(57)【要約】      （修正有）【課題】カキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの物質と昆布抽出物の混合物を発酵させて製造した、多量の天然ＧＡＢＡを含むストレス解消または睡眠障害改善用組成物及びその製造方法の提供。【解決手段】タウリンのような機能性物質には影響を与えない発酵菌株を利用して、カキと昆布の抽出混合液を発酵させて、カキと昆布内に存在するグルタミン酸をＧＡＢＡに転換し、カキと昆布の抽出混合液を発酵させた発酵物を有効成分として含むストレス解消または睡眠障害改善用組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
(ａ)カキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの物質と
(ｂ)昆布抽出物の混合物を発酵させた発酵物と、を有効成分で含むこと
を特徴とするストレス解消または睡眠障害改善用組成物。
【請求項２】
前記発酵物は、ラクトバチルスブレビス(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ)、サッカロミケスセレビシエ(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌株で発酵され、ＧＡＢＡ(ｇａｍｍａ−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ)が４５００〜５０００ｐｐｍ含まれたこと
を特徴とする請求項１に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物。
【請求項３】
前記ストレスは、ＧＡＢＡ Ａ(ｇａｍｍａ−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ ｔｙｐｅ Ａ)受容体と５−ＨＴ２ｃ(５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ−２ｃ)受容体が関与する機構により誘発されること
を特徴とする請求項１に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物。
【請求項４】
前記睡眠障害は、不眠症、睡眠中の異常な動き及び無呼吸症、週間過多嗜眠症を伴う睡眠障害及び神経安定剤(ｂａｒｂｉｔｕｒａｔｅ)系痲酔剤であるペントバルビタール(ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ)で改善可能な睡眠障害からなる群より選択された１種以上の睡眠障害であること
を特徴とする請求項１に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物。
【請求項５】
前記カキ加水分解物は、カキを水洗、脱塩及び粉砕する前処理段階と、
水と前記前処理されたカキを１：０.１〜２.０の体積比で混合し、酵素を添加して５０〜７０℃で６０〜１２０分間撹拌する加水分解段階と、
前記加水分解されたカキと水の混合物を９０〜１２０℃で６０〜１２０分間撹拌する酵素失活段階と、
前記失活されたカキと水の混合物を濾過し、濾過されたカキ加水分解物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造されたこと
を特徴とする請求項１に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物。
【請求項６】
前記カキ抽出物は、カキを水洗、脱塩及び粉砕する前処理段階と、
前記前処理されたカキと水を１：１０〜２０の体積比で混合して７０〜９０℃で６０〜９０分間撹拌しながら抽出する抽出段階と、
前記抽出段階で得られた抽出物を濾過し、濾過されたカキ抽出物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造されたこと
を特徴とする請求項１に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物。
【請求項７】
前記昆布抽出物は、昆布を水洗及び脱塩する前処理段階と、
前記前処理された昆布とアルコールを１：１０〜２０の体積比で混合して７０〜９０℃で６０〜１２０分間撹拌しながら抽出する抽出段階と、
前記抽出段階で得られた抽出物を濾過し、濾過された昆布抽出物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造されたこと
を特徴とする請求項１に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物。
【請求項８】
カキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの物質と昆布抽出物を１：０.１〜２.０の体積比で混合する前処理段階と、
前記前処理された原料液が全体体積の１０〜３０％(ｖ/ｖ)になるように水を混合して、１００〜１４０℃で１０〜２０分間熱処理する滅菌段階と、
前記滅菌された原料液を３０〜３７℃に冷却する冷却段階と、
前記冷却された原料液に発酵菌株を接種して、２〜７日間発酵する発酵段階と、
前記発酵された発酵物を１００〜１４０℃で１０〜２０分間処理する再滅菌段階と、
前記再滅菌された発酵物を濾過して、濾過された発酵物を収得する濾過段階と、を含むこと
を特徴とするストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法。
【請求項９】
前記濾過段階で収去された発酵物を噴霧乾燥または凍結乾燥の方法で乾燥する乾燥段階をさらに含むこと
を特徴とする請求項８に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法。
【請求項１０】
前記カキ加水分解物は、カキを水洗、脱塩及び粉砕する前処理段階と、
水と前記前処理されたカキを１：０.１〜２.０の体積比で混合して、酵素を添加して５０〜７０℃で６０〜１２０分間撹拌する加水分解段階と、
前記加水分解されたカキと水の混合物を９０〜１２０℃で６０〜１２０分間撹拌する酵素失活段階と、
前記失活されたカキと水の混合物を濾過して、濾過されたカキ加水分解物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造されたこと
を特徴とする請求項８に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法。
【請求項１１】
前記カキ抽出物は、カキを水洗、脱塩及び粉砕する前処理段階と、
前記前処理されたカキと水を１：１０〜２０の体積比で混合して７０〜９０℃で６０〜９０分間撹拌しながら抽出する抽出段階と、
前記抽出段階で得られた抽出物を濾過し、濾過されたカキ抽出物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造されたこと
を特徴とする請求項８に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法。
【請求項１２】
前記昆布抽出物は、昆布を水洗、脱塩する前処理段階と、
前記前処理された昆布とアルコールを１：１０〜２０の体積比で混合して７０〜９０℃で６０〜９０分間撹拌しながら抽出する抽出段階と、
前記抽出段階で得られた抽出物を濾過し、濾過された昆布抽出物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造されたこと
を特徴とする請求項８に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法。
【請求項１３】
前記発酵菌株は、ラクトバチルスブレビス(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ)、サッカロミケスセレビシエ(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌株であり、前記発酵菌株を前記原料液全体体積に対して１〜５％(ｖ/ｖ)になるように接種すること
を特徴とする請求項８に記載のストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法 。
【請求項１４】
請求項１〜請求項７の中でいずれか一項の組成物を有効成分で含むこと
を特徴とする ストレス解消または睡眠障害改善用食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カキと海藻類の混合物を発酵させて多量の天然ＧＡＢＡを含むストレス解消または睡眠障害改善用組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近、食習慣の変化(高エネルギー、飽和脂肪、食塩)により肥満及び代謝症侯群の大人疾患の有病率が高くなっており、睡眠障害及びストレスが随伴されて各種疾病を直・間接的に誘発するなど国民保健上ストレスの解消及び睡眠増進が国家的次元でその重要性が台頭されている。最近の研究調査によれば、世界人口の１/４が不眠症を経験しており、その中で約１０％は、慢性不眠症を経験しているほどに睡眠障害による問題が拡がっている。
【０００３】
世界の睡眠関連市場規模は２００億ドルでね睡眠クリニック(ｓｌｅｅｐ ｃｌｉｎｉｃ)が急増しており、機能性マットレス、天然睡眠補助剤(ｈｅｒｂａｌ Ｓｌｅｅｐａｉｄｓ)などの睡眠関連製品の市場が拡がっている。現在、神経医薬品の中で睡眠薬の成長率が約２０％で一番高くて、最近には先進国だけではなく発展途上国でも市場が拡がっている。しかし、睡眠薬の場合、現在約７０％が長期服用者、５０％が６０歳以上の高齢層で消費されており、４週以上の長期服用は、依存性及び副作用の問題を有し、老人及び妊婦などは攝取が制限されることもある。したがって、睡眠薬長期服用者及び制限者の場合、これを代替できる手段で天然睡眠補助剤の必要性が高まっている。
【０００４】
また、現代人の生の質の改善に関する関心が急増することに従ってウェルビング(ｗｅｌｌ−ｂｅｉｎｇ)を越えてＬＯＨＡＳ(ｌｉｆｅｓｔｙｌｅｓ ｏｆ ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｉｔｙ)を追い求めることで健康機能食品に対する関心が増大しており、原料安全性などに対する憂慮を含んで安全な食べ物に対する関心が増大している。このような点で、海洋生物は食品の３次的な機能である栄養的特性、嗜好的特性及び生体調節特性を全て備えた食品原料で嗜好度と消費量が増加しており、生産量も増加している実情である。
【０００５】
したがって、天産物来由の新素材開発のために使われる昆布とカキは、安全性と経済性が確保された天然健康食品として広く食用されている立派な海洋生物資源である。昆布は、陸上植物に比べてビタミン及びミネラル、特に、マグネシウム、カルシウム、ヨード(４０００ｐｐｍ以上)及び鉄などの含量が高くて、代表的な精米成分である天然のアミノ酸(グルタミン酸及びアスパラギン酸)を多量で含んでおり、高機能性天然素材で脚光を浴びている水溶性食物纎維であるフコイダン(ｆｕｃｏｉｄａｎ)などのような生理活性が強い多糖類を豊かに含んでいるので、理想的な天然食品として認識されており、最近には機能性素材または健康食品の原料としてたくさん利用されている。最近、昆布の生理活性に関する国内外専門家の活発な研究実行の結果、昆布がダイエット効果、整腸作用による便秘治療、重金属及び放射能物質の体外排出作用などに深く関与することで立証された。そして、フコイダンで通称される硫黄含有多糖類の場合は、抗菌、抗酸化、抗ウイルス、坑癌活性を含めて動脈硬化、心筋梗塞、高血圧、狭心症、脳卒中などの成人病予防に効果的であると報告されたことがある。カキは、ＧＡＢＡの前駆物質であるグルタミン酸が多量で含み、抗酸化能、肝機能改善及び心血関系効能改善物質として報告されて来た天然アミノ酸であるタウリンも多量含むだけではなく、グリコーゲン、ビタミン、タンパク質及びタイロシンなど１８種以上のアミノ酸と鉄分、ヨードなど必須無機質が豊かで世界１０代水産物として広く利用されている。
【０００６】
発酵を通じて得られる主要成分であるＧＡＢＡは、非蛋白質性アミノ酸として、分子量が１０３.２ダルトン(ｄａｌｔｏｎ)だ。沸点が２０２℃で熱安全性があり、Ｃ４Ｈ９ＮＯ２の分子式を有し、水に対する溶解性が大きい。ＧＡＢＡは、Ｌ−グルタミン酸(Ｌ−Ｇｌｕｔａｍｉｃ ａｃｉｄ)がグルタミン酸デカルボキシラーゼ(ＧＡＤ：Ｇｌｕｔａｍｉｃ ａｃｉｄ ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ)の触媒作用により脱炭酸されて生成され、主要機能では、脳または脊椎に存在する神経伝達物質で血流を改善して脳の酸素供給を増加させて脳の代謝促進及び脳記憶を増進させる脳の営養剤で知られている。ＧＡＢＡは、グルタミン酸が神経を活性化させることとは異なり神経活性を抑制すると知られており、このような機能は、神経細胞の機能と情報処理に大きい影響を及ぼすようになる。特に、感覚脳において方向敏感性、角度敏感性反応などを決定し、精巧な運動機能も調律することで知られている。同時に脳の興奮を適切に制御して非正常的に過度な活性を制御することで知られており、脊椎と無脊椎動物内にはＧＡＢＡを伝達するニューロンが存在し、このニューロンにＧＡＢＡが充分に供給されると、癲癇発作が抑制されると報告されたことがある。ＧＡＢＡの脳血流促進効果と酸素供給増加効果は、脳細胞の代謝を促進させることで脳卒中の後遺症及び脳動脈硬化症などを改善する効果があるので医薬品で使われている。これと反対に、脳血液内にＧＡＢＡ及びＧＡＤ濃度が低いと、癲癇病、パーキンソン病、精神分裂症などの疾病の発病と非常に密接な関連があることで知られており、アルコール中毒者は、正常人に比べて相対的にＧＡＢＡ濃度が低いことで知られている。以外にも、ＧＡＢＡは成長ホルモンの分泌調節、痛症緩和、精神神経安定作用、血圧降下作用、ＡＣＥ活性阻害作用などがあるので生理学的に非常に有用な物質である。
【０００７】
しかし、一般的に食品などを通じて取られるタウリンとＧＡＢＡの量は、制限的なので薬理作用を発揮するための必要量を食品で取ることは容易ではない。このように人体に有用なタウリンとＧＡＢＡを充分に取ることは困難であり、これを克服するために機能成分を極大化した抽出法を通じて昆布とカキの前処理を行い、これら成分の中でグルタミン酸をＧＡＢＡに転換するが、その他機能成分(海藻オリゴ糖、海藻ミネラル、タウリン、ペプチッドなど)の損失のない発酵工程及び菌株を利用して、海洋生物特有の異味、異臭を除去することで嗜好性及び機能性を確保した組成物の製造方法に対する研究を通じた海洋生物の１次的消費行動を脱した高付加価値の素材の開発が必要になった。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明者らは、海洋生物の中で多量のタウリン及びＧＡＢＡを含有する組成物に関して研究するうち、自然攝取では量的制限を有するタウリンとＧＡＢＡを生理活性が期待される量まで高めて取るように、カキと昆布内に存在するグルタミン酸をＧＡＢＡに転換するとともにタウリンのような機能性物質には影響を与えない発酵菌株を利用して、カキと昆布の抽出混合液を発酵させる場合、ストレス抑制及び睡眠障害改善効果が優れることを確認して本発明を完成した。
【０００９】
したがって、本発明の目的は、カキと昆布の混合物を発酵させて多量の天然ＧＡＢＡを含有するストレス解消または睡眠障害改善用組成物、その製造方法及びそれを含む食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
前記目的を達成するために本発明は、カキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの物質と昆布抽出物の混合物を発酵させた発酵物を有効成分で含むストレス解消または睡眠障害改善用組成物及びその製造方法を提供する。
【００１１】
また、本発明は、前記組成物を有効成分で含むストレス解消または睡眠障害改善用食品を提供する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によるカキと昆布抽出物の混合物を発酵させて製造した組成物は、発酵前の組成物と比較してタウリンの損失がなくて、ＧＡＢＡを多量で含んでおり、優れたストレス抑制効果及び睡眠障害改善効果がある。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】カキ加水分解物と昆布抽出物の混合物を利用した組成物の製造過程を示した図である。
【図２】カキ抽出物と昆布抽出物の混合物を利用した組成物の製造過程を示した図である。
【図３】本発明の組成物の発酵過程で発酵の前後によるタウリン、ＧＡＢＡ、グルタミン酸(ｇｌｕｔａｍａｔｅ)の含量変化を示した図である。
【図４】本発明の一実施例による組成物と代表的な神経安定受容体のＧＡＢＡＡ(ｇａｍｍａ−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ ｔｙｐｅ Ａ)受容体の結合親和度の活性を比較した図である。
【図５】本発明の一実施例による組成物と代表的な神経安定受容体の５−ＨＴ２ｃ(５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ−２ｃ)受容体の結合親和度の活性を比較した図である。
【図６】本発明の組成物の睡眠剥奪動物モデルにおいて睡眠誘導時間及び維持時間との関係を示した図である。(Ａ)は、カキ抽出物発酵物、(Ｂ)は、昆布抽出物と緑茶抽出物混合液の発酵物、(Ｃ)は、昆布抽出物とカキ抽出物混合液の発酵物、(Ｄ)は、昆布抽出物発酵物を各々有効成分で含む組成物に対する睡眠誘導時間及び維持時間の関係を示したグラフである。各グラフの横軸は、対照群(ｃｏｎｔｒｏｌ)と各組成物を２００ｍｇ及び４００ｍｇで処理した処理区を意味し、各グラフの縦軸は、睡眠誘導時間(秒)及び睡眠維持時間(秒)を意味する。
【図７】本発明の組成物のカフェインによる行動剥奪動物モデルにおいて神経安定効能に対して示した図である。(Ａ)は、カキ抽出物の発酵物、(Ｂ)は、昆布抽出物及び緑茶抽出物混合液の発酵物、(Ｃ)は、昆布抽出物及びカキ抽出物混合液の発酵物、(Ｄ)は、昆布抽出物の発酵物を有効成分で含む組成物に対する神経安定効能に対して示したグラフである。各グラフの横軸は、陰性対照群(ｂｌａｎｋ)、対照群、そして各組成物を２００ｍｇ及び４００ｍｇで処理した処理区を意味し、各グラフの縦軸は、実験動物の移動距離を意味する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明は、カキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの物質と昆布抽出物の混合物を発酵させた発酵物を有効成分で含むストレス解消または睡眠障害改善用組成物を提供する。前記組成物は、食品組成物または医薬組成物である。前記食品組成物は、健康機能食品組成物である。
【００１５】
前記発酵物は、ラクトバチルス属(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ.)、サッカロミケス属(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓｐ.)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌属に属する菌株で発酵されたものである。好ましくは、ラクトバチルスブレビス(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ)、サッカロミケスセレビシエ(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌株で発酵されたものであり、より好ましくは、ラクトバチルスブレビスＢＪ２０(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ ＢＪ２０、ＫＣＴＣ１１３７７ＢＰ)、サッカロミケスセレビシＭＢＰ−２７(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＭＢＰ−２７)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌株で発酵されたものである。前記菌株を利用する場合、タウリン、海藻オリゴ糖、海藻ミネラルなどの生理活性物質の含量を減少させなくても原料液に含まれた天然グルタミン酸を高効率でＧＡＢＡに転換することができる。
【００１６】
前記発酵物は、発酵菌株を原料液全体重量の１〜５％(ｖ/ｗ)になるように接種して発酵させたものであってもよい。
【００１７】
前記発酵物は、ＧＡＢＡ(ｇａｍｍａ−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ)が４５００〜５０００ｐｐｍで含まれたものであってもよい。前記ＧＡＢＡは、カキ加水分解物、カキ抽出物及び昆布抽出物に含まれた成分が発酵菌株によりＧＡＢＡに転換された天然ＧＡＢＡであってもよい。
【００１８】
前記ストレスは、現代人が一般生活で受ける全てのストレスを含むが、好ましくは、ストレス関連受容体であるＧＡＢＡＡ(ｇａｍｍａ−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ ｔｙｐｅ Ａ)受容体と５−ＨＴ２ｃ(５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ−２ｃ)受容体が関与する機構により誘発されることを含む。
【００１９】
前記睡眠障害(ｓｌｅｅｐ ｄｉｓｔｕｒｂａｎｃｅ)は、睡眠の開始や睡眠維持の困難または元気が回復されない睡眠を訴える障害を意味することで、一次性不眠症(ｐｒｉｍａｒｙ ｉｎｓｏｍｎｉａ)、不眠症、睡眠関連呼吸障害、嗜眠症、下肢不安症侯群及び神経安定剤(ｂａｒｂｉｔｕｒａｔｅ)系痲酔剤であるペントバルビタール(ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ)で改善可能な睡眠障害などを含む。
【００２０】
前記睡眠関連呼吸障害は、中枢睡眠無呼吸症侯群または閉鎖睡眠無呼吸症侯群であり、前記嗜眠証は、週間過多嗜眠症を含む。
【００２１】
好ましくは、前記睡眠障害は、不眠症、睡眠中の異常な動き及び無呼吸症、週間過多嗜眠症を伴う睡眠障害及び神経安定剤(ｂａｒｂｉｔｕｒａｔｅ)系痲酔剤であるペントバルビタール(ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ)で改善可能な睡眠障害からなる群より選択された１種以上の睡眠障害である。
【００２２】
本発明によるカキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの物質と昆布の抽出物を混合して発酵させた発酵物を有効成分で含む組成物の場合、発酵前と比較してタウリン含量の損失がなくて、ＧＡＢＡの含有量が発酵前と比較して一層向上され、ストレス抑制効果及び睡眠障害改善効果が優れる。
【００２３】
本発明において、カキ加水分解物は、魚貝類加水分解物の製造のための通常の製造方法により製造されたものであり、好ましくは、酵素を利用した加水分解により製造されたものであってもよい。
【００２４】
より詳しくは、水洗、脱塩及び粉砕して前処理したカキを水と混合し、酵素を添加して反応させた後、前記反応が終了すれば、酵素を不活性化(失活)させた後に不用物を除去し、前記不用物が除去された加水分解物または前記加水分解物を濃縮するか乾燥したものを収得する方法で製造されたものである。
【００２５】
前記前処理したカキを水と混合する段階は、水と前記前処理したカキを１：０.１〜２.０の体積比で混合し、好ましくは、カキを１：０.８〜１.２体積比で混合する。
【００２６】
前記酵素は、食品原料の加水分解に通常的に使われるすべての酵素を含み、好ましくは、アルカラーゼ(ａｌｃａｌａｓｅ、２％)である。前記酵素を添加して反応させる加水分解段階は、酵素の種類によって適切に実行することができ、好ましくは、５０〜７０℃で６０〜１２０分間撹拌しながら加水分解する方法で実行することができる。
【００２７】
前記酵素を不活性化させる失活段階は、酵素の種類によって適切に選択された通常の方法で実行することができ、好ましくは、前記加水分解されたカキと水の混合物を９０〜１２０℃で６０〜１２０分間撹拌しながら失活させる方法で実行することができる。
【００２８】
前記不用物を除去する濾過段階は、食品の濾過において通常的に使われるすべての濾過方法を利用して実行することができる。一例で、４０〜２００メッシュ(１２７&#13211;〜６３５&#13211;)の篩を使用してカキの残渣を除去し、残ったカキ加水分解物を収得する方法で実行することができる。
【００２９】
本発明において、カキ抽出物は、カキを抽出溶媒で抽出するか抽出溶媒で抽出して製造した抽出物を濃縮して製造することができる。 
【００３０】
前記カキ抽出物は、通常の魚貝類抽出物の製造方法によって製造されたものである。より具体的には、不純物を除去した前記カキに抽出溶媒を添加し、抽出過程を実行する方法で製造される。前記抽出過程は、冷浸抽出法、温浸抽出法、加圧抽出法または超音波粉砕抽出法により行われる。
【００３１】
前記抽出溶媒は、水及び有機溶媒からなる群より選択された１種以上の物質であり、前記有機溶媒は、炭素数１〜５のアルコールであり、好ましくは、水である。
【００３２】
好ましくは、前記カキ抽出物は、水洗、脱塩及び粉砕して前処理したカキに水を抽出溶媒で添加して抽出する抽出段階と、抽出段階で得られた抽出物から残渣を除去し、前記残渣が除去されたカキ抽出物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造される。
【００３３】
前記抽出段階は、抽出溶媒の種類によって適切に選択された通常の方法で実行することができ、好ましくは、前処理したカキを水と１：１０〜２０の体積比で混合し、７０〜９０℃で６０〜９０分間撹拌する方法で実行することができる。
【００３４】
前記濾過段階は、食品の濾過において通常的に使われるすべての濾過方法を利用して実行することができる、一例で、４０〜２００メッシュ(１２７μｍ〜６３５μｍ)の篩を使用してカキの残渣を除去し、残ったカキ加水分解物を収得する方法で実行することができる。
【００３５】
前記カキ抽出物は、抽出過程を実行した以後、減圧濾過過程を実行するか追加で濃縮及び/または凍結乾燥を実行して濃縮するか溶媒を除去したものである。好ましくは、前記カキ抽出物を３０〜５０℃で減圧してブリックス(ｂｒｉｘ)濃度が２０〜４０％になるように濃縮する方法で製造したものである。
【００３６】
前記収得した抽出物、加水分解物または抽出物の濃縮物は、使用時まで急速冷凍冷蔵庫(ｄｅｅｐ ｆｒｅｅｚｅｒ)に保管することができる。
【００３７】
本発明において、昆布抽出物は、昆布を抽出溶媒で抽出するか抽出溶媒で抽出して製造した抽出物を濃縮して製造することができる。
【００３８】
前記昆布抽出物は、通常の海藻抽出物の製造方法によって製造することができ、より具体的には、不純物を除去した昆布に抽出溶媒を添加し、抽出過程を実行する方法で製造する。前記抽出過程は、冷浸抽出法、温浸抽出法、加圧抽出法または超音波粉砕抽出法で行われる。
【００３９】
前記抽出溶媒は、水及び有機溶媒からなる群より選択された１種以上の物質であり、前記有機溶媒は、炭素数１〜５のアルコールであり、好ましくは、５0％エタノールである。
【００４０】
好ましくは、前記昆布抽出物は、水洗及び脱塩して前処理した昆布にアルコールを抽出溶媒で添加して抽出する抽出段階と、前記抽出段階で得られた抽出物を濾過して濾過された昆布抽出物を収得する濾過段階と、を含む方法で製造することができる。
【００４１】
前記抽出段階は、抽出溶媒の種類によって適切に選択された通常の方法で実行することができ、好ましくは、前処理した昆布を５０％エタノールと１：１０〜２０の体積比で混合し、７０〜９０℃で６０〜１２０分間撹拌する方法で実行することができる。
【００４２】
前記濾過段階は、食品の濾過において通常的に使われるすべての濾過方法を利用して実行することができ、一例で、圧力濾過器(ｆｉｌｔｅｒ ｐｒｅｓｓ)を使用して昆布の残渣を除去し、残った昆布抽出物を収得する方法で実行することができる。
【００４３】
前記昆布抽出物は、抽出過程を実行した以後減、圧濾過過程を実行するか、追加で濃縮及び/または凍結乾燥を実行して濃縮するか、溶媒を除去したものである。好ましくは、前記昆布抽出物を３０〜５０℃の温度で減圧してブリックス(ｂｒｉｘ)濃度が２０％〜３０％になるように濃縮する方法で製造したものである。
【００４４】
前記発酵物を有効成分で含む組成物は、前記組成物１００重量部に対して前記発酵物を０.００１重量部〜１００重量部で含むことができる。
【００４５】
前記発酵物を有効成分で含む組成物は、その製造に通常的に使用する適切な担体、賦形剤及び希釈剤をさらに含むことができる。
【００４６】
前記組成物に含むことができる担体、賦形剤及び希釈剤では、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、澱粉、アカシアゴム、アルギン酸、ゼラチン、リン酸化カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、未晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、ステアリン酸マグネシウム及び鉱物油の中で１種が挙げられる。
【００４７】
前記組成物は、各々通常の方法によって散剤、顆粒剤、錠剤、懸濁剤、エマルジョン、シロップなどの経口用剤形物で調製される。
【００４８】
前記経口用剤形物は、経口投与のための固形製剤と液状製剤を含む意味であり、経口投与のための固形製剤には、錠剤 、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤などを含むことができ、このような固形製剤は、前記加水分解物に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム(ｃａｌｃｉｕｍｃａｒｂｏｎａｔｅ)、スクロース(ｓｕｃｒｏｓｅ)またはラクトース(ｌａｃｔｏｓｅ)、ゼラチンなどを交ぜて調剤することができる。また、単純な賦形剤以外に、ステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤を使用することもできる。経口投与のための液状製剤では、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などがあり、よく使われる単純希釈財である水、リキッドパラフィンの以外にさまざまな賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などを含むことができる。
【００４９】
また、本発明は、カキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの物質と昆布抽出物を１：０.１〜２.０の体積比で混合する前処理段階と、前記前処理された原料液が全体体積の１０〜３０％(ｖ/ｖ)になるように水を混合し、１００〜１４０℃で１０〜２０分間熱処理する滅菌段階と、前記滅菌された原料液を３０〜３７℃に冷却する冷却段階と、前記冷却された原料液に発酵菌株を接種し、２〜７日間発酵する発酵段階と、前記発酵された発酵物を１００〜１４０℃で１０〜２０分間処理する再滅菌段階と、前記再滅菌された発酵物を濾過し、濾過された発酵物を収得する濾過段階と、を含むストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法を提供する。
【００５０】
好ましくは、前記前処理段階は、カキ加水分解物、カキ抽出物及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つ物質と昆布抽出物を１：０.８〜１.２の体積比で混合して実行することができる。
【００５１】
前記原料液の含量が全体体積の１０〜３０％(ｖ/ｖ)の範囲を脱する場合、カキと昆布の塩分により最終的に製造される発酵物を含む組成物の味に影響を及ぼすことができるので、前記範囲を満足するように混合することが好ましい。
【００５２】
前記滅菌段階は、好ましくは、１１５〜１２５℃で１０〜２０分間実行することができる。
【００５３】
前記発酵段階で、発酵菌株は、ラクトバチルス属(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ.)、サッカロミケス属(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｓｐ.)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌属に属する菌株である。好ましくは、ラクトバチルスブレビス(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ)、サッカロミケスセレビシエ(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌株で発酵されたものであり、より好ましくは、ラクトバチルスブレビスＢＪ２０(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ ＢＪ２０、ＫＣＴＣ１１３７７ＢＰ)、サッカロミケスセレビシＭＢＰ−２７(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＭＢＰ−２７)及びこれらの組合せからなる群より選択されたいずれの一つの菌株で発酵されたものである。前記菌株を利用する場合、タウリン、海藻オリゴ糖、海藻ミネラルなどの生理活性物質の含量を減少させないとともに原料液に含まれた天然グルタミン酸を高効率でＧＡＢＡに転換することができる。
【００５４】
前記発酵段階は、前記発酵菌株の種類によって適切な含量を選択して接種することができ、好ましくは、原料液全体重量の１〜５％(ｖ/ｗ)になるように接種することができる。
【００５５】
前記再滅菌段階を通じて発酵物を再滅菌することで発酵期間のうち増殖した発酵微生物を死滅させて過発酵が発生しないようにすることができる。
【００５６】
前記濾過段階は、食品の濾過において通常的に使われるすべての濾過方法を利用して実行することができ、一例で、圧力濾過器(ｆｉｌｔｅｒ ｐｒｅｓｓ)を使用して発酵物の残渣を除去し、残った発酵物を収得する方法で実行することができる。
【００５７】
前記発酵物は、減圧濾過過程を実行するか、追加で濃縮及び/または凍結乾燥を実行して濃縮するか、溶媒を除去したものである。好ましくは、前記発酵物を減圧してブリックス(ｂｒｉｘ)濃度が２０〜３０％になるように濃縮する方法で製造する。
【００５８】
前記ストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法は、収得した発酵物または発酵物の濃縮物を噴霧乾燥または凍結乾燥の方法で乾燥した後、粉砕して粉末化する段階をさらに含むことができる。
【００５９】
前記ストレス解消または睡眠障害改善用組成物の製造方法は、収得した発酵物、発酵物の濃縮物または前記発酵物を含む組成物を含む段階をさらに含むことができる。
【００６０】
また、本発明は、前記組成物を有効成分で含むストレス解消または睡眠障害改善用食品を提供する。
【００６１】
前記食品は、栄養素を一つまたはその以上含んでいる天産物または加工品を意味し、好ましくは、ある程度の加工工程を経て直接食べることができる状態になったものを意味し、通常的な意味として食品、食品添加剤、健康機能食品及び飲料を全て含む意味である。
【００６２】
前記食品では、一例で、各種食品類、飲料、ガム、茶、ビタミン複合剤、機能性食品などがある。さらに、本発明の食品には、特殊栄養食品(例えば、調剤乳類、乳幼児食など)、食肉加工品、魚肉製品、豆腐類、ゼリー製品類、麺類(例えば、ラーメン類、うどん類など)、健康補助食品、調味食品(例えば、醤油、みそ、コチュジャン、混合醤類など)、ソース類、お菓子類(例えば、スナック類)、乳加工品(例えば、発酵乳、チーズなど)、その他加工食品、キムチ、漬物食品(各種キムチ類、漬物など)、飲料(例えば、果物、野菜類飲料、豆乳類、発酵飲料類など)、天然調味料(例えば、、ラーメンスープなど)を含むが、これに限定されるものではない。前記食品、飲料または食品添加剤は、通常の製造方法で製造することができる。
【００６３】
前記食品に含まれる本発明のストレス解消または睡眠障害改善用組成物は、全体食品１００重量部に対して０.０１重量部及び１００重量部で含まれる。
【００６４】
本発明において機能性食品とは、食品に物理的、生化学的、生物工学的手法などを利用して該当食品の機能を特定目的に作用、発現するように付加価置を付与した食品群や食品組成が有する生体防御リズム調節、疾病防止と回復などに関する体調節機能を生体に対して充分に発現するように設計して加工した食品を意味する。前記機能性食品には、食品学的に許容可能な食品補助添加剤を含むことができ、機能性食品の製造に通常的に使われる適切な担体、賦形剤及び希釈剤をさらに含むことができる。
【００６５】
本発明の飲料は、喉の渇きを解消するか味を楽しむために飲むものを総称する意味として、機能性飲料を含む。前記機能性飲料は、飲料に物理的、生化学的、生物工学的手法などを利用して該当飲料の機能を特定目的に作用、発現するように付加価置を付与した飲料群や飲料組成が有する生体防御リズム調節、疾病防止と回復などに関する体調節機能を生体に対して充分に発現するように設計して加工した飲料を意味する。
【００６６】
前記飲料は、通常の飲料のようにさまざまな香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含むことができる。前記天然炭水化物は、ブドウ糖、果糖のようなモノサッカライド、マルトース、シュクロースのようなジサッカライド、及びデキストリン、シクロデキストリンのようなポリサッカライド、キシリトール、ソルビトール、エリトリトールなどの糖アルコールである。甘味剤としては、タウマチン、ステビア抽出物のような天然甘味剤や、サッカリン、アスパルテームのような合成甘味剤などを使用することができる。前記天然炭水化物の割合は、本発明の組成物１００ｍｌ当たり一般的に約０.０１〜２０ｇ、好ましくは、約０.０２〜０.０３ｇである。
【００６７】
以下、本発明を実施例及び実験例により詳しく説明するが、下記実施例及び実験例は本発明を例示することで、本発明の内容が下記実施例及び実験例により限定されるものではない。
【００６８】
本発明による組成物の製造時、カキと昆布を水洗、脱塩、粉砕などの前処理過程を同一に実行するが、最終組成物のタウリンとＧＡＢＡ及びオリゴ糖を含めたミネラルの収率を最大に増大するために、カキは加水分解物及びカキ抽出物を使用し、昆布抽出物を使用した。
【００６９】
＜実施例１＞カキ加水分解物と昆布抽出物の混合物を利用した組成物の製造
本発明のカキ加水分解物と昆布抽出物を混合した組成物の製造過程に対して図１に示し、以下段階ごとに具体的に説明する。
【００７０】
＜実施例１−１＞ 昆布抽出物の製造
昆布を水洗及び脱塩を通じて抽出が容易に前処理し、前記前処理した昆布に１０〜２０倍数の５０％エタノール(酒精)を混合して、７０〜９０℃で６０〜１２０分間撹拌しながら昆布抽出物を製造した。前記抽出された昆布の抽出物で圧力濾過器(ｆｉｌｔｅｒ ｐｒｅｓｓ)を利用して残渣を除去し、残った昆布抽出物を収得した。前記収得した昆布抽出物を３０〜５０℃の温度で減圧してブリックス(ｂｒｉｘ)濃度が２５％になるように減圧濃縮して包装して保管した。
【００７１】
＜実施例 １−２＞ カキ加水分解物の製造
カキを水洗、脱塩、粉砕して酵素による加水分解が容易に前処理し、前記前処理したカキと水を１：１の重量比で混合して、５０〜７０℃で６０〜１２０分間撹拌しながら０.２％(ｖ/ｖ)の加水分解酵素であるアルカラーゼ(ａｌｃａｌａｓｅ)を添加して加水分解した。前記加水分解したカキ加水分解物を９０〜１２０℃で６０〜１２０分間撹拌しながら添加されたアルカラーゼ(ａｌｃａｌａｓｅ)の活性を除去し、４０〜２００メッシュ(１２７μｍ〜６３５μｍ)の振動篩を使用して不用されたカキの残渣を除去し、カキ加水分解物を収得した後、包装して保管した。
【００７２】
＜実施例１−３＞ 昆布抽出物及びカキ加水分解物の混合物を利用した組成物の製造
前記<実施例１−１>と＜実施例１−２＞で各々製造した昆布抽出物とカキ加水分解物を１：１の体積比で配合して前処理し、前記前処理した原料液を全体体積の約１０〜３０％(ｖ/ｖ)になるように水を混合した後、１２１℃で１５分間滅菌した。前記滅菌した主原料液を発酵の適正温度である約３０〜３７℃まで冷却した後、発酵菌株でラクトバチルスブレビスＢＪ−２０(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ ＢＪ−２０)またはサッカロミケスセレビシＭＢＰ−２７(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＭＢＰ−２７)を接種して発酵した。この時、発酵菌株は、全体体積の１〜５％(ｖ/ｖ)になるように接種し、発酵が充分に起きるように約２〜７日間発酵した。前記発酵された発酵物を１２１℃で１５〜２０分間高温加圧して発酵期間のうちに増殖した発酵微生物を死滅させるように再滅菌した。前記再滅菌された発酵物を圧力濾過器(ｆｉｌｔｅｒ ｐｒｅｓｓ)を使用して残渣を除去し、残った発酵物を収去した。前記収去された発酵物を噴霧乾燥または凍結乾燥などの方法で乾燥した後、粉砕して粉末化した。前記粉末化された組成物を容量に合わせて包装した。
【００７３】
＜実施例２＞ カキ抽出物と昆布抽出物の混合物を利用した組成物の製造
本発明のカキ抽出物と昆布抽出物を混合した組成物の製造過程に対して図２に示し、以下段階ごとに具体的に説明する。
【００７４】
＜実施例２−１＞ カキ抽出物の製造
カキを水洗、脱塩、粉砕して抽出が容易に前処理し、前記前処理したカキに１０〜２０倍数の水を混合して７０〜９０℃で６０〜９０分間撹拌して抽出した。前記抽出されたカキの残渣を４０〜２００メッシュ(１２７μｍ〜６３５μｍ)の振動篩を利用して除去し、残ったカキ抽出物を収得した。前記収得したカキ抽出物を３０〜５０℃の温度で減圧してブリックス(ｂｒｉｘ)濃度が２０〜４０％になるように減圧濃縮した後、包装して保管した。
【００７５】
＜実施例２−２＞ 昆布抽出物及びカキ抽出物の混合物を利用した組成物の製造
前記＜実施例１−１＞と＜実施例２−１>で各々製造した昆布抽出物とカキ抽出物を１：１の重量比で配合して前処理し、前記前処理した原料液を全体体積の約１０〜３０％(ｖ/ｖ)になるように水を混合した後、１２１℃で１５分間滅菌した。前記滅菌した主原料液を発酵の適正温度である約３０〜３７℃まで冷却した後、発酵菌株でラクトバチルスブレビスＢＪ−２０(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｒｅｖｉｓ ＢＪ−２０)またはサッカロミケスセレビシＭＢＰ−２７(Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＭＢＰ−２７)を接種して発酵した。この時、発酵菌株は、全体体積の１〜５％(ｖ/ｖ)になるように接種し、発酵が充分に起きるように約２〜７日間発酵した。前記発酵された発酵物を１２１℃で１５〜２０分間高温加圧して発酵期間のうちに増殖した発酵微生物を死滅させるように再滅菌した。前記再滅菌された発酵物を圧力濾過器(ｆｉｌｔｅｒ ｐｒｅｓｓ)を使用して残渣を除去し、残った発酵物を収去した。前記収去された発酵物を噴霧乾燥または凍結乾燥などの方法で乾燥した後、粉砕して粉末化した。前記粉末化された組成物を容量に合わせて包装した。
【００７６】
＜実験例１＞ 発酵による発酵物のタウリン及びＧＡＢＡの含量の変化
本実験では、海洋生物の発酵によるタウリン及びＧＡＢＡの含量の変化に対して調べるため、前記＜実施例１−３＞及び＜実施例２−２＞で製造した組成物に効果的な含量変化を観察するために発酵によりＧＡＢＡに転換される前駆物質であるグルタミン酸を追加で添加して、発酵の前と後のタウリン、グルタミン酸及びＧＡＢＡの含量をＨＰＬＣ(ｍｏｄｅｌ Ｕ１ｔｉＭａｔｅ ３０００ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍ)を利用して測定した。
【００７７】
前記＜実施例１−３＞及び＜実施例２−２＞で製造された発酵物を含む組成物でアミノ酸をＯＰＡ(Ｏ−ｐｈｔｈａｌｄｅａｌｄｅｈｙｄｅ)誘導体に置換するために自動サンプラーユーザプログラム反応プロトコル測定方法を利用し、注入プログラム(ｉｎｊｅｃｔ ｐｒｏｇｒａｍ)によってサンプルは、ＯＰＡ−３ＭＰＡ(Ｏ−ｐｈｔｈａｌｄｅａｌｄｅｈｙｄｅ−３−ｍｅｒｃａｐｔｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃ ａｃｉｄ)で誘導した。この時、ＨＰＬＣに使われた検出器とコラムは、各々紫外線吸光光度検出器(ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｏｒ)とＤｉｏｎｅｘ Ｂｏｎｄｅｄ Ｓｉｌｉｃａ Ｃ１８(４.６mm Ｉ.Ｄ×２５０mm、５μｍ、１２０Å)を使用して測定した。ＨＰＬＣを利用した分析条件は、下記表１に示し、結果は、図３に示した。
【００７８】
【表１】
2014047213.tif 000002
【００７９】
図３に示したように、カキ加水分解物と昆布抽出物の混合物及びカキ抽出物と昆布抽出物の混合物の発酵前に、タウリンは、各々２３４７.４５ｐｐｍ、２５８９.３８ｐｐｍであったが、発酵によりあまり変化がないことを確認することができ、グルタミン酸は、カキ加水分解物と昆布抽出物の混合物及びカキ抽出物と昆布抽出物の混合物の発酵前に、各々４５８２.１４ｐｐｍ、４７８６.６６ｐｐｍであったが、発酵後にはほとんどないことで確認された。また、カキ加水分解物と昆布抽出物の混合物及びカキ抽出物と昆布抽出物の混合物の発酵前にはなかったＧＡＢＡの含量が発酵後には各々４４５１.７６ｐｐｍ、４７２６.５５ｐｐｍで顕著に増加することを確認することができた。
【００８０】
前記結果から、グルタミン酸は、発酵菌株により全てＧＡＢＡに転換され、カキ加水分解物と昆布抽出物の混合物及びカキ抽出物と昆布抽出物の混合物は、発酵により多量のタウリンと天然ＧＡＢＡを含んでいることを確認した。
【００８１】
＜実験例２＞ 組成物のストレス抑制効能
前記＜実施例１−３＞で昆布抽出物とカキ加水分解物の混合物を発酵させて製造した組成物のストレス抑制能を調べるため、ストレス関連受容体のＧＡＢＡ Ａ(ｇａｍｍａ−ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ ｔｙｐｅ Ａ)受容体と５−ＨＴ２ｃ(５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ−２ｃ)受容体を利用した。具体的には、８週された雄性ＳＤ−ラットの脳内皮質膜のＧＡＢＡＡ受容体を利用して放射性同位元素が結合されている[３Ｈ]−フルマゼニル(ＲＯ １５−１７８８)と抽出発酵物間競合結合測定法(ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｓｓａｙ)で測定した。効果的な測定のために、カキ加水分解物の発酵物、昆布抽出物と緑茶抽出物の混合物の発酵物、及び昆布抽出物の発酵物を対照区として、その結果を図４に示した。
【００８２】
図４に示したように、ＧＡＢＡ Ａ受容体の結合親和度の場合、濃度によって増加した。特に、１０ｍｇ/ｍＬの場合には２０％の抑制効果を示した。このような結果から、ＳＤ−ラットに対してカキ加水分解物及び昆布抽出物を混合した混合物の発酵物とカキ抽出物及び昆布抽出物を混合した混合物の発酵物がストレス抑制効果があることを確認した。
【００８３】
また、ヒトのセロトニン５−ＨＴ２Ｃ受容体(ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ ５−ＨＴ２Ｃｒｅｃｅｐｔｏｒ)を利用して放射性同位元素が結合されている[３Ｈ]-メスレルギン(Ｍｅｓｕｌｅｒｇｉｎｅ)と抽出発酵物間競合結合測定法(ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｓｓａｙ)で測定した。効果的な測定のために、カキ加水分解物の発酵物、昆布抽出物及び緑茶抽出物の混合物の発酵物、そして昆布抽出物の発酵物を対照区として、その結果を図５に示した。
【００８４】
図５に示したように、対照区を含んだすべての試料で５−ＨＴ２Ｃ受容体の結合親和度の場合は濃度によって増加した。特に、カキ発酵物を含んだ１０ｍｇ/ｍＬの処理区の場合、約４０％の抑制効果を示した。このような結果から、カキ加水分解物と抽出物の濃縮物を含む発酵物はストレス抑制効果があることを確認した。
【００８５】
＜実験例３＞ 組成物の睡眠障害改善効能
前記＜実施例１−３＞及び＜実施例２−２＞で製造された組成物の睡眠障害改善能を調べるため、睡眠関連動物モデルとして、８週齢の雄を利用してペントバルビタール(ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ)を利用して催眠実験を実行した。
【００８６】
具体的には、前記＜実施例１−３＞及び＜実施例２−２>で製造された発酵物を含んだ組成物を、ＩＣＲマウスに各々２００mgと４００mgを経口投与した後、３０分間安定化させて、神経安定剤(ｂａｒｂｉｔｕｒａｔｅ)系痲酔剤であるペントバルビタール(ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ)４０ｍｇ/ｋｇを投与して、睡眠に至る時間と睡眠を維持する時間を測定及び分析した。この時、対照群としてカキ加水分解物の発酵物、昆布抽出物と緑茶抽出物の混合物の発酵物、及び昆布抽出物の発酵物を前記組成物と同一な方式で経口投与し、食塩水(ｓａｌｉｎｅ)を投与した後、ペントバルビタール(ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ)により眠りについた基準値(ｂａｓｅｌｉｎｅ)の睡眠潜時(ｓｌｅｅｐｌａｔｅｎｃｙ)測定値として、その結果を図６に示した。
【００８７】
図６に示したように、対照群の場合、睡眠開始時間及び維持時間が、各々４１３.５±１８.５秒及び２８５４.１±１２.４秒であったが、単独でペントバルビタール(ｐｅｎｔｏｂａｒｂｉｔａｌ)を処理した群に比べて本発明の組成物４００mgを経口投与した場合、睡眠開始時間が有意に減少した。また、睡眠維持時間は増加することが分かる。このような結果から、組成物の場合、睡眠開始時間を縮めさせて熟眠を取るに役に立つことを確認した。
【００８８】
また、睡眠を妨害する化学的刺激を通じた運動活性変化誘導に対して調べるために、カフェインによ誘導された運動活性変化(Ｃａｆｆｅｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ)実験を実施した。具体的には、８週齢雄ＳＤ−ラットに組成物を経口投与し、３０分間安定化させた後にカフェイン(１０ｍｇ/ｋｇ)を投与し、ＳＭＡＲＴ−ｐｒｏｇｒａｍを通じたビデオトラッキング(ｖｉｄｅｏ ｔｒａｃｋｉｎｇ)方法を通じて歩行性を測定した。この時、対照群としてカキ加水分解物の発酵物、昆布抽出物と緑茶抽出物の混合物の発酵物及び昆布抽出物の発酵物を、前記本発明の組成物と同一な方式で経口投与して測定して、その結果を図７に示した。
【００８９】
図７に示したように、カフェインを注入したＳＤ−ラットが正常ＳＤ−ラットに比べて全体運動活性が増加した。また、カフェインに誘発された歩行性変化を観察した結果、カフェインのみ注入したＳＤ−ラットの場合、何も処理しなかった正常ＳＤ−ラットに比べて歩行距離が増加したが、本発明の組成物２００ｍｇと４００ｍｇを添加した時、カフェインのみを注入したＳＤ−ラットより顕著に移動距離が減少することが分かる。このような結果から、本発明の組成物は、歩行性を顕著に減少させる、すなわち、睡眠障害を改善する効果があることを確認した。
【００９０】
下記に本発明の健康機能食品を製造するための製造例を例示する。
【００９１】
＜製造例１＞ 食品の製造
製造例１−１：小麦粉食品の製造
本発明の発酵物を含む組成物を全体小麦粉１００重量部に対して０.５〜５.０重量部を小麦粉に添加して、この混合物を利用してパン、ケーキ、クッキー、クラッカー及び麺類を製造した。
【００９２】
製造例１−２：スープ及び肉汁(ｇｒａｖｉｅｓ)の製造
本発明の発酵物を含む組成物を全体スープ及び肉汁１００重量部に対して０.１〜５.０重量部をスープ及び肉汁に添加して健康増進用肉加工製品、麺類のスープ及び肉汁を製造した。
【００９３】
製造例１−３：グラウンドビーフ(ｇｒｏｕｎｄ ｂｅｅｆ)の製造
本発明の発酵物を含む組成物を全体グラウンドビーフ１００重量部に対して１０重量部をグラウンドビーフに添加して健康増進用グラウンドビーフを製造した。
【００９４】
製造例１−４：乳製品(ｄａｉｒｙｐｒｏｄｕｃｔｓ)の製造
本発明の発酵物を含む組成物を全体牛乳１００重量部に対して５〜１０重量部を牛乳に添加して、前記牛乳を利用してバター及びアイスクリームのような多様な乳製品を製造した。
【００９５】
製造例１−５：禅食の製造
玄米、麦、もち米、鳩麦を公知の方法でアルファ化させて乾燥させたものを焙煎した後、粉砕機で粒度６０メッシュの粉末で製造した。黒豆、黒ごま、エゴマも公知の方法で蒸して乾燥させたものを焙煎した後、粉砕機で粒度６０メッシュの粉末で製造した。本発明の組成物を真空濃縮機で減圧濃縮して、噴霧、熱風乾燥器で乾燥して得た建造物を粉砕機で粒度６０メッシュで粉砕して乾燥粉末を得た。前記製造した穀物類、種実類及び組成物を次の割合で配合して製造した。全体禅食１００重量部に対して、穀物類(玄米３０重量部、鳩麦１５重量部、麦２０重量部)、種実類(エゴマ７重量部、黒豆８重量部、黒ごま７重量部)、ＥＣＤＫ(３重量部)、霊芝(０.５重量部)、地黄(０.５重量部)及び本発明の組成物乾燥粉末１９重量部を含んで禅食を製造した。
【００９６】
＜製造例２＞ 飲料の製造
製造例２−１：健康飲料の製造
液状過糖(０.５重量％)、オリゴ糖(２重量％)、砂糖(２重量％)、食塩(０.５重量％)、水(７５重量％)のような副材料と本発明の発酵物を含む組成物５ｇを均質に配合して瞬間殺菌した後、これをガラスボトル、ペットボトルなど小包装容器に包装して製造した。
【００９７】
製造例２−２：野菜ジュースの製造
本発明の発酵物を含む組成物５ｇをトマトまたはニンジンジュース１,０００ｍｌに添加して野菜ジュースを製造した。
【００９８】
製造例２−３：果物ジュースの製造
本発明の発酵物を含む組成物１ｇをりんごまたはブドウジュース１,０００ｍｌに添加して果物ジュースを製造した。
【図１】
2014047213.tif 000003
【図２】
2014047213.tif 000004
【図３】
2014047213.tif 000005
【図４】
2014047213.tif 000006
【図５】
2014047213.tif 000007
【図６】
2014047213.tif 000008
【図７】
2014047213.tif 000009