(57)【要約】【課題】耐熱性好酸性菌の増殖が抑制された酸性飲料及び酸性飲料にカテキン類を配合することによって耐熱性好酸性菌の増殖が抑制する方法を提供すること。【解決手段】本発明に係る酸性飲料は、アリサイクロバチルス属細菌の静菌有効量のカテキン類を含み、ｐＨが４．０以下である。前記カテキン類は、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、及びエピカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレートからなる群より選ばれる１種以上を含むのが好ましい。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アリサイクロバチルス属細菌の静菌有効量のカテキン類を含み、ｐＨが４．０以下である酸性飲料。
【請求項２】
前記カテキン類は、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、及びエピカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレートからなる群より選ばれる１種以上を含む請求項１記載の酸性飲料。
【請求項３】
前記カテキン類の少なくとも一部は精製カテキン組成物の形態で配合され、前記静菌有効量は前記酸性飲料の質量に対して０．００４質量％以上である請求項１又は２記載の酸性飲料。
【請求項４】
前記カテキン類の少なくとも一部は茶抽出物の形態で配合され、前記静菌有効量は前記酸性飲料の質量に対して０．０２質量％以上である請求項１から３いずれか記載の酸性飲料。
【請求項５】
前記茶抽出物は、「べにふうき」、「べにふじ」、「べにほまれ」、「やえほ」、「するがわせ」、「ゆたかみどり」、「かなやみどり」、「おくむさし」、「青心大パン」、「青心烏龍」、「大葉烏龍」、「紅花」、「べにひかり」、「やまかい」、「やまみどり」、「からべに」、「香駿」、「そうふう」及び「おくみどり」、もしくはこれらの混合物の茶葉からの抽出物を含む請求項４記載の酸性飲料。
【請求項６】
ｐＨが４．０以下である酸性飲料にカテキン類を配合することで、前記酸性飲料中での耐熱性好酸性菌の増殖を抑制する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酸性飲料及び耐熱性好酸性菌の増殖抑制方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
酸性飲料の殺菌において、従来行われてきた６０〜９０℃程度の加熱処理では、酸性条件下のおける耐熱性好酸性菌、主としてアリサイクロバチルス属細菌は完全に死滅しにくく、飲料中で増殖した場合、異臭や風味の劣化がもたらされることが知られている。また、従来よりも高温で殺菌処理を施すことにより死滅することも可能であるが、熱によって酸性飲料の風味、外観が損なわれるという問題があった。
【０００３】
そのため、耐熱性好酸性菌を死滅させる方法に替えて、増殖を抑制する（静菌）方法が種々提供されている。
【０００４】
例えば、耐熱性好酸性菌に対して静菌作用を有するものとして、乳酸、乳酸塩（特許文献１参照）若しくは酢酸、酢酸塩（特許文献２参照）、リモネン（特許文献３参照）、ホップ（特許文献４参照）、ジグリセリンミリスチン酸エステル（特許文献５参照）及びオオバギ抽出物（特許文献６参照）が知られている。
【０００５】
一方、茶カテキンのうちガレートカテキン類及びテアフラビン類は、ボツリヌス菌を含む数種類の耐熱性有芽胞菌の芽胞ないし栄養細胞に対して顕著な抗菌活性を示すことが知られている（非特許文献１参照）。
【０００６】
しかし、非特許文献１では、カテキンの抗菌スペクトルが中性域でのみ検討されており、静菌された菌も中性で増殖する菌のみである。ここで、エピガロカテキン−３−０−（３−０−メチル）ガレートは、雰囲気ｐＨが変わると、状態が変わり、その静菌メカニズムが変化することが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開２００６／１０６６７３号公報
【特許文献２】特開２００２−３１５５４６号公報
【特許文献３】特開２００７−６０９２９号公報
【特許文献４】特開２００５−１３７２４１号公報
【特許文献５】特開２００３−１６０４１１号公報
【特許文献６】特開２０１１−５１９１５号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】日本食品工業学会誌第３６巻１２号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、新規の、耐熱性好酸性菌の増殖が抑制された酸性飲料及び耐熱性好酸性菌の増殖抑制方法の提供にある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、カテキンが酸性条件下において耐熱性好酸性菌の増殖を抑制するということを突き止め、本発明を完成するに至った。より具体的には、本発明は、以下のようなものを提供する。
【００１１】
（１）アリサイクロバチルス属細菌の静菌有効量のカテキン類を含み、ｐＨ４．０以下である酸性飲料。
【００１２】
（２）前記カテキン類は、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、及びエピカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレートからなる群より選ばれる１種以上を含む（１）記載の酸性飲料。
【００１３】
（３）前記カテキン類の少なくとも一部は精製カテキン組成物の形態で配合され、前記静菌有効量は前記酸性飲料の質量に対して０．００４質量％以上である（１）又は（２）記載の酸性飲料。
【００１４】
（４）前記カテキン類の少なくとも一部は茶抽出物の形態で配合され、前記静菌有効量は前記酸性飲料の質量に対して０．０２質量％以上である（１）から（３）いずれか記載の酸性飲料。
【００１５】
（５）前記茶抽出物は、「べにふうき」、「べにふじ」、「べにほまれ」、「やえほ」、「するがわせ」、「ゆたかみどり」、「かなやみどり」、「おくむさし」、「青心大パン」、「青心烏龍」、「大葉烏龍」、「紅花」、「べにひかり」、「やまかい」、「やまみどり」、「からべに」、「香駿」、「そうふう」及び「おくみどり」、もしくはこれらの混合物の茶葉からの抽出物を含む（４）記載の酸性飲料。
【００１６】
（６）ｐＨが４．０以下である酸性飲料にカテキン類を配合することで、前記酸性飲料中での耐熱性好酸性菌の増殖を抑制する方法。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、酸性飲料にカテキン類を配合することにより、酸性飲料中での耐熱性好酸性菌増殖が抑制された酸性飲料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明の実施形態について詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
【００１９】
本発明は、酸性条件下において、カテキン類を配合することにより、耐熱性好酸性菌の増殖を抑制可能であることに特徴を有する。以下、本発明の酸性飲料及び耐熱性好酸性菌の増殖抑制方法について説明する。
【００２０】
本発明における酸性飲料は、ｐＨ４．０以下の飲料である。ｐＨの下限は、特に限定されないが、官能性等の点で３．０以上であってよい。
【００２１】
酸性飲料の具体例としては、果実飲料、炭酸飲料、スポーツ飲料、健康飲料、茶系飲料、乳性飲料及びアルコール飲料などが挙げられる。果実飲料、スポーツ飲料などの糖類含有飲料においては、耐熱性好酸性菌の増殖が問題であるので、本発明が有用である。
【００２２】
茶系飲料は、アミノ酸などの栄養成分を多く含むので、耐熱性好酸性菌が増殖しやすく、本発明が有用である。茶系飲料は、緑茶、紅茶、ハーブティー及びこれらの混合物などの飲料でもよい。
【００２３】
炭酸飲料においても、ガス圧が低い場合等、耐熱性好酸性菌の増殖を考慮する必要があるので、本発明は有用である。
【００２４】
酸性飲料は、耐熱性好酸性菌の増殖を抑制するため、アリサイクロバチルス属細菌の静菌有効量のカテキン類を含む。アリサイクロバチルス属細菌の静菌有効量は、１０００ｃｆｕ／５００ｍｌになるようにアリサイクロバチルス属細菌を接種した酸性飲料を３７℃で１４日間培養したものを、寒天を主成分とする培地に１ｍｌ注入し、４５℃で７２時間培養した後、コロニー数をカウントした場合に、コロニー数が１０個以下となる場合の含有量をいう。
【００２５】
カテキン類の量は、酸性飲料を蒸留水で適宜希釈し、フィルターでろ過した試料について、島津製作所製の高速クロマトグラフ（型式ＳＣＬ−１０ＡＶＰ）を用い、和光純薬製Ｃ１８カラム（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）を装着し、カラム温度４０℃でグラジエント法により分析することにより、測定される。移動相Ａは蒸留水：アセトニトリル：リン酸を４００：１０：１で混合し、移動相Ｂはメタノール：移動相Ａを１：２で混合して調整したものを使用する。流量は１ｍｌ／ｍｉｎとし、酸性飲料を２０μｌ注入してＵＶ検出器にて２４２ｎｍ、２７２ｎｍの波長を測定する。
【００２６】
カテキン類の酸性飲料に配合される形態は、特に限定されない。ただし、カテキン類は独特の渋味を有する一方、消費者の嗜好性の観点で、酸性飲料の渋味をある程度抑制することが好ましい。カテキン類は任意の原料を用いて配合することができるが、精製カテキン組成物は低量で耐熱性好酸性菌の増殖でき、渋味を抑制しやすい点で好ましい。また、精製カテキン組成物は、夾雑物を多量には含まないので、酸性飲料の製造におけるプロセス管理が容易である点からも好ましい。他方、茶抽出物は、安価であり、他成分とのバランスが良く官能性に優れる点で好ましい。
【００２７】
茶抽出物とは、緑茶抽出物、紅茶抽出物又はこれらの混合物の茶葉からの抽出物などを指す。後述のように、メチル化カテキンの含有量が多い点で、「べにふうき」、「べにふじ」、「べにほまれ」、「やえほ」、「するがわせ」、「ゆたかみどり」、「かなやみどり」、「おくむさし」、「青心大パン」、「青心烏龍」、「大葉烏龍」、「紅花」、「べにひかり」、「やまかい」、「やまみどり」、「からべに」、「香駿」、「そうふう」及び「おくみどり」、もしくはこれらの混合物の茶葉からの抽出物が好ましい。
【００２８】
精製カテキン組成物とは、例えば、茶からカテキン類を抽出し、濃縮して精製したもの、有機合成されたカテキン化合物などを指す。
【００２９】
カテキン類の含有量下限は、用いるカテキン類の材料や酸性飲料に含まれる他成分等を考慮して設定される。カテキン類の少なくとも一部に精製カテキン組成物を用いる場合、カテキン類の含有量は、酸性飲料に対して０．００４質量％以上であることが好ましい。カテキン類の少なくとも一部に茶抽出物を用いる場合、カテキン類の含有量は、酸性飲料に対して０．０２質量％以上であることが好ましい。後述のようなメチル化カテキンを多く含む茶葉でない茶葉の抽出物を用いる場合、カテキン類の含有量は、酸性飲料に対して０．０４質量％以上であることが好ましい。
【００３０】
カテキン類の含有量の上限は特に限定されず、官能性、費用対効果等の観点で適宜設定されてよい。カテキン類の量は、例えば、酸性飲料の質量に対して１．０質量％以下、０．７５質量％以下、０．５０質量％以下、０．２５質量％以下、０．０１質量％以下、０．０７５質量％以下、０．０５質量％以下であってよい。精製カテキン組成物を使用する場合、低量で耐熱性好酸性菌の増殖を抑制可能であり、苦味を抑制できる点で、０．０４質量％以下でよい。茶抽出液を使用する場合、成分バランスの良さにより精製カテキン類よりも苦味を与えにくいため、０．０５質量％以下であってもよい。さ
【００３１】
カテキン類とは、例えば、ガロカテキン、エピガロカテキン、カテキン、エピガロカテキンガレート、エピカテキン、ガロカテキンカレートエピカテキンガレート、カテキンガレート及びこれらの異性体を指す。また、カテキン類にはメチル化カテキンが含まれる。
【００３２】
メチル化カテキンとは、例えば、エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、エピカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、エピカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、カテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、カテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−メチルエチルガレート、エピカテキン−３−Ｏ−メチルエチルガレート、エピカテキン−３−Ｏ−（３，５−Ｏ−ジメチル）ガレート及びこれらの異性化体を指す。
【００３３】
中でも、本発明におけるカテキン類は、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、及びエピカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレートからなる群より選ばれる１種以上を含むことが、低量で耐熱性好酸性菌の増殖を抑制可能である点で、好ましい。
【００３４】
耐熱性好酸性菌とは、酸性条件下で、かつ、６０〜９０℃といったような高温領域で生育が可能である芽胞菌を指す。耐熱性好酸性菌としては、アリサイクロバチルス（Ａ.ｌｉｃｙｃｌｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属細菌、（他の属の細菌を確認）が知られている。アリサイクロバチルス属に含まれる耐熱性好酸性菌は、例えば、アリサイクロバチルス・アシドテレストリス（Ａ．ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）、アリサイクロバチルス・アシドカルダリウス（Ａ．ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ）、アリサイクロバチルス・サイクロヘプタニカス（Ａ．ｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎｉｃｕｓ）、アリサイクロバチルス・アシディフィラス（Ａ．ａｃｉｄｉｐｈｉｌｕｓ）、アリサイクロバチルス・ハーバリウス（Ａ．ｈｅｒｂａｒｉｕｓ）、及びアリサイクロバチルス・ヘスペリダム（Ａ．ｈｅｓｐｅｒｉｄｕｍ）を指す。
【００３５】
本発明の酸性飲料には、カテキン類の他に、果汁、食塩、甘味料及び香料など、通常の飲料成分を任意に含んでもよい。酸性飲料のｐＨの調整のために、クエン酸、クエン酸ナトリウムなどの有機酸を含んでもよい。
【００３６】
クエン酸及びクエン酸ナトリウムは耐熱性好酸性菌に対する抗菌性が低いので、従来、ｐＨ調整剤としては、耐熱性好酸性菌の増殖抑制効果を有する乳酸などを、単独もしくはクエン酸などと併用して使用せざるを得なかった。しかし、本発明ではカテキン類により耐熱性好酸性菌の増殖が抑制されるので、ｐＨ調整剤としてクエン酸、クエン酸ナトリウムを単独で使用することもできる。
【００３７】
酸性飲料の製造方法は、特に限定されず、従来の公知の方法を用いてもよい。ただし、酸性飲料にカテキン類を添加することにより、耐熱性好酸性菌の増殖が抑制されるので、殺菌は低温、短時間で足り得る。これにより、加熱による風味の損失を抑制できるという点でも、本発明は有益である。
【実施例】
【００３８】
以下、本発明を実施例に基づいて説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００３９】
＜実施例１＞精製カテキン組成物の形態でカテキン類が配合された酸性飲料
果糖ぶどう液糖、レモン果汁、食塩、甘味料、無水クエン酸、クエン酸ナトリウム、香料、精製カテキン組成物「ポリフェノン７０Ａ」（三井農林社）を使用し、果汁含量が１質量％、カテキン量が表１に示す量、ｐＨ３．５の酸性飲料を作成した。
【００４０】
各酸性飲料の耐熱性好酸性菌に対する静菌作用を確認するための試験を行った。耐熱性好酸性菌としては、アリサイクロバチルス・アシドテレストリス（Ａ．ａｃｉｄｏｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ）を使用した。各酸性飲料を５００ｍｌＰＥＴボトル容器に充填し、耐熱性好酸性菌を１０００ｃｆｕ／５００ｍｌとなるように摂取した。ＰＥＴボトルを３７℃にて１４日間静置した後、酸性飲料における異臭の有無の確認し、官能評価を行った。
【００４１】
その結果、カテキンの質量％が０．０２質量％、０．０４質量％、０．００４質量％及び０．００８質量％の酸性飲料では異臭はなく、０質量％の酸性飲料では異臭があることが確認された（表１）。
【００４２】
また、酵母エキス２．０ｇ、可溶性デンプン２．０ｇ、グルコース１．０ｇ、寒天１５．０ｇを主成分とした培地を作成し、０．５Ｍの硫酸でｐＨ３．７±０．１に調整した。シャーレに前記酸性飲料を１ｍｌ注入し、その後、前記培地を１５〜２０ｍｌ注入して酸性飲料と培地を混釈した。シャーレで４５℃、７２時間培養して、コロニー数をカウントして生育の有無を確認した。
【００４３】
その結果、カテキン量が０．０２質量％、０．０３８質量％、０．００４質量％及び０．００８質量％の酸性飲料で、耐熱性好酸性菌の増殖が抑制された一方、０質量％の酸性飲料では耐熱性好酸性菌の増殖は抑制されなかったことが確認された（表１）。
【００４４】
【表１】
2014132850.tif 000002
【００４５】
＜実施例２＞煎茶抽出物の形態でカテキン類が配合された酸性飲料
煎茶葉５０ｇを１５００ｍｌの蒸留水（９０℃）で７分間抽出した後にろ過を行い、煎茶抽出物を得た。酸性飲料に対するカテキン類を表２に示す量で含め、また精製カテキン組成物の代わりに煎茶抽出物を添加した他は、実施例１と同様の条件で、酸性飲料を作成した。
【００４６】
前記酸性飲料を用い、実施例１と同様の条件で各酸性飲料に対して官能評価を行った。その結果、酸性飲料に対するカテキン量が０．０４質量％の酸性飲料では異臭はなかった一方、０．０２質量％、０．００８質量％及び０．００４質量％の酸性飲料では異臭があることが確認された（表２）。
【００４７】
前記酸性飲料を用い、実施例１と同様の条件で各酸性飲料に対して耐熱性好酸性菌の増殖抑制効果を評価した。その結果、酸性飲料に対するカテキンの質量％が０．０４質量％の酸性飲料では耐熱性好酸性菌の増殖は抑制された一方、０．０２質量％、０．００８質量％及び０．００４質量％の酸性飲料では耐熱性好酸性菌の増殖が十分には抑制されなかったことが確認された（表２）。
【００４８】
【表２】
2014132850.tif 000003
【００４９】
＜実施例３＞べにふうき茶抽出物の形態でカテキン類が配合された酸性飲料
べにふうき茶葉５０ｇを１５００ｍｌの蒸留水（９０℃）で７分間抽出した後にろ過を行い、べにふうき茶抽出物を得た。酸性飲料に対するカテキン類を表３に示す量とし、精製カテキン組成物の代わりにべにふうき茶抽出物を添加した他は、実施例１と同様の条件で、酸性飲料を作成した。
【００５０】
前記酸性飲料を用い、実施例１と同様の条件で各酸性飲料に対して官能評価を行った。その結果、酸性飲料に対するカテキン類量が０．０４質量％及び０．０２質量％の酸性飲料では異臭はなく、０．００９質量％及び０．００４質量％の酸性飲料では異臭があることが確認された（表３）。
【００５１】
前記酸性飲料を用い、実施例１と同様の条件で各酸性飲料に対して耐熱性好酸性菌の増殖抑制効果を評価した。その結果、酸性飲料に対するカテキン類量が０．０４質量％及び０．０２質量％の酸性飲料では耐熱性好酸性菌の増殖は抑制され、０．００９質量％及び０．００４質量％の酸性飲料では耐熱性好酸性菌の増殖が十分には抑制されなかったことが確認された（表３）。
【００５２】
【表３】
2014132850.tif 000004
【００５３】
各実施例の結果を検討すると、精製カテキン組成物を使用した場合、酸性飲料中に精製カテキン組成物が０．００４質量％以上あれば耐熱性好酸性菌の増殖を抑制することができることが確認された。また、煎茶抽出物を使用した場合、酸性飲料中に茶抽出物が０．０４質量％以上あれば耐熱性好酸性菌の増殖を抑制することができ、べにふうき茶抽出物を使用した場合、酸性飲料中にべにふうき茶抽出物が０．０２質量％以上あれば耐熱性好酸性菌の増殖を抑制することができることが確認された（表１〜３）。
【００５４】
[カテキン分析]
各実施例及び比較例で使用した酸性飲料中に含まれるカテキンの定量分析を、下の手順で行った。酸性飲料を蒸留水で適宜希釈し、０．４５μｍフィルターでろ過した試料を、島津製作所製の高速クロマトグラフ（型式ＳＣＬ−１０ＡＶＰ）を用い、和光純薬製Ｃ１８カラム（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）を装着し、カラム温度４０℃でグラジエント法により分析を行った。移動相Ａは、蒸留水：アセトニトリル：リン酸を４００：１０：１で混合し、移動相Ｂはメタノール：移動相Ａを１：２で混合して調整した。流量は１ｍｌ／ｍｉｎとし、酸性飲料を２０μｌ注入してＵＶ検出器にて２４２ｎｍ、２７２ｎｍの波長を測定した。結果は表４に示す。
【００５５】
【表４】
2014132850.tif 000005
2014132850.tif 000006
【００５６】
精製カテキン組成物を使用した場合の結果に基づくと、実施例１においてエピガロカテキンガレート及びエピカテキンガレートの総カテキン量に対する割合が多いことから（表４）、これらが耐熱性好酸性菌の増殖抑制効果を有することが分かる。
【００５７】
また、煎茶抽出物では、精製カテキン組成物を使用した場合と同程度のエピガロカテキンガレート及びエピカテキンガレートを含んでいるにもかかわらず（表４）、耐熱性好酸性菌の増殖抑制効果が確認されなかった（表２）。このことにより、煎茶抽出物の含まれるカテキン類以外の成分が耐熱性好酸性菌の生育を活性化させ、カテキン類の耐熱性好酸性菌に対する増殖抑制効果が落ちていることが推測される。
【００５８】
煎茶抽出物とべにふうき茶葉抽出物を比較すると、前者ではメチル化カテキンがほとんど含まれていない一方、後者３ではメチル化カテキン、具体的には、エピガロカテキン−３−０−（３−０−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−０−（３−０−メチル）ガレート及びエピカテキン−３−０−（３−０−メチル）ガレートが多く含まれていることが分かる（表４）。あわせて両者の増殖抑制効果を対比すると、カテキン類の中でも、エピガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、エピガロカテキン−３−０−（３−０−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−０−（３−０−メチル）ガレート及びエピカテキン−３−０−（３−０−メチル）ガレート）が、耐熱性好酸性菌の増殖を抑制するのに適していることが示唆される。