(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
製剤用の即可溶性の固体生成物の製造方法であって、
ａ）パクリタキセル、ドセタキセル、ならびにそれらの塩、水和物および溶媒和物から選ばれたタキソイドをエタノールに溶解し、
ｂ）得られた溶液にアセチル−γ−シクロデキストリン及びヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンから選ばれた凍結乾燥した固体シクロデキストリン誘導体を添加し、ｃ）溶媒を蒸発させて乾燥し、下記成分を含有する固体を得ることを特徴とする方法：
Ａ. 有効成分としての前記タキソイド、および
Ｂ. 前記シクロデキストリン誘導体、
ここでタキソイド：シクロデキストリンの重量比は１：25〜１：400 の範囲であり、但し、ヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンを使用する場合には、タキソイドはタキソイド：シクロデキストリンの重量比が１：25〜１：100 のドセタキセルだけとすることができる。
【請求項２】
製剤用の即可溶性の固体生成物の水性溶媒中の溶液の製造方法であって、
ａ) パクリタキセル、ドセタキセル、ならびにそれらの塩、水和物および溶媒和物から選ばれたタキソイドをエタノールに溶解した後、下記工程のいずれかを実施し：
i)  得られた溶液にアセチル−γ−シクロデキストリン及びヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンから選ばれた固体のシクロデキストリン誘導体を添加し、得られた混合物を水性溶媒に溶解し、得られた溶液を凍結乾燥して、即可溶性の固体を得る；または
ii) 得られた溶液にアセチル−γ−シクロデキストリンおよびヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンから選ばれた凍結乾燥した固体のシクロデキストリン誘導体を添加し、溶媒を蒸発させて乾燥し、即可溶性の固体を得る；そして
ｂ) 得られた即可溶性の固体を水性溶媒に溶解して、下記成分を含有する、そのまま医療処置に使用する溶液を得ることを特徴とする方法：
Ａ. 有効成分としての前記タキソイド、および
Ｂ. 前記シクロデキストリン誘導体、
ここでタキソイド：シクロデキストリンの重量比は１：25〜１：400 の範囲であり、但し、ヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンを使用する場合には、タキソイドはタキソイド：シクロデキストリンの重量比が１：25〜１：100 のドセタキセルだけとすることができる。
【請求項３】
非経口製剤用の即可溶性の固体生成物の製造方法であって、
ａ) パクリタキセル、ドセタキセル、ならびにそれらの塩、水和物および溶媒和物から選ばれたタキソイドをエタノールに溶解して溶液を形成し、
ｂ) この溶液にアセチル−γ−シクロデキストリンおよびヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンから選ばれた凍結乾燥した固体シクロデキストリン誘導体を添加し、
ｃ) 溶媒を蒸発させ、乾燥して、即可溶性の固体を得、
ｄ) この固体を水性溶媒中に溶解して水性溶液を得、
ｅ) この溶液を凍結乾燥して、下記成分を含有する即可溶性の凍結乾燥物を得ることを特徴とする方法：
Ａ. 有効成分としての前記タキソイド、および
Ｂ. 前記シクロデキストリン誘導体、
ここでタキソイド：シクロデキストリンの重量比は１：25〜１：400 の範囲であり、但し、ヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンを使用する場合には、タキソイドはタキソイド：シクロデキストリンの重量比が１：25〜１：100 のドセタキセルだけとすることができる。
【請求項４】
非経口製剤用の即可溶性の固体生成物の水性溶媒中の溶液の製造方法であって、
ａ) パクリタキセル、ドセタキセル、ならびにそれらの塩、水和物および溶媒和物から選ばれたタキソイドをエタノールに溶解して溶液を形成し、
ｂ) この溶液にアセチル−γ−シクロデキストリンおよびヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンから選ばれた凍結乾燥した固体シクロデキストリン誘導体を添加し、
ｃ) 溶媒を蒸発させ、乾燥して、即可溶性の固体を得、
ｄ) この固体を水性溶媒中に溶解して水性溶液を得、
ｅ) この溶液を凍結乾燥して即可溶性の固体の凍結乾燥物を得、
ｆ) この凍結乾燥物を水性溶媒中に再溶解して、下記成分を含有する水性溶液を得ることを特徴とする方法：
Ａ. 有効成分としての前記タキソイド、および
Ｂ. 前記シクロデキストリン誘導体、
ここでタキソイド：シクロデキストリンの重量比は１：25〜１：400 の範囲であり、但し、ヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンを使用する場合には、タキソイドはタキソイド：シクロデキストリンの重量比が１：25〜１：100 のドセタキセルだけとすることができる。
【請求項５】
水性溶媒として下記のいずれかを使用することを特徴とする請求項２または４に記載の溶液の製造方法：注射用品質の水、水溶液を等張化するのに有効な量で塩化ナトリウム、グルコースまたはデキストロースのような等張化剤を含有する等張化剤の水溶液。
【請求項６】
シクロデキストリン成分として下記のいずれかを使用することを特徴とする、請求項１または３に記載の固体生成物の製造方法：シクロデキストリン環当たりのアセチル基数が約２〜約12のアセチル化度を有するアセチル−γ−シクロデキストリン、またはシクロデキストリン環当たりのヒドロキシプロピル基数が約２〜約10の置換度を有するヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリン。
【請求項７】
シクロデキストリン成分として下記のいずれかを使用することを特徴とする、請求項２、４または５に記載の溶液の製造方法：シクロデキストリン環当たりのアセチル基数が約２〜約12のアセチル化度を有するアセチル−γ−シクロデキストリン、またはシクロデキストリン環当たりのヒドロキシプロピル基数が約２〜約10の置換度を有するヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリン。
【請求項８】
シクロデキストリン成分として下記のいずれかを使用することを特徴とする、請求項６に記載の固体生成物の製造方法：シクロデキストリン環当たりのアセチル基数が約８のアセチル化度を有するアセチル−γ−シクロデキストリン、またはシクロデキストリン環当たりのヒドロキシプロピル基数が約４〜約６の置換度を有するヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリン。
【請求項９】
シクロデキストリン成分として下記のいずれかを使用することを特徴とする、請求項７に記載の溶液の製造方法：シクロデキストリン環当たりのアセチル基数が約８のアセチル化度を有するアセチル−γ−シクロデキストリン、またはシクロデキストリン環当たりのヒドロキシプロピル基数が約４〜約６の置換度を有するヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリン。
【請求項１０】
パクリタキセルをその水和多形形態またはその溶媒和物形態で使用する請求項１、３、６または８に記載の固体生成物の製造方法。
【請求項１１】
パクリタキセルをその水和多形形態またはその溶媒和物形態で使用する請求項２、４、５、７または９に記載の溶液の製造方法。
【請求項１２】
溶液に凍結乾燥固体のシクロデキストリン誘導体を添加する工程が、さらに非経口用途の製剤に慣用の他の可溶性佐剤と混和することを含む、請求項１、３、６、８または10に記載の固体生成物の製造方法。
【請求項１３】
溶液に固体または凍結乾燥固体のシクロデキストリン誘導体を添加する工程が、さらに非経口用途の製剤に慣用の他の可溶性佐剤と混和することを含む、請求項２、４、５、７、９または11に記載の溶液の製造方法。
【請求項１４】
請求項１、３、６、８、10または12に記載の方法により製造された、製剤用の即可溶性の固体生成物。
【請求項１５】
請求項14に記載の固体生成物の水性溶媒中の溶液。
【請求項１６】
請求項１、３、６、８、10または12に記載の方法に従って製造された固体生成物を含む薬剤組成物。
【請求項１７】
請求項１、３、６、８、10または12に記載の方法により製造された固体生成物を使用して、望ましくない細胞増殖の治療用の薬剤を製造する方法。
【請求項１８】
請求項２、４、５、７、９または11に記載の方法に従って製造された溶液を含む薬剤組成物。
【請求項１９】
請求項２、４、５、７、９または11に記載の方法により製造された溶液の形態でタキソイドを使用することにより、パクリタキセルおよびドセタキセルならびにそれらの塩、溶媒和物および水和物の群のタキソイドの水溶液中での自己凝集と早期沈殿を防止し、該薬剤の過飽和溶解状態を延長する方法。
【請求項２０】
請求項２、４、５、７、９または11に記載の方法により製造された溶液を使用して、望ましくない細胞増殖の治療用の薬剤を製造する方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、タキソイドと或る種のシクロデキストリンとを含有し、有害な溶媒および／または洗浄剤を使用しない、非経口用の新規な水溶性の固体薬剤組成物およびその水溶液に関する。より詳しくは、本発明は新規な水溶性固体薬剤組成物とその水性溶媒溶液に関し、該組成物は下記成分を含有する：
ａ) 有効成分として、場合によりその塩またはその多形の水和物もしくは溶媒和物 (例、エタノールで形成された溶媒和物) の形態でもよい、パクリタキセルまたはドセタキセルのようなタキソイド；および
ｂ) 大表面積のアセチル−γ−シクロデキストリンまたはヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリン（以下、シクロデキストリン）、
−ここで、該タキソイド：該シクロデキストリンの重量比は１：25〜１：250 の範囲であり；
ｃ) および場合により、非経口用途の製剤に慣用の他の水溶性佐剤(auxiliary material)。
【０００２】
本発明はまた、この注射可能な薬剤組成物の製造および使用にも関する。
本明細書および特許請求の範囲を通して下記の用語の定義を使用する：
パクリタキセル＝タキソールＡ (taxol A)；
ドセタキセル＝ (Ｎ−デベンゾイル−Ｎ−tert−ブトキシカルボニル) −10−デアセチル−パクリタキセル；
「水性溶媒」＝注射用品質の水または水溶液を等張化するのに有効な量および濃度の溶解した等張化剤 (例、塩化ナトリウム、グルコース) を含む水溶液；
「非晶質」＝Ｘ線に対して非晶質構造を示す；
CD＝シクロデキストリン
γ−シクロデキストリン＝シクロマルトオクトース
β−シクロデキストリン＝シクロマルトヘプトース
AcγCD＝アセチル−γ−シクロデキストリン
HPβCD＝ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン (CD単位当たりのヒドロキシプロピル基数が約２〜８個)
DIMEβ＝ヘプタキス−2,6 −ジ−Ｏ−メチル−β−シクロデキストリン。
【０００３】
タキソイドは、パクリタキセルおよび構造的に関連した物質の総称である。パクリタキセルは、有糸分裂紡錘体毒および強力な細胞複製阻害剤として作用するその顕著な抗ガン活性により知られた化合物である。この化合物はまた、水溶解度が室温で約0.0005 mg/mlと難溶性であることが知られており、溶液状で保管した場合にも不安定で、そのエステル結合のソルボリシス (加溶媒分解) の結果として細胞毒性活性の低下に至ると報告されている。パクリタキセルは、エタノールとクレモファーEL (Cremophor EL、ポリヒドロキシ化ひまし油) の１：１混合溶媒にとかした溶液状態で販売されている。
【０００４】
クレモファーELは、静脈内処置中における或る種の副作用 (過敏症、ヒスタミン放出) に関係してきたため、新たな薬剤供給系を開発する多くの試みが過去10年になされてきた。
【０００５】
パクリタキセルを有機溶媒であるエタノールとポリエトキシ化ひまし油中の溶液として処方した場合、これは過飽和水中油型エマルションとして投与され、血液中ですぐに薄まる。血液は、脂質とタンパク質により与えられる疎水性ドメインに富む水性環境である。パクリタキセルは、拡散により細胞に出入りする間に、原形質膜の疎水性環境を通過する。
【０００６】
パクリタキセルが溶媒および濃度依存性の自己凝集を受ける傾向があることが、この難溶性薬剤を薬学的に許容された臨床投与用賦形剤中に処方する研究を邪魔してきた。
【０００７】
半合成タキソイドであるドセタキセルは非常に親油性で、パクリタキセルよりは水溶性であることも知られている [米国特許4814470]。注射用濃厚液としての市販のドセタキセルは、この薬剤をポリソルベート80にとかした滅菌溶液であり、注射用蒸留水中の13％(w/w) エタノール溶液からなる希釈剤が添付されている。使用できる最高薬剤濃度は 0.3〜0.9 mg/ml であった。0.9 mg/ml より高濃度は、沈殿の問題のために避けなければならなかった。市販の処方剤では、ポリソルベート80に伴う過敏反応が問題を引き起こすことがあった。
【０００８】
製剤処方には、疎水性の特性を持つビヒクルをはじめとする広範囲の手法がとられてきた。ほとんどのビヒクル中では、タキソイドが自己凝集して沈殿を生ずることが観察された濃度に匹敵するミリモル濃度範囲でタキソイドが処方されることになる。
【０００９】
タキソイドとシクロデキストリンとの間の相互作用に基づいて、さらなる提案がなされた。シクロデキストリンの存在下でのタキソイドの薄層クロマトグラフィーの移動度の研究では (Int. J. Pharm. 1994, 108, 64-75)、最初はタキソイドとシクロデキストリンとの間の相互作用は非常に弱いと結論づけられた。後になって (AU-P-35544/93; 645.927) 、非置換シクロデキストリン類と酵素変性した分岐β−シクロデキストリン類とを用いてタキソイドの溶解度のある程度の増大が認められた。
【００１０】
シクロデキストリン類と混合した難溶性薬剤の非経口用水溶液が、非経口投与後の注射部位または器官での薬剤沈殿を最小限にすることが提案された (米国特許5 024 998)。ここでは、高い (50％ w/v付近) CD濃度を用いると溶解度の増大が認められ、これらの濃厚液からのいくらかの生成物と共に固体複合体 (solid complexes)が得られたが、20％ w/v以下のCD濃度では沈殿が起こりうることを強調している。この明細書に列挙されたおびただしい数の薬剤の中に、タキソイドあるいはアセチル−γCDに関する用語は出てこない。
【００１１】
メチル化β−シクロデキストリンの水溶液を有効なパクリタキセル溶解度向上剤として使用すること (PCT WO94/26728) 、およびメチル化β−シクロデキストリンとエタノールを組合わせて１〜４mg/ml のパクリタキセル溶液を製造すること (EP 788373)はさらなる改善を与えた。これらのタキソイド濃厚液は、ある限度までは希釈しても沈殿を生じないので、毒性の洗浄剤の使用が避けられる。パクリタキセルのより効果的な可溶化剤として2,6 −ジ−Ｏ−メチル−β−シクロデキストリンを使用することも提案され (EPA 0639380)、その可溶化の効力についての詳細な結果が発表されている(J. Pharm. Sci. 84, 10, 1223-1230; 1995)。しかし、注射可能な製剤におけるメチル化β−シクロデキストリンの使用については、その界面活性剤の性質、低い濃度および用量で既にコレステロールおよび他の細胞膜脂質成分へのその親和性のために、ある懸念が表明されている。
【００１２】
管外遊出 (溢出) させた時に細胞毒性化合物の同じ処方で比べて潰瘍形成の低下を得るためにシクロデキストリン類を水溶性薬剤と一緒に使用したある研究が発表された (WO 95/06485)。パクリタキセルは水溶性ではないが、この特許明細書は50％エタノール溶液中の「タキソール」の実施例も含んでいて、"HPCD"を添加した時のこの効果を例示している。その結果は、HPCDはタキソールを皮内部位中に付着させるときに皮膚への保護効果を発揮して、病変部の大きさの減少を生じたことを示している。
【００１３】
チオ−分岐シクロデキストリン類が抗ガン性のタキソイド (例、ドセタキセルおよびパクリタキセル) を可溶化することが開示された (PCT WO 95/19994)が、溶解度、安定性または毒性の改善に関する詳細はない。このような処方製剤はパクリタキセルの水溶解度の著しい増大を与えた。しかし、非経口投与のために希釈すると(0.3〜1.2 mg/ml)、薬剤の沈殿が起こった。
【００１４】
本発明の狙いは、注射可能な処方製剤中のタキソイドの溶解度と、非経口投与用のタキソイド薬剤系の安定性の両方をさらに改善すると同時に、処方のために使用する配合物質の毒性の低減を可能にすることであった。
【００１５】
本発明の基礎は、アセチル化−γ−シクロデキストリンとヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンのどちらも、溶解したパクリタキセルとドセタキセルの過飽和状態の延長に積極的な効果を示し、共溶媒としてエタノールを使用せずに早期沈殿を防止するという知見にある。この知見は、γ−シクロデキストリンとそのヒドロキシプロピル化誘導体−−これらはCD類の中で最大の大きさのキャビティを有することが知られている−−が、パクリタキセルの可溶化と複合体形成にあまり適していないと前に開示されたことがある (Int. J. Pharm. 133, 191-201, 1996)のが知られていることから、予想外の事実である。これは、化学的に変性したγ−シクロデキストリンの水溶液の濃度との関係としてパクリタキセルの平衡溶解度を記録した本発明者らの研究によって確認された。それによると、高いシクロデキストリン濃度を使用しても、実際上有用な可溶化効果は認められなかった。下記の表１：アセチル−γ−シクロデキストリン濃度に対するパクリタキセルの溶解度の変化、を参照。
【００１６】
【表１】
0003656550.tif 000002
【００１７】
室温でのパクリタキセルの水溶解度は約0.5 μg/mlであり、従って、40％アセチル−γ−シクロデキストリン溶液中で得られた170 μg/mlという溶解パクリタキセル濃度は、約340 倍の溶解度の増大を既に意味している。しかし、上のデータは、既知の結果によればDIMEβの40％ w/v水溶液中で約 800〜1000μg/mlのパクリタキセルが溶解したのに比べると貧弱である。同様な貧弱な結果が、可溶化剤としてHPβCDを使用した場合にも見られた。この値はパクリタキセルの治療用量に対応する望ましい値にははるかに及ばず、かかる剤形を使用すると、30 mg のパクリタキセル剤形単位(dosage unit) に対して70グラムより多量のシクロデキストリンの投与が必要となろう。
【００１８】
本発明の目的は、アセチル−γ−シクロデキストリンまたはヒドロキシ−プロピレン−β−シクロデキストリン (以下、シクロデキストリンと呼ぶ) を含有する、即可溶性固体状態の非経口用の薬剤組成物ならびにその水性溶媒中の溶液の製造方法である。この方法は下記工程を含む：
ａ) タキソイド、好ましくはパクリタキセルもしくはドセタキセル、あるいはその塩もしくは水和物を、エタノールに溶解した後、下記工程のいずれかを実施し：
i)  固体シクロデキストリンと、場合により非経口用途の製剤に慣用の他の水溶性佐剤とを添加し、この混合物を水性溶媒に溶解し、凍結乾燥して固体を得る；または
ii) 大表面積固体で非晶質の（好ましくは凍結乾燥した）シクロデキストリンと、場合により非経口用途の製剤に慣用の他の水溶性佐剤とを添加し、溶媒を蒸発させ、乾燥して固体を得る；または
iii)上記溶液を、大表面積固体で非晶質の好ましくは凍結乾燥したシクロデキストリンと（および、場合により非経口用途の製剤に慣用の他の水溶性佐剤と共に）混和した後、場合により有効量の等張化剤の存在下、水性溶媒で溶解して溶液を得る；
得られた固体または溶液は、
ａ）有効成分として前記タキソイド、および
ｂ）前記シクロデキストリン、および
ｃ）場合により非経口用途の製剤に慣用の他の水溶性佐剤、
を含有し、ここでタキソイド：シクロデキストリンの重量比は１：25〜１：400 の範囲であり；そして場合により
ｂ) 工程i)またはii) を使用した場合、得られた固体を水性溶媒に溶解し、
そのまま医療処置に使用する非経口溶液を得ることを特徴とする方法。
【００１９】
本発明によれば、タキソイドのパクリタキセルは、その水和した多形形態で、またはエタノール溶媒和物のようなその溶媒和形態で使用される。
本発明の好適態様では、有効成分のパクリタキセルを１：100 ないし１：250 の重量比でアセチル−γ−シクロデキストリンと一緒に使用する。別の好適態様では、ドセタキセルを１：25ないし１：100 の重量比の範囲内でHPβCDと一緒に使用する。
【００２０】
本発明に係る方法を実施する場合、水性溶媒または希釈剤として下記のいずれかを使用することができる：注射用品質の水、または塩化ナトリウム、グルコース、マンニトール、デキストロースのような等張化剤の水溶液。後者の水溶液は、後述する条件下で該水溶液を有効に等張化する量の該等張化剤を含有していなければならない。即ち、薬剤溶液を等張化するのに適当であることが知られている濃度は、使用するシクロデキストリンおよびタキソイドの存在によりいくらか変動しよう。かくして、塩化ナトリウムでは約0.9 ％ w/v、またはグルコースでは約５％ w/vの大きさの濃度が、使用するタキソイドおよび使用するCDの量および品質に応じて、その具体的組成物に対して最適化されなければならない。
【００２１】
本発明の別の目的は、本発明の方法に従って製造されたいずれかの生成物を有効成分として含有する薬剤組成物である。
本発明のさらに別の目的は、水溶性固体薬剤組成物およびその水性溶媒中の溶液であり、この組成物は下記成分を含有する：
ａ) 有効成分として、微細分散された大表面積の、パクリタキセルもしくはドセタキセルのようなタキソイド、これは場合によりその塩またはその多形の水和物または例えばエタノールで形成された溶媒和物、および
ｂ) 微細分散された大表面積のアセチル−γ−シクロデキストリンまたはヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリン（シクロデキストリン）、
ここで、該タキソイド：該シクロデキストリンの重量比は１：25〜１：250 の範囲であり、
ｃ) および場合により、非経口用途の製剤に慣用の他の水溶性佐剤。
【００２２】
本発明に係る好ましい組成物は、有効成分としてパクリタキセルとシクロデキストリンとしてアセチル−γ−シクロデキストリンとを１：100 ないし１：250 の重量比で含有する。別の好ましい組成物は、ドセタキセルとヒドロキシ−プロピル−β−シクロデキストリンとの１：25ないし１：100 の重量比での組合わせである。
【００２３】
本発明の別の目的は、上に詳述した本発明に係る薬剤組成物の形態でタキソイドを使用することにより、パクリタキセルおよびドセタキセルのようなタキソイド、ならびにそれらの塩、溶媒和物および水和物の水溶液中での自己凝集と早期沈殿を防止し、該薬剤の過飽和溶解状態を延長する方法である。
【００２４】
本発明のさらに別の目的は、上に詳述した本発明に係る薬剤組成物の有効量を利用することによる、望ましくない細胞増殖の治療方法である。本発明のすぐに使用できるパクリタキセル溶液は、かなりの時間のあいだ物理的に安定にとどまる。静脈内処置では、少なくとも６時間は物理的に安定な溶液を使用することが一般に要求される。本発明にかかる化合物を水溶液中に溶解させると、こうして再構成 (元に還元) された溶液は少なくとも６〜８時間は安定である。パクリタキセル／AcγCDならびにドセタキセル／AcγCDもしくはHPβCDの組合わせの溶液の場合、24時間以上の物理的安定性が測定された。
【００２５】
本発明の方法によれば、そのような治療を必要とする患者に、薬剤組成物を含有する非経口剤形を投与する方法が提供される。タキソイド量が100 mgの剤形単位を凍結乾燥形態で調製することができる。これらの単位を、例えば、静脈内治療のために投与可能な、すぐに使用できる溶液剤形を与えるように希釈する。患者の具体的な必要性において適用可能な要求される治療に応じて、一般にmg／m2体表面積で表される所望量に対応する有効投与量に達するように、数100 mg単位を投与する場合もある。例えば、 135〜250 mg／m2体表面積の範囲内のパクリタキセルの推奨用量を達成することができる。本薬剤は、治療すべきガンの種類や使用するのに選んだタキソイドおよびシクロデキストリンに応じて、例えば、静脈内、腹腔内、筋肉内投与により有効に使用することができる。これまで使用されてきた公知の組成物に含まれているビヒクルの毒性に比べて、本剤形の毒性がかなり低いことから、既知の治療法に比べて改善された治療結果を達成することができる。また、パクリタキセルまたはドセタキセルの投与前に、重篤な過敏反応を防止するために行う、ステロイド剤、抗ヒスタミン剤およびH2受容体拮抗剤を使用した過敏症や他の望ましくない副作用に対する事前投薬を患者に受けさせる必要がなくなる。
【００２６】
本発明の詳細を、例示を目的とし、保護範囲の制限を意図しない、以下の実施例に示す。
Ｉ. 処方組成物の調製
実施例I.1.：再構成可能な固体のパクリタキセル／アセチル−γ−シクロデキストリン混合物の乾燥による調製
パクリタキセル３mg (エタノール0.3 ml中に溶解) をアセチル−γ−シクロデキストリン粉末500 mg (水溶液から凍結乾燥したもの) に添加する。この混合物を五酸化リン上で18時間減圧下に置いて、エタノールを除去する。このエタノールを含まない粉末混合物の一部を、それぞれ５、４、３および２mlの５％グルコース水溶液中に溶解する。これらの再構成された溶液の物理的安定性を表２に示す。
【００２７】
【表２】
0003656550.tif 000003
【００２８】
この実験を、より少量のアセチル−γ−シクロデキストリンを用いて繰り返した。パクリタキセル３mg (エタノール0.3 ml中に溶解) を、450 mg、400 mgまたは350 mgの凍結乾燥したアセチル−γ−シクロデキストリンサンプルに添加した後、これを五酸化リン上で18時間減圧下に置いて、エタノールを除去する。
【００２９】
これらの混合物を、それぞれ５、４、３および２mlの５％グルコース水溶液中に溶解させた。表３、４、５に、異なる量のアセチル−γ−シクロデキストリンを使用して実施例I.1 に従って調製した再構成されたパクリタキセル溶液の組成ならびに物理的安定性をまとめて示す。
【００３０】
【表３】
0003656550.tif 000004
【００３１】
【表４】
0003656550.tif 000005
【００３２】
【表５】
0003656550.tif 000006
【００３３】
実施例I.2.：公称パクリタキセル濃度0.6 mg/ml のパクリタキセル処方組成物の調製
非晶質化アセチル−γ−シクロデキストリン6.5 g を、パクリタキセル濃度10 mg/mlのパクリタキセル溶液３ml (パクリタキセル30 mg に相当) で湿らせる。湿った混合物に直ちに５％デキストロース溶液50 ml を加え、この組成物を透明溶液が得られるまで振盪する。溶液中に溶解したパクリタキセル濃度は、溶液を0.2 μｍメンブランフィルターを通して濾過した後にHPLCで測定して0.55±0.05 mg/mlになる。この溶液は、認めうる乳濁 (乳白、opalescence)および／または粒子生成を伴わずに、ガラス容器内で普通の照明条件下、室温で少なくとも６時間は保管することができる。６時間の保管後のHPLCによる溶解パクリタキセルの再分析は、溶解パクリタキセル濃度の低下が起こっていなかったことを示す。
【００３４】
実施例I.3.：公称パクリタキセル濃度〜0.3 mg/ml のパクリタキセル処方組成物の調製
予め非晶質化したアセチル−γ−シクロデキストリン6.5 g を、パクリタキセル濃度10 mg/mlのパクリタキセル溶液３ml (パクリタキセル30 mg に相当) で湿らせる。この湿った混合物に直ちに５％デキストロース溶液100 mlを加え、混合物を透明溶液が得られるまで振盪する。この溶液中に溶解したパクリタキセル濃度は、溶液を0.2 μｍメンブランフィルターを通して濾過した後にHPLCで測定して0.27±0.03 mg/mlになる。この溶液は、認めうる乳濁および／または粒子生成を伴わずに、ガラス容器内で普通の照明条件下、室温で少なくとも12時間は保管することができる。12時間の保管後に溶解パクリタキセルのHPLC再分析を行ったところ、12時間の間に溶解パクリタキセル濃度の低下が起こらなかったことを示す。
【００３５】
実施例I.4.：公称ドセタキセル濃度0.5 および１mg/ml のドセタキセル処方組成物の調製
非晶質化アセチル−γ−シクロデキストリン100 mgを、ドセタキセル濃度が20 mg/mlのドセタキセル溶液0.1 ml (ドセタキセル２mgに相当) で湿らせる。この湿った固体混合物に直ちに５％w/v デキストロース水溶液１または２mlを加え、混合物を透明溶液が得られるまで振盪する。実施例I.4.に従った溶液中の溶解ドセタキセル濃度はそれぞれ１および0.5 mg/ml になる。この溶液は、認めうる乳濁および／または粒子生成を伴わずに、ガラス容器内で普通の照明条件下、室温で少なくとも24時間は保管することができる。20 mg ドセタキセル剤形単位と呼ばれるどちらの溶液も、組成は次の通りである：
−1000 mg のAcγCD
−  20 mg のドセタキセル
−   1 ml のエタノール
−  20 ml または40 ml の５％デキストロース。
【００３６】
実施例I.5.：ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン (HPβCD) を用いた公称ドセタキセル濃度0.75 mg/mlのドセタキセル処方組成物の調製
200 mgのHPβCDを、ドセタキセル濃度10 mg/mlのドセタキセル溶液0.15 ml(これはドセタキセル1.5 mgに相当) で湿らせる。この湿った混合物に直ちに５％デキストロース水溶液２mlを加え、混合物を透明溶液が得られるまで振盪する。実施例I.5.に従った溶液中の溶解ドセタキセル濃度は0.75 mg/mlになる。この溶液は、認めうる乳濁および／または粒子生成を伴わずに、ガラス容器内で普通の照明条件下、室温で少なくとも24時間は保管することができる。20 mg ドセタキセル剤形単位と呼ばれる溶液の組成は次の通りである：
−2670 mg のHPβCD
−  20 mg のドセタキセル
−   2 ml のエタノール
−  27 ml の５％デキストロース。
【００３７】
実施例I.6.：二成分系パクリタキセル／アセチル−γ−シクロデキストリン共凍結乾燥物の調製
エタノール３mlに溶解したパクリタキセル30 mg を、非晶質化アセチル−γ−シクロデキストリン5.0 g に添加する。この湿った粉末にさらにエタノール２mlを加え、粉末を蒸留水50 ml に溶解すると、公称パクリタキセル濃度0.6 mg/ml の透明溶液が得られる。この溶液をドライアイス中ですばやく凍結させ凍結乾燥すると、パクリタキセル含有量 0.6±0.05％/wの白い凍結乾燥物が得られる。
【００３８】
この凍結乾燥物は５％グルコース水溶液50 ml を加えることにより元の体積の溶液に容易に再構成 (還元) することができる。得られたのは、パクリタキセル濃度0.6 mg/ml の透明溶液である。
【００３９】
再構成した溶液をガラス容器内で普通の条件下、室温で保管する。試験溶液を0.2 μｍのメンブランを通して濾過した後にHPLC法を用いてパクリタキセル濃度を分析する。パクリタキセル含有量は、
調製後：       0.513±0.07 mg/ml*
25時間保管後： 0.556±0.01 mg/ml
(* パクリタキセル濃度の公称値と測定値との差は、嵩高の凍結乾燥物の体積膨張によるものである。)
実施例I.7.：二成分系ドセタキセル／アセチル−γ−シクロデキストリン共凍結乾燥物の調製
エタノール0.5 mlに溶解したドセタキセル10 mg を、非晶質化アセチル−γ−シクロデキストリン400 mgに添加する。この湿った粉末を蒸留水８mlに溶解すると、公称ドセタキセル濃度が1.25 mg/mlの透明溶液が得られる。この溶液をドライアイス中ですばやく凍結させて凍結乾燥すると、ドセタキセル含有量2.25±0.1 ％の白い凍結乾燥物が得られる。
【００４０】
この固体凍結乾燥物50 mg は５％グルコース水溶液１ml中に容易に溶解させることができ、ドセタキセル含有量が1.13 mg/ml (HPLCで測定) の透明溶液が得られる。
【００４１】
この再構成した溶液をガラス容器内で普通の条件下、室温で保管する。21時間の保管後、HPLC法を用いて分析したドセタキセル濃度は1.15±0.02 mg/mlである。72時間の保管後でも、溶液中に肉眼で見ることができる乳濁や固体粒子の析出は起きていない。
【００４２】
実施例I.8.：パクリタキセル／アセチル−γ−シクロデキストリン／グルコース共凍結乾燥物の調製
パクリタキセル30 mg をエタノール３mlに溶解し、この溶液を非晶質化アセチル−γ−シクロデキストリン5.0 g に加える。この湿った粉末にさらにエタノール２mlを加え、粉末を５％グルコース水溶液50 ml に溶解する。この溶液をドライアイス中で凍結させ凍結乾燥すると、パクリタキセル含有量0.42±0.01％の白い凍結乾燥物が得られる。
【００４３】
この凍結乾燥物は蒸留水50 ml を加えることにより元の体積の溶液に容易に再構成することができる。得られたのは、パクリタキセル濃度0.6 mg/ml の透明溶液である。
【００４４】
再構成した溶液を密閉したガラス容器内で普通の条件下、室温で保管する。保管中のパクリタキセル濃度を、試験溶液の濾過後にHPLC法を用いて測定する。
パクリタキセル含有量は次の通りであった：
調製直後：     0.530±0.08 mg/ml*
25時間保管後： 0.541±0.05 mg/ml
(* パクリタキセル濃度の公称値と測定値との差は、嵩高の凍結乾燥物の体積膨張によるものである。)
実施例I.9.：ドセタキセル／アセチル−γ−シクロデキストリン／グルコース共凍結乾燥物の調製
エタノール0.4 mlに溶解したドセタキセル８mgを、非晶質化アセチル−γ−シクロデキストリン400 mgに添加する。この湿った粉末を次に５％w/v グルコース水溶液８mlに溶解する。その結果、公称ドセタキセル濃度が１mg/ml の透明溶液が得られる。この溶液をドライアイス中で凍結させて凍結乾燥すると、ドセタキセル含有量１％の白い凍結乾燥物が得られる。
【００４５】
エタノールを含まない固体の凍結乾燥物100 mgは、１、２または４mlの蒸留水中で容易に再構成することができ、それぞれ公称ドセタキセル濃度が１、0.5 または0.25 mg/mlの透明溶液が得られる。表６に、密閉したガラス容器に入れて室温で21時間保管する間のドセタキセル溶液の物理的安定性を、異なる公称濃度でHPLCにより溶解ドセタキセル濃度を測定することによりまとめて示す。
【００４６】
【表６】
0003656550.tif 000007
【００４７】
実施例I.10. ：二成分系ドセタキセル／ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン (HPβCD) 共凍結乾燥物の調製
エタノール0.3 mlに溶解したドセタキセル６mgを300 mgのHPβCDに添加する。この湿った粉末を蒸留水６mlに溶解すると、公称ドセタキセル濃度が１mg/ml の透明溶液が得られる。この溶液をドライアイス中ですばやく凍結させて凍結乾燥すると、ドセタキセル含有量が２％w/w の白い凍結乾燥物が得られる。
【００４８】
この固体凍結乾燥物50 mg は５％w/v グルコース水溶液１または２ml中に容易に溶解させることができ、HPLCで測定してドセタキセル含有量がそれぞれ0.97および0.59 mg/mlの透明溶液が得られる。
【００４９】
この再構成した溶液をガラス容器内で普通の条件下、室温で保管する。21時間の保管後、HPLC法により0.95±0.05および0.49±0.005 mg/ml のドセタキセル濃度であると分析される。
【００５０】
実施例I.11. ：共蒸発によるパクリタキセルの過飽和溶解状態の延長
パクリタキセル30 mg をエタノール６mlに溶解し、この溶液をアセチル−γ−シクロデキストリン５g と十分に混合する。追加のエタノール３mlを加え、混合物を室温で５分間攪拌する。次いで、混合物のエタノール分を減圧下、回転蒸発器を用いて窒素気流中で除去する。得られた白色固体を次に脱イオン水５mlに溶解すると、わずかに乳濁した溶液が得られ、これを直ちにドライアイスで凍結させて凍結乾燥する。得られた凍結乾燥物は即可溶性の非晶質粉末である。これは、注射用蒸留水または５％グルコース水溶液を加えて透明溶液に再構成するのが好都合である。溶解パクリタキセル濃度が 0.3〜0.6 mg/ml の再構成された溶液は室温で少なくとも24時間は安定性を保つ。
【００５１】
実施例I.12. ：静脈内用の非経口組成物
エタノール10 ml に溶解したパクリタキセル100 mgを非晶質大表面積のアセチル−γ−シクロデキストリン15.0 gに添加する。この湿った粉末にさらに10 ml のエタノールを加え、粉末を蒸留水80 ml 中に溶解すると、公称パクリタキセル濃度が1.25 mg/mlの透明溶液が得られる。この溶液をドライアイス中ですばやく凍結させて凍結乾燥すると、パクリタキセル含有量が 0.7±0.05％w の白色凍結乾燥物が得られる。
【００５２】
この凍結乾燥物は５％w/v デキストロース水溶液を用いて100 mlに容易に再構成することができる。静脈内投与にすぐに使用できるパクリタキセル濃度1.0 mg/ml の透明溶液が得られる。
【００５３】
II. 生物学的試験
本試験の目的は、パクリタキセルの静脈内投与のある特定の副作用を評価することであった。静脈内投与後のパクリタキセルの心血管および呼吸への作用を、α−クロラロース（α-chloralose)／ペントバルビタール(pentobarbitone)ナトリウムの麻酔下に維持した全７匹のビーグル犬で検査した。
【００５４】
II.1. 試験物質
Ａ. バイアルに入れて供給されたパクリタキセル１ml液 (エタノール中30 mg/ml) 。試験時クレモファーELP:エタノール1:1 のビヒクル中に溶解。
【００５５】
Ｂ. パクリタキセル／AcγCD白色結晶質粉末；本明細書の実施例I. I.6. に従って調製。試験時に2.5 ％w/v デキストロース水溶液中に溶解。
II.2. 方法
心血管および呼吸系内の各種要素の機能状態の指標として下記パラメータを記録または誘導し、保存した。
【００５６】
【表７】
0003656550.tif 000008
【００５７】
麻酔は、チオペンタールナトリウムの静脈内注射により誘導し、必要に応じてα−クロラロースとペントバルビタールナトリウムとの混合物の静脈内注射により維持した。体温は維持された。
【００５８】
一回呼吸量 (ml) とその派生パラメータである呼吸数 (回数／分) および分時呼吸量 (ml) の測定を可能にするために、気管にカニューレを挿入し、そのカニューレを呼吸気流スクリーン (pneumotach screen)に接続した。血圧の測定とビヒクル、試験物質および麻酔薬の各投与を容易にするために、カテーテルを右大腿動脈と橈側皮静脈に導入した。大腿動脈は、Grass 7Eポリグラフにつなげてある、ヘパリン／食塩水を満たした圧力トランスデューサに接続した。心拍数は血圧信号から電子的に得た。
【００５９】
超音波流量プローブを左大腿動脈に導入し、Grass ポリグラフにつなげてある血流計に接続し大腿血流量 (ml/min) を記録した。
左心室収縮期圧力 (LVSP) の測定を容易にするために、左頸動脈にカテーテルを導入し、左心室まで進めた。このカテーテルをヘパリン／食塩水を満たした圧力トランスデューサに接続し、LVSP信号をGrass ポリグラフ上に表示させた。
【００６０】
Grass ポリグラフ上に表示させた心電図を監視するために、適当な脚部に皮下針電極を挿入した。Grass ポリグラフから各種信号をコンピュータに転送して、コンピュータ処理したデータを解析および表示した。
【００６１】
30分の安定化期間の後、ビヒクルを7.0 ml/kG の投与用量で15分間かけて静脈内投与した。45分後、その後は最低45分の間隔で、薬剤を7.0 ml/kG の投与用量でやはり15分間かけて複数回、静脈内投与した。輸液の開始から少なくとも45分間は各パラメータを監視した。すべての投与はKdS 200 型輸液ポンプを使用して行った。
【００６２】
下記サンプルを試験した：
【００６３】
【表８】
0003656550.tif 000009
【００６４】
心電図 (ECG)の高解像度 (50 mm/sec)記録を含む全パラメータを、安定化期間中は５分間隔で、そしてビヒクルおよび薬剤の投与後は0.5 分、１分、２分および５分の投与後間隔で測定した。全部の観察期間の終了後に、動物をペントバルビタールナトリウムの静脈内過剰投与により致死させた。
【００６５】
II.3. 結果
0003656550.tif 000010
【００６６】
0003656550.tif 000011
【００６７】
II.4. 図面
これらの結果の重要なパラメータを図示するため、麻酔したビーグル犬の静脈内投与後の動脈血圧に及ぼす影響を図１〜６に示す：
【００６８】
【表９】
0003656550.tif 000012
【００６９】
II.5. まとめ
クレモファーELP ：エタノール１：１ビヒクル、ならびにこのビヒクルと一緒のパクリタキセルの静脈内投与は、アナフィラキシー型の反応を引き起したので、投与するのに適切ではない。ビヒクルとしてのデキストロース水溶液中でのパクリタキセル／アセチル−γ−CD (20 mg から240 mg/m2 まで) の投与は、試験したどの動物のどのパラメータについても顕著で不変の心血管への明白な影響を生じることはなかった。
【図面の簡単な説明】
【図１】  麻酔したビーグル犬の静脈内投与後の平均動脈血圧 (mmHg) に及ぼす影響を時間(min) との関係として示す。クレモファーELP ：エタノール１：１ビヒクルだけを静脈内投与。
●：収縮期血圧、▲：拡張期血圧 (以下、同じ) 。
【図２】  麻酔したビーグル犬の静脈内投与後の平均動脈血圧 (mmHg) に及ぼす影響を時間(min) との関係として示す。クレモファーELP ：エタノール１：１ビヒクルだけを静脈内投与。
【図３】  麻酔したビーグル犬の静脈内投与後の平均動脈血圧 (mmHg) に及ぼす影響を時間(min) との関係として示す。2.5 ％デキストロース水溶液ビヒクル中のパクリタキセル／アセチル−γ−CD (10, 20, 40, 60 mg/m2) を投与。
【図４】  麻酔したビーグル犬の静脈内投与後の平均動脈血圧 (mmHg) に及ぼす影響を時間(min) との関係として示す。2.5 ％デキストロース水溶液ビヒクル中のパクリタキセル／アセチル−γ−CD (120, 90, 240 mg/m2) を投与。
【図５】  麻酔したビーグル犬の静脈内投与後の平均動脈血圧 (mmHg) に及ぼす影響を時間(min) との関係として示す。2.5 ％デキストロース水溶液ビヒクル中のパクリタキセル／アセチル−γ−CD (10, 90, 40, 60 mg/m2) を投与。
【図６】  麻酔したビーグル犬の静脈内投与後の平均動脈血圧 (mmHg) に及ぼす影響を時間(min) との関係として示す。2.5 ％デキストロース水溶液ビヒクル中のパクリタキセル／アセチル−γ−CD (120, 90, 240 mg/m2) を投与。
【図１】
0003656550.tif 000013
【図２】
0003656550.tif 000014
【図３】
0003656550.tif 000015
【図４】
0003656550.tif 000016
【図５】
0003656550.tif 000017
【図６】
0003656550.tif 000018