(57)【要約】      （修正有）【課題】光学式デジタイザー用塗料として、均一な薄層塗布がしやすく、光の透過や、ハレーションが起こらず、かつ剥離しやすい塗膜を形成する塗料あるいはその素材としての酸化チタン分散液、及びその製造方法を提供する。【解決手段】酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と高分子添加剤（ｄ）を含む水分散液。高分子添加剤（ｄ）が、シリコン系化合物、ポリエーテル変性したシリコン系化合物、ポリエステル変性したシリコン系化合物、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも1種である水分散液。酸化チタン（ａ）が平均粒径が１μｍ以下好ましくは、５００ｎｍ以下である。塩基性化合物（ｂ）はアルキルアミン類、アルキレンアミン類及びアルカノールアミン類からなる群より選ばれた少くも１種である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と高分子添加剤（ｄ）を含む水分散液。
【請求項２】
高分子添加剤（ｄ）が、シリコン系化合物、ポリエーテル変性したシリコン系化合物、ポリエステル変性したシリコン系化合物、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも1種である請求項１に記載の水分散液。
【請求項３】
高分子添加剤（ｄ）が、ポリエーテル変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテル変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリエステル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１種である請求項１又は２に記載の水分散液。
【請求項４】
酸化チタン（ａ）の平均粒子径ｄ５０が１μｍ以下である請求項１〜３いずれかに記載の水分散液。
【請求項５】
酸化チタン（ａ）の平均粒子径ｄ５０が５００nm以下である請求項１〜４いずれかに記載の水分散液。
【請求項６】
塩基性化合物（ｂ）が、アルキルアミン類、アルカノールアミン類、及びアルキレンアミン類からなる群より選ばれる少なくとも１種である請求項１〜５いずれかに記載の水分散液。
【請求項７】
塩基性化合物（ｂ）が、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、モノプロパノールアミン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパール、ジプロパノールアミン、及びトリプロパノールアミンからなる群より選ばれる少なくとも１種である請求項１〜６いずれかに記載の水分散液。
【請求項８】
酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、高分子添加剤（ｄ）とを混合する工程を含む、酸化チタンの水分散液の製造方法。
【請求項９】
酸化チタン（ａ）と、β-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、高分子添加剤（ｄ）とを塩基性化合物（ｂ）を用いてアルカリ性に調整した溶液中で混合する工程と、混合した溶液に中和剤（ｅ）を添加して中和する工程とを含む、酸化チタンの水分散液の製造方法。
【請求項１０】
高分子添加剤（ｄ）が、シリコン系化合物、ポリエーテル変性したシリコン系化合物、ポリエステル変性したシリコン系化合物、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも1種である請求項８又は９に記載の水分散液の製造方法。
【請求項１１】
高分子添加剤（ｄ）が、ポリエーテル変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテル変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリエステル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１種である請求項８〜１０いずれかに記載に記載の水分散液の製造方法。
【請求項１２】
塩基性化合物（ｂ）が、アルキルアミン類、アルカノールアミン類、及びアルキレンアミン類からなる群より選ばれる少なくとも１種である請求項８〜１１いずれかに記載の水分散液の製造方法。
【請求項１３】
塩基性化合物（ｂ）が、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、モノプロパノールアミン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパール、ジプロパノールアミン、及びトリプロパノールアミンからなる群より選ばれる少なくとも１種である請求項８〜１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酸化チタン（ａ）と、塩基性物質（ｂ）と、β-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と高分子添加剤（ｄ）を含む分散液、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
物体（測定物）に接触することなく測定物の寸法や、形状計測する方法として三次元形状測定方法が利用されている（特許文献１参照）。
【０００３】
このような原理を利用して、測定物に接触することなく画像、形状の三次元データ化や表面寸法を測定する光学式の三次元スキャナなどのデジタイザーが市販されているが、測定物が透明なものや、色がついている場合には光の反射が弱く、また光沢のあるものはハレーションを起こし、そのままでは三次元スキャナによる画像の取り込みが難しい。
そのため、一般には白色スプレー塗料や、艶消しスプレーや欠陥検出用の深傷スプレー等を測定物に塗布することが必要である。しかし、白色スプレー塗料の濃度や粒子径の大きさによって塗膜面が不均一になることや、測定物の微細部分が正確にデータ化できない等の欠点がある。
また、光沢面に対し表面結露を生じさせることにより測定物の光沢を一時的に除去し、光学的に計測する方法もあるが装置や設備が大がかりとなり経済的に現実的でない（特許文献２、３参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００２−２６７４３０号公報
【特許文献２】特開２００５−２４９４８７号公報
【特許文献３】特開平８−２７１２３９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、光学式デジタイザーによって正確に画像が取り込めるように測定物に対して均一な薄層塗布がしやすく、光の透過やハレーションが起こらず、且つ剥離しやすい塗膜を形成する塗料を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、研究を重ね、酸化チタン（ａ）と、塩基性物質（ｂ）と、β-１,３-１,６グルカンの中でも、主鎖のβ-１,３結合に対する側鎖のβ-１,６結合の比率(分岐度)が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と、高分子添加剤（ｄ）を混合することによって水中で安定した分散性を有する分散液が得られ、光学式デジタイザー用塗料として用いた場合には、上記の課題を解決できることを見出した。
更に、その製造方法として、酸化チタン（ａ）と、塩基性物質（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と、高分子添加剤（ｄ）を混合する工程を含む、酸化チタンの水分散液の製造方法、また、酸化チタン（ａ）と、β-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と高分子添加剤（ｄ）とを塩基性物質（ｂ）を用いてアルカリ性に調整した溶液中で混合し、中和剤（ｅ）を用いて中和する工程とを含む、酸化チタンの水分散液の製造方法によって得られる酸化チタン化合物の水分散液が、分散性に著しく優れることを見出した。
本発明は、上記知見に基づき完成されたものであり、以下の酸化チタンの水分散液、及びその製造方法を提供する。
【０００７】
項１．酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と高分子添加剤（ｄ）を含む水分散液。
項２．高分子添加剤（ｄ）が、シリコン系化合物、ポリエーテル変性したシリコン系化合物、ポリエステル変性したシリコン系化合物、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも1種である項１に記載の水分散液。
項３．高分子添加剤（ｄ）が、ポリエーテル変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテル変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリエステル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１種である項１又は２に記載の水分散液。
項４．酸化チタン（ａ）の平均粒子径ｄ５０が１μｍ以下である項１〜３いずれかに記載の水分散液。
項５．酸化チタン（ａ）の平均粒子径ｄ５０が５００nm以下である項１〜４いずれかに記載の水分散液。
項６．塩基性化合物（ｂ）が、アルキルアミン類、アルカノールアミン類、及びアルキレンアミン類からなる群より選ばれる少なくとも１種である項１〜５いずれかに記載の水分散液。
項７．塩基性化合物（ｂ）が、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、モノプロパノールアミン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパール、ジプロパノールアミン、及びトリプロパノールアミンからなる群より選ばれる少なくとも１種である項１〜６いずれかに記載の水分散液。
項８．酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、高分子添加剤（ｄ）とを混合する工程を含む、酸化チタンの水分散液の製造方法。
項９．酸化チタン（ａ）と、β-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、高分子添加剤（ｄ）とを塩基性化合物（ｂ）を用いてアルカリ性に調整した溶液中で混合する工程と、混合した溶液に中和剤（ｅ）を添加して中和する工程とを含む、酸化チタンの水分散液の製造方法。
項１０．高分子添加剤（ｄ）が、シリコン系化合物、ポリエーテル変性したシリコン系化合物、ポリエステル変性したシリコン系化合物、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも1種である項８又は９に記載の水分散液の製造方法。
項１１．高分子添加剤（ｄ）が、ポリエーテル変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテル変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリエステル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテルからなる群より選ばれる少なくとも１種である項８〜１０いずれかに記載に記載の水分散液の製造方法。
項１２．塩基性化合物（ｂ）が、アルキルアミン類、アルカノールアミン類、及びアルキレンアミン類からなる群より選ばれる少なくとも１種である項８〜１１いずれかに記載の水分散液の製造方法。
項１３．塩基性化合物（ｂ）が、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、モノプロパノールアミン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパール、ジプロパノールアミン、及びトリプロパノールアミンからなる群より選ばれる少なくとも１種である項８〜１２に記載の方法。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の分散液は、測定物の形状や大きさ、材質に関わらず、測定物に対して均一な薄層塗布がしやすく、また光の透過やハレーションの防止効果が高いため、光学式デジタイザーによって測定物の画像を正確に取り込めるようになる。また、薄膜塗布したものは、剥離しやすいものであり、布等でのふき取りあるいは水洗浄で簡単に除去できるため測定物を再度活用することができため経済的であり、このような塗料として有用である。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】実験例で得たオーレオバシジウム・プルランス由来のグルカンの１Ｈ  ＮＭＲスペクトルである。
【図２】実験例で得たオーレオバシジウム・プルランス由来のグルカンの超音波照射したときの培養液の粒度分布を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１１】
（１）酸化チタン分散液
本発明の水分散液は、酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とさらにβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）と高分子添加剤（ｄ）を含む水分散液である。
【００１２】
（１−１）酸化チタン（ａ）
本発明において、使用される酸化チタンはルチル型、アナタース型等の結晶構造について限定されることなく、白色顔料として塗料、インク用等の工業用に用いられる粉末状のものから、化粧品用とされる微粒子状のものまで使用することができる。
酸化チタンの分散液中での平均粒子径（一次粒子または二次粒子）がｄ５０で1μｍ以下であることが好ましく、５００ｎｍ以下であることがより好ましく、２００ｎｍ以下であることが特に好ましい。この範囲の酸化チタンであれば、水中で十分な分散性を有する分散液が得られ、塗料としたときに、均一な薄層塗布ができる。尚、ｄ５０とは、メジアン径として知られ、粉体をある粒子径から２つに分けたとき、大きい側と小さい側が等量となる径のことであり、５０％平均粒径とも言われる。測定方法は、一般的にマイクロトラック法（レーザー回折・散乱法など）によって測定することができる。
酸化チタンは、他の化合物で被覆（修飾）したものであってよく、特にシリカコート、又はアルミナコートされたものが好ましい。
【００１３】
本発明の水分散液に用いる酸化チタンの添加量は、水分散液中での最終濃度として、０．１〜６０重量％であればよく、１〜５０重量％が好ましく、５〜４０重量％がより好ましい。上記範囲であれば、安定した水分散液が得られる。
【００１４】
（１−２）塩基性化合物（ｂ）
本発明に用いる塩基性化合物（ｂ）としてはアミン類が好ましく、例えば、アルキルアミン類、アルカノールアミン類、アルキレンアミン類などを例示することができ、具体的には、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、ブチルアミン、ペンチルアミン、ヘキシルアミン、ヘプチルアミン、オクチルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン、ジプロピルアミン、ジブチルアミン、ジペンチルアミン、ジヘキシルアミン、ジヘプチルアミン、ジオクチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、トリペンチルアミン、トリヘキシルアミン、トリヘプチルアミン、トリオクチルアミンなどのアルキルアミン類；モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ−メチルエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、Ｎ−メチルジエタノールアミン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、アミノエチルエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノエチルエタノールアミン、アミノエトキシエタノール、及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノエトキシエタノール、プロパノールアミン、イソプロパノールアミン、ジプロパノールアミン、ジ−ｉｓｏ−プロパノールアミン、ジ−n−プロパノールアミン、ジ−n− ブタノールアミン、ジイソブタノールアミン、ジ−n−ペンタノールアミン、ジ−n−ヘキサノールアミン、トリプロパノールアミン、テトラエタノールエチレンジアミン、テトラ−ｉｓｏ−プロパノールエチレンジアミンシクロヘキシルアミン、ジブチルエタノールアミン、ジブチル−ｉｓｏ−プロパノールアミンなどのアルカノールアミン類；エチレンジアミン、トリメチレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラミン、テトラエチレンペンタミン、ペンタエチレンヘキサミンなどのアルキレンアミン類を例示することができる。中でも作業環境の点で、アルカノールアミン類が好ましく、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、モノプロパノールアミン、２−アミノ−２−メチル−１−プロパノール、ジプロパノールアミン、トリプロパノールアミンがより好ましい。
【００１５】
水分散液中における酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）の比率は、（塩基性化合物：酸化チタン）は重量比で、１：０.１〜１００００程度の範囲が好ましく、１：１〜１０００程度の範囲がより好ましく、１：１０〜５００程度の範囲がさらに好ましい。上記範囲であれば、水中で十分な分散性を有する分散液が得られる。
【００１６】
本発明における塩基性化合物（ｂ）の使用量は、使用する酸化チタンの種類又は使用量にもよるが、水分散液とした際の最終濃度として０.００１〜３０重量％であればよく、０.０１〜１５重量％が好ましく、０.０５〜３重量％がより好ましい。上記範囲であれば、安定した水分散液が得られる。
【００１７】
（１−３）β-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）
本発明におけるβ-１,３-１,６グルカンはβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であれば特に限定することなく使用することができる。β-１,６結合の分岐度は６０〜１００％であることが好ましく、７０〜１００％であることがより好ましい。
【００１８】
(ｉ)オーレオバシジウム属微生物が生産するβ-１,３-１,６グルカン
上記の分岐度を有するβ-１,３-１,６グルカンは、オーレオバシジウム属(Aureobasidium  sp.)に属する微生物から得ることができる。
オーレオバシジウム属(Aureobasidium  sp.)に属する微生物由来のβ-１,３-１,６グルカンは、１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液を溶媒とする溶液の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルが約４．７ｐｐｍ及び約４．５ｐｐｍの２つのシグナルを有する。ＮＭＲの測定値は条件の微妙な変化によって変化し、また誤差を伴うことは周知のことであることから、「約４．７ｐｐｍ」「約４．５ｐｐｍ」は、通常予測される範囲の測定値の変動幅（例えば±０．２）を含む数値を意味する。
上記の分岐度を有するβ-１,３-１,６グルカンは、水溶液の３０℃、ｐＨ５．０、濃度０．５（ｗ／ｖ％）における粘度が、好ましくは２００ｃＰ（ｍＰａ・s）以下、より好ましくは１００ｃＰ（ｍＰａ・s）以下、さらに好ましくは５０ｃＰ（ｍＰａ・s）以下のものである。上記粘度の下限値は通常１０ｃＰ（ｍＰａ・s）程度であり得る。
本発明において、粘度は、ＢＭ型回転粘度計を用いて測定した値である。
オーレオバシジウム属の微生物が産生するβ-１,３-１,６グルカンは、菌体外に分泌されるため、キノコ類やパン酵母の細胞壁に含まれるβ-グルカンと比べて、回収が容易であり、また水溶性である点で好ましいものである。オーレオバシジウム属の微生物は、分子量が１００万以上の高分子量のグルカンから分子量が数万程度の低分子のグルカンまでを培養条件に応じて産生することができる。
【００１９】
中でも、オーレオバシジウム・プルランス(Aureobasidium  pullulans)が生産するものが好ましく、オーレオバシジウム・プルランスＧＭ-ＮＨ-１Ａ１株、又はＧＭ-ＮＨ-１Ａ２株（独立行政法人産業技術研究所特許生物寄託センターにそれぞれＦＥＲＭ  Ｐ-１９２８５及びＦＥＲＭ  Ｐ-１９２８６として寄託済み）が産生するものが好ましい。ＧＭ-ＮＨ-１Ａ１株及びＧＭ-ＮＨ-１Ａ２株は、オーレオバシジウム属（Aureobasidium  sp.）Ｋ-１株の変異株である。オーレオバシジウム属Ｋ-１株は、分子量２００万以上と１００万程度の２種類のβ-１,３-１,６グルカンを産生することが知られている。
また、オーレオバシジウム属微生物が産生するβ-１,３-１,６グルカンは、通常、硫黄含有基を有するところ、Ｋ-１株の産生するβ−グルカンはスルホ酢酸基を有することが知られている（Arg.Biol.Chem.,47,1167-1172(1983)）,科学と工業,64,131-135（1990））。ＧＭ-ＮＨ-１Ａ１株、及びＧＭ-ＮＨ-１Ａ２株が生産するβ-１,３-１,６グルカンもスルホ酢酸基を有すると考えられる。オーレオバシジウム属微生物の中には、リン酸基のようなリン含有基、リンゴ酸基などを含むβ-１,３-１,６グルカンを産生する菌種、菌株も存在する。
ＧＭ-ＮＨ-１Ａ１株及びＧＭ-ＮＨ-１Ａ２株は、後に実施例において示すようにメインピークが見かけ上５０〜２５０万の高分子量のβ-グルカン（微粒子グルカン）とメインピークが見かけ上２〜３０万の低分子量のβ-グルカンの両方を産生する菌株である。この微粒子状グルカンは、一次粒子径が０．０５〜２μｍ程度である。
【００２０】
β-１,３-１,６グルカンの溶解度は、ｐＨ及び温度に依存する。このβ-１,３-１,６グルカンは、ｐＨ３．５、温度２５℃の条件で２ｍｇ／ｍｌ水溶液を調製しようとすると、その５０重量％以上が一次粒子径０．０５〜２μｍの微粒子を形成し、残部は水に溶解する。本発明において粒子径は、レーザー回折散乱法により測定した値である。
β-１,３-１,６グルカンは、水溶液にしたときの粘度が、オーレオバシジウム属微生物が産生する天然型β-１,３-１,６グルカンより低いものが好ましい。この低粘度β-１,３-１,６グルカンは、水溶液の３０℃、ｐＨ５．０、濃度０．５（ｗ／ｖ％）における粘度が、通常２００ｃＰ（ｍＰａ・s）以下であり、より好ましくは１００ｃＰ（ｍＰａ・s）以下であり、さらに好ましくは５０ｃＰ（ｍＰａ・s）以下であり、よりさらに好ましくは１０ｃＰ以下である。
【００２１】
この低粘度グルカンは、オーレオバシジウム属微生物が産生する天然型β-１,３-１,６グルカンと同様の一次構造を有し得る。具体的には、１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液を溶媒とする溶液の１ＨＮＭＲスペクトルが約４．７ｐｐｍ及び約４．５ｐｐｍの２つのシグナルを有するものである。ＮＭＲの測定値は条件の微妙な変化によって変化し、また誤差を伴うことは周知のことであることから、「約４．７ｐｐｍ」「約４．５ｐｐｍ」は、通常予測される範囲の測定値の変動幅（例えば±０．２）を含む数値を意味する。
β-１,３-１,６グルカンは、金属イオン濃度が、β-１,３-１,６グルカンの固形分１ｇ当たり０．４ｇ以下であることが好ましく、０．２ｇ以下であることがより好ましく、０．１ｇ以下であることがさらにより好ましい。原料β-１,３-１,６グルカンが水溶液状態のものである場合は、金属イオン濃度は、水溶液の１００ｍｌ当たり１２０ｍｇ以下であることが好ましく、５０ｍｇ以下であることがより好ましく、２０ｍｇ以下であることがさらにより好ましい。
ここでいう金属イオンには、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、第３〜第５族金属イオン、遷移金属イオンなどが含まれるが、混入する可能性のある金属イオンとしては、代表的には、低粘度β-１,３-１,６グルカンの製造において使用されるアルカリ由来のカリウムイオン、ナトリウムイオンなどが挙げられる。金属イオン濃度は、限外ろ過や透析により調整できる。
金属イオン濃度が上記範囲であれば、水溶液状態で保存する場合や、水溶液状態で加熱滅菌する際に、β-１,３-１,６グルカンのゲル化、凝集、沈殿が生じ難い。また、固形で使用する場合は、再溶解させる場合に凝集などが生じ難い。
【００２２】
(ｉｉ)オーレオバシジウム属微生物によるβ-１,３-１,６グルカンの生産方法
分岐度５０〜１００％のβ-１,３-１,６グルカンは、例えば、これを産生する微生物の培養上清に有機溶媒を添加することにより沈殿物として得ることができる。
また、オーレオバシジウム属の微生物を培養して、β-１,３-１,６グルカンを産生させる方法は種々報告されている。培養培地に使用できる炭素源としては、シュークロース、グルコース、フラクトースなどの炭水化物、ペプトンや酵母エキスなどの有機栄養源などを挙げることができる。窒素源としては、硫酸アンモニウムや硝酸ナトリウム、硝酸カリウムなどの無機窒素源などを挙げることができる。場合によってはβ-グルカンの産生量を上昇させるために適宜、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸塩、マグネシウム塩、カルシウム塩などの無機塩、更には鉄、銅、マンガンなどの微量金属塩やビタミン類などを添加するのも有効な方法である。
オーレオバシジウム属微生物を、炭素源としてシュークロースを含むツアペック培地にアスコルビン酸を添加した培地で培養した場合、高濃度のβ-１,３-１,６グルカンを産生することが報告されている（Arg.Biol.Chem.,47,1167-1172(1983)）；科学と工業,64,131-135（1990）；特開平７−５１０８２号公報）。しかし、培地は、微生物が生育し、β-１,３-１,６グルカンを生産するものなら特に限定されない。必要に応じて酵母エキスやペプトンなどの有機栄養源を添加してもよい。
【００２３】
オーレオバシジウム属の微生物を上記培地で好気培養するための条件としては、１０〜４５℃程度、好ましくは２０〜３５℃程度の温度条件、３〜７程度、好ましくは３．５〜５程度のｐＨ条件などが挙げられる。
効果的に培養ｐＨを制御するためにアルカリ、あるいは酸で培養液のｐＨを制御することも可能である。更に培養液の消泡のために適宜、消泡剤を添加してもよい。培養時間は通常１〜１０日間程度、好ましくは１〜４日間程度であり、これによりβ−グルカンを産生することが可能である。なお、β-グルカンの産生量を測定しながら培養時間を決めてもよい。
上記条件下オーレオバシジウム属の微生物を４〜６日間程度通気攪拌培養すると、培養液にはβ-１,３-１,６グルカンを主成分とするβ-グルカン多糖が０．１％（ｗ/ｖ）〜数％（ｗ/ｖ）含有されており、その培養液の粘度はＢＭ型回転粘度計（東機産業社製）により３０℃では数百ｃＰ(ｍＰａ・s)から数千ｃＰ（ｍＰａ・s）という非常に高い粘度を有する。この培養を遠心分離して得られる上清に例えば有機溶媒を添加することにより、β-１,３-１,６グルカンを沈殿物として得ることができる。
【００２４】
＜低粘度β-１,３-１,６グルカンの製造方法＞
上記の高粘度のβ-１,３-１,６グルカンを含む培養液を、常温で攪拌しながら、これにアルカリを添加すると、急激に粘度が低下する。
アルカリは、水溶性で、かつ医薬品や食品添加物として用いることができるものであればよく、特に限定されない。例えば、炭酸カルシウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液、炭酸カリウム水溶液、炭酸アンモニウム水溶液などの炭酸アルカリ水溶液；水酸化ナトリウム水溶液、水酸化カリウム水溶液、水酸化カルシウム水溶液などの水酸化アルカリ水溶液；あるいはアンモニア水溶液などを使用できる。アルカリは、培養液のｐＨが１２以上、好ましくは１３以上になるように添加してもよい。例えば水酸化ナトリウムを使用して培養液のｐＨを上げる場合は、水酸化ナトリウムの最終濃度が好ましくは０．５％(ｗ/ｖ)以上、より好ましくは１．２５％(ｗ/ｖ)以上になるように添加すればよい。培養液にアルカリを添加し、良く攪拌すると、瞬時に培養液の粘度が低下する。
次いで、アルカリ処理後の培養液から菌体などの不溶性物質を分離する。培養液の粘度が低いため、菌体を自然沈降させて上澄みを回収する方法（デカント法）、遠心分離、ろ紙あるいはろ布を利用した全量ろ過、フィルタープレス、更に膜ろ過（ＭＦ膜などの限外ろ過）などの方法で、容易に不溶性物質とグルカンとを分離できる。ろ紙あるいはろ布による全量ろ過の場合は、セライトなどろ過助剤を利用するのも一つの手段である。工業的にはフィルタープレスによる菌体除去が好ましい。また、不溶性物質除去前のβ-グルカン液は必要に応じて水で希釈しても良い。濃度が高すぎると不溶性物質除去が困難であり、低すぎても効率的でない。β-グルカン濃度は、０.１ｍｇ/ｍｌ〜２０ｍｇ/ｍｌ程度、好ましくは０.５ｍｇ/ｍｌ〜１０ｍｇ/ｍｌ程度、さらに好ましくは１ｍｇ/ｍｌ〜５ｍｇ/ｍｌ程度が良い。
【００２５】
次いで、グルカンを含む溶液に酸を添加して中和する。中和は、不溶物の除去前に行ってもよい。酸は、医薬や食品添加物として使用できるものであればよく、特に限定されない。例えば、塩酸、燐酸、硫酸、クエン酸、リンゴ酸などを使用できる。酸の使用量は、溶液又は培養液の液性が中性（ｐＨ５〜８程度）になるような量とすればよい。即ち、中和はｐＨ７に合わせることを必ずしも要さない。
ｐＨ１２以上のアルカリ処理後、中和して得られるβ-１,３-１,６グルカンは、３０℃、ｐＨ５．０、濃度０．５（ｗ／ｖ％）における粘度が通常２００ｃＰ以下、場合によっては、１００ｃＰ以下、５０ｃＰ以下、又は１０ｃＰ以下である。粘度は製造方法ないしは精製方法によって変動する。
アルカリ処理された低粘度のβ-１,３-１,６グルカンは、中和しても粘度が高くなることがない。さらに、常温（１５〜３５℃）では、液性をｐＨが４を下回るような酸性にしても、粘度が高くなることがない。
また、培養上清をアルカリ処理、及び中和した後に、菌体などを除去するのに代えて、培養上清から菌体などを除去した後に、アルカリ処理、及び中和を行うこともできる。
【００２６】
得られるグルカン水溶液からグルカンより低分子量の可溶性夾雑物（例えば塩類など）を除去する場合は、例えば限外ろ過を行えばよい。
また、アルカリ処理、除菌した後、中和せずに、アルカリ性条件下で限外ろ過することもでき、これにより透明性、熱安定性、長期保存性に一層優れる精製β-１,３-１,６グルカンが得られる。アルカリ性条件は、ｐＨ１０以上、好ましくは１２以上であり、ｐＨの上限は通常１３．５程度である。
このようにして得られる水溶液に含まれるβ-１,３-１,６グルカンは、乾燥させて固形製剤にする場合も、また水溶液のまま製剤として使用する場合も、一旦、水溶液から析出させることができる。β-１,３-１,６グルカンの析出方法は、特に限定されないが、例えば、限外ろ過などにより濃縮してグルカン濃度を１ｗ／ｗ％以上にした水溶液に、エタノールのようなアルコールを、水溶液に対して容積比で等倍以上、好ましくは２倍以上添加することにより、β-１,３-１,６グルカンを析出させることができる。この場合にｐＨをクエン酸などの有機酸によりｐＨを酸性、好ましくはｐＨ４未満、さらに好ましくはｐＨ３-３．７に調整して、エタノールを添加すると高純度のβ-１,３-１,６グルカンの粉末を得ることができる。
β-１,３-１,６グルカンを低粘度化することにより、限外ろ過などによる濃縮を容易に行えることから、アルコール沈殿に使用するアルコール量を少なくすることができる。
固形物として得る場合は、低粘度β-１,３-１,６グルカン水溶液を直接乾燥させてもよく、析出させたβ-１,３-１,６グルカンを乾燥させてもよい。乾燥は、噴霧乾燥法、凍結乾燥法など公知の方法で行うことができる。
【００２７】
酸化チタン、β-１,３-１,６グルカンの比率（β-１,３-１,６グルカン：酸化チタン）は重量比で、１：０.３〜１００００程度の範囲が好ましく、１：３〜１０００程度の範囲がより好ましく、１：３０〜５００程度の範囲がさらに好ましい。上記範囲であれば、水中で十分な分散性を有する分散液が得られる。
【００２８】
本発明におけるβ-１,３-１,６グルカンの使用量は、使用する酸化チタンの種類又は使用量にもよるが、水分散液とした際の最終濃度として０.００１〜１０重量％であればよく、０.０１〜５重量％が好ましく、０.０５〜１重量％がより好ましい。上記範囲であれば、安定した水分散液が得られる。
【００２９】
（１−４）高分子添加剤（ｄ）
本発明に用いる高分子添加剤（ｄ）としては、例えば、シリコン系化合物、ポリエーテル変性したシリコン系化合物、ポリエステル変性したシリコン系化合物、ポリエーテル等を例示することができる。具体的には、ポリシロキサン等のシリコン系化合物、ポリエチレングリコール変性ポリシロキサン、ポリエチレングリコール変性ポリジメチルシロキサン、ポリエチレングリコール変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリプロピレングリコール変性ポリシロキサン、ポリプロピレングリコール変性ポリジメチルシロキサン、ポリプロピレングリコール変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリ（エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体）変性ポリシロキサン、ポリ（エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体）変性ポリジメチルシロキサン、ポリ（エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体）変性ポリメチルアルキルシロキサン等のポリエーテル変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエーテル変性ポリメチルアルキルシロキサンであるポリエーテル変性したシリコン系化合物、ポリエステル変性ポリシロキサン、ポリエステル変性ポリジメチルシロキサン、ポリエステル変性ポリメチルアルキルシロキサン等のポリエステル変性したシリコン系化合物、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリブチレングリコール等のポリエーテルを例示することができる。中でも剥離性において、ポリエーテル変性したシリコン系化合物が好ましく、ポリエチレングリコール変性ポリシロキサン、ポリエチレングリコール変性ポリジメチルシロキサン、ポリエチレングリコール変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリプロピレングリコール変性ポリシロキサン、ポリプロピレングリコール変性ポリジメチルシロキサン、ポリプロピレングリコール変性ポリメチルアルキルシロキサン、ポリ（エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体）変性シロキサン、ポリ（エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体）変性ポリジメチルシロキサン、ポリ（エチレングリコール−プロピレングリコール共重合体）変性ポリメチルアルキルシロキサンがより好ましい。
【００３０】
酸化チタン、高分子添加剤の比率（高分子添加剤：酸化チタン）は重量比で、１：０.０５〜１００程度の範囲が好ましく、１：０.１〜２０程度の範囲がより好ましく、１：０.５〜５程度の範囲がさらに好ましい。上記範囲であれば、水中で十分な分散性を有する分散液が得られ、かつ塗膜の剥離性が良好なものが得られる。
【００３１】
本発明における高分子添加剤（ｄ）の使用量は、使用する酸化チタンの種類又は使用量にもよるが、水分散液とした際の最終濃度として０.０１〜３０重量％であればよく、０.１〜２０重量％が好ましく、１〜１０重量％がより好ましい。上記範囲であれば、安定した水分散液が得られ、かつ塗膜の剥離性が良好なものが得られる。
【００３２】
（２）酸化チタンの水分散液の製造方法
本発明の酸化チタンの水分散液は、以下の態様によって製造することができる。
【００３３】
酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、及び高分子添加剤（ｄ）とを混合すること（混合工程）によって、酸化チタンの水分散液が得られる。
【００３４】
（２−１）混合工程
本発明の混合工程は、酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、及び高分子添加剤（ｄ）とを混合することができれば、添加の順序、方法等については特に限定されることはない。
即ち、酸化チタン（ａ）と、塩基性化合物（ｂ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、及び高分子添加剤（ｄ）をそれぞれ添加した後に攪拌混合する方法、酸化チタン（ａ）とβ-１,３結合に対するβ-１,６結合の分岐度が５０〜１００％であるβ-１,３-１,６グルカン（ｃ）、及び高分子添加剤（ｄ）を塩基性化合物（ｂ）、具体的にはアミン類のみ、又はアミン類と他の塩基性化合物を用いてｐＨを調整したアルカリ性（好ましくはｐＨ１１以上、さらに好ましくはｐＨ１２以上）の溶液中で攪拌混合する方法、塩基性化合物（ｂ）、具体的にはアミン類のみ、又はアミン類と他の塩基性化合物を用いてｐＨを調整したアルカリ性の後述のβ-１,３-１,６グルカン溶液を調製し、更に高分子添加剤（ｄ）をした後に、そのアルカリ溶液中に酸化チタン（ａ）を直接添加した後に攪拌混合する方法、後述する酸化チタン（ａ）の懸濁液を調製し、β-１,３-１,６グルカンの粉体、塩基性化合物（ｂ）、及び高分子添加剤（ｄ）を添加、又は塩基性化合物（ｂ）等を用いてｐＨを調整したアルカリ性のβ-１,３-１,６グルカン溶液、及び高分子添加剤（ｄ）を添加して攪拌混合する方法が挙げられる。
【００３５】
（２−２）β-１,３-１,６グルカンの溶液の調製方法
β-１,３-１,６グルカンの溶液の調製方法としては、溶液に粉体、又は水溶液のβ-１,３-１,６グルカンを添加し、攪拌することによって調製することができる。なお、溶液のｐＨ調整は、β-１,３-１,６グルカンを添加する前の水に塩基性化合物（ｂ）を添加して調節してもよく、β-１,３-１,６グルカンを添加しながら、同時に塩基性化合物（ｂ）を添加して調節してもよく、β-１,３-１,６グルカンを添加した後に、塩基性化合物（ｂ）を添加して調整してもよい。
【００３６】
本発明の混合工程において、β-１,３-１,６グルカンの溶液は混合する際の溶液のｐＨ調整のし易さの点で、溶液のｐＨを、塩基性化合物（ｂ）等を用いてアルカリ性（好ましくはｐＨ１１以上、さらに好ましくはｐＨ１２以上）に調整したものであることが好ましい。
【００３７】
（２−３）酸化チタンの懸濁液の調製方法
酸化チタンの「懸濁液」とは、酸化チタンを（水）溶液に添加し、攪拌することで一時的に（水）溶液中に分散状態となっているものを意味し、一定時間が経過すると酸化チタンが凝集あるいは沈降し、分散状態を保持することができないものをいう。
酸化チタンの懸濁液は、酸化チタンと（水）溶液とを攪拌混合して得られる。混合した後に、必要に応じて適宜、溶液のｐＨを調整してもよい。
【００３８】
本発明の混合工程における攪拌方法は、酸化チタンと塩基性化合物とβ-１,３-１,６グルカンを溶液中で均一に分散できる方法であれば、特に限定されない。具体的には、メカニカルスターラー、ディスパー、マグネティックスターラー、超音波分散機、遊星ミル、ビーズミル、三本ロールなどを例示することができる。なかでも、分散性の点で、ディスパー、ビーズミル、超音波分散機が好ましい。
混合工程における温度は１０〜４０℃であればよく、攪拌時間は０．１〜２時間であればよい。上記範囲であれば、溶液中で各成分を均一に混合することができる。
【００３９】
（２−４）中和工程
上記方法にて製造した水分散液はそのまま使用することができるが、酸化チタンの水分散液の製造方法として、更に中和工程を含めることができる。
【００４０】
本発明における中和工程は、上述した混合工程で得られるアルカリ性の溶液に中和剤（ｅ）を添加して中和する工程である。なお、中和の際の攪拌は、上述した攪拌方法によって行うことができる。
【００４１】
中和工程に用いる中和剤（ｅ）としては、一般に市販されているものを用いることができ、例えば、塩酸、硫酸、硝酸などの無機酸、不飽和脂肪族カルボン酸、飽和脂肪族カルボン酸、芳香族カルボン酸、アルドン酸、ウロン酸などをの有機酸を例示することができる。
【００４２】
飽和脂肪族カルボン酸としては、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸などのモノカルボン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、アジピン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸などのジカルボン酸、クエン酸、イソクエン酸などのトリカルボン酸を例示することができる。
【００４３】
不飽和脂肪族カルボン酸としては、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸など例示することができる。
【００４４】
芳香族カルボン酸としては、安息香酸、フタル酸、イソフタル酸、テレフタル酸、サリチル酸などを例示することができる。アルドン酸としては、グルコン酸、マンノン酸、ガラクトン酸、リボン酸、キシロン酸、マルトビオン酸、マルトトリオン酸、マルトテトラオン酸、マルトペンタオン酸、ラクトビオン酸などを例示することができる。ウロン酸としては、グルクチュロン酸、ガラクチュロン酸、マンヌロン酸などを例示することができる。
【００４５】
中和に使用する中和剤（ｅ）の添加量は、目的とするｐＨに応じて適宜選択すればよい。また、中和の際に発熱するため、必要に応じて冷却しながら中和をおこなってもよい。また、中和に用いる中和剤の添加方法としては、必要量を一括で添加してもよく、少量ずつ分けて添加して行うことができる。また、上述した中和剤を２種以上組合せて用いることもできる。
【００４６】
以上の操作により、酸化チタンが分散した溶液（水分散液）が得られる。本発明において、酸化チタンが「分散した溶液（水分散液）」とは、一定時間が経過しても溶液中に酸化チタンが均一に分散した状態で保たれたものを意味する。
【００４７】
この分散液を、塗料材料として、スプレーやエアブラシ等で塗布する場合には、分散液をそのまま用いてもよいが、分散液をエタノール等の揮発性を有する水溶性アルコールを加え希釈して用いることでも良い。
【００４８】
（３）その他
本発明の水分散液は、安全性が高く、光学式デジタイザー用の反射防止用塗料、磁気記録材料、導電膜形成材料、半導体膜形成材料などの各種用途に応用可能なものである。
【実施例】
【００４９】
以下、本発明の実施例を挙げてより詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実験例（精製β-１,３-１,６グルカンの製造）
（１）低粘度β-１,３-１,６グルカンの調製
（１-１）β−グルカンの培養産生
後掲の表１に示す組成を有する液体培地１００ｍｌを５００ｍｌ容量の肩付きフラスコに入れ、１２１℃で、１５分間、加圧蒸気滅菌を行った後、オーレオバシジウム  プルランス（Aureobasidium  pullulans）ＧＭ-ＮＨ-１Ａ１株（ＦＥＲＭ Ｐ-１９２８５）を同培地組成のスラントより無菌的に１白金耳植菌し、１３０ｒｐｍの速度で通気攪拌しつつ、３０℃で２４時間培養することにより種培養液を調製した。
次いで、同じ組成の培地２００Ｌを３００Ｌ容量の培養装置（丸菱バイオエンジ製）に入れ、１２１℃で、１５分間、加圧蒸気滅菌し、上記のようにして得られた種培養液２Ｌを無菌的に植菌し、２００ｒｐｍ、２７℃、４０L／ｍｉｎの通気攪拌培養を行った。なお、培地のｐＨは水酸化ナトリウム及び塩酸を用いてｐＨ４．２〜４．５の範囲内に制御した。９６時間後の菌体濁度はＯＤ６６０ｎｍで２３ＯＤで、多糖濃度は０．５％(ｗ/ｖ)で、硫黄含量から計算される置換スルホ酢酸含量は０．０９％であった。
【００５０】
＜多糖濃度測定＞
多糖濃度は、培養液を数ｍｌサンプリングし、菌体を遠心分離除去した後、その上清に最終濃度が６６％(v/v)となるようにエタノールを加えて多糖を沈殿させて回収した後、イオン交換水に溶解し、フェノール硫酸法で定量した。
【００５１】
＜置換スルホ含量測定＞
同様にして菌体を除去した培養上清にエタノールを最終濃度が６６％となるように添加し、β-グルカンを沈殿回収した。その後、再度イオン交換水に溶解し、再度遠心分離後、その上清に最終濃度が０．９％になるように食塩を加えた後、再度６６％エタノールでβ-グルカンを回収した。このβ−グルカン回収精製操作を更に２回繰り返し、得られたβ-グルカン水溶液をイオン交換水で透析後、凍結乾燥によりβ-グルカン粉末を得た。
このβ-グルカン粉末を燃焼管式燃焼吸収後、イオンクロマト法で組成分析した結果、Ｓ含量は２３９ｍｇ／ｋｇであり、この値から計算される置換スルホ酢酸含量は０．０９％であった。
【００５２】
【表１】
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【００５３】
（１−２）アルカリ処理
上記のようにして得られた培養液の粘度をＢＭ型回転粘度計（東京計器製）を用いて、３０℃、１２ｒｐｍで測定したところ、１５００ｃＰ（ｍＰａ・ｓ）であった。測定に用いるロータは粘度にあわせて適当なものを選択した。
この培養液に水酸化ナトリウム最終濃度が２．４％(ｗ/ｖ)となるように２５％(ｗ/ｗ)水酸化ナトリウムを添加し攪拌したところ（ｐＨ１３．６）、瞬時に粘度が低下した。引き続いて５０％(ｗ/ｖ)クエン酸水溶液でｐＨ５．０となるように中和してから、濃度０．５（ｗ／ｖ％）における粘度を測定したところ、そのときの粘度（３０℃）は２０ｃＰ(ｍＰａ・s)であった。
次いで、この培養液にろ過助剤としてＫＣフロック（日本製紙社製）を１ｗｔ％添加し、薮田式ろ過圧搾機（薮田機械製）を用いて菌体を除去し、最終的に培養ろ液（約２３０Ｌ）を得た。その多糖濃度は０．５％(ｗ/ｖ)で、ほぼ１００％の回収率であった。
【００５４】
（１−３）β-グルカン水溶液の脱塩
上記のβ-グルカン水溶液（培養ろ液）を０．３％に希釈後、限外ろ過（ＵＦ）膜（分子量カット５万、日東電工社製）を用いて脱塩を行い、最終的にナトリウムイオン濃度を２０ｍｇ／１００ｍｌに落とした後、５０％(ｗ/ｖ)クエン酸水溶液によりｐＨを３．５に調整した。
引き続いて、ホット充填用加熱ユニット（日阪製作所製）を用いて９５℃で、３分間保持することにより殺菌処理を行い、最終製品のβ-グルカン水溶液を得た。この時のβ-グルカンの濃度をフェノール硫酸法により測定したところ０．２２％(ｗ/ｖ)であった。また、培養液からのトータル収率は約７３％であった。
【００５５】
＜硫黄含有量の測定＞
また、得られたβ-グルカン水溶液をイオン交換水で透析後、凍結乾燥によりβ-グルカン粉末を得た。本β-グルカンの組成分析結果からＳ含量は３３０ｍｇ／ｋｇであり、これから計算される置換スルホ酢酸含量は０．１２％であった。
【００５６】
＜結合状態の確認＞
また、脱塩を行った上記培養ろ液について、コンゴーレッド法によって、４８０ｎｍから５２５ｎｍ付近への波長シフトを確認することができたのでβ−１，３結合を含むグルカンを含有していることが証明された（K. Ogawa, Carbohydrate Research, 67, 527-535 (1978)、今中忠行  監修,  微生物利用の大展開,  1012-1015,  エヌ・ティー・エス（2002））。そのときの極大値へのシフト差分はΔ0.48/500μｇ多糖であった。
上記培養ろ液１５ｍｌを取り出し、３０ｍｌのエタノールを添加し、４℃、１０００ｒｐｍ、１０ｍｉｎで遠心して、沈殿する多糖を回収した。６６％エタノールで洗浄し、４℃、１０００ｒｐｍ、１０分間遠心して、沈殿する多糖に２ｍｌのイオン交換水と、１ｍｌの１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を添加撹拌後、６０℃、１時間保温して沈殿を溶解させた。次に-８０℃にて凍結後、一晩、真空凍結乾燥を行い、乾燥後の粉末を１ｍｌの１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液に溶解させ、２次元ＮＭＲに供した。
２次元ＮＭＲ（１３Ｃ−１Ｈ  ＣＯＳＹ ＮＭＲ）１０６ｐｐｍと相関関係を有する１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを図１に示す。このスペクトルにおいて４．７ｐｐｍと４．５ｐｐｍ付近との２つのシグナルが得られた。
この結果、本β−グルカンがβ-１,３-１,６グルカンであることが証明された（今中忠行  監修、微生物利用の大展開、1012-1015、エヌ・ティー・エス（2002））。それぞれの１Ｈ  ＮＭＲシグナルの積分比から、β-１,３結合／β-１,６結合の比は１．１５であることが判明した。従って、主鎖のβ-１,３結合に対する側鎖のβ-１,６結合の分岐度は、約８７％である。
【００５７】
＜粒度測定＞
次に、レ−ザ回折/散乱式粒度分布測定装置(ＨＯＲＩＢＡ製ＬＡ−９２０)を用いて培養液の粒度を測定したところ、粒子としては０．３μｍと１００μｍ程度の大きさのところにピ−クが見られた。続いて、超音波を照射しながら、粒度測定を行うと、１００μｍのピ−クはみるみるうちに消失し、０．３μｍのピ−クが増え、最終的に０．３μｍのみとなった。超音波照射したときの培養液の粒度分布を図２に示す。
０．３μｍのピークはβ-１,３-１,６グルカンの一次粒子によるピークであり、１００〜２００μｍのピークはβ-１,３-１,６グルカンの一次粒子が凝集した二次粒子によるピークであると考えられる。
また、二次粒子はマグネチックスターラ−による攪拌、軽い振とうでも同じように消失し、容易に砕けて一次粒子になることが確認された。よって、二次粒子は非常に緩い凝集(緩凝集状態)と考えられる。
【００５８】
＜分子量測定＞
また、東ソー社製のトーヨーパールＨＷ６５（カラムサイズ７５ｃｍ×φ１ｃｍ、排除分子量２５０万（デキストラン））を用いて、０．１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を溶離液としてゲルろ過クロマトグラフィーを行い、溶解β-１,３-１,６グルカンとβ-１,３-１,６グルカンの１次粒子とを含む溶液の分子量を測定したところ、溶解β-１,３-１,６グルカンに由来する２〜３０万のピークの低分子画分と、１次粒子に由来する見かけ上５０〜２５０万の高分子画分との二種類が検出された。分子量のマーカーとしてＳｈｏｄｅｘ社製のプルランを用いた。
水溶性β-１,３-１,６グルカンと微粒子とを分離するため、上記の微粒子画分と可溶性画分とを含むβ-１,３-１,６グルカン溶液をアドバンテック社製のフィルター（０．２μｍ）でろ過を行ったところ、５０〜２５０万の高分子画分が消失した。このことから、高分子画分はβ-１,３-１,６グルカンの一次粒子や一次粒子が凝集した二次粒子に相当することが判明した。よって、水溶性β-１,３-１,６グルカンの分子量は２〜３０万と考えられる。
【００５９】
（２）粉末化β-グルカンの調製
（１−２）において、アルカリ処理及び菌体除去処理により調製された微粒子β-１,３-１,６グルカンを含むβ-１,３-１,６グルカン水溶液に、最終濃度が６６％(v/v)となるようにエタノールを添加して、多糖グルカンを沈殿させ、遠心分離法により回収した。次いで凍結乾燥法によりエタノールと水分を除去し、乾燥β-１,３-１,６グルカンを得た。そのときの収率はエタノール沈殿前の全糖濃度と比較して９５％以上であった。
次いで、得られた乾燥β-１,３-１,６グルカンを最終濃度が０．３％（ｗ／ｖ）となるように水に溶解分散後、前述したと同様にして東ソー社製のトーヨーパールＨＷ６５（カラムサイズ  ７５ｃｍ×φ１ｃｍ、排除分子量２５０万（デキストラン））により０．１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を溶離液としてゲルクロマトグラフィーを行い、分子量を測定したところ、得られた多糖の分子量は２〜３０万のピークの低分子画分と見かけ上５０〜２５０万の高分子画分の二種類からなることが判明した。ここで、分子量のマーカーとしてＳｈｏｄｅｘ社製のプルランを用いた。
一方、水溶性β-１,３-１,６グルカンと微粒子を分離するため、本法で調製したβ-１,３-１,６グルカン水溶液（微粒子と可溶化グルカンを含むもの）をアドバンテック社製のフィルター（０．２μｍ）でろ過を行ったところ、５０〜２５０万の高分子画分が消失した。よって、本法により得られたβ-１,３-１,６グルカンを乾燥させても、再溶解させれば乾燥前のβ-１,３-１,６グルカンと同様の物理的挙動を再現することが実証された。
【００６０】
（３）高純度β-１,３-１,６グルカン粉末の製造
（１）においてアルカリ処理を行い低粘度化した培養液（多糖濃度０．５％（５ｍｇ／ｍｌ））９０Ｌを５０％クエン酸水溶液９ｋｇで中和後、ろ過助剤（日本製紙ケミカル製粉末セルロ−スＫＣフロック）を１．８ｋｇプレコートした薮田式濾過圧搾機４０Ｄ-４を通して、菌体を取り除いた。ろ液を限外ろ過スパイラルエレメント（日東電工製ＮＴＵ３１５０−Ｓ４）で９Ｌまで濃縮した。本濃縮液を攪拌しながら、ｐＨを３．０-３．５にクエン酸により調整して、エタノール１８Ｌを加え、グルカン／エタノール／水スラリーを得た。スラリーの粘度はＢＭ型粘度計で２２ｍＰａ・ｓ（３０℃）であった。室温で３時間静置し、上澄み液（エタノール／水）約１７Ｌを取り除いた。残ったスラリーの粘度は４５ｍＰａ・ｓ（３０℃）であった。本濃縮スラリー１０Ｌを坂本技研型の噴霧乾燥装置Ｒ-３を用いて噴霧乾燥し、３６０ｇのβ-１,３-１,６グルカン粉末を得た（回収率８０％）。得られたβ-１,３-１,６グルカンの純度はＮＭＲスペクトルの解析の結果、９０％以上であった。
なお、得られたβ-１,３-１,６グルカン粉末を１Ｎ水酸化ナトリウム重水溶液に溶解させ、ＮＭＲスペクトルを測定したところ、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルが約４．７ｐｐｍ及び約４．５ｐｐｍの２つのシグナルを得た。また、得られたβ-１,３-１,６グルカン粉末の濃度０．５（ｗ／ｖ％）の水溶液の粘度は２００ｃＰ以下であった（ｐＨ５．０、３０℃）。上記記載の方法によって得られた精製β-グルカンを下記の試験に供した。
【００６１】
（４）水分散液の製造方法
以下に実施例及び比較例に用いた酸化チタンおよび高分子添加剤を示す。
酸化チタン：ＳＴＲ−１００Ｗ（分散液中におけるｄ５０  １８０ｎｍ）（堺化学工業株式会社製）
高分子添加剤１：ＢＹＫ−３３３（ポリエーテル変性ポリジメチルシロキサンとポリエーテルの混合物、ビッグケミージャパン株式会社製）
高分子添加剤２：ＢＹＫ−３４８（ポリエーテル変性ポリジメチルシロキサンとポリエーテルの混合物、ビッグケミージャパン株式会社製）
【００６２】
（実施例１）
水分散液１（酸化チタンの水分散液）の製造
（β-グルカン溶液の調製）
以下の方法を用いてβグルカン溶液を調製した。
２２５ｍｌのガラス瓶に２−アミノ−２−メチル−１−プロパノールを３ｇ用いて、ｐＨ１１．０に調整したイオン交換水９７ｇに上述した方法によって得られたβ-１，３-１，６グルカン粉末３．０ｇを添加し、ホモディスパー（プライミクス社製）を用いて、回転数１０００ｒｐｍで３時間、温度８５℃で攪拌処理を行い、３％β-グルカン溶液１００ｇを得た。
【００６３】
（酸化チタンの水分散液の調整）
以下の方法を用いて酸化チタンの水分散液１を調製した。
イオン交換水６８ｇに上記方法により調整した３％β-グルカン溶液  ４ｇと高分子添加剤（ＢＹＫ−３３３とＢＹＫ−３４８の５０：５０混合物）１２ｇ、酸化チタン３６ｇを添加し、ジルコニアビーズをメディアとしてペイントコンディショーナー（レッドデビル社）用いて２時間分散を行い、水分散液１  １２０ｇ（ｐＨ７．８）を得た。得られた分散液１（中和前）の分散性を測定した。結果を表２に示す。
【００６４】
中和工程
上記で得られた酸化チタン水分散液１  ６０ｇをホモディスパー（プライミクス（株）製）を用いて、回転数８００ｒｐｍで撹拌しながら、中和剤として２５％クエン酸溶液を使用して、中和を実施し、酸化チタンとβ-グルカンとアミンと高分子添加剤を含む水分散液１  約６０ｇ（酸化チタン濃度３０％、グルカン濃度０．１％、アミン類濃度０．１％、高分子添加剤濃度１０％、ｐＨ６．７）を得た。得られた分散液２（中和後）の分散性を測定した。結果を表２に示す。
【００６５】
（実施例２）
（酸化チタンの水分散液の調製）
以下の方法を用いて酸化チタンの水分散液３を調製した。
イオン交換水９２ｇに上記方法により調整した３％β-グルカン溶液  ４ｇと高分子添加剤（ＢＹＫ−３３３とＢＹＫ−３４８の８０：２０混合物）６ｇ、酸化チタン１８ｇを添加し、ジルコニアビーズをメディアとしてペイントコンディショーナー（レッドデビル社）用いて２時間分散を行い、水分散液３  １２０ｇ（（酸化チタン濃度１５％、グルカン濃度０．１％、アミン類濃度０．１％、高分子添加剤濃度５％、ｐＨ７．３）を得た。得られた分散液３（中和前）の分散性を測定した。結果を表２に示す。
【００６６】
（比較例１）
β-グルカン溶液を使用しない以外は、実施例１に記載の方法により、酸化チタンの水分散液の作成を行い懸濁液１（酸化チタン濃度３０％、高分子添加剤濃度１０％、ｐＨ７．８）（中和前）、懸濁液２（ｐＨ６．９）（中和後）を得た。結果を表２に示す。
【００６７】
（比較例２）
高分子添加剤を使用しない以外は、実施例１に記載の方法により、酸化チタンの水分散液の作成を行い分散液４（酸化チタン濃度３０％、グルカン濃度０．１％、アミン類濃度０．１％、ｐＨ７．４）（中和前）を得た。中和工程は省略した。結果を表２に示す。
【００６８】
評価方法
（分散液の分散性の評価）
分散性は、得られた水分散液を１２時間（室温）静置し、粒子の沈降状態を観察し、以下のように評価した。
○・・・沈降なし。
×・・・沈降が確認され、底部に粘土質の沈殿が発生する。
【表２】
2014227497.tif 000003
【００６９】
（実施例３）
分散液１（酸化チタン濃度３０％）の安全性を評価した後、分散液１をエアブラシで金属製の自動車の模型（全長５ｃｍ、高さ２ｃｍ）に塗布し、塗膜性（表面状態、厚さ）、剥離性、画像のハレーションについて評価した。結果を表３に示す。
【００７０】
（実施例４）
分散液３（酸化チタン濃度１５％）の安全性を評価した後、分散液３をエアブラシで金属製の自動車の模型（全長５ｃｍ、高さ２ｃｍ）に塗布し、塗膜性（表面状態、厚さ）、剥離性、画像のハレーションについて評価した。結果を表３に示す。
【００７１】
（実施例５）
分散液１  ３０ｇにエタノール  ３０ｇを加えホモディスパー（プライミクス（株）製）を用いて、回転数８００ｒｐｍで撹拌して得た分散液（酸化チタン濃度１５％）を安全性及び分散性を評価した後、エアブラシで金属製の自動車の模型（全長５ｃｍ、高さ２ｃｍ）に塗布し、塗膜性（表面状態、厚さ）、剥離性、画像のハレーションについて評価した。結果を表３に示す。
【００７２】
（実施例６）
分散液３  ３０ｇにエタノール  ３０ｇを加えホモディスパー（プライミクス（株）製）を用いて、回転数８００ｒｐｍで撹拌して得た分散液（酸化チタン濃度７．５％）を安全性及び分散性を評価した後、エアブラシで金属製の自動車の模型（全長５ｃｍ、高さ２ｃｍ）に塗布し、塗膜性（表面状態、厚さ）、剥離性、画像のハレーションについて評価した。結果を表３に示す。
【００７３】
（比較例３）
懸濁液２  ３０ｇにイオン交換水  ３０ｇを加えホモディスパー（プライミクス（株）製）を用いて、回転数８００ｒｐｍで撹拌して得た懸濁液（酸化チタン濃度１５％）を安全性及び分散性を評価した後、エアブラシで金属製の自動車の模型（全長５ｃｍ、高さ２ｃｍ）に塗布し、塗膜性（表面状態、厚さ）、剥離性、画像のハレーションについて評価した。結果を表３に示す。
【００７４】
（比較例４）
分散液４  ３０ｇにエタノール  ３０ｇを加えホモディスパー（プライミクス（株）製）を用いて、回転数８００ｒｐｍで撹拌して得た分散液（酸化チタン濃度１５％）を安全性及び分散性を評価した後、エアブラシで金属製の自動車の模型（全長５ｃｍ、高さ２ｃｍ）に塗布し、塗膜性（表面状態、厚さ）、剥離性、画像のハレーションについて評価した。結果を表３に示す。
【００７５】
（比較例５）
市販の白色スプレー（成分：シリカ、炭酸カルシウム、エタノール、ＬＰガス）（製品名：ミクロチェック現像液：(株)タイホーコウザイ社製）を用いて、金属製の自動車の模型（全長５ｃｍ、高さ２ｃｍ）に塗布し、塗膜性（表面状態、厚さ）、剥離性、画像について評価した。結果を表３に示す。
【００７６】
評価方法
（分散液・懸濁液の評価）
安全性
○・・・人体に対する有害性、発火などの危険性が低い。
×・・・有害危険性が高い。
分散性
○・・・均一で安定な分散性を示し、沈殿がない。
△・・・やや不均一で分散性がやや不良で沈殿が生じやすい。
×・・・不均一で分散性が不良ですぐに沈殿が生じる。
（塗布後の評価）
塗膜性（表面状態、厚さ）
塗膜性は、測定対象物に分散液等を塗布後温風乾燥し外観評価と厚みを測定した。
○・・・塗膜は均一でムラがない。
△・・・塗膜はやや不均一でムラがある。
×・・・塗膜は不均一でムラがある。
剥離性
剥離性は、分散液等を塗布した測定対象物を、浸水して超音波で2分洗浄し、乾燥した後、外観を目視で観察し塗膜の残存の様子を評価した。
○・・・塗膜は容易に洗浄でき、残存しない。
△・・・塗膜はほとんど洗浄で除けるがわずかに残存する。
×・・・塗膜は洗浄後も多く残存しムラがある。
画像の評価
測定対象物に接触することなく、表面状態と形状を3次元データ化できる非接触光学式三次元デジタイザ「ＡＴＯＳ（エイトス）」（ＧＯＭ  ｍｂＨ社製）を使用して画像を取り込み評価した。
○・・・測定対象物からのハレーション等はなく、正確に計測できる。
△・・・測定対象物の場所によってわずかにハレーション等がある。
×・・・測定対象物の正確な計測に支障がある。
【表３】
2014227497.tif 000004
【００７７】
表２、３に示すように、塩基性化合物、βグルカン、及び高分子添加剤を含む酸化チタン分散液は、安全性が高く、良好な分散性を示し、塗膜性についてはその膜厚の凹凸差は小さく、均一な薄膜に塗膜され、その塗膜の剥離性、画像評価は良好であった。
【産業上の利用可能性】
【００７８】
本発明の酸化チタンとアミン類、β-１,３-１,６グルカン、高分子添加剤を含む水分散液は、水中での分散性に優れ、均一な薄層塗布がしやすく、剥離しやすい塗膜を形成する塗料あるいはその素材となるため光学式デジタイザーで測定物に塗布する塗料またはその他用途の塗料、工業材料として実用可能なものである。
【図１】
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【図２】
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