(57)【要約】【課題】本発明の目的は、安全性が高く、優れた抗炎症作用を発揮できる抗炎症剤を提供することである。【解決手段】温州みかんに含まれているカロテノイドと呼ばれる分子種の１つであるクリプトキサンチン及び／又はその誘導体は、天然由来成分であり安全性が高く、しかも優れた抗炎症作用を発揮できるので、抗炎症剤の有効成分として使用できる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
クリプトキサンチン及び／又はその誘導体を有効成分とすることを特徴とする、抗炎症剤。
【請求項２】
クリプトキサンチン及び／又はその誘導体が温州みかん由来である、請求項に１記載の抗炎症剤。
【請求項３】
皮膚炎症の予防又は治療に使用される、請求項１又は２に記載の抗炎症剤。
【請求項４】
関節炎の予防又は治療に使用される、請求項１又は２に記載の抗炎症剤。
【請求項５】
慢性炎症が基盤病態となっている疾患の予防又は治療の予防又は治療に使用される、請求項１又は２に記載の抗炎症剤。
【請求項６】
クリプトキサンチン及び／又はそのエステル体を有効成分とすることを特徴とする、抗炎症用の食品用添加剤。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれかに記載の抗炎症剤を含む、抗炎症用の化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、安全性が高く、優れた抗炎症作用を発揮できる抗炎症剤に関する。また、本発明は、当該抗炎症剤を利用した、食品用添加剤、飲食品、化粧料、医薬品、飼料、及びペットフードに関する。
【背景技術】
【０００２】
炎症は、主に外界の刺激によって誘起される生体防御反応である。炎症が生じるメカニズムやカスケードについては完全に解明されてはいないが、人体に炎症性刺激が加わると、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）によってアラキドン酸から痛みを伝達する物質であるプロスタグランジン（ＰＧ）が産生され、これが局所的に発赤、腫脹、熱感、疼痛といった炎症症状を引き起こしていることが明らかにされている。このような炎症症状は、更に、発熱、血沈亢進、ＣＲＰ上昇、白血球数の増加又は減少、食欲不振、倦怠感、疼痛、ストレス反応等の全身症状を誘発させ得ることも知られている（非特許文献１）。更に、慢性炎症については、感染症、関節障害、アレルギー疾患、癌等の疾患の基盤病態にもなっていることも知られている。
【０００３】
従来、炎症症状を抑える抗炎症剤として、プレドニゾロン、コルチゾール、デキサメタゾン、ベタメタゾン等のステロイド系抗炎症剤や、アセチルサリチル酸、イブプロフェン等の非ステロイド系抗炎症剤が実用化されている。
【０００４】
ステロイド系抗炎症剤では、抗炎症作用が高いものの、長期間の使用によって、骨粗鬆症、動脈硬化症、感染症、糖尿病の誘発又は増悪等の副作用発現のリスクが高く、更に投与中止により反跳現象や離脱症状が生じることがあるという欠点がある。また、非ステロイド系抗炎症剤では、副作用発現リスクは、ステロイド系抗炎症剤に比べて低いという利点があるが、依然として副作用が生じることがあり、更なる安全性の向上が求められている。
【０００５】
一方、天然由来成分を用いた抗炎症剤を開発できれば、安全性がより高く利用価値の高い抗炎症剤になると期待されており、これまでに天然由来成分を用いた抗炎症剤についても種々検討されている。例えば、特許文献１には、天然由来成分であるアスタキサンチンが、炎症性サイトカイン及びケモカインの発現を阻害でき、抗炎症剤として使用できることが報告されている。しかしながら、従来報告されている天然由来成分を用いた抗炎症剤では、単独では抗炎症作用が弱いため、多量の投与が必要とされる、他の抗炎症剤との併用が必要とされる等の欠点がある。
【０００６】
このような従来技術を背景として、安全性が高い天然由来成分で、優れた抗炎症作用を発揮できる抗炎症剤を開発することが望まれていた。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】別冊・医学のあゆみ「サイトカイン−基礎から臨床応用まで」医歯薬出版、１９９２
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００３−５２８１３９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、安全性が高く、優れた抗炎症作用を発揮できる抗炎症剤を提供することを目的とする。また、本発明は、当該抗炎症剤を利用した食品用添加剤、飲食品、化粧料、医薬品、飼料、及びペットフードを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者等は、このような課題を解決するために鋭意検討の結果、温州みかんに含まれているカロテノイドと呼ばれる分子種の１つであるクリプトキサンチン及び／又はその誘導体は、天然由来成分であり安全性が高く、しかも優れた抗炎症作用を発揮できることを見出した。本発明は、かかる知見に基づいて更に検討を重ねることにより完成したものである。
【００１１】
即ち、本発明は、下記に掲げる態様の発明を提供する。
項１．  クリプトキサンチン及び／又はその誘導体を有効成分とすることを特徴とする、抗炎症剤。
項２．  クリプトキサンチン及び／又はその誘導体が温州みかん由来である、項に１記載の抗炎症剤。
項３．  皮膚炎症の予防又は治療に使用される、項１又は２に記載の抗炎症剤。
項４．  関節炎の予防又は治療に使用される、項１又は２に記載の抗炎症剤。
項５．  慢性炎症が基盤病態となっている疾患の予防又は治療の予防又は治療に使用される、項１又は２に記載の抗炎症剤。
項６．  クリプトキサンチン及び／又はそのエステル体を有効成分とすることを特徴とする、抗炎症用の食品用添加剤。
項７．  項１〜５のいずれかに記載の抗炎症剤を含む、抗炎症用の化粧料。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の抗炎症剤は、プロスタグランジンを生合成するシクロオキシナーゼの発現や、ＴＮＦ-αによって誘導される細胞間質分解酵素（ＭＭＰ−１）の発現を効果的に抑制でき、優れた抗炎症作用を発揮できるので、皮膚や関節等で生じる炎症症状や炎症疾患はもとより、局所又は全身炎症が基盤病態となっている疾患の予防又は治療にも有効である。また、本発明の抗炎症剤は、天然由来成分であり、長年の食経験もあるクリプトキサンチン及び／又はその誘導体を有効成分として使用しているため、副作用もなく高い安全性を確保できている。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】試験例１において、紫外線照射によって誘導されるシクロオキシナーゼ２（ＣＯＸ−２）遺伝子発現（右図）と、紫外線照射によって誘導されるＣＯＸ−２遺伝子発現に対してβ‐クリプトキサンチンが及ぼす影響(左図)を評価した結果を示す図である。
【図２】試験例２において、紫外線照射によって誘導されるプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）合成に対して、β−クリプトキサンチンが及ぼす影響を評価した結果を示す図である。
【図３】試験例３において、ＴＮＦ−αによって誘導される細胞間質分解酵素（ＭＭＰ−１及び−９）遺伝子発現に対して、β−クリプトキサンチンが及ぼす影響を評価した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の抗炎症剤は、クリプトキサンチン及び／又はその誘導体（以下、これらを「クリプトキサンチン類」と総括して表記することもある）を有効成分として使用することを特徴とする。以下、本発明の抗炎症剤について説明する。
【００１５】
クリプトキサンチン類
本発明の抗炎症剤の有効成分として使用されるクリプトキサンチンは、α−クリプトキサンチン又はβ−クリプトキサンチンのいずれであってもよく、またこれらの混合物であってもよい。また、クリプトキサンチンについては、その異性体のタイプについては、特に限定されず、オールトランス型又はシス型のいずれであってもよい。
【００１６】
本発明の抗炎症剤の有効成分として使用されるクリプトキサンチンの誘導体としては、特に限定されないが、具体的には、脂肪酸エステル体、硫酸エステル体、水酸基付加体、脱水酸基体、配糖体等が挙げられる。クリプトキサンチンの脂肪酸エステル体の種類については、特に限定されず、クリプトキサンチンと脂肪酸がエステル結合したものであればよい。クリプトキサンチンの脂肪酸エステル体を構成する脂肪酸については、特に限定されないが、例えば、炭素数８〜３２、好ましくは１０〜２４の飽和又は不飽和脂肪酸が挙げられる。当該脂肪酸としては、具体的には、ラウリン酸（Ｃ１２）、ミリスチン酸（Ｃ１４）、パルミチン酸（Ｃ１６）、ステアリン酸（１８）等が挙げられる。これらのクリプトキサンチンの脂肪酸エステルは、温州みかんに含まれており、クリプトキサンチンの脂肪酸として、温州みかん由来のものが好適に使用される。また、クリプトキサンチンの配糖体における糖成分の種類については特に限定されず、グルコース、マンノース、ガラクトース等の単糖類；スクロース、ラクトースやトレハロース等の二糖類；三糖類以上のオリゴ糖等が挙げられる。また、これらのクリプトキサンチンの誘導体の異性体のタイプについては、特に制限されず、シス型、トランス型のいずれでもよい。これらのクリプトキサンチンの誘導体は、１種単独で使用してもよく、また２種以上を組み合わせても良い。
【００１７】
本発明の抗炎症剤は、β−クリプトキサンチン類として、クリプトキサンチン及びその誘導体の中から１種を選択して使用してもよく、また２種以上を組み合わせて使用してもよい。β−クリプトキサンチン類の中でも、より一層優れた抗炎症作用を発揮させるという観点から、好ましくはβ−クリプトキサンチン及びその誘導体、更に好ましくはβ−クリプトキサンチが挙げられる。
【００１８】
本発明で使用されるクリプトキサンチン類の由来については、特に制限されず、天然素材（植物由来や動物由来）又は微生物から抽出されたものであってもよく、また化学合成や酵素合成等によって得られたものであってもよい。安全性、製造コストの低減等の観点から、天然素材由来のクリプトキサンチン類を使用することが好ましい。
【００１９】
本発明において、天然素材又は微生物由来のクリプトキサンチン類を使用する場合、当該のクリプトキサンチン類は、他の天然素材又は微生物素材が除去されて生成されたものであっても良いが、クリプトキサンチン類以外の天然素材又は微生物由来成分が含まれていてもよく、クリプトキサンチン類を含む事を限度として天然素材又は微生物の抽出物を使用することもできる。
【００２０】
クリプトキサンチン類の原料として使用される動植物については、クリプトキサンチン類が含まれていることを限度として特に制限されない。クリプトキサンチン類が含まれる動植物としては、例えば、玄米、とうもろこし等の穀類；さつまいも、さといも、やまいも等のいも類とその加工物；あずき、いんげんまめ、えんどうまめ、ささげ、そらまめ、だいず、ひよこまめ、べにばないんげん、らいまめ、りょくとう、レンズまめ等の豆類；アーモンド、あさ、えごま、カシューナッツ、かや、銀杏、栗、くるみ、ココナッツ、ゴマ、しい、すいか、とち、はす、ひし、ピスタチオ、ひまわり、ブラジルナッツ、ヘーゼルナッツ、マカダミアナッツ、まつ、落花生等の種実類；アーティチョーク、あさつき、明日葉、アスパラガス、うど、おおさかしろな、丘ひじき、おくら、カブ、かぼちゃ、からしな、カリフラワー、かんぴょう、菊、キャベツ、きゅうり、ぎょうじゃにんにく、京菜、キノコ類、キンサイ、クレソン、くわい、ケール、コールラビ、こごみ、ごぼう、小松菜、ザーサイ、さんとうさい、ししとうがらし、しそ、じゅうろくささげ、春菊、じゅんさい、しょうが、しろうり、ずいき、すぐきな、ズッキーニ、せり、セロリー、ぜんまい、タアサイ、だいこん類、たいさい、高菜、タケノコ、たまねぎ類、たらのめ、チコリー、チンゲンサイ、つうし、つるな、つるむらさき、つわぶき、唐辛子、冬瓜、トマト類、トレビス、とんぶり、ながさきはくさい、なす類、なずな、にがうり、にら、ニンジン、にんにく、ねぎ、野沢菜、のびる、白菜類、パクチョイ、バジル、パセリ、はつかだいこん、はやとうり、ビート、ピーマン類、ひのな、ひろしまな、ふき類、ふだんそう、ブロッコリー、ほうれん草、ホースラディッシュ、まこも、みずかけな、三つ葉、みょうが、むかご、めたで、もやし類、モロヘイヤ、やまごぼう、ゆりね、ようさい、よめな、よもぎ、らっきょう、リーキ、ルバーブ、レタス類、れんこん、わけぎ、わさび、わらび等の野菜類；アセロラ、アボカド、杏、イチゴ、イチジク、いよかん、梅、温州みかん、オリーブ、オレンジ、オロブランコ、柿、かぼす、かりん、キウイフルーツ、キワノ、キンカン、グァバ、グズベリー、ぐみ、グレープフルーツ、ごれんし、サクランボ、さんぼうかん、シイクワシャ―、すいか、すだち、すもも、だいだい、タンゴール、ダンゼロ、チェリモヤ、ドリアン、夏みかん、なつめ、なつめやし、パインアップル、ハスカップ、はっさく、パッションフルーツ、バナナ、パパイア、ひゅうがなつ、びわ、ブルーベリー、ぶんたん、ホワイトサポテ、ポンカン、まくわうり、マルメロ、マンゴー、メロン、もも、やまもも、ゆず、ラズベリー、りんご、レモン等の果実類；あおさ、あおのり、あまのり、あらめ、いわのり、えごのり、おごのり、かわのり、くびれつた、昆布類、すいぜんじのり、天草、とさかのり、ひじき、ひとえぐさ、ふのり、まつも、むかでのり、もずく類、わかめ類等の海藻類；いかなご、いわな、うなぎ、キャビア、こち、さけ・ます類、ししゃも、たら類、どじょう、はぜ、ぼら、まぐろ、わかさぎ等の魚類；あげまき、あさり、あわび、いあたやがい、牡蠣、さざえ、しじみ、たにし、つぶ、とこぶし、トップシェル、ばいがい、ばかがい、ハマグリ類、帆立貝、ほっきがい、もがい等の貝類；えび類、かに類等の甲殻類；いか類、たこ類等の頭足類；うに、おきあみ、くらげ、しゃこ、なまこ、ほや等のその他海産物；いのしし、いのぶた、うさぎ、牛、馬、鯨、鹿、豚、めんよう、ヤギ、あいがも、鳥肉類等の肉類；うこっけい卵、うずら卵、鶏卵、ピータン等の卵類；牛乳等の乳類や加工品等が挙げられる。これらの動植物の中でも、クリプトキサンチン類の原料として、好ましくはかんきつ類が挙げられる。かんきつ類としては、ミカン科などに属する植物を挙げられ、より具体的には、温州みかん、イヨカン、夏みかん、オレンジ、カボス、カワバタ、キシュウミカン、清見、キンカン、グレープフルーツ、ゲッキツ、三宝柑、シイクワサー、ジャバラ、スウィーティー、スダチ、ダイダイ、タチバナ、デコポン、ナツダイダイ、ハッサク、ネーブルオレンジ、バレンシアオレンジ、晩白柚、ヒュウガナツ、ブンタン、ポンカン、マンダリンオレンジ、ヤツシロ、ユズ、ライム、レモン、カラタチ（これらと同等又は類似の品種のものも含む）等が挙げられる。これらのかんきつ類の中でも、とりわけ温州みかんは、生産量が多く、クリプトキサンチン類の含有量も高いことから、クリプトキサンチン類の原料として好適である。
【００２１】
クリプトキサンチン類の原料として使用される微生物についてはクリプトキサンチン類の産生能を有していることを限度として特に制限されない。クリプトキサンチン類の産生能を有する微生物としては、例えば、デュナリエラ、ヘマトコッカス等の藻類；ファフィア（Phaffia）属、ロドトルーラ（Rhodotorula）属等に属する酵母；パラコッカス（Paracoccus）属、スフィンゴモナス（Sphingomonas）属、ブレバンディモナス（Brevundimonas）属、エリスロバクター（Erythrobacter）属等に属する細菌等が挙げられる。これらの中でも、クリプトキサンチン類の産生能力の観点から、好ましくは、パラコッカス属、スフィンゴモナス属、ブレバンディモナス属、エリスロバクター属に属する細菌が挙げられる。パラコッカス属に属する細菌としては、具体的には、パラコッカス・カロティニファシエンス（Paracoccus carotinifaciens）、パラコッカス・マークシイ（Paracoccus marcusii）、パラコッカス・ヘウンデンシス（Paracoccus haeundaensis）、パラコッカス・ゼアキサンチニファシエンス（Paracoccus zeaxanthinifaciens）、好ましくはパラコッカス・カロティニファシエンスが挙げられる。また、パラコッカス属に属する細菌の具体的な菌株の例として、パラコッカス・カロティニファシエンスＥ−３９６株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４２８３）、パラコッカス属細菌Ａ−５８１−１株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４６７１）、これらの変異株が挙げられる。
【００２２】
天然素材及び／又は微生物からクリプトキサンチン類を抽出するには、クリプトキサンチン類を含む天然素材及び／又は微生物を必要に応じて、破砕、粉砕、加熱、脱水、乾燥等の前処理を行った後に、抽出溶媒に静置又は撹拌しながら浸漬することにより行われる。抽出溶媒としては、クリプトキサンチン類を抽出可能であることを限度として、特に制限されないが、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール類；エチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、グリセリン等の多価アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類、酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等のエーテル類；ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、ペンタン等の脂肪族炭化水素類；トルエン等の芳香族炭化水素類；ポリエチレングリコール等のポリエーテル類；ピリジン類等の有機溶媒が挙げられる。これらの抽出溶媒は１種単独で使用してもよく、また２種以上を組み合わせて使用してもよい。これらの抽出溶媒の中でも、エタノール及びヘキサンは、高い安全性を確保できるので、特に本発明の抗炎症剤を食品分野で使用する場合には好適である。また、クリプトキサンチン類の抽出効率を高めるために、必要に応じて、水、酵素、界面活性剤等の添加物を抽出溶媒中に添加してもよい。また、溶媒抽出は複数回繰り返して行ってもよい。
【００２３】
また、天然素材及び／又は微生物からクリプトキサンチン類の抽出は、超臨界抽出によって行うこともできる。臨界抽出は、天然素材及び／又は微生物を、必要に応じて、破砕、粉砕、加熱、脱水、乾燥等の前処理を行った後に、超臨界二酸化炭素等の超臨界流体と接触させることにより行うことができる。
【００２４】
斯して得られた抽出物は、濃縮処理に供してクリプトキサンチン類の濃度を高めた濃縮物とすることが好ましい。濃縮処理としては、例えば、減圧、加熱等によって溶媒を除去する方法が挙げられる。更に、濃縮物は、必要に応じて、精製処理に供して不純物類を取り除いてもよい。精製処理としては、例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィー等のカラムクロマトグラフィー、アルカリ処理、脱塩、活性炭処理、再結晶法、分配精製等が挙げられる。これらの精製処理は、同一処理を複数回繰り返して実施してもよく、２以上の異なる処理を組み合わせて実施してもよい。また、得られた濃縮物又は生成物は、更に粉末化や乳化等の処理に供して、所望の形状に調整してもよい。
【００２５】
クリプトキサンチン類の含有量、適用量
本発明の抗炎症剤の適用量については、使用される製品の種類、用途、期待される効果、適用形態等に応じて適宜設定すればよい。例えば、経口適用される場合であれば、クリプトキサンチン類の成人１日当たりの摂取又は投与量が０．０００００１〜１００ｇ、好ましくは０．００００１ｇ〜１０ｇ、更に好ましくは０．０００１〜１０ｇとなるように設定すればよい。また経皮適用される場合であれば、クリプトキサンチン類の１日当たりの皮膚への適用量が０．００００１〜１０００μｇ／ｃｍ2、好ましくは０．００１〜５００μｇ／ｃｍ2、更に好ましくは０．０１〜１００μｇ／ｃｍ2となるように設定すればよい。
【００２６】
抗炎症剤の用途
本発明の抗炎症剤は、前記クリプトキサンチン類の作用によって、プロスタグランジン２（ＰＧ２）やＴＮＦ−α等の炎症性メディエーターの生成や作用を効果的に抑制し、炎症症状を予防又は緩和することができるので、炎症症状及び炎症性疾患の予防又は治療に使用される。炎症症状及び炎症性疾患としては、具体的には、慢性湿疹、薬疹、脂漏性皮膚炎、接触皮膚炎等の皮膚炎症；変形性関節炎等の関節炎；炎症性腸疾患等が挙げられる。
【００２７】
また、本発明の抗炎症剤は、慢性炎症が基盤病態となっている疾患の予防又は治療にも有効である。例えば、感染症、アレルギー疾患、自己免疫疾患、敗血症、癌、癌転移等の疾患は、局所又は全身の慢性炎症が基盤病態になっており、本発明の抗炎症剤は、これらの疾患の予防又は治療にも有効である。
【００２８】
本発明の抗炎症剤は、紫外線曝露によって誘発されるＣＯＸ２発現を抑制する作用や、ＴＮＦ−αによる炎症誘導を抑制する作用が卓越しており、かかる効果に鑑みれば、本発明の抗炎症剤の好適な用途として、皮膚炎症又は関節炎の予防又は治療、とりわけ慢性湿疹、脂漏性皮膚炎等の皮膚炎症、又は変形性関節炎等の予防又は治療が挙げられる。
【００２９】
抗炎症剤の使用形態
本発明の抗炎症剤の適用形態については、特に制限されないが、例えば、経口、経皮、経腸、経粘膜、経静脈、経動脈、皮下、筋肉内等の任意の適用形態で使用できるが、抗炎症作用をより一層有効に発揮させるという観点から、好ましくは、経口適用又は経皮適用が挙げられる。
【００３０】
本発明の抗炎症剤は、任意の適用形態で使用して抗炎症作用を発揮できるので、飲食品、化粧料、医薬品、飼料、ペットフード等の各種製品に配合して使用することができる。
【００３１】
また、本発明の抗炎症剤が配合される製品の剤型は、固形状、半固形状、液状等のいずれであってもよく、当該製品の種類や用途に応じて適宜設定される。本発明の抗炎症剤が配合される製品には、その形態等に応じて、本発明の効果を損なわない範囲内で、水、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、高級アルコール類、エステル類、植物抽出エキス類、水溶性高分子、界面活性剤、金属石鹸、アルコール、多価アルコール、ｐＨ調整剤、酸化防止剤、紫外線防止剤、防腐剤、香料、粉体、増粘剤、色素、キレート剤等の添加剤を含有しても良い。また、本発明の抗炎症剤が配合される製品には、その形態や用途等に応じて、本発明の効果を損なわない範囲で、他の抗炎症成分を配合しても良い。このような抗炎症成分としては、例えば、ビタミンＣ、スクワラン、ナイアシン、ナイアシンアミド、長鎖ヒアルロン酸、プラセンタエキス、ソルビトール、キチン、キトサン、各種植物抽出物等が挙げられる。これらの配合量については、本発明の効果を損なわない限り限定されない。
【００３２】
本発明の抗炎症剤を飲食品に使用する場合、クリプトキサンチン類を、そのまま又は他の食品素材や添加成分と組み合わせて所望の形態に調整して、前記所望の効果を奏する飲食品として提供される。このような飲食品としては、一般の飲食品の他、特定保健用食品、栄養補助食品、機能性食品、病者用食品等が挙げられる。これらの飲食品の形態として、特に制限されないが、具体的にはパン類、麺類等の主菜；チーズ、ハム、ウインナー、魚介加工品等の副菜；果汁飲料、炭酸飲料、乳酸飲料等の飲料；クッキー、ケーキ、ゼリー、アイス、プリン、キャンディー、ヨーグルト等の嗜好品；錠剤、顆粒、粉剤、カプセル、ソフトカプセル、栄養ドリンク等のサプリメント等が例示される。これらの飲食品は、前述する用途に供することが出来る。また、前記病者用食品は、炎症症状及び炎症性疾患の予防又は治療が必要とされる患者用として、或いは慢性炎症が基盤病態となっている疾患の予防又は治療が必要とされる患者用として提供される。
【００３３】
本発明の抗炎症剤を飲食品に使用する場合、飲食品に対する該抗炎症剤の配合量については、飲食品の形態等に応じて異なるが、例えば、クリプトキサンチン類が０．０００１〜５０質量％、好ましくは０．００１〜５０質量％、更に好ましくは０．０１〜５０質量％となる範囲が挙げられる。
【００３４】
更に、本発明の抗炎症剤を飲食品の分野で使用する場合、本発明の抗炎症剤を単独で、又は他の成分と組み合わせて、抗炎症用の食品用添加剤として提供することもできる。本発明の抗炎症剤を食品用添加剤として使用する場合、当該食品用添加剤中のβ−クリプトキサンチン類の含有量、飲食品に対する当該食品用添加剤の添加量等は、添加対象となる飲食品中でβ−クリプトキサンチン類が前述する含有量を充足できるように適宜設定すればよい。本発明の抗炎症剤を含む化粧料は、皮膚炎症の予防又は治療用途に好適に使用できる。
【００３５】
また本発明の抗炎症剤を化粧料に使用する場合、本発明の抗炎症剤を香粧学的に許容される基材や添加成分と組み合わせて所望の形態に調製して、前述所望の効果を奏する化粧料として提供される。このような化粧料の形態としては、特に制限されないが、化粧料の場合であれば、具体的には乳液、クリーム、化粧水（ローション）、パック、美容液、洗浄剤、メーキャップ化粧品等が挙げられる。
【００３６】
本発明の抗炎症剤を化粧料に使用する場合、皮膚外用剤に対する該抗炎症剤の配合割合については、化粧料の形態等に応じて異なるが、例えば、クリプトキサンチン類が０．００００００１〜１０質量％、好ましくは０．００００１〜１０質量％、更に好ましくは０．０００１〜１０質量％となる範囲が挙げられる。
【００３７】
また、本発明の抗炎症剤を医薬品に使用する場合、本発明の抗炎症剤を単独で、又は他の薬理活性成分、薬学的に許容される基剤や添加成分等と組み合わせて所望の形態に調整して、前記所望の効果を奏する医薬品として提供される。このような医薬品の形態としては、特に制限されないが、具体的には、錠剤、顆粒剤、粉剤、カプセル剤、ソフトカプセル剤、シロップ剤等の経口投与製剤；液剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、噴霧剤、貼付剤、吸入剤、坐剤等の経皮又は経粘膜投与製剤；注射剤等が挙げられる。
【００３８】
本発明の抗炎症剤を医薬品として使用する場合、医薬品に対する該抗炎症剤の配合割合については、医薬品の形態等に応じて異なるが、例えば、経口投与製剤又は注射剤の場合であれば、クリプトキサンチン類が０．０００１〜５０質量％、好ましくは０．００１〜５０質量％、更に好ましくは０．０１〜５０質量％となる範囲が挙げられ、経皮又は経粘膜投与製剤の場合であれば、クリプトキサンチン類が０．００００００１〜１０質量％、好ましくは０．００００１〜１０質量％、更に好ましくは０．０００１〜１０質量％となる範囲が挙げられる。
【００３９】
また本発明の抗炎症剤を飼料又はペットフードに使用する場合、本発明の抗炎症剤を単独で又は他の資料成分と組み合わせて所望の形態に調整して、前記所望の効果を奏する飼料又はペットフードとして提供される。該飼料又はペットフードに使用される資料成分としては、例えば、トウモロコシ、小麦、大麦、ライ麦等の穀類；ふすま、米ぬか等のぬか類；コーングルテンミール、コーンジャムミール等の粕類；脱脂粉乳、ホエー、魚粉、骨粉等の動物性飼料類；ビール酵母等の酵母類；リン酸カルシウム、炭酸カルシウム等のカルシウム類；ビタミン類；アミノ酸類；糖類等が挙げられる。
【００４０】
本発明の抗炎症剤を飼料又はペットフードとして使用する場合、飼料又はペットフードに対する該抗炎症剤の配合割合については、飼料又はペットフードの形態等に応じて異なるが、例えば、クリプトキサンチン類が０．０００００１〜１０質量％、好ましくは０．０００１〜１０質量％、更に好ましくは０．００１〜１０質量％となる範囲が挙げられる。
【実施例】
【００４１】
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００４２】
試験例１：β‐クリプトキサンチンによる紫外線防御作用
β‐クリプトキサンチンの紫外線照射時の防御作用を調べるために、正常ヒト表皮角化細胞（クラボウ社製）に対してβ‐クリプトキサンチン（四国八洲薬品株式会社製、試薬）を添加し検証を行った。正常ヒト表皮角化細胞を１．０×１０4細胞／ｃｍ2となるように３６ｍｍディッシュ（旭テクノグラス社製）に播種し、２日に一度専用の培地（クラボウ社製）で交換を行い、計４日間、３７℃にて前培養を行った。その後、培地を除去し、０．２質量％ラクトアルブミン水和物を含むＤＭＥＭ培地（和光純薬社製）に交換し、３０分培養を行った。その後、β‐クリプトキサンチン１、２．５、５、又は１０μＭと、０．２質量％ラクトアルブミン水和物とを含むＤＭＥＭ培地に交換し、紫外線（東芝社製ＦＬ−２０Ｓ ＢＬＢ）を照射した。紫外線照射条件は、紫外線を測定できるメーター（英弘精機株式会社製、ＵＶメーターＭＩ−３４０）を使用し、照射量をモニターしながら５分間で６０ｍＪ／ｃｍ2のＵＶＢを照射するように設定した。紫外線照射後は、３７℃にて２４時間培養を継続した。培養中、経時的に細胞のサンプリングを実施した。なお、コントロールとして、β‐クリプトキサンチンを添加しない条件で、紫外線照射した場合、及び紫外線照射をしなかった場合について、同様に試験を実施した。
【００４３】
サンプリングした細胞は、ＲＮＡ抽出試薬Ｉｓｏｇｅｎ（日本ジーン社製）を用いて常法に従ってＲＮＡの抽出を行い、逆転写酵素（タカラバイオ社製）を用いてｃＤＮＡへの合成を行った。その後、ＣＯＸ２（シクロオキシゲナーゼ２）の測定用に設計されたプライマー（北海道システムサイエンス社製）とＳｙｂｒＧｒｅｅｎ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ−ｔａｑ酵素（タカラバイオ社製）を混合し、リアルタイムＰＣＲ検出器（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社製）の中で反応させ、紫外線又はβ‐クリプトキサンチンのＣＯＸ２遺伝子発現量への影響を測定した。ＣＯＸ２遺伝子発現量は細胞数等を補正するために、ＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド３リン酸脱水素酵素）の発現量に対する比率を求め、コントロール（紫外線照射有り）におけるＧＡＰＤＨ遺伝子に対するＣＯＸ２遺伝子の発現量の比率を１とする相対値、或いはコントロール（紫外線照射なし）におけるＧＡＰＤＨ遺伝子に対するＣＯＸ２遺伝子の発現量の比率を１とする相対値として算出した。
【００４４】
得られた結果を図１に示す。この結果から、紫外線照射を行ったコントロールでは、紫外線照射を行なわなかったコントロールに比して、ＣＯＸ２遺伝子の発現量が大幅に上昇していたが、β‐クリプトキサンチン存在下で紫外線照射を行った場合には、その濃度依存的に、ＣＯＸ２遺伝子の発現量が減少することが確認された。ＣＯＸ２は、紫外線によって発現が誘導され、炎症性物質プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）をアラキドン酸より合成する生体内酵素であることが知られており、β‐クリプトキサンチンによるＣＯＸ２遺伝子の発現量の低下は、β‐クリプトキサンチンが優れた抗炎症作用を示すことを示している。
【００４５】
試験例２：炎症性物質ＰＧＥ２産生に対するβ‐クリプトキサンチンの作用
試験例１と同様の条件で前培養した正常ヒト表皮角化細胞（クラボウ社製）に対して、β‐クリプトキサンチン（四国八洲薬品株式会社製、試薬）１又は１６μＭ、ラクトアルブミン水和物０．２質量％を含むＤＭＥＭ培地に交換した後に、紫外線照射を行った。紫外線照射条件は、紫外線を測定できるメーター（英弘精機株式会社製、ＵＶメーターＭＩ−３４０）を使用し、照射量をモニターしながら５分間で６０ｍＪ／ｃｍ2のＵＶＢを照射するように設定した。紫外線照射後は、２４時間培養を継続した。その後、培養上清をサンプルとして回収し、ＰＧＥ２測定キット（Ｃａｙｍａｎ社製）を用いて、ＰＧＥ２量を定量した。なお、コントロールとして、β‐クリプトキサンチンを添加しない条件で、紫外線照射した場合、及び紫外線照射をしなかった場合についても同様に試験を実施した。
【００４６】
培養上清中のＰＧＥ２量を測定した結果を図２に示す。図２から明らかなように、紫外線の照射によって誘導されたＰＧＥ２の合成がβ‐クリプトキサンチンの濃度依存的に減少しており、β‐クリプトキサンチンによって、遺伝子の発現のみならず、炎症性物質の合成も抑制したことが確認された。以上の結果からも、β‐クリプトキサンチンには紫外線によって発生する炎症を抑制する作用があることが確認された。
【００４７】
試験例３：炎症性サイトカインＴＮＦ−α誘導に対するβ-クリプトキサンチンの作用
炎症を惹起するサイトカインであるＴＮＦ−α添加に対するβ-クリプトキサンチンの作用に関して、正常ヒト表皮角化細胞を用いて検討を行った。正常ヒト表皮角化細胞（クラボウ社製）を１．０×１０4細胞／ｃｍ2となるように２４ウェルプレート（旭テクノグラス社製）に播種を行い、Ｈｕｍｅｄｉａ−ＫＧ２培地を２日に一度交換しながら計４日間培養を行った。その後、ＴＮＦ−α（和光純薬社製）５０ｎｇ／ｍｌ、β-クリプトキサンチン（四国八洲薬品株式会社製、試薬）１．１、３．３、又は１０μＭを含むＨｕｍｅｄｉａ−ＫＧ２培地に交換し、２４時間培養を継続した。培養終了後、細胞を回収した。なお、コントロールとして、β‐クリプトキサンチンを添加しない条件で、ＴＮＦ−αを添加した場合、及びＴＮＦ−αを添加しなかった場合についても同様に試験を実施した。
【００４８】
回収した細胞はＲＮＡ抽出試薬Ｉｓｏｇｅｎ（（株）日本ジーン社製）を用いて常法に従ってＲＮＡの抽出を行い、逆転写酵素（タカラバイオ社製）を用いてｃＤＮＡへの合成を行った。その後、ＭＭＰ−１（細胞間質分解酵素−１）、ＭＭＰ−９（細胞間質分解酵素−９）の測定用に設計されたプライマー（北海道システムサイエンス社製）とＳｙｂｒＧｒｅｅｎ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ−ｔａｑ酵素（タカラバイオ社製）を混合し、リアルタイムＰＣＲ検出器（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ社製）の中で反応させ、β‐クリプトキサンチンのＭＭＰ−１及びＭＭＰ−９遺伝子発現量への影響を測定した。ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−９遺伝子発現量は、細胞数等を補正するために、ＧＡＰＤＨの発現量に対する比率を求め、コントロール（ＴＮＦ−α添加なし）におけるＧＡＰＤＨ遺伝子発現量に対するＭＭＰ−１及びＭＭＰ−９遺伝子の発現量の比率を１とする相対値として算出した。
【００４９】
得られた結果を図３に示す。ＴＮＦ−αの添加を行うことで、ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−９の各遺伝子発現量は顕著に増加したが、β‐クリプトキサンチンを添加することによって、その発現量は顕著に減少した。これらの遺伝子は炎症に従い発現が亢進することが知られており、β‐クリプトキサンチンは、ＴＮＦ−αから炎症が誘発される経路を阻害したと考えられる。また、ＭＭＰ−１及びＭＭＰ−９には、コラーゲンの分解作用があることが知られており、β‐クリプトキサンチンによって、抗炎症作用のみならず、コラーゲンの保護作用も発揮されることが見込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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