(57)【要約】【課題】容易入手可能なサーチュイン活性促進剤の製造方法並びにサーチュイン活性促進剤及びそれを含む組成物を提供する。【解決手段】ごぼうに対してブランチングを行うブランチング工程と、前記ブランチングされたごぼうに対し、麹を用いて発酵させる発酵工程と、前記発酵されたごぼうに対し、有機溶媒を用いてごぼう抽出液を抽出する抽出工程と、を含むことを特徴とする、サーチュイン活性促進剤の製造方法とすることにより、容易入手可能なサーチュイン活性促進剤の製造方法並びにサーチュイン活性促進剤及びそれを含む組成物を提供することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ごぼうに対してブランチングを行うブランチング工程と、
前記ブランチングされたごぼうに対し、麹を用いて発酵させる発酵工程と、
前記発酵されたごぼうに対し、有機溶媒を用いてごぼう抽出液を抽出する抽出工程と、を含むことを特徴とする、サーチュイン活性促進剤の製造方法。
【請求項２】
前記麹は、A. awamoriであることを特徴とする、請求項１に記載のサーチュイン活性促進剤の製造方法。
【請求項３】
請求項１又は２に記載のサーチュイン活性促進剤の製造方法により製造されたことを特徴とする、サーチュイン活性促進剤。
【請求項４】
請求項３に記載のサーチュイン活性促進剤を含むことを特徴とする、飲食用組成物。
【請求項５】
請求項３に記載のサーチュイン活性促進剤を含むことを特徴とする、医薬用組成物。
【請求項６】
請求項３に記載のサーチュイン活性促進剤を含むことを特徴とする、化粧品用組成物。
【請求項７】
請求項３に記載のサーチュイン活性促進剤を含むことを特徴とする、抗老化剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サーチュイン活性促進剤の製造方法並びにサーチュイン活性促進剤及びそれを含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
食生活と老化との間には関連があることが知られている。具体的には、低カロリーの食事を主とする食生活によってサーチュイン遺伝子が活性化され、抗老化タンパク質であるサーチュインが発現する。そして、サーチュインの発現により、細胞の寿命を掌るタンパク質をコードするテロメア遺伝子が分解されることなく保護される。そのため、細胞の寿命が延び易く、老化が進行しにくい。一方で、高カロリーの食事を主とする食生活とすると、サーチュイン遺伝子が不活性化されたままとなり、テロメア遺伝子は保護されずに分解されてしまう。そのため、細胞の老化が進行し易い。
【０００３】
サーチュイン遺伝子を活性化する成分として、レスベラトロールが近年注目されている。しかし、レスベラトロールには幾何異性体が存在し、これらのうち、トランス−レスベラトロールが、サーチュイン遺伝子の活性化に寄与すると考えられている。しかし、トランス−レスベラトロールは揮発性を有し、シス−レスベラトロールに変換され易い。そして、シス−レスベラトロールはサーチュイン遺伝子の活性化には寄与せず不活性であるため、レスベラトロールを利用し難いのが現状である。そこで、レスベラトロールに代わりうる、サーチュイン活性促進効果を有する化合物（サーチュイン活性促進剤）が求められている。
【０００４】
このような事情に鑑みて、例えば特許文献１には、グネツム科植物の抽出物及びグネチンＣからなる群から選択される少なくとも１種を有効成分とするサーチュイン活性化剤が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２０１１−０７９７９７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、特許文献１に記載のグネツム科植物は熱帯地方で生育する植物である。そのため、日本での生育は大掛かりな設備が必要になることがある。また、グネチンＣはグネツム科植物に含まれているものであるが、前記のように、グネツム科植物を日本で簡便な方法や設備で生育することは難しい。従って、特許文献１に記載の技術においては、サーチュイン活性促進剤を容易に入手することが難しい。
【０００７】
本発明は前記課題に鑑みて為されたものであり、容易に入手可能なサーチュイン活性促進剤の製造方法並びにサーチュイン活性促進剤及びそれを含む組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは前記課題を解決するべく鋭意検討を行った。その結果、以下の知見を見出した。即ち、本発明の要旨は、ごぼうに対してブランチングを行うブランチング工程と、前記ブランチングされたごぼうに対し、麹を用いて発酵させる発酵工程と、前記発酵されたごぼうに対し、有機溶媒を用いてごぼう抽出液を抽出する抽出工程と、を含むことを特徴とする、サーチュイン活性促進剤の製造方法に関する。また、本発明の別の要旨は、この製造方法により製造されたサーチュイン活性促進剤とそれを含む組成物に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、容易入手可能なサーチュイン活性促進剤の製造方法並びにサーチュイン活性促進剤及びそれを含む組成物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明を実施するための形態（本実施形態）を説明するが、本実施形態は以下の内容に何ら限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲内で任意に変更して実施することができる。
なお、菌体名は通常斜体で記載されるが、本明細書においては便宜上、通常の字体により記載している。
【００１１】
［１．サーチュイン活性促進剤の製造方法］
本実施形態のサーチュイン活性促進剤の製造方法は、ごぼうに対してブランチングを行うブランチング工程と、前記ブランチングされたごぼうに対し、麹を用いて発酵させる発酵工程と、前記発酵されたごぼうに対し、有機溶媒を用いてごぼう抽出液を抽出する抽出工程と、を含むものである。ただし、これら以外の製造条件は特に制限されないものの、本実施形態のサーチュイン活性促進剤の製造方法は、さらに、詳細は後記する乾燥工程及び殺菌工程を含むことが好ましい。
【００１２】
そこで、本実施形態のサーチュイン活性促進剤の製造方法が、ブランチング工程、乾燥工程、殺菌工程、発酵工程及び抽出工程をこの順で含む場合を例に、本実施形態のサーチュイン活性促進剤の製造方法を説明する。ただし、本実施形態のサーチュイン活性促進剤の製造方法においては、前記のように、ブランチング工程、発酵工程及び抽出工程以外は、任意である。
【００１３】
（１）ブランチング工程
はじめに、本実施形態のサーチュイン活性促進剤の原料としてのごぼうが準備される。利用可能なごぼうの原産地や種類は特に制限されず、任意のごぼうを用いればよい。
【００１４】
準備されたごぼうは、通常、土壌から採取（収穫）された未処理のものである。このような未処理の状態であると、ごぼう独特の風味ゆえ、ごぼうを食べにくいという課題がある。そこで、はじめに、ごぼうに対してブランチングを行うことが好ましい。ブランチングにより、ごぼうに含まれる多糖類を分解し、イヌリンやフラクトオリゴ糖等が得られ、甘みを増すことができる。
【００１５】
ブランチングは、例えば蒸すことにより行うことができるがこれに限定されるものではない。例えば、焙焼、湯浴、焙煎、温蔵庫や蒸し庫で加熱すること等によっても行うことができる。
【００１６】
また、ブランチングの処理温度及び処理時間は、甘みの強弱等、消費者の嗜好に合わせて任意に設定することができる。例えば、ブランチングの処理温度を３５℃とした場合は処理時間を１８０分間とし、ブランチングの処理温度を９５℃とした場合は処理時間を５分間とすることができる。なお、ブランチングの処理温度が低く、処理時間が短くなると、多糖類の分解があまり行われないため、フルクトースの生成量が少なくなり、甘みが弱くなる傾向になる。一方、ブランチングの処理温度が高く、処理時間が長くなると、多糖類の分解が多く行われるため、フルクトースの生成量が多くなり、甘みが強くなる傾向になる。従って、これらを勘案し、処理温度及び処理時間を決定すればよい。
【００１７】
なお、ブランチングの処理温度としては、処理量及び設備によっても異なるが、大型の蒸し庫であれば、好ましくは４０℃以上、より好ましくは５０℃以上、また、好ましくは９０℃以下、より好ましくは６０℃以下とすることが望ましい。また、処理時間としては、通常は１０分以上１５０分以下である。
【００１８】
ブランチングされたごぼうは、ごぼうの乾燥及び発酵並びにごぼうに対する抽出を行い易くするとともに、粉砕を容易にするために、通常は皮むき及びカット（切断）される。ごぼうの皮むき及びカットは、市販の自動野菜加工機、例えば、ごぼう皮むき機や電動ごぼう切り機等で行うことができる。ごぼうの皮むきは、ごぼうの外皮を除去できればよく、ごぼうのカットは、薄切り、輪切り、半月切り、いちょう切り、短冊切り、斜め切り、ささがき等とすればよい。これらはもちろん、作業員の手によって行うこともできる。
【００１９】
（２）乾燥工程
皮（表皮）が剥かれ、カットされたごぼうは、乾燥工程に供される。乾燥工程により、ごぼう中のポリフェノールオキシダーゼによるポリフェノール成分の酸化減少を抑制し、ＯＲＡＣ（Oxygen Radical Absorbance Capacity；活性酸素吸収能力）値を高く維持することができる。また、色、味、風味といった官能を優れたものにすることができる。乾燥時の温度及び時間は特に制限されない。ただし、乾燥温度としては、好ましくは３０℃以上、より好ましくは４０℃以上、また、好ましくは７０℃以下、より好ましくは６０℃以下とすることが望ましい。中でも、乾燥温度が５０℃程度であると、ごぼうが明るい褐色を呈し、ごぼうの甘み及び香りもよく、ポリフェノール成分の含有量が高くなるので特に好ましい。
【００２０】
このような温度範囲で乾燥を行うことにより、早期にごぼう中の水分を除去することができ、その結果、ポリフェノールオキシダーゼによるポリフェノール成分の酸化減少を抑制することができる。また、色、味、風味といったごぼうの官能を優れたものとすることができる。さらには、酵素の失活を防止することができる。
【００２１】
一方で、乾燥温度が３０℃未満であると、乾燥が不十分となる可能性があり、ごぼうに含まれるポリフェノールオキシダーゼによるポリフェノール成分の酸化減少が促進する可能性がある。また、黒っぽい褐色を呈し、酸味が強く、風味は生臭くなる可能性がある。一方、乾燥温度が７０℃を超えると乾燥し過ぎてしまい、メイラード反応が促進して黒っぽい褐色を呈し、えぐみと酸味が強くなる可能性がある。また、ポリフェノール成分の酸化による減少が促進される可能性もある。
【００２２】
また、乾燥時間としては、前記した温度範囲であれば、好ましくは３０分以上、より好ましくは５時間以上、また、好ましくは８時間以下、より好ましくは６時間以下である。ただし、所望の効果を奏するようにごぼうを乾燥することができれば、特にこの乾燥時間に限定されるものではない。なお、乾燥時間が長いほどごぼうの酸化が進み、酸味が強くなる傾向にあるため、なるべく短時間であることが好ましい。
【００２３】
乾燥の具体的な方法としては、例えば天日干し、熱風乾燥等の任意の方法により行うことができる。
【００２４】
ごぼうの乾燥は、水分率が２％以上１５％以下となる程度まで行うことが好ましい。水分率がこの範囲にあればポリフェノールオキシダーゼによるポリフェノール成分の酸化減少を抑制することや、ＯＲＡＣ値を高く維持すること、色、味、風味といった官能を優れたものとすることが可能である。一方、水分率が１５％を超えると、乾燥が不十分である可能性があり、ごぼうに含まれるポリフェノールオキシダーゼによるポリフェノール成分の酸化減少が促進される可能性がある。また、ごぼうの色が黒っぽい褐色を呈し、酸味が強く、風味は生臭くなる可能性もある。
【００２５】
（３）殺菌工程
乾燥後のごぼうは、水に分散され、殺菌される。分散させる乾燥ごぼうの量に特に制限は無く、通常は等量の水に対してごぼうを分散させればよい。具体的には例えば、乾燥されたごぼう３０ｋｇを３０Ｌの水に分散させることができる。このような量的関係にすることにより、乾燥させたごぼうが十分に吸水される。
【００２６】
吸水したごぼうは殺菌される。殺菌時の圧力、時間及び温度は特に制限されず、例えば、１気圧（１０１ｋＰａ（絶対圧））、１２１℃で２０分間加圧することにより、ごぼうが殺菌される。そして、殺菌が完了すると、ごぼうは種切り温度（後記する麹摂取時の温度）付近まで冷却される。具体的には、通常は３５℃以上３６℃以下程度まで冷却される。
【００２７】
（４）発酵工程
種切り温度まで放熱されたごぼうに対して、麹が接種される（種切り）。即ち、種切り温度程度のごぼうに対して、種麹が接種される（製麹）。麹の摂取量としては特に制限されないが、例えば３０ｋｇのごぼうに対して、３０ｇの種麹を接種することができる（即ち、０．１質量％接種）。麹の接種後、発酵が生じる温度及び時間にて、ごぼうの発酵が行われる。
【００２８】
発酵の温度及び時間は特に制限されるものではないが、例えば３０℃以上４０℃以下（好ましくは３５℃程度）で４０時間程度とすることが好ましい。このような条件とすることにより、発酵を十分に進行させることができ、ごぼうにおけるポリフェノール類の重合やリグニン類の低分子化等が低くなる等の機能性低下を防止することができる。なお、発酵の程度は、発酵物の酸性プロテアーゼ活性を測定することで確認することができる。
【００２９】
このように、本工程において、ごぼうが麹を用いて発酵されることになる。このような処理をごぼうに対して施すことにより、ごぼうにおけるポリフェノール類の重合やリグニン類の低分子化等を促進することができると考えられる。さらには、麹を用いてごぼうを発酵させることにより、クエン酸を生成させることができる。
【００３０】
本工程において用いられる麹の具体的な種類は特に制限されない。本工程において適用可能な麹としては、例えば、Aspergillus awamori（A. awamori）、Aspergilluskawachii（A. kawachii）、Aspergillusinuii（A. inuii）、Aspergillussaitoi（A. saitoi）等が挙げられる。これらは１種が単独で用いられてもよく、２種以上が任意に組み合わされて用いられてもよい。これらの具体例の中でも、クエン酸を生成することもできるという観点から、麹は、A. awamoriであることが好ましい。
【００３１】
麹は、アスペルギルス属の糸状菌である。そして、このような麹は、米を原料として泡盛の製造にも用いられる菌種である。従って、麹は市販されている微生物であり、この発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者（所謂当業者）であれば、麹は容易に入手可能である。具体的には、例えばA. awamoriはヤヱガキＦ＆Ｓ社から購入することができる。そのため、本願においては、麹の寄託機関への寄託は行っていない。
【００３２】
麹によってごぼうが十分に発酵された後、その全体が乾燥される。乾燥時の温度は特に制限されないが、乾燥時の温度は高すぎないことが好ましい。具体的には、乾燥時の温度としては、例えば４０℃程度で乾燥させることができる。このような温度で乾燥させることにより、発酵により生じた酵素の失活をより確実に防止することができる。
【００３３】
乾燥後のごぼうは、発酵により生じた成分（酵素やクエン酸等）を含んだ状態である。そこで、これらの成分を含んだ状態でごぼうを粉砕し、篩分けを行う。粉砕及び最終産物の大きさの程度は特に制限されない。粉砕により、後記する抽出工程において、溶媒を用いたサーチュイン活性促進剤の抽出効率が向上するという利点がある。
【００３４】
（５）抽出工程
前記の発酵及び乾燥されたごぼうに対して、有機溶媒を用いてごぼう抽出液が抽出される。得られたごぼう抽出液には、サーチュイン活性促進効果を有するサーチュイン活性促進剤が含まれている。即ち、本工程において、発酵工程を経たごぼうから、サーチュイン活性促進剤が得られる（抽出される）ことになる。
【００３５】
本工程において用いられる有機溶媒は、有機物を含む溶媒であれば、本発明の効果を著しく損なわない範囲で特に制限されることはない。ただし、良好な抽出効率という観点から、アルコールやアセトン等の、水と混和し易い溶媒であることが好ましく、中でもアルコールがより好ましい。
【００３６】
抽出に用いる有機溶媒には、本発明の効果を著しく損なわない範囲で、水等の無機溶媒が含まれていてもよい。特に、抽出に用いられる溶媒としては、水とアルコールとの混合溶媒が好ましく、中でも、水とアルコールとを体積比で１：１の割合で混合した混合溶媒（５０体積％アルコール水溶液）がより好ましい。このような溶媒を用いることで、より抽出効率の高い抽出ができ、サーチュイン活性をより促進可能なごぼう抽出液を得ることができる。
【００３７】
溶媒としてアルコールを含む溶媒が用いられる場合、含まれるアルコールの種類は特に制限されないが、低級アルコールが好ましく、具体的には、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等が好ましい。特に、例えば穀物由来エタノールを用いた場合、得られたごぼう抽出液は全て天然由来のものであることから、食品等への添加が行い易いという利点がある。
【００３８】
抽出の具体的な条件は特に制限されない。例えば、室温（２５℃程度）の溶媒に、粉末状のごぼう粉末を分散させた後、例えば数分静置して、上清をごぼう抽出液として得ることができる。このとき、静置に加えて、適宜攪拌を行ってもよい。また、抽出効率を向上させる観点から、例えば３０℃〜４０℃程度に加熱した溶媒を用いて、適宜攪拌しながら抽出を行ってもよい。
【００３９】
上清の分離は、例えばろ紙等を用いて行うことができる。ごぼう粉末の粒径に応じて、ろ紙の孔径を決定すればよい。ろ紙を用いてごぼう粉末と溶媒との混合物をろ過することにより、ごぼう抽出液が得られる。このようにして得られたごぼう抽出液は、必要に応じて、溶媒を除去する等して濃縮してもよいし、また、別の溶媒等を用いて希釈してもよい。前記のように、得られるごぼう抽出液には、サーチュイン活性を促進させるサーチュイン活性剤が含まれている。従って、所望の促進効果が得られるように、適宜溶媒を用いて、濃縮や希釈等を行なえばよい。
【００４０】
［２．サーチュイン活性促進剤］
本実施形態のサーチュイン活性促進剤は、前記した製造方法によって製造される。即ち、前記の抽出工程を経て得られたごぼう抽出液が、本実施形態のサーチュイン活性促進剤となる。また、前記の発酵工程において、クエン酸生成能を有するA. awamoriを用いた場合、ごぼう抽出液には、サーチュイン活性促進剤とともに、クエン酸が含まれることがある。そのため、このようなクエン酸を含むごぼう抽出液を摂取することにより、抗疲労効果やピロリ菌生育阻害作用といった、更なる利点が得られる。
【００４１】
サーチュイン活性促進剤は、利用の簡便さの観点から、例えば前記抽出工程において得られたごぼう抽出液の形態で用いられることができる。即ち、前記のごぼう抽出液を用いて、サーチュイン活性促進剤を含む飲食用組成物や医薬用組成物、化粧品用組成物が得られる。また、前記のように、サーチュイン遺伝子が活性化されることにより、細胞の老化が進行しにくくなる。そのため、サーチュイン活性促進剤を含む組成物は、抗老化剤としても好適である。
【００４２】
これらの組成物等の摂取方法は、通常は経口摂取になる。従って、前記組成物や抗老化剤は、そのままの形態での摂取のほか、例えばパン、菓子、惣菜等に含有させて、摂取することができる。ただし、必要に応じて、例えば皮膚に塗布する等、外用剤として用いてもよい。
【００４３】
また、ヒト以外の動物（犬や猫等に）に与えられる餌にサーチュイン活性促進剤を含有させ、それを当該動物に与えるようにしてもよい。
【００４４】
［３．効果］
本実施形態のサーチュイン活性促進剤は、抗老化タンパク質であるサーチュインの活性を促進させる効果を有しており、食べることにより手軽に、サーチュインの各種機能を生体内で促進させて、優れた機能を手軽に得ることができる。
【００４５】
具体的には、本実施形態のサーチュイン活性促進剤によれば、それを利用した各種疾患治療剤や健康食品、化粧品等を提供することができる。また、、サーチュイン活性の低下が関与する老化、酸化（エイジング）の抑制に役立つほか、メタボリックシンドローム、糖尿病やその合併症、動脈硬化、消化器疾患等の種々の病態の治療・予防、皮膚の老化防止等にも役立つ。さらには、古くから食材として利用しており、日本国内でも容易に入手可能なごぼうからサーチュイン活性促進剤が得られるため、これらの機能をよりいっそう手軽に得ることができる。
【実施例】
【００４６】
以下、実施例を挙げて、本実施形態をより具体的に説明する。
【００４７】
［１．ごぼう抽出液の調製］
はじめに、ごぼうを水洗いした後、５０℃で１５分間のブランチングを行った（ブランチング工程）。そして、ブランチングしたごぼうを水冷した後、カット（２ｍｍ×２ｍｍ×２０ｍｍ）した。次いで、カットしたごぼうを５０℃で４時間熱風乾燥した（乾燥工程）。
【００４８】
そして乾燥したごぼう３０ｋｇを同重量の３０Ｌの水に分散させ、１２１℃１気圧（１０１ｋＰａ（絶対圧））で加圧殺菌した（殺菌工程）。３５℃まで冷却し、A. awamori（ヤヱガキＦ＆Ｓ社製）の種麹を３０ｇ接種した。その後、３５℃で４１時間培養した（発酵工程）。発酵後、４０℃で４時間送風乾燥した。乾燥後、気流式粉砕機（ダルトン社製）で粉砕を行った。
【００４９】
そして、発酵後に乾燥及び粉砕されたごぼう粉末に対して、５０体積％エタノール（有機溶媒、エタノールと同体積の水との混合溶媒）による抽出工程を行い、実施例１の抽出液を得た。併せて、同じごぼう粉末に対して、水による抽出工程を行い、比較例１の抽出液を得た。
【００５０】
また、乾燥工程後のごぼう（殺菌工程以降の工程を行っていない）に対して、５０体積％エタノールによる抽出工程（比較例２）と、水による抽出工程（比較例３）とを行い、比較例２及び３の抽出液を得た。
【００５１】
さらに、殺菌工程後のごぼう（発酵工程以降の工程を行っていない）に対して、１８０℃、１３分間の焙煎工程を行い、粉砕後、焙煎ごぼう粉末を調製した。そして、得られた焙煎ごぼう粉末に対して、５０体積％エタノールによる抽出工程（比較例４）と、水による抽出工程（比較例５）とを行い、比較例４及び５の抽出液を得た。
【００５２】
［２．サーチュイン活性促進効果の評価］
サーチュインに対する活性促進効果を評価するために、サーチュイン（ＳＩＲＴ１）活性測定用キット「SIRT1 Direct Fluorescent Screening Assay Kit（Cayman Chemical社製）」を用いて測定を行った。測定は前記測定用キットに付属の取り扱い説明書の方法に準じて行った。
【００５３】
＜測定条件の決定＞
蛍光の妨害サンプルによる、ディベロッパの妨害で蛍光強度が減少する可能性があるため、以下の方法で減少を測定し、希釈して妨害が１０％以下になるような測定条件を求めた。
【００５４】
まず、ブランクとして５μＬの希釈した蛍光溶液、５μＬのエタノール及び９０μＬの緩衝液をウェルに入れた。サンプルについては５μＬの希釈した蛍光溶液、５μＬのサンプル（実施例１及び比較例１〜５の抽出液のそれぞれ）のエタノール溶液（サンプルは１倍から１万倍に希釈したもの）、及び９０μＬの緩衝液をウェルに入れた。これらを室温で１０分間放置し、励起波長を３５０ｎｍ〜３６０ｎｍとし、４５０ｎｍ〜４６５ｎｍの波長の蛍光を測定した。この測定において、蛍光妨害が１０％以下となるサンプルの希釈条件を決定し、決定された希釈条件のもと、以下のサーチュイン活性測定を行った。
【００５５】
＜サーチュイン活性測定＞
前記条件にて蛍光溶液の希釈を行って、妨害が１０％以下になるようにして、サーチュイン活性の測定を行った。
【００５６】
２５μＬの緩衝液、５μＬのＳＩＲＴ１液及び５μＬのエタノールをマイクロプレートのウェルに入れた（１００％）。ブランクは５μＬのＳＩＲＴ１の代わりに５μＬの緩衝液を使用した。その後、希釈したサンプル（実施例１及び比較例１〜５の抽出液）のそれぞれ５μＬを各ウェルに入れ、さらに１５μＬの基質溶液（ＳＩＲＴ１ペプチド及びＮＡＤ＋）を入れ、室温で４５分間反応させた。
【００５７】
４５分経過後、５０μＬの停止ディベロッパ液を加えて反応を停止させ、室温で３０分放置した。そして、励起波長を３５０ｎｍ〜３６０ｎｍとして、４５０ｎｍ〜４６５ｎｍの波長の蛍光を測定し、測定された蛍光に基づいて、サーチュイン活性を算出した。なお、基質液は、ＳＩＲＴ１ペプチド、ＮＡＤ＋に緩衝液を加えて調製した。停止ディベロッパ液は、ディベロッパにニコチンアミドと緩衝液を混ぜて調製した。
【００５８】
これらの結果を表１に示す。
【００５９】
【表１】
2014214136.tif 000002
※  表１中、「５０％ＥｔＯＨ」は、５０体積％エタノールを表す。
【００６０】
＜検討＞
表１に示すように、実施例１においてサーチュイン活性が特に高く、５０体積％エタノールを用いて得られた実施例１の抽出液には、サーチュイン活性を促進させる効果が得られることがわかった。また、同じ発酵ごぼうに対して抽出したにも関わらず、水による抽出を行った比較例１では、サーチュイン活性の促進効果は殆ど得られなかった。このことから、サーチュイン活性促進剤は、水には殆ど溶解せず、５０体積％エタノール等の有機溶媒に溶解し易いと考えられる。従って、抽出には、有機溶媒を用いることが重要であることと考えられる。
【００６１】
また、乾燥ごぼうからの抽出液は、水又は５０体積％エタノールのいずれを用いても、サーチュイン活性の促進効果がみられなかった（比較例２及び３）。乾燥後に発酵させている実施例１等の結果と比べると、サーチュイン活性促進剤を含む抽出液を得るためには、乾燥だけでは不十分であり、発酵させることが重要であると考えられる。
【００６２】
さらに、焙煎ごぼうからの抽出液は、水又は５０体積％エタノールのいずれを用いても、サーチュイン活性の促進効果が殆どみられなかった（比較例４及び５）。ただし、溶媒として５０体積％エタノールを用いた比較例４では、水を用いた比較例５と比べて、比較的サーチュイン活性促進効果が認められた。この結果からも、実施例１等の結果についての前記検討のように、サーチュイン活性促進剤は、水には殆ど溶解せず、５０体積％エタノール等の有機溶媒に溶解し易いことと考えられる。
【００６３】
また、比較例４及び５では、ごぼうについての発酵を行わず焙煎を行ったが、乾燥のみの比較例２及び３よりはサーチュイン活性促進効果が認められたものの、発酵を行った実施例１よりはサーチュイン活性促進効果は小さかった。この結果からも、サーチュイン活性促進剤を含む抽出液を得るためには、発酵させることが重要であると考えられる。
【００６４】
以上のように、発酵されたごぼうから有機溶媒を用いて抽出することで、サーチュイン活性促進剤を容易に入手することができる。特に、ごぼうは古くから食されており、しかも、日本国内で容易に入手可能である。また、麹であるA awamori等も食品や酒等の製造時に古くから用いられているものであり、日本国内で容易に入手可能である。従って、本実施形態によれば、容易に入手可能なサーチュイン活性促進剤の製造方法並びにサーチュイン活性促進剤及びそれを含む組成物を提供することができる。