【手続補正書】
【提出日】令和3年10月14日(2021.10.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a)抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、第1の共刺激分子の細胞内ドメインとを含むキメラ抗原受容体（CAR）をコードする核酸；ならびに
(b)少なくとも、
(i)内因性PD-1；
(ii)内因性β-2ミクログロブリン、内因性TCR α鎖、および内因性TCR β鎖；または
(iii)内因性HLA分子、内因性TCR α鎖、および内因性TCR β鎖
をダウンレギュレートすることができるCRISPR/Cas9系をコードする1つまたは複数の核酸
を含む改変T細胞。
【請求項２】
CRISPR系がpAd5/F35-CRISPRベクターを含む、請求項1記載の改変T細胞。
【請求項３】
前記CARの抗原結合ドメインが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、合成抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、単一ドメイン抗体、一本鎖可変断片、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される抗体を含み、かつ/または該CARの抗原結合ドメインが、標的細胞上の抗原に特異的に結合する、請求項1または2記載の改変T細胞。
【請求項４】
前記CARの細胞内ドメインが二重シグナル伝達ドメインを含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の改変T細胞。
【請求項５】
第2の共刺激分子をコードする外因性核酸をさらに含む、請求項1〜4のいずれか一項記載の改変T細胞。
【請求項６】
前記第2の共刺激分子が、CD3、CD27、CD28、CD83、CD86、CD127、4-1BB、4-1BBL、PD1、およびPD1Lからなる群より選択される、請求項5記載の改変T細胞。
【請求項７】
CD3が少なくとも2つの異なるCD3鎖を含む、請求項6記載の改変T細胞。
【請求項８】
少なくとも2つの異なるCD3鎖が、少なくともCD3ζ鎖およびCD3ε鎖である、請求項7記載の改変T細胞。
【請求項９】
(a)抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、および第1の共刺激分子の細胞内ドメインを含むキメラ抗原受容体（CAR）をコードする核酸；ならびに
(b)少なくとも、
(i)内因性 PD-1；
(ii)内因性β-2ミクログロブリン、内因性TCR α鎖、および内因性TCR β鎖；または
(iii)内因性HLA分子、内因性TCR α鎖、および内因性TCR β鎖
をダウンレギュレートすることができるCRISPR/Cas9系をコードする1つまたは複数の核酸
をT細胞にエクスビボで導入する段階を含む、改変T細胞を作製するためのエクスビボ方法。
【請求項１０】
CRISPR系がpAd5/F35-CRISPRベクターを含む、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
前記CARの抗原結合ドメインがモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、合成抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、単一ドメイン抗体、一本鎖可変断片、およびそれらの抗原結合断片からなる群より選択される抗体を含み、かつ/または該CARの抗原結合ドメインが標的細胞上の抗原に特異的に結合する、請求項9または10記載の方法。
【請求項１２】
前記CARの細胞内ドメインが二重シグナル伝達ドメインを含む、請求項9〜11のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
T細胞が、末梢血単核細胞、臍帯血細胞、精製されたT細胞集団、およびT細胞株からなる群より得られる、請求項9〜12のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４】
T細胞を拡大し、それによって拡大されたT細胞を得る段階をさらに含む、請求項9〜13のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５】
前記拡大する段階が、T細胞を、flt3-L、IL-1、IL-3、およびc-kitリガンドからなる群より選択される因子とともに培養することを含む、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
T細胞を凍結保存して凍結保存された細胞を得る段階、およびT細胞に請求項9(a)および(b)記載の前記核酸の少なくとも1つを導入する前に、該凍結保存されたT細胞を解凍する段階をさらに含む、請求項9〜15のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７】
請求項9(a)および(b)記載の前記核酸の少なくとも1つを導入する段階が、拡大されたT細胞に形質導入を行うこと、拡大されたT細胞にトランスフェクションを行うこと、および拡大されたT細胞にエレクトロポレーションを行うことからなる群より選択される少なくとも1つである、請求項14〜16のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８】
第2の共刺激分子をコードするRNAをT細胞中にエレクトロポレーションする段階をさらに含む、請求項9〜17のいずれか一項記載の方法。
【請求項１９】
前記第2の共刺激分子が、CD3、CD27、CD28、CD83、CD86、CD127、4-1BB、4-1BBL、PD1、およびPD1Lからなる群より選択される、請求項18記載の方法。
【請求項２０】
T細胞の多能性を誘導するためにT細胞においてKlf4、Oct3/4およびSox2を発現させる段階をさらに含む、請求項9〜19のいずれか一項記載の方法。
【請求項２１】
請求項1〜8のいずれか一項記載の改変T細胞を含む、対象における疾患または状態を処置するための薬学的組成物であって、該疾患または状態が、
(i)免疫亢進と関連しているか、または
(ii)後天性免疫不全症候群（AIDS）、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群、自己免疫性アジソン病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、内耳自己免疫病（AIED）、自己免疫性リンパ増殖症候群（ALPS）、自己免疫性血小板減少性紫斑病（ATP）、ベーチェット病、心筋症、セリアック病-疱疹状皮膚炎（celiac sprue-dermatitis hepetiformis）、慢性疲労免疫機能不全症候群（CFIDS）、慢性炎症性脱髄性多発神経炎（CIPD）、瘢痕性類天疱瘡、寒冷凝集素症、クレスト症候群、クローン病、ドゴー病、若年性皮膚筋炎、円板状ループス、本態性混合型クリオグロブリン血症、線維筋痛-線維筋炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本甲状腺炎、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病（ITP）、IgA腎症、インスリン依存性糖尿病、若年性慢性関節炎（スティル病）、若年性関節リウマチ、メニエール病、混合性結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症、悪性貧血、結節性多発動脈炎、多発性軟骨炎、多腺性症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎および皮膚筋炎、原発性無ガンマグロブリン血症、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、乾癬性関節炎、レイノー現象、ライター症候群、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症（進行性全身性硬化症（PSS）、これは全身性硬化症（SS）としても知られる）、シェーグレン症候群、スティッフマン症候群、全身性エリテマトーデス、高安動脈炎、側頭動脈炎/巨細胞性動脈炎、潰瘍性大腸炎、ブドウ膜炎、白斑、ヴェーゲナー肉芽腫症、ならびにそれらの任意の組み合わせからなる群より選択される自己免疫疾患であるか、または
(iii)乳がん、前立腺がん、卵巣がん、子宮頸がん、皮膚がん、膵臓がん、大腸がん、腎臓がん、肝臓がん、脳がん、リンパ腫、白血病、肺がん、およびそれらの任意の組み合わせからなる群より選択されるがんである、
薬学的組成物。
【請求項２２】
請求項1〜8のいずれか一項記載の改変T細胞を含む、対象において標的細胞または組織に対するT細胞媒介性免疫応答を刺激するための薬学的組成物であって、薬学的組成物が標的細胞または組織の溶解を誘導する、薬学的組成物。
【請求項２３】
誘導される溶解が、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ADCC）である、請求項22記載の薬学的組成物。
【請求項２４】
請求項1〜8のいずれか一項記載の改変T細胞を含む、養子細胞移入療法において対象にとって有害である免疫反応を予防または処置するための薬学的組成物。
【請求項２５】
その必要のある対象における免疫応答の処置のための医薬の製造における、請求項1〜8のいずれか一項記載の改変T細胞の使用。
【請求項２６】
請求項9〜20のいずれか一項記載の方法に従って作製された、改変T細胞を含む組成物。
【請求項２７】
請求項9〜20のいずれか一項記載の方法に従って作製された改変T細胞と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。