(57)【要約】      （修正有）【課題】不安の症状を発症する若しくはリスクのある患者の治療又は効果的な予防方法の提供。【解決手段】ＰＳＤ９５（シナプス後肥厚部−９５タンパク質）とＮＭＤＡ受容体（ＮＭＤＡと相互作用することが知られる膜結合タンパク質）との特異的結合を阻害する薬剤を用いた効果的な治療が患者に投与される。前記薬剤がＮＭＤＡ受容体のＣ又はＰＳＤ９５の特定のアミノ酸配列を有する活性ペプチドを含むキメラペプチドである治療若しくは予防の方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＳＤ９５とＮＭＤＡ受容体との特異的結合を阻害する薬剤を効果的な治療方法で患者に投与することを含む、不安の症状を発症する若しくはリスクを有する患者の治療又は効果的な予防の方法。
【請求項２】
該薬剤が、内在化ペプチドに連結したＮＭＤＡ受容体Ｃ末端から３から２５アミノ酸からなるアミノ酸配列又はＰＳＤ−９５のＰＤＺドメイン１及び／又は２からなるアミノ酸配列を有する活性ペプチドを含むキメラペプチドである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
該活性ペプチドが、［Ｅ／Ｄ／Ｎ／Ｑ］−［Ｓ／Ｔ］−［Ｄ／Ｅ／Ｑ／Ｎ］−［Ｖ／Ｌ］（配列番号：１）を含むアミノ酸配列を有する、請求項２記載の方法。
【請求項４】
該活性ペプチドが、ＥＳＤＶ（配列番号：２）、ＥＳＥＶ（配列番号：３）、ＥＴＤＶ（配列番号：４）、ＥＴＥＶ（配列番号：５）、ＤＴＤＶ（配列番号：６）、ＤＴＥＶ（配列番号：７）からなる群より選択されたアミノ酸配列を含む、請求項２記載の方法。
【請求項５】
該活性ペプチドが、ＫＬＳＳＩＥＴＤＶ（配列番号：８）を含むアミノ酸配列を有する、請求項２記載の方法。
【請求項６】
該キメラペプチドが、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＴＤＶ（配列番号：９）を含むアミノ酸を有する、請求項２記載の方法。
【請求項７】
該キメラプチドが、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＴＤＶの（配列番号：９）からなるアミノ酸配列を有する、請求項２記載の方法。
【請求項８】
請求項１に従って該活性ペプチドが、ＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１０）を含むアミノ酸配列を有する、請求項２記載の方法。
【請求項９】
該キメラペプチドが、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１１）を含むアミノ酸配列を有する、請求項２記載の方法。
【請求項１０】
該アミノ酸配列が、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１１）からなる、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
該患者は、該拮抗薬で治療が必要な不安以外の疾患はない、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
該患者は、興奮毒性で媒介される不安以外の疾患はない、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
該患者は、脳卒中ではない、請求項１記載の方法。
【請求項１４】
該患者は、興奮毒性で媒介される疾患はない、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
該薬剤が、不安を促進するイベントの経験を持つ患者に対応して投与される、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
該患者は急性不安のエピソードを有する、請求項１記載の方法。
【請求項１７】
該患者はパニック障害を経験している、請求項１記載の方法。
【請求項１８】
該患者は恐怖症を有し、及び該恐怖にさらされているか又はさらされようとしている、請求項１記載の方法。
【請求項１９】
該患者は社会不安障害を有し、及び該障害を誘起するであろう社会状況にさらされているか又はさらされようとしている、請求項１記載の方法。
【請求項２０】
該患者は強迫性障害を有し、及び該障害の症状を示している、請求項１記載の方法。
【請求項２１】
該患者は不安の身体的感覚を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２２】
該身体的感覚は動悸、吐き気、胸の痛み、息切れ、及び／又は緊張型頭痛を含む、請求項２１の方法。
【請求項２３】
該患者は心的外傷後ストレス症候群を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２４】
該患者は分離不安を有する、請求項１記載の方法。
【請求項２５】
該薬剤が将来のイベントについて不安を経験する患者に対応して投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２６】
該効果的な治療方法が、該患者において不安の診断に対応して投与される、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
不安の治療又は効果的な予防に効果的な二番目の治療方法を投与することをさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項２８】
該二番目の治療方法は、第二の薬剤を投与することを含む、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
該二番目の治療方法は、会話治療を与えることを含む、請求項２７記載の方法。
【請求項３０】
該患者が人間である、請求項１記載の方法。
【請求項３１】
該薬剤が点滴静注又は皮下注射によって投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３２】
該効果的な治療方法が、該患者の不安症状の診断後、該症状を緩和し又は該症状の一層の発展を停止し若しくは阻害するために投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３３】
該薬剤が、医薬組成物として薬学的に許容される担体と共に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３４】
不安の症状及び／又は徴候の治療効果を評価するために、該患者をモニタリングすることをさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項３５】
該キメラペプチドが、０．０５から５００ｍｇの用量で、必要に応じ０．１から１００ｍｇ、０．５から５０ｍｇ、又は１から２０ｍｇの用量で投与される、請求項２記載の方法。
【請求項３６】
任意の前記請求項中で定義された薬学的に許容される担体及び薬剤を含む、患者の不安の症状の予防又は治療のための医薬組成物。
【請求項３７】
不安の症状の治療又は効果的な予防に適したものであると表示するラベルを持つ該医薬組成物。
【請求項３８】
不安の治療又は効果的な予防のための薬剤の製造において、請求項１から３５の任意に定義された薬剤の使用。
【請求項３９】
内在化ペプチドに連結したｔＳＸＶペプチドを効果的な治療方法で患者に投与することを含む、不安に苦しむ又はリスクがある患者において不安の症状の治療又は効果的な予防のための方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
＜関連出願のクロスリファレンス＞
本願は、２００７年７月３日付けの米国特許出願（ＵＳＳＮ）第６０／９４７，８９２号に対して優先権を主張するものであり、該出願はすべての目的についてこの参照により本明細書中に完全に組み込まれる。
【０００２】
＜コンピュータが読める形式で提出された「配列表」、テーブル、又はコンピュータプログラムのリストに対する参照＞
ファイル０２６３７２０００２１０ＰＣ＿ＳｅｑＬｉｓｔ．ｔｘｔ中に記載された配列表は４０，５０４バイトで、Ｔａｓｋｅｒ外の「不安に対する治療法」と共にファイルされた本願のために２００８年６月３０日に作成された。このファイルに含まれている情報は、この参照によって本明細書中に組み込まれる。
【０００３】
＜本発明の背景＞
不安及びうつは、重大な臨床的及び社会経済的意義を有する主要な精神疾患である。臨床的うつ病は一般的に不安障害と一緒に呈され、その逆も同じである。患者は、まれに、１つだけ又は他方の症状を呈する。
【０００４】
一般人の間では、これらの疾患は日常のパフォーマンスに影響を与え、衝動制御、金融行動、薬物乱用並びに組織との相関を示す。不安は、恐怖、懸念及び心配を含む感情の複雑な組み合わせに関与する不快な状態である。多くの場合、動悸、吐き気、胸の痛み、息切れ、又は緊張型頭痛などの身体的感覚を伴う。不安障害は、突然に起き得る（急性不安）並びに／若しくは徐々に数年間の期間で起き得る（慢性）、及び正常な日常生活のルーチンを行うことを阻害し若しくは防止するかもしれない異常で、病的な不安、心配、恐怖、及び神経状態のいくつかの異なる型をカバーする包括的な用語である。不安障害は、しばしば衰弱性の慢性状態で、それは若年期から存在し又は突然、誘起イベントの後に始まり得る。それらは、高ストレス時に突発する傾向がある。
【０００５】
不安はしばしば、認知的、身体的、感情的、及び行動的要素を有するものとして記載される（非特許文献１）。認知的要素は、広範及び不確実な危険への予期を伴う。身体的には、身体は生命体が脅威に対処するための準備を行う（緊急反応として知られる）：血圧並びに心拍数は増加し、発汗が増加し、主要な筋肉グループへの血流が増加し、及び免疫系並びに消化器系の機能は阻害される。外部からは、不安の身体的徴候は青白い皮膚、発汗、震え、及び瞳孔散大を含んでもよい。感情的には、不安は恐怖又はパニックの感覚を引き起こし、及び身体的には吐き気並びに悪寒を引き起こす。行動的には、自発的及び非自発的行動の両者が、不安の原因を回避又は避けるよう仕向けるかもしれない。これらの行動は頻繁に起こり、しばしば不適応で、不安障害の最も極端なものである。しかしながら、不安は常に病的又は不適応ではない：それは恐怖、怒り、悲しみ、並びに幸福と共にある一般的な感情で、それは生存との関係で非常に重要な機能を持つ。
【０００６】
扁桃体や海馬に関連した神経回路が、不安の根底にあると考えられる（非特許文献２）。悪臭又は悪味などの不快で潜在的に有害な刺激に直面すると、ＰＥＴスキャンは扁桃体での血流の増加を示す（非特許文献３；非特許文献４）。これらの研究では、参加者は中程度の不安をも報告した。このことは、不安は生命体が潜在的に有害な行動に従事することを防ぐために設計された保護的メカニズムであることを示すだろう。
【０００７】
不安に対する従来の治療法は、行動療法、ライフスタイルの変化及び／又は薬物療法（薬）を含む。これらの疾患の治療に使用されるほとんどの薬は、その使用を制限するであろう副作用を有し、習慣性及び依存性を引き起こすことが知られている。
【０００８】
シナプス後肥厚部−９５タンパク質（ＰＳＤ−９５）は、ＮＭＤＡＲｓを興奮毒性及び虚血性脳損傷を仲介するパスウェイに共役する（非特許文献５）。この共役は、ＰＳＤ−９５／ＮＭＤＡＲ相互作用複合体のどちらかの側の修飾ドメインに結合するペプチドを用いて、伝達ニューロンによって阻害される。この処置は、ＮＭＤＡＲ活性をブロックすることなく下流にあるＮＭＤＡＲシグナリングを弱め、培養皮質ニューロンを興奮毒性傷害から保護し、及び一過性局所脳虚血のラットにおける脳梗塞のボリュームを減少させた。この結果により、脳卒中及び興奮毒性により媒介される他の病気の治療のため、ＰＳＤ−９５／ＮＭＤＡＲのペプチド拮抗薬を使用する提案に至った。一つのそのような拮抗薬のフェーズＩ試験において、重大な副作用は観察されなかった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｓｅｌｉｇｍａｎ、Ｗａｌｋｅｒ ＆ Ｒｏｓｅｎｈａｎ， ２００１年
【非特許文献２】Ｒｏｓｅｎ ＆ Ｓｃｈｕｌｋｉｎ，Ｐｓｙｃｈｏｌ．Ｒｅｖ．，１０５（２）：３２５−３５０，１９９８
【非特許文献３】Ｚａｌｄ ＆ Ｐａｒｄｏ， ＰＮＡＳ， ９４（８）：４１１９−４１２４， １９９７
【非特許文献４】ＺａＩｄ、 Ｈａｇｅｎ ＆ Ｐａｒｄｏ， Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．， ８７（２）：１０６８−１０７５， ２００２
【非特許文献５】Ａａｒｔｓ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２９８， ８４６−８５０（２００２）
【発明の概要】
【００１０】
＜発明の簡単な概要＞
本発明は、ＰＳＤ９５とＮＭＤＡ受容体との特異的結合を阻害する薬剤を効果的な治療方法で患者に投与することを含む、不安の症状を発症する若しくはリスクを有する患者の治療又は効果的な予防の方法を提供する。該薬剤は、内在化ペプチドに連結したＮＭＤＡ受容体Ｃ末端から３から２５アミノ酸からなるアミノ酸配列又はＰＳＤ−９５受容体のＰＤＺドメイン１及び／又は２からなるアミノ酸配列を有する活性ペプチドを含むキメラペプチドであってもよい。該活性ペプチドは、［Ｅ／Ｄ／Ｎ／Ｑ］−［Ｓ／Ｔ］−［Ｄ／Ｅ／Ｑ／Ｎ］−［Ｖ／Ｌ］（配列番号：１）を含むアミノ酸配列を有してもよい。該活性ペプチドは、ＥＳＤＶ（配列番号：２）、ＥＳＥＶ（配列番号：３）、ＥＴＤＶ（配列番号：４）、ＥＴＥＶ（配列番号：５）、ＤＴＤＶ（配列番号：６）、ＤＴＥＶ（配列番号：７）からなる群より選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。該活性ペプチドはＫＬＳＳＩＥＴＤＶ（配列番号：８）を含むアミノ酸配列を有してよい。該キメラペプチドは、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＴＤＶ（配列番号：９）を含むアミノ酸を有してもよい。該キメラプチドは、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＴＤＶの（配列番号：９）からなるアミノ酸配列を有してもよい。該活性ペプチドは、ＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１０）を含むアミノ酸配列を有してもよい。該キメラペプチドは、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１１）を含むアミノ酸配列を有してもよい。該アミノ酸配列は、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１１）からなってもよい。
【００１１】
該患者は、該拮抗薬で治療が必要な不安以外の疾患はなくてもよい。該患者は、興奮毒性で媒介される不安以外の疾患はなくてもよい。該患者は脳卒中ではなくてもよい。オプションで、該患者は、興奮毒性で媒介される疾患はない。該薬剤は不安を促進するイベントの経験を持つ患者に対応して投与されてもよい。該患者は急性不安のエピソードを有してもよい。該患者はパニック障害を経験していてもよい。該患者は恐怖症を有し、及び該恐怖にさらされているか又はさらされようとしていてもよい。該患者は社会不安障害を有し、及び該障害を誘起するであろう社会状況にさらされているか又はさらされようとしていてもよい。該患者は強迫性障害を有し、及び該障害の症状を示していてもよい。該患者は不安の身体的感覚を有していてもよい。該身体的感覚は動悸、吐き気、胸の痛み、息切れ、及び／又は緊張型頭痛を含んでもよい。
【００１２】
該患者は心的外傷後ストレス症候群を有してもよい。該患者は分離不安を有してもよい。該薬剤は将来のイベントについて不安を経験する患者に対応して投与されてもよい。該効果的な治療方法は、患者において不安の診断に対応して投与されてもよい。該方法は不安の治療又は効果的な予防に効果的な二番目の治療方法を投与することをさらに含んでもよい。該二番目の治療方法は、第二の薬剤を投与することを含んでもよい。該二番目の治療方法は、会話治療を与えることを含んでもよい。いくつかの方法では、該患者は人間である。該薬剤は点滴静注又は皮下注射によって投与されてもよい。該効果的な治療方法は、該患者の不安症状の診断後、該症状を緩和し又は該症状の一層の発展を停止し若しくは阻害するために投与されてもよい。該薬剤は医薬組成物として薬学的に許容される担体と共に投与されてもよい。
【００１３】
いくつかの方法は、不安の症状及び／又は徴候の治療の効果を評価するために、該患者をモニタリングすることをさらに含む。該キメラペプチドは、０．０５から５００ｍｇの用量で、必要に応じ０．１から１００ｍｇ、０．５から５０ｍｇ、又は１から２０ｍｇの用量で投与されてもよい。
【００１４】
本発明は上記に定義された薬学的に許容される担体及び薬剤を含む、患者の不安の症状の予防又は治療のための医薬組成物をさらに提供する。該医薬組成物は、不安の症状の治療又は効果的な予防に適したものであると表示するラベルを持ってもよい。
【００１５】
本発明は、不安の治療又は効果的な予防のための薬剤の製造において、上記に定義された薬剤の使用をさらに提供する。
【００１６】
本発明は、内在化ペプチドに連結したｔＳＸＶペプチドを効果的な治療方法で患者に投与することを含む、不安に苦しむ又はリスクがある患者において不安の症状の治療又は効果的な予防の方法をさらに提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は高架式十字迷路試験での平均訓化スコア（±ＳＥＭ）を示す。
【図２】図２はオープンフィールド試験での平均訓化スコア（＋ＳＥＭ）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
＜定義＞
「キメラポリペプチド」は複合ポリペプチドを指す（すなわち、１つの連続したアミノ酸配列で、通常は１つのアミノ酸配列に融合されていない２つ（又はそれ以上）の異なる異種のポリペプチドから構成される）。
【００１９】
「ＰＤＺドメイン」という用語は、約９０アミノ酸のモジュラータンパク質ドメインを指し、脳のシナプスタンパク質ＰＳＤ−９５、ショウジョウバエの中隔結合タンパク質Ｄｉｓｃｓ−Ｌａｒｇｅ（ＤＬＧ）、及び上皮のタイトジャンクションタンパク質ＺＯ１（ＺＯ１）と有意な配列相同性（例えば、少なくとも６０％）を有することを特徴とする。ＰＤＺドメインはまた、Ｄｉｓｃｓ−Ｌａｒｇｅ相同性リピート（「ＤＨＲｓ」）及びＧＬＧＦリピートとしても知られている。ＰＤＺドメインは、一般にコアコンセンサス配列を維持するように見える（Ｄｏｙｌｅ， Ｄ． Ａ．， １９９６， Ｃｅｌｌ ８５：１０６７−７６）。代表的なＰＤＺドメインを含むタンパク質とＰＤＺドメイン配列は米国特許出願２００６−０１４８７１１Ａ１に開示され、それは参照によって本明細書中に完全に組み込まれる。
【００２０】
「ＰＬタンパク質」又は「ＰＤＺリガンドタンパク質」の用語は、ＰＤＺドメインと分子複合体を形成する天然のタンパク質、又は全長タンパク質から分離して発現された場合（例えば、３から２５残基のペプチド断片、例えば、３、４、５、８、１０、１２、１４、又は１６残基のペプチド断片として）カルボキシ末端がそのような分子複合体を形成するタンパク質を指す。該分子複合体は、例えば米国特許出願２００６−０１４８７１１Ａ１に記載された「Ａアッセイ」若しくは「Ｇアッセイ」を使ってインビトロで、又はインビボで観察されることができる。
【００２１】
「ＰＬモチーフ」は、ＰＬタンパク質のＣ末端のアミノ酸配列（例えば、Ｃ末端３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１６、２０又は２５の連続したアミノ酸残基）（「Ｃ末端のＰＬ配列」）、又はＰＤＺドメインに結合することが知られた内部配列（「内部ＰＬ配列」）を指す。
【００２２】
「ＰＬペプチド」は、ＰＤＺドメインに特異的に結合するＰＬモチーフを含む若しくはからなる、あるいはそれ以外の場合には基づくペプチドである。
【００２３】
「ＮＭＤＡ受容体」又は「ＮＭＤＡＲ」という用語は、ＮＭＤＡと相互作用することが知られる膜結合タンパク質を指す。該用語は、従って、本出願に記載される様々な形態のサブユニット型を含む。このような受容体はヒト又は非ヒト（例えば、マウス、ラット、ウサギ、サル）由来であってもよい。
【００２４】
「単離された」又は「精製された」の用語は、目的の種（例えば、ペプチド）が、目的の種を含む自然発生源から得られたサンプルなどの、サンプルに存在する混入物から精製されてきたことを意味する。目的の種が単離され又は精製される場合、主要な高分子種（ポリペプチド）がサンプル中に存在し（つまり、モルベースで、それが組成物中の任意の他の個々の種よりも量が多い）、及び好ましくは、該目的の種が存在する全ての高分子種の少なくとも約５０％（モルベースで）を含む。一般的には、単離された、精製された又は実質的に純粋な組成物は、組成物中にある全ての高分子種の８０から９０パーセントより多く含む。最も好ましくは、該目的の種は本質的に均一に精製され（すなわち、混入された種は、従来の検出方法では該組成物中に検出できない）、そこでは該組成物は本質的に単一の高分子種からなる。
【００２５】
「ペプチド模倣剤」とは、本発明のペプチドと実質的に構造及び／又は機能的特性が同一の合成化学物質を指す。該ペプチド模倣剤は、アミノ酸の完全に合成された、非天然の類似体を含むことができ、又は部分的に天然のペプチドアミノ酸と部分的にアミノ酸の非天然類似体を有するキメラ分子である。該ペプチド模倣剤は、置換が模倣剤の構造及び／又は阻害若しくは結合活性を実質的に変更しない限り、任意の量の天然アミノ酸による保守的な置換をも取り込むことができる。ポリペプチド模倣剤の組成物は非天然構造組成物の任意の組み合わせを含むことができ、典型的には３つの構造グループからなる：ａ）天然アミド結合（「ペプチド結合」）連鎖以外の残基連鎖；ｂ）天然アミノ酸残基の代わりの非天然残基；又はｃ）二次構造の模倣を誘導する残基（すなわち、例えば、ベータターン、ガンマターン、ベータシート、アルファへリックス構造、及びそれに類似するものなどの二次構造を誘導又は安定化するもの）。
【００２６】
「特異的結合」の用語は、例えば、リガンドと受容体の二つの分子間の結合を指し、多くの他の様々な分子の存在下においても別の特異的分子（受容体）と結合する分子（リガンド）の能力を特徴とする（すなわち不均一な分子の混合物の中で、一分子が他の分子に優先的に結合することを示す）。リガンドと受容体の特異的結合は、過剰量の非標識リガンドの存在下で検出可能な標識されたリガンドと受容体との結合が減少することでも（すなわち、結合競合アッセイ）証拠づけられる。
【００２７】
統計的に有意とは、ｐ値が＜０．０５、好ましくは＜０．０１、及び最も好ましくは＜０．００１であることを指す。
【００２８】
「患者」は、人間、家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃ ａｎｉｍａｌ）（例えば、猫、犬）、家畜（ｆａｒｍ ａｎｉｍａｌ）（例えば、鶏、牛、羊、馬、豚）、及び実験動物（例えば、ラット、マウス）を指す。
【００２９】
抗体という用語は、完全な抗体及びその結合フラグメントを含めて使用される。通常、フラグメントは抗原への特異的結合において、それが由来する完全な抗体と競合し、及び他の抗体と競合する。
【００３０】
「薬剤」という用語は、薬理学的活性を有する又は有する可能性のある化合物について記述するために使用される。薬剤は、既知の治療薬、薬理活性が確認されているがさらに治療法の評価を受けている化合物、及び薬理活性をスクリーニングする必要のあるコレクション並びにライブラリのメンバーである化合物を含む。該用語は、抗体、タンパク質並びに低分子化合物（５００Ｄ未満）を含むペプチド、及び天然産物などの有機又は無機の化学物質を含む。
【００３１】
「症状」又は「臨床症状」という用語は、患者によって知覚される病気の主観的な証拠（吐き気の感覚など）を指す。「徴候」は、血圧の上昇など、医師により観察された病気の客観的な証拠を指す。症状と徴候は必ずしも相互に排他的ではない。
【００３２】
＜発明の詳細な説明＞
＜Ｉ．一般事項＞
本発明は、不安の症状の治療又は効果的な予防に有益な薬剤を提供する。本発明は、ＰＳＤ９５とＮＭＤＡＲ２Ｂとの特異的結合の拮抗薬がこの疾患のラットモデルにおいて不安を減少することが分かった実施例中に記載された結果に部分的に基づいている。不安は、そのような拮抗薬が、興奮毒性の結果として知られていない不安に有益であろうという提案がなされてきた他の病気とは異なっている。メカニズムの理解は本発明の実施のために必要とされていないけれども、本発明のそのような薬剤がＮＭＤＡＲｓ（特にＮＡＲ２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、及びＤ）とシナプス後膜肥厚９５タンパク質との相互作用を阻害すること（すなわち、ＰＳＤ−９５阻害剤）によって少なくとも部分的に作用すると信じられている。該薬剤は、ＰＳＤ−９５とｎＮＯＳ（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＭ＿００８７１２）との相互作用をも阻害してもよい。該薬剤は、ＰＳＤ９５ファミリーメンバーＳＡＰ１０２（Ｍｕｌｌｅｒ， Ｎｅｕｒｏｎ １７， ２５５−２６５ （１９９６））、ＳＡＰ９７（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＭ＿００７８６２）、及びＰＳＤ９３（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＭ＿００１１８０７）、又はＰＤＺを含むタンパク質であるＴＩＰ１（ＧｅｎＢａｎｋ ＮＭ＿０２９５６４）の相互作用をも阻害してもよい。１つ又は複数のそのような阻害の結果として、該薬剤は中枢神経の興奮性ＮＭＤＡ介在神経伝達を阻害し、及びそのような伝達より生じる不安の徴候並びに／又は症状を阻害すると信じられている。ただし、本発明の方法は任意の不安の型に使用できるが、それらは特に、緊急に起きる又は起きることが予想される誘起イベントの結果である、パニック発作などの不安の急性発症に有益である。
【００３３】
本方法で使用される薬剤は、以前に脳卒中の治療に有用であることが報告されていて、深刻な有害事象なしに、この事象のためのフェーズＩ臨床試験を受けている。脳卒中の治療に使用される投与量及び治療方法は、不安のために、特に不安の急性発症のために使用することもできる。不安のより慢性型は、より長い期間薬剤を投与する必要があるだろう。
【００３４】
＜ＩＩ． 薬剤＞
薬剤は少なくとも２つの要素を有するキメラペプチド及びペプチド模倣剤を含む。最初の要素は、ＮＭＤＡ受容体のＰＬモチーフ（すなわち、ＰＬペプチド）若しくはＰＳＤ９５のＰＤＺドメインを含む又は基づくアミノ酸配列を有する活性ペプチドである。本発明に有用な活性ペプチドは、シナプス後膜肥厚９５タンパク質（ＰＳＤ−９５）（ヒトのアミノ酸配列はＳｔａｔｈａｋｉｓｍ，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ４４（１）：７１ − ８２（１９９７）によって提供される）のＰＤＺドメイン１並びに２と、神経性Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体（Ｍａｎｄｉｃｈ ｅｔ ａｌ．， Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ２２， ２１６−８ （１９９４））のＮＲ２Ｂサブユニットを含む一以上のＮＭＤＡ受容体２サブユニットのＣ末端ＰＬ配列との相互作用を阻害する。ＮＭＤＡＲ２ＢはＧｅｎＢａｎｋ番号４０９９６１２、Ｃ末端２０アミノ酸ＦＮＧＳＳＮＧＨＶＹＥＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１２）及びＰＬモチーフＥＳＤＶ（配列番号：２）を有する。活性ペプチドは、好ましくはヒト型のＰＳＤ−９５及びヒトのＮＭＤＡＲ受容体を阻害する。しかし、阻害は該タンパク質の変種からでも示されることができる。使用され得るＮＭＤＡ及びグルタミン酸受容体のリストが下に表示される：
【００３５】
【表１】
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【００３６】
いくつかの活性ペプチドはＰＳＤ−９５と複数のＮＭＤＡＲサブユニットとの相互作用を阻害する。このような例では、該ペプチドの使用は、必ずしも異なるＮＭＤＡＲｓによる興奮性神経伝達へのそれぞれの貢献の理解を必要としない。他の活性ペプチドは単一のＮＭＤＡＲに特異的である。
【００３７】
活性ペプチドは、任意の上記サブユニットのＣ末端からのＰＬモチーフを含み又は基づいて、［Ｓ／Ｔ］−Ｘ−［Ｖ／Ｌ］を含むアミノ酸配列を有する。この配列は好ましくは、本発明のペプチドのＣ末端にある。好ましいペプチドは、［Ｅ／Ｄ／Ｎ／Ｑ］−［Ｓ／Ｔ］− ［Ｄ／Ｅ／Ｑ／Ｎ］−［Ｖ／Ｌ］（配列番号：１）をＣ末端に含むアミノ酸配列を有する。代表的なペプチドは、ＥＳＤＶ（配列番号：２）、ＥＳＥＶ（配列番号：３）、ＥＴＤＶ（配列番号：４）、ＥＴＥＶ（配列番号：５）、ＤＴＤＶ（配列番号：６）、ＤＴＥＶ（配列番号：７）をＣ末端アミノ酸として含む。二つの特に好ましいペプチドはＫＬＳＳＩＥＳＤＶ （配列番号：１０）及び ＫＬＳＳＩＥＴＤＶ（配列番号：８）である。内在化ペプチドのない本発明のペプチドは、通常、３から２５アミノ酸を有し、５から１０アミノ酸のペプチド長（また、内在化ペプチドなしに）、及び特に９アミノ酸が好まれる。そのような活性ペプチドのいくつかにおいて、すべてのアミノ酸はＮＭＤＡ受容体のＣ末端からなる。
【００３８】
他の活性ペプチドは、ＰＳＤ−９５のＰＤＺドメイン１及び／若しくは２、又はＰＳＤ−９５とＮＭＤＡ受容体（ＮＭＤＡ２Ｂのような）との相互作用を阻害する任意のサブフラグメントを含む。このような活性ペプチドは、ＰＳＤ−９５のＰＤＺドメイン１及び／若しくはＰＤＺドメイン２からの少なくとも５０、６０、７０、８０、又は９０アミノ酸を含む。それは、Ｓｔａｔｈａｋｉｓｍ， Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ４４（ｌ）：７１−８２ （１９９７）（ヒト配列）、若しくはＮＰ＿０３１８９０．１、ＧＩ：６６８１１９５ （マウス配列）により提供されるＰＳＤ−９５のアミノ酸約６５から２４８番、又は他の変種の対応する領域内にある。
【００３９】
本発明の任意のペプチドは、細胞の細胞膜を介してのトランスロケーションを容易にする内在化ペプチドと、好ましくはそのＮ末端に連結されることができる。これらのペプチドの例は、ＨＩＶ由来のｔａｔ（Ｖｉｖｅｓ ｅｔ ａｌ．， １９９７， Ｊ． Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１６０１０；Ｎａｇａｈａｒａ ｅｔ ａｌ．， １９９８， Ｎａｔ．Ｍｅｄ．４：１４４９）、ハエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）のアンテナペディア（ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ）（Ｄｅｒｏｓｓｉ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｊ． Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６１：１０４４４）、単純ヘルペスウイルスのＶＰ２２（Ｅｌｌｉｏｔ ａｎｄ Ｄ’Ｈａｒｅ， １９９７， Ｃｅｌｌ ８８：２２３−２３３）、抗ＤＮＡ抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）２若しくは３（Ａｖｒａｍｅａｓ ｅｔ ａｌ．， １９９８， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．， ９５：５６０１−５６０６）、７０ｋＤａヒートショックタンパク質（Ｆｕｊｉｈａｒａ， １９９９， ＥＭＢＯ Ｊ． １８：４１１−４１９）及びトランスポータン（ｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎ）（Ｐｏｏｇａ ｅｔ ａｌ．， １９９８， ＦＡＳＥＢ Ｊ． １２：６７−７７）を含む。例えば、ＨＩＶのＴＡＴ内在化ペプチドＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号：３７）を使用することができる。このＨＩＶＴａｔ内在化ペプチド及び活性ペプチドを含む二つの好ましいペプチドは、ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＴＤＶ（配列番号：９、Ｔａｔ−ＮＲ２Ｂ９ｃ（ＴＤＶ））、及びＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＫＬＳＳＩＥＳＤＶ（配列番号：１１、Ｔａｔ−ＮＲ２Ｂ９ｃ（ＳＤＶ））である。
【００４０】
標準的なｔａｔ配列ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号：３７）の変異体も使用することができる。２００７年３月２日付けの係属中の米国特許出願６０／９０４５０７によると、標準的なｔａｔペプチドはＮ型カルシウムチャンネルに結合及び阻害し、その結合により様々な副作用を誘導する可能性があると報告している。本発明の実施はメカニズムの理解に依存していないが、ｔａｔの膜を横断する能力とＮ型カルシウムチャネルに結合することの両者は、該ペプチド中の異常に高い頻度で起こるプラスに帯電したＹ、Ｒ、及びＫ残基により付与されると信じられている。本発明で使用する変異型ペプチドは、細胞への取り込みを容易にする能力を保持するが、Ｎ型カルシウムチャンネルへ結合する能力は減少している。いくつかの適切な内在化ペプチドは、アミノ酸配列ＸＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号：３８）を含み又はからなり、そのＸはＹ以外のアミノ酸又は何もなしである（この場合、ＧがフリーのＮ末端残基である）。好ましいｔａｔ変異体は、Ｎ末端のＹ残基がＦで置換される。従って、ＦＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号：３９）を含む又はからなるｔａｔ変異体が好まれる。別の好ましいｔａｔ内在化ペプチドは、ＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号：４０）からなる。ＸＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号：３８）をフランクする追加的な残基が存在するならば（活性ペプチドの他に）、該残基は例えば、ｔａｔタンパク質のこのセグメントをフランクする天然のアミノ酸、スペーサー、又は二つのペプチドドメインを結合することに通常使用されるリンカ―アミノ酸（例えば、ｇｌｙ（ｓｅｒ）４（配列番号：４１）、ＴＧＥＫＰ（配列番号：４２）、ＧＧＲＲＧＧＧＳ（配列番号：４３）、又はＬＲＱＲＤＧＥＲＰ（配列番号：４４）（例えば、Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９６）， Ｊ． Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１， １５６８２− １５６８６；Ｈｅｎｎｅｃｋｅ ｅｔ ａｌ．（１９９８）， Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．１１， ４０５−４１０を参照））である。又は、該残基はフランキング残基なしに該変異体を取り込む能力を検出できる程度に減少しない、及びフランキング残基なしに該変異体と比べてＮ型カルシウムチャネルの阻害を有意に増加しない任意の他のアミノ酸であってもよい。好ましくは、活性ペプチド以外のフランキングアミノ酸の数は、ＸＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ（配列番号：３８）のいずれかの側に１０を超えない。好ましくは、フランキングアミノ酸は存在せず、内在化ペプチドは直接活性ペプチドのＣ末端に連結される。
【００４１】
Ｎ型カルシウムチャンネルを阻害することなしにＰＳＤ−９５相互作用を阻害するための本発明の任意の活性ペプチドを取り込ませるのに使用され得る他のｔａｔ変異体は、以下の表２に示されるものを含む。これらの内在化ペプチドは、目的の取り込み及びＮ型カルシウムチャネルを阻害しないことを確認するためにスクリーニングされることが推奨される。これらの配列はＮ型カルシウムチャンネルを阻害することなしに輸送能力を維持することが本明細書中で予想され、従って不安の治療のためのより大きい治療の指標を示す。
【００４２】
【表２】
2014129353.tif 000003
【００４３】
Ｘは、フリーのアミノ末端、ビオチン分子又は他のキャッピング部分を表し、限定はされないが、Ｈ、アセチル、ベンゾイル、アルキル基（脂肪族）、ピログルタミン酸、シクロアルキル基を末端に有するアルキル基、アルキルスペーサーを有するビオチン、（５，６）−ＦＡＭを含む。Ｎ末端ペプチドにキャッピング基を化学結合するものは、アミド化学、スルファミド化学、スルホン化学、アルキル化化学を通して行われてもよい。また、Ｘは、チロシン以外のアミノ酸であってもよい。?
【００４４】
内在化ペプチドは通常融合ペプチドとして活性ペプチドに連結されるが、化学結合によっても結合され得る。２つの成分の結合は、結合剤又は接合剤を介して行われることができる。そのような多数の薬剤は、商業的に利用でき、Ｓ．Ｓ．Ｗｏｎｇ、蛋白質接合とクロスリンクの化学、ＣＲＣプレス（１９９１）によって概説される。クロスリンク薬剤のいくつかの例は、Ｊ−サクシニミジル３−（２−ピリジルジチオ）プロピオン酸（ＳＰＤＰ）又はＮ，Ｎ’−（１，３−フェニレン）ビスマレイミド；Ｎ，Ｎ’−エチレン−ビス−（イオドアセタミド）又は６から１１の炭素メチレンブリッジを有する（スルフヒドリル基に比較的特異的な）他の薬剤；及び、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン（これはアミノ基及びチロシン基と不可逆的なリンクを形成する）を含む。他のクロスリンク試薬は、ｐ，ｐ’−ジフルオロ−ｍ，ｍ’−ジニトロジフェニルスルフォン（これは、アミノ基及びフェノール基と不可逆的なクロスリンクを形成する）；ジメチルアジピミデート（これはアミノ基に特異的である）；フェノール１，４−ジスルフォニルクロライド（これは主にアミノ基と反応する）；ヘキサメチレンジイソシアネート若しくはジイソチオシアネート、又はアゾフェニル−ｐ−ジイソシアネート（これは主にアミノ基と反応する）；グルタルアルデヒド（これはいくつかの異なる側鎖と反応する）及びジスジアゾベンジジン（これは主にチロシン及びヒスチジンと反応する）を含む。
【００４５】
これら直前に記載したようなペプチドは、阻害剤の結合親和性を向上させるために、細胞膜を通過して輸送される阻害剤の能力を改善するために、又は安定性を向上するために、オプションで誘導体化（例えば、アセチル化、リン酸化、及び／又はグリコシル化）されることができる。具体的な例としては、Ｃ末端から３番目の残基がＳ又はＴの阻害剤の場合、この残基は該ペプチドを使用する前にリン酸化されてもよい。
【００４６】
本発明のペプチドは、オプションで内在化ドメインに融合され、固相合成又は遺伝子組換えの方法で合成されることができる。ペプチド模倣剤は、科学文献及び特許文献に記載される様々な手続き及び方法論を使って合成されてもよい。例えば、有機合成集、Ｇｉｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．、（Ｅｄｓ） Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ．， ＮＹ、ａｌ−Ｏｂｅｉｄｉ（１９９８） Ｍｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９：２０５−２２３、Ｈｒｕｂｙ （１９９７） Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．１：１１４−１１９、 Ｏｓｔｅｒｇａａｒｄ （１９９７） Ｍｏｌ．Ｄｉｖｅｒｓ． ３：１７−２７、 Ｏｓｔｒｅｓｈ （１９９６） Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２６７：２２０−２３４がある。
【００４７】
内在化ペプチドのない本発明のペプチドは、通常、３から２５アミノ酸を有し、５から１０アミノ酸のペプチド長（また、内在化ペプチドなしに）、及び特に９アミノ酸が好まれる。
【００４８】
ペプチド又はペプチド模倣剤の適切な薬理学的活性は、望ましくは、実施例中に記載された動物モデルを用いて確認されることができる。オプションで、ペプチド又はペプチド模倣剤は、この参照により組み込まれる米国特許出願２００５００５９５９７に記載されるアッセイを使って、ＰＳＤ−９５とＮＭＤＡＲ２Ｂとの相互作用を阻害する能力をもスクリーニングされることができる。有用なペプチドは、このようなアッセイにおいて、通常５０μＭ、２５μＭ、 １０μＭ、０．１μＭ、又は０．０１μＭ未満のＩＣ５０値を有する。好ましいペプチドは通常０．００１から１μＭ、より好ましくは０．０５から０．５又は０．０５から０．１μＭの間のＩＣ５０値を有する。
【００４９】
これら直前に記載したようなペプチドは、阻害剤の結合親和性を向上させるために、細胞膜を通過して輸送される阻害剤の能力を改善するために、又は安定性を向上するために、オプションで誘導体化（例えば、アセチル化、リン酸化、及び／又はグリコシル化）されることができる。具体的な例としては、Ｃ末端から３番目の残基がＳ又はＴの阻害剤の場合、この残基は該ペプチドを使用する前にリン酸化されてもよい。
【００５０】
薬剤はまた、ＰＳＤ９５とＮＭＤＡＲ２Ｂとの間の相互作用、及び／又は上記した他の相互作用を阻害する低分子化合物をも含む。適切な低分子阻害剤は、２００５年１２月２９日付の係属中の国際出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２００６／０６２７１５に記載され、それはこの参照により本明細書中に完全に組み込まれる。これらの分子は、ＰＳＤ９５に結合する化合物ライブラリのインシリコスクリーニングによって同定され、代表的な化合物の結合は実験的に確認された。適切な化合物は、一般構造Ｐ０−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅを有する化合物で、そこではＤとＥはオプションであり、及びＰ０は、
【化１】
2014129353.tif 000004
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５の一つは−ＣＯＯＨであり、及びＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５のその残りは、Ｆ、Ｈ、ＯＣＨ３並びにＣＨ３からなる群から選択され；
及びＸは、−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅで、ここではＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ並びにＥは単結合を介して連結され）、
及び、ＡはＣ＝Ｏ、ＮＨ、ＳＯ２並びに（ＣＨ２）ｍ（式中、ｍ＝０、１、２、３、４、又は５）からなる群から選択され；
Ｂは、−ＯＣＨ２−、Ｃ＝Ｏ、
【化２】
2014129353.tif 000005
（式中、Ｒ６−Ｒ１０の一つは−Ｃ−Ｄ−Ｅに結合し、及び式中Ｒ６−Ｒ１０のその残りはＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３並びにＯＣＨ３の群から選択され、並びにｎ＝０又は１で）；
又は、飽和又は不飽和のシクロアルキル又は複素環からなる群より選択される環系；
又は、
【化３】
2014129353.tif 000006
（式中、ｏ並びにｐ＝０又は１で、ｑ＝０、１、２、３、又は４で、及びＲ１１は、置換若しくは非置換の低級アルキル、アミド、チオエーテル、フェニル、フェノール、インドール、イミダゾール、ＮＨ（ＮＨ２）（Ｎ（＋）Ｈ２）、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ＯＨ、又はＨからなる群より選択され）；
Ｃは、−Ｏ−、Ｃ＝Ｏ、ＮＨ、ＣＯＮＨ、Ｓ、フタルアミド、ＣＨ３、Ｈ、ＳＯ２及び（ＣＨ２）ｒ（式中、ｒ＝０、１、２、３、４、又は５）からなる群より選択され；
Ｄはオプションで、Ｃが末端でない場合、Ｄは−ＣＮ−、Ｃ＝Ｏ、ＮＨ、Ｓ、Ｏ、ＳＯ２、 （ＣＨ２）Ｓ（式中、ｓ＝０、１、２、３、４、又は５）及び（ＣＨ２）ｔ−ＯＨ（式中、ｔ＝０、１、２、３、４又は５）並びに
【化４】
2014129353.tif 000007
からなる群より選択され；
及びＥはオプションで、並びにＤが末端でない場合、Ｅは、いずれかは低級アルキル、低級アルコキシ、ケトン、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ニトロソ、Ｎ置換インドリン、又は細胞膜透過ペプチドで置換されたシクロヘキシル又はフェニルで；又は−（ＣＨ２）ｕ−（ＣＨＲ１２Ｒ１３）（式中、Ｕ＝０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１、１２、１３、１４、１５、１６、又は１７、及びＲ１２並びにＲ１３は独立して、Ｈ、ＯＨ、シクロヘキサン、シクロペンタン、フェニル、置換フェニル、シクロペンタジエンからなる群より選択されて）；又はイソプロピル、イソブチル、１−イソプロピル−２−メチル−ブチル、１−エチル−プロピルを含む分岐した低級アルキルであり；又は−ＮＨ−ＣＯＲ１４（式中、 Ｒ１４は（ＣＲ１５Ｒ１６）ＶＨ（式中、Ｖ＝０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、 １６、又は１７、及びＲ１５並びにＲ１６は独立して、Ｈ、シクロヘキサン、フェニル、及び細胞膜透過ペプチドからなる群より選択される）を含む。
【００５１】
また、Ｐ０は：
【化５】
2014129353.tif 000008
（式中、ｔ＝０、１、又は２で、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、又はＲ６のいずれかはＣＯＯＨであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、並びにＲ６のその残りは、Ｈ、ＣＨ３、Ｆ、並びにＯＣＨ３からなる群から選択され、及びＸは、−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅで、
（式中、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ及びＥは単結合を介して連結され、及び
ＡはＣ＝Ｏ、ＳＯ２、ＮＨ、並びに（ＣＨ２）ｍ（式中、ｍ＝０、１、２、３、４、又は５）からなる群から選択され；
Ｂは、−ＯＣＨ２、Ｃ＝Ｏ、；又は
【化６】
2014129353.tif 000009
（式中、Ｒ５−Ｒ９の一つは−Ｃ−Ｄ−Ｅに結合し、及び式中、Ｒ５−Ｒ９のその残りはＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３並びにＯＣＨ３の群から選択され、並びにｎ＝０又は１）；
又は、飽和若しくは不飽和のシクロアルキル又は複素環からなる群より選択される環系；
又は、
【化７】
2014129353.tif 000010
（式中、ｏ並びにｐ＝０又は１で、及びＲ１０は置換若しくは非置換のアルキル、アミド、チオエーテル、フェニル、フェノール、インドール、イミダゾール、ＮＨ（ＮＨ２）（Ｎ（＋）Ｈ２）、ＣＯＯＨ、ＳＨ、ＯＨ、又はＨからなる群より選択され）；
Ｃは、Ｃ＝Ｏ、ＮＨ、Ｓ、フタルアミド、−Ｏ−、ＣＨ３、Ｈ、ＳＯ２、及び（ＣＨ２）ｒ（式中、ｒ＝０、１、２、３、４、又は５）からなる群より選択され；
Ｄはオプションで、Ｃが末端でない場合、ＤはＣ＝Ｏ、−ＣＮ−、ＮＨ、Ｓ、Ｏ、ＳＯ２、 （ＣＨ２）Ｓ（式中、ｓ＝０、１、２、３、４、又は ５）並びに
【化８】
2014129353.tif 000011
からなる群より選択され；
及びＥは、いずれかは低級アルキル、低級アルコキシ、ケトン、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ニトロソ、Ｎ置換インドリンで置換されたフェニル又はシクロヘキシルで；又は−（ＣＨＲ１１Ｒ１２）ｕ（式中、ｕ＝０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、又は１７、及びＲ１１並びにＲ１２は独立して、Ｈ、ＯＨ、シクロヘキサン、シクロペンタン、フェニル、置換フェニル、シクロペンタジエンからなる群より選択される）；又は、イソプロピル、イソブチル、１−イソプロピル−２−メチル−ブチル、１ −エチル−プロピルを含む分岐した低級アルキルであり；又は−ＮＨ−ＣＯＲ１１（式中 Ｒ１１は（ＣＲ１２Ｒ１３）ｓ（式中、ｓ＝０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、又は１７、及びＲ１２並びにＲ１３は独立して、Ｈ、シクロヘキサン、フェニル、及び細胞膜透過ペプチドからなる群より選択される）である））。
【００５２】
いくつかの好ましい化合物は、次の構造を有する：
【化９】
2014129353.tif 000012
（式中、Ｒ１は、０−４Ｒ７で置換されたシクロヘキシル、０−４Ｒ７で置換されたフェニル、−（ＣＨ２）Ｕ−（ＣＨＲ８Ｒ９）、分岐したＣ１−６アルキル（イソプロピル、イソブチル、１−イソプロピル−２−メチルーブチル、１−エチル−プロピル）及び−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＲ１０Ｒ１１）ＶＨからなる群より選択されたメンバーであり；
各Ｒ７は、独立して、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１２、ＯＨ、ＣＯＯＨ、−ＮＯ、Ｎ置換インドリン、並びに細胞膜透過ペプチドからなる群より選択されたメンバーであり；
各Ｒ８及びＲ９は、独立して、Ｈ、ＯＨ、シクロヘキサン、シクロペンタン、フェニル、置換フェニル（例えば、ハロ、アルキル、及び／又はヒドロキシル基で置換された）、並びにシクロペンタジエンからなる群より選択され；
各Ｒ１０及びＲ１１は、独立して、Ｈ、シクロヘキサン、フェニル、並びに細胞膜透過ペプチドからなる群より選択され；
Ｒ１２は、Ｃ１−６アルキル並びにアリールからなる群より選択されたメンバーであり；
及び、ｕ並びにｖの各々は、独立して０から２０であり；
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６の一つは−ＣＯＯＨで、並びに式中Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ６のその残りは、それぞれ独立して、Ｆ、Ｈ、ＯＣＨ３、並びにＣＨ３からなる群より選択される。）
【００５３】
一つの実施形態では、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｕ−（ＣＨＲ８Ｒ９）である。別の実施形態では、Ｒ１は−（ＣＨ２）ｕ−（ＣＨＲ８Ｒ９）以外のＲ１置換基の上記群のメンバーである。
【００５４】
好ましい薬剤は、次の構造を有する
【化１０】
2014129353.tif 000013
【００５５】
その他の化合物は、天然又は合成分子からスクリーニングされてもよい。スクリーニングされる薬剤は、また、海洋微生物、藻類、植物、菌類のような自然発生源から得られる可能性があり、ペプチドのランダムライブラリ又は他の化合物はまた、ＰＳＤ９５への結合、及びＮＭＤＡＲｓ並びに／若しくは上記セクションＩに記載された分子とＰＳＤ９５との相互作用を阻害する能力をスクリーニングされてもよい。コンビナトリアルライブラリが、ステップバイステップの様式で合成することができる多くの種類の化合物のために生産されてもよい。そのような化合物は、ポリペプチド、ベータターン模倣剤、多糖類、リン脂質、ホルモン、プロスタグランジン、ステロイド、芳香族化合物、複素環化合物、ベンゾジアゼピン、オリゴマーのＮ置換グリシン及びオリゴカルバミン酸を含む。該化合物の大規模なコンビナトリアルライブラリは、Ａｆｆｙｍａｘの国際出願ＷＯ９５／１２６０８、Ａｆｆｙｍａｘの国際出願ＷＯ９３／０６１２１、コロンビア大学の国際出願ＷＯ９４／０８０５１、Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａの国際出願ＷＯ９５／３５５０３及びスクリプスの国際出願ＷＯ９５／３０６４２（各出願は全ての目的のためにこの参照によって組み込まれる）に記載された、エンコードされた合成ライブラリ（ＥＳＬ）法によって構築され得る。ペプチドライブラリは、ファージディスプレイ法によって生成されてもよい。Ｄｅｖｌｉｎの国際出願ＷＯ９１／１８９８０を参照する。Ａドメインのマルチマーを構成するアビマー（Ａｖｉｍｅｒｓ）は、同様の方式で抗体に使用されることができる（Ｓｉｌｖｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３，１４９３−４ （２００５））。上記された結合及び抑制性の特性を有する化合物は、不安の動物モデルでさらにスクリーニングされることができる。オプションで、上記任意の化合物は、医薬組成物として、医薬賦形剤と混合される。?
【００５６】
＜ＩＩＩ．不安＞
文脈から明らかでない場合は、不安への言及は、精神疾患の診断と統計マニュアル、第４版（ＤＳＭ―ＩＶ−ＴＲ）及び／又は以下に定義された不安の任意の型を含む。不安のサブタイプの多くは、急性発症（すなわち、もしあれば、より少ない若しくはより激しくない症状並びに徴候が比較的長い間隔で分けられた、比較的に多数の並びに／若しくは激しい症状並びに徴候が比較的に短期間で現れる）を特徴とする。多くの場合、急性発症は、緊急に発生した又は発生することが予期される特定のイベントによりしばしば誘起される。不安とそのサブタイプは、患者がＤＳＭ−ＩＶ−ＴＲの基準を満たすかどうかを決定する質問表を適用することによって通常診断される。
【００５７】
＜全般性不安障害＞
全般性不安障害は、男性の２倍女性に発症し及びかなりの機能障害に導く可能性のある一般的な慢性疾患である（Ｂｒａｗｍａｎ−Ｍｉｎｔｚｅｒ ＆ Ｌｙｄｉａｒｄ，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ， ５７ （Ｓｕｐｐｌ．７）：３−８， １９９６；Ｂｕｌｌ．Ｍｅｎｎｉｎｇｅｒ Ｃｌｉｎ．， ６１（２ ｓｕｐｐｌ．Ａ）：Ａ６６−Ａ９４， １９９７；Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ， ５８（ｓｕｐｐｌ．３）：１６−２５， １９９７）。その名のとおり、全般性不安障害は、任意の特定の対象や状況に焦点を当てていない長期間持続する不安を特徴とする。言い換えれば、それは、非特異的又は漠然としている。この障害を有する人々は、何かに恐れを感じるが、特定の恐怖を明確にすることができない。彼らは常に思い悩み、及び不安を制御するのが難しい。永続的な筋緊張及び自律神経性の恐怖反応のため、彼らは、頭痛、動悸、めまい、及び不眠症を発症するかもしれない。これらの身体的な訴えは、強烈で長期的な不安と組み合わせされ、通常の日常活動への対処を難しくさせる。
【００５８】
＜パニック障害＞
パニック障害では、人は、震え並びに身震い、混乱、めまい、吐き気、呼吸困難、及び死が迫っているような感じ若しくは当惑するような状況の感覚を引き起こす、強烈な恐怖並びに不安の短い発作に苦しむ。米国精神医学会（２０００年）は、パニック発作を、突然起こり並びにピークが１０分以内に発生し、及び時折何時間も持続し得る恐怖又は不快感として定義する。
【００５９】
パニック発作は時折突然発生するように見えるが、それらは一般的に、恐ろしい経験、長期のストレス、又はさらに運動の後に起こる。パニック発作（特に、最初の１つ）が起こった多くの人は、心臓発作を起こしていると考え、しばしば医師又は救急室に駆け込む。検査が全て正常だと判明したとしても、人はそれでも不安で、何か自分の体に悪いところがあるのではという恐怖を強化するだけの不安の身体的な徴候を示す。人間の体の正常な機能における任意の変化への認識の高まり（過覚醒）がパニック発作に苦しむ個人によって認められ及び生命を脅かす可能性のある病気として解釈されるだろう。
【００６０】
階段を登る時のような心拍数の正常な変化が、パニックに苦しんでいる人に認識され、何か彼らの心臓に悪いところがある又は別のパニック発作を起こそうとしていると彼らに考えさせるように誘導する。幾人かは過度に心配し始め、仕事を辞めたり又は将来の発作を避けるために家を出ることを拒否さえする。パニック障害は、いくつかの明らかに自発的な発作が将来の発作についての永続的な懸念につながる場合に診断され得る。
【００６１】
＜広場恐怖症＞
パニック障害の一般的な合併症は広場恐怖症（逃避が難しい若しくは気恥ずかしい場所又は状況にあることについての不安（Ｃｒａｓｋｅ，２０００年；Ｇｏｒｍａｎ，２０００年））である。 該言葉の定義は、患者がしばしば発症する回避行動を指すように拡張される。パニック発作の患者が、例えば運転中にその発症をしたような場合、彼又は彼女は運転を避けるようになり、それは不安を軽減し、及びその後、行動の強化の結果、将来の運転がより難しくなる。
【００６２】
＜恐怖症＞
このカテゴリは、強く非合理的な恐怖、及び対象又は状況の回避に関わる。人は、該恐怖が不合理であるが、該不安は残ることを知る。強い恐怖反応を誘発する特定の刺激又は状況があるため、恐怖障害は全般性不安障害及びパニック障害とは異なる。クモの恐怖に苦しむ人は、クモに恐怖を感じ、彼又は彼女はスピードを出した車の外にジャンプしてそれから逃げようと試みるだろう。
【００６３】
恐怖症を有する人々は特に強力な想像力を持っていて、ナイフ、橋、血液、屋内、特定の動物又は状況などの恐れる対象物に遭遇することにより、恐ろしい結果を強く予測する。これらの個人は、自分たちの懸念は過剰及び理不尽であるが、一般的には不安を制御することができないと一般的に認識している。
【００６４】
＜社会不安障害＞
社会不安障害は社会恐怖症としても知られる。この障害を有する個人は、他人にネガティブに評価されること又は衝動的な行為のために公に辱められることへの強烈な恐怖を経験する。ほぼだれでもが群衆の前で話す又はパフォーマンスする場合、「舞台恐怖症」を経験する。有意な不安なしに公にパフォーマンスすることができる社会不安障害を有するアーティスト又はパフォーマーが時折いるので、自分たちの芸術をパフォーマンス及び実践することへの愛情が、彼らの不安を減少させるかもしれない。しかし、社会恐怖症を有する人はしばしば心配になり、子供たちが幼い頃から楽器の演奏をするなどのパフォーマンスは、もし彼らが天性のパフォーマーでない場合、論外である。実際には、公共の監視及び潜在的な辱めの恐怖が波及するので、通常の生活が不可能になり得る（ｄｅｎ Ｂｏｅｒ ２０００年；Ｍａｒｇｏｌｉｓ ＆ Ｓｗａｒｔｚ，２００１年）。もう一つの社会恐怖症は愛への内気であり、特定の男子に最も悪影響する。これらに苦しむ人は、親密な大人の関係を開始することはできないことを見出す（Ｇｉｌｍａｒｔｉｎ １９８７年）。
【００６５】
＜強迫性障害＞
強迫性障害は、主として強迫及び／又は強制を特徴とする不安障害の型である。強迫は、窮迫的、反復的、侵入的思考であり、又個人がしばしば認識するイメージは無意味である。強制とは、不安を緩和するために、その人が何かをすることを強制的に又は無理やりと感じる反復的行動である。ＯＣＤ（強迫性障害）の思考パターンは、迷信（もしＸがなされれば、Ｙは起こらない――Ｘを行うことが実際にはＹを阻止するということが如何に現実的でなかったとしても、もしＹがそもそも現実的な脅威である場合）にたとえられてもよい。この行動の一般的な例は、ドアが空いていると強迫され、強制的に常にドアを確認及び再確認することにつながり得る。多くの場合、該プロセスは全く論理的でないように見える。例えば、特定のパターンでの歩行の強制は、何か悪いことが起ころうとしているという強迫を軽減するために採用されることがある。照明や他の家庭用品はまた強迫の一般的な対象である。
【００６６】
＜心的外傷後ストレス障害＞
心的外傷後ストレス障害は、戦闘、強姦、人質に取られること、又は深刻な事故に巻き込まれることなどの心的外傷経験から生じる不安障害である。患者は、フラッシュバック、回避的行動、及びその他の症状を経験するかもしれない。心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）は、該患者が高度に外傷性のものであるとして経験するストレスのかかるイベントへの暴露又は直面という特定の深刻な心理的影響のための用語である。臨床的に、このようなイベントは、通常の心理的防衛がそのインパクトに対処できない程度に、実際の若しくは切迫する死、深刻な身体的傷害、又は身体的及び／若しくは心理的整合性に関与する。それは、既存の精神状態の症状というよりは、心的外傷経験の結果であるということを強調するために、心的外傷後ストレス反応と呼ばれる。ＰＴＳＤ反応の存在は、経験の強度、その期間、及び関係する個人に影響される。
【００６７】
ＰＴＳＤは外部の要因又は複数の要因によって誘起されるかもしれない。その症状は以下のものを含んでもよい：悪夢、フラッシュバック、感情的な脱離若しくは感情の麻痺（感情的な自己苦行又は解離）、不眠、思い出させるものの回避並びに思い出させるもの（「トリガー」）に暴露された場合の極度の苦痛、食欲不振、易刺激性、過覚醒、記憶喪失（注意を払うことが困難に見えてもよい）、過度の驚愕反応、臨床的うつ病、及び不安を含む。また、ＰＴＳＤを患う人が一つ又は複数の他の精神疾患の合併症を示すことが可能である；これらの疾患はしばしば、臨床的うつ病（又は、双極性障害）、全般性不安障害、及び様々な中毒を含む。
【００６８】
心的外傷の１月以内に見られる症状は、ＤＳＭ−ＩＶによると急性ストレス障害と呼ばれ、ＰＴＳＤではない。この期間後に症状が改善されなければ、ＰＴＳＤが診断される。ＰＴＳＤは３つのサブフォームがある：急性ＰＴＳＤは３カ月の期間後に治まる。該症状が続く場合、診断は慢性ＰＴＳＤに変更される。３番目のサブフォームは、イベントの、数月、数年、又は数十年間後に発生する可能性がある遅発性ＰＴＳＤと称される。
【００６９】
ＰＴＳＤは、１９８０年に精神疾患の診断及び統計マニュアル（ＤＳＭ）に最初に登場した。戦争の退役軍人は最も公に認知されたＰＴＳＤの被害者である；長期的な精神疾患が、第一次世界大戦の退役軍人に正式に観察された。ＰＴＳＤはまた、社会の中で疎外されたグループでの問題として認識されてきた。そのようなグループの一つはオーストラリアのアボリジニの人々、及び世界各地の他の先住民である。これらの事例では、子供及び成人の心的外傷の繰り返される履歴、家族から子供がいなくなること、対人暴力並びに薬物乱用、及び早期死亡によりＰＴＳＤレベルが高い世代の人々を生じる。
【００７０】
ＰＴＳＤは、通常、暴力犯罪、強姦、及び戦争経験などの心的外傷と関連する。しかし、がんの生存者及びその親族の間でＰＴＳＤの報告が増え続けている（Ｓｍｉｔｈ １９９９年、Ｋａｎｇａｓ ２００２年）。ほとんどの研究は、乳癌の生存者（Ｇｒｅｅｎ １９９８年、Ｃｏｒｄｏｖａ ２０００年、Ａｍｉｒ ＆ Ｒａｍａｔｉ，Ｊ．Ａｎｘｉｅｔｙ Ｄｉｓｏｒｄ．，１６（２）：１９５−２０６，２００２）、並びに子供とその両親のがんの生存者（Ｌａｎｄｏｌｔ １９９８年、Ｓｔｕｂｅｒ １９９８年）に関わるもので、５から２０％の有病率を示す。特徴的な侵入及び回避症状が、負傷、治療、及び死の外傷性記憶を有するがん患者で記載されている（Ｂｒｅｗｉｎ １９９８年）。がんの診断及び治療に関係する異なるストレスイベントに関連する心的外傷が実際にＰＴＳＤのストレス要因として認定されるかどうかはいまだ意見の相違がある（Ｇｒｅｅｎ １９９８年）。心的外傷としてのがんは多面的で、戦闘の様な苦痛を引き起こし得る複数のイベントを含み、再発の可能性及び生命を脅かす様々な即時性を有する拡張期間をしばしば特徴とする（Ｓｍｉｔｈ １９９９年）。
【００７１】
＜分離不安＞
分離不安は、社会的に従事するのにもがき又は主な介護者の不在中に社会参加する学校に通う年代の子供に影響を与える。分離不安は学校恐怖症に類似することができる。
【００７２】
＜露出不安＞
露出不安は、露出不安（自閉症の著者ドナウィリアムズによる、耐えるには極端すぎる自分自身の存在感に関連付けられた不安を指す目に見えないケージ）という本に最初に記載された。露出不安は、「自分で」、「自分により」、又は「自分のために」何かを行うことに苦闘するようになる不随意の回避反応、転換反応、及び報復反応の広範性の自己防衛状態を誘起するものとして記載された。「非自己」として物事を行うようになることによって、該不安を有する者は、他人の性格、役割、及び声を演じることで物事を時折行うこともできた。露出不安はさらに、混乱したジグソーパズルという本中で、回避性人格障害、反抗的行為障害及び需要回避症候群から区別された。
【００７３】
＜ＩＶ． 治療を受け入れる患者＞
治療を受け入れる患者は、上記された及び／又は診断と統計マニュアル（２０００年）（ＤＳＭ ＩＶ ＴＲ）（ＩＳＢＮ ０−８９０４２−０２４−６）（参照により本明細書中に組み入れられる）の基準によって定義された不安を有する人間を含む。そのような患者のいく人かは低レベルの慢性症状を経験し、他の者は症状が欠如又はずっと低下した期間により区切られる強烈な症状の急性発症を経験する。治療は、症状が存在する間に治療的に、又は、例えば以前に不安のエピソードを誘起したイベントがまさに起こりそうな患者の様な症状を発症する高いリスクが考慮される患者において、症状を発症することが予想される前に予防的に投与されてもよい。患者はまた、実施例に記載されるように不安の実験動物モデル、及び人間の状態に似た不安を経験する家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃ ａｎｉｍａｌ）並びに家畜（ｆａｒｍ ａｎｉｍａｌ）を含む。
【００７４】
本発明の方法は上記に議論した任意の型の不安について実施されてもよいが、それらは、パニック障害、恐怖症、社会不安障害、強迫性障害、分離不安並びに心的外傷後傷害などの急性発症を有する型、及び主観的な不快感と共に身体的感覚を有する他の急性障害に最も適している。このような障害では、患者は急性発症の発症後すぐに治療されてもよい。いくつかの障害では、患者は、トリガイベントから生じることが予想される急性発症の発症の前に代替し又は加えて治療されてもよい。例えば、将来のイベント（例えば、飛行機に乗る）に対する恐怖症を有する患者は、将来のイベントが十分に直前になって不安のエピソードが誘起される前に治療されてもよい。
【００７５】
患者のいく人かは不安と共にうつの合併症を有する。治療を受け入れる患者は、ＰＳＤ９５−ＮＭＤＡＲ拮抗薬による治療を以前に提案されている他の疾患若しくは障害を有するか又は有していなくてもよい。これらの疾患と状態は、興奮毒性が媒介する疾患、脳卒中、てんかん、低酸素症、外傷性脳損傷並びに脊髄損傷の様な脳卒中と関連しないＣＮＳへの外傷性傷害、アルツハイマー病及びパーキンソン病を含む。このような合併症が存在する患者においては、本発明の薬剤は不安及び合併症に対して効果があり得る。
【００７６】
＜ＶＩ． 治療法＞
本発明の薬剤は、上記のような不安の症状を発症するのに苦しむ又はリスクを有する患者を治療するのに使用される。急性発症を有する不安の型において、治療は通常、該エピソードを促進する誘起イベントの前か、又は該エピソード開始後できるだけ早くに開始される。治療がエピソードの開始した後に投与される場合、治療は通常、不安のエピソード開始後１から６時間以内に投与される。本発明の薬剤の一回の用量でしばしば十分である。しかしながら、複数回の用量が、６から２４時間の間隔でも投与されてもよい。
【００７７】
治療への患者の反応は、ＤＳＭ−ＩＶ−ＴＲの基準による不安並びにそのサブタイプの徴候及び症状を決定することによりモニターされてもよい。
【００７８】
本発明の方法は、不安に対する従来の治療法と組み合わせることができる。そのような従来の治療法は、行動療法、ライフスタイルの変化及び／又は薬剤療法を含む。不安に対する主流の治療法は、抗不安薬並びに／若しくは抗うつ薬の処方、及び／又は認知行動療法士への紹介（例えば、会話治療）からなる。従来の治療薬は、ベンゾジアゼピン（ザナックス（ｘａｎａｘ）など）並びに主なクラスのほとんどの抗うつ薬（ＳＳＲＩ、ＴＣＡｓ、ＭＡＯＩｓ）、及びクエチアピン（Ｑｕｅｔｉａｐｉｎｅ）を含む。
【００７９】
＜ＶＩＩ． 医薬組成物、投与量及び投与経路＞
本発明のペプチド及びペプチド模倣剤は、医薬組成物の形で投与されてもよい。医薬組成物は、ＧＭＰ条件下で製造される。医薬組成物は、以下に示す任意の投与量を含む単位用量形態（すなわち、単一の投与のための投与量）で提供され得る。医薬組成物は、混合、溶解、造粒、糖衣錠形成、粉末化（ｌｅｖｉｇａｔｉｎｇ）、乳化、カプセル化、封入（ｅｎｔｒａｐｐｉｎｇ）、又は凍結乾燥工程の従来の方法で製造されてもよい。特に、本発明の凍結乾燥ペプチド又はペプチド模倣剤は、以下で説明する処方及び組成物中で使用されてもよい。
【００８０】
医薬組成物は、ペプチド又はペプチド模倣剤を医療用に使用され得る製剤へと加工することを促進する、一つ又は複数の生理学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤又は助剤を使って、従来の方法で処方されてもよい。適切な処方は、選択された投与経路に依存する。
【００８１】
投与は、非経口、静脈内、経口、皮下、動脈内、頭蓋内、髄腔内、腹腔内、局所、鼻腔内又は筋中であってもよい。静脈内投与が好まれる。
【００８２】
非経口投与のための医薬組成物は、好ましくは滅菌及び実質的に等張である。注射については、ペプチド又はペプチド模倣剤は水溶液中に処方されてもよく、好ましくはハンクス溶液、リンガー溶液、又は生理食塩水若しくは酢酸緩衝液（注射部位での不快感を軽減するため）などの生理的に互換性のある緩衝液中である。該溶液は、懸濁剤、安定化剤、及び／又は分散剤などの調剤を含んでもよい。
【００８３】
また、ペプチド又はペプチド模倣剤は、使用前に適したビークル（例えば無菌で発熱物質フリーの水）で構成するために粉末状でもよい。
【００８４】
経粘膜的な投与については、透過させる障壁に適切な浸透剤が、該処方中に使用される。この投与経路が、該化合物を鼻腔に運ぶために又は舌下投与のために使用されてもよい。
【００８５】
経口投与については、治療される患者により経口摂取されるために、該化合物は該ペプチド又はペプチド模倣剤と、錠剤、ピル、糖衣錠、カプセル、液体、ジェル、シロップ、スラリー、懸濁液及びそれに類似するものとしての薬学的に許容できる担体とを組み合わせることにより処方されてもよい。例えば、粉末、カプセル及び錠剤などの経口固形製剤については、適切な賦形剤は、ラクトース、ショ糖、マンニトール及びソルビトールなどの糖質のような充填剤；トウモロコシ澱粉、小麦澱粉、米澱粉、ジャガイモ澱粉、ゼラチン、ガムトラガント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び／又はポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）などのセルロース製剤；顆粒剤；及び結合剤を含む。必要であれば、架橋したポリビニルピロリドン、寒天、又はアルギン酸若しくはアルギン酸ナトリウムの様なその塩などの崩壊剤が加えられてもよい。必要な場合は、固形用量形態は標準的な技術を使用して糖衣又は腸溶コーティングされてもよい。例えば、懸濁液、エリキシル剤及び溶液などの経口液体製剤については、適した担体、賦形剤又は希釈剤は水、グリコール、オイル、アルコールを含む。さらに、香料、防腐剤、着色剤及びそれに類似するものを加えてもよい。
【００８６】
前に記載した製剤に加えて、該化合物はまた、徐放性製剤として処方されてもよい。このような長期持続製剤は、移植（例えば、皮下又は筋中）又は筋肉注射によって投与されてもよい。従って、例えば、該化合物は適した高分子あるいは疎水性材料（例えば、許容されるオイル中のエマルジョンとして）若しくはイオン交換樹脂と共に、又は、例えば中程度の水溶性塩の様な中程度の水溶性誘導体として処方されてもよい。
【００８７】
あるいは、他の医薬品運搬システムが用いられてもよい。リポソーム及びエマルジョンがペプチド及びペプチド模倣剤を運搬するのに使用されてもよい。ジメチルスルホキシドのような特定の有機溶剤が、また、通常より大きな毒性の犠牲を払うが、用いられてもよい。さらに、該化合物は治療剤を含む固体高分子の半透性マトリックスなどの徐放システムを使用して運搬されてもよい。
【００８８】
徐放性カプセルは、その化学的性質に応じて、数週間から最大１００日以上の間ペプチド又はペプチド模倣剤を放出することができる。治療剤の化学的性質及び生物学的安定性に応じて、タンパク質の安定化のためのさらなる戦略を採用してもよい。
【００８９】
本発明のペプチド又はペプチド模倣剤は荷電側鎖又は末端を含むので、それらは、遊離酸若しくは塩基として、又は薬学的に許容できる塩として任意の上記製剤に含まれることができる。薬学的に許容できる塩は、実質的に遊離塩基の生物学的活性を保持する及び無機酸と反応して調製されるそれらの塩である。医薬用の塩は、遊離塩基形態に対応するものよりも水溶液及びその他のプロトン性溶媒中により溶解する傾向がある。
【００９０】
本発明の薬剤は、本来の目的を達成するために効果的な用量で使用される。治療に有効な量とは、現在不安の症状を経験している患者において、少なくとも一つの不安若しくはそのサブタイプの徴候及び／又は症状の悪化を除去、減少、又は阻害するのに十分な薬剤の量を意味する。例えば、量は、未治療患者のコントロールの人と比較して治療を受けた患者（人間又は動物）における少なくとも一つの不安の徴候又は症状を有意に減少させた場合、治療に効果があると考えられている。該量はまた、本発明の方法で治療しない比較対象の患者のコントロール群の平均結果よりも、個々の治療した患者がより好ましい結果を達成した場合、治療に有効だと考えられる。予防に有効な薬剤の量とは、現在症状を経験していないがそのような症状を発症する一般人と比較して高いリスクを有すると考えられる患者において、少なくとも一つの不安若しくはそのサブタイプの徴候及び／又は症状の発症を遅延、阻害、又は防止するのに十分な薬剤の量を意味する。例えば、量は、薬剤で未治療のコントロールの人と比較して、該薬剤で治療を受けた不安の症状を発症するリスクのある患者がその徴候又は症状を減少させた場合、予防に効果があると考えられている。有効量とは、治療又は予防のいずれかに有効な量を意味する。効果的な治療法とは、上記した本来の目的を達成するために必要な有効量及び投与頻度の組み合わせたものを意味する。
【００９１】
好ましい用量範囲は、脳卒中の６時間以内に患者の体重１ｋｇ当たり０．００１から２０μｍｏｌの薬剤を含み、オプションで患者の体重１ｋｇ当たり０．０３から３μｍｏｌの薬剤を含む。いくつかの方法では、６時間以内に患者の体重１ｋｇ当たり０．１から２０μｍｏｌの薬剤が投与される。いくつかの方法では、患者の体重１ｋｇ当たり０．１から１０μｍｏｌの薬剤が６時間以内に投与され、より好ましくは６時間以内に患者の体重１ｋｇあたり約０．３μｍｏｌの薬剤が投与される。他の実施例では、用量範囲は、患者の体重１ｋｇ当たり０．００５から０．５μｍｏｌの薬剤である。体重１ｋｇ当たりの投与量は、質量に対する異なる表面面積比率を補正するために６．２で割ることによってラットからヒトへ変換されることができる。投与量は、モル単位からグラムへ、ペプチドの分子量を乗じることにより変換されることができる。人間に使用する本発明のペプチド及びペプチド模倣剤の適切な投与量は、０．００１から５ｍｇ／ｋｇ患者の体重、又はより好ましくは０．００５から１ｍｇ／ｋｇ患者の体重、若しくは０．０５から１ｍｇ／ｋｇ、あるいは０．０９から０．９ｍｇ／ｋｇを含む。７５ｋｇの患者のための絶対的な重量については、これらの投与量は０．０７５から３７５ｍｇ、０．３７５から７５ｍｇ、又は３．７５ｍｇから７５ｍｇ、若しくは６．７から６７ｍｇと計算される。例えば、患者の体重の変化を含むよう四捨五入すると、投与量は通常０．０５から５００ｍｇ以内に、好ましくは０．１から１００ｍｇ、０．５から５０ｍｇ、又は１から２０ｍｇ以内である。
【００９２】
薬剤の投与量は、治療される被験者、被験者の体重、苦痛の重症度、投与方式、及び処方する医師の判断に依存する。症状が検出される間又はそれらが検出されない時であっても、治療は断続的に繰り返されてもよい。治療は単独で又は他の治療薬との組み合わせで提供されてもよい。
【００９３】
薬剤の治療に有効な用量は、実質的な毒性を引き起こすことなく治療効果を提供することができる。ペプチド又はペプチド模倣剤の毒性は、例えばＬＤ５０値（集団の５０％が致死する用量）又はＬＤ１００値（集団の１００％が致死する用量）を測定することで、細胞培養又は実験動物における標準的な薬学的手順により測定され得る。毒性と治療効果との間の用量比は治療指数である。高い治療指数を示すペプチド又はペプチド模倣剤が好まれる（例えば、Ｆｉｎｇｌ ｅｔ ａｌ．，１９７５年：治療の薬理学的基礎，Ｃｈ．１，Ｐ．ｌを参照）。
【００９４】
＜ＶＩＩＩ． スクリーニング方法＞
本発明はさらに、不安を治療するのに有用な活性を持つペプチド、ペプチド模倣剤、及び他の化合物をスクリーニングする方法を提供する。化合物は不安の動物モデルに投与される。不安は、実施例で記載されるように、ラットなどの動物を不慣れな環境に配置し応答を観察する（例えば、格子線を横切り、又は開いた若しくは閉じた管を選択する）ことにより誘導され得る。
【００９５】
本方法中でスクリーニングに適した化合物はＰＳＤ−９５とＮＤＭＡＲ２Ｂとの相互作用を阻害することが知られたペプチド、ペプチド模倣剤及び低分子化合物（すなわち５００Ｄａより小さい）を含む。表１に示されるＮＤＭＡＲとＰＤＺドメインの他のペア間の相互作用を阻害することが知られた他のペプチド、ペプチド模倣剤、及び低分子化合物もスクリーニングされてもよい。
【００９６】
スクリーニングされる化合物は、天然並びに合成の双方、有機並びに無機のものであり、及びポリマー（例えば、オリゴペプチド、ポリペプチド、オリゴヌクレオチド、及びポリヌクレオチド）、低分子化合物、抗体、糖、脂肪酸、ヌクレオチド並びにヌクレオチド類似体、天然の構造物の類似体（例えば、ペプチド模倣剤、核酸類似体、及びそれに類似するもの）、及び多数の他の化合物を含んでもよい。化合物は、ランダム若しくは組み合わせペプチド又は非ペプチドライブラリなどの多様なライブラリから調製されてもよい。ライブラリは、化学的に合成されたライブラリ、遺伝子組換え（例えば、ファージディスプレイライブラリ）、及びインビトロ翻訳ベースライブラリを含む。化学的に合成されたライブラリの例としては以下に記載される、Ｆｏｄｏｒ ｅｔ ａｌ．， １９９１， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５１：７６７−７７３；Ｈｏｕｇｈｔｅｎ ｅｔ ａｌ．， １９９１， Ｎａｔｕｒｅ ３５４：８４−８６；Ｌａｍ ｅｔ ａｌ．， １９９１， Ｎａｔｕｒｅ ３５４：８２−８４；Ｍｅｄｙｎｓｋｉ， １９９４， Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １２：７０９−７１０；Ｇａｌｌｏｐ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｊ． Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３７（９）：１２３３−１２５１；Ｏｈｌｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ．， １９９３， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：１０９２２−１０９２６；Ｅｒｂ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：１１４２２−１１４２６；Ｈｏｕｇｈｔｅｎ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ １３：４１２；Ｊａｙａｗｉｃｋｒｅｍｅ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：１６１４−１６１８；Ｓａｌｍｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９９３， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：１１７０８−１１７１２；ＷＯ９３／２０２４２；及びＢｒｅｎｎｅｒ ａｎｄ Ｌｅｒｎｅｒ， １９９２， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：５３８１−５３８３。ファージディスプレイライブラリの例は以下に記載される、Ｓｃｏｔｔ ａｎｄ Ｓｍｉｔｈ， １９９０， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：３８６−３９０；Ｄｅｖｌｉｎ ｅｔ ａｌ．， １９９０， Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２４９：４０４−４０６；Ｃｈｒｉｓｔｉａｎ， Ｒ．Ｂ． ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｊ．ＭｏＩ．Ｂｉｏｌ．２２７：７１ １−７１８）；Ｌｅｎｓｔｒａ， １９９２， Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．１５２： １４９−１５７；Ｋａｙ ｅｔ ａｌ．， １９９３， Ｇｅｎｅ １２８：５９−６５；１９９４年８月１８日付のＷＯ９４／１８３１８。インビトロ翻訳ベースライブラリは、ＷＯ９１／０５０５８に記載されたもの及びＭａｔｔｈｅａｋｉｓ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：９０２２−９０２６を含む。非ペプチド性ライブラリの例は、ベンゾジアゼピンのライブラリ（例えば、Ｂｕｎｉｎ ｅｔ ａｌ．， １９９４， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：４７０８−４７１２）が使用するのに採用されてもよい。ペプトイドライブラリ（Ｓｉｍｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ��Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：９３６７−９３７１）も使用されてもよい。使用可能なライブラリのもう一つの例では、ペプチド中のアミド官能基がパーメチル化（ｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ）されて化学的に変換されたコンビナトリアルライブラリを生成するものが、Ｏｓｔｒｅｓｈ外（１９９４， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：１１１３８−１１１４２）により記載される。
【実施例】
【００９７】
＜方法＞
実験は、体重２５０から３２５ｇの成体雄スプラーグドーリーラットで行われた（チャールズリバーラボラトリ、カナダ）。すべての手順は、動物ケアに関するカナダ評議会により確立されたガイドラインに従い及びプリンスエドワードアイランド大学の動物ケア委員会の承認を得ている。すべての動物は、ケージに２から３匹の集団で飼育し、食料並びに水への自由なアクセスがあり、及び外界温度は２１±１℃並びに１２：１２時間明／暗サイクルを有する部屋で飼育された。
【００９８】
イソフルラン／酸素麻酔下で尾静脈を介してＮＡ−１（又は生理食塩水ビークル）の注射を行った９０分後、ラットはオープンフィールドの活動領域中で試験され、覚醒状態及び新しい環境に訓化する能力の両方を測定された。また、ラットは高架式十字迷路の中で試験された。この迷路はラットの不安／情動を評価するために使用された。該迷路は、中央のプラットフォームから伸びた及び床から１．５ｍの高さである４つのアームからなる（２つは開いたもの、２つは閉じたもの：１５ｃｍ幅及び６０センチの長さ）。ラットは迷路の中心部に配置され及び任意のアームに入る自由な選択肢を与えられた；運用としては、アーム中に頭と前肢を有するものとして定義される。開いた又は閉じたアームのいずれかで過ごした時間を、１０分のトライアルの間記録し、二方向（頭上及び水平方向）から同時になされたビデオ録画からスコア化した（先入観なしの実験者）。
【００９９】
＜結果＞
図１は、高架式十字迷路試験での平均訓化スコア（±ＳＥＭ）を示す。１０分のトライアルで開いたアーム中で過ごした合計時間に有意差は見つからなかった（生理食塩水１７４．８０±４３．２３；ＮＡ１ １２７．４６±１８．９９）。ｔ１４＝１．００３、ｐ＝０．３３３。馴化スコアは、高架式十字迷路の最後の５分で開いたアームで過ごした合計時間（秒）から高架式十字迷路の最初の５分で開いたアームで過ごした合計時間を引いたものとして計算された。生理食塩水（ｎ＝８）；ＮＡ−１（３ｎｍｏｌ／ｇｒａｍ；ｎ＝８）、ｔ１４＝−２．４９、ｐ＝０．０２６。
【０１００】
図２はオープンフィールド試験での平均訓化スコア（＋ＳＥＭ）を示す。１０分のトライアル中に格子を横切った合計に有意差は見つからなかった（生理食塩水：３７．１３±６．４；ＮＡ−１：２８．８８±６．６２）。ｔ１４＝０．８９６、ｐ＝０．３８５。馴化スコアは、オープンフィールド試験の最後の５分で格子を横切った合計数からオープンフィールド試験の最初の５分で格子を横切った合計数を引いたものとして計算された。生理食塩水 （ｎ＝８）；ＮＡ−１（３ｎｍｏｌ／ｇｒａｍ；ｎ＝８）。Ｔ１４＝３．３７３、ｐ＝０．００５。
【０１０１】
ＮＡ−１を用いた治療が２つの別々の試験でラットの不安／情動レベルを減少することが、図１及び図２から結論され得る。高架式十字迷路の中でのパフォーマンスは、「閉じた」アーム又は「開いた」アームのいずれかで過ごした時間の平均量として定量化された；通常では、ラットはオープンスペースを避ける傾向にある。ＮＡ−１で処置したラットは、該アッセイの最初の５分について、生理食塩水で処置したラットと似たように行動した。しかしながら、次の５分では、それらは生理食塩水で処置したラットよりも開いたアームでより多くの時間を示し（閉じたアームでの時間は減少）、そのことは一旦試験に訓化すると、それらは不安のレベルがより低くなることを示唆している（図１）。ＮＡ−１の投与９０分後、ラットはまたオープンフィールドの活動領域中で試験され、覚醒状態及び新しい環境に訓化する能力の両方を測定された。それらは、覚醒と訓化に変換される探索行動の指標として、１０分のトライアルの間に格子を横切る合計回数をスコアされた。高架式十字迷路と同様に、オープンフィールド試験されたラットは、またそのトライアルの最初の５分においてコントロール（生理食塩水）とＮＡ−１処置グループに違いを示さなかった。その後、しかしながら、ＮＡ−１処置されたラットは、生理食塩水で処置された動物と比較して訓化スコアが改善し（格子を横切るのが減少した）、そのことは、それらがよりオープンフィールドの環境に訓化したことを示唆した。
【０１０２】
前述の発明は理解をわかりやすくする目的のために詳細に記載されているものの、特定の変更が付加した特許請求の範囲内で実践され得ることは明らかである。上記で引用したすべての出版物、文書、アクセス番号及びそれに類似するものは、それぞれが個々に示されると同程度に、参照によって全ての目的のために完全に本明細書中に組み込まれる。一以上のシーケンスのバージョンが異なる時期に同じアクセス番号と関連付けられる場合、アクセス番号の言及は、そのアクセス番号をも含む任意の優先権出願に時期を戻す現在の出願を提出した時期に関連するバージョンを意味する。文脈から明らかでない場合は、任意の工程、機能、要素、又は実施例は任意の他との組み合わせで使用されてもよい。
【図１】
2014129353.tif 000014
【図２】
2014129353.tif 000015
【配列表】
2014129353000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成26年2月19日(2014.2.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
不安の治療又は効果的な予防のための、NMDA受容体とPSD95との特異的結合を阻害する薬剤を含む医薬組成物。
【外国語明細書】
2014129353000001.pdf