(57)【要約】【課題】環境負荷が少なく、短時間で植物から繊維を抽出することができる繊維の抽出方法を提供する。【解決手段】本発明は、植物から繊維を抽出するための繊維の抽出方法であって、植物（例えば、靱皮植物等）に対して、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理を行う工程を備えており、微生物は、クレブシエラ属及びエンテロバクター属からなる群より選ばれた少なくとも１種である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物から繊維を抽出するための繊維の抽出方法であって、
植物に対して、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理を行う工程を備えており、
前記微生物は、クレブシエラ属及びエンテロバクター属からなる群より選ばれた少なくとも１種であることを特徴とする繊維の抽出方法。
【請求項２】
前記植物が、靱皮植物である請求項１に記載の繊維の抽出方法。
【請求項３】
前記微生物は、前記クレブシエラ属及び前記エンテロバクター属からなる群より選ばれた少なくとも２種以上である請求項１又は２に記載の繊維の抽出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、繊維の抽出方法に関する。更に詳しくは、本発明は、環境負荷が少なく、短時間で植物から繊維を抽出することができる繊維の抽出方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、植物から得られる天然繊維は、様々な分野において利用されており、環境保護の観点からも注目されている。そして、植物からの効率の良い繊維の抽出方法が検討されている。
具体的な繊維の抽出方法としては、例えば、採取した植物を、池や川に浸漬し、繊維を結合するペクチン等の物質を分解させる、いわゆるレッティング処理（解繊処理）によって繊維を抽出する伝統的な技法が知られている。更には、採取した植物を、特定の酵素液に浸漬し、繊維を結合するペクチン等の物質を分解させる方法が知られている。尚、ペクチン等を分解する酵素としては、特定のポリガラクツロナーゼをコードする遺伝子を含有する組換えベクターを含む形質転換体等が知られている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００１−２５８５７７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上述のように、池や川においてレッティング処理を行う場合には、繊維の抽出に３〜４週間程度の時間を要する。そのため、更なる時間効率の向上が求められているのが現状である。
また、特許文献１を利用してレッティング処理を行う場合には、環境負荷が大きく、排水処理に多大なコストを要するという問題がある。
【０００５】
本発明は上記実情に鑑みてなされたものであり、環境負荷が少なく、短時間で植物から繊維を抽出することができる繊維の抽出方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記問題を解決するために、請求項１に記載の発明は、植物から繊維を抽出するための繊維の抽出方法であって、
植物に対して、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理を行う工程を備えており、
前記微生物は、クレブシエラ属及びエンテロバクター属からなる群より選ばれた少なくとも１種であることを要旨とする。
請求項２に記載の発明は、請求項１記載において、前記植物が、靱皮植物であることを要旨とする。
請求項３に記載の発明は、請求項１又は２記載において、前記微生物は、前記クレブシエラ属及び前記エンテロバクター属からなる群より選ばれた少なくとも２種以上であることを要旨とする。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の繊維の抽出方法によれば、植物に、特定の微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理を行う工程を備えているため、環境負荷が少なく、短時間で植物から繊維を抽出することができる。
また、植物が、靱皮植物である場合には、効率よく靱皮繊維を抽出することができる。
更に、微生物が、クレブシエラ属及びエンテロバクター属からなる群より選ばれた少なくとも２種以上である場合には、植物から繊維をより短時間で抽出することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】各処理液と、試験片の残存率との関係を表すグラフである。
【図２】浸漬処理を行った期間と、試験片の残存率との関係を表すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の繊維の抽出方法は、植物から繊維を抽出するための繊維の抽出方法であって、植物に対して、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理を行う工程を備えている。
【００１０】
本発明において、繊維の抽出に用いられる植物は特に限定されないが、例えば、ケナフ、ジュート、雁皮、三椏、及び楮等の靱皮植物、マニラ麻、サイザル麻、パイナップル、バナナ、ココヤシ、トウモロコシ、サトウキビ、バガス、ヤシ、パピルス、葦、エスパルト、サバイグラス、麦、稲、竹、ひょうたん、へちま、トチュウ、各種針葉樹（スギ及びヒノキ等）、広葉樹及び綿花等を挙げることができる。特に、本発明においては、この植物を、靱皮繊維の得られる靱皮植物（ケナフ、ジュート、雁皮、三椏、及び楮等）とすることができる。尚、これらの植物は、１種のみ用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。
【００１１】
また、上記ケナフは、木質茎を有し、アオイ科に分類される植物である。このケナフには、学名におけるｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｃａｎｎａｂｉｎｕｓ及びｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｓａｂｄａｒｉｆｆａ等が含まれ、通称名における紅麻、キューバケナフ、洋麻、タイケナフ、メスタ、ビムリ、アンバリ麻及びボンベイ麻等が含まれる。
更に、上記ジュートには、黄麻（コウマ、Ｃｏｒｃｈｏｒｕｓ  ｃａｐｓｕｌａｒｉｓ  Ｌ．）、及び、綱麻（ツナソ）、シマツナソ並びにモロヘイヤ、を含む麻及びシナノキ科の植物を含むものとする。
【００１２】
また、繊維を抽出する際に用いる植物の部位は特に限定されず、木質部、非木質部、葉部、茎部及び根部等の植物体を構成するいずれの部位であってもよい。特に、繊維を多く含む部位を選択して用いることが好ましい。尚、用いられる部位は、特定の部位のみであってもよいし、２ヶ所以上の異なる部位の組み合わせであってもよい。
【００１３】
本発明における繊維の抽出方法では、上述の植物に対して、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理が行われる。
具体的には、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液に、植物を浸漬し、繊維を結合するペクチン等の物質を分解させるレッティング処理（解繊処理）が行われる。この処理において、植物は、培養液等に含まれる、微生物を培養した際に生じた酵素を含む分泌液等の作用によって、ペクチン等で結着されている繊維同士が解されると考えられる。
尚、この工程においては、必ずしも繊維同士が完全にばらばらに解された状態に至る必要はなく、繊維同士の結合が緩み容易に分離可能な状態となればよい。
【００１４】
上記培養液由来の液としては、例えば、（１）微生物の培養液の希釈物、（２）微生物の培養液に対して遠心分離や濾過を行い、微生物を分離除去して得られる培養上清液、（３）培養上清液の希釈物等が挙げられる。
また、本発明に用いられる微生物の培養液及びその培養液由来の液のなかでも、植物から繊維をより短時間で抽出することができるという観点から、上記培養上清液やその希釈物が好ましく、培養上清液の希釈物が特に好ましい。
尚、培養液や培養上清液を希釈する際の濃度は特に限定されないが、具体的には、例えば、原液（希釈前）の濃度を１００体積％とした場合に、希釈後の濃度が５〜５０体積％となるように希釈することが好ましい。
【００１５】
上記微生物は、クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）及びエンテロバクター属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ）からなる群より選ばれた少なくとも１種である。特に、植物から繊維をより短時間で抽出することができるという観点から、上記微生物が、クレブシエラ属及びエンテロバクター属からなる群より選ばれた少なくとも２種以上であることが好ましく、３種以上であることがより好ましい。この際、２種以上の微生物は、クレブシエラ属のみから選ばれてもよいし、エンテロバクター属のみから選ばれてもよいし、クレブシエラ属及びエンテロバクター属の両者から選ばれてもよい。
尚、２種以上の微生物が用いられる場合には、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液として、通常、１種の微生物ごとに培養を行い、それぞれの培養液や培養液由来の液を混合したものが用いられる。
【００１６】
上記エンテロバクター属の微生物としては、例えば、
配列番号１で示されるＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．、
配列番号２で示されるＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｏｗａｎｉｉ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＭＴＱ８、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ３４３（２０１０）、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ２６６（２０１０）、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ５９７（２０１０）、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＮＳＪ−４、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ２Ｊ−３、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＣＴＳＰ２９、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｇ−２−１０−２、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＦＭＢ−１、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＪＳ−１、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＭＺ＿１、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＡＩＭＳＴ  ４  Ｐ６．１、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ｓ１７２、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ｓ２３２、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  １３６０、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｎ−５−１０、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｅｎｄｏｓｙｍｂｉｏｎｔ  ｏｆ  Ｍｅｔａｓｅｉｕｌｕｓ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｆ４−１、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＡＴＣＣ  ２９９１８、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＤＲＳＢＩＩ７、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｒｉｎｕｓ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｍ．Ｄ．ＮＡ５−６、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｍ．Ｄ．ＮＡ５−２、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｍ．Ｄ．ＮＡ３−３、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ２４７ＢＭＣ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＩＮＢｉｏ３０１０Ｂ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃａｎｃｅｒｏｇｅｎｕｓ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＷＲ３５、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＪＤＭ−１９、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ｄＢ（２０１１）、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＩＮＢｉｏ２９５９Ｂ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＰＲ５、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＰＲ４、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＰＲ３、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＰＲ２、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＰＲ１、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｖ１６、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｖ１５、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｍｎｉｇｅｎｕｓ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｅｒｇｏｖｉａｅ、
Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｈｏｒｍａｅｃｈｅｉ等が挙げられる。
これらのなかでも、配列番号１で示されるＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．、配列番号２で示されるＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｏｗａｎｉｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＭＴＱ８、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ３４３（２０１０）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ２６６（２０１０）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ５９７（２０１０）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＮＳＪ−４、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ２Ｊ−３、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＣＴＳＰ２９、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  Ｇ−２−１０−２、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＦＭＢ−１、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．  ＪＳ−１が好ましい。
【００１７】
また、上記クレブシエラ属の微生物としては、例えば、
配列番号３で示されるＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＢＲ３３５７、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＳＨＮ−１、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＳＴ９Ｂ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＣＢＲ  ０４６、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｂ１２、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＩＩ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＸ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ３４２、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＣＢ５７２、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｖａｒｉｉｃｏｌａ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＮＢｉｏ３０１６Ｄ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＣＢ３９０、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＶＩＴＰＧＰ５ＡＡ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＶＩＴＰＧＰ４Ａ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ２００９Ｉ３、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ２００９Ｉ２、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＴＤ  ＩＷ  １８、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＢＪＱ−Ａ４、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｇｃ−７−ｃ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＦｅＬ２９、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｐ４ｈ−３−ｕ８ｆ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｐ４ｈ−２−ｕ８ｆ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｓ３０−５−ｕ８ｆ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｖａｒｉｉｃｏｌａ  Ａｔ−２２、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ８．１Ｔ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｉ−Ｆ７、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＹＨＢ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｐｔ５、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ａ１８−１、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｐ４、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｐ３、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｐ２、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＨＬ１、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＴＳ２７Ｎ１、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＡＬ０５０５１１＿０１、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＡＬ０６０２２４＿０３、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＣＲＬＳ０６１ａ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＣＲＰＶ０６１０、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＣＲＬＳ０６４、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＣＲＬＳ０６２２、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｐ０６４３、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＣＲＬＳ０６９ａ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＣＲＬＳ０６６、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｐ０６４０、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｐ０６３８、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＰＶ０６９ｂ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＣＲＬＳ０６２０ａ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＴＳ１４Ｎ１、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＧＹＰＢ１５、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ２００９Ｉ１０、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｄ３Ｓ、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｄ１、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ｓｕｂｓｐ．  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＭＧＨ  ７８５７８、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ｓｕｂｓｐ．  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ＮＴＵＨ―Ｋ２０４、
Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｏｘｙｔｏｃａ等が挙げられる。
これらのなかでも、配列番号３で示されるＫｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＢＲ３３５７、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＳＨＮ−１、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＳＴ９Ｂ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＣＢＲ  ０４６、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  Ｂ１２、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＩＩ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ＩＸ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ  ３４２が好ましい。
【００１８】
尚、上記各微生物の同定は、下記の１６ＳｒＤＮＡ解析によるものである。
＜１６ＳｒＤＮＡ解析＞
１０Ｆ（５’−ＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＡ−３’）と８００Ｒ  （５’−ＴＡＣＣＡＧＧＧＴＡＴＣＴＡＡＴＣＣ−３’）のプライマーセットを用い、コロニーダイレクトＰＣＲにより１６ＳｒＤＮＡを増幅する。そして、増幅したｃＤＮＡ断片の塩基配列解析後、ＤＮＡ  Ｄａｔａ  Ｂａｎｋ  ｏｆ  Ｊａｐａｎ（ＤＤＢＪ，  Ｍｉｓｈｉｍａ，  Ｊａｐａｎ）のＦＡＳＴＡによる相同性解析から微生物種を同定する。
【００１９】
上記微生物の培養方法は特に限定されない。例えば、クレブシエラ属やエンテロバクター属の微生物に一般的に適用されている方法によって培養することができる。
培養の際に用いられる培地は特に限定されず、例えば、ペクチンを加えたＭ９培地、マッコンキー寒天培地、ＬＢ培地等を用いることができる。
また、培養温度は特に限定されないが、２０〜４０℃が好ましく、より好ましくは２５〜３５℃である。
更に、培養時間は特に限定されないが、６〜４８時間が好ましく、より好ましくは８〜２４時間である。
また、培養の際のｐＨは、ｐＨ５〜９が好ましく、より好ましくはｐＨ６．５〜７．５である。
尚、微生物の増殖性は、分光光度計等により測定される吸光度によって確認することができる。本発明においては、この分光光度計による測定値（ＯＤ６００）が、０．４以上の培養液を用いるものとすることができる。
【００２０】
また、この工程において、植物を、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液に浸漬処理する時間は特に限定されず、植物の種類や、微生物の種類等によって適宜調整される。
通常、この浸漬処理時間は、７〜１４日間（特に７〜１０日間）とすることができる。
また、浸漬処理を行う際における、微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液の使用量は、この処理に用いる植物の重量により適宜選択される。具体的には、植物の重量（ｇ）に対して、１〜５００倍（特に５〜１００倍）の液量（ｍｌ）とすることが好ましい。
更に、浸漬処理を行う際における微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液の温度は特に限定されないが、２０〜４５℃が好ましく、より好ましくは２５〜３５℃である。
【００２１】
本発明の抽出方法は、上記微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理を行う工程以外にも他の工程を備えていてもよい。
上記他の工程としては、例えば、上記微生物の培養液又は微生物の培養液由来の液による処理が行われた植物の繊維（レッティング処理された植物の繊維）を回収する工程、回収された植物の繊維を水等により洗浄する工程、回収又は洗浄された植物の繊維を乾燥する工程等が挙げられる。
【実施例】
【００２２】
以下、実施例により本発明を具体的に説明する。
［１］微生物の培養
（１−１）エンテロバクター属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）の培養
配列番号１（表１参照）に示す微生物（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）を、以下の基本培地（２００ｍｌ）により、２４時間、３０℃で培養を行い、培養液Ａを得た。尚、この培養液Ａにおける微生物の増殖性を分光光度計（株式会社島津製作所製、型名「ＢｉｏＳｐｅｃ−ｍｉｎｉ」）で解析したところ、ＯＤ６００：０．４以上であった。
＜基本培地＞
最少培地（Ｍ９  Ｍｉｎｉｍａｌ  Ｍｅｄｉｕｍ）にペクチンを加えたＰｅｃｔｉｎ−Ｍ９培地（０．６％Ｎａ２ＨＰＯ４、０．３％ＫＨ２ＰＯ４、０．０５％ＮａＣｌ、０．１％ＮＨ４Ｃｌ、０．２％Ｐｅｃｔｉｎ、０．００１４７％ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ、０．０５％ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）を基本培地とした。
【００２３】
【表１】
2014034664.tif 000002
【００２４】
（１−２）エンテロバクター属（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）の培養
配列番号２（表２参照）に示す微生物（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）を、上記（１−１）と同様の基本培地により、２４時間、３０℃で培養を行い、培養液Ｂを得た。尚、この培養液Ｂにおける微生物の増殖性を、上記（１−１）と同様にして解析したところ、ＯＤ６００：０．４以上であった。
【００２５】
【表２】
2014034664.tif 000003
【００２６】
（１−３）クレブシエラ属（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．）の培養
配列番号３（表３参照）に示す微生物（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｓｐ．）を、上記（１−１）と同様の基本培地により、２４時間、３０℃で培養を行い、培養液Ｃを得た。尚、この培養液Ｃにおける微生物の増殖性を、上記（１−１）と同様にして解析したところ、ＯＤ６００：０．４以上であった。
【００２７】
【表３】
2014034664.tif 000004
【００２８】
尚、上記の各微生物（配列表参照）は、下記に示す１６ＳｒＤＮＡ解析により行われたものである。
＜１６ＳｒＤＮＡ解析＞
１０Ｆ（５’−ＧＴＴＴＧＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＡ−３’）と８００Ｒ  （５’−ＴＡＣＣＡＧＧＧＴＡＴＣＴＡＡＴＣＣ−３’）のプライマーセットを用い、コロニーダイレクトＰＣＲにより１６ＳｒＤＮＡを増幅した。そして、増幅したｃＤＮＡ断片の塩基配列解析後、ＤＮＡ  Ｄａｔａ  Ｂａｎｋ  ｏｆ  Ｊａｐａｎ（ＤＤＢＪ，  Ｍｉｓｈｉｍａ，  Ｊａｐａｎ）のＦＡＳＴＡによる相同性解析から微生物種を同定した。
【００２９】
［２］レッティング処理試験（１）
まず、下記の処理液ａ〜ｄを用意した。
処理液ａ：上記（１−１）の培養液Ａ（菌体＋分泌酵素）
処理液ｂ；上記（１−１）の培養液Ａを遠心分離して、微生物を分離除去した培養上清液（分泌酵素のみ）
処理液ｃ；上記（１−１）の培養液Ａを遠心分離して微生物のみを回収し、回収した微生物を上記（１−１）において用いたＭ９培地に新たに懸濁した液（菌体のみ）
処理液ｄ；水道水
【００３０】
次いで、上記の処理液ａ〜ｄを用いて、植物材料［ケナフ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｃａｎｎａｂｉｎｕｓ  ｃｖ．  ＥＶ４１）］に対して、下記の条件にて浸漬処理（レッティング処理）を行い、繊維の解れ具合を目視にて評価した。その結果を表４に示す。
＜処理条件＞
処理液（温度；２５℃）が１００ｍｌ入ったガラス管に、試験片［ケナフのコアと靭皮部を分離し、７０×２０ｍｍに裁断したケナフ靱皮（１枚の重量；０．９〜１．０ｇ）］を２枚入れて、１０日間浸漬させる（外温；２５℃）。
＜判断基準＞
各試験区から試験片を取り出し、繊維の解れ具合を目視と触診にて確認し、以下の基準で判断した。
◎；十分に解れている
○；解れている
△；わずかに解れている
×：解れていない
【００３１】
【表４】
2014034664.tif 000005
【００３２】
表４の結果によれば、上記（１−１）の培養液からなる処理液ａ（実施例１）を用いた場合、及び、その上清液である処理液ｂ（実施例２）を用いた場合においては、十分なレッティング処理効果が得られた。特に、処理液ｂ（実施例２）を用いた場合においては、その効果がより顕著であった。
【００３３】
［３］レッティング処理試験（２）
まず、下記の処理液ｅ及びｆを用意した。
処理液ｅ；上記（１−１）の培養液Ａを遠心分離して、微生物を分離除去した培養上清液
処理液ｆ；上記（１−１）の培養液Ａを遠心分離して、微生物を分離除去した培養上清液を、水で１０倍希釈した液（濃度；１０体積％）
【００３４】
次いで、上記の処理液ｅ及びｆを用いて、植物材料［ケナフ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｃａｎｎａｂｉｎｕｓ  ｃｖ．  ＥＶ４１）］に対して、下記の条件にて浸漬処理（レッティング処理）を行い、処理後における試験片の残存率［（処理後の試験片重量）／（処理前の試験片重量）×１００（％）］を測定した。その結果を表５に示す。
＜処理条件＞
処理液（温度；２５℃）が１００ｍｌ入ったガラス管に、試験片［ケナフのコアと靭皮部を分離し、７０×２０ｍｍに裁断したケナフ靱皮（１枚の重量；０．９〜１．０ｇ）］を２枚入れて、７日間浸漬させる（外温；２５℃）。
【００３５】
【表５】
2014034664.tif 000006
【００３６】
表５の結果によれば、培養上清液を１０倍希釈して得られた処理液ｆ（実施例４）を用いた場合の方が、培養上清液を希釈していない処理液ｅ（実施例３）を用いた場合よりも試験片の残存率が低くなっており、培養上清液を希釈して用いた方がレッティング処理をより促進させることができることが確認できた。
【００３７】
［４］レッティング処理試験（３）
まず、下記の処理液ｇ〜ｎを用意した。
処理液ｇ；上記（１−１）の培養液Ａを遠心分離して、微生物を分離除去した培養上清液を、水で１０倍希釈した液（培養液Ａの濃度；１０体積％）
処理液ｈ；上記（１−２）の培養液Ｂを遠心分離して、微生物を分離除去した培養上清液を、水で１０倍希釈した液（培養液Ｂの濃度；１０体積％）
処理液ｉ；上記（１−３）の培養液Ｃを遠心分離して、微生物を分離除去した培養上清液を、水で１０倍希釈した液（培養液Ｃの濃度；１０体積％）
処理液ｊ；上記（１−１）の培養液Ａから微生物を除去した培養上清液と、上記（１−２）の培養液Ｂから微生物を分離した培養上清液を混合して、水で１０倍希釈した液（培養液Ａの濃度；５体積％、培養液Ｂの濃度；５体積％）
処理液ｋ；上記（１−１）の培養液Ａから微生物を除去した培養上清液と、上記（１−３）の培養液Ｃから微生物を分離した培養上清液を混合して、水で１０倍希釈した液（培養液Ａの濃度；５体積％、培養液Ｃの濃度；５体積％）
処理液ｌ；上記（１−２）の培養液Ｂから微生物を除去した培養上清液と、上記（１−３）の培養液Ｃから微生物を分離した培養上清液を混合して、水で１０倍希釈した液（培養液Ｂの濃度；５体積％、培養液Ｃの濃度；５体積％）
処理液ｍ；上記（１−１）の培養液Ａから微生物を除去した培養上清液と、上記（１−２）の培養液Ｂから微生物を分離した培養上清液と、上記（１−３）の培養液Ｃから微生物を除去した培養上清液を混合して、水で約１０倍に希釈した液（培養液Ａの濃度；３．３３体積％、培養液Ｂの濃度；３．３３体積％、培養液Ｃの濃度；３．３３体積％）
処理液ｎ；水道水
【００３８】
次いで、上記の処理液ｇ〜ｎを用いて、植物材料［ケナフ（Ｈｉｂｉｓｃｕｓ  ｃａｎｎａｂｉｎｕｓ  ｃｖ．  ＥＶ４１）］に対して、下記の条件にてレッティング処理（浸漬処理）を行い、処理後における試験片の残存率［（処理後の試験片重量）／（処理前の試験片重量）×１００（％）］を測定した。尚、この評価試験は、それぞれ、３回ずつ行い、その平均値により評価を行った。その結果を表６、図１及び図２に示す。
また、図１は、処理液ｇ〜ｎを用いた際における、各処理液と、４日間の浸漬処理が行われた試験片の残存率との関係を表すグラフである。図２は、処理液ｇ、ｍ及びｎを用いた際における、浸漬処理を行った期間と、試験片の残存率との関係を表すグラフである。
＜処理条件＞
処理液（温度；２５℃）が１００ｍｌ入ったガラス管に、試験片［ケナフのコアと靭皮部を分離し、７０×２０ｍｍに裁断したケナフ靱皮（１枚の重量；０．９〜１．０ｇ）］を２枚入れて、１０日間浸漬させる（外温；２５℃）。
【００３９】
【表６】
2014034664.tif 000007
【００４０】
表６、図１及び図２の結果によれば、２種類の微生物の各培養液の混合液に由来する処理液ｊ、ｋ及びｌ（実施例８〜１０）を用いた場合の方が、１種類の微生物の培養液に由来する処理液ｇ、ｈ及びｉ（実施例５〜７）を用いた場合よりも試験片の残存率が低くなっており、２種類の微生物の各培養液の混合液に由来する処理液を用いた方がレッティング処理を促進させることができることが確認できた。
更に、３種類の微生物の各培養液の混合液に由来する処理液ｍ（実施例１１）を用いた場合の方が、２種類の微生物の各培養液の混合液に由来する処理液ｊ、ｋ及びｌ（実施例８〜１０）を用いた場合よりも試験片の残存率が低くなっており、３種類の微生物の各培養液の混合液に由来する処理液を用いた方がレッティング処理をより促進させることができることが確認できた。
【００４１】
前述の例は単に説明を目的とするものでしかなく、本発明を限定するものと解釈されるものではない。本発明を典型的な実施形態の例を挙げて説明したが、本発明の記述及び図示において使用された文言は、限定的な文言ではなく説明的及び例示的なものであると理解される。ここで詳述したように、その形態において本発明の範囲又は精神から逸脱することなく、添付の特許請求の範囲内で変更が可能である。ここでは、本発明の詳述に特定の構造、材料及び実施例を参照したが、本発明をここにおける開示事項に限定することを意図するものではなく、むしろ、本発明は添付の特許請求の範囲内における、機能的に同等の構造、方法、使用の全てに及ぶものとする。
【００４２】
本発明は前述した実施形態に限定されず、本発明の請求項に示した範囲で様々な変形又は変更が可能である。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明の繊維の抽出方法は、自動車等の車両関連分野、船舶関連分野、航空機関連分野、建築関連分野等において広く利用される。
【図１】
2014034664.tif 000008
【図２】
2014034664.tif 000009
【配列表】
2014034664000001.app