【手続補正書】
【提出日】令和3年8月2日(2021.8.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含むコンジュゲートであって、
該ＩＬ−２１ムテインは、
配列番号２
ＱＧＱＤＸ  ＨＭＸＸＭ  ＸＸＸＸＸ  ＸＶＤＸＬ  ＫＮＸＶＮ  ＤＬＶＰＥ  ＦＬＰＡＰ  ＥＤＶＥＴ  ＮＣＥＷＳ  ＡＦＳＣＦ  ＱＫＡＱＬ  ＫＳＡＮＴ  ＧＮＮＥＸ  ＸＩＸＸＸ  ＸＸＸＬＸ  ＸＸＸＸＸ  ＴＮＡＧＲ  ＲＱＫＨＲ  ＬＴＣＰＳ  ＣＤＳＹＥ  ＫＫＰＰＫ  ＥＦＬＸＸ  ＦＸＸＬＬ  ＸＸＭＸＸ  ＱＨＸＳＳ  ＲＴＨＧＳ  ＥＤＳ（配列番号２）
のアミノ酸配列を含む、ＩＬ−２１ムテインであって、
配列中、「Ｘ」は、任意のアミノ酸を表し、
前記ＩＬ−２１ムテインアミノ酸配列は、ヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列（配列番号１）と少なくとも１アミノ酸異なる、コンジュゲート。
【請求項２】
ＩＬ−２１ムテインが、ヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列（配列番号１）と７アミノ酸を超えない異なるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３】
ＩＬ−２１ムテインが、ヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列（配列番号１）と３、４、５または６アミノ酸異なるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項４】
ＩＬ−２１ムテインが、ヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列（配列番号１）と１または２アミノ酸異なるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項５】
ＩＬ−２１ムテインのアミノ酸配列と配列番号１のアミノ酸配列との間の相違（複数可）が、（Ａ）配列番号２のアミノ酸１０〜１５（両端を含む）またはアミノ酸１０５〜１２３（両端を含む）内に存在し、任意選択により、前記相違（複数可）は、配列番号２のアミノ酸１１、１４、１５、１０９、１１０、１１２、１１３、１１６、１１９、１２０及び／または１２３に存在する、または（Ｂ）配列番号２のアミノ酸５〜２５（両端を含む）またはアミノ酸６５〜８０（両端を含む）内にあり、任意選択により、前記相違（複数可）は、配列番号２のアミノ酸５、８、９、１２、１３、１６、１９、２３、６５、６６、６９、７０、７２、７３、７５、７６、７７、７８、７９及び／または８０に存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項６】
ＩＬ−２１ムテインが、ヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列（配列番号１）と比較して、１つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項７】
前記アミノ酸置換が、配列番号１の位置５、８、９、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１９、２３、６５、６６、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７５、７６、７７、７８、７９、８０、１０９、１１０、１１２、１１３、１１６、１１７、１１９、１２０または１２３に存在する、請求項６に記載のコンジュゲート。
【請求項８】
ＩＬ−２１ムテインが、
ａ．配列番号１の位置５、８、９、１２、１４、１５、６５、６６、６９、７０、７２、７３、７５、７６、７７、８０、１１６もしくは１１９にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、脂肪族アミノ酸であるか、
ｂ．配列番号１の位置５、８、９、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１９、２３、６５、６６、６９、７０、７２、７３、７５、７６、７７、７８、７９、１１０、１１２、１１６、１１７、１１９、１２０もしくは１２３にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、酸性アミノ酸であるか、
ｃ．配列番号１の位置５、９、７３、７６、１０９、１１３もしくは１１６にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、塩基性アミノ酸であるか、
ｄ．配列番号１の位置５、８、９、７０もしくは７６にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、芳香族アミノ酸であるか、
ｅ．配列番号１の位置５、８、９、１２、１５、７３、７６、１１６もしくは１１９にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、側鎖アミドを含有するアミノ酸であるか、
ｆ．配列番号１の位置５、８、９、１１、１２、１４、１５、７３、７６、１１６もしくは１１９にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、側鎖ヒドロキシルを含む非芳香族アミノ酸であるか、
ｇ．配列番号１の位置６５、６６、６９、７０、７２、７３、７５、７６、７７もしくは８０にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、イミノ酸であるか、
ｈ．配列番号１の位置５、９、１５、７６、１１６もしくは１１９にアミノ酸置換を含み、前記置換アミノ酸は、イオウ含有側鎖を含むアミノ酸であるか、または
ｉ．これらの組み合わせのアミノ酸置換を含む、
請求項１〜７のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項９】
ＩＬ−２１ムテインが、表Ａに従った位置にアミノ酸によるアミノ酸置換を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【表１】
2019033743.tif 000001
【請求項１０】
ＩＬ−２１ムテインが、
（ａ）配列番号３〜２１、２３〜５６、５８〜１１２、１１４〜１９８、２４９〜２５４及び２８３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、または
（ｂ）配列番号１９９〜２０８、２１０〜２２２、２２４〜２４８及び２５５のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、
請求項１〜９のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１１】
ＩＬ−２１ムテインが、ヒトＩＬ−２１のアミノ酸配列（配列番号１）と比較して、２つのアミノ酸置換を含むアミノ酸配列を含み、任意選択により、前記アミノ酸置換が、配列番号１の位置５、８、９、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１９、２３、６５、６６、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７５、７６、７７、７８、７９、８０、１０９、１１０、１１２、１１３、１１６、１１７、１１９、１２０または１２３のうちの２つに存在する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１２】
前記アミノ酸置換が、配列番号１の位置５、９、７３及び７６のうちの２つに存在する、請求項１１に記載のコンジュゲート。
【請求項１３】
ＩＬ−２１ムテインが、以下の（ｉ）から（ｉｖ）のいずれか２つを含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のコンジュゲート、
（ｉ）配列番号１の位置５のアミノ酸が、A, D, E, G, H, I, K, L, M, N, Q, S, T,V及びYからなる群から選択されるアミノ酸である、
（ｉｉ）配列番号１の位置９のアミノ酸が、A, D, E, G, H, I, K, L, M, N, Q, S, T,
V及びYからなる群から選択されるアミノ酸である、
（ｉｉｉ）配列番号１の位置７３のアミノ酸が、A, D, E, G, H, I, N, P, Q, S及びVからなる群から選択されるアミノ酸である、及び
（ｉｖ）配列番号１の位置７６のアミノ酸が、A, D, E, G, H, I, K, L, M, N, P, Q, S,
T, V及びYからなる群から選択されるアミノ酸である。
【請求項１４】
ＩＬ−２１ムテインが、配列番号１の位置５、９または７３にアミノ酸置換を有し、該アミノ酸置換が以下から選択される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【表２】
2019033743.tif 000002
【請求項１５】
ＩＬ−２１ムテインが、配列番号１の位置７６にアミノ酸置換を含み、位置７６における置換アミノ酸が、脂肪族アミノ酸または酸性アミノ酸であり、任意選択により脂肪族アミノ酸はアラニンであり、酸性アミノ酸はグルタミン酸である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１６】
ＩＬ−２１ムテインが、抗体のＦｃに直接結合されている、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１７】
ＩＬ−２１ムテインが、抗体のＦｃにリンカーを介して結合されている、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項１８】
コンジュゲートが単一のＩＬ−２１ムテインを含み、単一のＩＬ−２１ムテインは、２つの抗体重鎖のうちの一方のＣ末端に連結されている、請求項１６または１７に記載のコンジュゲート。
【請求項１９】
コンジュゲートが２つのＩＬ−２１ムテインを含み、第１のＩＬ−２１ムテインは、第１の抗体重鎖のＣ末端に連結され、第２のＩＬ−２１ムテインは、第２の抗体重鎖のＣ末端に連結され、任意選択により第１のＩＬ−２１ムテインが、第２のＩＬ−２１ムテインと同じアミノ酸配列を有する、請求項１６または１７に記載のコンジュゲート。
【請求項２０】
第１のＩＬ−２１ムテインが、第２のＩＬ−２１ムテインと同じアミノ酸配列を有する、請求項１９に記載のコンジュゲート。
【請求項２１】
第１のＩＬ−２１ムテインが、第２のＩＬ−２１ムテインと異なるアミノ酸配列を有する、請求項１９に記載のコンジュゲート。
【請求項２２】
ＩＬ−２１ムテインが配列番号２３３〜２４５のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項１〜２１のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２３】
ＩＬ−２１ムテインが配列番号２４４のアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載のコンジュゲート。
【請求項２４】
ＩＬ−２１ムテインが配列番号２４５のアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載のコンジュゲート。
【請求項２５】
コンジュゲートが、ＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体の融合タンパク質である、請求項１〜２４のいずれか一項に記載のコンジュゲート。
【請求項２６】
融合タンパク質が、
（ｉ）それぞれが配列番号３９１の軽鎖を含む２つの軽鎖、及び
それぞれが配列番号４９８〜５００または５１９のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｉ）それぞれが配列番号３９１の軽鎖を含む２つの軽鎖、
配列番号５０１〜５０６のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖、及び
配列番号５５６〜５５８のいずれか１つの重鎖を含む重鎖、または
（ｉｉｉ）それぞれが配列番号３７１の軽鎖を含む２つの軽鎖、及び
それぞれが配列番号５０８〜５１２のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｖ）それぞれが配列番号３７１の軽鎖を含む２つの軽鎖、
配列番号５１３〜５１８のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖、及び
配列番号５５９〜５６１のいずれか１つのアミノ酸配列を含む重鎖、または
（ｖ）それぞれが配列番号３８９の軽鎖可変領域を含む２つの軽鎖、及び
それぞれが配列番号４９８〜５００または５１９のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｖｉ）それぞれが配列番号３８９の軽鎖可変領域を含む２つの軽鎖、及び
配列番号５０１〜５０６のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖、及び
配列番号５５６〜５５８のいずれか１つの重鎖を含む重鎖、または
（ｖｉｉ）それぞれが配列番号３６９の軽鎖可変領域を含む２つの軽鎖、及び
それぞれが配列番号５０８〜５１２のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｖｉｉｉ）それぞれが配列番号３６９の軽鎖可変領域を含む２つの軽鎖、
配列番号５１３〜５１８のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖、及び
配列番号５５９〜５６１のいずれか１つの重鎖を含む重鎖、または
（ｉｘ）それぞれ配列番号３８９の軽鎖可変領域及び配列番号３９１の軽鎖定常領域を含む２つの軽鎖、及び
それぞれが配列番号４９８〜５００または５１９のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｘ）それぞれ配列番号３８９の軽鎖可変領域及び配列番号３９１の軽鎖定常領域を含む２つの軽鎖、
配列番号５０１〜５０６のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖、及び
配列番号５５６〜５５８のいずれか１つの重鎖を含む重鎖、または
（ｘｉ）それぞれ配列番号３６９の軽鎖可変領域及び配列番号３７１の軽鎖定常領域を含む２つの軽鎖、及び
それぞれが配列番号５０８〜５１２のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｘｉｉ）それぞれ配列番号３６９の軽鎖可変領域及び配列番号３７１の軽鎖定常領域を含む２つの軽鎖、
配列番号５１３〜５１８のいずれか１つのＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖、及び
配列番号５５９〜５６１のいずれか１つの重鎖を含む重鎖、
を含む、請求項２５に記載のコンジュゲート。
【請求項２７】
コンジュゲートが、ＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含む融合タンパク質であり、該融合タンパク質は、
（ｉ）それぞれ配列番号３８５、３８６及び３８７のアミノ酸配列を含むＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２及びＬＣ  ＣＤＲ３をそれぞれ含む２つの軽鎖、
（ｉｉ）それぞれ配列番号３８２、３８３及び３８４のアミノ酸配列を含むＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２及びＨＣ  ＣＤＲ３をそれぞれ含む２つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＩＬ−２１ムテインであって、ＩＬ−２１は抗体重鎖の一つに融合する、
を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項２８】
それぞれの軽鎖が配列番号３８９の軽鎖可変領域を含み、それぞれの重鎖が配列番号３８８の重鎖可変領域を含む、請求項２７に記載のコンジュゲート。
【請求項２９】
コンジュゲートがＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含む融合タンパク質であり、該融合タンパク質は、
（ｉ）それぞれ配列番号３９１の軽鎖を含む、２つの軽鎖、
（ｉｉ）配列番号５５６の重鎖を含む１つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号５０１のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した１つの重鎖、
を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３０】
コンジュゲートが、ＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含む融合タンパク質であり、
（ａ）該融合タンパク質は、
（ｉ）配列番号３８９の軽鎖可変領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、
（ｉｉ）配列番号５５６の重鎖を含む１つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号５０１のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した１つの重鎖、
を含む、または
（ｂ）該融合タンパク質は、
（ｉ）配列番号３８９の軽鎖可変領域及び配列番号３９１の軽鎖定常領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、
（ｉｉ）配列番号５５６の重鎖を含む１つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号５０１のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した１つの重鎖、
を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３１】
コンジュゲートが、ＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含む融合タンパク質であり、
該融合タンパク質は、
（ｉ）配列番号３９１の軽鎖をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号４９９のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｉ）配列番号３８９の軽鎖可変領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号４９９のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｉｉ）配列番号３８９の軽鎖可変領域及び配列番号３９１の軽鎖定常領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号４９９のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｖ）配列番号３９１の軽鎖をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５１９のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｖ）配列番号３８９の軽鎖可変領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５１９のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｖｉ）配列番号３８９の軽鎖可変領域及び配列番号３９１の軽鎖定常領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５１９のアミノ酸配列をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体
を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３２】
コンジュゲートがＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含む融合タンパク質であり、該融合タンパク質は、
（ｉ）それぞれ配列番号３６５、３６６及び３６７のアミノ酸配列を含むＬＣ  ＣＤＲ１、ＬＣ  ＣＤＲ２及びＬＣ  ＣＤＲ３をそれぞれ含む２つの軽鎖、
（ｉｉ）それぞれ配列番号３６２、３６３及び３６４のアミノ酸配列を含むＨＣ  ＣＤＲ１、ＨＣ  ＣＤＲ２及びＨＣ  ＣＤＲ３をそれぞれ含む２つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号２４４のアミノ酸配列を含むＩＬ−２１ムテインであって、ＩＬ−２１は抗体重鎖の一つに融合する、
を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３３】
それぞれの軽鎖が配列番号３６９の軽鎖可変領域を含み、それぞれの重鎖が配列番号３６８の重鎖可変領域を含む、請求項３２に記載のコンジュゲート。
【請求項３４】
コンジュゲートが、ＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含む融合タンパク質であり、
（ａ）該融合タンパク質は、
（ｉ）配列番号３７１の軽鎖をそれぞれ含む２つの軽鎖、
（ｉｉ）配列番号５５９の重鎖を含む１つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号５１３のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した１つの重鎖、
を含み、または
（ｂ）該融合タンパク質は、
（ｉ）配列番号３６９の軽鎖可変領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、
（ｉｉ）配列番号５５９の重鎖を含む１つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号５１３のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した１つの重鎖、
を含み、または
（ｃ）該融合タンパク質は、
（ｉ）配列番号３６９の軽鎖可変領域及び配列番号３７１の軽鎖定常領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、
（ｉｉ）配列番号５５９の重鎖を含む１つの重鎖、及び
（ｉｉｉ）配列番号５１３のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖を含む、ＩＬ−２１ムテインに融合した１つの重鎖、
を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３５】
コンジュゲートが、ＩＬ−２１ムテイン及び抗ＰＤ−１抗体を含む融合タンパク質であり、
該融合タンパク質は、
（ｉ）配列番号３７１の軽鎖をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５０８のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｉ）配列番号３６９の軽鎖可変領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５０８のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｉｉ）配列番号３６９の軽鎖可変領域及び配列番号３７１の軽鎖定常領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５０８のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｉｖ）配列番号３７１の軽鎖をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５１１のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｖ）配列番号３６９の軽鎖可変領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５１１のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、または
（ｖｉ）配列番号３６９の軽鎖可変領域及び配列番号３７１の軽鎖定常領域をそれぞれ含む２つの軽鎖、及び
配列番号５１１のＩＬ−２１ムテインに融合した重鎖をそれぞれ含む、２つの重鎖−ＩＬ−２１ムテイン融合体、
を含む、請求項１に記載のコンジュゲート。
【請求項３６】
請求項１〜３５のいずれか一項に記載のコンジュゲート及び容器を含む、キット。
【請求項３７】
請求項１〜３５のいずれか一項に記載のコンジュゲート、及び薬学的に許容される担体、賦形剤または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項３８】
治療が必要な対象において、対象の治療において使用するための、請求項３７に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
固形腫瘍を有する対象の治療において使用するための、請求項３８に記載の医薬組成物。