(57)【要約】【課題】煩雑な手順を伴わず、簡便に核酸を含む試料を核酸の分析に適した状態に調製する方法を提供する。【解決手段】陽極と、陰極と、該陽極と該陰極の間に形成された空間と、からなり、前記空間は、前記陽極側に設けられた第１多孔膜と、前記陰極側に設けられた第２多孔膜と、前記第１多孔膜と前記第２多孔膜に挟まれた領域に設けられた、該領域内へタンパク質及び核酸を含む試料を導入する導入口と、前記導入口と前記第１多孔膜との間に設けられたゲルフィルタと、を有する核酸の調製装置を提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
陽極と、陰極と、該陽極と該陰極の間に形成された空間と、からなり、
前記空間は、前記陽極側に設けられた第１多孔膜と、
前記陰極側に設けられた第２多孔膜と、
前記第１多孔膜と前記第２多孔膜に挟まれた領域に設けられた、該領域内へタンパク質及び核酸を含む試料を導入する導入口と、
前記導入口と前記第１多孔膜との間に設けられたゲルフィルタと、を有する
核酸の調製装置。
【請求項２】
前記ゲルフィルタと前記第１多孔膜とで区切られた第１領域の容積は、前記ゲルフィルタと前記第２多孔膜とで区切られた第２領域の容積に比して小さい
請求項１記載の核酸の調製装置。
【請求項３】
前記第１多孔膜の平均孔径は１ｎｍ〜１０ｎｍである
請求項１記載の核酸の調製装置。
【請求項４】
前記ゲルフィルタはｐＨ７〜１０に調製されている
請求項１記載の核酸の調製装置。
【請求項５】
前記ゲルフィルタの前記第１領域との境界へ前記タンパク質が移動したことを検出する検出部を備える
請求項１記載の核酸の調製装置。
【請求項６】
核酸増幅反応の鋳型核酸の調製に用いる請求項１記載の核酸の調製装置。
【請求項７】
前記ゲルフィルタ内に前記陰極とは別に陰極を設置可能である
請求項１記載の核酸の調製装置。
【請求項８】
前記ゲルフィルタ内の前記陰極は、前記核酸の移動方向に対して複数配設可能である
請求項７記載の核酸の調製装置。
【請求項９】
前記ゲルフィルタ内の前記陰極と前記陽極への通電と、前記ゲルフィルタ外に設けられた前記陰極と前記陽極への通電と、を切り替えることができる
請求項７記載の核酸の調製装置。
【請求項１０】
陽極と陰極との間のゲルフィルタが設けられた空間の、前記陰極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域にタンパク質及び核酸を含む試料が収容され、前記陽極及び前記陰極に通電する手順と、
前記ゲルフィルタ内で前記核酸を前記陽極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域に泳動させる手順と、を含む
核酸の調製方法。
【請求項１１】
陽極と陰極との間のゲルフィルタが設けられた空間の、前記陰極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域にタンパク質及び核酸を含む試料を収容する手順と、
前記陽極及び前記陰極に通電する手順と、
前記ゲルフィルタと前記陽極とに挟まれた領域から核酸を回収する手順と、
を含む
核酸の調製方法。
【請求項１２】
ｐＨ７〜１０に調製された前記ゲルフィルタを用いる
請求項１１記載の核酸の調製方法。
【請求項１３】
前記収容する手順の前に前記試料を超音波処理する手順を含む
請求項１１記載の核酸の調製方法。
【請求項１４】
前記収容する手順の前に前記試料を脱塩する手順を含む
請求項１１記載の核酸の調製方法。
【請求項１５】
核酸増幅反応の鋳型核酸を調製するための請求項１０記載の核酸の調製方法。
【請求項１６】
前記核酸増幅反応を、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法によって行う
請求項１５記載の核酸の調製方法。
【請求項１７】
前記核酸増幅反応は、等温核酸増幅反応である
請求項１５記載の核酸の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本技術は、核酸の調製装置及び核酸の調製方法に関する。より詳しくは、電極に挟まれた空間内にゲルフィルタを備える核酸の調製装置等に関する。
【背景技術】
【０００２】
核酸を分析する手法は、例えば、感染症の診断のための核酸検査や一塩基多型の検出などに利用されている。このような核酸の分析では、試料に含まれる核酸以外の成分が分析に悪影響を及ぼすことを防止するため、試料における核酸以外の成分の含有率を低減させることが必要な場合が多い。このため、核酸の分析においては、予め核酸を含む試料を核酸の分析に適した状態に調製する方法が求められてきた。
【０００３】
例えば、特許文献１には、試料中の核酸を核酸吸着性多孔膜に吸着させて核酸を単離する方法が記載されている。この方法では、核酸を含む試料溶液を核酸吸着性多孔膜に通過させ、核酸吸着性多孔膜内に核酸を吸着させる工程と、洗浄液を核酸吸着性多孔膜に通過させ、核酸吸着性多孔膜を核酸が吸着した状態で洗浄する工程と、回収液を核酸吸着性多孔膜に通過させ、核酸吸着性多孔膜内から核酸を脱着させる工程を含む。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００５−９５００３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
上記特許文献１に記載された核酸の分離精製方法によって、核酸は分析に適した精製度まで精製され得る。しかし、核酸吸着性多孔膜を利用した上記の調製方法では、吸着、洗浄、回収の各工程で、各工程に用いる液体が核酸吸着性多孔膜を通過しなければならず、核酸を調製する作業は煩雑となる。
【０００６】
そこで、本技術は、煩雑な手順を伴わず、簡便に核酸を含む試料を核酸の分析に適した状態に調製する方法を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題解決のため、本技術は、陽極と、陰極と、該陽極と該陰極の間に形成された空間と、からなり、前記空間は、前記陽極側に設けられた第１多孔膜と、前記陰極側に設けられた第２多孔膜と、前記第１多孔膜と前記第２多孔膜に挟まれた領域に設けられた、該領域内へタンパク質及び核酸を含む試料を導入する導入口と、前記導入口と前記第１多孔膜との間に設けられたゲルフィルタと、を有する核酸の調製装置を提供する。
前記ゲルフィルタと前記第１多孔膜とで区切られた第１領域の容積は、前記ゲルフィルタと前記第２多孔膜とで区切られた第２領域の容積に比して小さくてもよい。
また、前記第１多孔膜の平均孔径は１ｎｍ〜１０ｎｍであってもよく、前記ゲルフィルタはｐＨ７〜１０に調製されていてもよい。
さらに、前記ゲルフィルタの前記第１領域との境界へ前記タンパク質が移動したことを検出する検出部を備える核酸の調製装置とすることもできる。
前記核酸の調製装置は、核酸増幅反応の鋳型核酸の調製に用いることができる。
また、前記ゲルフィルタ内に前記陰極とは別に陰極を設置可能であってもよい。
前記ゲルフィルタ内の前記陰極は、前記核酸の移動方向に対して複数配設可能であってもよい。
さらに、前記ゲルフィルタ内の前記陰極と前記陽極への通電と、前記ゲルフィルタ外に設けられた前記陰極と前記陽極への通電と、を切り替えることができてもよい。
【０００８】
本技術はまた、陽極と陰極との間のゲルフィルタが設けられた空間の、前記陰極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域にタンパク質及び核酸を含む試料が収容され、前記陽極及び前記陰極に通電する手順と、前記ゲルフィルタ内で前記核酸を前記陽極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域に泳動させる手順と、を含む核酸の調製方法を提供する。
さらに、陽極と陰極との間のゲルフィルタが設けられた空間の、前記陰極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域にタンパク質及び核酸を含む試料を収容する手順と、前記陽極及び前記陰極に通電する手順と、前記ゲルフィルタと前記陽極とに挟まれた領域から核酸を回収する手順と、を含む核酸の調製方法をも提供する。
ｐＨ７〜１０に調製された前記ゲルフィルタを用いてもよい。
前記収容する手順の前に、前記試料を脱塩する手順を含んでもよく、前記試料を超音波処理する手順を含んでもよい。
前記核酸の調整方法は核酸増幅反応の鋳型核酸を調製するための核酸の調製方法とすることもできる。
また、前記核酸増幅反応を、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法によって行ってもよく、前記核酸増幅反応は、等温核酸増幅反応であってもよい。
【発明の効果】
【０００９】
本技術により、核酸を含む試料を簡便な操作で核酸の分析に適した状態に調製するための装置等が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本技術の第１実施形態に係る核酸の調製装置の断面模式図である。
【図２】本技術に係る核酸の調製方法を示すフローチャートである。
【図３】第１実施形態に係る核酸の調製装置における核酸の調製を説明するための図である。
【図４】第１実施形態の変形実施形態の模式図である。
【図５】本技術の第２実施形態に係る核酸の調製装置の断面模式図である。
【図６】第２実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置の断面模式図である。
【図７】本技術に係る核酸の調製装置による試料の調製の結果を示す図面代用グラフである（実験例１）。
【図８】本技術に係る核酸の調製装置によって調製された核酸を用いて行った核酸増幅反応の結果を示す図面代用グラフである（実験例２）。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下、本技術を実施するための好適な形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本技術の代表的な実施形態を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。説明は以下の順序で行う。
（１）本技術に係る核酸の調製方法の対象
（２）本技術の第１実施形態に係る核酸の調製装置
（３）本技術に係る核酸の調製方法
（４）第１実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置
（５）本技術の第２実施形態に係る核酸の調製装置
（６）第２実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置
【００１２】
（１）本技術に係る核酸の調製方法の対象
本技術に係る核酸の調製装置（以下、単に調製装置とも称する）を用いた核酸の調製では、核酸とタンパク質とを含む試料を、核酸の分析に適した状態に調製する。
【００１３】
試料とは、動物由来、植物由来、菌類由来、細菌類由来、あるいはウィルス由来などの、核酸とタンパク質が含まれる試料であれば何れであってもよく、特に限定されない。核酸は、一本鎖、二本鎖の何れでもよく、ＤＮＡ、ＲＮＡの何れでもよい。また、核酸の分子量についても特に限定されない。なお、試料に含まれる核酸は、細菌の細胞内に存在する細菌ゲノムなどのように、直接試料中に分散されず、細胞膜などの膜に囲まれた状態や粒子内に存在する状態であってもよい。
【００１４】
核酸を含む試料には、例えば、生体由来の試料が挙げられる。生体由来の試料としては、例えば、全血、血漿、血清、脳脊髄液、尿、精液、スワブ（鼻や喉の拭い液や鼻水、痰など）、唾液等が挙げられる。また、これらの生体由来の試料の希釈液も、本技術に係る核酸調製装置において調製する試料に含まれる。
【００１５】
核酸の分析とは、公知の手法によって試料に含まれる核酸の特徴や量を分析することである。核酸の特徴や量の分析とは、例えば、核酸鎖の塩基配列の決定や、一塩基多型の判定、核酸の定量など、各種の分析が含まれる。分析手法としては、例えば、核酸増幅法や、融解曲線解析法、定量ＰＣＲ法、ＤＮＡアレイ、ＲＮＡアレイ、などが挙げられる。本技術に係る核酸の調製装置及び調製方法は、核酸増幅反応の鋳型核酸を調製するために用いられ得る。
【００１６】
核酸増幅法としては、例えば、温度サイクルを実施するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法が好ましい。また、温度サイクルを伴わない各種等温増幅法によって行われる核酸増幅反応であってもよい。等温増幅法としては、例えば、ＬＡＭＰ（Loop-Mediated Isothermal Amplification）法やＴＲＣ（Transcription-Reverse transcription Concerted）法等が挙げられる。本技術に係る核酸増幅反応用試料の調製方法は、等温増幅反応により核酸を増幅させる方法にも好適であり、等温増幅法としては、例えば、ＬＡＭＰ法が好ましい。
【００１７】
（２）本技術の第１実施形態に係る核酸の調製装置
図１は、本技術の第１実施形態に係る核酸の調製装置（以下、単に調製装置とも称する）の断面模式図である。図１中、符号Ａ１１で示す調製装置は、陽極２１と、陰極２２ａと、陽極２１と陰極２２ａの間に形成された空間３と、からなる。また、この空間３は、陽極２１側に設けられた第１多孔膜３１と、陰極２２ａ側に設けられた第２多孔膜３２と、第１多孔膜３１と第２多孔膜３２に挟まれた領域に設けられた、領域内へタンパク質及び核酸を含む試料を導入する導入口３５と、導入口３５と第１多孔膜３１との間に設けられたゲルフィルタ３７と、を有する。図１を参照しながら、調製装置Ａ１１の各構成について説明する。
【００１８】
＜空間＞
調製装置Ａ１１には、陽極２１と陰極２２ａに挟まれて空間３が形成されている。空間３とは、図１に例示する調製装置Ａ１１においては、導入部３４（第２領域）、回収部３３（第１領域）、及び緩衝液収容部３８１，３８２に相当する。また、調製装置Ａ１１では、陽極２１と陰極２２ａとの間に空間３が保持され、空間３内へ試料等が収容され得るように、筐体１が備えられている。
【００１９】
筐体１は、絶縁性を有し、かつ、後述する陽極２１及び陰極２２ａへの通電によって生じる熱等に対し耐性を有する材料で構成されていればよく、材料は特に限定されない。筐体１の材料には、例えば、公知のプラスチック類を採用することができる。プラスチック類としては、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、アクリル樹脂（ポリメチルメタクリレート、ＰＭＭＡ）などが挙げられる。
【００２０】
図１に示すように空間３には、第１多孔膜３１、第２多孔膜３２及びゲルフィルタ３７が設けらている。このため、空間３は、陽極２１と第１多孔膜３１との間の緩衝液収容部３８１と、第１多孔膜３１とゲルフィルタ３７との間の第１領域（回収部）３３と、ゲルフィルタ３７と第２多孔膜３２との間の第２領域（導入部）３４と、第２多孔膜３２と陰極２２ａとの間の緩衝液収容部３８２に、各々、区切られている。
【００２１】
第１多孔膜３１、第２多孔膜３２及びゲルフィルタ３７については、後述する。また、調製装置Ａ１１の説明において、第１領域３３及び第２領域３４は、調製装置Ａ１１における各領域の機能に合わせ、便宜的に、各々、回収部３３及び導入部３４と称する。
【００２２】
空間３に設けられた導入部３４は、タンパク質及び核酸を含む試料が導入される空間Ｅ１であり、導入部３４は、導入口３５を介して調製装置Ａ１１の外部と連絡している。
【００２３】
回収部３３は、試料に含まれる核酸がゲルフィルタ３７を通過した後に到達する空間Ｅ２であり、核酸が回収される領域である。また、回収部３３内の核酸を含む液体を、他の容器などへ移すための回収口３６が設けられている。また、後述する理由により、ゲルフィルタ３７と第１多孔膜３１とで区切られた回収部３３（第１領域）の容積は、ゲルフィルタ３７と第２多孔膜３２とで区切られた導入部３４（第２領域）の容積に比して小さいことが好ましい。
【００２４】
緩衝液収容部３８１，３８２は、緩衝液が収容される空間Ｅ３１，Ｅ３２である。また、この緩衝液は、空間Ｅ３１，Ｅ３２において後述する電極（陽極２１及び陰極２２ａ）に接触している。本技術の第１実施形態に係る調製装置Ａ１１において、緩衝液収容部３８１，３８２に収容される緩衝液の組成は、ゲルフィルタ３７の組成等に合わせて適宜調製することができる。また、ゲルフィルタ３７のｐＨと同程度のｐＨに調製された緩衝液を緩衝液収容部３８１，３８２に収容することによって、後述する電気泳動において、ゲルフィルタ３７のｐＨを安定させることができる。
【００２５】
緩衝液としては、例えば、１ｘＴＡＥ（0.04 M Tris/  0.04M Acetate/  0.001 M EDTA）や１ｘＴＢＥ（0.089M Tris-Borate/  0.089M Boric Acid/  0.002M EDTA）などを用い
ることができる。
【００２６】
また、後述する本技術に係る核酸の調製方法における陽極２１及び陰極２２ａへの通電によって、緩衝液収容部３８１，３８２では、気体が発生する。このため、この気体を調製装置Ａ１１外へ排出するために緩衝液収容部３８１，３８２の空間Ｅ３１，Ｅ３２は密閉されていないことが好ましい。例えば、緩衝液収容部３８１，３８２に開口部分が設けられていてもよい。開口部分が設けられる場合には、発生した気体が排出され、液体である緩衝液が緩衝液収容部３８１，３８２内に保持されるように、開口部分に気体透過膜１１１，１１２が設けられていることが好ましい。
【００２７】
＜ゲルフィルタ＞
ゲルフィルタ３７は、本技術の第１実施形態に係る調製装置Ａ１１において、核酸とタンパク質とを分離し、回収部３３におけるタンパク質の濃度を、導入部３４における濃度に比べ低下させるための構成である。ゲルフィルタ３７を用いた核酸とタンパク質との分離については、後述する。
【００２８】
ゲルフィルタ３７は、ゲル内に形成された３次元網状構造内を核酸が通過可能となるよう構成されていればよく、材料やその濃度は特に限定されない。ゲルフィルタ３７の材質としては、例えば、アガロースやポリアクリルアミドなどを挙げることができる。
【００２９】
ゲルフィルタ３７の厚みｔは、試料に含まれるタンパク質及び核酸の濃度など応じて適宜設計することができるが、例えば１ｍｍ〜５０ｍｍが好ましい。ゲルフィルタ３７の厚みｔが薄すぎると、核酸とタンパク質との分離を十分に行うことができない。一方、ゲルフィルタ３７の厚みｔが厚すぎると、核酸がゲルフィルタ３７を通過して回収部３３へ達するまでの時間が長くなり、核酸の調製に要する時間が長くなる。
【００３０】
ゲルフィルタ３７のｐＨは、試料に含まれるタンパク質の種類等に応じて、適宜選択することができる。また、生体由来の試料を調製装置Ａ１１によって調製する場合には、後述する理由により、ゲルフィルタ３７は、ｐＨ７〜１０に調製されていることが好ましい。
【００３１】
＜多孔膜＞
本技術の第１実施形態に係る調製装置Ａ１１では、空間３内に、少なくとも２枚の多孔膜（第１多孔膜３１及び第２多孔膜３２）が、陽極２１側と陰極２２ａ側に各々設けられている。第１多孔膜３１及び第２多孔膜３２は、回収部３３又は導入部３４に収容されている核酸及びタンパク質の陽極２１側又は陰極２２ａ側へのさらなる移動を防止するための構成である。
【００３２】
第１多孔膜３１及び第２多孔膜３２の材料には、セルロースアセテート、再生セルロース、ポリカーボネイト等の公知の材料から適宜選択することが可能である。さらに多孔膜として、イオン交換膜を用いることもできる。また、第１多孔膜３１と第２多孔膜３２の材質は、同一である必要はなく、材料や性質のことなる多孔膜を、第１多孔膜３１と第２多孔膜３２に使い分けてもよい。
【００３３】
第１多孔膜３１の平均孔径は１ｎｍ〜１０ｎｍであることが好ましい。第１多孔膜３１の平均孔径を、上記範囲とすることにより、回収部３３の空間Ｅ２内にある核酸が、陽極２１側に泳動され、陽極２１まで達し、回収部３３の空間Ｅ２内における核酸の濃度が低下してしまうことを防ぐことができる。
【００３４】
＜陽極及び陰極＞
本技術の第１実施形態に係る調製装置Ａ１１に設けられている陽極２１及び陰極２２ａは、陽極２１及び陰極２２ａに挟まれた空間３（回収部３３、導入部３４及びゲルフィルタ３７）に電場を発生させるための構成である。陽極２１及び陰極２２ａの各電極の材料には、電極に使用する公知の材料を用いることができる。材料としては、例えば、金、白金、酸化イリジウム、窒化チタン、ステンレス等の金属が挙げられる。
【００３５】
（３）本技術に係る核酸の調製方法
上述した調製装置Ａ１１を用いた本技術に係る核酸の調製方法（以下、単に「調製方法」とも称す）について、図２及び図３を参照しながら説明する。図２は、本技術に係る調製方法を示すフローチャートである。
【００３６】
本技術に係る調製方法には、図２に示すように、陽極２１と陰極２２ａとの間のゲルフィルタ３７が設けられた空間の、陰極２２ａとゲルフィルタ３７に挟まれた領域（導入部３４）にタンパク質及び核酸を含む試料を収容する手順Ｓ１と、陽極２１及び陰極２２ａに通電する手順Ｓ２と、ゲルフィルタ３７と陽極２１とに挟まれた領域（回収部３３）から核酸を回収する手順Ｓ３と、を含む。
【００３７】
図３は、図２に示すフローチャートの各手順における調製装置Ａ１１内での核酸Ｎ及びタンパク質Ｐの挙動を示す模式図である。なお、図３に示す調製装置Ａ１１は、図１と同様に断面模式図である。
【００３８】
＜試料の収容手順＞
図２に示すタンパク質及び核酸を含む試料を収容する手順（試料の収容手順）Ｓ１では、前述のタンパク質及び核酸を含む試料を導入口３５から導入部３４内へ導入する（図３Ａ、矢印Ｆ１参照）。図３に示すように、試料が収容された導入部３４の空間Ｅ１では、核酸Ｎとタンパク質Ｐが混在した状態で存在する。
【００３９】
また、試料が生体由来のものである時には、本技術に係る核酸の調製方法では、本手順Ｓ１の前に、試料のｐＨをｐＨ７〜１０に調製する手順を含むことが好ましい。生体由来の試料の多くに含まれるタンパク質Ｐであるアルブミン（等電点  ４．７）やγーグロブリン（等電点  ７．３）などは、酸性溶液中では、正に帯電する。このため、負に帯電している核酸Ｎに吸着しやすくなり、陽極２１及び陰極２２ａに通電する手順Ｓ２において、核酸Ｎの陽極２１側への移動度が低下する。
【００４０】
また、ゲルフィルタ３７のｐＨは、試料のｐＨと同程度に調製されていることが好ましい。ゲルフィルタ３７と試料のｐＨに差が少ないことにより、陽極２１及び陰極２２ａに通電する手順Ｓ２によって、核酸Ｎ及びタンパク質Ｐが泳動される際に、これらの泳動が安定する。即ち、本技術に係る核酸の調製方法においては、試料が生体由来である場合には、ｐＨ７〜１０に調製されたゲルフィルタを用いることが好ましい。
【００４１】
試料が導入部３４へ収容された後、導入口３５は、蓋などによって閉じられ、導入部３４が封止されることが好ましい（図３Ａにおいて、蓋は不図示）。導入部３４が封止されることにより、試料が調製用装置Ａ１１の外へこぼれ出すことが防止される。また、試料が汚染されることが防止される。また、回収部３３についても、回収部３３内の汚染等を防止するために、ゲルフィルタ３７と陽極２１とに挟まれた領域から核酸を回収する手順Ｓ３まで、回収口３６は蓋などによって閉じられ、回収部３３が封止されていることが好ましい。
【００４２】
＜電極への通電手順＞
図２に示す陽極２１及び陰極２２ａに通電する手順（電極への通電手順）Ｓ２では、調製装置Ａ１１に備えられている陽極２１及び陰極２２ａへ通電し、陽極２１と陰極２２ａとの間の空間３に電場を発生させる。
【００４３】
図３Ａに示すように、本手順Ｓ２が開始される時点で、回収部３３及び緩衝液収容部３８１，３８２には、ゲルフィルタ３７のｐＨ等に適した組成の緩衝液が収容されている。
【００４４】
空間３に電場が生じると、導入部３４に収容されている核酸Ｎは、負に帯電しているため、陽極２１側へ向けて泳動され、ゲルフィルタ３７の方向へ進む（図３Ｂ、矢印Ｆ２参照）。一方、タンパク質Ｐは、試料のｐＨと個々のタンパク質Ｐの等電点に応じて、陽極２１側又は陰極２２ａ側へ各々泳動される。
【００４５】
例えば、タンパク質Ｐがアルブミン（等電点  ４．７）であり、試料及びゲルフィルタ３７のｐＨがｐＨ８．８であれば、空間３に電場が生じると、アルブミンは負に帯電しているため、陽極２１側へ泳動される。
【００４６】
図３Ｂに示すように、本手順Ｓ２により、核酸Ｎ及びタンパク質Ｐはゲルフィルタ３７内を進む（矢印Ｆ２参照）。この時、核酸Ｎの分子量がタンパク質Ｐの分子量に比べ小さいため、核酸Ｎとタンパク質Ｐのゲルフィルタ３７内を移動する速度に差が生じる。また、ゲルフィルタ３７のｐＨに近い等電点のタンパク質は、帯電度が低いため、泳動されにくい。この結果、核酸Ｎはタンパク質Ｐから分離される。核酸Ｎは、タンパク質Ｐから離れてゲル内を進み、最終的には、ゲルフィルタ３７外へ達し、回収部３３へ到達する。
【００４７】
本手順Ｓ２において、陽極２１及び陰極２２ａへ印加する電圧及び通電時間は、試料に含まれる核酸Ｎの濃度やタンパク質Ｐの種類やゲルフィルタ３７の厚みのなど、核酸Ｎとタンパク質Ｐとの分離条件に応じて適宜決めることができる。電極への通電は、核酸Ｎの大部分が回収部３３へ到達し、かつタンパク質Ｐの大部分がゲルフィルタ３７内に留まっている状態で終了されることが好ましい。
【００４８】
＜核酸の回収手順＞
図２に示すゲルフィルタ３７と陽極２１とに挟まれた領域（回収部３３）から核酸を回収する手順（核酸の回収手順）Ｓ３では、回収部３３に到達した核酸を、分析に用いるために他の容器などへ移す。本手順Ｓ３の説明においては、便宜的に、ゲルフィルタ３７を通過した核酸を含む回収部３３内の液体を回収液と称する。回収液は、ピペットなどを回収口３６から回収部３３内へ導入することで、他の容器に移すことができる（図３Ｃ、矢印Ｆ３参照）。
【００４９】
上述した電極への通電手順Ｓ２によって、核酸Ｎは回収部３３へ達している。回収部３３の容積は、導入部３４の容積に比して小さいため、導入部３４に導入された試料の容量比べ回収液の容量は少なくなる（図３Ｃ参照）。従って、試料に含まれる核酸Ｎと同程度の量の核酸Ｎが回収液に含まれていれば、核酸Ｎの濃度は、試料に比べ回収液において上昇する。即ち、本技術に係る核酸の調製方法によって試料に含まれる核酸Ｎを濃縮することができる。
【００５０】
また、上述した電極への通電手順Ｓ２によって、タンパク質Ｐはゲルフィルタ３７内へ移動し、ゲルフィルタ３７内に留まった状態にある。このため、回収液に含まれるタンパク質Ｐの量は、試料に含まれていたタンパク質Ｐの量に比べ減少する。核酸Ｎの精製度を高めるとは、核酸Ｎを含む液体に含まれる核酸Ｎ以外の成分の濃度を低下させるということである。従って、本技術に係る核酸の調製方法によって試料に含まれる核酸Ｎの精製度を高めることができ、核酸Ｎを分析により適した状態にできる。
【００５１】
本技術に係る核酸の調製方法では、上述したようにゲルフィルタ３７を用いることにより、核酸Ｎを濃縮し、精製度を高めることができる。例えば、特許文献１に開示されている核酸の単離方法では、種々の試薬を用意し、核酸が吸着された担体の複数回の洗浄が必要とされる。一方、本技術に係る核酸の調製方法では、陽極２１と陰極２２ａに通電することで、核酸を分析に適した状態に調製することができる。このため、本技術に係る核酸の調製方法によって、より簡便に核酸を分析に適した状態に調製することができる。
【００５２】
＜試料の超音波処理＞
本技術に係る核酸の調製方法では、前記収容する手順Ｓ１の前に前記試料を超音波処理する手順を含んでいてもよい。本手順は、本技術に係る核酸の調製方法において必須ではない。しかし、例えば、核酸Ｎが核ゲノムなど高分子である場合には、超音波処理により核酸Ｎを断片化することによって上述したゲルフィルタ３７による分離において、タンパク質Ｐとの移動度に差が生じ易くなる。超音波処理後の核酸の大きさは、２００〜２０００ｋｂｐの範囲であることが好ましい。
【００５３】
また、核酸Ｎが、細菌のゲノムなどのように、試料に含まれる細胞の中に存在する場合には、超音波処理によって細胞膜を破砕することにより、核酸が細胞内から試料中に放出され易くなり、試料に含まれる核酸Ｎの濃縮及び精製が容易となる。
【００５４】
超音波処理する手順は、公知の超音波発生装置を利用して行うことができる。例えばホーン型の超音波ホモジナイザーのような接触型の超音波発生装置を用いてもよい。また、試料と接触しない非接触型の超音波装置を用いることもできる。超音波の周波数は、超音波発生装置の性能や試料の性質に合わせ適宜選択できる。
【００５５】
＜試料の脱塩＞
本技術に係る核酸の調製方法では、前記収容する手順の前に前記試料を脱塩する手順を含んでいてもよい。本手順は、本技術に係る核酸の調製方法において必須ではない。しかし、例えば、試料が生体由来等である場合には、試料の塩濃度を下げることにより、上述した陽極２１及び陰極２２ａに通電する手順Ｓ２において、これらの電極へ１００Ｖ程度の電圧を印加することが容易となる。従って、ゲルフィルタ３７を用いて行う核酸Ｎとタンパク質Ｐとの分離をより短時間で完了させることが可能となる。
【００５６】
脱塩する手順は、公知の脱塩に用いる手法によって行うことができる。脱塩に用いる手法としては、例えば、透析、ゲル濾過、イオン交換樹脂による脱塩などが挙げられる。特に、電気透析及びイオン交換樹脂を用いる手法が好ましい。また、陽極２１及び陰極２２ａへ１００Ｖ程度の電圧を印加することためには、試料の電気伝導度を２ｍＳ／ｃｍ以下とすることが好ましい。また、上述した調製装置Ａ１１を電気透析装置として利用し、脱塩する手順を調製装置Ａ１１を用いて行ってもよい。この場合、試料の電気伝導度が低下した後に、電極へ印加する電圧値を上昇させることで、脱塩する手順と、試料の収容手順Ｓ１を、試料を別の容器に移し替えることなく連続して行うことができる。
【００５７】
なお、本技術に係る核酸の調製方法に、上記の超音波処理する手順と脱塩する手順とを含む場合には、脱塩する手順の後に超音波処理する手順を行うことが好ましい。これは、核酸が細胞内に保持されていたり、高分子の状態である方が、核酸がより分解され難いためである。
【００５８】
（４）第１実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置
図４は、第１実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置の模式図である。図４中符号Ａ１２で示す調製装置において、検出部４以外の構成は、第１実施形態と同一である。第１実施形態と同一の構成については、同一の符号を付し、重複する部分の説明は省略する。
【００５９】
核酸の調製装置Ａ１２は、図４に示すようにゲルフィルタ３７の回収部３３（第１領域）との境界Ｌへタンパク質Ｐが移動したことを検出する検出部４を備えている。上述したように、調製装置Ａ１２を用いて行う核酸の調製では、ゲルフィルタ３７内に移動したタンパク質Ｐがゲルフィルタ３７を通過し回収部３３へ到達する前に、電極への通電を終了することが好ましい。検出部４は、境界Ｌへタンパク質Ｐが到達したことを検出することで、ユーザに通電の終了の適切な時期を知らせることができる。また、検出部４には、ユーザに向けてタンパク質Ｐが到達したことを表示するための構成が備えられていてもよい。
【００６０】
検出部４におけるタンパク質の検出は、例えば、光学的に行うことができる。例えば、試料が生体由来であれば、ヘムやその代謝産物であるビリルビン等の色素が結合したアルブミンが含まれている場合が多い。また、血漿などにはヘモグロビンなどが含まれている場合もある。検出部４がこれらの色素に由来する特定の波長の光（図４、矢印参照）を検出することにより、タンパク質Ｐの境界Ｌへの到達を検出することができる。また、試料に由来する色素だけでなく、試料に含まれる特定のタンパク質を予め色素で標識しておき、検出部４が標識されたタンパク質Ｐを検出可能となるようにしておいてもよい。
【００６１】
第１実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置Ａ１２では、タンパク質Ｐの境界Ｌへの到達を検出する検出部４を有することにより、電極への通電を核酸の調製に適した時期に終了することがより簡便となる。従って、核酸の調製装置Ａ１２を用いて行う核酸の調製がより簡便となる。調製装置Ａ１２の他の効果については、第１実施形態に係る調製装置Ａ１１と同様である。
【００６２】
（５）本技術の第２実施形態に係る核酸の調製装置
図５は、本技術の第２実施形態に係る核酸の調製装置の模式図である。図５中符号Ａ２１で示す調製装置において、第２陰極２２ｂ、第１開口部３９１及びスイッチ５以外の構成は、第１実施形態と同一である。第１実施形態と同一の構成については、同一の符号を付し、重複する部分の説明は省略する。
【００６３】
＜第２陰極＞
第２実施形態に係る核酸の調製装置Ａ２１は、ゲルフィルタ３７内に陰極２２ａとは別に陰極２２ｂを設置可能である。核酸の調製装置Ａ２１の説明においては、便宜的に、陰極２２ａを第１陰極２２ａとし、ゲルフィルタ３７内に設けられる陰極２２ｂを第２陰極２２ｂとする。
【００６４】
上述したように、調製装置Ａ２１を用いて行う核酸の調製では、ゲルフィルタ３７内にタンパク質Ｐが留まっている状態で電極への通電を終了することが好ましい。一方、回収部３３へ到達した核酸Ｎについては、さらに陽極２１側へ泳動させ、第１多孔膜３１上に集めることで、核酸Ｎをより濃縮させることが好ましい（図５において、核酸Ｎ及びタンパク質Ｐは不図示）。
【００６５】
陽極２１と第１陰極２２ａへの通電が行われている時に、ゲルフィルタ３７内に第２陰極２２ｂが設けられていると、第２陰極２２ｂが分極して、ユーザが意図しない電極反応が起き、ゲルフィルタ３７によるタンパク質Ｐと核酸Ｎとの分離が十分に行われないおそれがある。そこで、調製装置Ａ２１では、陽極２１及び陰極２２ａへの通電が終了した後に、第１多孔膜３１上に核酸Ｎを集めるための第２陰極２２ｂをゲルフィルタ３７内に設けることができるように構成されている。
【００６６】
核酸Ｎが回収部３３へ到達し、ゲルフィルタ３７内にタンパク質Ｐが留まっている時点で、第１陰極２２ａへの通電は終了する。その後、ゲルフィルタ３７内に設けられ第２陰極２２ｂと陽極２１へ通電する。この結果、第２陰極２２ｂと陽極２１との間に電場が発生し、回収部３３内の核酸Ｎは、第１多孔膜３１上に集められる。一方、ゲルフィルタ３７内のタンパク質Ｐは電場の影響を受けにくいため、ゲルフィルタ３７内に留まる。
【００６７】
＜第１開口部＞
第２実施形態に係る核酸の調製装置Ａ２１において、ゲルフィルタ３７内に第１陰極２２ａとは別に第２陰極２２ｂを設置するための構成は、第２陰極２２ｂを設置可能であれば何れであってもよく、特に限定されない。図５では、第２陰極２２ｂを設置するための第１開口部３９１が筐体１に設けられている例を示す。図５に示すように、第２陰極を２２ｂを第１開口部３９１から挿入することにより、ゲルフィルタ３７内へ第２陰極を設置することができる。
【００６８】
＜スイッチ＞
第２実施形態に係る核酸の調製装置Ａ２１では、ゲルフィルタ３７内の陰極２２ｂ（第２陰極）と陽極２１への通電と、ゲルフィルタ３７外に設けられた陰極２２ａ（第１陰極２２ａ）と陽極２１への通電と、を切り替えることができる。例えば、陽極２１、第１陰極２２ａ及び第２陰極２２ｂへ通電する電源Ｂと各電極とをつなぐ配線上にスイッチ５を設けておくことで、第１陰極２２ａから第２陰極２２ｂへ通電を切り替えることができる。
【００６９】
本技術の第２実施形態に係る核酸の調製装置Ａ２１では、ゲルフィルタ３７内に第２陰極が２２ｂが設けられることによって、タンパク質Ｐをゲルフィルタ３７内に留めた状態で、回収部３３内の核酸Ｎを第１多孔膜３１上に集めることができる。従って、核酸の調製装置Ａ２１を用いた核酸の調製では、調製後に得られる液体における核酸Ｎの濃度を、精製度を低下させることなく高めることが可能となる。調製装置Ａ２１の他の効果については、第１実施形態に係る調製装置Ａ１１と同様である。
【００７０】
なお、核酸の調製装置Ａ２１が陽極２１及び陰極２２ａへの通電を制御する制御部を有している場合には、本技術に係る核酸の調製方法は、制御部が、陽極２１と陰極２２ａとの間のゲルフィルタ３７が設けられた空間３の、陰極２２ａとゲルフィルタ３７に挟まれた領域（導入部３４）にタンパク質Ｐ及び核酸Ｎを含む試料が収容され、陽極２１及び陰極２２ａに通電する手順と、ゲルフィルタ３７内で核酸を陽極とゲルフィルタに挟まれた領域に泳動させる手順と、を含む核酸の調製方法とすることもできる。
【００７１】
（６）第２実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置
図６は、第２実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置の模式図である。図６中符号Ａ２２で示す調製装置において、第３陰極２２ｃ及び第２開口部３９２部以外の構成は、第２実施形態と同一である。第２実施形態と同一の構成については、同一の符号を付し、重複する部分の説明は省略する（なお、図６において、電源Ｂ及びスイッチ５は不図示）。
【００７２】
＜第３陰極＞
第２実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置Ａ２２において、ゲルフィルタ３７内の陰極２２ｂ，２２ｃは、核酸Ｎの移動方向に対して複数配設可能である。図６に示すように、調製装置Ａ２２においては、核酸Ｎのゲルフィルタ３７内の移動に合わせて、陽極２１側に向かって、順に陰極（第２陰極２２ｂ、第３陰極２２ｃ）を設けることができる（矢印Ｆ参照）。第２陰極２２ｂ及び第３陰極２２ｃのゲルフィルタ３７内への設置は、調製装置Ａ２１の場合と同様に、例えば、筐体１に第１開口部３９１及び第２開口部３９２を設け、これらの開口部に第２陰極２２ｂ及び第３陰極２２ｃを挿入することにより行うことができる。
【００７３】
第２実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置Ａ２２では、通電する陰極を第１陰極２２ａから順に陽極２１側へ変えることが可能となる（矢印Ｆ参照）。このため、核酸Ｎのゲルフィルタ３１内への移動が完了した時点で、第１陰極２２ａから第２陰極２２ｂへ通電を切り替えることによって、ゲルフィルタ３７へ移動するタンパク質Ｐの量を減少させることができる（図６において、核酸Ｎ及びタンパク質Ｐは不図示）。さらに、核酸Ｎが回収部３３へ到達した時点で、第２陰極２２ｂから第３陰極２２ｃへ通電を切り替えることによって、タンパク質Ｐをゲルフィルタ３７内に留めた状態で、核酸Ｎを第１多孔膜３１上に集めることができる。
【００７４】
なお、図６においては、第２陰極２２ｂと第３陰極２２ｃの２つの陰極が配設されている例を示すが、第２実施形態の変形実施形態に係る調製装置Ａ２２において、配設される陰極の数は特に限定されず、３つ以上とすることもできる。
【００７５】
第２実施形態の変形実施形態に係る核酸の調製装置Ａ２２では、ゲルフィルタ３７内に陰極（第２陰極２２ｂ、第３陰極２２ｃ）を複数設けることができる。このため、調製装置Ａ２２を用いた核酸の調製では、タンパク質Ｐの混入をより抑えて核酸Ｎを濃縮することができる。従って、核酸の調製装置Ａ２２を用いた核酸の調製では、調製後に得られる液体の核酸Ｎの濃度を、精製度を低下させることなく高めることが可能となる。調製装置Ａ２２の他の効果については、第１実施形態に係る調製装置Ａ１１と同様である。
【００７６】
なお、本技術は、以下のような構成もとることができる。  
（１）陽極と、陰極と、該陽極と該陰極の間に形成された空間と、からなり、前記空間は、前記陽極側に設けられた第１多孔膜と、前記陰極側に設けられた第２多孔膜と、前記第１多孔膜と前記第２多孔膜に挟まれた領域に設けられた、該領域内へタンパク質及び核酸を含む試料を導入する導入口と、前記導入口と前記第１多孔膜との間に設けられたゲルフィルタと、を有する核酸の調製装置。
（２）前記ゲルフィルタと前記第１多孔膜とで区切られた第１領域の容積は、前記ゲルフィルタと前記第２多孔膜とで区切られた第２領域の容積に比して小さい上記（１）記載の核酸の調製装置。
（３）前記第１多孔膜の平均孔径は１ｎｍ〜１０ｎｍである上記（１）又は（２）記載の核酸の調製装置。
（４）前記ゲルフィルタはｐＨ７〜１０に調製されている上記（１）〜（３）の何れかに記載の核酸の調製装置。
（５）前記ゲルフィルタの前記第１領域との境界へ前記タンパク質が移動したことを検出する検出部を備える上記（１）〜（４）の何れかに記載の核酸の調製装置。
（６）核酸増幅反応の鋳型核酸の調製に用いる上記（１）〜（５）の何れかに記載の核酸の調製装置。
（７）前記ゲルフィルタ内に前記陰極とは別に陰極を設置可能である上記（１）〜（６）の何れかに記載の核酸の調製装置。
（８）前記ゲルフィルタ内の前記陰極は、前記核酸の移動方向に対して複数配設可能である上記（７）記載の核酸の調製装置。
（９）前記ゲルフィルタ内の前記陰極と前記陽極への通電と、前記ゲルフィルタ外に設けられた前記陰極と前記陽極への通電と、を切り替えることができる上記（７）又は（８）記載の核酸の調製装置。
（１０）陽極と陰極との間のゲルフィルタが設けられた空間の、前記陰極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域にタンパク質及び核酸を含む試料が収容され、前記陽極及び前記陰極に通電する手順と、前記ゲルフィルタ内で前記核酸を前記陽極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域に泳動させる手順と、を含む核酸の調製方法。
（１１）陽極と陰極との間のゲルフィルタが設けられた空間の、前記陰極と前記ゲルフィルタに挟まれた領域にタンパク質及び核酸を含む試料を収容する手順と、前記陽極及び前記陰極に通電する手順と、前記ゲルフィルタと前記陽極とに挟まれた領域から核酸を回収する手順と、を含む核酸の調製方法。
（１２）ｐＨ７〜１０に調製された前記ゲルフィルタを用いる上記（１１）記載の核酸の調製方法。
（１３）前記収容する手順の前に前記試料を超音波処理する手順を含む上記（１１）又は（１２）記載の核酸の調製方法。
（１４）前記収容する手順の前に前記試料を脱塩する手順を含む上記（１１）〜（１３）の何れかに記載の核酸の調製方法。
（１５）核酸増幅反応の鋳型核酸を調製するための上記（１０）〜（１４）の何れかに記載の核酸の調製方法。
（１６）前記核酸増幅反応を、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法によって行う上記（１５）記載の核酸の調製方法。
（１７）前記核酸増幅反応は、等温核酸増幅反応である上記（１５）記載の核酸の調製方法。
【実施例】
【００７７】
＜実験例１＞
１．本技術に係る核酸の調製装置を用いた試料中の核酸の濃縮
本技術に係る核酸の調製装置を用いて核酸及びタンパク質を含む試料を調製することにより、試料に含まれる核酸の濃縮が可能であるか検証した。また、調製装置を用いることで、試料に含まれるタンパク質の濃度を低下させ、核酸の精製度を高めることができるか検証した。
【００７８】
（材料と方法）
予め脱塩されたウシ血漿に蛍光色素Ｃｙ３で修飾された２０塩基対からなる核酸鎖を添加し、本実験例における試料とした。また、本実験例では、図１に示す調製装置Ａ１１を用いて試料の調製を行った。調製装置Ａ１１の詳細は以下の通りである。
【００７９】
第１多孔膜３１及び第２多孔膜３２には、炭酸ナトリウムにより洗浄された平均孔径５ｎｍの透析膜を用いた。ゲルフィルタ３７には、ｐＨ８．８に調製された１ｘＴＢＥ（0.089M Tris-Borate/  0.089M Boric Acid/  0.002M EDTA）を用いて作製された０．５％アガロースゲル（ｓｅａｋｅｍ  ｇｏｌｄ  ａｇａｒｏｓｅ、ＣＡＭＢＲＥＸ社製））を使用した。また、緩衝液収容部３８１，３８２及び回収部３３には、各々、１ｘＴＢＥ（ｐＨ８．８）を充填した。
【００８０】
上記の試料を導入部３４に収容した後、陽極２１及び陰極２２ａに１００Ｖで通電した。通電後、１０分ごとに回収部３３から液体を２０μｌずつ回収した。回収した液体に含まれる核酸鎖及びタンパク質の濃度は、紫外可視分光光度計（Ｎａｎｏｄｒｏｐ  ＮＤ−１０００、ＮａｎｏＤｒｏｐ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて測定した。核酸の定量は、波長５７０ｎｍにおける蛍光強度から算出し、タンパク質の定量は、波長２６０ｎｍの吸光度から算出した。
【００８１】
（結果）
本実験例の結果を図７に示す。図７の縦軸において、右側は、核酸の濃度に対応する目盛であり、左側は、タンパク質の濃度に対応する目盛である。図７に示すように、調製前の試料における核酸の濃度に比べ、通電後１０分、２０分、３０分の各々の時点で回収された液体における核酸の濃度が上昇していた。この結果から、本技術に係る調製装置を用いて核酸を含む試料を調製することによって、核酸を濃縮できることが確認された。
【００８２】
また、調製前の試料におけるタンパク質の濃度に比べ、通電後１０分、２０分、３０分の各々の時点で回収された液体のタンパク質の濃度が低下していた。この結果から、本技術に係る調製装置を用いて核酸を及びタンパク質を含む試料を調製することによって、核酸とタンパク質とが分離され、液体に含まれるタンパク質の濃度が低下することが確認された。即ち、回収部３３から回収された液体では、核酸の精製度が高まっていることが確認された。
【００８３】
＜実験例２＞
２．調製装置によって調製された液体中に含まれる核酸の分析
上述した調製装置によって調製された試料中の核酸が、調製前の試料に比べ分析に適しているか検証した。本実験例では、分析手法として、核酸増幅反応を選び、ＬＡＭＰ法によって核酸の増幅を行った。
【００８４】
本実験例では、ブタ髄液にビフィズス菌を１０００個／μｌの濃度となるように加え、試料とした。この試料については、超音波処理及び脱塩処理を行った後、実験例１に記した調製装置の導入部３４に収容し、電極に１００Ｖで１２分間通電して、調製を行った。
【００８５】
電極への通電を終了させた後に、回収部から液体を２０μｌ回収し、この回収液を３個のチューブの各々に５μｌずつ分注した。回収液が収容されたチューブにＬＡＭＰ反応用試薬液を５μｌずつ加え、これらを試験群１〜３とした。一方、対照群として、回収液の代わりに、調製装置で調製する前の試料を５μｌずつチューブへ分注し、ＬＡＭＰ反応用試薬液を５μｌずつ加え、これらを対照群１〜３とした。
【００８６】
試験群１〜３及び対照群１〜３をサーマルサイクラ―（ＢＩＯ−ＲＡＤ社製  ＤＮＡ  ｅｎｇｉｎｅ）を用いて６０℃に保ち、９０分間、核酸の増幅を測定した。
【００８７】
本実験例では、増幅核酸鎖の検出のため、ＱＰｒｏｂｅを用いた。ＱＰｒｏｂｅには、蛍光標識されたシトシンが末端に存在し、核酸鎖とハイブリダイスしていない状態では、この蛍光物質は発光する。一方、核酸鎖とハイブリダイズするとＱＰｒｏｂｅの蛍光標識されたシトシンがグアニンと対向するため、グアニンの影響により蛍光物質は消光する。従って、核酸増幅反応において、増幅核酸鎖にハイブリダイズするＱｐｒｏｂｅを用いることにより、Ｑｐｒｏｂｅ由来の蛍光強度の低下から核酸の増幅を検出することができる。
【００８８】
本実験例の結果を図８に示す。試験群１〜３では、蛍光強度が経時的に低下し、核酸が増幅していることが確認された。一方、対照群１〜３では、試験群１〜３に見られるような蛍光強度の低下は見られず、核酸が増幅されていないことが確認された。
【００８９】
本実験例の結果から、本技術に係る調製装置を用いて核酸及びタンパク質を含む試料を調製することによって、試料を核酸の分析に適した状態にすることができることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００９０】
本技術に係る核酸の調製装置等によれば、簡便な操作で核酸を調製することが可能である。このため、例えば、臨床における遺伝子型判定や病原体検出などのための核酸の調製に、本技術に係る核酸の調製装置は用いられ得る。
【符号の説明】
【００９１】
Ａ１１，Ａ１２，Ａ２１，Ａ２２：調製装置、Ｂ：電源、１：筐体、１１１，１１２：気体透過膜、２１：陽極、２２ａ：陰極（第１陰極）、２２ｂ：第２陰極、２２ｃ：第３陰極、３：空間、３１：第１多孔膜、３２：第２多孔膜、３３：回収部（第１領域）、３４：導入部（第２領域）、３５：導入口、３６：回収口、３７：ゲルフィルタ、３８１，３８２：緩衝液収容部、３９１：第１開口部、３９２：第２開口部、４：検出部、５：スイッチ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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