(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
0003679819.tif 000005
（式中、Ｒは炭素数１〜５の直鎖または分岐したアルキル基）で表される（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルを、シュードモナス  フルオレッセンス、シュードモナス  エスピー、クロモバクテリウム  ビスコーサス、ムコール  ミーハイ、フミコーラ  エスピー、カンジダ  アンタルクチカ、カンジダ  シリンドラセアまたはブタ肝臓起源のリパーゼの存在下で反応させ、式（II）：
【化２】
0003679819.tif 000006
で表される（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸を取得することを特徴とする（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸の製造法。 
【請求項２】
（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルが、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸メチルであることを特徴とする請求項１記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸の製造法に関するものである。この（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸は医薬品の合成原料としてきわめて重要な化合物である。
【０００２】
【従来の技術】
従来、（Ｓ）−３−（２−（チエニルチオ）ブタン酸をうる方法としては、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸メチルを濃塩酸を用いて還流することにより加水分解する方法（ジャーナル  オブ  オーガニック  ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５８，１６７２（１９９３））が知られている。また、同文献には、アルカリ条件下での（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸メチルの加水分解はラセミ化を引き起こすことが記載されている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸は、酸およびアルカリ条件下での加水分解において分解またはラセミ化を起こす傾向があり、前記方法のごとき強酸性下またはアルカリ条件下での加水分解は、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸を高純度でえるうえで好ましい方法とはいいがたい。そこで、強酸や強アルカリを用いずに、温和な条件下で（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルを加水分解する方法の確立が望まれていた。
【０００４】
本発明は前記課題を解決するもので、温和な条件の反応で（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸を製造し、目的物を高純度でえる方法を提供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは前記課題を解決するために鋭意研究した結果、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルを酵素、菌体またはその処理物を用いて加水分解すれば、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸が温和な条件で容易にえられることを見出した。
【０００６】
すなわち本発明は、一般式（Ｉ）：
【０００７】
【化３】
0003679819.tif 000002
【０００８】
（式中、Ｒは炭素数１〜５の直鎖または分岐したアルキル基）で表される（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルを、シュードモナス  フルオレッセンス、シュードモナス  エスピー、クロモバクテリウム  ビスコーサス、ムコール  ミーハイ、フミコーラ  エスピー、カンジダ  アンタルクチカ、カンジダ  シリンドラセアまたはブタ肝臓起源のリパーゼの存在下で反応させ、式（II）：
【０００９】
【化４】
0003679819.tif 000003
【００１０】
で表される（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸を取得することを特徴とする（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸の製造法に関する。
【００１１】
前記加水分解に用いることのできる（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルは、炭素数１から５の直鎖または分岐アルコールと（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸とのエステルであり、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルなどのエステルがあげられるが、とくにメチルエステルが望ましい。このメチルエステルは、商業的に入手可能な３−ヒドロキシブタン酸から２工程を経て合成することのできる（Ｒ）−３−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）ブタン酸メチルに２−（リチオメルカプト）チオフェンをマイケル付加させることで合成することができる（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５８，１６７２（１９９３））。
【００１２】
本発明において用いられる、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルを加水分解する能力を有する酵素としては、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルをアルコールと（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸に加水分解する能力をもった酵素であればとくに支障なく用いることができる。かかる酵素としてはリパーゼ、アシラーゼ、エステラーゼなどを例示することができるが、とくにリパーゼが好ましい。このリパーゼとしては、市販の、たとえばリパーゼＰ「アマノ」（シュードモナス  フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）起源、天野製薬（株）製）、リパーゼＰＳ「アマノ」（シュードモナス  フルオレッセンス起源、天野製薬（株）製）、ＬＰＬ（シュードモナス  スピーシス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）起源、天野製薬（株）製）、ＰＬＥ−Ａ（ブタ肝臓起源、天野製薬（株）製）、リパーゼ（クロモバクテリウム  ビスコーサス（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｖｉｓｃｏｓｕｓ）起源、東洋醸造（株）製）、リパーゼＯＦ（カンジダ  シリンドラセア（Ｃａｎｄｉｄａ  ｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）起源、名糖産業（株）製）、リパーゼＳＰ−３８８（ムコール  ミーハイ（Ｍｕｃｏｒ  ｍｉｅｈｅｉ）起源、ノボ  ノルディスク  バイオインダストリー  リミテッド（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ｂｉｏｉｎｄｕｓｔｒｙ  Ｌｔｄ．）製）、リパーゼＳＰ−５２３（フミコーラ  スピーシス（Ｈｕｍｉｃｏｌａ  ｓｐ．）起源、ノボ  ノルディスク  バイオインダストリー  リミテッド製）、リパーゼＳＰ−５２４（ムコール  ミーハイ起源、ノボ  ノルディスク  バイオインダストリー  リミテッド製）、リパーゼＳＰ−５２５（カンジダ  アンタルクチカ（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）起源、ノボ  ノルディスク  バイオインダストリー  リミテッド製）、リパーゼＳＰ−５２６（カンジダ  アンタルクチカ起源、ノボ  ノルディスク  バイオインダストリー  リミテッド製）、リポザイム（ＬＩＰＯＺＹＭＥ）ＩＭ（ムコール  ミーハイ起源、ノボ  ノルディスク  バイオインダストリー  リミテッド製）、ノボザイム（ＮＯＶＯＺＹＭＥ）４３５（カンジダアンタルクチカ起源、ノボ  ノルディスク  バイオインダストリー  リミテッド製）、リパーゼＬ−０５０（クロモバクテリウム  ビスコーサム（Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｖｉｓｃｏｓｕｍ）起源、バイオキャタリスツ（ＢＩＯＣＡＴＡＬＹＳＴＳ）社製）およびリパーゼＬ−０５６（シュードモナス  フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）起源、バイオキャタリスツ社製）などを用いるのが簡便で好ましい。
【００１３】
また本発明では、上記酵素の代わりに、この種の酵素を有する微生物菌体を用いることができる。これらの微生物としては、ムコール（Ｍｕｃｏｒ）属、フミコーラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属などに属する酵母、糸状菌、バクテリアなどの菌体を例示できる。またこれらの微生物は、その菌体取り扱い上の便宜から、たとえば凍結乾燥菌体、噴霧乾燥菌体などの乾燥菌体、あるいはこれらの菌体を有機溶媒、たとえばアセトン、トルエンなどで処理した菌体、あるいは菌体破壊物、菌体抽出物などの、菌体処理物として用いることもできる。これらの菌体あるいは菌体処理物は、そのまま、または固定化して反応させることもできる。
【００１４】
反応溶媒としては水、緩衝液などの水性溶媒、または水性溶媒とヘキサン、酢酸エチルなどの有機溶媒との混合溶媒を用いることが望ましい。また、界面活性剤を基質の分散を良くする目的で０．０１〜１０％（ｗ／ｗ、以下同様）程度反応系に添加することもできる。
【００１５】
加水分解反応は、たとえば（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルを好ましくは溶液濃度１〜３０ｗ／ｖ％になるように反応溶媒に懸濁させ、これに前記酵素をエステルの重量に対して好ましくは０．０１〜１０倍重量添加し撹拌混合することにより行われる。このときの反応温度は好ましくは１０〜８０℃、反応時間は好ましくは１〜１２０時間で行うことができる。加水分解反応後は酢酸エチル、ヘキサンなどの有機溶媒による抽出などにより、簡便に（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸を取得できる。
【００１６】
以下に実施例をあげて本発明を詳細に説明するが、もとより本発明はこれに限定されるものではない。
【００１７】
【実施例】
実施例１〜１５
（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸メチル１０ｍｇとｐＨ７．０のリン酸緩衝液１ｍｌを試験管に入れ、表１に記載した各酵素１５ｍｇを添加して３０℃の温度で２４時間振盪反応させた。反応終了後、アセトニトリル１ｍｌを加え、この懸濁液をフィルター濾過し、高速液体クロマトグラフィーにより（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸の生成率を測定した。その結果を表１に示す。
【００１８】
【表１】
0003679819.tif 000004
【００１９】
実施例１６
３−（２−チエニルチオ）ブタン酸メチル１．５ｇとリン酸緩衝液３０ｍｌをフラスコに入れ、ＰＬＥ−Ａ（ブタ肝臓起源、天野製薬（株）製）１５０ｍｇを添加して、３０℃で４Ｎの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ６．５にスタットしながら撹拌反応させた。撹拌開始２４時間後に１５０ｍｇの酵素を追加、反応を継続した。撹拌開始後４５時間で撹拌を終了した。
【００２０】
反応終了後、反応液に酢酸エチル２０ｍｌを添加して濾過し、抽出したところ、１．２５ｇの（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸をえた。収率８９．２％。
【００２１】
1Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ：７．４１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，Ｊ＝５．３Ｈｚ）、７．１７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，Ｊ＝３．４Ｈｚ）、７．０１（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．４Ｈｚ，Ｊ＝５．３Ｈｚ）、３．４０−３．３３（ｍ，１Ｈ）、２．７０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ）、２．４７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ）、１．３４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
【００２２】
【発明の効果】
本発明によれば、（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸エステルを加水分解する能力を有する酵素、菌体またはその処理物を用いて（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸をえることができるため、温和な方法で高純度の（Ｓ）−３−（２−チエニルチオ）ブタン酸をえることができる。