(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
内壁面に、重量平均分子量が６０万〜１５０万のポリビニルピロリドン及び吸着性無機物を存在させることを特徴とする血液検査用容器であって、上記吸着性無機物は、ガラス、シリカ、カオリン、セライト及びベントナイトから構成される群から選択される１又は２種以上の混合物であって、アマニ油吸油量２０〜４０ｍｌ／１００ｇ、ＢＥＴ比表面積値５０００〜３００００ｃｍ２／ｇ、比抵抗値１×１０１０Ω・ｃｍ以下のものであり、かつ、内壁面における存在量が、上記のポリビニルピロリドン１×１０−１０〜１×１０−２ｇ／ｃｍ２、吸着性無機物１×１０−６〜１×１０−２ｇ／ｃｍ２である血液検査用容器。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、血液検査用容器に関し、更に詳しくは被検者の全血試料から遠心分離により血清を分離するために用いる有底の管状容器（いわゆるスピッツ）に関する。
【０００２】
【従来の技術】
近年、検査技術の進歩に伴って、血清生化学検査、血清免疫学検査、血球検査等の血液検査が広く普及し、病気の予防や早期診断に大きく貢献するようになってきている。
【０００３】
血清検査は、これらの血液検査の主体をなしており、検査に供される血清は、通常、血液検査用容器に採取した血液を凝固させた後、遠心分離することによって、比重の異なる血餅から分離して取得されている。血液検査用容器は、この場合、血液を採取するための容器であるとともに、採取した血液を凝固させるための保管容器でもある。
【０００４】
従来の血液検査用容器としては、ガラス製のもの、及び、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリエチレン等の合成樹脂製のものが使用されているが、これらには以下の欠点があった。
一つは、血液検査用容器に血液を採取した後、凝固するまでに多くの時間を要し、迅速な検査を実施することができない点である。最も短いとされるガラス製血液検査用容器でさえ、採取後凝固までに４０〜６０分を要するし、合成樹脂製血液検査用容器にあっては４時間以上も掛かる等、特に緊急に検査を実施する必要のあるときの大きな障害となっている。
【０００５】
従来の血液検査用容器の今一つの欠点は、凝固した全血を遠心分離等の手段によって比重の異なる血清と血餅とに分離させて検査に使用する純粋な血清を取得するに際して、血清の分離性が概して不良である点である。すなわち、ゲル状の血餅が管壁に強固に付着して血清の採取量を極端に減少させ、血清生化学検査に障害を引き起こす等の問題点があった。血清分離性が比較的良好とされるガラス製血液検査用容器でさえ、１７℃以下の温度では実用上の問題点が指摘されていた。
【０００６】
例えば、特公平１−２６５０４号公報には、血餅剥離性を有する難水溶性又は不水溶性の親水性物質と、水溶性物質と、吸着性無機物とを血液検査用容器内壁面に存在させることにより上記問題点を解決する技術が開示されている。
しかしながら、この方法では、例えば、水酸基、カルボキシル基、エポキシ基、ポリエーテル基等の極性基を導入した変性シリコーンオイル等の血餅剥離性を有する難水溶性又は不水溶性の親水性物質の存在が必須であり、その他の水溶性物質と吸着性無機物とを同時に血液検査用容器内壁面に存在させなければならない技術的煩雑さがあった。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
上記に鑑み、本発明は、より簡便な方法によりしかも充分な血清分離性を発現する血液検査用容器を提供することを目的とするものである。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明の要旨は、血液検査用容器内壁面に、吸着性無機物とともに、重量平均分子量が１０万〜２００万のポリビニルピロリドンの一定量を存在させておくところにある。
【０００９】
本発明においては、血液検査用容器の素材としては、熱可塑性樹脂、熱硬化性樹脂、変性天然樹脂又はガラスのいずれをも用いることができる。
熱可塑性樹脂としては、例えばポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ−４−メチルペンテン−１、ポリスチレン、ポリメチルメタクリレート、ポリ塩化ビニル、ポリエチレンテレフタレート、ポリブチレンテレフタレート、スチレン−アクリロニトリル共重合体、スチレン−無水マレイン酸共重合体、スチレン−アクリル酸共重合体、スチレン−メチルメタクリレート共重合体、エチレン−プロピレン共重合体、エチレン−アクリル酸共重合体、エチレン−アクリル酸エステル共重合体、ポリビニルアルコールアセタール化物、ポリビニルアルコールブチラール化物等が、また熱硬化性樹脂としては、例えば、不飽和ポリエステル樹脂、エポキシ樹脂、エポキシ−アクリレート樹脂等が用いられる。
【００１０】
変性天然樹脂としては、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、エチルセルロース、エチルキチン等が用いられる。
またガラスとしては、ソーダ石灰ガラス、リンケイ酸ガラス、ホウケイ酸ガラスなどのケイ酸塩ガラス及び石英ガラスが用いられる。
【００１１】
本発明において用いられる、血液検査用容器内壁に存在させるポリビニルピロリドンとしては、重量平均分子量は１０万〜２００万であり、好ましくは６０万〜１５０万である。重量平均分子量が１０万〜２００万のポリビニルピロリドンは血餅剥離作用を有しており、重量平均分子量が低過ぎると血液中に溶解して管内壁面に残らなくなるので血餅剥離作用がなくなる。また、重量平均分子量が高過ぎると、水、アルコール等に不溶性となって管内壁面にコーティングすることが難しくなり、たとえコーティングできたとしても管内壁面に固着して血餅剥離作用がなくなる。従って、重量平均分子量は上記の範囲に限定される。
【００１２】
本発明においては、吸着性無機物としては、ガラス、シリカ、カオリン、セライト及びベントナイトから構成される群から選択される１又は２以上の混合物が挙げられる。
また、吸着性無機物は粒径が５０μｍ以下であって、平均粒径が１０μｍ以下のものを使用するのが好適である。そして特に血液凝固時間を短縮させるに有効な吸着性無機物はシリカであり、とりわけ無定形成分を２０重量％以上含有する多孔性のシリカが優れた効果を発揮する。
【００１３】
かかる吸着性無機物は、血液と接触した場合に血液凝固因子の活性化を促進し、また血小板の凝集を促す作用を有する。しかしながら吸着性無機物が血液凝固促進作用を効果的に発揮するためには、アマニ油吸油量、ＢＥＴ比表面積値、比抵抗値が一定の範囲内に存在することが必要とされる。
【００１４】
アマニ油吸油量及びＢＥＴ比表面積値は、吸着性無機物の表面積の程度を表し、また表面積は吸着性無機物の有する表面孔隙の程度と関連するので、吸油量及び比表面積によって表面孔隙の程度を知ることができる。そして本発明における吸着性無機物は、アマニ油吸油量が２０〜４０ｍｌ／１００ｇ、ＢＥＴ比表面積値が５０００〜３００００ｃｍ2 ／ｇであるものが使用される。
【００１５】
アマニ油吸油量は日本工業規格Ｋ−５１０１に準拠して測定される値を示す。ＢＥＴ比表面積値は、吸着性無機物の表面に吸着される気体の吸着量、その時の平衡圧、吸着ガスの飽和蒸気圧から単分子層として表面を覆いきる気体量を求め、これに吸着気体分子の平均断面積を乗じて算出された値を指すものであり、吸着気体としては、窒素ガス、酸素ガス、アルゴンガス、メタンガス等が使用される。そしてこの方法によれば、アマニ油吸油量の測定によって測定できない細孔を含めた表面積値が測定される。
【００１６】
血液凝固に際しては、第ＸＩＩ因子、すなわち、接触因子が活性化されるが、このためには異物表面上に第ＸＩＩ因子、プレカリクレイン、高分子キニノーゲンの３種の物質が錯体を形成して吸着されることが必要であり、これらの一つ又は二つが欠けた状態での吸着は活性化に至らないとされている。ところで、血液凝固促進作用を期待して吸着性無機物を使用した場合に、表面積が非常に大きなものであると、吸着性無機物の表面上には錯体を形成しない状態での第ＸＩＩ因子、プレカリクレイン、高分子キニノーゲンの吸着の割合が高まることになり、言い換えると、第ＸＩＩ因子の活性化に必要な三者の錯体形成割合は減少することになり、かえって血液凝固促進作用は減殺されることになる。また逆に吸着性無機物の表面積が小さすぎると、凝固因子の吸着の確率が小さくなり、血液凝固促進作用を期待することができなくなる。このために本発明における吸着性無機物はアマニ油吸油量が２０〜４０ｍｌ／１００ｇ、ＢＥＴ比表面積値が５０００〜３００００ｃｍ2 ／ｇの範囲の表面積を有することが必要とされる。
【００１７】
また、本発明における吸着性無機物の比抵抗値は１×１０10Ω・ｃｍ以下が必要とされ、より好ましくは５×１０4 Ω・ｃｍ以下であるものが好適に使用される。比抵抗値は電気伝導度の逆数であり、常温における値である。吸着性無機物に対する比抵抗値は、蛋白質と吸着性無機物との間の電位分布の整合性を保持し、蛋白質のコンフォーメーションの変化を防止することに寄与すると推測される。
【００１８】
本発明の血液検査用容器を製造するには、例えば、重量平均分子量が１０万〜２００万のポリビニルピロリドン及び吸着性無機物を適当なバインダー又は溶剤中に溶解又は分散させた状態であらかじめ用意された血液検査用容器の内壁面にスプレーするか浸漬により塗布することができる。
【００１９】
血液検査用容器内壁面に存在させる重量平均分子量が１０万〜２００万のポリビニルピロリドンの量は、１×１０-10 〜１×１０-2ｇ／ｃｍ2 である。１×１０-10 ｇ／ｃｍ2 未満であると血清分離効果を喪失し、１×１０-2ｇ／ｃｍ2 を超えると血液検査値に影響を及ぼすので、この範囲に限定される。
血液検査用容器内壁面に存在させる吸着性無機物の量は、１×１０-6〜１×１０-2ｇ／ｃｍ2 である。１×１０-6ｇ／ｃｍ2 未満であると血清分離効果を喪失し、１×１０-2ｇ／ｃｍ2 を超えると血液検査値に影響を及ぼすので、この範囲に限定される。また、各成分の合計量は、１×１０-2ｇ／ｃｍ2 以下であることが望ましい。
【００２０】
【実施例】
以下に、実施例及び比較例を示して本発明をさらに詳しく説明する。
【００２１】
実施例１
ポリビニルピロリドンとして、ＢＡＳＦ社製、ルビスコールＫ８０（重量平均分子量約７０万）を、吸着性無機物として微粉末シリカ（平均粒径４．０μｍ、アマニ油吸油量３０ｍｌ／１００ｇ、ＢＥＴ比表面積値１２０００ｃｍ2 ／ｇ、比抵抗値２．６×１０4 Ω・ｃｍ）を使用し、これらの各成分の濃度が０．１重量％、１．０重量％となるようにメチルアルコール分散液を調製し、これらを１０ｍｌ容量のポリスチレン樹脂製血液検査用容器の内壁面にスプレー塗布し、風乾した。
各成分の容器内壁面への単位面積当たりの付着量は、ポリビニルピロリドン２×１０-6ｇ／ｃｍ2 、微粉末シリカ２×１０-5ｇ／ｃｍ2 であった。
このようにして得られた血液検査用容器内に人新鮮血８ｍｌを注入した後２０℃で放置して、全血が完全に流動しなくなるまでに要した時間を血液凝固時間として測定し、血液凝固性を評価した。凝固確認後、直ちに３０００回転／分の回転速度で５分間遠心分離を行い、血清分離状態を観察すると共に上澄み血清をピペットで採取し、その量を血清収量とした。結果を表１に示した。
【００２２】
実施例２
ポリビニルピロリドンとして、ＢＡＳＦ社製、ルビスコールＫ９０（重量平均分子量約１１０万）を、吸着性無機物として実施例１と同様の微粉末シリカを使用し、これらの各成分の濃度が０．０２重量％、１．０重量％となるようにメチルアルコール分散液を調製し、これらを１０ｍｌ容量のポリスチレン樹脂製血液検査用容器の内壁面にスプレー塗布し、風乾した。
各成分の容器内壁面への単位面積当たりの付着量は、ポリビニルピロリドン６×１０-7ｇ／ｃｍ2 、微粉末シリカ４×１０-5ｇ／ｃｍ2 であった。
ついで実施例１と同様にして血液凝固性、血清分離状態、血清収量を評価した。その結果を表１の実施例２の欄に示す。
【００２３】
比較例１
ポリビニルピロリドンとして、ＢＡＳＦ社製、ルビスコールＫ３０（重量平均分子量３万）を、吸着性無機物として実施例１と同様の微粉末シリカを使用し、これらの各成分の濃度が０．１重量％、１．０重量％となるようにメチルアルコール分散液を調製し、これらを１０ｍｌ容量のポリスチレン樹脂製血液検査用容器の内壁面にスプレー塗布し、風乾した。
ついで実施例１と同様にして血液凝固性、血清分離状態、血清収量を評価した。その結果を表１の比較例１の欄に示す。
【００２４】
比較例２
ポリビニルピロリドンを使用しないものとし、吸着性無機物として実施例１と同様の微粉末シリカを使用し、この成分の濃度が１．０重量％となるようにメチルアルコール分散液を調製し、１０ｍｌ容量のポリスチレン樹脂製血液検査用容器の内壁面にスプレー塗布し、風乾した。
ついで実施例１と同様にして血液凝固性、血清分離状態、血清収量を評価した。その結果を表１の比較例２の欄に示す。
【００２５】
【表１】
0003644707.tif 000002
【００２６】
実施例に示すようにして得られた血液検査用容器は、血液凝固が極めて速やかであり、血清分離状態も良好であった。
【００２７】
【発明の効果】
本発明血液検査用容器によれば、血液凝固因子が迅速に活性化され、血液凝固に要する時間が著しく短縮されるとともに血液凝固の結果生じる血餅の容器内壁面への付着を生じないものとなり、血清と血餅との分離が容易に行われ、分離採取された血清中に残存する血餅成分が混入する問題も解消される。また、血清の収量が著しく大きくなる。