(57)【要約】【課題】ヤブツバキの若葉抽出液を含む化粧料の提供。【解決手段】ヤブツバキの若葉の抽出液を含有する化粧料であって、前記抽出液が、水、多価アルコール水溶液及びエタノール水溶液から選ばれる溶媒で抽出された成分を含むものである、化粧料。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヤブツバキの若葉の抽出液を含有する化粧料であって、
前記抽出液が、水、多価アルコール水溶液及びエタノール水溶液から選ばれる溶媒で抽出された成分を含むものである、化粧料。
【請求項２】
化粧料が皮膚化粧料である、請求項１記載の化粧料。
【請求項３】
化粧料が毛髪化粧料である、請求項１記載の化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヤブツバキの若葉抽出液を含有する化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
ツバキの葉、種子、花などから得られる抽出物は、化粧料成分や医薬成分として使用することが知られている。
【０００３】
特許文献１には、ツバキの葉の抽出物を有効成分として含有する表皮角化細胞賦活剤の発明が記載されている。
段落番号００１５には、ツバキ科ツバキ属に属するツバキ（Camellia japonica）の葉をそのまま、もしくは乾燥させた後、各種溶媒にて抽出することが記載されており、溶媒については、更に好ましくは水、エタノール、1,3-ブチレングリコールの１種または２種以上を使用することが記載されている。
段落番号００１６には、「抽出に際しては、ツバキ葉をそのまま、もしくは乾燥させたものに、抽出溶媒を加えて１時間以上浸漬し、ろ過することで抽出液を得ることができる。抽出は、常圧または加圧下で、室温または加熱、冷却下で行うことができる。得られた抽出液は、そのまま用いてもよく、あるいは溶媒留去により濃縮したり、カラムクロマトグラフィーや溶媒分画等の処理により精製したりしてもよい。」と記載されている。
実施例（段落番号００２３）には、「〔ツバキ葉抽出物の調製〕ツバキ葉を純水で洗浄し、７０℃で２４時間乾燥させて得られた葉５０ｇに、５００ｇの５０％エタノール水溶液を加え１週間浸漬して抽出した後、ろ過して得られたろ液をツバキ葉抽出物とした。乾燥残留物は１．４％であった。」と記載されている。
【０００４】
特許文献２の請求項２には、P.acnesのヒアルロニダーゼの活性阻害剤を含有することを特徴とする保湿化粧料であり、P.acnesのヒアルロニダーゼ活性阻害剤が，ばら科バラ属、ばら科サクラ属、あおい科フヨウ属、あおい科アオイ属、あおい科ゼニアオイ属、ゆり科ユリ属、まめ科シャジクソウ属、つばき科ツバキ属、きく科キク属、きく科ヒマワリ属、きく科キンセンカ属、きく科タンポポ属、あかばね科マツヨイグサ属より抽出された各種抽出物群より選択された1種または2種以上である保湿化粧料の発明が記載されている。
段落番号００２０には、抽出に使用する溶媒として、エタノール、プロピレングリコール、エチレングリコール、1,3-ブチレングリコールの1種又は2種以上の混合溶媒を用いることができると記載されている。
段落番号００２１には、「抽出時間・抽出温度は、特に限定されない。水による抽出であれば、通常60℃下において、３〜４時間抽出を行い、エタノールなどの低沸点溶媒を使用する場合は還流器付きの抽出装置を使用する。抽出した溶液は、冷却後、ろ過をすることによって抽出物を得ることができる。更に、活性炭やその他樹脂などを用いて脱臭・脱色などを行うこともできる。」と記載されている。
【０００５】
特許文献３には、ヤブツバキ抽出物中に含まれるエラグ酸誘導体を有効成分として含む脱顆粒阻害剤の発明が記載されている。
抽出に使用する溶媒は段落番号００１６に記載されており、抽出物の精製手段については段落番号００２０、００２１に記載されており、溶媒分配法、吸着剤カラムクロマトグラム法、中圧カラムクロマトグラム法、高速液体クロマトグラム法等を組み合わせた方法が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１２-１０２０４９号公報
【特許文献２】特開２００３−１２４８９号公報
【特許文献３】ＷＯ２００７／１２９４０６号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ヤブツバキの若葉抽出液を含有する化粧料を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、課題の解決手段として、ヤブツバキの若葉の抽出液を含有する化粧料であって、前記抽出液が、水、多価アルコール水溶液及びエタノール水溶液から選ばれる溶媒で抽出された成分を含むものである、化粧料を提供する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の化粧料に含有されているヤブツバキの若葉抽出液は、試験例１〜５で確認された効果を有していることから、特に皮膚用および頭皮用または毛髪用化粧料として優れている。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】製造例１で得た抽出液の薄層クロマトグラフィーの写真（左側）と、比較製造例１で得た抽出液の薄層クロマトグラフィーの写真（右側）（呈色試薬３０％アンモニア）。
【図２】製造例１で得た抽出液の薄層クロマトグラフィーの写真（左側）と、比較製造例１で得た抽出液の薄層クロマトグラフィーの写真（右側）（呈色試薬７０％硫酸）。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の化粧料に含有されているヤブツバキの若葉抽出液は、試験例１〜５で確認された効果を有していることから、特に皮膚化粧料や頭皮化粧料または毛髪化粧料として優れている。
【００１２】
本発明で使用するヤブツバキ（Camellia japonica）の若葉は、春に葉芽から伸びた新梢から採取されるものであり、黄緑色から明るい緑色までのものである。新梢が夏を過ぎた成葉や冬を越した以降の成葉は含まれない。
なお、若葉と成葉を比べると若葉の水分含有量の方が高い。水分含有量は、産地や採取時期などにより異なるが、若葉の水分含有量は６０質量％（９０℃で３時間乾燥したときの喪失質量より算出）程度であり、成葉の水分含有量は４０〜５３質量％程度である。
【００１３】
ヤブツバキの若葉抽出液は、水、多価アルコール水溶液及びエタノール水溶液から選ばれる溶媒で抽出された成分を含むものである。
次にヤブツバキの若葉抽出液の製造方法の一実施形態を工程ごとに説明する。
【００１４】
（ヤブツバキの若葉の粗抽出工程）
この工程では、ヤブツバキの若葉と、水、多価アルコール水溶液及びエタノール水溶液から選ばれる溶媒を共存させた状態で粗抽出液を得る。
【００１５】
ヤブツバキの若葉は、そのまま粗抽出工程にて使用することができるが、抽出効率を上げることと、素原料（若葉）の劣化を防止するため、乾燥した後に粗抽出工程を実施することができる。
乾燥工程を実施するときは、自然乾燥、送風乾燥のほか、加熱乾燥することができる。
前記した抽出効率を上げるなどの観点からは、水分含有量が５質量％以下になるように乾燥することが好ましく、より好ましくは３質量％以下、さらに好ましくは１質量％以下になるように乾燥する。
【００１６】
粗抽出工程は、ヤブツバキの若葉の質量に対して１０〜３０倍量の水、多価アルコール水溶液及びエタノール水溶液から選ばれる溶媒を使用して抽出する。
抽出は、抽出溶媒の温度が室温（２０〜３０℃）、冷却状態又は加熱状態になるようにして実施することができる。
抽出溶媒の温度が室温の場合は、例えば２０〜３０℃で８〜２４時間抽出する。
抽出溶媒の温度が冷却状態のとき（室温より低いとき）は、例えば４〜１０℃で１２〜７２時間抽出する。
抽出溶媒の温度が加熱状態のとき（室温より高いとき）は、例えば３５〜７０℃で３〜８時間抽出する。
抽出時間を短縮する観点からは加熱抽出することが好ましく、４０〜６０℃で４〜６時間加熱抽出することがより好ましい。
ヤブツバキの若葉は、抽出効率を高めるため、細かく切断したものを使用することができる。
【００１７】
多価アルコールとしては、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコールなどを使用することができるが、最終的に得られる抽出液を化粧料成分として使用する場合には、ブチレングリコール（1,3−ブチレングリコール）が好ましい。
多価アルコール水溶液中の多価アルコール濃度は特に制限されるものではないが、最終的に得られる抽出液を化粧料成分として使用する場合には、３０〜７０質量％が好ましく、４０〜６０質量％がより好ましい。
エタノール水溶液中のエタノール濃度は、３０質量％以上が好ましく、４０質量％以上がより好ましい。
抽出に使用する溶媒は、最終的に得られる抽出液をそのまま化粧料成分として使用できることから、濃度３０〜７０質量％（1,3−ブチレングリコールの濃度）の1,3−ブチレングリコール水溶液が特に好ましい。
なお、抽出溶媒として、水（好ましくはイオン交換水または純水）、多価アルコール水溶液、エタノール水溶液を使用するときは、ヤブツバキの若葉は成葉に比べて水分量が高いことから、若葉の水分量を考慮して水分量を調整することが好ましい。
【００１８】
（粗抽出液からヤブツバキの若葉の分離工程）
次に、前工程で得られた粗抽出液からヤブツバキの若葉を分離する。
この工程は、濾紙を使用した自然濾過法を適用することができる。前工程の終了後に直ちに濾過を実施することもできるが、抽出液の温度が高い場合には、作業の安全性を確保する観点から、冷却して温度を下げた後に濾過を実施することもできる。
【００１９】
（冷蔵工程）
次に、前工程でヤブツバキの若葉と分離した粗抽出液を１０℃以下の温度で３〜１４日間保持して沈澱を生成させる。
冷蔵工程では、好ましくは４〜７℃の温度で４〜１０日間保持する。
この冷蔵工程を実施することによって、化粧料成分として使用したときに濁りや沈澱を生じさせる原因となる成分を「おり（澱）」として生成させ、次工程にて除去する。
【００２０】
（抽出液を得る工程）
前工程にて沈澱を生成させた粗抽出液から沈殿物を分離して抽出液（精製抽出液）を得る。
沈殿物の分離手段は公知の濾過方法を適用することができ、好ましくはセライトなどの濾過材、ガラス繊維濾紙などを使用した吸引濾過法を適用することができる。
この工程で得られた抽出液が本発明の目的とするヤブツバキの若葉抽出液となるものである。
前記抽出液は、必要に応じて公知の精製手段（例えば、特許文献２、３に記載の精製手段）によりさらに精製することができるが、公知の精製手段を実施しなくても、そのまま化粧料成分として使用することができる。
【００２１】
上記の製造方法により得られたヤブツバキの若葉抽出液は、そのまま液体として使用することができるほか、乾燥して粉末、顆粒、その他の形態の固形物としても使用することができる。
【００２２】
本発明の化粧料は、上記のヤブツバキの若葉抽出液を含有するものである。
本発明で用いるヤブツバキの若葉抽出液は、「ヒドロキシラジカル消去能評価」、「過酸化水素消去能評価」、「角層タンパク質の酸化損傷抑制効果」、「過酸化水素による細胞傷害抑制効果」、「細胞内活性酸素消去能評価」の各種試験例で確認された効果を有しているものであり、前記効果を利用して化粧料成分として有用であり、その他、医薬品、医薬部外品などの製造原料としても使用することができる。
【００２３】
本発明の化粧料は、ヤブツバキの若葉抽出液と化粧料成分を混合して製造することができる。
ヤブツバキの若葉抽出液と混合する化粧料成分は、化粧料の種類に応じて適宜選択される周知の成分である。
本発明の化粧料は、化粧水、乳液、クリーム、ジェル、美容液、パック、オイル、軟膏、スプレー、貼付剤などにすることができる。
本発明の化粧料は、保湿クリーム、美容液、化粧水、美白化粧料、美白ローションなどの皮膚化粧料、育毛剤などの頭皮化粧料、シャンプー、コンディショナー、ヘアエッセンスなどの毛髪（頭皮も含む）化粧料として好適である。
化粧料中のヤブツバキの若葉抽出液の配合量は、化粧料の種類により異なるが、皮膚化粧料や頭皮化粧料の場合には固形分として０．０００１〜０．１質量％が好ましく、毛髪化粧料の場合には固形分として０．０００１〜０．１質量％が好ましい。
【実施例】
【００２４】
製造例１（ヤブツバキの若葉抽出液の製造方法）
ヤブツバキの若葉（外観は黄緑色。水分含有量約６０質量％）２００．０ｇを９０℃で３時間乾燥させて乾燥葉７９．８ｇを得た。
次に、乾燥葉４０．０ｇをビーカー内に入れ、そこに乾燥葉の質量に対して２０倍量の５０％1,3−ブチレングリコール水溶液を入れた。このビーカーを５０℃の水浴中に５時間保持した。
次に、濾紙（アドバンテック社製，No.２）を用いて、ビーカーの内容物を濾過して濾過液を得た。
次に、濾過液を冷蔵下（４〜７℃）で１週間放置した後、不溶物（沈澱物）をガラス繊維濾紙（アドバンテック社製，GA100）の上にさらに濾紙（アドバンテック社製，5C）を重ねたものを用い、沈澱物を含む液を吸引濾過して、目的とするヤブツバキの若葉抽出液（固形分〔蒸発残分〕濃度1.29質量％）を得た。
【００２５】
比較製造例１
ヤブツバキの成葉（外観は濃緑色。水分含有量約４０質量％）を使用したほかは製造例１と同様にして、ヤブツバキの成葉抽出液（固形分〔蒸発残分〕濃度0.41質量％）を得た。
【００２６】
製造例１と比較製造例１で得られた抽出液の薄層クロマトグラフィーを測定した。測定条件は表１に示すとおりである。結果を図１、図２に示す。
【００２７】
【表１】
2014034527.tif 000002
【００２８】
図１（呈色試薬３０％アンモニア）から確認できるとおり、製造例１で得られた抽出液（左側）と比較製造例１で得られた抽出液（右側）では、フラバノール類、またはフラボノール類と推察されるスポットが異なる位置に確認された。
図２（呈色試薬７０％硫酸）から確認できるとおり、製造例１で得られた抽出液（左側）と比較製造例１で得られた抽出液（右側）では、フラバノール類、またはフラボノール類と推察されるスポットが異なる位置に確認された。
【００２９】
試験例１（ヒドロキシラジカル消去能評価）
製造例１の若葉抽出液と比較製造例１の成葉抽出液のヒドロキシラジカル消去能を、スピントラップ剤を用い、ESR（Electron Spin Resonance）スペクトロメーターによって評価した。外部標準として酸化マンガンの３番目のシグナル（S.IMn2+）を用い、対象として抽出液の代わりに精製水を用いた際のシグナル（S.Iref）強度と、各抽出液を用いた際のシグナル（S.Isample）からヒドロキシラジカル消去率（％）を次式より算出した。
ヒドロキシラジカル消去率（％）＝
{１−（S.Isample/S.IMn2+）/（S.Iref/S.IMn2+）}×100
抽出液は希釈して数種類の濃度で測定をし、その消去率から５０％ヒドロキシラジカル消去濃度（ＱＣ50）を求めた。結果を表２に示す。
【００３０】
反応条件は次のとおりである。
1mM Fe(ClO4)2/6H2O：45μL
２５％5,5-Dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO)水溶液：10μL
若葉抽出液,または成葉抽出液：100μL
0.85mM 過酸化水素：45μL
全ての測定は、過酸化水素添加後、一定の時間で開始した。
【００３１】
【表２】
2014034527.tif 000003
若葉抽出液のヒドロキシラジカル消去能は、成葉抽出液に比し2.1倍であった。
【００３２】
試験例２（過酸化水素消去能評価）
製造例１の若葉抽出液と比較製造例１の成葉抽出液の過酸化水素消去能を、4-aminoantipyrine（4-AP）を用いた比色定量により評価した。
各抽出液をPBS(-)（pH7.4）で5mMに調製した過酸化水素と良く混合し、３７℃にて３０分インキュベートしたものを試料として、試料25μlと3.2mM 4-AP 25μl、16mM フェノール 25μl、1.8 units/mlのhorseradish peroxidase（シグマアルドリッチ社製、以下hP）25μlを混合し、３７℃で１０分間インキュベートの後、マイクロプレートリーダーによって490nmの吸光度を測定した。4-AP, フェノール，hPは50 mM Tris-HCl(pH8.0)で溶解した。
同時に試料の代わりに、既知濃度の過酸化水素を用いて作成した検量線と、得られた吸光度から残存する過酸化水素を定量した。
抽出液は希釈して数種類の濃度で測定を行って、５０％過酸化水素消去濃度（ＩＣ50）を求めた。結果を表３に示す。
【００３３】
【表３】
2014034527.tif 000004
若葉抽出液の過酸化水素消去能は、成葉抽出液に比し4.0倍であった。
【００３４】
試験例３（角層タンパク質の酸化損傷抑制効果）
製造例１の若葉抽出液の角層タンパク質酸化損傷抑制効果を、紫外線照射後に生じるカルボニルタンパク質量によって評価した。ヒトの上腕内側の皮膚表面より、テープストリッピング法によって角層を得た。
得られた角層に、固形分0 〜0.1質量％となるように調製した若葉抽出液を塗布後、紫外線(UVB)を２時間照射し（2800mJ/cm2）、37℃の湿潤下で24時間インキュベートした。
これを10μMのFluorescein-5-thiosemicarbazide(シグマアルドリッチ社製)を含む0.1M 2-Morpholinoethanesulfonic acid (MES)-Na buffer (pH5.5)によって1時間染色し、精製水にて十分に洗浄したのち、蛍光顕微鏡によって撮影した。得られた画像から、角層細胞面積当たりの平均輝度を算出しカルボニルタンパク質量の相対値（AU）を求めた。
【００３５】
【表４】
2014034527.tif 000005
角層タンパク質の酸化損傷（カルボニル化）は、皮膚のバリア機能や肌のくすみなどに、悪影響を与えることが知られているが、上記の結果から、若葉抽出液は、角層タンパク質のカルボニル化を抑制したことが確認された。
【００３６】
試験例４（過酸化水素による細胞傷害抑制効果）
製造例１の若葉抽出液と比較製造例１の成葉抽出液の過酸化水素による細胞傷害抑制効果を評価した。
ヒト表皮細胞由来HaCaT細胞を、96ウェル培養プレートに3.5×104cells/ウェルになるよう播種した。
通常培地は終濃度5％のウシ胎児血清（FBS）を含むダルベッコ変法イーグル培地（DMEM）を使用した。37℃、5%CO2下で一晩培養した後、培地を除去し、抽出液の固形分125μg/mLを含む通常培地に置き換えて、37℃、5%CO2下で24時間培養を継続した。
培地をHanks緩衝液（以下、HBSS（+））溶液で洗浄後、1.25mM過酸化水素を含むHBSS（+）溶液に置き換えて37℃、5%CO2下で2時間培養したのち、HBSS（+）溶液で過酸化水素を洗浄除去し、通常培地に置き換えて37℃、5%CO2下で24時間培養した。培地をHBSS（+）溶液で洗浄後、終濃度16.5mg/lのneutral red（以下NR）を含む通常培地に置き換え、37℃、5%CO2下で2時間培養をした。
培地をHBSS（+）溶液で洗浄後、細胞内に取り込まれたNRを溶出液（30%メタノール含有1 M塩酸水溶液）で抽出し、この溶液の550nmにおける吸光度をマイクロプレートリーダーで測定した。
通常培地のみで培養し、過酸化水素を含むHBSS（+）の代わりに、過酸化水素を含まないHBSS(+)を用いた以外は、同様の処理をした細胞の生残率が100％となるように、細胞生残率を算出した。
【００３７】
【表５】
2014034527.tif 000006
若葉抽出液は、過酸化水素による細胞傷害を抑制し、その程度は成葉抽出液に比し15倍であった。
【００３８】
試験例５（細胞内活性酸素消去能）
製造例１の若葉抽出液と比較製造例１の成葉抽出液の細胞内活性酸素消去能を評価した。
ヒト表皮細胞由来HaCaT細胞を、96ウェル培養プレートに3.5×104cells/ウェルになるよう播種した。通常培地は終濃度5％FBSを含むDMEMを使用した。
37℃、5%CO2下で一晩培養した後、培地を除去し、抽出液の固形分62.5μg/mLを含む通常培地に置き換えて、37℃、5%CO2下で24時間培養した後、終濃度10μMの2’, 7’-Dichlorodihydrofluorescein diacetate （DCFH-DA）を含むHBSS(+)に置き換え、37℃、5%CO2下の遮光下で30分間培養を継続した。
HBSS（+）溶液で洗浄した後、100μM過酸化水素を含むHBSS（+）溶液で15分間処理した。
処理後直ちにHBSS（+）溶液で洗浄したのち、プレートリーダーで蛍光（F）を測定した(Ex/Em 485nm/530nm)。
測定後に、終濃度1%のTriton-Xを含むPBS(-)を各ウェルに50μl加えて細胞を溶解し、BCA protein assay reagent kit(Thermo scientific社製)を用いてタンパク質量（P）を定量した。
これらをもとにタンパク質当たりの蛍光強度（F/P）を算出し、細胞内活性酸素上昇率（％）を以下の式で算出した。
【００３９】
【数１】
2014034527.tif 000007
【００４０】
【表６】
2014034527.tif 000008
若葉抽出液で予め処理した細胞では、細胞内活性酸素の上昇を完全に抑制したが、成葉抽出液では同様の傾向は見られなかった。
【００４１】
以下に本発明の若葉抽出液を配合した化粧料の実施例を示すが、以下の実施例により本発明は限定されるものではない。
実施例１（ミルキーローション）
製造例１にて若葉抽出液を製造した後、その若葉抽出液と下記の各成分を混合して（質量％表示で、合計１００質量％）、ミルキーローションを製造した。
【００４２】
【表７】
2014034527.tif 000009
【００４３】
成分１，３〜７，１１及び１２を８０℃に加熱溶解したところに、８０℃に加熱溶解した２，１０及び１３の多くを加え、冷却後８，９及び1３の残部を加えミルキーローションを得た。
【００４４】
実施例２（ローション）
製造例１にて若葉抽出液を製造した後、その若葉抽出液と下記の各成分を混合して（質量％表示で、合計１００質量％）、ローションを製造した。
【００４５】
【表８】
2014034527.tif 000010
【００４６】
成分１，２，７および８の多くを８０℃で加熱溶解し、冷却後３〜６および８の残部を加えローションを得た。
【００４７】
実施例３（ボディソープ）
製造例１にて若葉抽出液を製造した後、その若葉抽出液と下記の各成分を混合して（質量％表示で、合計１００質量％）、ボディソープを製造した。
【００４８】
【表９】
2014034527.tif 000011
【００４９】
成分１〜３，６〜１１を加熱溶解し、成分４，５を別に加熱溶解したものを加え、冷却後ボディソープを得た。
【００５０】
実施例４（ヘアトリートメント）
製造例１にて若葉抽出液を製造した後、その若葉抽出液と下記の各成分を混合して（質量％表示で、合計１００質量％）、ヘアトリートメントを製造した。
【００５１】
【表１０】
2014034527.tif 000012
【００５２】
成分１〜３,５,６及び９を８０℃ に加熱溶解したところに、８０℃に加熱溶解した４及び１０の多くを加え、冷却後７，８及び１０の残部を加えヘアトリートメントを得た。
【００５３】
実施例５（ヘアウォーター）
製造例１にて若葉抽出液を製造した後、その若葉抽出液と下記の各成分を混合して（質量％表示で、合計１００質量％）、ヘアウォーターを製造した。
【００５４】
【表１１】
2014034527.tif 000013
【００５５】
成分３，７，１２及び１３の多くを８０℃で加熱溶解後に冷却し、５及び１１を加熱溶解後に冷却したものと、１，２，４，６，８，９，１１と１３の残部を加えヘアウォーターを得た。
【００５６】
実施例６（頭皮ローション）
製造例１にて若葉抽出液を製造した後、その若葉抽出液と下記の各成分を混合して（質量％表示で、合計１００質量％）、頭皮ローションを製造した。
【００５７】
【表１２】
2014034527.tif 000014
【００５８】
成分３及び５を８０℃ に加熱溶解したところに、８０℃に加熱溶解した１，９及び１０の多くを加え、冷却後２，４，６〜８および１０の残部を加え頭皮ローションを得た。
【００５９】
実施例７（エッセンス）
製造例１にて若葉抽出液を製造した後、その若葉抽出液と下記の各成分を混合して（質量％表示で、合計１００質量％）、エッセンスを製造した。
【００６０】
【表１３】
2014034527.tif 000015
【００６１】
成分１，３，４，６と９の多くを混和した後、５を９の一部で分散したものを加え、７を９の一部で溶解したものを加えて、２を８で溶解したものと９の残部を加えてエッセンスを得た。
【図１】
2014034527.tif 000016
【図２】
2014034527.tif 000017