(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
4-[1-(5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフチル)エテニル]安息香酸；
3-[3-(5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-アクリル酸；
3-[3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-ブト-2-エン酸；
6-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-シクロプロピル]-ニコチン酸；
3-[3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-アクリル酸；
4-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-カルボニル)-安息香酸；
4-(3-ブロモ-5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルオキシ)-安息香酸；
5-[(E)-2-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-プロペニル]-チオフェン-３-カルボン酸；
3-[3-(5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルスルファニル)-フェニル]-アクリル酸；
6-(3-ブチル-5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルスルファニル)-ニコチン酸；
4-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチルチオ)安息香酸；
3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2ナフチル)フェニルプロピオル酸；および
6-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2ナフチルチオ)ニコチン酸
からなる群から選択される化合物を、皮膚および／または髪の色素沈着を誘導するのに十分な時間、局所的に適用することを含む、ヒトの皮膚および／または髪の美容学的色素沈着促進方法。
【請求項２】
ヒトの皮膚の褐色化または日焼けを促進するために用いられる、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ヒトの髪の着色を促進するために用いられる、請求項１記載の方法。
【請求項４】
前記化合物が、局所的に適用できる組成物中に、当該組成物の重量に対して０．００１ないし３０重量％の範囲で含まれる、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記化合物の量が、組成物の０．５ないし１５重量％の範囲である、請求項１記載の方法。
【請求項６】
（i）4-[1-(5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフチル)エテニル]安息香酸；
3-[3-(5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-アクリル酸；
3-[3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-ブト-2-エン酸；
6-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-シクロプロピル]-ニコチン酸；
3-[3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-アクリル酸；
4-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-カルボニル)-安息香酸；
4-(3-ブロモ-5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルオキシ)-安息香酸；
5-[(E)-2-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-プロペニル]-チオフェン-３-カルボン酸；
3-[3-(5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルスルファニル)-フェニル]-アクリル酸；
6-(3-ブチル-5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルスルファニル)-ニコチン酸；
4-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチルチオ)安息香酸；
3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2ナフチル)フェニルプロピオル酸；および
6-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2ナフチルチオ)ニコチン酸
からなる群から選択される化合物；および
（ii）薬理学、美容学または皮膚化学的に許容できるキャリア
を含む、局所的に適用することによりヒトの皮膚および／または髪の色素沈着を促進する薬理学／美容学／皮膚科学的組成物。
【請求項７】
前記化合物の量が、組成物の重量に対して０．００１ないし３０重量％の範囲である、請求項６記載の組成物。
【請求項８】
前記化合物の量が、組成物の重量に対して０．５ないし１５重量％の範囲である、請求項６記載の組成物。
【請求項９】
クリーム、ミルク、クリーム-ゲル、液状ローション、水中油型エマルション、油中水型エマルションおよび小胞分散物からなる群から選択される局所的適用に適した形態である、請求項６記載の組成物。
【請求項１０】
皮膚および／または髪の色素沈着に影響を与える他の化合物をさらに含む、請求項６記載の組成物。
【請求項１１】
イオン性または非イオン性増粘剤、柔軟剤、抗酸化剤、乳白剤、安定化剤、皮膚軟化薬、ＵＶ-Ａおよび／またはＵＶ-Ｂ領域において活性な有機サンスクリーン剤、光保護無機顔料およびナノ顔料、保湿剤、ビタミン、香料、防腐剤、フィラー、金属イオン遮閉剤、染料および着色料からなる群から選択される少なくとも一つの成分をさらに含む、請求項６記載の組成物。
【請求項１２】
前記化合物が、ＲＸＲの活性を示す、請求項１記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物が、ＲＸＲの活性を示す、請求項６記載の組成物。
【請求項１４】
前記化合物が、５０００ｎＭ未満のＲＸＲに対する結合を示す、請求項１２記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物が、５０００ｎＭ未満のＲＸＲに対する結合を示す、請求項１３記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野および従来の技術】
正常な皮膚の色は、メラニン、褐色色素が主要成分である、種々の色素の混合物の組み合わせられた発現の結果である。メラニンは、表皮内に見出される分化細胞、メラノサイトによって合成される。メラノサイトは、メラノソームと呼ばれるオルガネラ内でメラニンを合成する。メラノソームがメラニンで飽和された状態になると、メラノソームの樹状アームに輸送され、まわりのケラチノサイトに移される。次いで、ケラチノサイトは、皮膚の表面に移動し、皮膚に褐色の色素沈着を引き起こす。ケラチノサイトにおけるメラニンの量が、皮膚および髪の色素沈着の程度を決定する。
【０００２】
皮膚および髪の色素沈着におけるメラニンの効果のために、メラニン産生および／または周りのケラチノサイトへのメラニンの輸送に影響する化合物を同定することを目的とする研究が行われている。かかる化合物は、髪および皮膚の色素沈着を変更する可能性のある適用を有する。例えば、メラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）およびテオフィリンのような化合物が、色素沈着を促進することが知られている。さらに、ＭＳＨのアナログは、皮膚色素沈着を促進する臨床効果について試験されている。また、アルファ-リポプロテインが皮膚のメラニン産生を刺激しうることも報告されている（特許公開第８２−１５３３４８号公報、ＧＢ２１２４９００、Empresa Cubana Importadora y Exportadora de Productos Medicos, Cubaによる）。逆に、例えば、黒皮症を治療するために、色素沈着を阻害する化合物、例えば、ヒドロキノン（ＨＱ）およびモノベンゼンエーテル（Pathakら,J. American Academy Dermotol.15:894-899(1986); Smithら,Pigment Cell Research,1:386-389(1988)）、およびアルブチン、ＨＱの糖共役体(gluco conjugate)（Proceeding Japan Soc.Invest.Dermotol.12:138-139(1988)）の使用も知られている。
【０００３】
さらに、コウジ酸とその誘導体および／または吉草酸が、メラニン形成を阻害することが報告されている（特許公開第０３０１１０１０号公報；Oyama, Yasuaki, Sansei Pharmaceutical Co.,Ltd.,Japan）。
【０００４】
さらに、プロピオン酸、酪酸および吉草酸並びにこれらの塩が、不飽和脂肪酸と組み合わせて、または組み合わせることなく、メラニンの産生を触媒するチロシナーゼの形成を抑制することが報告されている（Mishimaら, EPA 345081, Hayashibara Biochemical Laboratories, Inc.,Japan）。
【０００５】
ＥＰ０５０９２４１およびＷＯ９３／１９７２９は、色素過剰または皮膚の日焼けが、十分な期間、有効量のトランスレチノイン酸を局所的に適用することによって行われうることを記載する。それにも関わらず、これらの方法で用いられる化合物は、炎症を引き起こす。
【０００６】
新たなメラニン合成を阻害する化合物、および可能性のある抗メラノソーマ、細胞毒性化合物を同定するのに適しているとされるインビトロ方法が、Dooleyら, Pharmcol.,7:188-200(1994)により報告された。この方法は、メラノサイト由来の二つの不死化マウス細胞系、Ｍｅｌ-Ａｂ（Dooleyら, Oncogene,3:531-535 (1988)）、および繊維芽細胞由来の他の細胞系を利用する。Ｍｅｌ-Ａｂ細胞は、培養中に急速に増殖し、かつ、多量のメラニンを産生する、自発的に不死化したマウスＣ５７ＢＬ／６メラノサイト系から誘導される。このアッセイは、メラノサイトに独特なメラニン生合成経路における中間体に類似した構造を有する化合物をスクリーニングするために、用いられたようである。特に、チロシンに関連するパラ置換フェノールと、ＤＯＰＡに関連する１,２-ジヒドロキシベンゼンがスクリーニングされ、また、１,３-ジヒドロキシベンゼン、１,４-ジヒドロキシベンゼン、１,４-ジメトキシベンゼン、および１,４-ベンゾキノンもスクリーニングされた。色素沈着を変更するとされているいくつかの化合物が、このスクリーニングを用いて同定された。しかしながら、本発明とは異なって、このインビトロスクリーニングは、不死化したマウス細胞系を利用し、正常なヒトメラノサイトを利用するものではない。
【０００７】
しかしながら、色素沈着並びにメラニン産生および／または輸送に影響を与える他の化合物が同定されれば、利益がもたらされる。また、よく寛容され、皮膚に非刺激性である化合物が同定されれば、利益がもたらされる。さらに、かかる化合物の同定を行うことができる、改善されたインビトロスクリーニングアッセイが開発されれば、有益である。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】
メラノサイト、好ましくはヒトメラノサイトによるメラニンの発現を変更（増強または阻害）することができる化合物を同定するための新規のアッセイを提供することが本発明の目的である。
【０００９】
本発明の他の目的は、かかるアッセイにより同定された少なくとも一つの化合物のメラニン促進または阻害量を含む皮膚科学／美容学／薬学的組成物を提供することである。
【００１０】
本発明のさらに特定の目的は、ヒトメラノサイトによるメラニン産生を変更（増強または阻害）する少なくとも一つの化合物のメラニン促進または阻害量を含む、局所的に適用できる皮膚科学／美容学／薬学的組成物を提供することである。
【００１１】
本発明のさらに特定の目的は、カルボン酸が遊離のフェノール、ナフトール、チオフェノールまたはチオナフトール基を含まない、あるいは保護基で保護されたものを含まないという条件で、置換された芳香族または複素環式カルボン酸またはそれらの誘導体の少なくとも一つのメラニン増強または阻害量を含む、皮膚科学／美容学／薬学的組成物を提供することである。
【００１２】
本発明のさらに特定の目的は、皮膚および／または髪の色素沈着を誘導するのに十分な時間、少なくとも一つのメラニン作用（増強または阻害）レチノイド化合物を含む組成物の有効量を局所的に適用することを含む、処置を必要とする者における、皮膚および／または髪の色素沈着を変更する方法を提供することである。
【００１３】
本発明のさらに特定の目的は、カルボン酸が遊離または保護されたフェノール、ナフトール、チオフェノールまたはチオナフトール基を含まないという条件で、皮膚および／または髪の色素沈着に影響を与えるのに十分な時間、少なくとも一つの置換された芳香族または複素環式カルボン酸またはそれらの誘導体を含む組成物の有効量を局所的に適用することを含む、処置を必要とする者における、皮膚および／または髪の色素沈着を変更、すなわち増強または低減する方法を提供することである。
【００１４】
【課題を解決するための手段および発明の実施の形態】
第一の実施態様では、本発明は、ヒトメラノサイトによるメラニンの発現を変更（増進または阻害）する化合物、好ましくはヒトメラノサイトによるメラニン産生を増強する化合物を同定するための新規アッセイを提供する。
【００１５】
一般に、この主題のアッセイは、特定の化合物または化合物の組合せの、培養中のヒトメラノサイトの成長または増殖に与える影響、および、同化合物の培養されたヒトメラノサイトによるメラニン産生に与える影響を調べ、前記培養ヒトメラノサイトの数（増殖）をベースとするメラニン含量を正常化し、かつ、細胞当たりのメラニン産生の増大または低減をベースとするメラニン産生に影響を与える化合物を同定することである。
【００１６】
特に、この主題のアッセイは、以下を含む。
（i）少なくとも二つのヒトメラノサイト培養物を、メラニン産生に対する効果についてスクリーニングする少なくとも一つの化合物と接触させる；
（ii）前記ヒトメラノサイト培養物の一方に含まれるメラノサイトの増殖を測定する；
（iii）第二のヒトメラノサイト培養物に含まれるメラニンの量を測定する；
（iv）上記化合物のメラニン産生に与える効果（増強または低減）を調べるために、工程（ii）および（iii）で得られたデータを比較し、培養物に含まれるメラノサイトの数に基づいてデータを正常化する；
（v）前記化合物が不在であることを除いて、先の培養物と同じ条件下で培養されたコントロールのヒトメラノサイト培養物におけるメラニン産生および増殖と、工程（ii）および（iii）で得られたデータとをさらに比較する；かつ、
（vi）前記化合物と接触していないコントロール培養物と比較した、前記化合物の存在下で培養されたメラノサイトによるメラニン産生の増大または低減をベースとして、スクリーニングされた化合物を、ヒトメラノサイトによるメラニン発現を変更（増強または低減）するものとして同定する。
【００１７】
この方法は、好ましくは、適切な源から、例えば新生児の皮膚メラノサイト等の、ヒトメラノサイトを得ることによって実施される。これらのメラノサイトは、例えば９６ウェルプレートと２４ウェルプレート等の二つの細胞培養チャンバーに同時に蒔かれる。かかる細胞をウェル表面に付着させた後に、固定量の特定の化合物と共に各ウェルをインキュベートして、メラニン発現に対する効果を調べる。かかるインキュベーションは、培養されたメラノサイトによるメラニン産生に与える上記化合物の影響を評価するのに十分な時間行われる。
【００１８】
次いで、インキュベーションは、約１分から約１ヶ月まで、好ましくは約１時間から約２週間まで、最も好ましくは約１２時間から１週間までの範囲である。インキュベーション後、前記培養物の一方の細胞の増殖を評価する。これは、吸光度等の適切な方法で行われる。
【００１９】
好ましい実施態様では、９６ウェルプレートの細胞は、３-（４,５-ジメチルチアゾール-２-イル）-５-（３-カルボキシメトキシフェニル）-２-（４-スルホフェニル）-２Ｈ-テトラゾリウム（細胞増殖の比色分析に通常用いられるテトラゾリウム染料）（ＭＴＳ）を用いて処理され、このプレートの吸光度を４９０ｎｍにおいて読み取り、９６ウェルプレート中の細胞の増殖を調べる。これらの結果を、同じ条件下で培養され、ＭＴＳ溶液で処理したが、試験化合物で処理されていないコントロールメラノサイト培養物と比較する。
【００２０】
同一条件下で試験化合物を用いてインキュベートされたヒトメラノサイト培養物を含む、２４ウェルプレート等の第二の培養物を、そこに含まれている細胞によって発現されたメラニンの量を調べるために試験する。これは周知の方法で実施される。本発明では、これは、例えば、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）等を用いてかかる細胞を洗浄し、例えば１Ｎ ＮａＯＨ等のアルカリ溶液を用いてこの洗浄された細胞を溶解し、かつ、例えば、４０５ｎｍにおけるアルカリ可溶性メラニンの吸光度を測定することにより、そこに含まれるアルカリ可溶性メラニンの量を測定することによって実施される。次いで、このデータを、同じ条件下であるが、試験化合物の不在下で生育されたコントロールのメラノサイト培養物と比較する。
【００２１】
次いで、両方のメラノサイト細胞培養物から得られたデータを、特定化合物の、メラノサイトによるメラニン産生およびメラニン蓄積に対する効果を調べるために、メラノサイト増殖（細胞数）に基づいて、正規化する。
【００２２】
本発明にかかるメラニン発現を変更する化合物は、培養されたヒトメラノサイトにおけるメラニン産生および蓄積に影響する化合物である。好ましくは、かかる化合物は、コントロールのメラノサイト培養物に対して少なくとも１０％までメラニン発現を変更する。さらに好ましくは、かかる化合物は、少なくとも２０％までメラニン産生に影響する。最も好ましくは、１５０ないし２５０％の程度、あるいはそれ以上、メラニン産生および蓄積に影響する。
【００２３】
それゆえ、主題の発明は、ヒトメラノサイトによるメラニン産生および蓄積を増大または低減する化合物またはそれらの組合せの同定に関する。メラニン産生および蓄積を増大する化合物は、例えば、皮膚の日焼け(tanning)または褐色化(browning)を促進し、かつ、髪のグレー化を処理または妨げるために用いられる。また、かかる化合物は、白斑等の色素沈着欠乏にかかる疾患または状態を処理するためにも用いられる。
【００２４】
メラニン産生を低減する化合物は、色素沈着過剰にかかる疾患または状態を有する患者の処理に利用される。かかる疾患および状態は、黒皮症または年齢に伴う色素沈着過剰、および肝斑を含む。
【００２５】
また、メラニン産生および／または蓄積を阻害する化合物は、老人の手や顔にしばしば観察される「肝斑」等の、年齢に伴う色素沈着過剰を処理および／または防止するために用いられる。色素沈着疾患にかかる疾患および状態のリストは、ここに完全に参照として含めるDermatology in General Medicine (Fitzpatric, T.B.,ら)に見出される。
【００２６】
本発明の化合物は、白斑、炎症後色素沈着欠乏または脱色等の色素沈着欠乏の処理、皮膚移植後の色素沈着欠乏または脱色の処理、紫外線に過度に暴露したことによる色素沈着欠乏または脱色の処理、瘢痕形成後色素沈着欠乏または脱色の処理、または老化またはほくろによる色素沈着欠乏または脱色の処理に使用できる。
【００２７】
メラニン産生を低減する化合物は、黒皮症または年齢に伴う色素沈着過剰の処理に使用できる。
【００２８】
さらに、主題のアッセイは、ヒトメラノサイトによるメラニン産生または蓄積に影響（増大または低減）する化合物の組合せ、特にメラニン産生または蓄積に対して相乗効果を有する組合せを同定するために用いられる。
【００２９】
上述したように、第二の実施態様では、本発明は、本発明に係る少なくとも一つのメラニン作用性化合物を含む薬学的／皮膚化学的／美容学的化合物に関する。これに関して、正常なヒトメラノサイトによるメラニン産生および／または蓄積を促進する新規クラスの化合物が、主題のアッセイ方法を用いて見出された。これらの化合物は、皮膚によく寛容され、かつ非刺激性であるという点でも有利である。これは、主題のアッセイを用いてスクリーニングされた他の多くのレチノイド化合物が、同様の条件下で色素沈着に影響しなかったと言うことから、驚くべきことである。これらの化合物は、レチノイドシグナリング経路を介してメラニン産生および／または蓄積に影響することが推定される。
【００３０】
好ましい実施態様では、本発明は、カルボン酸が、フリーまたは保護された形態の、フェノール、ナフトール、チオフェノールまたはチオナフトール基を含まないという条件で、少なくとも一つの置換された芳香族または複素環式カルボン酸またはその誘導体の一定量を含む薬学／美容学／皮膚化学的化合物を提供する。かかるカルボン酸は、例として、安息香酸、プロピオル酸、ニコチン酸、アクリル酸、ブテン酸およびナフト酸(naphtoic acid)を含む。
【００３１】
好ましい実施態様では、本発明に係る置換された芳香族または複素環式カルボン酸は、ＲＸＲの活性を示す。本発明によれば、ＲＸＲ活性を示す化合物は、５０００ｎＭ未満、好ましくは１０００ｎＭ未満のＲＸＲに対する結合を示す化合物である。ＲＸＲに対する結合を調べることは、当業者に周知であり、例えば（１）“Selective Synthetic Ligands for Nuclear Retinoic Acid Receptor Subtypes” RETINOIDS, Progress in Research and Clinical Applications, Chapitre 10 (pp261-267), Marcel Dekker Inc, Maria A.Livrea et Lester Packerにより公表;（２）Synthetic Retinoids: Receptor Selectivity and Biological Activity" Pharmacol Skin, Basel, Karger, 1993, Vol.5,pp117-127;（３）“Selective Synthetic Ligands for Human Nuclear Retinoic Acid Receptors” Skin Pharmacology, 1992, Vol.5,pp57-65;（４）“Identification of Synthetic Retinoids with Selectivity for Human Nuclear Retinoic Acid Receptor-γ”Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol.186,No.2, July 1992,pp977-983;および（５）“Selective High Affinity RAR-α or RAR-β Retinoic Acid Receptor Ligands”Mol.Pharmacol.,Vol.40,pp556-562に報告されている。
【００３２】
また、より好ましい実施態様では、ＲＸＲの活性を示す化合物は、ＲＸＲのアゴニスト活性を示す。このＲＸＲのアゴニスト活性は、例えば参照としてここにその全体の内容を含める米国特許第５６９６１０４号に報告されている方法で決定することができる。
【００３３】
特に、本発明に係るヒトメラノサイトによるメラニン産生および／または蓄積を促進することが驚くべきことに見出された化合物は、
4-[1-(5,6,7,8-テトラヒドロ-5,5,8,8-テトラメチル-2-ナフチル)エテニル]安息香酸(CD No.2771)；
3-[3-(5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-アクリル酸(CD No.2908)；
3-[3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-ブト-2-エン酸(but-2-enoic acid)(CD No.3206)；
6-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-シクロプロピル]-ニコチン酸(CD No.3127)；
3-[3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-フェニル]-アクリル酸(CD No.2915)；
4-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-カルボニル)-安息香酸(CD No.2608)；
4-(3-ブロモ-5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルオキシ)-安息香酸(CD No.2661)；
5-[(E)-2-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イル)-プロペニル]-チオフェン-３-カルボン酸(CD No.2425)；
3-[3-(5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルスルファニル)-フェニル]-アクリル酸(CD No.3132)；
6-(3-ブチル-5,5,8,8-テトラメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-ナフタレン-2-イルスルファニル)-ニコチン酸(CD No.3292)；
4-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチルチオ)安息香酸(CD No.2624)；
3-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2ナフチル)フェニルプロピオル酸(CD No.2906)；および
6-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2ナフチルチオ)ニコチン酸(CD No.2809)
を含む。
【００３４】
上述したように、薬学的／皮膚化学的／美容学的組成物は、皮膚および／または髪に対する局所的適用に適した形態である。好ましい実施態様では、これらの組成物は、皮膚の人工的日焼けおよび／または褐色化に適した形態である。
【００３５】
これらの組成物は、かかるタイプの組成物に通常用いられる、薬理学、美容学または皮膚化学的に許容できる、イオン性または非イオン性増粘剤、柔軟剤、抗酸化剤、乳白剤、安定化剤、皮膚軟化薬、ＵＶ-Ａおよび／またはＵＶ-Ｂ領域において活性な有機サンスクリーン剤、光保護無機顔料およびナノ顔料、湿潤剤、ビタミン、香料、防腐剤、フィラー、金属イオン遮閉剤、染料および着色料等の、他の成分を含んでもよい。
【００３６】
通常、当業者であれば、本発明の組成物に本質的に関連した有利な特性が、企図された添加によって不利な影響を受けないように、これらの最適な補助化合物および／またはその量を選択するのに注意を払うべきである。
【００３７】
本発明の組成物は、メラノサイトによるメラニン産生および／または蓄積に影響する一つ以上の化合物、例えば相乗的組合せを含んでもよい。また、かかる組成物は、例えばジヒドロキシアセトン（ＤＨＡ）またはその誘導体等の色素沈着を促進または阻害する他の化合物を含んでもよい。適切な化合物は、Tuloup等により１９９７年３月１８日に出願され、LOREALに譲渡された米国シリアル番号第０８／８１９０８４号に開示されている。また、色素沈着を促進するＭＳＨおよびそのアナログも含むことができる。逆に、ＨＱ、モノベンゼンエーテルおよびアルブチンのような色素沈着を阻害する化合物が、色素沈着を阻害する、本主題のアッセイを用いて同定された化合物と共に含まれてもよい。
【００３８】
本主題の組成物は、ヒトの皮膚および／または髪に局所的に適用するのに適した形態である。適切な形態は、クリーム、ミルク、クリーム-ゲル、液状ローション、水中油型エマルションまたは油中水型エマルション、小胞分散物または当該技術分野において通常用いられる他のあらゆる形態を含む。
【００３９】
本主題の組成物に含まれる少なくとも一つのメラニン作用化合物の量は、組成物の全重量に対して約０．０００１ないし約３０重量％、好ましくは組成物の全重量に対して約０．５ないし約１５重量％、さらに好ましくは組成物の全重量に対して約０．００１ないし５重量％の濃度範囲である。
【００４０】
また本発明は、本発明に係るメラニン作用性化合物の一定量を局所的に適用することを含む、処理、美容、皮膚科学または治療的方法を含む。有効量は、皮膚および／または髪の色素沈着に影響を与える（増大または低減）のに十分な量である。かかる方法は、皮膚および／または髪の色素沈着に影響を与える他の化合物と組み合わせて実施されてもよい。かかる方法は、色素沈着に対し所望の効果が達成されるまで繰り返し実施されてもよい。主題の化合物が皮膚を刺激しないので、長期にわたる投与は適している。
【００４１】
上述したように、本発明は、特に、髪の着色を促進するのに適した、本発明に係る少なくとも一つの化合物を含む組成物を含む。かかる組成物は、例えば、コンディショニング剤、顔料および色素成分、ストレート剤、パーマ剤、界面活性剤、香料、アルコール（以下参照）等の、髪用製剤に通常含まれる他の成分を含んでもよい。
【００４２】
本発明の理解をより容易なものとするため、以下の例を示す。
【００４３】
【実施例】
実施例１
新生児の皮膚の正常ヒトメラノサイトを、アッセイに用いた。始めのスクリーニングのために、これらの細胞を、ウェルの表面積に従って適切に９６ウェルプレートと２４ウェルプレートに同時に蒔き、５日間テスト化合物を用いて処理した。プレートに対する化合物の添加は、正確さを確実なものとするために（各ウェル当たり同量）ロボットを用いて行った。５日間処理の最後に、９６ウェルプレート中の細胞を、ＭＴＳ溶液で処理し、プレートを４９０ｎｍで読みとり、細胞の増殖に対する化合物の効果を調べた。２４ウェルプレート中の細胞をＰＢＳですすぎ、次いで１Ｎ ＮａＯＨで溶解し、アルカリ溶解性メラニンの吸光度を４０５ｎｍにおいて測定した。
【００４４】
９６ウェルプレートからのデータを分析して、細胞の増殖に対する各化合物の影響を調べ、２４ウェルプレートからのデータを用いて、細胞のメラニン含量に与える化合物の効果を調べた。次いで、メラニン含量を、細胞の増殖に対して正常化した。
【００４５】
この方法を用いて、本発明者らは、正常なヒトメラノサイトのメラニン含量を増大する以下の化合物を同定した。かかる結果に基づいて、ヒトメラノサイトによるメラニン産生を変更（増大または低減）する、レチノイド等の他の化合物を同定できることが期待される。
【００４６】
【表１】
0003669925.tif 000002
【００４７】
かくして、本発明のアッセイを用いて、本発明者らは、正常なヒトメラノサイトに対する新たなクラスのプロピグメントリー化合物（pro-pigmentory compound）を同定した（それによりメラニン産生が増大する）。これらの分子は、レチノイドシグナリング経路を介して作用すると仮定される。プロピグメントリー活性を有するあるクラスのレチノイド様分子の発見は、他のレチノイドシグナリング分子が同様の条件下で色素沈着を誘導しないことから、特に驚くべきものである。かかる知見は、これらの化合物が皮膚に刺激を与えず、非常によく寛容されることから、さらに有利である。従って、ヒトの被験者の皮膚および／または髪における色素沈着を変更することにおいて可能性のある適用を有する。
【００４８】
実施例２
製剤例
１．経口経路
（ａ）以下の組成物を、０．８ｇの錠剤の形態で調製する：
式（２）の化合物                                     ０．００５ｇ
予めゼラチン化された(pregelatinized)デンプン         ０．２６５ｇ
ミクロクリスタリンセルロース                         ０．３００ｇ
ラクトース                                           ０．２００ｇ
ステアリン酸マグネシウム                             ０．０３０ｇ
炎症後色素沈着欠乏を処理するため、処理するケースの深刻度に応じて３〜６ヶ月間、成人に一日当たり１〜３錠が与えられる。
【００４９】
（ｂ）５ｍｌのバイアルに収容される飲用懸濁液を調製する。
式（４）の化合物                                     ０．０５０ｇ
グリセロール                                         ０．５００ｇ
７０％ソルビトール                                   ０．５００ｇ
サッカリナートナトリウム                             ０．０１０ｇ
メチルパラ-ヒドロキシベンゾアート                    ０．０４０ｇ
味付剤                                               適量
精製水                              全体を５ｍｌとする量
皮膚移植後の色素沈着欠乏を処理するため、処理するケースの深刻度に応じて３ヶ月間、成人に一日当たり１本のバイアルが与えられる。
【００５０】
（ｃ）ゼラチンカプセルに収容される以下の製剤を調製する：
式（５）の化合物                                     ０．０２５ｇ
コーンスターチ                                       ０．０６０ｇ
ラクトース                           全体を０．３００ｇとする量
使用したゼラチンカプセルは、ゼラチン、酸化チタンおよび防腐剤からなる。  白斑を処理するため、３０日間、成人に一日当たり１つのゼラチンカプセルが与えられる。
【００５１】
２．局所的経路
（ａ）以下の非イオン性油中水型クリームを調製する：
0003669925.tif 000003
このクリームは、３０日間、一日当たり１または２回、色素沈着欠乏した移植された皮膚に適用される。
【００５２】
（ｂ）以下の製剤を調製することによってゲルを調製する：
0003669925.tif 000004
このゲルは、処理するケースの深刻度に応じて、６〜１２週間、一日当たり１〜３回、色素沈着欠乏の移植された皮膚に適用される。
【００５３】
（ｃ）以下の成分を混合することにより、炎症後色素沈着欠乏を矯正するためのローションを調製する：
式（２）の化合物                                     ０．０３０ｇ
プロピレングリコール                                 ５．０００ｇ
ブチルヒドロキシトルエン                             ０．１００ｇ
エタノール（９５゜）                全体を１００．０００ｇとする量
このローションを一日に２回適用し、２〜６週間以内に顕著な改善が見られる。
【００５４】
（ｄ）日光の有害な影響に対抗する美容組成物が、以下の成分を混合することによって調製される：
式（４）の化合物                                     １．０００ｇ
ベンジリデンカンファー                               ４．０００ｇ
脂肪酸トリグリセリド                               ３１．０００ｇ
グリセリルモノステアラート                           ６．０００ｇ
ステアリン酸                                         ２．０００ｇ
セチルアルコール                                     １．２００ｇ
ラノリン                                             ４．０００ｇ
防腐剤                                               ０．３００ｇ
プロピレングリコール                                 ２．０００ｇ
トリエタノールアミン                                 ０．５００ｇ
香料                                                 ０．４００ｇ
脱イオン水                          全体を１００．０００ｇとする量
この組成物は毎日適用され、光誘導老化を処置することができる。
【００５５】
（ｅ）以下の非イオン性水中油型クリームが調製される：
式（３）の化合物                                     ０．５００ｇ
ビタミンＤ３                                         ０．０２０ｇ
セチルアルコール                                     ４．０００ｇ
グリセリルモノステアラート                           ２．５００ｇ
ＰＥＧ-５０ステアラート                              ２．５００ｇ
カリテバター                                         ９．２００ｇ
プロピレングリコール                                 ２．０００ｇ
メチルパラ-ヒドロキシベンゾアート                    ０．０７５ｇ
プロピルパラ-ヒドロキシベンゾアート                  ０．０７５ｇ
無菌脱イオン水                      全体を１００．０００ｇとする量
このクリームは、白斑を有する皮膚に３０日間、一日に１または２回適用される。
【００５６】
（ｆ）以下の成分を混合することにより局所的ゲルが調製される：
式（７）の化合物                                     ０．０５０ｇ
エタノール                                         ４３．０００ｇ
α-トコフェロール                                    ０．０５０ｇ
“Goodrich”社からCarbopol 941（登録商標）の商品名で市販されているカルボキシビニルポリマー                                           ０．５００ｇ
２０重量％水溶液としてのトリエタノールアミン         ３．８００ｇ
水                                                   ９．３００ｇ
プロピレングリコール                 全体を１００．０００ｇとする量
このゲルは、白斑を有する皮膚に、処理するケースの深刻度に応じて、６〜１２週間、一日に１〜３回適用される。
【００５７】
（ｇ）以下の成分を混合することにより、髪を再着色するヘアローションが調製される：
0003669925.tif 000005
このローションは、深刻な脱色を有する頭皮に、３ヶ月間、一日に２回適用される。
【００５８】
（ｈ）以下の成分を混合することにより、瘢痕形成後クリームが調製される：
0003669925.tif 000006
このクリームは、６〜１２週間、一日に１〜３回適用される。
【００５９】
（ｉ）以下の製剤を調製することにより、水中油型クリームが調製される：
0003669925.tif 000007
このクリームは、老化による色素沈着の問題を有する皮膚に、一日に２回適用される。
【００６０】
（ｊ）以下の水中油型クリームが調製される：
0003669925.tif 000008
【００６１】
（ｋ）スプレー型皮膚用ローション：
式（５）の化合物                                     ５．０００ｇ
エタノール                                         ３０．０００ｇ
脱イオン水                          全体を１００．０００ｇとする量
【００６２】
（ｌ）ヘアローション：
式（８）の化合物                                     ３．０００ｇ
プロピレングリコール                               ３０．０００ｇ
エチルアルコール                                   ４０．５００ｇ
水                                  全体を１００．０００ｇとする量
このローションは、一回当たり１ｍｌを１日に１または２回、頭皮に適用される。
【００６３】
（ｍ）濃縮型ローション：
式（１）の化合物                                     ５．０００ｇ
カワイン(Kawaine)                                    ２．０００ｇ
ヒドロキシプロピルセルロース
（Hercules社のKlucel G（登録商標））                 ３．５００ｇ
エチルアルコール                     全体を１００．０００ｇとする量
この濃縮型ローションは、一回当たり１ｍｌを１日に１または２回、頭皮に適用される。
【００６４】
（ｎ）ニオソマル(Niosomal)ローション：
Chimexane ML（登録商標）                             ０．４７５ｇ
コレステロール                                       ０．４７５ｇ
ステアロイルグルタミン酸モノナトリウム               ０．０５０ｇ
式（３）の化合物                                     ０．１００ｇ
防腐剤                                               適量
染料                                                 適量
香料                                                 適量
脱イオン水                          全体を１００．０００ｇとする量
このローションは、一回当たり１ｍｌを１日に１または２回、頭皮に適用される。
【００６５】
（ｏ）ローション：
式（７）の化合物                                     ５．０００ｇ
プロピレングリコールモノメチルエーテル（Dow Chemical社のDowanol PM（登録商標））                                               ２０．０００ｇ
ヒドロキシプロピルセルロース
（Hercules社のKlucel G（登録商標））                 ３．０００ｇ
エチルアルコール                                   ４０．０００ｇ
ミノキシジル                                         ２．０００ｇ
水                                全体を１００．０００ｇとする量
この濃縮型ローションは、一回当たり１ｍｌを１日に１または２回、頭皮に適用される。
【００６６】
本発明についてある特定の実施態様に関して記載したが、本発明の精神から離れることなく当業者による多くの修正および変更が可能である。それゆえ、特許請求の範囲により、本発明の真の精神および範囲内に該当する全ての修正および変更が担保されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【図１】  メラニン産生に影響する、本発明に従って同定された化合物の構造を示す。
【図２】  本発明の化合物を用いて処理される色素沈着疾患を示す。
【図３】  本発明の化合物を用いて処理される色素沈着疾患を示す。
【図４】  本発明の化合物を用いて処理される色素沈着疾患を示す。
【図１】
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【図２】
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0003669925.tif 000012
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【図３】
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【図４】
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