(57)【要約】【課題】患者の25-ヒドロキシビタミンＤ不足及び欠乏を治療するための方法及び組成物を提供する。【解決手段】本発明の方法は、患者に対して、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせからなる群より選ばれる第一成分を含む遅延持続放出製剤を経口投与することを含み、又はその方法は、患者に対して、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせからなる群より選ばれる第一成分を含む無菌静脈内製剤を漸進的に投与することを含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者の25-ヒドロキシビタミンＤ不足及び欠乏を治療する方法であって、患者に対して、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせからなる群より選ばれる第一成分を含む遅延持続放出製剤を経口投与することを含む、又は患者に対して、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせからなる群より選ばれる第一成分を含む無菌静脈内製剤を漸進的に投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍の治療薬の製造のための免疫サイトカインの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3（“25-ヒドロキシビタミンＤ”と総称される）として知られるビタミンＤ代謝産物は、脂溶性ステロイドプロホルモンからビタミンＤホルモンまであり、それらは、血流におけるカルシウム及びリンの正常値の維持に貢献する。プロホルモン25-ヒドロキシビタミンＤ2は、ビタミンＤ2（エルゴカルシフェロール）から産生され及び25-ヒドロキシビタミンＤ3は、主に、肝臓に存在する１以上の酵素により、ビタミンＤ3（コレカルシフェロール）から産生される。２つのプロホルモンは、また、肝臓においてみられる酵素と同一又は類似する酵素を含む、ある種の細胞、例えば、腸細胞におけるビタミンＤ2及びビタミンＤ3（“ビタミンＤ”と称される）から肝臓の外部に産生され得る。
プロホルモンは、更に、腎臓において代謝されて、効力のある(potent)ホルモンとなる。プロホルモン25-ヒドロキシビタミンＤ2は、代謝されて、1α, 25-ジヒドロキシビタミンＤ3として知られるホルモンとなり；同様に、25-ヒドロキシビタミンＤ3は、代謝されて、1α, 25-ジヒドロキシビタミンＤ3（カルシトリオール）となる。これらのホルモンのプロホルモンからの産生は、また、必要な酵素を含む細胞において、腎臓の外部で生じ得る。
【０００３】
ビタミンＤホルモンには、細胞内ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）により介在される、ヒトの健康における重要な役割がある。具体的には、ビタミンＤホルモンは、小腸による食事性カルシウムの吸収及び腎臓によるカルシウムの再吸収を制御することにより、血中カルシウム濃度を調節する。過度なホルモン濃度は、一時的なものであろうと又は長期的なものであろうと、異常に高い尿中カルシウム（高カルシウム尿症）、血中カルシウム（高カルシウム血症）及び血中リン（高リン血症）を生じ得る。ビタミンＤホルモンは、また、細胞分化及び増殖、副甲状腺によるＰＴＨ分泌、及び正常な骨形成及び代謝の調節に関与する。更に、ビタミンＤホルモンは、筋骨格系、免疫系及びレニン・アンギオテンシン系の正常機能に必要とされる。ビタミンＤホルモンの多くの他の役割が、ほとんど全てのヒト組織における細胞内ＶＤＲの実証された(documented)存在をベースとして、主張及び解明されている。
特定の組織におけるビタミンＤホルモンの作用は、それらが、その組織における細胞内ＶＤＲに結合する（又はそれらを占有する）程度に依存する。プロホルモン25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3は、ＶＤＲに対する親和性が本質的に同一であり、それらは、ビタミンＤホルモンのものより少なくとも１００倍低いと見積もられている。結果として、生理学的濃度の25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3は、ビタミンＤホルモンへの前代謝なしでの生物学的作用が、たとえあったとしても、ほんの少しである。しかしながら、通常より１０〜１０００倍高い超生理学的濃度の25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3は、十分に、ＶＤＲを占有して、ビタミンＤホルモンと同様の作用を発揮し得る。
【０００４】
血中又は細胞内プロホルモン濃度の急増は、カルシウム及びリン代謝において局所的悪影響をもたらす、過度な腎外ホルモン産生を促進し得る。それらは、また、ビタミンＤからの、肝臓でのプロホルモン産生を抑制し、及び腎臓及び／他の組織におけるビタミンＤ及び25-ヒドロキシビタミンＤの双方の異化を促進し得る。プロホルモン及びビタミンＤホルモンの双方の血中濃度は、日光への暴露又は非補足的な食事(unsupplemented diet)による持続された適切なビタミンＤ供給を考慮すると、通常、一日を通して一定である。しかしながら、25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度は、特に、ビタミンＤ不足によるくる病又は骨軟化症を防止するのに必要とされる最低量を大きく超える量で、現在入手可能なビタミンＤのサプリメントを投与した後、顕著に上昇し得る。プロホルモンの血中濃度は、また、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3の急速静注後、顕著に上昇し得る。
25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の産生は、ビタミンＤが不足している場合、例えば、ビタミンＤ不足又はビタミンＤ欠乏（あるいはまた、ビタミンＤ欠乏症）などの状態におけるように、低下する。25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の産生が低いと、25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度が低くなる。不適切なビタミンＤ供給は、保護的日焼け止め剤なしに日光へ稀に暴露され、ビタミンＤの摂取が慢性的で不適切であり、又は脂溶性ビタミン（例えば、ビタミンＤ）の腸内吸収を低減する状態を患う人において発現することが多い。最近、北半球地方に住む人のほとんどは、ビタミンＤの供給が不適切であることが報告された。治療しないまま放置された、不適切なビタミンＤの供給は、くる病及び骨軟化症を含む深刻な骨疾患を生じるかもしれず、及び骨粗しょう症、脊椎及び臀部の非外傷性骨折(fracture)、肥満、糖尿病、筋衰弱、免疫不全症、高血圧症、乾癬及び種々の癌を含む多くの他の疾患の発現の一因となり得る。
【０００５】
全米科学アカデミーの医学研究所（ＩＯＭ）は、健常人についてのビタミンＤの適量摂取（ＡＩ）は、その人の年齢及び性別に依存して、一日当たり、２００〜６００ＩＵの範囲にあると結論付けた（Standing Committee on the Scientific Evaluation of Dietary Reference Intakes, Dietary reference intakes: calcium, phosphorus, magnesium, vitamin D, and fluoride. Washington, DC: National Academy Press (1997)）(参考文献として本件明細書に組み込まれるものとする)。ビタミンＤのＡＩは、主に、ビタミンＤ不足によるくる病又は骨軟化症を防止するのに十分な血清25-ヒドロキシビタミンＤ濃度（即ち、≧１１ｎｇ／ｍＬ）をベースとして定義された。ＩＯＭは、また、一日あたりの、ビタミンＤについての許容上限摂取量（ＵＬ）を２０００ＩＵと決定したが、これは、より多くの量は、高カルシウム尿症、高カルシウム血症並びに不整脈、発作、及び全身性血管及び他の軟組織石灰化を含む関連続発症の上昇されたリスクと関連するとの証拠をベースとする。
現在入手可能な経口ビタミンＤサプリメントは、最適な血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を達成及び維持するための理想からはかけ離れている。これらの製剤は、典型的には、４００〜５０００ＩＵのビタミンＤ3又は５００００ＩＵのビタミンＤ2を含み及び消化管における迅速又は即時放出用に配合される。ビタミンＤの充実のために必要とされることが多いように、慢性的高用量で投与される場合、これらの生成物には、有意であり及び深刻なものであることが多い制限があり、これらは以下に概要する。
【０００６】
高用量の即時放出ビタミンＤサプリメントは、血中ビタミンＤ濃度の顕著な急増をもたらし、それにより、以下のものが促進される：（ａ）貯蔵ビタミンＤは25-ヒドロキシビタミンＤへの後の転化のための利用性が低いので望ましくない、脂肪組織におけるビタミンＤの貯蔵；（ｂ）24-及び／又は26-ヒドロキシル化を介して、血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を高めるための有用性が少ないか又はもはや全くない代謝産物へのビタミンＤの異化；高カルシウム尿症、高カルシウム血症及び高リン血症（ＶＤＲへ結合する質量-作用(mass-action)を介する）の上昇されたリスクをもたらす、ビタミンＤの過剰な細胞内24-又は25-ヒドロキシル化。
高用量の即時放出ビタミンＤサプリメントは、また、血中及び細胞内25-ヒドロキシビタミンＤ濃度の急増及び急上昇をもたらし、それにより、以下のものが促進される：（ａ）カルシウム及びリンの恒常性の局所的異常並びに高カルシウム尿症、高カルシウム血症及び高リン血症の上昇したリスクをもたらす、一時的に過剰な腎臓での及び腎臓外でのビタミンＤホルモンの産生；（ｂ）腎臓及び他の組織における24-及び／又は26-ヒドロキシル化によるビタミンＤ及び25-ヒドロキシビタミンＤの双方の異化；（ｃ）ビタミンＤ不足又は欠乏の効果的充実を不必要に妨げる、ビタミンＤプロホルモンの肝臓での産生のダウンレギュレーション；及び（ｄ）ＶＤＲへ直接結合することにより介在するカルシウム及びリンの恒常性の局所的異常。
【０００７】
更に、高用量の即時放出ビタミンＤサプリメントは、例えば、十二指腸の内腔において、超生理学的で、薬理学的でさえあるビタミンＤ濃度をもたらし、それにより、以下のものが促進される：（ａ）高カルシウム尿症、高カルシウム血症及び高リン血症の危険を上昇させる、カルシウム及びリンの腸内吸収の局所的刺激並びに腸細胞における25-ヒドロキシル化；及び（ｂ）全身バイオアベイラビリティを低減する、局所的腸細胞における24-及び26-ヒドロキシル化によるビタミンＤの異化。
ＵＬより高いビタミンＤ補給が幾人かにおいて必要とされることが多く；しかしながら、現在入手可能な経口ビタミンＤサプリメントは、高用量の即時放出ビタミンＤ組成物を投与する際の問題を考慮すると、最適な濃度で血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を維持するのに適していない。
即時放出経口製剤における25-ヒドロキシビタミンＤ3の投与は、ビタミンＤ補給の代替法として試みられた。その後中止された、このアプローチでは、現在使用されるビタミンＤサプリメントのように問題が生じた。具体的には、それは、血中及び細胞内25-ヒドロキシビタミンＤ濃度の急増又は急上昇をもたらし、それにより、以下のものが促進された：（ａ）血清ビタミンＤ結合タンパク（ＤＢＰ）からのビタミンＤホルモンの競争的置換及びＶＤＲを含む組織への、置換されたホルモンの過剰な運搬；及び（ｂ）カルシウム及びリンの代謝における局所的異常を一緒にもたらした、一時的に過剰な腎臓での及び腎臓外でのビタミンＤホルモンの産生。また、血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度におけるこれらの急増は、腎臓及び他の組織における24-及び／又は26-ヒドロキシル化によるビタミンＤ及び25-ヒドロキシビタミンＤの双方の異化、ビタミンＤ不足又は欠乏の効果的充実を不必要に妨げる、ビタミンＤプロホルモンの肝臓での産生のダウンレギュレーション、及び、ＶＤＲへ直接結合することにより介在するカルシウム及びリンの恒常性の局所的異常を促進した。重要なことには、25-ヒドロキシビタミンＤ3の即時放出は、血清ＤＢＰへ結合するよりむしろ、カイロミクロンにおける肝臓への移送を実質的に含むメカニズムを介して、その腸内吸収を促進した。カイロミクロンを介する肝臓への25-ヒドロキシビタミンＤの運搬は、有意に、その異化の可能性を上昇させた。
現在入手可能な経口ビタミンＤサプリメント及び先に使用されていた経口25-ヒドロキシビタミンＤ3の双方で生じた問題を考慮すると、明らかに、ビタミンＤ補給の代替的アプローチが必要とされる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明の概要
本発明は、効果的及び安全に、血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度（患者について＞３０ｎｇ／ｍＬの25-ヒドロキシビタミンＤとして定義される）に回復させ及び血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度をそのような最適濃度で維持する方法を提供する。その方法は、現在入手可能なビタミンＤサプリメントでは今まで想像もつかなかった利益を受容者に提供する製剤中の十分な25-ヒドロキシビタミンＤ2又は25-ヒドロキシビタミンＤ3又はこれらの２つのプロホルモンの組み合わせを用いて、被検体、動物又はヒト患者に対して、経口的又は静脈内投与を行うことを含む。即ち、本発明は、血中25-ヒドロキシビタミンＤの一時的急増（即ち、超生理学的濃度）の危険及び関連副作用を低減する、効果的ビタミンＤ補給を提供する。
本発明の実施態様においては、所定量の(an amount of)25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3が、制御放出製剤に含まれ及び治療を必要とするヒト又は動物に対して経口的に連日投与される。他の実施態様においては、所定量の25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3が、静脈内投与に適する等張無菌製剤に含まれ及び治療を必要とするヒト又は動物に対して、週に３回、漸進的に注入される。25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3のこの投与により、有意に：含まれる25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3のバイオアベイラビリティが高められ；含まれる25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の、十二指腸における望ましくない初回通過効果が低減され；25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3の血中濃度における超生理学的急増の発生が避けられ；25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度を最適濃度（患者について＞３０ｎｇ／ｍＬの25-ヒドロキシビタミンＤとして定義される）に回復する際の、経口投与された25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の効果が高められ；そのような最適濃度で25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度を維持する際の、経口投与された25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の効果が高められ；ビタミンＤ代謝における混乱(disruption)並びにＰＴＨ、カルシウム及びリンの恒常性における関連異常が低減され；及びビタミンＤ補給に関連する深刻な副作用、即ち、ビタミンＤ毒性の危険が低減される。
【０００９】
ある態様においては、本発明は、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を含む安定性制御放出組成物を提供し、それが配合されると、25-ヒドロキシビタミンが、胃並びに小腸の十二指腸及び空腸を通過して、回腸に至ることが可能になる。その組成物は、効果的に、胃液における崩壊に抵抗し、及びそれが小腸の回腸に至るまで、含まれる25-ヒドロキシビタミンＤの実質的放出を避け、それにより、カイロミクロンにおける肝臓への移送により実質的に介在される吸収が最小化される。開示する組成物は、回腸の管腔内及び細胞内面(aspect)に漸進的に現れ、CYP24-介在性異化を低減し及び25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度の、維持され得る最適濃度への持続的上昇を誘発する。
他の態様においては、本発明は、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を含む、漸進的静脈内投与に適する等張無菌製剤を提供し、それは、25-ヒドロキシビタミンＤが胃腸管を完全にバイパス(bypass)することを可能にし、それにより、カイロミクロンにおける肝臓への移送により介在される吸収と同様に、十二指腸及び空腸における初回通過効果が排除される。
前述の簡単な説明は、一般に、本発明の主な態様を概要し及び以下に続く、より十分な詳細な説明をより一層理解する助けとしての役割を果たす。それらに関連して、本発明は、本件明細書に記載された製造方法又は詳細、化学組成又は用途には制限されないことが明確に理解されるべきである。他の製造、化学組成、使用又は適用の変化が、本発明の代替的実施態様として考慮されるべきことが明らかである。本発明の具体的適合、組成の変化及び化学的及び物理的特性の他の利点及び十分な認識が、詳細な説明の考察により得られるであろう。
また、本件明細書において使用する表現及び専門用語は、説明を目的とするものであり及び制限するものとしてみなされるべきではないことが理解される。本件明細書における“含む(including)”、“有する”及び“含む(comprising)”及びそれらの変形体を使用することにより、これ以降に挙げられる事項(item)及びそれらの同等物並びに追加事項及びそれらの同等物を包含することが意図される。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
発明の詳細な説明
本発明は、ビタミンＤ補給を必要とする被検体、動物又はヒト患者に対して、十分な25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3又はこれらの２つのプロホルモンの組み合わせを投与して、効果的及び安全に、血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度（ヒト被検体及び患者について＞３０ｎｇ／ｍＬの25-ヒドロキシビタミンＤとして定義される）に回復させ及びそのような最適濃度で血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を維持する方法に関する。
本件明細書において使用する以下の定義は、当業者による本発明の理解の助けに有用であり得る。
本件明細書において使用する、25-ヒドロキシビタミンＤの血清又は血中濃度に関連する用語“実質的に一定”は、以下に詳細に説明されるように投与された製剤の放出特性が、単位用量での投与後の約３ｎｇ／ｍＬより高い、25-ヒドロキシビタミンＤ3又は25-ヒドロキシビタミンＤ2の全血清又は血中濃度において一時的上昇を含まないべきであることを意味する。
本件明細書において使用する用語“制御放出”及び“持続放出”は、交換して使用するのが可能であり、及び25-ヒドロキシビタミンＤの全血清又は血中濃度が、延長時間、例えば、４〜２４時間又は更に長い時間、前投与濃度(predosing level)を越えて上昇され又は維持される速度での、投与された25-ヒドロキシビタミンＤの放出を意味する。
【００１１】
本件明細書において使用する用語“ビタミンＤ毒性”は、25-ヒドロキシビタミンＤの過剰投与及び過剰に上昇した25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度で受ける副作用を意味し、吐き気、嘔吐、多尿症、高カルシウム尿症、高カルシウム血症及び高リン血症を含む。
25-ヒドロキシビタミンＤの管腔内、細胞内及び血中濃度に関連する“超生理学的”は、２４時間後-投与期間(a 24-hour post-dose period)での、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせ濃度を意味し、それは、５ｎｇ／ｍＬを越え、検査室測定により先の２４時間にわたって観察された、一般に安定性の濃度より高い。
“ビタミンＤ不足及び欠乏”は、一般には、３０ｎｇ／ｍＬより低い血清25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を有するとして定義される（National Kidney Foundation guidelines, NKF, Am. J. Kidney Dis. 42:S1-S202 (2003)(参考文献として本件明細書に組み込まれるものとする)）。
他に記載のない限り、本件明細書において使用する“25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3”は、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又はそれらの組み合わせを包含することを意図する。
他に記載のない限り、“25-ヒドロキシビタミンＤ”は、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3をまとめて意味することを意図する。例えば、アッセイされた血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度は、存在するなら、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の双方を含むであろう。
【００１２】
また、本件明細書に記載される数値は、下位の値から上位の値までの全ての値を含み、即ち、列挙された最低値から最高値の間の数値の起こり得る全ての組み合わせが、本件明細書において明示的に定められると考慮すべきであることが明確に理解される。例えば、濃度範囲又は有益な効果範囲が、１〜５０％として記載される場合、値、例えば、２〜４０％、１０〜３０％又は１〜３％などが、本件明細書において明示的に列挙されていることが意図される。これらは、具体的に意図されるものの単なる例である。
本発明としては、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3の経口及び静脈内投与製剤を含む組成物、並びにそのような製剤を投与して、25-ヒドロキシビタミンＤ不足及び欠乏を治療することを、十二指腸及び空腸におけるこれらのプロホルモンの潜在的初回通過効果なしに；25-ヒドロキシビタミンＤ及びそれらの結果物(consequence)の管腔内、細胞内及び血中濃度における超生理学的急増なしに；投与された25-ヒドロキシビタミンＤの実質的に上昇された異化を引き起こすことなしに；及びビタミンＤ補給に関連する深刻な副作用、即ち、ビタミンＤ毒性をもたらすことなしに行う方法が挙げられる。
本発明に従った経口投与が意図される制御放出組成物は、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の濃度が単位用量あたりで１〜５０ｍｃｇとなるように設計され、及び延長時間にわたるヒト又は動物の消化管の回腸への25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の制御された又は実質的に一定の放出に影響を与えるような方法で製造される。その組成物により、（ａ）ＤＢＰにおける移送を介する25-ヒドロキシビタミンＤの実質的に上昇された吸収及びカイロミクロンにおける移送を介する低減された吸収、並びに（ｂ）２４時間後-投与期間での実質的に一定の血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度の維持が確実なものとなる。カイロミクロンに対するよりむしろ循環ＤＢＰに対して優先する25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の漸進的、持続性及び直接放出を提供することにより、血中、管腔内及び細胞内25-ヒドロキシビタミンＤ濃度が急上昇し、即ち、超生理学的濃度及び関連する不要な異化が軽減され又は削除される。
【００１３】
本発明に従った静脈内投与が意図される組成物は、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の濃度が単位用量あたりで１〜２５ｍｃｇとなるように設計され、及び１〜５分間にわたる漸進的注入を可能にして、血中のＤＢＰに直接的な、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の制御された又は実質的に一定の放出に影響を与えるような方法で製造される。その組成物により、投与された25-ヒドロキシビタミンＤの完全なバイオアベイラビリティ、十二指腸及び空腸における初回通過効果の完全な排除、25-ヒドロキシビタミンＤの低減された異化、並びに２４時間後-投与期間での実質的に一定の血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度の維持が確実なものとなる。循環ＤＢＰに対する長期にわたる25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の漸進的、持続性及び直接放出を提供することにより、管腔内、細胞内及び更には血中の25-ヒドロキシビタミンＤ濃度が急上昇し、即ち、超生理学的濃度が軽減され又は削除される。
本発明の組成物は、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3が、都合の良い連日の経口投与のために導入された、高度に安定性の医薬製剤を含む。開示される組成物は、ビタミンＤ又は25-ヒドロキシビタミンＤの従来から知られた製剤と比較して、長期にわたる連続した規則正しい投与での２つの予期せぬ利益である、血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度に回復させる際の卓越した効果及び卓越した安全性を伴って、血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度における漸進的上昇及びその後の持続をもたらす。
【００１４】
経口投与に適する25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の制御された、実質的に一定放出の製剤の製造は、多くの異なる技術に従って行うことができる。例えば、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3は、マトリックス内に、即ち、マトリックス内に慎重に選んだ比において律速成分及び賦形剤を含む独特な混合物内に分散させることができ、及びコーティング材料で包むことができる。種々のコーティング技術を利用して、医薬製剤からの25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の放出速度及び／又は部位を制御することができる。例えば、コーティングの溶解は、周囲媒体のｐＨにより誘発され得、及び経時的に生じるコーティングの漸進的溶解により、マトリックスが腸内環境の流体に付される。コーティングが透過性になった後、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3がマトリックスの外面から拡散する。この表面により、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3が使い果たされ、即ち、枯渇すると、基礎的貯蔵物(underlying store)が、崩壊マトリックスを通して外液へ拡散することにより枯渇され始める。
ある態様においては、本発明による製剤は、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を、回腸の内容物に付されたときに、制御された実質的に一定の放出において放出可能なように成分を留めるマトリックス内に提供する。
【００１５】
25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を含有するマトリックスは、胃液における崩壊に抵抗性のコーティングで適切に被覆される。25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の、被覆された制御放出製剤は、次いで、被検体、例えば、動物又はヒト被験者及び患者に対して経口投与される。製剤は、小腸の近位部中を移動するので、腸溶性コーティングは、次第により透過性のものとなるが、適切な実施態様においては、それにより、持続性構造骨組みが、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を含有するマトリックス周辺に提供される。25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を含有するマトリックスは、有意に、透過性保護膜を通して回腸における腸液に付されるようになり、及び25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3は、次いで、マトリックスの単純拡散及び／又は遅延崩壊により漸進的に放出される。
一旦、回腸の内腔に放出されると、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3が、リンパ系に又は門脈血流に吸収され、そこで、ＤＢＰに結合し及びＤＢＰにより運搬される。25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の大部分は、十二指腸及び空腸を越えるポイントで吸収される。小腸のこれらの近位部は、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の高い管腔内濃度に応答し得、及び、その過程において、有意量の25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3を異化し得る。実質的に、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の放出を回腸まで遅延させることにより、本件明細書に記載の医薬組成物は、実質的に、近位腸におけるこれらの潜在的初回通過効果を排除し、及び望まれていない異化作用を低減する。血流に吸収される前における投与されたビタミンＤの有意な異化により、有意に、そのバイオアベイラビリティが低減される。初回通過効果の排除により、ビタミンＤ毒性の危険が低減される。25-ヒドロキシビタミンＤの実質的に遅延された（即ち、十二指腸及び空腸を越えた）放出により、導入され及びカイロミクロンを介して小腸から吸収される25-ヒドロキシビタミンＤの量が（カイロミクロン形成及び吸収が空腸において最初に生じるため）顕著に低減され及び対応して、腸壁を通して及びリンパ液又は門脈血中を循環するＤＢＰ上に直接吸収される25-ヒドロキシビタミンＤの量が上昇される。
【００１６】
本発明のある実施態様においては、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3の制御放出経口製剤を、一般には、以下の手順に従って製造する。十分な量の25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を、ＵＳＰ等級の無水エタノール（又は他の適切な溶剤）に完全に溶解し並びに適切な量及びタイプの医薬品等級の賦形剤と混合して、室温及びヒトの正常体温の双方において固体又は半固体であるマトリックスを形成する。マトリックスは、完全に又はほぼ完全に、胃での消化及び上部小腸に対して抵抗性であり、及び下部小腸において漸進的に崩壊する。
適切な製剤においては、マトリックスは、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を留め及び25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の放出を、遅延し比較的一定して、即ち、実質的に一定して、４〜８時間又はそれ以上の時間をかけて、単純拡散及び／又は漸進的崩壊により、下部小腸の管腔の内容物に対して行うことを可能にする。製剤は、更に、腸溶性コーティングを有し、該コーティングは、ｐＨが約７．０〜８．０である水溶液において部分的に溶解し又は単純に溶解するが、それがあまりにも遅いので、25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の有意な放出が、製剤が十二指腸及び空腸を通過する後まで遅延する。
上で説明したように、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3の制御放出を提供する手段は、ワックスマトリックスシステム及びオイドラギトRS/RLシステム（独国ワイターシュタットのロームファーマ社製）を含む、約４時間以上かかる、活性成分の、知られた制御放出デリバリーシステムのいずれかより選ぶことができる。
【００１７】
ワックスマトリックスシステムは、脂溶性マトリックスを提供する。ワックスマトリックスシステムでは、蜜ろう、白ろう、カチャロットワックス又は類似の組成物を利用し得る。活性成分は、腸液においてゆっくりと崩壊して、漸進的に、活性物質を放出するワックスバインダー中に分散させる。25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を含浸したワックスバインダーを、部分的に架橋したソフトゼラチンカプセル中に充填する。ワックスマトリックスシステムにより、体温で軟化し及び腸液においてゆっくりと崩壊して、活性成分を漸進的に放出するワックスバインダー中に活性成分が分散される。そのシステムは、適切には、場合によりオイルを添加してもよい、ワックスの混合物を含み、達成される融点は、体温より高いが、典型的には、ソフト及びハードゼラチンカプセルのいずれかのシェルを形成するために使用するゼラチン製剤又は腸溶性コーティングを形成するために使用する他の製剤の融点より低い。
具体的には、ある適切な実施態様において、マトリックスのために選んだワックスを溶融し及び完全に混合する。望ましい量のオイルをこの段階で添加し、次いで、十分に混合する。ろう様混合物を、次いで、その融点よりほんの少しだけ高い温度まで漸進的に冷却する。エタノール中に溶解した、望ましい量の25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を、溶融マトリックス中に均一に分配し、及びマトリックスをソフトゼラチンカプセルに充填する。充填カプセルは、アルデヒド、例えば、アセトアルデヒドを含有する溶液で、適切な時間処理して、カプセルシェル中のゼラチンを部分的に架橋させる。ゼラチンシェルは、数週間にわたり次第に架橋され及びそれにより、胃及び腸上部の内容物における溶解に対する抵抗性が高まる。正確に構成した場合、このゼラチンシェルは、経口投与後、漸進的に溶解し及び回腸に到達する時までに（十分な崩壊なしに）十分多孔性のものとなって、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3が、ワックスマトリックスから下部小腸の内容物中にゆっくりと拡散することが可能となる。
【００１８】
有用な他の脂質マトリックスの例は、グリセリド、脂肪酸及びアルコール、及び脂肪酸エステルである。
他の適切な制御放出経口ドラッグデリバリーシステムは、オイドラギトRL/RSシステムであり、その中においては、活性成分、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を、寸法が２５／３０メッシュである顆粒に形成する。顆粒は、その後、水不溶性であるが、ゆっくりと水を透過し得る薄高分子ラッカー(thin polymeric lacquer)で均一に被覆する。被覆した顆粒は、場合により、添加剤、例えば、酸化防止剤、安定化剤、バインダー、潤滑剤及び加工助剤などと混合してもよい。混合物は、圧縮して、使用前には硬くて乾燥したタブレットにしてもよく及び更に被覆することが可能であり、又はそれは、カプセル中に注入してもよい。タブレット又はカプセルを飲み込み及びそれが水性腸液と接触した後、薄ラッカーが膨張し始め及び次第に腸液による透過が可能になる。腸液は、ラッカーコーティングをゆっくりと通過するので、及び含まれる25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3がゆっくりと放出される。タブレット又はカプセルが小腸を通過する時までに、約４〜８時間後又はそれより後に、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3が、ゆっくりとではあるが完全に放出されているであろう。従って、摂取したタブレットは、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3並びに任意の他の活性成分のストリーム(stream)を放出するであろう。
【００１９】
オイドラギトシステムは、高透過性ラッカー（ＲＬ）及び低透過性ラッカー（ＲＳ）からなる。ＲＳは、小割合の塩化メタクリル酸トリメチルアンモニオエチルを有する中性膨潤性メタクリル酸エステルをベースとする水不溶性塗膜形成剤であり、第４級アンモニウム基の中性エステル基に対するモル比は約１：４０である。また、ＲＬは、小割合の塩化メタクリル酸トリメチルアンモニオエチルを有する中性メタクリル酸エステルをベースとする水不溶性膨潤性塗膜形成剤であり、第４級アンモニウム基の中性エステル基に対するモル比は約１：２０である。コーティングの透過性及び薬剤放出の時間的経過は、コーティング材料ＲＳのＲＬに対する割合を変動させることにより滴定することができる。オイドラギトRL/RSシステムの更なる詳細については、Rohm Tech, Inc. 195 Canal Street, Maiden, Mass., 02146から入手可能な技術刊行物を参照されたい。また、参考文献として本件明細書に組み込まれるK. Lehmann, D. Dreher “Coating of tablets and small particles with acrylic resins by fluid bed technology”, Int. J. Pharm. Tech. & Prod. Mfr. 2(r), 31-43 (1981)を参照されたい。
不溶性ポリマーの他の例としては、ポリビニルエステル、ポリビニルアセタール、ポリアクリル酸エステル及びブタジエンスチレンコポリマーなどが挙げられる。
【００２０】
一旦、被覆顆粒について、タブレットへの形成又はカプセル内への注入のいずれかを行ったなら、そのタブレット又はカプセルは、ｐＨ７．０〜８．０で溶解する腸溶性コーティング材料で被覆する。そのようなｐＨ依存性腸溶性コーティング材料の１つは、腸液においては溶解するが、胃液においては溶解しないオイドラギトＬ／Ｓである。他の腸溶性コーティング材料、例えば、胃液による溶解には抵抗性であるが、腸内エステラーゼの加水分解作用により容易に崩壊する酢酸フタル酸セルロース（ＣＡＰ）を使用してもよい。
腸溶性コーティング材料及び制御放出コーティング材料の特定の選択は、４〜８時間又はそれ以上の時間にわたり制御された及び実質的に一定の放出を、その放出が製剤が回腸に到達するまで遅延されるように提供しなければならない。更に、本発明による制御放出組成物は、１日に１回投与した場合、適切には、１日に１回投与した、等しい投与量の25-ヒドロキシビタミンＤ2／25-ヒドロキシビタミンＤ3の即時放出組成物と比較して、実質的に一定の管腔内、細胞内及び血中25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を提供する。
本発明の他の実施態様においては、漸進的静脈内投与に適する、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3又はそれらの組み合わせの、無菌等張製剤を製造してもよい。そのような製剤は、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3を、無水エタノール、プロピレングリコール又は他の適切な溶剤中に溶解し、及び得られた溶液を、適切な容量の注射用水中において界面活性剤、塩及び防腐剤と組み合せることにより製造する。そのような製剤は、ヘパリンロックを介して注射器からゆっくりと又は長い時間をかけて徐々に注入される多量の無菌溶液（例えば、塩水）への添加により投与することができる。
【００２１】
投与形態物は、また、アジュバント、例えば、保存又は安定化アジュバントを含んでいてもよい。それらは、また、他の治療的に有益な物質を含んでいてもよく又は本件明細書及び請求の範囲において特定した２つ以上の化合物を混合物中に含んでいてもよい。
有利には、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3又はそれらの組み合わせは、他の治療剤と一緒に、上記実施態様に従って、１日あたり１〜１００ｍｃｇの投与量で、好ましくは、１日あたり５〜５０ｍｃｇの投与量で経口又は静脈内投与することができる。本発明の化合物を他の治療剤と組み合せて投与する場合、投与する組み合わせにおける各化合物の割合は、取り組まれている具体的病状に依存するであろう。例えば、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3の経口投与を、１以上のカルシウム塩（カルシウムサプリメント又は食事に関するホスフェートバインダーとして表される）、ビスホスホネート、カルシウム擬態薬、ニコチン酸、鉄、ホスフェートバインダー、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロール、活性ビタミンＤステロール、血糖及び高血圧コントロール剤並びに種々の抗腫瘍剤と共に行うように選択することができる。また、25-ヒドロキシビタミンＤ2及び／又は25-ヒドロキシビタミンＤ3の静脈内投与を、コレカルシフェロール、エルゴカルシフェロール、活性ビタミンＤステロール、血糖及び高血圧コントロール剤並びに種々の抗腫瘍剤と共に行うように選択することができる。実際面では、本発明の化合物はより高い投与量で用い、そこでは、病状の治療処置が望ましい目的(end)であるが、より低い投与量を予防目的で一般的に使用し、所定のケースにおける具体的投与量は、投与する具体的化合物、治療すべき疾患、被検体の状態及び当該技術分野における当業者によりよく知られるような、薬剤活性又は被検体の応答を変え得る他の関連する医学的事実に従って調整することが理解される。
記載したデリバリーシステム中に25-ヒドロキシビタミンＤ3及び25-ヒドロキシビタミンＤ2の組み合わせを含ませることにより、得られる製剤が、ビタミンＤ3及びビタミンＤ2内分泌系の双方を支えるのに有用なものとなる。現在入手可能な経口ビタミンＤサプリメント及び先に販売されていた、25-ヒドロキシビタミンＤ3の経口製剤は、たった１つだけ又は他のシステムを支えるものである。
本発明を、以下の実施例により更に説明するが、それは、本発明の範囲を制限するものとして解釈すべきではない。
【実施例】
【００２２】
実施例１
経口投与用の制御放出製剤の１つの実施態様
精製した蜜ろう及びヤシ油を、１：１の比で組み合わせ及び均一な混合物が得られるまで連続的に混合しながら７５℃に加熱した。ワックス混合物を、約４５℃に冷却しながら連続的に均質化した。１：１の比での25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3を無水エタノール中に溶解し及びエタノール溶液を、連続的均質化を伴って、溶融ワックス混合物に添加した。添加したエタノールの量は、１〜２ｖ／ｖ％の範囲内のものであった。混合を、混合物が均一になるまで継続した。均一混合物をソフトゼラチンカプセル中に充填した。カプセルを、直ちにリンスして、加工潤滑剤(processing lubricant)を除去し及びアセトアルデヒド水溶液中に簡単に含浸させて、ゼラチンシェルを架橋した。アセトアルデヒド溶液の濃度及び含浸時間は、近赤外分光光度法により測定される所望の程度の架橋が達成されるように選んだ。最終カプセルを洗浄し、乾燥し及び包装した。
【００２３】
実施例２
漸進的静脈内投与用の製剤の１つの実施態様
TWEENポリソルベート20を約１０〜１６℃（約５０〜６０°F）に加熱し及び最少容量の無水エタノール中に溶解させた25-ヒドロキシビタミンＤ3を連続的攪拌を伴って添加した。得られた、25-ヒドロキシビタミンＤ3、無水エタノール及びTWEENポリソルベート20の均一溶液を、窒素を完全散布して、全ての溶解酸素を除去した、適切な容量の注射用水に移した。塩化ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、リン酸ナトリウム（二塩基性及び一塩基性）及びエデト酸２ナトリウムを添加し、次いで、保護窒素雰囲気下での十分な攪拌を行って、２ｍＬの単位容量あたりで：２０ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ3；＜０．０１％の無水エタノール；０．４０％（ｗ／ｖ）のTWEENソルベート20；０．１５％（ｗ／ｖ）の塩化ナトリウム；１．００％（ｗ／ｖ）のアスコルビン酸ナトリウム；０．７５％（ｗ／ｖ）の無水第二リン酸ナトリウム；０．１８％（ｗ／ｖ）の第一リン酸ナトリウム一水和物；及び０．１１％（ｗ／ｖ）エデト酸２ナトリウムを含む等張均質混合物を得た。この混合物を、ろ過により殺菌し及び酸素汚染からの適切な保護を伴って、酸素ヘッドスペースが１％未満の琥珀色ガラスアンプル中に充填した。
【００２４】
実施例３
犬において試験する薬物動態
２０匹の雄性ビーグル犬を２つの比較群にランダムに分け及び３０日間補足的ビタミンＤを与えなかった。この期間の終わりに、群＃１の犬の各々に、実施例１において記載したものと類似する、制御放出製剤で製造した、２５ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ2を含有する単一ソフトゼラチンカプセルを与えた。他の群（群＃２）の犬の各々に、中鎖脂肪酸トリグリセリド油中に溶解した、２５ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ2を含有する単一即時放出ソフトゼラチンカプセルを与えた。全ての犬に、投薬前の少なくとも８時間は餌を与えなかった。犬の各々からの採血を、投薬(dose administration)から、０、０．５、１、１．５、２、３、４、６、９、１５、２４、３６及び７２時間後に行った。採取した血液を25-ヒドロキシビタミンＤの含有レベルについて分析し、及びデータを治療群により分析した。群＃１の犬では、25-ヒドロキシビタミンＤの平均血中濃度について、群＃２の犬のものより、より緩やかな上昇及びより低い最大値（Ｃmax）が観察された。しかしながら、群＃１の犬では、群＃１で観察されたＣmaxがより低いものであったという事実にもかかわらず、群＃２の犬と比較して、25-ヒドロキシビタミンＤ2の平均血中濃度のより長期化した上昇が観察された。（ｔ＝０で観察した）予備投与バックグラウンド濃度について補正した、濃度曲線下平均面積（ＡＵＣ）は、群＃１について、25-ヒドロキシビタミンＤについて実質的により高かった。これらの処置により、犬に対する、本発明の製剤中の25-ヒドロキシビタミンＤ2の投与により、（中鎖脂肪酸トリグリセリド油における）即時放出用に配合した同量の25-ヒドロキシビタミンＤ2を投与した後のものより、非常に高い漸進性で上昇し及び安定性がより高いままである、25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度が生じることが証明された。群＃１における25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度について計算した、より高いＡＵＣにより、本件明細書に記載したように配合した25-ヒドロキシビタミンＤ2のバイオアベイラビリティが顕著に改良されたことが証明された。
【００２５】
実施例４
健常ボランティアにおいて試験する薬物動態
１８〜２４才の健常な非肥満性成人１６人が、１１週の薬物動態学的研究の被験者となり、その中においては、被験者に、25-ヒドロキシビタミンＤ2の２つの製剤を、連続的に及び二重盲式で与えた。一方の製剤（製剤＃１）は、実施例１において記載したものと類似する、制御放出製剤で製造した、１００ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ2を含有するソフトゼラチンカプセルであった。他方の製剤（製剤＃２）は、中鎖脂肪酸トリグリセリド油中に溶解した、１００ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ2を含有する、外観が同一の、即時放出ソフトゼラチンカプセルであった。試験開始前６０日間及び試験終了まで継続して、被検者には、他のビタミンＤサプリメントの摂取を慎んでもらった。研究の第１、３及び５日目に、全ての被験者から早朝空腹時血液サンプルを採取して、前治療基礎値を得た。第８日目の朝に、被験者から更なる空腹時血液サンプル（ｔ＝０）を採取し、被験者を、２つの治療群のうちの一方へ、ランダムに、割り当てた。双方の群に、朝食をとる前に単一試験カプセルを投与したが：一方の群には、製剤＃１のカプセルを与え及び他方の群には、製剤＃２のカプセルを与えた。各被験者からの血液採取を、投与から０．５、１、１．５、２、３、４、６、８、１０、１２、１５、２４、３６、４８、７２及び１０８時間後に行った。第７０日目の朝に、被検体から更なる早朝空腹時血液サンプル（ｔ＝０）を採取し及び被験者に、朝食をとる前に、他の試験製剤の単一カプセルを投与した。第７０日目の朝に、被験者から更なる早朝空腹時血液サンプル（ｔ＝０）を採取し及び被検体に、朝食をとる前に他の試験製剤の単一カプセルを投与した。再び、各被験者からの血液採取を、投与から０．５、１、１．５、２、３、４、６、８、１０、１２、１５、２４、３６、４８、７２及び１０８時間後に行った。全採取血液を、25-ヒドロキシビタミンＤの含有濃度について分析し、及びそのデータを、基礎含有量の補正後に治療製剤により分析した。製剤＃１では、製剤＃２より、25-ヒドロキシビタミンＤの平均血中濃度が緩やかに上昇し及びそのＣmaxがより低いことが分かった。しかしながら、製剤＃１では、また、製剤＃２と比較して、観察されたＣmaxがより低いという事実にもかかわらず、25-ヒドロキシビタミンＤ2の平均血中濃度の上昇がより長期化した。平均ＡＵＣは、製剤＃１の投与後、25-ヒドロキシビタミンＤについて実質的により高かった。これらの処置により、健常成人に対する、本発明の製剤中の25-ヒドロキシビタミンＤ2の投与により、（中鎖脂肪酸トリグリセリド油における）即時放出用に配合した同量の25-ヒドロキシビタミンＤ2を投与した後のものより、非常に高い漸進性で上昇し及び安定性がより高いままである、25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度が生じることが証明された。製剤＃１を投与した後における25-ヒドロキシビタミンＤの血中濃度について計算した、より高いＡＵＣにより、本件明細書に記載したように配合した25-ヒドロキシビタミンＤ2のバイオアベイラビリティがより高いことが証明された。
【００２６】
実施例５
ビタミンＤ不足の健常成人男子ボランティアにおける効果研究
血清25-ヒドロキシビタミンＤを最適濃度（＞３０ｎｇ／ｍＬ）に回復させる際の、ビタミンＤの、３つの異なる製剤の効果を、ビタミンＤ不足であると診断された健常な非肥満性男性での２３日間の研究において試験した。製剤の１つ（製剤＃１）は、本発明について説明したように製造した、３０ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ3を含有するソフトゼラチンカプセルとした。第二製剤（製剤＃２）は、中鎖脂肪酸トリグリセリド油中に溶解した、5,000 IUのエルゴカルシフェロールを含有する、外観が同一の即時放出ソフトゼラチンカプセルとした。第三製剤（製剤＃３）は、中鎖脂肪酸トリグリセリド油中に溶解した、50,000 IUのコレカルシフェロールを含有する、外観がまた同一の即時放出ソフトゼラチンカプセルとした。全体で１００名の健常なカフカス人(Caucasian)及びアフリカ系アメリカ人男性が、この研究の被験者となり、その全員について、年齢が３０〜４５才であり及び血清25-ヒドロキシビタミンＤ濃度が１５〜２９ｎｇ／ｍＬ（包括的）であった。試験開始前６０日間及び試験終了まで継続して、全ての被検者に、他のビタミンＤサプリメントの摂取及び有意な日光暴露を避けてもらった。研究の第１及び２日目に、全ての被験者から早朝空腹時血液サンプルを採取して、血清25-ヒドロキシビタミンＤの前治療基礎値を得た。第３日目の朝に、被験者から更なる空腹時血液サンプル（ｔ＝０）を採取し、被験者を、４つの治療群のうちの１つへ、ランダムに、割り当て及び朝食をとる前に単一試験カプセルを投与したが：群＃１の各被験者には、製剤＃１の単一カプセルを与え、並びに群２及び群３の各被験者には、製剤＃２又は製剤＃３の単一カプセルを、それぞれ、与えた。群＃４の被験者には、適合性(matching)プラシーボカプセルを与えた。群１の各被験者には、第４〜２２日目の朝に、朝食前、製剤＃１の更なるカプセルを与えたが、群２、３及び４の被験者には、更なるカプセルは与えなかった。治療群は問わず、各被検者からの早朝空腹時血液サンプルの採取を、第４、５、６、１０、１７及び２３日目（投与開始後の第１、２、３、７、１４及び２０日目）に行った。採取した血液の全てを25-ヒドロキシビタミンＤの含有レベルについて分析し、及びデータを、基礎値の補正後に治療群により分析した。４つの全ての治療群の被験者について、平均基礎血清25-ヒドロキシビタミンＤ濃度が、第１〜３日目に採取した空腹時血液サンプルの分析をベースとして、約１６〜１８ｎｇ／ｍＬであった。群＃４（コントロール群）の被験者では、研究期間中、平均血清25-ヒドロキシビタミンＤは有意には変化しなかった。群１の被験者では、平均血清25-ヒドロキシビタミンＤが徐々に上昇し、第２３日目までに少なくとも３０ｎｇ／ｍＬに達した。それとは好対照に、群＃２の被験者では、平均血清25-ヒドロキシビタミンＤが、投与後(post-dosing)最初の数日間で、顕著に上昇し、２５ｎｇ／ｍＬの少し上の最大値に達し、及びその後急速に低下した。研究終了までに、血清25-ヒドロキシビタミンＤは、群＃２における基礎値より有意に低いものとなった。群３の被験者では、平均血清25-ヒドロキシビタミンＤが、投与後の最初の２週間にわたり連続的に上昇し、その後、漸進的であるが進行的に低下した。研究終了��でに、平均血清25-ヒドロキシビタミンＤは３０ｎｇ／ｍＬ未満となり、それは、前治療基礎値よりほんの約１１ｎｇ／ｍＬだけ高いものであった。この研究でのデータから証明されることには、本件明細書に記載したように配合した、６００ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ3を含み及び１日あたり３０ｍｃｇの投与量で２０日間投与した投与物(administration)では、低い血清25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度まで回復させる際の効果が、ＮＫＦ及び経口ビタミン補給治療法の他の第一人者により現在推奨されるような、単回投与法で投与した、エルゴカルシフェロール又はコレカルシフェロールのいずれかを50,000 IU含む即時排出製剤のものより実質的に高い。
【００２７】
実施例６
ビタミンＤ欠乏を示す末期腎不全患者における効果及び安全性の研究
血清25-ヒドロキシビタミンＤを最適濃度（＞３０ｎｇ／ｍＬ）に回復させる際の静脈内25-ヒドロキシビタミンＤ3の効果及び安全性についての試験を、定期的血液透析を必要とする末期腎不全（ＥＳＲＤ）に罹患し及びビタミンＤ不足と診断された患者での３ヶ月間の研究において行った。この研究で試験した製剤は、実施例２において記載したものと類似する、２０ｍｃｇの25-ヒドロキシビタミンＤ3を含有する水性等張及び無菌溶液であった。全部で５０名の健常なカフカス人、アジア人、ヒスパニック及びアフリカ系アメリカ人が、この研究の被験者となり、全員が、定期的な血液透析を少なくとも４ヶ月間受けており及び１５ｎｇ／ｍＬ未満の血清25-ヒドロキシビタミンＤ濃度を有していた。参加前に、全ての被験者から、少なくとも１週間おいて２つの早朝空腹時血液サンプルを採取して、血清カルシウム、血漿インタクト(intact)ＰＴＨ及び血清25-ヒドロキシビタミンＤの前治療基礎値を得た。第１日目の朝に、被験者を２つの治療群の一方にランダムに分け、及び被験者に対する試験製剤又は適合性プラシーボでの週に３回の投与を開始した。全ての投与は、定期的血液透析の期間に行い及び血液透析器から出る血液中への漸進的注入（１〜５分間かかる）により達成した。各被験者からの更なる空腹時血液サンプルの採取及び２４時間蓄尿を、血清カルシウム、血漿インタクトＰＴＨ及び血清25-ヒドロキシビタミンＤの測定のために年に４回行った。研究を行っている間、全ての被験者が、一日当たりの元素カルシウムの摂取量を約1,000〜1,500mgにする（必要に応じ、自己選択ダイエット及びカルシウムサプリメントによる）という栄養士の継続的指導に従った。研究の終わりに、実験室データを、治療群により及び試験製剤により、基礎値の適切な補正後に分析した。双方の群が、血清25-ヒドロキシビタミンＤ（１０．７〜１１．９ｎｇ／ｍＬの範囲）、血漿インタクトＰＴＨ（４５．３〜５２．１ｐｇ／ｍＬの範囲）及び血清カルシウム（８．７２〜９．３１ｍｇ／ｄＬの範囲）についての比較可能な平均基礎値を有していた。研究の間、プラシーボ（コントロール）群においては、実験室平均値についての有意な変化は観察されなかった。25-ヒドロキシビタミンＤ3を投与した治療群の被験者では、血清25-ヒドロキシビタミンＤ濃度が、投与後の最初の３ヶ月間、進行的に上昇し、その後、定常状態濃度に達した。平均血清カルシウムは、25-ヒドロキシビタミンＤ3を投与した治療群においては基礎値から有意に上昇し、及びプラシーボ群において観察されたものより有意に高かった。血清カルシウムが９．５ｍｇ／ｄＬより高いとして定義される高カルシウム血症の発現が、稀に、双方の治療群において観察された。この研究からのデータにより、25-ヒドロキシビタミンＤ3の静脈内製剤が、カルシウム及びＰＴＨ代謝に関連する、受け入れ不能な副作用を生じることなく、血清25-ヒドロキシビタミンＤを上昇させる点で効果的であることが証明される。
本件明細書において記載した全ての特許文献、刊行物及び参考文献は、ここに、参考文献として完全に組み込まれるものとする。本件明細書の開示内容と組み込まれた特許文献、刊行物及び参考文献で矛盾が生じた場合には、本件明細書の開示内容が優先されるべきである。
【手続補正書】
【提出日】平成26年2月24日(2014.2.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせを、ワックス、オイル、及びグリセリドを含みかつカプセルに充填されたワックスマトリックス中に分散させて含む、持続放出経口投与製剤。
【請求項２】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせを含む持続放出経口投与製剤。
【請求項３】
25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3が、回腸の腸液に接したときにこれらの成分を制御放出するマトリックス内に提供される、請求項１又は２記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項４】
マトリックスが、胃液における崩壊に抵抗性のコーティングで被覆されている、請求項３記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項５】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせをワックスマトリックス中に分散させて含む、請求項２〜４のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項６】
ワックスマトリックスが、ワックスの混合物及び１以上のオイルを含む、請求項５記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項７】
マトリックスが、グリセリドを含む脂質マトリックスである、請求項２〜６のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項８】
ワックスマトリックスが充填されたゼラチンカプセルをさらに含む、請求項１又は５〜７のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項９】
ゼラチンカプセルがハードゼラチンカプセルである、請求項８記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１０】
製剤が体温において半固体である、請求項１〜８のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１１】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせが、ポリマーで被覆された顆粒に含まれる、請求項２記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１２】
ポリマーが、メタクリル酸エステル、ポリビニルエステル、ポリビニルアセタール、ポリアクリル酸エステル及びブタジエンスチレンコポリマーからなる群から選択される不溶性ポリマーを含む、請求項１１記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１３】
ポリマーがメタクリル酸エステルを含む、請求項１２記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１４】
塩化メタクリル酸トリメチルアンモニオエチルをさらに含む、請求項１３記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１５】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせを単位用量あたりで１〜１００μｇ含む、請求項１〜１４のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１６】
少なくとも４時間の期間にわたって持続放出が達成される、請求項１〜１５のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１７】
25-ヒドロキシビタミンＤ3を含む、請求項１〜１６のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１８】
コレカルシフェロール又はエルゴカルシフェロールをさらに含む、請求項１〜１７のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項１９】
コレカルシフェロールをさらに含む、請求項１８記載の持続放出経口投与製剤。
【請求項２０】
患者の25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏、或いは、25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏に関連する疾患の治療に使用するための、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせを、ワックス、オイル、及びグリセリドを含みかつカプセルに充填されたワックスマトリックス中に分散させて含む製剤。
【請求項２１】
患者の25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏、或いは、25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏に関連する疾患の治療に使用するための、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせを含む製剤であって、遅延持続放出経口投与製剤として提供される製剤。
【請求項２２】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせが、請求項１〜１２のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤として提供される、請求項２０又は２１記載の製剤。
【請求項２３】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせが連日投与用の持続放出経口投与製剤として提供される、請求項２０〜２２のいずれか１項記載の製剤。
【請求項２４】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせの投与量が１日あたり１〜１００μｇである、請求項２０〜２３のいずれか１項記載の製剤。
【請求項２５】
コレカルシフェロール又はエルゴカルシフェロールをさらに含む、請求項２０〜２４のいずれか１項記載の製剤。
【請求項２６】
コレカルシフェロールをさらに含む、請求項２５記載の製剤。
【請求項２７】
患者の25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏、或いは、25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏に関連する疾患の治療に使用するための医薬品を製造するための、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせを、ワックス、オイル、及びグリセリドを含みかつカプセルに充填されたワックスマトリックス中に分散させて含む製剤。
【請求項２８】
患者の25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏、或いは、25-ヒドロキシビタミンＤ不足又は欠乏に関連する疾患の治療に使用するための医薬品を製造するための、25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせを含む製剤の使用であって、製剤が遅延持続放出経口投与製剤として提供される使用。
【請求項２９】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせが、請求項１〜１２のいずれか１項記載の持続放出経口投与製剤として提供される、請求項２７又は２８記載の使用。
【請求項３０】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせが連日投与用の持続放出経口投与製剤として提供される、請求項２７〜２９のいずれか１項記載の使用。
【請求項３１】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせの投与量が１日あたり１〜１００μｇである、請求項２７〜３０のいずれか１項記載の使用。
【請求項３２】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせが、コレカルシフェロール又はエルゴカルシフェロールと共に投与される、請求項２７〜３１のいずれか１項記載の使用。
【請求項３３】
25-ヒドロキシビタミンＤ2、25-ヒドロキシビタミンＤ3、又は25-ヒドロキシビタミンＤ2及び25-ヒドロキシビタミンＤ3の組み合わせが、コレカルシフェロールと共に投与される、請求項３２記載の使用。