(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0003703009.tif 000007
(式中、
Ｒは、水素原子、炭素数１〜２０のアルキル基、炭素数２〜２０のアルケニル基または炭素数２〜２０のアルキニル基を示し、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜２０のアルキル基、炭素数２〜２０のアルケニル基、炭素数２〜２０のアルキニル基、炭素数１〜２０のアルコキシ基、炭素数２〜２０のアルケニルオキシ基または炭素数２〜２０のアルキニルオキシ基を示すか、または、Ｒ1およびＲ2、Ｒ3およびＲ4、および、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して、一緒になってエポキシ環を形成するか、または、結合を形成してもよく、
破線は、一重結合または二重結合を示し、
Ｘは、ハロゲンを示す）
で示される化合物またはその塩。
【請求項２】
式（Ｉａ）：
【化２】
0003703009.tif 000008
（式中、Ｒ、Ｒ3、Ｒ4、破線およびＸは、請求項１において式（Ｉ）について定義したのと同一である）
で示される請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項３】
請求項１記載の化合物を含有するヒスチジンキナーゼ阻害剤。
【請求項４】
細菌性情報伝達阻害剤として用いるための請求項３記載のヒスチジンキナーゼ阻害剤。
【請求項５】
抗菌剤として用いるための請求項３記載のヒスチジンキナーゼ阻害剤。
【請求項６】
グラム陽性菌に対する抗菌剤として用いるための請求項３記載のヒスチジンキナーゼ阻害剤。
【請求項７】
式（ＩＩ）：
【化３】
0003703009.tif 000009
で示されるゼルンボンを臭素化し、式（ＩＩＩ）：
【化４】
0003703009.tif 000010
で示される化合物を得て、これを水酸化カリウム、シアン化メチルおよびα−シクロデキストリンで処理することによる、式（Ｉａ’）：
【化５】
0003703009.tif 000011
で示される化合物の製造方法。
【請求項８】
式（ＩＩ）：
【化６】
0003703009.tif 000012
で示されるゼルンボンをエポキシ化し、式（ＩＶ）：
【化７】
0003703009.tif 000013
で示される化合物を得て、これを臭素化して、式（Ｖ）：
0003703009.tif 000014
で示される化合物を得て、これを水酸化カリウム、シアン化メチルおよびα−シクロデキストリンで処理することによる、式（Ｉａ”）：
【化８】
0003703009.tif 000015
で示される化合物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、新規なドデカン酸誘導体、該化合物を含有するヒスチジンキナーゼ阻害剤および該化合物の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来多くの抗菌剤が細菌感染症の治療薬として用いられてきている。これまでに知られる抗菌剤の多くは、細菌の核酸合成、蛋白質合成、ペプチドグリカン合成等を阻害することにより作用する。これらの標的部位は単一で、主として代謝合成経路を阻害することを目的にしているため、これらの抗菌剤に対する耐性菌が出現しやすく、特に近年では複数の抗生物質に対して耐性を示す多剤耐性菌の出現が問題となっている。
近年問題になっている多剤耐性菌である黄色ブドウ球菌 Staphylococcus aureus、肺炎双球菌 Streptococcus pneumoniae 等はいずれもグラム陽性菌である。これらの出現にともない、従来の抗菌剤とは異なった新しいスクリーニングによるグラム陽性菌に対する新規抗菌剤（抗生物質）の開発が望まれている。
【０００３】
一方、細菌では、環境に応答してその変化を受容するレセプターとそれぞれの遺伝子発現を制御する情報伝達機構が知られており、その代表例が二成分制御系（two-component systems）である。二成分制御系とは、ヒスチジンキナーゼ活性を示すセンサータンパク質とＤＮＡ結合タンパク質であるレギュレーターより構成されている環境応答性の遺伝子発現制御系であり、細菌は様々な環境変化に対応すべく、種々のセンサーとレギュレーターを有している（バイオサイエンスとインダストリー、第５８巻、第４号参照）。グラム陽性菌の二成分制御系としては、ＹｙｃＦ（レギュレーター）およびＹｙｃＧ（センサー）が関与する情報伝達系が存在し、これを阻害すると細菌が死滅することが知られている（Fablet, C. and Hoch, A. A., J. Bacteriol., 180, 6375-6383, 1998, Marti, P. K., Li, T., Sun, D., Biek, D. P. and Schmid, M. B., J. Bacteriol., 181, 3666-3673, 1999, Lange, R., Wagner, C., DeSaizieu, A., Flint, N., Monos, J., Stiger, M., Caspers, P., Kamber, M., Keck wolfgang, Amrein, K. E., Gene, 237, 223-234, 1999, Beier, D. and Frank, R., J. Bacteriol., 182, 2068-2076, 2000）。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記従来技術に鑑みて行われたものであり、従来の抗生物質とは異なるスクリーニング法を用いることにより、グラム陽性菌に有効な抗菌剤を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は、細菌細胞の主要な情報伝達機構である二成分制御系に着目し、鋭意研究を重ねた結果、グラム陽性菌の二成分制御系であるＹｙｃＦおよびＹｙｃＧが関与する情報伝達系の阻害、特にセンサーであるＹｙｃＧのヒスチジンキナーゼ阻害を指標にスクリーニングを行うことにより、グラム陽性菌に有効な抗菌剤を開発することに成功した。
すなわち、本発明は、式（Ｉ）：
【化９】
0003703009.tif 000002
(式中、
Ｒは、水素原子、炭素数１〜２０のアルキル基、炭素数２〜２０のアルケニル基または炭素数２〜２０のアルキニル基を示し、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して、水素原子、炭素数１〜２０のアルキル基、炭素数２〜２０のアルケニル基、炭素数２〜２０のアルキニル基、炭素数１〜２０のアルコキシ基、炭素数２〜２０のアルケニルオキシ基または炭素数２〜２０のアルキニルオキシ基を示すか、または、Ｒ1およびＲ2、Ｒ3およびＲ4、および、Ｒ5およびＲ6は、それぞれ独立して、一緒になってエポキシ環を形成するか、または、結合を形成してもよく、
破線は、一重結合または二重結合を示し、
Ｘは、ハロゲンを示す）
で示される化合物またはその塩、および、該化合物またはその塩を含有するヒスチジンキナーゼ阻害剤を提供する。
本発明はまた、式（Ｉ）で示される化合物の製造方法を提供する。
【０００６】
【発明の実施の形態】
一般式（Ｉ）のＲ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ6における炭素数１〜２０のアルキル基とは、直鎖もしくは分枝鎖のアルキル基を包含し、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチルなどを挙げることができ、炭素数１〜１０のものが好ましく、炭素数１〜５のものが特に好ましい。
【０００７】
炭素数２〜２０アルケニル基とは、直鎖もしくは分枝鎖のアルケニル基を包含し、ビニル、プロぺニル、イソプロぺニル、ブテニル、イソブテニル、プレニル、ブタジエニル、ペンテニル、イソペンテニル、ペンタジエニルなどを挙げることができ、炭素数１〜１０のものが好ましく、炭素数１〜５のものが特に好ましい。
【０００８】
炭素数２〜２０アルキニル基とは、直鎖もしくは分枝鎖のアルキニル基を包含し、エチニル、ｎ−プロピニル、ｎ−ブチニル、ｎ−ペンチニル、イソペンチニルなどを挙げることができ、炭素数１〜１０のものが好ましく、炭素数１〜５のものが特に好ましい。
【０００９】
炭素数１〜２０のアルコキシ基とは、上記したアルキル基を有する基を包含し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシなどを挙げることができ、炭素数１〜１０のものが好ましく、炭素数１〜５のものが特に好ましい。
【００１０】
炭素数２〜２０のアルケニルオキシとは、上記したアルケニル基を有する基を包含し、例えば、ビニルオキシ、ｎ−プロペニルオキシ、ｎ−ブテニルオキシ、イソブテニルオキシ、ｓｅｃ−ブテニルオキシ、ｎ−ペンテニルオキシ、イソペンテニルオキシ、ブタジエニルオキシ、ペンタジエニルオキシなどを挙げることができ、炭素数１〜１０のものが好ましく、炭素数１〜５のものが特に好ましい。
【００１１】
低級アルキニルオキシとは、上記したアルキニル基を有する基を包含し、例えば、エチニルオキシ、ｎ−プロピニルオキシ、ｎ−ブチニルオキシ、ｎ−ペンチニルオキシおよびイソペンチニルオキシなどを挙げることができ、炭素数１〜１０のものが好ましく、炭素数１〜５のものが特に好ましい。
ハロゲンとは、臭素、塩素、フッ素またはヨウ素を意味し、特に臭素が好ましい。
【００１２】
本発明の式（Ｉ）で示される化合物としては、例えば、１１−ブロモ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸メチル、１１−ブロモ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸エチル、１１−ブロモ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸オクチル、１１−ブロモ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸、１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，１０−ドデカジエン酸メチル、１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，１０−ドデカジエン酸エチル、１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，１０−ドデカジエン酸オクチル、１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，１０−ドデカジエン酸などが挙げられる。
【００１３】
式（Ｉ）で示される化合物のうち、式（Ｉａ）：
【化１０】
0003703009.tif 000003
（式中、Ｒ、Ｒ3、Ｒ4およびＸは、式（Ｉ）における定義と同一である。）
で示される化合物が特に好ましい。
さらに特に好適な化合物としては、１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，１０−ドデカジエン酸および１１−ブロモ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸を挙げることができる。
【００１４】
式（Ｉ）の化合物は塩の形態で用いることもできる。式（Ｉ）の化合物の塩には、無機酸または有機酸、あるいは無機塩基または有機塩基との塩が含まれ、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、バリウム、マグネシウム、マグネシウム、モノ、ジまたはトリアルキルアミンとの塩等が挙げられる。
また、式（Ｉ）の化合物が１またはそれ以上の不斉炭素原子を含有する場合、ラセミ体および光学活性な形態で存在してもよく、本発明の式（Ｉ）の化合物には、これらすべての異性体およびこれらの混合物が含まれる。
【００１５】
本発明の式（Ｉ）および（Ｉａ）の化合物は、東南アジアに広く自生する生姜の一種である南洋ハナショウガ（Zingiber zerumbet Smith）の精油成分中に含まれるゼルンボン（Zerumbone）を出発物質として、製造することができる。スキーム１に、式（Ｉａ）の化合物のうち、Ｘが臭素であり、Ｒ3とＲ4が一緒になってエポキシを形成する化合物、および、結合を形成する化合物の製造例を示す。
【００１６】
【化１１】
0003703009.tif 000004
【００１７】
ゼルンボン（ＩＩ）は、南洋ハナショウガの根茎の水蒸気蒸留により、約０．５％の収率で単離することができる。ゼルンボンに、ＣＣｌ4中の臭素を加えることにより、位置選択的に臭素化が起こり、１０，１１−ジブロモ−４，４，７，１１−テトラメチル−２，６−シクロウンデカジエノン（ＩＩＩ）を得る（ J. Org. Chem., Vol. 64, No. 8, 1999）。この臭素化では、主にトランス付加が起こる（トランス：シス＝９．２：０．８）。（ＩＩＩ）に、１％ＫＯＨ、ＣＨ3ＣＮおよびα−シクロデキストリン（α−ＣＤ）を反応させると、１１員環が開環した１１−ブロモ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸（Ｉａ’）が得られる。この反応は、水酸基がカルボニル基へ求核攻撃した後、開裂して臭素が脱離するものと考えられる。
【００１８】
これとは別に、ゼルンボン（ＩＩ）に、ｍ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）を反応させると、位置選択的にエポキシ化が起こり、６，７−エポキシ−２，６，９，９−テトラメチル−２，１０−シクロウンデカジエノン（ＩＶ）が得られる。これを臭素化すると、２，３位のみが反応し、１０，１１−ジブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７，１１−テトラメチル−２−シクロウンデセノン（Ｖ）が得られる。この臭素化では、主にトランス付加が起こる（トランス：シス＝９：１）。これに１％ＫＯＨ、ＣＨ3ＣＮおよびα−ＣＤを反応させると、１１員環が開環した１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸（Ｉａ”）が得られる。この反応も、水酸基がカルボニル基へ求核攻撃した後、開裂して臭素が脱離するものと考えられる。
式（Ｉ）のその他の化合物は、スキーム１に示した反応および化学物質の製造において一般的な反応を適宜利用して、製造することができる。
【００１９】
式（Ｉ）の化合物は、以下の実施例において示すように、グラム陽性菌におけるＹｙｃＦおよびＹｙｃＧが関与する情報伝達系、特にセンサーであるＹｙｃＧのヒスチジンキナーゼ活性を阻害することにより、グラム陽性菌に対して抗菌活性を示す。これまでの抗菌剤のスクリーニング方法として、細菌の情報伝達機構である二成分制御系に着目したものはなく、したがって、本発明の抗菌剤は従来のものとは全く異なる新規な抗菌活性を有するものである。
【００２０】
式（Ｉ）の化合物を抗菌剤として用いる場合、式（Ｉ）の化合物またはその塩を、通常の経口または非経口製剤として用いてもよい。経口投与製剤としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、液剤などの種々の固形製剤、液体製剤を用いることができる。非経口投与としては、溶液、懸濁液、乳濁液などの注射剤、用時溶解または懸濁して使用する凍結乾燥または粉末状の製剤などを用いることができる。また、軟膏剤、パスタ剤などの経皮投与用製剤、坐剤等の非経口製剤を用いることもできる。
【００２１】
これらの製剤は、医薬品製剤における通常の担体、添加剤等を含有していてもよく、また、通常の方法により製造することができる。
式（Ｉ）の化合物を含有する医薬品製剤を投与する場合、その投与量は、患者の性別、年齢、体重、症状の重篤性などに応じて、適宜決定することができるが、経口投与の場合、式（Ｉ）の化合物を１日当たり０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは、０．１〜１０ｍｇ、非経口投与の場合、０．０００１〜１００ｍｇ、好ましくは０．０１〜１０ｍｇの量で投与する。
【実施例】
【００２２】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
実施例において、融点（ｍｐ）は修正していない。特記しない限り、ＮＭＲスペクトルは、内部標準としてテトラメチルシランを用い、ＣＤＣｌ3中で、1Ｈについては２７０ＭＨｚ、13Ｃについては５００ＭＨｚにて測定した。マススペクトルは、７０ｅｖにて記録し、高分解能マススペクトル（ＨＲＭＳ）は直接注入により測定した。特記しない限り、分析および分取ＨＰＬＣは、Wakosil-II 5C18 HC (158 x 8 mm) または Wakosil 5C18 HC (300 x 8 mm) のカラムに連結するシステムを用い、２１５ｎｍでモニターし、アセトニトリルおよび水（７：３）の混合物で溶出させて行った。用いた化学物質は、和光純薬工業（株）より購入した。
【００２３】
実施例１  ［２Ｅ，６Ｅ，１０（Ｅ／Ｚ）］−１１−ブロモ−４，４，７−トリメチル−２，６，１０−ドデカトリエン酸の製造
（１０Ｓ*，１１Ｒ*）−ジブロモ−４，４，７，１１−テトラメチル−２，６−シクロウンデカジエノン（３．１ｇ，８．２ｍｍｏｌ、J. Org. Chem., Vol. 64, No. 8, 1999に記載の方法にしたがって製造）、ＫＯＨ（０．８３ｇ，１４．８ｍｍｏｌ）およびα−ＣＤ（８．０ｇ，８．２ｍｍｏｌ）のアセトニトリルおよび水（それぞれ、４０ｍＬおよび４０ｍＬ）中溶液を室温にて５時間攪拌した。水（５０ｍＬ）を混合物中に加え、混合物をＨＣｌで酸性化した。酸性溶液をＥｔＯＡｃで抽出した（５０ｍＬｘ３回）。有機層を水（５０ｍＬｘ３回）および飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬｘ２回）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲル上カラムクロマトグラフィーに付し、溶離剤としてＣＨＣｌ3およびメタノールの１５：１混合物を用いて、標記化合物を得た（２．８ｇ，９０％）。
IR (KBr) 3050, 1695, 1647 cm-1; 1H NMR: δ 1.07 (s, 6H, 2CH3 at C4), 1.58 (s, 3H, CH3 at C7), 2.20 (s, 3H, 3H at C12), 2,05-2.16 (m, 6H, 2H at C5, C8 および C9), 5.10 (dd, 1H, J = 7.6 および 8.9 Hz, H at C6), 5.73 (d, 1H, J = 15.9 Hz, H at C3), 5.77 (m, 1H, H at C10), 7.06 (d, 1H, J = 16.2 Hz, H at C2); 13C NMR: δ 16.0 (CH3 at C7), 23.2 (C12), 25.9 (2CH3 at C4), 28.1 (C9), 37.9 (C4), 39.0 (C8), 40.0 (C5), 117.1 (C3), 119,2 (C7), 120.8 (C6), 131.7 (C10), 136.6 (C11), 161.0 (C2), 172.7 (C1); HRMS m /z C15H22O2Br についての計算値 (M-H) 313.0803, 実測値 313.0780.
【００２４】
実施例２  ［２Ｅ，６Ｅ，１０（Ｅ／Ｚ）］−１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，１０−ドデカジエン酸の製造
（ａ）６，７−エポキシ−２，６，９，９−テトラメチル−２，１０−シクロウンデカジエノン（ゼルンボン−オキシド）
塩化メチレン（５０ｍＬ）中のｍ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ，２．０ｇ，１２ｍｍｏｌ）の溶液を、同じ溶媒（３０ｍＬ）中のゼルンボン（２．２ｇ，１０ｍｍｏｌ、J. Org. Chem., Vol. 64, No. 8, 1999に記載の方法にしたがって製造）の攪拌溶液に−５℃にて徐々に加えた。混合物を３次間攪拌し、炭酸ナトリウム溶液（２０ｍＬ，５％）を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下濃縮し、黄色結晶性固体を得た。この固体をヘキサン：酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）中で再結晶し、標記化合物を得た（２．３ｇ，９９％）。
融点９６．０〜９６．５℃；
IR (KBr), 1657, 1263 cm-1; 1H NMR: δ 1.10 (s, 3H, CH3 at C11), 1.22 (s, 3H, CH3 at C3), 1.31 (s, 3H, CH3 at C11), 1.27-1.36 (m, 1H, H at C4), 1.45 (dd, 1H, J = 11.3 および 14.0 Hz, H at C1), 1.85 (s, 3H, CH3 at C7), 1.93 (d, 1H, J = 14.0 Hz, H at C1), 2.26-2.43 (m, 3H, H at C3 および 2H at C4), 2.72 (dd, 1H, J = 1.4 および 11.3 Hz, H at C2), 6.07-6.1 2 (m, 3H, 3H at C6, C9 および C10); 13C NMR: δ 12.3 (CH3 at C7), 15.8 (CH3 at C3), 23.9 (CH3 at C11), 24.8 (C5), 30.0 (CH3 at C11), 36.1 (C11), 38.2 (C4), 42.8 (C1), 61.2 (C3), 62.8 (C2), 128.6 (C9), 139.3 (C7), 147.6 (C6), 159.3 (C10), 202.3 (C8); C15H22O2 について計算値: C, 76.88; H, 9.46; 実測値: C, 76.96; H, 9.41
【００２５】
（ｂ）（１０Ｓ*，１１Ｒ*）−ジブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７，１１−テトラメチル−２−シクロウンデセノン
ＣＣｌ4（１０ｍＬ）中の臭素（０．７５ｇ，４．７ｍｍｏｌ）をＣＣｌ4（５ｍＬ）中の６，７−エポキシ−２，６，９，９−テトラメチル−２，１０−シクロウンデカジエノン（１．０ｇ，４．３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に−１５〜−１０℃にて滴下した。1ＨＮＭＲにより、ゼルンボン中の不飽和Ｃ３プロトンの存在を測定することにより臭素の添加を滴定した。溶液を減圧下濃縮し、結晶性（１０Ｓ*，１１Ｒ*）−ジブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７，１１−テトラメチル−２−シクロウンデセノン（１．６９ｇ，９５％）をトランス：シス＝５：１のジアステレオマー比で得た。固体をＥｔＯＡｃ：ヘキサンから再結晶し、１．４４ｇ（８５％）の標記化合物を得た。
IR (KBr), 2964, 1695, 1628 cm-1; 1H NMR: δ 1.10 (d, 1H, J = 9.0 Hz, H at C4), 1.12 (s, 3H, CH3 at C11 ), 1 .20 (s, 3H, CH3 at C3), 1.30 (dd, 1H, J = 6.0 および 11.5 Hz, H at C1), 1.30 (d, 1H, J = 6.5 Hz, H at C5), 1.32 (s, 3H, CH3 at C11 ), 1.84 (s, 3H, CH3 at C7), 1.92 (d, 1H, J = 6.0 Hz, H at C1), 2.10 (dd, 1H, 6.5 および 9.0 Hz, H at C6), 2.20 (d, 1H, J = 9.0 Hz, H at C4), 2.62 (d, 1H, J = 11.5 Hz, H at C2), 4.21 (d, 1H, J = 9.0 Hz, H at C6), 6.43 (d, 1H, J = 16.0 Hz, H at C10), 6.87 (d, 1H, J = 16.0 Hz, H at C9); 13C NMR: δ 17.1 (CH3 at C11), 20.7 (CH3 at C7), 23.5 (CH3 at C11), 29.7 (CH3 at C3), 31.3 (C5), 36.7 (C11), 36.8 (C4), 39.0 (C1), 59.9 (C2), 60.7 (C3), 62.4 (C6), 69.1 (C7), 124.3 (C9), 154.7 (C10), 192.8 (C8); Anal. calcd for C15H22O2Br2についての計算値: C, 45.71 ; H, 5.63;実測値: C 45.79; H. 5.64.
【００２６】
（ｃ）［２Ｅ，６Ｅ，１０（Ｅ／Ｚ）］−１１−ブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７−トリメチル−２，１０−ドデカジエン酸
（１０Ｓ*，１１Ｒ*）−ジブロモ−６，７−エポキシ−４，４，７，１１−テトラメチル−２−シクロウンデセノン（１．２ｇ，３．０ｍｍｏｌ）、ＫＯＨ（０．３ｇ，５．４ｍｍｏｌ）およびα−ＣＤ（２．８ｇ，３，０ｍｍｏｌ）のアセトニトリルおよび水（それぞれ、１５ｍＬおよび１５ｍＬ）中溶液を室温にて５時間攪拌した。水（１５ｍＬ）を混合物中に加え、混合物をＨＣｌで酸性化した。酸性溶液をＥｔＯＡｃで抽出した（５０ｍＬｘ３回）。有機層を水（５０ｍＬｘ３回）および飽和水性ＮａＣｌ（５０ｍＬｘ２回）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲル上カラムクロマトグラフィーに付し、溶離剤としてＣＨＣｌ3およびメタノールの１５：１混合物を用いて、標記化合物を得た（０．９５ｇ，８０％）。
IR (KBr) 3070, 1697, 1651 cm-1; 1H NMR: δ 1.15 (s, 3H, CH3 at C4), 1.18 (s, 3H, CH3 at C4), 1.23 (s, 3H, CH3 at trans C12), 1.26 (S, 3H, CH3 at cis C12), 1.59 (dt, 2H, J = 6.6 および 7.9 Hz, H at C8), 1.68 (dd, 2H, J = 5.6 および 6.9 Hz, H at C5), 2.10 (dt, 2H, J = 7.6 および 7.9 Hz, H at trans C9), 2.23 (dt, 2H, J = 6.6 および 7.6 Hz, H at cis C9), 2.27 (s, 3H, CH3 at C7), 2.69 (dd, 3H, J = 5.6 および 5.9 Hz, H at C6), 5.58 (dt, 1H, J = 1.3 および 6.6 Hz, H at cis C10), 5.78 (dt, 1H, J = 1.3 および 7.6 Hz, H at trans C10), 5.79 (d, 1H, J = 16.2 Hz, H at C3), 7.07 (d, 1H, J = 15.8 Hz, H at C2); 13C NMR: δ 16.6 (CH3 at C12), 23.1 (CH3 at C7), 25.1 (C9), 26.1 (CH3 at C4), 27.0 (CH3 at C4), 36.5 (C4), 37.7 (C5), 40.6 (C8), 59.4 (C7), 59.9 (C6), 118.1 (C3), 120.0 (C11), 131.0 (C10), 158.9 (C2), 171.7 (C1); C15H23O3Br についての計算値: C, 54.39; H, 7.00;実測値: C, 54.21 ; H, 7.13.
【００２７】
実施例３  ヒスチジンキナーゼ阻害活性
枯草菌（B. subtilis）のＹｙｃＧに対する本願発明化合物の活性を調べた。
ヒスチジンキナーゼ活性の測定は、Biosci. Biotechnol. Biochem., 64, 919-923, 2000 に報告された方法にしたがって行った。ＹｙｃＧのキナーゼ活性ドメインのみを含む領域（Ｎ−末端から２０４番目のアミノ酸から６１１番目のアミノ酸を含む）をＰＣＲ法により枯草菌の染色体ＤＮＡから調製し、発現ベクターｐＱＥ３０にクローニングした。このようにして得られたプラスミドｐＱＥ３０−ＹｙｃＧを大腸菌に形質転換した株の培養液から、ＹｙｃＧのヒスチジンキナーゼ活性ドメインのみを発現させたタンパク質（ＹｙｃＧ−２０４−６１１）を精製した。ヒスチジンキナーゼ活性測定のための反応溶液の組成は、１０μＭ ＹｙｃＧ−２０４−６１１、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５０ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ2、２．５μＭ ＡＴＰであり、この反応溶液１０μｌに１０μＣｉの［γ−32Ｐ］ＡＴＰを加え、反応を開始し、室温で１０分間インキュベート後、反応を終了させ、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行うことにより、枯草菌のＹｙｃＧに対する５０％阻害濃度（ＩＣ50）を求めた。
【００２８】
また、大腸菌（E. coli）および枯草菌に対する最小生育阻止濃度（ＭＩＣ）についても調べた。
ＭＩＣの測定には、液体培地希釈法を用いた。接種菌液としてＬＢ培地（Bacto tryptone １０ｇ、Bacto yeast extract ５ｇ、ＮａＣｌ １０ｇ／ｌ）で一昼夜培養した細菌を用いた。ＬＢ培地に薬剤濃度５００μｇ／ｍｌから順次２倍希釈系列を作成し、それらに接種菌液を１０6細胞／ｍｌとなるように植菌し、３７℃にて一昼夜培養後、完全に増殖が阻止されている最小濃度を記録した。
前記スキーム１中の化合物（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（Ｉａ’）および（Ｉａ”）について調べた結果を表１に示す。
【００２９】
【表１】
0003703009.tif 000005
【００３０】
実施例４  薬剤耐性病原菌に対する作用
本願発明の式（Ｉａ’）の化合物の各種薬剤耐性病原菌に対するＭＩＣを調べた。ＭＩＣの測定は、実施例３と同様に行った。
調べた結果を表２に示す。
【００３１】
【表２】
0003703009.tif 000006
【００３２】
実施例５  本発明化合物を含有する医薬の処方例（注射剤）
化合物（Ｉａ’）                  １部
非イオン性界面活性剤              ２部
生理食塩水                      ９７部
上記成分を加温混合後、滅菌して注射剤とした。
【００３３】
【発明の効果】
本発明の式（Ｉ）で示される化合物は、グラム陽性菌の二成分制御系であるＹｙｃＦおよびＹｙｃＧが関与する情報伝達系の阻害、特にセンサーであるＹｙｃＧのヒスチジンキナーゼを阻害することができ、グラム陽性菌に有効な抗菌剤として有用である。