【手続補正書】
【提出日】令和3年10月19日(2021.10.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞増殖を制御するための機構を含む単離された遺伝子修飾動物細胞であって、前記遺伝子修飾動物細胞は、1つまたは複数の細胞分裂遺伝子座（CDL）の遺伝子修飾を含み、該CDLは表２の1以上の遺伝子座であり、前記遺伝子修飾は、CDLに作動可能に連結された外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムを含む修飾であり、CDLの発現が、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの誘導物質の存在下でのみ活性化される、前記細胞。
【請求項２】
前記CDLの遺伝子修飾が、外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムを含むDNAベクターでの前記CDLの標的化された修飾による遺伝子修飾である、請求項１に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項３】
前記CDLが：
（a）表２に記載されている2以上の遺伝子座である、
（b）細胞周期、DNA複製、RNA転写、タンパク質翻訳、および代謝の1以上において機能する遺伝子産物をコードする、又は
（c）CDK1、TOP2A、CENPA、BIRC5、およびEEF2の1つ以上である、
請求項１又は２に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項４】
CDLがCDK1である、請求項３に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項５】
CDLがCDK1、TOP2A、CENPA、BIRC5、及びEEF2の２以上である、請求項３に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項６】
CDLがCDK1及びTOP2Aであるか、又は、CDK1及びEEF2である、請求項５に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項７】
前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムが、ドックスブリッジシステム、クメートスイッチ誘導性システム、エクジソン誘導性システム、電波誘導性システム、又はリガンド可逆的二量体化システムである、請求項１から６のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項８】
動物細胞が、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、および非ヒト霊長類の細胞、または鳥類細胞からなる群より選択される哺乳動物細胞である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項９】
動物細胞が、多能性幹細胞、複能性細胞、若しくは単能性前駆細胞であるか、又はそれらに由来するか、或いは、最終分化細胞である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１０】
対象の治療に使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１１】
医療に使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１２】
細胞療法に用いるための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞。
【請求項１３】
複数の、請求項１〜９のいずれか一項に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞を含む、集団。
【請求項１４】
対象の治療に使用するための、請求項１３に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞の集団。
【請求項１５】
医療に使用するための、請求項１３に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞の集団。
【請求項１６】
細胞療法に用いるための、請求項１３に記載の単離された遺伝子修飾動物細胞の集団。
【請求項１７】
動物細胞における内在性の細胞分裂遺伝子座（CDL）の発現を修飾するためのDNAベクターであって、前記CDLは表２の1以上の遺伝子座であり、前記ベクターは外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムを含むものであり、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムは、CDLの遺伝子座に、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムを挿入し、それにより前記CDLを該外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムに作動可能に連結するよう構成されており、それにより、該CDLの発現が、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの誘導物質の存在下でのみ活性化される、前記DNAベクター。
【請求項１８】
前記CDLが：
（a）表２に記載されている2以上の遺伝子座である、
（b）細胞周期、DNA複製、RNA転写、タンパク質翻訳、および代謝の1以上において機能する遺伝子産物をコードする、又は
（c）CDK1、TOP2A、CENPA、BIRC5、およびEEF2の1つ以上である、
請求項１７に記載のDNAベクター。
【請求項１９】
CDLがCDK1である、請求項１８に記載のDNAベクター。
【請求項２０】
CDLがCDK1、TOP2A、CENPA、BIRC5、及びEEF2の２以上である、請求項１８に記載のDNAベクター。
【請求項２１】
CDLがCDK1及びTOP2Aであるか、又は、CDK1及びEEF2である、請求項２０に記載のDNAベクター。
【請求項２２】
前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムが、ｄｏｘ−架橋システム、クメートスイッチ誘導システム、エクジソン誘導システム、電波誘導システム、又はリガンド−可逆的二量体化システムである、請求項１７〜２１のいずれか１項に記載のDNAベクター。
【請求項２３】
前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの、増殖している宿主細胞への組込みが、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの誘導物質への暴露による該宿主細胞の増殖を可能にする、請求項１７〜２２のいずれか１項に記載のDNAベクター。
【請求項２４】
動物細胞の増殖の制御に使用するための請求項１〜９のいずれか１項に記載の単離された、遺伝子修飾動物細胞であって、前記使用が、前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの誘導物質により制御することを含む、前記細胞。
【請求項２５】
前記使用が、
(a)前記遺伝子修飾動物細胞を、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの誘導物質に暴露することにより、前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を可能にすること、又は、
(b)前記遺伝子修飾動物細胞を、前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの誘導物質の不在下に維持することにより、前記動物細胞の増殖を予防又は阻害すること、
を含む、請求項２４に記載の単離された、遺伝子修飾動物細胞。
【請求項２６】
遺伝子修飾動物細胞を製造するための生体外の方法であって、1つまたは複数の細胞分裂遺伝子座（CDL）の遺伝子を修飾することを含み、該CDLは表２の1以上の遺伝子座であり、該遺伝子の修飾は該CDLに外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムを作動可能に連結することにより行い、該CDLの発現が前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムの誘導物質の存在下でのみ活性化される、前記方法。
【請求項２７】
前記CDLが：
（a）表２に記載されている2以上の遺伝子座である、
（b）細胞周期、DNA複製、RNA転写、タンパク質翻訳、および代謝の1以上において機能する遺伝子産物をコードする、又は
（c）CDK1、TOP2A、CENPA、BIRC5、およびEEF2の1つ以上である、
請求項２６に記載の生体外の方法。
【請求項２８】
CDLがCDK1である、請求項２７に記載の生体外の方法。
【請求項２９】
CDLがCDK1、TOP2A、CENPA、BIRC5、及びEEF2の２以上である、請求項２７に記載の生体外の方法。
【請求項３０】
CDLがCDK1及びTOP2Aであるか、又は、CDK1及びEEF2である、請求項２９に記載の生体外の方法。
【請求項３１】
前記外性誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現システムが、ｄｏｘ−架橋システム、クメートスイッチ誘導システム、エクジソン誘導システム、電波誘導システム、又はリガンド−可逆的二量体化システムである、請求項２６から３０のいずれか一項に記載の生体外の方法。
【請求項３２】
動物細胞が、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、および非ヒト霊長類の細胞、または鳥類細胞からなる群より選択される哺乳動物細胞である、請求項２６〜３１のいずれか一項に記載の生体外の方法。
【請求項３３】
動物細胞が、多能性幹細胞、複能性細胞、若しくは単能性前駆細胞であるか、又はそれらに由来するか、或いは、最終分化細胞である、請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の生体外の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７０】
Nagy A.et al. Manipulating the Mouse Embryo.(2003)
本開示は以下の実施形態を包含する。 
[１]  動物細胞の増殖を制御する方法であって、
−  動物細胞を用意するステップ；
−  前記動物細胞において、細胞分裂遺伝子座（ＣＤＬ）を遺伝子修飾するステップであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＣＤＬの前記遺伝子修飾は、
ａ）アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬをコードするＤＮＡ配列に転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含む、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系と；
ｂ）ＣＤＬの調節の誘導性外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＤＬの調節の誘導性外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系と
の１つ又は複数を含む、ステップ；
−  前記陰性選択マーカの誘導物質を用いて、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を制御するステップ；及び／又は
−  前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質を用いて、前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を制御するステップ
を含む方法。   
[２]  前記ＡＬＩＮＫ修飾動物細胞の前記制御は、
−  前記陰性選択マーカの誘導物質の非存在下で、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞を維持することにより、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を可能にするステップ；及び
−  前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記動物細胞を前記陰性選択マーカの前記誘導物質に曝露することにより、前記ＡＬＩＮＫ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖をアブレート又は阻害するステップ
の１つ又は複数を含む、実施形態１に記載の方法。   
[３]  前記ＥＡＲＣ修飾動物細胞の前記制御は、
−  前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞を前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質に曝露することにより、前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を可能にするステップ；及び
−  前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の前記誘導物質の非存在下で、前記ＥＡＲＣ系を含む前記動物細胞を維持することにより、前記ＥＡＲＣ系を含む前記遺伝子修飾動物細胞の増殖を阻止又は阻害するステップ
の１つ又は複数を含む、実施形態１又は２に記載の方法。   
[４]  前記ＣＤＬの前記遺伝子修飾は、
ａ）前記ＡＬＩＮＫ系を含むＤＮＡベクター；
ｂ）前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター；及び
ｃ）前記ＡＬＩＮＫ系及び前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター
の１つ又は複数による前記ＣＤＬの標的置換を実施するステップを含む、実施形態１〜３のいずれかに記載の方法。   
[５]  前記ＣＤＬの前記ＡＬＩＮＫ遺伝子修飾は、同型接合性、異型接合性、半接合性若しくは化合物異型接合性であり、及び／又は前記ＥＡＲＣ遺伝子修飾は、機能性ＣＤＬ修飾がＥＡＲＣ修飾対立遺伝子を通してのみ生成され得ることを確実にする、実施形態１〜４のいずれかに記載の方法。   
[６]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される１つ又は複数の遺伝子座である、実施形態１〜５のいずれかに記載の方法。   
[７]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態６に記載の方法。   
[８]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態７に記載の方法。   
[９]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態１〜８のいずれかに記載の方法。   
[１０]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態１〜８のいずれかに記載の方法。   
[１１]  前記動物細胞は、哺乳動物細胞又は鳥類細胞である、実施形態１〜１０のいずれかに記載の方法。   
[１２]  前記哺乳動物細胞は、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、又は非ヒト霊長類細胞であり、好ましくは、前記哺乳動物細胞はヒト細胞である、実施形態１１に記載の方法。   
[１３]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞である、実施形態１〜１２のいずれかに記載の方法。   
[１４]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞に由来する、実施形態１〜１２のいずれかに記載の方法。   
[１５]  実施形態１〜１４のいずれかに記載の方法に従って動物細胞集団の増殖を制御する方法。   
[１６]  細胞増殖を制御するための少なくとも１つの機構を含むように遺伝子修飾された動物細胞であって、
−  １つ又は複数の細胞分裂遺伝子座（ＣＤＬ）の遺伝子修飾
を含み、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記遺伝子修飾は、
ａ）アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬをコードするＤＮＡ配列に転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含む、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系と；
ｂ）ＣＥＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＥＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系と
の１つ又は複数である、動物細胞。   
[１７]  前記ＣＤＬの前記遺伝子修飾は、
ａ）前記ＡＬＩＮＫ系を含むＤＮＡベクター；
ｂ）前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター；
ｃ）前記ＡＬＩＮＫ系及び前記ＥＡＲＣ系を含むＤＮＡベクター
の１つ又は複数による前記ＣＤＬの標的置換を実施するステップを含む、実施形態１６に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[１８]  前記ＣＤＬの前記ＡＬＩＮＫ遺伝子修飾は、同型接合性、異型接合性、半接合性若しくは化合物異型接合性であり、及び／又は前記ＥＡＲＣ遺伝子修飾は、機能性ＣＤＬ修飾がＥＡＲＣ修飾対立遺伝子を通してのみ生成され得ることを確実にする、実施形態１６又は１７に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[１９]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される遺伝子座の１つ又は複数である、実施形態１６〜１８のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２０]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態１９に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２１]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態２０に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２２]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態１６〜２１のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２３]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態１６〜２１のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２４]  前記動物細胞は、哺乳動物細胞又は鳥類細胞である、実施形態１６〜２３のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２５]  前記哺乳動物細胞は、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、ネコ、イヌ、ウシ、ウマ、シカ、エルク、スイギュウ、雄牛、ラクダ、ラマ、ウサギ、ブタ、ヤギ、ヒツジ、又は非ヒト霊長類細胞であり、好ましくは、前記哺乳動物細胞はヒト細胞である、実施形態２４に記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２６]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞である、実施形態１６〜２５のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２７]  前記動物細胞は、多能性幹細胞、複能性細胞、単能性前駆細胞、又は最終分化細胞に由来する、実施形態１６〜２５のいずれかに記載の遺伝子修飾動物細胞。   
[２８]  実施形態１６〜２７のいずれかに記載の細胞による遺伝子修飾動物細胞の集団。   
[２９]  細胞分裂遺伝子座（ＣＤＬ）の発現を修飾するためのＤＮＡベクターであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＤＮＡベクターは、
−  アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系
を含み、前記ＡＬＩＮＫ系は、前記ＣＤＬに転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含み、
前記ＤＮＡベクターが１つ又は複数の宿主細胞に挿入される場合、前記ＤＮＡベクターを含む増殖宿主細胞は、前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記陰性選択マーカの誘導物質に曝露されると殺傷されることになる、ＤＮＡベクター。   
[３０]  細胞分裂必須遺伝子座（ＣＤＬ）の発現を修飾するためのＤＮＡベクターであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＤＮＡベクターは、
−  ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系
を含み、前記ＥＡＲＣ系は、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含み、
前記ＤＮＡベクターが１つ又は複数の宿主細胞に挿入される場合、前記ＤＮＡベクターを含む増殖宿主細胞は、前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質に曝露されなければ殺傷されることになる、ＤＮＡベクター。   
[３１]  細胞分裂必須遺伝子座（ＣＤＬ）の発現を修飾するためのＤＮＡベクターであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記ＤＮＡベクターは、
−  アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬに転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列である、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系と；
−  ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系と
を含み、
前記ＤＮＡベクターが１つ又は複数の宿主細胞に挿入される場合、前記ＤＮＡベクターを含む増殖宿主細胞は、前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記陰性選択マーカの誘導物質に曝露され、且つ前記ＤＮＡベクターを含む前記増殖宿主細胞が前記誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系の誘導物質に曝露されなければ殺傷されることになる、ＤＮＡベクター。   
[３２]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される遺伝子座の１つ又は複数である、実施形態２９〜３１のいずれかに記載のＤＮＡベクター。   
[３３]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態３２に記載のＤＮＡベクター。   
[３４]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態３３に記載のＤＮＡベクター。   
[３５]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態２９又は３１に記載のＤＮＡベクター。   
[３６]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態３０又は３１に記載のＤＮＡベクター。   
[３７]  １つ又は複数の細胞分裂必須遺伝子座（ＣＤＬ）を遺伝子修飾することにより、動物細胞の増殖を制御するためのキットであって、前記ＣＤＬは、１つ又は複数の遺伝子座であって、その転写産物が分裂細胞によって発現される１つ又は複数の遺伝子座であり、前記キットは、
−  アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系であって、前記ＣＤＬをコードするＤＮＡ配列に転写によって連結される陰性選択マーカをコードするＤＮＡ配列を含む、アブレーションリンク（ＡＬＩＮＫ）系を含むＤＮＡベクター；及び／又は
−  ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系であって、前記ＣＤＬに作動可能に連結される誘導性活性化因子に基づく遺伝子発現系を含む、ＣＤＬの調節の外性活性化因子（ＥＡＲＣ）系を含むＤＮＡベクター；及び／又は
−  ＡＬＩＮＫ系とＥＡＲＣ系とを含むＤＮＡベクターであって、前記ＡＬＩＮＫ系及び前記ＥＡＲＣ系は、それぞれ前記ＣＤＬに作動可能に連結されている、ＤＮＡベクター；並びに
−  前記ＤＮＡベクターの１つ又は複数を用いた動物細胞における前記ＣＤＬの標的置換の指示
を含むキット。   
[３８]  前記ＣＤＬは、表２に列挙される１つ又は複数の遺伝子座である、実施形態３７に記載のキット。   
[３９]  前記ＣＤＬは、遺伝子産物であって、その機能が細胞周期、ＤＮＡ複製、ＲＮＡ転写、タンパク質翻訳、及び代謝の１つ又は複数に関与している遺伝子産物をコードする、実施形態３８に記載のキット。   
[４０]  前記ＣＤＬは、Ｃｄｋ１／ＣＤＫ１、Ｔｏｐ２Ａ／ＴＯＰ２Ａ、Ｃｅｎｐａ／ＣＥＮＰＡ、Ｂｉｒｃ５／ＢＩＲＣ５、及びＥｅｆ２／ＥＥＦ２の１つ又は複数であり、好ましくは、前記ＣＤＬはＣｄｋ１又はＣＤＫ１である、実施形態３９に記載のキット。   
[４１]  前記ＡＬＩＮＫ系は、単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系、シトシンデアミナーゼ／５−フルオロシトシン系、カルボキシルエステラーゼ／イリノテカン系、又はｉＣａｓｐ９／ＡＰ１９０３系を含み、好ましくは、前記ＡＬＩＮＫ系は単純ヘルペスウイルス−チミジンキナーゼ／ガンシクロビル系である、実施形態３７〜４０のいずれかに記載のキット。   
[４２]  前記ＥＡＲＣ系は、ｄｏｘ−架橋系、クメートスイッチ誘導系、エクジソン誘導系、電波誘導系、又はリガンド−可逆的二量体化系であり、好ましくは、前記ＥＡＲＣ系はｄｏｘ−架橋系である、実施形態３７〜４０のいずれかに記載のキット。