(57)【要約】【課題】ポリマー粒子の収率を向上可能な、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法を提供する。【解決手段】一態様において、油中水滴型エマルション中で、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー、又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーと、（Ｂ）架橋剤とを重合させて（Ｃ）ポリマー粒子を得ることを含む、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法に関する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
油中水滴型エマルション中で、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー、又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーと、（Ｂ）架橋剤とを重合させて（Ｃ）ポリマー粒子を得ることを含む、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法。
【請求項２】
モノマーが（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーであり、さらに、前記（Ｃ）ポリマー粒子を１０体積パーセント以上の濃度のヒドラジン溶液で処理することを含む、請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
モノマーが（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーであり、さらに、前記（Ｃ）ポリマー粒子の保護基［Ｐ］を酸処理により脱保護することを含む、請求項１記載の製造方法。
【請求項４】
有機溶媒に、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー、（Ｂ）架橋剤、水、及び重合開始剤を含む混合物を分散させて油中水滴型エマルションを形成する工程を含む、請求項１から３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーが、下記一般式（Ｉ）で表される、請求項１から４のいずれかに記載の製造方法。
【化１】
2014105308.tif 000019
［式（Ｉ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−ＣＯＮＨ−からなる群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示す。］
【請求項６】
（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーが、下記式（１）で表される、請求項１から５のいずれかに記載の製造方法。
【化２】
2014105308.tif 000020
【請求項７】
（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーが、下記一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）で表される、請求項１から４のいずれかに記載の製造方法。
【化３】
2014105308.tif 000021
［式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−ＣＯＮＨ−からなる群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示し、［Ｐ］は、保護基を示す。］
【請求項８】
（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーが、下記式（２）又は（３）で表される、請求項１から４及び７のいずれかに記載の製造方法。
【化４】
2014105308.tif 000022
【請求項９】
架橋剤が、ポリオールのジ又はトリ（メタ）アクリル酸エステル、ポリオールのジ又はトリ不飽和酸エステル、ビスアクリルアミド、ポリイソシアネートと（メタ）アクリル酸ヒドロキシエステルを反応させて得られるジ（メタ）アクリル酸カルバミルエステル、多価アリル化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１から８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１０】
油中水滴型エマルションの有機溶媒が、脂肪族炭化水素、脂環族炭化水素、芳香族炭化水素、脂肪族アルコール、脂肪族ケトン、及び脂肪族エステル類、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１から９のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１１】
油中水滴型エマルションの有機溶媒が、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、ｎ−ヘプタン、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０記載の製造方法。
【請求項１２】
前記有機溶媒が、さらに、分散安定剤としてＨＬＢ３〜１０のソルビタン脂肪酸エステルを含む、請求項１から１１のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１３】
前記分散安定剤が、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノラウレート、及びソルビタンモノオレートからなる群から選択される、請求項１２記載の製造方法。
【請求項１４】
重合反応条件が、５０〜９０℃、０．５〜２４時間である、請求項１から１３のいずれかに記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、ヒドラジド基/オキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
特許文献１は、糖鎖のアルデヒド基と特異的に反応する官能基を担持してなる支持体及びこの支持体を適用したポリマー粒子を開示する。具体的には、オキシルアミノ基又はその誘導体を有するモノマーから懸濁重合反応によりポリマー粒子を製造することが開示する。
【０００３】
特許文献２は、ヒドラジド基又はアミノオキシ基を含有する糖鎖アフィニティビーズ及びその製造方法を開示する。具体的には、重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーを含む原料を架橋剤存在下で重合させてカルボン酸エステル含有ポリマーを得た後、当該カルボン酸含有ポリマー粒子を１０体積パーセント以上の濃度のヒドラジン溶液で処理することを含む製法を開示する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００５／０９７８４４号
【特許文献２】国際公開第２００８／０１８１７０号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本開示は、特許文献１及び２で開示される方法と比較してポリマー粒子の収率を向上可能な、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示は、一態様において、油中水滴型エマルション中で、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー、又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーと、（Ｂ）架橋剤とを重合させて（Ｃ）ポリマー粒子を得ることを含む、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法に関する。
【発明の効果】
【０００７】
本開示によれば、一態様において、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の収率を向上することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、本開示のビーズを含む３種類のビーズを用いて標識化糖鎖を検出した結果の一例を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本開示は、一態様において、カルボン酸エステルモノマー又はヒドラジル基若しくはオキシルアミノ基の誘導体を含むモノマーを重合させることを含むポリマー粒子の製造方法において、前記重合を逆相懸濁重合反応で行うことで、その収率を著しく向上できるという知見に基づく。
【００１０】
すなわち、本開示は、一態様において、油中水滴型エマルション中で、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー、又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーと、（Ｂ）架橋剤とを重合させて（Ｃ）ポリマー粒子を得ることを含む、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法（以下、「本開示の製造方法」ともいう。）に関する。
【００１１】
［重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー（Ａ１）］
本開示の製造方法に用いる重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー（Ａ１）（以下、「モノマー（Ａ１）」ともいう」）としては、限定されない一又は複数の実施形態において、下記一般式（Ｉ）で表されるモノマーが挙げられる。
【化１】
2014105308.tif 000002
［式（Ｉ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−ＣＯＮＨ−からなる群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示す。］
【００１２】
式（Ｉ）中、Ｒ1は、一又は複数の実施形態において、下記のものが挙げることができる。下記式中、ａ、ｂ、及びｄは、１〜５の整数を表し、ｃは、１〜１０の整数を表す。
【化２】
2014105308.tif 000003
【００１３】
前記一般式（Ｉ）の化合物としては、限定されない一又は複数の実施形態において、下記式（１）で表されるものが挙げられる。
【化３】
2014105308.tif 000004
【００１４】
重合反応前の油中水滴型エマルション又は前記エマルションを形成するための溶液におけるモノマー（Ａ１）の含有量としては、限定されない一又は複数の実施形態において、溶媒１００ｍＬに対し、５〜５０ｍｍｏｌ、５〜３０ｍｍｏｌ、又は、１０〜２０ｍｍｏｌである。なお、本開示の製造方法に用いるモノマー（Ａ１）は、一又は複数の実施形態において、１種類でもよく、複数種類であってもよい。
【００１５】
本開示の製造方法をモノマー（Ａ１）を用いて行う場合、本開示の製造方法は、一又は複数の実施形態において、重合反応により得られた（Ｃ）ポリマー粒子にヒドラジド基を付与する工程することを含む。（Ｃ）ポリマー粒子にヒドラジド基を付与する工程は、一又は複数の実施形態において、重合反応により得られた（Ｃ）ポリマー粒子をヒドラジン溶液で処理することにより行う。前記ヒドラジン溶液におけるヒドラジン濃度は、限定されない一又は複数の実施形態において、１０体積パーセント以上、３０体積パーセント以上、８０体積パーセント以上、９０体積パーセント以上、又は９８体積パーセント以上である。
【００１６】
［重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー（Ａ２）］
本開示の製造方法に用いる重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー（Ａ２）（以下、「モノマー（Ａ２）」ともいう）は、重合性基を含み、かつ、保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基を含む。モノマー（Ａ２）としては、限定されない一又は複数の実施形態において、下記一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）で表されるモノマーが挙げられる。
【化４】
2014105308.tif 000005
［式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−ＣＯＮＨ−からなる群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示し、［Ｐ］は、保護基を示す。］
【００１７】
式（ＩＩ）中、Ｒ1は、一又は複数の実施形態において、下記のものが挙げることができる。下記式中、ａ、ｂ、及びｄは、１〜５の整数を表し、ｃは、１〜１０の整数を表す。
【化５】
2014105308.tif 000006
【００１８】
式（ＩＩＩ）中、Ｒ1は、一又は複数の実施形態において、下記のものが挙げることができる。下記式中、ａ、ｂ、及びｄは、１〜５の整数を表し、ｃは、１〜１０の整数を表す。
【化６】
2014105308.tif 000007
【００１９】
前記一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物としては、限定されない一又は複数の実施形態において、それぞれ、下記式（２）及び（３）で表されるものが挙げられる。
【化７】
2014105308.tif 000008
【００２０】
重合反応前の油中水滴型エマルション又は前記エマルションを形成するための溶液におけるモノマー（Ａ２）の含有量としては、限定されない一又は複数の実施形態において、溶媒１００ｍＬに対し、５〜５０ｍｍｏｌ、５〜３０ｍｍｏｌ、又は、１０〜２０ｍｍｏｌである。
【００２１】
保護基［Ｐ］としては、限定されない一又は複数の実施形態において、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基（Ｆｍｏｃ）、ｔｅｒｔ-ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ）、２，２，２-トリクロロエトキシカルボニル基（Ｔｒｏｃ）、アリルオキシカルボニル基（Ａｌｌｏｃ）、４−メトキシトリチル基（Ｍｍｔ）、アミノ基、炭素数３から２０個のアルキル基、９−フルオレンアセチル基、１−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレンカルボン酸基、９−フルオレノン−１−カルボン酸基、ベンジルオキシカルボニル基、キサンチル基（Ｘａｎ）、トリチル基（Ｔｒｔ）、４−メチルトリチル基（Ｍｔｔ）、４−メトキシ２，３，６−トリメチル−ベンゼンスルホニル基（Ｍｔｒ）、メシチレン−２−スルホニル基（Ｍｔｓ）、４，４−ジメトキシベンゾヒドリル基（Ｍｂｈ）、トシル基（Ｔｏｓ）、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル基（Ｐｍｃ）、４−メチルベンジル基（ＭｅＢｚｌ）、４−メトキシベンジル基（ＭｅＯＢｚｌ）、ベンジルオキシ基（ＢｚｌＯ）、ベンジル基（Ｂｚｌ）、ベンゾイル基（Ｂｚ）、３−ニトロ−２−ピリジンスルフェニル基（Ｎｐｙｓ）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジアキソシクロヘキシリデン）エチル基（Ｄｄｅ）、２，６−ジクロロベンジル基（２，６−ＤｉＣｌ−Ｂｚｌ）、２−クロロベンジルオキシカルボニル基（２−Ｃｌ−Ｚ）、２−ブロモベンジルオキシカルボニル基（２−Ｂｒ−Ｚ）、ベンジルオキシメチル基（Ｂｏｍ）、シクロヘキシルオキシ基（ｃＨｘＯ）、ｔ−ブトキシメチル基（Ｂｕｍ）、ｔ−ブトキシ基（ｔＢｕＯ）、ｔ−ブチル基（ｔＢｕ）、アセチル基（Ａｃ）、トリフルオロアセチル基（ＴＦＡ）ｏ−ブロモベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基、２−クロロベンジル（Ｃｌ−ｚ）基、シクロヘキシル基、シクロペンチル基、イソプロピル基、ピバリル基、テトラヒドロピラン−２−イル基、トリメチルシリル基等が挙げられる。
【００２２】
モノマー（Ａ２）は、限定されない一又は複数の実施形態において、下記式（４）の化合物である。
【化８】
2014105308.tif 000009
【００２３】
本開示の製造方法をモノマー（Ａ２）を用いて行う場合、本開示の製造方法は、一又は複数の実施形態において、重合反応により得られた（Ｃ）ポリマー粒子の保護基［Ｐ］を酸処理により脱保護することを含む。脱保護は、保護基の種類に応じた公知の方法で行うことができる。
【００２４】
［架橋剤（Ｂ）］
架橋剤（Ｂ）としては、多官能の化合物であって、カルボン酸エステルモノマーと共重合を行う化合物を好適に用いることができ、限定されない一又は複数の実施形態において、
（１）ポリオールのジ又はトリ（メタ）アクリル酸エステル類、例えばポリオールがエチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチロールプロパン、グリセリン、ポリオキシエチレングリコール、ポリオキシプロピレングリコール、ポリグリセリン等であるもの、
（２）前記（１）において、不飽和酸が（メタ）アクリル酸以外のもの、例えばマレイン酸、フマル酸などであるもの、
（３）ビスアクリルアミド類、例えばＮ，Ｎ'−メチレンビスアクリルアミドなど、
（４）ポリエポキシドと（メタ）アクリル酸を反応させて得られるジ又はトリ（メタ）アクリル酸エステル類、
（５）ポリイソシアネートと（メタ）アクリル酸ヒドロキシエステルを反応させて得られるジ（メタ）アクリル酸カルバミルエステル類、例えばポリイソシアネートがトリレンジイソシアネート、ヘキサメチレンジイソシアネートなどであるもの、及び/又は、
（６）多価アリル化合物、例えばアリル化デンプン、アリル化セルロース、ジアリルフタレート、テトラアリロキシエタン、ペンタエリストールトリアリルエーテル、トリメチロールプロパントリアリルエーテル、ジエチレングリコールジアリルエーテル、トリアリルトリメリテート等、が挙げられる。
【００２５】
架橋剤（Ｂ）は、限定されない一又は複数の実施形態において、エチレングリコールジ（メタ）アクリレート、プロピレングリコールジ（メタ）アクリレート、又は、Ｎ，Ｎ'−メチレンビス（メタ）アクリルアミドである。
【００２６】
重合反応前の油中水滴型エマルション又は前記エマルションを形成するための溶液における（Ｂ）架橋剤の含有量としては、限定されない一又は複数の実施形態において、モノマー（Ａ１又はＡ２）に対し、１〜３０ｍｏｌ％、３〜２０ｍｏｌ％、又は、３〜１５ｍｏｌ％である。
【００２７】
なお、架橋剤（Ｂ）の重合反応系への添加タイミングは特に限定されず、一又は複数の実施形態において、重合前、重合中、重合後のいずれか時点で添加されうる。
【００２８】
［逆相懸濁重合反応］
本開示において「油中水滴型エマルション中における重合」とは、逆相懸濁重合をいう。本開示において、逆相懸濁重合とは、一又は複数の実施形態において、水溶性モノマー、必要に応じて他のモノマー若しくは架橋剤、及び重合開始剤等を含有する水相を、重合に不活性な疎水性有機溶媒を含む油相中に分散及び懸濁させ、油中水滴型の懸濁重合を行う方法である。したがって、本開示の製造方法は、一又は複数の実施形態において、有機溶媒に、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー、（Ｂ）架橋剤、水、及び重合開始剤を含む混合物を分散させて油中水滴型エマルションを形成する工程を含む。
【００２９】
［有機溶媒］
本開示の製造方法に使用しうる有機溶媒は、限定されない一又は複数の実施形態において、重合に不活性な疎水性有機溶媒である。本開示の製造方法に使用しうる有機溶媒は、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー、（Ｂ）架橋剤、水、及び重合開始剤を含む混合物を分散させるために用いられることから、限定されない一または複数の実施形態において、有機分散媒ともいうことができる。本開示の製造方法に使用しうる有機溶媒は、限定されない一又は複数の実施形態において、脂肪族炭化水素、脂環族炭化水素、芳香族炭化水素、脂肪族アルコール、脂肪族ケトン、及び脂肪族エステル類が挙げられる。前記脂肪族炭化水素は、限定されない一又は複数の実施形態において、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン及びｎ−ヘプタン等の炭素数５以上の脂肪族炭化水素が挙げられる。前記脂環族炭化水素は、限定されない一又は複数の実施形態において、シクロペンタン、メチルシクロペンタン、シクロヘキサン及びメチルシクロヘキサン等の炭素数５以上の脂環族炭化水素が挙げられる。前記芳香族炭化水素は、限定されない一又は複数の実施形態において、ベンゼン並びにトルエン及びキシレン等のベンゼン誘導体が挙げられる。前記脂肪族アルコールは、限定されない一又は複数の実施形態において、ｎ−ブチルアルコール及びｎ−アミルアルコール等の炭素数４以上又は４〜６の脂肪族アルコールが挙げられる。前記脂肪族ケトンは、限定されない一又は複数の実施形態において、メチルエチルケトン等の炭素数４以上又は４〜６の脂肪族ケトンが挙げられる。前記脂肪族エステル類は、限定されない一又は複数の実施形態において、酢酸エチル等の炭素数４以上又は４〜６の脂肪族エステル類が挙げられる。本開示の製造方法に使用しうる有機溶媒は、限定されない一又は複数の実施形態において、１種単独でもよく、２種以上の混合溶媒でもよい。本開示の製造方法に使用しうる有機溶媒は、限定されない一又は複数の実施形態において、上述の各有機溶媒１種のみでもよく、２種以上を混合してもよい。
【００３０】
前記有機溶媒の使用量には特に限定はなく、モノマー（Ａ１/Ａ２）の量等に応じて適宜設定することができる。前記モノマー（Ａ１及び/又はＡ２）１００質量部に対する前記有機溶媒の使用量は、限定されない一又は複数の実施形態において、５００〜５０００質量部、又は、５００〜３０００質量部である。
【００３１】
［重合開始剤］
本開示の製造方法に使用しうる重合開始剤は、限定されない一又は複数の実施形態において、水溶性である。前記重合開始剤は、限定されない一又は複数の実施形態において、水溶性のラジカル重合開始剤等が挙げられる。前記重合開始剤は、限定されない一又は複数の実施形態において、（１）過酸化水素、（２）過硫酸ナトリウム、過硫酸カリウム、及び過硫酸アンモニウム等の過硫酸塩、（３）過塩素酸カリウム及び過塩素酸ナトリウム等の過塩素酸塩、（４）塩素酸カリウム及び臭素酸カリウム等のハロゲン酸塩、（５）ｔ‐ブチルハイドロパーオキシド、クメンハイドロパーオキシド、及びジアルキルパーオキシド（ジ−ｔ−ブチルパーオキシド、ｔ−ブチルクミルパーオキシド等）等のパーオキシド類、（６）メチルエチルケトンパーオキシド及びメチルイソブチルケトンパーオキシド等のケトンパーオキシド、（７）ｔ−ブチルパーオキシアセテート、ｔ−ブチルパーオキシイソブチレート、及びｔ−ブチルパーオキシピバレート等のアルキルパーオキシエステル、並びに（８）アゾビスイソブチロニトリル及び２，２’−アゾビス（Ｎ，Ｎ’−ジメチレンイソブチルアミジン）ジヒドロクロリド等のアゾ化合物等が挙げられる。
【００３２】
前記重合開始剤の使用量は、逆相懸濁重合の条件に応じて適宜設定することができる。前記重合開示剤の使用量は、限定されない一又は複数の実施形態において、前記モノマー（Ａ１及び/又はＡ２）１００質量部に対して０．００５〜２０質量部、０．０１〜１０質量部、０．０２〜１０質量部、又は、０．０５〜５質量部である。なお、前記重合開始剤の添加方法には特に限定はない。前記重合開始剤は、限定されない一又は複数の実施形態において、前記モノマー（Ａ１及び/又はＡ２）とは別に前記有機溶媒に添加してもよく、前記モノマー（Ａ１及び/又はＡ２）の水溶液に予め添加して重合開始剤含有液を調製し、これを前記有機溶媒に添加してもよい。
【００３３】
［分散剤］
本開示の製造方法の限定されない一又は複数の実施形態において、逆相懸濁重合を行う際に、前記有機溶媒に分散剤を含有させることが好ましい。前記分散剤としては、限定されない一又は複数の実施形態において、ＨＬＢが３〜１０、又は３〜９の油溶性界面活性剤が挙げられる。そのような油溶性界面活性剤は、一又は複数の実施形態において、ソルビタン脂肪酸エステル（ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタン、ソルビタンモノオレート等）、ショ糖脂肪酸エステル（ショ糖と、ステアリン酸、パルミチン酸、ラウリン酸、オレイン酸などの脂肪酸とのモノ、ジまたはトリエステル等）が挙げられる。前記分散剤は１種単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
【００３４】
前記分散剤の使用量は特に限定はなく、逆相懸濁重合の条件に応じて適宜選択することができる。分散剤の使用量は、限定されない一又は複数の実施形態において、前記水前記モノマー（Ａ１及び/又はＡ２）１００質量部に対して０．１〜２０質量部、０．１〜１５質量部、又は０．１〜１０質量部である。
【００３５】
逆相懸濁重合反応は、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー、（Ｂ）架橋剤、水、及び前記重合開始剤を含む混合物が前記有機溶媒に分散した油中水滴型エマルションを懸濁しながら重合を行う。前記油中水適型エマルションの形成と前記懸濁は同時であってもよく、前記油中水適型エマルションの形成が先であってもよい。また、各成分は、全量を重合反応前に混合してもよく、一部又は全部を撹拌しながら添加混合してもよい。重合反応条件は、限定されない一又は複数の実施形態において、５０〜９０℃又は６０〜８０℃、０．５〜２４時間又は１〜２０時間である。
【００３６】
［ポリマー粒子（Ｃ）］
（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーを用いて前記逆相懸濁重合を行った場合、（Ｃ）ポリマー粒子として、カルボン酸エステルを有するポリマー粒子を得ることができる。よって、本開示は、その他の態様において、該「カルボン酸エステルを有するポリマー粒子」及び/又はその製造方法に関する。
【００３７】
得られた（Ｃ）ポリマー粒子にヒドラジド基を付与する工程することで、ヒドラジド基を有するポリマー粒子を製造できる。（Ｃ）ポリマー粒子にヒドラジド基を付与する工程は、上述のとおりにすることができる。
【００３８】
（Ａ２）重合性基を含み保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基を含むモノマーを用いて前記逆相懸濁重合を行った場合、（Ｃ）ポリマー粒子として、保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基を有するポリマー粒子を得ることができる。よって、本開示は、その他の態様において、該「保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基を有するポリマー粒子」及び/又はその製造方法に関する。
【００３９】
得られた（Ｃ）ポリマー粒子を脱保護することで、ヒドラジド基を有するポリマー粒子を製造できる。（Ｃ）ポリマー粒子を脱保護する工程は、上述のとおりにすることができる。
【００４０】
（Ａ２）重合性基を含み保護基［Ｐ］で保護されたオキシルアミノ基を含むモノマーを用いて前記逆相懸濁重合を行った場合、（Ｃ）ポリマー粒子として、保護基［Ｐ］で保護されたオキシルアミノ基を有するポリマー粒子を得ることができる。よって、本開示は、その他の態様において、該「保護基［Ｐ］で保護されたオキシルアミノ基を有するポリマー粒子」及び/又はその製造方法に関する。
【００４１】
得られた（Ｃ）ポリマー粒子を脱保護することで、オキシルアミノ基を有するポリマー粒子を製造できる。（Ｃ）ポリマー粒子を脱保護する工程は、上述のとおりにすることができる。
【００４２】
［ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子］
本開示の製造方法で製造されうるヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子は、一又は複数の実施形態において下記のような構造をとる。
−（ヒドラジド基含有化合物成分）ｍ−（架橋剤成分）ｎ−、又は
−（オキシルアミノ基含有化合物成分）ｍ−（架橋剤成分）ｎ−
【００４３】
本開示の製造方法で製造されうるヒドラジド基を有するポリマー粒子は、限定されない一又は複数の実施形態において、下記の一般式（ＩＶ）で表される架橋型ポリマー構造を有するものが挙げられる。
【化９】
2014105308.tif 000010
［式（ＩＶ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、−ＣＯＮＨ−で中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示し、ｍ、ｎはモノマーユニット数を示す。］
【００４４】
式（ＩＶ）中、Ｒ1は、限定されない一又は複数の実施形態において、下記のものが挙げることができる。下記式中、ａ、ｂ、及びｄは、１〜５の整数を表し、ｃは、１〜１０の整数を表す。
【化１０】
2014105308.tif 000011
【００４５】
式（ＩＶ）中、Ｒ2は、限定されない一又は複数の実施形態において、下記のものが挙げることができる。下記式中、ｅ、ｆは、１〜５の整数を表し、ｇは、１〜１０の整数を表す。
【化１１】
2014105308.tif 000012
【００４６】
本開示の製造方法で製造されうるヒドラジド基を有するポリマー粒子は、限定されない一又は複数の実施形態において、下記の式で表される架橋型ポリマー構造を有するものが挙げられる。
【化１２】
2014105308.tif 000013
（ｍ、ｎはモノマーユニット数を示す。）
【００４７】
［用途］
本開示の製造方法で製造されうるヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子は、一又は複数の実施形態において、糖鎖捕捉の用途に使用できる。例えば、試料中の還元末端を有する糖鎖の捕捉に使用できる。ポリマー粒子で捕捉した糖鎖は、一又は複数の実施形態において、ＰＮＧａｓｅＦ等の酵素やヒドラジン分解により精製することができる。或いは、ポリマー粒子で捕捉した糖鎖は、一又は複数の実施形態において、ヒドラゾン−オキシム交換反応又はヒドラゾン−ヒドラゾン交換反応により、標識化合物を標識することができる。これにより、検出感度の高感度化、高分解能化、及び/又は容易化が可能となる。
【００４８】
本開示は、さらに以下の一又は複数の実施形態に関する。
［１］  油中水滴型エマルション中で、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー、又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーと、（Ｂ）架橋剤とを重合させて（Ｃ）ポリマー粒子を得ることを含む、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法。
［２］  モノマーが（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーであり、さらに、前記（Ｃ）ポリマー粒子を１０体積パーセント以上の濃度のヒドラジン溶液で処理することを含む、［１］記載の製造方法。
［３］  モノマーが（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーであり、さらに、前記（Ｃ）ポリマー粒子の保護基［Ｐ］を酸処理により脱保護することを含む、［１］記載の製造方法。
［４］  有機溶媒に、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー、（Ｂ）架橋剤、水、及び重合開始剤を含む混合物を分散させて油中水滴型エマルションを形成する工程を含む、［１］から［３］のいずれかに記載の製造方法。
［５］  （Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーが、下記一般式（Ｉ）で表される、［１］から［４］のいずれかに記載の製造方法。
【化１３】
2014105308.tif 000014
［式（Ｉ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−ＣＯＮＨ−からなる群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示す。］
［６］  （Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーが、下記式（１）で表される、［１］から［５］のいずれかに記載の製造方法。
【化１４】
2014105308.tif 000015
［７］  （Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーが、下記一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）で表される、［１］から［４］のいずれかに記載の製造方法。
【化１５】
2014105308.tif 000016
［式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−ＣＯＮＨ−からなる群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示し、［Ｐ］は、保護基を示す。］
［８］  （Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジル基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーが、下記式（２）又は（３）で表される、［１］から［４］及び［７］のいずれかに記載の製造方法。
【化１６】
2014105308.tif 000017
［９］  架橋剤が、ポリオールのジ又はトリ（メタ）アクリル酸エステル、ポリオールのジ又はトリ不飽和酸エステル、ビスアクリルアミド、ポリイソシアネートと（メタ）アクリル酸ヒドロキシエステルを反応させて得られるジ（メタ）アクリル酸カルバミルエステル、多価アリル化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［１］から［８］のいずれかに記載の製造方法。
［１０］  油中水滴型エマルションの有機溶媒が、脂肪族炭化水素、脂環族炭化水素、芳香族炭化水素、脂肪族アルコール、脂肪族ケトン、及び脂肪族エステル類、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される、［１］から［９］のいずれかに記載の製造方法。
［１１］  油中水滴型エマルションの有機溶媒が、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、ｎ−ヘプタン、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、［１０］記載の製造方法。
［１２］  前記有機溶媒が、さらに、分散安定剤としてＨＬＢ３〜１０のソルビタン脂肪酸エステルを含む、［１］から［１１］のいずれかに記載の製造方法。
［１３］  前記分散安定剤が、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタン、及びモノオレートからなる群から選択される、［１２］記載の製造方法。
［１４］  重合反応条件が、５０〜９０℃、０．５〜２４時間である、［１］から［１３］のいずれかに記載の製造方法。
【００４９】
以下、本発明を以下の実施例及び比較例に基づいて説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【実施例】
【００５０】
［実施例］
［重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー（Ａ１）の合成］
以下のスキームで重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーである化合物（ｅ）を合成した。
【化１７】
2014105308.tif 000018
【００５１】
無水メタクリル酸（ＭＡＨ：５ｇ、０．０３ｍｏｌ）を１００ｍＬのクロロホルムに溶解させた溶液を、２５ｇの（エチレンジオキシ）ビス（エチルアミン）（ＥＤＢＥＡ：２５ｇ，０．１７ｍｏｌ）を１００ｍＬのクロロホルムに溶解させた溶液に氷浴上で滴下投入した。そこへ窒素を封入し、終夜攪拌させた。得られた反応溶液から溶媒を蒸発させて得た残留物を、シリカゲルカラム（展開溶媒：クロロホルム９０容／メタノール１０容の混合溶媒）にかけて所定のフラクションを分取して、このフラクションから溶媒を蒸発させて中間生成物（ｃ）を得た。この中間生成物（ｃ）５ｇ（０．０２３ｍｏｌ）を１００ｍＬのクロロホルムに溶解させた溶液に、１．５当量のコハク酸モノメチル及び１．５当量の水溶性カルボジイミド化合物（ＷＳＣ）である１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドを加えて、密栓した。そこへ窒素を封入し、終夜攪拌させた。得られた反応溶液から溶媒を蒸発させて得た残留物を、シリカゲルカラム（展開溶媒：クロロホルム９０容／メタノール１０容の混合溶媒）にかけて所定のフラクションを分取して、このフラクションから溶媒を蒸発させて重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー（ｅ）を得た。また、得られた化合物（ｅ）は、ＮＭＲ、マトリックス支援レーザイオン化−飛行時間型質量分析器（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ）により目的物であることを確認した。
【００５２】
［逆相懸濁重合反応によるポリマー粒子の合成］
密閉可能な重合容器に４０ｍＬの０．１％ソルビタンモノステアレート含有シクロヘキサンを装入し、窒素をパージした。２ｇの前記カルボン酸エステルモノマー（ｅ）（６ｍｍｏｌ）、エチレングリコールジメタクリレート（ＥＧＤＭＡ：メチルエステル含有モノマーに対して５ｍｏｌ％）、１．５ｍＬの純水、及び０．０１７５ｇのペルオキソ二硫酸カリウム（全モノマーに対して１ｍｏｌ％）からなる混合物を、窒素パージしながら前記重合容器に導入し、ソルビタンモノステアレート含有シクロヘキサン中に分散させた。窒素パージを停止し密閉した後、撹拌しながら７０℃で１６時間反応させた。生成したポリマー粒子を遠心分離により回収し、エタノールと水とで洗浄した。ポリマー粒子の収率は、６５％であった。
【００５３】
［比較例：懸濁重合反応によるポリマー粒子の合成］
密閉可能な重合容器に４０ｍＬの０．１％ポリビニルアルコール水溶液を装入し、窒素をパージした。２ｇの前記カルボン酸エステルモノマー（ｅ）（６ｍｍｏｌ）、エチレングリコールジメタクリレート（ＥＧＤＭＡ：メチルエステル含有モノマーに対して５ｍｏｌ％）、１．５ｍＬのクロロホルム、及び０．０１１ｇのアゾビスイソブチロニトリル（全モノマーに対して１ｍｏｌ％）からなる混合物を、窒素パージしながら前記重合容器に導入し、ポリビニルアルコール水溶液中に分散させた。窒素パージを停止し密閉した後、撹拌しながら７０℃で１６時間反応させた。生成したポリマー粒子を遠心分離により回収し、メタノールと水とで洗浄した。ポリマー粒子の収率は、１２％であった。
【００５４】
［ヒドラジド基の導入］
ポリマー粒子４００ｍｇを容器にとり、ヒドラジン１水和物（原液、９８体積％以上）４ｍＬを加えて攪拌し、室温で２時間静置した。反応後、ヒドラジン１水和物を除去し、メタノールで洗浄したのち、１Ｍ塩酸でリンスした。その後さらに純水で洗浄し、ヒドラジド基を有するポリマー粒子を得た。
【００５５】
［ヒドラジド基を有するポリマー粒子の特性評価］
上述の逆相懸濁重合で製造したヒドラジド基を有するポリマー粒子からなるビーズ（Ｘ）、上述の懸濁重合で製造したヒドラジド基を有するポリマー粒子からなるビーズ（Ｙ）及び市販のヒドラジド基含有ビーズ（Ｚ）を用い、官能基量を定量するとともに、ウシ血清由来ＩｇＧの糖鎖分析を行った。ビーズ（Ｚ）は、市販のヒドラジド基含有ビーズは、Ｂｉｏ−Ｒａｄ社製、商品名「アフィゲル‐Ｈｚ」を使用した。官能基量を定量及び糖鎖分析は、具体的には下記の条件で行った。
【００５６】
（官能基量の定量）
ビーズ（Ｘ）、ビーズ（Ｙ）各１ｍｇ、又はビーズ（Ｚ）分散液５０μＬ（ビーズ（Ｚ）の乾燥重量として１６．５ｍｇ）を容器にとり、Ｎ−アセチル−Ｄ−ラクトサミン（ＬａｃＮＡｃ）１μｍｏｌを添加し、さらに、２％酢酸を含むアセトニトリル１８０μＬを加えた。これを８０℃で４５分間加熱することによりＬａｃＮＡｃとビーズ上のヒドラジド基を反応させた。純水でビーズをリンスして未反応の糖鎖を回収し、それをＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ測定により定量（内部標準法）し、ビーズへのＬａｃＮＡｃ結合量を求めた。
【００５７】
結果：ビーズ（Ｘ）には、１ｍｇあたり０．８３μｍｏｌ（８３０ｎｍｏｌ）のＬａｃＮＡｃが結合した。ビーズ（Ｙ）には、１ｍｇあたり０．８５μｍｏｌ（８５０ｎｍｏｌ）のＬａｃＮＡｃが結合した。ビーズ（Ｚ）には、１ｍｇ（乾燥重量）あたり約８ｎｍｏｌのＬａｃＮＡｃが結合した。
【００５８】
（ヒドラジド基含有ポリマービーズを用いたウシ血清由来ＩｇＧの糖鎖分析）
１  生体試料の予備処理
ウシ血清由来ＩｇＧ１ｍｇを１００ｍＭ重炭酸アンモニウム５０μＬに溶解させた後、１２０ｍＭ  ＤＴＴ（ジチオスレイトール）を５μＬ加え、６０℃で３０分間反応させた。反応終了後、１２３ｍＭ  ＩＡＡ（ヨードアセトアミド）１０μＬを加えて遮光下、室温で１時間反応させた。続いて４００Ｕのトリプシンによってプロテアーゼ処理をし、タンパク質部分をペプチド断片化した。反応溶液を９０℃で５分処理した後、５ＵのグリコシダーゼＦによる処理を行って糖鎖をペプチドから遊離させ、予備処理済の生体試料を得た。
【００５９】
２  糖鎖捕捉工程（ａ）、洗浄工程（ｂ）
ヒドラジド基を有するビーズ（Ｘ）、（Ｙ）、又は（Ｚ）５ｍｇが入ったディスポカラムに予備処理済の生体試料の懸濁物２０μＬ及び１８０μＬの２％酢酸／アセトニトリル溶液を加え、８０℃で１時間反応させた。反応は開放系で行い、溶媒が完全に蒸発しビーズが乾固した状態であることを目視で確認した。続いて、グアニジン溶液、純水、メタノール、トリエチルアミン溶液にてビーズを洗浄後、１０％無水酢酸／メタノールを添加し、室温で３０分間反応させ、未反応のヒドラジド基をキャッピングした。キャッピング後、純水にてビーズを洗浄した。
【００６０】
３  糖鎖遊離工程（ｃ）
ビーズ（Ｘ）、（Ｙ）、又は（Ｚ）の入ったディスポカラムに純水２０μＬ及び２％酢酸／アセトニトリル溶液１８０μＬを加え、７０℃で１．５時間反応させた。反応は開放系で行い、溶媒が完全に蒸発しビーズが乾固した状態であることを目視で確認した。
【００６１】
４  標識化工程（ｄ）
ビーズの入ったディスポカラムに、２−ａｍｉｎｏｂｅｎｚａｍｉｄｅ（２−ＡＢ）及びシアノ水素化ホウ素ナトリウムの終濃度がそれぞれ０．３５Ｍ、１Ｍになるように３０％酢酸／ＤＭＳＯ混合溶媒に溶解させて調整した溶液５０μＬを添加し、６０℃で２時間反応させた。
【００６２】
前記、糖鎖捕捉工程（ａ）、洗浄工程（ｂ）、糖鎖遊離工程（ｃ）、及び標識化工程（ｄ）は同一の容器であるディスポカラム内で行なった。
【００６３】
５  余剰試薬除去工程
反応溶液５０μＬを回収し、アセトニトリルで１０倍に希釈した後、シリカゲル  （Ｉａｔｒｏｂｅａｄｓ、６ＲＳ−８０６０、三菱化学ヤトロン製）を詰めたカラムに添加してシリカゲルに標識糖鎖を吸着させた。アセトニトリル、アセトニトリル／水混合溶液（９５：５）にてカラムを洗浄後、純水５０μＬにて標識糖鎖を回収した。
【００６４】
６  標識化糖鎖の検出
得られた標識糖鎖をＨＰＬＣにて測定した。アミノカラム（Ｓｈｏｄｅｘ  Ａｓａｈｉｐａｋ  ＮＨ２Ｐ−５０）を用いて励起波長３３０ｎｍ、蛍光波長４２０ｎｍにて測定した。その結果、２ＡＢにより標識化された糖鎖が検出された。図１に、得られたＨＰＬＣチャートから求めたピーク総面積を示す。図１に示すように、ビーズ（Ｘ）とビーズ（Ｙ）のそれは同等の大きさであり、かつ、ビーズ（Ｚ）に比べて格段に大きかった。このことから、本開示のビーズ（Ｘ）のウシ血清由来ＩｇＧ糖鎖の捕捉量は、従来の懸濁重合で作製したビーズ（Ｙ）と同等であり、また、市販のヒドラジド基含有ビーズ（Ｚ）よりもが多いことがわかった。
【図１】
2014105308.tif 000023
【手続補正書】
【提出日】平成25年12月2日(2013.12.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
油中水滴型エマルション中で、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー、又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジド基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーと、（Ｂ）架橋剤とを重合させて（Ｃ）ポリマー粒子を得ることを含む、ヒドラジド基又はオキシルアミノ基を有するポリマー粒子の製造方法。
【請求項２】
モノマーが（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーであり、さらに、前記（Ｃ）ポリマー粒子を１０体積パーセント以上の濃度のヒドラジン溶液で処理することを含む、請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
モノマーが（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジド基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーであり、さらに、前記（Ｃ）ポリマー粒子の保護基［Ｐ］を酸処理により脱保護することを含む、請求項１記載の製造方法。
【請求項４】
有機溶媒に、（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマー又は（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジド基又はオキシルアミノ基とを含むモノマー、（Ｂ）架橋剤、水、及び重合開始剤を含む混合物を分散させて油中水滴型エマルションを形成する工程を含む、請求項１から３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーが、下記一般式（Ｉ）で表される、請求項１から４のいずれかに記載の製造方法。
【化１】
2014105308.tif 000024
［式（Ｉ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−ＣＯＮＨ−からな
る群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示す。］
【請求項６】
（Ａ１）重合性基を含むカルボン酸エステルモノマーが、下記式（１）で表される、請求項１から５のいずれかに記載の製造方法。
【化２】
2014105308.tif 000025
【請求項７】
（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジド基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーが、下記一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）で表される、請求項１から４のいずれかに記載の製造方法。
【化３】
2014105308.tif 000026
［式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）中、Ｒ1は、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＣＯ−、及び−
ＣＯＮＨ−からなる群から選択される少なくとも一つで中断されてもよい炭素数１〜２０の炭化水素鎖を示し、Ｒ2は、Ｈ、ＣＨ3又は炭素数２〜５の炭化水素鎖を示し、［Ｐ］は、保護基を示す。］
【請求項８】
（Ａ２）重合性基と保護基［Ｐ］で保護されたヒドラジド基又はオキシルアミノ基とを含むモノマーが、下記式（２）又は（３）で表される、請求項１から４及び７のいずれかに記載の製造方法。
【化４】
2014105308.tif 000027
【請求項９】
架橋剤が、ポリオールのジ又はトリ（メタ）アクリル酸エステル、ポリオールのジ又はトリ不飽和酸エステル、ビスアクリルアミド、ポリイソシアネートと（メタ）アクリル酸ヒドロキシエステルを反応させて得られるジ（メタ）アクリル酸カルバミルエステル、多価アリル化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１から８のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１０】
油中水滴型エマルションの有機溶媒が、脂肪族炭化水素、脂環族炭化水素、芳香族炭化水素、脂肪族アルコール、脂肪族ケトン、及び脂肪族エステル類、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１から９のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１１】
油中水滴型エマルションの有機溶媒が、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、ｎ−ヘプタン、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１０記載の製造方法。
【請求項１２】
前記有機溶媒が、さらに、分散安定剤としてＨＬＢ３〜１０のソルビタン脂肪酸エステルを含む、請求項１から１１のいずれかに記載の製造方法。
【請求項１３】
前記分散安定剤が、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンモノラウレート、及びソルビタンモノオレートからなる群から選択される、請求項１２記載の製造方法。
【請求項１４】
重合反応条件が、５０〜９０℃、０．５〜２４時間である、請求項１から１３のいずれかに記載の製造方法。