(57)【要約】【課題】浸液を長時間保持する技術を提供することを課題とする。【解決手段】液浸系対物レンズを備えた顕微鏡による観察に用いられる浸液保持具２０は、マウス２に固定される固定部２２と、浸液９を保持するための凹部が形成された浸液保持部２１と、を含んでいる。浸液保持部２１の凹部の底面は、カバーガラス２３からなっている。固定部２２には、試料であるマウス２の観察部位を臨む第１の貫通穴が形成されている。浸液保持具２０では、浸液保持部２１は、カバーガラス２３が第１の貫通穴を覆うように、固定部２２と接合または一体に形成されている。【選択図】図２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
液浸系対物レンズを備えた顕微鏡による観察に用いられる浸液保持具であって、
試料の観察部位を臨む第１の貫通穴が形成された、前記試料に固定される固定部と、
底面が透明な平板からなる浸液を保持するための凹部が形成された浸液保持部と、を含み、
前記透明な平板が前記第１の貫通穴を覆うように、前記液浸保持部が前記固定部と接合または一体に形成されている
ことを特徴とする浸液保持具。
【請求項２】
請求項１に記載の浸液保持具と、
前記試料が置かれるステージに設置された、前記浸液保持具を支持する支持部と、を含む
ことを特徴とする観察部位固定装置。
【請求項３】
請求項２に記載の観察部位固定装置において、さらに、
前記固定部と前記試料と前記透明な平板とにより囲まれた空間内の気体を吸引するための吸引部を含み、
前記吸引部は、前記浸液保持具に形成された第２の貫通穴を介して前記空間内の気体を吸引する
ことを特徴とする観察部位固定装置。
【請求項４】
請求項３に記載の観察部位固定装置において、
前記第２の貫通穴は、前記固定部の面であって前記透明な平板と接する面と同一の平面に形成された溝によって構成される
ことを特徴とする観察部位固定装置。
【請求項５】
請求項３に記載の観察部位固定装置において、
前記第２の貫通穴は、前記固定部と前記浸液保持部とを接合するそれぞれの接合面に形成された溝によって構成される
ことを特徴とする観察部位固定装置。
【請求項６】
請求項２乃至請求項５のいずれか１項に記載の観察部位固定装置において、
前記支持部は、
前記ステージに設置される支持部本体と、
前記支持部本体から延出した前記浸液保持具を支持するアーム部と、
前記アーム部を駆動して前記浸液保持具を前記ステージに対して相対的に移動させるための駆動部と、を備える
ことを特徴とする観察部位固定装置。
【請求項７】
請求項２乃至請求項６のいずれか１項に記載の観察部位固定装置と、
前記観察部位固定装置の浸液保持部に保持された浸液に浸される液浸系対物レンズと、
前記試料が置かれるステージと、を含む
ことを特徴とする顕微鏡。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
液浸系対物レンズを備えた顕微鏡で長時間にわたって実験動物を生きたまま観察するために用いられる浸液保持具及び観察部位固定装置、並びに、それらを備えた顕微鏡に関する。
【背景技術】
【０００２】
二光子励起顕微鏡などの多光子励起顕微鏡により、マウスなどの実験動物を生きたまま観察することが可能となり、近年では、数時間以上の長時間にわたって実験動物を生きたまま観察するタイムラプス観察も行われている。このような観察は実験動物を眠らせた状態で行われるのが通常であるが、顕微鏡の視野と焦点深度はごく狭いことから、実験動物の同じ部位を継続して観察するためには、実験動物の呼吸や心拍などによって生じる観察部位の動きを抑える必要がある。
【０００３】
実験動物の観察部位の動きを抑える技術は、例えば、特許文献１に開示されている。特許文献１には、試料表面の動的な挙動を抑えるためのスタビライザを備えた顕微鏡観察システムが開示されている。特許文献１に開示される顕微鏡観察システムは、さらに、スタビライザを試料表面に吸着させるための吸着手段を備えていて、これにより、吸着部位近傍の試料表面の動的な挙動を抑えることができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００５−３３８６３１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ところで、特許文献１には、乾燥系対物レンズにより試料を観察する顕微鏡観察システムが開示されているが、実験動物の観察では、液浸系対物レンズが用いられることも少なくない。
【０００６】
一般に、液浸系対物レンズを用いた観察は、液浸系対物レンズと試料（またはカバーガラス）との間に表面張力によって浸液が保持された状態で行われるが、表面張力によって保持し得る程度の量の浸液は、長時間にわたるタイムラプス観察では、観察期間中に蒸発してしまう。また、スライス標本とは異なり、生きている実験動物の表面形状は平らではないため、蒸発に備えて予め大量の液浸を供給しておくことも難しい。このため、生きている実験動物を長時間にわたってタイムラプス観察する場合には、観察期間中に、観察者が浸液を随時供給しなければならない。また、浸液を供給することによって浸液の温度変化が発生したり物理的に圧力が加えられたりするため、観察している部位が対物レンズの焦点深度から外れることも起こりうる。
以上のような実情を踏まえ、本発明は、浸液を長時間保持することができる浸液保持具、観察部位固定装置、及び、顕微鏡を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の第１の態様は、液浸系対物レンズを備えた顕微鏡による観察に用いられる浸液保持具であって、試料の観察部位を臨む第１の貫通穴が形成された、前記試料に固定される固定部と、底面が透明な平板からなる浸液を保持するための凹部が形成された浸液保持部と、を含み、前記透明な平板が前記第１の貫通穴を覆うように、前記液浸保持部が前記固定部と接合または一体に形成されている浸液保持具を提供する。
【０００８】
本発明の第２の態様は、第１の態様に記載の浸液保持具と、前記試料が置かれるステージに設置された、前記浸液保持具を支持する支持部と、を含む観察部位固定装置を提供する。
【０００９】
本発明の第３の態様は、第２の態様に記載の観察部位固定装置において、さらに、前記固定部と前記試料と前記透明な平板とにより囲まれた空間内の気体を吸引するための吸引部を含み、前記吸引部は、前記浸液保持具に形成された第２の貫通穴を介して前記空間内の気体を吸引する観察部位固定装置を提供する。
【００１０】
本発明の第４の態様は、第３の態様に記載の観察部位固定装置において、前記第２の貫通穴は、前記固定部の面であって前記透明な平板と接する面と同一の平面に形成された溝によって構成される観察部位固定装置を提供する。
【００１１】
本発明の第５の態様は、第３の態様に記載の試料固定装置において、前記第２の貫通穴は、前記固定部と前記浸液保持部とを接合するそれぞれの接合面に形成された溝によって構成される観察部位固定装置を提供する。
【００１２】
本発明の第６の態様は、第２の態様乃至第５の態様のいずれか１つに記載の観察部位固定装置において、前記支持部は、前記ステージに設置される支持部本体と、前記支持部本体から延出した前記浸液保持具を支持するアーム部と、前記アーム部を駆動して前記浸液保持具を前記ステージに対して相対的に移動させるための駆動部と、を備える観察部位固定装置を提供する。
【００１３】
本発明の第７の態様は、第２の態様乃至第６の態様のいずれか１つに記載の観察部位固定装置と、前記観察部位固定装置の浸液保持部に保持された浸液に浸される液浸系対物レンズと、前記試料が置かれるステージとを含む顕微鏡を提供する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、浸液を長時間保持することができる浸液保持具、観察部位固定装置、及び、顕微鏡を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の実施例１に係る顕微鏡の構成を示す図である。
【図２】本発明の実施例１に係る観察部位固定装置の構成を示す図である。
【図３Ａ】本発明の実施例１に係る浸液保持具の断面図である。
【図３Ｂ】図３Ａに示す浸液保持具の一部を拡大した断面図である。
【図４Ａ】本発明の実施例１に係る浸液保持具の変形例の断面図である。
【図４Ｂ】図４Ａに示す浸液保持具の変形例の一部を拡大した断面図である。
【図５】本発明の実施例１に係る浸液保持具の別の変形例の一部を拡大した断面図である。
【図６】本発明の実施例２に係る観察部位固定装置の構成を示す図である。
【図７Ａ】本発明の実施例２に係る浸液保持具の構成を示す図である。
【図７Ｂ】図７Ａに示す浸液保持具のＢＢ断面における断面図である。
【図７Ｃ】図７Ａに示す浸液保持具を矢印Ｃに沿って見た図である。
【図８Ａ】本発明の実施例２に係る浸液保持具の変形例の構成を示す図である。
【図８Ｂ】図８Ａに示す浸液保持具のＢＢ断面における断面図である。
【図８Ｃ】図８Ａに示す浸液保持具を矢印Ｃに沿って見た図である。
【図９】本発明の実施例３に係る観察部位固定装置の構成を示す図である。
【図１０Ａ】浸液保持具の装着位置の一例を示す図である。
【図１０Ｂ】浸液保持具の装着位置の別の一例を示す図である。
【図１０Ｃ】浸液保持具の装着位置のさらに別の一例を示す図である。
【図１１】本発明の実施例４に係る浸液保持具の構成を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【実施例１】
【００１６】
図１は、本実施例に係る顕微鏡の構成を示す図である。図１に示される顕微鏡１は、液浸系対物レンズ４を備えた二光子励起顕微鏡であり、試料である生きたマウス２を眠らせた状態で上方から観察する正立顕微鏡である。顕微鏡１は、マウス２の観察部位の経時的な変化を記録するタイムラプスユニットとして動作可能に構成されている。
【００１７】
顕微鏡１は、生きたマウス２の同じ部位を継続して観察するために、マウス２の観察部位を固定する観察部位固定装置１０を備えている。観察部位固定装置１０は、液浸系対物レンズ４を用いた長時間の観察を可能とするため、マウス２と液浸系対物レンズ４との間の空間を満たす浸液９を保持する役割を担っている。浸液９は、最も一般的には水であるが、使用される浸液は水に限られず、シリコーンオイルなどの他の浸液が用いられても良い。
【００１８】
顕微鏡１は、さらに、マウス２が置かれるステージ３と、液浸系対物レンズ４が装着されるZ方向に移動可能なノーズピース５と、マウス２に照射される励起光を出射するレーザ光源６と、マウス２からの蛍光が結像して得られる蛍光画像を目視するための接眼部７と、蛍光画像の画像データを生成するためにマウス２からの蛍光を検出して電気信号に変換するディテクタ８を備えている。なお、ステージ３は、液浸系対物レンズ４の光軸に直交するＸＹ方向に移動可能に構成されていて、より好ましくは、さらに、液浸系対物レンズ４の光軸と平行なＺ方向にも移動可能に構成されている。なお、顕微鏡１は、図示しないパーソナルコンピュータ（ＰＣ）に接続されても良く、ＰＣによって顕微鏡１の各部の制御や画像データの生成などが行われてもよい。
【００１９】
図２は、本実施例に係る観察部位固定装置の構成を示す図である。図２を参照しながら、顕微鏡１に含まれる観察部位固定装置１０の構成をさらに詳細に説明する。
観察部位固定装置１０は、図２に示されるように、浸液９を保持する浸液保持具２０と、浸液保持具２０を支持する支持部３０を備えている。なお、支持部３０は、マウス２が置かれるステージ３に設置されている。
【００２０】
浸液保持具２０は、さらに、浸液保持部２１と固定部２２を備えている。浸液保持部２１は、浸液９を保持する役割を担っていて、全体として、対物レンズ側に凹面を向けた椀形状を呈している。浸液保持部２１には、浸液９を保持するため、底面がカバーガラス２３からなる凹部が形成されていて、その凹部には少なくとも１ｃｃの浸液９を蓄えることが可能となっている。また、液浸系対物レンズ４の先端を浸液９に浸すことができるように、凹部の内径は液浸系対物レンズ４の先端部の外径よりも大きく形成されている。一方、固定部２２は、マウス２の観察部位を固定する役割を担っていて、マウス２に直接接触して固定されるように構成されている。固定部２２には、マウス２に固定された状態でマウス２の観察部位を臨む貫通穴（第１の貫通穴）が形成されていて、固定部２２は、全体として、底面に貫通穴が設けられた凹面を試料側に向けた椀形状を呈している。マウス２との十分な大きさの接触面を確保してしっかりとマウス２の観察部位を固定するためには、凹面の面積は少なくとも１ｍｍ２以上であることが望ましい。
【００２１】
そして、浸液保持部２１は、カバーガラス２３が貫通穴を覆うように、固定部２２に接合されている。このため、レーザ光源６から出射された励起光Ｌ１は、液浸系対物レンズ４側からマウス２側に向かって透明な平板であるカバーガラス２３を透過してマウス２に照射される。一方、励起光の照射によりマウス２から生じる蛍光Ｌ２は、マウス２側から液浸系対物レンズ４側に向かってカバーガラス２３を透過して接眼部７またはディテクタ８に導かれる。
【００２２】
支持部３０は、ステージ３に設置される支持部本体３１と、支持部本体３１から延出した浸液保持具２０を支持するアーム部３２を備えている。浸液保持具２０が支持部３０によりマウス２に押し付けられた状態で支持部３０を介してステージ３に対して設置されることで、観察部位固定装置１０はマウス２の観察部位を固定することができる。なお、アーム部３２には、浸液保持具２０が取り外し可能に装着されていて、実験動物の大きさや形状に合わせて異なる大きさまたは形状を有する任意の浸液保持具を装着することができる。
【００２３】
図３Ａは、本実施例に係る浸液保持具の断面図である。図３Ｂは、図３Ａに示す浸液保持具の一部を拡大した断面図である。図３Ａ及び図３Ｂを参照しながら、観察部位固定装置１０に含まれる浸液保持具２０の構成をさらに詳細に説明する。
【００２４】
浸液保持部２１は、より詳細には、図３Ａに示されるように、凹部の底面を構成するカバーガラス２３と、凹部の少なくとも側面を構成する浸液保持部本体２４と、カバーガラス２３と浸液保持部本体２４との隙間を塞ぐためのＯリング２５と、Ｏリング２５をカバーガラス２３及び浸液保持部本体２４に押さえつける押さえ部材２６と、から構成されている。
【００２５】
浸液保持部本体２４は、液浸系対物レンズ４の先端を内部に挿入し得るような環状部材であって、浸液保持部本体２４に形成された凹部の底面の一部には、固定部２２に形成されたマウス２の観察部位を臨む貫通穴２９（第１の貫通穴）と略同径の貫通穴が形成されている。浸液保持具２０では、浸液保持部本体２４の凹部の底面上にカバーガラス２３が配置されて、固定部２２に形成された貫通穴２９及び貫通穴２９と略同径の浸液保持部本体２４に形成された貫通穴を覆うことで、固定部２２側の空間と浸液保持部本体２４（浸液保持部２１）側の空間とが分離される。なお、Ｏリング２５及び押さえ部材２６も、浸液保持部本体２４と同様に環状部材である。カバーガラス２３と浸液保持部本体２４との隙間を塞ぐように配置されたＯリング２５は、浸液９が固定部２２側の空間に漏れ出ることを防止するためのものである。図３Ｂに示すように、押さえ部材２６に形成された雄ねじを浸液保持部本体２４の内側面に形成された雌ねじに螺合させて、押さえ部材２６がＯリング２５をカバーガラス２３及び浸液保持部本体２４に押しつけることで、浸液９が固定部２２側の空間に漏れ出ることを確実に防止することができる。
【００２６】
以上のように構成された浸液保持具２０は、カバーガラス２３がマウス２の観察部位に接触するようにマウス２に固定される。浸液保持具２０は、図１及び図２に示されるように、多くの浸液９を安定して浸液保持部２１の凹部に保持することができるため、観察に必要な量の浸液９を長時間保持することができる。従って、浸液保持具２０によれば、観察が長時間に及んだ場合であっても、観察期間中に浸液９を継ぎ足すことなく、液浸系対物レンズ４とカバーガラス２３との間を浸液９で満たしておくことができる。
【００２７】
また、浸液保持具２０を備えた観察部位固定装置１０は、浸液保持具２０がステージ３に設置された支持部３０に支持されているため、浸液保持具２０によってマウス２をステージ３上にしっかりと押さえつけることができる。このため、観察部位固定装置１０によれば、長時間浸液９を保持できるとともに、観察期間中に生じるマウス２の呼吸や心拍などによる観察部位の動きを抑えることができる。
【００２８】
従って、観察部位固定装置１０を備える顕微鏡１によれば、呼吸や心拍などによる観察部位の動きを抑えながら浸液９を長時間保持することができるため、マウス２の同じ部位を長時間継続して高い解像度で観察することができる。このため、数時間以上のわたる長時間のタイムラプス観察を、観察期間中に観察者が浸液９を継ぎ足すことなく行うことが可能であり、観察者の負担を大幅に軽減することができる。また、浸液を供給することによって浸液の温度変化が発生したり物理的に圧力が加えられたりすることで観察している部位が対物レンズの焦点深度から外れてしまう事態の発生を防止することができる。
【００２９】
なお、図３Ａ及び図３Ｂでは、カバーガラス２３が浸液保持部本体２４の凹部の底面上に配置される例を示したが、図４Ａ及び図４Ｂに示すように、浸液保持部本体４４に接合される固定部４２の接合面上に配置されても良い。カバーガラス２３は、貫通穴２９を覆うように配置され、且つ、浸液保持部に形成される凹部の底面を構成すればよい。また、図５に示すように、浸液保持部本体４４と固定部４２は、予め一体に形成されてもよい。これにより、浸液保持部本体４４と固定部４２の接合作業を省略することができる。
【００３０】
また、図３Ａ及び図３Ｂに示される浸液保持具２０と図４Ａ及び図４Ｂに示される浸液保持具４０では、浸液保持部本体と押さえ部材２６が螺合することでカバーガラス２３が固定されている。このような構成は、観察終了後、カバーガラス２３を浸液保持具から容易に取り外して洗浄することができる点で好ましい。なお、カバーガラス２３は、取り外し可能な任意の方法で固定されても良い。また、浸液保持具が使い捨て用に設計されている場合には、カバーガラス２３は浸液保持部本体に接着剤により固定されても良い。
【００３１】
また、以上では、浸液保持具２０の構成要素のうち励起光Ｌ１と蛍光Ｌ２が通過するカバーガラス２３のみが透明な材料によって構成されている例を示したが、浸液保持具２０を構成する他の構成要素も透明な材料によって構成されてもよい。これにより、浸液保持具２０をマウス２に装着した状態であっても、観察部位を固定部２２などを通して目視で確認することができる。このため、浸液保持具２０の装着位置の微調整などの作業が容易になる。
【実施例２】
【００３２】
図６は、本実施例に係る観察部位固定装置の構成を示す図である。本実施例に係る観察部位固定装置５０は、浸液保持具２０の代わりに浸液保持具６０を備えている点、及び、負圧（つまり、大気圧より低い圧力状態）によってマウス２を浸液保持具６０に固定するためのポンプ５１及びチューブ５２を備えている点が、実施例１に係る観察部位固定装置１０と異なっている。また、図示しない本実施例に係る顕微鏡は、観察部位固定装置１０の代わりに観察部位固定装置５０を含む点が、実施例１に係る顕微鏡１と異なっている。その他の点は、顕微鏡１と同様である。
【００３３】
浸液保持具６０は、浸液９を保持するための浸液保持部６１とマウス２の観察部位を固定するための固定部６２を備えていて、カバーガラス２３が浸液保持部６１に形成された凹部の底面を構成する点は、実施例１に係る浸液保持具２０と同様である。
【００３４】
図７Ａは、本実施例に係る浸液保持具の構成を示す図であり、図７Ａ（ａ）に示す浸液保持具の上面図と図７（ｂ）に示す浸液保持具の断面図とを併記したものである。図７Ｂは、図７Ａに示す浸液保持具のＢＢ断面における断面図である。図７Ｃは、図７Ａに示す浸液保持具を矢印Ｃに沿って見た図である。図７Ａから図７Ｃを参照しながら、試料固定装置５０に含まれる浸液保持具６０の構成について詳細に説明する。
【００３５】
図７Ａ及び図７Ｂに示されるように、浸液保持具６０は、カバーガラス２３がＯリング２５及び押さえ部材２６により浸液保持部本体６４に固定されている点は、浸液保持具２０と同様である。浸液保持具６０は、浸液保持具６０がマウス２に装着された状態でマウス２の観察部位を臨む貫通穴６９（第１の貫通穴）に加えて、浸液保持具６０がマウス２に装着された状態で固定部６２とカバーガラス２３とマウス２とにより囲まれる空間と浸液保持具６０の外側面との間を貫通する貫通穴６７（第２の貫通穴）が形成されている点が、浸液保持具２０と異なっている。
【００３６】
貫通穴６７は、図７Ａから図７Ｃに示されるように、固定部６２と浸液保持部本体６４とを接合するそれぞれの接合面に形成された溝によって構成されている。貫通穴６７は、図７Ａ（ａ）において太い破線で示されているように、貫通穴６９を中心に環状に形成された穴６７ａと、貫通穴６９を中心に放射状に形成された穴６７ｂと、穴６７ａと浸液保持具６０の外側面との間を貫通する穴６７ｃと、から構成されている。
【００３７】
チューブ５２は、穴６７ｃにつながっていて、ポンプ５１は、貫通穴６７及びチューブ５２を介して、固定部６２とカバーガラス２３とマウス２とにより囲まれた空間内の気体を吸引する吸引部として機能する。これにより、上述した空間には負圧が発生して、マウス２がカバーガラス２３及び固定部６２に吸着されることで、浸液保持具６０に観察部位が固定される。なお、ポンプ５１の吸引力は、調整可能であることが望ましい。
【００３８】
従って、本実施例に係る観察部位固定装置５０によれば、実施例１に係る観察部位固定装置１０と同様に、長時間浸液９を保持することができるとともに、観察部位固定装置１０に比べて、弱い押圧力でまたは押圧力を付与することなく観察期間中に生じるマウス２の呼吸や心拍などによる観察部位の動きを抑えることができる。このため、マウス２にかかる負担を軽減することができる。
【００３９】
なお、図７Ａから図７Ｃでは、カバーガラス２３が浸液保持部本体６４の凹部の底面上に配置される例を示したが、図８Ａから図８Ｃに示すように、カバーガラス２３は浸液保持部本体７４に接合される固定部７２の接合面上に配置されても良い。この場合、貫通穴７７は、固定部７２の面であってカバーガラス２３と接する面と同一の平面に形成された溝によって構成されていてもよい。そして、その貫通穴７７（第２の貫通穴）は、図８Ａ（ａ）において太い破線で示されているように、貫通穴６７と同様に、貫通穴７９（第１の貫通穴）を中心に環状に形成された穴７７ａと、貫通穴７９を中心に放射状に形成された穴７７ｂと、穴７７ａと浸液保持具７０の外側面との間を貫通する穴７７ｃと、から構成されていてもよい。貫通穴７７は、ポンプ５１が固定部とカバーガラス２３とマウス２とにより囲まれた空間内の気体を吸引できれば、任意の場所に形成することができる。  
【実施例３】
【００４０】
図９は、本実施例に係る観察部位固定装置の構成を示す図である。本実施例に係る観察部位固定装置８０は、支持部３０の代わりに支持部９０を備えている点が、実施例２に係る試料固定装置５０と異なっている。また、図示しない本実施例に係る顕微鏡は、観察部位固定装置１０の代わりに観察部位固定装置８０を含む点が、実施例１に係る顕微鏡１と異なっている。その他の点は、顕微鏡１と同様である。
【００４１】
支持部９０は、支持部本体３１とアーム部３２に加えて、３つの駆動部（駆動部９３、駆動部９４、駆動部９５）を備えている点が、実施例２に係る支持部３０と異なっている。駆動部９３、駆動部９４、駆動部９５は、それぞれ直交する方向にアーム部３２を駆動して、浸液保持具６０をステージ３に対して相対的に移動させる機能を備えている。なお、３つの駆動部は、手動で操作されてもよく、または、電気的に操作されてもよい。
【００４２】
本実施例に係る試料固定装置８０によれば、３つの駆動部を操作してマウス２に対する浸液保持具６０の位置を変化させることで、例えば、図１０Ａ及び図１０Ｂに示されるように、マウス２の任意の部位に浸液保持具６０を装着して固定することができる。また、図１０Ｃに示されるように、マウス２を仰向けにしてマウス２の腹部に浸液保持具６０を装着して固定しても良い。そして、３つの駆動部による浸液保持具６０に移動に合わせてステージ３も移動させることで液浸系対物レンズ４をカバーガラス２３上に位置させることができる。なお、長時間浸液９を保持することができるとともに、弱い押圧力でまたは押圧力を付与することなく観察期間中に生じるマウス２の呼吸や心拍などによる観察部位の動きを抑えることができる点については、実施例２に係る観察部位固定装置５０と同様である。
【００４３】
なお、実施例１では、押圧により試料に浸液保持具を固定する例を、実施例２及び実施例３では、吸着または押圧と吸着の併用により試料に浸液保持具を固定する例を示したが、他の方法によって試料に浸液保持具を固定してもよい。例えば、図１１に示されるように、接着剤１０１により試料であるマウス２に浸液保持具１００を固定してもよい。
【００４４】
上述した各実施例は、発明の理解を容易にするために具体例を示したものであり、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。各実施例に係る浸液保持具、観察部位固定装置及び顕微鏡は、特許請求の範囲により規定される本発明の思想を逸脱しない範囲において、さまざまな変形、変更が可能である。
【符号の説明】
【００４５】
１・・・顕微鏡
２・・・マウス
３・・・ステージ
４・・・液浸系対物レンズ
５・・・ノーズピース
６・・・レーザ光源
７・・・接眼部
８・・・ディテクタ
９・・・浸液
１０、５０、８０・・・観察部位固定装置
２０、４０、６０、７０、１００・・・浸液保持具
２１、６１・・・浸液保持部
２２、４２、６２、７２・・・固定部
２３・・・カバーガラス
２４、４４、６４、７４・・・浸液保持部本体
２５・・・Ｏリング
２６・・・押さえ部材
２９、６７、６９、７７、７９・・・貫通穴
３０、９０・・・支持部
３１・・・支持部本体
３２・・・アーム部
５１・・・ポンプ
５２・・・チューブ
６７ａ、６７ｂ、６７ｃ、７７ａ、７７ｂ、７７ｃ・・・穴
９３、９４、９５・・・駆動部
１０１・・・接着剤
Ｌ１・・・励起光
Ｌ２・・・蛍光
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
2014048549.tif 000008
【図５】
2014048549.tif 000009
【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１０Ｃ】
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【図１１】
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