(57)【要約】【課題】アーティチョークから水溶性の有効成分を効率よく抽出しつつ、脂溶性成分であるリノール酸誘導体をも効率よく抽出しうる手段を提供する。【解決手段】アーティチョークよりアーティチョーク由来抽出物を製造する際、アーティチョークを植物組織崩壊酵素で処理した後に、ｐＨ７〜１２の水を抽出溶媒として用いて４０〜１２１℃にて抽出を行う。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アーティチョークよりアーティチョーク由来抽出物を製造する方法であって、
アーティチョークを植物組織崩壊酵素で処理した後に、ｐＨ７〜１２の水を抽出溶媒として用いて４０〜１２１℃にて抽出を行う工程を含む、アーティチョーク由来抽出物の製造方法。
【請求項２】
前記植物組織崩壊酵素が、セルラーゼ、ヘミセルラーゼおよびペクチナーゼからなる群から選択される１種または２種以上である、請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の製造方法で得られうる、アーティチョーク由来抽出物。
【請求項４】
リノール酸誘導体を乾固物１ｇあたり１０μｇ以上含む、請求項３に記載のアーティチョーク由来抽出物。
【請求項５】
請求項３または４に記載のアーティチョーク由来抽出物を含有する食品。
【請求項６】
請求項３または４に記載のアーティチョーク由来抽出物を含有する医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アーティチョーク由来抽出物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
キク科チョウセンアザミ属の多年草であるアーティチョーク（学名：Cynara scolymus L.（和名：チョウセンアザミ））はヨーロッパやアメリカを中心に栽培されている野菜であり、その水抽出物には抗アレルギー作用など多くの薬理作用を示すことが知られている（例えば、特許文献１を参照）。
【０００３】
また、これまでにアーティチョークに含まれる水溶性物質のシナロサイドがコレステロールの生合成を阻害する効果を有する化合物として報告されている（例えば、非特許文献１を参照）。その他、フラボノイド配糖体であるスコリモサイドやルテオリン−７−Ｏ−ルチノサイド、多糖類のイヌリン等、アーティチョークには数多くの有用な水溶性物質が含まれることが明らかとなっている（例えば、特許文献２および非特許文献２を参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００３−２８６１８４号公報
【特許文献２】特表２００８−５３５９８３号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Rolf Gebhardt, J Pharmacol Exp Ther, Vol. 286, No. 3(1998) pp. 1122-1128
【非特許文献２】Negro D et al., J Food Sci, Vol. 77, No.2(2012) pp. 244-252
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ところで、近年、本発明者らは、アーティチョーク由来の脂溶性成分であるリノール酸誘導体に細胞賦活作用や抗酸化ストレス作用、細胞増殖抑制作用などがあることを見出し、特許出願を行なっている（特願２０１２−０６４３０１、特願２０１２−０６４２９８および特願２０１３−６０７６３）。
【０００７】
ここで、リノール酸誘導体は脂溶性成分である。そして、本来であれば、脂溶性成分であるリノール酸誘導体を効率よく抽出する方法としてはヘキサンや酢酸エチルなどの有機溶媒を抽出溶媒として用いる方法が望ましい。しかしながら、抽出物の食品への利用を考えると、抽出溶媒として有機溶媒を用いることはできない。また、エタノールを抽出溶媒として用いる抽出方法も考えられるが、設備やコストの観点からは、水を抽出溶媒として用いることが極めて好ましい。さらには、エタノールまたはエタノール水溶液を用いて抽出を行うと、アーティチョークに含まれる食物繊維や上記水溶性の有効成分の抽出効率が低下することからも、本来アーティチョークに含まれる様々な有効成分を含有する食品用のエキスを製造するには、抽出溶媒として水を用いることが好ましいといえる。
【０００８】
しかしながら、抽出溶媒として水を用いて、アーティチョークから水溶性の有効成分を効率よく抽出し、かつ、脂溶性成分であるリノール酸誘導体をも効率よく抽出することが可能な方法は従来知られていない。
【０００９】
そこで本発明は、アーティチョークから水溶性の有効成分を効率よく抽出しつつ、脂溶性成分であるリノール酸誘導体をも効率よく抽出しうる手段を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上述したような従来技術の現状に鑑み、鋭意検討を行なった。その過程で、驚くべきことに、アーティチョークを植物組織崩壊酵素で処理した後に、所定のｐＨの水を抽出溶媒として用い、所定温度条件下で抽出を行うことで、上記課題が解決されうることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【００１１】
すなわち、本発明の一形態によれば、アーティチョークよりアーティチョーク由来抽出物を製造する方法（アーティチョーク由来抽出物の製造方法）が提供される。そして、当該製造方法は、アーティチョークを植物組織崩壊酵素で処理した後に、ｐＨ７〜１２の水を抽出溶媒として用いて４０〜１２１℃にて抽出を行う工程を含む点に特徴を有する。
【００１２】
本発明の他の形態によれば、上記の製造方法で得られうるアーティチョーク由来抽出物が提供される。
【００１３】
また、本発明のさらに他の形態によれば、上記のアーティチョーク由来抽出物を含有する食品や医薬が提供される。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、アーティチョークから水溶性の有効成分を効率よく抽出しつつ、脂溶性成分であるリノール酸誘導体をも効率よく抽出しうる手段が提供される。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明の一形態によれば、アーティチョークよりアーティチョーク由来抽出物を製造する方法であって、アーティチョークを植物組織崩壊酵素で処理した後に、ｐＨ７〜１２の水を抽出溶媒として用いて４０〜１２１℃にて抽出を行う工程を含む、アーティチョーク由来抽出物の製造方法が提供される。
【００１６】
アーティチョーク（Cynara scolymus）は、別名チョウセンアザミともいわれる薬用ハーブの１種であり、生物学的分類でいえばキク科（Asteraceae）チョウセンアザミ属（Cynara）に属するものである。アーティチョークは、アジア、ヨーロッパ、北アフリカおよび北南米各地で広く商業生産されているが、これらの中では、特にベトナム産のものが好ましい。品種に関しても特に制限はなく、グリーングローブ種、バイオレット種、インペリアルスター種、カールドン種などが例示され、いずれも好ましく使用することができる。また、アーティチョークの使用可能な部位についても特に限定されることはなく、茎、葉、花部等の部位からなる群から選択される１種または２種以上が挙げられる。すなわち、一部位を単独で用いてもよく、また、複数の部位を混合して用いてもよい。さらに、アーティチョークは、天然のものでも人工栽培品でもよく、また、生、乾燥、冷凍、凍結乾燥したもののいずれであっても使用できるが、乾燥したものが好ましく使用される。
【００１７】
本発明者らは、抽出溶媒としてｐＨ７〜１２の水を抽出溶媒として用いて４０〜１２１℃にて抽出を行うことにより、有機溶媒を用いなくとも脂溶性成分であるリノール酸誘導体を豊富に含むアーティチョーク由来抽出物が製造されうることを見出した。なお、上述した本願出願人による一連の特許出願において明らかとなっているように、本発明において、得られるアーティチョーク由来抽出物に含まれるリノール酸誘導体としては、下記の化学式１〜４：
【００１８】
【化１】
2014195425.tif 000002
【００１９】
で表される化合物が例示される。以下、本発明に係るアーティチョーク由来抽出物の製造方法について、順を追って詳細に説明する。
【００２０】
［前処理］
原料として使用するアーティチョークは、そのままでも使用することができるが、水洗することが好ましい。水洗することによりアーティチョークに付着した不純物を取り除くことができ、抽出物の純度を向上させることができる。このような場合には、アーティチョークの水洗後、アーティチョークを乾燥してもよい。
【００２１】
本工程では例えば、アーティチョークに、アーティチョークの質量に対して０．５〜５０倍の質量の水を加えて破砕し、アーティチョーク破砕物を得る。上記水の添加量は、上記範囲であれば特に制限されないが、アーティチョークの状態によって適宜調節されることが好ましい。例えば、アーティチョークを生や冷凍状態で使用する場合には、アーティチョークは水をある程度含んでいる。このため、このような場合には、水は比較的少量添加すれば十分であり、具体的には、水を、アーティチョークの質量に対して、０．５〜１０倍の質量で、より好ましくは１〜５倍の質量で、添加することが好ましい。また、アーティチョークを乾燥物や凍結乾燥物の形態で使用する場合には、アーティチョークは水を少量しか含んでいないあるいはほとんど含んでいない。このため、このような場合には、水を、生や冷凍状態で使用する場合に比して、比較的多量添加する必要があり、具体的には、水を、アーティチョークの質量に対して、５〜５０倍の質量で、より好ましくは１０〜３０倍の質量で、添加することが好ましい。このような範囲であれば、アーティチョークを効率よく破砕できる。なお、本明細書において、「アーティチョークの質量に対して」とは、原料であるアーティチョークの質量を基準とすることを意味する。
【００２２】
また、本明細書で使用される水は、特に制限されず、水道水、蒸留水、純水、イオン交換水など、いずれを使用してもよい。
【００２３】
また、本工程の破砕は、特に制限されず、公知の方法によって行われる。例えば、ブレンダー、石臼式破砕機、ローラーミル、カッターミル、ボールミル、ジェットミル、ハンマーミル等の破砕機を使用できる。または、アーティチョークを予め上記したような粉砕機を用いて機械的処理して、アーティチョークの粗片を得た後、当該粗片をさらに超音波による破砕を行うことによって、アーティチョーク破砕物を得てもよい。後者の場合に機械的処理されるアーティチョークは、１０μｍ以下程度の大きさになるように破砕されることが好ましい。超音波破砕条件は、アーティチョークが適度な大きさになるような条件であれば特に制限されないが、５〜２０分間、処理することが好ましい。本工程で得られるアーティチョーク破砕物の大きさは、特に制限されない。好ましくは、アーティチョーク破砕物の大きさが、０．００１〜２ｍｍ、より好ましくは０．００５〜１ｍｍ程度である。このような大きさであれば、後述する植物組織崩壊酵素を用いた酵素処理が効率よく行われ、さらに続く熱水抽出操作によるリノール酸誘導体等の脂溶性成分の抽出効率の向上が期待できる。
【００２４】
上記操作において、加熱処理や酵素処理等の効率の向上を目的として、破砕後に、必要であれば、さらに水を添加してもよい。この際、水の添加量は、特に制限されず、所望の効果によって適宜選択される。好ましくは、本工程において、アーティチョークに添加される水の全量が、アーティチョークの質量に対して上記範囲となるような量である。
【００２５】
次に、得られたアーティチョーク破砕物を加熱（殺菌）することが好ましい。アーティチョークには、多数の微生物が付着しているため、この段階で殺菌処理を行うことで、次工程におけるこれら微生物の増殖が抑制され、微生物そのものあるいは微生物からの分泌物が次工程における酵素処理を阻害するのを防ぐことができる。また、次工程以降の工程において、繁殖した微生物が抽出成分を資化する、もしくは食品としては好ましくない毒素等を分泌する可能性もあることから、このような加熱（殺菌）操作により、アーティチョークに付着している細菌の繁殖を以降の製造工程において防ぐことができる。また、アーティチョーク破砕物の組織（例えば、細胞壁）をさらに部分的に熱分解することもできるため、得られるアーティチョーク破砕加熱物は、次工程で酵素処理を受けやすくなり、その結果、熱水抽出工程での抽出効率を上げることができる。
【００２６】
アーティチョーク破砕物の加熱条件は、上記したような効果が達成できるような条件であれば、特に制限されない。例えば、アーティチョーク破砕物を、８０〜１２１℃で５〜６０分間、加熱することが好ましく、８０〜１２１℃で１０〜３０分間、加熱することがより好ましい。
【００２７】
［植物組織崩壊酵素による処理］
本発明のアーティチョーク由来抽出物の製造方法では、抽出溶媒を用いた抽出工程の前に、アーティチョークを植物組織崩壊酵素で処理する。植物組織崩壊酵素の具体的な構成について特に制限はなく、アーティチョークの組織を崩壊させることが可能な酵素であればよい。植物組織崩壊酵素としては、セルラーゼ、ヘミセルラーゼおよびペクチナーゼが例示される。
【００２８】
ここで、セルラーゼやヘミセルラーゼは、セルラーゼ活性やヘミセルラーゼ活性を有するいずれの源由来であってもよく、特に制限されない。例えば、Aspergillus niger、Trichoderma reesei、Trichoderma viride、Trichoderma longibrachiatum、Streptomyces lividans、Bacillus subtilis、Pyrococcus horikoshii、Clostridium thermocellum、Humicola、Pyrococcus horikoshii等の細菌由来；アワビ、エゾボラ、ヒメエゾボラ、エゾバイ、サザエ、タマキビ等の巻き貝、二枚貝等の貝由来；マツノザイセンチュウ等の線虫由来；ヤマトシロアリ（Reticulitermes speratus）、タカサゴシロアリ（Nasutitermes takasagoensis）、イエシロアリ（Coptotermes formosanus）および豪州産イエシロアリ近縁種（C. acinaciformis）等のシロアリ由来などが挙げられる。また、セルラーゼやヘミセルラーゼは、上記適当な源から公知の方法によって製造してもよいが、市販品を使用してもよい。セルラーゼの市販品としては、例えば、セルラーゼ Ａ「アマノ」３、セルラーゼ Ｔ「アマノ」４（いずれも天野エンザイム（株）製）；スペザイム ＣＰ、ＧＣ２２０、マルチフェクト ＣＬ、プリマファースト、インディエイジ、インディエイジ ニュートラ、アクセレラーゼ、オプチマッシュ、マルチフェクトＣＸ１０Ｌ、オプチマーゼＣＸ４０Ｌ、ピュラダックス ＨＡ（いずれもジェネンコア協和（株）製）；ＧＯＤＯ−ＴＣＦ、ＧＯＤＯ−ＴＣＬ、ＧＯＤＯ ＴＣＤ−Ｈ３（いずれも合同酒精（株）製）；ソフィターゲン・Ｃ−１（タイショーテクノス（株）製）；超耐熱性セルラーゼ（（株）耐熱性酵素研究所製）；セルライザー、セルラーゼ ＸＬ−５２２、セルチーム Ｃ、セルライザー ＨＴ コンク、セルラーゼ ＳＳ、セルラーゼ ＸＬ−５３１（いずれもナガセケムテックス（株）製）；ベイクザイム ＸＥ（日本シイベルヘグナー（株）製）；セルソフト、デニマックス、ケアザイム、セルザイム、セルクラスト（いずれもノボザイムズジャパン（株）製）；セルロシン ＡＣ４０、セルロシン ＡＬ、セルロシンＴ３、セルロシンＴＦ（Ａ飼料）（いずれもエイチビイアイ（株）製）；セルラーゼ ”オノズカ” ３Ｓ、セルラーゼＹ−ＮＣ、パンセラーゼ ｂｒ（いずれもヤクルト薬品工業（株）製）；ＣｅｌｌＳＥＢ Ｔｓ（（株）樋口商会製）；スミチームＡＣ、スミチームＣ（いずれも新日本化学工業（株）製）；スクラーゼ Ｃ（三菱化学フーズ（株）製）；エンチロンＣＭ、エンチロンＭＣＨ、バイオヒット、バイオスター、フェドラーゼ（いずれも洛東化成工業（株）製）などが挙げられる。また、ヘミセルラーゼの市販品としては、例えば、ヘミセルラーゼ 「アマノ」９０（天野エンザイム（株）製）；ベイクザイム ＨＳ２０００、ベイクザイム ｌ Ｃｏｎｃ（いずれも日本シイベルヘグナー（株）製）；エンチロンＬＱ（洛東化成工業（株）製）；スクラーゼ Ｘ（三菱化学フーズ（株）製）などが挙げられる。
【００２９】
また、ペクチナーゼとしては、スクラーゼ Ｎやスクラーゼ Ａ（いずれも三菱化学フーズ（株）製）が例示されうる。
【００３０】
なお、上記セルラーゼ、ヘミセルラーゼおよびペクチナーゼは、上記に限定されるものではない。また、これらの植物組織崩壊酵素は、それぞれ、単独で使用されてももしくは２種以上を組み合わせて使用されてもよく、またはセルラーゼ、ヘミセルラーゼおよびペクチナーゼを適宜組み合わせて使用してもよい。
【００３１】
アーティチョークを植物組織崩壊酵素で処理する際の酵素の添加量は、抽出に供されたアーティチョークを十分酵素処理できる量であれば特に制限されず、また、使用する酵素の種類などによって適宜選択できる。例えば、酵素の添加量は、原料であるアーティチョーク１００質量％に対して、０．０１〜１０質量％であることが好ましく、０．０２〜５質量％であることがより好ましい。このような範囲であれば、アーティチョークを十分酵素処理できる。なお、酵素処理中は、アーティチョークと酵素とが均一にかつ十分混合できるように、攪拌機等で混合することが好ましい。
【００３２】
酵素処理条件もまた、アーティチョークを十分酵素処理できる条件であれば特に制限されない。例えば、酵素処理温度は、２０〜６０℃、より好ましくは２５〜５５℃の範囲が好ましく、酵素処理時間は、０．１〜１６時間、より好ましくは０．５〜８時間の範囲が好ましい。なお、２種以上の酵素を併用する場合には、同時に添加して酵素処理を行っても、あるいは各酵素を単独で使用して酵素処理を繰り返し行ってもよい。このうち、各酵素の至適条件が異なる場合には、後者の処理を行うことが好ましい。なお、酵素処理を繰り返し行う場合には、各酵素処理間にも酵素失活処理を行うことが好ましい。
【００３３】
［抽出工程］
本発明に係る製造方法では、上述した植物組織崩壊酵素による処理の後に、抽出溶媒を用いた抽出工程を行う。抽出溶媒は、有機溶剤を実質的に含まない中性〜アルカリ性の水性溶媒であれば特に限定はなく、例えば、無機塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどのアルカリ金属の水酸化物；水酸化マグネシウム、水酸化バリウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物；炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどのアルカリ金属の炭酸塩；炭酸マグネシウム、炭酸バリウムなどのアルカリ土類金属の炭酸塩；炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどのアルカリ金属の炭酸水素塩；炭酸アンモニウム；アンモニアなど）を含むアルカリ性水溶液、有機塩基（例えば、酢酸ナトリウム、プロピオン酸カリウムなどのアルカリ金属の有機酸塩；ギ酸マグネシウム、酢酸マグネシウムなどのアルカリ土類金属の有機酸塩；トリメチルアミン、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、プロピルアミン、ブチルアミン、ピペリジンなどのアミン類；ピリジンなどの含窒素複素環化合物など）を含むアルカリ性水溶液、および陰イオン交換樹脂を含むアルカリ性の懸濁液を用いることができ、そのうち、炭酸ナトリウム水溶液、水酸化ナトリウム水溶液、または陰イオン交換樹脂懸濁液が好適に用いられうる。
【００３４】
抽出溶媒中の無機塩基、有機塩基または陰イオン交換樹脂の含有量は、特に制限はなく、抽出溶媒のｐＨが所定の範囲内の値になるように調整することができる。
【００３５】
ここで、抽出溶媒のｐＨは中性〜アルカリ性であり、具体的には７〜１２であれば特に限定されないが、好ましくは７〜１１であり、より好ましくは７．５〜１０である。
【００３６】
抽出溶媒での処理温度は、リノール酸誘導体を十分な量抽出できるという観点から、４０〜１２１℃の抽出温度で処理することが必要である。短時間でより多くのリノール酸誘導体を抽出することができるという点で、抽出温度は好ましくは４０〜１００℃である。
【００３７】
抽出溶媒での処理時間は、処理温度により異なるが、例えば４０〜１００℃の処理温度の場合は１〜１６時間が好適であり、より好ましくは１〜８時間が好適である。
【００３８】
上述した製造方法によって得られた抽出物より、さらに抽出残渣を取り除くことにより、本発明に係るアーティチョーク由来抽出物が得られうる。抽出残渣を取り除く工程としては、遠心分離、濾過、限外濾過が例示されるが、大規模生産に適した濾過法をより好適に使用できる。濾過に際しては濾過助剤を用いる事ができ、濾過助剤としてはＣｅｌｉｔｅ＃５４５が例示される。
【００３９】
本明細書において「抽出物」とは、抽出溶媒を用いて抽出操作を行う工程により得られる物質のことをいう。また、該物質にさらに濾過、遠心分離、濃縮、限外濾過、分子ふるい、中和等の処理を施して得られる物質も本発明の抽出物に包含される。また、上記物質を公知の方法で分画することによって得られる画分や、分画操作を複数回繰り返すことによって得られる画分も、本発明の抽出物に包含される。上記の分画手段としては、抽出、分別沈殿、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー等が挙げられる。
【００４０】
本発明において、本発明の抽出物の形状は特に限定はないが、粉状、固形状、液状のいずれの形状であってもよい。粉状とする場合、特に限定はないが、原料よりアルカリ性の水性溶媒により抽出された抽出物を濃縮し、さらにデキストリン、ショ糖脂肪酸エステル、乳糖等の賦形剤を添加し、乾燥、粉砕することにより、本発明の抽出物を得ることができる。また、当該抽出物を公知の方法で造粒して得た粒状の固形物を、本発明の抽出物として使用することもできる。造粒方法としては、特に限定はないが、転動造粒、攪拌造粒、流動層造粒、気流造粒、押出し造粒、圧縮成型造粒、解砕造粒、噴射造粒または噴霧造粒等が例示される。また、液状の抽出物としては、前記抽出物の製造方法により得られた液体そのもの、その濃縮物や希釈物のほか、上述した粉状の抽出物を液体、例えば水やアルコール等に溶解して液状としたものが例示される。
【００４１】
本発明に係るアーティチョーク由来抽出物は、アーティチョーク由来の生理活性成分である上記化学式１〜４で表される化合物等のリノール酸誘導体を多く含むことを特徴とし、例えば、乾固物１ｇあたり１０μｇ以上のリノール酸誘導体を含む抽出物であり、より具体的には、乾固物１ｇあたり１００〜５００μｇのリノール酸誘導体を含む抽出物である。乾固物１ｇあたりの重量とは、液体をエバポレーター等で乾燥させた場合に得られる乾燥物の重量１ｇに占める、目的とする成分の重量のことをいう。
【００４２】
本発明に係る食品は、上記のアーティチョーク由来抽出物を含有する。本発明に係る食品は上記化学式１〜４で表される化合物のアーティチョーク由来のリノール酸誘導体を多く含むため、細胞賦活作用や抗酸化ストレス作用、細胞増殖抑制作用などを有することが期待できる。当該食品としては、例えば細胞賦活作用や抗酸化ストレス作用、細胞増殖抑制作用による所望の効果の発現のために用いられるものである旨の表示を付した健康食品（特定保健用食品）とすることもできる。
【００４３】
本発明に係る食品の製造方法に特に限定はない。たとえば、配合、調理、加工などは一般の食品のものに従えばよく、それらの製造方法により製造することができ、得られた食品に本発明に係る前記抽出物が含有されていればよい。また、本発明のアーティチョーク由来抽出物そのものを食品としたものであってもよい。
【００４４】
なお、本発明に係る食品において「含有」とは、含有、添加および／または希釈を意味する。ここで、「含有」とは食品中に本発明で使用される抽出物が含まれるという態様を、「添加」とは食品の原料に、本発明で使用される抽出物を添加するという態様を、「希釈」とは本発明で使用される抽出物に、食品の原料を添加するという態様をいうものである。
【００４５】
本発明に係る食品は、特に限定するものではないが、例えば、穀物加工品（例、小麦粉加工品、デンプン類加工品、プレミックス加工品、麺類、マカロニ類、パン類、あん類、そば類、麩、ビーフン、はるさめ、包装餅等）、油脂加工品（例、可塑性油脂、てんぷら油、サラダ油、マヨネーズ類、ドレッシング等）、大豆加工品（例、豆腐類、味噌、納豆等）、食肉加工品（例、ハム、ベーコン、プレスハム、ソーセージ等）、水産製品（例、冷凍すりみ、かまぼこ、ちくわ、はんぺん、さつま揚げ、つみれ、すじ、魚肉ハム、ソーセージ、かつお節、魚卵加工品、水産缶詰、つくだ煮等）、乳製品（例、原料乳、クリーム、ヨーグルト、バター、チーズ、練乳、粉乳、アイスクリーム等）、野菜・果実加工品（例、ペースト類、ジャム類、漬物類、果実飲料、野菜飲料、ミックス飲料等）、菓子類（例、チョコレート、ビスケット類、菓子パン類、ケーキ、餅菓子、米菓類等）、アルコール類（例、日本酒、中国酒、ワイン、ウイスキー、焼酎、ウオッカ、ブランデー、ジン、ラム酒、ビール、清涼アルコール飲料、果実酒、リキュール等）、嗜好飲料（例、緑茶、紅茶、ウーロン茶、コーヒー、健康飲料、清涼飲料、乳酸飲料等）、調味料（例、しょうゆ、ソース、酢、みりん等）、缶詰・瓶詰・袋詰食品、半乾燥または濃縮食品（例、レバーペースト、その他のスプレッド、そば・うどんの汁、濃縮スープ類等）、乾燥食品（例、即席麺類、即席カレー、インスタントコーヒー、粉末ジュース、粉末スープ、即席味噌汁、調理済食品、調理済飲料、調理済スープ等）、冷凍食品等が挙げられる。
【００４６】
本発明に係る食品は、前記抽出物が含有されるものであれば特にその形状に限定はなく、タブレット状、顆粒状、カプセル状等の形状の経口的に摂取可能な形状物も包含する。また、前記抽出物にグリセリン等を添加して、前記抽出物が濃縮された健康食品とすることもできる。
【００４７】
本発明に係る食品中の前記抽出物の含有量は特に限定はなく、その官能と活性発現の観点から適宜設定できるが、例えば食品中における前記抽出物の乾燥重量で、０．１〜１００重量％、好ましくは０．５〜９５重量％、更に好ましくは１〜９０重量％である。
【００４８】
本発明に係る医薬は、上述したアーティチョーク由来抽出物を含有する。本発明に係る医薬としては、本発明に係る上記抽出物を公知の医薬用担体と組み合わせて製剤化したものが挙げられる。
【００４９】
本発明に係る医薬は、通常、前記抽出物を薬学的に許容できる液状または固体状の担体と配合することにより製造され、所望により溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えて、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形剤や通常液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤とすることができる。また、使用前に適当な担体の添加によって液状となし得る乾燥品や、その他、外用剤とすることもできる。
【００５０】
医薬用担体は、本発明の医薬の投与形態および剤型に応じて選択することができる。固体組成物からなる経口剤とする場合は、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤等とすることができ、たとえば、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩などが担体として利用される。また経口剤の調製に当っては、更に結合剤、崩壊剤、界面活性剤、潤沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料などを配合することもできる。たとえば、錠剤または丸剤とする場合は、所望によりショ糖、ゼラチン、ハイドロキシプロピルセルロースなどの糖衣または胃溶性もしくは腸溶性物質のフィルムで被覆してもよい。液体組成物からなる経口剤とする場合は、薬理学的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤などとすることができ、たとえば、精製水、エタノールなどが担体として利用される。また、さらに所望により湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、防腐剤などを添加してもよい。なお、本発明の抽出物は経口投与によっても十分な効果を発揮することから、その投与の簡便性の観点から経口投与用の医薬とするのか好適な形態である。
【００５１】
一方、非経口剤とする場合は、常法に従い本発明の前記抽出物を希釈剤としての注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、落花生油、大豆油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどに溶解ないし懸濁させ、必要に応じ、殺菌剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤などを加えることにより調製することができる。また、固体組成物を製造し、使用前に無菌水または無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。
【００５２】
外用剤としては、経皮投与用または経粘膜（口腔内、鼻腔内）投与用の、固体、半固体状または液状の製剤が含まれる。また、座剤なども含まれる。たとえば、乳剤、ローション剤などの乳濁剤、外用チンキ剤、経粘膜投与用液剤などの液状製剤、油性軟膏、親水性軟膏などの軟膏剤、フィルム剤、テープ剤、パップ剤などの経皮投与用または経粘膜投与用の貼付剤などとすることができる。
【００５３】
以上の各種製剤は、それぞれ公知の医薬用担体などを利用して、適宜、常法により製造することができる。また、かかる製剤における抽出物の含有量は、その投与形態、投与方法などを考慮し、好ましくは後述の投与量範囲で当該抽出物を投与できるような量であれば特に限定されるものではない。本発明の医薬中の前記抽出物の含有量としては、乾燥重量で０．１〜１００重量％程度である。
【００５４】
本発明の医薬の投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的および当該医薬の投与対象である患者の年齢、体重、症状によって適宜設定され一定ではない。一般には、製剤中に含有される前記抽出物量を乾燥重量で表した場合の投与量で、例えば成人１日当り１μｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、好適には５μｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ体重、さらに好適には１０μｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重である。もちろん投与量は、種々の条件によって変動するので、上記投与量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。投与は、所望の投与量範囲内において、１日内において単回で、または数回に分けて行ってもよい。投与期間も任意である。また、本発明の医薬はそのまま経口投与するほか、任意の飲食品に添加して日常的に摂取させることもできる。
【００５５】
本発明に係るアーティチョーク由来抽出物の製造方法により得られたアーティチョーク由来抽出物を精製処理に供することで、リノール酸誘導体を精製することができる。精製の具体的な方法としては、公知の方法を用いることができ、抽出、分別沈殿、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、及びこれらの方法の組み合わせが挙げられる。カラムクロマトグラフィーとしては、高速液体クロマトグラフィーが例示される。
【実施例】
【００５６】
以下、実施例を用いて本発明の好適な実施形態についてより詳細に説明するが、本発明の技術的範囲が下記の実施例のみに限定して解釈されるべきではない。
【００５７】
≪実施例≫
乾燥させたアーティチョークをブレンダーで破砕し、得られたアーティチョーク破砕物３ｇに水３０ｍＬを加えた。その後、セルラーゼ ＸＰ−４２５（ナガセケムテックス株式会社製）およびスクラーゼ Ｎ（三菱化学フーズ株式会社製）を３ｍｇずつ加え、４０℃にて１時間撹拌した（ｐＨ未調整）。なお、撹拌直後のｐＨは５であった。続いて、１Ｎ水酸化ナトリウムを加えることによりｐＨを９に調整し、８０℃にてさらに２時間撹拌した。撹拌終了後、遠心分離することによりアーティチョークの残渣を取り除いて、水溶液の形態のアーティチョーク由来抽出物を得た。得られた抽出物中の成分を定量するために、分液ロートにリノール酸誘導体を含む上澄み液を移した後、クロロホルム：メタノール＝２：１溶液を加えて分液し、水層および有機溶媒層をそれぞれ回収した。各抽出層をエバポレーターで減圧乾燥させて、濃縮物を得た。
【００５８】
≪比較例１≫
乾燥させたアーティチョークをブレンダーで破砕し、得られたアーティチョーク破砕物３ｇに水３０ｍＬを加え、８０℃にて３時間撹拌した（ｐＨ未調整）。なお、撹拌直後のｐＨは５であった。撹拌終了後、遠心分離することによりアーティチョークの残渣を取り除いて、水溶液の形態のアーティチョーク由来抽出物を得た。得られた抽出物中の成分を定量するために、分液ロートにリノール酸誘導体を含む上澄み液を移した後、クロロホルム：メタノール＝２：１溶液を加えて分液し、水層および有機溶媒層をそれぞれ回収した。各抽出層をエバポレーターで減圧乾燥させて、濃縮物を得た。
【００５９】
≪比較例２≫
乾燥させたアーティチョークをブレンダーで破砕し、得られたアーティチョーク破砕物３ｇにエタノール３０ｍＬを加え、８０℃にて還流条件下で３時間撹拌した。撹拌終了後、遠心分離することによりアーティチョークの残渣を取り除いて、溶液の形態のアーティチョーク由来抽出物を得た。得られた抽出物中の成分を定量するために、得られた抽出物の上澄み液をエバポレーターで減圧乾燥させて、濃縮物を得た。
【００６０】
≪評価≫
以下の手法により、上述した実施例および比較例のそれぞれについて、得られた抽出物中の水溶性有効成分およびリノール酸誘導体の含有量を測定した。結果を下記の表１に示す。
【００６１】
［水溶性有効成分の含有量の測定方法］
水層由来の濃縮物の重量を精密天秤で測定し、水溶性有効成分の含有量とした。
【００６２】
［リノール酸誘導体の含有量の測定方法］
有機溶媒層由来の濃縮物またはエタノール抽出物由来の濃縮物に０．５ｍＬのアセトニトリル：メタノール＝５：１溶液を加え、十分に撹拌した後、０．４５μＬ（ＡＤＶＡＮＴＥＣ  Ｄｅｓｍｉｃ２５−ｃｓ）のフィルターを通し、下記条件のＨＰＬＣで分析を行った。
【００６３】
分析条件は、カラムとして東ソー株式会社製  ＴＳＫ−ＧＥＬ  ＯＤＳ−８０ＴＳ（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ）を用い、溶離液は、Ａ液には０．１％  ギ酸水溶液、Ｂ液にはアセトニトリルを用い、流速は１．０ｍＬ／ｍｉｎで、Ａ：Ｂ＝３０：７０でイソクラティック溶出を行った。カラム温度は４０℃、リノール酸誘導体の検出は２７８ｎｍの吸光度の測定により行い、リノール酸誘導体の含有量とした。
【００６４】
【表１】
2014195425.tif 000003
【００６５】
表１に示す結果から、本発明に係る抽出方法を採用した実施例では、抽出工程における抽出溶媒として有機溶媒を用いないくとも、アーティチョークから得られる水溶性成分の収量を十分に確保しつつ、脂溶性成分であるリノール酸誘導体をも効率よく抽出することができることがわかる。