(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
５（Ｗ／Ｖ）％以上の濃度でピロリドン化合物を配合することを特徴とする蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤の安定化方法。
【請求項２】
ピロリドン化合物が、ピロリドンまたはピロリドンカルボン酸またはその塩もしくはエステルである請求項１記載の安定化方法。
【請求項３】
コンタクトレンズ用剤が液状または固状であり、前者のまたは後者を水に溶解した場合のｐＨが４〜８である請求項１または２記載の安定化方法。
【請求項４】
蛋白分解酵素が、バチルス属に属する微生物由来のビオプラーゼおよび動物由来のトリプシンである請求項１、２または３記載の安定化方法。
【請求項５】
非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤および両性界面活性剤の１以上がさらにコンタクトレンズ用剤中に配合される請求項１記載の安定化方法。
【請求項６】
界面活性剤が０．０１〜１０（Ｗ／Ｖ）％配合される請求項５記載の安定化方法。
【請求項７】
コンタクトレンズ用剤中に蛋白分解酵素および５（Ｗ／Ｖ）％以上の濃度でピロリドン化合物を配合することを特徴とするコンタクトレンズ用剤の製造法。
【請求項８】
ピロリドン化合物がピロリドンまたはピロリドンカルボン酸またはその塩もしくはエステルである請求項７記載の製造法。
【請求項９】
非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤および両性イオン界面活性剤の１以上がさらに配合される請求項７記載の製造法。
【請求項１０】
界面活性剤が０．０１〜１０（Ｗ／Ｖ）％配合される請求項９記載の製造法。
【請求項１１】
コンタクトレンズ用剤中に蛋白分解酵素および５（Ｗ／Ｖ）％以上の濃度でピロリドン化合物を配合してなる蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤。
【請求項１２】
ピロリドン化合物がピロリドンまたはピロリドンカルボン酸またはその塩もしくはエステルである請求項１１記載のコンタクトレンズ用剤。
【請求項１３】
非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤および両性界面活性剤の１以上がさらに配合される請求項１１記載のコンタクトレンズ用剤。
【請求項１４】
界面活性剤が０．０１〜１０（Ｗ／Ｖ）％配合される請求項１１記載のコンタクトレンズ用剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、新規かつ有用な蛋白分解酵素の安定化方法に関する。さらに詳しく述べれば、本発明は、ピロリドン化合物を加えることにより蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤を安定化する方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
コンタクトレンズは、ハードコンタクトレンズとソフトコンタクトレンズに大別され、ハードコンタクトレンズは非親水性で酸素透過性が少ないと言われていたが、近年酸素透過性の良いハードコンタクトレンズが開発されてきた。しかしながら、これらのレンズは蛋白質等で汚れ易く、また酸素透過性レンズの場合は透過性を維持するためにも日々の洗浄、殺菌、保存を行うことが必要である。
【０００３】
コンタクトレンズの表面に付着した蛋白質の汚れを除くため蛋白分解酵素が用いられ、この酵素を含有するいろいろな洗浄剤が提案され、使用されている。たとえば、蛋白分解酵素を主成分とした錠剤、顆粒、粉末等の固形の形態で供給し、それを使用者がその都度精製水等に溶解して使用する方法が行われてきた。しかしながら、この方法では、固体状態の蛋白分解酵素を使用毎に溶解しなければならないことから、コスト高及び煩雑な手間を使用者に強いる結果となり、また溶解後の酵素は不安定になる。コンタクトレンズ用処理液として、蛋白分解酵素を溶液状態で安定化させる方法も提案されている。たとえば、特開昭６３−１５９８２２号公報、特開平１−１８０５１５号公報等において、水に混和性の多価アルコールを含有した溶液に蛋白分解酵素を配合させることによって、蛋白分解酵素を安定化させる方法が提案されている。しかし、このままでは蛋白分解酵素は殆ど活性を示さず、水で希釈すれば活性は高まるが、逆に安定性が低下するという欠点がある。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、上記の如き事情に鑑みてなされたもので、溶液中における蛋白分解酵素を安定化し、以てコンタクトレンズの洗浄、殺菌、保存を１剤で同時に実施しえるコンタクトレンズ用液剤を提供しようとするものである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
そして、本発明者は、蛋白質の汚れを落とす蛋白分解酵素の安定性に着眼し、鋭意研究を重ねた結果、意外にもピロリドン化合物を加えることにより蛋白分解酵素がコンタクトレンズ洗浄等に適する溶液中で活性をそこなわず安定性を延長し得ることを知り、この知見に基いてさらに研究を重ね、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は、有効量の蛋白分解酵素を含有する溶液に対して、ピロリドン化合物を加えることにより蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用液剤を安定化する方法、同方法により安定化した蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用液剤およびその製造法に関する。
【０００７】
本発明で使用するピロリドン化合物としては、２−ピロリドン、Ｄ−、Ｌ−もしくはＤＬ−ピロリドンカルボン酸（すなわち２−ピロリドン−５−カルボン酸）；またはそれらの塩たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩またはトリエタノールアミン塩のようなアミン塩；あるいはそれらのエステル、たとえばエチルエステル、のいずれでもよく、適宜に使用することができる。また、このピロリドン化合物の使用量は、ピロリドン化合物の種類、対象となるコンタクトレンズの種類、汚れの種類、程度等によって適宜に選択される。溶液中のピロリドン化合物の濃度が５（Ｗ／Ｖ）％より低いと十分な酵素安定性が得られないことから溶液状態で使用者に提供することが困難となる。従って、通常５（Ｗ／Ｖ）％以上、好ましくは１０〜６０（Ｗ／Ｖ）％程度が良い。
【０００８】
また、本発明で使用する蛋白分解酵素としては、たとえばトリプシン、キモトリプシンやバチルス属等の微生物由来のプロテアーゼなどが挙げられる。そして、本発明において、かかる蛋白分解酵素の配合量は、得ようとする洗浄効果に応じた有効量に基づいて、適宜に決定されることとなるが、好ましくは１０〜５０００単位／ｍｌ程度、更に好ましくは５０〜１０００単位／ｍｌ程度の割合となるように決定される。その配合量が少なすぎると、洗浄効果が不十分となるからであり、また酵素濃度が高すぎると、洗浄に際して、皮膚の障害を惹起するという危険性が生じるからである。
【０００９】
そして、本発明により調製されるコンタクトレンズ用剤は、蛋白分解酵素を安定化するために、通常、ｐＨが４〜８程度に調整されるのが望ましい。
【００１０】
本発明に関して、コンタクトレンズ用剤の形態としては固状でも液状でもよく、用時液状をとりうるものであれば特に制限はなく、たとえば液剤および長期保存し用時溶解して用いる固形剤が挙げられる。特に液剤の場合、本研究によると、蛋白分解酵素含有溶液にピロリドン化合物を配合した場合、蛋白分解酵素が水溶液中で安定であるとともに高い酵素活性を発現することから、従来のグリセリンなどの多価アルコールを使用したコンタクトレンズ用酵素安定化溶液の場合のように使用時に水で希釈する必要がないことから極めて有用である。固形剤としては、錠剤、顆粒剤、散剤並びに凍結乾燥品が挙げられるが、溶解の早さ並びに無菌、組成物の均一面等を考えると凍結乾燥品が好ましい。なお、上記のピロリドン化合物、界面活性剤および蛋白分解酵素の配合量は、固形剤の場合には、用時の液状のコンタクトレンズ用剤とした場合の量である。
【００１１】
そして、上記成分の他にも、本発明の目的を損なわない限り、界面活性剤、保存剤、ｐＨ調整剤、緩衝剤、キレート剤、崩壊剤、結合剤等の賦形剤並びに他の酵素剤、たとえば脂肪分解酵素等の各種の添加剤を更に配合することができる。
【００１２】
界面活性剤としては、非イオン界面活性剤、陰イオン界面活性剤および両性界面活性剤が効果的である。また、これらの界面活性剤は、所望により、適宜組み合わせて使用することができる。
【００１３】
陰イオン界面活性剤としては、たとえばラウロイルサルコシンナトリウム、ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸トリエタノールアミン、ミリスチルサルコシンナトリウム等が挙げられ、また、両性界面活性剤としては、たとえばラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン、２−アルキル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタイン、塩酸アルキルジアミノグリシン等が挙げられ、非イオン界面活性剤としては、たとえばポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ステアリン酸ポリオキシル４０、ポリオキシエチレンラウリルエーテル等が挙げられる。
かかる界面活性剤の配合量は、コンタクトレンズや眼組織に悪影響を与えることがなく充分な酵素安定性を得ることができる濃度であればよく、好ましくは０．０１〜１０（Ｗ／Ｖ）％、更に好ましくは０．１〜５（Ｗ／Ｖ）％程度の割合となるように調製される。
【００１４】
本発明の方法によって安定化されたコンタクトレンズ用剤の使用は、液状の当該コンタクトレンズ用剤（たとえば、水溶液状の当該コンタクトレンズ用剤）５ｍｌに眼から脱着したコンタクトレンズ１枚を入れ、３０分以上浸漬することにより行われる。それにより、自然に洗浄が行われると同時に殺菌も行われる。浸漬後、コンタクトレンズを水道水等で濯いだ後、再び装用する。これを毎日、同一溶液にて連続１週間使用しても問題はないことをつきとめた。
【００１５】
【実施例】
以下に、実験例および実施例を示し、本発明を更に具体的に明らかにすることとするが、それらは本発明を説明するためのものであって、本発明の範囲を制限するものではない。
【００１６】
〔実験例１〕
蛋白質汚れ除去試験
表１のコンタクトレンズ洗浄液の組成において、安定剤としてＤＬ−ピロリドンカルボン酸ナトリウムを１０％または４０％としたものおよび４０％グリセリンを用いたものに塩化リゾチーム等で作製した人工汚垢を付着した酸素透過性ハードコンタクトレンズ（シロキサニールメタクリレート）各２枚を浸漬し、室温で１５時間放置した後、水洗し、レンズに付着した人工汚垢が除去できるかどうか肉眼で観察して調べた。結果は下表のとおりで、１０％および４０％ＤＬ−ピロリドンカルボン酸ナトリウム溶液では完全に除去されたが、４０％グリセリン溶液では全く除去されていないことが確認された。
【００１７】
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【００１８】
なお、人工汚垢付着レンズは次のように調製した。
塩化リゾチーム                    ０．１ｇ
リン酸水素二ナトリウム            ０．２ｇ
水酸化ナトリウム                  適  量
精製水                            適  量
全  量                            １００ｍｌ（ｐＨ７．２）
上記の処方で人工汚垢液を調製し、脱気した後、約６０℃にて加熱する。その中にレンズを入れ、適度にレンズが白濁したら取り出し、汚垢の塊を除去した後、水中で保管した。
【００１９】
〔実施例１〕
表１、表２に記載した各配合成分を、混和、溶解して各種の試料を調製した。かくして得られた各試料について、調製直後と、３０℃の温度下に７日および１４日間保存した後に、アンソンー荻原氏変法に基づき酵素活性の測定を行い、下式によって、酵素活性残存率（％）を算出した。それらの結果を、下記表１、表２に示す。
【００２０】
【数１】
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【００２１】
【表１】
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【００２２】
【表２】
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【００２３】
表１、表２から明らかなように、蛋白分解酵素含有溶液に、ピロリドン化合物を加えることにより蛋白分解酵素が著しく安定化されることが認められた。
【００２４】
〔実施例２〕
表３に記載した各配合成分を混和、溶解して、試料を調製し、実施例１と同様にして酵素活性残存率（％）を調べた。結果を表３に示す。
表１の資料Ｂ−６と表３の資料Ｂ−８の試験結果から明らかなように、ピロリドン化合物のほか陰イオン界面活性剤および非イオン界面活性剤を加えることにより蛋白分解酵素がさらに安定化されることが認められた。
【００２５】
【表３】
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【００２６】
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上記の組成のものを精製水６ｍｌに溶解し、蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤を調製した。実施例１と同様にして酵素残存活性を測定した。その結果３０℃、１４日後の酵素活性残存率は９５％以上で良好な洗浄力を示した。また、脂質および蛋白質の除去試験においても良好な結果が認められた。さらに、菌の発生を実質的に見なかった。
【００２７】
〔実施例４〕
トリプシン                                              １４００単位
ステアリン酸ポリオキシル４０                            ０．０３ｇ
２−ピロリドン                                          ２．１ｇ
グルコン酸クロルヘキシジン                              ０．６ｍｇ
リン酸水素二ナトリウム                                  ０．０１２ｇ
リン酸                                                        適量
塩化ナトリウム                                          ０．０５１ｇ
上記の組成のものを精製水６ｍｌに溶解し、蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤を調製した。得られた試料液について実施例３と同一の試験を行い、実施例３と同様に良好な結果が認められた。
【００２８】
〔実施例５〕
ビオプラーゼ                                            ２８８０単位
ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸トリエタノールアミン（３０％）０．２ｇ
ステアリン酸ポリオキシル４０                              ０．０６ｇ
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン（３５％）              ０．１７ｇ
ホウ酸                                                    ０．０３ｇ
エデト酸ナトリウム                                        ０．００６ｇ
ＤＬ−ピロリドンカルボン酸ナトリウム（５０％）            ３．６ｇ
上記の組成のものを精製水６ｍｌに溶解後、塩酸でｐＨ６．０に調整し、蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤を調製した。得られた試料液について実施例３と同一の試験を行い、実施例３と同様に良好な結果が認められた。
【００２９】
〔実施例６〕
ビオプラーゼ                                            ２８００単位
ラウロイルサルコシンナトリウム                            ０．０６ｇ
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン（３５％）              ０．１７ｇ
ポリオキシエチレンラウリルエーテル                        ０．０３ｇ
ＤＬ−ピロリドンカルボン酸エチル                          １．５ｇ
ソルビン酸                                                ０．００６ｇ
ホウ酸                                                    ０．０６ｇ
ホウ砂                                                    適量
上記の組成のものを精製水６ｍｌに溶解し、蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤を調製した。得られた試料液について実施例３と同一の試験を行ない、実施例３と同様に良好な結果が認められた。
【００３０】
【発明の効果】
本発明によれば、蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤の蛋白分解酵素を液状で安定に保つことができる。以て、安定化された蛋白分解酵素含有コンタクトレンズ用剤により洗浄、殺菌、保存を１剤で同時に実施することができ、また浸漬放置するだけでコンタクトレンズの汚れが効率よく除去され、さらに液剤においては使用時に水による希釈等の処理が不要であることから、非常に簡便で操作性よく使用できる利点がある。