(57)【要約】【課題】ハスの抽出物を有効成分とする歯周病予防・治療用組成物、インプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）予防・治療用組成物、及び化粧品及び口腔化粧品用保存剤を提供する。【解決手段】ハスの抽出物を有効成分とする歯周病予防・治療用組成物、ハスの抽出物及び鶏血藤を有効成分とするインプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）予防・治療用組成物、及び化粧品及び口腔化粧品用保存剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ハスの抽出物を有効成分とする歯周病予防・治療用組成物。
【請求項２】
さらに、鶏血藤又はその抽出物を含有する請求項１に記載の歯周病予防・治療用組成物。
【請求項３】
さらに、マスティック、グレープフルーツ、シコン（紫根）、ニクズク、ビンロウジ、ヨモギ、オオバク、ボタンピ、オウゴン、ダイオウ（大黄）、ノギクカ、ヤクモソウ、熊笹、及びプロポリスからなる群から選択される植物成分を含有する請求項１又は２に記載の歯周病予防・治療用組成物。
【請求項４】
塗布剤、歯磨き剤、洗口含嗽剤（うがい薬）、リンス液又はパップ剤の形態で使用される請求項１〜３のいずれかに記載の歯周病予防・治療用組成物。
【請求項５】
前記塗布剤が、ジェル状である請求項４に記載の歯周病予防・治療用組成物。
【請求項６】
前記ハスの抽出物の含有量が、０．５重量％以上である請求項１〜５のいずれかに記載の歯周病予防・治療用組成物。
【請求項７】
前記ハスの抽出物が、二酸化炭素を抽出溶媒とする超臨界抽出法によって得られたものである請求項１〜６のいずれかに記載の歯周病予防・治療用組成物。
【請求項８】
ハスの抽出物及び鶏血藤を有効成分とするインプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）予防・治療用組成物。
【請求項９】
ハスの抽出物を含む化粧品及び口腔化粧品用保存剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、歯周病予防・治療用組成物及び化粧品用保存剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
慢性（成人性）歯周炎は、歯肉溝細菌叢を構成する常在菌のうち、主にグラム陰性嫌気性桿菌と呼ばれる細菌群の増殖により、歯周組織に引き起こされる慢性感染症である。加齢とともに罹患率が上昇し、４０歳代以降の多くが限局性あるいは広汎性の歯周炎に罹患していると言われている。本疾患の実体は、歯周組織の慢性化膿性炎である。本疾患の予防及び治療は、歯ブラシによる機械的清掃による日常的な手入れや、外科的処置に依存する部分が多く、予防及び又は治療手段にさらなる向上が望まれている。また、近年では、歯周病や齲蝕等によって失った歯を補うためのインプラントの使用が広がりを見せており、インプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）の問題も生じている。
【０００３】
特許文献１には、ビンロウジ（檳榔子）、カンゾウ（甘草）、ニクズク（肉蒄）、及びヤクモソウ（益母草）のうち、少なくとも２種以上の抽出エキス及びマスティック（乳香）の抽出エキスを有効成分とする歯周病予防又は治療用組成物が開示されている。
【０００４】
ポルフィロモナス・ジンジヴァーリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ（Ｐ．ｇ））は歯周病患者に高頻度かつ特徴的に検出される細菌であり、強いタンパク分解活性や、骨吸収誘導活性の強い内毒素を持つことから、慢性歯周炎の原因菌の一つと考えられている。歯周ポケットにおける本菌の増減が慢性歯周炎の病態の変化に一致することから、本菌に対する直接的な抗菌性あるいは、歯周病の主症状の一つである骨吸収の阻害作用のある物質は、慢性歯周炎の予防や進行の抑制に有効である。特許文献１の組成物は主に、歯周病原細菌を抑制することで効果を発揮する。
【０００５】
本発明者は、特許文献１の組成物とは異なる作用機序で歯周病の予防及び又は治療に効果のある成分を探索し、鶏血藤と呼ばれる植物が、強い破骨細胞の分化・延命抑制作用、歯周病の原因菌に対する抗菌作用、活性酸素種除去作用を有することを見出し、特許出願を行っている（特許文献２）。
【０００６】
歯槽骨等の骨組織は、骨芽細胞により形成され、破骨細胞により破壊・吸収が絶え間なく繰り返される動的な組織である。この骨吸収と骨形成のバランスが崩れて発生するのが骨粗鬆症であるが、歯周病においても、類似のメカニズムで歯槽骨が破壊され、歯を失う原因となる。
【０００７】
鶏血藤は、強い破骨細胞の分化・延命抑制作用を有する。さらに、鶏血藤は、インプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）（Ｐｅｒｉ−ｉｍｐｌａｎｔｉｔｉｓ）の予防又は治療用としても有効である（特許文献２）。
【０００８】
一方、ハス（蓮、学名：Ｎｅｌｕｍｂｏ  ｎｕｃｉｆｅｒａ）は、スイレン科のハスの成熟果実を生薬名「石蓮子」、果皮を除いた種子を生薬名「蓮肉」あるいは「蓮子」と呼び、鎮静、滋養強壮薬として利用されてきた。
近年、口臭の原因となるメチルメルカプタン発生のカギとなる口腔細菌由来のメチオニナーゼを阻害することによる口臭抑制のために、各種の生薬を用いることが提案されており、この目的でハスを用いることができることが開示されている（特許文献３）。
しかしながら、ハスが、歯周病原細菌や齲蝕原性細菌等の口腔内細菌に対して殺菌効果を有していることは知られていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特許第３３８９５５６号公報
【特許文献２】特開２０１０−１３８１００号公報
【特許文献３】特開２０１２−１７３３８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
鶏血藤は、強い破骨細胞の分化・延命抑制作用、活性酸素種除去作用を有しているが、鶏血藤のみでは歯周病菌の抑制という点では満足できる効果が得られない場合もあることを本発明者は見出した。
そこで、本発明者は、歯周病原細菌の抑制に効果のある新たな植物由来成分を探索し、ハスが歯周病原細菌及び齲蝕原性細菌に対して顕著に優れた殺菌効果を示すことを見出した。
さらに、鶏血藤とハスとを組み合わせると、重度の歯周病患者や、インプラントを移植した患者においても、高い治療効果が得られることを見出し、本発明を完成させた。
【００１１】
本発明の目的は、ハスの抽出物を有効成分とする歯周病予防・治療用組成物を提供することである。
また、本発明の他の目的は、ハスの抽出物及び鶏血藤を有効成分とするインプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）予防・治療用組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明によれば、以下の歯周病予防・治療用組成物、インプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）予防・治療用組成物、及び化粧品及び口腔化粧品用保存剤が提供される。
１．ハスの抽出物を有効成分とする歯周病予防・治療用組成物。
２．さらに、鶏血藤又はその抽出物を含有する１に記載の歯周病予防・治療用組成物。
３．さらに、マスティック、グレープフルーツ、シコン（紫根）、ニクズク、ビンロウジ、ヨモギ、オオバク、ボタンピ、オウゴン、ダイオウ（大黄）、ノギクカ、ヤクモソウ、熊笹、及びプロポリスからなる群から選択される植物成分を含有する１又は２に記載の歯周病予防・治療用組成物。
４．塗布剤、歯磨き剤、洗口含嗽剤（うがい薬）、リンス液又はパップ剤の形態で使用される１〜３のいずれかに記載の歯周病予防・治療用組成物。
５．前記塗布剤が、ジェル状である４に記載の歯周病予防・治療用組成物。
６．前記ハスの抽出物の含有量が、０．５重量％以上である１〜５のいずれかに記載の歯周病予防・治療用組成物。
７．前記ハスの抽出物が、二酸化炭素を抽出溶媒とする超臨界抽出法によって得られたものである１〜６のいずれかに記載の歯周病予防・治療用組成物。
８．ハスの抽出物及び鶏血藤を有効成分とするインプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）予防・治療用組成物。
９．ハスの抽出物を含む化粧品及び口腔化粧品用保存剤。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、ハスの抽出物を有効成分とする歯周病予防・治療用組成物が提供できる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】被験者Ａの治療効果の推移を示すグラフである。
【図２】被験者Ｂの治療効果の推移を示すグラフである。
【図３】被験者Ｃの治療効果の推移を示すグラフである。
【図４】被験者Ｄの治療効果の推移を示すグラフである。
【図５】被験者Ｅの治療効果の推移を示すグラフである。
【図６】被験者Ｆの治療効果の推移を示すグラフである。
【図７】被験者Ｇの治療効果の推移を示すグラフである。
【図８】被験者Ｈの治療効果の推移を示すグラフである。
【図９】被験者Ｉの治療効果の推移を示すグラフである。
【図１０】被験者Ｊの治療効果の推移を示すグラフである。
【図１１ａ】被験者Ａのジェル使用前のインプラント歯周炎患部を示す写真である。
【図１１ｂ】被験者Ａのジェル使用約３ヶ月後のインプラント歯周炎患部を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明のハスの抽出物を有効成分とする歯周病予防・治療用組成物は、ハスの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【００１６】
本発明で用いる「ハス（蓮）」は、学名Ｎｅｌｕｍｂｏ  ｎｕｃｉｆｅｒａ、英名Ｌｏｔｕｓであり、インド原産のハス科多年性水生植物である。
【００１７】
本発明で用いる「ハスの抽出物」は、ハスの植物体から抽出したものであれば部位は特に問わないが、葉から抽出したものであることが特に好ましい。
抽出方法は、特に限定されないが、超臨界抽出法が好ましい。超臨界抽出法によれば、低温での抽出が可能であり、抽出物に溶媒が残留せず、抽出成分の劣化や変性が起こりにくい。また、抽出溶媒は特に限定されず、抽出物のその後の加工に応じて適切なものを選択すればよいが、二酸化炭素を用いることが好ましい。
超臨界抽出法によって抽出されたハスの抽出物は、通常、薄い琥珀色のやや粘性のある液体である。
【００１８】
得られたハスの抽出物は、そのまま、希釈又は濃縮して用いることができる。
ハスの抽出物を希釈液とした場合のハス成分濃度は、目的に応じて適宜調整すればよい。例えば、ハス抽出物を保存剤、特に後述する化粧品及び口腔化粧品用の保存剤として使用する場合であれば、ハス成分濃度を０．１重量％以上とすることが好ましい。抗菌剤として使用する場合であれば、０．５重量％以上とすることが好ましく、１重量％以上とすることがより好ましく、３重量％以上とすることが特に好ましい。
また、ハスの抽出物はさらに濃縮してエキス状としてもよいし、凍結乾燥して粉末又は顆粒等としてもよい。
【００１９】
本発明で用いるハスの抽出物は、後記する試験例で示す通り、歯周病原細菌や齲蝕原性細菌等の口腔内細菌全般に対して高い殺菌効果を有する。従って、ハスの抽出物を有効成分として含有する本発明の歯周病予防・治療用組成物は、歯周病の予防及び治療に有効である。
【００２０】
また、本発明のインプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）予防・治療用組成物は、ハスの抽出物及び鶏血藤を有効成分とすることを特徴とする。
ハスの抽出物には各種の口腔内細菌に対する強力な殺菌作用があり、鶏血藤には歯槽骨吸収を抑制する作用がある（特許文献２）。これらを併用したところ、歯周病原細菌や齲蝕原性細菌全般を抑制しながら、歯槽骨を強固にするという相乗的な効果が得られ、優れたインプラント周囲炎の予防・治療効果が得られた。
【００２１】
ハスの抽出物に、さらに鶏血藤又はその抽出物を配合することにより、ハスの抽出物の歯周病原細菌及び齲蝕原性細菌に対する高い殺菌効果と、鶏血藤の強い破骨細胞の分化・延命抑制作用による相乗効果によって、歯周病に対してだけでなく、インプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）に対しても顕著な予防・治療効果が得られる。
【００２２】
本発明で用いる「鶏血藤」は公知の生薬であり、例えば、マメ科に属する密花豆（Ｓｐａｔｈｏｌｏｂｕｓ  ｓｕｂｅｒｅｃｔｕｓ  Ｄｕｎｎ）、光葉密花豆（Ｓ．  ｈａｒｍａｎｄｉｉ  Ｇａｇｎｅｐ）、紅血藤（Ｓ．  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｃｈｕｎ  ｅｔ  Ｔ，Ｃｈｅｎ）、香花崖豆藤（Ｍｉｌｌｅｔｔｉａ  ｄｉｅｌｓｉａｎａ  Ｈａｒｍｓ）、豊城崖豆藤（Ｍ．  ｎｉｔｉｄａ  Ｂｅｎｔｈ．  ｖａｒ．  ｈｉｒｓｕｔｉｓｓｉｍａ  Ｚ．  Ｗｅｉ）、崖豆藤（Ｍ．  ｇｅｎｔｉｌｉａｎａ  Ｌｅｖｅｌ）、美麗根崖豆藤（Ｍ．  ｓｐｅｃｉｏｓａ  Ｃｈａｍｐ．）、網絡崖豆藤（Ｍ．  ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ  ｂｅｎｔｈ）、常春油麻藤（Ｍｕｃｕｎａ  ｓｅｍｐｅｒｖｉｒｅｎｓ  Ｈｅｍｓｌ．）、白花油麻藤（Ｍ．  ｂｉｒｄｗｏｏｄｉａｎａ  Ｔｕｔｃｈｅｒ）、褐毛藜豆（Ｍ．  ｃａｓｔａｎｅａ  Ｍｅｒｒ）、巴豆藤（Ｃｒａｓｐｅｄｏｌｏｂｉｕｍ  ｓｃｈｏｃｈｉｉ  Ｈａｒｍｓ）、マツブサ科に属する内南五味子（Ｋａｄｓｕｒａ  ｉｎｔｅｒｉｏｒ  Ａ．  Ｃ．  Ｓｍｉｔｈ）、異型南五味子（Ｋ．  ｈｅｔｅｒｏｃｌｉｔａ  （Ｒｏｘｂ．）  Ｃｒａｉｂ）、鉄箍散（Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａ  ｐｒｏｐｉｎｑｕａ  （Ｗａｌｌ．）  Ｂａｉｌｌ．  ｖａｒ．  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  Ｏｌｉｖ．）を包含する。
【００２３】
本発明では、上記各種の植物からなる鶏血藤の乾燥した茎、つる、根をそのまま、若しくは切断、粉砕等したものを用いてもよいし、或いは、鶏血藤の乾燥した茎、つる、根と、適当な溶媒（例えば、水又は熱水）とを接触させ、得られた抽出物を用いることもできる。また、抽出物の形状も特に制限されず、液状、軟稠エキス状、粉末状、顆粒状等のものを用いることができる。
【００２４】
本発明で用いる鶏血藤の抽出物は、例えば、次のようにして製造することができる。
鶏血藤の茎、つる、根の乾燥物を、水若しくは熱水、アルコール等の有機溶媒に接触させ、必要に応じて加熱することによって抽出する。若しくは超臨界抽出法によって抽出してもよい。
鶏血藤の抽出物中の鶏血藤成分濃度は、必要に応じて適宜調整すればよいが、例えば、鶏血藤の乾燥物２００ｇを１Ｌの水に加え、加熱することで２０％とすることができる。得られた２０％抽出物を、さらに必要に応じて希釈して用いることができる。
鶏血藤の抽出物はさらに濃縮してエキス状としてもよいし、凍結乾燥して粉末又は顆粒等としてもよい。
【００２５】
本発明の化粧品及び口腔化粧品用保存剤は、ハスの抽出物を含むことを特徴とする。
上記本発明で用いるハスの抽出物は、口腔内細菌に対して高い抗菌性を有し、化粧品、特に口腔化粧品用の保存剤として有用である。
【００２６】
また、本発明の歯周病予防・治療用組成物及びインプラント歯周炎予防・治療用組成物（以下、両方を合わせて本発明の組成物という）には、上記有効成分以外に、歯周病の予防・治療に有効な薬効成分を配合することもできる。このような成分としては、例えば、歯周病原細菌に対する抗菌活性を有する成分、消炎剤等が挙げられる。上記の成分は、１種のみを用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００２７】
歯周病原細菌に対する抗菌活性を有する成分としては、公知の抗菌剤を用いることができ、例えば、マスティック、グレープフルーツ、シコン（紫根）、ニクズク、ビンロウジ、ヨモギ、オオバク、ボタンピ、オウゴン、ダイオウ（大黄）、ノギクカ、ヤクモソウ、熊笹、プロポリス等の植物成分が好ましく、マスティック、グレープフルーツ等の植物成分がより好ましい。
【００２８】
本発明の組成物は、各種の剤形で用いることができるが、塗布剤、あるいはパップ剤として口内等の患部に貼り付けて用いるか、歯磨き剤、洗口含嗽剤（うがい薬）、リンス液として用いることが好ましい。
塗布剤としては、ジェル状であることが好ましい。
【００２９】
本発明の組成物には、上記成分の他、用途や剤形に応じて、溶媒、香料、清涼剤、甘味剤、着色剤、界面活性剤、潤滑剤、増粘剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、賦形剤、消炎剤、薬用成分等の通常口腔用に用いられている添加剤をさらに含むことができる。上記添加剤は、１種のみを用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００３０】
溶媒としては、エタノール、水等の生体適合性の良いものを用いることが好ましい。
【００３１】
香料としては、メントール、ペパーミント油、スペアミント油、オレンジ油、レモン油、ユーカリ油、ハッカ油、アカシア油、ウイキョウ油、クエントウ油、カラムス油、ショウノウ油、ニッケイ油、ケイ皮油、ケイ葉油、バラ油、ビャクダン油、チョウジ油、ハーブ油、バナナ油、リンゴ油、サリチル酸メチル、カルボン、アネトール、リモネン等のテルペン類；及び調合香料等が挙げられる。
【００３２】
甘味料としては、サッカリン、サッカリンナトリウム、キシリトール、ステビオサイド、ステビアエキス、レバウディオサイド、パラメトキシシンナミックアルデヒド、ネオヘスベリジルジヒドロキシカルコン、ペリラルチン、タウマチン、グリチルチン、グリチルリチンモノグルコサイド、ヘルナンズルチン、トレハロース、アスパルテーム、ソルビット等が挙げられる。
また、調味剤として、梅果実エキス、乳酸、乳酸ナトリウム等を配合してもよい。
【００３３】
着色剤としては、青色１号、黄色４号等の法定色素、二酸化チタン、カルメル等が挙げられる。
【００３４】
界面活性剤としては、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン界面活性剤等が挙げられる。具体的には、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ショ糖脂肪酸エステル、ラクトース脂肪酸エステル、ラウロイルサルコシン塩、Ｎ−アシルグルタミン酸塩、α−オレフィンスルホン酸塩、２−アルキル−Ｎ−カルボキシ−Ｎ−ヒドロキシエチルイミダゾリウムベタイン、Ｎ−アシルタウリン塩、アルキロールアマイド、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油又はその脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル等が挙げられる。
【００３５】
潤滑剤としては、ソルビトール、マルチトール、キシリトール、ラクチトール等の糖アルコール；グリセリン、１，３−ブチレングリコール、１，２−ペンタンジオール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ジプロピレングリコール等の多価アルコール等が挙げられる。
【００３６】
増粘剤としては、カルボキシビニルポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム（セルロースガム）、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カラギーナン、アルギン酸ナトリウム等のアルギン酸アルカリ金属塩、ジュランガム、キサンタンガム、グアガム、トラガントガム、カラヤガム、ビーガム、アラビアガム等のガム類；ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、シリカゲル、アルミニウムシリカゲル等が挙げられる。
【００３７】
ｐＨ調整剤としては、クエン酸、リンゴ酸、リン酸、酢酸等の有機酸及びその塩類；炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カルシウム、炭酸水素カルシウム、炭酸アンモニウム、炭酸水素アンモニウム、炭酸カリウムナトリウム、炭酸リチウム、尿素、アミノ酸オリゴマー、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、硫酸カルシウム、グリセロリン酸カルシウム、水酸化カルシウム等の無機酸カルシウム塩、乳酸カルシウム、酢酸カルシウム、マロン酸カルシウム、クエン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、グリセリン酸カルシウム、酒石酸カルシウム、フィチン酸カルシウム等の有機酸カルシウム塩等が挙げられる。
【００３８】
防腐剤としては、メチルパラベン、エチルパラベン、ブチルパラベン、イソプロピルパラベン、プロピルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル類、安息香酸ナトリウム等の安息香酸塩、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、フェノキシエタノール、ソルビン酸等が挙げられる。
【００３９】
消炎剤としては、例えば、グリチルリチン酸及びその塩類、グリチルレチン酸及びその塩類、トラネキサム酸、塩化リゾチーム、オウバクエキス、トウキ軟エキス、酢酸ｄｌ−αトコフェロール、ニコチン酸ｄｌ−αトコフェロール、イプシロアミノカプロン酸、アズレンスルホン酸塩、ジヒドロコレステロール、エピジヒドロコレステリン等が挙げられる。
【００４０】
薬効成分としては、アラントイン、酢酸トコフェロール、イソプロピルメチルフェノール、デキストラーゼ、クロロフィル、銅クロロフィルナトリウム、フラボノイド、ムタナーゼ、リゾチーム、アミラーゼ、プロテアーゼ、溶菌酵素、スーパーオキサイドディスムターゼ、イプシロンアミノカプロン酸、アルミニウムアラントイン、アルミニウムクロルヒドロキシアラントイン、ジヒドロコレスタノール、ビサボロール、グリセロフォスフェート、水溶性無機リン酸化合物、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム、フッ化スズ、フッ化カリウム、フッ化ケイ素酸ナトリウム、フッ化アルミニウム、フッ化銀、フッ化水素酸ヘキシルアミン、フッ化水素酸デカノールアミン、フッ化水素酸オクタデセニルアミン等のフッ化物、エデト酸、クエン酸亜鉛、塩化亜鉛、グルコン酸銅、グルコン酸クロルヘキシジン、塩化銅、ポリリン酸塩、ピロリン酸塩、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＢ６、パントテン酸塩等のビタミン類、グリシン、リジン、ヒスチジン等のアミノ酸類、塩化ナトリウム、重曹、乳酸アルミニウム、硝酸カリウム、ザルコシネート、カテキン類等のポリフェノール化合物類、生薬等が挙げられる。
【実施例】
【００４１】
［試験例１］
下記試験により、ハスの抽出物が歯周病原細菌及び齲蝕原性細菌に対して殺菌作用を有することを検証する。
【００４２】
（１）ハス抽出物の製造
乾燥したハス葉１ｋｇを裁断・粉砕し、熱水に２時間浸漬した後、食品用酵母を加えて３日間発酵させ、加温、殺菌後、布フィルターで濾過して濾液を得た。この濾液から、二酸化炭素を抽出溶媒として用いる超臨界抽出法によって、薄い琥珀色でやや粘性の有るハス抽出物５ｍＬを得た。
【００４３】
（２）鶏血藤、熊笹、グレープフルーツ、及びプロポリスの抽出物の製造
ハスの抽出物と同様に、超臨界抽出法によって、鶏血藤、熊笹、グレープフルーツ、及びプロポリスの抽出物を得た。
【００４４】
（３）供試菌株及び培地
口腔内細菌Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  Ｉｎｇｂｒｉｔｔ株（表１中では、Ｓ．ｍと略す。以下同様。）、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｇｏｒｄｏｎｉｉ  ＤＬ−１株（Ｓ．ｇ）、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ  ＡＴＣＣ３９３株（Ｌ．ｃ）、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｓｃｏｓｕｓ  ＡＴＣＣ１５９８７株（Ａ．ｖ）、Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ＡＴＣＣ３３２７７株（Ｐ．ｇ）、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍ  ＡＴＣＣ２５５８６株（Ｆ．ｎ）及びＰｒｅｖｏｔｅｌｌａ  ｎｉｇｒｅｓｃｅｎｓ  ＡＴＣＣ２５２６１株（Ｐ．ｎ）、並びに一般細菌として、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ１０２３１株（Ｓ．ａ）及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＨＢ１０１株（Ｅ．ｃ）を供試した。
【００４５】
上記細菌の培養を、ｂｒａｉｎ  ｈｅａｒｔ  ｉｎｆｕｓｉｏｎ培地（ＢＨＩ；Ｂｅｃｔｏｎ，Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｍｐａｎｙ，ｓｐａｒｋｓ，ＭＤ）に、イーストエクストラクト（５ｍｇ／ｍＬ）、ヘミン（５μＬ／ｍＬ）、及びビタミンＫ１（１μＬ／ｍＬ）を添加した培地（ＢＨＩ・Ｙ・Ｈ・ＶＫ１液体培地）を使用し、口腔内細菌は嫌気条件下（Ｎ２：８０％、Ｈ２：１０％、ＣＯ２：１０％）、３７℃で４８時間培養した後、試験に用いた。
【００４６】
（４）最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定
上記（１）及び（２）で得られた供試抽出液原液を、滅菌リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で２−１４まで２倍段階希釈し、各希釈液１ｍＬ中に上記（３）で調整済みの供試菌株を１００μＬ加えた後、１ｍＬのＢＨＩ・Ｙ・Ｈ・ＶＫ１液体培地に接種して４８時間培養した。発育阻止が認められた抽出液濃度を最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）とした。希釈倍率で示した結果を表１に示す。
【００４７】
【表１】
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【００４８】
ハスの抽出液は、歯周病原細菌、齲蝕原性細菌及び一般細菌のいずれに対しても、８１９２倍希釈液又はそれ以上の希釈液で殺菌効果が得られることがわかる。
これに対し、鶏血藤、熊笹、グレープフルーツ及びプロポリスでは、細菌によって、優れた殺菌効果を示すものもあるが、４〜１６倍希釈程度までしか殺菌効果を示さないものもあることがわかる。
歯周病原細菌であるＦｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍに対しては、ハスの抽出物は、他の抽出液に比べて顕著に高い殺菌効果を示す。
【００４９】
［試験例２］
試験例１（１）で得たハスの抽出物に（２）で得た鶏血藤の抽出物を添加した組成物を用いた下記処方のジェル剤を製造し、歯周病及びインプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）のいずれか一方又は両方を患っている患者（１０名）に一日１〜３回、歯磨き後にジェルを手指で患部に塗布、マッサージすることを、１〜３ヶ月間継続してもらい、歯周病及びインプラント周囲炎いずれか一方又は両方の改善状況を歯科医の外観観察（所見・評価）及び患者の感覚で調査した結果を図１〜１０にグラフ及び表で示す。
尚、被験者として選択された患者１０名はいずれも、一定期間以上の歯科医による基本歯周病治療及び患者本人による歯磨き等の手入れを行っても、歯周病又はインプラント周囲炎の改善が見られないか、現状以上の改善が望めそうにない症例を有していた。
【００５０】
（ジェル剤処方）
ハスの抽出物                          ３重量％
鶏血藤の抽出物                        ３０重量％
グリセリン                            ３０〜５０重量％
クエン酸（２０％水溶液）              ０．１重量％
セルロースガム                        ５〜１０重量％
ステビア                              ０．０１〜０．０５重量％
精製水                                残量                    
合計    １００重量％
【００５１】
図１〜１０における各所見項目の評価基準は次の通りである。
腫膿：
［５］  乳頭及び付着歯肉に及んでいる
［３］  乳頭及び歯肉縁に認められる
［１］  乳頭の一部に認められる
「０」  全く認められない
【００５２】
発赤：
［５］  乳頭及び付着歯肉に及んでいる
［３］  乳頭及び歯肉縁に認められる
［１］  乳頭の一部に認められる
［０］  全く認められない
【００５３】
出血：
［５］  自然に出血している
［３］  指圧で認められる
［１］  指圧でわずかに認められる
［０］  指圧で全く認められない
【００５４】
排膿：
［５］  自然に排膿している
［３］  指圧で認められる
［１］  指圧でわずかに認められる
［０］  指圧で全く認められない
【００５５】
歯肉の色：
［５］  暗紅紫
［３］  暗紅
［１］  鮮紅
［０］  淡紅
【００５６】
動揺：
［５］  唇舌的及び上下に認められる
［３］  唇舌的に強く認められる
［１］  唇舌的にわずかに認められる
［０］  生理的動揺の範囲
尚、患者Ａについては、インプラントを移植しているため、動揺は無かった。
【００５７】
患者の感覚：
［５］  変わらない
［３］  少し良くなった
［１］  引き締まった
［０］  大変良くなった
【００５８】
これまで通常の歯周病治療では、なかなか治療効果が上がらなかったいずれの患者でも、歯周病の症状が大きく改善していることが歯科医の所見・評価として認められた。また、歯科医の所見では評価できない患者本人の感覚からも症状が大きく改善していることがわかる。
【００５９】
患者Ａは、歯周病のみでなく、インプラント周囲炎も伴った症例である。試験開始時のインプラント周囲炎患部の状態、及び試験開始から約３ヶ月後の患部の状態を示す写真を図１１ａ及び図１１ｂに示す。
図１１ａでは、インプラント部分が見えないほどに赤く腫れ、鬱血していた患部が、図１１ｂのように、腫れが治まり、インプラント部分が完全に見えるまでになったことがわかる。
【００６０】
ハスの抽出物と鶏血藤を含む組成物は、歯槽骨を強固にしながら、歯周病原細菌や齲蝕原性細菌を抑制する相乗的な効果が得られ、従来よりも高い歯周病の予防・治療効果、及びインプラント周囲炎の予防・治療効果が期待できる。
【産業上の利用可能性】
【００６１】
本発明の組成物は、歯周病予防・治療に有用である。
本発明の組成物、特にハスの抽出物に鶏血藤を配合した組成物は、インプラント周囲炎（ペリインプラントタイティス）の予防・治療に有用である。
本発明の組成物は、化粧品、特に口腔化粧品の保存剤としても有用である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１ａ】
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【図１１ｂ】
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