(57)【要約】【課題】本発明は、インターロイキン−１７リガンドおよび受容体ファミリーメンバーに、そしてＩＬ−１７受容体ＡおよびＩＬ−１７受容体Ｃが、生物学的に活性であるヘテロマー受容体複合体を形成するという発見に関する。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体、ならびに多様な使用法を開示する。【解決手段】ＩＬ−２５の生物学的活性を阻害する薬剤の製造における、配列番号４０で表わされる軽鎖可変領域および配列番号１４で表わされる重鎖可変領域を含む抗体の使用であって、該抗体がＩＬ−１７ＲＡに特異的に結合するＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストとして作用する使用。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−２５の生物学的活性を阻害する薬剤の製造における、配列番号４０で表わされる軽鎖可変領域および配列番号１４で表わされる重鎖可変領域を含む抗体の使用であって、
該抗体がＩＬ−１７ＲＡに特異的に結合するＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストとして作用する使用。
【請求項２】
ＩＬ−２５の生物学的活性が炎症促進性仲介因子の放出である請求項１に記載の使用。
【請求項３】
炎症促進性仲介因子がＩＬ−５である請求項２に記載の使用。
【請求項４】
薬剤がＩＬ−２５の生物学的活性をｉｎ  ｖｉｖｏで阻害する請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
薬剤がＩＬ−２５の生物学的活性をｉｎ  ｖｉｔｒｏで阻害する請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願に対するクロスリファレンス
本出願は、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９に基づいて、２００９年１月２０日出願の米国仮出願第６１／１４５，９０１号および２００８年２月１２日出願の米国仮出願第６１／０６６，５３８号の優先権を主張し、これらの出願は本明細書に援用される。
【０００２】
発明の分野
本発明は、インターロイキン−１７リガンドおよび受容体ファミリーメンバー、ならびにＩＬ−１７受容体ＡおよびＩＬ−１７受容体Ｂが生物学的に活性であるヘテロマー複合体を形成するという発見に関する。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のアンタゴニストおよび使用法を開示する。
【背景技術】
【０００３】
インターロイキン−１７ファミリーは、ＩＬ−１７Ａ〜ＩＬ−１７Ｆと称される、６つの構造的に関連するサイトカインのグループであり、免疫反応の制御に重要である。一次構造レベルでは、Ｃ末端領域中に最大の類似性があるようであり、該領域は、４つの保存されるシステイン残基を含有する（Ｋａｗａｇｕｃｈｉら，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １１４：１２６５，２００４；ＫｏｌｌｓおよびＬｉｎｄｅｎ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２１：４６７，２００４に概説される）。ＩＬ−１７Ｆの結晶構造が決定されてきており、そしてシステインノットファミリー増殖因子と構造的特徴を共有することが見出されてきており（Ｈｙｍｏｗｉｔｚら，２００１，ＥＭＢＯ  Ｊ．２０：５５３２−５３４１）、該増殖因子は、ホモ二量体性およびヘテロマー性対構造の両方を通じて結合し、そしてシグナルを伝達する、ホモ二量体性リガンドのグループである（Ｌｕら，２００５，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．６：６０３−６１４；Ｂａｒｋｅｒ，２００４，Ｎｅｕｒｏｎ  ４２：５２９−５３３）。
【０００４】
ＩＬ−１７受容体（ＩＬ−１７Ｒ）はまた、関連するＩ型膜貫通タンパク質のファミリーを形成する。このファミリーの５つの異なるメンバーが同定されてきており（ＩＬ−１ＲＡ〜ＩＬ−１ＲＥ）、このうちいくつかはまた、デコイ受容体として作用しうる可溶性型を含む、選択的スプライシングも示す（ＫｏｌｌｓおよびＬｉｎｄｅｎ，上記；Ｍｏｓｅｌｅｙら，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖ．１４：１５５，２００３）。ＩＬ−１７ＲＡは、リガンドとは独立に、多量体化可能であり、そしてＩＬ−１７ＲＣと一緒に、生物学的に活性であるヘテロマー受容体を形成することが示されてきている（Ｔｏｙら，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７７：３６；２００７）が、他のヘテロマーＩＬ−１７Ｒ複合体が形成される可能性（膜貫通型または可溶性型いずれか）、およびあるとすれば、生じる生物学的活性は、以前には未知であった。本発明の多様な態様のこの側面および他の側面を提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｋａｗａｇｕｃｈｉら，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １１４：１２６５，２００４
【非特許文献２】ＫｏｌｌｓおよびＬｉｎｄｅｎ，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ２１：４６７，２００４
【非特許文献３】Ｈｙｍｏｗｉｔｚら，２００１，ＥＭＢＯ  Ｊ．２０：５５３２−５３４１
【非特許文献４】Ｌｕら，２００５，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．６：６０３−６１４
【非特許文献５】Ｂａｒｋｅｒ，２００４，Ｎｅｕｒｏｎ  ４２：５２９−５３３
【非特許文献６】Ｍｏｓｅｌｅｙら，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｇｒｏｗｔｈ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｒｅｖ．１４：１５５，２００３
【非特許文献７】Ｔｏｙら，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７７：３６；２００７
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本明細書に用いるセクション見出しは、構成目的のみのためであり、そして記載する主題を限定するとは見なされないものとする。
組換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成、組織培養および形質転換、タンパク質精製等に関して、標準技術を用いてもよい。製造者の仕様書にしたがって、または当該技術分野で一般的に達成されるように、または本明細書に記載するように、酵素反応および精製技術を実行してもよい。当該技術分野に周知の慣用的方法にしたがって、そして本明細書全体で引用されそして論じられる、多様な一般的なおよびより特定の参考文献に記載されるように、以下の方法および技術を一般的に行ってもよい。例えば、任意の目的に関して本明細書に援用される、Ｓａｍｂｒｏｏｋら，２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，第３版，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，ニューヨーク州コールドスプリングハーバーを参照されたい。特定の定義が提供されない限り、本明細書に記載する分析化学、有機化学、ならびに医学および薬学的化学と関連して用いられる用語、ならびにこうした化学の実験法および技術は、当該技術分野に周知であり、そして一般的に用いられるものである。化学合成、化学分析、薬学的調製、配合、ならびに送達および患者の治療に、標準的技術を用いてもよい。
【０００７】
ＩＬ−１７ＲＡの性質決定、クローニング、および調製は、例えば、本明細書にその全体が援用される、２０００年６月６日発行のＵＳＰＮ  ６，０７２，０３３に記載される。ヒトＩＬ−１７ＲＡのアミノ酸配列は、ＵＳＰＮ  ６，０７２，０３３の配列番号１０に示される（ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＮＭ  ０１４３３９）。ヒトＩＬ−１７ＲＡは、ほぼアミノ酸２７および２８の間に、予測される切断部位を持つ、Ｎ末端シグナルペプチドを有する。シグナルペプチドに、２９３アミノ酸の細胞外ドメイン、２１アミノ酸の膜貫通ドメイン、および５２５アミノ酸の細胞質テールが続く。本発明の方法で有用であるヒトＩＬ−１７ＲＡ（ｈｕＩＬ−１７ＲＡ）の可溶性型には、細胞外ドメイン（残基１〜３２０またはシグナルペプチドを除く残基２８〜３２０）またはＩＬ−１７Ａに結合する能力を保持する、細胞外ドメインの断片が含まれる。本発明で有用なＩＬ−１７ＲＡの他の型には、ＵＳＰＮ  ６，０７２，０３３により詳細に記載されるように、ＩＬ−１７Ａに結合する能力を保持する天然ＩＬ−１７ＲＡに少なくとも７０％〜９９％の間のアミノ酸同一性を有する突然変異タンパク質（ｍｕｔｅｉｎ）および変異体が含まれる。
【０００８】
Ｔｉａｎら，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９：２０９８（２０００）に開示されそして記載されるものなどの、ＩＬ−１７受容体Ｂ（ＩＬ−１７ＲＢ）および多くのアイソフォームが当該技術分野に知られる。さらなる例には、限定されるわけではないが、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＮＭ  ０１８７２５などの公共データベース上で入手可能な配列が含まれる。さらに、以下に記載するように、ＩＬ−１７ＲＢにはまた、生物学的活性断片および／または変異体も含まれてもよい。
【０００９】
ＩＬ−１７ＲＡは、ＩＬ−１７ＲＢと会合して、生物学的に活性である（すなわち、リガンドの結合に際して、受容体複合体が活性化され、そして発現されている細胞内部にシグナルを伝達し、ｍＲＮＡの誘導、サイトカイン分泌、細胞の形態または活性化状態の変化等の生物学的活性を生じる）、ヘテロマー受容体複合体を形成する。ヘテロマー受容体複合体の各メンバーは、その「構成要素」または「サブユニット」と称される。本明細書において、「ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体」（または「ヘテロマー受容体複合体」）は、少なくともＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢを含む複合体を指し；さらなるサブユニットまたは構成要素もまた、ヘテロマー受容体複合体の一部を形成してもよい。
【００１０】
したがって、本発明の特定の側面は、ＩＬ−１７ＲＡとＩＬ−１７ＲＢ（および／またはさらなる受容体サブユニット）の会合を遮断し、そしてそれによって機能する受容体複合体（活性化されることが可能な受容体複合体）の形成を防止するための剤（例えば以下に記載するような抗原結合タンパク質）および方法に関する。本発明の他の側面は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体、あるいはそのサブユニットまたは構成要素に結合し、そしてリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合およびそれに続く受容体複合体の活性化を阻害するアンタゴニストに関する。本発明のさらにさらなる側面は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体またはそのサブユニットに結合し、そして活性化が起こるのを防止するアンタゴニストに関する。機能する受容体複合体が形成され、そして／または活性化されるのを防止すると、シグナル伝達が減少するかまたは防止され、そしてＩＬ−１７ＲＡ／ＩＬ−１７ＲＢ活性化の下流の炎症促進性効果が減少するであろう。こうした方法およびアンタゴニストは、ＩＬ−１７／ＩＬ−１７Ｒ経路によって影響を受ける多様な炎症および自己免疫障害の治療に有用であろう。本発明の態様は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のアンタゴニストまたはアゴニストをスクリーニングし、そして／またはＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を発現する細胞を同定する、ｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイに有用である。
【００１１】
さらに、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢはどちらも、機能するＩＬ−２５受容体複合体を形成するのに必要であるという知識は、ＩＬ−２５の生物学的活性を阻害するかまたはアンタゴナイズする際に有用なさらなる剤（抗原結合タンパク質など）につながる。例えば、受容体複合体の１以上のサブユニットに結合し（例えばＩＬ−１７ＲＡに結合する抗体、またはＩＬ−１７ＲＢに結合する抗体）、そしてＩＬ−２５による受容体複合体の結合または活性化を阻害する、抗原結合タンパク質は、ＩＬ−２５の有用なアンタゴニストであろう。
【００１２】
いくつかの態様において、本発明のアンタゴニストは、「単離された」または「実質的に純粋な」（または「実質的に均質な」）分子である。用語「単離された分子」（分子が、例えば、ポリペプチド、ペプチド、または抗体である場合）は、起源または由来する供給源によって、（１）天然状態で付随している天然会合構成要素と会合していないか、（２）同じ種由来の他の分子を実質的に含まないか、（３）異なる種の細胞によって発現されているか、あるいは（４）天然には存在しない、分子である。したがって、化学的に合成された、または該分子が天然に生じる細胞とは異なる細胞系において合成された「分子」は、天然会合構成要素から「単離されて」いるであろう。
【００１３】
分子はまた、当該技術分野に周知の精製技術を用いた単離によって、天然に会合する構成要素を実質的に含まないようにされてもよい（すなわち「精製された」タンパク質）。当該技術分野に周知のいくらかの手段によって、分子純度または均一性をアッセイしてもよい。例えば、当該技術分野に周知の技術を用いて、ポリアクリルアミドゲル電気泳動を用い、そしてゲルを染色してポリペプチドを視覚化することで、ポリペプチド試料の純度をアッセイしてもよい。特定の目的のために、ＨＰＬＣまたは精製のため当該技術分野に周知の他の手段を用いることによって、より高度の解像度を提供してもよい。
【００１４】
「単離された」アンタゴニスト（すなわちタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、または抗体）は、天然状態で通常会合する物質の少なくともある程度を伴わず、１つの態様において、所定の試料中、総タンパク質の少なくとも重量約５％、別の態様において、少なくとも約５０％を構成する。「実質的に純粋な」タンパク質は、総タンパク質の少なくとも重量約７５％、詳細には少なくとも約８０％、そして特に詳細には少なくとも約９０％を構成する。定義には、異なる生物中の１つの生物または宿主細胞からのタンパク質の産生が含まれる。あるいは、増加した濃度レベルでタンパク質が作製されるように、タンパク質は、誘導性プロモーターまたは高発現プロモーターの使用を通じて、通常見られるより有意により高い濃度で作製されてもよい。
【００１５】
これらは、本明細書に記載する本発明の多様な態様の多くの側面のごく一部である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの気道過敏反応性に対する効果を例示するグラフである。白抜きの丸は、ＭＳＡおよびＭｕＦｃを投与されたマウス（Ｎ＝４）において得られた結果を示し；白抜きの正方形は、ＩＬ−２５およびＭｕＦｃを投与されたマウス（Ｎ＝３）において得られた結果を示し；黒塗りの三角形は、ＩＬ−２５およびＭ７５１を投与されたマウス（Ｎ＝３）において得られた結果を示す。
【図２】図２は、実質的に実施例１１に記載するように調製されたウェスタンブロットを示す。レーン１および４は、分子量マーカーを含有する。パネルＡは、抗ＩＬ−１７ＲＡでブロッティングされ、パネルＢは抗ＨＩＳでブロッティングされた。レーン２は、ＩＬ−１７ＲＡ：ＨＩＳ陽性対照を示し、レーン３は、ＩＬ−１７ＲＢ：ＦｃでＩＬ−１７ＲＡ：ＨＩＳを沈殿させた結果を示す。レーン５は、ＩＬ−１７ＲＤ：ＨＩＳ陽性対照を示し、レーン６は、ＩＬ−１７ＲＤ：ＨＩＳがＩＬ−１７ＲＢ：Ｆｃでは沈殿不能であることを示す。
【図３】図３は、実施例１４の実験１由来のＯＶＡ喘息モデルにおけるマウスの気道過敏性（ＡＨＲ）を例示するグラフである。増加する濃度のメタコリンにマウスを曝露し、そしてベースラインより高いＰＥＮＨ変化±ＳＥＭを計算した。
【図４】図４は、実施例１４に記載するようなＯＶＡ喘息モデルにおけるマウスの肺抵抗性（ＲＬ）を例示する。各治療群に関する曲線下の平均気道抵抗性（Ｒ）面積（ＡＵＣ）±ＳＥＭを示す。図４ａは実験２由来の結果を示し、４ｂは実験３由来の結果を示す。
【図５−１】図５は、実施例１４の実験１に記載するような気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）細胞性の分析を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来のＢＡＬＦ細胞性を示す。Ｄｕｎｎの多重比較検定とともにノンパラメトリック一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図５−２】図５は、実施例１４の実験１に記載するような気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）細胞性の分析を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来のＢＡＬＦ細胞性を示す。Ｄｕｎｎの多重比較検定とともにノンパラメトリック一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図５−３】図５は、実施例１４の実験１に記載するような気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）細胞性の分析を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来のＢＡＬＦ細胞性を示す。Ｄｕｎｎの多重比較検定とともにノンパラメトリック一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図６−１】図６は、図５と類似であるが、実施例１４の実験２由来の結果を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較検定とともに一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図６−２】図６は、図５と類似であるが、実施例１４の実験２由来の結果を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較検定とともに一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図６−３】図６は、図５と類似であるが、実施例１４の実験２由来の結果を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較検定とともに一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図７−１】図７は、実施例１４の実験３由来の結果を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来のＢＡＬＦ細胞性を示す。Ｄｕｎｎの多重比較検定とともにノンパラメトリック一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図７−２】図７は、実施例１４の実験３由来の結果を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来のＢＡＬＦ細胞性を示す。Ｄｕｎｎの多重比較検定とともにノンパラメトリック一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図７−３】図７は、実施例１４の実験３由来の結果を示す。示す結果は、総ＢＡＬＦ（４ａ）、白血球、（４ｂ）好酸球、（４ｃ）好中球、（４ｄ）リンパ球、および（４ｅ）マクロファージである。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来のＢＡＬＦ細胞性を示す。Ｄｕｎｎの多重比較検定とともにノンパラメトリック一方向ＡＮＯＶＡを用いて、統計分析比較を行った（＊ｐ＜０．０５）。
【図８−１】図８は、ＯＶＡ喘息モデルにおけるマウス由来のＢＡＬＦ  ＩＬ−１３濃度を例示する。実施例１４に記載するように、３つの別個の実験において、ＥＬＩＳＡによって、個々のマウス由来のＢＡＬＦ試料におけるＩＬ−１３濃度を測定した：（ａ）実験１、（ｂ）実験２、（ｃ）実験３。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来の値を示す。水平線は群の平均を示す。一方向ＡＮＯＶＡを用いて、群間の比較を行った。＊ｐ＜０．０５。
【図８−２】図８は、ＯＶＡ喘息モデルにおけるマウス由来のＢＡＬＦ  ＩＬ−１３濃度を例示する。実施例１４に記載するように、３つの別個の実験において、ＥＬＩＳＡによって、個々のマウス由来のＢＡＬＦ試料におけるＩＬ−１３濃度を測定した：（ａ）実験１、（ｂ）実験２、（ｃ）実験３。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来の値を示す。水平線は群の平均を示す。一方向ＡＮＯＶＡを用いて、群間の比較を行った。＊ｐ＜０．０５。
【図９−１】図９は、ＯＶＡ喘息モデルにおけるマウス由来のＢＡＬＦ  ＩＬ−５濃度を示す。実施例１４に記載するように、３つの別個の実験において、ＥＬＩＳＡによって、個々のマウス由来のＢＡＬＦ試料におけるＩＬ−５濃度を測定した：（ａ）実験１、（ｂ）実験２、（ｃ）実験３。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来の値を示す。水平線は群の平均を示す。一方向ＡＮＯＶＡを用いて、群間の比較を行った。＊ｐ＜０．０５。
【図９−２】図９は、ＯＶＡ喘息モデルにおけるマウス由来のＢＡＬＦ  ＩＬ−５濃度を示す。実施例１４に記載するように、３つの別個の実験において、ＥＬＩＳＡによって、個々のマウス由来のＢＡＬＦ試料におけるＩＬ−５濃度を測定した：（ａ）実験１、（ｂ）実験２、（ｃ）実験３。各黒塗りの円は、１匹のマウス由来の値を示す。水平線は群の平均を示す。一方向ＡＮＯＶＡを用いて、群間の比較を行った。＊ｐ＜０．０５。
【図１０−１】図１０は、実施例１４に記載するように、（ａ）実験１、（ｂ）実験２、（ｃ）実験３において、ＥＬＩＳＡによって決定した、ＯＶＡ喘息モデルにおける個々のマウスのＩｇＥの血清濃度を例示する。各マウスの血清ＩｇＥ濃度を黒塗りの円で示す。水平線は群の平均を示す。一方向ＡＮＯＶＡを用いて、群間の比較を行った。＊ｐ＜０．０５。
【図１０−２】図１０は、実施例１４に記載するように、（ａ）実験１、（ｂ）実験２、（ｃ）実験３において、ＥＬＩＳＡによって決定した、ＯＶＡ喘息モデルにおける個々のマウスのＩｇＥの血清濃度を例示する。各マウスの血清ＩｇＥ濃度を黒塗りの円で示す。水平線は群の平均を示す。一方向ＡＮＯＶＡを用いて、群間の比較を行った。＊ｐ＜０．０５。
【図１１】図１１は、実施例１４の実験３に記載するようなＯＶＡ喘息モデルにおけるマウス群由来の肺病歴スコアを示す。統計的比較のため、対応のないｔ検定を用いる、＊ｐ＜０．０００１。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
１．ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト
ＩＬ−１７ＲＡは、ＩＬ−１７ＲＢと会合して、生物学的に活性である（すなわち、リガンドの結合によって活性化された際、シグナルを細胞に伝達し、細胞の生物学的活性の変化、例えばｍＲＮＡの誘導、サイトカインの分泌、細胞の形態または活性化状態の変化等を生じる）、ヘテロマー受容体複合体を形成する。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体は、細胞の細胞外膜上のヘテロマー受容体複合体として提示される、少なくともＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢタンパク質の会合（限定されるわけではないが、タンパク質−タンパク質相互作用など）と定義される。このヘテロマー受容体複合体は、最低でも、ＩＬ−２５シグナル伝達、すなわち、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化に必要である。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体は、さらに、さらなるタンパク質（すなわち「アクセサリータンパク質」）を含んでもよいことが理解される。例えば、Ａｃｔ−１として知られるシグナル伝達分子は、ＩＬ−１７Ａシグナル伝達カスケードの一部であり、そして最近の証拠によって、該分子は、ＩＬ−２５シグナル伝達にもまた関与しうることが示されている（Ｃｌａｕｄｉｏら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８２：１６１７，２００９；Ｓｗａｉｄａｎｉら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８２：１６３１，２００９）。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体活性化は、限定されるわけではないが、ＩＬ−２５（ＩＬ−１７Ｅ）などのＩＬ−１７リガンドファミリーメンバーの結合によって達成される。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体活性化には、限定されるわけではないが、細胞内シグナル伝達カスケード（単数または複数）の開始、ならびに遺伝子転写および翻訳などの下流事象が含まれる。
【００１８】
複数の態様は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を形成する際のサブユニット（すなわちＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢおよび／またはアクセサリータンパク質）の会合を阻害する抗原結合タンパク質を含むアンタゴニスト、ならびにＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体またはそのサブユニットへのリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合を阻害するアンタゴニスト（すなわち抗原結合タンパク質）に関する。さらなる態様は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の１以上のサブユニットに結合し、そして複合体のサブユニットの会合、該複合体
へのリガンドの結合、または該複合体の活性化を防止する、コンホメーション変化を生じる、アンタゴニスト（抗原結合タンパク質を含む）に関する。
【００１９】
「抗原結合タンパク質」は、本明細書において、同定されたターゲットタンパク質（例えば、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のサブユニット、またはヘテロマー受容体複合体自体）に特異的に結合するタンパク質である。「特異的に結合する」は、抗原結合タンパク質が、別のタンパク質に対してより、同定されるターゲットタンパク質に対して、より高いアフィニティを有することを意味する。典型的には、「特異的に結合する」は、平衡解離定数が、＜１０−７〜１０−１１Ｍ、または＜１０−８〜＜１０−１０Ｍ、または＜１０−９〜＜１０−１０Ｍであることを意味する。
【００２０】
抗原結合タンパク質には、本明細書に多様に定義されるように、同定されたターゲットタンパク質に特異的に結合する抗体、またはその断片、ならびに同定されたターゲットタンパク質に特異的に結合するペプチドまたはポリペプチドが含まれる。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の形成を阻害するか、あるいは該複合体へのリガンドの結合またはそれによるシグナル伝達を阻害する、抗原結合タンパク質は、本明細書において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストと称される。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの態様は、したがって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の任意の部分に（すなわち複合体自体にまたはそのサブユニットに）結合し、そして受容体活性化を阻害しうる。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト属の亜属は、本明細書に多様に定義するような抗体、ならびにペプチドおよびポリペプチドを含む。
【００２１】
受容体を活性化することまたは受容体の活性化は、本明細書において、限定されるわけではないが、受容体：リガンド相互作用などの、膜に結合した受容体への分子の結合に反応した、１以上の細胞内シグナル伝達経路（単数または複数）および細胞内シグナルの伝達（すなわちシグナル伝達）の関与と定義される。シグナル伝達は、本明細書において、１つの物理的または化学的形式から別のものへの変換による、シグナルのリレー；例えば、細胞生物学において、細胞が細胞外シグナルを反応（サイトカイン分泌、細胞の増殖または活性化状態の変化など）に変換することによるプロセスである。
【００２２】
「阻害」は、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％の、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の活性の減少、例えば、ヘテロマー受容体複合体形成の減少、ヘテロマー受容体複合体（またはその少なくとも１つのサブユニット）へのリガンド（すなわちＩＬ−１７Ａ  ＩＬ−１７Ｆおよび／またはＩＬ−２５）結合の減少、またはＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆおよび／またはＩＬ−２５などのリガンドに反応した生物学的活性（すなわちサイトカイン分泌刺激、細胞の数または活性化状態の変化、あるいは他の生物学的影響）の減少として測定可能である。１つの態様において、本発明のアンタゴニストは、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体活性を減少させ；別の態様において、本発明のアンタゴニストは、少なくとも３５％、４５％、５５％、６５％、７５％、８５％、９５％またはそれより多く、活性を阻害する。
【００２３】
限定されるわけではないが、本明細書に記載する免疫共沈降法などの当該技術分野に知られる任意の手段によって、ヘテロマー受容体複合体の形成阻害を測定してもよい。他の例には、フォルスター共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）分析、および当該技術分野に知られ、そしてリガンド／受容体相互作用を定量的にまたは定性的に分析するのに使用可能である他の方法が含まれる。また、ＦＡＣＳ、ＥＩＡ、ＲＩＡ、前述のアッセイ、ならびに本明細書記載のものおよびＵＳＳＮ１１／９０６，０９４に記載されるものを含む、２以上の分子の相互作用を評価するために当該技術分野に知られる方法によって、リガンド結合の阻害を測定することも可能である。
【００２４】
さらに、限定されるわけではないが、遺伝子転写の上方制御（例えば、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、エオタキシン、ＭＣＰ−１、および／またはＩＬ−１７ＲＢ  ｍＲＮＡのレベル増加）および／または遺伝子翻訳の上方制御、ならびに／あるいはＩＬ−５および／またはＩＬ−１３ならびにＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢを発現する任意の細胞から放出されることが当該技術分野に知られる任意の他の炎症促進性仲介因子を含む、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の活性化と関連する多様な因子の放出などの、生物学的に適切な読み取り値（単数または複数）によって測定されるようなＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のＩＬ−２５活性化の喪失として、「阻害」を測定してもよい。さらなる生物学的に適切な読み取り値には、生物学的試料中の細胞の数および／または外観の変化（気管支肺胞洗浄液試料中の細胞性の増加、杯細胞過形成および／または肺組織試料中の血管／血管周囲の炎症）が含まれる。
【００２５】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの他の態様は、ＩＬ−１７ＲＡに結合する、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストに関する。１つの態様において、アンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のサブユニットの会合を部分的に阻害するかまたは完全に阻害し、そしてそれによって、ヘテロマー受容体複合体の形成を防止する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体へのＩＬ−２５の結合を遮断する必要はない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体への（またはそのサブユニットへの）ＩＬ−２５の結合を遮断してもよい。
【００２６】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストのさらなる態様は、ＩＬ−１７ＲＢに結合する、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストに関する。１つの態様において、アンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のサブユニットの会合を部分的に阻害するかまたは完全に阻害し、そしてそれによって、ヘテロマー受容体複合体の形成を防止する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体へのＩＬ−２５の結合を遮断する必要はない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体への（またはそのサブユニットへの）ＩＬ−２５の結合を遮断してもよい。
【００２７】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストのさらなる態様は、ヘテロマー受容体複合体に結合するものを含む、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に結合するＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストに関する。１つの態様において、アンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のサブユニットの会合を部分的に阻害するかまたは完全に阻害し、そしてそれによって、ヘテロマー受容体複合体の形成を防止する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体へのＩＬ−２５の結合を遮断する必要はない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体への（またはそのサブユニットへの）ＩＬ−２５の結合を遮断してもよい。
【００２８】
上記のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの多様な態様には、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはヘテロマー受容体複合体に結合し、そしてヘテロマー受容体複合体のサブユニットの会合を立体的に阻害するかまたは妨害し、それによってＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体形成を防止する、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが含まれる。ヘテロマー受容体複合体サブユニットの会合の立体的妨害の一例では、サブユニットと受容体複合体の他のサブユニットとの会合に必要な部位で、またはアンタゴニストの空間的配置がヘテロマー受容体複合体サブユニットの会合を防止する部位の十分に近くで、サブユニットへのアンタゴニストの結合が生じる。あるいは、上述のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの多様な態様には、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはヘテロマー受容体複合体に結合し、そしてヘテロマー受容体複合体のサブユニットの１以上においてコンホメーション改変を誘導し（または防止し）、それによって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の形成を阻害する、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが含まれる。ヘテロマー受容体複合体サブユニットの会合を防止するコンホメーション変化の一例では、サブユニットへのアンタゴニストの結合は、そのサブユニットと受容体複合体の他のサブユニットとの会合に必要な部位から遠位であってもよい部位で起こり、そして該サブユニットと他のサブユニットの会合を防止するかまたはサブユニットの会合に必要なコンホメーション変化を防止する、サブユニットのコンホメーション変化を引き起こす。同様に、上述のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの多様な態様には、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはヘテロマー受容体複合体に結合し、そしてコンホメーション改変を誘導して（または防止して）、シグナル伝達を阻害するかまたはヘテロマー受容体複合体によるシグナル伝達を立体的に妨害する、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが含まれる。
【００２９】
別の態様において、上述の多様なＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストには、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはヘテロマー受容体複合体に結合し、そしてヘテロマー受容体複合体（またはそのサブユニット）にコンホメーション改変を誘導し、そしてそれによって、ＩＬ−２５（または別のリガンド）のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体への結合を阻害する、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが含まれる。該態様には、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に結合し、そしてＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体へのリガンド（ＩＬ−２５など）の結合を立体的に妨害するかまたは阻害する、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストがさらに含まれる。本態様にやはり含まれるのは、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に結合し、そして受容体複合体のシグナル伝達経路を（部分的にまたは完全に）阻害し、それによって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を通じたシグナル伝達を阻害するアンタゴニストである。
【００３０】
さらなる別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、リガンド（すなわちＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２５など）に結合し、そしてＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を通じたシグナル伝達を阻害する。こうしたアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の１つのサブユニットへの、または１つのこうしたサブユニットより多いサブユニットへの結合を阻害することによって、作用してもよい。したがって、例えば、アンタゴニストは、リガンドが第一の受容体サブユニットに結合するのを可能にするが、リガンドまたは第一の受容体サブユニットいずれかへの第二の受容体サブユニットの相互作用を防止してもよい。こうした阻害は、上述のように、例えば、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を通じたシグナル伝達を（部分的にまたは完全に）阻害する方式での、結合の立体的妨害、コンホメーション改変の誘導等によって、生じてもよい。
【００３１】
１．１  ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト：抗体
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの態様は、本明細書に多様に定義するように、抗体、またはその断片を含む。したがって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストには、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、二重特異性抗体、ディアボディ、ミニボディ、ドメイン抗体、合成抗体（本明細書において、ときに、「抗体模倣体」と称される）、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、抗体融合体（ときに、「抗体コンジュゲート」と称される）、ならびにこれらの断片が含まれる。
【００３２】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体はまた、ラクダ（ｃａｍｅｌｓ）およびラマ（ｌｌａｍａｓ）で見られるものなどの、２つの重鎖の二量体を含み、そして軽鎖をまったく含まない、単一ドメイン抗体も含んでもよい（例えば、Ｍｕｌｄｅｒｍａｎｓら，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７４：２７７−３０２；Ｄｅｓｍｙｔｅｒら，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：２６２８５−２６２９０を参照されたい）。
【００３３】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、四量体またはその断片を含んでもよい。各四量体は、典型的には、ポリペプチド鎖の２つの同一の対で構成され、各対は、１つの「軽鎖」（典型的には約２５ｋＤａの分子量を有する）および１つの「重鎖」（典型的には約５０〜７０ｋＤａの分子量を有する）を有する。各鎖のアミノ末端部分には、抗原認識に主に関与する可変領域が含まれる。各鎖のカルボキシ末端部分は、エフェクター機能に主に関与する定常領域を明示する。ヒト軽鎖は、カッパおよびラムダ軽鎖と分類される。重鎖は、ミュー、デルタ、ガンマ、アルファ、またはイプシロン鎖と分類され、そしてこれらは、抗体のアイソタイプを、それぞれ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、およびＩｇＥと定義する。ＩｇＧは、限定されるわけではないが、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４を含む、いくつかのサブクラスを有する。ＩｇＭサブクラスには、限定されるわけではないが、ＩｇＭ１およびＩｇＭ２が含まれる。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体には、こうしたアイソタイプすべてが含まれる。例示的な目的のため、抗体断片には、限定されるわけではないが、Ｆ（ａｂ）、Ｆ（ａｂ
’）、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、および一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃｆｖ）、ならびに一本鎖抗体が含まれる。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、前述の例のいずれを含んでもよい。
【００３４】
抗体の構造は当該技術分野に周知であり、そしてここで繰り返す必要はないが、例として、重鎖および軽鎖の可変領域は、典型的には、相補性決定領域またはＣＤＲとも呼ばれる、３つの超可変領域によって連結された比較的保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）の同じ一般構造を示す。ＣＤＲは、抗体（または本明細書に概略するような抗原結合タンパク質）の超可変領域であり、抗原認識および結合に関与する。各対の２つの鎖由来のＣＤＲは、フレームワーク領域によって並列され、特定のエピトープに結合することが可能になる。Ｎ末端からＣ末端まで、軽鎖および重鎖はどちらも、ドメインＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３およびＦＲ４を含む。いくつかの態様において、各ドメインへのアミノ酸の割り当ては、Ｋａｂａｔ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔの定義にしたがってもよい。Ｃｈｏｔｈｉａら，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７；Ｃｈｏｔｈｉａら，１９８９，Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７８−８８３を参照されたい。
【００３５】
「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、本明細書において、抗原結合のための主な表面接触点を構成する、結合タンパク質領域を指す。本発明の結合タンパク質は、６つのＣＤＲ、例えば１つの重鎖ＣＤＲ１（「ＣＤＲＨ１」）、１つの重鎖ＣＤＲ２（「ＣＤＲＨ２」）、１つの重鎖ＣＤＲ３（「ＣＤＲＨ３」）、１つの軽鎖ＣＤＲ１（「ＣＤＲＬ１」）、１つの軽鎖ＣＤＲ２（「ＣＤＲＬ２」）、１つの軽鎖ＣＤＲ３（「ＣＤＲＬ３」）を有してもよい。ＣＤＲＨ１は、典型的には、約５〜約７アミノ酸を含み、ＣＤＲＨ２は、典型的には、約１６〜約１９アミノ酸を含み、そしてＣＤＲＨ３は、典型的には、約３〜約２５アミノ酸を含む。ＣＤＲＬ１は、典型的には、約１０〜約１７アミノ酸を含み、ＣＤＲＬ２は、典型的には、約７アミノ酸を含み、そしてＣＤＲＬ３は、典型的には、約７〜約１０アミノ酸を含む。
【００３６】
最低限、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に特異的に結合する、軽鎖または重鎖可変領域のすべてまたは一部、あるいは軽鎖および重鎖可変領域両方のすべてまたは一部を含む。可変領域の断片（すなわち「一部」）の例は、ＣＤＲを含む。言い換えると、最低限、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、可変領域の少なくとも１つのＣＤＲを含み、ここでＣＤＲは、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に特異的に結合する。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、少なくとも２つ、または少なくとも３つ、または少なくとも４つ、または少なくとも５つ、または少なくとも６つすべての、可変領域（単数または複数）のＣＤＲを含み、ここでＣＤＲの少なくとも１つは、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に特異的に結合する。ＣＤＲは、重鎖または軽鎖由来であってもよいし、そして各鎖内の３つのＣＤＲの任意の１つであってもよく、すなわちＣＤＲは、各々、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、ＣＤＲＨ３、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２およびＣＤＲＬ３から独立に選択される。
【００３７】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体の態様は、有用なＣＤＲ（単数または複数）を移植する足場構造を含んでもよい。いくつかの態様には、ヒト化抗体のためのヒト足場構成要素が含まれる。１つの態様において、足場構造は伝統的な四量体抗体構造である。したがって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体の態様には、重鎖または軽鎖を構成する、フレームワーク、ＪおよびＤ領域、定常領域等のさらなる構成要素が含まれてもよい。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体の態様は、Ｆｃ変異体と称される、修飾Ｆｃドメインを有する抗体を含んでもよい。「Ｆｃ変異体」は、天然Ｆｃから修飾されているが、なおサルベージ受容体ＦｃＲｎの結合部位を含む分子または配列を指す。「Ｆｃ変異体」の他の例には、非ヒト天然Ｆｃからヒト化されている分子または配列が含まれる。さらに、天然Ｆｃは、本発明の融合分子に必要でない構造的特徴または生物学的活性を提供するため、除去されてもよい部位を含む。したがって、用語「Ｆｃ変異体」は、（１）ジスルフィド結合形成、（２）選択される宿主細胞との不適合、（３）選択される宿主細胞における発現に際してのＮ末端不均一性、（４）グリコシル化、（５）補体との相互作用、（６）サルベージ受容体以外のＦｃ受容体への結合、または（７）抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）に影響を及ぼすか、または関与する、１以上の天然Ｆｃ部位または残基を欠く分子または配列を含む。
【００３８】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体の態様は、ヒト・モノクローナル抗体を含む。限定されるわけではないが、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅＴＭ技術（例えば、米国特許第６，１１４，５９８号；第６，１６２，９６３号；第６，８３３，２６８号；第７，０４９，４２６号；第７，０６４，２４４号；Ｇｒｅｅｎら，１９９４，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ７：１３−２１；Ｍｅｎｄｅｚら，１９９７，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５：１４６−１５６；ＧｒｅｅｎおよびＪａｋｏｂｏｖｉｔｉｓ，１９９８，Ｊ．Ｅｘ．Ｍｅｄ．１８８：４８３−４９５を参照されたい）などの、当該技術分野に知られる任意の方法を用いて、ヒトＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に対して向けられるヒト・モノクローナル抗体を作製してもよい。完全ヒト抗体を作製する他の例には、ＵｌｔｉＭａｂヒト抗体発展系ＴＭおよびＴｒａｎｓ−Ｐｈａｇｅ技術ＴＭ（Ｍｅｄａｒｅｘ社、ニュージャージー州プリンストン）、ファージ・ディスプレイ技術、リボソーム−ディスプレイ技術（例えば、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、英国ケンブリッジ）、ならびに当該技術分野に知られる任意の他の方法が含まれる。
【００３９】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体の特定の態様は、キメラおよびヒト化抗体、またはその断片を含む。一般的に、キメラ抗体およびヒト化抗体はどちらも、１より多い種由来の領域を合わせた抗体を指す。例えば、キメラ抗体は、伝統的に、非ヒト種由来の可変領域（単数または複数）およびヒト由来の定常領域（単数または複数）を含む。ヒト化抗体は、一般的に、可変ドメインフレームワーク領域を、ヒト抗体で見られる配列と交換した非ヒト抗体を指す。一般的に、ヒト化抗体において、ＣＤＲを除く抗体全体は、ヒト起源のポリヌクレオチドにコードされるか、またはＣＤＲ内以外、こうした
抗体と同一である。いくつかまたはすべてが非ヒト生物に由来する核酸にコードされるＣＤＲを、ヒト抗体可変領域のベータシート・フレームワーク内に移植して抗体を生成し、その特異性は移植されたＣＤＲによって決定される。こうした抗体の生成は、当該技術分野に周知である（例えば、Ｊｏｎｅｓ，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６を参照されたい）。ヒト化抗体はまた、遺伝子操作された免疫系を持つマウスを用いて、あるいは当該技術分野に知られる任意の他の方法または技術によっても生成可能である（例えば、Ｒｏｑｕｅら，２００４，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：６３９−６５４を参照されたい）。いくつかの態様において、ＣＤＲはヒトであり、そしてしたがって、これに関連して、ヒト化およびキメラ抗体の両方には、いくつかの非ヒトＣＤＲが含まれてもよく；例えば、ＣＤＲＨ３およびＣＤＲＬ３領域を含み、他のＣＤＲ領域の１以上が異なる種の起源を持つ、ヒト化抗体を生成してもよい。
【００４０】
１つの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、多重特異性抗体を含む。これらは、２つの（またはそれより多い）異なる抗原に結合する抗体である。当該技術分野に知られる二重特異性抗体の例は、「ディアボディ」である。ディアボディは、当該技術分野に知られる多様な方法で、製造可能であり、例えば化学的に調製してもよいし、またはハイブリッド・ハイブリドーマに由来してもよい（ＨｏｌｌｉｇｅｒおよびＷｉｎｔｅｒ，１９９３，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．４：４４６−４４９）。多重特異性ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体の特定の態様は、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢの両方に結合する能力を有する抗体である。
【００４１】
別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体はミニボディを含む。ミニボディは、ＣＨ３ドメインに連結された一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ；以下に記載）を含む、最小化抗体様タンパク質である（例えば、Ｈｕら，１９９６，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５６：３０５５−３０６１を参照されたい）。
【００４２】
別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、ドメイン抗体を含み；ドメイン抗体は、例えば、米国特許第６，２４８，５１６号に記載されるものである。ドメイン抗体（ｄＡｂ）は、ヒト抗体の重鎖（ＶＨ）または軽鎖（ＶＬ）のいずれかの可変領域に対応する、抗体の機能的結合ドメインである。ｄＡｂは、およそ１３ｋＤａ、または完全抗体のサイズの１０分の１未満の分子量を有する。ｄＡｂは、細菌、酵母、および哺乳動物細胞系を含む、多様な宿主においてよく発現される。さらに、ｄＡｂは非常に安定であり、そして凍結乾燥または熱変性などの厳しい条件にさらされた後であってさえ、活性を保持する。例えば、米国特許６，２９１，１５８；６，５８２，９１５；６，５９３，０８１；６，１７２，１９７；米国第２００４／０１１０９４１号；欧州特許０３６８６８４；米国特許６，６９６，２４５、ＷＯ０４／０５８８２１、ＷＯ０４／００３０１９およびＷＯ０３／００２６０９を参照されたい。
【００４３】
先に言及したように、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、抗体断片、すなわちＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方への結合特異性を保持する、本明細書に言及する任意の抗体の断片を含んでもよい。特異的抗体断片には、限定されるわけではないが、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなるＦａｂ断片、（ｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、（ｉｉｉ）一本鎖抗体のＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；（ｉｖ）一本鎖可変領域からなるｄＡｂ断片（例えば、Ｗａｒｄら，１９８９，Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６を参照されたい）、（ｖ）単離ＣＤＲ領域、（ｖｉ）２つの連結されたＦａｂ断片を含む二価断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、（ｖｉｉ）ＶＨドメインおよびＶＬドメインが抗原結合部位を形成するように会合することを可能にするペプチドリンカーによって、２つのドメインが連結される、一本鎖Ｆｖ分子（ｓｃＦｖ）（例えば、Ｂｉｒｄら，１９８８  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；Ｈｕｓｔｏｎら，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５８７９−５８８３を参照されたい）、（ｖｉｉｉ）二重特異性一本鎖Ｆｖ二量体、および（ｉｘ）「ディアボディ」または「トリアボディ」、遺伝子融合によって構築される多価または多重特異性断片（例えば、Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎら，２０００，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．３２６：４６１−４７９；ＷＯ９４／１３８０４；Ｈｏｌｌｉｇｅｒら，１９９３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９０：６４４４−６４４８を参照されたい）が含まれる。抗体断片を修飾してもよい。例えば、ＶＨおよびＶＬドメインを連結するジスルフィド架橋を取り込むことによって、分子を安定化してもよい（例えば、Ｒｅｉｔｅｒら，１９９６，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．１４：１２３９−１２４５を参照されたい）。やはり本明細書に概略するように、これらの断片の非ＣＤＲ構成要素は、好ましくは、ヒト配列である。
【００４４】
さらなる態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、抗体融合タンパク質（本明細書において、ときに、「抗体コンジュゲート」と称される）を含む。コンジュゲート・パートナーは、タンパク質性または非タンパク質性であってもよく；後者は、一般的に、抗原結合タンパク質上（抗原結合タンパク質の共有修飾に関する考察を参照されたい）およびコンジュゲートパートナー上の官能基を用いて生成される。例えば、リンカーが当該技術分野に知られ；例えば、ホモまたはヘテロ二重官能性リンカーもまた周知である（例えば、本明細書に援用される、１９９４  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍ
ｉｃａｌ社カタログ、架橋剤に関する技術セクション、１５５−２００ページを参照されたい）。適切なコンジュゲートには、限定されるわけではないが、以下に記載するような標識、薬剤、および限定されるわけではないが、細胞傷害性薬剤（例えば化学療法剤）または毒素またはこうした毒素の活性断片を含む、細胞傷害剤が含まれる。適切な毒素および対応する断片には、ジフテリアＡ鎖、内毒素Ａ鎖、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、クルシン、クロチン、フェノマイシン、エノマイシン等が含まれる。細胞傷害剤には、また、放射性同位体を抗原結合タンパク質にコンジュゲート化するか、または抗原結合タンパク質に共有結合されているキレート剤に放射性核種を結合させることによって作製される放射性化学薬品も含まれる。さらなる態様は、カリケアマイシン、アウリスタチン、ゲルダナマイシンおよびメイタイシンを利用する。
【００４５】
１つの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、ときに「合成抗体」と称される、抗体類似体を含む。例えば、多様な代替タンパク質足場または人工的足場に、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体由来のＣＤＲを移植してもよい。こうした足場には、限定されるわけではないが、結合タンパク質の三次元構造を安定化させるために導入される突然変異、ならびに例えば生体適合性ポリマーからなる完全合成足場が含まれる。例えば、Ｋｏｒｎｄｏｒｆｅｒら，２００３，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，第５３巻，第１号：１２１−１２９；Ｒｏｑｕｅら，２００４，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：６３９−６５４を参照されたい。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト抗体は、ペプチド抗体模倣体、または「ＰＡＭ」、ならびに足場としてフィブロネクチン構成要素を利用する抗体模倣体を含んでもよい。
【００４６】
１．２  ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト：ペプチド／ポリペプチド
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの態様は、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に特異的に結合し、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆおよび／またはＩＬ−２５の活性を阻害する、ペプチドおよびポリペプチドの形のタンパク質を含む。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のサブユニットの会合を阻害し；受容体サブユニットのコンホメーション変化を誘導し（または防止し）、それによってこれらの相互作用を阻害し；ヘテロマー受容体複合体（またはそのサブユニット）へのリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合を阻害するか、またはヘテロマー受容体複合体（またはそのサブユニット）のコンホメーション変化を誘導して、該複合体へのリガンドの結合を阻害する。
【００４７】
複数の態様には、組換えＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが含まれる。「組換えタンパク質」は、組換え技術を用いて、すなわち当該技術分野に知られる方法を用いた組換え核酸の発現を通じて作製されるタンパク質である。
【００４８】
「ペプチド」は、本明細書において、１〜１００アミノ酸の分子を指す。ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ両方に結合し、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を形成する際のＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢの会合を阻害するかまたはＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体シグナル伝達を阻害する、例示的なペプチドは、ランダム化ライブラリーから生じるものを含んでもよい。例えば、完全ランダム配列由来のペプチド配列（例えばファージ・ディスプレイ法またはＲＮＡ−ペプチドスクリーニングによって選択されるもの）、および天然存在分子の１以上の残基が、天然存在分子において、その位には現れないアミノ酸残基によって置換されている配列。ペプチド配列を同定するための例示的な方法には、ファージ・ディスプレイ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ディスプレイ、リボソーム・ディスプレイ、ＲＮＡ−ペプチドスクリーニング、化学的スクリーニング等が含まれる。
【００４９】
「タンパク質」によって、本明細書において、タンパク質、ポリペプチド、オリゴペプチドおよびペプチドを含む、少なくとも２つの共有結合したアミノ酸を意味する。いくつかの態様において、２以上の共有結合アミノ酸は、ペプチド結合によって結合する。例えば、以下に概略するように、発現系および宿主細胞を用いて、タンパク質が組換え的に作製される場合、タンパク質は、天然存在アミノ酸およびペプチド結合で構成されてもよい。あるいは、いくつかの態様において（例えば、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ会合を阻害する能力に関して、タンパク質性候補剤をスクリーニングする場合）、タンパク
質には、プロテアーゼまたは他の生理学的および／または保存条件に耐性でありうる、合成アミノ酸（例えば、ホモフェニルアラニン、シトルリン、オルニチン、およびノルロイシン）、またはペプチド模倣体構造、すなわちペプトイドなどの「ペプチドまたはタンパク質類似体」が含まれてもよい（例えば、本明細書に援用される、Ｓｉｍｏｎら，１９９２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８９：９３６７を参照されたい）。特に、当該技術分野に周知の慣用法によって、タンパク質をｉｎ  ｖｉｔｒｏで合成する場合、こうした合成アミノ酸を取り込んでもよい。さらに、ペプチド模倣体、合成および天然存在残基／構造の任意の組み合わせが使用可能である。「アミノ酸」にはまた、プロリンおよびヒドロキシプロリンなどのイミノ酸残基も含まれる。アミノ酸「Ｒ基」または「側鎖」は、（Ｌ）または（Ｓ）立体配置のいずれであってもよい。特定の態様において、アミノ酸は、（Ｌ）または（Ｓ）立体配置にある。
【００５０】
アンタゴニスト性タンパク質の一例は、可溶性ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体である。こうした可溶性ヘテロマー受容体を調製する方法が当該技術分野に知られ、そして例えば、本明細書に援用される、米国特許第６，５８９，７６４号、２００３年７月８日発行に記載される。ＩＬ−１７Ａ−ＩＬ−１７Ｂ受容体複合体には、同じ細胞中で同時発現されるタンパク質としての、または（例えば任意の適切な手段による共有結合を介して、例えば架橋試薬またはポリペプチドリンカーを介して）互いに連結している受容体サブユニットとしての、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ（および／またはさらなるサブユニット）が含まれる。１つの態様において、ヘテロマー受容体は、抗体分子の部分、例えばＦｃ領域と各受容体構成要素の融合タンパク質から形成される。あるいは、ビオチンとアビジンのものなどの非共有相互作用を通じて、ヘテロマーＩＬ−１７Ａ−ＩＬ−１７Ｂ受容体を形成してもよい。
【００５１】
２．０  ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト
上述のように、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストには、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢ抗原結合タンパク質が含まれ、これには、限定されるわけではないが、抗体、ペプチド、およびポリペプチド、ならびに他のアンタゴニスト（他のポリペプチドまたはタンパク質が含まれる）が含まれる。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト（例えばＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢ抗原結合タンパク質）の別の態様は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの共有結合修飾を含む。こうした修飾を翻訳後に行ってもよい。例えば、アンタゴニストの特定のアミノ酸残基を、選択した側鎖あるいはＮまたはＣ末端残基と反応させることが可能な有機誘導体化剤と反応させることによって、いくつかのタイプのＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの共有結合修飾を分子内に導入する。以下は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストへのこうした修飾の例に相当する。
【００５２】
システイニル残基は、最も一般的には、α−ハロアセテート（および対応するアミン）、例えばクロロ酢酸またはクロロアセトアミドと反応して、カルボキシメチルまたはカルボキシアミドメチル誘導体を生じる。システイニル残基はまた、ブロモトリフルオロアセトン、α−ブロモ−β−（５−イミドゾイル）プロピオン酸、リン酸クロロアセチル、Ｎ−アルキルマレイミド、３−ニトロ−２−ピリジルジスルフィド、メチル２−ピリジルジスルフィド、ｐ−クロロ第二水銀安息香酸、２−クロロメルクリ−４−ニトロフェノール、またはクロロ−７−ニトロベンゾ−２−オキサ−１，３−ジアゾールとの反応によっても誘導体化される。ヒスチジル残基は、ｐＨ５．５〜７．０のジエチルピロカーボネートとの反応によって誘導体化され、これはこの剤がヒスチジル側鎖に比較的特異的であるためである。パラ−ブロモフェナシルブロミドもまた有用であり；反応は、好ましくは、ｐＨ６．０の０．１Ｍカコジル酸ナトリウム中で行われる。リジニルおよびアミノ末端残基は、コハク酸または他のカルボン酸無水物と反応する。これらの剤を用いた誘導体化は、リジニル残基の電荷を逆転させる効果を有する。アルファ−アミノ含有残基を誘導体化させるのに適した他の試薬には、ピコリンイミド酸メチルなどのイミドエステル；リン酸ピ
リドキサル；ピリドキサル；クロロ水素化ホウ素；トリニトロベンゼンスルホン酸；Ｏ−メチルイソ尿素；２，４−ペンタンジオン；およびグリオキシレートとのトランスアミナーゼ触媒反応が含まれる。アルギニル残基は、１つまたはいくつかの慣用的試薬との反応によって修飾され、それらの中には、フェニルグリオキサル、２，３−ブタンジオン、１，２−シクロヘキサンジオン、およびニンヒドリンがある。アルギニン残基の誘導体化では、反応がアルカリ条件において行われる必要があり、これは、グアニジン官能基のｐＫａが高いためである。さらに、これらの試薬を、リジンの基ならびにアルギニン・イプシ
ロン−アミノ基と反応させてもよい。
【００５３】
チロシル残基の特異的修飾を行ってもよく、芳香族ジアゾニウム化合物またはテトラニトロメタンとの反応によって、チロシル残基内にスペクトル標識を導入することが特に興味深い。最も一般的には、Ｎ−アセチルイミジゾールおよびテトラニトロメタンを用いて、それぞれ、Ｏ−アセチルチロシル種および３−ニトロ誘導体を形成する。１２５Ｉまたは１３１Ｉを用いてチロシル残基をヨウ素化して、ＩＬ−１７ＲＡｄｉｏイムノアッセイで使用するための標識タンパク質を調製するが、上述のクロラミンＴ法が適切である。カルボジイミド（Ｒ’−Ｎ＝Ｃ＝Ｎ−−Ｒ’）、式中、ＲおよびＲ’は、場合によって異なるアルキル基である、例えば１−シクロヘキシル−３−（２−モルホリニル−４−エチル）カルボジイミドまたは１−エチル−３−（４−アゾニア−４，４−ジメチルペンチル）カルボジイミドとの反応によって、カルボキシル側鎖（アスパルチルまたはグルタミル）を選択的に修飾する。さらに、アンモニウムイオンとの反応によって、アスパルチルおよびグルタミル残基をアスパラギニルおよびグルタミニル残基に変換する。
【００５４】
二重官能性剤を用いた誘導体化は、多様な方法で使用するために、水不溶性支持体マトリックスまたは表面にＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを架橋するのに有用である。一般的に用いられる架橋剤には、例えば、１，１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、例えば、４−アジドサリチル酸とのエステル、３，３’−ジチオビス（スクシニミジルプロピオネート）などのジスクシニミジルエステルを含むホモ二重官能性イミドエステル、およびビス−Ｎ−マレイミド−１，８−オクタンなどの二重官能性マレイミドが含まれる。メチル−３−［（ｐ−アジドフェニル）ジチオ］プロピオイミデートなどの誘導体化剤は、光の存在下で架橋を形成可能な、光活性化可能中間体を生じる。あるいは、反応性水不溶性マトリックス、例えば臭化シアン活性化炭水化物、ならびに米国特許第３，９６９，２８７号；第３，６９１，０１６号；第４，１９５，１２８号；第４，２４７，６４２号；第４，２２９，５３７号；および第４，３３０，４４０号に記載される反応性基質をタンパク質固定に使用する。
【００５５】
グルタミニルおよびアスパラギニル残基は、しばしば、脱アミド化されて、それぞれ、対応するグルタミルおよびアスパルチル残基になる。あるいは、これらの残基を、穏やかに酸性である条件下で脱アミド化する。これらの残基のいずれの型も、本発明の範囲内に属する。他の修飾には、プロリンおよびリジンのヒドロキシル化、セリルまたはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リジン、アルギニン、およびヒスチジン側鎖のアルファ−アミノ基のメチル化（Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ＆  Ｃｏ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ｐｐ．７９−８６［１９８３］）、Ｎ末端アミンのアセチル化、および任意のＣ末端カルボキシル基のアミド化が含まれる。
【００５６】
本発明の範囲内に含まれるＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの共有修飾の別のタイプは、タンパク質のグリコシル化パターンの改変を含む。当該技術分野に知られるように、グリコシル化パターンは、タンパク質の配列（例えば、以下に論じる、特定のグリコシル化アミノ酸残基の存在または非存在）、あるいはタンパク質が産生される宿主細胞または生物の両方に応じうる。ポリペプチドのグリコシル化は、典型的には、Ｎ連結またはＯ連結いずれかである。Ｎ連結は、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の付着を指す。３ペプチド配列、アスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−スレオニン、式中、Ｘはプロリン以外の任意のアミノ酸である、は、アスパラギン側鎖に炭水化物部分が酵素によって付着するための認識配列である。したがって、これらの３ペプチド配列のいずれかがポリペプチド中に存在すると、潜在的なグリコシル部位が生成される。Ｏ連結グリコシル化は、糖、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースの１つの、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはスレオニンへの付着を指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンもまた使用可能である。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストへのグリコシル化部位の付加は、アミノ酸配列が、１以上の上述の３ペプチド配列を含有するように、アミノ酸配列を改変することによって、好適に達成される（Ｎ連結グリコシル化部位に関して）。改変はまた、出発配列に１以上のセリンまたはスレオニン残基を付加するか、またはこれらによって置換することによって、作製可能である（Ｏ連結グリコシル化部位に関して）。容易にするため、抗原結合タンパク質アミノ酸配列は、好ましくは、ＤＮＡレベルでの変化を通じて、特に、所望のアミノ酸に翻訳されるであろうコドンが生成されるように、あらかじめ選択された塩基で、ターゲットポリペプチドをコードするＤＮＡを突然変異させることによって、改変される。
【００５７】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト上の炭水化物部分の数を増加させる別の手段は、タンパク質へのグリコシドの化学的または酵素的カップリングによる。これらの方法は、これらが、ＮおよびＯ連結グリコシル化のためのグリコシル化能を有する宿主細胞においてタンパク質を産生する必要がない点で好適である。用いるカップリング様式に応じて、糖（単数または複数）を、（ａ）アルギニンおよびヒスチジン、（ｂ）未結合（ｆｒｅｅ）カルボキシル基、（ｃ）システインのものなどの、未結合スルフィドリル基、（ｄ）セリン、スレオニン、またはヒドロキシプロリンのものなどの、未結合ヒドロキシル基、（ｅ）フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファンのものなどの、芳香族残基、あるいは（ｆ）グルタミンのアミド基に付着させてもよい。これらの方法は、１９８７年９月１１日公表のＷＯ  ８７／０５３３０、ならびにＡｐｌｉｎおよびＷｒｉｓｔｏｎ，１９８１，ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，ｐｐ．２５９−３０６に記載される。
【００５８】
出発ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト上に存在する炭水化物部分の除去を化学的または酵素的に達成してもよい。化学的脱グリコシル化は、化合物トリフルオロメタンスルホン酸または同等の化合物へのタンパク質の曝露を必要とする。この処理は、連結糖（Ｎ−アセチルグルコサミンまたはＮ−アセチルガラクトサミン）を除く、大部分のまたはすべての糖の切断を生じる一方、ポリペプチドを損なわれないままにする。化学的脱グリコシル化は、Ｈａｋｉｍｕｄｄｉｎら，１９８７，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２５９：５２およびＥｄｇｅら，１９８１，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１１８：１３１によって記載される。Ｔｈｏｔａｋｕｒａら，１９８７，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１３８：３５０に記載されるように、多様なエンドおよびエキソグリコシダーゼの使用によって、ポリペプチド上の炭水化物部分の酵素的切断を達成してもよい。潜在的なグリコシル化部位でのグリコシル化は、Ｄｕｓｋｉｎら，１９８２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５７：３１０５に記載されるように、化合物ツニカマイシンの使用によって防止されうる。ツニカマイシンは、タンパク質−Ｎ−グリコシド連結の形成を遮断する。
【００５９】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの別のタイプの共有結合修飾は、限定されるわけではないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコールまたはポリオキシアルキレンなどの多様なポリオールを含む多様な非タンパク質性ポリマーに、抗原結合タンパク質を、米国特許第４，６４０，８３５号；第４，４９６，６８９号；第４，３０１，１４４号；第４，６７０，４１７号；第４，７９１，１９２号または第４，１７９，３３７号に示される方式で、連結することを含む。さらに、当該技術分野に知られるように、抗原結合タンパク質内の多様な位で、アミノ酸置換を行って、ＰＥＧなどのポリマーの付加を促進してもよい。
【００６０】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの共有結合修飾は、本発明の範囲内に含まれ、そして常にではないが、一般的に、翻訳後に行われる。例えば、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの特定のアミノ酸残基を、選択される側鎖あるいはＮまたはＣ末端残基と反応可能な有機誘導体化剤と反応させることによって、いくつかのタイプのＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの共有結合修飾を分子に導入する。
【００６１】
いくつかの態様において、本発明の抗原結合タンパク質の共有結合修飾は、１以上の標識の添加を含む。一般的に、標識は、検出されるべきアッセイに応じて、多様なクラスに属する：ａ）放射性であってもまたは重同位体であってもよい、同位体標識；ｂ）磁気標識（例えば磁気粒子）；ｃ）レドックス活性部分；ｄ）光学色素；酵素基（例えば西洋ワサビ（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ）・ペルオキシダーゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、アルカリホスファターゼ）；ｅ）ビオチン化された基；およびｆ）二次レポーター（例えばロイシンジッパー対配列、二次抗体の結合部位、金属結合ドメイン、エピトープタグ等）によって認識される、あらかじめ決定されたポリペプチド・エピトープ。いくつかの態様において、多様な長さのスペーサー・アームを介して、抗原結合タンパク質に標識基をカップリングさせて、潜在的な立体障害を減少させる。タンパク質を標識するための多様な方法が当該技術分野に知られ、そして本発明を実行する際に使用可能である。
【００６２】
特定の標識には、限定されるわけではないが、発色団、リン光体および蛍光体を含む光学色素が含まれ、多くの例で、後者が特異的である。蛍光体は、「小分子」蛍光体またはタンパク質性蛍光体のいずれであってもよい。「蛍光標識」は、生得的な蛍光特性を介して検出されうる任意の分子を意味する。適切な蛍光標識には、限定されるわけではないが、フルオレセイン、ローダミン、テトラメチルローダミン、エオシン、エリスロシン、クマリン、メチル−クマリン、ピレン、マラカイトグリーン、スチルベン、ルシファーイエロー、カスケードブルーＪ、テキサスレッド、ＩＡＥＤＡＮＳ、ＥＤＡＮＳ、ＢＯＤＩＰＹ  ＦＬ、ＬＣレッド６４０、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、ＬＣレッド７０５、オレゴングリーン、Ａｌｅｘａ−Ｆｌｕｏｒ色素（Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ３５０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４３０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ４８８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５４６、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５６８、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５９４、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６３３、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６６０、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６８０）、カスケードブルー、カスケードイエローおよびＲ−フィコエリトリン（ＰＥ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ、オレゴン州ユージーン）、ＦＩＴＣ、ローダミン、およびテキサスレッド（Ｐｉｅｒｃｅ、イリノイ州ロックフォード）、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、ペンシルバニア州ピッツバーグ）が含まれる。蛍光体を含む適切な光学色素は、本明細書に完全に援用される、Ｒｉｃｈａｒｄ  Ｐ．ＨａｕｇｌａｎｄによるＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋに記載される。
【００６３】
適切なタンパク質性蛍光標識にはまた、限定されるわけではないが、レニラ属（Ｒｅｎｉｌｌａ）、プティロサルクス属（Ｐｔｉｌｏｓａｒｃｕｓ）、またはエクオレラ属（Ａｅｑｕｏｒｅａ）種のＧＦＰを含む緑色蛍光タンパク質（Ｃｈａｌｆｉｅら，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６３：８０２−８０５）、ＥＧＦＰ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ．，Ｉｎｃ．、Ｇｅｎｂａｎｋ寄託番号Ｕ５５７６２）、青色蛍光タンパク質（ＢＦＰ、Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．，１８０１  ｄｅ  Ｍａｉｓｏｎｎｅｕｖｅ  Ｂｌｖｄ．Ｗｅｓｔ，８ｔｈ  Ｆｌｏｏｒ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｑｕｅｂｅｃ，Ｃａｎａｄａ  Ｈ３Ｈ  １Ｊ９；Ｓｔａｕｂｅｒ，１９９８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ２４：４６２−４７１；Ｈｅｉｍら，１９９６，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．６：１７８−１８２）、増進黄色蛍光タンパク質（ＥＹＦＰ、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ．，Ｉｎｃ．）、ルシフェラーゼ（Ｉｃｈｉｋｉら，１９９３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：５４０８−５４１７）、βガラクトシダーゼ（Ｎｏｌａｎら，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２６０３−２６０７）およびレニラ属（ＷＯ９２／１５６７３、ＷＯ９５／０７４６３、ＷＯ９８／１４６０５、ＷＯ９８／２６２７７、ＷＯ９９／４９０１９、米国特許第５２９２６５８号、第５４１８１５５号、第５６８３８８８号、第５７４１６６８号、第５７７７０７９号、第５８０４３８７号、第５８７４３０４号、第５８７６９９５号、第５９２５５５８号）も含まれる。上記に引用する参考文献はすべて本明細書に援用される。
【００６４】
抗原結合タンパク質の上述の修飾はすべて、任意の他のタンパク質性ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト、例えばヘテロマーＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢ複合体、あるいは本明細書に記載するようなポリペプチドまたはペプチドアンタゴニストに行ってもよい。
【００６５】
３．０  使用法
本発明は、例えば診断目的のための、または治療目的のための、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用を含む、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用法も提供する。治療のためのＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用は、一般的に、治療を与える疾患または状態の徴候および／または症状の減少または軽減のためであることが理解される。本発明は、本明細書に記載する多様な状態および疾患の治療のための薬剤の調製または製造に使用可能な、本明細書全体に記載されるような、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを提供する。さらに、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの有効量および本明細書に記載するような１以上のさらなる活性剤の療法的有効量を、記載する治療に有用な薬剤の調製または製造に用いてもよい。いくつかの態様には、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを含む部分のキットが含まれ；場合によって、こうしたキットには、治療が必要な被験体に、別個に、同時に、または続いて投与するため、少なくとも１つのさらなる活性成分が含まれてもよい。
【００６６】
さらなる態様には、本明細書に記載する１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを用いて、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢを発現している細胞において、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害する方法が含まれる。例えば、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢを発現している細胞において、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害する方法は、前記細胞をＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストに曝露する工程を含み、ここでＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の少なくとも１つのサブユニットまたは構成要素に結合し、そしてヘテロマー受容体複合体の別のサブユニットまたは構成要素とのその会合を部分的に阻害するかまたは完全に阻害して（立体的妨害またはコンホメーション変化のいずれかを介して）、それによって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体形成を防止する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１つのサブユニットに結合する。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１より多いサブユニットに結合するか、またはヘテロマー受容体複合体自体に結合する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害するために、ヘテロマー受容体複合体の１以上の構成要素へのリガンド（ＩＬ−２５など）の結合を阻害する必要がない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢへのリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合を阻害し、そしてＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害する。さらなる態様は、前記ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが、本明細書に定義するような抗原結合タンパク質である方法を含み；場合によって、抗原結合タンパク質は薬学的組成物の形である。
【００６７】
さらなる態様には、本明細書記載の１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを用いて、ｉｎ  ｖｉｖｏで、少なくともＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢを発現している細胞において、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害する方法が含まれる。例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢを発現している細胞において、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害する方法は、前記細胞をＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストに曝露する工程を含み、ここでＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の少なくとも１つのサブユニットまたは構成要素に結合し、そしてヘテロマー受容体複合体の別のサブユニットまたは構成要素とのその会合を部分的に阻害するかまたは完全に阻害して（立体的妨害またはコンホメーション変化のいずれかを介して）、それによって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体活性化を阻害する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１つのサブユニットに結合する。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１より多いサブユニットに結合するか、またはヘテロマー受容体複合体自体に結合する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害するために、ヘテロマー受容体複合体の１以上の構成要素へのリガンド（ＩＬ−２５など）の結合を遮断する必要がない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢへのリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合を阻害し、そしてＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢ活性化を阻害する。さらなる態様は、前記ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが、本明細書に定義するような抗原結合タンパク質である方法を含み；場合によって、抗原結合タンパク質は薬学的組成物の形である。
【００６８】
さらなる態様には、本明細書記載の１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを用いて、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を発現している細胞において、該複合体活性化後に放出される炎症促進性仲介因子を減少させる方法が含まれる。例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を発現している細胞において、該複合体活性化後に放出される炎症促進性仲介因子を減少させる方法は、前記細胞をＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストに曝露する工程を含み、ここでＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の少なくとも１つのサブユニットまたは構成要素に結合し、そしてＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の形成または活性化を部分的に阻害するかまたは完全に阻害して（立体的妨害またはコンホメーション変化のいずれかを介して）、それによって、炎症促進性仲介因子の放出を減少させる。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１つのサブユニットに結合する。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１より多いサブユニットに結合するか、またはヘテロマー受容体複合体自体に結合する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、炎症促進性仲介因子の放出を減少させるために、ヘテロマー受容体複合体の１以上の構成要素へのリガンド（ＩＬ−２５など）の結合を阻害する必要がない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢへのリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合を阻害し、そして炎症促進性仲介因子の放出を減少させる。さらなる態様は、前記ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが、本明細書に定義するような抗原結合タンパク質である方法を含み；場合によって、抗原結合タンパク質は薬学的組成物の形である。
【００６９】
さらなる態様は、炎症促進性仲介因子が以下の少なくとも１つである、上述のような方法を含む：ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＩＬ−１β、ＴＮＦα、ＲＡＮＫ−Ｌ、ＬＩＦ、ＰＧＥ２、ＭＭＰ３、ＭＭＰ９、ＧＲＯα、ＮＯ、エオタキシン、ＭＣＰ−１、およびＩＬ−１７ＲＢ、ならびにＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢの活性化を通じて、任意の細胞から放出されることが当該技術分野で知られる任意の他の炎症促進性仲介因子。
【００７０】
さらなる態様には、限定されるわけではないが、炎症および自己免疫障害などのＩＬ−１７ファミリーメンバーが関連する障害を、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストで治療する方法が含まれる。
【００７１】
さらなる態様には、本明細書記載の１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを投与することによって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の活性化を部分的にまたは完全に遮断する、炎症を治療する方法が含まれる。例えば、必要な患者において炎症を治療する方法は、前記患者にＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを投与する工程を含み、ここでＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の少なくとも１つのサブユニットまたは構成要素に結合し、そしてヘテロマー受容体複合体の形成または活性化を部分的に阻害するかまたは完全に阻害して（立体的妨害またはコンホメーション変化のいずれかを介して）、それによって、炎症の治療を促進する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１つのサブユニットに結合する。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１より多いサブユニットに結合するか、またはヘテロマー受容体複合体自体に結合する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、炎症を治療するのに有用であるために、ヘテロマー受容体複合体の１以上の構成要素へのリガンド（ＩＬ−２５など）の結合を遮断する必要がない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢへのリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合を阻害し、そして炎症を治療するのに有用である。さらなる態様は、前記ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが、本明細書に定義するような抗体である方法を含み；場合によって、抗体は薬学的組成物の形である。
【００７２】
さらなる態様には、本明細書記載の１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを投与することによって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の活性化を部分的にまたは完全に遮断する、自己免疫障害を治療する方法が含まれる。例えば、必要な患者において自己免疫障害を治療する方法は、前記患者にＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを投与する工程を含み、ここでＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の少なくとも１つのサブユニットまたは構成要素に結合し、そしてヘテロマー受容体複合体の形成または活性化を部分的に阻害するかまたは完全に阻害して、それによって、自己免疫障害の治療を促進する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１つのサブユニットに結合する。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ヘテロマー受容体複合体の１より多いサブユニットに結合するか、またはヘテロマー受容体複合体自体に結合する。いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、自己免疫障害を治療するのに有用であるために、ヘテロマー受容体複合体の１以上の構成要素へのリガンド（ＩＬ−２５など）の結合を遮断する必要がない。別の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢへのリガンド（すなわちＩＬ−２５）の結合を阻害し、そして自己免疫障害を治療するのに有用である。さらなる態様は、前記ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストが、本明細書に定義するような抗体である方法を含み；場合によって、抗体は薬学的組成物の形である。
【００７３】
さらなる態様には、上述のような炎症および／または自己免疫障害を治療する方法が含まれ、障害には、限定されるわけではないが、軟骨炎症、および／または骨変性、関節炎、関節リウマチ、若年性関節炎、若年性関節リウマチ、小関節型若年性関節リウマチ、多関節型若年性関節リウマチ、全身型若年性関節リウマチ、若年性強直性脊椎炎、若年性腸炎性関節炎、若年性反応性関節炎、若年性ライター（Ｒｅｔｅｒ’ｓ）症候群、ＳＥＡ症候群（血清陰性、腱付着部症、関節症症候群）、若年性皮膚筋炎、若年性乾癬性関節炎、若年性強皮症、若年性全身性エリテマトーデス、若年性血管炎、小関節型関節リウマチ、多関節型関節リウマチ、全身型関節リウマチ、強直性脊椎炎、腸炎性関節炎、反応性関節炎、ライター症候群、ＳＥＡ症候群（血清陰性、腱付着部症、関節症症候群）、皮膚筋炎、乾癬性関節炎、強皮症、全身性エリテマトーデス、血管炎、ミオリチス（ｍｙｏｌｉｔｉｓ）、多発ミオリチス、皮膚ミオリチス、骨関節炎、結節性多発性動脈炎、ヴェゲナー肉芽腫症、動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、類肉腫症、強皮症、硬化症、原発性胆嚢硬化症、硬化性胆管炎、シェーグレン症候群、乾癬、斑状乾癬、滴状乾癬、反転乾癬（ｉｎｖｅｒｓｅ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）、膿疱性乾癬、紅皮性乾癬、皮膚炎、アトピー性皮膚炎、アテローム性動脈硬化症、狼瘡、スティル病、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、重症筋無力症、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、多発性硬化症（ＭＳ）、喘息（外因性および内因性喘息、ならびに関連する気道の慢性炎症性状態、または過敏性を含む）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ、すなわち慢性気管支炎、肺気腫）、急性呼吸器障害症候群（ＡＲＤＳ）、呼吸促迫症候群、嚢胞性線維症、肺高血圧症、肺血管収縮、急性肺傷害、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、過敏性肺炎、好酸球肺炎、気管支炎、アレルギー性気管支炎気管支拡張症、結核、過敏性肺炎、職業性喘息、喘息様障害、サルコイド、反応性気道疾患（または機能障害）症候群、綿肺、間質性肺疾患、好酸球増加症候群、鼻炎、副鼻腔炎、および寄生虫性肺疾患、ウイルス誘導性状態（例えば呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、パラインフルエンザウイルス（ＰＩＶ）、ライノウイルス（ＲＶ）およびアデノウイルス）に関連する気道過敏症、ギラン−バレー病、Ｉ型糖尿病、グレーブス病、アディソン病、レイノー現象、自己免疫性肝炎、ＧＶＨＤ等が含まれる。
【００７４】
さらなる態様には、療法的有効量の１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを、薬学的に許容されうる希釈剤、キャリアー、可溶化剤、乳化剤、保存剤、および／またはアジュバントとともに含む、薬学的組成物が含まれる。さらに、本発明は、こうした薬学的組成物を投与することによって患者を治療する方法、ならびに前述の状態を治療する際に使用するための薬剤を調製するかまたは製造するための方法を提供する。
【００７５】
許容されうる配合物質は、使用する投薬型および濃度で、レシピエントに対して非毒性である。特定の態様において、薬学的組成物は、例えば組成物のｐＨ、浸透圧、粘性、透明度、色、等張性、におい、無菌性、安定性、溶解速度または放出速度、吸着または浸透を修飾するか、維持するか、または保存するための配合物質を含有してもよい。こうした態様において、適切な配合物質には、限定されるわけではないが、アミノ酸（グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリジンなど）；抗菌剤；酸化防止剤（アスコルビン酸、亜硫酸ナトリウムまたは亜硫酸水素ナトリウムなど）；緩衝剤（ホウ酸塩、
重炭酸塩、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、クエン酸塩、リン酸塩または他の有機酸など）；充填剤（ｂｕｌｋｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）（マンニトールまたはグリシンなど）；キレート剤（エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）など）；錯化剤（カフェイン、ポリビニルピロリドン、ベータ−シクロデキストリンまたはヒドロキシプロピル−ベータ−シクロデキストリンなど）；増量剤（ｆｉｌｌｅｒ）；単糖；二糖；および他の炭水化物（グルコース、マンノース、またはデキストリンなど）；タンパク質（血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンなど）；着色剤、フレーバー剤および希釈剤；乳化剤；親水性ポリマー（ポリビニルピロリドンなど）；低分子量ポリペプチド；塩形成対イオン（ナトリウムなど）；保存剤（塩化ベンザルコニウム、安息香酸、サリチル酸、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸または過酸化水素など）；溶媒（グリセリン、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールなど）；糖アルコール（マンニトールまたはソルビトールなど）；懸濁剤；界面活性剤または湿潤剤（プルロニック、ＰＥＧ、ソルビタンエステル、ポリソルベート２０などのポリソルベート、ポリソルベート、トリトン、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサパール（ｔｙｌｏｘａｐａｌ）など）；安定性増進剤（スクロースまたはソルビトールなど）；等張性増進剤（ｔｏｎｉｃｉｔｙ  ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）（アルカリ金属ハロゲン化物、好ましくは塩化ナトリウムまたは塩化カリウム、マンニトールソルビトールなど）；送達ビヒクル；希釈剤；賦形剤および／または薬学的アジュバントが含まれる。ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ，第１８版，（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｒｍｏ監修），１９９０，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙを参照されたい。
【００７６】
特定の態様において、最適薬学的組成物は、例えば、意図される投与経路、送達形式、および所望の投薬量に応じて、当業者によって決定されるであろう。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ、上記を参照されたい。特定の態様において、こうした組成物は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの物理的状態、安定性、ｉｎ  ｖｉｖｏ放出速度、およびｉｎ  ｖｉｖｏクリアランス速度に影響を及ぼしうる。特定の態様において、薬学的組成物中の主なビヒクルまたはキャリアーは、水性または非水性いずれであってもよい。例えば、適切なビヒクルまたはキャリアーは、注射用水、生理食塩水溶液または人工的脳脊髄液であって、場合によって非経口投与用の組成物において一般的な他の物質が補充されているものであることも可能である。中性緩衝生理食塩水または血清アルブミンと混合された生理食塩水が、さらなる典型的なビヒクルである。特定の態様において、薬学的組成物は、約ｐＨ７．０〜８．５のＴｒｉｓ緩衝液、または約ｐＨ４．０〜５．５の酢酸緩衝液を含み、そしてこれらはソルビトールまたは適切な代用物をさらに含んでもよい。特定の態様において、凍結乾燥ケークまたは水溶液の形で、望ましい度合いの純度を有する、選択した組成物を、場合による配合剤（ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ、上記）と混合することによって、保存用のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト組成物を調製してもよい。さらに、特定の態様において、スクロースなどの適切な賦形剤を用いて、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト産物を凍結乾燥物として配合してもよい。
【００７７】
本発明の薬学的組成物を非経口送達用に選択してもよい。あるいは、吸入または消化管を通じた送達のため、例えば経口送達のため、組成物を選択してもよい。こうした薬学的に許容されうる組成物の調製は、当該技術分野の技術範囲内である。配合物構成要素は、好ましくは、投与部位に許容されうる濃度で存在する。特定の態様において、緩衝液を用いて、生理学的ｐＨまたはわずかにより低いｐＨ、典型的には約５〜約８のｐＨ範囲内に、組成物を維持する。
【００７８】
非経口投与が意図される場合、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、薬学的に許容されうるビヒクル中の所望のＩＬ−１７受容体抗原結合タンパク質を含む、発熱物質不含の、非経口的に許容されうる水溶液の形で提供されてもよい。非経口注射に特に適したビヒクルは、無菌蒸留水であり、この中でＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、適切に保存された無菌等張溶液として配合される。特定の態様において、調製物は、産物の徐放または持続放出を提供し、産物がデポー注射を介して送達されうる、注射可能微小球体、生体浸食性粒子、ポリマー性化合物（ポリ乳酸またはポリグリコール酸など）、ビーズまたはリポソームなどの剤と所望の分子の配合を伴ってもよい。特定の態様において、ヒアルロン酸もまた使用可能であり、これは循環中にある期間の持続を促進する効果を有しうる。特定の態様において、移植可能薬剤送達デバイスを用いて、所望の抗原結合タンパク質を導入してもよい。
【００７９】
本発明の薬学的組成物は吸入用に配合されうる。これらの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、乾燥吸入可能粉末として配合されてもよい。また、吸入溶液をエアロゾル送達用の噴霧剤（ｐｒｏｐｅｌｌａｎｔ）とともに配合してもよい。特定の態様において、溶液を噴霧してもよい。したがって、肺投与および配合法が、本明細書に援用される国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ９４／００１８７５号にさらに記載され、そして該文献は、化学的に修飾されたタンパク質の肺送達を記載する。
【００８０】
配合物を経口投与してもよいこともまた意図される。この方式で投与されるＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを、錠剤およびカプセルなどの固形投薬型の配合において、通例用いられるキャリアーを含むかまたは含まずに配合してもよい。特定の態様において、生物学的利用能が最大になり、そして前全身分解が最小限になる胃腸管の箇所で配合物の活性部分を放出するように、カプセルを設計してもよい。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの吸収を促進するため、さらなる剤を含めてもよい。希釈剤、フレーバー剤、低融点ワックス、植物油、潤滑剤、懸濁剤、錠剤崩壊剤、および結合剤（ｂｉｎｄｅｒ）もまた、使用可能である。
【００８１】
本発明の薬学的組成物は、好ましくは、錠剤の製造に適した非毒性賦形剤と混合された、有効量の１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを含むように提供される。錠剤を、無菌水、または別の適切なビヒクル中に溶解することによって、単位用量型で溶液を調製することも可能である。適切な賦形剤には、限定されるわけではないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウムもしくは重炭酸ナトリウム、ラクトース、またはリン酸カルシウムなどの不活性希釈剤；あるいはデンプン、ゼラチン、またはアカシアなどの結合剤；あるいはステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクなどの潤滑剤が含まれる。
【００８２】
さらなる薬学的組成物が当業者に明らかであり、こうした組成物には、持続送達または徐放送達配合物中のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを伴う配合物が含まれる。多様な他の持続送達または徐放送達手段、例えばリポソームキャリアー、生体浸食性微小粒子または多孔ビーズおよび蓄積注射を配合するための技術もまた、当業者に知られる。例えば、本明細書に援用され、そして薬学的組成物を送達するための多孔ポリマー性微小粒子の徐放を記載する、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ９３／００８２９号を参照されたい。持続放出調製物には、成型物品、例えばフィルムまたは微小カプセルの形の半透性ポリマーマトリックスが含まれることも可能である。持続放出マトリックスには、ポリエステル、ヒドロゲル、ポリラクチド（各々、本明細書に援用される、米国特許第３，７７３，９１９号および欧州特許出願公報第ＥＰ  ５８４８１号に開示されるようなもの）、Ｌ−グルタミン酸およびガンマ・エチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー（Ｓｉｄｍａｎら，１９８３，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ２：５４７−５５６）、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒら，１９８１，Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．１５：１６７−２７７、およびＬａｎｇｅｒら，１９８２，Ｃｈｅｍ．Ｔｅｃｈ．１２：９８−１０５）、エチレン酢酸ビニル（Ｌａｎｇｅｒら、１９８１、上記）またはポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸（欧州特許出願公報第１３３，９８８号）が含まれることも可能である。持続放出組成物にはまた、当該技術分野に知られる任意のいくつかの方法によって調製可能なリポソームも含まれてもよい。例えば、本明細書に援用される、Ｅｐｐｓｔｅｉｎら，１９８５，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８２：３６８８−３６９２；欧州特許出願公報第ＥＰ  ０３６，６７６号；第ＥＰ  ０８８，０４６号および第ＥＰ  １４３，９４９号を参照されたい。
【００８３】
ｉｎ  ｖｉｖｏ投与に用いられる薬学的組成物は、典型的には無菌調製物として提供される。滅菌は、無菌ろ過膜を通じたろ過によって達成可能である。組成物を凍結乾燥する場合、この方法を用いた滅菌は、凍結乾燥および再構成前またはその後のいずれに行うことも可能である。非経口投与用の組成物を、凍結乾燥型で、または溶液中で保存することも可能である。非経口組成物は、一般的に、無菌アクセスポートを有する容器、例えば静脈内溶液バッグ、または皮下注射針によって貫通可能な栓を有するバイアル内に入れられる。
【００８４】
薬学的組成物を配合したら、溶液、懸濁物、ゲル、エマルジョン、固体、結晶、あるいは脱水または凍結乾燥粉末として、無菌バイアル中で保存することも可能である。こうした配合物は、すぐに使える型、または投与前に再構成される型（例えば凍結乾燥型）のいずれで保存することも可能である。本発明は、単回用量投与単位を生じるキットもまた提供する。本発明のキットは、乾燥タンパク質を有する第一の容器および水性配合物を有する第二の容器を含有することも可能である。本発明の特定の態様において、単一チャンバーおよび多チャンバーのあらかじめ充填されたシリンジ（例えば液体シリンジおよびリオシリンジ（ｌｙｏｓｙｒｉｎｇｅｓ））を含有するキットを提供する。
【００８５】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを含有する使用すべき薬学的組成物の療法的有効量は、例えば、療法背景および目的に応じるであろう。当業者は、治療に適した投薬レベルが、部分的に、送達する分子、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを用いようとする徴候、投与経路、ならびに患者の大きさ（体重、体表面積または臓器の大きさ）および／または状態（年齢および全身の健康状態）に応じて多様であろうことを認識するであろう。特定の態様において、臨床医は、投薬量を滴定し、そして投与経路を修正して、最適療法効果を得ることも可能である。典型的な投薬量は、上述の要因に応じて、０．１μｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇまでの範囲、またはそれより多いことも可能である。特定の態様において、投薬量は、０．１μｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇまで、場合によって１μｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇまで、または１０μｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇまでの範囲であることも可能である。もちろん、これは免許がある医師によって決定されるべきであり、そしてこれらの用量は単に例示であることが理解される。投薬頻度は、用いる配合物中の特定のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの薬物動態学パラメータに応じるであろう。典型的には、望ましい効果を達成する投薬量に達するまで、臨床医が組成物を投与する。したがって、単回用量として、または長期に渡る２回以上の用量として（所望の分子を同量、含有してもまたはしなくてもよい）、あるいは移植デバイスまたはカテーテルを介した連続注入として、組成物を投与してもよい。適切な投薬量のさらなる微調整は、当業者によって日常的に行われ、そして当業者が日常的に行う仕事の範囲内である。適切な用量−反応データを使用して、適切な投薬量を確定することも可能である。特定の態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを長期間に渡って患者に投与してもよい。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの慢性投与は、完全にヒトではない、例えば非ヒト動物においてヒト抗原に対して作製された抗体、例えば非完全ヒト抗体または非ヒト種で産生された非ヒト抗体であるＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストと一般的に関連する、不都合な免疫またはアレルギー性反応を最小限にしうる。
【００８６】
薬学的組成物の投与経路は、既知の方法にしたがい、例えば経口投与、注射を通じた、静脈内、腹腔内、脳内（実質内）、脳室内、筋内、眼内、動脈内、門脈内、または病巣内経路によるもの；持続放出系によるもの、または移植デバイスによるものである。特定の態様において、ボーラス（ｂｏｌｕｓ）注射によって、または注入によって連続して、または移植デバイスによって組成物を投与してもよい。
【００８７】
また、所望の分子が吸着されるかまたは被包される膜、スポンジまたは別の適切な物質の移植を介して、組成物を局所的に投与してもよい。移植デバイスを用いる特定の態様において、任意の適切な組織または臓器内にデバイスを移植してもよいし、そして所望の分子の送達は、拡散、持続放出型ボーラス、または連続投与によってもよい。
【００８８】
本明細書に記載するＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを、本明細書に記載する疾患および状態を治療する際に用いられる薬学的剤と組み合わせて（前治療、後治療、または同時治療）用いてもよい。１つの態様において、本明細書記載のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストは、本明細書に列挙する疾患および障害の治療または防止のための任意の１以上のＴＮＦ阻害剤と組み合わせて（前治療、後治療、または同時治療）用いてもよく、これらには、限定されるわけではないが、Ｅｔａｎｅｒｃｅｐｔ（ＥＮＢＲＥＬ（登録商標）など）を含む、すべての型の可溶性ＴＮＦ受容体、ならびにすべての型の単量体または多量体型ｐ７５および／またはｐ５５  ＴＮＦ受容体分子およびその断片；限定されるわけではないが、Ｉｎｆｌｉｘｉｍａｂ（ＲＥＭＩＣＡＤＥ（登録商標）など）、およびＤ２Ｅ７（ＨＵＭＩＲＡ（登録商標）など）などの抗ヒトＴＮＦ抗体等がある。こうしたＴＮＦ阻害剤には、ＴＮＦのｉｎ  ｖｉｖｏ合成または細胞外放出を遮断する化合物およびタンパク質が含まれる。特定の態様において、本発明は、以下の任意の１以上のＴＮＦ阻害剤と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する：ＴＮＦ結合タンパク質（本明細書に定義するような可溶性ＴＮＦ受容体Ｉ型および可溶性ＴＮＦ受容体ＩＩ型（「ｓＴＮＦＲ」））、抗ＴＮＦ抗体、顆粒球コロニー刺激因子；サリドマイド（ｔｈａｌｉｄｏｍｉｄｅ）；ＢＮ  ５０７３０；テニダップ；Ｅ  ５５３１；チアパファント（ｔｉａｐａｆａｎｔ）ＰＣＡ  ４２４８；ニメスリド；パナビル（ｐａｎａｖｉｒ）；ロリプラム；ＲＰ  ７３４０１；ペプチドＴ；ＭＤＬ  ２０１，４４９Ａ；（１Ｒ，３Ｓ）−シス−１−［９−（２，６−ジアミノプリニル）］−３−ヒドロキシ−４−シクロペンタン塩酸塩；（１Ｒ，３Ｒ）−トランス−１−（９−（２，６−ジアミノ）プリン］−３−アセトキシシクロペンタン；（１Ｒ，３Ｒ）−トランス−１−［９−アデニル）−３−アジドシクロペンタン塩酸塩および（１Ｒ，３Ｒ）−トランス−１−（６−ヒドロキシ−プリン−９−イル）−３−アジドシクロペンタン。ＴＮＦ結合タンパク質は当該技術分野で開示されている（ＥＰ  ３０８  ３７８、ＥＰ  ４２２  ３３９、ＧＢ  ２  ２１８  １０１、ＥＰ  ３９３  ４３８、ＷＯ  ９０／１３５７５、ＥＰ  ３９８  ３２７、ＥＰ  ４１２  ４８６、ＷＯ  ９１／０３５５３、ＥＰ  ４１８  ０１４、ＪＰ  １２７，８００／１９９１、ＥＰ  ４３３  ９００、米国特許第５，１３６，０２１号、ＧＢ  ２  ２４６  ５６９、ＥＰ  ４６４  ５３３、ＷＯ  ９２／０１００２、ＷＯ  ９２／１３０９５、ＷＯ  ９２／１６２２１、ＥＰ  ５１２  ５２８、ＥＰ  ５２６  ９０５、ＷＯ  ９３／０７８６３、ＥＰ  ５６８  ９２８、ＷＯ  ９３／２１９４６、ＷＯ  ９３／１９７７７、ＥＰ  ４１７  ５６３、ＷＯ  ９４／０６４７６、およびＰＣＴ国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ９７／１２２４４号）。例えば、ＥＰ  ３９３  ４３８およびＥＰ  ４２２  ３３９は、集合的に「ｓＴＮＦＲ」と呼ばれる、可溶性ＴＮＦ受容体Ｉ型（「ｓＴＮＦＲ−Ｉ」または「３０ｋＤａ  ＴＮＦ阻害剤」としても知ら���る）および可溶性ＴＮＦ受容体ＩＩ型（「ｓＴＮＦＲ−ＩＩ」または「４０ｋＤａ  ＴＮＦ阻害剤」としても知られる）、ならびにその修飾型（例えば断片、機能性誘導体および変異体）のアミノ酸配列および核酸配列を解説する。ＥＰ  ３９３  ４３８およびＥＰ  ４２２  ３３９はまた、該阻害剤のコーディングに関与する遺伝子を単離し、該遺伝子を適切なベクターおよび細胞種中にクローニングし、そして該遺伝子を発現させて阻害剤を産生する方法もまた開示する。さらに、多価型（すなわち１より多い活性部分を含む分子）のｓＴＮＦＲ−ＩおよびｓＴＮＦＲ−ＩＩも開示されてきている。１つの態様において、多価型は、少なくとも１つのＴＮＦ阻害剤および別の部分を、任意の臨床的に許容されうるリンカー、例えばポリエチレングリコール（ＷＯ  ９２／１６２２１およびＷＯ  ９５／３４３２６）を用いて化学的にカップリングすることによって、ペプチドリンカー（Ｎｅｖｅら（１９９６），Ｃｙｔｏｋｉｎｅ，８（５）：３６５−３７０）によって、ビオチンに化学的にカップリングし、そして次いでアビジンに結合させることによって（ＷＯ  ９１／０３５５３）、そして最後に、キメラ抗体分子を結合させることによって（米国特許５，１１６，９６４、ＷＯ  ８９／０９６２２、ＷＯ  ９１／１６４３７およびＥＰ  ３１５０６２）、構築されうる。抗ＴＮＦ抗体には、ＭＡＫ  １９５Ｆ  Ｆａｂ抗体（Ｈｏｌｌｅｒら（１９９３），１ｓｔ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  ｏｎ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ  ｉｎ  Ｂｏｎｅ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，１４７）；ＣＤＰ  ５７１抗ＴＮＦモノクローナル抗体（Ｒａｎｋｉｎら（１９９５），Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，３４：３３４−３４２）；ＢＡＹ  Ｘ  １３５１ネズミ抗腫瘍壊死因子モノクローナル抗体（Ｋｉｅｆｔら（１９９５），７ｔｈ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，９ページ）；ＣｅｎＴＮＦ  ｃＡ２  抗ＴＮＦモノクローナル抗体（Ｅｌｌｉｏｔｔら（１９９４），Ｌａｎｃｅｔ，３４４：１１２５−１１２７、およびＥｌｌｉｏｔｔら（１９９４），Ｌａｎｃｅｔ，３４４：１１０５−１１１０）が含まれる。
【００８９】
本明細書に記載するＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを、限定されるわけではないが、キネレット（ｋｉｎｅｒｅｔ）（例えばＡＮＡＫＩＮＲＡ（登録商標））などのすべての型のＩＬ−１阻害剤と組み合わせて（前治療、後治療、または同時治療）用いてもよい。インターロイキン−１受容体アンタゴニスト（ＩＬ−１ｒａ）は、インターロイキン−１の天然阻害剤として作用するヒトタンパク質である。インターロイキン−１受容体アンタゴニスト、ならびにその作製法および使用法は、米国特許第５，０７５，２２２号；ＷＯ  ９１／０８２８５；ＷＯ  ９１／１７１８４；ＡＵ  ９１７３６３６；ＷＯ  ９２／１６２２１；ＷＯ  ９３／２１９４６；ＷＯ  ９４／０６４５７；ＷＯ  ９４／２１２７５；ＦＲ  ２７０６７７２；ＷＯ  ９４／２１２３５；ＤＥ  ４２１９６２６；ＷＯ  ９４／２０５１７；ＷＯ  ９６／２２７９３およびＷＯ  ９７／２８８２８に記載される。これらのタンパク質には、グリコシル化、ならびに非グリコシル化ＩＬ−１受容体アンタゴニストが含まれる。具体的には、各々、同じＤＮＡコード配列およびその変異体によってコードされるＩＬ−１ｒａの３つの型（ＩＬ−１ｒａα、ＩＬ−１ｒａβおよびＩＬ−１ｒａｘ）が、米国特許第５，０７５，２２２号に開示され、そして記載されている。ＩＬ−１阻害剤、特にＩＬ−１ｒａを産生するための方法もまた、この５，０７５，２２２特許に開示されている。さらなるインターロイキン−１阻害剤のクラスには、ＩＬ−１に対する細胞受容体の活性化を特異的に防止可能な化合物が含まれる。こうした化合物には、ＩＬ−１結合タンパク質、例えば可溶性受容体およびモノクローナル抗体が含まれる。こうした化合物にはまた、これらの受容体に対するモノクローナル抗体も含まれる。さらなるインターロイキン−１阻害剤のクラスには、ＩＬ−１のｉｎ  ｖｉｖｏ合成および／または細胞外放出を遮断する化合物およびタンパク質が含まれる。こうした化合物には、ＩＬ−１遺伝子の転写またはＩＬ−１プレタンパク質のプロセシングに影響を与える剤が含まれる。
【００９０】
本明細書に記載するＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを、限定されるわけではないが、アバタセプト（例えばＯＲＥＮＣＩＡ（登録商標））などのすべての型のＣＤ２８阻害剤と組み合わせて（前治療、後治療、または同時治療）用いてもよい。ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを、１以上のサイトカイン、リンホカイン、造血因子（単数または複数）、および／または抗炎症薬と組み合わせて（前治療、後治療、または同時治療）用いてもよい。
【００９１】
本明細書に列挙する疾患および障害の治療には、本明細書に提供する１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストでの治療と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、疼痛および／または炎症を制御するために最初に選択される薬剤の使用が含まれてもよい。これらの薬剤は非ステロイド系抗炎症薬剤（ＮＳＡＩＤ）として分類される。二次治療には、コルチコステロイド、遅効性抗リウマチ薬剤（ＳＡＡＲＤ）、または疾患修飾（ＤＭ）薬剤が含まれる。以下の化合物に関する情報は、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，第１８版，Ｍｅｒｃｋ，Ｓｈａｒｐ  ＆  Ｄｏｈｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，ニュージャージー州ローウェイ（２００６）およびＰｈａｒｍａｐｒｏｊｅｃｔｓ，ＰＪＢ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｌｔｄ．中に見出されうる。
【００９２】
特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニスト、および任意の１以上のＮＳＡＩＤの使用に関する（前治療、後治療、または同時治療）。ＮＳＡＩＤの抗炎症作用は、少なくとも部分的に、プロスタグランジン合成の阻害による（ＧｏｏｄｍａｎおよびＧｉｌｍａｎ，”Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”，ＭａｃＭｉｌｌａｎ  第７版（１９８５）中）。ＮＳＡＩＤは少なくとも９群に分類可能である：（１）サリチル酸誘導体；（２）プロピオン酸誘導体；（３）酢
酸誘導体；（４）フェナム酸（ｆｅｎａｍｉｃ  ａｃｉｄ）誘導体；（５）カルボン酸誘導体；（６）酪酸誘導体；（７）オキシカム（ｏｘｉｃａｍ）；（８）ピラゾール；および（９）ピラゾロン。
【００９３】
別の特定の態様において、本発明は、任意の１以上のサリチル酸誘導体、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。こうしたサリチル酸誘導体、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩は：アセトアミノサロール（ａｃｅｔａｍｉｎｏｓａｌｏｌ）、アロキシプリン、アスピリン、ベノリレート（ｂｅｎｏｒｙｌａｔｅ）、ブロモサリゲニン（ｂｒｏｍｏｓａｌｉｇｅｎｉｎ）、アセチルサリチル酸カルシウム、トリサリチル酸コリンマグネシウム、サリチル酸マグネシウム、サリチル酸コリン、ジフルシナル（ｄｉｆｌｕｓｉｎａｌ）、エテルサレート（ｅｔｅｒｓａｌａｔｅ）、フェンドサール（ｆｅｎｄｏｓａｌ）、ゲンチシン酸、サリチル酸グリコール、サリチル酸イミダゾール、アセチルサリチル酸リジン、メサラミン、サリチル酸モルホリン、サリチル酸１−ナフチル、オルサラジン、パルサルミド（ｐａｒｓａｌｍｉｄｅ）、アセチルサリチル酸フェニル、サリチル酸フェニル、サラセタミド（ｓａｌａｃｅｔａｍｉｄｅ）、サリチルアミドＯ−酢酸、サルサレート（ｓａｌｓａｌａｔｅ）、サリチル酸ナトリウムおよびスルファサラジンを含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するサリチル酸誘導体もまた、このグループに含まれるものと意図される。
【００９４】
さらなる特定の態様において、本発明は、任意の１以上のプロピオン酸誘導体、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。プロピオン酸誘導体、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロキシ酸（ｂｕｃｌｏｘｉｃ  ａｃｉｄ）、カルプロフェン、デキシンドプロフェン（ｄｅｘｉｎｄｏｐｒｏｆｅｎ）、フェノプロフェン、フルノキサプロフェン、フルプロフェン（ｆｌｕｐｒｏｆｅｎ）、フルルビプロフェン、フルクロプロフェン（ｆｕｒｃｌｏｐｒｏｆｅｎ）、イブプロフェン、イブプロフェンアルミニウム、イブプロキサム、インドプロフェン、イソプロフェン（ｉｓｏｐｒｏｆｅｎ）、ケトプロフェン、ロキソプロフェン、ミロプロフェン（ｍｉｒｏｐｒｏｆｅｎ）、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、オキサプロジン、ピケトプロフェン（ｐｉｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ）、ピメプロフェン（ｐｉｍｅｐｒｏｆｅｎ）、ピルプロフェン、プラノプロフェン、プロチジン酸、ピリドキシプロフェン（ｐｙｒｉｄｏｘｉｐｒｏｆｅｎ）、スプロフェン、チアプロフェン酸およびチオキサプロフェン（ｔｉｏｘａｐｒｏｆｅｎ）を含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するプロピオン酸誘導体もまた、このグループに含まれるものと意図される。
【００９５】
さらに別の特定の態様において、本発明は、任意の１以上の酢酸誘導体、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。酢酸誘導体、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：アセメタシン、アルクロフェナク、アンフェナク、ブフェキサマク、シンメタシン（ｃｉｎｍｅｔａｃｉｎ）、クロピラク、デルメタシン（ｄｅｌｍｅｔａｃｉｎ）、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、エトドラク、フェルビナク、フェンクロフェナク（ｆｅｎｃｌｏｆｅｎａｃ）、フェンクロラク（ｆｅｎｃｌｏｒａｃ）、フェンクロジン酸（ｆｅｎｃｌｏｚｉｃ  ａｃｉｄ）、フェンチアザク、フロフェナク（ｆｕｒｏｆｅｎａｃ）、グルカメタシン（ｇｌｕｃａｍｅｔａｃｉｎ）、イブフェナク、インドメタシン、イソフェゾラク（ｉｓｏｆｅｚｏｌａｃ）、イソキセパク（ｉｓｏｘｅｐａｃ）、ロナゾラク、メチアジン酸、オキサメタシン、オキシピナク（ｏｘｐｉｎａｃ）、ピメタシン（ｐｉｍｅｔａｃｉｎ）、プログルメタシン、スリンダク、タルメタシン（ｔａｌｍｅｔａｃｉｎ）、チアラミド、チオピナク（ｔｉｏｐｉｎａｃ）、トルメチン、トルメチンナトリウム、ジドメタシン（ｚｉｄｏｍｅｔａｃｉｎ）およびゾメピラックを含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連する酢酸誘導体もまた、このグループに含まれるものと意図される。
【００９６】
別の特定の態様において、本発明は、任意の１以上のフェナム酸誘導体、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。フェナム酸誘導体、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：エンフェナム酸（ｅｎｆｅｎａｍｉｃ  ａｃｉｄ）、エトフェナメート、フルフェナム酸、イソニキシン、メクロフェナム酸、メクロフェナム酸ナトリウム、メドフェナム酸（ｍｅｄｏｆｅｎａｍｉｃ  ａｃｉｄ）、メフェナム酸、ニフルミン酸、タルニフルメート（ｔａｌｎｉｆｌｕｍａｔｅ）、テロフェナメート（ｔｅｒｏｆｅｎａｍａｔｅ）、トルフェナム酸およびウフェナメートを含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するフェナム酸誘導体もまた、このグループに含まれるものと意図される。
【００９７】
さらなる特定の態様において、本発明は、任意の１以上のカルボン酸誘導体、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。使用可能なカルボン酸誘導体、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：クリダナク、ジフルニサール、フルフェニサール（ｆｌｕｆｅｎｉｓａｌ）、イノリジン（ｉｎｏｒｉｄｉｎｅ）、ケトロラクおよびチノリジンを含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するカルボン酸誘導体もまた、このグループに含まれるものと意図される。
【００９８】
さらなる別の特定の態様において、本発明は、任意の１以上の酪酸誘導体、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。酪酸誘導体、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：ブマジゾン、ブチブフェン（ｂｕｔｉｂｕｆｅｎ）、フェンブフェンおよびキセンブシン（ｘｅｎｂｕｃｉｎ）を含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連する酪酸誘導体もまた、このグループに含まれるものと意図される。
【００９９】
別の特定の態様において、本発明は、任意の１以上のオキシカム、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。オキシカム、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：ドロキシカム、エノリカム（ｅｎｏｌｉｃａｍ）、イソキシカム（ｉｓｏｘｉｃａｍ）、ピロキシカム、スドキシカム（ｓｕｄｏｘｉｃａｍ）、テノキシカムおよび４−ヒドロキシル−１，２−ベンゾチアジン １，１−ジオキシド４−（Ｎ−フェニル）−カルボキサミドを含む。類似の鎮痛
および抗炎症特性を有する、構造的に関連するオキシカムもまた、このグループに含まれるものと意図される。
【０１００】
さらなる別の特定の態様において、本発明は、任意の１以上のピラゾール、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。使用可能なピラゾール、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：ジフェナミゾール（ｄｉｆｅｎａｍｉｚｏｌｅ）およびエピリゾールを含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するピラゾールもまた、このグループに含まれるものと意図される。
【０１０１】
さらなる特定の態様において、本発明は、任意の１以上のピラゾロン、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。使用可能なピラゾロン、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：アパゾン、アザプロパゾン、ベンズピペリロン（ｂｅｎｚｐｉｐｅｒｙｌｏｎ）、フェプラゾン、モフェブタゾン、モラゾン（ｍｏｒａｚｏｎｅ）、オキシフェンブタゾン、フェニルブゾン、ピペブゾン（ｐｉｐｅｂｕｚｏｎｅ）、プロピルフェナゾン（ｐｒｏｐｙｌｐｈｅｎａｚｏｎｅ）、ラミフェナゾン（ｒａｍｉｆｅｎａｚｏｎｅ）、スキシブゾンおよびチアゾリノブタゾン（ｔｈｉａｚｏｌｉｎｏｂｕｔａｚｏｎｅ）を含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するピラゾロンもまた、このグループに含まれるものと意図される。
【０１０２】
別の特定の態様において、本発明は、任意の１以上の以下のＮＳＡＩＤと組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する：ε−アセトアミドカプロン酸、Ｓ−アデノシル−メチオニン、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸、アミキセトリン（ａｍｉｘｅｔｒｉｎｅ）、アニトラザフェン（ａｎｉｔｒａｚａｆｅｎ）、アントラフェニン（ａｎｔｒａｆｅｎｉｎｅ）、ベンダザック、ベンダザックリジネート（ｂｅｎｄａｚａｃ  ｌｙｓｉｎａｔｅ）、ベンジダミン、ベプロジン（ｂｅｐｒｏｚｉｎ）、ブロペラモール（ｂｒｏｐｅｒａｍｏｌｅ）、ブコローム、ブフェゾラク（ｂｕｆｅｚｏｌａｃ）、シプロキアゾン（ｃｉｐｒｏｑｕａｚｏｎｅ）、クロキシメート（ｃｌｏｘｉｍａｔｅ）、ダジダミン（ｄａｚｉｄａｍｉｎｅ）、デボキサメト（ｄｅｂｏｘａｍｅｔ）、デトミジン（ｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ）、ジフェンピラミド、ジフェンピラミド（ｄｉｆｅｎｐｙｒａｍｉｄｅ）、ジフィサラミン（ｄｉｆｉｓａｌａｍｉｎｅ）、ジタゾール、エモルファゾン、メシル酸ファネチゾール（ｆａｎｅｔｉｚｏｌｅ  ｍｅｓｙｌａｔｅ）、フェンフルミゾール（ｆｅｎｆｌｕｍｉｚｏｌｅ）、フロクタフェニン、フルミゾール（ｆｌｕｍｉｚｏｌｅ）、フルニキシン（ｆｌｕｎｉｘｉｎ）、フルプロキアゾン（ｆｌｕｐｒｏｑｕａｚｏｎｅ）、フォピルトリン（ｆｏｐｉｒｔｏｌｉｎｅ）、ホスフォサール（ｆｏｓｆｏｓａｌ）、グアイメサール（ｇｕａｉｍｅｓａｌ）、グアイアゾレン（ｇｕａｉａｚｏｌｅｎｅ）、イソニキシルン（ｉｓｏｎｉｘｉｒｎ）、塩酸レフェタミン、レフルノミド、ロフェミゾール（ｌｏｆｅｍｉｚｏｌｅ）、ロチファゾール（ｌｏｔｉｆａｚｏｌｅ）、リジンクロニキシネート（ｌｙｓｉｎ  ｃｌｏｎｉｘｉｎａｔｅ）、メセクラゾン（ｍｅｓｅｃｌａｚｏｎｅ）、ナブメトン、ニクチンドール（ｎｉｃｔｉｎｄｏｌｅ）、ニメスリド、オルゴテイン、オルパノキシン（ｏｒｐａｎｏｘｉｎ）、オキサセプロール、オキサパドール（ｏｘａｐａｄｏｌ）、パラニリン（ｐａｒａｎｙｌｉｎｅ）、ペリソキサール、クエン酸ペリソキサール、ピフォキシム（ｐｉｆｏｘｉｍｅ）、ピプロキセン（ｐｉｐｒｏｘｅｎ）、ピラゾラク（ｐｉｒａｚｏｌａｃ）、ピルフェニドン、プロカゾン、プロキサゾール、チエラビンＢ（ｔｈｉｅｌａｖｉｎ  Ｂ）、チフラミゾール（ｔｉｆｌａｍｉｚｏｌｅ）、チメガジン（ｔｉｍｅｇａｄｉｎｅ）、トレクチン（ｔｏｌｅｃｔｉｎ）、トルパドール（ｔｏｌｐａｄｏｌ）、トリプタミド（ｔｒｙｐｔａｍｉｄ）、ならびに４８０１５６Ｓ、ＡＡ８６１、ＡＤ１５９０、ＡＦＰ８０２、ＡＦＰ８６０、ＡＩ７７Ｂ、ＡＰ５０４、ＡＵ８００１、ＢＰＰＣ、ＢＷ５４０Ｃ、ＣＨＩＮＯＩＮ  １２７、ＣＮ１００、ＥＢ３８２、ＥＬ５０８、Ｆ１０４４、ＦＫ−５０６、ＧＶ３６５８、ＩＴＦ１８２、ＫＣＮＴＥＩ６０９０、ＫＭＥ４、ＬＡ２８５１、ＭＲ７１４、ＭＲ８９７、ＭＹ３０９、ＯＮＯ３１４４、ＰＲ８２３、ＰＶ１０２、ＰＶ１０８、Ｒ８３０、ＲＳ２１３１、ＳＣＲ１５２、ＳＨ４４０、ＳＩＲ１３３、ＳＰＡＳ５１０、ＳＱ２７２３９、ＳＴ２８１、ＳＹ６００１、ＴＡ６０、ＴＡＩ−９０１（４−ベンゾイル−１−インダンカルボン酸）、ＴＶＸ２７０６、Ｕ６０２５７、ＵＲ２３０１およびＷＹ４１７７０などの企業コード番号で示されるものを含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するＮＳＡＩＤもまた、このグループに含まれるものと意図される。
【０１０３】
さらに別の特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上のコルチコステロイド、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。コルチコステロイド、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩には、ヒドロコルチゾン、およびヒドロコルチゾンに由来する化合物、例えば２１−アセトキシプレグネノロン、アルクロメラゾン（ａｌｃｌｏｍｅｒａｓｏｎｅ）、アルゲストン、アムシノニド、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、ブデソニド、クロロプレドニゾン、クロベタゾール、プロピオン酸クロベタゾール、クロベタゾン、酪酸クロベタゾン、クロコルトロン、クロプレドノール、コルチコステロン、コルチゾン、コルチバゾール、デフラザコン（ｄｅｆｌａｚａｃｏｎ）、デソニド、デソキシメラゾン（ｄｅｓｏｘｉｍｅｒａｓｏｎｅ）、デキサメタゾン、ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ジフルプレドナート、エノキソロン、フルアザコルト（ｆｌｕａｚａｃｏｒｔ）、フルクロロニド（ｆｌｕｃｌｏｒｏｎｉｄｅ）、フルメタゾン、ピバル酸フルメタゾン、フルシノロンアセトニド（ｆｌｕｃｉｎｏｌｏｎｅ  ａｃｅｔｏｎｉｄｅ）、フルニソリド、フルオシノニド、フルオロシノロンアセトニド（ｆｌｕｏｒｏｃｉｎｏｌｏｎｅ  ａｃｅｔｏｎｉｄｅ）、フルオコルチンブチル（ｆｌｕｏｃｏｒｔｉｎ  ｂｕｔｙｌ）、フルオコルトロン、ヘキサン酸フルオコルトロン、吉草酸ジフルオコルトロン、フルオロメトロン、酢酸フルペロロン（ｆｌｕｐｅｒｏｌｏｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）、酢酸フルプレドニデン（ｆｌｕｐｒｅｄｎｉｄｅｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）、フルプレドニゾロン、フルランデノリド（ｆｌｕｒａｎｄｅｎｏｌｉｄｅ）、ホルモコータル、ハルシノニド、ハロメタゾン、酢酸ハロプレドン、ヒドロコルタメート、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾン、コハク酸ヒドロコルチゾン２１−ナトリウム、テブト酸ヒドロコルチゾン（ｈｙｄｒｏｃｏｒｔｉｓｏｎｅ  ｔｅｂｕｔａｔｅ）、マジプレドン（ｍａｚｉｐｒｅｄｏｎｅ）、メドリゾン、メプレドニゾン、メチルプレドニゾロン、フロ酸モメタゾン、パラメタゾン、プレドニカルベート、プレドニゾロン、プレドニゾロン２１−ジエドリアミノアセテート（ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ  ２１−ｄｉｅｄｒｙａｍｉｎｏａｃｅｔａｔｅ）、リン酸プレドニゾロンナトリウム、コハク酸プレドニゾロンナトリウム、プレドニゾロンナトリウム２１−ｍ−スルホベンゾエート、プレドニゾロンナトリウム２１−ステアログリコレート、テブト酸プレドニゾロン、プレドニゾロン２１−ｍ−トリメチルアセテート、プレドニゾン、プレドニバル（ｐｒｅｄｎｉｖａｌ）、プレドニリデン、プレドニリデン２１−ジエチルアミノアセテート、チキソコルトール、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンベネトニド（ｔｒｉａｍｃｉｎｏｌｏｎｅ  ｂｅｎｅｔｏｎｉｄｅ）およびトリアムシノロンヘキサセトニドが含まれる。類似の鎮痛および抗炎症特��を有する、構造的に関連するコルチコステロイドもまた、このグループに含まれるものと意図される。
【０１０４】
別の特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上の遅効性抗リウマチ剤（ＳＡＡＲＤ）または疾患修飾性抗リウマチ剤（ＤＭＡＲＤ）、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。ＳＡＡＲＤまたはＤＭＡＲＤ、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩は：アロクプレイドナトリウム（ａｌｌｏｃｕｐｒｅｉｄｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、オーラノフィン、オーロチオグルコース、オーロチオグリカニド、アザチオプリン、ブレキナルナトリウム、ブシラミン、３−オーロチオ−２−プロパノール−１−スルホン酸カルシウム、クロラムブシル、クロロキン、クロブザリット（ｃｌｏｂｕｚａｒｉｔ）、クプロキソリン（ｃｕｐｒｏｘｏｌｉｎｅ）、シクロ−ホスファミド、シクロスポリン、ダプソン、１５−デオキシスパガリン、ジアセレイン、グルコサミン、金塩（例えばシクロキン（ｃｙｃｌｏｑｕｉｎｅ）金塩、チオリンゴ酸金ナトリウム、チオ硫酸金ナトリウム）、ヒドロキシクロロキン、硫酸ヒドロキシクロロキン、ヒドロキシ尿素、ケブゾン、レバミソール、ロベンザリット、メリチン、６−メルカプトプリン、メトトレキセート、ミゾリビン、ミコフェノール酸モフェチル、ミオラール（ｍｙｏｒａｌ）、ナイトロジェンマスタード、Ｄ−ペニシラミン、ピリジノールイミダゾール、例えばＳＫＮＦ８６００２およびＳＢ２０３５８０、ラパマイシン、チオール、サイモポエチンおよびビンクリスチンを含む。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するＳＡＡＲＤまたはＤＭＡＲＤもまた、このグループに含まれるものと意図される。
【０１０５】
別の特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上のＣＯＸ２阻害剤、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。ＣＯＸ２阻害剤、そのプロドラッグ・エステル、または薬学的に許容されうる塩には、例えば、セレコキシブが含まれる。類似の鎮痛および抗炎症特性を有する、構造的に関連するＣＯＸ２阻害剤もまた、このグループに含まれるものと意図される。ＣＯＸ２選択的阻害剤には、限定されるわけではないが、エトリコキシブ、バルデコキシブ、セレコキシブ、リコフェロン（ｌｉｃｏｆｅｌｏｎｅ）、ルミラコキシブ、ロフェコキシブ等が含まれる。
【０１０６】
本明細書に列挙する疾患および障害の治療には、本明細書に提供する１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストでの治療と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、罹患個体の気道における過敏性などの炎症反応を制御するために最初に選択される薬剤の使用が含まれてもよい。こうした疾患または状態の治療にしばしば用いられる薬剤には、ベータ２−アゴニスト、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、抗炎症剤、抗コリン作用剤、気管支拡張剤、コルチコステロイド、およびこうした剤の組み合わせが含まれる。以下の化合物に関する情報は、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，第１８版，Ｍｅｒｃｋ，Ｓｈａｒｐ  ＆  Ｄｏｈｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，ニュージャージー州ローウェイ（２００６）およびＰｈａｒｍａｐｒｏｊｅｃｔｓ，ＰＪＢ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｌｔｄ．中に見出されうる。
【０１０７】
さらなる特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上のベータ−２アゴニスト、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。ベータ−２アゴニスト、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩の例には、例えば、アルブテロール（Ａｃｃｕｎｅｂ（登録商標）、Ｐｒｏａｉｒ  ＨＦＡ（登録商標）、Ｐｒｏｖｅｎｔｉｌ（登録商標）ＨＦＡ、Ｖｅｎｔｏｌｉｎ  ＨＦＡ（登録商標））、メタプロテレノール（Ａｌｕｐｅｎｔ（登録商標）、Ａｌｕｐｅｎｔ（登録商標）吸入溶液、Ａｌｕｐｅｎｔ（登録商標）シロップ）、酢酸ピルブテロール（Ｍａｘａｉｒ  Ａｕｔｏｈａｌｅｒ（登録商標））、および硫酸テルブタリン（Ｂｒｅｔｈａｉｒ（登録商標）、Ｂｒｅｔｈｉｎｅ（登録商標））が含まれる。そのうちいくつかを他の剤（例えば、Ａｄｖａｉｒ（登録商標）、Ｓｙｍｂｉｃｏｒｔ（登録商標）、Ｓｅｒｅｖｅｎｔ（登録商標）、およびＦｏｒａｄｉｌ（登録商標））と組み合わせる、長期作用ベータ−２アゴニストもまた知られており、そしてＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストと組み合わせた際に有用である。
【０１０８】
本発明のさらなる態様は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上のロイコトリエン阻害剤、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。ロイコトリエン阻害剤、そのプロドラッグ・エステル、および薬学的に許容されうる塩の例には、例えば、ジロートン（Ｚｙｆｌｏ（登録商標））、ザフィルルカスト（Ａｃｃｏｌａｔｅ（登録商標））、およびモンテルカスト（Ｓｉｎｇｕｌａｉｒ（登録商標））が含まれる。
【０１０９】
さらなる特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上のメチルキサンチン、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。メチルキサンチン、そのプロドラッグ・エステル、または薬学的に許容されうる塩の例には、例えば、テオフィリン（例えば、Ｂｒｏｎｋｏｄｙｌ（登録商標）、Ｅｌｉｘｏｐｈｙｌｌｉｎ（登録商標）、Ｓｌｏ−ｂｉｄ（登録商標）、Ｓｌｏ−Ｐｈｙｌｌｉｎ（登録商標）、Ｔｈｅｏ−２４（登録商標）、Ｔｈｅｏ−Ｄｕｒ（登録商標）、Ｔｈｅｏｌａｉｒ（登録商標）、Ｕｎｉｐｈｙｌ（登録商標））およびアミノフィリン（例えば、Ｐｈｙｌｌｏｃｏｎｔｉｎ（登録商標）、Ｔｒｕｐｈｙｌｌｉｎｅ（登録商標））が含まれる。
【０１１０】
別の特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上の抗炎症剤、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。こうした抗炎症剤の例には、限定されるわけではないが、クロモリン（Ｎａｓａｌｃｒｏｍ（登録商標）、Ｉｎｔａｌ（登録商標）、Ｏｐｔｉｃｒｏｍ（登録商標））およびネドクロミル（Ｔｉｌａｄｅ（登録商標））が含まれる。
【０１１１】
本発明のさらなる態様は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上の抗コリン作用剤、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。こうした抗コリン作用剤、そのプロドラッグ・エステル、または薬学的に許容されうる塩の例には、限定されるわけではないが、臭化イプラトロピウム（Ａｔｒｏｖｅｎｔ（登録商標））およびチオトロピウム（Ｓｐｉｒｉｖａ（登録商標））が含まれる。
【０１１２】
さらなる特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上のコルチコステロイド、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。吸入コルチコステロイドの例には、ジプロピオン酸ベクロメタゾン（Ｂｅｃｌｏｖｅｎｔ（登録商標）、Ｂｅｃｏｎａｓｅ（登録商標）、Ｖａｎｃｅｎａｓｅ（登録商標）、およびＶａｎｃｅｒｉｌ（登録商標））、トリアムシノロンアセトニド（Ａｚｍａｃｏｒｔ（登録商標）、Ｎａｓａｃｏｒｔ（登録商標）、Ｔｒｉ−Ｎａｓａｌ（登録商標））、およびフルニソリド（Ａｅｒｏｂｉｄ（登録商標）、Ｎａｓａｌｉｄｅ（登録商標））が含まれる。本発明において有用な他のコルチコステロイドの例には、プレドニゾン（Ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ  Ｉｎｔｅｎｓｏｌ（登録商標）、Ｓｔｅｒａｐｒｅｄ（登録商標））およびプレドニゾロン（Ｏｒａｐｒｅｄ（登録商標）、Ｐｅｄｉａｐｒｅｄ（登録商標）、Ｐｒｅｌｏｎｅ（登録商標））が含まれる。
【０１１３】
本発明のさらに別の特定の態様は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上の吸入ベータ−２アゴニスト、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。コルチコステロイド、そのプロドラッグ・エステル、または薬学的に許容されうる塩の例には、例えば、アルブテロール（Ｖｅｎｔｏｌｉｎ（登録商標）、Ｐｒｏｖｅｎｔｉｌ（登録商標））、メタプロテレノール（Ａｌｕｐｅｎｔ（登録商標））、酢酸ピルブテロール（Ｍａｘａｉｒ（登録商標））、テルブタリン（Ｂｒｅｔｈｉｎｅ（登録商標）、Ｂｒｅｔｈａｉｒｅ（登録商標））、イソエタリン（Ｂｒｏｎｋｏｓｏｌ（登録商標））およびレバルブテロール（ｌｅｖａｌｂｕｔｅｒｏｌ）（Ｘｏｐｅｎｅｘ（登録商標））が含まれる。
【０１１４】
さらなる特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上の気管支拡張剤（または抗コリン作用剤）、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。気管支拡張剤の例には、イプラトロピウム（Ａｔｒｏｖｅｎｔ（登録商標））およびチオトロピウム（Ｓｐｉｒｉｖａ（登録商標））が含まれる。
【０１１５】
本明細書に列挙する疾患および障害の治療には、本明細書に提供する１以上のＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストでの治療と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、感染性疾患を治療するかまたは制御するために最初に選択される薬剤の使用が含まれてもよい。こうした疾患または状態の治療にしばしば用いられる薬剤には、抗生物質、抗微生物剤、抗ウイルス剤、およびこうした剤の組み合わせが含まれる。以下の化合物に関する情報は、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，第１８版，Ｍｅｒｃｋ，Ｓｈａｒｐ  ＆  Ｄｏｈｍｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，ニュージャージー州ローウェイ（２００６）およびＰｈａｒｍａｐｒｏｊｅｃｔｓ，ＰＪＢ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｌｔｄ．中に見出されうる。
【０１１６】
さらに別の特定の態様において、本発明は、本明細書に列挙する疾患および障害の治療のための、任意の１以上の抗微生物剤、そのプロドラッグ・エステルまたは薬学的に許容されうる塩と組み合わせた（前治療、後治療、または同時治療）、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの使用に関する。抗微生物剤には、例えば、広いクラスのペニシリン、セファロスポリンおよび他のベータ−ラクタム、アミノグリコシド、アゾール、キノロン、マクロライド、リファマイシン、テトラサイクリン、スルホンアミド、リンコサミドおよびポリミキシンが含まれる。ペニシリンには、限定されるわけではないが、ペニシリンＧ、ペニシリンＶ、メチシリン、ナフシリン、オキサシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フロキサシリン、アンピシリン、アンピシリン／スルバクタム、アモキシシリン、アモキシシリン／クラブラネート、ヘタシリン、シクラシリン、バカンピシリン、カルベニシリン、カルベニシリンインダニル（ｃａｒｂｅｎｉｃｉｌｌｉｎ  ｉｎｄａｎｙｌ）、チカルシリン、チカルシリン／クラブラネート、アズロシリン、メズロシリン、ペペラシリン（ｐｅｐｅｒａｃｉｌｌｉｎ）およびメシリナムが含まれる。セファロスポリンおよび他のベータ−ラクタムには、限定されるわけではないが、セファロチン、セファピリン、セファレキシン、セフラジン、セファゾリン、セファドロキシル、セファクロル、セファマンドール、セフォテタン、セフォキシチン、セルロキシム（ｃｅｒｕｒｏｘｉｍｅ）、セフォニシド、セフォラジン（ｃｅｆｏｒａｄｉｎｅ）、セフィキシム、セフォタキシム、モキサラクタム、セフチゾキシム、セトリアキソン（ｃｅｔｒｉａｘｏｎｅ）、セフォペラゾン（ｃｅｐｈｏｐｅｒａｚｏｎｅ）、セフタジジム、イミペネムおよびアズトレオナムが含まれる。アミノグリコシドには、限定されるわけではないが、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、トブラマイシン、アミカシン、ネチルマイシン、カナマイシンおよびネオマイシンが含まれる。アゾールには、限定されるわけではないが、フルコナゾールが含まれる。キノロンには、限定されるわけではないが、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、エノキサシン、シプロフロキサシン、オフロキサシン、スパルフロキサシンおよびテマフロキサシンが含まれる。マクロライドには、限定されるわけではないが、エリスロマイシン、スピラマイシンおよびアジスロマイシンが含まれる。リファマイシンには、限定されるわけではないが、リファンピンが含まれる。テトラサイクリンには、限定されるわけではないが、スピサイクリン（ｓｐｉｃｙｃｌｉｎｅ）、クロルテトラサイクリン、クロモサイクリン、デメクロサイクリン、デオキシサイクリン、グアメサイクリン（ｇｕａｍｅｃｙｃｌｉｎｅ）、リメサイクリン、メクロサイクリン、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、ペニメピサイクリン、ピパサイクリン（ｐｉｐａｃｙｃｌｉｎｅ）、ロリテトラサイクリン、サンサイクリン（ｓａｎｃｙｃｌｉｎｅ）、セノサイクリン（ｓｅｎｏｃｉｃｌｉｎ）およびテトラサイクリンが含まれる。スルホンアミドには、限定されるわけではないが、スルファニルアミド、スルファメトキサゾール���スルファセタミド、スルファジアジン、スルフイソキサゾールおよびコトリモキサゾール（トリメトプリム／スルファメトキサゾール）が含まれる。リンコサミドには、限定されるわけではないが、クリンダマイシンおよびリンコマイシンが含まれる。ポリミキシン（ポリペプチド）には、限定されるわけではないが、ポリミキシンＢおよびコリスチンが含まれる。
【０１１７】
４．０  スクリーニングアッセイ
さらなる態様には、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のアンタゴニストに関してスクリーニングする方法が含まれる。当該技術分野に知られ、そしてＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のアンタゴニストを同定するのに適応可能なスクリーニングアッセイ形式が意図される。例えば：ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体中のＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢを提供し；前記受容体複合体に候補剤を曝露し；そして候補剤に曝露されていないものに比較して、受容体複合体形成量を決定する工程を含む、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体のアンタゴニストに関してスクリーニングする方法。候補剤を受容体複合体に曝露する工程は、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢがＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を形成する前、形成する間、または形成した後であってもよい。
【０１１８】
さらなる態様には、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体中のＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢを提供し；前記受容体複合体に候補剤を曝露し；１以上のＩＬ−１７リガンドを添加し；そして候補剤に曝露されていないものに比較して、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロ受容体複合体活性化量を決定する工程を含む、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体活性化のアンタゴニストに関してスクリーニングする方法が含まれる。生物学的に適切な読み取り値によって測定されるように（以下を参照されたい）、１以上のＩＬ−１７リガンドの存在下で、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体活性化を減少させる候補剤は、陽性と考えられる。ＩＬ−１７リガンドは、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−２５、あるいはＩＬ−１７ＲＡ、ＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体に結合し、そしてこれらを活性化させる任意の他のＩＬ−１７リガンドであってもよい。活性化は本明細書の別の場所に定義される。適切な生物学的読み取り値には、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１３、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＩＬ−１β、ＴＮＦα、ＲＡＮＫ−Ｌ、ＬＩＦ、ＰＧＥ２、ＩＬ−１２、ＭＭＰ３、ＭＭＰ９、ＧＲＯα、ＮＯ、ならびにＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢを発現している任意の細胞から放出されることが当該技術分野に知られる任意の他の分子が含まれる。候補剤を受容体複合体に曝露する工程は、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢがＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を形成する前、形成する間、または形成した後であってもよい。候補剤は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を部分的に、すなわち１００％阻害未満で阻害してもよいことが理解される。特定のアッセイ条件下では、候補剤は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を完全に阻害してもよい。
【０１１９】
１つの側面において、本発明は、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢの会合、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体、ならびにＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の活性化に対する、候補剤の影響を検出する、細胞に基づくアッセイを提供する。したがって、本発明は、１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体アンタゴニストに関してスクリーニングするため、細胞への候補剤の添加を提供する。
【０１２０】
「候補剤」または「候補薬剤」によって、本明細書において、限定されるわけではないが、本明細書に概略するように、活性に関してスクリーニング可能な、ペプチド、ペプチドの融合タンパク質（例えば、共有的にまたは非共有的に他のタンパク質に結合している、ＩＬ−１７ＲＡ、ＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体に結合するペプチド、例えば、当該技術分野に知られる抗体またはタンパク質に基づく足場の断片）、タンパク質、抗体、既知の薬剤および薬剤候補を含む小有機分子、多糖、脂肪酸、ワクチン、核酸などを記載する。
【０１２１】
候補剤は多くの化学的クラスを含む。１つの態様において、候補剤は有機分子、好ましくは１００より大きく、そして約２，５００ダルトン未満の分子量を有する小有機化合物である。１００より大きく、そして約２，０００ダルトン未満、より好ましくは約１５００ダルトン未満、より好ましくは約１０００ダルトン未満、より好ましくは５００ダルトン未満の分子量を有する小有機化合物が含まれる。候補剤は、タンパク質と構造的相互作用、特に水素結合に必要な官能基を含み、そして典型的には、アミン、カルボニル、ヒドロキシルまたはカルボキシル基の少なくとも１つ、好ましくは官能化学基の少なくとも２つを含む。候補剤は、しばしば、１以上の上記官能基で置換された、環状炭素または複素環構造および／または芳香族または多環芳香族構造を含む。候補剤はまた、ペプチド、サッカリド、脂肪酸、ステロイド、プリン、ピリミジン、その誘導体、構造的類似体を含む生体分子またはその組み合わせの中にも見出される。
【０１２２】
候補剤は、合成または天然化合物のライブラリーを含む非常に多様な供給源から得られる。例えば、ランダム化オリゴヌクレオチドおよびペプチドの発現および／または合成を含む多くの手段が、非常に多様な有機化合物および生体分子のランダムおよび有向（ｄｉｒｅｃｔｅｄ）合成に利用可能である。あるいは、細菌、真菌、植物および動物抽出物の形の天然化合物ライブラリーが入手可能であるか、または容易に産生される。さらに、天然のまたは合成で産生されたライブラリーおよび化合物は、慣用的な化学的、物理的および生化学的手段を通じて、容易に修飾される。既知の薬理学的剤を、アシル化、アルキル
化、エステル化、アミド化などの有向またはランダム化学修飾に供して、構造的類似体を産生してもよい。
【０１２３】
別の態様において、候補生物活性剤は、タンパク質またはタンパク質の断片であってもよい。したがって、例えば、タンパク質を含有する細胞抽出物、あるいはタンパク質性細胞抽出物のランダムまたは有向消化物を用いてもよい。この方式で、本明細書記載の系におけるスクリーニングのため、原核および真核タンパク質のライブラリーを作製してもよい。この態様に含まれるのは、細菌、真菌、ウイルス、およびヒトタンパク質を含む哺乳動物タンパク質のライブラリーである。
【０１２４】
いくつかの態様において、候補剤はペプチドである。この態様において、提示構造を含むペプチド構築物を用いることが有用でありうる。「提示構造」または本明細書中の文法的同等物によって、候補生物活性剤に融合した際、候補剤に、コンホメーション的に制限された型を取らせる配列を意味する。タンパク質は、主に、コンホメーション的に制約されたドメインを通じて、互いに相互作用する。自由に回転するアミノおよびカルボキシル末端を持つ小さいペプチドは、当該技術分野に知られるように、強力な機能を有しうるが、ペプチド模倣体合成に関して側鎖位を予測することが不可能であるため、こうしたペプチド構造を薬理学的剤に変換するのは困難である。したがって、コンホメーション的に制約された構造にあるペプチドの提示は、より後の薬剤の生成に有益であり、そしてかつまた、ターゲットタンパク質とペプチドのより高いアフィニティ相互作用を導く可能性が高い。この事実は、細菌ファージ系において、生物学的に生成された短いペプチドを用いたコンビナトリアルライブラリー生成系において認識されてきている。多くの研究者が、ランダム化ペプチド構造を提示しうる、小ドメイン分子を構築してきている。特定の提示構造は、外部ループ上に提示されることによって、ペプチドへのアクセス可能性を最大にする。したがって、適切な提示構造には、限定されるわけではないが、ミニボディ構造、構造にさほど重要ではない残基がランダム化されたベータ−シートターン上のループおよびコイルドコイル・ステム構造、ジンクフィンガードメイン、システイン連結（ジスルフィド）構造、トランスグルタミナーゼ連結構造、環状ペプチド、Ｂ−ループ構造、らせんバレルまたはバンドル、ロイシンジッパーモチーフ等が含まれる。本明細書に援用される米国特許第６，１５３，３８０号を参照されたい。
【０１２５】
スクリーニングアッセイにおいて特に有用なのには、ファージ・ディスプレイライブラリーがあり；ファージ・ディスプレイ法および構築物に関しては、例えば、その全体が本明細書に完全に援用される、米国特許第５，２２３，４０９号；第５，４０３，４８４号；第５，５７１，６９８号；および第５，８３７，５００号を参照されたい。一般的に、ファージ・ディスプレイライブラリーは、合成タンパク質（例えばペプチド）挿入物を利用してもよいし、またはゲノム、ｃＤＮＡ等の消化物を利用してもよい。
【０１２６】
アッセイおよび所望の結果に応じて、真核細胞および原核細胞を含む非常に多様な細胞種を用いてもよく、哺乳動物細胞およびヒト細胞が本発明において特別に使用法を見出す。１つの態様において、細胞を遺伝子操作してもよく、例えば、これらはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢをコードするものなどの外因性核酸を含有してもよい。いくつかの例において、本発明のＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢタンパク質を操作して、限定されるわけではないが、免疫沈降アッセイで使用するためのまたは他の使用のためのものを含む、エピトープタグなどの標識を含ませる。
【０１２７】
候補剤を細胞に添加して、そして適切な期間インキュベーションを可能にする。候補剤を受容体複合体に曝露する工程は、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢがＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を形成する前、形成する間、または形成した後であってもよい。１つの態様において、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢの会合を、候補剤の存在下および非存在下で評価する。例えば、タグ化構築物および抗体を用いることによって、免疫沈降実験を行ってもよい。次いで、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ会合に干渉する候補剤を、ＩＬ−１７リガンドファミリーメンバー（ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆなど）シグナル伝達活性に関して、例えば上述のような、ＩＬ−１７リガンドファミリーメンバーによって活性化される遺伝子の発現に関して試験することによって、試験する。
【０１２８】
いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢタンパク質は融合タンパク質である。例えば、別の異種ポリペプチドまたはアミノ酸配列に融合したアポタンパク質（すなわちキメラ分子または複合体のタンパク質部分）を含むキメラ分子を形成する方式で、受容体タンパク質を修飾してもよい。１つの態様において、こうしたキメラ分子は、抗タグ抗体が選択的に結合可能なエピトープを提供するタグポリペプチドと１以上の受容体との融合体を含む。エピトープタグは、一般的に、受容体タンパク質のアミノまたはカルボキシル末端に置かれる。タグポリペプチドに対する抗体を用いて、受容体のこうしたエピトープタグ化型の存在を検出してもよい。また、エピトープタグを提供すると、抗タグ抗体、またはエピトープタグに結合する別のタイプのアフィニティマトリックスを用いたアフィニティ精製によって、受容体ポリペプチドを容易に精製することが可能である。本明細書に概略するように、固体支持体への固定にこれらのエピトープタグを用いてもよい。
【０１２９】
多様なタグポリペプチドおよびそれぞれの抗体が当該技術分野に周知である。例には、ポリ−ヒスチジン（ポリ−ｈｉｓ）またはポリ−ヒスチジン−グリシン（ポリ−ｈｉｓ−ｇｌｙ）タグ；ｆｌｕ  ＨＡタグポリペプチドおよびその抗体１２ＣＡ５［Ｆｉｅｌｄら，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，８：２１５９−２１６５（１９８８）］；ｃ−ｍｙｃタグ、ならびにそれに対する８Ｆ９、３Ｃ７、６Ｅ１０、Ｇ４、Ｂ７および９Ｅ１０抗体［Ｅｖａｎら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，５：３６１０−３６１６（１９８５）］；ならびに単純ヘルペスウイルス糖タンパク質Ｄ（ｇＤ）タグおよびその抗体［Ｐａｂｏｒｓｋｙら，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，３（６）：５４７−５５３（１９９０）］が含まれる。他のタグポリペプチドには、ＦＬＡＧＧＴＭ−ペプチド［Ｈｏｐｐら，ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，６：１２０４−１２１０（１９８８）］；ＫＴ３エピトープペプチド［Ｍａｒｔｉｎら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５５：１９２−１９４（１９９２）］；チューブリンエピトープペプチド［Ｓｋｉｎｎｅｒら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６６：１５１６３−１５１６６（１９９１）］；およびＴ７遺伝子１０タンパク質ペプチドタグ［Ｌｕｔｚ−Ｆｒｅｙｅｒｍｕｔｈら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８７：６３９３−６３９７（１９９０）］が含まれる。
【０１３０】
多様な発現ベクターを作製してもよい。発現ベクターは、自己複製染色体外ベクター、または宿主ゲノム内に組み込まれるベクターであってもよい。一般的に、これらの発現ベクターには、金属タンパク質をコードする核酸に、機能可能であるように連結された転写および翻訳制御核酸が含まれる。用語「制御配列」は、特定の宿主生物において、機能可能であるように連結されたコード配列の発現に必要なＤＮＡ配列を指す。原核生物に適した制御配列には、例えば、プロモーター、場合によってオペレーター配列、およびリボソーム結合部位が含まれる。真核細胞は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、およびエンハンサーを利用することが知られる。
【０１３１】
いくつかの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体への結合阻害アッセイは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで行われる。例えば、アッセイ混合物（候補剤、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ）の構成要素を表面上に固定し、他の構成要素を添加する（いくつかの態様において、このうち１つを標識する）。例えば、ＩＬ−１７ＲＡまたはＩＬ−１７ＲＢを表面に付着させ、候補剤および標識ＩＬ−１７ＲＡおよび／またはＩＬ−１７ＲＢを添加する。洗浄後、標識の存在を評価する。この態様において、当該技術分野に知られるように、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢタンパク質を単離する。
【０１３２】
一般的に、当該技術分野に知られるように付着を行い、そして付着は、付着させようとする２つの物質の組成に応じるであろう。一般的に、各構成要素上の官能基を使用して、付着リンカーを利用し、これを次いで付着に用いてもよい。付着のための官能基は、アミノ基、カルボキシ基、オキソ基、ヒドロキシル基およびチオール基である。次いで、これらの官能基を、リンカーの使用を通じて、直接または間接的にのいずれかで付着させてもよい。リンカーは当該技術分野に周知であり；例えば、ホモまたはヘテロ二重官能性リンカーもまた周知である（本明細書に援用される、１９９４  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社カタログ、架橋剤に関する技術セクション、１５５−２００ページを参照されたい）。付着リンカーには、限定されるわけではないが、アルキル基（置換アルキル基、およびヘテロ原子部分を含有するアルキル基を含む）が含まれ、短鎖アルキル基、エステル、アミド、アミン、エポキシ基およびエチレングリコールおよび誘導体が含まれる。あるいは、融合パートナーを用いる；適切な融合パートナーには、他の固定構成要素が含まれ、例えばニッケルを含む表面に付着させるためのヒスチジンタグ、リンカーおよび標識を付着させるための機能的構成要素など、ならびにタンパク質性標識がある。
【０１３３】
１つの態様において、特に候補剤が固体支持体上に固定される場合、適切な融合パートナーは自己蛍光タンパク質標識である。適切なタンパク質性蛍光標識にはまた、限定されるわけではないが、レニラ属、プティロサルクス属、またはエクオレラ属種の緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）を含むＧＦＰ（Ｃｈａｌｆｉｅら，１９９４，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６３：８０２−８０５）、ＥＧＦＰ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｇｅｎｂａｎｋ寄託番号Ｕ５５７６２）、青色蛍光タンパク質（ＢＦＰ、Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．１８０１  ｄｅ  Ｍａｉｓｏｎｎｅｕｖｅ  Ｂｌｖｄ．Ｗｅｓｔ，８ｔｈ  Ｆｌｏｏｒ，Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｑｕｅｂｅｃ，Ｃａｎａｄａ  Ｈ３Ｈ  １Ｊ９；Ｓｔａｕｂｅｒ，１９９８，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ２４：４６２−４７１；Ｈｅｉｍら，１９９６，Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．６：１７８−１８２）、増進黄色蛍光タンパク質（ＥＹＦＰ、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）、ルシフェラーゼ（Ｉｃｈｉｋｉら，１９９３，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：５４０８−５４１７）、βガラクトシダーゼ（Ｎｏｌａｎら，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２６０３−２６０７）およびレニラ属（ＷＯ９２／１５６７３、ＷＯ９５／０７４６３、ＷＯ９８／１４６０５、ＷＯ９８／２６２７７、ＷＯ９９／４９０１９、米国特許第５２９２６５８号、第５４１８１５５号、第５６８３８８８号、第５７４１６６８号、第５７７７０７９号、第５８０４３８７号、第５８７４３０４号、第５８７６９９５号、第５９２５５５８号）も含まれる。上に引用する参考文献はすべて、本明細書に完全に援用される。
【０１３４】
組成物が結合可能であり、可溶性物質から容易に分離され、そしてそれ以外はスクリーニング法全体と適合可能である、不溶性支持体を任意の組成で作製してもよい。こうした支持体の表面は、固体または多孔および任意の好適な形状であってもよい。適切な支持体の例には、マイクロタイタープレート、アレイ、膜およびビーズが含まれ、そして限定されるわけではないが、ガラスおよび修飾または官能化ガラス、プラスチック（アクリル、ポリスチレン、ならびにスチレンおよび他の物質のコポリマー、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリブチレン、ポリウレタン、テフロン（登録商標）などを含む）、多糖、ナイロンまたはニトロセルロース、樹脂、シリカ、またはシリコンおよび修飾シリコンを含むシリカに基づく物質、炭素、金属、無機ガラス、プラスチック、セラミックス、および多様な他のポリマーが含まれる。いくつかの態様において、固体支持体は、光学検出を可能にし、そしてそれ自体、認識可能な蛍光を生じない。さらに、当該技術分野に知られるように、固体支持体を任意の数の物質でコーティングしてもよく、これには、デキストラン、アクリルアミド、ゼラチン、アガロース等のポリマーが含まれる。例示的な固体支持体には、シリコン、ガラス、ポリスチレンおよび他のプラスチックおよびアクリルが含まれる。マイクロタイタープレートおよびアレイが特に好適であり、これは少量の試薬および試料を用いて、多数のアッセイを同時に実行可能であるためである。試薬および本発明の方法全体と適合し、組成物の活性を維持し、そして非拡散性である限り、組成物の結合の特定の方式はさほど重大ではない。
【０１３５】
剤−ターゲット相互作用を支持する反応条件下で、候補剤をアッセイの他の構成要素と接触させる。一般的に、これは生理学的条件であろう。最適活性を促進する任意の温度でインキュベーションを行ってもよく、典型的にはこれは４〜４０℃の間である。最適活性のためにインキュベーション期間を選択するが、また、迅速ハイスループットスクリーニングを促進するため、最適化してもよい。典型的には、０．１〜１時間の間が十分であろう。一般的には、固相アッセイの場合、過剰な試薬を取り除くかまたは洗浄する。アッセイ形式を以下に論じる。
【０１３６】
多様な他の試薬をアッセイに含んでもよい。これらには、最適なアポタンパク質−剤結合を促進し、そして／または非特異的またはバックグラウンド相互作用を減少させるのに使用可能な、塩、中性タンパク質、例えばアルブミン、界面活性剤等の試薬が含まれる。また、別の方式でアッセイの効率を改善する試薬、例えばプロテアーゼ阻害剤、ヌクレアーゼ阻害剤、抗微生物剤等を用いてもよい。必要な結合を提供する、構成要素の混合物を、任意の順序で添加してもよい。
【０１３７】
１つの態様において、ハイスループットスクリーニングのため、本明細書に概略するアッセイいずれかは、ロボット系を利用してもよい。多くの系は、一般的に、９６（またはそれより多い）ウェル・マイクロタイタープレートの使用に関するが、当業者に認識されるであろうように、任意の数の異なるプレートまたは立体配置を用いてもよい。さらに、本明細書に概略するあらゆる工程を自動化してもよく；したがって、例えば、系を完全にまたは部分的に自動化してもよい。
【０１３８】
当業者に認識されるであろうように、使用可能な非常に多様な構成要素があり、これには、限定されるわけではないが、１以上のロボットアーム；マイクロプレートを位置づけるためのプレート取り扱い装置；非交差混入プレート上のウェル用に、フタを取り除きそして交換する、自動化フタ取り扱い装置；使い捨てチップを用いた、試料分配用のチップ・アセンブリー；試料分配のための洗浄可能チップ・アセンブリー；９６ウェル装填ブロック；冷却試薬ラック；マイクロタイタープレートピペット配置（場合によって冷却されている）；プレートおよびチップ用のスタッキング・タワー；ならびにコンピュータ系が含まれる。
【０１３９】
完全ロボットまたは微量流体系には、自動化された、液体、粒子、細胞および生物取り扱い装置が含まれ、スクリーニング適用のすべての工程を実行する、ハイスループットピペッティングが含まれる。これには、液体、粒子、細胞、および生物操作、例えば吸引、分配、混合、希釈、洗浄、正確な体積の移動；ピペットチップの回収および廃棄；ならびに試料を一回吸引してから多数回送達するための同一体積の反復ピペッティングが含まれる。これらの操作は交差混入がない、液体、粒子、細胞、および生物トランスファーである。この装置は、マイクロプレート試料からフィルター、膜、および／または娘プレートへの自動化複製、高密度移動、全プレート連続希釈、および高性能操作を実行する。
【０１４０】
１つの態様において、アッセイ構成要素に特異性を持つ、化学的に誘導体化された粒子、プレート、試験管、磁気粒子、または他の固相マトリックスを用いる。マイクロプレート、試験管または任意の固相マトリックスの結合表面には、非極性表面、高極性表面、共有結合を促進する修飾デキストランコーティング、抗体コーティング、融合タンパク質またはペプチドに結合するアフィニティ媒体、組換えタンパク質ＡまたはＧなどの表面固定タンパク質、ヌクレオチド樹脂またはコーティング、および他のアフィニティマトリックスが、本発明で有用である。
【０１４１】
１つの態様において、多様な体積のマルチウェルプレート、マルチチューブ、ミニチューブ、深底プレート、微量遠心管、凍結バイアル（ｃｒｙｏｖｉａｌ）、正方形ウェルプレート、フィルター、チップ、光ファイバー、ビーズ、および他の固相マトリックスまたはプラットフォームを、容量を増やすためアップグレード可能なモジュラープラットフォーム上に、適応させる。このモジュラープラットフォームには、変速軌道振盪装置、エレクトロポレーター、および供給源試料、試料および試薬希釈のための多数位置作業デッキ、アッセイプレート、試料および試薬容器、ピペットチップ、ならびに能動洗浄ステーションが含まれる。
【０１４２】
１つの態様において、制御ブロックまたはプラットフォームなどの熱交換体の温度を安定化させるために、熱サイクラーおよび熱制御系を用いて、４℃〜１００℃の試料インキュベーションの正確な温度制御を提供する。
【０１４３】
いくつかの態様において、装置には、標識およびアッセイに応じて、非常に多様な異なる検出装置であってもよい検出装置が含まれる。１つの態様において、有用な検出装置には、蛍光の多数のチャネルを持つ顕微鏡（単数または複数）；単一および二重波長終点ならびに動力学的能力を備えた、蛍光、紫外および可視分光測定検出、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）、ＳＰＲ系、発光、消光、二光子励起、および強度再分配を提供するためのプレートリーダー；データおよび画像を捕捉し、そして定量化可能な形式に転換するＣＣＤカメラ；ならびにコンピュータ・ワークステーションが含まれる。これらは、細胞、組織および生物のサイズ、増殖、およびこれらの上の特定のマーカーの表現型発現の監視；ターゲット検証；リード最適化；データ分析、マイニング、組織化、ならびに公的および私的データベースとハイスループットスクリーニングの統合を可能にする。
【０１４４】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体は、受容体の生物学的活性型であり、そして本明細書において、炎症促進性仲介因子の放出によって、リガンド−特異的活性化に応答することが示されてきている。本明細書に例示するような多様な疾患状態は、ＩＬ−１７リガンドファミリーメンバーの生理学的レベル増加と関連することが当該技術分野に知られる。１つの態様において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢ抗原結合タンパク質は、生物学的試料中で、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体の検出および前記複合体を発現する細胞または組織の同定に有用である。これは、研究コミュニティに対してかなりの価値があるであろう。
【０１４５】
本発明の抗原結合タンパク質を診断目的のために用いて、ＩＬ−１７またはＩＬ−１７ＲＡまたはＩＬ−１７ＲＢ受容体と関連する疾患および／または状態を検出するか、診断するか、または監視してもよい。本発明は、当業者に知られる古典的免疫組織学的方法を用いた、試料中のＩＬ−１７受容体の存在の検出を提供する（例えば、Ｔｉｊｓｓｅｎ，１９９３，Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ａｎｄ  Ｔｈｅｏｒｙ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ，ｖｏｌ  １５（Ｒ．Ｈ．ＢｕｒｄｏｎおよびＰ．Ｈ．ｖａｎ  Ｋｎｉｐｐｅｎｂｅｒｇ監修，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ）；Ｚｏｌａ，１９８７，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｐｐ．１４７−１５８（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｊａｌｋａｎｅｎら，１９８５，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７６−９８５；Ｊａｌｋａｎｅｎら，１９８７，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０５：３０８７−３０９６）。ＩＬ−１７受容体の検出を、ｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏで行ってもよい。
【０１４６】
本明細書に提供する診断適用には、ＩＬ−１７、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢタンパク質の発現、ならびにＩＬ−１７受容体へのリガンド（単数または複数）の結合を検出する、抗原結合タンパク質の使用が含まれる。ＩＬ−１７受容体の存在を検出するのに有用な方法の例には、酵素連結免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）およびラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）などのイムノアッセイが含まれる。上記に概略されるように、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を検出するには、同時免疫沈降の使用が非常に有用である。診断適用のため、抗原結合タンパク質を、典型的には、本明細書に定義するような検出可能標識基で標識してもよい。
【０１４７】
本発明の１つの側面は、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体を発現する単数または複数の細胞の同定を提供する。特定の態様において、抗原結合タンパク質を標識基で標識し、そしてＩＬ−１７受容体への標識抗原結合タンパク質の結合を検出する。さらなる特定の態様において、ＩＬ−１７受容体への抗原結合タンパク質の結合をｉｎ  ｖｉｖｏで検出する。さらなる特定の態様において、抗原結合タンパク質−ＩＬ−１７受容体を単離し、そして当該技術分野に知られる技術を用いて測定する。例えば、ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ，１９８８，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ（１９９１年版および定期的な補遺）；Ｊｏｈｎ  Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ監修，１９９３，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  Ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓを参照されたい。
【０１４８】
５．０  ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの作製
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの発現に適した宿主細胞には、原核生物、酵母、またはより高次の真核細胞が含まれる。細菌、真菌、酵母、および哺乳動物細胞宿主で使用するのに適したクローニングおよび発現ベクターは、例えば、Ｐｏｕｗｅｌｓら  Ｃｌｏｎｉｎｇ  Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，（１９８５）に記載される。また、本明細書に開示するＤＮＡ構築物由来のＲＮＡを用いて、細胞不含翻訳系を使用して、ＬＤＣＡＭポリペプチドを産生してもよい。
【０１４９】
原核生物には、グラム陰性またはグラム陽性生物、例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｉ）が含まれる。形質転換に適した原核宿主細胞には、例えば、大腸菌、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、ならびに、シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、ストレプトミセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、およびスタフィロコッカス属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）内の多様な他の種が含まれる。原核宿主細胞、例えば大腸菌において、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストには、原核宿主細胞において組換えポリペプチドの発現を促進する、Ｎ末端メチオニン残基が含まれてもよい。発現された組換えＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストから、Ｎ末端Ｍｅｔを切断してもよい。
【０１５０】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを、好ましくは、サッカロミセス属（例えば、Ｓ．セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ））由来などの酵母宿主細胞において発現可能である。ピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）、Ｋ．ラクティス（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ）またはクロイベロミセス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）などの酵母の他の属も使用可能である。酵母ベクターは、しばしば、２μ酵母プラスミド由来の複製起点配列、自律複製配列（ＡＲＳ）、プロモーター領域、ポリアデニル化のための配列、転写終結のための配列、および選択可能マーカー遺伝子を含有するであろう。酵母ベクターに適したプロモーター配列には、とりわけ、メタロチオネイン、３−ホスホグリセリン酸キナーゼ（Ｈｉｔｚｅｍａｎら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５５：２０７３，１９８０）、または、エノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、およびグルコキナーゼなどの他の解糖酵素（Ｈｅｓｓら，Ｊ．Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇ．７：１４９，１９６８；およびＨｏｌｌａｎｄら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．１７：４９００，１９７８）のプロモーターが含まれる。酵母発現に用いるのに適した他のベクターおよびプロモーターが、Ｈｉｔｚｅｍａｎ，ＥＰＡ−７３，６５７またはＦｌｅｅｒら，Ｇｅｎｅ，１０７：２８５−１９５（１９９１）；およびｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｅｒｇら，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，８：１３５−１３９（１９９０）にさらに記載される。別の代替物は、Ｒｕｓｓｅｌｌら（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５８：２６７４，１９８２）およびＢｅｉｅｒら（Ｎａｔｕｒｅ  ３００：７２４，１９８２）に記載されるグルコース抑制性ＡＤＨ２プロモーターである。上記酵母ベクター内に、大腸菌での選択および複製のためのｐＢＲ３２２由来のＤＮＡ配列（Ａｍｐｒ遺伝子および複製起点）を挿入することによって、酵母および大腸菌両方で複製可能なシャトルベクターを構築することも可能である。
【０１５１】
酵母α因子リーダー配列を使用して、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの分泌を導くことも可能である。α因子リーダー配列は、しばしば、プロモーター配列および構造遺伝子配列の間に挿入される。例えば、Ｋｕｒｊａｎら，Ｃｅｌｌ  ３０：９３３，１９８２；Ｂｉｔｔｅｒら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：５３３０，１９８４；米国特許第４，５４６，０８２号；およびＥＰ  ３２４，２７４を参照されたい。酵母宿主由来の組換えポリペプチドの分泌を容易にするのに適した他のリーダー配列が、当業者に知られる。３’端近傍でリーダー配列を修飾して、１以上の制限部位を含有させることも可能である。これは構造遺伝子へのリーダー配列の融合を容易にするであろう。
【０１５２】
酵母形質転換プロトコルが当業者に知られる。こうしたプロトコルの１つが、Ｈｉｎｎｅｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７５：１９２９，１９７８に記載される。Ｈｉｎｎｅｎらのプロトコルは、０．６７％酵母窒素基剤、０．５％カザミノ酸、２％グルコース、１０μｇ／ｍｌアデニンおよび２０μｇ／ｍｌウラシルからなる選択培地中で、Ｔｒｐ＋形質転換体を選択する。「リッチ」培地中の発現を誘導するため、ＡＤＨ２プロモーター配列を含有するベクターによって形質転換された酵母宿主細胞を増殖させることも可能である。リッチ培地の例は、８０μｇ／ｍｌアデニンおよび８０μｇ／ｍｌウラシルを補った、１％酵母エキス、２％ペプトン、および１％グルコースからなるものである。ＡＤＨ２プロモーターの抑制解除（ｄｅｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ）は、培地からグルコースが枯渇したとき起こる。
【０１５３】
哺乳動物または昆虫宿主細胞培養系もまた、組換えＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを発現するのに使用可能である。昆虫細胞における異種タンパク質産生のためのバキュロウイルス系が、ＬｕｃｋｏｗおよびＳｕｍｍｅｒｓ，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：４７（１９８８）に概説される。哺乳動物起源の樹立細胞株もまた、使用可能である。適切な哺乳動物宿主細胞株の例には、サル腎臓細胞のＣＯＳ−７株（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）（Ｇｌｕｚｍａｎら，Ｃｅｌｌ  ２３：１７５，１９８１）、Ｌ細胞、Ｃ１２７細胞、３Ｔ３細胞（ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １６３）、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＢＨＫ（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １０）細胞株、およびＭｃＭａｈａｎら（ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：２８２１，１９９１）に記載されるようなアフリカミドリザル（Ａｆｒｉｃａｎ  ｇｒｅｅｎ  ｍｏｎｋｅｙ）腎臓細胞株ＣＶ１（ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）由来であるＣＶ−１／ＥＢＮＡ−１細胞株が含まれる。
【０１５４】
哺乳動物宿主細胞発現ベクターのための転写および翻訳調節配列は、ウイルスゲノムより切り出されることも可能である。通常用いられるプロモーター配列およびエンハンサー配列は、ポリオーマウイルス、アデノウイルス２、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）、およびヒト・サイトメガロウイルス由来である。ＳＶ４０ウイルスゲノム由来のＤＮＡ配列、例えばＳＶ４０起点、初期および後期プロモーター、エンハンサー、スプライシング、およびポリアデニル化部位を用いて、哺乳動物宿主細胞における構造遺伝子配列の発現のための他の遺伝要素を提供することも可能である。ウイルス初期および後期プロモーターは、どちらもウイルス複製起点をも含有することも可能な断片として容易にウイルスゲノムから得られるため、特に有用である（Ｆｉｅｒｓら，Ｎａｔｕｒｅ  ２７３：１１３，１９７８）。ＳＶ４０ウイルス複製起点部位に位置するＨｉｎｄ  ＩＩＩ部位からＢｇｌ  Ｉ部位に渡る、およそ２５０ｂｐの配列が含まれていれば、より小さいかまたはより大きいＳＶ４０断片もまた使用可能である。
【０１５５】
哺乳動物宿主細胞において用いるための例示的な発現ベクターを、ＯｋａｙａｍａおよびＢｅｒｇ（Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．３：２８０，１９８３）に開示されるように構築することも可能である。Ｃ１２７ネズミ乳腺上皮細胞における哺乳動物ｃＤＮＡの安定した高レベル発現に有用な系を、実質的にＣｏｓｍａｎら（Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：９３５，１９８６）に記載されるように構築することも可能である。Ｃｏｓｍａｎら，Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：７６８，１９８４に記載される有用な高発現ベクター、ＰＭＬＳＶ  Ｎ１／Ｎ４はＡＴＣＣ  ３９８９０として寄託されている。さらなる有用な哺乳動物発現ベクターは、本明細書に援用される、ＥＰ−Ａ−０３６７５６６および米国特許出願第０７／７０１，４１５号、１９９１年５月１６日出願に記載されている。ベクターは、レトロウイルス由来であることも可能である。天然シグナル配列の代わりに、そしてイニシエーター・メチオニンに加えて、米国特許第４，９６５，１９５号に記載されるＩＬ−７のシグナル配列；Ｃｏｓｍａｎら，Ｎａｔｕｒｅ  ３１２：７６８（１９８４）に記載されるＩＬ−２受容体のシグナル配列；ＥＰ  ３６７，５６６に記載されるＩＬ−４シグナルペプチド；米国特許第４，９６８，６０７号に記載されるＩ型ＩＬ−１受容体シグナルペプチド；およびＥＰ  ４６０，８４６に記載されるＩＩ型ＩＬ−１受容体シグナルペプチドなどの異種シグナル配列を付加することも可能である。
【０１５６】
上述のような組換え発現系によって、本発明記載の単離、精製または均質タンパク質としてのＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを産生することも、あるいは天然存在細胞から精製することも可能である。
【０１５７】
ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを産生するための１つのプロセスは、少なくとも１つのＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストをコードするＤＮＡ配列を含む発現ベクターで形質転換された宿主細胞を、前記ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの発現を促進するのに十分な条件下で培養することを含む。次いで、使用した発現系に応じて、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを培地または細胞抽出物から回収する。当業者に知られるように、組換えタンパク質を精製するための方法は、使用する宿主細胞種、および組換えタンパク質が培地に分泌されるかどうかなどの要因にしたがって多様であろう。例えば、組換えタンパク質を分泌する発現系を使用する場合、商業的に入手可能なタンパク質濃縮フィルター、例えばＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外ろ過装置を用いて、培地をまず、濃縮することも可能である。濃縮工程後、濃縮物をゲルろ過媒体などの精製マトリックスに適用することも可能である。あるいは、陰イオン交換樹脂、例えばペンダント・ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基を有するマトリックスまたは支持体が使用可能である。マトリックスは、アクリルアミド、アガロース、デキストラン、セルロース、またはタンパク質精製に一般的に使用される他の種類であることも可能である。あるいは、陽イオン交換工程も使用可能である。適切な陽イオン交換体には、スルホプロピル基またはカルボキシメチル基を含む多様な不溶性マトリックスが含まれる。最後に、疎水性逆相高性能液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）媒体（例えばペンダントメチル、または他の脂肪族基を有するシリカゲル）を使用する、１以上のＲＰ−ＨＰＬＣ工程を使用して、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストをさらに精製することも可能である。多様な組み合わせの前述の精製工程のいくつかまたはすべてが周知であり、そしてこれを使用して、実質的に均質な組換えタンパク質を提供することも可能である。
【０１５８】
ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢの両方、またはＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢヘテロマー受容体複合体タンパク質を含むアフィニティーカラムを利用して、発現されたＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストをアフィニティ精製することも可能である。慣用的な技術を用いて、例えば利用するアフィニティマトリックスに応じて、高塩溶出緩衝液中で、そしてその後、使用のためより低塩の緩衝液中に透析することによって、またはｐＨもしくは他の構成要素を変化させることによって、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストをアフィニティーカラムから取り除くことも可能である。あるいは、アフィニティーカラムは、ＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストに結合する抗体を含むことも可能である。
【０１５９】
細菌培養中で産生された組換えタンパク質を、まず宿主細胞を破壊して、遠心分離し、不溶性ポリペプチドの場合は細胞ペレットから抽出し、また可溶性ポリペプチドの場合は上清液から抽出して、その後、１以上の濃縮、塩析、イオン交換、アフィニティー精製またはサイズ排除クロマトグラフィー工程を続けることによって、単離することも可能である。最後に、最終精製工程のため、ＲＰ−ＨＰＬＣを使用することも可能である。凍結融解サイクリング、超音波、機械的破壊、または細胞溶解剤の使用を含む、好適な方法いずれかによって、微生物細胞を破壊することも可能である。
【０１６０】
精製を単純化するため、分泌ポリペプチドとしてＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストを発現する形質転換酵母宿主細胞を使用してもよい。酵母宿主細胞発酵から分泌される組換えポリペプチドは、Ｕｒｄａｌら，１９８４，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇ．２９６：１７１に開示されるものと類似の方法によって精製可能である。Ｕｒｄａｌらは、分取用ＨＰＬＣカラム上での組換えヒトＩＬ−２精製のための、２つの連続する逆相ＨＰＬＣ工程を記載する。
【０１６１】
本明細書本文内に引用されるすべての参考文献は、その全体が完全に本明細書に援用される。実際の実施例および予言的実施例の両方の以下の実施例を、本発明の特定の態様または特徴を例示する目的のために提供し、そして該実施例は、本発明の範囲を限定しない。
【実施例】
【０１６２】
ヒトＩＬ−１７ＲＤ．ＨＩＳ、ヤギ抗ｈＩＬ−１７ＲＡポリクローナル抗体、ヤギ抗ｈＩＬ−１７ＲＢポリクローナル抗体、ヤギ抗ｈＩＬ−１７ＲＣポリクローナル抗体、およびすべてのＥＬＩＳＡキットをＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（ミネソタ州ミネアポリス）から得て、そして製造者の説明書にしたがって用いた。ネズミＩＬ−１３をＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ（カリフォルニア州カールスバッド）から得た。ネズミ血清アルブミン（ａｌｂｕｍｅｎ）（ＭＳＡ）をＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から得た。ヒトおよびマウスＩＬ−２５、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢに対するモノクローナル抗体を、実質的にＹａｏら（Ｙａｏら，１９９５，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３：８１１−８２１；Ｙａｏら，１９９５，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：５４８３−５４８６；Ｙａｏ，１９９７，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ９：７９４−８００）に記載されるように生成した。ヒトおよびマウスＩＬ−１７ＲＡをコードするｃＤＮＡが先に記載されてきている（３つのＹａｏ参考文献、上記を参照されたい）。ヒトおよびマウスＩＬ−１７ＲＢは、先に記載されたものと同一のオープンリーディングフレームをコードする（Ｔｉａｎら，２０００，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  １９（１７）：２０９８−２１０９）。ネズミＩＬ−２５をコードするｃＤＮＡが先に記載されてきている（Ｈｕｒｓｔら，２００２，Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９（１）：４４３−４５３）。ネズミＩＬ−２５は、記載されるように、大腸菌中で発現され、そして精製されてきている（Ｈｕｒｓｔら、上記）。Ｙａｏら，１９９５，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ（上記）に実質的に記載されるように、ヒトＩＬ−１７ＲＡの細胞外領域を、ポリＨＩＳまたはヒトＦｃ  ＩｇＧ１のいずれかに融合させ（それぞれ、ＩＬ−１７ＲＡ：ＨＩＳまたはＩＬ−１７ＲＡ：Ｆｃ）；ヒトＩＬ−ＲＢの細胞外領域を、ポリＨＩＳ（ＩＬ−１７ＲＢ．ＨＩＳ）またはヒトＦｃ  ＩｇＧ１（ＩＬ−１７ＲＢ．Ｆｃ）いずれかに融合させた。いくつかの実験において、商業的に入手可能なネズミおよびヒトＩＬ−２５、ＩＬ−１７ＲＡ  Ｆｃ、およびＩＬ−１７ＲＢ  Ｆｃを用いた（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）。
【０１６３】
実施例１
本実施例は、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＩＬ−２５に反応するためにＩＬ−１７ＲＢが必要であることを立証する。当該技術分野に知られる方法を用いて、ＩＬ−１７ＲＢ−／−マウスを生成した。簡潔には、ネズミＩＬ−１７ＲＢのエクソン３を含有するゲノム配列を、ＰＧＫｎｅｏカセットで置換することによって、遺伝子ターゲティングベクターを構築した。チミジンキナーゼカセット（ＭＣ−ＴＫ）をベクターの５’端内に挿入した。１２９由来胚性幹（ＥＳ）細胞にターゲティングベクターをエレクトロポレーションし、そして記載されるように（Ｋｏｌｌｓ，Ｊら  １９９４．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．９１：２１５−２１９）、Ｇ４１８およびガンシクロビルの存在下で選択した。ＰＣＲおよびゲノムサザンブロット分析の組み合わせによって、ＩＬ−１７ＲＢ中にターゲティングされた突然変異を所持するＥＳクローンを同定し、そしてＳｗｉｓｓ  Ｂｌａｃｋ胚盤胞内に注入した。雄のキメラをＳｗｉｓｓ  Ｂｌａｃｋの雌と交雑させて、ＩＬ−１７ＲＢ突然変異に関してヘテロ接合性であるマウスを生じ、これを続いて交雑させて、ＩＬ−１７ＲＢ欠損マウスを生成した。Ｍａｒｋｅｒ−Ａｓｓｉｓｔｅｄ  Ａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ  Ｂａｃｋｃｒｏｓｓｉｎｇ（ＭＡＸ−ＢＡＸＳＭ）技術（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、マサチューセッツ州ウィルミントン）を用いて、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに５回連続して戻し交配することによって、これらのマウスをＣ５７ＢＬ／６バックグラウンドに移した。９９．５％  Ｃ５７ＢＬ／６であると同定されたマウスを用いて、繁殖コロニーを確立し、実験使用のためのマウスを産生した。
【０１６４】
実質的にＨｕｒｓｔら（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６９：４４３，２００２）に記載されるように、対照Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ＷＴ）またはＩＬ−１７ＲＢ−／−マウス（ＫＯ）に、５０マイクロＬ  ＭＳＡ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス；１０マイクログラム／ｍＬ）またはマウスＩＬ−２５（Ａｍｇｅｎ；１０マイクログラム／ｍＬ）を、１日１回４日間、鼻内（ＩＮ）投与した。第５日、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）および肺組織をマウスから採取し、そして分析した。
【０１６５】
２．５％アバチン（２−２−２−トリブロモエタノール、Ｓｉｇｍａ）の３００マイクロＬ  ＩＰ注射で麻酔したマウスに挿管し、そして肺に６００マイクロＬ体積の氷冷したダルベッコのＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）を２回フラッシュすることによって、気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を行った。１０００ｒｐｍで１０分間遠心分離することによって、ＢＡＬ液細胞をペレットにし、そして総白血球細胞性に関して計数しそして分析するために、ならびにＡＤＶＩＡ（登録商標）１２０血液学装置（血液学標本をプロセシングしそして分析するためのベンチトップ分析装置；Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、ニューヨーク州タリータウン）を用いて、多様な細胞種の数の変化に関して計数しそして分析するために、ＰＢＳ＋５％ウシ胎児血清（ＦＢＳ；Ｈｙｃｌｏｎｅ；ユタ州ローガン）に再懸濁した。ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；検出限界：ＩＬ−５、３１ｐｇ／ｍＬ；ＩＬ−１３、６２ｐｇ／ｍＬ）によって、ＩＬ−５およびＩＬ−１３タンパク質濃度に関してもまた、ＢＡＬＦを試験した。
【０１６６】
実質的に先に記載されるように（Ｈａｒｔｅｌ，Ｃ．ら，１９９９  Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４９（６）：６４９−６５４）、Ａｓｓａｙｓ−Ｏｎ−Ｄｅｍａｎｄ  ＴａｑＭａｎ（登録商標）プライマー（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、カリフォルニア州フォスターシティー）を用いて、ＴａｑＭａｎ（登録商標）（迅速な、蛍光体に基づくリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応法）発現によって、肺組織中の多様な炎症仲介因子のｍＲＮＡレベルを決定した。ＡＢＩ  Ｐｒｉｓｍ  ７９００ＨＴ  Ｆａｓｔ  ＲＴ−ＰＣＲシステム（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）上で、ＴａｑＭａｎ（登録商標）分析を行った。Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ  ２．２．３（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）によって、各治療群におけるベータ−アクチン、ＨＰＲＴ、またはＧＡＰＤＨ遺伝子発現に対する各遺伝子の相対的発現を決定した。２つの別個の実験の結果を以下の表１〜４に示す。
【０１６７】
表１：ＩＬ−２５を鼻内投与したＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴマウスにおける、ＢＡＬＦ細胞性、ＩＬ−５濃度、およびＩＬ−１３濃度の分析
【０１６８】
【表１】
2014122231.tif 000002
【０１６９】
Ｎ＝５／群；示す値は（平均±ＳＤ）であり；ＩＬ−５  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、３１ｐｇ／ｍＬの値を割り当てた。
表２：ＩＮ  ＩＬ−２５曝露に反応した、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴマウス肺における、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、およびＩＬ−１７ＲＡ  ｍＲＮＡの分析
【０１７０】
【表２】
2014122231.tif 000003
【０１７１】
Ｎ＝５／群；示す値は（平均±ＳＤ）であり；示すＩＬ−５およびＩＬ−１３値は、β−アクチンに比較した遺伝子発現（２Ｅ−ΔＣｔ）（平均±ＳＤ）である。示すＩＬ−１７ＲＡ値は、ＨＰＲＴに比較した遺伝子発現（２Ｅ−ΔＣｔ）（平均±ＳＤ）である。Ｎ／Ａ＝未分析。
【０１７２】
実質的に同じ方式で、マウス・インターロイキン−１３曝露アームを付加して（ＩＬ−１３；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  ＢｉｏｓｏｕｒｃｅＴＭ、カリフォルニア州カールスバッド；１０マイクログラム／ｍＬで５０マイクロＬを１日１回４日間投与）、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯマウスをＩＮ  ＩＬ−２５に曝露する実験を反復し；結果を以下の表３〜４に示す。
【０１７３】
表３：ＩＮ  ＩＬ−１３またはＩＬ−２５曝露に反応した、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴマウスにおける、ＢＡＬＦ細胞性の分析
【０１７４】
【表３】
2014122231.tif 000004
【０１７５】
Ｎ＝５／群；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表４：ＩＮ  ＩＬ−２５曝露に反応した、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴマウス肺における、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、エオタキシン、ＭＣＰ−１、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１７Ａ、およびＩＬ−１７ＲＡ  ｍＲＮＡの分析
【０１７６】
【表４】
2014122231.tif 000005
【０１７７】
Ｎ＝４、個々のマウス由来の肺；示す値は、ＨＰＲＴに比較した遺伝子発現（２Ｅ−ΔＣｔ）（平均±ＳＤ）である。
肺組織病理研究のため、マウスをＣＯ２窒息によって安楽死させた。肺を採取し、１０％中性緩衝ホルマリン（ＮＢＦ）中で固定し、プロセシングし、６ミクロンで切片を作製し、そして実質的に記載されるように（Ｈａｒｋｅｍａ，Ｊ．Ｒ．およびＪ．Ａ．Ｈｏｔｃｈｋｉｓｓ，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１４１：３０７；１９９２）、ヘマトキシリンおよびエオジン（Ｈ＆Ｅ）または過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色で染色し；組織切片を分析する際に用いる、４つの異なるカテゴリーに関する類別スケールを以下に示す。各群の平均総炎症スコアを表５に報告する。
【０１７８】
表５：ＩＮ  ＩＬ−２５に曝露したＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴマウスにおける、肺組織炎症および杯細胞過形成の組織学的分析
【０１７９】
【表５】
2014122231.tif 000006
【０１８０】
報告される平均スコア±ＳＤ。
杯細胞過形成（ＰＡＳ染色）
０＝正常
１＝最小限、  太い気管支鞘中の杯細胞過形成
２＝軽度、太いおよび中程度の気管支鞘中の杯細胞過形成
３＝中程度、太い、中程度、およびいくつかの細い気管支鞘中の杯細胞過形成
４＝顕著な、すべての気道における杯細胞過形成
気管支周囲炎症
０＝正常
１＝最小限の好酸球／マクロファージ／リンパ球カフ（不連続から単層）、浮腫なし
２＝軽度の好酸球／マクロファージ／リンパ球カフ（２〜５細胞）；最小限の浮腫、線維増殖
３＝中程度の好酸球／マクロファージ／リンパ球カフ（５〜１０細胞）；浮腫および線維増殖が存在する
４＝顕著な好酸球／マクロファージ／リンパ球カフ（＞１０細胞）；顕著な浮腫および線維増殖
気管支肺炎
０＝正常
１＝最小限、マクロファージ／好中球／好酸球／ＭＮＧＣの病巣集積
２＝軽度、マクロファージ／好中球／好酸球／ＭＮＧＣの病巣集積
３＝中程度、マクロファージ／好中球／好酸球／ＭＮＧＣの多病巣集積
４＝顕著な、マクロファージ／好中球／好酸球／ＭＮＧＣの多病巣集積
肺血管周囲炎／血管炎
０＝正常
１＝最小限の好酸球／リンパ球／マクロファージカフ（不連続から単層）、内膜浸潤／過形成なし
２＝軽度の好酸球／リンパ球／マクロファージカフ（２〜５細胞）；病巣好酸球内膜浸潤および内皮過形成
３＝中程度の好酸球／リンパ球／マクロファージカフ（５〜１０細胞）；病巣内の大規模な内膜好酸球浸潤、および少数のＭＮＧＣを伴う内皮過形成
４＝顕著な好酸球／リンパ球／マクロファージカフ（＞１０細胞）；血管壁がときに消失し、そしてＭＮＧＣが顕著；目立たない血管炎が存在する野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいて、ＩＬ−２５の鼻内投与の効果には、（１）ＢＡＬＦ好酸球、好中球、リンパ球、およびマクロファージ数増加を含む、ＢＡＬＦ白血球総数増加、ならびにＢＡＬＦ  ＩＬ−５およびＩＬ−１３濃度増加（表１および３）、（２）ＩＬ−５、ＩＬ−１３、エオタキシン、およびＭＣＰ−１の肺ｍＲＮＡレベル増加（表２および４）、ならびに（３）太いおよび中程度の気道中の杯細胞過形成、ならびに動脈および静脈両方に関与するが肺胞毛細血管に関与しない頑強な血管周囲／血管炎症（表５）が含まれた。ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯマウスにＩＬ−２５を鼻内投与した際には、これらの効果のいずれも、観察されなかった（表１〜５）。ＩＬ−１７ＲＡ  ｍＲＮＡは、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯマウスに存在する（表２および４）。これらのデータは、今日までに測定されてきている肺中のＩＬ−２５活性すべてに、ＩＬ−１７ＲＢが必要であることを立証する。
【０１８１】
実施例２
本実施例は、ｉｎ  ｖｉｖｏでＩＬ−２５に反応するためにＩＬ−１７ＲＡが必要であることを立証する。Ｃ５７ＢＬ／６  ＩＬ−１７ＲＡ−／−マウスの生成が先に記載されている（Ｙｅ，Ｐ．ら，２００１  Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９４：５１９−５２９）。対照Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ＷＴ）またはＩＬ−１７ＲＡ−／−マウス（ＫＯ）を、ＩＬ−１７ＲＢ−／−マウスに関して実施例１に実質的に記載するように治療した；結果を以下の表６および７に示す。
【０１８２】
表６：ＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯ対Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴマウスにおけるＢＡＬＦの分析：細胞性およびタンパク質
【０１８３】
【表６】
2014122231.tif 000007
【０１８４】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。Ｎ／Ａ＝未試験。ＩＬ−５  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、３１ｐｇ／ｍＬの検出下限値を割り当てた。
表７：ＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯ対Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴマウスにおける肺組織の分析：ｍＲＮＡレベル
【０１８５】
【表７】
2014122231.tif 000008
【０１８６】
Ｎ＝４；示す値は、β−アクチンに比較した遺伝子発現（２Ｅ−ΔＣｔ）（平均±ＳＤ）である。本実験において、ＩＬ−１３治療マウス由来の肺組織は分析しなかった。
実質的に実施例１に記載するように、肺組織の切片を作製し、組織学的分析用に調製し、染色し、そして分析した。各群の平均総炎症スコアを表８に報告する。
【０１８７】
表８：ＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯ対ＷＴマウスにおける肺組織の組織学的分析
【０１８８】
【表８】
2014122231.tif 000009
【０１８９】
Ｎ＝４である、ＭＳＡで治療したＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯマウスを除いて、すべての群に関してＮ＝５。報告される平均スコア±ＳＤ。
実質的に同じ方式で、実験を反復した；結果を以下の表９および１０に示す。本実験では、肺の組織学的分析は行わなかった。
【０１９０】
表９：ＫＯ対ＷＴマウスにおけるＢＡＬＦの分析
【０１９１】
【表９】
2014122231.tif 000010
【０１９２】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表１０：ＫＯ対ＷＴマウスにおける肺組織の分析：ｍＲＮＡレベル
【０１９３】
【表１０】
2014122231.tif 000011
【０１９４】
Ｎ＝４；示す値は、ＧＡＰＤＨに比較した遺伝子発現（２Ｅ−ΔＣｔ）（平均±ＳＤ）である。
野生型Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいて、ＩＬ−２５のＩＮ投与の効果には：（１）ＢＡＬＦ好酸球、好中球、リンパ球、およびマクロファージ数増加を含む、ＢＡＬＦ白血球総数増加、ならびにＢＡＬＦ  ＩＬ−５およびＩＬ−１３濃度増加（表１および４）、（２）太いおよび中程度の気道中の杯細胞過形成、ならびに動脈および静脈両方に関与するが肺胞毛細血管に関与しない頑強な血管周囲／血管炎症（表３）、ならびに（３）ＩＬ−５、ＩＬ−１３、エオタキシン、ＭＣＰ−１、およびＩＬ−１７ＲＢの肺ｍＲＮＡレベル増加（表２および５）が含まれた。ＩＬ−１７ＲＢ  ｍＲＮＡがＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯマウスに存在するにもかかわらず、ＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯマウスにＩＬ−２５を鼻内投与した際には、これらの効果のいずれも、観察されなかった（表１〜５）。これらのデータは、肺中のＩＬ−２５活性に、ＩＬ−１７ＲＡが必要であることを立証する。
【０１９５】
実施例３
本実施例は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで、ＩＬ−２５に反応するためにはＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢが必要であることを立証する。脾臓細胞の生成は、先に記載されてきている（Ｈａｍｉｌｔｏｎら，１９７８，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．６２（６）：１３０３−１２）。簡潔には、Ｃ５７ＢＬ／６  ＷＴ、Ｃ５７ＢＬ／６  ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯ、およびＣ５７ＢＬ／６  ＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯマウスから個々の脾臓を無菌的に取り除き、そしてＲＰＭＩ  １６４０（Ｇｉｂｃｏ−Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州カールスバッド）中の０．４ｍｇ／ｍＬコラゲナーゼＤ（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，インディアナ州インディアナポリス）および０．１％ＤＮＡｓｅ−Ｉ（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）で処理して、単細胞懸濁物を生成した。単独、あるいは１マイクログラム／ｍＬのコンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、または示す最終濃度のＩＬ−２５（Ａｍｇｅｎ）を添加した、完全ＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ−Ｉｎｖｉｔｒｏｖｇｅｎ）中、２．０ｘ１０７細胞／ｍｌで、脾臓細胞を培養した。５％ＣＯ２加湿インキュベーター中、細胞を３７℃で７２時間培養した。ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）によって、ＩＬ−５およびＩＬ−１３濃度に関して、上清を調べた。異腹のＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯ、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴ動物を用いて、各遺伝子型に関して、脾臓細胞アッセイを２回反復した；２つの別個の実験由来のデータを以下に示す（表１１〜１４）。
【０１９６】
表１１：ＩＬ−２５で刺激したＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯおよびＷＴ脾臓細胞によるＩＬ−５およびＩＬ−１３産生
【０１９７】
【表１１】
2014122231.tif 000012
【０１９８】
Ｎ＝２の個々の脾臓；示す値は（平均±ＳＤ）である。ＩＬ−５  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、３１ｐｇ／ｍＬの値を割り当てた。ＩＬ−１３  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、６２ｐｇ／ｍｌの値を割り当てた。
【０１９９】
表１２：ＩＬ−２５で刺激したＷＴおよびＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯ脾臓細胞によるＩＬ−５およびＩＬ−１３産生
【０２００】
【表１２】
2014122231.tif 000013
【０２０１】
表１３：ＩＬ−２５で刺激したＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴ脾臓細胞によるＩＬ−５およびＩＬ−１３産生
【０２０２】
【表１３】
2014122231.tif 000014
【０２０３】
Ｎ＝３の個々の脾臓；示す値は（平均±ＳＤ）であり；ＩＬ−５  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、３１ｐｇ／ｍＬの値を割り当てた。ＩＬ−１３  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、６２ｐｇ／ｍＬの値を割り当てた。
【０２０４】
表１４：ＩＬ−２５で刺激したＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯおよびＷＴ脾臓細胞によるＩＬ−５およびＩＬ−１３産生
【０２０５】
【表１４】
2014122231.tif 000015
【０２０６】
Ｎ＝３の個々の脾臓；示す値は（平均±ＳＤ）であり；ＩＬ−５  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、３１ｐｇ／ｍＬの値を割り当てた。ＩＬ−１３  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、６２ｐｇ／ｍｌの値を割り当てた。
【０２０７】
ＩＬ−２５刺激は、培養野生型Ｃ５７ＢＬ／６脾臓細胞によるＩＬ−５およびＩＬ−１３の産生を誘導した。このサイトカイン産生は、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯまたはＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯ脾臓細胞いずれかのＩＬ−２５刺激によっては誘導されなかった（表１１〜１４）。脾臓細胞活性化の陽性対照であるＣｏｎＡは、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯ脾臓細胞がＩＬ−１３を産生するように誘導し、そしてＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯ脾臓細胞がＩＬ−５およびＩＬ−１３を産生するように誘導した。ＣｏｎＡ刺激は、１つの実験では、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯ脾臓細胞からのＩＬ−５産生を誘導しなかったが、第二の実験では、ＩＬ−１７ＲＢ  ＫＯ脾臓細胞からのＩＬ−５産生を誘導した。これらのｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞培養データは、ＩＬ−１７ＲＢおよびＩＬ−１７ＲＡの両方がＩＬ−２５シグナル伝達に必要であることのさらなる支持を提供する。
【０２０８】
実施例４
本実施例は、抗ＩＬ−１７ＲＢ−Ｍ７３５および抗ＩＬ−２５−Ｍ８１９抗体がｉｎ  ｖｉｔｒｏでＩＬ−２５反応を阻害する能力を性質決定する。未感作（ｎａｉｖｅ）ＢＡＬＢ／Ｃマウス由来の脾臓を用いて、脾臓細胞の単細胞懸濁物を調製し、そして完全ＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏ−Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州カールスバッド）中、４ｘ１０７細胞／ｍＬに希釈した。以下の条件で、細胞（１００マイクロＬ）を９６ウェルプレートに添加して４ｘ１０６細胞／ウェルの最終濃度にした：
培地のみ  １０ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−２５（刺激対照）
１０ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−２５＋１００ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−１７ＲＢ．ｍｕＦｃ（遮断対照）
１０ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−２５＋４６３、１５４、５１、１７、５．７、１．９、０．６４、０．２１、０．０７、０．０２３、０．００７、０．００３ｎｇ／ｍｌ抗ｍｕＩＬ−１７ＲＢ  Ｍ７３５
１０ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−２５＋１０００、１００、１０、１．０または０．１ｎｇ／ｍＬ抗ｍｕＩＬ−２５  Ｍ８１９。
【０２０９】
各試料が２つの未感作ＢＡＬＢ／ｃマウス脾臓由来の脾臓細胞からなる、３つの別個の生物学的試料を、上に列挙する各条件に関して試験し、そして３つの別個の実験において、これを３回反復した。培養を３７℃および１０％ＣＯ２で７２時間インキュベーションし、この時点で上清を採取し、そしてＥＬＩＳＡによってＩＬ−５濃度に関してアッセイした。Ｍ７３５およびＭ８１９はどちらも、ＩＬ−２５が誘導するマウス脾臓細胞によるＩＬ−５の分泌を阻害した；３つの別個の脾臓細胞実験における各抗体に関する、ＩＬ−２５が誘導する培養ＢＡＬＢ／ｃ脾臓細胞によるＩＬ−５産生の阻害に関して計算されるＩＣ５０値を以下の表１５〜１６に示す。
【０２１０】
表１５：抗ＩＬ−１７ＲＢ−Ｍ７３５に関するＩＣ５０
【０２１１】
【表１５】
2014122231.tif 000016
【０２１２】
表１６：抗ＩＬ−２５  Ｍ８１９に関するＩＣ５０
【０２１３】
【表１６】
2014122231.tif 000017
【０２１４】
ＩＬ−２５が誘導するＩＬ−５産生は、抗ＩＬ−１７ＲＢ  Ｍ７３５および抗ＩＬ−２５−Ｍ８１９の両方によって阻害された。これらのデータは、ＩＬ−１７ＲＢが脾臓細胞におけるＩＬ−２５シグナル伝達に必要であることのさらなる支持を提供する。
【０２１５】
実施例５
本実施例は、多様な抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体がｉｎ  ｖｉｔｒｏでＩＬ−２５反応を阻害する能力を性質決定する。実質的に実施例４に関して上述するように、脾臓細胞の単細胞懸濁物を調製した。細胞（１００マイクロＬ）を９６ウェルプレートに添加して、以下の条件で４ｘ１０６細胞／ウェルの最終濃度にした：
培地のみ  １０ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−２５（刺激対照）
１０ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−２５＋１００ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−１７ＲＢ．ｍｕＦｃ（遮断対照）  １０ｎｇ／ｍＬ  ｍｕＩＬ−２５＋１０００、１００、１０、１．０または０．１ｎｇ／ｍＬいずれかの抗ｍｕＩＬ−１７ＲＡモノクローナル抗体。
【０２１６】
各試料が２匹のマウス由来の脾臓細胞からなる、３つの別個の生物学的試料を、各条件に関して試験した。培養を３７℃および１０％ＣＯ２で７２時間インキュベーションし、この時点で上清を採取し、そしてＥＬＩＳＡによってＩＬ−５濃度に関してアッセイした。一団の８つの異なるラット抗マウスＩＬ−１７ＲＡモノクローナル抗体を試験した。これらのいずれも、ＩＬ−２５が誘導するマウス脾臓細胞によるＩＬ−５分泌を有意には阻害しなかった。
【０２１７】
この脾臓細胞アッセイにおいて、これらのラット抗マウス抗体に加えて、１つのマウス抗マウスＩＬ−１７ＲＡモノクローナル抗体、Ｍ７５１を２回評価した。Ｍ７５１は、ＩＬ−２５が誘導するマウス脾臓細胞によるＩＬ−５分泌を阻害した。２つの別個の脾臓細胞実験において計算される抗ｍＩＬ−１７ＲＡ  Ｍ７５１に関するＩＣ５０を以下の表１７に示す。抗ＩＬ−１７ＲＡ−Ｍ７５１は、したがって、この脾臓細胞アッセイにおいて、ＩＬ−２５が誘導するＩＬ−５産生の最適な抗ＩＬ−１７ＲＡ阻害剤であるが、抗ＩＬ−１７ＲＢ−Ｍ７３５に比較すると、同程度に強力な阻害剤ではなかった。
【０２１８】
表１７：抗ＩＬ−１７ＲＡ−Ｍ７５１に関するＩＣ５０
【０２１９】
【表１７】
2014122231.tif 000018
【０２２０】
実施例６
本実施例は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏバイオアッセイ（先に記載する）においてＩＬ−２５活性を阻害した、ＩＬ−１７ＲＡに対する抗体、Ｍ７５１を用いた、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＬ−２５反応の阻害を立証する。ＢＡＬＢ／ｃマウスにネズミ血清アルブミン（ａｌｂｕｍｅｎ）（ＭＳＡ；Ｓｉｇｍａ、１０μｇ／ｍＬ）またはマウスＩＬ−２５（Ａｍｇｅｎ、ＴＯ；１０μｇ／ｍＬ）を、１日１回４日間、鼻内投与した。第１〜４日、ＭＳＡまたはＩＬ−２５の鼻内注入の４時間前に、マウスに２００マイクログラムの中和抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体（Ｍ７５１）、中和抗ＩＬ−１７Ａ抗体（Ｍ２１０）、またはアイソタイプ対照抗体（ネズミＦｃ；Ａｍｇｅｎ）のいずれかを腹腔内注射した。第５日、先に記載するように、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）および肺組織を採取し、そして分析した。２つの別個の実験の結果を、以下の表１８〜２１に示す。
【０２２１】
表１８：マウスＩＬ−１７ＲＡに対する遮断抗体Ｍ７５１の存在下または非存在下で、ＩＮ  ＩＬ−２５で治療したＢＡＬＢ／ｃマウスにおける、ＢＡＬＦ細胞性、ＩＬ−５、およびＩＬ−１３濃度の分析−実験１
【０２２２】
【表１８】
2014122231.tif 000019
【０２２３】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
ＩＬ−５  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、３１ｐｇ／ｍＬの値を割り当てた。ＩＬ−１３  ＥＬＩＳＡの検出範囲より低い試料には、６２ｐｇ／ｍＬの値を割り当てた。
【０２２４】
表１９：マウスＩＬ−１７ＲＡに対する遮断抗体Ｍ７５１の存在下または非存在下で、ＩＮ  ＩＬ−２５で治療したＢＡＬＢ／ｃマウスにおける、ＢＡＬＦ細胞性、ＩＬ−５、およびＩＬ−１３濃度の分析−実験２
【０２２５】
【表１９】
2014122231.tif 000020
【０２２６】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表２０：マウスＩＬ−１７ＲＡに対する遮断抗体Ｍ７５１の存在下または非存在下で、ＩＮ  ＩＬ−２５に曝露したマウス由来の肺組織における、ＩＬ−１３、ＩＬ−５、ＩＬ−１７ＲＢ、エオタキシン、およびＭＣＰ−１  ｍＲＮＡの分析−実験１
【０２２７】
【表２０】
2014122231.tif 000021
【０２２８】
Ｎ＝４；示す値は、ＧＡＰＤＨに比較した遺伝子発現（２Ｅ−ΔＣｔ）（平均±ＳＤ）である。
表２１：マウスＩＬ−１７ＲＡに対する遮断抗体Ｍ７５１の存在下または非存在下で、ＩＮ  ＩＬ−２５に曝露したマウス由来の肺組織における、ＩＬ−１３、ＩＬ−５、ＩＬ−１７ＲＢ、エオタキシン、およびＭＣＰ−１  ｍＲＮＡの分析−実験２
【０２２９】
【表２１】
2014122231.tif 000022
【０２３０】
Ｎ＝４；示す値は、ＧＡＰＤＨに比較した遺伝子発現（２Ｅ−ΔＣｔ）（平均±ＳＤ）である；Ｎ／Ｄ＝未測定
抗ＩＬ−１７ＲＡ  ｍａｂ  Ｍ７５１での治療は、ＩＬ−２５が誘導するＢＡＬＦ細胞性、ならびにＩＬ−２５が誘導するＢＡＬＦ  ＩＬ−５およびＩＬ−１３濃度、ならびに肺転写物誘導を阻害した。対照的に、抗ＩＬ−１７Ａ  ｍａｂ  Ｍ２１０は、ＩＬ−２５が誘導するＢＡＬＦ細胞性に有意には影響を及ぼさなかった（しかし、データによって、ＩＬ−２５が誘導するＢＡＬＦ好中球レベルに対するこの抗体のありうる効果が示唆される）。これらのデータは、ＩＬ−１７ＲＡ  ＫＯマウスにおいて先に記載されるものとともに、ＩＬ−２５がＢＡＬＦ細胞性を誘導しそしてＩＬ−５およびＩＬ−１３濃度を増加させるのに、ＩＬ−１７ＲＡが必要であることを示す。ＩＬ−２５が誘導するＢＡＬＦ内への好中球流入を、抗ＩＬ−１７Ａ治療が有意に減少させることによって示されるような、ＩＬ−２５が誘導する好中球補充を例外として、ＩＬ−２５のｉｎ  ｖｉｖｏ効果は、ＩＬ−１７Ａを通じて仲介されないようである。
【０２３１】
実施例７
本実施例は、ＩＬ−２５による気道過敏性（ＡＨＲ）の誘導、ならびにそれに対する抗ＩＬ−１７ＲＡ−Ｍ７５１および抗ＩＬ−１７Ａ−Ｍ２１０の効果を例示する。ＢＡＬＢ／ｃマウスにＭＳＡまたはマウスＩＬ−２５を、実質的に先に記載するように、４日間の期間に渡って毎日ＩＮ投与した。第５日、全身プレチスモグラフ（Ｂｕｘｃｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ、ニューヨーク州トロイ）を用いて、意識があり拘束されていないマウスにおいて、メタコリン（ＭＣｈ）曝露に対する気道過敏性（ＡＨＲ）をまず非侵襲的に測定した。プレチスモグラフボックス中の、ＭＣｈ曝露濃度増加に反応した圧力波形に基づいて、エンハンスドポーズ（ＰＥＮＨ）を測定し、そしてＭＣｈＳ曝露前に行ったベースライン読み取り値に比較した変化パーセントとして報告する。ＰＣ２００は、ベースラインを超えてＰＥＮＨ２００％を誘導するのに必要なＭＣｈ濃度であり、そして本明細書において、以下の表２２および２３にこれを報告する。
【０２３２】
表２２：マウスＩＬ−１７ＲＡまたはＩＬ−１７Ａに対する遮断抗体の存在下または非存在下で、ＩＮ  ＩＬ−２５で治療したＢＡＬＢ／ｃマウスのＭＣｈ曝露に対するＡＨＲ
【０２３３】
【表２２】
2014122231.tif 000023
【０２３４】
Ｎ＝５／群；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表２３：マウスＩＬ−１７ＲＡに対する遮断抗体Ｍ７５１の存在下または非存在下で、ＩＮ  ＩＬ−２５で治療したＢＡＬＢ／ｃマウスのメタコリン曝露に対するＡＨＲ
【０２３５】
【表２３】
2014122231.tif 000024
【０２３６】
Ｎ＝４／群；示す値は（平均±ＳＤ）である。
また、麻酔し、そして機械的に換気したマウスに、ＩＬ−２５を鼻内投与し、そして抗ＩＬ−１７ＲＡ−Ｍ７５１で治療して、気道過敏性を測定した。実質的に先に記載するように、ＢＡＬＢ／ｃマウスにＭＳＡまたはマウスＩＬ−２５を４日間の期間に渡って毎日ＩＮ投与した。第５日、マウスを塩酸キシラジン（２０ｍｇ／ｋｇ腹腔内）で鎮静し、そしてペントバルビタールナトリウム（１００ｍｇ／ｋｇ腹腔内）で麻酔した。気管に金属針でカニューレを挿管し、そしてマウスを小型動物換気装置（ｆｌｅｘｉＶｅｎｔ、ＳＣＩＲＥＱ：Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ、カナダ・モントリオール）につないだ。各マウスを、１５０呼吸／分の速度および１０ｍＬ／ｋｇマウス体重の量で、正弦波吸気および受動呼気で換気した。マウスを水柱に連結することによって、３．０ｃｍＨ２Ｏの呼吸終末陽圧（ＰＥＥＰ）を確立した。
【０２３７】
マウスを１分間換気した後、肺を総肺容量（ＴＬＣ、３０ｃｍＨ２Ｏの振幅圧）まで、２回拡張した。生理食塩水または増加する濃度のアセチル−ベータ−メチルコリン（ＭＣｈ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）のエアロゾルを肺に１５秒間送達し、その後、１５秒間換気した。エアロゾルおよび換気後、２．５Ｈｚ体積駆動（ＶＤ）周期的変動を気道開口部に適用した。１０回の２．５Ｈｚ  ＶＤ周期的変動は、各々、０．２０ｍＬの量を有し、そして１．２５秒間持続した。次のＭＣｈ用量前に、肺をＴＬＣまで２回拡張した。小型動物換気装置によって、呼吸器系における長期に渡る圧および体積測定を記録し、そして呼吸器系の単一区画モデルにデータを適合させることによって、呼吸器系抵抗値（Ｒ）を計算し、ここで、Ｐｔｒ＝ＲＶ＋ＥＶ＋ＰＯ（Ｐｔｒ＝気道圧力、Ｖ＝体積／時間、Ｅ＝エラスタンス＝圧力／体積、Ｖ＝体積、ＰＯ＝ベースライン圧力）である。異なる濃度のＭＣｈで測定した肺抵抗性を図２に示す。
【０２３８】
これらの結果は、Ｍ７５１が、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのＩＬ−２５活性、ならびにｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＬ−２５が誘導するＢＡＬＦ細胞性、ならびにＩＬ−５およびＩＬ−１３濃度増加を阻害するのに加えて、ＩＬ−２５が誘導するＡＨＲを阻害することを立証し、これによって、ＩＬ−１７ＲＡに結合し、そしてＩＬ−２５の活性を阻害する抗体が、ＡＨＲを伴う、ＩＬ−２５が仲介する状態を治療するかまたは軽減するのに有用であることを示した。
【０２３９】
実施例８
本実施例は、どちらもｉｎ  ｖｉｔｒｏバイオアッセイにおいてＩＬ−２５活性を阻害した（上記）、ＩＬ−１７ＲＢに対する抗体（Ｍ７３５）またはＩＬ−２５に対する抗体（Ｍ８１９）を用いた、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＬ−２５反応の阻害を立証する。ＢＡＬＢ／ｃマウスにＰＢＳまたはマウスＩＬ−２５を鼻内投与し、そして２５０マイクログラムの中和マウス抗マウスＩＬ−１７ＲＢ抗体（Ｍ７３５）、中和ラット抗マウスＩＬ−２５抗体（Ｍ８１９）、関連しない対照ネズミＩｇＧ１抗体（ｍｕＩｇＧ１；Ａｍｇｅｎ）、ネズミＦｃタンパク質（ｍｕＦｃ；Ａｍｇｅｎ）、または全ラットＩｇＧ（Ｐｉｅｒｃｅ、イリノイ州ロックフォード）のいずれかを腹腔内注射した。第５日、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）を採取し、そして先に記載するように分析した。別個の反復実験を行い；二回目には、ＢＡＬＦ  ＩＬ−５およびＩＬ−１３タンパク質濃度を測定しなかった。結果を以下の表２４〜２６に示す。
【０２４０】
表２４：ＩＬ−１７ＲＢに対する遮断抗体（Ｍ７３５）の非存在下または存在下での、ＩＮ  ＩＬ−２５曝露マウス由来のＢＡＬＦ細胞性、ＩＬ−５濃度、およびＩＬ−１３濃度の分析
【０２４１】
【表２４】
2014122231.tif 000025
【０２４２】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表２５：ＩＬ−１７ＲＢに対する遮断抗体（Ｍ７３５）またはＩＬ−２５に対する遮断抗体（Ｍ８１９）の非存在下または存在下での、ＩＮ  ＩＬ−２５曝露マウス由来のＢＡＬＦ細胞性、ＩＬ−５濃度、およびＩＬ−１３濃度の分析
【０２４３】
【表２５】
2014122231.tif 000026
【０２４４】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表２６：ＩＬ−１７ＲＢに対する遮断抗体（Ｍ７３５）またはＩＬ−２５に対する遮断抗体（Ｍ８１９）の非存在下または存在下での、ＩＮ  ＩＬ−２５曝露マウス由来のＢＡＬＦ細胞性、ＩＬ−５濃度、およびＩＬ−１３濃度の分析
【０２４５】
【表２６】
2014122231.tif 000027
【０２４６】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
【０２４７】
実施例９
本実施例は、ＩＬ−２５による気道過敏反応（ＡＨＲ）の誘導、およびＩＬ−１７ＲＢに対する抗体（Ｍ７３５）またはＩＬ−２５に対する抗体（Ｍ８１９）の該反応に対する効果を例示する。実質的に先に記載するように、一連の実験を行った；全身プレチスモグラフを用いて、意識があり拘束されていないマウスにおいて、ＡＨＲを非侵襲的に測定した。３つの別個の実験結果を、以下の表２７〜２９に示す。
【０２４８】
表２７：抗ＩＬ−１７ＲＢに対する遮断抗体（Ｍ７３５）の非存在下または存在下での、ＩＮ  ＩＬ−２５曝露マウス由来のＡＨＲ値
【０２４９】
【表２７】
2014122231.tif 000028
【０２５０】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表２８：抗ＩＬ−１７ＲＢに対する遮断抗体（Ｍ７３５）またはＩＬ−２５に対する遮断抗体（Ｍ８１９）の非存在下または存在下での、ＩＮ  ＩＬ−２５曝露マウス由来のＡＨＲ値
【０２５１】
【表２８】
2014122231.tif 000029
【０２５２】
Ｎ＝５；示す値は（平均±ＳＤ）である。
表２９：抗ＩＬ−１７ＲＢに対する遮断抗体（Ｍ７３５）またはＩＬ−２５に対する遮断抗体（Ｍ８１９）の非存在下または存在下での、ＩＮ  ＩＬ−２５曝露マウス由来のＡＨＲ値
【０２５３】
【表２９】
2014122231.tif 000030
【０２５４】
これらの結果は、ＩＬ−２５がＡＨＲを増加させ、この効果が抗ＩＬ−１７ＲＢまたは抗ＩＬ−２５によって和らげられうることを示す。
【０２５５】
実施例１０
本実施例は、ＩＬ−２５のｉｎ  ｖｉｖｏでの反応が、ＩＬ−１７ＲＢに対する抗体（Ｍ７３５）、ＩＬ−２５に対する抗体（Ｍ８１９）、またはＩＬ−１７ＲＡに対する抗体（Ｍ７５１）での治療によって遮断されるという組織学的確認を提供する。ＢＡＬＢ／ｃマウスにＰＢＳまたはマウスＩＬ−２５を鼻内投与し、そして２００マイクログラムの中和抗ＩＬ−１７ＲＢ抗体（Ｍ７３５）、２００マイクログラムの中和抗ＩＬ−２５抗体（Ｍ８１９）、２００マイクログラムの中和抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体（Ｍ７５１）、２００マイクログラムの中和抗ＩＬ−１７Ａ抗体（Ｍ２１０）、または実質的に先に記載するアイソタイプ対照抗体いずれかを腹腔内注射する。研究第５日に、ＣＯ２窒息によってマウスを安楽死させた。記載するように、肺を採取し、固定し、プロセシングし、切片作製し、染色し、そして評価した。組織病理結果の要約を以下の表３０に示す。
【０２５６】
表３０：ＩＮ  ＩＬ−２５に曝露し、そして抗ＩＬ−１７ＲＡ、抗ＩＬ−１７Ａ、抗ＩＬ−２５、抗ＩＬ−１７ＲＢまたは対照で治療したマウスにおける、肺組織炎症および杯細胞過形成の組織学的分析
【０２５７】
【表３０】
2014122231.tif 000031
【０２５８】
Ｎ＝５／群；報告される平均スコア±ＳＤ。
ＩＬ−２５に曝露し、そしてアイソタイプ対照で治療したマウスは、最も顕著な病変を有し、そしてＭＳＡに曝露し、そしてアイソタイプ対照で治療したマウスが１．８±０．８の平均スコアを有したのに対して、７．６±２．２の平均スコアを有した。マウスをＩＬ−１７Ａに対する抗体で治療しても、平均スコアが６．８±１．３であることによって示されるように、肺病変に本質的にまったく影響を及ぼさなかった。対照的に、抗ＩＬ−１７ＲＡ（スコア１．０±０．７）、抗ＩＬ−２５（スコア１．４±１．１）または抗ＩＬ−１７ＲＢ（スコア１．８±１．５）のいずれかでの治療は、すべて、ＩＬ−２５が誘導する炎症をバックグラウンドのレベルまで阻害するのに有効であり、ＩＬ−２５または受容体複合体に関与するタンパク質のいずれか１つの遮断が、等しく有効な治療であることを示唆する。
【０２５９】
実施例１１
本実施例は、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢの間の会合を立証する。ヒトＩｇＧのＦｃ領域（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州ミネアポリス）に、またはポリヒスチジンタグ（Ａｍｇｅｎ）に融合させたヒトＩＬ−１７ＲＡおよびヒトＩＬ−１７ＲＢの細胞外ドメインを用いて、一連の免疫沈降を行った。５０マイクロＬのプロテインＧスラリーをエッペンドルフ試験管に添加し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、そして回転させながら、２マイクロｇのＩＬ−１７ＲＡ．ＦｃまたはＩＬ−１７ＲＢ．Ｆｃタンパク質と４℃で１時間インキュベーションした。このインキュベーション終了時、２マイクログラムの逆の可溶性受容体タンパク質を添加し（すなわちＩＬ−１７ＲＢ：ＦｃにはＩＬ−１７ＲＡ−ＨＩＳを添加し、そしてＩＬ−１７ＲＡ：ＦｃにはＩＬ−１７ＲＢ−ＨＩＳを添加した）、そして回転させながら、この最終的な組み合わせを４℃で一晩インキュベーションした。
【０２６０】
翌朝、試験管を１２，０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、そしてプロテインＧビーズをＰＢＳで洗浄し、次いでＲＩＰＡ緩衝液（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ミズーリ州セントルイス）で洗浄した。１０％ベータ−メルカプトエタノール（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州カールスバッド）を含む６０マイクロＬの２ｘＴｒｉｓ−グリシンＳＤＳ試料緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州カールスバッド）中にビーズを再懸濁し、そして氷上または−２０℃で保存した。４〜２０％Ｔｒｉｓ−グリシン１０ウェル・ミニアクリルアミドゲル（Ｎｏｖｅｘ（登録商標）−Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州カールスバッド）上で試料を分析し、そしてニトロセルロース膜（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カリフォルニア州カールスバッド）にトランスファーした。赤外線アッセイ（Ｌｉ−ｃｏｒ（登録商標）Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ネブラスカ州リンカーン）のために最適化されたウェスタンブロットブロッキング緩衝液であるＯｄｙｓｓｅｙ（登録商標）ブロッキング緩衝液を用いて、穏やかに振盪しながら、室温で１時間または４℃で一晩のいずれかで膜をブロッキングした。次いで、０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＯｄｙｓｓｅｙ（登録商標）ブロッキング緩衝液中で１：１０００〜１：５０００に希釈した一次抗体と膜を、穏やかに振盪しながら４℃で６０分間インキュベーションした。ＰＢＳ＋０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０中、膜を４回洗浄し、そして次いで、０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＯｄｙｓｓｅｙ（登録商標）ブロッキング緩衝液中で１：１０，０００に希釈した二次抗体中、穏やかに振盪しながら４℃で６０分間、膜をインキュベーションした。ＰＢＳ＋０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０中、膜を４回洗浄し、そしてＬｉ−Ｃｏｒ（登録商標）Ｏｄｙｓｓｅｙ（登録商標）赤外画像化系を用いて、タンパク質を視覚化した。以下の抗体を用いた：
【０２６１】
【表３１】
2014122231.tif 000032
【０２６２】
代表的なブロットを図２に示す。いくつかの実験の経過に渡って、ＩＬ−１７ＲＢ．Ｆｃは、ＩＬ−１７ＲＡ．ＨＩＳを免疫沈降可能であった。この実験系において、ＩＬ−１７ＲＡ．Ｆｃはまた、ＩＬ−１７ＲＣ．ＨＩＳを免疫沈降することも可能であり、この系が、他の系において以前立証されている、タンパク質間の生化学的相互作用を再現可能であることを立証する（Ｔｏｙ，Ｄ．ら，ＪＩ，２００６，１７７：３６）。ＩＬ−１７ＲＡ．ＦｃまたはＩＬ−１７ＲＢ．Ｆｃのいずれも、ＩＬ−１７ＲＤ．ＨＩＳ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州ミネアポリス）を免疫沈降させることが不可能であり、これによって、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ相互作用がこれらのタンパク質にユニークであり、そしてすべてのＩＬ−１７Ｒファミリーメンバーに生得的でないことが示唆される。これは、ＩＬ−１７ＲＡおよびＩＬ−１７ＲＢ間の生化学的相互作用の最初の記述である。
【０２６３】
実施例１２
ＵＳＳＮ  １１／９０６，０９４（本明細書に援用される）に記載されるように、Ａｂｇｅｎｉｘ（現在のＡｍｇｅｎ  Ｆｒｅｍｏｎｔ  Ｉｎｃ．）ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）技術（本明細書にその全体が援用される、米国特許第６，１１４，５９８号；第６，１６２，９６３号；第６，８３３，２６８号；第７，０４９，４２６号；第７，０６４，２４４号；Ｇｒｅｅｎら，１９９４，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ７：１３−２１；Ｍｅｎｄｅｚら，１９９７，Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  １５：１４６−１５６；ＧｒｅｅｎおよびＪａｋｏｂｏｖｉｔｉｓ，１９９８，Ｊ．Ｅｘ．Ｍｅｄ．１８８：４８３−４９５））を用いて、ヒトＩＬ−１７ＲＡに対して向けられる完全ヒト・モノクローナル抗体の開発を行った。該文献に記載されるように、ヒトＩＬ−１７ＲＡへの（およびカニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ）ＩＬ−１７ＲＡへの）ヒトＩＬ−１７Ａの結合を阻害する能力に関して、完全ヒト抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体をスクリーニングした。一団の抗体を同定し、そしてさらなる増殖および分析のために選択した；可変重鎖および軽鎖のアミノ酸配列を配列表に示し、そして多様な配列を要約する表を以下に示す。１つの抗体、３．４５４．１は、可変軽鎖の２つの型の証拠を示した。
【０２６４】
表３１：抗ｈｕＩＬ−１７Ａ抗体の要約
【０２６５】
【表３２】
2014122231.tif 000033
【０２６６】
ＩＬ−１７Ａおよび／またはＩＬ−１７Ｆ生物学的活性を阻害する能力に関して、そしてＩＬ−１７ＲＡのどのドメインが抗体結合に重要かに関して、抗体をさらに性質決定した。
【０２６７】
ＩＬ−１７Ａ／ＩＬ−１７Ｆが誘導するサイトカイン／ケモカイン分泌アッセイ
このアッセイは、ヒト包皮線維芽細胞（ＨＦＦ）細胞株を利用する。抗ＩＬ−１７ＲＡ抗体をＨＦＦ細胞（９６ウェルプレート中、５０００細胞／ウェル）と３６℃で３０分間インキュベーションし；次いで、ＩＬ−１７Ａ（５ｎｇ／ｍｌ）のみまたはＩＬ−１７Ｆ（２０ｎｇ／ｍｌ）およびＴＮＦ−アルファ（５ｎｇ／ｍｌ）のいずれかで一晩刺激する。ＩＬ−６またはＧＲＯ−アルファのいずれかの存在に関して、ＥＬＩＳＡによって、線維芽細胞培養上清を分析する。本アッセイにおいて産生されるＩＬ−６および／またはＧＲＯ−アルファの量が減少することによって示されるように、抗体は、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−１７Ｆの生物学的活性を阻害可能であった。
【０２６８】
交差競合アッセイ
ＵＳＳＮ  １１／９０６，０９４に記載されるように、交差競合研究を行って、特定の抗体のＩＬ−１７ＲＡ結合特性を決定した。Ｊｉａらによって記載される多重化ビン化（ｂｉｎｎｉｎｇ）法の修飾法を用い（Ｊｉａら，Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．Ｍｅｔｈ．，２００４，２８８：９１−９８）、Ｂｉｏ−Ｐｌｅｘワークステーションおよびソフトウェア（ＢｉｏＲａｄ、カリフォルニア州ハーキュルス）、ならびにＬｕｍｉｎｅｘ（登録商標）社（テキサス州オースティン）の試薬を使用した。概して、製造者の基本的プロトコルにしたがう。対の組み合わせで抗体を試験した；２つの抗体が互いに交差競合する場合、これらをともにグループにするかまたは「ビン化」した。一般的にいって、異なるビンに割り当てられた抗体は、ＩＬ−１７ＲＡの異なる部分に結合し、そして同じビン（単数または複数）に割り当てられた抗体は、ＩＬ−１７ＲＡの類似の部分に結合する。
【０２６９】
中和決定因子の評価：Ｈｕ／Ｍｕキメラ
いくつかのキメラ・ヒト／マウスＩＬ−１７ＲＡを用いて、多様なＩＬ−１７ＲＡアンタゴニスト（ヒト抗体の型）がヒトＩＬ−１７ＲＡのどこに結合するかを決定する研究を行った。この方法は、マウスＩＬ−１７ＲＡと多様なＩＬ−１７ＲＡ抗体の非交差反応性を利用する。各キメラに関して、ヒトＩＬ−１７ＲＡ細胞外ドメインの１つまたは２つの領域をマウスＩＬ−１７ＲＡの対応する領域（単数または複数）と交換する。６つの単一領域および８つの二重領域キメラを構築し；Ｂｉｏ−Ｐｌｅｘワークステーションおよびソフトウェア（ＢｉｏＲａｄ、カリフォルニア州ハーキュルス）を用いた多重分析を行って、野生型ＩＬ−１７ＲＡタンパク質への結合に対して、キメラＩＬ−１７ＲＡタンパク質への例示的なヒトＩＬ−１７ＲＡ  ｍＡｂの示差結合を分析することによって、ヒトＩＬ−１７ＲＡ上の中和決定因子を決定した。
【０２７０】
中和決定因子の評価：アルギニン・スキャニング
ヒトＩＬ−１７ＲＡの選択されるアミノ酸残基でアルギニン置換を有する、いくつかの突然変異体ＩＬ−１７ＲＡタンパク質を用いて、さらなる実験を行った。アルギニン・スキャニングは、抗体または他のタンパク質が別のタンパク質に結合する場所を評価する、当該技術分野に認識される方法であり、例えば、Ｎａｎｅｖｉｃｚ，Ｔ．ら，１９９５，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７０：３７，２１６１９−２１６２５、およびＺｕｐｎｉｃｋ，Ａ．ら，２００６，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２８１：２９，２０４６４−２０４７３を参照されたい。一般的に、アルギニン側鎖は正に荷電し、そして他のアミノ酸に比較して比較的大きく、突然変異が導入された抗原領域への抗体結合を破壊しうる。アルギニン・スキャニングは、残基が中和決定因子および／またはエピトープの一部であるかどうかを決定する方法である。アルギニンに突然変異させるため、ヒトＩＬ−１７ＲＡ細胞外ドメイン全体に分布する９５のアミノ酸を選択した。残基が表面にある可能性を最大にし、そしてミスフォールディングタンパク質を生じる突然変異の可能性を減少させるため、選択は荷電または極性アミノ酸に偏っていた。
【０２７１】
当該技術分野に知られる標準的技術を用いて、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ  Ｑｕｉｃｋｃｈａｎｇｅ（登録商標）ＩＩプロトコルキット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ／Ａｇｉｌｅｎｔ、カリフォルニア州サンタクララ）によって提供される基準に基づき、突然変異残基を含有するセンスおよびアンチセンスオリゴヌクレオチドを設計した。Ｑｕｉｃｋｃｈａｎｇｅ（登録商標）ＩＩキット（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）を用いて、野生型（ＷＴ）ＨｕＩＬ−１７ＲＡ−Ｆｌａｇ−ｐＨｉｓの突然変異誘発を行った。ポリＨｉｓタグを介した精製を促進するため、細胞外ドメインのカルボキシ末端上にＦＬＡＧ−ヒスチジンタグ（６ヒスチジン）をコードするよう、すべてのキメラ構築物を構築した。野生型ＩＬ−１７ＲＡタンパク質に対して、アルギニン突然変異体への特定のヒトＩＬ−１７ＲＡ  ｍＡｂの示差結合を分析することによって、Ｂｉｏ−Ｐｌｅｘワークステーションおよびソフトウェア（ＢｉｏＲａｄ、カリフォルニア州ハーキュルス）を用いた多重分析を行って、ヒトＩＬ−１７ＲＡ上の中和決定因子を決定した。
【０２７２】
これらの研究結果を以下の表３２に要約する。
表３２：特定のＩＬ−１７ＲＡ抗体の特性の要約
【０２７３】
【表３３】
2014122231.tif 000034
【０２７４】
実施例１３
本実施例は、ＩＬ−２５の生物学的活性に対するＩＬ−１７ＲＡ−ＩＬ−１７ＲＢアンタゴニストの効果を評価するのに有用なＩＬ−２５再刺激アッセイを記載する。ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を正常ドナーから単離し、そして胸腺間質リンホポエチン（ＴＳＬＰ（Ｑｕｅｎｔｍｅｉｅｒら，Ｌｅｕｋｅｍｉａ．２００１  Ａｕｇ；１５（８）：１２８６）、１００ナノグラム／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州ミネアポリスから入手可能）の存在下で、５ｘ１０６細胞／ｍｌで２４時間刺激する。次いで、ＰＢＭＣを収集し、そしてＩＬ−２（１０ナノグラム／ｍｌ、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州ミネアポリス）およびＩＬ−２５（１０ナノグラム／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州ミネアポリス）の存在下、阻害活性に関して試験しようとする剤の存在下または非存在下で、再刺激培養中にセットアップする。再刺激培養を単細胞懸濁物として調製し、そして４ｘ１０７細胞／ｍＬに希釈し；１００マイクロＬの細胞を４８ウェルプレートに添加して、４ｘ１０６細胞／ウェルの最終濃度にする。３日後、上清液体を採取し、そしてＥＬＩＳＡによってＩＬ−５に関して試験する（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ミネソタ州ミネアポリス）。試験する剤には、ＩＬ−１７ＲＢの可溶性型（先に記載する）、ならびに以下に要約する一団のポリクローナルおよびモノクローナル抗体が含まれる：
・ＭＡＢ１７７１：抗ＨｕＩＬ−１７ＲＡ  ＭｕＩｇＧ２ｂ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）
・ＭＡＢ１２０７：抗ＨｕＩＬ−１７ＲＢ  ＭｕＩｇＧ２ｂ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）
・ＡＦ１７７：抗ＨｕＩＬ−１７ＲＡヤギポリクローナルＩｇＧ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）
・いくつかの完全ヒト抗ＨｕＩＬ−１７ＲＡ  ＨｕＩｇＧ２（実施例１２に記載した）
異なるドナー由来のＰＢＭＣを利用するいくつかの異なる再刺激アッセイにおいて、多様な剤を試験した結果を、以下の表３３に示す。
【０２７５】
表３３：多様なＩＬ−１７ＲＢおよびＩＬ−１７ＲＡ阻害剤の存在下または非存在下で、ＩＬ−２＋ＩＬ−２５で刺激したＴＳＬＰ処理ヒトＰＢＭＣからのＩＬ−５産生
【０２７６】
【表３４】
2014122231.tif 000035
【０２７７】
異なる日に、そして異なる抗体調製を用いて、異なるＰＢＭＣドナーを利用する３つの別個の再刺激アッセイにおいて、ＩＬ−１７ＲＡに結合する一団のヒト抗体を試験した。結果を以下の表３４に示す。
【０２７８】
表３４：多様なＩＬ−１７ＲＡ抗体の存在下または非存在下で、ＩＬ−２＋ＩＬ−２５で刺激したＴＳＬＰ処理ヒトＰＢＭＣからのＩＬ−５産生
【０２７９】
【表３５】
2014122231.tif 000036
【０２８０】
＊これらの抗体に関するビン化分析の結果は不確かであった。
これらの抗体のさらなる調製を用いて、実質的に類似の結果を得た。結果は、ＩＬ−１７ＲＡに結合し、そしてＩＬ−１７Ａを阻害する特定の抗体が、ＩＬ−２５も阻害することを示す。
【０２８１】
実施例１４
本実施例は、喘息のマウスモデルを記載する。ミョウバンまたは別のアジュバント中の抗原を腹腔内注射することによって、マウス（例えば、ＢＡＬＢ／ｃ）を抗原（例えば、オボアルブミン［ＯＶＡ］）で感作する。いくつかの感作スキームが当該技術分野に知られ；１つのスキームでは、ミョウバン中の１０マイクログラムのＯＶＡを１週間間隔で３回（すなわち第−２１日、第−１４日、および第−７日に）、注射する。次いで、エアロゾル曝露（５％ＯＶＡ）または鼻内投与（０．１ｍｇ  ＯＶＡ）のいずれかによって、マウスを抗原に曝露する。より短い期間（すなわち第１日、第２日および第３日に毎日曝露）またはより長い期間（すなわち２〜３週間、毎週曝露）から、曝露スケジュールを選択してもよい。測定される終点には、ＡＨＲ、ＢＡＬ液細胞数および組成、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ排出肺リンパ節サイトカインレベル、血清ＩｇＥレベル、ならびに肺組織の組織病理学的評価が含まれてもよい。喘息の他の動物モデルが知られ、そしてこれには、他の動物（例えば、Ｃ５７ＢＬ／６マウス）、感作スキーム（例えば鼻内接種、他のアジュバントの使用またはアジュバントなし等）、および／または抗原（ＯＶＡまたは他のタンパク質性抗原由来のものなどのペプチド、ゴキブリ（ｃｏｃｋｒｏａｃｈ）抽出物、ブタクサ（ｒａｇｗｅｅｄ）抽出物または脱感作措置で用いるものなどの他の抽出物等を含む）の使用が含まれる。以下に示すマウス群を用いて、ＩＬ−１７ＲＡ、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７およびＩＬ−２５に対する抗体の効果をこのモデルで評価した。
【０２８２】
第−２１日、第−１４日、および第−７日、ミョウバン中のＯＶＡで雌ＢＡＬＢ／ｃマウスをＩＰ免疫し、そして第１〜３日、ＰＢＳ中のＯＶＡにエアロゾル曝露した。実験１および２では、ＯＶＡエアロゾル曝露前日（第−１日）に、マウスに抗体をＩＶ注射し、または実験３では、最初のＯＶＡエアロゾル曝露の日（第１日）、ＯＶＡ曝露３０分前に、抗体をＩＰ注射し、または実験１および３では、ＯＶＡへの各エアロゾル曝露３０分前（第１〜３日）に、陽性対照のデキサメタゾン（Ｄｅｘ）または陰性対照のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）をＩＰ注射した。年齢がマッチしたＯＶＡ抗原刺激のみの群を比較のため含めた。最後のＯＶＡ曝露４８時間後、ＭＣｈ曝露に対する気道過敏性（ＡＨＲ）を測定した。最後のＯＶＡ曝露７２時間後にマウスを屠殺し、そして分析のため、血清、ＢＡＬ液、排出肺リンパ節、および肺を収集した。一連の３つの実験を行った。
【０２８３】
実験１は、以下の治療群を含んだ：
・第１群、抗原刺激し、曝露しないマウス、ｎ＝１０  ・第２群、ＰＢＳ、ＩＰ、ｎ＝１０
・第３群、１ｍｇ／ｋｇ  Ｄｅｘ、ＩＰ、ｎ＝１０
・第４群、５００マイクログラムのｍＩｇＧ１アイソタイプ対照ａｂ、ＩＶ、ｎ＝１０
・第５群、５００マイクログラムの抗ＩＬ−１７ＲＢ  Ｍ７３５  ｍＡｂ、ＩＶ、ｎ＝１０
・第６群、５００マイクログラムのキメラ抗ｍＩＬ−１７ＲＡ  ｍＡｂ  Ｍ７５１、ＩＶ、ｎ＝１０
・第７群、５００マイクログラムのラットＩｇＧ対照ａｂ、ＩＶ、ｎ＝１０
・第８群、５００マイクログラムの抗ｍＩＬ−２５  Ｍ８１９、ＩＶ、ｎ＝１０
・第９群、５００マイクログラムの抗ｍＩＬ−１７  ｍＡｂ  Ｍ２１０、ＩＶ、ｎ＝１０
実験２は、以下の治療群を含んだ：
・第１群、抗原刺激し、曝露しないマウス、ｎ＝１０
・第２群、５００マイクログラムのｍＩｇＧ１アイソタイプ対照ａｂ、ＩＶ、ｎ＝１０
・第３群、５００マイクログラムのキメラ抗ｍＩＬ−１７ＲＡ  ｍＡｂ  Ｍ７５１、ＩＶ、ｎ＝１０
実験３は、以下の治療群を含んだ：
・第１群、抗原刺激し、曝露しないマウス、ｎ＝１０
・第２群、ＰＢＳ、ＩＰ、ｎ＝１０
・第３群、１ｍｇ／ｋｇ  Ｄｅｘ、ＩＰ、ｎ＝１０
・第４群、５００マイクログラムのｍＩｇＧ１アイソタイプ対照ａｂ、ＩＰ、ｎ＝１０
・第５群、５００マイクログラムの抗ＩＬ−１７ＲＢ  Ｍ７３５  ｍＡｂ、ＩＰ、ｎ＝１０
・第６群、５００マイクログラムのキメラ抗ｍＩＬ−１７ＲＡ  ｍＡｂ  Ｍ７５１、ＩＰ、ｎ＝１０
・第７群、５００マイクログラムのｇラットＩｇＧ対照ａｂ、ＩＰ、ｎ＝１０
・第８群、５００マイクログラムの抗ｍＩＬ−２５  Ｍ８１９、ＩＰ、ｎ＝１０
・第９群、５００マイクログラムの抗ｍＩＬ−１７  ｍＡｂ  Ｍ２１０、ＩＰ、ｎ＝１０
・第１０群、５００マイクログラムの抗ｍＩＬ−１７Ｆ  ｍＡｂ  Ｍ８５０、ＩＰ、ｎ＝１０  ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、マウスＯＶＡ喘息モデルにおけるＡＨＲを減少させたが、ＩＬ−１７Ａに対する中和抗体はこれを減少させなかった；結果を図１〜３に示す。ベースラインに比較したＰＥＮＨの平均パーセント変化を、実験１から、各治療群±ＳＥに関して報告する（図１）。実質的に実施例７に先に記載するように、気道過敏性を測定した。気管支収縮の度合いを、ベースラインに比較したＰＥＮＨのパーセント変化として表した。ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体での治療は、ＰＢＳまたは対照抗体で治療したマウスに比較して、ＭＣｈ曝露に反応したＡＨＲを減少させたが、ＩＬ−１７Ａに対する中和抗体はこれを減少させなかった（図３）。
【０２８４】
メタコリン曝露に反応した肺抵抗性（ＲＬ）を、機械的に換気されているマウスにおいて、実験２および３で測定した。小型動物換気装置によって、長期に渡って、呼吸器系における圧力および体積測定値を記録し、そして呼吸器系の単一区画モデルにデータを適合させることによって、呼吸器系抵抗値（Ｒ＝ｃｍＨ２Ｏ／ｍＬ）を計算し、ここで、Ｐｔｒ＝ＲＶ＋ＥＶ＋ＰＯ（Ｐｔｒ＝気道圧力、Ｖ＝体積／時間、Ｅ＝エラスタンス＝圧力／体積、Ｖ＝体積、ＰＯ＝ベースライン圧力）である。各マウスに関するメタコリンの各濃度に関して、すべてのＲ測定値の合計を取ることによって、曲線下の気道抵抗性（Ｒ）面積（ＡＵＣ）を計算する。実験２において、ＩＬ−１７ＲＡに対する中和抗体での治療は、対照抗体治療マウスに比較して、メタコリン曝露に反応した肺抵抗性を減少させた（図４ａ）。実験３では、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体での治療は、対照抗体治療マウスと比較して、メタコリン曝露に対する肺抵抗性を減少させたが、ＩＬ−１７Ａに対する中和抗体はこれを減少させなかった（図４ｂ）。
【０２８５】
ＢＡＬＦ細胞数および組成に対する抗体の効果もまた決定した；結果を図５〜７に示す。実験１において、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、このマウスＯＶＡ喘息モデルにおいて、適切な対照抗体治療と比較して、ＢＡＬＦ総白血球（図５ａ）、好酸球（図５ｂ）、およびリンパ球（図５ｄ）を有意に減少させたが、ＩＬ−１７Ａに対する中和抗体はこれらを減少させなかった。ＩＬ−１７ＲＢまたはＩＬ−１７ＲＡに対する中和抗体は、ＢＡＬＦ総好中球（図５ｃ）を有意に減少させたが、ＩＬ−１７Ａに対する中和抗体はこれを減少させなかった。ＩＬ−２５に対する中和抗体は、ＢＡＬＦ総好中球を減少させたが、これは有意ではなかった（図５ｃ）。
【０２８６】
実験２において、ＩＬ−２５、ＩＬ−１７ＲＢ、およびＩＬ−１７ＲＡに対する中和抗体は、このマウスＯＶＡ喘息モデルにおいて、適切な対照抗体治療と比較して、ＢＡＬＦ総白血球（図６ａ）、好酸球（図６ｂ）、およびリンパ球（図６ｄ）を有意に減少させた。これらの抗体は、総ＢＡＬＦ好中球（図６ｃ）またはマクロファージ（図６ｅ）数に対して有意な影響を持たなかった。
【０２８７】
実験３において、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、このマウスＯＶＡ喘息モデルにおいて、ＢＡＬＦ総白血球（図７ａ）、好酸球（図７ｂ）、およびリンパ球（図７ｄ）を有意に減少させたが、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれらを減少させなかった。ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、ＢＡＬＦ総好中球（図７ｃ）を減少させたが、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれらを減少させず、ただしＩＬ−１７ＲＢおよびＩＬ−２５抗体のみが有意な効果を有した。ＩＬ−１７ＲＢまたはＩＬ−１７ＲＡに対する中和抗体は、ＢＡＬＦ総マクロファージを減少させたが、ＩＬ−２５、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれを減少させず、ただしＩＬ−１７ＲＡ抗体のみが有意な効果を有した（図７ｅ）。
【０２８８】
ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、図８ａ（実験１）および図８ｃ（実験３）に示すように、ＢＡＬＦ  ＩＬ−１３濃度を有意に減少させたが、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれを減少させなかった。実験２において、ＢＡＬＦ  ＩＬ−１３濃度は、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体で治療したマウスでは、より低かったが、有意ではなく、これはおそらく、このマウスモデルにおいて典型的に観察されるものと比較して、ＩＬ−１３誘導全体がより低いレベルであるためであった（図８ｂ）。
【０２８９】
ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体はまた、このマウスＯＶＡ喘息モデルにおいて、ＢＡＬＦ  ＩＬ−５濃度も減少させたが、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれを減少させず、ただし、実験１では、アイソタイプ対照抗体治療マウスと比較して、抗ＩＬ−２５  ｍＡｂ治療群のみが有意に低く（図９ａ）、一方、実験３では、抗ＩＬ−１７ＲＢ、抗ＩＬ−１７ＲＡ、および抗ＩＬ−２５  ｍＡｂ治療群は、すべて有意に減少した（図９ｃ）。さらに、ＢＡＬＦ  ＩＬ−５濃度は、実験２において、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、およびＩＬ−２５に対する中和抗体での治療によって、有意に減少した（図９ｂ）。
【０２９０】
同様に、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、このマウスＯＶＡ喘息モデルにおいて、総血清ＩｇＥ濃度を減少させたが、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれを減少させなかった。実験１において、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、総血清ＩｇＥ濃度を減少させたが、ＩＬ−２５に対する中和抗体で治療した群のみが、適切なアイソタイプ対照抗体治療群と比較して、総血清ＩｇＥ濃度を有意に減少させた（図１０ａ）。実験２において、ＩＬ−２５、ＩＬ−１７ＲＢ、またはＩＬ−１７ＲＡに対する中和抗体は、総血清ＩｇＥ濃度を減少させたが、対照抗体治療群と比較して有意ではなかった（図１０ｂ）。実験３において、ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体は、その適切な対照抗体治療群と比較して、総血清ＩｇＥ濃度を有意に減少させたが、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれを減少させなかった（図１０ｃ）。
【０２９１】
実験３の各治療群から、８匹のマウス由来の肺を組織学的に分析した。肺組織切片をＨ＆ＥまたはＰＡＳで染色し、そして次いで、実施例１に先に記載するように、病理学者によってスコア付けされた。ＩＬ−１７ＲＢ、ＩＬ−１７ＲＡ、またはＩＬ−２５に対する中和抗体での治療は、このマウスＯＶＡ喘息モデルにおいて、炎症スコアを有意に減少させたが、ＩＬ−１７ＡまたはＩＬ−１７Ｆに対する中和抗体はこれを減少させなかった（図１１）。
【０２９２】
これらの結果は、抗ＩＬ−１７ＲＢ  ｍＡｂ  Ｍ７３５、抗ＩＬ−１７ＲＡ  ｍＡｂ  Ｍ７５１、または抗ＩＬ−２５  ｍＡｂ  Ｍ８１９での治療が、ヒトにおける喘息などの肺炎症状態のモデルと見なされる、このマウスＯＶＡ誘導喘息モデルにおいて、炎症の多重パラメータを有意に減少させることを立証した。対照的に、抗ＩＬ−１７Ａ  ｍＡｂまたは抗ＩＬ−１７Ｆ  ｍＡｂでの治療は、このモデルにおいて、炎症を有意に減少させなかった。したがって、ＩＬ−２５、ならびにその受容体ＩＬ−１７ＲＢおよびＩＬ−１７ＲＡは、このマウスＯＶＡ喘息モデルにおいて、炎症を仲介する際に役割を果たす。
【図１】
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【図３】
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【図４】
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【図５−１】
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【図５−２】
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【図５−３】
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【図６−１】
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【図６−２】
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【図６−３】
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【図７−１】
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【図７−２】
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【図７−３】
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【図８−１】
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【図８−２】
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【図９−１】
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【図９−２】
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【図１０−１】
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【図１０−２】
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【図１１】
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【図２】
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【配列表】
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