(57)【要約】      （修正有）【課題】磁気共鳴画像のための造影剤の薬学的製剤のガドリニウムによるキレート錯体の耐容性を改良した液体薬学的製剤の調製する方法の提供。【解決手段】大環状キレート化合物は、好適にはＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＤＯ３Ａ等から選択され、好ましくはＤＯＴＡ、ｂ）第一に、大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、第二に、遊離大環状キレート化合物及び／又は遊離ランタニドとを含有する液体薬学的組成物を調製する；ｃ）ｂ）で得られた薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の濃度Ｃｃｈ  １及び／又は遊離ランタニドの濃度Ｃｌａｎ  １を測定する；ｄ）式中、Ｃｔ  ｃｈ  １が、最終液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の目標濃度である、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １及びＣｌａｎ  １＝０が得られるように、Ｃｃｈ  １及び／又はＣｌａｎ  １を調整する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、０．００２％と０．４％との間のモル／モル量の遊離大環状キレート化合物とを含有する液体薬学的製剤を調製する方法であって、
以下の連続ステップ：
ｂ）第一に、大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、第二に、Ｌが大環状キレート化合物であり、ＸおよびＸ’が、特にカルシウム、ナトリウム、亜鉛およびマグネシウムおよび／または遊離ランタニドから独立して選択される金属イオンである添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］の形態ではない遊離大環状キレート化合物とを含有する液体薬学的組成物を調製するステップ；
ｃ）ステップｂ）で得られた薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の濃度Ｃｃｈ  １および／または遊離ランタニドの濃度Ｃｌａｎ  １を測定するステップ；
ｄ）式中、Ｃｔ  ｃｈ  １が、最終液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の目標濃度である、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １およびＣｌａｎ  １＝０が得られるように、Ｃｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １を調整するステップ
を含む方法。
【請求項２】
最終液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の理論的目標濃度Ｃｔ  ｃｈ  １を決定する先行ステップａ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップｂ）が、大環状キレート化合物によるランタニドの錯体化が得られるような、遊離大環状キレート化合物の溶液および遊離ランタニドの溶液の混合からなることを特徴とする、請求項１または２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物量および遊離ランタニド量と化学量論的比率との間に相違があることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
添加される遊離大環状キレート化合物量および遊離ランタニド量と化学量論的比率との間の相違が、前記大環状キレート化合物／ランタニドまたはランタニド／大環状キレート化合物のモル／モル比が１．４以下であるような相違であることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物量および遊離ランタニド量が、ランタニドの全てが錯体化されるわけではないような量であり；
−ステップｃ）が、Ｃｌａｎ  １が０に等しい場合のＣｃｈ  １を測定することからなり；
−ステップｄ）が、第一に、Ｃｌａｎ  １＝０が得られるように遊離ランタニドの錯体化を達成するために、第二にＣｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １を得るために、必要な遊離大環状キレート化合物量をステップｂ）で得られた製剤に添加することからなる
ことを特徴とする、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
ステップｂ）において、前記ランタニド／大環状キレート化合物比（モル／モル）が１．２未満であることを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物量および遊離ランタニド量が、ランタニドの全てが錯体化されかつＣｃｈ  １＞Ｃｔ  ｃｈ  １であるような量であり；
−ステップｃ）が、Ｃｌａｎ  １が０に等しい場合のＣｃｈ  １を測定することからなり；
−ステップｄ）が、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １が得られるように適切な量の遊離大環状キレート化合物を除去することからなる
ことを特徴とする、請求項４または５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ステップｂ）において、前記大環状キレート化合物／ランタニド比（モル／モル）が１．２未満であることを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物量および遊離ランタニド量が、化学量論的比率に等しく；
−ステップｃ）が、Ｃｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １を測定することからなり；
−ステップｄ）が、第一に、必要ならば遊離ランタニドの錯体化を達成するためにおよびＣｌａｎ  １＝０を得るために、ならびに第二にＣｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １を得るために、必要な遊離大環状キレート化合物量をステップｂ）で得られた製剤に添加することからなる
ことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物量および遊離ランタニド量が、化学量論的比率に等しく；
−ステップｂ）とｃ）との間で、錯体化に有利にまたは不利に化学的平衡をシフトさせるように、ステップｂ）で得られた薬学的製剤のｐＨを変更する中間ステップｂ１）を含み；
−ステップｃ）を、ステップｂ１）で得られた製剤に対して実施し；
−ステップｄ）が、ステップ（ｂ１）の方向とは逆方向に平衡をシフトさせるようにｐＨを変更することにより、および任意に遊離大環状キレート化合物を添加または除去することにより、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １およびＣｌａｎ  １＝０が得られるようにＣｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １を調整することからなる
ことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
−ステップｂ）において、混合を４と７との間のｐＨで実施し、
−ステップｂ１）が、１０と１３との間の値まで塩基を用いてｐＨを上げることからなり、
−ステップｄ）が、６．５と７．５との間の値までｐＨを低下させ、および任意に遊離大環状キレート化合物を添加または除去することからなる
ことを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
ステップｂ）が、固体錯体［キレート−ランタニド］を調製し、それを溶解することからなることを特徴とする、請求項１または２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
患者に投与される液体薬学的製剤中のカルシウム量が、５０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
患者に投与される液体薬学的製剤中のカルシウム量が、２０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
患者に投与される液体薬学的製剤中のカルシウム量が、５ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
薬学的溶液に用いられる成分、すなわちキレート化合物粉末、特にＤＯＴＡ、水およびメグルミン中のカルシウム量が、５０ｐｐｍ未満、好適には２０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
ステップｃ）の前に、カルシウム量を測定し、必要に応じて、過剰のカルシウムを除去する中間ステップｂ２）を含むことを特徴とする、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
Ｃｃｈ  １およびＣｌａｎ  １をチェックする追加ステップｅ）を含むことを特徴とする、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記大環状キレート化合物が、好適にはＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＤＯ３Ａ、ＢＴ−ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３ＡおよびＰＣＴＡから選択されることを特徴とする、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記大環状キレート化合物がＤＯＴＡであることを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記薬学的製剤が、ＤＯＴＡ−ガドリニウム錯体のメグルミン塩の薬学的製剤であることを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記遊離ランタニドをブロックする作用物質を、ステップｂ）に添加することを特徴とする、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記遊離ランタニドをブロックする作用物質が、ポリカルボン酸であることを特徴とする、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
０．００２モル／モル％と０．４モル／モル％との間の遊離大環状キレート化合物を含有することを特徴とする、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法により得ることができる薬学的製剤。
【請求項２６】
前記遊離大環状キレート化合物が、遊離ＤＯＴＡであることを特徴とする、請求項２５に記載の製剤。
【請求項２７】
０．０２モル／モル％と０．３モル／モル％との間の遊離大環状キレート化合物を含有することを特徴とする、請求項２５または２６のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項２８】
０．０２５モル／モル％と０．２５モル／モル％との間の遊離大環状キレート化合物を含有することを特徴とする、請求項２５または２６のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項２９】
０．０２モル／モル％と０．０８モル／モル％との間の遊離ＤＯＴＡを含有することを特徴とする、請求項２６に記載の製剤。
【請求項３０】
０．１５モル／モル％と０．２５モル／モル％との間の遊離ＤＯＴＡを含有することを特徴とする、請求項２６に記載の製剤。
【請求項３１】
カルシウム含量が５０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項２５〜３０のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項３２】
カルシウム含量が２０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項３１に記載の製剤。
【請求項３３】
カルシウム含量が５ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項３２に記載の製剤。
【請求項３４】
遊離ランタニドを配位できかつモノカルボン酸またはポリカルボン酸またはヒドロキシ酸の中から選択される補足化合物をさらに含むか、または該補足化合物と共投与される、請求項２５〜３３のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項３５】
ステロイド、抗炎症剤、ビタミン類の中から選択される抗線維症剤をさらに含む、請求項２５〜３４のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項３６】
キレート化合物粉末中のカルシウム量が５０ｐｐｍ未満、好適には２０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の方法に中間体として用いられる、キレート化合物粉末、特にＤＯＴＡ粉末。
【請求項３７】
大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、０．００２％と０．４％との間のモル／モル量の遊離大環状キレート化合物とを含有する液体薬学的製剤中の遊離ランタニドの濃度を測定するための、分析用比色法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特に、磁気共鳴画像のための造影剤の薬学的製剤、特に、常磁性金属イオンによるキレート錯体の薬学的製剤、ならびにこれらの製剤を得るための工業的に効率的な方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ランタニド（常磁性金属）、特にガドリニウムによるキレート化合物の錯体に基づいた多くの造影剤が知られており、例えば、米国特許第４  ６４７  ４４７号（特許文献１）明細書に記載されている。特に、ＤＯＴＡガドテレート（１，４，７，１０−テトラアザシクロ−ドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸）およびガドテリドールＨＰＤＯ３Ａなどの大環状キレート化合物、ならびにＤＴＰＡ（ジエチレントリアミンペンタ酢酸）およびＤＴＰＡ−ＢＭＡ（ガドジアミド）などの直鎖状キレート化合物に基づいたいくつかの製品が市販されている。
【０００３】
体内で、ランタニドによるキレート錯体は、化学平衡の状態にあり、これはランタニド、特にガドリニウムの望ましくない放出の危険をもたらす可能性がある。したがって、当業者は、患者における耐容性の複雑な問題をできるだけ安全に解決するために、この危険を制限する技術的解決の探索が促されている。造影剤の投与は診断検査、および／または治療処置の有効性の誘導およびモニタリングの間にしばしば反復されるため、この問題はいっそう困難である。
【０００４】
ガドリニウムによるキレート錯体の耐容性を改善するためのいくつかのアプローチが先行技術に記載されている。二十年以上前（米国特許第５  ８７６  ６９５号（特許文献２）明細書）、当業者は、過剰量のキレート化合物のランタニド錯体化キレート化合物への添加からなる製剤化、すなわち、ランタニドにより錯体化されていないキレート化合物を研究していた。この過剰キレート化合物はランタニドの望ましくない放出を相殺し、次いで過剰キレート化合物は放出されたランタニド（Ｇｄ３＋金属イオン）と錯体化することが意図されている。
【０００５】
米国特許第５  ８７６  ６９５号（特許文献２）明細書には、大環状キレート化合物に関して過剰に添加されたキレート化合物（リガンドＬ）が式Ｘ［Ｘ’，Ｌ］を有する添加剤の形態で記載されており、式中、ＸおよびＸ’は金属イオン（特にカルシウム、ナトリウム、亜鉛またはマグネシウム）であり、Ｌは過剰のキレート化合物である。これらの添加剤は、遊離ランタニドを捕捉するようにデザインされている。例えば、キレート化合物ＤＯＴＡに関して、添加剤はＮａ２［Ｃａ−ＤＯＴＡ］であり：過剰のＤＯＴＡキレート化合物は、キレート化合物により形成したケージ内のカルシウムイオンＣａ２＋によって錯体化され、生じた電荷２＋は２つのＮａ＋イオンによって中和される。
【０００６】
数年後、これらの添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］の改良がＥＰ  ４５４  ０７８（特許文献３）明細書（米国特許第７  ３８５  ０４１号（特許文献４）明細書）に提示され、改良されたＸ［Ｘ’，Ｌ］では、ＸとＸ’の双方がカルシウムまたは亜鉛であり、これらの添加剤は低用量（０．１％モル／モル）であっても遊離ランタニドと遊離有機リガンドキレート化合物の双方を捕捉することができる。この文献は、これらの添加剤、特に例えば、カルシウムキレート化錯体のカルシウム塩、特に、Ｎａ［Ｃａ−ＨＰＤＯ３Ａ］の代わりにＣａ［Ｃａ−ＨＰＤＯ３Ａ］２を扱っており、遊離のキレート化合物Ｌの毒性による安全性の理由から、このような添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］の代わりに遊離大環状リガンドＬを使用すべきでないと説明している（詳細は特に１段目の２１〜４０行）。
【０００７】
特に、米国特許第７  ３８５  ０４１号（特許文献４）明細書の表１は、ＩＤ５０値によって、遊離大環状キレート化合物（ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ＤＯ３Ａ、ＤＯＴＡ）は、Ｘ［Ｘ’，Ｌ］の形態でのこれらの大環状分子より少なくとも約１０倍毒性であることを示している。特にＤＯＴＡでは、ＬＤ５０は、遊離ＤＯＴＡよりもＮａ２［Ｃａ−ＤＯＴＡ］は少なくとも約４０倍良好である。
【０００８】
2014114306.tif 000002
【０００９】
市販製品ガトテリドールの製剤（Ｐｒｏｈａｎｃｅ  Ｂｒａｃｃｏ）は、０．１％のＣａ［Ｃａ−ＨＰＤＯ３Ａ］２を含み、ガドブトロール製品（Ｇａｄｏｖｉｓｔ  Ｂａｙｅｒ  Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）は、Ｎａ［Ｃａ−ＢＴ  ＤＯ３Ａ］添加剤を含む。
【００１０】
結論として、患者に投与された大環状キレート化合物の製剤が、ランタニドにより錯体化された大環状キレート化合物以外に、過剰の遊離大環状キレート化合物（特定の、かつ低容量の）を、金属イオンによって錯体化されていない遊離キレート化合物Ｌの形態で、特に添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］ではない形態で含有するか、または含有するべきであることを記載している先行技術の文献はない。反対に、遊離大環状キレート化合物の耐容性に関する危険性により、当業者にはそれをなすことにためらいがあった。
【００１１】
また、大環状キレート化合物に関する先行技術で（後に記載される本発明とは反対に）、ランタニドによるキレート化合物の錯体化の後に、専用の添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］が添加されたことも強調される点である（米国特許第５  ８７６  ６９５号（特許文献２）明細書および米国特許第７ ３８５ ０４１号（特許文献４）明細書の多数の例を参照）。錯体化は、キレート化合物Ｌ（例えば、ＨＰ−ＤＯ３Ａ）とランタニド「ｌａｎ」（例えば、Ｇｄ３＋）の化学量論的比率によって達成されている。以下のスキームＩは、先行技術の製造過程を記している（ｓｐは化学量論的比率を意味する）。
2014114306.tif 000003
【００１２】
これらすべての先行技術の研究にも関わらず、耐容性の複雑な問題は、特にＭＲＩ造影剤製品の投与に関するより明白な耐容性が脅かされる状況では、依然として存在している。例えば、国際公開公報第２００７／１０６  ５４４号（特許文献５）に例示されているように、金属に対するキレート化合物の親和性増加を意図したキレート化合物の化学基へのグラフトによる非常に異なるアプローチが最近試験されている。
【００１３】
さらに、耐容性に関する事で、最近、新たな問題、すなわち、体内の遊離ガドリニウム、すなわち、非錯体化ガドリニウムの存在に少なくとも部分的に相関していると思われるＮＳＦとして知られている病状（ヒトの皮膚にきわめて重篤な作用を有する腎臓病性全身性線維症、または線維形成性皮膚症）が出現した。この疾患により、市販のガドリニウムベースの造影剤に関して、一定のカテゴリーの患者に衛生当局は注意を喚起させられている。簡潔に述べると、ＮＳＦは、亜鉛などの内在性イオンによる錯体［ランタニド−キレート化合物］からのいくつかのランタニドの金属交換反応に関連していて、望ましくない遊離ランタニドの放出をもたらす可能性がある。
【００１４】
要約すると、ランタニドによるキレート化合物錯体のこの耐容性の問題は、依然として複雑かつ重要であり、さらに安全な製品の研究、また、薬学的溶液における種々の物質の比率を完全に制御する必要性が生じている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】米国特許第４  ６４７  ４４７号
【特許文献２】米国特許第５  ８７６  ６９５号
【特許文献３】ＥＰ  ４５４  ０７８
【特許文献４】米国特許第７  ３８５  ０４１号
【特許文献５】国際公開公報第２００７／１０６  ５４４号
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本出願人は、大環状キレート化合物の特定のケースを研究し、予想に反して、特定の低用量範囲で、先行技術の添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］の形態ではない過剰量の遊離大環状キレート化合物を用いた場合に得られる非常に満足すべき耐容性を実証した。
【００１７】
本出願人は、大環状キレート化合物、特にＤＯＴＡでは、きわめて低過剰の遊離キレート化合物Ｌを用いた結果がきわめて好適であり、患者に投与される薬学的組成物が、より具体的には、０．０２％と０．４％との間、特に０．０２５％と０．２５％との間の遊離大環状キレート化合物Ｌを含有することを示した。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明の目的に関して、用語「遊離大環状キレート化合物」とは、ランタニドまたは他の金属のイオンにより錯体化しておらず、特に添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］（ＸとＸ’は上記のとおり）の形態ではない任意の大環状キレート化合物Ｌを意味する。
【００１９】
簡潔に述べると、本出願人によって選択される遊離大環状分子を有する製剤は、特にＮＳＦを考えると、本出願でさらに詳細に説明されるように、先行の添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］に比較して、可能性のある遊離ガドリニウムの捕捉能力を高く増加させるという強い利点を有する。
【００２０】
その結果、遊離過剰のこの低い量を考えると、先行技術では不明の新たな問題、すなわち、遊離大環状キレート化合物の濃度のきわめて正確で細かい工業規模の制御の必要性、したがって、遊離キレート化合物量がこの範囲の目標値に達するように製品を製造する必要性が生じ、これらの値は数ヶ月または数年の貯蔵後を含めて安定であることが必要である。
【００２１】
具体的には、活性成分が数十トンの桁である製造量を考慮して、本出願人は、市販バッチの組成物の信頼性および再現性を確実にすることを可能にする、新規で特に最適化した調製法を開発しなければならなかった。
【００２２】
特に、理論的計算に基づいた化学量論的な量を混合することによっては、ランタニドによるキレート錯体および薬学的製剤中の低濃度の遊離キレート化合物それぞれの量が、工業的規模で十分満足に得られないことを本出願人は見出した。この理由は、数時間かかるいくつかの分析ステップを次に実施する必要があり、この製品の工業的元値を著しく増加させるからである。これとは対照的に、本出願人の方法は、特に前もって調製し、分析装置を最適化させることを可能にする。最終製品の品質に及ぼす影響を考えると、このことは重要である。
【００２３】
より具体的には、化学量論的比率を考慮し、ランタニドによる錯体化を意図しない過剰のＤＯＴＡを添加することによっては、特に以下を仮定すると、最終薬学的溶液における工業的規模での十分な再現性、目標範囲における過剰の遊離ＤＯＴＡを達成することは不可能である。
１）少量の過剰キレート化合物を考慮すると、キレート化合物と過剰キレート化合物との間の比率（１０００の桁で）を正確に保証することを可能としない工業的規模での重量測定の不確実性；
２）キレート化合物の吸湿性の変動性（その酸性官能基に関連）。
【００２４】
具体的には、一般に、例えばガドリニウムキレート化合物（例えば、ＤＯＴＡ−Ｇｄ）の０．５Ｍの溶液２００リットルの工業的量を調製するために、ランタニドによるＤＯＴＡの錯体化後、０．１モル／モル％の過剰な遊離ＤＯＴＡを得るために過剰に添加すべきＤＯＴＡの量は、ＤＯＴＡ溶液２００リットル中、約４０ｇのＤＯＴＡ（最初に溶液中に入れられた４０ｋｇのＤＯＴＡに加えて４０ｇ）となるが、これでは工業的レベルにおける十分信頼性のある再現性が可能にならない。
【００２５】
この問題は、液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の濃度（Ｃｃｈ  １）および／または遊離ランタニドの濃度（Ｃｌａｎ  １）を測定する少なくとも１つのステップ、およびＣｃｈ  １およびＣｌａｎ  １＝０の所望の濃度が、好適には薬学的組成物中の大環状キレート化合物またはランタニドの量を変更することにより得られるように、Ｃｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １を調整する少なくとも１つのステップを用いることにより、本出願人によって解決された。
【００２６】
略号Ｃｃｈ  １は、遊離キレート化合物の濃度を意味する。
【００２７】
略号Ｃｌａｎ  １は、遊離ランタニドの濃度を意味する。
【００２８】
本出願を通して、等式Ｃｌａｎ  １＝０は、患者に注入された製剤中のＣｌａｎ  １がゼロであるか、またはほぼゼロ（一般に１０−１０Ｍ未満、好適には１０−１２Ｍまたは１０−１４Ｍ未満）であることを規定するために用いられ、溶液中きわめて少量のランタニドの存在可能性は完全には除外できない。この理由は、１０−１０Ｍ未満の濃度は、現在の分析法によっては十分な信頼性をもって測定することができないからである。
【００２９】
したがって、一態様において、本発明は、大環状キレート化合物とランタニドとの錯体の液体薬学的製剤を調製する方法に関するものであり、前記方法は、液体薬学的製剤中、遊離大環状キレート化合物の濃度（Ｃｃｈ  １）および／または遊離ランタニドの濃度（Ｃｌａｎ  １）を測定する少なくとも１つのステップ、および０．００２％と０．４％との間、好適には、０．０２％と０．３％との間、きわめて好適には、０．０２５％と０．２５％との間のモル／モル量の遊離大環状キレート化合物を（最終薬学的溶液、すなわち、患者への投与を意図した薬学的製剤中、十分に安定に）得るように、Ｃｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １を調整する少なくとも１つのステップを含む。
【００３０】
したがって、本発明は、大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、０．００２％と０．４％との間、好適には、０．０２％と０．３％との間、きわめて好適には、０．０２５％と０．２５％との間のモル／モル量の遊離大環状キレート化合物とを含有する液体薬学的製剤を調製する方法に関するものであり、大環状キレート化合物は、好適には、ＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＤＯ３Ａ、ＢＴ−ＤＯ３Ａ（ガドブトロール）、ＨＰ−ＤＯ３ＡおよびＰＣＴＡ、好適にはＤＯＴＡから選択され、前記方法は、以下の連続ステップ：
ｂ）第一に、大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、第二に、好適には添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］（式中、Ｌは大環状キレート化合物であり、ＸおよびＸ’は金属イオン、特に、カルシウム、ナトリウム、亜鉛およびマグネシウム、および／または遊離ランタニドから独立して選択されるもの）の形態ではない遊離大環状キレート化合物とを含有する液体薬学的組成物を調製するステップ；
ｃ）ステップｂ）で得られた薬学的製剤中、遊離大環状キレート化合物の濃度Ｃｃｈ  １および／または遊離ランタニドの濃度Ｃｌａｎ  １を測定するステップ；
ｄ）Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １およびＣｌａｎ  １＝０（式中、Ｃｔ  ｃｈ  １は、最終液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の目標濃度である）が得られるように、Ｃｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １を調整するステップ
を含む。
【００３１】
本発明による方法は、最終液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の理論的目標濃度Ｃｔ  ｃｈ  １を決定する前ステップａ）を含むことが好適である。
【００３２】
この反応は、以下のスキームＩＩとして表される（「Ｌ」はリガンドキレート化合物、「ｌａｎ」は、例えばランタニドガドリニウムＧｄ＋３である）。
2014114306.tif 000004
【００３３】
この反応には２つのステップがある。
ステップ１：
[Ｌ]初期  ＋  [ｌａｎ]初期  -->  [ｌａｎ]初期  ＋  [Ｌ]遊離または[ｌａｎ]遊離
[Ｌ]遊離の濃度Ｃｃｈ  １および[ｌａｎ]遊離の濃度Ｃｌａｎ１を測定する
ステップ２：
[Ｌ−ｌａｎ]初期  ＋  [ｌａｎ]遊離または[ｌａｎ]遊離  ＋  [Ｌ]調整または[ｌａｎ]調整  -->  [Ｌ−ｌａｎ]  ＋  [Ｌ]目標遊離
濃度Ｃｃｈ  １  ＝  [Ｌ]目標遊離のＣｔ  ｃｈ  １および[ｌａｎ]遊離のＣｌａｎ１  ＝  ０
【００３４】
本発明の目的に関して、用語「遊離大環状キレート化合物の量」とは、製剤中に存在する錯体化大環状キレート化合物（ＤＯＴＡ−Ｇｄの場合は、ガドテル酸）の量に対する遊離大環状キレート化合物の比率をモル／モルで意味する。以下の記述では、選択的にではなく、「遊離大環状キレート化合物の量」または「過剰の遊離大環状キレート化合物」と称される。先に述べたとおり、大環状キレート化合物Ｌは添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］の形態ではなく、いずれの金属イオン（すなわちＸおよびＸ’）とも錯体化していない。
【００３５】
本発明の目的に関して、用語「遊離ランタニド」とは、大環状キレート化合物と錯体化していない任意のランタニドを意味する。
【００３６】
直鎖状のＤＴＰＡキレート化合物に関する米国特許第５  ８７６  ６９５号明細書の実施例２では、過剰のキレート化合物の量が開始時から化学量論の算出ベースで規定されており、予めの調整または濃度の測定はなかったことが本明細書で想起させられる。より具体的には、前記実施例において、化学量論的比率に従って、０．５モルのＤＴＰＡと０．２５モルの酸化ガドリニウム（Ｇｄ２Ｏ３）とが混合され、０．１モル／モル％（０．５ミリモル）過剰のリガンドが添加されるが、これは、大環状キレート化合物の大規模な工業的製造の場合、本出願人が望むリガンド目標量を保証しない。
【００３７】
正確には、過剰の遊離直鎖状リガンドＤＴＰＡを使用する目的は、それを使用しない場合は製剤を保存している間に遊離すると考えられる遊離ランタニドを捕捉することである。
【００３８】
大環状化合物に関する本発明の調整方法は、遊離物質のレベルを完全に制御すること、および特に、製造された薬学的溶液中に遊離ガドリニウムが無いことを完全に保証することを目的にしていることが（特に、使用される量および利用できる分析手段の検出能力の制限により）好適である。この調整方法は、溶液中のキレート化合物とランタニドとの混合物から生じる工業的錯体化にとって特に好適である。
【００３９】
また、当業者に知られているように、本出願人の調整方法は、添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］の熱力学的および動態学的平衡を考慮すると、さらにきわめて複雑な方法を使用する場合（製造者は、金属イオンとランタニドの動態学的および熱力学的定数の双方を管理する必要があろう）を除いては、このような添加剤による工業的規模では適用されないであろうことも想起される。
【００４０】
遊離大環状キレート化合物の分析／アッセイ用の装置として、任意の好適な装置が使用される。大環状キレート化合物には、ポテンシオメーターまたはキャピラリー電気泳動を用いることが好適である。より具体的には、硫酸銅の存在下、錯体化ステップ（バルクで）から得られた溶液に含有される遊離ＤＯＴＡが銅を錯体化する。銅指示電極および参照電極の存在下、ＥＤＴＡの溶液により、電位差測定により、好ましくはｐＨ５の緩衝化媒体中で、過剰の硫酸銅をアッセイする。
【００４１】
転回点インジケーターとしてキシレノールオレンジＡｒｓｅｎｅｚｏの存在下、例えばＥＤＴＡの溶液を用いることにより、遊離ランタニドの分析／アッセイを実施する。インジケーターとしてキシレノールオレンジの存在下、０．０１Ｍのエデト酸二ナトリウム滴定液を用いて、比色法により遊離ガドリニウムをアッセイすることが好適である。ｐＨ＝５の酢酸ナトリウム／酢酸緩衝溶液中、２０ｍＬのＤＯＴＡＲＥＭ製品に対して、インジケーターが赤から黄色へ色を変えるまで、滴定を実施する。０．０１Ｍのエデト酸二ナトリウム溶液の０．１ｍｌは、遊離Ｇｄの０．０００８重量／容量％（８ｐｐｍ）に相当する。この方法は８ｐｐｍから１００ｐｐｍの遊離ガドリニウムで有効である。
【００４２】
本出願人の知る限り、比色法はよく知られているが、造影剤中、本発明のきわめて低レベルでのガドリニウムＧｄ３＋の測定用にそれらを使用することは、知られていないし提案もされていない。これは本発明の調整法にとってきわめて興味深いことであり、本発明の概念に属している。したがって、本発明は、他の態様によれば、本出願の低い範囲での遊離ランタニドを測定する分析方法にも関するものであり、比色法（電位差測定法とも称される）からなる。
【００４３】
本発明は、大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、０．００２％と０．４％との間のモル／モル量の遊離大環状キレート化合物とを含有する液体薬学的製剤中の遊離ランタニドの濃度を測定するための分析的比色法に関する。
【００４４】
ステップｄ）を実施するために、ステップｃ）で測定されたＣｌａｎ  １およびＣｃｈ  １に応じて、いくつかの溶液が可能である。
【００４５】
特に、以下の溶液が考えられる。
−Ｃｌａｎ  １＞０および／またはＣｃｈ  １＜Ｃｔ  ｃｈ  １である場合、大環状キレート化合物の添加により、および／または遊離ランタニドの除去により、および／または本明細書の下記に記載されるとおりにｐＨを変更することにより、調整を好適に行うことができ；
−Ｃｌａｎ  １＝０およびＣｃｈ  １＞Ｃｔ  ｃｈ  １である場合、遊離大環状キレート化合物の除去により、および／または遊離ランタニドの添加により、および／または本明細書の下記に記載されるとおりにｐＨを変更することにより、調整を好適に行うことができる。
【００４６】
遊離ランタニドの除去の場合、スキーム２の［ｌａｎ］調整は、遊離ランタニドが除去されることを意味する。
【００４７】
遊離キレート化合物の除去の場合、スキーム２の［Ｌ］調整は、遊離キレート化合物Ｌが除去されることを意味する。
【００４８】
遊離ランタニドの除去は、イオン交換樹脂を通すことによって実施することが好適である。したがって、例えば、金属イオン（特にＧｄ３＋）と結合するためのキレート化基として作用するイミノジアセテートイオンを含有するスチレン／ジビニルベンゼンコポリマーの樹脂を用いることが可能である。
【００４９】
遊離大環状キレート化合物の除去は、例えば、ろ過、好適には樹脂（例えばアニオン性樹脂）を用いるろ過によって行うことが好適である。
【００５０】
特定の一実施形態において、ステップｂ）は、好適には、遊離大環式キレート化合物の溶液中に、ランタニド（好ましくは固体ランタニド）を添加することにより大環状キレート化合物によるランタニドの錯体化が得られるような、遊離大環状キレート化合物（初期）の溶液と遊離ランタニド（初期）溶液との混合からなる。先行技術は、錯体化の最適化（遊離の過剰リガンドの目標量を達成するように）が、本出願人の調整方法を必要とすることは提案していなかったことが強調される。
【００５１】
ランタニドは酸化物（特にガドリニウム酸化物）の形態で添加されることが好適であるが、本発明は、ランタニドの他の可能な形態、特に、当業者に知られているランタニド塩も扱っている。
【００５２】
ステップｂ）の正確な実験条件は、実施例に詳述してある。ステップｂ）の温度は、６０℃と１００℃との間、好適には約８０℃であることが好適である。調整ステップｄ）の前に、薬学的製剤を冷却することが好適である。ステップｂ）の所要時間は、例えば、１時間から３時間である。
【００５３】
さらに、ステップｄ）の調整変法についての本明細書の上記および下記の記述を通して、錯体化ステップｂ）は、当然のことながら、全体的な錯体化ステップに等価であると考えられるいくつかのサブステップにおいて実施できる。錯体化は、例えば、タンクの最終容量の約半分を調製してから、酸性ｐＨにおいてガドリニウム酸化物を添加することによって実施できる。
【００５４】
以下のような調製法を用いることが可能である。
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物の量（初期）および遊離ランタニドの量（初期）は化学量論的比率に等しく；
−ステップｃ）が、Ｃｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １の測定からなり；
−ステップｄ）が、ステップｂ）で得られた製剤に、第一に、必要ならば、遊離ランタニドの錯体化を達成するために、およびＣｌａｎ  １＝０（またはほぼ０に等しい）を達成するために、ならびに第二に、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １を達成するために、必要な遊離大環状キレート化合物量を添加することからなる。
【００５５】
本発明の目的で、語句「添加される遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量は化学量論的比率に等しい」とは、添加される量が、錯体化反応の化学量論の観点から、全てのランタニドと全てのキレート化合物が錯体形態にあり、遊離大環状キレート化合物が存在しないような量という意味である。
【００５６】
しかし、好適には、本発明による方法では、ステップｃ）の濃度測定は、ステップｂ）の錯体化反応が実施される媒体中で、以下によって実施されることが好ましい。
−化学量論的比率と、ステップｂ）において添加される遊離ランタニドの量および遊離大環状キレート化合物の量との間の相違を用いること：
−または、錯体化に有利な、または不利な化学平衡へシフトさせるためにｐＨを変更すること。
【００５７】
本発明の目的で、語句「化学量論的比率と、ステップｂ）において添加される遊離ランタニドの量および遊離大環状キレート化合物の量との間の相違」とは、ステップｂ）において添加される遊離ランタニドの量および遊離キレート化合物の量が、錯体化反応の化学量論の観点から、必ずしも全てのランタニドがキレート化合物によって錯体化されるわけではない（化学量論に対して、ランタニド過剰および／またはキレート化合物不足）ような量であるか、または、必ずしも全てのキレート化合物がランタニドにより錯体化されるわけではない（キレート化合物過剰および／またはランタニド不足）ような量であることを意味する。
【００５８】
この相違は、大環状キレート化合物／ランタニドまたはランタニド／大環状キレート化合物のモル／モル比が、１．４以下であるような相違が好適であり、好適には、１．００１と１．３との間、特に好適には、１．００５と１．２との間、特に１．００５と１．０２との間が好適である。また、この比率は、過剰のキレート化合物が使用されるか、過剰のランタニドが使用されるかによって、適合できる。錯体化に過剰のランタニドが使用される場合、ランタニド／大環状キレート化合物のモル／モル比は一般に、１．２以下であることが好適である。錯体化に過剰のキレート化合物が使用される場合、大環状キレート化合物／ランタニドのモル／モル比は１．４以下であることが好適である。
【００５９】
したがって、好適な一実施形態において、添加される遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量は、必ずしも全ての大環状キレート化合物がランタニドによって錯体化されないような量であるか、または必ずしも全てのランタニドが大環状キレート化合物により錯体化されるわけではないような量である。その結果、このステップｂ）の後、薬学的製剤は一般に、大環状キレート化合物−ランタニド錯体および：
−遊離大環状キレート化合物か、または
−遊離ランタニド
のいずれかを含む。
【００６０】
この場合、本発明による調製法は、ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量と、化学量論的比率との間に相違があることを特徴とし、この相違は、大環状キレート化合物／ランタニド、またはランタニド／大環状キレート化合物のモル／モル比が、１．４以下であることが好適であり、好適には、１．００１と１．３との間、特に好適には、１．００５と１．２との間、特に１．００５と１．０２との間であるような相違が好適である。
【００６１】
特定の実施形態によれば、この比率は、例えば、１．０１、１．０２、１．０３または１．０４となる。これにより、下表１に提示される濃度が提供されるが、これらは、過剰の初期キレート化合物も使用できるという前提で、過剰の初期遊離ランタニドが使用される場合を示している。
【００６２】
2014114306.tif 000005
（１）これは、Ｇｄ３＋の量であり、Ｇｄ２Ｏ３の量ではない。
【００６３】
例えば、キレート化合物ＤＯＴＡの場合、０．４９７Ｍのキレート化合物濃度に対応する遊離キレート化合物量、およびｘ＝１．０１４（ｘ＝０．５０４／０．４９７により）のランタニド／ＤＯＴＡのモル／モル比に対応する０．５０４Ｍのランタニド濃度に対応する遊離ランタニド量がステップｂ）で添加されることになる。
【００６４】
化学量論的比率に対するこの相違を表す別の方法は、最終溶液中のランタニド濃度に対する相違を規定することである。
【００６５】
過剰のランタニドを示すこの例の場合、化学量論で０．５Ｍのガドリニウムにおける製剤に関して、この相違は０．６％＝１００＊［（０．５−０．４９７）／０．５］である。したがって、この相違は、例えば、薬学的製剤の化学量論における０．１モル％と２モル％との間の濃度であることが好適である。
【００６６】
やはり好適（好ましい様式）である一実施形態において、調整ステップｄ）は、製剤中に存在するランタニドの総量に触れずに、すなわち、ランタニドを全く添加したり除去したりせずに実施する。この場合、大環状キレート化合物の総量および／またはｐＨのみが変更される。
【００６７】
本発明の目的に関して、用語「ランタニドの総量」とは、遊離体および錯体で存在する全てのランタニドを意味する。
【００６８】
本発明の目的に関して、用語「大環状キレート化合物の総量」とは、遊離体および錯体で存在する全ての大環状キレート化合物を意味する。
【００６９】
したがって、第一の場合（好ましい様式Ａの場合）、ステップｂ）において、大環状キレート化合物に対して過剰のランタニドが添加され；ステップｄ）は、遊離大環状キレート化合物の添加からなる。
【００７０】
この場合、本発明による調製法は以下を特徴とする。
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量は、必ずしも全てのランタニドが錯体化されるわけではないような量であり、ランタニド／大環状キレート化合物比（モル／モル）は１．２未満であることが好適であり；
−ステップｃ）は、Ｃｃｈ  １が一般に０に等しい（または、ほぼ０に等しい）場合のＣｌａｎ  １を測定することだけからなり；
−ステップｄ）は、ステップｂ）で得られた製剤に、第一に、Ｃｌａｎ  １＝０が得られるように遊離ランタニドの錯体化を達成するために、ならびに第二に、過剰の遊離大環状キレート化合物Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １を得るために、必要な遊離大環状キレート化合物量を添加することからなる。
【００７１】
第二の場合（好ましい様式Ｂの場合）、ステップｂ）において、ランタニドに対して過剰の大環状キレート化合物が添加される。この場合、過剰のキレート化合物によって、ステップｄ）は、大環状キレート化合物を添加または除去することからなる。
【００７２】
具体的には、ステップｂ）で添加される過剰のキレート化合物によって、Ｃｃｈ  １＜Ｃｔ  ｃｈ  １を得ることが可能になる場合は、ステップｄ）において、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １を得るために、さらなる遊離大環状キレート化合物を添加することが適切である。
【００７３】
他方、ステップｂ）で添加される過剰のキレート化合物によって、Ｃｃｈ  １＞Ｃｔ  ｃｈ  １を得ることが可能になる場合は、ステップｄ）において、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １を得るために、遊離大環状キレート化合物を除去すること（必要に応じて、遊離Ｇｄを添加すること）が適切である。
【００７４】
後者の場合、本発明による調製法は、以下を特徴とする。
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量は、全てのランタニドが錯体化されかつＣｃｈ  １＞Ｃｔ  ｃｈ  １であるような量であり、大環状キレート化合物／ランタニド比（モル／モル）が１．２未満であることが好適であり；
−ステップｃ）は、Ｃｌａｎ  １が０に等しい場合のＣｃｈ  １を測定することだけからなり；
−ステップｄ）は、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １が得られるように、遊離大環状キレート化合物の適切な量を除去することからなる。
【００７５】
実施例２で詳細に示されているように、Ａ）およびＢ）の場合、調整ステップｄ）は、最後に、ｐＨ調整および容量調整のステップを含み、ＤＯＴＡに関しては、メグルミンを用いることが好適であることを指摘する。
【００７６】
第三の場合（Ｃの場合）、製剤のｐＨ（および任意に、他の機能的に等価な化学的パラメーター）は、最後に目的の薬学的溶液（過剰量の目的リガンド）を得るために、反応の平衡をシフトさせるように制御される。
【００７７】
一実施形態によれば、調製法は以下のような方法である。
−ステップｂ）において、添加される遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量が、化学量論的比率に等しく；
−ステップｂ）とステップｃ）との間に、錯体化に有利である、または不利である化学平衡にシフトさせるように、ステップｂ）で得られた薬学的製剤のｐＨを変更する中間ステップｂ１）を含み；
−ステップｃ）が、ステップｂ１）で得られた製剤に対して実施し；
−ステップｄ）が、ステップ（ｂ１）の方向とは反対の方向に平衡をシフトさせるようにｐＨを変更することにより、かつ任意に、遊離大環状キレート化合物を添加または除去することにより、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １およびＣｌａｎ  １＝０（またはほぼ０）が得られるように、Ｃｃｈ  １および／またはＣｌａｎ  １を調整することからなる。
【００７８】
例えば、本発明による方法は、以下を特徴とする。
−ステップｂ）において、４と７との間、好適には５と６．５との間のｐＨで、混合を行い；
−ステップｂ１）は、１０と１３との間、好適には、１１と１２との間の値まで、塩基を用いてｐＨを上げることからなり；
−ステップｄ）は、６．５と７．５との間、好適には、６．８と７．４との間の値まで、ｐＨを低下させ、任意に遊離大環状キレート化合物を添加または除去させることからなる。
【００７９】
例えば、錯体化を６未満のｐＨ（例えば、３と６との間、好適には、５と６との間）で実施してから、ｐＨを、例えば、約１２へ上げ（例えば、ＮａＯＨにより）、次いで、ｐＨを約７に調整する。
【００８０】
本特許出願の実施例２に詳述されているように、ｐＨ調整をしない方法の変法においては、ステップ２で、錯体化は一般に、６未満のｐＨ（例えば、３と６との間）で実施し、ｐＨを直接約７にする。錯体化の機序は考慮せずに、熱力学定数がｐＨに従って変化するとすれば、ｐＨ調整を有する本方法のステップｂ１）は、少なくとも薬学的溶液の使用期限まで、薬学的溶液中の過剰の遊離キレート化合物の目標範囲を達成することを可能にするものである。ｐＨを上げることによって、過剰の大環状キレート化合物を目標の過剰量にほぼ等しいレベルへの方向へと平衡をシフトさせることが可能になる。次いで、ｐＨを低下させることにより、製品の使用期限にわたって、遊離ランタニド／大環状キレート化合物の量が不利に変化しないような、きわめて低い比率での遊離大環状キレート化合物の量の減少が得られる。これは、ｐＨ変更に関連して示される熱力学定数が導かれることから生じると考えられる。
【００８１】
遊離ランタニド測定が実施される（ｐＨ７で）場合、濃度は、ｐＨ変更がなされなかった場合よりも低くなるであろうこと、次いで、正確な量のキレート化合物によって調整がなされることも指摘できる。
【００８２】
さらに、幾つかの段階の分子レベルで生じる錯体化機序の詳細（特にＣｈｅｍ．Ｅｕｒ，Ｊ．２００４，１０．５２１８−５２３２に記載された）を検討せずには、調整を用いる方法により、この結果を得ることが可能になることは全く明らかではなかったことを、本出願人は指摘する。
【００８３】
別の好適な実施形態において、ステップｂ）は、固体錯体［キレート−ランタニド］を調製することおよびそれを溶解する（水に）ことからなる。
【００８４】
この場合、ステップｄ）は、固体錯体［キレート−ランタニド］を溶解することによって得られた液体製剤に対して実施する。
【００８５】
この実施形態によれば、本発明によるステップｂ）の方法は、２つのサブステップ：
ｉ）固体錯体［キレート−ランタニド］を調製するステップ、および
ｉｉ）ステップｉ）で得られた錯体を溶解するステップ
を含む。
【００８６】
ステップｄ）における調整は、前に詳細に記載されたとおり（キレート化合物またはランタニドの添加、キレート化合物またはランタニドの除去、ｐＨ変更による調整）実施することができる。
【００８７】
好適には結晶性［キレート−ランタニド］である固体錯体の調製は、必要に応じて、特に溶解度および純度の点で適切な物理化学的な特性を得るために、少なくとも１つの処理ステップ（ろ過、濃縮、結晶化、乾燥、吹き付けなど）を含む。
【００８８】
結論として、本出願人の製造方法により、臨床家にとって重要である過剰遊離リガンドの適切な範囲の制御最適化が可能になる。遊離ガドリニウムに対するインビボ捕捉能力は恐らく、添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］（例えば、ＤＯＴＡ−Ｃａのナトリウム塩）よりも遊離リガンド（例えば、ＤＯＴＡ）の方がはるかに高い。添加剤Ｘ［Ｘ’，ＤＯＴＡ］の錯体化／非錯体化の速度が、遊離ＤＯＴＡよりもはるかに低いことを考慮して、大環状キレート化合物としてＤＯＴＡの例を取り上げると、この添加剤は、遊離ＤＯＴＡと比較して、生理学的状況下でＤＯＴＡを緩徐におよび／または少量だけ遊離するであろう。したがって、遊離Ｇｄの錯体化に関して、本出願人の製剤の遊離ＤＯＴＡは、特に生体区画における錯体蓄積の場合、添加剤Ｘ［Ｘ’，ＤＯＴＡ］のＤＯＴＡよりも有意に利用可能性が高い。その結果、過剰の遊離ＤＯＴＡは、インビボで遊離ガドリニウムによる金属交換反応を回避するには添加剤Ｘ［Ｘ’，ＤＯＴＡ］よりも極めてはるかに良好である。
【００８９】
正確には、これは、添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］が極めて迅速に非錯体化し（または迅速な金属交換反応に至り）、したがって遊離Ｇｄを捕捉できるためにこの添加剤が使用される直鎖状キレート化合物（特にＤＴＰＡ−ＢＭＡ）の場合とは明確に異なっている。直鎖状キレート化合物に対する添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］のこの作用は、ヒト皮膚ＮＳＦ患者に対して最近インビボで実証されており、この添加剤が高含量で添加される（５％から１０％モル／モル）。
【００９０】
さらに、別の特に好適な実施形態において、大環状キレート化合物−ランタニド錯体に基づく造影剤の薬学的製剤の工業的製造に関してさらなる技術的問題が、本出願人により解決されたと同時に、この造影剤製品の耐容性プロファイルを最大化することを可能にした。さらに具体的には、薬学的製剤における先行技術の教示、例えば、米国特許第５  ８７６  ６９５号明細書（大量のカルシウムキレート化合物を使用する）を完成する米国特許第５  ０８２  ６４９号明細書（１％から２５％過剰の遊離カルシウム）に反して、本出願人は、本発明による方法の場合、極めて低含量のカルシウムが、この方法の工業的制御を確実にし、極めて耐容性の良好な製品を得ることを可能にすることを実証した。
【００９１】
さらに具体的には、通常の工業的分析手段によりキレート化合物量および／またはランタニド量を測定するステップｃ）の信頼性は、使用される成分中（特に、ステップｂ）で使用される大環状キレート化合物、ランタニドおよび水）のカルシウム量が、１５ｐｐｍから２００ｐｐｍ付近の極めて低い目標値未満である場合に著しく改善される。ステップｂ）で使用される大環状キレート化合物中のカルシウム含量（カルシウム量）は、２００ｐｐｍ未満が好適であり、５０ｐｐｍ未満の範囲が好適であり、１５ｐｐｍ未満がさらに好ましい。例えば、ＤＯＴＡ中のカルシウム量［ステップｂ）で水を添加した粉末形態の活性成分−詳細は実施例２−溶解ステップ１を参照］が高過ぎると（特に２００ｐｐｍ超）、カルシウムは、キレート化合物と錯体を形成し、遊離キレート化合物量の調整が、十分に満足いくように実施されないであろう。
【００９２】
薬学的溶液中のカルシウムを低含量にすると、遊離大環状キレート化合物のアッセイに関して生じ得る不利益な干渉（例えば、カルシウムとキレート化合物との錯体形成による）を回避することが可能になり、したがって必要とされる高レベルの品質で工業的規模での製造に特に有効である様式で、遊離キレート化合物のアッセイとその調整を達成することが可能になる。さらに、患者に投与される最終製品（特にガドリニウムＤＯＴＡのメグルミン塩）中に制御された極めて低濃度のカルシウムにより、いずれのホメオスタシスの不均衡をも回避することが可能になる限りでは患者のカルシウム血症に関して好適である：カルシウム血症に対する注射製品（通常２０ｍｌ未満の用量で）の影響は、多くて０．５％の範囲内である。投与される造影剤製品中のカルシウム量は、５０ｐｐｍ未満、特に２０ｐｐｍ未満、例えば、１ｐｐｍと５ｐｐｍとの間が好適である。例えば、ガドリニウムＤＯＴＡのメグルミン塩では、ステップｂ）に使用されるＤＯＴＡ粉末のＣａ／ｇの１５μｇ（１５ｐｐｍ）の限界量は、患者に投与される液体造影剤製品の３μｇのＣａ／ｍｌ（投与される液体造影剤製品１ｍｌ当り約０．２０２ｇのＤＯＴＡが存在する）、すなわちこの造影剤製品中３ｐｐｍに相当する。
【００９３】
したがって前述のとおり本発明による方法の別の変法としては、ステップｃ）およびｄ）の測定および調整前に、ステップｂ）で得られた製剤中のカルシウム量を制御する中間ステップｂ２）を含むことが好適である。
【００９４】
必要に応じて、特に最終溶液中のカルシウム量が１５ｐｐｍ超か、または好適には１０ｐｐｍ超である場合、この中間ステップは、この制御後に過剰のカルシウム除去を含む。
【００９５】
したがって一態様によれば、本発明による方法は、患者に投与される液体薬学的製剤中のカルシウム含量が、５０ｐｐｍ未満、特に２０ｐｐｍ未満、好ましくは５ｐｐｍ未満であり、本法は、好適にはステップｃ）前にカルシウム量の測定、および必要に応じて過剰のカルシウムを除去する中間ステップｂ２）を含むことを特徴とする。
【００９６】
さらに、前述のとおり本発明による方法の別法としては、ステップｂ）の前に、ステップｂ）に使用される成分、特に溶解しようとする大環状キレート化合物中、ランタニド（通常酸化物の形態で使用される）中、および水中のカルシウム量の制御を含むことが好適である。これらの成分中のカルシウム含量は、好適には１５０ｐｐｍ未満であり、１５ｐｐｍ未満であることが好ましい。したがって、一態様によれば、本発明による方法は、これらの成分（通常ＤＯＴＡ粉末、ガドリニウムＧｄ２Ｏ３粉末、水）中のカルシウム量は、１５０ｐｐｍ未満であること、好ましくは１５ｐｐｍ未満であることを特徴とする。一態様によれば、本発明は、カルシウムを１５０ｐｐｍ未満、好ましくは５０ｐｐｍ未満、好ましくは１５ｐｐｍ未満を含有する中間産物（ＤＯＴＡ粉末または水溶液中のＤＯＴＡ）としてのＤＯＴＡに関する。
【００９７】
極めて有利なことに、本出願人は、特にＤＯＴＡに関して、５０ｐｐｍ未満のカルシウム量を好適に達成することを可能にする水−エタノール混液を用いる結晶化による精製によって、ステップｂ）に使用されるキレート化合物（粉末）中の過剰のカルシウムを除去することに成功している。ステップｂ）に使用される水もまた、必要に応じて、相応しい処理、例えば、望ましくないカルシウム量を防ぐために酸によるデスケーリングより精製されることが好適である。
【００９８】
１００％に極めて近い純度、ほぼ９９．９９９％の純度を有する酸化ガドリニウムを特に使用することが好ましい。
【００９９】
さらに、調整ステップｄ）の最後に用いられるメグルミンも少量のカルシウムを含むことをチェックすることが好ましいであろう。
【０１００】
本法はまた、キレート化合物と相互作用してアッセイを破壊し易い金属（例えばニッケルおよびアルミニウム）を、極めて低含量有する成分を使用する場合にも好適である。したがって、本法は、ステップｂ）および／またはｃ）および／またはｄ）の測定および調整前に、これら金属量をチェックするステップを含むことが好適である。
【０１０１】
最後に、本発明による方法はまた、上記の変法にかかわりなく、Ｃｃｈ  １およびＣｌａｎ  １をチェックするさらなるステップｅ）を含むことが好適である。
【０１０２】
本発明による方法の好ましい一実施形態によれば、薬学的製剤が、ＤＯＴＡ−ガドリニウム錯体のメグルミン塩の薬学的製剤であることを特徴とする。
【０１０３】
本出願人の方法により、目標の製剤を安全に得ることが可能になる。この方法は、薬学的製造反応器（薬学的製剤用試剤を加える）内でのインサイチュ錯体化により提示される問題の解決を可能にする。具体的には、ランタニドがＧｄ３＋である場合、製剤用試剤としてメグルミンを使用する。しかしながら、ガドテル酸の物理化学的特性を考えると、同じ反応器内において３つの成分（非錯体化キレート化合物粉末、ランタニド粉末およびメグルミン粉末）の混合は、十分に満足すべきものにはならないであろう。したがって、この問題の解決を可能にする本発明による方法は、錯体化、目標との相違の測定、および調整を組み合わせることからなる。
【０１０４】
したがって全体的として、本出願人の方法は、キレート化法を薬学的製造に組み込むことを可能にし、特に元値および品質の点で利点を有する。
【０１０５】
好適な一実施形態において、遊離大環状キレート化合物以外に遊離ランタニドをブロックする試剤をステップｂ）に加える。このブロック剤は、好適には、ポリカルボン酸、特にジカルボン酸、トリカルボン酸またはテトラカルボン酸、特にクエン酸またはその誘導体である。
【０１０６】
遊離大環状キレート化合物量の目標範囲（０．００２％から０．４％、好適には０．０２％から０．３％、特に０．０２５％から０．２５％）の一般的な発明概念に関して、この範囲は、少なくとも以下の理由で、米国特許第５  ８７６  ６９５号明細書の特に実施例により例示された教示とは異なることを、本出願人は指摘する。
【０１０７】
本出願人の目標範囲は非常に狭く、前記文献に提示された非常に広い範囲内の選択されたものに相当する。
【０１０８】
大環状キレート化合物に関する米国特許第５  ８７６  ６９５号明細書（特に実施例３および４）に記載された製剤は、キレート化合物の塩類（カルシウム二ナトリウム、亜鉛二ナトリウムＤＯＴＡ）による製剤であって、遊離キレート化合物による製剤ではない。さらにその中の過剰の塩類量は非常に高く、少なくとも１０％である。しかし、本発明の特許出願においては、塩類の形態ではなくて遊離のキレート化合物だけを用いている。
【０１０９】
約０．１％の遊離キレート化合物量を有する米国特許第５  ８７６  ６９５号明細書に提示された製剤は、直鎖状キレート化合物（ＤＴＰＡ）だけに関するものであり、記載された０．０８％でのＤＴＰＡ製剤は、明らかに対照溶液として示されており、それどころか、前記文献は、はるかに高い量、２％またはそれよりかなり高い量の使用を示唆している。
【０１１０】
具体的には、前記文献の表２および６欄（６２〜６７行）においてキレート化合物の使用に対する耐容性に関して提示された唯一の試験では、好適な製剤（０．５ミリモルのＧｄ  ＤＴＰＡと０．０１ミリモルのＤＴＰＡ／ｋｇとの間の比率に基づいて、その量が確立された製剤Ｂ）に相当し、低値として記載されている（６欄、６１行）２％量と比較し、０．０８モル／モル％の直鎖状遊離キレート化合物量（０．５ミリモルのＧｄ  ＤＴＰＡと０．０００４ミリモルのＤＴＰＡ／ｋｇとの間の比率に基づいて、その量が確立された製剤Ａ）では、毒性減少が著しく不利であることを示している。
【０１１１】
このように、本出願人は、米国特許第５  ８７６  ６９５号明細書により明白に推奨されたものの約１／５〜１／１００である遊離大環状キレート化合物量を有する製剤に取り組んだ。意外なことに、大環状キレート化合物、特にＤＯＴＡは、過剰の遊離キレート化合物の存在の結果、耐容性に関してＤＴＰＡなどの直鎖状キレート化合物の挙動とは異なった挙動をすることが本出願人により実証された。
【０１１２】
さらに具体的には、この耐容性は、０．０８％から２％へ過剰の遊離キレート化合物を増加させることによりＤＴＰＡでは改善するようであるが、一方、ＤＯＴＡについては、極めて低値（０．０２５％から０．２５％）を通して、２％の値へ過剰の遊離キレート化合物を増加させることにより、改善するようである。その結果、直鎖状キレート化合物（特にＤＴＰＡ）と大環状キレート化合物（特にＤＯＴＡ）との間の毒性の危険性を減少させる値の転換点は、全く明らかではない。さらにこれは、既にヒトに注入された造影剤の何千万の用量に関してＮＳＦの文脈における科学共同体における現在の複雑な検討、錯体化動力学の主題および／またはキレート化合物間の構造比較に関する検討により示されていることである。例えば、幾つかの直鎖状キレート化合物に関してＮＳＦの危険性（ガドリニウムが蓄積するヒト皮膚についての結果）を軽減するために、直鎖状キレート化合物に関して極めて高含量の添加剤Ｘ，Ｘ’Ｌ、すなわち約５％から１０％のこのような添加剤の使用が大いに推奨されており、ＤＴＰＡ−ＢＭＡなどの遊離キレート化合物は明らかに使用すべきではないことが最近示されている。
【０１１３】
この目的のために、別の態様によれば、本発明は、０．００２モル／モル％と０．４モル／モル％との間、さらに特に０．０２モル／モル％と０．３モル／モル％との間、極めて好適には０．０２５モル／モル％と０．２５モル／モル％との間の遊離大環状キレート化合物、好適には遊離ＤＯＴＡを含有することを特徴とする、本発明による方法によって得ることができる薬学的製剤に関する。
【０１１４】
過剰の遊離大環状キレート化合物、特に遊離ＤＯＴＡの範囲の採用された選択によって、溶液中の遊離ランタニド、特にガドリニウムの値、生理学的ｐＨで約１０−１０Ｍから１０−１４Ｍが得られる。
【０１１５】
製剤中の錯体化キレート化合物の濃度は通常、約０．０１ミリモル／ｋｇから５ミリモル／ｋｇの投与用量で、１μＭと１Ｍとの間である。注入される製剤の濃度は、通常約０．５Ｍである。
【０１１６】
本法の特に好適な方法は、ＤＯＴＡ−ガドリニウム錯体のメグルミン塩の薬学的製剤の調製に関するものであり：大環状キレート化合物および遊離大環状キレート化合物はＤＯＴＡであり、ランタニドはガドリニウムであり、調製された塩はメグルミン塩である。
【０１１７】
好適なことに、本発明による薬学的製剤は、大環状キレート化合物がＤＯＴＡであり、この製剤は、０．０２モル／モル％と０．０８モル／モル％との間の遊離ＤＯＴＡを含有することを特徴とする。
【０１１８】
このより低い範囲は、幾つかの以下の生理学的利点を有し易い。
−過度に大過剰の大環状キレート化合物の存在により、内因性カチオン（例えば、亜鉛または銅）のある一定の疾患に関するキレート化の危険性を制限すること、
−例えば、動脈高血圧の制御に対して影響を有する金属酵素、特にＡＣＥの阻害を制限すること、
−金属活性成分：リチウム、ビスマス、白金などとの好ましくない薬物相互作用を回避すること、
−内因性金属のセリック（ｓｅｒｉｃ）用量の破壊を回避すること、
−錯体化する、例えば解毒する活性成分（デフェロキサミン、シクラムなど）と薬物との相互作用を回避すること。
【０１１９】
別の好適な実施形態において、本発明による薬学的製剤は、大環状キレート化合物がＤＯＴＡであり、この製剤が、過剰量の遊離ＤＯＴＡの０．１５モル／モル％と０．２５モル／モル％との間を含有することを特徴とする。
【０１２０】
このより高い範囲は、幾つかの以下の生理学的利点を有し易い。
−注入される遊離ガドリニウム量、すなわち、遊離ガドリニウムは毒性の危険性があり、また一定の疾患に関連する食作用機序に関与している可能性があるが、注入される遊離ガドリニウム量を最適に制限すること、
−病理学的状況下におけるインビボ金属交換反応、特に鉄（セリック（ｓｅｒｉｃ）鉄の増加）による金属交換反応を最少にすること。
【０１２１】
このより高い範囲はまた、注入される製剤の経時的安定性をさらに改善する利点がある（相応しくない保存条件：熱、航空機内での徐圧、光に対する過度の曝露などの下での脱キレート化）。
【０１２２】
一実施形態によれば、遊離大環状キレート化合物の量は０．０９％と０．１５％との間である。この中央範囲は、低値範囲および高値範囲の利点を組み合わせ易い。
【０１２３】
遊離大環状キレート化合物量の選択は、特に種々の病状に関する患者の危険性または上記に示された機序に関連する病理的危険性に応じて最適化することができる。例えば、ＮＳＦの危険性を示す患者の場合、ガドリニウムのいずれの放出をも最少にするために、中央範囲または高範囲における過剰の大環状キレート化合物が好ましいと考えられる。
【０１２４】
しかしながら、ある一定の範疇の患者（特に腎不全患者）でＮＳＦの病状が、インビボ金属交換反応または耐容性の点から不都合な同様の現象に関与すると思われる遊離キレート化合物の存在と部分的に関連していることが判明した場合、極めて低値の過剰遊離キレート化合物はまた、ＮＳＦ病状において有益な効果をもたらし易い。
【０１２５】
別の態様によれば、本発明による薬学的製剤（患者に投与される）のカルシウム含量は、５０ｐｐｍ未満、好適には３０ｐｐｍ未満、さらに好適には１５ｐｐｍ未満である。
【０１２６】
別の態様によれば、本発明は、造影製品製剤の使用に関するものであり、前記製剤は、耐容性改善のために、大環状キレート化合物と常磁性金属イオンとの錯体、好適には本発明による製剤の０．０２５％と０．２５％との間の遊離大環状キレート化合物量を含む。
【０１２７】
別の態様によれば、本発明は、０．０２５モル／モル％と０．２５モル／モル％との間、特に０．０２５と０．０８％との間、０．０９と０．１５％との間、０．１６と０．２５％との間の量の過剰の遊離キレート化合物を用いることからなる、大環状キレート化合物、特にＤＯＴＡに基づくＭＲＩ造影製品のインビボ耐容性を改善する方法に関する。
【０１２８】
製剤中のキレート化合物（錯体化キレート化合物）の濃度は、０．５Ｍと０．９Ｍとの間にあることが好適である。
【０１２９】
本発明の文脈で有用である大環状キレート化合物は、以下のキレート化合物から選択されるのが好適である：ＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＤＯ３Ａ、ＢＴ−ＤＯ３Ａ、ＨＰＤＯ３Ａ、ＰＣＴＡ、ＤＯＴＡＧＡおよびそれらの誘導体、特にＤＯＴＡ。これらキレート化合物の化学式は、当業者に広く知られており、例えば、国際公開公報第２００７／０４２  ５０４号パンフレットの２０頁から２３頁、および国際公開公報第２００３／０１１  １１５号パンフレットの８頁から１１頁が考えられる。
【０１３０】
本発明はまた、医療画像診断用組成物の調製のため、または治療的処置の有効性の診断用モニタリングのための、本発明による薬学的製剤の使用、ならびに本発明による製剤の薬学的に許容できる量の投与を含む診断法に関するものである。
【０１３１】
ＭＲＩの診断に関して、通常生理食塩水としての注射による静脈内投与は、一般に１マイクロモルから５００マイクロモルのＧｄ／ｋｇ用量で実施される。薬学的に許容できる単位用量は、キレート化合物の性質、投与経路、患者ならびに特に試験を受ける障害の性質による。静脈内注射および磁気共鳴による観察に関して、溶液の濃度は、一般に０．００１モル／リットルと０．５モル／リットルとの間であり、症例によって０．００１ミリモル／ｋｇから０．１ミリモル／ｋｇが、患者に投与される。より高い臨床的用量、例えば、三倍の用量（０．３ミリモル／ｋｇ）でも実施することができる。投与率、濃度、注射速度は、臨床的適応症および製品仕様書により、最終的にはまた、ＭＲＩ操作時に造影剤の挙動に鑑みて採用される。適切な任意のプロトコルが、患者データ、施された最初の試験的注射、得られた増強曲線に鑑みて可能な投与の調整をして用いられる。注入速度は、プロトコルにより、また、プロトコルの実施時に獲得過程での緩和性（ｒｅｌａｘｉｖｉｔｙ）曲線に鑑みて算出することができる（好適には、データ処理手段により自動的に）；例えば、投与率／速度が、データベースを考慮して最適増強に十分でない場合、ＭＲＩ操作時に注射器が、自動的にこの量を増加させる。
【０１３２】
好適な診断用表示の中でも、既に臨床的に使用された表示、およびその結果が、本発明による製剤によって改善される表示を挙げる。したがって、以下の表示およびそれらの改善を挙げる：血管造影、脳画像、血管画像、心血管、癌、神経変性および炎症性病状の画像、灌流画像による表示、幾つかの造影製品、特にＭＲＩ、Ｘ線スキャナー、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ、ＰＥＴ  ＣＴの使用を組み合わせる表示、および同一濃度または異なる濃度での造影製品の連続投与による表示、または多様式画像における表示。
【０１３３】
複数の実施形態によれば、これら新規な製剤は、患者の診断プロファイル、特に造影製品に対する患者の耐容性プロファイルに応じて先行技術の製剤と組み合わせるか、または先行技術の製剤の代わりに投与するために選択することができる。この選択は、医師により、および／または任意のタグ化システム（患者により担持されたＲＦＩＤタグ）により自動的に行うことができ、投与タイプ、例えば、本出願の製剤など最良に適合する造影剤の選択を調整することによって行うことができる。
【０１３４】
したがって、患者の耐容性を評価するためのデバイス、および評価デバイスにより得られた結果に応じた造影製品の製剤を投与するための注射器のようなデバイスを含む設置を用いることができる。幾つかの危険性、特にＮＳＦ（腎性線維症）の危険性を評価することができる。必要に応じて、ＭＲＩ製品は、少なくとも１種の抗ＮＳＦ治療剤（治療的に知られた抗線維症剤、例えば特にステロイド、抗炎症剤またはビタミン類）と同時にまたはその後に続いて共投与される。
【０１３５】
必要に応じて、ＮＳＦに関する患者の危険性評価を実施して、注射される造影製品の用量／濃度（例えば、いずれの危険性をも回避しながら画像のシグナルを得るための十分に満足すべき情報を得ることが可能な場合、この用量は通常の臨床的用量に比して減じることができる）を最適化する。
【０１３６】
危険性のある患者の場合、ランタニドの毒性の危険性をさらに減じるために、本出願人はまた：
−先行技術にあるような：ランタニドのキレート化合物（例えば、ガドテル酸ＤＯＴＡ−Ｇｄ錯体または直鎖状Ｇｄ−キレート化合物）およびキレート化合物を中和する塩化剤、例えばメグルミン（有機塩基）、
−しかしさらに、別に製剤中に遊離のまま残存し得るランタニド（Ｇｄ３＋）をブロックするように意図された、少なくとも１種の過剰の生体適合性補足ブロック剤、
を含む製剤も試験した。
【０１３７】
特に使用されるブロック剤の中には、モノカルボン酸またはポリカルボン酸（好適には、クエン酸およびその誘導体などのトリカルボン酸またはテトラカルボン酸）、ヒドロキシ酸（乳酸塩、リンゴ酸塩・・・）などの有機アニオン類、またはランタニドと好適な配位相互作用できる他の試剤がある。
【０１３８】
したがってブロック剤を、この製剤に導入し、および／または患者に共投与することができる。
【実施例】
【０１３９】
詳細な実施例
１）実施例１：インビボ耐容性
表２の耐容性結果（ＤＯＴＡの診断溶液に関するマウスの急性毒性；この溶液は、注射用薬学的溶液であり、ＤＯＴＡとＧｄ３＋との錯体、Ｇｄ３＋により錯体化されておらず、添加剤としての金属イオンにより錯体化されていない過剰の遊離ＤＯＴＡを含む）は、遊離大環状キレート化合物ＤＯＴＡの０．０２５モル／モル％から０．２５モル／モル％を含有する製剤は、毒性が、２％に近い製剤の１／３であることを示している。
【０１４０】
2014114306.tif 000006
【０１４１】
本出願人により実施されたさらなる安定性試験は、この製剤が、長期間の保存でガドリニウムの放出が無く、極めて満足できるものであることを示している。
【０１４２】
実施例２：ランタニドキレート化合物の製剤（キレート化合物溶液とランタニド溶液との混液）を調製する方法
大環状キレート化合物がＤＯＴＡである製剤の調製をさらに具体的に説明する。下表３は、ＤＯＴＡの１００リットル溶液（工業的量）の製造に使用される量の例を示している。
【０１４３】
2014114306.tif 000007
（１）１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，
Ｎ’’’−四酢酸
【０１４４】
ステップ１：溶解
４０リットルの注射グレード水を、８０℃で１００リットルの製造タンクに入れ、窒素の注入を開始し、次いで２０．１００ｋｇのＤＯＴＡと９．１３５ｋｇの酸化ガドリニウムを攪拌しながら組み入れた。錯体化は、ｐＨ６未満、例えば３と６との間、例えば、ｐＨ４で実施する。ＤＯＴＡの存在下で酸化ガドリニウムは、水溶性酸錯体を形成する。
【０１４５】
ステップ２：測定
ステップ１の後、サンプルを取り、遊離ガドリニウムをアッセイする。
【０１４６】
ステップ３：遊離種の調整
溶液の調整は、酸化ガドリニウムまたはＤＯＴＡで実施することが好適である。
【０１４７】
したがって、ＤＯＴＡ調整液は、１００ｍｌ当り１５〜３５ｍｇの適量を加える。
【０１４８】
ステップ４：冷却
ステップ３からの最終溶液を、例えば、タンクジャケット中の冷水を循環させることによって３０℃に冷却する。
【０１４９】
ステップ５：ｐＨおよび単位容積当りの質量の調整
形成された錯体の酸性官能基をメグルミンで塩化し、２０℃でのｐＨを６．８〜７．４に調整する。その濃度を、注射グレード水を添加することにより調整する。
【０１５０】
したがって、以下のものを製造タンクに導入する。
−９．１２５ｋｇのメグルミン、
−および３ＮのｐＨ＝６．８〜７．４でメグルミン溶液、
−注射グレード水、適量。
【０１５１】
次に最終溶液をろ過し、一般的方式でオートクレーブ操作により滅菌したボトルに入れる。
【０１５２】
２）実施例３：ランタニドキレート化合物製剤を調製する方法（固体錯体［キレート化合物−ランタニド］の溶解）
2014114306.tif 000008
この実施例は、少量の製品製造を例示するものであり、工業的規模では適切な置き換えを行う。
【０１５３】
2014114306.tif 000009
【０１５４】
１０ｇ（０．０２５モル；１当量）の大環状キレート化合物ＤＯＴＡを、冷却器、温度計、およびｐＨメーターが装備された三頚フラスコ中、８０℃に加熱することにより２００ｍｌの水に溶解する。測定されたｐＨは３．７である。これを２Ｎ  ＮａＯＨ溶液により６に調整する。４．４８ｇ（０．０１２５モル；０．５当量）の酸化ガドリニウムを加える。ｐＨを再調整し、１Ｎ  ＨＣｌを加えることによって６と７との間に安定させて維持する。この反応液を攪拌しながら８０℃に放置する。
【０１５５】
残存する遊離のガドリニウムを、水で予めリンスされたｃｈｅｌｅｘ樹脂により除去する。これを行うために、反応混合物をｐＨ５にする（樹脂がより効率的になる）。全体を、室温で２時間攪拌しながら放置する。ｐＨを６．５と７との間に上げる。樹脂をろ過により除去する。
【０１５６】
錯体をエタノール中で沈殿させて塩類を除去する（１容量の水当り５容量のＥｔＯＨ）。
【０１５７】
これら塩類のアッセイは、０．０５Ｎの硝酸銀溶液による滴定により実施する。遊離ガドリニウムの定量化もまた、アルセナゾ（ＩＩＩ）との比色アッセイにより実施する。１１．５ｇの生成物（白色粉末）を得る。
収率＝８０％、ＨＰＬＣ純度：９８％；ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ＋モード）：ｚ＝１（ｍ／ｚ＝５５９）。
【０１５８】
次に水中への溶解を、好適な方法によって、例えば、４５℃の水を用い、約３０分間攪拌し、ｐＨを調整して実施する。
【０１５９】
本発明は、詳細に示されたものから誘導される他の実施形態を幅広く包含している。例えば、メグルミンをＤＯＴＡの溶液に加え、その後、ガドリニウムによるＤＯＴＡの錯体化ステップのためガドリニウムを添加する。
【手続補正書】
【提出日】平成26年4月28日(2014.4.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、０．００２％〜０．４％のモル／モル量の遊離大環状キレート化合物と、を含有する液体薬学的製剤を調製するための方法であって、
以下の連続ステップ：
ｂ）すべてのランタニドが錯体化されず、かつ、Ｃｃｈ  １＞Ｃｔ  ｃｈ  １（式中、Ｃｃｈ  １は遊離大環状キレート化合物の濃度であり、Ｃｔ  ｃｈ  １は、最終液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の目標濃度であり、かつＣｔ  ｃｈ  １は０．００２％〜０．４％の範囲内で選択される）である遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量において、大環状キレート化合物によりランタニドが錯体形成されるように、遊離大環状キレート化合物の溶液と遊離ランタニドの溶液とを混合することにより、
大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、添加剤Ｘ［Ｘ’，Ｌ］（式中、Ｌが大環状キレート化合物であり、ＸおよびＸ’が金属イオンである）の形態ではない遊離大環状キレート化合物と、を含有する液体薬学的組成物を調製するステップ；
ｃ）ステップｂ）で得られた薬学的製剤中のＣｃｈ  １を測定するステップであって、ここで、遊離ランタニドの濃度Ｃｌａｎ  １は０であるステップ；
ｄ）ステップｂ）で得られた薬学的製剤に、遊離ランタニドを添加して、Ｃｃｈ  １＝Ｃｔ  ｃｈ  １およびＣｌａｎ  １＝０が得られるように、Ｃｃｈ  １およびＣｌａｎ  １を調整するステップ
を含み、ここで、
最終液体薬学的製剤中の遊離大環状キレート化合物の量が、最終液体薬学的製剤中の錯体化した大環状キレート化合物の量に対する遊離大環状キレート化合物の比率に対応する、方法。
【請求項２】
前記遊離大環状キレート化合物のモル／モル量が０．０２５％〜０．２５％である、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記大環状キレート化合物が、ＤＯＴＡ、ＮＯＴＡ、ＤＯＴＡＧＡ、ＤＯ３Ａ、ＢＴ−ＤＯ３Ａ、ＨＰ−ＤＯ３Ａ、およびＰＣＴＡから選択されることを特徴とする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記大環状キレート化合物がＤＯＴＡであることを特徴とする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記ランタニドがガドリニウムである、請求項３または４記載の方法。
【請求項６】
前記ランタニドが酸化ガドリニウムの形態で添加される、請求項１〜５のいずれか一項記載の方法。
【請求項７】
前記薬学的製剤が、ＤＯＴＡ−ガドリニウム錯体のメグルミン塩の薬学的製剤であることを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項記載の方法。
【請求項８】
調整ステップｄ）が、最後に、ｐＨおよび容量を調整するステップを含む、請求項７記載の方法。
【請求項９】
前記ｐＨおよび容量の調整が、メグルミンを用いて行われる、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
ステップｂ）が、６０℃〜１００℃の温度で行われる、請求項１〜９のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１】
ステップｂ）において、遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量が、大環状キレート化合物／ランタニドのモル／モル比が１．００１〜１．３であるように添加される、請求項１〜１０のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２】
ステップｂ）において、遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量が、大環状キレート化合物／ランタニドのモル／モル比が１．００５〜１．２であるように添加される、請求項１〜１１のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
ステップｂ）において、遊離大環状キレート化合物の量および遊離ランタニドの量が、大環状キレート化合物／ランタニドのモル／モル比が１．００５〜１．０２であるように添加される、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記液体薬学的製剤中のカルシウム量が５０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記液体薬学的製剤中のカルシウム量が５ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記液体薬学的製剤中のカルシウム量が５０ｐｐｍ未満であり、かつ、薬学的溶液に用いられる成分中のカルシウム量が、５０ｐｐｍ未満である、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
薬学的溶液を調製するために用いられるキレート化合物粉末、水、およびメグルミン中のカルシウム量が、５０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項１５記載の方法。
【請求項１８】
ステップｃ）の前に、カルシウム量を測定し、必要に応じて、過剰のカルシウムを除去する中間ステップｂ２）を含むことを特徴とする、請求項１３〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
Ｃｃｈ  １およびＣｌａｎ  １をチェックする追加ステップｅ）を含むことを特徴とする、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
ステップｂ）が６０℃〜１００℃の温度で行われ、調整ステップｄ）の前に薬学的製剤が冷却される、請求項１〜１９のいずれか一項記載の方法。
【請求項２１】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法により得ることができる、大環状キレート化合物とランタニドとの錯体と、０．００２％〜０．４％のモル／モル量の遊離大環状キレート化合物と、を含有する液体薬学的製剤。
【請求項２２】
カルシウム量が５０ｐｐｍ未満であることを特徴とする、請求項２１に記載の製剤。
【請求項２３】
前記製剤が注入可能な製剤である、請求項２２または２３記載の製剤。