(57)【要約】      （修正有）【課題】臨床適応可能なＳＥＣＭ誘導生検システム／プローブの装置、方法、及びシステムを提供する。【解決手段】工程及び構成部は、（ａ）ＳＥＣＭ内視鏡プローブ、（ｂ）ＳＥＣＭ画像を観察した病理組織学的特徴に基づく診断、及び／又は、（ｃ）画像誘導レーザーマーキングシステムなどを含む。【選択図】図３
2014097401.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物組織上又は生物組織内の位置を決定するための装置であって、
光学的撮像技術を用いて取得した生物組織の少なくとも一部の少なくとも一つの画像に関連付けられた情報を受け、
前記情報に基づいて、少なくとも一つの電磁放射を用いて、前記少なくとも一部の少なくとも一つの場所の上又は内部に視覚的変化をもらすように構成された、少くとも一つの構成部を含む、装置。
【請求項２】
前記少なくとも一つの画像は、前記少なくとも一部の体積画像を含む、請求項１記載の装置。
【請求項３】
前記体積画像は、略１０ｍｍから１００ｍｍの間の径を有する円筒状の画像である、請求項２記載の装置。
【請求項４】
前記体積画像は、最大で略１ｍの拡張部を有する、請求項２記載の装置。
【請求項５】
前記視覚的変化に関連付けられたデータを受け、
前記データに基づいて、前記少なくとも一部の可視化を誘導する構成された、少なくとも一つのさらなる構成部をさらに含む、請求項２記載の装置。
【請求項６】
前記少なくとも一つの構成部は、前記少なくとも一部を切除することによって、前記視覚的変化をもたらす、請求項１記載の装置。
【請求項７】
前記少なくとも一部の切除は、前記少なくとも一部を前記少なくとも一つの電磁放射によって照射することによって実行される、請求項６記載の装置。
【請求項８】
前記少なくとも一つの構成部は、プローブの内部に位置し、
前記少なくとも一つの構成部によって制御されて、前記少なくとも一部の上又は内部に前記視覚的変化をもたらす、前記プローブに設けられた切除構成部をさらに含む、請求項１記載の装置。
【請求項９】
前記少なくとも一つの構成部は、前記情報を、少なくとも一つの導波構成部を介して取得するように構成され、
前記切除構成部は、前記少なくとも一つの電磁放射を前記少なくとも一つの導波構成部を介して提供して、前記視覚的変化をもたらすように構成されている、請求項８記載の装置。
【請求項１０】
前記光学的撮像技術は、共焦点顕微鏡技術を含む、請求項１記載の装置。
【請求項１１】
前記共焦点顕微鏡技術は、スペクトル符号化共焦点顕微鏡法技術である、請求項１０記載の装置。
【請求項１２】
前記光学的撮像技術は、光学的コヒーレンストモグラフィーを含む、請求項１記載の装置。
【請求項１３】
少なくとも一つのサンプルの少なくとも一つの領域から受けた信号に関連付けられたデータを提供するように構成された、少なくとも一つの分散用の第１の構成部と、
前記データに基づいて前記少なくとも一つの第１の構成部に関連付けられた焦点距離又は焦点位置の少なくとも一つを制御するように構成された、少なくとも一つの合焦用の第２の構成部と、を含む装置。
【請求項１４】
前記少なくとも一つのサンプルの少なくとも一つのさらなる領域から受けたさらなる信号に関連付けられたさらなるデータを提供する、少なくとも一つの第３の構成部をさらに含み、
前記領域と前記さらなる領域は、（ｉ）少なくとも部分的に重なる、又は、（ｉｉ）近傍に位置する、の少なくとも一つであり、
前記少なくとも一つの合焦用の第２の構成部は、前記データ又は前記さらなるデータの少なくとも一つに基づいて前記少なくとも一つの第１の構成部に関連付けられた前記焦点距離又は前記焦点位置の少なくとも一つを制御するように構成されている、請求項１３記載の装置。
【請求項１５】
前記分散用の構成部及び前記合焦用の構成部は、バルーンの中に設けられている、請求項１３記載の装置。
【請求項１６】
解剖学的組織の少なくとも一部を撮像する装置であって、
少なくとも一つの第１の電磁放射を前記少なくとも一部に供給して、前記少なくとも一部の表面の面に対して０度より大きく、９０度より小さい角度でサンプルの面を形成するように構成された、分散用の構成部を含む少なくとも一つの構成部と、
前記少なくとも一つの第１の電磁放射に関連付けられた前記サンプルの面から少なくとも一つの第２の電磁放射を受けて、前記少なくとも一つの第２の電磁放射の関数として情報を生成するように構成された少なくとも一つの第２の構成部と、
前記情報に基づいて制御信号を生成し、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の焦点面の場所をさらに制御する、少なくとも一つの第３の構成部と、を備えた装置。
【請求項１７】
前記少なくとも一つの第３の構成部は、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の少なくとも一部を用いて、前記サンプルの表面の場所に基づいて前記制御信号を生成するように構成されている、請求項１６記載の装置。
【請求項１８】
前記少なくとも一つの第２の構成部は、前記少なくとも一つの第２の電磁放射を少なくとも一つの第１の信号と少なくとも一つの第２の信号に分離する、請求項１６記載の装置。
【請求項１９】
前記少なくとも一つの第３の構成部は、前記少なくとも一つの第１の信号に基づいて、前記制御信号を生成し、
前記少なくとも一つの第２の信号の関数として、前記サンプルに関連付けられた少なくとも一つの画像を生成するようにさらに構成されている、請求項１８記載の装置。
【請求項２０】
前記情報の関数として、前記少なくとも一部の少なくとも一つの三次元画像を生成するように構成された少なくとも一つの第４の構成部をさらに備える、請求項１６記載の装置。
【請求項２１】
解剖学的組織の少なくとも一部を撮像する装置であって、
少なくとも一つの第１の電磁放射を前記少なくとも一部に供給して、前記少なくとも一部の表面の面に対して０度より大きく、９０度より小さい角度でサンプルの面を形成するように構成された、分散用の構成部を含む少なくとも一つの構成部と、
前記少なくとも一つの第１の電磁放射に関連付けられた前記サンプルの面から少なくとも一つの第２の電磁放射を受けて、前記少なくとも一つの第２の電磁放射の関数として情報を生成するように構成された少なくとも一つの第２の構成部と、
前記情報の関数として前記少なくとも一部の少なくとも一つの３次元画像を生成するように構成された、少なくとも一つの第３の構成部と、を備えた装置。
【請求項２２】
前記情報に基づいて制御信号を生成し、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の焦点面の場所をさらに制御する、少なくとも一つの第４の構成部を備えた、請求項２１記載の装置。
【請求項２３】
生物組織上又は生物組織内の位置を決定するための方法であって、
光学的撮像技術を用いて取得した生物組織の少なくとも一部の少なくとも一つの画像に関連付けられた情報を受け、
前記情報に基づいて、少なくとも一つの電磁放射を用いて、前記少なくとも一部の少なくとも一つの場所の上又は内部に視覚的変化をもらす、方法。
【請求項２４】
解剖学的組織の少なくとも一部を撮像する方法であって、
少なくとも一つの第１の電磁放射を前記少なくとも一部に供給して、前記少なくとも一部の表面の面に対して０度より大きく、９０度より小さい角度でサンプルの面を形成するように構成された、分散用の構成部を用いて、
前記少なくとも一つの第１の電磁放射に関連付けられた前記サンプルの面から少なくとも一つの第２の電磁放射を受けて、前記少なくとも一つの第２の電磁放射の関数として情報を生成し、
前記情報に基づいて制御信号を生成し、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の焦点面の場所をさらに制御する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願のクロスリファレンス］
本出願は、２００９年１月２０日出願の米国特許出願第６１／１４５９１４号、及び２００９年６月４日出願の米国特許出願第６１／１８４１８０号の優先権を主張する。これらの出願に開示された内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、顕微鏡画像情報によって誘導される内視鏡生検システムの代表的な実施形態、及びその関連する方法に関連する。
【背景技術】
【０００３】
多くの上皮性前癌及び初期癌状態診断の標準療法に、直接的、又は内視鏡／腹腔鏡を介して患者を目視検査することにより異常組織を特定する手法がある。上述の部位から生体組織を採取し、処理し、切除し、ヘマトキシリン・エオジン  （Ｈ＆Ｅ）によって染色し、病理学者による顕微鏡観察を行うことができる。病理学者は分解能を徐々に上げながらこのスライドを観察し、その構造及び細胞パターンを既知の様々な病態に対応するパターンと比較して、診断を行うことができる。
【０００４】
しかしながら、化生、異形成、初期癌は、目視により特定することはできない場合が多い。このようケースでは、とりわけ、結腸、食道、前立腺及び膀胱ではごく普通に行われている、無作為な部位から生体組織を採取すること（生検）が唯一の選択肢の場合がある。疾病が集中している場合、又は、疑わしい領域により広範囲にわたって不均一に分散している場合、無作為な生検手法は、干し草の山の中で１本の針を探すことと同程度に乏しい診断率となってしまい、患者管理も不確かとなる可能性がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
無作為な生検は、潜在的に関連し得る組織の０．１％未満の評価を容易にするのみなので、これらの手法は通常、重大なサンプリングの誤差及び診断の不確かさを生じる可能性を孕んでいる。この課題は手術用腫瘍境界の描写などの他のタスクにも影響を与え得るものであり、結果として、過剰な再切除、又は時間を消耗する凍結切片分析を全て行う原因となる。このため、目視検査に先立って、最も深刻な疾病が存在し得る部位に医師を導くことができる、生検を誘導する装置及び方法を提供する必要がある。
【０００６】
バレット食道とは、扁平上皮が腸上皮に変化する、特殊腸上皮化生（ＳＩＭ）と呼ばれる冠状の食道の状態である。重度又は長期の胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）によって起こると考えられているＢＥは、異形成進行を伴い、食道腺癌となる可能性がある。バレット食道の現在の管理として、初期段階の異形成又は腺癌を特定するための、４象限（４−ｑｕａｄｒａｎｔ）無作為生検による上部内視鏡検査からなる定期的な内視鏡検査を含むことができる。この方法は、生検によって抽出された組織の低小領域（ｌｏｗ  ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ａｒｅａ）とＳＩＭ／異形成とを特定する内視鏡医の能力の乏しさにより妥協が生じるため、感度が低いことが問題であった。
【０００７】
過去において、生体医学の光学系の分野で、生体組織診断を改善するための撮像方法が開発された。この撮像方法は、一般的に、巨視的技術又は顕微鏡技術として分類することができる。
【０００８】
巨視的、例えば、広視野撮像法は、自己蛍光、蛍光寿命撮像、ＡＬＡ蛍光、反射及び吸収分光撮像、狭帯域撮像、及び、色素内視鏡検査を含む。これらの巨視的な方法を用いて、組織の広い領域を迅速に評価することができる。これらの多くの技術が妥協を伴うものである一方で、提供される情報は、診断医学で従来使われるものと大きく異なることがしばしばあった。
【０００９】
顕微鏡撮像法では、「光学的生検」とも呼ばれ、医師及び病理学者により親しまれた分解能スケールで組織を可視化することができる、もう一つのアプローチである。過去、生体病理組織診断に必要な構造及び細胞形態を可視化するために開発された低侵襲顕微内視鏡観察技術が、極めて小さい画角を容易にするが、プローブは通常、手作業で操作されて離散的な部位から画像を取得する（「ポイントサンプリング」）。この結果、かかる技術は、切除生検とほぼ同様に、サンプリングの限界の課題があり、誘導生検にはそれほど適していない可能性がある。
【００１０】
かかる顕微鏡撮像技術の一つとして、反射率共焦点顕微鏡（ＲＣＭ）が、〜１μｍの分解能で細胞構造の撮像を行い、組織と接触することなく微細構造を測定することができ、未承認の外因性造影剤の投与を不要することができるので、患者の非侵襲顕微鏡法に好適であると考えられる。
【００１１】
ＲＣＭは、組織からの多数重なった分散光を拒絶、又は無視し、密接に集光されたビームから反射された光の共焦点選択を採用することにより、構造的情報を含むわずかに後方散乱した光子を検出することができる。最も一般的には、ＲＣＭは、組織表面に対して平行な面で集光されたビームを迅速にスキャンすることによって実施することができるので、組織の横断画像又は正面画像を得ることができる。ＲＣＭの開口数（ＮＡ）が大きいと、極めて大きな空間分解能を得ることができる。光が不均一な組織を介して伝播することに起因する収差に敏感であるため、ＲＣＭによる高分解能撮像は、通常、１００〜２００μｍの深さに制限することができる。これは、管腔表面近傍に顕在化する大部分の上皮性障害には十分である。
【００１２】
ＲＣＭは皮膚では実証されてきたが、内視鏡共焦点顕微鏡システムの開発は、走査顕微鏡の小型化に関連する技術的課題のために長い時間を要した。かかる技術的課題の一つは、径が小さく、柔軟性のあるプローブの遠位端で集光されたビームを迅速にラスタスキャンする機構を提供することである。この問題に対処するために、遠位端ＭＥＭＳ（ｍｉｃｒｏ  ｅｌｅｃｔｒｏ  ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  ｓｙｓｔｅｍ）ビーム走査デバイスの使用、単一モードファイバ束の近位走査を含む、様々なアプローチが試みられた。
【００１３】
もう一つの課題として、光学切片化のために用いる高開口数対物レンズの小型化をあげることができる。可能な解決法として、ＧＲＮレンズ（ｇｒａｄｉｅｎｔ−ｉｎｄｅｘ  ｌｅｎｓ）システム、二軸式対物レンズ（ｄｕａｌ−ａｘｉｓ  ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ）又は、小型化対物レンズの特注設計を採用することが記載されている。第１に、これらの技術を患者に実演することは、始められつつあり、頸部上皮の形態の詳細な画像が小型の対物レンズに結合された光ファイバ束を用いて生体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で取得されており、結腸直腸及び食道の病変の蛍光画像が市販の装置を用いて示された。
【００１４】
内視鏡ＲＣＭを患者の内部で実演しても、この技術は、現在のところ、生検誘導のために最適化されてはいないようである。一つの理由は、この技術が、離散的な場所のみの顕微鏡画像を提供する、いわゆる上述の「ポイントサンプリング」アプローチの問題であると考えられる。切除生検のものよりも小さい、極めて制限された画角（例えば、２００〜５００μｍ）を有するので、ポイントサンプリングはＲＣＭに固有である。結果として、内視鏡ＲＣＭは、切除生検と同様のサンプリング誤差と診断率の制限を有する可能性がある。
【００１５】
生検誘導のために内視鏡ＲＣＭを使用する場合、撮像パラダイムは、ポイントサンプリングから離れて、関心組織の内部のあらゆる可能性のある場所をサンプリングする、極めて大きな画角を有する顕微鏡にシフトすることができる。「ＣＶＭ（Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｖｏｌｕｍｅｔｒｉｃ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ）」と呼ぶことが出来る、このパラダイムの出力は、組織全体又は管腔表面の３次元顕微鏡画像を含むことができる。
【００１６】
ＣＶＭでは、最新技術の撮像速度は、顕微鏡情報のバンド幅が極めて大きく、実際の処置時間内（例えば、２０分未満）にかかるデータを取得するという制限から、少なくともビデオレートを１桁上回る程度に増加する必要がある。さらに、カテーテル／内視鏡技術を、これらの大きな組織の表面領域にわたって迅速に顕微鏡を、高い精度で自動的にスキャンするように開発することができる。
【００１７】
最近では、光周波数領域撮像（ＯＦＤＩ）と呼ばれる、光学的コヒーレンストモグラフィ（ＯＣＴ）の第２世代の形式と、高速ヘリカルスキャンカテーテル、ＣＶＭを実施した。この研究は、数分で食道下部全体の３次元顕微鏡画像を取得すること、５秒未満で患者の長い区間の冠状動脈の３次元顕微鏡画像を取得することを容易にした（Ｓｕｔｅｒ  ＭＪ．  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｓｏｐｈａｇｕｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｏｐｔｉｃａｌ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  ｄｏｍａｉｎ  ｉｍａｇｉｎｇ”，  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ，  ２００８，  Ｖｏｌ．  ６８（４），  ｐｐ．  ７４５−５３；  ａｎｄ  Ｔｅａｒｎｅｙ  Ｇ．Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｔｈｒｅｅ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  ｃｏｒｏｎａｒｙ  ａｒｔｅｒｙ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ  ｂｙ  ｉｎｔｒａｃｏｒｏｎａｒｙ  ｏｐｔｉｃａｌ  ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ  ｄｏｍａｉｎ  ｉｍａｇｉｎｇ：  Ｆｉｒｓｔ−  ｉｎ−ｈｕｍａｎ  ｅｘｐｅｒｉｅｎｃｅ”，  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ，  Ｉｍａｇｉｎｇ，  ２００８，  ｐｐ．  １  ：７５２−６１を参照）。
【００１８】
ＯＦＤＩは、特定の臨床用途に大きな可能性を示しているが、その〜１０μｍの分解能は、構造と細胞の両方のレベルで組織形態の知識が必要となり得る異形成及び初期癌の診断には、必ずしも十分ではないかもしれない。このため、内視鏡プローブを介して高分解能の総合体積画像を迅速に取得することができる、新たな代表的な変形型ＲＣＭを提供する必要がある。
【００１９】
一つのアプローチは、スペクトル符号化顕微鏡（「ＳＥＣＭ」）技術を用いることである。ＳＥＣＭの高速撮像レートとその光ファイバ設計は、内視鏡プローブを介した総合体積ＲＣＭを可能とすることができる。食道下部（長さ略５０ｃｍ、径略２．５ｃｍ）の面積と同一の面積を、一つの深さの場所を、略１分間でスキャンすることができるＳＥＣＭプローブについて説明した（例えば、Ｙｅｌｉｎ  Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  “Ｌａｒｇｅ  ａｒｅａ  ｃｏｎｆｏｃａｌ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ”，  Ｏｐｔｉｃｓ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，  ２００７；  ３２（９）：  １１０２−４）。
【００２０】
スペクトル符号化共焦点顕微鏡法（「ＳＥＣＭ」）は、広帯域光源を用いて、光学的スペクトルの一次元空間情報を符号化する、単一光ファイバ共焦点顕微鏡撮像手法である（図１の例に例示）。図１に示すように、プローブの遠位端には、単一モード又はデュアルクラッドファイバ１１０のコアからの出力が、コリメータレンズ１１５によってコリメートされて、透過回折型回折格子１２０を照明する。対物レンズ１３０は、回折された波長ごとに、検体の内部の離散した空間的場所１４１、１４２又は１４３に合焦し、線上のポイントごとに異なる波長又は色を有する、横方向の線焦点１５０を生成する。組織に反射して、レンズ１３０を通過して戻った光は、回折格子１２０によって再び合成され、ファイバ１１０によって集められる。ファイバ１１０の開口部は、焦点から外れた光を拒否する空間フィルタリング機構の働きをする。プローブの外部（システムコンソール内）では、戻った光のスペクトルが計測され、サンプル内部の横方向の変位の関数として共焦点反射率に変換される。画像のこの線を空間復号することは、極めて高速に、例えば、略７０ｋＨｚのレートで実行することができる。これは、ビデオレート共焦点顕微鏡システムの略１０倍、いくつかの内視鏡ＲＣＭシステムに対しては略１００倍までの速度に相当し得る。画像の他の横方向の軸は、多様な内視鏡プローブで通常に採用することができる、比較的低速で直接的な機械的動作によって得ることができる。ＳＥＣＭによって取得した画像は、異形成及び癌の診断に関する、細胞内レベルの微細構造を撮像するその性能を実証する（図２参照）。図２Ａ及び２Ｂに、十二指腸旋毛と細胞核の詳細な構造を示す、腸壁を圧縮した後の、生体外で取得した豚の十二指腸の代表的なＳＥＣＭ画像を示す。撮像深度は、図２Ａ及び２Ｂでそれぞれ５０μｍ及び１００μｍである。
【００２１】
以上から、上述の課題、及び／又は、問題の少なくともいくつかを解決することが必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
上述の課題、及び／問題の少なくともいくつかは、本発明に係る代表的な実施形態の装置、システム、及び方法によって対処することができる。
【００２３】
本発明の代表的な実施形態は、所望の組織の深さに焦点を自動的に維持して、サンプルを横断してスペクトル符号化ラインをスキャニングする、機構及び方法を提供する。この代表的な進歩した技術によって、患者の動きを補償し、複数の深さの場所で撮像を行うことが可能になる。さらに、一代表的な実施形態では、人体の使用に好適なように、これらの技術を内視鏡プローブに組み込むことによって、患者に広域共焦点顕微鏡法を実行することができる。
【００２４】
本発明の他の代表的な実施形態によると、装置を提供することができる。かかる装置は、サンプルの少なくとも一つの領域から受けた信号に関連付けられたデータを提供するように構成された、少なくとも一つの分散用の第１の構成部を備えることができる。代表的な装置は、前記データに基づいて前記第１の構成部に関連付けられた焦点距離及び／又は焦点位置を制御するように構成された、少なくとも一つの合焦用の第２の構成部も含むことができる。代表的な変形態様によると、前記少なくとも一つのサンプルの少なくとも一つのさらなる領域から受けたさらなる信号に関連付けられたさらなるデータを提供するように構成された、少なくとも一つの第３の構成部をさらに含むことができる。前記領域と前記さらなる領域は、少なくとも部分的に重なる、及び／又は、近傍に位置するようにしてもよい。前記合焦用の第２の構成部は、前記データ、及び／又は、前記さらなるデータに基づいて前記第１の構成部に関連付けられた前記焦点距離、及び／又は、前記焦点位置を制御するように構成することができる。前記合焦用の第２の構成部は、前記データ、及び／又は、前記さらなるデータに基づいて前記第１の構成部に関連付けられた前記焦点距離、及び／又は、前記焦点位置を制御するように構成することができる。前記合焦用の第２の構成部は、前記データ、及び／又は、前記さらなるデータに基づいて前記第１の構成部に関連付けられた前記焦点距離、及び／又は、前記焦点位置を制御するように構成することができる。前記分散用の構成部及び前記合焦用の構成部は、バルーンの中に設けることができる。
【００２５】
本発明のさらなる代表的な実施形態によると、解剖学的組織の少なくとも一部を撮像する装置、方法、及びシステムも提供される。例えば、分散用の構成部を用いて、少なくとも一つの第１の電磁放射を前記少なくとも一部に供給して、前記一部の表面の面に対して０度より大きく、９０度より小さい角度でサンプル面を形成することができる。さらに、前記少なくとも一つの第１の電磁放射に関連付けられた前記サンプル面から少なくとも一つの第２の電磁放射を受けて、前記第２の電磁放射の関数として情報を生成することができる。前記情報に基づいて制御信号を生成し、前記第１の電磁放射の焦点面の場所をさらに制御する、あるいは、前記情報の関数として、前記少なくとも一部の少なくとも一つの三次元画像を生成することができる。
【００２６】
一代表的な変形形態によると、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の少なくとも一部を用いて、前記サンプルの表面の場所に基づいて前記制御信号を生成することができる。前記第２の電磁放射を少なくとも一つの第１の信号と少なくとも一つの第２の信号に分離することもできる。さらに、制御信号は、前記第１の信号に基づいて生成することができ、前記少なくとも一つの第２の信号の関数として、前記サンプルに関連付けられた少なくとも一つの画像を生成することができる。
【００２７】
本発明のさらなる代表的な実施形態では、ＳＥＣＭプローブは、例えば、径が略２．５ｃｍのセンタリングバルーンと、高速交換ガイドワイヤ具と、を有する、径が略１．０ｃｍの透明なチューブに組み込むことができる。チューブを通って巻ケーブルを介してＳＥＣＭ光学系に接続したプルバックモータと回転接合部を用いることによって、ヘリカルスキャンを行うことができる。対物レンズがサンプルの表面に対して角度をもっている代表的な構成部を使用することができる。この角度を有した構成部を使用して、対物レンズの焦点面を制御するフィードバック信号を生成し、単一のヘリカルスキャンによって三次元画像情報を提供することができる。ＳＥＣＭ光学系の横方向分解能は、例えば、公称で略１．６μｍであり、自動合焦機構は、例えば、略±５００μｍの範囲にわたって機能することができる。中心波長７２５ｎｍで動作し、略７Ｏｘ１０６の画素／秒で画素データを取得できるように構成されたＳＥＣＭ撮像システムは、携帯可能な構成部、例えば、カートに収納することができる。
【００２８】
代表的なシステム及びプローブは、略１０分間の間に略１０個の異なる合焦位置で、人間の食道下部（径が略２．５ｃｍ、長さ略５．０）全体を総合的に撮像できるように構成されている。代表的なソフトウェアを設けて、好適な画像データの取得、表示、及び生検用のマーキングする場所の選択のために（プロセッサ又はその他の演算構成部によって実行される）コンピュータがアクセス可能な有形の媒体に保存することができる。
【００２９】
本発明のその他の代表的な実施形態では、本発明に係るレーザーマーキング装置、方法、及びシステムを提供することができる。略４００ｍＷ、１４５０ｎｍのレーザーをシステムに組み込み、内視鏡プローブと結合して、内視鏡医が後で生検を行えるように、組織の選択された結像位置に目で見ることができる、微細な表面的なマーキングを生成することができる。例えば、ＳＥＣＭ又はＯＣＴによって特定されたターゲットとするサイトに、内視鏡医がこれらの場所を見て生検を行うことができるようにマーキングをすることができる。この代表的なタスクを実行するために、代表的な実施形態のレーザーマーキング装置、方法、及びシステムを提供することができる。代表的なレーザーマーキング技術は、本発明に係る代表的な実施形態の装置、システム、及びデバイスに組み込むことができる。
【００３０】
生物組織上又は生物組織内の位置を決定するための、本発明に係る一代表的な実施形態による装置、方法、及びシステムを提供することができる。例えば、かかる代表的な実施形態を用いると、光学的撮像技術を用いて取得した生物組織の少なくとも一部の少なくとも一つの画像に関連付けられた情報を（１以上の構成部を用いて）受けることができる。さらに、前記情報に基づいて、少なくとも一つの電磁放射を用いて、前記少なくとも一部の少なくとも一つの場所の上又は内部に視覚的変化をもらすことができる。
【００３１】
例えば、画像は、前記少なくとも一部の体積画像を含むことができる。前記体積画像は、略１０ｍｍから１００ｍｍの間の径を有する、及び／又は、最大で略１ｍの拡張部（ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ）を有する、円筒状の画像であってもよい。（例えば、特定の構成部を用いて）前記視覚的変化に関連付けられたデータを受け、前記データに基づいて、前記少なくとも一部の可視化を誘導することもできる。さらに、前記少なくとも一部を切除することによって、前記視覚的変化をもたらすことができる。前記切除は、前記少なくとも一部を前記少なくとも一つの電磁放射によって照射することによって実行できる。
【００３２】
本発明の一代表的な実施形態では、構成部をプローブの内部に配置し、前記構成部によって制御されて、前記少なくとも一部の上又は内部に前記視覚的変化をもたらす、切除構成部を前記プローブの内部に設けることができる。前記情報を、少なくとも一つの導波構成部を介して取得することもでき、前記切除構成部は、前記少なくとも一つの電磁放射を前記少なくとも一つの導波構成部を介して提供して、前記視覚的変化をもたらすことができる。さらに、前記光学的撮像技術は、共焦点顕微鏡技術を含むことができ、前記共焦点顕微鏡技術は、スペクトル符号化共焦点顕微鏡法技術であってもよい。さらに、前記光学的撮像技術は、光学的コヒーレンストモグラフィーを含むことができる。
【００３３】
これらの進歩した技術によって、内視鏡用途のために患者に使用することができる性能仕様を実現することができる。本書の代表的な実施形態を内視鏡に組み込み、ターゲットとされる生検検査技術を、例えば、臨床研究及びその他のシナリオで利用することができる。
【００３４】
本書で説明する本発明に係る代表的な実施形態のシステム及びプローブは、上部内視鏡検査を行う患者に使用することができる。代表的な実施形態の用途は、多様な上皮性癌、及び、腫瘍境界検出などのその他の臨床用途であってもよい。一代表的な用途は、これらの代表的な実施形態が大きな影響を及ぼし得る可能性のある、バレット食道（ＢＥ）であってもよい。代表的な総合ＳＥＣＭは、顕微鏡のスケールで食道下部全体をサンプリングすることができるので、代表的なＳＥＣＭ誘導式生検は、異形成及び初期腺癌の検出の感度を大幅に向上することができる。
【００３５】
本発明の代表的な実施形態によると、バレット食道のための患者のスクリーニング及び、サーベイランス内視鏡検査の診断能力を向上することができる。これらの利点は、食道腺癌に関連する死亡率を低下することができる。
【００３６】
本発明の代表的な実施形態に係る画像誘導生検は、安全であり、十分に許容可能であり、今まで実現できなかった、食道の上皮表面の広範囲にわたる細胞内情報及び構造的情報を検出し、効果的に内視鏡生検のターゲットを特定する方法を提供することが期待されている。臨床医にＢＥ患者の管理を向上する有力なツールを提供できるので、これらの本発明の代表的な実施形態の影響は大きいと考えられる。本発明の目的は広義には、食道腺癌の死亡率を低下することにある。代表的なＳＥＣＭシステム及びプローブは、異形成及びその他の内臓器官系の癌のスクリーニングに適用可能な新しい診断プラットフォームを意味する。本発明の代表的な実施形態は長期的には、疾病の進行が初期の段階で用いられる、ＲＦ切除、光線力学療法、又は、内視鏡粘膜切除法など、より侵襲の少ない外科技術科手術を可能とするので、治療にも影響を与え得る。
【００３７】
本発明の代表的な実施形態によると、バレット食道のための患者のスクリーニング及び、サーベイランス内視鏡検査の診断能力を向上することができる。これらの利点により、食道腺癌に関連する死亡率を低下することができる。
【００３８】
総合ＳＥＣＭを利用して生検を誘導するためには、さらなる代表的な手順、及び／又は、ステップを行うことができる。最初に、手順Ａで画像を解釈する。生検サンプルのＳＥＣＭ画像と対応する組織構造との比較を実行することによって、ＳＥＣＭ診断の代表的な基準を類型化することができる。疾病診断のための形態学的手法と互換性のある情報を取得する本発明に係る他の代表的な実施形態のシステム、デバイス、及び方法を提供することができる。この代表的な実施形態の利点として、近い将来に臨床で利用可能となり得ること、臨床病理学に関連する既存の大規模なデータベースを積極的に活用していく可能性があることを含むことができる。さらに、将来、分子撮像がこのパラダイムを変化させる影響を与え得る。
【００３９】
本発明の代表的な実施形態のこれら又はその他の目的、特徴及び利点については、添付の特許請求の範囲とともに、本発明の代表的な実施形態の詳細な説明を読むことによって明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】スペクトル符号化共焦点顕微鏡法（ＳＥＣＭ）技術を使用した代表的な構成部の概略図である。
【図２Ａ】図１に示した代表的な構造部を用いて腸壁を圧縮した後の、生体外で得た豚の十二指腸のＳＥＣＭ画像であって、略５０μｍの撮像深度で十二指腸絨毛の構造及び細胞核の細部を示す図である。
【図２Ｂ】図１に示した代表的な構造部を用いて腸壁を圧縮した後の、生体外で得た豚の十二指腸のＳＥＣＭ画像であって、略１００μｍの撮像深度で十二指腸絨毛の構造及び細胞核の細部を示す図である。
【図３】本発明の代表的な実施形態に係るプローブ／代表的なＳＥＣＭ構成部の概略図と挿入写真である。
【図４】図３のプローブ／代表的な実施形態の構成部を用いた、組織への代表的なスペクトル符号化照明の概略図である。
【図５Ａ】本発明に係る代表的な実施形態の構成部によって焦点合わせをするために用いることができる代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図５Ｂ】図５Ａに示す代表的なＳＥＣＭ画像と関連付けられた強度と画素座標の代表的なグラフである。
【図６Ａ】適応合焦を用いない場合の、代表的なＳＥＣＭ卓上プローブによって得られたレンズペーパファントムの代表的な画像の円筒状描写である。
【図６Ｂ】図６Ａに示す代表的な画像の拡大図である。
【図６Ｃ】適応合焦を用いた場合の、代表的なＳＥＣＭ卓上プローブによって得られたレンズペーパファントムの代表的な画像の円筒状描写である。
【図６Ｄ】図６Ｃに示す代表的な画像の拡大図である。
【図６Ｅ】撮像深度が５６μｍにわたるサンプルの領域におけるレンズペーパファントムのＳＥＣＭ画像の代表的なスタックを表す図である。
【図７】胃食道接合部、扁平上皮、胃噴門を示す人間の食道の生検サンプルの代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図８Ａ】好酸球性食道炎が推定される患者からの上皮内好酸球を示す食道扁平上皮の代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図８Ｂ】０．６％酢酸に続いて撮像された好酸球性食道炎が推定される患者からの胃基底部型（ｇａｓｔｒｉｃ  ｂｏｄｙ  ｆｕｎｄｉｃ  ｔｙｐｅ）粘膜の代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図８Ｃ】０．６％酢酸に続いて撮像された患者からの嚢胞壁を覆う円柱上皮を有する胃低腺ポリープの代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図９Ａ】０．６％酢酸を適用した後に取得された、本発明に係る代表的な実施形態のシステム、及び方法を用いて得られた特殊腸上皮化生の代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図９Ｂ】図９Ａの画像の杯細胞を示す拡大図である。
【図９Ｃ】本発明に係る代表的な実施形態のシステム、及び方法を用いて得られた悪性異形成の代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図９Ｄ】構造び核異型を示す本発明の代表的な実施形態に係る代表的なＳＥＣＭ画像である。
【図１０】本発明の代表的な実施形態の方法に係るレーザーマーキングを有する総合顕微鏡誘導式生検プラットフォームの代表的な画像フロー図である。
【図１１】本発明の代表的な実施形態に係るＳＥＣＭ誘導式生検工程の代表的なフロー図である。
【図１２】本発明の代表的な実施形態に係る代表的なＳＥＣＭ構成部／プローブの側面概略図である。
【図１３】本発明に係る代表的な実施形態のシステムの代表的な回転接合部の概略図である。
【図１４】本発明に係る代表的な実施形態の代表的なＳＥＣＭシステムの概略図である。
【図１５】本発明に係る自動合焦フィードバック信号を生成する代表的な実施形態の光電子装置の概略図である。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
特に断りのない限り、図面における同様の参照番号と符号は、図示の実施形態における同様の特徴部及び構成要素、部品、又は部分を示す。本発明の詳細を図面を参照して図示の実施形態に関連して説明する。添付の特許請求に範囲に記載される本発明の範囲と趣旨を逸脱しない限りにおいて、ここ説明する代表的な実施形態に対して、いかなる変更及び修正を加えることも可能である。
【００４２】
本発明に係る代表的な実施形態のシステム、工程及び構成部は、これに限定されないが、（ａ）ＳＥＣＭ内視鏡プローブ、（ｂ）ＳＥＣＭ画像を観察した病理組織学的特徴に基づく診断、及び／又は、（ｃ）画像誘導レーザーマーキングシステムなどを含む。以下、本発明に係る臨床適応可能なＳＥＣＭ誘導生検システム／プローブの代表的な実施形態とともに、これらの３つの代表的な実施形態について詳細に説明する。
【００４３】
管腔表面を広く総合的に内視鏡ＳＥＣＭ画像化することを容易にする、特定の構成部／プローブ部品を含む本発明の代表的な実施形態が提供される。図３の代表的な実施形態に示すように、広帯域光源３１０（例えば、スペクトルバンド幅＝略３０ｎｍ、中心波長＝略８７７ｎｍ）からの光を５０／５０光ファイバビームスプリッタ３２０に結合することができる。ビームスプリッタのファイバ出力ポート１１０からの光は、コリメータレンズ１１５（例えば、ｆ＝略２０ｍｍ）によってコリメートし、ホログラフィック透過回折格子１２０（例えば、略１７００ｌｉｎｅｓ／ｍｍ）によって、例えば、〜３５０の分解能点に分散することができる。この分散光は、対物レンズ１３０（例えば、非球面レンズｆ＝略４．５ｍｍ、有効ＮＡ＝略０．５３）によって薄壁バルーン３２８（例えば、径＝略２０ｍｍ、厚さ＝略５０μｍ）を介してサンプル３３０に合焦することができる。対物レンズ１３０に角度をつけて、合焦スポットの軸方向位置を、例えば、撮像バンド幅にわたって略５０μｍ変化させることができる。モータ３２６と並進ステージ３２７によって、プローブハウジング３２０を回転させ、並進させることによって、ヘリカルスキャンを行うことができる。代表的な実施形態のＳＥＣＭプローブの写真を図３の挿入写真として示す。代表的なプローブのサイズは、略１０ｍｍ（Ｗ）×３９ｍｍ（Ｌ）×１３ｍｍ（Ｈ）とすることができる。反射光は、ビームスプリッタに戻して結合し、コリメータレンズ３４１（ｆ＝４４ｍｍ）、回折格子３４２（略１８００ｌｉｎｅｓ／ｍｍ）、合焦レンズ３４３（ｆ＝２００ｍｍ）、及び、線走査カメラ３４４（例えば、Ｂａｓｌｅｒ  Ｓｐｒｉｎｔ、画素サイズ＝略１０μｍ、２０４８画素）を含む分光計に導くことができる。分光計の代表的なスペクトル分解能は、略０．０４ｎｍとすることができる。
【００４４】
深さ分解光学切片を生成するため、デジタル化されたスペクトル符号化ラインの各々を、例えば、８個のセグメントに分割することができる。セグメントの各々は、異なる深さレベルで取得された画像情報に対応する。同一の深さレベルからの代表的な画像セグメントを一緒に接合して、深さ毎の大面積光学切片を生成することができる。高ＮＡ（開口数）対物レンズ１３０の焦点をサンプル３３０の内部に保つため、対物レンズ１３０も合焦機構３２５によって軸方向に沿ってスキャンすることができる。合焦機構３２５は、小型のリニアガイドと圧電トランスデューサ（ＰＺＴ）アクチュエータとを含むことができる。
【００４５】
図４は、バルーン３２８を介した対物レンズ１３０からサンプル３３０への照明ビームの概略図である。対物レンズ１３０に角度をつけているので、波長毎にサンプル３３０の深さを変えて撮像することができる。バルーン領域３２８を線走査で撮像するスペクトルバンド４５０を用いて画角のバルーン表面を特定し、これを用いて、例えば、合焦機構３２５を制御するためのフィードバック信号を生成することができる。例えば、スペクトルバンド４５０とともに、残りのスペクトルバンド４４０を用いて、サンプル３３０の線画像を生成することができる。図５Ａは、図３及び４に示す本発明に係る代表的な実施形態のＳＥＣＮＭ構成部／プローブによって生成することができる代表的な画像を示す。例えば、バルーン３２８を可視化する部分は、サンプル３３０の部分のものよりも高い信号レベルを有する。線５３０に沿った線プロファイルは、バルーンの場所でより高い強度ピーク５４０を示す（図５Ｂに示す）。このピークの場所を基準点として用いて、合焦機構（例えば、処理デバイス又は計算デバイスを用いる）を制御することができる。
【００４６】
代表的な実験結果
１９５１ＵＳＡＦ分解能チャートのバーから、エッジ応答関数を撮像して撮像した本発明に係る代表的な実施形態のＳＥＣＭ構成部／プローブの横方向分解能は、スペクトル画角のエッジ中央からそれぞれ、１．２５±０．１３μｍから１．４５±０．３３μｍの範囲であった。焦点を介してミラーをｚスキャンすることによって得られた代表的な実施形態のＳＥＣＭ構成部／プローブの軸方向分解能は、スペクトルＦＯＶのエッジ及び中央においてそれぞれ、１０μｍ及び４．４μｍと測定された。代表的な実施形態のＳＥＣＭ構成部／プローブの適応合焦機構は、略２５０μｍの変位振幅で１Ｈｚのレートの移動ミラーの正弦波の動きを正確に追尾した。代表的な実施形態の構成部／プローブで使用するソフトウェア及びプローブヘッドの代表的な機械設計は若干、適応合焦機構の速度と範囲に限定された。独立した光電子装置を使用してフィードバック信号を生成することができ、プローブハウジングを修正することができるので、フィードバックループの応答速度と合焦範囲をそれぞれ増加することができる。
【００４７】
図６Ａ〜６Ｅに、適応合焦を用いない場合（図６Ａ及び６Ｂ）と適応合焦を用いた場合（図６Ｃ及び６Ｄ）の、例えば、２．０ｃｍのファントム（ｐｈａｎｔｏｍ）のほぼ完全なプルバック画像の代表的なＳＥＣＭ画像及びデータを示す。代表的なファントムは、バルーン（径＝略２０ｍｍ）の外部表面に装着されたレンズペーパからなる。本発明に係る代表的な実施形態のＳＥＣＭ構成部／プローブを、略２０ｒｐｍの回転速度でスキャンした。主に制御信号を生成するために用いる手法の速度に制限されたが、２０分間に円周方向に合計で略４００回のスキャンを行えた。単一のスペクトル符号化ラインの長さは、４００μｍであったので、縦方向のステップサイズは、８つの異なる深さレベルに５０μｍとなった。低倍率では、折り目と空間を含む紙の巨視的構造を観察することができる。このデータセットの領域をより高い倍率で示すと、個々の繊維と繊維の微細構造が明確に解像して示される（図６Ｂ及び６Ｄの挿入写真を参照）。
【００４８】
自動合焦機構を使用すると、代表的な構成部／プローブが中央になくとも、焦点と情報に残されたデータセットの全体を、略５０μｍの範囲内の全ての光学切片から得ることができる（生成された画像を図６Ｃ及び６Ｄに示す）。反対に、合焦機構がオフの場合、ファントムの小さな部分にのみ焦点が合わされ、見ることができる（図６Ａ及び６Ｂに示す）。サンプル領域の撮像深度の異なる代表的なＳＥＣＭ画像のスタックを図６Ｅに示す。この代表的な画像スタックは、略５６μｍの深さにわたり８つの異なる焦点面からなる３次元情報を提供する。特徴の変化は、白い点線で描いた円の領域を含む、異なる撮像面の画像の間で、特徴の変化がよくわかる。これらの代表的な結果は、管腔器官の代表的な総合的ＳＥＣＭの技術的な実施可能性を実演した。
【００４９】
代表的なＳＥＣＭ技術により可視化された病理組織学的特徴
代表的な実施形態の内視鏡ＳＥＣＭプローブについて上述の光学的仕様を用いた代表的なＳＥＣＭシステムは、例えば、人体生検サンプルの全体の撮像に利用することができる（例えば、Ｋａｎｇ  Ｄ．  ｅｔ  ａｌ，  ”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  ｇａｓｔｒｏｅｓｏｐｈａｇａｌ  ｂｉｏｐｓｙ  ｓａｍｐｌｅｓ  ｂｙ  ｓｐｅｃｔｒａｌｌｙ  ｅｎｃｏｄｅｄ  ｃｏｎｆｏｃａｌ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ”，  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｅｎｄｏｓｃ．  ２００９を参照）。この代表的なＳＥＣＭシステムは、波長掃引源（例えば、中心波長＝１３２０ｎｍ、バンド幅７０ｎｍ、反復レート＝５ｋＨｚ）及び０．７ＮＡ対物レンズを使用することができる。単一モード照明及び多モード検出撮像構成を使用して、レーザースペックルノイズを削減することができる。上述の代表的な構成部／プローブに採用可能な方法でもある。かかる代表的なＳＥＣＭシステムの分解能は、例えば、それぞれ横方向及び軸方向に沿って、２．３μｍ及び９．７μｍとすることができる。図７に、通常の胃食道接合部の構造的形態を明示する、代表的な生検研究から得られた第１のデータセットの一つの代表的な画像を示す。
【００５０】
好酸球性胃底部型粘膜及び胃低腺ポリープの分散した扁平上皮粘膜を含む、他の食道組織の種類の代表的なＳＥＣＭ画像も得ることができる（図８Ａ、８Ｂ、及び８Ｃ参照）。バレット食道の画像（図９Ａ及び９Ｂを参照）は胃噴門（図７に示す）及び高度異形成（図９Ｃに示す）から区別して見ることができる。例えば、核のコントラスト（ｎｕｃｌｅａｒ  ｃｏｎｔｒａｓｔ）を強調するため０．６％の酢酸（食用酢）を、例えば、生検サンプルの大部分に適用することができる。さらなるＳＥＣＭ撮像のより大きなセットの生検サンプルに対する臨床研究によって、ＳＥＣＭ撮像の診断基準が提供され、その精度の評価を行うことが可能となっている。診断基準は、画像読取装置又は臨床医が病巣領域を自動的又は手動で識別して特定するための、ＳＥＣＭ誘導生検で使用できる。
【００５１】
生検誘導のための代表的なレーザーマーキング
生検を誘導するための顕微内視鏡観察技術を用いて、撮像システムによって特定された異形成及び初期癌の領域をマーキングして、従来の内視鏡検査により可視化できるようにすることができる。
【００５２】
図１０に、本願発明に係る表在食道粘膜のレーザーマーキングを用いる、代表的な実施形態の画像誘導生検の方法の画像経過の図を示す。目標とする生検のレーザーマーキングの実施可能性を示すため、本代表的な技術を、ＯＦＤＩ撮像モダリティを用いたバルーンカテーテルにより豚の生体内（ｎ＝４）で試験した。１頭毎に、バルーンカテーテルと光学的内部撮像プローブを食道内部に配置させた。４００ｍＷ、１４５０ｎｍのレーザを用いて、食道を光ファイバープローブを介して、略３０μｍの径のスポットに焦点を合わせ、マーキングした。豚の食道に合計で６８個のランダムな場所に８秒（８−ｓｅｃｏｎｄ）ターゲット１０２１が生成された。食道の末端部５．０ｃｍの総合顕微鏡データセットを取得し（１０１０）、使用してターゲット１０２１を特定した（１０２０）。顕微内視鏡観察画像でターゲットを特定した後、より小さな２秒（２−ｓｅｃｏｎｄ）レーザーマーキング１０４１を生検のガイドとして、ターゲットの他方の側に設ける（１０３０）（図１０を参照）。レーザーマーキングの後、バルーンカテーテルを取り外し、食道を従来の内視鏡検査（１０４０）によって可視化した。食道の検査（１０４０）によって、ターゲット１０２１毎に取り囲む二つのマーキング１０４１が、ターゲットの略９７％を内視鏡検査により可視化されたことが明らかになった。マーキングの病理組織学的分析（１０５０）によって、８秒及び２秒のマーキングが粘膜から粘膜下層の表面にわずかな軽傷をもたらしたが、２日で治癒したことが示された。これらの一例の結果によって、レーザーマーキングが、顕微内視鏡観察により誘導される生検を簡易化する実施可能なアプローチであることが実証された。この実験にはＯＦＤＩ撮像モダリティを用いることができるが、バルーンカテーテルを介して生検を誘導するＳＥＣＭも利用することができる。
【００５３】
様々な内臓器官系に対して、無作為生検は、上皮性化生、異形成、初期癌の診断の標準的療法とすることができる。ＳＥＣＭ誘導式生検は、このパラダイムを変え、これらの状態を定期的に観察している患者に対する治療効果を改善することができる。ＳＥＣＭは、食道診断に関して、構造又は細胞内微細構造を識別可能にする。内視鏡プローブのＳＥＣＭ誘導式生検を実施する場合、ある代表的な技術的要素が好ましい。代表的な実施形態の臨床適応可能なＳＥＣＭシステム及び内視鏡プローブを提供することができる。代表的なシステム／デバイスは、ＲＣＭデータを食道下部全体にわたって複数の深さで取得することができ、医師が、続けて生検を行えるように、組織の中の疑わしい場所を識別して、マーキングすることを容易にすることができる。
【００５４】
代表的なＳＥＣＭ誘導式生検
図１１は、代表的なＳＥＣＭ誘導式生検を行うための、本発明に係る代表的な実施形態の手順を説明するフロー図である。例えば、センタリングバルーンプローブを、内視鏡によって既に配置された（ブロック１１１０）ガイドワイヤを介して挿入することができる（ブロック１１２０）。バルーンプローブが所定の位置に配置されると、ブロック１１３０でバルーンを膨張させ、ブロック１１４０でヘリカルスキャンパターンを用いて総合ＳＥＣＭを実行することができる。ブロック１１５０において、内視鏡から、代表的なＳＥＣＭデータセットを分析し、画像から生検ターゲットを選択することができる。続いて、ブロック１１６０においてＳＥＣＭプローブを患者のそれらの場所に自動的に戻し、レーザーマーキングをターゲットの一方の側に行う。この代表的なレーザーマーキングの後、ブロック１１７０においてバルーンを収縮させて、取り外すことができる。ブロック１１８０において、内視鏡医は、マーキングされた部位からの生検を取得することができる。図１１に示した代表的な手順では、ＳＥＣＭを使用しているが、ＯＣＴを含む他の顕微鏡撮像技術を用いて生検を誘導してもよい。
【００５５】
代表的な内視鏡プローブ
臨床用の代表的なＳＥＣＭ誘導式生検デバイスは、例えば、ａ）プローブ、ｂ）プローブコンソールインタフェース、及びｃ）コンソール、３つの要素を含むことができる。代表的な実施形態のＳＥＣＭ構造部／プローブの代表的な概略図を図１２に示す。代表的なＳＥＣＭ構造部／プローブは、撮像光を送受信し、レーザーマーキングビームを透過することもできるダブルクラッドファイバ（ＤＣＦ）１２１１を含むことができる。スペックルノイズを削減するため、ＤＣＦのコアを介してサンプルを照明し、コアと内部クラッディングの両方を介してサンプルから発光された光を受光することによって、撮像を行うことができる。ファイバは、回転し、１．０ｃｍ径の透明なシース１２３２の内部を並進することができる、巻きケーブル１２１２の内部に収納することができる。
【００５６】
巻ケーブルをその近位端で回転し、並進させることによって、バルーン３２８の全範囲にわたって代表的なヘリカル撮像を行うことを容易にできる。撮像時、バルーン表面（図４及び５を参照）からの反射で得られた制御信号を用いて、合焦機構３２５への入力を生成し、その合焦位置を適応的に変更することができる。巻ケーブル１２１２及びＤＣＦ１２１１は、コリメータレンズ１１５、回折格子１２０、対物レンズ１３０、合焦機構３２５を含むことができる、代表的なＳＥＣＭ構成部／プローブのハウジング３２０に取り付けることができる。６．０ｃｍ長で２．５ｃｍ径の透明なセンタリングバルーン３２８は、透明なシース１２３２に取り付けることができる。代表的な構成部／プローブの遠位端は、ガイドワイヤ具１２３１で終端できる。
【００５７】
代表的なプローブ光学系
特注の光学部品及び機械部品を開発することによって代表的な構成部／プローブのサイズをさらに縮小することができる。硬質部の長さを最小化又は縮小するためには、コリメータレンズ１１５を、ＤＣＦ１２１１とレンズ１１５の間の距離が短くなるように製造すればよい。回折格子１２０（例えば、Ｈｏｌｏｇｒａｐｈｉｘ社、Ｈｕｄｓｏｎ，ＭＡ）を設けて、例えば、最大回折効率が２次では略７２５ｎｍに、１次では１４５０ｎｍとなるようにしてもよい。代表的な対物レンズ１３０（例えば、ＮＡ＝０．４）を設けて（例えば、ＺＥＭＡＸ社製、Ｂｅｌｌｅｖｕｅ、ＷＡ）、製造し（例えば、Ｏｐｔｉｍａｘ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．，  Ｏｎｔａｒｉｏ）、組織の光学切片の深さ範囲略１００μｍを通して回折限界性能とすることができる。対物レンズ１３０は、７２５ｎｍと１４５０ｎｍにおいて無彩色であり、透明なカテーテルのシース１２３２により誘発される非点収差を補償するため円筒状の表面を有することができる。
【００５８】
代表的な巻きケーブル
代表的な多層巻き駆動シャフトを使用して、他の撮像モダリティのために患者の内部の遠位端光学系をスキャンすることができる。特注の巻きケーブル１２１２を製造して（例えば、Ａｓａｈｉ  Ｉｎｔｅｃ，  ＵＳＡ）、カテーテルを介した動き変換精度及び再現性を試験することができる。
【００５９】
代表的なバルーン−センタリングカテーテル
透明なポリカーボネイトシース１２３２（例えば、径＝略１０ｍｍ）と透明なプラスチックバルーン３２８（例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ，  Ｓａｌｅｍ，  ＮＨ、膨張径＝略２５ｍｍ）を使用する代表的なバルーン−センタリングカテーテルを、プローブ光学系及び巻ケーブル（例えば、Ｄｅｖｉｃｅ  ｃｏｍｐａｎｙ；  Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｅｓｉｇｎ，  Ｔｙｎｇｓｂｏｒｏ，  ＭＡ）を収納するように設けることができる。代表的なカテーテルは、透明度、柔軟性、追尾性能を試験して、食道内の撮像に適切であることを確認することができる。
【００６０】
代表的なプローブ−コンソールインタフェース
コンソール／プローブからの光を結合し、代表的なＳＥＣＭ構成部／プローブを透明なシースの内部で回転させる代表的な回転接合部（図１３の代表的な実施形態の構成部に示す）を設けることができる。代表的なＯＣＴ回転接合部とは異なり、代表的なＳＥＣＭ光学的回転接合部は、光源３１０からの撮像光をダブルクラッドファイバ（「ＤＣＦ」）のコア１３５１に送ることができる。ＤＣＦの内部クラッディング１３５２は、レーザーマーキング光１３８０を透過させ、サンプルから戻された撮像光を分光計１３７０に供給することができる。
【００６１】
多モード光から単一モード光を分離するため、代表的な回転接合部は、２つの合焦レンズ１３２０、１３６０と、単一モード／多モードスプリッタを含むことができ、例えば、中央に透明な開口部を有したミラー１３３０とリレーレンズ１３４０を含む（図１３参照）。代表的な回転接合部は、巻きケーブル１２１２を７０ｒｐｍで回転させることができる。静的システムからの光を回転するカテーテル光学系に結合させることに加えて、代表的な回転接合部は、低電流を流して、合焦機構を制御することもできる。さらに、代表的な回転接合部全体を、リニアスキャンプルバックステージに取り付けて、０．１ｍｍ／ｓのレートで並進させることにより、ＳＥＣＭプローブ光学系のヘリカルスキャンを可能にできる。回転モータとリニアモータの両方からのモータエンコーダの出力は、画像信号と同期してデジタル化され、代表的なＳＥＣＭプローブが、レーザーマーキングのために患者の所与の結像位置に戻ることを容易にすることができる。
【００６２】
代表的な光学的回転接合部は、Ｓｏｌｉｄ  Ｗｏｒｋｓで提供され、ＺＥＭＡＸでシミュレーションすることができる。代表的な設計は、スループットを最大にし、製造と交差表示を容易にするように最適化することができる。代表的な設計は、単一及び二重通過スループット、及び回転均一性のために特注加工、組立、試験を行うことができる。代表的な回転接合部は、さらに、標準モータ化プルバックトレイの内部に嵌合するように設計することができる。
【００６３】
代表的なコンソール
代表的なコンソール（図１４に示す概略図を例にあげる）は、光源及び検出器を備え、撮像、マーキングのために使用することができ、また、フィードバック信号を生成して、プローブの対物レンズの合焦位置を制御するためにも使用できる。撮像のため、広帯域光源３１０（例えば、Ｆｉａｎｉｕｍ  ＳＣ４５０−６）からの光を、７２５±３０ｎｍの広帯域ＮＩＲスペクトル１４２１を有するようにフィルタ１４１１によってフィルタリングすることができる。分解能、浸透深さ、検出器の感度の間で適当な妥協を得られるように、この代表的な波長範囲を選択することができる。さらに、中心波長を、高出力レーザー１３８０からのレーザーマーキングビーム１４４８の波長（例えば、略１４５０ｎｍ）の半分とすることができる。撮像ビームをプローブの２次の回折格子を介して回折し、マーキングレーザーを１次の回折格子を介して回折することによって、両者がサンプルの同一の位置を照射することができる。
【００６４】
コンソールのミラー１４４２とダイクロイックミラー１４４１を含む光学部品は、回転接合部１４２０を介して単一モード撮像レーザーと多モードマーキングレーザを代表的なＳＥＣＭプローブ１４３０に送る。回転接合部１４２０からの共焦点光はダイクロイックミラー１４４３によって、分光計１３７０に導かれる撮像ビーム１４４６と、合焦フィードバック信号を生成するために光電子装置１４６０に結合することができる合焦ビーム１４４７と、２つのビームに分割される。撮像ビーム１４４６と合焦ビーム１４４７は、異なるスペクトル領域をカバーすることができる。画像の各ラインを、分光計１３８０のラインスキャンカメラ（例えば、ＳＰＬ２０４８−１４０ｋ，  Ｂａｓｌｅｒ）を用いて検出することができ、代表的なデジタル画像データをコンピュータ１４８０に略７０ｋＨｚのラインレートで伝送し、データ記録システム（例えば、Ｓｉｇｎａｔｅｃ  ＤＲ−４００）にリアルタイムでセーブすることができる。コンピュータは、ＳＥＣＭプローブ１４３０の合焦機構のために制御信号を生成する。
【００６５】
代表的な適応合焦オプトエレクトロニクス
本発明に係る適応焦点フィードバック信号を生成する代表的な光電子装置を設けることができる（代表的な図を図１５に示す）。図１５に示すように、代表的なＳＥＣＭプローブ（図５参照）からの合焦ビーム１４４７は、撮像ビーム１４４６（図１４の図に示す）から光学的に分離することができ、回折格子１５２０を用いてそのスペクトルを位置敏感型検出器１５３０（ＰＳＤ、例えば、４象限光検出器）に分散させることができる。ＰＳＤ１５３０の個別のセルからの電気信号は、代数演算処理によって、又は、数学的処理によって（例えば、演算又は処理構成部を用いて）、バルーンの内部表面の位置に対応することができるピーク波長を提供する。
【００６６】
このバルーン表面位置は、合焦機構を駆動して、ＳＥＣＭプローブの対物レンズを動かすことができる制御信号に変換することができる。ＰＳＤ１５３０からの出力信号１５４０は、合焦機構を直接的に制御するアナログ電気フィードバック回路に供給する、又は、制御のために使用されるコンピュータ１５４０に送ることができる。このフィードバック／制御を、撮像データの取得とは独立して行うことによって、その応答時間を、図３を参照して説明した代表的なＳＥＣＭ構成部／プローブのものよりもはるかに高速にできる。したがって、撮像速度を、例えば、４倍以上に高めることができる。
【００６７】
生検を誘導するための代表的なレーザーマーキング
例えば、二つの代表的なダイオードレーザ（例えば、それぞれ波長＝略１４５０ｎｍ、出力＝略２００ｍＷ）を偏光多重化してＳＥＣＭシステムに統合し、生検を誘導するためのマーキングを生成することができる。ダイオードレーザからの光は、シャッターを介して透過して、回転接合部を解してＳＥＣＭプローブの内部クラッディングに結合することができる。コンピュータ、又は、その他の処理デバイスは、ダイオードレーザの強度と露光時間を制御することができる。安全のため、例えば、レーザーシャッターを所与のサイトの露光ごとに最大で、例えば、略１０秒のみとするように構成することができる。
【００６８】
代表的なシステム統合
代表的な撮像及びマーキングレーザーを、出力及び空間コヒーレンスについて試験することができる。光学系の一部又は全てをスループット及び効率性について試験することができる。光学的レイアウトを、小さなブレッドボード上に組み立て、カートに組み込むことができる。撮像分光計を作成し、そのスペクトル分解能及び光スループット標準的な技術を用いて試験することができる。代表的な個々の部品の組み立てに続いて、代表的なシステムを携帯可能な医療用カートに統合することができる。１以上のコンピュータを用いて回転接合部、適応合焦機構、及びマーキングレーザーを制御するためにソフトウェアを提供することができる。パンやズームでユーザが迅速に、特定した関心エリアに正確に焦点合わせできる、Ｇｏｏｇｌｅ  Ｅａｒｔｈ（登録商標）と類似の手法で画像のナビゲートを容易にする既存のソフトウェアが、ＳＥＣＭデータセットに適している。観察者が迅速に異なる光学切片を切り替え、ターゲットのサイトを描写して、レーザーマーキングを開始することを可能とする追加のソフトウェアユーザインタフェース入力を提供することができる。
【００６９】
代表的な仕様及び性能予想
表１は、本発明に係る代表的なＳＥＣＭ構成部／プローブ及びシステムの代表的な仕様と目的とする性能ターゲット（ＯＰＴ）を記載している。代表的なＯＰＴは、食道のセンタリングバルーン撮像を用いた従来の経験の性能と、総合内視鏡共焦点顕微鏡の性能との好みに基づくことができる。この代表的なＯＰＴに合わせることは、さらに、有利な撮像性能を提供することができる。代表的な構成部／プローブは、収縮径が略１．０ｃｍで、硬質部の長さは略４．５ｃｍと、市販のオーバーザワイヤー超音波内視鏡デバイスのものに適合する仕様とすることができる。ＤＣＦの内部クラッディングを介して透過されるモードの数によって規定される横方向と軸方向の分解能は、縦方向の寸法に沿って、円周方向にナイキスト周波数の限界にサンプリングした場合よりも優れたものになる可能性がある。隣接する円周方向のスキャンの間の略７２μｍの縦方向の間隔は、バルーンの表面を超えて略１００μｍまで、略１０個の離散的な深さの場所における光学切片を提供する。代表的なマーキングビームは、略３０μｍのサイズのスポットをサンプルに形成することができるが、これは、食道表面に内視鏡で観察可能なマーキングを、例えば、略２秒で生成するためには、十分なものである。
【表１】
2014097401.tif 000003
【００７０】
本発明の代表的な実施形態に係る画像誘導生検は、安全で十分に許容可能であり、今まで実現できなかった、食道の上皮表面の広範囲にわたる細胞内情報及び構造的情報を検出し、効果的に内視鏡生検のターゲットを特定する方法を提供することが期待されている。本発明の代表的な実施形態は長期的には、疾病の進行が初期の段階で用いられる、ＲＦ切除、光線力学療法、又は、内視鏡粘膜切除法など、より侵襲の少ない外科技術科手術を可能とするので、治療にも影響を与え得る。
【００７１】
上述の説明は、本発明の原理の例示に過ぎない。当業者であれば、本書の説明に基づいて、ここで説明した実施形態に対する様々な修正及び変形が可能であることは明かである。本発明の代表的な実施形態に係る構成部、システム、及び方法は、撮像システムとともに、例えば、参照により開示の全てが本明細書に統合される、２００５年５月２６日に公開された国際特許公報第ＷＯ  ２００５／０４７８１３号、２００６年５月４日に公開された米国特許公報第２００６／００９３２７６号、２００５年１月２７日に公開された米国特許公報第２００５／００１８２０１号、２００２年５月９日に公開された米国特許公報第２００２／０１２２２４６号とともに、利用することが可能である。本書では明示的に説明又は示していないが、当業者であれば、本発明の原理を具現化した、様々なシステム、構成部及び方法を考案することが可能であり、それはらは本発明の趣旨と範囲に含まれることは明かである。さらに、本書では参照によって明示的に取り入れていなくても、従来技術の範囲の知識は、その全体が本書に統合されることは明かである。本書で参照された全ての刊行物は、その全てが参照により本書に統合される。
【図１】
2014097401.tif 000004
【図２】
2014097401.tif 000005
【図３】
2014097401.tif 000006
【図４】
2014097401.tif 000007
【図５】
2014097401.tif 000008
【図６】
2014097401.tif 000009
【図７】
2014097401.tif 000010
【図８】
2014097401.tif 000011
【図９】
2014097401.tif 000012
【図１０】
2014097401.tif 000013
【図１１】
2014097401.tif 000014
【図１２】
2014097401.tif 000015
【図１３】
2014097401.tif 000016
【図１４】
2014097401.tif 000017
【図１５】
2014097401.tif 000018
【手続補正書】
【提出日】平成25年12月20日(2013.12.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも一つのサンプルの少なくとも一つの領域から受けた信号に関連付けられたデータを提供するように構成された、少なくとも一つの分散用の第１の構成部と、
前記データに基づいて前記少なくとも一つの第１の構成部に関連付けられた焦点距離又は焦点位置の少なくとも一つを制御するように構成された、少なくとも一つの合焦用の第２の構成部と、を含む装置。
【請求項２】
前記少なくとも一つのサンプルの少なくとも一つのさらなる領域から受けたさらなる信号に関連付けられたさらなるデータを提供する、少なくとも一つの第３の構成部をさらに含み、
前記領域と前記さらなる領域は、（ｉ）少なくとも部分的に重なる、又は、（ｉｉ）近傍に位置する、の少なくとも一つであり、
前記少なくとも一つの合焦用の第２の構成部は、前記データ又は前記さらなるデータの少なくとも一つに基づいて前記少なくとも一つの第１の構成部に関連付けられた前記焦点距離又は前記焦点位置の少なくとも一つを制御するように構成されている、請求項１記載の装置。
【請求項３】
前記分散用の構成部及び前記合焦用の構成部は、バルーンの中に設けられている、請求項１記載の装置。
【請求項４】
解剖学的組織の少なくとも一部を撮像する装置であって、
少なくとも一つの第１の電磁放射を前記少なくとも一部に供給して、前記少なくとも一部の表面の面に対して０度より大きく、９０度より小さい角度でサンプルの面を形成するように構成された、分散用の構成部を含む少なくとも一つの構成部と、
前記少なくとも一つの第１の電磁放射に関連付けられた前記サンプルの面から少なくとも一つの第２の電磁放射を受けて、前記少なくとも一つの第２の電磁放射の関数として情報を生成するように構成された少なくとも一つの第２の構成部と、
前記情報に基づいて制御信号を生成し、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の焦点面の場所をさらに制御する、少なくとも一つの第３の構成部と、を備えた装置。
【請求項５】
前記少なくとも一つの第３の構成部は、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の少なくとも一部を用いて、前記サンプルの表面の場所に基づいて前記制御信号を生成するように構成されている、請求項４記載の装置。
【請求項６】
前記少なくとも一つの第２の構成部は、前記少なくとも一つの第２の電磁放射を少なくとも一つの第１の信号と少なくとも一つの第２の信号に分離する、請求項４記載の装置。
【請求項７】
前記少なくとも一つの第３の構成部は、前記少なくとも一つの第１の信号に基づいて、前記制御信号を生成し、
前記少なくとも一つの第２の信号の関数として、前記サンプルに関連付けられた少なくとも一つの画像を生成するようにさらに構成されている、請求項６記載の装置。
【請求項８】
前記情報の関数として、前記少なくとも一部の少なくとも一つの三次元画像を生成するように構成された少なくとも一つの第４の構成部をさらに備える、請求項４記載の装置。
【請求項９】
解剖学的組織の少なくとも一部を撮像する装置であって、
少なくとも一つの第１の電磁放射を前記少なくとも一部に供給して、前記少なくとも一部の表面の面に対して０度より大きく、９０度より小さい角度でサンプルの面を形成するように構成された、分散用の構成部を含む少なくとも一つの構成部と、
前記少なくとも一つの第１の電磁放射に関連付けられた前記サンプルの面から少なくとも一つの第２の電磁放射を受けて、前記少なくとも一つの第２の電磁放射の関数として情報を生成するように構成された少なくとも一つの第２の構成部と、
前記情報の関数として前記少なくとも一部の少なくとも一つの３次元画像を生成するように構成された、少なくとも一つの第３の構成部と、を備えた装置。
【請求項１０】
前記情報に基づいて制御信号を生成し、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の焦点面の場所をさらに制御する、少なくとも一つの第４の構成部を備えた、請求項９記載の装置。
【請求項１１】
解剖学的組織の少なくとも一部を撮像する方法であって、
少なくとも一つの第１の電磁放射を前記少なくとも一部に供給して、前記少なくとも一部の表面の面に対して０度より大きく、９０度より小さい角度でサンプルの面を形成するように構成された、分散用の構成部を用いて、
前記少なくとも一つの第１の電磁放射に関連付けられた前記サンプルの面から少なくとも一つの第２の電磁放射を受けて、前記少なくとも一つの第２の電磁放射の関数として情報を生成し、
前記情報に基づいて制御信号を生成し、前記少なくとも一つの第１の電磁放射の焦点面の場所をさらに制御する、方法。