(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
陽極側にカチオン化された薬物、陰極側に水溶性酸性物質を含有してなるイオントフォレシス用マトリックス。
【請求項２】
薬物が水溶性カルボン酸でカチオン化された請求項１記載のマトリックス。
【請求項３】
カルボン酸が脂肪族カルボン酸である請求項２記載のマトリックス。
【請求項４】
酸性物質が水溶性有機酸である請求項１記載のマトリックス。
【請求項５】
酸性物質が水溶性無機酸である請求項１記載のマトリックス。
【請求項６】
酸性物質が脂肪族カルボン酸である請求項１記載のマトリックス。
【請求項７】
脂肪族カルボン酸が炭素数２から６の脂肪族カルボン酸である請求項３または６記載のマトリックス。
【請求項８】
脂肪族カルボン酸がクエン酸である請求項７記載のマトリックス。
【請求項９】
陽極側のｐＨが１から５の範囲である請求項１記載のマトリックス。
【請求項１０】
薬物が分子内に少なくとも１個の塩基性官能基を有する生理活性ペプチドである請求項１記載のマトリッス。
【請求項１１】
ペプチドの分子量が７０００以下である請求項１０記載のマトリックス。
【請求項１２】
ペプチドの等電点が５．５以上である請求項１０記載のマトリックス。
【請求項１３】
薬物がカルシウム調節ホルモンである請求項１記載のマトリックス。
【請求項１４】
カルシウム調節ホルモンが副甲状腺ホルモン、その誘導体またはそれらの塩である請求項１３記載のマトリックス。
【請求項１５】
カルシウム調節ホルモンがカルシトニン、その誘導体またはそれらの塩である請求項１３記載のマトリックス。
【請求項１６】
請求項１記載のイオントフォレシス用マトリックスに通電／非通電のサイクルを繰り返すことを特徴とするイオントフォレシス。
【請求項１７】
パルス直流電流を通電することを特徴とする請求項１６記載のイオントフォレシス。
【請求項１８】
連続直流電流を通電することを特徴とする請求項１６記載のイオントフォレシス。
【請求項１９】
直流電流を約０．０１から４ｍＡ／ｃｍ2の電流値で通電    することを特徴とする請求項１７または１８記載のイオントフォレシス。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、イオントフォレシス用の新規マトリックスに関する。
【０００２】
【従来の技術】
イオントフォレシス (Iontophoresis) は外的刺激に電気を用いた経皮吸収促進システムで、その原理は主に通電により陰極および陽極間に生じた電界中を正にチャージした分子は陽極から出て陰極へ、負にチャージした分子は陰極から出て陽極へ移動する力に基づいて薬物分子の皮膚バリヤー透過を促進する〔ジャーナル・オブ・コントロールド・リリース（Journal of Contorolled Release）１８巻，１９９２年，２１３−２２０頁；アドバンスト・ドラッグ・デリバリー・レビユウ（Advanced Drug Delivery Review）９巻，１９９２年，１１９頁；ファルマシウチカル・リサーチ（Pharmaceutical Research）３巻，１９８６年，３１８−３２６頁参照〕。
最近の合成技術、遺伝子工学の進歩により天然に存在するペプチドあるいは蛋白質もしくはこれらのアミノ酸組成を変化させたものや化学的修飾を加えた誘導体が、純粋にかつ大量に生産されるようになり医薬品としての応用が期待されている。しかしその一方で微量で多様な生理活性を有するこれらのペプチドや蛋白質を限定された疾病で薬効を最大限に発揮させ副作用を最小限に抑えるためには厳密な投薬コントロールが要求される。例えば副甲状腺ホルモンやその活性フラグメントは骨に対して造骨作用と破骨作用という相反する作用を有しているが、間欠的に投与することで造骨作用が強く発現して、骨粗鬆症の治療薬に利用されている。
ところが、一般にこのような生理活性ペプチドあるいは蛋白質は胃腸管内で消化液によって分解されたり、消化壁の分解酵素によって加水分解を受け、吸収が悪いことが知られている。従って充分な薬効を期待するためにはこれらの生理活性ペプチドあるいは蛋白質の投与方法は通常、経口投与ではなく注射による投与が行われているが、患者に与える苦痛は大きく、また自己投与が出来ないことも患者には大きな負担である。特に上記の副甲状腺ホルモンの活性フラグメントのような間欠的な連続投与を要求される場合はなおさらである。
【０００３】
製薬分野においてこうした生理活性ペプチドや蛋白質に対応できる新しい薬物送達システム（ドラッグデリバリーシステム）としてイオントフォレシスが精力的に研究されている。
特開平４−２２４７７０号公報には、一対の電極に薬物を配合し、双方の電極間に印加される電圧の正・負を各々交互に切り替えるための電圧調節手段を具備したイオントフォレシス用装置が記載されている。
カナダ公開特許出願２０４２９９４号公報には、陰陽両電極に薬物を含有し、陰極を高ｐＨに陽極を低ｐＨに保つことを特徴とするイオントフォレシス用装置が記載されている。
米国特許第５０４２９７５号公報には、イオントフォレシスにおける、薬物の等電点と電極のｐＨとが薬物の吸収性に及ぼす影響について記載されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、従来のイオントフォレシスの方法では、薬物の吸収が十分でなかったり、経時的に吸収が低下する欠点を有し、そのまま実用に供するには問題点があった。かかる現状に鑑み、薬物の利用効率を著しく高めた実用的なイオントフォレシス用マトリックスの開発が求められている。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、このような課題を解決するために鋭意研究をすすめたところ、陽極側にカチオン化された薬物、陰極側に水溶性酸性物質またはその塩を含有せしめてイオントフォレシスを行うと、薬物の経皮吸収性が著しく増大するこを見いだし、さらに鋭意研究を重ねた結果、本発明を完成した。即ち本発明は、
（１）陽極側にカチオン化された薬物、陰極側に水溶性酸性物質を含有してなるイオントフォレシス用マトリックス、
（２）薬物が水溶性カルボン酸でカチオン化された上記（１）記載のマトリックス、
（３）カルボン酸が脂肪族カルボン酸である上記（２）記載のマトリックス、
（４）酸性物質が水溶性有機酸である上記（１）記載のマトリックス、
（５）酸性物質が水溶性無機酸である上記（１）記載のマトリックス、
（６）酸性物質が脂肪族カルボン酸である上記（１）記載のマトリックス、
（７）脂肪族カルボン酸が炭素数２から６の脂肪族カルボン酸である上記（３）または（６）記載のマトリックス、
（８）脂肪族カルボン酸がクエン酸である上記（７）記載のマトリックス、
（９）陽極側のｐＨが１から５の範囲である上記（１）記載のマトリックス、
（１０）薬物が分子内に少なくとも１個の塩基性官能基を有する生理活性ペプチドである上記（１）記載のマトリッス、
（１１）ペプチドの分子量が７０００以下である上記（１０）記載のマトリックス、
（１２）ペプチドの等電点が５．５以上である上記（１０）記載のマトリックス、
（１３）薬物がカルシウム調節ホルモンである上記（１）記載のマトリックス、
（１４）カルシウム調節ホルモンが副甲状腺ホルモン、その誘導体またはそれらの塩である上記（１３）記載のマトリックス、
（１５）カルシウム調節ホルモンがカルシトニン、その誘導体またはそれらの塩である上記（１３）記載のマトリックス、
（１６）上記（１）記載のイオントフォレシス用マトリックスに通電／非通電のサイクルを繰り返すことを特徴とするイオントフォレシス、
（１７）パルス直流電流を通電することを特徴とする上記（１６）記載のイオントフォレシス、
（１８）連続直流電流を通電することを特徴とする上記（１６）記載のイオントフォレシスおよび
（１９）直流電流を約０．０１から４ｍＡ／ｃｍ2の電流値で通電することを特徴とする上記（１７）または（１８）記載のイオントフォレシスに関する。
【０００６】
本発明における薬物としては、カチオン化し得る薬物で、カチオン化した状態で水溶性であれば、いかなる薬物でも用いることができる。該薬物の好ましい例として、例えば生理活性を有し、分子内に少なくとも１個の塩基性官能基を有するペプチドが挙げられる。該ペプチドの分子量は、約７０００以下であることが好ましく、さらに約６０００以下であることが好ましい。特に約５０００以下が好ましい。該水溶性ペプチドの等電点は、約５．５以上であることが好ましく、さらに約６以上であることが好ましい。
【０００７】
薬物の水溶性は、水とｎ−オクタノールとの油水分配率で定義され、ｎ−オクタノール／水溶解度の比が１以下の薬物への適用が好ましく、０．１以下の薬物への適用がより好ましい。
油水分配率の測定は、「物理化学実験法」鮫島実三郎著、裳華房刊、昭和３６年に記載された方法に従えばよい。すなわち、まず試験管中にｎ−オクタノールおよびｐＨ５．５の緩衝液（１対１の等量混合物）を入れる。該緩衝液としては例えばゼーレンゼン（Sφerenzen）緩衝液〔エルジェブニッセ・デア・フィジオロジー(Ergeb. Physiol.) 12, 393(1912)〕、クラークルブス（Clark-Lubs）緩衝液〔ジャーナル・オブ・バクテリオロジー(J. Bact.) 2(1), 109, 191(1917)〕、マクルベイン（MacIlvaine）緩衝液〔ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー(J. Biol. Chem.) 49, 183(1921)〕、ミカエリス（Michaelis）緩衝液〔ディ・バッサー−シュトッフイオネンコンツエントラチオン(Die Wasser-stoffionenkonzentration.) p. 186(1914)〕、コルソフ（Kolthoff）緩衝液〔バイオヘミシェ・ツアイトシュリフト(Biochem. Z.) 179, 410(1926)〕などが挙げられる。これらの薬物を適宜量投入し、さらに栓をして恒温槽（２５℃）に浸し、しばしば強く振盪する。そして薬物が両液層間に溶け、平衡に達したと思われる頃、液を静置あるいは遠心分離し、上下各層より別々にピペットにて一定量の液をとり出し、これを分析して各層の中における薬物の濃度を決定し、ｎ−オクタノール層中の薬物の濃度／水層中の薬物の濃度の比をとれば、油水分配率となる。
【０００８】
なお本明細書において、アミノ酸，ペプチド等に関し、略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  コミッション・オン・バイオケミカル・ノーメンクレーチャー（Commission on Biochemical Nomenclature）による略号あるいは当該分野における慣用略号に基づくものとし、また、アミノ酸に光学異性体があり得る場合、特に明示しなければＬ体を示すものとする。
【０００９】
上記ペプチドの好ましい具体例として、例えば黄体形成ホルモン放出ホルモン（LH-RH），LH-RH と同様な作用を有する誘導体、例えば式（I）：(Pyr) Glu-R1-Trp-Ser-R2-R3-R4-Arg-Pro-R5（I） 〔式中、R1 は His，Tyr，Trp または p-NH2-Phe、R2は Tyr または Phe、R3 は Gly または D型のアミノ酸残基、R4は Leu，Ile または Nle、R5 は Gly-NH-R6（R6 は H または水酸基を有していてもよい低級アルキル基）または NH-R6（R6 は前記と同意義）を示す〕で表されるポリペプチドまたはそれらの塩〔米国特許第３８５３８３７号，同第４００８２０９号、同第３９７２８５９号，英国特許第１４２３０８３号，プロシーデイングス・オブ・ザ・ナショナル・アカデミー・オブ・サイエンス (Proceedings of the National Academy of Science)第７８巻，６５０９〜６５１２頁（１９８１年）参照〕；ＬＨ−ＲＨ 拮抗物質、例えば式（II） ：N-α-t-ブトキシカルボニル-O-ベンジル-Ser-Trp-Ser-Tyr-X1-Leu-Arg-Pro-GlyNH2（II） 〔式中、X1 は D-Ser または D-Trp を示す〕で表されるポリペプチドまたはそれらの塩（米国特許第４０８６２１９号，同第４１２４５７７号，同第４２５３９９７号，同第４３１７８１５号参照）；インスリン；ソマトスタチン，ソマトスタチン誘導体、例えば式（III）:
【化１】
0003638316.tif 000002
〔式中、Y は D-Ala，D-Ser または D-Val、Z は Asn または Ala を示す〕で表されるポリペプチドまたはそれらの塩（米国特許第４０８７３９０号，同第４０９３５７４号，同第４１００１１７号，同第４２５３９９８号参照）；副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）；メラノサイト刺激ホルモン（MSH）；甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（TRH），その誘導体、例えば式（IV）：
【化２】
0003638316.tif 000003
〔式中、X' は４，５または６員複素環基を、Y' はイミダゾール−４−イルまたは４−ヒドロキシフェニルを、Z' は CH2 または S を、R1'，R2'は同一または異なって水素もしくは低級アルキル基を、R3'は水素または置換基を有していてもよいアラルキル基を示す〕で表される化合物またはそれらの塩（特開昭５０−１２１２７３号，特開昭５２−１１６４６５号公報参照）；副甲状腺ホルモン（PTH），その誘導体、例えば式（V）：R1''-Val-Ser-Glu-Leu-R2''-His-Asn-R3''-R4''-R5''-His-Leu-Asn-Ser-R6''-R7''-Arg-R8''-Glu-R9''-Leu-R10''-R11''-R12''-Leu-Gln-Asp-Val-His-Asn-R13''（V） 〔R1'' は Ser または Aib、R2'' は Met または天然型の脂溶性アミノ酸、R3'' は Leu，Ser，Lys または芳香族アミノ酸、R4'' は Gly またはD-アミノ酸、R5'' は Lys または Leu、R6'' は Met または天然型の脂溶性アミノ酸、R7'' は Glu または塩基性アミノ酸、R8''は Val または塩基性アミノ酸、R9'' は Trp または 2-(1,3-ジチオラン-2-イル)Trp、R10'' は Arg または His、R11'' は Lys または His、R12'' は Lys，Gln または Leu、R13'' は Phe または Phe-NH2 を示す〕で表されるペプチドまたはそれらの塩（特開平５−３２６９６号，同第４−２４７０３４号，ヨーロッパ特許公開第５１０６６２号，同第４７７８８５号，同第５３９４９１号公報参照）、ヒト型 PTH のＮ末端（１→３４位）のペプチドフラグメント（hPTH(1→34)と略す）など〔G.W.Tregearら、エンドクリノロジー（Endocrinology），９３，１３４９−１３５３（１９７３）〕；バソプレシン，バソプレシン誘導体｛デスモプレシン〔日本内分泌学会雑誌，第５４巻  第５号第６７６〜６９１頁（１９７８）〕参照｝；オキシトシン；カルシトニン、カルシトニンと同様な作用を有する誘導体、例えば式（VI）：
【化３】
0003638316.tif 000004
〔式中、X'' は２−アミノスベリン酸〕で表される化合物またはそれらの塩〔エンドクリノロジー(Endocrinology)１９９２，１３１／６（２８８５−２８９０）〕；グルカゴン；ガストリン；セクレチン；コレシストキニン；アンジオテンシン；エンケファリン，エンケファリン誘導体、例えば式（VII）：
【化４】
0003638316.tif 000005
〔式中、R1''' と R3'''は水素または炭素数１から６のアルキル基、R2''' は水素または D-α-アミノ酸、R4''' は水素または炭素数１から８の置換されていてもよい脂肪族アシル基を示す〕で表されるペプチドまたはそれらの塩（米国特許第４２７７３９４号，ヨーロッパ特許出願公開第３１５６７号公報参照）等のオリゴペプチドおよびエンドルフィン；キョウトルフィン；インターロイキン（IからXI）；タフトシン；サイモポイエチン；胸腺液性因子（ＴＨＦ）；血中胸腺因子（ＦＴＳ）およびその誘導体、例えば式（VIII）：PGlu-X'''-Lys-Ser-Gln-Y'''-Z'''-Ser-Asn-OH （VIII） 〔式中、X''' は L- または D-Ala、Y''' 及び Z''' は各々 Gly または炭素数３から９の D-アミノ酸を示す〕で表されるペプチドまたはそれらの塩（米国特許第４２２９４３８号参照）；およびその他の胸腺ホルモン〔サイモシン α1およびβ4，サイミックファクター Ｘ等、医学のあゆみ、第１２５巻，第１０号，８３５−８４３頁（１９８３年）〕；モチリン；デイノルフィン；ボムベシン；ニュウロテンシン；セルレイン；ブラディキニン；ウロキナーゼ；サブスタンスＰ；ポリミキシンＢ；コリスチン；グラミシジン；バシトラシン；タンパク合成刺激ペプチド（英国特許第８２３２０８２号）；胃酸分泌抑制ポリペプチド（ＧＩＰ）；バソアクティブ・インティスティナル・ポリペプチド〔vasoactive intestinal polypeptide（ＶＩＰ）〕；プレートレット−ディライブド・グロース・ファクター〔platelet-derived growth factor（ＰＤＧＦ）〕；成長ホルモン分泌因子（ＧＲＦ，ソマトクリニン）などが挙げられる。
【００１０】
これらの生理活性ペプチドはヒト型でも他の動物、たとえばウシ、ブタ、ニワトリ、サケ、ウナギ由来のものでもよく、さらにはヒトとそれら動物由来のもののキメラ体でもよい。さらに一部構造を変化させた活性誘導体でもよい。たとえば、ブタ由来のインスリンや、カルシトニンではブタ、ニワトリ、サケ、ウナギ由来のものあるいはヒトとサケのキメラ体であって、式（IX）：Cys-Gly-Asn-Leu-Ser-Thr-Cys-Met-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Leu-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro （IX）で表されるペプチド〔エンドクリノロジー(Endocrinology)１９９２，１３１／６（２８８５−２８９０）〕などが挙げられる。
【００１１】
上記薬物の中で、副甲状腺ホルモン（PTH），その誘導体またはそれらの塩；カルシトニン，その誘導体またはそれらの塩；黄体形成ホルモン放出ホルモン（LH-RH），LH-RH と同様な作用を有する誘導体またはそれらの塩；甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（TRH），その誘導体またはそれらの塩；バソプレッシン，その誘導体；インスリンが好ましい。さらに、副甲状腺ホルモン，その誘導体またはそれらの塩；カルシトニン，その誘導体またはそれらの塩が特に好ましい。
【００１２】
薬物の陽極への配合量は、使用する薬物の種類、投与対象動物（例、マウス，ラット，ウシ，ウマ，サル，人等の温血哺乳動物）、投与部位（例、腕，腹部，背部等）により種々異なるが、薬物の有効量であればよい。例えば、ヒト副甲状腺ホルモン，その誘導体またはそれらの塩を成人（体重５０ｋｇ）へ投与するためのマトリックスは、マトリックス１ｇに該薬物を好ましくは約０.０１から１０重量％、さらに好ましくは約０.０３から８重量％、特に好ましくは約０.０５から５重量％含有させる。
【００１３】
薬物をカチオン化する方法は、薬物がカチオン化した状態で水溶性であればいかなる方法を用いてもよい。好ましい方法として例えば、薬物と水溶性カルボン酸とを接触させる方法が挙げられる。具体的には、例えば薬物を水に溶解または懸濁した液に水溶性カルボン酸を添加し、均一溶液とすることにより行なわれる。この場合、水溶性カルボン酸の配合量は、陽極のｐＨが約１から５の範囲、好ましくは約３から４の範囲となるように配合する。具体的には、薬物のモル数とカルボン酸のモル当量数（カルボン酸のモル数×カルボン酸の電荷数）の比が約１：２０から１：４００、好ましくは約１：４０から１：４００となるように配合することが好ましい。
【００１４】
上記水溶性カルボン酸の好ましい例として、例えば水溶性脂肪族カルボン酸が挙げられる。より好ましくは、炭素数２から６の水溶性脂肪族カルボン酸が挙げられる。特に好ましくは、１から５個の水酸基を有していてもよい炭素数２から６の脂肪族モノ、ジおよびトリカルボン酸である。該水溶性カルボン酸の具体例としては、例えば酢酸，プロピオン酸，アスコルビン酸，乳酸，グルコン酸，グルクロン酸等のモノカルボン酸、シュウ酸，マロン酸，コハク酸，リンゴ酸，酒石酸，フタル酸，マレイン酸等のジカルボン酸、クエン酸等のトリカルボン酸が挙げられる。これらの中で、酢酸，プロピオン酸，アスコルビン酸，乳酸，グルコン酸，グルクロン酸，マロン酸，コハク酸，マレイン酸，リンゴ酸，酒石酸，クエン酸が好ましく、クエン酸、酒石酸、コハク酸が更に好ましい。クエン酸が特に好ましい。
【００１５】
陰極側に用いられる水溶性酸性物質としては、例えば水溶性有機酸、水溶性無機酸等があげられる。これら水溶性酸性物質は、薬理効果を示さない水溶性酸性物質が好ましい。
該水溶性有機酸としては、例えば水溶性カルボン酸が好ましい。水溶性カルボン酸の好ましい例として、例えば水溶性脂肪族カルボン酸が挙げられる。さらに好ましくは、炭素数２から６の水溶性脂肪族カルボン酸が挙げられる。特に好ましくは、１から５個の水酸基を有していてもよい炭素数２から６の脂肪族モノ、ジおよびトリカルボン酸である。該水溶性カルボン酸の具体例としては、例えば酢酸，プロピオン酸，アスコルビン酸，乳酸，グルコン酸，グルクロン酸等のモノカルボン酸、シュウ酸，マロン酸，コハク酸，リンゴ酸，酒石酸，フタル酸，マレイン酸等のジカルボン酸、クエン酸等のトリカルボン酸が挙げられる。これらの中で、酢酸，プロピオン酸，アスコルビン酸，乳酸，グルコン酸，グルクロン酸，マロン酸，コハク酸，マレイン酸，リンゴ酸，酒石酸，クエン酸が好ましく、クエン酸、酒石酸、コハク酸が更に好ましい。クエン酸が特に好ましい。
該水溶性無機酸としては、例えばリン酸、ポリリン酸、ホスホン酸（亜リン酸）、塩酸等が好ましい。
リン酸は，さらにアルコールとのエステル（例、リン酸メチル、リン酸エチル等）として用いることもできる。
【００１６】
上記水溶性酸性物質は、酸性を示すのであればその塩として用いてもよく、例えばアルカリ金属（例、ナトリウム，カリウム等），アンモニア，有機アミン類〔例、アルキルアミン類（例、ジエチルアミン，トリエチルアミン等），芳香族アミン類（例、ピリジン，ルチジン等）等〕と上記ジまたはトリカルボン酸との塩が挙げられる。具体例を挙げれば、クエン酸モノナトリウム塩，酒石酸モノナトリウム塩，コハク酸モノカリウム塩等である。
水溶性カルボン酸、水溶性酸性物質における水溶性は、該カルボン酸または酸性物質１ｇまたは１ｍｌを２０±５℃において溶解するに要する水の量により示される。本発明には該水量が好ましくは約１０ｍｌ未満、さらに好ましくは５ｍｌ未満、特に好ましくは約１ｍｌ未満のカルボン酸または酸性物質が用いられる。
水溶性酸性物質またはその塩の陰極側への配合量は、皮膚に悪影響（刺激，腐食等）を与えない量であればいかなる量であってもよい。具体的には、マトリックス全体に対して、例えば約０．１から１５重量％配合する。好ましくは約０．１から１２重量％、特に約０．３から１０重量％である。
【００１７】
薬物を含有させるマトリックスの基剤としては、皮膚に悪影響（刺激，腐食等）を及ぼさず、皮膚密着性に富み、且つ導電性を示す基剤であればいかなるものも用いることができる。該基剤の好ましい例としては、例えば親水性樹脂または高分子化合物が用いられる。親水性樹脂としては、たとえばポリアクリルアミド，ポリアクリル酸またはそのアルカリ金属塩またはそのエステル等のアクリル系樹脂，ポリビニルピロリドン，ポリビニルアルコール，ポリビニルエチルエーテルおよびそのコーポリマー等のビニル系樹脂，トラガントガム，カラヤガム等の天然多糖類などが、また、高分子化合物としては、メチルセルロース，ヒドロキシプロピルセルロース，ヒドロキシプロピルメチルセルロース，ヒアルロン酸またはそのアルカリ金属塩などが挙げられる。
マトリックスとしては、綿，濾紙，メンプランフィルターなどの素材に導電性を付与した薬物含有液を含浸させたものを用いることもできる。
マトリックスは、自己保形性を維持しうる程度に調製し、フィルム状ないしシート状に展延する。厚さは約０.０５〜３.０mmが良く、特に好ましくは約０.１〜２.０mmである。厚すぎると良好な経皮吸収が得られないことがある。
【００１８】
本発明のイオトフォレシス用マトリックスは、例えば次のようにして製造される。
即ち、上記薬物を含有させるマトリックスの基剤を水に溶解し、この溶液に薬物、薬物をカチオン化するための化合物を添加し練合した後成形し陽極側用マトリックスを製造し、さらに上記マトリックスの基剤を水に溶解し、この溶液に水溶性酸性物質またはその塩を添加し練合した後成形し陰極側用マトリックスを製造することにより、イオントフォレシス用マトリックスを製造することができる。
その際、柔軟可塑剤として、水，ポリエチレングリコール，プロピレングリコール，グリセリンなどが、また、誘電性を付与するための電解質としては塩化ナトリウム，炭酸ナトリウム，リン酸，クエン酸ナトリウムなどが適宜配合される。
【００１９】
基剤の使用量は、基剤の種類、マトリックスの形状（例、フイルム状，シート状等）などにより異なるが、マトリックスの自己保形性を維持し得る程度に用いる。例えば、水溶液とした場合の濃度が、好ましくは約０.１から３０重量％、より好ましくは約０.５から２０重量％、特に好ましくは約１から１５重量％となる量を用いる。
各原料の配合量は、最終製品における各原料の量が、前述の範囲を満たすように適宜選択される。
上記製造法において、所望によりタンパク分解酵素阻害剤，等張化剤，保存剤，抗酸化剤，ｐＨ調整剤，可塑剤，界面活性剤，浸透圧増強剤等を適宜配合してもよい。
【００２０】
タンパク分解酵素阻害剤としては、例えばメシル酸ガベキサート，α−１−アンチトリプシン，アプロチニン，ペプスタチン等が挙げられる。
等張化剤としては、例えばマンニトール，ソルビトール等が挙げられる。
保存剤としては、例えば塩化ベンザルコニウム（benzalkonium chloride）、セトリミド（臭化セチルトリメチルアンモニウム），安息香酸，ベンジルアルコール，パラベン（ｐ−ヒドロキシ安息香酸のメチル−，エチル−，プロピル−およびブリル−エステルに対する商標），クロルヘキシジン，クロロブタノール，酢酸フェニル水銀，ホウ酸フェニル水銀，硝酸フェニル水銀，ソルビン酸カリウム，安息香酸ナトリウム，ソルビン酸ならびにチオメルサール（thiomersal）（メルクリチオサリチレート）またはそれらの混合物等が挙げられる。
【００２１】
抗酸化剤としては、例えばメタ重亜硫酸ナトリウム，ブチルヒドロキシアニソール（butylated hydroxyanisole）およびブチルヒドロキシトルエン（butylated hydroxytoluene）もしくはそれらの混合物等が挙げられる。ｐＨ調節剤としては、例えばクエン酸およびクエン酸ナトリウム等が挙げられる。
可塑剤としては、例えばフタル酸ジエチル，フタル酸ジブチルおよびクエン酸トリブチル等が挙げられる。
界面活性剤としては、例えばラウリル硫酸ナトリウム，モノステアリン酸ジエチレングリコール，モノステアリン酸プロピレングリコール，商標マクロゴル（MACROGOL）のもとに市販されるポリエチレングリコール，ポリソルベートおよびポリビニルアルコール等が挙げられる。
浸透圧増強剤としては、例えばジメチルスルホキシド，Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド，Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド，２−ピロリドン，Ｎ−メチル−２−ピロリドンおよび１−ドデシルアザシクロ−ヘプタン−２−オン等が挙げられる。
【００２２】
本発明のイオントフォレシス用マトリックスを、適当な電源と組み合わせてイオントフォレシスを行うことにより、薬物を例えば温血哺乳動物（例、マウス，ラット，ウシ，ウマ，サル，人等）に安全に経皮投与することができる。該電源としては、本発明のイオントフォレシス用マトリックスより薬物を効率よく生体内に移動させ得るものであれば、いかなる電源でもよい。
上記電源の好ましい例として、例えば本発明のイオントフォレシス用マトリックスに連続直流電流またはパルス直流電流を印加しうる電源が挙げられる。さらに、パルス直流電流を印加し得る電源が好ましい。特に方形型パルス直流電流を印加し得る電源が好ましい。
連続直流電流の電流値は、約０．０１から４mA/cm2が好ましい。より好ましくは約０．１から４mA/cm2である。
パルス直流電流の周波数は、好ましくは約０．１から２００ｋＨｚ、より好ましくは約１から１００ｋＨｚ、特に好ましくは約５から８０ｋＨｚの範囲より適宜選択される。
パルス直流電流のオン／オフ（on/off）の比は、好ましくは約１／１００から２０／１、より好ましくは約１／５０から１５／１、特に好ましくは約１／３０から１０／１の範囲より適宜選択される。
パルス直流電流の電流値は、好ましくは約０．１から４ｍＡ／ｃｍ2、より好ましくは約０．３から３．５ｍＡ／ｃｍ2、特に好ましくは約０．５から３ｍＡ／ｃｍ2の範囲より適宜選択される。
通電時間は、連続通電で約２４時間以下、さらに約１２時間以下、特に約６時間以下が好ましい。
【００２３】
好ましい通電方法は、例えば約１分から６時間、より好ましく約１分から２時間、特に好ましくは約１０分から１．５時間の連続通電期間とその後に続く約１分から６時間、より好ましくは約１０分から４時間、特に好ましくは約３０分から２時間の非通電期間を合わせて１サイクルとしたとき、少なくとも２回該サイクルを繰り返すことが好ましい。通電／非通電のサイクルは３回以上繰り返すことが特に好ましい。
通電／非通電のサイクルを繰り返す場合において、通電期間の総和は約１０分から２４時間となることが好ましい。より好ましくは約３０分から２時間である。
上記の通電／非通電のサイクルを繰り返すイオントフォレシスには、例えばパルス直流電流、連続直流電流、好ましくはパルス直流電流が用いられる。このパルス直流電流の周波数は、約１から１００kHzが好ましい、より好ましくは約２０から６０kHzである。このパルス直流電流のオン／オフ（ON／OFF）比は、約１０／１から１／１０が好ましい。より好ましくは約３／１から１／３である。パルス直流電流の電流値は、約０．０１から１．０mA/cm2が好ましく、約０．５から３．０mA/cm2がより好ましい。特に好ましくは約０．８から１．８mA/cm2である。
連続直流電流の電流値は、約０．０１から１．０mA/cm2が好ましく、約０．０１から１mA/cm2がより好ましい。特に好ましくは約０．０５から０．３mA/cm2である。
本発明のイオントフォレシス用マトリックスは、例えば図１または図２に示すような形態で用いることができる。
【００２４】
【実施例】
以下に、参考例、実施例、実験例により、本発明を具体的に例示するが、本発明はこれらに限定されるものではない。特にことわりのない限り、参考例中の％は容量％を、実施例，実験例中の％は重量％を示す。
参考例１  ヒト副甲状腺ホルモン（以下、hＰＴＨと略記）のアミノ基末端から３４番目までのアミノ酸からなる活性フラグメントの酢酸塩〔以下hＰＴＨ（１→３４）と略記する〕の合成と精製
本ペプチドの合成はメリフィールドらにより開発されたペプチドの固相合成法〔アール・ビー・メリフィールド(R. B. Merrifield) アドバンシズ  イン  エンザイモロジー（Adv. Enzymol.）３２巻、２２１−２９６頁  １９６９年）の変法に準じて行われ、自動ペプチド合成機４３０Ａ（アプライドバイオシステムズ社、米国）を用いた。保護ペプチド−樹脂の合成はアプライドバイオシステムズ社指定のプロトコールを用いた。縮合時に各アミノ酸のα−アミノ基を保護するため、三級ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ）基を用いた。側官能基保護は次のように行った。セリンとスレオニンのヒドロキシル基はｏ−ベンジルエーテルとして、グルタミン酸及びアスパラギン酸のカルボキシル基はベンジルエステルとして、ヒスチジンのイミダゾール窒素はベンジルオキシメチルによって、リジンの側鎖アミノ基は２−クロルベンジルオキシカルボキシルで、アルギニンのグアニジン官能基はｐ−トルエンスルホニル基で、トリプトファンのインドールイミンはホルミル基で保護した。すべてのアミノ酸は、アプライド・バイオシステムズジャパン社又はバチェム・ケミカルズから入手した。
【００２５】
Ｂoc−Ｌ−フェニルアラニン−ｐオキシメチルフェニルアセトアミドメチル樹脂（ポリスチレン−１％ジビニルベンゼン）を出発原料とし、これに逐次保護アミノ酸を縮合させた。樹脂上に全てのアミノ酸を縮合した後、保護ペプチド樹脂を合成機から取り出し、乾燥した。ペプチド樹脂（１g）を、ｐ−クレゾール（１ml）、１，２−エタンジチオール（１ml）、２−メルカプトピリジン（１００mg）を含んだ無水フッ化水素（８ml）と、０℃で２時間反応させた。反応終了後、フッ化水素を留去し、残留物をジエチルエーテルで洗浄し、大部分の混合試薬を除去した。ペプチドを３％酢酸（１０ml）で抽出し、濾過により樹脂を除いた。濾液をセファデックスＧ−２５を用いるゲル濾過により精製した。ゲル濾過の条件は、カラムサイズ２．８×６０cm、検出波長２３０もしくは２８０nm；溶媒、３％酢酸；流速４０ml／時間であった。ペプチドを含むフラクションを集めて凍結乾燥し、得られた粉末標品をさらに逆相高速液体クロマトグラフィーで精製した。カラムＹＭＣ−パック、Ａ−３２４  ＯＤＳ（１０×２５０mm）溶出溶媒Ａ，０．１％トリフルオロ酢酸−９９．９％水；溶出溶媒Ｂ，０．１％トリフルオロ酢酸−９９．９％アセトニトリル；溶出濃度勾配プログラム、０分（９０％Ａ＋１０％Ｂ）、３０分（６０％Ａ＋４０％Ｂ）溶出速度１．６ml／分、検出波長２３０または２８０nm。純粋な目的物を含むピーク画分を集めてバイオラッドＡＧＩ×８（酢酸型、１．８×５cm）のカラムに通し、洗液も集めアセトニトリルを留去した後、凍結乾燥した。収量１０５mg。４％チオグリコール酸存在下、６規定塩酸で減圧封管中、１１０℃、２４時間加水分解後のアミノ酸分析値は次のとおりであった。カッコ内は理論値。Ａsp 4.00(4); Ｓer 2.54(3); Ｇlu 4.92(5); Ｇly 0.91(1); Ｖal 2.61(3); Ｍet 1.97(2); Ｉle 0.83(1); Ｌen 4.90(5); Ｐhe 0.91(1); Ｌys 2.82(3); Ｈis 2.48(3); Ｔrp 0.76(1); Ａrg 1.74(2)。
【００２６】
実施例１
参考例１で製造したhＰＴＨ（１→３４）（１０mg）とクエン酸−水和物（７mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し（ｐＨ３．８）、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、またクエン酸−水和物（７mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液１ｇに溶解し、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例２
hＰＴＨ（１→３４）（１０mg）とクエン酸−水和物（７０mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し（ｐＨ２．８）、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、またクエン酸−水和物（７０mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状したものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例３
hＰＴＨ（１→３４）（１０mg）とクエン酸−水和物（７mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（０.４ｇ）に溶解し（ｐＨ３．８）、ゲル化・成形し断面積３．２cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、またクエン酸−水和物（７mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（０.４ｇ）に溶解し、ゲル化・成形し断面積３．２cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
【００２７】
実施例４
ヒトインシュリン（清水製薬製，１０mg）と酒石酸（１０mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し（ｐＨ３.４）、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、また酒石酸（１０mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例５
サケカルシトニン（生化学工業製，２mg）とクエン酸−水和物（５mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液０．４ｇに溶解し（ｐＨ３.４）、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、またクエン酸−水和物（５mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（０.４ｇ）に溶解し、ゲル化・成型し断面積３．２cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
【００２８】
実施例６
参考例１で製造したｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液１ｍｌにヒドロキシプロピルセルロース〔ＨＰＣ−Ｌ（日本曹達製）〕の６．２５％エチルアルコール溶液４ｍｌを加え均一溶液とした。この溶液０．５ｇをシリコン・ゴム製の底面積８ｃｍ2、厚み約１ｍｍの円筒状くぼみの中に流し込み、常温（２５℃）常圧（１気圧）下でアルコールを蒸発させ、ｈＰＴＨ（１→３４）を１ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2，重量２７ｍｇ、厚さ０．０２４ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例７
実施例６と同様にして製造したｈＰＴＨ（１→３４）およびＨＰＣ−Ｌの溶液１．０ｇをシリコン・ゴム製の底面積１６ｃｍ2、厚み約１ｍｍの円筒状くぼみの中に流し込み、常温（２５℃）常圧（１気圧）下でアルコールを蒸発させ、ｈＰＴＨ（１→３４）を２ｍｇ含有する断面積１６ｃｍ2、重量５４ｍｇ、厚さ０．０２４ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
【００２９】
実施例８
実施例６と同様にして製造したｈＰＴＨ（１→３４）およびＨＰＣ−Ｌの溶液０．２ｇをシリコン・ゴム製の底面積３．２ｃｍ2および厚み約１ｍｍの円筒状くぼみの中に流し込み、常温（２５℃）常圧（１気圧）下でアルコールを蒸発させ、ｈＰＴＨ（１→３４）を０．４ｍｇ含有する断面積３．２ｃｍ2重量１０ｍｇ厚さ０．０２２ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例９
ＨＰＣ−Ｌの６．２５％エチルアルコール溶液の代わりにＨＰＣ−Ｌの３．１２５％エチルアルコール溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｈＰＴＨ（１→３４）を１ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量１４．５ｍｇ、厚さ０．０１３ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例１０
ＨＰＣ−Ｌの６．２５％エチルアルコール溶液の代わりにＨＰＣ−Ｌの１２．５％エチルアルコール溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｈＰＴＨ（１→３４）１ｍｇを含有する断面積８ｃｍ2、重量５２ｍｇ、厚さ０．０４６ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
【００３０】
実施例１１
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、ｈＰＴＨ（１→３４）を０．２％を含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｈＰＴＨ（１→３４）を０．２ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２６．２ｍｇ、厚さ０．０２３ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例１２
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、ｈＰＴＨ（１→３４）を２％を含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｈＰＴＨ（１→３４）を２ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２８ｍｇ、厚さ０．０２５ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例１３
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、ｈＰＴＨ（１→３４）を４％を含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｈＰＴＨ（１→３４）を４ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量３０ｍｇ、厚さ０．０２７ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
【００３１】
実施例１４
ＨＰＣ−Ｌの６．２５％エチルアルコール溶液の代わりにヒドロキシプロピルメチルセルロース〔ＴＣ−５（信越化学社製）〕の６．２５％エチルアルコール分散液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｈＰＴＨ（１→３４）を１ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２７ｍｇ、厚さ０．０２４ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。なお、ＴＣ−５は１００％エチルアルコール中ではコロイド分散して存在するが、ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸溶液を混和後ＴＣ−５のコロイドは溶解した。
実施例１５
ＨＰＣ−Ｌの６．２５％エチルアルコール溶液の代わりにＨＰＣ−Ｌを３．１２５％およびメチルセルロース〔メトロースＳＭ（信越化学社製）〕を３．１２５％含有するＨＰＣ−Ｌおよびメチルセルロースのエチルアルコール溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｈＰＴＨ（１→３４）を１ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２７ｍｇ、厚さ０．０２４ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例１６
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、サケカルシトニン（以下、ｓＣＴと略する。シグマ社製、米国）を０．２％を含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｓＣＴを０．２ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２６．２ｍｇ、厚さ０．０２３ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
【００３２】
実施例１７
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、ｓＣＴを０．０２％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ｓＣＴを０．０２ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２６ｍｇ、厚さ０．０２３ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例１８
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、牛膵臓インスリン（和光純薬製）を１％を含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いた以外、実施例６と同様にして、牛膵臓インスリンを１ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２７ｍｇ、厚さ０．０２３ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例１９
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、ＴＲＨ〔インターナショナル・ジャーナル・オブ・ファルマシウチクス(International Journal of Pharmaceutics)第６９巻、第６９〜７５頁（１９９１年）記載の方法により製造したものを用いた〕を１％を含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、ＴＲＨを１ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２７ｍｇ、厚さ０．０２３ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
実施例２０
ｈＰＴＨ（１→３４）を１％含有する５０ｍＭクエン酸水溶液の代わりに、リュープロライド（武田薬品工業製）を０．２％を含有する５０ｍＭクエン酸水溶液を用いること以外、実施例６と同様にして、リュープロライドを０．２ｍｇ含有する断面積８ｃｍ2、重量２６．２ｍｇ、厚さ０．０２３ｍｍの円筒状イオントフォレシス用マトリックスを製造した。
【００３３】
実験例１
hＰＴＨ（１→３４）（１０mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し（約ｐＨ６．５）、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、また８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）を、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した（比較マトリックス１とする）。
実施例１のマトリックスと比較マトリックス１にカーボンコーティングチタン電極（以下電極と略す）を装着して、それらをＳＤ系雄性ラット（７週齢）のあらかじめ除毛した腹部に貼付した。実施例１のマトリックスを装着したラットを２つのグループに分けて、一群は装着したままの状態で通電せずに尾静脈より経時的に採血し（非通電投与群とする）、残りの群と比較マトリックス１を装着した群は通電した。電気供給装置にはＡＤＩＳ４０３０〔アドバンス（ＡＤＶＡＮＣＥ）社製，日本〕を用いた。通電条件は１mＡ／cm2（４０kHz、on／off＝３／７）の定電流条件で４時間連続で通電した。この時のhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移の結果を〔図３〕に示す。非通電投与群はマトリックス装着中も投与前のレベルのまま推移し、比較マトリックス１の投与群では投与後３０分目に血清中濃度が投与前の値の３倍まで上昇するが、その後速やかに減少しており、通電中も通電後も投与前のレベルを推移している。実施例１のマトリックスの投与群は投与後１時間までに投与前のレベルの約５倍に上昇し、４時間以降は約３０倍のレベルに到達する。このような血清中濃度の上昇の遅延現象は皮内にデポが形成されたためと思われる。この結果はカルボン酸の配合によりイオントフォレシスの吸収効果を著しく促進することを示している。
なお血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度はラジオイムノアッセイ法〔ラット・ピー・ティ・エイチ・キット（Rat PTH Kit），イムノトロピック・コーポレイテッド（Immutopics Inc）製、米国〕により測定した（以下、血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度は同様にして測定した）。
【００３４】
実験例２
hＰＴＨ（１→３４）（１０mg）とクエン酸−水和物（２.１mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（０.４ｇ）に溶解し（約ｐＨ５．３）、ゲル化・成形し断面積３．２cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、またクエン酸−水和物（７mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（０.４ｇ）に溶解し、ゲル化・成形し断面積３．２cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した（比較マトリックス２とする）。
実施例３のマトリックスと比較マトリックス２とに各々電極を装着して、それらをＳＤ系雄性ラット（７週齢）のあらかじめ除毛した腹部に貼付した。電気供給装置にはＡＤＩＳ４０３０（アドバンス社製，日本）を用いた。通電条件は２mＡ／cm2（４０kHz、on／off＝３／７）の定電流条件で４時間連続で通電した。この時のhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移の結果を〔図４〕に示す。通電開始直後から４時間目までは両群ともほぼ同じレベルの血清中濃度を推移しているが、４時間以降ではｐＨの低い実施例１のマトリックスの投与群の血清中濃度の上昇が顕著であり、６時間目では１０倍以上血清中濃度が高くなっている。この結果から吸収性の増加と製剤のｐＨには重要な関係があることが明らかである。
【００３５】
実験例３
hＰＴＨ（１→３４）（１０mg）とクエン酸−水和物（７mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し（ｐＨ３.８）、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陽極側用マトリックスとし、クエン酸−水和物（７mg）を８％ポリビニルアルコール水溶液（１ｇ）に溶解し、ゲル化・成形し断面積８cm2、 厚さ１mmの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとし、イオントフォレシス用マトリックスを製造した。各々のマトリックスにカーボンコーティングチタン電極を装着して、それらをラットのあらかじめ除毛した腹部に貼付した。電気供給装置にはＡＤＩＳ４０３０（アドバンス社製，日本）を用いた。通電条件は１．５mＡ／cm2（４０kHz、on／off＝３／７）の定電流条件でまず２時間連続で通電し、次の２時間は通電せず、さらに４時間目から２時間前と同じ条件（１．５mＡ／cm2、 ４０kHz、on／off＝３／７、定電流条件）での通電を繰り返した。この間マトリックスは装着したままである。経時的に尾静脈より採血し、hＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度を測定した。この時のhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移の結果を〔図５〕に示す。通電の２回の繰り返しに対して、若干の遅れがあるものの血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度も連動して増減している。しかも各通電時の最高血清中濃度は皮下注から得られている造骨作用に関わる薬効発現に必要な濃度に達している。
【００３６】
実験例４
hＰＴＨ（１→３４）（１mg）を、３３mMクエン酸水溶液にポリビニールアルコールを８％含有する溶液０．８mlに溶解した。この溶液を表面積８cm2、厚み１mmのシリコン製の鋳型に流し込み凍結保存後、解凍して陽極側用マトリックスを作製した。また薬物を含まない同組成の陰極側用マトリックスを同様にして作成し、イオントフォレシス用マトリックスを製造した。両マトリックスにカーボンコーティングチタン電極を接続し、それらのマトリックスをラットの腹部（雄性ＳＤ体重約２５０g；前日に腹部の毛を刈り取っておく）に当て、下記の条件で通電し、血清中のhＰＴＨ（１→３４）濃度を経時的に測定することによりhＰＴＨ（１→３４）の吸収促進性を評価した。
通電条件：パルス直流電流（４０kHz；ON/OFF＝3/7；電流値、１．５mA/cm2）を用い、通電期間２時間／非通電期間２時間のサイクルを２回行った。
測定したhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移を〔図６〕に示す。通電に応答した高い血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度が示された。
【００３７】
実験例５
下記の条件で通電を行った他、実験例４と同様にして、hＰＴＨ（１→３４）の吸収促進性を評価した。
通電条件：パルス直流電流（４０kHz；ON/OFF＝3/7；電流値、１．５mA/cm2）を用い、通電期間１時間／非通電期間１時間のサイクルを４回繰り返した。
測定したhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移を〔図７〕に示す。通電に応答した３つのピークを持つ高い血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度パターンが示された。
【００３８】
実験例６
下記の条件で通電を行った他、実験例４と同様にして、hＰＴＨ（１→３４）の吸収促進性を評価した。
通電条件：パルス直流電流（４０kHz；ON/OFF＝3/7；電流値、１．５mA/cm2）を用い、通電期間０．５時間／非通電期間１．５時間のサイクルを４回繰り返した。
測定したhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移を〔図８〕に示す。通電に応答した２つのピークを持つ高い血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度パターンが示された。
【００３９】
実験例７
下記の条件で通電を行った他、実験例４と同様にして、hＰＴＨ（１→３４）の吸収促進性を評価した。
通電条件：パルス直流電流（４０kHz；ON/OFF＝3/7；電流値、１．５mA/cm2）を用い、通電期間０．５時間／非通電期間０．５時間のサイクルを２回繰り返し、続いて通電期間０．５時間／非通電期間１．５時間のサイクルを４回繰り返した。
測定したhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移を〔図９〕に示す。通電に応答した４つのピークを持つ高い血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度パターンが示された。
【００４０】
実験例８
下記の条件で通電を行った他、実験例４と同様にして、hＰＴＨ（１→３４）の吸収促進性を評価した。
通電条件：パルス直流電流（４０kHz；ON/OFF＝3/7；電流値、２mA/cm2）を用い、通電期間０．２５時間／非通電期間１．７５時間のサイクルを４回繰り返した。
測定したhＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移を〔図１０〕に示す。通電に応答した２つのピークを持つ高い血清中hＰＴＨ（１→３４）濃度パターンが示された。
【００４１】
実験例９
８％ポリビニールアルコール水溶液をゲル化・成形し断面積８ｃｍ2、厚さ１ｍｍの円筒状としたものに実施例６から２０で作製したイオントフォレシス用マトリックスを貼付した。該マトリックスは貼付後１分以内に溶解した。
また実施例６と同様な方法でｈＰＴＨ（１→３４）を含有しないマトリックスを製造し、予め水分で湿らせた上腕部の皮膚に接触させた。該マトリックスは貼付後１分以内に溶解した。
実験例１０
ポリビニルアルコールを８％含有する３３ｍＭクエン酸水溶液（０．８ｍｌ）をゲル化・成形し断面積８ｃｍ2、厚さ１ｍｍの円筒状としたものに、実施例６のイオントフォレシス用マトリックスを、ピンセットを使ってシリコン製鋳型から剥離した後貼付し、陽極側マトリックスとした。また、ポリビニルアルコールを８％含有する３３ｍＭクエン酸水溶液（０．８ｍｌ）をゲル化・成形し断面積８ｃｍ2、厚さ１ｍｍの円筒状としたものを陰極側用マトリックスとした。これらのマトリックスにカーボンコーティングチタン電極を装着して、それらを雄性ＳＤ系ラット（体重約２５０ｇ）のあらかじめ除毛した腹部に接触させた。特に陽極側マトリックスは、実施例６の薬物含有層を貼付した面が腹部に接触するようにした。
ラットへの陽極用および陰極用マトリックスの接触に際しては、ラットをエーテルで麻酔した後、接触直前に実施例６のイオントフォレシス用マトリックスを貼付した陽極側用マトリックスおよび陰極側マトリックスをラット腹部に接触し伸縮性包帯で固定した後、さらにラットをボルマンケージで保定した。
電気供給装置には、ＡＤＩＳ４０３０〔アドバンス（ＡＤＶＡＮＣＥ）社製，日本〕を用いた。通電は、直流パルス電流（４０ｋＨｚ；ＯＮ／ＯＦＦ＝３／７；電流値、１．５ｍＡ／ｃｍ2）を１時間通電した。
血清中ｈＰＴＨ（１→３４）濃度はラジオイムノアッセイ法〔ラット・ピー・ティー・エイチ・キット（Rat PTH Kit）イムトピックス・インコーポレーテッド（Immutopics, Inc）製〕により測定した。
投与後の血清中ｈＰＴＨ（１→３４）濃度は、通電後１時間で最大血中濃度（約８４０ｐｇ／ｍｌ）を示した。この結果は、実施例６のイオントフォレシス用マトリックスを電極用マトリックスに貼付したイオントフォレシス用マトリックスを用いることにより迅速な吸収および高いバイオアベイラビリーが得られることを示す。
【００４２】
実験例１１
実施例６のイオントフォレシス用マトリックスの代わりに実施例１６のイオントフォレシス用マトリックスを用いること以外、実験例１０と同様にしてｓＣＴの経皮吸収性を評価した。ｓＣＴの経皮吸収性は、血清中カルシュウム濃度を経時的に測定することにより評価した。
血清中カルシュウム濃度は血中カルシュウム測定キット（カルシュウムＥ−テストワコー、和光純薬工業製）により測定した。
血清中カルシュウム濃度の時間推移を〔図１１〕に示した。１時間後、２時間後のカルシュウム濃度はｓＣＴ投与前の正常レベルに対し、有意に低下し、迅速なｓＣＴの吸収が示された。
実験例１２
イオントフォレシスを下記の通電条件で行うこと以外、実験例１０と同様にしてｈＰＴＨ（１→３４）の経皮吸収促進性を評価した。
通電条件：
パルス直流電流（４０ｋＨｚ；ＯＮ／ＯＦＦ＝３／７；電流値、１．５Ａ／ｃｍ2）を用い、通電期間１時間／非通電期間１時間のサイクルを４回繰り返した。
血清中ｈＰＴＨ（１→３４）濃度の時間推移を〔図１２〕に示した。通電に応答した３つのピークをもつ高い血中ＰＴＨ（３−３４）濃度パターンが示された。
【００４３】
実験例１３
イオントフォレシスを下記の通電条件で行うこと以外、実験例１１と同様にしてｓＣＴの経皮吸収性を評価した。
通電条件：
パルス直流電流（４０ｋＨｚ；ＯＮ／ＯＦＦ＝３／７；電流値、１．５Ａ／ｃｍ2）を用い、通電期間１時間／非通電期間１時間のサイクルを４回繰り返した。
血清中カルシュウムの時間推移を〔図１３〕に示した。有意な血清中カルシュウム濃度の低下（投与前の正常値の約６０から６５％）が長期に持続することが示された。
実験例１４
予め糊（コクヨ社製）を薄く塗っておいた剥離紙（タカラ社製）に、実施例６の薬物含有層を貼付し、緩く接着させた。該薬物含有層に、８％ポリビニルアルコール水溶液をゲル化・成形し得られる断面積８ｃｍ2、厚さ１ｍｍの円筒状電極用マトリックスを接触させ、適度に押さえたのち、剥離紙を剥すと該薬物含有層が円筒状のゲル断面に残存、付着した。
実験例１５
実施例１６のｓＣＴを含有する薬物含有層を室温（２５℃）で１週間保存後、薬物含有層中のｓＣＴ含量低下を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法で評価した。
ＨＰＬＣ条件：カラム：ＧＬ−ＰＡＣＫ ジー・エルー・サイエンス・リミテッド(GL Sciences Ltd)社製；溶出方法：グラジエント法〔Ａ液：０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸水溶液、Ｂ液：０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸含有アセトニトリル，Ａ液／Ｂ液比を８０／２０（ｖ／ｖ）から５０／５０（ｖ／ｖ）までの直線的グラジエント〕；検出、ＵＶ２８０ｎｍ
その結果、ｓＣＴ含量の低下は０％で、実施例１６の薬物含有層中のｓＣＴは安定に存在することが示された。
【００４４】
【発明の効果】
本発明のマトリックスを用いるイオントフォレシスでは、薬物が効率良く経皮吸収され、しかも皮膚のただれ等の副作用もほとんど無い。
【図面の簡単な説明】
【図１】本発明のイオントフォレシス用マトリックスを用いる装置の模式的な例示。なお、図中１は陰極側マトリックス、２は陽極側マトリックス、３は電源、４は角質層、５は表皮を示す。
【図２】本発明のイオントフォレシス用マトリックスを用いる装置の模式的な例示。なお、図中１は陰極側マトリックス、２は陽極側マトリックス、３は電源、４は角質層、５は表皮、６は絶縁層を示す。
【図３】実験例１におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図４】実験例２におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図５】実験例３におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図６】実験例４におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図７】実験例５におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図８】実験例６におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図９】実験例７におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図１０】実験例８におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図１１】実験例１１におけるカルシウムの血清中濃度の時間推移
【図１２】実験例１２におけるｈＰＴＨ（１→３４）の血清中濃度の時間推移
【図１３】実験例１３におけるカルシウムの血清中濃度の時間推移
【符号の説明】
図３における−○−は非通電投与群を示す。
図３における−△−は比較マトリックス１を示す。
図３における−●−は実施例１のマトリックスを示す。
【化５】0003638316.tif 000006
図４における−○−は比較マトリックス２を示す。
図４における−●−は実施例３のマトリックスを示す。
【化６】0003638316.tif 000007
【化７】0003638316.tif 000008
【化８】0003638316.tif 000009
【化９】0003638316.tif 000010
【化１０】0003638316.tif 000011
【化１１】0003638316.tif 000012
【化１２】0003638316.tif 000013
【化１３】0003638316.tif 000014
【化１４】0003638316.tif 000015
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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