(57)【要約】【課題】整形外科状態の治療のための抗コネキシンポリヌクレオチド、ペプチド、または抗体の使用の提供。【解決手段】整形外科的な障害、疾患、または症状を治療するため、および手術後の創傷治癒を促進するための、抗コネキシン剤を含む方法、化合物、組成物、キット、および製品。本発明は、一般的に、種々の整形外科関連疾患、障害、または状態に罹患している、その素因がある、またはその危険性がある対象の治療のための方法および組成物に関する。一態様において、本発明は、関節の内部および／または周辺での疼痛、炎症、過剰瘢痕化および／または異常な組織形成を全体的または部分的に特徴とする、様々な整形外科関連の疾患、障害、または状態に罹患している、その素因がある、またはその危険性がある対象を治療する方法であって、抗コネキシン剤および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を投与するステップを含む方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、整形外科疾患、障害および状態、ならびにこれらの治療方法、ならびに関連する医薬組成物、製剤、製品およびそのような組成物を含むキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
以下は、本発明の理解に有用でありうる情報を含む。このことは、本明細書に記載される情報が、本明細書に記載または特許請求されている発明に対する先行技術であるか、もしくはこれに関連していることを認めるものでも、明示的にもしくは暗黙に言及される刊行物もしくは文書が先行技術であることを認めるものでもない。
【０００３】
ヒトおよび他の哺乳動物において、創傷は、細胞イベントおよび生化学的イベントの組織化された複雑なカスケードを誘発し、この結果、大半の場合において創傷の治癒がもたらされる。理想的に治癒した創傷とは、細胞レベル、組織レベル、器官レベル、および生物レベルにおける正常な解剖学的構造、機能、および外見が回復しているものである。手術、外傷、微生物、または外来物質のいずれにより誘発されたものでも、創傷の治癒は、炎症、上皮形成、新脈管形成、およびマトリックス産生および沈着を含めたいくつものオーバーラップした段階を包含する複雑な過程により進行する。通常、これらの過程により、創傷の完成（ｍａｔｕｒｅ  ｗｏｕｎｄ）およびある程度の瘢痕形成がもたらされる。炎症および修復は大半が既定の経過に沿って起こるが、その過程の感受性は、例えば、調節サイトカインおよび成長因子のネットワークを含めた種々の創傷治癒調節因子の均衡に依存している。
【０００４】
関節の正常機能およびその運動は、整形外科的処置に続くその後の創傷治癒過程中に、炎症、瘢痕ならびに／または関節内部および／もしくは周囲の両方（関節内または関節周囲）または他の任意の患部で起こる異常組織形成により著しく損なわれることがある。これにより、圧痛、痛み、疼痛、および長期の回復時間、ならびに関節運動性の喪失または、例えば、筋肉、腱、被膜、骨もしくは靭帯などの関節構造の可動域、緊張性、もしくは弾力性の低下をもたらされうる。関節運動性の低下は、関節または組織構造の恒久的変化または短縮も含む。
【０００５】
関節運動性または関節構造の変化または異常は、例えば、代謝障害、虚血、外傷、関節、被膜、骨、軟骨、腱、靭帯もしくは筋肉への損傷、骨折、亜脱臼、脱臼、圧挫損傷、長期の固定化（例えば、ギブスもしくは副木での関節の固定化）、および麻痺などの種々の傷害または状態を伴うことも、これらにより引き起こされることもある。
【０００６】
外科的矯正処置は一種の制御された損傷または外傷でもあり、その処置は組織における炎症および増殖、ならびに関節先端周囲において傷痕および組織異常の再形成を引き起こしたり、再発させることが多いために、今日まで、瘢痕および異常組織形成により引き起こされる変化したもしくは異常な関節運動性または関節構造を緩和するための一般的外科的介入は成果が限られていた。
【０００７】
特定の場合には、低下した関節動作は遺伝的要素がある可能性があり、主要な傷痕および／または異常な組織増殖が関節の周囲および／または外側で起こることがある。１つのそのような状態は、デュピュイトラン拘縮であり、手の手掌面の結合組織が瘢痕になり肥厚し始め、最終的には肥厚部位で手が変形し、そのために指の可動域が失われる。拘縮の治療は、拘縮がすでに定着した後に限定される。外科的リリース処置は、患者を眠らせ、関節を強制することにより癒着を分離する麻酔下での操作（強制操作）が含まれる。これにより、組織における炎症および増殖、ならびに瘢痕および硬直の再形成が再発することが多い。外科的介入には、制限瘢痕および異常組織のリリース（オープンリリース）および除去（減量）を行うオープン手術が含まれうる。この手術は関節鏡を使って実施してもよく、その場合、瘢痕および制限組織が特別な器具を使用してリリースおよび除去が行われる（関節鏡リリース）。不運なことに、外科的介入には失敗があり、手術それ自体が制御された傷害または外傷であるために実際に状態を悪化させる可能性があり、これにより外科的傷害に応答してさらに多くの瘢痕および異常組織形成を引き起こしうる。物理療法および可動域運動などの治療が利用されるが、成果は限られている。薬理療法も試みられてきたが、成果は限られているかまったくなかった。最もよく使用される薬剤には、非ステロイド性抗炎症薬、ステロイド薬、および放射線が挙げられる。
【０００８】
ギャップジャンクションは、直接的な細胞間情報伝達（ｃｅｌｌ−ｃｅｌｌ  ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ）を促進する細胞膜構造である。ギャップジャンクションチャネルは、各々が６つずつのコネキシンサブユニットからなる２つのコネクソン（ｃｏｎｎｅｘｉｎ）（ヘミチャネル）から形成される。各６量体コネクソンは、向い側の膜内のコネクソンとドッキングして、単一のギャップジャンクションを形成する。ギャップジャンクションチャネルは、全身において見出される。例えば、角膜上皮などの組織は、６〜８層の細胞層を有するが、異なる層では異なるギャップジャンクションチャネルを発現することが報告されており、基底層ではコネキシン４３を有し、基底層から中翼細胞層ではコネキシン２６を有する。一般に、コネキシンは１つのタンパク質ファミリーであり、通常、それらの分子量により命名されるか、または系統発生に基づき、アルファ、ベータ、およびガンマのサブクラスに分類されている。ヒトで少なくとも２０種のアイソフォームが、また、マウスで少なくとも１９種のアイソフォームが同定されている。特徴的なパターンのコネキシンタンパク質発現を有する様々な組織および細胞型が報告されており、角膜などの組織は、傷害または移植後において、コネキシンタンパク質の発現パターンを変化させることが示されている（Ｑｕｉ，  Ｃ．ら（２００３年）、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、第１３巻、１９６７〜１７０３頁；  Ｂｒａｎｄｅｒ  ら（２００４年）、Ｊ．  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、第１２２巻、１３１０〜２０頁）。
【０００９】
ウイルス性疾患、真菌性疾患、および代謝性疾患に関係する遺伝子の発現調節について、アンチセンス技術が報告されている。例えば、特許文献１（ＨＩＶに対するオリゴヌクレオチド阻害剤）、特許文献２（単純ヘルペスウイルスのＶｍｗ６５  ｍＲＮＡにハイブリダイズし、複製を阻害するオリゴマー）を参照されたい。また、Ｂｅｃｋｅｒらに対する特許文献３（コネキシンに対するアンチセンスヌクレオチドを含む製剤）も参照されたい。ギャップジャンクションおよびヘミチャネルに対するペプチド阻害剤（模倣性ペプチドを含む）が報告されている。例えば、Ｂｅｒｔｈｏｕｄ，  Ｖ．Ｍ．  ら、Ａｍ  Ｊ．
Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、第２７９巻、Ｌ６１９〜Ｌ６２２頁（２０００年）；  Ｅｖａｎｓ，  Ｗ．Ｈ．およびＢｏｉｔａｎｏ，  Ｓ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｔｒａｎｓ．、第２９巻、６０６〜６１２頁；ならびにＤｅ  Ｖｒｉｅｓｅ  Ａ．Ｓ．  ら、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．、第６１巻、１７７〜１８５頁（２００１年）を参照されたい。また、ＢｅｃｋｅｒおよびＧｒｅｅｎ、特許文献４（「Ａｎｔｉ−ｃｏｎｎｅｘｉｎ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｕｓｅ」）も参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第５，１６６，１９５号明細書
【特許文献２】米国特許第５，００４，８１０号明細書
【特許文献３】米国特許第７，０９８，１９０号明細書
【特許文献４】国際公開第２００６／１３４４９４号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
整形外科的処置に関連する創傷治癒過程の根底にある機序の原理についての理解は進んでいるにもかかわらず、結果と回復を改善するのに適した治療選択に対する、満たされていない重大な必要性がいまだにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
簡単な要旨
本明細書で記載および特許請求される発明は、この「簡単な要旨」において説明または記載または言及される属性および実施形態を含むがこれらに限定されない多くの属性および実施形態を有する。それは包括的であることが意図されるものでなく、本明細書で記載および特許請求される発明は、限定ではなくて例示だけを目的として組み入れられているこの「簡単な要旨」に限定されるものでも、「簡単な要旨」において特定される特徴または実施形態により限定されるものでもない。
【００１３】
本発明は、一般的に、種々の整形外科関連疾患、障害、または状態に罹患している、その素因がある、またはその危険性がある対象の治療のための方法および組成物に関する。一態様において、本発明は、関節の内部および／または周辺での疼痛、炎症、過剰瘢痕化および／または異常な組織形成を全体的または部分的に特徴とする、様々な整形外科関連の疾患、障害、または状態に罹患している、その素因がある、またはその危険性がある対象を治療する方法であって、抗コネキシン剤および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を投与するステップを含む方法に関する。すでに罹患している疾患、障害、または症状のケースにおいて、本発明の組成物は、リリース手順（例えば、緊急処置、オープンリリース、関節鏡リリース、または瘢痕減量）を補完して、関節内および／または関節の周辺での異常な組織形成および／またはさらなる拘縮形成の再発を予防するために用いることができる。例えば、本発明の一実施形態において、手根管症候群（例えば、手根管リリース手術）、関節内および／もしくは関節の周辺での拘縮（「関節拘縮」）、またはその再発を治療するための、抗コネキシン剤を含む有効量の組成物を投与することを含む方法が提供される。一実施形態において、組成物は、リリース手順の前、手術時または後に、傷害部位に投与される。
【００１４】
一実施形態では、上記組成物は、整形外科処置（例えばリリース処置、関節鏡検査処置、関節手術（例えば、置換処置を含む股、肩または膝手術））の１つの時点でまたはその後に損傷部位に投与される。一般に、本明細書に記載され主張される本発明品を使用して取り組む整形外科手術には、手の手術、肩および肘の手術、全関節再建（関節形成）、足および足首の手術、脊椎手術、外科的スポーツ医学、ならびに整形外科的外傷が挙げられる。したがって、例えば、整形外科的手術には、膝関節鏡検査および半月板切除術、肩関節鏡検査および減圧術、手根管開放術、膝関節鏡検査および軟骨形成術、支持移植片の除去、膝関節鏡検査および前十字靭帯再建、膝置換術、大腿骨頚部骨折の修復、転子骨折の修復、皮膚／筋肉／骨／骨折のデブリドマン、両半月板の膝関節鏡検査修復、人工股関節置換術、肩関節鏡検査／末端鎖骨切除、回旋腱板腱の修復、橈骨／尺骨の修復骨折、椎弓切除術、足関節骨折の修復（両果タイプ）、肩関節鏡検査およびデブリドマン、腰椎固定術、橈骨遠位端の修復骨折、腰部椎間板手術、切開指腱鞘、足関節骨折の修復（腓骨）、大腿骨骨幹軸骨折の修復、転子骨折の修復が挙げられる。関節炎の膝の片側のみが置換される膝関節片側置換術、および肘、手首、足首、および指を含む他の関節の関節置換術同様に、人工股関節全置換術、人工肩関節全置換術、および人工膝関節全置換術も含まれる。整形外科的手術には、骨移植術、すなわち、患者自身の体由来の材料、または人工、合成もしくは天然代用骨を使用して欠けた骨を置換する手術も含まれる。
【００１５】
反復適用が、本発明に含まれる。
【００１６】
関節鏡適用、局所適用および滴下注入も本発明に包含される。
【００１７】
本発明はまた、整形外科的な傷害の後の治癒を促進する方法および組成物にも関する。一態様において、本発明は、整形外科的な傷害の後に対象を治療する方法であって、有効量の抗コネキシン剤の投与を含む方法に関する。
【００１８】
本発明はまた、整形外科手術の後の治癒を促進する方法および組成物にも関する。一態様において、本発明は、整形外科手術の後に対象を治療する方法であって、有効量の抗コネキシン剤の投与を含む方法に関する。一実施形態において、抗コネキシン剤の投与は、全体的または部分的に、手術後の対象における関節の収縮の軽減または予防に効果的である。一実施形態において、抗コネキシン剤の投与は、手術後の対象における回復時間の向上に効果的である。一実施形態において、抗コネキシン剤の投与は、手術後の対象における疼痛の軽減に効果的である。一実施形態において、抗コネキシン剤の投与は、手術後の対象における全体的な回復結果の向上に効果的である。一実施形態において、向上した回復結果は、手術後の運動性の向上を含む。
【００１９】
一態様において、本発明は、抗コネキシン剤を対象に投与することによる、整形外科手術後の関節の拘縮を軽減する方法および組成物に関する。
【００２０】
一態様において、本発明は、整形外科手術後の手術部位での血管の損傷を軽減する方法および組成物に関する。
【００２１】
一態様において、本発明は、抗コネキシン剤を対象に投与することによる、整形外科手術の間および／または後における血管の完全性を向上させる、または維持する方法および組成物に関する。
【００２２】
本発明の特定の態様において、本明細書において記載される組成物はさらに、１または複数の治療用薬剤を含みうる。治療用薬剤には、例えば、抗感染剤、麻酔剤、鎮痛剤、抗生物質、睡眠薬、ならびにステロイド系および非ステロイド系の抗炎症性剤が含まれうる。本発明の別の態様において、組成物にはまた、創傷治癒に有用な１または複数の薬剤も含まれうる。創傷治癒に有用な薬剤には、例えば、創傷治癒に関連する成長因子、および／またはサイトカインが含まれうる。
【００２３】
一態様において、治療方法はさらに、第２の組成物の投与を含む。第２の組成物は、好都合には、１もしくは複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な１もしくは複数の薬剤、および／または１もしくは複数の抗微小管剤を含む。
【００２４】
第２の組成物は、第１の組成物の前、後および／または同時に投与することができる。第２の組成物は、第１の組成物の前および後に投与することができる。第２の組成物は、第１の組成物と同時に投与することもできる。例えば、拘縮の治療に有効な抗コネキシン剤を含む組成物を、その使用において、拘縮または関連する症状の１もしくは複数の治療に有効な１または複数の薬剤を有する第２の組成物と組み合わせることができる。
【００２５】
抗コネキシン剤および組成物は、単独で、または他の治療用薬剤と組み合わせて、罹患部位内またはその周辺に、例えば局所適用、滴下注入、または注射、例えば腱周膜注射、軟組織注射、関節内注射、および関節周辺注射によって、投与することができる。抗コネキシン剤組成物はまた、単独で、または他の治療用薬剤と組み合わせて、手術間の技術を用いて投与することができる。投与はまた、注射を介して、または手術間に、関節包または骨洞内に行われる。抗コネキシン剤組成物は、単独療法として、並行してもしくは手術中に修正的な整形外科手順と組み合わせて、または手順後に、投与することができる。
【００２６】
本明細書において示される、本発明の全ての態様において有用な抗コネキシン剤には、例えば、抗コネキシンポリヌクレオチド、さらに抗体およびその結合フラグメント、ならびにペプチド模倣剤およびペプチド類似体を含むペプチドおよびポリペプチドが含まれる。
【００２７】
コネキシンアンチンセンスポリヌクレオチドの例には、アンチセンスポリヌクレオチド（改変された、および改変されていない骨格アンチセンスポリヌクレオチド、例えば、コネキシンのｍＲＮＡに結合するＤＮＡアンチセンスポリヌクレオチドを含む）、ＲＮＡｉポリヌクレオチド、およびｓｉＲＮＡポリヌクレオチドを含む、抗コネキシンオリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）が含まれる。
【００２８】
適切なコネキシンアンチンセンスポリヌクレオチドには、例えば、コネキシン４３、コネキシン２６、コネキシン３７、コネキシン３０、コネキシン３１．１、およびコネキシン３２に対するアンチセンスＯＤＮが含まれる。特定の実施形態において、適切な組成物には、例えばコネキシン４３、２６、３７、３０、および３１．１を標的とするポリヌクレオチドを含む、組み合わされた複数のコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドが含まれる。抗コネキシン４３オリゴヌクレオチド、例えばコネキシン４３アンチセンスポリヌクレオチドが好ましい。
【００２９】
本発明の態様は、オリゴンデオキシヌクレオチドに関して記載される。オリゴヌクレオチドには、改変された、および改変されていない骨格オリゴヌクレオチド、例えば、コネキシンのｍＲＮＡに結合するＤＮＡアンチセンスポリヌクレオチドが含まれる。しかし、他の適切なポリヌクレオチド（ＲＮＡポリヌクレオチドなど、例えばＲＮＡｉおよびｓｉＲＮＡ）をこれらの態様において用いることができることが理解される。
【００３０】
好都合には、コネキシン４３に対するオリゴデオキシヌクレオチドは、ＧＴＡ  ＡＴＴ
ＧＣＧ  ＧＣＡ  ＡＧＡ  ＡＧＡ  ＡＴＴ  ＧＴＴ  ＴＣＴ  ＧＴＣ（配列番号１）；ＧＴＡ  ＡＴＴ  ＧＣＧ  ＧＣＡ  ＧＧＡ  ＧＧＡ  ＡＴＴ  ＧＴＴ  ＴＣＴ  ＧＴＣ（配列番号２）；およびＧＧＣ  ＡＡＧ  ＡＧＡ  ＣＡＣ  ＣＡＡ  ＡＧＡ  ＣＡＣ  ＴＡＣ  ＣＡＧ  ＣＡＴ（配列番号３）から選択される。
【００３１】
好ましい一態様によると、コネキシン４３に対するオリゴデオキシヌクレオチドは、ＧＴＡ  ＡＴＴ  ＧＣＧ  ＧＣＡ  ＡＧＡ  ＡＧＡ  ＡＴＴ  ＧＴＴ  ＴＣＴ  ＧＴＣ（配列番号１）である。
【００３２】
一態様において、本発明は、治療処置に用いるための製剤を提供し、この製剤は、薬学的組成物を提供するために、少なくとも１つの抗コネキシン剤を、薬学的に許容される担体または媒体または希釈剤と共に含む。好ましい一形態において、製剤は、１つのコネキシンタンパク質のみに対する抗コネキシンポリヌクレオチドを含有する。最も好ましくは、このコネキシンタンパク質はコネキシン４３である。あるいは、製剤は、２つ以上のコネキシンタンパク質に対するオリゴデオキシヌクレオチドを含有する。
【００３３】
したがって、別の態様において、本発明は、コネキシンタンパク質に対する少なくとも１つのコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドを薬学的に許容される担体または媒体と共に含む製剤を提供する。
【００３４】
本発明は、整形外科手術後の対象において、治癒を促進するのに、疼痛を予防および／もしくは軽減するのに、血管の損傷を予防および／もしくは軽減するのに、回復時間を予防および／もしくは向上させるのに、ならびに／または全体的な回復結果を向上させる（例えば、手術後の運動性を増大させる）のに、ならびに／または関節内および／もしくは関節の周辺での異常な組織形成を予防および／もしくは軽減するのに有効な量の、薬学的に許容される抗コネキシン剤、例えばコネキシンポリヌクレオチド、好ましくはコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドを含む製剤を包含する。このような製剤には、例えば、ゲル製剤および洗浄溶液製剤を含む、局所的な送達形態および製剤が含まれる。好ましい抗コネキシンポリヌクレオチドおよびコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、抗コネキシン４３ポリヌクレオチドおよびコネキシン４３アンチセンスポリヌクレオチドである。
【００３５】
本明細書において記載される組成物は、持続放出を提供するために製剤することができる。一態様において、本発明は、遅延放出調製物、緩徐放出調製物、持続放出調製物、制御放出調製物に、および／または反復作用調製物に製剤された有効量の抗コネキシン剤を含む組成物を含む。これらは例えば、局所的に適用するか、または滴下注入することができる。
【００３６】
抗コネキシン剤を、他の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管薬剤と組み合わせて用いる、本発明の組成物および方法が開示および特許請求される。
【００３７】
本発明は、（ａ）治療有効量の抗コネキシン剤および（ｂ）治療有効量の１もしくは複数の治療用薬剤を含む、薬学的組成物および製剤を包含する。本発明は、（ａ）治療有効量の抗コネキシン剤、および（ｂ）創傷治癒に有用な治療有効量の１もしくは複数の薬剤を含む、薬学的組成物および製剤を包含する。本発明は、（ａ）治療有効量の抗コネキシン剤、および（ｂ）治療有効量の抗微小管剤を含む、薬学的組成物および製剤を包含する。好ましくは、薬学的組成物および製剤はさらに、薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む。
【００３８】
薬学的組成物および製剤は、組合せ投与、同時投与、個別投与、逐次投与、または持続投与用に提供される。一実施形態において、抗コネキシン剤を含む組成物または製剤は、１または複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤と同時に、またはほぼ同時に投与される。
【００３９】
薬学的組成物および製剤はまた、組合せ調製物の形態で、例えば、抗コネキシン剤と、創傷治癒に有用な１または複数の他の薬剤、例えば、血小板由来成長因子、上皮成長因子、線維芽細胞成長因子（例えばＦＧＦ２）、血管内皮成長因子、および形質転換成長因子β３などの、創傷治癒の促進もしくは向上に効果的な成長因子、ならびに／またはＩＬ−７およびＩＬ−１０などの、創傷治癒の促進もしくは向上に効果的なサイトカイン、ならびに／またはＩＧＦ（例えばＩＧＦ−１）およびＩＧＦＢＰ（例えばＩＧＦＢＰ−２）などの、創傷治癒の促進もしくは向上に効果的な他の薬剤との混合物として提供される。
【００４０】
「組合せ調製物」という用語は、上記に規定した組合せのパートナーを独立して、または、区別された量の組合せパートナー（ａ）および（ｂ）との異なる固定された組合せによって、すなわち同時に、分離して、または逐次的に、投与することができるという意味において、「要素キット（ｋｉｔｓ  ｏｆ  ｐａｒｔｓ）」を含む。したがって、キットの要素を、例えば、同時に投与することもでき、時間的にずらして投与する、すなわち、要素キットの任意の要素について、異なる時点および等しいかまたは異なる時間間隔で投与することもできる。
【００４１】
抗コネキシン剤、ならびに治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤は、同時に、逐次的に、または個別に患者に投与することができる。個別に投与される場合、好ましくは、抗コネキシン剤、ならびに治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤が逐次投与される。好ましくは、薬剤は、互いに少なくとも約１分、５分、１５分、３０分以内に、または１時間以内に、逐次投与される。薬剤はまた、互いに約２から８時間で、互いに約１日から約１週間で、または他に適切と考えられるように投与される。好ましくは、抗コネキシン剤が最初に投与される。好ましくは、抗コネキシン剤は、抗コネキシン４３剤である。
【００４２】
一態様において、本発明はまた、包帯材およびマトリクスと組み合わせた抗コネキシン剤の使用にも関する。一態様において、本発明は、合成または天然存在の抗コネキシンポリヌクレオチドを含む創傷治癒用のマトリクスを含む。特定の実施形態において、抗コネキシンポリヌクレオチドは、抗コネキシン４３ポリヌクレオチド、例えば抗コネキシン４３ポリヌクレオチドである。好ましい抗コネキシンポリヌクレオチドには、抗コネキシン４３オリゴデオキシヌクレオチドなどの抗コネキシンオリゴデオキシヌクレオチドが含まれる。
【００４３】
さらなる態様において、本発明は、包帯材およびマトリクスと組み合わせた、抗コネキシン剤、ならびに１または複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤の使用を包含する。
【００４４】
別の態様において、本発明は、治療有効量の抗コネキシン剤を含有する容器と、対象を治療するための使用を含めた、使用のための指示書とを含む製品を包含する。一実施形態において、容器は、１または複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または微小管剤をさらに含む。別の実施形態において、製品は、治療有効量の１または複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または微小管剤を含有する第２の容器を含む。
【００４５】
本発明は、１または複数の薬学的に許容される抗コネキシン剤を含有する１または複数の剤形を含有する包装材料を含む製品であって、上記剤形が整形外科手術後の対象に用いうることを示すラベルを包装材料が有する。このような剤形には、例えば、局所的送達および滴下注入の形態ならびに製剤が含まれる。一実施形態において、前記製品は、１または複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または微小管剤を含有する１または複数の剤形をさらに含む。
【００４６】
この概要における情報に限定されることも、それによって限定されることもない、本発明のこれらの態様および他の態様を、以下に示す。
したがって、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
整形外科手術を受けている対象を治療する方法であって、上記整形外科手術の前、手術時または後における、上記対象の内部の傷害部位への、抗コネキシン４３剤を含む組成物の投与を含み、手術結果が向上する方法。
（項目２）
上記手術結果が、回復時間の向上、疼痛の軽減、および／または運動性の向上である、項目１に記載の方法。
（項目３）
上記抗コネキシン４３剤がコネキシン４３ポリヌクレオチドである、項目１に記載の方法。
（項目４）
上記抗コネキシン剤が抗コネキシン４３アンチセンスポリヌクレオチドである、項目１に記載の方法。
（項目５）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがコネキシン４３タンパク質の発現を低減する、項目３に記載の方法。
（項目６）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがｓｉＲＮＡまたはおよびＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである、項目２に記載の方法。
（項目７）
上記抗コネキシン４３剤がペプチドである、項目１に記載の方法。
（項目８）
上記ペプチドがペプチド模倣剤である、項目７に記載の方法。
（項目９）
上記抗コネキシン４３剤が抗コネキシン４３抗体またはその抗原結合フラグメントである、項目１に記載の方法。
（項目１０）
上記抗コネキシン４３剤が、抗体、Ｆ（ｖ）フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、またはＦ（ａｂ’）２フラグメントである、項目１１に記載の方法。
（項目１１）
上記抗コネキシン４３剤が細胞間連絡を阻害または遮断する、項目１に記載の方法。
（項目１２）
上記抗コネキシン４３剤がコネキシン４３のヘミチャネルの開口を阻害または遮断する、項目１に記載の方法。
（項目１３）
上記方法が、１または複数の治療用薬剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目１４）
創傷治癒に有用な１または複数の薬剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目１５）
上記方法が、１または複数の抗微小管剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目１６）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前、後または同時に投与される、項目１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前および後に投与される、項目１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
整形外科手術の間または最後における、抗コネキシン４３剤を含む組成物の投与を含む、上記手術後の対象における疼痛を軽減する方法。
（項目１９）
上記抗コネキシン４３剤が抗コネキシン４３ポリヌクレオチドである、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがコネキシン４３タンパク質の発現を低減する、項目１９に記載の方法。
（項目２１）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである、項目１９に記載の方法。
（項目２２）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがｓｉＲＮＡまたはＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである、項目１９に記載の方法。
（項目２３）
上記抗コネキシン４３剤がペプチドである、項目１８に記載の方法。
（項目２４）
上記ペプチドがペプチド模倣剤である、項目３０に記載の方法。
（項目２５）
上記抗コネキシン４３剤が抗コネキシン４３抗体またはその抗原結合フラグメントである、項目１８に記載の方法。
（項目２６）
上記抗コネキシン４３剤が、抗体、Ｆ（ｖ）フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、またはＦ（ａｂ’）２フラグメントである、項目３２に記載の方法。
（項目２７）
上記抗コネキシン４３剤が細胞間連絡を阻害または遮断する、項目１８に記載の方法。
（項目２８）
上記抗コネキシン４３剤がコネキシン４３のヘミチャネルの開口を阻害または遮断する、項目１８に記載の方法。
（項目２９）
上記方法が、１または複数の治療用薬剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目１８に記載の方法。
（項目３０）
上記方法が、創傷治癒に有用な１または複数の薬剤を含む第２の組成物の投与を含む、項目１８に記載の方法。
（項目３１）
上記方法が、１または複数の抗微小管剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目１８に記載の方法。
（項目３２）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前、後または同時に投与される、項目２９〜３１のいずれか一項に記載の方法。
（項目３３）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前および後に投与される、項目２９〜３１のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
対象における整形外科手術後の関節の拘縮を全体的または部分的に治療および／または予防する方法であって、抗コネキシン４３剤を含む組成物を上記整形外科手術の間または後に上記対象に投与することによる方法。
（項目３５）
上記抗コネキシン４３剤が抗コネキシン４３ポリヌクレオチドである、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがコネキシン４３タンパク質の発現を低減する、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである、項目３５に記載の方法。
（項目３８）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがｓｉＲＮＡまたはＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである、項目３５に記載の方法。
（項目３９）
上記抗コネキシン４３剤がペプチド化合物である、項目６６に記載の方法。
（項目４０）
上記ペプチド化合物がペプチド模倣剤である、項目７３に記載の方法。
（項目４１）
上記抗コネキシン４３剤が、抗コネキシン４３抗体、Ｆ（ｖ）フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、またはＦ（ａｂ’）２フラグメントである、項目２４に記載の方法。
（項目４２）
上記抗コネキシン４３剤が細胞間連絡を阻害または遮断する、項目３４に記載の方法。
（項目４３）
上記抗コネキシン４３剤がコネキシン４３のヘミチャネルの開口を阻害または遮断する、項目３４に記載の方法。
（項目４４）
抗コネキシン剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目３４に記載の方法。
（項目４５）
１または複数の治療用薬剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目３４に記載の方法。
（項目４６）
創傷治癒に有用な１または複数の薬剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目３４に記載の方法。
（項目４７）
１または複数の抗微小管剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目３４に記載の方法。
（項目４８）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前、後または同時に投与される、項目４４〜４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前および後に投与される、項目４４〜４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
関節の内部および／または周辺での異常な組織形成が予防または軽減される、項目３４に記載の方法。
（項目５１）
関節の内部および／または周辺での異常な組織形成を全体的または部分的に特徴とする、整形外科的な疾患、障害、または状態を有する、または有することが疑われる、またはその素因がある、またはその危険性がある対象を治療する方法であって、有効量の抗コネキシン４３剤を含む組成物を投与するステップを含む方法。
（項目５２）
上記抗コネキシン４３剤が抗コネキシン４３ポリヌクレオチドである、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがコネキシン４３タンパク質の発現を低減する、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである、項目５２に記載の方法。
（項目５５）
上記抗コネキシン４３ポリヌクレオチドがｓｉＲＮＡまたはＲＮＡｉオリゴヌクレオチドである、項目５２に記載の方法。
（項目５６）
上記抗コネキシン４３剤がペプチド化合物である、項目５１に記載の方法。
（項目５７）
上記ペプチド化合物がペプチド模倣剤である、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
上記抗コネキシン４３剤が、抗コネキシン４３抗体、Ｆ（ｖ）フラグメント、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、またはＦ（ａｂ’）２フラグメントである、項目５１に記載の方法。
（項目５９）
上記抗コネキシン剤が細胞間連絡を阻害または遮断する、項目５１に記載の方法。
（項目６０）
上記抗コネキシン剤がコネキシン４３のヘミチャネルの開口を阻害または遮断する、項目５１に記載の方法。
（項目６１）
１または複数の治療用薬剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目５１に記載の方法。
（項目６２）
創傷治癒に有用な１または複数の薬剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目５１に記載の方法。
（項目６３）
１または複数の抗微小管剤を含む第２の組成物の投与をさらに含む、項目５１に記載の方法。
（項目６４）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前、後または同時に投与される、項目６１〜６３のいずれか一項に記載の方法。
（項目６５）
上記第２の組成物が、第１の組成物の前および後に投与される、項目６１〜６３のいずれか一項に記載の方法。
（項目６６）
関節の内部および／または周辺での異常な組織形成が予防または軽減される、項目１、１８、３４、または５１のいずれか一項に記載の方法。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
詳細な説明
整形外科的な疾患、障害、および／または症状、ならびに前記疾患、障害、および／または症状を治療するために実施する手順は、衰弱させ得、関節の機能および動作範囲の損失、ならびに遅く困難な回復時間をもたらしうる。本明細書において記載または言及されるものを含む特定の化合物が、対象における疼痛、血管の損傷、および／または異常な組織形成を予防および／または軽減できることが発見されている。
【００４８】
本明細書に記載される化合物、組成物、および治療法を使用して治療される対象には、例えば、整形外科疾患、障害および／または状態に罹患している、その素因がある、またはその危険性がある対象、ならびに整形外科的処置を受けたことがあるまたは受けることになっている対象が挙げられる。
【００４９】
本明細書で用いられる「対象」とは、ヒト、家畜動物、農場動物、動物園動物、競技動物、またはペット動物（イヌ、ウマ、ネコ、ヒツジ、ブタ、ウシなど）を含む任意の哺乳動物を指す。本明細書で好ましい哺乳動物は、成人、小児、および老齢者を含めたヒトである。
【００５０】
本明細書で用いられる「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」とは、状態の進行を全体的もしくは部分的に予防するか、またはこれらを改善するかもしくは制御するか、またはこれらを軽減するか、弱めるか、抑制するか、もしくは停止させることを意味する。
【００５１】
本発明の化合物または組成物に関して本明細書で用いられる「有効量」または「治療有効量」とは、所望の生物学的結果、薬学的結果、または治療結果を誘導するのに十分な量を指す。その結果は、疾患もしくは障害もしくは状態の徴候、症状、もしくは原因の緩和、または生物学的系の他の任意の望ましい変化でありうる。本発明では、前記結果は、治癒の促進、疼痛の予防および／もしくは軽減、血管損傷の予防および／もしくは軽減、関節内部および／もしくは周囲での異常組織形成の予防および／もしくは軽減、ならびに／または関節性拘縮の全体的もしくは部分的予防、軽減もしくは逆転、ならびに／または回復時間の改善、ならびに／または術後運動性の増加を含む全体的回復結果の改善を伴うことになる。本明細書に記載され主張される本発明品は、整形外科手術後の患者の回復時間も改善することができる。
【００５２】
本明細書で用いられる「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、治療的処置および予防（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）措置または予防（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）措置の両方を指す。
【００５３】
本明細書において用いる場合、「同時に」は、１または複数のギャップジャンクション改変剤、例えばペプチドまたはブロッカーが並行して投与されることを意味するために用いられ、一方、「組み合わせて」という用語は、それらが、同時にまたは物理的組合せにおいてではなく投与されることを意味するために用いられ、そして「逐次的に」は、それらの両方が治療的に作用するために利用可能である時間枠内で投与されることを意味するために用いられる。したがって、「逐次的な」投与により、１または複数のギャップジャンクション改変剤が並行して有効量で存在するという条件で、１つの薬剤を、他の薬剤の後、数分間（例えば、１、２、３、４、５、１０、１５、２０、２５、３０分）以内に、または数時間、数日、数週間、もしくは数ヶ月以内に投与することが可能になる。構成要素の投与の間の時間遅延は、構成要素の正確な性質、それらの間の相互作用、およびそれらのそれぞれの半減期に応じて変化する。
【００５４】
「ペプチド模倣剤」および「模倣剤」という用語は、それらが模倣するタンパク質領域と同じ構造的特徴および機能的特徴を実質的に有しうる天然に存在する化合物および合成化合物を含む。コネキシンの場合、これらは、例えば、コネキシン同士のドッキングおよび細胞間のチャネル形成に関与する、向かい合うコネキシンの細胞外ループ、および／またはヘミコネキシンの細胞外ループを模倣してよい。
【００５５】
本明細書において用いる場合、「ペプチド類似体」という用語は、鋳型ペプチドの特性に類似した特性を有する化合物を言い、非ペプチド薬剤であっても良い。ペプチドに基づいた化合物を含む「ペプチド模倣剤」（模倣ペプチドとしても公知である）もまた、ペプチド類似体などの、このようなペプチドに基づかない化合物を含む。治療上有用なペプチドに構造的に類似しているペプチド模倣剤を、等しいかまたは増強された治療的または予防的効果をもたらすために用いることができる。通常、ペプチド模倣剤は、パラダイムポリペプチド（すなわち、生物学的または薬理学的な機能または活性を有するポリペプチド）に対する構造的または機能的な模倣剤（例えば、同一または類似）であるが、例えば−ＣＨ２ＮＨ−、ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−（シスおよびトランス）、−ＣＯＣＨ２−、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２−、ならびに−ＣＨ２ＳＯ−からなる群から選択される結合によって随意に置換されている、１または複数のペプチド結合も有しうる。模倣剤は、全体が天然アミノ酸、合成化学的化合物、アミノ酸の非天然類似体から構成されるか、または、一部が天然のペプチドアミノ酸であり一部がアミノ酸の非天然の類似体であるキメラ分子である。模倣剤はまた、その置換がまた模倣活性を実質的に改変しない限りにおいて、いかなる量の天然アミノ酸の保存性の置換も含みうる。コネキシンのケースにおいて、これらは、例えば、コネキシン同士のドッキングおよび細胞同士のチャネル形成に関与する、対向するコネキシンの細胞外ループを模倣しうる。例えば、模倣組成物は、それがコネキシンの生物学的な作用または活性を下方調節しうる場合、例えば、ギャップジャンクション介在性の細胞間連絡を形成するためのコネキシンのドッキングを妨げるか、または細胞質を細胞外環境に曝露するためのコネキシンの開口を妨げる場合、ギャップジャンクション改変剤として有用でありうる。ペプチド模倣剤は、本明細書において記載されるものと、現在公知であるかまたは後に開発されるかに関わらず、当技術分野において公知である可能性があるものとを包含する。
【００５６】
全体として、本明細書において用いられる、様々な形態の、ギャップジャンクション活性の「改変剤」および「改変」という用語は、ギャップジャンクションまたはヘミチャネルの作用または活性の全部または一部における阻害について言い、ギャップジャンクション改変剤として機能しうる。
【００５７】
本明細書中で使用される、「タンパク質」という用語は、１つのアミノ酸（またはアミノ酸残基）のアルファ炭素に結合したカルボン酸基のカルボキシル炭素原子が、隣接するアミノ酸のアルファ炭素に結合したアミノ基のアミノ窒素原子に共有結合する場合に生じるペプチド結合により連結される、２つ以上の個々のアミノ酸（天然の場合であれ非天然の場合であれ）による任意のポリマーを指す。これらのペプチド結合、およびこれらを含む原子（すなわち、アルファ炭素原子、カルボキシルの炭素原子（およびこれらの置換基の酸素原子）、およびアミノの窒素原子（およびこれらの置換基の水素原子））は、タンパク質の「ポリペプチド骨格」を形成する。加えて、本明細書で用いられる「タンパク質」という用語は、「ポリペプチド」および「ペプチド」（本明細書では、場合によって、互換的に用いられうる）という用語を含む形で理解される。同様に、本明細書では、タンパク質のフラグメント、類似体、誘導体、および変異体も「タンパク質」と称し、別段に示されない限り、「タンパク質」であるとみなされるものとする。タンパク質の「フラグメント」という用語は、タンパク質のすべてのアミノ酸残基よりも少数のアミノ酸残基を含むポリペプチドを指す。タンパク質の「ドメイン」もまたフラグメントであり、多くの場合、活性または機能を付与することが必要とされる、タンパク質のアミノ酸残基を含む。
【００５８】
整形外科疾患、障害および状態は当技術分野では周知であり、例えば、前十字靭帯（ａｃｌ）傷害、肩の関節炎、膝の関節軟骨損傷、Ｏ脚、骨折した背骨、骨折股関節（骨盤）、骨折した脚、骨折した頚部、腱膜瘤、滑液包炎、手根管症候群、慢性腰痛症、内反足、脊椎湾曲（脊柱側弯症）、糖尿病足、肘の脱臼、股関節脱臼、デュピュイトラン拘縮、偏平足、足奇形、小児の前腕骨折、血友病関節炎、椎間板ヘルニア（椎間板破裂）、股関節唇裂傷、股関節炎、感染性関節炎、炎症性股関節状態、母趾内反、膝関節炎、Ｘ脚、半月板裂傷、骨関節炎、骨壊死、骨粗鬆症、関節リウマチ、回旋腱板損傷、脊柱側弯症、肩関節炎、肩関節不安定症、肩痛、椎間板破裂（椎間板ヘルニア）、脊柱管狭窄／変性脊椎すべり症、脊椎すべり症、足へのスポーツ損傷、足関節捻挫、腱炎、母指関節炎、ばね指、および関節性拘縮が挙げられる。
【００５９】
整形外科疾患、障害または状態には、疼痛、血管損傷、腫脹、炎症、瘢痕および整形外科損傷の後に生じる関節性拘縮も挙げられる。炎症、瘢痕および関節性拘縮を生じることがある損傷の代表例には、例えば、外傷（例えば、特に関節内もしくは周囲の挫滅、切断、裂傷、破損、衝撃および牽引）、骨折（これは肘もしくは股関節などの関節内もしくは周囲で起こることがある）、亜脱臼、脱臼（例えば、指、肘、肩、足首、膝もしくは股関節において）、または関節（例えば、肩、肘、股関節、顎関節、小関節、指、膝、足首もしくは足指）破損および他の骨、軟骨、腱もしくは靭帯損傷が挙げられるが、あるいは特定できる原因がなくてもよい（例えば、凍結肩）。
【００６０】
整形外科的処置も当技術分野では周知であり、例えば、整形外科関連疾患、障害または状態に罹患している対象を治療するために現在公知のまたはその後に開発されたあらゆる処置および／または治療法が挙げられ、例となる処置には、関節鏡検査、人工椎間板置換術、自己軟骨細胞移植、骨移植、腱膜瘤切除、手根管開放術、内反足修復、コルチコステロイド類（注射および投薬療法）、機能回復プログラム、股関節鏡視下手術、人工股関節置換術、膝関節鏡視下手術、最小侵襲全人工股関節置換術、部分的人工膝関節置換術、部分的人工股関節置換術、肩関節鏡視下手術、肩関節置換術、全人工股関節置換術、全人工膝関節置換術、手関節鏡視下手術、膝関節鏡視下手術および半月板切除術、肩関節鏡視下手術および徐圧術、手根管開放術、膝関節鏡視下手術および軟骨形成術、サポートインプラントの除去、膝関節鏡視下手術および前十字靭帯再構築、人工膝関節置換術、大腿骨頚部骨折の修復、転子骨折の修復、皮膚／筋肉／骨／骨折のデブリドマン、両半月板の膝関節鏡視下手術修復、人工股関節置換術、肩関節鏡視下手術／遠位鎖骨切除術、回旋腱板腱の修復、橈（骨）／尺骨の修復骨折、椎弓切除術、足首骨折の修復（両果タイプ）、肩関節鏡視下手術およびデブリドマン、腰椎固定術、橈骨の遠位部分の修復骨折、腰部椎間板手術、切開手指腱鞘、足首骨折（腓骨）の修復、大腿骨骨幹軸骨折の修復、転子骨折の修復の他にも一般的、特殊化した、または非定形な手の手術、肩および肘の手術、全関節再建（関節形成術）、小児整形外科、足と足首の手術、脊椎外科、筋骨格腫瘍学、外科的スポーツ医学、ならびに整形外科的外傷に関連するすべての処置が含まれうる。
【００６１】
抗コネキシン剤
本明細書に記載の本発明の抗コネキシン剤は、細胞内への、また細胞からの分子の輸送を調節するかまたはこれに影響を及ぼす（例えば、遮断するかまたは阻害するかまたは下方調節する）ことができる。したがって、本明細書に記載の一部の抗コネキシン剤は、細胞情報伝達（例えば、細胞間）を調節する。一部の抗コネキシン剤は、ギャップジャンクション調節剤である。一部の抗コネキシン剤は、細胞の細胞質と、ペリプラズム腔または細胞外腔との間における分子の移送を調節するかまたはこれに影響を及ぼす。このような抗コネキシン剤は一般に、コネキシンおよび／またはコネキシンヘミチャネル（コネクソン）もしくはギャップジャンクション自体を標的とする。コネキシンを含むヘミチャネルおよび結果として生じるギャップジャンクションは、開口ヘミチャネルの場合における、細胞質と細胞外腔または細胞外組織との間における低分子の放出または交換、また開口ギャップジャンクションの場合における、隣接する細胞の細胞質間における低分子の放出または交換に独立して関与する。したがって、本明細書で提供される抗コネキシン剤は、細胞間における結合および情報伝達を直接的または間接的に低下させる場合もあり、細胞と細胞外腔または細胞外組織との間における情報伝達（または分子の伝達）を低下させるかまたは遮断する場合もあり、細胞から細胞外腔もしくは細胞外組織への（または細胞外腔もしくは細胞外組織から細胞内への）または隣接する細胞間における分子輸送の調節は、本発明の抗コネキシン剤および本発明の実施形態の範囲内にある。コネキシンは、コネキシン４３であることが好ましい。
【００６２】
本発明の実施形態では、ギャップジャンクションまたはコネキシンヘミチャネルを介する分子の通過（例えば、輸送）に対する望ましい阻害を誘発することが可能な任意の抗コネキシン剤を用いることができる。ギャップジャンクションまたはコネキシンヘミチャネルを介する分子の通過を調節する任意の抗コネキシン剤はまた、特定の実施形態においても提供される（例えば、ある細胞の細胞質から細胞外腔または隣接する細胞の細胞質への分子の通過を調節するか、遮断するか、または低下させる抗コネキシン剤）。このような抗コネキシン剤は、ギャップジャンクションの結合解除（ギャップジャンクションを介する分子輸送の遮断）を伴う場合であれ伴わない場合であれ、ギャップジャンクションまたはコネキシンヘミチャネルを介する分子の通過を調節しうる。このような化合物は、例えば、タンパク質およびポリペプチド、ポリヌクレオチド、および他の有機化合物を含み、これらは、例えば、部分的または全体的にギャップジャンクションまたはヘミチャネルの機能または発現を遮断する場合もあり、全体的または部分的にコネキシンの生成を下方調節する場合もある。一部のギャップジャンクション阻害剤は、Ｅｖａｎｓ，  Ｗ．Ｈ．およびＢｏｉｔａｎｏ，  Ｓ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｔｒａｎｓ．、第２９巻、６０６〜６１２頁（２００１年）において列挙されている。他の化合物は、全体的または部分的にギャップジャンクションおよび／またはヘミチャネルを閉鎖するコネキシンリン酸化化合物、ならびにコネキシンカルボキシ末端ポリペプチドを含む。コネキシンは、コネキシン４３であることが好ましい。
【００６３】
一部の抗コネキシン剤は、コネキシン発現の下方調節（例えば、ｍＲＮＡの転写または翻訳に対する下方調節による）をもたらすか、またはこれ以外の形で、コネキシンタンパク質、コネキシンヘミチャネル、もしくはギャップジャンクションの活性を低下させるかもしくは阻害する。下方調節の場合、これは、コネキシン発現が下方調節される部位において、ギャップジャンクションによる直接的な細胞間情報伝達、またはヘミチャネルによる細胞の細胞質の細胞外腔への曝露を低下させる効果を有する。抗コネキシン４３剤が好ましい。
【００６４】
抗コネキシン剤の例は、コネキシンｍＲＮＡおよび／もしくはコネキシンタンパク質の発現もしくは機能を低下させるかもしくは阻害するか、またはコネキシン、コネキシンヘミチャネル、もしくはギャップジャンクションの活性、発現、もしくは形成を低下させる薬剤を含む。抗コネキシン剤は、アンチセンスポリヌクレオチドおよび他のポリヌクレオチド（ｓｉＲＮＡまたはリボザイムの機能性を有するポリヌクレオチドなどの）などの抗コネキシポリヌクレオチドのほか、抗体およびその結合フラグメント、ならびにヘミチャネルまたはギャップジャンクションの活性または機能を調節するペプチド模倣剤およびペプチド類似体を含むペプチドおよびポリペプチドを含む。抗コネキシン４３剤が好ましい。
【００６５】
抗コネキシンポリヌクレオチド
抗コネキシンポリヌクレオチドは、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドのほか、それらによるコネキシン発現の下方調節を可能とする機能性を有するポリヌクレオチドも含む。他の適切な抗コネキシンポリヌクレオチドは、ＲＮＡｉポリヌクレオチドおよびｓｉＲＮＡポリヌクレオチドを含む。抗コネキシン４３ポリヌクレオチドが好ましい。
【００６６】
ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ、およびリボザイムポリヌクレオチドのほか、骨格が改変および混合されたポリヌクレオチドなどの、アンチセンスポリヌクレオチドおよび他の抗コネキシンポリヌクレオチドの合成は、当業者に公知である。例えば、Ｓｔｅｉｎ  Ｃ．Ａ．およびＫｒｉｅｇ  Ａ．Ｍ．（編）、「Ａｐｐｌｉｅｄ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」、１９９８年、（Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ）を参照されたい。抗体および結合フラグメントのほか、ペプチド模倣剤およびペプチド類似体を含むペプチドおよびポリペプチドを合成する方法は、当業者に公知である。例えば、Ｌｉｈｕ  Ｙａｎｇら、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．、１；第９５巻、第１８号、１０８３６〜１０８４１頁（１９９８年９月１日）；  ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８年）、「Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕｅｌ」、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；  ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９９９年）、「Ｕｓｉｎｇ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕｅｌ」、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい。
【００６７】
一態様によれば、コネキシン発現の下方調節は一般に、アンチセンスポリヌクレオチド（ＤＮＡポリヌクレオチドまたはＲＮＡポリヌクレオチドなど）を用いるアンチセンス法に基づき、またより具体的に、アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチド（ＯＤＮ）の使用に基づきうる。これらのポリヌクレオチド（例えば、ＯＤＮ）は、（１または複数の）コネキシンタンパク質を標的としてこれらを下方調節する。ポリヌクレオチドは、一本鎖であることが典型的であるが、二本鎖の場合もある。
【００６８】
アンチセンスポリヌクレオチドは、コネキシンの転写および／または翻訳を阻害しうる。ポリヌクレオチドは、コネキシン遺伝子またはコネキシンｍＲＮＡからの転写および／または翻訳の特異的な阻害剤であり、他の遺伝子またはｍＲＮＡからの転写および／または翻訳を阻害しないことが好ましい。生成物は、（ｉ）コード配列に対する５’側、および／または（ｉｉ）コード配列に対する、および／または（ｉｉｉ）コード配列に対する３’側にあるコネキシン遺伝子またはコネキシンｍＲＮＡに結合しうる。
【００６９】
アンチセンスポリヌクレオチドは一般に、コネキシンｍＲＮＡ、好ましくはコネキシン４３  ｍＲＮＡに対してアンチセンスである。このようなポリヌクレオチドはコネキシンｍＲＮＡにハイブリダイズすることが可能であり、したがって、転写、ｍＲＮＡのプロセッシング、核からのｍＲＮＡの輸送、翻訳、またはｍＲＮＡの分解を含む、コネキシンｍＲＮＡ代謝の１つまたは複数の側面に干渉することにより、コネキシン発現を阻害しうる。アンチセンスポリヌクレオチドは、コネキシンｍＲＮＡにハイブリダイズして、ｍＲＮＡ翻訳の直接的な阻害および／またはｍＲＮＡの不安定化を引き起こしうる二重鎖を形成することが典型的である。このような二重鎖は、ヌクレアーゼによる分解に対して感受性でありうる。
【００７０】
アンチセンスポリヌクレオチドは、コネキシンｍＲＮＡの全部または一部にハイブリダイズしうる。アンチセンスポリヌクレオチドは、コネキシンｍＲＮＡのリボソーム結合領域またはコード領域にハイブリダイズすることが典型的である。ポリヌクレオチドは、コネキシンｍＲＮＡの全部または一部の領域に対して相補的でありうる。例えば、ポリヌクレオチドは、コネキシンｍＲＮＡの全部または一部の完全な相補体でありうる。しかし、絶対的な相補性は必要とされず、生理学的条件下において約２０℃、３０℃、または４０℃を超える融解温度を有する二重鎖を形成するのに十分な相補性を有するポリヌクレオチドが、本発明における使用に特に適する。
【００７１】
したがって、ポリヌクレオチドは、ｍＲＮＡに対して相補的な配列の相同体であることが典型的である。ポリヌクレオチドは、約５０℃〜約６０℃における０．０３Ｍ塩化ナトリウムおよび０．０３Ｍクエン酸ナトリウムなどの中程度〜高度に厳密な条件下においてコネキシンｍＲＮＡにハイブリダイズするポリヌクレオチドでありうる。
【００７２】
一部の態様について述べると、適切なポリヌクレオチドは、約６〜４０ヌクレオチドの長さであることが典型的である。ヌクレオチドは、好ましくは約１２〜約３５ヌクレオチドの長さでもあり、代替的には、約１２〜約２０ヌクレオチドの長さでもあり、より好ましくは、約１８〜約３２ヌクレオチドの長さでもありうる。代替的な態様によれば、ポリヌクレオチドは、少なくとも約４０ヌクレオチド、例えば、少なくとも約６０ヌクレオチドまたは少なくとも約８０ヌクレオチドの長さでありえ、最長約１００、約２００、約３００、約４００、約５００、約１０００、約２０００、または約３０００ヌクレオチド以上の長さでありうる。
【００７３】
ポリヌクレオチドにより標的とされる１または複数のコネキシンタンパク質は、下方調節が行われる部位に依存する。これは、コネキシンサブユニットの組成に関して、全身の異なる部位において（１または複数の）ギャップジャンクションの構成が一様でないことを反映する。コネキシンは、一態様における、ヒトもしくは動物の天然に存在するコネキシンであるか、またはコネキシンの発現または活性を低下させる予定の組織内の天然に存在するコネキシンである。コネキシン遺伝子（コード配列を含む）は一般に、表８に示すコネキシン４３コード配列との相同性など、本明細書で言及される１または複数の特異的なコネキシンのコード配列との相同性を有する。コネキシンは、αコネキシンまたはβコネキシンであることが典型的である。コネキシンはαコネキシンであり、治療される組織において発現することが好ましい。
【００７４】
しかし、組織内における分布に関して、一部のコネキシンタンパク質は、他のコネキシンタンパク質よりも遍在性である。最も広範に存在するコネキシンタンパク質の１つが、コネキシン４３である。コネキシン４３を標的とするポリヌクレオチドが、本発明における使用に特に適する。他の態様では、他のコネキシンが標的とされる。
【００７５】
抗コネキシンポリヌクレオチドは、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドのほか、それらによるコネキシン発現の下方調節を可能とする機能性を有するポリヌクレオチドも含む。他の適切な抗コネキシンポリヌクレオチドは、ＲＮＡｉポリヌクレオチドおよびｓｉＲＮＡポリヌクレオチドを含む。
【００７６】
好ましい一態様において、アンチセンスポリヌクレオチドは、１種のコネキシンタンパク質のｍＲＮＡだけを標的とする。このコネキシンタンパク質は、コネキシン４３であることが最も好ましい。別の態様において、コネキシンタンパク質は、コネキシン２６、３０、３１．１、３２、３６、３７、４０、または４５である。他の態様において、コネキシンタンパク質は、コネキシン３０．３、３１、４０．１、または４６．６である。
【００７７】
別個のコネキシンタンパク質を標的とするポリヌクレオチドを組み合わせて用いることもまた意図される（例えば、１種、２種、３種、４種以上の異なるコネキシンを標的とすることができる）。例えば、コネキシン４３を標的とするポリヌクレオチドと、コネキシンファミリーの１つまたは複数の他のメンバー（コネキシン２６、３０、３０．３、３１．１、３２、３６、３７、４０、４０．１、４５、および４６．６など）とを標的とするポリヌクレオチドを、組み合わせて用いることができる。
【００７８】
代替的に、アンチセンスポリヌクレオチドは、複数種のコネキシンタンパク質に対するポリヌクレオチドを含みうる組成物の一部でもありうる。ポリヌクレオチドが対象とするコネキシンタンパク質の１つは、コネキシン４３であることが好ましい。オリゴデオキシヌクレオチドが対象とする他のコネキシンタンパク質は、例えば、コネキシン２６、３０、３０．３、３１．１、３２、３６、３７、４０、４０．１、４５、および４６．６を含みうる。各種のコネキシンを対象とするのに適する例示的なポリヌクレオチド（およびＯＤＮ）を、表１に示す。
【００７９】
個々のアンチセンスポリヌクレオチドは、特定のコネキシンに特異的な場合もあり、１種、２種、３種以上の異なるコネキシンを標的とする場合もある。特異的なポリヌクレオチドが一般に、コネキシン間において保存されないコネキシン遺伝子またはコネキシンｍＲＮＡ内の配列を標的とする一方、非特異的なポリヌクレオチドは、各種コネキシンの保存的配列を標的とする。
【００８０】
本発明で用いられるポリヌクレオチドは、非改変のホスホジエステルオリゴマーでありうるのが好都合である。このようなオリゴデオキシヌクレオチドは、長さが変わりうる。３０マーのポリヌクレオチドが特に適することが分かっている。
【００８１】
本発明の多くの態様は、オリゴデオキシヌクレオチドに関して説明される。しかし、これらの態様では、他の適切なポリヌクレオチド（ＲＮＡポリヌクレオチドなど）も用いうることが理解される。
【００８２】
アンチセンスポリヌクレオチドは、化学修飾することができる。これにより、ヌクレアーゼに対するこれらの耐性を増強することができ、これらが細胞内に入る能力を増強することができる。例えば、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを用いることができる。他のデオキシヌクレオチド類似体は、メチルホスホネート、ホスホラミデート、ホスホロジチオエート、Ｎ３’Ｐ５’−ホスホラミデート、ならびにオリゴリボヌクレオチドホスホロチオエートおよびそれらの２’−Ｏ−アルキル類似体、ならびに２’−Ｏ−メチルリボヌクレオチドメチルホスホネートを含む。代替的に、混合骨格オリゴヌクレオチド（「ＭＢＯ」）も用いることができる。ＭＢＯは、ホスホチオエートオリゴデオキシヌクレオチドのセグメントと、改変されたオリゴデオキシヌクレオチドまたはオリゴリボヌクレオチドの適切に配置されたセグメントとを含有する。ＭＢＯは、ホスホロチオエート結合のセグメントと、非イオン性で、ヌクレアーゼまたは２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチドに対して極めて耐性なメチルホスホネートなどの、他の改変オリゴヌクレオチドの他のセグメントとを有する。改変骨格オリゴヌクレオチドおよび混合骨格オリゴヌクレオチドを調製する方法は、当技術分野において公知である。
【００８３】
本発明で用いられるアンチセンスポリヌクレオチドの正確な配列は、標的のコネキシンタンパク質に依存する。一実施形態において、適切なコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、表１に記載される以下の配列から選択されるオリゴデオキシヌクレオチドなどのポリヌクレオチドを含みうる。
【００８４】
【表１−１】
2014169330.tif 000002
【００８５】
【表１−２】
2014169330.tif 000003
本明細書に記載の、ポリヌクレオチドの組合せ組成物の調製に適するポリヌクレオチドは、例えば、上記の表１に記載したコネキシンＣｘ４３に対するポリヌクレオチドと、コネキシン２６、３０、３１．１、３２、および３７に対するポリヌクレオチドとを含む。
【００８６】
本発明において用いられるアンチセンスポリヌクレオチドの正確な配列は、標的のコネキシンタンパク質に依存するが、コネキシン４３の場合、以下の配列：
ＧＴＡ  ＡＴＴ  ＧＣＧ  ＧＣＡ  ＡＧＡ  ＡＧＡ  ＡＴＴ  ＧＴＴ  ＴＣＴ  ＧＴＣ（配列番号１）；
ＧＴＡ  ＡＴＴ  ＧＣＧ  ＧＣＡ  ＧＧＡ  ＧＧＡ  ＡＴＴ  ＧＴＴ  ＴＣＴ  ＧＴＣ（配列番号２）；および
ＧＧＣ  ＡＡＧ  ＡＧＡ  ＣＡＣ  ＣＡＡ  ＡＧＡ  ＣＡＣ  ＴＡＣ  ＣＡＧ  ＣＡＴ（配列番号３）
を有するアンチセンスポリヌクレオチドが特に適することが分かっている。
【００８７】
例えば、コネキシン２６、３１．１、および３２に適するアンチセンスポリヌクレオチドは、以下の配列：
５’  ＴＣＣ  ＴＧＡ  ＧＣＡ  ＡＴＡ  ＣＣＴ  ＡＡＣ  ＧＡＡ  ＣＡＡ  ＡＴＡ（コネキシン２６）（配列番号４）；
５’  ＣＧＴ  ＣＣＧ  ＡＧＣ  ＣＣＡ  ＧＡＡ  ＡＧＡ  ＴＧＡ  ＧＧＴ  Ｃ（コネキシン３１．１）（配列番号９）；および
５’  ＴＴＴ  ＣＴＴ  ＴＴＣ  ＴＡＴ  ＧＴＧ  ＣＴＧ  ＴＴＧ  ＧＴＧ  Ａ（コネキシン３２）（配列番号１２）
を有する。
【００８８】
本発明の方法により有用な他のコネキシンアンチセンスポリヌクレオチド配列は、
５’  ＣＡＴ  ＣＴＣ  ＣＴＴ  ＧＧＴ  ＧＣＴ  ＣＡＡ  ＣＣ  ３’（コネキシン３７）（配列番号５）；
５’  ＣＴＧ  ＡＡＧ  ＴＣＧ  ＡＣＴ  ＴＧＧ  ＣＴＴ  ＧＧ  ３’（コネキシン３７）（配列番号６）；
５’  ＣＴＣ  ＡＧＡ  ＴＡＧ  ＴＧＧ  ＣＣＡ  ＧＡＡ  ＴＧＣ  ３’（コネキシン３０）（配列番号７）；
５’  ＴＴＧ  ＴＣＣ  ＡＧＧ  ＴＧＡ  ＣＴＣ  ＣＡＡ  ＧＧ  ３’（コネキシン３０）（配列番号８）；
５’  ＡＧＡ  ＧＧＣ  ＧＣＡ  ＣＧＴ  ＧＡＧ  ＡＣＡ  Ｃ  ３’（コネキシン３１．１）（配列番号１０）；および
５’  ＴＧＡ  ＡＧＡ  ＣＡＡ  ＴＧＡ  ＡＧＡ  ＴＧＴ  Ｔ  ３’（コネキシン３１．１）（配列番号１１）
を含む。
【００８９】
コネキシンタンパク質を対象とする、ＯＤＮを含むポリヌクレオチドは、任意の簡便な従来の手法により、それらのヌクレオチド配列に関して選択することができる。例えば、コンピュータプログラムであるＭａｃＶｅｃｔｏｒおよびＯｌｉｇｏＴｅｃｈ（Ｏｌｉｇｏｓなど、Ｅｕｇｅｎｅ、Ｏｒｅｇｏｎ、ＵＳＡ製）を用いることができる。選択されると、ＤＮＡ合成器を用いてＯＤＮを合成することができる。
【００９０】
ポリヌクレオチドの相同体
本明細書では、相同性および相同体（例えば、ポリヌクレオチドは、コネキシンｍＲＮＡ中の配列に対する相補体の相同体でありうる）について論じる。このようなポリヌクレオチドは、例えば、（相同配列の）少なくとも約１５、少なくとも約２０、少なくとも約４０、少なくとも約１００以上の連続ヌクレオチドの領域にわたって、対象の配列と少なくとも約７０％の相同性、好ましくは少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％の相同性を有することが典型的である。
【００９１】
相同性は、当技術分野における任意の方法に基づいて計算することができる。例えば、ＵＷＧＣＧパッケージでは、相同性を計算するのに用いうるＢＥＳＴＦＩＴプログラム（例えば、そのデフォルト設定で用いられる）が提供される（Ｄｅｖｅｒｅｕｘら（１９８４年）、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第１２巻、３８７〜３９５頁）。ＰＩＬＥＵＰアルゴリズムおよびＢＬＡＳＴアルゴリズムは、例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  Ｓ．  Ｆ．（１９９３年）、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｅｖｏｌ、第３６巻、２９０〜３００頁；  Ａｌｔｓｃｈｕｌ，  Ｓ，  Ｆら（１９９０年）、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ、第２１５巻、４０３〜１０頁において説明される通り、相同性を計算するか、または配列を整列するのに用いることができる（それらのデフォルト設定における場合が典型的である）。
【００９２】
ＢＬＡＳＴ解析を実施するためのソフトウェアは、米国国立バイオテクノロジー情報センター（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）により公に入手可能である。このアルゴリズムは、まず、データベース配列中における同じ長さのワードにより整列する場合、ある正の値の閾値スコアＴにマッチするかまたはこれを満たすクエリー配列中における長さＷの短いワードを同定することによる、高スコアリング配列対（ＨＳＰ）の同定を伴う。Ｔを、近傍ワードスコア閾値（Ａｌｔｓｃｈｕｌら、前出）と称する。これらの初期近傍ワードヒットは、それらを含有するＨＳＰを見出す検索を開始するためのシード（ｓｅｅｄ）として作用する。ワードヒットは、累積のアライメントスコアが増大しうる限りにおいて、各配列に沿って両方向に延長される。各方向におけるワードヒットの延長は、累積アライメントスコアが、達成されたその最大値から量Ｘだけ低下する場合；累積スコアが、１つまたは複数の負のスコアの残基アライメントの累積により、ゼロ以下に低下する場合；またはいずれかの配列の端部に到達する場合に停止される。
【００９３】
ＢＬＡＳＴアルゴリズムのパラメータＷ、Ｔ、およびＸにより、アラインメントの感度および速度が決定される。ＢＬＡＳＴプログラムでは、ワード長（Ｗ）、ＢＬＯＳＵＭ６２スコアリングマトリックス（ＨｅｎｉｋｏｆｆおよびＨｅｎｉｋｏｆｆ（１９９２年）、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ、第８９巻、１０９１５〜１０９１９頁を参照されたい）によるアライメント（Ｂ＝５０）、期待値（Ｅ＝１０）、Ｍ＝５、Ｎ＝４、および両方の鎖の比較が、デフォルトとして用いられる。
【００９４】
ＢＬＡＳＴアルゴリズムでは、２つの配列間における類似性に対する統計学的解析が実施される。例えば、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｕｌ（１９９３年）、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ、第９０巻、５８７３〜５７８７頁を参照されたい。ＢＬＡＳＴアルゴリズムにより提供される類似性の１つの尺度は、２つのヌクレオチド配列またはアミノ酸配列の間におけるマッチが偶然に生じる確率を示す、最小合計確率（Ｐ（Ｎ））である。例えば、第２の配列に対して第１の配列を比較した場合の最小合計確率が約１未満、好ましくは約０．１未満、より好ましくは約０．０１未満、また最も好ましくは約０．００１未満である場合、ある配列は別の配列に対して類似すると考えられる。
【００９５】
相同配列は、少なくとも約２、５、１０、１５、２０以上（または約２、５、１０、１５、２０以下）の変異（置換、欠失、または挿入でありうる）により対象配列と異なることが典型的である。これらの変異は、相同性の計算との関連で、上述の領域のいずれかにわたって測定することができる。
【００９６】
相同配列は、バックグラウンドを有意に上回るレベルで、元の配列に選択的にハイブリダイズすることが典型的である。選択的なハイブリダイゼーションは、中程度〜高度に厳密な条件（例えば、約５０℃〜約６０℃における０．０３Ｍ塩化ナトリウムおよび０．０３Ｍクエン酸ナトリウム）を用いて達成することが典型的である。しかし、このようなハイブリダイゼーションは、当技術分野において公知の任意の適切な条件下で実施することができる（Ｓａｍｂｒｏｏｋら（１９８９年）、「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ」を参照されたい）。例えば、高い厳密性が必要とされる場合、適切な条件は６０℃における０．２×ＳＳＣを含む。より低い厳密性が必要とされる場合、適切な条件は６０℃における２×ＳＳＣを含む。
【００９７】
ペプチドおよびポリペプチドによる抗コネキシン剤
ペプチド、ペプチド模倣剤、抗体、抗体フラグメントなどを含む結合タンパク質もまた、ギャップジャンクションおよびヘミチャネルに適する調節剤である。
【００９８】
結合タンパク質は、例えば、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体フラグメント（例えば、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、およびＦｖフラグメント；単鎖抗体；単鎖Ｆｖ；また例えば、特定の抗体または他の結合分子と接触する抗原決定基（すなわち、一般にエピトープと称する分子の部分）に結合可能な結合ドメイン、ヒンジ、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメイン、組換え抗体、ならびに抗体フラグメントを含む単鎖結合分子などの単鎖結合分子を含む）を含む。抗体、抗体フラグメントなどを含むこれらの結合タンパク質は、キメラの場合もあり、ヒト化される場合もあり、他の形でこれらが投与される対象においてより低い免疫原性に作製する場合もあり、また、合成する場合もあり、組換えにより作製する場合もあり、発現ライブラリー内において作製する場合もある。本明細書で言及され、かつ／または当技術分野においてより詳細に説明される結合分子など、当技術分野において公知であるかまたは将来的に発見される任意の結合分子が想定される。例えば、結合タンパク質は、抗体などだけではなく、リガンド、受容体、ペプチド模倣剤、または標的（例えば、コネキシン、ヘミチャネル、または関連する分子）に結合する他の結合フラグメントもしくは他の結合分子（例えば、ファージディスプレイにより作製される）も含む。
【００９９】
結合分子は一般に、結合特異性を含むがこれに限定されない所望の特異性、および所望の親和性を有する。親和性は、例えば、約１０４Ｍ−１以上、約１０６Ｍ−１以上、約１０７Ｍ−１以上、約１０８Ｍ−１のＫａでありうる。約１０９Ｍ−１以上、約１０１０Ｍ−１以上、約１０１１Ｍ−１以上、および約１０１２Ｍ−１以上の親和性など、約１０８Ｍ−１をさらに超える親和性が適する。本発明による結合タンパク質の親和性は、従来の技法、例えば、Ｓｃａｔｃｈａｒｄら、１９４９年、Ａｎｎ．  Ｎ．Ｙ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．、第５１巻、６６０頁により説明される技法を用いて容易に決定することができる。
【０１００】
ヒドロパシープロットから得られるデータを用いることにより、コネキシンは、４つの膜貫通領域および２つの短い細胞外ループを含有すると仮定されている。コネキシンの第１および第２の細胞外領域の配置は、分離されたギャップジャンクション上における対応するエピトープの免疫学的局在決定に用いられる抗ペプチド抗体の作製報告によりさらに特徴づけられた（Ｇｏｏｄｅｎｏｕｇｈ  Ｄ．Ａ．、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、第１０７巻、１８１７〜１８２４頁（１９８８年）；  Ｍｅｙｅｒ  Ｒ．Ａ．、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、第１１９巻、１７９〜１８９頁（１９９２年））。
【０１０１】
隣接する２つの細胞が寄与するヘミチャネルの細胞外ドメインが互いに「結合（ｄｏｃｋ）」して、完全なギャップジャンクションチャネルが形成される。これらの細胞外ドメインの相互作用に干渉する試薬は、細胞間情報伝達を損なうことが可能である。ギャップジャンクションおよびヘミチャネルに対するペプチド阻害剤が報告されている。例えば、Ｂｅｒｔｈｏｕｄ，  Ｖ．Ｍ．ら、Ａｍ  Ｊ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ
Ｍｏｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、第２７９巻、Ｌ６１９〜Ｌ６２２頁（２０００年）；  Ｅｖａｎｓ，  Ｗ．Ｈ．およびＢｏｉｔａｎｏ，  Ｓ．、Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｔｒａｎｓ．、第２９巻、６０６〜６１２頁；ならびにＤｅ  Ｖｒｉｅｓｅ  Ａ．Ｓ．ら、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．、第６１巻、１７７〜１８５頁（２００１年）を参照されたい。コネキシンの細胞外ループ内の配列に対応する短いペプチドが、細胞間情報伝達を阻害すると言われた（Ｂｏｉｔａｎｏ  Ｓ．およびＥｖａｎｓ  Ｗ．、Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、第２７９巻、Ｌ６２３〜Ｌ６３０頁（２０００年））。Ｘｅｎｏｐｕｓの卵母細胞対において発現されるコネキシン（Ｃｘ）３２によりもたらされる細胞間チャネル形成に対する阻害剤としてのペプチドの使用もまた報告されている（Ｄａｈｌ  Ｇら、Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｊ、第６７巻、１８１６〜１８２２頁（１９９４年））。Ｂｅｒｔｈｏｕｄ，  Ｖ．Ｍ．およびＳｅｕｌ，  Ｋ．Ｈ．によりこれらの結果の一部がまとめられた（Ａｍ  Ｊ．，  Ｐｈｙｓｉｏｌ．  Ｌｕｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、第２７９巻、Ｌ６１９〜Ｌ６２２頁（２０００年））。
【０１０２】
抗コネキシン剤は、コネキシン（例えば、コネキシン４５、４３、２６、３０、３１．１、および３７）の膜貫通領域（例えば、第１〜第４）に対応するアミノ酸配列を含むペプチドを含む。抗コネキシン剤は、コネキシン４５の膜貫通領域の一部に対応するアミノ酸配列を含むペプチドを含みうる。抗コネキシン剤は、配列番号１３の約５〜２０の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチド、配列番号１３の約８〜１５の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチド、または配列番号１３の約１１〜１３の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチドを含む。他の実施形態は、配列番号１３の少なくとも約５、少なくとも約６、少なくとも約７、少なくとも約８、少なくとも約９、少なくとも約１０、少なくとも約１１、少なくとも約１２、少なくとも約１３、少なくとも約１４、少なくとも約１５、少なくとも約２０、少なくとも約２５、または少なくとも約３０の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチドである抗コネキシン剤を対象とする。本明細書で提供される一部の抗コネキシン剤では、配列番号１３の位置４６〜７５および１９９〜２２８にあるアミノ酸に対応するコネキシン４５の細胞外ドメインを用いて、特定のペプチド配列を開発することができる。本明細書に記載の一部のペプチドは、配列番号１３の位置４６〜７５および１９９〜２２８にある領域に対応するアミノ酸配列を有する。ペプチドは、配列番号１３のこれらの部分と同一のアミノ酸配列を有する必要はなく、ペプチドが結合活性または機能活性を保持するような保存的アミノ酸変化を作製することができる。代替的に、ペプチドは、細胞外ドメイン以外のコネキシンタンパク質の領域（例えば、位置４６〜７５および１９９〜２２８に対応しない配列番号１３の部分）も標的としうる。
【０１０３】
また、適切な抗コネキシン剤は、コネキシン４３の膜貫通領域の一部に対応するアミノ酸配列を含むペプチドも含む。抗コネキシン剤は、配列番号１４の約５〜２０の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチド、配列番号１４の約８〜１５の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチド、または配列番号１４の約１１〜１３の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチドを含む。他の抗コネキシン剤は、配列番号１４の少なくとも約５、少なくとも約６、少なくとも約７、少なくとも約８、少なくとも約９、少なくとも約１０、少なくとも約１１、少なくとも約１２、少なくとも約１３、少なくとも約１４、少なくとも約１５、少なくとも約２０、少なくとも約２５、または少なくとも約３０の連続アミノ酸を含むアミノ酸配列を有するペプチドを含む。他の抗コネキシン剤は、配列番号１４の位置３７〜７６および１７８〜２０８にあるアミノ酸に対応するコネキシン４３の細胞外ドメインを含む。抗コネキシン剤は、配列番号１４の位置３７〜７６および１７８〜２０８にある領域に対応するアミノ酸配列を有する、本明細書に記載のペプチドを含む。ペプチドは、配列番号１４のこれらの部分と同一のアミノ酸配列を有する必要はなく、ペプチドが結合活性または機能活性を保持するような保存的アミノ酸変化を作製することができる。代替的に、ペプチドは、細胞外ドメイン以外のコネキシンタンパク質の領域（例えば、位置３７〜７６および１７８〜２０８に対応しない配列番号１４の部分）も標的としうる。
【０１０４】
【化１】
2014169330.tif 000004
【０１０５】
【化２】
2014169330.tif 000005
【０１０６】
【化３】
2014169330.tif 000006
抗コネキシンペプチドは、ペプチドが機能的に活性な抗コネキシン剤であるような保存的アミノ酸置換を伴う、コネキシンの細胞外ドメインの一部に対応する配列を含みうる。例示的な保存的アミノ酸置換は、例えば、別の非極性アミノ酸による非極性アミノ酸の置換、別の芳香族アミノ酸による芳香族アミノ酸の置換、別の脂肪族アミノ酸による脂肪族アミノ酸の置換、別の極性アミノ酸による極性アミノ酸の置換、別の酸性アミノ酸による酸性アミノ酸の置換、別の塩基性アミノ酸による塩基性アミノ酸の置換、および別のイオン性アミノ酸によるイオン性アミノ酸の置換を含む。
【０１０７】
コネキシン４３を標的とする例示的なペプチドを、以下の表２に示す。Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、およびＭ４は、それぞれ、コネキシン４３タンパク質の第１〜第４の膜貫通領域を指す。Ｅ１およびＥ２は、それぞれ、第１および第２の細胞外ループを指す。
【０１０８】
【表２】
2014169330.tif 000007
表３は、ヘミチャネル機能またはギャップジャンクション機能を阻害するのに用いられる、さらなる例示的なコネキシンペプチドについて記載する。他の実施形態では、ペプチドまたはこれらのフラグメントに対して保存的なアミノ酸変化が作製される。
【０１０９】
【表３】
2014169330.tif 000008
表４は、本明細書に記載の使用に供するペプチド阻害剤を開発するのに用いられるコネキシンファミリーメンバーの細胞外ループについて記載する。表４に記載されるペプチドおよびこれらのフラグメントは、一部の非限定的な実施形態においてペプチド阻害剤として用いられる。他の非限定的な実施形態では、この表４中のペプチドの約８〜約１５、または約１１〜約１３の連続アミノ酸を含むペプチドが、ペプチド阻害剤である。ペプチドまたはこれらのフラグメントには、保存的なアミノ酸変化を作製することができる。
【０１１０】
【表４−１】
2014169330.tif 000009
【０１１１】
【表４−２】
2014169330.tif 000010
表５は、ペプチドによる抗コネキシン剤を開発するのに用いうるコネキシンファミリーメンバーの細胞外ドメインについて記載する。表５に記載されるペプチドおよびこれらのフラグメントもまた、ペプチドによる抗コネキシン剤として用いることができる。このようなペプチドは、この表５中のペプチド配列の約８〜約１５、または約１１〜約１３の連続アミノ酸を含みうる。ペプチドまたはこれらのフラグメントには、保存的なアミノ酸変化を作製することができる。
【０１１２】
【表５】
2014169330.tif 000011
表６は、コネキシン４０の細胞外ループ（Ｅ１およびＥ２）に関して示されるコネキシン４０に対するペプチド阻害剤について記載する。太字のアミノ酸は、コネキシン４０の膜貫通領域を対象とする。
【０１１３】
【表６】
2014169330.tif 000012
表７は、コネキシン４５の細胞外ループ（Ｅ１およびＥ２）に関して示されるコネキシン４５に対するペプチド阻害剤について記載する。太字のアミノ酸は、コネキシン４５の膜貫通領域を対象とする。
【０１１４】
【表７】
2014169330.tif 000013
一部の実施形態では、一部のペプチド阻害剤が、既存のギャップジャンクションを破壊することなく、ヘミチャネルを遮断することが好ましい。特定の理論または機構のいかなるものにも拘束されることを望まないが、一部のペプチド模倣剤（例えば、ＶＣＹＤＫＳＦＰＩＳＨＶＲ（配列番号２３））はまた、ギャップジャンクションの結合解除を引き起こすことなくヘミチャネルを遮断する（Ｌｅｙｂｅａｒｔら、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｍｍｕｎ．  Ａｄｈｅｓ．、第１０巻、２５１〜２５７頁（２００３年）を参照されたい）か、または低用量でヘミチャネルを遮断するとも考えられている。例えば、ギャップジャンクションの結合解除を伴わずにヘミチャネルを遮断するには、ペプチドＳＲＰＴＥＫＴＩＦＩＩ（配列番号１９）もまた用いることができる。ペプチドＳＲＧＧＥＫＮＶＦＩＶ（配列番号１０７）は、対照配列として用いることができる（ＤｅＶｒｉｅｓｅら、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔ．、第６１巻、１７７〜１８５頁（２００２年））。コネキシン４５に対するペプチド阻害剤の例は、ＹＶＣＳＲＬＰＣＨＰ  （配列番号１０８）、ＱＶＨＰＦＹＶＣＳＲＬ  （配列番号１０９）、ＦＥＶＧＦＬＩＧＱＹＦＬＹ  （配列番号１１０）、ＧＱＹＦＬＹＧＦＱＶＨＰ  （配列番号１１１）、ＧＦＱＶＨＰＦＹＶＣＳＲ  （配列番号１１２）、ＡＶＧＧＥＳＩＹＹＤＥＱ  （配列番号１１３）、ＹＤＥＱＳＫＦＶＣＮＴＥ  （配列番号１１４）、ＮＴＥＱＰＧＣＥＮＶＣＹ  （配列番号１１５）、ＣＹＤＡＦＡＰＬＳＨＶＲ  （配列番号１１６）、ＦＡＰＬＳＨＶＲＦＷＶＦ  （配列番号１１７）およびＬＩＧＱＹ  （配列番号１１８）、ＱＶＨＰＦ  （配列番号１１９）、ＹＶＣＳＲ  （配列番号１２０）、ＳＲＬＰＣ  （配列番号１２１）、ＬＰＣＨＰ  （配列番号１２２）およびＧＥＳＩＹ  （配列番号１２３）、ＹＤＥＱＳＫ  （配列番号１２４）、ＳＫＦＶＣＮ  （配列番号１２５）、ＴＥＱＰＧＣＥＮ  （配列番号１２６）、ＶＣＹＤＡＦＡＰ  （配列番号１２７）、ＬＳＨＶＲＦＷＶＦＱ  （配列番号１２８）である。ペプチドは、ＳＲＬ、ＰＣＨ、ＬＣＰ、ＣＨＰ、ＩＹＹ、ＳＫＦ、ＱＰＣ、ＶＣＹ、ＡＰＬ、ＨＶＲを含む３アミノ酸長だけの場合もあり、例えば、ＬＩＱＹＦＬＹＧＦＱＶＨＰＦ  （配列番号１２９）、ＶＨＰＦＹＣＳＲＬＰＣＨＰ  （配列番号１３０）、ＶＧＧＥＳＩＹＹＤＥＱＳＫＦＶＣＮＴＥＱＰＧ  （配列番号１３１）、ＴＥＱＰＧＣＥＮＶＣＹＤＡＦＡＰＬＳＨＶＲＦ  （配列番号１３２）、ＡＦＡＰＬＳＨＶＲＦＷＶＦＱ  （配列番号１３３）など、より長い場合もある。
【０１１５】
【表８−１】
2014169330.tif 000014
【０１１６】
【表８−２】
2014169330.tif 000015
治療剤
治療剤には、現在既存である、公知である、または後に開発されるかどうかにかかわらず、創傷の治療または創傷治癒の促進に有用な薬学的に許容される薬剤が含まれる。治療剤には、例えば、抗感染症薬、麻酔薬、鎮痛薬、抗生物質、麻酔剤、ならびにステロイド性抗炎症剤および非ステロイド性抗炎症剤が含まれる。好ましい治療剤には、局所ステロイド抗炎症剤、抗菌剤、局部および局所麻酔薬、ならびに局所オピオイドが含まれる。特定の実施形態において、１、２、３、４、５、または６つの治療剤は、組み合わせて使用されうる。
【０１１７】
創傷治癒に有用な薬剤
本明細書において使用される場合、創傷治癒に有用な薬剤には、１）自然の創傷治癒プロセスを促進するもしくは速めるまたは２）不適当なもしくは遅延性の創傷治癒と関連する影響を低下させる創傷治癒カスケードの刺激薬、賦活薬、または正の媒介物質が含まれ、これらの影響には、例えば、有害な炎症、上皮形成、血管形成、およびマトリックス沈着ならびに瘢痕および線維症が含まれる。
【０１１８】
正の媒介物質、賦活薬、および刺激薬には、例えば、創傷治癒の量、質、もしくは有効性または活性な創傷治癒過程または創傷部位の創傷治癒関連成長因子もしくは創傷治癒関連サイトカインまたは創傷治癒関連成長因子受容体もしくは創傷治癒関連サイトカイン受容体の活性化を刺激、増強、促進、または加速しうる（つまりアゴナイズする）薬剤が含まれる。そのような薬剤には、例えば、創傷治癒関連成長因子もしくは創傷治癒関連サイトカインまたは創傷治癒関連成長因子もしくは創傷治癒関連サイトカインの部分改変形態が含まれうる。創傷治癒関連成長因子または創傷治癒関連サイトカインの部分改変形態は、例えば、天然の創傷治癒関連成長因子または創傷治癒関連サイトカインよりも長い半減期を有するものでありうる。あるいは、それは、創傷治癒関連成長因子または創傷治癒関連サイトカインの代謝の阻害剤でありうる。
【０１１９】
そのような薬剤の部分的改変は、アミノ酸残基の付加、欠失、または置換によるものでありうる。置換は、例えば、保存的置換でありうる。したがって、部分的改変分子は、それが由来する分子の相同体でありうる。それは、それが由来する分子と、少なくとも約４０％、例えば約５０、６０、７０、８０、９０、または９５％の相同性を有しうる。
【０１２０】
本明細書において使用される場合、創傷治癒に有用な薬剤は、例えば、当技術分野において現在公知であるまたは後に開発される、創傷治療形態のための創傷治癒促進剤または瘢痕低下剤；創傷治癒を促進するための天然もしくは合成成長因子、サイトカイン、またはそのモジュレータ、創傷治癒を促進する生体工学でつくられたマトリックス、包帯材、包帯、およびその他同種のものを含めた、例示的な因子、薬剤、または形態が含まれうる。適した例には、１）ＳＡＧ（銀抗菌ゲル）、（ＣｏｌｌａＧＵＡＲＤ（商標）、Ｉｎｎｏｃｏｌｌ，Ｉｎｃ）（精製Ｉ型コラーゲンタンパク質ベースの包帯材）、ＣｏｌｌａＧＵＡＲＤ  Ａｇ（感染創傷もしくは感染症の危険性がある創傷のための、銀を浸透させたコラーゲンベースの生理活性包帯材）、ＤｅｒｍａＳＩＬ（商標）（深く、ひどく滲出性の創傷のためのコラーゲン合成気泡複合包帯材）などの、例えば銀含有薬剤を含む、全身もしくは局所クリームもしくはゲルを含む抗菌剤；２）細胞療法；３）例えば、ＮＧＦ、ＮＴ３、ＢＤＧＦ、インテグリン、プラスミン、セマフォリン、血液由来成長因子、ケラチノサイト成長因子、組織成長因子、ＴＧＦアルファ、ＴＧＦベータ、ＰＤＧＦ（３つのサブタイプのうちの１もしくは複数が使用されうる：ＡＡ、ＡＢ、およびＢ）、ＰＤＧＦ−ＢＢ、ＴＧＦベータ３、ＴＧＦβ３、ＴＧＦβ１、およびＴＧＦβ２の相対的なレベルを調整する因子（例えばマンノース−６−リン酸）、例えばエストロゲン、エストラジオール、もしくはエチニルエストラジオール、ジエノエストロール、メストラノール、エストラジオール、エストリオール、結合型エストロゲン、ピペラジンエストロンスルフェート、スチルベストロール、ホスフェストロール四ナトリウム、リン酸ポリエストラジオール、チボロン、フィトエストロゲン、１７−ベータ−エストラジオールからなる群から選択される、エストロゲン受容体アゴニストを含む性ステロイド；チモシン−ベータ−４などのような胸腺ホルモン、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、線維芽細胞成長因子（例えばＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ７）、ケラチノサイト成長因子、ＴＮＦ、例えばＩＬ−１０、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、およびＩＬ−１０ならびにそのモジュレータなどのような炎症応答モジュレータのインターロイキンファミリー；ＩＮＦ（ＩＮＦアルファ、ベータ、およびデルタ）；アクチビンもしくはインヒビンの刺激薬ならびにインターフェロンガンマプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）およびアデノシン３’，５’環状一リン酸（ｃＡＭＰ）経路の媒介物質の阻害剤；アデノシンＡ１アゴニスト、アデノシンＡ２アゴニストを含む、創傷治癒を促進するために創傷に導入されるサイトカイン、成長因子、もしくはホルモン（天然および合成の両方）、または５）例えば、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＡ、ＩＧＦ；ＩＧＦ−１、炎症誘発性サイトカイン、ＧＭ−ＣＳＦ、およびレプチンの天然もしくは合成の両方の相同体、アゴニスト、およびアンタゴニストを含む、創傷治癒に有用な他の薬剤、ならびに６）ＩＧＦ−１およびＫＧＦ  ｃＤＮＡ、自己由来血小板ゲル、次亜塩素酸（Ｓｔｅｒｉｌｏｘ（登録商標）、リポ酸、一酸化窒素シンターゼ３、マトリックスメタロプ��テイナーゼ９（ＭＭＰ−９）、ＣＣＴ−ＥＴＡ、アルファｖベータ６インテグリン、成長因子活性化線維芽細胞、およびデコリン、銀含有創傷包帯材、Ｘｅｎａｄｅｒｍ（商標）、パパイン創傷排膿促進剤、ラクトフェリン、サブスタンスＰ、コラーゲン、および銀−ＯＲＣ、胎盤アルカリホスファターゼもしくは胎盤成長因子、ヘッジホッグシグナル伝達のモジュレータ、コレステロール合成経路のモジュレータ、およびＡＰＣ（活性化プロテインＣ）、ケラチノサイト成長因子、ＴＮＦ、トロンボキサンＡ２、ＮＧＦ、ＢＭＰ骨形成タンパク質、ＣＴＧＦ（結合組織成長因子）、創傷治癒ケモカイン、デコリン、乳酸誘発性血管新生のモジュレータ、肝油、胎盤アルカリホスファターゼもしくは胎盤成長因子、およびチモシンベータ４が含まれうるが、これらに限定されない。特定の実施形態において、創傷治癒に有用な１、２、３、４、５、または６の薬剤は、組み合わせて使用されうる。
【０１２１】
上記の創傷治癒に有用な薬剤（例えば成長因子およびサイトカインを含む）は、天然で存在する多型（例えば成長因子またはサイトカインの多型）をすべて包含することを理解されたい。さらに、機能的断片、創傷治癒剤のうちの１つを含むキメラタンパク質またはその機能的断片、創傷治癒に有用な薬剤の１または複数のアミノ酸の類似性の置換によって得られる相同体、および種相同体が包含される。創傷治癒に有用な１または複数の薬剤は、組換えＤＮＡ技術の産物であってもよく、創傷治癒に有用な１または複数の薬剤は、トランスジェニック技術の産物でありうることが企図される。例えば、血小板由来成長因子は、組換えＰＤＧＦまたはＰＤＧＦのコード配列を含む遺伝子治療ベクターの形態で提供されうる。
【０１２２】
断片またはその部分改変形態は、追加の機能性をもちろん有していてもよいが、因子の生物学的または創傷治癒の機能性を保持する、創傷治癒剤の断片または部分改変形態を指す。部分改変は、例えば、アミノ酸残基の付加、欠失、または置換によるものでありうる。例えば、置換は、保存的置換でありうる。したがって、部分改変分子は、創傷治癒剤の相同体でありうる。それらは、例えば、前記因子と少なくとも約４０％の相同性を有していてもよい。それらは、例えば、前記因子と少なくとも約５０、６０、７０、８０、９０、または９５％の相同性を有する。例えば、特定の実施形態において、ＩＬ−１０またはその断片もしくは部分改変形態は、約１μＭおよび約１０μＭの間の濃度で投与されうる。それは、約２．５μＭおよび約５μＭの間の濃度で投与されうる。ある他の実施形態において、ＩＬ−１０またはその断片もしくは部分改変形態は、創傷治癒の直前に投与されうるが、損傷の約７日間以内に投与される場合、有効である可能性がある。それは、少なくとも２度投与することができる。
【０１２３】
抗微小管剤
例示的な抗微小管剤には、例えば、ジテルペノイド（例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、およびその誘導体または類似体）、ならびにビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビン）、白金配位錯体（例えば、シスプラチンおよびカルボプラチン）が含まれる。
【０１２４】
投与製剤および投与
（代表的には、本明細書で考察される製剤形態の）本発明の抗コネキシン剤（ＯＤＮを含む）は、本明細書で言及される疾患または状態のいずれかを有する対象など、治療を必要とする対象に投与することができる。こうして、対象の状態を改善することができる。したがって、抗コネキシン剤および抗コネキシン製剤は、治療による対象の身体の処置に用いることができる。これらは、本明細書で言及される状態のいずれかを治療する薬剤の製造において用いることができる。
【０１２５】
したがって、本発明により、細胞間情報伝達を一過性の様式および部位特異的な様式で下方調節しうる製剤が提供される。上記抗コネキシン剤は、薬学的に許容される担体と都合良く製剤して、所望の最終濃度をもたらし得る。
【０１２６】
抗コネキシン剤は、実質的に単離形態で存在しうる。生成物は、生成物の意図される目的に干渉しない担体または希釈剤と混合することができ、これをなおも実質的に単離状態にあるとみなしうることが理解される。本発明の生成物はまた、実質的に精製形態の場合もあり、この場合、生成物は一般に、ポリヌクレオチド（または他の抗コネキシン剤）の、または調製物の乾燥質量の、約８０％、８５％、または９０％、例えば、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％を含む。
【０１２７】
意図される投与の経路に応じて、本発明の医薬品、医薬組成物、組合せ調製物、および薬剤は、例えば、溶液、懸濁液、点滴、軟膏剤（ｓａｌｖｅｓ）、クリーム、ゲル、泡沫、軟膏（ｏｉｎｔｍｅｎｔ）、エマルジョン、ローション、ペイント、持続放出製剤、または粉末の形態をとる可能性があり、（１または複数の）有効成分の約０．０１％〜約１％、（１または複数の）有効成分の約１％〜約５０％、または（１または複数の）有効成分の約２％〜約６０％、（１または複数の）有効成分の約２％〜約７０％、あるいは（１または複数の）有効成分の約９０％までを含有することが典型的である。他の適切な製剤は、プロニックゲルベースの製剤、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）ベースの製剤、およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ｈｙｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｍｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）（ＨＰＭＣ）ベースの製剤を含む。他の有用な製剤は、徐放調製物または遅延放出調製物を含む。
【０１２８】
ゲルまたはゼリーは、ゼラチン、トラガカント、またはセルロース誘導体を含むがこれらに限定されない適切なゲル化剤を用いて作製することができ、保湿剤、皮膚軟化剤、および防腐剤としてグリセロールを含みうる。軟膏は、脂肪基剤、蝋基剤、または合成基剤中に組み込まれた有効成分からなる半固体調製物である。適切なクリームの例は、油中水エマルジョンおよび水中油エマルジョンを含むがこれらに限定されない。油中水クリームは、セチルアルコールまたはセトステアリルアルコールなどの脂肪族アルコールによる乳化剤および乳化蝋と類似するがこれらに限定されない特性を有する適切な乳化剤を用いて調合することができる。水中油クリームは、セトマクロゴール乳化蝋などの乳化剤を用いて調合することができる。適切な特性は、エマルジョンの粘稠度を変化させる能力、および広範なｐＨにわたる物理および化学の両面における安定性を含む。水溶性または混和性のクリーム基剤は、防腐剤系を含有する場合があり、また、許容される生理学的なｐＨを維持するように緩衝化することもできる。
【０１２９】
泡沫調製物は、不活性の噴霧剤を用いる適切なアプリケーターにより、加圧エアゾールキャニスターから送達するように調合することができる。泡沫基剤の製剤に適する賦形剤は、プロピレングリコール、乳化蝋、セチルアルコール、およびステアリン酸グリセリルを含むがこれらに限定されない。潜在的な防腐剤は、メチルパラベンおよびプロピルパラベンを含む。
【０１３０】
本発明の抗コネキシン剤を薬学的に許容される担体または希釈剤と組合せて、医薬組成物を作製することが好ましい。適切な担体および希釈剤は、等張性の食塩液、例えば、リン酸塩緩衝化食塩液を含む。適切な希釈剤および賦形剤はまた、例えば、水、食塩液、デキストロース、グリセロールなど、およびこれらの組合せ物も含む。加えて、所望の場合、保湿剤または乳化剤、安定化剤またはｐｈ緩衝剤などの物質もまた存在しうる。
【０１３１】
「薬学的に許容される担体」という用語は、組成物を投与される個体に有害な抗体の生成をそれ自体では誘導せず、不適切な毒性なしに投与しうる任意の薬学的な担体を指す。適切な担体は、タンパク質、多糖、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリマーアミノ酸、およびアミノ酸コポリマーなどの大型でゆっくりと代謝される高分子でありうる。
【０１３２】
例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩などのような鉱酸塩、および酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、安息香酸塩などの有機酸塩など、薬学的に許容される塩もまた存在しうる。
【０１３３】
適切な担体物質は、局所投与用のクリーム、ローション、スプレー、泡抹、ゲル、エマルジョン、ローション、またはペイントのための基剤として一般に用いられる任意の担体またはビークルを含む。例は、乳化剤、炭化水素による基剤を含む不活性担体、乳化基剤、非毒性溶媒、または水溶性の基剤を含む。特に適切な例は、プルロニック、ＨＰＭＣ、ＣＭＣ、および他のセルロース基剤の成分、ラノリン、硬質パラフィン、液体パラフィン、軟質黄色パラフィン、または軟質白色パラフィン、白色蜜蝋、黄色蜜蝋、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、ジメチコーン、乳化蝋、ミリスチン酸イソプロピル、微晶質蝋、オレイルアルコール、およびステアリルアルコールを含む。
【０１３４】
薬学的に許容される担体またはビークルは、ゲルであることが好ましく、非イオン性ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーゲル、例えば、プルロニックゲル、好ましくはＰｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−１２７（ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐ．）であることが適切である。このゲルは、低温では液体であるが、生理学的温度では急速に固まり、これにより、ＯＤＮ成分の放出が適応部位またはその部位にすぐの近接部位に限定されるので特に好ましい。
【０１３５】
カゼイン、ゼラチン、アルブミン、膠、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、またはポリビニルアルコールなどの補助剤もまた、本発明の製剤中に組み入れることができる。
【０１３６】
他の適切な製剤は、プロニックゲル基剤の製剤、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）基剤の製剤、およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）基剤の製剤を含む。組成物は、局所投与、点滴投与、非経口投与、筋肉内投与、皮下投与、または経皮投与を含む、任意の所望の送達形態に応じて調合することができる。他の有用な製剤は、徐放調製物または遅延放出調製物を含む。
【０１３７】
抗コネキシン剤が、ポリヌクレオチドなどの核酸である場合、哺乳動物細胞による核酸の取込みは、複数種の公知のトランスフェクション法、例えば、トランスフェクション剤の使用を含むトランスフェクション法により増強される。このような技法は、ポリヌクレオチドを含む一部の抗コネキシン剤と共に用いることができる。投与される製剤は、このようなトランスフェクション剤を含有しうる。これらの薬剤の例は、陽イオン剤（例えば、リン酸カルシウムおよびＤＥＡＥデキストラン）およびリポフェクション剤（例えば、ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍ（商標）およびｔｒａｎｓｆｅｃｔａｍ（商標））、ならびに界面活性剤を含む。
【０１３８】
抗コネキシン剤がポリヌクレオチドを含む場合、製剤がポリヌクレオチドの細胞透過を補助する界面活性剤をさらに含むか、または製剤が任意の適切な充填剤を含有すると好都合である。ＤＭＳＯなど、任意の適切な無毒性界面活性剤を組み入れることができる。代替的に、尿素などの経皮透過剤も組み入れることができる。
【０１３９】
所与の対象または状態に対して有効な用量は、日常的な実験または当技術分野において公知であるかもしくは将来的に開発される他の方法により決定することができる。例えば、ある範囲の用量値を調合するために、細胞培養アッセイおよび動物試験を用いることができる。このような化合物の用量は、集団の少なくとも５０％に対して治療的に有効な用量内にあり、このレベルにおいてほとんどまたはまったく毒性を示さないことが好ましい。
【０１４０】
本発明の方法および組成物において用いられる各抗コネキシン剤の有効用量は、用いられる１または複数の特定の抗コネキシン剤、組合せのパートナー、投与方式、投与頻度、治療される状態、治療される状態の重症度、投与経路、治療される患者部分集団の必要、またはその患者の異なる必要がその患者に特異的な年齢、性別、体重、患者の全身の状態、関連する治療状態に起因しうる個々の患者の必要を含むいくつかの因子に応じて異なりうる。
【０１４１】
適切な用量は、対象の体重ｋｇ当たりの抗コネキシン剤の量に基づき得、約０．００１から約１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば約０．０１から約０．４ｍｇ／ｋｇ体重を含む。しかし、適切な用量は、約０．００１から約０．１ｍｇ／ｋｇ体重、例えば約０．０１から約０．０５０ｍｇ／ｋｇ体重でありうる。約１から１００、約１００〜２００、約２００〜３００、約３００〜４００、および約４００〜５００マイクログラム以上、最大約７５０〜１０００マイクログラムの用量が、特定の指示では適切である。
【０１４２】
患者に抗コネキシン剤が投与される場合の用量は、患者の年齢、体重、および全般的な状態、治療される状態、ならびに投与される特定の抗コネキシン剤などの、各種の因子に依存する。
【０１４３】
抗コネキシン剤の適切な治療有効用量は、約０．０１〜約０．４ｍｇ／ｋｇ体重など、約０．００１〜約１ｍｇ／ｋｇ体重でありうる。しかし、適切な用量は、約０．０１〜約０．０５０ｍｇ／ｋｇ体重など、約０．００１〜約０．１ｍｇ／ｋｇ体重でありうる。
【０１４４】
約１〜１００、１００〜２００、１００〜３００または２００〜３００、１００〜４００または２００〜４００または３００〜４００、および１００〜５００または２００〜５００または３００〜５００または４００〜５００マイクログラムの治療有効用量の抗コネキシン剤が適切である。約１〜１０００マイクログラムの用量もまた適切である。最大２ミリグラムの用量もまた用いることができる。１または複数の抗コネキシン剤が包帯材の形態で提供される場合、用量は適切な形で調整され、所望の総用量投与を維持するよう上方に調整されることが典型的である。
【０１４５】
代替的に、抗コネキシンオリゴヌクレオチドまたは抗コネキシンペプチド模倣剤の場合、組成物中における各ギャップジャンクション調節剤の用量は、それが適用される領域のサイズ、長さ、深さ、面積、または容積に対する組成物の濃度を基準として決定することができる。例えば、一部の局所適用において、医薬組成物の用量は、医薬組成物の質量（例えば、グラム）または適用領域の長さ、深さ、面積、もしくは容積当たりの医薬組成物の濃度（例えば、μｇ／ｕｌ）に基づいて計算することができる。有用な用量は、創傷サイズの平方センチメートル当たり約１〜約１０マイクログラムの範囲にある。一部の用量は、創傷サイズの平方センチメートル当たり約１〜２、約１〜５、約２〜４、約５〜７、および約８〜１０マイクログラムである。他の有用な用量は、創傷サイズの平方センチメートル当たり約１０マイクログラムを超え、創傷サイズの平方センチメートル当たり少なくとも約１５マイクログラム、創傷サイズの平方センチメートル当たり少なくとも約２０マイクログラム、創傷サイズの平方センチメートル当たり少なくとも約２５マイクログラム、創傷サイズの平方センチメートル当たり約３０マイクログラム、創傷サイズの平方センチメートル当たり少なくとも約３５マイクログラム、創傷サイズの平方センチメートル当たり少なくとも約４０マイクログラム、創傷サイズの平方センチメートル当たり少なくとも約５０マイクログラム、および創傷サイズの平方センチメートル当たり少なくとも約１００〜少なくとも約１５０マイクログラムを含む。他の用量は、平方センチメートル当たり約１５０〜２００マイクログラム、平方センチメートル当たり約２００〜２５０マイクログラム、平方センチメートル当たり約２５０〜３００マイクログラム、平方センチメートル当たり約３００〜３５０マイクログラム、平方センチメートル当たり約３５０〜４００マイクログラム、および平方センチメートル当たり約４００〜５００マイクログラムを含む。
【０１４６】
一部の実施形態において、抗コネキシン剤組成物は、治療部位および／または治療部位に隣接して、約０．０１マイクロモル（μＭ）または０．０５μＭ〜約２００μＭ、  または最大３００μＭ、または最大１０００μＭ、または最大２０００μＭ、または最大３２００μＭ以上の最終濃度、およびこれらの用量数値内にある任意の用量および用量範囲で適用することができる。アンチセンスポリヌクレオチド組成物は約０．０５μＭ〜約１００μＭの最終濃度で適用されることが好ましく、抗コネキシン剤組成物は約１．０μＭ〜約５０μＭの最終濃度で適用されることがより好ましく、抗コネキシン剤組成物は約５〜１０μＭ〜約３０〜５０μＭの最終濃度で適用されることがより好ましい。加えて、組合わされた抗コネキシン剤組成物は約８μＭ〜約２０μＭの最終濃度で適用され、また代替的に、抗コネキシン剤組成物は約１０μＭ〜約２０μＭの最終濃度、または約１０〜約１５μＭの最終濃度で適用される。他の一部の実施形態において、抗コネキシン剤は、約１０μＭの最終濃度で適用される。さらに別の実施形態において、抗コネキシン剤組成物は、約１〜１５μＭの最終濃度で適用される。他の実施形態において、抗コネキシン剤は、約２０μＭ、３０μＭ、４０μＭ、５０μＭ、６０μＭ、７０μＭ、８０μＭ、９０μＭ、１００μＭ、１０〜２００μＭ、２００〜３００μＭ、３００〜４００μＭ、４００〜５００μＭ、５００〜６００μＭ、６００〜７００μＭ、７００〜８００μＭ、８００〜９００μＭ、９００〜１０００、または１０００〜１５００μＭ、または１５００μＭ〜２０００μＭ、または２０００μＭ〜３０００μＭ以上で適用される。
【０１４７】
抗コネキシン剤の投与量は、例えば、約０．１〜１、１〜２、２〜３、３〜４、または４〜５マイクログラム（μｇ）、約５〜約１０μｇ、約１０〜約１５μｇ、約１５〜約２０μｇ、約２０〜約３０μｇ、約３０〜約４０μｇ、約４０〜約５０μｇ、約５０〜約７５μｇ、約７５〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約２５０μｇ、および２５０μｇ〜約５００μｇを含む。上記で言及した通り、０．５〜約１．０ミリグラム以上の投与量もまた提供される。投与容量は治療される部位のサイズに依存し、例えば、約２５〜１００μＬ〜約１００〜２００μＬ、約２００〜５００μＬ〜約５００〜１０００μＬの範囲でありうる。より大きな治療部位には、ミリリットル用量もまた適切である。
【０１４８】
さらに他の用量は、本明細書に記載の各薬剤に対して、１日当たり約１ナノグラム（ｎｇ）／ｋｇ体重〜約１ｍｇ／ｋｇ体重のレベルである。一部の実施形態において、各対象化合物の用量は一般に、ｋｇ体重当たり約１ｎｇ〜約１マイクログラム、ｋｇ体重当たり約１ｎｇ〜約０．１マイクログラム、ｋｇ体重当たり約１ｎｇ〜約１０ｎｇ、ｋｇ体重当たり約１０ｎｇ〜約０．１マイクログラム、ｋｇ体重当たり約０．１マイクログラム〜約１マイクログラム、ｋｇ体重当たり約２０ｎｇ〜約１００ｎｇ、ｋｇ体重当たり約０．００１ｍｇ〜約０．０１ｍｇ、ｋｇ体重当たり約０．０１ｍｇ〜約０．１ｍｇ、またはｋｇ体重当たり約０．１ｍｇ〜約１ｍｇの範囲である。一部の実施形態において、各対象化合物の用量は一般に、ｋｇ体重当たり約０．００１ｍｇ〜約０．０１ｍｇ、ｋｇ体重当たり約０．０１ｍｇ〜約０．１ｍｇ、ｋｇ体重当たり約０．１ｍｇ〜約１ｍｇの範囲である。複数種の抗コネキシン剤を用いる場合、各抗コネキシン剤の用量は、他方の用量と同じ範囲である必要はない。例えば、１種の抗コネキシン剤の用量はｋｇ体重当たり約０．０１ｍｇ〜約１０ｍｇの可能性があり、別の抗コネキシン剤の用量はｋｇ体重当たり約０．１ｍｇ〜約１ｍｇの可能性がある。
【０１４９】
一部の実施形態において、抗コネキシン剤組成物は、治療部位および／または治療部位に隣接して、約０．０１マイクロモル濃度（μＭ）または０．０５μＭ〜約２００μＭの最終濃度、で適用することができる。アンチセンスポリヌクレオチド組成物は約０．０５μＭ〜約１００μＭの最終濃度で適用されることが好ましく、抗コネキシン剤組成物は約１．０μＭ〜約５０μＭの最終濃度で適用されることがより好ましく、抗コネキシン剤組成物は約５〜１０μＭから約３０〜５０μＭの最終濃度で適用されることがより好ましい。加えて、組合わされた抗コネキシン剤組成物は約８μＭ〜約２０μＭの最終濃度で適用され、また代替的に、抗コネキシン剤組成物は約１０μＭ〜約２０μＭの最終濃度、または約１０〜約１５μＭの最終濃度で適用される。他の一部の実施形態において、抗コネキシン剤は、約１０μＭの最終濃度で適用される。さらに別の実施形態において、抗コネキシン剤組成物は、約１〜１５μＭの最終濃度で適用される。抗コネキシン剤の投与量は、例えば、約０．１〜１、１〜２、２〜３、３〜４、または４〜５マイクログラム（μｇ）、約５〜約１０μｇ、約１０〜約１５μｇ、約１５〜約２０μｇ、約２０〜約３０μｇ、約３０〜約４０μｇ、約４０〜約５０μｇ、約５０〜約７５μｇ、約７５〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約２５０μｇ、および２５０μｇ〜約５００μｇを含む。上記で言及した通り、０．５〜約１．０ミリグラム以上の投与量もまた提供される。投与容量は治療される部位のサイズに依存し、例えば、約２５〜１００μＬから約１００〜２００μＬ、約２００〜５００μＬから約５００〜１０００μＬの範囲でありうる。より大きな治療部位には、ミリリットル用量もまた適切である。
【０１５０】
さらに他の投与量レベルは、本明細書において記載される薬剤のそれぞれの１日当たり約１ナノグラム（ｎｇ）／ｋｇ体重から約１ｍｇ／ｋｇ体重である。特定の実施形態において、対象の化合物のそれぞれの投与量は、通常、体重ｋｇ当たり約１ｎｇから約１マイクログラム、体重ｋｇ当たり約１ｎｇから約０．１マイクログラム、体重ｋｇ当たり約１ｎｇから約１０ｎｇ、体重ｋｇ当たり約１０ｎｇから約０．１マイクログラム、体重ｋｇ当たり約０．１マイクログラムから約１マイクログラム、体重ｋｇ当たり約２０ｎｇから約１００ｎｇ、体重ｋｇ当たり約０．００１ｍｇから約００１ｍｇ、体重ｋｇ当たり約０．０１ｍｇから約０．１ｍｇ、または体重ｋｇ当たり約０．１ｍｇから約１ｍｇの範囲である。特定の実施形態において、対象の化合物のそれぞれの投与量は、通常、体重ｋｇ当たり約０．００１ｍｇから約０．０１ｍｇ、体重ｋｇ当たり約０．０１ｍｇから約０．１ｍｇ、体重ｋｇ当たり約０．１ｍｇから約１ｍｇの範囲である。２つ以上の抗コネキシン剤を用いる場合、それぞれの抗コネキシン剤の投与量は、他方と同一の範囲である必要はない。例えば、１つの抗コネキシン剤の投与量は体重ｋｇ当たり０．０１ｍｇから約１０ｍｇであり得、別の抗コネキシン剤の投与量は、体重ｋｇ当たり約０．１ｍｇから約１ｍｇでありうる。
【０１５１】
上記組成物は、投与後少なくとも約０．５〜１時間、少なくとも約１〜２時間、少なくとも約２〜４時間、少なくとも約４〜６時間、少なくとも約６〜８時間、少なくとも約８〜１０時間、少なくとも約１２時間、または少なくとも約２４時間にわたって上記コネキシンタンパク質の発現を下方調節するか、またはギャップジャンクションの形成もしくはコネクソンの開口を調節するのに十分な量で投与されると好都合である。
【０１５２】
対象発明の組成物および方法における各抗コネキシン剤の用量はまた、それが適用される領域のサイズ、長さ、深さ、面積、または容積に対する組成物の濃度を基準として決定することもできる。例えば、一部の局所適用および他の適用、例えば、点滴において、医薬組成物の用量は、医薬組成物の質量（例えば、マイクログラム）または適用領域の長さ、深さ、面積、もしくは容積当たりの医薬組成物の濃度（例えば、μｇ／ｕｌ）に基づいて計算することができる。
【０１５３】
したがって、抗コネキシンオリゴヌクレオチドまたは抗コネキシンペプチド模倣剤において、組成物におけるギャップジャンクション改変剤のそれぞれの投与量は、それを適用する領域のサイズ、長さ、深さ、広さ、または容量に関して組成物の濃度を参照することにより決定することができる。例えば、特定の局所的適用において、薬学的組成物の投与量は、適用領域の長さ、深さ、広さ、または容積当たりの、薬学的組成物の質量（例えばグラム）または薬学的組成物における濃度（例えば、ｕｇ／ｕｌ）に基づいて計算することができる。有用な投与量は、創傷のサイズの平方センチメートル当たり約１から約１０マイクログラムの範囲である。特定の投与量は、創傷のサイズの平方センチメートル当たり、約１〜２、約１〜５、約２〜４、約５〜７、および約８〜１０マイクログラムである。他の有用な投与量は、創傷のサイズの平方センチメートル当たり約１０マイクログラム超であり、創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約１５マイクログラム、創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約２０マイクログラム、創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約２５マイクログラム、創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約３０マイクログラム、創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約３５マイクログラム、創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約４０マイクログラム、創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約５０マイクログラム、および創傷のサイズの平方センチメートル当たり少なくとも約１００から少なくとも約１５０マイクログラムを含む。他の用量には、平方センチメートル当たり約１５０〜２００マイクログラム、平方センチメートル当たり約２００〜２５０マイクログラム、平方センチメートル当たり約２５０〜３００マイクログラム、平方センチメートル当たり約３００〜３５０マイクログラム、平方センチメートル当たり約３５０〜４００マイクログラム、および平方センチメートル当たり約４００〜５００マイクログラムが含まれる。
【０１５４】
本明細書において言及される全ての用量および用量範囲は、例えば抗コネキンシンオリゴヌクレオチドに適用可能である。これらの用量範囲はまた、例えば抗コネキシンペプチド、抗コネキシン模倣ペプチド、および抗コネキシンペプチド模倣剤に対して適用可能である。
【０１５５】
好都合には、抗コネキシン剤は、投与後の少なくとも約０．５から１時間、少なくとも約１〜２時間、少なくとも約２〜４時間、少なくとも約４〜６時間、少なくとも約６〜８時間、少なくとも約８〜１０時間、少なくとも約１２時間、または少なくとも約２４時間にわたり、コネキシンタンパク質の発現を下方調節するのに、またはギャップジャンクションの形成もしくはコネキシンの開口を調整するために十分な量で投与される。
【０１５６】
本発明の組成物および方法における抗コネキシン剤のそれぞれの投与量はまた、それを適用する領域のサイズ、長さ、深さ、広さ、または容積に関して組成物の濃度を参照することにより決定することができる。例えば、特定の局所的および他の適用、例えば滴下注入において、薬学的組成物の投与量は、適用領域の長さ、深さ、広さ、または容積当たりの、薬学的組成物の質量（例えばマイクログラム）または薬学的組成物における濃度（例えば、μｇ／μｌ）に基づいて計算することができる。
【０１５７】
本明細書で言及される通り、組合せで投与される抗コネキシンポリヌクレオチド、抗コネキシンペプチドもしくは抗コネキシンペプチド模倣剤、またはこれらの一方もしくは両方との組合せで投与される他の抗コネキシン剤の用量は、単独で施される場合に投与される用量よりも下方に調整することができる。
【０１５８】
用量は、単一のまたは分割された適用で投与することができる。用量は、１回投与することができるか、または適用を繰り返すことができる。典型的には、適用は、創傷治癒が促進されるまで週に１回繰り返されるか、または、創傷治癒が遅れるかもしくは止まっている場合には反復適用が行われうる。投与は、３〜７日以上あけて適用されうる。慢性的な創傷の場合、例えば、週に１回もしくは週に２回で、または、例えば創傷治癒が遅れているかもしくは止まっている場合には月に１回もしくは他の頻度で、反復適用を行うことができる。特定の眼内使用などのいくつかの指示では、最大１時間に１回の、より頻繁な投与量が採用されうる。
【０１５９】
したがって、例えばコネキシンの発現の下方調節、またはコネキシンの開口もしくは活性の遮断もしくは阻害のための、１または複数の抗コネキシン剤の投与は、細胞間の連絡、またはコネキシンの制御の場合では細胞外空隙内への損失を調整し、さらなる細胞の損失もしくは傷害または傷害の予後を最小にする。
【０１６０】
送達期間は、下方調節が誘発される部位および所望の治療効果の両方に依存するが、約０．５〜１時間、約１〜２時間、約２〜４時間、約４〜６時間、約６〜８時間、または約２４時間、またはそれ以上にわたる連続的な送達または徐放送達が提供される。本発明に従うと、これは、製剤内に、１または複数の抗コネキシン剤を、薬学的に許容される担体または媒体と共に、とりわけ連続的な投与または徐放投与のための製剤形態で含めることにより達成される。
【０１６１】
上記のように、本発明の１または複数の薬剤は、例えば、創傷化の前に、その際に、その直後に投与することができるか、または、例えば、創傷化の後、約１８０日、約１２０日、約９０日、約６０日、もしくは約３０日以内、しかし好ましくは約１０日、約９日、約８日、約７日、約６日、約５日、約４日、約３日、もしくは約２日以内、もしくはそれ未満、最も好ましくは約２４時間、約１２時間、約１０時間、約９時間、約８時間、約７時間、約６時間、約５時間、約４時間、約３時間、約２時間以内、もしくは約６０分、約４５分、約３０分、約１５分、約１０分、約５分、約４分、約３分、約２分、約１分以内に投与することができる。
【０１６２】
当業者であればいかなる特定の患者および症状についても最適な投与経路および投与量を決定するため、本明細書において記載される投与経路および投与量は指針にすぎない。
【０１６３】
本明細書において言及されるかまたは記載される、創傷および／または症状を有する対象を治療する方法のいかなるものも、本明細書に記載の任意の用量、剤形、製剤、および／または組成物の投与を利用しうる。
【０１６４】
本明細書において記載される医薬組成物の調製物に適した、創傷治癒に有用な薬剤は、当技術分野において公知の方法を使用して調製され、投与されうる（例えば、米国特許第７，０９８，１９０号、第６，３１９，９０７号、第６，３３１，２９８号、第６，３８７，３６４号、第６，４５５，５６９号、第６，５６６，３３９号、第６，６９６，４３３号、第６，８５５，５０５号、第６，９００，１８１号、第７，０５２，６８４号、およびＥＰ１１００５２９  Ｂ１を参照されたい）。各抗コネキシンポリヌクレオチドおよび創傷治癒に有用な薬剤の濃度は、他方と同じ範囲にある必要がない。他の量は、当業者らに公知であり、容易に決定されるであろう。例えば、本明細書において記載される様々な態様および実施形態に従う、適した組み合わせの投薬量および製剤は、「Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ＰＤＧＦ，  ＫＧＦ，  ＩＧＦ，  ａｎｄ  ＩＧＦＢＰ  ｆｏｒ  ｗｏｕｎｄ  ｈｅａｌｉｎｇ」と題する、Ｌｅｗｉｓに対するＵＳ６９０３０７８において記載される投薬レジメンに従って、投与されうる。
【０１６５】
投与される最初のおよび任意の続く投薬量は、患者の年齢、体重、状態、および治療されている疾患、創傷、障害、または生物学的状態に依存するであろう。創傷治癒に有用な薬剤に依存して、投与のための投薬量およびプロトコールは、変動するであろう、また、投薬量はまた、選択される投与の方法、例えば局部または全身投与にも依存するであろう。
【０１６６】
創傷治癒に有用な薬剤は、内部にまたは外部に適用されてもよく、創傷を示す任意の組織に誘導されうる。ＩＧＦの局所投与については、例えば、酸化亜鉛製剤を適用することができ、これは、Ｔａｒｎｏｗら、Ｓｃａｎｄ  Ｊ．  Ｐｌａｓｔ  Ｒｅｃｏｎｓｔｒ  Ｈａｎｄ  Ｓｕｒｇ．  ２８号：２５５〜２５９頁（１９９４年）において記載されるように、ＩＧＦの局部生産を誘発する。ＰＤＧＦの有効な用量は、米国特許第４，８６１，７５７号において記載されるように、局所適用された場合、５ｎｇ／ｍｍ２またはそれ以上であり、ＰＤＧＦ（例えばＰＤＧＦ−ＡＡ、ＰＤＧＦ−ＢＢ、またはＰＤＧＦ−ＡＢ）のアイソフォームについて少なくとも１ｎｇ／ｍｌの局部濃度であり、Ｌｅｐｉｓｔｏら、Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍ  ２０９号：３９３〜３９９頁（１９９５年）において記載されるように、線維芽細胞の集団に適用される約３０ｎｇ／ｍｌまでの局部濃度であることが報告された。ＰＤＧＦは、約１０μｇ／ｇｍ〜約５００μｇ／ｇｍのゲル、約２０μｇ／ｇｍ〜約２００μｇ／ｇｍ、および約３０μｇ／ｇｍ〜約１００μｇ／ｇｍのゲル、最適には約１００μｇ／ｇｍのゲルの濃度のカルボキシメチルセルロースゲル製剤で投与することができる。ＰＤＧＦの有効性は、投与される約３μｇ／ｍｌ溶液〜約３００μｇ／ｍｌの溶液の範囲内で達成された。
【０１６７】
約５μｇ／ｍｌの濃度の約５０μｌのＫＧＦは、Ｓｏｔｏｚｏｎｏら、Ｉｎｖｅｓｔ．
Ｏｐｔｈａｌ．  Ｖｉｓ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３６号：１５２４〜２９頁（１９９５年）において記載されるように、上皮組織への局所適用による創傷治癒に有効である可能性がある。米国特許第４，８６１，７５７号において記載されるように、ＰＤＧＦと共に同時投与される場合の、ＩＧＦの有効量は、少なくとも２．５ｎｇ／ｍｍ２〜約５ｎｇ／ｍｍ２の範囲にあり、ＩＧＦに対するＰＤＧＦの比は、約１：１０〜約２５：１の重量対重量の範囲にあり、最も有効な比は、約１：１〜約２：１の重量対重量のＩＧＦに対するＰＤＧＦである。ＩＧＦと組み合わせて投与されるＩＧＦＢＰは、Ｊｙｕｎｇら、Ｓｕｒｇｅｒｙ  １１５号：２３３〜２３９頁（１９９４年）において記載されるように、約１１：１のＩＧＦ：ＩＧＦＢＰのモル比の、約１．５μｇのリン酸化ＩＧＦＢＰと約５μｇのＩＧＦの用量レベルで、創傷治癒を増加させることが示された。
【０１６８】
ポリペプチド治療薬、例えばＰＤＧＦ、ＫＧＦ、ＩＧＦ、およびＩＧＦＢＰポリペプチドの投与については、投薬量は、適用が対象とする組織の約５μｇ〜約５０μｇ／ｋｇ、さらに約５０μｇ〜約５ｍｇ／ｋｇ、さらに組織の約１００μｇ〜約５００μｇ／ｋｇ、および約２００〜約２５０μｇ／ｋｇの範囲とすることができる。ポリヌクレオチド治療薬については、例えば遺伝子治療投与プロトコールにおいて、組織標的投与についての、患者におけるポリヌクレオチドの発現強度に依存して、ＰＤＧＦ、ＫＧＦ、ＩＧＦ、およびＩＧＦＢＰコード配列を含む、発現可能な構築物を含有するベクターは、注射または投与当たり、遺伝子治療プロトコールにおける局部投与について約１００ｎｇ〜約２００ｍｇのＤＮＡ、遺伝子治療プロトコールにおける局部投与の間、さらに約５００ｎｇ〜約５０ｍｇ、さらに約１μｇ〜約２ｍｇのＤＮＡ、約５μｇのＤＮＡ〜約５００μｇのＤＮＡ、および約２０μｇ〜約１００μｇならびに約２５０μｇの範囲で投与することができる。そのため、形質転換および発現の作用の方法および有効性などのような因子は、ＤＮＡ治療薬の投与についての基本的な有効性に必要な投薬量をもたらすであろう、考慮すべき事項である。より高い発現が所望される場合、組織のより大きな領域にわたって、より多い量もしくは同じ量のＤＮＡが、投与の連続的なプロトコールにおいて再投与されるまたは異なる隣接するもしくは近い組織部分、例えば創傷部位への数回の投与が、正の治療結果をもたらすために必要とされうる。
【０１６９】
本明細書において記載される医薬組成物の調製に適した、治療剤および抗微小管剤は、当技術分野において公知の方法を使用して製剤され、投与されうる。投与される最初のおよび任意の続く投薬量は、患者の年齢、体重、状態、および治療されている疾患、創傷、障害、または生物学的状態に依存するであろう。治療薬に依存して、投与のための投薬量およびプロトコールは、変動するであろう、また、投薬量はまた、選択される投与の方法、例えば局部または全身投与にも依存するであろう。
【０１７０】
本明細書において述べられるように、抗コネキシンポリヌクレオチドまたは組み合わせて投与されるもう一方の薬剤の用量は、単独で与えられる場合に投与される用量から下方調節することができる。
【０１７１】
数種の薬剤の併用使用は、異なる薬剤の効果の開始および期間が相補的である可能性があるので、あらゆる個々の薬剤に必要とされる投薬量を低下させる可能性がある。好ましい実施形態において、１または複数の抗コネキシンポリヌクレオチドならびに１または複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤の併用使用は、付加的な、相乗的な、または高度に付加的な効果を有する。
【０１７２】
一部の場合では、１または複数の抗コネキシンポリヌクレオチドならびに１または複数の治療剤、創傷治癒に有用な１または複数の薬剤、および／または１または複数の抗微小管剤の組み合わせは、相加効果を有する。他の場合において、組み合わせは、相加効果よりも高い効果を有しうる。本明細書では、そのような効果を「超相加」効果と称し、相乗的なまたは相乗的に増した相互作用によるものでありうる。
【０１７３】
用語「創傷治癒の超相加的な促進」は、抗コネキシンポリヌクレオチドならびに１または複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤の組み合わせの投与によってもたらされた創傷治癒が、薬剤のうちの任意のいずれかの単独の個々の投与によってもたらされる創傷治癒の総量よりも統計的に有意に高いという意味を指す。抗コネキシンポリヌクレオチドならびに１または複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤の併用投与によってもたらされるものが、個々の化合物について予想される相加的な値よりも「統計的に有意に高い」かどうかは、本明細書において記載されるおよび／または当業者に公知である様々な統計的方法によって決定されうる。用語「相乗的な」は、抗コネキシンポリヌクレオチドならびに１または複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤の両方が、創傷治癒を促進するまたは線維化および瘢痕を低下させるための能力を個々に有する一種の超相加的な阻害を指す。用語「相乗的に増した」は、抗コネキシンポリヌクレオチドまたは１もしくは複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤のうちの１つが、創傷治癒を促進するための能力の増加を個々に有する一種の超相加的な効果を指す。
【０１７４】
一般に、それらの治療群それぞれにおいて個々の治療によりもたらされる平均創傷治癒増加の合計と比較した場合、組合せ治療が、治療群において統計学的に有意に超相加的な（ｓｕｐｒａ−ａｄｄｉｔｉｖｅ）平均創傷治癒の増大をもたらすかどうかを判定することにより強化を評価することができる。平均創傷治癒の増大は、対照群の平均創傷治癒と、治療群の平均創傷治癒との間の差として計算することができる。創傷治癒の増加率である「作用率（ｆｒａｃｔｉｏｎ  ａｆｆｅｃｔｅｄ）」（Ｆａ）は、治療群における平均創傷治癒の増加を、対照群における平均創傷治癒で除することにより計算することができる。統計学的に有意な強化に対する検定は、各治療群に対するＦａの計算を必要とする。組合せ治療に対して予測される相加Ｆａは、組合せのいずれかのエレメントを投与される群に由来する平均Ｆａの合計であると理解することができる。例えば、１試料による両側Ｔ検定を用いて、実験により得られる結果が偶然だけに起因する可能性はどの程度であるかを、ｐ値による測定の形で評価することができる。０．０５未満のｐ値は統計学的に有意である、すなわち、偶然だけに起因する可能性は低いと考えられる。したがって、組合せの結果として強化された超相加効果がもたらされるとみなすために、組合せ治療群に対するＦａは、単一エレメントによる治療群に対して予測される相加Ｆａよりも統計学的に有意に高度でなければならない。
【０１７５】
組合せ治療から相乗効果がもたらされるかどうかは、中央値効果／組合せ指標によるアイソボログラム法（Ｃｈｏｕ，  Ｔ．およびＴａｌａｌａｙ，  Ｐ．（１９８４年）、Ａｄ．  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇ．、第２２巻、２７〜５５頁）により評価することができる。この方法では、抗コネキシンポリヌクレオチド単独に対する、創傷治癒に有用な１または複数の薬剤単独に対する、および固定したモル比での２者の組合せに対する中央値効果プロットに由来するパラメータに基づき、異なる用量効果レベルに対する組合せ指数（ＣＩ）値を計算する。ＣＩ値が＆１ｔ；１は相乗効果を示し、ＣＩ−１は相加効果を示し、ＣＰ１はアンタゴニスト効果を示す。この解析は、ＣａｌｃｕＳｙｎ，Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ｆｏｒ  Ｄｏｓｅ  Ｅｆｆｅｃｔ  Ａｎａｌｙｓｉｓ（Ｂｉｏｓｏｆｔ（Ｄ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  ＵＫ）などのコンピュータソフトウェアツールを用いて実施することができる。
【０１７６】
組合せ療法について、超相加効果が存在するかどうかを解析するための、当技術分野において公知であるかまたは将来的に開発される任意の方法は、一つもしくは複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤と組み合わせて用いるのに適する抗コネキシンポリヌクレオチドのスクリーニングにおける使用が意図される。
【０１７７】
別の好ましい実施形態では、１または複数の抗コネキシンポリヌクレオチドと、一つもしくは複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤とを組み合わせて用いることにより、前記薬剤が単独で投与される場合の有効用量と比較して、任意のこのような薬剤の有効用量が低下する。一部の実施形態において、一つもしくは複数の抗コネキシンポリヌクレオチドと組み合わせて用いられる場合の薬剤の有効用量は、単独で用いられる場合の薬剤用量の約１／１５〜約１／２、約１／１０〜約１／３、約１／８〜約１／６、約１／５、約１／４、約１／３、または約１／２である。
【０１７８】
別の好ましい実施形態では、１または複数の抗コネキシンポリヌクレオチド、および１もしくは複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤を組み合わせて用いることにより、前記薬剤が単独で投与される場合の頻度と比較して、前記薬剤が投与される頻度が低下する。したがって、これらの組合せにより、所望の治療目標を達成するのにかつて必要とされた場合よりも低量および／または低頻度の投与で、各薬剤を用いることができる。
【０１７９】
用量は、単一のまたは分割された適用で投与することができる。用量は、１回投与することができるか、または適用を繰り返すことができる。反復適用は、典型的には、または創傷治癒が止まっているかもしくは遅れていると考えられうる場合には、およそ週に１回適用される。
【０１８０】
抗コネキシン剤（１または複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤を伴うかまたは伴わない）は、所望の結果を達成するいかなる様式で投与することもできる。好ましい方法には、管周囲投与（手術の時点での直接的な適用、または、内視鏡、超音波、ＣＴ、ＭＲＩ、もしくは蛍光透視鏡による誘導を用いるもの）、外科用インプラントの「被覆」、および手術部位での薬剤溶離ポリマーインプラントの配置が含まれる。好ましい実施形態において、０．５重量％から２０重量％の抗コネキシンポリヌクレオチドが、ポリマー担体（以下の実施例において記載される）内にロードされ、経時的に薬剤を放出する「ペースト」、「フィルム」、または「ラップ」として管周囲（腸間膜）表面に適用される。内視鏡手順の際、抗コネキシンポリマー調製物は、内視鏡内の送達ポートを介して、手術の際に操作される腹部および骨盤の器官の腸間膜に、「スプレー」として適用されうる。特に好ましい実施形態において、管周囲組成物は、約０．１重量％から約５重量％の抗コネキシンポリヌクレオチドである。別の好ましい実施形態において、約０．１％から約２０％またはそれ以上の抗コネキシン剤を含有するポリマー被覆が、外科用インプラント（例えば、胸部のインプラント、人工関節、血管移植片など）の表面に適用される。さらに別の好ましい実施形態において、約０．０１重量％から約２０重量％またはそれ以上の抗コネキシン剤を含有するポリマーインプラントが、手術部位に直接的に（例えば、副鼻腔、胸腔、腹腔、または神経手術の際の手術部位内に直接）適用される。
【０１８１】
別の実施形態において、約１から約１００μｇ／ｃｍ２（好ましくは約１０から約５０μｇ／ｃｍ２）の抗コネキシン剤を含有する洗浄液が、手術の際または手術の直後に用いられ、医師によって、手術の際にまたは腹腔内投与される。全ての実施形態において、他の抗コネキシンポリヌクレオチドが、ポリヌクレオチドの効力および認容性について調節された等しい用量で投与される。
【０１８２】
本発明の抗コネキシン剤は、同じ経路または異なる経路で投与され得る。抗コネキシン剤は、固体支持体（包帯材および他のマトリックスなど）および医薬製剤（ゲル、混合物、懸濁液、および軟膏など）を用いる局所投与を含むがこれらに限定されない局所投与（末梢投与または部位への直接投与）により送達されることが好ましい。一実施形態において、固体支持体は、生体適合膜または治療部位内への挿入を含む。別の実施形態において、固体支持体は、包帯材またはマトリックスを含む。本発明の一実施形態において、固体支持体組成物は、抗コネキシン剤が、アルギン酸塩、コラーゲン、または合成の生体吸収性ポリマーのマトリックスなどの徐放固体マトリックス中に分散される、徐放の固体支持体組成物でありうる。固体支持体組成物は、無菌であるかまたは低バイオバーデンであることが好ましい。一実施形態では、２つ以上の抗コネキシン剤を含む洗浄液を用いることができる。
【０１８３】
抗コネキシン剤は、例えば、局所的にまたは滴下注入によって（治療する部位またはその近辺で）投与することができる。好ましくは、抗コネキシン剤は、薬学的組成物を生産するために薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせられる。適切な担体および希釈剤には、等張生理食塩水溶液、例えばリン酸緩衝生理食塩水が含まれる。
【０１８４】
治療用薬剤は、関節内、関節周辺、腱周膜、または軟組織の注射によって投与することができる。治療用薬剤は、単回投与としてまたは複数回投与で注射することができる。本明細書において記載される方法および組成物は、例えば腹腔鏡技術を含む、当技術分野において公知の、またはその後開発された様々な方法を用いた投与でありうることが意図される。例示的な技術には、手術中の技術および／または直接的な注射、例えば注射の前の吸引；内側側副靭帯および外側側副靭帯の停止および起始、滑膜、ならびに四頭筋腱の先端への段階的な注射；前嚢および中臀筋の停止、ならびに後嚢および短外旋筋、中臀筋、ならびに大腿筋膜の先端への臀部注射が含まれうる。さらに、本明細書において記載される組成物は、「蓄積」効果をもたらすために、直接的にまたは手術中に関節包または骨洞に注射しうることが意図される。このような蓄積の効果は、持続放出の様式で薬剤送達を促進し得、それにより、生物学的利用能および／または分布が向上し、それが治療効率を増強させる。
【０１８５】
外傷性の出来事の後、（滅菌技術を用いた）針を用いて、治療用組成物を関節内に導入することができる。肘の場合においては、２５Ｇの針を橈骨頭および肘頭突起の間に導入する。動作の範囲は、許容される場合、または骨折が標準的なプロトコルにより治療されるケースにおいて、注射の直後に開始される。肩のケースにおいては、外側または後外側のアプローチを、２０Ｇから２５Ｇの１．５インチの針と共に用いることができる。膝のケースにおいては、抗コネキシン剤を導入するための同一のサイズの針を用いて、前内側に、前外側に、または上外側アプローチを介して、膝にアプローチすることができる。他の関節内注射法は、当技術分野において周知である。当業者であればいかなる特定の患者および症状についても最適な投与経路および投与量を容易に決定しうるため、上記の投与経路および投与量は指針にすぎない。
【０１８６】
言及の通り、抗コネキシン剤は、例えば、手術もしくは創傷前、その間、その直後、または例えば、組織損傷をもたらす手術または他の整形外科処置後、約１８０日以内、約１２０日以内、約９０日以内、約６０日以内、または約３０日以内に投与し得るが、好ましくはその後約１０日以内、約９日以内、約８日以内、約７日以内、約６日以内、約５日以内、約４日以内、約３日以内、または約２日以内に投与し得、最も好ましくはその後約２４時間以内、約１２時間以内、約１０時間以内、約９時間以内、約８時間以内、約７時間以内、約６時間以内、約５時間以内、約４時間以内、約３時間以内、約２時間以内、または創傷後約６０分以内、約４５分以内、約３０分以内、約１５分以内、約１０分以内、約５分以内、約４分以内、約３分以内、約２分以内、約１分以内に投与することができる。
【０１８７】
好都合には、組成物は、投与後の少なくとも約１〜２時間、少なくとも約２〜４時間、少なくとも約４〜６時間、少なくとも約６〜８時間、少なくとも約８〜１０時間、少なくとも約１２時間、または少なくとも約２４時間にわたり、１または複数の前記コネキシンタンパク質の発現を下方調節するために十分な量で投与される。
【０１８８】
医師により、任意の特定の患者および状態に対して最適な投与経路および用量が決定されるので、本明細書に記載の投与経路および用量は、指針だけのものとして容易に意図することができる。
【０１８９】
場合により、抗コネキシン剤は、１または複数の治療用薬剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤と共に製剤することができる。１または複数のこのような薬剤を含めることにより、慢性的な創傷の予防または治療に対する相乗的な効果が可能になる。１または複数のこのようなさらなる薬剤は、抗コネキシン剤と分離して、同時に、または逐次的に投与することができる。治療用薬剤には、例えば、抗感染剤、麻酔剤、鎮痛剤、抗生物質、睡眠薬、ならびにステロイド系および非ステロイド系の抗炎症性剤が含まれる。特定の実施形態において、１、２、３、４、５、または６つの治療用薬剤を組み合わせて用いることができる。
【０１９０】
本明細書で言及または説明される疾患、状態／または状態を有するか、その素因があるか、またはその危険性があると疑われる対象を治療する方法のいずれかでは、本明細書に記載の用量、剤形、製剤、および／または組成物のいずれかが投与されうる。
【０１９１】
包帯材およびマトリックス
一態様において、抗コネキシン剤は、単独で、あるいは１もしくは複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤と組み合わせて、包帯材またはマトリックスの形態で提供される。一部の実施形態では、本発明の１または複数の薬剤が直接的な適用のための液体組成物、半固体組成物、もしくは固体組成物の形態で提供されるか、あるいは組成物が包帯材ガーゼもしくはマトリックスなどの固体接触層の表面へと適用されるか、またはこの中へと組み込まれる。包帯材組成物は、例えば、流体またはゲルの形態で提供することができる。抗コネキシン剤は、単独で、あるいは１もしくは複数の治療剤、創傷治癒に有用な薬剤、および／または抗微小管剤と組み合わせて、局所適用のための従来の医薬賦形剤と組合せて提供することができる。適切な担体は、プルロニックゲル、ポロキサマーゲル、セルロース誘導体（ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびこれらの混合物を含む）を含有するヒドロゲル；ならびにポリアクリル酸を含有するヒドロゲル（Ｃａｒｂｏｐｏｌｓ）を含む。適切な担体はまた、局所医薬調製物に用いられるクリーム／軟膏、例えば、セトマクロゴール乳化軟膏に基づくクリームも含む。上記の担体は、アルギン酸塩（増粘剤または刺激剤として）、ベンジルアルコールなどの防腐剤、リン酸水素二ナトリウム／リン酸二水素ナトリウムなどのｐＨ調整のための緩衝液、塩化ナトリウムなどの浸透圧を調整するための薬剤、およびＥＤＴＡなどの安定化剤を含みうる。
【０１９２】
既に言及した生物学的マトリックスに加え、適切な包帯材またはマトリックスは、例えば、１または複数の抗コネキシンポリヌクレオチド、および１もしくは複数の抗コネキシンペプチドまたは抗コネキシンペプチド模倣剤（またはこれらの一方もしくは両方と組み合わせて投与される他の抗コネキシン剤）を伴う以下のものを含みうる。
【０１９３】
１）吸収材：適切な吸収材は、例えば、セルロース、木綿、またはレーヨンなどの高度に吸収性の繊維層と組み合わせた、例えば、半接着質または非接着層をもたらしうる、例えば、吸収性包帯材を含みうる。代替的に、吸収材は、主要な（ｐｒｉｍａｒｙ）包帯材または補助的な（ｓｅｃｏｎｄａｒｙ）包帯材として用いることができる。
【０１９４】
２）アルギン酸塩：適切なアルギン酸塩は、例えば、天然の多糖繊維または海藻に由来するキセロゲルからなる不織パッド、非接着パッド、およびリボンである包帯材を含む。適切なアルギン酸塩包帯材は、例えば、滲出物との接触の場合イオン交換過程を介して湿潤ゲルを形成しうる。一部の実施形態において、アルギン酸塩包帯材は、やわらかく快適であり、不規則的な形状をした領域上での填塞、陥入、または適合が容易であるように設計される。一部の実施形態において、アルギン酸塩包帯材は、第２の包帯材と共に用いることができる。
【０１９５】
３）抗菌包帯材：適切な抗菌包帯材は、例えば、例えば銀およびポリヘキサメチレンビグアニド（ＰＨＭＢ）などの生体活性薬剤の送達を促進して、これが必要であるかまたは望ましい場所で、感染に対する効力を維持しうる包帯材を含みうる。一部の実施形態において、適切な抗菌包帯材は、例えば、スポンジ、浸透化織りガーゼ、フィルム包帯材、吸収性製品、アイランド包帯材、ナイロン繊維、非接着バリア、または材料の組合せとして入手可能でありうる。
【０１９６】
４）生体物質および生合成物質：適した生体物質包帯材または生合成物質包帯材は、例えば、天然供給源（例えば、ブタまたはウシ）に由来するゲル、溶液、または半透性シートを含みうる。一部の実施形態において、ゲルまたは溶液は、治療部位に適用され、バリア保護のための包帯材により被覆される。別の実施形態では、膜として作用する可能性があり、単回の適用後においてその場に残存する生体物質基剤（例えば、ブタの腸粘膜または膀胱組織）もしくは生合成物質基剤のシートをｉｎ  ｓｉｔｕで配置するか、または１もしくは複数、好ましくは２つの抗コネキシン剤を組み入れるように、生体物質包帯材もしくは生合成物質包帯材をあらかじめ調製することができる。
【０１９７】
５）コラーゲン：適切なコラーゲン包帯材は、例えば、ウシ、ブタ、もしくは鳥類の供給源、または他の天然の供給源もしくはドナーに由来する、例えば、ゲル、パッド、粒子、ペースト、粉末、シート、または溶液を含みうる。一部の実施形態において、コラーゲン包帯材は、治療部位における滲出物と相互作用してゲルを形成しうる。一部の実施形態において、コラーゲン包帯材は、補助的な包帯材と組み合わせて用いることができる。
【０１９８】
６）複合材料：適切な複合材料包帯材は、例えば、物理的に異なる成分を単一の生成物へと混合して、例えば、細菌バリア、吸収、および接着など複数の機能を提供する包帯材を含みうる。一部の実施形態において、複合材料包帯材は、例えば、複数の層からなり、半接着パッドまたは非接着パッドを組み込む。一部の実施形態において、複合材料はまた、例えば、接着性の輪郭を有する不織布製テープまたは透明フィルムも含む。他の一部の実施形態において、複合材料包帯材は、例えば、主要な包帯材としても補助的な包帯材としても機能することが可能であり、さらに別の実施形態において、包帯材は、局所医薬組成物と組み合わせて用いることができる。
【０１９９】
７）接触層：適切な接触層包帯材は、例えば、ある領域上に配置されて、例えば、治療部位に適用された他の薬剤または包帯材との直接的な接触から組織を保護する、薄型の非接着シートを含みうる。一部の実施形態において、接触層は、治療部位領域の形状に調和するように配置することができ、また多孔性であるため、透過する滲出物を、上部の補助的な包帯材に吸収させることができる。さらに別の実施形態において、接触層包帯材は、局所医薬組成物と組み合わせて用いることができる。
【０２００】
８）弾性包帯：適切な弾性包帯は、例えば、伸縮して身体の外形に調和する包帯材を含みうる。一部の実施形態において、繊維成分は、例えば、木綿、ポリエステル、レーヨン、またはナイロンを含みうる。他の一部の実施形態において、弾性包帯は、例えば、第２層としてのまたは補助的包帯材としての吸収をもたらし、被覆をその場に保持するか、圧力を加えるか、または治療部位にクッションを与えることができる。さらに別の実施形態において、接触層包帯材は、局所医薬組成物と組み合わせて用いることができる。
【０２０１】
９）発泡体：適切な発泡体包帯材は、例えば、流体の保持が可能な小さな開放セルを有する、発泡ポリマー溶液（ポリウレタンを含む）のシートおよび他の形状を含みうる。例示的な発泡体は、例えば、他の材料と組み合わせて浸透化または層状化することができる。一部の実施形態では、発泡体の厚さおよび組成に基づいて吸収能を調製することができる。他の一部の実施形態において、治療部位と接触する領域は、取り外しを容易とするために非接着性でありうる。さらに別の実施形態において、発泡体は、接着性の輪郭および／または抗感染性バリアとして働きうる透明のフィルムコーティングと組み合わせて用いることができる。
【０２０２】
１０）ガーゼおよび不織包帯材：適切なガーゼ包帯材および織地包帯材は、例えば、吸収性の程度が多様な乾燥織地スポンジまたは吸収性の程度が多様な乾燥不織スポンジおよび吸収性の程度が多様な乾燥織地ラップまたは吸収性の程度が多様な乾燥不織ラップを含みうる。例示的な繊維組成物は、例えば、木綿、ポリエステル、レーヨンを含みうる。一部の実施形態において、ガーゼおよび不織包帯材は、バルクにおいて滅菌の場合であれ非滅菌の場合であれ、また、接着性の輪郭を伴う場合であれ伴わない場合であれ入手可能でありうる。例示的なガーゼ包帯材および不織包帯材は、各種の治療部位を消毒、パッキング、被覆に用いることができる。
【０２０３】
１１）親水コロイド：適切な親水コロイド包帯材は、例えば、ゼラチン、ペクチン、またはカルボキシメチルセルロースからなるウェハー、粉末、またはペーストを含みうる。一部の実施形態において、ウェハーは自己接着性であり、接着性の輪郭を伴う場合であれ伴わない場合であれ入手可能であり、また多種多様な形状およびサイズで入手可能である。例示的なハイドロコロイドは、外形合わせを必要とする領域において有用である。一部の実施形態において、粉末およびペーストの親水コロイドは、第２の包帯材と組み合わせて用いることができる。
【０２０４】
１２）ヒドロゲル（アモルファス）：適切なアモルファスヒドロゲル包帯材は、例えば、水分を与え、湿潤性の治癒環境を維持し、治療部位に水分を補給するように設計された、水、ポリマー、および不定形の他の成分による製剤を含みうる。一部の実施形態において、ヒドロゲルは、補助的な包帯材カバーと組み合わせて用いることができる。
【０２０５】
１３）ヒドロゲル：浸透化包帯材：適切な浸透化ヒドロゲル包帯材は、例えば、アモルファスヒドロゲルに浸したガーゼおよび不織スポンジ、ロープ、ならびにストリップを含みうる。アモルファスヒドロゲルは、例えば、乾燥治療部位に水分を与え、湿潤性の治癒環境を維持するように設計された、水、ポリマー、および不定形の他の成分による製剤を含みうる。
【０２０６】
１４）ヒドロゲルシート：適切なヒドロゲルシートは、例えば、水中において不溶性であり、膨潤により水溶液と相互作用する、架橋された親水性ポリマーの三次元ネットワークを含みうる。例示的なヒドロゲルは、高度に適合性でありそして透過性であり、それらの組成に応じて、広範な量のドレナージを吸収できる。一部の実施形態において、ヒドロゲルは、治療部位に対して非接着性であるか、または取り外しが容易であるように処置される。
【０２０７】
１５）浸透化包帯材：適切な浸透化包帯材は、例えば、溶液、エマルジョン、油、ゲル、または例えば、食塩液、油、亜鉛塩、ワセリン、ゼロフォーム（ｘｅｒｏｆｏｒｍ）、およびスカーレットレッド（ｓｃａｒｌｅｔ  ｒｅｄ）のほか、本明細書に記載の化合物を含む、他の一部の薬学的に活性な化合物もしくは担体薬剤に浸したガーゼおよび不織スポンジ、ロープ、ならびにストリップを含みうる。
【０２０８】
１６）シリコンゲルシート：適切なシリコンゲルシート包帯材は、例えば、メッシュまたは布により補強されるかまたはこれに結合した架橋ポリマーからなる軟質カバーを含みうる。
【０２０９】
１７）溶液：適切な液体包帯材は、例えば、細胞外マトリックス中に見出される多タンパク質物質および他のエレメントの混合物を含みうる。一部の実施形態では、デブリドマンおよび洗浄の後において例示的な溶液を治療部位に適用し、次いで、吸収性包帯材または非接着性パッドにより被覆することができる。
【０２１０】
１８）透明フィルム：適切な透明フィルム包帯材は、片面が接着剤によりコーティングされる、多様な厚さのポリマー膜を含みうる。一部の実施形態において、透明フィルムは液体、水、および細菌に対しては不透過性であるが、水蒸気および大気中の気体に対しては透過性である。一部の実施形態では、透明性により、治療部位が視覚化される。
【０２１１】
１９）充填剤：適切な充填剤包帯材は、例えば、ビーズ、クリーム、発泡体、ゲル、軟膏、パッド、ペースト、クッション（ｐｉｌｌｏｗ）、粉末、ストランド、または他の調合物を含みうる。一部の実施形態において、充填剤は非接着性であり、経時放出型抗菌剤を含みうる。例示的な充填剤は、湿潤環境の維持、滲出物の管理、また、例えば、部分層創傷および全層創傷、感染創傷、排液性創傷、およびパッキングを要する深部創傷の治療に有用でありうる。
【０２１２】
組成物
本発明は、（ａ）有効量の抗コネキシン剤、および（ｂ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を含む。一態様において、本発明は、（ａ）１または複数のコネキシンアンチセンスポリヌクレオチド、および（ｂ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含む薬学的組成物を提供する。好ましい実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、コネキシン２６、３１．１、３２、３６、４０、または４５アンチセンスポリヌクレオチドである。別の好ましい実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、コネキシン４３アンチセンスポリヌクレオチドである。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号１に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号２に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号３に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号４に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号５に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号６に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号７に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号８に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号９に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号１０に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号１１に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。一実施形態において、コネキシンアンチセンスポリヌクレオチドは、配列番号１２に示されるオリゴデオキシヌクレオチドを含む。
【０２１３】
一態様において、本発明は、（ａ）１または複数のポリヌクレオチド相同体、および（ｂ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含む薬学的組成物を提供する。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号１に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号１に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号２に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号２に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号３に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号３に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号４に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号４に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号５に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号５に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号６に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号６に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号７に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号７に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号８に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号８に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号９に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号９に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号１０に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号１０に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号１１に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号１１に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。一実施形態において、ポリヌクレオチド相同体は、配列番号１２に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに相同である。好ましくは、配列番号１２に示されるオリゴデオキシヌクレオチドに、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９９％相同である。
【０２１４】
一態様において、本発明は、（ａ）１または複数の結合タンパク質、および（ｂ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含む薬学的組成物を提供する。一実施形態において、結合タンパク質は抗体である。好ましい実施形態において、結合タンパク質は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体フラグメント、一本鎖抗体、一本鎖Ｆｖｓ、または一本鎖結合分子である。一実施形態において、結合タンパク質、例えば抗体は、コネキシンポリペプチド、好ましくはコネキシン２６、コネキシン３１．１、コネキシン３２、コネキシン３６、コネキシン４０、もしくはコネキシン４５ポリペプチド、またはその任意の部分に特異的に結合する。一実施形態において、結合タンパク質、例えば抗体は、コネキシン４３ポリペプチドまたはその任意の部分に特異的に結合する。一実施形態において、結合タンパク質は、コネキシンポリペプチドに特異的に結合し、約１０４Ｍ−１以上の、約１０６Ｍ−１以上の、１０７Ｍ−１以上の、または１０８Ｍ−１以上の親和性を有する。約１０８Ｍ−１よりもさらに大きい親和性、例えば約１０９Ｍ−１、約１０１０Ｍ−１、約１０１１Ｍ−１、および約１０１２Ｍ−１以上の親和性が好ましい。
【０２１５】
別の実施形態において、薬学的組成物は、（ａ）１または複数の結合タンパク質、および（ｂ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含み、結合タンパク質は、ペプチド阻害剤である。一実施形態において、ペプチド阻害剤は、コネキシン２６、コネキシン３１．１、コネキシン３２、コネキシン３６、コネキシン４０、またはコネキシン４５の膜貫通領域に対応するアミノ酸配列を含む。好ましい実施形態において、ペプチド阻害剤は、コネキシン４３の膜貫通領域に対応するアミノ酸配列を含む。別の実施形態において、ペプチド阻害剤は、配列番号１３に示される約５〜２０個の連続的なアミノ酸を含む。別の実施形態において、ペプチド阻害剤は、配列番号１４に示される約５〜２０個の連続的なアミノ酸を含む。別の実施形態において、ペプチド阻害剤は、配列番号１４の３７〜７６位および１７８〜２０８位の領域に対応するアミノ酸配列を含む。別の実施形態において、ペプチド阻害剤は、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、または配列番号３８に示される約５〜２０個の連続的なアミノ酸を含む。別の実施形態において、ペプチド阻害剤は、配列番号３９〜６６に示される約８から約１１個の連続的なアミノ酸を含む。別の実施形態において、ペプチド阻害剤は、配列番号：１８、１９、または６７〜８０に示される約８から１５個の連続的なアミノ酸を含む。さらに別の実施形態において、ペプチド阻害剤は、１または複数の保存性のアミノ酸の変化を有する。
【０２１６】
本発明の別の態様において、組成物は、（ａ）有効量の抗コネキシン剤、（ｂ）１または複数の治療用薬剤、および（ｃ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含む。治療用薬剤には、例えば、抗感染剤、麻酔剤、鎮痛剤、抗生物質、睡眠薬、ならびにステロイド系および非ステロイド系の抗炎症性剤が含まれる。特定の実施形態において、１、２、３、４、５、または６つの治療用薬剤を組み合わせて用いることができる。
【０２１７】
本発明の別の態様において、組成物は、（ａ）有効量の抗コネキシン剤、（ｂ）創傷の治癒に有用な１または複数の薬剤、および（ｃ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含む。創傷の治癒に有用な薬剤には、例えば、創傷の治癒に関連する成長因子、および／またはサイトカインが含まれうる。特定の実施形態において、創傷の治癒に有用な１、２、３、４、５、または６つの薬剤を組み合わせて用いることができる。
【０２１８】
本発明の別の態様において、組成物は、（ａ）有効量の抗コネキシン剤、（ｂ）１または複数の抗微小管剤、および（ｃ）薬学的に許容される担体または希釈剤を含む。例示的な抗微小管剤には、例えば、ジテルペノイド、ビンカアルカロイド、および白金配位錯体が含まれる。特定の実施形態において、１、２、３、４、５、または６つの抗微小管剤を組み合わせて用いることができる
本明細書において言及または記載される疾患、障害、および／または症状を有する、または有することが疑われる、またはその素因がある、またはその危険性がある対象を治療するいかなる方法も、本明細書に記載も任意の用量、剤形、製剤、および／または組成物の投与を利用することができる。
【０２１９】
治療
本発明は、抗コネキシン剤および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を投与するステップを含む、例えば、様々な整形外科関連の疾患、障害、または症状、ならびに関節の内部および／または周辺での異常な組織形成を全部または一部において特徴とする疾患、障害、または症状を有するか、またはそれを有することが疑われるか、またはそれを有しやすいか、またはその危険性がある対象を治療する方法を含む、様々な疾患、障害、および症状を、全体的または部分的に治療および／または予防するための方法を含む。このような化合物は、例えば、（１）整形外科手術後の患者における回復時間を向上させるため、（２）整形外科手術後の対象における疼痛を軽減させるため、（３）整形外科手術後の対象における全体的な回復結果を向上させるため、（４）関節の内部および／もしくは周辺での異常な組織形成を予防および／もしくは軽減するため、ならびに／または（５）血管の損傷を予防および／もしくは軽減するのに有効な量で投与することができる。このような化合物は、例えば、関節の拘縮を予防または軽減するのに有効な量で投与することができる。
【０２２０】
本発明はまた、例えば、抗コネキシン剤および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を投与するステップを含む、前記整形外科手術後の創傷治癒を促進する方法を含む、整形外科手術に関連する様々な疾患、障害、および症状を全体的または部分的に治療および／または予防する方法を含む。本発明はまた、整形外科手術後の関節の拘縮を予防または軽減する方法を含めた、前記整形外科手術に関連する様々な疾患、障害、および症状を全体的または部分的に治療および／または予防する方法であって、例えば、抗コネキシン剤および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を投与するステップを含む方法を包含する。本発明はまた、例えば、疾患、障害、または症状、ならびに整形外科手術に関連する、関節の内部および／または周辺での組織形成に全体的または部分的に特徴とする疾患、障害、または症状を治療する方法を含む、前記整形外科手術に関連する様々な疾患、障害、および症状を全体的または部分的に治療および／または予防する方法であって、抗コネキシン剤および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を投与するステップを含む方法を包含する。このような化合物は、例えば、（１）整形外科手術後の患者における回復時間を向上させるのに、（２）整形外科手術後の対象における疼痛を軽減させるのに、（３）整形外科手術後の対象における全体的な回復結果を向上させるのに、（４）関節の内部および／もしくは周辺での異常な組織形成を予防および／もしくは軽減するのに、ならびに／または（５）血管の損傷を予防および／もしくは軽減するのに有効な量で投与することができる。このような化合物は、例えば、関節の拘縮を予防または軽減するのに有効な量で投与することができる。このような化合物は、例えば、手術部位の、および手術部位にすぐ隣接するコネキシンタンパク質の発現を下方調節するのに有効な量で投与することができる。
【０２２１】
本発明はまた、抗コネキシン剤を含む組成物を投与することにより整形外科手術を有する対象を治療する方法であって、前記対象における回復時間が向上する方法を含む。一実施形態において、前記患者における回復時間は、治療していない場合の回復時間よりも短い。本発明はまた、抗コネキシン剤を含む組成物を投与することにより整形外科手術を有する対象を治療する方法であって、前記対象において疼痛が軽減する方法を含む。本発明はまた、抗コネキシン剤を含む組成物を投与することにより整形外科手術を有する対象を治療する方法であって、全体的な回復結果が向上する方法を含む。一実施形態において、向上した回復結果は、手術後の運動性が向上することにより実証される。本発明はまた、抗コネキシン剤を含む組成物を投与することにより、整形外科手術後の関節の拘縮を全体的または部分的に治療および／または予防する方法を含む。このような組成物は、単独で、または他の治療用薬剤と組み合わせて、例えば、限定はしないが腱周膜注射、軟組織注射、関節内および関節周辺の接合部を含む、整形外科手術による創傷部位を含む罹患部位の内部または周辺に投与することができる。このような組成物は、単独療法として、並行してもしくは手術中に修正的な整形外科手順と組み合わせて、または手術後に、投与することができる。反復適用は本発明に含まれる。
【０２２２】
本発明は、前十字靭帯（ａｃｌ）損傷、肩の関節炎、膝の関節軟骨損傷、Ｏ脚、骨折した背骨、骨折股関節（骨盤）、骨折した脚、骨折した頚部、腱膜瘤、滑液包炎、手根管症候群、慢性腰痛症、内反足、脊椎湾曲（脊柱側弯症）、糖尿病足、肘の脱臼、股関節脱臼、デュピュイトラン拘縮、偏平足、足奇形、小児の前腕骨折、血友病関節炎、椎間板ヘルニア（椎間板破裂）、股関節唇裂傷、股関節炎、感染性関節炎、炎症性股関節状態、母趾内反、膝関節炎、Ｘ脚、半月板裂傷、骨関節炎、骨壊死、骨粗鬆症、関節リウマチ、回旋腱板損傷、脊柱側弯症、肩関節炎、肩関節不安定症、肩痛、椎間板破裂（椎間板ヘルニア）、脊柱管狭窄／変性脊椎すべり症、脊椎すべり症、足へのスポーツ損傷、足関節捻挫、腱炎、母指関節炎、ばね指を含む整形外科疾患、障害および状態を含む、様々な疾患、障害、および症状を全体的または部分的に治療および／または予防するための方法を含む。
【０２２３】
一実施形態において、本明細書において記載される治療方法のいずれか１つは、さらに、（１）疼痛を予防および／または軽減するのに、（２）手術後の回復時間を向上させるのに、（３）整形外科手術後の対象における全体的な回復結果を向上させるのに、（４）関節の拘縮を予防および／もしくは軽減するのに、ならびに／または（５）血管の損傷を予防および／もしくは軽減するのに有効な１または複数の薬剤を有する第２の組成物を投与するステップを含む。一態様において、第２の組成物は、抗コネキシン剤を含む。一態様において、第２の組成物は、１または複数の治療用薬剤を含む。本発明の別の態様において、第２の組成物は、１または複数の抗微小管剤を含む。一実施形態において、第２の組成物は、第１の組成物の前、後および／または同時に投与される。一実施形態において、第２の組成物は、第１の組成物の前および後に投与される。一実施形態において、第２の組成物は、第１の組成物と同時に投与される。
【０２２４】
キットおよび製品
一態様において、本発明は、整形外科的な疾患、障害、および症状を治療するのに、整形外科関連の外科的な創傷の治癒を促進するのに、回復時間を向上させるのに、ならびに／または手術後の疼痛を軽減するのに、ならびに／または手術後の対象における全体的な回復結果を向上させるのに、ならびに／または血管の損傷を予防および／もしくは軽減するのに、関節の内部および／もしくは周辺での異常な組織形成を予防および／もしくは治療するのに、ならびに／または関節の拘縮を予防、軽減、もしくは回復させるためのキットを提供する。
【０２２５】
キットは、本明細書において記載される１または複数の組成物を含みうる。例えば、キットは、有効量の抗コネキシン剤を含む組成物を含みうる。一実施形態において、キットは、有効量の１または複数のコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドを含む組成物を含む。一実施形態において、キットは、有効量の１または複数のポリヌクレオチド相同体を含む組成物を含む。一実施形態において、キットは、有効量の１または複数のペプチドまたはポリペプチド抗コネキシン剤を含む組成物を含む。
【０２２６】
別の態様において、本発明は、治療有効量の抗コネキシン剤、例えばコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドを含有する容器と、整形外科的な疾患、障害、および／または症状を含む、本明細書において記載または参照される任意の疾患、障害、および／または症状を有する、または有することが疑われるか、またはその素因がある対象を治療するための使用を含めた、使用のための指示書とを含む製品であって、剤形が対象に用いられうることを指示するラベルを包装材料が有する製品を含む。
【０２２７】
特定の他の態様において、本発明は、有効量の抗コネキシン剤、例えばコネキシンアンチセンスポリヌクレオチドを含有する容器を、整形外科手術を受けた対象の治療に用いるための指示書と共に含む製品を含む。
【０２２８】
以下の実験の項を参照することにより本発明は良好に理解される。以下の実験は例示的なものであり、いかなる意味でも、本発明または特許請求の範囲の制限を意図したものではない。
【実施例】
【０２２９】
（実施例１）
関節内注射による最大耐量決定
少なくとも生後６週間の雄ハートレイモルモットを密封チャンバー中で５％イソフルランを使用して麻酔する。前記動物の体重を量り、次に２％イソフルランでノーズコーン（ｎｏｓｅ  ｃｏｎｅ）により麻酔が維持される手術台に移した。両脚の膝領域を剪毛し、大腿骨頭の膝幅を両脚で測定する。右膝の皮膚を殺菌する。２５Ｇ針を内側到達法を使用して滑液腔に導入し、０．１ｍｌの試験製剤を注射する。注射の７日後、前記動物は深麻酔（５％イソフルラン）下で０．７ｍｌ  Ｅｕｔｈａｎｙｌの心臓注射により屠殺する。
【０２３０】
耐容性の評価：膝機能は、歩行方法の変化および圧痛の徴候を記録することにより屠殺前に評価される。前記動物は、屠殺後直ちに体重を量る。次に、大腿骨頭の両膝の幅をキャリパーを使用して測定する。四頭筋腱を横に切断し、外側と内側の関節包を切り開き、脛骨を覆う膝蓋骨をひっくり返すことによって膝関節は切開される。皮下組織の他にも内部関節構造における膨腫、血管新生、液体貯留の徴候および色の変化を記録することにより膝炎症を評価する。
【０２３１】
（実施例２）
脊髄手術モデル
本明細書に記載されるウサギ椎弓切除脊髄癒着モデルを使用して、抗コネキシン剤の局所投与による脊髄瘢痕および異常組織形成（例えば、癒着）の予防を調査する。有意義な統計的分析を可能にするために各実験グループには５〜６匹の動物が含まれることになる。瘢痕および癒着形成の阻害を評価するために、様々な濃度の抗コネキシン剤を有する製剤が対照動物に対して試験される。
【０２３２】
ケタミン／ジラジンの筋肉注射によりウサギを麻酔する。ハロタンを使用した麻酔維持のために気管内チューブを挿入する。前記動物を、手術台上の加温パッドの上にうつぶせに乗せ、背中の下半分の皮膚を剪毛し無菌手術に備える。長径正中線皮膚切開を、Ｌ−１からＬ−５までおよび腰仙部筋膜の下方へ行う。筋膜を切開して、棘突起先端を露出させる。傍脊柱筋群を解体して、棘突起およびＬ−４の薄膜から後退させる。薄膜を両側から慎重に切除して棘突起を除去することによりＬ−４において椎弓切除を実施し、こうして小さな５×１０ｍｍの椎弓切除欠損を作り出す。うっ血はゼルフォームを使用して得られる。試験製剤を傷害の部位に適用し、傷はＶｉｃｒｙｌ縫合糸で層内に閉じる。前記動物は麻酔から覚醒するまでインキュベータ中に置き、次に檻に戻す。
【０２３３】
手術の２週間後、前記動物は上記の手順に類似する手順を使用して麻酔する。動物はＥｕｔｈａｎｙｌを使用して安楽死させる。皮膚切開の後、椎弓切除部位を解体により分析し、瘢痕および癒着の量を、この種の損傷について科学文献に発表されている採点システムを使用して点数化する。
【０２３４】
（実施例３）
腱手術モデル
このモデルは、抗コネキシンペプチドの局所化された逐次投与により、腱の瘢痕または癒着が予防され得るか調査するために使用される。徐放性製剤には、薬物が負荷され、ウサギの損傷腱の周囲に埋め込まれる。
【０２３５】
前記ウサギは麻酔され、右後肢上の皮膚を剪毛し、無菌手術に備える。無菌手術は、手術用顕微鏡の助けを借りて実施される。長径正中線皮膚切開は、指２および４において基節骨の裏側の掌側で行われる。腱の滑液鞘を慎重に露出させ、浅指屈筋分岐から遠位の深指屈筋に接近するために横方向に切開される。腱損傷は、湾曲鉗子を使用して深指屈筋を穏やかに持ち上げ、その組織の半分まで横方向に切開することにより実施する。試験製剤は、２本の指のうち無作為に選択される１本の鞘における腱周囲に適用される。他の指は未処理のままにして、対照として使用される。次に、前記鞘は６〜０ナイロン縫合糸で修復される。腱と鞘を単一の単位として固定化するために、固定化６〜０ナイロン縫合糸を、横中手靭帯を通して腱／鞘複合体まで挿入させる。傷は４〜０結節縫合糸を使用して閉ざす。後足の周りに包帯を巻いて、指の固定化をさらに増強し、動物の快適さと歩行運動を確保する。動物は正常な状態に戻され檻に戻される。
【０２３６】
手術の３週間後、前記動物は麻酔される。皮膚切開後、滑液鞘周囲の組織平面は解体され、腱鞘複合体はエンブロックに摘出され、病理組織学的分析のために１０％リン酸緩衝ホルムアルデヒド中に移される。次に前記動物を安楽死させる。パラフィン包埋後、一連の５μｍ薄横断面は鞘と腱複合体を通じて２ｍｍごとに切断される。薄片はＨ＆Ｅおよびモバト染料で染色され、癒着増殖を評価する。各スライドは、デジタル顕微鏡カメラ（ニコンＭｉｃｒｏｐｕｂｌｉｓｈｅｒ冷却カメラ）に接続されたコンピュータを使用してデジタル化される。次に、画像解析ソフトウェア（ＩｍａｇｅＰｒｏ）を使用して形態計測分析を実施する。滑膜腔を抹消する物質として定義される癒着の厚みと面積が測定され、製剤治療された動物と対照動物間で比較される。
【０２３７】
（実施例４）
抗コネキシン剤は、好都合には、本発明の方法による投与に適する形態に調合される。
【０２３８】
適当な製剤は、以下の調合剤の混合物を含む。１つまたは複数の個々の抗コネキシン剤および調合剤の量は、予定される特定の用途に依存するはずである。
【０２３９】
【表９】
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（実施例５）
本発明の方法による使用のための製剤を、下記の割合で化合物を混合することによって調製する。好ましい一実施形態において、抗コネキシン剤は、抗コネキシンポリヌクレオチドである。別の実施形態において、抗コネキシンポリヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えば、配列番号１のアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【０２４０】
製剤Ａ
以下の材料で構成されている（％ｗ／ｗ）−リン酸塩緩衝化食塩水中抗のコネキシン剤（０．４７％）；メチルパラベン（０．１７％）；プロピルパラベン（０．０３％）；プロピレングリコール（１．５％）；ＨＰＭＣ（１．５％）；および１０ｍＭリン酸緩衝液（９６．３３％）。製剤は、ｐＨ約６．７４および浸透圧モル濃度２４４の透明なゲルである。
【０２４１】
製剤Ｂ
以下の材料で構成されている（％ｗ／ｗ）−リン酸塩緩衝化食塩水中の抗コネキシン剤（０．４７％）；メチルパラベン（０．１７％）；プロピルパラベン（０．０３％）；プロピレングリコール（１．５％）；ＨＰＭＣ（１．５％）；０．５％ＢＡＣ（０．１％）；および１０ｍＭリン酸緩衝液（９６．２３％）。製剤は、ｐＨ約６．６５および浸透圧モル濃度２３０の透明なゲルである。
【０２４２】
製剤Ｃ
以下の材料で構成されている（％ｗ／ｗ）−リン酸塩緩衝化食塩水中の抗コネキシン剤（０．４７％）；メチルパラベン（０．１７％）；プロピルパラベン（０．０３％）；プロピレングリコール（１．５％）；ＨＰＭＣ（１．５％）；ポリクオタニウム１０（０．５％）；ポロキサマー１８８（０．１％）；および１０ｍＭリン酸緩衝液（９５．７３％）。製剤は、ｐＨ約６．５９および浸透圧モル濃度２３３のやや濁ったゲルである。
【０２４３】
製剤Ｄ
以下の材料で構成されている（％ｗ／ｗ）−リン酸塩緩衝化食塩水中の抗コネキシン剤（０．４７％）；メチルパラベン（０．１７％）；プロピルパラベン（０．０３％）；プロピレングリコール（１．５％）；ＨＰＭＣ（１．５％）；ＳＬＥＳ（０．５％）；および１０ｍＭリン酸緩衝液（９５．８３％）。製剤は、ｐＨ約６．８および浸透圧モル濃度２４６の透明なゲルである。
【０２４４】
製剤Ｅ
以下の材料で構成されている（％ｗ／ｗ）−リン酸塩緩衝化食塩水中の抗コネキシン剤（０．４７％）；メチルパラベン（０．１７％）；プロピルパラベン（０．０３％）；プロピレングリコール（１．５％）；ＨＰＭＣ（１．５％）；ポロキサマー１８８（０．１％）；２５Ｋポリエチレンイミン（０．０７５％）；および１０ｍＭリン酸緩衝液（９６．１５５％）。製剤は、ｐＨ約７．８および浸透圧モル濃度２４９の濁ったゲルである。
【０２４５】
製剤Ｆ
以下の材料で構成されている（％ｗ／ｗ）−リン酸塩緩衝化食塩水中の抗コネキシン剤（０．４７％）；メチルパラベン（０．１７％）；プロピルパラベン（０．０３％）；プロピレングリコール（１．５％）；ＨＰＭＣ（１．５％）；ヒアルロン酸ナトリウム（０．１％）；および１０ｍＭリン酸緩衝液（９６．２３％）。製剤は、ｐＨ約６．８８および浸透圧モル濃度２８９の透明なゲルである。
【０２４６】
製剤Ｇ
以下の材料で構成されている（％ｗ／ｗ）−リン酸塩緩衝化食塩水中の抗コネキシン剤（０．４７％）；メチルパラベン（０．１７％）；プロピルパラベン（０．０３％）；プロピレングリコール（１．５％）；ヒアルロン酸ナトリウム（１．０％）；および１０ｍＭリン酸緩衝液（９６．８３％）。製剤は、ｐＨ約６．８１および浸透圧モル濃度２４８の透明なゲルである。
【０２４７】
本明細書において参照されたかまたは言及されたすべての特許、出版物、科学論文、ウェブサイトならびに他の文書および資料は、本発明が属する技術分野の当業者の技術水準を示すものであり、これらの参照文書および資料はそれぞれ、個別にその全体が参照により組み込まれたか、またはその全体が本明細書に記載された場合と同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。出願人は、任意の上記の特許、出版物、科学論文、ウェブサイト、電子的に利用可能な情報、および別の参照資料または文書の、任意のおよびすべての資料および情報を本明細書に物理的に組み込む権利を保有する。
【０２４８】
記載される、本特許の説明の部分は、すべての請求項を含む。さらに、当初の請求項をすべて含むすべての請求項ならびにあらゆるおよびすべての優先権書類からのすべての請求項は、記載される、本明細書の説明の部分の中にそれらの全体が参照によってこれによって組み込まれ、出願人は、記載される説明または本出願、あらゆるそのような請求項、およびすべてのそのような請求項の任意の他の部分の中に物理的に組み込むための権利を所有する。したがって、例えば、いかなる状況下でも、本特許は、請求項の正確な表現が、本特許の、記載される説明の部分において、これらの言葉で記載されていないという主張に対して、請求項について記載される説明を提供しないと主張されるように解釈されない。
【０２４９】
請求項は、法律に従って解釈されるであろう。しかしながら、あらゆる請求項またはその部分を解釈する、主張されるまたはとらえられる容易さまたは困難さにもかかわらず、いかなる状況下でも、本特許に至る、１または複数の出願の遂行の間の請求項またはそのあらゆる部分のあらゆる修正または補正は、先行技術の一部を形成しない、そのあらゆるおよびすべての等価物に対するあらゆる権利を喪失したものとして解釈されない。
【０２５０】
本明細書において開示されるすべての特徴は、任意の組み合わせで、組み合わせられうる。したがって、明らかに述べられない限り、開示される各特徴は、等価なまたは類似する特徴の属のシリーズのほんの一例である。
【０２５１】
本発明が、その詳細な説明と共に記載されるが、先の説明は、例証することを意図するものであり、本発明の範囲を限定することを意図するものではなく、これは、添付の請求項の範囲によって規定されることが理解されたい。したがって、先のものから、本発明の特定の実施形態が、例証の目的で本明細書において記載されたが、様々な変更が、本発明の精神および範囲から逸脱することなくなされうることが十分に理解されるであろう。他の態様、長所、および変更は、以下の請求項の範囲内にあり、本発明は、添付の請求項による以外は限定されない。
【０２５２】
本明細書に記載されている具体的な方法および組成物は、好ましい実施形態を代表するものであり、それらは例示的であって本発明の範囲を限定するものではない。別の目的、態様、および実施形態が、本明細書を考慮すれば当業者には思いつくはずであり、本特許請求の範囲によって定義されている通り本発明の精神に包含される。本発明の範囲および精神から逸脱することなく、様々な置換および変更を本明細書に開示されている本発明に対して行ってもよいことが、当業者には容易に明らかとなるはずである。例示的に本明細書に適当に記載されている本発明は、本明細書において不可欠であると特に開示されていない任意の１つまたは複数の要素、あるいは１つまたは複数の限定の不在下で実施されてもよい。したがって、例えば、本発明の実施形態または実施例において、本明細書におけるそれぞれの場合において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含有している」などの用語は、包括的であって限定ではないと読み取るべきである。例示的に本明細書に記載されている方法およびプロセスは、異なる順序の工程で適当に実施されてもよく、必ずしも本明細書または本特許請求の範囲に示された工程の順序に制限されない。
【０２５３】
用いられた用語および表現は、限定ではなく説明の用語として使用され、そのような用語および表現の使用において、示され、記載される特徴のあらゆる等価物またはその部分を除外する意図はないが、様々な変更が、主張される本発明の範囲内で可能であることが認識される。したがって、本発明は、様々な実施形態および／または好ましい実施形態および任意の特徴によって特に開示されたが、当業者らによって用いられうる、本明細書において開示される概念のあらゆるおよびすべての変更および変化は、添付の請求項によって規定されるように、本発明の範囲内であると考えられることが理解されるであろう。
【０２５４】
本発明は、本明細書において広く、属的に記載された。属の開示内にあるより狭い種および亜属の群のそれぞれもまた、本発明の一部を形成する。これは、削除された物質が本明細書において具体的に記載されるかどうかにかかわらず、属からあらゆる主題を除く条件または負の限定を伴って、本発明の属の説明を含む。
【０２５５】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに指示しない限り、複数の指示語を含み、用語「Ｘおよび／またはＹ」は、「Ｘ」もしくは「Ｙ」または「Ｘ」および「Ｙ」の両方を意味し、名詞に続く文字「ｓ」は、その名詞の複数形および単数形の両方を示すこともまた理解されたい。さらに、本発明の特徴または態様が、マーカッシュグループによって記載される場合、本発明は、マーカッシュグループのあらゆる個々のメンバーおよびそのメンバーのあらゆるサブグループを包含し、またそれによって、それによっても記載され、出願人は、マーカッシュグループのあらゆる個々のメンバーまたはそのメンバーのあらゆるサブグループを具体的に指すために、本出願または請求項を修正するための権利を所有することが意図され、当業者らは、そのように認識するであろう。
【０２５６】
他の実施形態は、以下の特許請求の範囲内にある。本特許は、本明細書に特に開示されている具体的な実施例または実施形態または方法に限定されると解釈されるものではない。いかなる場合においても、本特許は、そのような陳述が、出願人による答弁書において明確に認められた限定または制限がなければ、特許商標庁のいかなる審査官またはいかなる別の当局者もしくは関係者によってなされたいかなる陳述によっても限定されると解釈されるものではない。
【配列表】
2014169330000001.app
【外国語明細書】
2014169330000001.pdf