(57)【要約】      （修正有）【課題】うつ病を診断するためのバイオマーカーを提供する。【解決手段】診断対象の被験者から採取された血液中の、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、チロシン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ホスホリルコリン、ＡＤＰリボース、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＡＴＰ、及びＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）からなる群から選択される少なくとも一種からなるバイオマーカーの含有量を測定する、及び、前記バイオマーカーの含有量が所定の閾値以下であればうつ病と判定される前記閾値と、前記バイオマーカーの含有量の測定とを比較する、ことを含む、うつ病の検出方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
うつ病の検出方法であって、以下のステップ：
（１）診断対象の被験者から採取された血液中の、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、チロシン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ホスホリルコリン、ＡＤＰリボース、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＡＴＰ、及びＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）からなる群から選択される少なくとも一種からなるバイオマーカーの含有量を測定する、及び
（２）前記バイオマーカーの含有量が所定の閾値以下であればうつ病と判定される前記閾値と、前記バイオマーカーの含有量の測定とを比較する、
を含む、前記うつ病の検出方法。
【請求項２】
前記ステップ（２）において、タウリンの前記閾値が５０．５４μＭ以下であり、ヒポタウリンの前記閾値が２．１５μＭ以下であり、アスパラギン酸の前記閾値が３．９５μＭ以下であり、チロシンの前記閾値が６７．１９μＭ以下であり、バリンの前記閾値が２５１．０５μＭ以下であり、ロイシンの前記閾値が１８８．２６μＭ以下であり、イソロイシンの前記閾値が３０．５９μＭ以下であり、ホスホリルコリンの前記閾値が０．８７μＭ以下であり、ＡＤＰリボースの前記閾値が０．１１μＭ以下であり、ＡＤＰの前記閾値が０．９３μＭ以下であり、ＡＭＰの前記閾値が０．４８μＭ以下であり、ＡＴＰの前記閾値が１．７６μＭ以下であり、そしてＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）の前記閾値が０．４２μＭ以下であることを特徴とする、請求項１に記載のうつ病の検出方法。
【請求項３】
前記ステップ（１）において、前記バイオマーカーの測定が、タウリン及びヒポタウリンの少なくとも一種を必須に含む、請求項２に記載のうつ病の検出方法。
【請求項４】
前記ステップ（１）において、前記バイオマーカーの測定が、タウリンを必須に含む、請求項３に記載のうつ病の検出方法。
【請求項５】
前記ステップ（１）において、前記被験者は、うつ病の治療後にうつ病を罹患しているかうつ病が寛解したかの判別が困難な患者であり、
前記ステップ（２）において、前記被験者のタウリン含有量の測定値が、前記閾値以下であれば、被験者は、うつ病を罹患しているに分類される、
ことを特徴とする、請求項４に記載のうつ病の検出方法。
【請求項６】
前記ステップ（１）において、前記被験者は、うつ病と不安障害との判別が困難な患者であり、
前記ステップ（２）において、前記被験者のタウリン含有量の測定値が、前記閾値以下であれば、被験者は、少なくともうつ病を発症しているに分類される、
ことを特徴とする、請求項４に記載のうつ病の検出方法。
【請求項７】
前記不安障害がパニック障害である、請求項６に記載のうつ病の検出方法。
【請求項８】
うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、チロシン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ホスホリルコリン、ＡＤＰリボース、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＡＴＰ、及びＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）からなる群から選ばれる少なくとも一種からなることを特徴とする、前記バイオマーカー。
【請求項９】
採取された血液試料中に存在することを特徴とする、請求項８に記載のバイオマーカー。
【請求項１０】
（ａ）診断対象の被検者から採取された血液中の、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、チロシン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ホスホリルコリン、ＡＤＰリボース、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＡＴＰ、及びＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）からなる群から選択される少なくとも一種からなるバイオマーカーの含有量を取得するステップ、
（ｂ）前記バイオマーカーの含有量が所定の閾値以下であれば、うつ病と判定するステップ、及び
（ｃ）得られた判定結果を出力するステップ
をコンピュータに実行させるためのプログラム。
【請求項１１】
前記ステップ（ｂ）において、タウリンの前記閾値が５０．５４μＭ以下であり、ヒポタウリンの前記閾値が２．１５μＭ以下であり、アスパラギン酸の前記閾値が３．９５μＭ以下であり、チロシンの前記閾値が６７．１９μＭ以下であり、バリンの前記閾値が２５１．０５μＭ以下であり、ロイシンの前記閾値が１８８．２６μＭ以下であり、イソロイシンの前記閾値が３０．５９μＭ以下であり、ホスホリルコリンの前記閾値が０．８７μＭ以下であり、ＡＤＰリボースの前記閾値が０．１１μＭ以下であり、ＡＤＰの前記閾値が０．９３μＭ以下であり、ＡＭＰの前記閾値が０．４８μＭ以下であり、ＡＴＰの前記閾値が１．７６μＭ以下であり、そしてＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）の前記閾値が０．４２μＭ以下であることを特徴とする、請求項１０に記載のプログラム。
【請求項１２】
請求項１０又は１１に記載のプログラムを記録したコンピュータ読み取り可能な記録媒体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、うつ病を診断するためのバイオマーカーに関する。
【背景技術】
【０００２】
うつ病とは、気分障害の一種であり、「抑うつ気分」及び「興味や喜びの喪失」を主たる症状とするが、それ以外にも、食欲低下、不眠、疲れやすさ、希死念慮、などの症状を訴える患者もいる。一般に、診断基準として、ＷＨＯ（世界保健機関）の国際疾病分類である「ＩＣＤ−１０」、又は米国精神医学会の「ＤＳＭ−ＩＶ」の２つが用いられることが多い。
【０００３】
しかしながら、うつ病の診断は、医師や心理士の主観、あるいは症状やストレスを申告する患者や個人の主観に依拠しており、客観的と言いがたいことも多い。実際、無意識的にしろ、意識的にしろ、患者が病気であることによって何らかの有利な点がある場合に症状を過剰に訴える疾病利得や、その反対にうつ病であると他人に知られることによって蒙る偏見や不都合を避けたくて症状を秘匿することが頻繁に観察される。そのような場合、正確な疾患の診断が困難であって、治療方法を決定することが難しかったり、誤った診断によって誤った治療をしたりすることもある。
【０００４】
そこで、医師や心理士の診断を客観的に補足する方法が各種検討されている。例えば、医師や心理士の診断結果をコンピュータ処理することによって患者の症状に表れるノイズをできるだけ除く方法（国際公開  ＷＯ２００４／０８０３１２）である。
【０００５】
これまでにうつ病のマーカーとして報告された例として、遺伝子の発現レベルを測定する方法（特開２００８−２５３２５８）や、タンパク質の分解産物を検出する方法（特開２００９−９２５５０）等の、高分子物質が知られている。
【０００６】
一方で、生体内における低分子化合物をうつ病マーカーとして着目した例は、テストステロン及びコルチゾール量の測定値と対比する方法（特開２００７−２４８２２）やトリプトファンの生体内分解産物を検出する方法（国際公開  ＷＯ２００６／１０５９０７）について報告されているものがあるが、実用化には至っていない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
そこで、本発明は、うつ病を診断するためのバイオマーカーを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、以下の各項よりなる。
（１）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、ＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択されることを特徴とするバイオマーカー。
（２）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
（３）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、ホスホエタノールアミン、タウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、２−アミノアジピン酸、ヒスチジン、及びイソロイシンからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
（４）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、ヒポタウリン、ホスホリルコリン、アルギニン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、チラミン、バリン、及びＡＤＭＡからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
（５）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、アスパラギン、フェニルアラニン、グルカル酸、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
（６）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、シスタチオニンであることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
【０００９】
（７）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、ＡＤＭＡ、ヒポタウリン、リジン、ヒスチジン、ロイシン、β−アラニン、コリン、スレオニン、グリセリン酸、イソクエン酸、セリン、リンゴ酸、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、フェニルアラニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、ベタイン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ＡＤＰリボース、アスパラギン酸、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、イソロイシン、ＳＤＭＡ、ピペリジン、ピペコリン酸、クレアチン、ニコチンアミド、γ−ブチロベタイン、尿酸、３−メチル酪酸、３−アミノ酪酸、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、及びメチオニンからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
（８）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、メチオニン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ＡＤＰリボース、アスパラギン酸、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、イソロイシン、ＳＤＭＡ、ピペリジン、ピペコリン酸、クレアチニン、及びニコチンアミドからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
（９）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、ＡＤＭＡ、ヒポタウリン、リジン、ヒスチジン、ロイシン、β−アラニン、コリン、スレオニン、グリセリン酸、イソクエン酸、セリン、リンゴ酸、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、イソ酪酸、γ−ブチロベタイン、尿酸、３−メチル酪酸、３−アミノ酪酸、オルニチン、カルニチン、及びエタノールアミンからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
（１０）うつ病を診断するためのバイオマーカーであって、フェニルアラニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、サルコシン、及びベタインからなる群から選択されることを特徴とする（１）項に記載のバイオマーカー。
【００１０】
（１１）採取された血液中のＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含む、測定方法。
（１２）採取された血液中のホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含む、（１１）項に記載の測定方法。
（１３）採取された血液中のヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される第１の化合物の含有量を測定する工程と、前記血液中のホスホエタノールアミン及びタウリンからなる群から選択される第２の化合物の含有量を測定する工程と、を含む（１１）項に記載の測定方法。
（１４）（１１）項に記載の測定方法であって、前記血液中のアスパラギン酸及びアルギニンの含有量を測定する工程を含む測定方法。
（１５）（１１）項に記載の測定方法であって、前記血液中のアスパラギン酸及びチロシンの含有量を測定する工程を含む測定方法。
（１６）（１１）項に記載の測定方法であって、前記血液中のチロシン及びグルカル酸の含有量を測定する工程を含む測定方法。
（１７）（１１）項に記載の測定方法であって、前記血液中のチロシン及び３−アミノ酪酸の含有量を測定する工程を含む測定方法。
【００１１】
（１８）採取された血液中のＡＤＭＡ、ヒポタウリン、リジン、ヒスチジン、ロイシン、β−アラニン、コリン、スレオニン、グリセリン酸、イソクエン酸、セリン、リンゴ酸、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、フェニルアラニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、ベタイン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ＡＤＰリボース、アスパラギン酸、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、イソロイシン、ＳＤＭＡ、ピペリジン、ピペコリン酸、クレアチン、ニコチンアミド、γ−ブチロベタイン、尿酸、３−メチル酪酸、３−アミノ酪酸、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、及びメチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含む、（１１）項に記載の測定方法。
【００１２】
（１９）うつ病に対する薬剤の効果を判定するための方法であって、前記うつ病を罹患した患者に前記薬剤を投与する前後で採取した血液に含まれる、ＡＤＰリボース、ＡＴＰのペア、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程と、前記血液間で、前記化合物含有量を比較する工程と、を含む方法。
（２０）うつ病に対する薬剤の効果を判定するための方法であって、前記うつ病を罹患した患者に前記薬剤を投与する前後で採取した血液に含まれる、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程と、前記血液間で、前記化合物含有量を比較する工程と、を含む（１９）項に記載の方法。
【００１３】
（２１）うつ病に対する薬剤の効果を判定するための方法であって、前記うつ病を罹患した患者に前記薬剤を投与した後で採取した血液に含まれる、ＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程と、うつ病患者と健常者を判別するための、血液中の前記化合物の含有量の閾値と、前記化合物の含有量を比較する工程と、を含む方法。
（２２）うつ病に対する薬剤の効果を判定するための方法であって、前記うつ病を罹患した患者に前記薬剤を投与した後で採取した血液に含まれる、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程と、うつ病患者と健常者を判別するための、血液中の前記化合物の含有量の閾値と、前記化合物の含有量を比較する工程と、を含む、（２１）項に記載の方法。
【００１４】
（２３）うつ病患者と健常者を判別するための、血液中のＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量の閾値を決定する方法であって、うつ病と診断された複数の患者、及び複数の健常者から採取された血液に含まれる、前記化合物の含有量を測定する工程、を含む方法。
（２４）うつ病患者と健常者を判別するための、血液中のホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量の閾値を決定する方法であって、うつ病と診断された複数の患者、及び複数の健常者から採取された血液に含まれる、前記化合物の含有量を測定する工程、を含む、（２３）項に記載の方法。
【００１５】
（２５）うつ病のモデル動物をスクリーニングする方法であって、候補の動物から血液を採取する工程と、前記血液中のＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程と、を含む方法。
【００１６】
（２６）うつ病患者に対する治療薬をスクリーニングする方法であって、前記うつ病のモデル動物に治療薬の候補物質を投与する工程と、前記候補物質を投与する前後で、血液を採取する工程と、前記血液中のＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程と、前記候補物質を投与する前後で、前記血液中の化合物の含有量を比較する工程と、を含む方法。
（２７）うつ病患者に対する治療薬をスクリーニングする方法であって、前記うつ病のモデル動物に治療薬の候補物質を投与する工程と、前記候補物質を投与する前後で、血液を採取する工程と、前記血液中のホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程と、
前記候補物質を投与する前後で、前記血液中の化合物の含有量を比較する工程と、を含む、（２６）項に記載の方法。
【００１７】
（２８）うつ病を診断するための診断方法であって、診断対象の被検者の血液中のＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含む診断方法。
（２９）（２８）項に記載の診断方法であって、被検者の血液中のホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群からなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含む診断方法。
（３０）（２８）項に記載の診断方法であって、被検者の血液中のヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択される第１の化合物の含有量を測定する工程と、患者の血液中のホスホエタノールアミン及びタウリンからなる群から選択される第２の化合物の含有量を測定する工程と、を含む診断方法。
（３１）（２８）項に記載の診断方法であって、被検者の血液中のアスパラギン酸及びアルギニンの含有量を測定する工程を含む診断方法。
（３２）（２８）項に記載の診断方法であって、被検者の血液中のアスパラギン酸及びチロシンの含有量を測定する工程を含む診断方法。
（３３）（２８）項に記載の診断方法であって、被検者の血液中のチロシン及びグルカル酸の含有量を測定する工程を含む診断方法。
（３４）（２８）項に記載の診断方法であって、被検者の血液中のチロシン及び３−アミノ酪酸の含有量を測定する工程を含む診断方法。
【００１８】
（３５）うつ病の軽重度を診断するための診断方法であって、患者の血液中のシスタチオニンの含有量を測定する工程を含む診断方法。
【００１９】
（３６）うつ病を診断するための診断方法であって、診断対象の被検者の血液中のＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、ヒポタウリン、リジン、ヒスチジン、ロイシン、β−アラニン、コリン、スレオニン、グリセリン酸、イソクエン酸、セリン、リンゴ酸、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、フェニルアラニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、ベタイン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ＡＤＰリボース、アスパラギン酸、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、イソロイシン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、ピペリジン、ピペコリン酸、クレアチン、及びニコチンアミドからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含むことを特徴とする（２８）項に記載の診断方法。
（３７）うつ病を診断するための診断方法であって、被検者の血液中のホスホエタノールアミン、タウリン、ＡＤＰリボース、アスパラギン酸、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、イソロイシン、ＳＤＭＡ、ピペリジン、ピペコリン酸、クレアチニン、及びニコチンアミドからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含むことを特徴とする（２８）項に記載の診断方法。
（３８）うつ病を診断するための診断方法であって、被検者の血液中のＡＤＭＡ、ヒポタウリン、リジン、ヒスチジン、ロイシン、β−アラニン、コリン、スレオニン、グリセリン酸、イソクエン酸、セリン、リンゴ酸、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニ
リン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、及びイソ酪酸からなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含むことを特徴とする（２８）項に記載の診断方法。
（３９）うつ病を診断するための診断方法であって、被検者の血液中のフェニルアラニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、サルコシン、及びベタインからなる群から選択される一以上の化合物の含有量を測定する工程を含むことを特徴とする（２８）項に記載の診断方法。
（４０）診断対象の被検者から採取された血液中のバイオマーカーの含有量を取得する工程と、当該含有量に基づいて、当該被験者が健常者であるか、健常者でないか、うつ病患者であるか、うつ病患者でないか、のいずれか一つ以上を判定する工程と、得られた判定結果を出力する工程と、をコンピュータに実行させるためのプログラムであって、前記バイオマーカーが、ＡＤＰリボース、ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、セロトニン、トリプトファン、キヌレニン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、ピペリジン、スルホキシド化メチオニン、ピペコリン酸、スフィンガニン、γ−ブチロベタイン、グアニド酢酸、イソ酪酸、クレアチニン、サルコシン、３−メチル酪酸、ニコチンアミド、ベタイン、オルニチン、カルニチン、エタノールアミン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンからなる群から選択されることを特徴とするプログラム。
（４１）バイオマーカー測定装置に、前記血液中の当該バイオマーカーの含有量を測定させる工程を、さらに含むことを特徴とする（４０）項に記載のプログラム。
（４２）（４０）項又は（４１）項に記載のプログラムを記録したコンピュータ読み取
り可能な記録媒体。
【００２０】
（４３）うつ病が非定型うつ病であることを特徴とする（１９）〜（２２）項のいずれか１項に記載の方法。
（４４）うつ病と診断された複数の患者が、非定型うつ病と診断された患者を含むことを特徴とする（２３）項又は（２４）項に記載の方法。
（４５）うつ病患者が、非定型うつ病の患者であることを特徴とする（２６）項又は（２７）項に記載の方法。
【００２１】
＜関連文献とのクロスリファレンス＞
なお、本出願は、２００９年８月１２日出願の日本国出願番号特願２００９−１８７５２１及び２００９年１２月２２日出願の日本国出願番号特願２００９−２９１０２９の優先権の利益を主張し、これを引用することにより本明細書に含めるものとする。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下、上記知見に基づき完成した本発明の実施の形態を、実施例を挙げながら詳細に説明する。なお、本発明の目的、特徴、利点、及び、そのアイデアは、本明細書の記載により、当業者には明らかであり、本明細書の記載から、当業者であれば容易に本発明を再現できる。以下に記載された発明の実施の形態及び具体的な実施例などは、本発明の好ましい実施態様を示すものであり、例示又は説明のために示されているのであって、本発明をそれらに限定するものではない。本明細書で開示されている本発明の意図並びに範囲内で、本明細書の記載に基づき、様々な改変並びに修飾ができることは、当業者にとって明らかである。
【００２３】
＝＝バイオマーカーの診断対象となるうつ病＝＝
本明細書において、うつ病を診断するためのバイオマーカー（以下、「診断するためのバイオマーカー」を、「診断マーカー」とも称する）という場合、うつ病患者を高確率で特定できるバイオマーカー（罹患マーカー）の他に、健常者をうつ病患者から高確率で排除できるバイオマーカー（健常マーカー）も含むものとする。
【００２４】
＝＝診断マーカーの含有量の測定方法＝＝
本発明にかかる診断マーカーは、ホスホエタノールアミン、タウリン、ヒポタウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、ホスホリルコリン、アルギニン、アスパラギン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、フェニルアラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、２−アミノアジピン酸、チラミン、バリン、グルカル酸、ヒスチジン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、イソロイシン、ヒドロキシプロリン、及びシスタチオニンである。うつ病に罹患しているかどうかは、患者から採取した血液中の診断マーカーの含有量を測定することにより診断できる。
【００２５】
採取された血液に含まれる、診断マーカーの含有量を測定するにあたっては、測定に先立って、血液に前処理をしておくことが好ましい。例えば、静置や遠心分離などによって血液から血清又は血漿を分離し、取り出した血清又は血漿を測定に用いることが好ましい。
【００２６】
採取された血液に含まれる診断マーカーである化合物の含有量は、公知の方法によって測定することができる。例えば、高速液体クロマトグラフィー−質量分析計（ＬＣ−ＭＳ）や、ガスクロマトグラフィー−質量分析計（ＧＣ−ＭＳ）などの目的とする化合物を単離した後の質量を測定する方法が挙げられるが、これらに限定されない。なお、高速液体クロマトグラフィーを用いる場合には、複数のイオン性代謝物質が同時に分析可能なカラム（例えば、イオン交換カラム）を用いることが好ましい。
【００２７】
また、目的とする化合物を測定する方法として、ＮＭＲ分析を利用する測定方法、酸アルカリ中和滴定を利用する測定方法、アミノ酸分析計による測定方法、酵素法による測定方法、核酸アプタマー／ペプチドアプタマーを利用する測定方法、比色定量による測定方法、高速液体クロマトグラフィーのみを利用する測定方法、ガスクロマトグラフィーのみを利用する測定方法、及び、質量分析計のみによる測定方法等が挙げられるが、これらに限定されない。高速液体クロマトグラフィーを用いる場合には、複数のイオン性代謝物質が同時に分析可能なカラム（例えば、イオン交換カラム）を用いることが好ましい。
【００２８】
血液に含まれる複数種類の診断マーカーである化合物の含有量を、全種類一斉に測定できるという観点から、キャピラリー電気泳動−飛行時間型質量分析計（ＣＥ−ＴＯＦＭＳ）を用いて測定することが好ましい。ＣＥ−ＴＯＦＭＳを用いて測定するにあたっては、前処理によって得られる血清又は血漿に、さらに以下の前処理をしておくことが好ましい。
【００２９】
血清又は血漿を、アルコール溶媒と混合し、血清中又は血漿中に含まれる酵素の反応を停止させる。使用するアルコール溶媒の種類は、メタノールが好ましい。次に、酵素反応を停止させた血清又は血漿に対して、有機溶媒と水とを加えて混合し、得られた混合液を相分離することによって、リン脂質等の脂溶性物質を含む有機相を除去する。用いる有機溶媒の種類は、水と相分離できる有機溶媒であれば特に限定されないが、ジクロロメタン、クロロホルム、及び、ジクロロエタン等が好ましく、クロロホルムが特に好ましい。得られた水相から、タンパク質を除去することが好ましい。タンパク質を除去する方法は、特に限定されないが、例えば、限外ろ過が好ましい。タンパク質を除去した後、水相中に含まれるアルコール溶媒を留去することが好ましい。溶媒を留去する方法は、自然乾燥、減圧乾燥、又は、減圧遠心乾燥等、特に限定されないが、短時間で簡便に行える
ということを考慮すれば、減圧遠心乾燥が好ましい。このようにして、採取した血液から不溶物を除去した水溶液を調製し、この不溶物が除去された水溶液を用いてＣＥ−ＴＯＦＭＳ測定を行うことが好ましい。
【００３０】
ＣＥ−ＴＯＦＭＳを用いた測定のために用いるサンプルは、診断マーカーである化合物の、電気泳動時間や含有量の測定基準となる内部標準物質を含んでいても良い。内部標準物質は、診断マーカーである化合物の電気泳動及び質量分析の効率に影響を及ぼさないものであれば特に限定されないが、例えば、メチオニンスルホンや１０−カンファースルホン酸（１０−ｃａｍｐｈｏｒｓｕｌｆｏｎｉｃ  ａｃｉｄ、ＣＳＡ）であることが好ましい。
【００３１】
キャピラリー電気泳動のためのキャピラリーは、ヒューズドシリカキャピラリーである
ことが好ましい。また、キャピラリーの内径は、分離能の向上を踏まえれば、１００  μｍ以下であることが好ましく、５０  μｍであることが特に好ましい。キャピラリーの全長は、５０  ｃｍ〜１５０  ｃｍであることが好ましい。
【００３２】
上記キャピラリー電気泳動により得られた各画分中における、目的の診断マーカーである化合物が含まれた画分を特定する方法は、特に限定されないが、例えば、目的化合物の標品を用いて、予め当該化合物の電気泳動時間を測定しておく方法や、内部標準物質の電気泳動時間との相対時間を利用する方法などが挙げられる。
【００３３】
次に、目的の診断マーカーである化合物が含まれていると特定された画分中の、目的化合物のｍ／ｚを有する化合物の含有量を、ピーク面積として測定する。このピーク面積は、内部標準物質のピーク面積との比をとることで標準化することができる。また、目的化合物の標品を用いて検量線を作成することによって、測定されたピーク面積から、採血された血液に含まれる目的診断マーカーである化合物の絶対濃度を求めることができる。この検量線は、標準溶液法ではなく、標準添加法で作成するのが好ましい。
【００３４】
＝＝診断マーカーの使用方法＝＝
診断マーカーの使用方法には、例えば、以下の様な態様が含まれる。
【００３５】
＜うつ病の診断方法＞
まず、ヒト又はヒト以外の脊椎動物から採血して得られた血液を用いて、診断マーカーの含有量（本明細書では、マーカー量とも称する）を測定することにより、疾患の診断を行うことができる。ここで、血液中のバイオマーカーの含有量とは、バイオマーカーの絶対濃度が好ましいが、バイオマーカーの絶対濃度と相関して各個体の絶対濃度の比較ができる値であれば限定されず、相対濃度や、単位体積辺りの重量や、絶対濃度を知るために測定した生データ（例えば、ＣＥ−ＴＯＦＭＳ測定によって得られるグラフのピーク面積を標準化して得られる値）などでも良い。
【００３６】
診断をする際には、予め、うつ病に罹患していると診断された脊椎動物（本明細書では、疾患脊椎動物とも称する）、及びうつ病ではないと診断された脊椎動物（本明細書では、健常脊椎動物とも称する）の血液中のバイオマーカー量の範囲を計測しておき、診断対象である脊椎動物の血液中のバイオマーカー量が、健常脊椎動物の血液中のバイオマーカー量の範囲に入る場合は、この脊椎動物は疾患に罹患していない可能性が高く、疾患脊椎動物の血液中のバイオマーカー量の範囲に入る場合は、疾患に罹患している可能性が高い。なお、疾患脊椎動物は、非定型うつ病であってもかまわない。また、疾患脊椎動物及び診断対象である脊椎動物は、不安障害、境界性人格障害、パニック障害など、他の疾患を併発していてもかまわない。
【００３７】
また、健常脊椎動物の血液中のバイオマーカー量の範囲として、診断対象となる脊椎動物個体の健常時における血液中のバイオマーカー量の範囲を予め測定しておき、診断時のマーカー量を、健常時のバイオマーカー量の範囲と比較してもよい。
【００３８】
ここで、健常脊椎動物の血液中のバイオマーカー量の範囲は、各動物に対する複数回の測定値の平均値に標準偏差を減じた値から平均値に標準偏差を加えた値までの範囲としてもよく、平均値の下限値から上限値までの範囲としてもよく、特に限定されるものではないが、診断マーカーによって、疾患を診断する際に最も好ましい値又は範囲を選択すればよい。
【００３９】
あるいは、疾患脊椎動物と健常脊椎動物を判別するための、血液中のバイオマーカー量の閾値を決定してもよい。例えば、予め、複数の疾患脊椎動物及び複数の健常脊椎動物の血液中のバイオマーカー量を計測し、閾値を決定する。閾値の決定方法は、当業者の定法に従えばよく、特に限定されないが、疾患脊椎動物が、閾値未満（又は閾値以上）に第１の所定の割合含まれ、健常脊椎動物が、閾値以上（又は閾値未満）に第２の所定の割合含まれるように、閾値を決定すればよい。具体的な方法としては、例えば、ＳＡＳ社の統計ソフトＪＭＰなどを用い、判別のカイ二乗値が最良となるような値を求めてもよい。診断マーカーとしては、第１の所定の割合も第２の所定の割合も高い方が好ましく、７０％以上が好ましく、８０％以上がより好ましく、９０％以上がさらに好ましく、１００％が最も好ましい。両方の値を高く設定すると、特異度（ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）及び感度（ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ
）が高くなる。しかしながら、第１と第２の所定の割合を両方とも高くできない場合は、特異度と感度のどちらかが高くなるように閾値を決めても良い。特異度、感度ともに高い方が好ましく、７０％以上が好ましく、８０％以上がより好ましく、９０％以上がさらに好ましく、１００％が最も好ましい。なお、特異度とは（閾値以上又は未満の健常脊椎
動物数）／（健常脊椎動物総数）の百分率のことであり、感度とは（閾値未満又は以上の疾患脊椎動物数）／（疾患脊椎動物総数）の百分率のことである。特異度が高いバイオマーカーは、バイオマーカー量が閾値未満又は以上であった場合にうつ病に罹患している確率が高く、うつ病患者を特定するバイオマーカー（本明細書で、これらのバイオマーカーを罹患マーカーとも称する。）として用いられるのが好ましい。感度が高いバイオマーカーは、バイオマーカー量が閾値以上又は未満であった場合にうつ病に罹患していない確率が高く、うつ病患者から健常者を排除するバイオマーカー（本明細書で、これらのバイオマーカーを健常マーカーとも称する。）として用いられるのが好ましい。
【００４０】
本明細書に記載の診断マーカーは罹患マーカーとしても健常マーカーとしても用いることができるが、ホスホエタノールアミン、タウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、２−アミノアジピン酸、ヒスチジン、イソロイシン、ＡＤＰリボース、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、ピペリジン、ピペコリン酸、クレアチニン、ニコチンアミドは、罹患マーカーとしても健常マーカーとしても有効であり、その血漿中濃度を、診断対象の脊椎動物で測定し、例えば、ヒトの場合、表１で示した範囲にある場合、うつ病の可能性が高い、又は健常の可能性が高いと診断する。また、アスパラギン、フェニルアラニン、グルカル酸、ヒドロキシプロリン、シスタチオニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、サルコシン、ベタインは罹患マーカーとして用いられるのが好ましく、その血漿中濃度を、診断対象の脊椎動物で測定し、例えば、ヒトの場合、表１で示した範囲にある場合、うつ病の可能性が高いと診断する。さらに、ヒポタウリン、ホスホリルコリン、アルギニン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、チラミン、バリン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）、スレオニン、グリセリン酸、セリン、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、イソ酪酸は健常マーカーとして用いられるのが好ましく、その血漿中濃度を、診断対象の脊椎動物で測定し、例えば、ヒトの場合、実施例１によって得られた表１、又は実施例２によって得られた表２で示した範囲にある場合、健常の可能性が高いと診断する。ホスホエタノールアミン及びタウリンの場合、閾値は、それぞれ、２．４１及び５０．５４（μＭ）を用いるのがより好ましい。なお、ここで挙げた閾値は、特定の集団において、特定の方法によって算出した一例にすぎず、集団が変わると変化する可能性が高い。
【００４１】
【表１】
2014013257.tif 000002
【００４２】
【表２】
2014013257.tif 000003
【００４３】
これらのバイオマーカーを組み合わせて用いることにより、診断精度を上げることが可能になり、バイオマーカーの組み合わせは特に限定されない。例えば、罹患マーカーを２種類用い、一方だけがうつ病の可能性を示す濃度であれば、うつ病の可能性があると診断してもよいが、両方ともうつ病の可能性を示す濃度であれば、１種類の時よりうつ病の可能性は上昇する。好ましいのは、健常マーカーを罹患マーカーに組み合わせて用いる場合であって、例えば、ある動物個体に対し、健常マーカーで診断し、「健常ではない」ことを示す濃度であれば、罹患マーカーで診断し、「罹患している」ことを示す濃度であれば、うつ病である可能性が高いと判定し、「罹患している」ことを示す濃度でなければ、健常である可能性が高いと判定する。このときの診断精度は、罹患マーカーだけを用いるときより高くなる。健常マーカーが「健常である」ことを示す濃度であれば、健常である可能性が高いと診断するが、その後罹患マーカーで診断し、「罹患していない」ことを示す濃度であれば、健常である可能性はさらに高くなる。もし、罹患マーカーで「罹患している」ことを示す濃度であれば、双方のバイオマーカーの濃度の、閾値からの距離や、第３のバイオマーカーの判定により、さらに診断を行うのが好ましい。
【００４４】
複数のバイオマーカーを用いてうつ病患者を同定する場合、一つ目のバイオマーカーにおいて、感度が高くなるように閾値を設定して健常マーカーとして用い、健常者の可能性が高い人を予め排除しても良い。この場合の閾値は、高い値であれば特に限定されず、例えば約９０％としてもよいが、約９２％とするのが好ましく、約９４％とするのがより好ましい。この方法によれば、一つ目の健常マーカーにおいて、「健常である」ことを示す濃度である場合は、健常である可能性が高いと診断することができる。また、「健常である」ことを示す濃度ではない場合、次に診断マーカーを用いて、「罹患している」ことを示す濃度であれば、うつ病である可能性が高いと判定し、「罹患している」ことを示す濃度でなければ、健常である可能性が高いと判定する。これにより、判定精度を高めることが可能になる。
【００４５】
また、診断マーカーによる診断を、面接による問診やアンケートなどの、従来の診断方法と組み合わせて診断してもよい。
【００４６】
このように、これらの診断マーカーを用いることによって、精神科において、より簡便で精度の高い診断が行えるようになるだけでなく、厳密な診断法が行えない健康診断現場、内科や外科などの精神科以外の診察現場、患者が救急状態などで言葉が使えない場合、などに、スクリーニングとして用い、これまで、精神科受診からもれていたうつ病患者を精神科受診（すなわち本来の治療現場）に到達させることができるようになる。
【００４７】
特に、感度の閾値を、極端に高く設定することによって、健常マーカーとして、より有効に用いることも可能である。ここで設定する閾値は、高い値であれば特に限定されず、例えば約９０％としてもよいが、約９２％とするのが好ましく、約９４％とするのがより好ましい。そして、厳密な診断法が行えない健康診断現場では、この閾値を用いた１次診断によって、うつ病患者が少なく健常者が多い範囲にある患者を健常者と診断し、うつ病患者が多い範囲にある患者を、うつ病の可能性がある者として、精神科における専門の診断を受けさせることができる。この１次診断によって、うつ病患者の割合を高くし、精神科における２次診断の負担を減らすことができる。
【００４８】
ここで診断対象となるうつ病とは、従来の診断方法で判定され得るうつ病であれば、特に限定されないが、ＳＣＩＤ面接法によって判定されるうつ病であることが好ましい。なお、面接による問診やアンケートなどの、従来の診断方法で、適応障害を有する患者は、あらかじめ排除しておくことが好ましい。また、不安障害、境界性人格障害や抑うつ性人格障害などの人格障害、気分変調性障害を有する患者は、診断し得るが、その場合、ＡＤＭＡ、ヒポタウリン、リジン、ヒスチジン、ロイシン、β−アラニン、コリン、スレオニン、グリセリン酸、イソクエン酸、セリン、リンゴ酸、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、フェニルアラニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、サルコシン、ベタイン、ホスホエタノールアミン、タウリン、ＡＤＰリボース、アスパラギン酸、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、イソロイシン、ＳＤＭＡ、ピペリジン、ピペコリン酸、イソ酪酸、クレアチニン、ニコチンアミドなどを用いるのが好ましく、表２の閾値、あるいは表２の閾値を得た方法と同じ方法で得られる閾値を用いるのが好ましい。不安障害、境界性人格障害や抑うつ性人格障害などの人格障害、気分変調性障害を有しない患者は、本発明のいずれのマーカーでも使用し得て、表１及び表２のどちらの閾値も用いることができるが、表１の閾値、あるいは表１の閾値を得た方法と同じ方法で得られる閾値を用いるのが好ましい。
【００４９】
＜うつ病の重症度を判定する方法＞
シスタチオニンの血漿中濃度は、ＣＥＳＤとの順位及びＳＣＩＤによる診断合致項目の多さと反比例しているため、うつ病患者の中で、うつ病の重症度を判定するためのバイオマーカーとして用いることができる。
まず、診断対象の動物がうつ病であるかどうか、本発明の一つであるバイオマーカーや、面接による問診やアンケートなどの従来の診断方法で診断する。その後、うつ病患者の血漿中濃度を調べ、例えば、１８．３６μＭ未満のとき、軽症うつであり、１８．３６μＭ以上のとき、重症うつであると診断できる。
【００５０】
＜薬効の判定＞
一般に、疾患の治療薬は、個体によってその効果がばらつくことがある。従って、各個体における、ある治療薬の薬効を調べることは非常に有益であり、本発明の診断マーカーを用いれば、容易にその治療薬の薬効を調べることができる。例えば、うつ病の治療薬を投薬する前後で、疾患脊椎動物から血液を採血し、その採血した血液に含まれる診断マーカーの含有量を測定して、治療薬を投薬する前後の血液における診断マーカーの含有量を比較する。そして、治療薬の投与後に、その診断マーカーの含有量が健常の範囲に近づけば、治療薬は効果があると判定できる。このように、本発明の診断マーカーを用いることにより、治療薬の効果があるかどうかについて容易に判定することができる。
【００５１】
＜うつ病のモデル動物のスクリーニング方法＞
本発明の診断マーカーを用いることにより、うつ病のモデル動物を容易にスクリーニングすることができる。例えば、候補の動物（ヒトを除く）の血液に含まれる診断マーカーの含有量を測定して、同種の健常な動物の血液中の診断マーカーの含有量と比較することにより、その動物を診断し、うつ病のモデル動物かどうかを判断できる。
【００５２】
＜うつ病に効果のある薬剤のスクリーニング方法＞
うつ病を有する実験動物を用いて、うつ病の治療に効果がある化合物を同定することができる。例えば、うつ病のモデル動物（ヒトを除く）にうつ病の治療薬の候補である化合物を投与し、投与前後で採血し、その血液に含まれる診断マーカーの含有量を測定して、その化合物を投与する前後の血液における診断マーカーの含有量を比較する。化合物投与後に、その診断マーカーの含有量が健常の範囲に近づけば、投与した化合物はうつ病の治療に効果があると判定できる。このように、本発明の診断マーカーを用いることにより、疾患の治療に効果がある化合物を容易にスクリーニングすることも可能である。
【００５３】
＜疾患動物に最も効果のある薬剤のスクリーニング方法＞
個体によって薬効が異なる薬剤の場合、うつ病を有する個体に複数の薬剤を試してみて、診断マーカーによって診断し、その個体にとって最も有効な薬剤をスクリーニングすることも可能である。
【００５４】
＝＝バイオマーカーを利用するためのコンピュータ＝＝
上述したように、脊椎動物個体から採取された血液に含まれる診断マーカーである化合物の含有量が測定された後、その結果が、コンピュータに送信され、上述の方法に従って、コンピュータが、その結果を利用してもよい。
例えば、医療従事者が、脊椎動物個体から血液を採取し、適切に処理をして、サンプルをバイオマーカー測定装置にセットする。コンピュータは、バイオマーカー測定装置に、サンプル中のバイオマーカーの含有量を測定させ、測定結果を取得する。そして、コンピュータは、取得した血漿中マーカー含有量に基づいて、診断対象の被験者が健常者であるか、健常者でないか、うつ病患者であるか、うつ病患者でないか、のいずれか一つ以上を判定する。また、コンピュータは、上述した方法と同様にして、うつ病の重症度や、抗うつ剤の薬効を判定することもできる。コンピュータは、そのようにして得られた判定結果を出力し、医療従事者は、診断対象の被験者についての情報を得ることが可能になる。
なお、本発明のプログラムは、コンピュータに、取得した血漿中マーカー含有量を利用する方法を実行させるものである。また、コンピュータに、バイオマーカー測定装置にサンプル中のバイオマーカーの含有量を測定させる工程を実行させてもよい。
そして、このようなプログラムを、コンピュータ読み取り可能な記録媒体に記録することもできる。記録媒体は、ハードディスク、ＣＤ、ＤＶＤ、ＵＳＢメモリ、フロッピー（登録商標）ディスクなど、特に限定されない。
【実施例】
【００５５】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。本実施例では、うつ病であると予め診断された患者に対し、本発明のマーカーを用いることにより、実際に、うつ病患者と健常者を区別しうることを示す。
【００５６】
［実施例１］
［１］うつ病患者の診断
うつ病患者は、国立精神・神経センター病院の外来で診察し、主に初診、及び、再診２−３回目までに、ＳＣＩＤ（Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｖｉｅｗ  ｆｏｒ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ）面接法にて、うつ病であると診断された患者から選択し、倫理委員会の承認のもと、所定のインフォームドコンセント手続きを経て、研究協力を依頼した患者である。除外規定は、Ｉ軸およびＩＩ軸の診断との併発のある大うつ病（ＭＤ）である。ＳＣＩＤ面接法とは、精神障害の鑑別診断法の一つであって、ＤＳＭ−ＩＶの診断基準に準拠して、再現性のある診断が可能なように組み立てられた構成的面接法である。初診時には、喫煙習慣などの生活習慣、薬物の摂取状況、主訴、月経、睡眠状態などの、一般的な問診情報と、既往歴、家族歴、身体疾患の有無などの検査、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎の有無、頭部ＣＴ、血液生化学検査、心電図、レントゲン、などの医学情報を得た。インフォームドコンセント取得後に、アンケート調査により、ＣＥＳＤ（抑うつに関する得点）、ＳＴＡＩ（不安に関する得点）についても調査した。その際、研究コーディネーター（臨床心理士）が直接面談することによって、回答が欠落している箇所を確認した。また、各患者から、本発明のマーカーの血漿中濃度を測定するために、１４ｍＬの血を採取し、２時間以内に血漿を分離し、測定まで液体窒素中で保管した。いずれかの不安障害の併発するうつ病、適応障害との鑑別が難しい軽症うつ病、境界性人格障害やなんらかの人格障害を持つうつ病、気分変調性障害の経過の中で起こった大うつ病エピソードの患者などを除外し、このようなＩ軸の患者およびＩＩ軸の診断との併発のない大うつ病（ＭＤ）の患者を３５名選択し、解析を行った。
【００５７】
一方、健常者は、広告などにより、精神保健研究所で召集し、研究協力を依頼した者から選択した。まず、精神保健研究所実験室にて、インフォームドコンセント取得後に、喫煙習慣などの生活習慣、薬物の摂取状況、主訴、月経、睡眠状態、既往歴、家族歴、身体疾患の有無などの問診、ＣＥＳＤ、ＳＴＡＩアンケート調査を行ったが、ＣＥＳＤが２１点以上のものは、アンケートのみによって、健常者ではないと判断して除外した。また、問診で、身体疾患の治療中の被験者は、極力排除した。アンケートに際しては、研究コーディネーター（臨床心理士）が直接面談することによって、回答が欠落している箇所を確認した。こうして健常であると診断された４１名を選び、各健常者から、本発明のマーカーの血漿中濃度を測定するために、１４ｍＬの血を採取し、２時間以内に血漿を分離し、測定まで液体窒素中で保管した。
【００５８】
表３に、うつ病及び健常者の、性別、年齢、心理テスト（ＣＥＳＤ，ＳＴＡＩ）の結果を示す。
【００５９】
【表３】
2014013257.tif 000004
【００６０】
性別の分布に関して、カイ二乗検定で、うつ病、健常の群間差はなかった。年齢に関しては、うつ病と健常者の間で、ｔ検定で有意差はなく、各群の、男性間、女性間でも、有意差はなかった。両群間で、結婚しているか否か、就労しているか否か、身長、体重、検査一ヶ月前の体重の変動、タバコの摂取量において、有意な差が、認められなかった。
【００６１】
抑うつの状態を自己申告で表現するＣＥＳＤ得点に関しては、うつ病と健常者の間で、ｔ検定でｐ＜０．０１で有意差があり、各群の、男性間、女性間でも、有意差があった。各群内の、男性及び女性の間では、有意差がなかった。検査時点での不安の状態を自己申告で表現するＳＴＡＩ−Ｓ得点に関しては、うつ病と健常者の間で、ｔ検定でｐ＜０．０５で有意差があり、各群の、男性間、女性間でも、有意差があった。各群内の、男性及び女性の間では、有意差がなかった。しかしながら、被験者の生来の不安になりやすさを測定するＳＴＡＩ−Ｔ得点に関しては、うつ病と健常者の間で、ｔ検定で有意差がなく、各群の、男性間、女性間でも、有意差がなく、各群内の男性及び女性の間でも、有意差がなかった。
【００６２】
なお、両群間で、有意な差のあった心理社会的指標は以下のとおりである。不眠症状である寝つきの悪さ、早朝覚醒において、うつ病群において、顕著に頻度が多かった。ＢＭＩは、うつ病群でやや大きかった。アルコール摂取頻度は、健常群のほうがやや多かった。学歴に関しては、うつ病群には、女性に中学卒が多く、健常女性に大学院卒がおり、やや、うつ病群の方が、低学歴であった。
【００６３】
検査時の薬物の使用に関しては、下記の表４のとおりで、カイ二乗検定で有意な差（ｐ＜０．０１）があった。健常者で使用している薬物は、頭痛腰痛などの痛み止め、高血圧の薬であり、うつ病で使用している薬物は、睡眠薬、抗不安薬が主体で、ＳＳＲＩは、７名が使用していた。
【表４】
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【００６４】
［２］血漿サンプルの調製  血液中に含まれる各診断マーカーである化合物の量を、キャピラリー電気泳動−飛行時間型質量分析計（ＣＥ−ＴＯＦＭＳ）で測定するべく、以下の方法でＣＥ−ＴＯＦＭＳ測定用血漿サンプルを調製した。
【００６５】
インフォームドコンセントを得たうえで患者から採血し調製された血漿１００  μＬ（国立精神・神経センターが採取）を、遠心チューブに入れた。内部標準溶液として１０  μＭのメチオニンスルホンと１０  μＭの１０−カンファースルホン酸（Ｈ３３０４−１００２、販売製造元：ヒューマン・メタボローム・テクノロジーズ株式会社）を含有するメタノール（和光純薬、ＬＣ／ＭＳ用）０．４５  ｍＬを加え、クロロホルム（和光純薬、試薬特級）０．５  ｍＬ及びＭｉｌｌｉ−Ｑ水２００  μＬを加えた後、ボルテックスで３０秒間よく混合し、遠心分離（４℃、２，３００  ×  ｇ、５分）した。水相を限外ろ過フィルター（ミリポア社  Ｕｌｔｒａｆｒｅｅ−ＭＣＰＢＣＣ  遠心式フィルターユニット  ５ｋＤａ）に移し、フィルターカップ内の溶液が、ほぼなくなるまで遠心ろ過（４℃、９，１００  ×  ｇ、２  −  ４時間）した。フィルターカップを取り除き、ろ液を減圧下で遠心乾燥した。乾燥物を、内部標準物質を添加した５０  μＬのＭｉｌｌｉ−Ｑ水に再溶解することによって、ＣＥ−ＴＯＦＭＳ測定用サンプルを調製した。
【００６６】
［３］ＣＥ−ＴＯＦＭＳの測定方法と結果の解析方法
ＣＥ−ＴＯＦＭＳの測定、及び、引き続くデータ解析は、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＣＥ−ＴＯＦ−ＭＳＤ  ｓｙｓｔｅｍ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）において、キャピラリーにＦｕｓｅｄ  ｓｉｌｉｃａ  ｃａｐｉｌｌａｒｙを用いて行った。
【００６７】
ＣＥ−ＴＯＦＭＳの測定の測定条件は、下記の通りである。
（Ａ）カチオンモード
Ｒｕｎ  ｂｕｆｆｅｒ  ：  Ｃａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  （  ｐ／ｎ  ：  Ｈ３３０１−１００１）
Ｒｉｎｓｅ  ｂｕｆｆｅｒ  ：  Ｃａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  （  ｐ／ｎ  ：  Ｈ３３０１−１００１）
Ｓａｍｐｌｅ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ：  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ５０  ｍｂａｒ，  １０  ｓｅｃ
ＣＥ  ｖｏｌｔａｇｅ  ：  Ｐｏｓｉｔｉｖｅ，  ３０  ｋＶ
ＭＳ  ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  ：  ＥＳＩ  Ｐｏｓｉｔｉｖｅ
ＭＳ  ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｖｏｌｔａｇｅ  ：  ４，０００  Ｖ
ＭＳ  ｓｃａｎ  ｒａｎｇｅ  ：  ｍ／ｚ  ５０−１，０００
Ｓｈｅａｔｈ  ｌｉｑｕｉｄ  ：  ＨＭＴ  Ｓｈｅａｔｈ  Ｌｉｑｕｉｄ  （  ｐ／ｎ  ：  Ｈ３３０１−１０２０）
【００６８】
（Ｂ）アニオンモード
Ｒｕｎ  ｂｕｆｆｅｒ  ：  Ａｎｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  （  ｐ／ｎ  ：  Ｈ３３０２−１０２１）
Ｒｉｎｓｅ  ｂｕｆｆｅｒ  ：  Ａｎｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  （  ｐ／ｎ  ：  Ｈ３３０２−１０２２）
Ｓａｍｐｌｅ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ：  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ５０  ｍｂａｒ，  ２５  ｓｅｃ
ＣＥ  ｖｏｌｔａｇｅ  ：  Ｐｏｓｉｔｉｖｅ，  ３０  ｋＶ
ＭＳ  ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ  ：  ＥＳＩ  Ｎｅｇａｔｉｖｅ
ＭＳ  ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｖｏｌｔａｇｅ  ：  ３，５００  Ｖ
ＭＳ  ｓｃａｎ  ｒａｎｇｅ  ：  ｍ／ｚ  ５０−１，０００
Ｓｈｅａｔｈ  ｌｉｑｕｉｄ  ：  ＨＭＴ  Ｓｈｅａｔｈ  Ｌｉｑｕｉｄ  （  ｐ／ｎ  ：  Ｈ３３０１−１０２０）
【００６９】
ＣＥ−ＴＯＦＭＳで検出されたピークは、ピーク情報としてｍ／ｚ、泳動時間（Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｔｉｍｅ：  ＭＴ）と面積値を得た。得られたピーク面積値は下記の式１を用いて相対面積値に変換した。
【数１】
2014013257.tif 000006
【００７０】
［４］ＣＥ−ＴＯＦＭＳによる診断マーカーの血漿中濃度測定と結果の解析
うつ病患者及び、健常者から採血し調製された血漿由来のＣＥ−ＴＯＦＭＳ測定用サンプルについて、カチオンモード及びアニオンモードでのＣＥ−ＴＯＦＭＳ測定を行った。この測定により、各サンプル内に含まれる、各化合物の含有量のデータをピーク面積として得た。
【００７１】
このピーク面積のデータから、ＳＡＳ社の統計ソフトＪＭＰを用い、判別のカイ二乗値が最良となるような値を求め、罹患マーカーとして、うつ病患者と健常者とを区別しうる閾値とした。また、市販の標品を用いて検量線を作成することにより、得られた閾値を、血漿中の濃度に基づく絶対値（閾値（μＭ））に変換した。表５に、罹患マーカーとして使用する際の、その値以上、又はその値未満の範囲に含まれる、うつ病患者数又は健常者数を示し、特異度及び感度を計算した結果を表６に示す。
【００７２】
【表５】
2014013257.tif 000007
【００７３】
【表６】
2014013257.tif 000008
【００７４】
これらの化合物のうち、ヒポタウリン、ホスホリルコリン、アルギニン、３−アミノ酪酸、β−アラニン、リジン、ホスホクレアチン、アラニン、尿酸、コリン、イソクエン酸、ロイシン、リンゴ酸、チラミン、バリン、ＡＤＭＡ（非対称性ジメチルアルギニン）などは、特に感度が高く、健常者を排除する能力が高いので、健常マーカーとして用いるのが好ましい。また、アスパラギン、フェニルアラニン、グルカル酸、ヒドロキシプロリン、シスタチオニンなどは、特に特異度が高く、罹患者を捕捉する能力が高いので、罹患マーカーとして用いるのが好ましい。特に、感度、特異度共に６０％以上あるような化合物、ホスホエタノールアミン、タウリン、アスパラギン酸、メチオニン、チロシン、２−アミノアジピン酸、ヒスチジン、イソロイシンなどは、罹患マーカーとしても健常マーカーとしても有効であり、単独で診断に用いることもできる。
【００７５】
また、これらの化合物に関しては、血液をＣＥ−ＴＯＦＭＳ測定するのみで、血液における全ての含有量を一斉に測定できるため、複数の化合物の結果を組み合わせて診断することが極めて容易である。
【００７６】
［５］健常者を効果的に除くための健常マーカーの使用
本実施例では、上記の化合物について、バイオマーカーの感度の閾値を９４．３％と設定して健常マーカーとして用いる場合に、閾値以上、又は閾値未満の範囲に含まれる、うつ病患者数又は健常者数を表７に示し、表８に特異度を計算した結果を示す。
【００７７】
【表７】
2014013257.tif 000009
【００７８】
【表８】
2014013257.tif 000010
【００７９】
このように閾値を決めることによって、閾値より高値あるいは低値に、うつ病患者を偏らせることができる。従って、うつ病患者を多数含んだ範囲を採ることによって、全体の人数におけるうつ病患者の割合を増やすことができる。
実際には、感度が９４．３％とした場合、特異度が５．７（＝１００−９４．３）％よ
り大きければ、集団中のうつ病患者と健常者の割合にかかわらず、この方法によって、うつ病患者の割合を増やすことができる。表８に示されたバイオマーカーについては、全て、特異度が５．７％以上であり、健常マーカーとして有用である。
【００８０】
［６］複数のバイオマーカーを用いた診断
上記の化合物のうち、複数のバイオマーカーを用いることにより、診断精度を上げることができる。特に、罹患マーカーと健常マーカーの組み合わせ、両方に有効なバイオマーカーと罹患マーカーの組み合わせ、両方に有効なバイオマーカーと健常マーカーの組み合わせ、両方に有効なバイオマーカー同士の組み合わせが有効であると考えられる。以下に、具体例を示す。
（１）アスパラギン酸が３．９５μＭ未満かつ、アルギニンが８９．２７μＭ未満の患者をうつ病と定義し、それ以外を健常と定義すると、感度９４％、特異度８８％
（２）アスパラギン酸が３．９５μＭ未満かつチロシンが６７．１９μＭ未満の患者をうつ病と定義し、それ以外を健常と定義すると、感度９４％、特異度８１％
（３）チロシンが６７．１９μＭ未満かつ、グルカル酸が０．４２μＭ以上の患者をうつ病と定義し、それ以外を健常と定義すると、感度９４％、特異度８１％
（４）チロシンが６７．１９μＭ未満かつ、３−アミノ酪酸が１１．５０μＭ未満の患者をうつ病と定義し、それ以外を健常と定義すると、感度９１％、特異度８５％
となって、単独でバイオマーカーを使用するより、診断精度が向上する。
【００８１】
［７］うつ病の重症度を判定するためのバイオマーカー
実施例４と同様に、うつ病患者群の各サンプル内に含まれる、シスタチオニンの含有量のデータをピーク面積として得て、ＣＥＳＤとの順位及びＳＣＩＤによる診断合致項目の多さに関し、Ｓｐｅａｒｍａｎの順位相関係数で検定したところ、ＣＥＳＤ  とは、ｒ＝−０．４６０  ｐ＝０．０３９で、ＳＣＩＤとは、ｒ＝−０．３３９、ｐ＝０．０４９となり、逆相関した。
そこで、シスタチオニンの含有量について、軽症うつ病患者と重症うつ病患者の閾値を求めたところ、表９に示すように、閾値０．００２６５を以って、軽症うつ病患者と重症うつ病患者が識別できた。なお、本実施例では、ＣＥＳＤ３０点以下を軽症うつ病、３１点以上を重症うつ病とし、ＳＣＩＤの診断基準９項目のうち、５−６項目該当が軽症うつ病、７項目以上該当を重症うつ病と定義した。
【００８２】
【表９】
2014013257.tif 000011
【００８３】
このように、シスタチオニンは、うつ病の診断マーカー、特に、うつ病の重症度を判定するためのバイオマーカーとして有効に利用できる。
【００８４】
なお、この閾値は、絶対濃度に変換すると約１８．３６μＭになった。
【００８５】
［実施例２］
［１］うつ病患者の診断
本実施例では、適応障害以外の不安障害を併発するうつ病患者３名、境界性人格障害を併発しているうつ病患者２名を含めた、Ｉ軸の患者３４名の患者群、及び適応障害との鑑別が難しい軽症うつ病患者７名及び健常者３１名を含めた対照群に対し、解析を行った。患者群及び対照群に含まれる検査対象者は、実施例１と同様に選択した。
両方の群で、年齢、身長、体重、ＢＭＩ、性別に有意差はなかった。また、結婚状況、就労状況、検査一ヶ月前の体重の変動、タバコの摂取量についても、有意差は認められなかった。
【００８６】
［２］血漿サンプルの調製及びＣＥ−ＴＯＦＭＳの測定方法と結果の解析方法
上述した検査対象者からの血漿サンプルの調製、及びそれらのサンプルにおける各マーカーのＣＥ−ＴＯＦＭＳによる測定方法は実施例１と同じである。
【００８７】
［３］ＣＥ−ＴＯＦＭＳによる診断マーカーの血漿中濃度測定と結果の解析
患者群及び対照群に含まれる検査対象者の血漿における診断マーカーの濃度測定、閾値決定、及び結果の解析は実施例１と同様に行った。
表１０に、各診断マーカーの解析結果を記載する。
【００８８】
【表１０】
2014013257.tif 000012
【００８９】
これらの化合物のうち、ＡＤＭＡ、ヒポタウリン、リジン、ヒスチジン、ロイシン、β−アラニン、コリン、スレオニン、グリセリン酸、イソクエン酸、セリン、リンゴ酸、２−メチルセリン、スフィンゴシン、ホモバニリン酸、スルホキシド化メチオニン、スフィンガニン、イソ酪酸などは、特に感度が高く、健常者を排除する能力が高いので、健常マーカーとして用いるのが好ましい。また、フェニルアラニン、アラニン、２−アミノアジピン酸、Ｎ−アセチルアスパラギン酸、グルタミン酸、トリゴネリン、クレアチン、グアニド酢酸、サルコシン、ベタインなどは、特に特異度が高く、罹患者を捕捉する能力が高いので、罹患マーカーとして用いるのが好ましい。特に、感度、特異度共に６０％以上あるような化合物、ホスホエタノールアミン、タウリン、ＡＤＰリボース、アスパラギン酸、チロシン、ＡＴＰ、ＡＤＰ、アスパラギン、ＡＭＰ、セロトニン、バリン、トリプトファン、キヌレニン、ホスホリルコリン、イソロイシン、ＳＤＭＡ（対称性ジメチルアルギニン）、ピペリジン、ピペコリン酸、クレアチニン、ニコチンアミドなどは、罹患マーカーとしても健常マーカーとしても有効であり、単独で診断に用いることもできる。
【００９０】
［４］健常者を効果的に除くための健常マーカー及びその閾値の設定
ここでは、健常マーカーによって、健常者を効率よく排除できることを示す。
各バイオマーカーの閾値を、感度を９４．１％になるように設定し、うつ病患者の少ない範囲の集団を除外することで、健常者を効率よく除外した。その閾値における特異度を計算し、その結果を表１１に示す。
【００９１】
【表１１】
2014013257.tif 000013
このように閾値を決めることによって、閾値より高値あるいは低値に、うつ病患者を偏らせることができる。従って、うつ病患者を多数含んだ範囲を採ることによって、全体の人数におけるうつ病患者の割合を増やすことができる。
実際には、感度が９４．１％とした場合、特異度が５．９（＝１００−９４．１）％よ
り大きければ、集団中のうつ病患者と健常者の割合にかかわらず、この方法によって、うつ病患者の割合を増やすことができる。表１１に示されたバイオマーカーについては、全て、特異度が５．９％以上であり、健常マーカーとして有用である。
［実施例３］
［１］標準添加法を用いた血漿中マーカー濃度の算出
実施例１及び２では、市販の標品を標準溶液として検量線を作成することにより、得られた閾値を、血漿中の濃度に基づく絶対値（閾値（μＭ））に変換した（標準溶液法）。本実施例では、所定の系列の濃度の標準溶液を作製し、サンプルごとに、各標準溶液を添加した溶液の系列を作製し、検量線を作成することによって、実施例２の各サンプルの血漿中マーカー濃度を決定した（標準添加法）。その濃度を用いて、実施例２と同様に閾値を決定したところ、ホスホエタノールアミン及びタウリンの閾値は、それぞれ、２．４１及び５０．５４（μＭ）となった。
【００９２】
［２］治療前後での血漿中マーカー濃度の変化
実施例１及び２の集団には入っていないうつ病患者２名について、治療前と、約６ヶ月間ＳＳＲＩなどの薬物で治療し、うつ病が寛解したと診断された後（治療後）において、ホスホエタノールアミン及びタウリンの血漿中マーカー濃度（μＭ）を測定した。なお、濃度は、標準添加法によって決定した。
【００９３】
【表１２】
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【００９４】
このように、両方の患者とも、ホスホエタノールアミン及びタウリンの血漿中マーカー濃度は、治療後、健常者と同等のレベルにまで増加した。また、閾値の一例として、［１］で決定した閾値を用いると、患者Ａ、患者Ｂともに、どちらのマーカーを用いても、治療前にはうつ病であると、治療後には健常であると診断できる。
【００９５】
［３］閾値の検定  その１
実施例１及び２で用いたサンプルと独立な１１名（６名は健常者、５名はうつ病患者と確定診断されている）の血漿中マーカー濃度を、［１］と同様に測定し、［１］で決定した閾値を用いて診断した。
【００９６】
【表１３】
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【００９７】
［１］で決定した閾値を用いることによって、健常者は１００％の確率で適切に診断できた。また、うつ病患者は、ホスホエタノールアミンでは８０％の確率で、タウリンは６０％の確率で適切に診断が可能であった。このように、ホスホエタノールアミン及びタウリンは、うつ病の診断マーカーとして有用である。
【００９８】
［４］閾値の検定  その２
実施例１〜３で用いたサンプルと独立な１４名（全員がパニック障害を有する。９名は非うつ病者［表では健常者と記載］、５名は非定型うつ病患者と確定診断されている。）の血漿中マーカー濃度を、［１］と同様に測定し、［１］で決定した閾値を用いて診断した。
【００９９】
【表１４】
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【０１００】
［１］で決定した閾値を用いることによって、ホスホエタノールアミンでは、うつ病者も非うつ病者も、１００％の確率で適切に診断できた。タウリンでは、６０％の確率でうつ病者を、８９％の確率で非うつ病者を、適切に診断できた。このように、ホスホエタノールアミン及びタウリンは、非定型うつ病の患者に対しても、うつ病の診断マーカーとして有用である。また、他の疾患（例えば、パニック障害）を併発していても、本発明のマーカーは使用可能である。
【産業上の利用可能性】
【０１０１】
本発明によって、うつ病を診断するためのバイオマーカー及びそのバイオマーカーを用いた診断方法を提供することができるようになった。