(57)【要約】【課題】ＰＥＴ用分子プローブとしての利用が可能な[11C]標識チミジン誘導体を提供すること、及びそれを用いたがんイメージング法を提供することを解決すべき課題としている。【解決手段】本発明の[11C]標識ジドブジンは下記化学構造式で示される。2014214092.tif 000013本発明の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを生体に投与することにより、ジドブジンの体内動態を観察することができる。さらには、本発明の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを生体に投与した場合、がん細胞に選択的に取り込まれることから、がんイメージング法として利用することができる。【選択図】図３
2014214092.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学構造式で示される[11C]標識ジドブジン。
【化１】
2014214092.tif 000011
【請求項２】
下記化学構造式で示される有機スズ化合物。
【化２】
2014214092.tif 000012
【請求項３】
請求項１の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブ。
【請求項４】
請求項３のＰＥＴ用プローブを生体に投与して陽電子放射断層撮影を行うことを特徴とするがんイメージング法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は[11C]標識ジドブジン、それを用いたＰＥＴ用プローブ及びがんイメージング法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＰＥＴ法は、11Cや18Fなどのポジトロンを放出する短寿命放射性核種で標識されたプローブを生体内に投与し、プローブにより発生するγ線をＰＥＴカメラ（ガンマ線シンチレーターと光電子増倍管からなる検出器）によって計測して、その体内分布をコンピューターにより画像化する方法である。この方法によれば、小動物からヒトまで含めた生体での薬剤の薬物挙動や標的部位への到達度を、非侵襲的かつ定量的に追跡することができる。
【０００３】
一方、チミジン（ピリミジンデオキシヌクレオシド）は生体やDNAウイルスに存在する4つのヌクレオシドの1つであり、チミジンの誘導体にはレトロウイルスのRNAが宿主DNAに組み込まれる際の逆転写プロセスを阻止したり、抗がん剤として機能したりするものが知られている（下記化学式参照）。
【０００４】
【化１】
2014214092.tif 000003
【０００５】
こうしたことから、チミジン誘導体やチミジンとよく似た化合物をPETプローブ化し、DNA合成や細胞増殖の研究や、がんの診断やがん治療の評価に役立てようとする試みがなされてきた。例えば以下に示す[18F]FLT、[18F]FMAU及び[11C]4DSTがPETプローブとして合成されており、 [18F]FLTは、がんの早期診断を促進するため医療分野において発達し、応用されてきた。
【０００６】
【化２】
2014214092.tif 000004
【０００７】
また、[11C]で標識されたチミジンについてもPETプローブとして合成されている（非特許文献１〜３参照）。
【０００８】
【化３】
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【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Appl. Radiat. Isot. 1991,42,103
【非特許文献２】Nucl. Med. Biol. 1997,24,713.
【非特許文献３】Nucl. Med. Biol. 2008,35,67.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
ＰＥＴプローブの合成は、分子に組み込む放射性核種の寿命が短いために困難を伴う。ＰＥＴ法で使用される短寿命放射核種としては11Cや18Fなどが用いられ、これらの放射性核種で標識された化合物がプローブとして用いられる。これらの中でも11Cは有機化合物中に存在している炭素原子を利用しているため適用範囲が極めて広く、さらには取扱者に対する被ばく量を少なくすることができるため、理想的な放射性核種といえる。しかしながら、11Cは半減期が２０分と短く、合成からＰＥＴ法での測定までを極めて短時間で行なわなければならないため、合成に与えられる時間はごくわずかとなってしまう。一方、前述した[18F]FLTは、合成過程で副生成物が生じ、その分離が難しいという問題がある。
【００１１】
また、サイクロトロンで製造できる11C核種は超微量（数十から数百ｎｍｏｌレベル；12Cの混入を考慮した値）であり、超希薄な11C核種の化合物と化学反応させるために、大過剰の被標識基質の存在下という特殊な条件下で行われる。このため、いかに短時間で効率良く生物活性有機化合物や創薬候補化合物をＰＥＴ分子プローブ化できるかということが最重要課題となっている。
【００１２】
本発明は、上記従来の実情に鑑みてなされたものであり、ＰＥＴ用分子プローブとしての利用が可能な[11C]標識チミジン誘導体を提供すること、及びそれを用いたがんイメージング法を提供することを解決すべき課題としている。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
PET法を抗HIV剤に適用し、その生体内での動態を観察することにより、AIDS/HIVの治療に役立てることができる。例えば、AIDS治療のため認可された最初の抗HIV剤であるジドブジンは、チミジン（ピリミジンデオキシヌクレオシド）の3´位の水酸基がアジド基に変換された化合物であり、細胞内にあるキナーゼによってリン酸化され、HIV逆転写酵素及びウィルスのDNA合成の阻害によってHIV細胞の複製を阻害する。本発明者らは、ジドブジンを[11C]で標識したところ、驚くべきことに、がん細胞に特異的に高い集積が認められることを発見し、これを利用すれば、がん細胞に対する高感度なイメージングが可能となることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１４】
【化４】
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【００１５】
すなわち、本発明の[11C]標識ジドブジンは下記化学構造式で示される。
【００１６】
【化５】
2014214092.tif 000007
【００１７】
本発明の[11C]標識ジドブジンは下記有機スズ化合物を前駆体とし、０価のパラジウム錯体とホスフィン系リガンドとハロゲン化銅と塩基の存在下で[11C]標識ヨウ化メチルを導入して容易に得ることができる。すなわち、本発明の有機スズ化合物は下記構造式で示される。
【００１８】
【化６】
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【００１９】
本発明の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを生体に投与することにより、ジドブジンの体内動態を観察することができる。
さらには、本発明の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを生体に投与した場合、がん細胞に選択的に取り込まれることから、がんイメージング法として利用することができる。すなわち、本発明のがんイメージング法は、[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを生体に投与して陽電子放射断層撮影を行うことを特徴とする。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】有機スズ化合物の[11C]標識ヨウ化メチルによる標識化の反応機構を説明する図である。
【図２】実施例１の[11C]ジドブジン合成時のHPLCチャートである。
【図３】HeLa細胞又はC6細胞を注入した担がんマウスの尾に実施例１の[11C]標識ジドブジンを静脈注射した後のＰＥＴ断層写真である。
【図４】[11C]標識ジドブジンの静脈注射後、60分及び80分の時点での[11C]標識ジドブジンの組織ごとの分配グラフである。
【図５】脳、Ｃ６腫瘍及びHeLa腫瘍における取り込み量の時間経過を示すグラフである。
【図６】HeLa細胞又はC6細胞を注入した担がんマウスの尾に比較例１の[11C]4DSTを静脈注射した後のＰＥＴ断層写真である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明の[11C]標識ジドブジンは、5-Iodo-2'-deoxyuridine (1)を出発物質として、以下に示す合成ルートによって、合成することができる。
【００２２】
【化７】
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【００２３】
すなわち、まず5-Iodo-2'-deoxyuridine (1)における５位の水酸基をTBS等で選択的に保護して化合物(2)する。さらに、残った３位の水酸基をアゾジカルボン酸ジイソプロピル及びトリフェニルホスフィンで環化させて化合物(3)とし、続いてアジ化ナトリウムでアジド(4)とする。そして、アジド(4)に存在するヨウ素をアルキルリチウムとトリブチルスズクロリドにより有機スズ化合物(5)とし、さらに、５位の保護基をはずして水酸基にもどし有機スズ化合物(6)とする。
最後に、有機スズ化合物(6)を０価のパラジウム錯体とホスフィン系リガンドとハロゲン化銅と塩基の存在下で[11C]標識ヨウ化メチルを導入して[11C]メチル基で標識化し、[11C]標識ジドブジンを得る。
【００２４】
上記の合成ルートでは、有機スズ化合物(6)の合成の段階までは[11C]標識化を行っておらず、有機スズ化合物(6)を前駆体として、最終段階で[11C]標識ヨウ化メチルを導入して[11C]メチル基で標識化している。また、最終段階の[11C]標識ヨウ化メチルによる標識化の反応は、ヨウ化メチルの濃度が極めて希薄であっても短時間で反応が終了し、高収率であり、さらには、ワンポットで行うことができるため、操作も短時間で終えることができる。このため、PETに利用するための充分な強さの放射能を有する[11C]標識ジドブジンを合成することができる。したがって、本発明の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを生体に投与することにより、ジドブジンの体内動態を観察することができる。
【００２５】
最終段階の[11C]標識ヨウ化メチルによる標識化の反応では、収率を上げるために[11C]CH3Iを導入している間、反応溶液を冷却することが好ましい。冷却は0℃以下が好ましく、さらに好ましくは-10℃以下であり、最も好ましくは-20℃である。反応液を冷却することの効果は図１に示す反応機構によって説明することができる。
すなわち、まず塩化第一銅とスタニル前駆体の金属交換反応（transmetallation）では、反応性の高い有機銅化合物中間体R-Cuとルイス酸Bu3SnClとが生成する。Bu3SnClは炭酸カリウムによって中和され、有機銅R-Cuは{[11C]CH3PdI}錯体と反応し、目的化合物[11C]CH3-Rを与える。このような反応プロセス中に、塩化銅及び炭酸カルシウムは相乗的に働く。換言すれば、炭酸カリウムを用いたBu3SnCl の中和は、Sn/Cuの金属交換反応を促進し、C-[11C]methylationを加速する。しかし、高い反応性を持つ有機銅R-CuはまたRHを生み出す脱メタル化反応や、R-Rを与えるホモカップリングのような副反応を起こし得るということに注意しなければならない。以上の結果から、脱メタル化プロセスは炭酸カリウム及び過剰量のP(o-tolyl)3によって一部抑制できるということが分かる。最近の研究によれば、R-Cuのホモカップリングは、室温あるいは0℃でさえ迅速に起こり、加熱あるいは高い温度によって加速されるということが証明されている。それゆえ、もし[11C]CH3Iガスが冷却されることなしにバブリングされたとしたら、[11C]methylationが起こる前に、これらの副反応が生じて、有機スズ前駆体が消費されてしまうであろう。
【００２６】
本発明者らは、さらに本発明の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを生体に投与した場合、がん細胞に選択的に取り込まれることを見出した。このことは、本発明の[11C]標識ジドブジンを含有するＰＥＴ用プローブを用いれば、がんのイメージングを行うことができるということを意味している。
【００２７】
さらには、本発明の[11C]標識ジドブジンを用い、ＰＥＴ法を適用することによって、トランスポーターを介した[11C]標識ジドブジンの体内動態を知ることができる。すなわち、[11C]標識ジドブジンをトランスポーター機能評価用のプローブとして用いることができる。
【００２８】
また、ジドブジンはHIV感染細胞内でリン酸化されて、活性型の3リン酸化体になり、HIV逆転写酵素を競合的に阻害してデオキシチミジン3リン酸の代わりにHIVのDNA中に取り込まれてDNA鎖の伸張を停止させる。これによりHIVウイルスの増殖を阻害する。HIV逆転写酵素に対する親和性は、正常細胞のDNAポリメラーゼに比べて約100倍強いので、[11C]標識ジドブジンの投与によるHIVウイルスのイメージングが可能となると考えられる。
【実施例】
【００２９】
＜[11C]標識ジドブジンの合成＞
（実施例１）
[11C]メチル化反応は、すべての操作をリモートコントロール可能な鉛遮蔽のホットセル内において行われた。[11C]CO2は、CYPRIS HM-12S サイクロトロン(住友重工業製) を用いて14N(p,α)11Cより調製され、理化学研究所にある11Cラベル化のための独自の自動化された合成システムを用い、ヨウ化水素で処理し、さらにLiAlH4還元することによって[11C]CH3Iを得た。こうして得られた[11C]CH3Iを反応系に導入することにより、[11C]メチル化反応を行った。
生成物の分析に使用したHPLCシステムは、システム制御装置 (CBM-20A)付の島津 HPLC system、online degasser (DGU-20A3)、溶媒運搬ユニット(LC-20AD)、カラムoven (CTO-20AC)、フォトダイオード-アレー検出器 (SPD-M20A)、ソフトウェア(LC-Solution)及びAloka radioanalyzer (RLC-700) によって構成されている。放射能はATOMLAB（登録商標）300 dose calibrator (Aloka)を用いて測定された。
【００３０】
5’-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-2,3’-anhydro-2’-deoxy-5-iodouridine (3)の合成
5-Iodo-2'-deoxyuridine (1)における５位の水酸基をTBSによって選択的に保護し、5'-O-(tert-butyldimethylsilyl)-2'-deoxy-5-iodouridine (2)を得た。化合物(2)（1.81g, 3.88 mmol）及びトリフェニルホスフィン（2.03 g, 7.76 mmol）をDMF（15 ｍL）に溶解した溶液にアゾジカルボン酸ジイソプロピル（1.56 mL, 7.76 mmol）を滴下した。反応溶液は室温で一晩撹拌し続け、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチした後、酢酸エチルで抽出した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去した。粗生成物はシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル溶媒）で精製し、化合物(3)を白色固体(1.6 g, 収率91%)として得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 0.07 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 2.44-2.49 (m, 1H), 2.67-2.70 (m, 1H), 3.71-3.86 (m, 2H), 4.11-4.31 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 5.53 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H). 13C NMR (100MHz; CDCl3 ) δ-5.46, 18.25, 25.78, 33.48, 61.01, 81.42, 85.96, 88.04, 143.92, 154.13, 167.46 . MS (HR-ESI) C15H23IN2O4SiNa (M+Na)+ calcd, 473.0369; found, 473.0363.
【００３１】
5’-O-(tert-Butyldimethylsilyl)-3’-azido-3’-deoxy-5-iodo-uridine (4)の合成
化合物（3）（900 mg, 2 mmol）とアジ化ナトリウム（900 mg, 13.8 mmol）をDMF（8ｍL）に溶解し、110℃で加熱し、6時間撹拌した。室温に冷却後、反応溶液を、飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチした後、酢酸エチルで抽出した。そして、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル：3：1）で精製し、生成物（4）を白色固体(480 mg, 収率49%)として得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.18 (s, 3H), 0.96 (s, 9H), 2.22-2.27 (m, 1H), 2.47-2.53 (m, 1H), 3.79-4.05 (m, 2H), 4.22-4.26 (m, 1H), 6.16 (t, J=6.4Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 8.28 (br s, 1H). 13C NMR (100MHz; CDCl3 ) δ  -5.22, 18.49, 26.16, 33.61, 60.77, 63.02, 68.55, 85.04, 85.48, 143.91, 149.64, 159.70. MS (HR-ESI) C15H24IN5O4SiNa (M+Na)+ calcd, 516.0540; found, 516.0530.
【００３２】
5’-O-tert-Butyldimethylsilyl -3’-azido-2’3’-dideoxy-5-(tributylstannyl)-uridine (5)の合成
化合物４（177 mg, 0.36 mmol）を脱水THF（５ｍL）に溶解した溶液に水酸化ナトリウム（17 mg, 50% in oil）を加え、室温にて10分間撹拌した。反応溶液を−78℃に冷却後、２当量のｎ−ブチルリチウム（1.6M, 0.45 mL, 0.72 mmol）を加えた。30分間撹拌した後、５当量のトリブチルスズクロリド（0.48mL, 1.8 mmol）を加えた。−78℃で２時間撹拌した後、反応溶液を室温に昇温し、反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチした後、酢酸エチルで抽出した。有機層を減圧下で溶媒留去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル：1：4）で精製し、生成物（5）を白色固体(50 mg, 収率21%)として得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 0.10 (s, 3H), 0.88-1.64 (m, 36H), 2.25-2.28 (m, 1H), 2.45-2.50 (m, 1H), 3.69-3.99 (m, 3H), 4.21-4.22 (m, 1H), 6.06 (t, J=6.8Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 8.14 (br s, 1H). 13C NMR (100MHz; CDCl3 ) δ -5.44, -5.32, 9.89, 13.57, 13.66, 17.50, 18.30, 25.88, 26.82, 26.93, 27.24, 27.82, 28.82, 28.92, 29.02, 37.27, 61.50, 63.22, 84.44, 85.78, 112.85, 143.10, 150.58, 165.95. MS (HR-ESI) C27H51N5O4SiSnNa (M+Na)+ calcd, 680.2634; found, 680.2640.
【００３３】
3’-Azido-2’3’-dideoxy-5-(tributylstannyl)-uridine (6)の合成
脱水THF（１ｍL）に溶解した化合物５（60 mg, 0.091 mmol）の混合物を氷浴で冷却した後、THF(1M, 1 mL)に溶解されたフッ化テトラ-n-ブチルアンモニウム（TBAF）で処理された。１時間撹拌後、反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチした。有機層を減圧下で溶媒留去し、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（メタノール：クロロホルム：1：20）で精製し、生成物６を白色固体(45 mg, 収率91%)として得た。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ0.88-1.55 (m, 27H), 2.30-2.40 (m, 1H), 2.61-2.67 (m, 1H), 3.80-3.99 (m, 3H), 4.41-4.43 (m, 1H), 5.98 (t, J=6.8Hz, 1H), 7.20 (s, 1H), 8.40 (br s, 1H). 13C NMR (100MHz; CDCl3 ) δ 9.89, 13.68, 16.40, 27.05, 27.28, 27.84, 28.94, 37.02, 60.48, 62.36, 84.67, 87.96, 113.30, 145.09, 150.69, 165.76. MS (HR-ESI) C21H37N5O4SnNa (M+Na)+ calcd,566.1769; found,566.1769.
【００３４】
5-[11C-methyl]-3’-azido-2’3’-dideoxy-thymidine  ([11C]ジドブジン)の合成
[11C]CO2を水素化アルミニウムリチウムによって還元し、さらにヨウ化水素酸で処理して[11C]CH3Iを調製した。
[11C]CH3Iは、Pd2(dba)3 (1.0 mg, 1.1μmol)、P(o-tolyl)3 ( 3.4 mg, 11μmol)、前駆体（6） (2.0 mg, 3.6μmol)、 CuCl (0.8 mg, 8μmol) 及びK2CO3 (1.4 mg, 10 μmol)を含むDMF溶液（300 mL）に-20℃で捕獲した。本溶液に捕獲した[11C]CH3Iの放射能は約27 GBqであった。この反応溶液を80℃で5分間加熱し、9％アセトニトリル（1 mL）で希釈した。得られた溶液を綿栓でろ過した後、メンブレンフィルター（filter media PVDF, pore size 0.2 mm, Whatman Inc.）でろ過した。ろ液を分取HPLCに供して目的物の分離精製を行った（semipreparative column, COSMOSIL 5C18 MS-II 20φx 250 mm (Nacalai Tesque); 移動相,13.3 % CH3CN; 流速, 9.9 mL/min; 検出波長, UV 265 nm）。結果を図１に示す。本分取条件における目的の[11C]ジドブジンの保持時間は12.5分であった。目的物のフラクションを集め、減圧下で溶媒を留去し25％のアスコルビン酸（200μL）及び生理食塩水（２ｍL）の混合溶液を添加して投与溶液を調整した。合成時間は38分であった。合成後の放射能は7.0 ± 0.8 GBq (n=3)で、比放射能は、74-128 GBq/μmolであった。[11C]4DSTのRadio-HPLC分析収率は92 ± 2% (n =3)であり、 [11C]4DSTの単離収率（崩壊補正放射化学収率）は、64.4± 6.9 % (n=3)であった（[11C]CH3Iからの変換収率）。[11C]4DSTの化学的及び放射化学的純度はそれぞれ>99% and >99.5%であった（分析条件：HPLC（カラム, COSMOSIL 5C18 AR-II 4.6φx 150 mm (Nacalai Tesque); 移動相,14% CH3CN; 流速, 1.0 mL/min; 検出波長, UV 265 nm）、保持時間は6.0分）。
【００３５】
[11C]CH3Iは、Pd2(dba)3 (1.0 mg, 1.1 μmol)、P(o-tolyl)3 ( 3.4 mg, 11 μmol)、前駆体 2’-3’-didehydro-2’,3’-dideoxy-5-(tributylstannyl)-uridine (2.0 mg, 3.6 μmol)、CuCl (0.8 mg, 8 μmol) 及びK2CO3 (1.4 mg, 10 μmol)を含むDMF溶液（300 mL）に-20℃で捕獲した。本溶液に捕獲した[11C]CH3Iの放射能は、約27 GBqであった。この反応溶液を80℃で5分間加熱し、9％アセトニトリル（1 mL）で希釈した。得られた溶液を綿栓でろ過した後、メンブレンフィルター（filter media PVDF, pore size 0.2 mm, Whatman Inc.）でろ過した。ろ液を分取HPLCに供して目的物の分離精製を行った（HPLC分取条件： semipreparative column, Gemini 5C18 21.2φx 250 mm Phenomenex）; 移動相, CH3CN /100 mM NH4HCO3 (pH 7.8) (9:91, v/v); 流速 9.9 mL/min; 検出波長, UV 265 nm）。本分取条件における目的の[11C]4DSTの保持時間は13.3分であった。目的物のフラクションを集め、減圧下で溶媒を留去し25％のアスコルビン酸（200μL）及び生理食塩水（２ｍL）の混合溶液を添加して投与溶液を調整した。合成時間は38分であった。合成後の放射能は6.6 ± 0.3 GBq (n=3)で、比放射能は126 ~ 135GBq/μmolであった。[11C]4DSTのRadio-HPLC分析収率は90 ± 2% (n=3) であり、 [11C]4DSTの単離収率（崩壊補正放射化学収率）は、60.0 ± 3.0 % (n=3)であった（[11C]CH3Iからの変換収率）。[11C]4DSTの化学的及び放射化学的純度はそれぞれ>97% and >99.5%であった（分析条件：HPLC（カラム, Luna 5C18 4.6φx 150 mm Phenomenex）; 移動相, CH3CN /100 mM NH4HCO3 (pH 7.8) (7:93, v/v) ; 流速, 1.0 mL/min; 検出波長, UV 265 nm）、保持時間は6.8分）。
【００３６】
実施例１の[11C]ジドブジンの合成及び比較例１の[11C] D4Tの合成におけるRadio-HPLC分析収率、放射能（Radioactivity）、単離収率（Isolated DCY）及び比放射能(Specific radioactivity)を表１に示す。
【表１】
2014214092.tif 000010
【００３７】
＜評  価＞
・腫瘍をもったマウスへの投与及びＰＥＴ撮影
実施例１の[11C]標識ジドブジン及び比較例１の[11C]D4Tを、担がんマウスに投与し、それらの生体内分布を評価した。以下にその詳細を示す。
ラットのC6細胞及びヒトのHela細胞を10％のウシ胎児血清及びペニシリン−ステプトマイシン100μg/mlを追加したDulbecco’s modified Eagle培地で培養した。すべての実験のプロトコルは、理化学研究所神戸研究所（MAH20-02）の動物実験審査委員会によって承認されたものである。５週令のメスのBalb/c-nu/nu マウスは、Japan CREAより実験の１週間前に入手した。マウスの肩の皮下に、C6では1×106細胞、Hela細胞は5×106個の細胞注入することで担がんマウスを作製した。マウスの腫瘍のサイズが200〜300 mm3の大きさに達した時、実験を行った。
実験では、50 MBq の[11C]ジドブジンを含んだ100μLの生理食塩水が、担がんマウスの尾静脈に注射された。所定時間経過後に3.0％のイソフルレンを用いてマウスを深麻酔させ、血液と尿を採取した。その後、肝臓、腎臓、心臓、脾臓、卵巣、肺、脳、大腿四頭筋、十二指腸、腸の内容物及び腫瘍を摘出し、それぞれの重さを測定した。組織、血液及び尿の試料における放射能は、放射能崩壊の補正がなされ、γカウンター（1480 Wizard counter, PerkinElmer Japan)を用いて測定した。結果は、%ID/g(=tissue activity / tissue weight (mg)×1000 / injected dose×100)として表した。
【００３８】
・結  果
HeLa細胞（あるいはC6細胞）担がんマウスに、実施例１の[11C]標識ジドブジンを静脈注射した後、30〜60分間のPETによる加算画像を図3に示す。また、[11C]標識ジドブジンの静脈注射後、60分及び80分の時点での[11C]標識ジドブジンの組織ごとの放射能分布を図4に示す。さらに、脳、Ｃ６腫瘍及びHeLa腫瘍における取り込み量の時間経過を示すグラフを図5に示す。図3、図4及び図5から、HeLa細胞やC6細胞に11Cが短時間に集積していることが分かった。以上の結果から、[11C]標識ジドブジンは、がんのイメージング用のプローブとして有用であることが分かった。
【００３９】
一方、HeLa細胞（あるいはC6細胞）担がんマウスに、比較例１の[11C]D4Tを静脈注射した後、30〜60分間のPETによるSummational imagesを図6に示す。この図から、HeLa細胞やC6細胞の領域からは11Cは検出されず、[11C]D4Tは、がんのイメージング用のプローブとしては適さないことが分かった。
【００４０】
この発明は上記発明の実施の態様及び実施例の説明に何ら限定されるものではない。特許請求の範囲を逸脱せず、当業者が容易に想到できる範囲で種々の変形態様もこの発明に含まれる。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明は、ＰＥＴ用分子プローブとして、医薬産業などにおいて利用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図４】
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【図５】
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【図３】
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【図６】
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