(57)【要約】      （修正有）【課題】対象における免疫応答を調節する方法であって、真菌の細胞壁に基づく化合物を含有する組成物を提供する。【解決手段】Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物であり、前記グルカンは少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含む。前記グルカンは、地衣類、真菌又は酵母若しくはイワタケ科から単離された又は得られた組成物。前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化された組成物。前記組成物が免疫応答を調節し促進するものである、方法。【選択図】図１
2014129366.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
組成物。
【請求項４】
請求項３に記載の組成物であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする組成物。
【請求項５】
請求項１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする組成物。
【請求項６】
請求項１に記載の組成物であって、
アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴
とする組成物。
【請求項７】
請求項１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする組成物。
【請求項８】
対象における免疫応答を調節する方法であって、
β−１，６−グルカンを含有し、前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化
基について富化されている組成物を前記対象に投与するステップを含むことを特徴とする
方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
【請求項１０】
請求項８に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類又は真菌から単離された又は得られたものであり、
前記真菌が随意的に酵母であることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項１０に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項８に記載の方法であって、
前記組成物が、アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに
含むことを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項８に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項８に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の促進を含むことを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項８に記載の方法であって、
前記免疫応答が、抗原特異的応答であることを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項８に記載の方法であって、
前記組成物が、化学療法化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項１７】
請求項８に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項８に記載の方法であって、
前記免疫応答が、感染性病原体因子、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに対するも
のであることを特徴とする方法。
【請求項１９】
請求項１８に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、敗血症を引き起こすものであることを特徴とする方法。
【請求項２０】
請求項１８に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、寄生虫、蠕虫、ウイルス又は細菌であることを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項８に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の下方制御又は抑制を含むことを特徴とする方法
。
【請求項２２】
請求項２１に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫抑制剤をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項２１に記載の方法であって、
前記免疫応答が、自己抗原又はアレルゲンに対するものであることを特徴とする方法。
【請求項２４】
請求項２１に記載の方法であって、
前記免疫応答が、移植された組織若しくは細胞に対するものであることを特徴とする方
法。
【請求項２５】
β−１，６−グルカンを含有する組成物であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする組成物。
【請求項２６】
請求項２５に記載の組成物であって、
前記グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする組成物。
【請求項２７】
請求項２６に記載の組成物であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する組成物。
【請求項２８】
請求項２５に記載の組成物であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
組成物。
【請求項２９】
請求項２８に記載の組成物であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする組成物。
【請求項３０】
請求項２５に記載の組成物であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする組成物。
【請求項３１】
請求項２５に記載の組成物であって、
アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴
とする組成物。
【請求項３２】
請求項２５に記載の組成物であって、
前記粒子が、ミクロスフェア又はナノ粒子であることを特徴とする組成物。
【請求項３３】
請求項３２に記載の組成物であって、
前記ミクロスフェアが、約０．１〜１５ミクロンの直径を有することを特徴とする組成
物。
【請求項３４】
対象における免疫応答を調節する方法であって、
粒子に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップ
を含むことを特徴とする方法。
【請求項３５】
請求項３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
【請求項３６】
請求項３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
【請求項３７】
請求項３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
【請求項３８】
請求項３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
【請求項３９】
請求項３４に記載の方法であって、
前記組成物が、アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに
含むことを特徴とする方法。
【請求項４０】
請求項３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、固体支持体に結合したことを特徴とする方法。
【請求項４１】
請求項３４に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の促進を含むことを特徴とする方法。
【請求項４２】
請求項４１に記載の方法であって、
前記免疫応答が、抗原特異的応答であることを特徴とする方法。
【請求項４３】
請求項４１に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫促進化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項４４】
請求項４１に記載の方法であって、
前記組成物が、化学療法化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項４５】
請求項４４に記載の方法であって、
前記免疫応答が、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに対するもので
あることを特徴とする方法。
【請求項４６】
請求項３４に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
【請求項４７】
請求項４６に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、敗血症を引き起こすものであることを特徴とする方法。
【請求項４８】
請求項４６に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、寄生虫、蠕虫、ウイルス又は細菌であることを特徴とする方法。
【請求項４９】
請求項３４に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の下方制御又は抑制を含むことを特徴とする方法
。
【請求項５０】
請求項４９に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫抑制剤をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項５１】
請求項４９に記載の方法であって、
前記免疫応答が、自己抗原、アレルゲン又は移植された組織若しくは細胞に対するもの
であることを特徴とする方法。
【請求項５２】
対象における癌を治療する、癌の進行を遅延させる、癌の寛解を延長する又は癌の発生
率若しくは重症度を低減させる方法であって、
精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含
むことを特徴とする方法。
【請求項５３】
請求項５２に記載の方法であって、
前記β−１，６−グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする
方法。
【請求項５４】
請求項５３に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
【請求項５５】
請求項５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
【請求項５６】
請求項５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
【請求項５７】
請求項５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
【請求項５８】
請求項５２に記載の方法であって、
アジュバント、抗原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療法化合物又はそれらの組み合
わせをさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項５９】
請求項５８に記載の方法であって、
前記抗原が、腫瘍関連抗原であることを特徴とする方法。
【請求項６０】
請求項５８に記載の方法であって、
前記ペプチドが、腫瘍関連抗原から得られたことを特徴とする方法。
【請求項６１】
請求項５８に記載の方法であって、
前記免疫促進化合物が、サイトカインであることを特徴とする方法。
【請求項６２】
請求項５８に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
【請求項６３】
請求項５２に記載の方法であって、
前記対象が、過形成病変又は前癌病変を有することを特徴とする方法。
【請求項６４】
請求項５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、ターゲティング部分に結合したことを特徴とする方法。
【請求項６５】
請求項６４に記載の方法であって、
前記ターゲティング部分が、腫瘍関連抗原と特異的に相互作用することを特徴とする方
法。
【請求項６６】
対象における感染症を治療する、感染症の進行を遅延させる又は感染症の発生率若しく
は重症度を低減させる方法であって、
精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含
むことを特徴とする方法。
【請求項６７】
請求項６６に記載の方法であって、
前記β−１，６−グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする
方法。
【請求項６８】
請求項６７に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
【請求項６９】
請求項６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
【請求項７０】
請求項６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
【請求項７１】
請求項６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
【請求項７２】
請求項６８に記載の方法であって、
前記組成物が、アジュバント、抗原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療法化合物又は
それらの組み合わせをさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項７３】
請求項６８に記載の方法であって、
前記抗原又はペプチドが、前記感染の源から得られたことを特徴とする方法。
【請求項７４】
請求項６８に記載の方法であって、
前記免疫促進化合物が、サイトカインであることを特徴とする方法。
【請求項７５】
請求項６８に記載の方法であって、
前記化学療法化合物が、抗生物質又は抗ウイルス性化合物であることを特徴とする方法
。
【請求項７６】
請求項６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
【請求項７７】
請求項６６に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
【請求項７８】
請求項６６に記載の方法であって、
感染性病原体が、敗血症を引き起こすものであることを特徴とする方法。
【請求項７９】
請求項６６に記載の方法であって、
感染性病原体が、寄生虫、蠕虫、ウイルス又は細菌であることを特徴とする方法。
【請求項８０】
細胞内での熱ショックタンパク質の発現を促進又は増進させる方法であって、
粒子に結合した精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記細胞に接触さ
せるステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項８１】
請求項８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、Ｏ−アセチル化グルカンについて富化されたことを特徴とする方法。
【請求項８２】
請求項８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
【請求項８３】
請求項８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
【請求項８４】
請求項８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
【請求項８５】
請求項８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
【請求項８６】
請求項８０に記載の方法であって、
前記細胞が、抗原提示細胞であることを特徴とする方法。
【請求項８７】
請求項８６に記載の方法であって、
前記細胞が、好中球であることを特徴とする方法。
【請求項８８】
請求項８６に記載の方法であって、
前記細胞が、感染していることを特徴とする方法。
【請求項８９】
細胞内での熱ショックタンパク質の発現を促進又は増進させる方法であって、
Ｏ−アセチル化グルカンについて富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を
前記細胞に接触させるステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項９０】
請求項８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
【請求項９１】
請求項８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
【請求項９２】
請求項８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
【請求項９３】
請求項８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
【請求項９４】
請求項８９に記載の方法であって、
前記細胞が、抗原提示細胞であることを特徴とする方法。
【請求項９５】
請求項８９に記載の方法であって、
前記細胞が、好中球であることを特徴とする方法。
【請求項９６】
請求項８９に記載の方法であって、
前記細胞が、感染していることを特徴とする方法。
【請求項９７】
β−１，６−グルカンを含有する粒子。
【請求項９８】
請求項９７に記載の粒子であって、
前記β−１，６−グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする
粒子。
【請求項９９】
請求項９７に記載の粒子であって、
少なくとも５０重量％のβ−１，６−グルカンを含有することを特徴とする粒子。
【請求項１００】
請求項９７に記載の粒子であって、
前記粒子に含まれる前記グルカンの少なくとも５０％がβ−１，６−グルカンであるこ
とを特徴とする粒子。
【請求項１０１】
請求項９７に記載の粒子であって、
前記β−１，６−グルカンが、前記粒子内に均一に分布していることを特徴とする粒子
。
【請求項１０２】
請求項９７に記載の粒子であって、
前記粒子が、好中球、単球、マクロファージ又は樹枝状細胞による貪食に適した大きさ
を有することを特徴とする粒子。
【請求項１０３】
免疫系細胞の免疫応答を調節する方法であって、
前記細胞に請求項９７に記載の前記粒子を、前記免疫応答を調節するのに十分な量で接
触させるステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１０４】
請求項１０３に記載の方法であって、
前記量は、貪食の促進、活性酸素種生成の誘導又は熱ショックタンパク質発現の誘導に
十分な量であることを特徴とする方法。
【請求項１０５】
対象における免疫応答を調節する方法であって、
前記対象に請求項９７に記載の前記粒子を、前記免疫応答を調節するのに十分な量で投
与するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１０６】
請求項１０５に記載の方法であって、
前記量は、貪食の促進、活性酸素種生成の誘導又は熱ショックタンパク質発現の誘導に
十分な量であることを特徴とする方法。
【請求項１０７】
精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物であって、
医薬組成物、食品若しくは食品製品、食品サプリメント又は化粧品組成物であることを
特徴とする組成物。
【請求項１０８】
請求項１０７に記載の組成物であって、
免疫応答を調節する能力が未処理のβ−１，６−グルカンよりも向上するように処理さ
れたβ−１，６−グルカンを含有することを特徴とする組成物。
【請求項１０９】
請求項１０７に記載の組成物であって、
当該組成物に含まれる前記グルカンの少なくとも５０％がβ−１，６−グルカンである
ことを特徴とする粒子。
【請求項１１０】
対象における免疫応答を調節する方法であって、
前記対象に請求項９７に記載の前記粒子を、前記免疫応答を調節するのに十分な量で投
与するステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１１１】
請求項１０７に記載の方法であって、
前記量は、貪食の促進、活性酸素種生成の誘導又は熱ショックタンパク質発現の誘導に
十分な量であることを特徴とする方法。
【請求項１１２】
β−１，６−グルカンを含有するミセルであって、
前記β−１，６−グルカンが、随意的にＯ−アセチル化基について富化されたことを特
徴とするミセル。
【請求項１１３】
β−１，６−グルカン及び生分解性高分子を含有する組成物であって、
前記生分解性高分子が、分解して生物活性サリチル酸塩又はアルファヒドロキシ酸部分
を形成し、
前記β−１，６−グルカンが、随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこ
とを特徴とする組成物。
【請求項１１４】
請求項１１３に記載の組成物を含む粒子。
【請求項１１５】
請求項１１３に記載の組成物を含む医療器具。
【請求項１１６】
医療器具であって、
インプラント又は器具の表面の少なくとも一部がβ−１，６−グルカンを含み、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこと
を特徴とする医療器具。
【請求項１１７】
請求項１１６に記載の医療器具であって、
表面の少なくとも一部が、β−１，６−グルカンを含有する組成物により被覆され、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこと
を特徴とする医療器具。
【請求項１１８】
請求項１１６に記載の医療器具であって、
カテーテル、ステント、バルブ、ペースメーカー、セントラルライン、ペッサリー、チ
ューブ、シャント、栄養チューブ、ドレイン及び整形外科用ハードウェア器具から成る群
より選択されることを特徴とする医療器具。
【請求項１１９】
請求項１１６に記載の医療器具であって、
前記組成物が、高分子及びβ−１，６−グルカンを含有する被覆層を含み、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこと
を特徴とする医療器具。
【請求項１２０】
請求項１１６に記載の医療器具であって、
前記組成物が、高分子及びβ−１，６−グルカンを含有する被覆層を含み、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されており
、前記高分子が生分解性を有することを特徴とする医療器具。
【請求項１２１】
対象を治療する方法であって、
治療を必要とする対象の体内に、請求項１１６に記載の医療器具を埋め込む又は導入す
るステップを含むことを特徴とする方法。
【請求項１２２】
被覆材料であって、
（ａ）基材と、
（ｂ）前記基材の表面の少なくとも一部と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有
する組成物とを含むことを特徴とする被覆材料。
【請求項１２３】
請求項１２２に記載の被覆材料であって、
前記組成物が、高分子を含有することを特徴とする被覆材料。
【請求項１２４】
請求項１２２に記載の被覆材料であって、
前記組成物が、生分解性高分子を含有することを特徴とする被覆材料。
【請求項１２５】
請求項１２２に記載の被覆材料であって、
前記基材の少なくとも一部が、金属、セラミック又は高分子から構成されることを特徴
とする被覆材料。
【請求項１２６】
対象を治療する方法であって、
治療を必要とする対象の身体に、請求項１２２に記載の被覆材料を接触させるステップ
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１２７】
ターゲティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物。
【請求項１２８】
請求項１２７に記載の組成物であって、
前記グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする組成物。
【請求項１２９】
請求項１２８に記載の組成物であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する組成物。
【請求項１３０】
請求項１２７に記載の組成物であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
組成物。
【請求項１３１】
請求項１３０に記載の組成物であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする組成物。
【請求項１３２】
請求項１２７に記載の組成物であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする組成物。
【請求項１３３】
請求項１２７に記載の組成物であって、
アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴
とする組成物。
【請求項１３４】
請求項１２７に記載の組成物であって、
前記食細胞が、プロフェッショナル抗原提示細胞であることを特徴とする組成物。
【請求項１３５】
請求項１２７に記載の組成物であって、
前記食細胞が、好中球であることを特徴とする組成物。
【請求項１３６】
請求項１２７に記載の組成物であって、
前記ターゲティング部分が、抗体又は抗体断片であることを特徴とする組成物。
【請求項１３７】
対象における免疫応答を調節する方法であって、
前記対象に請求項１２７に記載の組成物を投与するステップを含むことを特徴とする方
法。
【請求項１３８】
請求項１３７に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
【請求項１３９】
請求項１３７に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の促進を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４０】
請求項１３９に記載の方法であって、
前記免疫応答が、抗原特異的応答であることを特徴とする方法。
【請求項１４１】
請求項１３７に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫促進化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項１４２】
請求項１３７に記載の方法であって、
前記組成物が、化学療法化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項１４３】
請求項１３７に記載の方法であって、
前記免疫応答が、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに対するもので
あることを特徴とする方法。
【請求項１４４】
請求項１３７に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
【請求項１４５】
対象における感染症を治療する、感染症の進行を遅延させる又は感染症の発生率若しく
は重症度を低減させる方法であって、
前記対象に請求項１２７に記載の組成物を投与するステップを含むことを特徴とする方
法。
【請求項１４６】
請求項１４５に記載の方法であって、
アジュバント、抗原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療法剤又はそれらの組み合わせ
をさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項１４７】
請求項１４６に記載の方法であって、
前記抗原又はペプチドが、前記感染の源から得られたことを特徴とする方法。
【請求項１４８】
請求項１４６に記載の方法であって、
前記免疫促進化合物が、サイトカインであることを特徴とする方法。
【請求項１４９】
請求項１４６に記載の方法であって、
前記化学療法化合物が、抗生物質又は抗ウイルス性化合物であることを特徴とする方法。
【請求項１５０】
細胞内での熱ショックタンパク質の発現を促進又は増進させる方法であって、
前記細胞に請求項１２７に記載の前記組成物を接触させるステップを含むことを特徴と
する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（米国政府利権の記載）
本発明の全体又は一部は、米国国立衛生研究所により認可された認可番号ＧＭ０３５０
１０−２２に基づく米国政府の支援を受けてなされたものである。米国政府は、本発明に
一定の権利を有し得る。
【背景技術】
【０００２】
真菌の細胞壁は、強力な免疫刺激応答を引き起こすため、抗感染薬及び抗腫瘍薬として
使用することが提案されている。真菌細胞はまた、樹状細胞及び主要クラスＩＩ拘束性抗
原特異的Ｔ細胞反応を活性化することもできる。病原性真菌（カンジダ・アルビカンス）
及び非病原性真菌（サッカロマイセス・セレヴィシエ）の細胞壁の大部分（５０〜６０％
）は、様々な細胞表面マンナン糖タンパク質と共有結合したβグルカン（β−１，３−グ
ルカン及びβ−ｌ，６−グルカン）の内層から構成されている（Klis, F. M. et al. Med
Mycol 39Suppl 1, 1-8, 2001; Klis, F. M. et al. FEMS Microbiol Rev 26, 239-56, 
2002）。
【０００３】
マクロファージによるβグルカンの認識は、ＴＬＲ（ＴＬＲ２を含む）の協力を得て、
主にデクチン１を介して行われる（Brown, G. D. et al. Nature 413, 36-7, 2001）。デ
クチン１の活性は、β−１，３−グルカン及びβ−ｌ，６−グルカンにより抑制される。
その内、β−１，３−グルカンラミナリンが最も抑制効果が高い。また一方、オリゴ糖の
マイクロアレイ分析によって、デクチン１がβ−１，３−グルカンと特異的に結合するこ
とが示された。好中球は、細菌及び真菌を貪食及び殺滅するプロフェッショナルキラーで
あり、バクテリア及び真菌に対する食作用及び貪食作用におけるその役割はかなり明らか
にされている。個々の好中球は細菌感染及び真菌感染の影響を非常に受けやすく、感染の
治癒に重要な役割を果し、感染治癒後には正常な数に戻る。好中球は、マクロファージと
は異なり、貪食及び殺滅を最適に行うためには血清を必要とする。主なオプソニン受容体
は、補体受容体ＣＲ３及び免疫グロブリン結合受容体ＦｃγＲである。ＣＲ３は、β−１
，３−グルカン及びβ−ｌ，６−グルカンの混合物（ＰＧＧグルカン）（Wakshull, E. e
t al.lmmunopharmacology 41, 89-107, 1999）に向かっての好中球の運動性増加を仲介
するレクチン領域（Brown,G. D. et al. Immunity 19, 31 1-5, 2003）を有する。好中
球はデクチン１を発現するが（Taylor, P. R. et al. J Immunol 169, 3876-82, 2002）
、それの真菌認識における役割はまだ明らかになっていない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、ある実施形態では、Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グル
カンを含有する組成物を提供する。ある実施形態では、前記グルカンは、少なくとも２５
重量％のＯ−アセチル化グルカンを含む。ある実施形態では、前記グルカンは、地衣類か
ら単離される又は得られる。ある実施形態では、前記グルカンは、イワタケ科から単離さ
れる又は得られる。ある実施形態では、前記グルカンは、真菌から単離される又は得られ
る。ある実施形態では、前記グルカンは、酵母から単離される。他の実施形態では、前記
グルカンは、化学的に合成若しくはアセチル化される。他の実施形態では、前記グルカン
は、粒子と結合する。
【０００５】
他の実施形態では、前記組成物は、アジュバント、抗原、免疫調節化合物、又はそれら
の組み合わせを含む。
【０００６】
他の実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、Ｏ−ア
セチル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与
するステップを含む方法を提供する。
【０００７】
本発明のこの態様によれば及びある実施形態では、前記免疫応答の調節は、前記免疫応
答の促進を含む。ある実施形態では、前記免疫応答は、抗原特異的応答である。ある実施
形態では、前記組成物は、免疫促進化合物をさらに含む。他の実施形態では、前記組成物
は、化学療法化合物をさらに含む。他の実施形態では、前記免疫応答は、感染性病原体、
癌若しくは他の種類の腫瘍、前癌病変、又はそれらの組み合わせに対するものである。他
の実施形態では、前記免疫応答は、癌若しくは他の種類の腫瘍に対するものではない。
【０００８】
他の実施形態では、前記免疫応答の調節は、前記免疫応答の下方制御又は抑制を含む。
この態様によれば及びある実施形態では、前記組成物は、免疫抑制剤をさらに含む。ある
実施形態では、前記免疫応答は、自己抗原に対するものである。他の実施形態では、前記
免疫応答は、アレルゲンに対するものである。他の実施形態では、前記免疫応答は、移植
された組織若しくは細胞に対するものである。ある実施形態では、前記組成物は、自己免
疫疾患を患っている対象に投与される。ある実施形態では、前記自己免疫疾患は、好中球
の過剰な活性、浸潤、脱顆粒などと関連する。ある実施形態では、前記疾患は皮膚に影響
を及ぼす疾患であり、前記組成物は皮膚に直接的に塗布される。
【０００９】
他の実施形態では、本発明は、粒子に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物
を提供する。この態様によれば及びある実施形態では、前記グルカンはＯ−アセチル化基
について富化されており、ある実施形態では前記グルカンは少なくとも２５重量％のＯ−
アセチル化グルカンを含む。他の実施形態では、前記グルカンは、地衣類又は酵母から単
離される又は得られる。ある実施形態では、前記グルカンは、イワタケ科から単離される
又は得られる。他の実施形態では、前記グルカンは、化学的に合成若しくはアセチル化さ
れたものである。ある実施形態では、前記グルカンは、ミクロスフェアと結合したもので
ある。前記ミクロスフェアは、ある実施形態では、約０．１〜１５ミクロンの直径を有す
る。
【００１０】
他の実施形態では、前記組成物は、アジュバント、抗原、免疫調節化合物、又はそれら
の組み合わせを含む。
【００１１】
他の実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、粒子に
結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含む方
法を提供する。
【００１２】
他の実施形態では、本発明は、β−１，６−グルカンを含有する粒子を提供する。特定
の実施形態では、乾燥重量で前記粒子の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５
０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％
がβ−１，６−グルカンから成る。特定の実施形態では、前記粒子は、実質的にβ−１，
６−グルカンから成る。特定の実施形態では、前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−
アセチル化基について富化されている。本発明は、哺乳類の対象における免疫応答を調節
する方法であって、前述したいずかれの粒子又は前述したいずかれの粒子を含む化合物を
、前記対象に接触させる方法を提供する。
【００１３】
ある実施形態では、前記免疫応答の調節は、免疫応答の促進を含む。ある実施形態では
、前記免疫応答は、抗原特異的応答である。本発明のこの態様によれば、前記組成物は、
ある実施形態では免疫促進化合物を、他の実施形態では化学療法化合物をさらに含む。あ
る実施形態では、前記免疫応答は、感染性病原体、癌若しくは他の種類の腫瘍、前癌病変
、又はそれらの組み合わせに対するものである。
【００１４】
他の実施形態では、前記免疫応答の調節は、前記免疫応答の下方制御又は抑制を含む。
本発明のこの態様によれば及びある実施形態では、前記組成物は、免疫抑制剤をさらに含
む。ある実施形態では、前記免疫応答は、自己抗原に対するものである。他の実施形態で
は、前記免疫応答は、アレルゲンに対するものである。他の実施形態では、前記免疫応答
は、移植された組織に対するものである。他の実施形態では、前記免疫応答は、移植され
た細胞に対するものである。ある実施形態では、前記組成物は、自己免疫疾患を患ってい
る対象に投与される。ある実施形態では、前記自己免疫疾患は、好中球の過剰な活性、浸
潤、脱顆粒などと関連する。ある実施形態では、前記疾患は皮膚に影響を及ぼす疾患であ
り、前記組成物は皮膚に直接的に塗布される。
【００１５】
他の実施形態では、本発明は、対象における癌を治療する、癌の進行を遅延させる、癌
の寛解を延長する、又は癌の発生率若しくは重症度を低減させる方法であって、精製され
たβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含む方法を提
供する。他の実施形態では、本発明は、対象における腫瘍を治療する、腫瘍の進行を遅延
させる、腫瘍の寛解を延長する、又は腫瘍の発生率若しくは重症度を低減させる方法であ
って、精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップ
を含む方法を提供する。
【００１６】
ある実施形態では、前記β−１，６−グルカンはＯ−アセチル化基について富化されて
おり、ある実施形態では前記β−１，６−グルカンは少なくとも２５重量％のＯ−アセチ
ル化グルカンを含む。他の実施形態では、前記組成物は、アジュバント、抗原、ペプチド
、免疫促進化合物、化学療法剤、又はそれらの組み合わせをさらに含む。
【００１７】
ある実施形態では、前記抗原は、腫瘍関連抗原である。他の実施形態では、前記ペプチ
ドは、腫瘍関連抗原から得られる。
【００１８】
ある実施形態では、前記対象は、過形成病変又は前癌病変を有する。他の実施形態では
、前記対象は、癌を有する。他の実施形態では、前記対象は、癌であると診断されていな
い。他の実施形態では、前記対象は、腫瘍があるとは診断されていない。
【００１９】
他の実施形態では、本発明は、対象における感染症を治療する、感染症の進行を遅延さ
せる、又は感染症の発生率若しくは重症度を低減させる方法であって、精製されたβ−１
，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含む方法を提供する。
【００２０】
ある実施形態では、前記β−１，６−グルカンはＯ−アセチル化基について富化されて
おり、ある実施形態では前記β−１，６−グルカンは少なくとも２５重量％のＯ−アセチ
ル化グルカンを含む。他の実施形態では、前記組成物は、アジュバント、抗原、ペプチド
、免疫促進化合物、化学療法剤、又はそれらの組み合わせをさらに含む。
【００２１】
ある実施形態では、前記抗原又はペプチドは、感染源から得られる。ある実施形態では
、前記免疫促進化合物は、サイトカインである。他の実施形態では、前記化学療法化合物
は、抗生物質又は抗ウイルス性化合物である。ある実施形態では、前記組成物は、ステロ
イドを含む。他の実施形態では、前記組成物は、β−１，６−グルカン分岐を有するβ−
１，３−グルカン（β１，３／１，６グルカン、又はβ１，６分岐−β１，３グルカンと
も呼ばれる）を含有し、β−１，６−グルカン分岐の少なくともいくつかはＯ−アセチル
化基について富化されている。他の実施形態では、本発明は、（ｉ）Ｏ−アセチル化基に
ついて富化されたβ−１，６−グルカンと、（ｉｉ）β１，６分岐−β１，３グルカンと
を含有する組成物を提供する。
【００２２】
ある実施形態では、本発明は、Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グル
カンを含有する食品サプリメントを提供する。ある実施形態では、本発明は、Ｏ−アセチ
ル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有する食品を提供する。ある実施形
態では、本発明は、Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有す
る化粧品組成物を提供する。
【００２３】
他の実施形態では、本発明は、好中球内での熱ショックタンパク質の発現を誘導する方
法であって、β−１，６−グルカンを含有し、前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−
アセチル化基について富化されている組成物を好中球に接触させるステップを含む方法を
提供する。他の実施形態では、本発明は、好中球の貪食及び好中球内での活性酸素種生成
を誘導する方法であって、β−１，６−グルカンを含有し、前記β−１，６−グルカンが
随意的にＯ−アセチル化基について富化されている組成物を好中球に接触させるステップ
を含む方法を提供する。他の実施形態では、本発明は、好中球内での熱ショックタンパク
質の発現を誘導する方法であって、β−１，６−グルカンを含有し、前記グルカン分子の
少なくとも５％においてグルコース単位の少なくとも２５％がＯ−アセチル化基について
富化された組成物を好中球に接触させるステップを含む方法を提供する。
【００２４】
前述したいずれの実施形態においても、前記接触は、対象の体外でも体内でも行われ得
る。ある実施形態では、細胞（いくつかの実施形態では好中球である）が対象から取り出
され、前記組成物と接触させられ、そしてその後、対象に投与される。ある実施形態では
、前記細胞は組成物と、熱ショックタンパク質の発現を誘導するのに十分な時間接触させ
られる。特定の実施形態では、前記細胞は、血清又は１つ以上の血清成分とも接触させら
れる。ある実施形態では、前記対象は、前記細胞を投与する前に、免疫抑制療法を受ける
。例えば、対象が、臓器移植又は他の目的（例えば、癌、白血病、リンパ腫若しくは様々
な種類の腫瘍に対する化学療法若しくは放射線治療）のために免疫抑制療法を必要とする
場合があるが、そのような療法は、対象に免疫障害をもたらす傾向がある。本発明のある
実施形態では、免疫抑制療法を施す前に、前記対象から免疫系細胞が取り出される。前記
細胞は、前記対象の体外で本発明の組成物と接触させられ、その後、前記対象が免疫抑制
療法を受けた後の適切な時期に前記対象の体内に戻される。前記細胞は、ある実施形態で
は好中球、他の実施形態ではプロフェッショナル抗原提示細胞（例えば、マクロファージ
、樹枝状細胞、単球、ＮＫ細胞、Ｂ細胞など）などの他の免疫系細胞であり。前記適切な
時期は、対象が感染症の症状又はその兆候を示す危険があるとき（例えば、免疫抑制療法
が施された後、又は免疫抑制によって細胞傷害効果が減少した後）である。
【００２５】
ある実施形態では、本発明は、対象における熱ショックタンパク質の発現を誘導する方
法であって、β−１，６−グルカンを含有し、前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−
アセチル化グルカンについて富化された組成物を前記対象に、前記対象の細胞（例えば好
中球）内での熱ショックタンパク質の発現を誘導するのに十分な量で接触させるステップ
を含む方法を提供する。ある実施形態では、本発明は、対象における活性酸素種生成を誘
導する方法であって、β−１，６−グルカンを含有し、前記β−１，６−グルカンが随意
的にＯ−アセチル化グルカンについて富化された組成物を前記対象に、前記対象の細胞（
例えば好中球）による活性酸素種の生成を誘導するのに十分な量で接触させるステップを
含む方法を提供する。ある実施形態では、本発明は、対象における貪食を促進する方法で
あって、β−１，６−グルカンを含有し、前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセ
チル化グルカンについて富化された組成物を前記対象に、前記対象の細胞（例えば好中球
）による貪食を促進するのに十分な量で接触させるステップを含む方法を提供する。
【００２６】
本発明はさらに、（ａ）基材と、（ｂ）β−１，６−グルカンを含有する化合物又は組
成物とを含む被覆材料を提供する。特定の実施形態では、前記β−１，６−グルカンは、
Ｏ−アセチル化グルカンについて富化されている。特定の実施形態では、前記被覆材料は
、β−１，６−グルカンが物理的に結合した被覆層（例えばゲル又は膜）を有する。特定
の実施形態では、前記被覆層は、前記β−１，６−グルカンに加えて、前記β−１，６−
グルカンと物理的に結合した高分子（例えば有機高分子）を有する。ある実施形態では、
前記高分子は、前記β−１，６−グルカンと共有結合している。他の実施形態では、前記
高分子は、前記β−１，６−グルカンと混合している又は前記β−１，６−グルカンが含
浸している。特定の実施形態では、前記被覆層は、乾燥重量で１〜９９％のβ−１，６−
グルカンを含む。特定の実施形態では、前記被覆層は、乾燥重量で少なくとも１０％、２
０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％又は９０％のβ−１，６−グル
カンを含む。特定の実施形態では、前記被覆層は、乾燥重量で１０％、２０％、３０％、
４０％、５０％未満のβ−１，６−グルカンを含む。
【００２７】
様々な高分子が本発明に使用される。いくつかの適切な高分子が本明細書中に開示され
ている。特定の実施形態では、前記高分子は、生分解性を有する。そのような実施形態で
は、化合物又は組成物は、高分子分解されたときに放出され得る。特定の実施形態では、
前記高分子は、ポリ（ピラノース）、ポリ（ヒドロキシル酸）、ポリ（ラクトン）、ポリ
（アミノ酸）、ポリ（無水物）、ポリ（ウレタン）、ポリ（オルトエステル）、ポリ（ホ
スファジン）、ポリ（リン酸エステル）、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸‐コ‐
グリコール酸、ポリエーテルエステル、ポリアミド酸、合成ポリアミド酸、ポリカーボネ
ート、ポリ（ヒドロキシアルカノエート）、ポリ（ε−カプロラクトン）、又はポリ（サ
ッカリド）、或いはそれらの混合物である。特定の実施形態では、前記高分子は共重合体
である。前記共重合体は、特定の実施形態では、前述のいずれかの高分子のサブユニット
を有するブロック共重合体である。特定の実施形態では、本発明で使用される高分子は、
少なくとも１０、２５、５０、１００、２００又は３００ｋＤ、或いはそれらのいずれか
の範囲に入る平均分子量（例えば、数平均分子量又は重量平均分子量）を有する。特定の
実施形態では、本発明で使用される高分子は、平均１００〜１０，０００単量体サブユニ
ット、又はその範囲に入る任意の数のサブユニットから成る。特定の実施形態では、前記
高分子は、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリエチレンテレフタレー
ト、ポリスチレン、及びポリカーボネートから選択される。
【００２８】
ある実施形態では、基材は、ミクロ粒子、ナノ粒子、包帯、縫合糸、カテーテル、ステ
ント、バルブ、ペースメーカー、埋め込み型除細動器、コンジット、カニューレ、器具（
appliance）、骨格（scaffold）、セントラルライン（末梢から中心静脈まで挿入したカ
テーテル（ＰＩＣＣ又はＰＩＣライン））、ペッサリー、チューブ、ドレイン、シャント
、トロカール、プラグ、又は他のインプラント、或いは医療用若しくは外科用器具の形態
又はその一部である。ある実施形態では、前記カテーテルは、肺動脈カテーテル、心臓カ
テーテル、尿カテーテル、又は腹腔内カテーテルである。ある実施形態では、前記ドレイ
ンは、脳脊髄液ドレインである。ある実施形態では、前記チューブは、気管切開チューブ
、気官内チューブ、又は胸腔チューブである。他の実施形態では、前記基材は、インプラ
ント、ロッド（例えば、後脊髄ロッドなどの脊髄ロッド）、プレート、スクリュー、ワッ
シャ、ワイヤ、ピン、内部固定器具（例えば骨折固定器具）、又は当業者に知られている
他の埋め込み可能な整形外科用ハードウェアの形態又はその一部である。
【００２９】
また、本発明により、インプラント又は他の器具の使用方法も提供される。前記インプ
ラント又は器具は、当該技術分野で知られている、従来のインプラント又は器具は（例え
ば、本明細書中に開示された組成物を含まない及び／又は被覆されていないインプラント
又は器具）の使用方法を用いて使用することができる。いくつかの実施形態では、本発明
の方法は、本発明のインプラント又は器具による任意の疾患又は病状の治療を含むと理解
されるべきである。また、本発明は、本明細書中に開示されたβ−１，６−グルカンを含
有する化合物又は組成物を対象に送達する方法であって、前記化合物又は組成物を含む被
覆されたインプラント又は他の器具を前記対象の体内に埋め込む又は導入するステップを
含む方法を提供する。また、β−１，６−グルカンを含むインプラント又は他の器具（例
えば、カテーテル、埋込型ポンプ、留置静脈ラインなど）を使用して、β−１，６−グル
カンを含まない治療剤を対象に送達する方法が本発明により提供される。
【００３０】
他の実施形態では、本発明は、ターゲティング部分（例えば、食細胞と特異的に相互作
用する又は食細胞を引き寄せる部分）と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有す
る組成物を提供する。本発明のこの態様によれば及びある実施形態では、前記ターゲティ
ング部分は、感染細胞、腫瘍性細胞、前癌細胞、病原体又はそれらの成分と特異的に相互
作用する、或いは、食細胞を例えば腫瘍、前癌、感染部位などへ動員する。本発明のこの
態様によれば及びある実施形態では、前記ターゲティング部分は、感染細胞、腫瘍性細胞
、前癌細胞、病原体、又はそれらの成分と特異的に相互作用する。ある実施形態では、前
記グルカンはＯ−アセチル化基について富化されており、ある実施形態では前記グルカン
は少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含む。他の実施形態では、前記グル
カンは、地衣類又は酵母から単離される又は得られる。ある実施形態では、前記グルカン
は、イワタケ科から単離される又は得られる。ある実施形態では、前記グルカンは、化学
的に合成若しくはアセチル化される。他の実施形態では、前記組成物は、アジュバント、
抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含む。他の実施形態では、前記食
細胞は、プロフェッショナル抗原提示細胞である。他の実施形態では、前記食細胞は、好
中球である。
【００３１】
ある実施形態では、前記ターゲティング部分は、抗体又は抗体断片である。
【００３２】
他の実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、例えば
ターゲティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対
象に投与するステップを含む方法を提供する。前記ターゲティング部分は、食細胞と相互
作用する又は食細胞を引き寄せる、又は、本明細書中で説明されたいずれかの実施形態を
含む。
【００３３】
ある実施形態では、前記免疫応答の調節は、前記免疫応答の促進を含む。前記免疫応答
は、ある実施形態では、抗原特異的応答である。ある実施形態では、前記組成物は、免疫
促進化合物をさらに含む。他の実施形態では、前記組成物は、化学療法化合物をさらに含
む。ある実施形態では、前記免疫応答は、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み
合わせに対するものである。他の実施形態では、前記免疫応答は、補体依存性である。
【００３４】
ある実施形態では、本発明は、対象における感染症を治療する、感染症の進行を遅延さ
せる、又は感染症の発生率若しくは重症度を低減させる方法であって、例えばターゲティ
ング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与す
るステップを含む方法を提供する。前記ターゲティング部分は、食細胞と相互作用する又
は食細胞を引き寄せる、又は、本明細書中で説明されたいずれかの実施形態を含む。他の
実施形態では、前記組成物は、アジュバント、抗原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療
法剤又はそれらの組み合わせをさらに含む。ある実施形態では、前記抗原又はペプチドは
、感染源から得られる。ある実施形態では、前記免疫促進化合物は、サイトカインである
。他の実施形態では、前記化学療法化合物は、抗生物質又は抗ウイルス性化合物である。
【００３５】
ある実施形態では、本発明は、細胞内での熱ショックタンパク質の発現を促進又は増進
させる方法であって、例えばターゲティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカ
ンを含有する組成物を好中球に接触させるステップを含む方法を提供する。前記ターゲテ
ィング部分は、食細胞と相互作用する又は食細胞を引き寄せる、又は、本明細書中で説明
されたいずれかの実施形態を含む。
【００３６】
他の実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、本明細
書中で説明された粒子に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投
与するステップを含む方法を提供する。
【００３７】
他の実施形態では、本発明は、対象における癌を治療する、癌の進行を遅延させる、癌
の寛解を延長する、又は癌の発生率若しくは重症度を低減させる方法であって、本明細書
中で説明されたグルカン（例えば、精製されたβ−１，６−グルカン、事前にＯ−アセチ
ル化グルカンについて富化されたβ−１，６−グルカン、粒子と結合したβ−１，６−グルカン、ターゲティング部分と結合したβ−１，６−グルカン、又はそれらの組み合わせ）を含有する組成物を前記対象に投与するステップを含む方法を提供する。
【００３８】
他の実施形態では、本発明は、随意的にＯ−アセチル化基について富化されたβ−１，
６−グルカンを含むミセルを提供する。他の実施形態では、本発明は、β−１，６−グル
カン及び生分解性高分子を含有する組成物であって、前記生分解性高分子が分解して生物
活性サリチル酸塩又はアルファヒドロキシ酸部分を形成し、前記β−１，６−グルカンが
、随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたことを特徴とする組成物を提供す
る。他の実施形態では、本発明は、任意のグルカン、任意の組成物、任意のミセル、又は
それらの組み合わせの、本明細書中で説明された方法への使用を提供する。
【００３９】
本明細書で引用される刊行物、特許及び特許出願はいずれも、参照することで、個々の
刊行物、特許又は特許出願が具体的かつ個別に参照によって組み込まれるものと示されて
いる場合と同程度にその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書と組み込まれた引用物
との間に不一致がある場合は、本明細書を優先する。本明細書内において、数値の範囲の
終端は、前記範囲に含まれるものとする。さらに、別途に示されない又は文脈及び当業者
の理解から明らかにされない限り、範囲として示された値は、その範囲無内の特定の値又
は部分的な範囲と想定でき、異なる実施形態では、随意的に前記範囲の両端を含む又は含
まず、文脈が明確に示さない限り前記範囲の下限の単位の十分の１まで含むことを理解さ
れたい。元々の単位が整数である値に関連して記載されたパーセンテージでは、端数は最
も近い整数に丸められる。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】β−１，６−グルカンは、好中球における熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）の発現を促進する。ＨＳＰの誘導は、定量リアルタイムＰＣＲによって判定した。データは、２つ（Ａ）又は少なくとも３つの実験の平均及び標準偏差を表す。カンジダ（Ｃａ）又はビーズを、プールしたヒト血清でオプソニン化し、好中球で２時間培養した。（Ａ）カンジダ・アルビカンスは好中球においてＨＳＰを誘発する。発光量比は、好中球＋カンジダ／好中球単独の比を表す。（Ｂ）熱殺菌されたカンジダは、より高レベルのＨＳＰを誘発する。熱殺菌されたカンジダに対する結果をＵＶ殺菌されたカンジダに正規化した。（Ｃ〜Ｅ）β−１，６−グルカンは、ＨＳＰの発現を促進する。ポリビーズ（Polybead）ポリスチレンの６ミクロンのミクロスフェア（ｂｅａｄｓ）を、等量の、次のグルカンのうちの１つでコーティングした：ラミナリン（ｌａｍ，藻類β−１，３−グルカン）、カンジダ・アルビカンスから精製したβ−１，６−グルカン（Ｃａβ−１，６−グルカン）、プスツラン（ｐｕｓ，苔癬β−１，６−グルカン）、オオムギグルカン（ｂａｒ，３０％のβ−１，３−グルカン及び７０％のβ−１，４−グルカン）、又はデキストラン（ｄｅｘ，α−１，６−グルカン）。ビーズを、プールしたヒト血清で、又は加熱不活性化した（ＨＩ）プールしたヒト血清（Ｄ）でオプソニン化した。発光量比は、好中球＋グルカンでコーティングされたビーズ／好中球＋未処理ビーズの比を表す。（Ｃ）真菌β−１，６−グルカンは、ＨＳＰの発現を促進する。ビーズを、カンジダ・アルビカンスから精製したβ−１，３−グルカン（Ｃａ β−１，３−グルカン）、又はカンジダ・アルビカンスから精製したβ−１，６−グルカン（Ｃａ β−１，６−グルカン）でコーティングした。（Ｄ）標準β−１，６−グルカンは、ＨＳＰの発現を促進する。ビーズは、ラミナリン（ｌａｍ，藻類β−１，３−グルカン）、又はプスツラン（ｐｕｓ，苔癬β−１，６−グルカン）でコーティングされた。（Ｅ）可溶性β−１，６−グルカン及び他のグルカンでコーティングされたビーズはＨＳＰの発現を促進しない。ビーズは、オオムギ（ｂａｒ，３０％のβ−１，３−グルカン及び７０％のβ−１，４−グルカン）から単離されたβ−グルカンで、又はデキストラン（ｄｅｘ，α−１，６−グルカン）でコーティングされた。好中球を、５ｍｇ／ｍｌの可溶性ラミナリン（ｓｏｌｌａｍ）、５ｍｇ／ｍｌの可溶性プスツラン（ｓｏｌ ｐｕｓ）、又はビーズで培養した。発光量比は、好中球＋可溶性グルカン／好中球単独の比、又は好中球＋グルカンでコーティングされたビーズ／好中球+未処理ビーズの比を表す。
【図２】プスツランによるＨＳＰの誘発は、β−１，６−グルカンに起因する。Ａ及びＦにおいて、好中球を、オプソニン化したビーズで３７℃で２時間培養した。（Ａ）エンド−β−１，６−グルカナーゼは、プスツランによるＨＳＰの誘導を減少させる。ビーズを、等量のプスツラン（ｐｕｓ）又はエンド−β−１，６−グルカナーゼで消化したプスツランでコーティングした。酵素で処理したプスツランを用いたＨＳＰの誘導は、未処理のものと相関している。データは、幾つかの実験の平均及び標準偏差を表す。（Ｂ）プスツランをＢｉｏＧｅｌ Ｐ６カラム上でクロマトグラフ分析した。（Ｃ）プスツランを先ずエンド−β−１，６−グルカナーゼで消化し、Ｐ６カラムに送液すると、大小のピークを生じた。小さいピークは、酵素消化（Ｖｏ）に耐性がある本来のプスツランのほんの一部分を表している。（Ｄ）Ｃにおける大きいピークは、薄層クロマトグラフィーによって、期待された分解産物、ゲンチオビオース及びゲンチオトリオースであることが示された。レーン１は、対照として標準的なオリゴ糖（Ｇ１〜Ｇ５）を含む。レーン２は、グルコース（Ｇ）を加えたプスツランである。レーン３は、エンド−β−１，６−グルカナーゼで消化したｐｕｓである。Ｏｒ＝起源。（Ｅ）脱アセチル化プスツランのクロマトグラフィー。挿入図は、Ｃ及びＥから得られたＶｏを重ね書きしたものである。（Ｆ）プスツランの脱アセチル化及びそれに続くエンド−β−１，６−グルカナーゼでの消化は、ＨＳＰの誘導をなくす。脱アセチル化プスツラン又はエンド−β−１，６−グルカナーゼで消化した脱アセチル化プスツランにおけるＨＳＰの誘導は、未処理プスツランによるものに相関している。
【図３】β−１，６−グルカンは、好中球における活性酸素種（ＲＯＳ）の食作用及び生成を促進する。ポリビーズポリスチレンの６μｍのミクロスフェア（ｂｅａｄｓ）を等量の示されているβ−グルカンでコーティングし、その後オプソニン化した。（Ａ）β−１，６−グルカンは、食作用を促進する。ラミナリン（ａ及びｂ）又はプスツラン（ｃ及びｄ）でコーティングされたビーズに対して、食作用を経時的顕微鏡検査法によって評価した。ａ及びｃでの画像は、時間０で撮ったものである。画像ｂ及びｄは好中球で４０分間培養した後に撮ったものである。（Ｂ）β−１，６−グルカンは、食作用を促進する。（ａ）未処理ビーズ、（ｂ）カンジダ由来のβ−１，３−グルカンでコーティングされたビーズ、（ｃ）ラミナリン（ｌａｍ，β−１，３−グルカン）でコーティングされたビーズ、（ｄ）オオムギ（ｂａｒ）由来のグルカンでコーティングされたビーズ、（ｅ）プスツラン（ｐｕｓ，β−１，６−グルカン）でコーティングされたビーズ、（ｆ）可溶性プスツランで処理した好中球に対する食作用を、蛍光励起細胞分取（ＦＡＣＳ）により側方散乱の変化によって評価した。（Ｃ）β−１，６−グルカンは、ＲＯＳ生成を促進する。ＤＨＲ１２３を用いてＦＡＣＳによってＲＯＳ生成をアッセイした。β−１，３−グルカンは、適度の刺激だけを示す。
【図４】Ｃ３タンパク質分解断片がβ−１，６−グルカン上に沈着されている。ビーズは、未処理（ｂｅａｄｓ）、或いは等量のラミナリン（ｌａｍ，β−１，３−グルカン）又はプスツラン（ｐｕｓ，β−１，６−グルカン）でコーティングした。オプソニン化に続いて、ビーズを２％ＳＤＳ １Ｍ水酸化アンモニウム緩衝液中で懸濁し、３７℃で１時間インキュベートした。上清を４〜２０％アクリルアミドＳＤＳゲル上に置いた。分子量タンパク質スタンダ−ド（molecular weight protein standard）の移動が示されている。（Ａ）ゲルを銀染色剤とインキュベートし、バンドを取り出して質量分析による分析を行った。（Ｂ）Ｃ３の（ａ）α鎖又は（ｂ）β鎖に対するモノクローナル抗体を用いてウエスタン分析を行った。
【図５】血清を可溶性プスツラン（β−１，６−グルカン）とプレインキュベートすると、好中球の刺激を消失するが、可溶性ラミナリン（β−１，３−グルカン）はしない。（Ａ）プスツランでコーティングされたビーズの食作用を、ＦＡＣＳにより側方散乱の変化によって評価した。血清は、未処理（ａ）、或いは３７℃で５分間１ｍｇの（フェノール硫酸法により定量化）の可溶性ラミナリン（ｌａｍ）（ｂ）又はプスツラン（ｐｕｓ）（ｃ）とインキュベートした。（Ｂ）プスツランでコーティングされたビーズに反応しての活性酸素種の生成を、ＤＨＲ１２３を用いてＦＡＣＳによってアッセイした。血清は、未処理（赤色）、或いは可溶性ラミナリン（緑色）又はプスツラン（青色）とインキュベートした。（Ｃ）プスツランでコーティングされたビーズ上におけるＣ３沈着を、可溶性プスツラン（しかしラミナリンではない）による血清のプレインキュベーションによって除去した。Ｃ３の（ａ）α鎖又は（ｂ）β鎖に対するモノクローナル抗体を用いてウエスタン分析によってＣ３沈着をアッセイした。血清を可溶性プスツラン（１）またはラミナリン（２）とプレインキュベートしたか、或いは未処理（３）であった。分子量タンパク質スタンダ−ドの移動が示されている。（Ｄ）血清を可溶性プスツランとプレインキュベートすると、カンジダの死滅が減少した。血清は、未処理、或いはカンジダのオプソニン化の前に可溶性ｐｕｓ又はｌａｍとプレインキュベートした。好中球との３０分間のインキュベーションに続いて、ＸＴＴを用いてカンジダ生存度をアッセイした。
【図６】ＣＲ３は、好中球のβ−１，６−グルカン刺激を媒介する。ポリビーズポリスチレンの６．０ミクロンのミクロスフェア（ｂｅａｄｓ）をβ−１，６−グルカンプスツラン（ｐｕｓ）でコーティングされたビーズを、プールしたヒト血清でオプソニン化し、好中球で１５分間培養した。プスツランでコーティングされたビーズで培養する前に、好中球をＣＲ３阻止抗体又はＩｇＧアイソタイプ対照と氷上で３０分間プレインキュベートした。（Ａ）ＣＲ３阻止抗体は、β−１，６−グルカンにより促進される食作用を減少させる。（ａ）アイソタイプ対照ＩｇＧ又は（ｂ）抗ＣＲ３阻止抗体とプレインキュベートした好中球に対し、プスツランでコーティングされたビーズの食作用を、ＦＡＣＳにより側方散乱の変化によってアッセイした。（Ｂ）ＣＲ３阻止抗体は、β−１，６−グルカンにより促進されるＲＯＳ生成を減少させる。プスツランでコーティングされたビーズに反応してのＲＯＳの生成をＤＨＲ１２３を用いてＦＡＣＳによってアッセイした。好中球をアイソタイプ対照ＩｇＧ（緑色）又は抗ＣＲ３阻止Ａｂ（赤色）とプレインキュベートした。
【図７】β−１，６−グルカンは、単球においてケモカインを誘発する。ポリビーズポリスチレンの６．０ミクロンのミクロスフェア（ｂｅａｄｓ）を等量のβ−１，３−グルカンラミナリン（ｌａｍ）又はβ−１，６−グルカンプスツラン（ｐｕｓ）でコーティングされたビーズを、プールしたヒト血清でオプソニン化した。５ｍｇ／ｍｌの可溶性ｌａｍ又はｐｕｓで、又は上述のビーズで、単球を２時間培養した。ケモカインの誘導を定量リアルタイムＰＣＲによって判定した。結果を平均し、標準偏差を計算した。
【図８】好中球貪食を招く細胞ターゲティング及び相補体沈着におけるプスツラン−抗体キメラ活性の概略的な描写。抗体（Ａｂ）は、多糖（ＰＳ）に物理的に結合されている。相補体（Ｃ３）沈着は、抗体特異性に応じて標的細胞へ好中球を補充する。
【図９】プスツラン−抗カンジダ・アルビカンスモノクローナル抗体キメラへの暴露後のヒト好中球による高活性酸素種の誘発。３０〜１００ｋＤａ又はｈ１００ｋＤａ以上（＞１００）の大きさの抗カンジダ・アルビカンス抗体（Ａｂ）−プスツラン（ｐｕｓ）（Ａｂ−ｐｕｓ）複合体をポリアクリルアミドゲル上に置き、銀染色した（Ａ）。ＲＯＳ生成を、ＤＨＲ１２３を用いて蛍光励起細胞分取によってアッセイした（Ｂ）。
【図１０】β−１，６−グルカンは、カンジダ・アルビカンスの効率的な食作用、ＲＯＳの生成及びＨＳＰの発現に必要である。カンジダ・アルビカンス細胞を熱殺菌し、エンド−β−１，６−グルカナーゼで消化し、オプソニン化した。（Ａ）β−１，６−グルカンは、効率的な食作用に必要である。食作用を蛍光励起細胞分取（ＦＡＣＳ）により側方散乱の変化によってアッセイした。（Ｂ）効率的なＲＯＳ生成のためにβ−１，６−グルカンが必要である。ＲＯＳ生成をＤＨＲ１２３を用いてＦＡＣＳによってアッセイした。（Ｃ）β−１，６−グルカンは、ＨＳＰの誘導に必要である。ＨＳＰ誘導を定量リアルタイムＰＣＲによって判定した。β−１，６−グルカナーゼで消化したカンジダに対する結果を未消化カンジダに正規化した。データは、２つの実験の平均及び標準偏差を表す。
【図１１】（Ａ）マウス血清は、相補体を活性化する。ビーズは、未処理（１）、或いは等量のプスツラン（β−１，６−グルカン）（２）又はラミナリン（β−１，３−グルカン）（３）でコーティングした。マウス（Ｃ５７ＢＬ／６）血清でのオプソニン化に続いて、ビーズを２％ＳＤＳ １Ｍ水酸化アンモニウム緩衝液中で懸濁し、３７℃で１時間インキュベートした。上清を４〜２０％アクリルアミドＳＤＳゲル上に置いた。分子量タンパク質スタンダ−ドの移動が示されている。抗マウスＣ３抗体を用いてウエスタン分析を行った。（Ｂ）β−１，６−グルカンでコーティングされたビーズは、マウスを全身性真菌感染症から保護する。カンジダ・アルビカンス細胞（１０６）をＣ５７ＢＬ／６マウスの尾静脈に注入した。翌日、１０５個のβ−１，６−グルカンでコーティングされたビーズ又は未処理ビーズを同じマウスの尾静脈に注入した。生存を毎日モニタした。
【図１２】β−１，６−グルカン封入ＰＬＧＡビーズは、活性酸素種の生成を誘発し、マウスを全身性真菌感染症から保護する。１ｍｇのＰＬＧＡにつき２５０ｍｇの多糖を用いてＰＬＧＡビーズを作った。（Ａ）β−１，３−グルカン（ｂ，ｅ）又はβ−１，６−グルカン（ｃ，ｆ）を封入したＰＬＧＡビーズ（ａ，ｄ）又はＰＬＧＡビーズの０日目（ａ〜ｃ）又は３日後（ｄ〜ｆ）のＳＥＭ画像。（Ｂ）分解ＰＬＧＡビーズの表面上でβ−１，６−グルカンが検出される。ポリクローナル抗β−１，６−グルカン抗体を用いてＰＢＳで３日間インキュベーションした後、分解ＰＬＧＡビーズ上でβ−１，６−グルカンが検出された。（Ｃ）β−１，６−グルカン（７．１７ｍｇ−グルコース／ｍｇ−ＰＬＧＡ）（緑色）封入ＰＬＧＡビーズは、β−１，３−グルカン（３７．１ｍｇ−グルコース／ｍｇ−ＰＬＧＡ）（赤色）封入ＰＬＧＡビーズより高レベルの活性酸素種を誘発する。（Ｄ）β−１，６−グルカン封入ＰＬＧＡビーズは、マウスを全身性真菌感染症から保護する。カンジダ・アルビカンス細胞（１０６）をＣ５７ＢＬ／６マウスの尾静脈に注入した。１０５個のβ−１，６−グルカンビーズ封入ＰＬＧＡビーズ、β−１，３−グルカン封入ＰＬＧＡビーズ、又はＰＬＧＡビーズを翌日同じマウスの尾静脈に注入した。生存を毎日モニタした。
【図１３】β−１，６−グルカン上で高レベルのＩｇＧが検出される。ビーズは、未処理（赤色）、或いは等量のラミナリン（β−１，３−グルカン）（緑色）又はプスツラン（β−１，６−グルカン）（青色）でコーティングした。オプソニン化に続いて、抗ヒトＩｇＭ及びＩｇＧ抗体を用いてＩｇＭ及びＩｇＧ沈着を検出した。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
説明を簡単かつ明瞭にするために、図面に示す構成要素は必ずしも縮尺通りに描かれて
いない。例えば、構成要素のうちの幾つかは、明確にするために、他の構成要素に対して
寸法が誇張されていることがある。さらに、適切であると考えられる場合には、対応する
構成要素または類似の構成要素を示すために図面間で符号が繰り返し用いられていること
がある。
【００４２】
下記の説明では、本発明を完全に理解するために、本発明の様々な詳細について説明す
る。しかしながら、本発明はこれらの詳細なしで実施可能され得ることは、当業者は理解
されたい。他の例では、本発明を不明瞭にしないために、周知の方法、工程、及び構成物
については説明しない。
【００４３】
グルカンは、地衣化真菌における研究されている種の全てに見られる多糖である。部分
的にＯ−アセチル化されたプストラン（pustulan）は、典型的なイワタケ科であり、例え
ば、U.pustulata、U. hirsute、U. angulata、U. caroliniana、及びU. polyphyllaなど
のイワタケの様々な種について説明されている。
【００４４】
β−ｌ，６−グルカンは、β−１，３−グルカンとは対照的に、免疫応答を調節するの
に有用な作用を呈し得る特異的な遺伝子発現を誘導することが分かっている。これに限定
するものではないが、Ｏ−アセチル化されたβ−ｌ，６−グルカンは、これに関して有用
であることが分かっている。また、これに限定するものではないが、β−ｌ，６−グルカ
ンは、好中球による貪食及び活性酸素種生成を誘導することも分かっている。活性酸素種
は好中球における殺滅機構の重要な要素であり、それ故に、β−ｌ，６−グルカンのこの
活動は免疫応答を調節するのに有用であり得る。ある実施形態では、本発明は、対象にお
ける活性酸素種の生成を誘導する方法であって、β−ｌ，６−グルカンを前記対象に、前
記対象の細胞（例えば好中球）による貪食及び活性酸素種生成を誘導するのに十分な量で
投与するステップを含み、前記β−ｌ，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカン
となるように富化されていることを特徴とする方法を提供する。活性酸素種（Reactive o
xygen species：ＲＯＳ）としては、例えば、酸素イオン、遊離基、過酸化物（無機過酸
化物又は有機過酸化物の）などの分子がある。特定の実施形態では、活性酸素種は小分子
であり、不対の電子殻電子が存在することが原因で、極めて反応性に富む。ある実施形態
では、前記ＲＯＳは、超酸化物である。
【００４５】
本発明は、精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を提供する。前記組成物
は、本発明の様々な実施形態では、医薬組成物、食品若しくは食品製品、食品サプリメン
ト、又は化粧品組成物である。前記組成物は、一部の実施形態では、例えばプストランや
真菌細胞壁の製剤などの組成物とは異なる。本発明の特定の実施形態では、前記組成物内
に含有されるグルカンのうちの、少なくとも１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０
重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、８０重量％、９０重量％、９５重量％、
９８重量％、９９重量％又はそれ以上がβ−１，６−グルカンである。特定の実施形態で
は、前記組成物内に含有されるグルカンのうちの２０〜５０重量％が、β−１，６−グル
カンである。特定の実施形態では、前記組成物内に含有されるグルカンのうちの５０〜１
００重量％が、β−１，６−グルカンである。ある実施形態では、本発明の任意の組成物
又は方法では、前記グルカンは、約１５〜３０重量％のβ−１，６−グルカンを含む。他
の実施形態では、本発明の任意の組成物又は方法では、前記グルカンは、約１０〜３５重
量％のβ−１，６−グルカン、又は他の実施形態では約２０〜５０重量％のβ−１，６−
グルカン、又は他の実施形態では約２５〜６０重量％のβ−１，６−グルカン、又は他の
実施形態では約３５〜８０重量％のβ−１，６−グルカン、又は他の実施形態では約１８
〜３５重量％のβ−１，６−グルカン、又は他の実施形態では約１５〜７５重量％のβ−
１，６−グルカンを含む。本発明の特定の実施形態では、「重量」は「乾燥重量」を意味
する。他の実施形態では、「重量」は総重量を意味する。本発明の特定の実施形態では、
前記β−１，６−グルカンは処理される。前記処理としては、例えば、脱アセチル化、β
−１，６−グルカン以外のグルカンを消化する酵素による処理、β−１，６−グルカンを
消化する酵素による限定消化、特定の分子重量範囲の選択などがある。特定の実施形態で
は、前記処理は、他のグルカン（例えば、β−１，６−グルカンやβ−１，３−グルカン
など）からの分離を含む。特定の実施形態では、前記処理は、β−１，３−グルカンから
のβ−１，６−グルカン側鎖の除去、及び随意的にβ−１，６−グルカン側鎖の分離を含
む。特定の実施形態では、処理されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物は、免疫応
答を望ましく調節する能力が、未処理のグルカン又は未処理のβ−１，６−グルカンと比
較して向上する。
【００４６】
本発明は、ある実施形態では、Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グル
カンを含有する組成物を提供する。本発明の任意の組成物又は方法のある実施形態では、
前記グルカンは、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含む。本発明の任意
の組成物又は方法のある実施形態では、前記グルカンは、約１５〜３０重量％のＯ−アセ
チル化グルカンを含む。本発明の組成物又は方法の他の実施形態では、前記グルカンは、
約１０〜３５重量％の、又は他の実施形態では約２０〜５０重量％の、又は他の実施形態
では約２５〜６０重量％の、他の実施形態では約３５〜８０重量％の、又は他の実施形態
では約１８〜３５重量％の、又は他の実施形態では約１５〜７５重量％のＯ−アセチル化
グルカンを含む。他の実施形態では、前記グルカンは、約７５〜１００重量％、例えば７
５〜９０重量％又は９０〜１００重量％のＯ−アセチル化グルカンを含む。本発明の任意
の組成物又は方法のある実施形態では、前記グルカンは、天然発生的β−１，６−グルカ
ン（例えば、pustulan又は本明細書中で言及された任意の他のβ−１，６−グルカン）を
β−１，６−エンドグルカナーゼで前記β−１，６−グルカンの少なくとも９０重量％を
消化するのに十分な時間で消化して、５個以下のグルコースユニットを含むオリゴ糖を生
成することによって生じるＯ−アセチル化グルコースユニットを適切なパーセンテージ（
本発明の様々な実施形態では重量又は数で）で含んでおり、その後、（ｉ）前記組成物か
ら５個以下のグルコース残基を含む前記オリゴ糖を除去する、又は（ｉｉ）５ｋＤ以上、
一部の実施形態では１０、２０、３０、５０又は１００ｋＤ以上の分子量を有する得られ
た組成物の一部を単離する。
【００４７】
一部の実施形態では、「Ｏ−アセチル化残基についての富化」という表現は、天然グル
カン分子と比較して、前記グルカン分子内の個々のグルコースユニットにおけるＯ−アセ
チル化部位のパーセントが増加したこと、前記グルカン分子内のＯ−アセチル化グルコー
スユニットのパーセントが増加したこと、又はそれらの組み合わせを意味する。ある実施
形態では、特定の重量パーセントでＯ−アセチル化グルカンについて富化されたグルカン
製剤は、天然グルカン分子と比較して、前記グルカン分子内の個々のグルコースユニット
におけるＯ−アセチル化部分のパーセントが増加した、前記グルカン分子内のＯ−アセチ
ル化グルコースユニットのパーセントが増加した、又はそれらの組み合わせの製剤を意味
する。
【００４８】
異なるソースから得られるグルカンは、前記グルカン分子内の個々のグルコースユニッ
トにおけるＯ−アセチル化部位、前記グルカン分子内のＯ−アセチル化グルコースユニッ
ト、又はそれらの組み合わせに関して、様々な量のＯ−アセチル化を有する。本発明のこ
の態様によれば、「Ｏ−アセチル化グルカンについて富化された」という表現は、ある実
施形態では、ここに説明されるように、前記グルカンが得られる基準ソースと比較しての
Ｏ−アセチル化の増加を意味しており、任意のグルカン源と比較しての全体的な富化は意
味していない。
【００４９】
ある実施形態では、「Ｏ−アセチル化グルカンについて富化された」という表現は、少
なくとも２５重量％のグルカン鎖が富化されたこと（少なくとも１つのグルコースユニッ
トにおけるＯ−アセチル化）、又は前記組成物内の前記グルカン内に存在する少なくとも
２５％のグルコースユニットがＯ−アセチル化されたこと、又はそれらの組み合わせを意
味する。ある実施形態では、前記β−グルカン鎖の少なくとも１％、又は他の実施形態で
は少なくとも５％において、前記グルコースユニットの少なくとも２５％がＯ−アセチル
化される。他の実施形態では、前記β−グルカン鎖の少なくとも５％のグルコースユニッ
トにおける、２５〜３５％、２５〜５０％、２５〜７５％、１５〜４５％、２０〜６０％
、３５〜８０％、又はその他がＯ−アセチル化される。他の実施形態では、前記β−グル
カン鎖の少なくとも１０％、又は他の実施形態では前記β−グルカン鎖の少なくとも１５
％、又は他の実施形態では前記β−グルカン鎖の少なくとも２０％のグルコースユニット
における、２５〜３５％、２５〜５０％、２５〜７５％、１５〜４５％、２０〜６０％、
３５〜８０％、又はその他がＯ−アセチル化される。
【００５０】
ある実施形態では、前記グルカンは、地衣類から（ある実施形態ではイワタケ科から）
単離される又は得られる。ある実施形態では、前記グルカンは、真菌から単離される又は
得られる。ある実施形態では、前記真菌は食用菌であり、とりわけ、グリフォラフロンド
サ（Grifolafrondosa）、（マイタケ）、コルディセプスシネンシス（Cordyceps sinens
is）、アガリクス・ブラジリエンシス（Agaricusbrasiliensis）、イノノツオブリキュ
ア（lnonotusobliquus）（チャガ）である。ある実施形態では、前記グルカンは、酵母
から単離される。他の実施形態では、前記グルカンは、化学的に合成若しくはアセチル化
される。ある実施形態では、短いβ−１，６−グルカン合成高分子がリンカー（例えばジ
アミン）を介して結合され、長い高分子が形成される。他の実施形態では、前記グルカン
は、固体支持体と結合する。
【００５１】
グルカンは、グルコース含有多糖であり、とりわけ、真菌細胞壁、グルコースサブユニ
ット間に１つ若しくは複数のα結合を有するα−グルカン、及び、グルコースサブユニッ
ト間に１つ若しくは複数のβ結合を有するβグルカンに見られる。
【００５２】
β−１，６−グルカンは、真菌内に多く存在し、真菌の外側にはあまり存在しない。本
発明に従って使用される前記グルカンは、β−１，６−グルカンを含む。一部の実施形態
では、前記β−１，６−グルカンは、例えばU. pustulata、Hirsute、U. angulata、U. c
aroliniana、U.polyphyllaなどのイワタケ科から得られる。
【００５３】
一部の実施形態では、前記β−１，６−グルカンは、例えばカンジダ・アルビカンスな
どのカンジダ菌から得られる。β−１，６−グルカンが得られる他の有機体としては、例
えば、コクシジオイデス・イミティス、トリコフィトン・ベルコーズム、ブラストミセス
・デルマティディス、クリプトコックス・ネオフォルマンス、ヒストプラスマ・カプスラ
ーツム、サッカロマイセス・セレヴィシエ、パラコクシジオイデス・ブラジルエンシス、
及びピチウム・インシジオサムなどがある。一部の実施形態では、前記β−グルカンは、
当該技術分野で既知のように、化学的又は酵素的に合成される。他の実施形態では、β−
グルカンは、それを生成する任意の種から得られ、化学的又は酵素的に改変され、例えば
分子のＯ−アセチル化が増加させられる。
【００５４】
一部の実施形態では、前記β−グルカンは、真菌性のグルカンである。「真菌性のグル
カン」は一般的に真菌から得られるが、特定のグルカン構造は真菌及び非真菌（例えば、
細菌、下等植物又は藻）の両方において見られるので、非真菌有機体は代わりのソースと
して使用され得る。
【００５５】
完全長の天然のβ−グルカンは、不溶性であり、メガダルトンの範囲の分子量を有する
。一部の実施形態では、本発明は、溶解性のβ−１，６−グルカンを提供する。一部の実
施形態では、本発明は、溶解性のＯ−アセチル化β−１，６−グルカンを提供する。一部
の実施形態では、可溶化は、長い不溶性のグルカンを断片化することにより達成される。
このことは、例えば、加水分解により、又は一部の実施形態ではグルカナーゼ（例えば、
β−１，３−グルカナーゼにより、又はβ−１，３−グルカナーゼによる限定消化により
）による消化により達成される。他の実施形態では、グルカンは、例えば合成により作成
することができ、ある実施形態では単糖構成要素を連結することにより作成することがで
きる。そのようなグルカンのＯ−アセチル化は、当該技術分野で既知の方法により、容易
に達成することができる。そのような方法としては、当該技術分野で知られているような
、化学的及び／又は酵素的なアセチル化がある。
【００５６】
真菌性β−グルカンのソースは、様々なものがある。例えば、市販されている純粋なβ
−グルカン（例えば、pustulan（Calbiochem））は、Umbilicaria papullosaから精製さ
れたβ−１，６−グルカンである。β−グルカンは、例えば「Tokunaka et al. (1999) C
arbohydr Res316: 161-172」に説明されている様々な方法によって、真菌細胞壁から精
製することができる。そして、前記生成物は、当該技術分野で既知の様々な方法により、
β−１，６−グルカン部分又はＯ−アセチル化β−１，６−グルカン部分について富化す
ることができる。
【００５７】
当業者であれば、β−１，６−グルカン部分及び／又はＯ−アセチル化β−１，６−グ
ルカン部分について富化するための適切な方法を特定又は選択することができるであろう
。ある実施形態では、β−グルカンのＯ−アセチル化は化学的に行われる。例えば、多糖
（５０ｍｇ）をスピードバック（speed vac）遠心分離機内で乾燥させ、その後、１．５
ｍｌの無水酢酸（Mallindcrockdt）内で再懸濁する。再懸濁した後、触媒として、４−ジ
メチルアミノピリジン（Avocado Research Chemist, Ltd）の結晶を少量加える。この反
応は、室温で、５、２０又は１２０分間行われ、その後、２容量の水によって止められる
。その後、前記サンプルは、水に対して一晩透析される。当業者には明白であるように、
この処理は、変更又は大規模化できることに留意されたい。他の実施形態では、Ｏ−アセ
チル化β−１，６−グルカンを分離する方法は、様々な順番で行うことができる次の（ａ
）〜（ｄ）のステップを１つ以上含む。（ａ）例えば任意の疎水性マトリックス／樹脂へ
の結合などの、高疎水性に基づいた分離。（ｂ）Ｏ−アセチル化β−１，６−グルカンが
消化に耐性を示す場合の、適切なエンドグルカナーゼ若しくはエゴグルカナーゼ又はそれ
らの組み合わせによる消化に基づいた分離。（ｃ）β−１，６−グルカン又はそれのＯ−
アセチル化基に結合する適切な抗体又は他の部分を使用した親和性分離。（ｄ）分子量に
基づいた分離。ある実施形態では、β−１，６−グルカンは、アセチル化されていない及
び／又はアセチル化の度合いが低いβ−１，６−グルカンを消化する酵素により消化され
る。その結果得られた物質は、サイズ又は分子量に基づいて分離され、大量にアセチル化
されたグルカンを含む部分が単離される。一部の実施形態では、β−１，６−グルカン製
剤が得られ、消化され、Ｏ−アセチル化オリゴ糖が分離され（他の実施形態では単離され
）、新しい組成物の調製に使用される。そのような組成物は、本発明のＯ−アセチル化残
基について富化されたβ−１，６−グルカン製剤の実施形態を示す。
【００５８】
富化されたＯ−アセチル化β−１，６−グルカンを作成するための任意の処理により得
られた生成物は、本発明の一部と見なされることを理解されたい。
【００５９】
一部の実施形態では、本発明の組成物、製剤、ミセル及び／又は方法に使用する前記グ
ルカンは、天然のグルカン製剤には存在しない構造的改変を含み得る。そのような改変と
しては、ここに説明されるように、Ｏ−アセチル化がある。他の実施形態では、そのよう
な改変としては、メチル化、アルキル化、硫酸化、リン酸化、脂質結合、又は当業者には
既知の他の改変がある。一部の実施形態では、前記改変は、例えばギ酸、コハク酸、クエ
ン酸、又は当該技術分野で既知のその他の酸などの酸による改変（例えばエステル化）を
含む。
【００６０】
一部の実施形態では、遊離ヒドロキシル基の任意の又は全ての脂質結合は、例えば「Dr
ouillat B, etal., Pharm Sci. 1998 Jan; 87(1):25-30」や「B. N. A. Mbadugha, et a
l., Org. Lett.,5 (22), 4041-4044, 2003」に記載されているような、当該技術分野で
既知の様々な手段により達成される。
【００６１】
一部の実施形態では、メチル化は、「Mischnick et al. 1994 Carbohydr. Res., 264, 
293-304」、「Bowieet al. 1984, Carbohydr. Res., 125, 301-307」、「Sherman and G
ray 1992,Carbohydr. Res., 231, 221-235」、「Stankowski and Zeller 1992, Carbohy
dr. Res., 234,337-341」、「Harris, P.J., et al. (1984) Carbohydr. Res. 127, 59-
73」、「Carpita,N.C. & Shea, E.M. (1989) Linkage structure of carbohydrates by 
gaschromatography-mass spectrometry (GC-MS) of partially methylated alditol ace
tates. InAnalysis of Carbohydrates by GLC and MS (Biermann, CJ. & McGinnis, G.D
., eds), pp.157-216. CRC Press, Boca Raton, FL.」に記載されているような、当該技
術分野で既知の様々な手段により達成される。
【００６２】
一部の実施形態では、メチル化は、ＴＭＳエステル、アセテート又は他のエステルにさ
らに由来するＧＬＣ、結合したＭＳ、又は単糖への消化、ジ−Ｏ−メチル化によって確認
され、誘導体化及びＧＬＣ／ＭＳにより分析される。そのような方法は、例えば、「Pazu
r 1986,Carbohydrate Analysis - A Practical Approach, IRL Press, Oxford, pp. 55-
96」、「Montreuilet al. 1986, Glycoproteins. In M. F. Chaplin and J.F. Kennedy,
(eds.),Carbohydrate Analysis - a Practical Approach, IRL Press, Oxford, pp. 14
3-204」、「Sellerset al. 1990, Carbohydr. Res., 207, C1-C5」、「O'Neill et al. 
1990, Pecticpolysaccharides of primary cell walls. In P.M. Dey (ed.), Methods i
n PlantBiochemistry, Volume 2, Carbohydrates, Academic Press, London, pp. 415-4
41」、「Stephen etal. 1990, Methods in Plant Biochemistry, Volume 2, Carbohydra
tes, AcademicPress, London, pp. 483-522」、又は「Churms 1991, CRC Handbook of C
hromatography.Carbohydrates, Volume II, CRC Press, Boca Raton, Florida, USA」に
記載されている。
【００６３】
一部の実施形態では、リン酸化（随意的に他の改変の導入を含む）及び得られた生成物
の確認は、当該技術分野で公知の方法により実現される。例えば、「Brown, D. H., Bioc
hem. Biophys.Acta, 7, 487 (1951)」、「Roseman, S., and Daffner, L, Anal. Chem.,
28, 1743(1956)」、「Kornberg, A., and Horecker,. B. L., in Methods in enzymolo
gy, Vol. I,Academic Press, New York, 1955, p. 323」、米国特許第４，８１８，７５
２号を参照されたい。
【００６４】
一部の実施形態では、グルカンの硫酸化及び得られた生成物の確認は、当該技術分野で
公知の方法により実現される。そのような方法は、例えば、「Alban, S., and Franz, G.
(2001),Biomacromolecules 2, 354-361」、「Alban, et al. (1992) Arzneimittelfors
chung 42,1005-1008」又は「Alban, S., et al. (2001). Carbohydr. Polym. 47, 267-2
76」に記載されている。
【００６５】
また、本発明によれば、β−１，６−グルカンを含有するミセルが提供される。一部の
実施形態では、前記ミセルは、液体コロイド内に分散され得るβ−１，６−グルカンを含
有する界面活性剤分子から構成される複合体を含む。一部の実施形態では、前記界面活性
剤分子は両親媒性である。すなわち、前記界面活性剤分子は、疎水基（それらの「尾部」
）と親水基（それらの「頭部」）とを両方とも含む。一部の実施形態では、前記親水性成
分は、β−１，６−グルカンを含み、前記β−１，６−グルカンは、随意的にここで説明
された１つ以上の方法に従って改変される。一部の実施形態では、水溶液中のミセルは、
周囲の溶媒と接触して前記親水性「頭部」領域と凝集体を形成し、前記ミセルの中心に位
置する前記疎水性の尾部領域を隔離する。前記ミセルの形状は、球形及びほぼ球状で有り
得る。しかし、一部の実施形態では、前記ミセルの形状は、楕円、円筒状又は二重層で有
り得る。一部の実施形態では、前記ミセルは、例えば米国公開第２００２／００３５２１
７号に開示されているような高分子ミセルである。一部の実施形態では、前記ミセルは、
活性物質（例えば疎水性分子）をカプセル化する。例示的な活性物質としては、例えば、
抗感染症剤（例えば、抗細菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤、抗寄生虫剤）、癌を治療する
ための化学療法剤、免疫促進化合物、抗原、アジュバントなどが挙げられる。
【００６６】
本発明は、脂質と結合することにより改変されたβ−１，６−グルカンをさらに提供す
る。前記改変は、一部の実施形態では、脂質が結合されたβ−１，６−グルカンを含有す
るミセルの形成を可能にする。前記脂質は、直鎖又は分鎖状の、随意的に置換された炭化
水素であり得る。一部の実施形態では、前記脂質は脂肪酸を含む。一部の実施形態では、
前記脂質（例えば脂肪酸）は、４〜２６個又は４〜４０個の炭素原子を含む。
【００６７】
また、本発明は、酵母グルカンを含む又は実質的に酵母グルカンから成る粒子と共有結
合又は非共有結合されたβ−１，６−グルカンを含有する粒子を提供する。また、共有結
合を形成すべく酵母グルカンの官能基と反応可能な反応性部分を有するβ−１，６−グル
カンが提供される。前記酵母グルカンは、β−１，６−グルカン、β−１，３−グルカン
、他のグルカン、又はそれらの組み合わせを含み得る。
【００６８】
また、本発明によれば、β−１，６−グルカン及び生分解性高分子を含有する組成物が
提供される。一部の実施形態では、前記生分解性高分子は、生物学的に活性なサブユニッ
トを有する。「生分解性」という用語は、細胞又は対象が存在している生物環境において
分解される（すなわち、小さい断片に分解される）物質を意味する。ある実施形態では、
生分解性は、例えば酵素若しくは非酵素加水分解や消化などによって、高分子をその構成
サブユニットへ分解することを含む。ある実施形態では、生分解性は、高分子骨格におけ
る結合（共有結合であろうと非共有結合であろうと）の切断を含む。他の実施形態では、
生分解性は、側鎖の内部の結合、又は側鎖と高分子骨格とを接続する結合（共有結合であ
ろうと非共有結合であろうと）の切断を含む。一部の実施形態では、分解生成物は、対象
によって代謝可能である。一部の実施形態では、分解生成物は、より長い生体分子を合成
するために対象によって使用可能である。一部の実施形態では、分解生成物は、対象によ
って排出又は排泄される。一部の実施形態では、前記高分子及び／又はその分解生成物は
生体適合性を有し、本発明に適切な量で対象に投与（又は別の方法で対象の体内に導入）
した際に、実質的に非毒性であり、許容できない炎症や免疫応答を発生しない。
【００６９】
一部の実施形態では、本発明のグルカンをカプセル化する生分解性高分子は、本発明の
粒子を含む。一部の実施形態では、そのような高分子としては、例えば、ポリ（乳酸−ｃ
ｏ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、疎水性生体吸収性高分子（例えば、ポリグリコライド
）、ポリラクチド（Ｄ、Ｌ、ＤＬ）、ポリジオキサノン、炭酸ポリエステル、ポリヒドロ
キシアルカン酸、ポリカプロラクトン（ポリラクトン）、ポリエチレングリコール、ヒド
ロキシプロピルメチルセルロースフタレート、酢酸フタル酸セルロース、Ludragit Ｒ、
Ｌ、及びＥシリーズの高分子及びそれらの共重合体混合物、並びに、例えば米国特許第７
，０６０，２９９号、第６，９９８，１１５号、第６，０４８，５５１号（これらの文献
は、全文を引用することを以って本明細書の一部となす）に開示されているような当該技
術分野で公知の方法により作成された、上記の前駆体の２つ以上からなる共重合体などが
ある。
【００７０】
「生物学的な活性物質」という用語は、有効量で動物（例えば、ヒトなどの哺乳類）に
投与したときに治療的に望ましい効果を提供する治療剤を含む。なお、全ての対象が前記
物質の利益を受けるわけではないことを理解されたい。一部の実施形態では、前記高分子
は、ポリ酸無水物である。前記ポリ酸無水物は、随意的に、生物活性サリチル酸塩及びα
−ヒドロキシ酸を含む。前記高分子を分解すると、前記生物活性サリチル酸塩及び／又は
α−ヒドロキシ酸を放出する。一部の実施形態では、β−１，６−グルカンは、前記生分
解性高分子と、共有結合的又は非共有結合的に結合している。適切な高分子及びその製造
方法は、米国特許特許出願第２００３／００３５７８７号及び第２００５／００５３５７
７号に開示されている。一部の実施形態では、前記高分子は、１０〜１０００個、又は５
０〜５００個、又は約１００個の単量体を含む。ある実施形態では、前記高分子は、ポリ
アスピリン（登録商標）である。前記高分子にβ−１，６−グルカンが共有結合された組
成物を形成する方法は、当業者には周知である。前記β−１，６−グルカンは、重合前に
単量体と共有結合することができる、又は重合後に前記高分子の官能基と結合することが
できる。一部の実施形態では、前記β−１，６−グルカンは、結合基を介して共有結合す
る。例示的な結合基は、特許特許公開第２００５／００５３５７７号及び当業者に周知の
その他の文献に開示されている。
【００７１】
一部の実施形態では、前記組成物は、β−ｌ，６−グルカン及び生分解性高分子を含有
する粒子を含む。一部の実施形態では、前記粒子に、β−ｌ，６−グルカンにより被覆さ
れる又はβ−ｌ，６−グルカンが含浸される。一部の実施形態では、前記β−ｌ，６−グ
ルカンは、前記高分子と共有結合する。一部の実施形態では、本明細書の他の箇所で説明
されるように、前記組成物は、インプラント又は他の医療用若しくは外科用器具を被覆す
る。
【００７２】
β−ｌ，６−グルカン及び生物活性サリチル酸塩若しくはα−ヒドロキシ酸を対象に投
与する方法であって、β−ｌ，６−グルカン及び生分解性高分子（生物活性サリチル酸塩
及び／又はα−ヒドロキシ酸を含む）を含有する組成物を対象に投与するステップ、又は
、前記高分子及び／又は生物活性サリチル酸塩及び／又はα−ヒドロキシ酸を含む器具を
対象に埋め込む又は導入するステップを含む方法がさらに提供される。
【００７３】
一部の実施形態では、本発明は、１００ｋＤａ未満（例えば、８０、７０、６０、５０
、４０、３０、２５、２０、又は１５ｋＤａ未満）の分子量を有する低分子量グルカンを
提供する。一部の実施形態では、本発明は、例えば、８５個以下（例えば、８５、８４、
８３、８２、８１、８０、７９、７８、７７、７６、７５、７４、７３、７２、７１、７
０、６９、６８、６７、６６、６５、６４、６３、６２、６１、６０、５９、５８、５７
、５６、５５、５４、５３、５２、５１、５０、４９、４８、４７、４６、４５、４４、
４３、４２、４１、４０、３９、３８、３７、３６、３５、３４、３３、３２、３１、３
０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７
、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４個）のグルコー
ス単糖ユニットを含むオリゴ糖提供する。
【００７４】
β−ｌ，６−グルカンを含む本発明の任意の組成物、粒子、被覆材料質又は機器におけ
る一部の実施形態では、前記β−ｌ，６−グルカンは、低分子量グルカンを含有する又は
低分子量グルカンから実質的に構成される。β−ｌ，６−グルカンが使用される本発明の
一部の実施形態では、前記β−ｌ，６−グルカンは、低分子量グルカンを含有する又は低
分子量グルカンから実質的に構成される。本発明の任意の実施形態における少なくともい
くつかの低分子量のβ−ｌ，６−グルカンは、随意的に、Ｏ−アセチル化基について富化
される。
【００７５】
グルカンの結合タイプ及び構造を測定する一般的な技術は、炭素１３核磁気共鳴分光学
（１３Ｃ−ＮＭＲ）である。所与のスペクトラムにおける１３Ｃ信号の数及び相対強度を
使用して、グルカン高分子内の結合構造及び位置を測定することができる。例えば、前記
グリコシド結合に結合した炭素原子の化学シフト（信号）が、未結合の炭素と比較すると
、ダウンフィールドに向かって大きくシフトする（最大で９ｐｐｍ）。
【００７６】
本発明は、一部の実施形態では、固体支持体に結合したβ−ｌ，６−グルカンを含有す
る組成物を提供する。ある実施形態では、前記固体支持体は、ビーズ又は粒子である。
【００７７】
ある実施形態では、前記グルカンが結合する前記ビーズ又は粒子としては、変性タンパ
ク質（例えば、ヒト血清アルブミン（「Benacerraf et al.y 1957 Brit. J. Exp. Path, 
38:35」を参照）、不溶性物質（例えば、カーボンブラック、シリカ、二酸化ケイ素、ポ
リスチレン、ラテックス）、金属酸化物（例えば、酸化チタン、酸化鉄）、墨汁（すなわ
ち、コロイド状炭素粒子の懸濁液）（「Reichard and Filkins, 1984, The Reticuloendo
thelial System;A Comprehensive Treatise, pp. 73-101 (Plenum Press)」を参照）、
ヒドロゲル（例えば、米国公開第２００５／０１９１３６１号に開示されているヒドロゲ
ル）、セファロース又はアガロースのビーズ又は微粒子がある。一部の実施形態では、前
記ビーズ又は微粒子は、生分解性を有する非毒性の物質から形成される。そのような物質
としては、例えばポリ（α−ヒドロキシ酸）、すなわち、例えば、ポリ（ラクチド−コ−
グリコリド）、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリカプロラ
クトンなどがある。本発明の前記ビーズ又は粒子としては、例えば、「ゴーストＲＢＣ」
として知られる細胞質が除去された赤血球（ＲＢＣ）や、細菌（ＲＥＳにより消去される
細菌、例えば、「Benacerrafand Miescher, 1960, Ann NY Acad Sci, 88: 184-195」を
参照）、細胞断片、リポソーム、バクテリオファージ、バクテリオファージ断片、及びウ
イルス性核酸を欠いているウイルスカプシド（例えば、肝炎Ｂウイルス表面抗原粒子）な
どがある。
【００７８】
ある実施形態では、粒子又は固体支持体の本発明のグルカンへの結合は、化学的な架橋
結合によりなされる。化学的な架橋結合は、は当該技術分野で公知である。前記グルカン
と固体（例えばビーズ又は粒子）とを結合するのに使用される架橋結合剤の種類は、当該
技術分野で既知の任意の適切な架橋結合剤で有り得る。前記グルカンの活性が維持される
ように気を付けながら、任意の適切な架橋結合剤が使用され得ることを理解されたい。
【００７９】
一部の実施形態では、本明細書中でさらに説明されるように、前記グルカンは、ターゲ
ティング部分と結合する。一部の実施形態では、「結合（conjugate, linked）」という
用語及びそれらの文法的な形態は、示された分子のあらゆる結合を意味する。一部の実施
形態ではそのような結合は共有結合であり、他の実施形態ではそのような結合は非共有結
合である。一部の実施形態ではそのような結合は直接的であり、他の実施形態ではそのう
な結合はリンカー分子を介してなされる。
【００８０】
一部の実施形態では、そのような結合は、当該技術分野で既知の及び本明細書中で説明
される任意の手段を介してなされる。例えば、ある実施形態では、結合は、アミド形成、
各分子間のウレタン、イミン又はジスルフィド結合、又は各分子間のリンカー部分を介し
てなされる。前記リンカー分子の化学的バックボーンに関しては限定されるものでないこ
とを理解されたい。一部の実施形態では、前記リンカーのバックボーンは、生体適合性、
非免疫原性、及び／又は水溶性を有する。一部の実施形態では、前記リンカーは、本明細
書中で説明されるように、結合を容易にする活性化学基を有するポリエチレングリコール
（ＰＥＧ）を含む。
【００８１】
一部の実施形態では、そのような目的のために容易に使用される他のリンカーとしては
、アルカン、ポリエステル、ポリイミン、ポリ酸、タンパク質、ペプチド、ＤＮＡ、ＲＮ
Ａ、他のグルカン、脂質、単糖、多糖、カーボンナノチューブ、デンドリマー、又は固体
粒子（例えば、高分子、金属、塩、無機物質など）がある。
【００８２】
前記粒子は、バクテリオファージ又は細菌の断片であり得る。
【００８３】
一部の実施形態では、粒子は、マクロファージ、好中球又はその両方による摂取に適す
るサイズを有する。前記粒子は、本明細書中で説明される任意の組成物を有し得る。特定
の実施形態では、本発明は、粒子の集団であって、少なくとも５０％の粒子がマクロファ
ージ、好中球、又はその両方による摂取に適するサイズを有する粒子の集団を提供する。
本発明は、粒子の少なくとも５０％、７５％又９０％が、所望のサイズの範囲におさまる
粒子の集団を提供する。特定の実施形態では、前記所望のサイズの範囲は、所与の値の±
１０％、±２０％、±３０％、±４０％又は±５０％内である。前記値は、例えば、２０
ｎｍ、１００ｎｍ、５００ｎｍ、１ミクロン、５ミクロン、１０ミクロン、２０ミクロン
、５０ミクロンで有り得る。これらの実施形態のいずれにおいても、前記粒子は、本明細
書中で説明される組成物のいずれかを有することができる。前記粒子の集団は、異なる粒
子を任意の割合で含むことができる。本明細書中で説明されるいずれかの目的の使用し得
る前記粒子の集団、及びそのような使用のための方法は、本発明の一態様である。
【００８４】
使用可能な架橋剤としては、これらに限定されるものではないが、例えば、ｐ−アジド
ベンゾイルヒドラジド、Ｎ−（４−［ｐ−アジドサリチルアミド］−ブチル）−３´（２
´−ピリジルジチオ）−プロピオンアミド、ビス（ベータ−［４−アジドサリチルアミド
］−エチル）ジスルフィド、１，４−ビスマレイミジル−２，３−ジヒドロキシブタン、
１，６−ビスマレイミドヘキサン、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン、ア
ジプイミド酸ジメチル−２ＨＣｌ、スベルイミノ酸ジメチル−２ＨＣｌ、ジメチルアジポ
ジミデート−２ＨＣｌ、ピメルイミド酸ジメチル−２ＨＣｌ、グルタル酸ジサクシンイミ
ジル、酒石酸ジサクシンイミジル、１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カ
ルボジイミド塩酸塩、（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル）−４−アジドサリチル酸、ス
ルホスクシンイミジル２−［７−アジド−４−メチル−クマリン−３−アセトアミドメチ
ル−１，３−アミノプロピオン酸、Ｎ−スクシンイミジル−４−ヨードアセチルアミノ安
息香酸、Ｎ−スクシンイミジル−３−［２−ピリジルチオ］プロピオン酸、及び６−［３
−（２−ピリジルアチオ）−プロピオンアミド］ヘキサン酸スクシンイミジル（Pierce C
hemical Co.,Rockford, IL.）などがある。ある実施形態では、前記グルカンは、「Natu
re Methods VoI2 No. 11, p., 845, 2005」に記載されている方法又はそれと同様の方法
により誘導される。ある実施形態では、グルカンは、例えば２，６−ジアミノピリジンな
どの薬剤を使用して自由な反応性一級アミンを提供する部分により誘導化される。シッフ
（Schiff）塩基アゾメチンは、例えばシアノ水素化ホウ素ナトリウムにより、安定した二
級アミンに還元することができる。ある実施形態では、前記誘導化されたグルカンは、そ
の後、例えばＮＨＳ−ビオチンなどのＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステル
と反応させられる。
【００８５】
他の架橋剤としては、アルデヒド、イミド、シアノ、ハロゲン、カルボキシル、活性カ
ルボキシル、無水物、及びマレイミド官能基がある。一部の実施形態では、前記架橋剤は
、例えばＡＢＨ、Ｍ２Ｃ２Ｈ、ＭＰＢＨ及びＰＤＰＨ（Pierce Chemical Co., Rockford,
IL）などのヘテロ二官能性架橋剤を含む。例えば、「Hermanson,G. T. (1996). Biocon
jugateTechniques, Academic Press, Inc., for further discussion of cross-linking
methodsand reagents」を参照されたい。
【００８６】
他の実施形態では、グルカンのビーズ又は粒子への結合は、例えば「Brumeanu et al. 
GeneticEngineering News, Oct. 1, 1995, p. 16」に開示されている方法に従って結合
することができる官能基を含有するビーズを使用して行うことができる。
【００８７】
また、前記ビーズ／粒子／固体／ターゲティング部分を前記グルカンに、非共有結合手
段により結合させることも可能である。非共有結合するための従来の方法の１つは、共有
的又は非共有的に前記粒子やビーズと結合する、グルカンに対する抗体を使用する方法で
ある。他の実施形態では、非共有結合は、ビオチン・アビジンを使用して達成される（「
アビジン」は、アビジンのあらゆる形態を意味すると理解すべきである）。例えば、アビ
ジン被覆された又は結合されたビーズは、ビオチン分子により誘導化されたグルカンと接
触することができる。
【００８８】
一部の実施形態では、前記結合されたグルカンの作成は、非結合反応物質を実質的に含
まない最終的な結合体の精製を含む。精製は、親和性、ゲルろ過、疎水クロマトグラフィ
ー、接線限外ろ過、ダイアフィルトレーション、又は、結合体のいずれかの成分の性質に
基づいたイオン交換クロマトグラフィーにより達成される。例えば、精製することにより
、１つ以上の非結合反応物質（グルカン又は固体支持体）の量を、前記非結合反応物質の
当初の存在量の１０％以下、５％以下、１％以下に減少させることができる。
【００８９】
一部の実施形態では、本発明は、β−１，６−グルカンを含有する粒子を提供する。前
記β−１，６−グルカンは、一部の実施形態では、Ｏ−アセチル化基について富化されて
いる。一部の実施形態では、前記粒子は、少なくとも５０重量％のβ−１，６−グルカン
を含有する。一部の実施形態では、前記β−１，６−グルカンは、前記粒子内に均一に分
布している。本発明のβ−１，６−グルカンを含有しいている前記粒子は、本明細書中で
説明されるように、それについて適切な任意の実施形態を包含することを理解されたい。
【００９０】
ある実施形態では、前記結合されたグルカンは、Ｏ−アセチル化基について富化され、
ある実施形態では、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカン（又は本明細書中で
説明される任意の関連する実施形態のグルカン）を含有する、ある実施形態では、前記グ
ルカンは、ミクロスフェアと結合する。前記ミクロスフェアは、ある実施形態では、約１
〜１００ミクロンの直径を有する。ある実施形態では、前記ミクロスフェアは、約１０〜
５０ミクロンの直径を有する。他の実施形態では、前記ミクロスフェアは、約５〜４０ミ
クロンの直径を有する。他の実施形態では、前記直径の範囲は、０．１〜５ミクロンであ
る。他の実施形態では、前記直径の範囲は、０．５〜１ミクロンである。他の実施形態で
は、前記粒子又はビーズは、ナノメータの範囲内であり、例えば、１００〜５００ｎｍで
ある。
【００９１】
ある実施形態では、「ビーズ」又は「粒子」又は「固体支持体（solid support）」と
いう用語は、球形の物質を意味する。他の実施形態では、「ビーズ」又は「粒子」又は「
固体支持体」という用語は、非球形の物質を意味する。ある実施形態では、非球形のビー
ズ又は粒子は、それらの表面における任意の２点間で、上記した任意の範囲内で、最長軸
又は最長直径を有する。ある実施形態では、前記粒子の寸法（例えば直径）は、食細胞（
例えば、好中球、マクロファージ又は樹枝状細胞）による前記粒子の貪食を促進するよう
に選択される。
【００９２】
ある実施形態では、「ビーズ」又は「粒子」又は「固体支持体」という用語は、前記グ
ルカンと結合することができ、食細胞に取り込まれることができるサイズ及び組成物の、
固形、ゲル状又はゾルゲルベースの任意の物質を意味する。
【００９３】
ある実施形態では、本発明の組成物又は方法は、異なる寸法及び／又は表面密度のグル
カンを有する粒子と比べると、抗原提示細胞によって効率的に貪食される寸法及び表面密
度のグルカン（例えば、β−１，６−グルカン、随意的にＯ−アセチル化基について富化
される）を有するビーズ又は粒子を含む又は使用する。
【００９４】
ある実施形態では、前記固体支持体への結合は、反応性官能基を有する固体支持体との
反応による直接結合により達成され得る。
【００９５】
前記リンカーをβ−１，６−グルカンと結合するため、及び／又は前記リンカーを前記
抗体と結合するための化学結合は、とりわけ、アミノ形成、ウレタン、イミン若しくはジ
スルフィド結合である。
【００９６】
リンカー分子のための化学的バックボーンは、限定されるものではない。ある実施形態
では、前記バックボーンは、生体適合性、非免疫原性、及び水溶性を有する。ある実施形
態では、前記リンカーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。他のリンカーとし
ては、とりわけ、アルカン、ポリエステル、ポリイミン、ポリ酸、タンパク質、ペプチド
、ＤＮＡ、ＲＮＡ、グルカン、脂質、単糖、多糖、カーボンナノチューブ、又はデンドリ
マーがある。ある実施形態では、前記リンカーは、固形粒子であり、とりわけ、ポリマー
、金属、塩、天然材料、又は例えばシリカなどの無機材料であり得る。
【００９７】
リンカー基を介しての結合は、任意の既知の手法を用いて行うことができ、そのような
手法は、例えば、特許文献第６，６４２，３６３号、第４，８８２，３１７号又は第４，
６９５，６２４号に開示されている。有用なタイプの結合は、アジピン酸リンカーである
。アジピン酸リンカーは、アミノ化グルカン上に（例えば、ジミド活性を使用して）アジ
ピン酸により遊離ＮＨ２基を結合させ、その後、得られた単糖・アジピン酸中間体にタン
パク質を結合させるすることにより形成される。別のタイプの結合は、カルボニルリンカ
ーである。カルボニルリンカーは、変性グルカンの遊離ヒドロキシル基のＣＤＩとの反応
と、それに続いて行われるカルバメート結合を形成するためのタンパク質との反応により
形成される。他のリンカーとしては、例えば、Ｂ−プロピオンアミド、ニトロフェニル−
エチルアミン、ハロアキルハロゲン化物、グリコシド結合、６−アミノカプロン酸、ＡＤ
Ｈ、Ｃ４−Ｃｌ２部分などがある。
【００９８】
他の実施形態では、本発明は、β−１，６−グルカンを含有する粒子を提供する。特定
の実施形態では、前記粒子は、乾燥重量で、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％
、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９
９％のβ−１，６−グルカンを含む。特定の実施形態では、前記粒子は、実質的にβ−１
，６−グルカンから成る。特定の実施形態では、前記粒子は、実質的にβ−１，６−グル
カンから成り、水などの他の溶媒成分を含まない。特定の実施形態では、前記β−１，６
−グルカンは、Ｏ−アセチル化基について富化されている。特定の実施形態では、前記粒
子は、乾燥重量で、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％、又は５％未満のβ−１，
３−グルカンを含む。本発明は、β−１，６−グルカンを含有する又は実質的にβ−１，
６−グルカンから成り、前記グルカンが随意的にＯ−アセチル化基について富化された、
上述したいずれかの粒子を含有する組成物をさらに提供する。前記組成物は、薬学的に許
容される担体又はアジュバントをさらに含む。本発明は、哺乳類の対象における免疫応答
を調節する方法であって、上述したいずれかの粒子又は上述したいずれかの粒子を含有す
る組成物を前記対象に投与するステップを含む方法をさらに提供する。前記粒子は、当該
技術分野で既知の任意の方法を用いて作成される。前記粒子は、所望のサイズを得るため
に、粉砕される又はふるいにかけられる。特定の実施形態では、前記β−１，６−グルカ
ンは、前記粒子内に均等に又は均一に分布する。特定の実施形態では、「均等に分布する
」は、前記β−１，６−グルカンが異なる材料内にカプセル化されていないこと、異なる
材料から成る粒子の表面を単純に被覆していないこと、又は異なる材料から成る粒子の表
面に共有的又は非共有的に結合していないことを意味する。代わりに、特定の実施形態で
は、前記β−１，６−グルカンが実質的に前記粒子の全体積を通じて存在するように、前
記β−１，６−グルカンは随意的に別の材料と混合されて粒子状に形成される。前記β−
１，６−グルカンの密度は変化し得るが、一般的に前記粒子を通じて突然ではなく徐々に
及び連続的に変化することに留意されたい。
【００９９】
他の実施形態では、本発明は、ターゲティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グ
ルカンを含有する組成物を提供する。ある実施形態では、前記ターゲティング部分は、食
細胞と特異的に結合する又は食細胞を引き寄せる。
【０１００】
この態様によれば及びある実施形態では、「物理的に結合した」という表現は、共有結
合の形成を意味する。ある実施形態では、「物理的に結合した」という表現は、強力な非
共有結合を意味する。一部の実施形態では、そのような結合は、以下に例示及び説明され
るいくつかの手法を含む、当業者に既知の任意の手法により達成される。一部の実施形態
では、そのような目的のために、市販の結合剤が使用される。
【０１０１】
本発明のこの態様によれば及びある実施形態では、前記β−１，６−グルカンは、ター
ゲティング部分と結合する。そのようなターゲティング部分は、所望の標的と特異的に相
互作用する任意の分子を含み得、ある実施形態では食細胞との相互作用を促進する、又は
一部の実施形態では食細胞を引き付ける若しくは動員する。
【０１０２】
一部の実施形態では、前記ターゲティング部分は、特定の食細胞の種類に対するもので
あり、例えば、一部の実施形態では感染細胞、一部の実施形態では腫瘍細胞、一部の実施
形態では前癌細胞に対するものである。一部の実施形態では、例えば、ウイルス感染した
細胞を標的にすることは、前記グルカンのウイルス性のコレセプターと結合により達成さ
れる。一部の実施形態では、ターゲティング部分としては、例えばプロフェッショナル抗
原提示細胞などの感染細胞において上方制御され得る、インテグリン、又はＭＨＣのクラ
スＩＩ分子がある。
【０１０３】
一部の実施形態では、感染細胞を標的とすることにより、対象における感染に対する治
療反応を高めることができる。例えば、一部の実施形態では、感染細胞を標的とすること
により、病原体に対する貪食及び／又は細胞傷害反応を高めることができる、又は一部の
実施形態では、病原体の補体仲介性溶解を高めることができる。一部の実施形態では、感
染細胞を標的とすることにより、病原体に対する免疫応答を高めることができる。
【０１０４】
一部の実施形態では、本明細書中で説明されるように、前記ターゲティング部分は、腫
瘍若しくは前癌細胞と特異的に相互作用する、及びその任意の実施形態を含む。一部の実
施形態では、腫瘍若しくは前癌細胞を標的にする、ターゲティング部分と結合したβ−１
，６−グルカンの使用は、ホスト抗癌反応を促進する。一部の実施形態では、そのように
標的にすることにより、腫瘍細胞の溶解を促進する、又は一部の実施形態では、ホスト抗
腫瘍反応を向上させる。
【０１０５】
一部の実施形態では、これに限定するものではないが、ターゲティング部分と結合した
β−１，６−グルカン及び／又は本発明の組成物の使用は、とりわけ、補体仲介性溶解に
耐性を示す腫瘍を治療するのに有用である。
【０１０６】
一部の実施形態では、これに限定するものではないが、ターゲティング部分と結合した
β−１，６−グルカン及び／又は本発明の組成物の使用により、多糖が癌細胞上に特異的
に発現した抗原を標的とし、それにより、前記細胞の補体仲介性溶解を向上させる。
【０１０７】
一部の実施形態では、本明細書中で説明されるように、腫瘍若しくは前癌細胞若しくは
組織又は腫瘍を標的とすることは、腫瘍抗原を標的とすることにより達成することができ
る。一部の実施形態では、本明細書中で説明されるように、そのような細胞は、アドレノ
メデュリン受容体（ＡＤＭＲ）、カルシトニン受容体様受容体（ＣＲＬＲ）、ＣＤ１１７
、又は腫瘍関連抗原の任意の組み合わせを発現し得る。
【０１０８】
ある実施形態では、前記ターゲティング部分は、糖付加不十分のムチン−１タンパク質
に結合するペプチドである。ムチン−１（ＭＵＣ−１）は、例えばヒト乳癌、卵巣癌、膵
臓癌、結腸直腸癌、肺癌、前立腺癌、結腸癌、胃癌の９０％以上を含む、ほとんど全ての
ヒト上皮細胞腺癌の細胞表面及び細胞内コンパートメントにおいて過剰発現する膜貫通分
子である。通常は覆われている免疫原性エピトープが剥き出しになった糖付加不十分の形
態での発現は、非上皮性癌細胞株（例えば、星状細胞腫、黒色腫、神経芽細胞腫）や血液
悪性疾患（例えば、多発性骨髄腫、一部のＢ細胞非ホジキンリンパ腫）において、ヒトの
全ての癌の５０％以上を構成していることが実証されている。
【０１０９】
この態様によれば及びある実施形態では、アドレノメデュリン受容体発現細胞又はムチ
ン−１発現細胞を、本発明の結合されたグルカンで標的にすることにより、肺癌、膵臓癌
、卵巣癌、乳癌及び他の関連する癌を治療することができる。一部の実施形態では、本発
明の結合されたグルカンによりＣ、ＲＬＲ及び／又はＣＤ１１７発現する細胞を標的にす
ることにより、血管腫瘍、神経膠腫及び／又は他の関連する癌を治療することができる。
【０１１０】
一部の実施形態では、ここで言及するターゲティング部分は、本明細書中で説明される
ような抗体又はその断片、言及した受容体に対する自然発生的ペプチドリガンド、又はそ
れらの変形態様（例えば、切断生成物）を包含することを理解されたい。一部の実施形態
では、ここで言及するターゲティング部分は、人工ペプチドや小分子などを包含すること
を理解されたい。
【０１１１】
一部の実施形態では、多様なモノクローナル抗体（ｍＡｂ）が様々な治療において使用
される。そのようなモノクローナル抗体としては、例えば、アレムツズマブ（キャンパス
）、ベバシズマブ（アバスチン）、セツキシマブ（エルビタックス）、ゲムツズマブ（マ
イロターグ）、イブリツモマブ（ゼヴァリン）、パニツムマブ（ベクチビックス）、リツ
キシマブ（リツキサン）、トシツモマブ（ベクサール）、トラスツズマブ（ハーセプチン
）、パリビズマブ（シナジス）などがある。これらのｍＡｂはどれも、本発明のグルカン
と結合すること、又は本明細書中で説明される組成物に含めることが可能であり、ターゲ
ティング部分又は免疫刺激化合物の本明細書中で説明されるいずれかの方法での使用を含
む。任意のモノクローナル抗体若しくは他のターゲティング部分又は免疫促進化合物を、
本発明のグルカンに結合させること、或いは、本発明の組成物及び本発明の一部と見なさ
れる物質に含めることが可能であり、本明細書中で説明した方法のすべてへの使用を包含
することを理解されたい。
【０１１２】
一部の実施形態では、本発明は、グルカン、ターゲティング部分と結合したβ−ｌ，６
−グルカン及び／又は本発明の組成物（本明細書中で説明される組成物、その全ての実施
形態を含む）の、治療計画に対する、腫瘍又は前癌細胞（又は組織）の反応性を測定する
手段としての使用を提供する。一部の実施形態では、そのような方法は、腫瘍性又は前癌
細胞を含んでいる対象又は生検材料から腫瘍サンプルを取得するステップと、前記細胞の
インビトロ溶解に対する感度又は耐性を評価する、及び／又は内因性補体制御タンパク質
の発現及び／又は分泌レベルを測定するステップとを含む。
【０１１３】
一部の実施形態では、腫瘍細胞は、例えば補体受容体１（ＣＲ１又はＣＤ３５）、分解
促進因子（ＤＡＦ又はＣＤ５５）、膜補助因子タンパク質（ＭＣＰ又はＣＤ４６）、補体
因子Ｈ（ｆＨ）（又はＦＨＬ−１）、及び／又はＣ４ｂ結合タンパク質（Ｃ４ＢＰ）など
の内因性補体制御タンパク質を発現又は過剰発現する。
【０１１４】
一部の実施形態では、本発明は、ターゲティング部分と結合したβ−ｌ，６−グルカン
、及び／又は本発明の組成物（本明細書中で説明した組成物、その全ての実施形態を含む
）の使用であって、血管疾患（アテローム硬化性血管疾患）、或いはある実施形態では、
新生血管（例えば、腫瘍関連の新生血管）を標的にして、そのような血管系の除去の向上
を目的とした手段としての使用を提供する。
【０１１５】
本発明のこの態様によれば及び一部の実施形態では、前記ターゲティング部分は、とり
わけ、前記血管系の構成要素と特異的に相互作用する抗体若しくはその断片又はリガンド
を含み、そのようなものとしては、例えば、ＶＥＧＦと特異的に相互作用する物質、組織
因子、凝固因子、血管細胞接着分子、インテグリン、セレクチン、又は内皮細胞の表面上
で発現する任意の他のマーカーがある。
【０１１６】
ある実施形態では、ターゲティング部分は、ペプチド、抗体、抗体断片、受容体、タン
パク質Ａ、タンパク質Ｇ、タンパク質Ｌ、ビオチン、アビジン、ストレプトアビジン、金
属イオンキレート、酵素補助因子、核酸、又はリガンドである。
【０１１７】
ある実施形態では、そのようなターゲティング部分は、抗体又は抗体断片を含む。一部
の実施形態では、本明細書中で説明されるように、そのような抗体又は抗体断片は、前記
抗体又は抗体断片と前記グルカンとの結合が前記相互作用を妨げないように、食細胞と相
互作用することにより、所望の標的と特異的に相互作用する。
【０１１８】
一部の実施形態では、「抗体」という用語は、無傷分子並びにその機能的断片を意味し
、そのようなものとしては、例えば、本明細書中で説明されるような所望の標的と特異的
に相互作用可能な（例えば食細胞と結合する）Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ´）２及びＦｖなどがあ
る。一部の実施形態では、前記抗体断片は、下記の（１）〜（５）を含む。（１）Ｆａｂ
：抗体分子の一価抗原−結合断片を含む断片。抗体全体をパパイン酵素により消化し、無
傷軽鎖及び１つの重鎖の一部を生じさせることにより作成される。（２）Ｆａｂ´：抗体
全体をペプシンで処理し、その後還元させ、無傷軽鎖及び１つの重鎖の一部を生じさせる
ことにより得られる抗体分子の断片。１つの抗体分子につき、２つのＦａｂ´断片が得ら
れる。（３）Ｆ（ａｂ´）２：抗体全体をペプシンで処理し、その後還元させないことに
より得られる抗体分子の断片。Ｆ（ａｂ´）２は、２つのジスルフィド結合により互いに
結合した２個のＦａｂ´断片の二量体である。（４）Ｆｖ：遺伝子操作された断片であり
、軽鎖の可変領域及び二本鎖として発現する重鎖の可変領域を含んでいる。（５）一本鎖
抗体（ＳＣＡ）：遺伝子操作された断片であり、遺伝子的に融合された一本鎖分子として
の適切なポリペプチドリンカーにより結合された、軽鎖の可変領域及び重鎖の可変領域を
含んでいる。
【０１１９】
これらの断片を作成する方法は、当該技術分野において既知である（例えば、「Harlow
and Lane,Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New Y
ork, 1988」（引用することを以って本明細書の一部となす）を参照されたい）。
【０１２０】
一部の実施形態では、前記抗体断片は、抗体のタンパク質の加水分解により、或いは、
大腸菌若しくは哺乳類細胞（チャイニーズハムスター卵巣細胞又は他のタンパク質発現系
）におけるＤＮＡをエンコードしている断片の発現により作成される。
【０１２１】
抗体断片は、一部の実施形態では、従来の方法により、ペプシン又はパパインで抗体全
体を消化することにより得られる。例えば、抗体断片は、抗体をペプシンで酵素切断して
、Ｆ（ａｂ´）２で表される５Ｓ断片を作成することにより得ることができる。この断片
は、チオール還元剤を使用して、及び随意的にスルフヒドリル基のための保護基を使用し
てさらに切断することができ、ジスルフィド結合の決断により、３．５ＳＦａｂ´一価
断片を作成することができる。或いは、ペプシンを使用した酵素切断により、２つのＦａ
ｂ´一価断片と１つのＦｃ断片を直接的に作成することができる。これらの方法は、例え
ば、米国特許第４，０３６，９４５号及び第４，３３１，６４７号に開示されている（こ
れらの文献は、全文を引用することを以って本明細書の一部となす）。また、「Porter, 
R. R., Biochem.J., 73: 1 19-126, 1959」も参照されたい。抗原に結合する断片が無傷
抗体により認識できる限りは、例えば、重鎖を分離して一価の軽鎖−重鎖の断片を作成し
、断片をさらに切断する方法や、酵素的、化学的若しくは遺伝子学的方法などの、抗体を
切断する他の方法も使用することができる。
【０１２２】
Ｆｖは、ＶＨ鎖とＶＬ鎖との結合を含む。この結合は、「Inbar et al., Proc. Nat'l 
Acad. Sci. USA69:2659-62, 1972」に記載されているように、非共有結合である。或い
は、前記可変鎖は、分子間ジスルフィド結合により結合することができる、又は、例えば
グルタルアルデヒドなどの化学物質により交差結合することができる。好ましくは、Ｆｖ
断片は、ペプチドリンカーにより結合されたＶＨ鎖及びＶＬ鎖を含む。これらの単鎖抗原
結合タンパク質（ｓＦｖ）は、オリゴヌクレオチドにより結合されたＶＨ及びＶＬ領域を
エンコードするＤＮＡ配列を含有する構造遺伝子を構築することにより作成される。この
構造遺伝子は発現ベクター内に挿入され、発現ベクターはその後、例えば大腸菌などのホ
スト細胞に導入される。前記組み替え型ホスト細胞は、２つのＶ領域を架橋するリンカー
ペプチドにより、一本鎖ポリペプチドを合成する。ｓＦｖを作成する方法は、例えば、「
Whitlow andFilpula, Methods, 2: 97-105, 1991」、「Bird et al., Science 242:423-
426, 1988」、「Packet al., Bio/Technology 11:1271-77, 1993」及び「Ladner et al.
, U.S. Pat. No.4,946,778」に開示されている（これらの文献は、全文を引用すること
を以って本明細書の一部となす）。
【０１２３】
抗体断片の他の形態は、単一の相補性決定領域（ＣＤＲ）をコードしているペプチドで
ある。ＣＤＲペプチド（「最小認識単位」）は、対象とする抗体のＣＤＲをエンコードし
ている遺伝子を構成することにより得ることができる。そのような遺伝子は、例えば、ポ
リメラーゼ連鎖反応を使用して、抗体産生細胞のＲＮＡから可変領域を合成することによ
り作成することができる。例えば、「Larrick and Fry, Methods, 2: 106-10, 1991」を
参照されたい。
【０１２４】
一部の実施形態では、本明細書中で説明されるような前記抗体又は断片は、抗体の「ヒ
ト化形態」を含む。一部の実施形態では、「抗体のヒト化」という表現は、免疫グロブリ
ン、免疫グロブリン鎖、又はそれらの断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ´、Ｆ（ａｂ
´）、ｓｕｂ．２又は他の抗原結合配列など）のキメラ分子であり、非ヒト免疫グロブリ
ンに由来する最小配列を含む、非ヒト（例えばネズミ）抗体を意味する。ヒト化抗体は、
所望の特異性、親和性及び性質を有する、例えばマウス、ラット、ウサギなどの非ヒト種
の相補性決定領域（ＣＤＲ）からの残基により置換されるヒト免疫グロブリン（受容抗体
）を含む。ある場合では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基は、対応する非
ヒト残基に置換される。ヒト化抗体はまた、受容抗体にも移入されたＣＤＲ若しくはフレ
ームワーク配列にも見られない残基を含み得る。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ
及び典型的には２つの可変領域の実質的に全てを含み得る。ＣＤＲ領域の全て又は実質的
に全ては、非ヒト免疫グロブリンの前記領域に対応し、ＦＲ領域のの全て又は実質的に全
ては、ヒト免疫グロブリン共通配列の前記領域に対応する。また、最適なヒト化抗体は、
少なくとも１つの免疫グロブリンの定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの
定常領域を含み得る。「Jones et al.. Nature, 321 :522-525 (1986)」、「Riechmann e
t al., Nature,332:323-329 (1988)」及び「Presta, Curr. Op. Struct. Biol., 2:593-
596 (1992)」を参照されたい。
【０１２５】
非人抗体をヒト化する方法は、当該技術分野では公知である。一般に、ヒト化された抗
体は、非ヒトのソースから導入された１つ以上のアミノ酸配列残基を有する。これらの非
ヒトアミノ酸配列残基は、典型的には重要な可変領域から採取される重要な残基を指す場
合が多い。ヒト化は実質的に、「Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986)」、「Riec
hmann et al.,Nature 332:323-327 (1988)」、「Verhoeyen et al., Science, 239:1534
-1536 (1988)」に記載されているウインター（Winter）及び協力者による方法に従って、
げっ歯類のＣＤＲ又はＣＤＲ配列を対応するヒト抗体の配列と置換することにより行うこ
とができる。したがって、そのようなヒト化抗体は、キメラ抗体（米国特許第４，８１６
，５６７号）であり、非ヒト種由来の対応する配列によって置換された無傷のヒト可変領
域よりも実質的に少ない。実際には、ヒト化抗体は、典型的には、いくつかのＣＤＲ残基
及び場合によってはいくつかのＦＲ残基を、げっ歯類の抗体内の類似部位由来の残基によ
って置換したヒト抗体である。
【０１２６】
ヒト抗体はまた、例えば「Hoogenboom and Winter, J. MoI. Biol., 227:381 (1991)」
及び「Markset al., J. MoI. Biol., 222:581 (1991)」に開示されているファージ提示
法などの当該技術分野で既知の様々な技術を使用して作成することができる。また、「Co
le et al.,Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985)
」及び「Boerneret al., J. Immunol., 147(l):86-95 (1991)」に開示されている技術も
、ヒトモノクローナル抗体の作成に使用することができる。同様に、ヒト抗体は、内因性
免疫グロブリン遺伝子が部分的に又は完全に不活性されたトランスジェニック動物（例え
ばマウス）に、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を導入することにより作成することができる
。チャレンジすると、遺伝子再構成、集合、及び抗体レパートリーを含むあらゆる点でヒ
トにおいて見られるのと酷似した、ヒト抗体の生成が観察される。この方法は、例えば、
米国特許第５，５４５，８０７号、第５，５４５，８０６号、第５，５６９，８２５号、
第５，６２５，１２６号、第５，６３３，４２５号、第５，６６１，０１６号、「Marks 
et ai,Bio/Technology 10, 779-783 (1992)」、「Lonberg et ai, Nature 368 856-859 
(1994)」、「Morrison,Nature 368 812-13 (1994)」、「Fishwild et al., Nature Biot
echnology 14,845-51 (1996)」、「Neuberger, Nature Biotechnology 14, 826 (1996)
」、「Lonbergand Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13 65-93 (1995)」に開示されてい
る。
【０１２７】
ある実施形態では、当業者であれば理解できように、前記ターゲティング部分は、例え
ば、好中球により特異的に認識される抗体又はその断片、及び、Ｌ−セレクチン、β２−
インテグリン、補体受容体−１（ＣＲ−１）、分解促進因子（ＤＡＦ）、Ｃ５ａ受容体、
細胞間接着分子−１（ＩＣＡＭ−１）、ＩＣＡＭ−３、及びその他のものを特異的に認識
する抗体である。
【０１２８】
ある実施形態では、当業者であれば理解できように、食細胞は、Ｆｃ受容体、ケモカイ
ン受容体、ＣＤ４０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＭＨＣクラスＩＩ分子、ＣＤ６９、ＡＤＡＭ
８、ＣＤ１４、ＣＤ１６３、ＣＤ３３、ＣＤ６３、ＣＤ６８、ＣＤ７４、ＣＨＩＴ１、Ｃ
ＨＳＴ１０、ＣＳＦ１Ｒ、ＤＰＰ４、ＦＡＢＰ４、ＦＣＧＲ１Ａ、ＩＣＡＭ２、ＩＬ１Ｒ
２、ＩＴＧＡｌ、ＩＴＧＡ２、Ｓ１００Ａ８、ＴＮＦＲＳＦ８などとの分子相互作用によ
り標的にされる又は結合する。
【０１２９】
他の実施形態では、前記ターゲティング部分は、例えばアプタマー、自然発生的若しく
は人工的リガンド、又は改変結合タンパク質などの任意の適切な部分であり得、本明細書
中で説明されるようなターゲティング部分を含み得、本明細書中で説明されるようなそれ
らのグルカンとの物理的結合は、選択されたターゲティング部分の特性に適合するように
、例えば後述する方法やその変形例などの当該技術分野で既知のあらゆる手段によって達
成することができる。
【０１３０】
ある実施形態では、前記ターゲティング部分は、細胞への結合を促進する。または、他
の実施形態では、細胞へのをホーミングを促進する。ある実施形態では、前記ターゲティ
ング部分は、エネルギー源の供給後の結合を促進する。ある実施形態では、前記ターゲテ
ィング部分は、化学的架橋基を介して、グルカンと化学的に結合する。または、他の実施
形態では、前記ターゲティング部分は、グルカンと安定的な結合を形成する。または、他
の実施形態では、前記ターゲティング部分はグルカンとの間に、環境条件における例えば
塩濃度又はｐＨなどのその後の変化を防ぐ結合を形成する。
【０１３１】
ある実施形態では、前記ターゲティング部分は、例えばタンパク質や核酸などの対象と
なる分子を特異的に認識する抗体であり得る。他の実施形態では、前記抗体は、対象とな
る分子に結合したレポーター分子を特異的に認識し得る。他の実施形態では、前記ターゲ
ティング部分は、抗体断片、タンパク質Ａ、タンパク質Ｇ、タンパク質Ｌ、ビオチン、ア
ビジン、ストレプトアビジン、金属イオンキレート、酵素補助因子、核酸、又はリガンド
である。他の実施形態では、前記ターゲティング部分は、対象となる同族リガンドと結合
する或いは対象となる細胞若しくは分子と結合する受容体であり得る。他の実施形態では
、前記ターゲティング部分は、その同族受容体との相互作用を介して細胞へ結合させるの
に使用されるリガンドであり得る。
【０１３２】
本発明のグルカンへの前記ターゲティング部分の結合は、当該技術分野で既知のあらゆ
る手段によって実現することができ、例えば、実施例７に記載されているような方法、米
国特許第5,965,714号、米国特許公開第2007／0141084号、「Schneersonet al, Proc Nat
l Acad Sci U SA. 2003 JuI 22;100 (15):8945-50」又は「Lees et al, Vaccine. 1996 
Feb;14(3):190-8」に記載されているような方法、本明細書中で説明されるように架橋物
質の使用によって、又は当業者に理解されるであろう他の方法によって実現される。
【０１３３】
一部の実施形態では、グリコシル化抗体が使用され、前記抗体のグリコシル化残基にβ
−１，６−グルカンが結合する。または、他の実施形態では、当業者には理解されるよう
に、結合は複数で有り得、前記抗体又は標的部位の複数の部位に結合する。
【０１３４】
ある実施形態では、前記グルカンをターゲティング部分へ結合させることにより、標的
細胞又は有機体の貪食及び／又は殺滅を向上させることができる。一部の実施形態では、
そのような溶解は、任意のプロフェッショナル抗原提示細胞又はキラー細胞（例えば、好
中球、マクロファージ、樹枝状細胞、天然キラー細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球など）によ
り仲介される。
【０１３５】
ある実施形態では、任意のＯ−アセチル化グルカンは、ターゲティング部分と物理的に
結合され、その実施形態を表す本発明の前記グルカン又は組成物を含む。免疫応答を調節
する、癌又は前癌病変を治療する、感染の消散を促進するためのそのようなＯ−アセチル
化グルカン（例えば、Ｏ−アセチル化されたβ−１，３−グルカン）の使用は、又は本明
細書中で説明された任意の方法は、本発明の一部を見なされる。
【０１３６】
一部の実施形態では、本発明の任意のグルカン製剤は、前記グルカンの検出を容易にす
るために、標識物質と結合され得る。ある実施形態では、「標識物質」という用語は、標
識物質と接触したものを容易に検出できるようにする分子を意味する。ある実施形態では
、前記標識物質は、マーカーペプチドである。マーカーペプチドとしては、例えば、緑色
蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、ＤＳ−Ｒｅｄ（赤色蛍光タンパク質）、分泌型アルカリホス
ファターゼ（ＳＥＡＰ）、β−ガラクトシダーゼ、発光酵素、又は当業者に知られている
他の様々なレポータータンパク質がある。例えば、ある実施形態では、当業者には容易に
理解されるように、前記標識物質は、所与の標的分子と特異的に結合する抗体（他の実施
形態では、標的分子と結合した他の抗体と特異的に結合する抗体）に結合する蛍光色素で
ある。一部の実施形態では、当業者には容易に理解されるように、抗体に結合する前記グ
ルカンは、前記抗体内の蛍光色素を取り込む。
【０１３７】
ある実施形態では、前記グルカンは、Ｏ−アセチル化基について富化される。ある実施
形態では、前記グルカンは、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含む。他
の実施形態では、前記グルカンは、ある実施形態ではイワタケ科である地衣類又は酵母か
ら単離される又は得られる。ある実施形態では、前記グルカンは、化学的に合成若しくは
アセチル化される。他の実施形態では、前記組成物は、アジュバント、抗原、免疫調節化
合物又はそれらの組み合わせをさらに含む。他の実施形態では、前記食細胞は、プロフェ
ッショナル抗原提示細胞である。他の実施形態では、前記食細胞は、好中球である。
【０１３８】
ある実施形態では、前記ターゲティング部分は、抗体又は抗体断片である。
【０１３９】
本発明は、（ａ）基材と、（ｂ）β−１，６−グルカンを含有する化合物又は組成物と
を含む被覆材料を提供する。特定の実施形態では、前記β−１，６−グルカンは、Ｏ−ア
セチル化グルカンとなるように富化されている。特定の実施形態では、前記被覆材料は、
インプラント又は他の外科用若しくは医療用器具の形態又は構成要素である。特定の実施
形態では、前記被覆材料は、先行予備特許出願ＵＳＳＮ６０／８１７，０７５，（出願日
２００６年６月２９日、発明の名称「エフェクター化合物による器具の被覆」（エフェク
ター化合物は、β−１，６−グルカンである、又はβ−１，６−グルカンを含む）に開示
されている被覆材料である。
【０１４０】
本発明は、本発明の被覆材料を含んでいるインプラント及び外科用若しくは医療用器具
を提供する。本明細書中で使用される「医療用器具」という用語は、インプラント及び対
象における外科的若しくは医療的な管理に使用されるあらゆる器具を包含する。前記器具
は、対象の体内と接触させられ又は体内に導入され、少なくとも２時間の期間（例えば、
少なくとも、４、８、１２、又は２４時間）、典型的には接触したままにされる、又は少
なくともその一部が体内に留置したままにされる。特定の実施形態では、「器具」という
用語は、器具全体又はその器具の一部若しくは一構成要素を意味する。例えば、多くの用
途では、器具の一部を本発明に従って処理し、その後、他の部分と組み合わせて完全な器
具にする。
【０１４１】
特定の実施形態では、前記期間は、１日〜１週間、１〜４週間、４〜８週間、１〜６月
、６〜１２月、又はそれ以上である。特定の実施形態では、前記器具は、患者の生涯に渡
って（例えば感染が原因、前記器具が故障したり取り出す必要が生じたりしない限り）、
対象の身体と接触したままにする、又は身体内に留置したままにすることを目的としてい
る。特定の実施形態では、本発明は、β−１，６−グルカンを含む本明細書中で説明され
る化合物又は組成物で被覆された或いは前記化合物又は組成物を含有及び／又は放出する
ように構成された、インプラント及び外科用若しくは医療用器具（例えば、カテーテル、
留置静脈若しくは動脈ライン、ステント、グラフト）を提供する。前記β−１，６−グル
カンは、随意的に、Ｏ−アセチル化グルカンとなるように富化されている。特定の実施形
態では、β−１，６−グルカンで被覆された又はβ−１，６−グルカンを含む前記器具は
、前記化合物又は組成物で被覆されていない又は前記化合物又は組成物含んでいない場合
よりも、生物膜形成に対する耐性がより高い。特定の実施形態では、インプラント又は他
の器具は、先行予備特許出願ＵＳＳＮ６０／８１７，０７５，（出願日２００６年６月２
９日、発明の名称「エフェクター化合物による器具の被覆」（エフェクター化合物は、β
−１，６−グルカンである、又はβ−１，６−グルカンを含む）に開示されている。
【０１４２】
特定の実施形態では、前記被覆材料、インプラント、又は他の器具は、先行予備特許出
願ＵＳＳＮ６０／８１７，０７５，（出願日２００６年６月２９日、発明の名称「エフェ
クター化合物による器具の被覆」（エフェクター化合物は、β−１，６−グルカンである
、又はβ−１，６−グルカンを含む）に開示されているようにして作製される。
【０１４３】
ある実施形態では、β−１，６−グルカンは、長時間に渡って（例えば、１日〜１週間
以上、１〜４週間以上、４〜１２週間以上、１２〜２４週間以上、２４〜３６週間以上、
３６〜４８週間以上）、ゆっくりと放出される。特定の実施形態では、放出期間の終わり
までに、放出が実質的に終了する。特定の実施形態では、放出期間の終わりまでに、放出
速度は、放出ピーク速度の約５％未満、又は放出期間中の放出平均速度の約５％未満、及
び／又は、基材と結合している化合物の残りが５、１０又は２０％未満となる。他の実施
形態では、β−１，６−グルカンは急速に放出され、例えば、β−１，６−グルカンの少
なくとも約５０％が最初の２４時間で放出される。特定の実施形態では、放出は、対象と
なる期間（例えば、１日〜１週間、１〜４週間、４〜１２週間、１２〜２４週間、２４〜
３６週間、３６〜４８週間）に渡って最小限に抑えられる。特定の実施形態では、対象と
なる期間の終わりに、β−１，６−グルカン残基の少なくとも５０、６０、７０、８０、
９０、９５％以上が前記基材と結合する。放出は、哺乳類の対象の体内の生理学的条件に
近い塩濃度、ｐＨ及び温度の条件下でインビトロで及び／又はインビボで測定することが
できる。特定の実施形態では、放出速度は制御可能であり、例えば、被覆層の成分及び／
又は前記成分の濃度の適切な選択により制御される。特定の実施形態では、被覆層の厚さ
は、所望の持続期間に渡って放出が行われるように選択される。例えば、器具の被覆層の
厚さ又は組成物は、予想される使用期間（例えば、対象の身体と断続的に又は継続的に接
触することが予想される間の時間）の間、放出を提供するように選択される。
【０１４４】
被覆材料、インプラント、又は本明細書中に開示された他の器具はいずれも、β−１，
６−グルカン、及び対象における病状の治療に有用な１つ若しくは複数の治療物質を含み
得る。「病状」は、医療介入及び／又は外科介入が必要とされる、あらゆる後天性若しく
は遺伝子性の疾患、障害又は損傷などを包含する。
【０１４５】
本発明のインプラント及び他の外科用若しくは医療用器具の例としては、例えば、心血
管用器具（例えば、埋込型静脈カテーテル、静脈ポート、トンネル型静脈カテーテル、慢
性注入ライン又はポート（肝動脈注入カテーテルを含む）、ペースメーカーのワイヤ、埋
込型除細動器）；神経／脳神経外科用器具（例えば、心室腹膜シャント、心室心房シャン
ト、神経刺激装置、椎弓切除後硬膜外線維症を予防するための硬膜パッチ及びインプラン
ト、連続くも膜下注入するための器具）；胃腸用器具（例えば、長期留置カテーテル、栄
養チューブ、門脈体静脈シャント、腹水用シャント、薬剤供給用腹膜インプラント、腹膜
透析カテーテル、ヘルニア用埋込型メッシュ、外科的接着を防止するためのサスペンショ
ン又は固体インプラント（メッシュを含む）；泌尿生殖器用器具（例えば、子宮インプラ
ント（子宮内器具（ＩＵＤ）及び子宮内膜増殖症を予防するための器具を含む）、卵管イ
ンプラント（可逆性不妊器具を含む）、卵管ステント、失禁用の人工的括約筋及び尿道周
囲インプラント）、尿管ステント、短期又は長期留置カテーテル、膀胱拡大器、又は精管
吻合用のラップ若しくはスプリント）；フタルモノロジックインプラント（phthalmonlog
ic implants）（例えば、モルテノインプラント及び血管新生緑内障又は他の眼疾患用の
他のインプラント、翼状片用の薬剤溶出コンタクトレンズ、弱った涙嚢鼻腔吻合（failed
dacrocystalrhinostomy）用のスプリント、薬剤溶出コンタクトレンズ（例えば角膜血管
新生用の）、糖尿病性網膜症用のインプラント、高リスクの角膜移植用の薬剤溶出コンタ
クトレンズ）；耳鼻咽喉用器具（例えば、耳小骨インプラント、中耳炎又は慢性耳炎用の
耳管スプリント又はステント）；形成外科用インプラント、及び整形外科用インプラント
（例えば、脊髄用ロッド、スクリュー、整形外科用人工器官）がある。他の埋込型器具と
しては、インシュリンや鎮痛剤などを送達するためのポンプがある。そのようなポンプと
しては、例えば、髄腔内ポンプがある。また、例えば身体の欠損部位の代わりとなる、任
意の種類の人工器官も含まれる。さらに、縫合に有用な材料も含まれる。
【０１４６】
特定の実施形態では、インプラント又は医療用若しくは外科用器具は、「Hunter, T.B.
andTaljanovic, M.S., Glossary of Medical Devices and Procedures: Abbreviations
, Acronyms, andDefinitions Radiographics. 23: 195-213, 2003.」に列記されている
（ただし、これらに限定されるわけではない）。
【０１４７】
特定の実施形態では、前記器具は、ルーメンを有するチューブ状の構造体を含む。前記
構造体の壁部は内面及び外面を有し、前記内面及び外面は一方又は両方が被覆される。ま
たは、前記内面及び外面は、β−ｌ，６−グルカンを含む化合物又は組成物を含有するよ
うに構成され、随意的に、前記化合物又は組成物を放出する。
【０１４８】
インプラント及び他の外科用若しくは医療用器具は、例えば下記の（ａ）〜（ｆ）など
の様々な方法によって、本発明の組成物で被覆される（或いは、本発明の組成物を含有し
、随意的に放出するように構成される）。（ａ）インプラント又は器具に、化合物又は組
成物を塗布する方法（例えば、インプラント若しくは器具に本発明の化合物又は組成物を
含む組成をスプレーすることにより、インプラント若しくは器具を本発明の化合物又は組
成物を含有する溶液中に浸漬させることにより、又は、他の共有結合手段若しくは非共有
手段により）。（ｂ）インプラント又は器具に、本発明の化合物又は組成物をその後に吸
収する、例えばヒドロゲルなど物質を塗布する方法。（ｃ）インプラント又は器具に、化
合物又は組成物で被覆された糸又は他の物質を織り交ぜる方法。（ｄ）インプラント又は
器具を、本明細書中で説明される化合物又は組成物から成る又は前記化合物又は組成物に
より被覆されたスリーブ又はメッシュに挿入する方法。（ｅ）インプラント又は器具自体
を、本明細書中で開示した化合物又は組成物で構成する方法。（ｆ）他の方法によって、
インプラント又は器具を前記化合物又は組成物を放出するように構成する方法。
【０１４９】
ある実施形態では、「被覆された」という用語は、物理的な結合を意味する。他の実施
形態では、「被覆された」という用語は、「コーティング」が所望される物体の表面の少
なくとも一部への、β−ｌ，６−グルカンを含有するゲル、膜、発泡体、粒子及び／又は
組成物の結合を意味する。ある実施形態では、前記コーティングは、前記物体の少なくと
も１つの面における１％未満、他の実施形態では１から１〜１０％、他の実施形態では１
〜２５％、他の実施形態では１〜５０％、他の実施形態では１〜７５％、他の実施形態で
は１〜１００％の露出面を含む。
【０１５０】
ある実施形態では、そのような「コーティング」は、特定の目的に適合するように、パ
ターンで塗布される、又は物体の特定の領域に塗布される。例えば、及び一部の実施形態
では、例えばカテーテルなどのチューブ状の器具は、その内腔の露出面上に１つの物質の
コーティング（例えば、抗炎症又は抗増殖化合物を含むコーティング）を含む。一部の実
施形態では、前記チューブ状の器具は異なる物質により被覆され、ある実施形態では、例
えば、生体膜形成を抑制するＤ−１，６−グルカンを含むコーティングにより被覆される
。ある実施形態では、前記コーティングは、前記物体の少なくとも１つ面に形成される。
他の実施形態では、前記コーティングは、前記物体の２つ以上の面に形成される。他の実
施形態では、前記コーティングは、前記物体のすべての露出面に形成される。他の実施形
態では、前記コーティングは、前記物体の全ての面に形成される。
【０１５１】
一部の実施形態では、「被覆された材料」という用語は、物体の表面が被覆されたもの
だけではなく、β−ｌ，６−グルカンを含む本明細書中で説明されるゲル、膜、発泡体、
粒子及び／又は組成物の、前記物体の全体又は一部への埋め込み及び／又は含浸を包含す
ると理解されたい。一部の実施形態では、前記物質の埋め込み及び／又は含浸は、特定の
目的又は用途に適合するように、所望のパターン及び／又はデザインに従って行われる。
一部の実施形態では、複数のコーティングが物体内に含浸される又は埋め込まれ、複数の
コーティングのそれぞれは、同一の又は互いに異なる特定のパターン又はデザインに従っ
て塗布される。
【０１５２】
一部の実施形態では、前記物質埋め込み及び／又は含浸は、特定の目的又は用途に適合
するように、物体の特定の面に対して特定のパターン又はデザインで行われる。一部の実
施形態では、前記物質の埋め込み及び／又は含浸は、特定の目的又は用途に適合するよう
に、物体の２つ以上の面に対して特定のパターン又はデザインで行われる（前記パターン
又はデザインは、埋め込まれる及び／又は含浸される面に応じて異なり得る）。
【０１５３】
器具は、その使用目的に適した様々な物質から作成される。特定の実施形態では、本発
明の前記器具は、その少なくとも一部を、任意の適切な熱可塑性又は感熱性（例えば熱硬
化性）ポリマーから作成することができる。適切なポリマーとしては、例えば、シリコン
及びウレタン（例えばポリウレタン）がある。ある実施形態では、前記基材、物体又は器
具は、その少なくとも一部を、ポリ塩化ビニルから作成することができる。特定の実施形
態では、前記器具は、その少なくとも一部を、ポリエチレンから作成することができる。
これらの材料が、例えばカテーテルなどのチューブ状器具に一般的に使用されることは、
当業者であれば容易に理解できるであろう。
【０１５４】
特定の実施形態では、前記化合物又は組成物は、保管時及び体内への導入時（例えば挿
入時に）に前記器具が所定の処理に耐えることができ、かつ化合物又は組成物を著しく失
うことなく保管されるように（例えば、損失が、前記化合物又は組成物の１０％、２０％
又は３０％を超えないように）、前記インプラント又は他の器具に十分に結合する。特定
の実施形態では、前記化合物又は組成物は、保管中に、挿入前に、又は（挿入を行った場
合に）体内への挿入後に体温まで暖められたときに、著しく劣化しない。本発明の特定の
実施形態では、本発明のインプラント又は器具は、ひとたび配置されると、本発明の化合
物又は組成物の前記インプラント又は器具の周囲の液体又は組織への均一な、予測可能な
、長期に渡る放出を提供する。特定の実施形態では、例えば血管ステント又は血液に曝さ
れ得る他の器具の場合、組成物又は化合物及びコーティングを形成するのに使用される物
質は、表面の血液凝固（血液凝固を引き起こす）を示さない、及び、血流中の著しい乱流
を引き起こす（器具が被覆されていない場合や、器具の表面が本明細書中で説明される化
合物又は組成物を含まない場合に予期される以上の乱流を引き起こす）。
【０１５５】
一部の実施形態では、「ゲル」という用語は、当該技術分野における一般的な意味を包
含する。ある実施形態では、「ゲル」という用語は、室温において液体と個体の中間の流
動性を有する高分子を含有する組成物を意味する。ある実施形態では、「ゲル」という用
語は、連続的固相及び液相（不連続的又は連続的又は混合された）から作成された、一部
の実施形態ではゲル状の外観から識別することができ及び／又は例えば可塑性、弾力性又
は剛性などの固形性質を示す、固形又は半固形のコロイド系を意味する。一部の実施形態
では、前記液相は、「分散」相であり得る。他の実施形態では、前記液相は、連続的であ
り得る。一部の実施形態では、前記ゲル化成分（固相）は親油性であり、１０％未満、他
の実施形態では１５％未満、他の実施形態では２０％未満、他の実施形態では２５％未満
、他の実施形態では３０％未満、他の実施形態では４０％未満の濃度で存在する。一部の
実施形態では、「ゲル」という用語は、シリカゲル、アルミノケイ酸塩ゲル、又は主とし
て固形及び／又は微粒子状、微小球状、球状などの他の物質を包含する、或いは、二相系
の破壊を示す記述的な性質、用語、表現（例えば、孔、体積、直径、表面積）により説明
される。特定の実施形態では、前記ゲルは、重量％で少なくとも７０％、８０％、９０％
、９５％、９８％又はそれ以上の水を含むヒドロゲルである。他の実施形態では、前記ゲ
ルは、水又は水溶液以外の溶媒内に拡散された高分子を含む。
【０１５６】
一部の実施形態では、「発泡体」という用語は、当該技術分野における一般的な意味を
包含する。一部の実施形態では、「発泡体」という用語は、液体内の気体のコロイド状懸
濁液を意味する。ある実施形態では、、「発泡体」という用語は、液体又は固体の外相内
に気体の内相を含む組成物を意味する。液胞の場合は、一部の実施形態では、コロイド状
の吸着物質が、気泡と結合する膜を形成し、前記発泡体内におけるコロイドの寸法が、気
泡のサイズではなく膜の厚さに影響を与える。
【０１５７】
一部の実施形態では、「膜」という用語は、当該技術分野における一般的な意味を包含
する。ある実施形態では、「膜」という用語は、寸法が一次元に制限された層を意味する
。一部の実施形態では、前記膜の平均厚さは、１０μｍ〜１００μｍである。一部の実施
形態では、前記膜の平均厚さは、１μｍ〜１０μｍである。前記膜の厚さは、変更するこ
とや、実質的に均一にすることができる（例えば、様々な実質的において、表面上の約１
、５又は１０％未満に変更される）。
【０１５８】
本発明は、被覆材料（例えばβ−ｌ，６−グルカンを含む組成物）の前駆体、及び、基
材に塗布されたときに被覆層を形成するのに使用できる又は基材に含浸させるのに使用で
きる前駆物質を包含する。前記組成物は、随意的に、溶媒（例えば、蒸発して被覆層を形
成する）を含む。一部の実施形態では、溶媒は、水性溶媒である。ある実施形態では、前
記溶媒は、有機溶媒である。一部の実施形態では、前記溶媒は、極性又は若干の極性を有
する。一部の実施形態では、前記溶媒は、無極性又は実質的に無極性である。適切な溶媒
としては、とりわけ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アセトン、アルコール、メチ
ルエチルケトン、トルエン、キシレン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、テト
ラヒドロフランなどがある。一部の実施形態では、前記溶媒は、水である。
【０１５９】
また、本発明の前記被覆された材料、インプラント又は他の器具を作成する方法も提供
される。
【０１６０】
本発明の前記被覆された基材、材料及び／又は器具は、金属材料、セラミック材料又は
ポリマー材料、或いはそれらの組み合わせから構成され得る。前記基材、材料及び／又は
器具は、様々な物理的性質を有し得る。例えば、前記基材等は、使用条件下で所望の形状
又は構造に対して容易に一致する又は曲がるように可撓性を有し得る。または、前記基材
等は、変形させるのに大きな力が必要となるように剛性を有し得る。一部の実施形態では
、前記器具は、その一端又は端部でのみ支持されたときに、その形状を維持する。前記表
面は、実質的に平滑であり得るまたは、前記表面は、凸凹であり得る及び／又は裂け目を
有し得る。
【０１６１】
ある実施形態では、前記金属材料としては、チタンベースの金属及び／合金（例えば、
ニチノール、ニッケル−チタン合金、熱記憶合金材料）、ステンレス鋼、タンタル、ニッ
ケルクロム、いくつかのコバルト合金（例えばＥｌｇｉｌｏｙ（登録商標）及びＰｈｙｎ
ｏｘ（登録商標）などのコバルト−クロムーニッケル合金）がある。また、金属材料とし
ては、ＰＣＴ国際特許出願第９４／１６６４６号公報に開示されているような、金属被覆
複合繊維もある。
【０１６２】
一部の実施形態では、セラミック材料としては、これに限定するものではないが、例え
ば遷移元素の酸化物、炭化物、窒化物などがあり、そのようなものとしては、例えば、酸
化チタン、酸化ハフニウム、酸化インジウム、酸化クロム、酸化アルミニウム及び酸化ジ
ルコニウムなどがある。例えばシリカなどのシリコンベースの材料も使用され得る。これ
らの材料は、本発明の器具の一部又は基材を作成するのに使用することができ、本明細書
中で説明される、β−ｌ，６−グルカンを含むゲル、発泡体、膜又は他の組成物により被
覆され得る。
【０１６３】
また、本発明によって、前記器具の使用方法が提供される。前記器具は、従来の同等物
（例えば、本明細書中で説明した化合物又は組成物を含む又は前記化合物などで被覆され
た同等物）が使用されるあらゆる方法で使用され、そのような方法は当該技術分野では知
られている。また、本発明によって、本明細書中で説明されるβ−ｌ，６−グルカンを含
む化合物又は組成物を対象に送達する方法であって、本発明の化合物又は組成物を含む被
覆された材料又は器具を、対象の体内に埋め込む又は導入するステップを含む方法が提供
される。
【０１６４】
他の実施形態では、本発明の任意の組成物は、アジュバント、抗原、免疫調節化合物又
はそれらの組み合わせを含む。
【０１６５】
ある実施形態では、本発明は、β−グルカンとアジュバントとを組み合わせた使用、或
いはそれらを含有する組成物を提供する。一部の実施形態では、前記アジュバントとして
は、これに限定するものではないが、例えば、（Ａ）アルミニウム化合物（例えば、水酸
化アルミニウム、リン酸アルミニウム、ヒドロキシリン酸アルミニウム、オキシ水酸化物
、オルトリン酸塩、硫酸塩など（「chapters 8 & 9 of ref. 96」参照）、又は様々なア
ルミニウム化合物の混合物（前記化合物は適切な形態を取り（例えば、ゲル、結晶質、非
結晶質など）、吸着性を有することが好ましい）；（Ｂ）ＭＦ５９（５％のスクアレン、
０．５％のトゥイーン８０、及び０．５％のスパン８５。マイクロフルイダイザーを使用
してサブミクロン粒子に製剤化される）；（Ｃ）リポソーム；（Ｄ）ＩＳＣＯＭ（追加的
な洗浄剤を欠き得る）；（Ｅ）ＳＡＦ（１０％のスクアレン、０．４％のトゥイーン８０
、５％のプルロニック−ブロックポリマＬ１２１、及びｔｈｒ−ＭＤＰを含有する。サブ
ミクロン乳剤にマイクロ流動化又はボルテックスし、粒径が大きい乳剤を作成する）；（
Ｆ）Ｒｉｂｉ（登録商標）アジュバントシステム（ＲＡＳ）（Ribi Immunochem）（２％
のスクアレン、０．２％のトゥイーン８０、及び、モノホスホリリピッドＡ（ＭＰＬ）、
トレハロースジミコレート（ＴＤＭ）及び細胞壁骨格（ＣＷＳ）（好ましくは、ＭＰＬ＋
ＣＷＳ（Detox（登録商標）から成る群より選択される１つ以上の細菌細胞壁成分を含有
する）；（Ｇ）サポニンアジュバント（例えば、ＱｕｉｌＡ又はＱＳ２１、スティミュロ
ン（Stimulon（登録商標））とも呼ばれる）；（Ｈ）キトサン；（Ｉ）完全フロインドア
ジュバント（ＣＦＡ）及び不完全フロインドアジュバント（ＩＦＡ）；（Ｊ）サイトカイ
ン、（例えば、インターロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６
、ＩＬ−７、ＩＬ−１２））、インターフェロン（例えば、インターフェロンγ）、マク
ロファージコロニー刺激因子、腫瘍壊死因子など）；（Ｋ）モノホスホリルリピドＡ（Ｍ
ＰＬ）又は３−Ｏ−脱アシル化ＭＰＬ（３ｄＭＰＬ））；（Ｌ）３ｄＭＰＬと、例えばＱ
Ｓ２１及び／又は水中油型乳剤との組み合わせ；（Ｍ）ＣｐＧモチーフを含むオリゴヌク
レオチド（すなわち、少なくとも１つのＣＧジヌクレオチドを含み、随意的にシントンの
代わりに５−メチルシトシンが使用される）；（Ｎ）ポリオキシエチレンエーテル又はポ
リオキシエチレンエステル；（Ｏ）ポリオキシエチレンソルビタンエステル界面活性剤と
オクトキシノール若しくはポリオキシエチレンアルキルエーテルとの組み合わせ、或いは
、エステル界面活性剤と少なくとも１つの非イオン性界面活性剤（例えばオクトキシノー
ル）との組み合わせ；（Ｐ）免疫刺激オリゴヌクレオチド（例えばＧｐＧオリゴヌクレオ
チド）及びサポニン；（Ｑ）免疫刺激剤及び金属塩の粒子；（Ｒ）サポニン及び水中油型
乳剤；（Ｓ）サポニン（例えばＱＳ２１）＋３ｄＭＰＬ＋ＩＬ１２（随意的に＋ステロー
ル）；（Ｔ）大腸菌熱性エンテロトキシン（「ＬＴ」）、又はその無毒化突然変異体、例
えば、Ｋ６３又はＲ７２突然変異体；（Ｕ）コレラ毒素（「ＣＴ」）又はジフテリア毒素
（「ＤＴ」）或いはそれらの無毒化突然変異体；（Ｖ）二本鎖ＲＮＡ；（Ｗ）モノホスホ
リルリピドＡ模倣体、例えばアミノアルキルグルコサミニドリン酸誘導体（例えばＲＣ−
５２９）；（Ｘ）ポリホスファゼン（ＰＣＰＰ）；又は（Ｙ）生体接着剤（例えば、エス
テル化ヒアルロン酸ミクロスフェア又は粘膜付着剤（例えば、ポリ（アクリル酸）、ポリ
ビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、多糖及びカルボキシメチルセルロース）の架
橋誘導体））などがある。
【０１６６】
ムラミルペプチドとしては、例えば、Ｎ−アセチル−ムラミル−Ｌ−スレオニル−イソ
グルタミン（ｔｈｒ−ＭＤＰ）、Ｎ−アセチル−ノルムラミルｌ−Ｌ−アラニル−イソグ
ルタミン（ｎｏｒ−ＭＤＰ）、Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミ
ニル−Ｌ−アラニン−２−（１’−２’−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ヒドロ
キシホスホリルオキシ）エチルアミン（ＭＴＰ−ＰＥ）などがある。
【０１６７】
他の実施形態では、本発明は、β−グルカン及び抗原を組み合わせた使用、又はβ−グ
ルカン及び抗原を含む組成物を提供する。
【０１６８】
様々な実施形態では、前記抗原は、対象の免疫系により異物として認識される任意の分
子であり得る。例えば、前記抗原は、例えば、タンパク質（糖タンパク質やムコタンパク
質などの変性性タンパク質）、核酸、炭水化物、プロテオグリカン、脂質、ムチン分子、
又はそれらの組み合わせを含む他の類似分子などの、任意の異質分子であり得る。前記抗
原は、他の実施形態では、細胞又はその一部であり得、例えば、細胞表面分子であり得る
。他の実施形態では、前記抗原は、感染性ウイルス、細菌、真菌、又は他の有機体（例え
ば、原生生物）、或いはその一部に由来し得る。これらの感染性生物は活性で有り得、あ
る実施形態では、前記感染性生物を熱に曝すことにより、又は前記生物の複製に必要なタ
ンパク質又は遺伝子を少なくとも１つ除去することにより、不活性にすることができる。
ある実施形態では、前記抗原性タンパク質又はペプチドは単離される、他の実施形態では
、合成される。
【０１６９】
ある実施形態では、「抗原」という用語は、抗原に曝した又は接触させた後に、免疫応
答を刺激又は促進するタンパク質、ペプチド、又は他の断片などの物質を意味する。ある
実施形態では、前記抗原は、対象の免疫系によって免疫応答を開始又は強化すべきだと解
釈される「危険」信号である。他の実施形態では、前記抗原は、「非自己」分子の存在を
識別するホストの能力を表す。
【０１７０】
ある実施形態では、前記抗原は、病原体、感染した細胞、腫瘍、又は前癌細胞に由来す
る。他の実施形態では、前記抗原は、自己免疫応答を開始する又は強化する自己抗原又は
分子である。
【０１７１】
ある実施形態では、前記抗原は、その生涯の少なくともある時期において細胞内に存在
する寄生虫に由来する。前記細胞内の寄生虫は、例えば、原生動物で有り得る。細胞を感
染させる原生動物としては、例えば、マラリア原虫属（熱帯熱マラリア原虫、三日熱マラ
リア原虫、卵形マラリア原虫、及び四日熱マラリア原虫）、トリパノソーマ属、トキソプ
ラズマ属、リーシュマニア属、住血吸虫属、及びクリプトスポリジウム属の寄生虫がある
。他の実施形態では、寄生虫は、その生涯の少なくともある時期において細胞外に存在す
る。例としては、例えば、線虫、吸虫、及び条虫がある。一部の実施形態では、前記抗原
は、当業者には容易に理解できるように、前記した原生動物による感染の副生成物に由来
する（例えば、住血吸虫属の抗原、トキソプラズマ嚢胞からユニークに発現する抗原など
）。
【０１７２】
ある実施形態では、前記抗原は、病気及び／又は異常細胞から得られる。前記病気及び
／又は異常細胞としては、例えば、感染細胞、腫瘍細胞、前癌細胞、炎症性の病巣、良性
腫瘍若しくはポリープ、カフェオレ斑点、白板症、他の皮膚モル、自己反応性細胞（Ｔ細
胞及び／又はＮＫ細胞を含む）などがある。
【０１７３】
ある実施形態では、前記抗原は、感染性ウイルスから得られる。前記ウイルスとしては
、とりわけ、例えば、レトロウイルス科（例えば、ヒト免疫不全ウイルス、例えば、ＨＩ
Ｖ−Ｉ（ＨＴＬＶ−ＩＩＩとも呼ばれる）、ＬＡＶ若しくはＨＴＬＶ−ＩＩＩ／ＬＡＶ、
又は、ＨＩＶ−ＩＩＩ；及び他の分離株、例えばＨＶＩ−ＬＰ；ピコルナウイルス科（例
えば、ポリオウイルス、Ａ型肝炎ウイルス；エンテロウイルス、ヒトコクサッキーウイル
ス、ライノウイルス、エコーウイルス）；カルシウイルス科（例えば、胃腸炎を引き起こ
す菌株）；トガウイルス科（例えば、ウマ脳炎ウイルス、風疹ウイルス）；フラビウイル
ス科（例えば、デングウイルス、脳炎ウイルス、黄熱病ウイルス）；コロナウイルス科（
例えば、コロナウイルス）；ラブドウイルス科（例えば、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病
ウイルス）；フィロウイルス科（例えば、エボラウイルス）；パラミクソウイルス科（例
えば、パラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、呼吸器合胞体ウ
イルス）；オルトミクソウイルス科（例えば、インフルエンザウイルス）；ブンガウイル
ス科（例えば、ハンターンウイルス、ブンガウイルス、フレボウイルス及びナイロウイル
ス）；アレナウイルス科（出血熱ウイルス）；レオウイルス科（例えば、レオウイルス、
オルビウイルス及びロタウイルス）；ビルナウイルス科；ヘパドナウイルス科（Ｂ型肝炎
ウイルス）；パルボウイルス科（パルボウイルス）；パポバウイルス科（乳頭腫ウイルス
、ポリオーマウイルス）；アデノウイルス科（大部分のアデノウイルス）；ヘルペスウイ
ルス科（単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）１及び２、水痘帯状疱疹ウイルス、サイトメガ
ロウイルス（ＣＭＶ）、ヘルペスウイルス）；ポックスウイルス科（天然痘ウイルス、ワ
クシニアウイルス、ポックスウイルス）；イリドウイルス科（例えば、アフリカブタ熱ウ
イルス）；分類不能ウイルス（例えば、海綿状脳症の病原因子、デルタ型肝炎の因子（Ｂ
型肝炎ウイルスの欠損サテライトとなり得る）、非Ａ非Ｂ型肝炎の因子（クラス１＝経口
的に感染）；クラス２＝非経口的に感染（すなわち、Ｃ型肝炎）；ノーウォーク及び関連
ウイルス、及びアストロウイルスなどがある。
【０１７４】
ある実施形態では、前記抗原は、細菌から得られる。前記細菌としては、とりわけ、例
えば、ヘリコバクターピロリ、ライム病ボレリア、レジオネラニューモフィラ、マイコバ
クテリアｓｐｓ（例えば、ヒト結核菌、トリ結核菌、細胞内結核菌、カンサシ菌、マイコ
バクテリウムゴルドナエ）、黄色ブドウ球菌、淋菌、髄膜炎菌、リステリア菌、化膿連鎖
球菌（Ａ群連鎖球菌）、ストレプトコッカスアガラクティエ（Ｂ群連鎖球菌）、連鎖球菌
（緑色連鎖球菌）、大便連鎖球菌、ストレプトコッカスボビス、連鎖球菌（嫌気性ｓｐｓ
．）、肺炎連鎖球菌、病原性カンピロバクターｓｐ．、腸球菌ｓｐ．、クラミジアｓｐ．
、インフルエンザ菌、バチルスアントラシス、コリネバクテリウムジフテリエ、コリネバ
クテリウムｓｐ．、ブタ丹毒菌、ウェルシュ菌、破傷風菌、エンテロバクターエロゲネス
、肺炎桿菌、パスツレラマルトシダ、バクテロイデスｓｐ．、フソバクテリウムヌクレア
タム、モニリホルム連鎖桿菌、梅毒トレポネーマ、フランベジアトレポネーマ（Treponem
a pertenue）、レプトスピラ、イスラエル放線菌、及び野兎病菌などがある。
【０１７５】
ある実施形態では、前記抗原は、真菌から得られる。そのような真菌としては、とりわ
け、例えば、アブシディア属（例えば、アブシディアコリンビフェラ）、アジェロミセス
属（例えば、アジェロミセスカプスラータ、アジェロミセスデルマティティジス）、アル
スロデルマ属（例えば、アルスロデルマベンハミアエ、アルスロデルマフルブム、アルス
ロデルマギプセウム、アルスロデルマインクルバーツム、アルスロデルマオタエ、アルス
ロデルマバンブルースゲミイ）、アスペルギルス属（例えば、アスペルギルスフラバス、
アスペルギルスフミガータス、アスペルギルスニゲル）、ブラストミセス属（例えば、ブ
ラストミセスデルマティティジス）、カンジダ属（例えば、カンジダ・アルビカンス、カ
ンジダグラブラタ、カンジダギリエルモンディ、カンジダクルセイ（Candida krusei）、
カンジダパラプシローシス、カンジダトロピカリ、カンジダペリキュローザ）、クラドフ
ィアロフォラ属（例えば、クラドフィアロフォラキャリオニー）、コクシジオイデス属（
例えば、コクシジオイデス・イミティス）、クリプトコッカス属（例えば、クリプトコッ
クス・ネオフォルマンス）、クスダマカビ属、表皮菌属（例えば、有毛表皮菌）、エクソ
フィアラ属（例えば、エキソフィアラデルマティティジス）、フィロバジディエラ属（例
えば、フィロバジディエラネオフォルマンス）、フォンセカヤ属（例えば、フォンセカヤ
ペドロソイ）、フザリウム属（例えば、フザリウムソラニ）、ゲオトリクム属（例えば、
ゲオトリクムキャンディダム）、ヒストプラスマ属（例えば、ヒストプラスマ・カプスラ
ーツム）、ホルタエア属（例えば、ホルタエアウェルネッキィ）、イサチェンキア属（例
えば、イサチェンキアオリエンタリス）、マズレラ属（例えば、マズレラグリサエ（Madu
rella grisae））、マラセチア属（例えば、マラセチアフルフル、マラセチアグロボーサ
、マラセチアオブチューズ（Malassezia obtuse）、マラセチアパチデルマティス、マラ
セチアレストリクタ、マラセチアスルーフィエ（Malassezia slooffiae）、マラセチアシ
ンポディアリス）、小胞子菌属（例えば、イヌ小胞子菌、小胞子菌フルブム（Microsporu
m fulvum）、石こう状小胞子菌）、ケカビ属（例えば、ムコールシルシネロイデス）、ネ
クトリア属（例えば、ネクトリアヘマトコッカ）、ペシロミセス属（例えば、ペシロミセ
スバリオッティ）、パラコクシジオイデス属（例えば、パラコクシジオイデス・ブラジル
エンシス）、ペニシリウム属（例えば、ペニシリウムマルネッフィ）、ピキア属（例えば
、ピキアアノマラ、ピキアギリエルモンディ）、ニューモシスチス属（例えば、ニューモ
シスチスカリニ）、シュードアレシェリア属（例えば、シュードアレシェリアボイディ）
、クモノスカビ属（例えば、リゾプスオリザエ）、ロドトルラ属（例えば、ロドトルラル
ブラ）、セドスポリウム属（例えば、セドスポリウムアピオスペルマン）、スエヒロタケ
属（例えば、シゾフィラムコムネ）、スポロトリクス属（例えば、スポロトリクスシェン
キー）、白癬菌属（例えば、毛瘡白癬菌、紅色白癬菌、トリコフィトン・ベルコーズム、
紫色白癬菌）、トリコスポロン属（例えば、トリコスポロンアサヒ、トリコスポロンクタ
ネウム、トリコスポロンインキントリコスポロンムコイデス）などがある。
【０１７６】
ある実施形態では、前記病原菌は、ヒト宿主に感染する。ある実施形態では、前記病原
菌は、ヒト以外の動物に感染する。
【０１７７】
一部の実施形態では、本発明の前記組成物及び方法は、同一のソースに由来する複数の
抗原、同一の種類の有機体に由来する複数の抗原、異なる種類の有機体に由来する複数の
抗原、又はそれらの組み合わせを、組み合わせた使用を可能にする。
【０１７８】
他の実施形態では、本発明は、本発明は、対象における感染症を治療する、感染症の進
行を遅延させる、又は感染症の発生率若しくは重症度を低下させる方法であって、精製さ
れたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含む方法を
提供する。本発明の特定の実施形態では、前記感染症は、病原性真菌が原因の感染症であ
る。本発明の特定の実施形態では、前記感染症は、病原性の細菌、ウイルス又は寄生虫が
原因の感染症である。本発明の特定の実施形態では、前記対象には、本発明の組成物に加
えて、感染者から感染する危険性がある感染症の治療又は予防に有用であることが当該技
術分野で知られている任意の薬剤が投与される。したがって、ある実施形態では、前記方
法は、（ｉ）β−１，６−グルカンを含有する組成物と、（ｉｉ）既知の抗真菌物質、抗
細菌物質、抗ウイルス物質又は抗寄生虫物質とを対象に投与するステップを含む。前記組
成物及び抗真菌物質は、単一の組成物として投与することも別々に投与することもできる
。一部の実施形態では、そのような別々の投与は、最大で２４時間の間隔をおいて、又は
最大で４８時間の間隔をおいて、及び一部の実施形態では１時間の間隔をおいて行われる
。前記組成物は、ヒトへの使用、獣医的用途、又はその両方に適し得る。
【０１７９】
一部の実施形態では、本発明の粒子、グルカン、組成物又はそれらの組み合わせは、補
体結合を促進、増強又は助長する。
【０１８０】
この態様によれば及び一部の実施形態では、本発明の被覆された基材、材料、粒子、ビ
ーズ、グルカン及び／又はデバイスは、補体結合に関与しその結果として対象に治療効果
をもたらす免疫応答を、促進、増大又は推進する方法に使用され得る。一部の実施形態で
は、前記感染症は、本明細書中で説明される任意の病原体による感染を含む。一部の実施
形態では、前記免疫応答は、対象における敗血症を対象にし得る。一部の実施形態では、
前記免疫応答は、対象におけるシャーガス病、肺病原体、又は寄生虫若しくは蠕虫を対象
にし得る。一部の実施形態では、前記免疫応答は、例えばＨＳＶなどのウイルス性感染を
対象にする。
【０１８１】
一部の実施形態では、本発明のこの態様による前記方法は、補体カスケードの生成を促
進する物質を投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、本発明のこの態様で
は、前記方法は、対象が感染した病原性物質を特異的に認識する抗体を投与するステップ
をさらに含む。
【０１８２】
ある実施形態では、β−１，６−グルカンは、Ｏ−アセチル化基について富化される。
ある実施形態では、β−１，６−グルカンは、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グ
ルカンを含む。特定の実施形態では、β−１，６−グルカンは、１０〜２０重量％、又は
２０〜２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含む。他の実施形態では、前記組成物は、
アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含む。ある実施形
態では、前記抗原又はペプチドは、感染源から得られる。ある実施形態では、前記免疫促
進化合物は、サイトカインである。他の実施形態では、前記化学療法化合物は、抗生物質
又は抗ウイルス性化合物である。
【０１８３】
他の実施形態では、本発明は、対象における癌を治療する、癌の進行を遅延させる、癌
の寛解を延長する、又は癌の発生率若しくは重症度を低減させる方法であって、精製され
たβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含む方法を提
供する。
【０１８４】
ある実施形態では、前記抗原は、腫瘍関連抗原である。ある実施形態では、前記ペプチ
ドは、腫瘍関連抗原から得られる。
【０１８５】
ある実施形態では、前記対象は、過形成病変又は前癌病変を有する。他の実施形態では
、前記対象は、癌を有する。
【０１８６】
ある実施形態では、下記の癌抗原に関連する癌は、本発明の方法及び組成物により治療
又は予防することができる。ＫＳ１／４膵臓癌抗原（Perez and Walker, 1990, J. Immun
ol. 142:32-37；Bumal, 1988, Hybridoma 7(4):407-415）、卵巣癌抗原（ＣＡ１２５）
（Yu etal, 1991, Cancer Res. 51(2):48-475）、前立腺性酸性ホスファターゼ（Tailor
et al,1990, Nucl. Acids Res. 18(1):4928）、前立腺特異抗原（Henttu and Vihko, 1
989, Biochem.Biophys. Res. Comm. 10(2):903-910； Israeli et al., 1993, Cancer R
es. 53:227-230）、メラノーマ関連抗原ｐ９７（Estinet al., 1989, J. Natl. Cancer 
Instit. 81(6):445-44）、メラノーマ抗原ｇｐ７５（Vijayasardahl et al, 1990, J. E
xp. Med. 171(4): 1375-1380）、高分子量メラノーマ抗原（ＨＭＷ−ＭＡＡ）（Natali 
et al., 1987,Cancer 59:55-3； Mittelman et al., 1990, J. Clin. Invest. 86:2136-
2144）、前立腺特異的膜抗原、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）（Foonet al., 1994, Proc. Am.
Soc.Clin. Oncol. 13:294）、多形性上皮ムチン抗原、ヒト乳脂肪小球抗原、結腸直腸
腫瘍関連抗原（例えば、ＣＥＡ、ＴＡＧ−７２（Yokata et al., 1992, Cancer Res. 52:
3402-3408）、ＣＯ１７−１Ａ（Ragnhammaret al., 1993, Int. J. Cancer 53:751-758
）、ＧＩＣＡ１９−９（Herlyn et al., 1982, J. Clin. Immunol. 2:135）、ＣＴＡ−１
及びＬＥＡ）、バーキットリンパ腫抗原−３８．１３，ＣＤ１９（Ghetie et al, 1994, 
Blood 83:1329-1336）、ヒトＢリンパ腫抗原−ＣＤ２０（Reffet al, 1994, Blood 83:4
35-445）、ＣＤ３３（Sgouroset al., 1993, J. Nucl. Med. 34:422-430）、メラノーマ
特異抗原（例えば、ガングリオシドＧＤ２（Saleh et al., 1993, J. Immunol., 151, 33
90-3398）、ガングリオシドＧＤ３（Shitaraet al, 1993, Cancer Immunol. Immunother
. 36:373-380）、ガングリオシドＧＭ２（Livingstonet al, 1994, J. Clin. Oncol. 12
: 1036-1044）、ガングリオシドＧＭ３（Hoonet al., 1993, Cancer Res. 53:5244-5250
））、腫瘍特異的移植タイプの細胞表面抗原（ＴＳＴＡ）（例えば、ウイルス誘導腫瘍抗
原（ＲＮＡ腫瘍ウイルスの、Ｔ抗原ＤＮＡ腫瘍ウイルス及びエンベロープ抗原を含む））
、腫瘍胎児抗原−αフェトプロテイン（例えば、結腸のＣＥＡ）、膀胱腫瘍胎児抗原（He
llstrom et al,1985, Cancer. Res. 45:2210-2188）、分化抗原（例えば、ヒト肺癌抗原
Ｌ６、Ｌ２０（Hellstromet al, 1986, Cancer Res. 46:3917-3923））、線維肉腫の抗
原、ヒト白血病Ｔ細胞抗原−Ｇｐ３７（Bhattacharya-Chatterjee et al, 1988, J. of I
mmun.141:1398-1403）、ネオ糖タンパク質、スフィンゴリピド、乳癌抗原（例えば、Ｅ
ＧＦＲ（上皮成長因子受容体））、ＨＥＲ２抗原（ｐ１８５ＨＥＲ２）、多型性上皮ムチ
ン（ＰＥＭ）（Hilkenset al, 1992, Trends in Bio. Chem. Sci. 17:359）、悪性ヒト
リンパ球抗原−ＡＰＯ−１（Bernhard el al, 1989, Science 245:301-304）、分化抗原
（Feizi,1985, Nature 314:53- 57）（例えば、Ｉ抗原胎児赤血球及び初期内胚葉に見ら
れる、胃腺癌に見られるＩ（Ｍａ）、乳房上皮に見られるＭ１８及びＭ３９、骨髄性細胞
に見られるＳＳＥＡ−１、ＶＥＰ８、ＶＥＰ９、Ｍｙｌ、ＶＩＭ−Ｄ５、及び結腸直腸癌
に見られるＤ１５６−２２、ＴＲＡ−１−８５（血液型Ｈ）、結腸腺癌に見られるＣ１４
、肺腺癌に見られるＦ３、胃癌に見られるＡＨ６、Ｙハプテン、胚性癌腫細胞に見られる
血液型Ｌｅｙ、ＴＬ５（血液型Ａ）、Ａ４３１細胞に見られるＥＧＦ受容体、膵臓癌に見
られるＥ１シリーズ（血液型Ｂ）、胃腺癌、胚性癌腫細胞に見られるＦＣ１０．２、腺癌
に見られるＣＯ−５１４（血液型Ｌｅａ）、腺癌に見られるＮＳ−１０、ＣＯ−４３（血
液型Ｌｅｂ）、Ｇ４９、ＥＧＦ受容体、結腸腺癌に見られる（血液型ＡＬｅｂ／Ｌｅｙ）
、胃癌ムチン、結腸癌に見られる１９．９、骨髄性細胞に見られるＴ５Ａ７、メラノーマ
に見られるＲ２４、胚性癌腫細胞に見られる４．２、ＧＤ３、Ｄ１．１、ＯＦＡ−１、Ｇ
Ｍ２、ＯＦＡ−２、ＧＤ２、Ｍ１：２２：２５：８、及び４−８の細胞期の胚に見られる
ＳＳＥＡ−３、ＳＳＥＡ−４）。他の実施形態では、前記抗原は、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫
由来のＴ細胞受容体誘導ペプチドである（「Edelson, 1998, The Cancer Journal 4:62」
を参照）。
【０１８７】
他の実施形態では、前記抗原性ペプチド若しくはタンパク質は、それらの抗原を発現す
る、乳癌、卵巣癌、膵臓癌、結腸癌、前立腺癌及び肺癌の抑制／抑止のためのＨＥＲ２／
ｎｅｕ又は癌胎児性抗原（ＣＥＡ）から得られる。同様に、例えばＭＵＣ−１などのムチ
ン型抗原が、様々な癌に対して使用することができる。ＭＡＧＥ、ＢＡＧＥ、及びＭａｒ
ｔ−１抗原が、黒色腫に対して使用することができる。ある実施形態では、前記方法は、
対象が有する特定の癌に合わせて調整され、対象の癌細胞において発現する抗原（外科生
検又は血液細胞サンプルの免疫組織化学検査により予め決定される）に基づいて抗原性ペ
プチド若しくはタンパク質が選択される。
【０１８８】
他の実施形態では、本発明は、β−１，６−グルカンと免疫調節化合物とを組み合わせ
た使用、或いはそれらを含有する組成物を提供する。
【０１８９】
有用な免疫調整タンパク質の例としては、サイトカイン、ケモカイン、補体成分、免疫
系アクセサリー及び接着分子、及びヒト又は非ヒト動物に特異的なそれらのレセプターが
ある。有用な例は、これに限定するものではないが、ＧＭ−ＣＳＦ、ＥＬ−２、ＩＬ−１
２、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ（ｇｐ３４）、リンフォタクチン、ＣＤ４０、及びＣＤ４０Ｌ
がある。さらなる有用な例は、これに限定するものではないが、インターロイキン（例え
ばインターロイキン１〜１５）、インターフェロン（アルファ、ベータ又はガンマ）、腫
瘍壊死因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージ
コロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、ケモカイン
（例えば好中球活性化タンパク質（ＮＡＰ）など）、マクロファージ走化活性化因子（Ｍ
ＣＡＦ）、ＲＡＮＴＥＳ、マクロファージ炎症性ペプチド（ＭＩＰ−１ａ及びＭＩＰ−１
ｂ）、補体成分及びそれらのレセプター、又はアクセサリー分子（Ｂ７．１、Ｂ７．２、
ＴＲＡＰ、ＩＣＡＭ−１，２若しくは３、及びサイトカインレセプター）がある。ＯＸ４
０及びＯＸ４０リガンド（ｇｐ３４）は、免疫調整タンパク質のさらなる有用な例である
。本明細書中で説明される前記グルカンと協力して、免疫応答を増大、促進、又は抑制若
しくは抑止する任意の化合物が、本発明の組成物内に含まれ得る、又は本発明の方法に従
って使用される、及びそれらの実施形態と見なされることを理解されたい。
【０１９０】
他の実施形態では、本発明は、β−グルカンと、アジュバント、抗原及び免疫調節化合
物のうちの少なくとも１つ又はそれらの組み合わせとを組み合わせた使用、或いはそれら
を含有する組成物を提供する。他の実施形態では、本発明は、複数のソースから得ること
ができるβ−グルカンと、アジュバント、抗原及び免疫調節化合物のうちの少なくとも２
つ以上又はそれらの組み合わせとを組み合わせた使用、或いはそれらを含有する組成物を
提供する。本発明の様々な実施形態では、前記β−グルカンは本明細書中で説明される任
意のβ−グルカンであり得る。
【０１９１】
一旦製剤化した後、本発明の組成物は、対象に直接的に投与することができる。一部の
実施形態では、治療される対象は動物であり、例えば家畜を含む。一部の実施形態では、
治療される対象はヒトである。一部の実施形態では、男性及び／又は女性を、本発明の組
成物及び／又は方法に従って治療することができる。一部の実施形態では、治療される対
象は子供及び／又は１０代の若者、及び／又は大人である。
【０１９２】
本発明の一態様では、好中球は、β−１，６−グルカンへ曝したときに、熱ショックタ
ンパク（ＨＳＰ）発現を誘導する。一部の実施形態では、β−１，６−グルカンへの曝露
を増やすと、ＨＳＰ発現、及び下方免疫調節が増加する。
【０１９３】
β−１，３−グルカンではなくβ−１，６−グルカンで被覆されたミクロスフェアは、
ＨＳＰ発現、ＲＯＳ生成などの誘導において最も効果的である。
【０１９４】
ＨＳＰは、抗原提示細胞のＭＨＣクラスＩ及びＩＩ上に存在し得るペプチドと既に結合
されている。ある実施形態では、組成物中のβ−１，６−グルカンを認識した後、及び／
又は本発明の方法に従って、グルカンが投与された対象の好中球又は対象の細胞と接触し
た好中球は、ＨＳＰを発現して他の免疫細胞に対して信号を送り、抗原提示細胞上の他の
抗原を提示する。
【０１９５】
ある実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、Ｏ−ア
セチル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与
するステップを含む方法、又は本明細書中で説明された前記方法の任意の実施形態を提供
する。他の実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、固
体支持体と結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステッ
プを含む方法、又は本明細書中で説明された前記方法の任意の実施形態を提供する。他の
実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、β−１，６−
グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含む方法、本明細書中で説明
された前記方法の任意の実施形態を提供する。ある実施形態では、前記組成物内のβグル
カンは、その他のβグルカンと比較すると、少なくとも約３５〜９９重量％の、他の実施
形態では約４５〜９９重量％の、他の実施形態では約５５〜９９重量％の、他の実施形態
では約６５〜９９重量％の、他の実施形態では約７５〜９９重量％の、他の実施形態では
約８５〜９９重量％の、他の実施形態では約９０〜９９重量％のβ−１，６−グルカンを
含む。ある実施形態では、「約」という用語は、前記不一致が１００％を超える値となる
ことを文脈が示す場合を除き、１〜１０％、又は他の実施形態では５〜１５％、又は他の
実施形態では最大１０％の、又は他の実施形態では最大２５％の表示値との不一致を意味
する。
【０１９６】
本発明のこの態様によれば及びある実施形態では、免疫応答の調節は、免疫応答の促進
を含み、ある実施形態では、免疫応答は抗原特異的応答である。前記組成物は、ある実施
形態では免疫促進化合物を、又は他の実施形態では化学療法化合物をさらに含む。他の実
施形態では、前記免疫応答は、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに対
するものであり、これについては、β−１，６−グルカンを含有する組成物又はβ−１，
６−グルカンの投与が有用である。本発明のこの態様によれば、ある実施形態では追加的
な薬剤が投与され得る、又は他の実施形態ではこの態様に従って使用される組成物はこれ
について有用な追加的な薬剤を含有し得る。
【０１９７】
本発明のこの態様のある実施形態では、前記追加的な薬剤は、抗炎症剤を含む。抗炎症
剤としては、例えば、ベタメタゾン、プレドニゾロン、ピロキシカム、アスピリン、フル
ルビプロフェン及び（＋）−Ｎ−｛４−［３−（４−フルオロフェノキシ）フェノキシ］
−２−シクロペンテン−１−ｙｌ｝−Ｎ−ヒドロキシウレア；抗ウイルス剤（例えば、ア
シクロビル、ネルフィナビル、又はビラゾール）；抗生物質（例えば、アンピシリン及び
ペニシリンＧ又はペニシリンファミリーに属するもの、セファロスポリン、アミノグリコ
シド、マクロライド、カルバペネム及びペネム、単環性βラクタム、βラクタマーゼの阻
害剤、テトラサイクリン、ポリペプチド系抗生物質、クロラムフェニコール、及び誘導体
、フシジン酸、リンコマイシン、ノボビオシン、スペクチノマイシン、ポリエーテル系イ
オノフォア、キノロン）；抗感染薬（例えば、塩化ベンザルコニウム又はクロルヘキシジ
ン）；ダプソーン、クロラムフェニコール、ネオマイシン、セファクロル、セファドロキ
シル、セファレキシン、セフラジンエリスロマイシン、クリンダマイシン、リンコマイシ
ン、アモキシシリン、アンピシリン、バカンピシリン、カルベニシリン、ジクロキサシリ
ン、シクラシリン、ピクロキサシリン、ヘタシリン、メチシリン、ナフシリン、オキサシ
リン、ペニシリン（ペニシリンＧ及びペニシリンＶを含む）、チカルシリンリファンピン
及びテトラサイクリン；抗炎症薬（例えば、ジフルニサル、イブプロフェン、インドメタ
シン、メクロフェナム酸、メフェナム酸、ナプロキセン、オキシフェンブタゾン、フェニ
ルブタゾン、ピロキシカム、スリンダク、トルメチン、アスピリン及びサリチル酸塩）；
抗真菌剤（例えば、アムホテリシンＢ、グルカン合成阻害剤、例えば、カスポファンギン
、ミカファンギン、又はアニデュラファンギン（ＬＹ３０３３６６）、エコナゾール、テ
ルコナゾール、フルコナゾール、ボリコナゾール又はグリセオフルビン）；抗原虫薬（例
えば、メトロニダゾール）；イミダゾール型抗新生物薬（例えば、ツブラゾール）；駆虫
薬（例えば、チアベンダゾール又はオクスフェンダゾール）；抗ヒスタミン剤（例えば、
アステミゾール、レボカバスチン、セチリジン又はシンナリジン）；充血除去剤（例えば
、偽エフェドリン）；抗精神病薬（例えば、フルスピリレン、ペンフルリドール、リスペ
リドン又はジプラシドン）；抗腫瘍薬（例えば、白金化合物（例えば、スピロプラスチン
、シスプラチン及びカルボプラチン）、メトトレキサート、フルオロウラシル、アドリア
マイシン、マイトマイシン、アンサマイトシン、ブレオマイシン、シトシンアラビノシド
、アラビノシルアデニン、メルカプトポリリシン、ビンクリスチン、ブスルファン、クロ
ラムブシル、メルファラン（例えば、ＰＡＭ、Ｌ−ＰＡＭ又はフェニルアラニンマスター
ド）、メルカプトプリン、ミトタン、塩酸プロカルバジンダクチノマイシン（アクチノマ
イシンＤ）、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシンパクリタキセル及び他のタキサン
、ラパマイシン、マニュマイシンＡ、ＴＮＰ−４７０、プリカマイシン（ミトラマイシン
）、アミノグルテチミド、エストラムスチンリン酸ナトリウム、フルタミド、酢酸ロイプ
ロリド、酢酸メゲストロール、クエン酸タモキシフェン、テストラクトン、トリロスタン
、アムサクリン（ｍ−ＡＭＳＡ）、アスパラギナーゼ（Ｌ−アスパラギナーゼ）エルウィ
ナアスパラギナーゼ、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα―２ｂ、テニポシ
ド（ＶＭ−２６）、硫酸ビンブラスチン（ＶＬＢ）、硫酸ビンクリスチン、硫酸ブレオマ
イシン、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、及びダカルバジン）；分裂抑制剤（例えば
、エトポシド、コルヒチン、及びビンカアルカロイド）；放射性医薬品（例えば、放射性
ヨウ素及びリン生成物、或いはそれらの任意の組み合わせ）などがある。
【０１９８】
ある実施形態では、免疫応答の調節は、免疫応答の促進を含む。ある実施形態では、前
記免疫応答は、抗原特異的応答である。本発明のこの態様によれば、前記組成物は、ある
実施形態では免疫促進化合物を、又は他の実施形態では化学療法化合物をさらに含む。他
の実施形態では、前記免疫応答は、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせ
、或いは本明細書中で説明されるような任意の実施形態に対するものである。
【０１９９】
一部の実施形態では、本発明の組成物及び／又は方法は、本明細書中に説明されたよう
な前記β−グルカンを含有する組成物を経口又は非経口投与することにより、個体（動物
又はヒト）の免疫系の刺激に適用され有用である。一部の実施形態では、そのような組成
物及び／又は方法は、例えば、負傷した、免疫障害を有する又はタンパク質栄養不良の個
体若しくは患者の免疫応答を増強するのに効果的である。免疫障害を有する個体は、一部
の実施形態では、感染性病原体（ウイルス、細菌、真菌及び原生動物）に対する通常の細
胞若しくはホルモン防御を備える能力が弱まった又は減少した者を意味する。タンパク質
栄養不良の個体は、一部の実施形態では、血清アルブミン値が約３．２ｇ／ｄｌ未満の、
及び／又は意図的でない体重減少が健常時の体重の１０％を超える者を意味する。
【０２００】
一部の実施形態では、本発明の組成物及び／又は方法は、緊急外科手術、負傷、疾患、
放射線療法、化学療法、又は免疫系に有害な影響を与える他の状態に起因して感染する危
険性の高い動物又はヒトを治療的又は予防的に治療するのに使用される。一部の実施形態
では、本発明の組成物及び／又は方法は、例えばＨＩＶ感染症（ＡＩＤＳ）などの正常な
免疫応答の減少又は低下を引き起こす疾患又は障害を有する対象、又は免疫抑制治療を受
けている対象（例えば、移植候補の対象、又は移植を受けた対象、自己免疫疾患を患って
いる対象）を治療するのに使用される。一部の実施形態では、本発明の組成物及び／又は
方法は、化学療法又は放射線治療を受けている対象、又は、疾患、障害又は治療により感
染に対する身体の正常な応答を駆動する能力が低下したことに起因して二次感染症又は手
術後合併症が発症する危険性が高い対象における免疫応答を事前に開始するのに使用され
る。
【０２０１】
他の実施形態では、前記免疫応答の調節は、前記免疫応答の下方制御又は抑制を含む。
この態様によれば及びある実施形態では、前記組成物は、免疫抑制剤をさらに含む。前記
免疫応答は、ある実施形態では自己抗原、又は他の実施形態ではアレルゲン、又は他の実
施形態では移植された組織、又は他の実施形態では移植された細胞に対するものである。
【０２０２】
ある実施形態では、特定の抗原に対する免疫応答は、例えば免疫応答は対象に侵入した
病原体からの抗原を対象にするので、最初はホストに対して有効であり得る。ある実施形
態では、そのような免疫応答は、非常に強固なもので有り得るが、病原体が根絶又は制御
された後でさえも免疫応答は持続されるため、例えば最初に病原体に感染した組織内に組
織壊死を引き起こすことにより、ホストにダメージをもたらす。このような又は他の状況
においては、本発明の組成物及び／又は方法は、免疫応答の持続により何らかの方法でホ
ストが損傷しないように、免疫応答を下方制御するのに有用であり得る。
【０２０３】
他の実施形態では、免疫応答の下方制御が望まれる疾患は、宿主対移植片病である。組
織及び器官（例えば、皮膚、腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓及び骨髄）を対象に移植する外
科技術の効率の向上についての主な未解決の問題は、レシピエントが備える免疫応答が、
同種移植片又は器官に対して拒絶反応を示すことが多いことである。同種異系細胞又は器
官がホストに移植された場合（すなわち、ドナー及びレシピエント）が、同一種の別の固
体である場合）、ホストの免疫系は、移植組織における異種抗原の免疫応答を備えている
可能性が高く（宿主対移植片病）、移植組織の破壊をもたらす。したがって、本発明の組
成物及び／又は方法は、ある実施形態では、移植された組織又は器官の拒絶反応を防止す
るのに使用され得る。
【０２０４】
他の実施形態では、免疫応答の下方制御が望まれる疾患は、移植片対宿主疾患（ＧＶＨ
Ｄ）である。ＧＶＨＤは、免疫適格細胞が同種異形レシピエントに移植されたときに、致
死的になる可能性のある疾患である。この状況では、ドナーの免疫担当細胞が、レシピエ
ント内の組織を攻撃する。皮膚組織、内臓上皮及び肝臓が標的となることが多く、ＧＶＨ
Ｄの過程中に破壊され得る。この疾患は、免疫組織が移植された場合（例えば脊髄移植の
場合）、問題を特に解決するが、ＧＶＨＤの場合や、心臓及び肝臓移植の場合は、解決し
ないことが報告されている。本発明の前記組成物及び／又は方法は、ある実施形態では、
そのような疾患を予防又は改善するために使用され得る。
【０２０５】
他の実施形態では、下方制御が望まれる免疫応答は、任意の自己免疫応答である。本発
明のこの態様では及びある実施形態では、前記方法は、本明細書中で説明される組成物を
自己免疫応答疾患又は障害を患っている対象に投与するステップを含む。
【０２０６】
ある実施形態では、「自己免疫疾患」という用語は、対象における自己免疫応答の存在
を意味する。ある実施形態では、「自己免疫応答」という用語は、自己抗原に対する抗原
免疫応答を意味する。ある実施形態では、前記自己免疫疾患は、関節リウマチ、多発性硬
化症、糖尿病、重症筋無力症、悪性貧血、アジソン病、紅斑性狼瘡、ライター症候群、ア
トピー性皮膚炎、乾癬、又はグレーブス病である。
【０２０７】
本発明のこの態様では及び一部の実施形態では、本発明の前記組成物は、免疫抑制剤を
さらに含有する。一部の実施形態では、本発明の方法は、免疫抑制剤の同時投与又はその
後の投与を利用し得る。
【０２０８】
ある実施形態では、前記自己免疫疾患又は障害は、好中球の過剰な活性、浸潤、脱顆粒
などと関係がある。ある実施形態では、前記疾患は、皮膚に影響を及ぼす疾患である。こ
の態様では及びある実施形態では、本明細書中で説明される前記グルカン、組成物、結合
体、粒子、ミセルなどは、皮膚に直接的に塗布される。
【０２０９】
ある実施形態では、前記組成物は、ステロイドをさらに含む。一部の実施形態では、そ
のような組成物は、免疫応答の下方制御又は抑制に有用であり、免疫応答の下方制御につ
いて本明細書中に説明された任意の実施形態に応用される。
【０２１０】
ある実施形態では、「ステロイド」という用語は、自然発生的なステロイド及びその誘
導体、並びに、ステロイド様活性を有する合成若しくは準合成されたステロイド類似体を
意味する。ある実施形態では、ステロイドは、グルココルチコイド又はコルチコステロイ
ドである。タンパク質、そのようなステロイドの多くは、シクロペンタノフェナントレン
に基づいた縮環コア構造を有する。特定の天然及び合成ステロイドの例は、これに限定す
るものではないが、アルドステロン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、ブデソニド、クロ
プレドノール、コルチゾン、コルチバゾール、デオキシコルトン、デソニド、デソキシメ
タゾン、デキサメタゾン、ジフルオロコルトロン、フルクロロロン、フルメタゾン、フル
ニソリド、フルオシノロン、フルオシノニド、フルオコルチンブチル、フルオロコルチゾ
ン、フルオロコルトロン、フルオロメトロン、フルランドレノロン、フルチカゾン、ハル
シノニド、ヒドロコルチゾン、イコメタゾン、メプレドニゾン、２５メチルプレドニゾロ
ン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、チキソコルトー又はトリアムシノロ
ン、或いはそれらの薬学的に許容される塩又は誘導体などがある。そのようなステロイド
の組み合わせもまた、本発明に従って使用し得ることを理解されたい。
【０２１１】
一部の実施形態では、そのような組成物は、免疫応答を促進又は増強するのに有用であ
り、免疫応答を促進又は増強するために本明細書中で説明される任意の実施形態において
応用される。ある実施形態では、前記ステロイドは、アンドロゲン又はアンドロゲン受容
体アゴニストである。
【０２１２】
他の実施形態では、前記組成物は、β−１，６−グルカン分岐を有するβ−１，３−グ
ルカン（β１，３／１，６グルカン、又はβ１，６分岐−β１，３グルカンとも呼ばれる
）を含有し、β−１，６−グルカン分岐の少なくともいくつかはＯ−アセチル化基につい
て富化されている。他の実施形態では、本発明は、（ｉ）Ｏ−アセチル化基について富化
されたβ−１，６−グルカン、及び（ｉｉ）β１，６分岐−β１，３グルカンを含有し組
成物を提供する。他の実施形態では、前記組成物は、β−１，３−グルカンを実質的に含
まない。特定の実施形態では、前記組成物は、７５重量％未満、又は５０重量％未満、又
は２５重量％未満、又は１０重量％未満、又は５重量％未満、又は１重量％未満、又は０
重量％未満のβ−１，３−グルカンを含有する。特定の実施形態では、前記組成物内のグ
ルカン全体の０重量％未満、又は２５重量％未満、又は１０重量％未満、又は５重量％未
満、又は１重量％未満、又は０重量％未満が、β−１，３−グルカンである。
【０２１３】
本発明の組成物及び／又は方法による免疫応答の下方制御は、本発明の一部及びその実
施形態と見なされることを理解されたい。
【０２１４】
ある実施形態では、本発明の組成物及び／又は方法は、抑制的作用を仲介する物質の分
泌を促進及び／又は増強する。ある実施形態では、本発明の組成物及び／又は方法は、直
接的な細胞接触を必要とすることなく、バイスタンダー抑制を仲介する。ある実施形態で
は、抑制を仲介する物質は、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、又はそれらの組み合わせを含む、
本発明のＴ抑制細胞集団から分泌される。
【０２１５】
他の実施形態では、免疫応答の調整は、免疫応答に参加する細胞種類、免疫応答中に産
生された細胞生成物、及び／又は前記応答の総合特性の変更を含み、例えば、Ｔｈ１型応
答からＴｈ２型応答への変更又はその逆を含む。ある実施形態では、本発明の組成物及び
／又は方法は、対象に対して「Ｔｈ１」型応答が有効である場合に、「Ｔｈ２」型応答が
発生している疾患において「Ｔｈ１」型応答を誘発する。
【０２１６】
ある実施形態では、「Ｔｈ２型応答」という用語は、ロバストな抗体応答の発生を支援
する適応的免疫応答の一部としてＴヘルパー細胞によって誘発されるサイトカイン発現の
パターンを意味する。典型的なＴｈ２型応答は、例えば、患者における蠕虫感染において
有効である。典型的なＴｈ２型応答は、例えば、インターロイキン４又はインターロイキ
ン１０の産生により認識される。
【０２１７】
他の実施形態では、「Ｔｈ１型応答」という用語は、ロバストな細胞性免疫反応の発生
を支援する適応的免疫応答の一部としてＴヘルパー細胞によって誘発されるサイトカイン
発現のパターンを意味する典型的なＴｈ１型応答は、例えば、患者における細胞内感染に
おいて有効である。典型的なＴｈ１型応答は、例えば、インターロイキン２又はインター
フェロンγの産生により認識される。
【０２１８】
他の実施形態では、本発明の組成物及び／又は方法は、Ｔｈ２型応答がより多くの有益
な結果を対象に与える場合に、Ｔｈ１型応答が発現するように前記応答を調節するのに有
用であり、本発明の組成物及び／又は方法はより有益なサイトカイン特性へのシフトを提
供する。一例は、ハンセン病の場合であり、本発明の組成物及び／又は方法は、Ｔｈ１サ
イトカインシフトを促進し、Ｔｈ２型応答に関連する疾患の重症型がより高い癩腫癩では
なく、結核型らいをもたらす。
【０２１９】
他の実施形態では、本発明は、細胞（例えば抗原提示細胞）内での熱ショックタンパク
質の発現を誘導する方法であって、Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グ
ルカンを含有する組成物を前記細胞（抗原提示細胞）に接触させるステップを含む方法を
提供する。
【０２２０】
他の実施形態では、本発明は、細胞（例えば抗原提示細胞）内での熱ショックタンパク
質の発現を誘導する方法であって、固体支持体に結合したβ−１，６−グルカンを含有す
る組成物を前記細胞に接触させるステップを含む方法を提供する。
【０２２１】
本明細書中に例示されるように、β−１，３−グルカンを含有する組成物ではなく、β
−１，６−グルカンを含有する粒子の貪食は、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）発現の誘
導を促進する。
【０２２２】
ある実施形態では、前記細胞は好中球である。他の実施形態では、前記抗原提示細胞は
、樹枝状細胞又はマクロファージである。
【０２２３】
本発明のこの態様によれば、及びある実施形態では、本発明は、細胞（例えば、抗原提
示細胞や好中球など）内での熱ショックタンパク質の発現を誘導する方法であって、β−
１，６−グルカンを含有し、少なくとも５％の前記グルカン分子における前記グルコース
単位の少なくとも２５％がＯ−アセチル化基について富化されている組成物を、前記細胞
（抗原提示細胞、好中球）に接触させるステップを含む方法を提供する。
【０２２４】
他の実施形態では、本発明は、抗原提示を促進又は増強させる方法であって、β−１，
６−グルカンを含有する組成物を、抗原提示細胞に接触させるステップを含み、前記接触
により抗原提示細胞による抗原提示を促進又は誘導する方法を提供する。
【０２２５】
ある実施形態では、食細胞は、β−ｌ，６−グルカンを取り込むと細胞自然死（アポト
ーシス）を遂げる。本発明のこの態様では及び／又はある実施形態では、本発明は細胞の
アポトーシスを推進又は促進する方法であって、β−ｌ，６−グルカンを含有する組成物
を細胞に接触させるステップを含み、前記組成物が前記細胞内で少なくとも１つの熱ショ
ックタンパク質の発現を誘導し、それにより前記細胞をアポトーシスさせるようにした方
法を提供する。本発明のこの態様では及び／又はある実施形態では、前記細胞は、感染症
又は自己免疫疾患を有する患者に由来し、前記細胞のアポトーシスを促進することにより
、前記対象に治療効果を提供する。
【０２２６】
一部の実施形態では、本発明は、マクロファージ応答性を調節する方法であって、Ｏ−
アセチル化グルカンについて富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物と接触さ
せた好中球を、マクロファージに接触させるステップを含む方法を提供する。
【０２２７】
他の実施形態では、本発明は、対象における免疫応答を調節する方法であって、ターゲ
ティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投
与するステップを含み、前記ターゲティング部分は食細胞と特異的に相互作用する又は食
細胞を引き寄せるようにした方法を提供する。
【０２２８】
ある実施形態では、前記免疫応答の調節は免疫応答の促進を含み、ある実施形態では、
前記免疫応答は抗原特異的応答である。ある実施形態では、前記組成物は、免疫促進化合
物をさらに含む。他の実施形態では、前記組成物は、化学療法化合物をさらに含む。ある
実施形態では、前記免疫応答は、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに
対するものである。他の実施形態では、前記免疫応答は、補体依存性である。
【０２２９】
ある実施形態では、本発明は、対象における感染症を治療する、感染症の進行を遅延さ
せる、又は感染症の発生率若しくは重症度を低減させる方法であって、ターゲティング部
分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステ
ップを含み、前記ターゲティング部分が食細胞と特異的に相互作用する又は食細胞を引き
寄せるようにした方法を提供する。ある実施形態では、前記組成物は、アジュバント、抗
原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療法剤、又はそれらの組み合わせをさらに含む。あ
る実施形態では、前記抗原又はペプチドは、感染源から得られる。ある実施形態では、前
記免疫促進化合物は、サイトカインである。他の実施形態では、前記化学療法化合物は、
抗生物質又は抗ウイルス性化合物である。
【０２３０】
ある実施形態では、本発明は、細胞内の熱ショックタンパク質の発現を促進又は増強す
る方法であって、ターゲティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有す
る組成物を前記細胞に接触させるステップを含み、前記ターゲティング部分が食細胞と特
異的に相互作用する又は食細胞を引き寄せるようにした方法を提供する。
【０２３１】
一部の実施形態では、本発明の方法は、一部の実施形態では好中球に加えて、又は一部
の実施形態では好中球の代わりに、免疫系細胞の様々な細胞（例えば、マクロファージや
樹枝状細胞など）の活性を高める働きをする。
【０２３２】
一部の実施形態では、本発明の方法は、標的化された細胞又は物質に対して細胞傷害性
を促進する一般的な方法としての役割を果し、細胞傷害反応が所望される細胞又は物質を
標的とするリガンドを使用して、一部の実施形態では標的化された細胞又は物質に対して
細胞傷害効果を促進する本発明のグルカンと結合させる。
【０２３３】
一部の実施形態では、本明細書中で説明される前記グルカン、前記グルカン及びターゲ
ティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物、及び前記グル
カンを含有する組成物は、対象の補体仲介性溶解を向上させる働きをし得る。一部の実施
形態では、そのような向上、食細胞応答、例えば好中球又はマクロファージの増大、又は
他のプロフェッショナル抗原提示細胞の貪食及び細胞傷害応答と関係する。一部の実施形
態では、そのような向上は、例えば、膜攻撃複合体形成及び／又は活性により増大する食
細胞との関与とは独立的である。
【０２３４】
一部の実施形態では、本発明は、対象における癌を治療する、癌の進行を遅延させる、
癌の寛容を延長する、又は癌の発生率若しくは重症度を低減させる方法であって、本発明
のグルカン、組成物、結合体、ミセル、製剤又は粒子を前記対象における細胞に接触させ
るステップを含む方法を提供する。
【０２３５】
ある実施形態では、本発明は、免疫細胞（例えば好中球などの先天性免疫応答を有する
細胞）の動員を促進する化合物を含有する組成物及び結合体を包含すると理解されたい。
そのような化合物は、本明細書中では、とりわけ、ターゲティング部分と呼ばれ、前記タ
ーゲティング部分は、免疫細胞活性、免疫応答、所望の標的に対する細胞傷害性を促進し
、一部の実施形態では、例えば前記グルカンと結合した抗体又は断片によって特異的に決
定されることにより、所望の部分を介して特異的に標的化される。
【０２３６】
一部の実施形態では、本発明は、本明細書中で説明される、及び当業者には容易に理解
される、特定の用途に適合する所望の特異性を有する抗体を含有する結合体及び組成物を
含む。一部の実施形態では、本明細書中で説明されるそのような結合体及び組成物／製剤
は、とりわけ、当該技術分野で公知の補体結合性化合物を含有する。一部の実施形態では
、本明細書中で説明されるそのような結合体及び組成物／製剤は、コブラ毒要素以外の補
体結合性化合物を含有する。一部の実施形態では、本明細書中で説明されるそのような結
合体及び組成物／製剤は、デキストラン以外の多糖を含有する。一部の実施形態では、本
明細書中で説明される結合体及び組成物／製剤は、任意のグルカン、とりわけ、アセチル
化されたβ−１，６−グルカン、β−１，６−グルカン、β−１，３−グルカンとβ−１
，６−グルカンとの混合物、β−１，３−グルカン、β−１，３−グルカンとβ−１，４
−グルカンとの混合物、、β−１，４−グルカン、アセチル化されたグルカン及び／又は
その他の修飾を含む任意のグルカンを含み得る。一部の実施形態では、本明細書中で説明
される結合体及び組成物／製剤は、例えば、組換え手法により、細菌、酵母、哺乳類細胞
内に合成されたβ−グルカンなどの遺伝子操作された形態の任意のグルカンを含み得る。
【０２３７】
一部の実施形態では、本明細書中で説明される結合体及び組成物／製剤は、カンジダ・
アルビカンス及び他の真菌感染に対する免疫を対象に付与するのために適用される。
【０２３８】
上述した任意の実施形態では、前記接触は、対象における体外又は体内のどちらでも行
うことができる。ある実施形態では、細胞（例えば、抗原提示細胞）、一部の実施形態で
は好中球、マクロファージ、又は樹枝状細胞が対象から取り出され、前記組成物と接触さ
せられ、その後、対象に投与される。ある実施形態では、前記細胞は前記組成物と、熱シ
ョックタンパク質の発現を誘導するのに十分な時間で接触させられる。ある実施形態では
、前記細胞は前記組成物と、活性酸素種の生成を誘導するのに十分な時間で接触させられ
る。ある実施形態では、前記対象は、前記細胞の投与前に、免疫抑制療法を受ける。例え
ば、対象が、臓器移植又は他の目的（例えば、癌、白血病、リンパ腫若しくは様々な種類
の腫瘍に対する化学療法若しくは放射線治療）のために免疫抑制療法を必要とする場合が
あるが、そのような治療は個体の免疫障害を生じさせる傾向がある。本発明のある実施形
態では、免疫抑制療法を施す前に、前記対象から免疫系細胞が取り出される。前記細胞（
一部の実施形態では好中球、他の実施形態では例えばプロフェッショナル抗原提示細胞、
マクロファージ又は樹枝状細胞などの他の免疫系細胞）は、体外で本発明の組成物と接触
させられ、その後、前記対象が免疫抑制療法を受けた後の適切な時期に前記対象の体内に
戻される。前記適切な時期は、例えば前記治療が施された又は前記治療の細胞傷害効果が
減少した後における、前記対象が感染症の症状又は兆候を示す危険性があるときであり得
る。
【０２３９】
本発明の方法及び／又は組成物により免疫応答に影響を与える又は免疫応答を調節する
ことによる疾患の予防及び／又は疾患の改善及び／又は疾患の進行遅延は、本発明の一部
と見なされることを理解されたい。
【０２４０】
一部の実施形態では、「接触」又は「投与」なる用語は両方とも、示された物質に対し
て直接的及び間接的に曝すことを指す。
【０２４１】
一部の実施形態では、本発明の組成物及び／又は方法は、細胞、組織又は有機体へ投与
するための殺菌されていない又は殺菌された担体（例えば、個体への投与に適した医薬担
体）を含む又は使用する。そのような担体としては、これに限定するものではないが、例
えば、生理食塩水、緩衝食塩水、デキストロース、水、グリセロール、及びそれらの組み
合わせなどがある。前記製剤は、投与形態に適したものを使用すべきである。
【０２４２】
本発明の組成物又はグルカンは、例えば血管内、筋肉内、鼻腔内、皮下、口内、直腸内
、膣内に、任意の効果的で便利な方法により、或いは、グルカン／組成物を組織に送達で
きる他の方法（例えばニードル又はカテーテル）により投与される。また、上皮に挿入す
る場合は、局所投与が望ましい。他の投与方法としては、吸引やエアロゾル製剤を用いた
方法がある。ある実施形態では、前記グルカンは、（例えば被覆層の成分として）前記グ
ルカンを含むインプラント又は他の医療用若しくは外科用器具を対象の体内へ埋め込む又
は導入することにより投与される。
【０２４３】
ある実施形態では、本発明は、Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グル
カンを含有する食品サプリメントを提供する。ある実施形態では、本発明は、Ｏ−アセチ
ル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有する食品製品を提供する。他の実
施形態では、本発明は、Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含
有する化粧品組成物を提供する。
【０２４４】
一部の実施形態では、食品又は食品製品は、実質的に毒性がなく、有機体により代謝さ
れてエネルギーを与える及び組織を作成する任意の物質である。一部の実施形態では、食
品又は食品製品は、動物（例えばヒト）に摂取されるための栄養価値を有する製品を意味
する。一部の実施形態では、食品又は食品製品は、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により食
品又は食品製品として規定された製品を意味する。一部の実施形態では、食品又は食品製
品は、その製品が食品又は食品製品であることを示す標識を有する容器にパッケージ化さ
れた製品である。一部の実施形態では、食品又は食品製品は、その製品に関する栄養情報
（例えば、カロリー、脂肪、タンパク質の量、又は１つ以上のビタミン又はミネラルの他
の成分）が記された標識を有する容器にパッケージ化された製品である。一部の実施形態
では、食品サプリメント（「栄養補助食品」とも呼ばれる）は、食品又は食品製品に添加
される任意の物質である。一部の実施形態では、食品サプリメントは、本発明のグルカン
に加えて、１つ以上の必須栄養素（例えば、ビタミン、ミネラル及びタンパク質）を含む
。一部の実施形態では、食品サプリメントは、食事に対する栄養補助食品としての摂取を
目的とした任意の製品であり、本発明のグルカンに加えて、１つ以上のビタミン、ミネラ
ル、ハーブ、直物及び他の植物由来物質；アミノ酸；及びそれらの物質の濃縮物、代謝生
成物、構成物質及び抽出物を含み得る。一部の実施形態では、前記食品、食品製品、食品
サプリメント、又は化粧品組成物は、疾患を診断、治癒、緩和、治療又は予防することを
意図していない。一部の実施形態では、前記食品サプリメントは、例えば米国の現行の法
律及び／又はＦＤＡのガイドラインに従ってその内容物が食品又は栄養補助食品であるこ
とが標示された容器又は他の包装材料内に収容される。一部の実施形態では、前記食品サ
プリメント又は食品製品は、前記グルカンを約０．０１〜３０ｗ／ｗ％含み、ビタミン、
オリゴ糖、栄養成分、タンパク質、又はそれらの組み合わせをさらに含み得る。
【０２４５】
一部の実施形態では、前記成分の割合は、一定ではない。他の実施形態では、前記割合
は、１００ｗ／ｗ％あたり、約０．０１〜３０ｗ／ｗ％の範囲であり得る。本発明の前記
グルカンを含む食品の例は、様々な食品、飲料、ガム、複合ビタミン剤、健康増進食品な
どがある。
【０２４６】
前記成分は、１つ以上の有機酸（例えば、クエン酸、フマル酸、アジピン酸、乳酸、リ
ンゴ酸）、リン酸塩（例えば、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、酸性ピロリン酸、ポ
リリン酸塩）、天然の抗酸化剤（例えば、ポリフェノール、カテキン、アルファ・トコフ
ェロール、ローズマリー抽出物、ビタミンＣ、甘草抽出物、キトサン、タンニン酸、フィ
チン酸など）をさらに含み得る。
【０２４７】
一部の実施形態では、化粧用又はパーソナルケア組成物は、身体の少なくとも一部（例
えば、髪、爪、皮膚など）の外見を向上又は改善する組成物である。ある実施形態では、
前記組成物は、身体を美しくする。ある実施形態では、前記組成物は、外見をより若々し
くする。ある実施形態では、身体の少なくとも一部（例えば、髪、爪、皮膚など）の外見
を向上又は改善する目的で又は外見をより若々しくする目的で、対象に塗布又は送達され
た任意の組成物は、化粧品と見なされる。一部の実施形態では、本発明の前記化粧用又は
パーソナルケア組成物は、皮膚軟化剤、保湿剤、無痛化薬、紫外線Ａ及びＢ遮断剤、レチ
ノイド、着色剤、又は芳香剤を含み得る。一部の実施形態では、前記化粧用又はパーソナ
ルケア組成物は、本発明のグルカンに加えて、当該技術分野において外見に有益な効果を
提供するのに有用と認められる任意の他の成分をさらに含む。一部の実施形態では、前記
化粧用又はパーソナルケア組成物は、化粧用としての使用目的がラベル表示された、及び
／又は外見用としてのみの使用目的がラベル表示された容器に収容される。
【０２４８】
一部の実施形態では、前記化粧用又はパーソナルケア組成物は、活性成分を例えば０．
０００１〜５０％ｗ／ｗ（例えば０．０７５〜２０％ｗ／ｗ（０．６％ｗ／ｗ、０．７％
ｗ／ｗ…というように０．１％ｗ／ｗ単位で、活性成分を、０．１〜２０％、多くの場合
は０．２〜１５％、最も多くの場合は０．５〜１０％の範囲で含む））の量で含有する局
所的な軟膏、ローション、ゲル又はクリームとして製剤化される。一部の実施形態では、
軟膏に製剤化される場合、前記活性成分は、パラフィン系軟膏基剤又は水混和性の軟膏基
剤と共に使用される。一部の実施形態では、前記活性成分は、水中油型クリーム基剤と共
にクリームに製剤化される。
【０２４９】
一部の実施形態では、前記クリーム基剤の水相は、例えば、少なくとも３０ｗ／ｗ％の
多価アルコールを含み得る。多価アルコールは、２つ以上の水酸基を有するアルコールで
あり、多価アルコールとしては、例えば、プロピレン・グリコール、ブタン１，３−ジオ
ール、マンニトール、ソルビトール、グリセロール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ４
００を含む）、及びそれらの組み合わせなどがある。一部の実施形態では、局所製剤は、
前記活性成分の皮膚又は他の患部への吸収又は浸透を向上させる化合物を含み得る。その
ような皮膚透過促進剤の例としては、ジメチルスルホキシド及び関連類似体がある。
【０２５０】
一部の実施形態では、本発明の組成物は、利尿剤及び／又は乳化安定剤を使用し得、そ
のようなものとしては、例えば、トゥイーン６０（Tween 60）（登録商標）、スパン８０
（Span 80）（登録商標）、セトステアリルアルコール、ベンジルアルコール、ミリスチ
ルアルコール、モノステアリン酸グリセリン、及び／又はラウリル硫酸ナトリウムなどが
ある。
【０２５１】
一部の実施形態では、製剤のための油又は脂肪の適切な選択は、所望の化粧品性質に基
づいて行われる。クリームは、一般的に、ベタベタしない、着色しない、水で洗い流せる
製品であり、チューブ又は他の容器からの漏出を避けるために適切な固体性（consistenc
y）を有する。ジイソアジピン酸エステル、ステアリン酸イソセチル、ココナッツ脂肪酸
のプロピレングリコールジエステル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、パ
ルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸２−エチルヘキシル又はク
ロダモル（Crodamol）CAPと称される分岐エステルの混合物などの直鎖又は分岐鎖の一塩
基又は二塩基のアルキルエステルを用いることができる。これらは、必要とされる性質に
応じて、単独でまたは組み合わせて用いることができる。一部の実施形態では、白色軟パ
ラフィン及び／又は液体パラフィン又はその他の鉱油などの高融点脂質を用いることがで
きる。
【０２５２】
一部の実施形態では、前記組成物は、点眼薬として用いるために製剤化される。前記活
性成分は、適切な賦形剤（例えば、少なくとも１つ以上のｐＨ値が中性に近い（例えば約
ｐＨ６〜８）電荷を含む水性媒体）内に溶解または懸濁される。一部の実施形態では、前
記活性成分は前記組成物内に、約０．５〜２０％ｗ／ｗ、典型的には約１〜１０％ｗ／ｗ
、多くの場合は約２〜５％ｗ／ｗの濃度で存在する。
【０２５３】
一部の実施形態では、本発明の組成物は、口への局所投与用に製剤化される。そのよう
なものとしては、例えばショ糖及びアカシア若しくはトラガカントなどの風味付けされた
基剤中に活性化合物を含むトローチ剤；例えばゼラチン及びグリセリン、又はショ糖及び
アカシアなどの不活性基剤中に活性化合物を含む芳香錠；又は適切な液体賦形剤中に活性
化合物を含む洗口剤、或いは、当業者には理解されるであろうその他のものがある。
【０２５４】
直腸投与用の製剤は、例えばカカオバター又はサリチル酸塩などを含む適切な基剤を有
する坐剤として提供することができる。
【０２５５】
肺内又は経鼻投与に適した製剤は、例えば、０．０１〜５００ミクロン範囲の粒径（平
均粒径が、０．０１〜５００ミクロンであり、１ミクロン又はその他（例えば０．０５、
０．１、０．５、１、１．５、２．０、２．５、３．０、３．５、４．０、４．５、５．
０、６、７、８、９、１０、２０、２５、３０、３５、５０、７５、１００など）で増加
する）を有し、鼻道を通っての急速な吸入によって、又は肺胞嚢に届くような口を通って
の吸入によって投与される。適切な微粉化製剤は、前記活性成分の水性又は油性溶液又は
懸濁液がある。エアロゾル、乾燥粉末又はタブレットでの投与に適した製剤は、従来の方
法に従って作成され、他の治療物質（例えば、本明細書中で説明される、ウイルス又は他
の感染症の治療又は予防に従来使用されている化合物など）と共に送達される。そのよう
な組成物は、例えば、経口、非経口（血管内、筋肉内、皮下）、局所的、又は口腔経路で
投与される。本発明のこの態様によれば及びある実施形態では、前記組成物に含有される
β−ｌ，６−グルカンは、本明細書中で説明されるようにＯ−アセチル化グルカンとなる
ように富化される、本明細書中で説明されるように粒子又はビーズと結合する、又はその
両方が行われる。
【０２５６】
膣内投与に好適な製剤は、前記活性成分に加えて、当該技術分野で適切であることが知
られている賦形剤などを含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡又は
スプレー製剤噴霧剤製剤として提供することができる。
【０２５７】
非経口投与に好適な製剤としては、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤、及び製剤を所定のレ
シピエントの血液と等張にする溶質を含み得る水性及び非水性の無菌注射液；並びに懸濁
剤及び増粘剤を含み得る水性及び非水性の無菌注射液がある。
【０２５８】
前記製剤は、例えばアンプル及びバイアルなどの単位用量若しくは多用量密封容器に入
れて提供することができ、使用直前に例えば注射用水などの無菌液体賦形剤を加えるだけ
でよい冷凍乾燥（凍結乾燥）条件で保存することができる。即席の注射溶液及び懸濁液は
、無菌の粉剤、粒剤及び錠剤から調製することができる。単位用量製剤は、活性成分の、
本明細書中で説明されるような、一日量又は単位、分割日量（daily sub-dose）、又は適
切な画分を含有するものである。
【０２５９】
ある実施形態では、本発明の前記β−グルカンは、本明細書中で説明されるいずれの形
態でも、対象における体重に対して０．１〜約５０ｍｇ／ｋｇの用量で対象に投与される
。ある実施形態では、本発明の前記β−グルカンは、当業者には理解されるように、任意
に投薬計画に従って、様々な一日当たりの投与回数、投与間隔（これらは、対象における
治療過程の一部として調整される）によって投与される。
【０２６０】
上記した具体的な成分に加えて、本発明の組成物は、当該技術分野で一般的な他の物質
又は賦形剤を含むことができる。前記賦形剤等は組成物の種類を考慮して選択され、例え
ば、経口投与に適したものとしては、香味剤が含まれ得る。
【０２６１】
本発明の精神及び範囲を逸脱することなく、本発明の組成物、使用及び製剤の様々な改
変及び変更が可能であることを、当業者であれば理解できるであろう。
【０２６２】
哺乳類、特にヒトに投与する際は、医療の場合は、医師又は資格のある医療提供者が、
治療対象の年齢、体重及び応答に応じて、治療対象に最も適切だと考えられる投与量及び
治療期間を決定することが期待される。
処方箋が不要な（例えば市販）の薬剤、食品、食品製品、食品サプリメント、化粧品、パ
ーソナルケア組成物の場合は、随意的にラベルの使用ガイダンスを参考にして又は適切な
医療提供者又は他のアドバイザーからの助言に従って、前記量はユーザーが自由に決める
ことができる。
【０２６３】
例
【０２６４】
材料及び方法
【０２６５】
食細胞
【０２６６】
ＭＩＴ（マサチューセッツ工科大学）のＣＯＵＨＥＳ（Committee on Use of Humans a
s ExperimentalSubjects）に承認されたプロトコルに準拠して健康な献血者から採取し
たヒトの新鮮血から好中球及び単球を文献に記載されている如く単離した（Rubin-Bejera
no, L, el ai,Proc Natl Acad Sci U S A, 2003. 100(19): p. 1 1007-12）。
【０２６７】
カンジダの調製
【０２６８】
カンジダ菌株は、よく使われる実験用菌株ＣＡＦ２−１（Ｃａ）であった。文献に記載
されている如く（Sherman，上記参照）、標準培地（ＹＰＤ）上でカンジダを成長させた
。全ての実験において、一晩培養した培養物を用いた（約３×１０８細胞／ｍｌ）。その
理由は、カンジダ・アルビカンス集団は中対数期よりも同質（＞９９％の酵母型細胞を含
む）であることが分かったからである。
【０２６９】
好中球がどのように真菌を認識するかを検査するために、かつ培地又は好中球による真
菌の何らかの変更或いは真菌による好中球の処置を回避するために、細胞を殺すが真菌細
胞壁構造を変えないようなＵＶによって真菌を不活性化した（Wheeler, R.T. and G.R. F
ink, PloS Pathog,2006. 2(4): p. e35）。
【０２７０】
カンジダのオプソニン化
【０２７１】
１０人の健康な献血者から新鮮なヒト血清のプールを生成し、全ての実験に用いた。ダ
ルベッコリン酸緩衝塩（塩化カルシウム不含、塩化マグネシウム不含）（ギブコ社製）で
希釈した５０％血清中で３７℃で１５分間撹拌機上で真菌細胞を予めオプソニン化した。
その後、細胞を氷上で５分間インキュベートし、同じ緩衝液で希釈した０．０４ｍｇ／ｍ
ｌのプロテアーゼ阻害剤ＡＥＢＳＦ（シグマ社製）で２回洗浄し、その後、ＡＥＢＳＦな
しの同じ緩衝液で２回洗浄した。真菌細胞を数え直した。
【０２７２】
カンジダとの食細胞のコインキュベーション
【０２７３】
好中球又は単球をカンジダ・アルビカンス細胞と１：５（食細胞：標的）の比で混合し
た。食細胞を、オプソニン化した真菌と共に、又は単独で、３７℃で２時間、ＲＰＭＩ１
６４０中で培養し、−８０℃でＴＲＩ試薬（ＭＲＣ）中で凍結させた。
【０２７４】
マイクロアレイ手順
【０２７５】
ＲＮＡを沈殿させるために４℃で一晩イソプロパノールとプレインキュベートしたこと
を除いてＴＲＩ試薬プロトコルに従って全ＲＮＡを調製した。第１及び第２鎖合成、イン
ビトロ転写、ハイブリダイゼーション及びスキャニングを上記の如く行った（Rubin-Beje
rano, I., etal, Proc Natl Acad Sci U S A, 2003. 100(19): p. 11007-12）。マイク
ロアレイは、ジーンチップ・ヒトゲノムＵ１３３Ａ ２．０アッセイ（GeneChip Human Ge
nome U133A 2.0array）（アフィメトリクス社製）であった。
【０２７６】
マイクロアレイ分析
【０２７７】
データ集合を正規化して２０に切り下げた。カンジダで培養した好中球からの発現を好
中球単独対照からの発現で除した比を計算した。誘導された遺伝子及び抑制された遺伝子
を、所与の実験に対する平均±２σ（標準偏差）より大きな発現比を有する遺伝子として
定義した。２つの実験用デュプリケートにおいて一貫して誘導又は抑制された遺伝子のみ
を、誘導又は抑制された遺伝子と考えた。
【０２７８】
カンジダを取り込む好中球のリアルタイムＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）
【０２７９】
ＲＮＡを沈殿させるために４℃で一晩イソプロパノールとプレインキュベートしたこと
を除いてＴＲＩ試薬プロトコルに従って全ＲＮＡを調製した。大容量ｃＤＮＡアーカイブ
キット（HighCapacity cDNA Archive Kit）（アプライドバイオシステムズ社製）を用い
てｃＤＮＡを作成した。タックマン（登録商標）遺伝子発現アッセイ（Gene Expression 
Assay）（アプライドバイオシステムズ社製）及び７５００リアルタイムＰＣＲシステム
（アプライドバイオシステムズ社製）を用いて製造業者のプロトコルに従い定量ＲＴ−Ｐ
ＣＲを行った。次のタックマン（登録商標）遺伝子発現アッセイを用いた：ＡＣＴＢ（Ｈ
ｓ９９９９９９０３_ｍ１）、ＤＮＡＪＢ１（Ｈｓ００４２８６８０_ｍ１）、ＨＳＰＣＢ
（Ｈｓ００６０７３３６_ｇＨ）、ＨＳＰＨ１（Ｈｓ００１９８３７９_ｍ１）、ＣＸＣＬ
２（Ｈｓ００２３６９６６_ｍ１）及びＣＣＬ３（Ｈｓ００２３４１４２_ｍ１）。或る実
験条件において培養した食細胞からの発現を食細胞単独対照からの発現で除した比として
発光量比（Foldinduction）を計算した。
【０２８０】
炭水化物
【０２８１】
ラミナリン（シグマ社製）は純粋なβ−１，３−グルカン試料であり、プスツラン（カ
ルビオケム社製）は純粋なβ−１，６−グルカン試料である。デキストラン（フルカ社製
）はβ−１，６−グルカンである。オオムギ（シグマ社製）由来のグルカンは、β−１，
３−グルカン（３０％）及びβ−１，４−グルカン（７０％）からなる。文献に記載され
ている如くプスツランを処理した（Lindberg, B. and J. McPherson, Acta Chem. Scand.
, 1954. 8: p.985-988.）。適応があれば、エンド−β−１，６−グルカナーゼを用いて
プスツランを特異的に消化した（Lora, J. M., De Ia Cruz, J., Llobell, A., Benitez,
T. andPintor-Toro, J. A. MoI Gen Genet. 1995. 247: p. 639-45.）。酵素は、ニッ
ク・ゼケルル（NickZecherle）博士（バイオマリン・ファーマシューティカル社）の好
意により譲り受けた。反応生成物をゲルろ過クロマトグラフィー及び薄層クロマトグラフ
ィーによって分析した。
【０２８２】
ゲルろ過クロマトグラフィー
【０２８３】
ＢｉｏＧｅｌ Ｐ６カラム（１．５×１２０ｃｍ，バイオ・ラッド社製，２００〜４０
０メッシュ）にプスツラン（２０ｍｇ）を添加した。カラムを０．１Ｍ酢酸で平衡化し、
１５ｍｌ／ｈの一定流速で送液し、１．５ｍｌの分画を回収し、フェノール硫酸法により
炭水化物を測定した。酢酸を完全除去するためにピークを含む分画を２回乾燥させ、１０
〜２０ｍｇ／ｍｌで水中で懸濁した。チトクロームＣを排除体積のマーカーとして用い、
グルコースを含有体積（inclusion volume）のマーカーとして用いた。
【０２８４】
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）
【０２８５】
２０ｃｍ長のシリカゲル６０プレート（メルク社製，０．２５ｍｍ）上にサンプル（５
μｌ）を２度展開した。溶媒系は、ｎ−ブタノール／エタノール／水（５：３：２）であ
った。フェノール−硫酸を吹き付けた後でプレートを８０℃で加熱することによってサン
プル及び標準物質を視覚化した。プスツランの部分的酸加水分解物から標準ゲンチオオリ
ゴ糖を調製し、文献に記載されている如くＢｉｏＧｅｌ Ｐ４クロマトグラフィーによっ
て単離した（Magnelli,P., Cipollo, J. F., and Abeijon, C. (2002). Anal Biochem 3
01, 136-150.）。
【０２８６】
プスツランのＯ−脱アセチル化
【０２８７】
プスツラン（３ｍｌ，１５ｍｇ／ｍｌ）を０．１ＭのＮａＯＨに調整し、３７℃で１時
間インキュベートし、水に対して透析した。
【０２８８】
グルカンでコーティングされたミクロスフェアの調製
【０２８９】
ポリビーズ（Polybead）ポリスチレンの６．０ミクロンのミクロスフェア（ポリサイエ
ンス社製）を文献に記載されている如く多糖でコーティングした（Schlesinger, L.S., S
.R. Hull, andT.M. Kaufman, J Immunol, 1994. 152(8): p. 4070-9）。プスツランは室
温で凝固する傾向にある。
【０２９０】
プスツランを熱湯中で可溶化し、ビーズに塗布する前に室温まで冷ました。フェノール
硫酸法によってミクロスフェアコーティングを検出し、炭水化物を測定した（Duboius, M
., et al, Anal.Biochem., 1956. 28: p. 350-356）。特に明記しない限り、分析には１
ｍｌ当たり６〜１５μｇグルコースを有するビーズ（２×１０８個のビーズ）のみを採り
入れた（表１を参照）。短い多糖は、この方法によってビーズを効率的にコーティングし
ないことが分かった。さらに、この方法によって、アセチル化グルカンはアセチル化され
ていないグルカンよりも良好にビーズをコーティングした。アセチル化されていないとき
には、同じレベルのコーティングを達成するためにより多くのグルカンをビーズに添加し
た。
【０２９１】
ビーズのオプソニン化
【０２９２】
カンジダに関して上記した如くビーズをオプソニン化した。
【０２９３】
ビーズとの好中球のコインキュベーション
【０２９４】
カンジダに関して上記した如くビーズを好中球とコインキュベートした。
【０２９５】
ビーズを取り込む好中球のリアルタイムＰＣＲ
【０２９６】
カンジダに関して上記した如くＲＴ−ＰＣＲを行った。未処理ビーズで培養した好中球
に対する炭水化物でコーティングされたビーズで培養した好中球からの発現の比として発
光量比を計算した。
【０２９７】
活性酸素種（ＲＯＳ）生成アッセイ
【０２９８】
【表１】
2014129366.tif 000003
【０２９９】
酸化されると蛍光性になるＤＨＲ１２３（モレキュラープローブス社製）を用いて、Ｒ
ＯＳの生成をアッセイした。５×１０６個の好中球を、１ｍｌの体積中に１：５の比で、
示したビーズと共に３７℃で１時間培養した。１μｌのＤＨＲ１２３（Ｄ−２３８０６）
を２００μｌの培養液に添加した。室温で３０分間培養した後、細胞を蛍光励起細胞分取
（ＦＡＣＳ）によってアッセイした。
【０３００】
血清タンパク質結合性β−１，６−グルカンの同定
【０３０１】
ビーズを等量のβ−１，３−グルカン及びβ−１，６−グルカンでコーティングし、上
記した如くオプソニン化した。ビーズを２％ＳＤＳ １Ｍ水酸化アンモニウム緩衝液中で
懸濁し、３７℃で１時間インキュベートした。上清を４〜２０％アクリルアミドＳＤＳゲ
ル上に置いた。このゲルを銀色の染色剤で染色し、質量分析による分析のためにバンドを
切り取った。
【０３０２】
Ｃ３のウエスタン分析
【０３０３】
Ｃ３のウエスタン分析。Ｃ３ｂのα鎖又はβ鎖に対するモノクローナル抗体（ＲＤＩリ
サーチ・ダイアグノスティックス社製）を用いてＣ３沈着をアッセイした。
【０３０４】
死滅アッセイ（Killingassay）
【０３０５】
前述のようにＸＴＴを用いてカンジダ・アルビカンスの生存度を判定した（Meshulam, 
T., Levitz, S.M., Christin, L., and Diamond, R. D. (1995). J Infect Dis 172, 11
53-1156）。
【０３０６】
プレインキュベーション実験
【０３０７】
血清を等量の可溶性ラミナリン又はプスツランで３７℃で５分間プレインキュベートし
た。その後、血清を用いて、プスツランでコーティングされたビーズを上記した如くオプ
ソニン化した。
【０３０８】
ＣＲ３阻止Ａｂ
【０３０９】
オプソニン化されたプスツランでコーティングされたビーズを添加する前に、好中球を
抗ヒトＭａｃ−１又はアイソタイプ対照ＩｇＧ（ベンダーメッドシステムズ社（Bender M
ed Systems）製）で氷上で３０分間プレインキュベートした。
【０３１０】
例１
【０３１１】
β−１，６−グルカンは好中球を刺激する
【０３１２】
カンジダ菌株ＣＡＦ２−１を用いて真菌に対する好中球の反応を分析した。マイクロア
レイ実験は、カンジダを貪食する好中球が、ＩＬ−８受容体リガンドＣＸＣＬ２及びＣＣ
Ｌ３などのサイトカイン及びケモカインと共に、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）（１０
ｋＤａのＨＳＰＥ１、４０ｋＤａのＤＮＡＪＢ１ ＤＮＡＪＢ９、７０ｋＤａのＨＳＰＡ
１Ａ及びＨＳＰＡ９Ｂ、９０ｋＤａのＨＳＰＣＡ及びＨＳＰＣＢ、１０５／１１０ｋＤａ
のＨＳＰＨ１）（表２）を発現することを示した。
【０３１３】
【表２】
2014129366.tif 000004
【０３１４】
好中球によるＨＳＰの発現を定量ＲＴ−ＰＣＲによって実証した（図１Ａ）。
【０３１５】
カンジダを最初に加熱してその下にあるβグルカンをアンマスキングしたら、ＨＳＰの
誘導がより多かった（図１Ｂ）が、このことは、ＨＳＰの発現が露出βグルカンに比例す
ることを示唆している。
【０３１６】
この誘導に関与したのはどのグルカン成分であったかをアッセイするために、好中球に
様々なグルカン高分子を提供した。可溶型のグルカンは、好中球において低レベルのＨＳ
Ｐのみを誘発した（図１Ｅ）。
【０３１７】
好中球は粒子材料に最もよく反応するので、幾つかのβグルカン源を６ミクロンのポリ
スチレンビーズに接合した。６ミクロンのポリスチレンビーズは、カンジダ・アルビカン
ス酵母型細胞（５μ）と大きさが似ている。過去の研究においてスタンダードとして用い
られてきたβ−１，３−グルカン及びβ−１，６−グルカンの非真菌性源（図１Ｄ）（Br
own, G. D. etal. Nature 413, 36-7; Palma, A. S. et al. J Biol Chem 281, 5771-9
）のみならず、カンジダ細胞壁から精製したβ−１，３−グルカン及びβ−１，６−グル
カンも用いた。
【０３１８】
カンジダ・アルビカンス由来のプスツラン即ちβ−１，６−グルカンでコーティングさ
れたビーズは、好中球において高レベルのＨＳＰを誘発した（図１Ｃ、図１Ｄ）のに対し
て、カンジダ・アルビカンス由来のラミナリン即ちβ−１，３−グルカンでコーティング
されたビーズは、ビーズの効率的なコーティングにもかかわらず、ＨＳＰの最小発現を誘
発した（図１Ｃ、図１Ｄ）。β−１，３−グルカン（３０％）及びβ−１，４−グルカン
（７０％）から成るオオムギ由来のβグルカンも、ＨＳＰ発現を誘発しなかった（図１Ｅ
）。α−１，６−グルカン（デキストラン）でコーティングされたビーズはいかなる反応
も誘発しなかったが（図１Ｅ）、このことは、好中球の反応がβ構造に特異的であること
を示唆している。プスツランでコーティングされたビーズは、加熱不活性化した（ＨＩ）
血清でオプソニン化されたとき、ＨＳＰを誘発しなかったので、ＨＳＰの誘発には非耐熱
性血清成分が必要であった（図１Ｄ）。アセチル化されたβ−１，６−グルカンは、アセ
チル化されていないβ−１，６−グルカンより高レベルのＨＳＰを誘発した（図１Ｄを図
１Ｃと、及び図２Ｆと比較）。β−１，６−グルカンは、β−１，３−グルカンより大き
な刺激能を有していた（図１Ｃ、図１Ｄ）。
【０３１９】
例２
【０３２０】
プスツランによるＨＳＰの誘発は、β−１，６−グルカン及びＯ−アセチル化されたβ
−１，６−グルカンに起因する。
【０３２１】
プスツランによる誘発がβ−１，６−グルカンに起因することを確認するために、プス
ツランをβ−１，６−グルカン結合に特異的なエンドグルカナーゼで消化した（Lora, J.
M. et al.MoI Gen Genet 247, 639-45）。
【０３２２】
消化産物は、ＨＳＰの誘発を〜８０％低減した（図２Ａ）。Ｐ６サイズのカラムによる
プスツランの消化産物の分析（「方法」を参照）は、ＴＬＣによって判定されるような二
糖及び三糖（Ｇ２〜Ｇ３，レーン２を３と比較している，図２Ｄ）から成る小さな産物の
大きなピークを明らかにした（図２はＢをＣと比較している）。Ｇ２〜Ｇ３分画中のこれ
らの短い高分子は、ビーズを効率的にコーティングしなかった。
【０３２３】
プスツランの大部分を構成するβ−１，６−グルカナーゼによる予期された消化産物に
加えて、出発物質の４〜５％に相当するような酵素に耐性を示す小さなピーク（図２Ｃ，
Ｖｏと表す）があった。このピークにある物質は、抗グルカン抗体によって認識され、好
中球におけるＨＳＰの発現を誘発した。酵素消化に耐性を示す小さなピークが変更された
形（例えばアセチル化された形）の高分子であったか否かを判定するために、産物を脱ア
セチル化した。
【０３２４】
分別前のプスツランの脱アセチル化は、この微量成分を実質的に消滅させ（図２Ｅ）、
この残渣がＨＳＰを誘発できないようにした（図２Ｆ）。これらの実験は、プスツランが
、少量のＯ−アセチル化または別の方法でＯ−修飾したβ−１，６−グルカンを含むβ−
１，６−グルコースの重合体であることを示している。エンド−β−１，６−グルカナー
ゼで消化したプスツランによるＨＳＰの残りの誘導は、酵素に耐性を示しかつビーズを効
率的にコーティングしたＯ−アセチル化プスツランに起因すると考えられ得る。
【０３２５】
例３
【０３２６】
β−１，６−グルカンは好中球による効率的な食作用（貧食）及び活性酸素種の生成を
媒介する
【０３２７】
ポリビーズポリスチレンミクロスフェア（ｂｅａｄｓ）をβグルカンでコーティングし
、その後オプソニン化した。ラミナリン（図３Ａ，ａ及びｂ）又はプスツラン（図３Ａ，
ｃ及びｄ）でコーティングされたビーズの食作用（貧食）を経時的顕微鏡検査法により評
価した。
【０３２８】
ラミナリンは、コーティングされていないビーズよりもインターナリゼーションをより
良好に促進するのであるが、好中球を取り込むビーズの蛍光励起細胞分取（ＦＡＣＳ）分
析は、プスツランでコーティングされたビーズはラミナリンでコーティングされたビーズ
より効率的に内部に取り入れられる（インターナライズされる）ことを明らかにした（図
３Ｂ，パネルｅとｃ及びａをそれぞれ比較している）。
【０３２９】
好中球による病原体の死滅は、活性酸素種（ＲＯＳ）のバースト次第なので（Babior, 
B. M. et al. JClin Invest 52, 741-4）、２つのグルカンのいずれか一方によるＲＯＳ
誘導を評価した。好中球単独において、或いは処理しなかったビーズを提供された好中球
においては、ＲＯＳを検出することができなかった（図３Ｃ，それぞれ赤色及び緑色）。
ラミナリン、カンジダ・アルビカンス由来のβ−１，３−グルカン、またはオオムギ由来
のβグルカンでコーティングされたビーズにより、低レベルのＲＯＳが検出された（図３
Ｃ，それぞれ青色、褐色、紫色）。しかし、プスツランでコーティングされたビーズは、
かなりの量のＲＯＳの生成を促進した（図３Ｃ，淡青色）。可溶性プスツランを加えても
ＲＯＳは検出されなかった（図３Ｃ，ピンク色）。これらのデータは、β−１，６−グル
カンがＲＯＳの大量生産を引き起こすのに対して、β−１，３−グルカンに対する反応は
β−１，６−グルカンに比べてずっと低いことを示している。
【０３３０】
同様に、図１０では、β−１，６−グルカナーゼで消化されたサンプルが低い有効性を
示しており、β−１，６−グルカンは、カンジダ・アルビカンスの効率的な食作用（貧食
）、ＲＯＳの生成及びＨＳＰの発現に必要であることが示されている。
【０３３１】
例４
【０３３２】
β−１，６−グルカンでコーティングされたビーズ上の相補体沈着
【０３３３】
β−１，６−グルカンでコーティングされたビーズによる食作用（貧食）及びＨＳＰの
誘導には血清が必要なので（図１Ｄ）、β−１，６−グルカン又はβ−１，３−グルカン
でコーティングされたビーズ上に差次的に沈着される血清成分があったか否かを判定する
ことは重要であった。ビーズをラミナリン又はプスツランでコーティングし、オプソニン
化した。結合タンパク質をビーズから除去し、ＳＤＳゲル電気泳動によって分離した。複
数の血清タンパク質がβ−１，３−グルカン又はβ−１，６−グルカンの両方に結合した
が、β−１，６−グルカンにより強く付着する２つの顕著なタンパク質があった（図４Ａ
）。これらのタンパク質をゲルから抽出し、質量分析によって分析した。これらのバンド
からのペプチドは、両タンパク質をＣ３と見なす質量を与えた。このことは、Ｃ３のタン
パク質分解断片がβ−１，３−グルカンよりもβ−１，６−グルカン上に強く沈着するこ
とを示唆している。
【０３３４】
ウエスタン分析は、実際にβ−１，６−グルカンにより多くのＣ３が沈着したことを明
らかにした（図４Ｂ）。α鎖に特異的な抗体は、Ｃ３ｄの大きさ（３１及び３３ｋＤａ，
図４Ｂ ａ）の低分子二重線のみならず完全なＣ３又はＣ３ｂの大きさ（それぞれ１０５
及び１１５ｋＤａ）のバンドを含む高分子量バンドを検出した。ラミナリンでコーティン
グされたビーズは、低レベルのこれらのＣ３断片を有していた（図４Ｂａ）。Ｃ３β鎖
に特異的な抗体は、高分子量Ｃ３／Ｃ３ｂのみを示した（図４Ｂｂ）。７５ｋＤａのＣ
３ｂ又はｉＣ３ｂ鎖は検出されなかった（図４Ｂ ｂ）。
【０３３５】
例５
【０３３６】
追加の相補体沈着の研究
【０３３７】
β−１，３−グルカンと比較してのβ−１，６−グルカン上のＣ３沈着の差をさらに評
価するために、血清を、プスツランでコーティングされたビーズをオプソニン化するため
に用いる前に、可溶性プスツラン又はラミナリンとプレインキュベートした。血清を可溶
性プスツランとプレインキュベートすると、好中球による食作用（貧食）（図５Ａはｃと
ａを比較している）及びＲＯＳ生成（図５Ｂは赤色と青色を比較している）がなくなって
おり、このことは、血清Ｃ３が可溶性β−１，６−グルカンによって滴定されたことを示
唆している。等量の可溶性ラミナリンとプレインキュベートした血清は、尚も食作用（貧
食）（図５Ａはｂとａを比較している）及びＲＯＳ生成（図５Ｂは赤色と緑色を比較して
いる）を媒介し、β−１，３−グルカンが、プスツランでコーティングされたビーズとの
Ｃ３の相互作用を効率的に遮断しなかったことを示唆している。
【０３３８】
ウエスタン分析は、可溶性プスツランとのプレインキュベーションによって、プスツラ
ンでコーティングされたビーズ上のほとんどのＣ３／Ｃ３ｂ及びＣ３ｄ沈着がなくなるこ
とを明らかにした（図５Ｃは１と３を比較している）。ラミナリンとのプレインキュベー
ションは低分子量Ｃ３ｄ二重線を消し去ったが、高分子量Ｃ３／Ｃ３ｂ（図５Ｃは２を３
と比較している）を保持しており、このことは、残りのＣ３／Ｃ３ｂが食作用（貧食）及
びＲＯＳの誘導を媒介していたことを示唆している（図５Ａ及び図５Ｂ）。血清を可溶性
プスツランとプレインキュベートすると、カンジダの死滅が減少した（図５Ｄ）。
【０３３９】
例６
【０３４０】
食作用（貧食）におけるＣＲ３の役割 
【０３４１】
補体受容体３（ＣＲ３）は、ＲＯＳ生成のみならず酵母細胞壁から抽出したザイモサン
及びオプソニン化された酵母の食作用（貧食）を媒介することが知られているので、ＣＲ
３は、β−１，６−グルカンでコーティングされたビーズの食作用（貧食）を媒介した。
抗ヒトＣＲ３阻止抗体は、食作用（貧食）（図６Ａはｂをａと比較している）及びＲＯＳ
生成（図６Ｂは赤色を緑色と比較している）の程度を減少させており、このことは、ＣＲ
３が、粒子性β−１，６−グルカン上に沈着されるＣ３ｂタンパク質分解断片（Ｃ３ｄ）
を認識したことを示唆している。
【０３４２】
例７
【０３４３】
β−１，６−グルカンは単球においてケモカインを誘発する
【０３４４】
単球においてケモカインを誘発する際のβ−１，６−グルカンの役割を評価するために
、ポリビーズポリスチレンミクロスフェア（ｂｅａｄｓ）を等量のβ−１，３−グルカン
ラミナリン（ｌａｍ）又はβ−１，６−グルカンプスツラン（ｐｕｓ）でコーティングし
た。ビーズを、プールしたヒト血清でオプソニン化した。単球を、５ｍｇ／ｍｌの可溶性
ｌａｍ又はｐｕｓで、或いは上記したビーズで、２時間培養した。ケモカインの誘導を定
量リアルタイムＰＣＲによって判定した。結果を平均し、標準偏差を計算した（図７）。
【０３４５】
例８
【０３４６】
β−１，６−グルカン結合体（コンジュゲート）
【０３４７】
好中球の活性が増強され得るか否かを判定するために、多糖がモノクローナル抗体など
の標的薬剤と適切な特異性で物理的に結合することを推進した。
【０３４８】
そのような状況下で、β−１，６−グルカン多糖上の相補体の沈着は、好中球を補充し
かつ複合体全体の貪食を増強することが期待される（図８）。相補体を不完全に結合する
ことが特に知られている抗体もある（例えばＩｇＧ２及びＩｇＧ４）。相補体を活性化す
るヒトＩｇＧ１及びＩｇＧ４の分化能力はＣＨ２ドメインのＣＯＯＨ末端配列によって判
定され、この技術はこれらの有効性を高めるであろう。
【０３４９】
多糖と抗体の間の結合は、多糖をタンパク質に結合させるために記述されたプロトコル
（例えば、BystrickyS, et al. Glycoconj J. 2000 Oct;17 (10):677-80; and Tianhong
Chen, etal . Langmuir 2003, 19, 9382-9386）を含めて任意の数の手段により達成さ
れることができる。そのような結合の別の手段は、上記したようなアミノ基を含むように
多糖の還元末端を修飾するステップを含む（Xia B, et al. Nat Methods. 2005 Nov;2(l 
l ):845-50;Valdivia A, et al. J Biotechnol. 2006 Apr 10;122(3):326-33）。その後
、アミノ基を抗体のカルボキシル末端に結合することができよう。
【０３５０】
このような目的で、マンナンをＢＳＡに結合させるための従前の方法（Bystricky S, e
t al. GlycoconjJ. 2000 Oct;17 (10):677-80）に従って、プスツラン（１０〜２０％の
Ｏアセチル基を有するような、２０ＫＤａのβ−１，６−グルカン多糖）を抗カンジダ・
アルビカンスモノクローナル抗体に結合させた。産物を水に対して透析し、適切なカット
オフカラムを用いて１００ｋＤａより大きい複合体を単離した（図９Ａ）。１００ｋＤａ
より大きく、かつ抗体の特徴的なバンドと多糖の存在を示すスメアとを呈する分画を単離
したが、このことは、この２つが同じ分画にあったことを示している。多糖の分子量は２
０ＫＤａであるので、このことは、多糖と抗体が結び付いていたことを示唆している。
【０３５１】
上記フェノール硫酸法を用いて糖の定量化を達成した（Duboius, M., Gilles, K. A., 
Hamilton, J.K., Rebers, P. A., and Smith, F. (1956). Anal Biochem 28, 350-356）
。１００ｋＤａより大きい分画中に多糖が存在することがそれによって確認された。
【０３５２】
カンジダ・アルビカンスで培養した好中球によるＲＯＳの生成に対する修飾抗体の効果
の評価を行った。未処理抗体の存在下でカンジダ・アルビカンスで培養した好中球は、低
レベルのＲＯＳを生成した（図９Ｂ）。抗体は多糖に共有結合するが、好中球による高Ｒ
ＯＳ生成を誘発した。未処理抗体を多糖と共有結合することなく混合しても同等効果は得
られなかった。このことは、ＲＯＳ生成を誘発するために多糖は抗体に結合されなければ
ならないことを示している。
【０３５３】
例９
【０３５４】
β−１，６−グルカンによって媒介されるインビボ防御
【０３５５】
相補体の活性化はインビトロでβ−１，６−グルカンによって媒介されたので、マウス
モデルにおいてそのような防御反応がインビボで誘発されることができるか否かを判定す
ることは重要であった。このような目的で、マウスの血清が相補体を活性化するか否かを
先ず判定した（図１１）。プスツラン（β−１，６−グルカン）でコーティングされかつ
マウスの血清でオプソニン化されたビーズは、ラミナリンβ−１，３−グルカンでコーテ
ィングされたビーズに比べて相補体の活性化を示した。カンジダ・アルビカンス細胞（１
０６）を静注し、その後、β−１，６−グルカンでコーティングされた１０５個のビーズ
又は未処理ビーズを注入したマウスの生存を評価したところ、処置マウスは未処置マウス
に比べて有意に長い生存を示した。
【０３５６】
β−１，６−グルカン封入ＰＬＧＡビーズは、活性酸素種の生成を誘発し、マウスを全
身性真菌感染症から保護する（図１２）。β−１，６−グルカン封入ＰＬＧＡビーズは、
β−１，３−グルカン封入ＰＬＧＡビーズに比べてより高レベルの活性酸素種（パネルＢ
）及び著しく高まった生存（パネルＣ）を誘発した。
【０３５７】
例１０
【０３５８】
β−１，６−グルカンは免疫グロブリン沈着を媒介した
【０３５９】
相補体の活性化はインビボでβ−１，６−グルカンによって媒介されたので、免疫グロ
ブリン沈着が誘発されたか否かを判定することも重要であった。このような目的で、未処
理ビーズのみならずプスツラン（β−１，６−グルカン）及びラミナリン（β−１，３−
グルカン）で処理したビーズをオプソニン化し、ＩｇＭ及びＩｇＧ沈着を評価した（図１
３）。
【０３６０】
ＩｇＧ沈着は、ラミナリン又は未処理ビーズと比較すると、プスツランで処理したビー
ズ上で著しく高められて発生した。
【０３６１】
例１１
【０３６２】
β−１，６−グルカンを含むＰＬＧＡ微粒子の生成の実施形態
【０３６３】
ＰＬＧＡ及びＰＬＡなどの高分子の生分解性高分子微粒子を作るために溶媒蒸発カプセ
ル化法がよく用いられる。その理由は、これらのポリ酸は、生体適合性が高く、好ましい
生物分解速度を有するからである。溶媒蒸発カプセル化は、幾つかのステップ及びありふ
れた変形形態を含む。
１）高分子を水不混和性溶媒に溶解する。
２）薬物を高分子溶液に溶解し、分散又は乳化させる。
３）次に、得られた溶液、分散液またはエマルションを、離散的な液滴を形成する連続的
な水相において乳化させる。
４）水不混和性溶媒は、水相を通って拡散し、水と空気の界面で蒸発する。
高分子の沈殿及び薬物の封入を誘導する。
【０３６４】
溶媒は、水と不混和で、かつ薬物に適した溶媒でなければならいか、或いは高分子と薬
物の第１のエマルションができるように薬物に適した溶媒である別の溶媒と不混和でなけ
ればならいか、或いは高分子溶液中に薬物を分散させる別の方法がなければならない。
【０３６５】
候補溶媒におけるβ−１，６−グルカンの溶解度
【０３６６】
〜１０ｍｇ／ｍＬの固体β−１，６−グルカンを室温で溶媒に加え、溶解の度合いを観
察することによって、複数の溶媒マイクロエマルションプロトコルにおいて潜在的に有用
な複数の溶媒におけるβ−１，６−グルカンの溶解度を決定した。水不混和性溶媒には、
水、ＤＭＳＯ、メタノール及びエタノールが含まれる。水不混和性溶媒には、アセトン、
塩化メチレン及び酢酸エチルが含まれる。β−１，６−グルカンは、ＤＭＳＯにのみ＞１
０ｍｇ／ｍＬの溶解度を示したが、より低濃度で水に可溶であった。
【０３６７】
標準プロトコルによるβ−１，６−グルカン封入微粒子の生成
【０３６８】
Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションのための標準プロトコルを用い、内相として水を、油相として
塩化メチレンを、外相として水を用いて、β−１，６−グルカンを封入した。先ずＤＭＳ
Ｏにβ−１，６−グルカンを溶解し、次に水を加えることによって、内水相の濃度を２５
ｍｇ／ｍＬにした。得られた粒子（２％標識）は、好中球上で検査され、活性を示さなか
った。
【０３６９】
ナノ沈殿法によるβ−１，６−グルカン封入ナノ粒子の生成
【０３７０】
ナノ沈殿法は、薬物封入高分子ナノ粒子を作るのに有用な簡単な方法である。ナノ沈殿
法には、通常、次のステップが含まれる。
１）高分子及び薬物を溶媒に溶解。
２）この高分子／薬物溶液を強制的に混合しながら非溶媒にゆっくりと加える。非溶媒は
溶媒と混合できるべきであるが、高分子及び薬物は非溶媒に可溶であってはならない。
【０３７１】
β−１，６−グルカン及びＰＬＧＡは、ＤＭＳＯには非常に溶けやすく、水には溶けな
いので、様々なグルカン／ＰＬＧＡ比にわたるナノ粒子が可能であるべきである。次の条
件で検査した。
【０３７２】
【表３】
2014129366.tif 000005
【０３７３】
８０％以上の濃度では、もはやβ−１，６−グルカン粒子は生じないであろう。得られ
た粒子は、好中球上で検査され、活性を示さなかった。
【０３７４】
β−１，６−グルカン・ナノサスペンション−エマルションプロトコルの作成：標準Ｗ
／Ｏ／Ｗプロトコルの修正
【０３７５】
β−１，６−グルカン・ナノサスペンションの生成
【０３７６】
β−１，６−グルカンを室温でジメチルスルホキシドに溶解し（５０ｍｇ／ｍＬ）、等
量の脱イオン水で希釈した。この混合物を、プローブソニケータでの超音波処理下で、ジ
クロロメタンに溶かしたＰＬＧＡ溶液に加えた。
【０３７７】
ＤＭＳＯ／水／グルカン溶液はＰＬＧＡ／ジクロロメタン溶液と混合でき、単相を形成
した。撹拌下で（超音波処理下ではない）ＤＭＳＯ／水／グルカン溶液をジクロロメタン
に注入したとき、β−１，６−グルカンの沈殿が起こり、沈殿物は繊維状ゲルを形成した
（ナノ沈殿中に）。超音波処理下では、沈殿は、恐らくは第２の外部エマルション中で懸
濁したナノサスペンション又はエマルションである混濁した溶液を生成しそうであった。
【０３７８】
上記で生成したサスペンションを１％ポリビニルアルコールの水溶液に加え、均質化し
て高分子微粒子を生成した。ジクロロメタンの蒸発は、大気条件で３時間撹拌中に進行し
た。
【０３７９】
得られた粒子を脱イオン水で３回洗浄し、凍結乾燥して乾燥粉末を得た。
【０３８０】
例１２
【０３８１】
β−１，６−グルカン結合体はモノクローナル抗体の有効性を向上させることができる
【０３８２】
一部のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、標的への親和性は良いが、良好な免疫応答を
誘発しない。一部のｍＡｂは、補体結合特性が良ければ有効性も良くなることがある。本
発明の一部の実施形態では、β−１，６−グルカンのｍＡｂとの結合が例えばtheir補体
依存性細胞障害活性（ＣＤＣ）特性に与える影響の変化に関して、ｍＡｂを用いる際の上
記制限が扱われている。
【０３８３】
β−１，６−グルカン多糖は、例えばメタ過ヨウ素酸ナトリウムによる多糖及び／又は
抗体の酸化によって、ｍＡｂのＦｃ部分に直接結合される。ビオチン−アビジン／ストレ
プトアビジンベースの結合のみならずＰＥＧジアミンを含む様々なジアミンリンカーが検
査される。結合体は、標的への特異性を保持し、多糖の補体結合特性を保持しかつ可溶性
であることを保証するために、モニタされる。
【０３８４】
結合体は、例えば抗カンジダｍＡｂ又は異なるマンナン及びグルカンなどの他の細胞壁
構造に対するｍＡｂを含み得、これらが検査される。
【０３８５】
β−１，６−グルカンは、標的細胞（同一Ｆａｂ領域）への特異性は同じであるが保存
領域（Ｆｃ）が異なる（異なる補体結合特性を有する）一連の同種モノクローナル抗体に
結合される。多糖は、ＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂに結合され、これらの抗体がインビトロ
でＣＤＣ及び／又はＡＤＣＣを達成する能力を、生細胞によって除かれる染料（ヨウ化プ
ロピジウムなど）を用いて、或いは、死細胞によって放出される放射性同位体（例えば、
アデニル酸キナーゼなどを検出するトキシライト（ToxiLight），５１−クロムなど）に
よって検査した。
【０３８６】
ＣＤＣ増加に関して、多糖結合抗体を、それぞれの非結合抗体（共有結合なしで多糖と
混合）又は同種ＩｇＧ１と比較する。これらの細胞に対して、結合多糖に関連して強化さ
れたＣＤＣを示す抗体を、モデルにおいてインビボで検査した。マウスに、標的細胞、続
いて非結合抗体、結合抗体又はアイソタイプ対照抗体を注入し、生存をモニタした。
【０３８７】
同様に、ｍＡｂの有効性増加に関して、ＦＤＡ承認ｍＡｂ（アレムツズマブ（キャンパ
ス）、ベバシズマブ（アバスチン）、セツキシマブ（エルビタックス）、ゲムツズマブ（
マイロターグ）、イブリツモマブ（ゼバリン）、パニツムマブ（ベクチビックス）、リツ
キシマブ（リツキサン）、トシツモマブ（ベキサール）、トラスツズマブ（ハーセプチン
）、パリビズマブ（シナジス）を含む）への多糖の結合を検査する。検査され得る他のｍ
Ａｂは、防御試験の臨床試験で適切な免疫刺激が足りないことが示されてきたｍＡｂであ
って、その免疫刺激能力が、本発明のグルカンへの結合によって増強され得るようなｍＡ
ｂを含み得る。
【０３８８】
例１３
【０３８９】
ガン治療のためのβ−１，６−グルカン結合体
【０３９０】
乳ガンは、西洋の女性のガンによる死因の第２位であり、３０才から７０才までの女性
の死因の第１位である。最高の死亡率は、所属リンパ節が侵されている患者に限定される
。早期発見とそれに続く手術は、良好な予後をもたらす。潜在性リンパ節転移のあった患
者では、乳ガンに対するアジュバント化学療法又はホルモン療法は効果があることが証明
されているが、それでも多くの患者が転移によって死亡する。
【０３９１】
乳ガンに関して、いくつもの腫瘍関連抗原が述べられてきた。高分子量糖タンパク質で
あるＭＵＣ−１ムチンは、乳ガンに高度に発現される。ＢＡ−４６は、ヒトの乳ガンにお
いて過剰に発現されるヒト乳脂肪球膜（ＨＭＦＧ）の膜貫通関連糖タンパク質である。抗
ＢＡ−４６放射性結合（radio-conjugated）モノクローナル抗体は、マウスに移植された
ヒト乳房腫瘍をターゲティングすることに成功した。
【０３９２】
乳房腫瘍由来のペプチドを優先的に認識するＣＴＬを誘発する能力に対して、ＭＵＣ−
１及びＢＡ−４６由来のペプチドへのβ−１，６−グルカンの結合が与える影響について
調べる。
【０３９３】
β−１，６−グルカン多糖は、ＭＵＣ−１及びＢＡ−４６由来のペプチドに直接結合さ
れる。結合体は、標的への特異性を保持し、多糖の補体結合特性を保持しかつ可溶性であ
ることを保証するために、モニタされる。
【０３９４】
添付の請求項に記載の本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく形態及び詳細の種々
の変更がなされ得ることは、当業者に理解されるであろう。当業者は、ルーチンに過ぎな
い実験を用いて、本明細書に記載の本発明の具体的な実施形態に相当する多くの相当形態
を認識するか又は確認することができよう。そのような相当形態は、請求項の範囲に含ま
れることが意図されている。
【０３９５】
請求項において、「或る」、「その」などの冠詞は、反対のことが示されているかさも
なければ文脈から明らかである場合を除いて、１若しくは２つ以上を意味する。選択群の
要素間に「又は」又は「及び／又は」を含む請求項又は明細書は、反対のことが示されて
いるかさもなければ文脈から明らかである場合を除いて、選択群のうちの１つ、２つ以上
又は全ての要素が存在するか、用いられているか、或いはそうでなければ所与の製品又は
プロセスに関係があるならば、満足していると考えられる。本発明は、選択群のちょうど
１つの要素が存在するか、用いられているか、或いはそうでなければ所与の製品又はプロ
セスに関係があるような実施形態を含む。本発明はまた、選択群ののうちの２つ以上又は
全ての要素が存在するか、用いられているか、或いはそうでなければ所与の製品又はプロ
セスに関係があるような実施形態も含む。さらに、別段の記載がなければ、或いは矛盾又
は不一致が生じるであろうことが当業者に明らかになっていなければ、本発明は、種々の
実施形態において、特許請求の範囲に記載されている請求項のうちの１つ若しくは複数の
請求項からの１若しくは複数の制限、構成要素、文節、記述用語などが同じ引用元請求項
に従属する別の請求項に組み込まれているような全ての変形形態、組合せ形態及び置換形
態を提供することを理解されたい。構成要素がリストとして、例えばマーカッシュグルー
プ形式または同様のもので提示されている場合には、構成要素の各下位群も開示されてお
り、いかなる構成要素も群から削除されることができることを理解されたい。一般的に、
本発明又は本発明の態様が特定の構成要素、特徴部分などを含むものと見なされる場合に
は、本発明の特定の実施形態又は本発明の態様は、そのような構成要素、特徴部分などか
ら構成されるか或いは実質的に構成されることを理解されたい。簡単にするために、これ
らの実施形態は、本明細書中で正確に引用するとあらゆる場合において具体的に説明され
ている訳ではない。特定の請求項は便宜上独立形式で提示されているが、本出願人は、従
属形式で書かれた任意の独立請求項を、独立請求項及びそのような請求項に従属する他の
請求項の構成要素又は制限を含むように書き換える権利を保留し、そのような書き換えら
れた請求項は、従属形式に書き換えられる前にどのような形式で書かれていようとも（補
正あり又は補正なしのいずれか）、全ての点で独立請求項と同等であると考えられるべき
である。
【図１】
2014129366.tif 000006
【図２】
2014129366.tif 000007
【図３】
2014129366.tif 000008
【図４】
2014129366.tif 000009
【図５】
2014129366.tif 000010
【図６】
2014129366.tif 000011
【図７】
2014129366.tif 000012
【図８】
2014129366.tif 000013
【図９】
2014129366.tif 000014
【図１０】
2014129366.tif 000015
【図１１】
2014129366.tif 000016
【図１２】
2014129366.tif 000017
【図１３】
2014129366.tif 000018
【手続補正書】
【提出日】平成26年3月10日(2014.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載された発明。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
他の実施形態では、本発明は、随意的にＯ−アセチル化基について富化されたβ−１，
６−グルカンを含むミセルを提供する。他の実施形態では、本発明は、β−１，６−グル
カン及び生分解性高分子を含有する組成物であって、前記生分解性高分子が分解して生物
活性サリチル酸塩又はアルファヒドロキシ酸部分を形成し、前記β−１，６−グルカンが
、随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたことを特徴とする組成物を提供す
る。他の実施形態では、本発明は、任意のグルカン、任意の組成物、任意のミセル、又は
それらの組み合わせの、本明細書中で説明された方法への使用を提供する。
例えば、本願発明は以下の項目を提供する。
（書類名）特許請求の範囲
（項目１）
Ｏ−アセチル化基について富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物。
（項目２）
項目１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する組成物。
（項目３）
項目１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
組成物。
（項目４）
項目３に記載の組成物であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする組成物。
（項目５）
項目１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする組成物。
（項目６）
項目１に記載の組成物であって、
アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴
とする組成物。
（項目７）
項目１に記載の組成物であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする組成物。
（項目８）
対象における免疫応答を調節する方法であって、
β−１，６−グルカンを含有し、前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化
基について富化されている組成物を前記対象に投与するステップを含むことを特徴とする
方法。
（項目９）
項目８に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
（項目１０）
項目８に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類又は真菌から単離された又は得られたものであり、
前記真菌が随意的に酵母であることを特徴とする方法。
（項目１１）
項目１０に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
（項目１２）
項目８に記載の方法であって、
前記組成物が、アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに
含むことを特徴とする方法。
（項目１３）
項目８に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
（項目１４）
項目８に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の促進を含むことを特徴とする方法。
（項目１５）
項目８に記載の方法であって、
前記免疫応答が、抗原特異的応答であることを特徴とする方法。
（項目１６）
項目８に記載の方法であって、
前記組成物が、化学療法化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目１７）
項目８に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
（項目１８）
項目８に記載の方法であって、
前記免疫応答が、感染性病原体因子、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに対するも
のであることを特徴とする方法。
（項目１９）
項目１８に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、敗血症を引き起こすものであることを特徴とする方法。
（項目２０）
項目１８に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、寄生虫、蠕虫、ウイルス又は細菌であることを特徴とする方法。
（項目２１）
項目８に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の下方制御又は抑制を含むことを特徴とする方法
。
（項目２２）
項目２１に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫抑制剤をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目２３）
項目２１に記載の方法であって、
前記免疫応答が、自己抗原又はアレルゲンに対するものであることを特徴とする方法。
（項目２４）
項目２１に記載の方法であって、
前記免疫応答が、移植された組織若しくは細胞に対するものであることを特徴とする方
法。
（項目２５）
β−１，６−グルカンを含有する組成物であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする組成物。
（項目２６）
項目２５に記載の組成物であって、
前記グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする組成物。
（項目２７）
項目２６に記載の組成物であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する組成物。
（項目２８）
項目２５に記載の組成物であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
組成物。
（項目２９）
項目２８に記載の組成物であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする組成物。
（項目３０）
項目２５に記載の組成物であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする組成物。
（項目３１）
項目２５に記載の組成物であって、
アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴
とする組成物。
（項目３２）
項目２５に記載の組成物であって、
前記粒子が、ミクロスフェア又はナノ粒子であることを特徴とする組成物。
（項目３３）
項目３２に記載の組成物であって、
前記ミクロスフェアが、約０．１〜１５ミクロンの直径を有することを特徴とする組成
物。
（項目３４）
対象における免疫応答を調節する方法であって、
粒子に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップ
を含むことを特徴とする方法。
（項目３５）
項目３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
（項目３６）
項目３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
（項目３７）
項目３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
（項目３８）
項目３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
（項目３９）
項目３４に記載の方法であって、
前記組成物が、アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに
含むことを特徴とする方法。
（項目４０）
項目３４に記載の方法であって、
前記グルカンが、固体支持体に結合したことを特徴とする方法。
（項目４１）
項目３４に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の促進を含むことを特徴とする方法。
（項目４２）
項目４１に記載の方法であって、
前記免疫応答が、抗原特異的応答であることを特徴とする方法。
（項目４３）
項目４１に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫促進化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目４４）
項目４１に記載の方法であって、
前記組成物が、化学療法化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目４５）
項目４４に記載の方法であって、
前記免疫応答が、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに対するもので
あることを特徴とする方法。
（項目４６）
項目３４に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
（項目４７）
項目４６に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、敗血症を引き起こすものであることを特徴とする方法。
（項目４８）
項目４６に記載の方法であって、
前記感染性病原体が、寄生虫、蠕虫、ウイルス又は細菌であることを特徴とする方法。
（項目４９）
項目３４に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の下方制御又は抑制を含むことを特徴とする方法
。
（項目５０）
項目４９に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫抑制剤をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目５１）
項目４９に記載の方法であって、
前記免疫応答が、自己抗原、アレルゲン又は移植された組織若しくは細胞に対するもの
であることを特徴とする方法。
（項目５２）
対象における癌を治療する、癌の進行を遅延させる、癌の寛解を延長する又は癌の発生
率若しくは重症度を低減させる方法であって、
精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含
むことを特徴とする方法。
（項目５３）
項目５２に記載の方法であって、
前記β−１，６−グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする
方法。
（項目５４）
項目５３に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
（項目５５）
項目５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
（項目５６）
項目５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
（項目５７）
項目５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
（項目５８）
項目５２に記載の方法であって、
アジュバント、抗原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療法化合物又はそれらの組み合
わせをさらに含むことを特徴とする方法。
（項目５９）
項目５８に記載の方法であって、
前記抗原が、腫瘍関連抗原であることを特徴とする方法。
（項目６０）
項目５８に記載の方法であって、
前記ペプチドが、腫瘍関連抗原から得られたことを特徴とする方法。
（項目６１）
項目５８に記載の方法であって、
前記免疫促進化合物が、サイトカインであることを特徴とする方法。
（項目６２）
項目５８に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
（項目６３）
項目５２に記載の方法であって、
前記対象が、過形成病変又は前癌病変を有することを特徴とする方法。
（項目６４）
項目５２に記載の方法であって、
前記グルカンが、ターゲティング部分に結合したことを特徴とする方法。
（項目６５）
項目６４に記載の方法であって、
前記ターゲティング部分が、腫瘍関連抗原と特異的に相互作用することを特徴とする方
法。
（項目６６）
対象における感染症を治療する、感染症の進行を遅延させる又は感染症の発生率若しく
は重症度を低減させる方法であって、
精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記対象に投与するステップを含
むことを特徴とする方法。
（項目６７）
項目６６に記載の方法であって、
前記β−１，６−グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする
方法。
（項目６８）
項目６７に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
（項目６９）
項目６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
（項目７０）
項目６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
（項目７１）
項目６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
（項目７２）
項目６８に記載の方法であって、
前記組成物が、アジュバント、抗原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療法化合物又は
それらの組み合わせをさらに含むことを特徴とする方法。
（項目７３）
項目６８に記載の方法であって、
前記抗原又はペプチドが、前記感染の源から得られたことを特徴とする方法。
（項目７４）
項目６８に記載の方法であって、
前記免疫促進化合物が、サイトカインであることを特徴とする方法。
（項目７５）
項目６８に記載の方法であって、
前記化学療法化合物が、抗生物質又は抗ウイルス性化合物であることを特徴とする方法
。
（項目７６）
項目６８に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
（項目７７）
項目６６に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
（項目７８）
項目６６に記載の方法であって、
感染性病原体が、敗血症を引き起こすものであることを特徴とする方法。
（項目７９）
項目６６に記載の方法であって、
感染性病原体が、寄生虫、蠕虫、ウイルス又は細菌であることを特徴とする方法。
（項目８０）
細胞内での熱ショックタンパク質の発現を促進又は増進させる方法であって、
粒子に結合した精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を前記細胞に接触さ
せるステップを含むことを特徴とする方法。
（項目８１）
項目８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、Ｏ−アセチル化グルカンについて富化されたことを特徴とする方法。
（項目８２）
項目８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
（項目８３）
項目８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
（項目８４）
項目８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
（項目８５）
項目８０に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
（項目８６）
項目８０に記載の方法であって、
前記細胞が、抗原提示細胞であることを特徴とする方法。
（項目８７）
項目８６に記載の方法であって、
前記細胞が、好中球であることを特徴とする方法。
（項目８８）
項目８６に記載の方法であって、
前記細胞が、感染していることを特徴とする方法。
（項目８９）
細胞内での熱ショックタンパク質の発現を促進又は増進させる方法であって、
Ｏ−アセチル化グルカンについて富化されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物を
前記細胞に接触させるステップを含むことを特徴とする方法。
（項目９０）
項目８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する方法。
（項目９１）
項目８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
方法。
（項目９２）
項目８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする方法。
（項目９３）
項目８９に記載の方法であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする方法。
（項目９４）
項目８９に記載の方法であって、
前記細胞が、抗原提示細胞であることを特徴とする方法。
（項目９５）
項目８９に記載の方法であって、
前記細胞が、好中球であることを特徴とする方法。
（項目９６）
項目８９に記載の方法であって、
前記細胞が、感染していることを特徴とする方法。
（項目９７）
β−１，６−グルカンを含有する粒子。
（項目９８）
項目９７に記載の粒子であって、
前記β−１，６−グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする
粒子。
（項目９９）
項目９７に記載の粒子であって、
少なくとも５０重量％のβ−１，６−グルカンを含有することを特徴とする粒子。
（項目１００）
項目９７に記載の粒子であって、
前記粒子に含まれる前記グルカンの少なくとも５０％がβ−１，６−グルカンであるこ
とを特徴とする粒子。
（項目１０１）
項目９７に記載の粒子であって、
前記β−１，６−グルカンが、前記粒子内に均一に分布していることを特徴とする粒子
。
（項目１０２）
項目９７に記載の粒子であって、
前記粒子が、好中球、単球、マクロファージ又は樹枝状細胞による貪食に適した大きさ
を有することを特徴とする粒子。
（項目１０３）
免疫系細胞の免疫応答を調節する方法であって、
前記細胞に項目９７に記載の前記粒子を、前記免疫応答を調節するのに十分な量で接
触させるステップを含むことを特徴とする方法。
（項目１０４）
項目１０３に記載の方法であって、
前記量は、貪食の促進、活性酸素種生成の誘導又は熱ショックタンパク質発現の誘導に
十分な量であることを特徴とする方法。
（項目１０５）
対象における免疫応答を調節する方法であって、
前記対象に項目９７に記載の前記粒子を、前記免疫応答を調節するのに十分な量で投
与するステップを含むことを特徴とする方法。
（項目１０６）
項目１０５に記載の方法であって、
前記量は、貪食の促進、活性酸素種生成の誘導又は熱ショックタンパク質発現の誘導に
十分な量であることを特徴とする方法。
（項目１０７）
精製されたβ−１，６−グルカンを含有する組成物であって、
医薬組成物、食品若しくは食品製品、食品サプリメント又は化粧品組成物であることを
特徴とする組成物。
（項目１０８）
項目１０７に記載の組成物であって、
免疫応答を調節する能力が未処理のβ−１，６−グルカンよりも向上するように処理さ
れたβ−１，６−グルカンを含有することを特徴とする組成物。
（項目１０９）
項目１０７に記載の組成物であって、
当該組成物に含まれる前記グルカンの少なくとも５０％がβ−１，６−グルカンである
ことを特徴とする粒子。
（項目１１０）
対象における免疫応答を調節する方法であって、
前記対象に項目９７に記載の前記粒子を、前記免疫応答を調節するのに十分な量で投
与するステップを含むことを特徴とする方法。
（項目１１１）
項目１０７に記載の方法であって、
前記量は、貪食の促進、活性酸素種生成の誘導又は熱ショックタンパク質発現の誘導に
十分な量であることを特徴とする方法。
（項目１１２）
β−１，６−グルカンを含有するミセルであって、
前記β−１，６−グルカンが、随意的にＯ−アセチル化基について富化されたことを特
徴とするミセル。
（項目１１３）
β−１，６−グルカン及び生分解性高分子を含有する組成物であって、
前記生分解性高分子が、分解して生物活性サリチル酸塩又はアルファヒドロキシ酸部分
を形成し、
前記β−１，６−グルカンが、随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこ
とを特徴とする組成物。
（項目１１４）
項目１１３に記載の組成物を含む粒子。
（項目１１５）
項目１１３に記載の組成物を含む医療器具。
（項目１１６）
医療器具であって、
インプラント又は器具の表面の少なくとも一部がβ−１，６−グルカンを含み、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこと
を特徴とする医療器具。
（項目１１７）
項目１１６に記載の医療器具であって、
表面の少なくとも一部が、β−１，６−グルカンを含有する組成物により被覆され、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこと
を特徴とする医療器具。
（項目１１８）
項目１１６に記載の医療器具であって、
カテーテル、ステント、バルブ、ペースメーカー、セントラルライン、ペッサリー、チ
ューブ、シャント、栄養チューブ、ドレイン及び整形外科用ハードウェア器具から成る群
より選択されることを特徴とする医療器具。
（項目１１９）
項目１１６に記載の医療器具であって、
前記組成物が、高分子及びβ−１，６−グルカンを含有する被覆層を含み、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されたこと
を特徴とする医療器具。
（項目１２０）
項目１１６に記載の医療器具であって、
前記組成物が、高分子及びβ−１，６−グルカンを含有する被覆層を含み、
前記β−１，６−グルカンが随意的にＯ−アセチル化グルカンについて富化されており
、前記高分子が生分解性を有することを特徴とする医療器具。
（項目１２１）
対象を治療する方法であって、
治療を必要とする対象の体内に、項目１１６に記載の医療器具を埋め込む又は導入す
るステップを含むことを特徴とする方法。
（項目１２２）
被覆材料であって、
（ａ）基材と、
（ｂ）前記基材の表面の少なくとも一部と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有
する組成物とを含むことを特徴とする被覆材料。
（項目１２３）
項目１２２に記載の被覆材料であって、
前記組成物が、高分子を含有することを特徴とする被覆材料。
（項目１２４）
項目１２２に記載の被覆材料であって、
前記組成物が、生分解性高分子を含有することを特徴とする被覆材料。
（項目１２５）
項目１２２に記載の被覆材料であって、
前記基材の少なくとも一部が、金属、セラミック又は高分子から構成されることを特徴
とする被覆材料。
（項目１２６）
対象を治療する方法であって、
治療を必要とする対象の身体に、項目１２２に記載の被覆材料を接触させるステップ
を含むことを特徴とする方法。
（項目１２７）
ターゲティング部分と物理的に結合したβ−１，６−グルカンを含有する組成物。
（項目１２８）
項目１２７に記載の組成物であって、
前記グルカンが、Ｏ−アセチル化基について富化されたことを特徴とする組成物。
（項目１２９）
項目１２８に記載の組成物であって、
前記グルカンが、少なくとも２５重量％のＯ−アセチル化グルカンを含むことを特徴と
する組成物。
（項目１３０）
項目１２７に記載の組成物であって、
前記グルカンが、地衣類、真菌又は酵母から単離された又は得られたことを特徴とする
組成物。
（項目１３１）
項目１３０に記載の組成物であって、
前記グルカンが、イワタケ科から単離された又は得られたことを特徴とする組成物。
（項目１３２）
項目１２７に記載の組成物であって、
前記グルカンが、遺伝子操作された又は化学的に合成若しくはアセチル化されたことを
特徴とする組成物。
（項目１３３）
項目１２７に記載の組成物であって、
アジュバント、抗原、免疫調節化合物又はそれらの組み合わせをさらに含むことを特徴
とする組成物。
（項目１３４）
項目１２７に記載の組成物であって、
前記食細胞が、プロフェッショナル抗原提示細胞であることを特徴とする組成物。
（項目１３５）
項目１２７に記載の組成物であって、
前記食細胞が、好中球であることを特徴とする組成物。
（項目１３６）
項目１２７に記載の組成物であって、
前記ターゲティング部分が、抗体又は抗体断片であることを特徴とする組成物。
（項目１３７）
対象における免疫応答を調節する方法であって、
前記対象に項目１２７に記載の組成物を投与するステップを含むことを特徴とする方
法。
（項目１３８）
項目１３７に記載の方法であって、
前記グルカンが、粒子に結合したことを特徴とする方法。
（項目１３９）
項目１３７に記載の方法であって、
前記免疫応答の調節が、前記免疫応答の促進を含むことを特徴とする方法。
（項目１４０）
項目１３９に記載の方法であって、
前記免疫応答が、抗原特異的応答であることを特徴とする方法。
（項目１４１）
項目１３７に記載の方法であって、
前記組成物が、免疫促進化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目１４２）
項目１３７に記載の方法であって、
前記組成物が、化学療法化合物をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目１４３）
項目１３７に記載の方法であって、
前記免疫応答が、感染性病原体、癌、前癌病変又はそれらの組み合わせに対するもので
あることを特徴とする方法。
（項目１４４）
項目１３７に記載の方法であって、
前記免疫応答が、補体依存性であることを特徴とする方法。
（項目１４５）
対象における感染症を治療する、感染症の進行を遅延させる又は感染症の発生率若しく
は重症度を低減させる方法であって、
前記対象に項目１２７に記載の組成物を投与するステップを含むことを特徴とする方
法。
（項目１４６）
項目１４５に記載の方法であって、
アジュバント、抗原、ペプチド、免疫促進化合物、化学療法剤又はそれらの組み合わせ
をさらに含むことを特徴とする方法。
（項目１４７）
項目１４６に記載の方法であって、
前記抗原又はペプチドが、前記感染の源から得られたことを特徴とする方法。
（項目１４８）
項目１４６に記載の方法であって、
前記免疫促進化合物が、サイトカインであることを特徴とする方法。
（項目１４９）
項目１４６に記載の方法であって、
前記化学療法化合物が、抗生物質又は抗ウイルス性化合物であることを特徴とする方法。
（項目１５０）
細胞内での熱ショックタンパク質の発現を促進又は増進させる方法であって、
前記細胞に項目１２７に記載の前記組成物を接触させるステップを含むことを特徴と
する方法。
【外国語明細書】
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2014129366000002.pdf
2014129366000003.pdf
2014129366000004.pdf