(57)【要約】      （修正有）【課題】疾患の原因となる遺伝子配列を標的化する短鎖アンチセンス化合物を提供する。【解決手段】長さ８〜１６モノマーの化学的に修飾された高親和性モノマーを含むような化合物を含めた、短鎖アンチセンス化合物。効力が増大し、かつ、治療指数が改善したこのような特定の短鎖アンチセンス化合物は、細胞、組織および動物における標的核酸および／またはタンパク質の減少に有用である。インビボで標的ＲＮＡを減少させるために有用な、高親和性ヌクレオチド修飾を含む短鎖アンチセンス化合物を提供する。このような短鎖アンチセンス化合物は、以前に記載されたアンチセンス化合物よりも低い用量で有効であり、毒性と処置のコストの低下を可能にする。さらに、記載される短鎖アンチセンス化合物は、経口投薬により高い効力を有する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
長さ８〜１６モノマーの短鎖アンチセンス化合物であって、該短鎖アンチセンス化合物
は、両側の末端の各々にウィングが配置された、２’−デオキシリボヌクレオチドギャッ
プ領域を含み、該ウィングの各々は、独立して、１〜３の高親和性修飾モノマーを含み、
そして、該短鎖アンチセンス化合物は、ＡｐｏＢをコードするヌクレオチドに対して標的
化される、短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２】
前記高親和性修飾モノマーが、糖修飾ヌクレオチドである、請求項１に記載の短鎖アン
チセンス化合物。
【請求項３】
前記糖修飾ヌクレオチドのうち少なくとも１つが、該糖の４’位と２’位との間に架橋
を含む、請求項２に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項４】
前記高親和性修飾ヌクレオチドの各々が、１ヌクレオチドあたり１〜４℃のＴｍを与え
る、請求項２に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項５】
前記糖修飾性ヌクレオチドの各々が、ＨまたはＯＨ以外の２’置換基を含む、請求項２
に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項６】
前記糖修飾ヌクレオチドのうち少なくとも１つが、４’−２’架橋した二環式ヌクレオ
チドである、請求項５に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項７】
前記２’置換基の各々が、独立して、アルコキシ、置換アルコキシまたはハロゲンであ
る、請求項５に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項８】
前記２’置換基の各々が、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３である、請求項７に記載の短鎖アン
チセンス化合物。
【請求項９】
前記糖修飾ヌクレオチドの各々の立体配座が、独立して、β−Ｄまたはα−Ｌである、
請求項３に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項１０】
請求項５に記載の短鎖アンチセンス化合物であって、前記架橋の各々が、独立して、１
または２〜４の結合した基を含み、該結合した基は、独立して、−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）
］ｎ−、−Ｃ（Ｒ１）＝Ｃ（Ｒ２）−、−Ｃ（Ｒ１）＝Ｎ−、−Ｃ（＝ＮＲ１）−、−Ｃ
（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒ１）２−、−Ｓ（＝Ｏ）ｘ−および−
Ｎ（Ｒ１）−から選択され；
ここで
ｘは０、１または２であり；
ｎは１、２、３または４であり；
Ｒ１およびＲ２の各々は、独立して、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキ
ル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル
、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換
Ｃ５〜Ｃ２０アリール、複素環式基、置換複素環式基、ヘテロアリール、置換ヘテロアリ
ール、Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、置換Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、ハロゲン、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、
ＳＪ１、Ｎ３、ＣＯＯＪ１、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、ＣＮ、スルホニル
（Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ１）、またはスルホキシル（Ｓ（＝Ｏ）−Ｊ１）であり；そして
Ｊ１およびＪ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２ア
ルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニ
ル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換Ｃ５〜Ｃ２０アリール、
アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、複素環式基、置換複素環式基、Ｃ１〜Ｃ１２ア
ミノアルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、または保護基である、
短鎖アンチセンス化合物。
【請求項１１】
前記架橋の各々が、独立して、４’−ＣＨ２−２’、４’−（ＣＨ２）２−２’、４’
−ＣＨ２−Ｏ−２’、４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ１）−
２’および４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１）−Ｏ−２’−であり、ここで、Ｒ１の各々が、独立
して、Ｈ、保護基、またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである、請求項１０に記載の短鎖アンチ
センス化合物。
【請求項１２】
前記高親和性修飾モノマーの各々が、独立して、二環式ヌクレオチドまたは他の２’−
修飾ヌクレオチドから選択される、請求項１に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項１３】
前記２’−修飾ヌクレオチドが、ハロゲン、アリル、アミノ、アジド、チオ、Ｏ−アリ
ル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’−Ｏ
（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）またはＯ−ＣＨ２−
Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択され、ここで、ＲｍおよびＲｎの各々が、独立
して、Ｈ、または置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルである、請求項１２に記載
の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項１４】
前記２’−修飾ヌクレオチドが、２’−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３ヌクレオチドである、
請求項１３に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項１５】
少なくとも１つのモノマー性結合が、修飾されたモノマー性結合である、請求項１に記
載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項１６】
前記修飾されたモノマー性結合が、ホスホロチオエート結合である、請求項１５に記載
のアンチセンス化合物。
【請求項１７】
前記モノマー性結合の各々が、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、請求項
１に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項１８】
長さ８〜１５モノマーである、請求項１〜１７のいずれかに記載の短鎖アンチセンス化
合物。
【請求項１９】
長さ９〜１５モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２０】
長さ１０〜１５モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２１】
長さ９〜１４モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２２】
長さ１０〜１４モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２３】
長さ９〜１３モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２４】
長さ１０〜１３モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２５】
長さ９〜１２モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２６】
長さ１０〜１２モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２７】
長さ９〜１１モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２８】
長さ１０〜１１モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項２９】
長さ８モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３０】
長さ９モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３１】
長さ１０モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３２】
長さ１１モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３３】
長さ１２モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３４】
長さ１３モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３５】
長さ１４モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３６】
長さ１５モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３７】
長さ１６モノマーである、請求項１８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３８】
１−１２−１；３−１０−３；２−１０−３；２−１０−２；１−１０−１；１−１０
−２；３−８−３；２−８−２；１−８−１；３−６−３；および１−６−１１から選択
されるモチーフを有する、請求項１〜１８のいずれかに記載の短鎖アンチセンス化合物で
あって、ここで、１番目の数字は、前記５’−ウィング内のモノマーの数を表し、２番目
の数字は、前記ギャップ内のモノマーの数を表し、そして、３番目の数字は、前記３’−
ウィング内のモノマーの数を表す、短鎖アンチセンス化合物。
【請求項３９】
前記モチーフが、１−１０−１；２−１０−２；３−１０−３；および１−９−２から
選択される、請求項３８に記載の短鎖アンチセンス化合物。
【請求項４０】
１−１−１０−２、１−１−８−２、１−１−６−３および１−２−８−２から選択さ
れるモチーフを有する、請求項１〜１８のいずれかに記載の短鎖アンチセンス化合物であ
って、ここで、１番目の数字は、第１の５’−ウィング内のモノマーの数を表し、２番目
の数字は、第２の５’−ウィング内のモノマーの数を表し、３番目の数字は、前記ギャッ
プ内のモノマーの数を表し、そして、４番目の数字は、前記３’−ウィング内のモノマー
の数を表す、短鎖アンチセンス化合物。
【請求項４１】
２−１０−１−１、２−８−１−１、３−６−１−１および２−８−２−１から選択さ
れるモチーフを有する、請求項１〜１８のいずれかに記載の短鎖アンチセンス化合物であ
って、ここで、１番目の数字は、前記５’−ウィング内のモノマーの数を表し、２番目の
数字は、前記ギャップ内のモノマーの数を表し、３番目の数字は、第１の３’−ウィング
内のモノマーの数を表し、そして、４番目の数字は、第２の３’−ウィング内のモノマー
の数を表す、短鎖アンチセンス化合物。
【請求項４２】
１−２−１０−１−１；１−１−８−１−１；２−１−６−１−１；および１−２−８
−２−１から選択されるモチーフを有する、請求項１〜１８のいずれかに記載の短鎖アン
チセンス化合物であって、ここで、１番目の数字は、第１の５’−ウィング内のモノマー
の数を表し、２番目の数字は、第２の５’−ウィング内のモノマーの数を表し、３番目の
数字は、前記ギャップ内のモノマーの数を表し、４番目の数字は、第１の３’−ウィング
内のモノマーの数を表し、そして、５番目の数字は、第２の３’−ウィング内のモノマー
の数を表す、短鎖アンチセンス化合物。
【請求項４３】
ＡｐｏＢをコードする核酸を短鎖アンチセンス化合物と接触させることによって、Ａｐ
ｏＢの発現を調節する方法。
【請求項４４】
前記ＡｐｏＢ核酸が細胞内にある、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ＡｐｏＢ核酸が動物内にある、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記動物がヒトである、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記短鎖アンチセンス化合物が、請求項１〜３８のいずれかに記載の短鎖アンチセンス
化合物である、請求項４３〜４８のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
動物における前記ＡｐｏＢ  ＲＮＡの発現を低下させるための医薬の調製のための、請
求項１〜４２のいずれかに記載の短鎖アンチセンス化合物の使用。
【請求項４９】
前記医薬が、動物において全血清コレステロール、血清ＬＤＬ、血清ＶＬＤＬ、血清Ｈ
ＤＬ、血清トリグリセリド、血清アポリポタンパク質（ａ）、および／または遊離脂肪酸
を減少させる、請求項４８に記載の使用。
【請求項５０】
動物におけるＡｐｏＢ  ＲＮＡの発現を阻害する方法であって、請求項１〜４２のいず
れかに記載の短鎖アンチセンス化合物を該動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項５１】
動物における心臓血管の疾患を処置する方法であって、該処置を必要とする動物に対し
て、請求項１〜４２のいずれかに記載の短鎖アンチセンス化合物を投与する工程を包含す
る、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（配列表）
本願は、電子化された形式の配列番号表と共に出願されている。配列表は、２００７年
５月７日に作成されたＣＯＲＥ００６１ＷＯ７ＳＥＱ．ＴＸＴという名前のファイルとし
て提供され、このファイルは、７００ｋｂのサイズである。配列表の電子化された形式で
の情報は、その全体が本明細書中に参考として援用される。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
疾患の原因となる遺伝子配列を標的化することは、４０年近く前に初めて示唆されてお
り（非特許文献１）、そして、細胞培養におけるアンチセンスの活性が、その１０年後に
実証された（非特許文献２）。疾患原因遺伝子から生じる疾患または状態の処置における
アンチセンス技術の１つの利点は、特定の疾患原因遺伝子の発現を調節する能力を持つ直
接的な遺伝学的アプローチであるということである。
概して、アンチセンス技術の背後にある原理は、アンチセンス化合物が、標的核酸にハ
イブリダイズし、そして、遺伝子発現の活性または機能（例えば、転写、翻訳またはスプ
ライシング）の調節をもたらすということである。遺伝子発現の調節は、例えば、標的分
解または占有（ｏｃｃｕｐａｎｃｙ）ベースの阻害によって達成され得る。分解によるＲ
ＮＡ標的機能の調節の一例は、ＤＮＡ様アンチセンス化合物とハイブリッド形成した際の
標的ＲＮＡのＲＮａｓｅ  Ｈベースの分解である。標的分解による遺伝子発現の調節の別
の例は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）である。ＲＮＡｉは、ｄｓＲＮＡの導入を伴うアンチセ
ンス媒介性の遺伝子サイレンシングの一形態であり、標的化された内因性ｍＲＮＡの配列
特異的な減少をもたらす。配列特異性は、アンチセンス化合物を、標的の確認および遺伝
子の機能化のためのツールとして、ならびに、ヌクレアーゼを同定および特徴付けするた
めの研究ツールとして、そして、種々の疾患のうちのいずれか１つの病因に関与する遺伝
子の発現を選択的に調節するための治療薬として、非常に魅力的なものにする。
【０００３】
アンチセンス技術は、１以上の特定の遺伝子産物の発現を低下させるための有効な手段
であり、それゆえに、多数の治療、診断および研究の用途において比類なく有用なものと
なり得る。化学的に修飾されたヌクレオチドは、１以上の特性（例えば、ヌクレアーゼ抵
抗性、薬物動態、または標的ＲＮＡに対する親和性）を高める目的で、アンチセンス化合
物内に組み込むために慣用的に使用されている。
アンチセンス技術の発見以後、理解が拡がっているにもかかわらず、より効率が高く、
毒性が低く、そしてコストが低いアンチセンス化合物に対する必要性は、満たされないま
まである。本開示まで、高親和性修飾は、インビボにおいて標的ＲＮＡを減少させるため
の短鎖アンチセンス化合物（ｓｈｏｒｔ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）の設
計において使用されてこなかった。これは、生きている系における標的を減少させるため
に使用される場合に、１５ヌクレオチド以下の配列が持つ標的特異性の程度に関する問題
に起因する。以前の研究では、より高い特異性、したがってより高い効果を持つ可能性が
、長さ１６核酸塩基（ｎｕｃｌｅｏｂａｓｅ）〜２０核酸塩基の間のアンチセンス化合物
によって達成されたことが記載されている。
【非特許文献１】Ｂｅｌｉｋｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔ．，１９６７，３７，３５５７−３５６２
【非特許文献２】Ｚａｍｅｃｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１９７８，７５，２８０−２８４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本開示は、アンチセンス化合物に化学的に修飾された高親和性ヌクレオチドを組み込む
ことで、効果が高まり、そして、治療指数が改善された、動物内の標的ＲＮＡの減少にお
いて有用な長さ約８〜１６核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物を与えるということを記載
する。したがって、本明細書において、インビボにおいて標的ＲＮＡを減少させるために
有用な高親和性ヌクレオチド修飾を含む短鎖アンチセンス化合物が提供される。このよう
な短鎖アンチセンス化合物は、以前に記載されたアンチセンス化合物よりも少ない用量で
有効であり、処置の毒性およびコストの低下を可能とする。
【０００５】
（要旨）
本明細書において、短鎖アンチセンス化合物と、細胞および組織における標的ＲＮＡ発
現を減少させるために上記化合物を使用する方法とが開示される。特定の実施形態では、
本明細書において、動物における標的の発現を減少させる方法が提供され、この方法は、
この動物にこのような標的の核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を投与す
る工程を包含する。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、オリゴヌクレオチ
ド化合物である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドは、長さが
約８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１４ヌ
クレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドであり、そして、両側の末端にウィ
ングが配置されたギャップ領域を含み、このウィングの各々は、独立して、１〜３のヌク
レオチドから構成される。好ましいモチーフとしては、３−１０−３、２−１０−３、２
−１０−２、１−１０−１、２−８−２、１−８−１、３−６−３または１−６−１から
選択されるウィング−デオキシギャップ−ウィングモチーフが挙げられるがこれらに限定
されない。好ましい実施形態では、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも
１つの高親和性修飾を含む。さらなる実施形態では、高親和性修飾は、化学的に修飾され
た高親和性ヌクレオチドを含む。好ましい実施形態では、ウィングの各々は、独立して、
１〜３の高親和性修飾されたヌクレオチドから構成される。一実施形態では、高親和性修
飾されたヌクレオチドは、糖修飾ヌクレオチドである。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、より長いアンチセンス化合物と比較
して、消化管内でより高い取り込みを示す。したがって、本明細書においてはまた、動物
における標的を減少する方法が提供され、この方法は、本発明の短鎖アンチセンス化合物
を経口投与する工程を包含する。
【０００６】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＡｐｏＢ、ＳＧＬＴ２、ＰＣＳＫ９
、ＳＯＤ１、ＣＲＰ、ＧＣＣＲ、ＧＣＧＲ、ＤＧＡＴ２、ＰＴＰ１ＢおよびＰＴＥＮから
選択されるタンパク質をコードする核酸に対して標的化される。
さらに、動物における代謝障害を処置する方法が提供され、この方法は、このような処
置を必要とする動物に、グルコースの代謝もしくはクリアランス、脂質代謝、コレステロ
ール代謝、または、インシュリンのシグナル伝達の調節に関与する核酸に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物を投与する工程を包含する。
また、動物において、インシュリン感受性を増大させるか、血中グルコースを低下させ
るか、または、ＨｂＡ１ｃを低下させる方法が提供され、これらの方法は、上記動物に、
グルコースの代謝もしくはクリアランス、脂質代謝、コレステロール代謝、または、イン
シュリンのシグナル伝達の調節に関与する標的をコードする核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物を投与する工程を包含する。
【０００７】
さらに、動物において全血清コレステロール、血清ＬＤＬ、血清ＶＬＤＬ、血清ＨＤＬ
、血清トリグリセリド、血清アポリポタンパク質（ａ）、または遊離脂肪酸を減少させる
方法が提供され、この方法は、上記動物に、グルコースの代謝もしくはクリアランス、脂
質代謝、コレステロール代謝、または、インシュリンのシグナル伝達の調節に関与する標
的をコードする核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を投与する工程を包含
し、上記短鎖アンチセンス化合物は、長さ８〜１６ヌクレオチドであり、そして、両側の
末端の各々にウィングが配置されたギャップ領域を含み、このウィングの各々は、独立し
て、１〜３の高親和性修飾ヌクレオチドから構成される。
【０００８】
グルコースの代謝もしくはクリアランス、脂質代謝、コレステロール代謝、またはイン
シュリンのシグナル伝達の調節に関与する特定の標的としては、ＧＣＧＲおよびＡｐｏＢ
−１００が挙げられるがこれらに限定される。したがって、ＧＣＧＲおよびＡｐｏＢ−１
００をコードする核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物、動物における前記標的およ
び／または標的核酸の発現を減少させる方法が提供される。さらに、代謝または心臓血管
の疾患または状態の処置のための、ＧＣＧＲおよびＡｐｏＢ−１００をコードする核酸を
標的とする短鎖アンチセンス化合物の使用が提供される。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物はさらに、共役基（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ
ｇｒｏｕｐ）を含む。共役基としては、Ｃ１６およびコレステロール（Ｃ１６  ａｎｄ
ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）が挙げられるがこれらに限定されない。
【０００９】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、少なくとも１つの修飾された核酸塩
基、ヌクレオシド間結合または糖部分を含む。特定の実施形態では、このような修飾され
たヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。特定の実施形
態では、各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、少なくとも１つの高親和性修飾を含
む。特定のこのような実施形態では、高親和性修飾は、化学的に修飾された高親和性ヌク
レオチドである。特定の実施形態では、化学的に修飾された高親和性ヌクレオチドは、糖
修飾ヌクレオチドである。特定の実施形態では、少なくとも１つの糖修飾ヌクレオチドは
、糖の４’位と２’位との間に架橋を含む。糖修飾ヌクレオチドの各々は、独立して、β
−Ｄまたはα−Ｌの糖立体配座をとる。特定の実施形態では、上記高親和性修飾ヌクレオ
チドの各々は、１ヌクレオチドあたり少なくとも１〜４℃のＴｍを与える。特定の実施形
態では、上記糖修飾ヌクレオチドの各々は、ＨまたはＯＨ以外の２’−置換基を含む。こ
のような糖修飾ヌクレオチドとしては、４’から２’へと架橋された二環式糖部分を有す
るものが挙げられる。特定の実施形態では、２’−置換基の各々は、独立して、アルコキ
シ、置換アルコキシ、またはハロゲンである。特定の実施形態では、２’−置換基の各々
は、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３（２’−ＭＯＥ）である。
【００１０】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、糖の４’位と２’位との間に架橋を
含む１以上の糖修飾ヌクレオチドを有し、上記架橋の各々は、独立して、２〜４の結合し
た基を含み、該結合した基は、独立して、−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−、−Ｃ（Ｒ１）
＝Ｃ（Ｒ２）−、−Ｃ（Ｒ１）＝Ｎ−、−Ｃ（＝ＮＲ１）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝
Ｓ）−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒ１）２−、−Ｓ（＝Ｏ）ｘ−および−Ｎ（Ｒ１）−から選択
され；
ここで
ｘは０、１または２であり；
ｎは１、２、３または４であり；
Ｒ１およびＲ２の各々は、独立して、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキ
ル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル
、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換
Ｃ５〜Ｃ２０アリール、複素環式基、置換複素環式基、ヘテロアリール、置換ヘテロアリ
ール、Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、置換Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、ハロゲン、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、
ＳＪ１、Ｎ３、ＣＯＯＪ１、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、ＣＮ、スルホニル
（Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ１）、またはスルホキシル（Ｓ（＝Ｏ）−Ｊ１）であり；そして
Ｊ１およびＪ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２ア
ルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニ
ル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換Ｃ５〜Ｃ２０アリール、
アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、複素環式基、置換複素環式基、Ｃ１〜Ｃ１２ア
ミノアルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、または保護基である。
【００１１】
一局面では、上記架橋の各々が、独立して、−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−、−［Ｃ（
Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−Ｏ−、−Ｃ（Ｒ１Ｒ２）−Ｎ（Ｒ１）−Ｏ−または−Ｃ（Ｒ１Ｒ２
）−Ｏ−Ｎ（Ｒ１）−である。別の局面では、上記架橋の各々が、独立して、４’−（Ｃ
Ｈ２）３−２’、４’−（ＣＨ２）２−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−２’、４’−（ＣＨ２
）２−Ｏ−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ１）−２’および４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１）
−Ｏ−２’−であり、ここで、Ｒ１の各々が、独立して、Ｈ、保護基、またはＣ１〜Ｃ１
２アルキルである。
特定の実施形態では、本明細書において、動物における疾患状態に関連する標的および
／または標的ＲＮＡを減少させるのに有用な短鎖アンチセンス化合物が提供される。特定
の実施形態では、動物における標的ＲＮＡの発現を減少させるために短鎖アンチセンス化
合物を用いる方法が提供される。特定の実施形態では、本明細書において、動物における
代謝障害の処置のための医薬の調製における短鎖アンチセンス化合物の使用が提供される
。特定の実施形態において、本明細書において、動物において、インシュリン感受性を増
大させるか、血中グルコースを低下させるか、または、ＨｂＡ１ｃを低下させるための医
薬の調製における短鎖アンチセンス化合物の使用が提供される。また、動物において全血
清コレステロール、血清ＬＤＬ、血清ＶＬＤＬ、血清ＨＤＬ、血清トリグリセリド、血清
アポリポタンパク質（ａ）、または遊離脂肪酸を減少させるための医薬の調製における短
鎖アンチセンス化合物の使用が提供される。
【００１２】
特定の実施形態では、本明細書中に提供される短鎖アンチセンス化合物は、長さ少なく
とも２０ヌクレオチドのより長い親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ｐａｒｅｎｔ  ａ
ｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）と比較して、標的ＲＮＡノックダ
ウンに関して、同等かもしくは増強された効力を示す。特定の実施形態では、短鎖アンチ
センス化合物は、親アンチセンスオリゴヌクレオチドと比較して、より速い作用（標的Ｒ
ＮＡの減少）の開始を示す。特定の実施形態では、効力は腎臓において増強される。特定
の実施形態では、標的ＲＮＡは、目立って腎臓において発現される。特定の実施形態では
、効力は肝臓において増強される。特定の実施形態では、標的ＲＮＡは、目立って肝臓に
おいて発現される。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
（詳細な説明）
上述の一般的な説明と以下の詳細な説明とは共に、特許請求される本発明を単に例示お
よび説明するのみであり、本発明を制限するものではないことが理解されるべきである。
本明細書において、単数形の使用は、具体的にそうでないと示されない限り、複数形を含
む。本明細書中で使用される場合、「または」の使用は、そうでないと示されない限り、
「および／または」を意味する。さらに、用語「含んでいる」、ならびに「含む」および
「含んだ」のような他の形態の使用は、限定的ではない。また、「要素」または「成分」
のような用語は、具体的にそうでないと示されない限り、１つのユニットを含む要素およ
び成分と、１より多いサブユニットを含む要素および成分と、の両方を包含する。
本明細書中で使用される節のタイトルは、組織化の目的のためのみのものであり、記載
される主題を限定するものとしてみなされるべきでない。本願において引用される全ての
文書または文書の一部（特許、特許出願、論文、書籍および専門書を含むがこれらに限定
されない）は、あらゆる目的のために、その全体が本明細書により明白に参考として援用
される。米国特許出願第１０／７１２，７９５号および同第１０／２００，７１０号は、
あらゆる目的のために、その全体が本明細書により明白に参考として援用される。
【００１４】
Ａ．定義
特定の定義が提供されない限り、本明細書中に記載される、分析化学、合成有機化学、
ならびに、医薬品化学および薬化学の手順および技術に関連して利用される用語は、当該
分野で周知でありかつ一般に使用される用語である。標準的な技術が、化学合成、化学分
析、薬の調製、処方および送達、ならびに、被験体の処置のために使用され得る。特定の
このような技術および手順は、例えば、「Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ」（ＳａｎｇｖｉおよびＣｏ
ｏｋ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ
Ｄ．Ｃ．，１９９４）および「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ
ｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐ
ａ．，第１８版、１９９０）；ならびに、あらゆる目的のために本明細書により参考とし
て援用されるものに見られ得る。可能な場合、本明細書中の開示全体にわたって参照され
る、全ての特許、出願、出願公開、および他の刊行物、ならびに、ＧｅｎＢａｎｋおよび
他のデータベースからの配列は、その全体が参考として援用される。
そうでないと示されない限り、以下の用語は、以下の意味を有する：
本明細書中で使用される場合、用語「ヌクレオシド」は、核酸塩基および糖を含むグリ
コシルアミンを意味する。ヌクレオシドとしては、天然に存在するヌクレオシド、無塩基
ヌクレオシド、修飾ヌクレオシド、ならびに、擬似塩基および／または糖基を有するヌク
レオシドが挙げられるがこれらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、用語「ヌクレオチド」は、核酸塩基と、糖にリン酸基が
共有結合された糖とを含むグリコソミン（ｇｌｙｃｏｓｏｍｉｎｅ）を指す。ヌクレオチ
ドは、任意の種々の置換基で修飾され得る。
【００１５】
本明細書中で使用される場合、用語「核酸塩基」は、ヌクレオシドまたはヌクレオチド
の塩基部分を指す。核酸塩基は、別の核酸の塩基に水素結合し得る任意の原子または原子
の基を含み得る。
本明細書中で使用される場合、用語「複素環式塩基部分」は、複素環を含む核酸塩基を
指す。
本明細書中で使用される場合、用語「デオキシリボヌクレオチド」は、ヌクレオチドの
糖部分の２’位に水素を有するヌクレオチドを意味する。デオキシリボヌクレオチドは任
意の種々の置換基で修飾され得る。
本明細書中で使用される場合、用語「リボヌクレオチド」は、ヌクレオチドの糖部分の
２’位にヒドロキシを有するヌクレオチドを意味する。リボヌクレオチドは、任意の種々
の置換基で修飾され得る。
【００１６】
本明細書中で使用される場合、用語「オリゴマー性化合物」は、２以上の部分構造を含
み、核酸分子の一領域に対してハイブリダイズし得るポリマー性構造を指す。特定の実施
形態では、オリゴマー性化合物は、オリゴヌクレオシドである。特定の実施形態では、オ
リゴマー性化合物は、オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態では、オリゴマー性化
合物は、アンチセンス化合物である。特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、アン
チセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、短鎖
アンチセンス化合物である。特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、短鎖アンチセ
ンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、キメラオ
リゴヌクレオチドである。
【００１７】
本明細書中で使用される場合、用語「モノマー」は、オリゴマーの単一のユニットを指
す。モノマーとしては、天然に存在するものであれ、修飾されたものであれ、ヌクレオシ
ドおよびヌクレオチドが挙げられるがこれらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、「オリゴヌクレオシド」は、ヌクレオシド間結合がリン
原子を含まないオリゴヌクレオチドを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「オリゴヌクレオチド」は、複数の結合したヌクレ
オチドを含むオリゴマー性化合物を指す。特定の実施形態では、オリゴヌクレオチドの１
以上のヌクレオチドが修飾される。特定の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、リボ核
酸（ＲＮＡ）およびデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）を含む。特定の実施形態では、オリゴヌ
クレオチドは、天然に存在する核酸塩基および／または天然に存在しない核酸塩基、糖、
ならびに、ヌクレオチド間の共有結合から構成され、そして、さらに、非核酸共役を含み
得る。
本明細書中で使用される場合、「ヌクレオチド間結合」は、隣接ヌクレオチド間の共有
結合を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「モノマー性結合」は、２つのモノマー間の共有結
合を指す。モノマー性結合としては、ヌクレオチド間結合およびヌクレオシド間結合が挙
げられるがこれらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、「天然に存在するヌクレオチド間結合」は、３’から５
’のホスホジエステル結合を指す。
【００１８】
本明細書中で使用される場合、用語「アンチセンス化合物」は、標的核酸分子に対し少
なくとも部分的に相補的なオリゴマー性化合物を指し、この標的核酸分子に、そのアンチ
センス化合物がハイブリッド形成する。特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、標
的核酸の発現を調節（増加または減少）する。アンチセンス化合物としては、オリゴヌク
レオチド、オリゴヌクレオシド、オリゴヌクレオチドアナログ、オリゴヌクレオチド模倣
物およびこれらのキメラ混合物である化合物が挙げられるがこれらに限定されない。論理
的に、全てのアンチセンス化合物はオリゴマー性化合物であるが、全てのオリゴマー性化
合物がアンチセンス化合物であるわけではない。
本明細書中で使用される場合、用語「アンチセンスオリゴヌクレオチド」は、オリゴヌ
クレオチドであるアンチセンス化合物を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ｐａｒｅｎ
ｔ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）」は、デオキシギャップ領
域を有し、かつ、対応する短鎖アンチセンス化合物（この短鎖アンチセンス化合物の親と
なる）の配列を含む長さ２０ヌクレオチドのオリゴヌクレオチドであって、このデオキシ
ギャップ領域が、両端に第１のウィング領域および第２のウィング領域を配置された１０
の２’−デオキシリボヌクレオチドを有し、このウィング領域の各々は、５の２’−Ｏ−
（２−メトキシエチル）リボヌクレオチドを有するもの（５−１０−５  ＭＯＥ  ギャッ
プマー）を指す。
【００１９】
本明細書中で使用される場合、用語「短鎖アンチセンス化合物」は、長さ約８、９、１
０、１１、１２、１３、１４、１５または１６モノマーのアンチセンス化合物を指す。特
定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、少なくとも１つの高親和性修飾を有する
。
本明細書中で使用される場合、用語「短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチド」は、長さ
約８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６ヌクレオチドのアンチセンス
オリゴヌクレオチドを指す。特定の実施形態では、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチド
は、少なくとも１つの高親和性修飾を有する。
本明細書中で使用される場合、用語「短鎖ギャップマー（ｓｈｏｒｔギャップマー）」
は、各々が独立して１〜３のヌクレオチドである第１のウィング領域および第２のウィン
グ領域と、長さ２〜１４核酸塩基のギャップ領域とを有する、短鎖アンチセンスオリゴヌ
クレオチドを指す。
【００２０】
本明細書中で使用される場合、用語「モチーフ」は、短鎖アンチセンス化合物内の非修
飾ヌクレオチドおよび修飾ヌクレオチドのパターンを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「キメラアンチセンスオリゴマー」は、同じアンチ
センスオリゴマー性化合物内の少なくとも１つの（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎ）他の糖、核
酸塩基またはヌクレオシド間結合におけるものと比べて異なるように修飾された、少なく
とも１つの糖、核酸塩基、またはヌクレオシド間結合を有するアンチセンスオリゴマー性
化合物を指す。糖、核酸塩基およびヌクレオシド間結合の残りは、独立して、修飾されて
いても修飾されていなくても、同じであっても異なっていてもよい。
本明細書中で使用される場合、用語「キメラアンチセンスオリゴヌクレオチド」は、同
じアンチセンスオリゴヌクレオチド内の少なくとも１つの（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎ）他
の糖、核酸塩基またはヌクレオシド間結合におけるものと比べて異なるように修飾された
、少なくとも１つの糖、核酸塩基、またはヌクレオシド間結合を有するアンチセンスオリ
ゴヌクレオチドを指す。糖、核酸塩基およびヌクレオシド間結合の残りは、独立して、修
飾されていても修飾されていなくても、同じであっても異なっていてもよい。
本明細書中で使用される場合、用語「混合型バックボーン（ｍｉｘｅｄ−ｂａｃｋｂｏ
ｎｅ）アンチセンスオリゴヌクレオチド」は、アンチセンスオリゴヌクレオチドの少なく
とも１つのヌクレオシド間結合が、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドの少なくとも１
つの他のヌクレオシド間結合と異なっているアンチセンスオリゴヌクレオチドを指す。
【００２１】
本明細書中で使用される場合、用語「標的」は、その調節が望ましいとされるタンパク
質を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「標的遺伝子」は、標的をコードする遺伝子を指す
。
本明細書中で使用される場合、用語「標的核酸」および「標的をコードする核酸分子」
は、その発現または活性がアンチセンス化合物により調節され得る、任意の核酸分子を指
す。標的核酸としては、標的をコードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ（プレｍＲＮＡお
よびｍＲＮＡまたはその一部分が挙げられるがこれらに限定されない）、そしてまた、こ
のようなＲＮＡから誘導されるｃＤＮＡおよびｍｉＲＮＡが挙げられるがこれらに限定さ
れない。例えば、標的核酸は、その発現が特定の障害または疾患状態と関連している細胞
内遺伝子（またはその遺伝子から転写されたｍＲＮＡ）、または、感染性因子に由来する
核酸分子であり得る。
【００２２】
本明細書中で使用される場合、用語「標的とする」または「〜に対して標的化された」
は、特定の標的核酸分子、または、標的核酸分子内のヌクレオチドの特定の領域に対する
、アンチセンス化合物の会合を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「５’標的部位」は、特定のアンチセンス化合物の
最も５’側のヌクレオチドに対して相補的な標的核酸のヌクレオチドを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「３’標的部位」は、特定のアンチセンス化合物の
最も３’側のヌクレオチドに対して相補的な標的核酸のヌクレオチドを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「標的領域」は、標的核酸分子の一部分であって、
その部分に対して１以上のアンチセンス化合物が相補的となる部分を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「標的セグメント」は、標的核酸内の一領域のより
小さい部分、または下位区分の部分を指す。
【００２３】
本明細書中で使用される場合、用語「核酸塩基の相補性」は、別の核酸塩基と塩基対形
成し得る核酸塩基を指す。例えば、ＤＮＡにおいて、アデニン（Ａ）はチミン（Ｔ）に対
して相補的である。例えば、ＲＮＡにおいて、アデニン（Ａ）はウラシル（Ｕ）に対して
相補的である。特定の実施形態では、相補的な核酸塩基は、その標的核酸の核酸塩基と塩
基対形成し得る、アンチセンス化合物の核酸塩基を指す。例えば、アンチセンス化合物の
特定の位置における核酸塩基が、標的核酸の特定の位置における核酸塩基と水素結合し得
る場合、オリゴヌクレオチドと標的核酸との間の水素結合の位置は、その核酸塩基対にお
いて相補的であるとみなされる。
【００２４】
本明細書中で使用される場合、用語「非相補性核酸塩基」は、互いに水素結合を形成し
ないか、または、他の方法でハイブリッド形成を支持する、核酸塩基の対を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「相補性」は、核酸塩基の相補性により別のオリゴ
マー性化合物または核酸とハイブリッド形成するオリゴマー性化合物の能力を指す。特定
の実施形態では、アンチセンス化合物およびその標的は、各分子中の十分な数の対応する
位置が互いに結合し得る核酸塩基により占有されていて、アンチセンス化合物と標的との
間で安定に会合することを可能にする場合に、互いに相補的となる。当業者は、オリゴマ
ー性化合物がその会合に残る能力を排除することなく、ミスマッチを含めることが可能と
なることを認識する。したがって、本明細書中において、ミスマッチである（すなわち、
標的の対応するヌクレオチドに対して相補的な核酸塩基ではない）約２０％までのヌクレ
オチドを含み得るアンチセンス化合物が記載される。好ましくは、アンチセンス化合物は
、約１５％以下、より好ましくは約１０％以下、最も好ましくは５％以下のミスマッチを
含むか、または、ミスマッチを含まない。残りのヌクレオチドは、相補的な核酸塩基、ま
たは、他の方法でハイブリッド形成を分断しない核酸塩基（例えば、ユニバーサル塩基）
である。当業者は、本明細書中に提供される化合物が、標的核酸に対して、少なくとも８
０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少
なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％相補的であるこ
とを認識する。
【００２５】
本明細書中で使用される場合、用語「ミスマッチ」は、相補的なオリゴマー性化合物内
の非相補的な核酸塩基を指す。
本明細書中で使用される場合、「ハイブリッド形成（ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）」
は、相補的なオリゴマー性化合物（例えば、アンチセンス化合物とその標的核酸）の対形
成を意味する。特定の機構に制限されないが、対形成の最も一般的な機構は、相補的なヌ
クレオシドまたはヌクレオチド塩基（核酸塩基）間の水素結合（Ｗａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃ
ｋ、Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎまたは逆Ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ水素結合であり得る）を伴う。例え
ば、天然の塩基アデニンは、天然の核酸塩基チミジンおよびウラシルに対して相補的な核
酸塩基であり、水素結合の形成により対形成する。天然の塩基グアニンは、天然の塩基シ
トシンおよび５−メチルシトシンに対して相補的な核酸塩基である。ハイブリッド形成は
、種々の状況下で起こり得る。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、用語「特異的にハイブリッド形成する」は、別の核酸部
位にハイブリッド形成するよりも高い親和性で、ある核酸部位に対してハイブリッド形成
するオリゴマー性化合物の能力を指す。特定の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレ
オチドは、１より多くの標的部位に対して特異的にハイブリッド形成する。
本明細書中で使用される場合、「設計する」または「設計された」とは、選択された核
酸分子と特異的にハイブリッド形成するオリゴマー性化合物を設計するプロセスを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「調節（ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ）」は、調節前の機
能または活性のレベルと比較した場合の、機能または活性の摂動（ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉ
ｏｎ）を指す。例えば、調節は、遺伝子発現の増加（刺激または誘導）または低下（阻害
または減少）のいずれかの変化を含む。さらなる例として、発現の調節は、プレｍＲＮＡ
のプロセシングにおけるスプライシング部位の選択を混乱させることを含み得る。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、用語「発現」は、遺伝子がコードする情報が細胞中に存
在し、そして作動している構造に変換される、あらゆる機能および段階を指す。このよう
な構造としては、転写および翻訳の生成物が挙げられるがこれらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、「改変体」は、ＤＮＡの同じゲノム領域から生成され得
る、選択的なＲＮＡ転写体を指す。改変体としては、同じゲノムＤＮＡから生成された転
写体（その開始位置または終止位置のいずれかにおいて同じゲノムＤＮＡから生成された
他の転写物とは異なる）であり、そして、イントロン配列およびエキソン配列の両方を含
む、「プレｍＲＮＡ改変体」が挙げられるがこれらに限定されない。改変体としてはまた
、選択的スプライシング接合部、または選択的な開始コドンおよび終止コドンを持つもの
が挙げられるがこれらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、「高親和性修飾モノマー」は、修飾により、高親和性修
飾モノマーを含むアンチセンス化合物のその標的核酸に対する親和性が増大されるように
、天然に存在するモノマーと比較して少なくとも１つの修飾された核酸塩基、ヌクレオシ
ド間結合または糖部分を有するモノマーを指す。高親和性修飾としては、２’−修飾され
た糖を含むモノマー（例えば、ヌクレオシドおよびヌクレオチド）が挙げられるがこれら
に限定されない。
【００２８】
本明細書中で使用される場合、用語「２’−修飾」または「２’−置換」は、２’位置
にＨまたはＯＨ以外の置換基を含む糖を意味する。２’−修飾モノマーとしては、２’置
換基（例えば、アリル、アミノ、アジド、チオ、Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル
、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（
ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）またはＯ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ
）から選択され、ここで、ＲｍおよびＲｎの各々が、独立して、Ｈ、または置換もしくは
非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルである）を持つＢＮＡおよびモノマー（例えば、ヌクレオ
シドおよびヌクレオチド）が挙げられるがこれらに限定されない。特定の実施形態では、
短鎖アンチセンス化合物は、式２’−Ｏ（ＣＨ２）ｎＨ（ここで、ｎは１〜６である）を
有さない２’修飾モノマーを含む。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物、式２
’−ＯＣＨ３を有さない２’修飾モノマーを含む。特定の実施形態では、短鎖アンチセン
ス化合物は、式または代替として、２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＯＣＨ３を有さない２’修飾モ
ノマーを含む。
本明細書中で使用される場合、用語「二環式核酸」または「ＢＮＡ」または「二環式ヌ
クレオシド」または「二環式ヌクレオチド」は、ヌクレオシドのフラノース部分が、フラ
ノース環上の２個の炭素原子をつなぐ架橋を含み、それにより、二環式環系を形成するヌ
クレオシドまたはヌクレオチドを指す。
【００２９】
本明細書中で使用される場合、そうでないと示されない限り、用語「メチレンオキシＢ
ＮＡ」は単独で、β−Ｄ−メチレンオキシＢＮＡを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「ＭＯＥ」は、２’−メトキシエチル置換基を指す
。
本明細書中で使用される場合、用語「ギャップマー」は、中央領域（「ギャップ」）と
、中央領域のいずれかの側にある領域（「ウィング」）とを含むキメラオリゴマー性化合
物を指し、ここで、ギャップは、各ウィングの修飾とは異なる少なくとも１つの修飾を含
む。このような修飾としては、核酸塩基、モノマー性結合、および糖修飾、ならびに、修
飾なし（非修飾）が挙げられる。したがって、特定の実施形態では、ウィングの各々にお
けるヌクレオチド結合は、ギャップにおけるヌクレオチド結合と異なる。特定の実施形態
では、ウィングの各々は、高親和性修飾されたヌクレオチドを含み、そして、ギャップは
、その修飾を含まないヌクレオチドを含む。特定の実施形態では、ギャップ内のヌクレオ
チドおよびウィング内のヌクレオチドは全て、高親和性修飾を含むが、ギャップ内の高親
和性修飾は、ウィング内の高親和性修飾とは異なる。特定の実施形態では、ウィング内の
修飾は互いに同じである。特定の実施形態では、ウィング内の修飾は互いに異なる。特定
の実施形態では、ギャップ内のヌクレオチドは修飾されず、そして、ウィング内のヌクレ
オチドは修飾される。特定の実施形態では、各ウィング内の修飾は同じである。特定の実
施形態では、一方のウィングにおける修飾は、もう一方のウィングにおける修飾とは異な
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ギャップ内に２’−デオキシヌク
レオチドを有し、そして、ウィング内に高親和性修飾されたヌクレオチドを有するギャッ
プマーである。
【００３０】
本明細書中で使用される場合、用語「プロドラッグ」は、内因性の酵素または他の化学
物質および／もしくは状態の作用により、身体またはその細胞内で活性な形態（すなわち
、薬物）へと変換される、不活性な形態で調製された治療剤を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「薬学的に受容可能な塩」は、活性な化合物の所望
の生物学的活性を保持し、その活性な化合物に対して所望されない毒性学上の影響を与え
ない、活性な化合物の塩を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「キャップ構造」または「末端キャップ部分」は、
アンチセンス化合物のいずれかの末端に組み込まれた化学的修飾を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「予防」は、状態または疾患の発病または発症を、
数時間から数日、好ましくは、数週間から数ヶ月の期間にわたり遅延または未然に防ぐこ
とを指す。
【００３１】
本明細書中で使用される場合、用語「改善」は、状態または疾患の重篤度の少なくとも
１つの指標を軽減することを指す。指標の重篤度は、当業者に公知の主観的尺度または客
観的尺度によって決定され得る。
本明細書中で使用される場合、用語「処置」は、本発明の組成物を投与して、疾患また
は状態の変更または改善を達成することを指す。予防、改善および／または処置は、疾患
もしくは状態の経過を変更するために、一定間隔で、または、その疾患もしくは状態の発
病前に、複数用量の投与を必要とし得る。さらに、単一の薬剤が、状態または疾患の予防
、改善および処置の各々のために、連続して、または、同時に、単一の個体において使用
され得る。
本明細書中で使用される場合、用語「薬学的因子（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ａ
ｇｅｎｔ）」は、被験体に投与したときに治療上の利益を提供する物質を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「治療上有効な量」は、薬学的因子の、動物に治療
上の利益を提供する量を指す。
本明細書中で使用される場合、「投与すること」は、動物に薬学的因子を提供すること
を意味し、医療の専門家による投与および自分での投与が挙げられるがこれらに限定され
ない。
【００３２】
本明細書中で使用される場合、用語「同時投与」は、２以上の薬学的因子を動物に投与
することを指す。２以上の薬学的因子は、単一の薬学的組成物中にあっても、別々の薬学
的組成物中にあってもよい。２以上の薬学的因子の各々は、同じ投与経路または異なる投
与経路により投与され得る。同時投与は、平行した投与または連続的な投与を包含する。
本明細書中で使用される場合、用語「薬学的組成物」は、個体への投与に適した物質の
混合物を指す。例えば、薬学的組成物は、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび滅菌水
溶液を含有し得る。
本明細書中で使用される場合、用語「個体」は、処置または治療のために選択されたヒ
トまたは非ヒト動物を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「動物」は、ヒトまたは非ヒト動物を指し、マウス
、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタおよび非ヒト霊長類（サルおよびチンパンジーを含
むがこれらに限定されない）が挙げられるがこれらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、用語「被験体」は、薬学的組成物が投与される動物を指
し、ヒトを含むがこれらに限定されない。
本明細書中で使用される場合、用語「持続期間」は、活性または事象が継続する期間を
指す。特定の実施形態では、処置の持続期間は、薬学的因子の用量が投与される期間であ
る。
【００３３】
本明細書中で使用される場合、用語「非経口投与」は、注射または注入による投与を指
す。非経口投与としては、皮下投与、静脈内投与または筋肉内投与が挙げられるがこれら
に限定されない。
本明細書中で使用される場合、用語「皮下投与」は、皮膚の直ぐ下への投与を指す。「
静脈内投与」は、静脈内への投与を意味する。
本明細書中で使用される場合、用語「用量」は、単回の投与において提供される薬学的
因子の特定の量を指す。特定の実施形態では、用量は、２以上のボーラス、錠剤または注
射で投与され得る。例えば、皮下投与が望ましい特定の実施形態では、所望される用量は
、単回の注射により容易には供給されない容量を必要とする。このような実施形態では、
所望される用量を達成するために２回以上の注射が使用され得る。特定の実施形態では、
用量は、個体内での注射部位の反応を最小限にするために、２回以上の注射で投与され得
る。
本明細書中で使用される場合、用語「投薬単位」は、薬学的因子が提供される形態を指
す。特定の実施形態では、投薬単位は、凍結乾燥したアンチセンスオリゴヌクレオチドを
含むバイアルである。特定の実施形態では、投薬単位は、再構成されたアンチセンスオリ
ゴヌクレオチドを含むバイアルである。
【００３４】
本明細書中で使用される場合、用語「薬学的因子」は、個体に投与されたときに治療上
の利益を提供する物質を指す。例えば、特定の実施形態では、アンチセンスオリゴヌクレ
オチドは薬学的因子である。
本明細書中で使用される場合、用語「活性な薬学的成分」は、所望の作用を提供する薬
学的組成物中の物質を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「治療上有効な量」は、薬学的因子の、個体に治療
上の利益を提供する量を指す。特定の実施形態では、アンチセンス化合物の治療上有効な
量は、観察可能な利益をもたらすために投与されることを必要とする量である。
【００３５】
本明細書中で使用される場合、用語「高コレステロール血症」は、血清コレステロール
の上昇により特徴付けられる状態を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「高脂血症」は、血清脂質の上昇により特徴付けら
れる状態を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「高トリグリセリド血症」は、トリグリセリドレベ
ルの上昇により特徴付けられる状態を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「非家族性高コレステロール血症」は、単一の遺伝
子変異の遺伝の結果ではない、コレステロールの上昇により特徴付けられる状態を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「多遺伝子性高コレステロール血症」は、種々の遺
伝的要因の影響から生じるコレステロールの上昇により特徴付けられる状態を指す。特定
の実施形態では、多遺伝子性高コレステロール血症は、脂質の食事による摂取によって悪
化され得る。
【００３６】
本明細書中で使用される場合、用語「家族性高コレステロール血症（ＦＨ）」は、ＬＤ
Ｌ−レセプター（ＬＤＬ−Ｒ）遺伝子における変異、ＬＤＬ−Ｃの顕著な増加、およびア
テローム製動脈硬化症の早まった発病によって特徴付けられる、常染色体優性の代謝障害
を指す。家族性高コレステロール血症の診断は、個体が以下の基準のうち１以上を満たす
場合になされる：遺伝子検査が２つの変異ＬＤＬ−レセプター遺伝子を確認する；遺伝子
検査が、１つの変異ＬＤＬ−レセプター遺伝子を確認する；５００ｍｇ／ｄＬを上回る未
処理血清ＬＤＬ−コレステロールの記録歴；１０歳より前の腱および／もしくは皮膚の黄
色腫；または、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症と両立する脂質低下治療の前に
、両親が血清ＬＤＬ−コレステロールの上昇を記録されている。
本明細書中で使用される場合、用語「ホモ接合性家族性高コレステロール血症」または
「ＨｏＦＨ」は、母性および父性の両方のＬＤＬ−Ｒ遺伝子における変異によって特徴付
けられる状態を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症」また
は「ＨｅＦＨ」は、母性または父性のいずれかのＬＤＬ−Ｒ遺伝子における変異によって
特徴付けられる状態を指す。
【００３７】
本明細書中で使用される場合、用語「混合型脂質異常症」は、血清コレステロールの上
昇および血清トリグリセリドの上昇によって特徴付けられる状態を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「糖尿病性脂質異常症」または「脂質異常症を伴う
ＩＩ型糖尿病」は、ＩＩ型糖尿病、ＨＤＬ−Ｃの減少、血清トリグリセリドの上昇、およ
び低密度ＬＤＬ粒子（ｓｍａｌｌ  ｄｅｎｓｅ  ＬＤＬ  ｐａｒｔｉｃｌｅ）の増大によ
って特徴付けられる状態を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「ＣＨＤのリスク等価物（ｒｉｓｋ  ｅｑｕｉｖａ
ｌｅｎｔ）」は、冠動脈心疾患の高いリスクを与える、臨床上のアテローム性動脈硬化疾
患の指標を指す。例えば、特定の実施形態では、ＣＨＤのリスク等価物としては、臨床上
の冠動脈心疾患、症候性頚動脈疾患、末梢動脈疾患、および／または、腹部大動脈瘤が挙
げられるがこれらに限定されない。
【００３８】
本明細書中で使用される場合、用語「非アルコール性脂肪肝病（ＮＡＦＬＤ）」は、過
度のアルコールの使用（例えば、２０ｇ／日を超えるアルコール消費）に起因しない、肝
臓の脂肪性炎症により特徴付けられる状態を指す。特定の実施形態では、ＮＡＦＬＤは、
インシュリン抵抗性およびメタボリック症候群に関連する。
本明細書中で使用される場合、用語「非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）」は、過
度のアルコールの使用に起因しない、肝臓における脂肪および線維性組織の炎症および蓄
積によって特徴付けられる状態を指す。ＮＡＳＨは、ＮＡＦＬＤの最終形態である。
本明細書中で使用される場合、用語「主要危険因子」は、特定の疾患または状態に対す
る高いリスクに寄与する因子を指す。特定の実施形態では、冠動脈心疾患に対する主要危
険因子としては、喫煙、高血圧、低ＨＤＬ−Ｃ、冠動脈心疾患の家族暦および年齢が挙げ
られるがこれらに限定されない。
【００３９】
本明細書中で使用される場合、用語「ＣＨＤ危険因子」は、ＣＨＤのリスク等価物およ
び主要危険因子を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「冠動脈心疾患（ＣＨＤ）」は、心臓に血液および
酸素を供給する細い血管の狭窄を指し、これは、しばしば、アテローム性動脈硬化症の結
果である。
本明細書中で使用される場合、用語「冠動脈心疾患リスクの低下」は、個体が冠動脈心
疾患を発症する可能性の低下を指す。特定の実施形態では、冠動脈心疾患リスクの低下は
、１以上のＣＨＤ危険因子における改善（例えば、ＬＤＬ−Ｃレベルの低下）により判定
される。
【００４０】
本明細書中で使用される場合、用語「アテローム性動脈硬化症」は、大きなサイズおよ
び中程度のサイズの動脈に影響を与える、動脈の硬化を指し、そして、脂肪の沈着の存在
によって特徴付けられる。脂肪の沈着は、「アテローム」または「プラーク」と呼ばれ、
主に、コレステロール、ならびに他の脂肪、カルシウムおよび瘢痕組織から構成され、動
脈の内層に損傷を与える。
本明細書中で使用される場合、用語「冠動脈心疾患の病歴」は、個体または個体の家族
メンバーの病歴における、臨床的に明間冠動脈心疾患の存在を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「冠動脈心疾患の早期発病」は、５０歳より前の冠
動脈心疾患の診断を指す。
【００４１】
本明細書中で使用される場合、用語「スタチン不耐性の個体」は、スタチン療法の結果
として、クレアチンキナーゼの増加、肝機能検査の異常、筋肉痛、または、中枢神経系の
副作用のうち１つ以上を経験する個体を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「効能（ｅｆｆｉｃａｃｙ）」は、所望の作用を生
み出す能力を指す。例えば、脂質低下治療の効能は、ＬＤＬ−Ｃ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ
−Ｃ、非ＨＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ、リポタンパク質（ａ）またはトリグリセリドのうち１以
上の濃度における減少であり得る。
本明細書中で使用される場合、用語「受容可能な安全性プロフィール」は、臨床上受容
可能な限界である、副作用のパターンを指す。
【００４２】
本明細書中で使用される場合、用語「副作用」は、所望の作用以外の、処置に起因する
と考えられる生理学的応答を指す。特定の実施形態では、副作用としては、注射部位の反
応、肝機能検査の異常、腎機能の異常、肝毒性、腎毒性、中枢神経系の異常、およびミオ
パシーが挙げられるがこれらに限定されない。例えば、血清中のアミノトランスフェラー
ゼレベルの上昇は、肝毒性または肝機能の異常を示し得る。例えば、ビリルビンの上昇は
、肝毒性または肝機能の異常を示し得る。
本明細書中で使用される場合、用語「注射部位の反応」は、個体内の注射部位における
、皮膚の炎症または異常な赤みを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「個体のコンプライアンス」は、推奨または予測さ
れる治療に対する、個体による忠実さを指す。
【００４３】
本明細書中で使用される場合、用語「脂質低下治療（ｌｉｐｉｄ−ｌｏｗｅｒｉｎｇ  
ｔｈｅｒａｐｙ）」は、個体において１以上の脂質を低下させるために、個体に提供され
る治療レジメンを指す。特定の実施形態では、脂質低下治療は、個体における、ＡｐｏＢ
、総コレステロール、ＬＤＬ−Ｃ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−Ｃ、トリグリ
セリド、低密度ＬＤＬ粒子、およびＬｐ（ａ）のうちの１以上を低下させるために提供さ
れる。
本明細書中で使用される場合、用語「脂質低下因子」は、個体における脂質の低下を達
成するために個体に対して提供される薬学的因子を指す。例えば、特定の実施形態では脂
質低下因子は、ＡｐｏＢ、ＬＤＬ−Ｃ、総コレステロールおよびトリグリセリドのうち１
以上を低下させるために個体に対して提供される。
本明細書中で使用される場合、用語「ＬＤＬ−Ｃの目標」は、脂質低下治療の後に所望
されるＬＤＬ−Ｃのレベルを指す。
【００４４】
本明細書中で使用される場合、用語「従う（ｃｏｍｐｌｙ）」は、推奨される治療に対
する、個体による忠実さを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「推奨される治療は」、疾患の処置、改善、または
予防のために医療の専門家により推奨される治療レジメンを指す。
本明細書中で使用される場合、用語「低ＬＤＬ−レセプター活性」は、血流中のＬＤＬ
−Ｃの臨床上受容可能なレベルを維持するには十分に高くないＬＤＬ−レセプター活性を
指す。
本明細書中で使用される場合、用語「心血管の結果（ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  
ｏｕｔｃｏｍｅ）」は、主要な心血管の不都合な事象の存在を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「心血管の結果の改善（ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｃａｒ
ｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｏｕｔｃｏｍｅ）」は、主要な心血管の不都合な事象の存在、
またはそのリスクの減少を指す。主要な心血管の不都合な事象の例としては、死、再梗塞
、脳卒中、心原性ショック、肺浮腫、心停止および心房性不整脈が挙げられるがこれらに
限定されない。
【００４５】
本明細書中で使用される場合、用語「心血管の結果の代理マーカー」は、心血管事象ま
たはそのリスクの間接的な指標を指す。例えば、心血管の結果の代理マーカーとしては、
頚動脈内膜中膜の厚み（ｉｎｔｉｍａｌ  ｍｅｄｉａ  ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ）（ＣＩＭＴ
）が挙げられる。心血管の結果の代理マーカーの別の例としては、アテロームのサイズが
挙げられる。アテロームのサイズは、脈管内超音波（ＩＶＵＳ）により決定され得る。
本明細書中で使用される場合、用語「ＨＤＬ−Ｃの増加」は、個体における血清ＨＤＬ
−Ｃの経時的な増加を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「脂質低下」は、個体における１以上の血清脂質の
経時的な減少を指す。
本明細書中で使用される場合、用語「代謝障害」は、代謝機能の変更または逸脱によっ
て特徴付けられる状態を指す。「代謝性」および「代謝」は、当該分野で周知の用語であ
り、一般に、生きている生物内で生じる生化学的プロセスの全範囲を包含する。代謝障害
としては、高血糖、糖尿病前症、糖尿病（Ｉ型およびＩＩ型）、肥満、インシュリン抵抗
性およびメタボリック症候群が挙げられるがこれらに限定されない。
【００４６】
本明細書中で使用される場合、用語「メタボリック症候群」は、代謝起源の脂質および
非脂質性の心血管危険因子のクラスターを指す。メタボリック症候群は、インシュリン抵
抗性として知られる一般化された代謝障害と密接に関連している。Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃ
ｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）Ａｄｕｌｔ  
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｐａｎｅｌ  ＩＩＩ（ＡＴＰ  ＩＩＩ）は、５つ中３以上のリスク
決定要素が存在する場合の、メタボリック症候群の診断についての基準を確立した。５つ
のリスク決定要素は、男性について１０２ｃｍより大きい胴囲、または、女性について８
８ｃｍより大きい胴囲として規定される腹部肥満、１５０ｍｇ／ｄＬ以上のトリグリセリ
ドレベル、男性について４０ｍｇ／ｄＬ未満そして女性について５０ｍｇ／ｄＬ未満のＨ
ＤＬコレステロールレベル、１３０／８５ｍｍＨｇ以上の血圧、ならびに、１１０ｍｇ／
ｄＬ以上の空腹時グルコースレベルである。これらの決定要素は、臨床上の実務において
容易に測定され得る（ＪＡＭＡ，２００１，２８５：２４８６−２４９７）。
【００４７】
用語「アルキル」は、本明細書中で使用される場合、２４個までの炭素原子を含む飽和
の直鎖または分枝の炭化水素基を指す。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロ
ピル、ブチル、イソプロピル、ｎ−ヘキシル、オクチル、デシル、ドデシルなどが挙げら
れるがこれらに限定されない。アルキル基は代表的に、１〜約２４個の炭素原子、より代
表的には１〜約１２個の炭素原子（Ｃ１〜Ｃ１２アルキル）を含むが、１〜約６個の炭素
原子がより好ましい。用語「低級アルキル」は、本明細書中で使用される場合、１〜約６
個の炭素原子を含む。アルキル基は、本明細書中で使用される場合、必要に応じて１以上
のさらなる置換基を含み得る。
【００４８】
用語「アルケニル」は、本明細書中で使用される場合、２４個までの炭素原子を含み、
かつ、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する、直鎖または分枝の炭化水素鎖基を
指す。アルケニル基の例としては、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−
ブテン−１−イル、ジエン（例えば、１，３−ブタジエン）などが挙げられるがこれらに
限定されない。アルケニル基は代表的に、２〜約２４個の炭素原子、より代表的には、２
〜約１２個の炭素原子を含むが、２〜約６個の炭素原子がより好ましい。アルケニル基は
、本明細書中で使用される場合、必要に応じて１以上のさらなる置換基を含み得る。
用語「アルキニル」は、本明細書中で使用される場合、２４個までの炭素原子を含み、
かつ、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有する、直鎖または分枝の炭化水素基を指
す。アルキニル基の例としては、エチニル、１−プロピニル、１−ブチニルなどが挙げら
れるがこれらに限定されない。アルキニル基は代表的に、２〜約２４個の炭素原子、より
代表的には、２〜約１２個の炭素原子を含むが、２〜約６個の炭素原子がより好ましい。
アルキニル基は、本明細書中で使用される場合、必要に応じて１以上のさらなる置換基を
含み得る。
【００４９】
用語「アミノアルキル」は、本明細書中で使用される場合、アミノ置換されたアルキル
基を指す。この用語は、任意の位置にアミノ置換基を有するＣ１〜Ｃ１２アルキル基を含
むことが意味され、アルキル基が、親分子にアミノアルキル基を結合させる。アミノアル
キル基のアルキル部分および／またはアミノ部分は、さらに、置換基で置換され得る。
用語「脂肪族」は、本明細書中で使用される場合、２４個までの炭素原子を含む直鎖ま
たは分枝の炭化水素基を指し、ここで、任意の２個の炭素原子間の飽和（ｓａｔｕｒａｔ
ｉｏｎ）は、一重結合、二重結合または三重結合である。脂肪族基は、好ましくは、１〜
約２４個の炭素原子、より代表的には１〜約１２個の炭素原子を含むが、１〜約６個の炭
素原子がより好ましい。脂肪族基の直鎖または分枝鎖は、窒素、酸素、硫黄およびリンを
含む１以上のヘテロ原子で中断され得る。ヘテロ原子により中断されるこのような脂肪族
基としては、ポリアルキレングリコール、ポリアミンおよびポリイミンのようなポリアル
コキシ類が挙げられるがこれらに限定されない。脂肪族基は、本明細書中で使用される場
合、必要に応じて、さらなる置換基を含み得る。
【００５０】
用語「脂環式（ａｌｉｃｙｃｌｉｃ）」または「脂環式（ａｌｉｃｙｃｌｙｌ）」は、
環が脂肪族である環式環系を指す。この環系は、１以上の環を含み、この環のうち少なく
とも１つが脂肪族である。好ましい脂環式としては、環中に約５〜約９個の炭素原子を有
する環が挙げられる。脂環式は、本明細書中で使用される場合、必要に応じて、さらなる
置換基を含み得る。
用語「アルコキシ」は、本明細書中で使用される場合、アルキル基と酸素原子との間に
形成される基を指し、ここでは、酸素原子が、親分子にアルコキシ基を結合させるために
使用される。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポ
キシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ネオペ
ントキシ、ｎ−ヘキソキシなどが挙げられるがこれらに限定されない。アルコキシ基は、
本明細書中で使用される場合、必要に応じて、さらなる置換基を含み得る。
用語「ハロ」および「ハロゲン」は、本明細書中で使用される場合、フッ素、塩素、臭
素およびヨウ素から選択される原子である。
【００５１】
用語「アリール」および「芳香族」は、本明細書中で使用される場合、１以上の芳香族
環を有する、単環式または多環式の炭素環式環系基を指す。アリール基の例としては、ペ
ンチル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどが挙げられるが
これらに限定されない。好ましいアリール環系は、１以上の環中に約５〜約２０個の炭素
原子を有する。アリール基は、本明細書中で使用される場合、必要に応じて、さらなる置
換基を含み得る。
用語「アラルキル」および「アリールアルキル」は、本明細書中で使用される場合、ア
ルキル基とアリール基との間に形成される基であり、ここでは、アルキル基が、親分子に
アラルキル基を結合させるために使用される。例としては、ベンジル、フェネチルなどが
挙げられるがこれらに限定されない。アラルキル基は、本明細書中で使用される場合、必
要に応じて、この基を形成するアルキル基、アリール基または両方の基に結合されたさら
なる置換基を含み得る。
【００５２】
用語「複素環式基」は、本明細書中で使用される場合、少なくとも１個のヘテロ原子を
含み、不飽和、部分飽和もしくは完全飽和の、単環式または多環式の環系基を指し、それ
により、ヘテロアリール基を含む。複素環式はまた、縮合環のうちの１つ以上が、少なく
とも１個のヘテロ原子を含み、かつ、他の環が１以上のヘテロ原子を含んでいても、必要
に応じてヘテロ原子を含まなくてもよい、縮合環系を含むことが意味される。複素環式基
は代表的に、硫黄、窒素または酸素から選択される少なくとも１個の原子を含む。複素環
式基の例としては、［１，３］ジオキソラン、ピロリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジ
ニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキサゾリジ
ニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、キ
ノキサリニル、ピリダジノニル、テトラヒドロフリルなどが挙げられる。複素環式基は、
本明細書中で使用される場合、必要に応じて、さらなる置換基を含み得る。
【００５３】
用語「ヘテロアリール」および「複素環式芳香族」は、本明細書中で使用される場合、
環のうち少なくとも１つが芳香族であり、そして、１以上のヘテロ原子を含む、単環式ま
たは多環式の、芳香族の環、環系または縮合環系を含む基を指す。ヘテロアリールはまた
、縮合環のうち１つ以上がヘテロ原子を含まない縮合環系を含むことが意味される。ヘテ
ロアリール基は代表的に、硫黄、窒素または酸素から選択される１個の環原子を含む。ヘ
テロアリール基の例としては、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラ
ゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル
、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイ
ミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノキサリニルなどが挙げられるがこれらに限定され
ない。ヘテロアリール基は、直接、または、脂肪族基もしくはヘテロ原子のような連結部
分を介して親分子に結合され得る。ヘテロアリール基は、本明細書中で使用される場合、
必要に応じて、さらなる置換基を含み得る。
【００５４】
用語「ヘテロアリールアルキル」は、本明細書中で使用される場合、アルキル基を有す
る、先に規定されたヘテロアリール基を指し、このアルキル基は、親分子にヘテロアリー
ルアルキル基を結合させ得る。例としては、ピリジニルメチル、ピリミジニルエチル、ナ
フチリジニルプロピル（ｎａｐｔｈｙｒｉｄｉｎｙｌｐｒｏｐｙｌ）などが挙げられるが
これらに限定されない。ヘテロアリールアルキル基は、本明細書中で使用される場合、必
要に応じて、ヘテロアリール部分またはアルキル部分の一方または両方に、さらなる置換
基を含み得る。
用語「単環式または多環式の構造」は、本発明において使用される場合、縮合または連
結された環を有する単環式または多環式である全ての環系を含み、そして、独立して、脂
肪族、脂環式、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、アリールアルキル、複素環式、
ヘテロアリール、複素環式芳香族、ヘテロアリールアルキルから選択される単一および混
合型の環系を含むことが意味される。このような単環式および多環式の構造は、一様であ
るか、または、完全飽和、部分飽和もしくは完全不飽和を含む種々の飽和の程度を有する
環を含み得る。各環は、Ｃ、Ｎ、ＯおよびＳから選択される環原子を含んで、複素環式環
、および、Ｃのみの環原子を含む環を形成し得、これらは、例えば、ベンゾイミダゾール
（１つの環は炭素のみの環原子を有し、そして、縮合環は２個の窒素原子を有する）のよ
うな混合モチーフで存在し得る。単環式または多環式の構造は、さらに、例えば、フタル
イミド（環のうちの１つに結合された２個の＝Ｏ基を有する）のような置換基で置換され
得る。別の局面では、単環式または多環式の構造は、環原子を介して直接、置換基もしく
は二官能性連結部分を介して、親分子に結合され得る。
【００５５】
用語「アシル」は、本明細書中で使用される場合、有機酸に由来するヒドロキシル基を
除去することにより形成され、そして、一般式−Ｃ（Ｏ）−Ｘを有する基を指し、ここで
、Ｘは、代表的には、脂肪族、脂環式または芳香族である。例としては、脂肪族カルボニ
ル、芳香族カルボニル、脂肪族スルホニル、芳香族スルフィニル、脂肪族スルフィニル、
芳香族ホスフェート、脂肪族ホスフェートなどが挙げられる。アシル基は、本明細書中で
使用される場合、必要に応じて、さらなる置換基を含み得る。
用語「ヒドロカルビル」は、Ｃ、ＯおよびＨを含む基を包含する。あらゆる飽和の程度
を有する直鎖、分枝および環式の基が包含される。このようなヒドロカルビル基としては
、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１以上のヘテロ原子を含み得、そしてさらに、１以上の
置換基で一置換または多置換され得る。
【００５６】
用語「置換基（ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ）」および「置換基（ｓｕｂｓｔｉｔｕｅｎｔ
ｇｒｏｕｐ）」は、本明細書中で使用される場合、代表的には、所望の特性を高めるか
、または所望の作用を与えるように、他の基または親化合物に結合される基を含む。置換
基は、保護または脱保護され得、そして、親化合物中の１つの利用可能な部位または多数
の利用可能な部位に結合され得る。置換基はまた、他の置換基でさらに置換され得、そし
て、直接、または、アルキル基もしくはヒドロカルビル基のような連結基を介して親化合
物に結合され得る。このような基としては、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキル、アルケ
ニル、アルキニル、アシル（−Ｃ（Ｏ）Ｒａａ）、カルボキシル（−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒａａ
）、脂肪族基、脂環式基、アルコキシ、置換オキソ（−Ｏ−Ｒａａ）、アリール、アラル
キル、複素環式、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、アミノ（−ＮＲｂｂＲｃｃ
）、イミノ（＝ＮＲｂｂ）、アミド（−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂｂＲｃｃまたは−Ｎ（Ｒｂｂ）Ｃ
（Ｏ）Ｒａａ）、アジド（−Ｎ３）、ニトロ（−ＮＯ２）、シアノ（−ＣＮ）、カルバミ
ド（−ＯＣ（Ｏ）ＮＲｂｂＲｃｃまたは−Ｎ（Ｒｂｂ）Ｃ（Ｏ）ＯＲａａ）、ウレイド（
−Ｎ（Ｒｂｂ）Ｃ（Ｏ）ＮＲｂｂＲｃｃ）、チオウレイド（−Ｎ（Ｒｂｂ）Ｃ（Ｓ）ＮＲ
ｂｂＲｃｃ）、グアニジニル（−Ｎ（Ｒｂｂ）Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＮＲｂｂＲｃｃ）、アミ
ジニル（−Ｃ（＝ＮＲｂｂ）ＮＲｂｂＲｃｃまたは−Ｎ（Ｒｂｂ）Ｃ（ＮＲｂｂ）Ｒａａ
）、チオール（−ＳＲｂｂ）、スルフィニル（−Ｓ（Ｏ）Ｒｂｂ）、スルホニル（−Ｓ（
Ｏ）２Ｒｂｂ）、スルホンアミジル（−Ｓ（Ｏ）２ＮＲｂｂＲｃｃまたは−Ｎ（Ｒｂｂ）
Ｓ（Ｏ）２Ｒｂｂ）および共役基が挙げられるがこれらに限定されない。Ｒａａ、Ｒｂｂ
およびＲｃｃの各々は、独立して、Ｈ、必要に応じて連結された化学官能基であるか、ま
たは、好ましいリスト（Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、脂肪族、アルコキシ、
アシル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、脂環式、複素環式およびヘテロアリー
ルアルキルが挙げられるがこれらに限定されない）でさらに置換され得る。
【００５７】
Ｂ．特定のオリゴマー性化合物
特定の実施形態では、オリゴマー性化合物を、ＤＮＡまたはＲＮＡのような天然に存在
するオリゴマーと比べて、化学的に修飾することが望ましい。特定のこのような修飾は、
オリゴマー性化合物の活性を変更する。特定のこのような化学修飾は、例えば、以下によ
って活性を変更し得る：その標的核酸に対するアンチセンス化合物の親和性を高める、１
以上のヌクレアーゼに対するその抵抗性を高める、そして／または、オリゴマー性化合物
の薬物動態もしくは組織分布を変更する。特定の場合において、その標的に対するオリゴ
マー性化合物の親和性を高める化学の使用は、より短いオリゴマー性化合物の使用を可能
にし得る。
【００５８】
１．特定のモノマー
特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、１以上の修飾モノマーを含む。特定のこ
のような実施形態では、オリゴマー性化合物は、１以上の高親和性モノマーを含む。特定
の実施形態では、このような高親和性モノマーは、２’−修飾糖を含むモノマー（例えば
、ヌクレオシドおよびヌクレオチド）から選択され、２’−置換基（例えば、アリル、ア
ミノ、アジド、チオ、Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ
２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ
）（Ｒｎ）またはＯ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）、ここで、ＲｍおよびＲ
ｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルである）を
有するＢＮＡおよびモノマー（例えば、ヌクレオシドおよびヌクレオチド）が挙げられる
がこれらに限定されない。
【００５９】
特定の実施形態では、本発明の短鎖アンチセンス化合物を含むがこれに限定されないオ
リゴマー性化合物は、オリゴマー性化合物が、２’−Ｏ（ＣＨ２）ｎＨ（ここで、ｎは１
〜６である）を含むヌクレオチドを含まないという条件で、１以上の高親和性部分を含む
。
特定の実施形態では、本発明の短鎖アンチセンス化合物を含むがこれに限定されないオ
リゴマー性化合物は、オリゴマー性化合物が、２’−ＯＣＨ３または２’−Ｏ（ＣＨ２）
２ＯＣＨ３を含むヌクレオチドを含まないという条件で、１以上の高親和性部分を含む。
特定の実施形態では、本発明の短鎖アンチセンス化合物を含むがこれに限定されないオ
リゴマー性化合物は、オリゴマー性化合物が、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−
Ｏ−２’）ＢＮＡを含まないという条件で、１以上の高親和性部分を含む。
特定の実施形態では、本発明の短鎖アンチセンス化合物を含むがこれに限定されないオ
リゴマー性化合物は、オリゴマー性化合物が、β−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−
Ｏ−２’）ＢＮＡを含まないという条件で、１以上の高親和性部分を含む。
特定の実施形態では、本発明の短鎖アンチセンス化合物を含むがこれに限定されないオ
リゴマー性化合物は、オリゴマー性化合物が、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−
Ｏ−２’）ＢＮＡまたはβ−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡを含
まないという条件で、１以上の高親和性部分を含む。
【００６０】
ａ．特定の核酸塩基
ヌクレオシドの天然に存在する塩基部分は、代表的には、複素環式塩基である。このよ
うな複素環式塩基の２つの最も一般的な分類は、プリンおよびピリミジンである。ペント
フラノシル糖を含むこれらのヌクレオシドに関して、リン酸基は、糖の２’、３’または
５’のヒドロキシル部分に結合され得る。オリゴヌクレオチドを形成する際、これらのリ
ン酸基は、隣接するヌクレオシドを互いに共有結合し、直鎖状のポリマー化合物を形成す
る。オリゴヌクレオチド内では、リン酸基は、一般に、オリゴヌクレオチドのヌクレオチ
ド間バックボーンを形成するものとして解釈される。ＲＮＡおよびＤＮＡの天然に存在す
る結合またはバックボーンは、３’から５’へのホスホジエステル結合である。
プリン核酸塩基である、アデニン（Ａ）およびグアニン（Ｇ）、ならびに、ピリミジン
核酸塩基であるチミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）およびウラシル（Ｕ）のような、「修飾さ
れた」または「天然の」核酸塩基に加え、当業者に公知の修飾された核酸塩基または核酸
塩基模倣物の多くが、本明細書中に記載される化合物になじみやすい。特定の実施形態で
は、修飾された核酸塩基は、例えば、７−デアザプリン、５−メチルシトシンまたはＧ−
クランプのような、親核酸塩基に対して構造がかなり類似する核酸塩基である。特定の実
施形態では、核酸塩基模倣物としては、例えば、三環式フェノキサジン核酸塩基模倣物の
ようなより複雑な構造が挙げられる。上述のような修飾核酸塩基を調製するための方法は
、当業者に周知である。
【００６１】
ｂ．特定の糖
本明細書中で提供されるオリゴマー性化合物は、修飾された糖部分を有する１以上のモ
ノマー（ヌクレオシドまたはヌクレオチドを含む）を含み得る。例えば、ヌクレオシドの
フラノシル糖環は、多数の方法（置換基の付加、同一の原子に結合した環原子ではない２
個の環原子を架橋して、二環式核酸（ＢＮＡ）を形成すること、が挙げられるがこれらに
限定されない）で修飾され得る。
特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、ＢＮＡである１以上のモノマーを含む。
特定のこのような実施形態では、ＢＮＡとしては、以下の図１に記載されるような、（Ａ
）α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、（Ｂ）β−Ｄ−メチレン
オキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、（Ｃ）エチレンオキシ（４’−（ＣＨ２）２
−Ｏ−２’）ＢＮＡ、（Ｄ）アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡ
および（Ｅ）オキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡが挙げられるが
これらに限定されない。
【化１】
2014033674.tif 000002
【００６２】
特定の実施形態では、ＢＮＡ化合物としては、糖の４’位と２’位との間に少なくとも
１つの架橋を有する化合物が挙げられ（これに限定されない）、ここで、架橋の各々は、
独立して、１または２〜４の結合した基を含み、この結合した基は、独立して、−［Ｃ（
Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−、−Ｃ（Ｒ１）＝Ｃ（Ｒ２）−、−Ｃ（Ｒ１）＝Ｎ−、−Ｃ（＝Ｎ
Ｒ１）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒ１）２−、−Ｓ（＝Ｏ
）ｘ−および−Ｎ（Ｒ１）−から選択され；
ここで
ｘは０、１または２であり；
ｎは１、２、３または４であり；
Ｒ１およびＲ２の各々は、独立して、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキ
ル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル
、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換
Ｃ５〜Ｃ２０アリール、複素環式基、置換複素環式基、ヘテロアリール、置換ヘテロアリ
ール、Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、置換Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、ハロゲン、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、
ＳＪ１、Ｎ３、ＣＯＯＪ１、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、ＣＮ、スルホニル
（Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ１）、またはスルホキシル（Ｓ（＝Ｏ）−Ｊ１）であり；そして
Ｊ１およびＪ２の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２ア
ルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニ
ル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換Ｃ５〜Ｃ２０アリール、
アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、複素環式基、置換複素環式基、Ｃ１〜Ｃ１２ア
ミノアルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、または保護基である。
一実施形態において、ＢＮＡ化合物の架橋の各々は、独立して、−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２
）］ｎ−、−［Ｃ（Ｒ１）（Ｒ２）］ｎ−Ｏ−、−Ｃ（Ｒ１Ｒ２）−Ｎ（Ｒ１）−Ｏ−ま
たは−Ｃ（Ｒ１Ｒ２）−Ｏ−Ｎ（Ｒ１）−である。別の実施形態では、上記架橋の各々は
、独立して、４’−ＣＨ２−２’、４’−（ＣＨ２）２−２’、４’−（ＣＨ２）３−２
’、４’−ＣＨ２−Ｏ−２’、４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（
Ｒ１）−２’および４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ１）−Ｏ−２’−であり、ここで、Ｒ１の各々
が、独立して、Ｈ、保護基、またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである。
【００６３】
特許文献ならびに科学技術文献において、特定のＢＮＡが調製および開示されている（
Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９８，４，４５５−４５６
；Ｋｏｓｈｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９８，５４，３６０７
−３６３０；Ｗａｈｌｅｓｔｅｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，２０００，９７，５６３３−５６３８；Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．
，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９８，８，２２１９−２２２２；
ＷＯ  ９４／１４２２６；ＷＯ  ２００５／０２１５７０；Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，
Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，６３，１００３５−１００３９）；ＢＮＡを開示す
る、発行された米国特許および公開された出願の例としては、例えば以下が挙げられる：
米国特許第７，０５３，２０７号；同第６，２６８，４９０号；同第６，７７０，７４８
号；同第６，７９４，４９９号；同第７，０３４，１３３号；および同第６，５２５，１
９１号；ならびに特許査定前の米国特許出願公開第２００４−０１７１５７０号；同第２
００４−０２１９５６５号；同第２００４−００１４９５９号；同第２００３−０２０７
８４１号；同第２００４−０１４３１１４号；および同第２００３００８２８０７号。
【００６４】
本明細書中にはまた、リボシル糖環の２’−ヒドロキシル基が糖環の４’炭素原子に結
合され、それによって、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）結合を形成し、二環
式糖部分を形成しているＢＮＡが提供される（Ｅｌａｙａｄｉ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｕｒｒ．
Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｉｎｖｅｎｓ．Ｄｒｕｇｓ，２００１，２，５５８−５６１；Ｂｒａａ
ｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，２００１，８  １−７；およびＯｒｕｍ  
ｅｔ  ａｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００１，３，２３９−
２４３に総説される；また、米国特許第６，２６８，４９０号および同第６，６７０，４
６１号も参照のこと）。結合は、２’酸素原子および４’炭素原子を架橋するメチレン（
−ＣＨ２−）基であり得、この二環式部分については、用語メチレンオキシ（４’−ＣＨ
２−Ｏ−２’）ＢＮＡが使用される；この位置にエチレン基がある場合は、用語エチレン
オキシ（４’−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡが使用される（Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ
．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９８，４，４５５−４５６：Ｍｏｒｉｔａ  ｅｔ  
ａｌ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，１
１，２２１１−２２２６）。メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡおよび他
の二環式糖アナログは、相補的なＤＮＡおよびＲＮＡとの非常に高い二重鎖熱安定性（Ｔ
ｍ＝＋３℃〜＋１０℃）と、３’−エキソヌクレアーゼ性の分解に対する安定性と、良好
な溶解特性とを示す。ＢＮＡを含む、強力かつ非毒性のアンチセンスオリゴヌクレオチド
が記載されている（Ｗａｈｌｅｓｔｅｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａ
ｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，２０００，９７，５６３３−５６３８）。
これもまた考察されているメチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡのアイソ
マーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡであり、これは、３
’−エキソヌクレアーゼに対して優れた安定性を有することが示されている。α−Ｌ−メ
チレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡは、強力なアンチセンス活性を示したア
ンチセンスギャップマーおよびキメラに組み込まれた（Ｆｒｉｅｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｎ
ｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，２１，６３６５−６３７２）
。
メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡモノマーである、アデニン、シトシ
ン、グアニン、５−メチル−シトシン、チミンおよびウラシルの合成および調製、ならび
に、そのオリゴマー化、および核酸認識特性は記載されている（Ｋｏｓｈｋｉｎ  ｅｔ  
ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９８，５４，３６０７−３６３０）。ＢＮＡおよ
びその調製もまた、ＷＯ  ９８／３９３５２およびＷＯ  ９９／１４２２６に記載されて
いる。
【００６５】
メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡのアナログであるホスホロチオエー
ト−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡおよび２’−チオ−ＢＮＡもまた
、調製されている（Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅ
ｔｔ．，１９９８，８，２２１９−２２２２）。核酸ポリメラーゼに対する基質としてオ
リゴデオキシリボヌクレオチド二重鎖を含むロックされた（ｌｏｃｋｅｄ）ヌクレオシド
アナログもまた記載されている（Ｗｅｎｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ＷＯ  ９９／１４２２６
）。さらに、新規な立体配座が制限された高親和性オリゴヌクレオチドアナログである２
’−アミノ−ＢＮＡの合成が、当該分野で記載されている（Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，
Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，６３，１００３５−１００３９）。さらに、２’−
アミノ−ＢＮＡおよび２’−メチルアミノ−ＢＮＡが調製されており、その相補的なＲＮ
Ａ鎖およびＤＮＡ鎖とのその二重鎖の熱安定性が以前に報告されている。
修飾された糖部分は周知であり、そして、その標的に対するアンチセンス化合物の親和
性を変更する（代表的には高める）か、そして／または、ヌクレアーゼ抵抗性を高めるた
めに使用され得る。好ましい修飾糖の代表例としては、以下が挙げられるがこれらに限定
されない：二環式の修飾糖（ＢＮＡ）（メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮ
Ａおよびエチレンオキシ（４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’架橋）ＢＮＡを含む）；置換糖
（特に、２’−Ｆ置換基、２’−ＯＣＨ３置換基または２’−Ｏ（ＣＨ２）２−ＯＣＨ３
置換基を有する２’−置換糖）；および４’−チオ修飾糖。糖はまた、とりわけ、糖模倣
基で置き換えられ得る。修飾糖を調製するための方法は当業者に周知である。このような
修飾糖の調製を教示するいくつかの代表的な特許および公報としては、以下が挙げられる
がこれらに限定されない：米国特許第４，９８１，９５７号；同第５，１１８，８００号
；同第５，３１９，０８０号；同第５，３５９，０４４号；同第５，３９３，８７８号；
同第５，４４６，１３７号；同第５，４６６，７８６号；同第５，５１４，７８５号；同
第５，５１９，１３４号；同第５，５６７，８１１号；同第５，５７６，４２７号；同第
５，５９１，７２２号；同第５，５９７，９０９号；同第５，６１０，３００号；同第５
，６２７，０５３号；同第５，６３９，８７３号；同第５，６４６，２６５号；同第５，
６５８，８７３号；同第５，６７０，６３３号；同第５，７９２，７４７号；同第５，７
００，９２０号；同第６，５３１，５８４号；および同第６，６００，０３２号；ならび
にＷＯ  ２００５／１２１３７１。
【００６６】
特定の実施形態では、ＢＮＡは、以下の式：
【化２】
2014033674.tif 000003
を有する二環式ヌクレオシドを含み、上記式において、
Ｂｘは、複素環式塩基部分であり；
Ｔ１は、Ｈまたはヒドロキシル保護基であり；
Ｔ２は、Ｈ、ヒドロキシル保護基または反応性リン含有基であり；
Ｚは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、置換Ｃ１
〜Ｃ６アルキル、置換Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、アシル、置換
アシル、または置換アミドである。
【００６７】
一実施形態では、置換基の各々は、独立して、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシル、ＯＪ
１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、ＮＪ３Ｃ
（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２およびＣＮから独立して選択される必要に応じて保護された置換基で
、一置換または多置換され、ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の各々は、独立して、Ｈまた
はＣ１〜Ｃ６アルキルであり、そして、ＸはＯ、ＳまたはＮＪ１である。
特定のこのような実施形態では、置換基の各々は、独立して、ハロゲン、オキソ、ヒド
ロキシル、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１およびＮＪ３Ｃ（＝Ｘ
）ＮＪ１Ｊ２から独立して選択される置換基で一置換または多置換され、ここで、Ｊ１、
Ｊ２およびＪ３の各々は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたは置換Ｃ１〜Ｃ６アル
キルであり、そして、ＸはＯまたはＮＪ１である。
【００６８】
特定の実施形態では、Ｚ基は、１以上のＸｘで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
ここで、Ｘｘの各々は、独立して、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ
１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、ＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２またはＣＮであり；ここで、
Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の各々は、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、そして
、ＸはＯ、ＳまたはＮＪ１である。別の実施形態では、Ｚ基は、１以上のＸｘで置換され
たＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、Ｘｘの各々は、独立して、ハロ（例えば、フルオ
ロ）、ヒドロキシル、アルコキシ（例えば、ＣＨ３Ｏ−）、置換アルコキシまたはアジド
である。
特定の実施形態では、Ｚ基は−ＣＨ２Ｘｘであり、ここで、Ｘｘは、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ
２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１、ＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２またはＣＮであり；
ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の各々は、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり
、そして、ＸはＯ、ＳまたはＮＪ１である。別の実施形態では、Ｚ基は、−ＣＨ２Ｘｘで
あり、ここで、Ｘｘは、ハロ（例えば、フルオロ）、ヒドロキシル、アルコキシ（例えば
、ＣＨ３Ｏ−）またはアジドである。
【００６９】
特定のこのような実施形態では、Ｚ基は、以下の（Ｒ）−配置である。
【化３】
2014033674.tif 000004
【００７０】
特定のこのような実施形態では、Ｚ基は、以下の（Ｓ）−配置である。
【化４】
2014033674.tif 000005
【００７１】
特定の実施形態では、Ｔ１およびＴ２の各々は、ヒドロキシル保護基である。ヒドロキ
シル保護基の好ましいリストとしては、ベンジル、ベンゾイル、２，６−ジクロロベンジ
ル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、メシレート、トシレート
、ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）、９−フェニルキサンチン−９−イル（Ｐｉｘｙｌ）お
よび９−（ｐ−メトキシフェニル）キサンチン−９−イル（ＭＯＸ）が挙げられる。特定
の実施形態では、Ｔ１は、アセチル、ベンジル、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチル
ジフェニルシリルおよびジメトキシトリチルから選択されるヒドロキシル保護基であり、
ここで、より好ましいヒドロキシル保護基では、Ｔ１は４，４’−ジメトキシトリチルで
ある。
特定の実施形態では、Ｔ２は、反応性のリン含有基であり、好ましい反応性リン含有基
としては、ジイソプロピルシアノエトキシホスホロアミデートおよびＨ−ホスホネートが
挙げられる。特定の実施形態では、Ｔ１は、４，４’−ジメトキシトリチルであり、そし
て、Ｔ２は、ジイソプロピルシアノエトキシホスホロアミデートである。
【００７２】
特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、以下の式：
【化５】
2014033674.tif 000006
または以下の式：
【化６】
2014033674.tif 000007
または以下の式：
【化７】
2014033674.tif 000008
の少なくとも１つのモノマーを有し、上記式において、
Ｂｘは、複素環式塩基部分であり；
Ｔ３は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、連結共役基、または、ヌクレオシド、ヌクレオチド
、オリゴヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、モノマー性サブユニットもしくはオリゴマ
ー性化合物に結合されたヌクレオシド間連結基であり；
Ｔ４は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、連結共役基、または、ヌクレオシド、ヌクレオチド
、オリゴヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、モノマー性サブユニットもしくはオリゴマ
ー性化合物に結合されたヌクレオシド間連結基であり；
ここで、Ｔ３およびＴ４の少なくとも一方は、ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴヌ
クレオシド、オリゴヌクレオチド、モノマー性サブユニットもしくはオリゴマー性化合物
に結合されたヌクレオシド間連結基であり；そして
Ｚは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、置換Ｃ１
〜Ｃ６アルキル、置換Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、アシル、置換
アシル、または置換アミドである。
【００７３】
一実施形態では、置換基の各々は独立して、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシル、ＯＪ１
、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、ＮＪ３Ｃ（
＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２およびＣＮから独立して選択される必要に応じて保護された置換基で一
置換または多置換され、ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の各々は、独立して、ＨまたはＣ
１〜Ｃ６アルキルであり、そして、ＸはＯ、ＳまたはＮＪ１である。
一実施形態では、置換基の各々は独立して、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシル、ＯＪ１
、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１およびＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２から
独立して選択される置換基で一置換または多置換され、ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の
各々は、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、そして、ＸはＯまたはＮＪ１で
ある。
特定のこのような実施形態では、少なくとも１つのＺは、Ｃ１〜Ｃ６アルキルまたは置
換Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。特定の実施形態では、各Ｚが、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アル
キルまたは置換Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。特定の実施形態では、少なくとも１つのＺは
、Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。特定の実施形態では、各Ｚが、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アル
キルである。特定の実施形態では、少なくとも１つのＺはメチルである。特定の実施形態
では、各Ｚがメチルである。特定の実施形態では、少なくとも１つのＺはエチルである。
特定の実施形態では、各Ｚがエチルである。特定の実施形態では、少なくとも１つのＺは
置換Ｃ１〜Ｃ６アルキルである。特定の実施形態では、各Ｚが、独立して、置換Ｃ１〜Ｃ
６アルキルである。特定の実施形態では、少なくとも１つのＺは置換メチルである。特定
の実施形態では、各Ｚが置換メチルである。特定の実施形態では、少なくとも１つのＺは
置換エチルである。特定の実施形態では、各Ｚが置換エチルである。
【００７４】
特定の実施形態では、少なくとも１つの置換基は、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシである（例え
ば、少なくとも１つのＺは、１以上のＣ１〜Ｃ６アルコキシで置換されたＣ１〜Ｃ６アル
キルである）。別の実施形態では、各置換基が、独立して、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシである
（例えば、各Ｚが、独立して、１以上のＣ１〜Ｃ６アルコキシで置換されたＣ１〜Ｃ６ア
ルキルである）。
特定の実施形態では、少なくとも１つのＣ１〜Ｃ６アルコキシ置換基は、ＣＨ３Ｏ−で
ある（例えば、少なくとも１つのＺは、ＣＨ３ＯＣＨ２−である）。別の実施形態では、
各Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ置換基がＣＨ３Ｏ−である（例えば、各ＺがＣＨ３ＯＣＨ２−で
ある）。
特定の実施形態では、少なくとも１つの置換基はハロゲンである（例えば、少なくとも
１つのＺは１以上のハロゲンで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである）。特定の実施形態
では、各置換基が、独立して、ハロゲンである（例えば、各Ｚが、独立して、１以上のハ
ロゲンで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである）。特定の実施形態では、少なくとも１つ
のハロゲン置換基はフルオロである（例えば、少なくとも１つのＺは、ＣＨ２ＦＣＨ２−
、ＣＨＦ２ＣＨ２−またはＣＦ３ＣＨ２−である）。特定の実施形態では、各ハロ置換基
がフルオロである（例えば、各Ｚが、独立して、ＣＨ２ＦＣＨ２−、ＣＨＦ２ＣＨ２−ま
たはＣＦ３ＣＨ２−である）。
【００７５】
特定の実施形態では、少なくとも１つの置換基はヒドロキシルである（例えば、少なく
とも１つのＺは１以上のヒドロキシルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである）。特定の
実施形態では、各置換基が、独立して、ヒドロキシルである（例えば、各Ｚが、独立して
、１以上のヒドロキシルで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルである）。特定の実施形態では
、少なくとも１つのＺは、ＨＯＣＨ２−である。別の実施形態では、各ＺがＨＯＣＨ２−
である。
特定の実施形態では、少なくとも１つのＺは、ＣＨ３−、ＣＨ３ＣＨ２−、ＣＨ２ＯＣ
Ｈ３−、ＣＨ２Ｆ−またはＨＯＣＨ２−である。特定の実施形態では、各Ｚが、独立して
、ＣＨ３−、ＣＨ３ＣＨ２−、ＣＨ２ＯＣＨ３−、ＣＨ２Ｆ−またはＨＯＣＨ２−である
。
特定の実施形態では、少なくとも１つのＺ基は、１以上のＸｘで置換されたＣ１〜Ｃ６
アルキルであり、ここで、各Ｘｘは、独立して、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、Ｏ
Ｃ（＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、ＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２またはＣＮであ
り；ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の各々は、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルで
あり、そして、ＸはＯ、ＳまたはＮＪ１である。別の実施形態では、少なくとも１つのＺ
基は、１以上のＸｘで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、各Ｘｘは、独立し
て、ハロ（例えば、フルオロ）、ヒドロキシル、アルコキシ（例えば、ＣＨ３Ｏ−）また
はアジドである。
特定の実施形態では、各Ｚ基が、独立して、１以上のＸｘで置換されたＣ１〜Ｃ６アル
キルであり、ここで、各Ｘｘが、独立して、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（
＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、ＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２またはＣＮであり；
ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の各々が、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり
、そして、ＸがＯ、ＳまたはＮＪ１である。別の実施形態では、各Ｚ基が、独立して、１
以上のＸｘで置換されたＣ１〜Ｃ６アルキルであり、ここで、各Ｘｘが、独立して、ハロ
（例えば、フルオロ）、ヒドロキシル、アルコキシ（例えば、ＣＨ３Ｏ−）またはアジド
である。
【００７６】
特定の実施形態では、少なくとも１つのＺ基は、−ＣＨ２Ｘｘであり、ここで、Ｘｘは
、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、Ｎ
Ｊ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２またはＣＮであり；ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の各々は、
独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、そして、ＸはＯ、ＳまたはＮＪ１である
。特定の実施形態では、少なくとも１つのＺ基は、−ＣＨ２Ｘｘであり、ここで、Ｘｘは
、ハロ（例えば、フルオロ）、ヒドロキシル、アルコキシ（例えば、ＣＨ３Ｏ−）または
アジドである。
特定の実施形態では、各Ｚ基が、独立して、−ＣＨ２Ｘｘであり、ここで、各Ｘｘが、
独立して、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１
Ｊ２、ＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２またはＣＮであり；ここで、Ｊ１、Ｊ２およびＪ３の
各々が、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、そしてＸはＯ、ＳまたはＮＪ１
である。別の実施形態では、各Ｚ基が、独立して、−ＣＨ２Ｘｘであり、ここで、各Ｘｘ
が、独立して、ハロ（例えば、フルオロ）、ヒドロキシル、アルコキシ（例えば、ＣＨ３
Ｏ−）またはアジドである。
【００７７】
特定の実施形態では、少なくとも１つのＺはＣＨ３−である。別の実施形態では、各Ｚ
がＣＨ３−である。
特定の実施形態では、少なくとも１つのモノマーのＺ基は、以下の式：
【化８】
2014033674.tif 000009
または以下の式：
【化９】
2014033674.tif 000010
または以下の式：
【化１０】
2014033674.tif 000011
によって表される（Ｒ）−配置である。
【００７８】
特定の実施形態では、上記式の各モノマーのＺ基は、（Ｒ）−配置である。
特定の実施形態では、少なくとも１つのモノマーのＺ基は、以下の式：
【化１１】
2014033674.tif 000012
または以下の式：
【化１２】
2014033674.tif 000013
または以下の式：
【化１３】
2014033674.tif 000014
によって表される（Ｓ）−配置である。
【００７９】
特定の実施形態では、上記式の各モノマーのＺ基は、（Ｓ）−配置である。
特定の実施形態では、Ｔ３は、Ｈまたはヒドロキシル保護基である。特定の実施形態で
は、Ｔ４は、Ｈまたはヒドロキシル保護基である。さらなる実施形態では、Ｔ３は、ヌク
レオシド、ヌクレオチド、またはモノマー性サブユニットに結合されたヌクレオシド間連
結基である。特定の実施形態では、Ｔ４は、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはモノマー
性サブユニットに結合されたヌクレオシド間連結基である。特定の実施形態では、Ｔ３は
、オリゴヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドに結合されたヌクレオシド間連結基であ
る。特定の実施形態では、Ｔ４は、オリゴヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドに結合
されたヌクレオシド間連結基である。特定の実施形態では、Ｔ３は、オリゴマー性化合物
に結合されたヌクレオシド間連結基である。特定の実施形態では、Ｔ４は、オリゴマー性
化合物に結合されたヌクレオシド間連結基である。特定の実施形態では、Ｔ３およびＴ４
のうち少なくとも１つは、ホスホジエステルまたはホスホロチオエートから選択されるヌ
クレオシド間連結基を含む。
【００８０】
特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、以下の式：
【化１４】
2014033674.tif 000015
または以下の式：
【化１５】
2014033674.tif 000016
または以下の式：
【化１６】
2014033674.tif 000017
の少なくとも２つの連続するモノマーの少なくとも１つの領域を有する。
特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、上記式の少なくとも２つの連続するモノ
マーの少なくとも２つの領域を含む。特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、ギャ
ップを有するオリゴマー性化合物を含む。特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、
約８〜約１４の連続するβ−Ｄ−２’−デオキシリボフラノシルヌクレオシドの少なくと
も１つの領域を含む。
【００８１】
特定の実施形態では、オリゴマー性化合物は、約９〜約１２の連続するβ−Ｄ−２’−
デオキシリボフラノシルヌクレオシドの少なくとも１つの領域を含む。特定の実施形態で
は、モノマーは、糖模倣物を含む。特定のこのような実施形態では、模倣物は、糖または
糖−ヌクレオシド間結合の組み合わせの代わりに使用され、核酸塩基は、選択された標的
に対するハイブリッド形成のために維持される。糖模倣物の代表例としては、シクロヘキ
セニルまたはモルホリノが挙げられるがこれらに限定されない。糖−ヌクレオシド間結合
の組み合わせについての模倣物の代表例としては、ペプチド核酸（ＰＮＡ）および非荷電
アキラル結合により連結されるモルホリノ基が挙げられるがこれらに限定されない。いく
つかの場合、模倣物は核酸塩基の代わりに使用される。代表的な核酸塩基模倣物は、当該
分野で周知であり、そして、三環式フェノキサジンアナログおよびユニバーサル塩基（Ｂ
ｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．２０００，２８：２９１１−１
４，本明細書中に参考として援用される）が挙げられるがこれらに限定されない。糖、ヌ
クレオシドおよび核酸の模倣物の合成方法は当業者に周知である。
【００８２】
３．モノマー性結合
本明細書中には、モノマー（修飾および非修飾のヌクレオシドおよびヌクレオチド）を
一緒に連結し、それによって、オリゴマー性化合物を形成する連結基が記載される。連結
基の２つの主な分類は、リン原子の有無によって規定される。代表的なリン含有結合とし
ては、ホスホジエステル（Ｐ＝Ｏ）、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ホスホ
ロアミデートおよびホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）が挙げられるがこれらに限定されない
。代表的な非リン含有連結基としては、メチレンメチルイミノ（−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）
−Ｏ−ＣＨ２−）、チオジエステル（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｓ−）、チオノカルバメート（ｔ
ｈｉｏｎｏｃａｒｂａｍａｔｅ）（−Ｏ−Ｃ（Ｏ）（ＮＨ）−Ｓ−）；シロキサン（−Ｏ
−Ｓｉ（Ｈ）２−Ｏ−）；およびＮ，Ｎ’−ジメチルヒドラジン（−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３
）−Ｎ（ＣＨ３）−）が挙げられるがこれらに限定されない。非リン連結基を有するオリ
ゴマー性化合物は、オリゴヌクレオシドと呼ばれる。天然のホスホジエステル結合と比較
して、修飾された結合は、オリゴマー性化合物のヌクレアーゼ抵抗性を変更する、代表的
には高めるために使用され得る。特定の実施形態では、キラル原子を有する結合は、ラセ
ミ混合物、別々の鏡像異性体（ｅｎａｎｔｏｍｅｒ）として調製され得る。代表的なキラ
ル結合としては、アルキルホスホネートおよびホスホロチオエートが挙げられるがこれら
に限定されない。リン含有結合および非リン含有結合の調製方法は、当業者に周知である
。
本明細書中に記載されるオリゴマー性化合物は、１以上の非対称中心を含み、従って、
絶対的な立体化学（例えば、糖のアノマーについては（Ｒ）もしくは（Ｓ）、αもしくは
β、または、アミノ酸については（Ｄ）もしくは（Ｌ）など）の観点から規定され得る、
鏡像異性体、ジアステレオマーおよび他の立体化学配置を生じる。本明細書中で提供され
るアンチセンス化合物には、全てのこのような可能なアイソマー、ならびに、そのラセミ
的および光学的に純粋な形態が含まれる。
【００８３】
４．オリゴマー性化合物
特定の実施形態では、本明細書中には、結合（例えば、ホスホジエステル結合およびホ
スホロチオエートヌクレオシド間結合を含む）を形成するために有用な反応性リン含有基
を有するオリゴマー性化合物が提供される。前駆体またはオリゴマー性化合物の調製およ
び／または精製の方法は、本明細書中に記載される組成物または方法に制限されない。Ｄ
ＮＡ、ＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、オリゴヌクレオシドおよびアンチセンス化合物を含
む、オリゴマー性化合物の合成および調製のための方法は、当業者に周知である。
一般に、オリゴマー性化合物は、連結基によって一緒に連結された複数のモノマー性サ
ブユニットを含む。オリゴマー性化合物の非限定的な例としては、プライマー、プローブ
、アンチセンス化合物、アンチセンスオリゴヌクレオチド、外部ガイド配列（ｅｘｔｅｒ
ｎａｌ  ｇｕｉｄｅ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ）（ＥＧＳ）オリゴヌクレオチド、選択的スプラ
イサー（ａｌｔｅｒｎａｔｅ  ｓｐｌｉｃｅｒ）およびｓｉＲＮＡが挙げられる。したが
って、これらの化合物は、１本鎖、２本鎖、環状、分枝またはヘアピンの形状で導入され
得、そして、内部または末端の突出部またはループのような、構造的要素を含み得る。オ
リゴマー性の２本鎖化合物は、２本鎖化合物に対してハイブリッド形成した２本鎖、また
は、ハイブリッド形成および完全もしくは部分的に２本鎖の化合物の形成を可能にするの
に十分な自己相補性を有する１本鎖であり得る。
【００８４】
特定の実施形態では、本発明は、キメラオリゴマー性化合物を提供する。特定のこのよ
うな実施形態では、キメラオリゴマー性化合物は、キメラオリゴヌクレオチドである。特
定のこのような実施形態では、キメラオリゴヌクレオチドは、異なるように修飾されたヌ
クレオチドを含む。特定の実施形態では、キメラオリゴヌクレオチドは、混合型バックボ
ーンアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
一般に、キメラオリゴマー性化合物は、修飾ヌクレオシドを有し、この修飾ヌクレオシ
ドは、孤立した位置にあっても、特定のモチーフを規定する領域内で一緒にグループ化さ
れてもよい。修飾および／または模倣基の任意の組み合わせは、本明細書中に記載される
キメラオリゴマー性化合物を含み得る。
特定の実施形態では、キメラオリゴマー性化合物は、代表的に、ヌクレアーゼ分解に対
する増加した抵抗性、増加した細胞内取り込み、および／または、標的核酸に対する増加
した結合親和性を与えるように修飾された少なくとも１つの領域を含む。特定の実施形態
では、オリゴマー性化合物のさらなる領域が、ＲＮＡ：ＤＮＡハイブリッドまたはＲＮＡ
：ＲＮＡハイブリッドを切断し得る酵素に対する基質として機能し得る。一例として、Ｒ
ＮａｓｅＨは、ＲＮＡ：ＤＮＡ二重鎖のＲＮＡ鎖を切断する細胞内エンドヌクレアーゼで
ある。したがって、ＲＮａｓｅＨの活性化は、ＲＮＡ標的の切断をもたらし、それによっ
て、遺伝子発現の阻害効率を大いに高める。結果として、キメラを用いた場合、より短い
オリゴマー性化合物を用いても、しばしば、例えば、同じ標的領域に対してハイブリッド
形成するホスホロチオエートデオキシオリゴヌクレオチドと比較して、匹敵するような結
果が達成され得る。ＲＮＡ標的の切断は、慣用的に、ゲル電気泳動により検出され得、必
要な場合、当該分野で公知の核酸ハイブリッド形成技術と組み合わされ得る。
【００８５】
特定の実施形態では、キメラオリゴマー性化合物は、ギャップマーである。特定の実施
形態では、キメラ化合物は、短鎖アンチセンス化合物である。特定の実施形態では、短鎖
アンチセンス化合物は、ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、混合型バ
ックボーンアンチセンスオリゴマーは、一方または両方のウィング内に１つのタイプのヌ
クレオチド間結合を有し、ギャップ内に異なるタイプのヌクレオチド間結合を有する。特
定のこのような実施形態では、混合型バックボーンアンチセンスオリゴヌクレオチドは、
ウィング内にホスホジエステル結合を、そして、ギャプ内にはホスホロチオエート結合を
有する。ウィング内のヌクレオチド間結合がギャップ内のヌクレオチド間結合と異なる特
定の実施形態では、ウィングとギャップとをつなぐヌクレオチド間結合は、ウィング内の
ヌクレオチド間結合と同じである。ウィング内のヌクレオチド間結合とギャップ内のヌク
レオチド間結合とが異なる特定の実施形態では、ウィングとギャップとをつなぐヌクレオ
チド間結合は、ギャップ内のヌクレオチド間結合と同じである。
【００８６】
Ｃ．特定の短鎖アンチセンス化合物
本明細書中では、長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より
好ましくは９〜１４ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドの短鎖アンチ
センス化合物が開示される。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜
１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０〜
１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖アンチセンス化合物は、
短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、１以上の化学的修飾を含む。特定の
このような実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、少なくとも１つの修飾ヌクレオチ
ドを含む。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、少なくとも２以上の修飾ヌ
クレオチドを含む。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、少なくとも１つの
修飾されたヌクレオチド間結合を含む。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は
、混合型バックボーンオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態では、短鎖アンチセン
ス化合物は、キメラオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス
オリゴヌクレオチドは、一様に修飾される。特定の実施形態では、短鎖アンチセンスオリ
ゴヌクレオチドは、各核酸塩基および各結合において独立して選択された修飾を含む。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、短いギャップマーである。特定のこ
のような実施形態では、短いギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に少なくとも
１つの高親和性修飾を含む。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、各ウィン
グ内に１〜３の高親和性修飾を含む。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物の高
親和性修飾は、より長いアンチセンス化合物の標的親和性と同等、または、これよりもな
お高い標的親和性を可能にする。特定の実施形態では、高親和性修飾ヌクレオチドは、糖
修飾ヌクレオチドである。このような糖修飾ヌクレオチドとしては、糖の４’位と２’位
との間に架橋を含むものが挙げられる。例示的な高親和性糖修飾としては、ＢＮＡおよび
他の２’−修飾（例えば、Ｔ−ＭＯＥ）が挙げられるがこれらに限定されない。本発明の
代替的な実施形態において、高親和性修飾は、２’−Ｏ−（ＣＨ２）ｎＨ（ｎ＝１〜６）
糖−修飾ヌクレオチドではない。さらなる代替的な実施形態において、高親和性修飾ヌク
レオチドは、２’−ＯＣＨ３ヌクレオチドでも２’−ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３ヌクレオチ
ドでもない。特定の実施形態では、高親和性修飾ヌクレオチドは、１ヌクレオチドにつき
、少なくとも１℃、少なくとも１．５℃、少なくとも２℃、少なくとも２．５℃、少なく
とも３．０℃、少なくとも３．５℃、または少なくとも４．０℃のＴｍを与える。いくつ
かの高親和性ヌクレオチド修飾は、毒性を増大させることが当該分野で公知である。本明
細書中に示されるように、限られた数（一般に、２〜６）の高親和性修飾を有する短鎖ア
ンチセンス化合物は、毒性の増大をほとんど示さないか、または全く示さないが、ＲＮＡ
標的の発現を有意に減少させる一方で、標的ＲＮＡに対する親和性を保持または増大させ
る。本発明の短鎖アンチセンス化合物は、必要に応じて、例えば、コレステロールまたは
Ｃ１６のような共役基を含み得る。
【００８７】
１．特定のウィング
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、５’ウィングおよび／または３’ウ
ィングを含む。このような実施形態では、３’ウィングの特徴および５’ウィングの特徴
は、別個に選択される。したがって、このような実施形態では、５’ウィング内のモノマ
ー数および３’ウィング内のモノマー数（長さ）は同じであっても異なっていてもよい；
５’ウィング内の修飾（存在する場合）は、３’ウィング内の修飾（存在する場合）と同
じであってもよいが、または、このような修飾は、存在する場合、異なっていてもよい；
そして、５’ウィング内のモノマー性結合および３’ウィング内のモノマー性結合は、同
じであっても異なっていてもよい。
【００８８】
特定の実施形態では、ウィングは、１、２または３のモノマーを含む（すなわち、１、
２または３の長さを有する）。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは修飾される。
特定のこのような実施形態では、ウィングのモノマーは、その標的核酸に対するアンチセ
ンス化合物の親和性を高めるように修飾される。特定の実施形態では、ウィングのモノマ
ーは、ヌクレオシドまたはヌクレオチドである。特定のこのような実施形態では、ウィン
グのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのような実施形態で
は、ウィングのモノマー（ヌクレオシドまたはヌクレオチド）は、ＢＮＡである。特定の
このような実施形態では、ウィングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ
２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、β−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エ
チレンオキシ（４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−
Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡおよびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）
ＢＮＡから選択される。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル
、アミノ、アジド、チオ、Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（
ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（
Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換
基を含み、ここで、ＲｍおよびＲｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換の
Ｃ１〜Ｃ１０アルキルである。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’ＭＯＥ
ヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ウィング内のモノマー性結合は、天然に存在するヌクレオチド間
結合である。特定の実施形態では、ウィング内のモノマー性結合は、天然には存在しない
ヌクレオチド間結合またはヌクレオシド間結合である。特定のこのような実施形態では、
ウィング内のモノマー性結合は、天然に存在するヌクレオチド間結合よりも、１以上のヌ
クレアーゼに対して抵抗性である。特定のこのような実施形態では、ウィング内のモノマ
ー性結合は、ホスホロチオエート結合（Ｐ＝Ｓ）である。ウィングが１以上のモノマー性
結合を有する特定の実施形態では、モノマー性結合は、互いに同じである。ウィングが１
以上のモノマー性結合を有する特定の実施形態では、モノマー性結合は、互いに異なる。
当業者は、上述の特徴および修飾が、ウィングを調製するために任意の組み合わせで使
用され得ることを認識する。以下の表は、特定の数のモノマー、モノマー性修飾（存在す
る場合）、およびモノマー性結合（ともにウィング内に存在）を選択することによって、
いかにウィングを調製し得るかを示す非限定的な例を提供する。
【表１】
2014033674.tif 000018
ウィングが２、３または４のモノマーを含む特定の実施形態では、これらの２、３また
は４のモノマーは全て、存在する場合、同じ修飾を含む。ウィングが２、３または４のモ
ノマーを含む特定の実施形態では、これらの２、３または４の核酸塩基のうちの１つ以上
は、残りのモノマーの１つ以上の修飾のうちの１つ以上とは異なる１以上の修飾を含む。
【００８９】
２．特定のギャップ
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、５’ウィングと３’ウィングとの間
にギャップを含む。特定の実施形態では、ギャップは、５、６、７、８、９、１０、１１
、１２、１３または１４のモノマーを含む。特定の実施形態では、ギャップのモノマーは
、非修飾デオキシリボヌクレオチドである。特定の実施形態では、ギャップのモノマーは
、非修飾リボヌクレオチドである。特定の実施形態では、ギャップの修飾（存在する場合
）は、その標的核酸に結合されたときに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅＨを含むがこれらに限
定されない）による切断を支えるアンチセンス化合物をもたらす。
特定の実施形態では、ギャップ内のモノマー性結合は、天然に存在するヌクレオチド間
結合である。特定の実施形態では、ギャップ内のモノマー性結合は、天然に存在しない結
合である。特定のこのような実施形態では、ギャップ内のモノマー性結合は、天然に存在
するヌクレオチド間結合よりも、１以上のヌクレアーゼに対して抵抗性である。特定のこ
のような実施形態では、ギャップ内のモノマー性結合はホスホロチオエート結合（Ｐ＝Ｓ
）である。特定の実施形態では、ギャップ内のモノマー性結合は全て、互いに同じである
。特定の実施形態では、ギャップ内のモノマー性結合は全て同じではない。
当業者は、上述の特徴および修飾が、ギャップを調製するために任意の組み合わせで使
用され得ることを認識する。以下の表は、特定の数のモノマー、モノマー性修飾（存在す
る場合）、およびモノマー性結合（ともにギャップ領域内に存在）を選択することによっ
て、いかにギャップを調製し得るかを示す非限定的な例を提供する。
【表２】
2014033674.tif 000019
。
【００９０】
３．特定のギャップを有するアンチセンスオリゴマー性化合物
当業者は、上述のウィングおよびギャプが選択され、次いで、ギャップを有するオリゴ
マー性化合物（ギャップを有するアンチセンスオリゴマー性化合物およびギャップを有す
るアンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられるがこれらに限定されない）を生成するた
めに種々の組み合わせで組み合され得ることを認識する。５’ウィングおよび３’ウィン
グの特徴（長さ、修飾、結合）は、互いに独立して選択され得る。ギャップの特徴として
は、５’ウィングの特徴と比較した際の修飾における少なくとも１つの差、および、３’
ウィングの特徴と比較した際の修飾における少なくとも１つの差を含む（すなわち、隣接
する領域を互いに区別するために、隣接する領域間で修飾に少なくとも１つの差が存在し
なければならない）。ギャップの特徴は、他の方法で、別個に選択され得る。
特定の実施形態では、ウィング内のモノマー性結合およびギャップ内のモノマー性結合
は、同じである。特定の実施形態では、ウィング内のモノマー性結合およびギャップ内の
モノマー性結合は異なる。特定のこのような実施形態では、ウィングとギャップとをつな
ぐモノマー性結合は、ウィング内のモノマー性結合と同じである。特定の実施形態では、
ウィングとギャップとをつなぐモノマー性結合は、ギャップ内のモノマー性結合と同じで
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、化合物全体に一様な結合を有す
る。特定のこのような実施形態では、結合は全て、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）結合で
ある。
当業者は、上述の３’ウィング、５’ウィングおよび結合が、ギャップマーを調製する
ために任意の組み合わせで使用され得ることを認識する。以下の表は、特定の５’ウィン
グ、ギャップ、３’ウィング、および、ギャップと各ウィングとをつなぐ特定の結合を選
択することによって、いかにギャップマーを調製し得るかを示す非限定的な例を提供する
。
【表３】
2014033674.tif 000020
【００９１】
特定の実施形態では、本明細書中に開示されるオリゴマー性化合物は、約８〜約１６の
モノマー、好ましくは９〜１５のモノマー、より好ましくは９〜１４のモノマー、より好
ましくは１０〜１４のモノマーを含み得る（すなわち、約８〜約１６の連結されたモノマ
ー）。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６
の核酸塩基のアンチセンス化合物を含むことを理解する。特定の実施形態では、オリゴマ
ー性化合物はアンチセンス化合物である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ８核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ９核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１２核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１５核酸塩基である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１６核酸塩基である。
【００９２】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ８モノマーである。特定の実施
形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、短
鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施形態では、短鎖アンチセ
ンス化合物は、長さ１１モノマーである。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物
は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は
、長さ１３モノマーである。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４
モノマーである。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１５モノマーで
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定
の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを含む。特定の実施形態
では、短鎖アンチセンス化合物は、１０〜１５モノマーを含む。特定の実施形態では、短
鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、短鎖アンチ
センス化合物は、１２〜１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含む。
当該分野の技術を有し、本明細書中に例示される短鎖アンチセンス化合物の知識を持つ
当業者は、過度の実験なしに、さらなる短鎖アンチセンス化合物を同定し得る。
【００９３】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、片側または両側に１以上のウィング
が配置されたギャップを含む。従って、特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は
、２以上の５’ウィングと２以上の３’ウィングとを含む。特定の実施形態では、短鎖ア
ンチセンス化合物は、１つの５’ウィングと２以上の３’ウィングとを含む。特定の実施
形態では、短鎖アンチセンス化合物は、１つの３’ウィングと２以上の５’ウィングとを
含む。特定のこのような実施形態は、例えば、以下の領域を含む：第１の５’ウィング−
架橋−第２の５’ウィング−架橋−ギャップ−架橋−第２の３’ウィング−架橋−第１の
３’ウィング。このような実施形態において、各領域は、その隣接領域と比較して、修飾
に少なくとも１つの差を有する。したがって、このような実施形態において、第２の５’
ウィングおよび第２の３’ウィングとは、各々が、独立して、ギャップと比較して、そし
て、第１の５’ウィングおよび第１の３’ウィングと比較して、修飾に１以上の差を含む
。このような実施形態において、第１の３’ウィングの修飾と第１の５’ウィングの修飾
とは、いずれかが、または、両方ともに、ギャップの修飾（存在する場合）と同じであっ
ても異なっていてもよい。
【００９４】
４．特定の共役基
一局面では、オリゴマー性化合物は、１以上の共役基の共有結合により修飾される。一
般に、共役基は、結合されたオリゴマー性化合物の１以上の特性（薬力学、薬物動態、結
合、吸収、細胞内分布、細胞内取り込み、電荷およびクリアランスが挙げられるがこれら
に限定されない）を変更する。共役基は、化学の分野において慣用的に用いられ、そして
、直接、または、任意の連結部分もしくは連結基を介して、オリゴマー性化合物のような
親化合物へと連結される。共役基の好ましいリストとしては、インターカレーター（ｉｎ
ｔｅｒｃａｌａｔｏｒ）、レポーター分子、ポリアミン、ポリアミド、ポリエチレングリ
コール、チオエーテル、ポリエーテル、コレステロール、チオコレステロール、コール酸
部分、葉酸、脂質、リン脂質、ビオチン、フェナジン、フェナントリジン（ｐｈｅｎａｎ
ｔｈｒｉｄｉｎｅ）、アントラキノン、アダマンタン、アクリジン、フルオロセイン、ロ
ーダミン、クマリンおよび色素が挙げられるがこれらに限定されない。
本発明になじみやすい好ましい共役基としては、コレステロール部分のような脂質部分
（Ｌｅｔｓｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
，１９８９，８６，６５５３）；コール酸（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ
ｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９４，４，１０５３）；チオエーテル（例
えば、ヘキシル−Ｓ−トリチルチオール）（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ
．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１９９２，６６０，３０６；Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ
ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔ．，１９９３，３，２７６５）；チ
オコレステロール（Ｏｂｅｒｈａｕｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅ
ｓ．，１９９２，２０，５３３）；脂肪族鎖（例えば、ドデカンジオール残基またはウン
デシル残基）（Ｓａｉｓｏｎ−Ｂｅｈｍｏａｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＥＭＢＯ  Ｊ．，１
９９１，１０，１１１；Ｋａｂａｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，１９９
０，２５９，３２７；Ｓｖｉｎａｒｃｈｕｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ，１９
９３，７５，４９）；リン脂質（例えば、ジ−ヘキサデシル−ｒａｃ−グリセロールまた
はトリエチル−アンモニウム−１，２−ジ−Ｏ−ヘキサデシル−ｒａｃ−グリセロ−３−
Ｈ−ホスホネート）（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌ
ｅｔｔ．，１９９５，３６，３６５１；Ｓｈｅａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ
Ｒｅｓ．，１９９０，１８，３７７７）；ポリアミン鎖もしくはポリエチレングリコー
ル鎖（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  ＆  Ｎｕｃｌｅｏ
ｔｉｄｅｓ，１９９５，１４，９６９）；酢酸アダマンタン（Ｍａｎｏｈａｒａｎ  ｅｔ
ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，１９９５，３６，３６５１）；パルミ
チル部分（Ｍｉｓｈｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，
１９９５，１２６４，２２９）；または、オクタデシルアミンもしくはヘキシルアミノ−
カルボニル−オキシコレステロール部分（Ｃｒｏｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ
ａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，１９９６，２７７，９２３）が挙げられる。
【００９５】
当該分野で公知のもののような連結基または二官能性連結部分は、本明細書中に提供さ
れる化合物になじみやすい。連結基は、化学的な官能基、共役基、レポーター基および他
の基を、例えば、オリゴマー性化合物のような親化合物内の選択的な部位に結合するため
に有用である。一般に、二官能性の連結部分は、２つの官能基を有するヒドロカルビル部
分を含む。官能基のうちの一方は、関心のある親分子または化合物に結合するために選択
され、そして、もう一方は、化学的な官能基または共役基のような本質的に任意の選択さ
れた基を結合するために選択される。いくつかの実施形態では、リンカーは、エチレング
リコールまたはアミノ酸ユニットのような反復ユニットの鎖構造またはオリゴマーを含む
。二官能性連結部分において慣用的に使用される官能基の例としては、求核性基と反応さ
せるための求電子性試薬、および求電子性基と反応させるための求核性試薬が挙げられる
がこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、二官能性の連結部分としては、アミ
ノ、ヒドロキシル、カルボン酸、チオール、不飽和部分（例えば、二重結合または三重結
合）などが挙げられる。二官能性連結部分のいくつかの非限定的な例としては、８−アミ
ノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキ
サン−１−カルボン酸スクシンイミジル（ＳＭＣＣ）および６−アミノヘキサン酸（ＡＨ
ＥＸまたはＡＨＡ）が挙げられる。他の連結基としては、置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置
換もしくは非置換のＣ２〜Ｃ１０アルケニル、または置換もしくは非置換のＣ２〜Ｃ１０
アルキニルが挙げられるがこれらに限定されず、好ましい置換基の非限定的なリストとし
ては、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ、
チオール、チオアルコキシ、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニルおよびアルキニ
ルが挙げられる。
【００９６】
５．合成、精製および解析
修飾および非修飾のヌクレオシドおよびヌクレオチドのオリゴマー化は、ＤＮＡ（Ｐｒ
ｏｔｏｃｏｌｓ  ｆｏｒ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ａｎａｌｏｇｓ
，Ｅｄ．Ａｇｒａｗａｌ（１９９３），Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ）および／またはＲＮ
Ａ（Ｓｃａｒｉｎｇｅ，Ｍｅｔｈｏｄｓ（２００１），２３，２０６−２１７．Ｇａｉｔ
ｅｔ  ａｌ．，Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  ｓｙｎｔｈ
ｅｓｉｚｅｄ  ＲＮＡ  ｉｎ  ＲＮＡ：Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，Ｅ
ｄ．Ｓｍｉｔｈ（１９９８），１−３６．Ｇａｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄ
ｒｏｎ  （２００１），５７，５７０７−５７１３）についての文献の手順に従って慣用
的に行われ得る。
【００９７】
本明細書中に提供されるオリゴマー性化合物は、固相合成の周知の技術によって、簡便
に、かつ慣用的に作製され得る。このような合成のための設備は、例えば、Ａｐｐｌｉｅ
ｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｒｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）を含むいくつかの売り手
によって販売される。当該分野で公知のこのような合成のための任意の手段が、さらに、
もしくは代替的に用いられ得る。ホスホロチオエートおよびアルキル化誘導体のようなオ
リゴヌクレオチドを調製するために類似の技術を用いることは周知である。本発明は、ア
ンチセンス化合物の合成方法によって制限されない。
オリゴマー性化合物の精製および合成の方法は、当業者に公知である。分析方法として
は、キャピラリー電気泳動（ＣＥ）および電気スプレー質量分光法が挙げられる。このよ
うな合成および分析の方法は、マルチウェルプレートにて行われ得る。本発明の方法は、
オリゴマーの精製方法により制限されない。
【００９８】
Ｄ．アンチセンス
アンチセンスの機構は全て、化合物の標的核酸とのハイブリッド形成を必要とするもの
であり、ここで、ハイブリッド形成の結果または作用は、標的の分解または標的の占有の
いずれかであり、同時に、細胞機構の関与（例えば、転写またはスプライシング）を回避
する。
標的の分解を伴うアンチセンス機構の１つのタイプは、ＲＮａｓｅ  Ｈを含む。ＲＮａ
ｓｅ  Ｈは、ＲＮＡ：ＤＮＡ二重鎖のＲＮＡ鎖を切断する細胞内エンドヌクレアーゼであ
る。当該分野では、「ＤＮＡ様」である短鎖アンチセンス化合物が、哺乳動物細胞におけ
るＲＮＡｓｅ  Ｈ活性を誘導することが知られる。したがって、ＲＮａｓｅ  Ｈの活性化
は、ＲＮＡ標的の切断をもたらし、それによって、ＤＮＡ様オリゴヌクレオチド媒介性の
遺伝子発現の阻害の効率を大いに高める。
特定の実施形態では、化学的に修飾されたアンチセンス化合物は、非修飾ＤＮＡよりも
高い標的ＲＮＡに対する親和性を有する。特定のこのような実施形態では、このより高い
親和性は、次いで、効力の増加をもたらし、このような化合物の投与用量の低下、潜在的
な毒性の低下、ならびに、治療指数の改善および治療の全体的なコストの低下を可能にす
る。
【００９９】
本開示は、化学的に修飾された高親和性ヌクレオチドおよびヌクレオシドの、アンチセ
ンス化合物内への組み込みが、細胞、組織および動物（ヒトを含むがこれに限定されない
）において標的ＲＮＡおよび／または標的タンパク質を減少させるのに有用な、効力が増
大しかつ治療指数が改善された、長さ８〜１６核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物の設計
を可能にする。したがって、特定の実施形態では、本明細書中に、インビボにおいて標的
ＲＮＡを減少させるのに有用な高親和性ヌクレオチド修飾を含む短鎖アンチセンス化合物
が提供される。特定のこのような短鎖アンチセンス化合物は、先に記載したアンチセンス
化合物よりも低い用量で有効であり、毒性および処置のコストの低下を可能にする。さら
に、特定の短鎖アンチセンス化合物は、経口投薬についてより高い潜在能力を有する。
より強力なアンチセンス化合物に対する需要に対処するために、本明細書中では、より
長い化合物に関してインビボでの活性が増加した短鎖アンチセンス化合物（長さ８〜１６
ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１４ヌクレオチド
、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチド）が提供される。特定の短鎖アンチセンス化合
物は、化合物の３’末端および５’末端（ウィング）上に、高親和性の化学的に修飾され
たヌクレオチドを含むギャップマー化合物である。特定の実施形態では、高親和性修飾ヌ
クレオチドの付加することで、アンチセンス化合物が、その長さがより短いにもかかわら
ず、インビボでのその意図される標的ＲＮＡに対して活性でありかつ特異的であることを
可能にする。本明細書中では、ウィングの各々が独立して１〜３の高親和性修飾ヌクレオ
チドを含む短鎖アンチセンス化合物が企図される。特定の実施形態では、高親和性修飾は
糖修飾である。高親和性修飾ヌクレオチドとしては、ＢＮＡまたは他の２’−修飾ヌクレ
オチド（例えば、２’−ＭＯＥヌクレオチド）が挙げられるがこれらに限定されない。ま
た、少なくとも１つの修飾されたヌクレオチド間結合（例えば、ホスホロチオエートヌク
レオチド間結合）を有する短鎖アンチセンス化合物も企図される。特定の実施形態では、
本発明の短鎖アンチセンス化合物は、全てホスホロチオエートヌクレオシド間結合を有し
得る。短鎖アンチセンス化合物は、必要に応じて、共役基を含む。本明細書中で示される
ように、短鎖アンチセンス化合物は、ＤＮＡに対して有するよりも高い標的ＲＮＡに対す
る親和性を有し、そして、標的ｍＲＮＡの減少によって、ならびに、種々の疾患の徴候の
改善によって示されるように、インビボで有意により強力である。
【０１００】
本明細書中で使用される場合、グルコースの代謝もしくはクリアランス、脂質代謝、コ
レステロール代謝、または、インシュリン代謝に関与するＲＮＡは、これらのプロセスを
調節する生化学経路に関与するあらゆるＲＮＡである。このようなＲＮＡは当該分野で周
知である。標的遺伝子の例としては、ＡｐｏＢ−１００（ＡＰＯＢ；Ａｇ（ｘ）抗原；ａ
ｐｏＢ−４８；アポリポタンパク質Ｂ；アポリポタンパク質Ｂ−１００；アポリポタンパ
ク質Ｂ−４８としても公知）およびＧＣＧＲ（グルカゴンレセプター；ＧＲとしても公知
）、ＣＲＰ、ＤＧＡＴ２、ＧＣＣＲ、ＰＣＳＫ９、ＰＴＥＮ、ＰＴＰ１Ｂ、ＳＧＬＴ２お
よびＳＯＤ１が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１０１】
１．標的発現の調節
特定の実施形態では、標的が同定され、そして、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、
その標的またはその発現を調節するように設計される。特定の実施形態では、標的核酸分
子に対するオリゴマー性化合物の設計は、多工程プロセスであり得る。代表的には、プロ
セスは、標的タンパク質の同定から開始され、そして、その標的タンパク質の活性が調節
され、次いで、その発現が標的タンパク質をもたらす核酸を同定する。特定の実施形態で
は、アンチセンス化合物の設計は、標的化された核酸分子に対してハイブリッド形成可能
なアンチセンス化合物をもたらす。特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、アンチ
センスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスオリゴヌクレオシドである。特定の実施形
態では、アンチセンス化合物と標的核酸とは、互いに相補的である。特定のこのような実
施形態では、アンチセンス化合物は、標的核酸に対して完全に相補的である。特定の実施
形態では、アンチセンス化合物は、１つのミスマッチを含む。特定の実施形態では、アン
チセンス化合物は２つのミスマッチを含む。特定の実施形態では、アンチセンス化合物は
３以上のミスマッチを含む。
【０１０２】
標的核酸の発現の調節は、任意の数の核酸の機能を変更することによって達成され得る
。特定の実施形態では、調節されるべきＲＮＡの機能としては、転移機能（タンパク質翻
訳の部位へのＲＮＡの転移、ＲＮＡ合成部位から離れた細胞内の部位へのＲＮＡの転移を
含むがこれらに限定されない）、およびＲＮＡからのタンパク質の翻訳が挙げられるがこ
れらに限定されない。調節され得るＲＮＡのプロセシング機能としては、１以上のＲＮＡ
種を得るためのＲＮＡのスプライシング、ＲＮＡのキャッピング、ＲＮＡの３’成熟、お
よびＲＮＡを伴う触媒的活性もしくは複合体の形成（ＲＮＡが関与し得るか、または、Ｒ
ＮＡにより促進され得る）が挙げられるがこれらに限定されない。発現の調節は、一過的
、または、正味の定常状態レベルのいずれかにより、１以上の核酸種のレベルの上昇、ま
たは、１以上の核酸種のレベルの低下をもたらし得る。したがって、一実施形態では、発
現の調節は、標的ＲＮＡまたはタンパク質レベルの増加または減少を意味し得る。別の実
施形態では、発現の調節とは、１以上のＲＮＡのスプライシング産物の増加もしくは減少
、または、２以上のスプライシング産物の割合における変化を意味し得る。
特定の実施形態では、標的遺伝子の発現は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１
５モノマー、より好ましくは９〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（す
なわち、約８〜約１６の連結されたモノマー）を含むオリゴマー性化合物を用いて調節さ
れる。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６
の核酸塩基の１以上のアンチセンス化合物を用いて標的遺伝子の発現を調節する方法を包
含するものと理解する。
【０１０３】
特定の実施形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ８核酸塩基の短鎖アンチセン
ス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ９
核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子
を調節する方法は、長さ８核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の
実施形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ１０核酸塩基の短鎖アンチセンス化合
物の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ１０核酸
塩基の短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子を調
節する方法は、長さ１１核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実
施形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ１２核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ１３核酸塩
基の短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子を調節
する方法は、長さ１４核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施
形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ１５核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物の
使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子を調節する方法は、長さ１６核酸塩基
の短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
特定の実施形態では、標的遺伝子の発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含む短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子の発現を調節
する方法は、１０〜１５モノマーを含む短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定
の実施形態では、標的遺伝子の発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含む短鎖ア
ンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、標的遺伝子の発現を調節する
方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含む短鎖アンチセンス化合
物の使用を包含する。
【０１０４】
２．ハイブリッド形成
特定の実施形態では、特異的な結合が所望される条件下、すなわち、インビボアッセイ
もしくは治療的な処置の場合には生理学的条件下、そして、インビトロアッセイの場合に
はアッセイが行われる条件下で、アンチセンス化合物の非標的核酸配列に対する非特異的
な結合を回避するのに十分な程度の相補性が存在する場合、アンチセンス化合物は特異的
にハイブリッド形成する。
本明細書中で使用される場合、「ストリンジェントなハイブリッド形成条件」または「
ストリンジェントな条件」は、アンチセンス化合物がその標的配列に対してはハイブリッ
ド形成するが、最小数の他の配列とはハイブリッド形成しない条件を指す。ストリンジェ
ントな条件は、配列依存的であり、異なる状況下では異なる。そして、「ストリンジェン
トな条件」（この条件下でアンチセンス化合物が標的配列に対してハイブリッド形成する
）は、アンチセンス化合物の性質および組成、ならびに、それらが調べられるべきアッセ
イによって決定される。
【０１０５】
３．相補性
ヌクレオチドの親和性修飾の取り込みは、非修飾化合物と比較して、より多い数のミス
マッチを許容し得ることが当該分野で理解される。同様に、特定のオリゴヌクレオチド配
列は、他のオリゴヌクレオチド配列よりもミスマッチに対して耐性であり得る。当業者は
、例えば、溶融温度（Ｔｍ）を決定することにより、オリゴヌクレオチド間、または、オ
リゴヌクレオチドと標的核酸との間の、適切なミスマッチの数を決定し得る。Ｔｍまたは
Ｔｍは、当業者にはよく知られた技術によって算出され得る。例えば、Ｆｒｅｉｅｒ  ｅ
ｔ  ａｌ．（Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９７，２５，２２：
４４２９−４４４３）に記載された技術により、当業者は、ＲＮＡ：ＤＮＡ二重鎖の溶融
温度を上昇させる能力について、ヌクレオチドの修飾を評価することができる。
【０１０６】
４．同一性
アンチセンス化合物またはその一部分は、配列番号、または、特定のＩｓｉｓ番号を有
する化合物に対して、規定された同一性の割合を有し得る。本明細書中で使用される場合
、配列は、同じ核酸塩基対形成の能力を有する場合、本明細書中に開示される配列と同一
である。例えば、本明細書中に記載される化合物の開示される配列中で、チミジンの代わ
りにウラシルを含むＲＮＡは、これらが共にアデニンと対形成をすることから、同一であ
るとみなされる。この同一性は、オリゴマー性化合物の全長にわたるものであっても、ア
ンチセンス化合物の一部分におけるものであってもよい（例えば、配列番号に対するオリ
ゴマー性化合物の同一性の割合を決定するために、２７マーの核酸塩基の１〜２０は、２
０マーに対して比較され得る）。アンチセンス化合物は、本明細書中に記載されるアンチ
センス化合物と類似するように機能するよう、本明細書中に記載される配列と同一の配列
番号を有する必要はないことが当業者により理解される。本明細書中に教示されるアンチ
センス化合物の短縮バージョン、または、本明細書中に教示されるアンチセンス化合物の
非同一バージョンもまた本明細書中に提供される。非同一バージョンは、各塩基が、本明
細書中に開示されるアンチセンス化合物と同じ対形成活性を有さないバージョンである。
塩基は、より短いか、または、少なくとも１つの無塩基部位を有することにより、同じ対
形成活性を有さない。あるいは、非同一バージョンは、異なる対形成活性を有する異なる
塩基で置き換えられた少なくとも１つの塩基を含み得る（例えば、Ｇは、Ｃ、ＡまたはＴ
で置き換えられ得る）。同一性の割合は、比較先の配列番号またはアンチセンス化合物に
対応する同一の塩基対形成を有する塩基の数に従って算出される。同一でない塩基は、互
いに隣接し得るか、オリゴヌクレオチド全体に分散し得るか、またはこれらの両方であり
得る。
【０１０７】
例えば、２０マーの核酸塩基２〜１７と同じ配列を有する１６マーは、その２０マーに
対し８０％同一である。あるいは、２０マーに対して同一ではない４つの核酸塩基を含む
２０マーもまた、その２０マーに対して８０％同一である。１８マーの核酸塩基１〜１４
と同じ配列を有する１４マーは、その１８マーに対して７８％同一である。このような計
算は、十分に当業者の技量の範囲内である。
同一性の割合は、修飾された配列の一部分に存在する元の配列における核酸塩基の割合
に基づく。したがって、２０核酸塩基の活性な標的セグメントの相補体の完全配列を含む
３０核酸塩基のアンチセンス化合物は、その２０核酸塩基の活性な標的セグメントの相補
体に対して１００％同一である部分を有する一方で、さらに、追加の１０核酸塩基の部分
を含む。この本説明の文脈において、活性な標的セグメントの相補体は、単一の部分を構
成し得る。好ましい実施形態では、本明細書中に提供されるオリゴヌクレオチドは、本明
細書中に提示される活性な標的セグメントの相補体の少なくとも一部分に対して、少なく
とも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６
％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であ
る。
【０１０８】
Ｅ．標的核酸、領域およびセグメント
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、任意の標的核酸を標的とするように
設計され得る。特定の実施形態では、標的核酸は、臨床的に問題とされる標的をコードす
る。このような実施形態では、標的核酸の調節は、臨床上の利益をもたらす。特定の標的
核酸としては、表１に示される標的核酸が挙げられるがこれらに限定されない。
特定の実施形態では、標的核酸は、ＡｐｏＢをコードする核酸分子である。ＡｐｏＢを
コードする核酸分子としては、配列番号１および配列番号２が挙げられるがこれらに限定
されない。
【０１０９】
特定の実施形態では、標的核酸は、ＳＧＬＴ２をコードする核酸分子である。ＳＧＬＴ
２をコードする核酸分子としては、配列番号３が挙げられるがこれに限定されない。
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９をコードする核酸分子である。ＰＣＳＫ９をコードす
る核酸分子としては、配列番号４が挙げられるがこれに限定されない。
特定の実施形態では、標的核酸は、ＳＯＤ１をコードする核酸分子である。ＳＯＤ１を
コードする核酸分子としては、配列番号５が挙げられるがこれに限定されない。
特定の実施形態では、標的核酸は、ＣＲＰをコードする核酸分子である。ＣＲＰをコー
ドする核酸分子としては、配列番号６が挙げられるがこれに限定されない。
特定の実施形態では、標的核酸は、ＧＣＣＲをコードする核酸分子である。ＧＣＣＲを
コードする核酸分子としては、配列番号７および配列番号８が挙げられるがこれらに限定
されない。
特定の実施形態では、標的核酸は、ＧＣＧＲをコードする核酸分子である。ＧＣＧＲを
コードする核酸分子としては、配列番号９が挙げられるがこれに限定されない。
特定の実施形態では、標的核酸は、ＤＧＡＴ２をコードする核酸分子である。ＤＧＡＴ
２をコードする核酸分子としては、配列番号１０が挙げられるがこれに限定されない。
特定の実施形態では、標的核酸は、ＰＴＰ１Ｂをコードする核酸分子である。ＰＴＰ１
Ｂをコードする核酸分子としては、配列番号１１および配列番号１２が挙げられるがこれ
らに限定されない。
【０１１０】
特定の実施形態では、標的核酸は、ＰＴＥＮをコードする核酸分子である。ＰＴＥＮを
コードする核酸分子としては、配列番号１４または配列番号１５が挙げられるがこれらに
限定されない。
【表４】
2014033674.tif 000021
標的化のプロセスは通常、アンチセンスの相互作用が生じ、結果として所望の作用がも
たらされるように、標的の領域、セグメントまたは標的核酸内の部位のうち少なくとも１
つの決定を含む。
【０１１１】
特定の実施形態では、標的領域の最も５’側のヌクレオチドは、短鎖アンチセンス化合
物の５’標的部位であり、そして、標的領域の最も３’側のヌクレオチドは、短鎖アンチ
センス化合物の３’標的部位である。特定の実施形態では、標的領域の最も５’側のヌク
レオチドは、短鎖アンチセンス化合物の５’標的部位であり、そして、標的領域の最も３
’側のヌクレオチドは、異なる短鎖アンチセンス化合物の３’標的部位である。特定の実
施形態では、標的領域は、５’標的部位または３’標的部位の１０、１５または２０ヌク
レオチド内にヌクレオチド配列を含む。
特定の実施形態では、標的領域は、核酸の構造的に規定された領域である。例えば、特
定のこのような実施形態では、標的領域は、３’ＵＴＲ、５’ＵＴＲ、エキソン、イント
ロン、コード領域、翻訳開始領域、翻訳終止領域、または他の規定される核酸領域を包含
し得る。
それに対して標的化された１以上の活性な短鎖アンチセンス化合物を有することによっ
て規定される標的核酸における位置は、「活性な標的セグメント」と称される。特定の実
施形態では、それに対して標的化された１以上の活性な短鎖アンチセンス化合物を有する
標的核酸は、標的ＲＮＡである。活性な標的セグメントが複数の短鎖アンチセンス化合物
によって規定される場合、化合物は、好ましくは、標的配列における約１０以下のヌクレ
オチド、より好ましくは、標的配列における約５以下のヌクレオチドによって隔てられ、
なおより好ましくは、短鎖アンチセンス化合物は連続しており、最も好ましくは、短鎖ア
ンチセンス化合物は重なっている。活性な標的セグメント内の短鎖アンチセンス化合物の
活性（例えば、阻害の割合により規定される）には、実質的なバリエーションが存在し得
る。活性な短鎖アンチセンス化合物は、その標的核酸（標的ＲＮＡが挙げられるがこれに
限定されない）の発現を調節するものである。活性な短鎖アンチセンス化合物は、その標
的ＲＮＡの発現を少なくとも１０％、好ましくは２０％阻害する。好ましい実施形態では
、活性な標的セグメントに対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の少なくとも約５
０％、好ましくは約７０％は、その標的ＲＮＡの発現を少なくとも４０％調節する。より
好ましい実施形態では、活性な短鎖アンチセンス化合物を規定するのに必要とされる阻害
のレベルは、活性な標的セグメントを規定するために使用される選別からの結果に基づい
て規定される。
【０１１２】
適切な標的セグメントは、標的領域（この領域に対して活性な短鎖アンチセンス化合物
が標的化される）の少なくとも約８核酸塩基の部分である。標的セグメントは、例示的な
標的セグメントのうちの１つの５’末端からの少なくとも８個の連続する核酸塩基を含む
ＤＮＡまたはＲＮＡ配列を含み得る（同じＤＮＡまたはＲＮＡの連続する伸長部である残
りの核酸塩基は、標的セグメントの５’末端の直ぐ上流から始まり、そして、そのＤＮＡ
またはＲＮＡが約８〜約１６の核酸塩基を含むようになるまで続く）。標的セグメントは
また、例示的な標的セグメントのうちの１つの３’末端からの少なくとも８個の連続する
核酸塩基を含むＤＮＡまたはＲＮＡ配列によっても表される（同じＤＮＡまたはＲＮＡの
連続する伸長部である残りの核酸塩基は、標的セグメントの３’末端の直ぐ下流から始ま
り、そして、そのＤＮＡまたはＲＮＡが約８〜約１６の核酸塩基を含むようになるまで続
く）。また、アンチセンス標的セグメントが、例示的な標的セグメントの配列の内部部分
からの少なくとも８個の連続する核酸塩基を含むＤＮＡまたはＲＮＡ配列によって表され
得ること、そして、短鎖アンチセンス化合物が約８〜約１６の核酸塩基を含むようになる
まで、一方または両方の方向に伸長し得ることも理解される。本明細書中に例示される標
的セグメントを手にした当業者は、過度の実験を行うことなしに、さらなる標的セグメン
トを同定することができる。
一旦、１以上の標的領域、セグメントまたは部位が同定されると、その標的に対して十
分に相補的な（すなわち、十分に首尾よくかつ十分な特異性でハイブリッド形成して、所
望の作用を与える）短鎖アンチセンス化合物が選択される。
短鎖アンチセンス化合物はまた、標的核酸分子に沿って、長さ８〜１６核酸塩基の任意
の連続する核酸塩基を含む、標的核酸塩基配列の領域に対して標的化され得る。
例示される標的セグメント内から選択される少なくとも８個の連続した核酸塩基の伸長
部を含む、長さ８〜１６核酸塩基の標的セグメントもまた、標的とするのに適切であると
考えられる。したがって、短鎖アンチセンス化合物はまた、特定の５’標的部位において
開始するような、本明細書中で同定されるこれらのセグメント内の８〜１６の核酸塩基も
包含し得る。これらの領域の周囲、５０核酸塩基内、好ましくは２５核酸塩基内、より好
ましくは１６核酸塩基内の、８、９、１０、１１、または、より好ましくは、１２、１３
、１４、１５もしくは１６の連続した核酸塩基の任意のセグメントもまた、標的とするの
に適切であると考えられる。
【０１１３】
さらなる実施形態では、本明細書中で同定される「適切な標的セグメント」は、標的核
酸の発現を調節するさらなる短鎖アンチセンス化合物についてのスクリーニングにおいて
使用され得る。「モジュレーター」は、標的核酸の発現を増大または低下させ、そして、
標的セグメントに対して相補的な少なくとも８個の核酸塩基部分を含む化合物である。ス
クリーニング方法は、核酸の標的セグメントを、１以上の候補モジュレーターと接触させ
る工程、および、標的核酸の発現を増大または低下させる１以上の候補モジュレーターを
選択する工程を包含する。一旦、候補モジュレーターが標的核酸の発現を調節し得る（例
えば、低下させるか、または、増大させる）ことが示されると、そのモジュレーターは、
次いで、標的の機能のさらなる調査研究において、または、本発明に従う研究用、診断用
または治療用の因子としての使用のために、使用され得る。
本明細書中で考察される全ての短鎖アンチセンス化合物について、配列、モノマー、モ
ノマー性修飾およびモノマー性結合は、各々、独立して選択され得る。特定の実施形態で
は、短鎖アンチセンス化合物は、モチーフにより説明される。このような実施形態では、
その配列および／またはモチーフが具体的に本明細書中で開示されていようがいまいが、
任意のモチーフが、任意の配列と共に使用され得る。特定の実施形態では、短鎖アンチセ
ンス化合物は、モチーフによる説明になじみにくい修飾を含む（例えば、化合物全体にわ
たって、種々の位置にいくつかの異なる修飾および／または結合を含む短鎖アンチセンス
化合物）。このような組み合わせは、本明細書中に開示されていようがいまいが、任意の
配列について組み込まれ得る。本願に添付する配列表は、化学的な修飾とは無関係に、特
定の核酸配列を提供する。配列表は、必要に応じて、各配列を「ＲＮＡ」または「ＤＮＡ
」のいずれかとして同定するが、実際には、これらの配列は、化学的な修飾および／また
はモチーフの任意の組み合わせで変更され得る。
【０１１４】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、少なくとも１つの高親和性修飾され
たモノマーを含む。特定の実施形態では、標的（ＡｐｏＢ−１００（また、ＡＰＯＢ；Ａ
ｇ（ｘ）抗原；ａｐｏＢ−４８；アポリポタンパク質Ｂ；アポリポタンパク質Ｂ−１００
；アポリポタンパク質Ｂ−４８としても公知）、ＧＣＧＲ（また、グルカゴンレセプター
；ＧＲとしても公知）、ＣＲＰ、ＤＧＡＴ２、ＧＣＣＲ、ＰＣＳＫ９、ＰＴＥＮ、ＰＴＰ
１Ｂ、ＳＧＬＴ２およびＳＯＤ１が挙げられるがこれらに限定されない）をコードする核
酸分子に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物が提供される。特定のこのような実
施形態では、このような短鎖アンチセンス化合物は、これらの標的のいずれかをコードす
る核酸分子に対して標的化される。
【０１１５】
Ｆ．特定の標的
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、任意の標的を調節するように設計さ
れ得る。特定の実施形態では、標的は、臨床的に問題とされている。このような実施形態
では、標的の調節は、臨床上の利益をもたらす。特定の標的は、腎臓において優先的に発
現される。特定の標的は、肝臓において優先的に発現される。特定の標的は、代謝障害と
関連している。特定の標的は、心血管障害と関連している。特定の実施形態では、標的は
、ＡｐｏＢ、ＳＧＬＴ２、ＰＣＳＫ９、ＳＯＤ１、ＣＲＰ、ＧＣＣＲ、ＧＣＧＲ、ＤＧＡ
Ｔ２、ＰＴＰ１ＢおよびＰＴＥＮから選択される。特定の実施形態では、標的は、Ａｐｏ
Ｂ、ＳＧＬＴ２、ＰＣＳＫ９、ＳＯＤ１、ＣＲＰ、ＧＣＣＲ、ＧＣＧＲ、ＤＧＡＴ２およ
びＰＴＰ１Ｂから選択される。特定の実施形態では、標的は、ＳＧＬＴ２以外の任意のタ
ンパク質である。
【０１１６】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、インビボにおいて、肝臓および腎臓
に特異的な標的ＲＮＡの減少を示す。このような特性は、これらの短鎖アンチセンス化合
物を、代謝障害および心血管疾患に関与する多くの標的ＲＮＡの阻害に特に有用なものと
する。したがって、本明細書中では、上記腎臓または肝臓の組織を、心血管障害または代
謝障害に関連するＲＮＡに対して標的化された短鎖アンチセンス化合物に接触させること
によって、心血管障害または代謝障害を処置する方法が提供される。したがって、本発明
の短鎖アンチセンス化合物を用いて、種々の代謝疾患または心血管疾患の適応のいずれか
を改善するための方法も提供される。
【０１１７】
１．ＡｐｏＢ
ＡｐｏＢ（アポリポタンパク質Ｂ−１００；ＡｐｏＢ−１００；アポリポタンパク質Ｂ
−４８；ＡｐｏＢ−４８およびＡｇ（ｘ）抗原としても公知）は、脂質の組み立ておよび
分泌、ならびに、別の分類のリポタンパク質の輸送およびレセプター媒介性の取り込みお
よび送達において、必須の役割を果たす大きな糖タンパク質である。ＡｐｏＢは、食べ物
の脂質の吸収および処理から、循環中のリポタンパク質レベルの調節まで、種々の活動を
行う（ＤａｖｉｄｓｏｎおよびＳｈｅｌｎｅｓｓ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ．，２０
００，２０，１６９−１９３）。この後者の特性は、アテローム性動脈硬化症の罹患率の
点でのその関連性の根拠を成し、これは、周囲のＡｐｏＢ含有リポタンパク質の濃度と大
いに相関している（ＤａｖｉｄｓｏｎおよびＳｈｅｌｎｅｓｓ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｕ
ｔｒ．，２０００，２０，１６９−１９３）。ＡｐｏＢ−１００は、ＬＤＬ−Ｃの主要な
タンパク質成分であり、そして、このリポタンパク質種のＬＤＬレセプターとの相互作用
に必要とされるドメインを含む。ＬＤＬ−Ｃレベルの上昇は、アテローム性動脈硬化症を
含む心血管疾患に対する危険因子である。
【０１１８】
定義
「ＡｐｏＢ」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投与によって調節されるべき、
遺伝子産物またはタンパク質である。
「ＡｐｏＢ核酸」は、ＡｐｏＢをコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特定の
実施形態では、ＡｐｏＢ核酸としては、ＡｐｏＢをコードするＤＮＡ配列、ＡｐｏＢをコ
ードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列、およびＡｐｏＢをコードするｍＲＮＡ配列が
挙げられるがこれらに限定されない。
「ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡ」は、ＡｐｏＢをコードするｍＲＮＡを意味する。
【０１１９】
ＡｐｏＢの治療上の適応
特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＡｐｏＢの発現を調節する方法を提供し
、この方法は、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を投与する工
程を包含する。特定の実施形態では、本発明は、個体を処置する方法を提供し、この方法
は、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含む１以上の薬学的組
成物を投与する工程を包含する。特定の実施形態では、個体は、高コレステロール血症、
非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コ
レステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常症、アテロ
ーム性動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症を発症するリスク、冠動脈心疾患、冠動脈心
疾患の病歴、早期発症した冠動脈心疾患、冠動脈心疾患についての１以上の危険因子、Ｉ
Ｉ型糖尿病、脂質異常症を伴うＩＩ型糖尿病、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高脂
血症、過脂肪酸血症（ｈｙｐｅｒｆａｔｔｙａｃｉｄｅｍｉａ）、肝臓脂肪症、非アルコ
ール性脂肪性肝炎、または非アルコール性脂肪肝病を有する。
脂質低下治療のためのガイドラインは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  
Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）のＡｄｕｌｔ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  
Ｐａｎｅｌ  ＩＩＩ（ＡＴＰ  ＩＩＩ）によって２００１年に確立され、そして、２００
４年に更新された（Ｇｒｕｎｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００４，
１１０，２２７−２３９）。このガイドラインは、ＬＤＬ−Ｃ、総コレステロールおよび
ＨＤＬ−Ｃのレベルの決定のために、代表的には、食事の９〜１２時間後に、完全なリポ
タンパク質プロフィールを得ることを含む。最も最近に確立されたガイドラインによれば
、１３０〜１５９ｍｇ／ｄＬ、１６０〜１８９ｍｇ／ｄＬ、および１９０ｍｇ／ｄＬ以上
のＬＤＬ−Ｃレベルは、それぞれ、境界線上の高さ、高い、および非常に高い、とみなさ
れる。２００〜２３９ｍｇ／ｄＬおよび２４０ｍｇ／ｄＬ以上の総コレステロールレベル
は、それぞれ、境界線上の高さ、および高いとみなされる。４０ｍｇ／ｄＬ未満のＨＤＬ
−Ｃレベルは、低いとみなされる。
【０１２０】
特定の実施形態では、個体は、脂質低下治療が必要であるとして同定される。特定のこ
のような実施形態では、個体は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  Ｅｄｕｃ
ａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）のＡｄｕｌｔ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｐａｎｅ
ｌ  ＩＩＩ（ＡＴＰ  ＩＩＩ）によって２００１年に確立され、そして、２００４年に更
新されたガイドライン（Ｇｒｕｎｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００
４，１１０，２２７−２３９）にしたがって、脂質低下治療が必要であるとして同定され
る。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１９０ｍｇ／ｄ
Ｌを上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要と
する個体は、１６０ｍｇ／ｄＬを上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態
では、脂質低下治療を必要とする個体は、１３０ｍｇ／ｄＬを上回るＬＤＬ−Ｃを有する
。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１００ｍｇ／ｄＬ
を上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とす
る個体は、１６０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。特定のこのような
実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１３０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃ
を維持すべきである。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は
、１００ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。特定のこのような実施形態
では、個体は、７０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。
【０１２１】
特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＡｐｏＢを減少させるための方法を提供
する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＡｐｏＢ含有リポタンパク質を減少
させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＬＤＬ−Ｃ
を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＶＬ
ＤＬ−Ｃを減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体にお
けるＩＤＬ−Ｃを減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個
体における非ＨＤＬ−Ｃを減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発
明は、個体におけるＬｐ（ａ）を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では
、本発明は、個体における血清トリグリセリドを減少させるための方法を提供する。特定
の実施形態では、本発明は、個体における肝トリグリセリドを減少させるための方法を提
供する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＯｘ−ＬＤＬ−Ｃを減少させるた
めの方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体における小型のＬＤＬ粒子を
減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体における小型の
ＶＬＤＬ粒子を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体
におけるリン脂質を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、
個体における酸化されたリン脂質を減少させるための方法を提供する。
【０１２２】
特定の実施形態では、本発明は、被験体におけるＯｘ−ＬＤＬ−Ｃ濃度を減少させるた
めの方法を提供する。特定のこのような実施形態では、ＡｐｏＢ、ＬＤＬ−Ｃ、ＶＬＤＬ
−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、総コレステロール、非ＨＤＬ−Ｃ、Ｌｐ（ａ）、トリグリセリドまた
はＯｘ−ＬＤＬ−Ｃの減少は、独立して、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なく
とも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０
％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少な
くとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８
５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％および少なくとも１００％から選択される。
特定のこのような実施形態では、ＡｐｏＢ、ＬＤＬ−Ｃ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、総
コレステロール、非ＨＤＬ−Ｃ、Ｌｐ（ａ）、トリグリセリドまたはＯｘ−ＬＤＬ−Ｃの
減少は、独立して、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくと
も５０％、少なくとも６０％および少なくとも７０％から選択される。特定のこのような
実施形態では、ＡｐｏＢ、ＬＤＬ−Ｃ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、総コレステロール、
非ＨＤＬ−Ｃ、Ｌｐ（ａ）、トリグリセリドまたはＯｘ−ＬＤＬ−Ｃの減少は、独立して
、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％および少なくとも７０％から
選択される。
【０１２３】
特定の実施形態では、本発明は、被験体におけるＨＤＬ−Ｃ濃度を上昇させるための方
法を提供する。
特定の実施形態では、本発明により提供される方法は、ＨＤＬ−Ｃを低下させない。特
定の実施形態では、本発明により提供される方法は、肝臓における脂質の蓄積をもたらさ
ない。特定の実施形態では、本発明により提供される方法は、肝臓脂肪症を引き起こさな
い。
特定の実施形態では、本発明は、処置に伴う副作用を減少させつつ、被験体におけるＡ
ｐｏＢ濃度を低下させるための方法を提供する。特定のこのような実施形態では、副作用
は、肝毒性である。特定のこのような実施形態では、副作用は、肝機能の異常である。特
定のこのような実施形態では、副作用は、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）
の上昇である。特定のこのような実施形態では、副作用は、アスパラギン酸アミノトラン
スフェラーゼ（ＡＳＴ）の上昇である。
特定の実施形態では、本発明は、脂質低下治療の結果、目標のＬＤＬ−Ｃレベルに達し
なかった被験体においてＡｐｏＢの濃度を低下させるための方法を提供する。特定のこの
ような実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、被
験体に対して投与される唯一の脂質低下剤である。特定のこのような実施形態では、被験
体は、推奨される脂質低下治療に従っていない。特定のこのような実施形態では、本発明
の薬学的組成物は、さらに異なる脂質低下治療と同時に施される。特定のこのような実施
形態では、さらなる脂質低下治療は、ＬＤＬ−アフェレーシスである。特定のこのような
実施形態では、さらなる脂質低下治療は、スタチンである。特定のこのような実施形態で
は、さらなる脂質低下治療は、エゼチミブである。
特定の実施形態では、本発明は、スタチン不耐性の被験体においてＡｐｏＢの濃度を低
下するための方法を提供する。特定のこのような実施形態では、被験体は、スタチン投与
の結果として、クレアチンキナーゼ濃度が増加している。特定のこのような実施形態では
、被験体は、スタチン投与の結果として、肝機能の異常を有する。特定のこのような実施
形態では、被験体は、スタチン投与の結果として、筋肉痛を有する。特定のこのような実
施形態では、被験体は、スタチン投与の結果として、中枢神経系の副作用を有する。特定
の実施形態では、被験体は、推奨されるスタチン投与に従っていない。
特定の実施形態では、本発明は、被験体における肝トリグリセリドを低下させるための
方法を提供する。特定のこのような実施形態では、被験体は、肝トリグリセリドが上昇し
ている。特定のこのような実施形態では、被験体は、脂肪性肝炎を有する。特定のこのよ
うな実施形態では、被験体は、脂肪症を有する。特定のこのような実施形態では、肝トリ
グリセリドレベルは、磁気共鳴画像法により測定される。
【０１２４】
特定の実施形態では、本発明は、被験体における冠動脈心疾患のリスクを低下させるた
めの方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、被験体におけるアテローム性動脈
硬化症の進行を遅らせるための方法を提供する。特定のこのような実施形態では、本発明
は、被験体におけるアテローム性動脈硬化症の進行を停止させるための方法を提供する。
特定のこのような実施形態では、本発明は、被験体におけるアテローム性プラークのサイ
ズおよび／または有病率を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、提供
される方法は、アテローム性動脈硬化症を発症する被験体のリスクを低下させる。
特定の実施形態では、提供される方法は、被験体における心血管系の結果を改善する。
特定のこのような実施形態では、改善された心臓血管系の結果は、冠動脈心疾患を発症す
るリスクの低下である。特定のこのような実施形態では、改善された心臓血管系の結果は
、１以上の主要な心血管事象（死、心筋梗塞、再梗塞、発作、心原性ショック、肺浮腫、
心停止および心房性不整脈が挙げられるがこれらに限定されない）の発生の減少である。
特定のこのような実施形態では、改善された心血管系の結果は、頚動脈内膜中膜厚の改善
により実証される。特定のこのような実施形態では、頚動脈内膜中膜厚の改善は、厚みの
減少である。特定のこのような実施形態では、頚動脈内膜中膜厚の改善は、内膜中膜厚の
増加の防止である。
【０１２５】
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含
有する薬学的組成物は、治療において使用するためのものである。特定の実施形態では、
治療は、個体における、ＬＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−
Ｃ、Ｌｐ（ａ）、血清トリグリセリド、肝トリグリセリド、Ｏｘ−ＬＤＬ−Ｃ、小型ＬＤ
Ｌ粒子、小型ＶＬＤＬ、リン脂質、または酸化されたリン脂質の減少である。特定の実施
形態では、治療は、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コ
レステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレ
ステロール血症、混合型脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症
を発症するリスク、冠動脈心疾患、冠動脈心疾患の病歴、早期発症した冠動脈心疾患、冠
動脈心疾患についての１以上の危険因子、ＩＩ型糖尿病、脂質異常症を伴うＩＩ型糖尿病
、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高脂血症、過脂肪酸血症、肝臓脂肪症、非アルコ
ール性脂肪性肝炎、または非アルコール性脂肪肝病の処置である。さらなる実施形態では
、治療は、ＣＨＤリスクの低下である。特定の実施形態では、治療は、アテローム性動脈
硬化症の予防である。特定の実施形態では、治療は、冠動脈心疾患の予防である。
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含
有する薬学的組成物は、医薬の調製のために使用される。個体における、ＬＤＬ−Ｃ、Ａ
ｐｏＢ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−Ｃ、Ｌｐ（ａ）、血清トリグリセリド、
肝トリグリセリド、Ｏｘ−ＬＤＬ−Ｃ、小型ＬＤＬ粒子、小型ＶＬＤＬ、リン脂質、また
は酸化されたリン脂質を減少させるための特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物を含有する薬学的組成物は、冠動脈心疾患のリスクを
低下させるための医薬の調製のために使用される。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、高コレステロール血症、非家族性高コレ
ステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血
症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常症、アテローム性動脈硬化
症、アテローム性動脈硬化症を発症するリスク、冠動脈心疾患、冠動脈心疾患の病歴、早
期発症した冠動脈心疾患、冠動脈心疾患についての１以上の危険因子、ＩＩ型糖尿病、脂
質異常症を伴うＩＩ型糖尿病、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高脂血症、過脂肪酸
血症、肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝炎、または非アルコール性脂肪肝病の処置の
ための医薬の調製のために使用される。
【０１２６】
ＡｐｏＢの併用治療
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含
有する１以上の薬学的組成物は、１以上の他の薬学的因子と同時に投与される。特定の実
施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と同
じ疾患または状態を処置するように設計される。特定のこのような実施形態では、１以上
の薬学的因子は、脂質低下剤である。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学
的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と異なる疾患または状態を処置するように設計
される。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の
薬学的組成物の望ましくない作用を処置するように設計される。特定の実施形態では、１
以上の本発明の薬学的組成物は、その他の薬学的因子の望ましくない作用を処置するため
に、別の薬学的因子と同時に投与される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的
組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、同時に投与される。特定の実施形態では、１以
上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、異なる時点で投与される。
特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、
単一の処方物内で一緒に調製される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成
物と、１以上の他の薬学的因子とは、別々に調製される。
【０１２７】
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含
有する薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子としては、脂質低下剤が挙げられる
。特定のこのような実施形態では、本発明の薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因
子としては、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタチンおよびエゼチミブが挙
げられるがこれらに限定されない。特定のこのような実施形態では、脂質低下剤は、本発
明の薬学的組成物の投与の前に投与される。特定のこのような実施形態では、脂質低下剤
は、本発明の薬学的組成物の投与の後に投与される。特定のこのような実施形態では、脂
質低下剤は、本発明の薬学的組成物と同時に投与される。特定のこのような実施形態では
、同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で投与される場合に投与され
る用量と同じである。特定のこのような実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用
量は、脂質低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よりも少ない。特定のこのよ
うな実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で投与され
る場合に投与される用量よりも多い。
【０１２８】
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼイ
ンヒビターである。特定のこのような実施形態では、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒ
ビターは、スタチンである。特定のこのような実施形態では、スタチンは、アトルバスタ
チン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチンおよびロスバスタチンから選択
される。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、コレステロール吸収阻害薬であ
る。特定のこのような実施形態では、コレステロール吸収阻害薬は、エゼチミブである。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、同時に処方されるＨＭＧ−Ｃｏ
Ａレダクターゼインヒビターおよびコレステロール吸収阻害薬である。特定のこのような
実施形態では、同時に処方される脂質低下剤は、エゼチミブ／シンバスタチンである。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ミクロソームトリグリセリド転
移タンパク質インヒビター（ＭＴＰインヒビター）である。
【０１２９】
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、胆汁酸金属イオン封鎖剤である
。特定のこのような実施形態では、胆汁酸金属イオン封鎖剤は、コレスチラミン、コレス
チポールおよびコレセベラムから選択される。特定の実施形態では、同時に投与される薬
学的因子は、ニコチン酸である。特定のこのような実施形態では、ニコチン酸は、即時放
出性ニコチン酸、延長放出性ニコチン酸および持続放出性ニコチン酸から選択される。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、フィブリン酸である。特定のこ
のような実施形態では、フィブリン酸は、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、クロ
フィブラート、ベザフィブラートおよびシプロフィブラートから選択される。
ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有する薬学的組成物と
同時に投与され得る薬学的因子のさらなる例としては、以下が挙げられるがこれらに限定
されない：コルチコステロイド（プレドニゾンが挙げられるがこれに限定されない）；免
疫グロブリン（静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）が挙げられるがこれに限定されない）
；鎮痛剤（例えば、アセトアミノフェン）；抗炎症剤（非ステロイド性抗炎症薬（例えば
、イブプロフェン、ＣＯＸ−１インヒビターおよびＣＯＸ−２インヒビター）が挙げられ
るがこれらに限定されない）；サリチル酸；抗生物質；抗ウイルス薬；抗真菌剤；抗糖尿
病剤（例えば、ビグアナイド、グルコシダーゼ阻害剤、インシュリン、スルホニル尿素お
よびチアゾリジンジオン）；アドレナリン作動性修飾物質；利尿薬；ホルモン（例えば、
同化性ステロイド、アンドロゲン、エストロゲン、カルシトニン、プロゲスチン、ソマト
スタチンおよび甲状腺ホルモン）；免疫調節因子；筋弛緩剤；抗ヒスタミン薬；骨粗しょ
う症剤（例えば、ビホスホネート、カルシトニンおよびエストロゲン）；プロスタグラン
ジン、抗新生物剤；精神療法剤；鎮静薬；ウルシ属の非常に有毒な低木（ｐｏｉｓｏｎ  
ｏａｋ  ｏｒ  ｐｏｉｓｏｎ  ｓｕｍａｃ）の生成物；抗体；およびワクチン。
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含
有する薬学的組成物は、脂質低下治療と組み合わせて投与され得る。特定のこのような実
施形態では、脂質低下治療は、治療的なライフスタイルの変化である。特定のこのような
実施形態では、脂質低下治療は、ＬＤＬアフェレーシスである。
【０１３０】
一実施形態では、本明細書中に提供されるアンチセンス化合物は、ヒト被験体における
アポリポタンパク質Ｂ含有リポタンパク質のレベルを低下させるために使用され得る。本
明細書中で使用される場合、「アポリポタンパク質Ｂ含有リポタンパク質」は、そのタン
パク質成分としてアポリポタンパク質Ｂを有し、そして、ＬＤＬ、ＶＬＤＬ、ＩＤＬおよ
びリポタンパク質（ａ）を含むと理解されるあらゆるリポタンパク質を指す。ＬＤＬ、Ｖ
ＬＤＬ、ＩＤＬおよびリポタンパク質（ａ）は、各々が、１分子のアポリポタンパク質Ｂ
を含み、したがって、血清アポリポタンパク質Ｂの測定は、これらのリポタンパク質の総
数を反映する。当該分野で公知であるように、上述のリポタンパク質の各々は、アテロー
ム発生性である。したがって、血清中の１以上のアポリポタンパク質Ｂ含有リポタンパク
質の低下は、ヒト被験体に対して、治療上の利益を提供し得る。小型のＬＤＬ粒子は、大
型のＬＤＬ粒子と比較して、特にアテローム発生性であると考えられ、したがって、小型
のＬＤＬ粒子の低下は、ヒト被験体に治療上の利益を提供し得る。さらなる脂質パラメー
タもまた、被験体において決定され得る。総コレステロール：ＨＤＬの比、または、ＬＤ
Ｌ：ＨＤＬの比の低下は、コレステロールの比において、臨床的に望ましい改善である。
同様に、脂質レベルの上昇を示すヒトにおいて、血清トリグリセリドを減少させることも
臨床上望ましい。
【０１３１】
被験体において測定され得る心血管疾患の他の指標としては、血清ＬＤＬ粒子のサイズ
；血清ＬＤＬコレステリルエステルの濃度；血清ＬＤＬコレステリルエステルの組成；血
清ＬＤＬコレステリルエステルの多価不飽和の程度；および血清ＬＤＬコレステロールの
レベルが挙げられる。本明細書中で使用される場合、「血清ＬＤＬ粒子のサイズ」は、血
清ＬＤＬ粒子のサイズの分類（非常に小さい、小さい、中ぐらい、または大きいのいずれ
かであり得、代表的には、ｇ／μｍｏｌで表される）を指す。本発明の文脈において、「
血清ＬＤＬコレステリルエステルの濃度」は、ＬＤＬ粒子中に存在するコレステリルエス
テルの量を意味し、そして、代表的には、ｍｇ／ｄＬとして測定される。本発明の文脈に
おいて、「血清ＬＤＬコレステリルエステルの組成」は、血清ＬＤＬ粒子中に存在する、
飽和、一価不飽和および多価不飽和のコレステリルエステル脂肪酸の割合の測定値である
。「血清ＬＤＬコレステリルエステルの多価不飽和の程度」は、血清ＬＤＬ粒子中の多価
不飽和コレステリルエステル脂肪酸の割合を意味する。
分析のための血清または血漿サンプルを得る方法、および、分析を可能にするように血
清サンプルを調製する方法は、当業者に周知である。リポタンパク質、コレステロール、
トリグリセリドおよびコレステリルエステルの測定に関して、用語「血清」および「血漿
」は、本明細書中で交換可能に使用される。
【０１３２】
別の実施形態では、本明細書中に提供されるアンチセンス化合物は、代謝障害を処置す
るために使用され得る。種々のバイオマーカーは、代謝疾患を評価するために使用され得
る。例えば、血中グルコースレベルは、一般に利用可能な検査キットまたはグルコメータ
ー（例えば、Ａｓｃｅｎｓｉａ  ＥＬＩＴＥＴＭキット、Ａｓｃｅｎｓｉａ（Ｂａｙｅｒ
）、Ｔａｒｒｙｔｏｗｎ  ＮＹまたはＡｃｃｕｃｈｅｃｋ，Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓ
ｔｉｃｓ）を用いて、医師によって、または、患者によってさえ、決定され得る。グリケ
ート化されたヘモグロビン（ＨｂＡ１ｃ）もまた測定され得る。ＨｂＡ１ｃは、グルコー
スによる翻訳後修飾によってインビボで形成される、安定な微量のヘモグロビン改変体で
あり、主としてＮＨ２末端がグリケート化されたβ鎖を含む。ＨｂＡ１ｃのレベルと、先
の３ヶ月にわたる平均血中グルコースレベルとの間には、強い相関が存在する。したがっ
て、ＨｂＡ１ｃは、しばしば、持続的な血中グルコースの制御を測定するための「ゴール
ドスタンダート（ｇｏｌｄ  ｓｔａｎｄａｒｄ）」として見られる（Ｂｕｎｎ，Ｈ．Ｆ．
ｅｔ  ａｌ．，１９７８，Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００，２１−７）。ＨｂＡ１ｃは、イオン
交換ＨＰＬＣまたはイムノアッセイによって測定され得る；ＨｂＡ１ｃ測定のための自宅
での採血および郵送のキットは、現在広く入手可能である。血清フルクトサミンは、安定
なグルコース制御の別の指標であり、そして、比色法（Ｃｏｂａｓ  Ｉｎｔｅｇｒａ，Ｒ
ｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）により測定され得る。
【０１３３】
ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＮＭ＿０００３８４．１（配列番号１として本明細書中に引用される）の配
列を有するＡｐｏＢ核酸に対して標的化される。特定のこのような実施形態では、配列番
号１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１に対して少なくとも９
０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、配列番号１に対して少なくとも９５％相補的である。特定のこ
のような実施形態では、配列番号１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配
列番号１に対して１００％相補的である。特定の実施形態では、配列番号１に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、表２および表３に示されるヌクレオチド配列を含む
。
表２および３における各配列番号に示されるヌクレオチド配列は、糖部分、モノマー性
結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、配列番号により
規定される短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合または核
酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）により記載
されるアンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸
塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
表２および３は、配列番号１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例を示す
。表２は、配列番号１に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。表３は
、配列番号１に関して、１または２のミスマッチを有する短鎖アンチセンス化合物を示す
。「ギャップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウィング−
ギャップ−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌクレオチ
ドを含み、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾された糖を含む。特定
の２’−修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２−１０−
２  ＭＯＥ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’−デオキ
シヌクレオチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィングセグメン
トが配置され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯＥヌクレ
オチドであることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである。「非修
飾シトシン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセンス化合
物は、非修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモチーフの
欄に「非修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシンである。
例えば、「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシトシンを
有する一方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
【０１３４】
【表５】
2014033674.tif 000022
2014033674.tif 000023
2014033674.tif 000024
2014033674.tif 000025
【０１３５】
【表６】
2014033674.tif 000026
2014033674.tif 000027
【０１３６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド２６３〜２７８である。
特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド２６３〜２７８に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１６または１７から選択されるヌクレオチ
ド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド２６３〜２７
８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８１６または３
７２８９４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド４２８〜４８３である。
特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４２８〜４８３に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１８、１９、２０、２１、２２、２３、２
４、２５、２６または２７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実
施形態では、配列番号１のヌクレオチド４２８〜４８３に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８１７、３７２８９５、３７２８１８、３７２８９
６、３７２８１９、３７２８９７、３７２８２０、３７２８９８、３７２８２１または３
７２８９９から選択される。
【０１３７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド４２８〜４５８である。
特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４２８〜４５８に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１８、１９、２０、２１、２２、２３、２
４または２５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、
配列番号１のヌクレオチド４２８〜４５８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号３７２８１７、３７２８９５、３７２８１８、３７２８９６、３７２８
１９、３７２８９７、３７２８２０または３７２８９８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド４６８〜４８３である。
特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４６８〜４８３に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２６または２７から選択されるヌクレオチ
ド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４６８〜４８
３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８２１または３
７２８９９から選択される。
【０１３８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド５８７〜６０７である。
特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド５８７〜６０７に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２８、２９、３０または３１から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド
５８７〜６０７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
２２、３７２９００、３７２８２３または３７２９０１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド７１５〜７３６である。
特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド７１５〜７３６に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３２、３３、３４、３５、３６、３７、３
８、３９または４０から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１のヌクレオチド７１５〜７３６に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４６５８３、３４６５８４、３４６５８５、３４６５８６、３
４６５８７、３４６５８８、３４６５８９、３４６５９０または３４６５９１から選択さ
れる。
【０１３９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド９２９〜９４４である。
特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド９２９〜９４４に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４１または４２から選択されるヌクレオチ
ド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド９２９〜９４
４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８２４または３
７２９０２から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１２５６〜１３１９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１２５６〜１３１９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４３、４４、４５または４６から
選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌク
レオチド１２５６〜１３１９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ
番号３７２８２５、３７２９０３、３７２８２６または３７２９０４から選択される。
【０１４０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１２５６〜１２７１であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１２５６〜１２７１に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４３または４４から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１２
５６〜１２７１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
２５または３７２９０３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１３０４〜１３１９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３０４〜１３１９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４５または４６から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３
０４〜１３１９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
２６または３７２９０４から選択される。
【０１４１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド２１３５〜２１５０であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド２１３５〜２１５０に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４７または４８から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド２１
３５〜２１５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
２９または３７２９０７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド２７７４〜２７９４であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド２７７４〜２７９４に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４９、５０、５１または５２から
選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌク
レオチド２７７４〜２７９４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ
番号３７２８３２、３７２９１０、３７２８３３または３７２９１１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド２９６１〜２９７６であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド２９６１〜２９７６に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５３または５４から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド２９
６１〜２９７６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
３５または３７２９１３から選択される。
【０１４２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド３２４８〜３２６９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３２４８〜３２６９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５５、５６、５７、５８、５９、
６０、６１、６２または６３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような
実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３２４８〜３２６９に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４６５９２、３４６５９３、３４６５９４、３４
６５９５、３４６５９６、３４６５９７、３４６５９８、３４６５９９または３４６６０
０から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド３３５０〜３３７５であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３３５０〜３３７５に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６４、６５、６６、６７、６８ま
たは６９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列
番号１のヌクレオチド３３５０〜３３７５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号３７２８３６、３７２９１４、３７２８３７、３７２９１５、３７２８
３８または３７２９１６から選択される。
【０１４３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド３４０９〜３４２４であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３４０９〜３４２４に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７０または７３から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３４
０９〜３４２４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
３９、３８７４６１、３８０１４７または３７２９１７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド３５７３〜３５８８であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３５７３〜３５８８に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７４または７５から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３５
７３〜３５８８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
４０または３７２９１８から選択される。
【０１４４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド３７０１〜３７１６であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３７０１〜３７１６に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７６または７７から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド３７
０１〜３７１６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
４１または３７２９１９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド４２１９〜４２３４であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４２１９〜４２３４に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７８または７９から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４２
１９〜４２３４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
４３または３７２９２１から選択される。
【０１４５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド４３０１〜４３２３であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４３０１〜４３２３に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８０、８１、８２または８３から
選択されるヌクレオチド配列を含む。特定の実施形態では、配列番号１のヌクレオチド４
３０１〜４３２３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２
８４４、３７２９２２、３７２８４５または３７２９２３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド５５８８〜５６０９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド５５８８〜５６０９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４、８５、８６、８７、８８、
８９、９０、９１または９２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような
実施形態では、配列番号１のヌクレオチド５５８８〜５６０９に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４６６０１、３４６６０２、３４６６０３、３４
６６０４、３４６６０５、３４６６０６、３４６６０７、３４６６０８または３４６６０
９から選択される。
【０１４６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド５９２４〜５９３９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド５９２４〜５９３９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９３または９４から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド５９
２４〜５９３９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
５１または３７２９２９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド６６６４〜６６７９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド６６６４〜６６７９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９５または９６から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド６６
６４〜６６７９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
５４または３７２９３２から選択される。
【０１４７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド６９０８〜６９２３であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド６９０８〜６９２３に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９７または９８から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド６９
０８〜６９２３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８
５５または３７２９３３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド７１９０〜７２０５であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド７１９０〜７２０５に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９９または１００から選択される
ヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド７
１９０〜７２０５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２
８５６または３７２９３４から選択される。
【０１４８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド７８１７〜７８３９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド７８１７〜７８３９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０１、１０２、１０４、１０５
、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０または１１１から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド７８１７〜７８３
９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８５８、３７２
９３６、３４６６１０、３４６６１１、３４６６１２、３４６６１３、３４６６１４、３
４６６１５、３４６６１６、３４６６１７または３４６６１８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド７９９５〜８０１０であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド７９９５〜８０１０に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１２または１１３から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド
７９９５〜８０１０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７
２８５９または３７２９３７から選択される。
【０１４９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド８３３６〜８３５６であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド８３３６〜８３５６に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１４、１１５、１１６または１
１７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号
１のヌクレオチド８３３６〜８３５６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号３７２８６１、３７２９３９、３７２８６２または３７２９４０から選択さ
れる。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド８５３９〜８５５４であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド８５３９〜８５５４に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１８または１１９から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド
８５３９〜８５５４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７
２８６３または３７２９４１から選択される。
【０１５０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド９３４４〜９３５９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド９３４４〜９３５９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１２０または１２１から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド
９３４４〜９３５９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７
２８７１または３７２９４９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド９５１５〜９５３０であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド９５１５〜９５３０に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１２２または１２３から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド
９５１５〜９５３０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７
２８７２または３７２９５０から選択される。
【０１５１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド９７９４〜９８０９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド９７９４〜９８０９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１２４または１２５から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド
９７９４〜９８０９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７
２８７５または３７２９５３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１０１５７〜１０１８７
である。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１０１５７〜１０１
８７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１２６、１２７、１２８
、１２９、１３０、１３１、１３２または１３３から選択されるヌクレオチド配列を含む
。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１０１５７〜１０１８７に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８７７、３７２９５
５、３７２８７８、３７２９５６、３７２８７９、３７２９５７、３７２８８０または３
７２９５８から選択される。
【０１５２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１０８３８〜１０８５９
である。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１０８３８〜１０８
５９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１３４、１３５、１３６
、１３７、１３８、１３９、１４０、１４１または１４２から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１０８３８〜１０
８５９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４６６１９、３
４６６２０、３４６６２１、３４６６２２、３４６６２３、３４６６２４、３４６６２５
、３４６６２６または３４６６２７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１３６８９〜１３７１４
である。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３６８９〜１３７
１４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１４３、１４４、１４５
、１４６、１４７または１４８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのよう
な実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３６８９〜１３７１４に対して標的化され
た短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２８９０、３７２９６８、３７２８９１
、３７２９６９、３７２８９２または３７２９７０から選択される。
【０１５３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１３９０７〜１３９２８
である。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３９０７〜１３９
２８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１４９、１５０、１５１
、１５２、１５３、１５４、１５５、１５６または１５７から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３９０７〜１３
９２８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４６６２８、３
４６６２９、３４６６３０、３４６６３１、３４６６３２、３４６６３３、３４６６３４
、３４６６３５または３４６６３６から選択される。
【０１５４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１３９６３〜１３９８４
である。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３９６３〜１３９
８４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１５８、１５９、１６０
、１６１、１６２、１６３、１６４、１６５または１６６から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１３９６３〜１３
９８４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４６６３７、３
４６６３８、３４６６３９、３４６６４０、３４６６４１、３４６６４２、３４６６４３
、３４６６４４または３４６６４５から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１のヌクレオチド１４０５１〜１４０７２
である。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１４０５１〜１４０
７２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１６７、１６８、１６９
、１７０、１７１、１７２、１７３、１７４または１７５から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１のヌクレオチド１４０５１〜１４
０７２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４６６４６、３
４６６４７、３４６６４８、３４６６４９、３４６６５０、３４６６５１、３４６６５２
、３４６６５３または３４６６５４から選択される。
【０１５５】
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１４
ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、Ａ
ｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオチド
である。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖アンチ
センス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０１５６】
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
短鎖ギャップマー（ｓｈｏｒｔギャップマー）である。特定のこのような実施形態では、
ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に
少なくとも１つの高親和性修飾を含む。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定
のこのような実施形態では、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を
含む。特定のこのような実施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこの
ような実施形態では、ウィングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−
Ｏ−２’）ＢＮＡ、β−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレ
ンオキシ（４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−
Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡおよびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮ
Ａから選択される。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、ア
ミノ、アジド、チオ、Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ
２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ
）（Ｒｎ）およびＯ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を
含み、ここで、ＲｍおよびＲｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１
〜Ｃ１０アルキルである。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレ
オチドである。
【０１５７】
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャッ
プは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特定
の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の実
施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）（ｇａｐ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔ
ｉｏｎｓ（ｉｆ  ａｎｙ）ｇａｐ）は、その標的核酸に結合したときに、ＲＮａｓｅ（Ｒ
Ｎａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を支持するアンチセンス化
合物をもたらす。
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て、
ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジエ
ステル結合である。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、混合型バックボーンを有する。
【０１５８】
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施形態で
は、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モノマーで
ある。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施形態では、Ａ
ｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モノマーである。
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長
さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを含む。特定の実施形態
では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１０〜１５モノマ
ーを含む。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含む
。
特定の実施形態では、本発明は、ＡｐｏＢの発現を調節する方法を提供する。特定の実
施形態では、このような方法は、１以上のＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含し、ここで、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好ましくは９
〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の連結さ
れたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４
、１５または１６のモノマーのＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物１つ以上を用いるＡｐｏＢの発現を調節する方法を包含することを理解する。
特定の実施形態では、ＡｐｏＢを調節する方法は、長さ８モノマーのＡｐｏＢ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、Ａｐ
ｏＢを調節する方法は、長さ９モノマーのＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＡｐｏＢを調節する方法は、長さ
１０モノマーのＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含
する。特定の実施形態では、ＡｐｏＢを調節する方法は、長さ１１モノマーのＡｐｏＢ核
酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では
、ＡｐｏＢを調節する方法は、長さ１２モノマーのＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＡｐｏＢを調節する方法
は、長さ１３モノマーのＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使
用を包含する。特定の実施形態では、ＡｐｏＢを調節する方法は、長さ１４モノマーのＡ
ｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施
形態では、ＡｐｏＢを調節する方法は、長さ１５モノマーのＡｐｏＢ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＡｐｏＢを調節
する方法は、長さ１６モノマーのＡｐｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物の使用を包含する。
【０１５９】
特定の実施形態では、ＡｐｏＢの発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＡｐ
ｏＢ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形
態では、ＡｐｏＢの発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＡｐｏＢ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、Ａｐ
ｏＢの発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＡｐｏＢ核酸に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＡｐｏＢの発現を
調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含むＡｐｏＢ核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細書
中に一般的に記載される短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有し
得る。特定の実施形態では、ＡｐｏＢ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−
１２−１、１−１−１０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１
０−２、１−１０−１、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−
３または１−６−１、より好ましくは１−１０−１、２−１０−２、３−１０−３および
１−９−２から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有する
。
【０１６０】
２．ＳＧＬＴ−２
ナトリウム依存性グルコース輸送体２（ＳＧＬＴ−２）は、腎臓の近位尿細管の上皮細
胞において発現され、そして、グルコースを再吸収して、尿中へのグルコースの損逸を防
ぐように機能する。ヒトゲノムについて、ＳＧＬＴ−２は、１１のメンバーからなるナト
リウム基質共輸送体のファミリーのメンバーである。これらのファミリーメンバーの多く
は、配列相同性を共有し、例えば、ＳＧＬＴ１は、ＳＧＬＴ−２と約５９％の配列同一性
を共有し、そして、ＳＧＬＴ−３と約７０％の配列同一性を共有する。ＳＧＬＴ−１は、
心臓およびＣＮＳにおいて見られるグルコース輸送体である。ＳＧＬＴ−３は、小腸にお
けるグルコース感知性ナトリウムチャネルである。これらのＳＧＬＴについての個別の局
在化パターンは、相同なファミリーメンバー間を区別する１つのポイントである。（Ｈａ
ｎｄｌｏｎ，Ａ．Ｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ（２００５
）１５（１１）：１５３２−１５４０；Ｋａｎａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎ
ｖｅｓｔ．，１９９４，９３，３９７−４０４；Ｗｅｌｌｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．
Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，１９９２，２６３，Ｆ４５９−
４６５）。
【０１６１】
アフリカツメガエルの卵母細胞に注入したヒトＳＧＬＴ２の研究は、このタンパク質が
、Ｄ−グルコースおよびα−メチル−Ｄ−グルコピラノシド（α−ＭｅＧｌｃ；グルコー
スアナログ）のナトリウム依存性の輸送を媒介し、α−ＭｅＧｌｃについてのＫｍ値が１
．６ｍＭであり、ナトリウムとグルコースのカップリング比が１：１であることを実証し
た（Ｋａｎａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１９９４，９３，３９
７−４０４；Ｙｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９５，２７０，２
９３６５−２９３７１）。この輸送活性は、フロリジン（ＳＧＬＴのグルコース部位には
結合するが、輸送されず、したがって、ＳＧＬＴの作用を阻害する植物性グルコシド）に
よって抑制される（Ｙｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９５，２７
０，２９３６５−２９３７１）。
【０１６２】
糖尿病は、インシュリン作用の欠陥に起因する高血糖により特徴付けられる障害である
。慢性高血糖は、糖尿病に付随する合併症（心臓病、網膜症、腎症およびニューロパシー
が挙げられるがこれらに限定されない）に対する主要な危険因子である。腎臓は、血漿グ
ルコースレベルの調節において主要な役割を果たすので、腎グルコース輸送体は、魅力的
な薬物標的となっている（Ｗｒｉｇｈｔ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｎａｌ  Ｐｈ
ｙｓｉｏｌ．，２００１，２８０，Ｆ１０−１８）。糖尿病性腎症は、糖尿病を有する多
くの患者において発症する末期の腎疾患の最も一般的な原因である。長期の高血糖から生
じる、糖毒性（ｇｌｕｃｏｔｏｘｉｃｉｔｙ）は、糖尿病患者における組織依存性のイン
シュリン抵抗性を誘導する（Ｎａｗａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．
Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．，２０００，２７８，Ｅ５３５−５４３）。
【０１６３】
定義
「ナトリウム依存性グルコース輸送体２」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投
与によって調節されるべき、遺伝子産物またはタンパク質である。ナトリウム依存性グル
コース輸送体２は、一般に、ＳＧＬＴ２と称されるが、ＳＬＣ５Ａ２；ナトリウム−グル
コース輸送体２；ナトリウム−グルコース共輸送体、腎低親和性；ナトリウム−グルコー
ス共輸送体、腎；溶質キャリアファミリー５（ナトリウム／グルコース共輸送体）、メン
バー２；ＳＬ５２とも称され得る。
「ＳＧＬＴ２核酸」は、ＳＧＬＴ２をコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特
定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸としては、ＳＧＬＴ２をコードするＤＮＡ配列、ＳＧ
ＬＴ２をコードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列、およびＳＧＬＴ２をコードするｍ
ＲＮＡ配列が挙げられるがこれらに限定されない。
「ＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡ」は、ＳＧＬＴ２タンパク質をコードするｍＲＮＡを意味する
。
【０１６４】
治療上の適応
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＳＧＬＴ−２および関連のタンパク
質の発現を調節するために使用される。特定の実施形態では、このような調節は、ＳＧＬ
Ｔ−２をコードする１以上の標的核酸分子（ＳＧＬＴ２、ＳＬ５２、ＳＬＣ５Ａ２、ナト
リウム−グルコース共輸送体、腎低親和性ナトリウム−グルコース共輸送体、腎ナトリウ
ム−グルコース共輸送体２および溶質キャリアファミリー５ナトリウム／グルコース共輸
送体メンバー２が挙げられるがこれらに限定されない）とハイブリッド形成する短鎖アン
チセンス化合物を提供することによって達成される。また、本明細書中に記載される代謝
および／または心血管の疾患および障害を処置する方法も提供される。特定の実施形態で
は、ＳＧＬＴ２の発現を阻害する短鎖アンチセンス化合物が、動物において血中グルコー
スレベルを低下させる方法、および、２型糖尿病の発病を遅延または防止する方法におい
て使用される。このような方法は、本発明の１以上の化合物の治療上または予防上有効な
量を、処置を必要とする可能性のある動物に対して投与する工程を包含する。１以上の化
合物は、ＳＧＬＴ２をコードする核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物であり得る。
本明細書中には、腎細胞または腎組織におけるＳＧＬＴ２の発現の阻害を強化する方法が
提供され、この方法は、ＳＧＬＴ２をコードする核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合
物のような本発明の１以上の化合物に、細胞または組織を接触させる工程を包含する。
特定の実施形態にしたがって、特定の化合物、組成物および方法が具体的に記載されて
いるが、以下の例は、本発明の化合物を例示するようにのみ機能し、本発明の化合物を限
定することは意図されない。
【０１６５】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、混合型のホスホロチオエートおよび
ホスホジエステルバックボーンを有するキメラオリゴマー性化合物である。特定の混合型
バックボーンの短鎖アンチセンス化合物は、両側に２つのウィングが配置された、少なく
とも５個の連続した２’−デオキシヌクレオチドを含む中央のギャップを有し、この２つ
のウィングの各々は、少なくとも１つの２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドを含む。
特定の実施形態では、この混合型バックボーン化合物のヌクレオシド間結合は、ギャップ
内ではホスホロチオエート結合であり、そして、２つのウィング内ではホスホジエステル
結合である。特定の実施形態では、混合型バックボーン化合物は、オリゴヌクレオチドの
最５’末端および最３’末端の一方または両方にある１つのホスホジエステル結合を除い
て、ウィング内にホスホロチオエート結合を有する。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、３−１０−３、２−１０−３、２−１０
−２、１−１０−１、１−１０−２、２−８−２、１−９−２、１−８−１、３−６−３
または１−６−１から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を
有する。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、１−１０−１、１−１０−２、２−８−２、１−９−２、１−８−１、３−６−３ま
たは１−６−１から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有
する。
【０１６６】
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化され、かつ、混合型バックボーン
を有する短鎖アンチセンス化合物は、腎臓に効率的に送達される。特定の実施形態では、
ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化され、かつ、混合型バックボーンを有する短鎖アンチセン
ス化合物の投与は、腎臓における標的遺伝子の発現の調節をもたらす。特定のこのような
実施形態では、肝臓または腎臓には、ほとんど毒性がないか、または全く毒性がない。特
定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化され、かつ、混合型バックボーンを有
する短鎖アンチセンス化合物は、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡの減少についてより強力であり
、そして、混合型バックボーンを有さないが、その他は同一の短鎖アンチセンス化合物と
比較して、開始がより早い。特定のこのような実施形態では、このような効能の増大およ
び／または毒性の減少は、マウスおよび／またはラットにおいてである。特定のこのよう
な実施形態では、このような効能の増大および／または毒性の減少は、ヒトにおいてであ
る。
一例として、そして、例示のみの目的で、一様にホスホロチオエート結合を含むＩＳＩ
Ｓ  １４５７３３と、ウィングにホスホジエステル結合を、そして、ギャップにホスホロ
チオエート結合を含むＩＳＩＳ  ２５７０１６とは、その他は同一である。両方とも、配
列ＧＡＡＧＴＡＧＣＣＡＣＣＡＡＣＴＧＴＧＣ（配列番号１５７２）を含む。これらのオ
リゴヌクレオチドは共に、さらに、両側に５個のヌクレオチドの"２’−メトキシエチル
（２’−ＭＯＥ）ヌクレオチドが配置された、１０個の２’−デオキシヌクレオチドから
構成されるギャップを含む。シチジン残基は全て、５−メチルシチジンである。混合型バ
ックボーン化合物であるＩＳＩＳ  ２５７０１６は、非混合型の親化合物であるＩＳＩＳ
１４５７３３と比べて、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡの減少について、約５０倍より強力で
あった（実施例９を参照のこと）。
【０１６７】
特定の混合型バックボーン化合物ＩＳＩＳ  ２５７０１６の薬物動態研究は、特定の実
施形態では、この化合物が、１２核酸塩基のファーマコフォア（ｐｈａｒｍａｃｏｐｈｏ
ｒｅ）へと代謝されるプロドラッグとして機能することを示す。ＩＳＩＳ  ３７０７１７
（ＩＳＩＳ  ２５７０１６に対応する１２核酸塩基の短鎖アンチセンス化合物）を用いた
研究は、この化合物が、ＩＳＩＳ  ２５７０１６に似た薬理学的プロフィールを有するが
、作用の開始はより早いことを示す。ＩＳＩＳ  ３７０７１７は、配列ＴＡＧＣＣＡＣＣ
ＡＡＣＴ（配列番号１５５４）を含み、さらに、両側に１ヌクレオチドのウィングが配置
された１０個の２’−デオキシヌクレオチドからなるギャップを含む、ＳＧＬＴ−２に対
して標的化された１２核酸塩基のアンチセンスオリゴヌクレオチドである。ウィングは、
２’−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）ヌクレオチドから構成される。シチジン残基は全
て５−メチルシチジンである。ヌクレオシド間結合は、このオリゴヌクレオチド全体を通
して、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）である。ＩＳＩＳ  ２５７０１６およびＩＳＩＳ  
３７０７１７の薬理学的活性の類似性は、ＩＳＩＳ  ２５７０１６が１２ヌクレオチドの
ファーマコフォアを有するプロドラッグであったことを示す薬物動態研究を支持する（実
施例１０を参照のこと）。さらに、ＩＳＩＳ  ２５７０１６の安定化された（末端をキャ
ッピングされた）バージョンを用いた研究は、活性の劇的な喪失を示す。
【０１６８】
特定の実施形態では、ウィングに２’ＭＯＥモノマーを含む短鎖アンチセンス化合物は
、腎臓に効率的に送達され、そして、このような化合物を用いた処置は、肝毒性も腎毒性
もなしに、腎臓における標的遺伝子発現の効率的な調節をもたらす。さらに、本明細書中
では、特定の実施形態において、短鎖アンチセンス化合物が、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡの
減少についてより強力であり、そして、マウスおよびラットにおいて、ＳＧＬＴ−２  ｍ
ＲＮＡに対して標的化された親オリゴヌクレオチドと比較して、より開始が早いことが示
される。２’ＭＯＥの短鎖ギャップマー（ｇａｐ  ｓｈｏｒｔｍｅｒ）は、親化合物を上
回って、効能およびバイオアベイラビリティが改善されることが本明細書中で示される。
一例として、そして、例示のみの目的で、ＩＳＩＳ  ３７０７１７を用いた研究は、腎
臓組織における短鎖アンチセンス化合物が、より長い親化合物と比較して有意により高く
蓄積することを明らかにする（組織１グラムあたり、約５００マイクログラム）。さらに
、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡは、コントロールを上回って、８０％より多く減少された（実
施例１１を参照のこと）。ＩＳＩＳ  ３７０７１７の１−１０−１ギャップマーは、種々
のモチーフを有する配列が関連するオリゴを作製するための鋳型として使用された。ＩＳ
ＩＳ  ３７０７１７の１２マーのオリゴヌクレオチドを取り巻く、ウィング、ギャップお
よび全長のバリエーションを評価する研究が、実施例１２に見られ得る。評価した特定の
モチーフには、１−１０−１、２−８−２、１−８−１、３−６−３および１−６−１が
含まれた（実施例１２の表６０を参照のこと）。これらの化合物は、ＳＧＬＴ２  ｍＲＮ
Ａレベルに対するその作用について分析された。これらのモチーフは全て、用量依存性の
様式で、インビボにおいてＳＧＬＴ２の発現を阻害した。１−１０−１、２−８−２およ
び１−８−１のギャップマーは、特に強力であることが分かった。ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮ
Ａは、これらのモチーフを用いると、コントロールを上回って、８０％より多く減少され
た。
特定の実施形態では、本発明は、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化され、かつ、１−１０
−１  ＭＯＥギャップマーおよび１−１０−２  ＭＯＥギャップマーから選択されるモチ
ーフを有する短鎖アンチセンス化合物を提供する（実施例１３の表６２を参照のこと）。
特定のこのような化合物は、ラットのＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡに対するその作用について分
析された。表６３の結果は、１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび１−１０−２  Ｍ
ＯＥギャップマーの両方が、用量依存性の様式で、インビボでＳＧＬＴ２の発現を阻害し
、そして、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡの８０％を超える減少が達成され得ることを示す。
特定のさらなる１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび２−８−２  ＭＯＥギャップ
マーは、マウスおよびラットの両方のインビボモデルにおいて評価された（例えば、実施
例１４および１５を参照のこと）。ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡにおける８０％より多い減少
が、比較的低い濃度のオリゴで、そして、あらゆる毒性作用なしに、１−１０−１  ＭＯ
Ｅギャップマーおよび２−８−２  ＭＯＥギャップマーの多くで達成された。
【０１６９】
別の非限定的な例では、イヌのＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルに対するＩＳＩＳ  ３８８
６２５の作用もまた分析された。イヌの研究は、ＳＧＬＴ２の発現の８０％より多い阻害
が、１ｍｇ／ｋｇ／ｗｋの用量で達成され得ることを示す。なおより多い阻害が、わずか
により高い用量で達成され得る。イヌにおけるＩＳＩＳ  ３８８６２５の投与もまた、グ
ルコース耐性を改善したことが示された。ピーク血漿グルコースレベルは、平均して５０
％より多く減少され、そして、その後のグルコースの低下は、標準的なグルコース耐性試
験における生理食塩水のコントロールと比較して、少なくなっていた（実施例１７を参照
のこと）。また、糖尿病のラットモデルにおいては、短鎖アンチセンス化合物は、ＰＢＳ
およびコントロールで処置された動物と比較して、経時的に、血漿グルコースレベルおよ
びＨｂＡ１ｃを有意に減少させることが示された（実施例１６を参照のこと）。
全ての研究における動物は、さらに、毒性について評価された。例えば、総体重、肝臓
の重量、脾臓の重量および腎臓の重量が評価された。脾臓の重量、肝臓の重量または体重
における有意な差は、特定の化合物が毒性作用を引き起こすことを示し得る。全ての変化
は、誤差の限界範囲内であることが分かった。処置の間または研究の終了時点では、体重
における有意な変化が観察されなかった。肝臓または脾臓の重量における有意な変化が観
察されなかった。
【０１７０】
ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＮＭ＿００３０４１．１（本明細書中に配列番号２として引用される）の配
列を有するＳＧＬＴ２核酸に対して標的化される。特定のこのような実施形態では、配列
番号３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３に対して少なくとも
９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号３に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３に対して少なくとも９５％相補的である。特定の
このような実施形態では、配列番号３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
配列番号１に対して１００％相補的である。特定の実施形態では、配列番号３に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物は、表４および５に示されるヌクレオチド配列を含む
。
表４および５に示される各配列番号に示されるヌクレオチド配列は、糖部分、モノマー
性結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、配列番号によ
り規定される短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合または
核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）によって
説明されるアンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結合または
核酸塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
【０１７１】
表４および５は、配列番号３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例を示す
。表４は、配列番号３に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。表５は
、配列番号３に関して、１または２のミスマッチを有する短鎖アンチセンス化合物を示す
。「ギャップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウィング−
ギャップ−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌクレオチ
ドを含み、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾糖を含む。特定の２’
−修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２−１０−２  Ｍ
ＯＥ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’−デオキシヌク
レオチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィングセグメントが配
置され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯＥヌクレオチド
であることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである。「非修飾シト
シン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセンス化合物は、
非修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモチーフの欄に「
非修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシンである。例えば
、「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシトシンを有する
一方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
【０１７２】
【表７】
2014033674.tif 000028
2014033674.tif 000029
【０１７３】
【表８】
2014033674.tif 000030
【０１７４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド８５〜１８４である。特
定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド８５〜１８４
を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド８５〜１８４に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２１４、２１５、２１６、２１７、２１８
、２１９、２２１、２２２、２２３、２２４、２２５または２２７から選択されるヌクレ
オチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレオチド８５〜１
８４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７９６８４、４０
５１９３、４０５１９４、４０５１９５、４０５１９６、４０５１９７、３７９６８５、
４０５１９８、４０５１９９、４０５２００、４０５２０１、３７９６８６、３７９７１
１または３８８６２８から選択される。
【０１７５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド１１３〜１３２である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド１１３〜１
３２を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１１３〜１３２に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２１５、２１６、２１７、２１８、
２１９、２２１、２２２、２２３または２２４から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレオチド１１３〜１３２に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５１９３、４０５１９４、４０５
１９５、４０５１９６、４０５１９７、３７９６８５、４０５１９８、４０５１９９、４
０５２００または４０５２０１から選択される。
【０１７６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド２０７〜３２９である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド２０７〜３
２９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２０７〜３２９に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２２８、２２９、２３０、２３２、
２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８、２３９、２４０または２４１から選
択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレ
オチド２０７〜３２９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４
０５２０２、４０５２０３、４０５２０４、３７９６８７、４０５２０５、４０５２０６
、４０５２０７、４０５２０８、４０５２０９、４０５２１０、４０５２１１、４０５２
１２、３７９６８８または３７９６８９から選択される。
【０１７７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド２０７〜２７３である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド２０７〜２
７３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２０７〜２７３に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２２８、２２９、２３０、２３２、
２３３、２３４、２３５、２３６、２３７、２３８または２３９から選択されるヌクレオ
チド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレオチド２０７〜２
７３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２０２、４０
５２０３、４０５２０４、３７９６８７、４０５２０５、４０５２０６、４０５２０７、
４０５２０８、４０５２０９、４０５２１０、４０５２１１または４０５２１２から選択
される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド２０７〜２１９である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド２０７〜２
１９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２０７〜２１９に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２２８または２２９から選択される
ヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレオチド２
０７〜２１９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２０
２または４０５２０３から選択される。
【０１７８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド２３６〜２５２である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド２３６〜２
５２を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２３６〜２５２に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２３０、２３２、２３３、２３４、
２３５または２３６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号３のヌクレオチド２３６〜２５２に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２０４、３７９６８７、４０５２０５、４０５２０６、４
０５２０７、４０５２０８または４０５２０９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド２６０〜２７３である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド２６０〜２
７３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２６０〜２７３に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２３７、２３８または２３９から選
択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレ
オチド２６０〜２７３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４
０５２１０、４０５２１１または４０５２１２から選択される。
【０１７９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド４３５〜６４０である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド４３５〜６
４０を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド４３５〜６４０に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２４２、２４３、２４５、２４６、
２５１、２５２、２５３、２５４、２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、
２６２、２６３または２６４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような
実施形態では、配列番号３のヌクレオチド４３５〜６４０に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７９６９０、４０５２４８、３７９６９１、３８９７
８０、３７９６９２、３８２６７６、３８８６２５、３９２１７０、３９２１７３、４０
５２１３、４０５２１４、４０５２１５、４０５２１６、３７９６９３、４０５２１７、
４０５２１８、４０５２１９、４０５２２０、４０５２２１、４０５２２２、４０５２２
３、４０５２２４または３７９６９４から選択される。
【０１８０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド５２７〜５４０である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド５２７〜５
４０を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド５２７〜５４０に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２４５、２４６または２５１から選
択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレ
オチド５２７〜５４０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３
８９７８０、３７９６９２、３８２６７６、３８８６２６、３９２１７０、３９２１７３
または４０５２１３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド５６４〜６０３である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド５６４〜６
０３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド５６４〜６０３に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２５２、２５３、２５４、２５６、
２５７、２５８、２５９、２６０、２６１、２６２または２６３から選択されるヌクレオ
チド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌクレオチド５６４〜６
０３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２１４、４０
５２１５、４０５２１６、３７９６９３、４０５２１７、４０５２１８、４０５２１９、
４０５２２０、４０５２２１、４０５２２２、４０５２２３または４０５２２４から選択
される。
【０１８１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド５６４〜５７９である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド５６４〜５
７９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド５６４〜５７９に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２５２、２５３、２５４、２５６ま
たは２５７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号３のヌクレオチド５６４〜５７９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、Ｉｓｉｓ番号４０５２１４、４０５２１５、４０５２１６、３７９６９３、４０５２１
７または４０５２１８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド５８７〜６０３である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド５８７〜６
０３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド５８７〜６０３に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２５８、２５９、２６０、２６１、
２６２または２６３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号３のヌクレオチド５８７〜６０３に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２１９、４０５２２０、４０５２２１、４０５２２２、４
０５２２３または４０５２２４から選択される。
【０１８２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド９７４〜１０１４である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド９７４〜
１０１４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９７４〜１０１４
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２６７、２６８、２６９、２
７０、２７１、２７２または２７４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこの
ような実施形態では、配列番号３のヌクレオチド９７４〜１０１４に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７９６９６、４０５２２６、４０５２２７、
４０５２２８、４０５２２９、４０５２３０、３７９６９７または４０５２３１から選択
される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド９９８〜１０１４である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド９９８〜
１０１４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９９８〜１０１４
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２６８、２６９、２７０、２
７１、２７２または２７４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実
施形態では、配列番号３のヌクレオチド９９８〜１０１４に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２２６、４０５２２７、４０５２２８、４０５２
２９、４０５２３０、３７９６９７または４０５２３１から選択される。
【０１８３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド１０９１〜１１７０であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド１０９
１〜１１７０を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１０９１〜１
１７０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２７５、２７６、２７
７、２７８、２７９、２８０、２８１、２８３、２８４、２８５、２８６または２８７か
ら選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号３のヌ
クレオチド１０９１〜１１７０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉ
ｓ番号３７９６９８、４０５２３２、４０５２３３、４０５２３４、４０５２３５、３８
８６２６、３７９６９９、３８２６７７、４０５２３６、４０５２３７、４０５２３８、
３７９７００または４０５２３９から選択される。
【０１８４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド１０９１〜１１０４であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド１０９
１〜１１０４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１０９１〜１
１０４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２７５、２７６または
２７７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番
号３のヌクレオチド１０９１〜１１０４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、Ｉｓｉｓ番号３７９６９８、４０５２３２または４０５２３３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド１１３０〜１１４４であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド１１３
０〜１１４４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１１３０〜１
１４４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２７８、２７９、２８
０、２８１または２８３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施
形態では、配列番号３のヌクレオチド１１３０〜１１４４に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２３４、４０５２３５、３８８６２６、３７９６
９９、３８２６７７または４０５２３６から選択される。
【０１８５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド１１５７〜１１７０であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド１１５
７〜１１７０を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１１５７〜１
１７０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２８４、２８５または
２８７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番
号３のヌクレオチド１１５７〜１１７０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、Ｉｓｉｓ番号４０５２３７、４０５２３８、３７９７００または４０５２３９から選択
される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド１５４２〜１５５６であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド１５４
２〜１５５６を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１５４２〜１
５５６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２８９、２９０、２９
１、２９２または２９３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施
形態では、配列番号３のヌクレオチド１５４２〜１５５６に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２４０、４０５２４１、４０５２４２、３８８６
２９、３７９７０２または３８２６７８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号３のヌクレオチド１９７６〜１９９１であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３のヌクレオチド１９７
６〜１９９１を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１９７６〜１
９９１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号２９６、２９７、２９
８、２９９または３００から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施
形態では、配列番号３のヌクレオチド１９７６〜１９９１に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４０５２４３、４０５２４４、４０５２４５、４０５２
４６または４０５２４７から選択される。
【０１８６】
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１
４ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、
ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオ
チドである。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖
アンチセンス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０１８７】
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、短鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標
的化された短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に少なくとも１つの高親和
性修飾を含む。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施形態
では、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのよう
な実施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態では、
ウィングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、β
−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−（Ｃ
Ｈ２）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮ
Ａおよびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される。特
定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チオ、
Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、
２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−
ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、Ｒｍお
よびＲｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルであ
る。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
【０１８８】
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャ
ップは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の
実施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合した
ときに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を
支持するアンチセンス化合物をもたらす。
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て
、ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジ
エステル結合である。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、混合型バックボーンを有する。
【０１８９】
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施
形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施
形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、長さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では
、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを
含む。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、１０〜１５モノマーを含む。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、Ｓ
ＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチ
ドまたはヌクレオシドを含む。
【０１９０】
特定の実施形態では、本発明は、ＳＧＬＴ２の発現を調節する方法を提供する。特定の
実施形態では、このような方法は、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された１以上の短鎖ア
ンチセンス化合物の使用を包含し、ここで、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好まし
くは９〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の
連結されたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３
、１４、１５または１６のモノマーの、ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された１以上の短
鎖アンチセンス化合物を用いてＳＧＬＴ２の発現を調節する方法を包含することを理解す
る。
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２を調節する方法は、長さ８モノマーのＳＧＬＴ２核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、
ＳＧＬＴ２を調節する方法は、長さ９モノマーのＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２を調節する方
法は、長さ１０モノマーのＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２を調節する方法は、長さ１１モノマ
ーのＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特
定の実施形態では、ＳＧＬＴ２を調節する方法は、長さ１２モノマーのＳＧＬＴ２核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、Ｓ
ＧＬＴ２を調節する方法は、長さ１３モノマーのＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２を調節する方
法は、長さ１４モノマーのＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２を調節する方法は、長さ１５モノマ
ーのＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特
定の実施形態では、ＳＧＬＴ２を調節する方法は、長さ１６モノマーのＳＧＬＴ２核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０１９１】
特定の実施形態では、ＳＧＬＴ２の発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＳ
ＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実
施形態では、ＳＧＬＴ２の発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＳＧＬＴ２
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態で
は、ＳＧＬＴ２の発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＳＧＬＴ２核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＧ
ＬＴ２の発現を調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含
むＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０１９２】
３．ＰＣＳＫ９
常染色体優性の高コレステロール血症（ＡＤＨ）を有する個体において、ＬＤＬ−Ｃレ
ベルの上昇は、ＬＤＬ−レセプター（ＬＤＬ−Ｒ）、アポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏＢ）
またはプロタンパク質コンバターゼサブチリシン／ケキシン９型（ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ
ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ  ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ／ｋｅｘｉｎ  ｔｙｐｅ  ９）（ＰＣＳ
Ｋ９）をコードする遺伝子における変異と関連付けられている（Ａｂｉｆａｄｅｌ  ｅｔ
ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２００３，３４：１５４−１５６）。ＰＣＳＫ９は、
ＰＣＳＫ９における機能獲得変異（ｇａｉｎ−ｏｆ−ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｍｕｔａｔｉｏ
ｎ）がＬＤＬ−Ｃレベルの上昇と関連していることが分かったときに、ＡＤＨに関連する
第３の遺伝子座として同定された。ＡｐｏＢは、トリグリセリドリッチなリポタンパク質
の細胞内アセンブリおよび分泌に関与し、そして、ＬＤＬ−Ｒに対するリガンドである。
ＰＣＳＫ９は、肝臓におけるＬＤＬ−Ｒの発現レベルを低下させることが提案されている
。ＬＤＬ−Ｒの発現の減少は、循環中のＡｐｏＢ含有リポタンパク質の肝臓取り込みの減
少をもたらし、次いで、コレステロールの上昇につながる。
【０１９３】
定義
「ＰＣＳＫ９」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投与によって調節されるべき
、遺伝子産物またはタンパク質である。
「ＰＣＳＫ９核酸」は、ＰＣＳＫ９をコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特
定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸としては、ＰＣＳＫ９をコードするＤＮＡ配列、ＰＣ
ＳＫ９をコードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列、およびＰＣＳＫ９をコードするｍ
ＲＮＡ配列が挙げられるがこれらに限定されない。
「ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡ」は、ＰＣＳＫ９をコードするｍＲＮＡを意味する。
【０１９４】
ＰＣＳＫ９の治療上の適応
特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＰＣＳＫ９の発現を調節する方法を提供
し、この方法は、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を投与す
る工程を包含する。特定の実施形態では、本発明は、個体を処置する方法を提供し、この
方法は、１以上の本発明の薬学的組成物を投与する工程を包含する。特定の実施形態では
、個体は、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロ
ール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロー
ル血症、混合型脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症を発症す
るリスク、冠動脈心疾患、冠動脈心疾患の病歴、早期発症した冠動脈心疾患、冠動脈心疾
患についての１以上の危険因子、ＩＩ型糖尿病、脂質異常症を伴うＩＩ型糖尿病、脂質異
常症、高トリグリセリド血症、高脂血症、過脂肪酸血症、肝臓脂肪症、非アルコール性脂
肪性肝炎、または非アルコール性脂肪肝病を有する。
【０１９５】
脂質低下治療に対するガイドラインは、２００１年にＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｏｌｅｓ
ｔｅｒｏｌ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）のＡｄｕｌｔ  Ｔｒｅａ
ｔｍｅｎｔ  Ｐａｎｅｌ  ＩＩＩ（ＡＴＰ  ＩＩＩ）によって確立され、そして、２００
４年に更新された（Ｇｒｕｎｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００４，
１１０，２２７−２３９）。このガイドラインは、ＬＤＬ−Ｃ、総コレステロールおよび
ＨＤＬ−Ｃのレベルの決定のために、代表的には、食事の９〜１２時間後に、完全なリポ
タンパク質プロフィールを得ることを含む。最も最近に確立されたガイドラインによれば
、１３０〜１５９ｍｇ／ｄＬ、１６０〜１８９ｍｇ／ｄＬ、および１９０ｍｇ／ｄＬ以上
のＬＤＬ−Ｃレベルは、それぞれ、境界線上の高さ、高い、および非常に高い、とみなさ
れる。２００〜２３９ｍｇ／ｄＬおよび２４０ｍｇ／ｄＬ以上の総コレステロールレベル
は、それぞれ、境界線上の高さ、および高いとみなされる。４０ｍｇ／ｄＬ未満のＨＤＬ
−Ｃレベルは、低いとみなされる。
【０１９６】
特定の実施形態では、個体は、脂質低下治療を必要としているとして同定される。特定
のこのような実施形態では、個体は、２００１年にＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅ
ｒｏｌ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）のＡｄｕｌｔ  Ｔｒｅａｔｍ
ｅｎｔ  Ｐａｎｅｌ  ＩＩＩ（ＡＴＰ  ＩＩＩ）によって確立され、２００４年に更新さ
れたガイドライン（Ｇｒｕｎｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００４，
１１０，２２７−２３９）にしたがって、脂質低下治療が必要であるとして同定されてい
る。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１９０ｍｇ／ｄ
Ｌを上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要と
する個体は、１６０ｍｇ／ｄＬを上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態
では、脂質低下治療を必要とする個体は、１３０ｍｇ／ｄＬを上回るＬＤＬ−Ｃを有する
。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１００ｍｇ／ｄＬ
を上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とす
る個体は、１６０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。特定のこのような
実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１３０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃ
を維持すべきである。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は
、１００ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。特定のこのような実施形態
では、個体は、７０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。
【０１９７】
特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＡｐｏＢを減少させるための方法を提供
する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＡｐｏＢ含有リポタンパク質を減少
させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＬＤＬ−Ｃ
を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＶＬ
ＤＬ−Ｃを減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体にお
けるＩＤＬ−Ｃを減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個
体における非ＨＤＬ−Ｃを減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発
明は、個体におけるＬｐ（ａ）を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では
、本発明は、個体における血清トリグリセリドを減少させるための方法を提供する。特定
の実施形態では、本発明は、個体における肝トリグリセリドを減少させるための方法を提
供する。特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＯｘ−ＬＤＬ−Ｃを減少させるた
めの方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体における小型のＬＤＬ粒子を
減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体における小型の
ＶＬＤＬ粒子を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、個体
におけるリン脂質を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、
個体における酸化されたリン脂質を減少させるための方法を提供する。
【０１９８】
特定の実施形態では、本発明により提供される方法は、ＨＤＬ−Ｃを低下させない。特
定の実施形態では、本発明により提供される方法は、肝臓における脂質の蓄積をもたらさ
ない。
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
含有する薬学的組成物は、治療において使用するためのものである。特定の実施形態では
、治療は、個体における、ＬＤＬ−Ｃ、ＡｐｏＢ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ
−Ｃ、Ｌｐ（ａ）、血清トリグリセリド、肝トリグリセリド、Ｏｘ−ＬＤＬ−Ｃ、小型Ｌ
ＤＬ粒子、小型ＶＬＤＬ、リン脂質、または酸化されたリン脂質の低下である。特定の実
施形態では、治療は、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高
コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コ
レステロール血症、混合型脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、アテローム性動脈硬化
症を発症するリスク、冠動脈心疾患、冠動脈心疾患の病歴、早期発症した冠動脈心疾患、
冠動脈心疾患についての１以上の危険因子、ＩＩ型糖尿病、脂質異常症を伴うＩＩ型糖尿
病、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高脂血症、過脂肪酸血症、肝臓脂肪症、非アル
コール性脂肪性肝炎、または非アルコール性脂肪肝病の処置である。さらなる実施形態で
は、治療は、ＣＨＤリスクの低下である。特定の実施形態では、治療は、アテローム性動
脈硬化症の予防である。特定の実施形態では、治療は、冠動脈心疾患の予防である。
【０１９９】
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
含有する薬学的組成物は、医薬の調製のために使用される。個体における、ＬＤＬ−Ｃ、
ＡｐｏＢ、ＶＬＤＬ−Ｃ、ＩＤＬ−Ｃ、非ＨＤＬ−Ｃ、Ｌｐ（ａ）、血清トリグリセリド
、肝トリグリセリド、Ｏｘ−ＬＤＬ−Ｃ、小型ＬＤＬ粒子、小型ＶＬＤＬ、リン脂質、ま
たは酸化されたリン脂質を減少させるための特定の実施形態では、ＰＣＫＳ９に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物を含有する薬学的組成物は、冠動脈心疾患のリスクを
低下するための医薬の調製のために使用される。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、高コレステロール血症、非家族性高コレ
ステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血
症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常症、アテローム性動脈硬化
症、アテローム性動脈硬化症を発症するリスク、冠動脈心疾患、冠動脈心疾患の病歴、早
期発症した冠動脈心疾患、冠動脈心疾患についての１以上の危険因子、ＩＩ型糖尿病、脂
質異常症を伴うＩＩ型糖尿病、脂質異常症、高トリグリセリド血症、高脂血症、過脂肪酸
血症、肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝炎、または非アルコール性脂肪肝病の処置の
ための医薬の調製のために使用される。
【０２００】
ＰＣＳＫ９の併用治療
特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物は、１以上の他の薬学的因子と同
時に投与される。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の
本発明の薬学的組成物と同じ疾患または状態を処置するように設計される。特定の実施形
態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と異なる
疾患または状態を処置するように設計される。特定の実施形態では、このような１以上の
他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物の望ましくない作用を処置するように
設計される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物は、その他の薬学的因
子の望ましくない作用を処置するために、別の薬学的因子と同時に投与される。特定の実
施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、同時に投
与される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的
因子とは、異なる時点で投与される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成
物と、１以上の他の薬学的因子とは、単一の処方物内で一緒に調製される。特定の実施形
態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、別々に調製さ
れる。
【０２０１】
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子としては
、脂質低下剤が挙げられる。特定のこのような実施形態では、本発明の薬学的組成物と同
時に投与され得る薬学的因子としては、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタ
チンおよびエゼチミブが挙げられるがこれらに限定されない。特定のこのような実施形態
では、脂質低下剤は、本発明の薬学的組成物の投与の前に投与される。特定のこのような
実施形態では、脂質低下剤は、本発明の薬学的組成物の投与の後に投与される。特定のこ
のような実施形態では、脂質低下剤は、本発明の薬学的組成物と同時に投与される。特定
のこのような実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で
投与された場合に投与される用量と同じである。特定のこのような実施形態では、同時に
投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よ
りも少ない。特定のこのような実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂
質低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よりも多い。
【０２０２】
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼイ
ンヒビターである。特定のこのような実施形態では、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒ
ビターは、スタチンである。特定のこのような実施形態では、スタチンは、アトルバスタ
チン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチンおよびロスバスタチンから選択
される。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、コレステロール吸収阻害薬であ
る。特定のこのような実施形態では、コレステロール吸収阻害薬は、エゼチミブである。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、同時に処方されるＨＭＧ−Ｃｏ
Ａレダクターゼインヒビターおよびコレステロール吸収阻害薬である。特定のこのような
実施形態では、同時に処方される脂質低下剤は、エゼチミブ／シンバスタチンである。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ミクロソームトリグリセリド転
移タンパク質インヒビター（ＭＴＰインヒビター）である。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ＡｐｏＢ核酸に対して標的化さ
れたオリゴヌクレオチドである。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、胆汁酸金属イオン封鎖剤である
。特定のこのような実施形態では、胆汁酸金属イオン封鎖剤は、コレスチラミン、コレス
チポールおよびコレセベラムから選択される。
【０２０３】
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、ニコチン酸である。特定のこの
ような実施形態では、ニコチン酸は、即時放出性ニコチン酸、延長放出性ニコチン酸およ
び持続放出性ニコチン酸から選択される。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、フィブリン酸である。特定のこ
のような実施形態では、フィブリン酸、フェムフィブロジル、フェノフィブラート、クロ
フィブラート、ベザフィブラートおよびシプロフィブラートから選択される。
本発明の薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子のさらなる例としては、以下が
挙げられるがこれらに限定されない：コルチコステロイド（プレドニゾンが挙げられるが
これに限定されない）；免疫グロブリン（静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）が挙げられ
るがこれに限定されない）；鎮痛剤（アセトアミノフェン）；抗炎症剤（非ステロイド性
抗炎症薬（例えば、イブプロフェン、ＣＯＸ−１インヒビターおよびＣＯＸ−２インヒビ
ター）を含むがこれらに限定されない）；サリチル酸；抗生物質；抗ウイルス剤；抗真菌
剤；抗糖尿病剤（例えば、ビグアナイド、グルコシダーゼ阻害剤、インシュリン、スルホ
ニル尿素およびチアゾリジンジオン）；アドレナリン作動性修飾物質；利尿薬；ホルモン
（例えば、同化作用ホルモン、アンドロゲン、エストロゲン、カルシトニン、プロゲスチ
ン、ソマトスタチンおよび甲状腺ホルモン）；免疫調節因子；筋弛緩剤；抗ヒスタミン薬
；骨粗しょう症剤（例えば、ビホスホネート、カルシトニンおよびエストロゲン）；プロ
スタグランジン、抗新生物剤；精神療法剤；鎮静薬；トキシコデンドロン属の生成物；抗
体；およびワクチン。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、脂質低下治療と組み合わせて施され得
る。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療は、治療的なライフスタイルの変化で
ある。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療は、ＬＤＬアフェレーシスである。
【０２０４】
ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化される特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＮＭ＿１７４９３６．２（本明細書中に配列番号４として引用される）の配
列を有するＰＣＳＫ９核酸に対して標的化される。特定のこのような実施形態では、配列
番号４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４に対して少なくとも
９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号４に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４に対して少なくとも９５％相補的である。特定の
このような実施形態では、配列番号４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
配列番号４に対して１００％相補的である。特定の実施形態では、配列番号４に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物は、表６または表７に示されるヌクレオチド配列を含
む。
【０２０５】
表６および７における各配列番号に示されるヌクレオチド配列は、糖部分、ヌクレオシ
ド間結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、配列番号に
より規定される短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合また
は核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）により
説明される短鎖アンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結合ま
たは核酸塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
表６および７は、配列番号４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例を示す
。表６は、配列番号４に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。表７は
、配列番号４に関して、１または２のミスマッチを有する短鎖アンチセンス化合物を示す
。「ギャップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウィング−
ギャップ−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌクレオチ
ドを含み、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾糖を含む。特定の２’
−修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２−１０−２  Ｍ
ＯＥ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’−デオキシヌク
レオチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィングセグメントが配
置され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯＥヌクレオチド
であることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである。「非修飾シト
シン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセンス化合物は、
非修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモチーフの欄に「
非修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシンである。例えば
、「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシトシンを有する
一方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
【０２０６】
【表９】
2014033674.tif 000031
2014033674.tif 000032
【０２０７】
【表１０】
2014033674.tif 000033
【０２０８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド６９５〜７１０である。
特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド６９５〜７１０に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３２９、３３０または３３１から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド
６９５〜７１０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００２
９７、４００２９８または４００２９９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド７４２〜７７０である。
特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド７４２〜７７０に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３３２または３３３から選択されるヌクレ
オチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド７４２〜
７７０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３００また
は４００３０１から選択される。
【０２０９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド８２８〜８４３である。
特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド８２８〜８４３に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３３４、３３５または３３６から選択され
るヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド
８２８〜８４３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３
０２、４００３０３または４００３０４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド９３７〜１００７である
。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド９３７〜１００７に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３３７、３３８、３３９、３４０、３
４１、３４２、３４３、３４４または３４５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特
定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド９３７〜１００７に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３０５、４００３０６、４００
３０７、４００３０８、４００３０９、４００３１０、４００３１１、４００３１２、４
００３１３または４０３７３９から選択される。
【０２１０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド９３７〜９６５である。
特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド９３７〜９６５に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３３７または３３８から選択されるヌクレ
オチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド９３７〜
９６５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３０５また
は４００３０６から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド９８８〜１００７である
。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド９８８〜１００７に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３３９、３４０、３４１、３４２、３
４３、３４４または３４５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実
施形態では、配列番号４のヌクレオチド９８８〜１００７に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３０７、４００３０８、４００３０９、４００３
１０、４００３１１、４００３１２、４００３３１３または４０３７３９から選択される
。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１１６０であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１１６０に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３４６、３４７、３４８、３４９
、３５０、３５１、３５２、３５３、３５４または３５５から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１１６
０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３１４、４００
３１５、４００３１６、４００３１７、４００３１８、４００３１９、４００３２０、４
００３２１、４００３２２または４００３２３から選択される。
【０２１１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１１０９である
。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１１０９に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３４６、３４７、３４８、３４９、
３５０、３５１、３５２、３５３または３５４から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１１０９に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３１４、４００３１５、４
００３１６、４００３１７、４００３１８、４００３１９、４００３２０、４００３２１
または４００３２２から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１０９１であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１０９１に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３４６、３４７、３４８、３４９
または３５０から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、
配列番号４のヌクレオチド１０５７〜１０９１に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３１４、４００３１５、４００３１６、４００３１７または
４００３１８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１０９３〜１１０９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１０９３〜１１０９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３５１、３５２、３５３または３
５４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号
４のヌクレオチド１０９３〜１１０９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号４００３１９、４００３２０、４００３２１または４００３２２から選択さ
れる。
【０２１２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１３３４〜１３４９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１３３４〜１３４９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３５７、３５８または３５９から
選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌク
レオチド１３３４〜１３４９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ
番号４００３２５、４００３２６または４００３２７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１４５３〜１４６９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１４５３〜１４６９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３６０、３６１、３６２または３
６３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号
４のヌクレオチド１４５３〜１４６９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号４００３２８、４００３２９、４００３３０、４００３３１または４０３４
７０から選択される。
【０２１３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１５６９〜１５９１であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１５６９〜１５９１に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３６４、３６５、３６６、３６７
、３６８、３６９、３７０、３７１、３７２または３７３から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１５６９〜１５９
１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３３２、４００
３３３、４００３３４、４００３３５、４００３３６、４００３３７、４００３３８、４
００３３９、４００３４０または４００３４１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１６２１〜１６３７であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１６２１〜１６３７に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３７４、３７５、３７６または３
７７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号
４のヌクレオチド１６２１〜１６３７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号４００３４２、４００３４３、４００３４４または４００３４５から選択さ
れる。
【０２１４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１７３８〜１７５４であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１７３８〜１７５４に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３７８、３７９、３８０または３
８１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号
４のヌクレオチド１７３８〜１７５４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号４００３４６、４００３４７、４００３４８または４００３４９から選択さ
れる。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド１８３４〜１８５３であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド１８３４〜１８５３に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３８２、３８３、３８４、３８５
、３８６、３８７または３８８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定の実施形態
では、配列番号４のヌクレオチド１８３４〜１８５３に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３５０、４００３５１、４００３５２、４００３５３
、４００３５４、４００３５５または４００３５６から選択される。
【０２１５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド２０８３〜２０９９であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド２０８３〜２０９９に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３８９、３９０、３９１または３
９２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号
４のヌクレオチド２０８３〜２０９９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号４００３５７、４００３５８、４００３５９または４００３６０から選択さ
れる。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号４のヌクレオチド２３１６〜２３３８であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド２３１６〜２３３８に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号３９３、３９４、３９５、３９６
、３９７、３９８、３９９、４００、４０１または４０２から選択されるヌクレオチド配
列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号４のヌクレオチド２３１６〜２３３
８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号４００３６１、４００
３６２、４００３６３、４００３６４、４００３６５、４００３６６、４００３６７、４
００３６８、４００３６９または４００３７０から選択される。
【０２１６】
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１
４ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、
ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオ
チドである。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖
アンチセンス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０２１７】
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、短鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標
的化された短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に少なくとも１つの高親和
性修飾を含む。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施形態
では、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのよう
な実施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態では、
ウィングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、β
−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−（Ｃ
Ｈ２）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮ
Ａおよびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される。特
定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チオ、
Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、
２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−
ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、Ｒｍお
よびＲｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルであ
る。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
【０２１８】
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャ
ップは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の
実施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合した
ときに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を
支持するアンチセンス化合物をもたらす。
【０２１９】
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細
書中に一般的に記載される短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有
し得る。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、
１−１２−１、１−１−１０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２
−１０−２、１−１０−１、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−
６−３または１−６−１、より好ましくは１−１０−１、２−１０−２、３−１０−３お
よび１−９−２から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有
する。
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て
、ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジ
エステル結合である。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、混合型バックボーンを有する。
【０２２０】
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施
形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施
形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、長さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では
、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを
含む。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、１０〜１５モノマーを含む。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、Ｐ
ＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチ
ドまたはヌクレオシドを含む。
【０２２１】
特定の実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９の発現を調節する方法を提供する。特定の
実施形態では、このような方法は、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された１以上の短鎖ア
ンチセンス化合物の使用を包含し、ここで、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好まし
くは９〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の
連結されたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３
、１４、１５または１６のモノマーのＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された１以上の短鎖
アンチセンス化合物を用いてＰＣＳＫ９の発現を調節する方法を包含することを理解する
。
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９を調節する方法は、長さ８モノマーのＰＳＣＫ９核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、
ＰＣＳＫ９を調節する方法は、長さ９モノマーのＰＳＣＫ９核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９を調節する方
法は、長さ１０モノマーのＰＳＣＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９を調節する方法は、長さ１１モノマ
ーのＰＳＣＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特
定の実施形態では、ＰＣＳＫ９を調節する方法は、長さ１２モノマーのＰＳＣＫ９核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、Ｐ
ＣＳＫ９を調節する方法は、長さ１３モノマーのＰＳＣＫ９核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９を調節する方
法は、長さ１４モノマーのＰＳＣＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９を調節する方法は、長さ１５モノマ
ーのＰＳＣＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特
定の実施形態では、ＰＣＳＫ９を調節する方法は、長さ１６モノマーのＰＳＣＫ９核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
特定の実施形態では、ＰＣＳＫ９の発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＰ
ＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実
施形態では、ＰＣＳＫ９の発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＰＣＳＫ９
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態で
は、ＰＣＳＫ９の発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＰＣＳＫ９核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＣ
ＳＫ９の発現を調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含
むＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０２２２】
４．スーパーオキシドジスムターゼ１酵素（ＳＯＤ１）
スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）として知られる酵素は、過酸化水素（Ｈ２Ｏ
２）へのスーパーオキシドの相互変換（ｄｉｓｍｕｔａｔｉｏｎ）を触媒することによっ
て、生体分子の酸化的損傷に対する防御を提供する（Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ，Ａｎｎｕ．Ｒ
ｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９５，６４，９７−１１２）。スーパーオキシドジスムタ
ーゼには２つの主要な分類が存在する。一方は、銅および亜鉛を含む活性部位を持つ酵素
の群であり、もう一方の分類は、活性部位にマンガンまたは鉄のいずれかを有する（Ｆｒ
ｉｄｏｖｉｃｈ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９９５，６４，９７−１１２
）。
【０２２３】
スーパーオキシドジスムターゼ１遺伝子における変異は、上向性および下向性の運動ニ
ューロンの選択的な変性によって特徴付けられる障害である、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬ
Ｓ、ルー・ゲーリグ病としても公知）の優性遺伝される形態に関連している（Ｃｌｅｖｅ
ｌａｎｄおよびＬｉｕ，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２０００，６，１３２０−１３２１）。スー
パーオキシドジスムターゼ１における種々の変異の有害な作用の多くは、スーパーオキシ
ドジスムターゼ１活性の喪失ではなく毒性機能の獲得により媒介されるようである。とい
うのも、マウスにおいてスーパーオキシドジスムターゼ１を完全に欠失させても、寿命を
減らしたり、明白な疾患を引き起こしたりしないからである（Ａｌ−Ｃｈａｌａｂｉおよ
びＬｅｉｇｈ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｎｅｕｒｏｌ，２０００，１３，３９７−４０５；
ＡｌｉｓｋｙおよびＤａｖｉｄｓｏｎ，Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．，２０００，１１
，２３１５−２３２９）。
ヒトＳＯＤ１遺伝子の１００を超える変異が同定されており、全部合わせると、家族性
筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）症例の約２０％を占める。米国において最も一般的に見出
されるＡ４Ｖ変異のようないくつかの変異は、高度に致死性であり、疾患症状の発病から
わずか９ヶ月の保命生存をもたらす。ＳＯＤ１の他の変異は、減速した疾患の経過で明ら
かとなる。
【０２２４】
定義
「ＳＯＤ１」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投与によって調節されるべき、
遺伝子産物またはタンパク質を意味する。
「ＳＯＤ１核酸」は、ＳＯＤ１をコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特定の
実施形態では、ＳＯＤ１核酸としては、ＳＯＤ１をコードするＤＮＡ配列、ＳＯＤ１をコ
ードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列、およびＳＯＤ１をコードするｍＲＮＡ配列が
挙げられるがこれらに限定されない。
「ＳＯＤ１  ｍＲＮＡ」は、ＳＯＤ１をコードするｍＲＮＡを意味する。
【０２２５】
ＳＯＤ１の治療上の適応
家族性ＡＬＳの動物モデルにおけるスーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）のア
ンチセンス性阻害は、ＳＯＤ１のｍＲＮＡおよびタンパク質の両方を減少させ、さらに、
疾患の進行の減速、そして、重要なことには、生存時間の増加をもたらすことが発見され
た。したがって、特定の実施形態では、本発明は、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物を、家族性ＡＬＳを罹患する個体に対して投与することによって、
このような個体における疾患の進行を減速させるための方法を提供する。特定のこのよう
な実施形態では、ＳＯＤ１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、個体の脳脊
髄液に直接送達される。特定のこのような実施形態では、この方法はさらに、家族性ＡＬ
Ｓを罹患する個体の生存時間の増加を含む。疾患の進行の減速は、ＡＬＳ疾患の進行の１
以上の徴候における改善（ＡＬＳの機能的な評定尺度、肺機能検査および筋力強度測定の
修正が挙げられるがこれらに限定されない）によって示される。
【０２２６】
ＳＯＤ１の併用治療
特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含
有する１以上の薬学的組成物は、１以上の他の薬学的因子と同時に投与される。特定の実
施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と同
じ疾患または状態を処置するように設計される。特定の実施形態では、このような１以上
の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と異なる疾患または状態を処置する
ように設計される。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上
の本発明の薬学的組成物の望ましくない作用を処置するように設計される。特定の実施形
態では、１以上の本発明の薬学的組成物は、その他の薬学的因子の望ましくない作用を処
置するために、別の薬学的因子と同時に投与される。特定の実施形態では、１以上の本発
明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、同時に投与される。特定の実施形態
では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、異なる時点で投
与される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的
因子とは、単一の処方物内で一緒に調製される。特定の実施形態では、１以上の本発明の
薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、別々に調製される。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、ニコチン酸である。特定のこの
ような実施形態では、ニコチン酸は、即時放出性ニコチン酸、延長放出性ニコチン酸およ
び持続放出性ニコチン酸から選択される。
【０２２７】
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、フィブリン酸である。特定のこ
のような実施形態では、フィブリン酸は、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、クロ
フィブラート、ベザフィブラートおよびシプロフィブラートから選択される。
ＳＯＤ１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有する薬学的組成物と同時
に投与され得る薬学的因子のさらなる例としては、以下が挙げられるがこれらに限定され
ない：コルチコステロイド（プレドニゾンが挙げられるがこれに限定されない）；免疫グ
ロブリン（静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）が挙げられるがこれに限定されない）；鎮
痛剤（例えば、アセトアミノフェン）；抗炎症剤（非ステロイド性抗炎症薬（例えば、イ
ブプロフェン、ＣＯＸ−１インヒビターおよびＣＯＸ−２インヒビター）が挙げられるが
これらに限定されない）；サリチル酸；抗生物質；抗ウイルス薬；抗真菌剤；抗糖尿病剤
（例えば、ビグアナイド、グルコシダーゼ阻害剤、インシュリン、スルホニル尿素および
チアゾリジンジオン）；アドレナリン作動性修飾物質；利尿薬；ホルモン（例えば、同化
性ステロイド、アンドロゲン、エストロゲン、カルシトニン、プロゲスチン、ソマトスタ
チンおよび甲状腺ホルモン）；免疫調節因子；筋弛緩剤；抗ヒスタミン薬；骨粗しょう症
剤（例えば、ビホスホネート、カルシトニンおよびエストロゲン）；プロスタグランジン
、抗新生物剤；精神療法剤；鎮静薬；トキシコデンドロン属の生成物；抗体；およびワク
チン。
【０２２８】
ＳＯＤ１核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＮＭ＿Ｘ０２３１７．１（本明細書中に配列番号５として引用される）の配
列を有するＳＯＤ１核酸に対して標的化される。特定のこのような実施形態では、配列番
号５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５に対して少なくとも９
０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号５に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、配列番号５に対して少なくとも９５％相補的である。特定のこ
のような実施形態では、配列番号５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配
列番号５に対して１００％相補的である。特定の実施形態では、配列番号５に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、表８または９に示されるヌクレオチド配列を含む。
表８および９における各配列番号に示されるヌクレオチド配列は、糖部分、ヌクレオシ
ド間結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、配列番号に
より規定される短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合また
は核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）により
説明される短鎖アンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結合ま
たは核酸塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
【０２２９】
表８は、配列番号５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例を示す。表８は
、配列番号５に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。「ギャップマー
のモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウィング−ギャップ−ウィン
グモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌクレオチドを含み、そして
、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾された糖を含む。特定の２’−
修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２−１０−２  ＭＯ
Ｅ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’−デオキシヌクレ
オチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィングセグメントが配置
され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯＥヌクレオチドで
あることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである。「非修飾シトシ
ン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセンス化合物は、非
修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモチーフの欄に「非
修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシンである。例えば、
「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシトシンを有する一
方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細書
中に一般的に記載される短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有し
得る。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−
１２−１、１−１−１０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１
０−２、１−１０−１、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−
３または１−６−１、より好ましくは１−１０−１、２−１０−２、３−１０−３および
１−９−２から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有する
。
【０２３０】
【表１１】
2014033674.tif 000034
【０２３１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号５のヌクレオチド８５〜１００である。特
定のこのような実施形態では、配列番号５のヌクレオチド８５〜１００に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４０６、４０７または４０８から選択されるヌ
クレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号５のヌクレオチド８５
〜１００に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３８７５４１、
３８７５４０または３８７５３９から選択される。
特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１４
ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、Ｓ
ＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオチド
である。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖アンチ
センス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物 は
、短鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的
化された短鎖ギャップマーＳＯＤ１は、化合物の１以上のウィング内に少なくとも１つの
高親和性修飾を含む。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施
形態では、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこの
ような実施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態で
は、ウィングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ
、β−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−
（ＣＨ２）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）
ＢＮＡおよびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される
。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チ
オ、Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ
３、２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）および
Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、Ｒ
ｍおよびＲｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキル
である。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
【０２３２】
特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャッ
プは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特定
の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の実
施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合したと
きに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を支
持するアンチセンス化合物をもたらす。
特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て、
ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジエ
ステル結合である。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、混合型バックボーンを有する。
【０２３３】
特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施形態で
は、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モノマーで
ある。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施形態では、
ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モノマーである
。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを含む。特定の実施形
態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１０〜１５モノ
マーを含む。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、ＳＯＤ１核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含
む。
特定の実施形態では、本発明は、ＳＯＤ１の発現を調節する方法を提供する。特定の実
施形態では、このような方法は、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含し、ここで、ＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好ましくは９
〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の連結さ
れたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４
、１５または１６のモノマーのＳＯＤ１核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチセ
ンス化合物を用いてＳＯＤ１の発現を調節する方法を包含することを理解する。
【０２３４】
特定の実施形態では、ＳＯＤ１を調節する方法は、長さ８モノマーのＳＯＤ１核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＯ
Ｄ１を調節する方法は、長さ９モノマーのＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＯＤ１を調節する方法は、長さ
１０モノマーのＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含
する。特定の実施形態では、ＳＯＤ１を調節する方法は、長さ１１モノマーのＳＯＤ１核
酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では
、ＳＯＤ１を調節する方法は、長さ１２モノマーのＳＯＤ１核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＯＤ１を調節する方法
は、長さ１３モノマーのＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使
用を包含する。特定の実施形態では、ＳＯＤ１を調節する方法は、長さ１４モノマーのＳ
ＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施
形態では、ＳＯＤ１を調節する方法は、長さ１５モノマーのＳＯＤ１核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＯＤ１を調節
する方法は、長さ１６モノマーのＳＯＤ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物の使用を包含する。
特定の実施形態では、ＳＯＤ１の発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＳＯ
Ｄ１核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形
態では、ＳＯＤ１の発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＳＯＤ１核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＯ
Ｄ１の発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＳＯＤ１核酸に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＳＯＤ１の発現を
調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含むＳＯＤ１核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０２３５】
５．ＣＲＰ
ＣＲＰ（Ｃ反応性タンパク質およびＰＴＸ１としても公知）は、種々の炎症性サイトカ
インに応答して肝臓で生成される必須のヒト急性期反応物質である。このタンパク質は、
最初に１９３０年に同定され、そして、高度に保存されており、感染または炎症の状態の
早期の指標であると考えられている。血漿ＣＲＰレベルは、感染、虚血、外傷、火傷およ
び炎症性の状態に応答して、１０００倍増加する。患者が脂質低下治療を受けている臨床
治験において、ＬＤＬ−ＣおよびＣＲＰの両方が減少している患者は、ＬＤＬ−Ｃの減少
のみを経験する患者と比較して、将来的に心臓に関する事象を生じるリスクが低下してい
たことが実証されている。
【０２３６】
定義
「ＣＲＰ」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投与によって調節されるべき、遺
伝子産物またはタンパク質を意味する。
「ＣＲＰ核酸」は、ＣＲＰをコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特定の実施
形態では、ＣＲＰ核酸としては、ＣＲＰをコードするＤＮＡ配列、ＣＲＰをコードするＤ
ＮＡから転写されたＲＮＡ配列、およびＣＲＰをコードするｍＲＮＡ配列が挙げられるが
これらに限定されない。
「ＣＲＰ  ｍＲＮＡ」は、ＣＲＰをコードするｍＲＮＡを意味する。
【０２３７】
ＣＲＰの治療上の適応
特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＣＲＰの発現を調節する方法を提供し、
この方法は、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物をこの個体に対し
て投与する工程を包含する。特定の実施形態では、本発明は、個体を処置する方法を提供
し、この方法は、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有する１
以上の薬学的組成物を投与する工程を包含する。特定の実施形態では、個体は、高コレス
テロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接
合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質
異常症、アテローム性動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症を発症するリスク、冠動脈心
疾患、冠動脈心疾患の病歴、早期発症した冠動脈心疾患、冠動脈心疾患についての１以上
の危険因子を有する。特定の実施形態では、個体は、急性冠動脈症候群、脈管損傷、動脈
閉塞、不安定狭心症、後末梢（ｐｏｓｔ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ）血管疾患、心筋梗塞症
候群（ｐｏｓｔ  ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ）（ＭＩ）、血栓症、深
部静脈血栓、末期の腎疾患（ＥＳＲＤ）、慢性腎不全、補体活性化、うっ血性心不全また
は全身性脈管炎を有する。特定の実施形態では、個体は、発作を有する。
【０２３８】
特定の実施形態では、個体は、選択的なステントの配置、血管形成術、経皮的冠動脈形
成術（ＰＴＣＡ）、心臓移植、腎臓透析または心肺バイパスから選択される手順を受けて
いる。
特定の実施形態では、個体は、炎症性疾患を有する。特定のこのような実施形態では、
炎症性疾患は、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、慢性関節リウマチまたは変形性関節症から
選択される。
脂質低下治療に対するガイドラインは、２００１年にＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｏｌｅｓ
ｔｅｒｏｌ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）のＡｄｕｌｔ  Ｔｒｅａ
ｔｍｅｎｔ  Ｐａｎｅｌ  ＩＩＩ（ＡＴＰ  ＩＩＩ）によって確立され、そして、２００
４年に更新された（Ｇｒｕｎｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００４，
１１０，２２７−２３９）。このガイドラインは、ＬＤＬ−Ｃ、総コレステロールおよび
ＨＤＬ−Ｃのレベルの決定のために、代表的には、食事の９〜１２時間後に、完全なリポ
タンパク質プロフィールを得ることを含む。最も最近に確立されたガイドラインによれば
、１３０〜１５９ｍｇ／ｄＬ、１６０〜１８９ｍｇ／ｄＬ、および１９０ｍｇ／ｄＬ以上
のＬＤＬ−Ｃレベルは、それぞれ、境界線上の高さ、高い、および非常に高い、とみなさ
れる。２００〜２３９ｍｇ／ｄＬおよび２４０ｍｇ／ｄＬ以上の総コレステロールレベル
は、それぞれ、境界線上の高さ、および高いとみなされる。４０ｍｇ／ｄＬ未満のＨＤＬ
−Ｃレベルは、低いとみなされる。
特定の実施形態では、個体は、脂質低下治療を必要としているとして同定される。特定
のこのような実施形態では、個体は、２００１年にＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｏｌｅｓｔｅ
ｒｏｌ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＣＥＰ）のＡｄｕｌｔ  Ｔｒｅａｔｍ
ｅｎｔ  Ｐａｎｅｌ  ＩＩＩ（ＡＴＰ  ＩＩＩ）によって確立され、２００４年に更新さ
れたガイドライン（Ｇｒｕｎｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，２００４，
１１０，２２７−２３９）にしたがって、脂質低下治療が必要であるとして同定されてい
る。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１９０ｍｇ／ｄ
Ｌを上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要と
する個体は、１６０ｍｇ／ｄＬを上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態
では、脂質低下治療を必要とする個体は、１３０ｍｇ／ｄＬを上回るＬＤＬ−Ｃを有する
。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１００ｍｇ／ｄＬ
を上回るＬＤＬ−Ｃを有する。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とす
る個体は、１６０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。特定のこのような
実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は、１３０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃ
を維持すべきである。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療を必要とする個体は
、１００ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。特定のこのような実施形態
では、個体は、７０ｍｇ／ｄＬを下回るＬＤＬ−Ｃを維持すべきである。
特定の実施形態では、本発明は、個体におけるＣＲＰを減少させるための方法を提供す
る。特定のこのような実施形態では、ＣＲＰの減少は、少なくとも１０％、少なくとも１
５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少
なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも
６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、
少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％および少なくとも１００％であ
る。
【０２３９】
特定の実施形態では、本発明により提供される方法は、ＨＤＬ−Ｃを低下させない。特
定の実施形態では、本発明により提供される方法は、肝臓における脂質の蓄積をもたらさ
ない。特定の実施形態では、本発明により提供される方法は、肝臓脂肪症を引き起こさな
い。
特定の実施形態では、本発明は、処置に関連する副作用を減少させつつ、被験体におけ
るＣＲＰの濃度を低下させるための方法を提供する。特定のこのような実施形態では、副
作用は、肝毒性である。特定のこのような実施形態では、副作用は、肝機能の異常である
。特定のこのような実施形態では、副作用は、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬ
Ｔ）の上昇である。特定のこのような実施形態では、副作用は、アスパラギン酸アミノト
ランスフェラーゼ（ＡＳＴ）の上昇である。
特定の実施形態では、本発明は、被験体におけるＣＲＰを低下させるための方法を提供
する。脂質低下治療の結果、目標のＬＤＬ−Ｃレベルに達しなかった被験体においてＣＲ
Ｐの濃度を低下させるための方法を提供する。特定のこのような実施形態では、ＣＲＰ核
酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、被験体に投与される唯一の薬学的因
子である。特定のこのような実施形態では、被験体は、推奨される脂質低下治療に従って
いない。特定のこのような実施形態では、本発明の薬学的組成物は、さらなに異なる脂質
低下治療と同時に施される。特定のこのような実施形態では、さらなる脂質低下治療は、
ＬＤＬ−アフェレーシスである。特定のこのような実施形態では、さらなる脂質低下治療
は、スタチンである。特定のこのような実施形態では、さらなる脂質低下治療は、エゼチ
ミブである。
【０２４０】
特定の実施形態では、本発明は、スタチン不耐性の被験体においてＣＲＰの濃度を低下
するための方法を提供する。特定のこのような実施形態では、被験体は、スタチン投与の
結果として、クレアチンキナーゼ濃度が増加している。特定のこのような実施形態では、
被験体は、スタチン投与の結果として、肝機能の異常を有する。特定のこのような実施形
態では、被験体は、スタチン投与の結果として、筋肉痛を有する。特定のこのような実施
形態では、被験体は、スタチン投与の結果として、中枢神経系の副作用を有する。特定の
実施形態では、被験体は、推奨されるスタチン投与に従っていない。
特定の実施形態では、本発明は、被験体における冠動脈心疾患のリスクを低下させるた
めの方法を提供する。特定の実施形態では、本発明は、被験体におけるアテローム性動脈
硬化症の進行を遅らせるための方法を提供する。特定のこのような実施形態では、本発明
は、被験体におけるアテローム性動脈硬化症の進行を停止させるための方法を提供する。
特定のこのような実施形態では、本発明は、被験体におけるアテローム性プラークのサイ
ズおよび／または有病率を減少させるための方法を提供する。特定の実施形態では、提供
される方法は、アテローム性動脈硬化症を発症する被験体のリスクを低下させる。
特定の実施形態では、提供される方法は、被験体における心血管系の結果を改善する。
特定のこのような実施形態では、改善された心臓血管系の結果は、冠動脈心疾患を発症す
るリスクの低下である。特定のこのような実施形態では、改善された心臓血管系の結果は
、１以上の主要な心臓血管系の事象（死、心筋梗塞、再梗塞、発作、心原性ショック、肺
浮腫、心停止および心房性不整脈が挙げられるがこれらに限定されない）の発生の減少で
ある。特定のこのような実施形態では、改善された心血管系の結果は、頚動脈内膜中膜厚
の改善により実証される。特定のこのような実施形態では、頚動脈内膜中膜厚の改善は、
厚みの減少である。特定のこのような実施形態では、頚動脈内膜中膜厚の改善は、内膜中
膜厚の増加の防止である。
【０２４１】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有
する薬学的組成物は、治療において使用するためのものである。特定の実施形態では、治
療は、個体におけるＣＲＰの減少である。特定の実施形態では、治療は、高コレステロー
ル血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロール血症、ヘテロ接合性家
族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール血症、混合型脂質異常症
、アテローム性動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症を発症するリスク、冠動脈心疾患、
冠動脈心疾患の病歴、または早期発症した冠動脈心疾患の処置である。さらなる実施形態
では、治療は、ＣＨＤリスクの低下である。特定の実施形態では、治療は、アテローム性
動脈硬化症の予防である。特定の実施形態では、治療は、冠動脈心疾患の予防である。特
定の実施形態では、治療は、急性冠動脈症候群、慢性腎不全、脈管損傷、動脈閉塞、アテ
ローム性血栓症、不安定狭心症、後末梢血管疾患、心筋梗塞症候群（ＭＩ）、血栓症、深
部静脈血栓、末期の腎疾患（ＥＳＲＤ）、補体活性化、うっ血性心不全または全身性脈管
炎の処置である。特定の実施形態では、治療は、選択的なステントの配置、血管形成術、
経皮的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）、心臓移植、腎臓透析または心肺バイパスから選択され
る手順を受けている個体の処置である。治療は、炎症性障害の処置である。
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有
する薬学的組成物は、個体においてＣＲＰを減少させるための医薬の調製のために使用さ
れる。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
含有する薬学的組成物は、冠動脈心疾患のリスクを低下させるための医薬の調製のために
使用される。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、高コレステロール血症、非家族性高コレステロール血症、家族性高コレステロー
ル血症、ヘテロ接合性家族性高コレステロール血症、ホモ接合性家族性高コレステロール
血症、混合型脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症を発症する
リスク、冠動脈心疾患、冠動脈心疾患の病歴、早期発症した冠動脈心疾患、または冠動脈
心疾患の１以上の危険因子の処置のための医薬の調製のために使用される。
【０２４２】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、急
性冠動脈症候群、慢性腎不全、脈管損傷、動脈閉塞、アテローム性血栓症、不安定狭心症
、後末梢血管疾患、心筋梗塞症候群（ＭＩ）、血栓症、深部静脈血栓、末期の腎疾患（Ｅ
ＳＲＤ）、補体活性化、うっ血性心不全または全身性脈管炎の処置のための医薬の調製の
ために使用される。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、発作を有する個体の処置のための医薬の調製のために使用される。
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、選
択的なステントの配置、血管形成術、経皮的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）、心臓移植、腎臓
透析または心肺バイパスから選択される手順を受けている個体における処置のための医薬
の調製のために使用される。
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、炎
症性疾患の処置のための医薬の調製のために使用される。特定のこのような実施形態では
、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、炎症性腸疾患，潰瘍性大
腸炎、慢性関節リウマチまたは変形性関節症の処置のための医薬の調製のために使用され
る。
【０２４３】
ＣＲＰの併用治療
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有
する１以上の薬学的組成物は、１以上の他の薬学的因子と同時に投与される。特定の実施
形態では、１以上の他の薬学的因子は、脂質低下剤である。特定の実施形態では、このよ
うな１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と同じ疾患または状態を
処置するように設計される。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は
、１以上の本発明の薬学的組成物と異なる疾患または状態を処置するように設計される。
特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組
成物の望ましくない作用を処置するように設計される。特定の実施形態では、１以上の本
発明の薬学的組成物は、その他の薬学的因子の望ましくない作用を処置するために、別の
薬学的因子と同時に投与される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と
、１以上の他の薬学的因子とは、同時に投与される。特定の実施形態では、１以上の本発
明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、異なる時点で投与される。特定の実
施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、単一の処
方物内で一緒に調製される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１
以上の他の薬学的因子とは、別々に調製される。
【０２４４】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有
する薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子としては、脂質低下剤が挙げられる。
特定のこのような実施形態では、本発明の薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子
としては、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタチンおよびエゼチミブが挙げ
られるがこれらに限定されない。特定のこのような実施形態では、脂質低下剤は、本発明
の薬学的組成物の投与の前に投与される。特定のこのような実施形態では、脂質低下剤は
、本発明の薬学的組成物の投与の後に投与される。特定のこのような実施形態では、脂質
低下剤は、本発明の薬学的組成物と同時に投与される。特定のこのような実施形態では、
同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で投与される場合に投与される
用量と同じである。特定のこのような実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用量
は、脂質低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よりも少ない。特定のこのよう
な実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で投与される
場合に投与される用量よりも多い。
【０２４５】
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼイ
ンヒビターである。特定のこのような実施形態では、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒ
ビターは、スタチンである。特定のこのような実施形態では、スタチンは、アトルバスタ
チン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチンおよびロスバスタチンから選択
される。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ＩＳＩＳ  ３０１０１２である
。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、コレステロール吸収阻害薬であ
る。特定のこのような実施形態では、コレステロール吸収阻害薬は、エゼチミブである。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、同時に処方されるＨＭＧ−Ｃｏ
Ａレダクターゼインヒビターおよびコレステロール吸収阻害薬である。特定のこのような
実施形態では、同時に処方される脂質低下剤は、エゼチミブ／シンバスタチンである。
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ミクロソームトリグリセリド転
移タンパク質インヒビター（ＭＴＰインヒビター）である。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、胆汁酸金属イオン封鎖剤である
。特定のこのような実施形態では、胆汁酸金属イオン封鎖剤は、コレスチラミン、コレス
チポールおよびコレセベラムから選択される。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、ニコチン酸である。特定のこの
ような実施形態では、ニコチン酸は、即時放出性ニコチン酸、延長放出性ニコチン酸およ
び持続放出性ニコチン酸から選択される。
【０２４６】
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、フィブリン酸である。特定のこ
のような実施形態では、フィブリン酸は、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、クロ
フィブラート、ベザフィブラートおよびシプロフィブラートから選択される。
ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有する薬学的組成物と同
時に投与され得る薬学的因子のさらなる例としては、以下が挙げられるがこれらに限定さ
れない：コルチコステロイド（プレドニゾンが挙げられるがこれに限定されない）；免疫
グロブリン（静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）が挙げられるがこれに限定されない）；
鎮痛剤（例えば、アセトアミノフェン）；抗炎症剤（非ステロイド性抗炎症薬（例えば、
イブプロフェン、ＣＯＸ−１インヒビターおよびＣＯＸ−２インヒビター）が挙げられる
がこれらに限定されない）；サリチル酸；抗生物質；抗ウイルス薬；抗真菌剤；抗糖尿病
剤（例えば、ビグアナイド、グルコシダーゼ阻害剤、インシュリン、スルホニル尿素およ
びチアゾリジンジオン）；アドレナリン作動性修飾物質；利尿薬；ホルモン（例えば、同
化性ステロイド、アンドロゲン、エストロゲン、カルシトニン、プロゲスチン、ソマトス
タチンおよび甲状腺ホルモン）；免疫調節因子；筋弛緩剤；抗ヒスタミン薬；骨粗しょう
症剤（例えば、ビホスホネート、カルシトニンおよびエストロゲン）；プロスタグランジ
ン、抗新生物剤；精神療法剤；鎮静薬；トキシコデンドロン属の生成物；抗体；およびワ
クチン。
【０２４７】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有
する薬学的組成物は、脂質低下治療と組み合わせて施され得る。特定のこのような実施形
態では、脂質低下治療は、治療的なライフスタイルの変化である。特定のこのような実施
形態では、脂質低下治療は、ＬＤＬアフェレーシスである。
【０２４８】
ＣＲＰ核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセッション番号ＮＭ＿０００５
６７．１（本明細書中に配列番号６として引用される）の配列を有するＣＲＰ核酸に対し
て標的化される。特定のこのような実施形態では、配列番号６に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、配列番号６に対して少なくとも９０％相補的である。特定のこの
ような実施形態では、配列番号６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列
番号６に対して少なくとも９５％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番
号６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６に対して１００％相補
的である。特定の実施形態では、配列番号６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、表９に示されるヌクレオチド配列を含む。
表９の各配列番号番号に示されるヌクレオチド配列は、糖部分、ヌクレオシド間結合ま
たは核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、配列番号により規定さ
れる短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩基
に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）により説明される
短鎖アンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩
基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
【０２４９】
表９は、配列番号６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例を示す。表９は
、配列番号６に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。「ギャップマー
のモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウィング−ギャップ−ウィン
グモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌクレオチドを含み、各ウィ
ングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾糖を含む。特定の２’−修飾糖もまた、
ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２−１０−２  ＭＯＥ」は、２−１
０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’−デオキシヌクレオチドのギャッ
プセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィングセグメントが配置され、ここで、
このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯＥヌクレオチドであることを意味
する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである。「非修飾シトシン」がギャップ
マーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセンス化合物は、非修飾シトシンの
代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモチーフの欄に「非修飾シトシン」
が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシンである。例えば、「ギャップ内に
のみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシトシンを有する一方で、ウィング
セグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
【０２５０】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細書中
に一般的に記載される短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有し得
る。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１２
−１、１−１−１０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１０−
２、１−１０−１、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−３ま
たは１−６−１、より好ましくは１−１０−１、２−１０−２、３−１０−３および１−
９−２から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有する。
【０２５１】
【表１２】
2014033674.tif 000035
【０２５２】
特定の実施形態では、標的領域は、ＮＭ＿０００５６７．１のヌクレオチド１３０５〜
１３２０である。特定のこのような実施形態では、ＮＭ＿０００５６７．１のヌクレオチ
ド１３０５〜１３２０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１３０
５または１３０６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態で
は、ＮＭ＿０００５６７．１のヌクレオチド２６３〜２７８に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３５３４８４または３５３４８５である。
特定の実施形態では、標的領域は、ＮＭ＿０００５６７．１のヌクレオチド１２５７〜
１２７２である。特定のこのような実施形態では、ＮＭ＿０００５６７．１のヌクレオチ
ド１２５７〜１２７２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１２５
７または１２５８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態で
は、ＮＭ＿０００５６７．１のヌクレオチド４２８〜４８３に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３５３５０６または３５３５０７である。
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長
さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１４ヌ
クレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、ＣＲ
Ｐ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオチドであ
る。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖アンチセンス
化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０２５３】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、短
鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化され
た短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に少なくとも１つの高親和性修飾を
含む。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施形態では、ウィン
グのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのような実施形態で
は、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態では、ウィングのモ
ノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、β−Ｄ−メチレ
ンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−（ＣＨ２）２−Ｏ
−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡおよびオキ
シアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される。特定の実施形態
では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チオ、Ｏ−アリル、
Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’−Ｏ（Ｃ
Ｈ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−ＣＨ２−Ｃ（
＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、ＲｍおよびＲｎの各
々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルである。特定の実
施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
【０２５４】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、５
’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャップ
は、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特定の
実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。特定
の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の実施
形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合したとき
に、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を支持
するアンチセンス化合物をもたらす。
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、一
様なモノマー性の結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て、
ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジエ
ステル結合である。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、混合型バックボーンを有する。
【０２５５】
特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長
さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施形態では、Ｃ
ＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モノマーである。特
定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、いくつ
かのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モノマーである。特定の実施形態
では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１５モノマーで
ある。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを含む。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１０〜１５モノマーを含む。特定の実施形
態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４モノマ
ーを含む。特定の実施形態では、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、１２〜１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含む。
【０２５６】
特定の実施形態では、本発明は、ＣＲＰの発現を調節する方法を提供する。特定の実施
形態では、このような方法は、１以上のＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物の使用を包含し、ここで、ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好ましくは９〜１４
モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の連結されたモ
ノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５
または１６のモノマーのＣＲＰ核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチセンス化合
物を用いてＣＲＰの発現を調節する方法を包含することを理解する。
【０２５７】
特定の実施形態では、ＣＲＰを調節する方法は、長さ８モノマーのＣＲＰ核酸に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰを
調節する方法は、長さ９モノマーのＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰを調節する方法は、長さ１０モノマ
ーのＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の
実施形態では、ＣＲＰを調節する方法は、長さ１１モノマーのＣＲＰ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰを調節す
る方法は、長さ１２モノマーのＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰを調節する方法は、長さ１３モノマーの
ＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施
形態では、ＣＲＰを調節する方法は、長さ１４モノマーのＣＲＰ核酸に対して標的化され
た短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰを調節する方
法は、長さ１５モノマーのＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使
用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰを調節する方法は、長さ１６モノマーのＣＲ
Ｐ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０２５８】
特定の実施形態では、ＣＲＰの発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＣＲＰ
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態で
は、ＣＲＰの発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＣＲＰ核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰの発現
を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＣＲＰ核酸に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＣＲＰの発現を調節する方法は
、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含むＣＲＰ核酸に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０２５９】
６．糖質コルチコイドレセプター（ＧＣＣＲ）
糖質コルチコイドは、とりわけ最初に同定されたステロイドホルモンであり、そして、
多数の生理学的機能（糖新生の刺激、末梢組織におけるグルコース取り込みおよび利用の
低下、グリコーゲン蓄積の増加、免疫および炎症応答の抑制、サイトカイン合成の阻害、
ならびに、種々の発生事象の加速を含む）を担っている。糖質コルチコイドはまた、スト
レスとの闘いに特に重要である。糖質コルチコイドの合成および放出のストレス誘導性の
上昇は、他の応答の中でもとりわけ、心室負荷の増加、炎症性メディエータの阻害、サイ
トカイン合成の阻害、およびグルコース生成の増加をもたらす（Ｋａｒｉｎ，Ｃｅｌｌ，
１９９８，９３，４８７−４９０）。
【０２６０】
天然の糖質コルチコイドおよびその合成誘導体の両方が、レセプターの核ホルモンスー
パーファミリーの遍在性に発現される細胞質メンバーである糖質コルチコイドレセプター
をを介してその作用を発揮する。ヒト糖質コルチコイドレセプターはまた、核レセプター
サブファミリー３、グループＣ、メンバー１；ＮＲ３Ｃ１；ＧＣＣＲ；ＧＣＲ；ＧＲＬ；
糖質コルチコイドレセプター、リンパ球としても知られる。この遺伝子は、ヒトの染色体
５ｑ１１−ｑ１３に位置し、そして、９つのエキソンから構成される（Ｅｎｃｉｏおよび
Ｄｅｔｅｒａ−Ｗａｄｌｅｉｇｈ，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ，１９９１，２６６，７１８
２−７１８８；Ｇｅｈｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ
Ｕ  Ｓ  Ａ，１９８５，８２，３７５１−３７５５）。ヒト糖質コルチコイドレセプタ
ーｍＲＮＡには多数の形態が存在する；５．５ｋｂのヒト糖質コルチコイドレセプターα
ｃＤＮＡ（エキソン１〜８およびエキソン９αを含む）；４．３ｋｂのヒト糖質コルチ
コイドレセプターβ  ｃＤＮＡ（エキソン１〜８およびエキソン９βを含む）；および７
．０ｋｂのヒト糖質コルチコイドレセプターα  ｃＤＮＡ（エキソン１〜８およびエキソ
ン９全体（エキソン９α、エキソン９β、および両側にエキソン９αとエキソン９βとが
配置された「Ｊ領域」を含む）を含む）（Ｈｏｌｌｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ
ｕｒｅ，１９８５，３１８，６３５−６４１；Ｏａｋｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏ
ｌ  Ｃｈｅｍ，１９９６，２７１，９５５０−９５５９）。ヒト糖質コルチコイドレセプ
ターαは、レセプターの優性なアイソフォームであり、ステロイド結合活性を示すレセプ
ターである（Ｈｏｌｌｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９８５，３１８，
６３５−６４１）。さらに、３つの異なるプロモーターの使用により、２つの異なるエキ
ソン１改変体が転写され、そして、１つのエキソン１改変体の選択的スプライシングによ
り、このエキソンの３つの異なるバージョンが生じ得る。したがって、ヒト糖質コルチコ
イドレセプターｍＲＮＡは、５つの異なるバージョンのエキソン１を含み得る（Ｂｒｅｓ
ｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，２００１，１５，１３８１−１
３９５）。
【０２６１】
ヒト糖質コルチコイドレセプターｍＲＮＡのαアイソフォームおよびβアイソフォーム
の発現パターンの検査は、αアイソフォームがより豊富に発現されることを明らかにする
。両方のアイソフォームが、同じような組織および細胞のタイプ（肺、腎臓、心臓、肝臓
、骨格筋、マクロファージ、好中球および末梢血単核細胞が挙げられる）において発現さ
れる。結腸においては、ヒト糖質コルチコイドレセプターαのみが発現される。タンパク
質レベルでは、αアイソフォームは検査した全ての組織において検出されたが、βアイソ
フォームは検出できず、生理学的条件下では、デフォルトのスプライシング経路は、αア
イソフォームを生じる経路であることが示唆される（Ｐｕｊｏｌｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ
Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００２，２８３，Ｃ１３２４−１
３３１）。糖質コルチコイドレセプターのβアイソフォームは、糖質コルチコイドのアゴ
ニストにもアンタゴニストにも結合しない。さらに、βアイソフォームは、主として、ホ
ルモンの刺激とは無関係に、トランスフェクトされた細胞において核に局在化する。両方
のアイソフォームが同じ細胞において発現されるとき、糖質コルチコイドレセプターβは
、ホルモンにより誘導された、遺伝子発現の糖質コルチコイドレセプターα媒介性の刺激
を阻害し、βアイソフォームが、糖質コルチコイドレセプターαの活性のインヒビターと
して機能することが示唆される（Ｏａｋｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ
，１９９６，２７１，９５５０−９５５９）。特にそうでないと述べられない限り、本明
細書中に記載されるヒト糖質コルチコイドレセプターは、染色体５ｑ１１〜ｑ１３に位置
する遍在性の遺伝子産物として規定される。
【０２６２】
相補的な糖質コルチコイドレセプターアンチセンスＲＮＡ鎖でトランスフェクトした細
胞株は、糖質コルチコイドレセプターｍＲＮＡレベルの減少と、糖質コルチコイドレセプ
ターアゴニストであるデキサメタゾンに対する応答の低下とを示した（Ｐｅｐｉｎおよび
Ｂａｒｄｅｎ，Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，１９９１，１１，１６４７−１６５３）。
視床下部−脳下垂体−副腎軸に対する糖質コルチコイドのフィードバック作用を研究する
ために、アンチセンス糖質コルチコイドレセプター遺伝子構築物を担持するトランスジェ
ニックマウスが用いられた（Ｐｅｐｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１９９２，３５
５，７２５−７２８）。同様の遺伝子操作されたマウスの別の研究では、エネルギーの摂
取および消費、心臓および中間広筋リポタンパク質リパーゼの活性、ならびに、心臓およ
び褐色脂肪組織のノルエピネフリンが、コントロール動物よりも低かった。逆に、脂肪含
量および総身体エネルギーは、コントロール動物よりも有意に高かった。これらの結果は
、糖質コルチコイドレセプター系の欠損が、エネルギー効率を高めることによってエネル
ギーバランスに影響を与え得、そして、視床下部−脳下垂体−副腎軸の調節作用が、筋肉
のリポタンパク質リパーゼ活性を変化させることを強調するものである（Ｒｉｃｈａｒｄ
ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９９３，２６５，Ｒ１４６−１５０）．
。
糖質コルチコイドレセプターアンタゴニストの反応性の作用（ｂｅｈａｖｏｒｉａｌ  
ｅｆｆｅｃｔ）が、不安、学習および記憶を評価するように設計された動物モデルにおい
て測定された。糖質コルチコイドレセプターｍＲＮＡを標的とするアンチセンスオリゴデ
オキシヌクレオチドを長期にわたり脳室内注入されたラットにおける糖質コルチコイドレ
セプターの発現の減少は、Ｍｏｒｒｉｓの水迷路試験（ｗａｔｅｒ  ｍａｚｅ  ｔｅｓｔ
）における空間的操縦とは干渉しなかった（Ｅｎｇｅｌｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ
Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１９９８，３６１，１７−２６）。糖質コルチコイドレセプ
ターｍＲＮＡを標的とするアンチセンスオリゴデオキシヌクレオチドのラットの海馬の歯
状回への両側注入は、Ｐｏｒｓｏｌｔの強制水泳試験（ｆｏｒｃｅｄ  ｓｗｉｍ  ｔｅｓ
ｔ）におけるラットの不動性を低下させた（Ｋｏｒｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐ
ｈａｒｍａｃｏｌ，１９９６，３０１，１９−２５）。
【０２６３】
糖質コルチコイドは、しばしば、アレルギー、喘息、慢性関節リウマチ、ＡＩＤＳ、全
身性エリテマトーデスおよび変性性変形性関節症のような疾患の処置において、その免疫
抑制性の抗炎症作用のために使用される。ＮＦ−κＢとの糖質コルチコイドレセプターと
の相互作用によりもたらされるような遺伝子発現の負の調節は、少なくとも部分的に、イ
ンビボでの糖質コルチコイドの抗炎症作用を担うことが提唱されている。インターロイキ
ン−６、腫瘍壊死因子αおよびインターロイキン−１は、炎症ストレスの間の、視床下部
−脳下垂体−副腎（ＨＰＡ）軸の刺激の多くを説明する３つのサイトカインである。ＨＰ
Ａ軸ならびに全身の交感神経系および副腎髄質系は、基礎の、そしてストレスに関連する
ホメオスタシスの維持を担う、ストレス系の周辺構成要素である。ＨＰＡ軸の最終産物で
ある糖質コルチコイドは、３つ全ての炎症性サイトカインの産生を阻害し、そしてまた、
インターロイキン−６は除いて、標的組織に対するその作用も阻害する。インターロイキ
ン−６は、糖質コルチコイドと相乗的に作用して、急性期の反応物質の産生を刺激する。
糖質コルチコイドでの処置は、ＨＰＡ軸の活性を低下させる（Ｃｈｒｏｕｓｏｓ，Ｎ  Ｅ
ｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，１９９５，３３２，１３５１−１３６２）。
いくつかの場合において、患者は、糖質コルチコイドでの処置に対して不応性である。
このステロイドに対する抵抗性の１つの理由は、糖質コルチコイドレセプター遺伝子中に
存在する変異または多型にある。合計１５のミスセンス変異、３つのナンセンス変異、３
つのフレームシフト変異、１つのスプライシング部位および２つの選択的スプライシング
変異と、１６の多型とが、糖質コルチコイドの抵抗性に関連するＮＲ３Ｃ１遺伝子におい
て報告されている（ＢｒａｙおよびＣｏｔｔｏｎ，Ｈｕｍ  Ｍｕｔａｔ，２００３，２１
，５５７−５６８）。ヒトにおけるさらなる研究により、メタボリック症候群の発生およ
び進行と、糖質コルチコイドレセプター（ＧＲ）遺伝子における対立遺伝子との間の正の
関連が示唆されている（Ｒｏｓｍｏｎｄ，Ｏｂｅｓ  Ｒｅｓ，２００２，１０，１０７８
−１０８６）。
【０２６４】
糖質コルチコイド非感受性の他の分類は、糖質コルチコイドレセプターアイソフォーム
の発現の変更と関連する。糖質コルチコイド抵抗性の潰瘍性大腸炎の患者におけるヒト糖
質コルチコイドレセプターβアイソフォームｍＲＮＡ発現の研究は、このｍＲＮＡの存在
が、糖質コルチコイド感受性の患者において有意により高かったことを明らかにし、末梢
血単核細胞におけるヒト糖質コルチコイドレセプターβ  ｍＲＮＡの発現が、潰瘍性大腸
炎における糖質コルチコイド応答の予測因子として働き得ることを示唆した（Ｈｏｎｄａ
ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０００，１１８，８５９−８６
６）。糖質コルチコイドレセプターβの発現の増加もまた、かなり多い数の糖質コルチコ
イド非感受性の喘息において観察される。さらに、糖質コルチコイドレセプターのＤＮＡ
結合能におけるサイトカイン誘導性の異常が、糖質コルチコイド非感受性の患者のトラン
スフェクションに由来する末梢血単核細胞において見られ、そして、糖質コルチコイドレ
セプターβ遺伝子を持つＨｅｐＧ２細胞は、糖質コルチコイドレセプターαのＤＮＡ結合
能の有意な減少をもたらした（Ｌｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ，１９９
７，１８６，１５６７−１５７４）。デキサメタゾンの結合研究は、ヒト糖質コルチコイ
ドレセプターβが、ホルモンリガンドに対する糖質コルチコイドレセプターの親和性は変
えないが、ＧＲＥに対するその結合能を変えることを実証する（Ｂａｍｂｅｒｇｅｒ  ｅ
ｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ，１９９５，９５，２４３５−２４４１）。ま
とめて考慮すると、これらの結果は、ＧＲＥ標的部位についての糖質コルチコイドレセプ
ターαとの競合により、糖質コルチコイドレセプターβが、糖質コルチコイドの作用の生
理学的および病態生理学的に関連する内因性インヒビターとして機能し得ることを示す。
肝臓において、糖質コルチコイドアゴニストは、糖質コルチコイドレセプターを活性化
することによって肝グルコース産生を増加させ、これは続いて、糖新生酵素であるホスホ
エノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）およびグルコース−６−リン酸の
発現の増加をもたらす。糖新生により、グルコースは、乳酸、ピルビン酸およびアラニン
のような非六炭糖の前駆体から形成される（Ｌｉｎｋ，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓ
ｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ，２００３，４，４２１−４２９）。ＲＵ  ４８６のようなステロイ
ド性糖質コルチコイドレセプターアンタゴニストは、糖尿病のげっ歯類モデルにおいて試
験されている。レプチンレセプター遺伝子を欠失するマウス（ｄｂ／ｄｂマウスと呼ばれ
る）は、遺伝的に、肥満、糖尿病および高インシュリン血症である。高血糖のｄｂ／ｄｂ
マウスのＲＵ  ４８６での処置は、血漿インシュリンレベルに影響を及ぼすことなく、血
中グルコースレベルを約４９％低下させた。さらに、ＲＵ  ４８６での処置は、未処置の
動物と比較して、ｄｂ／ｄｂマウスにおける糖質コルチコイドレセプター応答性遺伝子Ｐ
ＥＰＣＫ、グルコース−６−リン酸、グルコース輸送体２型およびチロシナミノトランス
フェラーゼの発現を減少させた（Ｆｒｉｅｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈ
ｅｍ，１９９７，２７２，３１４７５−３１４８１）。ＲＵ  ４８６はまた、血清インシ
ュリンおよび血中グルコースレベルの低下により、糖尿病、肥満および高インシュリン血
症のｏｂ／ｏｂマウスモデルにおいて、糖尿病を改善する（Ｇｅｔｔｙｓ  ｅｔ  ａｌ．
，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｏｂｅｓ  Ｒｅｌａｔ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｏｒｄ，１９９７，２１，８
６５−８７３）。
【０２６５】
糖新生の増加は、糖尿病における糖産生の増加の主要な原因であると考えられるので、
肝グルコース産生の阻害のための多数の治療標的が調べられている。糖質コルチコイドレ
セプターのアンタゴニストの、動物モデルにおける糖尿病を改善する能力に起因して、こ
のような化合物は、探索される中でもとりわけ、強力な治療因子である。しかし、糖質コ
ルチコイドレセプターアンタゴニストには、有害な全身性の作用（ＨＰＡ軸の活性化を含
む）が存在する（Ｌｉｎｋ，Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ，２０
０３，４，４２１−４２９）。ＨＰＡ軸活性の増加は、免疫に関連する炎症作用の抑制と
関連しており、これは、感染因子および新生物に対する感受性を増加させ得る。ＨＰＡ軸
またはその標的組織における欠損による免疫媒介性の炎症の抑制に関連する状態としては
、クッシング症候群、慢性的なストレス、慢性アルコール依存症およびメランコリックな
抑うつ症が挙げられる（Ｃｈｒｏｕｓｏｓ，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，１９９５，３３
２，１３５１−１３６２）。したがって、肝臓特異的な糖質コルチコイドレセプターアン
タゴニストを開発することは、非常に価値がある。ステロイド性の糖質コルチコイドレセ
プターアンタゴニストが、これらを肝臓に標的化する目的で、胆汁酸に結合されている（
Ａｐｅｌｑｖｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０００）。現在、所望されない末梢作用を伴わず
に、糖質コルチコイドレセプターを標的化する治療因子は知られていない（Ｌｉｎｋ，Ｃ
ｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ，２００３，４，４２１−４２９）。
したがって、肝糖質コルチコイドレセプターを効率的に阻害し得る因子に対する長く感じ
られてきた必要性が存在したままである。
【０２６６】
定義
「糖質コルチコイドレセプター」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投与によっ
て調節されるべき、遺伝子産物またはタンパク質である。糖質コルチコイドレセプターは
、一般に、ＧＣＣＲと称される。
「ＧＣＣＲ核酸」は、ＧＣＣＲをコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特定の
実施形態では、ＧＣＣＲ核酸としては、ＧＣＣＲをコードするＤＮＡ配列、ＧＣＣＲをコ
ードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列、およびＧＣＣＲをコードするｍＲＮＡ配列が
挙げられるがこれらに限定されない。
「ＧＣＣＲ  ｍＲＮＡ」は、ＧＣＣＲをコードするｍＲＮＡを意味する。
【０２６７】
治療上の適応
アンチセンス技術は、特定の遺伝子産物の発現を減少させるための有効な手段であり、
したがって、糖質コルチコイドレセプターの発現を調節するための多数の治療、診断およ
び研究の用途において有用である。さらに、特定の実施形態では、肝臓は、投与後にアン
チセンスオリゴヌクレオチドの最も高い濃度が見られる組織の１つである（Ｇｅａｒｙ  
ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ，２００１，２，５
６２−５７３）。したがって、このような実施形態では、アンチセンス技術は、糖質コル
チコイドレセプターの肝特異的な阻害のための魅力的な方法に相当する。
特定の実施形態では、糖質コルチコイドレセプターをコードする核酸に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物は、肝臓に優先的に分配される。特定の実施形態では、短鎖
アンチセンス化合物は、より長い親化合物と比べて、肝臓において増大した効力を有する
。特定の実施形態では、標的ＲＮＡは、肝臓において優先的に発現される。
治療のために、ＧＣＣＲの発現を調節することにより処置され得る疾患または障害を有
する疑いのある被験体は、１以上の短鎖アンチセンス化合物を投与することによって処置
される。非限定的な例において、この方法は、治療上有効な量の短鎖アンチセンス化合物
を動物に投与する工程を包含する。特定の短鎖アンチセンス化合物は、ＧＣＣＲの活性を
阻害するか、そして／または、ＧＣＣＲの発現を阻害する。特定の実施形態では、被験体
におけるＧＣＣＲの活性または発現は、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくと
も２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％
、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なく
とも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％阻
害される。特定の実施形態では、被験体におけるＧＣＣＲの活性または発現は、少なくと
も３０％阻害される。特定の実施形態では、被験体におけるＧＣＣＲの活性または発現は
、少なくとも５０％以上阻害される。
【０２６８】
ＧＣＣＲの発現の低下は、例えば、動物の血中、血漿中、血清中、脂肪組織中、肝臓ま
たは任意の他の体液、組織もしくは器官中で測定され得る。特定の実施形態では、このよ
うな解析される体液、組織もしくは器官内に含まれる細胞は、ＧＣＣＲをコードする核酸
分子を含むか、そして／または、これらは、ＧＣＣＲタンパク質自体を含む。
短鎖アンチセンス化合物を含有する特定の薬学的組成物およびその他の組成物もまた提
供される。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、有効な量の化合物を適切な
薬学的に需要可能な希釈剤またはキャリアに加えることによって、薬学的組成物において
利用される。
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細書
中に一般に記載される短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有する
。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１２
−１、１−１−１０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１０−
２、１−１０−１、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−３ま
たは１−６−１から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有
する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−
１０−１、２−１０−２、３−１０−３および１−９−２から選択されるモチーフ（ウィ
ング−デオキシギャップ−ウィング）を有する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸を標
的とする短鎖アンチセンス化合物は、３−１０−３、２−１０−３、２−１０−２、１−
１０−１、１−１０−２、２−８−２、１−８−１、３−６−３または１−６−１から、
より好ましくは、２−１０−２および２−８−２から選択されるモチーフ（ウィング−デ
オキシギャップ−ウィング）を有する。
【０２６９】
特定の実施形態では、本明細書中には、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された１以上の短
鎖アンチセンス化合物またはこのような化合物を含有する薬学的組成物を投与することに
よって、個体を処置する方法が提供される。さらに、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物を投与することによって、ＧＣＣＲ活性に関連する疾患または状
態を有する被験体を処置する方法が提供される。糖尿病、特に、２型糖尿病に加え、ＧＣ
ＣＲに関連する疾患および状態としては以下が挙げられるがこれらに限定されない：肥満
、メタボリックシンドロームＸ、クッシング症候群、アジソン病、炎症性疾患（例えば、
喘息、鼻炎および関節炎）、アレルギー、自己免疫疾患、免疫不全、食欲不振、悪液質、
骨の減損または骨の脆弱化、および創傷治癒。メタボリック症候群、メタボリックシンド
ロームＸまたは単純なシンドロームＸとは、肥満、脂質異常症、特に、高血中トリグリセ
リド、グルコース不耐性、高血糖および高血圧を含む危険因子のクラスターを指す。特定
の実施形態では、ＧＣＣＲに対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、全身性のス
テロイド治療によって誘導される高血糖の改善のために使用される。さらに、アンチセン
ス技術は、糖質コルチコイド処置に対して不応性の患者において過剰発現することが実証
されている、糖質コルチコイドレセプターβアイソフォームの発現を阻害するための手段
を提供する。
特定の実施形態では、本発明は、ＧＣＣＲをコードする核酸に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物を提供し、この化合物は、糖質コルチコイドレセプターの発現を調節
する。本発明の化合物を含有する薬学的組成物および他の組成物もまた提供される。さら
に、糖質コルチコイドレセプターのモジュレーターをスクリーニングする方法、および、
細胞、組織もしくは動物における糖質コルチコイドレセプターの発現を調節する方法（上
記細胞、組織もしくは動物を、１以上の本発明の化合物または組成物に接触させる工程を
包含する）が提供される。糖質コルチコイドレセプターの発現に関連する疾患または状態
を有するか、またはその傾向にあると疑われる動物、特にヒトを処置する方法もまた、本
明細書中に示される。このような方法は、１以上本発明の化合物または組成物の治療上ま
たは予防上有効な量を、処置を必要とする人に投与する工程を包含する。
【０２７０】
ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＡＣ０１２６３４（本明細書中に配列番号８として引用される）のヌクレオ
チド１〜１０６０００の配列を有するＧＣＣＲ核酸に対して標的化される。特定のこのよ
うな実施形態では、配列番号８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番
号８に対して少なくとも９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号
８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８に対して少なくとも９５
％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号８に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、配列番号８に対して１００％相補的である。特定の実施形態では
、配列番号８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、表１０および１１に示さ
れるヌクレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列を含む。
表１０および１１における各配列番号に示されるヌクレオチド配列は、糖部分、ヌクレ
オシド間結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、配列番
号により規定される短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合
または核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）に
より説明される短鎖アンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結
合または核酸塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
【０２７１】
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
ギャップマーモチーフを含む。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物は、２−１０−２のギャップマーモチーフを含む。
表１０および１１は、配列番号８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例を
示す。表１０は、配列番号８に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。
表１１は、配列番号８に関して、１または２のミスマッチを有する短鎖アンチセンス化合
物を示す。「ギャップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウ
ィング−ギャップ−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌ
クレオチドを含み、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾された糖を含
む。特定の２’−修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２
−１０−２  ＭＯＥ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’
−デオキシヌクレオチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィング
セグメントが配置され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯ
Ｅヌクレオチドであることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである
。「非修飾シトシン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセ
ンス化合物は、非修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモ
チーフの欄に「非修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシン
である。例えば、「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシ
トシンを有する一方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
【０２７２】
【表１３】
2014033674.tif 000036
【０２７３】
【表１４】
2014033674.tif 000037
2014033674.tif 000038
【０２７４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号８のヌクレオチド８８１４２〜８８２６９
である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８のヌクレオチド８
８１４２〜８８２６９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド８８
１４２〜８８２６９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４１３、
４１４、４１５、４１６、４１７または４１８から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号８のヌクレオチド８８１４２〜８８２６９に対
して標的化されたアンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７１６４４、３７１６４５、３
７１６４９、３７１６５１、３７１６５２または３７１６５３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号８のヌクレオチド８８１４２〜８８１６９
である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８のヌクレオチド８
８１４２〜８８１６９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド８８
１４２〜８８１６９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４１３ま
たは４１４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号８のヌクレオチド８８１４２〜８８１６９に対して標的化されたアンチセンス化合
物は、Ｉｓｉｓ番号３７１６４４または３７１６４５から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号８のヌクレオチド８８２４２〜８８２６９
である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８のヌクレオチド８
８２４２〜８８２６９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド８８
２４２〜８８２６９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４１６、
４１７または４１８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号８のヌクレオチド８８２４２〜８８２６９に対して標的化されたアンチセ
ンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７１６５１、３７１６５２または３７１６５３から選択さ
れる。
【０２７５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号８のヌクレオチド９２０３７〜９２１５５
である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８のヌクレオチド９
２０３７〜９２１５５を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９２
０３７〜９２１５５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４１９、
４２０、４２１または４２２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような
実施形態では、配列番号８のヌクレオチド９２０３７〜９２１５５に対して標的化された
アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７１６６５、３７１６６９、３７１６７１または
１７１６７３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号８のヌクレオチド９２１１４〜９２１５５
である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８のヌクレオチド９
２１１４〜９２１５５を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９２
１１４〜９２１５５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４２１ま
たは４２２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号８のヌクレオチド９２１１４〜９２１５５に対して標的化されたアンチセンス化合
物は、Ｉｓｉｓ番号３７１６７１または１７１６７３から選択される。
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１４
ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、Ｇ
ＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオチド
である。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖アンチ
センス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０２７６】
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物 は
、短鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的
化された短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に少なくとも１つの高親和性
修飾を含む。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施形態では
、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのような実
施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態では、ウィ
ングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、β−Ｄ
−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−（ＣＨ２
）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡお
よびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される。特定の
実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チオ、Ｏ−
アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’
−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−ＣＨ
２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、Ｒｍおよび
Ｒｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルである。
特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャッ
プは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特定
の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の実
施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合したと
きに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を支
持するアンチセンス化合物をもたらす。
【０２７７】
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て、
ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジエ
ステル結合である。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、混合型バックボーンを有する。
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施形態で
は、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モノマーで
ある。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施形態では、
ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モノマーである
。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを含む。特定の実施形
態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１０〜１５モノ
マーを含む。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含
む。
特定の実施形態では、本発明は、ＧＣＣＲの発現を調節する方法を提供する。特定の実
施形態では、このような方法は、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含し、ここで、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好ましくは９
〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の連結さ
れたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４
、１５または１６のモノマーの、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチ
センス化合物を用いてＧＣＣＲの発現を調節する方法を包含することを理解する。
特定の実施形態では、ＧＣＣＲを調節する方法は、長さ８モノマーのＧＣＣＲ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣ
ＣＲを調節する方法は、長さ９モノマーのＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲを調節する方法は、長さ
１０モノマーのＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含
する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲを調節する方法は、長さ１１モノマーのＧＣＣＲ核
酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では
、ＧＣＣＲを調節する方法は、長さ１２モノマーのＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲを調節する方法
は、長さ１３モノマーのＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使
用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲを調節する方法は、長さ１４モノマーのＧ
ＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施
形態では、ＧＣＣＲを調節する方法は、長さ１５モノマーのＧＣＣＲ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲを調節
する方法は、長さ１６モノマーのＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物の使用を包含する。
【０２７８】
特定の実施形態では、ＧＣＣＲの発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＧＣ
ＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形
態では、ＧＣＣＲの発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＧＣＣＲ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣ
ＣＲの発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＧＣＣＲ核酸に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＣＲの発現を
調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含むＧＣＣＲ核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０２７９】
７．グルカゴンレセプター（ＧＣＧＲ）
正常血糖の維持は、注意深く調節される代謝の事象である。吸収可能となった後の状態
で血中グルコースレベルの維持を担う２９アミノ酸ペプチドであるグルカゴンは、肝のグ
リコーゲン分解、糖新生を活性化し、脂肪組織における脂肪分解を刺激し、そして、イン
シュリン分泌を刺激することによって、肝臓からのグルコース放出を増加させる。血中グ
ルコースレベルが高い間、インシュリンは、グリコーゲン分解および糖新生のグルカゴン
媒介性の亢進を逆転する。糖尿病患者において、インシュリンは、利用可能でないか、完
全には有効でないかのいずれかである。糖尿病の処置は、従来、インシュリンレベルの増
加に焦点を当てているが、グルカゴン機能の拮抗は、代替的な治療と考えられている。グ
ルカゴンは、グルカゴンレセプターを介したシグナル伝達によってその生理学的作用を発
揮しているので、グルカゴンレセプターは、糖尿病のための潜在的な治療標的として提唱
されている（Ｍａｄｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．，１９９９
，５，６８３−６９１）。
【０２８０】
グルカゴンレセプターは、７回膜貫通ドメインを有するＧタンパク質共役型レセプター
のスーパーファミリーに属する。グルカゴンレセプターはまた、構造的にグルカゴンに類
似するペプチドに結合する、相同なレセプターのより小さなサブファミリーのメンバーで
もある。ヒトグルカゴンレセプターをコードする遺伝子は、１９９４年にクローニングさ
れ、そのゲノム配列の解析により、複数のイントロンと、ラットグルカゴンレセプター遺
伝子に対する８２％の同一性とが明らかになった（Ｌｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ，１
９９４，１４０，２０３−２０９．；ＭａｃＮｅｉｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．
Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９４，１９８，３２８−３３４）。ラッ
トグルカゴンレセプター遺伝子のクローニングはまた、複数の選択的スプライシング改変
体の説明をもたらした（Ｍａｇｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．，１９９４，
３５１，２７１−２７５）。ヒトグルカゴンレセプター遺伝子は、染色体１７ｑ２５に局
在化する（Ｍｅｎｚｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，１９９４，２０，３２７−
３２８）。グルカゴンレセプター遺伝子の４０番目のコドンにおけるＧｌｙからＳｅｒへ
のミスセンス変異は、グルカゴンに対し３倍より低い親和性をもたらし（Ｆｕｊｉｓａｗ
ａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，１９９５，３８，９８３−９８５）、そ
してこの変異は、非インシュリン依存性糖尿病（Ｆｕｊｉｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉ
ａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，１９９５，３８，９８３−９８５）、高血圧（Ｃｈａｍｂｅｒｓ
およびＭｏｒｒｉｓ，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，１９９６，１２，１２２）および中心性肥
満症（Ｓｉａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｂｅｓ．Ｒｅｓ．，２００１，９，７２２−７２６
）を含む、いくつかの疾患状態と関連付けられている。
【０２８１】
定義
「グルカゴンレセプター」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投与によって調節
されるべき、遺伝子産物またはタンパク質である。グルカゴンレセプターは、一般に、Ｇ
ＣＧＲと称されるが、また、ＧＲ、ＧＧＲ、ＭＧＣ１３８２４６、ＭＧＣ９３０９０とも
称され得る。
「ＧＣＧＲ核酸」は、ＧＣＧＲをコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特定の
実施形態では、ＧＣＧＲ核酸としては、ＧＣＧＲをコードするＧＣＧＲ配列、ＧＣＧＲを
コードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列およびＧＣＧＲをコードするｍＲＮＡ配列が
挙げられるがこれらに限定されない。
「ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡ」は、ＧＣＧＲタンパク質をコードするｍＲＮＡを意味する。
【０２８２】
治療上の適応
アンチセンス技術は、グルカゴンレセプター（ＧＣＧＲ）の発現を減少させるための有
効な手段であり、そして、多数の治療上、診断上および研究上の用途において比類なく有
用であることが分かっている。したがって、特定の実施形態では、本発明は、グルカゴン
レセプターをコードする核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を提供し、こ
の化合物は、グルカゴンレセプターの発現を調節する。さらに、ＧＣＧＲの発現を阻害し
得る短鎖アンチセンス化合物が本明細書中に提供される。また、個体を処置する方法も本
明細書中に提供され、この方法は、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物を含有する１以上の薬学的組成物を投与する工程を包含する。特定の実施形態では
、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物がＧＣＧＲの発現を阻害す
るので、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を含有する１以上の
薬学的組成物を投与することによって、ＧＣＧＲの活性に関連する疾患または状態を有す
る被験体を処置する方法が本明細書中に提供される。例えば、高血中グルコース、高血糖
、糖尿病前症、糖尿病、２型糖尿病、メタボリック症候群、肥満および／またはインシュ
リン抵抗性を有する被験体を処置する方法が本明細書中に提供される。
また、ＧＣＧＲに対して標的化された１以上の短鎖アンチセンス化合物と、必要に応じ
て、薬学的に受容可能なキャリア、希釈剤、増強剤もしくは賦形剤とを含有する薬学的組
成物が、本明細書中で企図される。本発明の特定の化合物はまた、ＧＣＧＲにより媒介さ
れるグルカゴン作用に関連する疾患および障害の処置のための医薬の製造において使用さ
れ得る。
【０２８３】
本発明の特定の実施形態は、組織または細胞中のＧＣＧＲの発現を減少させる方法を含
み、この方法は、上記細胞または組織に対して、ＧＣＧＲをコードする核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物、または、このような短鎖アンチセンス化合物を含有す
る薬学的組成物を接触させる工程を包含する。特定のこのような実施形態では、本発明は
、被験体における血中グルコースレベル、血中トリグリセリドレベル、または血中コレス
テロールレベルを低下させる方法を提供し、この方法は、短鎖アンチセンス化合物または
薬学的組成物を被験体に対して投与する工程を包含する。血中レベルは、血漿レベルまた
は血清レベルであり得る。また、動物における、インシュリン感受性を改善する方法、Ｇ
ＬＰ−１レベルを増加させる方法、および、肝グルコース生産を阻害する方法もまた企図
され、これらの方法は、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドまたは薬学的組成物を
上記動物に投与する工程を包含する。インシュリン感受性における改善は、循環中のイン
シュリンレベルの減少によって示され得る。
特定の実施形態では、本発明は、ＧＣＧＲを介してグルカゴン活性に関連する疾患また
は状態を有する被験体を処置する方法を提供し、この方法は、短鎖アンチセンス化合物ま
たは薬学的組成物の治療上または予防上有効な量を上記被験体に投与する工程を包含する
。特定の実施形態では、このような疾患または状態は、代謝性の疾患または状態であり得
る。特定の実施形態では、代謝性の疾患または状態は、糖尿病，高血糖，高脂血症，メタ
ボリックシンドロームＸ、肥満、原発性高グルカゴン血症、インシュリン欠損症またはイ
ンシュリン抵抗性である。いくつかの実施形態では、糖尿病は２型糖尿病である。いくつ
かの実施形態では、肥満は食事誘発性である。いくつかの実施形態では、高脂血症は、血
中脂質レベルの上昇と関連している。脂質は、コレステロールおよびトリグリセリドを含
む。一実施形態では、状態は、肝臓脂肪症である。いくつかの実施形態では、脂肪症は、
脂肪性肝炎または非アルコール性脂肪性肝炎である。
特定の実施形態では、本発明は、本明細書中に説明されるオリゴマー性化合物を用いて
、動物における血中グルコースレベルの上昇の発病を予防または遅延する方法、ならびに
、動物におけるβ細胞の機能を防止する方法を提供する。
【０２８４】
ＧＣＧＲに対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物は、ＧＣＧＲ発現の調節
を必要とする被験体（例えば、ヒトを含むがこれに限定されない動物）におけるＧＣＧＲ
の発現を調節するために使用され得る。特定の実施形態では、このような方法は、ＧＣＧ
Ｒ  ＲＮＡの発現を減少させる短鎖アンチセンス化合物の有効量を上記動物に投与する工
程を包含する。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＣＧＲ  ＲＮＡのレ
ベルまたは機能を効率的に低下させる。ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡレベルの低下は、発現のＧＣ
ＧＲタンパク質産物における変化ももたらし得るので、このような結果としての変化もま
た測定され得る。ＧＣＧＲ  ＲＮＡまたは発現のタンパク質産物のレベルまたは機能を効
率的に低下させる特定のアンチセンス化合物は、活性なアンチセンス化合物とみなされる
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＣＧＲの発現を減少させ、ＲＮＡ
の少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なく
とも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも７５
％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少な
くとも９８％、少なくとも９９％または１００％の低下を引き起こす。
【０２８５】
さらに、グルカゴンレセプターのモジュレーターをスクリーニングする方法、および、
細胞、組織または動物におけるグルカゴンレセプターの発現を調節する方法が提供され、
これらの方法は、ＧＣＧＲに対して標的化された１以上の短鎖アンチセンス化合物、また
は、このような化合物を含有する組成物と、上記細胞、組織または動物とを接触させる工
程を包含する。グルカゴンレセプターの発現に関連する疾患または状態を有するか、また
はその傾向があると疑われる動物、特にヒトを処置する方法もまた、本明細書中に示され
る。このような特定の方法は、本発明の１以上の化合物または組成物の治療上または予防
上有効な量を、処置を必要とする人に投与する工程を包含する。
グルカゴンレセプターの発現の低下は、例えば、動物の血中、血漿中、血清中、脂肪組
織中、肝臓または任意の他の体液、組織もしくは器官中で測定され得る。好ましくは、解
析される上記体液、組織もしくは器官内に含まれる細胞は、グルカゴンレセプタータンパ
ク質をコードする核酸分子を含むか、そして／または、これらは、グルカゴンレセプター
タンパク質自体を含む。
【０２８６】
短鎖アンチセンス化合物を含有する薬学的組成物および他の組成物もまた提供される。
特定の実施形態では、ＧＣＧＲをコードする核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、化合物の有効量を、適切な薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアに加える
ことによって、薬学的組成物において利用される。
ＧＣＧＲ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細書中に一般的に記載され
る短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有し得る。特定の実施形態
では、ＧＣＧＲ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１２−１、１−１−１
０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１０−２、１−１０−１
、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−３または１−６−１か
ら選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有する特定の実施形
態では、ＧＣＧＲ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１２−１、２−１０
−２、３−１０−３、３−８−３、１−１−１０−２から選択されるモチーフ（ウィング
−デオキシギャップ−ウィング）を有する。
【０２８７】
ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＮＭ＿０００１６０．１（本明細書中に配列番号９として引用される）の配
列を有するＧＣＧＲ核酸に対して標的化される。特定のこのような実施形態では、配列番
号９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９に対して少なくとも９
０％相補的である．特定のこのような実施形態では、配列番号９に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、配列番号９に対して少なくとも９５％相補的である。特定のこ
のような実施形態では、配列番号９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配
列番号９に対して１００％相補的である。特定の実施形態では、配列番号９に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、表１２および１３に示されるヌクレオチド配列から
選択されるヌクレオチド配列を含む。
【０２８８】
表１２および１３における各配列番号に示されるヌクレオチド配列は、糖部分、ヌクレ
オシド間結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、配列番
号により規定される短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合
または核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）に
より説明される短鎖アンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結
合または核酸塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
ギャップマーモチーフを含む。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物は、３−１０−３のギャップマーモチーフを含む。特定の実施形
態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、ギャップマーモ
チーフを含む。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、３−８−３のギャップマーモチーフを含む。特定の実施形態では、ＧＣＣＲ
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、ギャップマーモチーフを含む。特
定の実施形態では、ＧＣＣＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、２−
１０−２のギャップマーモチーフを含む。
【０２８９】
表１２および１３は、配列番号９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例を
示す。表１２は、配列番号９に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。
表１３は、配列番号９に関して、１または２のミスマッチを有する短鎖アンチセンス化合
物を示す。「ギャップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウ
ィング−ギャップ−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌ
クレオチドを含み、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾された糖を含
む。特定の２’−修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２
−１０−２  ＭＯＥ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’
−デオキシヌクレオチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィング
セグメントが配置され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯ
Ｅヌクレオチドであることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである
。「非修飾シトシン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセ
ンス化合物は、非修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモ
チーフの欄に「非修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシン
である。例えば、「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシ
トシンを有する一方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
【０２９０】
【表１５】
2014033674.tif 000039
2014033674.tif 000040
【０２９１】
【表１６】
2014033674.tif 000041
2014033674.tif 000042
2014033674.tif 000043
【０２９２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド３７８〜３９１である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド３７８〜３
９１を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド３７８〜３９１に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４８６または４８７から選択される
ヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド３
７８〜３９１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３３８４６
３または３３８５３４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド４９９〜５２１である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド４９９〜５
２１を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド４９９〜５２１に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４８８、４８９、４９０、４９１、
４９２、４９３、４９４、４９５、４９６または４９７から選択されるヌクレオチド配列
を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド４９９〜５２１に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３２７１３０、３２７１３１
、３２７１３２、３２７１３３、３２７１３４、３２７１３５、３２７１３６、３２７１
３７、３２７１３８または３２７１３９から選択される。
【０２９３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド５３１〜５５３である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド５３１〜５
５３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド５３１〜５５３に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４９８、４９９、５００、５０１、
５０２、５０３、５０４、５０５、５０６または５０７から選択されるヌクレオチド配列
を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド５３１〜５５３に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３２７１４０、３２７１４１
、３２７１４２、３２７１４３、３２７１４４、３２７１４５、３２７１４６、３２７１
４７、３２７１４８または３２７１４９から選択される。
【０２９４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド５４５〜５６７である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド５４５〜５
６７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド５４５〜５６７に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５０８、５０９、５１０、５１１、
５１２、５１３、５１４、５１５、５１６または５１７から選択されるヌクレオチド配列
を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド５４５〜５６７に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３２７１５０、３２７１５１
、３２７１５２、３２７１５３、３２７１５４、３２７１５５、３２７１５６、３２７１
５７、３２７１５８または３２７１５９から選択される。
【０２９５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド５３１〜５６７である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド５３１〜５
６７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド５３１〜５６７に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号４９８、４９９、５００、５０１、
５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、５０７、５０８、５０９、５１０、５１１、
５１２、５１３、５１４、５１５、５１６または５１７から選択されるヌクレオチド配列
を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド５３１〜５６７に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３２７１４０、３２７１４１
、３２７１４２、３２７１４３、３２７１４４、３２７１４５、３２７１４６、３２７１
４７、３２７１４８、３２７１４９、３２７１５０、３２７１５１、３２７１５２、３２
７１５３、３２７１５４、３２７１５５、３２７１５６、３２７１５７、３２７１５８ま
たは３２７１５９から選択される。
【０２９６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド６８４〜７１４である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド６８４〜７
１４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６８４〜７１４に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５１８、５２０、５２１、５２２、
５２３、５２４、５２５、５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、５３１、５３２、
５３３、５３４、５３５または５３６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこ
のような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド６８４〜７１４に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３４５８９７、３２７１６０、３２７１６１、
３２７１６２、３２７１６３、３２７１６４、３２７１６５、３２７１６６、３２７１６
７、３２７１６８、３２７１６９、３２７１７０、３２７１７１、３２７１７２、３２７
１７３、３２７１７４、３２７１７５、３２７１７６または３２７１７７から選択される
。
【０２９７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド８６９〜８９１である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド８６９〜８
９１を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド８６９〜８９１に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５３７、５３８、５３９、５４０、
５４１、５４２、５４３、５４４、５４５または５４６から選択されるヌクレオチド配列
を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド８６９〜８９１に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３２７１７８、３２７１７９
、３２７１８０、３２７１８１、３２７１８２、３２７１８３、３２７１８４、３２７１
８５、３２７１８６または３２７１８７から選択される。
【０２９８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド９５５〜９７７である。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド９５５〜９
７７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９５５〜９７７に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５４７、５４８、５４９、５５０、
５５１、５５２、５５３、５５４、５５５または５５６から選択されるヌクレオチド配列
を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド９５５〜９７７に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３２７１８８、３２７１８９
、３２７１９０、３２７１９１、３２７１９２、３２７１９３、３２７１９４、３２７１
９５、３２７１９６または３２７１９７から選択される。
【０２９９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド１０１９〜１０４１であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド１０１
９〜１０４１を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１０１９〜１
０４１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５５７、５５８、５５
９、５６０、５６１、５６２、５６３、５６４、５６５または５６６から選択されるヌク
レオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌクレオチド１０１
９〜１０４１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３２７１９
８、３２７１９９、３２７２００、３２７２０１、３２７２０２、３２７２０３、３２７
２０４、３２７２０５、３２７２０６または３２７２０７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド１１６０〜１１７５であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド１１６
０〜１１７５を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１１６０〜１
１７５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５６７または５６８か
ら選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号９のヌ
クレオチド１１６０〜１１７５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉ
ｓ番号３３８４９１または３３８５６２から選択される。
【０３００】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド１３０７〜１３７７であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド１３０
７〜１３７７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１３０７〜１
３７７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５６９、５７０、５７
１、５７２または５７３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施
形態では、配列番号９のヌクレオチド１３０７〜１３７７に対して標的化された短鎖アン
チセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３３８４９８、３３８５６９、３３８４９９、３３８５
７０または３８５０６７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号９のヌクレオチド１３０７〜１４１４であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号９のヌクレオチド１３０
７〜１４１４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１３０７〜１
４１４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号５６９、５７０、５７
１、５７２、５７３または５７４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのよ
うな実施形態では、配列番号９のヌクレオチド１３０７〜１４１４に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３３８４９８、３３８５６９、３３８４９９、
３３８５７０、３８５０６７または３３８５７３から選択される。
【０３０１】
特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１４
ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、Ｇ
ＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオチド
である。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖アンチ
センス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０３０２】
特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
短鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化
された短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に、少なくとも１つの高親和性
修飾を含む。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施形態では
、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのような実
施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態では、ウィ
ングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、β−Ｄ
−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−（ＣＨ２
）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮＡお
よびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される。特定の
実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チオ、Ｏ−
アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、２’
−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−ＣＨ
２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、Ｒｍおよび
Ｒｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルである。
特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
【０３０３】
特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャッ
プは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特定
の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の実
施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合したと
きに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を支
持するアンチセンス化合物をもたらす。
特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て、
ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジエ
ステル結合である。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、混合型バックボーンを有する。
【０３０４】
特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施形態で
は、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モノマーで
ある。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施形態では、
ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モノマーである
。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
長さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを含む。特定の実施形
態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１０〜１５モノ
マーを含む。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス
化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、ＧＣＧＲ核酸に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含
む。
【０３０５】
特定の実施形態では、本発明は、ＧＣＧＲの発現を調節する方法を提供する。特定の実
施形態では、このような方法は、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含し、ここで、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好ましくは９
〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の連結さ
れたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３、１４
、１５または１６のモノマーの、ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチ
センス化合物を用いてＧＣＧＲの発現を調節する方法を包含することを理解する。
【０３０６】
特定の実施形態では、ＧＣＧＲを調節する方法は、長さ８モノマーのＧＣＧＲ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣ
ＧＲを調節する方法は、長さ９モノマーのＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＧＲを調節する方法は、長さ
１０モノマーのＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含
する。特定の実施形態では、ＧＣＧＲを調節する方法は、長さ１１モノマーのＧＣＧＲ核
酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では
、ＧＣＧＲを調節する方法は、長さ１２モノマーのＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＧＲを調節する方法
は、長さ１３モノマーのＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使
用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＧＲを調節する方法は、長さ１４モノマーのＧ
ＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施
形態では、ＧＣＧＲを調節する方法は、長さ１５モノマーのＧＣＧＲ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＧＲを調節
する方法は、長さ１６モノマーのＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物の使用を包含する。
【０３０７】
特定の実施形態では、ＧＣＧＲの発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＧＣ
ＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形
態では、ＧＣＧＲの発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＧＣＧＲ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣ
ＧＲの発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＧＣＧＲ核酸に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＧＣＧＲの発現を
調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含むＧＣＧＲ核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０３０８】
８．ＤＧＡＴ２
ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ２、ジアシルグリセロールＯ−
トランスフェラーゼ２、アシル−ＣｏＡ：ジアシルグリセロールアシルトランスフェラー
ゼ２としても公知）、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２は、食事からのトリグ
リセリド（トリアシルグリセロールとも呼ばれる）の吸収プロセスに関与していることが
示されている。
食事からのトリグリセリドの吸収は、食事性のトリアシルグリセロールが腸の管腔内で
加水分解され、次いで、腸の細胞内で再合成される一連の工程によって生じる、非常に効
率的なプロセスである。トリアシルグリセロールの再合成は、モノアシルグリセロール経
路を介して生じ得、この経路は、モノアシルグリセロールおよび脂肪性アシル−ＣｏＡか
らのジアシルグリセロールの合成を触媒するモノアシルグリセロールアシルトランスフェ
ラーゼ（ＭＧＡＴ）から始まる。ジアシルグリセロールの代替的な合成は、グリセロール
−リン酸経路により提供され、この経路は、２分子の脂肪性アシル−ＣｏＡのグリセロー
ル−３−リン酸への結合を説明する。いずれの場合においても、ジアシルグリセロールは
、次いで、２つのジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ酵素のうちの一方によ
り触媒される反応において、脂肪性アシル−ＣｏＡの別の分子でアシル化され、トリグリ
セリドを形成する（Ｆａｒｅｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｌｉｐｉｄｏｌ
，２０００，１１，２２９−２３４）。
【０３０９】
ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼにより触媒される反応は、トリグリセ
リドの合成において最終的な工程でありかつ、唯一の約束された（ｃｏｍｍｉｔｔｅｄ）
工程である。したがって、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼは、腸の脂肪
吸収、リポンタンパク質の組み立て、血漿トリグリセリド濃度の調節、および脂肪細胞に
おける脂肪の貯蔵に関与している。第１のジアシルグリセロールアシルトランスフェラー
ゼであるジアシルグリセロールトランスフェラーゼ１は、１９６０年に同定され、そして
、このタンパク質をコードするヒトおよびマウスの遺伝子が、１９９８年に単離された（
Ｃａｓｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１
９９８，９５，１３０１８−１３０２３；Ｏｅｌｋｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ
．Ｃｈｅｍ．，１９９８，２７３，２６７６５−２６７７１）。ジアシルグリセロールア
シルトランスフェラーゼ１を欠失するマウスは生存能力があり、そして、なお、他の生物
学的経路を介してトリグリセリドを合成し得、トリグリセリド合成のための複数の機構の
存在が示唆された（Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２０００，２５
，８７−９０）。
その後、第２のジアシルグリセロールトランスフェラーゼであるジアシルグリセロール
トランスフェラーゼ２（ＤＧＡＴ２、ジアシルグリセロールＯ−トランスフェラーゼ２、
アシル−ＣｏＡ：ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２としても公知）が、
真菌Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ、ヒトおよびマウスにおいて同定された（Ｃａｓｅｓ  ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００１，２７６，３８８７０−３８８７６；Ｌ
ａｒｄｉｚａｂａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００１，２７６，３
８８６２−３８８６９）。酵素アッセイは、この近年同定されたタンパク質が、広範囲の
長鎖脂肪性アシル−ＣｏＡ基質を利用するジアシルグリセロールトランスフェラーゼ活性
を有することを示す（Ｃａｓｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００１
，２７６，３８８７０−３８８７６）。
【０３１０】
ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２は、その配列がジアシルグリセロールトラ
ンスフェラーゼ１と無関係である遺伝子ファミリーのメンバーである。ジアシルグリセロ
ールトランスフェラーゼ１と比較した際の配列における相違に加え、インビトロアッセイ
は、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２が、より低い濃度の塩化マグネシウムお
よびオレオイル−ＣｏＡで、より高い活性を有することを示す（Ｃａｓｅｓ  ｅｔ  ａｌ
．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００１，２７６，３８８７０−３８８７６）。ジアシ
ルグリセロールトランスフェラーゼ２の推測されるタンパク質配列は、少なくとも１つの
推定膜貫通ドメイン、２つの潜在的なＮ結合グリコシル化部位、６つの潜在的なプロテイ
ンキナーゼＣリン酸化のコンセンサス部位、ならびに、アシルトランスフェラーゼ酵素に
見られる推定グリセロールリン酸化部位と共通する配列を含む（Ｃａｓｅｓ  ｅｔ  ａｌ
．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００１，２７６，３８８７０−３８８７６）。Ｉｎｔ
ｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｃｏｎｓ
ｏｒｔｉｕｍは、ヒトジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２を、染色体１１ｑ１３
．３にマッピングした。
【０３１１】
ヒト組織において、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２の最も高いレベルは、
肝臓および白色の脂肪組織において検出され、乳腺、精巣および末梢血白血球においても
より低いレベルで見出される（Ｃａｓｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，
２００１，２７６，３８８７０−３８８７６）。２．４キロベースおよび１．８キロベー
スの２つのｍＲＮＡ種が、ヒト組織において検出されているのに対して、マウス組織にお
ける主要なジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２  ｍＲＮＡは、２．４キロベース
である。肝臓および白色脂肪組織に加え、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２は
、マウスの小腸の全セグメントにおいて発現され、近位小腸では発現がより高く、そして
、遠位小腸では発現がより低い（Ｃａｓｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．
，２００１，２７６，３８８７０−３８８７６）。
ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ活性は、ラット肝臓の生後の発生の間、異な
るパターンを示す。ｍＲＮＡの発現と活性のパターンとの間には相関がないので、ラット
の発生の間、翻訳後修飾が、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２の活性の調節に
関与し得る（Ｗａｔｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｌｉｐｉｄ．Ｒｅｓ．，２００２，
４３，１５５５−１５６２）。
【０３１２】
ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２  ｍＲＮＡは、培養マウス脂肪細胞の膜画
分からのジアシルグリセロール活性を測定するインビトロアッセイによって示されるよう
に、インシュリンでの処置により優先的にアップレギュレートされる（Ｍｅｅｇａｌｌａ
ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２００２
，２９８，３１７−３２３）。絶食中のマウスにおいて、ジアシルグリセロールトランス
フェラーゼ２の発現は大いに減少しており、そして、食餌を再開すると、劇的に増加する
。脂肪酸合成に関与する２つの酵素、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼおよび脂肪酸シ
ンターゼの発現パターンは、類似する様式で、絶食および食餌の再開に応答する。これら
の結果は、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２が肝臓において豊富に発現される
という観察と併せて、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２が内因性の脂肪酸合成
経路と密接に関連していることを示唆する（Ｍｅｅｇａｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃ
ｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２００２，２９８，３１７−３２３
）。
【０３１３】
ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ１遺伝子に破壊部位を有するマウスの
研究は、ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２がトリグリセリド合成に寄与
するという証拠を提供する。ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２  ｍＲＮＡの発
現レベルは、野生型マウスおよびジアシルグリセロールトランスフェラーゼ１欠損マウス
の両方からの腸セグメントにおいて同様である（Ｂｕｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉ
ｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００２，２７７，２５４７４−２５４７９）。ジアシルグリセロー
ルトランスフェラーゼ１の活性とジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２の活性との
間を区別するために塩化マグネシウムを用いることで、Ｂｕｈｍａｎらは、ジアシルグリ
セロールトランスフェラーゼ１欠損マウスにおいて、ジアシルグリセロールトランスフェ
ラーゼ活性が、腸の近位において５０％、そして、腸の遠位において１０〜１５％まで減
少される（Ｂｕｈｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００２，２７７
，２５４７４−２５４７９）。
【０３１４】
さらに、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２  ｍＲＮＡレベルは、数週間高脂
肪の食餌を与えた後でさえ、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ１欠損マウスの肝
臓または脂肪組織においてアップレギュレートされない（Ｃａｓｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ
．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２００１，２７６，３８８７０−３８８７６；Ｃｈｅｎ  ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２００２，１０９，１０４９−１０５５）。
しかし、レプチン遺伝子に肥満をもたらす変異を有するｏｂ／ｏｂマウスにおいて、ジア
シルグリセロールトランスフェラーゼ２は、野生型マウスよりも多く発現されており、ジ
アシルグリセロールトランスフェラーゼ２が、これらのマウスにおいて見られる大いに蓄
積された脂肪塊の責任の一部を負う可能性があることが示唆される。さらに、レプチンお
よびジアシルグリセロールトランスフェラーゼ１の変異を組み合わせると、ジアシルグリ
セロールトランスフェラーゼ１欠損マウスからの白色脂肪組織におけるレベルと比較して
、白色脂肪組織におけるジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２の発現の３倍の上昇
をもたらす（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２００２，１０
９，１０４９−１０５５）。ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２  ｍＲＮＡはま
た、これらのマウスの皮膚においてもアップレギュレートされる（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ
．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２００２，１０９，１７５−１８１）。これらのデ
ータは、レプチンが通常、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２の発現をダウンレ
ギュレートすること、そして、これらのマウスにおける白色脂肪組織中のジアシルグリセ
ロールトランスフェラーゼ２のアップレギュレーションが、レプチン欠損／ジアシルグリ
セロールトランスフェラーゼ１欠損マウスにおいてなお生じているトリグリセリド合成の
ための代替的な経路を提供し得ることを示唆する（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉ
ｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，２００２，１０９，１０４９−１０５５）。
【０３１５】
ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ１ノックアウトマウスは、痩せており
、食事により誘発される肥満に対して抵抗性で、組織トリグリセリドのレベルが低下して
おり、そして、インシュリンおよびレプチンに対する感受性が増加しているという興味深
い表現型を示す（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ，２００２，１
０９，１０４９−１０５５；Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２００
０，２５，８７−９０）。ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２はまた、トリグリ
セリド合成にも関与しているので、ジアシルグリセロールトランスフェラーゼ２との干渉
は、同様に、身体の脂肪含量の低下をもたらし得る。
【０３１６】
定義
「ＤＧＡＴ２」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の投与によって調節されるべき
、遺伝子産物またはタンパク質を意味する。
「ＤＧＡＴ２核酸」は、ＤＧＡＴ２をコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特
定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸としては、ＤＧＡＴ２をコードするＤＮＡ配列、ＤＧ
ＡＴ２をコードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列およびＤＧＡＴ２をコードするｍＲ
ＮＡ配列が挙げられるがこれらに限定されない。
「ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡ」は、ＤＧＡＴ２をコードするｍＲＮＡを意味する。
【０３１７】
治療上の適応
アンチセンス技術は、ＤＧＡＴ２の発現を減少させるための有効な手段であり、そして
、多数の治療上、診断上および研究上の用途において比類なく有用であることが分かって
いる。したがって、特定の実施形態では、本発明は、ＤＧＡＴ２をコードする核酸に対し
て標的化された化合物を提供し、この化合物は、ＤＧＡＴ２の発現を調節する。さらに、
ＤＧＡＴ２の発現を効率的に阻害し得る短鎖アンチセンス化合物が本明細書中に提供され
る。
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２に関連する疾患または障害を有すると疑われる被験体
は、ＤＧＡＴ２をコードする核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチセンス化合物
を投与することによって処置される。例えば、非限定的な実施形態では、このような方法
は、治療上有効な量の短鎖アンチセンス化合物を動物に対して投与する工程を包含する。
特定のこのような実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、効率的にＤＧＡＴ２の活性
を阻害するか、または、ＤＧＡＴ２の発現を阻害する。一実施形態では、被験体における
ＤＧＡＴ２の活性または発現は、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも２５
％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少な
くとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９
０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％阻害され
る。特定の実施形態では、被験体におけるＤＧＡＴ２の活性または発現は、約３０％阻害
される。より好ましくは、被験体におけるＤＧＡＴ２の活性または発現は、５０％以上阻
害される。
【０３１８】
ＤＧＡＴ２の発現の低下は、例えば、動物の血中、血漿中、血清中、脂肪組織中、肝臓
または任意の他の体液、組織もしくは器官中で測定され得る。好ましくは、解析される上
記体液、組織もしくは器官内に含まれる細胞は、ＤＧＡＴ２タンパク質をコードする核酸
分子を含むか、そして／または、これらは、ＤＧＡＴ２タンパク質自体を含む。
特定の実施形態では、本発明の化合物を含有する薬学的組成物および他の組成物もまた
提供される。例えば、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
化合物は、適切な薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアにこの化合物の有効量を加え
ることによって、薬学的組成物において利用され得る。
ＤＧＡＴ２を標的とする特定の短鎖アンチセンス化合物は、本明細書中に一般的に記載
される短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有し得る。特定の実施
形態では、ＤＧＡＴ２核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１２−１、１−
１−１０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１０−２、１−１
０−１、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−３または１−６
−１から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有する特定の
実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１０−１、
２−１０−２および３−１０−３から選択されるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ
−ウィング）を有する。
ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチセンス化合物、またはこのよ
うな化合物を含有する薬学的組成物を投与することによって、個体を処置する方法が本明
細書中に提供される。さらに、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物を投与することによって、ＤＧＡＴ２活性に関連する疾患または状態を有する被験体
を処置する方法が提供される。ＤＧＡＴ２に関連する疾患および状態としては、心臓血管
障害、肥満、糖尿病、コレステロール血症、および肝臓脂肪症が挙げられるがこれらに限
定されない。
【０３１９】
ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＮＭ＿０３２５６４．２（本明細書中に配列番号１０として引用される）の
配列を有するＤＧＡＴ２核酸に対して標的化される。特定のこのような実施形態では、配
列番号１０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０に対して少な
くとも９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１０に対して標的
化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０に対して少なくとも９５％相補的であ
る。特定のこのような実施形態では、配列番号１０に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、配列番号１０に対して１００％相補的である。特定の実施形態では、配列番
号１０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、表１４および１５に示されるヌ
クレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列を含む。
【０３２０】
表１４および１５の各々に示される各ヌクレオチド配列は、糖部分、ヌクレオシド間結
合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、表１４および１５
に示されるヌクレオチド配列を含む短鎖アンチセンス化合物は、独立して、糖部分、ヌク
レオシド間結合または核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉ
ｓ  Ｎｏ．）によって記載されるアンチセンス化合物は、核酸塩基配列と、糖部分、ヌク
レオシド間結合または核酸塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示す。
表１４および１５は、配列番号１０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例
を示す。表１４は、配列番号１０に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示
す。表１５は、配列番号１０に関して、１または２のミスマッチを有する短鎖アンチセン
ス化合物を示す。「ギャップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合
物のウィング−ギャップ−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオ
キシヌクレオチドを含み、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾された
糖を含む。特定の２’−修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば
、「２−１０−２  ＭＯＥ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個
の２’−デオキシヌクレオチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウ
ィングセグメントが配置され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’
−ＭＯＥヌクレオチドであることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエート
である。「非修飾シトシン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖ア
ンチセンス化合物は、非修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマ
ーのモチーフの欄に「非修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シ
トシンである。例えば、「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メ
チルシトシンを有する一方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す
。
【０３２１】
【表１７−１】
2014033674.tif 000044
2014033674.tif 000045
【０３２２】
【表１８】
2014033674.tif 000046
2014033674.tif 000047
【０３２３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド２３１〜２６７である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド２３１
〜２６７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２３１〜２６７に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６８１、６８２、６８３、６８
４、６８５、６８６または６８７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのよ
うな実施形態では、配列番号１０のヌクレオチド２３１〜２６７に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２５５６、３７２５５７、３８２６０１、３
７２４８０、３７２４８１、３７２５５８または３７２５５９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド２４９〜２６７である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド２４９
〜２６７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２４９〜２６７に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６８３、６８４、６８５、６８
６または６８７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では
、配列番号１０のヌクレオチド２４９〜２６７に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号３８２６０１、３７２４８０、３７２４８１、３７２５５８または
３７２５５９から選択される。
【０３２４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド３３１〜４９３である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド３３１
〜４９３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド３３１〜４９３に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６８８、６８９、６９０、６９
１、６９２、６９３または６９４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのよ
うな実施形態では、配列番号１０のヌクレオチド３３１〜４９３に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３８２６０３、３８２６０４、３７２４８５、３
７２５６３、３８２６０５、３７２５６５または３８２６０６から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド３３１〜４２７である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド３３１
〜４２７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド３３１〜４２７に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６８８、６８９、６９０、６９
１、６９２または６９３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施
形態では、配列番号１０のヌクレオチド３３１〜４２７に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３８２６０３、３８２６０４、３７２４８５、３７２５６
３、３８２６０５または３７２５６５から選択される。
【０３２５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド３９２〜４０８である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド３９２
〜４０８を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド３９２〜４０８に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６９０、６９１または６９２か
ら選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１０の
ヌクレオチド３９２〜４０８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ
番号３７２４８５、３７２５６３または３８２６０５から選択される。
【０３２６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド６５１〜７０７である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド６５１
〜７０７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６５１〜７０７に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６９５、６９６、６９７、６９
８、６９９、７００、７０１、７０２、７０３、７０４、７０５、７０６、７０７、７０
８、７０９、７１０、７１１、７１２、７１３、７１４、７１５、７１６、７１７、７１
８、７１９、７２０、７２１、７２２、７２３、７２４、７２５、７２６、７２７または
７２８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番
号１０のヌクレオチド６５１〜７０７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号３７２４９７、３７２４９８、３７２５７５、３７２５７６、３８２６０７
、３７２４９９、３７２５７７、３７２５００、３７２５７８、３７２５０１、３７２５
７９、３７２５０２、３７２５８０、３７２５０３、３７２５８１、３７２５０４、３７
２５８２、３７２５０５、３７２５０６、３７２５８３、３７２５８４、３７２５０７、
３７２５８５、３８２６０８、３７２５０８、３７２５８６、３７２５０９、３７２５８
７、３７２５１０、３７２５８８、３７２５１１、３７２５１２、３７２５８９または３
７２５９０から選択される。
【０３２７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド７２４〜７４５である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド７２４
〜７４５を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド７２４〜７４５に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７２９、７３０、７３１、７３
２または７３３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では
、配列番号１０のヌクレオチド７２４〜７４５に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号３８２６０９、３７２５１４、３７２５９２、３７２５１５または
３７２５９３から選択される。
【０３２８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド６５１〜７４５である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド６５１
〜７４５を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６５１〜７４５に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号６９５、６９６、６９７、６９
８、６９９、７００、７０１、７０２、７０３、７０４、７０５、７０６、７０７、７０
８、７０９、７１０、７１１、７１２、７１３、７１４、７１５、７１６、７１７、７１
８、７１９、７２０、７２１、７２２、７２３、７２４、７２５、７２６、７２７、７２
８、７２９、７３０、７３１、７３２または７３３から選択されるヌクレオチド配列を含
む。特定のこのような実施形態では、配列番号１０のヌクレオチド６５１〜７４５に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２４９７、３７２４９８、
３７２５７５、３７２５７６、３８２６０７、３７２４９９、３７２５７７、３７２５０
０、３７２５７８、３７２５０１、３７２５７９、３７２５０２、３７２５８０、３７２
５０３、３７２５８１、３７２５０４、３７２５８２、３７２５０５、３７２５０６、３
７２５８３、３７２５８４、３７２５０７、３７２５８５、３８２６０８、３７２５０８
、３７２５８６、３７２５０９、３７２５８７、３７２５１０、３７２５８８、３７２５
１１、３７２５１２、３７２５８９、３７２５９０、３８２６０９、３７２５１４、３７
２５９２、３７２５１５または３７２５９３から選択される。
【０３２９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド８５１〜９２２である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド８５１
〜９２２を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド８５１〜９２２に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７３４、７３５、７３６または
７３７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番
号１０のヌクレオチド８５１〜９２２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号３８２６１０、３８２６１１、３８２６０２または３８２６１２から選択さ
れる。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド８５１〜８７９である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド８５１
〜８７９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド８５１〜８７９に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７３４、７３５または７３６か
ら選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１０の
ヌクレオチド８５１〜８７９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ
番号３８２６１０、３８２６１１または３８２６０２から選択される。
【０３３０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド９６５〜１００７であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド９６
５〜１００７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９６５〜１０
０７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７３８、７３９、７４０
、７４１、７４２、７４３、７４４または７４５から選択されるヌクレオチド配列を含む
。特定のこのような実施形態では、配列番号１０のヌクレオチド９６５〜１００７に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２５２４、３７２６０２、
３８２６１３、３８２６１４、３７２５２５、３７２６０３、３７２５２６または３７２
６０４から選択される。
【０３３１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド９６５〜９７９である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド９６５
〜９７９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９６５〜９７９に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７３８、７３９または７４０か
ら選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１０の
ヌクレオチド９６５〜９７９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ
番号３７２５２４、３７２６０２または３８２６１３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド９８７〜１００７であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド９８
７〜１００７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９８７〜１０
０７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７４１、７４２、７４３
、７４４または７４５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形
態では、配列番号１０のヌクレオチド９８７〜１００７に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３８２６１４、３７２５２５、３７２６０３、３７２５２
６または３７２６０４から選択される。
【０３３２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド１１０６〜１１３２で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド１
１０６〜１１３２を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１１０６
〜１１３２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７４６、７４７、
７４８、７４９、７５０、７５１、７５２、７５３または７５４から選択されるヌクレオ
チド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１０のヌクレオチド１１０６
〜１１３２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２５３０
、３７２６０８、３７２５３１、３７２６０９、３７２５３２、３７２６１０、３７２５
３３、３８２６１５または３７２６１１から選択される。
【０３３３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド１１９９〜１２３３で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド１
１９９〜１２３３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１１９９
〜１２３３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７５５、７５６、
７５７、７５８、７５９、７６０、７６１、７６２または７６３から選択されるヌクレオ
チド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１０のヌクレオチド１１９９
〜１２３３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２５３６
、３７２６１４、３７２５３７、３７２６１５、３７２５３８、３７２６１６、３８２６
１６、３７２５３９または３７２６１７から選択される。
【０３３４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド１２９３〜１３９４で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド１
２９３〜１３９４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１２９３
〜１３９４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７６４、７６５、
７６６、７６７、７６８、７６９、７７０、７７１、７７２、７７３、７７４、７７５、
７７６または７７７から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１０のヌクレオチド１２９３〜１３９４に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２５４０、３７２６１８、３８２６１７、３７２５４
１、３７２６１９、３７２５４２、３７２６２０、３７２５４３、３７２６２１、３７２
５４４、３７２６２２、３８２６１８、３８２６１９または３８２６２０から選択される
。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド１２９３〜１３３６で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド１
２９３〜１３３６を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１２９３
〜１３３６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７６４、７６５、
７６６、７６７、７６８、７６９、７７０、７７１、７７２、７７３、７７４、７７５ま
たは７７６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１０のヌクレオチド１２９３〜１３３６に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号３７２５４０、３７２６１８、３８２６１７、３７２５４１、３７
２６１９、３７２５４２、３７２６２０、３７２５４３、３７２６２１、３７２５４４、
３７２６２２、３８２６１８または３８２６１９から選択される。
【０３３５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１０のヌクレオチド１２９３〜１３２４で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１０のヌクレオチド１
２９３〜１３２４を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１２９３
〜１３２４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号７６４、７６５、
７６６、７６７、７６８、７６９、７７０、７７１、７７２、７７３、７７４または７７
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
０のヌクレオチド１２９３〜１３２４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号３７２５４０、３７２６１８、３８２６１７、３７２５４１、３７２６１９
、３７２５４２、３７２６２０、３７２５４３、３７２６２１、３７２５４４、３７２６
２２または３８２６１８から選択される。
【０３３６】
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１
４ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、
ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオ
チドである。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖
アンチセンス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物 
は、短鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して
標的化された短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に少なくとも１つの高親
和性修飾を含む。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施形
態では、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのよ
うな実施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態では
、ウィングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、
β−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−（
ＣＨ２）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）Ｂ
ＮＡおよびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される。
特定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チオ
、Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３
、Ｔ−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−
ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、Ｒｍお
よびＲｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルであ
る。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
【０３３７】
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャ
ップは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の
実施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合した
ときに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を
支持するアンチセンス化合物をもたらす。
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て
、ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジ
エステル結合である。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化される短鎖ア
ンチセンス化合物は、混合型バックボーンを有する。
【０３３８】
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施
形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施
形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、長さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では
、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを
含む。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、１０〜１５モノマーを含む。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、Ｄ
ＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチ
ドまたはヌクレオシドを含む。
【０３３９】
特定の実施形態では、本発明は、ＤＧＡＴ２の発現を調節する方法を提供する。特定の
実施形態では、このような方法は、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された１以上の短鎖ア
ンチセンス化合物の使用を包含し、ここで、ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好まし
くは９〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の
連結されたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３
、１４、１５または１６のモノマーのＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された１以上の短鎖
アンチセンス化合物を用いてＤＧＡＴ２の発現を調節する方法を包含することを理解する
。
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２を調節する方法は、長さ８モノマーのＤＧＡＴ２核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、
ＤＧＡＴ２を調節する方法は、長さ９モノマーのＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２を調節する方
法は、長さ１０モノマーのＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２を調節する方法は、長さ１１モノマ
ーのＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特
定の実施形態では、ＤＧＡＴ２を調節する方法は、長さ１２モノマーのＤＧＡＴ２核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、Ｄ
ＧＡＴ２を調節する方法は、長さ１３モノマーのＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２を調節する方
法は、長さ１４モノマーのＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
の使用を包含する。特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２を調節する方法は、長さ１５モノマ
ーのＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特
定の実施形態では、ＤＧＡＴ２を調節する方法は、長さ１６モノマーのＤＧＡＴ２核酸に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
特定の実施形態では、ＤＧＡＴ２の発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＤ
ＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実
施形態では、ＤＧＡＴ２の発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＤＧＡＴ２
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態で
は、ＤＧＡＴ２の発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＤＧＡＴ２核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＤＧ
ＡＴ２の発現を調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含
むＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０３４０】
９．ＰＴＰ１Ｂ
ＰＴＰ１Ｂ（タンパク質ホスファターゼ１ＢおよびＰＴＰＮ１としても公知）は、元々
、ヒト胎盤の主要なタンパク質チロシンホスファターゼとして単離された、小胞体（ＥＲ
）に関連する酵素である（Ｔｏｎｋｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９８
８，２６３，６７３１−６７３７；Ｔｏｎｋｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．
，１９８８，２６３，６７２２−６７３０）。
【０３４１】
インシュリンレセプターにより媒介されるシグナル伝達における本質的な調節の役割が
、ＰＴＰ１Ｂについて確立されている。特定の状況において、ＰＴＰ１Ｂは、インビトロ
およびインタクトな細胞の両方において活性化されたインシュリンレセプターと相互作用
して、このレセプターを脱リン酸化し、シグナル伝達経路のダウンレギュレーションをも
たらす（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１
９９８，１８２，９１−９９；Ｓｅｅｌｙ  ｅｔ  ａｌ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，１９９６，
４５，１３７９−１３８５）。さらに、ＰＴＰ１Ｂは、インシュリンのマイトジェン作用
を調節する（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，
１９９８，１８２，９１−９９）。ＰＴＰ１Ｂを過剰発現するラットの脂肪細胞において
、ＧＬＵＴ４グルコース輸送体のトランスロケーションが阻害され、ＰＴＰ１Ｂがグルコ
ース輸送の負の調節因子としてもはたらくことが示された（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ
．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９７，２７２，８０２６−８０３１）。
ＰＴＰ１Ｂ遺伝子を欠失するマウスノックアウトモデルもまた、ＰＴＰ１Ｂによるイン
シュリンシグナル伝達の負の調節の証拠となる。破壊されたＰＴＰ１Ｂ遺伝子を有するマ
ウスは、インシュリン感受性の増加と、インシュリンレセプターのリン酸化の増加とを示
した。高脂肪の食事を与えたとき、ＰＴＰ１Ｂ  −／−マウスは、体重の増加に対して抵
抗性であり、そして、インシュリン感受性が復活した（ｒｅｍａｉｎｅｄ）（Ｅｌｃｈｅ
ｂｌｙ  ｅｔ  ａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９，２８３，１５４４−１５４８）。これ
らの研究は、明らかに、ＰＴＰ１Ｂを糖尿病および肥満の処置における治療標的として確
立するものである。
【０３４２】
糖尿病および肥満（現在ではときどき、まとめて、「ディアベシティ（ｄｉａｂｅｓｉ
ｔｙ）」と呼ばれる）は、相互に関係がある。ヒトの肥満の多くは、インシュリン抵抗性
およびレプチン抵抗性に関連している。実際、肥満は、糖尿病自体よりも、インシュリン
の作用に対してより大きな影響を有し得る（Ｓｉｎｄｅｌｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｓ
ｉｏｌ  Ｒｅｓ．，２００２，５１，８５−９１）。シンドロームＸまたはメタボリック
症候群は、一緒に生じたときに、糖尿病および心臓血管疾患に対する素因を示し得る状態
のクラスターに対する新しい用語である。これらの症状（高血圧、高トリグリセリド、Ｈ
ＤＬの低下および肥満を含む）は、いくつかの個体において一緒に出現する傾向がある。
糖尿病および肥満の両方におけるその役割に起因して、ＰＴＰ１Ｂは、糖尿病、肥満およ
びメタボリック症候群を含む、ある範囲の代謝性の状態に対する治療標的であると考えら
れる。血中グルコースの制御を改善することによって、ＰＴＰ１Ｂのインヒビターはまた
、糖尿病の続発症（網膜症、ニューロパシー、心臓血管系の合併症および腎症を含む）の
減速、予防、遅延または改善において有用であり得る。
【０３４３】
細胞周期の間に差示的に調節される（Ｓｃｈｉｅｖｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ，Ｃｅｌｌ．
Ｇｒｏｗｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．，１９９３，４，２３９−２４６）ＰＴＰ１Ｂは、プレｍ
ＲＮＡの選択的スプライシングから生じる２つの異なるアイソフォームとして、インシュ
リン感受性の組織において発現される（ＳｈｉｆｒｉｎおよびＮｅｅｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．
Ｃｈｅｍ．，１９９３，２６８，２５３７６−２５３８４）。選択的スプライシングを受
けた生成物の割合は、インシュリンのような増殖因子により影響され、そして、調べられ
る種々の組織で異なっている（ＳｅｌｌおよびＲｅｅｓｅ，Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．Ｍｅｔ
ａｂ．，１９９９，６６，１８９−１９２）。これらの研究において、改変体のレベルは
、血漿インシュリン濃度および体脂肪率と相関していた。したがって、これらの改変体は
、慢性の高インシュリン血症または２型糖尿病を有する患者についてのバイオマーカーと
して使用され得る。
【０３４４】
定義
「タンパク質チロシンホスファターゼ１Ｂ」は、その発現が短鎖アンチセンス化合物の
投与によって調節されるべき、遺伝子産物またはタンパク質である。タンパク質チロシン
ホスファターゼ１Ｂは、一般に、ＰＴＰ１Ｂと称されるが、また、タンパク質チロシンホ
スファターゼ；ＰＴＰＮ１；ＲＫＰＴＰ；タンパク質チロシンホスファターゼ、非レセプ
ター１型とも称され得る。
「ＰＴＰ１Ｂ核酸」は、ＰＴＰ１Ｂをコードするあらゆる核酸を意味する。例えば、特
定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸としては、ＰＴＰ１ＢをコードするＤＮＡ配列、ＰＴ
Ｐ１ＢをコードするＤＮＡから転写されたＲＮＡ配列、およびＰＴＰ１Ｂをコードするｍ
ＲＮＡ配列が挙げられるがこれらに限定されない。
「ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡ」は、ＰＴＰ１Ｂタンパク質をコードするｍＲＮＡを意味する
。
【０３４５】
治療上の適応
アンチセンス技術は、ＰＴＰ１Ｂの発現を減少させるための有効な手段であり、そして
、多数の治療上、診断上および研究上の用途において比類なく有用であることが分かって
いる。したがって、特定の実施形態では、本発明は、ＰＴＰ１Ｂをコードする核酸に対し
て標的化された化合物を提供し、この化合物は、ＰＴＰ１Ｂの発現を調節する。さらに、
ＰＴＰ１Ｂの発現を効率的に阻害し得る短鎖アンチセンス化合物が本明細書中に提供され
る。
特定の治療では、ＰＴＰ１Ｂの発現を調節することによって処置され得る疾患または障
害を有すると疑われる被験体は、ＰＴＰ１Ｂをコードする核酸に対して標的化された１以
上の短鎖アンチセンス化合物を投与することによって処置される。例えば、非限定的な一
実施形態では、このような方法は、治療上有効な量の短鎖アンチセンス化合物を動物に対
して投与する工程を包含する。本発明の短鎖アンチセンス化合物は、効率的にＰＴＰ１Ｂ
の活性を阻害するか、または、ＰＴＰ１Ｂの発現を阻害する。一実施形態では、被験体に
おけるＰＴＰ１Ｂの活性または発現は、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくと
も２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％
、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なく
とも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％阻
害される。特定の実施形態では、被験体におけるＰＴＰ１Ｂの活性または発現は、約３０
％阻害される。より好ましくは、被験体におけるＰＴＰ１Ｂの活性または発現は、５０％
以上阻害される。
【０３４６】
ＰＴＰ１Ｂの発現の低下は、例えば、動物の血中、血漿中、血清中、脂肪組織中、肝臓
または任意の他の体液、組織もしくは器官中で測定され得る。好ましくは、解析される上
記体液、組織もしくは器官内に含まれる細胞は、ＰＴＰ１Ｂをコードする核酸分子を含む
か、そして／または、これらは、ＰＴＰ１Ｂタンパク質自体を含む。
本発明の化合物を含有する薬学的組成物および他の組成物もまた提供される。特定の実
施形態では、ＰＴＰ１Ｂをコードする核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、化合物の有効量を、適切な薬学的に受容可能な希釈剤またはキャリアに加えることに
よって、薬学的組成物において利用される。
ＰＴＰ１Ｂを標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細書中に一般的に記載される
短鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有し得る。特定の実施形態で
は、ＰＴＰ１Ｂ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１２−１、１−１−１
０−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１０−２、１−１０−１
、１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−３または１−６−１、
より好ましくは１−１０−１、２−１０−２、３−１０−３および１−９−２から選択さ
れるモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有する。
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された１以上の短鎖アンチセンス
化合物、またはこのような化合物を含有する薬学的組成物を投与することによって個体を
処置する方法が本明細書中に提供される。さらに、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された
短鎖アンチセンス化合物を投与することによって、ＰＴＰ１Ｂに関連する疾患または状態
を有する被験体を処置する方法が提供される。ＰＴＰ１Ｂに関連する疾患および状態とし
ては、高い血中グルコースまたは高血糖、糖尿病前症、糖尿病、２型糖尿病、メタボリッ
ク症候群、肥満およびインシュリン抵抗性が挙げられるがこれらに限定されない。したが
って、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を投与することによ
って、高い血中グルコースまたは高血糖、糖尿病前症、糖尿病、２型糖尿病、メタボリッ
ク症候群、肥満およびインシュリン抵抗性を処置する方法が本明細書中に提供される。
特定の実施形態では、本発明は、ＰＴＰ１Ｂ発現の短鎖アンチセンスインヒビターを被
験体に投与することによって、被験体における血中グルコースレベルを低下させるための
、または、被験体における血中グルコースレベルの上昇の開始を予防もしくは遅延するた
めの、組成物および方法を提供する。
【０３４７】
特定の実施形態では、本発明は、ＰＴＰ１Ｂ発現の短鎖アンチセンスインヒビターを被
験体に投与することによって、被験体におけるインシュリン感受性を改善するため、また
は、被験体におけるインシュリン抵抗性の発病を予防もしくは遅延するための、組成物お
よび方法を提供する。
特定の実施形態では、本発明は、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物を被験体に投与することによって、被験体における代謝性の状態を処置するため
の、または、被験体における代謝性の状態の発病を予防もしくは遅延するための、組成物
および方法を提供する。このような代謝性の状態は、ＰＴＰ１Ｂ発現に関連するあらゆる
代謝性の状態であり得、これには、糖尿病および肥満が含まれるがこれらに限定されない
。また、肥満症を減少させる方法が提供される。また、代謝速度が増大している肥満を処
置する方法が提供される。
【０３４８】
特定の実施形態では、被験体は２型糖尿病を有する。特定の実施形態では、被験体は、
ＨｂＡ１ｃレベルの上昇を示す。特定の実施形態では、ＨｂＡ１ｃレベルは、少なくとも
約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％
または少なくとも約１１％である。好ましい実施形態では、ＨｂＡ１ｃレベルは、約７％
以下まで低下される。特定の実施形態では、被験体は、ボディマス指数の上昇を示す。特
定の実施形態では、ボディマス指数の上昇は、２５ｋｇ／ｍ２より大きい。特定の実施形
態では、被験体は、高血糖または血中グルコースレベルの上昇を示す。特定の実施形態で
は、血中グルコースレベルは、空腹時の血中グルコースレベルである。特定の実施形態で
は、空腹時の血中グルコースレベルの上昇は、少なくとも１３０ｍｇ／ｄＬである。特定
の実施形態では、被験体は、処置の開始前に高血糖を示すか、あるいは、約１３０ｍｇ／
ｄＬを上回る空腹時の血中グルコースレベル、少なくとも約７％の基線ＨｂＡ１ｃレベル
、もしくは、２５ｋｇ／ｍ２より大きいボディマス指数、またはこれらの任意の組み合わ
せを示す。
【０３４９】
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
投与することによって、１以上のこのようなレベルを低下させる方法が提供される。例え
ば、ＰＴＰ１Ｂを標的とする短鎖アンチセンス化合物を被験体に投与することによって、
被験体において、空腹時のグルコースレベル、ＨｂＡ１ｃレベルもしくはボディマス指数
のレベル、またはこれらの任意の組み合わせを低下させる方法が提供される。空腹時のグ
ルコースは、空腹時の血中グルコース、空腹時の血清グルコース、または空腹時の血漿グ
ルコースであり得る。いくつかの実施形態では、空腹時の血漿グルコースレベルは、少な
くとも約２５ｍｇ／ｄＬまたは少なくとも約１０ｍｇ／ｄＬ低下される。特定の実施形態
では、上記被験体は、インシュリン、スルホニル尿素またはメトホルミンのようなグルコ
ース低下剤の治療レジメンにおいて、正常なグルコースレベルを達成しない。
【０３５０】
特定の実施形態では、本発明は、脂質レベルを変化させる方法を提供する。特定のこの
ような方法は、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を被験体に
投与することによって、被験体において、コレステロール、ＬＤＬおよび／もしくはＶＬ
ＤＬのレベル、またはこれらの任意の組み合わせを低下させる。特定の実施形態では、被
験体におけるＨＤＬレベルは、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物を被験体に投与することによって、増加させられる。特定の実施形態では、被験体に
おけるＬＤＬ：ＨＤＬの比および／または総コレステロール：ＨＤＬの比は、ＰＴＰ１Ｂ
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を被験体に投与することによって、低
下される。特定の実施形態では、被験体におけるＨＤＬ：ＬＤＬの比および／またはＨＤ
Ｌ：総コレステロールの比は、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物を被験体に投与することによって、増加させられる。特定の実施形態では、被験体に
おける脂質のプロフィールは、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物を被験体に投与することにより、ＨＤＬを増加させるか、ＬＤＬを低下するか、ＶＬ
ＤＬを低下させるか、トリグリセリドを低下させるか、アポリポタンパク質Ｂのレベルを
低下させるか、または、総コレステロールレベルを低下させるか、あるいは、これらの組
み合わせによって改善される。このような実施形態では、被験体はヒトを含む動物である
。
【０３５１】
併用治療
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
含有する１以上の薬学的組成物は、１以上の他の薬学的因子と同時に投与される。特定の
実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と
同じ疾患または状態を処置するように設計される。特定の実施形態では、このような１以
上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と異なる疾患または状態を処置す
るように設計される。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以
上の本発明の薬学的組成物の望ましくない作用を処置するように設計される。特定の実施
形態では、１以上の本発明の薬学的組成物は、その他の薬学的因子の望ましくない作用を
処置するために、別の薬学的因子と同時に投与される。特定の実施形態では、１以上の本
発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、同時に投与される。特定の実施形
態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、異なる時点で
投与される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学
的因子とは、単一の処方物内で一緒に調製される。特定の実施形態では、１以上の本発明
の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、別々に調製される。
【０３５２】
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
含有する薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子としては、グルコース低下剤およ
びグルコース低下治療が挙げられる。いくつかの実施形態では、グルコース低下剤は、Ｐ
ＰＡＲアゴニスト（γ、デュアル（ｄｕａｌ）または汎用（ｐａｎ））、ジペプチジルペ
プチダーゼ（ＩＶ）インヒビター、ＧＬＰ−１アナログ、インシュリンもしくはインシュ
リンアナログ、インシュリン分泌促進物質、ＳＧＬＴ２インヒビター、ヒトアミリンアナ
ログ、ビグアナイド、α−グルコシダーゼインヒビター、メグリチニド、チアゾリジンジ
オンまたはスルホニル尿素である。
【０３５３】
いくつかの実施形態では、グルコース低下治療は、ＧＬＰ−１アナログである。いくつ
かの実施形態では、ＧＬＰ−１アナログは、エキセンジン（ｅｘｅｎｄｉｎ）−４または
リラグルチド（ｌｉｒａｇｌｕｔｉｄｅ）である。
他の実施形態では、グルコース低下治療は、スルホニル尿素である。いくつかの実施形
態では、スルホニル尿素は、アセトヘキサミド、クロロプロパミド、トルブタミド、トラ
ザミド、グリメピリド、グリピジド、グリブリドまたはグリクラジドである。
いくつかの実施形態では、グルコース低下薬はビグアナイドである。いくつかの実施形
態では、ビグアナイドは、メトホルミンであり、そして、いくつかの実施形態では、血中
グルコースレベルは、メトホルミン単独での処置後に乳酸アシドーシスが観察されるのと
比較して、乳酸アシドーシスの増加なしで低下させられる。
【０３５４】
いくつかの実施形態では、グルコース低下薬は、メグリチニドである。いくつかの実施
形態では、メグリチニドは、ナテグリニドおよびレパグリニドである。
いくつかの実施形態では、グルコース低下薬は、チアゾリジンジオンである。いくつか
の実施形態では、チアゾリジンジオンは、ピオグリタゾン、ロシグリタゾンまたはトログ
リタゾンである。いくつかの実施形態では、血中グルコースレベルは、ロシグリタゾン単
独での処置で観察されるよりも大きい体重の増加なしに低下させられる。
いくつかの実施形態では、グルコース低下薬は、α−グルコシダーゼインヒビターであ
る。いくつかの実施形態では、α−グルコシダーゼインヒビターは、アカルボーまたはミ
グリトールである。
【０３５５】
特定の実施形態では、同時に投与されるグルコース低下剤は、ＩＳＩＳ  １１３７１５
である。
特定の実施形態では、グルコース低下治療は、治療的なライフスタイルの変化である。
特定のこのような実施形態では、グルコース低下剤は、本発明の薬学的組成物を投与す
る前に投与される。特定のこのような実施形態では、グルコース低下剤は、本発明の薬学
的組成物を投与した後に投与される。特定のこのような実施形態では、グルコース低下剤
は、本発明の薬学的組成物と同時に投与される。特定のこのような実施形態では、同時に
投与されるグルコース低下剤の用量は、グルコース低下剤が単独で投与される場合に投与
される用量と同じである。特定のこのような実施形態では、同時に投与されるグルコース
低下剤の用量は、グルコース低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よりも少な
い。特定のこのような実施形態では、同時に投与されるグルコース低下剤の用量は、グル
コース低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よりも多い。
【０３５６】
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
含有する薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子としては、脂質低下剤が挙げられ
る。このような脂質低下剤は、本願の他の場所で考察され、そして、ＰＴＰ１Ｂに関して
、ここに含められる。このような脂質低下剤は、グルコース低下剤について上述されたよ
うにして投与され得る。
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を
含有する薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子としては、抗肥満剤治療が挙げら
れる。このような抗肥満剤治療は、グルコース低下剤について上述されたようにして投与
され得る。
さらに、注射によりＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を投
与し、さらに、注射部位に局所用ステロイドを投与する工程を包含する方法が提供される
。
【０３５７】
医薬
また、血中グルコースレベル（空腹時グルコースレベルおよびＨｂＡ１ｃレベル、ボデ
ィマス指数のレベルまたは任意のこれらの組み合わせを含む）を低下させるための医薬の
調製のための、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用が本
明細書中に提供される。医薬は、負荷期間および維持期間の間に投与され得る。いくつか
の実施形態では、医薬は、経皮または静脈内で投与される。他の実施形態では、上記医薬
の投与は、少なくとも１日１回、少なくとも１週間に１回、または、少なくとも１ヶ月に
１回行われる。特定の実施形態では、医薬中に存在する短鎖アンチセンス化合物は、より
長い配列、特に、２０以上の核酸塩基の配列を有する短鎖アンチセンス化合物よりも低い
用量で投与される。医薬は、高い血中グルコースまたは高血糖、糖尿病前症、糖尿病、２
型糖尿病、メタボリック症候群、肥満およびインシュリン抵抗性を示す被験体に投与され
得る。
短鎖アンチセンス化合物の他の局面および利点が本明細書中に提供される。本明細書中
に開示され、特に、他の標的に関して開示される、あらゆる局面および利点は、ＰＴＰ１
Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス核酸を含む組成物およびその使用方法に関
しても適用可能である。
【０３５８】
核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセッシ
ョン番号ＮＭ＿００２８２７．２（本明細書中に配列番号１１として引用される）の配列
またはＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセッション番号ＮＴ＿０１１３６２．９（本明細
書中に配列番号１２として引用される）の配列のヌクレオチド１４１７８０００〜１４２
５６００を有するＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化される。特定のこのような実施形態では
、配列番号１１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１に対して
少なくとも９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１１に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１に対して少なくとも９５％相補的
である。特定のこのような実施形態では、配列番号１２に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物は、配列番号１２に対して１００％相補的である。特定のこのような実施形
態では、配列番号１２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１２に
対して少なくとも９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１２に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１２に対して少なくとも９５％
相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１２に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物は、配列番号１２に対して１００％相補的である。
【０３５９】
特定の実施形態では、配列番号１１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
表１６および１７に示されるヌクレオチド配列を含む。特定の実施形態では、配列番号１
２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、表１８および１９に示されるヌクレ
オチド配列を含む。
表１６、１７、１８および１９の各々に示される各ヌクレオチド配列は、糖部分、ヌク
レオシド間結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、表１
６、１７、１８および１９に示されるヌクレオチド配列を含む短鎖アンチセンス化合物は
、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得
る。Ｉｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）によって説明されるアンチセンス化合物は、核酸
塩基配列と、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩基に対する１以上の修飾との組み
合わせを示す。
【０３６０】
表１６および１７は、配列番号１１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の例
を示す。表１６は、配列番号１１に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示
す。表１７は、配列番号１１に関して、１または２のミスマッチを有する短鎖アンチセン
ス化合物を示す。表１８は、配列番号１２に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化
合物を示す。表１９は、配列番号１２に対して１または２のミスマッチを有する短鎖アン
チセンス化合物を示す。「ギャップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセン
ス化合物のウィング−ギャップ−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’
−デオキシヌクレオチドを含み、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾
糖を含む。特定の２’−修飾糖もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば
、「２−１０−２  ＭＯＥ」は、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個
の２’−デオキシヌクレオチドのギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウ
ィングセグメントが配置され、ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’
−ＭＯＥヌクレオチドであることを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエート
である。「非修飾シトシン」がギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖ア
ンチセンス化合物は、非修飾シトシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマ
ーのモチーフの欄に「非修飾シトシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シ
トシンである。例えば、「ギャップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メ
チルシトシンを有する一方で、ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す
。
【０３６１】
【表１９】
2014033674.tif 000048
2014033674.tif 000049
2014033674.tif 000050
2014033674.tif 000051
2014033674.tif 000052
【０３６２】
2014033674.tif 000053
2014033674.tif 000054
2014033674.tif 000055
2014033674.tif 000056
【０３６３】
【表２０】
2014033674.tif 000057
2014033674.tif 000058
2014033674.tif 000059
2014033674.tif 000060
【０３６４】
【表２１】
2014033674.tif 000061
2014033674.tif 000062
2014033674.tif 000063
2014033674.tif 000064
2014033674.tif 000065
【０３６５】
2014033674.tif 000066
2014033674.tif 000067
2014033674.tif 000068
2014033674.tif 000069
2014033674.tif 000070
【０３６６】
2014033674.tif 000071
2014033674.tif 000072
2014033674.tif 000073
2014033674.tif 000074
2014033674.tif 000075
【０３６７】
【表２２】
2014033674.tif 000076
2014033674.tif 000077
2014033674.tif 000078
2014033674.tif 000079
2014033674.tif 000080
【０３６８】
2014033674.tif 000081
2014033674.tif 000082
2014033674.tif 000083
2014033674.tif 000084
2014033674.tif 000085
【０３６９】
2014033674.tif 000086
2014033674.tif 000087
2014033674.tif 000088
2014033674.tif 000089
2014033674.tif 000090
【０３７０】
2014033674.tif 000091
2014033674.tif 000092
2014033674.tif 000093
2014033674.tif 000094
2014033674.tif 000095
【０３７１】
2014033674.tif 000096
2014033674.tif 000097
2014033674.tif 000098
2014033674.tif 000099
2014033674.tif 000100
2014033674.tif 000101
2014033674.tif 000102
2014033674.tif 000103
【０３７２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１７７〜１９０である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１７７
〜１９０を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１７７〜１９０に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８６、８５９または８５３か
ら選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１１の
ヌクレオチド１７７〜１９０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ
番号１４７０２２、１４７０２３または１４７０２４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１９５〜２２８である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１９５
〜２２８を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１９５〜２２８に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７７、８６８、８８２、８８
６、８５９、８５３、８６５、８３５、８４３、８４６、８４２、８４８、８７４、８４
９、８６３、８５５、８５０、８６４または８３４から選択されるヌクレオチド配列を含
む。特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド１９５〜２２８に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０１９、１４７０２０、
１４７０２１、１４７０２２、１４７０２３、１４７０２４、１４７０２５、１４７０２
６、１４７０２７、１４７０２８、１４７０７３、１４７０２９、１４７０３０、１４７
０３６、１４７０３７、１４７０３８、１４７０３９、１４７０４０または１４７０４１
から選択される。
【０３７３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３２３〜３５３である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド３２３
〜３５３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド３２３〜３５３に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６６、８８１、８６９、８８
３、８５８、８３３、８７５、８３７、８２９、８７１、８８４、８８７、８３９、８３
０、８４０、８６１または８７９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのよ
うな実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド３２３〜３５３に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４２、１４７０４３、１４７０４４、１
４７０４５、１４７０４６、１４７０４７、１４７０５１、１４７０５２、１４７０５３
、１４７０５４、１４７０５５、１４７０５６、１４７０５７、１４７０５８、１４７０
５９、１４７０６０または１４７０６１から選択される。
【０３７４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３２２〜３５３である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド３２２
〜３５３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド３２２〜３５３に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４２、８６６、８８１、８６
９、８８３、８５８、８３３、８７５、８３７、８２９、８７１、８８４、８８７、８３
９、８３０、８４０、８６１または８７９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定
のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド３２２〜３５３に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７３、１４７０４２、１４７０
４３、１４７０４４、１４７０４５、１４７０４６、１４７０４７、１４７０５１、１４
７０５２、１４７０５３、１４７０５４、１４７０５５、１４７０５６、１４７０５７、
１４７０５８、１４７０５９、１４７０６０または１４７０６１から選択される。
【０３７５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６７９〜７９９である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド６７９
〜７９９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６７９〜７９９に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８３、８５８、８８３または
８５８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番
号１１のヌクレオチド６７９〜７９９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号１４７０４５、１４７０４６、１４７０４５または１４７０４６から選択さ
れる。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６７９〜８２７である
。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド６７９
〜８２７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６７９〜８２７に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８３、８５８、８８３、８５
８または８５１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では
、配列番号１１のヌクレオチド６７９〜８２７に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４５、１４７０４６、１４７０４５、１４７０４６または
１４７０６６から選択される。
【０３７６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１０２４〜１０４６で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１
０２４〜１０４６を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１０２４
〜１０４６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４１、８６２、
８８０、８５７、８５１、８７６、８３８、８６０、８７８、８５６、８３２または８４
２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド１０２４〜１０４６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号１４７０６２、１４７０６３、１４７０６４、１４７０６５、１４７０６６
、１４７０６７、１４７０６８、１４７０６９、１４７０７０、１４７０７１、１４７０
７２または１４７０７３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド９９２〜１０４６であ
る。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド９９
２〜１０４６を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド９９２〜１０
４６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３１、８４１、８６２
、８８０、８５７、８５１、８７６、８３８、８６０、８７８、８５６、８３２または８
４２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号
１１のヌクレオチド９９２〜１０４６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号４０４１３１、１４７０６２、１４７０６３、１４７０６４、１４７０６５
、１４７０６６、１４７０６７、１４７０６８、１４７０６９、１４７０７０、１４７０
７１、１４７０７２または１４７０７３から選択される。
【０３７７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１８６８〜１８８１で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１
８６８〜１８８１を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１８６８
〜１８８１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８６、８５９ま
たは８５３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド１８６８〜１８８１に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２２、１４７０２３または１４７０２４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１８８６〜１９１９で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１
８８６〜１９１９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１８８６
〜１９１９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７７、８６８、
８８２、８８６、８５９、８６５、８４３、８４６、８７４、８６３、８５５、８６４ま
たは８３４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド１８８６〜１９１９に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０１９、１４７０２０、１４７０２１、１４７０２２、１４
７０２３、１４７０２５、１４７０２７、１４７０２８、１４７０３０、１４７０３７、
１４７０３８、１４７０４０または１４７０４１から選択される。
【０３７８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１８６９〜１９１９で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１
８６９〜１９１９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１８６９
〜１９１９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５９、８５３、
８７７、８６８、８８２、８８６、８５９、８６５、８４３、８４６、８７４、８６３、
８５５、８６４または８３４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような
実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド１８６９〜１９１９に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２３、１４７０２４、１４７０１９、１
４７０２０、１４７０２１、１４７０２２、１４７０２３、１４７０２５、１４７０２７
、１４７０２８、１４７０３０、１４７０３７、１４７０３８、１４７０４０または１４
７０４１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１９７６〜１９８９で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１
９７６〜１９８９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１９７６
〜１９８９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８６、８５９ま
たは８５３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド１９７６〜１９８９に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２２、１４７０２３または１４７０２４から選択される。
【０３７９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１９９５〜２０２７で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド１
９９５〜２０２７を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド１９９５
〜２０２７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６８、８８２、
８８６、８５９、８５３、８６５、８３５、８４３、８４６、８４８、８７４、８４９、
８６３、８５５、８５０、８６４または８３４から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド１９９５〜２０２７に対し
て標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２０、１４７０２１、
１４７０２２、１４７０２３、１４７０２４、１４７０２５、１４７０２６、１４７０２
７、１４７０２８、１４７０２９、１４７０３０、１４７０３６、１４７０３７、１４７
０３８、１４７０３９、１４７０４０または１４７０４１から選択される。
【０３８０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２３６６〜２３８２で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド２
３６６〜２３８２を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド２３６６
〜２３８２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６７または８７
３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド２３６６〜２３８２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号４０４１９９または４０４１３４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６２２０〜６２３３で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド６
２２０〜６２３３を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６２２０
〜６２３３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７０、８３６ま
たは８４４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド６２２０〜６２３３に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３２、１４７０３３または１４７０３４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６２８８〜６３００で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド６
２８８〜６３００を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６２８８
〜６３００に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６９または８８
３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６２８８〜６３００に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号１４７０４４または１４７０４５から選択される。
【０３８１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６３２９〜６３４２で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド６
３２９〜６３４２を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６３２９
〜６３４２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７０、８３６ま
たは８４４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド６３２９〜６３４２に対して標的化された短鎖アンチセンス化
合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３２、１４７０３３または１４７０３４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６３９７〜６４０９で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド６
３９７〜６４０９を標的とする。特定のこのような実施形態では、ヌクレオチド６３９７
〜６４０９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６９または８８
３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６３９７〜６４０９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
Ｉｓｉｓ番号１４７０４４または１４７０４５から選択される。
【０３８２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド７０５７〜７１７８で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド７
０５７〜７１７８を標的とする。特定のこのような実施形態では、７０５７〜７１７８に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３０、８４０、８６１、８３
０または８４０から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では
、配列番号１１のヌクレオチド７０５７〜７１７８に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５８、１４７０５９、１４７０６０、１４７０５８ま
たは１４７０５９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド８６３０〜８７５０で
ある。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチド８
６３０〜８７５０を標的とする。特定のこのような実施形態では、８６３０〜８７５０に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４３、８４６、８４３または
８４６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番
号１１のヌクレオチド８６３０〜８７５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２７、１４７０２８、１４７０２７または１４７０２８から選
択される。
【０３８３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１０９５７〜１１０７
７である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド１０９５７〜１１０７７を標的とする。特定のこのような実施形態では、１０９５７〜
１１０７７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８１、８６９、
８８１または８６９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１１のヌクレオチド１０９５７〜１１０７７に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４３、１４７０４４、１４７０４３または１
４７０４４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１１６０５〜１１６２
３である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド１１６０５〜１１６２３を標的とする。特定のこのような実施形態では、１１６０５〜
１１６２３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５６、８７８ま
たは８５６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド１１６０５〜１１６２３に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７１、１４７０７０または１４７０７１から選択され
る。
【０３８４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１２８０５〜１２８１
７である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド１２８０５〜１２８１７を標的とする。特定のこのような実施形態では、１２８０５〜
１２８１７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７４または８８
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド１２８０５〜１２８１７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３０または１４７０３１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１２９８６〜１２９９
８である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド１２９８６〜１２９９８を標的とする。特定のこのような実施形態では、１２９８６〜
１２９９８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７４または８８
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド１２９８６〜１２９９８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３０または１４７０３１から選択される。
【０３８５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１５５６０〜１５５７
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド１５５６０〜１５５７２を標的とする。特定のこのような実施形態では、１５５６０〜
１５５７２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７６または８３
８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド１５５６０〜１５５７２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６７または１４７０６８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド１７７８７〜１７９４
１である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド１７７８７〜１７９４１を標的とする。特定のこのような実施形態では、１７７８７〜
１７９４１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７４または８８
０から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド１７７８７〜１７９４１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３０または１４７０６４から選択される。
【０３８６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２１１９０〜２１２０
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２１１９０〜２１２０２を標的とする。特定のこのような実施形態では、２１１９０〜
２１２０２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４３または８４
６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド２１１９０〜２１２０２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２７または１４７０２８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２１３５８〜２１３７
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２１３５８〜２１３７０を標的とする。特定のこのような実施形態では、２１３５８〜
２１３７０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４３または８４
６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド２１３５８〜２１３７０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号０１７０２７または１４７０２８から選択される。
【０３８７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２４３１８〜２４３３
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２４３１８〜２４３３２を標的とする。特定のこのような実施形態では、２４３１８〜
２４３３２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８１、８６９、
８８３または８５８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１１のヌクレオチド２４３１８〜２４３３２に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４３、１４７０４４、１４７０４５または１
４７０４６から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２４４８６〜２４５０
１である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２４４８６〜２４５０１を標的とする。特定のこのような実施形態では、２４４８６〜
２４５０１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８１、８６９、
８５８または８３３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１１のヌクレオチド２４４８６〜２４５０１に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４３、１４７０４４、１４７０４６または１
４７０４７から選択される。
【０３８８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２５０６５〜２５０７
７である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２５０６５〜２５０７７を標的とする。特定のこのような実施形態では、２５０６５〜
２５０７７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６４または８３
４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド２５０６５〜２５０７７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４０または１４７０４１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２５２３２〜２５２４
５である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２５２３２〜２５２４５を標的とする。特定のこのような実施形態では、２５２３２〜
２５２４５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５０、８６４ま
たは８３４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド２５２３２〜２５２４５に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３９、１４７０４０または１４７０４１から選択され
る。
【０３８９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２５５０８〜２５５２
３である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２５５０８〜２５５２３を標的とする。特定のこのような実施形態では、２５５０８〜
２５５２３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３９または８７
９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド２５５０８〜２５５２３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５７または１４７０６１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド２５６７６〜２８８９
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド２５６７６〜２８８９０を標的とする。特定のこのような実施形態では、２５６７６〜
２８８９０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３９、８６０ま
たは８７８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド２５６７６〜２８８９０に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５７、１４７０６９または１４７０７０から選択され
る。
【０３９０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３３０５６〜３３０６
９である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド３３０５６〜３３０６９を標的とする。特定のこのような実施形態では、３３０５６〜
３３０６９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６０、８７８ま
たは８５６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド３３０５６〜３３０６９に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６９、１４７０７０または１４７０７１から選択され
る。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３３２０５〜３３２１
７である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド３３２０５〜３３２１７を標的とする。特定のこのような実施形態では、３３２０５〜
３３２１７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７８または８５
６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド３３２０５〜３３２１７に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７または１４７０７１から選択される。
【０３９１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３３３１８〜３３３３
４である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド３３３１８〜３３３３４を標的とする。特定のこのような実施形態では、３３３１８〜
３３３３４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５８、８５４ま
たは８７５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド３３３１８〜３３３３４に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４６、１４７０４９または１４７０５１から選択され
る。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３３４６６〜３３４８
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド３３４６６〜３３４８２を標的とする。特定のこのような実施形態では、３３４６６〜
３３４８２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５８、８３３ま
たは８７５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド３３４６６〜３３４８２に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４６、１４７０４７または１４７０５１から選択され
る。
【０３９２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３３６４０〜３３６５
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド３３６４０〜３３６５６を標的とする。特定のこのような実施形態では、３３６４０〜
３３６５６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５８または８７
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド３３６４０〜３３６５６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４６または１４７０５１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３３７８８〜３３８０
４である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド３３７８８〜３３８０４を標的とする。特定のこのような実施形態では、３３７８８〜
３３８０４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５８または８７
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド３３７８８〜３３８０４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４６または１４７０５１から選択される。
【０３９３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド３５４３７〜３５４４
９である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド３５４３７〜３５４４９を標的とする。特定のこのような実施形態では、３５４３７〜
３５４４９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４０または８６
１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド３５４３７〜３５４４９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５９または１４７０６０から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４０３５３〜４０３７
３である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４０３５３〜４０３７３を標的とする。特定のこのような実施形態では、４０３５３〜
４０３７３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７９または８８
１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド４０３５３〜４０３７３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６１または１４７０４３から選択される。
【０３９４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４２５２７〜４２５４
１である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４２５２７〜４２５４１を標的とする。特定のこのような実施形態では、４２５２７〜
４２５４１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８５、８７０ま
たは８４４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド４２５２７〜４２５４１に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３１、１４７０３２または１４７０３４から選択され
る。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４２６７５〜４２６８
９である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４２６７５〜４２６８９を標的とする。特定のこのような実施形態では、４２６７５〜
４２６８９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８５、８７０、
８３６または８４４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、ヌクレオチド４２６７５〜４２６８９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３１、１４７０３２、１４７０３３または１４７０３４から
選択される。
【０３９５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４６３１３〜４６３２
８である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４６３１３〜４６３２８を標的とする。特定のこのような実施形態では、４６３１３〜
４６３２８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３９、８３０、
８４０または８７９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１１のヌクレオチド４６３１３〜４６３２８に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５７、１４７０５８、１４７０５９または１
４７０６１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４６４６１〜４６４７
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４６４６１〜４６４７６を標的とする。特定のこのような実施形態では、４６４６１〜
４６４７６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３９、８４０ま
たは８７９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド４６４６１〜４６４７６に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５７、１４７０５９または１４７０６１から選択され
る。
【０３９６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４８３６９〜４８３８
１である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４８３６９〜４８３８１を標的とする。特定のこのような実施形態では、４８３６９〜
４８３８１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４２または８４
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド４８３６９〜４８３８１に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７３または１４７０７４から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４８７１４〜４８７２
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４８７１４〜４８７２６を標的とする。特定のこのような実施形態では、４８７１４〜
４８７２６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４３または８４
６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド４８７１４〜４８７２６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２７または１４７０２８から選択される。
【０３９７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４９０５０〜４９０６
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４９０５０〜４９０６２を標的とする。特定のこのような実施形態では、４９０５０〜
４９０６２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７６または８３
８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド４９０５０〜４９０６２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６７または１４７０６８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド４９６７２〜４９６８
４である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド４９６７２〜４９６８４を標的とする。特定のこのような実施形態では、４９６７２〜
４９６８４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４２または８４
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド４９６７２〜４９６８４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７３または１４７０７４から選択される。
【０３９８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５２２９２〜５２３０
４である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５２２９２〜５２３０４を標的とする。特定のこのような実施形態では、５２２９２〜
５２３０４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４９または８６
３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５２２９２〜５２３０４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３６または１４７０３７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５２４３８〜５２４５
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５２４３８〜５２４５０を標的とする。特定のこのような実施形態では、５２４３８〜
５２４５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４９または８６
３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５２４３８〜５２４５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３６または１４７０３７から選択される。
【０３９９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５３４４５〜５３４５
８である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５３４４５〜５３４５８を標的とする。特定のこのような実施形態では、５３４４５〜
５３４５８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６６、８８１ま
たは８６９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド５３４４５〜５３４５８に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４２、１４７０４３または１４７０４４から選択され
る。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５３５９１〜５３６０
４である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５３５９１〜５３６０４を標的とする。特定のこのような実施形態では、５３５９１〜
５３６０４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６６、８７４、
８８１、８８５または８６９から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような
実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド５３５９１〜５３６０４に対して標的化され
た短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４２、１４７０３０、１４７０４３
、１４７０３１または１４７０４４から選択される。
【０４００】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５３７３８〜５３７５
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５３７３８〜５３７５０を標的とする。特定のこのような実施形態では、５３７３８〜
５３７５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７４または８８
５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５３７３８〜５３７５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３０または１４７０３１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５３７８３〜５３７９
５である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５３７８３〜５３７９５を標的とする。特定のこのような実施形態では、５３７８３〜
５３７９５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６４または８３
４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５３７８３〜５３７９５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４０または１４７０４１から選択される。
【０４０１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５５００８〜５５０２
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５５００８〜５５０２０を標的とする。特定のこのような実施形態では、５５００８〜
５５０２０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６６または８８
１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５５００８〜５５０２０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４２または１４７０４３から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５５１５４〜５５１６
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５５１５４〜５５１６６を標的とする。特定のこのような実施形態では、５５１５４〜
５５１６６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６６または８８
１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５５１５４〜５５１６６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４２または１４７０４３から選択される。
【０４０２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５５６８２〜５５６９
５である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５５６８２〜５５６９５を標的とする。特定のこのような実施形態では、５５６８２〜
５５６９５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７７または８８
２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５５６８２〜５５６９５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０１９または１４７０２１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５６２７５〜５６２９
３である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５６２７５〜５６２９３を標的とする。特定のこのような実施形態では、５６２７５〜
５６２９３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７１、８８４、
８８７、８３０、８４０、８６１または８７９から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド５６２７５〜５６２９３に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５４、１４７０５
５、１４７０５６、１４７０５８、１４７０５９、１４７０６０または１４７０６１から
選択される。
【０４０３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５６４１８〜５６４３
９である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５６４１８〜５６４３９を標的とする。特定のこのような実施形態では、５６４１８〜
５６４３９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８７５、８２９、
８７１、８８４、８８７、８３９、８３０または８７９から選択されるヌクレオチド配列
を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド５６４１８〜５６
４３９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０５１、１
４７０５３、１４７０５４、１４７０５５、１４７０５６、１４７０５７、１４７０５８
または１４７０６１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド５７２６４〜５７２７
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド５７２６４〜５７２７６を標的とする。特定のこのような実施形態では、５７２６４〜
５７２７６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８３または８５
８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド５７２６４〜５７２７６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４５または１４７０４６から選択される。
【０４０４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６１２７６〜６１２９
３である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６１２７６〜６１２９３を標的とする。特定のこのような実施形態では、６１２７６〜
６１２９３に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５６、８４７、
８４９、８６３、８５５、８５０または８６４から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド６１２７６〜６１２９３に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７１、１４７０３
５、１４７０３６、１４７０３７、１４７０３８、１４７０３９または１４７０４０から
選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６１２５７〜６１３２
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６１２５７〜６１３２０を標的とする。特定のこのような実施形態では、６１２５７〜
６１３２０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８１、８５６、
８４７、８４９、８６３、８５５、８５０、８６４または８８６から選択されるヌクレオ
チド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド６１２５
７〜６１３２０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、ｌｓｉｓ番号１４７０
４３、１４７０７１、１４７０３５、１４７０３６、１４７０３７、１４７０３８、１４
７０３９、１４７０４０または１４７０７１から選択される。
【０４０５】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６１４２２〜６１４３
９である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６１４２２〜６１４３９を標的とする。特定のこのような実施形態では、６１４２２〜
６１４３９に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４４、８４７、
８４９、８６３、８５５または８６４から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこ
のような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド６１４２２〜６１４３９に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３４、１４７０３５、１４
７０３６、１４７０３７、１４７０３８または１４７０４０から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６１４２２〜６１４６
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６１４２２〜６１４６６を標的とする。特定のこのような実施形態では、６１４２２〜
６１４６６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４４、８４７、
８４９、８６３、８５５、８６４または８５６から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド６１４２２〜６１４６６に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３４、１４７０３
５、１４７０３６、１４７０３７、１４７０３８、１４７０４０または１４７０７１から
選択される。
【０４０６】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６３０６５〜６３０７
８である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６３０６５〜６３０７８を標的とする。特定のこのような実施形態では、６３０６５〜
６３０７８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５１または８３
８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６３０６５〜６３０７８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６６または１４７０６８から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６３２０７〜６３２２
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６３２０７〜６３２２２を標的とする。特定のこのような実施形態では、６３２０７〜
６３２２２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４１または８５
１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６３２０７〜６３２２２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６２または１４７０６６から選択される。
【０４０７】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６４５３８〜６４５５
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６４５３８〜６４５５０を標的とする。特定のこのような実施形態では、６４５３８〜
６４５５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４９または８６
３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６４５３８〜６４５５０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３６または１４７０３７から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６４８６４〜６４８７
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６４８６４〜６４８７６を標的とする。特定のこのような実施形態では、６４８６４〜
６４８７６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５１または８７
６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６４８６４〜６４８７６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６６または１４７０６７から選択される。
【０４０８】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６５０１０〜６５０２
８である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６５０１０〜６５０２８を標的とする。特定のこのような実施形態では、６５０１０〜
６５０２８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５１、８７６ま
たは８８３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド６５０１０〜６５０２８に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６６、１４７０６７または１４７０４５から選択され
る。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６５１６３〜６５１７
５である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６５１６３〜６５１７５を標的とする。特定のこのような実施形態では、６５１６３〜
６５１７５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８３または８５
８から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６５１６３〜６５１７５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４５または１４７０４６から選択される。
【０４０９】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６５４０８〜６５４２
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６５４０８〜６５４２２を標的とする。特定のこのような実施形態では、６５４０８〜
６５４２２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８３または８５
６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド６５４０８〜６５４２２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６８または１４７０７１から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６５５４９〜６５５６
８である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６５５４９〜６５５６８を標的とする。特定のこのような実施形態では、６５５４９〜
６５５６８に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６０、８３８ま
たは８５６から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド６５５４９〜６５５６８に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６９、１４７０６８または１４７０７１から選択され
る。
【０４１０】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６７７４１〜６７７５
４である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６７７４１〜６７７５４を標的とする。特定のこのような実施形態では、６７７４１〜
６７７５４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４８、８７４ま
たは８８５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド６７７４１〜６７７５４に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２９、１４７０３０または１４７０３１から選択され
る。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６７８８６〜６７９０
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６７８８６〜６７９００を標的とする。特定のこのような実施形態では、６７８８６〜
６７９００に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８４６、８４８、
８７４または８８５から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１１のヌクレオチド６７８８６〜６７９００に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２８、１４７０２９、１４７０３０または１
４７０３１から選択される。
【０４１１】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６８８６７〜６８８８
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６８８６７〜６８８８０を標的とする。特定のこのような実施形態では、６８８６７〜
６８８８０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８１、８６９ま
たは８８３から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配
列番号１１のヌクレオチド６８８６７〜６８８８０に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４３、１４７０４４または１４７０４５から選択され
る。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６９０１３〜６９５３
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６９０１３〜６９５３２を標的とする。特定のこのような実施形態では、６９０１３〜
６９５３２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８８１、８６９、
８８３、８５８、８５６、８３２または８４２から選択されるヌクレオチド配列を含む。
特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド６９０１３〜６９５３２に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０４３、１４７０４
４、１４７０４５、１４７０４６、１４７０７１、１４７０７２または１４７０７３から
選択される。
【０４１２】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド６９６６５〜６９８８
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド６９６６５〜６９８８０を標的とする。特定のこのような実施形態では、６９６６５〜
６９８８０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５６、８３２、
８４２、８４５または８５１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような
実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド６９６６５〜６９８８０に対して標的化され
た短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７１、１４７０７２、１４７０７３
、１４７０７４または１４７０６６から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド７０６１１〜７０６３
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド７０６１１〜７０６３０を標的とする。特定のこのような実施形態では、７０６１１〜
７０６３０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８５９、８４１、
８６２、８８０、８５７または８５１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこ
のような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド７０６１１〜７０６３０に対して標
的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０２３、１４７０６２、１４
７０６３、１４７０６４、１４７０６５または１４７０６６から選択される。
【０４１３】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド７０７６２〜７０７７
６である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド７０７６２〜７０７７６を標的とする。特定のこのような実施形態では、７０７６２〜
７０７７６に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８６２、８８０、
８５７または８５１から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態
では、配列番号１１のヌクレオチド７０７６２〜７０７７６に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０６３、１４７０６４、１４７０６５または１
４７０６６から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド７０９９８〜７１０１
０である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド７０９９８〜７１０１０を標的とする。特定のこのような実施形態では、７０９９８〜
７１０１０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３２または８４
２から選択されるヌクレオチド配列を含む。特定のこのような実施形態では、配列番号１
１のヌクレオチド７０９９８〜７１０１０に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物
は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７２または１４７０７３から選択される。
【０４１４】
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド７１１４４〜７１４３
６４である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオ
チド７１１４４〜７１４３６４を標的とする。特定のこのような実施形態では、７１１４
４〜７１４３６４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号８３２、８
４２、８４５、８６３、８５５または８５０から選択されるヌクレオチド配列を含む。特
定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド７１１４４〜７１４３６４に
対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０７２、１４７０７
３、１４７０７４、１４７０３７、１４７０３８または１４７０３９から選択される。
特定の実施形態では、標的領域は、配列番号１１のヌクレオチド７１４９７〜７１６５
２である。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１１のヌクレオチ
ド７１４９７〜７１６５２を標的とする。特定のこのような実施形態では、配列番号１１
のヌクレオチド７１４９７〜７１６５２に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、配列番号８６３、８５５、８５０または８７９から選択されるヌクレオチド配列を含む
。特定のこのような実施形態では、配列番号１１のヌクレオチド７１４９７〜７１６５２
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、Ｉｓｉｓ番号１４７０３７、１４７０
３８、１４７０３９または１４７０６１から選択される。
【０４１５】
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８〜１６ヌクレオチド、好ましくは９〜１５ヌクレオチド、より好ましくは９〜１
４ヌクレオチド、より好ましくは１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、
ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ９〜１４ヌクレオ
チドである。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物は、長さ１０〜１４ヌクレオチドである。特定の実施形態では、このような短鎖
アンチセンス化合物は、短鎖アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、短鎖ギャップマーである。特定のこのような実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標
的化された短鎖ギャップマーは、化合物の１以上のウィング内に少なくとも１つの高親和
性修飾を含む。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、各ウィングに、１〜３の高親和性修飾を含む。特定のこのような実施形態
では、ウィングのヌクレオシドまたはヌクレオチドは、２’修飾を含む。特定のこのよう
な実施形態では、ウィングのモノマーはＢＮＡである。特定のこのような実施形態では、
ウィングのモノマーは、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、β
−Ｄ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、エチレンオキシ（４’−（Ｃ
Ｈ２）２−Ｏ−２’）ＢＮＡ、アミノオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’）ＢＮ
Ａおよびオキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’）ＢＮＡから選択される。特
定の実施形態では、ウィングのモノマーは、２’位に、アリル、アミノ、アジド、チオ、
Ｏ−アリル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＯＣＦ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ３、
２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）およびＯ−
ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）から選択される置換基を含み、ここで、Ｒｍお
よびＲｎの各々は、独立して、Ｈまたは置換もしくは非置換のＣ１〜Ｃ１０アルキルであ
る。特定の実施形態では、ウィングのモノマーは２’ＭＯＥヌクレオチドである。
【０４１６】
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、５’ウィングと３’ウィングとの間にギャップを含む。特定の実施形態では、このギャ
ップは、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４のモノマーを含む。特
定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のデオキシリボヌクレオチドである。
特定の実施形態では、ギャップのモノマーは、非修飾のリボヌクレオチドである。特定の
実施形態では、ギャップ内のギャップ修飾（存在する場合）は、その標的核酸に結合した
ときに、ＲＮａｓｅ（ＲＮａｓｅ  Ｈが挙げられるがこれに限定されない）による切断を
支持するアンチセンス化合物をもたらす。
【０４１７】
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、一様なモノマー性結合を有する。特定のこのような実施形態では、これらの結合は全て
、ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態では、これらの結合は全て、ホスホジ
エステル結合である。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、混合型バックボーンを有する。
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は
、長さ８モノマーである。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、長さ９モノマーである。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１０モノマーである。特定の実施
形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１１モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、いくつかのモノマーの長さである。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１３モノマーである。特定の実施
形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１４モ
ノマーである。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセ
ンス化合物は、長さ１５モノマーである。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して
標的化された短鎖アンチセンス化合物は、長さ１６モノマーである。特定の実施形態では
、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、９〜１５モノマーを
含む。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合
物は、１０〜１５モノマーを含む。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４モノマーを含む。特定の実施形態では、Ｐ
ＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、１２〜１４のヌクレオチ
ドまたはヌクレオシドを含む。
【０４１８】
特定の実施形態では、本発明は、ＰＴＰ１Ｂの発現を調節する方法を提供する。特定の
実施形態では、このような方法は、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された１以上の短鎖ア
ンチセンス化合物の使用を包含し、ここで、ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖ア
ンチセンス化合物は、約８〜約１６モノマー、好ましくは９〜１５モノマー、より好まし
くは９〜１４モノマー、より好ましくは１０〜１４モノマー（すなわち、約８〜約１６の
連結されたモノマー）である。当業者は、このことが、８、９、１０、１１、１２、１３
、１４、１５または１６のモノマーのＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された１以上の短鎖
アンチセンス化合物を用いてＰＴＰ１Ｂの発現を調節する方法を包含することを理解する
。
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂを調節する方法は、長さ８モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態で
は、ＰＴＰ１Ｂを調節する方法は、長さ９モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂを調
節する方法は、長さ１０モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂを調節する方法は、長
さ１１モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使
用を包含する。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂを調節する方法は、長さ１２モノマーを
含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特
定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂを調節する方法は、長さ１３モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核
酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では
、ＰＴＰ１Ｂを調節する方法は、長さ１４モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化
された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂを調
節する方法は、長さ１５モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチ
センス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂを調節する方法は、長
さ１６モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使
用を包含する。
【０４１９】
特定の実施形態では、ＰＴＰ１Ｂの発現を調節する方法は、９〜１５モノマーを含むＰ
ＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実
施形態では、ＰＴＰ１Ｂの発現を調節する方法は、１０〜１５モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ
核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態で
は、ＰＴＰ１Ｂの発現を調節する方法は、１２〜１４モノマーを含むＰＴＰ１Ｂ核酸に対
して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。特定の実施形態では、ＰＴ
Ｐ１Ｂの発現を調節する方法は、１２または１４のヌクレオチドまたはヌクレオシドを含
むＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物の使用を包含する。
【０４２０】
１０．ＰＴＥＮ
特定の実施形態では、本発明は、ＰＴＥＮをコードする核酸に対して標的化された短鎖
アンチセンス化合物を提供する。特定の実施形態では、このような化合物は、細胞におけ
るＰＴＥＮの発現を調節するために使用される。特定のこのような実施形態では、ＰＴＥ
Ｎ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、動物に投与される。特定の実施
形態では、ＰＴＥＮ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、ＰＴＥＮの研
究のため、特定のヌクレアーゼの研究のため、そして／または、アンチセンス活性の評価
のために有用である。特定のこのような実施形態では、ＰＴＥＮ核酸に対して標的化され
た短鎖アンチセンス化合物は、特定のモチーフおよび／または化学的修飾を評価するため
に有用である。特定の実施形態では、ＰＴＥＮ核酸に対して標的化された短鎖アンチセン
ス化合物の動物への投与は、測定可能な表現型の変化をもたらす。
ＰＴＥＮを標的とする短鎖アンチセンス化合物は、本明細書中に一般的に記載される短
鎖アンチセンス化合物の任意の１以上の特性または特徴を有し得る。特定の実施形態では
、ＰＴＰ１Ｂ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物は、１−１２−１、１−１−１０
−２、２−１０−１−１、３−１０−３、２−１０−３、２−１０−２、１−１０−１、
１−１０−２、３−８−３、２−８−２、１−８−１、３−６−３または１−６−１、よ
り好ましくは１−１０−１、２−１０−２、３−１０−３および１−９−２から選択され
るモチーフ（ウィング−デオキシギャップ−ウィング）を有する。
【０４２１】
ＰＴＥＮ核酸に対して標的化された特定の短鎖アンチセンス化合物
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセ
ッション番号ＮＭ＿０００３１４．４（本明細書中に配列番号１４として引用される）の
配列を有するＰＴＥＮ核酸に対して標的化される。特定の実施形態では、短鎖アンチセン
ス化合物は、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセッション番号ＮＴ＿０３３８９０．３（
本明細書中に配列番号１５として引用される）の配列のヌクレオチド８０６３２５５〜８
１６７１４０の配列を有するＰＴＥＮ核酸に対して標的化される。特定のこのような実施
形態では、配列番号１４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１４
に対して少なくとも９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１４
に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１４に対して少なくとも９５
％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１５に対して標的化された短
鎖アンチセンス化合物は、配列番号１５に対して１００％相補的である。特定のこのよう
な実施形態では、配列番号１５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番
号１５に対して少なくとも９０％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番
号１５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１５に対して少なくと
も９５％相補的である。特定のこのような実施形態では、配列番号１５に対して標的化さ
れた短鎖アンチセンス化合物は、配列番号１５に対して１００％相補的である。
特定の実施形態では、配列番号１４に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、
表２０および２１に示されるヌクレオチド配列を含む。特定の実施形態では、配列番号１
５に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物は、表２２および２３に示されるヌクレ
オチド配列を含む。
【０４２２】
表２０、２１、２２および２３に示される各ヌクレオチド配列は、糖部分、ヌクレオシ
ド間結合または核酸塩基に対する任意の修飾とは無関係である。したがって、表２０、２
１、２２および２３に示されるヌクレオチド配列を含む短鎖アンチセンス化合物は、独立
して、糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩基に対する１以上の修飾を含み得る。Ｉ
ｓｉｓ番号（Ｉｓｉｓ  ＮＯ．）により説明されるアンチセンス化合物は、核酸塩基配列
と糖部分、ヌクレオシド間結合または核酸塩基に対する１以上の修飾との組み合わせを示
す。
【０４２３】
表２０は、配列番号１４に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。表
２２は、配列番号１５に対して１００％相補的な短鎖アンチセンス化合物を示す。「ギャ
ップマーのモチーフ」と題された欄は、各短鎖アンチセンス化合物のウィング−ギャップ
−ウィングモチーフを示す。ギャップセグメントは、２’−デオキシヌクレオチドを含み
、各ウィングセグメントの各ヌクレオチドは、２’−修飾糖を含む。特定の２’−修飾糖
もまた、ギャップマーのモチーフの欄に示される。例えば、「２−１０−２  ＭＯＥ」は
、２−１０−２のギャップマーモチーフであって、１０個の２’−デオキシヌクレオチド
のギャップセグメントの両側に、２つのヌクレオチドのウィングセグメントが配置され、
ここで、このウィングセグメントのヌクレオチドは、２’−ＭＯＥヌクレオチドであるこ
とを意味する。ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである。「非修飾シトシン」が
ギャップマーのモチーフの欄に列挙されない限り、短鎖アンチセンス化合物は、非修飾シ
トシンの代わりに５−メチルシチジンを含み、ギャップマーのモチーフの欄に「非修飾シ
トシン」が列挙される場合、示されるシトシンは非修飾シトシンである。例えば、「ギャ
ップ内にのみ５−ｍＣ」は、ギャップセグメントが５−メチルシトシンを有する一方で、
ウィングセグメントは非修飾シトシンを有することを示す。
【０４２４】
２’−修飾ヌクレオチドおよびその省略形としては、以下が挙げられる：２’−Ｏ−メ
トキシエチル（ＭＯＥ）；２’−Ｏ−メチル（ＯＭｅ）；２’−Ｏ−（２，２，３，３，
３−ペンタフルオロプロピル）（ＰｅｎｔａＦ）；２’−Ｏ−［（２−メトキシ）エチル
］−４’−チオ（２’−ＭＯＥ−４’−チオ）；（Ｒ）−ＣＭＯＥ−ＢＮＡ。表２０およ
び２２に示すように、ウィングは、２’置換のタイプより多くを含むモノマーを含み得る
。例えば、１−２−１０−２  ＭＯＥ／ＰｅｎｔａＦ／ＭＯＥは、１つのＭＯＥ−修飾ヌ
クレオチド、それに続く２つの２つのＰｅｎｔａＦ−修飾ヌクレオチド、それに続く１０
デオキシヌクレオチドのギャップ、それに続く２つのＰｅｎｔａＦ−修飾ヌクレオチドを
示す。例えば、１−１−１０−２  ２’−（ブチルアセトアミド（ｂｕｔｙｌａｃｅｔｏ
ｍｉｄｏ））−パルミタミドメチレンオキシＢＮＡ／メチレンオキシＢＮＡは、最も５’
側のヌクレオチドが２’−（ブチルアセトアミド）−パルミタミドであり、２番目のヌク
レオチドがメチレンオキシＢＮＡヌクレオチドであり、そして、３’ウィングがメチレン
オキシＢＮＡであることを示す。他に示されない限り、シトシンは５−メチルシトシンで
あり、そして、ヌクレオシド間結合はホスホロチオエートである。
【０４２５】
【表２３】
2014033674.tif 000104
2014033674.tif 000105
2014033674.tif 000106
2014033674.tif 000107
2014033674.tif 000108
【０４２６】
2014033674.tif 000109
2014033674.tif 000110
2014033674.tif 000111
2014033674.tif 000112
2014033674.tif 000113
2014033674.tif 000114
【０４２７】
【表２４】
2014033674.tif 000115
2014033674.tif 000116
2014033674.tif 000117
2014033674.tif 000118
2014033674.tif 000119
【０４２８】
2014033674.tif 000120
2014033674.tif 000121
2014033674.tif 000122
2014033674.tif 000123
2014033674.tif 000124
2014033674.tif 000125
2014033674.tif 000126
【０４２９】
塩、プロドラッグおよび生物学的等価体（ｂｉｏｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）
本明細書中に提供されるアンチセンス化合物は、任意の薬学的に受容可能な塩、エステ
ル、またはこのようなエステルの塩、あるいは、ヒトを含む動物に投与した際に生物学的
に活性な代謝産物またはその残基を（直接的または間接的に）提供し得る、任意の他の機
能的な化学等価体を含む。したがって、例えば、本開示はまた、アンチセンス化合物のプ
ロドラッグおよび薬学的に受容可能な塩、このようなプロドラッグの薬学的に受容可能な
塩、ならびに、他の生物学的等価体にも拡張される。
用語「プロドラッグ」は、不活性または活性が低い形態で調製され、体内またはその細
胞内で、内因性の酵素、化学物質および／または状態の作用により活性な形態（すなわち
、薬物）へと変換される治療因子を指す。具体的に、オリゴヌクレオチドのプロドラッグ
バージョンは、ＷＯ  ９３／２４５１０またはＷＯ  ９４／２６７６４に開示される方法
に従って、ＳＡＴＥ（（Ｓ−アセチル−２−チオエチル）ホスフェート）誘導体として調
製される。プロドラッグはまた、一方または両方の末端が核酸塩基（この核酸塩基は、（
例えば、末端にホスホジエステルバックボーン結合を組み込むことによって）切断されて
活性な化合物を生じる）を含む、アンチセンス化合物を含み得る。特定の実施形態では、
１以上の非薬物部分が、プロドラッグから切断されて、活性な形態を生じる。特定のこの
ような実施形態では、このような非薬物部分は、ヌクレオチドでもオリゴヌクレオチドで
もない。
用語「薬学的に受容可能な塩」は、本明細書中に記載される化合物の生理学的に重要な
塩および薬学的に受容可能な塩；すなわち、親化合物の所望の生物学的活性を保持し、こ
れに対して所望されない毒物学的作用を与えない塩、を指す。アンチセンスオリゴヌクレ
オチドのナトリウム塩は、ヒトに対する治療的な投与に有用であり、このような投与に対
し、都合よく適応される。
特定の実施形態では、二本鎖核酸（ｄｓＲＮＡ化合物が挙げられるがこれらに限定され
ない）の塩（ナトリウム塩が挙げられるがこれらに限定されない）もまた提供される。
【０４３０】
Ｇ．特定の薬学的組成物
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、１以上の短鎖アンチセンス化合物およ
び１以上の賦形剤を含む。特定のこのような実施形態では、賦形剤は、水、塩溶液、アル
コール、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミラーゼ、ステアリン酸マ
グネシウム、タルク、ケイ酸、粘性パラフィン、ヒドロキシメチルセルロースおよびポリ
ビニルピロリドンから選択される。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、公知の技術（溶解、造粒、糖衣錠作製
、研和（ｌｅｖｉｇａｔｉｎｇ）、カプセル化、エントラッピング（ｅｎｔｒａｐｐｉｎ
ｇ）または錠剤化プロセスが挙げられるがこれらに限定されない）を用いて調製される。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、液体（例えば、懸濁液、エリキシルお
よび／または溶液）である。特定のこのような実施形態では、液体薬学的組成物は、当該
分野で公知の成分（水、グリコール、油、アルコール、矯味矯臭剤、保存料および着色剤
が挙げられるがこれらに限定されない）を用いて調製される。
【０４３１】
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、固体（例えば、粉末、錠剤および／ま
たはカプセル）である。特定のこのような実施形態では、１以上のオリゴヌクレオチドを
含有する固体薬学的組成物は、当該分野で公知の成分（デンプン、糖、希釈剤、顆粒化剤
、滑沢剤、結合剤および法介在が挙げられるがこれらに限定されない）を用いて調製され
る。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、蓄積調製物（ｄｅｐｏｔ  ｐｒｅｐａ
ｒａｔｉｏｎ）として処方される。特定のこのようなデポー調製物は、代表的には、非蓄
積調製物よりも長く作用する。特定の実施形態では、このような調製物は、移植（例えば
、皮下または筋肉内）または筋肉内注射によって投与される。特定の実施形態では、蓄積
調製物は、適切なポリマー性もしくは疎水性材料（例えば、受容可能な油中のエマルジョ
ン）またはイオン交換樹脂を用いて、または、難溶性誘導体として（例えば、難溶性塩と
して）調製される。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、送達システムを含む。送達システムの
例としては、リポソームおよびエマルジョンが挙げられるがこれらに限定されない。特定
の送達システムは、特定の薬学的組成物（疎水性化合物を含有する組成物を含む）を調製
するための有用である。特定の実施形態では、ジメチルスルホキシドのような特定の有機
溶媒が使用される。
【０４３２】
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、本発明の１以上の薬学的因子を特定の
組織または細胞型に送達するように設計された１以上の組織特異的な送達分子を含有する
。例えば、特定の実施形態では、薬学的組成物は、組織特異的な抗体でコーティングされ
たリポソームを含む。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、共溶媒系を含む。特定のこのような共
溶媒系は、例えば、ベンジルアルコール、非極性界面活性剤、水混和性ポリマーおよび水
性相を含む。特定の実施形態では、このような共溶媒系は、疎水性化合物のために使用さ
れる。このような共溶媒系の非限定的な例は、ＶＰＤ共溶媒系であり、これは、３％ｗ／
ｖのベンジルアルコール、８％ｗ／ｖの非極性界面活性剤であるＰｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ
８０ＴＭおよび６５％ｗ／ｖのポリエチレングリコール３００を含有する無水エタノー
ルの溶液である。このような共溶媒系の割合は、その可溶性および毒性の特徴を有意に変
更することなく、かなり変化し得る。さらに、共溶媒の成分の同一性が変化し得る：例え
ば、他の界面活性剤が、Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ  ８０ＴＭの代わりに使用され得る；ポ
リエチレングリコールの分画サイズが変化し得る；他の生体適合性ポリマー（例えば、ポ
リビニルピロリドン）が、ポリエチレングリコールを置き換え得る；ならびに、他の糖ま
たは多糖が、デキストロースに取って代わり得る。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、持続放出システムを含む。このような
持続放出システムの非限定的な例は、固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスである。
特定の実施形態では、持続放出システムは、その化学的性質に依存して、数時間、数日間
、数週間または数ヶ月間の期間にわたり、薬学的因子を放出し得る。
【０４３３】
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、経口投与のために調製される。特定の
このような実施形態では、薬学的組成物は、１以上のオリゴヌクレオチドを１以上の薬学
的に受容可能なキャリアと合わせることによって処方される。特定のこのようなキャリア
は、薬学的組成物が、被験体による経口摂取のための錠剤、丸剤、糖衣錠、カプセル、液
体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして処方されることを可能にする。特定の
実施形態では、経口用の薬学的組成物は、オリゴヌクレオチドおよび１以上の固体賦形剤
を混合することによって得られる。適切な賦形剤としては、糖（乳糖、ショ糖、マンニト
ールまたはソルビトールを含む）のような充填剤；例えば、トウモロコシデンプン、小麦
デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガントガム、メチルセルロ
ース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース
および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）のようなセルロース調製物が挙げられる
がこれらに限定されない。特定の実施形態では、このような混合物は、必要に応じて、磨
り潰され、そして、補助物質（ａｕｘｉｌｉａｒｙ）が必要に応じて添加される。特定の
実施形態では、薬学的組成物は、錠剤または糖衣錠のコアを得るために形成される。特定
の実施形態では、崩壊剤（例えば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天もしくははアルギン
酸、またはアルギン酸ナトリウムのようなこれらの塩）が添加される。
【０４３４】
特定の実施形態では、糖衣錠のコアにはコーティングが施される。特定のこのような実
施形態では、濃縮糖溶液が使用され得、これは、必要に応じて、アラビアゴム、タルク、
ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコールおよび／または二酸
化チタン、ラカー溶液、ならびに、適切な有機溶媒もしくは溶媒混合物を含有し得る。染
料または色素が、錠剤または糖衣錠のコーティングに添加され得る。
特定の実施形態では、経口投与のための薬学的組成物は、ゼラチンから形成された滑り
嵌め（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセルである。特定のこのような滑り嵌めカプセルは、乳糖
のような１以上の充填剤、デンプンのような結合剤、および／または、タルクもしくはス
テアリン酸マグネシウムのような滑沢剤、ならびに、必要に応じて、安定化剤を含む混合
剤中に、１以上の本発明の薬学的因子を含有する。特定の実施形態では、経口投与のため
の薬学的組成物は、ゼラチンおよび可塑剤（例えば、グリセロールまたはソルビトール）
から作成された、密封された軟カプセルである。特定の軟カプセルにおいて、１以上の本
発明の薬学的因子は、適切な液体（例えば、脂肪性油、流動パラフィン、または液体ポリ
エチレングリコール）中に溶解または懸濁される。さらに、安定化剤が添加され得る。
特定の実施形態では、薬学的組成物は、バッカル投与（ｂｕｃｃａｌ  ａｄｍｉｎｉｓ
ｔｒａｔｉｏｎ）のために調製される。特定のこのような薬学的組成物は、従来の様式で
処方される錠剤またはロゼンジである。
【０４３５】
特定の実施形態では、薬学的組成物は、注射（例えば、静脈内、皮下、筋肉内など）に
よる投与のために調製される。特定のこのような実施形態では、薬学的組成物はキャリア
を含み、そして、水溶液（例えば、水またはＨａｎｋ溶液、Ｒｉｎｇｅｒ溶液または生理
食塩水のような生理学的に適合性の緩衝液）中に処方される。特定の実施形態では、他の
成分（例えば、溶解性を補助する成分または保存料としてはたらく成分）が含められる。
特定の実施形態では、注射可能な懸濁液が、適切な液体キャリア、懸濁剤などを用いて調
製される。注射のための特定の薬学的組成物は、単位投薬形態（例えば、アンプル）また
は複数の用量の容器で提供される。注射のための特定の薬学的組成物は、油性または水性
ビヒクル中の懸濁液、溶液もしくはエマルジョンであり、そして、懸濁剤、安定化剤およ
び／もしくは分散剤のような処方用の因子を含み得る。注射のための薬学的組成物におい
て使用するのに適した特定の溶媒としては、親油性溶媒および脂肪性油（例えば、ごま油
）、合成脂肪酸エステル（例えば、オレイン酸エチルまたはトリグリセリド）およびリポ
ソームが挙げられるがこれらに限定されない。水性注射用懸濁液は、懸濁液の粘性を増加
させる物質（例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ソルビトールまたはデキ
ストラン）を含み得る。必要に応じて、このような懸濁液はまた、適切な安定化剤、また
は薬学的因子の溶解性を増大させて、高度に濃縮された溶液の調製を可能にする因子を含
み得る。
特定の実施形態では、薬学的組成物は、経粘膜投与のために調製される。特定のこのよ
うな実施形態では、浸透されるバリアに適切な浸透性物質が処方に使用される。このよう
な浸透性物質は、一般に当該分野で公知である。
【０４３６】
特定の実施形態では、薬学的組成物は、吸入による投与のために調製される。吸入のた
めの特定のこのような薬学的組成物は、加圧パックまたは噴霧器中のエアロゾルスプレー
の形態で調製される。特定のこのような薬学的組成物は、圧縮不活性ガス（例えば、ジク
ロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二
酸化炭素または他の適切なガス）を含む。特定の実施形態では、加圧エアロゾルを使用す
る場合、投薬単位は、定量の用量を送達する弁で決定され得る。特定の実施形態では、吸
入器または散布器において使用するためのカプセルおよびカートリッジが処方され得る。
特定のこのような処方物は、本発明の薬学的因子と、乳糖またはデンプンのような適切な
粉末基剤との粉末混合物を含む。
特定の実施形態では、薬学的組成物は、直腸投与のために調製される（例えば、挫剤ま
たは貯留浣腸）。特定のこのような薬学的組成物は、カカオ脂および／または他のグリセ
リドのような公知の成分を含む。
【０４３７】
特定の実施形態では、薬学的組成物は、局所投与のために調製される。特定のこのよう
な薬学的組成物は、無刺激の湿潤基材（例えば、軟膏またはクリーム）を含む。例示的な
適切な軟膏基材としては、ワセリン、ワセリン＋揮発性シリコーン、ラノリン、およびＢ
ｅｉｅｒｓｄｏｒｆ（Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ，Ｏｈｉｏ）から入手可能なＥｕｃｅｒｉｎ
ＴＭのような油中水エマルジョンが挙げられるがこれらに限定されない。例示的な適切な
クリーム基材  としては、Ｂｅｉｅｒｓｄｏｒｆ（Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ，Ｏｈｉｏ）か
ら入手可能なＮｉｖｅａＴＭクリーム、コールドクリーム（ＵＳＰ）、Ｊｏｈｎｓｏｎ  
＆  Ｊｏｈｎｓｏｎ（Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，Ｎ．Ｊ．）から入手可能なＰｕｒｐ
ｏｓｅ  ＣｒｅａｍＴＭ、Ｐｆｉｚｅｒ（Ｍｏｒｒｉｓ  Ｐｌａｉｎｓ，Ｎ．Ｊ．）から
入手可能なＬｕｂｒｉｄｅｒｍＴＭが挙げられるがこれらに限定されない。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、治療上有効な量のオリゴヌクレオチド
を含む。特定の実施形態では、治療上有効な量は、疾患の症状を予防、軽減もしくは改善
するか、または、処置される被験体の生存を延長するのに十分である。治療上有効な量の
決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。
【０４３８】
特定の実施形態では、１以上の本発明の短鎖アンチセンス化合物は、プロドラッグとし
て処方される。特定の実施形態では、インビボ投与した際、プロドラッグは、短鎖アンチ
センス化合物の生物学的に、薬学的に、または、治療的により活性な形態へと化学的に変
換される。特定の実施形態では、プロドラッグは、対応する活性形態よりも投与が容易な
ので、有用である。例えば、特定の場合において、プロドラッグは、対応する活性形態よ
りも（例えば、経口投与を介した）バイオアベイラビリティが高くあり得る。特定の場合
において、プロドラッグは、対応する活性形態と比較して改善された溶解性を有し得る。
特定の実施形態では、プロドラッグは、対応する活性形態よりも水への溶解性が低い。特
定の場合において、このようなプロドラッグは、より優れた細胞膜通過性を有し、細胞膜
では、水への溶解性が移動性に対し不利益である。特定の実施形態では、プロドラッグは
エステルである。特定のこのような実施形態では、エステルは、投与した際に、カルボン
酸へと代謝により加水分解される。特定の場合において、カルボン酸を含有する化合物は
、対応する活性形態である。特定の実施形態では、プロドラッグは、酸性基に結合した短
いペプチド（ポリアミノ酸）を含む。特定のこのような実施形態では、ペプチドは、投与
した際に切断されて、対応する活性形態を形成する。
【０４３９】
特定の実施形態では、プロドラッグは、インビボ投与した際に活性な化合物が再生され
るように、薬学的に活性な化合物を修飾することによって生成される。プロドラッグは、
薬物の代謝安定性もしくは輸送特性を変更するため、副作用もしくは毒性を遮蔽するため
、薬物の風味を改良するため、または、薬物の他の特徴もしくは特性を変更するために設
計され得る。インビボにおける薬力学的プロセスおよび薬物代謝の知識に基づけば、一旦
薬学的に活性な化合物が公知となると、当業者は化合物のプロドラッグを設計し得る（例
えば、Ｎｏｇｒａｄｙ（１９８５）Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａ  Ｂｉ
ｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅ
ｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，３８８−３９２頁を参照のこと）。
【０４４０】
特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的因子を含有する薬学的組成物は、哺乳動
物（特に、ヒト）被験体における状態または障害を処置するために有用である。適切な投
与経路としては、経口、直腸、経粘膜、腸内（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ）、経腸（ｅｎｔｅ
ｒａｌ）、局所、挫剤、吸入、クモ膜下腔内、心室内、腹腔内、鼻腔内、眼内および非経
口（例えば、静脈内、筋肉内、骨髄内および皮下）が挙げられるがこれらに限定されない
。特定の実施形態では、クモ膜下腔内投与用の薬（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｉｎ
ｔｒａｔｈｅｃａｌ）は、全身への曝露ではなく、局所的な曝露を達成するように投与さ
れる。例えば、薬学的組成物は、所望の作用領域（例えば、腎臓領域または心臓領域）に
直接注射され得る。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、その親オリゴヌクレオチドと比較し
て、特に経口投与に適するようにされる。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物
は、その親オリゴヌクレオチドと比較して増大した効力を有するので、これらの親オリゴ
ヌクレオチドよりも経口投与により適している。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス
化合物は、その親オリゴヌクレオチドと比較してより良い安定性、アベイラビリティまた
は溶解性の特性を有するので、これらの親オリゴヌクレオチドよりも経口投与に適してい
る。
【０４４１】
さらなる局面では、薬学的因子は、適切な希釈剤（例えば、注射用の滅菌水）で再構成
される、滅菌の凍結乾燥されたオリゴヌクレオチドである。再構成された生成物は、生理
食塩水中に希釈した後、皮下注射として、または、静脈内注入として投与される。凍結乾
燥された薬物生成物は、調製中に酸または塩基でｐＨ７．０〜９．０に調整された注射用
水中で調製され、その後凍結乾燥されたオリゴヌクレオチドから構成される。この凍結乾
燥されたオリゴヌクレオチドは、２５〜８００ｍｇのオリゴヌクレオチドであり得る。こ
れは、２５ｍｇ、５０ｍｇ、７５ｍｇ、１００ｍｇ、１２５ｍｇ、１５０ｍｇ、１７５ｍ
ｇ、２００ｍｇ、２２５ｍｇ、２５０ｍｇ、２７５ｍｇ、３００ｍｇ、３２５ｍｇ、３５
０ｍｇ、３７５ｍｇ、４２５ｍｇ、４５０ｍｇ、４７５ｍｇ、５００ｍｇ、５２５ｍｇ、
５５０ｍｇ、５７５ｍｇ、６００ｍｇ、６２５ｍｇ、６５０ｍｇ、６７５ｍｇ、７００ｍ
ｇ、７２５ｍｇ、７５０ｍｇ、７７５ｍｇおよび８００ｍｇの凍結乾燥したオリゴヌクレ
オチドを包含することが理解される。凍結乾燥した薬物生成物は、ブロモブチルのゴム栓
で栓をし、そして、アルミニウムＦＬＩＰ−ＯＦＦ（登録商標）オーバーシールでシール
された、２ｍＬのＩ型の透明なガラスバイアル（硫酸アンモニウム処理）中に入れられ得
る。
【０４４２】
本発明の組成物は、さらに、当該分野で確立された使用レベルの、薬学的組成物中に従
来見られる他の補助成分を含み得る。したがって、例えば、組成物は、追加の適合性があ
る薬学的に活性な物質（例えば、鎮痒剤、収斂剤、局所麻酔薬または抗炎症剤など）を含
んでいても、本発明の種々の投薬形態を物理的に処方する際に有用な追加の物質（色素、
矯味矯臭剤、保存料、抗酸化剤、不透明化剤、増粘剤および安定化剤など）を含んでいて
も良い。しかし、このような物質は、添加される場合、本発明の組成物の成分の生物学的
活性と過度に干渉しないべきである。処方物は、滅菌され得、そして、所望される場合、
処方物のオリゴヌクレオチドと有害に干渉しない補助因子（例えば、滑沢剤、保存料、安
定化剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩、緩衝液、着色料、矯味矯臭料および
／または芳香物質など）と混合され得る。
【０４４３】
本明細書中に提供されるアンチセンス化合物はまた、他の分子、分子構造体もしくは化
合物の混合物と、混合、カプセル化、結合、または、他の方法で関連付けられ得る。
また、本明細書中には、本明細書中に提供されるアンチセンス化合物を含む薬学的組成
物および処方物が記載される。薬学的組成物は、局所性または全身性の処置が所望されて
いるかどうか、そして、処置される領域に依存して、多数の方法で投与され得る。好まし
い実施形態では、投与は、呼吸器管（特に、肺）の表面に、例えば、粉末もしくはエアロ
ゾルの噴霧、吸入または散布によって、口および／または鼻によって、局所的になされる
。
簡便には単位投薬形態で提供され得る、本明細書中に記載される薬学的処方物は、製薬
産業において周知の従来技術に従って調製され得る。このような技術は、活性な成分を薬
学的なキャリアまたは賦形剤と会合させる工程を包含する。一般に、処方物は、活性成分
を、液体キャリア、微粉化された固体キャリアまたはその両方と均一かつ密接に会合させ
、次いで、必要に応じて、生成物を（例えば、送達のための特別な粒子サイズへと）成形
することによって調製される。好ましい実施形態では、薬学的処方物は、キャリアまたは
他の因子を用いて、適切な溶媒（例えば、水または通常の生理食塩水）中、可能であれば
、滅菌処方物中で、肺投与のために調製されて、吸入器、経鼻送達デバイス、噴霧器およ
び肺送達のための他のデバイスを用いた送達のために所望される直径の液滴の形成を可能
にする。あるいは、薬学的処方物は、乾燥粉末吸入器において使用するためのドライパウ
ダーとして処方され得る。
「薬学的なキャリア」または「賦形剤」は、１以上の核酸を個体に送達するための薬学
的に受容可能な溶媒、懸濁剤、または任意の他の薬理学的に不活性なビヒクルであり得、
そして、当該分野で公知である。賦形剤は、液体または固体であり得、そして、核酸およ
び所定の薬学的組成物の他の成分と組み合わされる場合に、所望される容積、粘度（ｃｏ
ｎｓｉｓｔｅｎｃｙ）などを提供するように、心に決めた投与様式に従って選択される。
【０４４４】
Ｈ．特定の治療上の用途
特定の実施形態では、アンチセンス化合物は、動物（例えば、ヒト）における標的遺伝
子の発現を調節するために使用される。特定の実施形態ではこのような化合物は、代謝障
害を処置するため、または、１以上の疾患の徴候を調節するために使用され得る。例えば
、この方法は、標的遺伝子に関連する疾患または状態の治療を必要とする上記動物に対し
て、この標的遺伝子の発現を調節するアンチセンス化合物の有効量を投与する工程を包含
する。標的ＲＮＡの発現または発現のタンパク質生成物を効率的に調節する、本明細書中
に提供されるアンチセンス化合物は、有効なアンチセンス化合物とみなされる。有効なア
ンチセンス化合物はまた、多数の疾患の徴候（例えば、代謝および心臓血管系の疾患の徴
候、この例は、以下に記載される）のうち１以上を効率的に調節する化合物を含む。
【０４４５】
標的遺伝子の発現の調節は、動物の細胞；組織；または器官を含んでいても含んでいな
くてもよい体液において測定され得る。体液（例えば、唾液、血清、尿）、組織（例えば
、生検）または器官のような解析のためのサンプルを得る方法、および、サンプルを解析
可能に調製する方法は、当業者に周知である。ＲＮＡおよびタンパク質のレベルを解析す
るための方法は、上述されており、当業者に周知である。処置の効果は、当該分野で慣用
的な臨床上の方法により、バイオマーカーもしくは疾患の徴候（動物から回収され、本明
細書中に記載される１以上の化合物と接触させられた上述の体液、組織もしくは器官にお
いて標的遺伝子の発現と関連付けられる）を測定することによって評価され得る。これら
のバイオマーカーとしては、肝トランスアミナーゼ、ビリルビン、アルブミン、血中尿素
窒素、クレアチン、ならびに腎機能および肝機能の他のマーカー；インターロイキン、腫
瘍壊死因子、細胞間接着分子、Ｃ反応性タンパク質、ケモカイン、サイトカインおよび他
の炎症マーカーが挙げられるがこれらに限定されない。
【０４４６】
本明細書中に提供されるアンチセンス化合物は、有効量の化合物を、適切な薬学的に受
容可能な希釈剤またはキャリアに加えることによって、薬学的組成物中で利用され得る。
需要可能なキャリアおよび希釈剤は、当業者に周知である。希釈剤またはキャリアの選択
は、多数の要因（化合物の溶解性および投与経路が挙げられるがこれらに限定されない）
に基づく。このような考慮は、十分に当業者により理解される。一局面では、本明細書中
に記載されるアンチセンス化合物は、標的遺伝子の発現を阻害する。化合物はまた、標的
遺伝子に関連する疾患および障害の処置のための医薬の製造において使用され得る。
体液、器官または組織を、本明細書中に提供される１以上のアンチセンス化合物または
組成物の有効量と接触させる方法もまた企図される。体液、器官または組織は、１以上の
上記化合物と接触させられ、体液、器官または組織の細胞における標的遺伝子の発現の調
節をもたらし得る。有効な量は、当業者にとって慣用的な方法により、標的核酸またはそ
の産物に対する、アンチセンス化合物もしくは組成物の調節作用をモニタリングすること
によって決定され得る。
【０４４７】
同時投与
特定の実施形態では、２以上のアンチセンス化合物が同時に投与される。特定の実施形
態では、薬学的組成物は、第１の核酸に対して標的化された１以上のアンチセンス化合物
（特に、オリゴヌクレオチド）と、第２の核酸標的に対して標的化された１以上のアンチ
センス化合物とを含む。１以上のこれらのアンチセンス化合物は、短鎖アンチセンス化合
物であり得る。特定の実施形態では、薬学的組成物は、同じ核酸標的の異なる領域に対し
て標的化された２以上のアンチセンス化合物を含む。１以上のこのようなアンチセンス化
合物は、短鎖アンチセンス化合物であり得る。２以上の組み合わされた化合物は、一緒に
、または、連続して使用され得る。
【０４４８】
特定の実施形態では、１以上の薬学的組成物は、１以上の他の薬学的因子と同時に投与
される。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の
薬学的組成物と同じ疾患または状態を処置するように設計される。特定の実施形態では、
このような１以上の他の薬学的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物と異なる疾患また
は状態を処置するように設計される。特定の実施形態では、このような１以上の他の薬学
的因子は、１以上の本発明の薬学的組成物の望ましくない作用を処置するように設計され
る。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物は、その他の薬学的因子の望ま
しくない作用を処置するために、別の薬学的因子と同時に投与される。特定の実施形態で
は、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、同時に投与される
。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは
、異なる時点で投与される。特定の実施形態では、１以上の本発明の薬学的組成物と、１
以上の他の薬学的因子とは、単一の処方物内で一緒に調製される。特定の実施形態では、
１以上の本発明の薬学的組成物と、１以上の他の薬学的因子とは、別々に調製される。
【０４４９】
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子としては
、脂質低下剤が挙げられる。特定のこのような実施形態では、本発明の薬学的組成物と同
時に投与され得る薬学的因子としては、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタ
チンおよびエゼチミブが挙げられるがこれらに限定されない。特定のこのような実施形態
では、脂質低下剤は、本発明の薬学的組成物の投与の前に投与される。特定のこのような
実施形態では、脂質低下剤は、本発明の薬学的組成物の投与の後に投与される。特定のこ
のような実施形態では、脂質低下剤は、本発明の薬学的組成物と同時に投与される。特定
のこのような実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で
投与された場合に投与される用量と同じである。特定のこのような実施形態では、同時に
投与される脂質低下剤の用量は、脂質低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よ
りも少ない。特定のこのような実施形態では、同時に投与される脂質低下剤の用量は、脂
質低下剤が単独で投与される場合に投与される用量よりも多い。
【０４５０】
特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼイ
ンヒビターである。特定のこのような実施形態では、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒ
ビターは、スタチンである。特定のこのような実施形態では、スタチンは、アトルバスタ
チン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチンおよびロスバスタチンから選択
される。特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、コレステロール吸収阻害
薬である。特定のこのような実施形態では、コレステロール吸収阻害薬は、エゼチミブで
ある。特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、同時に処方されるＨＭＧ−
ＣｏＡレダクターゼインヒビターおよびコレステロール吸収阻害薬である。特定のこのよ
うな実施形態では、同時に処方される脂質低下剤は、エゼチミブ／シンバスタチンである
。特定の実施形態では、同時に投与される脂質低下剤は、ミクロソームトリグリセリド転
移タンパク質インヒビターである。
【０４５１】
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、胆汁酸金属イオン封鎖剤である
。特定のこのような実施形態では、胆汁酸金属イオン封鎖剤は、コレスチラミン、コレス
チポールおよびコレセベラムから選択される。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、ニコチン酸である。特定のこの
ような実施形態では、ニコチン酸は、即時放出性ニコチン酸、延長放出性ニコチン酸およ
び持続放出性ニコチン酸から選択される。
特定の実施形態では、同時に投与される薬学的因子は、フィブリン酸である。特定のこ
のような実施形態では、フィブリン酸は、ゲムフィブロジル、フェノフィブラート、クロ
フィブラート、ベザフィブラートおよびシプロフィブラートから選択される。
本発明の薬学的組成物と同時に投与され得る薬学的因子のさらなる例としては、以下が
挙げられるがこれらに限定されない：コルチコステロイド（プレドニゾンが挙げられるが
これに限定されない）；免疫グロブリン（静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩｇ）が挙げられ
るがこれに限定されない）；鎮痛剤（例えば、アセトアミノフェン）；抗炎症剤（非ステ
ロイド性抗炎症薬（例えば、イブプロフェン、ＣＯＸ−１インヒビターおよびＣＯＸ−２
インヒビター）が挙げられるがこれらに限定されない）；サリチル酸；抗生物質；抗ウイ
ルス薬；抗真菌剤；抗糖尿病剤（例えば、ビグアナイド、グルコシダーゼ阻害剤、インシ
ュリン、スルホニル尿素およびチアゾリジンジオン）；アドレナリン作動性修飾物質；利
尿薬；ホルモン（例えば、同化性ステロイド、アンドロゲン、エストロゲン、カルシトニ
ン、プロゲスチン、ソマトスタチンおよび甲状腺ホルモン）；免疫調節因子；筋弛緩剤；
抗ヒスタミン薬；骨粗しょう症剤（例えば、ビホスホネート、カルシトニンおよびエスト
ロゲン）；プロスタグランジン、抗新生物剤；精神療法剤；鎮静薬；ウルシ属の非常に有
毒な低木の生成物；抗体；およびワクチン。
特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物は、脂質低下治療と組み合わせて施され得
る。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療は、治療的なライフスタイルの変化で
ある。特定のこのような実施形態では、脂質低下治療は、ＬＤＬアフェレーシスである。
【０４５２】
Ｉ．キット、研究用試薬および診断
本明細書中に提供されるアンチセンス化合物は、診断に、そして研究試薬およびキット
として利用され得る。さらに、特異性をもって遺伝子発現を阻害するか、または、遺伝子
発現を調節することが可能なアンチセンス化合物は、しばしば、特定の遺伝子の機能を解
明するため、または、生物学的な経路の種々のメンバーの機能間を区別するために、当業
者により使用される。
キットおよび診断における使用について、本明細書中に記載されるアンチセンス化合物
は、単独または他の化合物もしくは治療薬との組み合わせのいずれであれ、細胞および組
織内で発現される遺伝子の一部または全相補体の発現パターンを解明するための、微分解
析および／または組み合わせ解析におけるツールとして使用され得る。遺伝子発現解析の
方法は当業者に周知である。
【０４５３】
Ｊ．短鎖アンチセンス化合物の特定の利点
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、その親オリゴヌクレオチドと比較し
たときに、利点を有する。例えば、特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、標
的核酸に対して、その親オリゴヌクレオチドよりも高い親和性を有する。特定の実施形態
では、短鎖アンチセンス化合物は、その親オリゴヌクレオチドよりも高いインビトロでの
効力を有する。特定のこのような実施形態では、インビトロでの効力の増加は、親和性の
増加によっては完全には説明されない。特定の実施形態では、このようなインビトロでの
効力の増加は、短鎖アンチセンス化合物の細胞透通能の増加、および／または、細胞内の
標的核酸にアクセスする能力の増加に寄与し得る。特定の実施形態では、短鎖アンチセン
ス化合物は、その親オリゴヌクレオチドよりも高いインビボでの効力を有する。特定の実
施形態では、このようなより大きなインビボでの効力は、インビトロでの効力の増加また
は親和性の増加には寄与しない。特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、その
親オリゴヌクレオチドと比較したとき、インビトロでの効力または親和性に基づいて予測
されるよりもなおより大きなインビボでの効力を有する。特定の実施形態では、このよう
なインビボでの効力の増加は、バイオアベイラビリティの増加、良好な細胞内への透通、
（一度細胞内に入れば）標的核酸に対する良好なアクセス、または、他の要因に寄与し得
る。
【０４５４】
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物は、その親オリゴヌクレオチドと比較し
た場合に、その標的核酸に対して特異性がより低いことが予想される。特定のこのような
実施形態では、短鎖アンチセンス化合物からの副作用（毒性作用の可能性を含む）の増加
が予想される。特定の実施形態では、このような追加の副作用は観察されない。特定の実
施形態では、特定の短鎖アンチセンス化合物が結合し得る非標的核酸は、上記短鎖アンチ
センス化合物に対しては利用可能ではない可能性がある。このような実施形態では、副作
用（毒性を含む）は、予想されるよりも問題とならない。
特定の実施形態では、短鎖アンチセンス化合物がより小さいので、短鎖アンチセンス化
合物は、タンパク質と結合する可能性が低い。特定のこのような実施形態では、このよう
なタンパク質への少ない結合は、より低い毒性をもたらす。なぜならば、タンパク質の結
合は、所望されない結果をもたらし得るからである。特定の実施形態では、このようなタ
ンパク質への少ない結合は、より高い効力をもたらす。なぜならば、タンパク質への結合
が少ないことで、治療効果に利用可能なアンチセンス化合物をより多く残すからである。
特定の実施形態では、タンパク質への少ない結合は、薬物−薬物相互作用の毒性の低下を
もたらす。
【０４５５】
非限定的な開示と参考としての援用
本明細書中に記載される特定の化合物、組成物および方法は、特定の実施形態に従って
具体的に記載されてはいるものの、以下の実施例は、本明細書中に記載される化合物を単
に例示するものとして機能し、本明細書中に記載される化合物を限定することは意図され
ない。本願で列挙される参考文献、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号などは各々、その
全体が本明細書中に参考として援用される。
【実施例】
【０４５６】
実施例１：
細胞培養および短鎖アンチセンス化合物での処理
標的核酸の発現に対する短鎖アンチセンス化合物の効果は、多数の培養細胞株または初
代細胞株のいずれか１つにおいて試験され得る。細胞株は、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ
Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）のような公的に利
用可能な供給源から得られ得る。細胞は、当業者に周知の方法に従って培養する。
細胞が適切なコンフルエンシーに達したときに、細胞を、記載されるようにして、ＬＩ
ＰＯＦＥＣＴＩＮ（登録商標）を用いてオリゴヌクレオチドで処理した。細胞が６５〜７
５％のコンフルエンシーに達したときに、細胞をオリゴヌクレオチドで処理した。オリゴ
ヌクレオチドを、Ｏｐｔｉ−ＭＥＭ（登録商標）−１低血清培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）中でＬＩＰＯＦＥＣ
ＴＩＮ（登録商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃ
ａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）と混ぜ、オリゴヌクレオチド１００ｎＭあたり２．５μｇ／ｍＬ
または３μｇ／ｍＬの濃度の、オリゴヌクレオチドおよびＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ（登録商
標）の所望される濃度を得た。このトランスフェクション混合物を室温で約０．５時間イ
ンキュベートした。９６ウェルプレート中で増殖させた細胞について、ウェルを１００μ
ＬのＯＰＴＩ−ＭＥＭ（登録商標）−１で１回洗浄し、次いで、１３０μＬのトランスフ
ェクション混合物で処理した。２４ウェルプレートまたは他の標準的な組織培養プレート
において増殖させた細胞を、適切な容量の培地およびオリゴヌクレオチドを用いて同様に
処理した。二連または三連で、細胞を処理し、そして、データを得た。３７℃で約４〜７
時間処理した後、トランスフェクション混合物を含む培地を、新しい培養培地と交換した
。オリゴヌクレオチド処理の１６〜２４時間後に細胞を回収した。
コントロールのオリゴヌクレオチドを用いて、特定の細胞株についての最適なオリゴマ
ー性化合物の濃度を決定する。さらに、オリゴマー性化合物を、オリゴマー性化合物のス
クリーニング実験または表現型アッセイにおいて試験する場合、コントロールのオリゴヌ
クレオチドを平行して試験する。
【０４５７】
使用されるオリゴヌクレオチドの濃度は、細胞株毎に異なる。特定の細胞株についての
最適なオリゴヌクレオチドの濃度を決定するために、細胞を、ある範囲の濃度のポジティ
ブコントロールのオリゴヌクレオチドで処理する。標的ｍＲＮＡの８０％阻害をもたらす
ポジティブコントロールのオリゴヌクレオチドの濃度を、次に、その細胞株についてのそ
の後の実験における新しいオリゴヌクレオチドのスクリーニング濃度として利用する。８
０％阻害が達成されない場合、今度は、標的ｍＲＮＡの６０％阻害をもたらすポジティブ
コントロールのオリゴヌクレオチドの最低濃度を、その細胞株についてのその後の実験に
おけるオリゴヌクレオチドのスクリーニング濃度として利用する。６０％阻害が達成され
ない場合、その特定の細胞株は、オリゴヌクレオチドトランスフェクション実験には不適
切であるとみなす。本明細書中で使用されるアンチセンスオリゴヌクレオチドの濃度は、
そのアンチセンスオリゴヌクレオチドが、リポソーム試薬を用いてトランスフェクトされ
る場合には、５０ｎＭ〜３００ｎＭであり、そのアンチセンスオリゴヌクレオチドがエレ
クトロポレーションによりトランスフェクトされる場合には、１ｎＭ〜４０ｎＭである。
【０４５８】
実施例２：標的ｍＲＮＡレベルのリアルタイム定量的ＰＣＲ解析
標的ｍＲＮＡレベルの定量を、ＡＢＩ  ＰＲＩＳＭ（登録商標）７６００、７７００ま
たは７９００  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＰＥ−Ａｐｐｌ
ｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）を製造業者の説明書に
従って用いる、リアルタイム定量的ＰＣＲにより行った。
定量的ＰＣＲ解析の前に、測定される標的遺伝子に対して特異的なプライマー−プロー
ブのセットを、ＧＡＰＤＨ増幅反応と「複合化される（ｍｕｌｔｉｐｌｅｘｅｄ）」能力
について評価した。単離した後、ＲＮＡを、連続的な逆転写酵素（ＲＴ）反応およびリア
ルタイムＰＣＲ（これらは共に、同じウェル内で行う）に供する。ＲＴおよびＰＣＲの試
薬は、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｃａｒｌｓｂａｄ
，ＣＡ）から入手した。３０μＬの総ＲＮＡ溶液（２０〜２００ｎｇ）を含む９６ウェル
プレートに、２０μＬのＰＣＲカクテル（２．５ｘＰＣＲ緩衝液（ＭｇＣｌ２なし）、６
．６ｍＭ  ＭｇＣｌ２、各３７５μＭのｄＡＴＰ、ｄＣＴＰ、ｄＣＴＰおよびｄＧＴＰ、
各３７５ｎＭのフォワードプライマーおよびリバースプライマー、１２５ｎＭのプローブ
、４単位のＲＮＡｓｅインヒビター、１．２５単位のＰＬＡＴＩＮＵＭ（登録商標）Ｔａ
ｑ、５単位のＭｕＬＶ逆転写酵素、ならびに２．５ｘＲＯＸ色素）を加えることによって
、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲを、同じウェル内で行った。ＲＴ反応を、４８℃にて３０分
間行った。９５℃で１０分間インキュベートしてＰＬＡＴＩＮＵＭ（登録商標）Ｔａｑを
活性化させた後、４０サイクルの以下の２段階ＰＣＲプロトコルを行った：９５℃で１５
秒間（変性）、その後、６０℃で１．５分間（アニーリング／伸長）。
【０４５９】
ＲＴ、リアルタイムＰＣＲにより得られる遺伝子標的の量を、ＧＡＰＤＨ（その発現が
一定である遺伝子）の発現レベルを用いるか、または、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎ（登録商標）
（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を用いて総ＲＮＡ
を定量化することによって正規化した。ＧＡＰＤＨの発現を、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲ
により、標的と同時に、複合化して、または、別々に実行することによって定量化した。
ＲｉｂｏＧｒｅｅｎ（登録商標）ＲＮＡ定量化試薬（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ
，Ｉｎｃ．Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を用いて、総ＲＮＡを定量化した。
１７０μＬのＲｉｂｏＧｒｅｅｎ（登録商標）作業試薬（ｗｏｒｋｉｎｇ  ｒｅａｇｅ
ｎｔ）（１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ７．５中１：３５０に希
釈したＲｉｂｏＧｒｅｅｎ（登録商標）試薬）を、ピペットで、３０μＬの精製した細胞
ＲＮＡを含む９６ウェルプレートに入れた。プレートを、４８５ｎｍの励起および５３０
ｎｍの放射で、ＣｙｔｏＦｌｕｏｒ（登録商標）４０００（ＰＥ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉ
ｏｓｙｓｔｅｍｓ）において読み取った。
【０４６０】
ＧＡＰＤＨ  ＰＣＲプローブは、５’末端に共有結合されたＪＯＥと、３’末端に共有
結合されたＴＡＭＲＡまたはＭＧＢとを有し、ＪＯＥは、蛍光レポーター色素であり、Ｔ
ＡＭＲＡまたはＭＧＢは、クエンチャー色素である。いくつかの細胞型において、異なる
種に由来するＧＡＰＤＨ配列に対して設計されたプライマーおよびプローブを、ＧＡＰＤ
Ｈの発現を測定するために使用する。例えば、ヒトＧＡＰＤＨプライマーおよびプローブ
のセットを、サルに由来する細胞および細胞株におけるＧＡＰＤＨの発現を測定するため
に使用する。
リアルタイムＰＣＲにおいて使用するためのプローブおよびプライマーは、慣用的な方
法を用いて標的核酸に対してハイブリッド形成するように設計した。例えば、慣用的に、
ＰｒｉｍｅｒＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆ
ｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ）ソフトウェアを用いて、リアルタイムＰＣＲにおいて使用
するためのプローブおよびプライマーを設計する。プライマーおよびプローブの配列、な
らびに、これらがハイブリッド形成する標的核酸の例を表２４に示す。標的特異的なＰＣ
Ｒプローブは、５’末端に共有結合されたＦＡＭと、３’末端に共有結合されたＴＡＭＲ
ＡまたはＭＧＢとを有し、ＦＡＭは、蛍光色素であり、ＴＡＭＲＡまたはＭＧＢはクエン
チャー色素である。
【０４６１】
【表２５】
2014033674.tif 000127
【０４６２】
実施例３：ＡｐｏＢ核酸に対して標的化され、２’−ＭＯＥまたはメチレンオキシ（４
’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を有する短鎖アンチセンス化合物
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、３週間にわたり、１週につき２回の頻度で、ＡｐｏＢに対して
標的化されたアンチセンス化合物を腹腔内（ｉ．ｐ．）注射した。アンチセンス化合物の
用量には、２．４μｍｏｌ／ｋｇ、１．２μｍｏｌ／ｋｇ、０．６μｍｏｌ／ｋｇ、０．
３μｍｏｌ／ｋｇおよび０．１５μｍｏｌ／ｋｇを含めた。長さ１４ヌクレオチドのアン
チセンス化合物について、これらの用量は、それぞれ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋ
ｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇまたは約０．７５ｍｇ／ｋｇと同等である。表
２５には、この研究において使用したアンチセンス化合物の配列およびモチーフを示す。
アンチセンス化合物は、長さ２０ヌクレオチドまたは１４ヌクレオチドのいずれかであり
、そして、２’−Ｏ−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）を有するウィングまたはＢＮＡ修
飾された「ウィング」が両側に配置された、１０の２’−デオキシヌクレオチドから構成
される、中央の「ギャップ」領域を有する。例えば、２−１０−２  ＭＯＥギャップマー
のモチーフは、２’−ＭＯＥ修飾を持つ２ヌクレオチドのウィングが両側に配置された１
０のヌクレオチドのギャップを持つアンチセンス化合物を示す。太字の残基は、２’−Ｏ
−メトキシエチル部分を示し、そして、斜体の残基は、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−
Ｏ−２’）ＢＮＡを示す。各化合物のヌクレオシド間結合は、全体を通してホスホロチオ
エートである。ＩＳＩＳ  １４７７６４およびＩＳＩＳ  ３７２９３８のシトシン残基は
全て、５−メチルシトシンで置き換えられる。ＩＳＩＳ  ３８７４６２について、この化
合物のウィング内の唯一のシトシン残基は、５−メチルシトシンで置き換えられる。Ａｐ
ｏＢアンチセンス化合物は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＸＭ＿１３７９５５．５
（配列番号２）を含む、公的に利用可能なＡｐｏＢ−１００配列に対して標的化される。
【０４６３】
【表２６】
2014033674.tif 000128
【０４６４】
最後の注射から４８時間後に、マウスを屠殺して、トランスアミナーゼ（表２６）；肝
臓および腎臓の重量（表２７）；トリグリセリド、ＬＤＬ、ＨＤＬおよび遊離脂肪酸のレ
ベル（表２８）；肝臓における標的ｍＲＮＡレベル（表２９）；血漿中の標的タンパク質
レベル；ならびにオリゴヌクレオチドの組織における濃度（表３０）を評価した。これら
のエンドポイントは、本明細書中に記載され、かつ当業者に周知の方法を用いて決定した
。
【０４６５】
【表２７】
2014033674.tif 000129
【０４６６】
【表２８】
2014033674.tif 000130
【０４６７】
総体重および食料消費は、血清処置した動物またはオリゴヌクレオチド処置した動物と
の間で有意には異ならなかった。グルコースレベルもまた、全ての処置群の間で同様であ
った。
【０４６８】
【表２９】
2014033674.tif 000131
【０４６９】
【表３０】
2014033674.tif 000132
【０４７０】
ＩＳＩＳ  ３８７４６２での処置は、トリグリセリド、総コレステロール、ＨＤＬ、Ｌ
ＤＬおよび脂肪酸における有意かつ用量依存性の減少をもたらした。これらの表現型の知
見によれば、ＩＳＩＳ  ３８７４６２での処置はまた、マウス血漿におけるＡｐｏＢのｍ
ＲＮＡ（表２９）およびタンパク質（示さず）のレベルの用量依存性の減少ももたらした
。メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡギャップマーを用いた場合の効率の
この観察された増加が、オリゴヌクレオチド蓄積の増加に起因するものであるかどうかを
決定するために、肝臓および腎臓における全長オリゴヌクレオチドおよび総オリゴヌクレ
オチドの濃度を決定した。
【０４７１】
【表３１】
2014033674.tif 000133
【０４７２】
２−１０−２  メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡギャップマーのレベ
ルは、腎臓においては、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーおよび２−１０−２  ＭＯＥ
ギャップマーと同様であったが、肝臓においては有意に減少していた。肝臓におけるＩＳ
ＩＳ  ３８７４６２についてのＥＣ５０を、肝臓におけるオリゴヌクレオチド濃度をＡｐ
ｏＢ  ｍＲＮＡの阻害に対して比較することによって決定した。ＩＳＩＳ  ３８７４６２
についてのおよそのＥＣ５０は、１μＭである。対照的に、有効な５−１０−５  ＭＯＥ
ギャップマー化合物は、代表的に、肝臓において、約１５μＭのＥＣ５０を有する。
【０４７３】
総合すると、これらの結果は、ウィング内にメチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’
）を有するＡｐｏＢの短鎖ギャップマーが、標的ｍＲＮＡ発現の強力なインヒビターであ
り、そして、トリグリセリド、コレステロールおよび遊離脂肪酸を効率的に低下させ得る
ことを示す。この短鎖アンチセンス化合物の効力は、組織への蓄積の増加の結果ではない
ようである。というのも、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーに関して、同様のレベルの
化合物が腎臓において観察され、そして、肝臓においては、レベルの低下が見られたから
である。さらに、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡギャップマーは、有
害な副作用をほとんど示さなかったか、全く示さなかった。
【０４７４】
実施例４：ＧＣＧＲ核酸に対して標的化され、２’−ＭＯＥ修飾を有する短鎖アンチセ
ンス化合物
８週齢の雄性Ｃ５７／ＢＬ６マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、６．２５ｍｇ、１２．５ｍｇ、２５ｍｇまたは５０ｍｇの濃
度のＧＣＧＲオリゴヌクレオチドの単回用量を腹腔内注射により投与した。各用量の群を
、４匹の動物から構成した。表３１には、この研究において使用したＧＣＧＲアンチセン
ス化合物の配列、モチーフおよび共役基を示す。太字の残基は、２’−Ｏ−メトキシエチ
ル（２’−ＭＯＥ）部分を示す。化合物は全て、全体を通してホスホロチオエートヌクレ
オシド間結合を含み、そして、各シトシンは、５−メチルシトシンで置き換えられる。Ｉ
ＳＩＳ  ３８６６２６、ＩＳＩＳ  ３８６６２７およびＩＳＩＳ  ３８６６２８はさらに
、ジアミド結合を介して糖の２’−Ｏ位に結合されるＣ１６結合基（２’−ＯＣＨ２Ｃ（
＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）（ＣＨ２）４Ｎ（Ｈ）Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ２）１５ＣＨ３）を含む。ＧＣ
ＧＲアンチセンス化合物は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０３１８８５．１（
配列番号７）を含む、公開されたＧＣＧＲ配列を標的とする。
【０４７５】
【表３２】
2014033674.tif 000134
【０４７６】
注射から４８時間後にマウスを屠殺して、血清トランスアミナーゼレベル（表３２）；
肝臓、白色脂肪組織（ＷＡＴ）、脾臓および腎臓の重量（表３３）；コレステロール、ト
リグリセリドおよびグルコースのレベル（表３４）；ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡレベル（表３５
〜４１）；ならびに、肝臓および腎臓における全長オリゴヌクレオチドおよび総オリゴヌ
クレオチドの濃度（表４２）を決定した。これらのエンドポイントは、本明細書中に記載
され、かつ当業者に周知の方法を用いて評価した。データには、処置前の瀉血（Ｐｒｅ−
Ｂｌｅｅｄ）および処置後の瀉血（Ｐｏｓｔ−Ｂｌｅｅｄ）からのデータを含める。
【０４７７】
【表３３】
2014033674.tif 000135
【０４７８】
【表３４】
2014033674.tif 000136
【０４７９】
全体として、ＧＣＧＲアンチセンス化合物は、有害な副作用をほとんど示さなかったか
、全く示さなかった。
【０４８０】
【表３５】
2014033674.tif 000137
【０４８１】
ＧＣＧＲの２−１０−２  ＭＯＥギャップマーは、５−１０−５  ＭＯＥギャップマー
と比較して、より低い処置後の瀉血のトリグリセリドレベルに向かう傾向を示し、ＩＳＩ
Ｓ  ３８６６２８およびＩＳＩＳ  ３８６５９４が、最大の用量依存性作用を有した。グ
ルコースレベルもまた、ＩＳＩＳ  ３８６６２６およびＩＳＩＳ  ３８６６２７での処置
の後に用量依存性の様式で減少した。ＩＳＩＳ  ３８６６２８、ＩＳＩＳ  ３８６５９３
およびＩＳＩＳ  ３８６５９４での処置もまた、全体として、処置後の瀉血のグルコース
レベルの低下をもたらした。コレステロールのレベルは、処置群の間で有意に異なるよう
には見えなかった。
上に示される表現型の変化がＧＣＧＲ  ｍＲＮＡの低下と相関しているかどうかを決定
するために、処置した動物を、本明細書中に記載される方法に従い、リアルタイムＰＣＲ
によって、肝臓における標的ｍＲＮＡのレベルについて評価した。表３５〜４１は、ＧＣ
ＧＲ核酸を標的とするアンチセンス化合物の、その標的の発現に対する作用についての直
接的な比較からの結果を示す。結果は、生理食塩水コントロールの割合（％）として表す
。
【０４８２】
【表３６】
2014033674.tif 000138
【０４８３】
【表３７】
2014033674.tif 000139
【０４８４】
【表３８】
2014033674.tif 000140
【０４８５】
【表３９】
2014033674.tif 000141
【０４８６】
【表４０】
2014033674.tif 000142
【０４８７】
【表４１】
2014033674.tif 000143
【０４８８】
【表４２】
2014033674.tif 000144
【０４８９】
２−１０−２  ＭＯＥギャップマーでの処置は、ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡの発現における有
意な用量依存性の低下をもたらした。ＩＳＩＳ  ３８６６２６は、標的ｍＲＮＡの最大の
低下を示した。短鎖アンチセンス化合物の効力における観察される増加が、アンチセンス
化合物の蓄積の増加に起因するものであるかどうかを決定するために、肝臓および腎臓に
おける全長アンチセンス化合物および総アンチセンス化合物の濃度を決定した。
【０４９０】
【表４３】
2014033674.tif 000145
【０４９１】
表４２に示す結果は、Ｃ１６共役基を含む短鎖アンチセンス化合物が、肝臓および腎臓
の両方においてアンチセンス化合物の蓄積の有意な増加を示すことを実証する。しかしな
がら、標的ｍＲＮＡ、トリグリセリドおよびグルコースレベルを低下させるのに有効であ
ったＩＳＩＳ  ３８６５９３は、肝臓においては５−１０−５  ＭＯＥギャップマーと同
様のレベルまで、そして、腎臓においては、より低いレベルまで蓄積する。これらの結果
は、Ｃ１６との共役が、肝臓および腎臓のアンチセンス化合物の濃度を増加させ得る一方
で、完全には短鎖アンチセンス化合物の有効性の説明とはならないことを示唆する。
総合すると、これらの結果は、ＧＣＧＲ短鎖アンチセンス化合物が、トリグリセリドお
よびグルコースのレベルもまた低下させつつ、標的ｍＲＮＡの発現を有意に阻害し得るこ
とを実証する。さらに、ＩＳＩＳ  ３８６６２７を除いて、短鎖ＭＯＥギャップマーは、
毒性作用をほとんど示さなかったか、全く示さなかった。
【０４９２】
実施例５：ＧＣＧＲ核酸に対して標的化され、２’−ＭＯＥ修飾およびメチレンオキシ
（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を有する短鎖アンチセンス化合物
８週齢の雄性Ｃ５７／ＢＬ６マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、１０μｍｏｌ／ｋｇ、３．２μｍｏｌ／ｋｇ、１μｍｏｌ／
ｋｇおよび０．３２μｍｏｌ／ｋｇの濃度のＧＣＧＲアンチセンス化合物の単回用量を腹
腔内（ｉ．ｐ．）注射により投与した。各用量の群を、４匹の動物から構成した。表４３
には、この研究において使用したＧＣＧＲアンチセンス化合物の配列、モチーフおよび共
役基を示す。太字の残基は、２’−Ｏ−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）修飾を示し、そ
して、斜体の残基は、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を示す。ア
ンチセンス化合物は全て、全体を通してホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含み、
そして、各シトシンは、５−メチルシトシンで置き換えられる。ＧＣＧＲアンチセンス化
合物は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号ＢＣ０３１８８５．１（配列番号７）を含む
、公開されたＧＣＧＲ核酸を標的とする。
【０４９３】
【表４４】
2014033674.tif 000146
【０４９４】
上に示される表現型の変化がＧＣＧＲ  ｍＲＮＡの低下と相関しているかどうかを決定
するために、処置した動物を、本明細書中に記載される方法に従い、ＲＴ、リアルタイム
ＰＣＲによって、肝臓における標的ｍＲＮＡのレベルについて評価した。表４４は、ＧＣ
ＧＲ核酸を標的とするアンチセンス化合物の、その標的の発現に対する作用についての直
接的な比較からの結果を示す。結果は、生理食塩水コントロールの割合（％）として表す
。
【０４９５】
【表４５】
2014033674.tif 000147
【０４９６】
表４４に示すように、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を有する
短鎖アンチセンス化合物の各々は、用量依存性のＧＣＧＲ  ｍＲＮＡレベルの低下を示し
た。さらに、短鎖アンチセンス化合物は、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーよりも、標
的の減少の点で、より効果的であった。ウィング内にメチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ
−２’）ＢＮＡを含む短鎖アンチセンス化合物の各々は、生理食塩水コントロールおよび
ＩＳＩＳ  １４８３６４処置の両方に対して、ＧＣＧＲタンパク質の有意な減少をもたら
した。次に、各アンチセンスについての推定のＥＤ５０濃度を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒ
ｉｓｍを用いて計算した；ＥＤ５０は、５０％のｍＲＮＡ減少が観察される用量である。
これらの結果を、以下の表４５に示す。
【０４９７】
【表４６】
2014033674.tif 000148
【０４９８】
実施例６：ＰＴＥＮ核酸を標的とし、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮ
Ａ修飾を有する短鎖アンチセンス化合物
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、８μｍｏｌ／ｋｇの用量のＰＴＥＮアンチセンス化合物を単回
ｉ．ｐ．注射により投与した。各用量の群を、４匹の動物から構成した。表４６には、こ
の研究において使用したＰＴＥＮアンチセンス化合物の配列およびモチーフを示す。太字
の残基は、２’−Ｏ−メトキシエチル部分（２’−ＭＯＥ）を示し、そして、斜体の残基
は、メチレンオキシＢＮＡヌクレオチドを示す。各アンチセンス化合物は、全体を通して
ホスホロチオエート結合を含む。さらに、ＩＳＩＳ  ３８４０７３のギャップ、ならびに
ＩＳＩＳ  ３９２０５６、ＩＳＩＳ  ３９２０５７、ＩＳＩＳ  ３９２０６１およびＩＳ
ＩＳ  ３９２０６３のウィングにおけるシトシン残基は、５−メチルシトシンで置き換え
られる。アンチセンス化合物は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｕ９２４３７．１（
配列番号１３）を含む、公開されたＰＴＥＮ核酸を標的とする。
【０４９９】
【表４７】
2014033674.tif 000149
【０５００】
注射から７２時間後にマウスを屠殺して、血清トランスアミナーゼレベル（表４７）；
肝臓および脾臓の重量（表４７）；ならびに、肝臓、腎臓および脂肪におけるＰＴＥＮの
レベル（表４８）を、本明細書中に記載され、かつ当業者に周知の手法に従って決定した
。
【０５０１】
【表４８】
2014033674.tif 000150
【０５０２】
全体として、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を持つ短鎖アンチ
センス化合物は、有害な作用をほとんど示さなかったか、または全く示さなかった。さら
に、総体重は、処置群の間で有意に異ならなかった。
【０５０３】
【表４９】
2014033674.tif 000151
【０５０４】
表４８に示すように、ＰＴＥＮ核酸に対して標的化されたアンチセンス化合物の各々は
、生理食塩水で処置された動物およびコントロール処置の動物と比較して、肝臓における
標的ｍＲＮＡレベルの有意な減少をもたらした。アンチセンス化合物は、腎臓および脂肪
における標的ｍＲＮＡレベルに対して種々の作用を有した。アンチセンス化合物は、腎臓
および脂肪における標的ｍＲＮＡレベルに対し種々の作用を有した。
【０５０５】
実施例７：ＰＴＥＮ核酸に対して標的化され、ＢＮＡ修飾を有する短鎖アンチセンス化
合物
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、８μｍｏｌ／ｋｇ、４μｍｏｌ／ｋｇ、２μｍｏｌ／ｋｇまた
は１μｍｏｌ／ｋｇの用量のＰＴＥＮ核酸に対して標的化されたアンチセンス化合物を単
回腹腔内（ｉ．ｐ．）注射により投与した。各用量の群を、４匹の動物から構成した。表
４９には、この研究において使用した各アンチセンス化合物の配列、ウィング化学および
モチーフを示す。太字の残基は、２’−Ｏ−ＭＯＥ修飾されたヌクレオチドを示し、斜体
の残基は、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を示す。アンチセンス
化合物は全て、各位置にホスホロチオエート結合を含む。さらに、ＩＳＩＳ  １１６８４
７のシトシン、およびＩＳＩＳ  ３９２７４５のメチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２
’）ＢＮＡウィングにおけるシトシンは、５−メチルシトシンで置き換えられる。アンチ
センス化合物は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｕ９２４３７．１（配列番号１３）
を含む、公開されたＰＴＥＮ核酸を標的とする。
【０５０６】
【表５０】
2014033674.tif 000152
【０５０７】
注射から７２時間後にマウスを屠殺して、血清トランスアミナーゼレベル（表５０）；
肝臓、腎臓および脾臓の重量（表５０）；肝臓におけるＰＴＥＮ  ｍＲＮＡのレベル（表
５１）；ならびに、推定のＥＤ５０オリゴヌクレオチド濃度（表５２）を決定した。これ
らのエンドポイントは、本明細書中に記載され、かつ当業者に周知の方法を用いて測定し
た。
【０５０８】
【表５１】
2014033674.tif 000153
全体として、ＰＴＥＮアンチセンス化合物は、毒性の徴候を示さなかった。腎臓、肝臓
および脾臓の重量は全て、正常範囲内であった。総体重は、処置群の間で有意に異ならな
かった。
【０５０９】
【表５２】
2014033674.tif 000154
【０５１０】
表５１に示すように、メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を有する
短鎖アンチセンス化合物の各々は、用量依存性のＰＴＥＮ  ｍＲＮＡレベルの低下を示し
た。さらに、短鎖アンチセンス化合物は、５−１０−５  ＭＯＥギャップマーよりも、標
的の減少の点で、より効果的であった。肝臓におけるＰＴＥＮタンパク質のレベルもまた
、各々８μｍｏｌ／ｋｇの用量のアンチセンス化合物を投与した後に決定した。ウィング
内にメチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡを含む短鎖アンチセンス化合物の
各々は、生理食塩水コントロールおよびＩＳＩＳ  １１６８４７処置の両方に対して、Ｐ
ＴＥＮタンパク質の有意な減少をもたらした。次に、各オリゴヌクレオチドについての推
定のＥＤ５０濃度を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて計算した。これらの結果を
、以下の表５２に示す。
【０５１１】
【表５３】
2014033674.tif 000155
【０５１２】
種々のタイプの二環式核酸化合物をさらに調べるために、ＰＴＥＮ核酸を標的とする短
鎖アンチセンス化合物のさらなるセットを設計し、そして、試験した。６週齢の雄性Ｂａ
ｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ
）に、８μｍｏｌ／ｋｇ、４μｍｏｌ／ｋｇ、２μｍｏｌ／ｋｇまたは１μｍｏｌ／ｋｇ
の用量のアンチセンス化合物を単回腹腔内（ｉ．ｐ．）注射により投与した。各用量の群
を、４匹の動物から構成した。表５３には、この研究において使用した各アンチセンス化
合物の配列、ウィング化学およびモチーフを示す。アンチセンス化合物は全て、各位置に
ホスホロチオエート結合を含む。ＩＳＩＳ  ３９２０６３のメチレンオキシ（４’−ＣＨ
２−Ｏ−２’）ＢＮＡウィングにおけるシトシン残基は、５−メチルシトシンで置き換え
られる。アンチセンス化合物は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｕ９２４３７．１（
配列番号１３）を含む、公開されたＰＴＥＮ核酸を標的とする。
【０５１３】
【表５４】
2014033674.tif 000156
【０５１４】
注射から７２時間後にマウスを屠殺して、血清トランスアミナーゼレベル（表５４）；
肝臓および脾臓の重量（表５４）；ならびに肝臓におけるＰＴＥＮ  ｍＲＮＡのレベル（
表５５）を、本明細書中に記載され、かつ当業者に周知の方法に従って決定した。
【０５１５】
【表５５】
2014033674.tif 000157
【表５６】
2014033674.tif 000158
【０５１６】
上に示すように、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を有
する短鎖アンチセンス化合物は、標的ｍＲＮＡレベルの用量依存性の減少をもたらした。
オキシアミノＢＮＡ修飾を有する短鎖アンチセンス化合物での処置は、標的発現のわずか
な減少をもたらした。
【０５１７】
実施例８：ＡｐｏＢ核酸およびＰＴＥＮ核酸を標的とする短鎖アンチセンス化合物を用
いた、単回用量投与の用量応答研究
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、８μｍｏｌ／ｋｇ、４μｍｏｌ／ｋｇ、２μｍｏｌ／ｋｇまた
は１μｍｏｌ／ｋｇの用量のアンチセンス化合物を単回腹腔内（ｉ．ｐ．）注射により投
与した。各用量の群を、４匹の動物から構成した。表５６には、この研究において使用し
た各アンチセンス化合物の配列、ウィング化学およびモチーフを示す。斜体の残基は、メ
チレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を示し、下線の残基はＮ−メチル−
オキシアミノ（４’−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を示し、そして、四
角で囲った残基は、α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡ修飾を示
す。アンチセンス化合物は全て、各位置にホスホロチオエート結合を含む。ＩＳＩＳ  １
１６８４７のシトシン、およびＩＳＩＳ  ３９２０６３のメチレンオキシ（４’−ＣＨ２
−Ｏ−２’）ＢＮＡウィングにおけるシトシンは各々、５−メチルシトシンで置き換えら
れるが、ＩＳＩＳ  ３９２７４５のメチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）ＢＮＡウ
ィングにおけるチミジンは、５−メチルチミジンで置き換えられる。ＰＴＥＮアンチセン
ス化合物は、Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号Ｕ９２４３７．１（配列番号１３）を含
む、公開されたＰＴＥＮ核酸を標的とする。ＡｐｏＢアンチセンス化合物は、Ｇｅｎｂａ
ｎｋアクセッション番号ＸＭ＿１３７９５５．５（配列番号２）を含む、公開されたＡｐ
ｏＢ核酸を標的とする。
【０５１８】
【表５７】
2014033674.tif 000159
【表５８】
2014033674.tif 000160
【０５１９】
表５７に示すように、メチレンオキシＢＮＡ修飾を有する短鎖アンチセンス化合物の各
々は、用量依存性の標的ｍＲＮＡレベルの低下を示した。特筆すべきことに、Ｎ−メチル
−オキシアミノＢＮＡウィングを有する短鎖アンチセンス化合物（ＩＳＩＳ  ３９６５６
５）もまた、β−Ｄ−メチレンオキシＢＮＡアンチセンス化合物およびα−Ｌ−メチレン
オキシＢＮＡアンチセンス化合物の両方に類似した、ＰＴＥＮの発現の用量依存性の減少
を示した。次に、各アンチセンスについての推定のＥＤ５０濃度を、Ｇｒａｐｈｐａｄ  
Ｐｒｉｓｍを用いて計算した。これらの結果を、以下の表５８に示す。
【０５２０】
【表５９】
2014033674.tif 000161
【０５２１】
実施例９：ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡを標的とする親化合物および親の混合型バックボー
ンアンチセンス化合物の投与
ＩＳＩＳ  ２５７０１６を、週２回、１ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋ
ｇまたは１７ｍｇ／ｋｇの用量で、ｄｂ／ｄｂマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）に腹腔内投与した。コントロー
ル群には、同じ投薬スケジュールで生理食塩水を受けた群、および、ＩＳＩＳ  １４５７
３３を受けた群を含めた。ＩＳＩＳ  ２５７０１６およびＩＳＩＳ  １４５７３３は共に
、配列ＧＡＡＧＴＡＧＣＣＡＣＣＡＡＣＴＧＴＧＣ（配列番号１５７２）を含み、さらに
、５ヌクレオチドの「ウィング」が両側（５’方向および３’方向）に配置された１０の
２’−デオキシヌクレオチドから構成される中央の「ギャップ」領域を含む。これらのウ
ィングは、２’−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）ヌクレオチドから構成される。シチジ
ン残基は全て５−メチルシチジンである。ヌクレオシド間（バックボーン）結合は、ＩＳ
ＩＳ  １４５７３３についてのオリゴヌクレオチド全体にわたりホスホロチオエート（Ｐ
＝Ｓ）であるが；ＩＳＩＳ  ２５７０１６は混合型バックボーンを有する。ＩＳＩＳ  ２
５７０１６についてのヌクレオシド間結合は、ウィング内がホスホジエステル（Ｐ＝Ｏ）
であり、ギャップ内がホスホロチオエートである。最後の用量の投与から４８時間後にマ
ウスを屠殺し、そして、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡレベルについて腎臓組織を解析した。結
果を、以下の表５９に示す。
【０５２２】
【表６０】
2014033674.tif 000162
【０５２３】
ＩＳＩＳ  ２５７０１６およびＩＳＩＳ  １４５７３３は共に、生理食塩水コントロー
ルと比較してＳＧＬＴ−２のレベルを顕著に減少させた。（ｍＲＮＡレベルは、上述のよ
うに、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲを用いて決定した）。しかし。ＩＳＩＳ  ２５７０１６
は、ＩＳＩＳ  １４５７３３と比較して、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡを減少させる効力が、
約２０〜５０倍高いことが示された。血漿グルコースレベルにおける付随する減少が、処
置群について見られた（ＩＳＩＳ  ２５７０１６を受けた群について４７０  ±２３であ
るのに比べ、生理食塩水の群では、６６１±１４であった）。腎臓におけるＩＳＩＳ  ２
５７０１６およびＩＳＩＳ  １４５７３３の蓄積は、用量範囲全体で同様であったが、全
長２５７０１６のアンチセンスは、腎臓においてほとんど検出されず、これは、変性産物
が活性の増大を担っているという理論を支持している。また、２５ｍｇ／ｋｇの単回投薬
の後の作用の開始が、インタクトな２５７０１６のアンチセンス化合物がほとんど残され
ていない時点と相関していた。
【０５２４】
上述のような同様の同じ投薬スケジュールで、ＩＳＩＳ  ２５７０１６、ＩＳＩＳ  １
４５７３３または生理食塩水を用いて、痩せたマウス、ｏｂ／ｏｂマウスおよびＺＤＦラ
ット（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）において同様の研究
を行った。ＩＳＩＳ  １４５７３３およびＩＳＩＳ  ２５７０１６についての結合部位の
配列は、マウスとラットとの間で保存されている（表６０を参照のこと）。腎臓における
ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡの減少は、上で見られたものと同様であった。ラットを利用する
研究において、２週にわたり週２回１０ｍｇ／ｋｇの用量を与えた場合、ＩＳＩＳ  １４
５７３３は、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡレベルを約４０％低下させることが示されたが、一
方で、ＩＳＩＳ  ２５７０１６で達成された減少は、８０％を上回った。ＩＳＩＳ  ２５
７０１６は、１２．５ｍｇ／ｋｇの低用量でＳＧＬＴ２の発現を最大限に減少させた。よ
り低い用量範囲でのさらなる研究は、１ｍｇ／ｋｇ／ｗｋ未満の用量の混合型バックボー
ンのアンチセンス化合物で、ＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡの有意な減少を示す。
【０５２５】
実施例１０：ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡを標的とする親化合物および短鎖アンチセンス化
合物の投与
薬物動態研究は、ＩＳＩＳ  ２５７０１６が、１２核酸塩基のファーマコフォアへと代
謝されるプロドラッグとして作用したことを示した。次の研究において、ＺＤＦラットに
、１．５ｍｇ／ｋｇのＩＳＩＳ  ２５７０１６またはＩＳＩＳ  ３７０７１７のいずれか
を週に２回、あるいは、同様の投薬スケジュールで生理食塩水を腹腔内投薬した。ＩＳＩ
Ｓ  ３７０７１７は、ＳＧＬＴ−２核酸に対して標的化された１２核酸塩基のアンチセン
ス化合物であり、配列ＴＡＧＣＣＡＣＣＡＡＣＴ（配列番号１５４）を含み、そしてさら
に、１ヌクレオチドの「ウィング」が両側（５’方向および３’方向）に配置された１０
の２’−デオキシヌクレオチドから構成される中央の「ギャップ」領域を含む。ウィング
は、２’−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）ヌクレオチドから構成される。シチジン残基
は全て、５−メチルシチジンである。ヌクレオシド間（バックボーン）結合は、オリゴヌ
クレオチド全体にわたりホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）である。
投薬から５週間後に、動物を屠殺し、そして、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡレベルについて
腎臓組織を解析した。ＩＳＩＳ  ２５７０１６およびＩＳＩＳ  ３７０７１７の薬物動態
活性は同様であったが、１２ヌクレオチドのアンチセンス化合物は、より早い作用の開始
を示した。ＩＳＩＳ  ３７０７１７は、２．８μｍｏｌ／ｋｇの単回投薬の２日後に、腎
臓においてＳＧＬＴ２の発現の８０％近い阻害を示したが、ＩＳＩＳ  ２５７０１６は、
同じ用量の投与の２日後に、約２５％の阻害を示すのみであった。このデータは、ＩＳＩ
Ｓ  ２５７０１６が１２ヌクレオチドのファーマコフォアを有するプロドラッグであるこ
とを支持する。
【０５２６】
実施例１１：短鎖アンチセンス化合物の効力およびバイオアベイラビリティ
ＩＳＩＳ  ３７０７１７により示された効力の改善と、これらの短鎖アンチセンス化合
物についての経口バイオアベイラビリティの改善とは、これらの化合物を、経口投与に有
用なものにする。正常なラットに、週２回、１００ｍｇ／ｋｇで、ＩＳＩＳ  ３７０７１
７、ＩＳＩＳ  １４５７３３または生理食塩水を腹腔内投与により与えた。最後の投薬か
ら約４８時間後に動物を屠殺して、アンチセンス化合物の濃度およびＳＬＧＴ−２  ｍＲ
ＮＡのレベルについて腎臓組織を解析した。腎臓組織において、コントロールと比較して
有意により高いＩＳＩＳ  ３７０７１７の蓄積が見られた（組織１グラムあたり約５００
μｇ）。さらに、ＳＧＬＴ−２  ｍＲＮＡは、コントロールを８０％より多く上回って減
少した。
【０５２７】
実施例１２：およそ１２ヌクレオチドの短鎖アンチセンス化合物のウィング、ギャップ
および全長のバリエーション
ＩＳＩＳ  ３７０７１７  １−１０−１  ＭＯＥギャップマーをテンプレートとして用
いて、種々のモチーフを持つ配列に関連性のあるオリゴを作成した。これらのバリエーシ
ョンを表６０に提示する。公開された配列（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｕ２９８
８１．１（本明細書中に配列番号１５７５として引用）およびＧｅｎＢａｎｋアクセッシ
ョン番号ＡＪ２９２９２８．１（本明細書中に配列番号１５７６として引用））を用いて
、マウスまたはラットのＳＧＬＴ２核酸の異なる領域を標的とするように、アンチセンス
化合物を設計した。
【０５２８】
【表６１】
2014033674.tif 000163
【０５２９】
アンチセンス化合物を、マウスＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルに対するその作用について
解析した。データは、２．５μｍｏｌ／ｋｇ、０．５μｍｏｌ／ｋｇまたは０．１μｍｏ
ｌ／ｋｇの上記ＭＯＥギャップマー（腹腔内注射により与えた）を、３週間にわたり、週
２回マウスに投薬した３つの実験から取った範囲である。最後の投与から４８時間後にマ
ウスを屠殺し、腎臓におけるＳＧＬＴ２レベルについて評価した。ＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡ
レベルを、本明細書中の他の実施例に記載されるようにして、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲ
により決定した。ＰＣＲの結果を、内部のＩＳＩＳコントロールに対して正規化した。結
果を、以下の表６１に示す。
【０５３０】
【表６２】
2014033674.tif 000164
【０５３１】
これらの結果は、試験した種々のモチーフが全て、用量依存性の様式で、インビボでＳ
ＧＬＴ２の発現を阻害することを示す。１−１０−１ギャップマー、２−８−２ギャップ
マーおよび１−８−１ギャップマーが特に強力であることが分かった。
【０５３２】
実施例１３：１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび１−１０−２  ＭＯＥギャップ
マーによるラットＳＧＬＴ−２のアンチセンス性阻害
表６２に提供される１−１０−１  ＭＯＥギャップマーアンチセンス化合物および１−
１０−２  ＭＯＥギャップマーアンチセンス化合物は、マウスまたはラットのＳＧＬＴ２
ＲＮＡの異なる領域を標的とするように設計した。表６２における短鎖アンチセンス化
合物は全て、長さ１２または１３ヌクレオチドのいずれかのキメラオリゴヌクレオチド（
「ギャップマー」）であり、５’側に１ヌクレオチドの「ウィング」、そして、３’側に
２または１ヌクレオチドの「ウィング」が配置された、１０の２’−デオキシヌクレオチ
ドからなる中央の「ギャップ」セグメントから構成される。これらのウィングは、２’−
メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）ヌクレオチドから構成される。ヌクレオシド間（バック
ボーン）結合は、オリゴヌクレオチド全体を通してホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）である
。シチジン残基は全て、５−メチルシチジンである。
【０５３３】
【表６３】
2014033674.tif 000165
【０５３４】
短鎖アンチセンス化合物を、ラットＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルに対するその作用につ
いて解析した。データは、４５０ｎｍｏｌ／ｋｇ、１５０ｎｍｏｌ／ｋｇまたは５０ｎｍ
ｏｌ／ｋｇの１−１０−１  ＭＯＥギャップマーまたは１−１０−２  ＭＯＥギャップマ
ー（腹腔内注射により与えた）を、３週間にわたり、週２回、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａ
ｗｌｅｙラット（１７０〜２００ｇ）に投薬した３つの実験から取った範囲である。最後
の投与から４８時間後にラットを屠殺し、腎臓におけるＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルにつ
いて評価した。標的のレベルを、本明細書中の他の実施例に記載されるようにして、ＲＴ
、リアルタイムＰＣＲにより決定した。ＰＣＲの結果を、内部のＩＳＩＳコントロールに
対して正規化した。結果を、以下の表６３に示す。
【０５３５】
【表６４】
2014033674.tif 000166
【０５３６】
これらの結果は、１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび１−１０−２  ＭＯＥギャ
ップマーが共に、用量依存性の様式で、インビボでＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡを減少させるこ
とを示す。
ラットを、さらに、総体重、肝臓、脾臓および腎臓の重量について評価した。脾臓、肝
臓または体重における有意な変化は、特定の化合物が毒性作用を引き起こすことを示し得
る。全ての変化が、実験の誤差の許容範囲内であった。処置の間、または、研究の終了時
点では、体重の有意な変化は観察されなかった。肝臓または脾臓の重量においても有意な
変化が観察されなかった。
インビボで投与された短鎖アンチセンス化合物の毒性作用はまた、肝臓または腎臓の疾
患または損傷に関連する酵素およびタンパク質のレベルを測定することによって評価され
得る。血清トランスアミナーゼアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）およ
びアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）のレベルにおける上昇は、しばしば、肝
臓の疾患または損傷の指標となる。血清総ビリルビンは、肝臓および胆汁の機能の指標と
なり、そして、アルブミンおよび血中尿素窒素（ＢＵＮ）は、腎機能の指標となる。グル
コースおよびトリグリセリドのレベルはときどき、処置の毒性に起因して変化する。血清
グルコースもまた、ＳＧＬＴ２の活性に一部依存する。ＡＬＴ、ＡＳＴ、総ビリルビン、
アルブミン、ＢＵＮ、グルコースおよびトリグリセリドのレベルを、短鎖アンチセンス化
合物で処置したラットにおいて測定した。肝臓および腎臓の損傷および疾患の慣用的な臨
床上の指標のレベルは、正常範囲内であり、そして、生理食塩水で処置した動物に対して
、有意に変わっておらず、これらの短鎖アンチセンス化合物が、腎機能または肝機能に有
意に影響を及ぼさないことが実証された。トリグリセリドおよびグルコースのレベルは、
生理食塩水で処置した動物に対して、有意には上昇しなかった。
【０５３７】
実施例１４：１−１０−１  ＭＯＥギャップマーによるマウスおよびラットのＳＧＬＴ
２のアンチセンス性阻害
マウスＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡの異なる領域を標的とするように設計された１−１０−１
ＭＯＥギャップマーアンチセンス化合物を、表６４に示す。
【０５３８】
【表６５】
2014033674.tif 000167
【０５３９】
短鎖アンチセンス化合物を、マウスＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルに対するその作用につ
いて解析した。データは、４５０ｎｍｏｌ／ｋｇ、１５０ｎｍｏｌ／ｋｇまたは５０ｎｍ
ｏｌ／ｋｇの上記１−１０−１  ＭＯＥギャップマーのうちの１つ（腹腔内注射により与
えた）を、３週間にわたり、週２回、雄性の６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスに投薬した３つ
の実験から取った範囲である。最後の投与から４８時間後にマウスを屠殺し、腎臓におけ
るＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルについて評価した。標的のレベルを、本明細書中の他の実
施例に記載されるようにして、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲにより決定した。ＰＣＲの結果
を、内部のＩＳＩＳコントロールに対して正規化した。結果を、以下の表６５に示す。
【０５４０】
【表６６】
2014033674.tif 000168
これらの結果は、ＩＳＩＳ  ３８１４０８を除いて、１−１０−１  ＭＯＥギャップマ
ーが全て、マウスにおいて、用量依存性の様式で、インビボでＳＧＬＴ２の発現を阻害す
ることを示す。ＩＳＩＳ  ３８１４０８の活性は、ラットの研究に示されている（表６５
を参照のこと）。
【０５４１】
ラットにおける１−１０−１ギャップマーの評価
上記１−１０−１ギャップマー（上の表６４を参照のこと）のラットＳＧＬＴ２  ｍＲ
ＮＡレベルに対する作用。データは、２５０ｎｍｏｌ／ｋｇ（腹腔内注射により与えた）
を、３週間にわたり、週２回、雄性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１７０〜２０
０ｇ）に投薬した４つの実験から取った。最後の投与から４８時間後にラットを屠殺し、
腎臓におけるＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルについて評価した。標的のレベルを、本明細書
中の他の実施例に記載されるようにして、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲにより決定した。Ｐ
ＣＲの結果を、内部のＩＳＩＳコントロールに対して正規化した。結果を、以下の表６６
に示す。
【０５４２】
【表６７】
2014033674.tif 000169
これらの結果は、１−１０−１  ＭＯＥギャップマーが全て、インビボでのラットの研
究においてＳＧＬＴ２の発現を阻害することを示す。
【０５４３】
実施例１５：さらなる１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび２−８−２  ＭＯＥギ
ャップマーによるマウスおよびラットのＳＧＬＴ２発現のアンチセンス性阻害
１−１０−１  ＭＯＥギャップマー短鎖アンチセンス化合物および２−８−２  ＭＯＥ
ギャップマー短鎖アンチセンス化合物は、マウスＳＧＬＴ２  ＲＮＡの異なる領域を標的
とするが、種族にわたって相補性を有するように設計した。短鎖アンチセンス化合物を表
６７に示す。表６７における短鎖アンチセンス化合物は全て、長さ１２ヌクレオチドであ
り、両側（５’方向および３’方向）に２’−修飾を有するウィングセグメントが配置さ
れた、２’−デオキシヌクレオチドからなる中央の「ギャップ」セグメントから構成され
る。これらのウィングは、２’−メトキシエチル（２’−ＭＯＥ）ヌクレオチドから構成
される。ヌクレオシド間（バックボーン）結合は、オリゴヌクレオチド全体を通してホス
ホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）である。シチジン残基は全て、５−メチルシチジンである。
【０５４４】
【表６８】
2014033674.tif 000170
短鎖アンチセンス化合物を、インビボでのマウスＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルに対する
その作用について解析した。データは、０．５μｍｏｌ／ｋｇ、０．１μｍｏｌ／ｋｇま
たは０．０２μｍｏｌ／ｋｇの１−１０−１  ＭＯＥギャップマーまたは２−８−２  Ｍ
ＯＥギャップマーのいずれか（腹腔内注射により与えた）を、３週間にわたり、週２回、
雄性の６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスに投薬した３つの実験から取った。最後の投与から４
８時間後にマウスを屠殺し、腎臓におけるＳＧＬＴ２レベルについて評価した。標的のレ
ベルを、本明細書中の他の実施例に記載されるようにして、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲに
より決定した。ＰＣＲの結果を、内部のＩＳＩＳコントロールに対して正規化した。結果
を、以下の表６８に示す。
【０５４５】
【表６９】
2014033674.tif 000171
【０５４６】
これらの結果は、１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび２−８−２  ＭＯＥギャッ
プマーが共に、用量依存性の様式で、インビボでＳＧＬＴ２の発現を阻害することを示す
。
マウスを、さらに、総体重、肝臓、脾臓および腎臓の重量について評価した。全ての変
化が、実験の誤差の許容範囲内であった。処置の間、または、研究の終了時点では、体重
の有意な変化は観察されなかった。肝臓または脾臓の重量においても有意な変化が観察さ
れなかった。
ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＢＵＮ、トランスアミナーゼ、血漿クレアチニン、グルコースおよび
トリグリセリドのレベルを、短鎖アンチセンス化合物で処置したマウスにおいて測定した
。肝臓および腎臓の損傷および疾患の慣用的な臨床上の指標のレベルは、正常範囲内であ
り、そして、生理食塩水で処置した動物に対して、有意に変わっておらず、これらの短鎖
アンチセンス化合物が、腎機能または肝機能に有意に影響を及ぼさないことが実証された
。トリグリセリドおよびグルコースのレベルは、生理食塩水で処置した動物に対して、有
意には上昇しなかった。
【０５４７】
マウスにおけるＩＳＩＳ  ３７９６９２  １−１０−１  ＭＯＥギャップマー、ＩＳＩ
Ｓ  ３９２１７０  １−１０−１メチレンオキシＢＮＡギャップマー、ＩＳＩＳ  ３８８
６２５  ２−８−２  ＭＯＥギャップマーおよびＩＳＩＳ  ３９２１７３  ２−８−２メ
チレンオキシＢＮＡギャップマーの評価
インビボでのマウスＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルに対する、ＩＳＩＳ  ３７９６９２  
１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよびＩＳＩＳ  ３８８６２５  ２−８−２  ＭＯＥ
ギャップマーの作用を、ＩＳＩＳ  ３９２１７０  １−１０−１メチレンオキシＢＮＡギ
ャップマーおよびＩＳＩＳ  ３９２１７３  ２−８−２メチレンオキシＢＮＡギャップマ
ー（表６９を参照のこと）の作用と比較した。データは、５ｎｍｏｌ／ｋｇ、２５ｎｍｏ
ｌ／ｋｇまたは１２５ｎｍｏｌ／ｋｇのＩＳＩＳ  ３７９６９２  １−１０−１  ＭＯＥ
ギャップマーまたはＩＳＩＳ  ３８８６２５  ２−８−２  ＭＯＥギャップマーのいずれ
か（腹腔内注射により与えた）を、３週間にわたり、週２回、雄性の６週齢のＢａｌｂ／
ｃマウスに投薬した３つの実験から取った。最後の投与から４８時間後にマウスを屠殺し
、腎臓におけるＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルについて評価した。標的のレベルを、本明細
書中の他の実施例に記載されるようにして、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲにより決定した。
ＰＣＲの結果を、内部のＩＳＩＳコントロールに対して正規化した。データは、生理食塩
水で処置した動物に対する変化の割合（％）（「＋」は増加を示し、「−」は減少を示す
）として表し、表６９に示す。
【０５４８】
【表７０】
2014033674.tif 000172
【０５４９】
これらの結果は、１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび２−８−２  ＭＯＥギャッ
プマーが共に、３つの投薬範囲のうち最も高い点において、用量依存性の様式で、インビ
ボでＳＧＬＴ２の発現を阻害することを示す。これらの結果はまた、メチレンオキシＢＮ
Ａ構築物がＭＯＥ構築物よりもより強力であることを示す。処置の間、または、研究の終
了時点では、体重の有意な変化は観察されなかった。肝臓または脾臓の重量においても有
意な変化が観察されなかった。ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＢＵＮおよびクレアチニンのレベルを含
む毒性パラメータは、正常範囲内であり、生理食塩水で処置した動物に対して、有意に変
化しておらず、これらの化合物が、腎機能または肝機能に有意に影響を及ぼさないことが
実証された。
【０５５０】
ラットにおけるＩＳＩＳ  ３７９６９２  １−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよびＩ
ＳＩＳ  ３８８６２５  ２−８−２  ＭＯＥギャップマーの評価
インビボでのラットＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルに対する、ＩＳＩＳ  ３７９６９２  
１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよびＩＳＩＳ  ３８８６２５  ＭＯＥ  ２−８−２
ギャップマー（表７０を参照のこと）の作用。データは、２００ｎｍｏｌ／ｋｇ、５０ｎ
ｍｏｌ／ｋｇ、１２．５ｎｍｏｌ／ｋｇまたは３．１２５ｎｍｏｌ／ｋｇのＩＳＩＳ  ３
７９６９２  １−１０−１  ＭＯＥギャップマーまたはＩＳＩＳ  ３８８６２５  ２−８
−２  ＭＯＥギャップマーのいずれか（腹腔内注射により与えた）を、３週間にわたり、
週２回、雄性のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１７０〜２００ｇ）に投薬した４
つの実験から取った。最後の投与から４８時間後にラットを屠殺し、腎臓におけるＳＧＬ
Ｔ２レベルについて評価した。標的のレベルを、本明細書中の他の実施例に記載されるよ
うにして、ＲＴ、リアルタイムＰＣＲにより決定した。ＰＣＲの結果を、内部のＩＳＩＳ
コントロールに対して正規化した。結果を、以下の表７０に示す。
【０５５１】
【表７１】
2014033674.tif 000173
【０５５２】
これらの結果は、１−１０−１  ＭＯＥギャップマーおよび２−８−２  ＭＯＥギャッ
プマーが共に、３つの投薬範囲のうち最も高い点において、用量依存性の様式で、インビ
ボでＳＧＬＴ２の発現を阻害することを示す。
ラットを、さらに、総体重、肝臓、脾臓および腎臓の重量について評価した。全ての変
化が、実験の誤差の許容範囲内であった。処置の間、または、研究の終了時点では、体重
の有意な変化は観察されなかった。肝臓または脾臓の重量においても有意な変化が観察さ
れなかった。
ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＢＵＮ、コレステロール、血漿クレアチニンおよびトリグリセリドの
レベルを、短鎖アンチセンス化合物で処置したラットにおいて測定した。肝臓および腎臓
の損傷および疾患の慣用的な臨床上の指標のレベルは、正常範囲内であり、そして、生理
食塩水で処置した動物に対して、有意に変わっておらず、これらの短鎖アンチセンス化合
物が、腎機能または肝機能に有意に影響を及ぼさないことが実証された。
【０５５３】
実施例１６：ＺＤＦラットにおけるＳＧＬＴ２発現のアンチセンス性阻害
ＩＳＩＳ  ３８８６２５、ＩＳＩＳ  ３８８６２６およびコントロールオリゴであるＩ
ＳＩＳ  ３８８６２８を、ＺＤＦラットの血漿グルコースレベルおよびＨｂＡ１ｃに対す
るその作用について解析した。レプチンレセプター欠失Ｚｕｃｋｅｒ糖尿病脂肪過多（Ｚ
ＤＦ）ラットは、２型糖尿病の研究に有用なモデルである。糖尿病は、８〜１０週齢のこ
れらの雄性ラットにおいて自然に生じ、そして、過食症、多尿症、多渇症および体重増加
の障害（ｉｍｐａｉｒｅｄ  ｗｅｉｇｈｔ  ｇａｉｎ）、糖尿病の臨床上の症状と並行す
る症状を伴う（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ  ＭＳ，ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｎａｔ  Ｇｅｎｅｔ
１３，１８−１９）。６週齢のＺＤＦラットに、１２週にわたり、週１回、４００ｎＭ
／ｋｇの用量で短鎖アンチセンス化合物を腹腔内注射した。データを表７１および７２に
示す。
【０５５４】
【表７２】
2014033674.tif 000174
【表７３】
2014033674.tif 000175
ＩＳＩＳ  ３８８６２５およびＩＳＩＳ  ３８８６２６は、ＰＢＳおよびコントロール
処置動物と比較して、血漿グルコースレベルおよびＨｂＡ１Ｃを有意に減少させた。
【０５５５】
実施例１７：イヌ腎臓におけるＳＧＬＴ２発現のアンチセンス性阻害（ＩＳＩＳ  ３８
８６２５）
ＩＳＩＳ  ３８８６２５は、ＴＧＴＴＣＣＡＧＣＣＣＡ（配列番号２４６）の配列を持
つ２−８−２  ＭＯＥギャップマーである（例えば、表７１を参照のこと）。イヌＳＧＬ
Ｔ２  ｍＲＮＡレベルに対するＩＳＩＳ  ３８８６２５の作用。データは、１ｍｇ／ｋｇ
／週または１０ｍｇ／ｋｇ／週のいずれかのＩＳＩＳ  ３８８６２５または生理食塩水（
週に２回、皮下注射により与えた）を、合計９匹の雄性のビーグル犬に投薬した２つの投
薬群から取った。研究の４６日目に全てのイヌを屠殺し、腎臓におけるＳＧＬＴ２レベル
について評価した。標的のレベルを、本明細書中の他の実施例に記載されるようにして、
ＲＴ、リアルタイムＰＣＲにより決定した。ＰＣＲの結果を、内部のＩＳＩＳコントロー
ルに対して正規化した。結果を、以下の表７３に示す。
【０５５６】
【表７４】
2014033674.tif 000176
【０５５７】
これらの結果は、８０％を上回るＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡの減少が、１ｍｇ／ｋｇ／ｗｋ
の用量のＩＳＩＳ  ３８８６２５で達成され得ることを示す。なおより多い現象が、わず
かにより高い用量で達成され得る。イヌにおけるＩＳＩＳ  ３８８６２５の投与はまた、
グルコース抵抗性を改善することも示された。ピーク血漿グルコースレベルは、平均して
５０％を上回って減少され、そして、その後のグルコースの下降が、標準的なグルコース
抵抗性試験における生理食塩水コントロールと比較して、少なくなった。尿中へのグルコ
ースの排泄もまた増加した。
【０５５８】
実施例１８：ＳＧＬＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物のインビボ
試験
ヒト／サル／マウス／ラットのＳＧＬＴ２に対して相補的な２０の１−１０−１  ＭＯ
Ｅギャップマーを設計、合成し、そして、腎臓におけるＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルの抑
制についてインビボで試験した。マウスおよびラットについての標的部位を表７４に示す
。ヒトについての標的部位を表４および５に示す。データは、２週間の期間にわたり、週
に２回（合計４回の注射）の、３５０ｎｍｏｌ／ｋｇのオリゴヌクレオチドを腹腔内注射
により雄性の６週齢のＢａｌｂ／ｃマウスに投与した２つの実験からの平均である。最後
の投与から４８時間後にマウスを屠殺し、腎臓におけるＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルにつ
いて評価した。ＳＧＬＴ２  ｍＲＮＡレベルを、２つの異なるＰＣＲプライマープローブ
セットである、プライマープローブセット（ＰＰＳ）５３４およびＰＰＳ  ５５３を用い
て、標準的な手順に従って、定量的リアルタイムＰＣＲ解析により決定した。ＳＧＬＴ２
ｍＲＮＡレベルを、シクロフォリンｍＲＮＡレベル（これもまた、定量的リアルタイム
ＰＣＲにより測定した）に対して正規化した。結果を、以下の表７４に示す。
【０５５９】
【表７５】
2014033674.tif 000177
【０５６０】
実施例１９：Ｈｅｐ３Ｂ細胞におけるヒトＰＣＳＫ９のアンチセンス性阻害
ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を、インビトロでのＰＣ
ＳＫ９  ｍＲＮＡに対するその作用について試験した。短鎖アンチセンス化合物を表６に
示す。各短鎖アンチセンス化合物のＩｓｉｓ  Ｎｏ、ギャップマーのモチーフおよび配列
番号を、再度、表７５に示す。培養Ｈｅｐ３Ｂ細胞を、１００ｎＭの短鎖アンチセンス化
合物で処理した。ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された５−１０−５  ＭＯＥギャップマ
ーを、ポジティブコントロールとして用いた。処理期間の後、これらの細胞からＲＮＡを
単離し、ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、定量的リ
アルタイムＰＣＲにより測定した。ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ
（登録商標）により測定した総ＲＮＡ含量に従って調整した。結果は、未処理のコントロ
ール細胞に対するＰＣＳＫ９の阻害の割合（％阻害）として表７５に示す。「％阻害」の
欄において、「０」は、その特定の短鎖アンチセンス化合物では、ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡ
の減少が観察されなかったことを示す。
【０５６１】
【表７６】
2014033674.tif 000178
2014033674.tif 000179
【０５６２】
表７５に示されるように、ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化され、かつ２−１０−２  Ｍ
ＯＥのギャップマーのモチーフを有する短鎖アンチセンス化合物は、培養細胞においてＰ
ＣＳＫ９  ｍＲＮＡを減少させた。
ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を、用量応答実験のＨｅ
ｐ３Ｂ細胞において試験した。細胞を、本明細書中に記載されるようにして、  ｎＭの濃
度の表７６に示される短鎖アンチセンス化合物で処理した。処理期間の後、これらの細胞
からＲＮＡを単離し、そして、ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載される
ようにして、定量的リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを
、シクロフォリン特異的なプライマープローブセットを用いてリアルタイムＰＣＲにより
測定したシクロフォリンｍＲＮＡレベルに対して正規化した。結果を、未処理のコントロ
ール細胞に対するＰＣＳＫ９の阻害の割合として示す。また、用量応答実験において試験
した短鎖アンチセンス化合物の各々についての、Ｇｒａｐｈｐａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いて
計算したＥＣ５０（ｍＲＮＡの５０％の減少が観察される濃度）も示す。以下の表に示す
ように、ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルは、用量依存性の様式で減少した。
【０５６３】
【表７７】
2014033674.tif 000180
【０５６４】
実施例２０：ＢＮＡを含む短鎖アンチセンス化合物によるＰＣＳＫ９のアンチセンス性
阻害
ＰＣＳＫ９核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を、マウスおよびヒトの
両方の培養細胞において、用量応答性実験において試験した。試験した化合物には、ＩＳ
ＩＳ  ４０３７３９およびＩＳＩＳ  ４０３７４０を含んだ。ＩＳＩＳ  ４０３７３９は
、配列番号４０４のヌクレオチド配列からなり、２−１０−２のギャップマーのモチーフ
を有する短鎖アンチセンス化合物であり、ウィング内のヌクレオチドは、（６’Ｓ）−６
’メチルＢＮＡを含む。ＩＳＩＳ  ４０３７４０は、配列番号４０５のヌクレオチド配列
からなり、２−１０−２のギャップマーのモチーフを有する短鎖アンチセンス化合物であ
り、ウィング内のヌクレオチドは、（６’Ｓ）−６’メチルＢＮＡを含む。また、ＰＣＳ
Ｋ９核酸に対して標的化された５−１０−５  ＭＯＥギャップマーも試験した。
【０５６５】
マウス肝細胞をプレーティングし、そして、本明細書中に記載されるようにして、  ｎ
Ｍの濃度の表７７に示される短鎖アンチセンス化合物で処理した。処理期間の後、これら
の細胞からＲＮＡを単離し、そして、ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載
されるようにして、定量的リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレ
ベルを、シクロフォリン特異的なプライマープローブセットを用いてリアルタイムＰＣＲ
により測定したシクロフォリンｍＲＮＡレベルに対して正規化した。結果は、未処理のコ
ントロール細胞に対するＰＣＳＫ９の阻害の割合として示す。存在する場合、「０」は、
ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡにおける減少が観察されなかったことを示す。ＩＳＩＳ  ４０３７
３９は、３０ｎＭ以上の用量で、マウスＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡの用量依存性の減少を示し
た。ＩＳＩＳ  ４０３７４０は、短鎖アンチセンス化合物の２つの最も高い用量において
、マウスＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡの減少を示した。
【０５６６】
【表７８】
2014033674.tif 000181
【０５６７】
ヒトＨｅｐ３Ｂ細胞を、本明細書中に記載されるように、  ｎＭの濃度の短鎖アンチセ
ンス化合物で処理した。処理期間の後、これらの細胞からＲＮＡを単離し、そして、ＰＣ
ＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、定量的リアルタイムＰ
ＣＲにより測定した。ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを、シクロフォリン特異的なプライマ
ープローブセットを用いてリアルタイムＰＣＲにより測定したシクロフォリンｍＲＮＡレ
ベルに対して正規化した。結果は、未処理のコントロール細胞に対するＰＣＳＫ９の阻害
の割合として示す。データを表７８に示し、このデータは、ＩＳＩＳ  ４０３７４０での
処理後のヒトＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡの用量依存性の減少を実証する。ＩＳＩＳ  ４０３７
３９は、より高い用量において、用量依存性の減少を示した。
【０５６８】
【表７９】
2014033674.tif 000182
【０５６９】
実施例２１：ＨｅｐＧ２細胞におけるＧＣＧＲのアンチセンス性阻害
ＧＣＧＲ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を、インビトロでのＧＣＧ
Ｒ  ｍＲＮＡに対するその作用について試験した。
【０５７０】
ＨｅｐＧ２細胞
９６ウェルプレート内の１ウェルあたりに１００００細胞の濃度で培養したＨｅｐＧ２
細胞を、本明細書中に記載されるようにして、２５ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭまたは２
００ｎＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドで処理した。処理期間の後、これらの細胞か
らＲＮＡを単離し、そして、ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるよう
にして、定量的リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩ
ＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）により測定した総ＲＮＡ含量に従って調整した。結果は、未
処理のコントロール細胞に対するＧＣＧＲ  ｍＲＮＡの減少の割合として示す。
表７９は、３−１０−３  ＭＯＥギャップマーであるＩＳＩＳ  ３２７１６１の示され
る用量での処理後のデータを示す。ＩＳＩＳ  ３２７１６１は、用量依存性の様式でＧＣ
ＧＲ  ｍＲＮＡを減少させた。
【０５７１】
【表８０】
2014033674.tif 000183
【０５７２】
サルの肝細胞
ＧＣＧＲ核酸に対して標的化させたさらなる短鎖アンチセンス化合物を、インビトロで
の、サルＧＣＧＲ  ｍＲＮＡに対するその作用について試験したサルの初代培養肝細胞を
、本明細書中に記載されるようにして、２５ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭまたは２００ｎ
Ｍの短鎖アンチセンス化合物で処理した。処理期間の後、これらの細胞からＲＮＡを単離
し、そして、ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、定量的
リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＧＣＧＲ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ
（登録商標）により測定した総ＲＮＡ含量に従って調整した。結果は、未処理のコントロ
ール細胞に対するＧＣＧＲ  ｍＲＮＡの減少の割合として表８０に示す。
【０５７３】
【表８１】
2014033674.tif 000184
【０５７４】
実施例２２：短鎖アンチセンス化合物によるＤＧＡＴ２のアンチセンス性阻害
ＤＧＡＴ２核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を、インビトロでのＤＧ
ＡＴ２  ｍＲＮＡに対するその作用について試験した。９６ウェルプレート中の培養Ａ１
０細胞を、７５ｎＭの短鎖アンチセンス化合物で処理した。約２４時間の処理期間の後、
これらの細胞からＲＮＡを単離し、そして、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中
に記載されるようにして、定量的リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＤＧＡＴ２  ｍＲ
ＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）により測定した総ＲＮＡ含量に従って調
整した。結果は、未処理のコントロール細胞に対するＤＧＡＴ２の阻害の割合として表８
１に示す。
【０５７５】
【表８２】
2014033674.tif 000185
【０５７６】
ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡに対して標的化されたさらなる短鎖アンチセンス化合物を、イン
ビトロで、用量応答性実験において試験した。Ａ１０細胞を上述のようにして調製し、そ
して、６．２５ｎＭ、１２．５ｎＭ、２５．０ｎＭ、５０．０ｎＭ、１００．０ｎＭおよ
び２００．０ｎＭの短鎖アンチセンス化合物で処理して、ＤＧＡＴ２の阻害が用量依存性
の様式で生じているかどうかを決定した。データは、以下の表８２に示される短鎖アンチ
センス化合物の各々が、用量依存性の様式でラットＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡを減少させるこ
とを実証する。結果は、未処理のコントロール細胞に対する阻害の割合として示す。「０
」は、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡが減少されなかったことを示す。
【０５７７】
【表８３】
2014033674.tif 000186
【０５７８】
ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡに対して標的化されたさらなる短鎖アンチセンス化合物をインビ
トロにおいて試験した。Ａ１０細胞を上述のようにして調製し、そして、０．６２ｎＭ、
１．８５ｎＭ、５．５６ｎＭ、１６．６７ｎＭ、５０．０ｎＭおよび１５０．０ｎＭの短
鎖アンチセンス化合物で処理して、ＤＧＡＴ２の阻害が用量依存性の様式で生じているか
どうかを決定した。ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡを、本明細書中に記載されるようにして、定量
的リアルタイムＰＣＲを用いて測定した。データは、以下の表８３に示される短鎖アンチ
センス化合物の各々が、用量依存性の様式でラットＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡを阻害すること
を実証する。結果は、未処理のコントロール細胞に対するラットＤＧＡＴ２の阻害の割合
として示す。存在する場合、「０」は、ＤＧＡＴ２  ｍＲＮＡの減少が観察されなかった
ことを示す。
【０５７９】
【表８４】
2014033674.tif 000187
【０５８０】
実施例２３：ＨｕＶＥＣ細胞におけるヒトＰＴＰ１Ｂのアンチセンス性阻害
ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を、インビトロでのＰＴ
Ｐ１Ｂ  ｍＲＮＡに対するその作用について試験した。９６ウェルプレート内の１ウェル
あたりに５０００細胞の濃度で培養したＨｕＶＥＣ細胞を、本明細書中に記載されるよう
にして、３ｎＭの短鎖アンチセンス化合物で処理した。処理期間の後、これらの細胞から
ＲＮＡを単離し、そして、ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるよう
にして、定量的リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡレベルを、Ｒ
ＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）により測定した総ＲＮＡ含量に従って調整した。結果は、
未処理のコントロールに対する、ＰＴＰ１Ｂの阻害の割合（％阻害）として示す。データ
は、表８４におけるＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化され、かつ、２−１０−２ギャップマ
ーのモチーフを有する短鎖アンチセンス化合物が、ＨｕＶＥＣ細胞においてＰＴＰ１Ｂを
阻害し得ることを実証した。
【０５８１】
【表８５】
2014033674.tif 000188
【０５８２】
実施例２４：ＨｅｐＧ２細胞におけるヒトＰＴＰ１Ｂのアンチセンス性阻害
ＰＴＰ１Ｂ核酸に対して標的化された短鎖アンチセンス化合物を、インビトロでのＰＴ
Ｐ１Ｂ  ｍＲＮＡに対するその作用について試験した。９６ウェルプレート内の１ウェル
あたりに１００００細胞の濃度で培養したＨｅｐＧ２細胞を、２５ｎＭのアンチセンスオ
リゴヌクレオチドで処理した。処理期間の後、これらの細胞からＲＮＡを単離し、そして
、ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、定量的リアルタ
イムＰＣＲにより測定した。ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録
商標）により測定した総ＲＮＡ含量に従って調整した。結果は、未処理のコントロールに
対する、ＰＴＰ１Ｂの阻害の割合（％阻害）として示す。データは、表８５におけるＰＴ
Ｐ１Ｂ核酸に対して標的化され、かつ、２−１０−２ギャップマーのモチーフを有する短
鎖アンチセンス化合物が、ＨｅｐＧ２細胞においてＰＴＰ１Ｂを阻害し得ることを実証し
た。
【０５８３】
【表８６】
2014033674.tif 000189
【０５８４】
実施例２５：ＨｕＶＥＣ細胞におけるＰＴＰ１Ｂのアンチセンス性阻害：用量応答実験
ヒト血管内皮（ＨｕＶＥＣ）細胞を、１ウェルあたり５０００細胞の濃度でプレーティ
ングし、そして、本明細書中に記載されるようにして、  ｎＭの濃度の表８６に示される
短鎖アンチセンス化合物で処理した。処理期間の後、これらの細胞からＲＮＡを単離し、
そして、ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、定量的リ
アルタイムＰＣＲにより測定した。ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ
（登録商標）により測定した総ＲＮＡ含量に従って調整した。２つの異なるヒトＰＴＰ１
Ｂプライマープローブセットを用いてｍＲＮＡレベルを測定した。プライマープローブセ
ット（ＰＰＳ）１９８での結果を表８６に示し、プライマープローブセット（ＰＰＳ）３
０００での結果を表８７に示す。結果は、未処理のコントロール細胞に対する、ＰＴＰ１
Ｂ  ｍＲＮＡ発現の阻害の割合として示す。存在する場合、「０」は、ＰＴＰ１Ｂ  ｍＲ
ＮＡの減少が観察されなかったことを示す。表８６および８７に示されるように、ＰＴＰ
１Ｂ  ｍＲＮＡレベルは、用量依存性の様式で減少した。
【０５８５】
【表８７】
2014033674.tif 000190
【表８８】
2014033674.tif 000191
【０５８６】
実施例２６：短鎖アンチセンス化合物による、ＡｐｏＢのアンチセンス性阻害
表８８に示される短鎖アンチセンス化合物を、そのインビボでの作用について試験した
。６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、３．２μｍｏｌ／ｋｇ、１μｍｏｌ／ｋｇ、０．３２μｍｏｌ
／ｋｇまたは０．１μｍｏｌ／ｋｇの用量を、３週間にわたり週に２回、腹腔内投与した
。５−１０−５  ＭＯＥギャップマーをコントロール処置に用いた。最後の投薬の約４８
時間後にマウスを屠殺した。ＲＮＡ単離のために肝臓組織を回収し、そして、血清化学解
析のために血液を回収した。ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるよう
にして、リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧ
ＲＥＥＮにより決定したＲＮＡレベルに対して正規化し、そして、生理食塩水で処置した
コントロール動物におけるＡｐｏＢ  ｍＲＮＡに対する阻害の割合として、表８９に示す
。
【０５８７】
【表８９】
2014033674.tif 000192
【表９０】
2014033674.tif 000193
【０５８８】
表８９は、２−１０−２のギャップマーのモチーフと、ウィング内のＢＮＡ修飾とを有
する短鎖アンチセンス化合物での処置後に、ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルが用量依存性の様
式で減少したことを示す。１μｍｏｌ／ｋｇの用量では、短鎖アンチセンス化合物による
ＡｐｏＢの阻害は、同等の用量の５−１０−５  ＭＯＥギャップマーで観察されるよりも
大きかった。１μｍｏｌ／ｋｇおよび３．２μｍｏｌ／ｋｇの短鎖アンチセンス化合物の
用量において、コレステロールが減少された。
短鎖アンチセンス化合物は、臓器の重量および体重、血清トランスアミナーゼ、ビリル
ビン、血中尿素窒素およびクレアチニンにより判断されるように、有害な副作用をほとん
ど示さなかったか、または全く示さなかった。
【０５８９】
実施例２７：短鎖アンチセンス化合物による、ＰＴＥＮのアンチセンス性阻害
表９０に示される短鎖アンチセンス化合物を、そのインビボでの作用について試験した
。６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、３．２μｍｏｌ／ｋｇ、１μｍｏｌ／ｋｇまたは０．３２μｍ
ｏｌ／ｋｇの用量を、３週間にわたり週に２回、腹腔内投与した。５−１０−５  ＭＯＥ
ギャップマーをコントロール処置に用いた。最後の投薬の約４８時間後にマウスを屠殺し
た。ＲＮＡ単離のために肝臓組織を回収し、そして、血清化学解析のために血液を回収し
た。ＰＴＥＮ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、リアルタイムＰ
ＣＲにより測定した。ＰＴＥＮ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮにより決定した
ＲＮＡレベルに対して正規化し、そして、生理食塩水で処置したコントロール動物におけ
るＰＴＥＮ  ｍＲＮＡに対する阻害の割合として、表９１に示す。
【０５９０】
【表９１】
2014033674.tif 000194
【表９２】
2014033674.tif 000195
【０５９１】
表９１は、２−１０−２のギャップマーのモチーフと、ウィング内のＢＮＡ修飾とを有
する短鎖アンチセンス化合物での処置後に、ＰＴＥＮ  ｍＲＮＡレベルが用量依存性の様
式で減少したことを示す。１μｍｏｌ／ｋｇの用量では、短鎖アンチセンス化合物による
ＰＴＥＮの阻害は、同等の用量の５−１０−５  ＭＯＥギャップマーで観察されるよりも
大きかった。
最高用量のＩＳＩＳ  ３９２０６３を除いて、血清トランスアミナーゼでは有意な増加
は観察されなかった。全体として、短鎖アンチセンス化合物は、有害な副作用をほとんど
示さなかったか、または全く示さなかった。
【０５９２】
実施例２８：ＢＮＡ修飾を含む短鎖アンチセンス化合物の単回用量投与
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、８μｍｏｌ／ｋｇ、４μｍｏｌ／ｋｇ、２μｍｏｌ／ｋｇまた
は１μｍｏｌ／ｋｇの用量の短鎖アンチセンス化合物の単回の腹腔内注射を施した。試験
した短鎖アンチセンス化合物は、ＩＳＩＳ  ３８７４６２およびＩＳＩＳ  ３９８２９６
であった。各用量の群を、４匹の動物から構成した。５−１０−５  ＭＯＥギャップマー
をコントロール処置に用いた。最後の投薬の約４８時間後にマウスを屠殺した。ＲＮＡ単
離のために肝臓組織を回収し、そして、血清化学解析のために血液を回収した。ＡｐｏＢ
ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、リアルタイムＰＣＲにより測
定した。ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮにより決定したＲＮＡレベル
に対して正規化し、そして、生理食塩水で処置したコントロール動物におけるＡｐｏＢ  
ｍＲＮＡに対する阻害の割合として、表９２に示す。
【０５９３】
【表９３】
2014033674.tif 000196
【０５９４】
表９２は、２−１０−２のギャップマーのモチーフと、ウィング内のＢＮＡ修飾とを有
する短鎖アンチセンス化合物の単回投与後に、ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルが用量依存性の
様式で減少したことを示す。８μｍｏｌ／ｋｇの用量では、短鎖アンチセンス化合物によ
るＡｐｏＢの阻害は、同等の用量の５−１０−５  ＭＯＥギャップマーで観察されるより
も大きかった。ＩＳＩＳ  ３８７４６２のＥＤ５０は、３．９ｍｇ／ｋｇであり、そして
、ＩＳＩＳ  ３９８２９６のＥＤ５０は、８．７ｍｇ／ｋｇであった。コレステロールも
また、用量依存性の様式で減少した。トリグリセリドは、最高用量で減少した。
短鎖アンチセンス化合物は、臓器の重量および体重、血清トランスアミナーゼ、ビリル
ビン、血中尿素窒素およびクレアチニンにより判断されるように、有害な副作用をほとん
ど示さなかったか、または全く示さなかった。
同様の単回用量投与研究において、配列番号１２２６、２−１０−２のギャップマーの
モチーフ（このウィングのヌクレオチドは、（６’Ｒ）−６’メチルメチレンオキシＢＮ
Ａ修飾を含む）を持つＩＳＩＳ  ３９２７４８は、ＰＴＥＮ  ｍＲＮＡを用量依存性の様
式で減少させた。さらに、配列番号１２２６、２−１０−２のギャップマーのモチーフ（
このウィングのヌクレオチドは、（６’Ｓ）−６’−メチルメチレンオキシＢＮＡ修飾を
含む）を持つＩＳＩＳ  ３９２７４９は、ＰＴＥＮ  ｍＲＮＡを用量依存性の様式で減少
させた。２−１０−２のギャップマーのモチーフ、配列番号１２２６の配列、および６−
（Ｓ）−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ３−ＢＮＡ修飾を有する短鎖アンチセンス化合物もまた、同様
のインビボ研究においてＰＴＥＮ  ｍＲＮＡを減少させた。
【０５９５】
実施例２９：ＢＮＡ修飾を含む短鎖アンチセンス化合物の単回用量投与
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、８μｍｏｌ／ｋｇ、４μｍｏｌ／ｋｇ、２μｍｏｌ／ｋｇまた
は１μｍｏｌ／ｋｇの用量の短鎖アンチセンス化合物の単回の腹腔内注射を施した。各用
量の群を、４匹の動物から構成した。試験した短鎖アンチセンス化合物は、ＩＳＩＳ  ３
９２０６３、ＩＳＩＳ  ３９２７４９およびＩＳＩＳ  ３６６００６であった。５−１０
−５  ＭＯＥギャップマーをコントロール処置に用いた。最後の投薬の約４８時間後にマ
ウスを屠殺した。ＲＮＡ単離のために肝臓組織を回収し、そして、血清化学解析のために
血液を回収した。ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に記載されるようにして、リ
アルタイムＰＣＲにより測定した。ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮに
より決定したＲＮＡレベルに対して正規化し、そして、生理食塩水で処置したコントロー
ル動物におけるＡｐｏＢ  ｍＲＮＡに対する阻害の割合として、表９３に示す。
【０５９６】
【表９４】
2014033674.tif 000197
【０５９７】
表９３は、２−１０−２のギャップマーのモチーフと、ウィング内のＢＮＡ修飾とを有
する短鎖アンチセンス化合物での処置後に、ＰＴＥＮ  ｍＲＮＡレベルが用量依存性の様
式で減少したことを示す。８μｍｏｌ／ｋｇの用量では、短鎖アンチセンス化合物による
ＰＴＥＮの阻害は、同等の用量の５−１０−５  ＭＯＥギャップマーで観察されるよりも
大きかった。推定のＥＤ５０は、ＩＳＩＳ  ３９２０６３について７ｍｇ／ｋｇ、ＩＳＩ
Ｓ  ３９６５６５について１７．４ｍｇ／ｋｇ、そして、ＩＳＩＳ  ３９６００６につい
て９．３ｍｇ／ｋｇであった。
ＩＳＩＳ  ３９２０６３の最高用量を除いて、血清トランスアミナーゼでは有意な増加
は観察されなかった。全体として、短鎖アンチセンス化合物は、有害な副作用をほとんど
示さなかったか、または全く示さなかった。
【０５９８】
実施例３０：パルミチン酸結合を含む短鎖アンチセンス化合物による、ＡｐｏＢのアン
チセンス性阻害
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、２．５μｍｏｌ／ｋｇ、１．０μｍｏｌ／ｋｇ、０．４μｍｏ
ｌ／ｋｇおよび０．１６μｍｏｌ／ｋｇの用量のアンチセンス化合物の単回の腹腔内注射
を施した。各用量の群を、４匹の動物から構成した。試験した短鎖アンチセンス化合物を
、表９４に示す。５−１０−５  ＭＯＥギャップマーをコントロール処置に用いた。最後
の投薬の約４８時間後にマウスを屠殺した。ＲＮＡ単離のために肝臓組織を回収し、そし
て、血清化学解析のために血液を回収した。ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルを、本明細書中に
記載されるようにして、リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベル
を、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮにより決定したＲＮＡレベルに対して正規化し、そして、生理食
塩水で処置したコントロール動物におけるＡｐｏＢ  ｍＲＮＡに対する阻害の割合として
、表９５に示す。
【０５９９】
【表９５】
2014033674.tif 000198
【表９６】
2014033674.tif 000199
【０６００】
表９５は、パルミチン酸（Ｃ１６）共役基を有する短鎖アンチセンス化合物での処置後
に、ＡｐｏＢ  ｍＲＮＡレベルが用量依存性の様式で減少したことを示す。２．５μｍｏ
ｌ／ｋｇの用量では、短鎖アンチセンス化合物によるＡｐｏＢの阻害は、同等の用量の５
−１０−５  ＭＯＥギャップマーで観察されるよりも大きかった。この研究において、推
定のＥＤ５０は、ＩＳＩＳ  ３８７４６２について１．５ｍｇ／ｋｇ、ＩＳＩＳ  ３９１
８７１について１３．１ｍｇ／ｋｇ、そして、ＩＳＩＳ  ３９１８７２について１．９ｍ
ｇ／ｋｇであった。５−１０−５  ＭＯＥギャップマーについての推定のＥＤ５０は、１
７．４ｍｇ／ｋｇであった。トリグリセリドは、ＩＳＩＳ  ３８７４６２およびＩＳＩＳ
３９１８７２の２．５ｍｇ／ｋｇおよび１．０ｍｇ／ｋｇの用量において減少した。Ｉ
ＳＩＳ  ３８７４６２およびＩＳＩＳ  ３９１８７２は、総コレステロール、ＨＤＬ−Ｃ
およびＬＤＬ−Ｃを用量依存性の様式で顕著に減少させた；ＬＤＬ−Ｃにおける減少は、
検出限界を下回って下がるほど顕著であった。全体として、短鎖アンチセンス化合物は、
有害な副作用をほとんど示さなかったか、または全く示さなかった。
【０６０１】
実施例３１：ＢＮＡ修飾を含む短鎖アンチセンス化合物による、インビボでのＰＣＳＫ
９のアンチセンス性阻害
６週齢の雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂａｒ  
Ｈａｒｂｏｒ，ＭＥ）に、ＩＳＩＳ  ４０３７３９またはＩＳＩＳ  ４０３７４０の１５
μｍｏｌ／ｋｇ、４．７μｍｏｌ／ｋｇ、１．５μｍｏｌ／ｋｇまたは０．４７μｍｏｌ
／ｋｇの用量にて、短鎖アンチセンス化合物の単回の腹腔内注射を施した。各用量の群を
、４匹の動物から構成した。５−１０−５  ＭＯＥギャップマーをコントロール処置に用
いた。最後の投薬の約７２時間後にマウスを屠殺した。ＲＮＡ単離のために肝臓組織を回
収し、そして、血清化学解析のために血液を回収した。ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡレベルを、
本明細書中に記載されるようにして、リアルタイムＰＣＲにより測定した。ＰＣＳＫ９  
ｍＲＮＡレベルを、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮにより決定したＲＮＡレベルに対して正規化した
。ＩＳＩＳ  ４０３７３９は、生理食塩水コントロールに対して、ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡ
を約７０％減少させた。ＩＳＩＳ  ４０３７４０は、生理食塩水コントロールに対して、
ＰＣＳＫ９を約１３％減少させたが、この減少は、統計的に有意ではなかった。より低い
用量では、ＰＣＳＫ９  ｍＲＮＡを有意には減少しなかった。全体として、短鎖アンチセ
ンス化合物は、有害な副作用をほとんど示さなかったか、または全く示さなかった。
【配列表】
2014033674000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成25年10月2日(2013.10.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
長さ８〜１６モノマーの短鎖アンチセンス化合物。
【外国語明細書】
2014033674000001.pdf