(57)【要約】【課題】  高い効果を有し安全なＴＲＰＡ１活性化組成物、並びに当該組成物を含有する飲食品、医薬品、香粧品、口腔用組成物、香味料組成物を提供することである。【解決手段】  ショウガ科バンウコン属バンウコン抽出物、該植物の抽出物の分画物、精油、精油由来のｐ−メトキシ桂皮酸エチル、桂皮酸エチルを有効成分として含有するＴＲＰＡ１活性化組成物、並びに当該組成物を含有する飲食品、医薬品、香粧品、口腔用組成物、香味料組成物である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
バンウコン（Kaempferia  galanga L.）の抽出物又はその分画物を有効成分として含有するTRPA1活性化組成物。
【請求項２】
バンウコン（Kaempferia  galanga L.）の精油を有効成分として含有するＴＲＰＡ１活性化組成物。
【請求項３】
ｐ−メトキシ桂皮酸エチル及び桂皮酸エチルのうち少なくとも１種を有効成分として含有するＴＲＰＡ１活性化組成物。
【請求項４】
請求項３記載のｐ−メトキシ桂皮酸エチル、桂皮酸エチルがバンウコンの抽出物、分画物、又は精油由来であるＴＲＰＡ１活性化組成物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のＴＲＰＡ１活性化組成物を含有することを特徴とする飲食品。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のＴＲＰＡ１活性化組成物を含有することを特徴とする香味料組成物。
【請求項７】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のＴＲＰＡ１活性化組成物を含有することを特徴とする医薬品。
【請求項８】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のＴＲＰＡ１活性化組成物を含有することを特徴とする香粧品。
【請求項９】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のＴＲＰＡ１活性化組成物を含有することを特徴とする口腔用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バンウコン抽出物、その分画物、バンウコン精油、ｐ−メトキシ桂皮酸エチル又は桂皮酸エチルを有効成分として含有するＴＲＰＡ１活性化組成物に関する。また、当該ＴＲＰＡ１活性化組成物を含有する飲食品、香味料組成物、医薬品並びに香粧品に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＴＲＰ（Transient receptor potential）チャネルは感覚機能など多様な生理活性を発揮し、多くの生体反応や病態に関わっている。その活性化機能は多岐にわたっており、温度、機械刺激、化学刺激、浸透圧、痛み、酸・塩基など種々の刺激で活性化される。
ＴＲＰチャネルの中でＮ末端に１４〜１８回のアンキリンリピート構造を持つことを特徴とするＴＲＰＡ（ＴＲＰ  ankyrin）ファミリーは、哺乳類においてＴＲＰＡ１のみが同定されている。生体内においては後根神経節、三叉神経節、節状神経節、脳、肺、胃、肝臓、腎臓、膵臓、脾臓、胎盤、精巣、子宮に発現している。ＴＲＰＡ１は脱分極、細胞内Ｃａ2+濃度上昇、ｐＨ変化、機械刺激、冷刺激（１７℃以下）など様々な刺激や物質により活性化されることが報告されている（非特許文献１〜３参照）。
また、炎症性疼痛の発生にも関わっているとされる（非特許文献４参照）。
さらに、ワサビやカラシに含まれるアリルイソチオシアナート、桂皮中のシンナムアルデヒド、胡椒中のピペリンなどの刺激物質に反応し、辛味、灼熱感、体熱産生を引き起こす（非特許文献５〜７参照）。
【０００３】
バンウコン（Kaempferia  galanga L.）は、インド及びマラヤ原産のショウガ科植物である。その根茎部を乾燥したものは、ショウガに似た芳香と辛味があり、東南アジアを中心に調味料や香辛料として流通している。また、根茎は芳香性健胃薬として利用される。さらに、血小板凝集抑制剤（特許文献１）、毛穴目立ち予防又は改善剤（特許文献２）、骨粗鬆症などの骨吸収性疾患の予防改善を目的とした破骨細胞分化抑制剤（特許文献３）、肌のうるおい、張り、しわ、くすみ改善作用を示す皮膚改善剤（特許文献４）、紫外線吸収性皮膚化粧料（特許文献５）としての用途が提案されている。
しかし、健康長寿が注目されている現在、安全安心な食品素材によるクォリティ・オブ・ライフ（ＱＯＬ）向上の要望は極めて高く、バンウコンにおいてもさらなる効能を見出すことでさらなる用途拡大が期待されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１２−１５３６７１号公報
【特許文献２】特開２０１１−１２１８７９号公報
【特許文献３】特開２００９−９６７１８号公報
【特許文献４】特開２００２−１２１１４４号公報
【特許文献５】特開平８−１５７３４６号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】沼田朋大、外８名、「TRPチャネルの構造と多様な機能」、生化学、第81巻、第11号、p.962-983、2009
【非特許文献２】辛島裕士、外１名、「感覚とTRPチャネル」、福岡医誌、 2011年、102(3)、p.48-55
【非特許文献３】岩井和夫、編、「トウガラシ―辛味の科学」、改訂増補、株式会社幸書房、2008年10月、p.62-82（2008)
【非特許文献４】Yi Dai, et al. "Sensitization of TRPA1 by PAR2 contributes to the sensation of inflammatory pain", The Journal of Clinical Investigation, 117(7), 1979-1987 (2007).
【非特許文献５】Yusaku IWASAKI, et al. "TRPA1 Agonists - Allyl Isothiocyanate and Cinnamaldehyde - Induce Adrenaline Secretion", Biosci. Biotechnol. Biochem. 72(10), 2608-2614 (2008).
【非特許文献６】Yukiko OKUMURA, et al. "Activation of TRPV1 and TRPA1 by Black Pepper Components", Biosci. Biotechnol. Biochem. 74(5), 1068-1072 (2010).
【非特許文献７】Toshihide YOSHIDA, et al. "Effects of Capsaicin and Isothiocyanate on Thermogenesis of Interscapular Brown Adipose Tissue in Rats", J. Nutr. Sci. Vitaminol. 34, 587-594 (1988).
【非特許文献８】Masataka NARUKAWA, et al. "Galangal Pungent Component, 1'-Acetoxychavicol Acetate, Activates TRPA1", Biosci. Biotechnol. Biochem. 74(8), 1694-1696 (2010).
【非特許文献９】R. Othman, et al. "Bioassay-guided isolation of a vasorelaxant active compound from Kaempferia galanga L.", Phytomedicine, 13, 61-66 (2006).
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の解決しようとする課題は、ＴＲＰＡ１活性化作用を有する組成物の提供であり、当該ＴＲＰＡ１活性化組成物を含有する飲食品、医薬品、香粧品、口腔用組成物、香味料組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記目的を達成するために鋭意研究を重ねた結果、バンウコン抽出物、その分画物、バンウコン精油、バンウコンに含まれる成分のうちｐ−メトキシ桂皮酸エチル又は桂皮酸エチルが優れたＴＲＰＡ１活性を有することを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は以下の通りである。
（１）バンウコン（Kaempferia  galanga L.）の抽出物又はその分画物、或いはバンウコンの精油を有効成分として含有するＴＲＰＡ１活性化組成物、
（２）ｐ−メトキシ桂皮酸エチル、桂皮酸エチルのうち少なくとも１種を有効成分として含有するＴＲＰＡ１活性化組成物、
（３）上記ｐ−メトキシ桂皮酸エチル、桂皮酸エチルがバンウコンの抽出物、分画物、又は精油由来であるＴＲＰＡ１活性化組成物、
（４）上記（１）〜（３）のＴＲＰＡ１活性化組成物を含有することを特徴とする飲食品、香味料組成物、医薬品、口腔用組成物、香粧品。
【発明の効果】
【０００９】
ＴＲＰＡ１の生理的役割については未だ解明されていない点が多い。公知のＴＲＰＡ１活性化剤（アリルイソチオシアナート、シンナムアルデヒド、ピペリン等）に本発明の活性化組成物が新たに加わることで、その役割解明の研究をいっそう進展させることができ、新たな鎮痛薬開発など創薬に寄与することが期待される。ＴＲＰＡ１は活性化されることで辛味、灼熱感、痛みなど様々な感覚を生じさせるので、感覚増強剤として新規な香味料、香粧品、医薬品、嗜好品などその応用範囲は広い。
特に、本発明のバンウコンの抽出物、分画物、精油、あるいはｐ−メトキシ桂皮酸エチル又は桂皮酸エチルを有効成分とするＴＲＰＡ１活性組成物を摂取することで、例えば体熱産生などの生理効果が期待される。その結果、ヒトの体温上昇効果やエネルギー代謝亢進によるいわゆるダイエット効果などの有用性が見込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物及び製造例３のバンウコン精油のＴＲＰＡ１活性を示したグラフである。
【図２】ｐ−メトキシ桂皮酸エチル及び桂皮酸エチルのＴＲＰＡ１活性を示したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（１）原材料
本発明で用いられるショウガ科バンウコン属バンウコン（Kaempferia galanga L.）は、その根茎部が用いられる。
本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物は根茎部をそのまま用いても良く、これらを乾燥した乾燥体、もしくは乾燥後粉砕した粉末を用いることもできる。また、これらを溶媒抽出、圧搾、酵素分解、超臨界抽出、水蒸気蒸留、濃縮、希釈、固液分離、精製等の公知の技術を単独あるいは組み合わせて得られるエキスあるいは粉末であってもよい。
【００１２】
（２）バンウコンの抽出物
各種の抽出法の中でも、好ましい方法としては溶媒抽出が挙げられる。用いられる溶媒としては、例えば水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、アセトン、１,３−ブチレングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン、酢酸、酢酸エチル、エーテル、へキサン等およびこれらの混合溶媒が挙げられる。
中でも、水、エタノール又はエタノール水溶液（エタノール濃度（Ｗ／Ｗ）が１０〜９０％、好適には３０〜７０％）が特に好ましい。
【００１３】
用いる溶媒の量は特に限定されるものではないが、通常はバンウコン根茎部の乾燥体1質量部に対して０.５〜５０質量部、好ましくは１.０〜３０質量部、特に好ましくは５.０〜２０質量部で用いられる。溶媒量が植物の乾燥体１質量部に対して０.５質量部未満の場合は、溶媒の種類によっては抽出が十分でない場合があり、溶媒量が５０質量部を超える場合は経済的に有利でない場合がある。
抽出方法としては、そのまま又は粉砕物を適当な抽出溶媒に浸漬する方法、加温下（常温〜溶媒の沸点の範囲）攪拌する方法等によって抽出物を得ることができる。
例えば、バンウコン根茎部の粉砕物を室温下の５０％エタノール中で１０〜６０分間攪拌して抽出物を得る方法や、バンウコン根茎部の粉砕物を１００℃加熱還流下の水中で３０〜６０分間攪拌して抽出物を得る方法などが挙げられる。
【００１４】
上記の抽出操作で得られた抽出物は、香気成分を除去してもよい。抽出物から香気成分を除去する方法としては、溶媒抽出を行う方法（例えば米国特許第３９５０２６６号明細書参照）、超臨界二酸化炭素を用いる方法（例えば特開平３−９９８５号公報参照）、合成吸着樹脂を用いる方法（例えば特開２００３−１０５３３７号公報参照）などを単独あるいは適宜組み合わせて用いることができる。
【００１５】
（３）バンウコン抽出物の分画物
また、低極性画分を目的として得られた抽出物を分画してもよい。特に、合成吸着剤による分画が好ましい。本発明に用いる合成吸着剤は、一般に不溶性の三次元架橋構造ポリマーであってイオン交換基のような官能基を実質的に持たないものである。
本発明に用いる合成吸着剤としては、その母体がスチレン系のスチレン−ジビニルベンゼン共重合体、例えば三菱化学株式会社製の「セパビーズＳＰ７０（商品名）」（細孔分布：細孔容積１.６ｍＬ／ｇ、比表面積８７０ｍ2／ｇ、最頻度半径が７１Å）や「ダイヤイオンＨＰ２０（商品名）」（細孔分布：細孔容積１.３ｍＬ／ｇ、比表面積５９０ｍ2／ｇ、最頻度半径が２６０Å）等が使用できるが、これらに限るものではない。
【００１６】
（４）バンウコンの精油
バンウコンの根茎を水蒸気蒸留装置に仕込み、常圧にて蒸気（１００℃）を導入し、原料を通過した抽出水蒸気をコンデンサーで冷却し、凝集液を回収してオイル部のみを分離し、さらにアルコールを加え冷却濾過を行うことで、バンウコン精油を得ることができる。
【００１７】
（５）ｐ−メトキシ桂皮酸エチル、桂皮酸エチル
バンウコンは古来より高血圧の治療に効果があるとされ、その主要活性物質を探索する研究において、バンウコンのジクロロメタン抽出物中に桂皮酸エチルとｐ−メトキシ桂皮酸エチルが存在することが確認され、それぞれ単離されている。そして、ラットに対して静脈内投与した結果、桂皮酸エチルについては血管緊張低下作用が確認され、一方、ｐ−メトキシ桂皮酸エチルについては弛緩作用が見られなかったことが報告されている（非特許文献９参照）。
今般、本発明者らはバンウコンに含まれる成分である桂皮酸エチルとｐ−メトキシ桂皮酸エチルについてＴＲＰＡ１活性化試験を行ったところ、意外にも双方、特にｐ−メトキシ桂皮酸エチルに高い値のＴＲＰＡ１活性を確認した（図２参照）。
【００１８】
（６）組成物に添加する任意成分
本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物においては、飲食品用、香粧品又は医薬用として通常用いられている他の任意成分を含有させてもよい。
用いられる任意成分としては、例えば香味料、甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、苦味料、酸味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、可塑剤、防腐剤、界面活性剤及び香料などであり、これらを添加して各種製剤・剤型として用いることもできる。
【００１９】
（７）組成物の製剤化
本発明のバンウコン抽出物あるいは分画物の使用形態は、そのまま或いは希釈した状態、乳化状態、更には粉化した様々な製剤の形で用いることができる。
【００２０】
（８）香味料組成物
本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物は、その原材料のバンウコンに特有の芳香と辛味があるので、既存の各種香味料を適宜添加して新規でユニークな香味料組成物を調製することができる。
添加する既存の香味料としては、例えばアセト酢酸エチル、アセトフェノン、アニスアルデヒド、α−アミルシンナムサルデヒド、アントラニル酸メチル、イオノン、イソオイゲノール、イソ吉草酸イソアミル、イソ吉草酸エチル、イソチオシアン酸アリル、イソチオシアン酸３−ブテニル、
【００２１】
イソチオシアン酸４−ペンテニル、イソチオシアン酸ベンジル、イソチオシアン酸３−メチルチオプロピル、イソチオシアネート類、インドール及びその誘導体、γ−ウンデカラクトン、エステル類、エチルバニリン、エーテル類、オイゲノール、オクタノール、オクタナール、オクタン酸エチル、ギ酸イソアミル、ギ酸ゲラニル、ギ酸シトロネリル、ケイ皮酸、ケイ皮酸エチル、ケイ皮酸メチル、ケトン類、ゲラニオール、酢酸イソアミル、酢酸エチル、酢酸ゲラニル、酢酸シクロヘキシル、酢酸シトロネリル、酢酸シンナミル、酢酸テルピニル、酢酸フェネチル、酢酸ブチル、酢酸ベンジル、
【００２２】
酢酸リナリル、シクロヘキシルプロピオン酸アリル、シトラール、シトロネラール、シトロネロール、１,８−シネオール、脂肪酸類、脂肪族高級アルコール類、脂肪族高級アルデヒド類、脂肪族高級炭化水素類、シンナミルアルコール、シンナムアルデヒド、チオエーテル類、チオール類、デカナール、デカノール、デカン酸エチル、テルピネオール、リモネン、ピネン、ミルセン、タピノーレン、テルペン系炭化水素類、γ−ノナラクトン、バニリン、パラメチルアセトフェノン、ヒドロキシシトロネラール、ヒドロキシシトロネラールジメチルアセタール、ピペロナール、フェニル酢酸イソアミル、フェニル酢酸イソブチル、フェニル酢酸エチル、
【００２３】
フェノールエーテル類、フェノール類、フルフラール及びその誘導体、プロピオン酸、プロピオン酸イソアミル、プロピオン酸エチル、プロピオン酸ベンジル、ヘキサン酸、ヘキサン酸アリル、ヘキサン酸エチル、ヘプタン酸エチル、ｌ−ペリラアルデヒド、ベンジルアルコール、ベンズアルデヒド、芳香族アルコール類、芳香族アルデヒド類、ｄ−ボルネオール、マルトール、Ｎ−メチルアントラニル酸メチル、メチルβ−ナフチルケトン、酪酸、酪酸イソアミル、酪酸エチル、酪酸シクロヘキシル、酪酸ブチル、ラクトン類、リナロオール等の合成或いは天然由来の香料の他、オレンジ、レモン、ライム、グレープフルーツなどシトラス系精油類、アップル、バナナ、グレープ、メロン、ピーチ、パイナップル、ストロベリーなどフルーツ系の精油或いは回収フレーバー、
【００２４】
ミルク、クリーム、バター、チーズ、ヨーグルトなど乳系の抽出香料、緑茶、ウーロン茶、紅茶、コーヒー、ココアなど嗜好品系の回収フレーバー、アサノミ、アサフェチダ、アジョワン、アニス、アンゼリカ、ウイキョウ、ウコン、オレガノ、オールスパイス、オレンジノピール、カショウ、カッシア、カモミール、カラシナ、カルダモン、カレーリーフ、カンゾウ、キャラウェー、クチナシ、クミン、クレソン、クローブ、ケシノミ、ケーパー、コショウ、ゴマ、コリアンダー、サッサフラス、サフラン、サボリー、サルビア、サンショウ、
【００２５】
シナモン、シャロット、ジュニパーベリー、ショウガ、スターアニス、セイヨウワサビ、セロリー、ソーレル、タイム、タマネギ、タマリンド、タラゴン、チャイブ、ディル、トウガラシ、ナツメグ、ニガヨモギ、ニジェラ、ニンジン、ニンニク、バジル、パセリ、バニラ、パプリカ、ヒソップ、フェネグリーク、ホースラディッシュ、マジョラム、ミョウガ、ラベンダー、リンデン、レモングラス、レモンバーム、ローズ、ローズマリー、ローレル、ワサビなどから得られる香辛料抽出物、アイスランドモス、アカヤジオウ、アケビ、アサ、
【００２６】
アサフェチダ、アジアンタム、アジョワン、アズキ、アスパラサスリネアリス、アップルミント、アーティチョーク、アニス、アボカド、アマチャ、アマチャズル、アミガサユリ、アミリス、アーモンド、アリタソウ、アルカンナ、アルテミシア、アルニカ、アルファルファ、アロエ、アンゴスツラ、アンゴラウィード、アンズ、アンズタケ、アンゼリカ、アンバー、アンバーグリス、アンブレット、イカ、イカリソウ、イグサ、イースト、イタドリ、イチゴ、イチジク、イチョウ、イノコヅチ、イランイラン、イワオウギ、インペラトリア、インモルテル、ウィンターグリーン、ウォータークレス、ウコギ、ウコン、ウスバサイシン、ウッドラフ、ウニ、ウメ、ウーロンチャ、エゴマ、エノキダケ、エビ、エビスグサ、エリゲロン、エルダー、エレウテロコック、エレカンペン、エレミ、エンゴサク、エンジュ、エンダイブ、欧州アザミ、オウレン、
【００２７】
オオバコ、オカゼリ、オキアミ、オーク、オークモス、オケラ、オスマンサス、オポポナックス、オミナエシ、オモダカ、オランダセンニチ、オリガナム、オリス、オリバナム、オリーブ、オールスパイス、オレンジ、オレンジフラワー、カイ、カイニンソウ、カカオ、カキ、カサイ、カシューナッツ、カスカラ、カスカリラ、カストリウム、カタクリ、カツオブシ、カッシー、カッシャフィスチュラ、カテキュ、カニ、カーネーション、カノコソウ、カモミル、
【００２８】
カヤプテ、カラシ、カラスウリ、カラスビシャク、ガラナ、カラムス、ガランガ、カーラント、カリッサ、カリン、カルダモン、ガルバナム、カレー、カワミドリ、カンゾウ、ガンビア、カンラン、キウィーフルーツ、キカイガラタケ、キキョウ、キク、キクラゲ、キササゲ、ギシギシ、キダチアロエ、キナ、キハダ、ギボウシ、ギムネマシルベスタ、キャットニップ、キャラウェイ、キャロップ、キュウリ、キラヤ、キンミズヒキ、グァバ、グァヤク、クコ、クサスギカズラ、クサボケ、クズ、クスノキ、クスノハガシワ、グーズベリー、
【００２９】
クチナシ、クベバ、クマコケモモ、グミ、クミン、グラウンドアイビー、クララ、クラリセージ、クランベリー、クリ、クルミ、クリーム、グレインオブパラダイス、クレタディタニー、グレープフルーツ、クローバー、クローブ、クロモジ、クロレラ、クワ、クワッシャ、ケイパー、ゲットウ、ケード、ケブラコ、ゲルマンダー、ケンチュール、ケンポナシ、ゲンノショウコ、コウジ、コウダケ、コウチャ、コウホネ、コカ、コガネバナ、コクトウ、コクルイ、ココナッツ、ゴシュユ、コショウ、コスタス、コストマリー、コパイパ、コーヒー、コブシ、ゴボウ、ゴマ、コーラ、コリアンダー、コルツフート、ゴールデンロッド、コロンボ、コンサイ、コンズランゴ、コンフリー、サイプレス、
【００３０】
魚、サクラ、サクランボ、ザクロ、サケカス、ササ、ササクサ、サーチ、サッサフラス、サフラン、サポジラ、サボテン、サラシナショウマ、サルサパリラ、サルシファイ、サルノコシカケ、サンザシ、サンシュユ、サンショウ、サンタハーブ、サンダラック、サンダルウッド、サンダルレッド、シイタケ、ジェネ、シダー、シトラス、シトロネラ、シヌス、シベット、シマルーバ、シメジ、シャクヤク、ジャスミン、ジャノヒゲ、ジャボランジ、シャロット、シュクシャ、ジュニパーベリー、ショウガ、ショウユ、ショウユカス、ジョウリュウシュ、ショウロ、シロタモギタケ、ジンセン、シンナモン、酢、スイカ、スイセン、スギ、スターアニス、スターフルーツ、スチラックス、スッポン、スッポンタケ、ズドラベッツ、スネークルート、スパイクナード、スプルース、
【００３１】
スベリヒユ、スローベリー、セイボリー、セキショウ、セージ、ゼドアリー、セネガ、ゼラニウム、セロリー、センキュウ、センタウリア、センゲン、セントジョーンズウォルト、センナ、ソース、ダイオウ、ダイズ、タイム、タケノコ、タコ、タデ、ダバナ、タマゴ、タマゴタケ、タマネギ、タマリンド、ダミアナ、タモギタケ、タラゴン、タラノキ、タンジー、タンジェリン、タンポポ、チェリモラ、チェリーローレル、チェリーワイルド、チガヤ、チコリ、チーズ、チチタケ、チャイブ、チャービル、チャンパカ、チュベローズ、チョウセンゴミシ、チラータ、ツクシ、ツケモノ、ツタ、ツバキ、ツユクサ、ツリガネニンジン、ツルドクダミ、ディアタング、ティスル、ディタニー、ディル、デーツ、
【００３２】
テンダイウヤク、テンマ、トウガラシ、トウキ、ドウショクブツタンパクシツ、ドウショクブツユ、トウミツ、トウモロコシ、ドクダミ、トチュウ、ドッググラス、トマト、ドラゴンブラッド、ドリアン、トリュフ、トルーバルサム、トンカ、ナギナタコウジュ、ナシ、ナスターシャム、ナッツ、ナットウ、ナツメ、ナツメグ、ナデシコ、ナメコ、ナラタケ、ニアウリ、ニュウサンキンバイヨウエキ、ニンジン、シンニク、ネズミモチ、ネットル、ネムノキ、ノットグラス、バイオレット、パイナップル、ハイビスカス、麦芽、ハコベ、バジル、ハス、ハスカップ、パースカップ、パセリ、バター、バターオイル、バターミルク、バーチ、ハチミツ、パチュリー、バックビーン、ハッコウシュ、ハッコウニュウ、ハッコウミエキ、パッションフルーツ、ハツタケ、バッファローベリー、ハトムギ、ハナスゲ、バナナ、バニラ、ハネーサックル、
【００３３】
パパイヤ、バーベリー、ハマゴウ、ハマスゲ、ハマナス、ハマボウフウ、ハマメリス、バラ、パルマローザ、パンダナ、バンレイシ、ヒキオコシ、ヒシ、ピスタチオ、ヒソップ、ヒッコリー、ピーナッツ、ヒノキ、ヒバ、ピプシシワ、ヒメハギ、ヒヤシンス、ヒラタケ、ビワ、ビンロウ、フェイジョア、フェネグリーク、フェンネル、フジバカマ、フジモドキ、フスマ、フーゼルユ、プチグレイン、ブチュ、ブドウ、ブドウサケカス、フトモモ、ブナ、ブナハリタケ、ブラックキャラウェイ、ブラックベリー、プラム、ブリオニア、プリックリーアッシュ、プリムローズ、プルネラ、ブルーベリー、ブレッドフルーツ、
【００３４】
ヘイ、ベイ、ヘーゼルナッツ、ベチバー、ベーテル、ベニバナ、ペニーロイヤル、ヘビ、ペピーノ、ペプトン、ベルガモット、ベルガモットミント、ペルーバルサム、ベルベナ、ベロニカ、ベンゾイン、ボアドローズ、ホアハウンド、ホウ、ホウキタケ、ホウショウ、ボウフウ、ホエイ、ホオノキ、ホースラディッシュ、ボタン、ホップ、ポピー、ポプラ、ポポー、ホホバ、ホヤ、ボルドー、ボロニア、マイタケ、マグウォルト、マシュマロー、マジョラム、マスティック、マソイ、マタタビ、マチコ、マツ、マツオウジ、マッシュルーム、マツタケ、マツブサ、マツホド、マテチャ、マメ、マリーゴールド、マルバダイオウ、マルメロ、マレイン、マロー、マンゴー、マンゴスチン、ミカン、ミシマサイコ、ミソ、ミツマタ、ミツロウ、ミート、ミモザ、ミョウガ、ミルク、ミルテ、ミルフォイル、ミルラ、ミロバラン、ムギチャ、ムスク、ムラサキ、メスキート、メドウスィート、メハジキ、メープル、メリッサ、メリロット、
【００３５】
メロン、モウセンゴケ、モニリアバイヨウエキ、モミノキ、モモ、モロヘイヤ、ヤクチ、ヤマモモ、ユーカリ、ユキノシタ、ユズ、ユッカ、ユリ、ヨウサイ、ヨロイグサ、ライオンズフート、ライチ、ライフエバーラスティングフラワー、ライム、ライラック、ラカンカ、ラカンショウ、ラズベリー、ラタニア、ラディッシュ、ラブダナム、ラベンダー、ラングウォルト、ラングモス、
【００３６】
ランブータン、リキュール、リーク、リツェア、リナロエ、リュウガン、リョウフンソウ、リョクチャ、リンゴ、リンデン、リンドウ、ルー、ルリジサ、レセダ、レモン、レモングラス、レンギョウ、レンゲ、レンブ、ローズマリー、ロベージ、ローレル、ロンゴザ、ワサビ、ワタフジウツギ、ワームウッド、ワームシード、ワラビ、ワレモコウなどから得られる天然香料が例示され、適宜選択して使用される。
【００３７】
香味料の添加量は特に限定されるものではないが、一般的には本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物を含む組成物中、０.０００１〜５０質量％、好ましくは０.００１〜３０質量％、最も好ましくは０.０１〜１０質量％の添加量となるように配合される。
【００３８】
（９）飲食品
本発明に関わるＴＲＰＡ１活性化組成物を含有する飲食品を製造するには、上記の方法で製造した成分またはその製剤を用いることができ、慣用の手段を用いて、食用に適した状態、例えば、顆粒状、粒状、錠剤、カプセル剤、ソフトカプセル剤、ペースト状等に形成したものを用いることができる。
この飲食品は、香辛料、清涼菓子や嗜好品としてそのまま食用に供してもよく、また種々の食品（例えばハム、ソーセージ、かまぼこ、ちくわ、パン、バター、粉乳、チューインガム、ビスケット、キャンデー等の菓子など）に添加して使用、あるいは水、酒類、果汁、牛乳、清涼飲料水等の飲料に添加して使用してもよい。
【００３９】
（１０）医薬品
本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物を医薬品として使用する場合には、そのままでも種々の投与形態で使用できるが、好ましくは錠剤、丸剤、粉剤、シロップ剤、乳剤、液剤、カプセル剤のような製剤化した内服薬、注射剤として使用する。
また、外用剤としては、クリーム、パップ剤、浴用剤などに使用できる。
【００４０】
本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物の摂取量は、年齢、体重、症状、疾患の程度、医薬品や飲食品の形態等により適宜選択・決定されるが、例えば、抽出、乾燥した粉末として一日当たり１ｍｇ〜１０ｇ程度、好ましくは１０ｍｇ〜１ｇとされ、一日数回に分けて摂取してもよい。
【００４１】
（１１）香粧品
本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物は、その原材料のバンウコンに特有の芳香と辛味があるので、香粧品に適用することができる。
ＴＲＰＡ１活性化組成物を含む香粧品として化粧料組成物や浴用剤組成物などを例示することができ、それぞれ液状、乳液状、ぺースト状、ゲル状、パウダー状（粉末状）、顆粒状、ペレット状、スティック状、固形状等の何れの形態として提供されてもよい。
【００４２】
化粧料組成物としては、化粧水（ローション）、乳液、クリーム、オイル、軟膏、パック、リップ、口紅、ファンデーション、アイライナー、頬紅、マスカラ、アイシャドウ、マニキュア・ペディキュア、爪被覆剤、爪被覆除去剤、ひげ剃り用剤、シャンプー、リンス、ヘアトリートメント、ヘアトニック、ヘアスプレー、ヘアクリーム、ヘアローション、整髪料、育毛料、パーマネント液、染毛料、ハンドソープ・ボディーソープ、洗顔料・石鹸類等が上げられる。
【００４３】
浴用剤組成物は、入浴時、浴湯に投じて使用するもので、液状、粉末状、顆粒状、固形状、ゲル状など性状は何れであってもよい。粉末、顆粒又は固形状である場合は、本発明の抗酸化性植物抽出液を乾燥せず、液状のままで吹きつけて乾燥することにより製造することも可能である。
【００４４】
（１２）口腔用組成物
本発明のＴＲＰＡ１活性化組成物を口腔用組成物として使用する場合には、歯磨き類、洗口剤、口中清涼剤、トローチ、うがい薬として使用できる。
【実施例】
【００４５】
以下、実施例等を挙げて本発明をさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
〔原材料〕
製造例に用いたバンウコン根茎は、外国産（中国、タイ、インドネシア）の乾燥品を購入して使用した。
ｐ−メトキシ桂皮酸エチルと桂皮酸エチルは、いずれも東京化成工業(株)製の試薬Ethyl 4-Methoxycinnamate、Ethyl Cinnamateを購入して使用した。
【００４６】
〔製造例１〕バンウコンのエタノール抽出物
バンウコン根茎の乾燥品１００ｇに対して２ｋｇの５０％エタノール水溶液を加えて、室温下１時間撹拌した。残渣を濾過除去して得られた抽出液を減圧濃縮、凍結乾燥し１２ｇの粉末品を得た。
【００４７】
〔製造例２〕バンウコンのエタノール抽出物の分画物
バンウコン根茎の乾燥品１００ｇに対して２ｋｇの５０％エタノール水溶液に浸漬し室温下１０分間、攪拌しながら抽出を行った。この抽出液に蒸留水を加えてエタノール濃度を３０％に調整し、三菱化学株式会社製の合成吸着剤「セパビーズ  ＳＰ７０（商品名）」を充填したカラム（直径１３５ｍｍ×長さ１２０ｃｍ）に導入した。さらに３０％エタノール水溶液にて溶出した。これを濃縮乾固して３ｇの試料を得た。
【００４８】
〔製造例３〕バンウコン精油
バンウコン根茎を水蒸気蒸留装置に２ｋｇ仕込んだ。常圧にて、原料の下部から蒸気（１００℃）を導入し、原料を通過した抽出水蒸気をコンデンサー（５℃）で冷却し、凝集液を回収し、オイル部のみを分離し、さらに９５％エタノール水溶液を加え冷却濾過を行うことで、バンウコン精油２ｇを得た。
【００４９】
＜ＴＲＰＡ１活性の測定＞
ＴＲＰＡ１を発現させたＨＥＫ  Ｔ−ＲＥｘ細胞は、非特許文献８の方法に従って、以下の通り調製した。
ｈＴＲＰＶ１のｍＲＮＡはAgilent Technologies社製のヒト脳一本鎖ｃＤＮＡ (Santa Clara, CA, USA)から入手した。また、ｈＴＲＰＡ１のｍＲＮＡはヒトＷＩ３８細胞から抽出した。得られたｍＲＮＡを鋳型としてＲＴ−ＰＣＲにより増幅したｈＴＲＰＶ１  ｃＤＮＡを、哺乳類細胞用遺伝子発現ベクターであるｐｃＤＮＡ３  (invitrogen社製（Carlsbad, CA, USA)へ組み込み、Qiagen社製（Hilden, Germany）の遺伝子導入試薬であるSuperFect transfection reagentを用いてヒト胎児腎由来ＨＥＫ２９３Ｔ細胞に導入した。ｐｃＤＮＡ３にはネオマイシン耐性遺伝子が組み込まれている。そこで７５０μｇ／ｍＬの抗生物質Ｇ４１８存在下で培養後、生き残った細胞を選抜することで、ｈＴＲＰＶ１を安定的に発現させたＨＥＫ２９３Ｔ細胞株を樹立した。一方、安定的にｈＴＲＰＡ１を発現させたＨＥＫ細胞は、Invitrogen社のテトラサイクリン制御Ｔ−ＲＥｘ発現システムにより誘導した。ｈＴＲＰＡ１  ｍＲＮＡを鋳型としてＲＴ−ＰＣＲにより増幅させたｈＴＲＰＡ１  ｃＤＮＡ  を、哺乳類細胞用遺伝子発現ベクターであるｐｃＤＮＡ４／ＴＯ  (invitrogen社製)へ組み込み、invitrogen社の遺伝子導入試薬であるLipofectamin 2000 reagentを用いてＨＥＫ  Ｔ−ＲＥｘ細胞に導入した。ｐｃＤＮＡ４／ＴＯはＺｅｏｃｉｎおよびブラストサイジン耐性遺伝子が組み込まれている。そこで、抗生物質であるＺｅｏｃｉｎ５００μｇ／ｍＬおよびブラストサイジン１０μｇ／ｍＬを用いて安定的にｈＴＲＰＡ１遺伝子を保持するＨＥＫ  Ｔ−ＲＥｘ細胞株を選択し、樹立した。
【００５０】
次いで、ＴＲＰＡ１の活性化度についても非特許文献８の方法に従って測定した。
ＴＲＰＡ１が活性化されることにより細胞内へＣａ2+が流入する。そこで、Ｃａ2+濃度に応じて蛍光量が増すＣａ2+濃度指示薬を用いてＴＲＰＡ１の活性化度を測定することができる。
具体的には、Ｃａ2+濃度指示薬を予めＨＥＫ  Ｔ−ＲＥｘ細胞内に取り込ませておき、Ｆｌｅｘ  ＳｔａｔｉｏｎIIマイクロプレートリーダー（Molecula
r Devices、Sunnyvale、CA、USA）にて蛍光量を測定した。
【００５１】
ＴＲＰＡ１活性（％）は以下の式で算出した。
ＴＲＰＡ１活性（％）＝（サンプル投与時の蛍光量／イオノマイシン(注)投与時の最大蛍光）×１００
(注)イオノマイシン（Ionomycin）は、Ｃａ2+と複合体を形成しＣａ2+の細胞膜透過性を高めるため、最大蛍光を測定できる。なお、イオノマイシンは、試薬（Sigma、St. Luis、Mo、USA）を使用した。
【００５２】
ポジティブコントロールとしてアリルイソチオシアナート（和光純薬工業(株)、大阪）を用いた。さらに、サンプルがアゴニストであることを確かめるため、アンタゴニストとして公知である化合物ＨＣ−０３００３１（Sigma、St. Luis、Mo、USA）を投与する実験を併せて行った。
【００５３】
図１、図２に示すように、ＴＲＰＡ１を発現させたＨＥＫ  Ｔ−ＲＥｘ細胞において、バンウコン抽出物（製造例１）、バンウコン精油（製造例３）、ｐ−メトキシ桂皮酸エチル（東京化成工業(株)、東京）ならびに桂皮酸エチル（東京化成工業(株)、東京）添加時に高いＴＲＰＡ１活性が見られ、その活性はアンタゴニスト（ＨＣ−０３００３１）添加時のＴＲＰＡ１活性と比較し、有意であった。
またＴＲＰＡ１を発現させていないＨＥＫ  Ｔ−ＲＥｘ細胞ではＴＲＰＡ１活性が見られず、本応答はＴＲＰＡ１に特異的であった。
【００５４】
〔実施例１〕（混合茶飲料）
９０℃の湯５００ｍｌに対して、緑茶葉１ｇ、はとむぎ８ｇ、大麦１ｇ、玄米０.２ｇ、プーアル茶０.２ｇ、どくだみ茶０.１ｇ、はぶ茶０.１ｇ、チコリー０.１ｇを添加し、８分間抽出を行った。
抽出後固液分離を行い、ビタミンＣ  ０.１ｇと水を加えて１０００ｍｌとし炭酸水素ナトリウムにてｐＨを５.５に調整後、製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物を０.１％となるように添加して、混合茶飲料を得た。
【００５５】
〔実施例２〕（清涼飲料水）
バレンシアオレンジ果汁３０ｍｌ、レモン果汁３ｍｌ、果糖１.５ｇ、クエン酸０.５ｇ、ビタミンＣ  ０.１ｇ、に製造例２のバンウコン５０％エタノール抽出物の分画物０.１ｇ加え、水を加えて１００ｍｌとし、よく攪拌した後に炭酸ガスを封入し、清涼飲料水を得た。
【００５６】
〔実施例３〕（チューインガム）
ガムベース５０ｇに砂糖１００ｇ、香料０.５ｇ、製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物の１％水溶液を３０ｇ添加し、ニーダーを使用して練り、成型後完成した。
【００５７】
〔実施例４〕（ビスケット）
強力粉１００ｇ、ショートニング１００ｇ、上白糖４０ｇ、薄力粉３０ｇ、水  ２０ｇ、製造例２のバンウコン５０％エタノール抽出物の分画物１０ｇ、全脂粉乳４ｇ、重曹０.６ｇを混合し、成型したのち焼成してビスケットを得た。
【００５８】
〔実施例５〕（キャンデー）
水飴２８０ｇ、グラニュー糖３６０ｇ、製造例２のバンウコン５０％エタノール抽出物の分画物２ｇを混合した後、１５５℃まで加熱した。その後、１２０℃まで冷却し、クエン酸１２ｇ、香料１.２ｇ、グリセリン５０ｇを添加し、成型、冷却後完成した。
【００５９】
〔実施例６〕（顆粒剤）
製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物５.０ｇに、乳糖５.０ｇ、トウモロコシデンプン５.０ｇを加えて練合し、造粒した後、乾燥して整粒した。
【００６０】
〔実施例７〕（カプセル剤）
製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物５.０ｇ、トウモロコシデンプン５.０ｇ、乳糖５.０ｇ、結晶セルロース１.０ｇを充分に混合した後、カプセルに充填し、カプセル剤４０個を製造した。
【００６１】
〔実施例８〕（錠剤）
製造例３のバンウコン精油５０ｇにトウモロコシデンプン２.０ｇ、乳糖５０ｇ、ステアリン酸カルシウム０.２ｇ、タルク１.８ｇを充分に混合した後、打錠機により打錠し、重量０.５２ｇの錠剤を２００錠製造した。
【００６２】
［実施例９］（スキンケア用クリーム）
処方例１にしたがい、水相部として、精製水に１,３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール１５００などの保湿剤を配合したものを用意し、これに製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物を０.３％配合した。油相部として、ステアリン酸、ステアリルアルコール、水添ラノリンなどの固形油分、スクワラン、オクチルドデカノールなどの液体油分、防腐剤、界面活性剤などの油性成分を配合したものを用意した。
水相部を徐々に加熱し、約８０℃になったところで、これに、ほぼ同じ温度に加熱された油相部を少しずつ添加し、乳化して本発明のスキンケア用クリームを製造した。
【００６３】
【表１】
2014169240.tif 000002
【００６４】
［実施例１０］（浴用剤組成物）
処方例２にしたがい、硫酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムに、香料を添加し混合した浴用剤基剤を用意し、製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物を２.０％配合し、本発明の浴用剤組成物を製造した。
【００６５】
【表２】
2014169240.tif 000003
【００６６】
［実施例１１］（洗口剤）
処方例３にしたがい、安息香酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、硬化ひまし油に、香料などを添加した洗口剤基剤を用意し、製造例１のバンウコン５０％エタノール抽出物を０.１％配合し、本発明の洗口剤を製造した。
【００６７】
【表３】
2014169240.tif 000004
【産業上の利用可能性】
【００６８】
本発明により、ＴＲＰＡ１活性化組成物を提供することができる。それを摂取することで、例えば体熱産生効果が期待できる。
【図１】
2014169240.tif 000005
【図２】
2014169240.tif 000006