(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液を複数の血液成分に分離するとともに分離された血液成分を移送する血液成分分離装置であって、
内部に貯血空間を有する回転可能なローターと、前記貯血空間に連通する流入口および流出口とを有し、前記ローターの回転により前記流入口より導入された血液を前記貯血空間内で複数の血液成分に遠心分離する遠心分離器と、
前記流入口に接続された第１のラインと、
前記流出口に接続された第２のラインと、
バフィーコートを貯留する容器と、
一端が前記容器と接続され、他端が前記第１のラインおよび／または第２のラインに接続された第３のラインとを有し、
前記第１のラインを介して前記貯血空間に血液を導入するとともに前記ローターを回転し、前記血液を遠心分離して複数の血液成分に分離し、次いで、これにより得られたバフィーコートを前記第３のラインを介して前記容器へ移送するとともに、バフィーコート以外の血液成分を前記貯血空間から排出、移送し、その後、前記容器内のバフィーコートを前記第３のラインを介して前記貯血空間へ戻した後、前記貯血空間に血液を導入するとともに前記ローターを回転し、前記血液を遠心分離して複数の血液成分に分離し、前記貯血空間から流出した血漿を前記容器およびバフィーコートの流路に導入して前記容器およびバフィーコートの流路を洗浄し、その洗浄に供された血漿を前記貯血空間に戻して、該バフィーコートを含む血液成分に対し再度遠心分離を施してバフィーコート中の血小板を前記第２のラインを介して回収するよう作動することを特徴とする血液成分分離装置。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、血液中から所定の血液成分を分離する血液成分分離装置に関する。
【０００２】
【従来の技術】
採血を行う場合、現在では、血液の有効利用および供血者の負担軽減などの理由から、採血血液を遠心分離などにより各血液成分に分離し、輸血者に必要な成分だけを採取し、その他の成分は供血者に返還する成分採血が行われている。
【０００３】
このような成分採血において、血小板製剤を得る場合、供血者から採血した血液を血液成分分離回路に導入し、該血液成分分離回路に設置された遠心ボウルと呼ばれる遠心分離器により、血漿、白血球、血小板および赤血球の４成分に分離し、その内の血小板を容器に回収して血小板製剤とし、残りの血漿、白血球および赤血球は、供血者に返血することが行われる。そして、目標とする血小板数を確保するために、上記採血、採血血液の遠心分離、血小板の回収および返血よりなる一連の血液処理工程が複数回行われる。
【０００４】
しかしながら、この方法では、白血球と血小板との比重がわずかな差であることから、これらの界面が明確ではなく、白血球と血小板とを含む一体のバフィーコート層として認識されるため、回収された血小板中の白血球（特にリンパ球）の除去率が低くなり、その結果、その血小板製剤を使用した場合に、肝炎、エイズ、ＧＶＨＤ等の感染の確率が高くなるという問題がある。
【０００５】
そこで、遠心ボウルの下方より先に得られた血漿を供給して血小板を浮上させ、該血小板を回収する方法（サージ法）が提案されているが、１回の遠心分離で得られるバフィーコートの量が少なく、遠心ボウル内でのバフィーコート層の厚さが薄くなり、しかも、血漿の供給速度が比較的高速（２００ml／min 以上）であるため、やはり血小板中の白血球除去率が低く、上記問題が解決されていない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、遠心分離により得られた血小板の収率または該血小板中の白血球の除去率が高い血液成分分離装置を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
このような目的は、下記（１）の本発明により達成される。
【０００８】
（１）  血液を複数の血液成分に分離するとともに分離された血液成分を移送する血液成分分離装置であって、
内部に貯血空間を有する回転可能なローターと、前記貯血空間に連通する流入口および流出口とを有し、前記ローターの回転により前記流入口より導入された血液を前記貯血空間内で複数の血液成分に遠心分離する遠心分離器と、
前記流入口に接続された第１のラインと、
前記流出口に接続された第２のラインと、
バフィーコートを貯留する容器と、
一端が前記容器と接続され、他端が前記第１のラインおよび／または第２のラインに接続された第３のラインとを有し、
前記第１のラインを介して前記貯血空間に血液を導入するとともに前記ローターを回転し、前記血液を遠心分離して複数の血液成分に分離し、次いで、これにより得られたバフィーコートを前記第３のラインを介して前記容器へ移送するとともに、バフィーコート以外の血液成分を前記貯血空間から排出、移送し、その後、前記容器内のバフィーコートを前記第３のラインを介して前記貯血空間へ戻した後、前記貯血空間に血液を導入するとともに前記ローターを回転し、前記血液を遠心分離して複数の血液成分に分離し、前記貯血空間から流出した血漿を前記容器およびバフィーコートの流路に導入して前記容器およびバフィーコートの流路を洗浄し、その洗浄に供された血漿を前記貯血空間に戻して、該バフィーコートを含む血液成分に対し再度遠心分離を施してバフィーコート中の血小板を前記第２のラインを介して回収するよう作動することを特徴とする血液成分分離装置。
【００１９】
【実施例】
以下、本発明の血液成分分離装置を添付図面に示す好適実施例に基づいて詳細に説明する。
【００２０】
図１は、本発明の血液成分分離装置の第１実施例を示す平面図、図２は、図１に示す血液成分分離装置の制御系を示すブロック図である。これらの図に示すように、血液成分分離装置１Ａは、遠心ボウル（遠心分離器）４と、その回転駆動装置５と、遠心ボウル４に血液および血漿を選択的に導入する第１のライン２（血液または血漿導入ライン）と、遠心ボウル４にて分離された血液成分を回収する第２のライン３（血液成分回収ライン）と、バフィーコートを貯留する容器であるバフィーコートバッグ２５と、該バフィーコートバッグ２５内のバフィーコートを遠心ボウル４へ導入する第３のライン８と、光学センサー６１、６２と、制御手段７と、血液貯留部１０６を有する第４のライン（供血者を想定した脱・返血ライン）１０と、第１のライン２に設置されたポンプ９１とを有する。
【００２１】
図１に示すように、第４のライン１０は、主に、チューブ１０１と、チューブ１０１の途中にト字状の分岐コネクタ１０２を介して接続されたチューブ１０３と、チューブ１０１、１０３の先端にそれぞれ接続された血液バッグ１０４、１０５とで構成されている。両血液バッグ１０４、１０５により、血液貯留部１０６が構成されている。
【００２２】
チューブ１０１の基端は、Ｔ字状の分岐コネクタ１２を介してチューブ１３および２０の一端と接続されている。チューブ１０１の途中には、チューブ１０１の内部流路を遮断・解放し得る流路開閉手段であるバルブ８３が設置されている。
【００２３】
第１のライン２は、チューブ１３およびその一端に接続された分岐コネクタ１２により構成されている。チューブ１３の他端は、遠心ボウル４の流入口４３に接続され、チューブ１３の途中には、例えばローラポンプよりなる送液用のポンプ９１が設置されている。
【００２４】
図３に示すように、遠心ボウル４は、上端に流入口４３が形成された鉛直方向に伸びる管体４１と、該管体４１の回りで回転し、上部４５に対し液密にシールされたローター４２とで構成されている。ローター４２の内部には、ローター周壁内面に沿って環状の貯血空間４６が形成されている。この貯血空間４６は、図３中下部から上部に向けてその内外径が漸減するような形状（テーパ状）をなしている。貯血空間４６の下部は、ローター４２の底部に沿って形成されたほぼ円盤状の流路４７を介して管体４１の下端開口と連通し、貯血空間４６の上部は、流路４８を介して流出口４４に連通している。また、このローター４２において、貯血空間４６の容積は、例えば、１００〜３５０ml程度とされる。
【００２５】
このようなローター４２は、回転駆動装置５により予め設定された所定の遠心条件（回転速度および回転時間）で回転される。この遠心条件により、ローター４２内の血液の分離パターン（例えば、分離する血液成分数）を設定することができる。本実施例では、図３に示すように、血液が貯血空間４６内で内層より血漿層３１、バフィーコート層３２および赤血球層３３に分離されるように遠心条件が設定される。
【００２６】
回転駆動装置５は、図３に示すように、遠心ボウル４を収納するハウジング５１と、脚部５２と、駆動源であるモータ５３と、遠心ボウル４を保持する円盤状の固定台５５とで構成されている。
【００２７】
ハウジング５１は、脚部５２の上部に載置、固定されている。また、ハウジング５１の下面には、ボルト５６によりスペーサー５７を介してモータ５３が固定されている。モータ５３の回転軸５４の先端部には、固定台５５が回転軸５４と同軸でかつ一体的に回転するように嵌入されており、固定台５５の上部には、ローター４２の底部が嵌合する凹部５５１が形成されている。また、遠心ボウル４の上部４５は、図示しない固定部材によりハウジング５１に固定されている。
【００２８】
このような回転駆動装置５では、モータ５３を駆動すると、固定台５５およびそれに固定されたローター４２が、例えば、回転数３０００〜６０００rpm で回転する。
【００２９】
ハウジング５１の内壁には、ローター４２内の分離された血液成分の界面、すなわち、バフィーコート層３２と赤血球（濃厚赤血球）層３３との界面Ｂの位置を光学的に検出する光学センサー６１が、取付部材５８により設置、固定されている。この光学センサー６１としては、ローター４２の外周面に沿って上下方向に走査し得るラインセンサーが用いられる。すなわち、ＬＥＤのような発光素子とフォトダイオードのような受光素子とが列状に配置され、発光素子から発っせられた光の血液成分での反射光を受光素子により受光し、その受光光量を光電変換するように構成されている。分離されたバフィーコート層３２と赤血球層３３とで反射光の強度が異なるため、受光光量すなわち出力電圧が変化した受光素子に対応する位置が、界面Ｂの位置として検出される。
【００３０】
図１に示すように、遠心ボウル４の流出口４４には、チューブ１４の一端が接続され、チューブ１４の他端は、Ｔ字状の分岐コネクタ１５を介してチューブ１６および１８の一端と接続されている。
【００３１】
チューブ１６の他端は、血小板バッグ１７に接続され、チューブ１６の途中には、チューブ１６内の流路を開閉するバルブ８５が設置されている。
また、チューブ１８の他端は、気泡除去用のチャンバー１９に接続され、チューブ１８の途中には、チューブ１８内の流路を開閉するバルブ８６が設置されている。
【００３２】
一端が分岐コネクタ１２に接続されているチューブ２０の他端は、気泡除去用のチャンバー１９に接続され、チューブ２０の途中には、チューブ２０内の流路を開閉するバルブ８４が設置されている。
【００３３】
空気貯留バッグ２２は、一連の処理後に血漿バッグ２１内からエアーを排出し、これを貯留するためのバッグであり、そのため、血漿バッグ２１および空気貯留バッグ２２は、チューブ２３により接続されてその内部同士が連通している。また、血漿バッグ２１には、チューブ２４の一端が接続され、チューブ２４の他端は、気泡除去用のチャンバー１９に接続されている。
【００３４】
このような構成において、チューブ１４、１６、１８、２０、２３、２４、分岐コネクタ１５、チャンバー１９およびバッグ１７、２１、２２により、第２のライン３が構成されている。このうち、チューブ１８、チャンバー１９、チューブ２３、２４およびバッグ２１、２２は、血漿を回収するための血漿回収用分岐ラインを構成し、チューブ１４、１６および血小板バッグ１７は、血小板を回収するための血小板回収用分岐ラインを構成する。
【００３５】
なお、図示されていないが、血漿バッグ２１は、チューブ２４の接続側端部を上方または下方へ選択的に向けることができる装置（バッグ揺動装置）にセットされていてもよい。
【００３６】
チューブ１４の流出口４４の近傍には、分岐コネクタ２８が設置され、この分岐コネクタ２８には、チューブ２６の一端が接続されている。また、チューブ２６の他端は、バフィーコートバッグ２５に接続され、チューブ２６の途中には、チューブ２６内の流路を開閉するバルブ８７が設置されている。このチューブ２６および分岐コネクタ２８により第３のライン８が構成されている。
【００３７】
このようなバフィーコートバッグ２５は、複数個設置されていてもよく、その接続パターンも特に限定されない。また、バフィーコートバッグ２５の容量は、特に限定されないが、通常、合計容量が１００〜８００ml程度が好ましく、４００〜５００ml程度がより好ましい。
なお、図示されていないが、バフィーコートバッグ２５は、前記と同様のバッグ揺動装置にセットされていてもよい。
【００３８】
また、チューブ１４の途中には、チューブ１４内を流れる血液成分中の血小板の濃度を検出し得る光学センサー６２が設置されている。この光学センサー６２は、チューブ１４を介して対向配置された投光部（光源）６３および受光部（フォトダイオード）６４で構成されている。投光部６３から発せられた光（例えばレーザー光）は、チューブ１４を透過して受光部６４で受光され、その受光光量に応じた電気信号に変換されるが、チューブ１４内を流れる血液成分中の血小板濃度に応じて透過率が変化し、受光部６４での受光光量が変動するため、この変動を受光部６４からの出力電圧の変化として検出することができる。
【００３９】
前記各バルブ８３〜８７は、例えば、ソレノイド、電動モーター、またはシリンダ（油圧または空気圧）等の駆動源で作動し、該駆動源は、後述する制御手段７からの信号に基づいて作動する。なお、本発明において、流路開閉手段は、前記バルブ（コック）に限らず、例えば可撓性チューブを挟持してその内腔を閉塞し得るクレンメであってもよい。
【００４０】
前記各バッグ１７、２１、２２、２５、１０４、１０５は、それぞれ、樹脂製の可撓性を有するシート材を重ね、その周縁部を融着（熱融着、高周波融着等）または接着して袋状にしたものである。
【００４１】
各バッグ１７、２１、２２、２５、１０４、１０５を構成するシート材の構成材料としては、例えば、軟質ポリ塩化ビニルが好適に使用される。この軟質ポリ塩化ビニルにおける可塑剤としては、例えば、ジ（エチルヘキシル）フタレート（ＤＥＨＰ）、ジ−（ｎ−デシル）フタレート（ＤｎＤＰ）等が使用される。なお、このような可塑剤の含有量は、ポリ塩化ビニル１００重量部に対し、３０〜７０重量部程度とするのが好ましい。
【００４２】
また、各バッグ１７、２１、２２、２５、１０４、１０５のシート材の他の構成材料としては、ポリオレフィン、すなわちエチレン、プロピレン、ブタジエン、イソプレン等のオレフィンあるいはジオレフィンを重合または共重合した重合体を用いることができ、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン−酢酸ビニル共重合体（ＥＶＡ）、ＥＶＡと各種熱可塑性エラストマーとのポリマーブレンド等、あるいは、これらを任意に組み合せたものが挙げられる。さらには、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）、ポリ−１，４−シクロヘキサンジメチルテレフタレート（ＰＣＨＴ）のようなポリエステルや、ポリ塩化ビニリデンを用いることもできる。
【００４３】
なお、血小板バッグ１７を構成するシート材は、血小板保存性を向上するために、ガス透過性に優れるものが好ましく、そのために、例えば、シート材として、前記ポリオレフィンやＤｎＤＰ可塑化ポリ塩化ビニル等を用いたり、また、シート材の厚さを比較的薄く（例えば、０．１〜０．５mm程度、特に、０．１〜０．３mm程度）するのが好ましい。
【００４４】
血液バッグ１０４、１０５の少なくとも一方の内部には、予め血液が貯留されている。この血液中には、例えば、ＡＣＤ−Ａ液、ＣＰＤ液、ＣＰＤ−Ａ１液、ヘパリンナトリウム液等の抗凝固剤が添加されているのが好ましい。なお、血液貯留部１０６に設置される血液バッグの数は、１または３以上であってもよく、その接続方法、接続パターンも任意可能である。例えば、実開平６−２６８７７号公報等に記載されているチューブ接続装置により、１または２以上の血液バッグを無菌的に接続、交換して使用することもできる。
また、血小板バッグ１７は、空の状態でもよいが、例えば、生理食塩水、ＧＡＣ、ＰＡＳ、ＰＳＭ−１のような血小板保存液が予め入れられていてもよい。
【００４５】
チューブ１０１、１０３、１３、１４、１６、１８、２０、２３、２４、２６、２７の構成材料としては、例えば、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ＰＥＴやＰＢＴのようなポリエステル、エチレン−酢酸ビニル共重合体、ポリウレタン、ポリエステルエラストマー、スチレン−ブタジエン−スチレン共重合体等の熱可塑性エラストマー等が挙げられるが、その中でも特に、ポリ塩化ビニルが好ましい。各チューブがポリ塩化ビニル製であれば、十分な可撓性、柔軟性が得られるので取り扱いがし易く、また、クレンメ等による閉塞にも適するからである。
また、分岐コネクタ１０２、１２、１５、２８、２９の構成材料についても、前記チューブの構成材料と同様のものを用いることができる。
【００４６】
図２に示すように、血液成分分離装置１Ａは、例えばマイクロコンピュータで構成される制御手段７を有し、該制御手段７には、前記ポンプ９１、バルブ８３〜８７、光学センサー６１、６２および回転駆動装置５がそれぞれ電気的に接続されている。
【００４７】
光学センサー６１からの検出信号（界面位置検出情報）および光学センサー６２からの検出信号（血小板濃度情報）は、それぞれ、制御手段７へ随時入力される。制御手段７は、光学センサー６１、６２からの各検出信号に基づき、ポンプ９１の回転／停止、回転方向（正転／逆転）および回転数を制御するとともに、必要に応じ、各バルブ８３〜８７の開閉および回転駆動装置５の作動を制御する。
【００４８】
以上のような遠心ボウル４を用いた血液成分分離装置１Ａでは、バッグ内で血液を遠心分離する方法に比べ、回収された血小板のペレット化（塊状となること）が極めて少ないという利点がある。
【００４９】
次に、図１に示す血液成分分離装置１Ａを用いた本発明の血小板採取方法の好適な実施例について説明する。以下の各工程におけるバルブ８３〜８７、ローター４２およびポンプ９１の作動状態を、下記表１に示し、該表１を参照しつつ説明する。
【００５０】
【表１】
0003715338.tif 000002
【００５１】
［１ａ］  血液バッグ１０４、１０５内には、それぞれ、例えば４００mlの採血血液が充填されており、チューブ１０３をクレンメで閉塞し、バルブ開閉パターンを表１中の（１）として、ポンプ９１を作動（正転）する。これにより、血液バッグ１０４内の血液は、チューブ１０１および１３を介して移送され、遠心ボウル４の流入口４３より管体４１を経てローター４２内に導入される。なお、ポンプ９１の回転速度は、血液吐出量（血液供給速度）が例えば３０〜８０ml／min 程度となるように設定される。
【００５２】
［２ａ］  また、前記工程［１ａ］の血液移送と同時に、回転駆動装置５を作動して、ローター４２を好ましくは３０００〜６０００rpm （例えば、４８００rpm ）で回転する。管体４１の下端開口より流出した血液は、ローター４２の回転による遠心力により、流路４７を外周方向へ向けて放射状に流れ、貯血空間４６に集められ、該貯血空間４６において内層より血漿層３１、バフィーコート層３２および赤血球層３３に分離される。
【００５３】
［３ａ］  前記工程［１ａ］、［２ａ］を継続しつつ、血漿層３１が貯血空間４６の上部に到達したら、バルブ開閉パターンを（２）とする。これにより、ローター４２内の血漿が流出口４４よりオーバーフローし、チューブ１４、１８、チャンバー１９、チューブ２４を介して血漿バッグ２１内に回収される。
【００５４】
［４ａ］  ローター４２内からの血漿の排出に伴い、バフィーコート層３２と赤血球層３３との界面Ｂも徐々に上昇する。この界面Ｂは、光学センサー６１により随時検出されており、界面Ｂが所定レベル、すなわち流出口４４からバフィーコートが流出し始める程度のレベルに到達したことが検出されると、制御手段７は、その検出信号（界面位置検出情報）に基づき、バルブ開閉パターンを（３）とするよう制御する。これにより、以後、流出口４４から流出したバフィーコートは、チューブ１４、２６を介してバフィーコートバッグ２５へ移送、回収される。
【００５５】
［５ａ］  光学センサー６１により、界面Ｂが所定レベル、すなわち貯血空間４６からほぼ全てのバフィーコートが排出される程度のレベルに到達したことが検出されると、制御手段７は、その検出信号（界面位置検出情報）に基づき、回転駆動装置５を停止し、バルブ開閉パターンを（４）とし、ポンプ９１を逆回転するよう制御する。これにより、遠心ボウル４内に残った赤血球が、管体４１、チューブ１３、１０１を介して、血液バッグ１０４内に返血される。
【００５６】
［６ａ］  バルブ開閉パターンを（５）とし、ポンプ９１を作動（正転）して、血漿バッグ２１内の血漿の全部または一部をチューブ２４、チャンバー１９、チューブ２０、１３を介してローター４２内に入れる。
【００５７】
［７ａ］  続いて、バルブ開閉パターンを（６）とし、ポンプ９１を逆回転して、血漿バッグ２１から移送した遠心ボウル４内の血漿を、管体４１、チューブ１３、１０１を介して、血液バッグ１０４内に返血する。
【００５８】
［８ａ］  分岐コネクタ１０２と血液バッグ１０４との間のチューブ１０１の途中を例えば融着により封止し、さらにこの封止部を切断、分離する。これにより、返血用乏血小板血液入りの血液バッグ１０４が得られる。血液バッグ１０４内の乏血小板血液は、必要に応じ、供血者に返血される。
【００５９】
なお、処理する血液バッグ数がｎ個（ｎ＝３以上の整数）である場合、ｎ−１個までの血液バッグに対し、前記工程［１ａ］〜［８ａ］を繰り返し行い、ｎ個目の血液バッグに対し、以下の工程を行う。
【００６０】
［９ａ］  回転駆動装置５を作動してローター４２を例えば３０００〜６０００rpm で回転するとともに、バフィーコートバッグ２５のチューブ２６の接続側端部を下方へ向けた状態で、バルブ開閉パターンを（７）とし、ポンプ９１を逆回転する。これにより、バフィーコートバッグ２５内に貯留されているバフィーコートは、チューブ２６、１４、流出口４４、流路４８を介して貯血空間４６内に戻される。
【００６１】
［１０ａ］  クレンメによるチューブ１０３の閉塞を解除し、バルブ開閉パターンを（８）とし、ポンプ９１を前記工程［１ａ］と同条件で作動（正転）する。これにより、血液バッグ１０５内の血液は、チューブ１０３、１０１および１３を介して移送され、遠心ボウル４の流入口４３より管体４１を経てローター４２内に導入され、貯血空間４６において血液が内層より血漿層３１、バフィーコート層３２および赤血球層３３に分離される。
【００６２】
この場合、バフィーコート層３２は、複数回の採血に相当する複数の血液バッグ（図示の構成では血液バッグ１０４、１０５）内の合計の血液より得られる量のバフィーコートで構成されるため、その層厚が厚くなり、後述するサージ工程において、血小板の浮上、濃縮がより明確に行われ、血小板の収率および回収された血小板中の白血球の除去率が向上する。
【００６３】
［１１ａ］  流出口４４より血漿が流出したら、まず、バルブ開閉パターンを（９）とする。これにより、流出口４４より流出した血漿が、チューブ１４、２６を介してバフィーコートバッグ２５内に導入され、チューブ１４、２６の流路およびバフィーコートバッグ２５の内部が洗浄される。このとき、バフィーコートバッグ２５を揺動させると、その内部の洗浄効果が高まり、好ましい。
【００６４】
［１２ａ］  バフィーコートバッグ２５のチューブ２６の接続側端部を下方へ向けた状態で、バルブ開閉パターンを（10）とし、ポンプ９１を逆回転する。これにより、バフィーコートバッグ２５内等の洗浄に供された血漿（洗浄液）が、チューブ２６、１４、流出口４４、流路４８を介して貯血空間４６内に戻される。なお、バフィーコートバッグ２５を高所へ置き、必要に応じ所定のエアー抜きを設け、落差によりバフィーコートバッグ２５内の洗浄液を貯血空間４６へ移送してもよく、あるいは、バフィーコートバッグ２５を例えば一対の加圧板等により挟持、圧迫して洗浄液を排出、移送してもよい。
【００６５】
このような、バフィーコートバッグ２５内等の洗浄およびその洗浄液の貯血空間４６への回収を行うことにより、血小板をバフィーコートバッグ２５内等に残存せず、血小板の収率が向上する。
【００６６】
［１３ａ］  バルブ開閉パターンを（11）とし、ポンプ９１を作動（正転）する。これにより、血漿バッグ２１内の血漿が、チューブ２４、チャンバー１９、チューブ２０、１３および管体４１を介してローター４２内に供給され、さらにチューブ１４、１６を流れ、サージ回路が血漿でプライミングされる。
【００６７】
［１４ａ］  次いで、バルブ開閉パターンを（12）とする。これにより、ローター４２内の血漿が流出口４４より流出し、チューブ１４、１８、チャンバー１９、チューブ２４を介して血漿バッグ２１内に回収される。
【００６８】
［１５ａ］  光学センサー６１により、界面Ｂが所定のサージ開始レベル、すなわち貯血空間４６の容積に対する貯血空間４６内に存在する赤血球層３３の体積の比率が好ましくは７０〜９６％、より好ましくは８５〜９４％に達したときのレベルに到達したことが検出されると、制御手段７は、その検出信号（界面位置検出情報）に基づき、バルブ開閉パターンを（13）とするよう制御する。これにより、血漿バッグ２１内の血漿が、チューブ２４、チャンバー１９、チューブ２０、１３および管体４１を介してローター４２内に供給される。管体４１の下端開口より流出した血漿は、ローター４２の回転による遠心力により、流路４７を外周方向へ向けて放射状に流れ、貯血空間４６の下部を経て貯血空間４６内を上昇する。これにより、バフィーコート層３２中の血小板が遠心力に抗して浮上し（舞い上がり）、流路４８を経て流出口４４より流出し、チューブ１４および１６を介して血小板バッグ１７内に回収される（サージ工程）。なお、血小板の流出は、光学センサー６２による血小板濃度の上昇により検知される。
【００６９】
このサージ工程において、制御手段７は、ポンプ９１の回転速度（血漿吐出量）を制御することにより、ローター４２内への血漿の供給速度を好ましくは１０〜９０ml／min 、より好ましくは１０〜７０ml／min に設定する。血漿供給速度が１０ml／min 未満では、血小板の回収に長時間を要し、９０ml／min を超えると、血小板とともに白血球の浮上量が増え、回収された血小板中の白血球の除去率が低下するからである。
【００７０】
また、血小板の回収中において、血漿の供給速度は、１０〜９０ml／min の範囲内で適宜変更してもよい。例えば、最初に血漿を所定速度で供給し、次いでそれより低速で供給するサイクルを少なくとも１回行うような方法が挙げられる。このような場合、血漿の最大供給速度は、２５〜９０ml／min 、特に３０〜７０ml／min とするのが好ましい。このような血漿供給速度の変更は、例えば、制御手段７に内蔵されるタイマーに基づいて、あるいは光学センサー６２により検出される血小板濃度情報に応じて行うことができる。
【００７１】
［１６ａ］  光学センサー６２により検出される血小板濃度が予め設定された基準値以下となったら、血小板バッグ１７への血小板の回収が終了したものとみなし、制御手段７は、その検出信号（血小板濃度情報）に基づき、回転駆動装置５を停止し、バルブ開閉パターンを（14）とし、ポンプ９１を逆回転するよう制御する。これにより、遠心ボウル４内に残った赤血球、白血球および血漿が、管体４１、チューブ１３、１０１を介して、血液バッグ１０５内に返血される。
【００７２】
［１７ａ］  バルブ開閉パターンを（15）とし、ポンプ９１を作動（正転）して、血漿バッグ２１内に残った血漿をチューブ２４、チャンバー１９、チューブ２０、１３を介してローター４２内に入れる。
【００７３】
［１８ａ］  続いて、バルブ開閉パターンを（16）とし、ポンプ９１を逆回転して、血漿バッグ２１から移送した遠心ボウル４内の血漿を、管体４１、チューブ１３、１０１を介して、血液バッグ１０５内に返血する。
【００７４】
［１９ａ］  チューブ１０３の途中を例えば融着により封止し、さらにこの封止部を切断、分離する。これにより、返血用乏血小板血液入りの血液バッグ１０５が得られる。血液バッグ１０５内の乏血小板血液は、必要に応じ、供血者に返血される。
【００７５】
［２０ａ］  血小板バッグ１７付近のチューブ１６を例えば融着により封止し、さらにこの封止部を切断、分離することにより、血小板製剤入りの血小板バッグ１７が得られる。
【００７６】
以上のように、本発明では、複数の血液バッグ（図示の構成では血液バッグ１０４、１０５）内の合計の血液より得られる量のバフィーコートを集め、これに対し一度にサージ工程を行うため、サージの際の貯血空間４６内におけるバフィーコート層３２の層厚が厚くなり、よって、バフィーコート層３２中からの血小板の浮上、濃縮がより明確に行われ、血小板の収率および回収された血小板中の白血球の除去率が向上する。
【００７７】
特に、サージ工程において、血漿の供給速度を１０〜９０ml／min とすることにより、血小板の浮上を最適に調整し、よって、白血球の除去率が極めて高い高品質の血小板製剤が得られる。しかも、光学センサー６１により、分離された血液成分の界面を検出し、それに基づいて血漿供給の開始（血液供給の終了）のタイミングを制御するため、自動化とともにより高精度の制御が可能となり、血小板の回収率および回収された血小板中の白血球の除去率がさらに向上する。このようなことから、該血小板製剤を用いた場合、肝炎、エイズ、ＧＶＨＤ等の感染をより高い確率で防止することができ、安全性が高い。
また、サージ工程が１回でよいため、全体の処理時間を短縮することができる。
【００７８】
図４は、本発明の血液成分分離装置の第２実施例の構成を模式的に示す平面図である。同図に示す血液成分分離装置１Ｂは、第３のライン８の構成が異なる以外は、前記血液成分分離装置１Ａと同様である。
【００７９】
血液成分分離装置１Ｂにおいて、バフィーコートバッグ２５には、２本のチューブ２６、２７の一端が接続されている。チューブ２６の他端は、前記と同様、分岐コネクタ２８を介してチューブ１４の途中に接続されており、チューブ２７の他端は、分岐コネクタ２９を介してチューブ１３のポンプ９１と流入口４３との間に接続されている。また、チューブ２６の途中には、チューブ２６内の流路を開閉するバルブ８７が設置されている。これらのチューブ２６、２７および分岐コネクタ２８、２９により第３のラインが構成されている。
【００８０】
このような血液成分分離装置１Ｂを用いた血小板採取方法は、次の通りであり、工程［１２ａ］以外は、基本的に前記血液成分分離装置１Ａによる血小板採取方法と同様である。
【００８１】
［１ｂ］〜［１１ｂ］  チューブ２７をクレンメで閉塞した状態で、前記［１ａ］〜［１１ａ］と同様の工程を行う。
【００８２】
［１２ｂ］  ポンプ９１の作動（正転）下で、バルブ８３および８６を開放、その他のバルブを閉鎖した状態とする。さらに、チューブ２７のクレンメによる閉塞を解除し、バフィーコートバッグ２５を高所へ置き、かつそのチューブ２６の接続側端部を下方へ向け、落差によりバフィーコートバッグ２５内の洗浄液をチューブ２７を介して第１のライン２へ供給する。これにより、洗浄液は、分岐コネクタ２９内において、ポンプ９１より送液されて来る血液と混合され、チューブ１３、流入口４３および管体４１を介して貯血空間４６へ移送される。
【００８３】
［１３ｂ］〜［２０ｂ］  チューブ２７をクレンメで再び閉塞した状態で、前記［１３ａ］〜［２０ａ］と同様の工程を行う。
【００８４】
このような血小板採取方法では、工程［１２ｂ］における洗浄液（血小板を含む）の返送を、血液貯留部１０６からローター４２内への血液の移送を停止することなく行うことができるので、全体の処理時間を短縮することができるという利点がある。
【００８５】
図５は、本発明の血液成分分離装置の第３実施例の構成を模式的に示す平面図である。同図に示す血液成分分離装置１Ｃは、ポンプ９１の位置が異なる以外は、前記血液成分分離装置１Ｂと同様である。
【００８６】
すなわち、血液成分分離装置１Ｃにおいて、ポンプ９１は、チューブ１３の分岐コネクタ２９と流入口４３との間に設置されている。
このような血液成分分離装置１Ｃを用いた血小板採取方法は、次の通りである。各工程におけるバルブ８３〜８７、ローター４２およびポンプ９１の作動状態を、下記表２に示し、該表２を参照しつつ説明する。
【００８７】
【表２】
0003715338.tif 000003
【００８８】
［１ｃ］〜［８ｃ］  チューブ２７をクレンメで閉塞した状態で、前記［１ａ］〜［８ａ］と同様の工程を行う。
【００８９】
［９ｃ］  回転駆動装置５を作動してローター４２を所定の回転数で回転するとともに、クレンメによるチューブ１０３の閉塞を解除し、バルブ開閉パターンを表２中の（８）とし、ポンプ９１を前記工程［１ａ］と同条件で作動（正転）する。これにより、血液バッグ１０５内の血液は、チューブ１０３、１０１および１３を介して移送され、遠心ボウル４の流入口４３より管体４１を経てローター４２内に導入され、貯血空間４６において血液が内層より血漿層３１、バフィーコート層３２および赤血球層３３に分離される。
【００９０】
［１０ｃ］  前記工程［９ｃ］と同時に、バフィーコートバッグ２５のチューブ２６の接続側端部を下方へ向けた状態で、チューブ２７のクレンメによる閉塞を解除する。これにより、バフィーコートバッグ２５内に貯留されているバフィーコートは、ポンプ９１の作動によりチューブ２７を介して第１のライン２へ供給され、分岐コネクタ２９内において、血液貯留部１０６側から送液されて来る血液と混合され、チューブ１３、流入口４３および管体４１を介して貯血空間４６へ移送され、遠心分離に供される。バフィーコートバッグ２５からバフィーコートのほぼ全量が排出されたら、再びチューブ２７をクレンメで閉塞する。
【００９１】
貯血空間４６においては、血液バッグ１０５からの血液とバフィーコートバッグ２５からのバフィーコートとが混合され、遠心分離が施されるが、分離されたバフィーコート層３２は、複数回の採血に相当する複数の血液バッグ（図示の構成では血液バッグ１０４、１０５）内の合計の血液より得られる量のバフィーコートで構成されるため、その層厚が厚くなり、サージ工程において、血小板の浮上、濃縮がより明確に行われ、血小板の収率および回収された血小板中の白血球の除去率が向上する。
【００９２】
［１１ｃ］  流出口４４より血漿が流出したら、バルブ開閉パターンを（９）とする。これにより、流出口４４より流出した血漿が、チューブ１４、２６を介してバフィーコートバッグ２５内に導入され、チューブ１４、２６の流路およびバフィーコートバッグ２５の内部が洗浄される。このとき、バフィーコートバッグ２５を揺動させると、その内部の洗浄効果が高まり、好ましい。
【００９３】
［１２ｃ］  バフィーコートバッグ２５のチューブ２６の接続側端部を下方へ向けた状態で、バルブ開閉パターンを（10）とし、再びクレンメによるチューブ２７の閉塞を解除する。これにより、バフィーコートバッグ２５内等の洗浄に供された血漿（洗浄液）が、前記工程［１０ｃ］と同様の経路で貯血空間４６内に戻される。
【００９４】
このような、バフィーコートバッグ２５内等の洗浄およびその洗浄液の貯血空間４６への回収を行うことにより、血小板をバフィーコートバッグ２５内等に残存せず、血小板の収率が向上する。
【００９５】
［１３ｃ］〜［２０ｃ］  チューブ２７をクレンメで再び閉塞した状態で、前記［１３ａ］〜［２０ａ］と同様の工程を行う。
【００９６】
このような血小板採取方法では、工程［１０ｃ］におけるバフィーコートの返送および工程［１２ｃ］における洗浄液（血小板を含む）の返送を、血液貯留部１０６からローター４２内への血液の移送中に行うことができ、特に、バフィーコートおよび洗浄液の返送をポンプ９１の駆動により確実かつ迅速に行うことができるので、全体の処理時間をさらに短縮することができる。
【００９７】
図６は、本発明の血液成分分離装置の第４実施例の構成を模式的に示す平面図である。同図に示す血液成分分離装置１Ｄは、チューブ２７の途中にポンプ９２を設置した以外は、前記血液成分分離装置１Ｂと同様である。ポンプ９２としては、例えばローラポンプが用いられ、図２中の制御手段７によりその駆動が制御される。このポンプ９２は、一方向のみ回転可能なものであればよい。この構成では、ポンプ９２が停止しているときには、チューブ２７の流路は、閉塞されているが、チューブ２７の途中に別途前記と同様のバルブ（図示せず）を設けてもよい。
【００９８】
このような血液成分分離装置１Ｄを用いた血小板採取方法は、次の通りである。各工程におけるバルブ８３〜８７、ローター４２およびポンプ９１、９２の作動状態を、下記表３に示し、該表３を参照しつつ説明する。
【００９９】
【表３】
0003715338.tif 000004
【０１００】
［１ｄ］〜［８ｄ］  ポンプ９２を停止した状態で、前記［１ａ］〜［８ａ］と同様の工程を行う。
【０１０１】
［９ｄ］  回転駆動装置５を作動してローター４２を所定の回転数で回転するとともに、クレンメによるチューブ１０３の閉塞を解除し、バルブ開閉パターンを表３中の（８）とし、ポンプ９１を前記工程［１ａ］と同条件で作動（正転）する。これにより、血液バッグ１０５内の血液は、チューブ１０３、１０１および１３を介して移送され、遠心ボウル４の流入口４３より管体４１を経てローター４２内に導入され、貯血空間４６において血液が内層より血漿層３１、バフィーコート層３２および赤血球層３３に分離される。
【０１０２】
［１０ｄ］  前記工程［９ｄ］と同時に、バフィーコートバッグ２５のチューブ２６の接続側端部を下方へ向けた状態で、ポンプ９２を作動（正転）する。これにより、バフィーコートバッグ２５内に貯留されているバフィーコートは、チューブ２７を介して第１のライン２へ供給され、分岐コネクタ２９内において、血液貯留部１０６側から送液されて来る血液と混合され、チューブ１３、流入口４３および管体４１を介して貯血空間４６へ移送され、遠心分離に供される。バフィーコートバッグ２５からバフィーコートのほぼ全量が排出されたら、ポンプ９２を停止する。
【０１０３】
［１１ｄ］  流出口４４より血漿が流出したら、まず、バルブ開閉パターンを（９）とする。これにより、流出口４４より流出した血漿が、チューブ１４、２６を介してバフィーコートバッグ２５内に導入され、チューブ１４、２６の流路およびバフィーコートバッグ２５の内部が洗浄される。このとき、バフィーコートバッグ２５を揺動させると、その内部の洗浄効果が高まり、好ましい。
【０１０４】
［１２ｄ］  バフィーコートバッグ２５のチューブ２６の接続側端部を下方へ向けた状態で、バルブ開閉パターンを（10）とし、ポンプ９２を作動（正転）する。これにより、バフィーコートバッグ２５内等の洗浄に供された血漿（洗浄液）が、前記工程［１０ｄ］と同様の経路で貯血空間４６内に戻される。このような操作により、前記と同様、血小板が回路に残存せず、その収率が向上する。
【０１０５】
［１３ｄ］〜［２０ｄ］  ポンプ９２を停止した状態で、前記［１３ａ］〜［２０ａ］と同様の工程を行う。
【０１０６】
このような血小板採取方法では、工程［１０ｄ］におけるバフィーコートの返送および工程［１２ｄ］における洗浄液（血小板を含む）の返送を、血液貯留部１０６からローター４２内への血液の移送中に行うことができ、特に、バフィーコートおよび洗浄液の返送をポンプ９２の駆動により確実かつ迅速に行うことができるので、全体の処理時間をさらに短縮することができる。
【０１０７】
なお、血液成分分離装置１Ｄにおいて、チューブ２０の一端を分岐コネクタ１２と接続せず、図示しない分岐コネクタを用いてチューブ２７の途中に接続した構成としてもよい。
次に、本発明を具体的実施例に基づいてさらに詳細に説明する。
【０１０８】
（実施例１）
図１および図２に示す構成の血液成分分離装置１Ａを用い、前述した工程［１ａ］〜［２０ａ］により、貯血量４００mlの血液バッグ５個に対し血液処理を行い、血小板製剤の作製を行った。各工程での条件を下記表４に示す。
【０１０９】
【表４】
0003715338.tif 000005
【０１１０】
（実施例２）
図５および図２に示す構成の血液成分分離装置１Ｃを用い、前述した工程［１ｃ］〜［２０ｃ］により、貯血量４００mlの血液バッグ５個に対し血液処理を行い、血小板製剤の作製を行った。対応する各工程での条件は、上記表４に示す条件と同様とした。
【０１１１】
（実施例３）
図６および図２に示す構成（ただし、ポンプ９２は制御手段７に接続）の血液成分分離装置１Ｄを用い、前述した工程［１ｄ］〜［２０ｄ］により、貯血量４００mlの血液バッグ５個に対し血液処理を行い、血小板製剤の作製を行った。対応する各工程での条件を上記表５に示す条件と同様とした。
【０１１２】
【表５】
0003715338.tif 000006
【０１１３】
（比較例）
図１に示す装置において、バフィーコートバッグ２５および第３のライン８を有さない構成の回路を用い、貯血量４００mlの血液バッグ５個のそれぞれを処理する毎に、サージ工程を行い、サージ５回分の血小板を集め血小板製剤とした。
なお、各サージ工程における血漿供給は、ポンプ吐出量（血漿供給速度）２２０ml／min で４０秒とした。
【０１１４】
［評価］
実施例１〜３および比較例で得られた血小板製剤について、回収量、血小板数、白血球数、血小板回収率および処理時間を求めた。その結果を下記表６に示す。なお、血小板数は、血球計数装置（東亜電子社製、Sysmex K-2000 型）を用いてカウントし、白血球数は、Negeotteチャンバー法により測定した。
【０１１５】
【表６】
0003715338.tif 000007
【０１１６】
上記表６に示すように、実施例１〜３は、比較例に比べ、いずれも、血小板の回収率および回収された血小板中の白血球の除去率が高く、しかも、合計処理時間も短い。
【０１１７】
以上、本発明を各実施例に基づいて説明したが、本発明の血液成分分離装置に用いられる回路構成等は、図示のものに限定されず、例えば、前記第４のライン１０は、供血者の血管に穿刺する穿刺針を有する脱・返血ラインであってもよい。また、前記血漿回収用分岐ラインおよび前記血小板回収用分岐ラインのいずれか一方がない構成であってもよい。また、バルブのような流路開閉手段が、チューブ１３または２４の途中に設けられていてもよい。また、第２のライン３または第４のライン１０にポンプが設けられていてもよい。
【０１１８】
なお、バフィーコートを一旦貯留する容器は、図示のごときバッグに限らず、例えばボトルのような硬質の容器であってもよい。
また、本発明の装置を用いた血小板採取方法において、上記各工程のうちの所定の工程の順序が異なっていてもよく、任意の工程が追加されてもよく、また所定の工程（例えば、バフィーコートバッグの洗浄および洗浄液の返送工程）が省略されていてもよい。
【０１１９】
バフィーコートバッグ等の洗浄は、別途容易された例えば生理食塩水等の洗浄液により行ってもよい。この場合、予め洗浄液が貯留された容器がバフィーコートバッグに連通するよう例えば第３のラインの途中に接続されていてもよい。
なお、本発明の血液成分分離装置は、前述した血小板製剤の製造に使用される場合に限らないことは、言うまでもない。
【０１２０】
【発明の効果】
以上述べたように、本発明の血液成分分離装置によれば、複数の血液成分への分離および血液成分の移送を行うに際し、より高精度の分離、移送が可能となり、特に、成分採血に適用した場合、血小板の回収率が高く、回収された血小板中の白血球（特にリンパ球）の除去率が極めて高い高品質の血液製剤が得られる。その結果、肝炎、エイズ、ＧＶＨＤ等の感染をより高い確率で防止することができ、安全性が高い。
また、本発明では、血小板の回収を一度で行うため、全体の処理時間を短縮することができる。
【０１２１】
また、貯血空間の下方より血漿を供給して血小板を浮上させて回収する方法を採用した場合、特に血漿供給速度を１０〜９０ml／minとした場合には、血小板の回収率および白血球の除去率がさらに向上する。
また、バフィーコートを貯留する容器を洗浄し、その洗浄に供された液を貯血空間に戻す場合には、血小板が残存せず、血小板の回収率がさらに向上する。
【図面の簡単な説明】
【図１】  本発明の血液成分分離装置の第１実施例の構成を模式的に示す平面図である。
【図２】  本発明の血液成分分離装置の制御系を示すブロック図である。
【図３】  本発明における遠心ボウルおよび回転駆動装置の構成例を示す部分断面正面図である。
【図４】  本発明の血液成分分離装置の第２実施例の構成を模式的に示す平面図である。
【図５】  本発明の血液成分分離装置の第３実施例の構成を模式的に示す平面図である。
【図６】  本発明の血液成分分離装置の第４実施例の構成を模式的に示す平面図である。
【符号の説明】
１Ａ〜１Ｄ    血液成分分離装置
２            第１のライン
３            第２のライン
４            遠心ボウル
４１          管体
４２          ローター
４３          流入口
４４          流出口
４５          上部
４６          貯血空間
４７、４８    流路
５            回転駆動装置
５１          ハウジング
５２          脚部
５３          モータ
５４          回転軸
５５          固定台
５５１        凹部
５６          ボルト
５７          スペーサー
５８          取付部材
６１、６２    光学センサー
６３          投光部
６４          受光部
７            制御手段
８            第３のライン
８３〜８７    バルブ
９１、９２    ポンプ
１０          第４のライン
１０１        チューブ
１０２        分岐コネクタ
１０３        チューブ
１０４、１０５  血液バッグ
１０６        血液貯留部
１２          分岐コネクタ
１３、１４    チューブ
１５          分岐コネクタ
１６          チューブ
１７          血小板バッグ
１８          チューブ
１９          チャンバー
２０          チューブ
２１          血漿バッグ
２２          空気貯留バッグ
２３、２４    チューブ
２５          バフィーコートバッグ
２６、２７    チューブ
２８、２９    分岐コネクタ
３１          血漿層
３２          バフィーコート層
３３          赤血球層
Ｂ            界面
【図１】
0003715338.tif 000008
【図２】
0003715338.tif 000009
【図３】
0003715338.tif 000010
【図４】
0003715338.tif 000011
【図５】
0003715338.tif 000012
【図６】
0003715338.tif 000013