【手続補正書】
【提出日】令和3年3月12日(2021.3.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カリウムチャネル３（Ｋｖ１．３）のＥＬ１細胞外ループに特異的に結合する免疫グロブリンシングル可変ドメインであって、
該免疫グロブリンシングル可変ドメインは、パッチクランプアッセイ法で決定された場合に、Ｔ細胞からのカリウムイオンの流出を減少させるか又は完全に阻害すらすることにより、Ｋｖ１．３の活性をモデュレーションし、
該免疫グロブリンシングル可変ドメインは、４つのフレームワーク領域（それぞれＦＲ１〜ＦＲ４）と、３つの相補性決定領域（それぞれＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）とから本質的になり、ここで、
ｉ）ＣＤＲ１が、
ａ）配列番号：１８２、又は
ｂ）配列番号：１８２のアミノ酸配列に対して、３、２、もしくは１つのアミノ酸差を有するアミノ酸配列、ここで、
−１位において、Ｇが、ＬもしくはＲに変更されており、
−２位において、Ｌが、Ｆ、Ｐ、もしくはＩに変更されており、
−３位において、Ｌが、ＰもしくはＦに変更されており、
−４位において、Ｆが、Ｓ、ＬもしくはＩに変更されており、
−５位において、Ｓが、ＩもしくはＲに変更されており、
−６位において、Ｒが、Ｃ、Ａ、Ｐ、Ｖ、もしくはＬに変更されており、
−７位において、Ｎが、Ｈ、Ｐ、Ｉ、Ｍ、Ｙ、Ｔ、もしくはＤに変更されており、
−８位において、Ｓが、Ｔ、Ｒ、もしくはＩに変更されており、
−９位において、Ａが、ＶもしくはＴに変更されており、及び／又は
−１０位において、Ｇが、Ｓ、Ｒ、もしくはＶに変更されている、
からなる群より選択され、
及び
ｉｉ）ＣＤＲ２が、
ｃ）配列番号：２６９及び配列番号：５４１〜５５５、又は
ｄ）配列番号：２６９のアミノ酸配列に対して、３、２、もしくは１つのアミノ酸差を有するアミノ酸配列、ここで、
−１位において、Ｒが、ＧもしくはＣに変更されており、
−２位において、Ｉが、Ｖ、Ｔ、Ｓ、もしくはＬに変更されており、
−３位において、Ｒが、ＧもしくはＬに変更されており、
−４位において、Ｍが、Ｓ、Ｒ、Ａ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ、Ｐ、Ｑ、Ｖ、Ｗ、Ｙ、Ｉ、もしくはＴに変更されており、
−５位において、Ｇが、Ｖ、Ｓ、もしくはＴに変更されており、
−７位において、Ｓが、Ｇ、Ｃ、Ｄ、もしくはＥに変更されており、及び／又は
−８位において、Ｉが、Ｔ、Ｍ、もしくはＲに変更されている、
からなる群より選択され、
及び
ｉｉｉ）ＣＤＲ３が、
ｅ）配列番号：３９７、又は
ｆ）配列番号：３９７のアミノ酸配列に対して、３、２、もしくは１つのアミノ酸差を有するアミノ酸配列、ここで、
−１位において、Ｗが、Ｇに変更されており、
−３位において、Ｅが、Ｔ、Ｋ、Ｇ、ＡもしくはＩに変更されており、
−４位において、Ｇが、ＥもしくはＤに変更されており、
−５位において、Ｆが、Ａ、Ｌ、Ｖ、Ｙ、Ｔ、もしくはＳに変更されており、
−６位において、Ｙが、ＦもしくはＤに変更されており、
−７位において、Ｅが、ＧもしくはＫに変更されており、
−８位において、Ｙが、ＳもしくはＨに変更されており、及び／又は
−９位において、Ｗが、Ｓ、Ｇ、もしくはＣに変更されている、
からなる群より選択される、
免疫グロブリンシングル可変ドメイン。
【請求項２】
前記免疫グロブリンシングル可変ドメインが、
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９５である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９６である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７０であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８３であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８４であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８５であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７１であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９８である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８６であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９９である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８７であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８８であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７２であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８９であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７３であり、ＣＤＲ３が配列番号：４００である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９０であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７４であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７２であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０１である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９３であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７５であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０２である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９４であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７６であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７７であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８３であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９５であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０５である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９６であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９７であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０６である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９８であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９９であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８０であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２００であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８１であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０８である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：５８２であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４０９である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０３であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０４であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１９９であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８３であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０５であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８４であり、ＣＤＲ３が配列番号：４１０である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８５であり、ＣＤＲ３が配列番号：４１１である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８６であり、ＣＤＲ３が配列番号：４１２である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８５であり、ＣＤＲ２が配列番号：２７１であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９８である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０６であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８７であり、ＣＤＲ３が配列番号：４１３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８１であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８８であり、ＣＤＲ３が配列番号：４１１である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０７であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：４１４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０８であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２０９であり、ＣＤＲ２が配列番号：２６８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９３である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：２１０であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８９であり、ＣＤＲ３が配列番号：４１５である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４２であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４３であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４５であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４６であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４７であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４８であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５５０であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：２８９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５５１であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５５２であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５５３であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５５４であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５５５であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５５４であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４１であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４１であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４４であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９４である、ポリペプチド；
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４４であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド；及び
−ＣＤＲ１が配列番号：１８２であり、ＣＤＲ２が配列番号：５４９であり、ＣＤＲ３が配列番号：３９７である、ポリペプチド
の群より選択される、
請求項１記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン。
【請求項３】
前記免疫グロブリンシングル可変ドメインが、ドメイン抗体、ドメイン抗体として使用するのに適した免疫グロブリン、シングルドメイン抗体、シングルドメイン抗体として使用するのに適した免疫グロブリン、ｄＡｂ、ｄＡｂとして使用するのに適した免疫グロブリン、ナノボディ、ＶＨＨ配列、ヒト化ＶＨＨ配列、ラクダ化ＶＨ配列、又は親和性成熟により得られたＶＨＨ配列から本質的になり、前記免疫グロブリンシングル可変ドメインが、配列番号１〜６４、４９５、４９８〜５１３及び５２３〜５４０を有する免疫グロブリン、並びに配列番号１〜６４、４９５、４９８〜５１３及び５２３〜５４０と９０％を超える配列同一性を有する免疫グロブリンからなる群より選択される、請求項１又は２記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項記載の１つ以上の免疫グロブリンシングル可変ドメインを含むか、又は、同免疫グロブリンシングル可変ドメインから本質的になる、ポリペプチド。
【請求項５】
前記ポリペプチドが、配列番号：４５２〜４７３、４９６〜４９７、及び５１４〜５２２を有するポリペプチド、並びに配列番号：４５２〜４７３、４９６〜４９７、及び５１４〜５２２に対して、８０％超の配列同一性を有するポリペプチドからなる群より選択される、請求項４記載のポリペプチド。
【請求項６】
請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項４もしくは５記載のポリペプチドを含むか、又は、これらから本質的になる、化合物又は構築物であって、１つ以上のペプチドリンカーを介して連結されていてもよい１つ以上の他の基、残基、部分、又は結合ユニットを更に含む、化合物又は構築物。
【請求項７】
前記１つ以上の他の基、残基、部分、又は結合ユニットが、対応する請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項４もしくは５記載のポリペプチドと比較して、延長した半減期を有するポリペプチドを提供する、請求項６記載の化合物又は構築物。
【請求項８】
延長した半減期を有する免疫グロブリンシングル可変ドメイン又はポリペプチドを提供する前記１つ以上の他の基、残基、部分、又は結合ユニットが、ポリエチレングリコール分子、血清タンパク質もしくはそのフラグメント、血清タンパク質に結合することができる結合ユニット、Ｆｃ部分、及び、血清タンパク質に結合することができる小型タンパク質又はペプチドからなる群より選択される、請求項７記載の化合物又は構築物。
【請求項９】
前記化合物又は構築物が、配列番号：４５２〜４７３、４９６〜４９７、及び５１４〜５２２を有する化合物もしくは構築物、及び、配列番号：４５２〜４７３、４９６〜４９７、及び５１４〜５２２に対して、８０％超の配列同一性を有する化合物もしくは構築物からなる群より選択される、請求項８記載の化合物又は構築物。
【請求項１０】
発現ベクターに含まれていてもよい、請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項４もしくは５記載のポリペプチド、又は請求項６〜９のいずれか一項記載の化合物もしくは構築物をコードする、核酸。
【請求項１１】
請求項１０記載の核酸を含む、ホスト又はホスト細胞。
【請求項１２】
請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項４もしくは５記載のポリペプチド、請求項６〜９のいずれか一項記載の化合物もしくは構築物、又は請求項１０記載の核酸から選択される少なくとも１つを含む、組成物。
【請求項１３】
少なくとも１つの薬学的に許容し得る単体、希釈剤もしくは賦形剤及び／又は補助剤を更に含み、１つ以上の更なる薬学的に活性なポリペプチド及び／又は化合物を含んでいてもよい、医薬組成物である、請求項１２記載の組成物。
【請求項１４】
医薬として使用するための、請求項１２又は１３記載の組成物、請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項４又は５記載のポリペプチド、請求項６〜９のいずれか一項記載の化合物又は構築物。
【請求項１５】
Ｔ細胞の活性化及び／又は増殖を阻害する並びに／或いはブロックするのに使用するための、請求項１４記載の組成物、免疫グロブリンシングル可変ドメイン、ポリペプチド、又は化合物もしくは構築物。
【請求項１６】
Ｋｖ１．３に関連する疾患、障害もしくは症状の治療又は予防に使用するための、請求項１４もしくは１５記載の組成物、請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン、請求項４もしくは５記載のポリペプチド、又は請求項６〜９のいずれか一項記載の化合物もしくは構築物。
【請求項１７】
ａ）適切なホスト細胞又はホスト生物中において、又は、別の適切な発現系において、請求項１０記載の核酸配列を発現させる工程と、必要に応じてその後に、
ｂ）請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項４もしくは５記載のポリペプチドを単離及び／又は精製する工程と
を少なくとも含む、
請求項１〜３のいずれか一項記載の免疫グロブリンシングル可変ドメイン又は請求項４もしくは５記載のポリペプチドを製造するための方法。