【手続補正書】
【提出日】令和2年10月19日(2020.10.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）第１の重鎖ポリペプチド（Ｈ１）及び第１の軽鎖ポリペプチド（Ｌ１）を含む、第１の抗原に結合する第１の重鎖／軽鎖対と、ｂ）第２の重鎖ポリペプチド（Ｈ２）及び第２の軽鎖ポリペプチド（Ｌ２）を含む、第２の抗原に結合する第２の重鎖／軽鎖対と、を含み、各Ｈ１及びＨ２が、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び重鎖定常ドメイン（ＣＨ１）を含み、各Ｌ１及びＬ２が、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）及び軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）を含み；
Ｈ１のＣＨ１ドメインが、Ｓ１８３（ＥＵ付番）におけるアミノ酸置換を含み、Ｌ１のＣＬドメインが、Ｖｌ３３（ＥＵ付番）におけるアミノ酸置換を含み；
Ｈ１のＶＨドメインが、Ｑ３９の位置におけるアミノ酸置換を含み、Ｌ１のＶＬドメインが、Ｑ３８の位置（Ｋａｂａｔ付番）におけるアミノ酸置換を含み、かつ／又はＨ２のＶＨドメインが、Ｑ３９の位置におけるアミノ酸置換を含み、Ｌ２のＶＬドメインが、Ｑ３８の位置（Ｋａｂａｔ付番）におけるアミノ酸置換を含む
多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項２】
Ｓ１８３置換は、Ｓ１８３Ａ、Ｓ１８３Ｔ、Ｓ１８３Ｖ、Ｓ１８３Ｙ、Ｓ１８３Ｆ、Ｓ１８３Ｈ、Ｓ１８３Ｎ、Ｓ１８３Ｄ、Ｓ１８３Ｅ、Ｓ１８３Ｒ及びＳ１８３Ｋからなる群から選択され、並びにＶｌ３３置換は、Ｖ１３３Ｅ、Ｖ１３３Ｓ、Ｖ１３３Ｌ、Ｖ１３３Ｗ、Ｖ１３３Ｋ、Ｖ１３３Ｒ及びＶ１３３Ｄからなる群から選択される、請求項１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項３】
Ｈ１のＣＨ１ドメイン上のＳ１８３におけるアミノ酸が、正荷電残基に置き換えられ、Ｌ１のＣＬドメイン上のＶ１３３におけるアミノ酸が、負荷電残基に置き換えられる；又は
Ｈ１のＣＨ１ドメイン上のＳ１８３におけるアミノ酸が、負荷電残基に置き換えられ、Ｌ１のＣＬドメイン上のＶ１３３におけるアミノ酸が、正荷電残基に置き換えられる、請求項２に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項４】
前記正荷電残基が、Ｒ及びＫから成る群から選択され、前記負荷電残基が、Ｄ及びＥから成る群から選択される、請求項３に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項５】
ＣＨ１ドメインが、Ｓ１８３（ＥＵ付番）でのアミノ酸置換からなり、Ｌ１のＣＬドメインが、Ｖ１３３（ＥＵ付番）でのアミノ酸置換からなる、請求項１に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項６】
Ｈ２のＣＨ１ドメインが、Ｓ１８３（ＥＵ付番）でのアミノ酸置換を含み、Ｌ２のＣＬドメインが、Ｖ１３３（ＥＵ付番）でのアミノ酸置換を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項７】
Ｓ１８３置換が、Ｓ１８３Ａ、Ｓ１８３Ｔ、Ｓ１８３Ｖ、Ｓ１８３Ｙ、Ｓ１８３Ｆ、Ｓ１８３Ｈ、Ｓ１８３Ｎ、Ｓ１８３Ｄ、Ｓ１８３Ｅ、Ｓ１８３Ｒ、及びＳ１８３Ｋから成る群から選択され、Ｖ１３３置換が、Ｖ１３３Ｅ、Ｖ１３３Ｓ、Ｖ１３３Ｌ、Ｖ１３３Ｗ、Ｖ１３３Ｋ、Ｖ１３３Ｒ、及びＶ１３３Ｄから成る群から選択される、請求項６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項８】
（ａ）Ｈ１のＣＨドメイン中のＳ１８３におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられ、Ｌ１のＣＬドメイン中のＶ１３３におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられ、かつ／またはＨ２のＣＨドメイン中のＳ１８３におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられ、Ｌ２のＣＬドメイン中のＶ１３３におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられるか；または
（ｂ）Ｈ１のＣＨドメイン中のＳ１８３におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられ、Ｌ１のＣＬドメイン中のＶ１３３におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられ、かつ／またはＨ２のＣＨドメイン中のＳ１８３におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられ、Ｌ２のＣＬドメイン中のＶ１３３におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられる、
請求項７に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項９】
前記正荷電残基が、Ｒ及びＫから成る群から選択され、前記負荷電残基が、Ｄ及びＥから成る群から選択される、請求項８に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１０】
Ｈ２のＣＨ１ドメインが、Ｓ１８３（ＥＵ付番）でのアミノ酸置換からなり、Ｌ２のＣＬドメインが、Ｖ１３３（ＥＵ付番）でのアミノ酸置換からなる、請求項６に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１１】
（ａ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ａ１４１Ｉ、Ｆ１７０Ｓ、Ｓ１８１Ｍ、Ｓ１８３Ｖ及びＶ１８５Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１６Ａ、Ｖ１３３Ｉ、Ｌ１３５Ｖ、Ｓ１６２Ｍ、Ｓ１７４Ａ、Ｓ１７６Ｆ及びＴ１７８Ｖ変異を含むか；
（ｂ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ａ１４１Ｉ、Ｆ１７０Ｓ、Ｓ１８１Ｍ、Ｓ１８３Ａ及びＶ１８５Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１６Ａ、Ｓ１３１Ｄ、Ｌ１３５Ｖ、Ｓ１６２Ａ、Ｓ１７４Ａ、Ｓ１７６Ｆ及びＴ１７８Ｉ変異を含むか；
（ｃ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ａ１４１１、Ｆ１７０Ｓ、Ｓ１８１Ｍ、Ｓ１８３Ａ及びＶｌ８５Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１６Ａ、Ｌ１３５Ｖ、Ｓ１７４Ａ、Ｓ１７６Ｆ及びＴ１７８Ｖ変異を含むか；
（ｄ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ａ１４１１、Ｆ１７０Ａ、Ｓ１８１Ｍ、Ｓ１８３Ｖ及びＶ１８５Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１６Ａ、Ｌ１３５Ｖ、Ｓ１６２Ｍ、Ｓ１７４Ａ、Ｓ１７６Ｆ及びＴ１７８Ｖ変異を含むか；
（ｅ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ｌ１２８Ｆ、Ａ１４１Ｍ、Ｆｌ７０Ｍ、Ｓ１８１１及びＳ１８３Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１８Ｖ、Ｓ１３１Ｔ、Ｖ１３３Ａ、Ｌ１３５Ｙ、Ｓ１６２Ａ，Ｔ１６４Ｓ、Ｓ１７６Ｍ及びＴ１７８Ｌ変異を含むか；
（ｆ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ｌ１２８Ｆ、Ａ１４１Ｍ、Ｆ１７０Ｙ、Ｓ１８１Ｉ、Ｓ１８３Ａ及びＶ１８５Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１８Ｖ、Ｓ１３１Ｔ、Ｖ１３３Ａ、Ｌ１３５Ｆ、Ｓ１６２Ａ、Ｓ１７６Ａ及びＴ１７８Ｌ変異を含むか；
（ｇ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ｌ１２８Ｆ、Ａ１４１Ｔ、Ｆ１７０Ｍ、Ｓ１８１Ｔ、Ｓ１８３Ａ及びＶ１８５Ｌ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１８Ｖ、Ｓ１３１Ｔ、Ｖ１３３Ａ、Ｌ１３５Ｆ、Ｓ１６２Ａ、Ｔ１６４Ｓ、Ｓ１７６Ｔ及びＴ１７８Ｌ変異を含むか；又は
（ｈ）Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ｌ１２８Ｆ、Ａｌ４１Ｍ、Ｆｌ７０Ｍ、Ｓ１８１Ｔ及びＳ１８３Ａ、変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１８Ｖ、Ｓ１３１Ｔ、Ｖ１３３Ａ、Ｌ１３５Ｆ、Ｓ１６２Ｍ、Ｔ１６４Ｓ、Ｓ１７６Ｍ及びＴ１７８Ｌ変異を含む、
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１２】
（ａ）Ｈ１のＶＨドメイン中のＱ３９におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられ、Ｌ１のＶＬドメイン中のＱ３８におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられ、かつ／またはＨ２のＶＨドメイン中のＱ３９におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられ、Ｌ２のＶＬドメイン中のＱ３８におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられるか；または
（ｂ）Ｈ１のＶＨドメイン中のＱ３９におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられ、Ｌ１のＶＬドメイン中のＱ３８におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられ、かつ／またはＨ２のＶＨドメイン中のＱ３９におけるアミノ酸が正荷電残基に置き換えられ、Ｌ２のＶＬドメイン中のＱ３８におけるアミノ酸が負荷電残基に置き換えられる、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１３】
Ｈ１のＶＨドメインが、Ｑ３９Ｋ変異を含み、Ｈ１のＣＨ１ドメインが、Ｓ１８３Ｅ変異を含み、Ｌ１のＶＬドメインが、Ｑ３８Ｅ変異を含み、Ｌ１のＣＬドメインが、Ｖ１３３Ｋ変異を含み、Ｈ２のＶＨドメインが、Ｑ３９Ｅ置換変異を含み、Ｌ２のＶＬドメインが、Ｑ３８Ｋ置換変異を含む、請求項１に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１４】
Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ｓ１８３Ｋ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｖ１３３Ｅ変異を含む、請求項１３に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１５】
Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ａ１４１Ｉ、Ｆ１７０Ｓ、Ｓ１８１Ｍ、Ｓ１８３Ａ及びＶ１８５Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１６Ａ、Ｌ１３５Ｖ、Ｓ１７４Ａ、Ｓ１７６Ｆ及びＴ１７８Ｖ変異を含む、請求項１３に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１６】
Ｈ１のＶＨドメインは、Ｑ３９Ｅ変異を含み、Ｈ１のＣＨ１ドメインは、Ｓ１８３Ｋ変異を含み、Ｌ１のＶＬドメインは、Ｑ３８Ｋ変異を含み、Ｌ１のＣＬドメインは、Ｖ１３３Ｅ変異を含み、Ｈ２のＶＨドメインは、Ｑ３９Ｋ変異を含み、Ｌ２のＶＬドメインは、Ｑ３８Ｅ変異を含む、請求項１に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１７】
Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ｓ１８３Ｅ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｖ１３３Ｋ変異を含む、請求項１６に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１８】
Ｈ２のＣＨ１ドメインは、Ａ１４１Ｉ、Ｆ１７０Ｓ、Ｓ１８１Ｍ、Ｓ１８３Ａ及びＶ１８５Ａ変異を含み、Ｌ２のＣＬドメインは、Ｆ１１６Ａ、Ｌ１３５Ｖ、Ｓ１７４Ａ、Ｓ１７６Ｆ及びＴ１７８Ｖ変異を含む、請求項１６に記載の多特異性抗原結合タンパク質。
【請求項１９】
Ｈ１及び／またはＨ２のそれぞれがＦｃ領域を含み、Ｆｃ領域が、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域、ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域、またはヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域である、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項２０】
Ｈ１及びＨ２のそれぞれが、ＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインを含むＦｃ領域を含み、
ＣＨ３／ＣＨ３界面内で、１個以上のアミノ酸残基が、より大きな側鎖体積を有する１個以上のアミノ酸残基に置き換えられ、それにより、Ｈ２のＣＨ３ドメインと相互作用するＨ１のＣＨ３ドメインの表面上にノブが生成されるように、Ｈ１のＣＨ３ドメインが変更され、かつＣＨ３／ＣＨ３界面内で、１個以上のアミノ酸残基が、より小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基に置き換えられ、それにより、Ｈ１のＣＨ３ドメインと相互作用するＨ２のＣＨ３ドメインの表面上にホールが生成されるように、Ｈ２のＣＨ３ドメインが変更されるか；または
ＣＨ３／ＣＨ３界面内で、１個以上のアミノ酸残基が、より大きな側鎖体積を有する１個以上のアミノ酸残基に置き換えられ、それにより、Ｈ１のＣＨ３ドメインと相互作用するＨ２のＣＨ３ドメインの表面上にノブが生成されるように、Ｈ２のＣＨ３ドメインが変更され、かつＣＨ３／ＣＨ３界面内で、１個以上のアミノ酸残基が、より小さな側鎖体積を有するアミノ酸残基に置き換えられ、それにより、Ｈ２のＣＨ３ドメインと相互作用するＨ１のＣＨ３ドメインの表面上にホールが生成されるように、Ｈ１のＣＨ３ドメインが変更される、
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項２１】
ノブ変異がＴ３６６Ｗ（ＥＵ付番）を含み、かつホール変異が、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ（ＥＵ付番）のうちの少なくとも１つ、少なくとも２つ、または３つ全てを含む、請求項２０に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項２２】
Ｌ１は、ラムダ軽鎖である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項２３】
Ｌ１及びＬ２は、ラムダ軽鎖である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質と、薬学的に許容される担体と、を含む、薬学的組成物。
【請求項２５】
個体における疾患を治療するための、有効量の請求項２４に記載の薬学的組成物を含む医薬。
【請求項２６】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質の少なくとも１つのポリペプチド配列をコードする、単離された核酸（複数可）。
【請求項２７】
請求項２６に記載の核酸（複数可）を含むベクター。
【請求項２８】
請求項２６に記載の核酸（複数可）を含む、単離された宿主細胞。
【請求項２９】
原核宿主細胞、及びＥ．ｃｏｌｉ細胞、真核宿主細胞、酵母細胞、哺乳動物細胞、またはＣＨＯ細胞である、請求項２８に記載の宿主細胞。
【請求項３０】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の多重特異性抗原結合タンパク質の産生方法であって、
（ａ）Ｈ１、Ｌ１、Ｈ２、及びＬ２をコードする一つ以上のポリヌクレオチド分子を宿主細胞に導入することと、
（ｂ）宿主細胞を培養して多重特異性抗原結合タンパク質を産生することと、を含む、方法。
【請求項３１】
多重特異性抗原結合タンパク質を回収することをさらに含む、請求項３０に記載の方法。