【手続補正書】
【提出日】令和3年8月16日(2021.8.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質であって、
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合する第１の抗原結合部位；
（ｂ）ＥＧＦＲ、ＣＣＲ４、またはＰＤ−Ｌ１に結合する第２の抗原結合部位；および
（ｃ）抗体ＦｃドメインもしくはＣＤ１６に結合するのに十分なその一部またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位
を含む、タンパク質。
【請求項２】
前記第１の抗原結合部位がヒトおよびカニクイザルのＮＫＧ２Ｄに結合する、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項３】
タンパク質であって、
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合するＦａｂ断片を含む第１の抗原結合部位；
（ｂ）ＥＧＦＲに結合する単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む第２の抗原結合部位；および
（ｃ）抗体ＦｃドメインもしくはＣＤ１６に結合するのに十分なその一部またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位
を含む、タンパク質。
【請求項４】
前記ｓｃＦｖが、Ａｌａ−Ｓｅｒを含むヒンジを介して前記抗体ＦｃドメインもしくはＣＤ１６に結合するのに十分なその一部、またはＣＤ１６に結合する前記第３の抗原結合部位に連結しており、ここで、前記ｓｃＦｖが重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項３に記載のタンパク質。
【請求項５】
ａ）前記ｓｃＦｖが前記抗体Ｆｃドメインに連結している、
ｂ）前記ｓｃＦｖの前記重鎖可変ドメインが、前記ｓｃＦｖの前記軽鎖可変ドメインとジスルフィド架橋を形成している、または
ｃ）前記ｓｃＦｖが、可動性リンカーである（ＧｌｙＧｌｙＧｌｙＧｌｙＳｅｒ）４を介して軽鎖可変ドメインに連結された重鎖可変ドメインを含む、
請求項４に記載のタンパク質。
【請求項６】
前記ジスルフィド架橋が、前記重鎖可変ドメイン由来のＣ４４と前記軽鎖可変ドメイン由来のＣ１００との間に形成されている、請求項５に記載のタンパク質。
【請求項７】
前記ｓｃＦｖの前記重鎖可変ドメインが、（ＧｌｙＧｌｙＧｌｙＧｌｙＳｅｒ）４を含む可動性リンカーを介して前記ｓｃＦｖの前記軽鎖可変ドメインに連結している、請求項１〜６のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項８】
前記ｓｃＦｖの前記軽鎖可変ドメインが、前記ｓｃＦｖの前記重鎖可変ドメインのＮ末端に配置されている、請求項４〜７のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項９】
前記Ｆａｂが前記抗体Ｆｃドメインに連結している、請求項３〜８のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１０】
配列番号２６４、配列番号２６５、配列番号２６６、配列番号２６７、配列番号２６８、および配列番号２６９から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３〜９のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１１】
配列番号２６４、配列番号２６５、配列番号２６６、配列番号２６７、配列番号２６８、および配列番号２６９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の配列を含む、請求項４〜９のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１２】
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、および配列番号５９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１３】
前記第１の抗原結合部位が、
ａ）配列番号４１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列および配列番号４２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列、
ｂ）配列番号４９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列および配列番号５０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列、
ｃ）配列番号５７と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列および配列番号５８と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列、
ｄ）配列番号５９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列および配列番号６０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列、
ｅ）配列番号１０１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列および配列番号１０２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列、または
ｆ）配列番号１０３と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列および配列番号１０４と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列
を含む、請求項１〜１１のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１４】
前記第１の抗原結合部位が、
ａ）配列番号１０５のアミノ酸配列と同一の重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲ１）配列、配列番号１０６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１０７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、
ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号４４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号４５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号４６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号４７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号４８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｃ）配列番号５１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号５２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号５３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号５４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号５５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番５６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｄ）配列番号１３４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１３５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１３６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１３７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１３８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番１３９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
請求項１〜１１のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１５】
ａ）前記第２の抗原結合部位がＥＧＦＲに結合し、且つ、
ｉ）配列番号１５１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１５２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｉｉ）配列番号１５３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１５４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｉｉｉ）配列番号１５５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１５６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｉｖ）配列番号１５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１５８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｖ）配列番号１５９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１６０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｖｉ）配列番号１６１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｖｉｉ）配列番号１６３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１６４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｖｉｉｉ）配列番号２１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１０９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｉｘ）配列番号１１３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｘ）配列番号１２１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１２５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｘｉ）配列番号１２９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１３３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、または
ｘｉｉ）配列番号１４３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１４７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、
ｂ）前記第２の抗原結合部位がＰＤ−Ｌ１に結合し、且つ、
ｉ）配列番号１６７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１７１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｉｉ）配列番号１７５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１７９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、または
ｉｉｉ）配列番号１８３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１８７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、または
ｃ）前記第２の抗原結合部位がＣＣＲ４に結合し、且つ、
ｉ）配列番号１９２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号１９６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、
ｉｉ）配列番号２００と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号２０４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、または
ｉｉｉ）配列番号２０８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、配列番号２１２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む、
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１６】
ａ）前記第２の抗原結合部位がＥＧＦＲに結合し、且つ、
ｉ）配列番号２１８のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２１９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２２０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１１０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１１１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１１２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｉｉ）配列番号１１４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１１５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１１６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１１８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１１９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１２０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｉｉｉ）配列番号１２２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１２３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１２４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１２６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１２７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１２８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｉｖ）配列番号１３０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１３１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１３２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１４０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１４１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１４２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｖ）配列番号１４４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１４５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１４６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１４８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１４９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１５０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｖｉ）配列番号２２１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２２２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２２３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号２２４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２２５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２２６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｖｉｉ）配列番号２２７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２２８のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２２９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号２３０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２３１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２３２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｖｉｉｉ）配列番号２３９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２４０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２４１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号２４２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２４３のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２４４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、または
ｘｉ）配列番号２５７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２５８のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２５９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号２６０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２６１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２６２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列を含む、
ｂ）前記第２の抗原結合部位がＰＤ−Ｌ１に結合し、且つ、
ｉ）配列番号１６８のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１６９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１７０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１７２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１７３のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１７４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｉｉ）配列番号１７６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１７７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１７８のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１８０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１８１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１８２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、または
ｉｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１８５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１８６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１８８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１８９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１９０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、または
ｃ）前記第２の抗原結合部位がＣＣＲ４に結合し、且つ、
ｉ）配列番号１９３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１９４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１９５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１９７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１９８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１９９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、
ｉｉ）配列番号２０１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２０２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２０３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号２０５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２０６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２０７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列、または
ｉｉｉ）配列番号２０９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２１０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２１１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号２１３のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２１４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、配列番号２１５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列を含む、
請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１７】
前記第１または第２の抗原結合部位が単一ドメイン抗体を含む、請求項１または２に記載のタンパク質。
【請求項１８】
前記第１または第２の抗原結合部位の前記単一ドメイン抗体が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片を含む、請求項１７に記載のタンパク質。
【請求項１９】
（ｉ）前記第１の抗原結合部位または（ｉｉ）前記第２の抗原結合部位の重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインが、同一のポリペプチド上に存在する、請求項１〜１６のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項２０】
前記抗体Ｆｃドメインが、
ａ）ヒンジおよびＣＨ２ドメイン、
ｂ）ヒトＩｇＧ１抗体のヒンジおよびＣＨ２ドメイン、
ｃ）ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列、
ｄ）ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインと少なくとも９０％同一、ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列であって、Ｑ３４７、Ｙ３４９、Ｌ３５１、Ｓ３５４、Ｅ３５６、Ｅ３５７、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｓ３６４、Ｔ３６６、Ｌ３６８、Ｋ３７０、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｄ４０１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｋ４０９、Ｔ４１１、およびＫ４３９からなる群から選択される１またはそれを超える位置で異なるアミノ酸配列
を含む、請求項１〜１９のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項２１】
前記タンパク質が、１０ｎＭのＫＤまたはそれより弱い親和性でＮＫＧ２Ｄに結合する、請求項１〜２０のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項２２】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載のタンパク質および薬学的に許容され得る担体を含む製剤。
【請求項２３】
請求項１〜２１のいずれか１項に記載のタンパク質をコードする１またはそれを超える核酸を含む細胞。
【請求項２４】
療法において使用するための、請求項１〜２１のいずれか１項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２２に記載の製剤。
【請求項２５】
腫瘍細胞死を増強する方法において使用するための、請求項１〜２１のいずれか１項に記載のタンパク質を含む組成物であって、前記腫瘍細胞およびナチュラルキラー細胞を、前記組成物に曝露することを含み、ここで、前記腫瘍細胞が、ＥＧＦＲ、ＣＣＲ４、またはＰＤ−Ｌ１のうちの少なくとも１つを発現する、組成物。
【請求項２６】
がんを処置する方法において使用するための、請求項１〜２１のいずれか１項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２２に記載の製剤。
【請求項２７】
ａ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位がＥＧＦＲに結合し、前記がんが、頭頸部がん、結腸直腸がん、非小細胞肺がん、神経膠腫、腎細胞癌、膀胱がん、子宮頸がん、卵巣がん、膵臓がん、および肝臓がんからなる群から選択される、
ｂ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位がＰＤ−Ｌ１に結合し、前記がんが、リンパ腫、白血病、多発性骨髄腫、頭頸部がん、膀胱がん、子宮頸がん、肺がん、腎がん、黒色腫、結腸直腸がん、卵巣がん、膠芽細胞腫、肉腫、および胃がんからなる群から選択される、または
ｃ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位がＣＣＲ４に結合し、前記がんが、成人Ｔ細胞リンパ腫／白血病、末梢Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、慢性リンパ球性白血病、Ｂ細胞悪性疾患、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、成熟Ｔ／ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞新生物、胸腺腫、胃がん、および腎細胞癌からなる群から選択される、
請求項２６に記載の組成物又は製剤。