(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ソマトスタチン・レセプターに対する親和性を有する放射性薬剤（radiopharmaceutical）であって、当該薬剤が次式で示される化合物と放射性核種（radionuclide）とのコンプレックスであるもの：
【化４１】
0003686503.tif 000037
〔式中、ＤＴＰＡはジエチレントリアミン五酢酸の残基である。〕。
【請求項２】
放射性核種がα−、β−またはγ−線放出核種である、請求項１記載の薬剤。
【請求項３】
ソマトスタチン・レセプター陽性悪性腫瘍または転移の診断のために使用する、γ−線放出核種とのコンプレックスである、請求項２記載の薬剤。
【請求項４】
ソマトスタチン・レセプター陽性悪性腫瘍または転移の処置のために使用する、β−線放出核種とのコンプレックスである、請求項２記載の薬剤。
【請求項５】
放射性核種を坦持させてソマトスタチン・レセプターに対する親和性を有する放射性薬剤を調製するための坦体であって、当該坦体が次式で示される化合物またはその塩であるもの：
【化４２】
0003686503.tif 000038
〔式中、ＤＴＰＡはジエチレントリアミン五酢酸の残基である。〕。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ポリペプチド及びこれらの製造方法、これらを含有する薬剤、およびたとえばソマトスタチンレセプター陽性腫瘍の処置用医薬としてまたはインビボ診断用イメージング試薬としての使用に係るものである。
【０００２】
【従来の技術】
過去２,３年の間に、ソマトスタチンレセプターが、種々のヒトの腫瘍、たとえば下垂体腫瘍、中枢神経系腫瘍、乳房の腫瘍、胃腸・膵臓の腫瘍及びそれらの転移物中に高頻度で見出だされるようになってきている。それらのいくつかは、小さく成長が遅い腫瘍なので、従来の診断方法では、正確に位置をきめることが困難である。
【０００３】
ソマトスタチンレセプターは、インビトロで放射性ヨウ素化ソマトスタチンまたはソマトスタチン類似体、たとえば[125Ｉ−Ｔyr11]ソマトスタチン−１４〔テーラー,Ｊ.Ｅ.ら、ライフ・サイエンス（Ｌife Ｓcience(１９８３)４３：４２１〕または[125Ｉ−Ｔyr3]ＳＭＳ２０１−９９５(２０４−０９０とも称する)〔リュービ,Ｊ.Ｃ.ブレーン・リサーチ(Ｂrain Ｒes.)(１９８７)４０６：８９１；リュービ,,Ｊ.Ｃ.ら、ジャーナル・オブ・クリニカル・エンドクリノロジー・アンド・メタボリズム(Ｊ.Ｃlin.Ｅndocr.Ｍetab.)(１９８７)６５：１１２７；リュービ,Ｊ.Ｃ.ら、キャンサー・リサーチ(Ｃancer Ｒes.)(１９８７)４７：５５１；リュービ,Ｊ.Ｃ.ら、キャンサー・リサーチ(Ｃancer Ｒes.)(１９８７)４７：５７５８〕などを用いた腫瘍組織のオートラジオグラフィーを用いて可視化されてきた。
【０００４】
【発明の記載】
治療上有益でインビボ診断及び治療のための投与のためにラベルすることができる新しいソマトスタチンペプチドが本発明により見出された。
本発明は、検出可能な要素（たとえば、検出可能な元素）のための少なくとも１つのキレート基を有するソマトスタチンペプチドを提供するものである。このキレート基は上記ペプチドのアミノ基に結合しており、このアミノ基は、ソマトスタチンレセプターに、有意な結合親和性を示すものではない。
これらの化合物は、以下、「本発明のリガンド」または「この発明のリガンド」と命名する。これらは、検出可能要素、たとえば放射性核種、放射性非透過性（Ｘ線可視性）要素、あるいは常磁性イオンと反応し、錯体を形成することができる１個のキレート（形成）基を有し、さらに、たとえば腫瘍や転移物により発現あるいは過剰に発現されたソマトスタチンレセプターに結合することができる。
キレート基は、ペプチドのアミノ基に、共有結合により結合している。
キレート基は、ソマトスタチンペプチドのＮ末端アミノ基に結合するのが好ましい。
【０００５】
本発明によると、キレート基は、直接あるいは間接的、すなわち介在基（spacer group）を介してソマトスタチンペプチドに結合することができる。「リガンド」の一群にはソマトスタチンペプチドのアミノ基に直接キレート基が結合しているものもある。
ソマトスタチンペプチドのアミノ基に架橋や介在基で間接的に結合しているキレート基を有している「リガンド」の一群もある。
キレート基はペプチドにアミド結合により結合するのが好ましい。
ソマトスタチンペプチドという用語は、天然ソマトスタチン(テトラデカペプチド）及びその類似体あるいは誘導体をも含める。
【０００６】
ここで使用される誘導体および類似体とは、天然テトラデカペプチドソマトスタチン由来の任意の直鎖または環状のポリペプチドであって、それらのうちの１個もしくはそれ以上のアミノ酸単位が、除去され、および／または１個あるいはそれ以上の別のアミノ酸基で置換され、および／または１個もしくはそれ以上の官能基が、１個もしくはそれ以上の他の官能基で置換され、および／または、１個もしくはそれ以上の基が、１個もしくはいくつかの他のアイソステリックな基と置換されたものである。一般に、その用語は、生物学的に活性である全ての修飾された誘導体を包含するものであり、その誘導体は、修飾されていないソマトスタチンペプチドと、質的に類似の効果を示す。たとえば、ソマトスタチンレセプターに結合し、ホルモン分泌を抑制するものである。
【０００７】
環状、架橋環状及び直鎖ソマトスタチン類似体は、既知の化合物である。それらの化合物や製造法に関しては、たとえばヨーロッパ特許明細書ＥＰ−Ａ−１２９５；２９５７９；２１５１７１；２０３０３１；２１４８７２；２９８７３２；２７７４１９に記されている。
好ましい「本発明のリガンド」は、以下に示したソマトスタチン類似体に由来するものである。
【０００８】
Ａ．Ｉ式の類似体
【化１】
0003686503.tif 000002
式中、
Ａ  はＣ1-12アルキル、Ｃ7-10フェニルアルキルまたはＲＣＯ−の式で表される基である。ここで、
i）  Ｒは水素、Ｃ1-11アルキル、フェニルまたはＣ7-10フェニルアルキル、または
ii）  ＲＣＯ−は
a)  所望によりＦ、Ｃl、Ｂr、ＮＯ2、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1-3アルキル及び／またはＣ1-3アルコキシで環置換されていてもよい、Ｌ−またはＤ−フェニルアラニン残基；
b)  上記のa)で規定されたもの以外の天然もしくは合成α−アミノ酸残基、または対応するＤ−アミノ酸残基、または
c)  個々のアミノ酸残基が同じかまたは異なっており、上記のa）及び／またはb)で規定されたものから選択されたジペプチドアミノ酸残基a）及びb）のα−アミノ基、及びジペプチド残基c）のＮ−末端アミノ基は、所望によりモノもしくはジＣ1-12アルキル化またはＣ1-8アルカノイルで置換されていてもよい。
【０００９】
Ａ'  は水素、Ｃ1-12アルキルまたはＣ7-10フェニルアルキルであり、
Ｙ1及びＹ2は   一緒になって直接結合を呈し、
Ｙ1,Ｙ2各々は  独立に水素または、(１)〜(５)式の基である。
【化２】
0003686503.tif 000003
式中、
Ｒa  はメチルまたはエチル、
Ｒb  は水素、メチルまたはエチル、
m    は１から４までの整数、
n    は１から５までの整数、
Ｒc  は（Ｃ1-6)アルキル、
Ｒd  は天然または合成α−アミノ酸のα炭素原子に結合した置換基（水素を含む）、
Ｒe  は（Ｃ1-5)アルキル、
Ｒa'及びＲb'  は独立して水素、メチル、またはエチル、
Ｒ8及びＲ9  は独立して水素、ハロゲン、(Ｃ1-3)アルキル、または（Ｃ1-3)アルコキシ、
p    は０、または１、
q    は０、または１、
r    は０、１、または２、
【００１０】
Ｂ   は所望によりハロゲン、ＮＯ2、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1-3アルキル及び／またはＣ1-3アルコキシで置換されていてもよい−Ｐhe−(ペンタフルオロアラニンを含む)、またはβ−ナフチル−Ａlaである。
Ｃ   は所望によりα−Ｎ−メチル化されていてもよく、及びベンゼン環が、所望によりハロゲン、ＮＯ2、ＮＨ2、ＯＨ、Ｃ1-3アルキル及び／またはＣ1-3アルコキシで置換されていてもよい(Ｌ)−Ｔrp−または(Ｄ)−Ｔrp−、
Ｄ  はＬys、側鎖がβ位に０もしくはＳを含有しているＬys、γＦ−ＬysまたはδＦ−Ｌys、(これらは所望によりα−Ｎ−メチル化されていてもよい)、または４−アミノシクロヘキシルＡlaまたは４−アミノシクロヘキシルＧly残基、
Ｅ  はＴhr、Ｓer、Ｖal、Ｐhe、Ｉle、またはアミノイソ酪酸もしくはアミノ酪酸残基、
【００１１】
Ｇ  は−ＣＯＯＲ7、−ＣＨ2ＯＲ10、
【化３】
0003686503.tif 000004
の式で表される基、
ここで、
Ｒ7  は水素、またはＣ1-3アルキル、
Ｒ10  は水素、または生理学的に許容され、生理的に加水分解できるエステルの残基、
Ｒ11  は水素、Ｃ1-3アルキル、フェニル、またはＣ7-10フェニルアルキル、
Ｒ12  は水素、Ｃ1-3アルキル、または−ＣＨ(Ｒ13)−Ｘ1で表される基、
Ｒ13  はＣＨ2ＯＨ、−(ＣＨ2)2−ＯＨ、−(ＣＨ2)−ＯＨ、または−ＣＨ(ＣＨ3)ＯＨであるか、または天然または合成α−アミノ酸のα−炭素原子に結合した置換基(水素を含む)、
【００１２】
Ｘ1  は−ＣＯＯＲ7、−ＣＨ2ＯＲ10、または
【化４】
0003686503.tif 000005
ここで、
Ｒ7及びＲ10  は上記に示されたような意味、
Ｒ14  は水素、またはＣ1-3アルキル、
Ｒ15  は水素、Ｃ1-3アルキル、フェニル、またはＣ7-10フェニルアルキル、
Ｒ16  は水素、またはヒドロキシを意味する。
但し、
Ｒ12が−ＣＨ(Ｒ13)−Ｘ1であるとき、Ｒ11は水素、またはメチルであるものとし、
Ｂ、Ｄ及びＥ残基はＬ体であり、２及び７位にある残基と、Ｙ1(４)及びＹ2(４)の任意の残基は、独立して(Ｌ)または(Ｄ)配置をとる。
I式のＡ及びＡ'の定義は、化合物がキレート試薬に結合できる末端−ＮＨ−基を有するように選択することが好ましい。
I式の化合物においては、以下の定義がそれぞれ、独立ででも、あるいは組みあわせても、また下位の組合わせとしても好ましい。
【００１３】
１．ＡはＣ7-10フェニルアルキル、とりわけフェネチル、またはＲＣＯの式で表される基である。ＡはＲＣＯの式で表される基であるのが好ましい。
１.１．ＲはＣ1-11アルキル、またはＣ7-10フェニルアルキル、とりわけＣ7-10フェニルアルキル、さらにはフェネチルであるのが好ましい。また、ＲＣＯにはa)、b)またはc)の意味が好ましい。
１.２．ＲＣＯにa)、b)またはc)の意味があるとき、アミノ酸残基a)及びb)のα−アミノ基や、ジペプチド残基c)のＮ−末端アミノ基は、アルキル化されていないか、Ｃ1-12モノアルキル化、とりわけＣ1-8アルキル化、さらにはメチル化されるのが好ましい。Ｎ−末端がアルキル化されていないのが最も好ましい。
１.３．ＲＣＯがa)を意味する場合、これは所望により、Ｎ−Ｃ1-12−モノアルキル化されていてもよい、Ｌ−もしくはＤ−フェニルアラニン、または−チロシン残基a')であるのが好ましい。
a')がＬ−またはＤ−フェニルアラニン残基であれば、さらに好ましい。
１.４．ＲＣＯにb)、c)の意味があるとき、規定された残基は、親油性であるのが好ましい。好ましい残基b)は、b')炭化水素の側鎖を有するα−アミノ酸である。たとえば３個、好ましくは４個あるいはそれ以上の炭素原子をもつアルキル、たとえば７個までの炭素原子、ナフチル−メチル、またはヘテロアリール、たとえば３−(２−または１−ナフチル)−アラニン、ピリジル−メチル、またはトリプトファン残基などであり、上記の残基にはＬ体とＤ体がある。好ましい残基c)は、ジペプチド残基であり、その個々のアミノ酸残基は同じかまたは異なるのだが、これは、上記a')、およびb')で規定されたものの中から選定される。例をあげると、
残基c)は、たとえば３−(２−ナフチル)−アラニン残基などである。
１.５．ＲＣＯはa)、とりわけa')を意味するのが最も好ましい。
【００１４】
２．ＢはＢ'であり、Ｂ'はＰhe、またはＴyrである。
３．ＣはＣ'であり、Ｃ'は(Ｄ)Ｔrpである。
４．ＤはＤ'であり、Ｄ'はＬys、ＭeＬys、あるいはＬys(ε−Ｍe)、とりわけＬysである。
５．ＥはＥ'であり、Ｅ'はＶal、またはＴhr、とりわけＴhrである。
６．ＧはＧ'であり、Ｇ'は
【化５】
0003686503.tif 000006
の式で表される基、とりわけ
【化６】
0003686503.tif 000007
の式で表される基である(この場合、Ｒ11＝ＨまたはＣＨ3)。後者の場合、−ＣＨ(Ｒ13)−Ｘ1部分はＬ体であるのが好ましい。
【００１５】
６.１．Ｒ11は水素であるのが好ましい。
６.２．天然アミノ酸(すなわち、Ｈ2Ｎ−ＣＨ(Ｒ13)−ＣＯＯＨ式で表される)のα−炭素原子に結合している置換基のように、Ｒ13は、−ＣＨ2ＯＨ、−ＣＨ(ＣＨ3)−ＯＨ、イソブチルまたはブチルであるのが好ましい。またはＲ13は−(ＣＨ2)2−ＯＨまたは、−(ＣＨ2)3−ＯＨである。とりわけ、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ(ＣＨ3)−ＯＨが好ましい。
６.３．Ｘ1は
【化７】
0003686503.tif 000008
または−ＣＨ2−ＯＲ10の式で表される基、とりわけ−ＣＨ2−ＯＲ10の式で表される基であるのか好ましい。
Ｒ10は水素であるのが好ましいが、以下の７で示されたことを意味する。Ｒ10が水素であるのが最も好ましい。
【００１６】
以下の個々の化合物は、I式の化合物の実例である：
【化８】
0003686503.tif 000009
これは、オクトレオチドとしても知られている。
【化９】
0003686503.tif 000010
【００１７】
Ｂ．II式の類似体
【化１０】
0003686503.tif 000011
〔ヴェールら、メタボリズム(Ｍetabolism)２７  補遺１、１３９(１９７８)参照〕
【化１１】
0003686503.tif 000012
(ＥＰ−Ａ−２００１８８参照)
具体的な化合物も含めた上記の刊行物の全ての内容は、引用することによりこの明細書に包含させる。
【００１８】
格別に好ましい「リガンド」は以下のものに由来するものである：
【化１２】
0003686503.tif 000013
【００１９】
適当なキレート基とは、生理学的に許容され、検出可能な要素と錯体を形成することができるキレート基である。キレート基は、十分に親水性を呈するものが好ましい。キレート基の例としては、たとえばイミノジカルボキシル基、ポリアミノポリカルボキシル基や、たとえば非環状リガンドから誘導されるもの、たとえばエチレンジアミンテトラ酢酸(ＥＤＴＡ)、ジエチレントリアミンペンタ酢酸(ＤＴＰＡ)、エチレングリコール−Ｏ、Ｏ'−ビス(２−アミノエチル)−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラ酢酸(ＥＧＴＡ)、Ｎ,Ｎ'−ビス(ヒドロキシベンジル)エチレンジアミン−Ｎ,Ｎ'−ジ酢酸(ＨＢＥＤ)、及びトリエチレンテトラアミンヘキサ酢酸(ＴＴＨＡ)、置換されたＥＤＴＡや−ＤＴＰＡから誘導されるもの、たとえばp−イソチオシアネートベンジル−ＥＤＴＡや−ＤＴＰＡ、大環状リガンドから誘導されるもの、たとえば１,４,７,１０−テトラアザシクロオドデカン−Ｎ,Ｎ',Ｎ",Ｎ"'−テトラ酢酸(ＤＯＴＡ)、及び１,４,８,１１−テトラアザシクロテトラデカン−Ｎ,Ｎ',Ｎ",Ｎ"'−テトラ酢酸(ＴＥＴＡ)シクラム類をも含めた大環状アミンのＮ−置換体あるいはＣ−置換体から誘導されるものたとえば、ＥＰ−３０４７８０Ａ１及びＷＯ８９／０１４７６−Ａで公開されたIV式あるいはＶ式で表される基、
【化１３】
0003686503.tif 000014
式中、
Ｒ1,Ｒ2,Ｒ3  は独立してＣ1-6アルキルＣ6-8アリール、またはＣ7-9アリールアルキルであり、各々は所望によりＯＨ、Ｃ1-4アルコキシ、ＣＯＯＨ、またはＳＯ3Ｈで置換されていてもよく、
n'  は１または２、
i  は２から６までの整数、
ＴＴ  は独立にαまたはβアミノ酸であり(互いにアミド結合で結合している)ビスアミノチォール誘導体から誘導される基、たとえばVI式で表される化合物、
【化１４】
0003686503.tif 000015
式中、
Ｒ20,Ｒ21,Ｒ22,Ｒ23各々  は各々独立して、水素またはＣ1-4アルキル、
Ｘ2  ペプチドのＮ−アミノ基と反応できる基、
m'   は２または３、
ジチアセミカルバゾン誘導体から誘導される基、たとえばVII式の化合物
【化１５】
0003686503.tif 000016
式中
Ｘ2  は上記で規定された意味、
プロピレンアミンオキシム誘導体から誘導される基、たとえばVIII式の化合物
【化１６】
0003686503.tif 000017
式中
Ｒ24,Ｒ25,Ｒ26,Ｒ27,Ｒ28,Ｒ29  は各々独立して水素またはＣ1-4アルキル、
Ｘ2及びm'  は上記で規定された意味、
ジアミドジメルカプチト類から誘導される基、たとえばIX式の化合物：
【化１７】
0003686503.tif 000018
式中、
Ｘ3  は２価の基であり、所望により置換されていてもよく、ペプチドのＮ−アミノ基と反応できる基を有する基、たとえばＸ2基を有するＣ1-4アルキレン、またはフェニレン、
Ｙ5  は水素またはＣＯ2Ｒ30であり、このＲ30はＣ1-4アルキル、
または、ポルフィリン類から誘導される基、たとえばＮ−ベンジル−５,１０,１５,２０−テトラキス−(４−カルボキシフェニル)ポルフィン、または上記で規定されたＸ2基を有するＴＰＰなどがある。
アリールはフェニルが好ましい。アリールアルキルはベンジルが好ましい。
【００２０】
Ｘ2の例としては−(Ｘ4)n"−Ｘ5式の基があり、式中のＸ4はＣ1-6アルキレンまたは所望により炭素原子に酸素原子または−ＮＨ−が結合していてもよいＣ1-6アルキレンなどである。n"は０または１であり、Ｘ5は−ＮＣＳ、カルボキシ基、あるいはこれらの官能性誘導体、たとえば酸ハロゲン化物、無水物、またはヒドラジドなどである。Ｘ2は水素原子の代わりに−[ＣＨ2]m'−、または＝ＣＨ−ＣＨ＝の炭素原子の１つに結合していると考えられる。
【００２１】
キレート基はソマトスタチンペプチドのＮ−アミノ基に直接的に、または間接的に結合することができる。間接的に結合した場合、架橋や、介在基を介して結合するのが好ましい。たとえば(α1)式の基のようなものである。
Ｚ−Ｒ35−ＣＯ−        (α1)
Ｒ35  はＣ1-11アルキレン、Ｃ2-11アルケニレン、または−ＣＨ(Ｒ')−であり、式中、Ｒ'は天然または合成α−アミノ酸のα位に結合している残基である。
たとえば水素、Ｃ1-11アルキル、ベンジル、所望により置換されていてもよいベンジル、ナフチル−メチル、ピリジル−メチルなどである。
Ｚ  はキレート試薬と反応して共有結合できる官能基である。
Ｚは、たとえばキレート基と結合してエーテル、エステル、またはアミドを形成することができるような基である。
キレート基は、カルボキシ、−ＳＯ3Ｈ及び／またはアミノ基を含有する場合、遊離または塩の形で存在できる。
好ましい、キレート基とは、ポリアミノ−ポリカルボキシル基から誘導されるものである。たとえばＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＴＥＴＡ、またはＥＤＴＡもしくはＤＴＰＡの置換体から誘導されるものなどである。キレート基はＤＴＰＡから誘導されるものが最も好ましい。
【００２２】
「本発明のリガンド」において、官能基が複数である、キレート基は１個のソマトスタチンペプチド分子にか、または１個以上のソマトスタチンペプチド分子、たとえば２個のソマトスタチンペプチド分子に結合することができる。
「本発明のリガンド」は、たとえば、遊離形または塩形で存在することができる。塩には、酸付加塩、たとえば有機酸、ポリマー酸、または無機酸でできる塩、例えば塩酸塩、酢酸塩、及びキレート基に存在するカルボン酸やスルホン酸で得られる塩、たとえばナトリウムやカリウムのようなアルカリ金属、または置換されているか、置換されていないアンモニウム塩などである。
【００２３】
本発明は、「本発明のリガンド」の製造方法をも包含する。これらは既知の方法に類似の方法で製造することができる。
「本発明のリガンド」は、たとえば以下のように製造することができる：
a)  キレート基を有するソマトスタチンペプチドに存在する、少なくとも１個の保護基を除去する。または、
b)  ２個のペプチドフラグメントをアミド結合で結合する。ペプチドフラグメントの各々には少なくとも１個のアミノ酸かアミノアルコールが、保護された形、または保護されていない形であり、それらの１個にはキレート基を含む。その中では、アミド結合か、所望のアミノ酸配列が得られるような方法で結合している。そして所望により反応のa）工程を行う。または
c)  キレート試薬と、保護されたまたは保護されていない形の、所望のソマトスタチンペプチドを、ペプチドの所望のＮ−アミノ基上にキレート基がくるように結合する。そして所望によりa）工程を行う。または
d)  キレート基を有する保護されていない、または保護されているペプチドの官能基を除去するか、またはそれを別の官能基に変換して、キレート基を有する別の保護されていないか、または保護された形のペプチドを得る。後者の場合、反応のa）工程を行う。または
e)  キレート基で修飾されたソマトスタチンペプチドを酸化する。そのペプチドでは、２個のＣys基がＳ−Ｓ架橋結合している類似体を作るようにＣys基のメルカプト基が遊離の形で存在している。このようにして得られた「リガンド」は遊離、または塩の形で再生される。
【００２４】
上記の反応は、たとえば実施例記載の公知方法に類似の方法、とくに前記a）およびc）の方法で行われる。キレート基がアミド結合した場合、これはアミド形成で用いられる方法と類似の方法で行うことができる。これらの反応では、所望により、ペプチドの使用や目的とするキレート基に適した保護基が反応に関与しない官能基のために使用することができる。保護基という用語は、官能基を有するポリマー樹脂をも包含しうる。
【００２５】
キレート基が、出発物質として使用されるペプチドまたはペプチドフラグメントのＮ−末端アミノ基に結合することが所望され、ペプチドが１個あるいはそれ以上の側鎖アミノ基を含む場合、これらの側鎖アミノ基は保護基、たとえばペプチド化学で使用されるようなもので、好便に保護される。
【００２６】
キレート基が、出発物質として使用されるペプチドまたはペプチドフラグメントの側鎖アミノ基に結合することが所望され、ペプチドがフリーのＮ−末端アミノ基を含む場合、後者は保護基により保護されるのが好ましい。
【００２７】
キレート基を有し、b)工程で使用されるペプチドフラグメントは、少なくとも１個のアミノ酸またはアミノアルコールを保護されたあるいは保護されていない形で含んでいるペプチドフラグメントを、キレート試薬と反応させることにより調製できる。反応は、工程c)と類似の方法で行うことができる。
IVまたはＶ式のキレート基は、IV'またはＶ'式のキレート試薬を反応させることにより、ペプチドに結合することができる。
【化１８】
0003686503.tif 000019
式中、ＸはペプチドのＮ−アミノ基とアミド結合を形成することができる活性化基である。反応はＥＰ２４７８６６Ａ１で開示されたような方法で行うことができる。
【００２８】
反応のc)工程で用いられるキレート試薬は既知であり、既知の方法と類似の方法で調製することができる。キレート試薬は、所望されたキレート基かソマトスタチンペプチドに導入できるようなものであることが好ましい。たとえば開示されたポリアミノポリカルボン酸、その塩または無水物である。
【００２９】
上記の反応では、出発物質として使用されるアミノ酸、ペプチド、またはペプチドフラグメントのキレート基か、ペプチドに架橋または介在基を介して結合する場合、たとえば前記式（α1）の基を介して結合させる場合、かかるアミノ酸、ペプチドフラグメントまたはペプチドは、常法により対応するアミノ酸または架橋や介在基のないペプチドと、対応する架橋や介在基形成化合物、例を示すと架橋基や介在基を含む酸あるいは反応性酸誘導体、たとえばＺ−Ｒ35−ＣＯＯＨ式の酸や、活性エステルのようなそれの反応性酸誘導体とを反応させることによって調製することができる。例をあげると、活性エステル基、またはカルボキシ活性化基、たとえば４−ニトロフェニル、ペンタクロロフェニル、ペンタフルオロフェニル、スクシンイミジル、または１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾリルなどである。
【００３０】
別法として、まずキレート試薬を架橋あるいは介在基形成化合物と反応させて、架橋基または介在基をつけ、それから常法によりペプチド、ペプチドフラグメントまたはアミノ酸と反応させることができる。
「本発明のリガンド」は、たとえばクロマトグラフィなどで、常法により精製することができる。「本発明のリガンド」は、キレート基を結合していないペプチドの含量の重量％が５％未満であるのが好ましい。
別の態様によると、「本発明のリガンド」は検出可能要素と錯体を形成することができる。
【００３１】
したがって、本発明は、上記で規定されたように遊離または塩の形の検出可能要素(以下、本発明のキレートと称する)と錯体を形成している「本発明のリガンド」(以下、本発明のキレートと称する)、及びこれらの製造法、インビボでの診断及び治療上の処置のための使用をも提供するものである。
検出可能要素としては、治療あるいはインビボ診断技法において適切に検出できる任意の要素、好ましくは金属イオンを含む。たとえば、検出可能な放射線を発する金属イオン、またはＮＭＲ緩和特性に影響を及ぼす金属イオンなどである。
【００３２】
適当な検出可能な金属イオンには、例をあげると、重金属イオン、または希土類イオン、たとえばＣＡＴスキャン(コンピューターアクシャルトモグラフィー)に用いられるようなもの、常磁性イオン、たとえばＧd3+、Ｆe3+、Ｍn2+、Ｃr2+など、蛍光金属イオン、たとえばＥu3+、及び放射性核種、たとえばγ線放出放射性核種、β線放出線性核種、α線放出放射性核種、陽電子放出放射性核種、たとえば68Ｇaなとがある。
【００３３】
適当なγ線放出放射性核種には診断技法に有用なものがある。γ線放出放射性核種は好都合には半減期が１時間から４０日であり、５時間から４日というのが好ましく、さらに好ましいのは１２時間から３日である。例をあげると、ガリウム、インジウム、テクネチウム、イッテルビウム、レニウム及びタリウム、などに由来する放射性核種、たとえば67Ｇa、111Ｉn、99mＴＣ、169Ｙb及び186Ｒeなどである。「本発明のリガンド」または使用されたソマトスタチンペプチドの代謝に合わせてγ線放射性核種を選択するのが好ましい。「本発明のリガンド」が、ソマトスタチンペプチドの半減期よりも長い半減期を有するγ線放出核種と、腫瘍上でキレートするのが、より好ましい。
イメージングに使用するのに適当な放射性核種は陽電子放出放射性核種、たとえば上記で記載したようなものである。
【００３４】
適当なβ線放出放射性核種には治療のための投与に有用なものがある。たとえば90Ｙ、67−Ｃu、186Ｒe、188Ｒe、169Ｅr、121Ｓn、127Ｔe、143Ｐr、198Ａu、109Ｐd、165Ｄy、32Ｐ、142Ｐrなどである。β線放出性核種は、好都合には、２.３時間から１４.３日の半減期を有するが、２.３〜１００時間が好ましい。β線放出放射性核種は、腫瘍上で、ソマトスタチンペプチドよりも長い半減期を有するものを選択するのが好ましい。
適当なα線放出放射性核種は治療上の処置に使用されるもの、たとえば211Ａt、212Ｂiなどである。
【００３５】
「本発明のキレート」は、「リガンド」を対応する検出可能要素造成化合物、たとえば金属塩、好ましくは水溶性塩と反応させて調製することができる。反応は既知の方法、たとえばペリン、オルガニックリガンド・ケミカルデータシリーズ（Ｏrganic Ｌigand,Ｃhemical Ｄata Ｓeries)２２.ニューヨークペルガモンプレス(１９８２)、グレジュカリットとタッカー、バイオフイジカル・アンド・バイオケミカル・リサーチ・コミュニケーションズ（Ｂiophys.Ｂiohem.Ｒes.Ｃom.)７７：５８１(１９７７)及びワグナーとヴェルヒ、ジャーナル・オブ・ニュークレアー・メディシン（Ｊ.Ｎucl.Ｍed.)２０ ４２８(１９７９)などに開示されているのと類似の方法で行うことができる。
「リガンド」の錯体は、「本発明のリガンド」が生理学的に安定な状態を示すpＨで形成されるのが好ましい。
【００３６】
別法として、検出可能要素もまた、仲介キレート試薬との錯体として溶液に加えることができる。仲介キレート試薬とは、たとえば、リガンドの生理学的pＨ、要素を可溶化するキレート錯体を形成するが、キレートよりも熱力学的に不安定なキレート試薬などである。そのような仲介キレート試薬の例としては、４,５−ジヒドロキシ−１,３−ベンゼン−ジスルホン酸(チロン)がある。このような反応では、検出可能要素がリガンドととってかわってしまう。
【００３７】
「本発明のキレート」はまた、検出可能要素と錯体を形成したキレート試薬と、保護されたまたは保護されていない形のソマトスタチンペプチドを結合し、もし所望されるならば、存在する少なくとも１つの保護基を除去することによって作ることができる。同じ反応は、検出不可能な金属イオンと錯体を形成するキレート試薬とでもおこり、その結果できるペプチド錯体では、金属イオンを所望の検出可能要素と置換することができる。
【００３８】
「本発明のキレート」はまた、検出可能要素と錯体を形成したキレート試薬と、保護されたまたは保護されていない形の、少なくとも１個のアミノ酸を含有するソマトスタチンペプチドフラグメントを結合し、そして、ペプチド合成を、最終的なペプチド配列が得られるまで段階的に続け、もし所望されるならば、存在する少なくとも１個の保護基を除去して作ることができる。検出可能要素の代わりに、キレート試薬が検出不能な金属と錯体を形成することができ、ついで、その結果できるソマトスタチンペプチドは、この金属を検出可能要素と置換することができる。
【００３９】
キレート基が架橋あるいは介在基を介してソマトスタチンペプチドに結合している場合、たとえば上記で規定されたような、(α1）式の基を介した場合、ソマトスタチンペプチドとペプチドフラグメントまたはキレート試薬のどれかが、上記の架橋、あるいは介在基を有することができる。
【００４０】
上記で記載された反応は、既知の方法と類似の方法で行うことができる。存在するキレート基に応じて異なるが、ラベル化効率は１００％近くになり、精製は不要となることもある。たとえばテクネチウム−９９mのような放射性核種は、酸化体、たとえばＴc−９９mパーテクネテートのような形で用いられ、これは、還元状態下で錯体形成することができる。
【００４１】
上記で記載された反応は、微量な金属きょう雑物を除去した状態にするのが好適である。脱イオンした蒸留水、超純度の試薬、キレーション−グレードの放射活性など…が、微量金属の影響を減らすために用いられる。
【００４２】
「本発明のキレート」は、たとえば遊離体、または塩として存在することができる。塩には、たとえば有機酸、ポリマー酸、あるいは無機酸、例をあげると塩酸、酢酸などとの酸付加塩及び、キレート形成に関与しない分子に存在するカルボン酸類とで得られる塩、たとえばナトリウムやカリウムのようなアルカリ金属塩、または置換されたかまたは置換されていないアンモニウム塩などがある。
【００４３】
「本発明のキレート」及び医薬として許容される塩は、医薬活性を呈する。それゆえに、たとえば常磁性イオン、γ線放出金属イオンあるいは陽電子放出放射性核種と錯体を形成して、ソマトスタチンレセプター陽性腫瘍または転移を視覚化するようなイメージング試薬として、または、αまたはβ放射性核種と錯体を形成して、ソマトスタチンレセプター陽性腫瘍または転移をインビボで処置する放射性薬剤として有用である。これらは、標準的な試験で証明することができる。
とくに、「本発明のキレート」は、インビトロでの標準的結合分析によって示されるように、腫瘍や転移物により発現または過剰に発現されたソマトスタチンレセプターに対する親和性を有している。
【００４４】
ヒト胃腸管に由来するソマトスタチンレセプター陽性腫瘍を患者から取出し、即座に氷上にのせ、最長３０分間、−８０℃で凍結する。さらにオートラジオグラフィーにかけるため、この凍結物を低温槽（ライツ１７２０）中１０μm断片に切断し、洗浄された顕微鏡のスライド上にマウントし、−２０℃で少なくとも３日間保存し、組織のスライドへの吸着性を高める。その断片は、ＣaＣl2（２mＭ）とＫＣl（５mＭ）を含有するトリス塩酸緩衝液（５０mＭ、pＨ７.４）中、１０分間、室温でプレインキュベートし、塩を添加していない同じ緩衝液で２分間、２度洗浄する。この断片は、それからウシ血清アルブミン(１０g／l)、バシトラシン（４０mg／l）及びＭgＣl2（５mＭ）を含有するトリス塩酸緩衝液（１７０mＭ、pＨ７.４）中、室温温度で２時間、「本発明のキレート」と一緒にインキュベートし、内因性のプロテアーゼを阻害する。非特異的結合は、
【化１９】
0003686503.tif 000020
を１μＭの濃度で加えて定量する。インキュベートされた断片は、０.２５g／l ＢＳＡを含有する冷たいインキュベーション緩衝液で５分間、２度洗浄する。蒸留水中に短い間浸して過剰の塩を除去し、断片を急速に乾燥し、[3Ｈ]−ＬＫＢフィルムにのせる。Ｘ線カセットに約１週間さらしたあと、「本発明のキレート」、たとえば放射性核種の「キレート」は、１０-10から１０-3Ｍの濃度で加えたとき、周囲の健全な組織はラベルせずに、腫瘍組織をラベルする点で、極めて良好な結果が得られる。
インビトロ アッセイのこの結合では、実施例５の化合物は、ソマトスタチンレセプター陽性腫瘍組織を高度に特異的にラベルし、非特異的なバックグランドは低いことが明らかになった。
【００４５】
「本発明のキレート」のソマトスタチンレセプターに対する親和性は、インビボの試験ででも明示すことができる。
移植可能な外分泌性の膵臓のソマトスタチンレセプター陽性腫瘍を有するラットを、「本発明のキレート」を静脈内注射をして処置した。注射部位はペニスの血管である。投与後即座に、動物をガンマーカメラのコリメーター上に置き、放射活性の分布を、種々の時間間隔でモニターした。
放射活性の生物分布は、そのように処置した多くのラットを一連に剖検し、器官の放射活性を検定することによっても決定することができる。
「本発明のキレート」、たとえば放射性核種の「キレート」、例をあげるとγ線放出「キレート」を、０.１〜２mＣiの放射性核種でラベルされた「リガンド」１〜５μg／kgの投与量で投与した後、腫瘍部位は、実際に分泌される器官と一緒に検出できるようになる。実施例５の化合物は、０.５mＣi111Ｉnで、ラベルされた実施例１の化合物４μg／kg体重に相当する投与量で動物に静脈内投与する。放射活性は注射後３分、１０分、１５分、２０分、２０時間、４８時間に評価する。注射後３分で放射活性は腎臓、ぼうこう、及び腫瘍部位で検出された。注射後２０時間には、放射活性は高まり、腫瘍部位に非常に高度に局在する。
【００４６】
したがって、一連の具体的な、あるいは選択的な態様において本発明は以下のものをも提供する。
１．a)対象に「この発明のキレート」を投与し、
b)上記「キレート」が標的とするレセプターの位置を記録することからなる、対象におけるソマトスタチンレセプター陽性腫瘍または転移のインビボ検出法。
この発明のインビボ検出法に使用する「この発明のキレート」は、γ線放出性放射性核種、ポジトロン放出性放射性核種または常磁性金属イオン、例えば前述のものと複合した「キレート」である。
【００４７】
方法(１)で画像形成剤として用いる「この発明のキレート」は、非経口的、好ましくは静脈内に、例えば注射用溶液またはけんだく液の形で、好ましくは１回の注射で投与することができる。適当な用量は、勿論、例えば「リガンド」および使用した検出要素のタイプ、例えば放射性核種によって異なる。適当な注射用量は、当業界で既知の写真走査法により画像化が可能な範囲の量である。放射能標識した「この発明のキレート」を用いる場合、放射能として０.１−５０mＣi、好ましくは０.１−３０mＣi、さらに好ましくは０.１−２０mＣiを有する用量を投与するのが有利であり得る。
【００４８】
動物の場合、指示用量は、０.１−２mＣiのγ線放出性放射性核種、例えば111Ｉnで標識した「リガンド」０.１−１０μg／kgの範囲であり得る。大形動物、例えばひとの場合、指示用量は、０.１−５０mＣi、好ましくは０.１−３０mＣi、例えば３−１５mＣiのγ線放出性放射性核種（この量は使用したγ線放出性放射性核種により異なる）で標識した「リガンド」１−２００μgの範囲であり得る。例えばＩnの場合、低い範囲の放射能を用いるのが好ましく、Ｔcの場合は、高い範囲の放射能を用いるのが好ましい。
【００４９】
「キレート」による腫瘍（がん）形成性部位の濃厚化後に、対応する画像技術、例えば核医学的画像形成器具、例えばスキャナー、γ線カメラ、回転式γ線カメラ（これらはそれぞれコンピューター化されているのが好ましい)、ＰＥＴスキャナー（ポジトロンエミッショントモグラフィー)、ＭＲＩ装置またはＣＡＴスキャニング装置を用いた技術を用い得る。
「この発明のキレート」、例えばγ線放出性「キレート」の大部分は腎から実質的に排出され、肝に顕著に蓄積することはない。
【００５０】
２．対象に治療有効量の「この発明のキレート」を投与することからなる、処置の必要な対象におけるソマトスタチンレセプター陽性腫瘍および転移のインビボ処置法。
この発明のインビボ処置法に使用する「この発明のキレート」は、前記のようなαまたはβ線放出性放射性核種と複合した「キレート」である。
この発明の治療法の実施に用いる用量は、勿論、例えば処置すべき具体的症状、例えば腫瘍の体積、使用する特定の「キレート」、例えば腫瘍中における「キレート」の半減期、および目的とする治療により異なる。一般に、用量は、各臓器に対する放射能分布および観察される標的のとり込みに基づいて計算する。例えば、０.１−３mＣi／体重Ｋg、例えば１−３mＣi、好ましくは１−１.５mＣi／Ｋgの放射能を有する日用量範囲で「キレート」を投与することができる。
【００５１】
動物の場合、指示用量は、０.１−３mＣiのαまたはβ線放出性放射性核種、例えば90Ｙで標識した「リガンド」０.１−５μg／kgの範囲であり得る。大形動物、例えばひとの場合、指示日用量は、０.１−３mＣi／体重kg、例えば０.１−１.５mＣi／体重kgのαまたはβ線放出性放射性核種で標識した「リガンド」１−２００μgの範囲であり得、これは１日４回以下の分割用量で投与するのが好便である。
【００５２】
この発明のαまたはβ線放出性放射性核種は、任意の慣用経路、特に非経口経路で、例えば注射用溶液またはけんだく液の形で投与することができる。これらはまた、輸液、例えば３０−６０分輸液により有利に投与することができる。腫瘍の部位によるが、これらはできるだけ腫瘍部位に近く、例えばカテーテルにより投与することができる。投与法は、使用した「キレート」の解離速度および排泄速度に応じて選択することができる。
「この発明のキレート」は、遊離形または医薬として許容される塩形で投与することができる。このような塩は常法により製造することができ、遊離化合物と同じオーダーの活性を示す。
【００５３】
この発明の方法で用いる「この発明のキレート」は、対象に投与する直前に製造すること、すなわち、目的とする金属イオン、特に目的とするα、βまたはγ放射性核種による放射能標識を投与の僅か前に行なうことが望ましい。
「この発明のキレート」は、下垂体、消化器膵、中枢神経系、胸（乳)、前立腺、卵巣または大腸の腫瘍、小細胞肺がん、パラガングリオーマ、神経芽腫、褐色細胞腫、骨髄質性甲状腺がん、骨髄腫等の腫瘍およびその転移の画像形成または処置に適当である。
【００５４】
この発明の別の態様によると、γ線放出性の「この発明のキレート」は、また、腎機能の評価のための画像形成剤として使用し得る。
５匹からなるマウス群を使用した。各マウスに、尾静脈から１mＣiの「この発明のキレート」含有液０.１mlを静注した。マウスを、排泄尿採取用メタボリックケージに入れた。注射１０または１２０分後に尿道を結さつし、マウスをクロロホルムで麻酔した。尿産生系の画像形成を常用画像化技術により行なった。この試験において、γ線放出性の「この発明のキレート」を０.１−３０mＣiの用量で投与したとき、腎排泄の画像化が実証された。
したがって、この発明はまた、対象に有効量のγ線放出性「キレート」を投与し、腎機能を記録することからなる、対象の腎機能のインビボ評価法を提供するものである。
【００５５】
この発明の別の態様によると、下記のものが提供される。
ｉ) １種以上の医薬として許容される担体または希釈剤と共に、「この発明のリガンド」の遊離形またはその医薬として許容される塩形を含有する、医薬組成物。
ii) １種以上の医薬として許容される担体または希釈剤と共に、この発明の「キレート」の遊離形またはその医薬として許容される塩形を含有する、医薬組成物。
【００５６】
このような組成物は常法により製造することができる。
この発明の組成物は「リガンド」と金属イオンを混合すること、および生成する「キレート」を投与することに関する指示書と共に、別個のパッケージとして供給することができる。また、混合および「キレート」の投与に関する指示書と共に、「リガンド」および検出可能な金属イオンの別個の単位用量を含む１個のパッケージ、すなわちツインパック形として供給することができる。担体または希釈剤は単位用量形態中に存在することができる。
次の実施例において、温度はすべて℃で示し、[α]20D値と共に未補正である。次の省略記号を用いる。
Ｂoc:      t−ブトキシカルボニル
ＴＦＡ:    トリフルオロ酢酸
ＤＴＰＡ:  ジエチレントリアミン五酢酸
【００５７】
実施例１
【化２０】
0003686503.tif 000021
遊離塩基形の
【化２１】
0003686503.tif 000022
１.１g（１mＭ）をジオキサン／水１／１（v／v）５lに溶解し、ＮaＨＣＯ3５gと反応させた。ＤＴＰＡ二無水物５２０mgを撹拌しながらゆっくり加えた。反応混合物をさらに３０分間撹拌し、凍結乾燥させた。残留物を水２５０mlに溶解し、pＨを濃ＨＣlでpＨ２.５に調節した。沈澱生成物を濾過、洗浄および五塩化リンで乾燥させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー後、次の生成物を単離した。
【化２２】
0003686503.tif 000023
２３０mgおよび相当する二量体
【化２３】
0003686503.tif 000024
５００mg。
ＴＦＡ３mlに
【化２４】
0003686503.tif 000025
２００mgを混合した。室温下５分後、混合物をジイソプロピルエーテルで沈澱させ、濾過および乾燥した。残留物をデュオライトで脱塩および凍結乾燥し、標題化合物１５０mgを得た。
[α]20D＝−２６.６゜(c＝１、９５％酢酸)
【００５８】
出発原料は次のように製造することができる。
【化２５】
0003686503.tif 000026
ＤＭＦ３０mlに溶解したジ−t−ブチル−ピロ炭酸塩２.２５gをＤＭＦ１００ml中の
【化２６】
0003686503.tif 000027
１０g溶液に室温下ゆっくりと一滴ずつ加えた。室温下２時間後、溶媒を真空下吸引除去し、残留物にジイソプロピルエーテル２００mlを加えた。形成した析出物を濾過、ジイソプロピルエーテルで洗浄および乾燥した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤：ＣＨ2Ｃl2／ＭeＯＨ  ９／１）で精製し、その後白色無定形粉末を単離した。
[α]20D＝２９．８゜(ＤＭＦ中c＝１.２８)
【００５９】
実施例２
【化２７】
0003686503.tif 000028
実施例１で得られた中間生成物
【化２８】
0003686503.tif 000029
を含む分画を相当する一量体形に対する上記記載のように処理し、Ｂoc保護基を除去し標題化合物を得た。
[α]20D＝−２４.５゜(c＝０.５５、９５％酢酸)
【００６０】
実施例３
【化２９】
0003686503.tif 000030
【化３０】
0003686503.tif 000031
０.５６g、Ｆmoc−ε−アミノカプロン酸０.５ミリモルおよびヒドロキシベンゾトリアゾール１１５mgをＤＭＦ１０mlに溶解し、−３０℃に冷却した。この溶液にＤＭＦ５ml(−１０℃に冷却)中のジシクロヘキシルカルボジイミド１１５mg溶液を加えた。
２４時間反応中に、混合物を室温までもどし、その後生成ジシクロヘキシル尿素を濾過し、濾過物を１０倍量の水で希釈した。沈澱反応生成物を濾過し、洗浄および五塩化リンで乾燥した。粗生成物をこれ以上精製せずに次の段階に使用した。
【００６１】
b）Ｆmoc開裂
カップリング反応(a)からの粗精製物０.５gをＤＭＦ／ピペリジン  ４／１v／v（透明液）と室温下１０分間処理し、つづいてジイソプロピルエーテル１００mlに混合した。反応生成物の沈澱物を濾過、洗浄および乾燥した。粗生成物をこれ以上精製せずに次の段階に使用した。
【００６２】
c）ＢＯＣ開裂
(１．b)で得られた粗生成物３００mgを１００％ＴＦＡ（完全に溶解）５mlと室温下５分間処理し、つづいてジイソプロピルエーテル５０mlに混合した。ＨＣl／ジエチルエーテル２mlを加えた後、生成析出物を濾過、洗浄および高減圧下乾燥した。
最終生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨＣl3／ＭeＯＨ／ＡcＯＨ  ７／３／０.５／０.５）で精製し、つづいてデュオライトで脱塩した（勾配：Ｈ2Ｏ／ＡcＯＨ  ９５／５−−−Ｈ2Ｏ／ジオキサン／ＡcＯＨ  ４５／５０／５)。
標題混合物が酢酸塩(白色凍結乾燥物)として得られた。
[α]20D＝−３２゜(c＝０.５、９５％酢酸)
生成化合物を実施例１および２の工程によりＤＴＰＡの反応を使用した。
【００６３】
実施例４
実施例３および１に記載された方法にしたがって次のリガンドが調製された。
【化３１】
0003686503.tif 000032
[α]20D＝−１４.８゜(c＝０.５、９５％酢酸)
【００６４】
実施例５
【化３２】
0003686503.tif 000033
【化３３】
0003686503.tif 000034
１mgを０.０１Ｍ酢酸５mlに溶解した。得られた溶液を０.２２μミレックス−ＧＶフィルターに通し、０.１ml部に分配し、−２０℃に貯蔵した。111ＩnＣl3(アメルシャム、１mＣi／１００μl)を０.５Ｍ酢酸ナトリウム同容量で前希釈し、室温下でＩnＣl3溶液およびリガンドを混合し穏やかにホモジナイズすることにより実施した。
ＨＥＰＥＳ緩衝液、pＨ７.４を加えて１０-6Ｍ溶液にした。
【００６５】
実施例６
90Ｙラベル化した
【化３４】
0003686503.tif 000035
90Ｙを90Ｓr−90Ｙ放射性核種発生装置から得た。装置の構成、溶出および[90Ｙ]ＥＤＴＡから酢酸錯体への変換は、ジャーナル・オブ・ヌクレアー・メディシン(Ｊ．Ｎucl．Ｍed.）２８巻１４６５−１４７０頁(１９８７年)のＭ．チノールおよびＤ．Ｊ．ナトウィッチにより記載された方法により実施される。０．０１Ｍ酢酸５mlに溶解した
【化３５】
0003686503.tif 000036
１gを室温にし、殺菌０.５Ｍ酢酸５０μl中の90Ｙ１.０mＣiを加えた。その後混合物を静かに３０分から１時間放置し、キレート化を最大にさせた。