【手続補正書】
【提出日】令和3年2月10日(2021.2.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がん免疫療法において、免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）における一本鎖抗体として用いるための、配列番号１５５に示されるアミノ酸配列からなるヒトＧＰＣ３（Glypican-3）由来のポリペプチドに特異的に結合する一本鎖抗体であって、
（１−１）配列番号１７８に示されるアミノ酸配列の１番目〜１１９番目のアミノ酸配列（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTGYNMNWVRQAPGQGLEWIGNIDPYYGGTSYNQKFKGRATLTVDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARGDYRAYYFDYWGQGTTVTVSS）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる重鎖可変領域と、配列番号１７８に示されるアミノ酸配列の１３５番目〜２４１番目のアミノ酸配列（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVRTAVAWYQQKPGKAPKALIYLASNRHTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQHWNYPLTFGGGTKVEIK）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域とを含むか；
（２−１）配列番号１７９に示されるアミノ酸配列の１番目〜１１９番目のアミノ酸配列（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFTGYNMNWVRQAPGQGLEWIGNIDPYYGGTSYNQKFKGRVTLTVDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARGDYRAYYFDYWGQGTTVTVSS）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる重鎖可変領域と、配列番号１７９に示されるアミノ酸配列の１３５番目〜２４１番目のアミノ酸配列（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVRTAVAWYQQKPGKAPKALIYLASNRHTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQHWNYPLTFGGGTKVEIK）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域とを含むか；
（３−１）配列番号１８０に示されるアミノ酸配列の１番目〜１１９番目のアミノ酸配列（QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYNMNWVRQAPGQGLEWIGNIDPYYGGTSYNQKFKGRVTLTVDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARGDYRAYYFDYWGQGTTVTVSS）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる重鎖可変領域と、配列番号１８０に示されるアミノ酸配列の１３５番目〜２４１番目のアミノ酸配列（DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCKASQNVRTAVAWYQQKPGKAPKALIYLASNRHTGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQHWNYPLTFGGGTKVEIK）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域とを含むか；
（４−１）配列番号１８１に示されるアミノ酸配列の１番目〜１１８番目のアミノ酸配列（EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFAFSSYDMSWVRQAPGKGLEWVAYISSGGGSTYYPDTVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARRGLRRAMDYWGQGTMVTVSS）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる重鎖可変領域と、配列番号１８１に示されるアミノ酸配列の１３４番目〜２４５番目のアミノ酸配列（DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域とを含むか；
（５−１）配列番号１８２に示されるアミノ酸配列の１番目〜１１８番目のアミノ酸配列（EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFAFSSYDMSWVRQAPGKGLEWVAYISSGGGSTYYPDTVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARRGLRRAMDYWGQGTMVTVSS）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる重鎖可変領域と、配列番号１８２に示されるアミノ酸配列の１３４番目〜２４５番目のアミノ酸配列（DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLVHSSGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域とを含むか；
（６−１）配列番号１８３に示されるアミノ酸配列の１番目〜１１８番目のアミノ酸配列（EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFAFSSYDMSWVRQAPGKRLEWVAYISSGGGSTYYPDTVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARRGLRRAMDYWGQGTMVTVSS）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる重鎖可変領域と、配列番号１８３に示されるアミノ酸配列の１３４番目〜２４５番目のアミノ酸配列（DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域とを含むか；或いは
（７−１）配列番号１８４に示されるアミノ酸配列の１番目〜１１８番目のアミノ酸配列（EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFAFSSYDMSWVRQAPGKRLEWVAYISSGGGSTYYPDTVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARRGLRRAMDYWGQGTMVTVSS）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる重鎖可変領域と、配列番号１８４に示されるアミノ酸配列の１３４番目〜２４５番目のアミノ酸配列（DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLVHSSGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSTHVPLTFGGGTKVEIK）と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域とを含む；
前記一本鎖抗体。
【請求項２】
細胞膜に局在するヒトＧＰＣ３の立体構造を特異的に認識する、請求項１に記載の一本鎖抗体。
【請求項３】
配列番号１５６に示されるアミノ酸配列からなるヒトＧＰＣ３由来のポリペプチドに特異的に結合しない、請求項１又は２に記載の一本鎖抗体。
【請求項４】
免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるＣＡＲにおける一本鎖抗体として用いたときに、前記免疫担当細胞が、ＧＰＣ３陽性がん細胞特異的な細胞傷害活性及びＩＦＮ−γ産生能を有する、請求項１〜３のいずれかに記載の一本鎖抗体。
【請求項５】
（１−２）配列番号１７８に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか；
（２−２）配列番号１７９に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか；
（３−２）配列番号１８０に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか；
（４−２）配列番号１８１に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか；
（５−２）配列番号１８２に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか；
（６−２）配列番号１８３に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか；或いは
（７−２）配列番号１８４に示されるアミノ酸配列と少なくとも９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む；
請求項１〜４のいずれかに記載の一本鎖抗体。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の一本鎖抗体と、該抗体のカルボキシル末端に融合した細胞膜貫通領域と、該細胞膜貫通領域のカルボキシル末端に融合した免疫担当細胞活性化シグナル伝達領域とを含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であって、がん免疫療法において、免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるための、前記ＣＡＲ。
【請求項７】
免疫担当細胞の細胞表面上に発現させたときに、前記免疫担当細胞が、ＧＰＣ３陽性がん細胞特異的な細胞傷害活性及びＩＦＮ−γ産生能を有する、請求項６に記載のＣＡＲ。
【請求項８】
配列番号１８５〜１８７のいずれかに示されるアミノ酸配列を含む請求項６又は７に記載のＣＡＲ。
【請求項９】
がん免疫療法に用いるための、請求項６〜８のいずれかに記載のＣＡＲを発現する免疫担当細胞。
【請求項１０】
さらに、インターロイキン７（ＩＬ―７）、及びケモカインリガンド１９（ＣＣＬ１９）を発現する請求項９に記載の免疫担当細胞。
【請求項１１】
ＧＰＣ３陽性がん細胞特異的な細胞傷害活性及びＩＦＮ−γ産生能を有する、請求項９又は１０に記載の免疫担当細胞。
【請求項１２】
がん免疫療法において、免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）における一本鎖抗体をコードする一本鎖抗体遺伝子として用いるための、請求項１〜５のいずれかに記載の一本鎖抗体をコードする一本鎖抗体遺伝子、又は
がん免疫療法において、免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるＣＡＲをコードするＣＡＲ遺伝子として用いるための、請求項６〜８のいずれかに記載のＣＡＲをコードするＣＡＲ遺伝子。
【請求項１３】
免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるＣＡＲにおける一本鎖抗体をコードする一本鎖抗体遺伝子として用いたときに、前記免疫担当細胞が、ＧＰＣ３陽性がん細胞特異的な細胞傷害活性及びＩＦＮ−γ産生能を有する、請求項１２に記載の一本鎖抗体遺伝子、又は
免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるＣＡＲをコードするＣＡＲ遺伝子として用いたときに、前記免疫担当細胞が、ＧＰＣ３陽性がん細胞特異的な細胞傷害活性及びＩＦＮ−γ産生能を有する、請求項１２に記載のＣＡＲ遺伝子。
【請求項１４】
プロモーターと、該プロモーターの下流に作動可能に連結されている請求項１２若しくは１３に記載の一本鎖抗体遺伝子、又は請求項１２若しくは１３に記載のＣＡＲ遺伝子とを含むベクターであって、がん免疫療法において、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を免疫担当細胞の細胞表面上に発現させるための、前記ベクター。
【請求項１５】
ＣＡＲを免疫担当細胞の細胞表面上に発現させたときに、前記免疫担当細胞が、ＧＰＣ３陽性がん細胞特異的な細胞傷害活性及びＩＦＮ−γ産生能を有する、請求項１４に記載のベクター。