(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｌ−バリンを有効成分として含有し、かつＬ−バリン以外のアミノ酸を有効成分として全く含まないことを特徴とする、肝機能低下に伴う低アルブミン血症を改善または治療するための組成物。
【請求項２】
低アルブミン血症が血中の低アルブミン状態である請求項１記載の組成物。
【請求項３】
低アルブミン血症が血清の低アルブミン状態である請求項１記載の組成物。
【請求項４】
注射剤である請求項１記載の組成物。
【請求項５】
輸液製剤である請求項１記載の組成物。
【請求項６】
経口製剤である請求項１記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、バリンを有効成分として含有し、かつバリン以外のアミノ酸を有効成分として実質的に含有しないことを特徴とする肝疾患治療または肝機能改善用組成物に関する。詳しくは、急性肝炎、肝不全、慢性肝炎、肝硬変等の肝疾患の治療または改善効果を有するバリンを有効成分として含有し、かつバリン以外のアミノ酸を有効成分として実質的に含有しない医薬あるいは食品組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、肝不全、肝硬変等の肝疾患に対し、種々のアミノ酸製剤が使用されている。例えば、アミノレバン（登録商標）、モリヘパミン（登録商標）、アミノレバン（登録商標）ＥＮ、ヘパン（登録商標）ＥＤ、リーバクト（登録商標）顆粒等のアミノ酸製剤が、肝硬変、肝不全等の肝疾患に伴う肝性脳症や低アルブミン血症の改善等を目的として使用されている。しかしながら、これらアミノ酸製剤は、これら肝疾患を直接、治療、改善するというよりも、肝疾患による栄養障害の改善、すなわち、血漿アミノ酸の不均衡是正による窒素代謝の改善や血中アンモニア値の低下等を期待して使用される。また、これら製剤はアミノ酸の混合物であり、単一のアミノ酸がこれら肝疾患を改善するということもほとんど知られていない。一方、特公昭５７−２９４４６号公報には、Ｌ−バリンが注入液として、単独で肝性脳症治療に有用である旨記載されているが、肝性脳症は肝疾患の悪化に伴って起こる合併症の一つで、血中に増加したアンモニア等の中毒性物質が中枢神経系を障害し、種々の神経症状を引き起こすものであり、本発明でいう肝疾患とは異なるものである。また該公報には肝疾患自体を直接治療または改善することは示唆されていない。事実、肝性脳症の治療には、ラクツロース等血中アンモニア低下剤等が用いられているのが現状であり、肝疾患治療剤を肝性脳症の治療に用いた症例はないことも、本発明が該公報から容易に導き出せるものではないことを示している。
【０００３】
一方、本発明者らは先にバリンが肝障害・肝硬変等の肝臓を切除した後の肝細胞を再生させる作用を有することを見出し、特許出願に至った（特開平８−６７６２８号公報参照）。該公報には、バリンが肝細胞の再生に効果がある旨の記載はあるが、バリンが肝炎、肝硬変等の肝臓疾患自体に効果があることは開示されておらず、示唆もされていない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
ところで、慢性肝炎、肝硬変等の治療薬としていくつかの薬剤が知られているが、有効性や安全性面で満足のいくものはない。例えば、これら肝疾患に、ミノファーゲンＣ等のグリチルリチン製剤が使われているが、腸内で不活化されるために主に注射剤として使用されており、経口投与での効果はあまり期待できない。また、その副作用として、そのアルドステロン様作用に基づく、血圧上昇、低カリウム血症、ナトリウム貯留による水分貯留傾向等が報告されており、特に腹水等を有する重度肝障害時あるいは長期投与に際し問題となっている。
【０００５】
また特公昭５７−２９４４６号公報で、単独のアミノ酸としてＬ−バリンが肝性脳症の治療に有用であるとされているが、これはバリンがクエン酸サイクルの一員であるスクシニルコエンチームＡに分解されることによるアンモニア濃度の降下に基づくもので、組織のアンモニア濃度が非常に高くなっている肝性脳症だけに適応されるものである。前述のように肝性脳症は肝臓自体の疾患ではなく、肝疾患の悪化に伴って起こる合併症の一つであり、したがって、該公報には肝疾患自体を直接治療または改善することは示されていない。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、このような状況に鑑み、有効性が高く、安全性面でも問題のない、注射のみならず経口投与でも有効な、肝疾患の治療薬について鋭意検討してきたが、今回、アミノ酸の一種のバリンが、バリン以外のアミノ酸を全く含まないか、またはバリン以外のアミノ酸を有効成分として実質的に含有しない形で、経口あるいは非経口投与において、肝不全、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬変等の肝疾患に対し優れた改善作用を有し、安全性面でも問題ないことを見出し本発明を完成した。
【０００７】
バリンの肝疾患に対する効果は、後記実施例に示すように肝疾患動物モデルおよび肝疾患患者において確認できる。急性肝炎および肝不全に関しては、ガラクトサミンや四塩化炭素等の薬物性急性肝障害モデルおよび９０％肝切除肝不全モデルを用いて評価し、慢性肝炎・肝硬変に関しては、四塩化炭素等の薬物誘発性慢性肝障害モデルを用いて評価し、これらモデルにおいて、バリンは有効であった。また、慢性肝炎患者に経口等によって投与されたとき、バリンは肝機能（ＧＯＴ、ＧＰＴ、血小板等）を改善することが示された。これらのことから、バリンはヒトを含む動物において肝疾患用剤として有用であることが示された。
【０００８】
【発明の実施の形態】
本発明で用いられるバリンは、市販品、合成品、その他製法に関係なく使用されうる。また、Ｄ体、Ｌ体、ＤＬ体のいずれも使用可能であるが、特にＬ体が好ましく使用できる。
【０００９】
本発明においてバリンは、急性肝炎、慢性肝炎、肝不全、肝硬変等の様々な肝臓疾患の治療または改善効果が期待できるが、特に急性肝炎、肝不全等に優れた治療効果を示す。治療効果が期待できる肝炎としては、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型等の肝炎ウィルスによって惹起される急性および慢性肝炎が挙げられる。また肝不全としては、急性肝不全および慢性肝不全が挙げられる。さらに本発明のバリンはこれら肝炎や肝不全等の疾患により現れる様々な症状や異常あるいはアンモニア濃度に影響されない合併症、例えば発熱、倦怠感、食思不振、嘔吐、腹痛、腹水および胸水等の改善、緩和、回復にも効果を示す。ここで挙げる合併症には、アンモニア濃度に影響される肝性脳症は含まれない。
【００１０】
本発明の肝臓疾患治療または改善用組成物を生体に投与する場合は、経口的にあるいは直腸内、皮下、髄腔内、筋肉内、静脈内、動脈内、経皮等の非経口的に投与することができるが、好ましくは経口的にあるいは静脈内に投与するのがよい。
【００１１】
本発明によるバリンを生体に投与する場合、バリンは適当な剤型に製剤化して用いるのが好ましく、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤、チュワブル剤、液剤、乳剤、懸濁剤、坐剤、シロップ剤、ローション剤、軟膏剤、パップ剤等の製剤で用いることができる。これらの剤型に製剤化するには薬学上許容しうる適当な担体、賦形剤、添加剤等を用いて行うことができる。
【００１２】
本発明の肝臓疾患治療または改善用組成物を静脈内投与する際に好ましい剤型は液剤であり、液剤を調製するには、例えば精製水、生理食塩水、エタノール・プロピレングリコール・グリセリン・ポリエチレングリコール等のアルコール類、トリアセチン等の溶媒を用いて行うことができる。このような製剤にはさらに防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定剤のような補助剤を加えても良い。また懸濁剤として投与することも可能である。
【００１３】
また錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、トローチ剤、チュワブル剤等の固形製剤を調製するには、例えば重炭酸ナトリウム、炭酸カルシウム、デンプン、ショ糖、マンニトール、カルボキシメチルセルロース等の担体、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、グリセリン等の添加剤を加えて常法により行うことができる。またセルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ポリビニルアルコールフタレート、スチレン−無水マレイン酸共重合体、メタクリル酸−メタクリル酸メチル共重合体等の腸溶性物質の有機溶媒あるいは水中溶液を吹き付けて、腸溶性被膜を施して、腸溶性製剤として製剤化することもできる。薬学上許容しうる担体には、その他通常、必要により用いられる補助剤、芳香剤、安定剤あるいは防腐剤を含む。さらに本発明の肝臓疾患治療または改善用組成物は、高カロリー輸液剤のような輸液製剤と併用して用いるか、バリンを他の輸液製剤に添加して用いることもできる。
【００１４】
本発明の肝疾患治療または改善用組成物は、肝機能改善用食品としても適用できる。この場合、既存の食品や飲料等にバリンを直接添加して使用するか、あるいはバリンをガム、キャンディー、ゼリー、グミ、クッキー、ビスケット、チョコレート等の菓子類、ジュース等の清涼飲料、チーズ、バター、ヨーグルト等の乳製品、アイスクリーム、ハム等の農産加工品、ちくわ、はんぺん等の水産加工品、そば、うどん等の麺類、パン、ケーキ等の小麦粉加工品、缶詰または塩、こしょう、さとう、人工甘味料等の調味食品等に直接添加するか、またバリンをこれらの食品の加工段階で混合し、加工することにより適用できる。肝機能改善用の特定保健用医薬品としても応用可能である。バリンを食品に添加・混合する際は、バリンを粉末、顆粒、細粒等の固形状で用いるか、あるいは液状のものを用いることができる。またバリンを食品に加工する際は、通常の食品加工方法に基づき行うことができる。
【００１５】
本発明の肝疾患治療または改善用組成物は、バリンを有効成分として含有し、かつ従来より知られている他のアミノ酸の混合製剤とは異なり、バリン以外のアミノ酸を全く含まないか、または肝疾患治療剤の有効成分としては含まない、つまり実質的にバリン以外のアミノ酸を有効成分として含まないものであり、従来より危惧されていた有効性や安全性の課題を解消する優れた組成物である。
【００１６】
本発明の肝疾患治療または改善用組成物を医薬として使用する場合は、急性肝炎、肝不全、慢性肝炎、肝硬変等の肝疾患患者に用いられ、その投与量は、患者の性別、体型、体質、年齢、症状あるいは投与剤型等により異なるが、一般にバリンを有効成分として１日当り０．１〜３００ｇ、好ましくは１〜１００ｇの範囲で適宜選択することができる。投与回数は、患者の症状あるいは投与剤型等により異なるが、１日１ないし数回が適当である。
【００１７】
【実施例】
以下に、実施例を上げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに何ら限定されるものではない。
【００１８】
【実施例１】
急性肝障害に対する作用
１）実験方法
８〜９週齢の２５０ｇ前後のＣｒｊ：Ｄｏｎｒｙｕ系雄性ラットを用いた。実験中はラット用飼料ＭＦ（オリエンタル酵母社製）と水を自由摂取させた。Ｄ−Ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ・ＨＣｌ（Ｄ−ガラクトサミン塩酸塩；シグマ社製）は生理食塩水で溶解し、１Ｎ−ＮａＯＨでｐＨ７．０に調整後、Ｄ−Ｇａｌａｃｔｏｓａｍｉｎｅ（以下、「ガラクトサミン」と称する）１００ｍｇ／ｍｌ溶液として使用した。四塩化炭素（和光純薬工業社製）はオリーブ油（和光純薬工業社製）で５０％（ｖ／ｖ）溶液として使用した。１２時間の絶食後、ラットにガラクトサミンを１０ｍｌ／ｋｇの容量で腹腔内投与、または四塩化炭素溶液を４ｍｌ／ｋｇの容量で皮下投与することにより肝障害を惹起した。その後直ちにエーテル麻酔下で右頚静脈にカテーテルを挿入し、中心静脈内に留置した。中心静脈カテーテルは皮下を通して肩甲骨間に抜き、Ｈａｒｎｅｓｓ装着後、ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｉｌを経て、Ｓｗｉｖｅｌ（Ｂｉｏ−Ｃａｎｎｕｌａ、Ｂｉｏｍｅｄｉｃａ社製）に接続した。ラットを代謝ケージに移し、無麻酔・無拘束下で実験を行った。実験液はポンプによる投与速度を１００ｍｌ／ｋｇ／ｄａｙに設定して持続投与した。実験液の投与期間は１〜４日とし、実験液群としては、乳酸リンゲル液（ラクテック（登録商標）、大塚製薬社製）群（コントロール群）およびバリン群（乳酸リンゲル液にＬ−バリンを添加し、Ｌ−バリン濃度を１６．８８ｇ／ｌとした。Ｌ−Ｖａｌ群）とした。また、無処置群（Ｎｏｎ−ｔｒｅａｔ、ＮＴ群）も設定した。実験液投与終了後に、エーテル麻酔下に腹部大動脈より採血後剖検し、肝を採取した。
【００１９】
２）結果
a）ガラクトサミン誘発急性肝障害ラットモデル
結果を表１に示す。
ガラクトサミン投与により、ラットに肝障害が生じたが、Ｌ−バリンを投与することによりそれが改善された。また、Ｆｉｓｃｈｅｒ比（ＢＣＡＡ（Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ）／ＡＡＡ（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ））も改善した。
【００２０】
【表１】
0003712539.tif 000002
【００２１】
b）四塩化炭素誘発急性肝障害ラットモデル
結果を表２に示す。
四塩化炭素投与により、ラットに肝障害が生じたが、Ｌ−バリンを投与することによりそれが改善された。また、Ｆｉｓｃｈｅｒ比（ＢＣＡＡ（Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ）／ＡＡＡ（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ））も改善した。
【００２２】
【表２】
0003712539.tif 000003
【００２３】
【実施例２】
肝不全に対する作用
１）実験方法
８〜９週齢の２５０ｇ前後のＣｒｊ：Ｄｏｎｒｙｕ系雄性ラットを用いた。実験中はラット用飼料ＭＦ（オリエンタル酵母社製）と水を自由摂取させた。１２時間の絶食後、エーテル麻酔下で右頚静脈にカテーテルを挿入し、中心静脈内に留置した。続いてＧａｕｂらの方法（Ｊ．Ｇａｕｂら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，４，９０２−９０４，１９８４年）に従い、９０％肝切除を施行した。中心静脈カテーテルは皮下を通して肩甲骨間に抜き、Ｈａｒｎｅｓｓ装着後、ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｃｏｉｌを経て、Ｓｗｉｖｅｌ（Ｂｉｏ−Ｃａｎｎｕｌａ、Ｂｉｏｍｅｄｉｃａ）に接続した。ラットを代謝ケージに移し、無麻酔・無拘束下で実験を行った。実験液はポンプによる投与速度を１００ｍｌ／ｋｇ／ｄａｙに設定して持続投与した。なお、肝切除直後に２０％グルコース溶液を３ｍｌ皮下投与し、肝切除後３日間は１０％グルコース溶液を飲水させ、その後は水道水を飲水させた。実験液の投与期間は４日間または６日間とした。実験液群としては、乳酸リンゲル液（ラクテック（登録商標）、大塚製薬社製）群（コントロール群）およびバリン群（乳酸リンゲル液にＬ−バリンを添加し、Ｌ−バリン濃度を１６．８８ｇ／ｌとした。Ｌ−Ｖａｌ群）とした。また、無処置群（Ｎｏｎ−ｔｒｅａｔ群、ＮＴ群）も設定した。実験液投与終了後に、エーテル麻酔下に腹部大動脈より採血後剖検し、肝を採取した。
【００２４】
２）結果
a）９０％肝切除肝不全ラットモデルにおける生存率に対する効果
結果を表３に示す。
９０％肝切除によって、ラットに肝不全状態が惹起され、６日間観察において約半数に死亡例が見られた。一方、Ｌ−バリンの６日間投与により生存率は有意に改善された。
【００２５】
【表３】
0003712539.tif 000004
【００２６】
b）９０％肝切除肝不全ラットモデルに対する効果
結果を表４に示す。
９０％肝切除により、ラットに肝不全状態が生じたが、Ｌ−バリンを投与することによりそれが改善された。また、Ｆｉｓｃｈｅｒ比（ＢＣＡＡ（Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ）／ＡＡＡ（Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ））も改善した。
【００２７】
【表４】
0003712539.tif 000005
【００２８】
【実施例３】
慢性肝障害に対する作用
１）実験方法
８〜９週齢のＣｒｊ：Ｄｏｎｒｙｕ系雄性ラットを用いた。実験中はラット用飼料ＭＦ（オリエンタル酵母社製）と水を自由摂取させた。四塩化炭素（和光純薬工業社製）はオリーブ油（和光純薬工業社製）で５０％（ｖ／ｖ）溶液として使用し、１回２ｍｌ／ｋｇの投与量で、週２回１４週（２８回）ラットに皮下投与して慢性肝障害モデルを作成した。１４週間の実験中は実験飼料を給餌し、コントロール群にはラット用飼料ＭＦを用い、Ｌ−Ｖａｌ群にはラット用飼料ＭＦに３％重量のＬ−バリンを添加した飼料を与えた。また、無処置群（Ｎｏｎ−ｔｒｅａｔ群、ＮＴ群）も設定した。１４週間の実験終了後、エーテル麻酔下に腹部大動脈より採血後剖検し、肝を採取した。
【００２９】
２）結果
結果を表５に示す。
四塩化炭素の１４週間投与によって、ラットに慢性肝障害が惹起され、死亡例も見られた。一方、Ｌ−バリンの１４週間混餌投与により肝障害状態の改善がみられた。
【００３０】
【表５】
0003712539.tif 000006
【００３１】
【実施例４】
Ｃ型慢性肝炎患者に対するＬ−バリンの経口投与の効果
Ｃ型慢性肝炎患者（女性）に、Ｌ−バリン１回１グラムを１日３回経口的に服用させた。本患者は、Ｌ−バリン服用前の４ヶ月間のＧＯＴおよびＧＰＴの平均値（mean±SD；毎月１回、計４回検査した平均値）は、それぞれ８９．０±２１．９ＩＵ／ｌおよび９１．５±２３．１ＩＵ／ｌであったが、服用開始翌月から４ヶ月間のＧＯＴおよびＧＰＴの平均値（mean±SD；毎月１回、計４回検査した平均値）は、それぞれ６８．３±２０．４ＩＵ／ｌおよび７３．０±２４．３ＩＵ／ｌとなり、それぞれ有意（ｐ＜０．０５、ｔ検定）に低下していた。また血小板に関しても改善効果が見られ、Ｌ−バリン服用前６ヶ月間の血小板の平均値（mean±SD；１または２ヶ月に１回、計４回検査した平均値）は、１５．７±１．７（×１０4）であったが、服用開始翌月から４ヶ月間の血小板の平均値（mean±SD；毎月１回、計４回検査した平均値）は、２０．４±０．９（×１０4）となり、有意（ｐ＜０．０１、ｔ検定）に増加していた。このように、Ｌ−バリンは慢性肝炎患者においても有効であることが示された。
【００３２】
【発明の効果】
本発明の組成物は、従来の薬物治療法よりも副作用が少なく、急性肝炎、肝不全、慢性肝炎、肝硬変等の肝臓疾患の治療ならびに該肝臓疾患により引き起こされる発熱、倦怠感、食思不振、嘔吐、腹痛、腹水等の症状や異常あるいは合併症（肝性脳症を除く）を改善、緩和、回復することができる優れた肝疾患治療または肝機能改善用組成物である。