(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
インタ−ロイキン18結合蛋白質を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【請求項２】
インタ−ロイキン18に特異的なモノクロ−ナル抗体を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【請求項３】
インターロイキン１８受容体蛋白質を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【請求項４】
インタ−ロイキン18の受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【請求項５】
インタ−ロイキン2に特異的なモノクロ−ナル抗体を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【請求項６】
インタ−ロイキン2受容体のα鎖、β鎖および／またはγ鎖のサブユニットに結合する抗体またはリガンドを有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【請求項７】
抗体がモノクローナル抗体である請求項６に記載の間質性肺炎治療薬。
【請求項８】
モノクロ−ナル抗体が、哺乳動物由来の抗体である請求項２，請求項４，請求項５または請求項７のいずれかに記載の間質性肺炎治療薬。
【請求項９】
モノクロ−ナル抗体が、キメラ抗体である請求項２，請求項４，請求項５または請求項７のいずれかに記載の間質性肺炎治療薬。
【請求項１０】
モノクロ−ナル抗体が、擬人化抗体である請求項２，請求項４，請求項５または請求項７のいずれかに記載の間質性肺炎治療薬。
【請求項１１】
インタ−ロイキン2とジフテリア毒素の融合体を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【請求項１２】
請求項１乃至１１の間質性肺炎治療薬の少なくとも１種または２種以上を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インタ−ロイキン18阻害剤および/またはインタ−ロイキン２阻害剤の少なくとも1種または2種以上を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
間質性肺炎は、乾性咳嗽と息切れを主症状とし、ときに発熱や関節痛などを伴う疾患であるが、全身性疾患に合併する場合には、他の全身症状が認められる。  間質性肺炎には急性型と慢性型があり、急性型には、ハンマン・リッチ症候群(Hamman-Rich syndrome)が知られる。間質性肺炎の治療には、主としてステロイド剤が用いられるが、一般に予後は不良で肺線維症へと移行するものが多く、肺線維症へ移行すれば重篤な経過を辿るため、間質性肺炎の治療ひいては肺線維症の予防・治療のための新たな治療薬が求められている。
【０００３】
従来、ブレオマイシンやシリカをマウスに投与することによって肺線維症が誘導されることは知られていたが、間質性肺炎の適当な動物モデルは知られていなかった。
【０００４】
インタ−ロイキン18（ＩＬ−18）は、マクロファ−ジの産性するインタ−フェロンγ（ＩＦＮ−γ）誘導因子として1995年に発見された最も新しいサイトカインである[Nature 378,88-91(1995)]。ＩＬ−18は、前駆体（pro ＩＬ−18）として合成された後、インタ−ロイキン 1β変換酵素［カスパ−ゼ１(caspase-1)]等により切断されて活性型（mature ＩＬ−18）となる。マウスＩＬ−18の前駆体は１９２個のアミノ酸よりなり、その活性型は１５７個のアミノ酸よりなる。
【０００５】
また、ヒトＩＬ−18の前駆体は１９３個のアミノ酸よりなり、その活性型は１５７個のアミノ酸よりなる。
【０００６】
ＩＬ−18の受容体は、ＩＬ−1受容体ファミリ−に属し、ＩＬ−18ＲαとＩＬ−18Ｒβとが知られている。
【０００７】
ＩＬ−18は、１型ヘルパ−Ｔ細胞（Ｔｈ１）やナチュラルキラ−細胞（ＮＫ細胞）に作用してＩＦＮ−γの産性を誘導するほか、細胞傷害性Ｔ細胞活性を増強させることにより細胞傷害活性を増強することが知られており、Ｔｈ１応答をもたらす炎症性サイトカインと考えられている。
【０００８】
これらのことからＴｈ１過剰反応が原因であるインシュリン依存性糖尿病や多発性硬化症およびクロ−ン病等とＩＬ−18との関連が注目されてきた。
【０００９】
しかしながら、これまで間質性肺炎とＩＬ−18の関連については全く知られていなかった。
【００１０】
インタ−ロイキン 2（ＩＬ−2)は、主としてＴ細胞（ＣＤ４＋、ＣＤ８＋）が分泌するサイトカインで、１３３個のアミノ酸よりなる。ＩＬ−２はT細胞増殖因子（ＴＣＧＦ）とも呼ばれ、Ｔ細胞を増殖させるが、ＩＬ−２はＴ細胞ばかりでなく、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、マクロファージ、好中球等にも作用を及ぼすことが知られている。そして、これら細胞の細胞表面にはＩＬ-2受容体が発現している。ＩＬ-2受容体は、α鎖、β鎖およびγ鎖のサブユニットからなる複合体であり、α鎖はTac抗原とも呼ばれ、２５１個のアミノ酸よりなる。また、γ鎖はＩＬ−4受容体、ＩＬ−７受容体およびＩＬ−９受容体の第二のサブユニットであり、β鎖とγ鎖のサブユニットはＩＬ-15受容体の第二および第三のサブユニットである。
【００１１】
国際出願ＷＯ99/51580号公報には、ＩＬ−２の産生を阻害するピラゾール誘導体が、免疫が介在する疾患の治療に用いられることが開示されており、当該疾患として、多数例示されている疾患のなかに肺腺維症および特発性間質性肺炎の記載も挙げられている。
【００１２】
しかしながら、例示されているいずれの疾患においても、ＩＬ−２の産生を阻害することに基く治療効果については、何ら具体的な記載がない。
【特許文献１】国際出願ＷＯ99/51580号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明の目的は、間質性肺炎の治療に用いられる新規な間質性肺炎治療薬を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者は、ＩＬ−18の生体内での役割を明らかにするために、マウスにＩＬ−２を投与してリンパ球を活性化させた状態で、ＩＬ−18を投与した際の変化を観察した。
【００１５】
その結果、ＩＬ−18の投与により間質性肺炎が惹起されることを見い出し、間質性肺炎の病態形成にＩＬ−18が深く係っていることを見い出した。
【００１６】
本発明者は、ＩＬ−18の過剰な作用発現を抑えることによって間質性肺炎の発症が抑えられると考え、この仮説を実証するためにＩＬ−18受容体(ＩＬ−１８Ｒα)ノックアウト・マウスを用いて検討した結果、ＩＬ−18の働きを抑えることによって間質性肺炎の発症が抑えられることを確かめて本発明を完成させた。
また、上記において、間質性肺炎はリンパ球を活性化させた状態、即ち、ＩＬ−２の共存下でのみ発症することからＩＬ−２の作用を抑制することによっても間質性肺炎の発症が抑制されることを見い出した。
【００１７】
本発明は、ＩＬ−18阻害剤および/またはＩＬ−２阻害剤の少なくとも1種または2種以上を有効成分とすることを特徴とする間質性肺炎治療薬に関する。
【００１８】
なお、上記においてＩＬ−18およびＩＬ−２をげっ歯類に投与することによって間質性肺炎の動物モデルを作成し得ることが見い出されたことから、当該動物モデルを用いる間質性肺炎治療薬のスクリーニングが可能となった。
以下、本発明を詳細に説明する。
【発明の効果】
【００１９】
本発明の間質性肺炎治療薬は、間質性肺炎の病態形成に深く関与するＩＬ−18の過剰な作用発現を抑えることによって治療効果をもたらす。また、本発明の間質性肺炎治療薬は、間質性肺炎がリンパ球を活性化させた状態、即ち、ＩＬ−２の共存下でのみ発症することから、当該ＩＬ−２の作用を抑制することによっても治療効果をもたらす。
【００２０】
本発明の間質性肺炎治療薬によって、間質性肺炎から肺線維症への移行が抑制されるため、本発明の間質性肺炎治療薬は、肺線維症の予防・治療薬としても有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
本発明に用いられるＩＬ−18阻害剤としては、過剰に発現したＩＬ−18の働きを抑える物質であれば特に限定されない。
【００２２】
本発明に用いられるＩＬ−18阻害剤としては、例えば、pro ＩＬ−18からmature ＩＬ−18への変換を阻害する物質が挙げられる。当該物質の具体例としては、システインプロテアーゼの阻害剤を挙げることができる。システインプロテアーゼの阻害剤としてはインタ−ロイキン1β変換酵素阻害剤（カスパ−ゼ１の阻害剤）が好適に使用できる。
【００２３】
また、本発明に用いられるＩＬ−18阻害剤としては、ＩＬ−18結合蛋白質、抗ＩＬ−18抗体等のＩＬ−18の活性を中和する物質およびＩＬ−18受容体へのＩＬ−18の結合を阻害する物質等が挙げられる。更に、ＩＬ−18受容体結合後のシグナル伝達の阻害剤等が挙げられる。
【００２４】
本発明に用いられるＩＬ−18阻害剤としては、特に、ＩＬ−18受容体へのＩＬ−18の結合を阻害する物質が好適に使用される。
【００２５】
本発明に用いられるインタ−ロイキン1β変換酵素阻害剤としては、種々の化合物が知られており、具体例として、例えば、公開特許公報平５−２５５２１８号公報に記載のペプチド誘導体、公開特許公報平１１−１４７８７３号公報に記載のスルホンアミド誘導体、公表特許公報平１０−５０４２８５号公報に記載のペプチド誘導体、公開特許公報平１１−１４７８９５号公報に記載のグリシン誘導体および国際出願ＷＯ９７／２４３３９号公報に記載のテトラゾ−ル誘導体等が挙げられる。
【００２６】
ＩＬ−18結合蛋白質は、文献[Immunity,10,127-136(1999)]に記載の方法に準じて調製することができる。
【００２７】
ＩＬ−18に特異的なモノクロ−ナル抗体は、文献[J.Immunol.Methods,217,97-102(1998)]に記載の方法に準じて調製することができる。
【００２８】
ＩＬ−18受容体(ＩＬ−１８Ｒα)へのＩＬ−18の結合を阻害する物質の具体例としては、例えば、ＩＬ−18受容体蛋白質およびＩＬ−18の受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体等を挙げることができる。
【００２９】
上記ＩＬ−18の受容体に特異的なモノクローナル抗体は、哺乳動物由来の抗体、キメラ抗体または擬人化抗体のいずれであっても良い。
【００３０】
本発明に用いられるＩＬ−18受容体蛋白質およびＩＬ−18の受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体は、例えば、特開平11-100400号公報に記載の方法に準じて調製することができる。
【００３１】
本発明に用いられるＩＬ−２阻害剤としては、過剰に発現したＩＬ−２の働きを抑える物質であれば、特に限定されない。
【００３２】
本発明に用いられるＩＬ−２阻害剤としては、例えば、抗ＩＬ−２抗体等のＩＬ−２の活性を中和する物質、ＩＬ−２とジフテリア毒素の融合体（ＩＬ−２融合蛋白）のようにＩＬ−２のアンタゴニストとして作用する物質およびＩＬ−２受容体へのＩＬ−２の結合を阻害する物質等が挙げられる。ＩＬ−２受容体へのＩＬ−２の結合を阻害する物質としては、ＩＬ-2受容体のα鎖、β鎖および／またはγ鎖のサブユニットに結合する抗体およびリガンドを挙げることができる。
【００３３】
抗ＩＬ−２抗体等のＩＬ−２の活性を中和する物質は、例えば、特開昭60-246322号公報に記載されている。
【００３４】
ＩＬ−２のアンタゴニストとして作用する物質は、例えば、特公平6-92318号公報に記載されている。また、ＩＬ−２とジフテリア毒素の融合体製剤は、T細胞皮膚リンパ腫、乾癬等の治療薬として、DAB389ＩＬ−２およびオンターク（ONTAK）（商品名）等の開発が進められている。ONTAKは、T細胞皮膚リンパ腫の治療薬として、すでに米国においては上市されている。
【００３５】
ＩＬ−２受容体へのＩＬ−２の結合を阻害する物質の具体例としては、抗ＩＬ−２受容体に特異的な抗体が挙げられる。
【００３６】
抗ＩＬ−２受容体に特異的な抗体は、例えば、公開特許公報昭６２−５６４４０号公報、特開平5-244982号公報および公開特許公報平７−１６５７９５号公報に開示されている。
【００３７】
抗ＩＬ−２受容体に特異的な抗体としては、モノクローナル抗体が好ましい。抗ＩＬ−２受容体に特異的なモノクローナル抗体としては、例えば、抗ＩＬ−２受容体ヒト化モノクローナル抗体（ヒト化抗Tac抗体）が好適に使用される。ヒト化抗Tac抗体は、米国特許5530101号公報に開示されている。また、ヒト化抗Tac抗体は、腎臓移植における拒絶反応抑止薬としてゼナパックス（Zenapax）の商品名で既に米国等において上市されている。
【００３８】
本発明の間質性肺炎治療薬は、適宜、経口投与用製剤、注射剤または吸入剤等種々の製剤形態で患者に投与することができる。
【００３９】
また、本発明の間質性肺炎治療薬は、適宜、ステロイド剤等、間質性肺炎に用いられる他の薬剤と組み合わせて使用することもできる。更に、本発明に使用されるインタ−ロイキン 1β変換酵素阻害剤、ＩＬ−18結合蛋白質、抗ＩＬ−18抗体、ＩＬ−18の受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体、抗ＩＬ−２抗体、ＩＬ−２融合蛋白およびＩＬ−２受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体等を適宜2種以上組み合わせて使用することもできる。
【００４０】
本発明の間質性肺炎治療薬の各種製剤は、常法により製造することができる。
【００４１】
例えば、経口投与のための剤型としては、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤および散剤等があり、これらの製剤は、本発明に用いられるＩＬ−18阻害剤および/またはＩＬ−２阻害剤の少なくとも1種または2種以上と、乳糖、コ−ンスタ−チ、結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、カルボキシメチルセルロ−スカルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース、タルク等の通常の医薬品添加物とを適宜混合し、常法により製造される。
【００４２】
注射剤は、常法によって製造することができ、適宜、マンニト−ル、塩化ナトリウム、グルコ−ス、ソルビット、グリセロ−ル、キシリト−ル、フルクト−ス、マルト−ス、マンノ−ス等の等張化剤、亜硫酸ナトリウム、アルブミン等の安定化剤、ベンジルアルコ−ル、パラヒドロキシ安息香酸メチル等の保存剤等を製剤中に添加することができる。
【００４３】
注射剤は、用時溶解用の凍結乾燥製剤とすることもできる。凍結乾燥製剤は、常法によって製造することができ、適宜、上記、等張化剤、安定化剤、保存剤等を製剤中に添加することができる。
【００４４】
吸入剤は、常法によって製造することができ、本発明に用いられるＩＬ−18阻害剤および/またはＩＬ−２阻害剤の少なくとも1種または2種を生理食塩液に溶解または懸濁させ、適宜、マンニト−ル、塩化ナトリウム、グルコ−ス、ソルビット、グリセロ−ル、キシリト−ル、フルクト−ス、マルト−ス、マンノ−ス等の等張化剤、亜硫酸ナトリウム、アルブミン等の安定化剤、ベンジルアルコ−ル、パラヒドロキシ安息香酸メチル等の保存剤等を添加して調製される。
【００４５】
本発明に用いられるＩＬ−18阻害剤および/またはＩＬ−２阻害剤の少なくとも1種または2種が、ＩＬ−18またはＩＬ−２の受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体である場合には、本発明の間質性肺炎治療薬は、通常注射剤もしくは吸入剤として用いられる。当該注射剤もしくは吸入剤の製造も常法によって行うことができる。
【００４６】
本発明の間質性肺炎治療薬の投与量は、本発明に用いられる阻害剤の種類、投与経路、患者の病態、年齢、体重などによってもそれぞれ異なるが、通常、１日当たり０．１ｍｇから１，０００ｍｇであり、これを１度にまたは２〜３回に分けて適宜投与する。
【００４７】
本発明に使用される間質性肺炎の動物モデルに使用されるげっ歯類としては、マウス、ラット等が挙げられるが、マウスが好ましい。
【００４８】
本発明に使用される間質性肺炎の動物モデルは、ＩＬ−18およびＩＬ−２を、例えば、後記試験例１に示すようにマウスに連続投与することによって容易に作成することができる。
【００４９】
また、このようにして作成された間質性肺炎の動物モデルに、適宜、被検薬を投与し、被検薬の当該モデル動物に対する効果（例えば、生存率等）を検討することによって、間質性肺炎治療薬のスクリーニングを行うことができる。
【００５０】
上述の発明の効果は、以下の試験例１から試験例３の試験結果から明らかである。
【００５１】
試験例１−（１）
ＩＬ−2 ＋ＩＬ−18投与による間質性肺炎発症の証明（１）：
(1)試験方法：
C57BL/6 およびBALB/cの２系統のマウスについて、それぞれ以下の試験を行った。両系統のマウスは全て６週令の雌を使用した。
マウス（１群５−10匹）を群分けし、１日１回連続１０日間、下表に示す処置を行った。全てのマウスは１１日目に回収された。
回収されたマウスを解剖し、全ての臓器をヘマトキシリン−エオシン（ＨＥ）染色し、検鏡した。
ＩＬ−2 およびＩＬ−18は、何れも市販の、リコンビナント・ヒトＩＬ−2 およびリコンビナント・マウスＩＬ−18を使用した。
【００５２】
【表１】
0003640254.tif 000002
【００５３】
(2)試験結果：
C57BL/6 系統；
対照群（グル−プ１）、ＩＬ−2 単独投与群（グル−プ２）およびＩＬ−18単独投与群（グル−プ３）では全てのマウスが生存した。
ＩＬ−2 とＩＬ−18を同時に投与した群では、ＩＬ−18の量が0.04μgの群（グル−プ４）では全てのマウスが生存したが、0.1μg、0.5μg、1μg、2μgの群（グル−プ５−８）ではマウスの生存率は0-10%であり、ＩＬ−18の量に依存してマウスの生存期間が短縮した。
【００５４】
BALB/c系統；
対照群（グル−プ１）、ＩＬ−2 単独投与群（グル−プ２）およびＩＬ−18単独投与群（グル−プ３）では全てのマウスが生存した。
ＩＬ−2 とＩＬ−18を同時に投与した群では、ＩＬ−18の量が0.04μgの群（グル−プ４）と0.1μgの群（グル−プ５）でのマウスの生存率は90-100%であったが、0.5μg、1μg、2μgの群（グル−プ６−８）でのマウスの生存率は0-20%であり、ＩＬ−18の量に依存してマウスの生存期間が短縮した。
【００５５】
解剖したマウスのＨＥ染色では、肺のみに病変が認められ、肝臓、心臓、腎臓、消化器等その他の臓器には異常は認められなかった。肺では、間質にリンパ球が浸潤し、肺胞構造の一部が破壊される等、間質性肺炎の症状が認められた。
【００５６】
なお、C57BL/6マウスに、ＩＬ−2(50,000IU)とＩＬ−18(0.2μg)とを0.2mlPBSに懸濁し、１日１回、14日間腹腔内に連続投与し15日以降に回収したマウスでは、肺の線維化が認められた。
【００５７】
以上の結果から、ＩＬ−2 共存下において、ＩＬ−18の量に依存して間質性肺炎が発症し、呼吸不全により死亡することが判った。即ち、ＩＬ−18の作用発現を抑えることによって間質性肺炎が治療し得ることが示唆された。
【００５８】
試験例１−（２）
ＩＬ−2 ＋ＩＬ−18投与による間質性肺炎発症の証明（２）：
(1)試験方法：
C57BL/6マウスについて、上記試験例１−（１）に引き続いて以下の試験を行った。マウスは全て６週令の雌を使用した。
マウス（１群10匹）を群分けし、１日１回連続１４日間、下表に示す処置を行った。全てのマウスは１４日目に回収された。
回収されたマウスを解剖し、全ての臓器をＨＥ染色し、検鏡した。
ＩＬ−2 およびＩＬ−18は、何れも市販の、リコンビナント・ヒトＩＬ−2 およびリコンビナント・マウスＩＬ−18を使用した。
【００５９】
【表２】
0003640254.tif 000003
(2)試験結果：
対照群（グル−プ１）、ＩＬ−2 単独投与群（グル−プ２）では全てのマウスが生存した。
ＩＬ−2 とＩＬ−18を同時に投与した群では、ＩＬ−２の量が100IUの群（グル−プ３）および1,000IUの群（グル−プ４）では全てのマウスが生存したが、10,000IUの群（グル−プ５）ではマウスの生存率は60%であり、50,000IUの群（グル−プ６）および100,000IUの群（グル−プ７）は全例死亡した。また、ＩＬ−２の量に依存してマウスの生存期間が短縮した。
【００６０】
解剖したマウスのＨＥ染色では、ＩＬ−2 とＩＬ−18を同時に投与した群では肺のみに致死的な病変が認められ、肝臓、心臓、腎臓、消化器等その他の臓器には致死に至るほどの病理学的変化は認められなかった。肺では、間質にリンパ球が急激にまた著明に浸潤し、肺胞構造の一部が破壊される等、間質性肺炎患者の肺病理像とほぼ同一の病理学的変化が認められた。
【００６１】
以上の結果から、ＩＬ−18存在下においては、ＩＬ−2の過剰発現によって間質性肺炎が発症し、呼吸不全により死亡することが判った。即ち、ＩＬ−２の作用発現を抑えることによって間質性肺炎が治療し得ることが示唆された。
【００６２】
上記試験例１−（1）および（2）の結果から、間質性肺炎は、ＩＬ−2 およびＩＬ−18の少なくとも何れか一方の作用発現を抑えることによって治療し得ることが示唆された。
【００６３】
試験例２
ＩＬ−18受容体ノックアウト・マウスによる間質性肺炎発症機序の解明：
(1)試験方法：
実験動物には、K.Hoshino等の方法[J.Immunol.,162,5041-5044(1999)]で作成した129/SvJマウスのＩＬ−18受容体(ＩＬ−１８Ｒα)ノックアウト・マウス（１群５匹、７週令の雌）と対照群として129Tcrのワイルド・タイプ(wild type)（１群５匹、15週令の雌）を使用した。
両群のマウスに、ＩＬ−2(50,000IU)とＩＬ−18(1μg)とを0.2ml PBSに懸濁し、１日１回、17日間腹腔内に連続投与した。全てのマウスを18日目に回収し、回収されたマウスを解剖し、全ての臓器をＨＥ染色し、検鏡した。
ＩＬ−2およびＩＬ−18は、何れも市販の、リコンビナント・ヒトＩＬ−2 およびリコンビナント・マウスＩＬ−18を使用した。
【００６４】
(2)試験結果：
対照群の18日目における生存率が20%であったのに対し、ＩＬ−18受容体(ＩＬ−１８Ｒα)ノックアウト・マウス群は、全て生存した。
【００６５】
解剖したすべてのワイルド・タイプマウスのＨＥ染色では、肺のみに病変が認められ、肝臓、心臓、腎臓、消化器等その他の臓器には異常は認められなかった。肺では、間質にリンパ球が浸潤し、肺胞構造の一部が破壊される等、間質性肺炎の症状が認められた。一方、すべてのＩＬ−18受容体(ＩＬ−１８Ｒα)ノックアウト・マウス群では全く間質性肺炎の症状が認められなかった。
【００６６】
上記の結果から、間質性肺炎発症の機序が、少なくともＩＬ−18の過剰発現に依存することが明らかにされた。即ち、この過剰なＩＬ−18の作用発現を抑えることによって間質性肺炎が治療し得ることが解明された。
【００６７】
試験例３
ＩＬ−18ノックアウト・マウス、ＩＬ−18受容体αノックアウト・マウスによるブレオマイシン肺炎の抑制：
(1)試験方法：
６週令雌の正常C57BL/6マウス（１群５匹、体重約２０ｇ）、ＩＬ−18ノックアウト・マウス（１群５匹、体重約２０ｇ）、ＩＬ−18受容体αノックアウト・マウス（１群５匹、体重約２０ｇ）にブレオマイシン２ｍｇを含む0.2mlのＰＢＳを尾静脈より投与した。これら正常C57BL/6マウス、ＩＬ−18ノックアウト・マウスおよびＩＬ−18受容体αノックアウト・マウスを７日目に処分しマウスの肺の組織を光学顕微鏡で観察した。なお、陰性対照群として、正常C57BL/6マウスに溶媒（ＰＢＳ 0.2ml）のみを同様に投与した群を用いた。
【００６８】
(2)試験結果：
顕微鏡写真を図１から４に示した。ＩＬ−18ノックアウト・マウスおよびＩＬ−18受容体αノックアウト・マウスでは、正常C57BL/6マウスと比べ肺間質部、血管部へのリンパ球浸潤が抑制された。
【００６９】
これらの事実よりＩＬ−18を抑制することでブレオマイシンによる肺炎（肺腺維症）が抑制された。
【実施例】
【００７０】
以下に、実施例を挙げて、本発明をさらに具体的に説明する。
【００７１】
実施例１
注射剤：
ヒトＩＬ−18の受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体が溶解しているＰＢＳ（1mg/ml）を濾過滅菌した後、１アンプルに５ｍｌずつ分注することにより、ヒトＩＬ−18の受容体に特異的なモノクロ−ナル抗体を含有する注射剤（５ｍｇ／アンプル）が調製される。
【００７２】
実施例２
注射剤：
抗ＩＬ−２受容体ヒト化モノクローナル抗体（ヒト化抗Tac抗体）が溶解しているＰＢＳ（1mg/ml）を濾過滅菌した後、１アンプルに１００ｍｌずつ分注することにより、ヒト化抗Tac抗体を含有する点滴用注射剤（１００ｍｇ／アンプル）が調製される。
【図面の簡単な説明】
【００７３】
【図１】正常C57BL/6マウス（陰性対照群）の顕微鏡写真を示す図である。
【図２】正常C57BL/6マウス（ブレオマイシン投与群）の顕微鏡写真を示す図である。
【図３】ＩＬ−18ノックアウトマウス（ブレオマイシン投与群）の顕微鏡写真を示す図である。
【図４】ＩＬ−18受容体αノックアウトマウス（ブレオマイシン投与群）の顕微鏡写真を示す図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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