、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンとは、上記式（Ｉ）で示される単体に限定されるものではなく、その誘導体、前駆体もしくはプロドラッグ、その塩、その溶媒和物（以下、「誘導体等」と省略する場合がある）を含む概念である。
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、例えば、下記式（ＩＩ）で示される化合物であってもよい。
【００１７】
【化２】
2014208625.tif 000003
【００１８】
〔式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は各々独立して水素（Ｈ）、Ｒ６、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ６、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７を示し、Ｒ６は置換基を有していてもよいＣ１−７の鎖状炭化水素または環状炭化水素を示し、Ｒ７は水素（Ｈ）、置換基を有していてもよいＣ１−７の鎖状炭化水素または環状炭化水素を示す。
Ｒ５は水素（Ｈ）、Ｒ６、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ６、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７、−Ｃ(＝Ｏ)−ＣＨ２−Ｒ８を示し、Ｒ６は置換基を有していてもよいＣ１−７の鎖状炭化水素もしくは環状炭化水素を示し、Ｒ７は水素（Ｈ）、置換基を有していてもよいＣ１−７の鎖状炭化水素または環状炭化水素を示し、Ｒ８は置換基を有していてもよいＣ１−７の鎖状炭化水素もしくは環状炭化水素、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ９（ｎは１〜６の整数であり、Ｒ９はＣ１−６アルキルである）、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１０（Ｒ１０は置換基を有していてもよいＣ１−７の鎖状炭化水素である）、アジド、オキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、チオカルボニル−Ｃ１−６アルキルを示す。〕
置換基としてはハロゲン原子（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素）を用いることができる。
【００１９】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、例えば、下記式（IIa）〜（IIc）および（IIIa）〜（IIIc）で示される化合物であってもよい。
【００２０】
【化３】
2014208625.tif 000004
【００２１】
【化４】
2014208625.tif 000005
【００２２】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの誘導体等は、文献（Metabolic glycoengineering: Sialic acid and beyond Glycobiology 2009 vol. 19 (12) pp. 1382-1401（特にFig.4）、Metabolic oligosaccharide engineering with N-Acyl functionalized ManNAc analogs: Cytotoxicity, metabolic flux, and glycan-display considerations Biotechnol Bioeng 2011 vol. 109 (4) pp. 992-1006（特にFigure 2））にも記載されており、本発明においても好適に用いることができる。
【００２３】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの塩としては、薬理学的に許容し得る塩、例えば、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩などがあげられる。
【００２４】
無機酸との塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸などとの塩があげられる。
【００２５】
有機酸との塩の例としては、安息香酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などとの塩があげられる。
【００２６】
塩基性アミノ酸との塩の例としては、アルギニン、リジン、オルニチンなどとの塩があげられ、酸性アミノ酸との塩の例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸などとの塩があげられる。
【００２７】
溶媒和物としては、好ましくは水和物（例、一水和物、二水和物など）、エタノレートなどがあげられる。
【００２８】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、市販品を用いてもよく、公知の方法により製造したものを用いてもよい。式（Ｉ）で示されるＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの製造方法として、Ｎ−アセチルグルコサミンをアルカリ条件下で異性化する方法（特開平１０−１８２６８５号公報）、シアル酸を基質としてＮ−アセチルノイラミン酸リアーゼを反応させることにより製造する方法（特開２００１−７８７９４号公報）があげられるが、これに限定されるものではない。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの誘導体等も、式（Ｉ）で示されるＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを原料として自体公知の方法により製造することができる。
【００２９】
本発明の剤が治療対象とする「ナルコレプシー」は、ＤＳＭ-ＩＶに規定され、その診断にあたって、The International Classification of Sleep Disorder（ICSD-2）の使用が推奨されている。具体的には、日本睡眠学会が作成したナルコレプシーの診断・治療ガイドラインに詳述されている。ヒトを始めとする動物の場合、簡便には当該動物の脳脊髄液を採取し、液中のオレキシン濃度を常法によりナルコレプシーと判定することも可能である。ヒトの場合、ナルコレプシー患者は、脳脊髄液中のオレキシンＡが低値（１１０ｐｇ／ｍＬ未満）〜検出限界以下であるとされる。
【００３０】
本発明の剤の作用機序は、生体内、特に視床下部外側野におけるオレキシンニューロンの誘導である。かかる作用機序から本発明の剤は、ナルコレプシー以外に摂食障害の治療にも適用可能である。
【００３１】
本発明において、「摂食障害」とは、ＤＳＭ-ＩＶに規定され、神経性無食欲症（拒食症）と神経性大食症（過食症）とに大別される。神経性無食欲症は、制限型と無茶喰い／排出型に分類され、神経性大食症は、排出型と非排出型に分類される。本発明においては、視床下部外側野におけるオレキシンニューロンの誘導作用により、特に、神経性無食欲症の症状が改善されることが期待される。
【００３２】
本発明の剤がナルコレプシーに対して奏功したか否かは、診断時に使用した複数の質問項目から成るテストならびに脳波測定や脳波測定を含む複数の項目を計測する睡眠ポリグラフィーを利用し、投与前と比べて投与後のテスト結果の改善および睡眠ポリグラフィーが正常波形に近づいていることから確認することができる。あるいは、脳脊髄液中のオレキシンＡ濃度が投与前よりも高値にシフトしていることによっても確認することができる。
【００３３】
本発明の剤が摂食障害に対して奏功したか否かは、標準体重への回帰、食欲や摂食行動の正常化により判定することができる。
【００３４】
本発明の剤は、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミン単独で、あるいは賦形剤（例えば、乳糖、ショ糖、デンプン、シクロデキストリン等）、場合によっては、香料、色素、調味料、安定剤、保存剤等も含有し、錠剤、丸剤、顆粒、細粒、粉末、ペレット、カプセル、溶液、乳液、懸濁液、シロップおよびトローチ等に製剤化して、医薬または保健機能食品もしくは食品添加物として用いることができる。また、本発明の剤は、研究用試薬として用いることもできる。
【００３５】
本発明の剤に含まれるＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの量は、本発明の効果を奏する限り特に限定されるものではないが、通常０．０００１〜１００重量％であり、好ましくは０．００１〜９９．９重量％である。
【００３６】
また、本発明は、有効量のＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンおよび医薬として許容されうる担体を含有する、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づいてナルコレプシーまたは摂食障害を治療するための医薬組成物を提供する。
【００３７】
医薬として許容されうる担体としては、例えば、賦形剤（例えば、乳糖、ショ糖、デキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン等）、崩壊剤（例えば、デンプン、カルボキシメチルセルロース等）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム等）、界面活性剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム等）、溶剤（例えば、水、食塩水、大豆油等）、保存剤（例えば、p-ヒドロキシ安息香酸エステル等）などがあげられるが、これらに限定されるものではない。
【００３８】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの有効量は、医薬としての効果を奏する限り特に限定されるものではないが、通常０．０００１〜９９．５重量％であり、好ましくは０．００１〜９９．０重量％である。
【００３９】
本発明の剤または医薬組成物は、哺乳動物（例、マウス、ラット、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、サル、ヒト）に対して、経口的あるいは非経口的に安全に投与することができる。
【００４０】
本発明は、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療剤としてのＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを添加してなる食品を提供する。
【００４１】
本発明の「食品」は、食品全般を意味するが、いわゆる健康食品を含む一般食品の他、厚生労働省の保健機能食品制度に規定される特定保健用食品や栄養機能食品等の保健機能食品をも含むものであり、さらにサプリメント、飼料等も本発明の食品に包含される。
【００４２】
食品用途の場合、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを、例えば、パン、菓子等の一般食品（いわゆる健康食品を含む）に含有させて用いることもできる。また、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを、賦形剤（例えば、乳糖、ショ糖、デンプン等）、場合によっては、香料、色素等と共に、錠剤、丸剤、顆粒、細粒、粉末、ペレット、カプセル、溶液、乳液、懸濁液、シロップおよびトローチ等に製剤化して、特定保健用食品や栄養機能食品等の保健機能食品、サプリメントとして用いることができる。また、本発明の食品は、飼料用途にも適用することができ、家禽や家畜等には、通常の飼料に添加して摂取または投与することができる。
【００４３】
食品または飼料として摂取する場合、食品または飼料の１日当たりの摂取回数および１回当たりの摂取量の目安を概算し、１日摂取量を規定した上で１日摂取量の食品または飼料に含まれるＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの量を決定する。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの含有量は、後述する用量に基づいて決定することができる。
【００４４】
本発明の剤、食品または医薬組成物の摂取または投与量は、摂取または投与対象の年齢、体重、健康状態によって異なり、一概に決定することはできない。例えば、ナルコレプシーの予防もしくは改善または正常な摂食行動の維持を目的とする場合は、通常、食品の形態にして、一方、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療や健康回復を目的とする場合には、通常、医薬品または食品の形態にして、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンとして、成人１日当たり０．１〜１０ｇ、好ましくは０．２ｇ〜７ｇを１日１回から数回に分けて摂取または服用することが好ましい。
【００４５】
本発明の医薬（剤または医薬組成物）の投与方法としては、上記疾患または障害に対する予防的および治療的な効果が得られる経路であれば特に限定されない。例えば、非経口的投与（静脈内投与、筋肉内投与、組織内直接投与、鼻腔内投与、皮内投与、髄液内投与など）または経口投与により投与することができ、特に、該医薬をヒトに適用するには、静脈内、筋肉内または経口投与によって投与することができる。また、剤型としても特に制限されることなく、各種投与剤型、例えば、経口剤（顆粒剤、散剤、錠剤、舌下錠、フィルムコーティング剤、舌下フィルム製剤、カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤など）、注射剤、点滴剤、外用剤（経鼻投与製剤、経皮製剤、軟膏剤など）として投与することが可能である。
【００４６】
また本発明は、ナルコレプシーまたは摂食障害の治療用医薬を製造するためのＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの使用を提供する。具体的には、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを使用したナルコレプシーまたは摂食障害の予防、改善または治療用医薬の製造方法を提供する。
【００４７】
本発明の医薬の製造方法は、製剤分野において自体公知の方法を限定なく用いることができる。
【００４８】
ManNAcを始めとするＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、ヒトの細胞内に中間体として微量含まれており、毒性（例、急性毒性、慢性毒性、遺伝毒性、生殖毒性、心毒性、薬物相互作用、癌原性）を有さず、ヒトに対する安全性は高いと考えられる。
【００４９】
本発明の医薬は、本発明の医薬または他の薬物が有用性を有し得る疾病または状態の危険性の治療、予防、寛解、または低下において、１つまたはそれ以上の他の薬物との組み合わせで使用され得、その場合、薬物の組み合わせは互いに、いずれの薬物単独よりも安全であるかまたはより効果的である。このような他の薬物は、当該薬物に関して一般的に使用される経路及び量で、本発明の医薬と同時に又は連続して投与され得る。本発明の医薬が１つまたはそれ以上の他の薬物と同時に使用される場合には、このような他の薬物及びＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを含有する単位剤形中の医薬組成物が好ましい。しかしながら、組み合わせ療法には、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミン及び１つ以上の他の薬物が異別の重複スケジュールで投与される療法も含まれ得る。１つまたはそれ以上の他の活性成分との組み合わせで使用される場合には、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミン及び前記他の活性成分が、各々単独で使用される場合よりも少量の用量で使用され得ることも想定される。従って、本発明の医薬組成物には、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンに加え、１つまたはそれ以上の他の活性成分を含有するものが含まれる。上述の組み合わせには、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンと１つの他の活性化合物だけでなく、２つまたはそれ以上の他の活性化合物との組み合わせが含まれる。
【００５０】
第二の活性成分に対するＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの重量比は変動し得、各成分の効果的な用量に依存する。一般的に、各々の効果的な用量が使用される。従って、例えば、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンが別の薬物と組み合わされるとき、他の薬物に対するＮ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの重量比は一般的に、約１０００：１ないし約１：１０００、好ましくは約２００：１ないし約１：２００の範囲である。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンと他の活性成分との組み合わせも一般的に、上述の範囲内であるが、各場合において、各活性成分の効果的な用量が使用されるべきである。このような組み合わせにおいて、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミン及び他の活性薬物は、個別にまたは共に投与され得る。さらに、１つの要素の投与は、他の薬物の投与前、投与と同時、投与後であり得る。
【００５１】
本発明の医薬は、ナルコレプシーの治療に現在用いられている薬物または現在ナルコレプシーの治療剤として開発中の薬物と組み合わせて用いることができる。本発明の医薬は、リタリン（メチルフェニデート）、モディオダール（モダフィニル）、アルモダフィニル（CEP-10953）、ペモリン（ベタナミン）、Clarithromycin、BF2.649（Pitolisant）、Vigil、PF-03654746、GSK189254、ADK-N05、Flumazenil、オレキシンＡ、Sodium Oxybate(Xyrem)、APD916、Methylphenidate、NRP104、Pramipexole、Almorexant、カフェインおよびこれらの組み合わせなどを含む、ナルコレプシーを治療するのに有用であることが本分野で公知の他の化合物との組み合わせで投与され得る。
【００５２】
本発明の医薬は、摂食障害（特に拒食症）の治療に現在用いられている薬物または現在摂食障害（特に拒食症）の治療剤として開発中の薬物と組み合わせて用いることができる。本発明の医薬は、Risperidone、Estrogen/Progesterone、オメガ-3脂肪酸、Teriparatide、Somatropine、経皮17-ベータエストラジオール、ヒト成長ホルモン（遺伝子組換え）、RM-131、Quetiapine、Olanzapine、Methylphenidate、ヒトインスリン様成長因子（遺伝子組換え：rhIGF-1）、Teriparatide、Somatropine、DHEA（Dehydroepiandrosterone、Prasterone）、Dronabinol、Ghrelin、Testosterone、Testosterone cypionate、Fluoxetine、Aripiprazole、ERT(Aviane)、Norgestimate、Ethinylestradiol、Alprazolam、Atomoxetine、Duloxetine、アミノ酸、セロトニン、hydroxyzine、hydroxyzine HCl、オキシトシンおよびこれらの組み合わせなどを含む、摂食障害（特に拒食症）を治療するのに有用であることが本分野で公知の他の化合物との組み合わせで投与され得る。
【００５３】
本発明の医薬は、例えば鎮静薬、催眠薬、抗不安薬、抗ヒスタミン、ベンゾジアゼピン、バルビツール酸塩、シクロピロロン、ＧＡＢＡアゴニスト、５ＨＴ−２Ａアンタゴニスト及び５ＨＴ−２Ａ／２Ｃアンタゴニストを含む５ＨＴ−２アンタゴニスト、ヒスタミンＨ３アンタゴニスト、ヒスタミンＨ３逆アゴニスト、イミダゾピリジン、マイナートランキライザー、メラトニンアゴニスト及びアンタゴニスト、メラトニン作動薬、オレキシンアゴニスト、プロキネチシンアゴニスト及びアンタゴニスト、ピラゾロピリミジン、Ｔ型カルシウムチャネルアンタゴニスト、トリアゾロピリジン、及びアジナゾラム、アロバルビタール、アロニミド、アルプラゾラム、アミトリプチリン、アモバルビタール、アモキサピン、ＡＰＤ−１２５、ベンタゼパム、ベンゾクタミン、ブロチゾラム、ブプロピオン、ブスピリオン、ブタバルビタール、ブタルビタール、カプロモレリン、カプリド、カルボクロラール、クロラールベタイン、抱水クロラール、クロルジアゼポキシド、クロミプラミン、クロナゼパム、クロペリドン、クロラゼプ酸塩、クロレテート（ｃｌｏｒｅｔｈａｔｅ）、クロザピン、コナゼパム、シプラゼパム、デシプラミン、デクスクラモール、ジアゼパム、ジクロルアルフェナゾン、ジバルプロエクス、ジフェンヒドラミン、ドキセピン、ＥＭＤ−２８１０１４、エプリバンセリン、エスタゾラム、エスゾピクロン、エスクロリノール、エトミデート、フェノバム、フルニトラゼパム、フルラゼパム、フルボキサミン、フルオキセチン、フォサゼパム、ガボキサドール、グルテチミド、ハラゼパム、ヒドロキシジン、イブタモレン、イミプラミン、インジプロン、リチウム、ロラゼパム、ロルメタゼパム、ＬＹ−１５６７３５、マプロチリン、ＭＤＬ−１００９０７、メクロクアロン、メラトニン、メフォバルビタール、メプロバメート、メタクアロン、メチプリロン、ミダフルル、ミダゾラム、モダフィニル、ネファゾドン、ＮＧＤ−２−７３、ニソバマート、ニトラゼパム、ノルトリプチリン、オキサゼパム、パラアルデヒド、パロキセチン、ペントバルビタール、ペルラピン、ペルフェナジン、フェネルジン、フェノバルビタール、プラゼパム、プロメタジン、プロポフォール、プロトリプチリン、クアゼパム、ラメルテオン、レクラゼパム、ロレタミド、セコバルビタール、セルトラリン、スプロクロン、ラメルテオン、テマゼパム、チオリダジン、チアギャビン、トラカゾラート、トラニルシプロマイン（ｔｒａｎｙｌｃｙｐｒｏｍａｉｎｅ）、トラゾドン、トリアゾラム、トレピパム、トリセタミド、トリクロフォス、トリフルオペラジン、トリメトジン、トリミプラミン、ウルダゼパム、ベンラファキシン、ザレプロン、ゾラゼパム、ゾピクロン、ゾルピデム、及びこれらの塩、これらの組み合わせなどを含む、睡眠の質を向上させ、睡眠障害を予防及び治療するのに有用であることが本分野で公知の他の化合物との組み合わせで投与され得る。
【００５４】
別の実施形態において、本発明の医薬は、本分野で公知の、個別に投与されるかまたは同一の医薬組成物中にあるかのいずれかの、
（ａ）グリタゾン（例えば、シグリタゾン、ダルグリタゾン、エングリタゾン、イサグリタゾン（ＭＣＣ−５５５）、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、トログリタゾン、チュラリック、ＢＲＬ４９６５３、ＣＬＸ−０９２１、５−ＢＴＺＤ）、ＧＷ−０２０７、ＬＧ−１００６４１、ＬＹ−３００５１２などのＰＰＡＲγアンタゴニスト；
（ｂ）メトホルミン及びフェンフォルミンなどのビグアニド；
（ｃ）インスリン、またはビオタ、ＬＰ−１００、ノバラピド、インスリンデテミル、インスリンリスプロ、インスリングラルジン、インスリン亜鉛懸濁液（レンテ及びウルトラレンテ）などのインスリン擬似薬、Ｌｙｓ−Ｐｒｏインスリン、ＧＬＰ−１（７３−７）（インスリントロピン）、ＧＬＰ−１（７−３６）−ＮＨ２；
（ｄ）アセトヘキサミド、クロルプロパミド、ジアビニース（ｄｉａｂｉｎｅｓｅ）、グリベンクラミド、グリピジド、グリブリド、グリメピリド、グリクラジド、グリペンチド、グリキドン、グリソラミド、トラザミド、トルブタミドなどのスルホニル尿素；
（ｅ）アカルボース、アディポシンなどのα−グルコシダーゼ阻害剤、カミグリボース、エミグリテート、ミグリトール、ボグリボース、プラジマイシン−Ｑ、サルボスタチン、ＣＫＤ−７１１、ＭＤＬ−２５，６３７、ＭＤＬ−７３，９４５、ＭＯＲ１４など；
（ｆ）（ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（アトルバスタチン、イタバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、リバスタチン、ロスバスタチン、シムバスタチン、及び他のスタチン）、（ｉｉ）コレスチルアミン、コレスチポール、交差架橋したデキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体などの胆汁酸吸収剤／捕捉剤、Ｃｏｌｅｓｔｉｄ（登録商標）、ＬｏＣｈｏｌｅｓｔ（登録商標）など、（ｉｉｉ）ニコチニルアルコール、ニコチン酸、またはそれらの塩、（ｉｖ）フェノフィブリン酸誘導体（ジェムフィブロジル、クロフィブレート、フェノフィブレート及びベンザフィブレート）などの増殖因子活性化因子受容体αアゴニスト、（ｖ）スタノールエステル、β−シトステロール、チケシドなどのステロールグリコシド、エゼチミブなどのアセチジノンなど、アバシミブ、及びメリナミドなどの（アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ））阻害剤、（ｖｉ）プロブコールなどの抗酸化剤、（ｖｉｉ）ビタミンＥ、（ｖｉｉｉ）甲状腺ホルモン様擬似薬（ｔｈｙｒｏｍｉｍｅｔｉｃ）；
（ｇ）ベクロフィブレート、ベンザフィブレート、シプロフィブレート、クロフィブレート、エトフィブレート、フェノフィブレート、ゲムフィブロジルなどのＰＰＡＲαアゴニスト、及びＡｔｒｏｍｉｄ（登録商標）及びＴｒｉｃｏｒ（登録商標）などの他のフィブリン酸（ｆｉｂｒｉｃ ａｃｉｄ）誘導体、及びＷＯ９７／３６５７９に記載のＰＰＡＲαアゴニスト；
（ｈ）ＰＰＡＲδアゴニスト；
（ｉ）ムラグリタザール及び米国特許第６，４１４，００２号に開示される化合物などのＰＰＡＲα／δアゴニスト；
（ｊ）（１）成長ホルモン分泌促進物質、ＮＮ７０３、ヘキサレリン、ＭＫ−０６７７、ＳＭ−１３０６８６、ＣＰ−４２４，３９１、Ｌ−６９２，４２９、Ｌ−１６３，２５５などの成長ホルモン分泌促進物質受容体アゴニスト／アンタゴニスト、（２）タンパク質チロシンホスファターゼ−１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）阻害剤、（３）カンナビノイドＣＢ１受容体アンタゴニストなどのカンナビノイド受容体リガンドまたはリモナバント（Ｓａｎｏｆｉ Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ＡＭＴ−２５１、ＳＲ−１４７７８及びＳＲ１４１７１６Ａ（Ｓａｎｏｆｉ Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）などのインバースアゴニスト、ＳＬＶ−３１９（Ｓｏｌｖａｙ）、ＢＡＹ６５−２５２０（Ｂａｙｅｒ）、（４）フェンフルラミン、デクスフェンフルラミン、フェンテルミン、シブトラミンなどの抗肥満薬、（５）ＡＤ９６７７／ＴＡＫ６７７（Ｄａｉｎｉｐｐｏｎ／Ｔａｋｅｄａ）、ＣＬ−３１６，２４３、ＳＢ４１８７９０、ＢＲＬ−３７３４４、Ｌ−７９６５６８、ＢＭＳ−１９６０８５、ＢＲＬ−３５１３５Ａ、ＣＧＰ１２１７７Ａ、ＢＴＡ−２４３、トレカドリン、Ｚｅｎｅｃａ Ｄ７１１４、ＳＲ５９１１９Ａ、（６）オーリスタット（Ｘｅｎｉｃａｌ（登録商標）、トリトンＷＲ１３３９、ＲＨＣ８０２６７、リプスタチン、テトラヒドロリプスタチン、茶サポニン、リン酸ジエチルウンベリフェリルなどの膵リパーゼ阻害剤、（７）ＢＩＢＰ３２２６、Ｊ−１１５８１４、ＢＩＢＯ３３０４、ＬＹ−３５７８９７、ＣＰ−６７１９０６、ＧＩ−２６４８７９Ａなどの神経ペプチドＹ１アンタゴニスト、（８）ＧＷ−５６９１８０Ａ、ＧＷ−５９４８８４Ａ、ＧＷ−５８７０８１Ｘ、ＧＷ−５４８１１８Ｘ、ＦＲ２２６９２８、ＦＲ２４０６６２、ＦＲ２５２３８４、１２２９Ｕ９１、ＧＩ−２６４８７９Ａ、ＣＧＰ７１６８３Ａ、ＬＹ−３７７８９７、ＰＤ−１６０１７０、ＳＲ−１２０５６２Ａ、ＳＲ−１２０８１９Ａ、ＪＣＦ−１０４などの神経ペプチドＹ５アンタゴニスト、（９）メラニン凝集ホルモン（ＭＣＨ）受容体アンタゴニスト、（１０）Ｔ−２２６２９６（Ｔａｋｅｄａ）などのメラニン凝集ホルモン１受容体（ＭＣＨ１Ｒ）アンタゴニスト、（１１）メラニン凝集ホルモン２受容体（ＭＣＨ２Ｒ）アゴニスト／アンタゴニスト、（１２）フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリンなどのセロトニン再取り込み阻害剤、（１３）メラノタンＩＩなどのメラノコルチンアゴニスト、（１４）ＣＨＩＲ８６０３６（Ｃｈｉｒｏｎ）、ＭＥ−１０１４２、ＭＥ−１０１４５（Ｍｅｌａｃｕｒｅ）、ＣＨＩＲ８６０３６（Ｃｈｉｒｏｎ）などの他のＭｃ４ｒ（メラノコルチン４受容体）アゴニスト、（１５）５ＨＴ−２アゴニスト、（１６）ＢＶＴ９３３、ＤＰＣＡ３７２１５、ＷＡＹ１６１５０３、Ｒ−１０６５などの５ＨＴ２Ｃ（セロトニン受容体２Ｃ）アゴニスト、（１７）ガラニンアンタゴニスト、（１８）ＣＣＫアゴニスト、（１９）ＡＲ−Ｒ１５８４９、ＧＩ１８１７７１、ＪＭＶ−１８０、Ａ−７１３７８、Ａ−７１６２３、ＳＲ１４６１３などのＣＣＫ−Ａ（コレシストキニン−Ａ）アゴニスト、（２０）コルチコトロピン放出ホルモンアゴニスト、（２１）ヒスタミン受容体−３（Ｈ３）修飾因子、（２２）ヒオペラミド、Ｎ−（４−ペンテニル）カルバミン酸３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロピル、クロベンプロピト、ヨードフェンプロピト、イモプロキシファン、ＧＴ２３９４（Ｇｌｉａｔｅｃｈ）、Ｏ−［３−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）プロパノール］−カルバミン酸塩などのヒスタミン受容体−３（Ｈ３）アンタゴニスト／インバースアゴニスト、（２３）テオフィリン、ペントキシフィリン、ザプリナスト、シルデナフィル、アムリノン、ミルリノン、シロスタミド、ロリプラム、シロミラストなどのＰＤＥ（ホスホジエステラーゼ）阻害剤、（２４）ホスホジエステラーゼ−３Ｂ（ＰＤＥ３Ｂ）阻害剤、（２５）ＧＷ３２０６５９、デスピラミン、タルスプラム、ノミフェンシンなどのＮＥ（ノルエピネフリン）輸送阻害剤、（２６）グレリン受容体アンタゴニスト、（２７）組換えヒトレプチン（ＰＥＧ−ＯＢ、Ｈｏｆｆｍａｎ Ｌａ Ｒｏｃｈｅ）及び組換えメチオニルヒトレプチン（Ａｍｇｅｎ）を含む、レプチン、（２８）レプチン誘導体、（２９）［Ｄ−Ｐｈｅ６，β−Ａｌａ１１，Ｐｈｅ１３，Ｎｌｅ１４］Ｂｎ（６−１４）及び［Ｄ−Ｐｈｅ６，Ｐｈｅ１３］Ｂｎ（６−１３）プロピルアミドなどのＢＲＳ３（ボンベシン受容体サブタイプ３）アゴニスト、Ｐｅｐｔ．Ｓｃｉ．２００２ Ａｕｇ； ８（８）： ４６１−７５に開示される化合物、（３０）ＧＩ−１８１７７１（Ｇｌａｘｏ−ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＳＲ１４６１３１（Ｓａｎｏｆｉ Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ブタビンジド（ｂｕｔａｂｉｎｄｉｄｅ）、ＰＤ１７０，２９２、ＰＤ１４９１６４（Ｐｆｉｚｅｒ）などのＣＮＴＦ（繊毛様神経栄養因子）、（３１）アキソキン（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）などのＣＮＴＦ誘導体、（３２）シブトラミンなどのモノアミン再取り込み阻害剤、（３３）フィタン酸、４−［（Ｅ）−２−（５，６，７，８−テトラヒドロ−５，５，８，８−テトラメチル−２−ナフタレニル）−１−プロペニル］安息香酸（ＴＴＮＰＢ）、レチノイン酸などのＵＣＰ−１（脱共役タンパク質−１）、２、または３活性化因子、（３４）ＫＢ−２６１１（ＫａｒｏＢｉｏＢＭＳ）などの甲状腺ホルモンβアゴニスト、（３５）セルレニン及びＣ７５などのＦＡＳ（脂肪酸合成酵素）阻害剤、（３６）ＤＧＡＴ１（ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ１）阻害剤、（３７）ＤＧＡＴ２（ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２）阻害剤、（３８）ＡＣＣ２（アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼ−２）阻害剤、（３９）グルココルチコイドアンタゴニスト、（４０）ｄｅｌ Ｍａｒ−Ｇｒａｓａ，Ｍ． ｅｔ ａｌ．， Ｏｂｅｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ９：２０２−９（２００１）に開示される、オレオイル−エストロンなどのアシルエストロゲン、（４１）イソロイシンチアゾリジド、バリンピロリジド、ＮＶＰＤＰＰ７２８、ＬＡＦ２３７、ＭＫ−４３１、Ｐ９３／０１、ＴＳＬ２２５、ＴＭＣ−２Ａ／２Ｂ／２Ｃ、ＦＥ９９９０１１、Ｐ９３１０／Ｋ３６４、ＶＩＰ０１７７、ＳＤＺ２７４−４４４などのジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰ−ＩＶ）阻害剤、（４２）ジカルボン酸塩トランスポーター阻害剤、（４３）グルコーストランスポーター阻害剤、（４４）リン酸塩トラ��スポーター阻害剤、（４５）トピラメート（Ｔｏｐｉｍａｘ（登録商標））、（４６）ペプチドＹＹ、ＰＹＹ３−３６、ペプチドＹＹアナログ、誘導体、ＢＩＭ−４３０７３Ｄ、ＢＩＭ−４３００４Ｃなどの断片（Ｏｌｉｔｖａｋ，Ｄ．Ａ．ｅｔ ａｌ．， Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．Ｓｃｉ．４４（３）：６４３−４８（１９９９））、（４７）ＮＰＹ３−３６、Ｎアセチル［Ｌｅｕ（２８，３１）］ＮＰＹ２４−３６、ＴＡＳＰ−Ｖ、シクロ−（２８／３２）−Ａｃ−［Ｌｙｓ２８−Ｇｌｕ３２］−（２５−３６）−ｐＮＰＹなどの神経ペプチドＹ２（ＮＰＹ２）受容体アゴニスト、（４８）膵ペプチド（ＰＰ）などの神経ペプチドＹ４（ＮＰＹ４）及び１２２９Ｕ９１などの他のＹ４アゴニスト、（４９）エトリコキシブ、セレコキシブ、バルデコキシブ、パレコキシブ、ルミラコキシブ、ＢＭＳ３４７０７０、チラコキシブまたはＪＴＥ５２２、ＡＢＴ９６３、ＣＳ５０２、ＧＷ４０６３８１などのシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤、及び医薬として許容されるそれらの塩、（５０）ＢＩＢＰ３２２６、Ｊ−１１５８１４、ＢＩＢＯ３３０４、ＬＹ−３５７８９７、ＣＰ−６７１９０６、ＧＩ−２６４８７９Ａなどの神経ペプチドＹ１（ＮＰＹ１）、（５１）ナルメフェン（Ｒｅｖｅｘ（登録商標））、３−メトキシナルトレキソン、ナロキソン、ナルトレキソンなどのオピオイドアンタゴニスト、（５２）ＢＶＴ３４９８、ＢＶＴ２７３３などの１１βＨＳＤ−１（１１−βヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ１型）阻害剤、（５３）アミノレックス、（５４）アンフェクロラル、（５５）アンフェタミン、（５６）ベンズフェタミン、（５７）クロルフェンテルミン、（５８）クロベンゾレックス、（５９）クロフォレックス、（６０）クロミノレックス、（６１）クロルテルミン、（６２）シクレキセドリン、（６３）デクストロアンフェタミン、（６４）ジフェメトキシジン、（６５）Ｎ−エチルアンフェタミン、（６６）フェンブトラゼート、（６７）フェニソレックス、（６８）フェンプロポレックス、（６９）フルドレックス、（７０）フルミノレックス、（７１）フルフリルメチルアンフェタミン、（７２）レバンフェタミン、（７３）レボファセトペラン、（７４）メフェノレックス、（７５）メタンフェプラモン、（７６）メタンフェタミン、（７７）ノルシュードエフェドリン、（７８）ペントレックス、（７９）フェンジメトラジン、（８０）フェンメトラジン、（８１）ピシロレックス、（８２）フィトファーム５７、（８３）ゾニサミドなどを含む（但し、これらに限定されるわけではない。）他の化合物との組み合わせにおいて採用され得る。
【００５５】
別の実施形態において、本発明の医薬は、ノルエピネフリン再取り込み阻害剤（第三級アミン三環系及び第二級アミン三環系を含む。）、選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）、モノアミンオキシダーゼ阻害剤（ＭＡＯＩ）、モノアミンオキシダーゼの可逆的阻害剤（ＲＩＭＡ）、セロトニン及びノルアドレナリン再取り込み阻害剤（ＳＮＲＩ）、コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）アンタゴニスト、α−アドレナリン受容体アンタゴニスト、ニューロキニン−１受容体アンタゴニスト、非定型抗鬱薬、ベンゾジアゼピン、５−ＨＴ１Ａアゴニストまたはアンタゴニスト、特に５−ＨＴ１Ａ部分的アゴニスト、コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）アンタゴニストを含む抗鬱薬または抗不安薬と組み合わせて使用され得る。特定の薬物には、アミトリプチリン、クロミプラミン、ドキセピン、イミプラミン及びトリイミプラミン、アモキサピン、デシプラミン、マプロチリン、ノルトリプチリン及びプロトリプチリン、フルキセチン、フルボキサミン、パロキセチン及びセルトラリン、イソカルボキサジド、フェネルジン、トラニルシプロミン及びセレギリン、モクロベミド、ベンラファキシン、アプレピタント、ブプロピオン、リチウム、ネファゾドン、トラゾドン及びビロキサジン、アルプラゾラム、クロルジアゼポキシド、クロナゼパム、クロラゼペート、ジアゼパム、ハラゼパム、ロラゼパム、オキサゼパム及びプラゼパム、ブスピロン、フレシノキサン、ゲピロン及びイプサピロン、及び医薬として許容されるそれらの塩が含まれる。
【００５６】
別の実施形態において、本発明の医薬は、抗アルツハイマー薬、ベータ−セクレターゼ阻害剤、ガンマ−セクレターゼ阻害剤、成長ホルモン分泌促進物質、組換え成長ホルモン、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、イブプロフェンを含むＮＳＡＩＤ、ビタミンＥ、抗アミロイド抗体、ＣＢ−１受容体アンタゴニストまたはＣＢ−１受容体インバースアゴニスト、ドキシサイクリン及びリファンピンなどの抗生物質、メマンチンなどのＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸塩（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニスト、ガランタミン、リバスチグミン、ドネペジル、タクリンなどのコリンエステラーゼ阻害剤、イブタモレン、メシル酸イブタモレン、カプロモレリンなどの成長ホルモン分泌促進物質、ヒスタミンＨ３アンタゴニスト、ＡＭＰＡアゴニスト、ＰＤＥ ＩＶ阻害剤、ＧＡＢＡＡインバースアゴニスト、または神経型ニコチン性アゴニストと組み合わせて使用され得る。
【００５７】
別の実施形態において、本発明の医薬は、レボドパ（カルビドパまたはベンセラジドなどの選択的脳外脱炭酸酵素阻害剤を有するかまたは有さない。）、（必要に応じてその塩酸塩または乳酸塩としての）ビペリデン及び塩酸トリへキシフェニジル（ベンズヘキソール）などの抗コリン作動薬、エンタカポンなどのＣＯＭＴ阻害剤、ＭＯＡ−Ｂ阻害剤、抗酸化剤、Ａ２ａアデノシン受容体アンタゴニスト、コリン作動性アゴニスト、ＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト、セロトニン受容体アンタゴニスト、アレンテモール、ブロモクリプチン、フェノルドパム、リスリド、ナキサゴリド、ペルゴリド、プラミペキソールなどのドーパミン受容体アゴニストと組み合わせて使用され得る。ドーパミンアゴニストが、医薬として許容される塩、例えば臭化水素酸アレンテモール、メシル酸ブロモクリプチン、メシル酸フェノルドパム、塩酸ナキサゴリド、メシル酸ペルゴリドの形態にあり得る。リスリド及びプラミペキソールは、非塩の形態で一般的に使用される。
【００５８】
別の実施形態において、本発明の医薬は、アセトフェナジン、アレンテモール、ベンズヘキソール、ブロモクリプチン、ビペリデン、クロルプロマジン、クロルプロチキセン、クロザピン、ジアゼパム、フェノルドパム、フルフェナジン、ハロペリドール、レボドパ、ベンセラジドを有するレボドパ、カルビドパを有するレボドパ、リスリド、ロキサピン、メソリダジン、モリンドロン、ナキサゴリド、オランザピン、ペルゴリド、ペルフェナジン、ピモジド、プラミペキソール、リスペリドン、スルピリド、テトラベナジン、トリヘキシフェニジル、チオリダジン、チオチキセン、またはトリフルオペラジンと組み合わせて使用され得る。
【００５９】
別の実施形態において、本発明の医薬は、アミノレックス、アンフェクロラール、アンフェタミン、ベンズフェタミン、クロルフェンテルミン、クロベンゾレックス、クロフォレックス、クロミノレックス、クロルテルミン、シクレキセドリン、デクスフェンフルラミン、デクストロアンフェタミン、ジエチルプロピオン、ジフェメトキシジン、Ｎ−エチルアンフェタミン、フェンブトラザート、フェンフルラミン、フェニソレックス、フェンプロポレックス、フルドレックス、フルミノレックス、フルフリルメチルアンフェタミン、レバンフェタミン、レボファセトペラン、マジンドール、メフェノレックス、メタンフェプラモン、メタンフェタミン、ノルシュードエフェドリン、ペントレックス、フェンジメトラジン、フェンメトラジン、フェンテルミン、フェニルプロパノールアミン、ピシロレックス、シブトラミンなどの食欲低下薬、選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）、クロルフェンテルミン、クロフォレックス、クロルテルミン、デクスフェンフルラミン、フェンフルラミン、ピシロレックス、シブトラミンを含むハロゲン化アンフェタミン誘導体、及び医薬として許容されるそれらの塩と組み合わせて使用され得る。
【００６０】
Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンの投与のための医薬組成物は、単位剤形で都合よく与えることができ、薬学の分野で周知の方法のいずれかによって調製され得る。全ての方法には、１つまたはそれ以上の補助成分を構成する担体と活性成分を一緒にする工程が含まれる。一般的に、医薬組成物は、液体担体または細かく分割された固体担体またはその両者と活性成分を均一かつ完全に混合した後、必要に応じて、製品を望ましい剤形へと成形することによって調製される。医薬組成物において、目的の活性化合物は、疾病のプロセスまたは状態に及ぼす望ましい効果を生じるのに十分な量で包含される。本明細書で使用される「組成物」という用語は、指定された量の指定された成分を含む製品及び指定された量の指定された成分の組み合わせから直接的にまたは間接的に得られる全ての製品を包含するものとする。
【００６１】
経口使用のための医薬組成物は、医薬組成物の製造に関して本分野で公知のいずれかの方法に従って調製され得、このような組成物は、薬学的に上質であり、味のよい調製物を提供するために、甘味料、香料、着色料、保存料からなる群から選択される１つまたはそれ以上の薬剤を含有し得る。錠剤は、錠剤の製造に適した、医薬として許容される無毒の賦形剤との混合された活性成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤、例えばトウモロコシデンプン、アルギン酸などの顆粒化剤及び崩壊剤、例えば、デンプン、ゼラチン、アカシアなどの結合剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、滑石などの潤滑剤であり得る。錠剤はコーティングされ得ないか、または胃腸管における崩壊及び吸収を遅延させる公知の技術によってコーティングされ得、これにより、より長時間にわたって持続した作用を提供する。経口使用のための組成物は、活性成分が不活性固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、カオリンと混合される硬質ゼラチンカプセルとして与えることもでき、または活性成分が水若しくは油媒体、例えばピーナッツ油、液体パラフィン、オリーブ油と混合される軟質ゼラチンカプセルとしても与えることもできる。水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合された活性材料を含有する。油性懸濁液は、適切な油の中に活性成分を懸濁することによって製剤され得る。水中油乳剤も採用され得る。水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散可能な粉末及び顆粒によって、分散または湿潤剤、懸濁剤、１つまたはそれ以上の保存料と混合された活性成分が提供される。本化合物の医薬組成物は、滅菌済みの注射可能な水性または油性懸濁液の形態であり得る。本発明の医薬は、直腸投与のための坐薬の形態においても投与され得る。局所使用のため、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを含有するクリーム、軟膏、ゼリー、溶液、懸濁液等が採用され得る。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、吸入によって投与されるためにも製剤され得る。Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンは、本分野で公知の方法による経皮パッチによっても投与され得る。
【実施例】
【００６２】
以下、実施例を示してさらに具体的に本発明を説明する。以下は代表的な実施例を示すものでこれらに限定されるものではなく、本発明の技術的思想を逸脱しない範囲内で種々の応用が可能である。
【００６３】
実施例１：in vivoにおけるオレキシンニューロンの増加
＜ＭａｎＮＡｃ投与条件＞
ＭａｎＮＡｃを飲料水に溶解し、５ｍｇ／ｍｌの濃度とした飲水を、老齢マウス（Ｃ５７ＢＬ／６系統、オス）に対して自由飲水投与で５３週齢時から６１週齢時まで計８週間投与した。投与終了後、前記マウスをすぐに灌流固定して、in situ hybridization法に供した。対照群として、ＭａｎＮＡｃ非投与の老齢マウス（固定時点で６１週齢）ならびに若齢マウス（固定時点で１０週齢）を用いた。
＜in situ hybridization法によるオレキシン遺伝子の発現検出＞
ＭａｎＮＡｃ投与ならびに対照群のマウス各３個体にネンブタール麻酔を施し、ホルムアミド系固定液（Genostaff）にてかん流固定を行い、脳を取り出してパラフィン包埋し、矢状断方向に６μｍ厚の切片を作製した。１０枚おきに切片をヘマトキシリン・エオジン染色で染色し、マウス脳アトラス（Paxinos G, Franklin KBJ. The mouse brain in stereotaxic coordinates. 2nd edition, Academic Press, 2001）に従い、切片の位置を特定して、視床下部外側野を含む切片をin situ hybridization法に供した。切片は、キシレンで脱パラフィン処理した後、エタノールとＰＢＳで段階的に再水和した。この切片を４％パラホルムアルデヒド／ＰＢＳで１５分間固定し、ＰＢＳで洗浄した。次いで、８ｇ／ｍｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｋ／ＰＢＳで３７℃、３０分間処理し、ＰＢＳで洗浄、４％パラホルムアルデヒド／ＰＢＳで１５分間再固定し、ＰＢＳで洗浄、０．２Ｎ  ＨＣｌで１０分間処理し、ＰＢＳで洗浄した。切片を０．１Ｍトリエタノールアミン塩酸塩／０．２５％  無水酢酸で１０分間処理し、ＰＢＳで洗浄した。切片をエタノールで段階的に脱水し、Probe Diluent（Genostaff）で３００ｎｇ／ｍｌに希釈したＲＮＡプローブを６０℃、１６時間ハイブリダイズさせた。プローブはオレキシン遺伝子の部分配列：
cgtgttcctgccgtctctacgaactgttgcacggagctggcaaccacgctgcgggtatcctgactctgggaaagcggcggcctggacctccaggcctccagggacggctgcagcgcctccttcaggccaacggtaaccacgcagctggcatcctgaccatgggccgccgcgcaggcgcagagctagagccacatccctgctctggtcgcggctgtccgaccgtaactaccaccgctttagcaccccggggagggtccggagtctgaacccatcttctatccttgtcctgatccaaacttccccctctgctc（配列番号１）を、
pGEM-1 Easy vector（Promega）にクローニングし、プラスミドを鋳型にDIG RNA Labeling Mix (Roche)を用いてジゴキシゲニン標識RNAプローブを作製した。ハイブリダイゼーション後、切片を５×HybriWash（Genostaff）で６０℃、２０分間それぞれ洗浄した。続いて、５０μｇ／ｍｌ  ＲＮａｓｅＡ、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１Ｍ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液中で３７℃、３０分間ＲＮａｓｅ処理を行った。切片は、２×HybriWashで６０℃、２０分間を２回、０．２×HybriWashで６０℃、２０分間を２回洗浄し、ＴＢＳＴ（０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０／ＴＢＳ）で１回洗浄した。０．５％  blocking reagent(Roche)／ＴＢＳＴで３０分間ブロッキング処理をした後、切片をＴＢＳＴで１０００倍希釈したanti-DIG AP conjugate(Roche）中で室温、２時間インキュベートした。ＴＢＳＴで２回洗浄の後、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０、１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ９．５）溶液中でインキュベートした。発色反応は、ＮＢＴ／ＢＣＩＰ（Sigma）を用いて一晩行い、ＰＢＳで洗浄した。染色した切片は、ケルネヒトロート（MUTO PURE CHEMICALS）で対比染色し、マリノール（MUTO PURE CHEMICALS）で封入した、オレキシン遺伝子を発現する細胞を計数し、３個体の平均と標準誤差を求めた。
【００６４】
＜実験結果＞
結果を図１に示す。視床下部外側野において、オレキシン遺伝子発現細胞（オレキシンニューロン）が確認され、無投与の老齢マウスでは若齢マウスと比較して数が減少していた。一方、ＭａｎＮＡｃを投与した老齢マウスでは無投与群と比較してオレキシンニューロンが増加していた。
【００６５】
実施例２：ヒトiPS細胞からの神経分化誘導の系を用いたManNAcならびにManNAc 誘導体によるオレキシン遺伝子(Hcrt)の発現誘導
分化培養
ヒトiPS細胞株201B7(HSP0001)は、ナショナルバイオリソースプロジェクト（MEXT、日本）を介して、理研バイオリソースセンターより入手した。ヒトiPS細胞は、5 ng/mLのrecombinant human bFGF（Wako)を補足した霊長類ＥＳ培地(ReproCELL)中、マイトマイシンＣ処理STO/Neo resistant/LIF(SNL)フィーダー細胞のフィーダー層上で維持した。Stromal cell-derived inducing activity (SDIA)分化培養系とBMP4系による神経への分化誘導のため、ヒトiPS細胞をPA6間質細胞とともに20日間共培養した。5nM BMP4を、7日目から補足した。分化培養開始時（０日）からManNAcまたはManNAc 誘導体を、特定の濃度になるように神経分化培地中に添加し、分化培養７、１０および１４日目に培地の交換を行った。また、分化培養７日目から5 nM recombinant human BMP4(Wako)を添加した。分化培養２０日目に細胞を回収してRT-PCRに供した。
【００６６】
RT-PCR法による発現解析
回収した細胞からRNeasy plus Mini Kit (QIAGEN)を用いてtotal RNAを抽出した。次いでSuperScript III First Strand Synthesis System (Invitrogen) を用いて、total RNA 1 μgおよびOligo(dT)を含む反応液中で逆転写反応を行いcDNAを合成した。
PCR反応は10 μlスケールで行い、0.5 μlのcDNA、5 μlの2xGC Buffer I、200 μM各dNTP、1.5 mM MgCl2、終濃度0.2 μM各プライマーに1 UのLA-Taq DNA Polymerase (Takara) を加え、95℃ 3分の熱変性後、(95℃ 30秒、55℃ 30秒、72℃ 30秒)x35サイクル (Actbの場合は20サイクル) の条件で行った。用いたプライマーは以下に示す。
Hcrt Forward; 5'- CTCCAGGCACCATGAACTTT -3'（配列番号：２）
Hcrt Reverse; 5'- AGTTCGTAGAGACGGCAGGA -3'（配列番号：３）
Actb Forward; 5'- TTCTACAATGAGCTGCGTGTGG -3'（配列番号：４）
Actb Reverse; 5'- ATGGCTGGGGTGTTGAAGGT -3'（配列番号：５）
各PCR産物は2% アガロースゲルで電気泳動し、エチジウムブロマイド染色後、UV照射によりバンドの観察を行った。
【００６７】
結果（図２および図３）
RT-PCRによるオレキシン遺伝子（Hcrt）の発現解析を行った結果、ManNAcと 同程度の活性でAc４ManNAc、Ac3ManNAc-6csP、ManNPrF、 及びManNGlyAcFにおいてはオレキシンニューロンの再生が促進され、また、ManNFAc、ManNAcF2、 及び5S-ManNAcでは、ManNAcよりもオレキシンニューロンの再生誘導活性が高いことが示された。これら一連のManNAcはオレキシンニューロンの生成促進剤として機能し、オレキシンニューロンの機能低下、欠損などを理由とする疾患、例えば、睡眠の質の改善、引いては摂食行動の制御をもたらし得る。
【００６８】
実施例３：ManNFAcの脳室内投与による効果
ManNFAcを生理食塩水に溶解し、０．１ｍｏｌ／Ｌの濃度とした。マウス（C57BL6/J、オス、５２週齢、ManNFAc投与群：n=7、コントロール群：n=6）を、イソフルラン2％の麻酔下で、脳定位固定装置（Koph 900）にて固定した。
前記マウスに対して、脳室内カニューラ(Plastic one #313-000)の留置手術（十字縫合に対して0.3 mm後部 かつ 1 mm側部、頭蓋骨表面から3 mm下方）を施した。側脳室に埋め込んだカニューラと背中に埋め込んだ浸透圧ポンプ(alzet（登録商標）、MICRO-OSMIC PUMP MODEL 1004)と繋いだ。
術後、麻酔から離して、個別飼育した。
ManNFAc(0.1mol/L、 100μl)、または生理食塩水(100μl)を0.11μl /hrの速度で4週間持続投与した。
投与開始3週間目と4週間目のマウスを実験に供した。前記マウスをすぐに灌流固定して、in situ hybridization法に供した。対照群として、若齢マウス（固定時点で８〜１８週齢）を用いた。
＜in situ hybridization法によるオレキシン遺伝子の発現検出＞
ManNFAc投与ならびに対照群のマウス各３個体にネンブタール麻酔を施し、ホルムアミド系固定液（Genostaff）にてかん流固定を行い、脳を取り出してパラフィン包埋し、矢状断方向に６μｍ厚の切片を作製した。１０枚おきに切片をヘマトキシリン・エオジン染色で染色し、マウス脳アトラス（Paxinos G, Franklin KBJ. The mouse brain in stereotaxic coordinates. 2nd edition, Academic Press, 2001）に従い、切片の位置を特定して、視床下部外側野を含む切片をin situ hybridization法に供した。切片は、キシレンで脱パラフィン処理した後、エタノールとＰＢＳで段階的に再水和した。この切片を４％パラホルムアルデヒド／ＰＢＳで１５分間固定し、ＰＢＳで洗浄した。次いで、８ｇ／ｍｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ  Ｋ／ＰＢＳで３７℃、３０分間処理し、ＰＢＳで洗浄、４％パラホルムアルデヒド／ＰＢＳで１５分間再固定し、ＰＢＳで洗浄、０．２Ｎ  ＨＣｌで１０分間処理し、ＰＢＳで洗浄した。切片を０．１Ｍトリエタノールアミン塩酸塩／０．２５％  無水酢酸で１０分間処理し、ＰＢＳで洗浄した。切片をエタノールで段階的に脱水し、Probe Diluent（Genostaff）で３００ｎｇ／ｍｌに希釈したＲＮＡプローブを６０℃、１６時間ハイブリダイズさせた。プローブはオレキシン遺伝子の部分配列：
cgtgttcctgccgtctctacgaactgttgcacggagctggcaaccacgctgcgggtatcctgactctgggaaagcggcggcctggacctccaggcctccagggacggctgcagcgcctccttcaggccaacggtaaccacgcagctggcatcctgaccatgggccgccgcgcaggcgcagagctagagccacatccctgctctggtcgcggctgtccgaccgtaactaccaccgctttagcaccccggggagggtccggagtctgaacccatcttctatccttgtcctgatccaaacttccccctctgctc（配列番号１）を、
pGEM-1 Easy vector（Promega）にクローニングし、プラスミドを鋳型にDIG RNA Labeling Mix (Roche)を用いてジゴキシゲニン標識RNAプローブを作製した。ハイブリダイゼーション後、切片を５×HybriWash（Genostaff）で６０℃、２０分間それぞれ洗浄した。続いて、５０μｇ／ｍｌ  ＲＮａｓｅＡ、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１Ｍ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ溶液中で３７℃、３０分間ＲＮａｓｅ処理を行った。切片は、２×HybriWashで６０℃、２０分間を２回、０．２×HybriWashで６０℃、２０分間を２回洗浄し、ＴＢＳＴ（０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０／ＴＢＳ）で１回洗浄した。０．５％  blocking reagent(Roche)／ＴＢＳＴで３０分間ブロッキング処理をした後、切片をＴＢＳＴで１０００倍希釈したanti-DIG AP conjugate(Roche）中で室温、２時間インキュベートした。ＴＢＳＴで２回洗浄の後、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１％  Ｔｗｅｅｎ２０、１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ９．５）溶液中でインキュベートした。発色反応は、ＮＢＴ／ＢＣＩＰ（Sigma）を用いて一晩行い、ＰＢＳで洗浄した。染色した切片は、ケルネヒトロート（MUTO PURE CHEMICALS）で対比染色し、マリノール（MUTO PURE CHEMICALS）で封入した、オレキシン遺伝子を発現する細胞を計数し、３個体の平均と標準誤差を求めた。
【００６９】
＜実験結果＞
結果を図５に示す。ManNFAc無投与の老齢マウスでは若齢マウスと比較して数が減少していた。一方、ManNFAcを投与した老齢マウスでは無投与群と比較してオレキシンニューロンが増加していた。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明により、Ｎ−アセチル−Ｄ−マンノサミンを有効成分として含有する医薬、食品などが提供される。本発明の医薬または食品の服用または摂取により、生体内でのオレキシンニューロンの誘導に基づく、ナルコレプシーまたは摂食障害を予防、改善または治療することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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