(57)【要約】【課題】放出システムとしてのポリアセタール薬物抱合体を提供すること。【解決手段】本発明は、構造（Ｉ）を有する１以上の部分で置換されるキャリアを含む抱合体に関し、ここで、各Ｍは、独立して、分子量が１０ｋＤａ以下の修飾物質であって、はリンカーＬＭへのＭの直接的または間接的結合を表し、各ＬＭは、独立して、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンカーであり、これによって、前記修飾物質Ｍは、アミド結合を介して、直接的あるいは間接的にスクシンアミドリンカーに結合し、かつ前記キャリアは、エステル結合を介して、直接的あるいは間接的に各スクシンアミドリンカーに結合する。他の態様では、本発明は、前記抱合体を含む組成物、抱合体の製造方法、癌を含む（これに限定させるものではない）種々の障害の処置における前記抱合体の用途を提供する。2014111657.tif 000090【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書中に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（優先権情報）
本願は、２００３年９月５日に出願された米国特許出願第６０／５００，５７１号に対する優先権を主張し、その出願の全内容は参考として本明細書に援用される。
【０００２】
（政府による資金供与）
本発明は、一部、米国国立健康研究所（ＮＩＨ）の国立研究資源開発センター（ＮＣＲＲ）の承認により援助を受けて（承認番号Ｒ２１−ＲＲ１４２２１およびＴ３２  ＧＭ０７０３５）なされた。したがって、アメリカ合衆国政府は本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
従来、医薬品は経口投与（固形錠剤および液体として）される、または注射可能な低分子から主になるものである。過去３０年にわたって、製剤（すなわち、薬物送達の経路および／または速度を調整し、治療剤を必要とする部位への送達することを可能にする組成物）は、ますます一般的かつ複雑になっている。それにもかかわらず、新しい処置の開発とそれらの投与のメカニズムに関する多くに疑問と課題が依然として取り扱われている
この分野におけるかなりの研究努力は重大な進歩をもたらしてきたが、長年にわたって開発され現在も使用されている薬物送達方法／システムは、まだ、改良を要する特定の問題を示す。たとえば、多くの薬物は、一般的にそれらが体内の所望の標的に到達する前に部分的に分解したりあるいは標的以外の体内組織に蓄積したり、またはその両方が起こるため、限られた、言い換えれば、低下した効力および治療効果しか発揮しない。
【０００４】
したがって、薬物送達システムの分野における目的の１つは、薬物を安定化することのできるシステムによって、体内の特定の標的領域まで無傷で薬剤を送達すること、あるいは生理学的または化学的メカニズムあるいは両方を利用して、治療剤の生体内移送を調整することである。過去１０年にわたって、高分子ミクロスフェア、高分子ミセル、可溶性高分子およびヒドロゲル型材料のような材料が、生体外および生体内での薬物安定性、放出力、標的特異性の強化、全身薬物毒性の低下を効果的にすることを示してきており、したがって、これらは、生物医学的応用、特に種々の製剤および薬物送達機器の構成要素としての用途に、大きな可能性を示している。
【０００５】
したがって、生物医学的分野では、前記問題点を克服あるいは最小限にする、薬学的に有用な修飾物質を含む、低毒性、生分解性、生体適合性高分子抱合体を必要としている。このような高分子抱合体は、治療用および診断用医薬製剤、遺伝子ベクター、医療機器、移植、および他の処置、診断および予防剤を含む数種の適用において用途が発見されている。
【０００６】
生物医学的高分子（たとえば、生理学的条件下で使用される高分子）の設計およびエンジニアリングは、一般的に特定の厳しい要求が求められる。特に、そのような高分子材料は、それらが将来使用される生物学的環境に適合しなければならず、このことはそれらが親水性特性を示すことを意味することが多い。数種の適用において、それらはまた、適切な生分解性（すなわち、それらは分解して低分子量種になる。高分子片は体内あるいは次々に体内で代謝されあるいは排泄される）を実証しなければならない。
【０００７】
生分解性は、通常、骨格鎖に加水分解に不安定なリンクを有する高分子を合成あるいは使用することによって、成し遂げられる。この特長を持つ最もありふれた化学的骨格鎖成分は、エステル類とアミド類である。ごく最近、無水物、オルソエステル、ポリアセタール、ポリケタールおよび他の生分解性骨格鎖成分に関して、新規の高分子が開発されている。骨格鎖構造の加水分解は、そのような高分子では一般的な分解メカニズムである。ポリエーテル類のような他の高分子タイプでは、細胞内あるいは細胞外酸化作用によって分解する。生分解性高分子は天然であっても合成であってもよい。医学的適用および生物医学的研究に普通使用される合成高分子は、ポリエチレングリコール（薬物動態および免疫応答修飾物質）、ポリビニルアルコール（薬物キャリア）、およびポリ（ヒドロキシプロピルメタクリルアミド）（薬物キャリア）が挙げられる。また、天然高分子は生物医学的適用においても使用される。たとえば、デキストラン、ヒドロキシエチルでんぷん、アルブミン、ポリアミノ酸、および部分的に加水分解されたタンパク質は、血漿増量剤から栄養輸液療法に対する放射性医薬品までの範囲にわたる適用における用途が見出される。一般的に、合成高分子は、調整されて、殆どの天然源から得られる材料が提供しうる特性より広い範囲の特性、およびより予測可能なロット間均一性を与えることができる点で、天然材料より大きな利点を提供する。種々の高分子材料を製造する方法は、当業界で周知である。多くの生物医学的適用において、高分子の分子は、薬剤物質、他の修飾物質、またはそれぞれ互いに化学的に結び付ける（たとえば、ゲルの形成）べきである。最終製品のいくつかの特性は、関連品の特徴、たとえば、薬物放出プロファイル、免疫毒性、免疫性、および薬物動態に依る。したがって、結合品（抱合体、ゲル）の生物医学的用途と適合性のある、薬剤物質および他の薬学的に有用な修飾物質と高分子を結合する方法が必要である。もし必要であれば、そのような方法は、さらに、最適な速度での生理学的条件下で、あるいは意図する適用に最適な化学的形態で薬物放出を可能にする。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
（発明の要旨）
本発明は、生分解性、生体適合性で、生体内で殆ど毒性および／またはバイオ接着性を示さない、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンクを介して高分子に共有結合する修飾物質を１以上含む高分子抱合体を開示する。
【０００９】
一態様として、本発明は、１以上の以下の構造を有する部分で置換されるキャリアを含む抱合体であって、該構造は、
【００１０】
【化１８】
2014111657.tif 000002
【００１１】
（ここで、各Ｍは、独立して、分子量が１０ｋＤａ以上の修飾物質であって、
【００１２】
【化１８Ａ】
2014111657.tif 000003
【００１３】
は、リンカーＬＭへのＭの直接的または間接的結合を表し、
各ＬＭは、独立して、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンカーである）で表され、これによって、前記修飾物質Ｍは、アミド結合を介して、直接的あるいは間接的にスクシンアミドリンカーに結合し、かつ前記キャリアは、エステル結合を介して、直接的あるいは間接的に各スクシンアミドリンカーに結合するキャリアを含む抱合体を包含する。
【００１４】
別の態様として、本発明は、前記抱合体を含む組成物、抱合体の製造方法、癌を含む（ただしこれに限定されない）種々の障害の処置における前記抱合体の用途を提供する。
【００１５】
（定義）
本発明のある化合物および特定の官能基の定義を本明細書でさらに詳しく説明する。本発明の目的のために、化学元素は元素周期表、ＣＡＳ版、化学物理便覧、第７５編、内表紙に従って同定され、および特定の官能基は、一般的に底に記載のように定義される。加えて、有機化学の一般原則、と特定の官能部および反応性は、「有機化学」、Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ、サウサリート：１９９９年、に記載され、その全内容は参照により本明細書に組み込まれる。さらに、本明細書に記載された合成方法で種々の保護基を利用することは、当業者によって理解されるであろう。
【００１６】
「保護基」：本明細書で使用される語句「保護基」は、多官能性化合物において、特定の官能基部分、たとえばＯ、ＳまたはＮが一時的にブロックされ、反応が他の反応性部位で選択的に行われることを意味する。好ましい実施態様では、保護基は、高収率で選択的に反応して、予定された反応に対して安定な保護置換基を得；簡単に入手しうる、好ましくは他の官能基を攻撃しない無毒の試薬によって、高収率で選択的に脱離しなければならず；簡単に分離しうる誘導体を形成し（さらに好ましくは、新しい立体形成中心を生成することなく）；そして、機能の追加が最小限で反応部位がさらに増えることを避ける。本明細書で詳しく説明するように、酸素、イオウ、窒素および炭素の保護基が利用されてもよい。たとえば、ある実施形態では、ある例示的な酸素保護基が利用されてもよい。これらの酸素保護基として、メチルエーテル類、置換されたメチルエーテル（たとえば、いくつか名前を挙げると、ＭＯＭ（メトキシメチルエーテル）、ＭＴＭ（メチルチオメチルエーテル）、ＢＯＭ（ベンジルオキシメチルエーテル）、ＰＭＢＭ（ｐ−メトキシベンジルオキシメチルエーテル））、置換されたエチルエーテル類、置換されたベンジルエーテル類、シリルエーテル類（いくつか名前を挙げると、たとえば、ＴＭＳ（トリメチルシリルエーテル）、ＴＥＳ（トリエチルシリルエーテル）、ＴＩＰＳ（トリイソプロピルシリルエーテル）、ＴＢＤＭＳ（ｔ−ブチルジメチルシリルエーテル）、トリベンジルシリルエーテル、ＴＢＤＰＳ（ｔ−ブチルジフェニルシリルエーテル））、エステル類（いくつか名前を挙げると、たとえば、蟻酸エステル、酢酸エステル、ベンジル酸エステル（Ｂｚ）、トリフルオロ酢酸エステル、ジクロロ酢酸エステル）、炭酸エステル、環状アセタール類およびケタール類が挙げられるが、これらに限定されるものではない。ある他の例示的な実施形態では、窒素保護基が利用される。窒素保護基および保護および脱保護方法は、業界で知られている。「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｇｒａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第３編Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．およびＷｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．，Ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ニューヨーク：１９９９年、中に指針が見つかり、その全内容は参照により本明細書に組み込まれる。ある例示的な実施形態において、ＲＮ１およびＲＮ２はそれぞれ水素である。窒素保護基として、いくつか名前を挙げると、カーバメイト類（いくつか名前を挙げるとメチル、エチルおよび置換されたエチルカーバメイト類（たとえばＴｒｏｃ）が含まれる）、アミド類、環状イミド誘導体、Ｎ−アルキルおよびＮ−アリールアミン類、イミン誘導体、およびエナミン誘導体が挙げられるが、しかしこれらに限定されない。他の例示的な保護基が、本明細書に詳細に記載されるが、本発明は、これらの保護基に限定することを意図するものではなく、むしろ本発明においては、種々の他の等価の保護基が、上記基準を使用して容易に同一視され、利用できることは、理解されるであろう。加えて、種々の保護基が「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｇｒａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第３編Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．およびＷｕｔｓ，Ｐ．Ｇ．，Ｅｄｓ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ニューヨーク：１９９９年、中に記載され、その全内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【００１７】
「生体適合性」：本明細書で使用される語句「生体適合性」は、体液、生体細胞または体内組織と接触すると、ごく僅かしか破壊あるいは宿主反応効果を発揮しない化合物を説明するものである。したがって、本明細書で使用される、生体適合性基は、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリールまたはヘテロアリール部分をいい、これらは、上記および明細書で記載した、語句生体適合性の定期の範囲内に入る。本明細書で使用される語句「生体適合」もまた、相互反応が特に望ましい場合を除いて、認識タンパク質、たとえば、自然に発生する抗体、細胞タンパク質、生態系の細胞および他の成分とのごく僅かな相互反応を意味する。したがって、上記効果を起こすことを特に意図されている物質および官能基、たとえば薬物およびプロドラグ、は生体適合性であると考えられる。好ましくは（細胞毒性であることが意図される化合物、たとえば抗癌薬などを除いて）、それらを試験管内で目的とする全身性生体内濃度に類似した濃度で正常細胞に添加し、生体内で、化合物の半減期と同等の時間（たとえば、生体内で投与された化合物の５０％が、除去される／消去されるのに要する時間）の間に１％以下の細胞死の結果を得、生体内でのそれらの投与によって、ごく僅かな、医学的に許容しうる炎症、異物反応、免疫毒性、化学毒性またはその他のそのような悪影響しか引き起こさなければ、化合物は「生体適合性」である。上記文で、語句「正常細胞」は、破壊が意図されない、言い換えれば、試験される化合物によって重大な影響を受けない細胞を言う。
【００１８】
「生分解性」：本明細書で使用される「生分解性」高分子は、生体内で、生物学的調整処理を受けやすい高分子である。本明細書で使用される「生分解性」化合物は、細胞に取り囲まれた時、リソソームまたは他の化学装置、あるいは加水分解によって、細胞上に重大な中毒作用を起こさず、該細胞が再利用あるいは処理することのできる成分に分解されることのできる化合物である。分解断片は、臓器あるいは細胞過剰負荷、または生体内でそのような過剰負荷あるいは他の悪影響によって起こる病理学的プロセスを全くあるいは殆ど誘発しないものが好ましい。生分解プロセスの例として、酵素的および非酵素的加水分解、酸化および還元が挙げられる。種々の抱合体の高分子骨格鎖の非酵素的加水分解の好ましい条件として、たとえば、リソソーム細胞内区画の温度およびｐＨで、生分解性抱合体を水に曝すことが挙げられる。たとえば、本発明のポリアル（ｐｏｌｙａｌ）抱合体のような幾つかの抱合体骨格鎖の生分解は、また、細胞外、たとえば炎症域のような動物体内の低いｐＨ領域、または活性化されたマクロファージや分解促進因子を放出する他の細胞のすぐそばなどでも強化されうる。ある好ましい実施形態では、ｐＨ約７．５での高分子の有効径は、１〜７日間にわたって検出できる程度に変化せず、数週間にわたって、元の高分子径の５０％以内の値を保つ。一方、ｐＨ約５では、高分子は、１〜５日間で検出できる程度に分解し、２週間から数ヶ月の時間枠内で低分子量断片に完全に移行するのが好ましい。このような試験における高分子保存度は、たとえば、サイズ排除ＨＰＬＣによって測定することができる。速い分解が好ましい場合もあるが、一般的には、高分子は細胞による高分子片の代謝または排泄速度を超えない速度で、細胞内で分解するのがより望ましい。好ましい実施形態では、高分子および高分子生分解副産物は、生体適合性である。
【００１９】
「親水性」：語句「親水性」は、高分子の単位上の置換基を言う場合、当該技術分野でのこの語句の一般的な意味と実質的に違いはなく、イオン化しうる、極性または分極性原子、または他に水分子によって溶解しうる化学的部分を意味する。したがって、本明細書で使用される親水性基は、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリールまたはヘテロアリール部分を言い、上記で定義した語句親水性の定義の範囲内である。特定の親水性有機部分の好ましい例として、約１と１２との間の範囲の原子数の鎖を含む脂肪族またはヘテロ脂肪族基、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、アミン、カルボキシル、アミド、カルボキシルエステル、チオエステル、アルデヒド、ニトリル、イソニトリル、ニトロソ、ヒドロキシルアミン、メルカプトアルキル、ヘテロ環、カーバメイト類、カルボン酸類およびこれらの塩、スルホン酸類およびこれらの塩、スルホン酸エステル類、リン酸類およびこれらの塩、リン酸エステル類、ポリグリコールエーテル類、ポリアミン類、ポリカルボキシレート類、ポリエステル類、およびポリチオエステル類が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の好ましい実施形態では、少なくとも１つの高分子単位として、カルボキシル基（ＣＯＯＨ）、アルデヒド基（ＣＨＯ）、メチロール（ＣＨ２ＯＨ）またはグリコール（たとえば、ＣＨＯＨ−ＣＨ２ＯＨまたはＣＨ−（ＣＨ２ＯＨ）２）が挙げられる。
【００２０】
「親水性」：本発明の高分子を言う場合、語句「親水性」は、一般的に、当該技術分野でのこの語句の使い方と違いはなく、前に定義した、親水性官能基を含む高分子を表わす。好ましい実施形態では、親水性高分子は、水溶性高分子である。高分子親水度は、水和エネルギーの測定によって、２つの液相間の検査によって、あるいは公知の疎水度たとえばＣ４またはＣ１８の個体クロマトグラフィーによって、直接測定することができる。
【００２１】
「生体高分子」：本明細書で使用される語句「生体高分子」は、化合物質のクラスに属し、自然に発生したものでも人工的に造られたものでも（たとえば合成または組換え方法による）よく、通常、細胞および体内組織で見出される、分子（たとえば、タンパク質、アミノ酸、ペプチド、ポリヌクレオチド、ヌクレオチド、炭水化物、糖類、脂質、核タンパク質、糖タンパク質、リポタンパク質、ステロイドなど）を言う。生体高分子の例示的なタイプとして、酵素、レセプター、神経伝達物質、ホルモン、サイトカイン、成長因子および化学走化性因子のような細胞応答修飾物質、抗体、ワクチン、ハプテン、毒素、インターフェロン、リボザイム、抗センス剤、プラスミド、ＤＮＡおよびＲＮＡが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２２】
「キャリア」：本明細書で使用される語句キャリアは、どのような低あるいは高分子、生体高分子、粒子、ゲルまたは他の物体または材料でもよく、１以上のスクシンアミドリンカーを有する薬物分子に共有結合で結合している、またはできるものを言う。
【００２３】
「生理学的条件」：本明細書で使用される句「生理学的条件」は、生体内組織の細胞外体液中に発生する見込みのある、化学的（たとえば、ｐＨ、イオン強度）および生化学的（たとえば、酵素濃度）条件の範囲を言う。最も正常な体内組織では、生理学的ｐＨは約７．０から７．４の範囲である。循環血液の血漿および正常な間隙液が、正常な生理学的条件の典型的な例示の代表である。
【００２４】
「多糖類」、「炭水化物」または「オリゴ糖」：語句「多糖類」、「炭水化物」、「オリゴ糖」は、当該技術分野で公知であり、一般的に、化学式：（ＣＨ２Ｏ）ｎ（ここで、一般的にｎ＞２である）を有する物質、およびこれらの誘導体を言う。炭水化物は、ポリヒドロキシアルデヒド類またはポリヒドロキシケトン類、または加水分解、酸化または還元のような単純な化学的変換で変化した物質である。通常、炭水化物は、環状アセタール類またはケタール類（たとえば、グルコースまたは果糖）の形で存在する。これらの環状単位（単糖類）は、互いにつながって、２、３（オリゴ糖類）または５、６（多糖類）の単糖類単位を持つ分子を形成してもよい。単糖類単位の明確に決まった数、タイプおよび位置を持つ炭水化物は、しばしばオリゴ糖と呼ばれ、一方、単糖類単位の数および／または位置がばらばらの分子の混合物からなる炭水化物は、多糖類と呼ばれる。語句「多糖類」、「炭水化物」および「オリゴ糖」は、本明細書では互換的に使用される。多糖類は天然の糖類（たとえば、グルコース、果糖、ガラクトース、マンノース、アラビノース、リボースおよびキシロース）および／または自然発現糖類（たとえば、２’−フルオロリボース、２’−デオキシリボースおよびヘキソース）の誘導体であってもよい。
【００２５】
「低分子」：本明細書で使用される語句「低分子」は、自然に発生したものでも人工的に造られたものでも（たとえば、化学的合成）よく、比較的低分子量の分子を言う。低分子としては、生物学的に活性で、動物、好ましくは哺乳類、さらに好ましくはヒトにおいて、局所または全身作用を生み出すことが好ましい。通常低分子の分子量は、約１５００Ｄａ（１５００ｇ／ｍｏｌ）未満である。ある好ましい実施形態では、低分子は薬物であり、「薬物分子」または「薬物」とも言われる。ある実施形態では、薬物分子のＭＷ（重量平均分子量）は、約１０ｋＤａ以下である。必ずしも必要ではないが、薬物はすでに適切な行政機関や行政体によってその使用が安全で効果があることが確認されているものが好ましい。たとえば、ＦＤＡ、２１Ｃ．Ｆ．Ｒ．§§３３０．５、３３１〜３６１および４４０〜４６０によって列挙されているヒト用薬物；ＦＤＡ、２１Ｃ．Ｆ．Ｒ．§§５００〜５８９によって列挙されている獣医学上の薬物（これらは参照により本明細書に組み込まれる）は、全て、本親水性高分子との用途に適切であると考えられる。
【００２６】
本発明の実践に使用できる薬物分子の分類として、抗癌物質、放射性核物質、ビタミン、抗ＡＩＤＳ物質、抗生物質、免疫抑制剤、抗ウイルス物質、酵素阻害剤、神経毒、オピオイド、睡眠薬、抗ヒスタミン、潤滑剤、トランキライザー、抗けいれん薬、筋弛緩剤および抗パーキンソン病物質、チャンネル遮断薬を含む抗痙性剤および筋肉収縮剤、縮瞳薬および抗コリン作用薬、抗緑内障化合物、抗寄生虫および／または抗原虫化合物、細胞増殖阻害剤および抗癒着分子を含む細胞−細胞外マトリックス相互作用の調節因子、血管拡張剤、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質合成の抑制剤、降圧剤、鎮痛剤、解熱剤、ステロイド系および非ステロイド系抗炎症剤、抗血管形成因子、分泌抑制因子、抗凝血剤および／または抗血栓剤、局所麻酔剤、眼病薬、プロスタグランジン、抗うつ剤、抗精神病物質、嘔吐抑制剤、造影剤が挙げられるが、これらに限定されない。多くの高分子もまた薬物である。
【００２７】
本発明の用途に適する分類および特定の薬物のさらに完全な列挙が、網羅するものではないが、「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ：Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ，Ｐｔｅｎｔｓ，Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」Ａｘｅｌ  ＫｌｅｅｍａｎｎおよびＪｕｒｇｅｎ  Ｅｎｇｅｌ，Ｔｈｉｅｍｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，１９９９年、および「Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ：Ａｎ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｄｒｕｇｓ，ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ」、Ｓｕｓａｎ  Ｂｕｄａｖａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．編，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９９６年、に見出すことができる。これら両書は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００２８】
「薬学的に有用な基または構成要素」：本明細書で使用される語句薬学的に有用な基または構成要素は、本発明の抱合体と結びついた時、ある生物学的または診断的機能、または被験体に投与した時、活性を示すことのできる、生物医学的適用において、抱合体の治療的、診断的または保護的特性を増強することのできる、または安全性、あるいは生分解または排泄を改善できる、または測定可能にできる、化合物あるいはその断片、または化学的部分を言う。適切な薬学的に有用な基または構成要素の例として、親水性／疎水性の修飾物質、薬物動態学的修飾物質、生物学的に活性な修飾物質、検出可能な修飾物質が挙げられる。
【００２９】
「修飾物質」：本明細書で使用される語句修飾物質は、キャリアに共有結合で組入れられた有機、無機または生物有機部分を言う。修飾物質は、低分子でもマクロ分子でもよく、たとえば、ヌクレオチド、化学療法剤、抗バクテリア剤、抗ウイルス剤、免疫調整剤、ホルモンまたはその類縁体、酵素、抑制剤、アルカロイドおよび治療用放射性核物質、治療用放射性核物質（たとえば、α、β、またはポジトロン放射体）など、いかなる化学薬品または医薬品分類に属していてもよい。ある実施形態では、化学療法剤として、トポイソメラーゼＩおよびＩＩ抑制剤、アルキル化剤、アントラサイクリン類、ドキソルビシン、シスプラスチン、カルボプラチン、ビンクリスチン、マトロマイシン、タキソール、カンプトテシン、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、およびダクチノマイシンが挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態では、本発明による修飾物質は、いくつか名前を挙げると、生体分子、低分子、治療剤、医薬的に有益な基または構成要素、マクロ分子、診断ラベル、キレート剤、親水性部分、分散剤、電荷変性剤、粘度変性剤、界面活性剤、凝固剤および凝集剤が挙げられるが、これらに限定されない。修飾物質は、１以上の医薬的機能、たとえば生物学的活性および薬物動態学的修飾を有することができる。薬物動態学的修飾物質として、たとえば、抗体、抗原、レセプターリガンド、親水性、疎水性または帯電した基が挙げられる。生物学的に活性な修飾物質として、たとえば、治療用薬物およびプロドラグ、抗原、免疫調整剤が挙げられる。、検出可能な修飾物質として、放射性、蛍光性、常磁性、超常磁性、強常磁性、Ｘ線調整性、Ｘ線不透明、超音波反射性などの診断ラベル、および入手可能な臨床的または実験室的方法、たとえば、シンチグラフィー、ＮＭＲスペクトル観測、ＭＲＩ、Ｘ線トモグラフィー、ソノトモグラフィー、写真撮影、ラジオイムノアッセイの１つによって検出可能な他の物質が挙げられる。ウイルスおよび非ウイルス遺伝子ベクターもまた修飾物質と考えられる。
【００３０】
「マクロ分子」：本明細書で使用される語句マクロ分子は、自然に発生したものでも人工的に造られたものでも（たとえば、化学合成によって）よく、比較的高い分子量、一般的に１５００ｇ／ｍｏｌｅを超える分子量を有する分子を言う。マクロ分子は、生物学的に活性で、動物、好ましくは哺乳類、さらに好ましくはヒトにおいて生物学的機能を発揮するのが好ましい。マクロ分子の例として、タンパク質、酵素、成長因子、サイトカイン、ペプチド、ポリペプチド、ポリリジン、タンパク質、脂質、高分子電解質、イムノグロブリン、ＤＮＡ、ＲＮＡ、リボザイム、プラスミド、およびレクチンが挙げられる。本発明の目的に照らし、ウイルス、核酸ヘリカルおよびタンパク質結合体（たとえば、ダイマー）のような超分子構造は、マクロ分子であると考えられる。本発明の抱合体と結びつく時、マクロ分子は、前記生分解性、生体適合性抱合体と結びつく前に、化学的に修飾されてもよい。
【００３１】
「診断ラベル」：本明細書で使用される語句診断ラベルは、原子、原子、部分または官能基の基、ナノ結晶、または他の個別の物質組成物の要素であって、生体内または生体外で、当業界で公知の分析方法を使用して検出できるものを言う。本発明の抱合体と結び付けられる時、そのような診断ラベルは、生体内での抱合体のモニタリングを可能にする。あるいはまたは加えて、診断ラベルを含む構造および組成は、生物学的機能または構造をモニターするために使用することができる。診断ラベルの例として、限定されないが、放射、反射、吸収、散乱できる、または他の電磁界または電磁波（たとえば、γ線、Ｘ線、電波、マイクロ波、光）、粒子（たとえば、α粒子、エレクトロン、陽電子、ニュートロン、プロトン）またはたとえば超音波のような他の形での放射線に影響をあたえることのできる一般的な部分における、医療診断的処置で使用できるラベル、たとえば、γ−シンチグラフィーおよびポジトロン放射断層撮影（ＰＥＴ）用放射性アイソトープ（放射性核物質）、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）（たとえば、常磁性原子および超常磁性ナノ結晶）用造影剤、ＣＴ検査法および他のＸ線系画像検査法用の造影剤、超音波系診断的方法（断層撮影法）用剤、中性子活性化（たとえば、ホウ素、ガドリニウム）剤、種々の光学処置用蛍光体が挙げられる。
【００３２】
「グリコール特異的酸化剤の有効量」：本発明で多糖類の酸化開裂において言う時、句グリコール特異的酸化剤の有効量は、多糖類の実質的に全ての炭水化物環の酸化開環をもたらす、グリコール特異的酸化剤の量を意味する。
【００３３】
本明細書で使用される「保護親水性」および「保護有機部分」は、キャリアまたはキャリア抱合体が供される化学反応に干渉しない化学的基を意味する。保護親水性基の例として、カルボキシエステル、アルコキシ基、チオエステル、チオエーテル、ビニル基、ハロアルキル基、Ｆｍｏｃアルコールなどが挙げられる。
【００３４】
「脂肪族」：一般的に、本明細書で使用される語句脂肪族は、飽和および不飽和の直鎖（すなわち分岐状でない）または分岐状の脂肪族炭化水素を含み、これらは１以上の官能基で必要に応じて置換される。当業者によって認識されるように、本明細書において「脂肪族」としては、アルキル、アルケニル、アルキニル部分が挙げられるが、これらに限定されない。したがって、本明細書で使用される語句「アルキル」には、直鎖および分岐状アルキル基が含まれる。同じような約束事が他の一般用語「アルケニル」、「アルキニル」などにも適用される。さらに、本明細書で使用される語句「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」などは、置換されたおよび置換されていない基も包含する。ある実施形態では、本明細書で意図される「低級アルキル」とは、炭素数が約１〜６のアルキル基（置換された、置換されていない、分岐状または分岐していない）を言う。
【００３５】
「アルケニル」：語句アルケニルは、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する炭化水素部分から１個の水素原子の離脱によって誘導された１価の基を表わし、該アルケニル基は、１以上の官能基で、必要に応じて置換される。置換基としては、下記するどのような置換基、すなわち、安定な化合物の形成につながる以下に記載した置換基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。アルケニル基として、たとえば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イルなどが挙げられる。
【００３６】
「アルキニル」：本明細書で使用される語句アルキニルは、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を有する炭化水素部分から１個の水素原子の離脱によって誘導された１価の基を言い、該アルケニル基は、必要に応じて置換される。置換基としては、下記するどのような置換基、すなわち、安定な化合物の形成につながる以下に記載した置換基が挙げられるが、これらに限定されるものではない。例示的なアルキニル基として、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、１−プロピニルなどが挙げられる。
【００３７】
ある実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、約１〜２０個の脂肪族炭素原子を含む。また別の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、約１〜１０個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、約１〜８個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、約１〜６個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、約１〜４個の炭素原子を含む。具体的な脂肪族基として、たとえば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、アリル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル部分などが挙げられるが、これらに限定されない。これらは、また、１以上の置換基を有してもよい。アルケニル基として、たとえば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。例示的なアルキニル基として、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、１−プロピニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
「脂環式」：本明細書で使用される語句脂環式は、脂肪族化合物と環状化合物との特性を組み合わせた化合物を言い、環状またはポリ環状脂肪族炭化水素および架橋されたシクロアルキル化合物が挙げられ、１以上の官能基で必要に応じて置換される。しかしこれらに限定されるものではない。当業者によって認識されるように、本明細書で意図する「脂環式」は、シクロアルキル、シクロアルケニルおよびシクロアルキニル部分を含み、１以上の官能基で必要に応じて置換される。しかしこれらに限定されるものではない。具体的な脂環式基として、たとえば、シクロプロピル、−ＣＨ２−シクロプロピル、シクロブチル、−ＣＨ２−シクロブチル、シクロペンチル、−ＣＨ２−シクロペンチル−ｎ、シクロヘキシル、−ＣＨ２−シクロヘキシル、シクロヘキセニルエチル、シクロヘキサニルエチル、ノルボルニル部分などが上げられるが、これらに限定されない。これらは、また、１以上の置換基を有してもよい。
【００３９】
「シクロアルキル」：本明細書で使用される語句シクロアルキルは、特に３〜７個の、好ましくは３〜１０個の炭素原子を有する基を言う。適切なシクロアルキルとして、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが挙げられ、これらが脂肪族、ヘテロ脂肪族または複素環式部分である場合、必要に応じて置換されるが、これらに限定されない。同じような約束事が他の一般用語「シクロアルケニル」、「シクロアルキニル」などにも適用される。
【００４０】
「ヘテロ脂肪族」：本明細書で使用される語句ヘテロ脂肪族は、主鎖中の１個以上の炭素原子がヘテロ原子で置換されている脂肪族部分を言う。したがって、ヘテロ脂肪族基とは、炭素原子の代わりに、１個以上の、たとえば、酸素、イオウ、窒素、リンまたはケイ素原子を含む脂肪族鎖を言う。ヘテロ脂肪族部部分は、分岐状でもあるいは直線状で分岐していないものでもよい。ある実施形態では、ヘテロ脂肪族部分は、１以上の、脂肪族；ヘテロ脂肪族；脂環式；ヘテロ脂環式；芳香族；ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；アルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアルキルチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＮＯ２；−ＣＮ；−ＣＦ３；−ＣＨ２ＣＦ３；−ＣＨＣｌ２；−ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＮＨ２；−ＣＨ２Ｓ０２ＣＨ３；または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリールまたはアルキルヘテロアリール部分である（しかしこれらに限定されない）である）の（ただしこれらに限定されない）の部分による、該へテロ脂肪族部分上の１個以上の水素原子への独立した置換によって置換されている。一般的に適用される置換基の付加的な例示は、本明細書に記載される実施例において示される特定の実施形態に挙げられている。
【００４１】
「ヘテロ脂環式」、「ヘテロシクロアルキル」または「複素環式」：本明細書で使用される語句ヘテロ脂環式、ヘテロシクロアルキルまたは複素環式は、ヘテロ脂肪族と環状化合物との特性が組合された化合物を言い、本明細書で定義した１以上の官能基で必要に応じて置換される、モルフォリノ、ピロリジニル、フラニル、チオフラニル、ピロリルなどの、飽和および不飽和モノ−またはポリ環状ヘテロ環が含まれるが、これらに限定されない。ある実施形態では、語句「複素環式」は、非芳香族５−、６−、７−または８−員環またはポリ環状基を言い、１個と３個の間の酸素、イオウおよび窒素から独立して選択されるヘテロ原子を有する６員縮合環であって、（ｉ）各５−員環は、０〜２個の二重結合を有し、各６−員環は０〜２個の二重結合を有し、（ｉｉ）前記窒素およびイオウヘテロ原子は酸化されていてもよく、（ｉｉｉ）前記窒素ヘテロ原子は四級化されていてもよく、（ｉｖ）前記複素環式環のどれも縮合してアリールまたはヘテロアリール環を形成してもよいポリ環状環を含む、ビ−またはトリ−環状基が挙げられるが、これに限定されるものではない。ある実施形態では、「ヘテロ脂環式」、「ヘテロシクロアルキル」または「複素環式」は、部分的に不飽和あるいは完全に飽和の３〜１０員環のものを言い、これらは３〜８原子の大きさの単環、および芳香族６員環アリールまたは非芳香族環と縮合した芳香族複素環式基を含んでもよいビ−およびトリ−環式環を含む。例示的なヘテロ環として、ピロリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキサゾリジニル、イソキサゾリジニル、モルフォリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、およびテトラヒドロフリルが挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態では、本明細書で利用され、使用される「置換されたヘテロシクロアルキルまたはヘテロ環」基は、上記で定義したヘテロシクロアルキルまたはヘテロ環基上の１、２または３個の水素原子への、脂肪族；ヘテロ脂肪族；脂環式；ヘテロ脂環式；芳香族、ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；アルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアルキルチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＮＯ２；−ＣＮ；−ＣＦ３；−ＣＨ２ＣＦ３；−ＣＨＣｌ２；−ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＮＨ２；−ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３；またはＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲン、または必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリールまたはアルキルヘテロアリール部分であるが、これらに限定されない）である）（しかしこれらに限定されない）による独立した置換によって置換された基を言う。一般的に適用される置換基の付加的な例示は、本明細書に記載される実施例において示される特定の実施形態に挙げられている。
【００４２】
加えて、前記のおよび明細書に記載の脂環式またはヘテロ脂環式部分のどれも、これに縮合するアリールまたはヘテロアリール部分を含んでもよいことは、理解されるであろう。一般的に適用される置換基の更なる例示は、本明細書に記載される実施例において示される特定の実施形態に挙げられている。
【００４３】
「芳香族部分」：本明細書で使用される語句芳香族部分は、好ましくは３〜１４個の炭素原子を有する、安定な置換されたまたは置換されていない、不飽和モノ−またはポリ環状炭化水素部分であって、芳香族性に関するヒュッケルルールを満足する環を少なくとも１個含む部分を言う。芳香族部分の例として、フェニル、インダニル、インデニル、ナフチル、フェナントリル、およびアントラシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
「複素芳香族部分」：本明細書で使用される語句複素芳香族部分は、好ましくは３〜１４個の炭素原子を有する、安定な置換されたまたは置換されていない、不飽和モノ−複素環式またはポリ複素環式部分であって、芳香族性に関するヒュッケルルールを満足する環を少なくとも１個含む部分を言う。ヘテロ芳香族部分の例として、ピリジル、キノリニル、ジヒドロキノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、ジヒドロキナゾリル、およびテトラヒドロキナゾリルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
本明細書に記載の芳香族およびヘテロ芳香族部分は、脂肪族（たとえばアルキル）またはヘテロ脂肪族（たとえばヘテロアルキル）部分を介して結合していてもよいことは理解されるであろう。したがって、前記部分は、また、−（脂肪族）芳香族、−（ヘテロ脂肪族）芳香族、−（脂肪族）ヘテロ芳香族、−（ヘテロ脂肪族）ヘテロ芳香族、−（アルキル）芳香族、−（ヘテロアルキル）芳香族、−（アルキル）ヘテロ芳香族、および−（ヘテロアルキル）ヘテロ芳香族部分も含む。したがって、本明細書で使用される句「芳香族またはヘテロ芳香族部分」と「芳香族、ヘテロ芳香族、−（アルキル）芳香族、−（ヘテロアルキル）芳香族、−（ヘテロアルキル）ヘテロ芳香族、および−（ヘテロアルキル）ヘテロ芳香族」は、相互に交換可能である。置換基は、安定な化合物の形成になる、先に記載した置換基、すなわち本明細書で記載した脂肪族部分または他の部分で挙げた置換基のどのようなものも含まれるが、これらに限定されない。
【００４６】
「アリール」：本明細書で使用される語句アリールは、脂肪族（たとえばアルキル）またはヘテロ脂肪族（たとえばヘテロアルキル）部分を介して結合するものを除いた前記芳香族部分を言う。本発明のある実施形態では、「アリール」は、芳香族性に関するヒュッケルルールを満足する環を１または２個含む、モノ−またはビ環状炭素環を言い、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４７】
「ヘテロアリール」：本明細書で使用される語句ヘテロアリールは、脂肪族（たとえばアルキル）またはヘテロ脂肪族（たとえばヘテロアルキル）部分を介して結合するものを除いた前記ヘテロ芳香族部分を言う。本発明のある実施形態では、本明細書で使用される語句「ヘテロアリール」は、１個の環原子がＳ、ＯおよびＮから選択される約５個から約１０個の環原子を有する環状  不飽和基であって；０、１、または２個の環原子は、Ｓ、ＯおよびＮから独立して選択される付加的なヘテロ原子であって；残りの環原子は炭素である基であって、該基は、環原子を介して分子の残りと結合している、たとえば、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニルなどが挙げられる。
【００４８】
アリールおよびヘテロアリール部分の置換基として、安定な化合物の形成になる、先に記載した置換基、すなわち本明細書で記載した脂肪族部分または他の部分で挙げた置換基のどのようなものも含まれるが、これらに限定されない。たとえば、アリールおよびヘテロアリール基（ビ環状アリール基を含む）は、置換されていないまたは置換されることができ、該置換として、１以上の下記の部分による、前記環上の１、２または３個の水素原子への独立した置換が含まれる。置換基として、脂肪族；ヘテロ脂肪族；脂環式；ヘテロ脂環式；芳香族、ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；アルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアルキルチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＮＯ２；−ＣＮ；−ＣＦ３；−ＣＨ２ＣＦ３；−ＣＨＣｌ２；−ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＮＨ２；−ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３；またはＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲン、または必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリールまたはアルキルヘテロアリール部分であるが、これらに限定されない）である）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。一般的に適用される置換基の付加的な例示は、本明細書に記載される実施例において示される特定の実施形態に挙げられている。
【００４９】
「アルコキシ」または「アルキルオキシ」：本明細書で使用される語句アルコキシ（またはアルキルオキシ）は、先に提示したアルキル基であって、親分子の部分に酸素原子を介して（「アルコキシ」）結合するものを言う。ある実施形態では、アルキル基は、約１〜２０個の脂肪族炭素原子を含む。ある他の実施形態では、アルキル基は、約１〜１０個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は１〜８個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は１〜６個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は１〜４個の脂肪族炭素原子を含む。アルコキシ基の例示として、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ネオペントキシおよびｎ−ヘキソキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５０】
「アミン」：語句アミンは、構造：−Ｎ（Ｒ）２（ここで、各Ｒは、独立して水素、または脂肪族、ヘテロ脂肪族、芳香族またはヘテロ芳香族部分であり、またＲ基はいっしょになってヘテロ環部分を形成してもよい）を有する基を言う。ある例示では、アミン基は、たとえば、−ＨＮ＋（Ｒ）２または−Ｎ＋（Ｒ）３のように帯電（プロトン化）、または四級化してもよい。
【００５１】
「アルキルアミノ」：本明細書で使用される語句アルキルアミノは、−ＮＨＲ’（ここで、Ｒ’は、本明細書で定義するアルキルである）の構造を持つ基を言う。語句「アミノアルキル」は、ＮＨ２Ｒ’−（ここでＲ’は本明細書で定義するアルキルである）の構造を持つ基を言う。ある実施形態では、アルキル基は、約１〜２０個の脂肪族炭素原子を含む。ある他の実施形態では、アルキル基は約１〜１０個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニルおよびアルキニル基は、約１〜８個の脂肪族炭素原子を含む。他の実施形態では、アルキル基は約１〜６個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は約１〜４個の脂肪族炭素原子を含む。アルキルアミノの例として、メチルアミノ、エチルアミノ、イソプロピルアミノなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
「カルボン酸」：本明細書で使用される語句カルボン酸は、式−ＣＯ２Ｈの基を含む化合物を言う。
【００５３】
「ハロ、ハライドおよびハロゲン」：本明細書で使用される語句ハロ、ハライドおよびハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素から選択される原子を言う。
【００５４】
「メチロール」：本明細書で使用される語句メチロールは、構造−ＣＨ２ＯＨのアルコール基を言う。
【００５５】
「ヒドロキシアルキル」：本明細書で使用される語句ヒドロキシアルキルは、少なくとも１個のＯＨ基を有する、先に定義したアルキル基を言う。
【００５６】
「メルカプトアルキル」：本明細書で使用される語句メルカプトアルキルは、少なくとも１つのＳＨを有する、先に定義したアルキル基を言う。
【００５７】
「アシル」：本明細書で使用される語句アシルは、式Ｃ＝Ｏのカルボニル基を含む基を言う。アシル基の例として、アシルハライド、無水物、チオエステル、アミドおよびカルボキシルエステルが挙げられる。
【００５８】
「炭化水素」：本明細書で使用される語句炭化水素は、水素と炭素とを含むどのような化学的基をも言う。炭化水素は置換されていても非置換であってもよい。炭化水素は、不飽和、飽和、分岐状、分岐していない、環状、ポリ環状、または複素環式であってもよい。具体的な炭化水素として、たとえば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、アリル、ビニル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、エチニル、シクロヘキシル、メトキシ、ジエチルアミノなどが挙げられる。当業者に知られているように、全ての価がどのような置換も作れるよう満足されていなければならない。
【００５９】
「置換された」：本明細書で使用される語句置換されたは、「任意に」という語が前についていてもいなくても、所定の構造における水素ラジカルの特定の置換基による置換を言う。いかなる所定の構造における２以上の位置が特定の基から選択される２以上の置換基で置換される場合、該置換基はどの位置であっても、同じでもまた異なっていてもよい。本明細書で使用される語句「置換された」は、有機化合物の許容されうる置換基全てを含むものである。広い態様において、該許容しうる置換基は、有機化合物の非環状および環状、分岐状および分岐していない、炭素環式および複素環式、芳香族および非芳香族置換基を含む。窒素のようなヘテロ原子は、水素置換基および／またはいかなる本明細書で記載される有機化合物の許容されうる置換基であってヘテロ原子の価を満足する置換基を有してもよい。置換基の例示として、脂肪族；ヘテロ脂肪族；脂環式；ヘテロ脂環式；芳香族；ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；アルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアルキルチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＮＯ２；−ＣＮ；−ＣＦ３；−ＣＨ２ＣＦ３；−ＣＨＣｌ２；−ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ；−ＣＨ２ＮＨ２；−ＣＨ２ＳＯ２ＣＨ３；またはＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲン、または必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリールまたはアルキルヘテロアリール部分であるが、これらに限定されない）である）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。一般的に適用される置換基の付加的な例示は、本明細書に記載される実施例において示される特定の実施形態に挙げられている。
【００６０】
「スクシンアミドリンカー」または「スクシンアミド」：本明細書で使用される語句置換されたは、「スクシンアミドリンカー」または「スクシンアミド」は、他に規定されない限り、以下の構造を有するリンカーを表す：
【００６１】
【化１９】
2014111657.tif 000004
【００６２】
（ここで、ｑは０〜４の整数であり；Ｒ１は、水素または窒素保護基であり；各Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である）である）。ある実施形態では、
【００６３】
【化２０】
2014111657.tif 000005
【００６４】
は、修飾物質Ｍの結合部位を表し、これはアミド結合によってスクシンアミド部分に直接または間接的に結合する。ある実施形態では、
【００６５】
【化２１】
2014111657.tif 000006
【００６６】
はキャリアの結合部位を表し、これはエステル結合によってスクシンアミド部分に直接または間接的にリンクする。
【００６７】
「スクシンイミド」：本明細書で使用される語句スクシンイミドは、他に規定されない限り、以下の構造を有する部分を表す：
【００６８】
【化２２】
2014111657.tif 000007
【００６９】
（ここで、ｑは０〜４の整数であり；各Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である）である）。
【００７０】
以下に本願で使用されるより一般的な語句を挙げる。
【００７１】
「動物」：本明細書で使用される語句動物は、たとえば、哺乳類、鳥類、爬虫類、両生類、魚類、虫類および単細胞など、どのような発展段階のものも含む、ヒトおよび非ヒト動物を言う。細胞培養および生体内組織サンプルは、複数の動物であると考えられる。非ヒト動物は、哺乳類（たとえば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、霊長類、またはブタ）であることが好ましい。動物は、遺伝子組換え動物であってもヒトクローンであってもよい。語句「被験体」は動物を包含する。
【００７２】
「と結びつく」：本明細書で２つの構成要素が互いに「と結びつく」と記載する場合、それらは、直接的または間接的共有結合相互作用によってリンクしていることを言う。結合は共有結合が好ましい。望ましい非共有結合相互作用として、水素結合、ファンデルワールス相互作用、疎水性相互作用、磁気的相互作用、静電的相互作用、またはこれらの組合せが挙げられる。
【００７３】
「有効量」：一般的に活性な剤または薬物送達装置に関して言う場合、語句「有効量」は、所望の生物学的反応を発現させるのに必要な量を言う。当業者には認められているように、剤または装置の有効量は、所望の生物学的終点、送達すべき剤、封入しているマトリックスの組成、標的体内組織などの因子に依って様々である。たとえば、各個を免疫化するために、送達すべき抗原を含む微粒子の有効量は、投与された抗原を持つ生物体の感染を阻止するのに充分な免疫応答を得る結果となる量である。
【００７４】
「直接結合」：本明細書で使用される語句直接結合は、他への１構成要素の共有結合（たとえば、スクシンアミドリンカーに結合する修飾物質）を言う場合、２つの構成要素が共有結合を介して結合していることを意味する。たとえば、本明細書では、スクシンアミドリンカーに結合する修飾物質と記載することによって、スクシンアミドリンカーへの結合点は、アミド結合であることを表す。適切な修飾物質としては、適切なコハク酸リンカーのカルボン酸基と反応する時、アミド結合を形成する、アミン官能基（またはその保護された形体）を含むいかなる修飾物質であってもよい。
【００７５】
「間接的結合」：本明細書で使用される語句間接的結合は、他への１構成要素の共有結合（たとえば、スクシンアミドリンカーに結合する修飾物質）を言う場合、２つの構成要素があるリンキング部分を介して共有結合している（直接共有結合ではなく）ことを意味する。たとえば、本明細書では、スクシンアミドリンカーに結合する修飾物質と記載することによって、スクシンアミドリンカーへの結合点は、アミド結合であることを表す。適切な修飾物質としては、官能基を含む修飾物質であればどのようなものでもよく、それは、アミン基またはその保護形を含む化学的部分で「キャップ」されていてもよく、アミンでキャップされた修飾物質は、適切なコハク酸リンカーのカルボン酸基と反応すれば、アミド結合を形成する。
【００７６】
「天然アミノアシル残基」：本明細書で使用される語句天然アミノアシル残基は、一般的などのようなもの、天然起源のタンパク質、すなわちグリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、リジン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、システイン（Ｃｙｓ）およびメチオニン（Ｍｅｔ）で見出される天然起源のＬ−アミノ酸を言う。
【００７７】
「非天然アミノアシル残基」：本明細書で使用される語句非天然アミノアシル残基は天然アミノ酸ではないいかなるアミノ酸も言う。これには、たとえば、α−、β−、ω−、Ｄ−、Ｌ−アミノアシル残基および下記一般式の化合物が含まれる。
【００７８】
【化２３】
2014111657.tif 000008
【００７９】
（ここで、側鎖Ｒは、天然に存在するアミノ酸側鎖以外の鎖である）。
【００８０】
「アミノアシル」：さらに一般的に、本明細書で使用される語句アミノアシルは、天然アミノ酸および非天然アミノ酸を包含する。
【００８１】
「ＰＨＦ」は、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルムアルデヒド）を言う。
【００８２】
「ＣＰＴ」は、カンプトテシンを言う。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する。
（項目１）
以下の構造：
【化１】
2014111657.tif 000009
を有する１以上の部分で置換されるキャリアを含む抱合体であって、
ここで、各Ｍは、独立して、１０ｋＤａ以下の分子量を有する修飾物質であり；
【化１Ａ】
2014111657.tif 000010
は、リンカーＬＭに対するＭの直接的結合または間接的結合を表し、
各ＬＭは、独立して、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンカーであり、これによって、該修飾物質Ｍは、アミド結合によって、直接的または間接的に該スクシンアミドリンカーに結合し、そして該キャリアは、エステル結合によって、直接的または間接的に各スクシンアミドリンカーに結合する、抱合体。
（項目２）
各ＬＭは、独立して、以下の構造：
【化２】
2014111657.tif 000011
を有する部分を含み、
ここで、
【化３】
2014111657.tif 000012
は、前記修飾物質Ｍに対する結合部位を表し；
【化４】
2014111657.tif 000013
は、前記キャリアに対する結合部位を表し；ｑは、０から４の整数であり；Ｒ１は、水素、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１Ａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１Ａ、−ＳＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａ、または脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分（ここで、各Ｒ１Ａは、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリールである）であり；各Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−である（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である））、項目１に記載の抱合体。
（項目３）
Ｒ１が、水素またはアルキル、アルケニル、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１Ａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１Ａ、−ＳＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａ（ここで、各Ｒ１Ａは、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリールまたはヘテロアリールである）である、項目２に記載の抱合体。
（項目４）
Ｒ１が水素である、項目３に記載の抱合体。
（項目５）
各Ｒ２が水素である、項目２に記載の抱合体。
（項目６）
前記キャリアが、マクロ分子、可溶性高分子、ナノ粒子、ゲル、リポソーム、ミセル、縫合糸または移植片である、項目１に記載の抱合体。
（項目７）
前記キャリアがポリアルである、項目６に記載の抱合体。
（項目８）
前記ポリアルが、以下の構造：
【化５】
2014111657.tif 000014
を有し、
ここで、ｎ個のかっこで囲まれた各構造に関して、Ｒ１およびＲ２のうちの一方は水素であり、他方は生体適合性基であり、そしてＣ１に共有結合する炭素原子を含み；Ｒｘは、Ｃ２に共有結合する炭素原子を含み；ｎは整数であり；各Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、生体適合性基であり、該基は、独立して、水素または有機部分であり；各かっこで囲まれた構造ｎに関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６の少なくとも１つはエステル結合によってスクシンアミドとカップリングするのに適切な官能基を有する、項目７に記載の抱合体。
（項目９）
前記ポリアルが、以下の構造：
【化６】
2014111657.tif 000015
を有し、
ここで、各Ｒ１およびＲ２は、生体適合性基であり、そしてＣ１に共有結合する炭素原子を含み；Ｒｘは、Ｃ２に共有結合する炭素原子を含み；ｎは整数であり；各Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、生体適合性基であり、該基は、独立して、水素または有機部分であり；各かっこで囲まれた構造ｎに関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６の少なくとも１つはエステル結合を介してスクシンアミドとカップリングするのに適切な官能基を含む、項目７に記載の抱合体。
（項目１０）
前記キャリアが、以下の構造：
【化７】
2014111657.tif 000016
を有する、項目７に記載の抱合体。
（項目１１）
前記修飾物質が、生体分子、低分子、有機分子または無機分子、治療剤、微粒子、薬学的に有用な基または物質、マクロ分子、診断ラベル、キレート剤、挿入剤、親水性部分、分散剤、電荷変性剤、粘度変性剤、界面活性剤、凝固剤または凝集剤である、項目１に記載の抱合体。
（項目１２）
前記修飾物質が、化学療法部分である、項目１１に記載の抱合体。
（項目１３）
前記修飾物質が、カンプトテシン（ＣＰＴ）またはタキソールである、項目１１に記載の抱合体。
（項目１４）
前記修飾物質が、アミド結合の形成によって、必要に応じて置換されるコハク酸と共有結合に適切な官能基を含むように化学的に修飾され；コハク酸が、エステル結合によって前記キャリアと抱合される、項目１１に記載の抱合体。
（項目１５）
以下の構造：
【化８】
2014111657.tif 000017
を有する、項目１４に記載の抱合体であって、
ここで、前記キャリアはポリアルであり；各Ｍは、独立して、修飾物質であり；ｐは１−１２の整数であり；ｐは１−４の整数であり；ｔは、キャリアに抱合する修飾物質の数を指定する整数であり；Ｒ１は、水素、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１Ａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１Ａ、−ＳＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａまたは脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分（各Ｒ１Ａは、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリールである）であり；各ＲおよびＲ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１である（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−である（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２、ＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である））、項目１４に記載の抱合体。
（項目１６）
ｐが１である、項目１５に記載の抱合体。
（項目１７）
ｐが１であり、Ｒが水素である、項目１５に記載の抱合体。
（項目１８）
各ＭがＣＰＴまたはタキソールである、項目１５に記載の抱合体。
（項目１９）
ｐが１であり、ＲおよびＲ１がそれぞれ、水素であり、各ＭがＣＰＴまたはタキソールである、項目１５に記載の抱合体。
（項目２０）
以下の構造：
【化９】
2014111657.tif 000018
を有する１以上の部分で置換されるキャリアを含む抱合体を調製する方法であって、
ここで、各Ｍは、独立して、修飾物質であり、
【化９Ａ】
2014111657.tif 000019
は、リンカーＬＭに対するＭの直接的結合または間接的結合を表し、そして
各ＬＭは、独立して、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンカーであり、これによって、該修飾物質Ｍは、アミド結合を介して、直接的または間接的にスクシンアミドリンカーに結合し、かつ前記キャリアは、エステル結合を介して、直接的または間接的に各スクシンアミドリンカーに結合し、
該方法は、以下の工程：
キャリアを提供する工程；
１以上の修飾物質を提供する工程；
前記キャリアを、以下の構造：
【化１０】
2014111657.tif 000020
を有する、必要に応じて置換されるコハク酸無水物と、適切な条件下で反応させて、以下の構造：
【化１１】
2014111657.tif 000021
を有するスクシニル化キャリアまたはその塩を形成する工程であって、
ここで、ｑは、０−４の整数であり；各Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１である（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である）である）、
ここで、ｓは該キャリア上のスクシニル部分の数を表す、工程；ならびに
該スクシニル化キャリアを１以上の修飾物質部分（Ｍ）と反応させ、それによって、少なくとも１つの修飾物質部分が、直接的または第２リンカーを介して間接的に、該キャリアに存在するスクシニル部分とともにアミド結合を形成し、
それによって、以下の構造：
【化１２】
2014111657.tif 000022
を有する抱合体（ここで、Ｒ２およびｑは上記のとおりであり；
【化１２Ａ】
2014111657.tif 000023
は、スクシンアミドリンカーへのＭの直接的または間接的結合を表し；ｔは、ｔ≦ｓとなるような該キャリアに抱合する修飾物質部分の数を表す整数である）を生成する、工程
を包含する、方法。
（項目２１）
各Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２Ａまたは−ＺＲ２Ａである（ここで、Ｚは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ２Ｂである（ここで、各Ｒ２ＡおよびＲ２Ｂは、独立して、水素、またはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリールまたはヘテロアリール部分である））、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
各Ｒ２は、独立して、水素またはアルキルである、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記スクシニル化キャリアをカップリングする工程において、該キャリア上のスクシンアミド酸部位の一部が未反応のままである、項目２０に記載の方法。
（項目２４）
前記キャリアは、生分解性の生体適合性ポリアセタールであって、該ポリアセタール繰返し構造単位の少なくとも一部が、以下の化学構造：
【化１３】
2014111657.tif 000024
を有し、
ここで、ｎ個のかっこで囲まれた各構造に関し、Ｒ１およびＲ２の一方は水素であり、他方は生体適合性基であり、そしてＣ１に共有結合する炭素原子を含み；Ｒｘは、Ｃ２に共有結合する炭素原子を含み；ｎは整数であり；各Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、生体適合性基であり、該基は、独立して、水素または有機部分であり；各かっこで囲まれた構造ｎに関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６の少なくとも１つはエステル結合を介してスクシンアミドとカップリングするのに適切な官能基を有する、項目２０に記載の方法。
（項目２５）
前記キャリアが、生分解性の生体適合性ポリケタールであり、該ポリケタール繰返し構造単位の少なくとも一部が、以下の化学構造：
【化１４】
2014111657.tif 000025
を有し、
ここで、各Ｒ１およびＲ２は、生体適合性基であり、そしてＣ１に共有結合する炭素原子を含み；Ｒｘは、Ｃ２に共有結合する炭素原子を含み；ｎは整数であり；各Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、生体適合性基であり、そして、独立して、水素または有機部分であり；各かっこで囲まれた構造ｎに関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６の少なくとも１つはエステル結合を介してスクシンアミドとカップリングするのに適切な官能基を含む、項目２０に記載の方法。
（項目２６）
前記官能基がヒドロキシル部分である、項目２４または２５に記載の方法。
（項目２７）
前記キャリアがＰＨＦである、項目２０に記載の方法。
（項目２８）
少なくとも１つのＭが、ＣＰＴまたはタキソールを含む、項目２０に記載の方法。
（項目２９）
各ＭがＣＰＴまたはタキソールを含む、項目２０に記載の方法。
（項目３０）
ＣＰＴまたはタキソールが、グリシン部分を介してスクシンアミドリンカーに間接的に結合される、項目２８または２９に記載の方法。
（項目３１）
項目１に記載の抱合体と、薬学的に適切なキャリアまたは希釈剤とを含む、組成物。
（項目３２）
項目１に記載の抱合体を含む組成物であって、少なくとも１つのＭがＣＰＴまたはタキソールを含み、該抱合体が有効量の治療剤と結びつき、該治療剤が、一定の期間にわたる抱合体マトリックスの分解または該マトリックスの外部への治療剤の拡散により該抱合体マトリックスから放出されたものに取り込まれる、組成物。
（項目３３）
項目１に記載の抱合体を含む組成物であって、少なくとも１つのＭがＣＰＴまたはタキソールを含む、組成物。
（項目３４）
項目１に記載の抱合体を含む組成物であって、各ＭがＣＰＴまたはタキソールを含む、組成物。
（項目３５）
ＣＰＴまたはタキソールが、グリシン部分を介してスクシンアミドリンカーに間接的に結合する、項目３４または３５に記載の組成物。
（項目３６）
前記組成物が、式（Ｉ）：
【化１５】
2014111657.tif 000026
を有するＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体を含み、
ここで、ｎ、ｋおよびｍは、それぞれ、１０と３００との間の整数、１と２０の間の整数および０と３００との間の整数である、項目３２に記載の組成物。
（項目３７）
前記組成物が、式（ＩＩ）：
【化１６】
2014111657.tif 000027
を有するＰＨＦ−タキソール抱合体を含み、
ここで、ｎ、ｋおよびｍは、それぞれ、１０と３００との間の整数、１と２０の間の整数および０と３００との間の整数である、項目３２に記載の組成物。
（項目３８）
疾患または障害を処置する方法であって、
以下の構造：
【化１７】
2014111657.tif 000028
を有する１以上の部分で置換されるキャリアを含む抱合体の有効量を、処置を必要とする被験体に投与する工程であって、
ここで、各Ｍは、独立して、分子量が１０ｋＤａ以上の修飾物質であって、
【化１７Ａ】
2014111657.tif 000029
は、リンカーＬＭへのＭの直接的または間接的結合を表し、
各ＬＭは、独立して、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンカーであり、これによって、該修飾物質Ｍは、アミド結合を介して、直接的または間接的にスクシンアミドリンカーに結合し、かつ前記キャリアは、エステル結合を介して、直接的または間接的に各スクシンアミドリンカーに結合するキャリアを含み、
ここで、該修飾物質は、該疾患または障害の処置に適切な治療剤であり；該修飾物質は、二段階プロセスによって抱合体から放出される、方法。
（項目３９）
前記修飾物質が、送達の所望の部位における前記抱合体の移植によって局所送達される、項目３８に記載の方法。
（項目４０）
前記修飾物質が、ビタミン、抗ＡＩＤＳ物質、抗癌物質、放射性核物質、抗生物質、免疫抑制剤、抗ウイルス物質、酵素阻害剤、神経毒、オピオイド、睡眠薬、抗ヒスタミン、潤滑剤、トランキライザー、抗痙攣薬、筋弛緩剤および抗パーキンソン病物質、チャンネル遮断薬を含む抗痙性剤および筋肉収縮剤、縮瞳薬および抗コリン作用薬、抗緑内障化合物、抗抗寄生虫および／または抗原虫化合物、細胞増殖阻害剤および抗癒着分子を含む細胞−細胞外マトリックス相互作用の調節因子、血管拡張剤、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質合成の抑制剤、降圧剤、鎮痛剤、解熱剤、ステロイド系および非ステロイド系抗炎症剤、抗血管形成因子、分泌抑制因子、抗凝血剤および／または抗血栓剤、局所麻酔剤、眼病薬、プロスタグランジン、抗うつ剤、抗精神病物質、嘔吐抑制剤、および造影剤からなる群より選択される、項目３８に記載の方法。
（項目４１）
少なくとも１つの修飾物質がＣＰＴまたはタキソールである、項目３８に記載の方法。
（項目４２）
各修飾物質がＣＰＴまたはタキソールである、項目３８に記載の方法。
（項目４３）
ビタミン、抗ＡＩＤＳ物質、抗癌物質、放射性核物質、抗生物質、免疫抑制剤、抗ウイルス物質、酵素阻害剤、神経毒、オピオイド、睡眠薬、抗ヒスタミン、潤滑剤、トランキライザー、抗けいれん薬、筋弛緩剤および抗パーキンソン病物質、チャンネル遮断薬を含む抗痙性剤および筋肉収縮剤、縮瞳薬および抗コリン作用薬、抗緑内障化合物、抗寄生虫および／または抗原虫化合物、細胞増殖阻害剤および抗癒着分子を含む細胞−細胞外マトリックス相互作用の調節因子、血管拡張剤、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質合成の抑制剤、降圧剤、鎮痛剤、解熱剤、ステロイド系および非ステロイド系抗炎症剤、抗血管形成因子、分泌抑制因子、抗凝血剤および／または抗血栓剤、局所麻酔剤、眼病薬、プロスタグランジン、抗うつ剤、抗精神病物質、嘔吐抑制剤、造影剤およびこれらの組み合わせからなる群より選択される少なくとも１つの追加の生物学的に活性な化合物を、前記抱合体とともに投与する工程をさらに包含する、項目３８に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】図１は、３７℃でのラット血漿中のＰＨＦ−ＣＰＴからの例示的なプロドラグ放出実験を示す。挿入部：ＰＨＦ−ＣＰＴ動態のログ線形化。２つの独立した実験の平均値、全ポイントＳＤ＜平均値の１０％、ｐ＜０．０５
【図２】図２は、ＬＳ１７４ｔ異種移植片を有するヌードマウスにおける例示的な腫瘍サイズ動特性検査を示す。矢印：薬物注射（ｑｗｘ３）。最小抱合体投与であっても、イリノテカンコントロールより活性であることに注意。統計値：ｎ＝１０／グループ、平均の２５％以内の標準偏差；図には明らかに示されていない。
【図３】図３は、ＬＳ１７４ｔ異種移植片を有する生存動物における腫瘍体積動特性を示す。ｎ＝１０／グループ、イリノテカンおよびＰＨＦ−ＣＰＴは等用量（ＣＰＴで１６０ｎｍ／ｋｇ）。
【図４】図４は、図３の腫瘍サイズ動特性検査に対応する例示的な生存動物検査を示す。
【図５】図５は、ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体（１１１Ｉｎ−ＤＴＰＡで標識されたＰＨＦ骨格鎖と３Ｈで標識されたＣＰＴ）の例示的な生動態実験を示す。
【図６】図６は、二重標識されたＰＨＦ−ＣＰＴのＩＶ投与から２４時間後のキャリア高分子（１１１Ｉｎ）とＣＰＴ（３Ｈ）の例示的な生体内分布実験を示す。異種移植片：ＨＴ２９、０．１〜０．１５ｍＬ腫瘍；  ｎ＝６／グループ
【図７】図７は、ＰＨＦ−ＣＰＴの投与から２４時間後の腫瘍体内組織におけるＣＰＴの例示的な微細分布実験を示す。同じ領域のＣＰＴ蛍光強度（左）および位相コントラスト（右）画像。汚れていない非固定１５μｍスライス。フィールド：８０×ｌ３０μｍ。
【図８】図８は、ＣＰＴとＰＨＦ＝ＣＰＴとの間の体内組織分布１グラム当たりの例示的な比較％用量を示す。ヌードマウス（ｎ＝６）においてＨＴ２９異種移植片、１ｋｇ当たり２０ｍｇのＣＰＴをＩＶ投与、注射後４８時間，％用量／ｇ体内組織。フレキシマー−ＣＰＴを有する循環において、フレキシマー５Ｘ用量で腫瘍中２６ＸレベルのＣＰＴ。
【発明を実施するための形態】
【００８４】
（本発明の特定の好ましい実施形態の詳細な説明）
本発明の好ましい実施形態をさらに詳しく説明し、請求の範囲で指摘する。本発明の特定の実施形態は説明のために示されるものであり、発明の限定のためにあるものではないことは理解されるであろう。本発明の本質的な特徴は、本発明の精神および範囲を逸脱しなければ、種々の実施形態で使用されてよい。
【００８５】
一態様において、生物医学的適用に用いられる、非生体付着性、全生分解性、可溶性高分子抱合体を取り扱う必要性のために、本発明は、新規なキャリア抱合体を提供し、これによって、キャリアが、必要に応じて置換されるモノスクシンアミド含有リンクを介して、低／高（生）分子または他の有機（無機）部分（すなわち修飾物質）の共有結合で、化学的に修飾される。
【００８６】
したがって、ある実施形態では、本発明は、１以上の以下の構造を有する部分で置換されるキャリアを含む抱合体であって、該構造は、
【００８７】
【化２４】
2014111657.tif 000030
【００８８】
（ここで、各Ｍは、独立して、修飾物質であって、
【００８９】
【化２４Ａ】
2014111657.tif 000031
【００９０】
は、リンカーＬＭへのＭの直接、間接的結合を表し、各ＬＭは、独立して、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンカーである）で表され、これによって、前記修飾物質Ｍは、アミド結合によって、直接的あるいは間接的にスクシンアミドリンカーに結合し、かつ前記キャリアは、エステル結合によって、直接的あるいは間接的に各スクシンアミドリンカーに結合するキャリアを含む抱合体を提供する。
【００９１】
ある実施形態では、各ＬＭは、独立して、構造：
【００９２】
【化２５】
2014111657.tif 000032
【００９３】
（ここで、
【００９４】
【化２６】
2014111657.tif 000033
【００９５】
は、修飾物質Ｍの結合部位を表し；
【００９６】
【化２７】
2014111657.tif 000034
【００９７】
は、キャリアの結合部位を表し；ｑは、０から４の整数であり；Ｒ１は、水素、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１Ａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１Ａ、−ＳＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａ、または脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分（ここで、各Ｒ１Ａは、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリールである）であり；各Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である）である）である）で表される部分を含む。
【００９８】
ある実施形態では、Ｒ１は、水素またはアルキル、アルケニル、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１Ａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１Ａ、−ＳＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａ；（ここで、各Ｒ１Ａは、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１Ｂ、−ＧＲ１Ｇ（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ１Ｇ（各Ｒ１ＢおよびＲ１Ｇは、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリールまたはヘテロアリールである）である）である。ある実施形態では、Ｒ１は、水素である。
【００９９】
ある実施形態では、各Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２Ａまたは−ＺＲ２Ａ（ここで、Ｚは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ２Ｂ（ここで、各Ｒ２ＡおよびＲ２Ｂは、独立して、水素、またはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリールまたはヘテロアリール部分である）である）である。ある実施形態では、各Ｒ２は水素である。ある実施形態では、１以上のＲ２は、Ｃ１−１０アルキルである。ある実施形態では、１以上のＲ２は低級アルキルである。ある実施形態では、１以上のＲ２は疎水性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２は、親水性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２は、アニオン性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２はカチオン性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２は、レセプターリガンドである。
【０１００】
ある実施形態では、本発明の抱合体は、以下の一般構造を有する：
【０１０１】
【化２８】
2014111657.tif 000035
【０１０２】
（１）キャリア
（ここで、Ｒ２およびｑは先に定義したとおりであり、
【０１０３】
【化２８Ａ】
2014111657.tif 000036
【０１０４】
はスクシンアミドリンカーへのＭの直接的または間接的結合を表し；ｔは、キャリアに抱合する修飾物質の数を指定する整数である。）
そのような抱合体は、下記スキーム１に示されるように、修飾物質部分（Ｍ）の二段階放出を特徴としている。
【０１０５】
（スキーム１）
【０１０６】
【化２９】
2014111657.tif 000037
【０１０７】
二段階放出は、エステル結合の開裂（キャリア−ＯＨの放出を伴う）および同時にアミド側でＭ−スクシンイミドの形成によって進み、次いで更にＭ−スクシンイミド部分が加水分解（Ｍの放出を伴う）される。放出過程で、フェーズ１および／またはフェーズ２で副生物が形成されてもよい。フェーズ１で形成されてもよい副生物として、たとえば、
【０１０８】
【化３０】
2014111657.tif 000038
【０１０９】
（ここで、
【０１１０】
【化３０Ａ】
2014111657.tif 000039
【０１１１】
はＭの直接的または間接的結合を表す）が挙げられる。同様に、フェーズ１で形成されてもよい副生物として、
【０１１２】
【化３１】
2014111657.tif 000040
【０１１３】
（ここで、
【０１１４】
【化３１Ａ】
2014111657.tif 000041
【０１１５】
は、水素（直接結合の場合）または第二リンカー（間接的結合の場合）である。）
一態様では、本発明は、１以上の薬物部分（たとえば、ＭＷが１０ｋＤａ以下）が、必要に応じて置換されるスクシンアミドリンカーを介して、共有結合でキャリアに直接または間接的に結合する薬物−キャリア抱合体も包含する。
【０１１６】
上記したように、このようなシステムは、下記スキーム２で示すように、薬物部分の二段階放出を特徴としている。
【０１１７】
（スキーム２）
【０１１８】
【化３２】
2014111657.tif 000042
【０１１９】
上記したように、この過程においても副生物が形成されてよい。
【０１２０】
二段階薬物放出を起こさなかった、キャリア側９にアミド基を有するスクシンアミドエステルリンカーを使用する試みがなされている。本発明では、スクシンアミドエステルを、反対側のカルボキシルがアミン含有修飾物質（たとえば薬物または薬物誘導体）を持つアミド結合を形成しつつ、エステルがキャリア側で形成されるように方向づける。
【０１２１】
ある実施形態では、本発明の二段階薬物放出システムを薬物分子（すなわち修飾物質）に適用して、新規な薬物動態を持ち毒性が軽減された、可溶性、標的移行可能性マクロ分子生成法の工学的技術を可能にする。ある実施形態では、本発明のシステムは、肝ミクロソームＰ４５０錯体による前代謝を必要とすることなく、新油性プロドラグ（たとえば安定化されたラクトン環を有するＣＰＴプロドラグ）を放出し、次いで、活性な薬剤物質を局所的（細胞内および細胞外で）に放出する、親水性薬物−キャリア抱合体の組み立ても含む。
【０１２２】
本発明の二段階放出システムを薬物に適用した場合の潜在的利点として次の点が挙げられる。（１）たとえば静脈内に投与することができる、水溶性薬物−キャリア抱合体の製造の能力。（２）中間プロドラグ（ＩＩＩ）を肝臓内でよりむしろ「部位上」で活性化するため、局所投与および標的化を可能にする［出願人は、すでに薬物としてＣＰＴを用いたこの実施形態を例示している。たとえばイリノテカンのような他のＣＰＴプロドラグと違って、該中間ＣＰＴプロドラグは、確かに「部位上」で活性化させる］。（３）本発明の方法は、安定化された形（薬物−スクシンイミド中間体の形）でのある薬物の放出（ＣＰＴのケースのように、ラクトン−安定化された形での放出）を可能にし、これは、体内組織におけるプロドラグ体積および尿への再分布および移行の速度を低くすることを保障する。
【０１２３】
本発明は、現在の薬物放出システムと少なくとも以下の点において相違する。
（１）業界で公知の薬物放出システムでは、薬物は一般的に１段階で放出されることが意図されている。これとは対照的に、本発明は、（ｉ）スクシンイミド化された形または薬物分子（プロドラグ）、またはスクシンイミド化された形とスクシンアミド化された形の組合せの放出、および（ｉｉ）スクシンイミド化されたまたはスクシンアミド化された薬物分子からの薬物放出を含む。
（２）スクシンアミド化されたリンカー基を薬物分子とキャリアとの間に含む、業界で知られた低分子放出システムにおいては、薬物はエステル基を介して前記リンカーと結合する。したがって、リンカーをキャリアに結合したままで、薬物は１段階で放出される。
【０１２４】
本発明の実施で使用してもよい修飾物質のサイズ（分子量）に考慮が払われるべきであるということをさらに理解すべきである。たとえば、実施例１１でさらに詳しく説明するが、スクシンイミド化されたプロドラグを放出することになる環化−脱離反応は、非環状中間体構造へのスクシンアミドエステルの折り曲げ（たとえば、スキーム１および２参照）、それに続いて起こる、エステル炭素上での分子内ヌクレオシド求核性攻撃を含む。どのような特定の理論にも固執しないが、嵩高い修飾物質（たとえば、タンパク質）からの立体障害は、そのような折り曲げを妨げるかもしれない。したがって、それは薬物放出に関する著しい干渉となり、そのような修飾物質を造ることは二段階薬物放出に適切ではない。ある実施形態で、二段階薬物放出の適切な修飾物質として分子量が１０ｋＤａ、最も好ましくは１．５ｋＤａ未満であると本発明では説明される。本発明では、置換されていないまたは置換されたコハク酸誘導体も利用することができ、また、抗腫瘍薬、抗感染薬および麻酔薬を含む（ただしこれらに限定されない）種々の薬剤物質と組み合わせて使用することもできる。
【０１２５】
（キャリア）
ある実施形態では、キャリアは、モノアミノスクシンアミドリンカーによって、１以上の修飾物質（たとえば、薬物分子）に、共有結合で結合できる、どのような低分子または高分子、生体高分子、粒子、ゲルまたは他の物質または材料でもよい。ある実施形態では、本発明の実施に適切なキャリアは、スクシニル化可能な官能基を１以上含む、どのような低分子または高分子、生体高分子、粒子、ゲルまたは他の物質または材料でもよい。たとえば、適切なキャリアは、適切な条件下で、
【０１２６】
【化３３】
2014111657.tif 000043
【０１２７】
の構造を有する、必要に応じて置換されるコハク酸無水物と反応して以下の構造を持つスクシニル化キャリアを形成しうる官能基を１以上含む：
【０１２８】
【化３４】
2014111657.tif 000044
【０１２９】
（ここで、ｓはキャリア上のスクシニル化の数を指定する整数であり；ｑは０〜４の整数であり；各Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２およびＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である）である。
【０１３０】
ある他の実施形態では、適切なキャリアは、適切な条件下で、必要に応じて置換される無水コハク酸（前記）、コハク酸
【０１３１】
【化３５】
2014111657.tif 000045
【０１３２】
、スクシニルジハロ無水物
【０１３３】
【化３６】
2014111657.tif 000046
【０１３４】
、コハク酸エステル
【０１３５】
【化３７】
2014111657.tif 000047
【０１３６】
、またはスクシニル化に適切な他の試薬と反応することのできる官能基を１以上含んでいる。
【０１３７】
ある他の実施形態では、適切なキャリアは、適切な条件下で、
【０１３８】
【化３８】
2014111657.tif 000048
【０１３９】
（ここで、ｑおよびＲ２は先に定義した通り；Ｍは修飾物質であり、
【０１４０】
【化３８Ａ】
2014111657.tif 000049
【０１４１】
はスクシニル部分へのＭの直接的または間接的結合を表し；Ｒ１は、水素、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１Ａ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１Ａ、−ＳＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａ、または脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分（ここで、各Ｒ１Ａは、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリールである）である）の構造を有する、必要に応じて置換されるコハク酸と反応し、
【０１４２】
【化３９】
2014111657.tif 000050
【０１４３】
（ここで、ｔは、キャリアに抱合する修飾物質部分の数を指定する整数である）を形成することのできる官能基を１以上含んでいる。
【０１４４】
ある実施形態では、キャリアが高分子の場合、約２〜約２５％の、さらに好ましくは約５〜約２０％、さらに好ましくは約５〜約１８％、さらに好ましくは約５〜約１５％、さらに好ましくは約６〜約１５％、さらに好ましくは約６〜約１４％、さらに好ましくは約７〜約１３％、さらに好ましくは約７〜約１２％、さらに好ましくは約８〜約１２％、さらに好ましくは約９〜約１２％、さらに好ましくは約１０〜約１２％、さらに好ましくは約９〜約１１％、さらに好ましくは約１０〜約１１％のモノマーが修飾物質Ｍを含む。
【０１４５】
ある例示的な実施形態では、本発明の抱合体は、生物医学的適用、たとえば、遺伝子、薬物送達および体内組織エンジニアリングにおける用途を見出し、キャリアは生体適合性であり生分解性である。ある実施形態では、キャリアは、マクロ分子、分子マトリックス（たとえば、ゲルまたは個体）、または界面である。ある実施形態では、キャリアは、マクロ分子、可溶性高分子、ナノ粒子、ゲル、リポソーム、ミセル、縫合糸、移植片などである。ある実施形態では、語句「可溶性高分子」は、ポリアルポリアル（たとえば、親水性ポリアセタールまたはポリケタール）のような生分解性、生体適合性高分子を包含する。ある他の実施形態では、キャリアは完全な合成、半合成または天然起源の高分子である。ある他の実施形態では、キャリアは親水性である。
【０１４６】
ある例示的な実施形態では、本発明で使用されるキャリアは、主鎖内に位置する各モノマー単位中に加水分解性結合を少なくとも１つ含む生分解性、生体適合性ポリアルである。これは、分解過程（モノマー単位の加水分解／開裂を介して）が、高分子抱合体のモノマー成分への断片化（すなわち分解）に帰結し、本発明の高分子抱合体に生分解性特性を与えることを保障する。生分解性、生体適合性高分子抱合体の特性（たとえば、溶解性、バイオ接着性および親水性）は、引き続き、付加的な親水性または疎水性基の置換によって変性することができる。本発明を実施するために適切な生分解性生体適合性高分子の例示としては、特に、米国特許第５，８１１，５１０号、５，８６３，９９０号および５，９５８，３９８号；米国仮出願Ｎｏ．６０／３４８，３３３；米国実用新案出願Ｎｏ．１０／５０１，５６５；欧州特許Ｎｏ．０８２０４７３およびＮｏ．０３７０７３７５．６；国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ０３／０１０１７およびＰＣＴ／ＵＳ０３／２２５８４に見出すことができる。上記で挙げられた文献の全内容は参照により本明細書に組み込まれる。このタイプの高分子優位性、製造および用途に関する指針は、前記文献に見出される。ある実施形態では、本発明は、前記特許文献、および米国特許Ｎｏ．５，５８２，１７２号、米国特許出願Ｎｏ．６０／１４７，９１９および０９／６３４，３２０との併用が特に有用であることが見込まれる。前に挙げられた特許文献はそれぞれその全内容が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１４７】
実施例で説明するように、我々は、親水性、加水分解性で、モノスクシンアミド含有リンクを介して、共有結合で高分子キャリアに結合する薬物分子（たとえば、カンプトテシン（すなわちＣＰＴ））を含む生分解性、生体適合性抱合体を製造するのに成功した。したがって、ある例示的な実施形態では、本発明の実施に適切なキャリアは、主鎖内に位置する各モノマー単位に少なくとも１つのアセタール／ケタール酸素原子を有するポリアルである。先に検討したように、これは、分解過程（高分子アセタール／ケタール基の加水分解／開裂を介して）は、ポリアル抱合体の断片化による低分子量成分化（すなわち分解）に帰結することを保障する。したがって、本発明の新規態様は、一部、主鎖中にアセタール／ケタール基を含む親水性キャリアに、スクシンアミド含有リンクを介して共有結合する修飾物質を１以上含有する抱合体の構造および特性に関する。
【０１４８】
ある実施形態では、本発明の高分子抱合体の製造に使用される、生分解性、生体適合性高分子キャリアは、天然起源の多糖類、グリコ多糖類、ポリグリコシド、ポリアセタール、ポリアミド、ポリエーテルおよびポリエステルの合成高分子、これらの酸化、脚色、修飾、架橋および抱合体形成製品である。
【０１４９】
ある他の実施形態では、キャリアは、炭水化物、グリコ多糖類、糖脂質、糖抱合体、ポリアセタール類、ポリケタール類およびこれらの誘導体からなる群より選択される親水性、生分解性高分子である。
【０１５０】
ある例示的な実施形態では、キャリアは、セルロース、アミロース、デキストラン、レバン、フコイダン、カラギナン、イヌリン、ペクチン、アミロペクチン、グリコーゲンおよびリセナン（ｌｉｘｅｎａｎ）からなる群より選択される、天然起源の直鎖および分岐状の生分解性、生体適合性ホモ多糖類である。
【０１５１】
ある他の例示的な実施形態では、キャリアは、アガロース、ハイルロナン（ｈｙｌｕｒｏｎａｎ）、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、アルギニンサンおよびヘパリンからなる群より選択される、天然起源の直鎖および分岐状の生分解性、生体適合性ヘテロ多糖類である。
【０１５２】
さらに他の例示的な実施形態では、キャリアは、ポリアクリレート、ポリビニル高分子、ポリエステル類、ポリオルソエステル類、ポリアミド類、ポリペプチドおよびこれらの誘導体からなる群より選択される、親水性高分子である。
【０１５３】
ある実施形態では、キャリアは、１，２−、１，４−、１，６−および２，６−ピラノシドまたは１，２−、１，５−、１，６−フラノシドの環状ビシナルジオールの選択的酸化によって、または１以上の修飾物質の抱合の前に、多糖類を含むラテラル６−ヒドロキシおよび５，６−ジオールの酸化によって、活性化された多糖類を含む。
【０１５４】
一実施形態では、本発明のキャリアは、下記化学構造：
（−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨＲ１−Ｏ−ＣＨＲ２−）ｎ
（ここで、Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、ヒドロキシル、カルボニル、カルボニル含有置換基、１以上のヘテロ原子または保護された親水性官能基を含む生体適合性有機部分であり；ｎは１〜５０００の整数である）で表されるポリアセタール部分を０．１％〜１００％含む、活性化された親水性、生分解性、生体適合性高分子キャリアを含む。
【０１５５】
さらに他の例示的な実施形態では、キャリアは、生分解性、生体適合性ポリアセタールであって、ポリアセタール繰返し構造単位の少なくとも一部が下記の化学的構造を有するポリアセタールを含む：
【０１５６】
【化４０】
2014111657.tif 000051
【０１５７】
（ここで、ｎのついたかっこで囲まれた各構造に関して、Ｒ１およびＲ２の１つは水素で、もう一方は生体適合性基であり、該基はＣ１に共有結合する炭素原子を含み；Ｒｘは、Ｃ２に共有結合する炭素原子を含み；ｎは整数であり；各Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、生体適合性基であり、該基は、独立して、水素または有機部分であり；各かっこで囲まれた構造ｎに関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６の少なくとも１つはエステル結合によってスクシンアミドとカップリングするのに適切な官能基を有する。）ある実施形態では、官能基は、ヒドロキシルである。
【０１５８】
さらに例示的な実施形態では、キャリアは、生分解性、生体適合性ポリケタールであって、ポリアセタール繰返し構造単位の少なくとも一部が下記の化学的構造を有するポリケタールを含む：
【０１５９】
【化４１】
2014111657.tif 000052
【０１６０】
（ここで、Ｒ１およびＲ２のそれぞれは、生体適合性基であり、該基はＣ１に共有結合する炭素原子を含み；Ｒｘは、Ｃ２に共有結合する炭素原子を含み；ｎは整数であり；各Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６は、生体適合性基であり、該基は、独立して、水素または有機部分であり；各かっこで囲まれた構造ｎに関し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６の少なくとも１つはエステル結合を介してスクシンアミドとカップリングするのに適切な官能基を含む。）ある実施形態では、官能基は、ヒドロキシルである。
【０１６１】
適切有機部分の例として、約１個と１２個との間の範囲の原子鎖を持つ脂肪族基、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、アミン、カルボキシル、アミド、カルボキシルエステル、チオエステル、アルデヒド、ニトリル、イソニトリル、ニトロソ、ヒドロキシルアミン、メルカプトアルキル、ヘテロ環、カーバメイト、カルボン酸およびその塩、スルホン酸およびその塩、スルホン酸エステル、リン酸およびその塩、リン酸エステル、ポリグリコールエーテル、ポリアミン、カルボキシレート、ポリエステル、ポリチオエステル、薬学的に有用な基、生物学的に活性な物質または診断ラベルが挙げられる。
【０１６２】
ある実施形態では、先に直接記載したポリアセタールおよびポリケタールにおける、大かっこｎで囲ったそれぞれに関して、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６の少なくとも１つが、高分子の親水性を増加させる、スクシンアミドリンカーへの共有結合に適用した官能基を含む。
【０１６３】
ある実施形態では、先に直接記載したポリアセタールおよびポリケタールにおける、大かっこｎで囲ったそれぞれに関して、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６の少なくとも１つが、リンカーＬＭへの共有結合に適用したカルボニル基を含む。ある例示的な実施形態では、先に直接記載したポリアセタールおよびポリケタールであって、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６の少なくとも１つがヒドロキシル基を含むものは、１以上の、以下の構造を有する部分と抱合する：
【０１６４】
【化４２】
2014111657.tif 000053
【０１６５】
（ここで、ｑおよびＲ２は、一般的に前に定義し、本明細書のクラスおよびサブクラスで定義した通りである。）
さらに他の実施形態では、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６の少なくとも１つがキラル部分を含む。
【０１６６】
ある実施形態では、本発明の生分解性、生体適合性キャリアは、架橋することができる。ポリアルとの結合における一般的な架橋リンカーおよび架橋方法の指針は、たとえば、米国仮出願Ｎｏ．６０／３４８，３３３；米国実用新案出願Ｎｏ．１０／５０１，５６５および国際出願Ｎｏ．ＰＣＴ／ＵＳ０３／０１０１７中に見出すことができる。
【０１６７】
ある例示的な実施形態では、キャリアは、エピブロモヒドリンまたはエピクロロヒドリンと架橋した、生分解性で生体適合性のポリアルである。ある実施形態では、該エピブロモヒドリンまたはエピクロロヒドリンの量は、架橋した生分解性、生体適合性ポリアルの約１重量％と約２５重量％の間の量である。
【０１６８】
一実施形態では、本発明の実施に適切な、生分解性で生体適合性のポリアルは約０．５ｋＤａと約１５００ｋＤａとの間の分子量を有する。本発明の好ましい実施形態では、生分解性、生体適合性ポリアルは、約１ｋＤａと約１０００ｋＤａとの間の分子量を有する。
【０１６９】
ある実施形態では、高分子キャリアは、一端または両端が修飾（すなわち１以上の修飾物質と抱合）されている。たとえば、キャリアがポリケタールの場合、該キャリアは、構造：
【０１７０】
【化４３】
2014111657.tif 000054
【０１７１】
（ここで、ｎは整数であり、Ｒ’、Ｒ”およびＲ”’は、修飾物質でもよい）を有してもよい。たとえば、Ｒ’は、タンパク質または他の生体高分子との抱合のために、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルまたはマレイミド部分を含むことができ；Ｒ”およびＲ”’は、特にリポソーム修飾のために、それぞれ脂質および抗体のような標的特異部分を含むことができる。）
ある他の実施形態では、キャリアは、一末端および１以上の非末端位置、または両端および１以上の非末端位置で置換されることができる。
【０１７２】
ある実施形態では、キャリアは、直鎖マクロ分子、分岐状マクロ分子、球状マクロ分子グラフト共重合体、櫛状高分子、ナノ粒子または脂質系キャリアである。ある例示的な実施形態では、脂質系キャリアはリポソームである。
【０１７３】
ある実施形態では、キャリアは以下に示す構造を持つＰＨＦである：
【０１７４】
【化４４】
2014111657.tif 000055
【０１７５】
。
【０１７６】
（修飾物質）
ある実施形態では、本発明による修飾物質として、いくつか名前を挙げると、生体高分子、低分子、有機または無機分子、治療剤、微粒子、薬学的に有用な基または構成要素、マクロ分子、診断ラベル、キレート剤、挿入剤、親水性部分、分散剤、電荷変性剤、粘度変性剤、界面活性剤、凝固剤および凝集剤が挙げられるが、これらに限定されない。ある実施形態では、修飾物質は、化学療法部分である。ある実施形態では、修飾物質は、第二リンカーに共有結合で結合していてもよい、カンプトテシン（ＣＰＴ）である。ある実施形態では、修飾物質は、第二リンカーに共有結合で結合していてもよい、タキソールである。ある実施形態では、修飾物質は、第二リンカーに共有結合で結合していてもよい、以下の構造を持つイルジンである：
【０１７７】
【化４５】
2014111657.tif 000056
【０１７８】
生体高分子の例として、酵素、レセプター、神経伝達物質、ホルモン、サイトカイン、成長因子および化学走化性因子のような細胞応答修飾物質、抗体、ワクチン、ハプテン、毒素、インターフェロン、リボザイム、抗センス剤、プラスミド、ＤＮＡおよびＲＮＡが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７９】
低分子の例として、ビタミン、抗ＡＩＤＳ物質、抗癌物質、放射性核物質、抗生物質、免疫抑制剤、抗ウイルス物質、酵素阻害剤、神経毒、オピオイド、睡眠薬、抗ヒスタミン、潤滑剤、トランキライザー、抗けいれん薬、筋弛緩剤および抗パーキンソン病物質のような薬物；チャンネル遮断薬、縮瞳薬および抗コリン作用薬を含む抗痙性剤および筋肉収縮剤；抗緑内障化合物、抗寄生虫および／または抗原虫化合物、細胞増殖阻害剤および抗癒着分子を含む細胞−細胞外マトリックス相互作用の調節因子、血管拡張剤、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質合成の抑制剤、降圧剤、鎮痛剤、解熱剤、ステロイド系および非ステロイド系抗炎症剤、抗血管形成因子、分泌抑制因子、抗凝血剤および／または抗血栓剤、局所麻酔剤、眼病薬、プロスタグランジン、抗うつ剤、抗精神病物質、嘔吐抑制剤および造影剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８０】
ある実施形態では、修飾物質は、分子量が好ましくは≦約１０ｋＤａ、さらに好ましくは≦約９ｋＤａ、さらに好ましくは≦約８ｋＤａ、さらに好ましくは≦約７ｋＤａ、さらに好ましくは≦約６ｋＤａ、さらに好ましくは≦約５ｋＤａ、さらに好ましくは≦約４ｋＤａ、さらに好ましくは≦約３ｋＤａ、さらに好ましくは≦約１．５ｋＤａの低分子である。
【０１８１】
適切な、薬学的に有用な基または構成要素の例示として、親水性／疎水性修飾物質、薬物動態学的修飾物質、生物学的に活性な修飾物質および検出可能な修飾物質が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８２】
診断ラベルの例示として、γシンチグラフィーおよびＰＥＴ用の診断的放射性医薬品または放射性アイソトープ、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）用造影剤（たとえば、常磁性原始および超常磁性ナノ結晶）、ＣＴ検査法用造影剤、Ｘ線画像検査法用造影剤、超音波診断的方法用剤中性子活性化剤、およびＸ線を超音波、電波およびマイクロ波を反射、散乱またはこれらに作用することのできる部分、種々の光学処置における蛍光体が挙げられるが、これらに限定されない。診断的放射性医薬品としては、γ−放出放射性核物質、たとえば、インジウム１１１、テクネチウム９９ｍおよびヨウ素１３１などが挙げられる。ＭＲＩ（磁気共鳴画像法）用造影剤としては、磁性化合物、たとえば、常磁性イオン、鉄、マンガン、ガドリニウム、ランタン系、有機常磁性部分、および超常磁性、強常磁性および反強常磁性化合物、たとえば酸化鉄コロイド、フェライトコロイドなどが挙げられる。ＣＴ検査法および他のＸ線系画像検査法用の造影剤としては、Ｘ線を吸収する化合物、たとえば、ヨウ素、バリウムなどが挙げられる。超音波系方法用の造影剤としては、超音波を吸収、反射、および散乱する化合物、たとえば、乳剤、結晶、気泡などが挙げられる。さらに他の例示として、中性子活性化に有用な物質、たとえばホウ素およびガドリニウムが挙げられる。反射、屈折、散乱、その他、Ｘ線、超音波、電波、マイクロ波および診断的処置に有用なほかの放射線に作用することのできるラベルも使用することができる。蛍光性ラベルは、写真撮影のために使用することもできる。ある実施形態では、修飾物質は、常磁性イオンまたは基を含む。
【０１８３】
ある実施形態では、修飾物質は、化学的に修飾され、アミド結合の形成によって、必要に応じて置換されるコハク酸との共有結合に適切な官能基（すなわちアミン基）を含んでもよく、該コハク酸は、エステル結合の形成によって、キャリアと抱合している。
抱合体
本発明の抱合体は、Ｍを１以上含み、該Ｍは修飾物質であって、１以上のＭは同一または相違してもよい。ある実施形態では、１以上のＭは生体適合性部分である。ある実施形態では、１以上のＭは親水性部分である。ある実施形態では、１以上のＭは薬物分子である。ある実施形態では、１以上のＭは化学療法部分である。ある実施形態では、１以上のＭはカンプトテシン部分である。
【０１８４】
ある他の実施形態では、１以上のＭは、直接または第二リンカーを介して、スクシンアミドリンカーに結合する。ある実施形態では、該第二リンカーは、アミノアシル残基であり、前記抱合体は以下の一般構造を有する：
【０１８５】
【化４６】
2014111657.tif 000057
【０１８６】
（ここで、ｐは１〜１２の整数であり；ｔは、キャリアに抱合する修飾物質の数を指定する整数であり；各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、Ｎ０２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２、ＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である）である。）
ある実施形態において、第二リンカーは、α−アミノアシル残基であり、抱合体は、以下の一般構造を有する：
【０１８７】
【化４７】
2014111657.tif 000058
【０１８８】
（ここで、ｔは、キャリアに抱合する修飾物質の数を指定する整数であり；Ｒは天然または非天然アミノ酸側鎖を示す。）
先により一般的に説明したように、ある実施形態では、キャリアが高分子の場合、約２〜約２５％の、より好ましくは約５〜約２０％の、より好ましくは約５〜約１８％の、より好ましくは約５〜約１５％の、より好ましくは約６〜約１５％の、より好ましくは約６〜約１４％の、より好ましくは約７〜約１３％の、より好ましくは約７〜約１２％の、より好ましくは約８〜約１２％の、より好ましくは約９〜約１２％の、より好ましくは約１０〜約１２％の、より好ましくは約９〜約１１％の、より好ましくは約１０〜約１１％のモノマーが、修飾物質Ｍを構成する。
【０１８９】
ある実施形態では、ＭはＣＰＴである。ある実施形態では、ＭはＣＰＴであり、第二リンカーはアミノアリール残基である。ある実施形態では、ＭはＣＰＴであり、第二リンカーはグリシン残基である。
【０１９０】
他の実施形態では、本発明の抱合体において、１以上のＭは、生物学的に活性な修飾物質を含む。ある例示的な実施形態では、１以上のＭは、タンパク質、抗体、抗体断片、ペプチド、ステロイド、挿入剤、薬物、ホルモン、サイトカイン、酵素、酵素基質、レセプターリガンド、脂質、ヌクレオチド，ヌクレオシド、金属錯体、カチオン、アニオン、アミン、ヘテロ環、ヘテロ環アミン、芳香族基、脂肪族基、挿入剤、抗生物質、抗原、免疫調整剤、および抗ウイルス化合物からなる群より選択される。ある実施形態では、薬物は、抗腫瘍性、抗バクテリア性、抗ウイルス性、抗真菌性、抗寄生虫性、麻酔性薬物を含むが、これらに限定されない。
【０１９１】
ある実施形態では、修飾物質は、化学療法部分である。ある実施形態では、修飾物質は、カンプトテシン（ＣＰＴ）である。したがって、一態様では、本発明は、ＣＰＴおよびキャリアが共有結合でスクシンアミド含有リンカーによって結合し、それによって、前記ＣＰＴは直接的または間接的にアミド結合によってスクシンアミド部分に結合し、前記キャリアは直接的または間接的にエステル結合によってスクシンアミド部分に結合するＣＰＴ−キャリア抱合体である。ある実施形態では、ＣＰＴは、アミノアシル部分を介して、間接的にスクシンアミド部分に結合する。ある実施形態では、ＣＰＴは、グリシン部分を介して、間接的にスクシンアミド部分に結合する。ある実施形態では、キャリアは本明細書で説明するポリアルである。
【０１９２】
ある実施形態では、下記スキーム３で示す構造（Ｉ）を有するＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体が提供される。
【０１９３】
（スキーム３）
【０１９４】
【化４８】
2014111657.tif 000059
【０１９５】
（ここで、ｎ、ｋおよびｍは、それぞれ、１０と３００との間の整数、１と２０との間の整数、および０と３００との間の整数である。）
先に示したように、抱合体（Ｉ）は、二段階プロセスで、次いでＣＰＴを放出することができる。
【０１９６】
ある実施形態では、以下の構造を有するＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体が提供される：
【０１９７】
【化４９】
2014111657.tif 000060
【０１９８】
（ここで、ｎは１０と３０００との間の整数である。）
ある実施形態では、下記スキーム４で示す構造（ＩＩ）を有するＰＨＦ−タキソール抱合体が提供される。
【０１９９】
（スキーム４）
【０２００】
【化５０】
2014111657.tif 000061
【０２０１】
（ここで、ｎ、ｋおよびｍは、それぞれ、１０と３００との間の整数、１と２０との間の整数、および０と３００との間の整数である。）
先に示したように、抱合体（ＩＩ）は、二段階プロセスで、次いでタキソールを放出することができる。
【０２０２】
ある実施形態では、以下の構造を有するＰＨＦ−タキソール抱合体が提供される：
【０２０３】
【化５１】
2014111657.tif 000062
【０２０４】
（ここで、ｎは１０と３０００との間の整数である。）
ある実施形態では、下記スキーム５で示す構造（ＩＩＩ）を有するＰＨＦ−イルジン抱合体が提供される。
【０２０５】
（スキーム５）
【０２０６】
【化５２】
2014111657.tif 000063
【０２０７】
（ここで、ｎ、ｋおよびｍは、それぞれ、１０と３００との間の整数、１と２０との間の整数、および０と３００との間の整数である。）
先に示したように、抱合体（ＩＩＩ）は、二段階プロセスで、次いでイルジンを放出することができる。
【０２０８】
ある実施形態では、以下の構造を有するＰＨＦ−イルジン抱合体が提供される：
【０２０９】
【化５３】
2014111657.tif 000064
【０２１０】
（ここで、ｎは１０と３０００との間の整数である。）
ある他の実施形態では、１以上のＭは検出可能なラベルを含む．ある例示的な実施形態では、１以上のＭは、放射性、常磁性、超常磁性、蛍光性、光吸収性、または構造ドメインを含む原子の原子または基を含む。
【０２１１】
ある実施形態では、１以上のＭは診断用ラベルを含む。
【０２１２】
ある例示的な実施形態では、本発明の抱合体は、生物学的に活性な修飾物質と検出可能なラベルとを含む。
【０２１３】
ある実施形態では、本発明の抱合体は、高分子鎖に直接リンクする、検出可能なラベルを含む。
【０２１４】
本発明の生分解性、生体適合性抱合体は、生体分解性および親水性の所望の要求基準に合うように製造することができる。たとえば、生理学的条件下で、生体分解性と安定性との間のバランスに達することができる。たとえば、ある閾値を超える分子量（分子の物理的形状に依るが、一般的に５０〜１００ｋＤａを超える）を持つマクロ分子は、腎臓を介して排泄せず、一方、低分子は、細胞による摂取および細胞内区画、最も著しくはリソソームにおける分解を通してのみ体から除去することは知られている。この観察は、一般的な生理学的条件（ｐＨ＝７．５±０．５）およびリソソームｐＨ（ｐＨ約５）下で、それらの安定性を調整することによって、いかに機能的に安定な生分解性材料を設計できるかを実証する。たとえば、アセタールおよびケタール基の加水分解には酸の触媒作用が働くため、ポリアルは、一般的に、酸性リソソーム環境では、たとえば、血漿中より不安定なことが知られている。当業者は、水性媒体中、たとえば、ｐＨ＝５およびｐＨ＝７．５、３７℃で、高分子分解プロファイルを比較し、したがって、正常な生理学的環境、細胞による摂取後の「消化性」リソソーム区画における、高分子安定性の期待バランスを測定する検査を設計できる。そのような検査における高分子完全性は、サイズ排除ＨＰＬＣによって測定することができる。当業者は、本発明の分解した抱合体の種々の断片を研究する、他の適切な方法を選択することができる。
【０２１５】
多くの場合、ｐＨ＝７．５での高分子の有効サイズは、１〜７日では検出できるほど変化せず、少なくとも数週間は元のサイズから５０％以内のサイズを保つことが好ましいであろう。一方、ｐＨ＝５での高分子は、１〜５日で検出できるほど分解し、２週間から数ヶ月の時間枠で、低分子量完全に断片に移行するのが好ましい。より速い分解が好ましい場合もあるが、一般的には、高分子は細胞による高分子片の代謝または排泄速度を超えない速度で、細胞内で分解するのがより望ましい。したがって、ある実施形態では、本発明の抱合体は、特に細胞による摂取の際、生分解性であり、生体系に関して比較的「非活性」であることが期待される。キャリア分解性生物は、変化せず、環境のｐＨを大きくシフトしないことが好ましい。アルコール基が大量であると、細胞レセプター、特に食細胞による高分子の認識速度が低下するかもしれないと考えられている。本発明の高分子骨格は、一般的に、抗原決定因子（特性たとえば、ある多糖類およびポリペプチド用）を、たとえあっても殆ど含まず、一般的に、後で望まれない限り、生体内で「キーインロック」型の相互作用に従事しうる硬い構造は含まない。したがって、本発明の可溶性、架橋された個体抱合体は、数種の生物医学的応用に適切な抱合体を造る、低毒性およびバイオ接着性を持つことが推定できる。
【０２１６】
本発明のある実施形態では、生分解性、生体適合性抱合体は、直鎖または分岐状の構造を形成することができる。たとえば、本発明の該生分解性、生体適合性ポリアル抱合体は、キラル（活性であってもよい）でありうる。場合によっては、本発明の生分解性、生体適合性ポリアル抱合体は、ラセミ形でもありうる。
【０２１７】
さらに他の実施形態では、本発明の抱合体は、マクロ分子またはナノ粒子と関連する。適切なマクロ分子の例示として、酵素、ポリペプチド、ポリリジン、タンパク質、脂質、ポリ電解質、抗体、リボ核酸、デオキシリボ核酸およびレクチンが挙げられるが、これらに限定されない。該マクロ分子は、前記生分解性、生体適合性抱合体と関連させる前に、化学的に修飾されてもよい。環状および直鎖ＤＮＡおよびＲＮＡ（たとえば、プラスミド）とその超分子関連物、たとえば、ウイルス粒子は、本発明の目的に照らし、マクロ分子であると考えられる。ある実施形態では、本発明の抱合体は、非共有結合でマクロ分子と関連する。
【０２１８】
ある実施形態では、本発明の抱合体は、水溶性である。ある実施形態では、本発明の抱合体は水不溶性である。ある実施形態では、抱合体は、個体形状である。ある実施形態では、本発明の抱合体はコロイドである。ある実施形態では、本発明の抱合体は、粒状の形態である。ある実施形態では、本発明の抱合体は、ゲル状である。ある実施形態では、本発明の抱合体は、繊維状である。ある実施形態では、本発明の抱合体はフィルム状である。
【０２１９】
（適用）
一態様では、本発明の適用の範囲は、癌処置／化学療法である。しかし、本発明の適用の領域はこの範囲に限定されない。他の適用も読者には簡単に明らかになるであろう。
【０２２０】
合衆国における癌の統計値は近年大きく改良されてきたにもかかわらず、癌は、主な死因の一つである。主要な治療法である化学療法の有効性は、まだ、信頼のおける寛解傾向をもたらすレベルまで用量を上げることを妨げる、入手可能な薬物の毒性によって、制限されている。本発明の一態様は、新しく、かなり効率的で、殆ど毒性のない化学療法的製剤の開発の可能性に関する。本発明のシステムは、また、炎症、疼痛管理において、および一般的に他の全ての種々の持続的放出または薬物の標的化が好都合である領域において有用でありえる。
【０２２１】
過去２０年にわたって広範囲に研究されてきた、巨大分子薬物送達システムは、数種の薬剤物質の薬理学的特性を大きく改良し、癌細胞１８，１９への薬物送達を管理する新しいツールを提供する。現在まで報告されている、圧倒的多数の抗腫瘍性薬物抱合体は、（ａ）薬剤物質が巨大分子キャリアから放出するまで不活性である、（ｂ）薬剤物質は、一段階で放出される、または少なくとも放出される２０，２１ものである。抱合体（たとえば、タンパク質の）は、キャリアからの薬物放出なしで、活性な場合もある。
【０２２２】
キャリアマクロ分子との薬物関連の利点は、一部、以下の要因、すなわち、（１）薬剤物質の可溶化；（２）抱合体の大きな流体力学的サイズに起因する、正常な間質組織への薬剤物質の制限された接近；（３）浸透・維持能力（ＥＰＲ）効果２２を介する腫瘍体内組織への抱合体送達；および（４）癌細胞サイクルを超える期間にわたって持続する薬物の維持がある。（最近になって開発された）抱合体のあるものにおいては、癌細胞への薬物送達の特異性は、さらに、種々の標的部分（たとえば抗体）の取り込みを介して、およびキャリアへ薬物分子が結合しているリンクの酵素補助加水分解２３，２４を介して、行われている。
【０２２３】
数種の前臨床研究において、抗腫瘍性薬物抱合体は、それぞれの遊離の薬物より毒性が低かった２５ことが示された。抱合体の抗腫瘍性活性（投与された薬剤物質の１単位当たり）は、非修飾薬物の活性と同じか高い場合もあるが、普通は低かった２６。しかし、抱合体は、等毒性の用量で、しばしばより効果的であり、したがって、抗腫瘍性活性の部分的損失は、より低い毒性とより大きな最大耐用用量によって、より重要である。
【０２２４】
一態様では、本発明の二段階薬物放出システムは、２つの追加の主要な利点、すなわち、（１）放出プロドラグの管理される特性に特徴が付け加えられたこと（たとえば、疎水性、細胞成分への親和性、膜透過輸送、薬物活性保全、放出部位からの再分布）；および（２）薬物放出の両相を調整する可能性が付け加えられたこと（したがって、たとえば、活性な薬物濃度および放出時間対癌細胞サイクルの最適化）が加わる。
【０２２５】
先に述べたように、非生体付着性で、完全に生分解性な可溶性高分子抱合体のようなキャリアは、本発明を実践するために強く望まれている。
【０２２６】
（合成方法）
本発明によれば、本発明の抱合体、またはそれを含む組成物、それを製造するのに有用な中間体および成分（たとえばキャリアおよび修飾物質）を製造するために、入手しうる技術であればどんなものでも使用することができる。たとえば、以下で詳細に述べる、半合成的および完全に合成的な方法を使用してもよい。
【０２２７】
（キャリア）
修飾物質との抱合に適切な、高分子キャリア（たとえば、生体適合性、生分解性高分子キャリア）を製造する方法は、業界で知られている。たとえば、合成の指針は、米国特許第５，８１１，５１０号、第５，８６３，９９０号および第５，９５８，３９８号；米国特許仮出願Ｎｏ．６０／３４８，３３３；米国実用新案出願Ｎｏ．１０／５０１，５６５；欧州特許第０８２０４７３号および第０３７０７３７５．６号；国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ０３／０１０１７およびＰＣＴ／ＵＳ０３／２２５８４中に見出すことができる。当業者であれば、本発明の実践において使用する高分子キャリアを造るために、これらの方法をどのように適応するかはわかるであろう。
【０２２８】
たとえば、半合成ポリアルは、ポリアルドースとポリケトースから、水溶液中で過ヨウ素酸塩による炭水化物環の完全なラテラル開裂に続き、スクシンアミドリンカーを介して修飾物質を１以上有するヒドロキシル基を抱合するため、親水性部分への変換（たとえば、ホウ化水素還元による）によって製造してもよい。例示的な実施形態では、適切な多糖類の炭水化物は、グリコール特異的試薬によって参加することができ、ヒドロキシル基にそれぞれ結合する炭素原子間の炭素−炭素結合が開裂する。この手法のデキストランＢ−５１２への適用の例を以下に記載する：
【０２２９】
【化５４】
2014111657.tif 000065
【０２３０】
【化５５】
2014111657.tif 000066
【０２３１】
同じような検討がレバン：
【０２３２】
【化５６】
2014111657.tif 000067
【０２３３】
とイヌリン：
【０２３４】
【化５７】
2014111657.tif 000068
【０２３５】
を使用して行われてもよい。
【０２３６】
一実施形態では、本発明の抱合体の生分解性、生体適合性ポリアルを形成する方法は、適切な多糖類を有効量のグリコール特異的酸化剤と組み合わせて、アルデヒド中間体を形成する過程を含む。ポリアルそれ自身であるアルデヒド中間体は、ついで、還元されて対応するポリオールとし、サクシン化し、１以上の適切な修飾物質とカップリングし、スクシンアミド含有リンクを含む、生分解性、生体適合性ポリアル抱合体を形成してもよい。
【０２３７】
他の好ましい実施形態では、本発明で使用するための完全な合成生分解性、生体適合性ポリアルは、適切な開始剤を適切な前駆体化合物と反応させることによって製造することができる。
【０２３８】
たとえば、完全な合成ポリアルは、ビニルエーテルと保護、置換されたジオールとの縮合によって製造されてもよい。開環重合のような他の方法を使用してもよく、該方法有効性は、置換の程度および保護基の嵩高さによる：
【０２３９】
【化５８】
2014111657.tif 000069
【０２４０】
溶剤系、触媒および他の要因を最適化して高分子量製品を得ることは、当業者であれば認識するであろう。
【０２４１】
ある実施形態では、キャリアは構造：
【０２４２】
【化５９】
2014111657.tif 000070
【０２４３】
を有するＰＨＦである。
【０２４４】
（修飾物質）
ある実施形態では、本発明による修飾物質は、いくつか名前を挙げると、生体高分子、低分子、有機または無機分子、治療剤、微粒子、薬学的に有用な基または構成要素、マクロ分子、診断ラベル、キレート剤、挿入剤、親水性部分、分散剤、電荷変性剤、粘度変性剤、界面活性剤、凝固剤および凝集剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２４５】
先に検討したように、本発明の実践において有用な修飾物質は、化学的に修飾され、独立して、アミド結合の形成によって、必要に応じて置換されるコハク酸と共有結合するのに適切な官能基を含んでもよく；該コハク酸はエステル結合の形成によってキャリアと抱合していてもよい。
【０２４６】
（抱合体）
他の態様では、本発明は、以下の構造を有する１以上の部分で置換されたキャリアを含む抱合体を製造する方法を提供する：
【０２４７】
【化６０】
2014111657.tif 000071
【０２４８】
（ここで、各Ｍは、独立した修飾物質であって、
【０２４９】
【化６０Ａ】
2014111657.tif 000072
【０２５０】
は、リンカーＬＭへのＭの直接的または間接的結合を表し、
各ＬＭは、独立して、必要に応じて置換されるスクシンアミド含有リンカーである）で表され、これによって、前記修飾物質Ｍは、アミド結合によって、直接的あるいは間接的にスクシンアミドリンカーに結合し、かつ前記キャリアは、エステル結合によって、直接的あるいは間接的に各スクシンアミドリンカーに結合するキャリアを含む。該製造法は、
キャリアを提供する工程と；
１以上の修飾物質を提供する工程と；
前記キャリアを、以下の構造を有する、必要に応じて置換されるコハク酸無水物と、適切な条件下で反応させ、
【０２５１】
【化６１】
2014111657.tif 000073
【０２５２】
（ここで、ｑは、０〜４の整数であり；各Ｒ２は、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、芳香族、複素芳香族部分、または−ＧＲＧ１（ここで、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＧ２−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｃ（＝Ｓ）Ｓ−、−ＳＣ（＝Ｓ）−、−ＳＣ（＝Ｓ）Ｓ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）Ｏ−、−Ｃ（＝ＮＲＧ２）ＮＲＧ３−、−ＯＣ（＝ＮＲＧ２）−、−ＮＲＧ２Ｃ（＝ＮＲＧ３）−、−ＮＲＧ２ＳＯ２−、−ＮＲＧ２ＳＯ２ＮＲＧ３−、または−ＳＯ２ＮＲＧ２−（ここで、各ＲＧ１、ＲＧ２、ＲＧ３は、独立して、水素、ハロゲンまたは必要に応じて置換される脂肪族、ヘテロ脂肪族、脂環式、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリールまたはヘテロアリール部分である）である）、以下の構造を有するスクシニル化キャリアを得る工程と；
【０２５３】
【化６２】
2014111657.tif 000074
【０２５４】
または塩；
（ここで、ｓは前記キャリア上のスクシニル部分の数を表す）
スクシニル化キャリアを１以上の修飾物質部分（Ｍ）と反応させ、
それによって、少なくとも１つの修飾物質部分が、直接的あるいは第２リンカーを介して間接的に、キャリアに存在するスクシニル部分とともにアミド結合を形成し、
結果として以下の構造を有する抱合体：
【０２５５】
【化６３】
2014111657.tif 000075
【０２５６】
（ここで、Ｒ２およびｑは前記のとおりであり；
【０２５７】
【化６３Ａ】
2014111657.tif 000076
【０２５８】
は、スクシンアミドリンカーＬＭへのＭの直接的または間接的結合を表し；ｔは、キャリアに抱合する修飾物質部分の数がｔ≦ｓとなるように指定する整数である）を生成する工程と；
を含む。
【０２５９】
ある実施形態では、各Ｒ２は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２Ａまたは−ＺＲ２Ａ（ここで、Ｚは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ２Ｂ（ここで、各Ｒ２ＡおよびＲ２Ｂは、独立して、水素、またはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルケニル、ヘテロシクロアルキニル、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリールまたはヘテロアリール部分である）である）である。ある実施形態では、各Ｒ２は水素である。ある実施形態では、１以上のＲ２はＣ１−１０のアルキル部分である。ある実施形態では、１以上のＲ２は低級アルキルである。ある実施形態では、１以上のＲ２は疎水性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２は親水性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２はアニオン性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２はカチオン性基である。ある実施形態では、１以上のＲ２はレセプターリガンドである。
【０２６０】
ある例示的な実施形態では、スクシニル化キャリアをカップリングする工程で、キャリア上にスクシンアミド酸部位の一部が未反応のまま残っている。
【０２６１】
ある実施形態では、キャリアを必要に応じて置換される無水コハク酸と反応させる工程で、無水コハク酸量対キャリア量の比を変化させることによって、キャリア上のスクシニル化の度合いを調節する。したがって、スクシニル化は、適正な無水コハク酸／キャリア比を選択することによって調整してもよい。
【０２６２】
ある実施形態では、スクシニル化キャリアを１以上の修飾物質部分に反応させる工程で、修飾物質量体スクシニル化キャリア量の比を変化させることによって、抱合体中の修飾物質導入度を調整する。したがって、抱合体中に含まれる修飾物質は、適正な修飾物質／スクシニル化キャリア比を選択することによって、調節してもよい。ある実施形態では、抱合体中の修飾物質導入度は、キャリアスクシニル化度によって測定される。
【０２６３】
ある例示的な実施形態では、本発明方法の実施において、キャリアは、米国特許第５，８１１，５１０号、第５，８６３，９９０号および第５，９５８，３９８号；米国特許仮出願Ｎｏ．６０／３４８，３３３；米国実用新案出願Ｎｏ．１０／５０１，５６５；欧州特許第０８２０４７３号および第０３７０７３７５．６号；および国際特許出願Ｎｏ．ＰＣＴ／ＵＳ０３／０１０１７およびＮｏ．ＰＣＴ／ＵＳ０３／２２５８４に開示するような、生分解性、生体適合性ポリアルである。
【０２６４】
ある実施形態では、種々の修飾物質がスクシニル化キャリアとともに混合することができ、適切な条件で所望の転化率まで培養された反応混合物が得られる。この方法は、修飾物質とキャリアとを違った比で混合することによって、修飾物質の組成と含有量が様々な抱合体のライブラリーを１段階で製造するのに、使用することができる。
【０２６５】
ある実施形態では、修飾物質は化学療法部分である。ある実施形態では、修飾物質は、カンプトテシン（ＣＰＴ）、タキソールまたはイルジンである。したがって、一態様では、本発明は、ＣＰＴ−、タキソール−またはイルジン−キャリア抱合体を製造する方法であって、ＣＰＴ、タキソールまたはイルジンとキャリアとがスクシンアミド含有リンカーを介して共有結合で結合し、それによって、ＣＰＴ、タキソールまたはイルジンが直接または間接的にアミド結合によってスクシンアミド部分と結合し、キャリアが直接または間接的にエステル結合によってスクシンアミド部分と結合している方法を提供する。ある実施形態では、ＣＰＴ、タキソールまたはイルジンは、アミノアシル部分を介して、間接的にスクシンアミド部分に結合する。ある実施形態では、ＣＰＴ、タキソールまたはイルジンは、グリシン部分を介して、間接的にスクシンアミド部分に結合する。ある実施形態では、キャリアは、本明細書で記載されるようなポリアルである。ある例示的な実施形態では、ポリアルはＰＨＦである。ある実施形態では、本発明によるＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体は以下のようにして製造することができる：
【０２６６】
【化６４】
2014111657.tif 000077
ここで、ｍ＋ｎ＋ｋ＝１であり、かつｋ＝０．１１−０．１２であり、そして各Ｒ２は同じかまたは異なり、本明細書中で定義されるとおりである。
【０２６７】
ある実施形態では、本発明によるＰＨＦ−タキソール抱合体は、以下のように製造することができる：
【０２６８】
【化６５】
2014111657.tif 000078
ここで、ｍ＋ｎ＋ｋ＝１であり、かつｋ＝０．１１−０．１２であり、そして各Ｒ２は同じかまたは異なり、本明細書中で定義されるとおりである。
【０２６９】
ある実施形態では、本発明によるＰＨＦ−イルジン抱合体は、以下のように製造することができる：
【０２７０】
【化６６】
2014111657.tif 000079
【０２７１】
（組成物）
ある実施形態では、本明細書で開示された抱合体を１以上と、薬学的に適切なキャリアまたは希釈剤とを含む組成物が提供される。ある実施形態では、該組成物は、ＣＰＴ−キャリア抱合体を含む。ある実施形態では、ＣＰＴは、アミノアシル部分を介して、スクシンアミド部分に間接的に結合する。ある実施形態では、ＣＰＴは、グリシン部分を介して、スクシンアミド部分に間接的に結合する。ある実施形態では、キャリアは、本明細書で記載されるようなポリアルである。ある例示的な実施形態では、ポリアルはＰＨＦである。ある実施形態では、組成物は、式（Ｉ）または（Ｉａ）で表されるＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体を含む。
【０２７２】
ある実施形態では、組成物は、タキソール−キャリア抱合体を含む。ある実施形態では、タキソールは、アミノアシル部分を介して、スクシンアミド部分に間接的に結合する。ある実施形態では、タキソールは、グリシン部分を介して、スクシンアミド部分に間接的に結合する。ある実施形態では、キャリアは、本明細書で記載されるようなポリアルである。ある例示的な実施形態では、ポリアルはＰＨＦである。ある実施形態では、組成物は、式（ＩＩ）または（ＩＩａ）で表されるＰＨＦ−タキソール抱合体を含む。
【０２７３】
ある実施形態では、組成物はイルジン−キャリア抱合体を含む。ある実施形態では、イルジンは、アミノアシル部分を介して、スクシンアミド部分に間接的に結合する。ある実施形態では、イルジンは、グリシン部分を介して、スクシンアミド部分に間接的に結合する。ある実施形態では、キャリアは、本明細書で記載されるようなポリアルである。ある例示的な実施形態では、ポリアルはＰＨＦである。ある実施形態では、組成物は、式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩａ）で表されるＰＨＦ−イルジン抱合体を含む。
【０２７４】
ある実施形態では、本発明は、ゲルの形での本発明の生分解性、生体適合性抱合体と、該ゲル内に配置される生物学的に活性な化合物との組成物を提供する。あるいは、またはそれに加えて、診断ラベルもゲル内に配置され、またはゲルマトリックスに結合することができる。
【０２７５】
他の実施形態では、本発明は、溶液の形の生分解性、生体適合性ポリアル抱合体と、該溶液に溶解した薬学的に有用な構成要素、薬物またはマクロ分子との組成物を提供する。あるいは、またはそれに加えて、診断ラベルも溶液内に溶解することができる。
【０２７６】
ある実施形態では、有効量の治療剤と結びついた、本発明の生分解性、生体適合性抱合体を含む組成物が提供され、該治療剤は、前記生分解性、生体適合性抱合体マトリックスに導入され、ある期間にわたる高分子マトリックスの分解または該マトリックスから放出した剤の拡散によって放出される。ある実施形態では、抱合体は有効量の治療剤と非共有結合で結びつく。ある実施形態では、治療剤は、ビタミン、抗ＡＩＤＳ物質、抗癌物質、放射性核物質、抗生物質、免疫抑制剤、抗ウイルス物質、酵素阻害剤、神経毒、オピオイド、睡眠薬、抗ヒスタミン、潤滑剤、トランキライザー、抗けいれん薬、筋弛緩剤および抗パーキンソン病物質、チャンネル遮断薬を含む抗痙性剤および筋肉収縮剤、縮瞳薬および抗コリン作用薬、抗緑内障化合物、抗寄生虫および／または抗原虫化合物、細胞増殖阻害剤および抗癒着分子を含む細胞−細胞外マトリックス相互作用の調節因子、血管拡張剤、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質合成の抑制剤、降圧剤、鎮痛剤、解熱剤、ステロイド系および非ステロイド系抗炎症剤、抗血管形成因子、分泌抑制因子、抗凝血剤および／または抗血栓剤、局所麻酔剤、眼病薬、プロスタグランジン、抗うつ剤、抗精神病物質、嘔吐抑制剤、造影剤およびこれらの組み合わせからなる群より選択される。
【０２７７】
これらの実施形態の変形では、他の医薬的に活性な化合物、たとえば、腫脹を減らすために使用される、抗炎症剤またはステロイド、抗生物質、抗ウイルス剤、または抗体を含むことが望ましいかもしれない。含むことのできる他の化合物として、高分子マトリックス安定性および／または薬物放出速度を変更するために利用されてもよい、防腐剤、酸化防止剤、およびフィラー、コーティング剤またはバルク剤がある。
【０２７８】
（抱合体組成物の特性を変えるために使用される添加剤）
緩衝剤やフィラーのように、加工、貯蔵または他の目的のために、他の生体適合性、好ましくは生分解性または代謝性材料を含むことができるが、好ましい実施形態では、抱合体だけが送達装置または構造体に導入される。
【０２７９】
緩衝剤、酸および塩基は、組成物のｐＨを調整するために使用される。移植された高分子から放出された剤の拡散距離を長くするための剤も含めることができる。
【０２８０】
フィラーは、水溶性または嵩を増やすために製剤に導入された材料に可溶性である。フィラーの種類は、ＮａＣＩ、マンニトール、糖類、合成高分子、化工デンプンおよびセルロースが挙げられるが、これらに限定されない。製剤中のフィラーの量は、通常、約１重量％と約９０重量％との間である。
【０２８１】
（使用方法）
本発明は、主に（しかしこれに限定されない）薬理学、バイオエンジニアリング、創傷治療、および皮膚病学／化粧品の分野で、生物医学的適用に使用される高分子抱合体を包含する。ある実施形態では、該高分子抱合体は、生分解性ポリアル抱合体である。特に、本発明の抱合体のための医学的適用として、注射可能な医薬品、注射可能な診断的医薬品、ゲル、管理された薬物放出のための外科用移植片およびシステム、創口閉鎖用途（縫合糸、ステープル）、整形外科固定具（ピン、杵（状）体、スクリュー、タック、靭帯）、心臓血管用途（ステント、移植片）および長く循環する標的薬物が含まれる。本発明の抱合体は、生体材料、薬物、薬物キャリア、医薬品製剤、医療装置、移植片の成分として使用することができ、低分子、薬学的に有用な構成要素、薬物、マクロ分子および診断ラベルと結びつくことができる。
【０２８２】
（処置方法）
本発明のある好ましい実施形態では、本発明の抱合体は、動物（好ましくは哺乳類、最も好ましくはヒト）を処置する方法において使用される。一実施形態では、本発明の抱合体は、本発明の生分解性、生体適合性抱合体を動物に投与することを含む、動物を処置する方法において使用されてもよい。たとえば、本発明による抱合体は、可溶性直鎖重合体、共重合体、抱合体、コロイド、粒子、ゲル、固形状物、繊維、フィルムなどの形で投与することができる。本発明の生分解性、生体適合性抱合体は、薬物キャリア、薬物キャリア成分、管理された薬物放出、低侵入式外科用処置用の製剤などとして、使用することができる。医薬品製剤は、注射可能であり、移植可能である。
【０２８３】
さらに他の態様では、本発明は、被験体に、本発明抱合体を少なくとも１つ有効量で投与することを含む、それを必要とする被験体の疾患または障害を処置する方法を提供し、前記抱合体は１以上の修飾物質を二段階プロセスで放出し、前記修飾物質は、疾患または障害の処置に適切な治療剤である。
【０２８４】
さらに他の態様では、本発明は、本発明の抱合体を少なくとも１つ、有効量で被験体に投与することを含む、該抱合体を必要とする被験体の疾患または障害を処置する方法であって前記抱合体は治療剤と結びつき；それによって抱合体は１以上の修飾物質を二段階プロセスで放出し；前記修飾物質は疾患または障害の処置のための適切な治療剤であり；前記治療剤は前記生分解性、生体適合性抱合体ポリケタールマトリックスに導入され、ある期間にわたる高分子マトリックスの分解または該マトリックスから放出した剤の拡散によって放出される、方法を提供する。
【０２８５】
ある実施形態では、修飾物質は、送達を望む部位に、前記抱合体マトリックスを移植することにより、局所送達される。
【０２８６】
ある他の例示的な実施形態では、先に記載したどの方法においても、さらに付加的な生物学的に活性な化合物を少なくとも１つ投与することを含む。
【０２８７】
ある実施形態では、修飾物質、生物学的に活性な化合物および治療剤は、独立して、ビタミン、抗ＡＩＤＳ物質、抗癌物質、放射性核物質、抗生物質、免疫抑制剤、抗ウイルス物質、酵素阻害剤、神経毒、オピオイド、睡眠薬、抗ヒスタミン、潤滑剤、トランキライザー、抗けいれん薬、筋弛緩剤および抗パーキンソン病物質、チャンネル遮断薬を含む抗痙性剤および筋肉収縮剤、縮瞳薬および抗コリン作用薬、抗緑内障化合物、抗寄生虫  および／または抗原虫化合物、細胞増殖阻害剤および抗癒着分子を含む細胞−細胞外マトリックス相互作用の調節因子、血管拡張剤、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質合成の抑制剤、降圧剤、鎮痛剤、解熱剤、ステロイド系および非ステロイド系抗炎症剤、抗血管形成因子、分泌抑制因子、抗凝血剤および／または抗血栓剤、局所麻酔剤、眼病薬、プロスタグランジン、抗うつ剤、抗精神病物質、嘔吐抑制剤、造影剤およびこれらの組み合わせからなる群より選択される。
【０２８８】
ある実施形態では、本発明の方法を実施において、抱合体は、診断ラベルをさらに含む、あるいは結びつく。ある例示的な実施形態では、診断ラベルは、γシンチグラフィーおよびＰＥＴ用放射性医薬品または放射性アイソトープ、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）用造影剤、ＣＴ検査法用造影剤、Ｘ線画像検査法用造影剤、超音波診断的法用剤、中性子活性化用剤、Ｘ線、超音波、電波およびマイクロ波を反射，  散乱またはこれらに作用しうる部分および蛍光体からなる群より選択される。ある例示的な実施形態では、抱合体はさらに生体内でモニターされる。
【０２８９】
他の態様では、本発明は、被験体の疾患または障害を処置する方法であって、少なくとも１つの本発明の抱合体の水性製剤を準備し、該製剤を前記被験体に非経口的に注射することを含む方法を提供する。ある例示的な実施形態では、抱合体は、生物学的に活性な修飾物質を含む。ある例示的な実施形態では、抱合体、検出可能な修飾物質を含む。
【０２９０】
他の態様では、本発明は、被験体の疾患または障害を処置する方法であって、本発明の抱合体を少なくとも１つ含む移植片を準備し、該移植片を前記被験体に移植することを含む方法を提供する。ある例示的な実施形態では、移植片は、生分解性ゲルマトリックスである。
【０２９１】
他の態様では、本発明は、それを必要とする動物を処置する方法であって、前記方法によって抱合体を投与することを含み、前記抱合体は、生物学的に活性な修飾物質を含む方法を提供する。ある例示的な実施形態では、生物学的に活性な成分は遺伝子ベクターである。
【０２９２】
他の態様では、本発明は、動物において免疫応答を発現させる方法であって、先に記載した方法に従って抱合体を投与することを含み、前記抱合体は抗原修飾物質を含む方法を提供する。
【０２９３】
他の態様では、本発明は、動物において疾患を診断する方法であって、前記方法により抱合体を投与する工程であって、該抱合体は検出可能な修飾物質を含む工程と、検出可能な修飾物質を検出する工程とを含む方法を提供する。
【０２９４】
ある例示的な実施形態では、前記検出可能な修飾物質を検出する工程は、非侵襲的に行われる。ある例示的な実施形態では、前記検出可能な修飾物質を検出する工程は、適切な画像機器を使用して行われる。
【０２９５】
ある一実施形態では、動物を処置する方法は、動物に本発明の生分解性、生体適合性抱合体を、腫瘍または増殖が取り除かれた外科創傷の包装体として、投与することを含む。生分解性、生体適合性抱合体包装体は、回復中に腫瘍部位と取り替えられ、創傷が癒えた時、分解し消える。
【０２９６】
ある実施形態では、抱合体は、生体内でモニタリングするために診断ラベルと結びつく。
【０２９７】
前記抱合体は、動物の処置、予防、および分析（診断的）処置のために使用することができる。抱合体は、一般的に、経口的投与されるものであるが、他の経路で投与されてもよい場合がある。
【０２９８】
一実施形態では、可溶性またはコロイド状抱合体は、静脈内投与される。他の実施形態では、可溶性またはコロイド状抱合体は、局所（たとえば、皮下、筋肉）注射によって投与される。他の実施形態では、個体抱合体（たとえば、粒子、移植片、薬物送達システム）は、移植または注射によって投与される。
【０２９９】
一実施形態では、生物学的に活性な物質（たとえば、薬物または遺伝子ベクター）を含む抱合体は、前記物質に反応する疾患を処置するために投与される。
【０３００】
他の実施形態では、検出可能なラベルを含む抱合体は、動物体内のラベル分布のパターンと動特性を研究するために投与される。
【０３０１】
他の実施形態では、抗原または抗原−発現成分（たとえば、プラスミド）を含む抱合体は、前記抗原への免疫性を発症させるために投与される。
【０３０２】
ある実施形態では、本明細書に開示するいずれか１以上の抱合体は、前記方法のいずれかの実施において使用してもよい。ある例示的な実施形態において、抱合体は、ＣＰＴ−、タキソール−またはイルジン−ＰＨＦ抱合体である。
【０３０３】
（薬物送達方法への適用）
本発明に適用できる薬物送達方法への適用の例は、特に、米国特許仮出願Ｎｏ．６０／３４８，３３３；米国実用新案出願Ｎｏ．１０／５０１，５６５；欧州特許第０３７０７３７５．６号；および国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ０３／０１０１７中に見出すことができる。これらには、ポリアル低分子−薬物抱合体、タンパク質修飾キャリア、カチオン化ポリアル、ポリアル修飾リポソーム、ポリアル修飾ナノ粒子および微粒子が含まれる。
【０３０４】
他の実施形態では、本発明の生分解性、生体適合性抱合体は、適切な診断処置によって生体内でモニタリングすることができる。このような診断的処置には、核磁気共鳴画像法（ＮＭＲ）、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、超音波、Ｘ線、シンチグラフィー、ポジトロン放射断層撮影（ＰＥＴ）などが含まれる。診断的処置によって、たとえば、抱合体配置（たとえば、分布、局在性、密度など）、または薬物、プロドラグ、生物学的に活性な化合物、またはある期間にわたる生分解性、生体適合性抱合体診断ラベルの放出を検出することができる。該方法の適性は、投与された抱合体の形および検出可能なラベルの存在に大きく依存する。たとえば、抱合体移植片のサイズおよび形は、ＮＭＲ画像法、超音波断層撮影またはＸ線（「コンピュータ化された」）断層撮影によって非侵襲的に測定することができる。γ放射または陽電子放射ラジオトレーサーを含む可溶性抱合体製剤の分布は、γシンチグラフィーまたはＰＥＴをそれぞれ使用して行うことができる。蛍光性ラベルを含む抱合体製剤の微細分布は、写真撮影を使用して、調査することができる。
【０３０５】
本発明の目的に照らし、生体内での抱合体の移行および配置は、抱合構造に導入された基を、疎水性および親水性修飾物質、帯電修飾物質、レセプターリガンド、抗体などに修飾することによって規定することができることが理解される。このような修飾は、診断ラベルの導入と組み合わせて、新しい有用な診断材の開発に使用することができる。後者は、合理的な根拠（たとえば、細胞レセプター、表在抗原、その他のような公知の体内組織成分に結合する高分子または低分子の抱合体）の基に、および合成ペプチドおよびオリゴヌクレオチド、低有機分子および金属有機分子、その他のような、知られていない、あるいはあまり知られていない結合活性を持つ種々の部分で修飾された抱合体分子のライブラリーのスクリーニングによって、設計することができる。
【０３０６】
（インターフェース成分）
本発明の実施形態では、生分解性、生体適合性抱合体は、インターフェース成分として使用することができる。本明細書で使用される語句「インターフェース成分」は、物体上の塗膜や層のような、たとえば、異物反応を抑える、炎症性応答を減少させる、血栓形成を抑えるなど、物体の生物学的環境との相互作用の特徴を変える成分を意味する。物体は、微視的でも巨視的でもありえることは理解すべきである。微視的物体の例として、マクロ分子、コロイド、小胞、リポソーム、乳液、気泡、ナノ結晶などが挙げられる。巨視的物体の例として、外科用機器、試験管、導入管の表面などの表面、生物学的体内組織に接触するものなどが挙げられる。インターフェース  成分は、細胞およびオプソニンとの直接相互作用から物体を保護し、物体と生物学的システムとの相互作用を減少させることができと考えられる。
【０３０７】
抱合体高分子の骨格鎖の官能基を修飾すべき表面に存在する官能基と抱合することによって、表面を本発明の生分解性、生体適合性抱合体によって修飾することができる。たとえば、生分解性、生体適合性ポリアル前駆体のアルデヒド基は、シアノホウ化水素の存在下、表面に存在するアミノ基と反応し、アミンリンクを形成することができる。他の実施形態では、適切な末端基を含む、本発明の生分解性、生体適合性ポリアル抱合体は、たとえば、末端アルデヒド基を有するポリアルを合成することができる。高分子は、末端基の反応によって表面に結合することができる。
【０３０８】
さらに他の実施形態では、適切な多糖類は、多糖類の還元末端、非還元末端の反応、あるいは他に、続いて起こる酸化／還元反応と多糖類残基の更なる変換によるポリアル抱合体の生成によって、表面とリンクすることができる。
【０３０９】
本発明の生分解性、生体適合性抱合体は、生分解性、生体適合性抱合体を表面上に存在する官能基を抱合する前記方法によって、酵素、ポリペプチド、タンパク質、その他のようなマクロ分子と抱合することができることは理解される。
【０３１０】
本発明の生分解性、生体適合性抱合体は、また、たとえば、疎水性、ファンデルワールス、静電的相互作用によって表面に物理的に結合することができる化合物と抱合することができる。たとえば、生分解性、生体適合性ポリアル前駆体は、脂質、高分子電解質、タンパク質、抗体、レクチン、その他と抱合することができる。
【０３１１】
本発明の他の実施形態では、本発明の生分解性、生体適合性ポリアル抱合体の生物医学的製剤は、種々の形にすることができる。インターフェース成分は、巨大分子およびコロイド状薬物キャリアの循環を延ばすことができると考えられる。したがって、そのようなキャリアに導入されている低分子、生物学的に活性な化合物、診断ラベル、その他は、免疫原生応答を刺激することなく、および細胞レセプターおよび認識タンパク質（オプソニン）との有意な相互作用なしに、体中を循環することができる。したがって、本発明の抱合体は、インターフェース成分（たとえば、ポリエチレングリコールまたは親水性ポリアル高分子）でさらに修飾され、抱合体の薬物を持つ骨格鎖が、前記インターフェース成分の鎖によって形成された「ブラシ」によって取り囲まれることもできる。後者はさらに修飾され、抱合体が、生体内のある分子マーカー、細胞または体内組織を標的とすることを可能にする。
【０３１２】
本明細書を通して、種々の刊行物が記載されているが、本発明に関連する技術の現状をさらに詳しく説明する目的で、これらは全てその全内容が参照により本明細書に組み込まれる。
【０３１３】
本発明を以下の実施例によってさらに詳しく説明する。特に断らない限り、全ての部および％は重量基準である。
【０３１４】
（等価物）
以下の代表的な例は、本発明の説明の補助するものであり、本発明の領域をこれに限定する意図もなければまた、するべきでもない。実際、本明細書で示し記載した例示に加えて、本発明の種々の変形例およびその更なる多くの実施形態が、本明細書で挙げる以下の例示および科学および特許文献に関する参考文献を含む本明細書の全内容から、当業者には明らかになるであろう。さらに、それら引用した文献の内容は、技術の現状の説明の補助のために、参照により本明細書に組み込まれる。
【０３１５】
以下の例示は、種々の実施形態およびその均等物において本発明の実践を適合させるために、重要な追加の情報、例証、および指針を含む。
【０３１６】
(例証)
実施者は、合成経路、保護基、および本発明の抱合体の合成に有用な他の材料および方法の指針のために、本明細書に含まれる情報と組み合わせて利用する高分子化学の定評のある文献を持っている。
【０３１７】
本明細書で引用した種々の参考文献は、本明細書で記載した本発明の化合物または関連のある中間体に類似する高分子の製造に関する有益な背景情報および、興味の被験体である本発明の抱合体の製剤、用途および投与に関する情報を提供する。さらなる指針は、特に、出版されている（ｉ）  Ｐａｐｉｓｏｖ  ＭＩ．Ａｃｙｃｌｉｃ  ｐｏｌｙａｃｅｔａｌｓ  ｆｒｏｍ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ７８６（２００１），３０１−３１４；（ｉｉ）Ｃａｂｏｄｉ  Ｓ．，Ｎｅｎｃｉ  Ａ．，Ｏｎｇ  Ｌ，Ｐａｐｉｓｏｖ  Ｍ，Ｄｏｔｔｏ  Ｇ−Ｐ．Ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．  Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ，  Ｄｅｐｔ  ｏｆ  Ｄｅｆｅｎｓｅ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｇｒａｍ  Ｍｅｅｔｉｎｇ，  アトランタ，ジョージア州，２０００；ｖ．ｌ  ｐ．３０７；（ｉｉｉ）  Ｍ．Ｉ．Ｐａｐｉｓｏｖ，Ｍ．Ｙｉｎ，Ａ．Ｙｕｒｋｏｖｅｔｓｋｉｙ，Ａ．Ｈｉｌｌｅｒ，Ｓ．Ｃｈｏｉ，Ａ．Ｊ．Ｆｉｓｃｈｍａｎ．Ｆｕｌｌｙ  ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ  ｐｏｌｙａｌｓ（ｐｏｌｙａｃｅｔａｌｓ  ａｎｄ  ｐｏｌｙｋｅｔａｌｓ）．２９ｔｈ  Ｉｎｔ．Ｓｙｍｐ．ｏｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，  ２００２，Ｓｅｏｕｌ，Ｋｏｒｅａ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ
Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，ディアフィールド，イリノイ州，２００２；ｐａｐｅｒ＃４６５；（ｉｖ）Ａ．Ｙｕｒｋｏｖｅｔｓｋｉｙ，Ｓ．Ｃｈｏｉ，Ａ．Ｈｉｌｌｅｒ，Ｍ．Ｙｉｎ，Ａ．Ｊ．Ｆｉｓｃｈｍａｎ，Ｍ．Ｉ．Ｐａｐｉｓｏｖ．Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ｐｏｌｙａｌ  ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ．２９ｔｈ  Ｉｎｔ．Ｓｙｍｐ．ｏｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，２００２，ソウル，韓国．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，  ディアフィールド，イリノイ州，２００２；ｐａｐｅｒ＃３５７；（ｖ）Ｍ．Ｐａｐｉｓｏｖ，Ａ．Ｙｕｒｋｏｖｅｔｓｋｉｙ，Ｍ．Ｙｉｎ，Ａ．Ｈｉｌｌｅｒ，Ａ．Ｊ．Ｆｉｓｃｈｍａｎ．  Ｆｕｌｌｙ  ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ  ｐｏｌｙａｃｅｔａｌｓ  ｆｏｒ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ．４９−ｔｈ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｔｈｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，  ロサンゼルス，カリフォルニア州，２００２．Ｊ．Ｎｕｃ．Ｍｅｄ．２００２，４３：５（Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）ｐ．３７７Ｐ；（ｖｉ）Ａ．Ｖ．Ｙｕｒｋｏｖｅｔｓｋｉｙ，Ａ．Ｈｉｌｌｅｒ，Ｍ．Ｙｉｎ，Ｓ．Ｓａｙｅｄ，Ａ．Ｊ．Ｆｉｓｃｈｍａｎ，Ｍ．Ｉ．Ｐａｐｉｓｏｖ．Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ｐｏｌｙａｌｓ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ
Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ’ｓ  Ｗｉｎｔｅｒ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ，ソルトレークシティ，ユタ州，２００３；（ｖｉｉ）Ｐａｐｉｓｏｖ，Ａ  Ｙｕｒｋｏｖｅｔｓｋｉｙ，Ｍ  Ｙｉｎ，Ｐ  Ｌｅｏｎｅ，Ａｌａｎ  Ｊ．Ｆｉｓｃｈｍａｎ，Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  Ｈｉｌｌｅｒ，ａｎｄ  Ｓａｋｉｎａ  Ｓａｙｅｄ．  Ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ  Ｐｏｌｙａｌｓ：Ｂｉｏｍｉｍｅｔｉｃ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｓｔｅａｌｔｈ
Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ２２６ｔｈ  Ｎａｔｌ．Ｍｅｅｔｉｎｇ
ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，ニューヨーク，ニューヨーク州，２００３；（ｖｉｉｉ）Ａ．Ｖ．Ｙｕｒｋｏｖｅｔｓｋｉｙ，Ａ．Ｈｉｌｌｅｒ，Ｓ．Ｓｙｅｄ，Ｍ．Ｙｉｎ，Ｘ．Ｍ．Ｌｕ，Ａ．Ｊ．Ｆｉｓｃｈｍａｎ，ａｎｄ  Ｍ．Ｉ．Ｐａｐｉｓｏｖ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ａ  ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ
ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅ  ｗｉｔｈ  ｄｕａｌ  ｐｈａｓｅ  ｄｒｕｇ  ｒｅｌｅａｓｅ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００４，中に見出せる。
【０３１８】
さらに、実施者は、特定の指針および種々の例示的な抱合体およびその中間体に関する本明細書に提供されている特定の指針および実施例に導かれる。
【０３１９】
本発明の抱合体およびそれらの製剤は、これらの化合物を製造しまたは使用する方法のいくつかを説明する実施例によってさらに理解できる。しかし、これらの実施例が本発明を限定するものではないことは理解されるであろう。現在知られているまたはさらに開発される本発明の変形は、本明細書に記載され、その後、請求の範囲としている本発明の領域内に入るものと考えられる。
【０３２０】
本発明によれば、本発明の抱合体またはそれを含む組成物を製造するために、どのような技術も使用することができる。たとえば、以下に詳しく述べる、種々の溶相合成法を使用してもよい。あるいはまたはそれに加えて、本発明の抱合体は、当業界で知られている組み合わせ技術、並列合成および／または溶相合成法を使用して製造してもよい。
【０３２１】
以下に記載するように、種々の本発明の抱合体は、本明細書に記載の方法により合成することができることが認識されるであろう。これらの化合物の製造に使用される出発材料および試薬は、アルドリッチケミカル社（ミルウォーキー、ウィスコン州）、バッケム社（トランス、カリフォルニア州）、シグマ社（セントルイス、ミズーリ州）のような市販業者から入手したり、当業者には周知の、Ｆｉｅｓｅｒ  ａｎｄ  Ｆｉｅｓｅｒ  １９９１，”Ｒｅａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，ｖｏｌｓ  １−１７，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，ニューヨーク、ニューヨーク州，１９９１；Ｒｏｄｄ  １９８９”Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，ｖｏｌｓ．１−５  ａｎｄ  ｓｕｐｐｓ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９８９；”Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ”，ｖｏｌｓ  １−４０，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  ニューヨーク、ニューヨーク州，１９９１；Ｍａｒｃｈ  ２００１，”Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，５ｔｈ  ｅｄ．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  ニューヨーク、ニューヨーク州；Ｌａｒｏｃｋ  １９９０，”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ”，２ｎｄ  ｅｄ．ＶＣＨ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；および高分子化学をさらに詳しく示すほかの参考文献などの参考文献に記載の処置によって製造したりする。以下に記載する方法は、発明の抱合体を合成することができるいくつかの方法を単に説明しただけのものであり、これらの方法は種々に変形することができ、当業者にこの開示に関し種々の変形を示唆する。
【０３２２】
出発材料、中間体および本発明の抱合体は、ろ過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィーなどを含む慣用の技法を使用して、単離、精製してもよい。それらは、物理定数およびスペクトルデータなどの寛容の方法を使用して特徴付けてもよい。
【０３２３】
（材料）
水素化ホウ素ナトリウム、水素化シアノホウ素ナトリウム、メタ過ヨウ素酸ナトリウム，１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、ジエチレントリアミン５酢酸（ＤＴＰＡ）、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）および無水コハク酸は、アルドリッチ社、セントルイス、ミズーリ州から入手した。ＩｎＣｌ３［Ｉｎ−１１１］は、パーキンエルマライフサイエンス社（ボストン、マサチューセッツ州）から入手した。無水ピリジン、エチルアルコールおよび他の溶剤は、シグマ−アルドリッチ社から得、精製することなく用いた。
【０３２４】
カンプトテシンは、ハンドテクデベロプメント社（ヒューストン、テキサス州）から入手した。デキストランＢ−５１２（Ｍｎ：７３，０００Ｄａ、１８８，０００Ｄａ）およびＮ−ＢＯＣ−グリシンは、シグマケミカル社（セントルイス、ミズーリ州）から入手した。無水コハク酸（ＳＡ）、水素化ホウ素ナトリウム、メタ過ヨウ素酸ナトリウム、１−［３−（ジメチルアミノ）プロピル−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣ）、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、トリフルオロ酢酸、塩酸および水酸化ナトリウムは、アルドリッチ社（セントルイス、ミズーリ州）から購入した。他の化学薬品、またはよりグレードの高いものは、アクロスオーガニクス社またはフィッシャーサイエンティフィック社から得、そのまま使用した。無水ピリジン、メチルアルコール、エチルアルコール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルフォキサイド，メチレンクロライド、ジエチルエーテルおよび他の溶剤は、シグマ−アルドリッチ社から入手し、精製することなく用いた。脱イオン水（固有抵抗＞１８ＭΩ）は、すべての合成および分析処置で使用した。
【０３２５】
（機器および方法）
水性媒体中のサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）および逆相（ＲＰ）クロマトグラフィーは、ＢＩＯ−ＲＡＤモデル１７５５  ＲＩ検出器およびＬＤＣ／ミルトンロイスペクトロモニター３０００ＵＶ検出器を備えるＶａｒｉａｎ−Ｐｒｏｓｔａｒ  ＨＰＬＣシステムを使用して行った。ＨＰＳＥＣバイオシルＳＥＣ−１２５およびバイオシルＳＥＣ−４００（ＢＩＯ−ＲＡＤ）、および低圧スーパーローズ−６（ファルマシア）カラムは、サイズ排除クロマトグラフィー用に使用した。ＳＥＣカラムキャリブレーションは、広分子量範囲デキストランとタンパク質基準に基づいて行った。他に記載しない限り、溶出は５０ｍＭのリン酸緩衝０．９％ＮａＣｌ、ｐＨ＝７．０で等張的に行った。
【０３２６】
アルティマＣ１８カラム（アルティマ社、２５０ｍｍ×４．６ｍｍ、５μｍのビーズ）は、低分子量ＣＰＴ誘導体および高分子−ＣＰＴ抱合体の分解生成物のＲＰクロマトグラフ測定用に使用した。
【０３２７】
高分子および高分子抱合体の分取・精製は、ミルトン−ロイ液送システム、マスターフレックスＣＬぜん動ポンプ、クナウナー−２４０１ＲＩ検出器、Ｆｏｘｙ  ＪＲフラクションコレクターおよびＶａｒｉａｎ−Ｐｒｏｓｔａｒ  データー収集システムを備えるＧ−２５ゲルスペクトラクロム（６０ｃｍ×ＩＤ１０ｃｍ）カラム上で行った。あるいは、高容量処置においては、ＵＦＰ−１０−Ｃ−４ＭＡ中空繊維カートリッジ（カットオフ：１０ｋＤａ）を備えるＱｕｉｘＳｔｅｎｄ流動透析システム（Ａ／Ｇテクノロジー社、ニードハム、マサチューセッツ州）を使用した。光子相関光散乱は、Ｂｒｏｏｋｈａｖｅｎ
ＺｅｔａＰｌｕｓ分析器を使用して行った。
【０３２８】
プロトンおよび１３Ｃ  ＮＭＲは、基準ゲージとして溶媒ピークを用いて、バリアンマキュリー−３００、ブルカーＤＰＸ−３００、およびブルカーアスペクト３０００ＮＭＲスペクトロメーター上で行った。
【０３２９】
恒温マルチセルペルチエブロックをおよびモレキュラデバイス社９６−ウェルプレートリーダーを備えるケーリー３００バイオＵＶ可視分光光度計を、分光計測および酵素動態研究のために使用した。
【０３３０】
アジレント１１００シリーズＬＣ／ＭＳＤシステムをＰＨＦ−ＣＰＴ加水分解生成物のＭＳ特性評価のために使用した。
【０３３１】
雄ｎｕ／ｎｕマウス、１８〜２４ｇ（８〜１０週齢）は、チャールズリバーラボラトリーズ、マサチューセッツ州から入手した。
【０３３２】
ヒト結腸直腸腺癌ＨＴ−２９細胞培養物は、ＡＴＣＣ（ＡＴＣＣ  ＨＴＢ−３８）由来のものである。
【０３３３】
写真撮影は、長距離作業位相差光学部品、エピフルオレッセンス画像セットアップ、ＣＣＤカメラおよびＭａｃＯＳを基礎とする画像ワークステーションとともに、ニコンエクリプスＴＥ３００顕微鏡を使用して行った。
【０３３４】
放射能測定は、ワラックウィザード１４８０γカウンター（パーキンエルマー社）を用いて行った。γシンチグラフィーは、中間エネルギーコリメーターとともに、オハイオ核γカメラを使用して行った。
【０３３５】
（ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体）
先に検討したように、巨大分子治療の生分解は、非常に幅広く使用された高分子に関し、重要なしかし充分に研究されていない問題である。たとえば、非あるいは低速度−生分解性高分子片を含む抱合体の広範な臨床用途は、長期の細胞空胞化（たとえば、Ｂｅｎｄｅｌｅ  Ａ．Ｓｅｅｌｙ  Ｊ．Ｒｉｃｈｅｙ  Ｃ．Ｓｅｎｎｅｌｌｏ  Ｇ．Ｓｈｏｐｐ  Ｇ．（１９９８）Ｓｈｏｒｔ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ：ｒｅｎａｌ  ｔｕｂｕｌａｒ  ｖａｃｕｏｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ａｎｉｍａｌｓ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ−ｇｌｙｃｏｌ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ．  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ．４２，１５２−７参照）およびリソソーム疾患症候群の過負荷の発現（たとえば、Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ，Ｍ．，Ｊｏｈａｎｓｅｎ，Ｐ．，Ｈａｕ  Ｃ．，（１９７８）Ｓｔｏｒａｇｅ  ｏｆ  ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｉｒｒｏｌｌｉｄｏｎｅ（ＰＶＰ）ｉｎ  ｔｉｓｓｕｅ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｌｏｎｇ−ｔｅｒｍ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ａ  ＰＶＰ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ．  Ａｃｔａ  Ｍｅｄ．  Ｓｃａｎｄ．，
２０４，  ２９５−２９８参照）の、用量が多い場合は、他の病理学的代謝異常（たとえば、Ｍｉｙａｓａｋｉ  Ｋ．（１９７５）Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐｏｌｙｍｅｒ
Ｓｔｏｒａｇｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ  ｉｎ  Ｒａｂｂｉｔｓ．Ｖｉｒｃｈｏｗｓ  Ａｒｃｈ．Ａ．Ｐａｔｈ．Ａｎａｔ．Ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｌ．，３６５，３５１−３６５参照）の原因となる潜在的危険性がある。実質的に完全な生分解性高分子、好ましくは低毒性の形成となる分解で、簡単に消えうるまたは代謝しうる生成物の発現が、長期細胞内体積の問題の主な根本的解決策となるようだ。正常な細胞外環境において充分な抱合体安定性を可能にする一方、細胞内取り込みの際、抱合体分解速度を適切にする巨大分子材料と架橋試薬との組み合わせは、最も有益である。
【０３３６】
親水性の実質的に完全な分解性ポリアル、たとえば、ポリ［１−ヒドロキシメチルエチレン  ヒドロキシメチルホルマール］（ＰＨＦ）が開発され、多糖類の非環状ミメティックとして報告されている（たとえば、（１）Ｐａｐｉｓｏｖ  ＭＩ，Ｇａｒｒｉｄｏ  Ｌ，Ｐｏｓｓ  Ｋ，Ｗｒｉｇｈｔ  Ｃ，Ｗｅｉｓｓｌｅｄｅｒ  Ｒ，Ｂｒａｄｙ  ＴＪ．（１９９６）  Ａ  ｌｏｎｇ−ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｐｏｌｙｍｅｒ  ｗｉｔｈ  ｈｙｄｒｏｌｙｚａｂｌｅ  ｍａｉｎ  ｃｈａｉｎ．２３−ｒｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  ｏｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，京都、日本，１９９６；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，  デルフィールド、イリノイ州；１０７−１０８；（２）Ｐａｐｉｓｏｖ  Ｍ．Ｉ．（１９９８）Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ  ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ＲＥＳ−ａｖｏｉｄｉｎｇ  ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ
Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．，３２，１１９−１３８、参照）。ある多糖類のラテラル開裂によって合成的に製造することができる、これらの材料は、基本的に、（ｉ）非生反応性、（ｉｉ）非毒性で、（ｉｉｉ）完全に分解し、したがって、種々の医薬品に適応される可能性があることが証明された（たとえば、（１）Ｐａｐｉｓｏｖ  ＭＩ，Ｂａｂｉｃｈ  ＪＷ，Ｄｏｔｔｏ  Ｐ，Ｂａｒｚａｎａ  Ｍ，Ｈｉｌｌｉｅｒ  Ｓ，Ｇｒａｈａｍ−Ｃｏｃｏ  Ｗ，Ｆｉｓｃｈｍａｎ  ＡＪ．（１９９８）Ｍｏｄｅｌ  ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ（ｍｕｌｔｉｖａｌｅｎｔ）ｖｅｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ．２５ｔｈ  Ｉｎｔ．Ｓｙｍｐ．ｏｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，１９９８，ラスベガス，ネバダ州，ＵＳＡ；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，デヒアフィールド，イリノイ州、１７０−１７１；および（２）Ｐａｐｉｓｏｖ  ＭＩ．（２００１）Ａｃｙｃｌｉｃ  ｐｏｌｙａｃｅｔａｌｓ  ｆｒｏｍ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．（Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ｆｒｏｍ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ａｎｄ  ａｇｒｏｐｒｏｔｅｉｎｓ），  ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ７８６，ｐｐ．３０１−３１４参照）。ポリアルは、ｐＨ感応性アセタールまたはケタール基を主鎖内に含み、これが、重合体について中性およびアルカリ性媒体中での安定性と酸性環境下での不安定化との所望の組み合わせをもたらす。
【０３３７】
ある実施形態では、本発明はさらに親水性ポリアルの潜在的な適用の領域を広げ、二段階薬物放出システムにおける実質的に完全に分解しうるキャリア−薬物抱合体の製剤用のこれらの材料の適切性を実証するある例示的な実施形態において、親水性ポリアル（ＰＨＦ）は、ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体得、特徴づけるために使用される。
【０３３８】
カンプトテシン１（ＣＰＴ）は、トポイソメラーゼＩ阻害活性を有する強力な抗腫瘍剤である。非修飾ＣＰＴの治療的な適用は、水性媒体中への非常に低い溶解性と、高い毒性、および生体内でのラクトン環加水分解による素早い不活性化によって、妨げられている。酸性媒体中では可逆性であるラクトン加水分解は、水溶性カルボキシレートとなる２。後者は、腎臓で消去され、出血性膀胱炎、ＣＰＴ投与に対し重篤な拒絶反応を起こす。（Ｏ２０）ラクトン環ヒドロキシルのアシル化は、安定性を大きく増す３，４。
【０３３９】
ＣＰＴ分子の親水性化は、水溶性形体、たとえばイリノテカン（ＣＰＴ−１１）を造る。後者は、最も広く使用される可溶性プロドラグであり（他のＣＰＴプロドラグと同様に）、活性な形（ＳＮ３８５）に変換するために、主に肝臓で、内質活性化を要求する。癌組織の外で活性化されたこのようなプロドラグは、癌細胞の標的化と同様に、腫瘍には適合不可となる。
【０３４０】
ＣＰＴ巨大分子およびリポソーム形は、低分子量類縁体と比較して６，７、有効性の改善が示されている。しかし、膀胱毒性はまだ報告されていた８。この書類に記載した二段階薬物放出システムある、新規な薬物動態学的と軽減された毒性を有する、可溶性、潜在的に標的移行性の巨大分子製剤を設計するものであった。
【０３４１】
二段階方式は、新油性の安定化されたＣＰＴプロドラグを放出し、次に、肝臓ミクロソームＰ４５０錯体による予備代謝の必要なく、活性な薬剤物質を局在的に（細胞内および細胞外で）放出する親水性抱合体の組み立てである。
【０３４２】
この仕事で開発したモデル放出システムは、公知の反応、スクシンアミドエステルの加水分解性環化反応に基づく。該反応は、エステル結合が開裂すると同時にアミド側でスクシンイミドが形成される。キャリア側にアミド基を有するスクシンアミドエステルリンカーを使用した試みはなされている９が、これは二段階薬物放出とはならない。本発明のシステムにおいては、スクシンアミドエステルを、エステルが高分子側に形成し、一方反対側のカルボキシルには、アミン含有薬物または薬物誘導体（本明細書ではＣＰＴ−（Ｏ２０）−グリシネート）を有するアミド結合を形成するように、配置する。
【０３４３】
スクシンアミドエステルリンカーの加水分解によって、非環状サクシンイミドグリシル−ＣＰＴの形において、高分子から薬物が開裂する（スキーム２）。反応は塩基触媒で行われ、水性媒体中穏やかな条件下で進み、完了する。第二段階は、生体内で、グリシルエステル結合加水分解が起こり、不活性な薬物を放出する。
【０３４４】
ＣＰＴに適用されるこの二段階薬物放出システムの潜在的な利点として、（１）抱合体が水溶性で、静脈内投与内投与が可能であること、（２）他のＣＰＴプロドラグと違って、たとえば、イリノテカンの中間プロドラグは、肝臓よりむしろ「部位上」で活性化され、したがって、局所投与および標的化が可能であること、および（３）ＣＰＴは、新油性でラクトン−安定化された形で放出され、これは体内組織中にプロドラグが体積し、およびカルボキシレートが再分布および尿へ移行する速度を低くすることを保障すること、が挙げられる。
【０３４５】
本明細書では、置換されていないスクシンアミドエステルリンカーから二段階放出する、完全に生分解性の巨大分子ＣＰＴ抱合体のモデルを、生体内で合成し、特徴づけた。進行中の生体内での特徴化の研究の初期の結果もまた載せている。
【０３４６】
抱合体は、骨格鎖として、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシ−メチルホルメート）（ＰＨＦ）を用いて、組み立てられた。ＰＨＦは、本発明者らの研究所で開発された高い親水性、生分解性「ステルス」高分子である１０，１１。ＰＨＦの生分解性は、非分解性高分子の大用量の投与に関する潜在的危険性を減らし、モデルＰＨＦ抱合体を臨床開発できるようにする。
【実施例】
【０３４７】
（実施例１  ＰＨＦ）
ＰＨＦは、デキストランＢ−５１２の完全ラテラル開裂によって製造された半合成非環状  ポリアセタールである。デキストランＢ−５１２の（１−＞６）−ポリグリコシド配列の完全過ヨウ素酸塩開裂によって、ポリ（１−カルボニルエチレンカルボニルホルマルホルムアルデヒド）（ＰＣＦ）を得る。ＰＣＦのペンダントアルデヒド基のホウ化水素還元によって、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルムアルデヒド）（ＰＨＦ）、具リセロールの共重合体（コポリアセタール）およびグリコールアルデヒドを得る（以下の構造を参照）を得る。酸化段階での不完全な開裂により、メチロール基のいくつかが隣接グリコール基に置き換わり、これは所望のことである。幾分低い程度の開裂で、高分子鎖中にグリコール基といくらかの原型を保った炭水化物環の両方が残る。
【０３４８】
【化６７】
2014111657.tif 000080
【０３４９】
ＰＨＦの特性は、以下の通りである：
ＰＨＦは、高親水性であり、水溶性高分子であり、生理学的条件で安定であるが、リソソームｐＨでプロトン触媒加水分解を受ける。
【０３５０】
該高分子は、４ｇ／ｋｇのＩＶおよびＩＰ（多量用量は検査せず）までの用量でマウスには毒性のないことを示した。ＩＶ投与の時、低分子量ＰＨＦ（＜５０ｋＤａ）で、どの体内組織においても重篤な蓄積なく、腎臓で殆ど完全に消滅する。
【０３５１】
腎臓によって消滅しない、高分子量ＰＨＦおよび誘導体（ＰＨＦ修飾マクロ分子およびモデル薬物キャリア）は、１０〜２５時間までの半減期（げっ歯類）、ほぼ均一な最終分布（蓄積／他の臓器より２倍高いだけのＲＥＳにおける組織１ｇ）で循環する。後者は、食細胞他の細胞および認識タンパク質（「ステルス」特性２７）による認識の欠如を示唆する。
【０３５２】
ＰＨＦは、マルチグラムスケールで、種々の分子量において製造された。ＰＨＦの化学構造は、ペンダントＯＨ基と少なくとも１つの末端隣接グリコール基を介して、多種多様な修飾と誘導体化を可能にする２８。数種のＰＨＦ誘導体が、モデル生物医学的製剤（タンパク質および低分子抱合体、長時間循環する薬物キャリア、その他）として、合成され、特徴付けられた２８，２９，３０，３１，３２，３３，３４。
【０３５３】
「ステルス」特性、生分解性プロファイルおよび技術的自由度のため、ＰＨＦは数種の医薬品およびバイオエンジニアリング用途に大いに期待できる材料である。特に、ＰＨＦの生分解性および多官能基性は、低分子抱合体のサイズと構造上のいくつかの限定を解消し、たとえば、細胞中に高分子が長い期間蓄積される危険性なく、高分子量抱合体の高用量投与（＞５０ｋＤａ）を可能にする。
【０３５４】
発明者らの研究所、ＭＧＨで開発されたＰＨＦのいくつかの臨床的な関連モデル製剤は、医薬品工業との共同研究で評価された。ポリアセタール技術の種々の態様が共同開発され、またはＭＧＨによって、ノバルティス社、アムジェン社、およびナノファルマ社にライセンスされている。
【０３５５】
ＰＨＦ高分子材料の製剤に関する付加的な指針は、特に、ＰＣＴ／ＵＳ０３／２２５８４に見出すことができる。
【０３５６】
高分子は、Ｃ２〜Ｃ３のデキストランに由来する、５％２，３−ジヒドロキシエチルホルムアルデヒド単位ホスムアルデヒド単位を有するＰＨＦの形成を可能にする、先に記載した技術ｌ２の加速変性を使用して製造した。デキストランＢ−５１２、７３ｋＤａ製剤（１５．１５ｇ、９３．４ｍｍｏｌ、グリコピラノシド）を３００ｍＬの脱イオン水に０〜５℃で溶解し、遮光反応器中、４７．９５ｇ（２２４．２ｍｍｏｌ）のメタ過ヨウ素酸ナトリウムで３時間処理した。結晶性ヨウ素酸ナトリウムをろ過（１μガラスフィルター）によって、反応混合物から除去した。ろ液のｐＨを５ＮのＮａＯＨで８．０に調整し、得られた溶液を直ちに水素化ホウ素ナトリウム（７．０７ｇ、１８７ｍｍｏｌ、７０ｍＬの脱イオン水中に溶解）で２時間処理した。次いで、ｐＨを１ＮのＨＣＩで６．５に調整した。生成物を、セファデックスＧ２５上で脱塩し、凍結乾燥した。収率：８０％。ＳＥＣ分析の結果、Ｍｎ＝６０ｋＤａ、多重分散度指標（Ｍｗ／Ｍｎ）は２．０であった。プロトンＮＭＲスペクトル（ＤＭＦ−ｄ６中）：Ｄ２０（９５：５ｖ／ｖ）によって、Ｃ２〜Ｃ３（δ４．４９ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ）由来の隣接ジオールペンダント基約５％を含む、予測ＰＨＦ構造（Ｃｌ−Ｈδ：４．６２ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ）と一致することがわかった。
【０３５７】
（実施例２  ＣＰＴ−２０−（Ｏ）−グリネートトリフルオロ酢酸塩  （ＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ））
ＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡは、Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ１２，１４によって報告された手順によって２段階で製造し、Ｍｉｎｋｏ１ｅによって修飾した。つまり、ＣＰＴをメチレンクロライド中、ＤＭＡＰの存在化下で、ＢＯＣ−グリシンおよびＤＩＰＣで処理した。Ｎ−ＢＯＣ基はトリフルオロ酢酸で取り除き、得られたＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡをジエチルエーテルから結晶化した。純度：＞９７％（ＨＰＬＣ，ＮＭＲ）
（実施例３  ＰＨＦ−スクシネート（ＰＨＦ−ＳＡ））
ＰＨＦ（１０．００ｇ、７５．６ｍｍｏｌ）、無水コハク酸（０．７６ｇ，７．６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１．２ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）を５ｍＬの無水ピリジンに溶解した。４０℃で１８時間撹拌した後、ピリジンを真空下取り除き、残基を脱イオン水中に懸濁し、ｐＨを１ＮのＮａＯＨで７．０に調整した。該スクシニル化ＰＨＦをセファデックスＧ−２５上で脱塩し、凍結乾燥し、８６％の収率を得た。電位差滴定によって測定したコハク酸含量は、１０．３％（ｍｏｌ／モノマー）であった。高分子（Ｄ２Ｏ）の１Ｈ
ＮＭＲスペクトルスペクトルは、ＰＨＦ骨格鎖のメチレンおよびメチン（δ３．３−３．８）およびアセタール（δ４．４−４．７）プロトンの特徴的シグナルに加え、コハク酸エステルのメチレンプロトンの特徴シグナル、δ２．６６およびδ２．５７（ｂｒｏａｄ  ｔｒｉｐｌｅｔｓ）も含んでいた。
【０３５８】
（実施例４  カンプトテシン−ＰＨＦ抱合体（ＰＨＦ−ＣＰＴ））
ＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡとＰＨＦ−ＳＡとの抱合は、（ｉ）水性媒体中での高分子−スクシネートのＣＰＴ−２０−Ｏ−グリシネートトリフルオロアセテート塩によるＥＤＣ媒介アミド化、または（ｉｉ）非水性条件（ＤＭＦ）下でのＤＩＰＣ媒介カップリングによって行われた。最初のアプローチは（下記）より効率的で、より速い反応速度に基づき、よりきれいな生成物が得られ、生成は簡単であった。
【０３５９】
全段階合成の前に、種々のＣＰＴ含量（約５％〜１５％ｗ／ｗ）をもつ抱合体を下側の目盛りで準備し、水性媒体中で溶解性をテストすると、１０％ｗ／ｗまでのＣＰＴ含量をもつ抱合体は、易可溶性を示した。
【０３６０】
（前段階合成）ＰＨＦ−ＳＡ（１５．０ｇ，１０．７ｍｍｏｌＳＡ）を１５０ｍＬの脱イオン水に溶解し、３０ｍＬのＤＭＦと混合し、−２℃に冷却し、ＣＰＴ−ＧｌｙのＴＦＡ溶液（２０ｍＬの３：１アセトニトリル／水混合物中、２．０ｇ／３．８５ｍｍｏｌ）と組み合わせた。激しく撹拌しながら、ＥＤＣ（２．０ｇ）を反応混合物に加えた。ｐＨを５．９〜６．０に調整した。３０分撹拌した後、反応混合物の温度を室温にし、撹拌をさらに３時間続けた。この時点のＣＰＴ変換率は、ＲＰ  ＨＰＬＣ（ＵＶ：３６０ｎｍ）に基づき９３％であった。ｐＨを５．５に調整して、ＣＰＴが抱合体から放出するのを防ぎ、反応混合物を８℃で一晩放置した。次いで、混合物をＤＭＦおよび水で希釈して、６００ｍＬ（ＤＭＦ含量：１０％ｖ／ｖ）とし、抱合体をセファデックスＧ−２５上で脱塩し、凍結乾燥し、−２０℃で保存した。得られた生成物は、オフホワイトから薄い黄色の個体で、ＣＰＴ含量は７．４８％ｗ／ｗ（３６０ｎｍで分光光学的に測定）であった。ＣＰＴに基づく収率：８０％
ＰＨＦ−ＣＰＴのプロトンＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ６／Ｄ２Ｏ）は、コハク酸修飾ＰＨＦ骨格鎖に特徴づけられたシグナル：δ３．３−３．８（メチレンおよびメチン），δ４．４−４．７（アセタール），δ２．４−２．６（−ＣＨ２−，スクシネート）；およびペンダントＣＰＴ構造に対応するシグナル：δ０．９５（ｔ），δ２．２１（ｄ），δ５．２６（ｍ），δ５．４６（ｓ），δ７．２０（ｓ），δ７．７０（ｔ），δ７．８８（ｔ），δ８．０９（ｄ），δ８．１８（ｄ），δ８．４５（ｓ）を含んでいた。
【０３６１】
反応混合物および凍結乾燥生成物の組成物を表１に示す。
【０３６２】
（表１  ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体組成物（ＣＰＴ、ｍｏｌ％））
【０３６３】
【表１】
2014111657.tif 000081
【０３６４】
合成されたＰＨＦ−ＣＰＴは、水性媒体に可溶性であった。ＨＰＳＥＣは、Ｍｎが〜６５ｋＤａであり、実質的に凝集が起こっていないことを示した（光子相関光散乱法）。２０％までの溶液の粘度は、げっ歯類研究で使用される高いゲージ針による注射が実施可能なものであった。殆どの注射は、６％ｗ／ｗ（η＝４．０５ｃｐｓ）で行われる。
【０３６５】
（実施例５  カンプトテシン−２０−（Ｎ−スクシンイミドグリシネート）（ＣＰＴ−ＳＩ））
ＣＰＴ−ＳＩは、ＰＨＦ−ＣＰＴ加水分解生成物から単離した新油性プロドラグである（下記参照）。ＣＰＴ−ＳＩはコントロール化合物として合成した。
【０３６６】
ＰＨＦ−ＣＰＴ（５００ｍｇ）を１０ｍＬの０．１Ｍリン酸塩、ｐＨ７．６に溶解し、２４時間、３７℃で培養した。得られた懸濁物を１５０ｍＬに希釈し、メチレンクロライド（３×１５０ｍＬ）で抽出した。メチレンクロライド層を組み合わせ、０．０１ＮのＨＣｌで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。溶剤を真空下で取り除いた。薄い黄色の残渣をメチレンクロライド中に再溶解し、ろ過し、真空管層し、ＲＰ  ＨＰＬＣによれば、＞９３％ＣＰＴ−ＳＩを含む３８ｍｇの生成物を得た。ＣＰＴ−ＳＩの水への溶解性は、非修飾ＣＰＴより低く、それぞれ＜１．０μｇ／ｍＬ対２．５μｇ／ｍＬであった。
【０３６７】
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１．０１（τ，３Ｈ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，Ｃ１９），δ２．０５−２．３２（ｍ，２Ｈ，Ｃ１８），δ２．６６（ｓ，４Ｈ，スクシンイミド），δ４．３２−４．５１（ＡＢ，２Ｈ，１７．２Ｈｚ，Ｃ−aＧｌｙ），δ
５．３２（ｓ，２Ｈ，Ｃ−５），δ５．２９−５．６５（ＡＢ，２Ｈ，１７．３Ｈｚ，Ｃ−１７），δ７．２０（ｓ，１Ｈ，Ｃ−１４），δ７．６０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｃ−１１），δ７．７６（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），δ７．８６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，Ｃ−１２），δ８．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．３，Ｃ−９），δ８．３２（ｓ，１Ｈ，Ｃ−７）
１３Ｃ  ＮＭＲ：７．２３，２８．３６，２９．８９，３２．０４，３９．５３，５０．１７，６７．３１，７７．４５，９６．２９，１２０．５４，１２８．２３，１２８．３３，１２８．６４，１３０．００，１３０．８０，１３１．３５，１４５．１４，１４６．７０，１４９．０８，１５２．４６，１５７．４８，１６６．２７，１６６．７８，１７５．９５。
【０３６８】
ＭＳ：ｍ／ｚ４８８．２（Ｍ＋Ｈ）
（実施例６  カンプトテシン−２０−（Ｎ−スクシンアミドグリシネート）（ＣＰＴ−ＳＡ，コントロール））
ＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ（５０ｍｇ，０．０９６ｍｍｏｌ）および無水コハク酸（１８ｍｇ，０．１９０ｍｍｏｌ）を２ｍＬの無水ピリジン中に溶解した。室温で１８時間撹拌した後、ピリジンを真空下で取り除いた。個体残渣を脱イオン水に懸濁し、メチレンクロライドで抽出し、０．０１ＮのＨＣｌで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。真空下で溶剤を取り除き、＞９０％ＣＰＴ−ＳＡ（３６０ｎｍでのＨＰＬＣ検出）を含む、淡黄色個体（４１．４ｍｇ，収率：８５％）を得た。ＬＣ−ＭＳ：ｍ／ｚ５０６．２（Ｍ＋Ｈ）。生成物は、ＰＨＦ−ＣＰＴ加水分解生成物の組成物を測定するためのＨＰＬＣ基準として使用した。
【０３６９】
（実施例７  スクシニル化ポリアセタールキャリアの製剤）
置換されたスクシニル基で修飾されたポリアセタールキャリアを、前記ＰＨＦ−ＳＡで記載した手順に類似した手順によって製造した。つまり、１００ｍＬの乾燥ピリジン中の無水ＰＨＦ  Ｍｎ６０ｋＤａ（１０．０ｇ）を、計算量の無水コハク酸誘導体（表２参照）とＤＭＡＰ（無水物：ＤＭＡＰ＝１：０．１モル比）で１８時間、４０℃で処理して、ＰＨＦ構造単位置換率が約１０％（ｍｏｌ）である、コハク酸誘導体の対応ＰＨＦ−スクシネートの定量的転換を行った。真空下、ピリジンを除去後、ＰＨＦ−スクシネートをＤＩ水に溶解し、ＤＩ水で平衡化したセファデックスＧ−２５カラム上でゲルろ過することによって、低分子量不純物を精製した。最終生成物を、凍結乾燥によって水溶液から回収し、平均収率８５〜９０％の泡状体として得た。得られたＰＨＦ−スクシネートは、親水性高分子で、水および極性有機溶剤（ピリジン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ）に容易に溶解する。高分子収率、組成、およびスクシネート含量を表２に示す。
【０３７０】
（表２  スクシニル化ＰＨＦキャリアの組成および特性）
【０３７１】
【表２】
2014111657.tif 000082
【０３７２】
（実施例８  （２−ノネン−１−イル）−コハク酸架橋ＰＨＦ−ＣＰＴ  （ＰＨＦ−ＮＳＡ−ＣＰＴ））
ＰＨＦ−（コハク酸２−ノネニル）（ＰＨＦ−ＮＡＳ）（２．５ｇ、２．２３ｍｍｏｌ
ＮＳＡ）を５０ｍＬの脱イオン水に溶解し、２０ｍＬのＤＭＦと混合し、０℃に冷却し、１５ｍＬの４：１アセトニトリル／水混合物）中のＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ溶液（４５４ｍｇ／０．８４８ｍｍｏｌ）と組み合わせた。激しく撹拌しながら、該反応混合物にＥＤＣ（５００ｍｇ）を加えた。ｐＨを５．９〜６．０に調整した。３０分撹拌した後、反応混合物の温度を室温にし、撹拌をさらに３時間続けた。ＨＰＬＣ（ＵＶ：３６０ｎｍ）でモニタリングした３時間後のＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ変換率は＞９２％であった。次いで反応混合物を１：９ｖ／ｖＤＭＦ／水混合物で希釈して１５０ｍＬとし、得られた溶液のｐＨを５．５に調整した。得られた抱合体をセファデックスＧ−２５上で脱塩し、凍結乾燥した。生成物はオフホワイトから淡黄色の、水および極性有機溶剤（ピリジン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ）に溶解しうる個体として得られた。３６０ｎｍで分光光学的に測定したＣＰＴ抱合体含量は、１３．０％ｗ／ｗであった。ＣＰＴに基づく収率：＞９５％。抱合体中の残留カルボキシル基含量は４．１ｘ１０−４ｍｏｌ／ｇであった。
【０３７３】
ＰＨＦ−ＮＳＡ−ＣＰＴのプロトンＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ６／Ｄ２Ｏ）は、コハク酸ノネニル修飾ＰＨＦ骨格鎖に特徴づけられたシグナル：δ３．３−３．８（メチレンおよびメチンＰＨＦ），δ４．４−４．７（アセタール），δ２．６−２．７（−ＣＨ２−，スクシネート），δ０．９６（ｔ）（−ＣＨ３，ノネニル），δ１．２５−１．３５（−ＣＨ２−，ノネニル），δ５．６５およびδ５．７５．（−ＣＨ＝，ノネニル）；およびペンダントＣＰＴ構造に対応するシグナル：δ０．９５（ｔ），δ２．２２（ｄ），δ５．２６（ｍ），δ５．４６（ｓ），δ７．２０（ｓ），δ７．７１（ｔ），δ７．８９（ｔ），δ８．１０（ｄ），δ８．１８（ｄ），δ８．４５（ｓ）を含んでいた。
【０３７４】
（実施例９  メチルコハク酸−架橋ＰＨＦ−ＣＰＴ（ＰＨＦ−ＭＳＡ−ＣＰＴ））
ＰＨＦ−（コハク酸メチル）（ＰＨＦ−ＭＳＡ）（２．５ｇ，１．７２ｍｍｏｌ  ＭＳＡ）を５０ｍＬの脱イオン水に溶解し、２０ｍＬのＤＭＦと混合し、０℃に冷却し、１５ｍＬの４：１アセトニトリル／水混合物）中のＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ溶液（４５０ｍｇ／０．８４０ｍｍｏｌ）と組み合わせた。激しく撹拌しながら、該反応混合物にＥＤＣ（５００ｍｇ）を加えた。ｐＨを５．９〜６．０に調整した。３０分撹拌した後、反応混合物の温度を室温にし、撹拌をさらに３時間続けた。ＨＰＬＣ（ＵＶ：３６０ｎｍ）でモニタリングした３時間後のＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ変換率は＞９０％であった。次いで反応混合物を１：９ｖ／ｖＤＭＦ／水混合物で希釈して１５０ｍＬとし、得られた溶液のｐＨを５．５に調整した。得られた抱合体をセファデックスＧ−２５上で脱塩し、凍結乾燥した。生成物はオフホワイトから淡黄色の、水、食塩水および極性有機溶剤（ＤＭＦ、ＤＭＳＯ）に溶解しうる個体として得られ、固有ｐＨ５．７であった。３６０ｎｍで分光光学的に測定したＣＰＴ抱合体含量は、７．６５％ｗ／ｗであった。ＣＰＴに基づく収率：７１％。抱合体中の残留カルボキシル基含量は３．０ｘ１０−４ｍｏｌ／ｇであった。
【０３７５】
ＰＨＦ−ＮＳＡ−ＣＰＴのプロトンＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ６／Ｄ２Ｏ）は、メチルコハク酸修飾ＰＨＦ骨格鎖およびペンダントＣＰＴ構造に特徴付けられるシグナルを含んでいた。
【０３７６】
（実施例１０  １，１−ジメチルコハク酸架橋ＰＨＦ−ＣＰＴ（ＰＨＦ−ＭＳＡ−ＣＰＴ））
ＰＨＦ−（コハク酸１，１−ジメチル）（ＰＨＦ−ＤＭＳＡ）（２．５ｇ，１．７０ｍｍｏｌ  ＤＭＳＡ）を５０ｍＬの脱イオン水に溶解し、２０ｍＬのＤＭＦと混合し、０℃に冷却し、１５ｍＬの４：１アセトニトリル／水混合物）中のＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ溶液（４５０ｍｇ／０．８４０ｍｍｏｌ）と組み合わせた。激しく撹拌しながら、該反応混合物にＥＤＣ（５００ｍｇ）を加えた。ｐＨを５．９〜６．０に調整した。３０分撹拌した後、反応混合物の温度を室温にし、撹拌をさらに３時間続けた。ＨＰＬＣ（ＵＶ：３６０ｎｍ）でモニタリングした３時間後のＣＰＴ−Ｇｌｙ．ＴＦＡ変換率は＞９０％であった。次いで反応混合物を１：９ｖ／ｖＤＭＦ／水混合物で希釈して１５０ｍＬとし、得られた溶液のｐＨを５．５に調整した。得られた抱合体をセファデックスＧ−２５上で脱塩し、凍結乾燥した。生成物はオフホワイトから淡黄色の、水、食塩水および極性有機溶剤（ＤＭＦ、ＤＭＳＯ）に溶解しうる個体として得られ、固有ｐＨ５．７であった。３６０ｎｍで分光光学的に測定したＣＰＴ抱合体含量は、６．９％ｗ／ｗあった。ＣＰＴに基づく収率：  約６５％  抱合体中の残留カルボキシル基含量は２．９ｘ１０−４ｍｏｌ／ｇであった。
【０３７７】
ＰＨＦ−ＮＳＡ−ＣＰＴのプロトンＮＭＲスペクトル（ＤＭＳＯ−ｄ６／Ｄ２Ｏ）は、メチルコハク酸修飾ＰＨＦ骨格鎖およびペンダントＣＰＴ構造に特徴付けられるシグナルを含んでいた。
【０３７８】
（実施例１１  ＰＨＦ−ＣＰＴ加水分解）
ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体の加水分解安定性を、ＤＩ水および等張食塩水中、室温、ｐＨ＝５．７で、０．０５Ｍリン酸緩衝０．９％食塩水（ｐＨ７．４）中、および新しく製造したラット血漿中３７℃で、試験した。ＰＨＦ−ＣＰＴ加水分解およびＣＰＴ誘導体の蓄積は、２０分１０〜７０％アセトニトリル／水勾配（両溶剤とも０．１％ＴＦＡを含む）を使用したＲＰ  ＨＰＬＣによってモニタリングした。結果は２つの独立した実験で再現した。
【０３７９】
ＣＰＴ−ＳＩの第二段階加水分解を同様にして行った。
【０３８０】
環化−消滅（スキーム２）反応は、スクシンアミドエステルの非環状中間体構造への折りたたみ、続いてエステル炭素上での分子内ヌクレオシドによる求核性攻撃を包含する。したがって、反応は（１）嵩高い置換基および（２）リンカーのいずれかのカルボキシル炭素上の帯電密度を変える置換基の存在に敏感であるべきである。第二フェーズは、また、プロドラグのスクシンイミド環中の置換基によって影響を受けうる。したがって、スクシネートリンカー中の置換は、薬物放出プロフィールの調整に関し、力強いツールでありえる。さらに、スクシネートリンカー中の置換は、プロドラグ特性（疎水性、経膜移送、細胞レセプターに対する親和性など）の調整に道を開くこともでき、これによって、薬物動態が強化されうる。
【０３８１】
ＰＨＦ−ＣＰＴの他の置換された類縁体を、実施例７〜１０で記載したメチル、２，２−ジメチルおよび２−ノネン−２−イルスクシネートを用いて合成した。前記した処理に類似する処理を用いて、これらの抱合体からのＣＰＴ  放出は、前記リン酸緩衝食塩水中で調べた。抱合体は、また、ＨＴ２９細胞培養における細胞毒性についてもテストした。
【０３８２】
ＰＨＦ−ＣＰＴ溶液（固有ｐＨ＝５．５〜５．７、生理学的に無視できる緩衝能で）は、８℃で１週間保存後、または室温で２４時間放置後、有意な分解を示さなかった。中性および弱塩基性ｐＨ（７．０〜７．４）および穏やかな条件（８〜３７℃）で、抱合体は緩やかな加水分解を受け、主にＣＰＴ−２０−Ｏ−（Ｎ−スクシンイミドグリシネート）（ＣＰＴ−ＳＩ）を生成した。たとえば、ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体の加水分解（０．０５Ｍリン酸緩衝０．９％食塩水中２ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ７．４、２４時間）によって、ＰＨＦ−ＣＰＴからのＣＰＴの定量的な放出が、検出可能な生成物のみであるＣＰＴ−ＳＩラクトン（８７％）、ＣＰＴカルボキシレート（８％）およびＣＰＴ−ＳＡラクトン（５％）として、起こった。特に、これらの条件下でプロドラグから放出されたＣＰＴは、カルボキシレートの形であり、ラクトンの形ではなかった。これは、ＣＰＴ−ＳＩおよびＣＰＴ−ＳＡ中では安定であったラクトン環が、ＣＰＴ放出の第二段階の間に加水分解されたことを示唆する。
【０３８３】
類似の傾向しかし僅かに相違する加水分解生成物の組成が、図１に示すように、新たに調製したラット血漿中で観察された。これは、おそらく血漿タンパク質の相互作用が介在する、付加的なＣＰＴ放出メカニズムの存在を示唆する。ＰＨＦ−ＣＰＴからのＣＰＴの開裂（全て形成）は、２．２±０．１時間の半減放出時間を伴う単一指数関数であることがわかった。
【０３８４】
続いて起こるＣＰＴ−ＳＩの加水分解の半減時間は、条件（もしあるとすれば、正確なｐＨ依存性および酵素感応性は進行中の研究の中で決定される）に依るが、２０時間を超えていた。
【０３８５】
３種の合成、置換されたＰＨＦ−ＣＰＴ類縁体に関しても、第一フェーズ放出速度を測定する検査を行った。予期したように、嵩高いノネニル基（加水分解環化に必要なリンカーの折りたたみを立体的に妨害する）が放出速度を減少させ、一方、環状構造を安定化するメチル基は、放出速度を増加させた（表３；各結果は２つの独立した実験に基づく。各データポイントデｎ＝４〜６；全ての数字ＳＤ＜平均値の１０％，ｐ＜０．０５）。
【０３８６】
（表３  ｐＨ７．４／３７℃でのＰＢＳ中の修飾ＣＰＴ−ＰＨＦ抱合体の放出速度の比較）
【０３８７】
【表３】
2014111657.tif 000083
【０３８８】
。
【０３８９】
（実施例１２  ＰＨＦ−ＳＡＧ−タキソール抱合体）
二段階放出スクシンアミドグリシンリンクを利用した、水溶性のＰＨＦとのタキソール抱合体、ＰＨＦ−スクシンアミドグリシン−タキソール抱合体（ＰＨＦ−ＳＡＧ−タキソール）を、タキソール−２’（Ｏ）−グリニネートおよびスクシネート化ＰＨＦから製造した。
【０３９０】
タキソール−２’（Ｏ）−グリシン−ＮＨ２を、タキソールのＨＯ−Ｇｌｙ−（Ｚ）（ＤＩＰＣ，ＤＭＡＰ，ＣＨ２Ｃｌ２）とのアシル化、続いて、アミノ基脱保護（Ｈ２，Ｐｄ／Ｃ，ＭｅＯＨ）の２工程で得た。全体の収率：６０％［Ｚ＝Ｃｂｚ］タキソール−２’（Ｏ）−Ｇｌｙ−ＮＨ２を５０％ＤＭＦ水溶液中ＥＤＣ介在カップリングを介して、ＰＨＦ−スクシネートに抱合させた（１０％ｍｏｌ、コハク酸，ＭＷ：６５ｋＤａ）。ＰＨＦ−ＳＡＧ−タキソール抱合体合成は、２ｇスケール、室温、ｐＨ５．５〜６．０で行われた。ＰＨＦ−ＳＡＧ−タキソールへの定量的（＞９８％）タキソール−グリシネート変換率は、３時間以内に測定された。ＰＨＦ−ＳＡＧ−タキソールに関し、ＤＩ水で平衡化したセファデックスＧ２５カラム上でゲルろ過することによって、低分子量不純物を精製し、凍結乾燥によって水溶液から回収した。上記処置に続き、６％〜１３％（ｗｔ．）の範囲のタキソール荷重をもつ抱合体を製造した。生成物は全て脱イオン水および食塩水に易可溶性であった。水性媒体中のＰＨＦ−タキソール抱合体の安定性は、ＨＰＬＣによってモニタリングした。ＰＨＦ−ＳＡＧ−タキソールの水溶液は、室温条件、ｐＨ範囲が４．５〜５．５で安定であった。生理学的条件（ＰＢＳ，ｐＨ７．４，３７℃）で、該薬物は、１．５±０．２時間の半減時間で抱合体から放出し、タキソール−２’（Ｏ）−（スクシンイミドグリシン）およびタキソールの１．５：１．０の比の混合物を得た。これらの条件下、タキソール−２’（Ｏ）−（スクシンイミドグリシン）エステルは約３時間の半減時間でタキソールに加水分解した。タキソール含量が１３％のＰＨＦ−ＳＡＧ−タキソール製剤の抗腫瘍活性を試験管内で、ＨＴ−２９ヒト結腸直腸癌細胞を使用してテストした。ＰＨＦ−タキソール抱合体および非修飾タキソール製剤とも、統計値的に同一の細胞増殖阻害有効性（ＥＤ５０  １５ｎＭ）を示した。
【０３９１】
（実施例１３  グリシル−イルジン）
イルジンＭ、５０ｍｇ（０．２ｍｍｏｌ）を２ｍＬの無水ＴＨＦに溶解し、０℃に冷却した。次いで、６５ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）のＦｍｏｃ−グリシン、３０ｍｇ（０．２２ｍｍｏｌ）のジイソプロピルカルボジイミドおよび１ｍｇの４−（ジメチルアミノ）ピリジン（ＤＭＡＰ）を加えた。反応混合物を０℃で２時間撹拌し、一晩室温で放置した。得られたＦｍｏｃ−グリシル−イルジンをカラムクロマトグラフィー（シリカ，１％エタノールを含むクロロホルム）で精製し、真空下で乾燥した。収率：７３ｍｇ（７０％）
Ｆｍｏｃ−グリシル−イルジン（３０ｍｇ）をＤＭＦ中５ｍＬの２０％ピペリジンに溶解した。溶液を室温で３時間撹拌した。溶剤を真空下取り除き、得られたグリシル−イルジンをカラムクロマトグラフィー（シリカ，３％エタノールおよび１％トリエチルアミンを含むクロロホルム）で精製した。収率：１０ｍｇ（５７％）
（実施例１４  ＰＨＦ−イルジンＭ）
実施例１で記載したように製造した無水ＰＨＦ、Ｍｎ７３ｋＤａ（２．０ｇ）を５０ｍＬの乾燥ピリジンに溶解した。次いで、０．１５ｇの無水コハク酸および１８ｍｇのＤＭＡＰを加えた。反応混合物を１８時間、４０℃で培養した。該反応によってＰＨＦの定量的なアシル化が起こり、スクシニル化モノマー単位が１０％のＰＨＦ−スクシネートを得た。真空でピリジンを取り除いた後、ＰＨＦ−スクシネートを脱イオン水に溶解し、脱イオン水で等張化したセファデックスＧ−２５カラム上のゲルろ過によって精製した。最終生成物を凍結乾燥によって水溶液から回収した。収率：ほぼ１００％
ＰＨＦ−スクシネート（１００ｍｇ）を２ｍＬの脱イオン水に溶解し、０．５ｍＬのＤＭＦと混合した。グリシル−イルジン、１０ｍｇを０．５ｍＬのアセトニトリルに溶解した。溶液を０℃に冷却して、混合した。激しく撹拌しながら、ＥＤＣ（１−エチル−３−（３−ジエチルアミノプロピル）カルボジイミド；２０ｍｇ）を反応混合物に加えた。ｐＨを５．９〜６．０に調製した。３０分後、反応混合物の温度を室温にし、さらに３時間撹拌を続けた。ＰＨＦ−スクシネートに結びついたグリシル−イルジンを、サイズ排除ＨＰＬＣ（検出：ＵＶ３１８ｎｍで）によってモニタリングした。反応が終了した時、１５ｍＬの脱イオン水を加えた。ｐＨを５．５に調整し、反応混合物を直ちにセファデックスＧ−２５上で脱塩した。生成物、ＰＨＦ−イルジンを凍結乾燥した。収率：ほぼ１００％。高分子特性を表４に示す。
【０３９２】
（表４  ＰＨＦ−イルジンＭ抱合体の特性）
【０３９３】
【表４】
2014111657.tif 000084
【０３９４】
１：薬物負荷は３１８ｎｍでＵＶスペクトロメーターによって測定した。
２：合理的溶解度は、２５０ｍｇの抱合体を１ｍＬの水に溶解することによって測定した。得られた溶液の粘度は、非常に高くてＩＶ注射をすることができなかった。
【０３９５】
（実施例１５  標識化）
二段階標識化抱合体（３Ｈ標識されたＣＰＴおよび１１１Ｉｎ標識された骨格鎖）を使用して、抱合体成分の平行独立モニタリングを行った。
【０３９６】
０．２１０ｍＣｉ／ｇの活性度および７．０％ｗ／ｗのＣＰＴ含量を有する、［３Ｈ］標識化ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体を、ＰＨＦ−ＣＰＴにおいて記載した［５−３Ｈ（Ｎ）］−カンプトテシン（モラベックバイオケミカル社）を使用して製造した。抱合体の高分子骨格鎖をＤＴＰＡで修飾し、ｐＨ５．５でクエン酸インジウムからトランスキレート化によって１１１Ｉｎで標識化した。ＤＴＰＡによるＰＨＦ−ＣＰＴの修飾は、（１）ＰＨＦ構造上に存在する隣接ジオール（実施例１参照）をジオール基のメタ過ヨウ素酸ナトリウム塩で、過ヨウ素酸塩比１：１、ｐＨ５．７、２時間、室温で酸化した。得られたペンダントアルデヒド基を、１−アミノ−２−ヒドロキシ−３−（アミノオキシ）−プロパンのＤＴＰＡアミドで非還元的にアミド化した。穏やかな条件下でアルデヒドとオキシム結合を形成する後者「アミノオキシ−ＤＴＰＡ」は、発明者らの研究所で製造した（合成は他で記載）。生理学的条件下でヒドラジドより有意に安定１５で、一般的に毒性が殆どないオキシムは、分子抱合体におけるカルボニル修飾により適切であると考える。
【０３９７】
全ての標識化された誘導体の放射化学的純度は＞９８％（ＨＰＬＣ）であった。
【０３９８】
（実施例１６  生物動態）
ＰＨＦ−ＣＰＴ抱合体の生物動態および生体内分布を、正常なラットおよび二重−標識化ＣＰＴ抱合体を含む抱合体を使用した、ＨＴ２９およびＡ２７８０異種移植片をもつヌードマウスについて検討した。全ての動物実験は、機関で承認されたプロトコルに従って行った。
【０３９９】
１５０〜２００μＬの腫瘍異種移植片（ｎ＝６／基）をもつ雄ヌード／ｎｕマウス、平均体重２８〜３２ｇ（チャールズリバーラボ、ボストン、マサチューセッツ州）に、０．９％食塩水中の二段階標識された化ＰＨＦ−ＣＰＴをＣＰＴに対して２０ｍｇ／ｋｇ注射（ｉｖ）した。注射活性は、３Ｈに関し１．２５μＣｉ／動物および１１１Ｉｎに関し５μＣｉ／動物であった。
【０４００】
成熟非近交系２４０ｇの雄ラット（チャールズリバーラボ、ボストン、マサチューセッツ州）、ｎ＝６／基、に０．９％食塩水中の８００μＬの標識化されたＰＨＦ−ＣＰＴをＣＰＴに対して２０ｍｇ／ｋｇ注射（ｉｖ）した。動物１匹にたいする注射活性は、３Ｈに関し１．２５μＣｉ／動物および１１１Ｉｎに関し２４μＣｉ／動物であった。
【０４０１】
血液サンプルを、５、１５、３０分および１、２、４、８および２４時間の点で採取した。２４時間後、動物を安楽死させ、腫瘍および腫瘍な臓器のサンプルを測定のために採取した。体内組織の全３Ｈおよび１１１Ｉｎ活性を、シンチレーション（β）およびγ測定でそれぞれ行い、％注射用量／ｇ体内組織で示し、３Ｈ−ＣＰＴ（全形成の合計）および１１１Ｉｎ−ＰＨＦの分布を特徴付けた。
【０４０２】
ラットにおけるキャリア高分子の半減時間は、１４．２±１．７時間であり、一方薬剤物質半減時間は、２．１±０．２時間であった。これは、試験管内の第一フェーズの放出速度の測定値（図５）とよく対応している。
【０４０３】
３Ｈ−ＣＰＴおよび１１１Ｉｎ−ＰＨＦは、腫瘍体内組織内に実質的な堆積したことを示した。２４時間後、腫瘍中のＣＰＴ摂取は、Ａ２７８０に関する用量／ｇで２．２２％およびＨＴ２９に関する用量／ｇで２．５２％であった。これは、ＣＰＴ（ｐ＜０．０５）より約７５倍高く、ＰＥＧ−ＣＰＴに類似する１４。筋肉に対する平均腫瘍率は、それぞれ２．４および１．５（異なる異種移植片間での違いに関しｐ＜０．２）であった。
【０４０４】
他の体内組織内での堆積もまたＰＥＧ−ＣＰＴの堆積と類似していた（図６）。しかし、２〜３倍高い薬物濃度が細網内皮系（ＲＥＳ）組織中で検出された。理論に拘束されるのではないが、後者は、ＣＰＴ−ＳＩがＰＥＧ−ＣＰＴより高くＲＥＳを摂取することによる、あるいは薬物動態依存的血液量によるものであるえる。
【０４０５】
投与２４時間後の染色されていない、固定されていない腫瘍組織内のＣＰＴ蛍光の「写真撮影」（蛍光顕微鏡）は、比較的均質はＣＰＴ分布を示すが、高い薬物体積が血管床に隣接するいくつかの箇所で起こっていた（図７）。ＣＰＴ蛍光の拡散細胞内分布は、優勢的に細胞質（非小胞性）薬物局在化を示した。
【０４０６】
（実施例１７  抗増殖性）
ＣＰＴ誘導体の細胞毒性は、ＨＴ２９細胞培養液中で検査した。細胞は、１０％のＦＢＳが添加された１．５ｍＭのＬ−グルタミンを有するマッコイ５ａ培地で成長させた。（指数的に増えた）細胞を２４−ウェル培養プレート（〜１００００個の細胞／ウェル）に植え、２４時間培養し、次いで種々の希釈度の試験化合物で処置した。増殖阻害性を７２時間ポスト処置（ＭＴＴアッセイ）で評価した。ＨＴ−２９  細胞培養液中のＰＨＦ−ＣＰＴのＩＤ５０は１７２ｎＭであった。これは、ＣＰＴのＩＤ５０（１７ｎＭ）より１０倍、ＣＰＴ−ＳＩのＩＤ５０（３４ｎＭ）より５倍高い。
【０４０７】
（実施例１８  生体内抗腫瘍活性および毒性）
ＣＰＴの毒性は、抗腫瘍活性検査の途中で、正常な非近交系マウスと無胸線動物の異種移植片において評価した。
【０４０８】
ＰＨＦ−ＣＰＴの抗腫瘍活性は、無胸腺マウス中のＨＴ−２９異種移植片モデルを機関で承認されたプロトコルに従って評価した。カンプトテシンおよびＣＰＴ−ＳＩ（第一フェーズ生成物）はコントロールとして用いた。
【０４０９】
検査は、ほぼ等毒性の用量のＣＰＴおよびＰＨＦ−ＣＰＴを使用して行った。細胞を５０μＬ中１０６個の細胞／動物の量で左側腹に皮下注射した。腫瘍の堆積が１００〜１５０ｍｍ３に達した時、マウスを、ＰＨＦ−ＣＰＴ、カンプトテシン、ＣＰＴ−ＳＩおよび処置をしないコントロール（各ｎ＝３）の各群４匹ずつの実験群にランダムに分けた。最初の３つの群の動物には、それぞれ実験物質を尾血管から３日毎に５回与えた（５ｘｑ３Ｄ）。各注射は、ＣＰＴおよびＣＰＴ−ＳＩの２２．５ｍｇのＣＰＴ  ｅｑｖ／ｋｇと、ＰＨＦ−ＣＰＴに関して４５ｍｇのＣＰＴ  ｅｑｖ／ｋｇを含んでいた。製剤は全て投与の直前に製造した。ＰＨＦ−ＣＰＴは０．９％食塩水中の溶液として投与した。ＣＰＴおよびＣＰＴ−ＳＩは、ツウィーン８０／水（９／１ｖ／ｖ）中の分散剤として投与した。動物の重さ、腫瘍サイズ、動物の外観、行動および生存率は、投与後４週間にわたって、モニタリングした。２０％を超える体重の減少および１５００ｍｍ３を超える腫瘍増殖は、致死であるとカウントした（動物は安楽死させた）。
【０４１０】
（実施例１９  ＬＳ１７４ｔ異種移植片モデルにおけるＰＨＦ−ＣＰＴの生体活性）
ＰＨＦ−ＣＰＴを成長したＬＳ１７４ｔ腫瘍異種移植片を有するヌードマウスにＣＰＴで１６０ｎｍ／ｋｇ、ｑ７ｄｘ３（ＩＶ）投与した。イリノテカン（可溶性低分子量ＣＰＴ誘導体、コントロールとして使用）を、ＩＰに投与し、また１６０ｎｍ／ｋｇ投与し、続いて同じ工程を行った。結果（図３および４）は、同じ用量で（薬剤物質による）、ＰＨＦ−ＣＰＴは腫瘍増殖をイリノテカンより強力に抑えた（図３）。ＰＨＦ−ＣＰＴで処置された動物の群は、イリノテカンで処置された動物の群より致死率が改善していた（図４）。
【０４１１】
ＰＨＦ−ＣＰＴの最大容認用量（ＭＴＤ）は、＞２４ｍｇ／ｋｇであった。これは、低分子量ＣＰＴおよびイリノテカン（類似の工程で９〜１０ｍｇ／ｋｇ）の用量より少なくとも２倍高い。
【０４１２】
（実施例２０  ＰＨＦ−ＣＰＴ抗腫瘍毒性）
ＰＨＦ−ＣＰＴの抗腫瘍毒性を、ＨＴ２９モデル（腫瘍サイズ：１００〜１５０μＬ）中で、コントロールとしてＣＰＴおよびＣＰＴ−ＳＩを使用してテストした。後者はＣｒｅｍｏｆｏｒ（登録商標）乳液として投与した。ＣＰＴで４５ｍｇ／ｋｇ（５ｘｑ３ｄ．）投与されたＰＨＦ−ＣＰＴは、修飾されていないＣＰＴを２２．５ｍｇ／ｋｇ投与したばあい（同じ工程）と比べて、効果の点では高く、毒性の点では低かった。腫瘍増殖が０．１０〜０．１５ｃｍ３から１．５ｃｍ３に増えた時間によって測定したとき（処置をしないコントロールは２７日対２４であり２２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｘｑ４ｄのＣＰＴを処置した場合４０日）時対応、中間放出生成物、ＣＰＴ−ＳＩは、腫瘍動特性においても有意な効果は示さなかった。
【０４１３】
（参考文献）
【０４１４】
【表５】
2014111657.tif 000085
【０４１５】
【表６】
2014111657.tif 000086
【０４１６】
【表７】
2014111657.tif 000087
【０４１７】
【表８】
2014111657.tif 000088
【０４１８】
【表９】
2014111657.tif 000089
【図１】
2014111657.tif 000091
【図２】
2014111657.tif 000092
【図３】
2014111657.tif 000093
【図４】
2014111657.tif 000094
【図５】
2014111657.tif 000095
【図６】
2014111657.tif 000096
【図７】
2014111657.tif 000097
【図８】
2014111657.tif 000098
【外国語明細書】
2014111657000001.pdf