(57)【要約】【課題】セラミドの産生を促進する作用を有する組成物であって、日常的に使用でき、安定かつ安全な組成物を開発する。【解決手段】本発明は、Ｄ−アラニン、その誘導体及び／又は塩からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を有効成分として含む、セラミド産生促進用組成物を提供する。本発明のセラミド産生促進用組成物は皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善するために用いられる場合がある。前記皮膚状態の悪化は、肌あれ、乾燥肌、アトピー性皮膚炎、乾癬、魚鱗癬及び乾皮症の場合がある。前記組成物は、医薬品、皮膚外用剤及び／又は食品の場合がある。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｄ−アラニン、その誘導体及び／又は塩からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を有効成分として含むことを特徴とする、セラミド産生促進用組成物。
【請求項２】
皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善するために用いられることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記皮膚状態の悪化は、肌あれ、乾燥肌、アトピー性皮膚炎、乾癬、魚鱗癬及び乾皮症からなるグループから選択されることを特徴とする、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
医薬品として用いられることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項５】
皮膚外用剤として用いられることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項６】
食品として用いられることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１つに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｄ−アラニン、その誘導体及び／又は塩からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を有効成分として含む、セラミド産生促進用組成物と、該セラミド産生促進用組成物の有効量を投与するステップを含む、皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善する方法とを提供する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚の最外層には、角質細胞と、角質細胞間を埋める角層細胞間脂質とから主に形成される層状構造の角層が存在する。角層細胞間脂質は表皮細胞から角質細胞への分化過程で生合成され、セラミド、コレステロール、遊離脂肪酸等が主成分である（非特許文献１）。角層細胞間脂質、特にセラミドが、加齢、ストレス等によって減少すると、角層が正常に形成されず、皮膚バリア機能が低下し、皮膚状態が悪化する。この皮膚状態の悪化は、キメの乱れ、体内からの水分喪失、及び／又は、炎症・感染を増大させることが知られている。また、セラミドは、アポトーシスの誘導、腫瘍の抑制（非特許文献２）、破骨細胞の骨吸収抑制（特許文献１）、歯槽骨減少の抑制（特許文献２）、毛髪の状態の改善（特許文献３）等に関係することが知られている。したがって、セラミド産生を促進することは、健康上、美容上の重大な関心事である。
【０００３】
セラミドは、水、油等への溶解度が低いため、化粧品等への配合が困難である。従来、セラミドは乳化剤等の溶媒への分散方法を用いて配合されている。しかし、低濃度のセラミドを含む組成物を調製することしかできず、該組成物は皮膚状態の悪化を抑制・改善するには不十分である。
【０００４】
また、角層細胞間脂質のセラミド含有量を増大させる化合物として、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン（特許文献４）、ニコチン酸（特許文献５）、Ｎ−アセチル−トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（特許文献６）等が知られている。しかし、前記化合物の使用には、さまざまな問題がある。例えば、Ｎ−アセチル−Ｌ−システインはグルタチオン等に速やかに代謝される。ニコチン酸は水溶性ビタミンのため、尿中に容易に排出される。Ｎ−アセチル−トランス−４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンは非天然物のため、安心して使用できない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００１−１５８７３６号公報
【特許文献２】特開２００１−１５８７３５号公報
【特許文献３】特開平１０−１５２４２１号公報
【特許文献４】特開平０７−２９１８５１号公報
【特許文献５】特開平０９−００２９５２号公報
【特許文献６】特開２０１１−０７９８５６号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｋｅｎｎｅｔｈ  Ｒ．  Ｆｅｉｎｇｏｌｄ、Ｊ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．、４８：２５３１（２００７）
【非特許文献２】Ｍｏｄｒａｋ  Ｄ．Ｅ．ら、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．  ５：２００（２００６）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって、セラミド産生を促進することができる組成物であって、日常的に使用でき、安定かつ安全な組成物を開発する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、Ｄ−アラニン、その誘導体及び／又は塩からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を有効成分として含む、セラミド産生促進用組成物を提供する。
【０００９】
本発明のセラミド産生促進用組成物は皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善するために用いられる場合がある。
【００１０】
本発明のセラミド産生促進用組成物において、前記皮膚状態の悪化は、肌あれ、乾燥肌、アトピー性皮膚炎、乾癬、魚鱗癬、及び／又は、乾皮症を含むが、これらに限定されない。
【００１１】
本発明のセラミド産生促進用組成物は医薬品として用いられる場合がある。
【００１２】
本発明のセラミド産生促進用組成物は皮膚外用剤として用いられる場合がある。
【００１３】
本発明のセラミド産生促進用組成物は食品として用いられる場合がある。
【００１４】
本発明は、Ｄ−アラニン、その誘導体及び／又は塩からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を有効成分として含むセラミド産生促進用組成物の有効量を投与するステップを含む、皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善する方法を提供する。前記皮膚状態の悪化は、肌あれ、乾燥肌、アトピー性皮膚炎、乾癬、魚鱗癬、及び／又は、乾皮症からなるグループから選択される場合がある。前記皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善する方法において、Ｄ−アラニン、その誘導体及び／又は塩からなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を有効成分として含むセラミド産生促進用組成物は、医薬品、皮膚外用剤、医薬部外品、化粧品、及び／又は、食品の場合がある。本発明のセラミド産生促進用組成物の有効量を投与するステップの投与経路は、経口、静脈内、経皮、経鼻等を含むが、これらに限定されない。本発明の組成物の調製及び送達には、Ｄ−アラニン、その誘導体及び／又は塩の体内分布を、量的、空間的及び時間的に制御できる当業者に周知の送達システムを用いることができる。
【００１５】
本明細書において「セラミド」とは、スフィンゴシンと脂肪酸とが縮合した化合物をいう。前記セラミドは、Ｌ−セリンと、パルミトイル−ＣｏＡとから生合成され、グルコシルセラミド又はスフィンゴミエリンとして表皮細胞に一旦蓄積される。前記グルコシルセラミド又はスフィンゴミエリンは細胞外に分泌され、さまざまな酵素反応によって角層のセラミドが産生される。ヒトの角層のセラミドは、３タイプの脂肪酸（非ヒドロキシ脂肪酸、α−ヒドロキシ脂肪酸、及び、エステル型ω−ヒドロキシ脂肪酸）と、４タイプのスフィンゴイド（ジヒドロスフィンゴシン、スフィンゴシン、フィトスフィンゴシン、及び、６−ヒドロキシスフィンゴシン）との組み合わせから形成される少なくとも１１タイプのセラミドが存在することが従来報告されている（Ｍａｓｕｋａｗａ，Ｙ．、Ｊ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．、４９：１４６６（２００８））。本明細書におけるセラミドは、前記１１タイプのヒトのセラミドを含むが、これらに限定されない。前記セラミドは、糖（例えば、グルコース、ガラストース）と縮合する場合がある。糖と縮合したセラミドはスフィンゴ糖脂質と呼ばれ、該スフィンゴ糖脂質は、グルコシルセラミド及びガラクトシルセラミドを含む。本明細書において「グルコシルセラミド」とは、セラミドとブドウ糖とが縮合した化合物をいう。
【００１６】
本明細書において「皮膚状態の悪化」とは、キメの乱れや皮膚バリア機能の低下を伴う皮膚のトラブルをいい、肌あれ、乾燥肌、アトピー性皮膚炎、乾癬、魚鱗癬、及び／又は、乾皮症を含むが、これらに限定されない。本明細書において「皮膚バリア機能」とは、皮膚を正常な状態に保持する機能であって、体内への異物侵入や体内からの水分喪失を防止する機能をいう。
【００１７】
本明細書においてＤ−アラニンの「塩」とは、金属塩、アミン塩等を含むいずれかの塩をいう。前記金属塩は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等の場合がある。前記アミン塩は、トリエチルアミン塩、ベンジルアミン塩等の場合がある。
【００１８】
本明細書においてＤ−アラニンの「誘導体」とは、Ｄ−アラニンのアミノ基、カルボキシル基及び／又は側鎖が修飾された化合物をいう。前記誘導体は誘導体の塩を含む。前記誘導体は、酵素、胃酸等による酸化、還元及び加水分解されることを含むが、これらに限定されない生体内での化学的反応及び／又は生物学的反応によってＤ−アラニンを遊離できる化合物を含む。前記誘導体は、Ｎ−フェニルアセチル誘導体と、４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）誘導体と、エステル誘導体と、アミド誘導体とを含むが、これらに限定されない。前記エステル誘導体は、メチルエステル、エチルエステルその他のエステル化合物を含む。前記アミド誘導体は、アセチルアミドその他のアミド化合物を含む。また、前記誘導体は、タンパク質、ペプチド、糖、脂質、核酸等のような生体高分子との結合誘導体と、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリビニル、ポリエステル等のような合成高分子との結合誘導体とを含むが、これらに限定されない。
【００１９】
アミノ酸には光学異性体としてＬ体とＤ体とがあるが、天然のタンパク質はＬ−アミノ酸がペプチド結合したものであり、細菌の細胞壁などの例外を除きＬ−アミノ酸のみが利用されていることから、ヒトを始めとする哺乳類にはＬ−アミノ酸のみが存在し、Ｌ−アミノ酸のみを利用していると考えられてきた。（木野内忠稔ら、蛋白質  核酸  酵素、５０：４５３−４６０  （２００５）、レーニンジャーの新生化学［上］第２版  ｐｐ１３２−１４７  （１９９３）  廣川書店、ハーパー・生化学  原書２２版  ｐｐ２１−３０（１９９１）  丸善）したがって、従前より、学術的にも産業的にもアミノ酸としてはＬ−アミノ酸のみが専ら使用されてきた。
【００２０】
例外的にＤ−アミノ酸が使用されるケースとしては、細菌に産生させる抗生物質の原料として使用する場合、およびアミノ酸を化学合成した際に等量得られるＬ−アミノ酸とＤ−アミノ酸混合物からＬ−アミノ酸のみを分取するコストを省くために、そのままＤ／Ｌ−アミノ酸混合物としてＤ−アミノ酸を使用している食品添加物の例がある。しかし、生理活性を有する物質として、Ｄ−アミノ酸だけを産業的に使用している例は従来なかった。
【００２１】
Ｄ−セリンやＤ−アスパラギン酸はＤ体の割合が高いことから比較的研究が進んでいる。Ｄ−セリンは大脳、海馬に局在し、脳内のＮＭＤＡ受容体の調節因子であることが明らかにされている。Ｄ−アスパラギン酸は精巣や松果体に局在し、ホルモン分泌の制御に関与していることが示されている（特開２００５−３５５８号公報）。また近年、コラーゲン及びラミニン３３３の産生促進効果がＤ−アラニンにあることが開示された（国際特許出願第ＷＯ／２０１１／０４０３６３号公報、及び、国際特許出願第ＷＯ／２０１１／０４００８２号公報）。しかし、以下の実施例に示すとおり、Ｄ−アラニンのグルコシルセラミド及びセラミドの産生促進効果はこれまで知られていなかった。したがって、Ｄ−アラニンを含む本発明のセラミド産生促進用組成物は新規発明である。
【００２２】
近年、ｄｄＹマウスに１０ｍＭのＤ−アミノ酸水溶液を２週間自由摂取させた後、各器官でＤ−アミノ酸濃度を測定したところ、松果体では松果体１腺あたり３−１０００ｐｍｏｌであり、脳組織では湿質量１グラムあたり２−５００ｎｍｏｌであることが報告された（Ｍｏｒｉｋａｗａ，Ａ．ら、Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，３２：１３−２０（２００７））。これに基づいて、以下に説明する本発明の組成物に含まれるＤ−アラニンの１日摂取量の下限が算出された。
【００２３】
本発明のＤ−アラニンは、以下の実施例に示すとおり、培養ヒト表皮細胞に対して１μＭ〜１０μＭの濃度でグルコシルセラミド及びセラミド産生を促進する効果を有する。したがって、本発明のセラミド産生促進用組成物に含まれるＤ−アラニンの量は、この濃度範囲のＤ−アラニンが生体皮膚組織の表皮細胞に送達されることを条件として、いかなる含有量であってもかまわない。本発明のセラミド産生促進用組成物が外用剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、本発明の組成物全量中０．０００１５質量％から５０質量％か、配合可能な最大質量濃度かまでの範囲であればよい。すなわち前記組成物が外用剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、０．０００３質量％〜３０質量％が望ましく、０．００３質量％〜３質量％が最も望ましい。本発明のセラミド産生促進用組成物が内服剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、０．０００１質量％〜１００質量％の範囲であればよい。本発明のセラミド産生促進用組成物が内服剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、０．０００２質量％〜８０質量％が望ましく、０．０００２質量％〜６０質量％であることが最も望ましい。本発明のセラミド産生促進用組成物に含まれるＤ−アラニンの１日摂取量の下限は、体重１ｋｇあたり０．１ｎｇであればよく、１ｎｇが好ましく、１０ｎｇがより好ましい。なお、本発明のセラミド産生促進用組成物に含まれるＤ−アラニンの１日摂取量の上限は、前記組成物を投与された被験者が健康を害さず、かつ、前記被験者で本発明の効果を有する摂取量であり、例えば、体重１ｋｇあたり１００ｍｇが好ましく、１０ｍｇがより好ましく、１ｍｇが最も好ましい。前記被験者は、未成年、成人又は高齢者の男性及び／又は女性の場合がある。
【００２４】
本発明のセラミド産生促進用組成物は、有効成分として、Ｄ−アラニン、Ｄ−アラニンの塩、及び／又は、生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−アラニンを遊離できる誘導体に加えて、Ｄ−アラニンのセラミド産生の促進効果を損なわないことを条件として、さらに１種類又は２種類以上の薬学的に許容される添加物を含む場合がある。前記添加物は、希釈剤と、結合剤と、接着剤と、滑剤と、流動促進剤と、可塑剤と、崩壊剤と、担体溶媒と、緩衝剤と、着色料と、香料と、甘味料と、防腐剤と、安定化剤と、吸着剤と、当業者に知られたその他の医薬品添加剤とを含むが、これらに限られない。
【００２５】
本発明のセラミド産生促進用組成物は、有効成分として、Ｄ−アラニン、Ｄ−アラニンの塩、及び／又は、生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−アラニンを遊離できる誘導体のみを使用して調製することも可能であるが、通常本発明の効果を損なわない範囲で、医薬部外品、化粧品、医薬品等に用いられる他の成分を、必要に応じて適宜配合することができる。前記他の成分（任意配合成分）としては、例えば、油分、界面活性剤、粉末、色材、水、アルコール類、増粘剤、キレート剤、シリコーン類、酸化防止剤、紫外線吸収剤、保湿剤、香料、各種薬効成分、防腐剤、ｐＨ調整剤、中和剤等が挙げられる。
【００２６】
本発明の皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善するために用いられるセラミド産生促進用組成物の剤型は、例えば軟膏剤、クリーム剤、乳液剤、ローション剤、パック剤、ジェル剤、貼付剤等の外用剤と、例えば粉末剤、顆粒剤、カプセル剤、錠剤等の経口剤と、例えば経鼻スプレー等の経鼻剤と、注射剤とを含む、従来の医薬部外品組成物及び医薬品組成物に用いるものであればいかなるものでもかまわない。
【００２７】
本発明の食品組成物は、有効成分として、Ｄ−アラニン、Ｄ−アラニンの塩、及び／又は、生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−アラニンを遊離できる誘導体に加えて、Ｄ−アラニンのセラミド産生の促進効果を損なわないことを条件として、調味料、着色料、保存料その他の食品として許容される成分を含む場合がある。
【００２８】
本発明の食品組成物は、例えば、キャンディー、クッキー、味噌、フレンチドレッシング、マヨネーズ、フランスパン、醤油、ヨーグルト、ふりかけ、調味料・納豆のたれ、納豆、もろみ黒酢等、従来食品組成物に用いるものであればいずれでもよく、前記例示に限定されるものでない。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】グルコシルセラミド産生に対する１ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図２】グルコシルセラミド産生に対する１００ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図３】グルコシルセラミド産生に対する１０μＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図４】セラミド産生に対する１ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図５】セラミド産生に対する１００ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図６】セラミド産生に対する１０μＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
以下に説明する本発明の実施例は例示のみを目的とし、本発明の技術的範囲を限定するものではない。本発明の技術的範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定される。本発明の趣旨を逸脱しないことを条件として、本発明の変更、例えば、本発明の構成要件の追加、削除及び置換を行うことができる。
【００３１】
本明細書において言及される全ての文献はその全体が引用により本明細書に取り込まれる。
【実施例１】
【００３２】
１．アラニンによるセラミド産生促進
１−１．材料と方法
（１）細胞
細胞は、表皮ケラチノサイト（Ｃ−００１−５Ｃ、Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ（商標）、ライフテクノロジーズジャパン株式会社）が用いられた。前記細胞は、２４ウェルプレートに１ウェルあたり４ｘ１０４個となるように播種され、細胞培養用培地（ＥｐｉＬｉｆｅ−ＫＧ２、倉敷紡績株式会社）（以下、「通常培地」という。）を用いて、３７°Ｃ、５％ＣＯ２及び飽和水蒸気雰囲気下で１日間培養された。
【００３３】
（２）実験条件
前記細胞は、前記通常培地に、１ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンを添加した培地（以下、「１ｎＭのＬ−アラニン培地」又は「１ｎＭのＤ−アラニン培地」という。）か、１００ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンを添加した培地（以下、「１００ｎＭのＬ−アラニン培地」又は「１００ｎＭのＤ−アラニン培地」という。）か、１０μＭのＬ−又はＤ−アラニンを添加した培地（以下、「１０μＭのＬ−アラニン培地」又は「１０μＭのＤ−アラニン培地」という。）か、Ｌ−及びＤ−アラニンの代わりに精製水を添加した培地（以下、「対照培地」という。）かに切り替えて２日間培養された。その後、前記細胞は、１ｎＭのＬ−アラニン培地、１ｎＭのＤ−アラニン培地、１００ｎＭのＬ−アラニン培地、１００ｎＭのＤ−アラニン培地、１０μＭのＬ−アラニン培地、１０μＭのＤ−アラニン培地、及び、対照培地に１．８ｍＭのカルシウムイオンを添加した培地（以下、それぞれ、「１ｎＭのＬ−アラニンの実験条件」、「１ｎＭのＤ−アラニンの実験条件」、「１００ｎＭのＬ−アラニンの実験条件」、「１００ｎＭのＤ−アラニンの実験条件」、「１０μＭのＬ−アラニンの実験条件」、「１０μＭのＤ−アラニンの実験条件」、及び、「対照」という。）に切り替えて、約１００％コンフルエントの状態になるまで２−３日間培養された。その後、前記細胞の角化状態が目視により確認された。
【００３４】
（３）表皮ケラチノサイトの細胞数の測定
培養後、ａｌａｍａｒＢｌｕｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）が最終濃度１０％となるように培地に添加された。３時間後、蛍光強度が、Ａｈｍｅｄ  Ｓ．Ａ．ら、（Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄ．  １７０，２１１−２２４（１９９４））及び製造・販売者の指示書に従って、励起波長５４４ｎｍ、蛍光波長５９０ｎｍで測定された。
【００３５】
（４）セラミド及びグルコシルセラミド産生量の測定
細胞数の測定後、前記細胞及び培養上清が回収され、セラミド及びグルコシルセラミド産生量が当業者に周知の方法で測定された。簡潔には、回収した細胞は、細胞破砕用溶液に懸濁され、脂質試料が振盪抽出された。前記細胞破砕用溶液は、市販のＤ−ＰＢＳ（−）、メタノール及びクロロホルムを４：１：３で混合して調製された。遠心分離後、有機層が回収され、窒素気流下で乾固された。抽出した脂質試料はエタノールに溶解され、グルコシルセラミド（脂肪酸；ミリスチン酸（Ｃ１２）−ベヘン酸（Ｃ２２））及びセラミド（脂肪酸；ミリスチン酸（Ｃ１２）−ベヘン酸（Ｃ２２））の産生量がＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（ＡＰＩ  ４０００  ＱＴＲＡＰ、ＡＢＳＣＩＥＸ）で製造・販売者の指示書に従って測定された。測定では、以下の市販のグルコシルセラミド及びセラミドが、それぞれ、標品として用いられた。標品が市販されていない場合には、グルコシルセラミド及びセラミドは、質量電荷比（ｍ／ｚ）、溶出時間、及び、ＭＳ／ＭＳフラグメントに基づいて決定された。各実験条件下の細胞のグルコシルセラミド及びセラミド産生量は、対照の実験条件下の細胞のセラミド及びグルコシルセラミド産生量を１００％として算出された（以下、「グルコシルセラミド産生率（％）」及び「セラミド産生率（％）」という）。
【００３６】
市販のグルコシルセラミド及びセラミド
Ｄ−グルコシルセラミドＣ１８（ＧｌｃＣｅｒ  ＮＳ  Ｃ１８、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）、Ｄ−グルコシル−β−１，１’−Ｎ−パルミトイル−Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン（ＧｌｃＣｅｒ  ＮＳ  Ｃ１６、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．）、Ｎ−ヘプタデカノイル−Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン（Ｃｅｒ  ＮＳ  Ｃ１７，Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．）、Ｎ−ステアロイル−Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン（Ｃｅｒ  ＮＳ  Ｃ１８、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．）、Ｎ−リグノセロイル−Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン（Ｃｅｒ  ＮＳ  Ｃ２４、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．）、Ｎ−ステアロイル−フィトスフィンゴシン（Ｃｅｒ  ＮＰ  Ｃ１８、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．）、及び、Ｎ−パルミトイルスフィンゴシン（Ｃｅｒ  ＮＳ  Ｃ１６、Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）。
【００３７】
１−２．結果
（１）グルコシルセラミド産生量の測定
図１は、グルコシルセラミド産生に対する１ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示す。図２は、グルコシルセラミド産生に対する１００ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示す。図３は、グルコシルセラミド産生に対する１０μＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示す。図１ないし３のグラフでは、縦軸はグルコシルセラミド（脂肪酸；パルミチン酸（Ｃ１６））の産生率（％）を示し、横軸は各実験条件を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊＊）はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ−Ｄｕｎｎ検定でｐ値が０．１％未満であることを示す。なお、培養後の細胞数は各実験条件で同程度であった。
【００３８】
図１では、グルコシルセラミド産生率（％）は、対照を１００％とするとき、１ｎＭのＤ−アラニンの実験条件では約８５％であり、１ｎＭのＬ−アラニンの実験条件では約１１０％であった。図２では、グルコシルセラミド産生率（％）は、対照を１００％とするとき、１００ｎＭのＤ−アラニンの実験条件では約１０３％であり、１００ｎＭのＬ−アラニンの実験条件では約８５％であった。図３では、グルコシルセラミド産生率（％）は、対照を１００％とするとき、１０μＭのＤ−アラニンの実験条件では約１６０％であり、１０μＭのＬ−アラニンの実験条件では約１０２％であった。１０μＭのＤ−アラニンの実験条件と、対照との間ではＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ−Ｄｕｎｎ検定でｐ値が０．１％未満であり、統計学的に有意な差が認められた。１μＭのＤ−アラニンの実験条件と、対照との間でも統計学的に有意な差が認められた（データは示されない。）。
【００３９】
（２）セラミド産生量の測定
図４は、セラミド産生に対する１ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示す。図５は、セラミド産生に対する１００ｎＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示す。図６は、セラミド産生に対する１０μＭのＬ−又はＤ−アラニンの効果を示す。図４ないし６のグラフでは、縦軸はセラミド（脂肪酸；パルミチン酸（Ｃ１６））の産生率（％）を示し、横軸は各実験条件を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊）はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ−Ｄｕｎｎ検定でｐ値が５％未満であることを示す。なお、培養後の細胞数は各実験条件で同程度であった。
【００４０】
図４では、セラミド産生率（％）は、対照を１００％とするとき、１ｎＭのＤ−アラニンの実験条件では約９０％であり、１ｎＭのＬ−アラニンの実験条件では約９５％であった。図５では、セラミド産生率（％）は、対照を１００％とするとき、１００ｎＭのＤ−アラニンの実験条件では約８３％であり、１００ｎＭのＬ−アラニンの実験条件では約７５％であった。図６では、セラミド産生率（％）は、対照を１００％とするとき、１０μＭのＤ−アラニンの実験条件では約１２０％であり、１０μＭのＬ−アラニンの実験条件では約９８％であった。１０μＭのＤ−アラニンの実験条件と、対照との間では、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ−Ｄｕｎｎ検定でｐ値が５％未満であり、統計学的に有意な差が認められた。１μＭのＤ−アラニンの実験条件と、対照との間でも統計学的に有意な差が認められた（データは示されない。）。
【００４１】
１−３．結論
以上の実験結果から、グルコシルセラミド及びセラミド産生の促進効果が、Ｄ−アラニンで認められたが、Ｌ−アラニンでは認められなかった。皮膚バリア機能に重要な役割を果たす角層のセラミドは、グルコシルセラミドから、さまざまな酵素反応によって産生される。したがって、Ｄ−アラニンは、グルコシルセラミド及びセラミドの産生を促進することによって、皮膚状態の悪化を抑制及び／又は改善できることが示唆された。
【００４２】
Ｄ−アラニンは、乳酸菌、甲殻類等に豊富に含まれる天然物であるため、日常的に安全に使用することができる。また、Ｄ−アラニンはヒトではタンパク質の生合成等に用いられないため、代謝されにくい。したがって、本発明のセラミド産生促進用組成物は、日常的に使用できる、安定かつ安全な組成物として用いることができる。
【実施例２】
【００４３】
２．セラミド産生促進用組成物の配合例
本発明にもとづいてＤ−アラニンを有効成分として含む、乳液製剤、貼付剤、錠剤、ソフトカプセル、顆粒、ドリンク、キャンディー、クッキー、味噌、フレンチドレッシング、マヨネーズ、フランスパン、醤油、ヨーグルト、ふりかけ、調味料・納豆のたれ、納豆、もろみ黒酢、クリーム、ボディー用クリーム、ジェル剤、ピールオフマスク、含浸マスク、乳液、化粧水及びエアゾール剤の配合例を以下に示す。これらの配合例は例示を目的として列挙されるものであって本発明の技術的範囲を限定することを意図するものではない。
【００４４】
配合例１（乳液製剤）
（組成物）                        配合量（質量％）
Ｄ−アラニン                              ０．４２
ベヘニルアルコール                        ０．２
セタノール                                ０．５
グリセリンモノ脂肪酸エステル              １．８
硬化ヒマシ油ＰＯＥ（６０）                １．０
白色ワセリン                              ２．０
流動パラフィン                          １０．０
ミリスチン酸イソプロピル                  ３．０
メチルポリシロキサン（６ｃｓ）            １．５
濃グリセリン                            １３．０
ジプロピレングリコール                    ２．０
カルボキシビニルポリマー                  ０．２５
ヒアルロン酸ナトリウム                    ０．００５
水酸化カリウム                            適量
乳酸                                      適量
エデト酸ナトリウム                        適量
エチルパラベン                            適量
精製水                                    残余

１００．０００
【００４５】
配合例２（貼付剤）
（組成物）                              配合量（質量％）
Ｄ−アラニン                                    ０．３
ポリアクリル酸                                  ３．０
ポリアクリル酸ナトリウム                        ２．５
ゼラチン                                        ０．５
カルボキシメチルセルロースナトリウム            ４．０
ポリビニルアルコール                            ０．３
濃グリセリン                                  １４．０
１，３−ブチレングリコール                    １２．０
水酸化アルミニウム                              ０．１
エデト酸ナトリウム                              ０．０３
メチルパラベン                                  ０．１
精製水                                          残余

１００．００  
【００４６】
配合例３（錠剤）
（組成物）                              配合量（ｍｇ／１錠中）
Ｄ−アラニン                                  ３６０．５
乳糖                                          １０２．４
カルボキシメチルセルロースカルシウム            ２９．９
ヒドロキシプロピルセルロース                      ６．８
ステアリン酸マグネシウム                          ５．２
結晶セルロース                                  １０．２

５１５．０  
【００４７】
配合例４（錠剤）
（組成物）                            配合量（ｍｇ／１錠中）
ショ糖エステル                                ７０
結晶セルロース                                ９９
メチルセルロース                              ６１
グリセリン                                    ２５
Ｄ−アラニン                                ４７５
Ｎ−アセチルグルコサミン                    ２００
ヒアルロン酸                                １５０
ビタミンＥ                                    ３０
ビタミンＢ６                                  ２０
ビタミンＢ２                                  １０
α−リポ酸                                    ２０
コエンザイムＱ１０                            ４０
Ｌ−プロリン                                ３００

１５００    
【００４８】
配合例５（ソフトカプセル）
（組成物）                          配合量（ｍｇ／１カプセル中）
食用大豆油                                ５３０
トチュウエキス                              ５０
ニンジンエキス                              ５０
Ｄ−アラニン                              １００
ローヤルゼリー                              ５０
マカ                                        ３０
ＧＡＢＡ                                    ３０
ミツロウ                                    ６０
ゼラチン                                  ３７５
グリセリン                                １２０
グリセリン脂肪酸エステル                  １０５

１５００
【００４９】
配合例６（ソフトカプセル）
（組成物）                          配合量（ｍｇ／１カプセル中）
玄米胚芽油                                ６５９
Ｄ−アラニン                              ５００
レスベラトロール                              １
ハス胚芽エキス                            １００
エラスチン                                １８０
ＤＮＡ                                      ３０
葉酸                                        ３０

１５００
【００５０】
配合例７（顆粒）
（組成物）                        配合量（ｍｇ／１包中）
Ｄ−アラニン                            ４００
ビタミンＣ                              １００
大豆イソフラボン                        ２５０
還元乳糖                                ３００
大豆オリゴ糖                              ３６
エリスリトール                            ３６
デキストリン                              ３０
香料                                      ２４
クエン酸                                  ２４

１２００
【００５１】
配合例８（ドリンク）
（組成物）                          配合量（ｇ／６０ｍＬ中）
トチュウエキス                              １．６
ニンジンエキス                              １．６
Ｄ−アラニン                                １．６
還元麦芽糖水飴                            ２８
エリスリトール                              ８
クエン酸                                    ２
香料                                        １．３
Ｎ−アセチルグルコサミン                    １
ヒアルロン酸Ｎａ                            ０．５
ビタミンＥ                                  ０．３
ビタミンＢ６                                ０．２
ビタミンＢ２                                ０．１
α−リポ酸                                  ０．２
コエンザイムＱ１０                          １．２
Ｌ−プロリン                                ２
精製水                                      残余

６０．０
【００５２】
配合例９（キャンディー）
（組成物）                      配合量（質量％）
砂糖                                  ５０
水飴                                  ４８
Ｄ−アラニン                            １
香料                                    １

１００
【００５３】
配合例１０（クッキー）
（組成物）                        配合量（質量％）
薄力粉                                  ４５．０
バター                                  １７．５
グラニュー糖                            ２０．０
Ｄ−アラニン                              ４．０
卵                                      １２．５
香料                                      １．０

１００．０
【００５４】
配合例１０（クッキー）の製造方法
バターを撹拌しながらグラニュー糖を徐々に添加し、卵及び香料と、Ｄ−アラニンとを添加して撹拌する。十分に混合した後、均一に振るった薄力粉を加えて低速で撹拌し、塊状で冷蔵庫で寝かせる。その後、成型し１７０°Ｃ、１５分間焼成しクッキーとする。
【００５５】
配合例１１（味噌）
（組成物）                    配合量（ｇ）
大豆                              １０００
米麹                              １０００
食塩                                ４２０
Ｄ−アラニン                        １５８
水                                    残余

４０００
【００５６】
配合例１１（味噌）の製造方法
米こうじと食塩とをよく混ぜ合わせる。洗浄した大豆を３倍量の水に一晩つけた後に水を切り、新しい水を加えながら煮込み、ざるにあける。煮汁（種水）を集め、Ｄ−アラニンを１０％ｗ／ｖとなるように溶解する。煮あがった豆を直ちにすりつぶし、食塩を混ぜた米麹を加えて、上記のＤ−アラニンを溶解した種水を足しながら粘土程の固さになるまでむらなく混ぜ合わせる。団子状に丸めたものを桶に隙間のない様に隅々まで、しっかりと詰め込み、表面を平らにしてラップで覆い密封する。３箇月後に容器を移し変え、表面を平らにしてラップで覆う。なお、Ｄ−アラニンを種水に加える代わりに、Ｄ−アラニンを多く産生する米麹を用いてもよい。前記米麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法で、Ｄ−アラニンを測定することにより選抜することができる。また、市販の味噌にＤ−アラニンか、その塩かを加えてもよい。
【００５７】
配合例１２（フレンチドレッシング）
（組成物）                      配合量（ｇ）
サラダ油                            ２７．０
酢                                  ３０．０
食塩                                  ０．９
Ｄ−アラニン                          １．１
胡椒                                  １．０

６０．０  
【００５８】
配合例１２（フレンチドレッシング）の製造方法
酢に食塩と、Ｄ−アラニンとを加えた後に、よく攪拌して溶解する。サラダ油を加えて、よく攪拌し胡椒を加える。
【００５９】
配合例１３（マヨネーズ）
（組成物）                      配合量（ｇ）
サラダ油                          １３４．０
酢                                    ５
食塩                                  ０．９
Ｄ−アラニン                          １
卵黄                                １８
砂糖                                  ０．２
胡椒                                  ０．９

１６０．０
【００６０】
配合例１３（マヨネーズ）の製造方法
卵黄（室温）に酢、食塩及び胡椒と、Ｄ−アラニンとを加えて、泡立て器で十分に攪拌する。サラダ油を少しずつ加えながら攪拌を継続してエマルジョンにする。最後に砂糖を加えて攪拌する。
【００６１】
配合例１４（フランスパン）
（組成物）                    配合量（ｇ）
強力粉                              １４０
薄力粉                                ６０
食塩                                    ３
砂糖                                    ６
Ｄ−アラニン                            ２
ドライイースト                          ４
ぬるま湯                            １２８

３４３
【００６２】
配合例１４（フランスパン）の製造方法
ぬるま湯に砂糖１ｇ及びドライイーストを入れて予備発酵させる。強力粉、薄力粉、食塩及び砂糖５ｇと、Ｄ−アラニンとをボウルに入れ、その中に予備発酵させたイーストを入れる。十分捏ねた後に球状にして３０°Ｃで一次発酵させる。生地を再度捏ねてから休ませた後に適当な形に整形して電子発酵機を用いて最終発酵させる。クープを入れて２２０°Ｃのオーブンで３０分間焼く。
【００６３】
配合例１５（醤油）
（組成物）                      配合量（ｇ）
市販の醤油                            ９００
Ｄ−アラニン                          １００

１０００
【００６４】
配合例１５（醤油）の製造方法
市販の醤油にＤ−アラニンか、その塩かを加えてよく攪拌する。また、Ｄ−アラニンか、その塩かを加える代わりに、Ｄ−アラニンを多く産生する麹を用いて醤油を醸造してもよい。前記麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法で、Ｄ−アラニンを測定することにより選抜することができる。
【００６５】
配合例１６（ヨーグルト）
（組成物）                      配合量（ｇ）
牛乳                                  ８８０
Ｌ．ブルガリカス菌                      ５０
Ｓ．サーモフィルス菌                    ５０
Ｄ−アラニン                            ２０

１０００
【００６６】
配合例１６（ヨーグルト）の製造方法
４０°Ｃ〜４５°Ｃで発酵させる。他の市販の種菌を用いてもよく、市販のヨーグルトにＤ−アラニンか、その塩かを加えてもよい。また、Ｄ−アラニンか、その塩かを加える代わりに、Ｄ−アラニンを多く産生する菌を用いてもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法で、Ｄ−アラニンを測定することにより選抜することができる。
【００６７】
配合例１７（ふりかけ）
（組成物）                    配合量（ｇ）
Ｄ−アラニン                        ５０
のり                                １５
Ｌ−グルタミン酸Ｎａ                １０
食塩                                  ２
煎りごま                            １０
さば削り節                          １０
砂糖                                  １
醤油                                  ２

１００
【００６８】
配合例１８（調味料・納豆のたれ）
（組成物）                    配合量（ｇ）
市販の納豆のたれ                    ９
Ｄ−アラニン                        １

１０
【００６９】
配合例１９（納豆）
（組成物）                        配合量（ｇ）
市販の納豆                            １９．９
Ｄ−アラニン                            ０．１

２０．０
【００７０】
配合例１９（納豆）の製造方法
市販の納豆に、Ｄ−アラニンか、その塩かを加えてよく攪拌する。また、Ｄ−アラニンか、その塩かを加える代わりに、Ｄ−アラニンを多く産生する菌を用いて納豆を作ってもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法で、Ｄ−アラニンを測定することにより選抜することができる。
【００７１】
配合例２０（もろみ黒酢）
（組成物）                  配合量（ｇ）
市販のもろみ黒酢                  ９００
Ｄ−アラニン                      １００

１０００
【００７２】
配合例２０（もろみ黒酢）の製造方法
市販のもろみ黒酢に、Ｄ−アラニンか、その塩かを加えてよく攪拌する。Ｄ−アラニンか、その塩かを加える代わりにＤ−アラニンを多く産生する菌を用いて酢、黒酢、もろみを作ってもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−アラニンを測定することにより選抜することができる。
【００７３】
配合例２１（クリーム）
（組成物）                                        配合量（質量％）
流動パラフィン                                              ３
ワセリン                                                    １
ジメチルポリシロキサン                                      １
ステアリルアルコール                                        １．８
ベヘニルアルコール                                          １．６
グリセリン                                                  ８
ジプロピレングリコール                                      ５
マカデミアナッツ油                                          ２
硬化油                                                      ３
スクワラン                                                  ６
ステアリン酸                                                ２
ヒドロキシステアリン酸コレステリル                          ０．５
２−エチルヘキサン酸セチル                                  ４
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                              ０．５
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン                        ３
水酸化カリウム                                              ０．１５
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                  ０．０５
トリメチルグリシン                                          ２
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム      １
酢酸トコフェロール                                          ０．１
Ｄ−アラニン                                                ４
パラベン                                                    適量
エデト酸三ナトリウム                                        ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン            ０．０５
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル    ０．０５
色剤                                                        適量
カルボキシビニルポリマー                                    ０．０５
精製水                                                      残余

１００．００
【００７４】
配合例２２（ボディー用クリーム）
（組成物）                                        配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                                      ３
デカメチルシクロペンタシロキサン                          １３
ドデカメチルシクロヘキサシロキサン                        １２
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体            １
エタノール                                                  ２
イソプロパノール                                            １
グリセリン                                                  ３
ジプロピレングリコール                                      ５
ポリエチレングリコール６０００                              ５
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                  ０．０５
酢酸トコフェロール                                          ０．１
Ｄ−アラニン                                                ５
ウイキョウエキス                                            ０．１
ハマメリスエキス                                            ０．１
ニンジンエキス                                              ０．１
Ｌ−メントール                                              適量
パラオキシ安息香酸エステル                                  適量
エデト酸三ナトリウム                                        ０．０５
ジモルホリノピリダジノン                                    ０．０１
トリメトキシ桂皮酸メチルビス（トリメチルシロキシ）
シリルイソペンチル    ０．１
黄酸化鉄                                                    適量
チタン酸コバルト                                            適量
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト                １．５
ポリビニルアルコール                                        ０．１
ヒドロキシエチルセルロース                                  ０．１
トリメチルシロキシケイ酸                                    ２
香料                                                        適量
精製水                                                      残余

１００．００
【００７５】
配合例２３（ジェル剤）
（組成物）                                        配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                                      ５
グリセリン                                                  ２
１，３−ブチレングリコール                                  ５
ポリエチレングリコール１５００                              ３
ポリエチレングリコール２００００                            ３
オクタン酸セチル                                            ３
クエン酸                                                    ０．０１
クエン酸ナトリウム                                          ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                  ０．１
グリチルリチン酸ジカリウム                                  ０．１
Ｄ−アラニン                                                ２
酢酸トコフェロール                                          ０．１
オウゴンエキス                                              ０．１
ユキノシタエキス                                            ０．１
エデト酸三ナトリウム                                        ０．１
キサンタンガム                                              ０．３
アクリル酸・メタクリル酸
アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−２）          ０．０５
寒天末                                                      １．５
フェノキシエタノール                                        適量
ジブチルヒドロキシトルエン                                  適量
精製水                                                      残余

１００．００
【００７６】
配合例２４（ピールオフマスク）
（組成物）                                        配合量（質量％）
エタノール                                                １０
１，３−ブチレングリコール                                  ６
ポリエチレングリコール４０００                              ２
オリーブ油                                                  １
マカデミアナッツ油                                          １
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル                        ０．０５
乳酸                                                        ０．０５
乳酸ナトリウム                                              ０．１
Ｌ−アスコルビン酸硫酸エステル２ナトリウム                  ０．１
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム      ０．１
Ｄ−アラニン                                              １０
魚コラーゲン                                                ０．１
コンドロイチン硫酸ナトリウム                                ０．１
カルボキシメチルセルロースナトリウム                        ０．２
ポリビニルアルコール                                      １２
パラオキシ安息香酸エステル                                  適量
香料                                                        適量
精製水                                                      残余

１００．００
【００７７】
配合例２５（含浸マスク）
（組成物）                              配合量（質量％）
グリセリン                                      １
１，３−ブチレングリコール                      ８
キシリット                                      ２
ポリエチレングリコール１５００                  ２
ローズマリー油                                  ０．０１
セージ油                                        ０．１
クエン酸                                        ０．０２
クエン酸ナトリウム                              ０．０８
ヘキサメタリン酸ナトリウム                      ０．０１
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン      ０．１
Ｄ−アラニン                                    ０．５
バーチエキス                                    ０．１
ラベンダー油                                    ０．０１
キサンタンガム                                  ０．０５
カルボキシビニルポリマー                        ０．１５
パラオキシ安息香酸エステル                      適量
精製水                                          残余

１００．００
【００７８】
配合例２６（乳液）
（組成物）                                    配合量（質量％）
流動パラフィン                                        ７
ワセリン                                              ３
デカメチルシクロペンタシロキサン                      ２
ベヘニルアルコール                                    １．５
グリセリン                                            ５
ジプロピレングリコール                                ７
ポリエチレングリコール１５００                        ２
ホホバ油                                              １
イソステアリン酸                                      ０．５
ステアリン酸                                          ０．５
ベヘニン酸                                            ０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット          ３
２−エチルヘキサン酸セチル                            ３
モノステアリン酸グリセリン                            １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン          １
水酸化カリウム                                        ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム                            ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル                            ０．０５
Ｄ−アラニン                                          １
ローヤルゼリーエキス                                  ０．１
酵母エキス                                            ０．１
酢酸トコフェロール                                    ０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム                      ０．１
エデト酸三ナトリウム                                  ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン      ０．１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル                  ０．１
カルボキシビニルポリマー                              ０．１５
パラベン                                              適量
香料                                                  適量
精製水                                                残余

１００．００
【００７９】
配合例２７（乳液）
（組成物）                                  配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                              ２
ベヘニルアルコール                                  １
バチルアルコール                                    ０．５
グリセリン                                          ５
１，３−ブチレングリコール                          ７
エリスリトール                                      ２
硬化油                                              ３
スクワラン                                          ６
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット        ２
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル        １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン        １
Ｄ−アラニン                                        ０．３
水酸化カリウム                                      適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム                          ０．０５
フェノキシエタノール                                適量
カルボキシビニルポリマー                            ０．１
精製水                                              残余

１００．００
【００８０】
配合例２８（化粧水）
（組成物）                                        配合量（質量％）
エチルアルコール                                            ５
グリセリン                                                  １
１，３−ブチレングリコール                                  ５
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン
デシルテトラデシルエーテル        ０．２
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                  ０．０３
トリメチルグリシン                                          １
ポリアスパラギン酸ナトリウム                                ０．１
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム      ０．１
チオタウリン                                                ０．１
Ｄ−アラニン                                                ８
エデト酸三ナトリウム                                        ０．１
カルボキシビニルポリマー                                    ０．０５
水酸化カリウム                                              ０．０２
フェノキシエタノール                                        適量
香料                                                        適量
精製水                                                      残余

１００．００
【００８１】
配合例２９（化粧水）
（組成物）                                  配合量（質量％）
エタノール                                        １０
ジプロピレングリコール                              １
ポリエチレングリコール１０００                      １
ポリオキシエチレンメチルグルコシド                  １
ホホバ油                                            ０．０１
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル                  ０．１
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                      ０．２
ジイソステアリン酸ポリグリセリル                    ０．１５
Ｎ−ステアロイル−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム        ０．１
クエン酸                                            ０．０５
クエン酸ナトリウム                                  ０．２
水酸化カリウム                                      ０．４
グリチルリチン酸ジカリウム                          ０．１
塩酸アルギニン                                      ０．１
Ｌ−アスコルビン酸  ２−グルコシド                  ２
Ｄ−アラニン                                        ０．５
エデト酸三ナトリウム                                ０．０５
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル                ０．０１
ジブチルヒドロキシトルエン                          適量
パラベン                                            適量
海洋深層水                                          ３
香料                                                適量
精製水                                              残余

１００．００
【００８２】
配合例３０（エアゾール尿素外用剤原液）
（組成物）                          配合量（質量％）
エタノール                                １５．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０          １．５
ジフェンヒドラミン                          １．０
ジブカイン                                  ２．０
酢酸トコフェロール                          ０．５
Ｄ−アラニン                                ０．１
イソステアリン酸                            ０．１
１，３−ブチレングリコール                  ３．０
ポリエチレングリコール４００                ３．０
カンフル                                    ０．０５
尿素                                      ２０．０
精製水                                      残余

１００．００
【００８３】
配合例３１（エアゾール尿素噴射剤）
（組成物）                      配合量（質量％）
エアゾール尿素外用剤原液              ６５．０
ジメチルエーテル                      ３５．０

１００．００
【００８４】
配合例３１（エアゾール尿素噴射剤）の充填方法
エアゾール尿素外用剤原液及びジメチルエーテルを内面テフロン（登録商標）コート処理耐圧エアゾールアルミ缶に充填してエアゾール剤を調製する。
【図１】
2014031323.tif 000002
【図２】
2014031323.tif 000003
【図３】
2014031323.tif 000004
【図４】
2014031323.tif 000005
【図５】
2014031323.tif 000006
【図６】
2014031323.tif 000007