(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴから選ばれる化合物及び／又はその生理的に許容される塩からなる活性酸素消去剤。
【請求項２】
請求項１記載の活性酸素消去剤を含有する化粧料。
【請求項３】
請求項１記載の活性酸素消去剤を含有する食用組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は活性酸素消去剤及びこれを含有する化粧料、医薬組成物、食用組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
一般的に、活性酸素が生体に及ぼす影響としては、コラーゲン線維の架橋や、ＤＮＡ螺旋の部分開裂、連鎖的ラジカルの発生による組織の損傷が挙げられ、その結果として皮膚のシワや弾力消失、脱毛といった生体の老化、気管支喘息等のアレルギー反応の惹起とヒスタミン放出による炎症の惹起、虚血性疾患である心筋梗塞における平滑筋の損傷、肝臓障害などの疾患の悪化、また、脳組織の破壊による痴呆の誘発等が引き起こされることが知られている。更に、詳細な原因は不明であるがリューマチの発症にも活性酸素が関与していると言われている。
【０００３】
従って、生体内において活性酸素の発生を抑制することは、これらの疾患を治療あるいは予防する点で非常に重要なことであり、このため、従来より生体内に発生した活性酸素を消去する作用のある物質の探索が広く行われてきた。
【０００４】
例えば、この様な作用を有する薬剤として、従来より用いられてきたものとしては、天然物由来のものでは、脂溶性のトコフェロール（ビタミンＥ）、水溶性のアスコルビン酸（ビタミンＣ）が挙げられ、合成化合物では、ＢＨＴ（ブチルヒドロキシトルエン）、ＢＨＡ（ブチルヒドロキシアニソール）等が挙げられる。しかし、これらの薬剤は活性酸素消去作用が十分ではなく、合成化合物においては、ＢＨＴもＢＨＡも発癌性の疑いが持たれており、何れも活性酸素消去剤としては実用的とは言い難かった。
【０００５】
また、最近では、十分な薬効と安全性を求めて、生薬抽出物から活性酸素消去作用を有する物質を得ようとする試みも数多くなされており、例えば、特開昭６０−２２４６２９号、特開昭６１−２４５２２号、特開平２−１９３９３０号、特開平２−２４３６３２号、特開平２−２６４７２７号、特開平３−１５３６２９号、特開平３−２２１５８７号、特開平４−６９３４３号、特開平４−２０２１３８号、特開平４−２４７０１０号の各公報に記載の発明は、何れも生薬由来の活性酸素消去作用を有する物質を利用したものである。しかし、これらの生薬抽出物では、安全性に問題がないものの、活性酸素消去作用の点から言えば、未だ十分なものは得られていなかった。
【０００６】
更に、生体内の酵素の一つスーパーオキシドデスムターゼ（ＳＯＤ）を投与することにより、生体内に発生する活性酸素を消去する試みもなされてきているが、ＳＯＤはタンパク質であるため、その入手が困難であるばかりでなく、消化されてしまうが故に、経口投与は不可能であり、また、注射による投与においても、血中半減期が短く満足の行くものではなかった。
【０００７】
一方、２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴ、コニフェリルアルコールから選ばれる化合物やその塩が、活性酸素を消去する作用を有することは全く知られていなかった。更に、化粧料、医薬品あるいは食品等に含有させて、上述した様々な疾患の予防や治療、老化の防止、改善に用いる試みはされていなかった。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記観点からなされたものであり、生体内に発生する活性酸素を消去する作用を十分に有し、更に、安全性が高い活性酸素消去剤及びこれを含有する化粧料、医薬品、食品等の組成物を提供することを課題とする。
【０００９】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記課題を解決するために、活性酸素消去作用を指標に各種化合物を広くスクリーニングした結果、２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴ、コニフェリルアルコールから選ばれる化合物が優れた活性酸素消去作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち本発明は、２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴ、コニフェリルアルコールから選ばれる化合物及び／又はその生理的に許容される塩からなる活性酸素消去剤及びこれを含有する化粧料、医薬組成物、食用組成物である。
【００１３】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１４】
＜１＞本発明の活性酸素消去剤
本発明の活性酸素消去剤は、化１で表される２，６−ジメトキシフェノール、化２で表されるシリンゴ酸、化３で表されるカフェー酸、化４で表されるピロガロール、化５で表されるメチルシナペート、化６で表されるシリングアルデヒド、化７で表されるプロトカテキン酸、化８で表されるアセトシリンゴ、化９で表されるコニフェリルアルコールから選ばれる化合物及び／又はその生理的に許容される塩からなる。
【００１８】
【化１】
0003665360.tif 000002
【００１９】
【化２】
0003665360.tif 000003
【００２１】
【化３】
0003665360.tif 000004
【００２２】
【化４】
0003665360.tif 000005
【００２４】
【化５】
0003665360.tif 000006
【００２５】
【化６】
0003665360.tif 000007
【００２７】
【化７】
0003665360.tif 000008
【００２８】
【化８】
0003665360.tif 000009
【００３０】
【化９】
0003665360.tif 000010
【００３１】
なお、上記化合物は何れも既知物質であり、一般的な製造方法により得られる。また、これらの化合物のほとんどは合成品が市販されているので、本発明においては、これら市販品を用いることも可能である。
【００３２】
本発明の活性酸素消去剤には、この様な化１から化９で表される化合物の他にこの化合物の生理的に許容される塩を用いることもできる。この場合、化１から化９で表される化合物及びその塩の１種を単独で用いても、又は２種以上を混合して用いてもよい。
【００３３】
また、この様な塩としては、生理的に許容されるものであれば特に限定はされないが、例えば、ナトリウム、カリウム等のアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属との塩、アンモニア、トリエチルアミン、トリエタノールアミン等のアミン類との塩、アルギニン、リジン等の塩基性アミノ酸類との塩等が例示できる。
【００３４】
＜２＞本発明の活性酸素消去剤を含有する組成物
本発明の組成物は、上記活性酸素消去剤の１種あるいは２種以上を常法により配合したものであり、具体的には、化粧料、医薬品、食品等が例示できる。
【００３５】
（１）化粧料
本発明の化粧料は、シワ、脱毛等の予防、改善、体臭等の好ましくない匂いの発生を防ぐ等の目的で、上記活性酸素消去剤を配合したものである。
【００３６】
上記化粧料における本発明の活性酸素消去剤の配合量は特に限定されないが、化粧料全量に対して０．０１〜１０重量％の範囲で配合されることが好ましく、更に、０．１〜１重量％の範囲で配合されることがより好ましい。活性酸素消去剤の配合量が０．０１％未満では、活性酸素消去剤が有するシワ改善、脱毛改善、体臭改善等の効果が十分に得られない場合があり、１０重量％を越えて配合しても効果が頭打ちになり経済的でない場合が多い。
【００３７】
本発明が適用される化粧料としては、剤型は特に限定されないが、例えば、化粧水、乳液、クリーム等の基礎化粧料、ファンデーション、アンダーメークアップ、白粉等のメークアップ化粧料、ヘアトニック、ヘアリキッド、シャンプー、リンス等の頭髪用化粧料等を挙げることができる。これらの化粧料は、上記活性酸素消去剤を配合する以外は、通常の化粧料と同様の方法で製造することができる。
【００３８】
また、本発明の化粧料には、上記活性酸素消去剤の他に、化粧料に一般に用いられる各種成分、例えば、ワセリン、流動パラフィン等の炭化水素類、ホホバ油、カルナバワックス等のエステル類、オリーブ油、牛脂等のトリグリセライド類、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール等の高級アルコール類、ステアリン酸、ベヘン酸等の脂肪酸類、グリセリルモノステアレート、ポリオキシエチレンステアリン酸、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンステアリルエーテル等のノニオン界面活性剤、石鹸、硫酸エステル等のアニオン界面活性剤、ステアリルアミン等のカチオン界面活性剤、アルキルベタイン等の両性界面活性剤、グリセリン、プロピレングリコール等の多価アルコール類、各種粉末成分、保湿剤、増粘剤、色剤、香料、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐剤、あるいは紫外線防御剤、抗炎症剤、美白剤等を配合することができる。
【００３９】
更に、本発明の化粧料には、本発明の活性酸素消去剤である２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴ、コニフェリルアルコールから選ばれる化合物及び／又はその生理的に許容される塩以外に、ＳＯＤ等の活性酸素消去作用を有する物質を配合してもよい。
【００４０】
（２）医薬品
本発明の活性酸素消去剤を医薬品として製剤化する場合、剤型は特に限定されないが、例えば、注射剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤等、通常用いられている各種製剤に、通常の方法に従って剤型化することができる。また、剤型化に際しては、上記活性酸素消去剤以外に、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、増量剤、被覆剤等の医薬品で通常用いられる任意成分を任意の量、用いることもできる。
【００４１】
上記医薬品の投与量に関しては、疾患の種類、症状、患者の年令、体重等により異なるが、成人１人１日あたり、活性酸素消去剤の量として１０ｍｇ〜１０００ｍｇを１回ないしは数回に分けて経口投与するか、５ｍｇ〜５００ｍｇを注射で投与するのが適当である。注射剤の投与方法としては、静脈内投与、動脈内投与、門脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮下投与等が例示できる。
【００４２】
（３）食品
本発明の活性酸素消去剤を食品に配合する場合、種々の食品へ、食品で通常用いられる任意成分と共に配合できる。例えば、キャンディーやグミ、ゼリーといった菓子類やジュースの様なドリンク類、パン等の主食が挙げられる。配合量は、食品の種類により異なるが、食品の味を損なわずに、且つ十分な活性酸素消去効果が期待できる０．０１〜１０重量％であることが好ましく、更に、０．１〜１重量％であることがより好ましい。
【００４３】
【作用】
本発明の活性酸素消去剤として用いる、２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴ、及びコニフェリルアルコール、及びこれらの他に没食子酸、グアヤコール、メチルガレート、及びフェルラ酸を用いて、安全性及び活性酸素消去作用に関する試験を行った。
【００４４】
なお、試験に用いた上記化合物は全てアルドリッチ製のものであった。
【００４５】
（１）急性毒性試験（腹腔内投与）
５匹づつ１３群のＩＣＲ雄性マウス（体重２５〜３０ｇ）の各群に、上記各化合物を生理食塩水に溶解して１０００ｍｇ／ｋｇの割合でそれぞれ腹腔内投与した。投与後１４日に生死を判定したが何れの群においても死亡例を認めなかった。これより、本発明の活性酸素消去剤の腹腔内投与によるＬＤ50値は１０００ｍｇ／ｋｇより大きく、安全性に優れていることがわかる。
【００４６】
（２）急性毒性試験（経口投与）
６匹づつ１３群のＩＣＲ雄性マウス（体重２５〜３０ｇ）の各群に、上記各化合物を生理食塩水に溶解して１０００ｍｇ／ｋｇの割合でそれぞれ経口投与した。投与後１４日目に生死を判定したが何れの群においても死亡例を認めなかった。これより、本発明の活性酸素消去剤の経口投与によるＬＤ50値は１０００ｍｇ／ｋｇより大きく、安全性に優れていることがわかる。
【００４７】
（３）活性酸素消去作用の測定
化２９に示す反応式に基づき、キサンチン−キサンチンオキシダーゼ（ＸＯＤ）系により活性酸素の一つであるスーパーオキシドアニオン（Ｏ2-）を発生させ、発生したＯ2-の生成率を亜硝酸法により測定し、この値をキサンチンオキシダーゼ阻害率値で補正して活性酸素消去作用値を求めた。
【００４８】
【化１０】
0003665360.tif 000011
【００４９】
上記各化合物を各種モル濃度で含有する活性酸素消去剤水溶液０．１ｍＬを、６５ｍＭ燐酸２水素カリウム、３５ｍＭホウ酸ナトリウム、０．５ｍＭＥＤＴＡ２ナトリウム水溶液（以下、緩衝液Ａという）０．２ｍＬ、０．５ｍＭキサンチン溶液０．２ｍＬ、１０ｍＭヒドロキシルアミン塩酸塩水溶液０．１ｍＬ、純水０．２ｍＬの混合液に、加えてよく撹拌し試験液とした。同様にして、活性酸素消去剤の代わりに純水０．１ｍＬを用いたコントロールの溶液を作成した。
【００５０】
上記試験液及びコントロール溶液に、キサンチンオキシダーゼを１μＬ／ｍＬ濃度で含有する緩衝液Ａを０．２ｍＬ加えて撹拌した後、３７℃で３０分インキュベーションした。ブランクとして、上記と同様に調整された試験液及びコントロール溶液に、キサンチンオキシダーゼを含まない緩衝液Ａを０．２ｍＬ加え、上記と同様に処理した溶液を用意した。
【００５１】
この様にして得られた各溶液のそれぞれに、３０μＭのＮ−１−ナフチルエチレンジアミン塩酸塩、３ｍＭのスルファニル酸、２５％氷酢酸混液２ｍＬを加え、３０分間室温で放置した後、各溶液について５５０ｎｍの吸光度で活性酸素の発生量を、２９５ｎｍの吸光度で尿酸の発生量を測定した。
【００５２】
得られた値を用いて、以下の式に基づき、活性酸素消去活性値を算出した。
【００５３】
【数１】
活性酸素発生率＝［（Ａ550-3−Ａ550-4）／（Ａ550-1−Ａ550-2）］×１００
尿酸生成率＝［（Ａ295-3−Ａ295-4）／（Ａ295-1−Ａ295-2）］×１００
活性酸素消去活性＝１００−（活性酸素発生率／尿酸生成率）×１００
但し、式中の記号は、表１に示す条件で調整された各溶液の吸光度の値とする。
【００５４】
【表１】
0003665360.tif 000012
【００５５】
更に、上記方法で得られた活性酸素消去活性値を非線形最小自乗法プログラムにかけ、ＩＣ50値（Ｍ）を算出した。結果を表２に示す。
【００５６】
【表２】
0003665360.tif 000013
【００５７】
この結果から明らかなように、本発明の活性酸素消去剤として用いる上記９種類の化合物は何れもＩＣ50値が極めて低く、低濃度でも優れた活性酸素消去活性を有していることがわかる。
【００５８】
本発明の活性酸素消去剤及びこれを含有する化粧料、医薬品、食品等の組成物は、その有効成分である２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴ、コニフェリルアルコールから選ばれる化合物及び／又はその生理的に許容される塩の優れた活性酸素消去作用により、上述したような活性酸素が関与しているとされている、シワの形成、体臭の発生、脱毛、炎症、老人性痴呆、心筋梗塞等の虚血性疾患、あるいはアレルギー性疾患、肝臓障害、リューマチ等様々な疾病の治療や皮膚などの生体老化の改善に対して有効に働くものである。
【００５９】
また、本発明の活性酸素消去剤及びこれを含有する化粧料、医薬品、食品等の組成物は、上記疾病や生体老化の予防のためにも有効に使用できる。これは、活性酸素消去作用を有する成分を、予め生体内に存在させることにより、生体内で発生した活性酸素を素早く消去し、無毒化することができるためである。
【００６０】
【実施例】
以下に、２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド、プロトカテキン酸、アセトシリンゴ、コニフェリルアルコールから選ばれる化合物を活性酸素消去剤として含有する食品、医薬品、化粧料等の本発明の組成物の実施例を説明する。なお、以下に用いる配合量は、特にことわりのない限りすべて重量部である。
【００６１】
また、本発明の実施例に活性酸素消去剤として配合した２，６−ジメトキシフェノール、シリンゴ酸、カフェー酸、ピロガロール、メチルシナペート、シリングアルデヒド及びコニフェリルアルコールは、全てアルドリッチ製のものであった。
【００６２】
【実施例１】
キャンディー
表３のＡ成分を１５０℃で加熱溶解し１２０℃に冷却した後、Ｂ成分を添加し撹拌して均一にした。これを成形した後、冷却してキャンディーを得た。
【００６３】
【表３】
0003665360.tif 000014
【００６６】
【実施例２〜４】
ジュース
表４の成分をよく撹拌可溶化し、滅菌、無菌充填、密閉してジュースを製造した。
【００６７】
【表４】
0003665360.tif 000015
【００６８】
【実施例５】
ホットケーキ
表５の成分をよく混ぜ合わせ、油を引いたフライパンで焼き上げてホットケーキを作製した。
【００６９】
【表５】
0003665360.tif 000016
【００７０】
【実施例６】
顆粒剤
表６のＡ成分をよく混合し、これに１００ｍＬの２０％エタノール水溶液に溶解したＢ成分を練合しながら徐々に加え造粒した。これを４０℃で２昼夜送風乾燥し、篩過、整粒し顆粒剤を得た。
【００７１】
【表６】
0003665360.tif 000017
【００７４】
【実施例７、８】
化粧水
表７の成分を室温で撹拌可溶化し、化粧水を得た。
【００７５】
【表７】
0003665360.tif 000018
【００７６】
【実施例９、１０】
乳液
表８のＡ成分、Ｂ成分、Ｃ成分をそれぞれ８０℃で加熱溶解し、Ａ成分にＢ成分を加え、更にＣ成分を加え粗乳化し、ホモゲナイザーで均一に乳化し冷却して乳液を得た。
【００７７】
【表８】
0003665360.tif 000019
【００７８】
【実施例１１】
クリーム
表９のＡ成分、Ｂ成分、Ｃ成分をそれぞれ８０℃に加熱溶解し、Ａ成分にＢ成分を加え、更にＣ成分を加え、乳化し冷却してクリームを得た。
【００７９】
【表９】
0003665360.tif 000020
【００８０】
【発明の効果】
本発明の活性酸素消去剤は活性酸素消去作用に優れ、更に安全性も高い。従って、これを配合した化粧料、医薬品、食品、あるいは飲料等の組成物は活性酸素が関与する疾患の予防と治療に長期にわたって有効に使用することができる。