(57)【要約】【課題】ＴＧＦ−βスーパーファミリーメンバー含有タンパク質の最小に侵襲性の全身送達のための組成物および方法の提供。【解決手段】本発明は、それだけには限らないが、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質などの最小に可溶性の生物活性剤の全身送達のための方法および組成物を対象とする。本発明によれば、例示的生物活性剤として、ＢＭＰ−７がある。本発明は、骨粗鬆症などの骨格障害に対する最小に侵襲性の全身治療ならびに傷害されたまたは病変した非石灰化組織および腎臓などの臓器に対する最小に侵襲性の全身治療をさらに提供する。本発明の実施は、生物活性剤の血管内送達の部位での有害な副作用を排除する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本願は、２００９年２月１２日に出願された米国仮特許出願第６１／１５１，９０２号の優先権および利益を主張し、この米国仮特許出願の内容は、本明細書中に参考として援用される。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
骨形成タンパク質（ＢＭＰ）は、トランスフォーミング増殖因子β（ＴＧＦ−β）のスーパーファミリーに属し、パターン形成および組織の特殊化ならびに成体組織における創傷治癒プロセスおよび修復プロセスの促進など、細胞プロセスおよび発達プロセスの多様なセットを制御する。ＢＭＰは、骨および軟骨形成を誘導するその能力によって最初に単離されたが、その他の組織および器官の修復にとってのその有用性が今では広く認められている。
【０００３】
今日まで、臨床上有効な用量のＢＭＰの非局所送達、特にＢＭＰの反復投与を伴わない長期間にわたる非局所送達、のための信頼できる手段は当業者の手に入らなかった。実際、ほとんどのタンパク質性生物薬剤（ｐｒｏｔｅｉｎａｃｅｏｕｓ  ｂｉｏｌｏｇｉｃ  ａｇｅｎｔ）の有効な送達は、概して、未解決の課題のままとなっている。タンパク質技術および製薬化学の進歩にもかかわらず、少なくとも２つの問題が、患者へ鍵となる生理学的因子を提供することを必要とする臨床医を悩ませ続けている。
【０００４】
第１に、ほとんどの治療薬の好ましい投与様式は、経口または注射によってである。しかし、経口投与は、タンパク質などの高分子薬剤にとっては、それらの多くが消化管中で不安定であり、それによって、特定の投薬計画の有効性が損なわれ得るので不適当であることが多い。さらに、特定の治療用タンパク質またはタンパク性薬剤が、通常の注射法によって投与される場合には、これらの薬剤が無視できるバイオアベイラビリティを有し得るので頻繁な、複数回の注射が必要とされる。したがって、最も一般的な、通常の医薬の投与手段は、患者に実質的に身体的負担を課し、患者管理に関連する相当な管理費を生じ得る。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、生物学的に活性な薬剤、特に、ＢＭＰおよびその他のタンパク質性高分子生物製剤または薬物などの高分子の代替提供様式が必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、例示的骨形成タンパク質（ＢＭＰ）であるＢＭＰ−７を、例えば、それだけには限らないが、中心静脈カテーテルなどの血管アクセス構造物を介して、タンパク質の溶液を提供することによって、有害作用を伴わずに、非外科的に、非局所的に哺乳類に提供できるという発見に基づいている。実際、本発明は、特定の的確な生理学的判定基準が、投与および送達の成功において決定的であるという発見を利用する。本明細書に示されるように、例示的タンパク質であるＢＭＰ−７は、いくつか挙げると、中心静脈ライン、中心静脈カテーテルまたは動静脈瘻などの血管アクセス構造物を介してＢＭＰの溶液を提供することによって、ＢＭＰで治療可能な状態を患っているヒト被験体に安全に提供できる。例えば、中心静脈ラインは、例えば、外頚静脈または内頚静脈（頚部）、鎖骨下静脈（胸部）、大腿静脈（鼠径部）または上大静脈にアクセスするための、頚部、胸部または鼠径部に挿入された中心静脈アクセスカテーテルを含み得る。血管ラインは、それが容易にアクセス可能であり、カテーテルアクセスが、適所で十分に治癒されるように、例えば、治療薬が導入されるカテーテルの注入先端に血管アクセスポートを有するように、留置されることが好ましい。血管ラインは、手術で留置しても、手術を行わずに留置してもよく、次いで、血管への穿刺部位での任意の漏出を最小化または回避するために治癒することが可能にされる。本明細書において別の場所で説明されるように、本発明の態様は、いくつか挙げると、ｐＨ、添加剤および／または濃度などの製剤パラメータ、ならびに製剤パラメータおよび／または投与速度の操作によって達成される、このような製剤の投与速度およびその有効な投与量を含む、最小に侵襲性の全身送達（例えば、中心性に）に適したタンパク質製剤をさらに含む。
【０００７】
ＢＭＰなどのタンパク質ならびに組織モルフォゲンのＴＧＦ−βスーパーファミリーのその他のメンバーの現在の臨床適用は、局所骨成長および修復を誘導するための、局所的な、外科的に侵襲性の埋め込みに限定されているが、前臨床研究によって、ＢＭＰ治療が有益であり得るいくつかの全身性病状が確認されている。これらとして、それだけには限らないが、慢性および急性腎臓病、アテローム性動脈硬化症、肺線維症、肥満症、糖尿病、癌、眼の瘢痕、肝臓線維症、炎症性障害および神経系障害における適用が挙げられる。本発明を使用するこのような疾患の治療に従って、ＢＭＰ−７の非局所投与が、最適なアプローチであると現在認識されている。さらに、本発明によって、直接末梢注射（例えば、血管内、皮下または腹腔内投与を介した；さらに従来のシリンジニードルを備えたシリンジを使用する血管内投与を含む）などの従来の全身投与法は、注射部位での異所性骨および／または線維性組織の形成および／または例えば、末梢浮腫などの局在化した組織外傷の誘発をはじめとする望ましくない作用を有し得ることがさらに確認される。本明細書において別の場所で説明されるように、本発明は、生物薬剤（ｂｉｏｌｏｇｉｃ  ａｇｅｎｔ）、特に、それだけには限らないが、ＢＭＰなどのタンパク質性高分子の最小に侵襲性の全身送達のための、これまで記載されていない材料および方法に関する。本明細書において意図される最小に侵襲性の全身送達は、経口、非経口または局所送達（ｔｏｐｉｃａｌ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）を含まないことはさらに理解される。
【０００８】
第１の態様では、本発明は、生物薬剤および血管アクセス構造物を含む組成物を対象とする。特定の好ましい実施形態では、生物薬剤は、最小に可溶性のタンパク質である。一実施形態では、タンパク質性生物薬剤は、生理学的ｐＨで実質的に不溶性であるタンパク質である。一実施形態では、タンパク質性生物薬剤は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のメンバーである。本発明の別の実施形態は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のＢＭＰサブファミリーのメンバーであるタンパク質性生物薬剤を提供する。本発明の一実施形態では、タンパク質性生物薬剤は、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６またはＧＤＦ−７である。本発明の別の態様では、タンパク質性生物薬剤は、ＢＭＰ−７である。本発明はまた、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６またはＧＤＦ−７のうち任意の１種の配列バリアントであるタンパク質性生物薬剤を提供する。本発明の別の態様では、タンパク質性生物薬剤は、保存されたＣ末端システインリッチドメイン内で、ＢＭＰサブファミリーのメンバーと少なくとも約５０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質である。
【０００９】
本発明に従って、血管アクセス構造物は、被験体の血管系へのアクセスを提供するデバイスまたは装置である。本発明によって意図されるように、血管アクセス構造物は、被験体の外部または内部に埋め込み可能である。本発明によれば、その血管系は、一実施形態では、末梢性に、または別の実施形態では、中心性にアクセスされ得る。本発明の一実施形態によれば、生物薬剤の、被験体の血流への送達部位は、中心性に、例えば、外内頚静脈または内頚静脈、鎖骨下静脈、大腿静脈または上大静脈を介して存在する。特定の実施形態では、このような血管アクセス構造物は、実際の穿刺部位から離れた部位で、被験体の血流に生物薬剤を送達するよう機能し得る。中心送達部位が好ましい。また、血管アクセスポートを含むカテーテルの留置では一般的であるように、血管自体への実際の穿刺部位が、ＢＭＰなどの生物薬剤の導入に先立って治癒することが可能となることも好ましい。このことが、血管系の直接の穿刺部位での薬剤の漏出を最小化または回避する。
【００１０】
現在好ましい実施形態では、傷害または疾患を改善させるのに適した本発明の組成物は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のメンバー、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のＢＭＰサブファミリーのメンバーおよび保存されたＣ末端システインリッチドメイン内でＢＭＰサブファミリーのメンバーと少なくとも約５０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質からなる群から選択される生物薬剤ならびに中心静脈カテーテル、中心静脈ライン、皮下ポートおよびそれらと機能的にまたは構造的に同様の配置を有する構造物からなる群から選択される血管アクセス構造物を含み、前記生物薬剤は、傷害または疾患を回復させるのに有効な量で存在する。
【００１１】
別の態様では、本発明はまた、上記の組成物に含まれるのに適している、生物薬剤を組織傷害または疾患を改善するのに有効な量で含む製剤を提供する。一実施形態では、改善されるべき傷害は、石灰化または非石灰化骨格組織傷害である。別の実施形態では、改善されるべき傷害または疾患は、代謝性骨疾患、変形性関節症、骨軟骨性疾患、関節リウマチ、骨粗鬆症、パジェット病、歯周炎、象牙質形成、軟骨疾患、外傷誘発性および炎症誘発性軟骨変性症、加齢性軟骨変性症、関節軟骨傷害および疾患、全層軟骨疾患、表層性軟骨欠損、全身性エリテマトーデスの後遺症、強皮症の後遺症、歯周組織再生、椎間板のヘルニア形成および断裂、椎間板の変性性疾患、骨軟骨症（ｏｓｔｅｏｃｏｎｄｒｏｓｉｓ）または靭帯、腱、滑液包、滑膜および半月板組織の傷害および疾患である。別の実施形態では、改善されるべき傷害または疾患は、肝臓疾患、肝臓切除（ｌｉｖｅｒ  ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ）、肝切除術（ｈｅｐａｔｅｃｔｏｍｙ）、腎疾患、慢性腎不全、中枢神経系虚血または外傷、神経障害、運動ニューロン傷害、樹状細胞欠乏症および異常症、パーキンソン病、眼の疾患、眼の瘢痕、網膜瘢痕または消化管の潰瘍性疾患である。さらに別の実施形態では、組成物は、腫瘍細胞増殖を抑制するか、腫瘍退縮を促進するのに有効な量で存在する生物薬剤を含む。
【００１２】
さらに別の態様では、本発明は、それだけには限らないが、最小に侵襲性であるＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質などのタンパク質を使用して全身を治療する方法を意図する。本明細書において使用する場合、「全身」とは、非局所を意味する。当業者ならば、非局所は、タンパク質またはその他の生物活性剤が、それだけには限らないが、末梢経皮的部位などの単一の局所部位で被験体に導入され、単に単一の局所部位ではなく被験体の身体全体の治療を達成する方法を含み得ることを理解する。さらなる実施形態において、「全身」とはまた、投与される治療薬の治療的血液レベルが、ある時点で血液中に存在することを意味し得る。「全身」投与はまた、投与された治療薬の治療的血液レベルを提供することによって、投与の部位から離れた患者の身体のある部位の治療も達成し得る。本明細書において使用する場合、「最小に侵襲性の」とは、非侵襲性または非オープンフィールドの手術法を意味する。当業者ならば、このような方法は、切開術（複数可）または医療デバイス（複数可）の埋め込みを含む手順を含み得ることを理解する。
【００１３】
特定の現在好ましい実施形態では、傷害された組織または病変した組織の治療方法は、投与部位に、生物薬剤および血管アクセス構造物を含む組成物を提供するステップを含み、そこでは、生物薬剤が傷害された組織または病変した組織を治療するのに有効な量で送達される。物理的投与部位は、生物薬剤の実際の送達部位から離れていることが好ましい。特定の実施形態では、送達部位は、非末梢部位である。例えば、送達部位は、中心部位である。特定の実施形態では、投与部位は、末梢部位である。
【００１４】
現在好ましい実施形態では、生物薬剤は、その送達の際に、送達の部位から離れた部位で生物学的に有効な用量を提供するのに十分な速度で分散する。例えば、一実施形態では、投与部位は末梢であるが、送達部位は中心である。特に好ましい実施形態では、生物薬剤は、少なくとも１ｍｌ／分の速度で分散する。別の特に好ましい実施形態では、送達部位は、実質的に浮腫を含まない、および／または実質的に乱されておらず、損なわれていない。さらに別の特に好ましい実施形態では、送達部位の、送達部位の近くのまたは送達部位に隣接する非血管組織は、送達後に生物薬剤を実質的に含まない。
【００１５】
本発明の別の現在好ましい実施形態では、傷害された組織または病変した組織の治療方法は、生物薬剤を含む組成物を投与部位に投与することおよび送達部位の内膜組織完全性が実質的に損なわれないように、組成物を血管内送達部位に送達することを含む。これは、血管の最初の穿刺部位が、血管腔への生物薬剤（例えば、ＢＭＰ）の投与に先立って、治癒することが可能となった場合である。好ましい実施形態では、生物薬剤は、送達部位から傷害された組織または病変した組織を治療するのに有効な速度で、および量で分散する。特定の実施形態では、投与部位および送達部位は、同一である。その他の実施形態では、送達部位は、投与部位から離れている。特に好ましい実施形態では、送達部位は、細静脈の弁を含まない。別の特に好ましい実施形態では、送達部位の血流速度は、送達部位から離れた部位で生物学的に有効な用量を提供するのに十分である。特に好ましい実施形態では、生物薬剤は、少なくとも１ｍｌ／分の速度で分散する。さらに別の特に好ましい実施形態では、送達ステップは、損傷を与えない配置で遠位末端を有する血管内装置を使用して達成される。このような一実施形態では、装置は、フォーリー型カテーテルまたはその機能的等価物が有する損傷を与えない特徴を構造的に摸倣する、損傷を与えない遠位末端を備えている。
【００１６】
本発明の教示と一致して、現在好ましい生物薬剤は、ＢＭＰ−７であり、傷害された非石灰化組織または病変した非石灰化組織が、治療の現在好ましい対象である。このような傷害された組織または病変した組織は、臓器であり得る。特に好ましい治療方法では、生物薬剤は、少なくとも約０．５時間、より好ましくは、少なくとも約２時間、少なくとも約８時間；約１日、好ましくは、１日を超えて生物学的利用能がある。有効な量は、患者の体重１ｋｇ当たり、約１０マイクログラム〜約１０００マイクログラムの生物薬剤、より好ましくは、約５０マイクログラム〜約５００マイクログラム、最も好ましくは、約１００マイクログラム〜３００マイクログラムである。
【００１７】
別の実施形態では、本発明は、骨形成タンパク質を、それを必要とする患者に全身投与することによって、患者において疾患を治療する方法を提供する。本方法は、骨形成タンパク質を、血管アクセス構造物を介して投与部位で患者に投与するステップを含み、ここで、骨形成タンパク質は、患者において中心性に位置する送達部位で患者に送達される。別の実施形態によれば、本方法は、患者に中心静脈アクセスを備えた血管アクセス構造物を埋め込むステップをさらに含み得る。例えば、本発明の特定の実施形態によれば、中心静脈アクセスは、頚静脈、鎖骨下静脈、上大静脈または大腿静脈を介するものであり得る。一実施形態では、血管アクセス構造物は、中心静脈カテーテルまたは中心静脈ポートである。本発明の別の実施形態によれば、投与部位は末梢であり、血管アクセス構造物は、ＰＩＣＣラインである。代替の一実施形態では、投与部位は、中心性に位置する。本発明の一実施形態によれば、骨形成タンパク質は、ＢＭＰ−７である。本発明の一実施形態によれば、送達部位は、実質的に浮腫を含まず、実質的に乱されていない。別の実施形態では、血管アクセス構造物は、骨形成タンパク質の投与に先立って適所で実質的に治癒されている。
【００１８】
別の態様では、本発明はまた、生物薬剤を、上記の方法を用いて使用に適する組織傷害または疾患を改善させるのに有効な量で含む製剤を提供する。
【００１９】
別の態様では、本発明はまた、骨形成タンパク質を、それを必要とする患者に全身に投与することにおいて使用するためのキットを提供する。一実施形態では、キットは、骨形成タンパク質および血管アクセス構造物を含む。キットは、患者に骨形成タンパク質を全身に投与するための使用説明書をさらに含むことができる。例えば、使用説明書は、血管アクセス構造物が、前記患者への前記骨形成タンパク質の中心送達を可能にするために、患者に埋め込まれることをさらに示し得る。本発明の一実施形態によれば、骨形成タンパク質はＢＭＰ−７である。骨形成タンパク質は、適した薬学的キャリアを含む組成物で提供され得る。本発明の別の実施形態によれば、血管アクセス構造物は、中心静脈カテーテルである。別の実施形態では、骨形成タンパク質を、それを必要とする患者に全身投与することにおいて使用するためのキットは、骨形成タンパク質および骨形成タンパク質を、中心性に位置する血管アクセス構造物を介して患者に全身投与するための使用説明書を含む。さらなる一実施形態では、キットは、血管アクセス構造物を含む。例えば、血管アクセス構造物は、骨形成タンパク質の中心投与および送達を提供する。
【００２０】
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
骨形成タンパク質を、それを必要とする患者に全身投与することによって、患者における疾患を治療する方法であって、
血管アクセス構造物を介して投与部位で、前記患者に前記骨形成タンパク質を投与するステップを含み、ここで、前記骨形成タンパク質が、前記患者において中心性に位置する送達部位で前記患者に送達される方法。
（項目２）
前記患者において中心静脈アクセスを備えた血管アクセス構造物を埋め込むステップをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記中心静脈アクセスが、頚静脈、鎖骨下静脈、上大静脈または大腿静脈を介する、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記血管アクセス構造物が、中心静脈カテーテルまたは中心静脈ポートである、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記投与部位が末梢である、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記血管アクセス構造物が、ＰＩＣＣラインである、項目５に記載の方法。
（項目７）
前記投与部位が、中心性に位置する、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記骨形成タンパク質がＢＭＰ−７である、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記送達部位が、実質的に浮腫を含まない、実質的に乱されていない、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記血管アクセス構造物が、前記骨形成タンパク質の投与に先立って、適所で実質的に治癒している、項目１に記載の方法。
（項目１１）
傷害された組織または病変した組織を治療する方法であって、
投与部位に、生物薬剤および血管アクセス構造物を含む組成物を提供するステップを含み、
そこでは、前記生物薬剤が、前記傷害された組織または前記病変した組織を治療するのに有効な量で送達部位で送達される、
方法。
（項目１２）
前記生物薬剤がＢＭＰ−７である、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記投与部位が、前記生物薬剤の送達部位から離れている、項目１１に記載の方法。
（項目１４）
前記送達部位が、非末梢部位である、項目１１に記載の方法。
（項目１５）
前記非末梢部位が、中心部位である項目１４に記載の方法。
（項目１６）
前記投与部位が、末梢部位である、項目１１に記載の方法。
（項目１７）
前記投与部位が、中心部位である、項目１１に記載の方法。
（項目１８）
前記生物薬剤が、送達の際に約１ｍｌ／分の速度で分散する、項目１１に記載の方法。
（項目１９）
前記血管アクセス構造物が、中心静脈カテーテルである、項目１１に記載の方法。
（項目２０）
前記送達部位が、実質的に浮腫を含まない、項目１１に記載の方法。
（項目２１）
前記送達部位が、実質的に乱されていない、項目１１に記載の方法。
（項目２２）
送達後に、前記送達部位の、前記送達部位付近の、または前記送達部位に隣接する非血管性組織が、実質的に生物薬剤を含まない、項目１１に記載の方法。
（項目２３）
前記傷害された組織または前記病変した組織が、非石灰化組織である、項目１１に記載の方法。
（項目２４）
前記傷害された組織または前記病変した組織が、臓器である、項目１１に記載の方法。
（項目２５）
前記生物薬剤が、少なくとも約２時間の間、生物学的利用能がある項目１１に記載の方法。
（項目２６）
前記有効な量が、生物薬剤について約１００〜約３００マイクログラムである、項目１１に記載の方法。
（項目２７）
傷害または疾患を改善させるのに適した組成物であって、
生物薬剤と、
血管アクセス構造物と
を含み、
前記生物薬剤が、傷害または疾患を改善させるのに有効な量で存在する組成物。
（項目２８）
前記生物薬剤が、タンパク質性である、項目２７に記載の組成物。
（項目２９）
前記生物薬剤が、最小に可溶性のタンパク質である、項目２８に記載の組成物。
（項目３０）
前記生物薬剤が、生理学的ｐＨで実質的に不溶性である、項目２９に記載の組成物。
（項目３１）
前記生物薬剤が、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のメンバーである、項目３０に記載の組成物。
（項目３２）
前記生物薬剤が、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６  ＧＤＦ−７、ＭＰ−５２および前記のもののうち任意の１種の配列バリアントからなる群から選択される、項目３１に記載の組成物。
（項目３３）
前記生物薬剤が、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６、ＧＤＦ−７およびＭＰ−５２からなる群から選択される、項目３１に記載の組成物。
（項目３４）
前記生物薬剤が、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６およびＧＤＦ−７からなる群から選択される、項目３１に記載の組成物。
（項目３５）
前記生物薬剤がＢＭＰ−７である、項目３１に記載の組成物。
（項目３６）
前記生物薬剤が、前記ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のＢＭＰサブファミリーのメンバーである、項目３１に記載の組成物。
（項目３７）
前記生物薬剤が、保存されたＣ末端システインリッチドメイン内で、前記ＢＭＰサブファミリーのメンバーと少なくとも約５０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質である、項目３６に記載の組成物。
（項目３８）
前記生物薬剤が、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のメンバーではないタンパク質である、項目３０に記載の組成物。
（項目３９）
前記生物薬剤が、代謝性骨疾患、変形性関節症、骨軟骨性疾患、関節リウマチ、骨粗鬆症、パジェット病、歯周炎および象牙質形成からなる群から選択される骨格組織傷害または疾患を改善させるのに有効な量で存在する、項目２７に記載の組成物。
（項目４０）
前記生物薬剤が、変形性関節症、骨軟骨性疾患、軟骨疾患、関節リウマチ、外傷誘発性および炎症誘発性軟骨変性症、加齢性軟骨変性症、関節軟骨傷害および疾患、全層軟骨欠損、表層性軟骨欠損、全身性エリテマトーデスの後遺症、強皮症の後遺症、歯周組織再生、椎間板のヘルニア形成および断裂、椎間板の変性性疾患、骨軟骨症、ならびに靭帯、腱、滑液包、滑膜および半月板組織の傷害および疾患からなる群から選択される非石灰化骨格組織傷害または疾患を改善させるのに有効な量で存在する、項目２７に記載の組成物。
（項目４１）
前記生物薬剤が、外傷誘発性および炎症誘発性軟骨変性症、関節軟骨傷害、全層軟骨欠損、表層性軟骨欠損、椎間板のヘルニア形成および断裂、傷害（複数可）による椎間板の変性、ならびに靭帯、腱、滑液包、滑膜および半月板組織の傷害からなる群から選択される組織傷害を改善させるのに有効な量で存在する、項目２７に記載の組成物。
（項目４２）
前記生物薬剤が、肝臓疾患、肝臓切除、肝切除術、腎疾患、慢性腎不全、中枢神経系虚血または外傷、神経障害、運動ニューロン傷害、脊髄傷害、樹状細胞欠乏症および異常症、パーキンソン病、眼の疾患、眼の瘢痕、網膜瘢痕および消化管の潰瘍性疾患からなる群から選択される組織の傷害または疾患を改善させるのに有効な量で存在する、項目２７に記載の組成物。
（項目４３）
前記生物薬剤が、慢性および急性腎臓病、アテローム性動脈硬化症、肺線維症、心臓線維症、腎臓線維症、肥満症、糖尿病、癌、眼の瘢痕、肝臓線維症、炎症性障害および神経系の障害からなる群から選択される組織の傷害または疾患を改善させるのに有効な量で存在する、項目２７に記載の組成物。
（項目４４）
前記生物薬剤が、石灰化組織または非石灰化組織の傷害または疾患を改善させるのに有効な量で存在する、項目２７に記載の組成物。
（項目４５）
前記血管アクセス構造物が、中心静脈カテーテル、中心静脈ライン、皮下ポート、オープンポート、動静脈瘻、前記のもののうちいずれか１種と機能的にまたは構造的に同様の配置を有する構造物および前記のもののうちいずれか１種の組合せからなる群から選択される、項目２７に記載の組成物。
（項目４６）
項目２７に記載の組成物への封入に適した生物薬剤の製剤。
（項目４７）
項目１１に記載の方法とともに使用するのに適した生物薬剤の製剤。
（項目４８）
傷害または疾患を改善させるのに適した組成物であって、
ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のメンバー、前記ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のＢＭＰサブファミリーのメンバーおよび保存されたＣ末端システインリッチドメイン内で前記ＢＭＰサブファミリーのメンバーと少なくとも約５０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質からなる群から選択される生物薬剤と、
中心静脈カテーテル、中心静脈ライン、皮下ポートおよびそれらと機能的にまたは構造的に同様の配置を有する構造物からなる群から選択される血管アクセス構造物と
を含み、
前記生物薬剤が、傷害または疾患を改善させるのに有効な量で存在する組成物。
（項目４９）
傷害された組織または病変した組織の治療方法であって、
投与部位に生物薬剤を含む組成物を投与するステップと、
血管内送達部位の内膜組織完全性が実質的に損なわれないように、前記送達部位に前記組成物を送達するステップとを含み、
そこでは、前記生物薬剤が前記傷害された組織または前記病変した組織を治療するのに有効な速度および量で前記送達部位から分散する、
、方法。
（項目５０）
前記投与部位および前記送達部位が同一である、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
前記送達部位が、細静脈弁を含まない、項目４９に記載の方法。
（項目５２）
前記分散速度が、約１ｍｌ／分である、項目４９に記載の方法。
（項目５３）
前記送達ステップが、損傷を与えない配置で遠位末端を有する血管内装置を使用して達成される、項目４９に記載の方法。
（項目５４）
骨形成タンパク質を、それを必要とする患者に全身投与することにおいて使用するためのキットであって、
骨形成タンパク質と、
血管アクセス構造物と
を含むキット。
（項目５５）
前記患者に前記骨形成タンパク質を全身投与するための使用説明書をさらに含む、項目５４に記載のキット。
（項目５６）
前記使用説明書が、前記患者への前記骨形成タンパク質の中心送達を可能にするために前記血管アクセス構造物が前記患者に埋め込まれることをさらに示す、項目５５に記載のキット。
（項目５７）
前記骨形成タンパク質がＢＭＰ−７である、項目５４に記載のキット。
（項目５８）
前記血管アクセス構造物が、中心静脈カテーテルである、項目５４に記載のキット。
（項目５９）
前記骨形成タンパク質が、適した薬学的キャリアを含む組成物で提供される、項目５４に記載のキット。
（項目６０）
骨形成タンパク質を、それを必要とする患者に全身投与することにおいて使用するためのキットであって、
骨形成タンパク質と、
前記骨形成タンパク質を、中心性に位置する血管アクセス構造物を介して前記患者に全身投与するための使用説明書と
を含むキット。
以下の図、説明および特許請求の範囲から、本発明の前述の、およびその他の特徴および利点ならびに本発明自体が、より完全に理解されよう。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、例示的骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、ＢＭＰ−７を、例えば、それだけには限らないが、中心静脈カテーテルなどの血管アクセス構造物を介してタンパク質の溶液を提供することによって、有害作用を伴わずに、非外科的に、非局所的に哺乳類に提供できるという発見に基づいている。実際、本発明は、特定の的確な生理学的判定基準が、投与および送達の成功において決定的であるという発見を利用する。本明細書に示されるように、例示的タンパク質であるＢＭＰ−７は、いくつか挙げると、中心静脈ライン、中心静脈カテーテルまたは動静脈瘻などの血管アクセス構造物を介してＢＭＰの溶液を提供することによって、ＢＭＰで治療可能な状態を患っているヒト被験体に安全に提供できる。例えば、中心静脈ラインは、頚静脈（頚部）、鎖骨下静脈（胸部）または大腿静脈（鼠径部）にアクセスするための、頚部、胸部または鼠径部に挿入された中心静脈アクセスカテーテルを含み得る。血管ラインは、それが容易にアクセス可能であって、カテーテルアクセスが、適所で十分に治癒されるように、例えば、治療薬が導入されるカテーテルの注入先端に血管アクセスポートを有するように、留置されることが好ましい。血管ラインは、手術で留置しても、手術を行わずに留置してもよく、次いで、血管への穿刺部位での任意の漏出を最小化または回避するために治癒することが可能にされる。本明細書において別の場所で説明されるように、本発明の態様は、ｐＨ、添加剤および／または濃度ならびに投与速度および投与速度の調節によって達成される投与量を含むタンパク質製剤をさらに含む。
【００２２】
ＢＭＰなどのタンパク質ならびに組織モルフォゲンのＴＧＦ−βスーパーファミリーのその他のメンバーの現在の臨床適用は、局所骨成長および修復を誘導するための、局所的な、外科的に侵襲性の埋め込みに限定されているが、前臨床研究によって、ＢＭＰ治療が有益であり得るいくつかの全身性病状が確認されている。これらとして、それだけには限らないが、それによって影響を受ける石灰化組織ならびに非石灰化組織を含む代謝性骨疾患における適用が挙げられる。さらに、前臨床研究によって、慢性および急性腎臓病、アテローム性動脈硬化症、肺線維症、肥満症、糖尿病、癌、眼の瘢痕、肝臓線維症、炎症性障害および神経系障害などの疾患または障害によって影響を受ける組織および／または臓器を含む、ＢＭＰ治療が有益であり得るいくつかの全身性病状が確認されている。本発明を使用するこのような疾患の治療に従って、ＢＭＰ−７の非局所投与は、現在最適アプローチであると理解されている。さらに、本発明によって、直接末梢注射（例えば、血管内、皮下または腹腔内投与による）などの従来の全身投与の方法は、侵入部位、例えば血管穿刺部位での異所性骨および／または線維性組織の形成および、例えば、浮腫などの局在化された組織反応物の誘発をはじめとする望ましくない作用を有し得ることがさらに確認される。
【００２３】
骨形成タンパク質をはじめとする生物薬剤
手短には、本発明は、適した生物薬剤は、好ましくは最小に可溶性のタンパク質であることを意図する。すなわち、好ましい生物薬剤は、生理学的ｐＨで実質的に不溶性であるタンパク質である。例えば、例示的なタンパク質性生物薬剤として、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のメンバーがある。本発明は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のＢＭＰサブファミリーのメンバーであるタンパク質性生物薬剤をさらに提供する。本発明の特定の実施形態では、タンパク質性生物薬剤は、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６またはＧＤＦ−７である。本発明の好ましい実施形態では、タンパク質性生物薬剤はＢＭＰ−７である。本発明はまた、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６またはＧＤＦ−７のうちいずれか１種の配列バリアントであるタンパク質性生物薬剤を提供する。本発明の別の実施形態では、タンパク質性生物薬剤は、保存されたＣ末端システインリッドメイン内でＢＭＰサブファミリーのメンバーと少なくとも約５０％のアミノ酸配列同一性を有するタンパク質である。
【００２４】
上記のように、ＢＭＰは、本発明の目的上、好ましい例示的生物薬剤であり、ＴＧＦ−βスーパーファミリーに属する。ＴＧＦ−βスーパーファミリータンパク質は、６個の保存されたシステイン残基を特徴とするサイトカインである。ヒトゲノムは、ＴＧＦ−βスーパーファミリータンパク質をコードする約４２のオープンリーディングフレームを含む。ＴＧＦ−βスーパーファミリータンパク質は、配列相同性およびそれらが活性化する特定のシグナル伝達経路に基づいて、ＢＭＰサブファミリー生物薬剤およびＴＧＦ−βサブファミリー生物薬剤に少なくとも分割され得る。ＢＭＰサブファミリーとして、それだけには限らないが、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−３（オステオゲニン）、ＢＭＰ−３ｂ（ＧＤＦ−１０）、ＢＭＰ−４（ＢＭＰ−２ｂ）、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７（骨原性タンパク質−１またはＯＰ−１）、ＢＭＰ−８（ＯＰ−２）、ＢＭＰ−８Ｂ（ＯＰ−３）、ＢＭＰ−９（ＧＤＦ−２）、ＢＭＰ−１０、ＢＭＰ−１１（ＧＤＦ−１１）、ＢＭＰ−１２（ＧＤＦ−７）、ＢＭＰ−１３（ＧＤＦ−６、ＣＤＭＰ−２）、ＢＭＰ−１５（ＧＤＦ−９）、ＢＭＰ−１６、ＧＤＦ−１、ＧＤＦ−３、ＧＤＦ−５（ＣＤＭＰ−１、ＭＰ−５２）およびＧＤＦ−８（ミオスタチン）が挙げられる。本発明の目的上、好ましいスーパーファミリータンパク質として、ＢＭＰ−２、−４、−５、−６および−７ならびにＧＤＦ−５、−６および−７ならびにＭＰ−５２が挙げられる。特に好ましいタンパク質として、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−７およびＧＤＦ−５、−６および−７が挙げられる。最も好ましい例示的ＢＭＰは、ＢＭＰ−７である。ＢＭＰはまた、その他の動物種に存在する。さらに、ヒト集団の異なるメンバー間で、ＢＭＰ配列中に対立遺伝子変異があり、今日までに発見され、特性決定されたＢＭＰ間には種間変動がある。
【００２５】
ＴＧＦ−βサブファミリーとして、それだけには限らないが、ＴＧＦ（例えば、ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２およびＴＧＦ−β３）、アクチビン（例えば、アクチビンＡ）およびインヒビン、マクロファージ阻害性サイトカイン−１（ＭＩＣ−１）、ミュラー管抑制物質、抗ミュラー管ホルモンおよびグリア細胞系由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）が挙げられる。本明細書において使用する場合、「ＴＧＦ−βサブファミリー」、「ＴＧＦ−βｓ」、「ＴＧＦ−βリガンド」およびその文法上の同等物は、特別に別に示されない限り、ＴＧＦ−βサブファミリーメンバーを指す。
【００２６】
順に、ＴＧＦ−βスーパーファミリーは、システインノットサイトカインスーパーファミリーのサブセットである。システインノットサイトカインスーパーファミリーのさらなるメンバーとして、それだけには限らないが、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、胎盤増殖因子（ＰＩＧＦ）、ノギン、ニューロトロフィン（ＢＤＮＦ、ＮＴ３、ＮＴ４およびβＮＧＦ）、ゴナドトロピン、フォリトロピン、ルトロピン、インターロイキン−１７およびコアグロゲンが挙げられる。
【００２７】
これらの配列ならびにその化学的および物理的特性を開示する刊行物として、ＢＭＰ−７およびＯＰ−２（米国特許第５，０１１，６９１号；同５，２６６，６８３号；Ｏｚｋａｙｎａｋら、ＥＭＢＯ  Ｊ．、９、２０８５〜２０９３頁（１９９０年）；ＯＰ−３（ＷＯ９４／１０２０３（ＰＣＴ  ＵＳ９３／１０５２０））、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４、（ＷＯ８８／００２０５；ＷｏｚｎｅｙらＳｃｉｅｎｃｅ、２４２、１５２８〜１５３４頁（１９８８年））、ＢＭＰ−５およびＢＭＰ−６、（Ｃｅｌｅｓｔｅら、ＰＮＡＳ、８７、９８４３〜９８４７頁（１９９１年））、Ｖｇｒ−１（Ｌｙｏｎｓら、ＰＮＡＳ、８６、４５５４〜４５５８頁（１９８９年））；ＤＰＰ（Ｐａｄｇｅｔｔら  Ｎａｔｕｒｅ、３２５、８１〜８４頁（１９８７年））；Ｖｇ−１（Ｗｅｅｋｓ、Ｃｅｌｌ、５１、８６１〜８６７頁（１９８７年））；ＢＭＰ−９（ＷＯ９５／３３８３０（ＰＣＴ／ＵＳ９５／０７０８４）；ＢＭＰ−１０（ＷＯ９４／２６８９３（ＰＣＴ／ＵＳ９４／０５２９０）；ＢＭＰ−１１（ＷＯ９４／２６８９２（ＰＣＴ／ＵＳ９４／０５２８８）；ＢＭＰ−１２（ＷＯ９５／１６０３５（ＰＣＴ／ＵＳ９４／１４０３０）；ＢＭＰ−１３（ＷＯ９５／１６０３５（ＰＣＴ／ＵＳ９４／１４０３０）；ＧＤＦ−１（ＷＯ９２／００３８２（ＰＣＴ／ＵＳ９１／０４０９６）およびＬｅｅら  ＰＮＡＳ、８８、４２５０〜４２５４頁（１９９１）；ＧＤＦ−８（ＷＯ９４／２１６８１（ＰＣＴ／ＵＳ９４／０３０１９）；ＧＤＦ−９（ＷＯ９４／１５９６６（ＰＣＴ／ＵＳ９４／００６８５）；ＧＤＦ−１０（ＷＯ９５／１０５３９（ＰＣＴ／ＵＳ９４／１１４４０）；ＧＤＦ−１１（ＷＯ９６／０１８４５（ＰＣＴ／ＵＳ９５／０８５４３）；ＢＭＰ−１５（ＷＯ９６／３６７１０（ＰＣＴ／ＵＳ９６／０６５４０）；ＭＰ−１２１（ＷＯ９６／０１３１６（ＰＣＴ／ＥＰ９５／０２５５２）；ＧＤＦ−５（ＣＤＭＰ−１、ＭＰ５２）（ＷＯ９４／１５９４９（ＰＣＴ／ＵＳ９４／００６５７）およびＷＯ９６／１４３３５（ＰＣＴ／ＵＳ９４／１２８１４）およびＷＯ９３／１６０９９（ＰＣＴ／ＥＰ９３／００３５０））；ＧＤＦ−６（ＣＤＭＰ−２、ＢＭＰ１３）（ＷＯ９５／０１８０１（ＰＣＴ／ＵＳ９４／０７７６２）およびＷＯ９６／１４３３５およびＷＯ９５／１０６３５（ＰＣＴ／ＵＳ９４／１４０３０））；ＧＤＦ−７（ＣＤＭＰ−３、ＢＭＰ１２）（ＷＯ９５／１０８０２（ＰＣＴ／ＵＳ９４／０７７９９）およびＷＯ９５／１０６３５（ＰＣＴ／ＵＳ９４／１４０３０））が挙げられる。上記の刊行物は参照により本明細書に組み込まれる。
【００２８】
本明細書において使用する場合、「ＴＧＦ−βスーパーファミリーメンバー」または「ＴＧＦ−βスーパーファミリータンパク質」とは、トランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーのメンバーとして当業者に公知のタンパク質を意味する。構造的に、このようなタンパク質は、疎水性シグナル配列、数百個のアミノ酸のＮ末端プロ領域ならびに可変Ｎ末端領域および保存された６個または７個のシステイン骨格を有する特徴的なシステインモチーフを有する約１００個のアミノ酸を含有する高度に保存されたＣ末端領域を含む成熟ドメインを含有する大きな前駆体ポリペプチド鎖として発現される、ホモまたはヘテロ二量体である。これらの構造的に関連するタンパク質は、種々の発生事象に関与していると同定されている。
【００２９】
用語「形態形成タンパク質」とは、真の形態形成活性を有するＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質に属するタンパク質を指す。例えば、このようなタンパク質は、前駆細胞が増殖するのを誘導し、および／または局所環境要因（ｃｕｅ）に応じて、軟骨、骨、腱、靭帯、神経またはその他の種類の分化組織の形成につながる分化経路における事象のカスケードを開始できる。したがって、本発明において有用である形態形成タンパク質は、異なる環境で異なって挙動し得る。特定の実施形態では、本発明の形態形成タンパク質は、ホモ二量体種またはヘテロ二量体種であり得る。
【００３０】
用語「骨原性タンパク質（ＯＰ）」とは、前駆細胞がまた軟骨および／または骨を形成するのを誘導できる形態形成タンパク質を指す。骨は、膜性骨または軟骨性骨であり得る。最も骨原性のタンパク質は、ＢＭＰサブファミリーのメンバーであり、したがって、同様に、ＢＭＰである。しかし、逆は真実ではない場合がある。本発明によれば、ＤＮＡ配列相同性またはアミノ酸配列同一性によって同定されたＢＭＰはまた、骨原性タンパク質であるためには、機能的生物検定法において実証可能な骨原性または軟骨形成活性を有するべきである。適当な生物検定法は、当技術分野で周知であり；特に有用な生物検定法として、異所性骨形成アッセイがある（例えば、米国特許第５，０１１，６９１号；同５，２６６，６８３号参照のこと）。
【００３１】
構造的に、ＢＭＰは、二量体のシステインノットタンパク質である。各ＢＭＰモノマーは、複数の分子内ジスルフィド結合を含む。さらなる分子間ジスルフィド結合は、ほとんどのＢＭＰにおいて二量体化を媒介する。ＢＭＰは、ホモ二量体を形成し得る。いくつかのＢＭＰは、ヘテロ二量体を形成し得る。ＢＭＰは、長いプロドメイン、１以上の切断部位および成熟ドメインを含むプロタンパク質として発現される。プロドメインは、ＢＭＰの正しいフォールディングおよびプロセシングを補助すると考えられている。さらに、一部ではあるがすべてではないＢＭＰでは、プロドメインは、非共有結合によって成熟ドメインと結合し得、阻害剤として作用し得る（例えば、Ｔｈｉｅｓら（２００１年）Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒｓ１８：２５１〜２５９頁）。
【００３２】
ＢＭＰは、長いプロドメイン、１以上の切断部位および成熟ドメインを含むプロタンパク質として天然に発現される。次いで、このプロタンパク質は、細胞機構によってプロセシングされて、二量体の成熟ＢＭＰ分子が生じる。プロドメインは、ＢＭＰの正しいフォールディングおよびプロセシングを補助すると考えられている。さらに、一部ではあるがすべてではないＢＭＰでは、プロドメインは、非共有結合によって成熟ドメインと結合し得、シャペロンならびに阻害剤として作用し得る（例えば、Ｔｈｉｅｓら（２００１年）Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒｓ、１８：２５１〜２５９頁）。
【００３３】
本明細書において意図されるように、用語「ＢＭＰ」とは、ＤＮＡ相同性およびアミノ酸配列同一性に基づいて定義されるＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質のＢＭＰサブファミリーに属するタンパク質を指す。本発明に従って、タンパク質は、ＢＭＰサブファミリーを特徴付ける保存されたＣ末端システインリッチドメイン内で、公知ＢＭＰサブファミリーメンバーと少なくとも５０％のアミノ酸配列同一性を有する場合に、ＢＭＰサブファミリーに属する。ＢＭＰサブファミリーのメンバーは、全体では５０％未満のＤＮＡまたはアミノ酸配列同一性を有し得る。本明細書において使用する場合、用語「ＢＭＰ」とは、アミノ酸配列バリアント、ドメイン交換バリアントならびに天然に存在する骨形成タンパク質の末端切断物および活性な断片ならびに２種の異なるモノマーＢＭＰペプチドから形成されるヘテロ二量体タンパク質、例えば、ＢＭＰ−２／７；ＢＭＰ−４／７：ＢＭＰ−２／６；ＢＭＰ−２／５；ＢＭＰ−４／７；ＢＭＰ−４／５およびＢＭＰ−４／６ヘテロ二量体であるタンパク質をさらに指す。適したＢＭＰバリアントおよびヘテロ二量体として、ＵＳ２００６／０２３５２０４；ＷＯ０７／０８７０５３；ＷＯ０５／０９７８２５；ＷＯ００／０２０６０７；ＷＯ００／０２０５９１；ＷＯ００／０２０４４９；ＷＯ０５／１１３５８５；ＷＯ９５／０１６０３４およびＷＯ９３／００９２２９に示されるものが挙げられる。
【００３４】
本明細書において使用する用語「薬物」「医薬品」または「生物薬剤」／「生物薬剤」（すなわち、生物学的に活性な薬剤）とは、制限するものではないが、身体において局所的にまたは全身に作用し得る、生物学的に、生理学的または薬理学的に活性な物質を含む。生物薬剤は、疾患または疾病の治療、予防、診断、治癒または軽減のために使用される物質であり、身体の構造または機能に影響を及ぼす物質または好ましい生理学的環境に存在もしくは接触した後に、生物学的に活性に、もしくはより活性になるプロドラッグである。また、種々の形態の生物薬剤を使用してよい。これらとして、制限するものではないが、身体に注射されると生物学的に活性化される、無電荷の分子、分子複合体、塩、エーテル、エステル、アミドなどといった形態が挙げられる。好ましい生物薬剤として、それだけには限らないが、酵素、増殖因子、ホルモン、分化因子、サイトカイン、ケモカインおよび抗体をはじめとする治療活性または予防活性を有するタンパク質が挙げられる。
【００３５】
当業者には、水性環境において放出され得る任意の生物薬剤を、開示される本発明において利用できる。好ましい実施形態では、生物薬剤は、タンパク質性である。別の好ましい実施形態では、生物薬剤は、最小に可溶性である。より好ましい実施形態では、生物薬剤は、実質的に生理学的に不溶性である。さらに好ましい実施形態では、生物薬剤は、生理学的ｐＨで実質的に不溶性である。別の好ましい実施形態では、生物薬剤は、投薬後、ｉｎ  ｖｉｖｏで、有効性をもって１時間、より好ましくは、２４時間、より好ましくは、４８時間、さらにより好ましくは、１週間、さらにより好ましくは、１カ月、なおさらにより好ましくは、数カ月持続し得るものである。より特に好ましい実施形態では、生物薬剤は、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのメンバーである。なおさらにより特に好ましい実施形態では、生物薬剤は、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ−４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６、ＧＤＦ−７ならびにそれらのありとあらゆるバリアントおよび相同体からなる群から選択される。例えば、有用なＢＭＰとして、ＢＭＰ−２、ＢＭＰ４、ＢＭＰ−５、ＢＭＰ−６、ＢＭＰ−７、ＧＤＦ−５、ＧＤＦ−６またはＧＤＦ−７のＣ末端システインドメインと、少なくとも５０％、好ましくは、少なくとも６０％、より好ましくは、少なくとも７０％、最も好ましくは、少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を共有する相同体またはバリアントである配列を含有するものが挙げられる。本明細書において意図されるように、好ましいＢＭＰとして、保存的アミノ酸置換を含有するバリアントをはじめとする任意のこのようなＢＭＰの生物学的に活性なバリアントが挙げられる。本発明によって必要とされるすべては、これらのバリアントが、天然の形態に匹敵する生物活性を保持することである。本明細書において使用する場合、用語「ＢＭＰ関連タンパク質」または「複数のＢＭＰ関連タンパク質」とは、前記タンパク質のうち任意の１種またはすべてを意味する。
【００３６】
本明細書において有用な形態形成タンパク質は、対立遺伝子対応物、系統発生対応物およびそれらのその他のバリアントを含む、任意の公知の天然に存在する天然タンパク質を含む。これらのバリアントは、様々なグリコシル化パターン、様々なＮ末端および天然タンパク質の活性な末端切断形態または変異形態を有する形態を含む。有用な形態形成タンパク質はまた、生合成的に産生されるタンパク質（例えば、「ムテイン」または「変異体タンパク質」）および一般的な形態形成ファミリーのタンパク質の新規の、形態形成的に活性なメンバーであるタンパク質も含む。
【００３７】
投与および送達の様式；血管アクセス構造物を含む
本発明が、それだけには限らないが、最小に侵襲性である、ＴＧＦ−βスーパーファミリーのタンパク質などのタンパク質を使用する全身治療の方法を意図することが特に重要である。本明細書において使用する場合、「全身の」とは、非局所を意味する。当業者ならば、非局所は、タンパク質またはその他の生物活性剤が、それだけには限らないが、末梢経皮的部位または中枢部位などの単一の局所部位で被験体に導入されて、単に単一の局所部位でではなく被験体の全身の治療を達成する方法を含み得ることは理解する。本明細書において使用する場合、「最小に侵襲性の」とは、非侵襲性または非オープンフィールドの手術法を意味する。当業者ならば、最小に侵襲性の方法は、切開術（複数可）または医療デバイス（複数可）の埋め込みを含む手順を含み得ることは理解する。
【００３８】
すでに記載されたように、本発明は、最小に可溶性の生物活性剤を、経口投与、腹腔注射または反復性末梢注射などの従来の経路以外によって被験体に提供できるという発見に基づいている。すなわち、ここで、タンパク質などの最小に可溶性の生物活性剤を、有害作用を伴わずに、外科的介入を伴わずに、全身経路によって今や効率的に提供できる。
【００３９】
本発明の目的上「送達部位」とは、生物活性剤が実際に血液と直接接触する解剖学的部位を意味するが、「投与部位」とは、生物活性剤が、レシピエントに物理的に最初に導入される解剖学的部位を意味する。例えば、一実施形態によれば、投与部位は、生物活性剤が投与されるカテーテルが、レシピエントの身体中に導入される部位であり得る。
【００４０】
本発明は、特定の的確な生理学的判定基準が、ＢＭＰ−７などの例示的タンパク質をはじめとするタンパク質などの最小に可溶性の生物活性剤の投与および送達の成功において決定的であるという発見を利用する。まず第１に、本発明の実施には、実際の送達の血管内部位が、実質的に損なわれないことが必要である。例えば、最も好ましい部位は外傷を含まない、例えば、浮腫を含まない。最も好ましい部位での血管周囲組織、血管組織および／または血管内膜組織の完全性は、無傷である。内膜完全性の指標には、タンパク質が、送達部位で血管組織、血管周囲組織および／または非血管組織へ進入または漏出する程度が挙げられ、組織の漏出または浸透がないことが好ましい。すなわち、本発明の教示によれば、送達部位での、送達部位の付近のまたは送達部位に隣接する血管組織、血管周囲組織および／または非血管組織は、送達後に実質的に生物薬剤を含むべきでない。前記指標の各々は、通常の材料および方法を使用して当業者によって容易に測定可能である
さらに別の判断基準に関して、生物薬剤は、その送達の際に、少なくとも１ｍｌ／分の速度で分散するべきである。さらに、当業者ならば、分散速度は操作できる；好ましい分散速度は、中止静脈部位で生じるものに匹敵するということは認識する。手短には、通常、中心静脈ラインまたはカテーテルによってアクセスされる中心静脈部位または深部静脈部位と関連する生理学的および解剖学的状態を再現および／または摸倣する任意の投与および送達の様式は、本発明の範囲内にある。
【００４１】
本発明を実施するためのさらに別の判断基準は、血管内送達部位でタンパク質溶液が血液に導入される、または血液と混合する速度に関する。当業者には当然であるが、導入速度または混合速度の操作によって、開業医が、導入される溶液中の実際のタンパク質濃度を操作することが可能となる。送達部位でのタンパク質濃度を効果的に低減するより遅い導入速度によって、投与容積の減少ならびに沈殿の減少および投与される薬剤による非血管組織の偶発的な浸透の減少をもたらすより高い濃度の出発材料が可能となる。前記しるしの各々は、通常の材料および方法を使用して当業者によって容易に測定可能である。
【００４２】
したがって、本発明の現在好ましい実施形態では、傷害された組織または病変した組織の治療方法は、送達部位での内膜組織完全性が、実質的に損なわれないよう、投与部位に生物薬剤を含む組成物を投与することおよびその組成物を血管内送達部位に送達することを含む。この実施形態では、生物薬剤は、傷害された組織または病変した組織を治療するのに有効な速度および量で送達部位から分散する。特定の実施形態では、投与部位および送達部位は、同一である。特に好ましい実施形態では、送達部位は、細静脈弁を含まない。別の特に好ましい実施形態では、送達部位での血流速度は、送達部位から離れた部位で生物学的に有効な用量を提供するのに十分である。さらに別の特に好ましい実施形態では、送達ステップは、損傷を与えない配置で遠位末端を有する静脈内装置を使用して達成される。このような一実施形態では、装置は、損傷を与えない配置を有する留置している血管内カテーテルである。
【００４３】
関連態様では、本発明は、生物薬剤および血管アクセス構造物を含む組成物を対象とする。本明細書において意図されるように、血管アクセス構造物は、本発明に従って有効量の生物薬剤を提供するために使用できる任意のデバイスまたは装置である。最も好ましい血管アクセス構造物は、送達部位で内膜組織を破壊しないものである。本発明に従って、血管アクセス構造物は、被験体の脈管構造物へのアクセスを提供するデバイスまたは装置であり、脈管構造物は中心または末梢のいずれかであり得る。本発明によって意図されるように、血管アクセス構造物は、被験体の外部または内部に埋め込み可能である。特定の実施形態では、このような構造物は、生物薬剤を、埋め込み部位から離れた部位で被験体の血流中へ送達するよう機能し得る。中心送達部位が好ましい。
【００４４】
当業者ならば、通常、血管アクセス構造物に精通している、これらのうち最も一般的なものは、本明細書に簡単に記載されており、本発明ととものその有用性は、容易に明らかとなる。本明細書において意図される構造物として、例えば、ヒックマンライン、例示的中心静脈カテーテルである末梢性に挿入される中心カテーテル（ＰＩＣＣ）および留置ポートが挙げられる。いくつかの種類の中心静脈カテーテルがある。以下により詳細に記載されるように、ＰＩＣＣラインは、通常、頚部（内頚静脈）または胸部（鎖骨下静脈）または鼠径部（大腿静脈）の静脈ではなく腕の静脈に挿入される。トンネル式カテーテルは、頚部または胸部の血管に外科的に挿入され、皮膚の下を通される別の種類のものである。カテーテルの先端のみが皮膚を通って通される。さらに、埋め込みポートまたは血管アクセスポートとして公知である種類がある。これも、トンネル式であるが、液体医薬を受け取るポートを含む装置全体は、通常、皮下に埋め込まれる。
【００４５】
ＰＩＣＣは、通常、腕の静脈から心臓近くの上大静脈に達し、通常、中心ＩＶアクセスを数週間から最大数カ月間提供し、そこでは、それらは、カテーテルの先端が、比較的大きい静脈にとどまるが、最大の中心静脈には達していないような方法で留置され、それらは、ミッドラインカテーテルとして公知である。非トンネル式中心カテーテルは、末梢性に挿入される中心カテーテルよりも大きな直径であり、頚部の頚静脈または鼠径部の大腿静脈などの、より中心性の静脈を介して留置されるよう設計される。トンネル式カテーテルは、身体中の適所にそれを維持するのに役立つ組織増殖を刺激するカフを有する。トンネル式カテーテルの例として、ＨＩＣＫＭＡＮ（登録商標）カテーテル、ＢＲＯＶＩＡＣ（登録商標）カテーテルおよびＧＲＯＳＨＯＮＧ（登録商標）カテーテルが挙げられる。ＨＩＣＫＭＡＮ（登録商標）、ＢＲＯＶＩＡＣ（登録商標）および／またはＧＲＯＳＨＯＮＧ（登録商標）は、Ｃ．Ｒ．Ｂａｒｄ，Ｉｎｃ．およびその関連会社、ＢＣＲ，Ｉｎｃ．の登録商標である。トンネル式カテーテルは、静脈へのアクセスが、長期間必要である場合に好ましい。ポートカテーテルまたは皮下埋め込み可能ポートは、小さいリザーバーに接続されたカテーテルからなり、その両方とも、トンネル式カテーテルと同様に皮膚の下に留置される永久デバイスである。オープンポートカテーテルは、同様であるが皮膚の上部に留まる。
【００４６】
特定の現在好ましい実施形態では、傷害された組織または病変した組織の治療方法は、生物薬剤および血管アクセス構造物を含む組成物を投与部位に提供するステップを含み、そこでは、生物薬剤が、傷害された組織または病変した組織を治療するのに有効な量で送達される。物理的投与部位は、生物薬剤の送達の実際の部位とは離れていることが好ましい。特定の実施形態では、送達部位は、非末梢部位である。例えば、一実施形態では、送達部位は、中心部位である。特定の実施形態では、投与部位は、末梢部位である。
【００４７】
本発明の教示と一致して、現在好ましい生物薬剤は、ＢＭＰ−７であり、傷害された非石灰化組織または病変した非石灰化組織は、治療の現在好ましい対象である。このような傷害された組織または病変した組織は、臓器であり得る。特に好ましい治療方法では、生物薬剤は、少なくとも約０．５時間、より好ましくは、少なくとも約２時間、少なくとも約８時間；約１日、好ましくは、１日を越えて生物学的利用能がある。また、有効な量は、患者の体重のｋｇ当たり約１０マイクログラム〜約１０００マイクログラムの生物薬剤、より好ましくは、約５０マイクログラム〜約５００マイクログラム、最も好ましくは、約１００マイクログラム〜３００マイクログラムの生物薬剤である。
【００４８】
本発明の一実施形態では、血管ラインは、それが容易にアクセス可能であって、カテーテルアクセスが、適所で十分に治癒されるように、例えば、治療薬が導入されるカテーテルの注入先端に血管アクセスポートを有するように、留置されることが好ましい。血管ラインは、手術で留置しても、手術を行わずに留置してもよく、次いで、血管への穿刺部位での任意の漏出を最小化または回避するために治癒することが可能にされる。本発明によれば、用語「治癒する（heal）」または「治癒した（healed）」は、組織完全性が実質的に損なわれていないこと、および／または静脈穿刺部位が実質的に組織損傷を含まないことを示唆する。言い換えれば、用語「治癒する」は、傷害された部位または損なわれた部位の完全な修復を必要としないが、「治癒した」組織は完全に修復された、または損なわれていないものであり得る。用語「治癒する」または「治癒した」は、一実施形態では、損傷を受けた組織または病変した組織が、瘢痕組織を含み得る新規組織増殖で実質的に置換されていることを示唆する。
【００４９】
当業者ならば、本発明の治療および投与方法は、それだけには限らないが、適応症、疾患の病状および個体の身体特性をはじめとする多数の因子を考慮して、個体の治療を最適化するよう改変または変更してよいことを理解する。
【００５０】
治療的介入
上記で説明したように、本発明はまた、任意の生物薬剤またはその製剤を、生物薬剤が有効である任意の公知な状態または潜在的状態を改善させる、および／または予防するのに有効な量で含有する、本発明の組成物を使用して治療する方法を提供する。本明細書において使用する場合、「有効な量」とは、それが投与される生体において状態を治療するのに有効である生物薬剤の量を意味する。例えば、本発明のＢＭＰ製剤を使用して、骨および軟骨などの結合組織の疾患または傷害を患う患者を治療できる。さらに、以下に記載されるように、本発明のＢＭＰ製剤を使用してその他の組織の疾患または傷害を治療できる。
【００５１】
本発明の一実施形態では、改善されるべき傷害は、石灰化または非石灰化骨格組織傷害である。別の実施形態では、改善されるべき傷害または疾患は、代謝性骨疾患、変形性関節症、骨軟骨性疾患、関節リウマチ、骨粗鬆症、パジェット病、歯周炎、象牙質形成、軟骨疾患、外傷誘発性および炎症誘発性軟骨変性症、加齢性軟骨変性症、関節軟骨傷害および疾患、全層軟骨疾患、表層性軟骨欠損、全身性エリテマトーデスの後遺症、強皮症の後遺症、歯周組織再生、椎間板のヘルニア形成および断裂、椎間板の変性性疾患、骨軟骨症または靭帯、腱、滑液包、滑膜および半月板組織の傷害および疾患である。別の実施形態では、改善されるべき傷害または疾患は、肝臓疾患、肝臓切除、肝切除術、腎疾患、慢性腎不全、中枢神経系虚血または外傷、神経障害、運動ニューロン傷害、樹状細胞欠乏症および異常症、パーキンソン病、眼の疾患、眼の瘢痕、網膜瘢痕または消化管の潰瘍性疾患である。
【００５２】
ＢＭＰは、骨または軟骨とは異なる哺乳類におけるさまざまな組織についての骨形態形成および組織形態形成の発達カスケードを誘導できる。この形態形成活性は、前駆細胞の増殖および分化を誘導する能力ならびに骨、軟骨、非石灰化骨格または結合組織ならびにその他の成体組織の形成をもたらす事象の進行によって、分化した表現型を支持および維持する能力を含む。
【００５３】
例えば、ＢＭＰは、代謝性骨疾患において骨量の減少を防ぐ、および／または骨量を増加させるための治療に使用できる。骨原性タンパク質を使用して、代謝性骨疾患において骨量の減少を防ぐ、および／または骨量を増加させるための一般的な治療方法が、米国特許第５，６７４，８４４号に開示されており、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。本発明のＢＭＰは、歯周組織再生に使用できる。骨原性タンパク質を使用する歯周組織再生のための一般的な方法は、米国特許第５，７３３，８７８号に開示されており、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。ＢＭＰは、肝臓再生のために使用できる。骨原性タンパク質を使用する肝臓再生のための一般的な方法は、米国特許第５，８４９，６８６号に開示されており、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。ＢＭＰは、慢性腎不全の治療のために使用できる。骨原性タンパク質を使用する慢性腎不全の一般的な治療方法は、米国特許第６，８６１，４０４号に開示されており、その開示内容は参照により本明細書に組み込まれる。ＢＭＰは、中枢神経系虚血または外傷後の機能回復の増強に使用できる。骨原性タンパク質を使用する、中枢神経系虚血または外傷後の機能回復の増強のための一般的な方法は、米国特許第６，４０７，０６０号に開示されており、その開示内容は参照により本明細書に組み込まれる。ＢＭＰは、樹枝状成長の誘導のために使用できる。骨原性タンパク質を使用する、樹枝状成長の誘導のための一般的な方法は、米国特許第６，９４９，５０５号に開示されており、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。ＢＭＰは、神経細胞接着の誘導のために使用できる。骨原性タンパク質を使用する、神経細胞間接着の誘導のための一般的な方法は、米国特許第６，８００，６０３号に開示されており、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。ＢＭＰは、パーキンソン病の治療および予防のために使用できる。骨原性タンパク質を使用する、パーキンソン病の治療および予防のための一般的な方法は、米国特許第６，５０６，７２９号に開示されており、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００５４】
さらに、ＢＭＰは、病変したまたは損傷を受けた哺乳類組織を修復するために使用できる。その位置に存在する組織は、病変していようと、損傷を受けていようと、適当なマトリックスを提供して、前駆細胞の増殖および組織特異的分化を可能にする。さらに、損傷を受けた、または病変した組織の位置、特に、外科的手段によってさらに攻撃された位置は、形態形成的に許容される環境を提供する。
【００５５】
ＢＭＰはまた、傷害後の瘢痕組織形成を防ぐか、または実質的に阻害するために使用できる。それは、その位置での組織形態形成を誘導でき、移動する線維芽細胞の非分化結合組織への凝集を防ぐ。例えば、ＢＭＰを、部分肝切除術後の実質的に傷害された肝臓組織のタンパク質誘導性形態形成のために使用できる。
【００５６】
別の例として、ＢＭＰを、象牙質形成を誘導するために使用できる。今日まで、傷害に対する歯髄組織の予測不可能な応答は、歯学における根本的な臨床上の問題である。さらに別の例として、ＢＭＰは、ラット脳穿刺モデルを使用して評価され得る、中枢神経系（ＣＮＳ）修復における再生効果を誘導し得る。
【００５７】
骨格障害の場合には、哺乳類では、外傷および炎症性疾患をはじめとするいくつかの因子が、軟骨変性を引き起こすか、その一因であり得る。炎症反応の作用に起因する細胞に対する損傷は、関節の疾患（例えば、関節リウマチ（ＲＡ）および変形性関節症（ＯＡ））における軟骨機能の低下または軟骨機能の喪失の原因と関連があるとされてきた。さらに、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）および強皮症などの自己免疫疾患は、結合組織の分解を特徴とし得る。変形性関節症（ＯＡ）などのいくつかの軟骨変性性疾患の場合には、関節軟骨の正常な加齢が、病的なＯＡ過程に変化する機序は、現在まだわかっていない。以上の疾患の各々は、本発明の材料および方法を用いて効果的に治療され得る。  
【００５８】
先に記載したように、本発明のＢＭＰ製剤は、骨格の疾患または傷害を治療するために効果的に使用できる。例えば、本発明のＢＭＰ製剤は、椎間板変性症、または腱、靭帯もしくは半月板をはじめとするその他の線維軟骨組織などの軟骨分解または軟骨欠損をもたらす疾患または傷害を治療するために使用できる。本発明の製剤はまた、膝、肘、臀部または肩をはじめとする滑膜性の連結などの関節の軟骨内層などの、公開されたＰＣＴ出願ＷＯ０５／１１５４３８に示される関節軟骨の欠損または変性を治療するために使用できる。別の実施形態では、本発明の製剤は、関節における軟骨欠損または骨軟骨欠損などの関節軟骨欠損部位を治療するために使用される。このような関節軟骨欠損は、変形性関節症または関節リウマチなどの疾患経過の、または関節の傷害による結果であり得る。
【００５９】
製剤
本発明の生物薬剤、特に、ＢＭＰは、それを必要とする哺乳類、好ましくは、ヒトへの投与のために、薬学的組成物の一部として製剤化できる。特定の実施形態では、生物薬剤は、それだけには限らないが、ゴマ油などの生体適合性オイル、ヒアルロン酸、シクロデキストリン、ラクトース、ラフィノース、マンニトール、カルボキシメチルセルロース、熱反応性または化学物質反応性ゲル（ｃｈｅｍｏ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｇｅｌ）、ショ糖酢酸イソ酪酸エステルをはじめとする適当なキャリアまたは増量剤中で、またはそれらとともに投与することができる。当業者ならば、増量剤またはキャリアは、投与量の容積が、例えば、それだけには限らないが、２０μｌ以下の容積を含む、本明細書に開示される生物薬剤の濃縮された剤形の送達を促進し得ることは理解する。本発明の特に好ましい実施形態では、増量剤は、生理学的ｐＨで実質的に不溶性である本発明の生物薬剤とともに使用し、生物薬剤の溶解を高め、その結果、増量剤が生物薬剤の放出のためのキャリアとして従来的に作用できる。なおさらに特に好ましい実施形態では、生物薬剤はＢＭＰ−７である。本発明の現在好ましい実施形態は、トレハロース、好ましくは、乳酸バッファー中のトレハロース、最も好ましくは、９％トレハロースを含む１０ｍＭ乳酸塩のバッファー中のＢＭＰ−７を含むＢＭＰ製剤を含む。本発明の前記実施形態を実施することは、当技術分野における技術の範囲内であり、ならびに、当業者が認識する本発明のありとあらゆる変法および改変は、ｉｎ  ｖｉｖｏでの生物薬剤の有効な投薬を提供する。
【００６０】
なおさらに、本発明の生物薬剤は、それを必要とする哺乳類に、単独で、または組織形態形成に対して有益な効果を有することが公知である別の物質と組み合わせて投与できる。このような物質（本明細書においては、補助因子）の例として、制限するものではないが、組織修復および再生を促進し、かつ／または炎症を阻害する物質が挙げられる。骨粗鬆症の個体において骨組織成長を刺激するための有用な補助因子の例として、例えば、それだけには限らないが、ビタミンＤ３、カルシトニン、プロスタグランジン、副甲状腺ホルモン、デキサメタゾン、エストロゲンおよびＩＧＦ−ＩまたはＩＧＦ−ＩＩが挙げられる。神経組織修復および再生にとって有用な補助因子として、それだけには限らないが、神経成長因子を挙げることができる。その他の有用な補助因子として、それだけには限らないが、防腐薬、抗生物質、抗ウイルス薬および抗真菌薬、鎮痛薬および麻酔薬をはじめとする症状を軽減する補助因子が挙げられる。
【００６１】
当業者には当然であるが、治療用組成物において記載される化合物の濃度は、制限するものではないが、投与される薬物の投薬量、および使用される化合物の化学的特性（例えば、疎水性）をはじめとするいくつかの因子に応じて変わる。好ましい投薬量は、それだけには限らないが、疾患の種類および程度、組織喪失または欠損、特定の患者の全体的な健康状態、選択された化合物の相対的な生物学的有効性、化合物の製剤、および製剤における添加剤の存在および種類をはじめとする変数に応じて変わる可能性がある。本発明の治療用分子は、通常の用量が、１日あたり約１０ｎｇ／ｋｇ体重〜約１ｇ／ｋｇ体重の範囲である場合に個体に提供され得；好ましい用量範囲は、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、１０〜１０００μｇ／用量のより特に好ましい投薬量範囲を有する。熟練した臨床医には当然であるが、本発明の有効な用量は、それだけには限らないが、適応症、疾患の病状および個体の身体特性をはじめとする多数の因子を考慮して改変され得る。ありとあらゆる前記因子を考慮して用量を変更、改変または最適化することが、当技術分野の技術の範囲内であることは明らかである。
【００６２】
本発明の特定の実施形態のパラメータおよび状態に従って、生物薬剤のアベイラビリティーを制御できる。特に、製剤に由来する生物薬剤のアベイラビリティーの速度および程度は、それだけには限らないが、ポリマーの種類および分子量、速度改変剤（ｒａｔｅ  ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）の使用、可塑剤および浸出可能剤（ｌｅａｃｈａｂｌｅ  ａｇｅｎｔ）の使用ならびに熱可塑性ポリマーおよび生物薬剤の濃度および種類などの特性のバリエーションによって制御できる。
【００６３】
生物薬剤の放出速度および必要に応じて含まれるマトリックスの柔軟性を管理するために、速度改変剤、可塑剤および浸出可能剤を含めてもよい。速度改変剤は、マトリックスに組み込まれる速度改変剤の性質に応じて放出の速度を増大または遅延し得る。公知の可塑剤ならびにポリマー系における二次的擬結合形成（ｐｓｅｕｄｏｂｏｎｄｉｎｇ）に適している有機化合物が、速度改変剤として、また柔軟性改変剤（ｐｌｉａｂｉｌｉｔｙ  ｍｏｄｉｆｉｅｒ）および浸出剤（ｌｅａｃｈｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）としても許容される。通常、これらの薬剤は、モノ、ジおよびトリカルボン酸のエステル、ジオールおよびポリオール、ポリエーテル、非イオン性界面活性剤、脂肪酸、脂肪酸エステル、植物油などのオイルなどである。マトリックス内のこのような薬剤の濃度は、マトリックスの総重量に対して、総計で最大６０重量％、好ましくは、最大３０重量％、より好ましくは、最大１５重量％の範囲であり得る。概して、これらの速度改変剤、浸出剤、可塑剤および柔軟性改変剤およびその適用は、米国特許第５，７０２，７１６号および同５，４４７，７２５号に記載されており、その開示内容は、使用されるポリマーが生体適合性および／または生分解性であるという条件で参照により本明細書に組み込まれる。当業者には当然であるが、本発明は、生物薬剤の可溶化速度または生物薬剤のための任意のキャリアの分解速度もしくは浸食速度を増大させ得る当技術分野内のありとあらゆる薬剤を含む。したがって、本発明の実施に従うその他の薬剤として、それだけには限らないが、同時局在化のｐＨ改変剤および張度改変剤が挙げられる。特に好ましい実施形態では、本発明の組成物は、生物薬剤の可溶化速度を実質的に増大させる濃度または量で提供される、同時局在化のｐＨ改変剤または張度改変剤を含む。別の好ましい実施形態では、本発明の組成物は、キャリアの分解速度または浸食速度を実質的に増大させる濃度または量で提供される、同時局在化のｐＨ改変剤または張度改変剤を含む。当業者には当然であるが、本発明の速度改変剤、浸出剤、可塑剤、柔軟性改変剤、ｐＨ改変剤および張度改変剤は、性質または濃度において置換、改変、変更され得、それだけには限らないが、所望の放出速度、キャリアの性質（もしあれば）、適応症、疾患の病状および個体の身体特性をはじめとする多数の因子を考慮して最適化され得る。
【００６４】
本発明の生物薬剤の製剤は、１種以上の添加剤をさらに含み得る。添加剤の例は、ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎおよびｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｇｒｅａｔ  Ｂｒｉｔａｉｎによって共同で出版されたＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓに記載されている。本発明の製剤および薬学的組成物の製造および使用において使用してもよい添加剤として、それだけには限らないが、酢酸、氷酢酸、クエン酸、フマル酸、塩酸、希塩酸、リンゴ酸、硝酸、リン酸、希リン酸、硫酸、酒石酸などの酸性化剤；安息香酸デナトリウム、メチルイソブチルケトン、スクロースオクタアセテートなどのアルコール変性剤；強アンモニア溶液、炭酸アンモニウム、ジエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、トロラミンなどのアルカリ化剤；ジメチコン、シメチコンなどの消泡剤；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンザルコニウム溶液、塩化ベンゼルトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブチルパラベン、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、クロロクレゾール、クレゾール、デヒドロ酢酸、エチルパラベン、メチルパラベン、メチルパラベンナトリウム、フェノール、フェニルエチルアルコール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、プロピルパラベン、プロピルパラベンナトリウム、安息香酸ナトリウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸、チメロサール、チモールなどの抗菌保存剤；アスコルビン酸、パルミチン酸アコルビル（ａｃｏｒｂｙｌ  ｐａｌｍｉｔａｔｅ）、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、次亜リン酸、モノチオグリセロール、没食子酸プロピル、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、二酸化硫黄、トコフェロール、トコフェロール添加剤などの抗酸化剤；酢酸、炭酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、ホウ酸、クエン酸、乳酸、リン酸、クエン酸カリウム、メタリン酸カリウム、リン酸二水素カリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム溶液、リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなどの緩衝剤；エデト酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸および塩、エデト酸などのキレート化剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ゼラチン、医薬用グレーズ、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタクリル酸コポリマー、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、酢酸フタル酸ポリビニル、セラック、スクロース、二酸化チタン、カルナウバロウ、微晶質ワックス、ゼインなどのコーティング剤；カラメル、赤、黄色、黒またはブレンド、酸化鉄などの色；エチレンジアミン四酢酸および塩（ＥＤＴＡ）、エデト酸、ゲンチジン酸エタノールアミド（ｅｔｈａｎｏｌｍａｉｄｅ）、硫酸オキシキノリンなどの錯化剤；塩化カルシウム、硫酸カルシウム、二酸化シリコンなどの乾燥剤；アラビアガム、コレステロール、ジエタノールアミン（補助剤）、モノステアリン酸グリセリル、ラノリンアルコール、レシチン、モノおよびジグリセリド、モノエタノールアミン（補助剤）、オレイン酸（補助剤）、オレイルアルコール（安定剤）、ポロキサマー、ステアリン酸ポリオキシエチレン５０、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポリオキシル４０硬化ヒマシ油、ポリオキシル１０オレイルエーテル、ポリオキシル２０セトステアリルエーテル、ポリオキシル４０ステアレート、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、二酢酸プロピレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、ソリタン（ｓｏｒｉｔａｎ）モノオレエート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ステアリン酸、トロラミン、乳化ワックスなどの乳化剤および／または可溶化剤；粉末セルロース、精製ケイ質土などの濾過助剤；ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム、コロイド状二酸化シリコン、タルクなどの流動促進剤および／またはアンチケーキング剤；グリセリン、ヘキシレングリコール、プロピレングリコール、ソルビトールなどの保湿剤；ヒマシ油、ジアセチル化モノグリセリド、フタル酸ジエチル、グリセリン、モノ−およびジアセチル化モノグリセリド、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、トリアセチン、クエン酸トリエチルなどの可塑剤；酢酸セルロースなどのポリマー膜；アセトン、酢酸、アルコール、希アルコール、アミレン水和物、安息香酸ベンジル、ブチルアルコール、四塩化炭素、クロロホルム、コーンオイル、綿実油、酢酸エチル、グリセリン、ヘキシレングリコール、イソプロピルアルコール、メチルアルコール、塩化メチレン、メチルイソブチルケトン、鉱油、ピーナッツオイル、ポリエチレングリコール、炭酸プロピレン、プロピレングリコール、ゴマ油、注射用水、滅菌注射用水、洗浄用滅菌水、精製水などの溶剤；粉末セルロース、木炭、精製ケイ質土および二酸化炭素吸着剤などの吸収剤；硬化ヒマシ油、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、セチルエステルワックス、固い脂肪、パラフィン、ポリエチレン添加剤、ステアリルアルコール、乳化ワックス、白ろう、黄ろうなどの硬化剤；アラビアガム、寒天、アルギン酸、モノステアリン酸アルミニウム、ベントナイト、精製ベントナイト、マグマベントナイト、カルボマー９３４ｐ、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム１２、カラギーナン、微晶質およびカルボキシメチルセルロースナトリウムセルロース、デキストリン、ゼラチン、グアーガム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、メチルセルロース、ペクチン、酸化ポリエチレン、ポリビニルアルコール、ポビドン、アルギン酸プロピレングリコール、二酸化シリコン、コロイド状二酸化シリコン、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、キサンタンガムなどの懸濁化剤および／または増粘剤；ならびに塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、ドキュセートナトリウム、ノノキシノール９、ノノキシノール１０、オキトキシノール９、ポロキサマー、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポリオキシル４０、硬化ヒマシ油、ポリオキシル５０ステアレート、ポリオキシル１０オレイルエーテル、ポリオキシル２０、セトステアリルエーテル、ポリオキシル４０ステアレート、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、チロキサポールなどの湿潤剤および／または可溶化剤が挙げられる。
【００６５】
生物活性助剤
本発明はまた、本発明の生物薬剤組成物と同時投与できる「生物活性助剤」を意図し、これとして、それだけには限らないが、タンパク質同化剤、制酸剤、抗喘息薬、抗高コレステロール血症薬および抗脂質薬、抗凝固薬、抗けいれん薬、止痢薬、制吐薬、例えば、抗細菌薬および抗菌薬を含めた抗感染薬、抗炎症薬、抗躁薬、代謝拮抗薬、制嘔吐剤、抗新生物薬剤、抗骨吸収剤、抗肥満症薬、解熱剤および鎮痛薬、鎮痙薬、抗血栓剤、鎮咳薬、抗尿酸血症薬、抗狭心症薬、抗ヒスタミン剤、食欲抑制剤、生物製剤、脳血管拡張剤（ｃｅｒｅｂｒａｌ  ｄｉｌａｔｏｒｓ）、冠動脈拡張剤、気管支拡張剤、細胞傷害性薬剤、鬱血除去薬、利尿薬、診断薬、赤血球生成剤（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｃ  ａｇｅｎｔｓ）、去痰薬、胃腸の鎮静剤、血糖上昇剤、睡眠薬、血糖降下剤、免疫調節剤、イオン交換樹脂、緩下剤、ミメラルサプリメント、粘液溶解薬、神経筋薬物、末梢血管拡張薬、向精神剤、鎮静剤、刺激薬、甲状腺薬および抗甲状腺薬、組織増殖剤、子宮弛緩薬、ビタミンまたは抗原性物質が挙げられる。
【００６６】
より詳しくは、本発明との同時投与に好ましい生物活性助剤として、それだけには限らないが、アンドロゲン阻害剤、多糖類、増殖因子、ホルモン、ビスホスホネート、抗新脈管形成因子、デキストロメトルファン、臭化水素酸デキストロメトルファン、ノスカピン、クエン酸カルベタペンタン、塩酸クロフェジアノール、マレイン酸クロロフェニラミン、酒石酸フェニンダミン、マレイン酸ピリラミン、コハク酸ドキシラミン、クエン酸フェニルトロキサミン、塩酸フェニレフリン、塩酸フェニルプロパノールアミン、塩酸シュードエフェドリン、エフェドリン、リン酸コデイン、硫酸コデインモルヒネ、ミメラルサプリメント、コレスチラミン（ｃｈｏｌｅｓｔｒｙｒａｍｉｎｅ）、Ｎ−アセチルプロカインアミド、アセトアミノフェン、アスピリン、イブプロフェン、塩酸フェニルプロパノールアミン、カフェイン、グアイフェネシン、水酸化アルミニウム、水酸化マグネシウム、ペプチド、ポリペプチド、タンパク質、アミノ酸、ホルモン、インターフェロン、サイトカインおよびワクチンが挙げられる。本発明と同時投与できるその他の代表的生物活性助剤として、それだけには限らないが、ペプチド薬物、タンパク質薬物、脱感作物質、抗原、抗生物質、抗菌剤、抗ウイルス性物質、抗細菌性物質、抗寄生虫性物質、抗真菌性物質などの抗感染薬およびそれらの組合せ、抗アレルギー剤、アンドロゲンステロイド、鬱血除去薬、催眠薬、ステロイド性抗炎症薬、抗コリン作動薬、交感神経作動薬、鎮静剤、縮瞳薬、精神賦活剤、トランキライザー、ワクチン、エストロゲン、プロゲステロン作用薬、体液性物質、プロスタグランジン、鎮痛薬、鎮痙薬、抗マラリア剤、抗ヒスタミン剤、心臓作用薬、非ステロイド性抗炎症薬、抗パーキンソン病薬、抗高血圧薬、β−アドレナリン作動性遮断薬、栄養剤およびベンゾフェナントリジンアルカロイドが挙げられる。生物活性助剤は、さらに、刺激薬、鎮静薬、催眠薬、鎮痛薬、抗けいれん薬などとして作用できる物質であり得る。
【００６７】
生物活性助剤は、細胞および組織の成長および生存を促進できる、または例えば、血液細胞、ニューロン、筋肉、骨髄、骨細胞および組織などのような機能性細胞の活性を増強できる物質またはその代謝前駆体であり得る。例えば、同時投与してもよい生物活性助剤として、制限するものではないが、例えば、ガングリオシド、ホスファチジルセリン、神経成長因子、脳由来神経栄養因子のような神経成長促進物質が挙げられる。生物活性助剤はまた、いくつか挙げると、例えば、線維芽細胞増殖因子、上皮成長因子、内皮細胞増殖因子、血小板由来増殖因子、インスリン様成長因子、歯根膜細胞増殖因子のような軟部または線維性結合組織のための増殖因子であり得る。
【実施例】
【００６８】
１．例示的ＢＭＰの最小に侵襲性の全身送達
げっ歯類におけるＢＭＰ−７の中心静脈送達
（ａ）ラット研究番号１：静脈内カテーテルを介し雌のスプラーグ−ドーリーラットに静脈内に投与されたＢＭＰ−７の最大耐量の決定および２８日目実行可能性毒性研究
本研究の目的は、例示的ＢＭＰであるＢＭＰ−７の最大耐量（ＭＴＤ）を決定することであった。４匹の雌のスプラーグ−ドーリーラットに、１ｍｇ／ｍＬ溶液として１０ｍｇ／ｋｇのＢＭＰ−７（ｎ＝２）または等容積（１ｍＬ）の１０ｍＭ乳酸塩／９％トレハロースバッファー（ｎ＝２）のいずれかを頚静脈血管アクセスポート（ＶＡＰ）を介して、１週間に５日間、４週間の間、２８日間で合計２０用量を投与した。曝露前および投薬後２８日目に、血清抗ＢＭＰ−７抗体の分析のために血液を採取した。動物を臨床徴候、体重、ＣＢＣ、血清化学、剖検および臓器重量のアセスメントによって評価した。血清サンプルを分析して、抗ＢＭＰ−７抗体の量を決定した。
【００６９】
ＢＭＰ−７のＩＶ投与と関連していると考えられる臨床徴候や、体重、ＣＢＣ、血清化学、臓器重量、肉眼的または顕微鏡的所見の変化はなかった。剖検では、すべての臓器が正常の範囲内にあるようであった。１匹の処置動物のカテーテルが詰まり、この動物は、多数のＷＢＣを有しており、カテーテルからの細菌汚染の可能性を示した。
【００７０】
この研究の条件下で、ＭＴＤは達成されず、動物は、１０ｍｇ／ｋｇのＢＭＰ−７に十分に耐容性を示した。これは、試験したＢＭＰ−７溶液に基づくＭＦＤ（投与可能な最大用量）であった。
【００７１】
（ｂ）ラット研究番号２：スプラーグ−ドーリーラットにおいて静脈内に投与されたＢＭＰ−７の２８日目安全性評価
本研究の目的は、雌のスプラーグ−ドーリー（ＳＤ）ラットに頚静脈カテーテルを介して静脈内に投与された（ＩＶ）１ｍｇ／ｋｇ  ＢＭＰ−７の作用を評価することであった。５匹の雌のＳＤラットに、頚静脈カテーテルを介して１ｍｇ／ｋｇ  ＢＭＰ−７をＩＶで６回、１０日間にわたって注射した。５匹の対照の雌のＳＤラットには、ビヒクルのみをＩＶで６回、１０日間かけて注射した。動物を、注射の前後での臨床徴候の変化について評価した。臨床徴候がないことが、ＢＭＰ−７またはビヒクルのＩＶ投与と関連して記載された。ＢＭＰ−７のＩＶ投与は、ラットにおいて毒性徴候がないことと関連しており、耐容性良好であった。
【００７２】
したがって、これらの観察結果から、本発明の方法の実施によって、通常、ＢＭＰを使用する全身治療と関連している有害作用が低減または排除されることが確認される。
【００７３】
ネコにおけるＢＭＰ−７の中心静脈送達
（ａ）ネコに静脈内投与されたＢＭＰ−７の薬物動態プロフィール
本研究の目的は、ネコに対する、中心静脈カテーテル（静脈中に埋め込まれた血管アクセスポート）を介してＩＶ投与されたＢＭＰ−７の任意の作用を評価することであった。１０匹の成体の雄ドメスティックショートヘアネコに０．３ｍｇ／ｋｇ  ＢＭＰ−７を、１週間に１回、４週間の間、次いで、１ｍｇ／ｋｇ  ＢＭＰ−７を、１週間に１回、２週間の間、次いで、２ｍｇ／ｋｇ  ＢＭＰ−７を、１週間に１回、２週間の間投与した。ネコを臨床観察、理学的検査、臨床病理学および体重によって評価した。すべてのネコが、研究を通じて臨床的に正常のままであり、いかなる有害作用の徴候もエビデンスも有さず、いかなるネコも研究の経過にわたって、いかなる血管刺激や炎症の徴候は観察されなかった（いかなる骨形成や軟骨形成の徴候がないことを含む）。この研究の条件下で、雄のネコにおける中心静脈カテーテルを介する最大２ｍｇ／ｋｇのＢＭＰ−７のＩＶ投与は、有害な所見を有さなかった。
【００７４】
サルにおけるＢＭＰ−７の中心静脈送達
（ａ）カニクイザルにおけるＢＭＰ−７静脈内毒性研究
本研究の目的は、雄および雌のカニクイザルにおける隔日、４週間にわたる１４回の静脈内（ＩＶ）注射後のＢＭＰ−７の潜在毒性を調べることおよび２週間の回復期間後の潜在効果の回復を評価することであった。この研究は、５群、各々３匹の雄および３匹の雌のカニクイザル（主研究）および回復を評価するための群１および４におけるさらなる２匹の雄および２匹の雌のカニクイザルからなっていた。すべての動物に血管アクセスポートを有する中心静脈カテーテルを介して注射した。群１には、対照物（ビヒクル、５ｍＭ
ラクトース／９％トレハロース）を注射し、群２には、０．１ｍｇ／ｋｇ  ＳＦ  ＢＭＰ−７、群３には、０．３ｍｇ／ｋｇ  ＳＦ  ＢＭＰ−７、群４には、１ｍｇ／ｋｇ  ＳＦ  ＢＭＰ−７、群５には、０．３ｍｇ／ｋｇ  ３７Ｃ  ＢＭＰ−７を投与することとした。毒性は、臨床観察、体重、摂食量、理学的検査および眼科検査、体温、呼吸数、非観血的血圧、心電図検査（ＥＣＧ）および臨床病理学パラメータ（ＣＢＣ、凝固、血清化学および尿検査）および臓器重量および組織の顕微鏡的評価を含む剖検をモニタリングすることによって評価した。
【００７５】
１日目に、群５中の動物には、０．３ｍｇ／ｋｇの用量のＢＭＰ−７の代わりに、約１ｍｇ／ｋｇの用量のＢＭＰ−７を与えた。投薬は、５日目後、群５の動物には中止し、動物は研究から除いた。
【００７６】
ＢＭＰ−７に関連した臨床観察結果（ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ）、または体重、摂食量、眼科検査、体温、呼吸数、血圧、ＥＣＧまたは臨床病理学パラメータの変化は観察されなかった。埋め込まれた中心静脈ラインによる薬物投与に使用された静脈は、ＢＭＰ−７の投与に関連する肉眼的または顕微鏡的所見が観察されなかった。
【００７７】
０．１（群２）、０．３（群３）または１（群４）ｍｇ／ｋｇ／日のＳＦ  ＢＭＰ−７
ＩＶ、２８日間にわたって１日おき（１４用量について）で処置された動物は、対照動物（群１）と比較して、毒物学的に意味のある、または臨床的に関連のあると考えられる観察結果または所見を有していなかった。この研究の条件下で、有害作用が観察されないレベル（ＮＯＡＥＬ）および効果が観察されないレベル（ＮＯＥＬ）は、雄および雌カニクイザルに対する試験された最高用量（１ｍｇ／ｋｇ  ＢＭＰ−７）を超えていると決定された。
【００７８】
２．例示的ＢＭＰの最小に侵襲性の全身送達
霊長類におけるＢＭＰ−７の中心静脈送達
（ａ）霊長類研究番号１
各３匹の雌および雄のカニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、ＢＭＰ−７が、以下のプロトコールに従って投与され、送達される血管アクセスポートを外科的に装着した：
【００７９】
【表１】
2014169337.tif 000002
a 群1および4の用量は、約30分の注入によって投与した。
b 群2および3の用量は、約15分の注入によって投与した。
【００８０】
対照および処置被験体において、血清を採取して、ＢＭＰ−７抗体レベルを測定した。２８日目に、被験体を安楽死させ、肉眼的および顕微鏡的両方の病理学評価のために組織を採取した。
【００８１】
対照および処置被験体両方における投与部位（すなわち、大静脈の管腔）での肉眼的および顕微鏡的所見は、慢性的に留置している血管内カテーテルの埋め込みの予測される徴候のみを示した。すなわち、対照および処置被験体のいずれも、線維症や骨形成などの任意のその他の作用を示さない。また、ＢＭＰ−７処置した被験体は、対照被験体と比較して局在化した血管刺激の徴候を示さなかった。したがって、これらのデータから、本発明に従うＢＭＰの全身投与は、ＢＭＰの従来の全身送達法と関連する有害作用をいずれも取り除くことが確認される。
【００８２】
（ｂ）霊長類研究番号２
８匹の若い成体雄のカニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、以下のプロトコールに従ってＢＭＰ−７が投与され、送達される、腸骨をベースとする血管アクセスポートおよびカテーテルを外科的に装着する：
【００８３】
【表２】
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研究プロトコールに記載されるように、ＢＭＰ−７は、血管アクセスポートを介して１４日間（毎日）または２７日間（１日おき）投与される。ＢＭＰ−７投与の前およびＢＭＰ−７投与の後に、カテーテルを通して１０ｍＭ乳酸塩、９％トレハロース溶液、３ｍｌを流す。ＢＭＰ−７を、毎日ほぼ同時間に投与する。血液サンプルを、末梢血管から採取し、種々の血液学的、化学的、抗体および毒物動態学パラメータについて調べる。研究の完了の際に動物を屠殺し、さらに投与部位および送達部位を含む、種々の外部組織および内部組織および外部臓器および内部臓器の調査を含む完全な肉眼的剖検を実施する。
【００８４】
手短には、血液サンプルの分析によって、生物学的に重要なレベルのＢＭＰ−７が存在し、ＢＭＰ−７循環抗体を誘導するのに十分であったことを確認する。手短には、死後分析によって、本発明に従う全身ＢＭＰ−７投与の有害作用がないことを確認する。したがって、この研究は、例示的ＢＭＰの最小に侵襲性の全身送達が、血管アクセス構造物を使用して達成され得、それによって、有害な副作用を伴わない持続的な全身治療が可能になることを実証する。
【００８５】
（ｃ）霊長類研究番号３
４匹の若い成体雄のカニクイザル（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）に、以下のプロトコールに従ってＢＭＰ−７が投与され、送達される、腸骨をベースとする血管アクセスポートおよびカテーテルを外科的に装着する：
【００８６】
【表３】
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ＢＭＰ−７を、約３０分の投薬期間をかけてポート開口部に所定の容積を導入することによって投与する。研究プロトコールに記載されるように、ＢＭＰ−７を、血管アクセスポートを介して２８日間（毎日）投与する。ＢＭＰ−７投与の前およびＢＭＰ−７投与の後に、カテーテルを通して１０ｍＭ乳酸塩、９％トレハロース溶液、３ｍｌを流す。ＢＭＰ−７を、毎日ほぼ同時間に投与する。血液サンプルを、末梢血管から採取し、種々の血液学的、化学的、抗体および毒物動態学パラメータについて調べる。研究の完了の際に動物を屠殺し、さらに投与部位および送達部位を含む、種々の外部組織および内部組織および外部臓器および内部臓器の調査を含む完全な肉眼的剖検を実施する。
【００８７】
手短には、血液サンプルの分析によって、生物学的に重要なレベルのＢＭＰ−７が存在し、ＢＭＰ−７循環抗体を誘導するのに十分であったことを確認する。手短には、死後分析によって、本発明に従う全身ＢＭＰ−７投与の有害作用がないことを確認する。したがって、この研究は、例示的ＢＭＰの最小に侵襲性の全身送達が、血管アクセス構造物を使用して達成され得、それによって、有害な副作用を伴わない持続的な全身治療が可能になることを実証する。
【００８８】
３．ヒトにおける、例示的ＢＭＰの最小に侵襲性の全身送達のための治療的使用
（ａ）骨粗鬆症
骨粗鬆症の確定された臨床診断を有するヒト患者の集団に、０．０１〜３．０μｇ／ｋｇの用量のＢＭＰ−７を本発明の方法に従って、中心性に位置するカテーテルを介して１週間に１回投与する。このような治療が、処置された患者集団において統計的に有意な程度にその疾患を調節することが予想される。
【００８９】
（ｂ）代謝性骨疾患
代謝性骨疾患の確定された臨床診断を有するヒト患者の集団に、０．０１〜３．０μｇ／ｋｇの用量のＢＭＰ−７を本発明の方法に従って、中心性に位置するカテーテルを介して１週間に１回投与する。このような治療が、処置された患者集団において統計的に有意な程度にその疾患を調節することが予想される。
【００９０】
（ｃ）肝臓の、肺の、心臓のおよび腎臓の徴候を含めた線維症
肝臓の、肺の、心臓のおよび腎臓の線維症の各々をはじめとする線維症の確定された臨床診断を有するヒト患者の集団に、０．０１〜３．０μｇ／ｋｇの用量のＢＭＰ−７を本発明の方法に従って、中心性に位置するカテーテルを介して１週間に１回投与する。このような治療が、処置された集団各々において統計的に有意な程度にその疾患を調節することが予想される。
【００９１】
（ｄ）神経および脊髄傷害
神経および脊髄傷害の各々の確定された臨床診断を有するヒト患者の集団に、０．０１〜３．０μｇ／ｋｇの用量のＢＭＰ−７を本発明の方法に従って、中心性に位置するカテーテルを介して１週間に１回投与する。このような治療が、処置された集団各々において統計的に有意にその疾患を調節することが予想される。
【００９２】
（ｅ）腫瘍転移
腫瘍転移の確定された臨床診断を有するヒト患者の集団に、０．０１〜３．０μｇ／ｋｇの用量のＢＭＰ−７を本発明の方法に従って、中心性に位置するカテーテルを介して１週間に１回投与する。このような治療が、処置された患者集団において統計的に有意な程度にその疾患を調節することが予想される。
【００９３】
等価物
本発明は、その趣旨または本質的な特徴から逸脱することなく、その他の特定の形態で具体化され得る。したがって、本実施形態は、例示的なものであって、制限的なものではないとみなすべきであり、本発明の範囲は、前記説明によってではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の等価の意味および範囲内に入るすべての変化が、その中に包含されるものとする。
【外国語明細書】
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