(57)【要約】【課題】安全性の高い天然物の中からメラニン産生抑制作用又はコラーゲン産生促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とするメラニン産生抑制剤及びコラーゲン産生促進剤を提供する。【解決手段】本発明のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤の有効成分として、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを含有させる。また、皮膚化粧料及び飲食品に、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを配合する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを有効成分として含有することを特徴とするメラニン産生抑制剤。
【請求項２】
パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを有効成分として含有することを特徴とするコラーゲン産生促進剤。
【請求項３】
パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを配合したことを特徴とする皮膚化粧料。
【請求項４】
パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを配合したことを特徴とする飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メラニン産生抑制剤、コラーゲン産生促進剤、皮膚化粧料及び飲食品に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
皮膚においてメラニンは、紫外線から生体を保護する役目も果たしているが、過剰生成や不均一な蓄積は、皮膚の黒化やシミの原因となる。一般にメラニンは、色素細胞の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、ついで５，６−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成されるものとされている。したがって、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）、シミ、ソバカス等を予防、治療又は改善するためには、メラニンの産生を抑制することが考えられる。
【０００３】
このような観点から、従来、メラニン産生抑制作用を有するものとして、例えば、トウゴマ根部からの抽出物（特許文献１参照）、サウスウレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物（特許文献２参照）等が知られている。
【０００４】
皮膚は、表皮、基底膜及び真皮から構成されている。真皮は、線維芽細胞と該細胞から分泌されるコラーゲン、エラスチン及びヒアルロン酸等の細胞外マトリックスとにより構成されている。若い皮膚においてはこれらの皮膚組織が恒常性を維持することにより水分保持力、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。
【０００５】
ところが、皮膚が紫外線、著しい空気の乾燥、過度の皮膚洗浄、ストレス、喫煙等の外的因子の影響を受けたり、加齢が進んだりすると、細胞外マトリックスの主要構成成分であるコラーゲン等の産生量が減少するとともに、分解や変質を引き起こす。その結果、皮膚の保湿機能や弾力性が低下し、角質の異常剥離が起こり、皮膚の老化に伴う変化、すなわち、シワ、くすみ、きめの消失、弾力性の低下等が生じる。
【０００６】
このように、皮膚の老化に伴う変化、すなわち、シワの形成、張りの消失、弾力性の低下等には、コラーゲン等の細胞外マトリックス成分の減少、変性が関与している。したがって、コラーゲンの産生を促進することは、皮膚の老化を防止又は改善する上で重要である。
【０００７】
また、コラーゲンは、骨、腱、靱帯、角膜、血管等にも多く存在し、加齢等によるコラーゲン産生の低下が、骨粗鬆症等の原因になることが知られている。さらに、創傷の治癒過程において、コラーゲンの産生量が亢進し、線維芽細胞等の足場となることで、創傷の治癒を促進することが知られている。そのため、コラーゲンの産生を促進することは、骨粗鬆症等の予防又は治療、創傷治癒の促進といった観点からも重要である。
【０００８】
従来、コラーゲン産生促進作用を有するものとしては、例えば、五斂子の葉部からの抽出物（特許文献３参照）、クスノハガシワからの抽出物（特許文献４参照）等が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００１−２１３７５７号公報
【特許文献２】特開２００２−２０１１２２号公報
【特許文献３】特開２００２−２２６３２３号公報
【特許文献４】特開２００３−１４６８３７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、安全性の高い天然物の中からメラニン産生抑制作用又はコラーゲン産生促進作用を有するものを見出し、それを有効成分とするメラニン産生抑制剤及びコラーゲン産生促進剤、並びに当該天然物を配合した皮膚化粧料及び飲食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記課題を解決するために、本発明のメラニン産生抑制剤及びコラーゲン産生促進剤は、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを有効成分として含有することを特徴とする。また、本発明の皮膚化粧料及び飲食品は、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを配合したことを特徴とする。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、優れたメラニン産生抑制作用を有し、かつ安全性の高いメラニン産生抑制剤、及び優れたコラーゲン産生促進作用を有し、かつ安全性の高いコラーゲン産生促進剤を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本実施形態のメラニン産生抑制剤及びコラーゲン産生促進剤は、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを有効成分として含有するものである。また、本実施形態の皮膚化粧料及び飲食品は、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とが配合されるものである。
【００１４】
ここで、本実施形態における「抽出物」には、上記植物を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１５】
本実施形態において、パイナップルからの抽出物を製造するために使用する抽出原料は、パイナップル（学名：Ananas comosus (L.) Merr.又はAnanas sativus Schult）である。
【００１６】
パイナップル（Ananas comosus (L.) Merr.又はAnanas sativus Schult）は、熱帯アメリカ原産のパイナップル科アナナス属に属する多年生の植物である。パイナップルは、タイ、フィリピン、ブラジルなどの熱帯から亜熱帯で広く栽培されており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得るキンモクセイの構成部位としては、例えば、葉部、茎部、果実部、花部等の地上部、根部、地下茎部等の地下部、又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは果実部である。
【００１７】
また、本実施形態において、キンモクセイからの抽出物を製造するために使用する抽出原料は、キンモクセイ（学名：Osmanthus fragrans var. aurantiacus）である。
【００１８】
キンモクセイ（Osmanthus fragrans var. aurantiacus）は、モクセイ科モクセイ属に属する常緑小高木であり、別名、桂花とも呼ばれ、中国南部が原産地であり、このような地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得るキンモクセイの構成部位としては、例えば、葉部、枝部、樹皮部、幹部、茎部、果実部、花部等の地上部、根部又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは花部である。
【００１９】
ここで、「花」とは、一般に、種子植物の有性生殖にかかわる器官の総体をいい、葉の変形である花葉と茎の変形である花軸とから構成され、花葉には、萼、花弁、雄しべ、心皮等の器官が含まれる。本発明において抽出原料として使用する「花部」には、種子植物の有性生殖にかかわる器官の総体の他、その一部、例えば、花葉、花被（萼と花冠）、花冠、花弁等も含まれる。
【００２０】
パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物は、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、上記抽出原料の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００２１】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００２２】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２３】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２４】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を抽出溶媒として使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比が９：１〜１：９（容量比）であることが好ましく、７：３〜２：８（容量比）であることがさらに好ましい。また、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族ケトンとの混合比が９：１〜２：８（容量比）であることが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水と多価アルコールとの混合比が５：５〜１：９（容量比）であることが好ましい。
【００２５】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００２６】
なお、上述のようにして得られた抽出液はそのままでもメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００２７】
また、パイナップルからの抽出物やキンモクセイからの抽出物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００２８】
ここで、本実施形態において用いられるパイナップルからの抽出物は、その構成成分としてグルコシルセラミドを２質量％以上含有することが好ましく、３〜２５質量％含有することがさらに好ましい。かかる含有量でグルコシルセラミドを含有することで、キンモクセイ抽出物との相乗効果がより顕著になり、より優れたメラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用を発揮することができる。
【００２９】
〔メラニン産生抑制剤，コラーゲン産生促進剤〕
以上のようにして得られるパイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物は、それぞれ単独で使用するよりも、これらを併せて使用することで相乗効果を発揮し、優れたメラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用を示す。そのため、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを併用することで、これらをメラニン産生抑制剤及びコラーゲン産生促進剤の有効成分として用いることができる。本実施形態のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品等の幅広い用途に使用することができる。
【００３０】
なお、本実施形態において、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物との含有量比は、質量換算で１：１〜１：１００であることが好ましく、１：３〜１：２０であることがさらに好ましい。また、上記パイナップルからの抽出物がグルコシルセラミドを含有する場合、当該パイナップル抽出物に含まれるグルコシルセラミドとキンモクセイからの抽出物との含有量比は、質量換算で１：１〜１：２５０であることが好ましく、１：１５〜１：１００であることがより好ましい。かかる含有量比にてパイナップル抽出物とキンモクセイ抽出物とを含有させることで、その相乗効果がより顕著になり、より優れたメラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用を発揮することができる。
【００３１】
本実施形態のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤は、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物のみからなるものでもよいし、これらの抽出物を配合・製剤化したものでもよい。
【００３２】
本実施形態のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味・矯臭剤等を用いることができる。メラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤は、他の組成物（例えば、皮膚外用剤、美容用飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００３３】
本実施形態のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤を製剤化した場合、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物の合計含有量は、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定することができる。
【００３４】
なお、本実施形態のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤は、必要に応じて、メラニン産生抑制作用又はコラーゲン産生促進作用を有する他の天然抽出物等を、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００３５】
本実施形態のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤の患者に対する投与方法としては、経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。
【００３６】
また、本実施形態のメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００３７】
本実施形態のメラニン産生抑制剤は、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物が有するメラニン産生抑制作用を通じて、シミ、ソバカス等を予防、治療又は改善することができる。また、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、メラニンの異常産生に起因する疾患の予防・治療用医薬品又は医薬部外品の有効成分として用いることができる。ただし、本実施形態のメラニン産生抑制剤は、これらの用途以外にもメラニン産生抑制作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３８】
また、本実施形態のコラーゲン産生促進剤は、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物が有するＩ型コラーゲン産生促進作用を通じて、しわ、たるみ等の皮膚の老化症状を予防又は改善することができる。また、本実施形態のコラーゲン産生促進剤は、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物が有するコラーゲン産生促進作用を通じて、骨粗鬆症等のコラーゲン産生の低下に起因する疾患の予防、治療又は改善；損傷した腱や靱帯の再生促進；創傷又は熱傷の治癒の促進；等の用途に用いることができる。ただし、本実施形態のＩ型コラーゲン産生促進剤は、これらの用途以外にもＩ型コラーゲン産生促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３９】
また、本実施形態のメラニン産生抑制剤及びコラーゲン産生促進剤は、優れたメラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用を有するため、例えば、皮膚外用剤に配合するのに好適である。この場合に、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物をそれぞれそのまま配合してもよく、またこれらの混合物をそのまま配合してもよく、さらにはパイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物を配合・製剤化したメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤を配合してもよい。
【００４０】
ここで、皮膚外用剤としては、その区分に制限はなく、後述する皮膚化粧料のほか、経皮的に使用される医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００４１】
また、本実施形態のメラニン産生抑制剤及びコラーゲン産生促進剤は、優れたメラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用を有するので、メラニンの産生機構に関連する研究やＩ型コラーゲンの産生機構に関連する研究のための試薬としても好適に利用することができる。
【００４２】
〔皮膚化粧料〕
パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物は、優れたメラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用を有しているため、皮膚化粧料に配合するのに好適である。この場合、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物をそれぞれそのまま配合してもよく、またこれらの混合物をそのまま配合してもよく、さらにはパイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物を配合・製剤化したメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤を配合してもよい。パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物、若しくはこれらの混合物、上記メラニン産生抑制剤、又は上記コラーゲン産生促進剤を皮膚化粧料に配合することによって、皮膚化粧料にメラニン産生抑制作用又はコラーゲン産生促進作用を付与することができる。
【００４３】
パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物、若しくはこれらの混合物、上記メラニン産生抑制剤、又は上記コラーゲン産生促進剤を配合し得る皮膚化粧料としては、特に限定されるものではなく、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ファンデーション、リップクリーム、入浴剤、ヘアートニック、ヘアーローション、石鹸、ボディシャンプー等が挙げられる。
【００４４】
パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物又はこれらの混合物を皮膚化粧料に配合する場合、その配合量は、皮膚化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物の合計量で換算した場合の好適な配合率は、約０．０００１〜１０質量％であり、特に好適な配合率は約０．００１〜１質量％である。
【００４５】
本実施形態の皮膚化粧料は、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物が有するメラニン産生抑制作用又はコラーゲン産生促進作用を妨げない限り、通常の皮膚化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された他の有効成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた効果をもたらすことがある。
【００４６】
本実施形態の皮膚化粧料は、メラニン産生抑制作用又はコラーゲン産生促進作用を通じて、シミ、ソバカス等の予防、治療又は改善；メラニンの異常産生に起因する疾患の予防・治療；しわ、たるみ等の皮膚の老化症状の予防又は改善；骨粗鬆症等のコラーゲン産生の低下に起因する疾患の予防、治療又は改善；損傷した腱や靱帯の再生促進；創傷又は熱傷の治癒の促進；等の用途に用いることができる。
【００４７】
〔飲食品〕
パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物は、優れたメラニン産生抑制作用及びコラーゲン産生促進作用を有しているため、飲食品に配合するのに好適である。この場合、この場合、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物をそれぞれそのまま配合してもよく、またこれらの混合物をそのまま配合してもよく、さらにはパイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物を配合・製剤化したメラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤を配合してもよい。
【００４８】
ここで、飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品等の区分に制限されるものではない。したがって、本実施形態における「飲食品」は、経口的に摂取される一般食品、健康食品、保健機能食品、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００４９】
パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物、若しくはこれらの混合物、又はパイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物を配合・製剤化したメラニン産生抑制剤若しくはコラーゲン産生促進剤を飲食品に配合する場合、それらにおける有効成分の配合量は、使用目的、症状、性別等を考慮して適宜変更することができるが、添加対象となる飲食品の一般的な摂取量を考慮して、成人１日あたりの抽出物摂取量が、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物の合計で約１〜１０００ｍｇになるようにするのが好ましい。なお、添加対象飲食品が顆粒状、錠剤状又はカプセル状の飲食品の場合、メラニン産生抑制剤又はコラーゲン産生促進剤の添加量は、添加対象飲食品に対して通常０．１〜１００質量％であり、好ましくは５〜１００質量％である。
【００５０】
本実施形態の飲食品は、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物又はこれらの混合物を、その活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物又はこれらの混合物を主成分とする栄養補助食品であってもよい。
【００５１】
本実施形態の飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類などの任意の助剤を添加して任意の形状の飲食品にすることができる。
【００５２】
パイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物又はこれらの混合物を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物；その他種々の形態の健康・栄養補助食品；錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などが挙げられ、これらの飲食品にパイナップルからの抽出物及びキンモクセイからの抽出物又はこれらの混合物を配合するときに、通常用いられる補助的な原料や添加物を併用することができる。
【００５３】
なお、本実施形態のメラニン産生抑制剤、コラーゲン産生促進剤、皮膚化粧料及び飲食品は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば，マウス，ラット，ハムスター，イヌ，ネコ，ウシ，ブタ，サル等）に対して適用することもできる。
【実施例】
【００５４】
以下、試験例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。なお、下記試験例においては、パイナップル抽出物としてパイナップル果実抽出物Ａ（丸善製薬社製，セラミド２０％含有，試料１）又はパイナップル果実抽出物Ｂ（丸善製薬社製，セラミド４％含有，試料２）を、またキンモクセイからの抽出物として桂花抽出物（丸善製薬社製，試料３）を、それぞれ使用した。
【００５５】
〔試験例１〕Ｂ１６メラノーマ細胞に対するメラニン産生抑制作用試験
上記抽出物（試料１及び３）について、以下のようにしてＢ１６メラノーマ細胞に対するメラニン産生抑制作用を試験した。
【００５６】
Ｂ１６メラノーマ細胞を、１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２４．０×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように１０％ＦＢＳ及び１ｍｍｏｌ／Ｌテオフィリン含有ダルベッコＭＥＭ培地で希釈した後、４８ウェルプレートに１ウェルあたり３００μＬずつ播種し、６時間培養した。
【００５７】
培養終了後、被験試料（試料１及び／又は試料３，試料濃度は下記表１を参照）を添加した１０％ＦＢＳ及び１ｍｍｏｌ／Ｌテオフィリン含有ダルベッコＭＥＭ培地又は試料無添加の１０％ＦＢＳ及び１ｍｍｏｌ／Ｌテオフィリン含有ダルベッコＭＥＭ培地を各ウェルに３００μＬ添加し、４日間培養した。培養終了後、各ウェルから培地を取り除き、２ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨ溶液２００μＬを添加して超音波破砕機により細胞を破壊し、波長４７５ｎｍにおける吸光度を測定してメラニン産生量とした。
【００５８】
また、細胞生存率を測定するために、上記と同様にして培養した後、培地を除去し４００μＬのＰＢＳ緩衝液で洗浄して、終濃度０．０５ｍｇ／ｍＬで１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭに溶解したニュートラルレッドを各ウェルに２００μＬ添加し、２．５時間培養した。培養後、ニュートラルレッド溶液を除去し、エタノール・酢酸溶液（エタノール：酢酸：水＝５０：１：４９）を各ウェルに２００μＬ添加し、色素を抽出した。抽出後、波長５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。得られた結果から、下記式により細胞生存率により補正したメラニン産生抑制率（％）を算出した。
【００５９】
メラニン産生抑制率(％)＝{１−（Ｂ／Ｄ）／（Ａ／Ｃ）}×１００
上記式において、Ａは「試料無添加での４７５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｂは「被験試料添加での４７５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｃは「試料無添加での５４０ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｄは「被験試料添加での５４０ｎｍにおける吸光度」を表す。
結果を表１に示す。
【００６０】
【表１】
2014114235.tif 000002
【００６１】
表１に示すように、試料１又は試料３は、いずれも単独でメラニンの産生を抑制することができるが、試料１と試料３とを併せて処理することで、相乗的にメラニンの産生を抑制した。したがって、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを併用することで、非常に優れたメラニン産生抑制作用が発揮されるものと認められた。
【００６２】
〔試験例２〕Ｉ型コラーゲン産生促進作用試験
上記抽出物（試料２及び３）について、以下のようにしてＩ型コラーゲン産生促進作用を試験した。
【００６３】
ヒト正常線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を、１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１．６×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように上記培地で希釈した後、９６ウェルマイクロプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。
【００６４】
培養終了後、培地を抜き、被験試料（試料２及び／又は試料３，試料濃度は下記表２を参照）を添加した０．２５％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭ培地又は試料無添加の０．２５％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭ培地を各ウェルに１５０μＬずつ添加し、３日間培養した。培養後、各ウェルの培地中のＩ型コラーゲン量をＥＬＩＳＡ法により測定した。測定結果から、下記式によりＩ型コラーゲン産生促進率（％）を算出した。
【００６５】
Ｉ型コラーゲン産生促進率(％)＝Ａ／Ｂ×１００
上記式において、Ａは「被験試料添加でのＩ型コラーゲン量」を表し、Ｂは「試料無添加でのＩ型コラーゲン量」を表す。
結果を表２に示す。
【００６６】
【表２】
2014114235.tif 000003
【００６７】
表２に示すように、試料２又は試料３は、いずれも単独ではＩ型コラーゲンの産生を促進することができないにもかかわらず、試料２と試料３とを併せて処理することで、Ｉ型コラーゲンの産生を促進した。したがって、パイナップルからの抽出物とキンモクセイからの抽出物とを併用することで、非常に優れたＩ型コラーゲン産生促進作用が発揮されるものと認められた。
【００６８】
〔配合例１〕
下記組成に従い、乳液を常法により製造した。
パイナップル果実抽出物Ａ                                  ０．２５ｇ
桂花抽出物                                                ２．０ｇ
ホホバオイル                                              ４．０ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ３．０ｇ
アルブチン                                                ３．０ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.）                ２．５ｇ
オリーブオイル                                            ２．０ｇ
スクワラン                                                ２．０ｇ
セタノール                                                ２．０ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ２．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）          ２．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  ０．１５ｇ
グリチルリチン酸ステアリル                                ０．１０ｇ
黄杞エキス                                                ０．１０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１０ｇ
イチョウ葉エキス                                          ０．１０ｇ
コンキオリン                                              ０．１０ｇ
オウバクエキス                                            ０．１０ｇ
カミツレエキス                                            ０．１０ｇ
香料                                                      ０．０５ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００６９】
〔配合例２〕
下記組成のクリームを常法により製造した。
パイナップル果実抽出物Ｂ                                  ０．３ｇ
桂花抽出物                                                １．０ｇ
クジンエキス                                              ０．１ｇ
オウゴンエキス                                            ０．１ｇ
流動パラフィン                                            ５．０ｇ
サラシミツロウ                                            ４．０ｇ
スクワラン                                              １０．０ｇ
セタノール                                                ３．０ｇ
ラノリン                                                  ２．０ｇ
ステアリン酸                                              １．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）          １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ３．０ｇ
油溶性甘草エキス                                          ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ６．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  １．５ｇ
香料                                                      ０．１ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００７０】
〔配合例３〕
下記組成の美容液を常法により製造した。
パイナップル果実抽出物Ａ                                  ０．１ｇ
桂花抽出物                                                ２．０ｇ
カミツレエキス                                            ０．１ｇ
ニンジンエキス                                            ０．１ｇ
キサンタンガム                                            ０．３ｇ
ヒドロキシエチルセルロース                                ０．１ｇ
カルボキシビニルポリマー                                  ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ４．０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１ｇ
グリセリン                                                ２．０ｇ
水酸化カリウム                                            ０．２５ｇ
香料                                                      ０．０１ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                        ０．１５ｇ
エタノール                                                ２．０ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００７１】
〔配合例４〕
常法により、以下の組成を有する錠剤を製造した。
パイナップル果実抽出物Ａ                                  ３．０ｍｇ
桂花抽出物                                              １２．５ｍｇ
ドロマイト（カルシウム２０％、マグネシウム１０％含有）  ７８．４ｍｇ
カゼインホスホペプチド                                  １６．７ｍｇ
ビタミンＣ                                              ３３．４ｍｇ
マルチトール                                          １３１．３ｍｇ
コラーゲン                                              １２．７ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル                                    １２．０ｍｇ
【００７２】
〔配合例５〕
常法により、以下の組成を有する経口液状製剤を製造した。
＜１アンプル（１本１００ｍＬ）中の組成＞
パイナップル果実抽出物Ａ                                  ０．５質量％
桂花抽出物                                                ２．０質量％
ソルビット                                              １２．０質量％
安息香酸ナトリウム                                        ０．１質量％
香料                                                      １．０質量％
硫酸カルシウム                                            ０．５質量％
精製水                                          残部（１００質量％）
【産業上の利用可能性】
【００７３】
本発明のメラニン産生抑制剤は、皮膚の色素沈着等の予防・改善に大きく貢献できる。また、本発明のコラーゲン産生促進剤は、しわ、たるみ等の皮膚の老化の予防又は改善に大きく貢献できる。