(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）マロナト白金（II）化合物（カルボプラチン又はマロナト同種体）の抗腫瘍有効量、（ｂ）１，１−シクロブタンジカルボン酸（又は対応するマロナト同種体）又はそのアルカリ金属塩の安定化量、（ｃ）ｐＨを４から７に保つに十分なｐＨ変性剤、及び（ｄ）製薬上受け入れられるキャリアからなることを特徴とするマロナト白金（II）化合物の安定な注射可能組成物。
【請求項２】
ｐＨ変性剤が１，１−シクロブタンジカルボン酸のナトリウム塩である請求項１記載の組成物。
【請求項３】
成分（ａ）の量が１から２０ｍｇ／ｍｌである請求項２記載の組成物。
【請求項４】
成分（ｂ）の量が０．２５から４ｍｇ／ｍｌである請求項２記載の組成物。
【請求項５】
成分（ｄ）が水、Ｃ1-6 アルキル基を含有するポリアルキレングリコール、デキストロース水溶液及びそれらの混合物から選ばれる請求項３記載の組成物。
【請求項６】
成分（ｄ）が水である請求項２記載の組成物。
【請求項７】
成分（ａ）がカルボプラチンである請求項５記載の組成物。
【請求項８】
混合後に溶液を空気又は酸素でパージする請求項１記載の組成物。
【請求項９】
（１）マロナト白金（II）化合物（カルボプラチン又はマロナト同種体）の溶液に１，１−シクロブタンジカルボン酸（又は対応するマロナト同種体）の安定化量を加え、（２）ｐＨを調節し４から７に保持することを特徴とするマロナト白金（II）化合物溶液の安定化法。
【請求項１０】
用いる１，１−シクロブタンジカルボン酸又はその塩の量が０．２５から２０ｍｇ／ｍｌである請求項９記載の方法。
【請求項１１】
存在する１，１−シクロブタンジカルボン酸又はその塩の量が１から２０ｍｇ／ｍｌである請求項９記載の方法。
【請求項１２】
混合後に溶液を空気又は酸素でパージする請求項１０記載の方法。
【請求項１３】
５０％以上の上部空間をもつ密封容器に最終溶液を保存する請求項１１記載の方法。
【請求項１４】
容器を密封する前に上部空間を空気又は酸素で充填する請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
引き続く（３）工程として、溶液を空気又は酸素でパージする請求項１１記載の方法。
【請求項１６】
（１）マロナト白金（II）化合物をキャリアに溶解し、１，１−シクロブタンジカルボン酸（又は対応するマロナト同種体）又はそのアルカリ金属塩を加え、ｐＨを４から７に調節し、（２）工程（１）の生成物を空気又は酸素ガスの少なくとも１つでパージし、（３）パージした溶液を、少なくとも５０容量％が液体では満たされないが、空気又は酸素で飽和されるように容器に入れることを特徴とするマロナト白金（II）化合物の溶液の安定化法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は白金（ＩＩ）抗腫瘍剤の安定化溶液に関するものである。
【０００２】
【従来の技術とその課題】
カルボプラチン、１，１−シクロブタンジカルボン酸ジアミン白金（ＩＩ）、は白色ないし灰色の結晶粉末である。シスプラチン同様これは細胞毒性をもっており、卵巣癌を含む哺乳動物の種々の悪性腫瘍の治療に有効である。
Ｃｌｅａｒｅ等に対する米国特許第４，１４０，７０７号及び４，６５７，９２７号にはカルボプラチンその他のマロナト白金化合物と標準スクリーニング腫瘍、固体サルコマ１８０の処置でその使用が開示されている。このグループの化合物はその構造中に−（ＯＯＣ）２−Ｃ＜結合をもつことから「マロナト（ｍａｌｏｎａｔｏ）」といわれる。
【０００３】
シスプラチンと異なり、カルボプラチンは腎性毒性、耳毒性及び神経毒性といったきびしい副作用は通常生じない。カルボプラチンはアクア化抵抗性があり、毒性が低い。これまでに小細胞肝癌、リン状細胞癌及び精巣癌を含む種々のヒトの癌の治療に用いられてきた。Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｉｓｔ，１９８９年９月号、６２−６３頁参照。
【０００４】
カルボプラチンは通常患者に静脈注射する前に水、生理食塩水、デキストロース溶液及び／又は他の稀釈剤で稀釈して用いる凍結乾燥粉末として販売される。しかし水に対する溶解度が比較的小さい（室温で１４ｍｇ／ｍｌ）ために再構成中のはねかえり現象（スプラッシュバック）等の問題を生ずる。またすべての抗腫瘍剤同様正常細胞と接触すると望ましくない作用を示しうる。
【０００５】
濃縮された即用（ｒｅａｄｙ−ｔｏ−ｕｓｅ（ＲＴＵ））型のカルボプラチン溶液は取扱い及び投与を促進する上で非常に望ましい。しかしこの化合物は単純な水溶液の場合即ち水だけと混合した場合長期間保存に対し物理的安定性を欠くという欠点がある。
Ｎｉｊｋｅｒｋ等に対する米国特許第５，１０４，８９６号ではこの問題の解決が検討されている。それはカルボプラチンを２２ｍｇ／ｍｌ以下と無機緩衝剤０．０１−０．１モルを含みｐＨを２−６．５に維持したカルボプラチン溶液である。
【０００６】
Ｃａｎｃｅｖ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２３：１９７−２０７（１９８９）でＡ．Ｂｏｓｏｎｑｕｅｔはカルボプラチンの不安定性を論じた上水と塩化ナトリウムを用いて安定な溶液をつくることを提案している。ＥＰＯ公開３３４，５５１（１９８９年９月２１日発行）でＬｅｖｉｕｓ等はカルボプラチン溶液には塩素イオンを用いるべきでないことを示唆している（３頁７行）。また彼らは薬剤濃度１０−１５ｍｇ／ｍｌのカルボプラチン水溶液はこの薬剤が凍結乾燥されていずまたその水が塩を含まない場合には安定であることを開示している（２頁２２行）。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明は安定なカルボプラチン組成物、その製造法及びこれら組成物と製法に基づく安定な生成物に関する。
本発明者等はカルボプラチン（又はマロナト同種体ｃｏｎｇｅｎｅｒ）の安定な１，１−シクロブタンジカルボン酸（ＣＢＤＣＡ）緩衝溶液が安定剤として次の少なくとも１つを用いることによって得られることを見出した：
（１）１，１−シクロブタンジカルボン酸（ｐＨ４−８へ）、
（２）この溶液を空気又は酸素でパージし、そして
（３）薬瓶その他の容器の上部空間を空気又は酸素で覆う。
特に好ましい態様では上記（１），（２）及び（３）のすべてを用いる。生ずる溶液はｐＨが約４から約８で、カルボプラチンを約１から約１５ｍｇ／ｍｌ含み、水を含有するキャリアを含み、５０容量％の上部空間を持つ薬瓶に保存される。この溶液は５０℃で少なくとも４ケ月間化学的及び物理的に安定である。
【０００８】
本発明の組成物、生成物及び方法は従来技術に比しいくつかの利点を有する。カルボプラチンの凍結乾燥物その他の粉末型を用いたときのスプラッシュバック等の問題が本発明の即用（ＲＴＵ）注射処方の稀釈性溶液を用いることによって防ぐことができる。
本発明のＲＴＵ処方は製造費用が安く、投与前に稀釈以外の追加の操作を必要としない。
【０００９】
本発明の新処方の安定性（即ち２４℃又は周囲温度で１８ケ月まで安定）は有効期間のチェックや従来品のような頻繁な廃棄を必要としないことを意味する。温度と光感応性についての最小限の注意を払うだけで本発明のカルボプラチン溶液は容易に使用しまた維持できる。
これら及び他の作用効果は以下の記載から明らかとなろう。
特に断らない限りすべての％は全組成物重量に基づく重量％である。すべての表において「透明」、「沈澱なし」は同義である。
【００１０】
活性成分：
本発明で用いる活性成分は１以上のマロナト白金（ＩＩ）化合物である。「カルボプラチン」は明細書全体を通じ、２つの単座配位のアンモニア又はアミンリガンド及び１，１−シクロアルキルジカルボン酸残基をもつ１つの２座配位のマロナトリガンドを含有するすべての配位化合物を含むものとして用いる。
好ましい化合物は式Ｉに相当するものである。
【００１１】
【式１】
0003629044.tif 000002
【００１２】
上記においてＲ及びＲ′は独立にＨ，Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ５−１２アリール、Ｃ５−１２アルカリール、Ｃ５−１２アラルキル、Ｃ１−６アルコキシアルキルおよびＣ５−１２アミノ酸残基から選ばれ、ｎは２又は３であり、Ｘは環状のＣ３−６アルキル又はアルケニル基である。
Ｒ＝Ｒ′＝Ｈで、ｎ＝３で、Ｘがシクロアルキル基であることが好ましい。
（構造式ＩＩの）カルボプラチン及びその異性体及び周知の誘導体を用いることが特に好ましい。
【００１３】
【式２】
0003629044.tif 000003
【００１４】
上記において「周知の誘導体」とは溶媒和物、錯体、水和物、幾何異性体、置換した核をもつ同類体等を意味する。
本発明で用いるシスプラチン及び他の治療化合物は米国特許第４，１４０，７０７号及び４，６５７，９２７号に記載された方法で製造できる。
【００１５】
一般的な反応スキームは次のとおりである。
シス−〔ＰｔＡＣｌ２〕＋２ＡｇＮＯ３＋２Ｈ２→シス−〔ＰｔＡ（Ｈ２Ｏ）２〕（ＮＯ３）２＋２ＡｇＣｌ
シス−〔ＰｔＡ（Ｈ２Ｏ）２〕（ＮＯ３）２＋Ｘ（ＣＯＯＨ）２→〔ＰｔＡ（ＯＯＣ）２−ＣＨ２〕＋２ＮＯ３−＋２Ｈ２Ｏ＋２Ｈ＋
上記においてＡは１つの２座配位のアミンリガンド又は２つの単座配位のアミンリガンドであり、Ｘは上記のとおりである。
【００１６】
カルボプラチンの抗癌剤としての有用性は周知である。
安定系：
（１）１，１−シクロブタンジカルボン酸（ＣＢＤＣＡ）及び塩：
ＣＢＤＣＡはカルボプラチンを製造する好ましい方法における試薬である。これはその安定化されていない溶液の水溶性成分である。
ＣＢＤＣＡの有用な塩にはアルカリ金属塩がある。ナトリウム塩が好ましく、特にキャリアが水又は１以上のポリアルキレングリコールであるときはナトリウム塩が好ましい。
【００１７】
ＣＢＤＣＡとそのナトリウム塩はその高い相溶性の故にカルボプラチン用の緩衝剤として検討されたことがある。しかしこれらが白金（ＩＩ）化合物の安定剤として検討された例はない。
好ましい態様の一つにおいて、この安定剤系は安定剤としてのＣＢＤＣＡの使用とｐＨ変性剤としてのそのナトリウム塩の使用を含む。
この酸又は１以上の塩は約０．２５から約４ｍｇ／ｍｌの最終ＣＢＤＣＡ濃度をｐＨ約４から約８で与えるに十分な量でカルボプラチン又は他のマロナト白金（ＩＩ）化合物の溶液に加えられる。好ましい量は約１から約２ｍｇ／ｍｌである。
【００１８】
（２）空気又は酸素パージ
空気即ち室温において約７８％の窒素と約２１％の酸素のガス状混合物ないし純酸素（Ｏ２）が用いられる。好ましいパージ用ガスは酸素である。
酸素と空気の混合物も用いうる。これら混合物の酸素濃度は約２５％と約９５％の間が好ましい。アルゴン等の非窒素性ガスも用いうる。
パージガス中の窒素濃度を約７８％より高くすることは避けるべきである。
「パージ」とは所望のガスを大気圧下にバブリングその他の手段で溶液に通して最適量の酸素で液体及び上部空間を飽和することをいう。
【００１９】
パージ工程の時間は臨界的ではない。しかし通常薬剤含有溶液を約１から約５時間パージすることが好ましい。典型的な時間は２時間である。約２５−３０℃の周囲温度又は室温が通常用いられる。
パージ技術を用いる際、容器中の液体が全体容積の５０％以下即ち液体で満たされていない空気酸素容積又は上部空間が容器の全容積（液体及び気体）の５０％以上であることが（必須ではないが）好ましい。
【００２０】
（３）上部空間（ヘッドスペース）の空気又は酸素での充填
容器の上部空間即ち液体容積上の空間を空気又は酸素で満たすことが別の安定化法である。ここで充填又は覆うとは薬瓶（バイアル）、ビン又は他の密閉容器の空気又は酸素で飽和した液体上の空間からすべての周囲又は大気ガスを押し出す技術を含むものである。その直後に容器を密閉する。
この操作時間は通常約１時間から５時間である。約２ないし３時間が好ましい。
パージ工程で述べたように、７８％より多い窒素を含有するガスの使用は避けねばならない。
【００２１】
これらの３つの技術は各々単独でマロナト結合を融着するカルボプラチン又は他の類似の白金（ＩＩ）薬剤を含む溶液の安定化に用いられる。しかし上記（１）と（２）を一緒に用いること又は（２）と（３）を一緒に用いることが好ましい。
【００２２】
キャリア：
白金（ＩＩ）化合物の溶媒として用いられるキャリアは通常水である。純水（たとえば注射用の滅菌水）が好ましい。
水とある種のポリアルキレングリコール及び糖溶液等の１以上の補助キャリアとの混合物も用いうる。典型的には本発明の溶液中の最終の水含量は約０．５から約９９．５％の範囲であり、グリコール等の補助的キャリアは全キャリア含量に基づき約１０から約９０重量％の濃度で用いられる。
【００２３】
好ましいグリコールは約３００から約９００の分子量をもつポリアルキレングリコールでＣ１−６アルキル基に基づくものである。従ってポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリブチレングリコール等のポリエーテルグリコールが用いうる。
ポリプロピレングリコール及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ−４００）がより好ましい。１５容量％の水と８５容量％のＰＥＧ−４００又は８５容量％のプロピレングリコールとの混合物が最も好ましい。
【００２４】
糖溶液には等張性調節剤として機能するデキストロース、サクロース、マンノースその他の糖の製薬上受け入れられる糖の溶液がある。５％のデキストロース水溶液（「Ｄ５Ｗ」）は最も好ましい補助キャリアの１つである。
【００２５】
本発明の溶液は水性又は非水性濃厚ＲＴＵ型のいずれでも供しうる。従って適量の補助キャリアの使用は任意である。白金化合物の有効性又は安定剤の効果に悪影響を与えない他のキャリアを上記キャリアの一部又は全部のかわりに用いうる。
【００２６】
緩衝剤：
本発明で用いる白金（ＩＩ）化合物は上記（１），（２）又は（３）の１以上の技術を用いるため還元分解を受けにくい。しかしこれら溶液の安定性は、溶液ｐＨを最適範囲に保ちその結果緩衝剤として作用する１以上のｐＨ調節剤の存在により更に高められる。
通常溶液のｐＨは約４と約７の間にあることが好ましい。
カルボプラチン単独の周囲ｐＨは約６．５である。ＣＢＤＣＡを添加するとｐＨが４以下に低下してしまう。それ故塩基性緩衝剤又はｐＨ変性剤を用いてｐＨを上げる必要がある。
【００２７】
通常、緩衝剤はカチオン部が製薬上受け入れられる単純な無機塩基である。ナトリウム、カリウム及びカルシウムの酸化物及び水酸化物が好ましい。水酸化ナトリウムが特に好ましい。
水酸化ナトリウムその他の緩衝剤の最適量はＣＢＤＣＡ／白金（ＩＩ）化合物混合物を約４から約８、好ましくは約５から約７、最も好ましくは約５．５から約６．５の安定ｐＨが得られるまで滴定することにより決めうる。
塩基性添加剤とＣＢＤＣＡの両者の存在が所望の溶液ｐＨを得るために必要であり、ＣＢＤＣＡは緩衝剤と考えられる。しかし、本発明系におけるＣＢＤＣＡの主たる機能はカルボプラチン又は他の白金（ＩＩ）化合物の安定剤としてのものである。
【００２８】
投与：
本発明の処方が用いられる投与量は、たとえばＰｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅに述べられているサウンドメディカルジャッジその他のガイド原理によって通常求めることができる。
通常、本発明の溶液は癌の治療のために動物、好ましくはヒトに投与される。典型的な投与量は約１から約２００ｍｇ／ｋｇ／ドースの範囲で、通常周期的に約１〜約３回投与される。
この溶液は静脈注射に適している。即用濃度（ＲＴＵ）溶液として供給される。これらの濃縮物は注射前に１から６０容量の水その他の適当な稀釈剤で稀釈されるべきである。
注射が好ましい投与法でだが経口その他の他のルートも用いうる。
【００２９】
保存：
白金（ＩＩ）抗腫瘍剤の長期安定性が本発明の第１の目的である。従ってこれらの化合物の分解を促すことが知られた条件の使用は避けるべきである。過度の光、低いｐＨ（４未満）及び高温は避けるべき３つの条件である。
本発明の組成物の約６０℃までの温度での安定性につきここで述べる。試料をテストし２５℃で数週間から１年の期間安定であることがわかった。
高いストレスを受けた溶液で見られるわずかな色変化は通常薬剤力価の安定性や効能の重大な低下を示すものではない。しかしにごっていたり沈澱のある溶液の使用は望ましくない。これらの沈澱粒子は静脈投与を妨害するおそれがある。
【００３０】
【実施例】
次の例は本発明を例証するものである。
例１：  水溶液安定性に対する１，１−シクロブタンジカルボン酸（ＣＢＤＣＡ）濃度の効果
カルボプラチンの安定性に対するＣＢＤＣＡ濃度の効果を５０℃と６０℃で調べた。１０ｍｇ／ｍＬまでのカルボプラチン水溶液を８，４，２，１，０．５，０．２５及び０ｍｇ／ｍＬのＣＢＤＣＡ濃度でつくった。
ＣＢＤＣＡを含有する各溶液のｐＨをＮａＯＨで６．０に調節した。ＣＢＤＣＡなしの各溶液のｐＨは調節しなかった。カルボプラチンの周囲ｐＨは〜６．１であり、５．５から７．０に変わる。
これらの溶液を空気でパージ（バブリング）し、洗浄したＮｏ．０４５１５／００  Ｗｈｅａｔｏｎ  ６ｍＬ薬瓶に、１０ｍＬの使いすてシリンジとＧｅｌｍａｎ  Ｎｏ．４１９２無菌０．２μｍフィルターを用い濾過して注入した。各薬瓶は３ｍｌの溶液を含み約５０％の空気上部空間を残していた。すべての試験薬瓶をＤａｉｋｙｏ  Ｎｏ．７５９フルオロレシン被覆ストッパーで栓をしＷｈｅａｔｏｎ  ２０ｍｍアルミニウム密封部材で密封した。２５℃と４０℃で長期安定性試験（８．５ケ月及び９ケ月）を行った。結果を表に示す。
【００３１】
【表１】
0003629044.tif 000004
【００３２】
【表２】
0003629044.tif 000005
【００３３】
【表３】
0003629044.tif 000006
【００３４】
【表４】
0003629044.tif 000007
【００３５】
【表５】
0003629044.tif 000008
【００３６】
【表６】
0003629044.tif 000009
【００３７】
第２表：カルボプラチンの定量分析用ＨＰＬＣ法
カラム：Ａｌｌｔｅｃｈ  １０ミクロンＮＨ２，４．６×１５０ｍｍ
検出  ：２３０ｎｍ
注入容量：２０ｍｌ
試料濃度：約１ｍｇ／ｍＬ
稀釈剤：Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水
外部標準：約１ｍｇ／ｍＬカルボプラチン
温度  ：３０℃
モービル相：アセトニトリル８５％／Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水１５％
流動速度：２．０ｍＬ／分
操作時間：１５−１８分
典型的保持時間：カルボプラチン１０分
試料を６０℃で１，２，４及び８週間、５０℃で２，４，８及び１６週間保存した。これら試料のデータを第３表及び第４表に示す。
【００３８】
【表７】
0003629044.tif 000010
【００３９】
【表８】
0003629044.tif 000011
【００４０】
【表９】
0003629044.tif 000012
【００４１】
【表１０】
0003629044.tif 000013
【００４２】
カルボプラチンの１０ｍｇ／ｍＬ水溶液に極めて少量のＣＢＤＣＡを加えた場合でも上昇した温度において溶液（ｐＨ約６，〜５０％，空気上部空間）の物理安定性に対し効果を示した。前記表に示したようにＣＢＤＣＡを添加しない溶液は６０℃で４から８週間後、５０℃で１６週間後に色がコハク色ないし褐色になった。褐色の無定形沈澱が認められた。反対に、ＣＢＤＣＡを加えた溶液は色がずっと明るく６０℃で８週間又は５０℃で１６週間沈澱を生じなかった。
添加した最低濃度のＣＢＤＣＡ（０．２５ｍｇ／ｍＬ）でより６０℃での８週間又は５０℃での１６週間の保存中目視できる沈澱形成はなかった。
【００４３】
第３表に示した６０℃４及び８週間データ及び第４表に示した５０℃８週間及び１６週間データから明らかなように、ＣＢＤＣＡ濃度が増加すると色形成の強さが漸進的に低下する。
両温度においてカルボプラチンの化学安定性は存在するＣＢＤＣＡ濃度には影響されないようにみえた。第１表に示したようにＣＢＤＣＡを加えないカルボプラチン溶液のｐＨは検討中低下傾向を示した。しかしＣＢＤＣＡを含有する溶液のｐＨは極めて高い安定性を保持した。これは加えたＣＢＤＣＡが（ＮａＯＨを用いてｐＨを調節したことと相まって）緩衝効果をもつことを示しているといえる。
【００４４】
例２：（ガスでパージした）溶液安定性に対する上部空間ガスの性質の効果
カルボプラチンの水溶液の安定性に対する窒素、酸素及び空気の効果を５０℃及び６０℃で調べた。カルボプラチン溶液はＣＢＤＣＡを１ｍｇ／ｍＬ加えた上１０ｍｇ／ｍＬで調製した。ｐＨは１０Ｎ及び１ＮのＮａＯＨで６．０に調節した対照溶液は１０ｍｇ／ｍＬ（ＣＢＤＣＡを用いず、周囲ｐＨ〜６．４）で調製した。
次いで酸素、空気又は窒素を１時間溶液にバブリングして溶液をガスで飽和させた。パージした溶液をＧｅｌｍａｎ  Ｎｏ．４１９２無菌０．２μｍフィルターを用い、洗浄したＮｏ．０４５１５／００  Ｗｈｅａｔｏｎ  ６ｍＬ薬瓶（３ｍＬ，充填容量５０％）に濾過した。充填後、残った上部空間に各パージガスを充填した。上部空間ガスの損失又は汚染を防止するため薬瓶を直ちにＤａｉｋｙｏ  Ｎｏ．７５９フルオロレシン被覆栓で栓をした。全部の薬瓶をＷｈｅａｔｏｎ  ２０ｍｍアルミニウム密封部材で密封した。試料を６０℃で１，２，４及び８週間、５０℃で２，４，８及び１６週間保存した。
これら試料のデータを第５表及び第６表に示す。
【００４５】
【表１１】
0003629044.tif 000014
【００４６】
【表１２】
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【００４７】
【表１３】
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【００４８】
第５表及び第６表の結果はカルボプラチン水溶液の物理及び化学安定性に対し薬瓶上部空間ガスが顕著な効果をもつことを明瞭に示している。試料の窒素パージによって酸素のカルボプラチンに対する比を低下させた場合６０℃で１−２週間以内に（第５表）、また５０℃で４−１６週間以内に（第６表）沈澱（不溶性分解／転化生成物）が生ずる。
ＣＢＤＣＡを含有する溶液に対し窒素パージし加温下に保存すると高いカルボプラチン力価損失をもたらし、上澄液は（沈澱の結果）無色で残った。これらは白金酸化物と思われる重質で暗黒色の沈澱を含んでいた。
【００４９】
ＣＢＤＣＡを加えず同様に窒素パージ（酸素なし）した溶液は通常、１８ケ月以上より低温（４−３０℃）で保存した溶液中に観察されるオリゴマー混合物と同定される物質と同様のモルホロジーをもつきれいな褐色の無定形沈澱をもたらした。第４表に示すようにＣＢＤＣＡを加えず５０℃で１６週間保存した窒素パージ（酸素なし）した溶液は白金酸化物及び金属白金特有の黒色及び銀色沈澱を生じた。
５０℃及び６０℃で、空気上部空間（ＣＢＤＣＡあり及びなしで薬瓶充填容量〜５０％）をもつカルボプラチン溶液は、対応する窒素パージ（空気なし）した溶液に比し沈澱生成が少なくまたずっと高いカルボプラチン力価保持性を示した。また空気の上部空間をもち１ｍｇ／ｍＬのＣＢＤＣＡを含有するカルボプラチン溶液は、ＣＢＤＣＡ濃度の効果を検討した実験でみられたと同じ色の低下及び沈澱の抑制を示した
【００５０】
酸素パージ試料は加えたＣＢＤＣＡの存否にかかわらず１０ｍｇ／ｍＬカルボプラチン水溶液の物理安定性の効果がある。これは６０℃８週間及び５０℃１６週間でわずかな色形成（即ち麦わら色）及び沈澱形成の抑制を示している第３表及び第４表のデータで裏付けられる。カルボプラチンの力価保持性は１ｍｇ／ｍＬのＣＢＤＣＡの存否いずれの場合も空気パージ溶液と酸素パージ溶液とで同様である。
【００５１】
例３：溶液安定性に対する薬瓶充填容量の効果
カルボプラチン水溶液の安定性に対する薬瓶充填容量（即ち非充填上部空間）の効果を５０℃及び６０℃で調べた。１０ｍｇ／ｍＬのカルボプラチンの溶液を（それぞれＣＢＤＣＡ１ｍｇ／ｍｌを用いて）つくった。ｐＨを１０Ｎ及び１ＮＮａＯＨで６．０に調節した。対照溶液を１０ｍｇ／ｍＬ（ＣＢＤＣＡなし、周囲ｐＨ〜５．７）でつくった。
すべての溶液を１時間空気をパージ（バブリング）して空気を飽和した。パージ後、溶液をＧｅｌｍａｎ  Ｎｏ．４１９２無菌０．２μｍフィルターを用い洗浄したＮｏ．０４５１４／００  Ｗｈｅａｔｏｎ  １０ｍＬ薬瓶（全容量１４ｍＬ）中に濾過した。薬瓶充填容量（即ち全液体容量）は２，４，６，８，１０及び１２ｍｌだった。薬瓶をＤａｉｋｙｏ  Ｎｏ．７５９フルオロレシン被覆栓でとめ、Ｗｈｅａｔｏｎ  ２０ｍｍアルミニウムシールで密封した。試料を６０℃で１，２，４及び８週間後及び５０℃で２，４，８及び１６週間後に分析した。データを第７表及び第８表に示す。より長期間の安定性をもつ試料はより低温（４．２４及び４０℃）に置いた。最初の試料及び安定化した試料を化学的及び物理的に分析した。
【００５２】
【表１４】
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【００５３】
【表１５】
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【００５４】
【表１６】
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【００５５】
【表１７】
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【００５６】
５０℃及び６０℃で１０ｍｇ／ｍＬのカルボプラチン水溶液（ＣＢＤＣＡなし、当初周囲ｐＨ〜５．７）中で形成した沈澱の量は１０ｃｃ薬瓶中に充填した溶液の容量（最大充填容量〜１４ｍＬ）に直接関係した。充填容量が増加すると（相対的に酸素：カルボプラチン比が減少）、色強さ、沈澱量が共に増加した。これはカルボプラチンの安定性が存在する酸素の量（比）に相関し上部空間ガスの安定性に対する効果を示している。
第６表のデータは１０−１２ｍＬの溶液（ＣＢＤＣＡ添加なし）の高い薬瓶充填容量（低い酸素有効量）は６０℃で８週間後にかなりの力価損失をもたらし、黒色及び銀色の沈澱（白金の酸化物及び金属白金と思われる）を生じたことを示している。
【００５７】
５０℃及び６０℃で保存した添加ＣＢＤＣＡなしのカルボプラチン溶液はすべての充填容量で沈澱を生じた（沈澱形成時間は温度が高いか充填容量が大きいほど早くまた存在する量も多い）。極めて高い充填容量（即ち１０−１２ｍＬ）の薬瓶を除き、５０℃及び６０℃で形成した沈澱は褐色の無定形型のオリゴマー混合物が主体だった。分解した多くの試料中に円形のマルタクロス（ｍａｌｔｅｓｅ  ｃｒｏｓｓ）状結晶が観察された。
【００５８】
例４：溶液安定性（空気パージ溶液）に対するｐＨの効果
１０ｍｇ／ｍＬのカルボプラチンの水溶液安定性に対するｐＨの効果を５０℃及び６０℃で調べた。ＣＢＤＣＡを１ｍｇ／ｍＬの温度で各溶液に加えた。溶液のｐＨを１Ｎ及び１０Ｎ  ＮａＯＨを用いて４，５，６，７及び８に調節した。添加ＣＢＤＣＡなしの溶液についてのｐＨの効果は、カルボプラチンを他の化合物に転換せずにｐＨを調節することが困難なので（たとえばＨＣｌを加えるとシスプラチンに転換する）、実験しなかった。
各溶液を１時間空気をバブリングしてパージし、次いでＧｅｌｍａｎ  Ｎｏ．４１９２の０．２μｍ無菌フィルターを用い洗浄したＮｏ．０４５１５／００
Ｗｈｅａｔｏｎ  ６ｍＬ薬瓶に濾過した。各薬瓶にカルボプラチン溶液３ｍｌを充填した８充填容量５０％）。
薬瓶をＤａｉｋｙｏ  Ｎｏ．７５９フルオロレシン被覆栓でとめ、Ｗｈｅａｔｏｎ  ２０ｍｍアルミニウム密封部材で密封した。試料を６０℃で１，２，４及ひ８週間、５０℃で２，４，８及び１６週間保存した。データを第９表に示す。
【００５９】
【表１８】
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【００６０】
【表１９】
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【００６１】
添加ＣＢＤＣＡ１ｍｇ／ｍＬを含むカルボプラチンの１０ｍｇ／ｍＬ水溶液（空気上部空間として薬瓶充填容量〜５０％）の化学及び物理安定性に対するｐＨの効果を第７表に示す。最初のｐＨ（即ちｐＨ４−８）とは独立に、６０℃で８週間、５０℃で１６週間全溶液が透明性と沈澱のない状態を保った。これは物理安定性に対しＣＢＤＣＡの添加が有効であることを示している。
加温下に保存した溶液の色、最も低い初期ｐＨ（ｐＨ４）で最も強かった。初期ｐＨ６−７の試料の色形成が最も小さかった。
化学安定性（カルボプラチン力価保持）はｐＨが４から８に増加するとわずかに低下した（５０℃８及び１６週のデータと６０℃８週のデータが最も明瞭である）。初期ｐＨ４−７の溶液にとって、分解した試料のｐＨは比較的変化しなかった（即ち＜０．５ｐＨ単位変化）。これらの予備検討で得た物理及び化学データから４−７の形成ｐＨが全体の化学及び物理安定性にとって最適であることが分かる。
【００６２】
全体の結果：
ここに示したデータはＣＢＤＣＡと空気又は酸素のパージと容器の上部空間のかなりの量の空気又は酸素（即ち１０容量％から５０容量％又はそれ以上）が満足する化学及び物理安定性をもつ保存性カルボプラチン溶液をもたらすことを示してる。これらの安定性は、溶液が最低限の色形成（一般に、透明、コハク色、黄色又は緑色）を示しまた固体沈澱を全く又は殆ど形成しないことによって裏付けられる。
水酸化ナトリウム、さらに所望によりＣＢＤＣＡでの緩衝化又はｐＨ保持は有効である。カルボプラチン濃度の５−４０％のＣＢＤＣＡ濃度は色と沈澱の生成を抑制する。
本発明の範囲を離れることなく当業者は適宜の変形をなしうる。