(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アミノ酸を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアミノ酸検出キットを用いたアミノ酸検出方法において、
アミノ酸検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアミノ酸を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アミノ酸を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していたアミノ酸を検出することを特徴とするアミノ酸検出方法。
【請求項２】
炭水化物と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、炭水化物を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる炭水化物検出キットを用いた炭水化物検出方法において、
炭水化物検出用キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から炭水化物を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、炭水化物を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していた炭水化物を検出することを特徴とする炭水化物検出方法。
【請求項３】
アルデヒドと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルデヒドを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアルデヒド検出キットを用いたアルデヒド検出方法において、
アルデヒド検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルデヒドを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルデヒドを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していたアルデヒドを検出することを特徴とするアルデヒド検出方法。
【請求項４】
アルコールと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルコールを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアルコール検出キットを用いたアルコール検出方法において、
アルコール検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルコールを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルコールを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していたアルコールを検出することを特徴とするアルコール検出方法。
【請求項５】
脂質と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、脂質を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる脂質検出キットを用いた脂質検出方法において、
脂質検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から脂質を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、脂質を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していた脂質を検出することを特徴とする脂質検出方法。
【請求項６】
試薬が、オキシダーゼを含む発色試薬液からなっていることを特徴とする請求項１から５に記載の検出方法。
【請求項７】
アミノ酸と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アミノ酸を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアミノ酸検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアミノ酸を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アミノ酸を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とするアミノ酸検出用キット。
【請求項８】
炭水化物と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、炭水化物を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる炭水化物検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から炭水化物を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、炭水化物を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とする炭水化物検出用キット。
【請求項９】
アルデヒドと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルデヒドを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる炭水化物検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルデヒドを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルデヒドを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とするアルデヒド検出用キット。
【請求項１０】
アルコールと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルコールを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアルコール検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルコールを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルコールを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とするアルコール検出用キット。
【請求項１１】
脂質と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、脂質を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる脂質検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から脂質を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、脂質を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とする脂質検出用キット。
【請求項１２】
試薬が、オキシダーゼを含む発色試薬液からなっていることを特徴とする請求項７から１１に記載の検出キット。
【請求項１３】
前記検出媒体の吸水部が結晶性高分子の繊維からなることを特徴とする請求項７から１１のいずれかに記載の検出キット。
【請求項１４】
前記検出媒体の吸水部が疎水性繊維からなることを特徴とする請求項１３記載の検出キット。
【請求項１５】
試薬が、オキシダーゼを含む発色試薬液からなっていることを特徴とする請求項７から１１に記載の検出キット。
【請求項１６】
可撓性ケースが２種類の試薬を個別に封入してなることを特徴とする請求項７から１１のいずれかに記載の検出キット。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は残留物（アミノ酸、炭水化物、脂質、アルデヒド及びアルコール）の検出方法及び残留物検出キットに関する。
【０００２】
【従来の技術】
人間生活を営んでいく物質的条件の３大要素である衣、食、住のうち衣、住は環境、その他の条件である程度は閑却できるが、食は日常、必須不可欠である。
【０００３】
従って食物は生命維持の根源として常に適度な栄養源を含むと共に、健康に危害を与えることがあってはならない。我が国の公衆衛生状態は目覚ましく進歩改善をみせているが、こと食品衛生の面では、質的観点から完全に衛生的とは言えない。
【０００４】
飲食に起因する衛生上の危害が発生しない様、飲食関連の添加物、容器、包装環境等は衛生的に品質、性状を管理する必要がある。
【０００５】
特に、食品の加工工場或いは、薬品の製造工場などの設備ではしばしば同じ設備で異なる複数の種類の製品を製造している様な場合、一度使用した設備を洗浄した後にラインの切り替えを行なっている。その際、これまでは、残留物をチェックすることによる洗浄度の判定は特に行なわれていなかった。そのため、必要以上に洗浄操作が行なわれ、作業効率を落していることがあった。逆に、不十分な洗浄操作により、製品の汚染やコンタミなどが起きるという懸念があった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、簡便で正確な残留物の検出方法及び残留物検出キットを提供することにある。特に食品加工工場・薬品製造工場などの設備、機具の残留物質（炭水化物・糖・アミノ酸、或いはアルデヒド、アルコール、脂質（中性脂肪、脂肪酸））を簡便かつ正確に検出する残留物の検出方法及び残留物検出キットを提供し、洗浄度の判定や汚染状況の確認に利用できる残留物の検出方法及び残留物検出キットを提供することにある。又、本発明の目的は上記利用方法に限定されず、固体物体上に付着した微量の残留物を簡便迅速かつ正確に検出する検出方法及び残留物検出キットを提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明の上記目的は、以下の構成により達成される。
【０００８】
請求項１の発明では、アミノ酸と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アミノ酸を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアミノ酸検出キットを用いたアミノ酸検出方法において、
アミノ酸検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアミノ酸を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アミノ酸を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していたアミノ酸を検出することを特徴とする。
【０００９】
請求項２の発明では、炭水化物と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、炭水化物を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる炭水化物検出キットを用いた炭水化物検出方法において、
炭水化物検出用キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から炭水化物を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、炭水化物を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していた炭水化物を検出することを特徴とする。
【００１０】
請求項３の発明では、アルデヒドと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルデヒドを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアルデヒド検出キットを用いたアルデヒド検出方法において、
アルデヒド検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルデヒドを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルデヒドを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していたアルデヒドを検出することを特徴とする。
【００１１】
請求項４の発明では、アルコールと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルコールを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアルコール検出キットを用いたアルコール検出方法において、
アルコール検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルコールを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルコールを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していたアルコールを検出することを特徴とする。
【００１２】
請求項５の発明では、脂質と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、脂質を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる脂質検出キットを用いた脂質検出方法において、
脂質検出キットが、キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、
前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から脂質を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、脂質を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させ、その発色の度合により前記試料の表面に付着していた脂質を検出することを特徴とする。
【００１３】
請求項６の発明では、試薬が、オキシダーゼを含む発色試薬液からなっていることを特徴とする。
【００１４】
請求項７の発明では、アミノ酸と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アミノ酸を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアミノ酸検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアミノ酸を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アミノ酸を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とする。
【００１５】
請求項８の発明では、炭水化物と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、炭水化物を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる炭水化物検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から炭水化物を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、炭水化物を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とする。
【００１６】
請求項９の発明では、アルデヒドと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルデヒドを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる炭水化物検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルデヒドを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルデヒドを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とする。
【００１７】
請求項１０の発明では、アルコールと接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、アルコールを移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなるアルコール検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料からアルコールを移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、アルコールを検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とする。
【００１８】
請求項１１の発明では、脂質と接触して発色する試薬が封入された可撓性ケースと、脂質を移しとる吸水部を支持棒の先端に有する検出媒体と、前記試薬と検出媒体とを接触させるキャップ付きのチューブとが組み合わされて一つに収納されてなる脂質検出キットにおいて、
キャップの底にチューブに収納する検出媒体の支持棒の上端を固定すると共に、上記キャップに試薬を封入した可撓性ケースを内蔵してなり、前記チューブに水性媒体を充填し前記キャップを被せることで試料から脂質を移しとる前に検出媒体の吸水部を湿潤させることができ、脂質を検出媒体に移しとった後に前記チューブに検出媒体を戻してキャップを閉じ、前記可撓性ケースを潰して前記試薬をチューブ内に落とし吸水部に接触させてなることを特徴とする。
【００１９】
請求項１２の発明では、試薬が、オキシダーゼを含む発色試薬液からなっていることを特徴とする。
【００２０】
請求項１３の発明では、前記検出媒体の吸水部が結晶性高分子の繊維からなることを特徴とする。
【００２１】
請求項１４の発明では、前記検出媒体の吸水部が疎水性繊維からなることを特徴とする。
【００２２】
請求項１５の発明では、前記試薬が、オキシダーゼを含む発色試薬液からなっていることを特徴とする。
【００２３】
請求項１６の発明では、前記可撓性ケースが２種類の試薬を個別に封入してなることを特徴とする。
【００２６】
上記の本発明の構成のごとく
本発明者らは鋭意検討を行なった結果、試料表面に固体及び／又は溶液として付着している残留物の検出方法において、試料表面の対象部分を検出媒体に移しとった後、これを検出試薬と接触させ、その発色の度合いによって前記試料の表面に付着した残留物を検出することによって、簡便に残留物の検出方法及び残留物キットを開発した。
【００２７】
具体的には、設備などの対象部分を検出媒体で払拭し、付着している成分を検出媒体に移し取る。次いで、この検出媒体と検出用試薬を接触させることによって反応させ、その残留物の有無や濃度を測定するのである。検出試薬を選択することによって、アミノ酸、炭水化物（でんぷん、糖など）、アルコール、アルデヒド、脂質（中性脂肪・脂肪酸）を検出することが可能であり、より広範囲の用途に利用することが可能である。
【００２８】
本発明の具体的な利用例をあげれば、食品の加工工場或いは、薬品の製造工場などの設備の洗浄度検査の他、例えば検出媒体を用いて口腔内の唾液を採取し、これとエタノール検出試薬と反応させることによって、自動車運転者のアルコール摂取の有無をチェックすることにも利用できる。
【００２９】
以下に、本発明を詳細に述べる。
【００３０】
本発明は試料表面の対象部分から残留物を検出媒体に移し、予め調製された反応発色試薬溶液中に残留物が転移した検出媒体を接触させた後、必要に応じ加温して、発色した濃度を、例えば残留物量に対応した発色濃度を示す色見本、検量線（残留物量−発色濃度）、分光光度計、カラーメーターで該試料に付着した残留物量を１〜６０分間の短時間で定量できる残留物の検出方法である。
【００３１】
本発明に使用される試料とは表面に残留物が付着しているか調べたいものである。
【００３２】
検出媒体は、好ましくは吸水部と支持棒からなり、特に吸水部は繊維を寄せ集めた構造からなることが好ましく、綿棒状の形態にすることが好ましい。検出反応が主に検出媒体の吸水部で行なわれるため、白色である吸水部の繊維が染色され、目視による確認が極めて容易となる。この吸水部は結晶性高分子の繊維からなることが好ましい。
【００３３】
これによって、製品ｌｏｔによるバラツキが少なく、精度の高い測定ができる。さらに、吸水部が疎水性繊維からなる検出媒体を用いることによって、非特異的な発色が防止され、より正確で高感度な検出が可能となるのである。
【００３４】
具体的には綿棒のように支持体先端部に繊維がからまれているものである。市販の綿棒も本発明の検出媒体として用いることもできるが好ましくは結晶性高分子の繊維又は疎水性繊維からなる吸水性部分を持つものが望ましい。
【００３５】
また、本発明においては上記検出媒体の吸水部が試料払拭前に水性媒体で湿潤されていることが好ましい。
【００３６】
結晶性高分子の繊維としては例えば、
・ナイロン系  ：-(NH(CH2)xNH-CO(CH2)y-CO)-n
・ポリエステル系  ：-CO-O-多価アルコールと多塩基酸の重縮合体
・アクリル系  ：アクリロニトリルCH2=CHCNのポリマー
・ポリビニルアルコール系  ：-(CH2C(OH)H)-n
・ポリウレタン系  ：-NHCOO-いわゆるウレタン結合を有するポリマー
・ポリ塩化ビニリデン系  ：-(CH2CHCl2)-n塩化ビニリデンのラジカル重合体
・ポリ塩化ビニル系  ：-(CH2CHCl)-n塩化ビニルの重合体
・ポリフルオロエチレン系  ：
・ポリプロピレン系  ：-(CH3CHCHCH2)-nプロピレンの重合体
・ポリエチレン系  ：-(CH2CH2)-n
などが挙げられる。
【００３７】
このうち特に好ましいのは、疎水性繊維であり例えば高分子の繰り返し単位の中に親水性基（水酸基、アミノ基、カルボキシル基、アミド基）を含まない高分子からなる繊維をいう。例えば、ポリエステル繊維は高分子の繰り返し単位の中に親水性基（水酸基、アミノ基、カルボキシル基、アミド基）を含まず、分子の末端部にのみ水酸基又はカルボキシル基を含むだけであり、親水性が極めて小さい。
【００３８】
具体的には、例えばポリエステル、ポリアクリル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリウレタン等があげられる。なかでもポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレンを用いた場合、非特異的発色が少なく特に好ましい。
【００３９】
また、形状については、検出媒体吸水部に吸水保水性を持たせられればよい。例えば膜状のものは微細な孔を設ける、スリットを入れる等の加工で十分その機能は確保出来る。好ましくは材質が繊維状のものを寄せ集め、綿棒のような形状にすると好ましい。
【００４０】
前記試料表面の残留物を前記検出媒体に移しとる方法としては例えば、拭う、圧着させる、吸いとる方法等がある。拭う方法としては例えば綿棒等スワブを使う、メンブレンフィルター等を使う方法がある。圧着させる方法としては例えば吸着材料をつけたテープ、スタンプ、ストリップベース等で圧着させる、吸着材料をつけたローラで圧着させる方法がある。吸いとる方法としては例えば、吸水性の綿棒、フィルターで吸いとる、スポイト等で直接吸いとる方法がある。
【００４１】
吸いとる方法の場合、例えば試料表面に水又は界面活性剤水溶液を垂らして暫く時間を置いた後、該表面の残留物を吸いとることによって、より効率的にサンプリングすることができる。
【００４２】
前記水性媒体としては、例えば生理食塩水、精製水（例えば蒸留水、脱イオン水等）、界面活性剤水溶液、水溶性有機溶媒（例えば、アセトン、エタノール、プロピルアルコール、メチルエチルケトン等）水溶液（１〜９５％溶液）が挙げられる。アルコール検出の場合は、当然アルコールを含有してはならない。特に中性脂肪又は脂肪酸等の脂質を検出する場合は界面活性剤水溶液を用いるとサンプリングの精度及び検出感度が向上するため好ましい。
【００４３】
前記界面活性剤水溶液中の界面活性剤としては例えば以下のものが具体的に挙げられる。
【００４４】
非イオン系活性剤
１．ソルビタン脂肪酸エステル
２．グリセリン脂肪酸エステル
３．デカグリセリン脂肪酸エステル
４．ポリグリセリン脂肪酸エステル
５．プロピレングリコール・ペンタエリスリトール脂肪酸エステル
６．ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル
７．ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル
８．ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル
９．ポリエチレングリコール脂肪酸エステル
１０．ポリオキシエチレンアルキルエーテル
１１．ポリオキシエチレンフィトステロール・フィトスタノール
１２．ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル
１３．ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル
１４．ポリオキシエチレンヒマシ油・硬化ヒマシ油
１５．ポリオキシエチレンラノリン・ラノリンアルコール・ミツロウ誘導体
１６．ポリオキシエチレンアルキルアミン・脂肪酸アミド
１７．ポリオキシエチレンアルキルフェニルホルムアルデヒド縮合物
１８．単一鎖長ポリオキシエチレンアルキルエーテル
上記のアルキルとしては直鎖、分岐の炭素数１〜１８を表す。
【００４５】
また上記界面活性剤の市販品としては例えば以下のものが挙げられる。
【００４６】
非イオン界面活性剤：Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００（和光純薬工業（株）、Ｔｗｅｅｎ−２０（和光純薬工業（株）、Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ−４０（ベーリンガー・マンハイム山之内（株））
本発明の残留物検出用キットは、例えば、検出媒体、反応発色用試薬、反応発色試薬調製容器、残留物を移しとった検出媒体と反応発色試薬溶液と反応させる容器（例えばキャップがついているガラス又はプラスチックチューブ）、反応発色試薬滴定用プレート、色見本、試薬の表面の残留物を検出媒体に移させる為に、こする面積が一定になるような枠体が一式となっているものをいい、具体的には実施例で詳述する。
【００４７】
また上記反応発色試薬は当業界公知のものが使用でき、これらの試薬を適宜調合し、反応発色試薬溶液として本発明の残留物の検出に使用できる。
【００４８】
本発明の検出媒体とは試料の表面の残留物を移しとれる吸水性部分を含む媒体であることが好ましく、吸水部は、繊維構造物からなることが好ましく、該吸水部が支持体の先端に保持されているものが良い。図４に本発明の好ましい検出媒体の一例を示す。図４（ａ）の１４の吸水部は繊維をより合わせたものであり、図４（ｂ）の１４の吸水部は多孔性樹脂（スポンジ状）であり、図４（ｃ）の１４の吸水部は布を用いたものである。１６は支持棒である。
【００４９】
検出媒体の吸水部は測定対象物の表面から一定量の試料を採取し、検出試薬と試料を接触させて反応させ、かつ反応を促進する作用も持っている。
【００５０】
例えば、検出試薬としてオキシダーゼ酵素を用いる測定系の場合は、吸水部の繊維集合体に試薬が染み込むことによって空気との接触が容易になり、酵素反応に必要な酸素が十分に供給されるという効果もある。
【００５１】
即ち、通常発色試薬は予め調製し適当なボトル或いは点眼瓶などの密閉容器に保存されている。その為、オキシダーゼの酵素反応に必要な酸素が十分でないことがあり、本発明の方法のように検出媒体の存在下で発色反応を行なわれることによって、空気中の酸素が効率的に取り込まれ、特にオキシダーゼ酵素を用いる測定系ではより短時間で高感度な測定が可能になるのである。更に、吸水部自身が染色されることによって目視による確認を容易にしている。特に検出反応によって生成する発色物質が吸水部の繊維に吸着することによってより明瞭に発色を確認することが可能になるのである。
【００５２】
本発明の検出方法で測定できるものは、特に下記に示したものが挙げられる。炭水化物〔例えばでんぷん等、糖類（例えばグルコース、スクロース、マルトース等）〕、アミノ酸（例えば、グリシン、アラニン、バリン、セリン、ロイシン、グルタミン酸、プロリン、ヒドロキシプロリン等）、脂質〔例えば中性脂肪、脂肪酸（例えばカプロン酸、カプリル酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸などの飽和脂肪酸及びミリストレイン酸、オレイン酸、エルカ酸、リノール酸、リノレン酸など不飽和脂肪酸）〕、アルコールである。
【００５３】
アルデヒド検出方法
アルデヒドはシッフ試薬と反応させて生じる赤紫色の色素によって検出できる。シッフ試薬はそれ自身市販されており、容易に入手できる。この試薬は、塩基性フクシン２００ｍｇを水１２０ｍｌに溶解し、これに亜硫酸水素ナトリウム２ｇを水２０ｍｌに溶かした液を加えて２００ｍｌとし、活性炭０．０３ｇを加え濾過したものである。シッフ試薬は褐色びんに保存するか、遮光条件で保存することが望ましい。
【００５４】
アルデヒドの検出に用いる検出媒体の吸水部は非特異的な発色を防ぐため、疎水性繊維からなることが特に望ましい。中でもポリエステル繊維、ポリエチレン繊維などが好ましく用いられる。又、吸水部と接触している支持棒も疎水性の高分子からなることが望まれる。
【００５５】
アミノ酸検出方法
アミノ酸はニンヒドリン反応によって生成する紫色の色素によって検出できる。ニンヒドリンは０．２〜２％の水溶液及び／又はアルコール溶液としてキットに含まれることが望ましい。例えば、７０〜９５％エタノール溶液を発色試薬としてキットに組み込むことができる。ニンヒドリンを用いる方法は、検出媒体の吸水部に用いられる繊維が非特異的に発色することもなく、感度も優れている。
【００５６】
炭水化物（でんぷん・糖類）検出方法
でんぷんは例えば、ヨウ素−でんぷん反応によって検出することができる。糖類の測定方法としては、下記の公知の方法が利用できる。還元糖Ｂｅｎｅｄｉｃｔ反応試験管内にＢｅｎｅｄｉｃｔ試液を数液加え、これに試料が付着した検出媒体を浸し、１〜２分間強く加熱したのち、冷却する。存在する還元糖の還元力に応じて、赤、黄又は緑色に呈色する。Ｂｅｎｅｄｉｃｔ試液は下記の手順で調製できる。
【００５７】
精製した結晶硫酸銅１７．３ｇを加熱した蒸留水に溶解して全量を６０ｍｌとし、これをＡ液する。クエン酸ナトリウム１７３ｇと無水炭酸ナトリウム１００ｇを加熱した蒸留水に溶かし、全量を６０ｍｌとする。冷却後、蒸留水で希釈し、８５０ｍｌとし、これにＡ液を加えて混合し、Ｂｅｎｅｄｉｃｔ試液とする。
【００５８】
３，６ジニトロフタル酸による呈色試験
試験管に０．３％  ３，６−ジニトロフタル酸（ピリジン塩）の水溶液数滴とアルカリ液（Ｋ2ＣＯ3  １２５ｇとＮａ2Ｓ2Ｏ3・５Ｈ2Ｏ  ２５ｇを水に溶かし全量を５００ｍｌとしたもの。）数滴を加え、この試験管内に試料が付着した検出媒体を入れて接触させ、約１０分間加熱（およそ９０〜１００℃）して反応させる。還元糖が存在すれば目視により呈色を確認できる。或いは、冷却後水で希釈して、４５０ｎｍの吸光度を測定することによってより正確に定量することもできる。
【００５９】
４−メトキシベンズアミジン又はベンズアミジンを用いる還元糖の蛍光測定方法還元糖はアルカリ性で４−メトキシベンズアミジン又はベンズアミジンと加熱すると直ちに強い蛍光を発する。この反応により、ウロン酸、アミノ酸、及びシアル酸も蛍光を発する。測定は、試験管に３０ｍＭ４−メトキシベンズアミジン又はベンズアミジン水溶液１滴と１Ｍ  ＫＯＨ水溶液１滴を加え、１００℃で２〜３分加熱し、直ちに氷水にて冷却して反応を停止する。
【００６０】
４−メトキシベンズアミジンを用いた場合は励起波長３６５ｎｍ発光波長４７０ｎｍで蛍光強度を測定できる。ベンズアミジンを用いたときには励起波長３１０ｎｍ発光波長４７０ｎｍで蛍光強度を測定できる。
【００６１】
アルコール検出方法
本発明のアルコール検出方法の一例として、エタノールを測定する場合を説明する。エタノールを測定する方法としては、アルコールデヒドロゲナーゼ又はアルコールオキシダーゼなどの酵素を用いる方法が好ましい。アルコールデヒドロゲナーゼ（以下ＡＤＨと略す）を用いる方法の反応は下記の通りである。
【００６２】
0003654956.tif 000002
ここで、ＮＡＤ（Ｐ）+は酸化型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈは還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、ＤＩＡはジアホラーゼである。
【００６３】
本発明において、アルコールデヒドロゲナーゼの活性によって生成した還元型捕酵素は本発明に係る還元型捕酵素検出組成物によって定量的に表示される。
【００６４】
即ち還元型捕酵素のＮＡＤＨ或いはＮＡＤＰＨの定量は、適当な物質を用いるＮＡＤＨ或いはＮＡＤＰＨを発色色原体、蛍光前駆体、発光体等と作用させ、比色、蛍光、蛍光等で定量することができる。ここでの適当な物質とはＮＡＤＨ或いはＮＡＤＰＨを酸化し、発色色原体、蛍光前駆体、発光体等を還元する反応を触媒する物質をさし、具体的には、５−メチルフエナジムニウムメチルサルフェート、（１−メトキシ）−５−メチルメチルフエナジムニウムメチルサルフェート（以下、ＭｅＯ−ＰＭＳという）、メルドラブルー（即ち、９−ジメチルアミノベンゾ−α−フェナゾキソニウムクロライド）等の化合物や、ジヒドロリボアミドレダクターゼ（ＮＡＤ+）（別名ジアホラーゼ）、ＮＡＤＨデヒドロゲナーゼ（キノン）等の酵素を用いることができる。
【００６５】
この場合、好ましい発色色原体の例として３−（ｐ−ヨ−ドフェニル）−２−（ｐ−ニトロフェニル）−５−フェニル−２水素テトラゾリウムクロライド）（Ｎｅｏ−ＴＢ）、３−３′−ジメトキシ−４，４−ビフェニリレン）−ビス〔２−（ｐ−ニトロフェニル）−５−フェニル−２−水素テトテゾリヴムクロライド〕（Ｎｉｔｏｒｏ−ＴＢ）、３，３′−（３，３′−ジメトキシ−４，４′−ビフェニリレン）−ビス（２，５−ジフェニル−２水素テトラゾリウムクロライド）（ＴＢ）、３，３′−（３，３′−ジメトキシ−４，４′−ビフェニリレン）−ビス〔２，５−ビス（ｐ−ニトロフェニル）−２水素テトラゾリウムクロライド）（ＴＮＴＢ）等が挙げられる。
【００６６】
更に特異的結合反応、酵素反応、発色反応等に適したｐＨにするためには緩衝剤を含有させることが好ましい。具体的には体液試料適用時にｐＨ＝６．０〜１０．０の範囲に緩街しうるに、十分な量含有する事が好ましい。用いることができる緩衝剤としては日本化学会編「化学便覧基礎編」（東京、丸善（株）１９６６）ｐ１３１２〜１３２０、Ｎ，Ｅ，ＧＯＯｄ等；バイオケミストリ（Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）ｖｏｌ．５，ｐ４６７（１９６６）、今村、斎藤；化学の領域．ｖｏｌ．３０（２），ｐ７９（１９７６）、Ｗ，Ｊファーギュソン（Ｆｅｒｇｕｓｏｎ）等；Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，ｖｏｌ．１０４，ｐ３００（１９８０）等の文献に記載されているものを挙げることができる。具体的な例としては、くえん酸塩、硼酸塩、燐酸塩、炭酸塩、トリス、バルビツール、グリシン、グッド緩衝剤等があげられる。これらの緩衝剤は必要に応じて発色反応試薬に含有させてもよい。
【００６７】
更に本発明では試薬の保存性、定量再現性の向上のため保恒剤として多価アルコール、非還元糖の少なくとも１つを含有させられる。これら保恒剤の添加量は試薬層重量に対し０．１％〜１０ｗｔ％が好ましく、更に好ましくは１〜１５％ｗｔ％である。
【００６８】
多価アルコールとしては糖アルコール、非還元糖としては還元基が消尽された多糖類が好ましい。
【００６９】
次にこれらの具体例を挙げる。
【００７０】
（糖アルコール）
エリトリトール、トレイトール、アラビニトール、リビトール、キシリトール、ソルビトール、ガラクチトール、マンニトール、アリトール、ポレミトール、プレセイトール、ｍｙｏ−イノシトール、
ｃｈｉｒｏ−イノシトール、ｓｃｙｌｌｏ−イノシトール、クエルシトール、ビブニトール、シクロヘキサンテトロール、コンズリトール。
【００７１】
（多糖類）
トレハロース、蔗糖、イソトレハロース、ラフィノース、ゲンチアノース、メソチトース、プランテオース、スタキオース、ペルバスコース、リクノース、α−デキストリン、β−デキストリン、γ−デキストリン。
【００７２】
これら発色反応試薬保恒剤、緩衝剤は、水或いは有機溶媒に溶解し検出試薬として用いられる。
【００７３】
更にアルコールの酵素分析法には、アルコールオキシダーゼを用いる方法がある。アルコールオキシダーゼ（以下ＡＯＤと略す）を用いる検出方法の反応は下記のとおりである。生成したH2O2を適当な比色反応系に導いて検出する。例えば、ペルオキシダーゼを触媒として、検出可能な色素を形成させて検出する方法が好ましく用いられる。
【００７４】
0003654956.tif 000003
発色反応試薬としては、トリンダー試薬の変法として知られる４−アミノアンチピリン又はその塩、ｌ，７−ジヒドロキシナフタレン；３−Ｎ−スルホプロピルアニリン誘導体、例えばＮ−エチル−Ｎ−スルホプロピルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−スルホプロピル−３、５−ジメチロキシアニリンスルホン酸及びその塩、Ｎ−スルホプロピルアニリン、Ｎ−エチルーＮ−スルホプロピル−３，５−ジメチルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−スルホプロピル−ｍ−トルイジン；Ｎ−２−ヒドロキシー３−スルホプロピルアニリン誘導体、例えばＮ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−アニシジン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）アニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシー３−スルホプロピル）−３、５−ジメチロキシアニリンスルホン酸及びその塩、Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−３，５−ジメチロキシアニリン、Ｎ−エチルーＮ−（２−ヒドロキシー３−スルホプロピル）−３，５−ジメチルアニリン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）−ｍ−トルイジン等との組合せ等が挙げられる。
【００７５】
更に化学発光する化合物、例えばノレミノール（５−アミノ−２，３−ジヒドロ−１，４−フタラジンジオン）、イソルミノール（６−アミノ−２，３−ジヒドロ−ｌ，４−フタラジンジオン）、ＡＢＥＩ−Ｈ（Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−エチルイソルミノーノレヘミサクシンアミド、ＡＨＥＩ（Ｎ−（６−アミノヘキシル）−Ｎ−エチノレイソルミノール）ＡＢＥＩ（Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−エチルイソルミノール）等が挙げられる。
【００７６】
更に特開昭５７−９４６５３号、同５７−９４６５４号、同５７−９４６５５号、同５７−９４６５６号に記載された芳香族第一級アミン化合物とカップリング反応によって発色する拡散性フェノール化合物、或いはピラゾロン化合物、その他の発色試薬が用いられる。
【００７７】
前記アルコールオキシダーゼに代えて、グルコースオキシダーゼ（以下ＧＯＤと称す）を用いればグルコースを検出することが可能である。即ち、生成したＨ2Ｏ2を例えば、ペルオキシダーゼを触媒として、検出可能な色素を形成させて検出する方法が好ましく用いられる。
【００７８】
グルコース
0003654956.tif 000004
また、これにα−グルコシダーゼ、β−グルコシダーゼ、β−フルクトシダーゼなどの二糖ないしオリゴ糖を加水分解する酵素を併用することによって、二糖ないしオリゴ糖を構成するグルコースとして、それらの存在を一括して検出することができる。例えば、下記の酵素を併用すればマルトース／スクロース／グルコース何れかの存在を一度に検出することが可能である。
【００７９】
0003654956.tif 000005
中性脂肪
中性脂肪はグリセロールと脂肪酸のエステルである。検出方法は、リポプロテインリパーゼ（以下ＬＰＬと称す）及びグリセロールデヒドロゲナーゼ（以下ＧＤＨと称す）によって生成するＮＡＤＨを例えば、ジアホラーゼを触媒としてテトラゾリウム塩をホルマザン色素に変換して検出することが好ましい。検出試薬は適当な緩衝液に溶解していることが望ましく、１０ｍＭ〜１Ｍ、ｐＨ７〜１０．５の範囲で例えば、リン酸緩衝液、炭酸緩衝液、トリス−トリス塩酸緩衝液、その他グッドバッファーが適宜選択され用いられる。酸化型ニコチン酸アミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤ＋）は好ましくは１〜１００ｍＭの濃度で含有させることができる。ＬＰＬ、ＧＤＨ、ＤＩＡなどの酵素は好ましくは０．１〜５０Ｕｎｉｔ／ｍｌを含有させることができる。
【００８０】
テトラゾリウム塩としては、２−（４−Ｉｏｄｏｐｈｅｎｙｌ）−３−（４−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）−５−ｐｈｅｎｙｌ−２Ｈ  ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＩＮＴ），３−（４，５−Ｄｉｍｅｔｈｙｌ−２−ｔｈｉａｚｏｌｙｌ）−２，５−ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２Ｈ  ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ（ＭＴＴ），３，３′−〔３，３′−Ｄｉｍｅｔｈｏｘｙ−（１，１′−ｂｉｐｈｅｎｙｌ）−４，４′−ｄｉｙｌ〕−ｂｉｓ〔２−（４−ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌ）−５−ｐｈｅｎｙｌ−２Ｈ  ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ〕（Ｎｉｔｒｏ−ＴＢ）などが好ましく用いられる。
【００８１】
0003654956.tif 000006
又は、ＬＰＬによって生成するグリセロールをＡＴＰの存在下にグリセロキナーゼ（ＧＫ）でグリセリン３−リン酸（Ｇ  ３−Ｐ）とし、これをグリセリン３−リン酸酸化酵素（ＧＰＯ）によって酸化し、生成したＨ2Ｏ2を例えば、ペルオキシダーゼを触媒として、検出可能な色素を形成させて検出する方法が好ましく用いられる。
【００８２】
0003654956.tif 000007
脂肪酸
脂肪酸としては例えば、オレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸などであり、単体として或いは混合物の形で存在するものが測定対象である。これを下記に示すようにアシルＣｏＡシンセターゼ（ＡＣＳ）、アシルＣｏＡオキシダーゼ（ＡＣＯ）といった酵素を作用させることによって生成した過酸化水素を適当な比色反応系に導いて検出する。比色反応系としてペルオキシダーゼを用いた場合、ＣｏＡのＳＨ基が次の反応で色素形成を阻害することから、Ｎ−エチルマレイミドにより、未反応ＣｏＡをブロックする必要がある。これらの測定方法については、北村元仕（編）：遊離脂肪酸、実践臨床化学ｐ５３０−５４４，医歯薬出版，１９８２に記載されている。
【００８３】
0003654956.tif 000008
中性脂肪或いは脂肪酸などのような脂質を測定する場合、検出媒体の吸水部を予め界面活性剤を含有する水溶液で湿らせておくとサンプリングの精度及び検出感度があがる。このような界面活性剤としては非イオン性界面活性剤が好ましく用いられる。具体的には、Ｔｗｅｅｎ２０やトリトンＸ−１００などのポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル類が好ましく用いられる。使用する界面活性剤の濃度は０．０５〜５％が好ましい。
【００８４】
これらの試薬は、好ましくは開口部を有する可撓性部材からなる１つ或いは複数の容器に収納されており、使用時に容器の一部を押圧して開口部から液滴を形成し、これを試料を採取済みの検出媒体の吸水部に点着して反応させる。或いは、別の容器（試験管など）に必要量を分注した試薬に検出媒体の吸水部を接触させて反応させる。必要に応じドライヤー又はヒーターなどで加熱させて反応を促進させるとよい。酵素を用いている反応を利用している場合は、室温（２５℃）若しくは３７℃に保温して行なわれる。必要があれば試薬ブランクをとり、発色度の差を確認することもできる。
【００８５】
標準型キット
本発明の一例を示す残留物検出用キット構成（図１）は、次の構成である。すなわち、図１（ａ）中の５の試薬Ｂ（点眼ビン形状の容器に充填）、検出媒体１（形状：綿棒状のもの、柄はプラスチック製φ２ｍｍ）、キャップ２がついた３のガラスチューブφ１０×７０ｍｍから構成されている。保存性の問題で２種以上の試薬を測定直前に混合して使用する場合は、図１の３のガラスチューブに４の試薬Ａとして、５の容器に試薬Ｂ（好ましくは点眼ビン形状の容器に充填）として分割して入れておくことができる。さらに第三の試薬Ｃが必要であれば、５の容器をもう１つ追加してキットに入れることができる。
【００８６】
また、測定対象物の表面が乾燥している場合は、検出媒体吸水部１４を水性媒体で湿らせた方が、効率的に試料を採取できる。６はそのための水性媒体で、必要に応じ蒸留水、生理食塩水、界面活性剤水溶液、緩衝溶液、含水アルコールなどが用いられる。その他に、必要に応じ、反応促進・反応速度を一定に保つために恒温槽（ブロックヒーター等）、或いは単純に加熱して反応を促進するためのドライヤー、試験管立てなどを用意する。
【００８７】
精密に測定する場合は、検量線をたて反応液中の生成色素を分光高度計によって測定する。或いは、カラーメーター（図１（ｂ））、標準カラースケール（図１（ｃ））を用いて、目視により判定することができる。図１（ｂ）、図１（ｃ）において、１ａは標準カラースケール、１ｂはライト、１ｃは比色窓、１ｄは標準カラースケールホルダー、１ｅは試験管ホルダー、１ｆは物質濃度（レベル）、１ｇは発色の度合を示す色見本である。キット操作方法測定の一例をあげれば、測定の際にガラスチューブの試薬Ａに、試薬Ｂを数滴滴下して混合し発色試薬を調製する。
【００８８】
次いで、測定対象物の表面の一定面積を検出媒体１でふき取る。このとき、試料表面が乾燥している場合は、検出媒体１の吸水部を適当な水性媒体（蒸留水、界面活性剤水溶液、生理食塩水、含水アルコール、など）で湿らせてふき取ると効率的である。ふき取った検出媒体１を発色試薬内に浸漬して反応させる。
【００８９】
反応中は検出媒体１は反応液内に浸漬し続けることが望まれる。特に、検出試薬にオキシダーゼを使用している場合は、これによって空気中の酸素が効率的に供給され反応が促進される。必要に応じ、恒温槽で加温し反応を促進させる。残留物による発色を分光光度計で測定するか、或いは目視により確認する。このとき必要に応じて標準カラースケールを用意しておくと半定量が可能である。
【００９０】
標準改良型キット
本発明の他の例を図２に示す。即ち、適当な透明チューブ９に水性媒体１０が１００〜１０００μｌ程度入っており、キャップ７の下段には８、１２の試薬Ａ，Ｂを封入した可撓性ケース１１が装着してある。キャップ７の底には、検出媒体１３が固定されている。キャップ７を強く握ることにより可撓性ケース１１が潰れ、中の試薬Ａ，Ｂが透明チューブ９内へ落ち、検出媒体１３と接触する仕組みとなっている。その他に、必要に応じ、恒温槽ブロックヒーター等）、分光光度計、カラーメーター、標準カラースケール、試験管たてなどを用意する。
【００９１】
キット操作方法
図２においてキャップ７を外し、検出媒体１３の先端に対し、上記標準型キット操作法に示した要領で測定対象物表面から試料をサンプリングする。検出媒体１３を透明チューブへ戻し、キャップ７を閉める。８，１２の試薬Ａ，Ｂの入った可撓製ケース１１を潰して、該試薬Ａ，Ｂを透明チューブ内へ落す。該透明チューブを攪拌した後、必要に応じ該透明チューブを加温或いは一定の温度に保ち、反応を進行させる。一定時間後、目視、或いは分光光度計にて発色程度を確認する。目視により確認する場合は、予め容易していた標準カラースケールと比較することによって、簡便に残留物の検出（半定量）が可能となる。発色試薬が試薬Ａ，Ｂの混合によって調製される場合を例示しているが、発色試薬が単一の溶液として供給される場合は試薬Ａ、Ｂのかわりに１種の発色試薬液を用いればよい。図２の場合、１４が吸水部であり、検出部である。
【００９２】
簡易型キット
本発明の他の例を図３に示す。この例では、全ての発色試薬を容器（点眼ビン形状の容器が好ましい）に分注保管してある。標準型キットの操作方法と同じ要領で測定対象物の表面の一定面積を検出媒体１でふき取る。この検出媒体の吸水部（試料採取部）に発色試薬を容器から直接数滴ずつ添加して、吸水部上で発色反応を行なわせる。採取した残留物量に応じ試料採取部で発色反応が進行するので、これを目視で判定することができる。必要に応じ標準カラースケールで発色の程度を比較することにより、半定量が可能である。試薬Ａ，Ｂを予め混合して使用したい場合は、容器１７で両液を混合したものを用意し、ここから試料採取部に試薬を添加すればよい。
【００９３】
キットのタイプに係わらず、分光光度計により測定する場合は発色した反応試薬液を測定することになる。一方、目視による確認を行なう場合は、発色した反応試薬液の発色によっても確認することは可能であるが、検出媒体の吸水部がより明瞭に染色されるため、この部分で判定することによって高感度な判定が可能となる。
【００９４】
【実施例】
以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明の態様はこれに限定されない。以下に本発明の残留物検出キットの形態及び測定手順を示す。キットの操作時において、何れもサンプリング時には指、手などが試薬、サンプリングの媒体に、直接触れないように十分注意する。
【００９５】
実施例１  ブドウ糖の検出
標準型キットを用いて、ブドウ糖の検出をおこなった。下記組成のＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ａ及びＢを調製し、ＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ａはガラスチューブ各１ｍｌずつ、ＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ｂは点眼ビンに充填した。
【００９６】
ＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ａ
０．１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ６．９
０．５ｍＭ  ４−アミノアンチピリン
２０ｍＭフェノール
ＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ｂ
０．１Ｍリン酸緩衝液ｐＨ６．９
５００Ｕ／ｍｌグルコースオキシダーゼ：ＧＯＤ（ベーリンガーマンハイム製）
３００Ｕ／ｍｌペルオキシダーゼ：ＰＯＤ（ベーリンガーマンハイム製）
シャーレに０．１％ブドウ糖を含む水溶液を０．１ｍｌまき、乾燥させて測定試料とした。
【００９７】
測定：ＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ａはガラスチューブ各１ｍｌに点眼ビンからＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ｂを１滴滴下し、軽く振盪して混合する。検出媒体（綿棒）に、蒸留水２〜３滴（１００μｌ程度）を含ませ、前述のシャーレをふきとり、これを検出試薬に浸漬し、３７℃で１０分間反応させた。その結果、ブドウ糖の存在を示す発色が確認された。同様に調製した検出試薬に直接０．１％ブドウ糖を含む水溶液を０．１ｍｌを入れて反応させたものと比較して、本発明の方法で反応させたものはより短時間で発色反応が進行することが確認された。又、分光光度計を用いて発色液の吸光度を測定することによって、予め作成していた検量線から検出媒体で採取したブドウ糖の量を知ることができた。
【００９８】
実施例２  ブドウ糖の検出
検出媒体の吸水部の材質として下記ものを用いてブドウ糖の検出を行なった。検出試薬として点眼ビンに入れておいた下記のＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ｃを用いた。
【００９９】
１．検出媒体として吸水部の材質：ａ．ポリエステル  ｂ．ポリエチレン  ｃ．ポリウレタンを用いた。
【０１００】
ＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ｃ
０．１Ｍリン酸緩衝液  ｐＨ６．５
０．５ｍＭ  ４−アミノアンチピリン
１５ｍＭフェノール
５Ｕ／ｍｌグルコースオキシダーゼ：ＧＯＤ（ベーリンガーマンハイム製）
３Ｕ／ｍｌペルオキシダーゼ：ＰＯＤ（ベーリンガーマンハイム製）
２．試料のサンプリング
１０μｌの１％ブドウ糖水溶液をシャーレ底部に点着し、一旦乾燥させた。これを予め蒸留水で湿らせた各検出媒体吸水部にてふき取り、各々ＧＯＤ−ＰＯＤ発色試薬Ｃを数滴点着し、反応させた。３０分後、目視によって発色濃度別に５段階（発色なし−、薄い＋  〜濃い＋＋＋＋）で評価した。
【０１０１】
３．結果  何れの場合もブドウ糖の存在によって、発色し検出できた。特に吸水部の材質がポリエステル又はポリエチレン繊維の場合に、強く発色し感度が高いことが確認された。
【０１０２】
材質                蒸留水のみ              ブドウ糖水溶液
ａ．                    −                      ＋＋＋
ｂ．                    −                      ＋＋＋
ｃ．                    −                        ＋＋
実施例３  アミノ酸の検出
材質の吸水部からなる検出媒体を用いて、試料に付着したアミノ酸の検出を行なった。検出には下記ニンヒドリン試液を用いた。
【０１０３】
ニンヒドリン試液の調製：蒸留水５０ｍｌにニンヒドリン２ｇを溶解した液に８０ｍｇのＳｎＣｌ2を加え、沈殿を濾過して除き、１昼夜以上暗所に放置後、蒸留水を加えて１００ｍｌとした。この溶液１ｍｌに水２ｍｌを加え、さらにイソプロパノール１８ｍｌを加えて混合した。
【０１０４】
１．検出媒体  吸水部の材質：ａ．ポリエステル  ｂ．ポリウレタン  ｃ．天然綿糸
２．試料のサンプリング：シャーレ底部に点着した１０μｌのグリシン水溶液（１０ｍｇ／ｍｌ）を各検出媒体吸水部にて吸い取り、各々ニンヒドリン試液を数滴点着し、これをドライヤーにて加熱させて反応させた。目視によって発色濃度別に５段階（発色なし−、薄い＋〜濃い＋＋＋＋）で評価した。
【０１０５】
３．結果：すべての例で吸水部が紫色に発色し、グリシンの存在が確認できた。ｎ＝５の測定結果を以下に示した。結晶性高分子繊維からなる吸水部を持つ検出媒体（ａ，ｂ）は天然綿糸と比べると明らかに発色のばらつきは少なかった。
【０１０６】
再現性の比較
材質                    発色濃度（ｎ＝５）
ａ．            ＋＋＋  ＋＋＋  ＋＋＋  ＋＋＋  ＋＋＋
ｂ．              ＋＋  ＋＋      ＋＋    ＋＋    ＋＋
ｃ．            ＋＋＋  ＋＋    ＋＋＋    ＋＋    ＋＋
実施例４  アルデヒドの検出実施例２と同様の手順で、異なる材質の吸水部からなる検出媒体を用いて、試料に付着したアルデヒドの検出を行なった。検出にはシッフ試薬を用いた。シッフ試薬の塩基調整フクシン２００ｍｇを水１２０ｍｌに溶解し、これに亜硫酸水素ナトリウム  ２ｇを水２０ｍｌに溶かした液を加えて２００ｍｌとする。活性炭０．０３ｇを加え濾過し、使用時まで暗所に保存した。
【０１０７】
１．検出媒体  吸水部の材質：ａ．ポリエステル  ｂ．ポリエチレン  c.天然綿糸
２．試料のサンプリング：シャーレ底部に点着した１０μｌの０．１％ホルムアルデヒド水溶液を各検出媒体吸水部にて吸い取り、各々シッフ試薬を数滴点着し、反応させた。３０分後、目視によって発色濃度別に５段階（発色なし−、薄い＋〜濃い＋＋＋＋）で評価した。又、０．１％ホルムアルデヒド水溶液のかわりに蒸留水を用いて同様に測定しバックグラウンドを比較した。
【０１０８】
３．結果  吸水部がポリエステル、ポリエチレン等の結晶性高分子繊維からなる吸水部を有する検出媒体を用いた場合、アルデヒドを含有していない蒸留水ではまったく発色しなかったのに対し、吸水部が天然綿糸などからなる場合は、蒸留水でも発色してしまうことが判明した。
【０１０９】
材質        蒸留水          ０．１％  ホルムアルデヒド水溶液
ａ．        −                        ＋＋
ｂ．        −                        ＋＋
ｃ．      ＋＋＋                    ＋＋＋
実施例５  アルコールの検出
実施例３と同様の手順で、異なる材質の吸水部からなる検出媒体を用いて、試料に付着したエタノールの検出を行なった。検出には下記組成のＡＯＤ−ＰＯＤ発色試薬を調製し用いた。
【０１１０】
ＡＯＤ−ＰＯＤ発色試薬
５０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．５
０．０５％  ＴｒｉｔｏｎＸ−１００
２ｍＭ ＥＤＴＡ−３Ｎａ
０．５ｍＭ ４−アミノアンチピリン
２．０ｍＭ Ｓｏｄｉｕｍ−Ｎ−ｅｔｈｙｌ−Ｎ−（３−ｓｕｌｆｏｐｒｏｐｙｌ）−ｍ−ａｎｉｓｉｄｉｎｅ
５Ｕ／ｍｌペルオキシダーゼ（ベーリンガーマンハイム製）
１０Ｕ／ｍｌアルコールオキシダーゼ（東洋紡製）
１．検出媒体  吸水部の材質：ａ．ポリエステル繊維  ｂ．ポリウレタンフォーム  ｃ．天然綿糸
試料のサンプリング：１０μｌの０．１％エタノール水溶液をシャーレ底部に点着し、これを各検出媒体吸水部にて吸い取り、各々ＡＯＤ−ＰＯＤ発色試薬を数滴点着し、室温で反応させた。３０分後、目視によって発色濃度別に５段階（発色なし−、薄い＋〜濃い＋＋＋＋）で評価した。
【０１１１】
２．結果  いずれの場合もエタノールの存在によって、発色し検出可能であることが確認された。ｎ＝５の測定結果を以下に示した。このように疎水性繊維からなる吸水部を持つ検出媒体（ａ，ｂ）は発色のばらつきが少なかった。
【０１１２】
再現性の比較
材質                  発色濃度（ｎ＝５）
ａ．        ＋＋＋  ＋＋＋  ＋＋＋  ＋＋＋  ＋＋＋
ｂ．          ＋＋    ＋＋    ＋＋    ＋＋  ＋＋＋
ｃ．          ＋＋  ＋＋＋    ＋＋  ＋＋＋    ＋＋
実施例６  脂肪酸の検出
実施例１と同様の手順で、試料に付着した脂肪酸の検出を行なった。検出媒体は天然綿糸の吸水部を有するもの（綿棒）を用いた。検出には下記脂肪酸発色試薬１〜３を用いた。
【０１１３】
脂肪酸発色試薬１
５Ｕ  アシルＣｏＡシンセターゼ（東洋紡製）
４Ｕ  ミオキナーゼ（ベーリンガーマンハイム製）
１０ｍｇ  ＡＴＰ・２Ｎａ
３ｍｇ  ＣｏＡ
５ｍｇ  ＭｇＣｌ2．６Ｈ2Ｏ
１９ｍｇ  ＫＣｌ
１００ｍｇ  ｐ−トルエンスルホン酸ナトリウム
３ｍｇ  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００
これらを０．１Ｍ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液（ｐＨ７．８５）５ｍｌに溶解した。
【０１１４】
脂肪酸発色試薬２（反応停止液）
Ｎ−エチルマレイミド５０ｍｇを０．０１Ｎ  ＨＣｌ５ｍｌに溶解した。
【０１１５】
脂肪酸発色試薬３
３Ｕ  アシルＣｏＡオキシダーゼ（東洋紡製）
５Ｕ  ペルオキシダーゼ（ベーリンガーマンハイム製）
１．５ｍｇ  ４−アミノアンチピリン塩酸塩
２．５ｍｇ  ジエチル−ｍ−トルイジン
６００ｍｇ  ＫＣｌ
これらを２０ｍＭ  Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシメチル）−２−アミノエタンスルホン酸緩衝液（ｐＨ７．５）２０ｍｌに溶解した。
【０１１６】
試料の検出：５０μｌの１０００μＥｑ／ｌのオレイン酸カリウムを含む水溶液をシャーレ底部に点着した。これを検出媒体吸水部にて吸い取り、予め試験管内に入れておいた脂肪酸発色試薬１（０．５ｍｌ）に漬けて、室温で３０分間反応させた。次いで脂肪酸発色試薬２を数滴滴下して混合し、数分後、脂肪酸発色試薬３を２ｍｌ加えて発色させた。３０分後、目視によって発色が確認され、脂肪酸が検出できることが確認された。
【０１１７】
【発明の効果】
本発明による残留物の検出方法及び残留物検出キットは、バックグラウンドが低く、再現性の高い良好な効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明の一例を示す残留物検出キット（標準型）構成図である。
【図２】本発明の他の例を示す残留物検出キット（改良型）構成図である。
【図３】本発明の他の例を示す残留物検出キット（簡易型）構成図である。
【図４】本発明の好ましい一例を示す検出媒体の構成図である。
【符号の説明】
１  検出媒体
２  キャップ
３  ガラスチューブ
４  試薬Ａ
５  試薬Ｂ
６  水性媒体
７  キャップ
８  試薬Ａ
９  透明チューブ
１０  水性媒体
１１  可撓性ケース
１２  試薬Ｂ
１３  検出媒体
１４  吸水部（試料採取部、検出部）
１５  試薬Ａ
１７  試薬混合容器
【図１】
0003654956.tif 000009
【図２】
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【図３】
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【図４】
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