【手続補正書】
【提出日】令和3年8月27日(2021.8.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
改変ゲノムを含む改変ヒトＴ細胞であって、
（ａ）Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）αの発現の低減；および
（ｂ）β２−ミクログロブリン（Ｂ２Ｍ）の発現の低減
を含み、必要に応じて、
（ｃ）損傷細胞、異形成細胞、感染細胞、免疫原性細胞、炎症細胞、悪性細胞、化生細胞、突然変異細胞、およびこれらの組み合わせの少なくとも１つの表面上に発現される目的の抗原またはエピトープに特異的に結合する、少なくとも１つのキメラ抗原受容体、または前記少なくとも１つのキメラ抗原受容体をコードする外因性核酸；および／または
（ｄ）隣接細胞、組織または器官における目的の生理学的効果をモジュレートする少なくとも１つの外因性タンパク質、または前記少なくとも１つの外因性タンパク質をコードす外因性核酸
を含む、改変ヒトＴ細胞。
【請求項２】
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）βの発現の低減をさらに含む、請求項１に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項３】
（ａ）１４番染色体上の前記ＴＣＲαをコードする遺伝子が前記細胞におけるＴＣＲαの発現を低減するように編集されている、第１のゲノム改変；および
（ｂ）１５番染色体上の前記Ｂ２Ｍをコードする遺伝子が前記細胞におけるＢ２Ｍの発現を低減するように編集されている、第２のゲノム改変
を含む、請求項１または２に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項４】
（ｃ）７番染色体上の前記ＴＣＲβをコードする遺伝子が前記細胞におけるＴＣＲβの発現を低減するように編集されている、第３のゲノム改変をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項５】
改変ヒトＴ細胞であって、
（ａ）１４番染色体上のＴＣＲαをコードする遺伝子が、ゲノムＤＮＡの第１の連続ストレッチを欠失させるように編集されている、第１のゲノム改変；
（ｂ）１５番染色体上のβ２−ミクログロブリン（Ｂ２Ｍ）をコードする遺伝子が、ゲノムＤＮＡの第２の連続ストレッチを欠失させるように編集されている、第２のゲノム改変
を含み、必要に応じて、
（ｃ）損傷細胞、異形成細胞、感染細胞、免疫原性細胞、炎症細胞、悪性細胞、化生細胞、突然変異細胞、およびこれらの組み合わせの少なくとも１つの表面上に発現される目的の抗原またはエピトープに特異的に結合する、少なくとも１つのキメラ抗原受容体、または前記少なくとも１つのキメラ抗原受容体をコードする外因性核酸；および／または
（ｄ）隣接細胞、組織または器官における目的の生理学的効果をモジュレートする少なくとも１つの外因性タンパク質、または前記少なくとも１つの外因性タンパク質をコードす外因性核酸
を含む、改変ヒトＴ細胞。
【請求項６】
前記ゲノムＤＮＡの第１の連続ストレッチが、第１のコーディングエクソンの部分を含む、請求項５に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項７】
前記ゲノムＤＮＡの第１の連続ストレッチが、配列番号５３２〜６０９、９１０２〜９７５０、および９７５１〜９７９７からなる群より選択されるリボ核酸と相補的であり、かつ／またはハイブリダイズする第１のＤＮＡ配列を含む、請求項５に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項８】
前記ゲノムＤＮＡの第２の連続ストレッチが、第２のコーディングエクソンの部分を含む、請求項５〜７のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項９】
前記ゲノムＤＮＡの第２の連続ストレッチが、配列番号７６６〜７８０、および１０５７４〜１３２５７からなる群より選択されるリボ核酸と相補的であり、かつ／またはハイブリダイズする第２のＤＮＡ配列を含む、請求項５〜７のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項１０】
７番染色体上のＴＣＲβをコードする遺伝子が、ゲノムＤＮＡの第３の連続ストレッチを欠失するように編集されている、第３のゲノム改変をさらに含む、請求項５〜９のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項１１】
前記ゲノムＤＮＡの第３の連続ストレッチが、第３のコーディングエクソンの部分を含む、請求項１０に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項１２】
前記ゲノムＤＮＡの第３の連続ストレッチが、配列番号６１０〜７６５、９７９８〜１０５３２、および１０５３３〜１０５７３からなる群より選択されるリボ核酸と相補的であり、かつ／またはハイブリダイズする第３のＤＮＡ配列を含む、請求項１０に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのキメラ抗原受容体が、ＣＤ１９、ＣＤ２０、およびＣＤ２２のいずれか１つに特異的に結合するものである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの外因性タンパク質が、宿主による改変ヒトＴ細胞の耐性を誘導する免疫耐性因子を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項１５】
前記細胞が、自己免疫障害、癌、慢性感染性疾患および移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）からなる群より選択される障害を患っているか、その障害について処置されているか、その障害と診断されているか、その障害を発症するリスクを有するか、またはその障害を有すると疑われる被験体から得られたものである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項１６】
改変ヒトＴ細胞の作製方法であって、
（ａ）前記細胞中の１４番染色体上のＴＣＲαをコードする遺伝子を編集してゲノムＤＮＡの第１の連続ストレッチを欠失させ、ＴＣＲαの発現を低減させること；および
（ｂ）前記細胞中の１５番染色体上のＢ２Ｍをコードする遺伝子を編集してゲノムＤＮＡの第２の連続ストレッチを欠失させ、Ｂ２Ｍの発現を低減させること
を含み、必要に応じて、
（ｃ）損傷細胞、異形成細胞、感染細胞、免疫原性細胞、炎症細胞、悪性細胞、化生細胞、突然変異細胞、およびこれらの組み合わせの少なくとも１つの表面上に発現される目的の抗原またはエピトープに特異的に結合する、少なくとも１つのキメラ抗原受容体を前記細胞に発現させること；および／または
（ｄ）隣接細胞、組織または器官における目的の生理学的効果をモジュレートする少なくとも１つの外因性タンパク質を前記細胞に発現させること
を含み、
（ａ）−（ｂ）における編集が、前記細胞を、
Ｃａｓタンパク質または前記Ｃａｓタンパク質をコードする核酸；
（ａ）における前記遺伝子から前記ゲノムＤＮＡの第１の連続ストレッチを欠失させるためのガイドＲＮＡ配列の少なくとも１つの第１のペア；および
（ｂ）における前記遺伝子から前記ゲノムＤＮＡの第２の連続ストレッチを欠失させるためのガイドＲＮＡ配列の少なくとも１つの第２のペア
と接触させることを含む、方法。
【請求項１７】
前記細胞中の７番染色体上のＴＣＲβをコードする遺伝子を編集してゲノムＤＮＡの第３の連続ストレッチを欠失させ、ＴＣＲβの発現を低減させることをさらに含み、
前記編集が、前記細胞を、
Ｃａｓタンパク質または前記Ｃａｓタンパク質をコードする核酸、および
ＴＣＲβをコードする前記遺伝子から前記ゲノムＤＮＡの第３の連続ストレッチを欠失させるためのガイドＲＡＮ配列の少なくとも１つの第３のペア
と接触させることを含む、請求項１６に記載の作製方法。
【請求項１８】
前記Ｃａｓタンパク質が、Ｃａｓ１、Ｃａｓ２、Ｃａｓ３、Ｃａｓ４、Ｃａｓ５、Ｃａｓ６、Ｃａｓ７、Ｃａｓ８、およびＣａｓ９からなる群から選択される、請求項１６または１７に記載の作製方法。
【請求項１９】
請求項１６〜１８のいずれか一項の作製方法により得られる改変ヒトＴ細胞。
【請求項２０】
前記Ｔ細胞が、多能性幹細胞に由来するＴ細胞である、請求項１〜１５および１９のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項２１】
前記Ｔ細胞が、初代ヒトＴ細胞である、請求項１〜１５および１９のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞。
【請求項２２】
請求項１〜１５および１９〜２１のいずれか一項に記載の改変ヒトＴ細胞を含む、処置を必要とする患者を処置するための組成物。
【請求項２３】
前記処置が、
ｉ）前記改変ヒトＴ細胞をエクスパンドすること；および
ｉｉ）前記改変ヒトＴ細胞を前記患者に投与すること
を含むものである、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記患者が、自己免疫障害、癌、慢性感染性疾患および移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）からなる群より選択される障害を患っているか、その障害について処置されているか、その障害と診断されているか、その障害を発症するリスクを有するか、またはその障害を有すると疑われる、請求項２２または２３に記載の組成物。