【手続補正書】
【提出日】令和3年10月21日(2021.10.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性化された状態で、第１標的及び第２標的に結合する、多重特異的活性化可能抗体であって、ここで、前記第１標的がＣＤ３のイプシロン鎖（ＣＤ３ε）であり、かつ前記第２標的がＥＧＦＲであり、前記多重特異的活性化可能抗体が：
ＣＤ３εに特異的に結合する第１抗体又はその抗原結合フラグメント（ＡＢ１）、及び、ＥＧＦＲに結合する第２抗体又はその抗原結合フラグメント（ＡＢ２）［ここで、前記ＡＢ１が、アミノ酸配列ＫＹＡＭＮ（配列番号８５０）を含むＶＨ  ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＤ（配列番号５４）を含むＶＨ  ＣＤＲ２；アミノ酸配列ＨＧＮＦＧＮＳＹＩＳＹＷＡＹ（配列番号８５１）を含むＶＨ  ＣＤＲ３；アミノ酸配列ＧＳＳＴＧＡＶＴＳＧＹＹＰＮ（配列番号８４７）を含むＶＬ  ＣＤＲ１；アミノ酸配列ＧＴＫＦＬＡＰ（配列番号８４８）を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及びアミノ酸配列ＡＬＷＹＳＮＲＷＶ（配列番号８４９）を含むＶＬ  ＣＤＲ３を含む］；
前記多重特異的活性化可能抗体が未切断状態にある場合に、前記ＡＢ１のＣＤ３εへの結合を阻害するマスキング部分（ＭＭ１）；
前記ＡＢ１にカップリングされた切断可能部分（ＣＭ１）であって、ここで前記ＣＭ１はプロテアーゼの基質として機能するポリペプチドである、切断可能部分（ＣＭ１）、
前記多重特異的活性化可能抗体が未切断状態にある場合に、前記ＡＢ２の前記第２標的への結合を阻害するマスキング部分（ＭＭ２）；及び
前記ＡＢ２にカップリングされた切断可能部分（ＣＭ２）であって、ここで前記ＣＭ２はプロテアーゼの基質として機能するポリペプチドである、切断可能部分（ＣＭ２）
を含む、多重特異的活性化可能抗体。
【請求項２】
前記ＭＭ１が、配列番号３７１〜３９１から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項３】
前記ＡＢ２が、以下：ＮＹＧＶＨ（配列番号９４）のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；ＶＩＷＳＧＧＮＴＤＹＮＴＰＦＴＳ（配列番号９５）のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；ＡＬＴＹＹＤＹＥＦＡＹ（配列番号９６）のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３；ＲＡＳＱＳＩＧＴＮＩＨ（配列番号９７）のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；ＫＹＡＳＥＳＩＳ（配列番号９８）のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；ＱＱＮＮＮＷＰＴＴ（配列番号９９）のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３、を含む、請求項１に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項４】
多重特異的活性化可能抗体が、少なくとも１つの以下の特徴：
（ａ）前記ＡＢ１の抗原結合フラグメントが、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ｓｃＦｖ、及びｓｃＡｂから成る群から選択される；
（ｂ）前記ＭＭ１が、前記多重特異的活性化可能抗体が切断された状態にある場合、前記第１標的へ結合する前記ＡＢ１を妨害しないか、又は競合しない；
（ｃ）前記ＭＭ１が４０個以下の長さのアミノ酸のポリペプチドである；
（ｄ）前記ＭＭ１ポリペプチド配列が、前記第１標的とは異なる；
（ｅ）前記ＣＭ１が１５個までの長さのアミノ酸のポリペプチドである；
（ｆ）前記ＣＭ１が、以下：
ADAMS、ADAMTS、ADAM8、ADAM9、ADAM10、ADAM12、ADAM15、ADAM17/TACE、ADAMDEC1、ADAMTS1、ADAMTS4、ADAMTS5、アスパラギン酸プロテアーゼ、BACE、レニン、アスパラギン酸カテプシン、カテプシンD、カテプシンE、カスパーゼ、カスパーゼ1、カスパーゼ2、カスパーゼ3、カスパーゼ4、カスパーゼ5、カスパーゼ6、カスパーゼ7、カスパーゼ8、カスパーゼ9、カスパーゼ10、カスパーゼ14、システインカテプシン、カテプシンB、カテプシンC、カテプシンK、カテプシンL、カテプシンS、カテプシンV/L2、カテプシンX/Z/P、システインプロテイナーゼ、クルジパイン、レグマイン、オツバシン-2（Otubain-2）、KLKs、KLK4、KLK5、KLK6、KLK7、KLK8、KLK10、KLK11、KLK13、KLK14、メタロプロテイナーゼ、メプリン、ネプリライシン、PSMA、BMP-1、MMPs、MMP1、MMP2、MMP3、MMP7、MMP8、MMP9、MMP10、MMP11、MMP12、MMP13、MMP14、MMP15、MMP16、MMP17、MMP19、MMP20、MMP23、MMP24、MMP26、MMP27、セリンプロテアーゼ、活性化プロテインC、カテプシンA、カテプシンG、キマーゼ、凝固因子プロテアーゼ、FVIIa、FIXa、FXa、FXIa、FXIIa、エラスターゼ、グランザイムB、グアニジノベンゾエターゼ、HtrA1、ヒト好中球エラスターゼ、ラクトフェリン、マラプシン(Marapsin)、NS3/4A、PACE4、プラスミン、PSA、tPA、トロンビン、トリプターゼ、uPA、II型トランスメンブラン、セリンプロテアーゼ(TTSPs)、DESC1、DPP-4、FAP、ヘプシン、マトリプターゼ-2、MT-SP1/マトリプターゼ、TMPRSS2、TMPRSS3、及びTMPRSS4、
に示されるプロテアーゼから成る群から選択されるプロテアーゼの基質である；
（ｇ）前記ＣＭ１が、配列番号６７〜８６、３２１〜３４１、及び８９６〜９２６から成る群から選択されるアミノ酸を含む；
（ｈ）前記多重特異的活性化可能抗体が、前記ＭＭ１と前記ＣＭ１との間に結合ペプチドを含む；
（ｉ）前記多重特異的活性化可能抗体が、前記ＣＭ１と前記ＡＢ１との間に結合ペプチドを含む、
を有する、請求項１から３のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項５】
多重特異的活性化可能抗体が、少なくとも１つの以下の特徴：
（ａ）前記ＡＢ２の抗原結合フラグメントが、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ｓｃＦｖ、及びｓｃＡｂから成る群から選択される；
（ｂ）前記ＭＭ２が、多重特異的活性化可能抗体が切断された状態にある場合、前記標的へ結合する前記ＡＢ２を妨害しないか、又は競合しない；
（ｃ）前記ＭＭ２が、４０個以下の長さのアミノ酸のポリペプチドである；
（ｄ）前記ＭＭ２ポリペプチド配列が、前記第２標的とは異なる；
（ｅ）前記ＣＭ２が、１５個までの長さのアミノ酸のポリペプチドである；
（ｆ）前記ＣＭ２が、以下：
ADAMS、ADAMTS、ADAM8、ADAM9、ADAM10、ADAM12、ADAM15、ADAM17/TACE、ADAMDEC1、ADAMTS1、ADAMTS4、ADAMTS5、アスパラギン酸プロテアーゼ、BACE、レニン、アスパラギン酸カテプシン、カテプシンD、カテプシンE、カスパーゼ、カスパーゼ1、カスパーゼ2、カスパーゼ3、カスパーゼ4、カスパーゼ5、カスパーゼ6、カスパーゼ7、カスパーゼ8、カスパーゼ9、カスパーゼ10、カスパーゼ14、システインカテプシン、カテプシンB、カテプシンC、カテプシンK、カテプシンL、カテプシンS、カテプシンV/L2、カテプシンX/Z/P、システインプロテイナーゼ、クルジパイン、レグマイン、オツバシン-2（Otubain-2）、KLKs、KLK4、KLK5、KLK6、KLK7、KLK8、KLK10、KLK11、KLK13、KLK14、メタロプロテイナーゼ、メプリン、ネプリライシン、PSMA、BMP-1、MMPs、MMP1、MMP2、MMP3、MMP7、MMP8、MMP9、MMP10、MMP11、MMP12、MMP13、MMP14、MMP15、MMP16、MMP17、MMP19、MMP20、MMP23、MMP24、MMP26、MMP27、セリンプロテアーゼ、活性化プロテインC、カテプシンA、カテプシンG、キマーゼ、凝固因子プロテアーゼ、FVIIa、FIXa、FXa、FXIa、FXIIa、エラスターゼ、グランザイムB、グアニジノベンゾエターゼ、HtrA1、ヒト好中球エラスターゼ、ラクトフェリン、マラプシン(Marapsin)、NS3/4A、PACE4、プラスミン、PSA、tPA、トロンビン、トリプターゼ、uPA、II型トランスメンブラン、セリンプロテアーゼ(TTSPs)、DESC1、DPP-4、FAP、ヘプシン、マトリプターゼ-2、MT-SP1/マトリプターゼ、TMPRSS2、TMPRSS3、及びTMPRSS4、
に示されるプロテアーゼから成る群から選択されるプロテアーゼの基質である；
（ｇ）前記ＣＭ２が、配列番号６７〜８６、３２１〜３４１、及び８９６〜９２６から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む；
（ｈ）前記多重特異的活性化可能抗体が、前記ＭＭ２と前記ＣＭ２との間に結合ペプチドを含む；及び
（ｉ）前記多重特異的活性化可能抗体が、前記ＣＭ２と前記ＡＢ２との間に結合ペプチドを含む、
を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項６】
前記プロテアーゼが、組織においてＣＤ３εを発現する細胞に近接する腫瘍により生成される、及び／又は組織において前記第２標的と共局在される腫瘍により生成されるものであって、ここで、前記プロテアーゼは、前記多重特異的活性化可能抗体が前記プロテアーゼに暴露される場合、前記多重特異的活性化可能抗体における前記ＣＭ１又はＣＭ２を切断する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項７】
前記多重特異的活性化可能抗体が、第１結合ペプチド（ＬＰ１）と第２結合ペプチド（ＬＰ２）とを含み、ここで；
（ａ）未切断状態における前記多重特異的活性化可能抗体が、次のようなＮ−末端からＣ−末端への構造配置：ＭＭ１−ＬＰ１−ＣＭ１−ＬＰ２−ＡＢ１を有する；
（ｂ）ＬＰ１及びＬＰ２が互いに同一ではない；
（ｃ）ＬＰ１及びＬＰ２のそれぞれが、１〜２０個の長さのアミノ酸のペプチドである；及び／又は
（ｄ）ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つが、（ＧＳ）ｎ、（ＧＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５９）及び（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号６０）、ＧＧＳＧ（配列番号６１）、ＧＧＳＧＧ（配列番号６２）、ＧＳＧＳＧ（配列番号６３）、ＧＳＧＧＧ（配列番号６４）、ＧＧＧＳＧ（配列番号６５）、及びＧＳＳＳＧ（配列番号６６）（式中、ｎは少なくとも１の整数である）から成る群から選択されたアミノ酸配列を含む、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項８】
前記多重特異的活性化可能抗体が、第１結合ペプチド（ＬＰ１）と第２結合ペプチド（ＬＰ２）とを含み、ここで：
（ａ）未切断状態における前記多重特異的活性化可能抗体が、次のようなＮ−末端からＣ−末端への構造配置：ＭＭ２−ＬＰ１−ＣＭ２−ＬＰ２−ＡＢ２を有する；
（ｂ）ＬＰ１及びＬＰ２が互いに同一ではない；
（ｃ）ＬＰ１及びＬＰ２のそれぞれが、１〜２０個の長さのアミノ酸のペプチドである；及び／又は
（ｄ）ＬＰ１又はＬＰ２の少なくとも１つが、（ＧＳ）ｎ、（ＧＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号５９）及び（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号６０）、ＧＧＳＧ（配列番号６１）、ＧＧＳＧＧ（配列番号６２）、ＧＳＧＳＧ（配列番号６３）、ＧＳＧＧＧ（配列番号６４）、ＧＧＧＳＧ（配列番号６５）、及びＧＳＳＳＧ（配列番号６６）（式中、ｎは少なくとも１の整数である）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む、
請求項１〜７のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項９】
前記多重特異的活性化可能抗体が、少なくとも１つの以下の特徴：
（ａ）前記ＡＢ１が、配列番号２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（Ｌｖ）を含む；
（ｂ）前記ＡＢ１及び／又はＡＢ２が、ｓｃＦｖフラグメントを含む；
（ｃ）前記ＡＢ１が、ｓｃＦｖフラグメントを含む；
（ｄ）前記ＡＢ１が、配列番号４４６、４６２、５２４及び５２６から成る群から選択される重鎖配列含む；及び
（ｅ）前記ＡＢ１が、配列番号５８７のアミノ酸配列を含む、
を有する、請求項１〜８の何れか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項１０】
前記多重特異的活性化可能抗体が、Ｆｃドメインを含む、請求項１〜９の何れか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項１１】
ＡＢ１及びＡＢ２の少なくとも１つに結合された剤を含み、
ここで前記剤が、治療剤、抗腫瘍剤、トキシン又はそのフラグメント、検出可能成分又は診断剤である、及び／又は、前記剤が、リンカーを介してＡＢ１及びＡＢ２の少なくとも１つに結合されており、ここで前記リンカーが、切断可能リンカー又は非切断可能リンカーである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項１２】
前記多重特異的活性化可能抗体が、二重特異的である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体。
【請求項１３】
請求項１〜１２の何れか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体、及び担体を含む医薬組成物。
【請求項１４】
追加の剤を含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記追加の剤が治療剤である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体をコードする単離された核酸分子。
【請求項１７】
請求項１６に記載の単離された核酸分子を含むベクター。
【請求項１８】
少なくともＣＤ３のイプシロン鎖（ＣＤ３ε）を特異的に結合する多重特異的活性化可能抗体の生成方法であって、前記方法が、多重特異的活性化可能抗体の発現をもたらす条件下で、細胞を培養することを含むものであって、ここで、前記細胞が、請求項１６に記載の単離された核酸分子又は請求項１７に記載のベクターを含む、方法。
【請求項１９】
癌の治療に使用するための、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体、又は請求項１８に従って産生される多重特異的活性化可能抗体、又は請求項１３から１５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
対象における障害に関連する臨床適応症の症状を緩和するための医薬の製造における、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の多重特異的活性化可能抗体、又は請求項１８に従って産生される多重特異的活性化可能抗体、又は請求項１３から１５のいずれか１項に記載の医薬組成物の使用。
【請求項２１】
前記対象がヒトである、請求項１９及び２０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２２】
前記障害が癌である、請求項２０又は２１に記載の使用。