(57)【要約】【課題】デヒドロスルフレン酸の溶出効率を高めることができるベニクスノキタケの抽出方法を提供するものである。【解決手段】ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液に含浸し、上記ベニクスノキタケの生薬材に上記塩類溶液を吸収させることにより、含浸ベニクスノキタケを獲得する。次いで、上記含浸ベニクスノキタケをアルコール溶剤に浸し、超音波振動を経ることにより、ベニクスノキタケの抽出物を獲得することにより、効率よくベニクスノキタケから抽出することができる。【選択図】図２Ｂ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液に含浸し、上記ベニクスノキタケの生薬材に上記塩類溶液を吸収させることにより、含浸ベニクスノキタケを獲得する段階と、上記含浸ベニクスノキタケをアルコール溶剤に浸し、超音波の振動を経ることにより、ベニクスノキタケの抽出物を獲得する段階とを含むベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項２】
他に上記含浸ベニクスノキタケを上記アルコール溶剤で浸して抽出する前、上記含浸ベニクスノキタケを一個の密閉空間に置き、温度が１１０から１５０℃まで、圧力が１から３kg/cm2までの環境下で加熱して蒸煮する段階を含むことを特徴とする請求項１に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項３】
先ず上記ベニクスノキタケの生薬材の表面の不純物を除去した後、再び上記ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液の中に含浸することを特徴とする請求項１または２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項４】
上記加熱して蒸煮する時間は１５から６０分間までであることを特徴とする請求項２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項５】
温度が１２１℃、圧力が１kg/cm2の環境下で加熱して蒸煮することを特徴とする請求項２または４に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項６】
上記塩類溶液は２％の塩化ナトリウム溶液であることを特徴とする請求項１または２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項７】
５００グラムのベニクスノキタケの生薬材を１リットルの塩化ナトリウム溶液の中に含浸することを特徴とする請求項６に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項８】
上記アルコール溶剤は９５％のエタノール溶剤であることを特徴とする請求項１または２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項９】
上記ベニクスノキタケの生薬材はベニクスノキタケの子実体から選択することを特徴とする請求項１または２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベニクスノキタケの抽出方法に関するもので、特にデヒドロスルフレン酸の抽出効率を高めることができるベニクスノキタケの抽出方法に係るものである。
【背景技術】
【０００２】
ベニクスノキタケ（Antrodia Camphorata、アントロディア カンフォラータ）は、台湾特有の貴重な薬材であり、台湾の保育類の牛樟樹（Cinnamomum kanehirai）の中空の心材の内周壁にのみ寄生しており、野生のベニクスノキタケには豊富なトリテルペノイド（Triterpenoids）が含有され、トリテルペノイドは癌細胞の成長の抑制、肝臓の修復と肝機能の促進、血液脂質と血圧の降下、免疫力の強化などの功能を有する。
【０００３】
その中、図１を参照すると、デヒドロスルフレン酸（dehydrosulphurenic acid）はベニクスノキタケの特有のトリテルペノイド成分である。デヒドロスルフレン酸はラノスタンステロール化合物（lanostane）に属しており、生物体の細胞が代謝の過程においてスクアレン（squalene）を経てステロール（sterol）に合成する中間生成物であり、生物体のコレステロールの代謝と細胞膜生成の生化学の経路を干渉し易いため、細胞の成長周期と代謝に対して顕著な影響を有する。研究では、デヒドロスルフレン酸は癌細胞の細胞死と分裂期細胞死（mitotic catastrophe）の促進効果を有するため、膵臓癌と急性骨髄性白血病の治療に対して最良な効果を有する。
【０００４】
従来、ベニクスノキタケの栄養価値を高めるべく、ベニクスノキタケの抽出はベニクスノキタケに含まれるトリテルペノイドを抽出溶剤に溶出させ、それから濃縮と乾燥を経て、高濃度の栄養成分を有するベニクスノキタケの抽出物を獲得する。そして使用者はこのベニクスノキタケの抽出物を少量服用するだけで、大量のベニクスノキタケを服用するのと同じような効果を獲得することができる。
【０００５】
従来のベニクスノキタケの抽出方法としては、抽出溶剤の選択に基づいて水抽出法および有機溶剤抽出法と分けることができる。
【０００６】
従来の水抽出法は水を抽出溶剤とし、一個のベニクスノキタケの生薬材に対して抽出を行うことにより、一個のベニクスノキタケの水抽出物を獲得する。
【０００７】
また、従来の有機溶剤抽出法としては、例えば、アルコール、エステル、アルカン類およびハロゲン化アルキル類などの有機溶剤を抽出溶剤として使用し、上記ベニクスノキタケの生薬材を浸し、それから低温で上記有機溶剤を蒸留して除去することにより、一個のベニクスノキタケの抽出物を獲得する。
【０００８】
また、中華民国公告第Ｉ３３５３１４号の発明においては、エタノール溶剤で抽出されるベニクスノキタケの抽出物にはアントロキノノールＢ（antroquinonol Ｂ）とアントロキノノールＣ（antroquinonol Ｃ）の含有量が比較的高い化合物が含まれることが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】中華民国公告第Ｉ３３５３１４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
従来の水抽出法では、トリテルペノイドの水溶性がよくないため、上記ベニクスノキタケの水抽出物に含まれるトリテルペノイドの総含有量は普遍的に高くないという問題点があった。
【００１１】
また、従来の有機溶剤抽出法では、水抽出法と比較すると、抽出されるトリテルペノイドの総含有量は比較的高くなったが、依然としてデヒドロスルフレン酸の抽出量を有効に高めることができないため、デヒドロスルフレン酸の抽出効率が悪いという問題点があった。
【００１２】
本発明はこのような問題点に鑑みて考案されたものであって、その第一の目的は、デヒドロスルフレン酸の溶出率を高めることにより、デヒドロスルフレン酸の含有量が比較的高いベニクスノキタケの抽出物を獲得することができるベニクスノキタケの抽出方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
上記目的を達成するために、本発明によるベニクスノキタケの抽出方法は、ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液に含浸し、上記ベニクスノキタケの生薬材に上記塩類溶液を吸収させることにより、含浸ベニクスノキタケを獲得する段階と、上記含浸ベニクスノキタケをアルコール溶剤に浸し、超音波振動を経ることにより、ベニクスノキタケの抽出物を獲得する段階とを含む。
【００１４】
また、本発明によるベニクスノキタケの抽出方法は、他に上記含浸ベニクスノキタケを上記アルコール溶剤で浸して抽出する前、上記含浸ベニクスノキタケを一個の密閉空間に置き、温度が１１０から１５０℃まで、圧力が１から３kg/cm2までの環境下で加熱して蒸煮する段階を含むこともできる。また、先ず上記ベニクスノキタケの生薬材の表面の不純物を除去した後、再び上記ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液の中に含浸することもできる。また、上記加熱して蒸煮する時間は１５から６０分間までであってもよい。また、温度が１２１℃、圧力が１kg/cm2の環境下で加熱して蒸煮することもできる。また、上記塩類溶液は２％の塩化ナトリウム溶液であることもできる。また、５００グラムのベニクスノキタケの生薬材を１リットルの塩化ナトリウム溶液中に含浸することもできる。また、上記アルコール溶剤は９５％のエタノール溶剤であることもできる。また、上記ベニクスノキタケの生薬材はベニクスノキタケの子実体から選択することもできる。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、デヒドロスルフレン酸の抽出の効率を高めることにより、デヒドロスルフレン酸の含有量が高いベニクスノキタケの抽出物を獲得することができるという利点がある。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、デヒドロスルフレン酸の化学式を示す図である。
【図２Ａ】図２Ａは、第Ａ１組のベニクスノキタケの抽出物が高速液体クロマトグラフで分析した結果を示す図である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、第Ａ２組のベニクスノキタケの抽出物が高速液体クロマトグラフで分析した結果を示す図である。
【図２Ｃ】図２Ｃは、第Ａ３組のベニクスノキタケの抽出物が高速液体クロマトグラフで分析した結果を示す図である。
【図２Ｄ】図２Ｄは、第Ａ４組のベニクスノキタケの抽出物が高速液体クロマトグラフで分析した結果を示す図である。
【図２Ｅ】図２Ｅは、第Ａ５組のベニクスノキタケの抽出物が高速液体クロマトグラフで分析した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明の実施の形態について、以下、図面を参照して説明する。
【００１８】
本発明のベニクスノキタケの抽出方法は、ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液に含浸し、上記ベニクスノキタケの生薬材に上記塩類溶液を吸収させることにより、含浸ベニクスノキタケを獲得する段階と、上記含浸ベニクスノキタケをアルコール溶剤に浸し、超音波の振動を経ることにより、ベニクスノキタケの抽出物を獲得する段階とを含む。
【００１９】
さらに詳しく言えば、定量のベニクスノキタケの生薬材を定量の塩類溶液の中に含浸することにより、含浸ベニクスノキタケを獲得する。その中、本実施例においては、先ず上記ベニクスノキタケの生薬材の表面の不純物を除去した後、再び上記塩類溶液の中に含浸することにより、上記ベニクスノキタケの生薬材の表面の不純物によって後続における抽出効果に悪影響を及ぼすのを避けることができる。上記塩類溶液は選択的に重量百分率が２％の塩化ナトリウムからなることができ、塩化ナトリウムは取得が簡単で、価格も易いため、コストを低く抑えることができる。薬物が食塩水を経て製造された後は薬物の性能を変えることができるため、上記薬物の作用を増強することができる。
【００２０】
本実施例においては、上記ベニクスノキタケの生薬材を上記塩化ナトリウム溶液の中に含浸し、かつ好ましくは、一個の密閉容器の中に含浸することにより、外部の不純物が上記塩化ナトリウム溶液の中に進入するのを避けることができる。このように、上記塩化ナトリウム溶液を通じて上記ベニクスノキタケの中に密閉して滲み込ませることにより、共同で上記含浸ベニクスノキタケを形成することができる。例を挙げると、本実施例においては、選択的に、５００グラムのベニクスノキタケの生薬材を、その表面の不純物を除去した後に上記１リットルの塩化ナトリウム溶液の中に２４時間含浸させることにより、上記含浸ベニクスノキタケを獲得する。
【００２１】
次に、含浸ベニクスノキタケをアルコール溶剤に浸し、超音波振動を経ることにより、ベニクスノキタケの抽出物を獲得する。本実施例においては、上記アルコール溶剤は選択的に、濃度９５％のエタノール溶剤からなることができ、かつ比較的高い含有量のトリテルペノイドを抽出することができる。さらに、エタノール溶剤は無機成分と結晶状に形成することができ、かつ水溶解度の高い分子化合物に対してその溶解度を高めることができる。
【００２２】
好ましくは、５グラムの上記含浸ベニクスノキタケを、６００ミリリットルの上記エタノール溶剤に置き、２５℃の環境下で、周波数４０KHzの超音波で振動して抽出を行なうことにより、上記含浸ベニクスノキタケの中の有効成分（例えばトリテルペノイド）を上記エタノール溶剤に溶出させることができる。また、好ましくは、上記抽出時間は８時間で、かつ３回の抽出を繰り返すことにより、総抽出量を高めて上記ベニクスノキタケの抽出物を獲得することができる。他に、再び冷凍乾燥（−５５℃、真空度０Ｐａ(０torr)）を経由することにより、一個の濃縮したベニクスノキタケの抽出物を獲得する。
【００２３】
また、より好ましくは、本発明のベニクスノキタケの抽出方法はさらに含浸ベニクスノキタケをアルコール溶剤で浸して抽出する前に、上記含浸ベニクスノキタケを一個の密閉空間に置き、温度が１１０から１５０℃まで、圧力が１から３kg/cm2までの環境下で加熱して蒸煮する段階を含むことにより、デヒドロスルフレン酸の溶出を促進することができる。さらに詳しく言えば、本実施例においては選択的に高温高圧の環境を制御することができる装置または機器（例えば圧力鍋）を用いて上記密閉空間を提供することにより、上記密閉容器内の圧力と温度を制御する。
【００２４】
本実施例においては、上記含浸ベニクスノキタケを上記高温高圧の環境を制御することができる圧力鍋に置き、かつその温度を１１０から１５０℃まで制御し、圧力を１から３kg/cm2まで制御し、１５分間から１時間まで蒸煮を行なう。その中、仮に温度が１１０℃より低くなると、ベニクスノキタケのトリテルペノイドの抽出の効率は落ちてしまう。仮に、温度が１５０℃より高くなると、高温によってベニクスノキタケの中の活性成分を破壊してしまう虞がある。
【００２５】
そして、１１０℃から１５０℃までの高温に到達しようとするとき、上記密閉空間を通じて圧力が１から３kg/cm2までの環境を提供しなければならない。仮に、圧力が１kg/cm2より低くなると、蒸気は所要温度まで上昇し難くなる。仮に、圧力が３kg/cm2より高くなると、蒸気温度は高くなり過ぎる虞がある。例を挙げると、本実施例においては１２１℃、１kg/cm2の環境条件で１５分間から６０分間まで蒸煮することにより、上記含浸ベニクスノキタケの外観の色が深くなって黒赤色になり、上記蒸煮された含浸ベニクスノキタケを獲得することができ、それから再び上記アルコール溶剤で浸して抽出することにより、上記ベニクスノキタケの抽出物を効率よく獲得することができる。
【００２６】
このように、上記密閉空間内で蒸煮を行なうことにより、蒸気は外部に洩れ出てしまうことがなくなるため、温度と圧力を制御し易くなるだけではなく、上記密閉空間によって高圧の環境を提供して水の沸騰点を高めることができるため、さらに上記蒸気の温度を１１０℃越えるまで高めることができる。このように、高温高圧の蒸気をもって上記密閉空間内で上記含浸ベニクスノキタケに対して蒸煮を行なうことにより、僅かな時間で上記含浸ベニクスノキタケを表面が黒赤色になるまで蒸煮することができるため、蒸煮の時間を大幅に短縮することができ、さらに効率を高め、コストを低く抑えることができる。
【００２７】
本実施例のベニクスノキタケの抽出方法は上記ベニクスノキタケの抽出物のデヒドロスルフレン酸の含有量を高めることができることを証明すべく、本実施例について高速液体クロマトグラフ（ＨＰＬＣ）で分析を行なった。
【００２８】
さらに詳しく言えば、本試験では例えば表１に示されるベニクスノキタケの抽出物を取ることができた。Ａ１組はベニクスノキタケの生薬材が上記エタノール溶剤の浸し抽出を経て獲得したベニクスノキタケの抽出物で、Ａ２組は含浸ベニクスノキタケが上記エタノール溶剤の浸し抽出を経て獲得したベニクスノキタケの抽出物で、Ａ３組からＡ５組は含浸ベニクスノキタケがそれぞれ１５、３０と６０分間の蒸煮を経た後、再びエタノール溶剤で浸し抽出を行なって獲得したベニクスノキタケの抽出物である。そして、それぞれ０．２グラムの上記ベニクスノキタケの抽出物を秤とって一個の螺旋状試験管の中に入れ、５ミリリットルのメタノールを加え、超音波で１５分間振動し、それから３０００回転で１０分間遠心分離した後、５ミリリットルの上澄み液を取って一個のきれいな試験管に置き入れてから、再び１００℃で水浴して乾燥になるまで加熱した。
【００２９】
【表１】
2014214113.tif 000003
【００３０】
それから、選択的にPurospher STAR（Merck）RP-18e（５μm）２５０mm×４.６mmの円柱を使用して分析を行ない、表２に示されるアセトニトリル（Acetonitrile、以下、ＡＣＮと称する）と０.０８５％のリン酸溶液の溶出液を移動相とし、流速が１ml/minで、測定波長が２５４nmの吸光度で後続の分析を行なった。
【００３１】
【表２】
2014214113.tif 000004
【００３２】
図２Ａから２Ｅと表３を参照し、Ａ１組と比較すると、ベニクスノキタケの生薬材が上記塩化ナトリウム溶液の含浸を経た後（Ａ２組）、かつ上記エタノール溶剤の浸し抽出を経て獲得したベニクスノキタケの抽出物の中に、アントシンＫ（antcin Ｋ）、アントシンＣ（antcin Ｃ）、ザンクイン酸Ｃ（zhankuic acid Ｃ）、ザンクイン酸Ａ（zhankuic acid Ａ）とデヒドロエブリコ酸（dehydroeburicoic acid）の抽出量は全て低減の現象を有するようになるが、デヒドロスルフレン酸（dehydrosulphurenic acid）の抽出量はＡ１組と比較すると、約４倍の増加があることが判った。
【００３３】
また、上記塩化ナトリウム溶液の含浸を経て、さらに１５分間高温の蒸煮を経て、上記エタノール溶剤の浸し抽出を経て獲得したベニクスノキタケの抽出物（Ａ３組）の内のデヒドロスルフレン酸の抽出量は増加し、Ａ１組の６倍であった。蒸煮の時間を３０分間延長すると（Ａ４組）、デヒドロスルフレン酸の抽出量はＡ１組の５．５倍になった。蒸煮の時間が６０分間になると（Ａ５組）、デヒドロスルフレン酸の抽出量はＡ１組の３倍になることが判った。
【００３４】
【表３】
2014214113.tif 000005
【００３５】
ここで知ることができるように、本実施例のベニクスノキタケの抽出方法では、上記塩類溶液の含浸により、デヒドロスルフレン酸の抽出量を明らかに増やすことができ、さらに高温、高圧の蒸煮を行なうことにより、デヒドロスルフレン酸の抽出の効率をより一層高めることができ、その中、蒸煮の時間は好ましくは１５分間であることが判った。
【００３６】
綜合すると、本発明のベニクスノキタケの抽出方法によれば、上記塩類溶液の含浸を経た後、デヒドロスルフレン酸がアルコール溶剤における抽出の効率を高めることができ、さらにデヒドロスルフレン酸の含有量が比較的高いベニクスノキタケの抽出物を獲得するという目的を達成することができる。
【００３７】
本発明は、その精神および必須の特徴事項から逸脱することなく他のやり方で実施することができる。従って、本明細書に記載した好ましい実施形態は例示的なものであり、限定を意図するものではない。
【図１】
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【図２Ａ】
2014214113.tif 000007
【図２Ｂ】
2014214113.tif 000008
【図２Ｃ】
2014214113.tif 000009
【図２Ｄ】
2014214113.tif 000010
【図２Ｅ】
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【手続補正書】
【提出日】平成26年8月21日(2014.8.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液に含浸し、上記ベニクスノキタケの生薬材に上記塩類溶液を吸収させることにより、含浸ベニクスノキタケを獲得する段階と、上記含浸ベニクスノキタケをアルコール溶剤に浸し、超音波の振動を経ることにより、ベニクスノキタケの抽出物を獲得する段階とを含み、上記塩類溶液は２％の塩化ナトリウム溶液である、ベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項２】
他に上記含浸ベニクスノキタケを上記アルコール溶剤で浸して抽出する前、上記含浸ベニクスノキタケを一個の密閉空間に置き、温度が１１０から１５０℃まで、圧力が１から３ｋｇ／ｃｍ2までの環境下で加熱して蒸煮する段階を含むことを特徴とする請求項１に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項３】
先ず上記ベニクスノキタケの生薬材の表面の不純物を除去した後、再び上記ベニクスノキタケの生薬材を塩類溶液の中に含浸することを特徴とする請求項１または２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項４】
上記加熱して蒸煮する時間は１５から３０分間までであることを特徴とする請求項２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項５】
温度が１２１℃、圧力が１ｋｇ／ｃｍ2の環境下で加熱して蒸煮することを特徴とする請求項２または４に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項６】
５００グラムのベニクスノキタケの生薬材を１リットルの塩化ナトリウム溶液の中に含浸することを特徴とする請求項１に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項７】
上記アルコール溶剤は９５％のエタノール溶剤であることを特徴とする請求項１または２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。
【請求項８】
上記ベニクスノキタケの生薬材はベニクスノキタケの子実体から選択することを特徴とする請求項１または２に記載のベニクスノキタケの抽出方法。