(57)【要約】【課題】  高純度であり、且つ、所望の融点を有する（Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシドの結晶を、簡便に収率よく製造できる方法を提供することにある。【解決手段】  （Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシドの粗体を、エタノールを用いた再結晶によって精製し、ブリンゾラミドの結晶を製造する方法において、活性炭処理工程に続いて、種晶を使用した結晶化工程を行うことを特長とする方法である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシドの粗体とエタノールとを混合し、当該粗体のエタノール溶液からなる第一溶液を調製する工程、前記第一溶液と活性炭とを、液温を６０〜８０℃に保ちながら混合した後に活性炭を分離して第二溶液を得る活性炭処理工程、前記第二溶液から種晶を用いて（Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシドの結晶を析出させる結晶化工程を含んでなることを特徴とする、（Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシドの製造方法。
【請求項２】
前記結晶化工程を２〜４回行う請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記結晶化工程において、４５〜５５℃にて種晶を加える請求項１又は２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、緑内障治療薬として有用なブリンゾラミド（化学名：（Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシド）の新規な製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
下記式（１）
【０００３】
【化１】
2014034566.tif 000002
【０００４】
で示されるブリンゾラミドは炭酸脱水素酵素阻害作用を持つ緑内障治療薬として用いられている。該ブリンゾラミドの製造方法としては、下記式（２）
【０００５】
【化２】
2014034566.tif 000003
【０００６】
で示される（Ｓ）−３，４−ジヒドロ−４−ヒドロキシ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシド（以下、スルホンアミド体とも言う。）より製造する方法が一般的に知られている。
【０００７】
即ち、スルホンアミド体の６位置の炭素原子｛以下、Ｃ（６）と略記する。｝に結合したスルホンアミド官能基を保護してイミダート体とし（段階１）、イミダート体の４位置の炭素原子｛以下、Ｃ（４）と略記する。｝に結合した水酸基を活性化した後（段階２）、活性化したＣ（４）部位の水酸基をアミンでの置換、及びＣ（６）部位のスルホンアミド官能基から保護基を除去してブリンゾラミドを得る（段階３）、という方法が一般的に知られている（特許文献１および非特許文献１）。上記方法において、段階１の反応は、スルホンアミド体及び過剰のオルト酢酸トリメチル等のオルト酢酸低級アルキルのアセトニトリル溶液を１２〜４８時間還流することにより行われる。また、段階２の活性化は、溶媒を除去した後、溶媒をテトラヒドロフランに置き換え、段階１で得られたイミダート体をピリジン、トリエチルアミンまたはジメチルアミノピリジン等の塩基の存在下に無水メタンスルホン酸または塩化ｐ−トルエンスルホニル、塩化ｐ−ブロモトルエンスルホニル若しくは塩化ｐ−ニトロトルエンスルホニル等の塩化スルホニルと反応させることによって行われるものであり、好ましくは、−１０〜１５℃の温度で１〜４時間、２．０〜２．５当量の塩化ｐ−トルエンスルホニル及びトリエチルアミンを用いて行われる。さらに、段階３では、１０〜４０当量の適切なアミンを冷溶液に添加して８〜６０時間反応させた後、生成物を酸−塩基処理することによってブリンゾラミドを単離していた。
【０００８】
一方、原薬として使用されるブリンゾラミドには、通常、純度が９９．５％以上であり、融点が１３１℃付近であることが求められている。そのため、上記方法にて得られたブリンゾラミド粗体は、高純度に精製される必要がある。特許文献１および非特許文献１には、単離されたブリンゾラミド粗体を２−プロパノールから結晶化させることによって精製する方法が記載されているが、該方法では、得られるブリンゾラミド結晶の純度は９７．４％であり（非特許文献１）、融点は１２５〜１２７℃であり（特許文献１）、満足のいくものではなかった。
【０００９】
また、他の精製方法として、特許文献２には、エタノールから再結晶させる方法が記載されている。しかしながら、本発明者らが検討したところ、エタノールから再結晶させる方法では、純度が９９．５％以上のブリンゾラミド結晶が得られたが、その融点は１２５〜１２７℃であり、やはり満足のいくものは得られなかった。
【００１０】
このようにして得られた融点が１２５〜１２７℃を示すブリンゾラミド結晶は、融点が約１３１℃であるブリンゾラミド結晶と同じ結晶形を示すため、融点が低く測定されるのはブリンゾラミド結晶に含まれる不純物の影響があると考えられる。なお、上記方法にて得られたブリンゾラミド結晶の純度は９９．５％以上と高いものではあるが、該純度の測定は液体クロマトグラフィーによるものであり、融点が低いという結果から考えると、このような純度測定方法では検出されない不純物が含まれていることが考えられた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特許第２８５４７９８号公報
【特許文献２】国際公開第２００８／０６２４６３号
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｒｅｓｅａｃｈ  ＆  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  （１９９９），  ３（２），  １１４−１２０
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
したがって、本発明の目的は、高純度のブリンゾラミドを製造する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、前記課題を解決するために鋭意検討した。その結果、ブリンゾラミドの粗体をエタノールから再結晶させる方法において、再結晶操作の前に活性炭処理を実施し、さらに結晶化させる際に種晶を加えることによって、効率的に不純物を除去することができることを見出した。
即ち、本発明は、（Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシド（ブリンゾラミド）の粗体とエタノールとを混合し、当該粗体のエタノール溶液からなる第一溶液を調整する工程、前記第一溶液と活性炭とを、液温６０〜８０℃に保ちながら混合した後に活性炭を分離して第二溶液を得る活性炭処理工程、前記第二溶液から種晶を用いて（Ｒ）−３，４−ジヒドロ−４−エチルアミノ−２−（３−メトキシプロピル）−２Ｈ−チエノ［３，２−ｅ］−１，２−チアジン−６−スルホンアミド−１，１−ジオキシド（ブリンゾラミド）の結晶を析出させる結晶化工程を含んでなることを特徴とする方法である。
また、本発明において、上記結晶化工程は２〜４回行うことが好ましく、上記再結晶操作において、４５〜５５℃にて種晶を加えることが好ましい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、ブリンゾラミドの粗体を特定の方法で精製することによって、融点が約１３１℃で、純度が９９．６％以上、さらには９９．８％以上の高純度のブリンゾラミド結晶を安定的に製造することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、ブリンゾラミドの粗体とエタノールとを混合し、当該粗体のエタノール溶液からなる第一溶液を調整する工程、前記第一溶液と活性炭とを、液温を６０〜８０℃に保ちながら混合した後に活性炭を分離して第二溶液を得る活性炭処理工程、前記第二溶液から種晶を用いてブリンゾラミドの結晶を析出させる結晶化工程を含んでなることを特徴とする方法である。
以下、本発明の詳細について、順を追って説明する。
【００１７】
（ブリンゾラミド粗体）
本発明で使用するブリンゾラミド粗体は、特に制限されるものではなく、公知の方法、例えば特許文献１に記載の方法で製造されたものが使用され、下記製造方法で製造されたものを使用することもできる。下記製造方法では純度が９７〜９９％のブリンゾラミドを安定して得ることができ、これを本発明のブリンゾラミド粗体として使用することによって、より高純度のブリンゾラミド結晶を安定して製造することができる。以下、該製造方法の詳細を説明する。
【００１８】
（ブリンゾラミド粗体の製造方法）
該製造方法において、ブリンゾラミド粗体は、前記スルホンアミド体から、反応工程、分離工程、単離工程を経て製造される。以下、各工程の詳細を説明する。
【００１９】
１．反応工程
反応工程では、前記スルホンアミド体のＣ（４）部位に結合した水酸基を活性化した後エチルアミノ化して前記目的物を含む反応混合物を得る。すなわち、原料化合物のＣ（４）部位に結合した水酸基を活性化する活性化工程、活性化された水酸基をエチルアミンで置換して、目的化合物を生成するアミノ化工程を含んでなる方法により好適に行うことができる。また、必要に応じて活性化工程前に原料化合物のＣ（６）部位に結合したスルホンアミド基を保護して、保護された原料化合を生成する保護工程を行っても良い。保護工程を行った場合、活性化工程実施後、アミノ化工程の前後いずれかに脱保護工程を入れても良い。
【００２０】
上記保護工程における、前記原料化合物のＣ（６）部位に結合したスルホンアミド基の保護は、反応溶媒中で原料化合物と保護剤としてのオルト酢酸低級アルキルを加熱混合することにより好適に行うことができる。オルト酢酸低級アルキルとしては、反応で副生するアルコールの除去が容易であるという理由からオルト酢酸トリメチルを使用することが特に好ましい。また、反応溶媒は反応に関与しない不活性溶媒であれば特に制限されないが、反応温度の管理が容易であることから、酢酸エチル、アセトニトリルを用いるのが特に好ましい。反応条件は適宜決定すればよいが、通常、原料化合物、当該原料化合物１モルに対して１．０〜１．５モルのオルト酢酸低級アルキル、及び原料化合物１質量部に対して１．５〜１０質量部の反応溶媒を混合し、還流下１〜２４時反応させればよい。このような反応を行うことにより、Ｃ（６）部位に結合したスルホンアミド基が保護された原料化合物（以下、イミダート体とも言う。）を得ることができる。
【００２１】
上記活性化工程における水酸基の活性化は、例えば、上記保護工程終了後、溶媒を留去することによりイミダート体の濃縮物を得、これをテトラヒドロフラン等の有機溶媒に溶解させて得た溶液を冷却してから当該溶液にイミダート体1モルに対して１．０〜１．５モルの塩化スルホニル化合物を添加し、−１０〜１５℃の温度で１〜４時間攪拌することによって行うことができる。このような操作により、Ｃ（４）部位がスルホニル化された原料化合物またはイミダート体（以下、スルホニル体とも言う。）を得ることができる。該化合物は反応液中に溶解しているので、アミノ化反応は該反応液にエチルアミンを加えることにより行うことができる。なお、塩化スルホニル化合物としては、引き続き行う脱離工程における反応時間が短縮でき、収率も向上するという理由から、塩化ｐ−トルエンスルホニルを使用することが好ましい。
【００２２】
脱保護工程における脱保護反応は活性化工程後ならば、アミノ化工程の前後どちらに実施しても良い。活性化基が脱保護材の影響を受けることがないことからアミノ化工程と同時またはアミノ化工程の後の実施した方が良い。脱保護の方法はオルト酢酸低級アルキルを脱保護する一般的な方法ならいかなる反応でも良いが、後述のエチル化反応と同時に実施できることから７０％エチルアミン水溶液中の水を用いるのが特に好ましい。
【００２３】
前記アミノ化工程はスルホニル体とエチルアミンを反応させることから成る。用いるエチルアミンはどのような形態でも良いが、入手の容易さ、前述の脱保護工程をアミノ化と同時に実施できること、エチルアミンの濃度が高く反応効率が高いことから７０％エチルアミン水溶液を用いるのが特に良い。スルホニル体とエチルアミンとの反応（アミノ化反応）は１０℃以下に冷却された反応液にエチルアミンをスルホニル体１モルに対するエチルアミンの量が１０〜５０モルとなるように添加し、冷却を維持したまま、所定時間反応させることによって好適に行うことができる。反応温度は１０℃以下ならば特に問題無いが、低温では反応純度が向上することから５℃以下が良い。温度が低下すると全体の反応速度も低下することから０℃〜５℃が特に良い。冷却は反応進行度が９０％以上まで行うのが特に良いが、必要に応じて反応進行度に応じて加温しても良い。但し、１０℃以上まで加熱する際の反応進行度が低い場合、得られる目的化合物の収量、純度の向上幅は小さくなる。なお、この場合反応進行度は目的化合物と保護化された目的化合物の合計を目的化合物、保護化された目的化合物、スルホニル体、脱保護化されたスルホニル体の合計で除したものをいう。
【００２４】
２．分離工程
分離工程では、前記工程で得られた反応混合物から前記目的化合物の粗体を分離する。ここでいう分離とは、反応混合物中の反応溶媒および水溶性不純物と、有機系不純物を含む目的化合物からなる粗体とを分離することを意味する。また、目的化合物の粗体とは、主たる不純物として有機系不純物（有機系副生物や残存有機溶媒など）を含む目的化合物を意味し、通常も目的化合物の純度が６５〜８５％程度の固体状若しくは粘稠な液状のものを意味する。反応混合物からの粗体の分離は、反応混合物である反応溶液に炭酸水素ナトリウムなどの塩基を添加して中和した後に、酢酸エチルなどの有機溶媒（抽出溶媒）を用いて有機成分を分離し、必要に応じて水洗、乾燥（水分除去）を行い、抽出溶媒を留去して濃縮することにより好適に行うことができる。
【００２５】
３．単離工程
単離工程では、得られた目的化合物を有機溶媒へ溶解させ該当混合溶液から目的化合物を結晶化させる。用いる溶媒は単一溶媒でも混合溶媒でも良いが、アルコールと非極性溶媒の混合溶液、またはアルコールが良い。得られる目的化合物の純度、収率が高くなることから２−プロパノールが特に好ましい。このとき使用する溶媒量は、通常、粗体１質量部に対して１〜５０質量部である。バッチ収量及びろ過工程の操作性向上を考慮すると２〜１０質量部が好ましい。このようにして調製された溶液から目的化合物を結晶化させるには、溶液を冷却すればよい。なお、溶液を調製する際の温度にもよるが、アルコールに粗体を溶解させてから非極性溶媒を添加する場合には、非極性溶媒の添加に伴い目的物の結晶化が起ることもある。通常は、粗体を含む溶液を５０℃〜１００℃に加熱して粗体を完全に溶解せしめてから溶液を−１０℃〜２０℃に冷却して結晶化を行うことが好ましい。
【００２６】
本発明では、上記ブリンゾラミド粗体に本発明の操作を実施することによって、高純度のブリンゾラミド結晶を製造することが出来る。すなわち、本発明は、ブリンゾラミド粗体とエタノールとを混合し、当該粗体のエタノール溶液からなる第一溶液を調整する工程、前記第一溶液と活性炭とを、液温を６０〜８０℃に保ちながら混合した後に活性炭を分離して第二溶液を得る活性炭処理工程、前記第二溶液から種晶を用いてブリンゾラミドの結晶を析出させる結晶化工程を含んでなることを特徴とする方法である。以下、本発明の各操作の詳細について説明する。
【００２７】
（第一溶液調整工程）
本発明では、まず、ブリンゾラミド粗体とエタノールとを混合し、当該粗体のエタノール溶液からなる第一溶液を調整する。
本発明において、上記第一溶液を調整する方法は特に限定されず、具体的には、ブリンゾラミド粗体とエタノールとを混合し、必要に応じて加熱することによって、当該粗体を溶解させて上記第一溶液を得ることができる。加熱する際の温度は、当該粗体が溶解する温度であれば特に限定されないが、６０〜８０℃とすることによって、次の活性炭処理工程をそのまま行うことができるため好ましい。
また、本発明で溶媒として使用されるエタノールの量は、精製能力、操作性等を考慮すると、ブリンゾラミド粗体１質量部に対して、４〜１６質量部であることが好ましく、８〜１２質量部であることがより好ましい。
【００２８】
（活性炭処理工程）
本発明の活性炭処理工程は、前記第一溶液と活性炭とを、液温を６０〜８０℃に保ちながら混合した後に活性炭を分離して第二溶液を得る工程である。本発明において、下記結晶化工程の前に当該工程を実施することによって、下記結晶化工程では除去されない不純物が効果的に除去され、さらに下記結晶化工程で種晶を使用することによって、融点が１３１℃で高純度のブリンゾラミド結晶を得ることができる。
本発明の活性炭処理工程では、具体的には、前記第一溶液と活性炭とを混合し、この混合液を熱時濾過することによって活性炭を除去して第二溶液を得る。当該工程においては、混合液を撹拌することが好ましい。また、除去された活性炭を７０〜８０℃のエタノールで洗浄し、得られた洗浄液を、熱時濾過で得られた濾液とあわせて第二溶液とすることが好ましい。
【００２９】
当該活性炭処理工程において使用される活性炭の量は、活性炭処理により向上する純度および、それに続く結晶化での純度向上度、操作性、さらには副次的に得られる脱色効果等を考慮すると、ブリンゾラミド粗体１質量部に対して、０．０５〜０．５質量部であることが好ましく、０．１〜０．３重量部であることがより好ましい。また、当該工程において、洗浄で使用するエタノールの量は１〜４質量部であることが好ましい。
さらに、当該活性炭処理工程は、長時間実施することによってブリンゾラミドが分解する恐れがあることから、第一溶液と活性炭とを混合して、５分〜２時間撹拌することが好ましく、１０〜２０分間撹拌することがさらに好ましい。
当該活性炭処理工程で得られた第二溶液を用い、そのまま次の結晶化工程を行うことができる。
【００３０】
（結晶化工程）
本発明の結晶化工程は、前記第二溶液から種晶を用いてブリンゾラミドの結晶を析出させる工程である。
本発明の結晶化工程は、具体的には、前記第二溶液を４５〜５５℃まで冷却して種晶を添加し、ブリンゾラミドの結晶を析出させる。また、種晶を添加した後、混合液を攪拌しながら毎時６〜６０℃、好ましくは毎時２５〜３５℃にて溶液の温度を下げ、０〜２０℃さらに好ましくは０〜５℃で１時間以上保持して、結晶を析出させることが好ましい。この混合液を濾過してエタノールを除去し、得られた結晶を０〜２５℃のエタノールで１〜３回洗浄し、ブリンゾラミド結晶を得ることができる。当該結晶化工程１回における収率は９０〜９５％となる。
当該結晶化工程で使用される種晶は、ブリンゾラミドの結晶であれば特に限定されず、使用される種晶の量は、ブリンゾラミド粗体１質量部に対して、０．０００１〜０．００１質量部であることが種晶の分散性等の点で好ましい。また、上記洗浄で使用されるエタノールの量は、０．８〜２質量部であることが好ましい。
また、本発明においては、当該結晶化工程を２〜４回行うことが好ましい。当該結晶工程を２回行うことによって、ブリンゾラミド結晶の純度を９９．８％以上とすることができ、３〜４回行うことによって純度を９９．９％以上とすることができる。
【００３１】
本発明において、２回目以降の結晶化工程では、前の結晶化工程で得られたブリンゾラミドの結晶とエタノールとを混合して第二溶液とし、前記第二溶液から種晶を用いてブリンゾラミドの結晶を析出させる。具体的には、前の結晶化工程で得られたブリンゾラミドの結晶とエタノールとを混合し、必要に応じて加熱して当該結晶のエタノール溶液からなる第二溶液とし、上記１回目の結晶化工程と同様の操作をすることによって結晶を析出させ、固液分離して結晶を得ることが好ましい。第二溶液を得る際に、加熱する場合の温度は、当該結晶が溶解する温度であれば特に限定されないが、種晶の添加温度である４５〜５５℃より高温であれば特に限定されず、当該結晶が溶解する温度であればよい。また、２回目以降の結晶化工程において、溶媒として使用されるエタノールの量は、収率，純度，操作性等を考慮すると、ブリンゾラミド１質量部に対してエタノール４〜１６質量部であることが好ましく、８〜１２質量部であることがより好ましい。
【００３２】
本発明によれば、上記のとおり、活性炭処理操作に続いて、種晶を使用した再結晶操作を実施することによって、融点が約１３１℃で、純度が９９．６％以上のブリンゾラミド結晶を安定的に製造することができる。さらに、再結晶操作を２〜４回行うことによって、得られるブリンゾラミド結晶の純度を９９．８％以上、さらには９９．９％以上とすることができる。
【実施例】
【００３３】
以下、実施例によって本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
なお、実施例、比較例で得られたブリンゾラミドの純度測定は、以下のように行った。
【００３４】
＜ブリンゾラミドなどの純度の測定方法＞
装置：ＷＡＴＥＲＳ社製  Ａｌｌｉａｎｃｅ  型式ｅ２６９５−２４８９
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：２５４ｎｍ）
カラム：ジーエルサイエンス株式会社製  商品名  Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＣＮ−３、粒径５μｍ、内径４．６ｍｍ、長さ２５ｃｍ、
カラム温度：４０℃  一定温度
移動相：ｎ−ヘキサン／エタノール＝８０／２０
流量：１．０ｍｌ／分
測定時間：４５分
【００３５】
実施例１
ブリンゾラミド粗体（純度９８．２５％）１ｇにエタノール８ｇを加え７０℃で加熱溶解して得られた第一溶液に、活性炭０．２ｇ加え１０分間攪拌した後、濾過操作によって活性炭を除去し、７０℃のエタノール４ｇで活性炭を洗浄し、濾液と洗浄液を合わせて第二溶液を得た（活性炭処理工程）。第二溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．００１ｇを添加した後、１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール０．８ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶０．９ｇ（純度９９．６４％）を得た（結晶化工程１回目）。この結晶にエタノール１０．７ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０００９ｇ添加した後１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール０．７１ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶０．８２ｇ（純度９９．８８％）を得た（結晶化工程２回目）。この結晶にエタノール９．７ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０００８ｇ添加した後１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール０．６５ｇで２回洗浄し、乾燥後、ブリンゾラミド結晶０．７５ｇ（純度９９．９３％）を得た（結晶化工程３回目）。得られたブリンゾラミド結晶の融点は１３１℃であり、光学純度は１００．０％ｅｅ．であった。
【００３６】
実施例２
ブリンゾラミド粗体（純度９８．６６％）３８．０２ｇにエタノール３００ｇを加え７０℃で加熱溶解して得られた第一溶液に、活性炭７．６ｇ加え１０分間攪拌した後、濾過操作によって活性炭を除去し、７０℃のエタノール１５０ｇで活性炭を洗浄し、濾液と洗浄液を合わせて第二溶液を得た（活性炭処理工程）。第二溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０３８ｇを添加した後、１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール３０ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶３４．２ｇ（純度９９．６８％）を得た（結晶化工程１回目）。この結晶にエタノール４０５ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０３４ｇ添加した後１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール２７ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶３１．５ｇ（純度９９．８１％）を得た（結晶化工程２回目）。この結晶にエタノール２４９ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０３１ｇ添加した後１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール２５ｇで２回洗浄し、乾燥後、ブリンゾラミド結晶２９．０ｇ（純度９９．９５％）を得た（結晶化工程３回目）。得られたブリンゾラミド結晶の融点は１３１℃であり、光学純度は１００．０％ｅｅ．であった。
【００３７】
比較例１（活性炭処理工程なし、種晶未使用）
ブリンゾラミド粗体（純度９８．２５％）１ｇにエタノール１２ｇを加え７０℃で加熱溶解して得られた第一溶液を、攪拌しながら徐冷し、０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール０．８ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶０．９ｇ（純度９９．５１％）を得た。得られたブリンゾラミド結晶の融点は１２７℃であり、光学純度は９９．９％ｅｅ．であった。
【００３８】
比較例２（種晶未使用）
ブリンゾラミド粗体（純度９８．２４％）１５．０７ｇにエタノール４０ｇを加え７０℃で加熱溶解して得られた第一溶液に、活性炭１．３ｇ加え１０分間攪拌した後、濾過操作によって活性炭を除去し、７０℃のエタノール１０ｇで活性炭を洗浄し、濾液と洗浄液を合わせて第二溶液を得た（活性炭処理工程）。第二溶液を攪拌しながら０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール１０ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１２．８３ｇ（純度９９．３４％）を得た（結晶化工程１回目）。この結晶にエタノール４５ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール９．５ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１１．２ｇ（純度９９．５７％）を得た（結晶化工程２回目）。この結晶にエタノール４４ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール９ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１０．７ｇ（純度９９．７９％）を得た（結晶化工程３回目）。得られたブリンゾラミド結晶の融点は１２９℃であり、光学純度は９９．９％ｅｅ．であった。
【００３９】
比較例３（活性炭処理工程なし）
ブリンゾラミド粗体（純度９８．２４％）１２．４９ｇにエタノール１９７ｇを加え７０℃で加熱溶解して得られた第一溶液を、攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０１２ｇを添加した後、１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール９．９ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１１．２４ｇ（純度９８．４６％）を得た（結晶化工程１回目）。この結晶にエタノール１７７ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０１１ｇ添加した後１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール８．９ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１０．１５ｇ（純度９９．２５％）を得た（結晶化工程２回目）。この結晶にエタノール１３０ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら５０℃まで徐冷し、種晶０．０１０ｇ添加した後１００分間で０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃のエタノール８ｇで２回洗浄し、乾燥後、ブリンゾラミド結晶９．１４ｇ（純度９９．３９％）を得た（結晶化工程３回目）。得られたブリンゾラミド結晶の融点は１２８℃であり、光学純度は９９．８％ｅｅ．であった。
【００４０】
比較例４（活性炭処理工程なし、２−プロパノールによる結晶化工程）
ブリンゾラミド粗体（純度９８．６４％）１７．１２ｇに２−プロパノール１３５ｇを加え７０℃で加熱溶解して得られた第一溶液を、攪拌しながら０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃の２−プロパノール１４ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１６．７５ｇ（純度９８．９５％）を得た（結晶化工程１回目）。この結晶に２−プロパノール１０７ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃の２−プロパノール１１ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１５．６１ｇ（純度９９．０２％）を得た（結晶化工程２回目）。この結晶に２−プロパノール９８ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃の２−プロパノール１２ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１５．５３ｇ（純度９９．２１％）を得た（結晶化工程３回目）。得られたブリンゾラミド結晶の融点は１２５℃であり、光学純度は９９．８％ｅｅ．であった。
【００４１】
比較例５（２−プロパノールによる結晶化工程）
ブリンゾラミド粗体（純度９９．２１％）１５．５３ｇに２−プロパノール１００ｇを加え７０℃で加熱溶解して得られた第一溶液に活性炭５ｇ加え１０分間攪拌した後、濾過操作によって活性炭を除去し、７０℃の２−プロパノール２０ｇで活性炭を洗浄し、濾液と洗浄液を合わせて第二溶液を得た（活性炭処理工程）。第二溶液を攪拌しながら０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃の２−プロパノール１２ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶１０．１９ｇ（純度９９．８４％）を得た（結晶化工程１回目）。この結晶に２−プロパノール１２０ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃の２−プロパノール１３ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶８．０９ｇ（純度９９．８６％）を得た（結晶化工程２回目）。この結晶に２−プロパノール９９ｇを加え、７０℃で加熱溶解した。溶液を攪拌しながら０℃まで冷却して１時間攪拌した。析出結晶を濾過操作により取得し、０℃の２−プロパノール９ｇで２回洗浄し、ブリンゾラミド結晶７．４４ｇ（純度９９．８８％）を得た（結晶化工程３回目）。得られたブリンゾラミド結晶の融点は１２７℃であり、光学純度は９９．９％ｅｅ．であった。