(57)【要約】【課題】新規な化学構造を有する抗菌剤を提供することにあり、更には、かかる抗菌剤の中でも体内動態が良好で、特に哺乳類の体内で体内動態が良好で、治療効果に優れた感染症治療剤を提供すること。【解決手段】下記式（１）で表わされるものであることを特徴とする抗菌剤であり、及び、該抗菌剤よりなることを特徴とする感染症治療剤である。2014118379.tif 000006【選択図】図１
2014118379.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）で表わされるものであることを特徴とする抗菌剤。
【化１】
2014118379.tif 000005
【請求項２】
請求項１記載の抗菌剤よりなることを特徴とする感染症治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗菌剤及び該抗菌剤よりなる感染症治療剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
抗菌剤や感染症治療剤の探索は活発に行なわれている。特に、抗菌剤に対する耐性菌の出現により、新規な抗菌剤の種類を増やすことが望まれている。また、耐性菌に対する作用機序が既存の抗菌剤と異なることが期待できる新規な抗菌剤の選択肢を更に増やすことも望まれている。
【０００３】
更には、哺乳動物に投与したときに、該哺乳動物における体内動態が好適で、該哺乳動物の感染症を好適に治療できる実用的な抗菌剤が望まれている。
従来、最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）で評価したインビトロにおける抗菌活性を中心に抗菌剤が選択されており、「哺乳動物の感染症を好適に治療できる効果」（以下、「治療効果」と略記することがある）を含めた評価方法によって抗菌剤が選択された例はほとんどなく、最後に治療効果の篩が残っているため、実用化へのハードルが高いという問題点があった。
【０００４】
一方、本発明者は、抗菌剤の探索に好適に用いられる、カイコガの幼虫（以下、「カイコ」と略記することがある）を実験動物とする「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」（特許文献１、２）を構築し、抗菌剤の探索、及び、治療効果を含めた抗菌剤の検討、すなわち感染症治療剤の探索を進めていた。
そして、本発明者は、新規な環状ペプチド化合物を見出し（特許文献３等）、それが抗菌剤、感染症治療剤として優れていることを見出し、更に、新規な化学構造を有する化合物、抗菌剤、感染症治療剤等の探索を進めていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】ＷＯ２００５／１１６２６９
【特許文献２】特開２００７−３２７９６４号公報
【特許文献３】特開２０１２−００６９１７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は上記背景技術に鑑みてなされたものであり、その課題は、新規な抗菌剤を提供することにあり、更には、かかる抗菌剤の中でも体内動態が良好で治療効果に優れた感染症治療剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者は、上記の課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、特定の化合物が抗菌剤として有用であることを見出し、更に、治療効果をも含めた検討を行なった結果、その特定の化合物が、哺乳動物における体内動態にも優れた感染症治療剤として有用であることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、下記式（１）で表わされるものであることを特徴とする抗菌剤を提供するものである。
【化１】
2014118379.tif 000003
【０００９】
また、本発明は、上記の抗菌剤よりなることを特徴とする感染症治療剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の抗菌剤は、具体的には、例えば、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ１）の最小発育阻止濃度（以下、「ＭＩＣ」と略記することがある）が６．３μｇ／ｍＬであり、その他の菌にも抗菌作用を示したことから抗菌剤として有用である。
また、耐性菌に対しても有効である。
【００１１】
更に、前記特許文献に記載の「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」を用いて、哺乳類における体内動態も考慮した抗菌治療活性を評価した結果、本発明の抗菌剤は、体内動態が良好で治療効果に優れており、更に、マウスにおいても治療効果が認められたため、抗菌治療剤、感染症治療剤としても有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】黄色ブドウ球菌に感染したマウスに対する、式（１）で表わされる本発明の抗菌剤「ＧＰＩ０３６３」の治療効果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明について説明するが、本発明は、以下の具体的態様に限定されるものではなく、技術的思想の範囲内で任意に変形することができる。
【００１４】
本発明は、前記式（１）で表わされるものであることを特徴とする抗菌剤である。
また、本発明は、該抗菌剤よりなることを特徴とする感染症治療剤である。
【００１５】
＜抗菌剤＞
約１０万種類の化合物について、ＭＩＣを測定した結果、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ１）に対して抗菌活性を有していた３３８３種類の化合物のうちの３種が、後述する「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」において治療効果を示した。
前記式（１）で表わされる化合物（以下、「ＧＰＩ０３６３」と略記する）は、その３種のうちの１種であり、抗菌剤や抗菌治療剤として有用である。
【００１６】
ＧＰＩ０３６３は、黄色ブドウ球菌（ＲＮ４２２０）に対するＭＩＣを測定したところ、１２．５μｇ／ｍＬであり、抗菌性が確認された。また、ＧＰＩ０３６３について抗菌スペクトルを求めたところ、耐性菌を含む複数の菌において抗菌性が確認された。
また、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ１）、及び、多剤耐性黄色ブドウ球菌であるメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ４）に対して、何れも６．３μｇ／ｍＬの抗菌活性を示した（表１）。
また、グラム陽性菌の一部に対して抗菌活性を示す一方、グラム陰性菌に対しては抗菌活性を示さなかった。
【００１７】
ＭＩＣの測定方法は、ＣＬＳＩ（旧ＮＣＣＬＳ米国臨床検査標準委員会）に基づく微量検体希釈法による。ＭＩＣの測定において、試験化合物は、全て０．９質量％塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）溶液又はジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）等適当な溶媒で希釈して用いる。
【００１８】
前記式（１）で表わされるＧＰＩ０３６３を抗菌剤として用いる場合には、ＧＰＩ０３６３に、それぞれの用途に通常用いられている配合剤等を加えることができる。
本発明の抗菌剤は、哺乳類等の生物に投与等を含む付与をして用いる他、抗菌の対象となる物への散布、塗布等や、抗菌の対象となる物を本発明の抗菌剤溶液に浸漬する等として用いることができる。また、カーテン等の布、身につける広い意味での衣類、履物、カーペット等に付与することもできる。また、長繊維（フィラメント）、短繊維（ステープル）等の化学繊維等の中に含有させて使用することもできるし、天然繊維等に付着させて使用することができる。ＧＰＩ０３６３を含有する繊維は、紡績等して糸としても、更に布としても使用できる。
【００１９】
本発明の抗菌剤は、哺乳類等の生物に投与して用いる他、哺乳類以外の生物に対しても付与できる。生物は動物と植物を含む。
【００２０】
＜感染症治療剤＞
抗菌剤を哺乳動物に投与した際、哺乳動物における該抗菌剤の体内動態の良否によっては、該哺乳動物に治療効果を示さない場合がある。
ＭＩＣによって評価した抗菌活性を基準に得られた３３８３種類の抗菌剤について、哺乳動物における体内動態の良好なものが示す「治療効果」をも含めた評価を更に行なった。
哺乳動物における治療効果も勘案して（含めて）抗菌剤をスクリーニングする方法については、本発明者による「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」を用いた。
【００２１】
「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」は、カイコを実験動物として使用するもので、その評価方法は、特許文献１、特許文献２等に記載されている。本発明においても、それに従って評価した。
すなわち、治療効果も含めた抗菌剤のスクリーニングは、「治療効果」（ＥＤ５０）を指標にして行なわれる。「治療効果」（ＥＤ５０）の測定方法は、具体的には以下の通りである。
【００２２】
ＥＤ５０の測定において、試験化合物は、全て０．９質量％ＮａＣｌ水溶液で希釈して用いる。
カイコを微生物に感染させて、感染したカイコに対するＥＤ５０を求めるために、約３ｘ１０７個の黄色ブドウ球菌を複数のカイコの血液中に注射後、更に、種々の濃度の試験化合物の溶液０．０５ｍＬを、それらのカイコの血液中にそれぞれ注射する。
注射２日後に生存個体数が半数となる試験化合物の濃度を、試験化合物の濃度を横軸にとり、生存個体数を縦軸にとったときの測定点に近似曲線を当てはめることによって求める。次いで、該濃度の値を、カイコ１ｇあたりの試験化合物のμｇ数に換算する。
本発明おける「治療効果」（ＥＤ５０［μｇ／ｇ］）は、上記のようにして求めたものとして定義される。
【００２３】
「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」を用いて、「治療効果」（ＥＤ５０）を求めた結果、ＧＰＩ０３６３の「治療効果」（ＥＤ５０）は、３９［μｇ／ｇ］であった。
ＥＤ５０が小さく、治療効果が認められたものは、感染症治療剤として用いられ得る。特に、ＥＤ５０が８２［μｇ／ｇ）］以下のものは、感染症治療剤として、特に哺乳類に対する感染症治療剤として、好適であることが確かめられている。
従って、本発明の好ましい別の形態は、前記式（１）で表される抗菌剤よりなることを特徴とする感染症治療剤である。
【００２４】
＜マウスモデルにおける治療効果＞
ＧＰＩ０３６３は、マウス黄色ブドウ球菌感染モデルにおいても治療効果を示した。
図１に示すように、ＧＰＩ０３６３を投与したマウスは、Ｎ＝３で、５日後の生存率は１００％であった。一方、投与しないものは、Ｎ＝５で、５日後の生存率は２０％であり、哺乳類における感染症治療効果が確認された。
従って、ＧＰＩ０３６３は、感染症治療剤として有用である。
【００２５】
ＧＰＩ０３６３は、スピロ複素環を有しており、そのような化合物の周辺には抗菌活性を有する化合物は知られていないことから、抗菌剤、更には感染症治療剤として、新規の化合物を合成展開できる可能性がある点でも有用である。
【００２６】
本発明の感染症治療剤には、通常、製剤化する際に用いられる担体や賦形剤、その他の添加剤を、適宜、その剤形等に応じて、薬理効果を損なわない範囲内で選択して用いる。
剤形は、投与の目的や方法に応じて適宜選択すればよく、例えば、粉末、顆粒、カプセル、錠剤、液剤等の経口投与用；注射剤、経静脈剤、坐剤、経皮、経鼻、経腸、吸入剤等の非経口投与用；の何れにも本発明の感染症治療剤は用いることができる。
【００２７】
経口投与のための賦形剤としては、乳糖、ブドウ糖、デンプン、ポリビニルピロリドン等、公知の賦形剤を用いることができ、液剤とする場合は、本発明の化合物に、不活性な溶媒、例えば、精製水、エタノール等と共に、薬学的に許容される乳剤、懸濁剤、可溶化剤、甘味剤、ｐＨ調整剤、芳香剤、防腐剤等を含有させて用いることができる。
【００２８】
注射剤として用いる場合は、注射用の蒸留水や生理食塩水のような無菌の水性液剤を用いることができ、非水性の液剤としては、オリーブ油等の植物油；エタノール、ポリエチレングリコール、ブチレングリコール等のアルコール類等を用いることができる。更に、等張化剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、シクロデキストリン等の溶解補助剤を含んでいてもよい。
【００２９】
＜ＧＰＩ０３６３の作用機序＞
放射標識化合物を用いて、黄色ブドウ球菌の高分子合成に与えるＧＰＩ０３６３の影響を検討した結果、ＧＰＩ０３６３は黄色ブドウ球菌のＲＮＡ合成を阻害し、ＤＮＡ合成を部分的に阻害した。
一方、タンパク質合成及び細胞壁合成の阻害は見られなかった。従って、ＧＰＩ０３６３は、主にＲＮＡ合成を阻害することによって抗菌活性を発揮していると考えられる。
【００３０】
ＧＰＩ０３６３が黄色ブドウ球菌に対してどのような様式で抗菌活性を示すか否か、培地へ薬剤添加後の生菌数を測定することによって検討した。その結果、ＧＰＩ０３６３の培養液への添加後、生菌数の減少は認められず、一方、生菌数の増加も認められなかった。従って、ＧＰＩ０３６３化合物は、黄色ブドウ球菌に対して静菌的に作用すると考えられる。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例、試験例及び検討例に基づき本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例等の具体的範囲に限定されるものではない。
【００３２】
実施例１
＜本発明の式（１）で表わされるＧＰＩ０３６３の取得＞
東京大学オープン創薬オープンイノベーションセンターから入手した１０３８７３個の化合物から、前記した方法で抗菌活性（ＭＩＣ）を指標とした探索を実施し、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ１）に対して抗菌活性を有していた３３８３個（約３％に該当）の化合物を見出した。
【００３３】
そのうちの３個（約０．００３％に該当）が、前記した「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」において治療効果を示した。
その内の１つである前記式（１）で表わされる「ＧＰＩ０３６３」は、ＥＤ５０が３９［μｇ／ｇ］であった。ＥＤ５０が８２［μｇ／ｇ］以下のものは、哺乳類に対する感染症治療剤として好適であることが確かめられている。
【００３４】
前記式（１）で表わされる「ＧＰＩ０３６３」は、抗菌剤や抗菌治療剤として有用である。更に、「カイコ黄色ブドウ球菌感染モデル」において治療効果を示したことから、感染症治療剤として有用であり、哺乳類における体内動態が良好なことから、哺乳類に対する感染症治療剤としてとして特に有用である。
【００３５】
＜ＧＰＩ０３６３化合物の抗菌スペクトラム
ＧＰＩ０３６３化合物の抗菌スペクトラムを液体希釈法により求めた。結果を以下の表１に示す。
【００３６】
【表１】
2014118379.tif 000004
【００３７】
ＲＮ４２２０：黄色ブドウ球菌
ＭＳＳＡ１  ：メチシリン感受性黄色ブドウ球菌
ＭＲＳＡ４  ：メチシリン耐性黄色ブドウ球菌
ＭＴＣ，ＯＸ，ＦＬ，ＫＭ，ＣＰ，ＣＰＬＸに耐性を示す多剤耐性黄色ブドウ球菌
ＭＴＣ：メチシリン、ＯＸ：オキサシリン、ＦＬ：フロモキエフ、
ＫＭ：カナマイシン、ＣＰ：クロラムフェニコール、ＣＰＬＸ：シプロフロキサシン
【００３８】
黄色ブドウ球菌（ＲＮ４２２０）で１２．５μｇ／ｍＬ、メチシリン感受性黄色ブドウ球菌（ＭＳＳＡ１）で６．３μｇ／ｍＬ、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ４）で６．３μｇ／ｍＬで抗菌活性を示した（表１）。
また、グラム陽性菌の一部に対して弱い抗菌活性を示す一方、グラム陰性菌に対して抗菌活性を示さなかった。
【００３９】
＜マウスモデルにおける治療効果の確認＞
マウスＩＣＲメスの８匹（Ｎ＝８）に、黄色ブドウ球菌Ｓｍｉｔｈ株を腹腔に注射器によって投与した。次いで、ＧＰＩ０３６３をＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬで希釈して、マウス体重１ｋｇ当たり、１００［ｍｇ／ｋｇ］で、皮下に投与した。
【００４０】
その結果、図１に示すように、ＧＰＩ０３６３を投与したマウス（Ｎ＝３）の５日後の生存率は１００％であった。
一方、投与しないマウス（Ｎ＝５）の５日後の生存率は２０％であり、ＧＰＩ０３６３は、黄色ブドウ球菌に感染したマウスにおいても治療効果を示し、哺乳類における感染症治療効果が確認された。
【産業上の利用可能性】
【００４１】
本発明の前記式（１）で表わされる化合物（ＧＰＩ０３６３）は、抗菌活性と治療効果があり、耐性菌にも効果を有するものであることから、新たな抗菌剤や感染症治療剤として広く利用可能である。
【図１】
2014118379.tif 000007