(57)【要約】【課題】両親媒性実体ナノ粒子の提供。【解決手段】本発明は、ＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を提供する。本発明は、１種または複数の両親媒性実体を含むＡＥナノ粒子、およびＡＥナノ粒子を含む医薬組成物を提供する。本発明は、ＡＥナノ粒子を製造する方法を提供する。本発明は、生物学的活性物質を含むＡＥナノ粒子を対象に投与することによって、生物学的活性物質を対象に送達する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、ＡＥナノ粒子を作製するための方法、試薬および／または組成物を含むシステムを提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載された発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、米国特許法§１１９（ｅ）の下、２００６年１２月１日に出願された米国仮特許出願第６０／８７２，１９８号（「‘１９８出願」）に対する優先権を主張する。この‘１９８出願の全内容は、本明細書中で参考として援用される。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
高分子ナノ粒子を製造するための戦略については重要な文献が存在する。例えば、両親媒性ポリマーがその臨界ミセル濃度を超える濃度で溶媒中に存在すると、それは自己集合してナノ粒子構造となる。そうしたポリマーがより低い濃度で存在する場合でも、水での溶媒希釈によるなどの溶媒の溶媒和を低下させることによって、ナノ粒子の形成をもたらすことができる。ナノ粒子を作製するのに従来用いられてきた溶媒は、通常、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトイミド、ジメチルホルムアミド、クロロホルム、テトラメチルホルムアミドの１つまたは複数であった。残念ながら、これらはどれも毒性が非常に強く、かつ高価である。
【０００３】
それらが１種または複数の有毒性溶媒を必要とするという事実に加えて、高分子ナノ粒子を生成するための標準的方法は、その速度が遅く（ナノ粒子の集合が完了するのに最高で数日かかる）、かつ低いナノ粒子収率しか得られない傾向がある。したがって、成分のコスト、化学反応の速度および収率、残留成分の毒性、およびナノ粒子の作製に利用できる工程の総費用が、そうしたナノ粒子を用いることの商業的実現可能性に対して著しい悪影響を及ぼす恐れがある。
【０００４】
ナノ粒子は、医薬品などの生物学的活性物質（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔ）のための送達手段として用いるためにしばしば提供される。取り込むことができる量に限界があるか、または材料を取り込む（例えば、拡散によって）のに非常に時間がかかるため、生物学的活性物質をナノ粒子中に取り込む（すなわち「担持させる」）ことはしばしば大きな課題であった。この課題は、生物学的活性物質のための送達手段としてのナノ粒子の実用性または商業的有用性を限られたものにする可能性がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、安価で効率的なナノ粒子の製造方法の開発が必要である。毒性残留成分または反応副生成物を用いないかまたは残留させないナノ粒子の製造方法の開発がさらに必要である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
発明の要旨
いくつかの実施形態では、本発明は、両親媒性実体（ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ  ｅｎｔｉｔｙ）（ＡＥ）ナノ粒子を含むナノ粒子組成物を提供する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は均一である。例えば、いくつかの実施形態では、全粒子分布は特定の範囲内の粒子径サイズ（以下に、より詳細に論ずる）に包含される。いくつかの実施形態では、全粒子分布の一部は特定の範囲の外にある。
【０００７】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＡＥナノ粒子、およびＡＥナノ粒子を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子は１種または複数の両親媒性実体を含む。ＡＥナノ粒子は、１種または複数の分散媒体、界面活性剤、生物学的活性物質および／または放出遅延成分を含むことができる。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子は直径が１０００ｎｍ（ナノメータ）、５００ｎｍ、２００ｎｍまたは１００ｎｍより小さい。
【０００８】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＡＥナノ粒子を作製するための方法、試薬および／または組成物を含むシステムを提供する。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子組成物は、高いせん断力にさらすことによって生成させることができる。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子組成物は、高圧均質化によって生成させることができる。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子組成物はキャビテーションによって生成させることができる。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子組成物はマイクロ流動化（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｚａｔｉｏｎ）によって生成させることができる。いくつかの実施形態では、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｚｉｄｅｒ（登録商標）などの市販の装置を用いて、高いせん断力を発生させることができる。
【０００９】
いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子を作製する方法は一般に、１種または複数の両親媒性実体のプレミックスを調製するステップと、そのプレミックスに高いせん断力にさらすステップを含む。プレミックスは一般に、１つまたは複数の両親媒性実体および１種または複数の分散媒体を含む。プレミックスは、１種または複数の界面活性剤、生物学的活性物質および／または放出遅延成分を任意選択で含むことができる。いくつかの実施形態では、プレミックスの両親媒性実体は、高いせん断力にさらす前に、集合して粒子（例えば、ナノ粒子、微小粒子および／またはミセル）となる。いくつかの実施形態では、高いせん断力にさらす前に、プレミックスの両親媒性実体が集合して粒子となることはない。
【００１０】
いくつかの実施形態では、本発明は、ナノ粒子の従来の製造方法に優る改善を提供する。例えば、機械的エネルギーを用いると、高価で毒性のある化学的溶媒の使用の必要性を置き換えるかまたはそれを最少にし、速度と反応収率を増大し、合成反応の全体コストを低減させ、それによって、ＡＥナノ粒子の商業的有用性を高めることになる。さらに、高いせん断力を用いることによって、従来のナノ粒子形成方法に比べて、ナノ粒子の担持能力を高めることが可能になる。従来の方法では、ナノ粒子中またはその表面上への薬剤の担持は、ナノ粒子の内部および／またはその表面上への薬剤の拡散に依存することになる。
【００１１】
本発明は、粒子（例えば、ナノ粒子、微小粒子および／またはミセル）に高いせん断力にさらすことが、安価で効率的であり、かつ毒性残留成分を使用しないナノ粒子の製造方法であるという認識を包含するものである。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子は、有毒成分を完全に含まないかまたはそれを実質的に含まない。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物は、有毒成分を完全に含まないかまたはそれを実質的に含まない。本発明はさらに、粒子（例えば、ナノ粒子、微小粒子および／またはミセル）に高いせん断力にさらすと、従来のナノ粒子の製造方法と比べて高い担持能力を有するナノ粒子を生成するという認識を包含する。
【００１２】
いくつかの実施形態では、本発明は、対象に組成物、物質または生物学的活性物質を送達する方法を提供する。いくつかの実施形態では、組成物、物質または生物学的活性物質を任意の経路で送達することができる。いくつかの実施形態では、組成物、物質または生物学的活性物質を経皮的に（または局所に）送達する。
【００１３】
いくつかの実施形態では、本発明は、対象にＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を対象の皮膚の表面に投与することによって、対象に生物学的活性物質を経皮的に送達するための方法および組成物を提供し、生物学的活性物質は、ＡＥナノ粒子内に封入されている、かつ／またはその表面に結合している。本発明は、皮膚の構造を変化させる、または改変することなく、本発明のＡＥナノ粒子が生物学的活性物質の経皮的送達を実現することができるという発見を包含するものである。例えば、生物学的活性物質の経皮的送達を実現するために、磨耗薬剤、または皮膚の最上層を磨滅させる薬剤（化学的、機械的、電気的、磁気的等のいずれであっても）を必要とすることはない。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質の経皮的送達のための組成物は、経皮パッチの形態であってもよい。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質の経皮的送達のためのＡＥナノ粒子を含む本発明の組成物は、皮膚の非標的部位領域に組成物を塗布することなく、皮膚上の標的部位への組成物の施用を可能にする塗布装置で用いることができる。
【００１４】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は生体高分子を含む。いくつかの実施形態では、その高分子はＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質である。いくつかの実施形態では、タンパク質は複数のタンパク質および／またはタンパク質複合体を含む。特定の実施形態では、本発明に従って送達される生物学的活性物質は１種または複数のボツリヌス毒素ペプチド、ポリペプチドおよび／またはタンパク質複合体である。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素はボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧのうちの１つまたは複数であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、単離されているか、かつ／または精製されたボツリヌス毒素であってもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、部分的に単離されているか、かつ／または部分的に精製されたボツリヌス毒素であってもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は天然のボツリヌス複合体であってもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は非毒性タンパク質と会合していてもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は組換え技術によるボツリヌス毒素であってもよい。
【００１５】
いくつかの実施形態では、本発明は、顔のしわ（例えば、額、眉間、リチド（ｒｈｙｔｉｄ）および／または眼窩領域を含むしわ）；多動性の顔のしわの線；広頸筋の横縞（ｐｌａｔｙｓｍａ  ｂａｎｄ）；筋肉けいれんおよび／または拘縮を含む神経筋の障害および状態（例えば、顔面神経麻痺、眼瞼けいれん、脳性麻痺、斜視および／またはジストニア）；前立腺肥大；多汗症；頭痛および／または顎関節疾患および障害（ＴＭＪ、「開口障（ｌｏｃｋｊａｗ）」としても知られている）を治療する方法を提供する。そうした方法は一般に、ボツリヌス毒素またはボツリヌス毒素複合体を経皮的に送達するために、ＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を対象に投与することを含む。
【００１６】
いくつかの実施形態では、本発明は、顔のしわ（例えば、額、眉間、リチドおよび／または眼窩領域を含むしわ）、多動性の顔のしわの線および／または広頸筋の横縞を治療するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物は、顔のしわを治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素またはボツリヌス毒素複合体を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物は顔のしわを治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、顔のしわには、眉間しわ、顔のしわの線（例えば、多動性の顔のしわの線）、額のしわ、顔面中央のしわ、口まわりのしわ、頸のしわおよび横縞（ｂａｎｄｉｎｇ）（例えば、広頸筋の横縞）およびあごのしわが含まれる。そうした方法は一般に、ボツリヌス毒素またはボツリヌス毒素複合体を経皮的に送達するための、ＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を対象に投与することを含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、本発明は、前立腺肥大を治療する方法は提供しない。いくつかの実施形態では、本発明は、筋肉けいれんおよび／または拘縮を含む神経筋の障害および状態を治療する方法は提供しない。いくつかの実施形態では、本発明は、多汗症を治療する方法は提供しない。いくつかの実施形態では、本発明は、頭痛を治療する方法は提供しない。いくつかの実施形態では、本発明は、ＴＭＪを治療する方法は提供しない。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
粒子の集団を含むナノ粒子組成物であって、前記粒子の大部分が約１０〜約３００ｎｍの直径を有し、前記粒子が１種または複数の両親媒性実体を含むナノ粒子組成物。
（項目２）
前記粒子の大部分が約１０〜約２５０ｎｍの範囲の直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３）
前記粒子の大部分が約１０〜約２００ｎｍの範囲の直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目４）
前記粒子の大部分が約１０〜約１５０ｎｍの範囲の直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５）
前記粒子の大部分が約１０〜約１２０ｎｍの範囲の直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６）
前記粒子の大部分が約１０〜約１００ｎｍの範囲の直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７）
前記粒子の大部分が約１０〜約５０ｎｍの範囲の直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目８）
前記粒子の集団が、３００ｎｍを超える直径を有する粒子を実質的に含まない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目９）
前記粒子の５０％未満が３００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０）
前記粒子の２５％未満が３００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１）
前記粒子の１０％未満が３００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２）
前記粒子の５％未満が３００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３）
前記粒子の１％未満が３００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４）
前記粒子の集団が、２００ｎｍを超える直径を有する粒子を実質的に含まない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１５）
前記粒子の５０％未満が２００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１６）
前記粒子の２５％未満が２００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１７）
前記粒子の１０％未満が２００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１８）
前記粒子の５％未満が２００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１９）
前記粒子の１％未満が２００ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２０）
前記粒子の集団が、１２０ｎｍを超える直径を有する粒子を実質的に含まない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２１）
前記粒子の５０％未満が１２０ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２２）
前記粒子の２５％未満が１２０ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２３）
前記粒子の１０％未満が１２０ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２４）
前記粒子の５％未満が１２０ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２５）
前記粒子の１％未満が１２０ｎｍを超える直径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２６）
最小粒子径と最大粒子径の差が約６００ｎｍを超えない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２７）
最小粒子径と最大粒子径の差が約５００ｎｍを超えない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２８）
最小粒子径と最大粒子径の差が約４００ｎｍを超えない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目２９）
最小粒子径と最大粒子径の差が約３００ｎｍを超えない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３０）
最小粒子径と最大粒子径の差が約２００ｎｍを超えない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３１）
最小粒子径と最大粒子径の差が約１００ｎｍを超えない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３２）
最小粒子径と最大粒子径の差が約５０ｎｍを超えない項目１に記載のナノ粒子組成物。（項目３３）
前記粒子が３００ｎｍの平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３４）
前記粒子が２００ｎｍの平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３５）
前記粒子が１５０ｎｍの平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３６）
前記粒子が１００ｎｍの平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３７）
前記粒子が７５ｎｍの平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３８）
前記粒子が５０ｎｍの平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目３９）
前記粒子が１００〜３００ｎｍの範囲の平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目４０）
前記粒子が５０〜２５０ｎｍの範囲の平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。（項目４１）
前記粒子が６０〜２００ｎｍの範囲の平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。（項目４２）
前記粒子が６５〜１５０ｎｍの範囲の平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。（項目４３）
前記粒子が７０〜１３０ｎｍの範囲の平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。（項目４４）
前記粒子が８０〜１１０ｎｍの範囲の平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。（項目４５）
前記粒子が９０〜１００ｎｍの範囲の平均径を有する項目１に記載のナノ粒子組成物。（項目４６）
有毒性溶媒を実質的に含まない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目４７）
５０％未満の有毒性溶媒を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目４８）
２５％未満の有毒性溶媒を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目４９）
１０％未満の有毒性溶媒を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５０）
５％未満の有毒性溶媒を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５１）
１％未満の有毒性溶媒を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５２）
安定である項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５３）
前記粒子の大部分が少なくとも１日間安定である項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５４）
前記粒子の大部分が少なくとも２週間安定である項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５５）
前記粒子の大部分が少なくとも２カ月間安定である項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５６）
前記粒子の大部分が少なくとも５カ月間安定である項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５７）
前記粒子の大部分が少なくとも１２カ月間安定である項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５８）
前記粒子の大部分が少なくとも２４カ月間安定である項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目５９）
高いせん断力にさらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６０）
高いせん断力に１０分間未満さらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６１）
高いせん断力に２分間未満さらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６２）
高いせん断力に１分間未満さらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６３）
高いせん断力に３０秒間未満さらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６４）
３，０００ｐｓｉを超える圧力にさらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６５）
１０，０００ｐｓｉを超える圧力にさらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６６）
１８，０００ｐｓｉを超える圧力にさらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６７）
２４，０００ｐｓｉを超える圧力にさらすことによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６８）
マイクロ流動化によって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目６９）
３，０００ｐｓｉを超える圧力でのマイクロ流動化によって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７０）
１０，０００ｐｓｉを超える圧力でのマイクロ流動化によって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７１）
１８，０００ｐｓｉを超える圧力でのマイクロ流動化によって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７２）
２４，０００ｐｓｉを超える圧力でのマイクロ流動化によって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７３）
前記マイクロ流動化が１回パスのマイクロ流動化である項目６８〜７２のいずれか一項に記載のナノ粒子組成物。
（項目７４）
キャビテーションによって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７５）
高圧均質化によって生成された項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７６）
両親媒性実体が概略記載されているナノ粒子組成物。
（項目７７）
両親媒性実体が具体的に記載されているナノ粒子組成物。
（項目７８）
１種または複数の生物学的活性物質を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目７９）
前記生物学的活性物質が粒子中に封入されている項目７８に記載のナノ粒子組成物。
（項目８０）
前記生物学的活性物質がミセル膜内に包み込まれている項目７８に記載のナノ粒子組成物。
（項目８１）
前記生物学的活性物質が粒子表面と会合している項目７８に記載のナノ粒子組成物。
（項目８２）
前記生物学的活性物質が１つまたは複数のボツリヌス毒素である項目７８に記載のナノ粒子組成物。
（項目８３）
前記ボツリヌス毒素が、Ａ型、Ｂ型、Ｃ１型、Ｃ２型、Ｄ型、Ｆ型およびＧ型を含む群から選択される項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目８４）
前記ボツリヌス毒素がＡ型ボツリヌス毒素である項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目８５）
前記ボツリヌス毒素がボツリヌス毒素複合体である項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目８６）
前記ボツリヌス毒素複合体が、非毒性の血球凝集素タンパク質および非毒性の非血球凝集素タンパク質を含む項目８５に記載のナノ粒子組成物。
（項目８７）
前記ボツリヌス毒素がアルブミンマトリックス中に取り込まれている項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目８８）
前記アルブミンがヒトアルブミンである項目８７に記載のナノ粒子組成物。
（項目８９）
前記ボツリヌス毒素が、精製されたボツリヌス毒素タンパク質またはその断片である項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目９０）
前記ボツリヌス毒素が、他のタンパク質から単離されるかまたは実質的に単離される項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目９１）
前記ボツリヌス毒素が、非毒性タンパク質から単離されるかまたは実質的に単離される項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目９２）
前記ボツリヌス毒素がボツリヌス菌から単離される項目８２に記載のナノ粒子組成物。（項目９３）
前記ボツリヌス毒素が化学的に合成される項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目９４）
前記ボツリヌス毒素が組換え技術によって生成される項目８２に記載のナノ粒子組成物。
（項目９５）
皮膚を改変する、または変化させることなく皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目９６）
皮膚浸透促進剤または磨耗剤を使用することなく皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目９７）
皮膚浸透促進剤または磨耗剤を使用することなく皮膚の最上層を浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目９８）
前記皮膚の最上層が角質層の表面である項目９７に記載のナノ粒子組成物。
（項目９９）
前記皮膚の最上層が皮膚の細孔を含む項目９７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１００）
前記皮膚の最上層が皮膚腺を含む項目９７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０１）
化学的浸透促進剤または磨耗剤を使用することなく、皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０２）
機械的浸透促進剤または磨耗剤を使用することなく、皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０３）
前記粒子が、皮膚を改変する、または変化させることなく皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０４）
前記粒子が、皮膚浸透促進剤または磨耗剤を使用することなく皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０５）
前記ボツリヌス毒素が、皮膚を改変する、または変化させることなく皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０６）
前記ボツリヌス毒素が、皮膚浸透促進剤または磨耗剤を使用することなく皮膚に浸透することができる項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０７）
オイルを含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０８）
前記オイルが、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、クロフサスグリの種、ルリヂサ、カデ、カモミール、キャノーラ、キャラウェー、カルナバ、ひまし、シナモン、ココアバター、ココナツ、タラの肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、アマニ、ゲラニオール、ヘチマ、ブドウの種、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイの実、ラバンディン、ラベンダー、レモン、リツェアクベバ、マカダミアナッツ、アオイ、マンゴーの種、メドウフォームの種、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナツ、ケシの実、カボチャの実、菜種、米ぬか、ローズマリー、サフラワー、ビャクダン、サザンカ、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチベル、クルミおよび小麦胚種のオイルならびにその組合せからなる群から選択される項目１０７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１０９）
前記オイルが大豆油である項目１０７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１０）
前記オイルが、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油、Ｌａｂｒａｆａｃ  ＷＬ１３４９およびその組合せからなる群から選択される項目１０７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１１）
２つ以上のオイルを含まない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１２）
界面活性剤を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１３）
前記界面活性剤が非イオン性洗剤である項目１１２に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１４）
前記界面活性剤が、ホスホグリセリド；ホスファチジルコリン；ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）；ジオレイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）；ジオレイルオキシプロピルトリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）；ジオレオイルホスファチジルコリン；コレステロール；コレステロールエステル；ジアシルグリセロール；ジアシルグリセロールスクシネート；ジホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）；ヘキサンデカノール；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの脂肪族アルコール；ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル；パルミチン酸またはオレイン酸などの表面活性脂肪酸；脂肪酸；脂肪酸モノグリセリド；脂肪酸ジノグリセリド；脂肪酸アミド；トリオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８５）グリココレート；モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ２０）；ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ−２０）；ポリソルベート６０（Ｔｗｅｅｎ−６０）；ポリソルベート６５（Ｔｗｅｅｎ−６５）；ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ−８０）；ポリソルベート８５（Ｔｗｅｅｎ−８５）；ポリオキシエチレンモノステアレート；サーファクチン；ポロキサマー；トリオレイン酸ソルビタンなどのソルビタン脂肪酸エステル；レシチン；リゾレシチン；ホスファチジルセリン；ホスファチジルイノシトール；スフィンゴミエリン；ホスファチジルエタノールアミン（セファリン）；カルジオリピン；ホスファチジン酸；セレブロシド；ジセチルホスフェート；ジパルミトイルホスファチジルグリセロール；ステアリルアミン；ドデシルアミン；ヘキサデシル−アミン；アセチルパルミテート；グリセロールリシノレエート；ヘキサデシルステアレート；ミリスチン酸イソプロピル；チロキサポール；ポリ（エチレングリコール）５０００−ホスファチジルエタノールアミン；ポリ（エチレングリコール）４００−モノステアレート；リン脂質；高い界面活性剤特性を有する合成および／または天然洗剤；デオキシコレート；シクロデキストリン；カオトロピック塩；イオン対形成剤；およびその組合せからなる群から選択される項目１１２に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１５）
前記界面活性剤がＴｗｅｅｎ８０である項目１１２に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１６）
２つ以上の界面活性剤を含まない項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１７）
オイルと界面活性剤を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１８）
前記オイルと界面活性剤が、０．５〜２．０の範囲の比で存在する項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１１９）
前記オイルと界面活性剤が、０．５〜１．５の範囲の比で存在する項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２０）
前記オイルと界面活性剤が、０．５〜１．０の範囲の比で存在する項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２１）
前記オイルと界面活性剤が、１．０〜２．０の範囲の比で存在する項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２２）
前記オイルと界面活性剤が、１．５〜２．０の範囲の比で存在する項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２３）
ナノ粒子組成物中のオイルの割合が１％〜３０％の範囲である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２４）
ナノ粒子組成物中のオイルの割合が１％〜２０％の範囲である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２５）
ナノ粒子組成物中のオイルの割合が１％〜１０％の範囲である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２６）
ナノ粒子組成物中のオイルの割合が約８％である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。（項目１２７）
ナノ粒子組成物中のオイルの割合が約５％である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。（項目１２８）
ナノ粒子組成物中の界面活性剤の割合が１％〜３０％の範囲である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１２９）
ナノ粒子組成物中の界面活性剤の割合が１％〜２０％の範囲である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３０）
ナノ粒子組成物中の界面活性剤の割合が１％〜１０％の範囲である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３１）
ナノ粒子組成物中の界面活性剤の割合が約８％である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３２）
ナノ粒子組成物中の界面活性剤の割合が約５％である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３３）
前記オイルが、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、クロフサスグリの種、ルリヂサ、カデ、カモミール、キャノーラ、キャラウェー、カルナバ、ひまし、シナモン、ココアバター、ココナツ、タラの肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、アマニ、ゲラニオール、ヘチマ、ブドウの種、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイの実、ラバンディン、ラベンダー、レモン、リツェアクベバ、マカダミアナッツ、アオイ、マンゴーの種、メドウフォームの種、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナツ、ケシの実、カボチャの実、菜種、米ぬか、ローズマリー、サフラワー、ビャクダン、サザンカ、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチベル、クルミおよび小麦胚種のオイルならびにその組合せからなる群から選択される項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３４）
前記オイルが大豆油である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３５）
前記オイルが、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油、Ｌａｂｒａｆａｃ  ＷＬ１３４９およびその組合せからなる群から選択される項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３６）
前記界面活性剤が非イオン性洗剤である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３７）
前記界面活性剤が、ホスホグリセリド；ホスファチジルコリン；ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）；ジオレイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）；ジオレイルオキシプロピルトリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）；ジオレオイルホスファチジルコリン；コレステロール；コレステロールエステル；ジアシルグリセロール；ジアシルグリセロールスクシネート；ジホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）；ヘキサンデカノール；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの脂肪族アルコール；ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル；パルミチン酸またはオレイン酸などの表面活性脂肪酸；脂肪酸；脂肪酸モノグリセリド；脂肪酸ジノグリセリド；脂肪酸アミド；トリオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ８５）グリココレート；モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ２０）；ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ−２０）；ポリソルベート６０（Ｔｗｅｅｎ−６０）；ポリソルベート６５（Ｔｗｅｅｎ−６５）；ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ−８０）；ポリソルベート８５（Ｔｗｅｅｎ−８５）；ポリオキシエチレンモノステアレート；サーファクチン；ポロキサマー；トリオレイン酸ソルビタンなどのソルビタン脂肪酸エステル；レシチン；リゾレシチン；ホスファチジルセリン；ホスファチジルイノシトール；スフィンゴミエリン；ホスファチジルエタノールアミン（セファリン）；カルジオリピン；ホスファチジン酸；セレブロシド；ジセチルホスフェート；ジパルミトイルホスファチジルグリセロール；ステアリルアミン；ドデシルアミン；ヘキサデシル−アミン；アセチルパルミテート；グリセロールリシノレエート；ヘキサデシルステアレート；ミリスチン酸イソプロピル；チロキサポール；ポリ（エチレングリコール）５０００−ホスファチジルエタノールアミン；ポリ（エチレングリコール）４００−モノステアレート；リン脂質；高い界面活性剤特性を有する合成および／または天然洗剤；デオキシコレート；シクロデキストリン；カオトロピック塩；イオン対形成剤およびその組合せからなる群から選択される項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３８）
前記界面活性剤がＴｗｅｅｎ８０である項目１１７に記載のナノ粒子組成物。
（項目１３９）
水性分散媒体中に分散された油性粒子を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４０）
前記水性分散媒体が、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、短鎖アルコール、５％デキストロース、リンゲル溶液、乳酸化リンゲル液、乳酸化リンゲル液＋５％デキストロース注射液、アシル化リンゲル注射液、Ｎｏｒｍｏｓｏｌ−Ｍ、Ｉｓｏｌｙｔｅ  Ｅ、およびその組合せからなる群から選択される項目１３９に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４１）
前記水性分散媒体が水である項目１３９に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４２）
前記油性粒子が、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、クロフサスグリの種、ルリヂサ、カデ、カモミール、キャノーラ、キャラウェー、カルナバ、ひまし、シナモン、ココアバター、ココナツ、タラの肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、アマニ、ゲラニオール、ヘチマ、ブドウの種、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイの実、ラバンディン、ラベンダー、レモン、リツェアクベバ、マカダミアナッツ、アオイ、マンゴーの種、メドウフォームの種、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナツ、ケシの実、カボチャの実、菜種、米ぬか、ローズマリー、サフラワー、ビャクダン、サザンカ、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチベル、クルミまたは小麦胚種のオイルからなる群から選択されるオイルを含む項目１３９に記載のナノ粒子組成物。（項目１４３）
前記油性粒子が大豆油を含む項目１３９に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４４）
前記油性粒子が、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油、Ｌａｂｒａｆａｃ  ＷＬ１３４９およびその組合せからなる群から選択されるオイルを含む項目１３９に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４５）
油性分散媒体中に分散された水性粒子を含む項目１に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４６）
前記水性粒子が、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、短鎖アルコール、５％デキストロース、リンゲル溶液、乳酸化リンゲル液、乳酸化リンゲル液＋５％デキストロース注射液、アシル化リンゲル注射液またはＮｏｒｍｏｓｏｌ−Ｍ、Ｉｓｏｌｙｔｅ  Ｅからなる群から選択される水性物質を含む項目１４５に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４７）
前記水性粒子が水を含む項目１４５に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４８）
前記油性分散媒体が、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、クロフサスグリの種、ルリヂサ、カデ、カモミール、キャノーラ、キャラウェー、カルナバ、ひまし、シナモン、ココアバター、ココナツ、タラの肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、アマニ、ゲラニオール、ヘチマ、ブドウの種、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイの実、ラバンディン、ラベンダー、レモン、リツェアクベバ、マカダミアナッツ、アオイ、マンゴーの種、メドウフォームの種、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナツ、ケシの実、カボチャの実、菜種、米ぬか、ローズマリー、サフラワー、ビャクダン、サザンカ、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチベル、クルミおよび小麦胚種のオイルならびにその組合せからなる群から選択される項目１４５に記載のナノ粒子組成物。
（項目１４９）
前記油性分散媒体が大豆油である項目１４５に記載のナノ粒子組成物。
（項目１５０）
前記オイルが、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油、Ｌａｂｒａｆａｃ  ＷＬ１３４９およびその組合せからなる群から選択される項目１４５に記載のナノ粒子組成物。
（項目１５１）
約１０〜約３００ｎｍの直径を有する粒子の集団を含むナノ粒子組成物であって、親水性成分および疎水性成分を含む少なくとも１つの両親媒性実体を含むナノ粒子組成物。
（項目１５２）
約１０〜約３００ｎｍの直径を有する粒子の集団を含むナノ粒子組成物であって、高いせん断力にさらすことによって生成され、親水性成分および疎水性成分を含む少なくとも１つの両親媒性実体を含み、少なくとも１つの生物学的活性物質を含むナノ粒子組成物。（項目１５３）
約１０〜約３００ｎｍの直径を有する粒子の集団；プルラン成分およびポリカプロラクトン成分を含む両親媒性実体；ならびに
少なくとも１つの生物学的活性物質
を含むナノ粒子組成物であって、高いせん断力にさらすことによって生成されたナノ粒子組成物。
（項目１５４）
項目１または１５１〜１５３に記載のナノ粒子組成物のいずれか１つを含む医薬組成物。
（項目１５５）
クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、軟膏、噴霧剤、粉剤、皮膚軟化剤およびその組合せからなる群から選択される項目１５４に記載の組成物。
（項目１５６）
クリーム剤である項目１５４に記載の組成物。
（項目１５７）
（ａ）生物学的活性物質を含む組成物を提供するステップと、
（ｂ）前記組成物を対象の皮膚に投与するステップと
を含む、対象に生物学的活性物質を経皮的に投与する方法。
（項目１５８）
前記組成物を、接着性パッチを用いて経皮的に投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１５９）
前記組成物を、スパチュラを用いて経皮的に投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１６０）
前記組成物を、スワブを用いて経皮的に投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１６１）
前記組成物を、針なしシリンジを用いて経皮的に投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１６２）
前記組成物を、手袋をはめた指で経皮的に投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１６３）
前記組成物を、保護していない指で経皮的に投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１６４）
前記組成物を、皮膚の非標的部位に塗布することなく、皮膚上の標的部位への組成物の塗布を可能にするデバイスを用いて経皮的に投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１６５）
前記ボツリヌス毒素のすべてが皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。
（項目１６６）
前記生物学的活性物質の少なくとも９９％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。（項目１６７）
前記生物学的活性物質の少なくとも９５％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。（項目１６８）
前記生物学的活性物質の少なくとも９０％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。（項目１６９）
前記生物学的活性物質の少なくとも７５％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。（項目１７０）
前記生物学的活性物質の少なくとも５０％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。（項目１７１）
前記生物学的活性物質の少なくとも２５％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。（項目１７２）
前記生物学的活性物質の少なくとも１０％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。（項目１７３）
前記生物学的活性物質の少なくとも１％が皮膚に浸透する項目１５７に記載の方法。
（項目１７４）
前記組成物を、しわ、顔のしわの線および／または頸のしわを治療するために投与する項目１５７に記載の方法。
（項目１７５）
前記しわ、顔のしわの線および／または頸のしわが、運動過多性の顔のしわの線、顔のしわ、広頸筋の横縞、デコルテ横縞およびその組合せからなる群から選択される項目１７４に記載の方法。
（項目１７６）
前記顔のしわが、額領域、眉間領域、前頭領域、側頭領域、リチド領域または眼窩領域の１つまたは複数を含む項目１７５に記載の方法。
（項目１７７）
前記組成物を、対象の皮膚の外観を改善するために投与する項目１５７に記載の方法。（項目１７８）
（ａ）（ｉ）対象；および
（ｉｉ）項目１または１５１〜１５３のいずれか一項に記載のナノ粒子組成物を含む組成物
を提供するステップと、
（ｂ）前記組成物を前記対象の皮膚に投与するステップと
を含む、対象に生物学的活性物質を経皮的に投与する方法。
（項目１７９）
（ａ）（ｉ）しわ、顔のしわの線および／または頸のしわの症状を示している対象；および
（ｉｉ）項目１または１５１〜１５３のいずれか一項に記載のナノ粒子組成物を含む組成物
を提供するステップと、
（ｂ）前記組成物を前記対象の皮膚に投与し、それによって前記症状を軽減するステップと
を含む、しわ、顔のしわの線および／または頸のしわを治療する方法。
（項目１８０）
（ａ）（ｉ）しわ、顔のしわの線および／または頸のしわの症状を示していない対象；および
（ｉｉ）項目１または１５１〜１５３のいずれか一項に記載のナノ粒子組成物を含む組成物
を提供するステップと、
（ｂ）前記組成物を前記対象の皮膚に投与し、それによって前記症状の発生を遅延させるステップと
を含む、しわ、顔のしわの線および／または頸のしわの発生を遅延させる方法。
（項目１８１）
１種または複数の両親媒性実体を含むプレミックスを提供するステップと、
項目１または１５１〜１５３のいずれか一項に記載のナノ粒子組成物が得られる期間および条件下で、前記プレミックスを高いせん断力または高圧均質化にさらすステップと
を含む、ナノ粒子組成物を製造する方法。
（項目１８２）
前記プレミックスが生物学的活性物質を含む項目１８１に記載の方法。
（項目１８３）
前記プレミックスがオイルを含む項目１８１に記載の方法。
（項目１８４）
前記プレミックスが界面活性剤を含む項目１８１に記載の方法。
（項目１８５）
（ａ）プルラン成分およびポリカプロラクトン成分を含む両親媒性実体を含むプレミックスを提供するステップと、
（ｂ）前記プレミックスを含む溶液を形成させるステップと、
（ｃ）前記プレミックスを、項目１または１５１〜１５３のいずれか一項に記載のナノ粒子組成物が得られる期間および条件下で、高いせん断力または高圧均質化にさらすステップと
を含む、ナノ粒子組成物を製造する方法。
（項目１８６）
（ａ）（ｉ）プルラン成分およびポリカプロラクトン成分を含む両親媒性実体；および（ｉｉ）生物学的活性物質
を含むプレミックスを提供するステップと、
（ｂ）前記プレミックスを含む溶液を形成させるステップと、
（ｃ）前記溶液を、項目１または１５１〜１５３のいずれか一項に記載のナノ粒子組成物が得られる期間および条件下で、高いせん断力または高圧均質化にさらすステップと
を含む、ナノ粒子組成物を製造する方法であって、
オイルと界面活性剤が０．５〜２．０（重量）の範囲の比で存在し、前記高いせん断力をマイクロ流動化によって発生させる、方法。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本出願は様々な特許公開物を引用するが、そのすべてを参照により本明細書に組み込む。
【００１９】
定義
磨耗：本明細書で用いる「磨耗」という用語は、皮膚の最上層を改変、崩壊、除去または破壊させる任意の手段を指す。いくつかの実施形態では、磨耗は、皮膚の最上層を改変、崩壊、除去または破壊する機械的手段を指す。いくつかの実施形態では、磨耗は、皮膚の最上層を改変、崩壊、除去または破壊する化学的手段を指す。その例を若干示すと、剥離剤（ｅｘｆｏｌｉａｎｔ）、微粒子（例えば、マグネシウムまたはアルミニウム粒子）、酸（例えば、α−ヒドロキシ酸またはβ−ヒドロキシ酸）、アルコールなどの薬剤は、磨耗を引き起こすことができる。一般に、例えば、Ｄｏｎｏｖａｎ（例えば、米国特許公開番号２００４／００９１８０および同２００５／１７５６３６ならびにＰＣＴ特許公開ＷＯ０４／０６９５４；そのすべてを参照により本明細書に組み込む）およびＧｒａｈａｍ（例えば、米国特許第６，９３９，８５２号および米国特許公開番号２００６／０９３６２４；その両方を参照により本明細書に組み込む）等に記載されているものなどの浸透促進剤は磨耗を引き起こすことが考えられる。もちろん、当業者は、ある特定の薬剤は、１つの濃度で存在するか、または１つもしくは複数の他の薬剤と共に存在する場合、磨耗を引き起こすことができるが、異なる環境下では磨耗を引き起こすことができないことを理解されよう。したがって、特定の材料が「磨耗剤」であるかないかは状況に依存することになる。当業者は磨耗を容易に評価することができる。例えば、皮膚の赤みまたは炎症の観察、および／または角質層の改変、崩壊、除去または浸食を示す皮膚の組織学的検査によって評価することができる。
【００２０】
アミノ酸：本明細書で用いる「アミノ酸」という用語は、その最も広い意味において、ポリペプチド鎖に取り込むことができる任意の化合物および／または物質を指す。いくつかの実施形態では、アミノ酸は一般構造式Ｈ２Ｎ−Ｃ（Ｈ）（Ｒ）−ＣＯＯＨを有する。いくつかの実施形態では、アミノ酸は天然由来のアミノ酸である。いくつかの実施形態では、アミノ酸は合成アミノ酸である。いくつかの実施形態では、アミノ酸はＤ−アミノ酸である。いくつかの実施形態では、アミノ酸はＬ−アミノ酸である。「標準アミノ酸」は、天然由来のペプチド中に通常認められる２０の標準Ｌ−アミノ酸のいずれかを指す。「非標準アミノ酸」は、合成によって調製されるか天然資源から得られるかに関係なく、標準アミノ酸以外の任意のアミノ酸を指す。本明細書で用いる「合成アミノ酸」は、これらに限定されないが、塩、アミノ酸誘導体（アミドなど）および／または置換体を含む化学的に改変されたアミノ酸を包含する。ペプチド中のカルボキシ末端および／またはアミノ末端アミノ酸を含むアミノ酸は、メチル化、アミド化、アセチル化、および／またはその活性に悪影響を及ぼすことなく、ペプチドの循環半減期を変えることができる他の化学基での置き換えによって改変させることができる。アミノ酸はジスルフィド結合に関与することができる。「アミノ酸」という用語は「アミノ酸残基」と互換的に用いられ、遊離アミノ酸および／またはペプチドのアミノ酸残基を指すことができる。それが遊離アミノ酸を指すかまたはペプチドの残基を指すかどうかは、その用語が用いられている文脈から明らかであろう。
【００２１】
両親媒性実体：本明細書で用いる「両親媒性実体」という用語は、親水性と疎水性の性質の両方を有する化学的実体を指す。本明細書で用いる「両親媒性（ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ）」および「両親媒性（ａｍｐｈｉｐａｔｈｉｃ）」という用語は互換的に用いることができる。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子の両親媒性実体は生体適合性である。生体適合性両親媒性実体は細胞に対してそれほど毒性はない。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子の両親媒性実体は生分解性である。生分解性両親媒性実体は、細胞機構および／または加水分解によって、細胞がそれほど有毒作用なく再利用するかまたは廃棄できる成分に分解される。いくつかの実施形態では、生分解性両親媒性実体およびその生分解副生成物は生体適合性である。いくつかの実施形態では、両親媒性実体は非免疫原性である。いくつかの実施形態では、両親媒性実体は、それ自体が両親媒性である１種または複数の個別の化合物または分子を含むことができる。いくつかの実施形態では、両親媒性実体は、それ自体は両親媒性ではないが、親水性または疎水性の特徴をある程度有する１種または複数の個別の成分を含むことができる。一般に、個別成分は互いに会合しており、その結果、その個別成分の集合体は両親媒性である。
【００２２】
動物：本明細書で用いる「動物」という用語は動物界の任意のメンバーを指す。いくつかの実施形態では、「動物」は任意の発達段階にあるヒトを指す。いくつかの実施形態では、「動物」はヒト以外の任意の発達段階の動物を指す。特定の実施形態では、ヒト以外の動物は哺乳動物（例えば、齧歯動物、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ヒツジ、ウシ、霊長類および／またはブタ）である。いくつかの実施形態では、動物には、これらに限定されないが、哺乳動物、鳥類、は虫類、両生類、魚類および／または虫が含まれる。いくつかの実施形態では、動物はトランスジェニック動物、遺伝子操作を受けた動物および／またはクローンであってもよい。
【００２３】
抗体：本明細書で用いる「抗体」という用語は免疫グロブリンを指し、それは天然由来でも合成由来でもその両方でもよい。抗体は、ヒトの部類のいずれをも含む任意の免疫グロブリンの部類のメンバー：ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよび／またはＩｇＥであってよい。抗体は、Ｆａｂ’；Ｆ（ａｂ’）２；ｓｃＦｖ（一本鎖変形体）などの抗体の断片および／または抗原結合部位を保持する他の任意の断片；および／または遺伝子操作を受けた断片を含む遺伝子操作を受けたｓｃＦｖ断片であってよい（例えば、Ａｌｌｅｎ、２００２年、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ、２：７５０頁およびその中の参考文献を参照されたい；これを参照により本明細書に組み込む）。本発明の特定の実施形態では、その用語は、ヒト由来の配列を含む「ヒト化された」抗体を指す。いくつかの実施形態では、「ヒト化された」抗体は、ヒト由来の定常領域と融合した齧歯動物由来の可変領域を特徴としており、したがって、齧歯動物抗体の特異性を保持している。ヒト由来の領域は、人間においてまず合成されるという意味でヒトから直接由来する必要はないことに留意されたい。例えば、「ヒト」領域は、そのゲノムがヒト免疫グロブリン遺伝子を組み込んでいる齧歯動物においてもたらすことができる（例えば、Ｈａｒｌｏｗら、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，  Ｎ．Ｙ，、１９８８年を参照されたい；これを参照により本明細書に組み込む）。抗体はポリクローナルであってもモノクローナルであってもよい。
【００２４】
おおよそ：１つまたは複数の所定の値に適用される、本明細書での「おおよそ」または「約」という用語は、言及された参照値と近似した値を指す。特定の実施形態では、「おおよそ」または「約」は、別段の指定がないか、あるいは文脈から明らかでない限り（そうした数が、可能な値の１００％を超える場合を除いて）、両方向に（それより大きいかまたは小さい）、言及された参照値の２５％、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％またはそれより少ない範囲内に包含される範囲の値を指す。
【００２５】
生物学的活性物質：本明細書で用いる「生物学的活性物質」という語句は、生物系および／または有機体において活性を有する任意の物質を指す。例えば、有機体に投与した場合、その有機体に対して生物学的作用を有する物質は生物学的に活性であると見なされる。具体的な実施形態では、タンパク質またはポリペプチドが生物学的に活性である場合、タンパク質またはポリペプチドの少なくとも１つの生物学的活性を共有する、そのタンパク質またはポリペプチドの一部は一般に、「生物学的に活性な」部分であると称される。
【００２６】
特徴的部分：本明細書で用いる、ある物質の「特徴的部分」という語句は、最も広い意味で、ある程度の配列および／または構造的同一性および／または少なくとも１つの機能的特徴を、対応するもとのままの（ｉｎｔａｃｔ）物質と共有するものである。例えば、タンパク質またはポリペプチドの「特徴的部分」は、一続きの連続するアミノ酸、または一続きの連続するアミノ酸の集合体を含むものであり、それが合わせてタンパク質またはポリペプチドの特徴である。いくつかの実施形態では、そうしたそれぞれの連続する一続きは一般に、少なくとも２、５、１０、１５、２０個またはそれ以上のアミノ酸を含む。一般に、特徴的部分は、上記に規定した配列同一性に加えて、対応するもとのままのタンパク質と少なくとも１つの機能的特徴を共有するものである。いくつかの実施形態では、特徴的部分は生物学的に活性であってよい。
【００２７】
分散媒体：本明細書で用いる「分散媒体」という用語は、その中に粒子（例えば、ＡＥナノ粒子）が分散される液媒体を指す。一般に、分散液は、少なくとも２つの非混和性材料を一緒にしたとき形成される。「水中油型」分散液は、油性粒子がその中で水性分散媒体中に分散されているものである。「油中水型」分散液は、水性粒子がその中で油性分散媒体中に分散されているものである。分散液は、２つの任意の非混和性媒体から形成させることができ、水性媒体と油性媒体の組合せに厳密に限定されないことを当業者は理解されよう。したがって、「分散媒体」という用語は、それが一般に「水性」および「油性」のカテゴリーを指すのが一般的であるのにもかかわらず、任意の分散媒体に広く適用される。
【００２８】
封入された：「封入された（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ）」（また「封入する（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅ）」または「封入する（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ）」も）という用語は、本明細書では、封入された実体が別の材料で完全に取り囲まれているという意味で用いられる。一例を挙げると、生物学的活性物質は、本発明の組成物中のナノ粒子に封入することができる。そうした封入は、例えば、ナノ粒子組成物の生成の際、例えば高いせん断力への曝露の際に行うことができる。
【００２９】
発現：本明細書で用いる、核酸配列の「発現」という用語は以下の事象の１つまたは複数を指す：（１）ＤＮＡ配列からＲＮＡ鋳型の生成（例えば、転写による）；（２）ＲＮＡ転写物のプロセシング（例えば、スプライシング、編集、５’キャップ形成および／または３’末端形成による）；（３）ＲＮＡからポリペプチドまたはタンパク質への翻訳；（４）ポリペプチドまたはタンパク質の翻訳後修飾。
【００３０】
遺伝子：本明細書で用いる「遺伝子」という用語は、当業界で理解されている意味を有する。当業者は、「遺伝子」という用語が、遺伝子調節配列（例えば、プロモーター、エンハンサー等）および／またはイントロン配列を含むことができることを理解されよう。さらに、遺伝子の定義には、タンパク質はコードしないが、ｔＲＮＡなどの機能性ＲＮＡ分子をコードする核酸への言及が含まれることを理解されよう。明確にするために、本出願で用いられるように、「遺伝子」という用語は一般に、タンパク質をコードする核酸の一部を指し、当業者には文脈から明らかなように、任意選択で調節配列を含むことができることを述べておく。この定義は、「遺伝子」という用語の非タンパク質をコードする発現単位への適用を排除しようとするものではなく、ほとんどの場合、本明細書で用いる用語が、タンパク質もコードする核酸を指すことを明確にしようとするものである。
【００３１】
遺伝子産物または発現産物：本明細書で用いる「遺伝子産物」または「発現産物」という用語は一般に、遺伝子から転写されたＲＮＡ（プロセシング前および／またはプロセシング後）、または遺伝子から転写されたＲＮＡによってコードされるポリペプチド（修飾前および／または修飾）を指す。
【００３２】
相同性：本明細書で用いる「相同性」および「同一性」という用語は、互換的に用いられ、高分子間、例えば核酸分子間（例えば、ＤＮＡ分子および／またはＲＮＡ分子）および／またはポリペプチド分子間の全体的近縁性を指す。２つの核酸配列の相同性または同一性の割合の計算は、２つの配列を最適比較のために整列化することによって実施することができる（例えば、最適整列のためにギャップを、第１および第２の核酸配列の一方またはその両方に導入することができ、比較のためには非相同的配列は無視することができる）。特定の実施形態では、比較のために整列された配列の長さは基準配列の長さの少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または１００％である。次いで、対応するヌクレオチド位置のヌクレオチドを比較する。第１の配列中の位置が、第２の配列中の対応する位置と同じヌクレオチドで占められている場合、その分子はその位置で同一（または相同的）である。２つの配列間の同一性の割合は、ギャップの数を考慮に入れて、配列によって共有される同じ位置の数と、２つの配列を最適整列させるために導入する必要のある各ギャップの長さの関数である。配列の比較および２つの配列間の同一性の割合の決定は、数学アルゴリズムを用いて行うことができる。例えば、２つのヌクレオチド配列間の同一性の割合は、ＭｅｙｅｒｓおよびＭｉｌｌｅｒのアルゴリズム（ＣＡＢＩＯＳ、１９８９年、４：１１〜１７頁；これを参照により本明細書に組み込む）を用いて決定することができる。このアルゴリズムは、ＰＡＭ１２０重量残基表（ｗｅｉｇｈｔ  ｒｅｓｉｄｕｅ  ｔａｂｌｅ）、１２のギャップ長さペナルティおよび４のギャップペナルティを用いたＡＬＩＧＮプログラム（第２．０版）に組み込まれている。あるいは、２つのヌクレオチド配列間の同一性の割合は、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリクスを用いたＧＣＧソフトウェアパッケージのＧＡＰプログラムを用いて決定することもできる。
【００３３】
親水性：本明細書で用いる「親水性」物質は極性分散媒体に可溶性の物質である。いくつかの実施形態では、親水性物質は一時的に極性分散媒体と結合することができる。いくつかの実施形態では、親水性物質は一時的に水素結合で極性分散媒体と結合することができる。いくつかの実施形態では、極性分散媒体は水である。いくつかの実施形態では、親水性物質はイオン性であってよい。いくつかの実施形態では、親水性物質は非イオン性であってよい。いくつかの実施形態では、親水性物質は、オイル、非極性分散媒体または疎水性分散媒体より、水、極性分散媒体または親水性分散媒体に容易に溶解することができる。いくつかの実施形態では、親水性物質は、オイル、非極性分散媒体または疎水性分散媒体中には、水、極性分散媒体または親水性分散媒体中ほどは容易には溶解しない。いくつかの実施形態では、それが他の物質より水、極性分散媒体または親水性分散媒体中により可溶性であるため、ある物質は別の物質と比べて親水性である。いくつかの実施形態では、それが他の物質ほど、オイル、非極性分散媒体または疎水性分散媒体中に可溶性ではないため、ある物質は別の物質と比べて親水性である。
【００３４】
疎水性：本明細書で用いる「疎水性」物質は非極性分散媒体中に可溶性の物質である。いくつかの実施形態では、疎水性物質は極性分散媒体からはじかれる。いくつかの実施形態では、極性分散媒体は水である。いくつかの実施形態では、疎水性物質は非極性である。いくつかの実施形態では、疎水性物質は、水、極性分散媒体または親水性分散媒体より、オイル、非極性分散媒体または疎水性分散媒体に容易に溶解することができる。いくつかの実施形態では、疎水性物質は、水、極性分散媒体または親水性分散媒体中には、オイル、非極性分散媒体または疎水性分散媒体ほど容易には溶解しない。いくつかの実施形態では、それが他の物質よりオイル、非極性分散媒体または疎水性分散媒体中により可溶性であるため、ある物質は別の物質と比べて疎水性である。いくつかの実施形態では、それが他の物質ほど水、極性分散媒体または親水性分散媒体中に可溶性ではないため、ある物質は別の物質と比べて疎水性である。
【００３５】
〜と共に（ｉｎ  ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ）：本明細書で用いる「〜と共に送達する」という語句は、２つ以上の物質または薬剤を同時に送達することを指す。具体的には、本発明によれば、本明細書ではこの語句を、本発明の生物学的活性物質をＡＥナノ粒子および／またはナノ粒子組成物と一緒に送達する関連で用いる。物質または薬剤は、その物質または薬剤がＡＥナノ粒子および／またはナノ粒子組成物と一緒にされているか；ＡＥナノ粒子に封入されているかまたはＡＥナノ粒子によって完全に取り囲まれているか；ＡＥナノ粒子ミセル膜中に埋め込まれているか；かつ／またはＡＥナノ粒子ミセル膜の外表面と会合している場合に、ＡＥナノ粒子と共に送達される。ＡＥナノ粒子および／またはナノ粒子組成物と共に送達される物質または薬剤は、ＡＥナノ粒子および／またはナノ粒子組成物と共有結合的に結合していてもいなくてもよい。ナノ粒子および／またはナノ粒子組成物と共に送達される物質または薬剤は、吸着力でＡＥナノ粒子および／またはナノ粒子組成物と結合していてもいなくてもよい。
【００３６】
単離された：本明細書で用いる「単離された」という用語は、（１）最初に生成された際（本来的に、かつ／または実験装置で）にそれと一緒になっている成分の少なくとも一部から分離され、かつ／または（２）人の手によって、作製、調製および／または製造された物質および／または実体を指す。単離された物質および／または実体は、最初にそれと一緒になっている他の成分の少なくとも約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％またはそれ以上から分離することができる。いくつかの実施形態では、単離された物質および／または実体は９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％を超える純度である。
【００３７】
マイクロ流動化された：本明細書で用いる「マイクロ流動化された」という用語は、高いせん断力にさらすことを意味する。いくつかの実施形態では、高いせん断力へのそうした曝露は高圧への曝露によって達成される。いくつかの実施形態では、そうした高圧は約１５，０００〜約２６，０００ｐｓｉの範囲内である。いくつかの実施形態では、高いせん断力へのそうした曝露はキャビテーションによって達成される。いくつかの実施形態では、高いせん断力へのそうした曝露は、試料を、例えばＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ／ＭＦＩＣ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、または均一なナノ粒子組成物を生成させるのに有用な他の類似の装置などの機器に通すことによって達成される。本発明のいくつかの実施形態では、試料を、約１０分間未満の期間、高いせん断力にさらすことによってマイクロ流動化させる。いくつかの実施形態では、その期間は約９、８、７、６、５、４、３、２または１分間未満である。いくつかの実施形態では、その期間は約１〜２分間の範囲内である。いくつかの実施形態では、その期間は１分間未満である。いくつかの実施形態では、その期間は約３０秒間である。本発明のいくつかの実施形態では、高いせん断力に１回さらすことによって、試料を「マイクロ流動化する」。そうした実施形態は、「１回パス」マイクロ流動化と称される。
【００３８】
ナノ粒子：本明細書で用いる「ナノ粒子」という用語は、１０００ｎｍ（ｎｍ）未満の直径を有する任意の粒子を指す。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は、米国国立科学財団（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）による定義で３００ｎｍ未満の直径を有する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は米国国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）による定義で１００ｎｍ未満の直径を有する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は、それが、ミセル膜によってバルク溶液から分離されている密封された区画を含むという点でミセルである。「ミセル膜」は、空間または区画を取り囲み密封する（例えば、内腔を画定する）ように凝集した両親媒性実体を含む。
【００３９】
ナノ粒子組成物：本明細書で用いる「ナノ粒子組成物」という用語は、少なくとも１つのＡＥナノ粒子を含む任意の物質を指す。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物はＡＥナノ粒子の均一な集合体である。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は分散液またはエマルジョンである。一般に、分散液またはエマルジョンは、少なくとも２つの非混和性材料が混合されたときに形成される。「水中油型」分散液は、その中で油性粒子（または疎水性もしくは非極性）が水性分散媒体中に分散されているものである。「油中水型」分散液は、その中で水性（または親水性もしくは極性）粒子が油性分散媒体中に分散されているものである。分散液は、２つの任意の非混和性媒体から形成させることができ、厳密には水性媒体と油性媒体の組合せに限定されないことを当業者は理解されよう。したがって「分散媒体」という用語は、それが一般に「水性」および「油性」カテゴリーを指すにもかかわらず、任意の分散媒体に広く適用される。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物はナノエマルジョンである。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物はミセルを含む。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は安定である。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は、ＡＥナノ粒子と共に送達される１種または複数の生物学的活性物質を含む。
【００４０】
〜で汚染されていない：本明細書でナノ粒子組成物について言及するのに用いる場合の「〜で汚染されていない」という語句は、「〜を実質的に含まない」と同義であり、ナノ粒子組成物が約５０％以下の当該材料を含むことを表す。例えば、あるナノ粒子組成物が、その直径が示された範囲外にある粒子を「実質的に含まない」と記されている場合、その組成物中の約５０％以下の粒子は、範囲外の直径を有する。いくつかの実施形態では、２５％以下の粒子は範囲外にある。いくつかの実施形態では、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％以下またはそれ以下の粒子は示された範囲外の直径を有する。
【００４１】
核酸：本明細書で用いる「核酸」という用語は、その最も広い意味において、オリゴヌクレオチド鎖中に組み込むことができる任意の化合物および／または物質を指す。いくつかの実施形態では、「核酸」はＲＮＡならびに一本鎖および／または二本鎖ＤＮＡおよび／またはｃＤＮＡを包含する。さらに、「核酸」「ＤＮＡ」「ＲＮＡ」という用語および／または類似の用語には、核酸類似物、すなわちリン酸ジエステル主鎖以外を有する類似物が含まれる。例えば、当業界で知られており、主鎖中にリン酸ジエステル結合の代わりにペプチド結合を有する、いわゆる「ペプチド核酸」は、本発明の範囲内であるものとする。「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」という用語は、互いの縮重型であり、かつ／または同じアミノ酸配列をコードするすべてのヌクレオチド配列を含む。タンパク質および／またはＲＮＡをコードするヌクレオチド配列はイントロンを含むことができる。
【００４２】
栄養補給物質：本明細書で用いる「栄養補給物質」という用語は、医学的、健康面での利益または生物学的利益を提供すると考えられる任意の物質を指す。いくつかの実施形態では、栄養補給物質は病気を予防する。いくつかの実施形態では、栄養補給物質は基礎的な栄養価を与えることができる。いくつかの実施形態では、栄養補給物質は食品、または食品の一部である。いくつかの実施形態では、栄養補給物質は、単離された栄養物類、栄養補助食品、ビタミン、ミネラル、ハーブ、強化食品、治療用食品（ｈｅａｌｉｎｇ  ｆｏｏｄ）、遺伝子組換え食品および加工食品の部類であってよい。栄養補給物質は「ファイトケミカル食品」または「機能性食品」としても知られている。
【００４３】
患者：本明細書で用いる「患者」または「対象」という用語は動物を意味する。いくつかの実施形態では、その動物は哺乳動物、一般にヒトである。
【００４４】
プレミックス：本明細書で用いる「プレミックス」という用語は、その後で本発明によるナノ粒子組成物を生成させるのに使用される成分の任意の組合せである。例えば、プレミックスは、高いせん断力にかけられた場合、本発明によるＡＥナノ粒子を生成させる成分の任意の集合体である。いくつかの実施形態では、プレミックスは２つ以上の非混和性溶媒を含む。いくつかの実施形態では、プレミックスは、自己集合して微小粒子またはナノ粒子になる成分を含む。いくつかの実施形態では、プレミックスは、自己集合してミセルになる成分を含む。いくつかの実施形態では、プレミックスは、２００７年１１月３０日出願のＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０７／ 、表題「Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｆｏｒ」に記載されているような１種または複数のペプチドを含む。いくつかの実施形態では、プレミックスは１種または複数の非改変ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、プレミックスは少なくとも１つの他の生物学的活性物質を含む。いくつかの実施形態では、プレミックスを、かき混ぜ、混合しかつ／または攪拌する。いくつかの実施形態では、プレミックスを、高いせん断力にかけられる前に、かき混ぜ、混合しかつ／または攪拌する。いくつかの実施形態では、プレミックスは、少なくとも１つの可溶化成分（すなわち、溶液中にある少なくとも１つの成分）を含む。いくつかのそうした実施形態では、そうした可溶化が達成された後に、プレミックスを高いせん断力にさらす。
【００４５】
純粋：本明細書で用いるように、ある物質および／または実体が他の成分を実質的に含有しなければ、それは「純粋」である。例えば、特定の物質および／または実体を、約９０％を超えて含む調製物は一般に、純粋な調製物であると考えられる。いくつかの実施形態では、物質および／または実体は少なくとも９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の純度である。
【００４６】
せん断力：本明細書で用いる「せん断力」という用語は、材料の面に対して垂直な力に対向する、材料の面に対して平行な力を指す。いくつかの実施形態では、均一なナノ粒子組成物を生成させるために、組成物を高いせん断力にさらす。高いせん断力を発生させるためには、当業界で知られている任意の方法を用いることができる。いくつかの実施形態では、高いせん断力を発生させるためにキャビテーションが用いられる。いくつかの実施形態では、高いせん断力を発生させるために高圧均質化が用いられる。それに代えるかまたはそれに加えて、高圧、例えば約１５，０００ｐｓｉにかけて高いせん断力を施すことができる。いくつかの実施形態では、そうした高圧は約１８，０００〜約２６，０００ｐｓｉの範囲内である。いくつかの実施形態では、それは約２０，０００〜約２５，０００ｐｓｉの範囲内である。いくつかの実施形態では、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ／ＭＦＩＣ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）または同様の他の装置を用いて高いせん断力を発生させる。Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）処理装置はナノスケール領域まで微細化するために、高圧を提供し、高速（一般に５０ｍ／ｓ〜３００ｍ／ｓの範囲）でマイクロチャンネル（一般に７５ミクロンのオーダーの大きさを有する）を通して組成物を加速することによって、高いせん断速度をもたらす。流体はマイクロチャンネルを出る際にジェット流を形成し、このジェット流は、対向するマイクロチャンネルからのジェット流と衝突する。チャンネル内においてその流体は、従来技術より高い程度の高いせん断（最大で１０７１／ｓ）を受ける。ジェット流の衝突によってサブミクロンレベルでの混合がもたらされる。したがって、そうした装置においては、高いせん断および／または衝撃によって、粒子の微細化と多相の混合を実現することができる。本発明のいくつかの実施形態では、試料を、約１０分間未満の期間高いせん断力にさらす。いくつかの実施形態では、その期間は約９、約８、約７、約６、約５、約４、約３、約２または約１分間未満である。いくつかの実施形態では、その期間は約１〜約２分間またはそれ以下の範囲内である。いくつかの実施形態では、その期間は約３０秒間である。本発明のいくつかの実施形態では、試料は、高いせん断力への１回の曝露によって「マイクロ流動化」される。そうした実施形態を、本明細書では「１回パス」マイクロ流動化と称する。
【００４７】
小分子：一般に、「小分子」は当業界では、約５キロダルトン（Ｋｄ）未満の大きさの有機分子と理解されている。いくつかの実施形態では、小分子は約３Ｋｄ、約２Ｋｄまたは約１Ｋｄ未満である。いくつかの実施形態では、小分子は約８００ダルトン（Ｄ）、約６００Ｄ、約５００Ｄ、約４００Ｄ、約３００Ｄ、約２００Ｄまたは約１００Ｄ未満である。いくつかの実施形態では、小分子は非重合体である。いくつかの実施形態では、小分子はタンパク質、ペプチドまたはアミノ酸ではない。いくつかの実施形態では、小分子は核酸またはヌクレオチドではない。いくつかの実施形態では、小分子は糖類または多糖類ではない。
【００４８】
対象：本明細書で用いる「対象」または「患者」という用語は、例えば実験、診断、予防および／または治療の目的で、それに本発明の組成物を投与することができる任意の有機体を指す。典型的な対象には、動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ヒト以外の霊長類およびヒトなどの哺乳動物；昆虫；虫；等）が含まれる。
【００４９】
実質的に：本明細書で用いる「実質的に」という用語は、全部かまたはほぼ全部の程度または度合いの所定の特徴または特性を示す定性的状態を指す。生物学的技術分野の技術者は、生物学的および化学的現象は、それが完了にまで至るか、かつ／または完全に進行するか、または絶対的結果に達するかもしくはそれを回避することは、仮にあったとしても、それが極めて稀であることを理解されよう。したがって、「実質的に」という用語は本明細書では、多くの生物学的および化学的現象に固有の完全性の潜在的な欠如をとらえるために用いられる。
【００５０】
安定な：「安定な」という用語は、本明細書でナノ粒子組成物に適用する場合、組成物が、ある期間にわたってその物理的構造の１つまたは複数の側面（例えば、粒子の粒径範囲および／または分布）を維持することを意味する。本発明のいくつかの実施形態では、安定なナノ粒子組成物は、平均粒子径、最大粒子径、粒子径の範囲および／または粒子径の分布（すなわち、指定された粒子径を超える粒子および／または指定された粒子径の範囲外にある粒子の割合）をある期間にわたって維持する組成物である。いくつかの実施形態では、その期間は少なくとも約１時間である。いくつかの実施形態では、その期間は約５時間、約１０時間、約１日間、約１週間、約２週間、約１カ月、約２カ月、約３カ月、約４カ月、約５カ月、約６カ月、約８カ月、約１０カ月、約１２カ月、約２４カ月またはそれ以上である。いくつかの実施形態では、その期間は、約１日〜約２４カ月、約２週間〜約１２カ月、約２カ月〜約５カ月等の範囲内である。例えば、ナノ粒子組成物を長期保存、温度変化および／またはｐＨ変化にかけ、その集団中のナノ粒子の大部分が示された範囲内の直径（すなわち、例えば、約１０ｎｍ〜１２０ｎｍ）を維持した場合、そのナノ粒子組成物は安定である。そうしたいくつかの集団について、大部分とは、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、約９９．５％、約９９．６％、約９９．７％、約９９．８％、約９９．９％超またはそれ以上のことである。本発明のいくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物が１種または複数の生物学的活性物質（例えば、ボツリヌス毒素）を含む場合、指定された期間にわたって、かつ指定された一連の条件下で、組成物中の生物学的活性物質の濃度が維持されれば、そのナノ粒子組成物は安定であると考えられる。
【００５１】
実質的に含まない：その組成物中の約５０％以下の粒子がある範囲外の直径を有する場合、本発明のナノ粒子組成物は、その直径が示された範囲外の粒子を「実質的に含まない」と称される。いくつかの実施形態では、２５％以下の粒子はその範囲外である。いくつかの実施形態では、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％以下またはそれ以下の粒子は示された範囲外の直径を有する。
【００５２】
患う：疾患、障害または状態（例えば、顔のしわ）を「患う」個体は、疾患、障害もしくは状態の症状を有すると診断されているか、またはそれを示す。
【００５３】
治療有効量：本明細書で用いる「治療有効量」という用語は、疾患、障害および／または状態を患うかまたはそれに罹りやすい患者に投与した場合、その疾患、障害および／または状態を治療するのに十分な本発明のＡＥナノ粒子組成物の量を意味する。
【００５４】
治療薬：本明細書で用いる「治療薬」という語句は、対象に投与した場合、治療効果を有するか、かつ／または所望の生物学的および／または薬理学的効果を誘発する任意の薬剤を指す。
【００５５】
有毒性溶媒：本明細書で用いる「有毒性溶媒」という用語は、動物の組織を改変、崩壊、除去または破壊させる恐れのある任意の物質を指す。当業者が理解されるように、動物の組織は、生きた細胞、死んだ細胞、細胞外マトリックス、細胞間結合（ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｊｕｎｃｔｉｏｎ）、生体分子等を含むことができる。若干例を挙げると、有毒性溶媒には、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトイミド、ジメチルホルムアミド、クロロホルム、テトラメチルホルアミド、アセトン、酢酸エステルおよびアルカリが含まれる。
【００５６】
治療：本明細書で用いる「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」（さらには「治療する（ｔｒｅａｔ）」または「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」）という用語は、特定の疾患、障害および／または状態（例えば、顔のしわ）の１つまたは複数の症状または特徴を、部分的にまたは完全に軽減する、改善する、生き返らせる、阻止する、その開始を遅延させる、その重篤度を軽減させる、かつ／またはその発生率を低減させる生物学的活性物質の任意の投与を指す。そうした治療は、関係する疾患、障害および／または状態の兆候を示さない対象の治療であっても、かつ／または疾患、障害および／または状態のごく初期の兆候を示す対象の治療であってもよい。それに代えるかまたはそれに加えて、そうした治療は、関係する疾患、障害および／または状態の１つまたは複数の確定的な兆候を示す対象の治療であってもよい。
【００５７】
均一な：ナノ粒子組成物に関して本明細書で用いる場合、「均一な」という用語は、個々のナノ粒子が指定された範囲の粒子径サイズを有するナノ粒子組成物を指す。例えば、いくつかの実施形態では、均一なナノ粒子組成物は、最大直径と最小直径との間の差が約６００、約５５０、約５００、約４５０、約４００、約３５０、約３００、約２５０、約２００、約１５０、約１００、約９０、約８０、約７０、約６０、約５０ｎｍまたはそれ以下を超えない組成物である。いくつかの実施形態では、本発明の均一なナノ粒子組成物中の粒子（例えば、ＡＥナノ粒子）は、約６００、約５５０、約５００、約４５０、約４００、約３５０、約３００、約２５０、約２００、約１５０、約１３０、約１２０、約１１５、約１１０、約１００、約９０、約８０ｎｍより小さいまたはそれ以下の直径を有する。いくつかの実施形態では、本発明の均一なナノ粒子組成物中の粒子（例えば、ＡＥナノ粒子）は約１０〜約６００ｎｍの範囲内の直径を有する。いくつかの実施形態では、本発明の均一なナノ粒子組成物中の粒子（例えば、ＡＥナノ粒子）は、約１０〜約３００、約１０〜約２００、約１０〜約１５０、約１０〜約１３０、約１０〜約１２０、約１０〜約１１５、約１０〜約１１０、約１０〜約１００または約１０〜約９０ｎｍの範囲内の直径を有する。いくつかの実施形態では、本発明のボツリヌスナノ粒子組成物中の粒子（例えば、ＡＥナノ粒子）は、約３００、約２５０、約２００、約１５０、約１３０、約１２０、約１１５、約１１０、約１００または約９０ｎｍを下まわる平均粒子径を有する。いくつかの実施形態では、平均粒子径は約１０〜約３００、約５０〜約２５０、約６０〜約２００、約６５〜約１５０、約７０〜約１３０ｎｍの範囲内である。いくつかの実施形態では、平均粒子径は約８０〜約１１０ｎｍである。いくつかの実施形態では、平均粒子径は約９０〜約１００ｎｍである。いくつかの実施形態では、本発明の均一なナノ粒子組成物中の粒子（例えば、ＡＥナノ粒子）の大部分は、指定されたサイズを下まわるかまたは指定された範囲内の直径を有する。いくつかの実施形態では、その大部分とは、組成物中に５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、９９．９％を超えるかまたはそれ以上その粒子があることである。本発明のいくつかの実施形態では、均一なナノ粒子組成物は、試料をマイクロ流動化することによって実現される。本発明のいくつかの実施形態では、均一なナノ粒子組成物は高いせん断力にさらすことによって、例えばマイクロ流動化によって調製される。
【００５８】
ベクター：本明細書で用いる「ベクター」は、それと結合した別の核酸を輸送することができる核酸分子を指す。いくつかの実施形態では、ベクターは、真核細胞および／または原核細胞などの宿主細胞中で、それに結合している核酸の染色体外複製および／または発現を実現することができる。操作して結合された遺伝子の発現を対象とすることができるベクターを、本明細書では「発現ベクター」と称する。
両親媒実体（ＡＥ）ナノ粒子
いくつかの実施形態では、本発明はＡＥナノ粒子を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は安定である（すなわち、ナノ粒子組成物の粒子は、温度および／またはｐＨを変化させても経時的に、示された範囲内に留まる）。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は無菌性である（すなわち、ナノ粒子組成物は生きた細胞汚染物質を含まない）。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は耐細菌性である（すなわち、ナノ粒子組成物は観測可能な細菌増殖が存在しないことを特徴とする）。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物は、有毒成分を完全に含まないかまたはそれを実質的に含まない。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子は有毒成分を完全に含まないかまたはそれを実質的に含まない。
【００５９】
いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は均一である。いくつかの実施形態では、均一なナノ粒子組成物は、最小直径と最大直径とのその差が約６００ｎｍ、約５５０ｎｍ、約５００ｎｍ、約４５０ｎｍ、約４００ｎｍ、約３５０ｎｍ、約３００ｎｍ、約２５０ｎｍ、約２００ｎｍ、約１５０ｎｍまたは約１００ｎｍを超えない粒子の集団を含む。
【００６０】
いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物のＡＥナノ粒子は、約１０００、約６００、約５５０、約５００、約４５０、約４００、約３５０、約３００、約２５０、約２００、約１５０、約１３０、約１２０、約１１５、約１１０、約１００、約９０、約８０、約５０ｎｍより小さいまたはそれ以下の直径を有する。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本発明のＡＥナノ粒子は、１〜１０００ｎｍ、１〜６００ｎｍ、１〜５００ｎｍ、１〜４００ｎｍ、１〜３００ｎｍ、１〜２００ｎｍ、１〜１５０ｎｍ、１〜１２０ｎｍ、１〜１００ｎｍ、１〜７５ｎｍ、１〜５０ｎｍまたは１〜２５ｎｍの直径を有する。いくつかの実施形態では、本発明のＡＥナノ粒子は、１〜１５ｎｍ、１５〜２００ｎｍ、２５〜２００ｎｍ、５０〜２００ｎｍまたは７５〜２００ｎｍの直径を有する。
【００６２】
いくつかの実施形態では、全粒子分布は指定された範囲内の粒子径サイズを包含する。いくつかの実施形態では、全粒子分布のうちの５０％、２５％、１０％、５％または１％未満は、粒子径サイズの指定された範囲外にある。いくつかの実施形態では、全粒子分布の１％未満は、粒子径サイズの指定された範囲外にある。特定の実施形態では、ナノ粒子組成物は、３００ｎｍ、２５０ｎｍ、２００ｎｍ、１５０ｎｍ、１２０ｎｍ、１００ｎｍ、７５ｎｍ、５０ｎｍまたは２５ｎｍより大きい直径を有する粒子を実質的に含まない。
【００６３】
いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物中のＡＥナノ粒子は、約３００、約２５０、約２００、約１５０、約１３０、約１２０、約１１５、約１１０、約１００、約９０または約５０ｎｍを下まわる平均粒子径を有する。いくつかの実施形態では、平均粒子径は約１０〜約３００、約５０〜約２５０、約６０〜約２００、約６５〜約１５０、約７０〜約１３０ｎｍの範囲内である。いくつかの実施形態では、平均粒子径は約８０〜約１１０ｎｍである。いくつかの実施形態では、平均粒子径は約９０〜約１００ｎｍである。
【００６４】
いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物は３００ｎｍを超える直径を有する粒子を実質的に含まない。具体的には、いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物中のナノ粒子の５０％未満は３００ｎｍを超える直径を有する。いくつかの実施形態では、その粒子の２５％未満は３００ｎｍを超える直径を有する。いくつかの実施形態では、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％未満またはそれ以下の粒子は３００ｎｍを超える直径を有する。さらに、いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物中のナノ粒子は１０〜３００ｎｍの範囲内の直径を有する。
【００６５】
いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物は２００ｎｍを超える直径を有する粒子を実質的に含まない。具体的には、いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物中のナノ粒子の５０％未満は２００ｎｍを超える直径を有する。いくつかの実施形態では、その粒子の２５％未満は２００ｎｍを超える直径を有する。いくつかの実施形態では、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％未満またはそれ以下の粒子は、２００ｎｍを超える直径を有する。さらに、いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物中のナノ粒子は１０〜２００ｎｍの範囲内の直径を有する。
【００６６】
いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物は、１２０ｎｍを超える直径を有する粒子を実質的に含まない。具体的には、いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物中のナノ粒子の５０％未満は１２０ｎｍを超える直径を有する。いくつかの実施形態では、その粒子の２５％未満は１２０ｎｍを超える直径を有する。いくつかの実施形態では、２０％、１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％未満またはそれ以下の粒子は、１２０ｎｍを超える直径を有する。さらに、いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物中のナノ粒子は１０〜１２０ｎｍの範囲内の直径を有する。
【００６７】
いくつかの実施形態では、本発明の組成物中のＡＥナノ粒子の大部分は、指定されたサイズ未満かまたは指定された範囲内の直径を有する。いくつかの実施形態では、大部分とは、組成物中の粒子の５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．６％、９９．７％、９９．８％、９９．９％を超えるかまたはそれ以上ということである。
【００６８】
ゼータ電位はせん断面での電位の大きさである。せん断面は、固体表面（例えば、本発明のナノ粒子の表面）との液境界の薄層を隔て、かつ、正常な粘性挙動を示す液体（例えば、液体分散媒体）による弾性的挙動を示す仮想表面である。いくつかの実施形態では、本発明のＡＥナノ粒子は−５０ｍＶ〜＋５０ｍＶの範囲のゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、本発明のＡＥナノ粒子は−２５ｍＶ〜＋２５ｍＶの範囲のゼータ電位を有する。いくつかの実施形態では、本発明のＡＥナノ粒子は−１０ｍＶ〜＋１０ｍＶの範囲のゼータ電位を有する。
【００６９】
いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子はミセルである。いくつかの実施形態では、本発明によって提供されるＡＥナノ粒子はナノスフェアである。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子は１種または複数の両親媒性実体を含む。本発明のＡＥナノ粒子は、１種または複数の分散媒体、界面活性剤、生物学的活性物質または放出遅延成分を任意選択で含むことができる。
【００７０】
本発明のナノ粒子組成物はエマルジョンまたは分散液であってよい。いくつかの実施形態では、組成物は「水中油型」分散液（すなわち、油性粒子が水性分散媒体中に分散している分散液）である。いくつかの実施形態では、組成物は「油中水型」分散液（すなわち、水性粒子が油性分散媒体中に分散している分散液）である。いくつかの実施形態では、ナノ粒子の一部またはすべては、その中で内腔がミセル「膜」で取り囲まれているミセル構造を有する。いくつかのそうした実施形態では、ミセルの内腔は分散媒体と同じ特徴（例えば、水性対油性）を有し、ミセル膜はその反対の特徴（例えば、油性対水性）を有する。いくつかの実施形態では、ミセルの内腔はミセル膜と同じ特徴を有し、分散媒体はその反対の特徴を有する。
プレミックス
いくつかの実施形態では、本発明は、本発明のＡＥナノ粒子の製造方法を提供する。その方法は一般に、１種または複数の両親媒性実体を混合して「プレミックス」を形成させるステップと、そのプレミックスに高いせん断力にさらすステップを含む。プレミックスは一般に、１種または複数の両親媒性実体および１種または複数の分散媒体を含む。いくつかの実施形態では、プレミックスは、例えば、界面活性剤、生物学的活性物質、放出遅延成分等の１種または複数の追加の物質も含むことができる。しかし、当業者は、すべての成分が必ずプレミックス中（またはプレミックスでのその最終的な合計量の中）に存在することが必須ではないことを理解されよう。いくつかの場合、１つまたは複数の成分を、後で加えるかまたは補充することが望ましいかまたは適切である。
【００７１】
いくつかの実施形態では、プレミックス成分は、高いせん断力がかけられる前にナノ粒子形成を可能にする条件下で、選択されるか、かつ／またはそれに維持される。いくつかの実施形態では、プレミックスは、高いせん断力がかけられる前に粒子形成を可能にする条件下には保持されない。いくつかの実施形態では、これらの粒子はナノ粒子またはミクロ粒子である。いくつかの実施形態では、これらの粒子はミセルである。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は、高いせん断力にさらす前にプレミックス成分から形成させることができる。いくつかの実施形態では、高いせん断力がかけられる前でのプレミックス中のナノ粒子形成は阻止される。特定の実施形態では、プレミックス成分からナノ粒子が形成された後に高いせん断力にさらす。特定の実施形態では、プレミックス成分からナノ粒子が形成される前に高いせん断力にさらす。特定の実施形態では、プレミックス成分からナノ粒子が形成されている間に高いせん断力にさらす。
【００７２】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＡＥナノ粒子を製造する方法を提供する。その方法は一般に、２つ以上の両親媒性実体のプレミックスを調製するステップと、そのプレミックスに高いせん断力にさらすステップを含む。いくつかの実施形態では、プレミックスは１種または複数の分散媒体、界面活性剤、生物学的活性物質または放出遅延成分を含むことができる。
【００７３】
いくつかの実施形態では、本発明のＡＥナノ粒子を作製する方法は、プレミックスを提供するステップと、プレミックス中での粒子（例えば、ナノ粒子、微小粒子および／またはミセル）の集合を可能にするかまたはそれを誘発するステップと、その粒子に高いせん断力をかけ、それによって、本発明のナノ粒子組成物を得るステップとを含む。いくつかの実施形態では、プレミックス中の粒子形成は、乳化重合、自己集合によるか、あるいはミクロ粒子またはナノ粒子を作製するための他の任意の既知技術によって行うことができる。
【００７４】
特定の実施形態では、プレミックス中での粒子形成は、両親媒性実体を分散媒体中に溶解するステップと、分散媒体および両親媒性実体の溶液に水を徐々に加えるステップと、粒子（例えば、ナノ粒子、微小粒子および／またはミセル）が自己集合するのを待つステップとを含む。いくつかの実施形態では、粒子形成は、その溶液を緩やかに冷却することによって誘発することができる。
【００７５】
特定の実施形態では、プレミックス中での粒子形成は、両親媒性実体を水などの分散媒体に溶解するステップと、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５時間攪拌しながら、粒子（例えば、ナノ粒子、微小粒子および／またはミセル）を形成させるステップと、水に対して透析させ、任意の有機性分散媒体を除去して粒子を安定化させるステップと、凍結乾燥して組成物を生成させるステップとを含む。
【００７６】
プレミックスを利用する本発明のいくつかの実施形態では、高いせん断力にさらす前に、プレミックス成分を集合させて粒子にすることができることを理解されたい。そうした粒子の少なくとも一部は、微小粒子であってもナノ粒子であってもよい。いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物はプレミックスから調製される。そのプレミックスは懸濁液またはマイクロエマルジョンを含む群から選択される。しかし、いくつかの実施形態では、高いせん断力にさらす前に、プレミックス中で粒子構造が形成されることはない。
【００７７】
本発明のいくつかの実施形態では、最終ナノ粒子組成物中に存在する成分のすべてがプレミックス中に存在し、高いせん断力にかけられてナノ粒子組成物を生成する。本発明のいくつかの実施形態では、最終ナノ粒子組成物中に存在する成分の１つまたは複数はプレミックスからなくなるか、または最終ナノ粒子組成物中より少ない量でプレミックス中に存在する。すなわち、本発明のいくつかの実施形態では、プレミックスに高いせん断応力をかけた後に、１種または複数の材料をナノ粒子組成物に加える。
【００７８】
本発明の特定の実施形態では、高いせん断力にさらす前に、プレミックスを溶液として調製する。具体的には、少なくとも１つの生物学的活性物質（例えば、非改変ペプチド）を含むナノ粒子組成物のためには、高いせん断応力にさらす前に、生物学的活性物質をプレミックス中に溶解させることがしばしば望ましい。したがって、多くの実施形態では、生物学的活性物質は、媒体の少なくとも１つ（または、プレミックスに用いられる媒体と共に）に可溶性である。本発明のいくつかの実施形態では、そうした溶解には加熱を必要とする。他の実施形態では、それを必要としない。
【００７９】
以下に、我々は、本発明による高いせん断力にかけられるプレミックスの成分の例を論じる。
【００８０】
両親媒性実体
本発明は、両親媒性実体を含む、ナノ粒子およびナノ粒子組成物を提供する。有用な両親媒性実体には、天然実体、合成実体、および天然成分と合成成分の両方を含む実体が含まれる。いくつかの実施形態では、両親媒性実体は、１種または複数のポリマー、および／またはポリマーの特徴を有する１種または複数の化合物を含むことができる。
【００８１】
先に論じたように、両親媒性実体は疎水性と親水性の両方を有するものである。当業者は理解されるように、両親媒性実体は、多くの異なる仕方で構成することができる。いくつかの実施形態では、両親媒性実体は、それ自体両親媒性である１つまたは複数の個別の化合物または物質を含むことができる。若干の例を挙げると、そうした化合物または分子には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、リン脂質、コレステロール、糖脂質脂肪酸、胆汁酸およびサポニンが含まれる。ＰＥＧは、米国食品医薬品局（ＵＳ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）によって、食品、化粧品および医薬品で使用するのに概ね安全であると認められている。ＰＥＧは水溶性、非毒性、無臭、潤滑性、非揮発性であり、かつ非刺激性である。
【００８２】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体は、それ自体は両親媒性ではないが、親水性または疎水性の特徴をいくらか有する１つまたは複数の個別成分を含むことができる。そうした実施形態では、２つ以上のそうした非両親媒性成分は一般に互いに会合しており、その結果、個々の成分の集合体は両親媒性となる。そうした会合は共有結合を含んでも含まなくてもよい。そうした会合は非共有結合（例えば、静電相互作用、アフィニティー相互作用、疎水性相互作用、水素結合、ファンデルワールス相互作用、イオン相互作用、双極子−双極子相互作用等による）を含むことができる。一般に、そうした会合は、関連する任意の力、結合、または付着の手段を含むことができる。
【００８３】
いくつかの実施形態では、本発明の両親媒性実体は、異なる程度の親水性または疎水性を有する２つ以上の個別成分で構成することができる。特定の実施形態では、両親媒性実体は、少なくとも１つの親水性成分と少なくとも１つの疎水性成分を含むことができる。特定の実施形態では、「親水性」および「疎水性」成分は互いに親水性かまたは疎水性である。
【００８４】
いくつかの実施形態では、異なる程度の親水性または疎水性の２つ以上の成分は、共有結合により一緒に結合してホモポリマーまたはコポリマーを生成することができる。いくつかの実施形態では、コポリマーはブロックコポリマーであってよい。いくつかの実施形態では、コポリマーはグラフトコポリマーであってもよい。
【００８５】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体は、両親媒性ブロックコポリマーを含むかまたはそれからなってよい。いくつかの実施形態では、両親媒性ブロックコポリマーはジブロックコポリマーであってよい。特定の実施形態では、両親媒性ジブロックコポリマーは、鎖末端で共有結合的に連結された第１のポリマーブロックおよび第２のポリマーブロックを含むことができる。特定の実施形態では、第１のポリマーブロックは親水性成分の繰り返し単位を含むことができ、第２のポリマーブロックは疎水性成分の繰り返し単位を含むことができる。特定の実施形態では、第１のポリマーブロックは疎水性成分の繰り返し単位を含むことができ、第２のポリマーブロックは親水性成分の繰り返し単位を含むことができる。いくつかの実施形態では、両親媒性ブロックコポリマーはマルチブロックコポリマーであってよい。特定の実施形態では、両親媒性ブロックコポリマーは、鎖末端で共有結合した２つ以上のポリマーからなる複数の交互ブロックを含むことができる。特定の実施形態では、両親媒性ブロックコポリマーは、鎖末端で共有結合した複数の交互親水性ブロックと疎水性ブロックを含むことができる。特定の実施形態では、交互ブロックの各ブロックは、親水性成分かまたは疎水性成分のいずれかからなる繰り返し単位を含むことができる。
【００８６】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体は、両親媒性グラフトコポリマーを含むかまたはそれからなってよい。いくつかの実施形態では、両親媒性グラフトコポリマーは、ポリマーの他のブロックの側鎖と共有結合したポリマーのブロックを含むかまたはそれからなってよい。特定の実施形態では、各ポリマーブロックは、親水性成分かまたは疎水性成分の繰り返し単位を含むかまたはそれからなってよい。特定の実施形態では、両親媒性グラ
フトコポリマーは、第１のポリマーブロックと、その第１のポリマーブロックの側鎖に共有結合した第２のポリマーブロックとを含むかまたはそれからなってよい。特定の実施形態では、第１のポリマーブロックは親水性成分の繰り返し単位を含むかまたはそれからなることができ、第２のブロックは疎水性成分の繰り返し単位を含むことができる。特定の実施形態では、第１のポリマーブロックは疎水性成分の繰り返し単位を含むかまたはそれからなることができ、第２のブロックは親水性成分の繰り返し単位を含むことができる。
【００８７】
いくつかの実施形態では、両親媒性ブロックまたはグラフトコポリマーは、多糖の繰り返し単位を含む親水性ポリマーブロックと、ポリエステルまたは多糖の繰り返し単位を含む疎水性ポリマーブロックを含むことができる。それに代えるかまたはそれに加えて、両親媒性ブロックまたはグラフトコポリマーは、多糖の繰り返し単位を含む疎水性ポリマーブロックと、ポリエステルまたは多糖の繰り返し単位を含む親水性ポリマーブロックを含むことができる。そうした親水性ポリマーブロックは、多糖（例えば、プルラン）またはポリアルケンオキシド（例えば、ポリエチレンオキシド）などの任意のタイプの親水性ポリマーの繰り返し単位を含むことができる。疎水性ポリマーブロックは、ポリカプロラクトン、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリジオキサノン、これらのコポリマーまたはポリアミド（例えば、ポリカプロラクタム）などの任意のタイプの疎水性ポリマーの繰り返し単位を含むことができる。
【００８８】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の親水性部分は非イオン性であってよい。いくつかの実施形態では、両親媒性実体の親水性成分は１種または複数のイオン基を含む。一般に、そうしたイオン基は親水性であり、両親媒性実体に親水特性を付与することができる。
【００８９】
いくつかの実施形態では、イオン基はカチオン性であってよい。いくつかの実施形態では、カチオン基は、アンモニウム（ＮＨ４＋）、ニトロニウム（ＮＯ２＋）、ニトロシル（ＮＯ＋）、ヒドロニウム（Ｈ３Ｏ＋）、第１水銀（Ｈｇ２２＋）、ホスホニウム（ＰＨ４＋）、バナジル（ＶＯ２＋）、またはその塩であってよい。
【００９０】
いくつかの実施形態では、イオン基はアニオン性であってよい。いくつかの実施形態では、アニオン基は、脂肪酸、アーセニド（Ａｓ３−）、アジド（Ｎ３−）、ブロミド（Ｂｒ−）、クロリド（Ｃｌ−）、フルオリド（Ｆ−）、ヒドリド（Ｈ−）、アイオダイド（Ｉ−）、ニトリド（Ｎ３−）、オキシド（Ｏ２−）、ホスフィド（Ｐ３−）、セレニド（Ｓｅ２−）、スルフィド（Ｓ２−）、ペルオキシド（Ｏ２２−）、ヒ酸（ＡｓＯ４３−）、亜ヒ酸（ＡｓＯ３３−）、ホウ酸（ＢＯ３３−）、過臭素酸（ＢｒＯ４−）、臭素酸（ＢｒＯ３−）、亜臭素酸（ＢｒＯ２−）、次亜臭素酸（ＢｒＯ−）、炭酸（ＣＯ３２−）、炭酸水素（ＨＣＯ３−）、塩素酸（ＣｌＯ３−）、過塩素酸（ＣｌＯ４−）、亜塩素酸（ＣｌＯ２−）、次亜塩素酸（ＣｌＯ−）、クロム酸（ＣｒＯ４２−）、重クロム酸（Ｃｒ２Ｏ７２−）、過フッ素酸（ＢｒＯ４−）、フッ素酸（ＢｒＯ３−）、亜フッ素酸（ＢｒＯ２−）、次亜フッ素酸（ＢｒＯ−）、過ヨウ素酸（ＩＯ４−）、ヨウ素酸（ＩＯ３−）、亜ヨウ素酸（ＩＯ２−）、次亜ヨウ素酸（ＩＯ−）、硝酸（ＮＯ３−）、亜硝酸（ＮＯ２−）、リン酸（ＰＯ４３−）、リン酸水素（ＨＰＯ４２−）、リン酸二水素（Ｈ２ＰＯ４−）、亜リン酸（ＰＯ３３−）、ケイ酸（ＳｉＯ３２−）、硫酸（ＳＯ４２−）、チオ硫酸（Ｓ２Ｏ３２−）、硫酸水素（ＨＳＯ４−）、亜硫酸（ＳＯ３２−）、亜硫酸水素（ＨＳＯ３−）、スルホン酸（−Ｓ（−Ｏ）２−Ｏ−）、酢酸（Ｃ２Ｈ３Ｏ２−）、ギ酸（ＨＣＯ２−）、シュウ酸（Ｃ２Ｏ４２−）、シュウ酸水素（ＨＣ２Ｏ４−）、クエン酸（Ｃ６Ｈ５Ｏ７３−）、コハク酸（Ｃ４Ｈ４Ｏ４２−）、フマル酸（Ｃ４Ｈ２Ｏ４２−）、リンゴ酸（Ｃ４Ｈ５Ｏ５２−）、硫化水素（ＨＳ−）、テルリド（Ｔｅ２−）、アミド（ＮＨ２−）、シアン酸（ＯＣＮ−）、チオシアン酸（ＳＣＮ−）、シアニド（ＣＮ−）、ヒドロキシド（ＯＨ−）、過マンガン酸（ＭｎＯ４−）またはその塩であってよい。
【００９１】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の親水性成分は核酸を含むかまたはそれからなってよい。例えば、核酸ポリマーはＤＮＡ、ＲＮＡまたはその組合せを含むことができる。いくつかの実施形態では、核酸ポリマーはオリゴヌクレオチドおよび／またはポリヌクレオチドであってよい。いくつかの実施形態では、核酸ポリマーは、オリゴヌクレオチドおよび／または修飾オリゴヌクレオチド；アンチセンスオリゴヌクレオチドおよび／または修飾アンチセンスオリゴヌクレオチド；ｃＤＮＡ；ゲノムＤＮＡ；ウイルスＤＮＡおよび／またはＲＮＡ；ＤＮＡおよび／またはＲＮＡキメラ；プラスミド；コスミド；遺伝子断片；人工染色体および／または天然染色体（例えば、酵母人工染色体）および／またはその一部、ＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡおよび／またはリボザイム）；ペプチド核酸（ＰＮＡ）；修飾されていても修飾されていなくてもよい、核酸の合成類似物を含むポリヌクレオチド；一本鎖ＤＮＡ、二本鎖ＤＮＡ、超らせんＤＮＡおよび／または三重らせんＤＮＡを含む様々な構造形態のＤＮＡ；Ｚ−ＤＮＡ；および／またはその組合せであってよい。
【００９２】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の親水性成分は、炭水化物を含むかまたはそれからなってよい。いくつかの実施形態では、炭水化物は、当業界で知られているような、グリコシド結合で連結された単糖（またはその誘導体）からなる多糖であってよい。そうした糖類には、これらに限定されないが、グルコース、フルクトース、ガラクトース、リボース、ラクトース、スクロース、マルトース、トレハロース、セロビオース、マンノース、キシロース、アラビノース、グルコロン酸、ガラクトロン酸、マンヌロン酸、グルコサミン、ガラトサミン、およびノイラミン酸が含まれる。いくつかの実施形態では、ポリマーは、アミノ化、カルボキシル化および硫酸化された多糖類を含む親水性炭水化物であってよい。いくつかの実施形態では、親水性炭水化物は、プルラン、セルロース、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシセルロース、メチルセルロース、デキストラン、シクロデキストランラン、グリコーゲン、デンプン、ヒドロキシエチルスターチ、カラギーナン、グリコン、アミロース、キトサン、Ｎ，Ｏ−カルボキシメチルキトサン、アルギンおよびアルギン酸、デンプン、キチン、ヘパリン、コンニャク、グルコマンナン、プスツラン（ｐｕｓｔｕｌａｎ）、ヘパリン、ヒアルロン酸、カードランならびにキサンタンの１つまたは複数であってよい。いくつかの実施形態では、親水性多糖類は、多数の側鎖疎水性基を導入することによって、疎水性になるように改変することができる。いくつかの実施形態では、疎水性炭水化物には、セルロースアセテート、プルランアセテート、コンニャクアセテート、アミロースアセテートおよびデキストランアセテートが含まれる。
【００９３】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の親水性成分は、これらに限定されないが、キサンタンゴム、アルギン酸、カラヤゴム、アルギン酸ナトリウム、および／またはローカストビーンガムを含むゴムを含むかまたはそれからなってよい。
【００９４】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の成分はタンパク質を含むかまたはそれからなってよい。いくつかの実施形態では、タンパク質は両親媒性実体の親水性成分である。他の実施形態では、タンパク質は両親媒性実体の疎水性成分である。本発明で使用できるタンパク質の例には、これらに限定されないが、アルブミン、コラーゲンまたはポリ（アミノ酸）（例えば、ポリリシン）が含まれる。
【００９５】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の疎水性成分は、１つもしくは複数の脂肪酸基またはその塩を含むかまたはそれからなってよい。一般に、そうした基は、典型的には疎水性であり、両親媒性実体に疎水特性を付与することができる。いくつかの実施形態では、脂肪酸基は、可消化性の長鎖（例えば、Ｃ８〜Ｃ５０）、置換または非置換炭化水素を含むことができる。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はＣ１０〜Ｃ２０脂肪酸またはその塩であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はＣ１５〜Ｃ２０脂肪酸またはその塩であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はＣ１５〜Ｃ２５脂肪酸またはその塩であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基は不飽和であってもよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はモノ不飽和であってもよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はポリ不飽和であってもよい。いくつかの実施形態では、不飽和脂肪酸基の二重結合はシス構造であってよい。いくつかの実施形態では、不飽和脂肪酸基の二重結合はトランス構造であってよい。
【００９６】
いくつかの実施形態では、脂肪酸基は、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸またはリグノセリン酸の１つまたは複数であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基は、パルミトレイン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、α−リノール酸、γ−リノール酸、アラキドン酸、ガドレイン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸またはエルカ酸の１つまたは複数であってよい。
【００９７】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の疎水性成分は、例えば、ポリエチレン、ポリカーボネート（例えば、ポリ（１，３−ジオキサン−２オン））、ポリアンヒドリド（例えば、ポリ（セバシン酸アンヒドリド））、ポリヒドロキシ酸（例えば、ポリ（β−ヒドロキシアルカノエート））、ポリプロピルフメレート、ポリカプロラクトン、ポリアミド（例えば、ポリカプロラクタム）、ポリアセタール、ポリエーテル、ポリエステル（例えば、ポリラクチドおよびポリグリコリド）、生分解性ポリシアノアクリレート、ポリビニルアルコールおよび生分解性ポリウレタンを含む１つまたは複数の生体適合性および／または生分解性合成ポリマーを含むかまたはそれからなってよい。例えば、両親媒性実体は、以下の生分解性ポリマー、すなわち、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（カプロラクトン）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−カプロラクトン）、ポリ（グリコリド−ｃｏ−カプロラクトン）およびポリ（ＤＬ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）の１つまたは複数を含むことができる。
【００９８】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の疎水性成分は、１つまたは複数のアクリルポリマーを含むかまたはそれからなってよい。特定の実施形態では、アクリルポリマーには、例えば、アクリル酸とメタクリル酸のコポリマー、メチルメタクリレートコポリマー、エトキシエチルメタクリレート、シアノエチルメタクリレート、アミノアルキルメタクリレートコポリマー、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）、メタクリル酸アルキルアミドコポリマー、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（メタクリル酸アンヒドリド）、メチルメタクリレート、ポリメタクリレート、ポリ（メチルメタクリレート）コポリマー、ポリアクリルアミド、アミノアルキルメタクリレートコポリマー、グリシジルメタクリレートコポリマーおよび上記ポリマーの１つまたは複数を含む組合せが含まれる。アクリルポリマーは、低含量の第四アンモニウム基を有するアクリル酸とメタクリル酸エステルの完全に重合したコポリマーを含むことができる。
【００９９】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体の疎水性成分はポリエステルを含むかまたはそれからなってよい。そうしたポリエステルの例には、例えば、ポリアルキレングリコール、ポリ（グリコリド−ｃｏ−ラクチド）、ＰＥＧ化ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリ（乳酸）、ＰＥＧ化ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ＰＥＧ化ポリ（グリコール酸）、ポリ乳酸とポリグリコール酸のコポリマーおよびその誘導体が含まれる。いくつかの実施形態では、ポリエステルには、例えば、ポリアンヒドリド、ポリ（オルトエステル）ＰＥＧ化ポリ（オルトエステル）、ポリ（カプロラクトン）、ＰＥＧ化ポリ（カプロラクトン）、ポリリシン、ＰＥＧ化ポリリシン、ポリ（エチレンイミン）、ＰＥＧ化ポリ（エチレンイミン）およびその誘導体が含まれる。いくつかの実施形態では、ポリエステルは、例えば、ポリカプロラクトン、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−Ｌ−リシン）、ポリ（セリンエステル）、ポリ（４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンエステル）、ポリ［α−（４−アミノブチル）−Ｌ−グリコール酸］、およびその誘導体を含むことができる。
【０１００】
いくつかの実施形態では、両親媒性実体は生物学的活性を有することができる。
【０１０１】
当業者はこれが、包括的なものではないが、両親媒性実体の例示的なリストであることを理解されよう。ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の両親媒性実体の割合は、４０％〜９９％、５０％〜９９％、６０％〜９９％、７０％〜９９％、８０％〜９９％、８０％〜９０％または９０％〜９９％の範囲であってよい。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の両親媒性実体の割合は、約７５％、約７６％、約７７％、約７８％、約７９％、約８０％、約８１％、約８２％、約８３％、約８４％、約８５％、約８６％、約８７％、約８８％、約８９％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％または約９９％である。
【０１０２】
分散媒体
一般に、プレミックスは、少なくとも１つの分散媒体を含むことが期待される。いくつかの実施形態では、プレミックスは親水性分散媒体を含むことができる。いくつかの実施形態では、プレミックスは疎水性分散媒体を含むことができる。いくつかの実施形態では、プレミックスは、例えば、異なる特徴の２つ以上の分散媒体の組合せを含むことができる。いくつかの実施形態では、プレミックスは少なくとも２つの非混和性分散媒体を含むことができる。
【０１０３】
適切な分散媒体の選択は、少なくとも一部は、使用される両親媒性実体の性質に依存し、かつ、対象とするナノ粒子の目的とする外部および内部特性を対象としているかどうかに依存することを理解されたい。例えば、いくつかの実施形態では、ナノ粒子は親水性の外部特性と疎水性の内部特性を有する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は疎水性の外部特性と親水性の特性を有する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は親水性の外部および内部特性を有する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子は疎水性の外部および内部特性を有する。当業者は、同じナノ粒子成分を集合させて、異なる内部および外部特性を有する異なるナノ粒子構造にすることもできることを理解されよう。１つの例を挙げると、個々の両親媒性化合物の単分子層から形成されたナノ粒子は異なる外部および内部特性を有するが、他方、同じ化合物の二分子層から形成されたナノ粒子は同じ外部および内部特性を有することになる。
【０１０４】
本発明のいくつかの実施形態では、親水性分散媒体を使用する。いくつかの実施形態では、そうした親水性分散媒体は水性である。そうした水性分散媒体には、これらに限定されないが、水、短鎖アルコール（例えば、エタノール）、オイル類、５％デキストロース、リンゲル溶液（例えば、乳酸化リンゲル注射液、乳酸化リンゲル液＋５％デキストロース注射液、アシル化リンゲル注射液）、Ｎｏｒｍｏｓｏｌ−Ｍ、ＩｓｏｌｙｔｅＥ、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、クロロホルム、テトラメチルホルムアミド、四塩化炭素、Ｎ−メチルピロリドンまたはジクロロエタン等およびその組合せが含まれる。
【０１０５】
本発明のいくつかの実施形態では、疎水性分散媒体を使用する。いくつかの実施形態では、そうした疎水性分散媒体はオイル類である。一般に、当業界で知られているどのオイルも、本発明のＡＥナノ粒子の作製において使用するのに適している。いくつかの実施形態では、そのオイルは１つもしくは複数の脂肪酸基またはその塩を含むことができる。いくつかの実施形態では、脂肪酸基は、可消化性の長鎖（例えば、Ｃ８〜Ｃ５０）、置換または非置換炭化水素を含むことができる。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はＣ１０〜Ｃ２０脂肪酸またはその塩であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はＣ１５〜Ｃ２０脂肪酸またはその塩であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はＣ１５〜Ｃ２５脂肪酸またはその塩であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基は不飽和であってもよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はモノ不飽和であってもよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基はポリ不飽和であってもよい。いくつかの実施形態では、不飽和脂肪酸基の二重結合はシス構造であってよい。いくつかの実施形態では、不飽和脂肪酸基の二重結合はトランス構造であってよい。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、脂肪酸基は、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸またはリグノセリン酸の１つまたは複数であってよい。いくつかの実施形態では、脂肪酸基は、パルミトレイン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、α−リノレン酸、γ−リノール酸、アラキドン酸、ガドレイン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸またはエルカ酸の１つまたは複数であってよい。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、そのオイルは液体トリグリセリドである。特定の実施形態では、オイルは中鎖（例えば、６〜１２個の炭素）トリグリセリド（例えば、Ｌａｂｒａｆａｃ  ＷＬ１３４９、ココナツオイル、パーム核油、クスノキの核果油等）である。特定の実施形態では、オイルは短鎖（例えば、２〜５個の炭素）トリグリセリドである。特定の実施形態では、オイルは長鎖（例えば、１２個を超える炭素）トリグリセリド（例えば、大豆油、ひまわり油等）である。
【０１０８】
本発明で用いるのに適したオイル類には、これらに限定されないが、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、クロフサスグリの種、ルリヂサ、カデ、カモミール、キャノーラ、キャラウェー、カルナバ、ヒマシ、シナモン、ココアバター、ココナツ、タラの肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、アマニ、ゲラニオール、ヘチマ、ブドウの種、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ホホバ、ククイの実、ラバンディン（Ｌａｖａｎｄｉｎ）、ラベンダー、レモン、リツェアクベバ（ｌｉｔｓｅａ  ｃｕｂｅｂａ）、マカダミアナッツ、アオイ、マンゴーの種、メドウフォーム（ｍｅａｄｏｗｆｏａｍ）の種、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナツ、ケシの実、カボチャの実、菜種、米ぬか、ローズマリー、サフラワー、ビャクダン、サザンカ（ｓａｓｑｕａｎａ）、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチベル、クルミおよび小麦胚種のオイルならびにその組合せが含まれる。本発明で用いるのに適したオイル類には、これらに限定されないが、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油およびその組合せが含まれる。
【０１０９】
当業者は、「分散媒体」という用語が特定の量の材料が存在することを意味させようとするものではないことを理解されよう。例えば、特に２つ以上の分散媒体（例えば、異なる疎水性／親水性の特徴を有する）を用いる系では、異なる分散媒体の相対量は要望通り調節することができる。例えば、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の分散媒体の割合は０％〜９９％、１０％〜９９％、２５％〜９９％、５０％〜９９％または７５％〜９９％の範囲であってよい。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の分散媒体の割合は０％〜７５％、０％〜５０％、０％〜２５％または０％〜１０％の範囲であってよい。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）のオイルの割合は０％〜３０％の範囲である。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）のオイルの割合は約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約９％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、約２０％、約２１％、約２２％、約２３％、約２４％、約２５％、約２６％、約２７％、約２８％、約２９％または約３０％である。いくつかの実施形態では、オイルの割合は約８％である。いくつかの実施形態では、オイルの割合は約５％である。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、プレミックスは、オイルと界面活性剤を０．５：１〜１０：１の範囲の比で含む。いくつかの実施形態では、オイルと界面活性剤の比は約０．５：１、約１：１、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約６：１、約７：１、約８：１、約９：１または約１０：１である。いくつかの実施形態では、界面活性剤とオイルの比は約０．５：１、約１：１、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約６：１、約７：１、約８：１、約９：１または約１０：１である。いくつかの実施形態では、プレミックスは、オイルと界面活性剤を０．５：１〜２：１の範囲の比で含む。いくつかの実施形態では、オイルと界面活性剤の比は約０．５：１、約１：１または約２：１である。いくつかの実施形態では、界面活性剤とオイルの比は約０．５：１、約１：１または約２：１である。特定の実施形態では、オイルと界面活性剤の比は約１：１である。
【０１１２】
当業者は、上記のものが、包括的なものではないが、本発明で用いることができる分散媒体のある例示的なリストを示すものであることを理解されよう。適切な任意の分散媒体を、ＡＥナノ粒子の作製に用いることができる。
【０１１３】
界面活性剤
いくつかの実施形態では、プレミックスは、１種または複数の界面活性剤の作用を有する物質を任意選択で含むことができる。いくつかの実施形態では、界面活性剤の作用を有する物質は、高い安定性、向上した均一性または高い粘度を有するＡＥナノ粒子の作製を促進することができる。界面活性剤は、２つ以上の分散媒体を使用する実施形態において特に有用な可能性がある。ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の界面活性剤の作用を有する物質の割合は０％〜９９％、１０％〜９９％、２５％〜９９％、５０％〜９９％または７５％〜９９％の範囲であってよい。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の界面活性剤の作用を有する物質の割合は０％〜７５％、０％〜５０％、０％〜２５％または０％〜１０％の範囲であってよい。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の界面活性剤の作用を有する物質の割合は０％〜３０％の範囲である。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子がそれから調製される組成物中（例えば、プレミックス中）の界面活性剤の作用を有する物質の割合は約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約９％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、約２０％、約２１％、約２２％、約２３％、約２４％、約２５％、約２６％、約２７％、約２８％、約２９％または約３０％である。いくつかの実施形態では、界面活性剤の作用を有する物質の割合は約８％である。いくつかの実施形態では、界面活性剤の作用を有する物質の割合は約５％である。
【０１１５】
当業界で知られている界面活性剤の作用を有する物質のどれも本発明のＡＥナノ粒子の作製に用いるのに適している。そうした界面活性剤には、これらに限定されないが、ホスホグリセリド；ホスファチジルコリン；ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）；ジオレイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）；ジオレイルオキシプロピルトリエチルアンモニウム（ＤＯＴＭＡ）；ジオレオイルホスファチジルコリン；コレステロール；コレステロールエステル；ジアシルグリセロール；ジアシルグリセロールスクシネート；ジホスファチジルグリセロール（ＤＰＰＧ）；ヘキサンデカノール；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの脂肪族アルコール；ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル；パルミチン酸またはオレイン酸などの表面活性脂肪酸；脂肪酸；脂肪酸モノグリセリド；脂肪酸ジノグリセリド；脂肪酸アミド；ソルビタントリオレエート（Ｓｐａｎ８５）グリココレート；モノラウリン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ２０）；ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ−２０）；ポリソルベート６０（Ｔｗｅｅｎ−６０）；ポリソルベート６５（Ｔｗｅｅｎ−６５）；ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ−８０）；ポリソルベート８５（Ｔｗｅｅｎ−８５）；ポリオキシエチレンモノステアレート；サーファクチン（ｓｕｒｆａｃｔｉｎ）；ポロキサマー；トリオレイン酸ソルビタンなどのソルビタン脂肪酸エステル；レシチン；リゾレシチン；ホスファチジルセリン；ホスファチジルイノシトール；スフィンゴミエリン；ホスファチジルエタノールアミン（セファリン）；カルジオリピン；ホスファチジン酸；セレブロシド；ジセチルホスフェート；ジパルミトイルホスファチジルグリセロール；ステアリルアミン；ドデシルアミン；ヘキサデシルアミン；アセチルパルミテート；グリセロールリシノレエート；ヘキサデシルステアレート；ミリスチン酸イソプロピル；チロキサポール；ポリ（エチレングリコール）５０００−ホスファチジルエタノールアミン；ポリ（エチレングリコール）４００−モノステアレート；リン脂質；高い界面活性剤特性を有する合成および／または天然洗剤；デオキシコレート；シクロデキストリン；カオトロピック塩；イオン対形成剤；およびその組合せが含まれる。界面活性剤成分は異なる界面活性剤の混合体であってよい。これらの界面活性剤は、天然資源から抽出しそれを精製することができ、また実験室で合成することもできる。好ましい実施形態では、界面活性剤は市場で入手することができる。
【０１１６】
当業者はこれが、包括的なものではないが、界面活性剤の作用を有する物質の例示的なリストであることを理解されよう。任意の界面活性剤を、ＡＥナノ粒子の作製に用いることができる。
【０１１７】
生物学的活性物質
本発明のＡＥナノ粒子組成物は、１種または複数の生物学的活性物質を送達するために用いることができる。したがって、生物学的活性物質を、本発明のＡＥナノ粒子と共に送達することができる。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質をプレミックス中に含める。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子形成後に生物学的活性物質を加える。
【０１１８】
例えば、治療薬、診断薬、予防薬、栄養剤、化粧品、および／または皮膚用薬を含む任意の生物学的活性物質を本発明によって送達することができる。そうした生物学的活性物質は、小分子、有機金属化合物、核酸、タンパク質（多量体タンパク質、タンパク質複合体等を含む）、ペプチド、脂質、炭水化物、ハーブ、ホルモン、金属、放射性元素および化合物、薬物、ワクチン、免疫薬等および／またはその組合せであってよい。そうした生物学的作用物質は、本発明のＡＥナノ粒子のミセル膜内に封入するか、その表面に吸着させるかかつ／またはその中に存在させることができる。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、プレミックスまたはナノ粒子の中の生物学的活性物質の割合は０．１％〜２５％の範囲である。いくつかの実施形態では、プレミックスまたはナノ粒子の中の生物学的活性物質の割合は０．１％〜２０％、０．１％〜１５％、０．１％〜１０％、０．１％〜５％または０．１％〜１％の範囲である。いくつかの実施形態では、プレミックスまたはナノ粒子の中の生物学的活性物質の割合は１％〜２０％、５％〜２０％、１０％〜２０％、１５％〜２０％または１５％〜２５％の範囲である。いくつかの実施形態では、プレミックスまたはナノ粒子の中の生物学的活性物質の割合は０．１％未満である。いくつかの実施形態では、プレミックスまたはナノ粒子の中の生物学的活性物質の割合は２５％を超える。いくつかの実施形態では、プレミックスまたはナノ粒子の中の生物学的活性物質の割合は約０．１％、約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％、約１０％、約１１％、約１２％、約１３％、約１４％、約１５％、約１６％、約１７％、約１８％、約１９％、約２０％、約２１％、約２２％、約２３％、約２４％、約２５％またはそれ以上である。
【０１２０】
関係する生物学的活性物質は、とり得る任意の方法またはアプローチによって作製するかまたは得ることができる。生物学的活性物質は、本発明のナノ粒子と一緒にそれを使用または送達するのを容易にするための１つまたは複数の部分を含むか、またはそれを含むように改変することができる。そうした改変によって、その薬剤の生物学的活性が妨害されることがあってはならない。いくつかの実施形態では、任意選択でその改変をインビボで取り除くことができる。例えば、生物学的活性物質に検出できるようなラベルを付けるか、かつ／または、送達後に活性な形態に転換または改変される「プロ（ｐｒｏ）」の形態で提供することができる。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は薬剤活性を有する小分子および／または有機化合物である。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は臨床上用いられる薬物である。いくつかの実施形態では、その薬物は、抗生物質、抗ウイルス剤、麻酔剤、抗凝血剤、抗癌剤、酵素の阻害剤、ステロイド剤、抗炎症剤、抗腫瘍剤、抗原、ワクチン、抗体、充血除去剤、降圧剤、鎮静剤、妊娠調節剤、黄体ホルモン薬、抗コリン作用薬、鎮痛剤、抗うつ剤、抗精神病剤、β−抗アドレナリン作動薬、利尿薬、心血管作用薬、血管作用薬、非ステロイド系抗炎症剤等である。
【０１２２】
送達される生物学的活性物質は薬剤として活性な剤の混合物であってよい。例えば、局所麻酔剤はステロイドなどの抗炎症剤と共に送達することができる。局所麻酔剤は、エピネフリンなどの血管作用薬と併用して投与することができる。別の例を挙げると、抗生物質は、抗生物質（例えば、ペニシリンおよびクラブラン酸）を不活性化させるためにバクテリアを用いて通常作製される酵素の阻害剤と一緒にすることができる。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は診断薬である。いくつかの実施形態では、診断薬には、ガス類；陽電子放出型断層撮影法（ＰＥＴ）、コンピュータ断層撮影法（ＣＡＴ）、単一光子放出型コンピュータ断層撮影法、Ｘ線、蛍光透視法および磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）において用いられる市販の映像化用薬剤（ｉｍａｇｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）；ならびに造影剤（ｃｏｎｔｒａｓｔ  ａｇｅｎｔ）が含まれる。ＭＲＩの造影剤として用いられる適切な材料の例には、ガドリニウムキレートならびに鉄、マグネシウム、マンガン、銅およびクロムが含まれる。ＣＡＴおよびＸ線映像法で用いられる材料の例には、ヨウ素をベースとした材料が含まれる。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は予防薬である。いくつかの実施形態では、予防薬はワクチン含む。ワクチンは、単離されたタンパク質またはペプチド、不活性化された有機体およびウイルス、死んだ有機体およびウイルス、遺伝子操作された有機体またはウイルスおよび細胞抽出物を含むことができる。予防薬は、インターロイキン、インターフェロン、サイトカインおよびコレラ毒素、ミョウバン、フロイントアジュバント等などのアジュバントと併用することができる。予防薬には、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｃｕｓ  ｐｎｕｅｍｏｎｉａｅ）、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｒｏｇｅｎｅｓ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｓｍ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、ミュータンス連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、チフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ）、ヘモフィルスラインフルエンザ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｐａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、野兎病菌（Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ
ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ）、ペスト菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）、レジオネラニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ
ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ）、ヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、ハンセン菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｌｅｐｒａｅ）、梅毒トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｕｍ）、レプトスピラインテロガンス（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒｏｓｉｓ  ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓ）、ボレリアブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、カンピロバクタージェジュニ（Ｃａｍｐｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ）などの細菌性生物の抗原；天然痘、Ａ型インフルエンザおよびＢ型インフルエンザ、呼吸器合胞体ウイルス、パラインフルエンザ、はしか、ＨＩＶ、水痘帯状ヘルペス、単純ヘルペ１型および２型、サイトメガロウイルス、エプスタインバーウイルス、ロタウイルス、ライノウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、ポリオウイルス、おたふく風邪（ｍｕｍｐｓ）、狂犬病、風疹、コクサッキーウイルス、馬脳炎、日本脳炎、黄熱病、リフトバレー熱、肝炎Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型およびＥ型ウイルスなどのウイルスの抗原；クリプトコックスネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、ヒストプラスマカプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）、カンジダアルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）、カンジダトロピカリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）、ノカルジアアステロイデス（Ｎｏｃａｒｄｉａ  ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）、リケッチアリケッチイ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｒｉｃｋｅｔｓｉｉ）、リケッチアチフィ（Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ  ｔｙｐｈｉ）、肺炎マイコプラズマ（Ｍｙｃｏ  ｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、オウム病クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）、クラミジアトラコマチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｌ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、トリパノソーマブルーセイ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）、赤痢アメーバ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、トキソプラズマ原虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎ．ｄｉｉ）、膣トリコモナス（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ）、マンソン住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ）などの真菌、原生動物および寄生生物の抗原を含むことができる。これらの抗原は、完全な死菌、ペプチド、タンパク質、糖タンパク質、炭水化物またはその組合せの形態であってもよい。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質はタンパク質であってよい。本明細書で用いる「タンパク質」と「ペプチド」という用語は互換的に用いることができる。特定の実施形態では、ペプチドは、約５〜４０、１０〜３５、１５〜３０または２０〜２５の範囲のサイズのアミノ酸である。ランダムな配列、および／または最大限に多様なペプチドのパネルを一貫してもたらすように変化させた配列を含むペプチドのパネルからのペプチドを用いることができる。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は抗体であってよい。いくつかの実施形態では、抗体には、これらに限定されないが、ポリクローナル、モノクローナル、キメラ（すなわち、「ヒト化された」）、一本鎖（組換え型）抗体が含まれる。いくつかの実施形態では、抗体は、低いエフェクター機能および／または二重特異性分子を有することができる。いくつかの実施形態では、抗体はＦａｂ断片、および／またはＦａｂ発現ライブラリーによって産生された断片を含むことができる。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は核酸であってよい。いくつかの実施形態では、オリゴヌクレオチドはＤＮＡ、ＲＮＡ、混合キメラ、誘導体、特徴的部分および／またはその変形体を含む。本発明のオリゴヌクレオチドは一本鎖および／または二本鎖であってよい。例えば、分子の安定性、混成等を改善するために、塩基部分、糖部分および／またはリン酸主鎖でオリゴヌクレオチドを改変することができる。
【０１２８】
特定の実施形態では、核酸は翻訳開始部位、転写開始部位および／またはスプライスジャンクションと結合するアンチセンス分子を含む。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的ｍＲＮＡと結合するか、かつ／または翻訳を阻止する。それに代えるかまたはそれに加えて、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、例えば調節要素などの標的遺伝子のＤＮＡと結合することができる。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、標的ｍＲＮＡの転写を触媒的に切断するように設計されたリボザイムを含む核酸を用いて、標的ｍＲＮＡの翻訳および／または標的の発現を阻止することができる（例えば、ＰＣＴ特許出願ＷＯ９０／１１３６４；およびＳａｒｖｅｒら、１９９０年、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４７：１２２２頁を参照されたい；その両方を参照により本明細書に組み込む）。
【０１３０】
それに代えるかまたはそれに加えて、内生的標的遺伝子の発現を、標的遺伝子の調節領域（すなわち、標的遺伝子のプロモーターおよび／またはエンハンサー）に対して相補的なデオキシリボヌクレオチド配列を標的化することによって低減させて、体内の標的筋細胞中の標的遺伝子の転写を阻止する三重らせん構造を形成させることができる（概要として、Ｈｅｌｅｎｅ、１９９１年、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．  ６：５６９頁；Ｈｅｌｅｎｅら、１９９２年、Ａｎｎ、Ｎ．Ｙ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ６６０：２７頁；およびＭａｈｅｒ、１９９２年、Ｂｉｏａｓｓａｙｓ  １４：８０７頁を参照されたい。そのすべてを参照により本明細書に組み込む）。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は栄養補給剤である。いくつかの実施形態では、栄養補給剤は基礎的な栄養価を提供する。いくつかの実施形態では、栄養補給剤は、健康面での利益または医学的利益を提供する。いくつかの実施形態では、栄養補給剤は栄養補助食品である。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、栄養補給剤はビタミンである。いくつかの実施形態では、ビタミンは、ビタミンＡ（レチノイド）、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ３（ナイアシン）、ビタミンＢ５（パントテン酸）、ビタミンＢ６（ピロキシドン）、ビタミンＢ７（ビオチン）、ビタミンＢ９（葉酸）、ビタミンＢ１２（シアノコバラミン）、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、ビタミンＤ、ビタミンＥまたはビタミンＫの１つまたは複数である。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、栄養補給剤はミネラルである。いくつかの実施形態では、そのミネラルはビスマス、ホウ素、カルシウム、塩素、クロム、コバルト、銅、フッ素、ヨウ素、鉄、マグネシウム、マンガン、モリブデン、ニッケル、リン、カリウム、ルビジウム、セレン、ケイ素、ナトリウム、ストロンチウム、イオウ、テルル、チタン、タングステン、バナジウムまたは亜鉛の１つまたは複数である。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、栄養補給剤は必須アミノ酸である。いくつかの実施形態では、アミノ酸はアルギニン、グルタミン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、トレオニン、トリプトファンまたはバリンの１つまたは複数である。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、栄養補給剤には、脂肪酸および／またはω−３脂肪酸（例えば、ＤＨＡまたはＡＲＡ）、果物および野菜抽出物、ルテイン、ホスファチジルセリン、リポイド酸、メラトニン、グルコサミン、コンドロイチン、アロエ、ググル、緑茶、リコピン、食品全般、食品添加物、ハーブ、ファイトニュートリエント、酸化防止剤、果物のフラボノイド成分、月見草油、アマニ油、魚油および海産動物油（例えば、タラの肝油）および生菌剤（ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ）が含まれる。いくつかの実施形態では、栄養補給剤は、所望の特性をもつように遺伝子操作を受けたバイオ食品（「ファーマフード」としても知られている）を含むことができる。
【０１３６】
栄養補給剤および栄養補助食品の例は、例えば、Ｒｏｂｅｒｔｓら（Ｎｕｔｒｉｃｅｕｔｉｃａｌｓ：  Ｔｈｅ  Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ，  Ｈｅｒｂｓ，  Ｖｉｔａｍｉｎｓ，  ａｎｄ  Ｈｅａｌｉｎｇ  Ｆｏｏｄｓ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｎｕｔｒｉｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、２００１年；これを参照により本明細書に組み込む）に開示されている。栄養補給剤および栄養補助食品は、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ、第１版、２００１年およびＰｈｙｓｉｃｉａｎｓ  ’  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｈｅｒｂａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ、第１版、２００１年（これを参照により本明細書に組み込む）にも開示されている。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、栄養補給剤を担持したＡＥナノ粒子を、食品に混ぜ込むことができる。例えば、栄養補給物質を担持したＡＥナノ粒子を飲料品などの液体に溶解させることができる。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は化粧品および／または皮膚用薬である。いくつかの実施形態では、化粧品および／または皮膚用薬は、金属イオン封鎖剤、軟化剤、着色物質（例えば、顔料や染料）および香料などの賦形剤を任意選択で含むことができる。いくつかの実施形態では、化粧品および／または皮膚用薬は、これらに限定されないが、皮膚軟化剤、栄養ローション、クレンジンローション、クレンジングクリーム、乳液、エモリエントローション、マッサージ用クリーム、エモリエントクリーム、メークアップベース、口紅、フェイシャルパックまたはフェイシャルゲル、洗剤配合品（例えば、シャンプー、リンス、ボディクリーナー、ヘアートニックおよびせっけん）および皮膚用組成物（例えば、ローション剤、軟膏、ゲル剤、クリーム剤、パッチおよび噴霧剤）を含む組成物であってよい。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、化粧品および／または皮膚用薬は、ビタミンおよびその誘導体（例えば、ビタミンＥおよびそのエステル、ビタミンＣおよびそのエステル、ビタミンＢ、ビタミンＡアルコールまたはレチノールおよびそのエステル）、プロビタミン（例えば、パンテノール、ナイアシンアミドまたはエルゴカルシフェロール）、酸化防止剤、フェノール化合物（例えば、過酸化ベンゾイル）、エッセンシャルオイル、湿潤剤、日焼け防止薬、保湿剤、タンパク質、セラミドおよび疑似セラミドを含むことができる。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は１種または複数のボツリヌス毒素ペプチドまたはタンパク質複合体であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素はボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧのうちの１つまたは複数であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、単離されているか、かつ／または精製されたボツリヌス毒素であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、部分的に単離されているか、かつ／または部分的に精製されたボツリヌス毒素であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は天然のボツリヌス複合体であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は非毒性タンパク質と会合していてもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は組換え技術によるボツリヌス毒素であってよい。
【０１４１】
当業者はこれが、包括的なものではないが、生物学的活性物質の例示的なリストであることを理解されよう。任意の生物学的活性物質を、ＡＥナノ粒子中に封入するかまたはその表面に結合させることができる。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を含むＡＥナノ粒子は、薬剤の制御放出を可能にするために１つまたは複数の放出遅延成分を任意選択で含むことができる。当業界で知られているどの放出遅延成分も、本発明のＡＥナノ粒子の作製に用いるのに適している。いくつかの実施形態では、放出遅延成分は親水性および／または疎水性ポリマーである。放出遅延成分には、例えばセルロースまたはその誘導体、アクリルポリマー、エステルポリマー、ビニルピロリドンをベースとしたポリマー、ゴム類、他の天然高分子および／またはこれらの組合せが含まれる。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、放出遅延成分はセルロースまたはその誘導体である。特定の実施形態では、セルロースまたはその誘導体はヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースおよびヒドロキシプロピルセルロースの１つまたは複数を含む。特定の実施形態では、セルロースまたはその誘導体はメチルセルロースまたはその誘導体である。特定の実施形態では、セルロースまたはその誘導体はヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）である。当業者は、他のアルキルセルロースポリマーを含む他のセルロースポリマーを使用できることを理解されよう。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、放出遅延成分はアクリルポリマーである。特定の実施形態では、アクリルポリマーには、例えば、アクリル酸とメタクリル酸のコポリマー、メチルメタクリレートコポリマー、エトキシエチルメタクリレート、シアノエチルメタクリレート、アミノアルキルメタクリレートコポリマー、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）、メタクリル酸アルキルアミドコポリマー、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（メタクリル酸アンヒドリド）、メチルメタクリレート、ポリメタクリレート、ポリ（メチルメタクリレート）コポリマー、ポリアクリルアミド、アミノアルキルメタクリレートコポリマー、グリシジルメタクリレートコポリマーおよび上記ポリマーの１つまたは複数を含む組合せが含まれる。アクリルポリマーは、低含量の第四アンモニウム基を有するアクリル酸とメタクリル酸エステルの完全に重合したコポリマーを含むことができる。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、放出遅延成分はポリエステルである。いくつかの実施形態では、ポリエステルには、ポリアルキレングリコール、ポリ（グリコリド−ｃｏ−ラクチド）、ＰＥＧ化ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリ（乳酸）、ＰＥＧ化ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ＰＥＧ化ポリ（グリコール酸）、ポリ乳酸とポリグリコール酸のコポリマーおよびその誘導体が含まれる。いくつかの実施形態では、ポリエステルには、例えば、ポリアンヒドリド、ポリ（オルトエステル）ＰＥＧ化ポリ（オルトエステル）、ポリ（カプロラクトン）、ＰＥＧ化ポリ（カプロラクトン）、ポリリシン、ＰＥＧ化ポリリシン、ポリ（エチレンイミン）、ＰＥＧ化ポリ（エチレンイミン）およびその誘導体が含まれる。いくつかの実施形態では、ポリエステルには、例えば、ポリカプロラクトン、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−Ｌ−リシン）、ポリ（セリンエステル）、ポリ（４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンエステル）、ポリ［α−（４−アミノブチル）−Ｌ−グリコール酸］およびその誘導体が含まれる。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、放出遅延成分はポリ（ビニル−ピロリドン）の架橋ポリマーである。いくつかの実施形態では、そのポリマーはクロスポビドンである。いくつかの実施形態では、ポリマーは非架橋ポリ（ビニル−ピロリドン）である。いくつかの実施形態では、ポリマーはポビドンである。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、放出遅延成分は天然高分子であってよい。いくつかの実施形態では、天然高分子は、例えば、キサンタンゴム、アルギン酸、カラヤゴム、アルギン酸ナトリウムおよび／またはローカストビーンガムを含むゴムである。いくつかの実施形態では、天然高分子はタンパク質（例えば、アルブミン）、脂質、核酸または炭水化物であってよい。
【０１４８】
ＡＥナノ粒子の製造方法
一般に、本発明のナノ粒子組成物（例えば、ボツリヌスナノ粒子組成物）は、利用できる任意の方法で調製することができる。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は化学的手段で調製される。しかし、化学的手段は毒性（一般に有機）溶媒をしばしば必要とする。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は、そうした溶媒を使用することなく本発明によって調製される。
【０１４９】
本発明の特定の実施形態では、ナノ粒子組成物は、プレミックスを調製し、そのプレミックスを高いせん断力にさらすことによって作製する。本明細書で用いる「せん断力」という用語は、材料の面に対して垂直な力に対向する、材料の面に対して平行な力を指す。
【０１５０】
高いせん断力を発生させるためには当業界で知られている任意の方法を用いることができる。本発明によれば、機械的エネルギー（すなわち、高いせん断力）を使用すると、高価でかつ／または毒性のある化学的溶媒を使用する必要性を置き換えるかまたはそれを最小限にすることができ、ナノ粒子が集合する速度を増大させ、成分の特定の混合体中に生成するナノ粒子の収率を増大させることができ、かつ／または、ナノ粒子組成物を調製する総コストを大幅に低減させることができる。さらに、生物学的活性物質（例えば、ボツリヌス毒素）などの物質が本発明のナノ粒子組成物中に取り込まれたそうした実施形態では、高いせん断力を用いると、ナノ粒子を形成させる従来の方法と比べて、ナノ粒子の担持能力を高めることができる。従来の方法では、そうした物質のナノ粒子中またはその表面上への担持は一般に、ナノ粒子の内部および／またはその表面への物質の拡散に依存している。本発明によれば、高いせん断力の使用によって、より小さい粒子（例えば、平均して）の製造、および／またはナノ粒子組成物中におけるより狭い粒子径分布が可能になる。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、高いせん断力は、例えば、高圧、例えば約１５，０００ｐｓｉでの連続的乱流による高圧に曝すことによって実現する。いくつかの実施形態では、そうした高圧は約１８，０００〜約２６，０００ｐｓｉの範囲内である。いくつかの実施形態では、それは約２０，０００〜２５，０００ｐｓｉの範囲内である。いくつかの実施形態では、高いせん断力は、少なくとも３，０００ｐｓｉ、１０，０００ｐｓｉ、１５，０００ｐｓｉ、１８，０００ｐｓｉ、２０，０００ｐｓｉ、２２，０００ｐｓｉまたは２４，０００ｐｓｉの圧力を特徴とする。いくつかの実施形態では、高いせん断力は１６，０００ｐｓｉ、１７，０００ｐｓｉ、１８，０００ｐｓｉ、１９，０００ｐｓｉ、２０，０００ｐｓｉ、２１，０００ｐｓｉ、２２，０００ｐｓｉ、２３，０００ｐｓｉ、２４，０００ｐｓｉまたは２５，０００ｐｓｉの圧力を特徴とする。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、キャビテーションを用いて高いせん断力を発生させる。いくつかの実施形態では、高圧均質化を用いて高いせん断力を発生させる。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、高いせん断力は、例えば、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）処理装置（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ／ＭＦＩＣ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）または同様の他の装置などの機器を通過させることによって施すことができる。Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）処理装置は、ナノスケール領域までサイズを微細化するために、高圧を提供し、マイクロチャンネルを通して生成物を高速に加速することによって、高いせん断速度をもたらす。その流体は２つに分かれ、通常７５ミクロンのオーダーの大きさを有するマイクロチャンネルの中を、高速で（５０〜３００ｍ／ｓの範囲）押し通される。流体はマイクロチャンネルを出る際にジェット流を形成し、このジェット流は、対向するマイクロチャンネルからのジェット流と衝突する。チャンネル内においてその流体は、従来技術より高い程度の高いせん断（最大で１０７１／ｓ）を受ける。ジェット流の衝突によってサブミクロンレベルでの混合がもたらされる。したがって、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ（登録商標）技術において、高いせん断および衝撃は、粒子径の細分化および多相流体の混合に関わっている。
【０１５４】
本発明のいくつかの実施形態では、試料は、約１０分間未満の期間高いせん断力にさらすことによって「マイクロ流動化」される。いくつかの実施形態では、その期間は約９、８、７、６、５、４、３、２または１分間未満である。いくつかの実施形態では、その期間は約１〜２分間またはそれ以下の範囲内である。いくつかの実施形態では、その期間は約３０秒間である。
【０１５５】
本発明のいくつかの実施形態では、試料は、高いせん断力への１回の曝露によって「マイクロ流動化」される。そうした実施形態を、本明細書では「１回パス」マイクロ流動化と称する。
【０１５６】
本発明は、プレミックスを高いせん断力にさらすことによってナノ粒子組成物を発生させることができ、特に、均一なナノ粒子組成物を発生させることができるという認識を包含するものである。
【０１５７】
本発明のいくつかの実施形態では、最終ナノ粒子組成物中に存在する成分のすべてがプレミックス中に存在し、高いせん断力にかけられてナノ粒子組成物を生成する。本発明のいくつかの実施形態では、最終ナノ粒子組成物中に存在する成分の１つまたは複数は、プレミックスからなくなるか、または最終ナノ粒子組成物の中より少ない量でプレミックス中に存在する。すなわち、本発明のいくつかの実施形態では、プレミックスに高いせん断力をかけた後に、１種または複数の材料をナノ粒子組成物に加える。
【０１５８】
本発明の特定の実施形態では、高いせん断力にさらす前に、プレミックスを溶液として調製する。具体的には、少なくとも１つの生物学的活性物質（例えば、ボツリヌス毒素）を含むナノ粒子組成物のためには、高いせん断力にさらす前に、生物学的活性物質をプレミックス中に溶解させることがしばしば望ましい。したがって、多くの実施形態では、生物学的活性物質は、媒体の少なくとも１つ（または、プレミックスに用いた媒体の組合せ）に可溶性である。本発明のいくつかの実施形態では、そうした溶解に加熱が必要である。他の実施形態では、それを必要としない。
【０１５９】
本発明のいくつかの実施形態では、高いせん断力にさらす前に、プレミックス成分を粒子に集合させることができる。そうした粒子の少なくとも一部は、微小粒子であっても、またナノ粒子であってもよい。いくつかの実施形態では、本発明のナノ粒子組成物をプレミックスから調製する。そのプレミックスは、懸濁液またはマイクロエマルジョンを含む群から選択される。しかし、いくつかの実施形態では、高いせん断力にさらす前に、プレミックス中に粒子構造は形成されない。
【０１６０】
使用方法
いくつかの実施形態では、本発明は、それらを（任意選択で生物学的活性物質または他の物質と共に）対象に送達することによって、ＡＥナノ粒子および／またはナノ粒子組成物を使用する方法を提供する。そうした送達はどんな経路を介してもよい。例えば、送達は、経口、非経口、嚢内、膣内、皮下、腹腔内、筋肉内、静脈内、経皮的（局所）、皮内、頬側、経直腸および／または眼内（ｏｐｔｈａｌｍｉｃａｌｌｙ）であってよい。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、対象に１つまたは複数のＡＥナノ粒子を対象の皮膚の表面に投与することによって、対象に生物学的活性物質を経皮的に送達する方法であって、その生物学的活性物質がＡＥナノ粒子中かまたはその表面上に含まれる方法を提供する。いくつかの実施形態では、対象は哺乳動物（例えば、ヒト）であってよい。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するための組成物は、送達されるその薬剤を含むＡＥナノ粒子を含むことができる。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質はＡＥナノ粒子中に封入されていてもよい。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質はＡＥナノ粒子の表面と結合していてもよい。
【０１６３】
物質を経皮的に投与する従来からの試みでは、その物質を施用する前に、皮膚浸透性を改善するステップが必要とされている。いくつかの試みは、皮膚の表面に作用して、皮膚を通した物質の浸透性を増大させる化学的浸透促進剤の使用を含めている。こうした化学的浸透促進剤の使用はしばしば痛みを伴い、皮膚の表面に損傷を与える可能性がある。他の試みには、超音波もしくはイオン導入、または皮膚を通した物質の浸透を容易にする他の形態のエネルギー、ならびに、角質層などの皮膚の表面層を貫通するマイクロチャンネルを発生させるためのマイクロパンクチャーもしくは高エネルギー技術の使用が含まれている。本発明のＡＥナノ粒子は、磨耗剤または他の皮膚崩壊剤（化学的、機械的、電気的、磁気的等による）の使用を必要とすることなく、生物学的活性物質の経皮的送達を実現することができる。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するＡＥナノ粒子を含む組成物の経皮的送達のための組成物は、これらに限定されないが、皮膚軟化剤、栄養ローションタイプのエマルジョン、クレンジンローション、クレンジングクリーム、乳液、エモリエントローション、マッサージ用クリーム、エモリエントクリーム、メークアップベース、口紅、フェイシャルパックまたはフェイシャルゲル、洗剤配合品（例えば、シャンプー、リンス、ボディクリーナー、ヘアートニックまたはせっけん）および皮膚用組成物（例えば、ローション剤、軟膏、ゲル剤、クリーム剤、パッチおよび噴霧剤）を含む化粧品の形態であってよい。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質の経皮的送達のための組成物は経皮パッチの形態であってよい。接着パッチの使用は当業界でよく知られている（例えば、米国特許第２９６，００６（設計）号、同第６，０１０，７１５号、同第５，５９１，７６７号、同第５，００８，１１０号、同第５，６８３，７１２号、同第５，９４８，４３３号および同第５，９６５，１５４号を参照されたい。いくつかの実施形態では、経皮パッチは人の皮膚に貼る接着剤層を含むことができる。いくつかの実施形態では、経皮パッチは、生物学的活性物質または組成物を保持するためのデポーまたはリザーバを含むことができる。いくつかの実施形態では、経皮パッチは、デポーから薬剤や組成物が漏れるのを阻止できる外部表面を含む。いくつかの実施形態では、パッチの外部表面は非接着性であってよい。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含む組成物をパッチの中に取り込んで、ＡＥナノ粒子が長期間安定に保たれるようにすることができる。ＡＥナノ粒子を安定化させ、かつ、ＡＥナノ粒子がマトリックスおよびパッチから拡散するのを可能にするポリマーマトリックス中にＡＥナノ粒子を取り込むことができる。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子を、パッチの接着剤層中に取り込むことができる。一実施形態では、接着剤層は加熱して活性化することができる。特定の実施形態では、約３７℃の温度で接着剤を徐々に液化させ、それによってＡＥナノ粒子が皮膚を通して拡散するようにすることができる。特定の実施形態では、３７℃未満で保存した場合、接着剤の粘着性を維持することができる。いくつかの実施形態では、接着剤が約３７℃の温度で液化するとその粘着性は失われる。いくつかの実施形態では、ＡＥナノ粒子の投与は１回で完了し、パッチはもはや皮膚に付着しない。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質の経皮的送達のためのＡＥナノ粒子を含む組成物は、皮膚の非標的部位領域に組成物を塗布することなく、皮膚上の標的部位への組成物の塗布を可能にする塗布装置で使用することができる。いくつかの実施形態では、最初に人の指に組成物を塗布する（これは望ましくない指の麻痺をもたらす恐れがある）ことなく、組成物を塗布できるようにする装置を用いることができる。適切なデバイスには、スパチュラ、スワブ、針なしシリンジ、および接着パッチが含まれる。スパチュラもしくはスワブまたは同様のものを使用すると、組成物を含む容器中へのデバイスの挿入を必要とする可能性がある。シリンジまたは接着パッチの使用は、シリンジまたはパッチにその組成物を充填することによって行うことができる。組成物はスパチュラまたはスワブで局所に薄く塗るか、あるいは、シリンジから人の皮膚の上に押し出すことができる。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、生物学的活性物質は、１つもしくは複数のボツリヌス毒素ペプチドまたはタンパク質複合体であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素はボツリヌス毒素血清型Ａ、Ｂ、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ、Ｅ、ＦまたはＧの１つまたは複数であってよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、単離されているか、かつ／または精製されたボツリヌス毒素であってもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、部分的に単離されているか、かつ／または部分的に精製されたボツリヌス毒素であってもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は天然のボツリヌス複合体であってもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は非毒性タンパク質と会合していてもよい。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は組換え技術によるボツリヌス毒素であってもよい。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、経皮的送達のための組成物中のボツリヌス毒素は、患者の皮膚を約１０−３Ｕ／ｋｇ〜１０Ｕ／ｋｇで通過するような量で存在させることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、患者の皮膚を約１０−２Ｕ／ｋｇ〜約１Ｕ／ｋｇで通過するような量で存在させることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、患者の皮膚を約１０−１Ｕ／ｋｇ〜約１Ｕ／ｋｇで通過するような量で存在させることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素は、患者の皮膚を約０．１Ｕ〜約５Ｕで通過するような量で存在させることができる。本明細書で用いる「単位」（「Ｕ」）は、ボツリヌス毒素の製造業者によって定義される単位と生物学的に同等であるかまたは生物活性的に同等である。
【０１７０】
一実施形態では、ボツリヌス毒素の投薬量は、低くて約１Ｕ〜高くて約２０，０００Ｕの範囲であってよい。具体的な投薬量は、治療を受ける状態、とられる治療レジメンに応じて変えることができる。例えば、皮下の活動亢進した筋肉（ｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｅ  ｍｕｓｃｌｅ）の治療は、高いの経皮投薬量（例えば、２００Ｕ〜２０，０００Ｕ）のボツリヌス毒素を必要とする。相対的に、神経性炎症または活動亢進汗腺の治療には、比較的少ない経皮投薬量（例えば、約１Ｕ〜約１，０００Ｕ）のボツリヌス毒素を必要とする。いくつかの実施形態では、組成物は、１か月間から５年間持続する治療効果を得るのに十分なボツリヌス毒素の量を含むことができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素を含む組成物は、これらに限定されないが、全身毒性またはボツリヌス中毒を含む予測される合併症を回避するように処方することができる。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、本発明は、顔のしわを治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、顔のしわを治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、顔のしわを治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、顔のしわには、眉間しわ、顔のしわの線（例えば、多動性の顔のしわの線）、額のしわ、顔面中央のしわ、口まわりのしわ、頸のしわおよび横縞（例えば、広頸筋の横縞）およびあごのしわを含むことができる。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、本発明は、対象の神経筋の障害および状態を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、筋肉けいれんおよび／または拘縮を含む神経筋の障害および状態を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、神経筋の障害および状態を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、筋肉けいれんおよび／または拘縮を含む神経筋の障害および状態には、これらに限定されないが、様々な形態の麻痺、顔面拘縮、ジストニア、片側顔面けいれん、振戦、痙性（例えば、多発性硬化症から生じる）、後眼窩筋（ｒｅｔｒｏｏｒｂｉｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ）および様々な他の眼科的状態（ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）が含まれる（Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓら、１９９６年、Ｊ．  Ａｍ．  Ａｃａｄ．  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，  ３４：７８８頁；これを参照により本明細書に組み込む）。いくつかの実施形態では、本発明は、対象の筋肉けいれんおよび／または拘縮を含む神経筋の障害および状態を治療する方法は提供しない。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、本発明は、対象の多汗症（すなわち、過剰にかつ予測できない形で汗をかく人における病状）を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、多汗症を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、多汗症を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、本発明は、対象の多汗症を治療する方法は提供しない。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、本発明は、対象の頭痛を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、頭痛を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、頭痛を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、本発明は、対象の頭痛を治療する方法は提供しない。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、本発明は、対象の前立腺肥大を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、生物学的活性物質を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、前立腺肥大を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、ボツリヌス毒素を経皮的に送達するためのＡＥナノ粒子を含むナノ粒子組成物を、前立腺肥大を治療するのに用いることができる。いくつかの実施形態では、本発明は、対象の前立腺肥大を治療する方法は提供しない。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、本発明は、１つまたは複数のＡＥナノ粒子を、レポーター基、およびその障害に付随する標的と結合する標的化剤で標識化し、標的と結合するのに十分な条件および量でその標識化した粒子を対象に投与し、レポーター基を画像化し、それによってその障害を画像化することによって、対象の疾患（例えば、癌）を画像化する方法を提供する。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、本発明のＡＥナノ粒子を、対象に薬物を送達するために用いる。いくつかの実施形態では、ナノ粒子組成物は、これらに限定されないが、抗生物質、抗ウイルス剤、麻酔剤、抗凝血剤、抗癌剤、酵素の阻害剤、ステロイド剤、抗炎症剤、抗腫瘍剤、抗原、ワクチン、抗体、充血除去剤、降圧剤、鎮静剤、妊娠調節剤、黄体ホルモン薬、抗コリン作用薬、鎮痛剤、抗うつ剤、抗精神病剤、β−抗アドレナリン作動薬、利尿薬、心血管活性剤、血管作用薬、ホルモン（例えば、インスリン、エストラジオール）および非ステロイド系抗炎症剤を含む薬物を含むＡＥナノ粒子を含むことができる。
【０１７８】
医薬組成物
本発明はＡＥナノ粒子を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書で記載するＡＥナノ粒子を含む医薬組成物を提供する。本発明は、治療有効量の生物学的活性物質を含むＡＥナノ粒子を含む医薬組成物を提供する。そうした医薬組成物は、１つまたは複数の追加の治療効果のある物質を任意選択で含むことができる。一実施形態によれば、治療有効量の治療薬を含むＡＥナノ粒子を含む医薬組成物を、それを必要とする患者に投与する方法を提供する。いくつかの実施形態では、その組成物をヒトに投与する。
【０１７９】
本明細書で提供する医薬組成物の説明は、主にヒトへの医療用投与に適した医薬組成物を対象としているが、当業者はそうした組成物が、もろもろの動物への投与にも適していることを理解されよう。様々な動物への投与に適した組成物を付与するためにヒトへの投与に適した医薬組成物を改変することはよく理解されており、当業界の薬理獣医学者（ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｓｔ）は、もしあれば、通常の実験によってそうした改変を設計および／または実行することができる。本発明の医薬組成物を投与する対象には、これらに限定されないが、ヒトおよび／または他の霊長類；ウシ、ブタ、ウマ、ヒツジ、ネコおよび／またはイヌなどの商業的に関係する哺乳動物；および／またはニワトリ、カモ、ガチョウおよび／またはシチメンチョウなどの商業的に関係する鳥を含む鳥類が含まれるものとする。
【０１８０】
本明細書で記載する医薬組成物の処方物は、薬理学の技術分野で知られているかまたは今後開発される任意の方法で調製することができる。一般に、そうした調製方法は、活性成分を担体および／または１つもしくは複数の補助成分と一緒にするステップと、必要であり、かつ／または望ましい場合、その生成物を、所望の単一投薬単位もしくは複数投薬単位に成形し、かつ／または包装するステップとを含む。
【０１８１】
本発明の医薬組成物は、バルクで、単一単位用量として、かつ／または複数の単一単位用量として調製し、包装し、かつ／または販売することができる。本明細書で用いる「単位用量」は、所定量の活性成分を含む離散した量の医薬組成物である。活性成分の量は一般に、対象に投与される活性成分の投薬量、および／またはそうした投薬量の好都合な画分、例えば、そうした投薬量の１／２または１／３に等しい。
【０１８２】
本発明の医薬組成物中の活性成分、薬剤として許容される担体および／または任意の追加成分の相対量は、治療を受ける対象の実体、大きさおよび／または状態に依存し、さらに組成物が投与される経路にも依存する。例を挙げると、組成物は０．１％〜１００％（重量／重量）の活性成分を含むことができる。
【０１８３】
本発明の化合物のいくらかは、治療用に遊離の形態で存在することができ、あるいは適切な場合、薬剤として許容されるその誘導体として存在することができることも理解されよう。本発明によれば、薬剤として許容される誘導体には、これらに限定されないが、薬剤として許容される塩、エステル、そうしたエステルの塩、あるいは必要とする患者に投与されると直接かまたは間接に本明細書で別途説明した化合物またはその代謝体もしくは残基を提供できる他の任意の付加体もしくは誘導体、例えばプロドラッグが含まれる。
【０１８４】
本明細書で用いる「薬剤として許容される塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、炎症、アレルギー反応等を伴わずヒトや下等動物の組織と接触して使用するのに適しており、かつ、妥当な利益／リスク比に相応している塩を指す。薬剤として許容される塩は当業界で周知である。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ等は薬剤として許容される塩を詳細に記載している（１９７７年、Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．，  ６６：１頁；これを参照により本明細書に組み込む）。塩は、本発明の化合物の最終的な単離および精製の際にその場で、あるいは、別に、遊離塩基の官能基を適切な有機酸または無機酸と反応させることによって調製することができる。薬剤として許容される非毒性の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸などの無機酸、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸などの有機酸で形成されるか、あるいは、イオン交換などの当技術分野で用いる他の方法を使用されることによって形成されるアミノ基の塩である。他の薬剤として許容される塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルクロン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、マル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、ハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが含まれる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩にはナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。他の薬剤として許容される塩には、適切な場合、ハライド、ヒドロキシド、カルボン酸、硫酸、リン酸、硝酸、低級アルキルスルホン酸およびアリールスルホン酸などの対イオンを用いて形成される非毒性のアンモニウム、第四アンモニウムならびにアミンカチオンが含まれる。
【０１８５】
さらに、本明細書で用いる「薬剤として許容されるエステル」という用語は、インビボで加水分解するエステルを指し、それらには、人の体内で容易に分解してその親化合物またはその塩を後に残すエステルが含まれる。適切なエステル基には、例えば、薬剤として許容される脂肪族カルボン酸、具体的にはアルカン酸、アルケン酸、シクロアルカン酸およびアルカン二酸から誘導されるものが含まれる。ここで、各アルキルまたはアルケニル部分は６個以下の炭素原子を有することが有利である。具体的なエステルの例には、ギ酸エステル、酢酸エステル、プロピオン酸エステル、酪酸エステル、アクリル酸エステルおよびエチルコハク酸エステルが含まれる。特定の実施形態では、そのエステルは、エステラーゼなどの酵素によって開裂される。
【０１８６】
さらに、本明細書で用いる「薬剤として許容されるプロドラッグ」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、炎症、アレルギー反応等を伴いヒトや下等動物の組織と接触して使用するのに適しており、妥当な利益／リスク比に相応しており、かつその使用目的に対して有効な本発明の化合物のプロドラッグ、ならびに、可能な場合、本発明の化合物の両性イオン性の形態を指す。「プロドラッグ」という用語は、例えば、血液中での加水分解によって、インビボで急速に変換されて、上記式の親化合物をもたらす化合物を指す。詳細な考察は、Ｔ．  ＨｉｇｕｃｈｉおよびＶ．  Ｓｔｅｌｌａ、Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｖｏｌ．  １４
ｏｆ  ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ａｎｄ  ｉｎ  Ｅ．Ｂ．  Ｒｏｃｈｅ，  ｅｄ．，  Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７年（その両方を参照により本明細書に組み込む）に提供されている。
【０１８７】
上記したように、本発明の医薬処方物は薬剤として許容される賦形剤をさらに含むことができ、本明細書で用いるそれらには、望ましい具体的な剤形に適した形で、ありとあらゆる溶媒、分散媒体、希釈剤または他の液媒体、分散助剤もしくは懸濁助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤もしくは乳化剤、保存剤、固体結合剤、滑剤などが含まれる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、２１ｓｔ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ａ．  Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ、ＭＤ、２００６年）は、医薬組成物の処方に使用される様々な担体、およびその処方のための既知の技術を開示している。何らかの望ましくない生物学的作用もたらすか、あるいは医薬組成物の他の任意の成分と、悪影響を及ぼす形で相互作用することによって従来の任意の担体媒体が物質またはその誘導体に適合しない場合を除いて、その使用は本発明の範囲内であるものとする。
【０１８８】
いくつかの実施形態では、薬剤として許容される賦形剤は少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の純度である。いくつかの実施形態では、賦形剤はヒトへの使用や獣医学的使用に承認されている。いくつかの実施形態では、賦形剤は米国食品医薬品局によって承認されている。いくつかの実施形態では、賦形剤は医薬品グレードである。いくつかの実施形態では、賦形剤は、米国薬局方（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）（ＵＳＰ）、ヨーロッパ薬局方（Ｅｕｒｏｐｅａｎ
Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）（ＥＰ）、英国薬局方（Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）および／または国際薬局方（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）の基準に適合している。
【０１８９】
医薬組成物の製造に用いられる薬剤として許容される賦形剤には、これらに限定されないが、不活性希釈剤、分散化剤および／または顆粒化剤、表面活性剤および／または乳化剤、崩壊剤、結合剤、保存剤、緩衝剤、潤滑剤および／またはオイル類が含まれる。そうした賦形剤は任意選択で本発明の処方物に含まれていてよい。ココアバターや坐薬用ワックス、着色剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤および香料などの賦形剤も、処方責任者の判断によって組成物中に含ませることができる。
【０１９０】
希釈剤の例には、これらに限定されないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、リン酸ナトリウム、ラクトース、スクロース、セルロース、微結晶性セルロース、カオリン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、塩化ナトリウム、乾燥デンプン、トウモロコシデンプン、粉砂糖等およびその組合せが含まれる。
【０１９１】
顆粒化剤および／または分散化剤の例には、これらに限定されないが、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプン、タピオカデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、粘土、アルギン酸、グアーガム、シトラスパルプ、寒天、ベントナイト、セルロースおよび木製品、海綿、陽イオン交換樹脂、炭酸カルシウム、ケイ酸塩、炭酸ナトリウム、架橋ポリ（ビニル−ピロリドン）（クロスポビドン）、カルボキシメチルデンプンナトリウム（デンプングリコール酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、架橋したカルボキシメチルセルロースナトリウム（クロスカルメロース）、メチルセルロース、アルファ化デンプン（デンプン１５００）、微晶質デンプン、水不溶性デンプン、カルボキシメチルセルロースカルシウム、マグネシウムケイ酸アルミニウム（ビーガム（Ｖｅｅｇｕｍ））、ラウリル硫酸ナトリウム、第四アンモニウム化合物等およびその組合せが含まれる。
【０１９２】
表面活性剤および／または乳化剤の例には、これらに限定されないが、天然乳化剤（例えば、アカシア、寒天、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、トラガカント、チョンドラックス（ｃｈｏｎｄｒｕｘ）、コレステロール、キサンタン、ペクチン、ゼラチン、卵黄、カゼイン、羊毛脂、コレステロール、ワックスおよびレシチン）、コロイド粘土（例えば、ベントナイト［ケイ酸アルミニウム］およびビーガム［マグネシウムケイ酸アルミニウム］）、長鎖アミノ酸誘導体、高分子量アルコール（例えば、ステアリルアルコール、セチルアルコール、オレイルアルコール、トリアセチンモノステアレート、ジステアリンエチレングリコール、グリセリルモノステアレートおよびプロピレングリコールモノステアレート、ポリビニルアルコール）、カルボマー（例えば、カルボキシポリメチレン、ポリアクリル酸、アクリル酸ポリマーおよびカルボキシビニルポリマー）、カラギーナン、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、粉末セルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース）、ソルビタン脂肪酸エステル（例えば、ポリオキシエチレンモノラウリン酸ソルビタン［Ｔｗｅｅｎ２０］、ポリオキシエチレンソルビタン［Ｔｗｅｅｎ６０］、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート［Ｔｗｅｅｎ８０］、ソルビタンモノパルミテート［Ｓｐａｎ４０］、ソルビタンモノステアレート［Ｓｐａｎ６０］、ソルビタントリステアレート［Ｓｐａｎ６５］、グリセリルモノオレエート、ソルビタンモノオレエート［Ｓｐａｎ８０］）、ポリオキシエチレンエステル（例えば、ポリオキシエチレンモノステアレート［Ｍｙｒｊ４５］、ポリオキシエチレン水素化ひまし油、ポリエトキシ化ひまし油、ポリオキシメチレンステアレートおよびＳｏｌｕｔｏｌ）、スクロース脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル（例えば、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ）、ポリオキシエチレンエーテル、（例えば、ポリオキシエチレンラウリルエーテル［Ｂｒｉｊ３０］）、ポリ（ビニル−ピロリドン）、ジエチレングリコールモノラウレート、トリエタノールアミンオレエート、オレイン酸ナトリウム、オレイン酸カリウム、オレイン酸エチル、オレイン酸、ラウリン酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ６８、ポロキサマー１８８、臭化セトリモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、ドキュセートナトリウム等および／またはその組合せが含まれる。
【０１９３】
結合剤の例には、これらに限定されないが、デンプン（例えば、トウモロコシデンプンおよびデンプン糊）；ゼラチン；糖類（例えば、スクロース、グルコース、デキストロース、デキストリン、糖蜜、ラクトース、ラクチトール、マンニトール）；天然および合成ゴム（例えば、アカシア、アルギン酸ナトリウム、アイリッシュモスの抽出物、パンワーゴム、ガッチゴム、イサポール皮の粘液、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、酢酸セルロース、ポリ（ビニル−ピロリドン）、マグネシウムケイ酸アルミニウム（ビーガム）およびカラマツのアラボガラクタン）；アルギン酸塩；ポリエチレンオキシド；ポリエチレングリコール；無機カルシウム塩；ケイ酸；ポリメタクリレート；ワックス；水；アルコール；等およびその組合せが含まれる。
【０１９４】
保存剤の例には、酸化防止剤、キレート剤、抗菌性保存剤、抗真菌性保存剤、アルコール保存剤、酸性保存剤および他の保存剤が含まれる。酸化防止剤の例には、これらに限定されないが、αトコフェロール、アスコルビン酸、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、モノチオグリセロール、ピロ亜硫酸カリウム、プロピオン酸、没食子酸プロピル、アスコルビン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウムおよび亜硫酸ナトリウムが含まれる。キレート剤の例には、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸一水和物、エデト酸２ナトリウム、エデト酸二カリウム、エデト酸、フマル酸、リンゴ酸、リン酸、エデト酸ナトリウム、酒石酸およびエデト酸３ナトリウムが含まれる。抗菌性保存剤の例には、これらに限定されないが、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミド尿素、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、プロピレングリコールおよびチメロサールが含まれる。抗真菌性保存剤の例には、これらに限定されないが、ブチルパラベン、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウムおよびソルビン酸が含まれる。アルコール保存剤の例には、これらに限定されないが、エタノール、ポリエチレングリコール、フェノール、フェノール化合物、ビスフェノール、クロロブタノール、ヒドロキシ安息香酸およびフェニルエチルアルコールが含まれる。酸性保存剤の例には、これらに限定されないが、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、β−カロチン、クエン酸、酢酸、デヒドロ酢酸、アスコルビン酸、ソルビン酸およびフィチン酸が含まれる。他の保存剤には、これらに限定されないが、トコフェロール、酢酸トコフェロール、メシル酸デテロキサミン、セトリミド、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエンド（ＢＨＴ）、エチレンジアミン、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）、亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸カリウム、ピロ亜硫酸カリウム、Ｇｌｙｄａｎｔ  Ｐｌｕｓ、Ｐｈｅｎｏｎｉｐ、メチルパラベン、Ｇｅｒｍａｌｌ  １１５、Ｇｅｒｍａｂｅｎ  ＩＩ、Ｎｅｏｌｏｎｅ、ＫａｔｈｏｎおよびＥｕｘｙｌが含まれる。特定の実施形態では、保存剤は酸化防止剤である。他の実施形態では、保存剤はキレート剤である。
【０１９５】
緩衝剤の例には、これらに限定されないが、クエン酸緩衝液、酢酸酸緩衝液、リン酸緩衝液、塩化アンモニウム、炭酸カルシウム、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルビオン酸カルシウム、グルセプト酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、Ｄ−グルコン酸、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、プロパン酸、レブリン酸カルシウム、ペンタン酸、第二リン酸カルシウム、リン酸、第三リン酸カルシウム、カルシウムヒドロキシドホスフェート、酢酸カリウム、塩化カリウム、グルコン酸カリウム、カリウム混合液、リン酸水素二カリウム、リン酸２水素カリウム、リン酸カリウム混合物、酢酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、第二リン酸ナトリウム、リン酸一ナトリウム、リン酸ナトリウム混合物、トロメタミン、水酸化マグネシウム、水酸化アルミニウム、アルギン酸、パイロジェンフリー水、等張食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコール等およびその組合せが含まれる。
【０１９６】
潤滑剤の例には、これらに限定されないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、シリカ、タルク、モルト、ベハン酸グリセリル、硬化植物油、ポリエチレングリコール、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、ロイシン、ラウリル硫酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム等およびその組合せが含まれる。
【０１９７】
オイル類の例には、これらに限定されないが、アーモンド、杏仁、アボカド、ババス、ベルガモット、クロフサスグリの種、ルリヂサ、カデ、カモミール、キャノーラ、キャラウェー、カルナバ、ひまし、シナモン、ココアバター、ココナツ、タラの肝、コーヒー、トウモロコシ、綿実、エミュー、ユーカリ、月見草、魚、アマニ、ゲラニオール、ヘチマ、ブドウの種、ヘーゼルナッツ、ヒソップ、ミリスチン酸イソプロピル、ホホバ、ククイの実、ラバンディン、ラベンダー、レモン、リツェアクベバ、マカダミアナッツ、アオイ、マンゴーの種、メドウフォームの種、ミンク、ナツメグ、オリーブ、オレンジ、オレンジラフィー、パーム、パーム核、桃仁、ピーナツ、ケシの実、カボチャの実、菜種、米ぬか、ローズマリー、サフラワー、ビャクダン、サザンカ、セイボリー、シーバックソーン、ゴマ、シアバター、シリコーン、大豆、ヒマワリ、ティーツリー、アザミ、ツバキ、ベチベル、クルミおよび小麦胚種のオイルが含まれる。オイル類の例には、これらに限定されないが、ステアリン酸ブチル、カプリル酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、シクロメチコン、セバシン酸ジエチル、ジメチコン３６０、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、オクチルドデカノール、オレイルアルコール、シリコーン油およびその組合せが含まれる。
【０１９８】
医薬組成物は、動物、好ましくは哺乳動物（例えば、家畜、ネコ、イヌ、マウス、ラット）、より好ましくはヒトに投与することができる。医薬組成物を動物に送達するために任意の投与方法を用いることができる。特定の実施形態では、医薬組成物を経口で投与する。他の実施形態では、医薬組成物を非経口で投与する。
【０１９９】
本発明のいくつかの実施形態では、それを必要とする対象に治療有効量のボツリヌス毒素を含むＡＥナノ粒子を、所望の結果を得るのに必要な量と時間で投与することを含む顔のしわを治療するための方法を提供する。本発明の特定の実施形態では、ボツリヌス毒素を含むＡＥナノ粒子の「治療有効量」は、これらに限定されないが、眉間しわ、顔のしわの線（例えば、多動性の顔のしわの線）、額のしわ、顔面中央のしわ、口まわりのしわ、頸のしわおよび横縞（例えば、広頸筋の横縞）およびあごのしわを含む顔のしわを治療するのに有効なその量である。
【０２００】
本発明のいくつかの実施形態では、治療有効量のボツリヌス毒素を含むＡＥナノ粒子を、所望の結果を得るのに必要な量と時間で、それを必要とする対象の手、足および／または脇の下に投与することを含む多汗症の治療のための方法を提供する。
【０２０１】
本発明の方法によれば、組成物を、顔のしわの治療をするのに効果的な任意の量と投与経路を用いて投与することができる。正確な必要量は、その種、対象の年齢および全身状態、感染症の重篤度、具体的な組成物、その投与方式、その作用の仕方などに応じて対象ごとに異なることになる。本発明の組成物は、投与のケースおよび投薬量の均一性のために投薬単位形態で処方することが好ましい。しかし、本発明の組成物の日々の総使用量は、健全な医学的判断の範囲内で担当医によって判断されることになることを理解されよう。具体的な任意の患者または有機体のための具体的な治療有効用量レベルは、治療を受ける障害、その障害の重篤度、使用する具体的な化合物の活性、患者の年齢、体重、全体的な健康状態、性別および食事；投与の時間、投与経路、使用する具体的な化合物の排出速度、治療期間、使用する具体的な化合物と共にまたはそれと同時に用いる薬物、および当医学技術分野で周知の同様の因子を含む様々な因子に依存することになる。
【０２０２】
本発明の医薬組成物は任意の経路で投与することができる。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、経口、静脈内、筋肉内、動脈内、髄内、髄腔内、皮下、脳室内、経皮、皮内、経直腸、膣内、腹腔内、局所（粉剤、軟膏、クリーム剤および／またはドロップ剤で）、粘膜、頬側、腸内、舌下および／または経口スプレー、鼻腔用スプレーおよび／またはエアロゾルを含む様々な経路で投与される。一般に、投与の最も適切な経路は、薬剤の性質（例えば、胃腸管の環境でのその安定性）、患者の状態（例えば、患者が経口投与に耐えられるかどうか）等を含む様々な因子に依存することになる。現在、肺および／または呼吸器系に直接治療薬を送達するのに、経口および／または鼻腔用スプレーおよび／またはエアロゾル経路が最も一般的に用いられている。しかし、本発明は、薬物送達の科学における起こり得る進歩を考慮に入れた任意の適切な経路による、本発明の医薬組成物の送達を包含する。
【０２０３】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、所望の治療が得られるように、１日当たり対象の体重の約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの投薬量レベルで、日に１回または複数回経口または非経口で投与することができる。所望の投薬量は、１日に３回、１日に２回、１日に１回、１日おきに、２日おきに、毎週、隔週に、３週間に１回または４週間に１回送達することができる。特定の実施形態では、所望の投薬量を、複数回投与（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４回またはそれ以上の回数の投与）で送達することができる。
【０２０４】
経口および非経口投与のための液体剤形には、これらに限定されないが、薬剤として許容される乳剤、マイクロエマルジョン、液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。活性化合物に加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、オイル類（具体的には、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ひまし油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステルならびにその混合物などの当業界で通常使用されている不活性な希釈剤を含むことができる。不活性な希釈剤の外に、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、香味剤ならびに香料などの補助剤も含むことができる。非経口的投与用の特定の実施形態では、本発明の化合物を、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ、アルコール、オイル類、改質オイル類、グリコール、ポリソルベート、シクロデキストリン、ポリマーおよびその組合せなどの可溶化剤と混合する。
【０２０５】
注射用製剤、例えば、無菌注射用の水性または油性懸濁剤は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて既知の技術に従って処方することができる。無菌注射用製剤は、非毒性の非経口で許容される希釈剤または溶媒中の無菌注射用溶液、懸濁液または乳液、例えば、１，３−ブタンジオールの溶液であってもよい。使用できる許容媒体および溶媒の中には、水、リンゲル溶液、Ｕ．Ｓ．Ｐおよび等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌性固定油が、溶媒または懸濁化剤として通常使用される。このためには、合成モノ−またはジノグリセリドを含む任意の無菌固定油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が注射液の調製に使用される。
【０２０６】
注射用処方物は、例えば、細菌保持フィルターでのろ過によるか、あるいは、使用前に、滅菌水または他の滅菌した注射用媒体に溶解するかまたは分散させることができる無菌性固体組成物の形態で殺菌剤を混ぜ込むことによって滅菌することができる。
【０２０７】
薬物の効果を長引かせるために、皮下または筋肉内注射による薬物の吸収を遅くするのが望ましいことがしばしばある。これは、水への溶解度の小さい結晶性または非晶質の物質の液体懸濁液を用いて実施することができる。薬物の吸収速度はその溶解速度に依存し、さらには結晶サイズや結晶形態に依存する。あるいは、非経口で投与した薬物形態の遅延吸収は、油性媒体中に薬物を溶解するかまたは懸濁することによって行われる。注入可能なデポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に薬物のマイクロカプセルマトリックスを形成させることによって作製する。薬物とポリマーの比、および使用する具体的なポリマーの特性に応じて、薬物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（アンヒドリド）が含まれる。デポー注射用処方物は、体内組織に適合するリポソームまたはマイクロエマルジョン中に、薬物を取り込むことによって調製することもできる。
【０２０８】
経直腸または膣内投与のための組成物は、本発明の化合物を、常温で固体であるが体温で液体であり、したがって、直腸腔または膣腔内で溶融し活性化合物を放出する、ココアバター、ポリエチレングリコールまたは坐薬用ワックスなどの適切な非刺激性の賦形剤または担体と混合することによって調製できる坐薬であることが好ましい。
【０２０９】
経口投与のための固体剤形には、カプセル剤、錠剤、丸薬、粉剤および顆粒剤が含まれる。そうした固体剤形では、活性化合物を少なくとも１種の不活性な薬剤として許容される賦形剤または担体、例えば、クエン酸ナトリウムもしくは第二リン酸カルシウム、および／または、ａ）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸などのフィラーすなわち増量剤、ｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロースおよびアカシアなどの結合剤、ｃ）グリセロールなどの湿潤剤、ｄ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモもしくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、ｅ）パラフィンなどの溶解遅延剤、ｆ）第四アンモニウム化合物などの吸収促進剤、ｇ）例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなどの湿潤剤、ｈ）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤、ならびにｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの滑剤およびその混合物と混合する。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合、その剤形は緩衝剤を含むこともできる。
【０２１０】
類似したタイプの固体組成物は、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコール等のような賦形剤を用いて、軟質および硬質のゼラチンカプセル中のフィラーとして使用することもできる。固体剤形の錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸薬および顆粒剤は、腸溶コーティング、および製剤処方技術分野でよく知られている他のコーティングなどのコーティングやシェルを用いて調製することができる。それらは任意選択で乳白剤を含むことができ、また、腸管の特定の部分で、任意選択で遅延した形で、活性成分だけを放出するかまたはそれを優先的に放出する組成物でできていてもよい。使用できる埋め込み組成物の例には、重合物質およびワックスが含まれる。類似したタイプの固体組成物は、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポルエチレングリコール等のような賦形剤を用いて、軟質および硬質のゼラチンカプセル中のフィラーとして使用することもできる。
【０２１１】
活性化合物は、上記したような１種または複数の賦形剤でマイクロカプセル化した形態であってもよい。固体剤形の錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸薬および顆粒剤は、腸溶コーティング、放出制御コーティング、および製剤処方技術分野でよく知られている他のコーティングなどのコーティングやシェルを用いて調製することができる。そうした固体剤形では、活性化合物を、スクロース、ラクトースまたはデンプンなどの少なくとも１つの不活性な希釈剤と混合することができる。そうした剤形は、通常の慣行であるが、不活性な希釈剤以外の追加の物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムや微結晶性セルロースなどの錠剤化用滑剤および他の錠剤化用助剤も含むことができる。カプセル剤、錠剤および丸薬の場合、剤形は緩衝剤を含むこともできる。それらは任意選択で乳白剤を含むことができ、また、腸管の特定の部分で、任意選択で遅延した形で、活性成分だけを放出するかまたはそれを優先的に放出する組成物でできていてもよい。使用できる埋め込み組成物の例には、重合物質およびワックスが含まれる。
【０２１２】
本発明の化合物の局所および／または経皮的投与のための剤形は、軟膏、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、粉剤、液剤、噴霧剤、吸入剤および／またはパッチを含むことができる。一般に、活性成分は、無菌状態下で、薬剤として許容される担体および／または必要な任意の保存剤および／または必要に応じて緩衝剤と混合することができる。さらに、本発明は経皮パッチの使用を考慮する。これは、身体への化合物の制御された送達をもたらす追加的な利点をしばしば有する。そうした剤形は、例えば、その化合物を適切な媒体中に溶解および／または分散させることによって調製することができる。それに代えるかまたはそれに加えて、速度制御膜を提供するか、かつ／または、化合物をポリマーマトリックスおよび／またはゲルの中に分散させることによって、その速度を制御することができる。
【０２１３】
本明細書で記載する皮内用医薬組成物を送達するのに用いる適切なデバイスには、米国特許第４，８８６，４９９号、同第５，１９０，５２１号、同第５，３２８，４８３号、同第５，５２７，２８８号、同第４，２７０，５３７号、同第５，０１５，２３５号、同第５，１４１，４９６号、同第５，４１７，６６２号（そのすべてを参照により本明細書に組み込む）に記載されているものなどの短針デバイスが含まれる。皮内用組成物は、ＰＣＴ特許公開ＷＯ９９／３４８５０（これを参照により本明細書に組み込む）に記載されているものおよび機能的にそれと同等のものなどの皮膚内への針の有効貫通長さを制限するデバイスで投与することができる。液体ジェット流注入器を介して、かつ／または角質層を貫き、かつ、真皮に達するジェット流を発生させる針を介して、真皮に液体ワクチンを送達するジェット流注入装置は適切なものである。ジェット流注入装置は、例えば、米国特許第号５，４８０，３８１号、同第５，５９９，３０２号、同第５，３３４，１４４号、同第５，９９３，４１２号、同第５，６４９，９１２号、同第５，５６９，１８９号、同第５，７０４，９１１号、同第５，３８３，８５１号、同第５，８９３，３９７号、同第５，４６６，２２０号、同第５，３３９，１６３号、同第５，３１２，３３５号、同第５，５０３，６２７号、同第５，０６４，４１３号、同第５，５２０，６３９号、同第４，５９６，５５６号、同第４，７９０，８２４号、同第４，９４１，８８０号、同第４，９４０，４６０号ならびにＰＣＴ特許公開ＷＯ９７／３７７０５および同ＷＯ９７／１３５３７に記載されている。そのすべてを参照により本明細書に組み込む。粉末形態でワクチンを加速して皮膚の外層を通して真皮に入れるために圧縮ガスを使用するバリスティック粉末／粒子送達デバイスは適切なものである。それに代えるかまたはそれに加えて、通常のシリンジを、皮内投与の古典的ツベルクリン方式（ｍａｎｔｏｕｘ  ｍｅｔｈｏｄ）で使用することもできる。
【０２１４】
局所投与に適した処方物には、これらに限定されないが、液状および／または半液状製剤、例えば塗布薬、ローション剤、水中油型および／または油中水型乳剤、例えばクリーム剤、軟膏および／またはペースト剤および／または液剤および／または懸濁剤が含まれる。局所投与処方物は、例えば約１％〜約１０％（重量／重量）の活性成分を含むことができるが、活性成分の濃度は、溶媒中での活性成分の溶解限度までの濃度であってよい。局所投与用の処方物は、本明細書で述べる追加成分の１つまたは複数をさらに含むことができる。
【０２１５】
本発明の医薬組成物は、口腔を介した肺への投与に適した処方物で調製、包装および／または販売することができる。そうした処方物は活性成分を含み、かつ約０．５〜約７ｎｍまたは約１〜約６ｎｍの範囲の直径を有する乾燥粒子を含むことができる。そうした組成物は、噴射剤のストリームをそれに向けて粉末を分散させることができる乾燥粉末リザーバを備えたデバイスを用いるか、かつ／または、密封容器内の低沸点噴射剤中に溶解および／または懸濁された活性成分を含むデバイスなどの自己噴射型溶媒／粉末分注容器を用いた投与のために、乾燥粉末の形態であることが好都合である。そうした粉末は、重量でその粒子の少なくとも９８％が０．５ｎｍを超える直径を有し、数で粒子の少なくとも９５％が７ｎｍ未満の直径を有する粒子を含む。あるいは、重量でその粒子の少なくとも９５％が１ｎｍを超える直径を有し、数で粒子の少なくとも９０％が６ｎｍ未満の直径を有する。乾燥粉末組成物は砂糖などの固体の微粉状希釈剤を含むことができ、それらは好都合には単位用量形態で提供される。
【０２１６】
低沸点噴射剤は一般に、大気圧で６５°Ｆ未満の沸点を有する液体噴射剤を含む。一般に、噴射剤は組成物の５０〜９９．９％（重量／重量）を構成し、活性成分は、組成物の０．１〜２０％（重量／重量）を構成することができる。噴射剤は、非イオン性液状および／または固体状のアニオン性界面活性剤および／または固体希釈剤（活性成分を含む粒子と同程度の粒子径を有することができる）などの追加成分をさらに含むことができる。
【０２１７】
肺への送達のために処方される本発明の医薬組成物は、溶液および／または懸濁液の液滴の形態で活性成分を提供することができる。そうした処方物は、任意選択で殺菌した活性成分を含む、水性および／または希釈アルコール液剤および／または懸濁剤として調製、包装および／または販売することができ、任意の噴霧および／または微粒化デバイスを用いて好都合に投与することができる。そうした処方物は、これらに限定されないが、サッカリンナトリウムなどの香味剤、揮発性油、緩衝剤、表面活性剤および／または安息香酸メチルヒドロキシなどの保存剤を含む１種もしくは複数の追加成分をさらに含むことができる。この投与経路で提供される液滴は、約０．１ｎｍ〜約２００ｎｍの範囲の平均径を有することができる。
【０２１８】
肺に送達するのに有用であるとして本明細書で記載の処方物は、本発明の医薬組成物の鼻腔内送達に有用である。鼻内への注入に適した別の処方物は、活性成分を含み、約０．２μｍ〜５００μｍの平均粒子を有する粗い粉末である。そうした処方物は、鼻から吸い込む仕方で、すなわち、鼻孔に近接して保持された粉末の容器から鼻孔を通した急速注入によって投与される。
【０２１９】
経鼻投与に適した処方物は、おおよそ、少なくて０．１％（重量／重量）から多くて１００％（重量／重量）の活性成分を含むことができ、本明細書で記載の追加成分の１つまたは複数を含むことができる。本発明の医薬組成物は、口腔投与に適した処方物で調製、包装および／または販売することができる。そうした処方物は、例えば、通常の方法を用いて作製された錠剤および／またはトローチ剤の形態であってよく、例えば、０．１％〜２０％（重量／重量）の活性成分、経口で溶解可能でかつ／または分解可能な組成物を含む残分、および任意選択の本明細書で記載の追加成分の１つまたは複数を含むことができる。あるいは、口腔投与に適した処方物は、活性成分を含む粉剤および／またはエアロゾル化および／または微粒化された液剤および／または懸濁剤を含むことができる。そうした粉末化、エアロゾル化および／またはエアロゾル化処方物は、分散されると、約０．１ｎｍ〜約２００ｎｍの範囲の平均粒子および／または液滴サイズを有し、かつ、本明細書で記載の追加成分の１つまたは複数をさらに含むことができる。
【０２２０】
本発明の医薬組成物は、眼内投与に適した処方物で調製、包装および／または販売することができる。そうした処方物は、例えば、水性または油性の液状担体中に、活性成分の例えば０．１％／１．０％（重量／重量）溶液および／または懸濁液を含む点眼薬の形態であってよい。そうした点眼薬は、緩衝剤、塩および／または本明細書で記載の追加成分の他の１つもしくは複数をさらに含むことができる。有用な他の眼内投与可能処方物は、活性成分を微晶質形態および／またはリポソーム製剤として含むものを含む。点耳薬および／または点眼薬は本発明の範囲内であるものとする。
【０２２１】
本発明の化合物および医薬組成物は、治療法（ｔｈｅｒａｐｉｅｓ）と併用して用いることができることも理解されよう。併用レジメンで用いるための治療法の具体的な組合せ（治療術（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）または手順）は、所望の治療術および／または手順、および達成しようとする所望の治療効果の適合性を考慮に入れることになる。用いる治療法は同じ障害について所期の効果を達成できるか（例えば、本発明の化合物を、他の抗癌剤と同時に投与することができる）、あるいは異なる効果（例えば、何らかの副作用の制御）を達成できることも理解されよう。
【０２２２】
本発明の医薬組成物は、単独でも、また１種または複数の他の治療薬と併用しても投与することができる。「併用して」ということは、その薬剤を同時に投与するか、かつ／または一緒に送達するように処方しなければならないということを示すものではないが、これらの送達方法は本発明の範囲内である。組成物は、１種または複数の他の所望治療薬または医療処置と同時か、それに先行するか、またはそれに続いて投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤のための決められた用量および／またはタイムスケジュールに従って投与される。さらに、本発明は、その生物学的利用能を向上させ、その代謝を低減および／または改変し、その排出を阻止し、かつ／またはその体内分布を改変することができる薬剤と併用して本発明の医薬組成物を送達することを包含する。
【０２２３】
併用レジメンで用いるための治療法の具体的な組合せ（治療術または手順）は、所望の治療術および／または手順および／または達成しようとする所望の治療効果の適合性を考慮に入れることになる。用いる治療法は、同じ障害について所期の効果を達成できる（例えば、同じ障害を治療するために、本発明の化合物を、他の薬剤と同時に投与することができる）、かつ／または、異なる効果（例えば、何らかの副作用の制御）を達成できることを理解されよう。
【０２２４】
本発明の医薬組成物は、単独でも、また顔のしわの症状を治療するのに用いられる他の薬剤と併用しても投与することができる。若干の例を挙げると、本発明の医薬組成物は、投与の経路に応じて、レチノイン酸、ビタミンＣおよび／またはＥおよび／またはヒアルロン酸、ペンタペプチド（例えば、ｌｙｓ−ｔｈｒ−ｔｈｒ−ｌｙｓ−ｓｅｒ）および／またはヘキサペプチド（例えば、アセチルヘキサペプチド−３、Ａｒｇｉｒｅｌｉｎｅとしても知られている）などの薬剤と併用して投与することができる。ペンタペプチドおよびヘキサペプチドを含む新規な組成物が、２００７年１１月３０日出願のＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０７／ 、表題「Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」にさらに記載されている。
【０２２５】
併用して使用する治療活性剤は、単一組成物と共に投与するか、または異なる組成物と別個に投与することができることをさらに理解されよう。
【０２２６】
一般に、併用して用いられる薬剤は、それが個別に用いられる際のレベルを超えないレベルで使用することが期待される。いくつかの実施形態では、併用して用いられるレベルは個別に用いられるレベルより低いことになる。
【０２２７】
医薬品の処方および／または製造の全般的な考察は、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２１ｓｔ
ｅｄ．、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、２００５年に見ることができる。
キット
いくつかの実施形態では、本発明は、本発明の方法を好都合にかつ／または効果的に実施するためのキットに関する。一般に、本発明の薬剤パックおよび／またはキットは、本発明の医薬組成物の成分の１つまたは複数を充てんされた１つまたは複数の容器を含む。そうしたキットは、錠剤および／またはカプセル剤などの固形の経口形態物を送達するのに特に適している。いくつかの実施形態では、そうしたキットは複数の単位投薬量を含み、かつ、その目的とする用途の指示にそった投薬量を記したカードを含むことができる。記憶補助物（ｍｅｍｏｒｙ  ａｉｄ）としては、例えば、数字、文字および／または他の印の形で、および／または、その投薬量を投与する治療スケジュールの日付けを指定したカレンダー挿入物を提供することができる。あるいは、医薬組成物の投薬と同様かまたはそれと異なる形態で、偽薬投与および／またはカルシウム栄養補助食品を含ませ、投薬量をそこで毎日取り出すキットを提供することができる。医薬製品の製造、使用および／または販売を規制する行政機関によって規定された形の通知（その通知は、ヒトへの投与が、製造、使用および／または販売の行政機関によって承認されていることが反映する）を任意選択でそうした容器に付けることができる。
【０２２８】
本発明は、本発明のＡＥナノ粒子、および／または、本発明のＡＥナノ粒子を対象の細胞および／または組織に投与することを説明した指導資料を含むキットを提供する。他の実施形態では、キットは、その化合物を対象に投与する前に、本発明のＡＥナノ粒子を溶解および／または懸濁するのに適した分散媒体を含む。
例示
以下の実施例は、本発明で考慮される具体的な実施例を提供しようとするだけに過ぎない。これらの実施例は限定しようとするものではない。
【実施例】
【０２２９】
（実施例１）
自己集合するプルランおよびポリカプロラクトンナノスフェアの調製
２．５ｇの大豆油と２．５ｇポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ−８０）の混合物を調製した。この混合物を４０℃で５分間攪拌し、加熱した。５０ｍｌ脱塩水を加え、得られた混合物を４０℃で１０分間攪拌し、加熱した。０．９０５ｇプルランおよびポリカプロラクトンを含む５ｍｌのＤＭＳＯを加え、得られた混合物を４５℃で１０分間攪拌し、加熱した。５ｍｌを処理前試料として取った。残りの混合物を２４，０００ｐｓｉで１回パスさせてマイクロ流動化した。処理前試料の粒子径は＞４０００ｎｍであった。マイクロ流動化後の粒子径は１５５ｎｍであった。
【０２３０】
（実施例２）
マイクロ流動化試料のための試料調製（試料ごとに）
１００μｌのマイクロ流動化試料と９００μｌの試薬（０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝剤、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．２５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１６０ＩＵ／ｍＬのトリグリセリドヒドロラーゼおよび１ＩＵ／ｍｌのコレステロールエステラーゼ）の混合物を８ｍｌガラスバイアル中に調製した。
【０２３１】
得られた混合物を、暗所で周囲温度で１時間インキュベートした。１００μｌの５％ドデシル硫酸ナトリウムを加え、得られた混合物を３０秒間渦巻き混合させた。１ｍｌのエタノールを加え、得られた混合物を３０秒間渦巻き混合させた。１００μｌの内部標準を加え、得られた混合物を３０秒間渦巻き混合させた。１％エタノールおよび０．１％ＢＨＴを含む４ｍｌの１：１ヘキサン：エーテル混合液を加えた。エタノールおよびＢＨＴはエーテルを安定化させて過酸化物の生成を防止する。得られた混合物を６０秒間渦巻き混合させ、次いで、中程度の速さで２分間遠心分離にかけた。ガラスピペットで上澄みを抜き出し、−８０℃で最大３０日間保存した。上澄みを蒸発させ、４０μｌのメタノール中に再溶解した。３０μｌを高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）装置にかけた。
【０２３２】
（実施例３）
プルランおよびポリカプロラクトンを含むボツリヌス毒素Ａ処方物
１．６ｇの大豆油と１．６ｇのポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ−８０）の混合物を調製し、これを５分間攪拌した。別の容器に、１００ｎｇのボツリヌス毒素Ａと２０ｍｌの０．９％生理食塩水の混合物を調製し、これを５分間攪拌する。生理食塩水とボツリヌス毒素Ａの混合物をオイルとＴｗｅｅｎ−８０の混合物に加え、１０分間攪拌する。０．９０５ｇのプルランおよびポリカプロラクトンを含む５ｍｌのＤＭＳＯを加え、得られた混合物を１０分間攪拌する。５ｍｌの処理前試料を取る。残りの混合物を２４，０００ｐｓｉで１回パスでマイクロ流動化する。マイクロ流動化前後の粒子径を測定する。
【０２３３】
（実施例４）
プルランおよびポリカプロラクトンを含むビタミンＥ処方物
２．５ｇの大豆油と１ｇのビタミンＥの混合物を調製する。２．５ｇのポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ−８０）を加える。得られた混合物を４０℃で５分間攪拌し、加熱する。その混合物に５０ｍｌの水を加え、得られた混合物を４０℃で１０分間攪拌し、加熱する。０．９０５ｇのプルランおよびポリカプロラクトンを含む５ｍｌのＤＭＳＯを加える。得られた混合物を４５℃で１０分間攪拌し、加熱する。５ｍｌの処理前試料を取る。残りの混合物を２４，０００ｐｓｉで１回パスでマイクロ流動化する。マイクロ流動化前後の粒子径を測定する。
【０２３４】
（実施例５）
トコフェロール（ビタミンＥ）分析
患者の血漿またはナノ粒子組成物について、δトコフェロール濃度を測定することができる。δトコフェロール濃度は、１０μＬの酢酸レチニル（内部標準；１０μｇ／ｍＬ）を含む２００μＬの血漿またはナノ粒子組成物、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）（１０ｍｇ／Ｌ）を含む２００μＬのエタノールおよび１．０ｍＬのヘキサンを加え、続いて渦巻き混合させて測定する。試料を５００×ｇで５分間遠心分離にかけ、有機層を新しい管に移す。試料残留物を１．０ｍｌのヘキサンで再抽出し、有機層を一緒にする。有機層をＮ２雰囲気下で蒸発させ、ＢＨＴ（１０ｍｇ／ｄＬ）を含む２００μＬのエタノールでもどし、ＨＰＬＣに注入する。ＨＰＬＣ装置は、２基のモデル５８０型ポンプ、高圧グラジエントミキサー、ピークパルスダンパー、モデル５４０型自動注入装置、ＣｏｕｌＡｒｒａｙ恒温槽および８個の電量電極からなる一連のアレイを備えたモデル５６００型ＣｏｕｌＡｒｒａｙ８チャンネル装置（ＥＳＡ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｉｎｃ．、Ｃｈｅｌｍｓｆｏｒｄ、ＭＡ、ＵＳＡ）である。カラムは３．０×１５０ｍｍ、３ｕＭ、Ｓｕｐｅｌｃｏｓｉｌ  ＬＣ−１８（Ｓｕｐｅｌｃｏ、Ｂｅｌｌｅｆｏｎｔｅ、ＰＡ、ＵＳＡ）である。移動相は０．８ｍＬ／分の流速のメタノール／１プロパノール／１Ｍ酢酸アンモニウム（７８：２０：２容積：容積：容積）からなる。δトコフェロールの濃度は、δトコフェロール標準品（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）の精製溶液を使用した外部標準化法によって測定する。
等価物および範囲
上記に、本発明の特定の非限定的な好ましい実施形態を説明してきた。当業者は、通常の範囲内の実験を用いて、本明細書で述べてきた本発明の具体的な実施形態に対する多くの等価物を認識されるか、またはそれを確認することができよう。当業者は、以下の特許請求の範囲で定義するような本発明の趣旨または範囲から逸脱することなく、本発明の説明に様々な変更および修正を加えることができることを理解されよう。
【０２３５】
特許請求の範囲において、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」などの冠詞は、それとは相いれない指定がないか、あるいは文脈から明らかでない限り、１つまたは１つを超えることを意味する。あるグループの１つもしくは複数のメンバーの間に「または（ｏｒ）」を含む特許請求の範囲または詳細な説明は、それとは相いれない指定がないか、あるいは文脈から明らかでない限り、そのグループメンバーの１つ、１つ超もしくはすべてが、所与の産物または方法（ｐｒｏｃｅｓｓ）中に存在するか、それに用いられているか、あるいはそれに関連していれば、満たされているものとする。本発明は、そのグループの正確に１つのメンバーが、所与の産物または方法中に存在するか、それに用いられているか、あるいはそれに関連している実施形態を含む。本発明は、そのグループメンバーの１つ超もしくはすべてが、所与の産物または方法中に存在するか、それに用いられているか、あるいはそれに関連している実施形態も含む。さらに、その中で、特許請求の範囲の１つもしくは複数から、またはその説明の関連する部分からの１つもしくは複数の限定、要素、節、記述用語等が別の請求項に導入されているすべての変更形態、組合せ形態および置換形態を包含することを理解されたい。例えば、別の請求項に従属する任意の請求項は、その同じ基本請求項に従属する他の任意の請求項中に記載されている１つまたは複数の限定を含むように改変することができる。さらに、特許請求の範囲に、ある組成物が記載されている場合、別段の指定のない限り、あるいは、矛盾または不一致が生じるであろうことが当業者に明白であることがない限り、本明細書で開示する目的のいずれかのためにその組成物を使用する方法が含まれ、かつ本明細書で開示する作製方法、または当業界で知られている他の方法のいずれかによるその組成物の作製方法が含まれることを理解されたい。例えば、本発明の組成物のどれも、複数の場所のいずれかで、かつ／または本明細書で論じられているかまたは当業界で知られている原因のいずれかに起因する付着の形成、進行および／または再発を阻止するために用いることができることを理解されたい。本明細書で開示する組成物の調製方法によって作製された組成物のどれも、複数の場所のいずれかで、かつ／または本明細書で論じられているかまたは当業界で知られている原因のいずれかに起因する付着の形成、進行および／または再発を阻止するために用いることができることも理解されたい。さらに、本発明は、本明細書で開示する組成物の調製方法のいずれかによって作製された組成物を包含する。
【０２３６】
要素が列挙として、例えば、マーカッシュグループ形式で示されている場合、その要素の各下位グループも開示されており、そのグループから任意の要素を排除することができることを理解されたい。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、非限定的なものとするものであり、追加の要素またはステップを含めることを許容することも留意されたい。一般に、本発明、または本発明の態様が特定の要素、特徴、ステップ等を含むと言及されている場合、本発明の特定の実施形態または本発明の態様は、そうした要素、特徴、ステップ等からなるか、または本質的にそれからなることを理解すべきである。簡潔にするために、そうした実施形態は、本明細書では、この通りの言葉で具体的に示されていない。したがって、１つまたは複数の要素、特徴、ステップ等を含む本発明の各実施形態について、本発明は、そうした要素、特徴、ステップ等からなるか、または本質的にそれからなる実施形態も提供する。
【０２３７】
範囲が示されている場合、それには端点も含まれる。さらに、別段の指定がないか、または文脈からかつ／または当業者の理解より明らかでない限り、範囲として示された値は、その文脈による明らかな別段の指定のない限り、本発明の異なる実施形態における示された範囲内で、その範囲の下限の単位の１０分の１までの具体的な任意の値を想定できることを理解されたい。別段の指定がないか、または文脈からかつ／または当業者の理解より明らかでない限り、範囲として示された値は、所与の範囲内の任意の下位範囲を想定でき、その下位範囲の端点は、その範囲の下限の単位の１０分の１と同じ精度で表わされることも理解されたい。
【０２３８】
さらに、本発明の特定の任意の実施形態は、特許請求の範囲のいずれか１つまたは複数から明らかに排除することができることを理解されたい。本発明の組成物および／または方法の任意の実施形態、要素、特徴、適用または態様（例えば、任意の両親媒性実体、両親媒性実体の任意の成分、任意のポリマー、任意の生物学的活性物質、任意の界面活性剤、任意の分散媒体、任意の放出遅延成分、任意のＡＥナノ粒子または任意のＡＥナノ粒子を含む組成物、投与の任意の経路または位置、そのために組成物が投与される任意の目的等）は、任意の１つまたは複数の請求項から排除することができる。簡潔にするために、１つまたは複数の要素、特徴、目的または態様が排除される実施形態のすべてが本明細書で明確に示されているわけではない。
【外国語明細書】
2014031382000001.pdf