(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）（式中、Ｒ1〜Ｒ5のうち、２個は水酸基、それ以外の３個は水素原子または低級アルキル基を示し、Ｒ6、Ｒ7は、水素原子、低級アルキル基またはアセチル基を示す。ｎは２または３を示す。）で表されるジヒドロキシフェニルスルフィド誘導体またはその塩としての４−Ｓ−システアミニルカテコール誘導体またはその塩を含有する抗メラノーマ剤。
【化１】
0003718533.tif 000008
【請求項２】
前記４−Ｓ−システアミニルカテコール誘導体は４−Ｓ−システアミニルカテコール、４−Ｓ−ホモシステアミニルカテコールあるいはＮ−アセチル−４−Ｓ−システアミニルカテコールである請求項１記載の抗メラノーマ剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、新規なジヒドロキシフェニルスルフィド誘導体またはその塩を含む抗メラノーマ剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
メラノーマは、メラニン形成能を有することを特徴とする悪性腫瘍で、化学療法に対する抵抗性が高く、また転移後の治療が困難など、予後の悪い疾病である。近年、欧米のみならず本邦でも増加する傾向にあり、有効なメラノーマ治療薬の開発は急務である。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
ところで、現在メラノーマの臨床治療薬としては、ＤＴＩＣ（5-(3,3-dimethyl-1-triazenyl)-1H-imidazole-4-carboxamide：ＮＳＣ４５３８８）が最もよく知られているが、安定性、肝障害等の問題を抱えている。またハイドロキノン誘導体にも優れたメラニン合成阻害作用が知られているが、皮膚刺激性、白斑の問題等に大きな欠点を抱えている。
【０００４】
以前、本発明者らはシステニルフェノールやシステアミニルフェノール（Biochemical Pharmacology Vol.36 No.12 p2007-2011）、システニルカテコール（Br. J. Cancer 1988 58 p776-778）がメラノサイトに対して選択的毒性を示すことを見いだし、メラノーマ治療での有効性を認めた。しかし未だその効果は不十分で、メラノーマの有効な治療手段としては、外科的切除手術に頼ざらなければならないのが現状である。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、新規にジヒドロキシフェニルスルフィド誘導体またはその塩を合成し、それらの化合物がメラニン産生細胞に対して優れた細胞毒性を有すること、さらにはメラノーマ細胞を移植したマウスにおいて著しい延命効果が確認されたことから本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明の新規なジヒドロキシフェニルスルフィド誘導体は、一般式（１）（式中、Ｒ1〜Ｒ5のうち、２個は水酸基、それ以外の３個は水素原子または低級アルキル基を示し、Ｒ6 、Ｒ7は、水素原子、低級アルキル基またはアセチル基を示す。ｎは２または３を示す。）で表される。
【化２】
0003718533.tif 000002
【０００７】
たとえば、３−Ｓ−システアミニルカテコール、３−Ｓ−ホモシステアミニルカテコール、３−Ｓ−システアミニル−５−メチルカテコール、Ｎ−アセチル−３−Ｓ−システアミニルカテコール、３−Ｓ−システアミニル−Ｎ，Ｎ−ジメチルカテコール、４−Ｓ−システアミニルカテコール、４−Ｓ−ホモシステアミニルカテコール、Ｎ−アセチル−４−Ｓ−システアミニルカテコール、２−Ｓ−システアミニルハイドロキノンおよびその塩などが挙げられる。これらの中でも４−Ｓ−システアミニルカテコール、４−Ｓ−ホモシステアミニルカテコール、Ｎ−アセチル−４−Ｓ−システアミニルカテコールおよびその塩などの４−Ｓ−システアミニルカテコール誘導体が特に優れた抗メラノーマ作用を有するので好ましい。なお、塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩などが挙げられる。
【０００８】
本発明のジヒドロキシフェニルスルフィド誘導体は、例えば下記の方法により合成することができる。
【０００９】
＜合成方法１＞
ピロカテコールおよびシスタミン、ホモシスタミンまたはその塩の中から選ばれる１種に臭化水素酸を加え、加熱還流し、放冷後、赤茶色の反応液を濃縮し、イオン交換クロマトグラフィーにより精製し、４−Ｓ−システアミニルカテコール誘導体を得ることができる。たとえば、シスタミンを用いれば４−Ｓ−システアミニルカテコールが得られ、ホモシスタミンを用いれば４−Ｓ−ホモシステアミニルカテコールが得られる。なお、塩としては塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩などが挙げられる。
【化３】
0003718533.tif 000003
【００１０】
＜合成方法２＞
ハイドロキノンおよびシスタミン、ホモシスタミンまたはその塩の中から選ばれる１種に臭化水素酸を加え、加熱還流し、放冷後、赤茶色の反応液を濃縮し、イオン交換クロマトグラフィーにより精製し、２−Ｓ−システアミニルハイドロキノン誘導体を得ることができる。たとえば、シスタミンを用いれば２−Ｓ−システアミニルハイドロキノンが得られ、ホモシスタミンを用いれば２−Ｓ−ホモシステアミニルハイドロキノンが得られる。
【化４】
0003718533.tif 000004
【００１１】
＜合成方法３＞
メタノールおよびギ酸にピロカテコールまたは４−メチルカテコールを溶解し、次に、酸化銀および無水硫酸ナトリウムを加え、ｏ−キノン体を生成する。これをシステアミン、ホモシステアミンまたはその塩の中から選ばれる１種にメタノールおよび精製水を加えた溶液に滴下する。５〜１５分間攪拌した後、亜硫酸水を添加し反応を停止させた後、反応液を濃縮し、イオン交換クロマトグラフィーにより精製後、エタノール中より再結晶することにより、３−Ｓ−システアミニルカテコール誘導体が得られる。たとえば、ピロカテコールおよびシステアミンを用いれば３−Ｓ−システアミニルカテコールが得られ、ピロカテコールおよびホモシステアミンを用いれば３−Ｓ−ホモシステアミニルカテコールが得られ、４−メチルカテコールおよびホモシステアミンを用いれば３−Ｓ−システアミニル−５−メチルカテコールが得られる。
【化５】
0003718533.tif 000005
【００１２】
また、当該化合物はメラニン産生細胞に対して優れた細胞毒性を有し、さらにはメラノーマ細胞を移植したマウスにおいて著しい延命効果が確認された。特に、４−Ｓ−システアミニルカテコール誘導体には、きわめて優れた効果を確認された。なお、カテコール類の細胞毒性については、細胞内でカテコール類が酸化されｏ−キノン体を生成し、これがＤＮＡポリメラーゼなどのＳＨ酵素と結合して不活性化することによって、細胞毒性を与えるものと推定される。
【化６】
0003718533.tif 000006
【００１３】
本発明のジヒドロキシフェニルスルフィド誘導体を抗メラノーマ剤として使用する場合、経皮あるいは経口などあらゆる投与形態で用いられる。また、当該化合物の配合量は投与形態によって異なるが、多くの場合、０．０００１〜１０重量％の範囲で用いられる。なお、投与方法は常法によるが、たとえば、局所適用の場合、皮膚浸透促進剤としてプロピレングリコール、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、プロピレングリコールなど、角質層溶解剤としてサリチル酸、硫黄、トランスレチン酸、レチノイドなどのほか、油脂、ロウ、脂肪酸、界面活性剤、アルコールなどを適宜配合することができる。
【００１４】
【実施例】
次に、合成方法および抗メラノーマ作用を例を挙げて本発明を説明する。
【００１５】
＜合成例１＞  ４−Ｓ−システアミニルカテコール
ピロカテコール（33.0g,300mmol）、シスタミン２塩酸塩（16.9g,75mmol）に47％臭化水素酸500mlを加え、２時間加熱還流した。放冷後、赤茶色の反応液を濃縮し、イオン交換クロマトグラフィー（３Ｍ  ＨＣｌ）により精製し、４−Ｓ−システアミニルカテコール塩酸塩(5.07g,22.9mmol）を得た。収率は30.5％であり、mp142〜145℃の無色針状晶である。
【００１６】
＜合成例２＞  ３−Ｓ−システアミニルカテコール
メタノール100ml、98％ギ酸1mlにピロカテコール(1.10g,10mmol）を溶解した液に、酸化銀(4.70g,20mmol）と無水硫酸ナトリウム（6g）を加え、ｏ−キノンを発生させた。このｏ−キノン溶液を、システアミン塩酸塩（1.13g,10mmol）にメタノール20mlおよび水20mlを加えた溶液に、滴下した。１０分攪拌後、6％亜硫酸水5mlを入れ反応を停止させた後、反応液を濃縮し、イオン交換クロマトグラフィー（３Ｍ  ＨＣｌ）により精製後、エタノール中より再結晶し、３−Ｓ−システアミニルカテコール塩酸塩(1.45g,6.55mmol）を得た。収率は65.5％であり、mp141〜144℃の無色針状晶である。
【００１７】
＜合成例３＞  ３−Ｓ−システアミニル−５−メチルカテコール
メタノール200ml、98％ギ酸2mlに４−メチルカテコール(2.48g,20mmol）を溶解した液に、酸化銀(9.30g,40mmol）と無水硫酸ナトリウム（9.3g）を加え、ｏ−キノン体を発生させた。このｏ−キノン溶液を、システアミン塩酸塩（2.50g,22mmol）にメタノール50mlおよび水50mlを加えた溶液に、滴下した。１０分攪拌後、6％亜硫酸水10mlを入れ反応を停止させた後、反応液を濃縮し、イオン交換クロマトグラフィー（３Ｍ  ＨＣｌ）により精製後、エタノール中より再結晶し、３−Ｓ−システアミニルカテコール塩酸塩(2.21g,9.4mmol）を得た。収率は46.9％であり、mp162〜164℃の淡黄色針状晶である。
【００１８】
＜試験例１＞  マウスに対する延命効果
オス５週齢のＢＤＦ１マウスにＢ１６マウス黒色腫細胞を移植し、表１に示したように対照群には生理食塩水、実施例として４−Ｓ−システアミニルカテコール塩酸塩を１００ｍｇ／ｋｇ、２００ｍｇ／ｋｇ、比較例として４−Ｓ−システアミニルフェノールを３００ｍｇ／ｋｇ、ＤＴＩＣ（5-(3,3-dimethyl-1-triazenyl)-1H-imidazole-4-carboxamide：ＮＳＣ４５３８８）を５０ｍｇ／ｋｇ、それぞれ各１０匹のマウスに９日間連日投与した。そして平均生存率、および対照群に対する延命率を表１に示した。
【００１９】
【表１】
0003718533.tif 000007
本発明の４−Ｓ−システアミニルカテコール塩酸塩は、４−Ｓ−システアミニルフェノールと比較して、メラノーマ細胞を移植したマウスにおいて、著しい延命効果が認められた。また、現在、メラノーマの臨床治療薬として使用されているＤＴＩＣと比較して、同程度あるいはそれ以上の延命効果が認められた。
【００２０】
【効果】
本発明の新規な４−Ｓ−システアミニルカテコール誘導体またはその塩によれば、メラノーマを有効に治療することができる。