(57)【要約】【課題】天然魚に近い穏やかな赤橙色の肉色を有するサケ類を生産することができるサケ類の肉色改善方法、肉色改善用飼料、及び該肉色改善方法により生産されたサケ類及びその魚肉の提供。【解決手段】アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサンチンを少なくとも含むカロテノイド色素を混合した飼料でサケ類を飼育することを特徴とする、穏やかな赤橙色の肉色を有するサケ類を生産する方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサンチンを少
なくとも含むカロテノイド色素を混合した飼料でサケ類を飼育することを特徴とする、穏
やかな赤橙色の肉色を有するサケ類を生産する方法。
【請求項２】
飼料中のアスタキサンチン含有量が20〜100mg/kgであり、かつ、フェニコキサンチン含
有量が5〜80mg/kgである請求項１に記載の方法。
【請求項３】
飼料中のカンタキサンチン含有量が0.5〜25mg/kgである請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
飼料中のアドニキサンチン含有量が0.2〜40mg/kgである請求項１〜３のいずれか１項に
記載の方法。
【請求項５】
生産したサケ類が、その魚肉中にアスタキサンチン及びフェニコキサンチンを含むこと
を特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
生産したサケ類が、その魚肉中にカンタキサンチン及び／又はアドニキサンチンを含む
ことを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
生産したサケ類の魚肉におけるアスタキサンチン含有量に対するフェニコキサンチン含
有量の比が５〜８０％であることを特徴とする請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
生産したサケ類の魚肉におけるアスタキサンチン含有量に対するカンタキサンチン含有
量の比が０．５〜２０％であることを特徴とする請求項５〜７のいずれか１項に記載の方
法。
【請求項９】
生産したサケ類の魚肉におけるアスタキサンチン含有量に対するアドニキサンチン含有
量の比が０．２〜４０％であることを特徴とする請求項５〜８のいずれか１項に記載の方
法。
【請求項１０】
飼料中のカロテノイド色素が天然品を含むことを特徴とする請求項１〜９のいずれか１
項に記載の方法。
【請求項１１】
飼料中のカロテノイド色素が天然品及び化学合成品を含むことを特徴とする請求項１〜
９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
カロテノイド色素に含まれる天然品がバクテリアの発酵により生産されたものであるこ
とを特徴とする請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
バクテリアがParacoccus属に属するバクテリアである請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
バクテリアは、配列番号１に記載の塩基配列と９８％以上の相同性を有する塩基配列を
含む、１６ＳリボソームＲＮＡに対応するＤＮＡを有するバクテリアである請求項１２に
記載の方法。
【請求項１５】
バクテリアが、Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４２８３）又はその変異株である請求
項１４に記載の方法。
【請求項１６】
サケ類がアトランティックサーモン、ニジマス、ギンザケ、キングサーモン、ベニザケ
、カラフトマス、サクラマス、シロサケ、サツキマス及びブラウンマスからなる群から選
ばれる少なくとも１種である請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
サケ類がアトランティックサーモン、ニジマス、ギンザケ及びキングサーモンからなる
群から選ばれる少なくとも１種である請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載のサケ類を生産するための飼料。
【請求項１９】
アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサンチンを少
なくとも含むカロテノイド色素を混合してなる、サケ類の養殖用飼料。
【請求項２０】
飼料中のアスタキサンチン含有量が20〜100mg/kgであり、かつ、フェニコキサンチン含
有量が5〜80mg/kgである請求項１９に記載の飼料。
【請求項２１】
飼料中のカンタキサンチン含有量が0.5〜25mg/kgである請求項１９又は２０に記載の飼
料。
【請求項２２】
飼料中のアドニキサンチン含有量が0.2〜40mg/kgである請求項１９〜２１のいずれか１
項に記載の飼料。
【請求項２３】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法により生産されたサケ類又はその魚肉若し
くはその卵。
【請求項２４】
魚肉又は卵におけるアスタキサンチン含有量に対するフェニコキサンチン含有量の比が
５〜８０％であることを特徴とする請求項２３に記載のサケ類又はその魚肉若しくはその
卵。
【請求項２５】
魚肉又は卵におけるアスタキサンチン含有量に対するカンタキサンチン含有量の比が０
．５〜２０％であることを特徴とする請求項２３又は２４に記載のサケ類又はその魚肉若
しくはその卵。
【請求項２６】
魚肉又は卵におけるアスタキサンチン含有量に対するアドニキサンチン含有量の比が０
．２〜４０％であることを特徴とする請求項２３〜２５のいずれか１項に記載のサケ類又
はその魚肉若しくはその卵。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、天然魚に近い穏やかな赤橙色の肉色を有するサケ類を生産することができる
サケ類の肉色改善方法、肉色改善用飼料、及び該肉色改善方法により生産されたサケ類及
びその魚肉に関する。
【背景技術】
【０００２】
天然のサケ類は自然界のエビやカニに含まれるカロテノイド色素を摂取、蓄積して赤橙
色の肉色を呈している。養殖のサケ類は、その肉色を天然のサケ類に近い色にするために
通常カロテノイド色素を添加した飼料で飼育される。
飼料に添加するカロテノイド色素として従来からアスタキサンチンの化学合成品が広く
一般に使用されている（Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 46: 185-19
6 (2006)）。天然由来のカロテノイド色素をサケ類の肉色改善に利用した例としては赤色
酵母Phaffia rhodozymaの生産するアスタキサンチン（特表平8-508885）、藻類Haematoco
ccus pluvialisの生産するアスタキサンチン（米国特許4,871,551）、トウガラシ成分で
あるカプサイシン類（特開2005-27662）が知られている。また、サケ類ではないがマダイ
の体表における色調改善を試験するためにバクテリアParacoccus carotinifaciens E-396
株（FERM BP-4283）の生産するカロテノイド色素が使用された例が知られている（特開平
9-308481）。さらに、カロテノイド化合物を含有する微生物培養沈殿物よりなる飼料添加
用色素含有物も知られている（特開2001-95500）。
【特許文献１】特表平８−５０８８８５号公報
【特許文献２】特開２００５−２７６６２号公報
【特許文献３】特開平９−３０８４８１号公報
【特許文献４】特開２００１−９５５００号公報
【非特許文献１】Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 46: 185-196 (2006)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
合成アスタキサンチンを添加した飼料で養殖したサケの肉は鮮やかな赤色を呈するが、
ときに赤色度が強すぎることがあり、その色素が化学合成品であるという知識と結びつい
たときに消費者に好ましくない印象を与えることが懸念される。天然志向の消費者に受け
入れられやすいという点において赤色酵母Phaffia rhodozyma及び藻類Haematococcus plu
vialisの生産するカロテノイド色素は有望であるが、これらの酵母及び藻類由来のカロテ
ノイド色素の成分はアスタキサンチンがほとんどであり、魚肉の色調としては合成アスタ
キサンチンを用いて飼育したときと同様な色調しか期待できない。また、トウガラシは赤
色の色素源として有用ではあるが、自然作物であるため天候に左右され易く、安定供給す
ることは困難である。
【０００４】
このため、安定供給可能な天然由来の色素を飼料に配合して自然な赤橙色の肉色を有す
るサケ類を養殖生産する方法が求められていた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記課題を解決するために本発明者らは、アスタキサンチン及びフェニコキサンチン（
別名アドニルビン）及びカンタキサンチン及びアドニキサンチンを含むカロテノイド色素
を配合した飼料を給餌することにより、合成アスタキサンチンを用いたときよりも穏やか
で自然な赤橙色の肉色を有するサケ類を生産できることを見出し、本発明を完成させるに
至った。
【０００６】
即ち、本発明は以下の方法、飼料及びサケ類を提供する。
【０００７】
（１）アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサンチ
ンを少なくとも含むカロテノイド色素を混合した飼料でサケ類を飼育することを特徴とす
る、穏やかな赤橙色の肉色を有するサケ類を生産する方法。
【０００８】
（２）飼料中のアスタキサンチン含有量が20〜100mg/kgであり、かつ、フェニコキサン
チン含有量が5〜80mg/kgである（１）に記載の方法。
【０００９】
（３）飼料中のカンタキサンチン含有量が0.5〜25mg/kgである（１）又は（２）に記載
の方法。
【００１０】
（４）飼料中のアドニキサンチン含有量が0.2〜40mg/kgである（１）〜（３）のいずれ
か１項に記載の方法。
【００１１】
（５）生産したサケ類が、その魚肉中にアスタキサンチン及びフェニコキサンチンを含
むことを特徴とする（１）〜（４）のいずれか１項に記載の方法。
【００１２】
（６）生産したサケ類が、その魚肉中にカンタキサンチン及び／又はアドニキサンチン
を含むことを特徴とする（５）に記載の方法。
【００１３】
（７）生産したサケ類の魚肉におけるアスタキサンチン含有量に対するフェニコキサン
チン含有量の比が５〜８０％であることを特徴とする（５）又は（６）に記載の方法。
【００１４】
（８）生産したサケ類の魚肉におけるアスタキサンチン含有量に対するカンタキサンチ
ン含有量の比が０．５〜２０％であることを特徴とする（５）〜（７）のいずれか１項に
記載の方法。
【００１５】
（９）生産したサケ類の魚肉におけるアスタキサンチン含有量に対するアドニキサンチ
ン含有量の比が０．２〜４０％であることを特徴とする（５）〜（８）のいずれか１項に
記載の方法。
【００１６】
（１０）飼料中のカロテノイド色素が天然品を含むことを特徴とする（１）〜（９）の
いずれか１項に記載の方法。
【００１７】
（１１）飼料中のカロテノイド色素が天然品及び化学合成品を含むことを特徴とする（
１）〜（９）のいずれか１項に記載の方法。
【００１８】
（１２）カロテノイド色素に含まれる天然品がバクテリアの発酵により生産されたもの
であることを特徴とする（１０）又は（１１）に記載の方法。
【００１９】
（１３）バクテリアがParacoccus属に属するバクテリアである（１２）に記載の方法。
【００２０】
（１４）バクテリアは、配列番号１に記載の塩基配列と９８％以上の相同性を有する塩
基配列を含む、１６ＳリボソームＲＮＡに対応するＤＮＡを有するバクテリアである（１
２）に記載の方法。
【００２１】
（１５）バクテリアが、Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４２８３）又はその変異株で
ある（１４）に記載の方法。
【００２２】
（１６）サケ類がアトランティックサーモン、ニジマス、ギンザケ、キングサーモン、
ベニザケ、カラフトマス、サクラマス、シロサケ、サツキマス及びブラウンマスからなる
群から選ばれる少なくとも１種である（１）〜（１５）のいずれか１項に記載の方法。
【００２３】
（１７）サケ類がアトランティックサーモン、ニジマス、ギンザケ及びキングサーモン
からなる群から選ばれる少なくとも１種である（１６）に記載の方法。
【００２４】
（１８）（１）〜（１７）のいずれか１項に記載のサケ類を生産するための飼料。
【００２５】
（１９）アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサン
チンを少なくとも含むカロテノイド色素を混合してなる、サケ類の養殖用飼料。
【００２６】
（２０）飼料中のアスタキサンチン含有量が20〜100mg/kgであり、かつ、フェニコキサ
ンチン含有量が5〜80mg/kgである（１９）に記載の飼料。
【００２７】
（２１）飼料中のカンタキサンチン含有量が0.5〜25mg/kgである（１９）又は（２０）
に記載の飼料。
【００２８】
（２２）飼料中のアドニキサンチン含有量が0.2〜40mg/kgである（１９）〜（２１）の
いずれか１項に記載の飼料。
【００２９】
（２３）（１）〜（１７）のいずれか１項に記載の方法により生産されたサケ類又はそ
の魚肉若しくはその卵。
【００３０】
（２４）魚肉又は卵におけるアスタキサンチン含有量に対するフェニコキサンチン含有
量の比が５〜８０％であることを特徴とする（２３）に記載のサケ類又はその魚肉若しく
はその卵。
【００３１】
（２５）魚肉又は卵におけるアスタキサンチン含有量に対するカンタキサンチン含有量
の比が０．５〜２０％であることを特徴とする（２３）又は（２４）に記載のサケ類又は
その魚肉若しくはその卵。
【００３２】
（２６）魚肉又は卵におけるアスタキサンチン含有量に対するアドニキサンチン含有量
の比が０．２〜４０％であることを特徴とする（２３）〜（２５）のいずれか１項に記載
のサケ類又はその魚肉若しくはその卵。
【発明の効果】
【００３３】
本発明により、アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニ
キサンチンを少なくとも含むカロテノイド色素を混合してなる飼料が提供される。本発明
の飼料でサケ類を飼育すると、穏やかで自然な赤橙色の肉色を有するサケ類を生産するこ
とができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００３５】
本発明は、アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサ
ンチンを少なくとも含むカロテノイド色素を混合してなるサケ類の生産用飼料であり、穏
やかな赤橙色の肉色を有するサケ類を生産するためのものである。また、本発明は、その
ような飼料を用いてサケ類を飼育することにより、穏やかな赤橙色の肉色を有するサケ類
を生産する方法に関する。
【００３６】
本発明において、サケ類とは、サケ科太平洋サケ属（Oncorhynchus属）あるいはサケ科
大西洋サケ属（Salmo属）に属する魚類のことである。太平洋サケ属に属するサケとして
は、例えばニジマス（Oncorhynchus mykiss）、ギンザケ（Oncorhynchus kisutch）、キ
ングサーモン（Oncorhynchus tshawytscha）、ベニザケ（Oncorhynchus nerka）、カラフ
トマス（Oncorhynchus gorbuscha）、シロサケ（Oncorhynchus keta）、サクラマス（Onc
orhynchus masou masou）及びサツキマス（Oncorhynchus masou macrostomus）が例示さ
れ、大西洋サケ属に属するサケとしては、例えばアトランティックサーモン（Salmo sala
r）及びブラウンマス（Salmo trutta）が例示される。中でもアトランティックサーモン
、ニジマス、ギンザケ及びキングサーモンが本発明におけるサケ類の好適な例として挙げ
られる。本発明においては、サケ類は海面養殖に用いられる降海型であっても淡水養殖で
用いられる陸封型であってもよく、養殖の態様は特に限定されない。
【００３７】
本発明の方法において使用するカロテノイド色素としては好ましくは天然品が用いられ
るが、天然品に化学合成品を混合してもよい。本発明の飼料は、天然品としてアスタキサ
ンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサンチンを少なくとも含む
ものである限り特に限定されないが、バクテリア、酵母又は藻類が産生するカロテノイド
色素、植物由来のカロテノイド色素、あるいはエビやカニなど甲殻類から得られるカロテ
ノイド色素を、単独であるいは２種以上を組み合わせて用いることができる。天然品は、
バクテリアの発酵により生産されたものが好ましい。
【００３８】
細胞壁が薄く色素の有効利用が可能である点でバクテリア由来のカロテノイド色素を用
いることが好ましい。Paracoccus属に属するバクテリア由来の色素は、カロテノイド色素
の生産性が高い点でより好ましい。またバクテリアの１６ＳリボソームＲＮＡに対応する
ＤＮＡの塩基配列が、配列番号１に記載の塩基配列と実質的に相同である塩基配列を含む
ようなリボソームRNAを有するバクテリアの色素を用いることも好ましい。
【００３９】
ここで言う「実質的に相同である」とは、ＤＮＡの塩基配列決定のエラー頻度等を考慮
し９８％以上の相同性を有することを意味する。Paracoccus carotinifaciens E-396株（
FERM BP-4283）又はその変異株由来のカロテノイド色素を用いることが特に好適な例とし
て挙げられる。
【００４０】
本発明において飼料に配合するカロテノイド色素の天然品は、そのままの形態で使用す
ることもできるが、色素を生体とともに乾燥した粉末を使用することもできる。「色素を
生体とともに乾燥した粉末」としては、例えば、色素を生産する微生物を培養して得られ
た色素と微生物を含む培養液をそのまま乾燥したもの、色素をもともと含有する植物をそ
のまま乾燥して粉末化したものなどが挙げられる。カロテノイド色素を含む生物や培養液
をそのまま乾燥して粉末としたものでもよく、そこから有機溶媒などで色素を抽出したも
の、あるいは、抽出したものをさらに分離精製して純度を高くしたものでもよい。
【００４１】
本発明の飼料は、アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアド
ニキサンチンを含む飼料である限り、成形状態が限定されるものではない。飼料の成形状
態としては、例えばペレット状、粉状、練り餌状などが挙げられ、その他押出成形ペレッ
ト、モイストペレット、マッシュなどが例示される。飼料の大きさはサケ類の成長に合わ
せて何段階かに変化させることが好ましいが特に限定はない。カロテノイド色素以外の飼
料原料は添加物として使用することができ、例えば魚粉等の飼料の主原料に、小麦粉、大
豆油糟、コーングルテンミール、ビタミン類、ミネラル類、魚油などの添加物を添加する
ことができる。これらの添加物は、通常サケ類の飼育に使用されるものであれば、その種
類及び配合量は特に限定されない。カロテノイド色素は、飼料製造工程における熱失活を
考慮して添加することができ、押出成形ペレットの場合には押出成形処理の前に添加して
も後に添加してもよい。
【００４２】
本発明において飼料中に配合するアスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサ
ンチン及びアドニキサンチンの量は特に限定されない。例えば、穏やかな赤橙色の肉色を
有するサケ類を生産するために飼料中のアスタキサンチン含有量は、好ましくは20mg/kg
以上、より好ましくは30mg/kg以上、さらに好ましくは40mg/kg以上であり、好ましくは10
0mg/kg以下、より好ましくは90mg/kg以下、さらに好ましくは80mg/kg以下に調製する。
【００４３】
魚肉に赤橙系統の色を付与するために、飼料中のフェニコキサンチン含有量は、好まし
くは5 mg/kg以上、より好ましくは10 mg/kg以上、さらに好ましくは15 mg/kg以上であり
、好ましくは80mg/kg以下、より好ましくは70mg/kg以下、さらに好ましくは60mg/kg以下
である。カンタキサンチン及びアドニキサンチンは魚肉に橙系の色を付与するために有効
である。本発明においては、飼料中のアスタキサンチン含有量が20〜100mg/kgであり、か
つ、フェニコキサンチン含有量が5〜80mg/kgとすることが好ましい。
【００４４】
飼料中のカンタキサンチン含有量は、好ましくは0.5mg/kg以上、より好ましくは1.0 mg
/kg以上、さらに好ましくは1.5 mg/kg以上であり、25mg/kg以下、より好ましくは20mg/kg
以下、さらに好ましくは15mg/kg以下である。飼料中のアドニキサンチン含有量は好まし
くは0.2mg/kg以上、より好ましくは1.0 mg/kg以上、さらに好ましくは2.0 mg/kg以上であ
り、40mg/kg以下、より好ましくは30mg/kg以下、さらに好ましくは20mg/kg以下である。
【００４５】
本発明におけるサケ類の飼育方法は特に限定されないが、たとえば100〜300g程度の魚
体重になるまで淡水で飼育した稚魚を海面生簀に放流し、１日１回の飽食給餌を魚が出荷
サイズになるまで継続する方法を例示することができる。本発明の飼料は海面生簀におけ
る給餌の全期間で使用することが好ましいが、本飼料を部分的に使用して他の期間は別の
飼料で飼育することも可能であり、また、淡水における稚魚の飼育に本飼料を用いてもよ
い。陸封型のサケ類の淡水養殖に本発明の方法を適用することもできる。
【００４６】
水揚げしたサケ類の肉色は、分光測色計を用いて測定することによりL*a*b*表色系で数
値化することができる。ここでL*は明度、a*は赤色度、b*は黄色度を示し、a*/b*が大き
ければ赤味が強いことを、小さければ橙色味が強いことを示す。本発明の方法により生産
したサケ類の肉色は合成アスタキサンチン添加飼料で飼育したサケ類に比較してa*/b*が
小さい傾向を示し、より自然な赤橙色を呈する。
【００４７】
サケ類の肉色を数値化する別の間接的な方法としては魚肉中のカロテノイド色素を抽出
し分析する方法を用いることができる。カロテノイド色素は化合物により異なる色調を有
している。本発明に利用される４種のカロテノイド化合物を赤色度の高いものから橙色度
の高いものへと順に並べると、アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチ
ン、アドニキサンチンになる。したがって、これらカロテノイド色素の魚肉中の含有量を
分析することにより肉色を推測することができる。
【００４８】
本発明の方法により生産したサケ類の魚肉はアスタキサンチン及びフェニコキサンチン
を含有することが好ましい。また、アスタキサンチン及びフェニコキサンチンに加えて、
カンタキサンチン又はアドニキサンチンのうち１種又は両方が魚肉中に含有することがよ
り好ましい。「魚肉」とは、ヒトが通常食する魚体の肉を意味し、生鮮肉及び加工肉の両
者を含む。加工肉としては、たとえば切り身、干物、スモークサーモン、塩サケ、新巻サ
ケ、缶詰肉などが挙げられる。また、本発明の方法により生産したサケ類の卵も穏やかな
赤橙色を呈するので産業上有用である。
【００４９】
魚肉におけるアスタキサンチン含有量に対するフェニコキサンチン含有量の割合（比）
は、好ましくは5%以上、より好ましくは10%以上、さらに好ましくは15%以上であり、好ま
しくは80%以下、より好ましくは70%以下、さらに好ましくは60%以下である。魚肉中のア
スタキサンチン含有量に対するカンタキサンチン含有量の比は、好ましくは0.5%以上、よ
り好ましくは1%以上、さらに好ましくは1.5%以上であり、好ましくは20%以下、より好ま
しくは15%以下、さらに好ましくは10%以下である。アスタキサンチン含有量に対するアド
ニキサンチン含有量の比は、好ましくは0.2%以上、より好ましくは1.0%以上、さらに好ま
しくは2.0%以上であり、好ましくは40%以下、より好ましくは30%以下、さらに好ましくは
20％以下である。
【００５０】
以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限
定されるものではない。
【００５１】
なお、実施例におけるカロテノイド色素の定量は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬ
Ｃ）を用いて行った。カラムはWakosil-II 5 SIL-100 φ4.6×250mm（和光純薬社製）を
２本連結して使用した。ｎ−ヘキサン：テトラヒドロフラン：メタノール（４０：２０：
１）混合液を移動相とし一定室温にて1.0ml/minの流速で、検出は波長４７０ｎｍで行っ
た。飼料又は魚肉を粉砕後、テトラヒドロフラン：メタノール（２０：１）混合液で色素
を抽出し、移動相で適当に希釈してＨＰＬＣ分析を行った。
【実施例１】
【００５２】
表１に示す組成の培地１００ｍｌを５００ｍＬ容量の綿栓付きフラスコに入れ、１２１
℃、１５分間加熱滅菌した。これにParacoccus carotinifaciens Ｅ−３９６株（ＦＥＲ
Ｍ  ＢＰ−４２８３）を1白金耳植菌し、２８℃で２日間振とう培養を行った。
【００５３】
この培養液全量を表１の培地が３０Ｌ入った５０Ｌ容量の発酵槽に植菌し、２８℃で１
日間２００ｒｐｍの攪拌培養を行った。次にこの培養液１０Ｌを表２に示す組成の培地が
３００Ｌ入った６００Ｌ容量の発酵槽に植菌し、２８℃、通気量１．０ｖｖｍ、溶存酸素
濃度が最低２．５ｐｐｍを維持するように攪拌回転数を自動制御し、ｐHを７．１以上に
維持するよう苛性ソーダで自動制御しながら１２０時間の培養を行った。シュークロース
は生育とともに消費されるため、培養１日目及び２日目に４．５ｋｇずつ追加した。培養
液を連続遠心分離機で処理して得られた濃縮液を、スプレードライヤーを用いて乾燥しカ
ロテノイド色素を含む発酵品を得た。発酵品を魚粉などと混合した後ペレット状とし、魚
油でコーティングすることによりサケ用の飼料を調製した。また、比較のために市販のア
スタキサンチン合成品を混合した飼料を調製した。調製した飼料中のカロテノイド色素を
ＨＰＬＣを用いて分析したところ、表３に示す組成であった。
【００５４】
体重約２００ｇのギンザケを各試験区３００尾として上記飼料による飽食給餌を海面生
簀で行った。６ヶ月間飼育後に各試験区１０尾の供試魚の体重を測定し、その平均値を表
４に示した。魚は延髄切断により即殺し冷凍保存した。解凍後、魚肉をコーヒーミルで粉
砕し、一部をポリエチレン袋に入れてミノルタ分光測色計ＣＭ−５０８ｉで色調を測定し
、１０尾の分析値の平均値を表４に示した。また、粉砕した魚肉の一部から色素を抽出し
、ＨＰＬＣによりカロテノイド色素の含量分析を行い１０尾の平均値を表５に示した。
合成品区の魚肉は不自然な赤色であるのに対し、発酵品区の魚肉は穏やかな赤橙色を呈
していた。
【００５５】
【表１】
2014097069.tif 000002
【００５６】
【表２】
2014097069.tif 000003
【００５７】
【表３】
2014097069.tif 000004
【００５８】
【表４】
2014097069.tif 000005
【００５９】
【表５】
2014097069.tif 000006
【実施例２】
【００６０】
Paracoccus carotinifaciens Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４２８３）をN-methyl-
N'-nitro-N-nitrosoguanidineで変異処理し、濃い赤色のコロニーを選択した。これら菌
株の培養液中のカロテノイド色素を分析し、アスタキサンチンの生産性が向上した変異株
を選択した。表１に示す組成の培地１００ｍｌを５００ｍＬ容量の綿栓付きフラスコに入
れ、１２１℃、１５分間加熱滅菌した。これに上記変異株を1白金耳植菌し、２８℃で２
日間振とう培養を行った。
【００６１】
この培養液全量を、表１に示す組成の培地が３０Ｌ入った５０Ｌ容量の発酵槽に植菌し
、２８℃で１日間２００ｒｐｍの攪拌培養を行った。次に、この培養液１０Ｌを表２に示
す組成の培地が３００Ｌ入った６００Ｌ容量の発酵槽に植菌し、２８．５℃、通気量１．
０ｖｖｍ、溶存酸素濃度が最低２．５ｐｐｍを維持するように攪拌回転数を自動制御し、
ｐHを７．１以上に維持するようアンモニア水で自動制御しながら１２０時間の培養を行
った。シュークロースは生育とともに消費されるため、培養１日目及び２日目に４．５ｋ
ｇずつ追加した。培養液を連続遠心分離機で処理して得られた濃縮液を、スプレードライ
ヤーを用いて乾燥しカロテノイド色素を含む発酵品を得た。発酵品を魚粉などと混合後ペ
レット状とし、魚油でコーティングすることによりサケ用の飼料を調製した。また、比較
のために市販のアスタキサンチン合成品を混合した飼料を調製した。調製した飼料中のカ
ロテノイド色素を、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて分析したところ、
表６に示す組成であった。
【００６２】
体重約１００ｇのニジマスを各試験区５０尾／水槽として、上記飼料を用い３ヶ月間の
飽食給餌を淡水で行った。飼育３ヶ月後に各試験区１２尾の体重を測定し、その平均値を
表７に示した。魚は延髄切断により即殺し、分光測色計で肉色を測定した１２尾の分析値
の平均値を表７に示した。また、測定後の肉を冷凍保存し、解凍後各試験区１２尾の魚肉
についてカロテノイド色素の含量分析を行い、その平均値を表８に示した。
【００６３】
合成品区の魚肉は赤色に近い赤橙色であるのに対し、発酵品区の魚肉は穏やかで自然な
赤橙色を呈していた。
【００６４】
【表６】
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【００６５】
【表７】
2014097069.tif 000008
【００６６】
【表８】
2014097069.tif 000009
【実施例３】
【００６７】
実施例２と同様の方法により、カロテノイド色素を含む発酵品を調製した。この発酵品
を魚粉などと混合後ペレット状とし、魚油でコーティングすることによりサケ用の飼料を
調製した。また、比較のために市販のアスタキサンチン合成品を混合した飼料を調製した
。調製した飼料中のカロテノイド色素を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用い
て分析したところ、表９に示す組成であった。
【００６８】
体重約３００ｇのアトランティックサーモンを各試験区４００尾として、上記飼料を用
い１２ヶ月間の飽食給餌を海面生簀で行った。各試験区２０尾について飼育１２ヶ月後に
水揚げして体重を測定し、その平均値を表１０に示した。魚を延髄切断により即殺し、分
光測色計で色調を測定し２０尾の分析値の平均値を表１０に示した。測定後１ヶ月間冷凍
保存し、解凍後各試験区２０尾の魚肉についてカロテノイド色素の含量分析を行い、その
平均値を表１１に示した。
【００６９】
合成品区の魚肉は赤色度の強い赤橙色であるのに対し、発酵品区の魚肉は穏やかで自然
な赤橙色を呈していた。
【００７０】
【表９】
2014097069.tif 000010
【００７１】
【表１０】
2014097069.tif 000011
【００７２】
【表１１】
2014097069.tif 000012
【実施例４】
【００７３】
実施例２と同様の方法により、カロテノイド色素を含む発酵品を調製した。この発酵品
を魚粉などと混合後ペレット状とし、魚油でコーティングすることによりサケ用の飼料を
調製した。また、比較のために市販のアスタキサンチン合成品を混合した飼料を調製した
。調製した飼料中のカロテノイド色素を、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用
いて分析したところ、表１２に示す組成であった。
【００７４】
体重約２００ｇのキングサーモンを各試験区１００尾として上記飼料を用い、３ヶ月間
の飽食給餌を海面生簀で行った。飼育３ヶ月後に各試験区１５尾をサンプリングして体重
を測定し、その平均値を表１３に示した。魚を延髄切断により即殺し、分光測色計で肉色
を測定した１５尾の分析値の平均値を表１３に示した。測定後魚肉を１ヶ月間冷凍保存し
、解凍後各試験区１５尾の魚肉についてカロテノイド色素の含量分析を行い、その平均値
を表１４に示した。
【００７５】
合成品区の魚肉は赤色に偏った赤橙色であるのに対し、発酵品区の魚肉は穏やかで自然
な赤橙色を呈していた。
【００７６】
【表１２】
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【００７７】
【表１３】
2014097069.tif 000014
【００７８】
【表１４】
2014097069.tif 000015
【配列表フリーテキスト】
【００７９】
配列番号１：nはa, c, g又はtを表す（存在位置：1350)。
【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成26年3月6日(2014.3.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスタキサンチン、フェニコキサンチン、カンタキサンチン及びアドニキサンチンを少なくとも含むカロテノイド色素を混合してなる、サケ類の魚肉に赤橙系統の色を付与する肉色改善用飼料であって、当該飼料のカロテノイド色素は、Paracoccus属に属するバクテリアの発酵により産生された天然品を含むものであり、飼料中のアスタキサンチン含有量が20〜100mg/kg、フェニコキサンチン含有量が5〜80mg/kg、カンタキサンチン含有量が0.5〜25mg/kg、かつ、アドニキサンチン含有量が0.2〜20mg/kgである、前記飼料。
【請求項２】
魚肉に付与する赤橙系統の色が、合成アスタキサンチンを添加した飼料で飼育されたサケ類の魚肉と比較して、a*/b*値（ここで、a*及びb*は、L* a* b*表色系で数値化された赤色度及び黄色度をそれぞれ表す）が小さいことを特徴とする、請求項１に記載の飼料。
【請求項３】
バクテリアが、Ｅ−３９６株（ＦＥＲＭ  ＢＰ−４２８３）又はその変異株である、請求項１又は２に記載の飼料。