(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）：
【化１】
0003686216.tif 000007
（上記一般式（Ｉ）中、Ｘはハロゲン原子を表し、Ｒは低級アルキル基を表す。）で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルに、ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.)MCI3468の菌体及び／又はそれらの調製物を作用させて、そのβ位のカルボニル基を立体特異的に還元することを特徴とする、下記一般式（II）：
【化２】
0003686216.tif 000008
（上記一般式（II）中、Ｘ及びＲは上記一般式（Ｉ）中のＸ及びＲと同義である。）で表される（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造方法。
【請求項２】
一般式（II）で表される（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルが、（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸エチルであることを特徴とする請求項１記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造方法に関し、詳しくは特定の属または分類単位に属する微生物を利用した、高光学純度の（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの効率的な製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
光学活性なγ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルは、種々の医薬品、農薬等に利用される光学活性化合物あるいはこれらの合成中間体の合成原料として有用であり、例えばコンパクチン、プラバスタチン等各種のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（高脂血症治療薬）に共通する光学活性なヒドロキシ酸誘導体の側鎖部分へ導くことができる。この光学活性なγ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造にあたっては、従来より、微生物の不斉還元能を利用することが検討され、その製造例の報告は多数にわたっている。
【０００３】
この様な光学活性なγ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造方法としては、例えば、キャンディダ属、デバリオマイセス属、サッカロマイセス属、ピキア属、ハンゼヌラ属等に属する酵母等の菌体を用いる方法（特公平４−７１９５号公報）、ステムフィリウム属、アルタナリア属、コリネスポラ属、プロイシア属等に属する糸状菌の培養液あるいは分離した菌体を用いる方法（特開平６−３８７７６号公報）、ブレビバクテリウム属、エッシェリシア属、ラクトバチルス属等に属する細菌、クルイベロマイセス属、サッカロマイコプシス属、ステファノアスカス属等に属する酵母等の菌体を用いる方法（特開平６−２０９７８２号公報）、さらにロドトルラ属、フザリウム属、パエシロマイセス属、バーティシラム属等に属する酵母・糸状菌等の酵素を用いて水−有機溶媒の二相系で反応せしめる方法（特開昭６３−３０９１９５号公報）などが知られている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、上記製造方法においては、何れも使用できる微生物の種類が限られており、それらは（１）反応速度が小さく反応に時間がかかる、（２）生成物の蓄積濃度が上がらない、（３）光学純度の低い生成物しか得られないなどの問題点があった。この様な状況から、高光学純度の光学活性γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを高蓄積濃度、高収率で製造することができる経済性に優れた製造方法の確立が望まれていた。
本発明は、上記観点からなされたものであり、数時間という短時間のうちに光学純度の高い（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを高蓄積濃度、高収率で製造する方法を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記課題を解決するために、（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの効率的な製造方法を開発すべく鋭意研究を行ったところ、上記各文献には未記載の特定の属の微生物の菌体及び／又はそれらの調製物をγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルに作用させることにより、数時間という短時間のうちに高光学純度の（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルが、高蓄積濃度、高収率で得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち本発明の要旨は、下記一般式（Ｉ）：
【０００６】
【化３】
0003686216.tif 000002
（上記一般式（Ｉ）中、Ｘはハロゲン原子を表し、Ｒは低級アルキル基を表す。）
【０００７】
で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルのβ位のカルボニル基を立体特異的に還元する能力を有し、フォーマ（Phoma）属、ネクトリア（Nectria）属、シュードネクトリア（Pseudonectria）属、スポンディロクラディウム（Spondylocladium）属、メラノスポラ（Melanospora）属、メタリジウム（Metarhizium）属、グリオクラディウム（Gliocladium）属、ペスタロチア（Pestalotia）属、ペスタロチオプシス（Pestalotiopsis）属、クルブラリア（Curvularia）属、ホルモネマ（Hormonema）属、シドウィア（Sydowia）属、サルシノマイセス（Sarcinomyces）属、ドチオラ（Dothiora）属、キサントテシウム（Xanthothecium）属、ドチデア（Dothidea）属、プリングスヘイミア（Pringsheimia）属、及びセレノフォーマ（Selenophoma）属からなる群より選ばれる微生物の菌体及び／又はそれらの調製物を、上記一般式（Ｉ）で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルに作用させて、そのβ位のカルボニル基を立体特異的に還元することを特徴とする、下記一般式（II）：
【０００８】
【化４】
0003686216.tif 000003
【０００９】
（上記一般式（II）中、Ｘ及びＲは上記一般式（Ｉ）中のＸ及びＲと同義である。）で表される（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造方法に存する。
【００１０】
【発明の実施の形態】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の製造方法では、原料として上記一般式（Ｉ）で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルを用い、これに上記記載の特定の属の微生物の菌体及び／又はそれらの調製物を作用させて、上記一般式（II）で表される（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを製造する。
【００１１】
上記一般式（Ｉ）及び（II）におけるＸで定義されるハロゲン原子として、例えば、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられ、好ましくは、塩素原子、臭素原子、特に好ましくは塩素原子が挙げられる。
また、上記一般式（Ｉ）及び（II）におけるＲで定義される低級アルキル基としては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基等の炭素数１〜４の低級アルキル基が挙げられる。これらの低級アルキル基の中では、エチル基、メチル基が好ましく、エチル基が特に好ましい。
【００１２】
＜１＞本発明に用いる微生物
本発明で用いる微生物の菌体及び／又はそれらの調製物としては、フォーマ（Phoma）属、ネクトリア（Nectria）属、シュードネクトリア（Pseudonectria）属、スポンディロクラディウム（Spondylocladium）属、メラノスポラ（Melanospora）属、メタリジウム（Metarhizium）属、グリオクラディウム（Gliocladium）属、ペスタロチア（Pestalotia）属、ペスタロチオプシス（Pestalotiopsis）属、クルブラリア（Curvularia）属、ホルモネマ（Hormonema）属、シドウィア（Sydowia）属、サルシノマイセス（Sarcinomyces）属、ドチオラ（Dothiora）属、キサントテシウム（Xanthothecium）属、ドチデア（Dothidea）属、プリングスヘイミア（Pringsheimia）属、及びセレノフォーマ（Selenophoma）属からなる群より選ばれる微生物の菌体及び／又はそれらの調製物が挙げられる。これらの中で、（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの産生能の点からは、フォーマ（Phoma）属、スポンディロクラディウム（Spondylocladium）属、ペスタロチア（Pestalotia）属、クルブラリア（Curvularia）属、ホルモネマ（Hormonema）属、又はドチオラ（Dothiora）属に属する微生物の菌体及び／又はそれらの調製物が好ましいものとして挙げられる。
【００１３】
本発明の製造方法に用いる上記微生物としては、γ−ハロゲン化アセト酢酸エステルのβ位のカルボニル基に作用してこれを立体特異的に還元（不斉還元）する能力を有するものであれば特に制限されないが、γ−ハロゲン化アセト酢酸エステルのβ位のカルボニル基に作用してこれを立体特異的に還元する能力の点から、例えば、フォーマ・ソルギナ（Phoma sorghina）、ネクトリア・ルドゥネンシス（Nectria lugdunensis）、シュードネクトリア・ディパリエトスポラ（Pseudonectria diparietospora）、スポンディロクラディウム・キシロゲナム（Spondylocladium xylogenum）、メラノスポラ・パラシティカ（Melanospora parasitica）、メタリジウム・アニスポリエ（Metarhizium anispoliae）、グリオクラディウム・カテヌラタム（Gliocladium catenulatum）、ペスタロチア・ジオスピリ（Pestalotia diospyri）、ペスタロチオプシス・フネレア（Pestalotiopsis funerea）、クルブラリア・ファラクス（Curvularia fallax）、ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）、ホルモネマ・プルノルム（Hormonema prunorum）、シドウィア・ポリスポラ（Sydowia polyspora）、サルシノマイセス・クルスタセウス（Sarcinomyces crustaceus）、ドチオラ・カナビナエ（Dothiora cannabinae）、ドチオラ・ラウレオラエ（Dothiora laureolae）、ドチオラ・モラビカ（Dothiora moravica）、ドチオラ・ファエオスペルマ（Dothiora phaeosperma）、ドチオラ・ラムニアルピナエ（Dothiora rhamni-alpinae）、ドチオラ・シゾスポラ（Dothiora schizospora）、ドチオラ・エリプチカ（Dothiora elliptica）、ドチオラ・ユーロパエア（Dothiora europaea）、キサントテシウム・ペルビアナム（Xanthothecium peruvianum）、ドチデア・ベルベリジス（Dothidea berberidis）、ドチデア・ムエレリ（Dothidea muelleri）、ドチデア・サンブシ（Dothidea sambuci）、プリングスヘイミア・カレリイ（Pringsheimia karelii）、プリングスヘイミア・セピンコラ（Pringsheimia sepincola）、及びセレノフォーマ・ドナシス（Selenophoma donacis）等が好ましいものとして挙げられる。
【００１４】
上記の微生物の具体的な菌株としては、
フォーマ・ソルギナ（Phoma sorghina）ATCC13145、
ネクトリア・ルドゥネンシス（Nectria lugdunensis）ATCC16713、
シュードネクトリア・ディパリエトスポラ（Pseudonectria diparietospora）ATCC13214、
【００１５】
スポンディロクラディウム・キシロゲナム（Spondylocladium xylogenum）ATCC12727、
メラノスポラ・パラシティカ（Melanospora parasitica）ATCC18055、
メタリジウム・アニスポリエ（Metarhizium anispoliae）IFO5940、
【００１６】、
グリオクラディウム・カテヌラタム（Gliocladium catenulatum)IFO6121、
ペスタロチア・ジオスピリ（Pestalotia diospyri)IFO5282、
ペスタロチオプシス・フネレア（Pestalotiopsis funerea)IFO5427、
【００１７】
クルブラリア・ファラクス（Curvularia fallax)IFO8885、
ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.)MCI3287、
ホルモネマ・プルノルム（Hormonema prunorum)CBS933.72、
ホルモネマ・プルノルム（Hormonema prunorum)CBS934.72、
ホルモネマ・プルノルム（Hormonema prunorum)CBS935.72、
ホルモネマ・プルノルム（Hormonema prunorum)CBS765.84、
ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.)MCI3468、
【００１８】
シドウィア・ポリスポラ（Sydowia polyspora)CBS116.29、
サルシノマイセス・クルスタセウス（Sarcinomyces crustaceus)CBS156.89、
ドチオラ・カナビナエ（Dothiora cannabinae)CBS737.71、
ドチオラ・ラウレオラエ（Dothiora laureolae)CBS744.71、
ドチオラ・モラビカ（Dothiora moravica)CBS266.59、
ドチオラ・ファエオスペルマ（Dothiora phaeosperma)CBS870.71、
ドチオラ・ラムニアルピナエ（Dothiora rhamni-alpinae)CBS745.71、
ドチオラ・シゾスポラ（Dothiora schizospora)CBS189.55、
ドチオラ・エリプチカ（Dothiora elliptica)CBS736.71、
ドチオラ・ユーロパエア（Dothiora europaea)CBS738.71、
【００１９】
キサントテシウム・ペルビアナム（Xanthothecium peruvianum)CBS301.67、
ドチデア・ベルベリジス（Dothidea berberidis)CBS186.58、
ドチデア・ムエレリ（Dothidea muelleri)CBS191.58、
ドチデア・サンブシ（Dothidea sambuci)CBS197.58、
プリングスヘイミア・カレリイ（Pringsheimia karelii)CBS374.59、
プリングスヘイミア・セピンコラ（Pringsheimia sepincola)CBS748.71、
【００２０】
セレノフォーマ・ドナシス（Selenophoma donacis）CBS417.51、
等の菌株を挙げることができる。上記微生物は、野生株、変異株、あるいは細胞融合もしくは遺伝子組換え法などの遺伝学的手法により誘導される組換え株などのいずれの株であってもよい。
【００２１】
また、上記の菌株のうちホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）MCI3287およびホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）MCI3468以外の菌株は全て公知の菌株であり、それぞれ、セントラルビューローフォーシュメルカルチャーズ（ＣＢＳ）、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ）、（財）発酵研究所（ＩＦＯ）から容易に入手することができる。
【００２２】
上記ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）MCI3287およびホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）MCI3468については本発明者が新たに自然界より見いだした菌株である。ホルモネマ・エスピーMCI3287は、平成８年５月２８日に通産省工業技術院生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭ  Ｐ−１５６５１として寄託され、平成９年５月１５日にベタペスト条約に基づく国際寄託に移管され、ＦＥＲＭＢＰ−５９４５の受託番号が付与されている。また、ホルモネマ・エスピーMCI3468は、平成９年５月１５日に通産省工業技術院生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭ  ＢＰ−５９４６の受託番号でベタペスト条約に基づき国際寄託されている。これらの菌株の菌学的性質を以下に示す。
【００２３】
（１）ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.)MCI3287
▲１▼形態学的性状
コロニーは、ポテトデキストロース寒天培地（ＰＤＡ）上、２４℃、２０日間の培養で直径２ｃｍに至る。
コロニー表面は、平滑、はじめうす黄茶色であり、のちに茶灰色に変色する。コロニー周縁部で気生菌糸、基底菌糸がよく発達する。
【００２４】
若い菌糸は、無色、分枝し、隔壁を有す。巾は、2.8-3.8μmである。古くなると菌糸は暗褐色に変色し、厚膜化し、多数の横隔壁を有し、隔壁部分で分節状に切断される。
分節型胞子は、円筒形〜だ円形、暗褐色であり、１隔壁〜数隔壁を有す。
分生子形成細胞は未発達で、菌糸から側生した刺状突起である。菌糸あるいは古くなった褐色菌糸の節間部に単生的に生じる。
分生子は、求基的（basipetal）に形成、アンネロ型分生子形成を示す。第１次分生子形成後、分生子形成細胞がさらに伸び上がって次の分生子ができる。
【００２５】
分生子形成に伴い、分生子形成細胞の柄が伸長することから環紋構造が形成される。分生子はだ円形〜円筒形、無色、１細胞、5.3-12.5×2.2-3.8μmである。
脱落した分生子は、膨潤し、褐色であり、厚膜化する。通常１個の隔壁を有す。12.5-15.6×4.1-6.3μm、テレオモルフは観察されなかった。
【００２６】
▲２▼生理学的性状
生育温度（PDA培地、  １週間培養）：10〜37℃
最適生育温度                     ：20〜30℃
生育pH（LCA液体培地、１週間培養）：3〜9
最適生育pH                       ：6〜7
【００２７】
▲３▼分類学的考察
本菌株（MCI3287）は刺状突起状の分生子形成細胞から求基的（ｂａｓｉｐｅｔａｌ）に分生子を形成するアンネロ型分生子形成を示す。前に形成された分生子形成細胞がさらに伸び上り、次の分生子ができる。分生子形成に伴ない次々に柄が伸び上るため環紋構造が形成される。これらの性状に基づいて、E.J.Hermanides-Nijhof著、Stud.Mycol.15:141-181の文献に従って属レベルの検索をしたところ、本菌株（MCI3287）はホルモネマ（Hormonema）属に帰属することが判明した。
【００２８】
ホルモネマ（Hormonema）属は菌糸の節間部に分生子を側生する点においてはAureobasidium属に似るが、ホルモネマ（Hormonema）は求基的（basipetal）に分生子を形成する、アンネロ型分生子形成様式を示す。一方、Aureobasidiumはコウボ様の出芽により求頂的（acropetal）に分生子を形成する特徴を有し、ホルモネマ（Hormonema）から明確に区別出来る。
【００２９】
Hermanides-Nijhof(1977),Stud.Mycol.,15:166-177、及びG.S.de Hoog & N.A.Yurlova(1994)，Antonie van Leeuwenhoek,65:41-54の文献によれば、ホルモネマ（Hormonema）のテレオモルフとして小房子嚢菌綱のドチデアレス（Dothideales）目に属すディスコスファエリナ（Discosphaerina）、シドウィア（Sydowia）、プリングスヘイミア（Pringsheimia）、ドチオラ（Dothiora）、グイルナルディア（Guignardia）を挙げている。
本菌株（MCI3287）ではテレオモルフの形成は認められなかった。
従って、本菌株は不完全糸状菌綱、アンネロ型分生子形成群−ホルモネマ（Hormonema）属に帰属する。
【００３０】
Hermanides-Nijhof(1977)及びG.S.de Hoog & N.A.Yurlova(1994)の文献によれば、テレオモルフの不明なホルモネマ（Hormonema）属にホルモネマ・デマチオイデス（H. dematioides）、ホルモネマ・プルノルム（H. prunorum）、ホルモネマ・メリオイデス（H. merioides）がある。これらの種は主として分生子の形態や大きさで区別されている。
Hermanides-Nijhofの検索表に従って、種の検索を行ったところ、本菌株の分生子は５．３−１２．５×２．２−３．８μｍの大きさであり、ホルモネマ・デマチオイデスH. dematioidesに類似した種であることが判った（ホルモネマ・メリオイデス（H. merioides）、４．５−１２×２．５−４．５μｍ）。
【００３１】
しかしながら、ホルモネマ・メリオイデス（H. merioides）は古い菌糸に横隔壁と縦隔壁を持つ、内生分生子を形成する特徴を有す。本菌株は横隔壁のみを有し、内生分生子は見られないことから、ホルモネマ・メリオイデス（H. merioides）とは異なる菌種と判断される。従って、本菌株（MCI3287）はホルモネマ・メリオイデス（H. merioides）近縁の新菌種と推定されるが、種名の決定は今後の分類学的検討を待つことにして、ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）MCI3287と命名した。
【００３２】
（２）ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）MCI3468
▲１▼形態学的性状
コロニーはポテトデキストロース寒天培地（PDA）上、24℃、７日間培養により直径40mmに達する。コロニー表面は均一で平滑、放射状に緩やかな凹凸が数本形成される。培養の進行に伴い、コロニー中心に胞子を含む白色の胞子塊及び黒色の粘液塊がしばしば形成される。また、コロニー中心部から短い菌糸束状の気菌糸が多数伸長する。表面は最初クリーム色で後に薄オリーブ色を呈する。周縁部はクリーム色、コロニー裏面はオリーブ色で表面の凹凸に対応した放射状のしわが観察される。基底菌糸は堅く密集し、皮革状となる。特徴的な臭気は認められない。
【００３３】
菌糸は最初無色、分枝し、隔壁を有する。幅1.9-5.6μm、培養後期にはしばしば菌糸壁が厚膜化し、暗褐色となる。厚膜化した菌糸の幅は3.1-7.2μm。通常細胞の幅は長さより短い。また伸長方向の隔壁(縦隔壁）は観察されない。
分生子形成細胞は未発達、多くは刺状突起状でフィアライド状のごく短い分枝となる場合も有る。無色あるいは肥厚化した菌糸より細胞あたり１〜2個単生する。分生子は求其的（basipetal）に形成、アンネロ型分生子形成様式である。すなわち、第一次分生子形成後、分生子遊離面直下の分生子形成細胞の内壁が伸長して次の分生子を形成する。この繰り返しにより分生子形成細胞は伸長し、環紋構造が形成される。環紋構造は光学顕微鏡では不明瞭であるが走査型電子顕微鏡(SEM)観察により明瞭に認められる。
【００３４】
分生子は楕円形〜円筒形、無色、1細胞性、4.7-10.3×1.9-4.4μm。二次分生子が形成される場合もある。遊離した分生子はしばしば膨潤・厚膜化し、多くは2細胞性となる。褐色、6.3-12.2×3.1-6.6 μm。
内生型分生子(endoconidia)及びテレオモルフは観察されなかった。
【００３５】
▲２▼生理学的性状
生育温度(PDA上、        7日間培養）：10℃〜30℃
最適生育温度                       ：20℃
生育pH（LCA液体培地上、10日間培養）：3〜10
最適生育pH                         ：6〜7
【００３６】
▲３▼分類学的考察
本菌株（MCI3468）は、１）テレオモルフを有しない、２）分生子形成細胞は刺状突起状である、３）分生子は分生子形成細胞から求其的（basipetal）に形成される、３）分生子形成様式はアンネロ型で分生子形成細胞先端に環紋構造が形成される特徴を有する。これらの性状に基づいてE. J. Hermanides-Nijhof (1977), Study in Mycology 15: 141-181 の文献中の検索表を用いて属レベルの検索を行ったところ本菌株（ＭＣＩ３４６８）はホルモネマ（Hormonema）属に帰属することが判明した。ホルモネマ（Hormonema）属は菌糸の節間部より分生子を側生する点においてはオウレオバシディウム（Aureobasidium）属に似るが、オウレオバシディウム（Aureobasidium）属が菌糸節間部周囲から数個の分生子を同調的に出芽するのに対し、ホルモネマ（Hormonema）属は1細胞あたり通常1〜2個の部位より求基的(basipetal)に分生子を形成し、アンネロ型分生子形成様式を示す点で明確に区別できる。
E. J. Hemmanides-Nijhof(1977), Study in Mycology 15:166-177; G. S. de Hoog & N. A. Yurlova(1994), Antonie van Leeuwenhoek 65: 41-54 によれば、Hormonema属のテレオモルフとして小房子嚢菌綱、ドチデアレス（Dothideales）に属するディスコスフェアエリナ（Discosphaerina）, シドウィア（Sydowia）, プリングスヘイミア（Pringsheimia）, ドチオラ（Dothiora）, グイグナルディア（Guignardia）属を挙げている。本菌株（ＭＣＩ３４６８）ではテレオモルフの形成は認められなかった。従って本菌株は不完全菌亜門、不完全糸状菌綱、アンネロ型分生子形成群のホルモネマ（Hormonema）属に帰属する。
【００３７】
E. J. Hermanides-Nijhof (1977)、Funk, A., T. A. D. Woods, and S. J. Hopkinson(1985)及びG. S. de Hoog & N. A. Yurlova (1994)の文献によればホルモネマ（Hormonema） 属菌として3種が記載されている。これらの種は主に分生子の形態と生育速度で区別されている。これらの文献に基づいて種の同定を行ったところ本菌は ホルモネマ・デマチオイデス（H. dematioides）に類似した種であることが判明した。本菌株とホルモネマ・デマチオイデス（H. dematioides）の主な形態的特徴（E. J. Hemmanides-Nijhof(1977)における文献値）の比較を別表に示す。
【００３８】
表１に示したように、ホルモネマ・デマチオイデス（H. dematioides）は肥厚した菌糸に横隔壁と縦隔壁を持つ、内生分生子を形成する、最適生育温度が24℃であるなどの特徴を有するが、本菌は横隔壁のみ有する、内生分生子形成は認められない、最適生育温度が24℃である点が異なっており、ホルモネマ・デマチオイデス（H. dematioides）とは別菌種と判断される。従って、本菌株（MCI3468）はホルモネマ・デマチオイデス（H. dematioides）近縁の新菌種と推定されるが種名の決定は今後の分類学的検討を待つこととして ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.） MCI3468と命名した。
【００３９】
【表１】
0003686216.tif 000004
【００４０】
＜２＞本発明に用いる微生物の分類学的考察
（１）18S ribosomal RNA遺伝子配列を用いた分類、同定
1980年代に入って分子生物学の技術進歩、特にクローニング技術、PCR（Polymerase Chain Reaction）法、自動シークエンサーの開発、高速演算可能なコンピューターの普及と新しい分子進化解析プログラムの開発は、生物の類縁関係や系統進化を分子レベルから研究する分子系統分類学を誕生させた。分子進化は、形態に比べて一定に近い速度で変化するので、これを「分子時計」とみなし、生物のＤＮＡ、ＲＮＡあるいは蛋白質といった情報高分子を比較することによって、生物間の系統関係が推定できると考えるようになった。菌類においても ribosomal RNA（リボゾームＲＮＡ）の塩基配列の解析が取り入れられ、コウボ、コウボ様糸状菌（yeast-like fungi）を中心に一部の糸状菌についてもデータが蓄積されつつある。
【００４１】
1980年、P.M. Rubtsov らによりサッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）の18S ribosomal RNA（以下、18S rRNA）の塩基配列が決定され、1989年、キャンディダ・アルビカンス（Candida albicans ）（L. Hendriks et al., Syst. Appl. Microbiol. 12:223-229）、1995年、Yeast-like fungi（G. Haase et al., Antonie van Leeuwenhoek 68: 19-35),1995年、C.P. Kurtzman & C.J. Robnett, Yeast-like fungi（Can. J. Bot. 73: S824-S830）などの18S rRNAの塩基配列が発表されている。
【００４２】
この様な状況下、本研究において、１）分子系統を考察するのに優れた指標として使われている18S rRNA遺伝子塩基配列の比較解析から、本発明の製造実施例に記載される菌株を含むコウボ様糸状菌の系統関係を明らかにして、２）得られた分子情報（18S rRNA遺伝子の塩基配列）と形態の両側面からコウボ様糸状菌の分類を試みた。18S rRNAの塩基配列に供した菌株は以下に挙げた30菌株である。
【００４３】
〔供試菌株〕
オウレオバシディウム  ミクロスティクタム（Aureobasidium microstictum）IFO32070
オウレオバシディウム  プルランス  バー  プルランス（A. pullulans var.pullulans）CBS701.76
オウレオバシディウム  プルランス  バー  プルランス（A. pullulans var.pullulans）ATCC34621
オウレオバシディウム  プルランス  バー  プルランス（A. pullulans var.pullulans）CBS146.30
オウレオバシディウム  プルランス  バー  プルランス（A. pullulans var.pullulans）CBS123.37
オウレオバシディウム  プルランス  バー  プルランス（A. pullulans var.pullulans）MCI3251
オウレオバシディウム  プルランス  バー  プルランス（A. pullulans var.pullulans）MCI3252
【００４４】
ディスコスファエリナ・ファギ（Discosphaerina fagi）CBS171.93
ドチデア・ベルベリジス（Dothidea berberidis）CBS186.58
ドチデア・ノキシア（D. noxia）CBS171.34
ドチデア・ムエレリ（D. muelleri）CBS191.58
ドチデア・サンブシ（D. sambuci）CBS197.58
ドチオラ・カナビナエ（Dothiora cannabinae）CBS737.71
ドチオラ・エリプチカ（D. elliptica）CBS736.71
ドチオラ・ユーロパエア（D. europaea）CBS738.71
ドチオラ・ラウレオラエ（D. laureolae）CBS744.71
ドチオラ・モラビカ（D. moravica）CBS266.59
ドチオラ・ファエオスペルマ（D. phaeosperma）CBS870.71
ドチオラ・ラムニアルピナエ（D. rhamni-alpinae）CBS745.71
ドチオラ・シゾスポラ（D. schizospora）CBS189.55
ホルモネマ・プルノルム（Hormonema prunorum）CBS933.72
ホルマネマ・エスピー（Hormonema sp.）MCI3287
ホルマネマ・エスピー（H. sp.）MCI3468
プリングスヘイミア・カレリイ（Pringsheimia karelii）CBS374.59
プリングスヘイミア・セピンコラ（P. sepincola）CBS748.71
セレノフォーマ・ドナシス（Selenophoma donacis）CBS417.51
セレノフォーマ・リニコラ（S. linicola）CBS468.48
セレノフォーマ・マホニアエ（S. mahoniae）CBS388.92
シドウィア・アガルカリ（Sydowia agharkari）CBS434.61
シドウィア・ポリスポラ（S. polyspora）CBS116.29
【００４５】
〔実験方法〕
麦芽培地（麦芽粉末20ｇ，ポリペプトン1ｇ，グルコース20ｇ，脱塩水1Ｌ）を200ml容の三角フラスコに40ml仕込み、オートクレーブ滅菌後、植菌して150rpm、20℃あるいは24℃で4日から10日間振とう培養した。培養は1菌株あたりフラスコ1本培養した。培養菌体はフイルター濾過（東洋濾紙No.101）して集菌した。
【００４６】
糸状菌のDNA抽出、精製は（四本、大原、三川  1995年、Microbiol. Cult. Coll. 11:19-21）に従った。18S rRNA遺伝子の増幅、クローニング、精製法は主としてD. M. Hills et al.（1996）のプロトコール（Molecular Systematics, 2nd ed. pp 205-381.Sinauer）に従った。凍結湿菌体からDNAを抽出、精製して、Candida albicans （L. Hendriks et al. 1989. System. Appl. Microbiol. 12: 223-229）の18S rRNAの塩基配列において、５’末端から数えた塩基番号917〜940、1733〜1756の位置に相補性を持つ２種類の合成プライマー（5'-CTACTGCGAAAGCATTTGCCAAGG-3'（配列番号５６）、5'-GAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3'（配列番号５７））とTaq polymerase の存在下、PCR反応を行って、18S rRNAをコードする遺伝子（18S rDNA）の部分塩基配列（941〜1732）を増幅した。
【００４７】
増幅DNA断片をアクリルアミドゲル電気泳動で精製して、回収したrDNA断片をpT7ベクターに組み込み、エシェリヒア・コリ（E. coli）に形質転換してdideoxy法で塩基配列を決定した。シークエンシングはABI社のマニュアルに従って行った。シークエンサーはABI社製高感度自動シークエンサーABI377を用いた。
得られたシークエンスデータは遺伝子解析ソフトGENETYX-MAC（ソフトウェア開発株式会社製）を用いて編集を行い、塩基データアラインメント（Alignment）ソフトCLUSTAL W（J. D. Thompson et al., 1994, Nucl. Acid Res. 22: 4673-4680）によりアラインメントを行った。系統樹の作成は系統樹作成パッケージソフトPhylip（J. Felsenstein. PHYLIP-Phylogenetic inference package, version 3.5C, Computer programs distributed by the auther, Department of Genetics, Univ. of Washington, Seattle）を用いて近隣結合法（Neighbour-joining法）により作成した。
【００４８】
系統解析の参照に供するため、データバンクに登録されている以下の塩基配列を利用した； キャンディダ・アルビカンス（Candida albicans）X53497、キトリディウム・コンフェルバエ（Chytridium confervae）M59758、エクソフィアラ・デルマティティディス（Exophiala dermatitidis）X79312、エクソフィアラ・ジーンセルメイ（E.jeanselmei）X80705、ファエオコッコマイセス・エクソフィアレ（Phaeococcomyces exophialae）X80709。菌名の後に付記した番号はEMBL（European Bioinformatics Institute）及びGenBank（National Center for Biotechnology Information）に登録されている18S rRNA遺伝子の塩基配列のaccession no.を示す。例えば、X53497は、Candida albicansの18S rRNAの塩基配列である。
【００４９】
〔結果〕
図１〜９は後記の実施例に記載される菌株を含むコウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の部分塩基配列のアラインメントを示したものである。供試菌株の18S rRNA遺伝子の塩基配列は、キャンディダ・アルビカンス（Candida albicans）X53497の配列と相補的に配列してある。また、キャンディダ・アルビカンス（Candida albicans）X53497の全配列を配列表の配列番号１に、各供試菌株の18S rRNA遺伝子の部分塩基配列のうち、X53497の塩基番号1117〜1631に相当する部分の塩基配列を、配列表の配列番号１〜３１に示した。特許請求の範囲で規定した塩基番号1480〜1498及び1579〜1591は、配列番号１に示したキャンディダ・アルビカンス（Candida albicans）X53497の塩基配列の塩基番号1478〜1498及び1578〜1590に各々対応する部分である。
【００５０】
Candida albicans X53497及び各供試菌株の18S rRNA遺伝子の塩基配列を比較した結果、上記の２つの部分（1480〜1498及び1579〜1591）は他の部分と比べて保存領域と可変領域を含んでおり、系統分類に好適な材料となると判断した。
図１０は、上記のようにして決定された18S rRNA遺伝子の塩基配列に基づいて、近隣結合法により作成した各コウボ様糸状菌の系統樹である。この系統樹に示すように、解析した30菌種は３つのクラスター（第１群、第２群及び第３群）に大別された。
【００５１】
第１群はドチデア・ノキシア（Dothidea noxia）とセレノフォーマ・ドナシス（Selenophoma donacis）から成り、第２群はドチオラ・モラビカ（Dothiora moravica）で構成された。
【００５２】
第３群はオウレオバシディウム（Aureobasidium）やドチオラ（Dothiora）属の菌種が含まれるが、さらに３つのサブクラスター（サブクラスター１群、サブクラスター２群及びサブクラスター３群）に分かれた。サブクラスター1群にはオウレオバシディウム（Aureobasidium）属の菌種を中心にセレノフォーマ・マホニアエ（Selenophoma mahoniae）,ディスコスファエリナ・ファギ（Discosphaerina fagi）が含まれた。サブクラスター２群はプリングスヘイミア・カレリイ（Pringsheimia karelii）, プリングスヘイミア・セピンコラ（P. sepincola）,シドウィア・アガルカリ（Sydowia agharkari）及びセレノフォーマ・リニコラ（Selenophoma linicola）から成り、サブクラスター３群はドチデア・ムエレリ（Dothidea muelleri）, ドチデア・サンブシ（D. sambuci）, ドチデア・ベルベリジス（D. berberidis）, ドチオラ・シゾスポラ（Dothiora schizospora）,ドチオラ・カナビナエ（D. cannabinae）, ドチオラ・エリプチカ（D. elliptica）,ドチオラ・ユーロパエア（D. europaea）, ドチオラ・ラムニアルピナエ（D. rhamni-alpinae）, ドチオラ・ファエオスペルマ（D. phaeosperma）, ドチオラ・ラウレオラエ（D. laureolae）, シドウィア・ポリスポラ（Sydowia polyspora）, ホルモネマ・プルノルム（Hormonema prunorum） 及びホルモネマ・エスピー（Hormonema spp.）（MCI3287, MCI3468）で構成された。
【００５３】
（２）系統分類学的考察
18S rRNA の系統解析の結果から、ドチデア（Dothidea）, ドチオラ（Dothiora）, セレノフォーマ（Selenophoma）及びシドウィア（Sydowia）属は系統的に異なった種群から構成されており、分類学的に再編成が必要であると思われる。第３群において、サブクラスター１群及びサブクラスター３群に含まれるオウレオバシディウム（Aureobasidium）属やホルモネマ（Hormonema）属のコウボ様糸状菌は、小房子嚢菌綱（Loculoascomycetes）のドチデアレス（Dothideales）に属するドチデア（Dothidea）, ドチオラ（Dothiora）,ディスコスフェアエリナ（Discosphaerina）及びプリングスヘイミア（Pringsheimia）等に関連したアナモルフ属である（Hermanides-Nijhof, 1977; Sivanesan, 1984; Hawksworth, 1994）。
【００５４】
オウレオバシディウム（Aureobasidium）は菌糸側面から同調的出芽により求頂的に分生子を形成し、一方、ホルモネマ（Hormonema）は主として環紋型の分生子形成を示すことで区別されているが、出芽型あるいは環紋型の分生子タイプを光学顕微鏡で見分けることは困難であったり、両方の形態が混在する菌株も存在し、両属の分類に混乱が生じている状況にある（Hermanides-Nijhof, 1977; Sivanesan, 1984; Hawksworth, 1994）。上記の18S rRNA遺伝子配列による分類、同定の結果では、図１０に示すようにオウレオバシディウム（Aureobasidium）属とホルモネマ（Hormonema）属は各々２つの系統群に分かれ、分生子の形成様式と対応していることが判った。このことから分生子形成様式は系統を反映した分類形質であることが示唆された。
【００５５】
環紋型の分生子を有するホルモネマ（Hormonema）属の近傍にテレオモルフ属のドチデア（Dothidea）, ドチオラ（Dothiora） 及びシドウィア（Sydowia）属がサブクラスター３群を構成した。分生子形成型確認のため、これらの属の菌株をPDA培地とLCA培地上で、20℃、2週間培養し、走査型電子顕微鏡を用いて分生子形成型を精査した。ドチオラ・カナビナエ（Dothiora cannabinae）, ドチオラ・エリプチカ（D. elliptica）, ドチオラ・ユーロパエア（D. europaea）, ドチオラ・ラムニアルピナエ（D. rhamni-alpinae）, ドチオラ・ファエオスペルマ（D. phaeosperma）, ドチオラ・ラウレオラエ（D. laureolae）及びシドウィア・ポリスポラ（Sydowia polyspora）は明瞭な環紋型分生子を有することが判った。この中で、ドチオラ・カナビナエ（Dothiora cannabinae）, ドチオラ・エリプチカ（D. elliptica）, ドチオラ・ファエオスペルマ（D. phaeosperma）,  及びドチオラ・ラムニアルピナエ（D. rhamni-alpinae）は本実験で解析した500bpの塩基配列が完全に一致したこと、環紋型の分生子を形成するという共通性状を有することから、系統的に同一種群に帰属するものと推定された。
【００５６】
本研究で、新たに分離されたホルモネマ・エスピー（Hormonema spp.）（MCI3287, MCI3468）は、これらのドチオラ（Dothiora）属に関連したアナモルフであることが強く支持された。サブクラスター３群の中で分生子の形成が観察されなかったテレオモルフ属にドチデア・ムエレリ（Dothidea muelleri）, ドチデア・サンブシ（D. sambuci）, ドチデア・ベルベリジス（D. berberidis）, 及びドチオラ・シゾスポラ（Dothiora schizospora） がある。これらの菌群はアナモルフの世代を欠損した菌種と推定されるが、塩基配列の結果から、ホルモネマ（Hormonema）属をアナモルフに持つ菌群と系統的に同一種群に属することが示唆された。
【００５７】
セレノフォーマ（Selenophoma）属は分生子殻（pycnidia）を形成するアナモルフ属であるが、図１０に示したように、遺伝子解析の結果、まとまった系統枝を形成せず分類学的な再整理の必要な属である。セレノフォーマ・マホニアエ（Selenophoma mahoniae）はディスコスフェアエリナ・ファギ（Discosphaerina fagi）と同一系統枝を形成し、ディスコスフェアエリナ（Discosphaerina）のアナモルフに関連した属であることが判った。ディスコスフェアエリナ（Discosphaerina）属、及びセレノフォーマ（Selenophoma）属菌について分生子の形成様式を観察したところ、ディスコスフェアエリナ・ファギ（Discosphaerina fagi）及びセレノフォーマ・マホニアエ（Selenophoma mahoniae）は共に出芽型の分生子を形成し、形態学的にも両属菌はテレオモルフとアナモルフの関係にあることが強く支持された。一方、セレノフォーマ・ドナシス（S. donacis）及びセレノフォーマ・リニコラ（S. linicola）では分生子が観察出来なかった。
【００５８】
プリングスヘイミア・カレリイ（Pringsheimia karelii）、プリングスヘイミア・セピンコラ（P. sepincola）及びシドウィア・アガルカリ（Sydowia agharkari）は1つの系統枝（サブクラスター2群）を形成した。シドウィア（Sydowia）属の種は、サブクラスター3群にも散在することから、系統的に異質な属であることが示唆された。分生子の形成様式を観察した結果、プリングスヘイミア・セピンコラ（Pringsheimia sepincola）は環紋型の分生子を形成したが、プリングスヘイミア・カレリイ（P. karelii）、シドウィア・アガルカリ（Sydowia agharkari）では観察されなかった。
【００５９】
18S rRNA遺伝子の塩基配列はアナモルフ-テレオモルフの関連性を検証する指標として有効であることが強く示唆された。また子実体の形態を基盤としたテレオモルフ属の分類システムを再構築する際にも、客観的な情報を提供してくれることが判った。
【００６０】
表２に、Candida albicans X53497の1480〜1498及び1579〜1591に相当する部位の18S rRNA遺伝子の塩基配列及び胞子形成性によるコウボ様糸状菌の分類を示す。この表に分類される微生物、すなわち、その微生物が属する属、胞子形成性、及び18S rRNA遺伝子の上記部位の塩基配列が同じである微生物は、後記実施例で用いた各菌株と同様に、前記一般式（Ｉ）で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルのβ位のカルボニル基を立体特異的に還元する能力を有しており、本発明の方法に用いることができることが強く示唆される。
【００６１】
【表２】
0003686216.tif 000005
【００６２】
＜３＞（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造方法
本発明の製造方法においては、上述したγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルのβ位のカルボニル基に作用してこれを立体特異的に還元（不斉還元）する能力を有する微生物の１種あるいは２種以上が、菌体及び／又はそれらの調製物の形で用いられる。具体的には、上記微生物を培養して得られた菌体をそのまま、あるいは培養して得られた菌体をアセトン処理したもの、凍結乾燥処理したもの、菌体を物理的又は酵素的に破砕したもの等の調製物を用いることができる。又、これらの菌体又は調製物から、上記一般式（Ｉ）で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルのβ位のカルボニル基に作用してこれを立体特異的に還元（不斉還元）して上記一般式（II）で表される（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルへ変換する能力を有する酵素画分を粗製物あるいは精製物として取り出して用いることも可能である。さらには、この様にして得られた菌体、調製物、酵素画分等をポリアクリルアミドゲル、カラギーナンゲル等の担体に固定化したもの等を用いることも可能である。本明細書において「菌体及び／又はそれらの調製物」の用語は、上述の菌体、調製物、酵素画分、及びそれらの固定化物全てを含有する概念として用いられる。
【００６３】
以下に、本発明の（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステル製造方法について具体的に説明する。
本発明の製造方法では、原料として上記一般式（Ｉ）で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルを用い、これに上記記載の特定の属の微生物の菌体及び／又はそれらの調製物を作用させ、上記一般式（II）で表される（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを製造する。
【００６４】
本発明の製造方法において微生物は、通常、培養して用いられるが、この培養については常法通り行うことができる。培養に使用する培地としては、グルコース、シュークロース、グリセリン、クエン酸等の炭素源、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム等の無機窒素源、酵母エキス、ペプトン、尿素、肉エキス、コーンスティープリカー等の有機窒素源、マグネシウム、カリウム等の無機塩類、リン酸等を適宜組み合わせて含有したものを用いればよい。又、これらの成分以外にも、反応活性を促進するための物質として、無機塩類、微量金属類、アミノ酸類、あるいはビタミン類を添加することも可能である。培養は、培地のｐＨを３〜１０の範囲に調整し、温度１０〜４５℃で、１〜１０日の範囲で活性が最大になるまで行うことが好ましい。
【００６５】
本発明においては、この様に培養して得られる微生物の菌体及び／又はその調製物と上記一般式（Ｉ）で表されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルとを水性媒体中で接触させて反応させ、反応生成物として上記一般式（II）で表される（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを得る。ここで用いられる水性媒体としては、水、緩衝液または培養液等が挙げられるが、この水性媒体には、水溶性有機溶媒または脂溶性有機溶媒を適宜含有させることも可能である。又、反応に際して、反応液にグルコース、シュークロース、フルクトース、エタノール、メタノール等の炭素源をエネルギー源として添加することにより収量が向上することが明らかである。
【００６６】
本発明に用いるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルにおいて、ハロゲンとしては塩素が、エステルとしてはエチルエステルが好ましい。特に好ましいものは、（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸エチルである。
【００６７】
反応液に添加するγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルの量はその反応液中の濃度が０．０１〜５０重量％となる程度の量であり、添加されたγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルは反応液中で水性媒体に必ずしも完全に溶解していなくてもよい。又、反応に基質阻害が起こる場合には、反応が進むにつれて消費されるγ−ハロゲン化アセト酢酸エステルを消費された量だけ連続的にあるいは間歇的に添加していくことにより生成物の蓄積量をより向上させることが可能である。反応液に添加する微生物の菌体及び／又はその調製物の量は、菌体を添加する場合は、反応液にその菌体濃度が０．０１〜２０重量％程度となるように添加し、酵素のような調製物を用いる場合には、酵素の比活性を求め、添加したときに上記菌体濃度に相当する酵素濃度になるような量を添加する。この反応における好ましい反応条件は、反応温度が氷点〜７０℃、好ましくは１０〜４０℃、ｐＨが２〜１１、好ましくは５〜８、反応時間が１〜１００時間程度である。
【００６８】
上記反応により反応生成物として（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルが得られるが、反応液から目的生成物である光学活性な（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを単離する方法としては、遠心分離等にて菌体及び／又はその調製物を除去した後、反応液よりクロロホルム、酢酸エチル等の有機溶媒で（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを抽出し、蒸留、カラムクロマトグラフィ等の公知の方法を利用して単離する等の方法を挙げることができる。
【００６９】
【実施例】
以下に本発明の実施例を説明する。
［実施例１］
表３に示す各種微生物の菌体をそれぞれ、グルコース４．０％、酵母エキス２．０％、コーンスティープリカー０．５％を含み、ｐＨ６．０とした培地１００ｍｌずつに植菌し、２６℃で２〜５日間好気的に振盪培養した。（表３中、＊印のついた微生物については、２１℃で培養した。）培養終了後、遠心分離により菌体を集め、リン酸緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ６．５）にて洗浄した後、これらの菌体のそれぞれを培養液と同じ菌体濃度になるように、グルコース３．０％を含む同緩衝液１００ｍｌに懸濁させた。これら菌体懸濁液にγ−クロロアセト酢酸エチルを２．０ｇずつ添加して、２６℃で４時間の振盪反応を実施した。
【００７０】
反応終了後、各反応液から遠心分離により菌体を除去し、この反応上清の逆相ＨＰＬＣ分析［コスモシール５Ｃ１８、溶離液；２０％アセトニトリル水溶液、流速；１．０ｍｌ／分、ＵＶ；２２０ｎｍ］を行い、上記反応で生成した（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸エチルの生成量を求めた。また、各反応上清に酢酸エチルを１００ｍｌずつ添加し抽出を行い、濃縮後イソプロパノールに溶解して光学分割ＨＰＬＣ分析［カラム；ダイセルＣＨＩＲＡＬＣＥＬ  ＯＤ、溶離液；ヘキサン／イソプロパノール＝９／２、流速；０．５ｍｌ／分、検出；ＲＩ］により光学純度測定を行うと共に絶対配置を求めた。得られた結果を表３に示す。なお表３中の生成量は、培養液当たりに換算した反応物生成量（単離；ｇ／Ｌ／ｂｒｏｔｈ）を示すものである。
【００７１】
【表３】
0003686216.tif 000006
【００７２】
［実施例２］
実施例１と同様の手順に従って、微生物菌体としてホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）ＭＣＩ３２８７を用い、反応基質としてγ−クロロアセト酢酸メチルを用いて、（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸メチルを製造した。この反応で得られた（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸メチルの生成量及び光学純度を上記実施例１と同様の方法で測定した。結果は生成量が１９ｇ／Ｌ／ｂｒｏｔｈ、光学純度は９５．０％ｅ．ｅ．（Ｓ）体であった。
【００７３】
［実施例３］
実施例１と同様の手順に従って、微生物菌体としてホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）ＭＣＩ３２８７を用い、反応基質としてγ−ブロモアセト酢酸エチルを用いて、（Ｓ）−γ−ブロモ−β−ヒドロキシ酪酸エチルを製造した。この反応で得られた（Ｓ）−γ−ブロモ−β−ヒドロキシ酪酸エチルの生成量及び光学純度を上記実施例１と同様の方法で測定した。結果は生成量が１６ｇ／Ｌ／ｂｒｏｔｈ、光学純度は９７．２％ｅ．ｅ．（Ｓ）体であった。
【００７４】
［実施例４］
ホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）ＭＣＩ３２８７の菌体を、グルコース４．０％、酵母エキス２．０％、コーンスティープリカー０．５％を含み、ｐＨ６．０とした培地の１００ｍｌに植菌し、２６℃で２日間好気的に振盪培養した。培養終了後、遠心分離により菌体を集め、リン酸緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ６．５）にて洗浄した後、この菌体を、培養液と同じ菌体濃度になるように、グルコース３．０％を含む同緩衝液１００ｍｌに懸濁させた。１Ｍ  Ｎａ2ＣＯ3水溶液でｐＨ６．３に維持しながら、この菌体懸濁液にγ−クロロアセト酢酸エチルを計３．５ｇ添加して、２６℃で８時間目まで撹拌反応を行った。
反応終了後、得られた（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸エチルの生成量及び光学純度を上記実施例１と同様の方法で測定した。結果は生成量が３２ｇ／Ｌ／ｂｒｏｔｈ、光学純度は９７．５％ｅ．ｅ．（Ｓ）体であった。
【００７５】
［実施例５］
実施例４と同様の手順に従って、微生物菌体としてホルモネマ・エスピー（Hormonema sp.）ＭＣＩ３４６８の菌体を用いて（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸エチルの製造を実施した。
反応終了後、得られた（Ｓ）−γ−クロロ−β−ヒドロキシ酪酸エチルの生成量及び光学純度を上記実施例１と同様の方法で測定した。結果は生成量が３４ｇ／Ｌ／ｂｒｏｔｈ、光学純度は９９．０％ｅ．ｅ．（Ｓ）体であった。
【００７６】
以上の結果から、上記本発明の製造方法によれば、光学純度の高い（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを数時間という短時間で高収率、高蓄積濃度で製造できることがわかる。
【００７７】
【発明の効果】
本発明の製造方法により、光学純度の高い（Ｓ）−γ−ハロゲン化−β−ヒドロキシ酪酸エステルを数時間という短時間で高収率、高蓄積濃度で製造することが可能であり、工業的に極めて有利である。
【００７８】
【配列表】
配列番号：１
配列の長さ：1788
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Candida albicans
株名： MUCL29800
配列
TATCTGGTTG ATCCTGCCAG TAGTCATATG CTTGTCTCAA AGATTAAGCC ATGCATGTCT     60
AAGTATAAGC AATTTATACA GTGAAACTGC GAATGGCTCA TTAAATCAGT TATCGTTTAT    120
TTGATAGTAC CTTACTACTT GGATAACCGT GGTAATTCTA GAGCTAATAC ATGCTTAAAA    180
TCCCGACTGT TTGGAAGGGA TGTATTTATT AGATAAAAAA TCAATGCCTT CGGGCTCTTT    240
GATGATTCAT AATAACTTTT CGAATCGCAT GGCCTTGTGC TGGCGATGGT TCATTCAAAT    300
TTCTGCCCTA TCAACTTTCG ATGGTAGGAT AGTGGCCTAC CATGGTTTCA ACGGGTAACG    360
GGGAATAAGG GTTCGATTCC GGAGAGGGAG CCTGAGAAAC GGCTACCACA TCCAAGGAAG    420
GCAGCAGGCG CGCAAATTAC CCAATCCCGA TTCAGGGGAG GTAGTGACAA TAAATAACGA    480
TACAGGGCCC TTTTGGGTCT TGTAATTGGA ATGAGTACAA TGTAAATACC TTAACGAGGA    540
ACAATTGGAG GGCAAGTCTG GTGCCAGCAG CCGCGGTAAT TCCAGCTCCA AAAGCGTATA    600
TTAAAGTTGT TGCAGTTAAA AAGCTCGTAG TTGAACTTTG GGCTTGGCTG GCCGGTCCAT    660
CTTTTTCGAT GCGTACTGGA CCAGCCGAGC CTTTCCTTCT GGTAGCCATT TATGGCGAAC    720
CAGGACTTTT ACTTTGAAAA AATTAGAGTG TTCAAAGCAG GCCTTTGCTC GAATATATTA    780
GCATGGAATA ATAGAATAGG ACGTTATGGT TCTATTGTGT TGGTTTCTAG GACCATCGTA    840
ATGATTAATA GGGACGGTCG GGGGTATCAG TATTCAGATG TCGAAAGGTG AAATTCTTGG    900
ATTTACTGAA GACTAACTAC TGCGAAAGCA TTTACCAAGG ACGTTTTCAT TAATCAAGAA    960
CGAAAGTTAG GGGATCGAAG ATGATCAGAT ACCGTCGTAG TCTTAACCAT AAACTATGCC   1020
GACTAGGGAT CGGTTGTTGT TCTTTTATTG ACGCAATCGG CACCTTACGA GAAATCAAAG   1080
TCTTTGGGTT CTGGGGGGAG TATGGTCGCA AGGCTGAAAC TTAAAGGAAT TGACGGAAGG   1140
GCACCACCAG GAGTGGAGCC TGCGGCTTAA TTTGACTCAA CACGGGGAAA CTCACCAGGT   1200
CCAGACACAA TAAGGATTGA CAGATTGAGA GCTCTTTCTT GATTTTGTGG GTGGTGGTGC   1260
ATGGCCGTTC TTAGTTGGTG GAGTGATTTG TCTGCTTAAT TGCGATAACG AACGAGACCT   1320
TAACCTACTA AATAGTGCTG CTAGCATTTG CTGGTATAGT CACTTCTTAG AGGGACTATC   1380
GACTCCAAGT CGATGGAAGT TTGAGGCAAT AACAGGTCTG TGATGCCCTT AGACGTTCTG   1440
GGCCGCACGC GCGCTACACT GACGGAGCCA GCGAGTATAA GCCTTGGCCG AGAGGTCTGG   1500
GAAATCTTGT GAAACTCCGT CGTGCTGGGG ATAGAGCATT GTAATTGTTG CTCTTCAACG   1560
AGGAATTCCT AGTAAGCGCA AGTCATCAGC TTGCGTTGAT TACGTCCCTG CCCTTTGTAC   1620
ACACCGCCCG TCGCTACTAC CGATTGAATG GCTTAGTGAG GCCTCCGGAT TGGTTTAGGA   1680
AAGGGGGCAA CTCCATTCTG GAACCGAGAA GCTGGTCAAA CTTGGTCATT TAGAGGAAGT   1740
AAAAGTCGTA ACAAGGTTTC CGTAGGTGAA CCTGCGGAAG GATCATTA                1788
【００７９】
配列番号：２
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Aureobasidium pullulans var. pullulans
株名： ATCC34621
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGAGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTC GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGC CCGGAAGGGT TGGGTAATCT CGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００８０】
配列番号：３
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Aureobasidium pullulans var.pullulans
株名： CBS123.37
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTATCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGC CCGGAAGGGT TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００８１】
配列番号：４
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Aureobasidium pullulans var.pullulans
株名： CBS146.30
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGC CCGGAAGGGT TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００８２】
配列番号：５
配列の長さ：515
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Aureobasidium pullulans var.pullulans
株名： CBS701.76
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG TGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACATTAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTC GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GCTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GTCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCGCGATGGA AGTTTGAGGC AATAACAGGT    300
CTGTGATGCC CTTAGATGTT CTGGGCCGCA CGCGCGCTAC ACTGACAGAG CCAACGAGTT    360
CATTTCCTTG CCCGGAAGGG TTGGGTAATC TTGTTAAACT CTGTCGTGCT GGGGATAGAG    420
CATTGCAATT ATTGCTCTTC AACGAGGAAT GCCTAGTAAG CGTACGTCAT CAGCGTGCGT    480
TGATTACGTC CCTGCCCTTT GTACACACCG CCCGT                               515
【００８３】
配列番号：６
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Aureobasidium pullulans var.pullulans
株名： MCI3251
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGC CCGGAAGGGT TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００８４】
配列番号：７
配列の長さ：513
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Aureobasidium pullulans var.pullulans
株名： MCI3252
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGCACCAA CCAGGCGTGG AGCTGCGGCT TAATTTGACT     60
CAACACGGGG AAACTCACCA GGTCCAGACA CAATAAGGAT TGACAGATTG AGAGCTCTTT    120
CTTGATTTTG TGGGTGGTGG TGCATGGCCG TTCTTAGTTG GTGGAGTGAT TTGTCTGCTT    180
AATTGCGATA ACGAACGAGA CCTTAACCTG CTAAATAGCC CGGCCCGCTT TGGCGGGTCG    240
CCGGCTTCTT AGAGGGACTA TCGGCTCAAG CCGATGGAAG TTTGAGGCAA TAACAGGTCT    300
GTGATGCCCT TAGATGTTCT GGGCCGCACG CGCGCTACAC TGACAGAGCC AACGAGTTCA    360
TTTCCTTGCC CGGAAGGGTT GGGTAATCTT GTTAAACTCT GTCGTGCTGG GGATAGAGCA    420
TTGCAATTAT TGCTCTTCAA CGAGGAATGC CTAGTAAGCG TACGTCATCA GCGTGCGTTG    480
ATTACGTCCC TGCCCTTTGT ACACACCGCC CGT                                 513
【００８５】
配列番号：８
配列の長さ：512
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Aureobasidium microsticutum
株名： IFO32070
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACAC CAGGCGTGGA CCTGCGGCTT AATTTGACTC     60
AACACGGGGA AACTCACCAG GTCCAGACAC AATAAGGGAT TGACAGATTG AGAGCTCTTT    120
CTTGATTTTG TGGGTGGTGG TGCATGGCCG TTCTTAGTTG GTGGAGTGAT TTGTCTGCTT    180
AATTGCGATA ACGAACGAGA CCTAACCTGC TAAATAGCCC GGCCCGCTTT GGCGGGTCGC    240
CGGCTTCTTA GAGGGACTAT CGGCTCAAGC CGATGGAAGT TTGAGGCAAT AACAGGTCTG    300
TGATGCCCTT AGATGTTCTG GGCCGCACGC GCGCTACACT GACAGAGCCA ACGAGTTCAT    360
TTCCTTGCCC GGAAGGGTTG GGTAATCTTG TTAAACTCTG TCGTGCTGGG GATAGAGCAT    420
TGCAATTATT GCTCTTCAAC GAAGAATGCC TAGTAAGCGT ACGTCATCAG CGTGCGTTGA    480
TTACGTCCCT GCCCTTTGTA CACACCGCCC GT                                  512
【００８６】
配列番号：９
配列の長さ：515
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora cannavinae
株名： CBS737.71
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTGC CCTGCCCTTT GTACACACCG CCCGT                               515
【００８７】
配列番号：10
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora elliptica
株名： CBS736.71
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００８８】
配列番号：11
配列の長さ：513
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora phaeosperma
株名： CBS870.71
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAAGGAG ACTTAACCTG CTAAATAGCC CGGCCCGCTT TGGCGGGTCG    240
CCGGCTTCTT AGAGGGACTA TCGGCTCAAG CCGATGGAAG TTTGAGGCAA TAACAGGTCT    300
GTGATGCCCT TAGATGTTCT GGGCCGCACG CGCGCTACAC TGACAGAGCC AACGAGTTCA    360
TCACCTTGGC CGGAAGGTCT GGGTAATCTT GTTAAACTCT GTCGTGCTGG GGATAGAGCA    420
TTGCAATTAT TGCTCTTCAA CGAGGAATGC CTAGTAAGCG CATGTCATCA GCATGCGTTG    480
ATTACGTCCC TGCCCTTTGT ACACACCGCC CGT                                 513
【００８９】
配列番号：12
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora rhamni-alpinae
株名： CBS745.71
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００９０】
配列番号：13
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Hormonema sp.
株名： MCI3287
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CACAGGCGTG GAGCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００９１】
配列番号：14
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Hormonema sp.
株名： MCI3468
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００９２】
配列番号：15
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora europaea
株名： CBS738.71
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGTACCA CCAGGCGTGG AGCCTGAGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATACGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTC    120
TCTTGATTTT GTGGCTGGCG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGCGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGATC    360
ATCACCTTGC CGGAAGGTCT GGGTAATCTT GTTAAACTCT GTCGTGCTGG GGATAGAGCA    420
TTGCAATTAT TGCTCTTCAA CGAGGAATGC CTAGTAAGCG CATGTCATCA GCATGCGTTG    480
ATTACGTGCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００９３】
配列番号：16
配列の長さ：513
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora laureolae
株名： CBS744.71
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGTCT GGGTAATCTT GTTAAACTCT GTCGTGCTGG GGATAGAGCA    420
TTGCAATTAT TGCTCTTCAA CGAGGAATGC CTAGTAAGCG CATGTCATCA GCATGCGTTG    480
ATTACGTCCC TGCCCTTTGT ACACACCGCC CGT                                 513
【００９４】
配列番号：17
配列の長さ：513
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora schizospora
株名： CBS189.55
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAATT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAA ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGTCT GGGTAATCTT GTTAAACTCT GTCGTGCTGG GGATAGAGCA    420
TTGCAATTAT TGCTCTTCAA CGAAGAATGC CTAGTAAGCG CATGTCATCA GCATGCGTTG    480
ATTACGTCCC TGCCCTTTGT ACACACCGCC CGT                                 513
【００９５】
配列番号：18
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Hormonema prunorum
株名： CBS933.72
配列
AAACTTAAAG GAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTC ATGGGTGGTG GTGCATGCCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGA CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AACATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００９６】
配列番号：19
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Sydowia polyspora
株名： CBS116.29
配列
AAACTTAAAG GAATAGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTC GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GCTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGTCCGCT TTGGCGGGCC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGT CCGGAAGGAT TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００９７】
配列番号：20
配列の長さ：513
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Pringsheimia sepincola
株名： CBS748.71
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGT CCGAAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGTCTTCAA CGAGGAATGC CTAGTAAGCG TACGTCATCA GCGTGCGTTG    480
ATTACGTCCC TGCCCTTTGT ACACACCGCC CGT                                 513
【００９８】
配列番号：21
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Selenophoma mahoniae
株名： CBS388.92
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGC CCGGAAGGGT TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【００９９】
配列番号：22
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Discosphaerian fagi
株名： CBS171.93
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGC CCGGAAGGGT TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【０１００】
配列番号：23
配列の長さ：512
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea noxia
株名： CBS171.34
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CAAGGGGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAACTAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGTTCCGCT TAGGCGGAAC    240
GCTGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAGCGAGTTC    360
CTCCTTGGCT GGAAAGCCCG GGTAATCTTG TGAAACTCTG TCGTGCTGGG GATAGAGCAT    420
TGCAATTATT GCTCTTCAAC GAGGAATCCC TAGTAAGCGC AAGTCATCAG CTTGCGTTGA    480
TTACGTCCCT GCCCTTTGTA CACACCGCCC GT                                  512
【０１０１】
配列番号：24
配列の長さ：513
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea muelleri
株名： CBS191.58
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTACTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACTTAACCTG CTAAATAGCC CGGCCCGCTT TGGCGGGTCG    240
CCGGCTTCTT AGAGGGACTA TCGGCTCAAG CCGATGGAAG TTTGAGGCAA TAACAGGTCT    300
GTGATGCCCT TAGATGTTCT GGGCCGCACG CGCGCTACAC TGACAGAGCC AACGAGTTCA    360
TCACCTTGGC CGAAAGGTCT GGGTAATCTT GTTAAACTCT GTCGTGCTGG GGATAGAGCA    420
TTGCAATTAT TGCTCTTCAA CGAGGAATGC CTAGTAAGCG CATGTCATCA GCATGCGTTG    480
ATTACGTCCC TGCCCTTTGT ACACACCGCC CGT                                 513
【０１０２】
配列番号：25
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea sambuci
株名： CBS197.58
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGAAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【０１０３】
配列番号：26
配列の長さ：513
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Selenophoma donacis
株名： CBS417.51
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGGGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATGAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGTATTGCT TTGGCAGTAC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGTTACA CTGACGGAGC CAGCGAGTAC    360
TCCCTTGGCC GGAAGGCCCG GGTAATCTTG TTAAACTCCG TCGTGCTGGG GATAGAGCAT    420
TGCAATTATT GCTCTTCAAC GAGGAAATCC CTAGTAAGCG CAAGTCATCA GCTTGCGTTG    480
ATTACGTCCC TGCCCTTTGT ACACACCGCC CGT                                 513
【０１０４】
配列番号：27
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora moravica
株名： CBS266.59
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAT GAAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT TCAGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CAGGCTAGCT TTGGCTGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
TTCACCTTGG CCGAAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCGTGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【０１０５】
配列番号：28
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Pringsheimia karelii
株名： CBS374.59
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATG GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGG CCGAAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【０１０６】
配列番号：29
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea berberidis
株名： CBS186.58
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATCACCTTGG CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GCATGTCATC AGCATGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【０１０７】
配列番号：30
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Sydowia agharkari
株名： CBS434.61
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAAGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGG CCGAAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAAGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【０１０８】
配列番号：31
配列の長さ：514
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Selenophoma linicola
株名： CBS468.48
配列
AAACTTAAAG AAATTGACGG AAGGGCACCA CCAGGCGTGG AGCCTGCGGC TTAATTTGAC     60
TCAACACGGG GAAACTCACC AGGTCCAGAC ACAATAAGGA TTGACAGATT GAGAGCTCTT    120
TCTTGATTTT GTGGGTGGTG GTGCATGGCC GTTCTTAGTT GGTGGAGTGA TTTGTCTGCT    180
TAATTGCGAT AACGAACGAG ACCTTAACCT GCTAAATAGC CCGGCCCGCT TTGGCGGGTC    240
GCCGGCTTCT TAGAGGGACT ATCGGCTCAA GCCGATGGAA GTTTGAGGCA ATAACAGGTC    300
TGTGATGCCC TTAGATGTTC TGGGCCGCAC GCGCGCTACA CTGACAGAGC CAACGAGTTC    360
ATTTCCTTGG CCGGAAGGTC TGGGTAATCT TGTTAAACTC TGTCGTGCTG GGGATAGAGC    420
ATTGCAATTA TTGCTCTTCA ACGAGGAATG CCTAGTAAGC GTACGTCATC AGCGTGCGTT    480
GATTACGTCC CTGCCCTTTG TACACACCGC CCGT                                514
【０１０９】
配列番号：32
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Hormonema sp.
株名： MCI3287
配列
CACCTTGGCC GGAAGGTCT                                                  19
【０１１０】
配列番号：33
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Hormonema sp.
株名： MCI3287
配列
CATGTCATCA GCA                                                        13
【０１１１】
配列番号：34
配列の長さ：18
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora europaea
株名： CBS738.71
配列
CACCTTGCCG GAAGGTCT                                                   18
【０１１２】
配列番号：35
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora europaea
株名： CBS738.71
配列
CATGTCATCA GCA                                                        13
【０１１３】
配列番号：36
配列の長さ：18
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora laureolae
株名： CBS744.71
配列
CACCTTGGCC GGAAGTCT                                                   18
【０１１４】
配列番号：37
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora laureolae
株名： CBS744.71
CATGTCATCA GCA                                                        13
配列
【０１１５】
配列番号：38
配列の長さ：18
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora schizospora
株名： CBS189.55
CACCTTGGCC GGAAGTCT                                                   18
配列
【０１１６】
配列番号：39
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora schizospora
株名： CBS189.55
配列
CATGTCATCA GCA                                                        13
【０１１７】
配列番号：40
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Hormonema prunorum
株名： CBS933.72
CACCTTGACC GGAAGGTCT                                                  19
配列
【０１１８】
配列番号：41
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Hormonema prunorum
株名： CBS933.72
配列
CATGTCATCA ACA                                                        13
【０１１９】
配列番号：42
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Sydowia polyspora
株名： CBS116.29
配列
CACCTTGTCC GGAAGGATT                                                  19
【０１２０】
配列番号：43
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Sydowia polyspora
株名： CBS116.29
配列
CATGTCATCA GCA                                                        13
【０１２１】
配列番号：44
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Pringsheimia sepincola
株名： CBS748.71
配列
TTCCTTGTCC GAAAGGTCT                                                  19
【０１２２】
配列番号：45
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Pringsheimia sepincola
株名： CBS748.71
配列
TACGTCATCA GCG                                                        13
【０１２３】
配列番号：46
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea muelleri
株名： CBS191.58
配列
CACCTTGGCC GAAAGGTCT                                                  19
【０１２４】
配列番号：47
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea muelleri
株名： CBS191.58
配列
CATGTCATCA GCA                                                        13
【０１２５】
配列番号：48
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Selenophoma donacis
株名： CBS417.51
配列
TCCCTTGGCC GGAAGGCCC                                                  19
【０１２６】
配列番号：49
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Selenophoma donacis
株名： CBS417.51
配列
CAAGTCATCA GCT                                                        13
【０１２７】
配列番号：50
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora moravica
株名： CBS266.59
配列
CACCTTGGCC GAAAGGTCT                                                  19
【０１２８】
配列番号：51
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothiora moravica
株名： CBS266.59
配列
CGTGTCATCA GCA                                                        13
【０１２９】
配列番号：52
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Pringsheimia karelii
株名： CBS374.59
配列
TTCCTTGGCC GAAAGGTCT                                                  19
【０１３０】
配列番号：53
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Pringsheimia karelii
株名： CBS374.59
配列
TACGTCATCA GCG                                                        13
【０１３１】
配列番号：54
配列の長さ：19
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea berberidis
株名： CBS186.58
配列
CACCTTGGCC GGAAGGTCT                                                  19
【０１３２】
配列番号：55
配列の長さ：13
配列の型：核酸
鎖の数：二本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：Genomic DNA
起源
生物名： Dothidea berberidis
株名： CBS186.58
配列
CATGTCATCA GCA                                                        13
【０１３３】
配列番号：56
配列の長さ：24
配列の型：核酸
鎖の数：一本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：他の核酸  合成ＤＮＡ
配列
CTACTGCGAA AGCATTTGCC AAGG                                            24
【０１３４】
配列番号：57
配列の長さ：24
配列の型：核酸
鎖の数：一本鎖
トポロジー：直鎖状
配列の種類：他の核酸  合成ＤＮＡ
配列
GAGGAAGTAA AAGTCGTAAC AAGG                                            24
【図面の簡単な説明】
【図１】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」はX53497と同一の塩基であることを、「-」は、ギャップを表す。
【図２】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図３】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図４】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図５】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図６】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図７】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図８】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図９】  Candida albicans MUCL29800（X53497）及び各種コウボ様糸状菌の18S rRNA遺伝子の塩基配列の比較を表す図。「.」及び「-」は図１と同様。
【図１０】18S rRNA遺伝子の部分塩基配列に基づくコウボ様糸状菌の系統関係を示す図。
【図１】
0003686216.tif 000009
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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