(57)【要約】【課題】本発明は、従来よりも早期かつ大幅にアディポネクチン濃度を上昇させることが可能な、血液中のアディポネクチン上昇システムを提供することにある。【解決手段】アルブミン篩係数が０．１〜０．８、且つフィブリノーゲンの篩係数が０．１以下の膜を主たる構成要素とする体外循環モジュール１０を用い、血液を体外循環モジュール１０に供給して処理する、血液中のアディポネクチン上昇システム１とする。当該膜は、エチレン−ビニルアルコール共重合体により形成された中空糸膜である。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルブミン篩係数が０．１〜０．８、且つフィブリノーゲンの篩係数が０．１以下の膜を主たる構成要素とする体外循環モジュールを用い、血液を前記体外循環モジュールに供給して処理することを特徴とする、血液中のアディポネクチン上昇システム。
【請求項２】
前記膜が、エチレン−ビニルアルコール共重合体により形成された膜であることを特徴とする、請求項１に記載の血液中のアディポネクチン上昇システム。
【請求項３】
前記膜が、中空糸状膜であることを特徴とする、請求項１又は請求項２に記載の血液中のアディポネクチン上昇システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体の血液中のアディポネクチン値を増加させるアディポネクチン上昇システムに関する。
【背景技術】
【０００２】
血液中のアディポネクチンは、糖尿病、高血圧、高脂血症、肥満、虚血性心疾患において減少し、有酸素運動による体重減少で増加することが知られており、またインスリン抵抗性を抑制することが知られている。アディポネクチンは、マウス実験等でもインスリン抵抗性改善作用を有することが証明されており（例えば、非特許文献１−３参照）、血液中のアディポネクチンが増加した状態を維持することで、肥満の改善や血管（動脈）の柔軟性などの抗加齢に対して好影響を与えることができると考えられている。
【０００３】
従来、体外循環療法によってアディポネクチンの血中濃度を上昇させる技術が知られている。例えば、特許文献１には、血液体外循環における血液を、血球を含む血球成分と血漿成分とに分離した後に、血漿成分中のＬＤＬ（Low Density Lipoprotein）を除去することによりアディポネクチン値を上昇させる技術が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１０−１６７０９０号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Philipp E.Schererほか、「A Novel Serum Protein Similar to Clq, Produced Exclusively in Adipocytes」、THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY、米国生化学分子生物学会（The American Society for Biochemistry and Molecular Biology）、1995年11月10日、Vol.270、No.45、p.26746-26749
【非特許文献２】前田和久ほか、「cDNA Cloning and Expression of a Novel Adipose Specific Collagen-like Factor, apM1 (Adipose Most Abundant Gene Transcript 1)」、Biochemical and Biophysical Research Communications、1996年4月16日、Vol.221、p.286-289
【非特許文献３】T.YAMAUCHIほか、「The fat-derived hormone adiponectin reverses insulin resistance associated with both lipoatrophy and obesity」、Nature Medicine、Nature Publishing Group、2001年8月、Vol.7、No.8、p.941-946
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、特許文献１に開示された技術によれば、処置後１４日後にしかアディポネクチン濃度の上昇が認められておらず、その上昇も初期値の１０〜２０％程度と低いものである。このようなことから、特許文献１に開示された技術は、必ずしも実用的に有効な方法であるとはいえない。
【０００７】
そこで、本発明の目的は、従来よりも早期かつ大幅にアディポネクチン濃度を上昇させることが可能な血液中のアディポネクチン上昇システムを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、特定の構造からなる膜を備えた体外循環モジュールを用いることで、アディポネクチンを効果的に上昇させることができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は、以下（１）〜（３）を特徴とする。
（１）アルブミン篩係数が０．１〜０．８、且つフィブリノーゲンの篩係数が０．１以下の膜を主たる構成要素とする体外循環モジュールを用い、血液を前記体外循環モジュールに供給して処理することを特徴とする、血液中のアディポネクチン上昇システム。
（２）前記膜が、エチレン−ビニルアルコール共重合体により形成された膜であることを特徴とする、上記（１）に記載の血液中のアディポネクチン上昇システム。
（３）前記膜が、中空糸状膜であることを特徴とする、上記（１）又は（２）に記載の血液中のアディポネクチン上昇システム。
【発明の効果】
【００１０】
詳細については実施例で後述するが、本発明の血液中のアディポネクチン上昇システムによれば、特定の構造からなる膜を備えた体外循環モジュールを用いて血液を処理（ろ過）することにより、従来よりも早期かつ大幅にアディポネクチン濃度を上昇させることが可能となる。また、本発明の血液中のアディポネクチン上昇システムによれば、糖尿病、高血圧、高脂血症等の疾患を抱えた患者の血液はもちろんのこと、例えば抗加齢を目的とする健常者の血液のアディポネクチン値も上昇させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実施形態に係る血液中のアディポネクチン上昇システムを説明するために示す図である。
【図２】体外循環モジュールを示す図であり、（ａ）は体外循環モジュールの側面図、（ｂ）は体外循環モジュールの内部構造を示す概念図である。
【図３】血液中のアディポネクチン濃度の測定結果を示す図であり、（ａ）は実施例群における施行前（Ｐｒｅ）と施行後（Ｐｏｓｔ）の平均値及び標準偏差（ｎ＝５２）を示し（ｐ＜０．０００１）、（ｂ）は比較例群における施行前（Ｐｒｅ）と施行後（Ｐｏｓｔ）の平均値及び標準偏差（ｎ＝１６）を示す（ｐ＜０．０５）。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の実施形態に係る血液中のアディポネクチン上昇システムについて説明する。なお、本発明において、「血液」には、血漿や血清も含まれる。
【００１３】
図１は、実施形態に係る血液中のアディポネクチン上昇システム１を説明するために示す図であり、図２（ａ）及び（ｂ）は、体外循環モジュールを示す図であり、図２（ａ）は体外循環モジュールの側面図、図２（ｂ）は体外循環モジュールの内部構造を示す概念図である。なお、図２（ｂ）においては、発明の理解を容易にするため、本来は体外循環モジュール１０内に複数配置されている選択性分離膜１２のうち、１つの選択性分離膜１２のみを模式的に図示している。図１に示す血液中のアディポネクチン上昇システム１は、例えば、Plasma dia-filtration（ＰＤＦ）法を実施するためのシステムである。
【００１４】
実施形態に係る血液中のアディポネクチン上昇システム１は、図１並びに図２（ａ）及び（ｂ）に示したように、体外循環モジュール１０と、体外循環モジュール１０の第１流入部１５に接続され、対象となる血液を体外循環モジュール１０に供給する血液供給手段２０と、体外循環モジュール１０によってろ過されてアディポネクチン値が上昇した血液を体外循環モジュール１０の第１流出部１６から体外循環モジュール１０外に送る送り手段３０と、体外循環モジュール１０の第２流入部１７に接続される透析液供給手段４０と、体外循環モジュール１０の第２流出部１８に接続され、体外循環モジュール１０によって除去された液体を体外循環モジュール１０外に排出する排出手段５０と、送り手段３０に接続され、補充液が通液する第１移送手段６０と、同じく送り手段３０に接続され、置換液が通液する第２移送手段７０とを備える。透析液供給手段４０、第１移送手段６０及び第２移送手段７０には、貯留容器４２，６２，７２がそれぞれ接続されている。
【００１５】
体外循環モジュール１０は、いわゆる膜型の体外循環モジュールであって、筒状のハウジング部１１の内部には、流入する血液を選択的に分離する選択性分離膜１２が配置されている。体外循環モジュール１０は、図２（ａ）及び（ｂ）に示したように、筒状のハウジング部１１と、ハウジング部１１の内部に配置された選択性分離膜１２と、ハウジング部１１の一方端部に設けられた第１流入部１５と、ハウジング部１１の他方端部に設けられた第１流出部１６と、ハウジング部１１の側面のうち第１流出部１６寄りの位置に設けられた第２流入部１７と、ハウジング部１１の側面のうち第１流入部１５寄りの位置に設けられた第２流出部１８とを有している。
【００１６】
選択性分離膜１２は、例えば複数の中空糸膜からなり、ハウジング部１１の長手方向に沿って束状になって延在配置されている。体外循環モジュール１０の内部は、図２（ｂ）に示すように、選択性分離膜１２によって血液流路１３と他の流路１４に区画されている。すなわち、選択性分離膜１２の内側が血液流路１３となり、選択性分離膜１２の外側が他の流路１４となる。第１流入部１５及び第１流出部１６は血液流路１３に通じており、第２流入部１７及び第２流出部１８は他の流路１４に通じている。体外循環モジュール１０は、体外循環時において血液流路１３の流れる向き（図２（ｂ）の黒矢印方向）と他の流路１４の流れる向き（図２（ｂ）の白抜き矢印方向）とが逆方向となるように（すなわち対向流となるように）構成されている。
【００１７】
選択性分離膜の材質としては、例えばエチレン−ビニルアルコール共重合体、セルローストリアセテート、ポリアクリロニトリル、ポリメチルメタクリレート、ポリスルフォンなどを好ましく用いることができる。中でも、線溶系各因子や血小板に対する影響が軽度であり、優れた血液抗凝固性を有するエチレン−ビニルアルコール共重合体を用いることが好ましい。
【００１８】
選択性分離膜１２は、アルブミン篩係数が０．１〜０．８であり、好ましくは０．１〜０．３であり、且つ、フィブリノーゲンの篩係数が０．１以下の性能を有する膜である。
【００１９】
このような選択性分離膜を有する体外循環モジュールとしては、例えば旭化成メディカル株式会社製の「エバキュアーＥＣ−１Ａ」、「エバキュアーＥＣ−２Ａ」、「エバキュアーＥＣ−３Ａ」、「エバキュアーＥＣ−４Ａ」（いずれも商品名、「エバキュアー」は川澄化学工業株式会社の登録商標）などを好適に用いることができる。中でも、アルブミン篩係数が０．１〜０．３の選択性分離膜を有する「エバキュアーＥＣ−１Ａ」及び「エバキュアーＥＣ−２Ａ」は、炎症性メディエーターの除去効率が高いため、血液中のアディポネクチン値を上昇させるうえで特に好適である。
【００２０】
なお、体外循環モジュールとしては、中空糸膜からなる選択性分離膜で構成された体外循環モジュールに限定されるものではなく、例えば、平膜（平板状膜を複数積層したもの）やチューブラー膜など、中空糸膜以外の選択性分離膜で構成された体外循環モジュールも用いることができる。また、選択性分離膜が内蔵された体外循環モジュールに限らず、吸着材が内蔵された体外循環モジュールも用いることができる。
【００２１】
血液供給手段２０は、動脈側回路中の血液を体外循環モジュール１０に向けて送るための血液ポンプ２４を有する。排出手段５０は、体外循環モジュール１０によって除去された液体を体外循環モジュール１０外に排出するための排出用ポンプ５４を有する。透析液供給手段４０は貯留容器４２の透析液を体外循環モジュール１０に向けて送るためのポンプ４４を有し、第１移送手段６０及び第２移送手段７０はそれぞれ、貯留容器６２，７２の補充液又は置換液を送り手段３０に向けて送るためのポンプ６４，７４を有する。貯留容器４２，６２，７２は、例えばプラスチック製の貯留バッグである。透析液及び補充液としては、例えばサブラッドＢＳＧ（「サブラッド」は扶桑薬品工業株式会社の登録商標）などを好適に用いることができる。置換液としては、例えば新鮮凍結血漿（fresh frozen plasma：ＦＦＰ）や５％、２０％、２５％のアルブミン溶液などを好適に用いることができる。なお、透析液、補充液及び置換液としては、ここで例示したもの以外を用いてもよいことは言うまでもない。
【００２２】
血液ポンプ２４、排出用ポンプ５４及び他のポンプ４４，６４，７４は、例えばローラポンプである。体外循環モジュール１０として、例えばエバキュアーＥＣ−２Ａを用いた場合において、血液ポンプ２４の流量を６０〜１００ｍＬ／分としたとき、排出用ポンプ５４の流量は血液ポンプ２４の流量の２０％以下に設定するのがよい。
なお、ローラポンプに限らず、例えばシリンジポンプなど、公知である他の送液手段を用いてもよい。
【００２３】
以上のように構成された実施形態に係る血液中のアディポネクチン上昇システム１によれば、上記性能を有する膜を備えた体外循環モジュール１０を用いて血液を処理することにより、詳細については実施例で後述するが、従来よりも早期かつ大幅にアディポネクチン濃度を上昇させることが可能となる。また、血液供給手段２０を介して体外循環モジュール１０に供給される血液として、糖尿病、高血圧、高脂血症等の疾患を抱えた患者のものであってもよいし、健常者のものであってもよいことから、実施形態に係る血液中のアディポネクチン上昇システム１によれば、糖尿病、高血圧、高脂血症等の疾患を抱えた患者の血液はもちろんのこと、例えば抗加齢を目的とする健常者の血液のアディポネクチン値も上昇させることができる。
【００２４】
上記性能を有する膜を備えた体外循環モジュール１０を用いて血液を処理することにより、血液中のアディポネクチン濃度を上昇させることができる機序として、推測ではあるが次の２点の仮説が考えられる。
【００２５】
１点目は、血液中のエンドトキシンとの関係によるものである。血液中のエンドトキシンとアディポネクチンとの濃度には逆相関関係があると考えられており、アディポネクチン値が減少するとエンドトキシン値が上昇すると考えられる。エンドトキシンが血液中でアディポネクチンと結合すると、血液中のアディポネクチン値が減少し、アディポネクチンの機能が阻害されるものと考えられる。上記性能を有する膜を備えた体外循環モジュール１０を用いて血液を処理すると、エンドトキシンを除去することができることから、血液中のエンドトキシン濃度が低下し、結果的に血液中のアディポネクチン値を上昇させることができるものと推測される。
【００２６】
２点目は、血液中のアディポネクチンのサイズによるものである。血液中のアディポネクチンは、２４７個のアミノ酸残基から構成されており、血中では３量体（分子量６７ｋＤａ以下）、６量体（１３６ｋＤａ）、１２−１８量体（３００ｋＤａ以上）などの多量体構造をとる。体外循環モジュール１０においては、上述したように、選択性分離膜１２のアルブミン篩係数が０．１〜０．８、且つフィブリノーゲンの篩係数が０．１以下の性能を有していることから、低分子量のアディポネクチン（３量体と同等）が血液中に保持され、結果として、血液中のアディポネクチン値を上昇させることができる（他のポアサイズからなる血液浄化器を用いた場合に比べてアディポネクチン濃度が低下しにくくなる）ものと推測される。
【００２７】
以上、本発明の血液中のアディポネクチン上昇システムを上記の実施形態に基づいて説明したが、本発明は上記の実施形態に限定されるものではなく、その要旨を逸脱しない範囲において種々の態様において実施することが可能であり、例えば次のような変形も可能である。
【００２８】
上記実施形態においては、ＰＤＦ法を実施して血液中のアディポネクチンを上昇させるシステムについて説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。例えば、単純血漿交換療法（ＰＥ）や、持続的血液濾過透析（ＣＨＤＦ）や持続的血液濾過（ＣＨＦ）、血液吸着療法（hemoadsorption：ＨＡ）などの他の血液浄化療法にも、本発明は適用可能である。
【実施例】
【００２９】
以下、実施例及び比較例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明は下記例に制限されない。
【００３０】
＜実施例１＞
急性肝不全、劇場肝炎又は敗血症性肝不全患者の血液を用い、ＰＤＦ法を１クール８時間実施した。このとき実施したＰＤＦ法においては、上述の実施形態に係る血液中のアディポネクチン上昇システム１と同様のシステムを用いた。体外循環モジュールとしては、「エバキュアーＥＣ−２Ａ」（旭化成メディカル社製）を用いた。各ポンプの設定流量としては、血液供給手段が備える血液ポンプの流量Ｑｂを８０−１００ｍＬ／分とし、排出手段が備える排出用ポンプの流量Ｑｆを６００ｍＬ／時間とし、透析液供給手段が備えるポンプの流量Ｑｄを６００ｍＬ／時間とし、第１移送手段が備えるポンプの流量Ｑｃを０−４５０ｍＬ／時間とし、第２移送手段が備えるポンプの流量Ｑｓを１５０ｍＬ／時間とした。透析液及び補充液としてサブラッドＢＳＧを用い、置換液として新鮮凍結血漿（ＦＦＰ）及びアルブミン製剤のうち少なくとも一方を用いた。
実施例１においては、ＰＤＦ法を５２回試行し、施行前（Ｐｒｅ）と施行後（Ｐｏｓｔ）の血液中のアディポネクチン濃度（μｇ／ｍＬ）を測定し、その平均値を求めた。結果を図３（ａ）に示す。
【００３１】
＜比較例１＞
急性肝不全、劇場肝炎又は敗血症性肝不全性患者の血液を用い、単純血漿交換療法（ＰＥ）を２−３時間実施した。体外循環モジュールとしては、旭化成メディカル社製の「プラズマキュアー」（商品名、「プラズマキュアー」は川澄化学工業株式会社の登録商標）を用いた。プラズマキュアーが備える選択性分離膜の材質はポリエチレンであり、膜性能は、アルブミン篩係数が１、フィブリノーゲンの篩係数が１である。各ポンプの設定流量としては、血液供給手段が備える血液ポンプの流量Ｑｂを６０−８０ｍＬ／分とし、排出手段が備える排出用ポンプの流量Ｑｆを８００−１６００ｍＬ／時間とし、置換液を送るための手段（置換液移送手段）が備えるポンプの流量Ｑｓを８００−１６００ｍＬ／時間とした。置換液としては新鮮凍結血漿（ＦＦＰ）を用いた。
比較例１においては、ＰＥ法を１６回試行し、施行前（Ｐｒｅ）と施行後（Ｐｏｓｔ）の血液中のアディポネクチン濃度（μｇ／ｍＬ）を測定し、その平均値を求めた。結果を図３（ｂ）に示す。
【００３２】
実施例１では、図３（ａ）から分かるように、施行前（Ｐｒｅ）に比べて施行後（Ｐｏｓｔ）の血液中のアディポネクチン濃度が上昇したのに対し、比較例１では、図３（ｂ）から分かるように、施行前（Ｐｒｅ）に比べて施行後（Ｐｏｓｔ）の血液中のアディポネクチン濃度が減少した。このことから、本発明の血液中のアディポネクチンの上昇システムを実施することにより、１クール８時間という非常に短時間で血液中のアディポネクチン濃度を上昇させられることが確認できた。
【００３３】
また、実施例１においては、施行前における血液中のアディポネクチン濃度が平均１８．６μｇ／ｍＬであったのに対し、施行後における血液中のアディポネクチン濃度が平均２２．３μｇ／ｍＬであり、実施例１に示す体外循環モジュールを用いてＰＤＦ法を実施することにより、血液中のアディポネクチン濃度が約２４％上昇した。一方、比較例１においては、施行前における血液中のアディポネクチン濃度が平均２０．２μｇ／ｍＬであったのに対し、施行後における血液中のアディポネクチン濃度が平均１４．２μｇ／ｍＬであり、比較例１に示す体外循環モジュールを用いてＰＥ法を実施すると、血液中のアディポネクチン濃度が約３０％低下した。このことから、本発明の血液中のアディポネクチンの上昇システムを実施することにより、従来よりも大幅にアディポネクチン濃度を上昇させられることが確認できた。
【００３４】
なお、実施例１で用いた血液には、必ずしもアディポネクチン値が低いものばかりではなく、アディポネクチン値が低くはない患者の血液も含まれていた。このことから言えば、本発明の血液中のアディポネクチンの上昇システムを実施することにより、糖尿病、高血圧、高脂血症等の疾患を抱えた患者の血液だけでなく、健常者における血液中のアディポネクチン値をも上昇させることができると考えられる。
【符号の説明】
【００３５】
１  血液浄化システム
１０  体外循環モジュール
１１  ハウジング部
１２  選択性分離膜
１３  血液流路
１４  他の流路
１５  第１流入部
１６  第１流出部
１７  第２流入部
１８  第２流出部
２０  血液供給手段
２４  血液ポンプ
３０  送り手段
４０  透析液供給手段
４２  貯留容器
４４  ポンプ
５０  排出手段
５４  排出用ポンプ
６０  第１移送手段
６２  貯留容器
６４  ポンプ
７０  第２移送手段
７２  貯留容器
７４  ポンプ
【図１】
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【図２】
2014161629.tif 000004
【図３】
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