(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式I
シクロ−（Ａｒｇ−Ｂ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｅ）          Ｉ
式中
Ｂは、Ｇｌｙであり、
Ｄは、Ｄ−ＰｈｅまたはＤ−Ｎａｌであり、
ここで、
Ｄが、Ｄ−Ｐｈｅである場合には、ＥはＬｙｓ、ＧｌｙもしくはＬｅｕであり、
Ｄが、Ｄ−Ｎａｌである場合には、ＥはＶａｌである、
で表されるシクロペプチド化合物、
またはその生理学的に許容し得る塩。
【請求項２】
請求項１記載の式Ｉの化合物の官能性誘導体の１種を加溶媒分解剤または水素化分解剤で処理することにより式Ｉの化合物を遊離させるか、または式ＩＩ
Ｈ−Ｚ−ＯＨ ＩＩ
（式中、Ｚは-Arg-B-Asp-D-E-
-B-Asp-D-E-Arg-
-Asp-D-E-Arg-B-
-D-E-Arg-B-Asp-または
-E-Arg-B-Asp-D-である）
のペプチドを環化剤で処理するかそして（または）式Ｉの塩基性化合物または酸性化合物を、酸または塩基で処理することにより、その塩の１種に変換させることを特徴とする請求項１記載の式Ｉの化合物またはその塩の１種を製造する方法。
【請求項３】
インテグリンを精製するためのアフィニティークロマトグラフィーカラムであって、請求項１記載の式Iの化合物をインテグリンリガンドとして含むことを特徴とする、前記アフィニティークロマトグラフィーカラム。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、式Ｉ
0003694332.tif 000002
されるアミノ酸またはそのアミノ酸の誘導体の残基であり、
Ｒは、１〜６個のＣ原子を有するアルキルであり、
Ｈａｌは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり、
Ｑは、１〜６個のＣ原子を有するアルキレンであり、
Ａｃは、１〜１０個のＣ原子を有するアルカノイルであり、
【０００２】
そして、上記各基が光学活性アミノ酸およびその誘導体の基である場合には、Ｄ形態およびＬ形態の両方の形態が包含されるものとする］のシクロペプチドおよびこれらの化合物の生理学に許容し得る塩に関するものである。
同様な化合物は、Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ４０（８）、５３２−５、（１９８５）により知られている。
【０００３】
本発明の目的は、有用な性質を有する新規な化合物、特に医薬の製造に使用することのできる新規な化合物を提供することにある。
本発明者らは、式Ｉの化合物およびこれらの化合物の塩が非常に有用な性質を有しているということを見出した。特に、これらの化合物は、インテグリン阻害剤として作用し、そしてこの場合においてこれらの化合物は、特にβ３−インテグリン受容体またはβ５−インテグリン受容体とリガンドとの相互作用を阻害する。これらの化合物は、特にインテグリンａｖβ３、ａｖβ５およびａＩＩｂβ３の場合において有効である。この作用は、例えばＪ．Ｗ．Ｓｍｉｔｈ等によりＪ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５、１２２６７−１２２７１（１９９０）に記載されている方法により証明することができる。さらに、これらの化合物は、抗炎症作用を有している。これらの作用は、すべて、既知文献により知られている方法をもって証明することができる。
【０００４】
これらの化合物は、特に、循環器系疾患、血栓症、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化症、炎症、卒中、狭心症、腫瘍疾患、骨溶解性疾患、特にオステオポローシス、脈管形成および血管形成術後の再狭サクの予防および治療のためのヒト用および家畜用の医薬における薬学的に活性な化合物として使用することができる。
【０００５】
これらの化合物は、また、例えば細菌、かびまたは酵母により起る感染を避ける抗菌剤としても適している。これらの物質は、例えば生物組織に触れる部位の補てつに用いられる物質（ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ）、インプラント、カテーテルまたは心臓−ペースメーカーのような非体制物質を挿入するために手術を行う場合における付随的抗菌剤として有用である。これらの化合物は、防腐剤として作用する。
本明細書中において使用されるアミノ酸基は、それぞれ以下に掲げる略号によって表わされる。
【０００６】
Ａｂｕ            ４−アミノ酪酸
Ａｈａ            ６−アミノヘキサン酸
Ａｌａ            アラニン
Ａｓｎ            アスパラギン
Ａｓｐ            アスパラギン酸
Ａｓｐ（ＯＲ）    アスパラギン酸（β−エステル）
Ａｒｇ            アルギニン
Ｃｈａ            ３−シクロヘキシルアラニン
Ｃｉｔ            シトルリン
Ｃｙｓ            システイン
Ｄａｂ            ２，４−ジアミノ酪酸
Ｇｌｎ            グルタミン
Ｇｌｕ            グルタミン酸
Ｇｌｙ            グリシン
Ｈｉｓ            ヒスチジン
【０００７】
Ｉｌｅ            イソロイシン
Ｌｅｕ            ロイシン
Ｌｙｓ            リジン
Ｌｙｓ（Ａｃ）          Ｎε−アルカノイルリジン
Ｌｙｓ（ＡｃＮＨ２）    Ｎε−アミノアルカノイルリジン
Ｌｙｓ（ＡｃＳＨ）      Ｎε−メルカプトアルカノイルリジン
Ｍｅｔ            メチオニン
Ｎａｌ            ３−（２−ナフチル）−アラニン
Ｎｌｅ            ノルロイシン
Ｏｒｎ            オルニチン
Ｐｈｅ            フェニルアラニン
【０００８】
４−Ｈａｌ−Ｐｈｅ      ４−ハロゲノフェニルアラニン
Ｐｈｇ            フェニルグリシン
Ｐｒｏ            プロリン
Ｐｙａ            ３−（２−ピリジル）−アラニン
Ｓｅｒ            セリシ
Ｔｉａ            ３−（２−チエニル）−アラニン
Ｔｉｃ            テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸
Ｔｈｒ            スレオニン
Ｔｒｐ            トリプトファン
Ｔｙｒ            チロシン
Ｖａｌ            バリン。
【０００９】
さらに、下記の記号は、以下に述べる意義を有す。
0003694332.tif 000003
【００１０】
上述したアミノ酸がいくつかのエナンチオマー形態で存在することができる場合は、これらの形態およびそれらの混合物の形態（例えば、ＤＬ−形態）は、いずれも式Ｉの化合物の成分として包含される。さらに、例えば式Ｉの化合物の成分としてのアミノ酸は、それ自体既知の適当な保護基を具備することができる。
【００１１】
さらに、本発明は、式Ｉの化合物の官能性誘導体の１種を加溶媒分解剤または水素化分解剤で処理することにより式Ｉの化合物を遊離させるか、または式ＩＩ
0003694332.tif 000004
反応性誘導体を環化剤で処理するかそして（または）式Ｉの塩基性化合物または酸性化合物を、酸または塩基で処理することにより、その塩の１種に変換させることを特徴とする式Ｉの化合物またはこれらの化合物の塩の１種の製造方法に関するものである。
【００１２】
基Ｂ、Ｄ、ＥおよびＺは、とくにことわらない限り、式ＩおよびＩＩにおいて示した意義を有する。
【００１３】
上記式において、アルキルは、好ましくはメチル、エチル、イソプロピルまたは第３−ブチルである。
基Ｂは、好ましくはＧｌｙ、そしてまた、−ＨＮ（−ＣＨ２）２−ＣＯ−、−ＨＮ−（ＣＨ２）３−ＣＯ−、−ＨＮ−（ＣＨ２）５−ＣＯ−またはＡｌａである。Ｄは、好ましくはＰｈｅ、特にＤ−Ｐｈｅ、そしてまた、４−Ｈａｌ−Ｐｈｅ、特に４−Ｉ−Ｐｈｅ、およびＰｒｏ、Ｔｉｃ、Ｌｙｓ、ＮａｌまたはＰｈｇであって、Ｄ形態が特に好ましい。
【００１４】
したがって、本発明は、特に、上記の基の少なくとも１個が上述した好ましい意義の一つを有する式Ｉの化合物に関するものである。
好ましい化合物群は、Ｂが、Ｇｌｙ、−ＨＮ−（ＣＨ２）２−ＣＯ−、−ＨＮ−（ＣＨ２）３−ＣＯ−、−ＨＮ−（ＣＨ２）５−ＣＯ−またはＡｌａであり、Ｄが、Ｄ−Ｐｒｏ、Ｄ−Ｔｉｃ、Ｐｈｅ、Ｄ−Ｎａｌ、Ｄ−Ｐｈｇまたは４−Ｉ−Ｐｈｅであり、そしてＥが、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ（Ａｃ）またはＮｌｅであるほかはその他の点は式Ｉに相当する部分式Ｉａにより表わすことができる。
【００１５】
さらに好ましい化合物群は、Ｂが、Ｇｌｙであり、ＤがＤ−Ｐｈｅであり、そしてＥがＶａｌ、ＬｙｓまたはＧｌｙであるほかはその他の点は式Ｉに相当する部分式Ｉｂにより表わすことができる。
式Ｉの化合物とこれらの化合物を製造するための出発物質とは、それぞれ別な方法で、文献［例えばＨｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ  Ｃｈｅｍｉｅ（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ）Ｇｅｏｒｇ−Ｔｈｉｅｍｅ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔのような標準参考書］に記載されているような既知の方法によって、特に各反応に対して知られた適当な反応条件下で製造される。この点に関しては、本明細書においては詳細には述べられていないが既知の変法を使用することもできる。
【００１６】
必要に応じて、出発物質は、また、これらの物質を反応混合物から単離しないで直接そのまゝ反応させて式Ｉの化合物を得るように、反応系内で形成させることもできる。
式Ｉの化合物は、式Ｉの化合物の官能性誘導体から、加溶媒分解、特に加水分解によりまたは水素化分解により遊離させることによって得ることができる。
【００１７】
加溶媒分解または水素化分解に対する好ましい出発物質は、１個または２個以上の遊離のアミノ基および（または）ヒドロキシル基の代りに適当な保護基を有するアミノ基および（または）ヒドロキシル基を含有する化合物、好ましくは、Ｎ原子に結合しているＨ原子の代りにアミノ保護基を有する化合物、例えばＮＨ２基の代りにＮＨＲ′基（式中、Ｒ′はアミノ保護基、例えばＢＯＣまたはＣＢＺである）を含有するほかは式Ｉに相当する化合物である。
【００１８】
さらに、ヒドロキシル基のＨ原子の代りにヒドロキシル保護基を含有する出発物質、例えばヒドロキシフェニル基の代りにＲ″Ｏ−フェニル基（式中、Ｒ″はヒドロキシル保護基である）を含有するほかは式Ｉに相当する化合物が、好ましい。
同一または異なる数個の保護されたアミノ基および（または）ヒドロキシル基が出発物質の分子中に存在していてもよい。存在する保護基が相互に異なっている場合は、多くの場合において、これらの保護基は、選択的に除去することができる。
【００１９】
“アミノ保護基”なる表現は、一般に既知でありそしてアミノ基を化学反応から保護（ブロッキング）するのに適した基でありそして分子の他の位置における所望の化学反応が行われた後に容易に除去することのできる基に関するものである。この種の典型的な基は、特に、置換されていないかまたは置換されたアシル、アリール、アルアルコキシメチルまたはアルアルキル基である。アミノ保護基は所望の反応（または反応連続）後に除去されるので、これらの保護基の性質および大きさは重要でないが、１〜２０個、特に１〜８個のＣ原子を有する保護基が好ましい。“アシル基”なる表現は、本発明の方法に関してもっとも広い意味において理解されるべきである。それは、脂肪族、芳香脂肪族、芳香族または複素環式のカルボン酸またはスルホン酸から誘導されたアシル基、そして特にアルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、とりわけ、アルアルコキシカルボニル基を包含する。このタイプのアシル基の例は、アルカノイル、例えばアセチル、プロピオニルまたはブチリル；アルアルカノイル、例えばフェニルアセチル；アロイル、例えばベンゾイルまたはトルイル；アリールオキシアルカノイル、例えばＰＯＡ；アルコキシカルボニル、例えばメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、ＢＯＣ、２−ヨードエトキシカルボニル；アルアルキルオキシカルボニル、例えばＣＢＺ（“カルボベンゾキシ”）、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、ＦＭＯＣ、およびアリールスルホニル、例えばＭｔｒである。好ましいアミノ保護基は、ＢＯＣおよびＭｔｒ、およびさらにＣＢＺ、ＦＭＯＣ、ベンジルおよびアセチルである。
【００２０】
“ヒドロキシ保護基”なる表現は、また、一般に既知でありそしてヒドロキシル基を化学反応から保護するのに適した基であってそして分子の他の位置における所望の化学反応が行われた後に容易に除去することのできる基に関するものである。この種の典型的な基は、上述した置換されていないかまたは置換されたアリール、アルアルキルまたはアシル基そしてさらにまた、アルキル基である。ヒドロキシ保護基は所望の化学反応または反応連続後に再び除去されるので、これらの保護基の性質および大きさは重要でない。好ましい保護基は、１〜２０個特に１〜１０個のＣ原子を有するものである。ヒドロキシル保護基の例は、とりわけ、ベンジル、ｐ−ニトロベンゾイル、ｐ−トルエンスルホニル、第３−ブチルおよびアセチルでありそしてベンジルおよび第３−ブチルが特に好ましい。アスパラギン酸およびグルタミン酸におけるＣＯＯＨ基は、好ましくは第３−ブチルエステルの形態［例えばＡｓｐ（ＯＢｕｔ）］で保護される。
【００２１】
出発物質として使用される式Ｉの化合物の官能性誘導体は、例えば上述した標準参考書および各種の特許に記載されているようなアミノ酸およびペプチド合成の慣用の方法によってそしてまた、例えばメリフィールド固相法［Ｂ．Ｆ．ＧｙｓｉｎおよびＲ．Ｂ．Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９４、３１０２頁以下（１９７２）］によって製造することができる。
【００２２】
式Ｉの化合物の官能性誘導体からの式Ｉの化合物の遊離は、使用された保護基によって、例えば強酸、好ましくはＴＦＡまたは過塩素酸、そしてまた他の強無機酸、例えば塩酸または硫酸、または強有機カルボン酸、例えばトリクロロ酢酸またはスルホン酸、例えばベンゼンスルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸を使用して行われる。必ずしも必要であるとは限らないが、追加的な不活性溶剤を存在させることも可能である。適当な不活性溶剤は、好ましくは、例えば有機カルボン酸、例えば酢酸、エーテル、例えばテトラヒドロフランまたはジオキサン、アミド、例えばＤＭＦ、ハロゲン化炭化水素、例えばジクロロメタンそしてさらにまた、アルコール、例えばメタノール、エタノールまたはイソプロパノール、そしてまた、水である。
【００２３】
さらに、上述した溶剤の混合物も適している。ＴＦＡは、好ましくは、さらに溶剤を添加することなしに過剰な量で使用される。過塩素酸は、９：１の比の酢酸および７０％過塩素酸の混合物の形態で使用される。開裂に対する反応温度は、好ましくは約０℃と約５０℃との間、好ましくは１５℃と３０℃（室温）との間にある。
【００２４】
基ＢＯＣ、ＯＢｕｔおよびＭｔｒは、例えば好ましくはジクロロメタン中でＴＦＡを使用してまたは１５〜３０℃でジオキサン中の約３〜５Ｎ  ＨＣｌを使用して除去することができる。ＦＭＯＣ基は、１５〜３０℃でＤＭＦ中のジメチルアミン、ジエチルアミンまたはピペリジンの約５〜５０％溶液を使用して除去することができる。
【００２５】
水素化分解により除去することのできる保護基（例えばＣＢＺまたはベンジル）は、例えば触媒（例えば貴金属触媒、例えば好ましくは炭素のような担体上のパラジウム）の存在下において水素で処理することによって除去することができる。この場合における適当な溶剤は、上述した溶剤、特に、例えばメタノールまたはエタノールのようなアルコールまたはＤＭＦのようなアミドである。水素化分解は、一般に、約０℃と１００℃との間の温度および約１バールと２００バールとの間の圧力、好ましくは２０〜３０℃および１〜１０バールで行われる。ＣＢＺ基の水素化分解は、例えばメタノール中において５〜１０％Ｐｄ−Ｃ上でまたは２０〜３０℃でメタノール／ＤＭＦ中においてＰｄ−Ｃ上でギ酸アンモニウム（Ｈ２の代りに）を使用して容易に行うことができる。
【００２６】
式Ｉの化合物は、また、ペプチド合成の条件下において式ＩＩの化合物を環化することによって得ることもできる。この場合においては、反応は、好ましくは、例えば上記引用の標準参考書Ｈｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌ、Ｖｏｌｕｍｅ  １５／ＩＩ、１〜８０６頁（１９７４）に記載されているようなペプチド合成の慣用の方法により行われる。
【００２７】
反応は、好ましくは、約−１０℃と４０℃との間、好ましくは０℃と３０℃との間の温度で、不活性溶剤、例えばジクロロメタンのようなハロゲン化炭化水素、テトラヒドロフランまたはジオキサンのようなエーテル、ＤＭＦまたはジメチルアセトアミドのようなアミド、アセトニトリルのようなニトリルまたはこれらの溶剤の混合物中で、脱水剤、例えば、カルボジイミド、例えばＤＣＣＩまたはＥＤＣＩ、およびさらに、プロパンホスホン酸無水物（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．９２，１２９（１９８０）参照）、ジフェニルホスホリルアジドまたは２−エトキシ−Ｎ−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリンの存在下において行われる。分子間ペプチド結合前の分子内環化を促進するために、稀釈溶液（稀釈原理）中で反応を行うことが好ましい。
【００２８】
式ＩＩの化合物の代りに、これらの物質の適当な反応性誘導体、例えば反応性基が保護基により中間的にブロックされた化合物を反応に使用することもできる。アミノ酸誘導体ＩＩは、好ましくは例えばＨＯＢｔまたはＮ−ヒドロキシサクシンイミドの添加により反応系内で形成される活性エステルの形態で使用することができる。
式ＩＩの出発物質は、一般に新規である。これらの化合物は、既知方法、例えばペプチド合成および保護基の除去について上述した方法によって製造することができる。
【００２９】
一般に、式Ｒ′−Ｚ−ＯＲ″例えばＢＯＣ−Ｚ−ＯＭｅまたはＢＯＣ−Ｚ−ＯＥｔなどの保護されたペンタペプチドエステルを初期に合成し、この化合物をはじめに加水分解して式Ｒ′−Ｚ−ＯＨ、例えばＢＯＣ−Ｚ−ＯＨの酸を得、これらの酸から保護基Ｒ′を除去し、それによって、式Ｈ−Ｚ−ＯＨ（ＩＩ）の遊離ペプチドを得る。
【００３０】
式Ｉの塩基は、酸を使用して適当な酸付加塩に変換することができる。この反応に対する適当な酸は、特に生理学的に許容し得る塩を与える酸である。すなわち、無機酸、例えば硫酸、硝酸、ハロゲン化水素酸、例えば塩酸または臭化水素酸、燐酸、例えばオルト燐酸およびスルファミン酸、およびさらに、有機酸、特に脂肪族、脂環式、芳香脂肪族、芳香族または複素環式の一塩基性または多塩基性のカルボン酸、スルホン酸または硫酸、例えばギ酸、酢酸、プロピオン酸、ピバル酸、ジエチル酢酸、マロン酸、コハク酸、ピメリン酸、フマール酸、マレイン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、安息香酸、サリチル酸、２−または３−フェニルプロピオン酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ナフタレンモノスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸およびラウリル硫酸を使用することができる。生理学的に許容し得ない酸との塩、例えばピクリン酸塩は、式Ｉの化合物の単離および（または）精製に対して使用することができる。
【００３１】
他方において、式Ｉの酸は、塩基との反応によって、その生理学的に許容し得る金属塩またはアンモニウム塩の１種に変換することができる。適当な塩は、特にナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムおよびアンモニウム各塩、さらにまた、置換されたアンモニウム塩、例えばジメチル−、ジエチル−またはジイソプロピルアンモニウム各塩、モノエタノール−、ジエタノール−またはトリエタノールアンモニウム各塩、シクロヘキシル−またはジシクロヘキシルアンモニウム各塩、ジベンジルエチレンジアンモニウム塩、さらにまた、例えばＮ−メチル−Ｄ−グルカミン、アルギニンまたはリシンとの塩である。
【００３２】
式Ｉの新規な化合物およびこれらの化合物の生理学的に許容し得る塩は、これらの化合物またはその塩を、少なくとも１種の賦形剤または補助剤および必要に応じて１種または２種以上の他の活性化合物と一緒に、適当な投与形態にすることによって、医薬製剤の製造に使用することができる。このようにして得られた製剤は、ヒト用医薬また家畜用医薬における医薬物質として使用することができる。適当な賦形剤物質は、経腸的（例えば経口的または直腸的）投与、非経口的（例えば静脈内注射）投与または局所的投与（例えば局部、皮膚、眼または鼻などにおける投与）または吸入スプレーの形態の投与に適しそして本発明の新規な化合物と反応しない有機または無機の物質、例えば水または等張食塩水溶液、低級アルコール、植物油、ベンジルアルコール、ポリエチレングリコール、グリセロールトリアセテートおよび他の脂肪酸グリセリド、ゼラチン、大豆レシチン、炭水化物、例えばラクトースまたは澱粉、ステアリン酸マグネシウム、タルク、セルロースおよびワセリンである。
【００３３】
特に、錠剤、コーティング錠剤、カプセル、シロップ、液剤または滴下剤は、経口的投与に使用される。エンテリック被膜またはカプセルシェルを有するフィルムコーティング錠剤およびカプセルは、特に重要である。直腸投与に対しては、坐剤が使用される。非経口的投与に対しては、溶液、好ましくは油性または水性の溶液、さらにまた、懸濁液、乳濁液またはインプラントが使用される。局所適用に対しては、例えば眼用滴下剤の形態で使用することのできる溶液、さらにまた、例えば懸濁液、乳濁液、クリーム、軟膏または湿布類が適している。発射剤ガスまたは発射剤ガス混合物（例えば、ＣＯ２またはクロロフルオロ炭化水素）に溶解または懸濁した活性化合物を含有するスプレーは、吸入スプレーとして投与するために使用することができる。
【００３４】
活性化合物は、好ましくは、微細な形態で使用されそして１種または２種以上の追加的な生理学的に許容し得る溶剤、例えばエタノールを存在させることができる。吸入溶液は、慣用の吸入器の助けにより投与することができる。本発明の新規な化合物は、また凍結乾燥しそして得られた凍結乾燥品を、例えば注射用製剤の製造に使用することができる。注射は、巨丸薬（ｂｏｌｕｓ）としてまたは連続注入液（例えば静脈内、筋肉内、皮下または鞘内注入液）として投与することができる。上述した製剤は、滅菌することができそして（または）補助剤、例えば防腐剤、安定剤および（または）湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩、緩衝物質、着色剤および（または）風味料を含有することができる。必要に応じて、これらの製剤は、また、１種または２種以上の他の活性化合物、例えば１種または２種以上のビタミンを含有することができる。
【００３５】
本発明による物質は、一般に商業的に入手できる他の既知のペプチドと同様にして、特にＵＳ−Ａ−４，４７２，３０５に記載されている化合物と同様にして、好ましくは１投与単位当り約０．０５〜５００ｍｇ、特に０．５〜１００ｍｇの間の投与量で投与することができる。１日の投与量は、好ましくは体重１ｋｇ当り約０．０１〜２ｍｇの間にある。しかしながら、それぞれの意図した患者に対する具体的な投与量は、多くの種々な因子、例えば使用される具体的な化合物の活性度、年令、体重、一般的な健康状態、性別、食事、投与回数および投与方法、および排泄速度、医薬の組み合わせ、および治療が適用される特定の疾患の程度などに依存する。非経口的投与が、好ましい。
【００３６】
さらに、式Ｉの新規な化合物は、純粋な形態のインテグリンの製造に使用されるアフィニティークロマトグラフィー用のカラムを製造するインテグリンリガンドとして使用することができる。
この場合においては、リガンド、すなわち、式Ｉのペプチド誘導体は、アンカー官能（ａｎｃｈｏｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ）を経て重合体の支持体に共有的に結合されている。
【００３７】
適当な重合体支持物質は、好ましくは親水性を有するペプチド化学においてそれ自体既知の重合体の固相、例えば架橋多糖類、例えばセルロース、セファロースまたはセファデックス（商品名）、アクリルアミド、ポリエチレングリコールを基にした重合体またはテンタケル重合体（商品名）である。
【００３８】
重合体の支持体に結合される適当なアンカー官能は、好ましくは、２〜１２個のＣ原子を有する線状のアルキレン鎖であって、そして、このアルキレン鎖は、一方の末端において直接重合体に結合しておりそして他方の末端において例えばヒドロキシル、アミノ、メルカプト、マレイミドまたは−ＣＯＯＨのような官能基を有しそしてそれぞれのペプチドのＣ−末端部分またはＮ−末端部分に結合するのに適している。
【００３９】
この場合において、ペプチドは、第２のアンカー官能を経て重合体のアンカーに直接または同様に結合することが可能である。また、官能化された側鎖を有するアミノ酸基を含有するペプチドを、これらを経て重合体のアンカー官能に結合させることも可能である。
さらに、式Ｉのペプチドの構成成分であるアミノ酸基は、これらのペプチドが、例えばＳＨ、ＯＨ、ＮＨ２またはＣＯＯＨ基を経て重合体のアンカーとの結合に利用し得られるような方法で、アミノ酸基の側鎖において変性することができる。
【００４０】
これに関連して、例えば、フェニル環の４−位にメルカプト、ヒドロキシル、アミノまたはカルボキシアルキル鎖を有するフェニルアラニン誘導体のような異常なアミノ酸（官能基は、鎖の末端に位置している）が、使用可能である。
側鎖をアンカー官能として直接使用することのできるアミノ酸基の例は、例えば、Ｌｙｓ、Ｏｒｎ、Ａｒｇ、Ｄａｂ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、ＣｉｔまたはＴｙｒである。
【００４１】
Ｎ−末端アンカーの例は、例えば−ＣＯ−ＣｎＨ２ｎ−ＮＨ２、−ＣＯ−ＣｎＨ２ｎ−ＯＨ、−ＣＯ−ＣｎＨ２ｎ−ＳＨまたは−ＣＯ−ＣｎＨ２ｎ−ＣＯＯＨ（式中、ｎは２〜１２であり、そしてアルキレン鎖の長さは重要でなくそしてまた、場合によっては、これを、例えば適当なアリールまたはアルキルアリール基により置換することも可能である）のような基である。
【００４２】
Ｃ−末端アンカーは、例えば−Ｏ−ＣｎＨ２ｎ−ＳＨ、−Ｏ−ＣｎＨ２ｎ−ＯＨ、−Ｏ−ＣｎＨ２ｎ−ＮＨ２、−Ｏ−ＣｎＨ２ｎ−ＣＯＯＨ、−ＮＨ−ＣｎＨ２ｎ−ＳＨ、−ＮＨ−ＣｎＨ２ｎ−ＯＨ、−ＮＨ−ＣｎＨ２ｎ−ＮＨ２または−ＮＨ−ＣｎＨ２ｎ−ＣＯＯＨ（上記の節において既に述べたことは、また、ｎそしてまたアルキレン鎖に対して適用される）であることができる。
【００４３】
これらのＮ−末端アンカーおよびＣ−末端アンカーは、また、アミノ酸基のすでに官能された側鎖に対するアンカー成分として使用することもできる。適当なアミノ酸基は、Ｌｙｓ（ＣＯ−Ｃ５Ｈ１０−ＮＨ２）、Ａｓｐ（ＮＨ−Ｃ３Ｈ６−ＣＯＯＨ）またはＣｙｓ（Ｃ３Ｈ６−ＮＨ２）（アンカーは、常に側鎖の官能基に結合している）のようなものである。
インテグリンを精製するためのアフィニティークロマトグラフィーに対する物質の製造は、アミノ酸の縮合に対して慣用でありそしてそれ自体既知でありそして既に式Ｉの化合物の製造に対する節において説明したような条件下において行われる。
【００４４】
本明細書中における温度は、すべて℃で示されている。以下の例において、“慣用の処理”とは、「必要に応じて水を加え、混合物を中和しそしてエーテルまたはジクロロメタンで抽出し、有機相を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過しそして蒸発しそして次に残留物をシリカゲル上のクロマトグラフィーおよび（または）結晶化により精製する」ことを意味する。ＲＴは、リクロソルブＲＰセレクトＢ（２５０〜４．７μｍ）カラム上のＨＰＬＣに対する保持時間（分）を示し、溶離は、１ｍｌ／分の流速で５０分  ０．３％ＴＦＡ水溶液；イソプロパノール０〜８０容量％グラジエントで行い、そして２１５ｎｍにおける検出が行われた。Ｍ＋は、高速原子衝撃法により得られた質量スペクトルにおける分子ピークである。
【００４５】
【例】
例１
ＤＭＦ  １５ｍｌ中のＨ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−ＯＮａ［例えば、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ−Ｏ−Ｗａｎｇ（式中、−Ｏ−Ｗａｎｇは、変形メリフィールド技術において使用される４−オキシメチル−フェノキシメチルポリスチレン樹脂の基である）から、ピペリジン／ＤＭＦによるＦｍｏｃ基の除去およびＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２による樹脂の除去によって得ることができる］０．２ｇの溶液を、ジクロロメタン８５ｍｌでうすめそしてＮａＨＣＯ３で処理する。ドライアイス／アセトン混合物中で冷却した後、ジフェニルホスホリルアジド４０μｌを加える。室温で１６時間放置した後、溶液を濃縮する。この濃縮物をゲル濾過（８：２のイソプロパノール／水中セファデックス  Ｇ１０  カラム）しそしてそれから、慣用の方法でＨＰＬＣにより精製する。シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｖａｌ）が得られた。
ＲＴ＝１３．４；Ｍ＋５２５。
【００４６】
同様にして、相当する線状ペプチドの環化により、次の化合物が得られた。
0003694332.tif 000005
【００４７】
0003694332.tif 000006
【００４８】
0003694332.tif 000007
0003694332.tif 000008
【００４９】
0003694332.tif 000009
【００５０】
0003694332.tif 000010
【００５１】
0003694332.tif 000011
【００５２】
0003694332.tif 000012
【００５３】
0003694332.tif 000013
【００５４】
0003694332.tif 000014
【００５５】
0003694332.tif 000015
0003694332.tif 000016
【００５６】
例２
ＴＦＡ８．４ｍｌ、ジクロロメタン１．７ｍｌおよびチオフェノール０．９ｍｌ中のシクロ−（Ａｒｇ（Ｍｔｒ）−β−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）（例１による還化によって得ることができる）０．２８ｇの溶液を、室温で４時間放置し、それから濃縮しそして水でうすめた後、凍結乾燥する。セファデックスＧ１０上のゲル濾過（１：１の酢酸／水）およびその後の上述した条件下における分取用ＨＰＬＣによる精製によって、シクロ−（Ａｒｇ−β−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｖａｌ）を得た。ＲＴ＝１７．０；Ｍ＋５８９。
同様にして、次の化合物を得た。
【００５７】
0003694332.tif 000017
【００５８】
0003694332.tif 000018
【００５９】
例３
シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ）８０ｍｇを、５〜６回０．０１Ｍ  ＨＣｌに溶解しそしてそれぞれの溶解操作後に凍結乾燥する。その後のＨＰＬＣによる精製によりシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ）・ＨＣｌを得た。
ＲＴ＝２０．６；Ｍ＋５８９。
同様にして、次の化合物を得た。
【００６０】
0003694332.tif 000019
【００６１】
例４
アフィニティー相を製造するために、Ｎ−マレイミド−（ＣＨ２）５ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）３−重合体［Ｎ−マレイミド−（ＣＨ２）５−ＣＯＯＨとＨ２Ｎ−（ＣＨ２）３−重合体との縮合によって得ることができる］０．９ｇを、ｐＨ７の０．１Ｍ燐酸ナトリウム緩衝液１０ｍｌに懸濁しそしてシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＣＯ（ＣＨ２）２ＳＨ）１当量を４℃で加える。反応混合物を、同時的に室温に加温しながら、４時間撹拌しそして固体の残留物を濾去し、次に、それぞれ１０ｍｌの緩衝溶液（ｐＨ７）で２回そしてそれからそれぞれ１０ｍｌの水で３回洗浄する。シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ（ＣＯ（ＣＨ２）２Ｓ−３−（Ｎ−マレイミド−（ＣＨ２）５−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）３−重合体））を得た。
【００６２】
例５
例１と同様にして、重合体−Ｏ−（ＣＨ２）３−ＮＨ２［商業的に入手できる］およびシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ（ＣＯ（ＣＨ２）４ＣＯＯＨ［上述した条件下でアジピン酸とシクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ）との縮合によって得ることができる］の縮合によって、次の重合体相を得た。
【００６３】
シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｌｙｓ−（ＣＯＭ（ＣＨ２）４−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）３−Ｏ−重合体）
同様に、シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−（ＣＯ−（ＣＨ２）５−ＮＨ２））とＨＯＯＣ−ＣＨ２−Ｏ−重合体との縮合によって、次の化合物を得た。
シクロ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−（ＣＯ−（ＣＨ２）５−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨ２−Ｏ−重合体））。
以下の例は、医薬製剤に関するものである。
【００６４】
例Ａ：注射用バイアル
二重に蒸溜した水３リットルに式Ｉのシクロペプチド１００ｇおよび燐酸水素二ナトリウム５ｇを溶解した溶液を、２Ｎ塩酸でｐＨ６．５に調節し、滅菌濾過し、注射用バイアルに充填しそして滅菌条件下で凍結乾燥し、そしてバイアルを滅菌方法下で密閉する。それぞれの注射用バイアルは、活性化合物５ｍｇを含有する。
【００６５】
例Ｂ：坐剤
式Ｉの活性化合物２０ｇの混合物を、大豆レシチン１００ｇおよびココアバター１４００ｇと一緒に溶融しそして混合物を型に注入しそして冷却する。それぞれの坐剤は、活性化合物２０ｍｇを含有する。
【００６６】
例Ｃ：溶液
式Ｉの活性化合物１ｇ、ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２Ｏ  ９．３８ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏ  ２８．４８ｇおよびベンザルコニウムクロライド０．１ｇを、二重に蒸溜した水９４０ｍｌに溶解して溶液を製造する。この溶液を、ｐＨ６．８に調節し、１リットルとなしそして照射により滅菌する。この溶液は、眼用滴下剤の形態で使用することができる。
【００６７】
例Ｄ：軟膏
式Ｉの活性化合物５００ｍｇを、無菌条件下でワセリン９９．５ｇと混合する。
例Ｅ：錠剤
式Ｉのシクロペプチド１００ｇ、ラクトース１ｋｇ、微小結晶性セルロース６００ｇ、とうもろこし澱粉６００ｇ、ポリビニルピロリドン１００ｇ、タルク８０ｇおよびステアリン酸マグネシウム１０ｇの混合物を、各錠剤が活性化合物１０ｍｇを含有するように、慣用の方法で打錠し、錠剤とする。
【００６８】
例Ｆ：コーティング錠剤
錠剤を例Ｅに説明したように打錠しそしてそれから慣用の方法で、ショ糖、とうもろこし澱粉、タルク、トラガントおよび着色剤のコーティングで被覆する。
【００６９】
例Ｇ：カプセル
各カプセルが活性化合物５ｍｇを含有するように、慣用の方法で式Ｉの活性化合物を硬質ゼラチンカプセルに充填する。
【００７０】
例Ｈ：吸入スプレー
式Ｉの活性化合物１４ｇを、等張ＮａＣｌ溶液１０リットルに溶解しそしてこの溶液を、商業的に入手できるポンプ機能を有するスプレー容器に充填する。この溶液は、口または鼻にスプレーすることができる。１回のスプレーバースト（約０．１ｍｌ）は、約０．１４ｍｇの投与量に相当する。