(57)【要約】【課題】クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＩＧＦ−１産生促進剤、育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤を提供する。【解決手段】本発明はクロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする、抜け毛予防又は改善、及び筋肉増強を目的とする化粧品、医薬品、医薬部外品及び食品である。本発明のクロバナツルアズキの抽出物は、優れたＩＧＦ−１産生促進作用をもち、抜け毛予防又は改善、及び筋肉増強効果を示した。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするインスリン様増殖因子１（ＩＧＦ−１）産生促進剤。
【請求項２】
クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。
【請求項３】
クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする筋肉活性化剤。
【請求項４】
クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする筋肉細胞におけるエネルギー産生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするインスリン様増殖因子１（ＩＧＦ−１）産生促進剤、育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ＩＧＦ−１は成長ホルモンから作られ、ほとんど全ての人体組織、母乳や唾液を含む液体の中に存在する物質である。生体内では、骨、筋肉、皮膚、毛髪、肝臓、腎臓、肺、神経等の多くの細胞が、ＩＧＦ−１の影響を受けると言われている。これまでの研究から、加齢とともにＩＧＦ−１の分泌量が減少することが明らかとなり、様々な老化現象を引き起こす主な原因として考えられている（非特許文献１）。又、毛根を活性化したり（非特許文献２）、筋芽細胞の増殖と分化を促進したり（非特許文献３）する等、身体の多くの組織に影響を及ぼすことも分かってきた。最近では、ＩＧＦ−１含有の化粧品が発売されている。
【０００３】
ヒトの毛髪は一生伸び続けるのではなく、一定の寿命の後に自然に抜け落ち、しばらくすると新しい毛髪が生え始める。毛髪は成長期、退行期及び休止期と呼ばれる３つの異なる活動状態を繰り返しており、この一連の周期をヘアサイクルと呼ぶ。毛髪は、毛根の最下部にある毛乳頭細胞からの刺激によって、その周りに存在する毛母細胞が増殖・分化して形成される。毛乳頭細胞はＩＧＦ−１等の多くのサイトカインを産生し、毛母細胞に強い影響を与えるため、育毛にとって重要であると考えられる。最近では、毛乳頭細胞からＩＧＦ−１産生を促進させる成分が育毛剤に利用されている（非特許文献４）。
【０００４】
筋肉の元になるのは、筋芽細胞である。筋芽細胞が増殖して融合することで筋管となり、更にその筋管が集合することで筋線維となる。その後、数々の過程を経て、筋線維から筋肉が作られる。筋管形成がスタートとなって筋肉が作られる過程が進行していくため、最初に筋芽細胞から筋管が形成されることが、筋肉形成や筋肉強化の鍵となる。筋芽細胞には様々なサイトカインが作用するが、ＩＧＦ−１を筋芽細胞に添加すると筋管の形成及び肥大が認められることから、ＩＧＦ−１は筋肉形成や筋肉増強にとって重要であると考えられる（非特許文献５及び６）。
【０００５】
今までに、ＩＧＦ−１を有効成分とする育毛剤が既に知られている（特許文献１）。しかしながら、ＩＧＦ−１は動物由来成分で分子量が大きいために、外用塗布による経皮吸収が困難である等の問題があった。
【０００６】
クロバナツルアズキはマメ科ナンバンアカアズキ属のつる性の植物であり、学名：Ｍａｃｒｏｐｔｉｌｉｕｍ  ａｔｒｏｐｕｒｐｕｒｅｕｍである。原産は北米であり、沖縄地方、世界の熱帯・亜熱帯で帰化している。今までに、クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするチロシナーゼ活性阻害剤、美白剤及び皮膚化粧料（特許文献２）、抗老化剤、皮膚化粧料及び美容用飲食品（特許文献３）、抗老化剤及び皮膚化粧料（特許文献４）、及び皮膚外用組成物（特許文献５）等が知られている。しかしながら、クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＩＧＦ−１産生促進剤、育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤については知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特公平４−６０５６７
【特許文献２】特開２００７−９１６３５
【特許文献３】特開２００７−２１７３５２
【特許文献４】特開２００７−２２３９１８
【特許文献５】特開２０１１−１６７２６
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】植木浩二郎，日本臨床，６７（７），１３１５−１３２０（２００９）
【非特許文献２】Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，９９（３），３４３−３４９（１９９２）
【非特許文献３】Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．，１３５５（２），１６７−１７６（１９９７）
【非特許文献４】小友進，日薬理誌，１１９，１６７−１７４（２００２）
【非特許文献５】Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，５（５），７１８−７２４（１９９１）
【非特許文献６】Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９２，１０３０７−１０３１１（１９９５）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
そこで、本発明が解決する課題は、ＩＧＦ−１産生を高める植物由来成分を見出し、これを有効成分とする、作用点が明確であり、且つ優れたＩＧＦ−１産生促進剤、育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記課題の解決に向け鋭意検討を行った結果、クロバナツルアズキ抽出物に優れたＩＧＦ−１産生促進作用を有することを見出した。更に、本発明者らは、クロバナツルアズキ抽出物を含有する組成物に、優れた育毛効果、筋肉活性化効果及びエネルギー産生促進効果を見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
即ち、本発明は、クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＩＧＦ−１産生促進剤、育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤に関する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明のクロバナツルアズキの抽出物は、ＩＧＦ−１産生促進効果に優れていた。又、この抽出物を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤は、安全で、抜け毛予防又は改善効果、及び筋肉増強効果に優れていた。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】クロバナツルアズキ抽出物添加によるＣ２Ｃ１２細胞における筋管形成の図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明に用いるクロバナツルアズキはマメ科ナンバンアカアズキ属のつる性の植物であり、学名：Ｍａｃｒｏｐｔｉｌｉｕｍ  ａｔｒｏｐｕｒｐｕｒｅｕｍである。クロバナツルアズキの幹部、地上部、根部等の一部や全草を乾燥したものを利用することができる。
【００１５】
本発明に用いるクロバナツルアズキの抽出物は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温又は低温で抽出したものであっても良い。抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、１，３−ブチレングリコール及びプロピレングリコールが良い。これらの溶媒は、１種でも２種以上を混合して用いても良い。又、「クロバナツルアズキ抽出液ＢＧ」（丸善製薬）が市販されているので、それを用いても良い。
【００１６】
上記抽出物は抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて濃縮、希釈、濾過、活性炭等による脱色、脱臭等の処理をして用いても良い。又、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良いし、カラム精製等を行い、有効成分を濃縮したり単離したりしてから用いても良い。
【００１７】
本発明における育毛剤とは、育毛又は発毛の促進、脱毛の予防又は改善等の有効成分を含有する製剤を意味する。育毛剤の対象は、頭髪、まつ毛等が挙げられる。
【００１８】
本発明における筋肉活性化剤とは、筋肉に刺激を与えることで、筋肉の機能が活発になる等の有効成分を含有する製剤を意味する。筋肉を活性化することにより、基礎代謝の向上、血流の改善等の効果が期待される。
【００１９】
本発明におけるエネルギー産生促進剤とは、生体内のエネルギー産生の向上又は改善等の有効成分を含有する製剤を意味する。生体内のエネルギーであるＡＴＰは、主に筋肉で合成されるため、その細胞の働きを高めることが重要である。
【００２０】
本発明に用いるクロバナツルアズキの抽出物を含有することを特徴とする育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤を、抜け毛予防又は改善、筋肉増強の目的で用いるには、通常、全身的又は局所的に外用や内用により投与される。投与量は年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人１人当たり１回に１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは２０ｍｇ〜２００ｍｇの範囲で１日１回から数回投与される。投与量は種々の条件で変動するので、上記投与範囲より少ない量で十分な場合もあるし、又、範囲を超えて投与する必要のある場合もある。
【００２１】
外用により投与する場合は、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、その剤型としては、例えば、ヘアトニック、ヘアローション、シャンプー、リンス、ボディローション等の頭皮や身体に適用されるものが挙げられる。上記抽出物をそのまま使用しても良く、本発明の効果を損なわない範囲で外用剤に用いられる成分である、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、キレート剤等を配合することもできる。
【００２２】
内用により投与する場合は、食品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等が挙げられる。上記抽出物をそのまま使用しても良く、本発明の効果を損なわない範囲で、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、香料、保存料、溶解補助剤、溶剤等を用いることができる。具体的には、乳糖、ショ糖、ソルビット、マンニット、澱粉、沈降性炭酸カルシウム、重質酸化マグネシウム、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、セルロース又はその誘導体、アミロペクチン、ポリビニルアルコール、ゼラチン、界面活性剤、水、生理食塩水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、カカオ脂、ラウリン脂、ワセリン、パラフィン、高級アルコール等である。
【００２３】
本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本発明の育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤に対し、固形物に換算して０．０００１重量％以上、好ましくは０．００１〜５０重量％の配合が良い。０．０００１重量％未満では十分な効果は望みにくい。一方、５０重量％を越えて配合した場合、効果の増強はみられにくく不経済である。又、添加の方法については、予め加えておいても製造途中で加えても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【００２４】
次に、本発明を詳細に説明するため、具体的な実施例を挙げて説明する。これらの実施例は効果を具体的に説明するもので、発明の範囲を限定するものではない。実施例中の配合量は重量％である。
【実施例】
【００２５】
本発明のクロバナツルアズキの抽出物は、製造例として下記の抽出を行うことができる。
【００２６】
製造例１  クロバナツルアズキ（地上部）の熱水抽出物
クロバナツルアズキの地上部５ｇに精製水５０ｍＬを加え、９５〜１００℃で１時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してクロバナツルアズキ（地上部）の熱水抽出物を１．３１ｇ得た。
【００２７】
製造例２  クロバナツルアズキ（地上部）の５０％エタノール抽出物
クロバナツルアズキの地上部５ｇに５０（ｖ／ｖ）％エタノール５０ｍＬを加え、常温で５日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、クロバナツルアズキ（地上部）の５０％エタノール抽出物を１．０９ｇ得た。
【００２８】
製造例３  クロバナツルアズキ（地上部）のエタノール抽出物
クロバナツルアズキの地上部５ｇにエタノール５０ｍＬを加え、常温で５日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、クロバナツルアズキ（地上部）のエタノール抽出物を０．９９ｇ得た。
【００２９】
本発明のクロバナツルアズキの抽出物は、処方例として下記の製剤化を行うことができる。
【００３０】
処方例１  ヘアトニック
処方                                                                配合量
１．エタノール                                                  ６０．０重量％
２．クロバナツルアズキ抽出液ＢＧ（丸善製薬）                      ２．０
３．グリセリン                                                    ２．０
４．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２を成分１に溶解し、成分３及び成分４を加え、十分攪拌混合して製品とする。
【００３１】
比較処方例１  従来のヘアトニック
処方例１において、クロバナツルアズキ抽出液ＢＧ（丸善製薬）を精製水に置き換えたものを、従来のヘアトニックとした。
【００３２】
処方例２  ヘアローション
処方                                                                配合量
１．クロバナツルアズキ（地上部）の５０％エタノール抽出物          ０．２重量％
２．ステアリン酸                                                  ５．０
３．セチルアルコール                                              ５．０
４．流動パラフィン                                                ２．０
５．グリセリンモノステアレート                                    １．３
６．ソルビタンモノオレエート                                      １．５
７．ポリオキシエチレン（１０）ソルビタンモノオレエート            ０．８
８．グリセリン                                                    ６．０
９．防腐剤                                                        適量
１０．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜７を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び８〜１０を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加え、かき混ぜながら冷却して製品とする。
【００３３】
処方例３  シャンプー
処方                                                                配合量
１．クロバナツルアズキ（地上部）の熱水抽出物                      ０．１重量％
２．アルキル硫酸トリエタノールアミン                            １８．０
３．ラウリン酸ジエタノールアミド                                  ３．０
４．メチルセルロース                                              ０．５
５．香料                                                          適量
６．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分６に成分４を均一に溶解した後、成分１及び成分２を加える。７０〜７５℃で加熱溶解した後、成分３を加える。冷却途中に成分５を加え、３０℃まで冷却して製品とする。
【００３４】
処方例４  リンス
処方                                                                配合量
１．クロバナツルアズキ（地上部）の熱水抽出物                      ０．１重量％
２．ホホバ油                                                      ０．０１
３．ベヘニルアルコール                                            ３．０
４．１，３−ブチレングリコール                                    ５．０
５．塩化ジステアリルジメチルアンモニウム（７５％）                ８．０
６．クエン酸                                                      ０．０５
７．香料                                                          適量
８．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜８を６０℃で溶解し、攪拌して３０℃まで冷却して製品とする。
【００３５】
処方例５  まつ毛用化粧料
処方                                                                配合量
１．クロバナツルアズキ（地上部）のエタノール抽出物                ０．１重量％
２．カルボキシビニルポリマー                                      １．０
３．ヒドロキシエチルセルロース                                    ０．５
４．１，３−ブチレングリコール                                    ５．０
５．水酸化カリウム                                                ０．５
６．９５エタノール                                                ５．０
７．エデト酸三ナトリウム                                          ０．０２
８．メチルパラベン                                                ０．２
９．香料                                                          適量
１０．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜４及び６〜１０を均一混合した後、成分５を添加して製品とする。
【００３６】
処方例６  ボディローション
処方                                                                配合量
１．クロバナツルアズキ（地上部）のエタノール抽出物                ０．５重量％
２．スクワラン                                                    ５．０
３．オリーブ油                                                    ５．０
４．ホホバ油                                                      ５．０
５．セタノール                                                    １．５
６．モノステアリン酸グリセリン                                    ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）              ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（２０Ｅ．Ｏ．）    ２．０
９．香料                                                          適量
１０．グリセリン                                                    ２．０
１１．パラオキシ安息香酸メチル                                      ０．２
１２．プロピレングリコール                                          １．０
１３．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１０〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化し、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、３０℃まで冷却して製品とする。
【００３７】
次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。
【００３８】
実験例１  ヒト皮膚線維芽細胞におけるＩＧＦ−１タンパクをコードする遺伝子発現の加齢変化
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ系における加齢モデルであるＰＤＬ（＝ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｏｕｂｌｉｎｇ ｌｅｖｅｌ、細胞の分裂回数）の異なるヒト皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ、ＰＤＬ＝２９：若い、ＰＤＬ＝４４：中程度及びＰＤＬ＝６５：老いた）から、ＲＮＡｉｓｏ  ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて総ＲＮＡの抽出を行った。総ＲＮＡを基に、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により、ＩＧＦ−１ｍＲＮＡ発現量の測定を行った。同時に、内部標準として、β−アクチンｍＲＮＡ発現量の測定を行った。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。
【００３９】
ＩＧＦ−１用のプライマーセット
ＡＡＧＧＡＧＧＣＴＧＧＡＧＡＴＧＴＡＴＴＧＣ（配列番号１）
ＣＧＧＡＣＡＧＡＧＣＧＡＧＣＴＧＡＣＴＴ（配列番号２）
β−アクチン用のプライマーセット
ＣＡＣＴＣＴＴＣＣＡＧＣＣＴＴＣＣＴＴＣＣ（配列番号３）
ＧＴＧＴＴＧＧＣＧＴＡＣＡＧＧＴＣＴＴＴＧ（配列番号４）
【００４０】
その結果を表１に示す。図示の通り、ヒト皮膚線維芽細胞におけるＩＧＦ−１ｍＲＮＡ発現量は、加齢にともなって減少した。
【００４１】
【表１】
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【００４２】
実験例２  ヒト皮膚線維芽細胞におけるＩＧＦ−１産生に及ぼすクロバナツルアズキ抽出物の影響
コンフルエントになったヒト皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）にクロバナツルアズキ抽出液ＢＧ（丸善製薬）を加え、ＦＢＳを含まないＤＭＥＭ培地にて２４時間培養した後、ＲＮＡｉｓｏ  ｐｌｕｓ（ＴＡＫＡＲＡ）を用いて総ＲＮＡの抽出を行った。尚、添加濃度は３０、１００及び３００μｇ／ｍＬにて行った。総ＲＮＡを基に、リアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により、ＩＧＦ−１ｍＲＮＡ発現量の測定を行った。同時に、内部標準として、β−アクチンｍＲＮＡ発現量の測定を行った。尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは実験例１の通りである。
【００４３】
その結果を表２に示す。図示の通り、クロバナツルアズキ抽出液ＢＧ（丸善製薬）にＩＧＦ−１ｍＲＮＡ発現量を増加させる効果が認められた。
【００４４】
【表２】
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【００４５】
実験例３  使用試験（育毛効果）
処方例１及び比較処方例１で得られる各ヘアトニックを用いて、使用試験を行った。男性型脱毛症患者である被験者２０名の頭部に毎朝晩２回、連続６ヶ月間試料を塗布した後、毛髪の増加及び剛毛化を基準に育毛効果を評価した。
【００４６】
これらの試験結果を表３に示す。その結果、処方例１のヘアトニックは優れた育毛効果を示した。尚、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。又、クロバナツルアズキ抽出液ＢＧ（丸善製薬）以外の抽出物を使用した処方例においても、同様の効果が認められた。
【００４７】
【表３】
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【００４８】
実験例４  筋芽細胞におけるエネルギー産生に及ぼすクロバナツルアズキ抽出物の影響
筋肉由来細胞株であるＣ２Ｃ１２を９６ｗｅｌｌプレートに５×１０３個／ｗｅｌｌ播種し、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培地にて３７℃、５％ＣＯ２条件下で培養した。７２時間後、コンフルエントな状態になったところでクロバナツルアズキ抽出物ＢＧ（丸善製薬）１及び１０μｇ／ｍＬを添加したＦＢＳを含まないＤＭＥＭ培地にて更に２４時間培養した。その後、ＭＴＴ  ａｓｓａｙにより、ミトコンドリア内の脱水素酵素の活性を測定した。即ち、５００μｇ／ｍＬのＭＴＴ（３−［４，５−ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ］−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌ−ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ）（Ｓｉｇｍａ）を含むＤＭＥＭ培地２００μＬにて２時間培養した後、培養上清を除去して生成されたフォルマザンの黒色結晶をイソプロパノール２００μＬに溶解し、１時間後に５７０ｎｍ及び６３０ｎｍにおける吸光度を測定し、１ｗｅｌｌあたりのフォルマザン生成量にて脱水素酵素の活性を評価した。
【００４９】
その結果を表４に示す。図示の通り、クロバナツルアズキ抽出物ＢＧ（丸善製薬）にエネルギー産生促進効果が認められた。
【００５０】
【表４】
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【００５１】
実験例５  クロバナツルアズキ抽出物による筋管形成の誘導効果
筋肉由来細胞株であるＣ２Ｃ１２を、Ｃｅｌｌｍａｔｒｉｘ  Ｉ−Ｃ（新田ゼラチン）にてコラーゲンコートした１２ｗｅｌｌプレートに３×１０４個／ｗｅｌｌ播種した。２４時間培養した後、ＦＢＳを含まないＤＭＥＭ培地に置換し、１０μｇ／ｍＬのクロバナツルアズキ抽出物ＢＧ（丸善製薬）を添加した。一日おきに培地交換を行い、１０日程かけて筋管形成を誘導させた。細胞を固定した後、ＴＲＩＴＣ−ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎにてＦ−アクチンを染色し、蛍光顕微鏡にて観察した。
【００５２】
その結果を図１に示す。図示の通り、未添加であるｎｏｒｍａｌは単核で球状の細胞であるが、クロバナツルアズキ抽出物ＢＧ（丸善製薬）添加により、多核の細長い筋管の形成を誘導する効果が認められた。
【産業上の利用可能性】
【００５３】
本発明に関わる、クロバナツルアズキの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするＩＧＦ−１産生促進剤、育毛剤、筋肉活性化剤及びエネルギー産生促進剤は、各剤の目的に対して優れた改善効果を発揮する。従って、抜け毛予防又は改善、及び筋肉増強を目的とする化粧品、医薬品、医薬部外品及び食品を提供することができる。
【図１】
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【配列表】
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