(57)【要約】      （修正有）【課題】親水性に優れ、長期にわたり安定して親水性を発揮することが可能なバイオセンサ用電極およびバイオセンサを提供する。【解決手段】支持基材２と、上記支持基材上に形成された電極系４、配線部５および端子部６と、上記支持基材上２に、上記電極系４および上記端子部６が露出し、上記配線部５が覆われるように形成された絶縁層３とを有するバイオセンサ用電極であって、上記絶縁層３がモスアイ構造を有する親水部を有することを特徴とする。【選択図】図３
2014215247.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
支持基材と、
前記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、
前記支持基材上に、前記電極系および前記端子部が露出し、前記配線部が覆われるように形成された絶縁層と
を有するバイオセンサ用電極であって、
前記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有することを特徴とするバイオセンサ用電極。
【請求項２】
前記絶縁層が樹脂組成物を用いて形成されたものであり、前記樹脂組成物を用いて平坦な樹脂層を形成したときの前記樹脂層の表面における純水の静的接触角が、θ／２法で５０°以上７５°以下の範囲内であることを特徴とする請求項１に記載のバイオセンサ用電極。
【請求項３】
前記バイオセンサ用電極をバイオセンサに用いた場合に空気抜き流路の出口が配置される領域に前記親水部よりも親水性が低い低親水性領域が形成されていることを特徴とする請求項１または請求項２に記載のバイオセンサ用電極。
【請求項４】
前記絶縁層上にスペーサが形成されていることを特徴とする請求項１から請求項３までのいずれかに記載のバイオセンサ用電極。
【請求項５】
支持基材と、
前記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、
前記電極系上に配置された反応部と、
前記支持基材上に、前記電極系および前記端子部が露出し、前記配線部が覆われるように形成された絶縁層と、
前記絶縁層上に形成され、前記電極系および前記反応部に試料を供給する試料供給路を形成するスペーサと、
前記スペーサ上に配置されたカバーと
を有するバイオセンサであって、
前記絶縁層はモスアイ構造を有する親水部を有し、前記親水部は前記試料供給路が配置される領域に形成されていることを特徴とするバイオセンサ。
【請求項６】
支持基材と、前記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、前記支持基材上に、前記電極系および前記端子部が露出し、前記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有し、前記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有するバイオセンサ用電極の製造方法であって、
前記絶縁層を形成する絶縁層形成工程が、
前記支持基材上に、前記電極系および前記端子部が露出し、前記配線部が覆われるように樹脂組成物を滴下した後、前記樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、
前記モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程と
を有することを特徴とするバイオセンサ用電極の製造方法。
【請求項７】
支持基材と、前記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、前記支持基材上に、前記電極系および前記端子部が露出し、前記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有し、前記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有するバイオセンサ用電極の製造方法であって、
前記絶縁層を形成する絶縁層形成工程が、
モスアイ構造形成用原版に樹脂組成物を充填した後、前記支持基材に前記樹脂組成物が充填された前記モスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、
前記モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程と
を有することを特徴とするバイオセンサ用電極の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液等の液体試料中の特定成分を測定するバイオセンサに関する。
【背景技術】
【０００２】
血液等の生体試料中の特定成分について迅速かつ簡便に濃度等を測定する方法として、電気化学的検出手段によるバイオセンサが実用化されている。バイオセンサは、一般に、作用極および対極を含む電極系、酵素および電子受容体を基本構成として備えている。このようなバイオセンサの一例として、電気化学的に血液中のグルコースを定量化するグルコースセンサがある。
【０００３】
グルコースセンサにおいては、酵素は血液中のグルコースを選択的に酸化してグルコン酸を生成し、また同時に電子受容体を還元して還元体を生じる。この還元体に電極系で一定の電圧を印加することで還元体が再び酸化され、その際に電流が発生する。この電流が血液中のグルコース濃度に依存することから、血液中のグルコースを定量化することができる。
【０００４】
また、一般にエンドトキシンという細菌壁毒素が知られており、近年では、電気化学法を用いてエンドトキシンの濃度を測定する方法が研究されている。エンドトキシンは、大腸菌やサルモネラ菌をはじめとするグラム陰性菌の外膜を構成している毒性物質である。このエンドトキシンが極微量（例えば、ｎｇ／ｍＬオーダー）でも血液中等に混入した場合、ショック症状等を引き起こし、最悪死に至る可能性もある。ただし、空気中にはエンドトキシンが広く存在している。このため、透析液等の医薬品にエンドトキシンが存在していないか等の検査が実施されている。
例えば、被検体および試薬の混合物に電極を入れ、ディファレンシャルパルスボルタンメトリー（ＤＰＶ）に基づく測定を行う技術が知られている（特許文献１参照）。
【０００５】
バイオセンサにおいては、血液等の液体試料を毛細管現象を利用して流路に円滑に導入するために、流路の内部に親水化処理を施すことが試みられている（例えば特許文献２参照）。親水化処理としては、例えば、樹脂中に界面活性剤を練り込んで樹脂基材を形成する方法、基材上に界面活性剤や親水性を有する樹脂を塗布する方法、基材表面にプラズマ処理やコロナ処理等の化学的な表面処理を行う方法、サンドブラスト処理等により基材表面を粗面化する方法が提案されている。また、酵素および電子受容体を含む反応部上に界面活性剤を塗布する、または反応部に界面活性剤を含有させることで、流路の内部を親水化する方法も提案されている（例えば特許文献３参照）。
しかしながら、いずれの方法においても純水の接触角を十分に小さくすることは難しく、所望の親水性が得られないという問題がある。さらに、バイオセンサの保管条件によっては大気中の水分と界面活性剤、親水性を有する樹脂、または化学的な表面処理が施された基材表面とが反応して親水性が劣化し、経時的に親水化効果が低下するという問題がある。また、電極系が形成される基材に親水化処理を施すと、電極系形成時に基材の親水性が劣化してしまうという問題もある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１２−１２７６９５号公報
【特許文献２】特開２００１−１５９６１８号公報
【特許文献３】特開２０１２−５８１６８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、上記問題点に鑑みてなされたものであり、親水性に優れ、長期にわたり安定して親水性を発揮することが可能なバイオセンサ用電極およびバイオセンサを提供することを主目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題を解決するために、本発明は、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有するバイオセンサ用電極であって、上記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有することを特徴とするバイオセンサ用電極を提供する。
【０００９】
本発明によれば、モスアイ構造がその構造上、親水性を示すため、親水性が劣化するのを抑制することが可能である。また、モスアイ構造による親水化では、純水の接触角を十分に小さくすることができ、本発明のバイオセンサ用電極をバイオセンサに用いた場合には、親水部によって試料をバイオセンサの内部へ迅速かつ容易に導くことができる。また、絶縁層が親水部を兼ねるため、絶縁層およびモスアイ構造を同時に形成することができ、工程数を低減し製造コストを削減することができる。
【００１０】
上記発明においては、上記絶縁層が樹脂組成物を用いて形成されたものであり、上記樹脂組成物を用いて平坦な樹脂層を形成したときの上記樹脂層の表面における純水の静的接触角が、θ／２法で５０°以上７５°以下の範囲内であることが好ましい。樹脂層の表面における純水の静的接触角が大きすぎると、樹脂組成物を用いて形成されるモスアイ構造の表面における純水の静的接触角が大きくなり、濡れ性が悪くなるおそれがある。また、樹脂層の表面における純水の静的接触角が小さすぎると、モスアイ構造による親水性向上の効果が十分に発揮されない場合がある。
【００１１】
また本発明においては、上記バイオセンサ用電極をバイオセンサに用いた場合に空気抜き流路の出口が配置される領域に上記親水部よりも親水性が低い低親水性領域が形成されていることが好ましい。空気抜き流路から試料が流れ出るのを防ぐことができるからである。
【００１２】
さらに本発明においては、上記絶縁層上にスペーサが形成されていてもよい。スペーサにより試料供給路を形成することができる。
【００１３】
また本発明は、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記電極系上に配置された反応部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層と、上記絶縁層上に形成され、上記電極系および上記反応部に試料を供給する試料供給路を形成するスペーサと、上記スペーサ上に配置されたカバーとを有するバイオセンサであって、上記絶縁層はモスアイ構造を有する親水部を有し、上記親水部は上記試料供給路が配置される領域に形成されていることを特徴とするバイオセンサを提供する。
【００１４】
本発明においては、上述のバイオセンサ用電極を有するため、親水性を長期にわたって安定して維持することができる。また、モスアイ構造を有する親水部が試料供給路が配置される領域に形成されていることにより、試料を電極系および反応部へ迅速かつ容易に導くことができる。
【００１５】
また本発明は、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有し、上記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有するバイオセンサ用電極の製造方法であって、上記絶縁層を形成する絶縁層形成工程が、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように樹脂組成物を滴下した後、上記樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、上記モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程とを有することを特徴とするバイオセンサ用電極の製造方法を提供する。
【００１６】
さらに本発明は、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有し、上記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有するバイオセンサ用電極の製造方法であって、上記絶縁層を形成する絶縁層形成工程が、モスアイ構造形成用原版に樹脂組成物を充填した後、上記支持基材に上記樹脂組成物が充填された上記モスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、上記モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程とを有することを特徴とするバイオセンサ用電極の製造方法を提供する。
【００１７】
本発明においては、絶縁層およびモスアイ構造を同時に形成することができ、工程数を低減し製造コストを削減することができる。
【発明の効果】
【００１８】
本発明においては、モスアイ構造を有する親水部が形成されていることにより、親水性に優れ、長期にわたり安定して親水性を発揮することが可能であるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】本発明のバイオセンサ用電極の一例を示す概略平面図および断面図である。
【図２】本発明のバイオセンサ用電極の他の例を示す概略平面図および断面図である。
【図３】本発明のバイオセンサの一例を示す分解斜視図および断面図である。
【図４】本発明のバイオセンサ用電極における絶縁層の一例を示す概略断面図である。
【図５】本発明のバイオセンサの他の例を示す分解斜視図および断面図である。
【図６】本発明のバイオセンサ用電極における電極系、配線部および端子部の一例を示す概略平面図である。
【図７】本発明のバイオセンサ用電極の他の例を示す概略平面図および断面図である。
【図８】本発明のバイオセンサの使用方法の一例を示す模式図である。
【図９】本発明のバイオセンサ用電極の製造方法の一例を示す工程図である。
【図１０】本発明のバイオセンサ用電極の製造方法の他の例を示す工程図である。
【図１１】Ｗｅｎｚｅｌ理論図の一例を示すグラフである。
【図１２】凹凸構造の一例を示す概略平面図および断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下、本発明のバイオセンサ用電極、バイオセンサおよびバイオセンサ用電極の製造方法について詳細に説明する。
【００２１】
Ａ．バイオセンサ用電極
本発明のバイオセンサ用電極は、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有するバイオセンサ用電極であって、上記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有することを特徴とするものである。
【００２２】
本発明のバイオセンサ用電極について図面を参照しながら説明する。
図１（ａ）は本発明のバイオセンサ用電極の一例を示す概略平面図であり、図１（ｂ）は図１（ａ）のＡ−Ａ線断面図、図１（ｃ）は図１（ａ）のＢ−Ｂ線断面図である。図１（ａ）〜（ｃ）に例示するように、バイオセンサ用電極１は、支持基材２と、支持基材２上に形成された電極系４、配線部５および端子部６と、支持基材２上に電極系４および端子部６が露出し、配線部５が覆われるように形成され、電極系４が露出する開口部を備える絶縁層３とを有する。この例では、絶縁層３はその表面の全面にモスアイ構造を有する親水部３Ｈを有している。また、電極系４は作用極１１および対極１２を有しており、電極系４、配線部５および端子部６は一体に形成されている。
【００２３】
図２（ａ）は本発明のバイオセンサ用電極の他の例を示す概略平面図であり、図２（ｂ）は図２（ａ）のＡ−Ａ線断面図、図２（ｃ）は図２（ａ）のＢ−Ｂ線断面図である。図２（ａ）〜（ｃ）に例示するバイオセンサ用電極１においては、支持基材２上に電極系４、配線部５および端子部６が形成され、さらに電極系４および端子部６が露出し、配線部５が覆われるように絶縁層３が形成されている。絶縁層３は電極系４が露出する開口部を備える。この例では、絶縁層３はその表面に部分的にモスアイ構造を有する親水部３Ｈを有している。
【００２４】
図３（ａ）は本発明のバイオセンサ用電極を備えるバイオセンサの一例を示す分解斜視図であり、図３（ｂ）は図３（ａ）のＣ−Ｃ線断面図、図３（ｃ）は図３（ａ）のＤ−Ｄ線断面図である。図３（ａ）〜（ｃ）は、図２（ａ）〜（ｃ）に示すバイオセンサ用電極を備えるバイオセンサの例である。
図３（ａ）〜（ｃ）に例示するように、バイオセンサ１０においては、支持基材２上に電極系４、配線部５および端子部６が形成され、電極系４および端子部６が露出し、配線部５が覆われるように絶縁層３がさらに形成されており、絶縁層３上に試料供給路２１を形成するためのスペーサ８が配置され、スペーサ８上に試料供給路２１を覆うようにカバー３１が配置されている。電極系４は作用極１１および対極１２を有しており、作用極１１上に反応部１５が形成されている。
スペーサ８は、作用極１１上の反応部１５および対極１２が露出するように、例えば試料供給路２１と試料供給路２１に通じる空気抜き流路２２とを形成するように配置されている。試料供給路２１および空気抜き流路２２は合わせてＴ字状の流路を構成している。
このバイオセンサ１０においては、試料供給路２１と空気抜き流路２２とが形成されていることで、試料供給路２１から毛細管現象を利用し、測定する試料を作用極１１上の反応部１５および対極１２の上部を通過させ、試料の目的成分を測定することができる。
【００２５】
絶縁層３の親水部３Ｈは、試料供給路２１が配置される領域に形成されている。絶縁層３の親水部３Ｈはモスアイ構造を有するため、純水の接触角を十分に小さくすることができ、親水部３Ｈ表面では試料を濡れ広がり易くすることができる。そのため、親水部３Ｈによって試料を素早く導入することができる。
【００２６】
ここで、層表面の親水化の原理は、Ｗｅｎｚｅｌ理論により説明することができる。この理論は、平坦な層を形成したときの層表面における純水との接触角が９０°未満となる材料では、表面積を大きくすることで親水化することができるという理論である。図１１にＷｅｎｚｅｌ理論図の一例を示す。図中の表面積率γは微細加工による表面積の増加率である。例えば、平坦な層を形成したときの層表面における純水との接触角が７０°の場合、表面積率γが１．５のときは純水との接触角は６０°に変化し、表面積率γが３．５のときは純水との接触角は５°以下に変化する。
従来のようなサンドブラスト処理等により基材表面を粗面化する方法では、表面積率γが小さいため、純水の接触角がそれほど変化せず、十分な親水性が得られない。これに対し、モスアイ構造では表面積率γが大きいため、純水の接触角を十分に小さくすることができ、親水化の効果が顕著に発揮される。
【００２７】
本発明において、モスアイ構造とは、蛾の目の構造を模倣したものであり、複数の微細突起が配列された微細凹凸構造である。モスアイ構造を構成する微細突起は、図４（ａ）、（ｂ）に例示するように、微細突起３ａの底部から頂部に向かうに従って、水平断面の断面積が徐々に小さくなる形状を有し、いわゆるテーパー形状を有するものである。そのため、液体の濡れ広がりが速いという利点を有する。例えば、モスアイ構造と、図１２（ａ）、（ｂ）に示すような支持基材１０２上に形成され、複数の円柱状の突起１０３ａが配列された凹凸構造１０３と比較すると、両者の表面積率γが同等であり純水との接触角が同等である場合、モスアイ構造の方が液体の濡れ広がりが速い。これは、モスアイ構造のテーパー形状によって、モスアイ構造では空気が抜けやすいためと推量される。
なお、図１２（ａ）、（ｂ）はモスアイ構造以外の凹凸構造の一例を示す概略平面図および断面図であり、図１２（ｂ）は図１２（ａ）のＥ−Ｅ線断面図である。
【００２８】
したがって本発明においては、モスアイ構造を有する親水部が形成されていることにより、本発明のバイオセンサ用電極をバイオセンサに用いた場合には、電極系および反応部へ試料を迅速かつ容易に導くことができ、測定に必要とされる試料の量を少なくすることが可能である。これにより、測定成功率の向上、使用者の負担軽減、操作性の向上を図ることが可能である。
また本発明においては、モスアイ構造がその構造上、親水性を示すため、親水性が経時的に劣化するのを抑制することが可能である。さらに、電極系、配線部および端子部が形成された支持基材上に親水部を有する絶縁層を形成するため、電極系、配線部および端子部を形成する際の親水性の劣化も抑制できる。
【００２９】
さらに本発明においては、絶縁層が親水部を兼ねるため、絶縁層およびモスアイ構造を同時に形成することができ、工程数を低減し製造コストを削減することができる。
【００３０】
以下、本発明のバイオセンサ用電極における各構成について説明する。
【００３１】
１．絶縁層
本発明における絶縁層は、支持基材上に、電極系および端子部が露出し、配線部が覆われるように形成されるものであり、モスアイ構造を有する親水部を有するものである。
【００３２】
モスアイ構造を構成する微細突起の形状は、上述のように、微細突起の底部から頂部に向かうに従って、水平断面の断面積が徐々に小さくなる形状である。微細突起の底部から頂部に向かうに従って、水平断面の断面積が徐々に小さくなるとは、微細突起の高さ方向と直交する水平面で切断したと仮定したときの水平断面内における微細突起の断面積占有率が、微細突起の底部から頂部に近づくに従い連続的に漸次減少することをいい、すなわち微細突起が先細りとなることをいう。このような微細突起の形状の具体例としては、半円状、半楕円状、三角形状、放物状、釣鐘状等の垂直断面形状を有するものが挙げられる。複数の微細突起は、同一の形状を有していてもよく異なる形状を有していてもよい。
【００３３】
モスアイ構造においては、図４（ａ）に示すように隣接する微細突起３ａ同士が密接して配置されていてもよく、図４（ｂ）に示すように隣接する微細突起３ａ同士が離れて配置されていてもよい。中でも、濡れ性が向上することから、隣接する微細突起が密接していることが好ましい。ここで、密接とは、隣接する微細突起の付け根位置が接しているか、接するほど近いことをいう。
【００３４】
モスアイ構造において、隣接する微小突起間の距離ｄ（以下、「隣接突起間距離ｄ」と称する。）の平均値ｄＡＶＧは、親水性を示すモスアイ構造が得られれば特に限定されないが、表面積を大きくして親水性を高める観点から、５０ｎｍ〜５００ｎｍの範囲内であることが好ましく、中でも７０ｎｍ〜３００ｎｍの範囲内、特に７０ｎｍ〜１８０ｎｍの範囲内であることが好ましい。なお、微細突起が一定周期で規則的に配置されている場合には、隣接突起間距離ｄは微細突起の周期と一致する。隣接突起間距離ｄの平均値ｄＡＶＧが大きすぎると、モスアイ構造の表面における純水の静的接触角が大きくなり、濡れ性が悪くなるおそれがある。また、隣接突起間距離ｄが小さすぎるものは形成が困難である。隣接突起間距離ｄにはばらつきがあってもよい。ここで、隣接突起間距離ｄとは、図４（ａ）、（ｂ）に示すような隣接する微小突起３ａの頂部から頂部までの距離をいう。
【００３５】
また、モスアイ構造を構成する微細突起の高さＨの平均値ＨＡＶＧは、親水性を示すモスアイ構造が得られれば特に限定されないが、表面積を大きくして親水性を高める観点から、１００ｎｍ〜３５０ｎｍの範囲内であることが好ましく、２００ｎｍ〜２５０ｎｍの範囲内であることがより好ましい。濡れ性を考慮すると微細突起の高さＨは高い方が好ましいが、微細突起の高さＨが高すぎるものは形成が困難である。また、微細突起の高さＨが低すぎると、表面積が小さくなり、十分な親水性が得られないおそれがある。微細突起の高さＨにはばらつきがあってもよい。ここで、微細突起の高さＨとは、図４（ａ）、（ｂ）に示すような微小突起３ａの付け根位置から頂部までの高さをいう。
【００３６】
本発明において、隣接突起間距離ｄの平均値ｄＡＶＧおよび微細突起の高さＨの平均値ＨＡＶＧは、以下の方法により測定される。
（１）まず、原子間力顕微鏡（Atomic Force Microscope:AFM）または走査型電子顕微鏡（Scanning Electron Microscope:SEM）を用いて微細突起の面内配列（微細突起配列の平面視形状）を検出する。
（２）続いて、この求められた面内配列から各微細突起の高さの極大点（以下、単に極大点と称する。）を検出する。なお、極大点を求める方法としては、平面視形状と対応する断面形状の拡大写真とを逐次対比して極大点を求める方法、平面視拡大写真の画像処理によって極大点を求める方法等、種々の手法を適用することができる。
（３）次に、検出した極大点を母点とするドロネー図（Delaunary Diagram）を作成する。ここで、ドロネー図とは、各極大点を母点としてボロノイ分割を行った場合に、ボロノイ領域が隣接する母点同士を隣接母点と定義し、各隣接母点同士を線分で結んで得られる３角形の集合体からなる網状図形である。各３角形は、ドロネー３角形と呼ばれ、各３角形の辺（隣接母点同士を結ぶ線分）は、ドロネー線と呼ばれる。
（４）次に、各ドロネー線の線分長の度数分布、すなわち隣接する極大点間の距離（隣接突起間距離）の度数分布を求める。
（５）このようにして求めた隣接突起間距離ｄの度数分布から平均値ｄＡＶＧおよび標準偏差σを求める。
【００３７】
同様の手法を適用して微細突起の高さＨの平均値ＨＡＶＧを求める。まず、上述の（２）により求められる極大点から、特定の基準位置からの各極大点位置の相対的な高さの差を取得してヒストグラム化する。このヒストグラムによる度数分布から微細突起の高さの平均値ＨＡＶＧ、標準偏差σを求める。
【００３８】
なお、微細突起の高さを測る際の基準位置は、微細突起の付け根位置、すなわち隣接する微細突起の間の谷底（高さの極小点）を高さ０の基準とする。ただし、谷底の高さ自体が場所によって異なる場合、例えば、各微細突起間の谷底を連ねた包絡面が、微細突起の隣接突起間距離に比べて大きな周期でうねった凹凸形状を有する場合等は、（１）まず、基材の表面または裏面から測った各谷底の高さの平均値を、該平均値が収束するに足る面積の中で算出する。（２）次いで、該平均値の高さを有し、かつ基材の表面または裏面と平行な面を基準面として考える。（３）その後、該基準面を改めて高さ０として、該基準面からの各微細突起の高さを算出する。
【００３９】
微細突起のアスペクト比（微細突起の高さの平均値ＨＡＶＧ／隣接突起間距離の平均値ｄＡＶＧ）は、親水性を示すモスアイ構造が得られれば特に限定されないが、０．４〜２．５の範囲内であることが好ましく、０．８〜２．１の範囲内であることがより好ましい。
【００４０】
モスアイ構造は親水性を示すものである。モスアイ構造の表面における純水の静的接触角は、θ／２法で２５°以下であることが好ましく、２０°以下であることがより好ましく、１０°以下であることが特に好ましい。これにより、モスアイ構造表面を試料が濡れ広がり易くなる。また、モスアイ構造の表面における純水の静的接触角は、通常３°以上である。
【００４１】
ここで、本発明において静的接触角は、測定対象物の表面に純水１．０μＬの液滴を滴下し、着滴１０秒後に、滴下した液滴の左右端点と頂点を結ぶ直線の、固体表面に対する角度から接触角を算出するθ／２法に従って測定した接触角とする。測定装置としては、例えば、協和界面科学社製  接触角計ＤＭ  ５００を用いることができる。
また、静的接触角は、絶縁層を形成する樹脂組成物の成分、モスアイ構造の形状等を変更することにより、調整することができる。
【００４２】
絶縁層は、樹脂組成物を用いて形成されるものである。樹脂組成物は、少なくとも樹脂を含有し、必要に応じて重合開始剤等その他の成分を含有する。ここで、樹脂とは、モノマーやオリゴマーの他、ポリマーを含む概念である。
樹脂としては、モスアイ構造を形成可能なものであれば特に限定されるものではなく、例えば、アクリレート系、エポキシ系、ポリエステル系等の電離放射線硬化性樹脂、アクリレート系、ウレタン系、エポキシ系、ポリシロキサン系等の熱硬化性樹脂、アクリレート系、ポリエステル系、ポリカーボネート系、ポリエチレン系、ポリプロピレン系等の熱可塑性樹脂等の各種材料および各種硬化形態の賦形用樹脂を使用することができる。また、非反応性重合体を含有してもよい。なお、電離放射線とは、分子を重合させて硬化させ得るエネルギーを有する電磁波または荷電粒子を意味し、例えば、すべての紫外線（ＵＶ−Ａ、ＵＶ−Ｂ、ＵＶ−Ｃ）、可視光線、ガンマー線、Ｘ線、電子線等が挙げられる。
樹脂としては、中でも成形性および機械的強度に優れる点から電離放射線硬化性樹脂が好ましい。電離放射線硬化性樹脂とは、分子中にラジカル重合性やカチオン重合性結合を有する単量体または重合体を適宜混合したものであり、適宜重合開始剤を用いて電離放射線により硬化されるものである。また、成形性に優れるとは、所望の形状に精度良く成形できることをいう。
中でも、樹脂組成物は、アクリレート系、エポキシ系、ポリエステル系の電離放射線硬化性樹脂よりなる群から選ばれる少なくとも一種を含むことが好ましく、さらに、アクリロイル基やメタクリロイル基を有するアクリレート系の電離放射線硬化性樹脂から選ばれる少なくとも一種を含むことが好ましい。
特に、樹脂は紫外線硬化性樹脂であることが好ましい。
【００４３】
樹脂組成物は、さらに必要に応じて、重合開始剤、離型剤、光増感剤、酸化防止剤、重合禁止剤、架橋剤、赤外線吸収剤、帯電防止剤、粘度調整剤、密着性向上剤等を含有することもできる。
【００４４】
また、樹脂組成物の親水性としては、親水性を示すモスアイ構造が得られれば特に限定されないが、樹脂組成物を用いて平坦な樹脂層を形成したときの樹脂層の表面における純水の静的接触角が、θ／２法で５０°以上７５°以下の範囲内であることが好ましく、より好ましくは５０°以上７０°以下の範囲内である。樹脂層の表面における純水の静的接触角が大きすぎると、樹脂組成物を用いて形成されるモスアイ構造の表面における純水の静的接触角が大きくなり、濡れ性が悪くなるおそれがある。また、樹脂層の表面における純水の静的接触角が小さすぎると、モスアイ構造による親水性向上の効果が十分に発揮されない場合がある。
ここで、絶縁層が樹脂組成物を硬化させてなるものである場合、上記の樹脂層の表面における純水の静的接触角は、樹脂組成物を硬化させて平坦な樹脂層を形成したときの樹脂層の表面における純水の静的接触角である。また、絶縁層が熱可塑性樹脂組成物で構成される場合、上記の樹脂層の表面における純水の静的接触角は、モスアイ構造形成前の絶縁層の表面における純水の静的接触角である。
【００４５】
絶縁層の形成位置としては、絶縁層が、配線部を覆い、かつ電極系および端子部を覆わないように形成されていればよい。配線部を覆うように絶縁層が形成されていることにより、配線部の酸化を防ぐとともに、ショートを防ぐことができる。
【００４６】
絶縁層の親水部は樹脂組成物を用いて形成されるものであることから、図１（ａ）〜（ｃ）に例示するように絶縁層３がその表面の全面に親水部３Ｈを有していてもよく、図２（ａ）〜（ｃ）に例示するように絶縁層３がその表面に部分的に親水部３Ｈを有していてもよい。
【００４７】
また、絶縁層の親水部の形成位置としては、図１（ａ）〜（ｃ）および図２（ａ）〜（ｃ）に示すような絶縁層の構成に応じて適宜選択される。中でも、絶縁層３の親水部３Ｈは、図３（ａ）〜（ｃ）に例示するように、本発明のバイオセンサ用電極をバイオセンサに用いた場合に、試料供給路２１が配置される領域に形成されていることが好ましい。電極系および反応部に試料を素早く導入することができるからである。
ここで、絶縁層の親水部が試料供給路が配置される領域に形成されているとは、絶縁層は電極系を覆わないように形成されることから、試料供給路が配置される領域のうち、電極系が形成される領域を除く領域に絶縁層の親水部が形成されていることをいう。
【００４８】
また、バイオセンサにおいて毛細管現象による試料供給を促進するための空気口が形成されている場合には、空気口の周辺には親水部が形成されていないことが好ましい。空気口から試料が流れ出るのを防ぐことができるからである。ここで、空気口とは、試料供給路内の空気を排出するための開口部の出口をいう。
例えば図５（ａ）〜（ｃ）に示すように、バイオセンサ１０においてカバー３１にカバー３１を貫通する空気孔３２が形成されている場合には、空気孔３２が配置される領域の周辺には絶縁層３の親水部３Ｈが形成されていないことが好ましい。
また、図３（ａ）〜（ｃ）に例示するように、バイオセンサ１０においてスペーサ８によって試料供給路２１に加えて空気抜き流路２２が形成されている場合には、空気抜き流路２２の出口の周辺には絶縁層３の親水部３Ｈが形成されていないことが好ましい。この場合、空気抜き流路の全体にわたって絶縁層の親水部が形成されていないことがより好ましい。
【００４９】
絶縁層の厚さは、例えば３μｍ以上５０μｍ以下の範囲内とすることができる。中でも、絶縁層の厚さは、電極系および反応部を合わせた厚さ、ならびに配線部の厚さよりも厚いことが好ましい。ここで、絶縁層の厚さＴとは、図４（ａ）、（ｂ）に示すような絶縁層３の支持基材２側の界面から微細突起３ａの頂部までの支持基材平面に対する垂線方向の距離を意味する。
【００５０】
絶縁層の形成方法としては、上述のモスアイ構造を形成可能な方法であれば特に限定されないが、成形性に優れ、かつ安定量産ができる点から、賦形によりモスアイ構造を形成する方法が好ましい。
なお、絶縁層の形成方法については、後述の「Ｃ．バイオセンサ用電極の製造方法」の項に記載するので、ここでの説明は省略する。
【００５１】
２．電極系、配線部および端子部
本発明における電極系、配線部および端子は、支持基材上に形成されるものである。
電極系は、少なくとも作用極および対極を有するものであり、さらに参照極を有していてもよい。作用極は、還元体の電子受容体に電圧を印加するための一方の電極である。対極は、電子受容体から作用極に放出された電子によって流れた電流を計測するための一方の電極である。また、参照極は、作用極の電位を決定する際の基準となる電極である。作用極、対極および参照極には配線部が電気的に接続され、配線部には端子部が電気的に接続されており、端子部により電極系への電圧印加、電気信号の取り出しを行うことができる。
【００５２】
電極系、配線部および端子部の形態としては、バイオセンサにおける一般的な電極系の形態であれば特に限定されるものではない。例えば、図１（ａ）に示すように、支持基材２上に２本の配線部５および端子部６が形成され、一方の配線部５に作用極１１が接続され、他方の配線部５に対極１２が接続されていてもよく、図６（ａ）に示すように、支持基材２上に２本の配線部５および端子部６が形成され、一方の配線部５に作用極１１が接続され、他方の配線部５に対極１２および参照極１３が別々に接続されていてもよく、図６（ｂ）、（ｃ）に例示するように、支持基材２上に３本の配線部５および端子部６が形成され、３本の配線部５にそれぞれ作用極１１、対極１２および参照極１３が接続されていてもよい。
【００５３】
電極系、配線部および端子部に用いられる導電性材料としては、例えば、金、白金、銀、パラジウム、銅、鉄、アルミニウム、クロム、スズ、コバルト、ニッケル、チタン、セリウム、タンタル等の金属、またはこれらの金属を含む合金等を用いることができる。また、電極系は、カーボンおよびバインダー樹脂を含有するものであってもよい。
また、本発明のバイオセンサがエンドトキシンセンサである場合には、図６（ｃ）に例示するような電極系４の形態とすることができ、参照極１３には銀塩化銀電極を用いることができる。
電極系、配線部および端子部は、同一の材料で構成されていてもよく、異なる材料で構成されていてもよい。また、電極系、配線部および端子部は、一体に形成されていてもよく、別に形成されていてもよい。
また、電極系、配線部および端子部は、単層であってもよく、複数の導電層を積層したものであってもよい。
【００５４】
電極系、配線部および端子部の厚さは、導電性材料の種類に応じて異なるが、例えば０．００５μｍ以上４０μｍ以下の範囲内であることが好ましく、０．０１μｍ以上０．１μｍ以下の範囲内であることがより好ましい。厚さが上記範囲未満であると、抵抗が高くなり目的とする電極が得られなくなるおそれがある。また、厚さが上記範囲より大きくなると、試料供給路および空気抜き流路の形成に三次元的な高い加工精度が要求され、加工金型の使用数や加工工程および時間が飛躍的に増えるおそれがある。
【００５５】
電極系、配線部および端子部の形成方法としては、所定のパターン状に導電層を形成することが可能な方法であれば特に限定されるものではなく、例えば、金属ペーストをグラビア印刷法、フレキソ印刷法、スクリーン印刷法、インクジェット法等により印刷する方法、真空蒸着法やスパッタリング法等の物理蒸着法、金属箔をエッチングする方法、カーボンおよびバインダー樹脂を含有するインキをグラビア印刷法、フレキソ印刷法、スクリーン印刷法、インクジェット法等により印刷する方法、レーザーアブレーション法等が挙げられる。また、支持基材上に水溶性レジスト層をパターン状に形成し、水溶性レジスト層が形成された支持基材上の全面に物理蒸着法等により導電層を形成し、水洗により水溶性レジスト層を溶解して水溶性レジスト層上の導電層を除去し、導電層をパターニングする方法を用いることもできる。
【００５６】
３．支持基材
本発明に用いられる支持基材は、電極系、配線部および端子部を支持するものであり、電極系、配線部および端子部が形成される面は絶縁性を有する。
支持基材としては、例えば、樹脂基材、セラミック基材、ガラス基材、少なくとも表面が絶縁された半導体基材や金属基材等を用いることができる。樹脂基材としては、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）樹脂、塩化ビニル樹脂、ポリスチレン（ＰＳ）樹脂、ポリプロピレン（ＰＰ）樹脂等のフィルムを好適に用いることができる。
支持基材は、可撓性を有していてもよく有さなくてもよい。また、支持基材は、剛性を有していてもよく、弾性を有していてもよい。
また、バイオセンサを多面付けで製造する場合、支持基材は長尺であってもよく枚葉であってもよい。支持基材が長尺である場合には、電極系、配線部および端子部の形成、ならびに絶縁層の形成をロールツーロール方式により連続して行うことができる。
【００５７】
また、支持基材は、第１基材および第２基材が積層されたものであってもよい。例えば、第１基材が可撓性を有し、第２基材が第１基材よりも剛性が高い場合には、第１基材上にロールツーロール方式により電極系、配線部および端子部を連続して形成することができるとともに、第１基材の裏面に第２基材を積層することにより第１基材を支持し、バイオセンサの測定時の取り扱い性能を向上させることができる。
この場合、第１基材としては、可撓性を有することが好ましく、上記の樹脂基材が好ましく用いられる。第１基材の厚みは、可撓性を有する程度であればよく、例えばＰＥＴ基材の場合は１２μｍ〜４００μｍ程度とすることができる。
また、第２基材としては、第１基材よりも剛性が高いことが好ましく、例えば樹脂基材、セラミック基材、ガラス基材、半導体基材、金属基材等を用いることができる。第２基材の厚みとしては、第１基材を支持することができる程度であればよく、例えばＰＥＴ基材の場合は５０μｍ〜１ｍｍ程度とすることができる。
【００５８】
第１基材および第２基材を積層する際には、例えば、電極系、配線部および端子部が形成された第１基材と第２基材とを接着層を介して貼り合わせることができる。
接着層に用いられる接着剤は、例えば、合成接着剤としてはアクリル系接着剤、エステル系接着剤、ビニル系接着剤、シリコーン系接着剤等、天然接着剤としてはニカワ、天然ゴム、樹液等の澱粉のり・天然高分子等を挙げることができる。
【００５９】
支持基材は透明であってもよく不透明であってもよいが、中でも透明であることが好ましい。透明基材の場合には、絶縁層を形成する際に、支持基材側から紫外線等を照射して樹脂組成物を硬化させることができる。支持基材が第１基材および第２基材が積層されたものである場合には、第１基材が透明基材であればよい。
透明基材の場合、可視光領域における透過率は８０％以上であることが好ましい。ここで、透過率は、ＪＩＳ  Ｋ７３６１−１（プラスチック−透明材料の全光透過率の試験方法）により測定することができる。
【００６０】
４．低親水性領域
本発明のバイオセンサ用電極を用いたバイオセンサにおいて毛細管現象による試料供給を促進するための空気口が形成されている場合には、空気口の周辺には親水部よりも親水性が低い低親水性領域が形成されていることが好ましい。空気口から試料が流れ出るのを防ぐことができるからである。
【００６１】
低親水性領域の濡れ性としては、親水部よりも親水性が低ければよく、具体的には低親水性領域の表面における純水の静的接触角が、θ／２法で５０°超であることが好ましく、８０°以上であることがより好ましい。
【００６２】
低親水性領域としては、親水部が形成されていない領域であってもよく、撥水処理された領域であってもよい。
低親水性領域が親水部が形成されていない領域である場合において、図１（ａ）〜（ｃ）に例示するように絶縁層３がその表面の全面に親水部３Ｈを有する場合には、支持基材２の表面が低親水性領域となり、図２（ａ）〜（ｃ）に例示するように絶縁層３がその表面に部分的に親水部３Ｈを有する場合には、絶縁層３の親水部３Ｈではない部分の表面が低親水性領域となりえる。
一方、低親水性領域が撥水処理された領域である場合において、図１（ａ）〜（ｃ）に例示するように絶縁層３がその表面の全面に親水部３Ｈを有する場合には、支持基材２の表面に撥水処理が施され、図２（ａ）〜（ｃ）に例示するように絶縁層３がその表面に部分的に親水部３Ｈを有する場合には、絶縁層３の親水部３Ｈではない部分の表面に撥水処理が施される。
また、撥水処理としては、例えば、シリコーンオイル、シリコーン系、ハイドロカーボン系、フルオロカーボン系、ワックス系、ポリエチレンイミン−オクタデシルイソシアネート系やポリ（メタ）アクリル酸エステル系、ポリスチレン系、ポリエチレン系、ポリプロピレン系樹脂等を有機溶剤や水に適宜溶解もしくは分散して塗布する方法が挙げられる。また、研磨により平滑性を付与することで撥水性を発現させることもできる。
【００６３】
低親水性領域の形成位置としては、低親水性領域が少なくとも空気口が配置される領域の周辺に形成されていればよい。
例えば図５（ａ）〜（ｃ）に示すようにカバー３１に空気孔３２が形成されている場合には、空気孔３２が配置される領域の周辺に低親水性領域が形成されていることが好ましい。図５（ａ）〜（ｃ）において、低親水性領域は絶縁層３の親水部３Ｈが形成されていない領域である。
また、図３（ａ）〜（ｃ）に例示するようにバイオセンサ１０においてスペーサ８によって試料供給路２１に加えて空気抜き流路２２が形成されている場合には、空気抜き流路２２の出口が配置される領域の周辺に低親水性領域が形成されていることが好ましい。図３（ａ）〜（ｃ）において、低親水性領域は絶縁層３の親水部３Ｈが形成されていない領域である。また、この場合、空気抜き流路が配置される領域の全体にわたって低親水性領域が形成されていてもよい。
【００６４】
５．スペーサ
本発明においては、図７（ａ）、（ｂ）に例示するように絶縁層３上にスペーサ８が形成されていてもよい。スペーサは、本発明のバイオセンサ用電極をバイオセンサに用いた場合に、バイオセンサ用電極の支持基材とカバーとの間に間隙を設け、電極系および反応部に試料を供給するための試料供給路を形成するために設けられるものである。
絶縁層の親水部上にスペーサが形成されている場合には、モスアイ構造によるアンカー効果によって絶縁層とスペーサとの密着性を向上させることができる。
なお、図７（ａ）は本発明のバイオセンサ用電極の他の例を示す概略平面図であり、図７（ｂ）は図７（ａ）のＢ−Ｂ線断面図である。
【００６５】
スペーサの材料としては、所定の厚みを有するスペーサを形成可能なものであれば特に限定されるものではなく、例えば光硬化性樹脂、熱硬化性樹脂、接着剤等を用いることができる。光硬化性樹脂、熱硬化性樹脂を用いる場合には、安価にスペーサを形成することができる。接着剤を用いる場合には、精度良くスペーサを形成することができる。また、スペーサとして樹脂基材を用いることもできる。
接着剤としては、例えば、合成接着剤としてはアクリル系接着剤、エステル系接着剤、ビニル系接着剤、シリコーン系接着剤等、天然接着剤としてはニカワ、天然ゴム、樹液等の澱粉のり・天然高分子等を用いることができる。また、ホットメルト型接着剤を用いることもできる。また、接着剤として両面テープを用いてもよい。
【００６６】
スペーサの厚さは、試料供給路の高さとなるため、１５μｍ以上５００μｍ以下の範囲内であることが好ましい。スペーサの厚さが薄すぎると、毛細管現象による試料供給が安定しなくなるおそれがある。また、スペーサの厚さが厚すぎると、反応部に均一に試料が流れず、反応部の一部に試料が流れない可能性がある。
【００６７】
スペーサの形成方法としては、所定のパターン状にスペーサを形成することができる方法であればよく、スペーサの材料等に応じて適宜選択される。例えば、光硬化性樹脂組成物を用いる場合には、グラビア印刷法、スクリーン印刷法等の印刷法を挙げることができる。また、接着剤として両面テープを用いる場合には、両面テープに打ち抜き加工等により試料供給路等を形成した後、絶縁層上に両面テープを貼付する方法が挙げられる。また、スペーサとして樹脂基材を用いる場合には、樹脂基材に打ち抜き加工等により試料供給路等を形成した後、接着層を介して絶縁層上にスペーサを貼付する方法が挙げられる。
接着層に用いられる接着剤としては、スペーサに用いられる接着剤と同様とすることができる。
【００６８】
６．バイオセンサ用電極
本発明のバイオセンサ用電極は、絶縁層の表面に、剥離可能な保護フィルムを仮接着した状態で保管、搬送、売買、後加工または施工を行い、適時、保護フィルムを剥離除去する形態とすることもできる。これにより、保管、搬送等の間におけるモスアイ構造の損傷、汚染を防止することができる。
【００６９】
本発明のバイオセンサ用電極は多面付けされたものであってもよい。この場合、バイオセンサ用電極は、例えば平板状であってもよくロール状に巻かれたものであってもよい。
【００７０】
Ｂ．バイオセンサ
本発明のバイオセンサは、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記電極系上に配置された反応部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層と、上記絶縁層上に形成され、上記電極系および上記反応部に試料を供給する試料供給路を形成するスペーサと、上記スペーサ上に配置されたカバーとを有するバイオセンサであって、上記絶縁層はモスアイ構造を有する親水部を有し、上記親水部は上記試料供給路が配置される領域に形成されていることを特徴とするものである。すなわち、本発明のバイオセンサは、上述のバイオセンサ用電極を備えるものである。
【００７１】
本発明のバイオセンサについて図面を参照しながら説明する。
図３（ａ）は本発明のバイオセンサの一例を示す分解斜視図であり、図３（ｂ）は図３（ａ）のＣ−Ｃ線断面図、図３（ｃ）は図３（ａ）のＤ−Ｄ線断面図である。なお、図３（ａ）〜（ｃ）については、上記「Ａ．バイオセンサ用電極」の項に記載したので、ここでの説明は省略する。
【００７２】
図５（ａ）は本発明のバイオセンサの他の例を示す分解斜視図であり、図５（ｂ）は図５（ａ）のＣ−Ｃ線断面図、図５（ｃ）は図５（ａ）のＤ−Ｄ線断面図である。図５（ａ）〜（ｃ）に例示するように、バイオセンサ１０においては、支持基材２上に電極系４、配線部５および端子部６が形成され、電極系４および端子部６が露出し、配線部５が覆われるように絶縁層３がさらに形成されており、絶縁層３上に試料供給路２１を形成するためのスペーサ８が配置され、スペーサ８上に試料供給路２１を覆うようにカバー３１が配置されている。絶縁層３はその表面に部分的にモスアイ構造を有する親水部３Ｈを有している。電極系４は作用極１１および対極１２を有しており、作用極１１上に反応部１５が形成されている。また、カバー３１はカバー３１を貫通する空気孔３２を有している。
スペーサ８は、作用極１１上の反応部１５および対極１２が露出するように、例えばカバー３１の空気孔３２に通じる試料供給路２１を形成するように配置されている。
このバイオセンサ１０においては、試料供給路２１と空気孔３２とが形成されていることで、試料供給路２１から毛細管現象を利用し、測定する試料を作用極１１上の反応部１５および対極１２の上部を通過させ、試料の目的成分を測定することができる。
【００７３】
本発明においては、上述のバイオセンサ用電極を有し、モスアイ構造を有する親水部が試料供給路が配置される領域に形成されていることにより、電極系および反応部へ試料を迅速かつ容易に導くことができる。これにより、必要とされる試料の量を少なくすることが可能であり、測定成功率の向上、使用者の負担軽減、操作性の向上を図ることが可能である。
また本発明においては、モスアイ構造がその構造上、親水性を示すため、親水性が経時的に劣化するのを抑制することが可能である。
さらに本発明においては、絶縁層が親水部を兼ねるため、絶縁層およびモスアイ構造を同時に形成することができ、工程数を低減し製造コストを削減することができる。
【００７４】
なお、支持基材、電極系、配線部、端子部および絶縁層については、上記「Ａ．バイオセンサ用電極」の項に記載したので、ここでの説明は省略する。以下、本発明のバイオセンサにおける他の構成について説明する。
【００７５】
１．反応部
本発明における反応部は、電極系の上部に配置されるものである。
本発明において、反応部は生体由来物質を含み、基質特異的な物質の変化移動に伴う、化学ポテンシャル、熱あるいは光学的な変化を電気信号へ変換する。
【００７６】
反応部は、生体由来物質として、例えば、酵素と電子受容体とを含む。
グルコース濃度を測定する場合には、酵素として、グルコースオキシダーゼ（ＧＯＤ）、グルコースデヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）を用いることができる。グルコースオキシダーゼ、グルコースデヒドロゲナーゼは、純度の高いものが好ましく、後述の範囲の活性を有するものであれば特に由来となる生物種は限定されず、例えば、グルコースオキシダーゼとしては、東洋紡社製ＧＬＯ−２０１を用いることができる。
電子受容体としては、フェリシアン化カリウム、フェロセン誘導体、キノン誘導体、オスミューム誘導体等を用いることができる。
【００７７】
また、エンドトキシン濃度を測定する場合、反応部には、カブトガニの血球成分（Ｌｉｍｕｌｕｓ  Ａｍｅｂｏｓｙｔｅ  Ｌｙｓａｔｅ;ＬＡＬ）を用いることができる。例えば、反応部には、Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酵素前駆体および色素が結合したペプチドを含むものを挙げることができる。具体的には、Ｃ因子、Ｂ因子および凝固酵素前駆体を含む物質としては、カブトガニ・アメボサイト・ライセート（カブトガニ血球抽出液）が挙げられる。また、色素が結合したペプチドとしては、一端に色素が結合し、他端にペプチド保護基が結合したオリゴペプチドを用いることができる。オリゴペプチドは、例えば、Ｘ−Ａ−Ｙ（式中、Ｘは保護基、Ｙは色素、Ａはオリゴペプチドである）で示されるものを挙げることができる。保護基Ｘは、ペプチドの保護基、例えば、ｔ−ブトキシカルボニル基（ＢｏＣ）、ベンゾイル基等を挙げることができ、色素Ｙとしては、例えば、ｐＮＡ（ｐ−ニトロアニリン）、ＭＣＡ（７−メトキシクマリン−４−酢酸）、ＤＮＡ（２、４−ジニトロアニリン）、Ｄａｎｓｙｌ色素等が挙げられる。オリゴペプチドとしては、アミノ酸数が２〜１０、好ましくは２〜５、さらには３〜４のものがよく、トリペプチドとしては、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−ＡｒｇおよびＴｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ等を例示することができる。
この場合、エンドトキシンを含む試料を、Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酵素前駆体、および色素が結合したペプチドを含む反応部に接触させて、Ｃ因子から活性型Ｃ因子を、Ｂ因子から活性型Ｂ因子を、凝固酵素前駆体から活性型凝固酵素を次々に発生させるカスケード反応と、活性型凝固酵素によるペプチドからの色素の遊離反応とを生じさせて、遊離反応後の試料および反応部に対して、ディファレンシャルパルスボルタンメトリを適用し、測定される電流値に基づいてエンドトキシンを定量することができる。
カスケード反応により生じた活性型凝固酵素によって、試料および反応部中には、色素が結合したペプチドから色素が遊離する。例えば、色素が結合したペプチドがＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐＮＡである場合、色素はｐＮＡである。
なお、このようなエンドトキシン濃度の測定方法については、例えば特開２０１２−１２７６９５号公報を参照することができる。
【００７８】
また、バイオセンサは、反応部の酵素を変更することで、グルコースセンサ、エンドトキシンセンサのみならず、コレステロールセンサ、アルコールセンサ、スクロールセンサ、乳酸センサ、フルクトースセンサ等の酵素に関与する反応系に広く用いることができる。各バイオセンサに用いる酵素としては、コレステロールエステラーゼ、コレステロールオキシダーゼ、アルコールオキシダーゼ、乳酸オキシダーゼ、フルクトースデヒドロゲナーゼ、キサンチンオキシダーゼ、アミノ酸オキシダーゼ等の反応系に合ったものを適宜用いることができる。
【００７９】
酵素と電子受容体は、適宜溶媒で希釈して用いる。溶媒としては、例えば、水、アルコール、水−アルコール混合溶媒が挙げられる。また、酵素と電子受容体は、直鎖、環状の炭化水素貧溶媒に均一分散させてもよい。
酵素および電子受容体はそれぞれ１試験体当り０．３ユニット以上１０ユニット以下の範囲内および０．５μｇ以上２００μｇ以下の範囲内とすることが好ましい。反応部の酵素および電子受容体は、酵素量（力価／ユニット）に準じた反応量が得られるが、反応部の性能を担保する最適重量部の小過剰でよい。
【００８０】
また、反応部は、その面積に比例した検出電流が得られるため、可能な範囲で広く設定することが好ましい。
【００８１】
反応部には、親水性高分子や界面活性剤を含有させてもよい。親水性高分子を含有させると、血液はゲル状となり応答電流値は若干低下するが、赤血球や他のタンパク質等のセンサ応答への影響を低減することができる。界面活性剤を含有させると、粘度の高い試料であっても反応部へ試料を容易に導くことができる。
親水性高分子としては、カルボキシルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリビニル酢酸、ポリビニルブチラール等、またはこれらの混合物を用いることができる。
反応部に用いる界面活性剤としては、例えば、非イオン性界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、両性界面活性剤、若しくはポリエチレングリコール類等が挙げられる。
【００８２】
反応部は、電極系の作用極上に、酵素および電子受容体を含む溶液を塗布した後、乾燥させ溶媒成分を除去して形成することができる。
酵素および電子受容体を含む溶液の塗布方法としては、例えばディスペンサー法を用いることができる。
反応部を形成する場合、酵素は４０℃以上で長時間放置すると活性を失うため、溶媒の乾燥は４０℃以下で行い、乾燥後は速やかに室温に戻すことが好ましい。
【００８３】
反応部の形成位置は、作用極の上部であればよく、例えば、反応部を作用極上に形成してもよく、反応部をスペーサおよびカバーの間に形成し、空間を介して作用極に対向するように配置してもよい。
【００８４】
２．カバー
本発明に用いられるカバーは、スペーサ上に電極系および反応部を覆うように、かつ試料供給路を覆うように配置されるものである。
【００８５】
カバーとしては、例えば、樹脂基材、セラミック基材、ガラス基材、半導体基材、金属基材等を用いることができる。樹脂基材としては、例えばポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）樹脂、塩化ビニル樹脂、ポリスチレン（ＰＳ）樹脂、ポリプロピレン（ＰＰ）樹脂、ポリエステル樹脂等のフィルムを好適に用いることができる。
カバーは、可撓性を有していてもよく有さなくてもよい。また、カバーは、剛性を有していてもよく、弾性を有していてもよい。
また、バイオセンサを多面付けで製造する場合、カバーは長尺であってもよく枚葉であってもよい。カバーが長尺である場合には、カバーの貼合をロールツーロール方式により連続して行うことができる。
【００８６】
カバーは透明であってもよく不透明であってもよいが、中でも透明であることが好ましい。カバーが透明基材の場合には、バイオセンサの使用時に試料の導入を目視することができる。
透明基材の場合、可視光領域における透過率は８０％以上であることが好ましい。ここで、透過率は、ＪＩＳ  Ｋ７３６１−１（プラスチック−透明材料の全光透過率の試験方法）により測定することができる。
【００８７】
カバーの形状は、バイオセンサにおける電極系、配線部および端子部の配置等に応じて適宜選択されるものであり、例えば、カバーは端子部が露出するように切欠部を有していてもよい。
【００８８】
カバーは、図５（ａ）に例示するようにカバー３１を貫通する空気孔３２を有していてもよい。毛細管現象による試料供給を促進することができる。
空気孔は、試料供給路に通じるように配置される。通常、試料供給路が配置される領域において、電極系および反応部よりも奥の領域に空気孔が配置される。
空気孔の直径は、例えば０．３ｍｍ以上１ｍｍ以下の範囲内とすることができる。
空気孔の形状は、例えば、円形、楕円形、多角形等が挙げられる。
空気孔の形成方法としては、例えばレーザー加工、打ち抜き加工等が挙げられる。
【００８９】
カバーの配置方法としては、バイオセンサの構成等に応じて適宜選択される。例えば、スペーサに両面テープを用いる場合には、スペーサを介して電極系、配線部および端子部ならびに絶縁層が形成された支持基材とカバーとを貼合することができる。また、支持基材上にスペーサを光硬化性樹脂や熱硬化性樹脂を用いて形成する場合には、接着層を介してスペーサが形成された支持基材とカバーとを貼合することができる。
【００９０】
３．スペーサ
本発明に用いられるスペーサは、支持基材とカバーとの間に間隙を設け、電極系および反応部に試料を供給するための試料供給路を形成するために設けられるものである。
なお、スペーサについては、上記「Ａ．バイオセンサ用電極」に記載したので、ここでの説明は省略する。
【００９１】
４．試料供給路および空気抜き流路
本発明における試料供給路は、支持基材とカバーとの間の間隙から構成され、スペーサにより形成される。試料供給路は、スペーサを水平方向に貫通して設けられた流路であり、外部から供給される試料を電極系および反応部に導く。
試料供給路の幅は０．５ｍｍ以上５ｍｍ以下の範囲内であることが好ましい。試料供給路の幅が狭すぎると、毛細管現象による安定した試料供給が困難になる場合や、また反応部の面積が小さくなり感度が低くなる場合がある。また、試料供給路の幅が広すぎると、バイオセンサを多面付けで製造した場合に個々のバイオセンサに切断する際、スペーサがアーチ状につぶれ、試料供給路内の容積が変化し易くなるおそれがある。試料供給路の幅は、全体にわたって均一の幅であってもよく、試料供給路の奥から入口に向かって幅が広くなっていてもよい。
【００９２】
また、スペーサにより空気抜き流路が形成されていてもよい。毛細管現象による試料供給を促進することができる。
空気抜き流路は、試料供給路に通じるように配置される。通常、試料供給路が配置される領域において、電極系および反応部よりも奥の領域に空気抜き流路が配置される。
空気抜き流路の形状としては、毛細管現象による試料供給を促進することができれば特に限定されるものではなく、例えば、試料供給路と空気抜き流路とを合わせてＴ字状の流路を構成することができる。このような構成とすることで、外部から試料が供給された場合に、試料供給路内の空気が逃げる空気抜き流路が機能する。
空気抜き流路の幅は、例えば０．３ｍｍ以上１０ｍｍ以下の範囲内とすることができる。
【００９３】
５．測定装置
図８（ａ）、（ｂ）は、本発明のバイオセンサを測定装置に接続した様子を示す模式図であり、図８（ａ）は全体図であり、図８（ｂ）は図８（ａ）の破線部における測定装置の内部を説明する図である。
図８（ａ）、（ｂ）に例示するように、測定装置６０は、公知の測定装置であって、バイオセンサ１０を接続して、試料中に含まれる被検出物を検出する装置である。測定装置６０は、例えば、バイオセンサ１０で生じた電気信号を受信するための接続電極６３、演算部（図示せず）、電源（図示せず）、表示部６１および操作部６２を備える。バイオセンサ１０は、測定装置６０の装着部に装着されると、バイオセンサ１０の２本の端子部６が測定装置６０の接続電極６３にそれぞれ接続される。この接続により、バイオセンサ１０で生じた電気信号は、測定装置６０に伝達される。
【００９４】
測定方法としては、例えば、測定者がバイオセンサ１０を測定装置６０に装着し、バイオセンサ１０の先端からスペーサに設けられた試料供給路に試料を導入し、操作部６２を操作して、測定を開始する。試料供給路に導入された試料に被検出物が含まれる場合は、被検出物と、反応部に配設された生体由来物質とが反応し、電気信号がバイオセンサ１０の電極系で検出され、電極系および配線部を介して端子部６から、測定装置６０の接続電極６３を介して、測定装置６０に伝達される。測定装置６０は、バイオセンサ１０から受信した電気信号を演算部で測定値に変換する。得られた測定値は、表示部６１に表示され、測定者は測定結果を視覚的に認識することができる。
【００９５】
Ｃ．バイオセンサ用電極の製造方法
本発明のバイオセンサ用電極の製造方法は、モスアイ構造の形成方法に応じて２つの実施態様に分けることができる。以下、各実施態様に分けて説明する。
【００９６】
１．第１実施態様
本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法は、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有し、上記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有するバイオセンサ用電極の製造方法であって、上記絶縁層を形成する絶縁層形成工程が、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように樹脂組成物を滴下した後、上記樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、上記モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程とを有することを特徴とする。
【００９７】
図９（ａ）〜（ｄ）は本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法の一例を示す工程図である。まず、図９（ａ）に示すように、電極系４、配線部５および端子部（図示なし）が形成された支持基材２を準備する。次に、図９（ｂ）に示すように、支持基材２上に、電極系４および端子部が露出し、配線部５が覆われるように樹脂組成物３ｂを滴下した後、図９（ｃ）に示すように、樹脂組成物３ｂにモスアイ構造形成用原版５１を押し付けて、樹脂組成物３ｂを硬化させることによりモスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程を行う。続いて、図９（ｄ）に示すようにモスアイ構造形成用原版５１を剥離する剥離工程を行う。これにより、モスアイ構造を有する親水部３Ｈを有する絶縁層３が形成される。
【００９８】
本実施態様においては、絶縁層およびモスアイ構造を同時に形成することができ、工程数を低減し製造コストを削減することができる。
以下、本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法における各工程について説明する。
【００９９】
（１）絶縁層形成工程
本実施態様における絶縁層形成工程は、支持基材上に、電極系および端子部が露出し、配線部が覆われるように樹脂組成物を滴下した後、樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程とを有する。
【０１００】
（ａ）モスアイ構造形成工程
本実施態様におけるモスアイ構造形成工程は、支持基材上に、電極系および端子部が露出し、配線部が覆われるように樹脂組成物を滴下した後、樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成する工程である。
【０１０１】
なお、樹脂組成物については、上記「Ａ．バイオセンサ用電極」に記載したので、ここでの説明は省略する。
樹脂組成物を滴下する方法としては、所定の領域に樹脂組成物を滴下することができる方法であればよく、例えば、インクジェット法、ディスペンサーを用いる方法等の吐出法が挙げられる。
【０１０２】
モスアイ構造を形成する方法は、樹脂組成物の種類等に応じて適宜選択される。例えば、硬化性樹脂組成物を用いる場合には、硬化性樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付けて、硬化性樹脂組成物を硬化させることによりモスアイ構造を形成することができる。また、熱可塑性樹脂組成物を用いる場合には、熱可塑性樹脂組成物を加熱して軟化させ、熱可塑性樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付けて、熱可塑性樹脂組成物を冷却することによりモスアイ構造を形成することができる。
樹脂組成物の硬化方法は、樹脂組成物の種類等に応じて適宜選択することができる。
【０１０３】
樹脂組成物にモスアイ構造形成用原版を押し付ける領域は、絶縁層の親水部の形成位置に応じて適宜選択される。図１（ａ）〜（ｃ）に示すように表面の全面に親水部３Ｈを有する絶縁層３を形成する場合には、樹脂組成物の全域にモスアイ構造形成用原版を押し付ける。一方、図２（ａ）〜（ｃ）に示すように表面に部分的に親水部３Ｈを有する絶縁層３を形成する場合には、樹脂組成物の親水部を形成する領域にモスアイ構造形成用原版を押し付ける。
【０１０４】
モスアイ構造形成用原版の凹凸形状は、多数の微細孔が密に形成されたものであり、モスアイ構造を構成する微細突起の形状に対応する形状である。
【０１０５】
モスアイ構造形成用原版としては、繰り返し使用した際に変形および摩耗するものでなければ特に限定されるものではなく、金属製であってもよく、石英製であってもよく、樹脂製であってもよいが、通常、耐変形性および耐摩耗性に優れている点から、金属製または石英製が好適に用いられる。中でも、モスアイ構造形成用原版側から紫外線等を照射して樹脂組成物を硬化させる場合には、モスアイ構造形成用原版が透明であることが好ましく、石英製が好ましい。また、支持基材が透明である場合であって、表面に部分的に親水部を有する絶縁層を形成する場合には、金属製のモスアイ構造形成用原版を用いて、支持基材側から紫外線等を照射して樹脂組成物を硬化させることもできる。
【０１０６】
また、モスアイ構造形成用原版の形状としては、例えば、平板状、ロール状等が挙げられ、生産性向上の観点からは、ロール状が好ましい。
【０１０７】
（ｂ）剥離工程
本実施態様における剥離工程は、モスアイ構造形成用原版を剥離する工程である。
モスアイ構造形成用原版の剥離方法としては、特に限定されるものではない。
モスアイ構造形成用原版を剥離することにより、モスアイ構造を有する親水部を有する絶縁層を形成することができる。
【０１０８】
（２）その他の工程
本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法は、上記絶縁層形成工程の他に、電極系、配線部および端子部を形成する工程やスペーサを形成する工程等を有していてもよい。なお、各部材の形成方法については、上記「Ａ．バイオセンサ用電極」に記載したので、ここでの説明は省略する。
【０１０９】
２．第２実施態様
本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法は、支持基材と、上記支持基材上に形成された電極系、配線部および端子部と、上記支持基材上に、上記電極系および上記端子部が露出し、上記配線部が覆われるように形成された絶縁層とを有し、上記絶縁層がモスアイ構造を有する親水部を有するバイオセンサ用電極の製造方法であって、上記絶縁層を形成する絶縁層形成工程が、モスアイ構造形成用原版に樹脂組成物を充填した後、上記支持基材に上記樹脂組成物が充填された上記モスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、上記モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程とを有することを特徴とする。
【０１１０】
図１０（ａ）〜（ｃ）は本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法の一例を示す工程図である。まず、図１０（ａ）に示すように、電極系４、配線部５および端子部（図示なし）が形成された支持基材２を準備する。次に、同じく図１０（ａ）に示すように、モスアイ構造形成用原版５１に樹脂組成物３ｃを充填する。続いて、図１０（ｂ）に示すように、支持基材２の絶縁層が形成される領域に樹脂組成物３ｃが充填されたモスアイ構造形成用原版５１を押し付けて、樹脂組成物３ｃを硬化させることによりモスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程を行う。続いて、図１０（ｃ）に示すようにモスアイ構造形成用原版５１を剥離する剥離工程を行う。これにより、モスアイ構造を有する親水部３Ｈを有する絶縁層３が形成される。
【０１１１】
本実施態様においては、絶縁層およびモスアイ構造を同時に形成することができ、工程数を低減し製造コストを削減することができる。
【０１１２】
以下、本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法における各工程について説明する。
【０１１３】
（１）絶縁層形成工程
本実施態様における絶縁層形成工程は、モスアイ構造形成用原版に樹脂組成物を充填した後、支持基材に樹脂組成物が充填されたモスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成するモスアイ構造形成工程と、モスアイ構造形成用原版を剥離する剥離工程とを有する。
なお、剥離工程については、上記第１実施態様と同様である。
【０１１４】
（モスアイ構造形成工程）
本実施態様におけるモスアイ構造形成工程は、モスアイ構造形成用原版に樹脂組成物を充填した後、支持基材に樹脂組成物が充填されたモスアイ構造形成用原版を押し付けて、モスアイ構造を形成する工程である。
樹脂組成物としては、硬化性樹脂を含むものが用いられる。なお、樹脂組成物については、上記「Ａ．バイオセンサ用電極」に記載したので、ここでの説明は省略する。
樹脂組成物の硬化方法は、樹脂組成物の種類等に応じて適宜選択することができる。
モスアイ構造を形成する際には、支持基材の絶縁層が形成される領域に樹脂組成物が充填されたモスアイ構造形成用原版を押し付ければよい。
モスアイ構造形成用原版については、上記第１実施態様と同様である。
【０１１５】
（２）その他の工程
本実施態様のバイオセンサ用電極の製造方法は、上記絶縁層形成工程の他に、電極系、配線部および端子部を形成する工程やスペーサを形成する工程等を有していてもよい。なお、各部材の形成方法については、上記「Ａ．バイオセンサ用電極」に記載したので、ここでの説明は省略する。
【０１１６】
本発明は、上記実施形態に限定されるものではない。上記実施形態は、例示であり、本発明の請求の範囲に記載された技術的思想と実質的に同一な構成を有し、同様な作用効果を奏するものは、いかなるものであっても本発明の技術的範囲に包含される。
【実施例】
【０１１７】
以下、本発明について実施例を用いて具体的に説明する。
【０１１８】
［実施例１］
（１）モスアイ構造形成用原版の作製
合成石英基板（１５０ｍｍ角、６．３５ｍｍ厚）上にポジ型レジスト（日本ゼオン社製、ＺＥＰ５２０）を塗布した。その上に帯電防止のため、水溶性導電膜を塗布した。次に、電子線描画装置（日本電子製、ＪＢＸ９３００）にて電子線で露光後、現像して、所定の形状のレジストパターンを形成した。次いで、レジストパターンをマスクにして、合成石英基板をＣＦ４ガスでドライエッチングした。この際、エッチングのデポ量を少なくし、レジスト後退量を大きくすることで、所望のテーパー形状を得た。続いて、Ｏ２アッシングによって残留するレジストを除去することで、表面に微細な凹凸形状が形成されたモスアイ構造形成用原版Ａを得た。微細な凹凸形状は、平均隣接微細孔間距離２００ｎｍ、平均深さ２００ｎｍ、孔径１００ｎｍで、深さ方向に徐々に断面積が小さくなり、先端部が曲面を有する多数の微細孔が密に形成された微細凹凸形状であった。
【０１１９】
（２）バイオセンサ用電極の作製
（ａ）電極の形成
支持基材上に、水溶性インク（ＤＩＣグラフィックス社製、ＭＣＡ２０５５）をグラビア印刷することによって、電極系、配線部および端子部のネガパターンを有する厚さ１μｍの水溶性レジスト層を形成した。次いで、水溶性レジスト層がパターン状に形成された支持基材の全面にニッケルを厚さ３０ｎｍで蒸着した後、水洗することによって、電極系、配線部および端子部のネガパターン以外の水溶性レジスト層をニッケル膜ごとリフトオフした。これにより、ニッケル膜からなる電極系、配線部および端子部を形成した。
【０１２０】
（ｂ）モスアイ構造の形成
電極系、配線部および端子部が形成された支持基材上に、ＵＶ硬化性樹脂組成物（ダイセル化学工業社製）をインクジェット法によって滴下した。次に、ＵＶ硬化性樹脂組成物にモスアイ構造用原版Ａを押し付け、原版Ａ側よりＵＶ光（波長３６５ｎｍ）を照射して、ＵＶ硬化性樹脂組成物を完全に硬化し、原版Ａを剥離して絶縁層を形成した。絶縁層の厚みは５μｍであり、表面にはモスアイ構造が形成されていた。モスアイ構造は隣接する突起間の距離の平均値が２００ｎｍ、平均突起高さが２００ｎｍであった。
【０１２１】
［実施例２］
（１）モスアイ構造形成用原版の作製
実施例１と同様にしてモスアイ構造形成用原版を作製した。
（２）バイオセンサ用電極の作製
（ａ）電極の形成
実施例１と同様にして、支持基材上に電極系、配線部および端子部を形成した。
（ｂ）モスアイ構造の形成
電極系、配線部および端子部が形成された支持基材上に、ＵＶ硬化性樹脂組成物（ダイセル化学工業社製）に剥離性向上用のシリコーン添加剤（信越化学工業社製）を０．２質量％混合した組成物をインクジェット法によって滴下した。次に、ＵＶ硬化性樹脂組成物にモスアイ構造用原版Ａを押し付け、原版Ａ側よりＵＶ光（波長３６５ｎｍ）を照射して、ＵＶ硬化性樹脂組成物を完全に硬化し、原版Ａを剥離して絶縁層を形成した。絶縁層の厚みは５μｍであり、表面にはモスアイ構造が形成されていた。モスアイ構造は隣接する突起間の距離の平均値が２００ｎｍ、平均突起高さが２００ｎｍであった。
【０１２２】
［比較例１］
（１）凹凸構造形成用原版の作製
合成石英基板（１５０ｍｍ角、６．３５ｍｍ厚）上にポジ型レジスト（日本ゼオン社製、ＺＥＰ５２０）を塗布した。その上に帯電防止のため、水溶性導電膜を塗布した。次に、電子線描画装置（日本電子製、ＪＢＸ９３００）にて電子線で露光後、現像して、所定の形状のレジストパターンを形成した。次いで、レジストパターンをマスクにして、合成石英基板をＣＨＦ３ガスでドライエッチングした。この際、エッチングのデポ量を多くし、レジスト後退量を小さくすることで、所望の円柱状の微細孔を得た。続いて、Ｏ２アッシングによって残留するレジストを除去することで、表面に微細な凹凸形状が形成された凹凸構造形成用原版Ｂを得た。微細な凹凸形状は、微細孔間距離１００ｎｍ、孔径４０ｎｍ、平均深さ２００ｎｍの円柱状の微細孔が正方格子状に配列されたものであった。
【０１２３】
（２）バイオセンサ用電極の作製
（ａ）電極の形成
実施例１と同様にして、支持基材上に電極系、配線部および端子部を形成した。
（ｂ）凹凸構造の形成
電極系、配線部および端子部が形成された支持基材上に、ＵＶ硬化性樹脂組成物（ダイセル化学工業社製）をインクジェット法によって滴下した。次に、ＵＶ硬化性樹脂組成物に凹凸構造用原版Ｂを押し付け、原版Ｂ側よりＵＶ光（波長３６５ｎｍ）を照射して、ＵＶ硬化樹脂を完全に硬化し、原版Ｂを剥離して絶縁層を形成した。絶縁層の厚みは５μｍであり、表面には円柱状の突起が正方格子状に配列された凹凸構造が形成されていた。円柱状の突起は突起間の距離１００ｎｍ、孔径４０ｎｍ、平均高さ２００ｎｍであった。
【０１２４】
［評価］
協和界面科学社製  接触角計（ＤＭ  ５００）を使って、θ／２法によって静的接触角を測定した。この際、着滴１秒後および１０秒後に接触角を測定した。また、接触角の測定は、モスアイ構造の形成の直後、２週間後および６ヵ月後に実施した。
【０１２５】
【表１】
2014215247.tif 000003
【０１２６】
実施例１、２では、６ヵ月後でも接触角が変化しなかった。また、実施例１では、水の濡れ広がりが速かった。
一方、比較例１では、水の濡れ広がりが遅いため、着滴１０秒後に接触角は低くなるが、バイオセンサ用電極には不向きであった。
【符号の説明】
【０１２７】
１  …  バイオセンサ用電極
２  …  支持基材
３  …  絶縁層
３Ｈ  …  親水部
４  …  電極系
５  …  配線部
６  …  端子部
７  …  絶縁層
８  …  スペーサ
１０  …  バイオセンサ
１１  …  作用極
１２  …  対極
１３  …  参照極
１５  …  反応部
２１  …  試料供給路
２２  …  空気抜き流路
３１  …  カバー
【図１】
2014215247.tif 000004
【図２】
2014215247.tif 000005
【図３】
2014215247.tif 000006
【図４】
2014215247.tif 000007
【図５】
2014215247.tif 000008
【図６】
2014215247.tif 000009
【図７】
2014215247.tif 000010
【図８】
2014215247.tif 000011
【図９】
2014215247.tif 000012
【図１０】
2014215247.tif 000013
【図１１】
2014215247.tif 000014
【図１２】
2014215247.tif 000015