(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒドロキソコバラミンを塩酸を加えることによって得られる酸性媒体中で凍結乾燥してなる青酸中毒治療用薬剤組成物であって、凍結乾燥される溶液中のヒドロキソコバラミン濃度が、１００ｍｌにつき１〜５ｇである、前記薬剤組成物。
【請求項２】
ヒドロキソコバラミンが、塩化ナトリウム溶液に再溶解されることを特徴とする、請求項１に記載の青酸中毒治療用薬剤組成物。
【請求項３】
充填剤が添加されていてもよい、塩酸を加えることによって得られる酸性媒体中でヒドロキソコバラミン溶液をその後使用の意図される容器内で凍結乾燥することにより製造する青酸中毒治療用薬剤組成物の製造方法であって、凍結乾燥される溶液中のヒドロキソコバラミンの濃度が、１００ｍｌにつき１〜５ｇの範囲である、前記製造方法。
【請求項４】
酸性媒体のｐＨが、３．５〜５．５の範囲であることを特徴とする、請求項３に記載の製造方法。
【請求項５】
酸性媒体のｐＨが、４．０〜５．０の範囲であることを特徴とする、請求項４に記載の製造方法。
【請求項６】
充填剤が、アルギニン塩酸塩、ラクトース、グリシンまたは酢酸ナトリウムからなる群から選択される１種または２種以上である、請求項３〜５のいずれかに記載の製造方法。
【請求項７】
有機酸のナトリウム塩からなる緩衝剤が加えられることを特徴とする、請求項３〜６のいずれかに記載の製造方法。
【請求項８】
凍結乾燥される溶液中のヒドロキソコバラミンの濃度が、１００ｍｌにつき２〜３ｇであることを特徴とする、請求項３〜７のいずれかに記載の製造方法。
【請求項９】
ヒドロキソコバラミンの水溶液をつくり、塩酸、および適宜充填剤、および／または緩衝剤を調節して加えることによってｐＨを３から５の範囲に合わせ、得られた溶液を凍結乾燥して、ヒドロキソコバラミンを基剤とする青酸中毒治療用薬剤組成物を製造すること、および一方で２０〜１５０ｍｌの容量をもつ食塩水溶液のアンプルを製造することを含む、青酸中毒治療用救急キットの製造方法であって、前記凍結乾燥される溶液中のヒドロキソコバラミンの濃度が、１００ｍｌにつき１〜５ｇの範囲である、前記製造方法。
【請求項１０】
再溶解のために使用される食塩水溶液は、塩化ナトリウム溶液であり、純水１０００に対して９の血漿に等張な溶液である、請求項９に記載の製造方法。
【請求項１１】
ヒドロキソコバラミンを１〜５ｇ含む請求項３〜８により得られる青酸中毒治療用薬剤組成物のバイアル、およびヒドロキソコバラミンを再溶解せしめる食塩水溶液２０〜１５０ｍｌを含むアンプルからなる青酸中毒の治療のための初期の救急キット。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、薬剤分野、およびより特には臨床化学の分野に関する。
【０００２】
【従来の技術】
青酸中毒の致死的効果と闘う薬物は既に公知である。
【０００３】
注射液の形態で提供されるKEROCYANOR（登録商標）は、エデチン酸の二コバルト塩である。エデチン酸の二コバルト塩は、コバルトエデテート-とコバルト++にイオン化し；コバルト++イオンは二つのシアニド-イオンと結合し；さらに二コバルト塩はゆっくりイオン化し、一般的に二つのシアニド-イオンと結合する別のコバルト++イオンを生成する。シアニド−コバルト錯体は非常に安定であり、尿から除かれる。
【０００４】
この医薬品の欠点は、程度の高い毒性を示し、多くの望ましくない効果をおよぼすそれ自体イオン化した形態で存在することである。
【０００５】
青酸による中毒と闘ったり、慢性の過シアン発生症を診断するために、ヒドロキソコバラミン溶液を使用することは既に提案されていた（仏国特許、2,153,156）。
【０００６】
この先行特許において、使用はナトリウムチオスルフェートと一緒にされたすっかりできあがったヒドロキソコバラミン組成物についてなされた。これらの組成物は急性治療には静脈投与、そして慢性治療には筋肉内投与が意図された。
【０００７】
そこで記載されている用量は、３０，０００μｇにもなる極めて高いヒドロキソコバラミンの用量を投与する可能性を与えている。これら抗シアニドキットは、従ってかなりの量のヒドロキソコバラミンを要求した。さらに、ナトリウムチオスルフェートとの組み合わせは、系全体に十分な安定性を与えず、ナトリウムチオスルフェートは特に還元性で且つアルカリ性の物質である。
【０００８】
青酸中毒の治療のためのＮａ2Ｓ2Ｏ3とヒドロキソコバラミンの組み合わせも公知である（“ケミカルアブストラクト”６４巻、１９６６、コラム１４  ８４９、ａ−ｄ）。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の課題は、前記の従来技術における欠点のない、青酸中毒の治療において役立つヒドロキソコバラミンの新規投与形態を発見することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、食塩水溶液、好ましくは生理食塩水溶液に使用時再溶解される凍結乾燥形態のヒドロキソコバラミンを有する新規医薬組成物を提供することにより従来の問題点を克服することを可能にする。
【００１１】
生理食塩水溶液は、酸化されず、および還元されず、アルカリ性でないから中性であるので安定であるという利点をもち、さらに凍結乾燥製造物を実際にすぐ溶かす。
【００１２】
これらの性質は、ヒドロキソコバラミン安定性の範囲が比較的せまいので重要であり、アルカリ溶液、還元溶液および酸化溶液はヒドロキソコバラミンを分解し、その性質を失わせる。
【００１３】
凍結乾燥形態は数多くの利点を有し、弱酸性の媒体中でなされると実質的にすぐ再溶解するのみならず無期限の保存を可能にする。
【００１４】
ヒドロキソコバラミンは当然アルカリ性ｐＨを有しているが、ヒドロキソコバラミンの安定性は酸性ｐＨの方がよい。
【００１５】
種々の局方のモノグラフ“ヒドロキソコバラミン注射剤”のみならず文献学的情報は、ヒドロキソコバラミン溶液が特に保護物質（アミノ酸）の添加により安定化されることを示している。
【００１６】
すべての場合において、ｐＨは３．５〜５の値に設定されるが、ヒドロキソコバラミン塩基溶液は９に近かいｐＨを有する。
【００１７】
本発明は、したがって安定な凍結乾燥ヒドロキソコバラミン製造物が若干酸性、好ましくは３．５から５．５の間である水溶液から出発して凍結乾燥を行うことによって得られる。最適ｐＨ領域は４．０から５．０の範囲である。
【００１８】
酸性ｐＨは、ヒドロキソコバラミン溶液に、例えば、塩酸、硫酸または酢酸等の強無機酸または強有機酸を計算量加えることによって得られる。
【００１９】
ヒドロキソコバラミン塩基溶液を塩酸で酸性にすることが分子の活性点をふさがないか、および活性点がＯＨ-⇔ＣＮ-交換力を保持しているかを調べることが必要であった。
【００２０】
シアン化試験が行われ、導入されたすべてのシアニドイオンはくっつくことを示した。
【００２１】
凍結乾燥をするためには、水溶液に例えばアルギニン塩酸塩、ラクトース、グリシンまたは酢酸ナトリウム等の中性不活性物質を加えることが必要である。
【００２２】
例えば有機酸のナトリウム塩のような緩衝剤もヒドロキソコバラミン水溶液に加えられる。
【００２３】
本発明の好ましい態様によれば、凍結乾燥される溶液は塩酸のみを含有し、この場合、凍結乾燥丸薬は完全に均一である。
【００２４】
酸性媒体中での凍結乾燥は分解を防ぎ、結果としてより純粋で、より安定な製造物を与える。
【００２５】
凍結乾燥される溶液中のヒドロキソコバラミンの濃度は、１００ｍｌにつき１．０〜５．０ｇ、好ましくは２．０〜３．０ｇの範囲である。
【００２６】
本発明は、またヒドロキソコバラミンの水溶液をつくり、無機酸または有機酸、および適宜充填剤、および／または緩衝剤を調節して加えることによってｐＨを３から５の範囲に合わせたり、それから凍結乾燥を行ったり、そしてさらに２０〜１５０ｍｌの容量をもつ食塩水溶液のアンプルを製造することからなるヒドロキソコバラミンを基剤とする薬剤組成物の製造方法を含む。再溶解のために使用される食塩水溶液は、好ましくは塩化ナトリウム溶液であり、特に純水１０００に対して９の血漿に等張な溶液である。
【００２７】
本発明の主題は、一方で、ヒドロキソコバラミンを１．０〜５．０ｇのヒドロキソコバラミンを含む凍結乾燥製造物のバイアル、およびヒドロキソコバラミンを再溶解せしめる食塩水溶液２０〜１５０ｍｌを含むアンプルからなる青酸中毒の治療のための初期救急キットでもある。
【００２８】
これらのキットは、完全な安定性を示し、従って長期間医薬棚で保存できる。
【００２９】
本発明の主題はまた、ヒドロキソコバラミン水溶液の再構成された内容物を、経静脈的に投与することにある、急性または慢性青酸中毒の治療のためのヒドロキソコバラミンを基剤とするキットの使用でもある。
【００３０】
【実施例】
0003699223.tif 000002
【００３１】
0003699223.tif 000003
溶液ｆ）、ｇ）およびｈ）は、二つに分けられ、各半分が酸性にされた。
ｉ）前記処方がくりかえされるが、ヒドロキソコバラミン２．５ｇを含む２５０ｍｌ灌流バイアルでくりかえされる。
ヒドロキソコバラミン塩基            ２．５ｇ
塩酸  ０．１Ｎ  適量                ｐＨ＝４．０
注射用水  適量                      １００．０ｍｌ
【００３２】
実施例２
生理食塩水中の凍結乾燥製造物の溶解度
１）  方法
凍結乾燥製造物（約２．５ｇ）を含むバイアルに生理食塩水１２５ｍｌを加える。
バイアルを正確に３０秒激しく振る。
溶液を直ちに０．４５μｍの孔と４７ｍｍの直径（SARTORIUS ref.11106）をもつセルロースアセテート膜でろ過する。
膜を通してから（底の面を吸着フィルター紙の上に置く）、そこに存在する粒子を顕微鏡で確かめる。また、溶解が完全であることを検査するためにバイアルの壁を確かめる。
それから集められた粒子をもつフィルターをＨＰＬＣ分析に使用される移動相２５．０ｍｌを含むビーカーに入れる。
フィルターをすばやく浸けて、存在する粒子を脱着するか、溶解するために撹拌する。得られる溶液をＨＰＬＣ用に注入する。
【００３３】
２）  実施試験
二つの試験が行われ、
−  １バイアルの凍結乾燥製造物＋実験室の温度（２１°Ｃ）で保存された生理食塩水１２５ｍｌ
−  １バイアルの凍結乾燥製造物＋使用前冷蔵庫（＋５°Ｃ）で保存された生理食塩水１２５ｍｌ。
【００３４】
３）  結果
空のバイアルを眼で確かめることが、試験された二つの温度条件に対してバイアルの壁に溶解していない粒子は存在しないことを観察せしめる。
膜の顕微鏡観察は、いくつかの無色結晶および一つまたは二つのピンク色の結晶を見ることを可能にする。結果は二つの温度条件で似ている。
フィルター（残渣をできるだけ集めて）を浸けるのに使われた溶液のＨＰＬＣ分析は、見い出されたヒドロキソコバラミンの量はバイアル中に存在する量のせいぜい０．０３％を表わすことを示す。結果は二つの保管条件で似ている。このパーセンテージは、事実フィルターに浸み込んでいる溶液でもたらされた溶解ヒドロキソコバラミンおよび多分不溶のヒドロキソコバラミンを含んでいる。
【００３５】
実施例３
注入の継続している間の再構成後の溶液の安定性
１）  操作条件
ａ）  溶液の生成
・  実験室温度と光にさらした試験
ヒドロキソコバラミン２．５ｇを含む凍結乾燥製造物のバイアルを開ける。
純水中１０００に対して９の塩化ナトリウム溶液１２５ｍｌを加える。
３０秒間手で激しく振る。
メスピペットを用いて、得られた溶液５．０ｍｌを１００ｍｌのメスフラスコに入れる。クロマトグラフィーに使用される移動相で必要な容量にする。この溶液をすぐにＨＰＬＣ（時間ゼロ（Ｔ０）での分析）のために注入する。
再構成された溶液を含むバイアルを、日光と室温（２０〜２２°Ｃ）のもと、実験室の窓の前の棚の上に置く。実験室はまたネオン形ランプで照明されている。
再構成された溶液を上記条件の下、２時間、４時間、６時間および８時間保管してから、バイアルからサンプルを集め、サンプルを時間Ｔ０での最初の分析で示されたように直ちにＨＰＬＣで分析する。
【００３６】
・  ３６６ｎｍのＵＶランプにさらした試験
実験室温度と光にさらした試験で示された手法を行い、再構成された溶液を３６６ｎｍのＵＶランプの下で保管する。
時間Ｔ０および３６６ｎｍのＵＶの下１時間、３時間および５時間保管した後、サンプルを集める。
【００３７】
ｂ）  クロマトグラフィー分析
未変化ヒドロキソコバラミンのピーク面積および時間ゼロおよび保管後の再構成された溶液中の関連物質の量をＨＰＬＣによって決める。
【００３８】
１）  結果
凍結乾燥製造物（１０００に対して９のＮａＣｌ溶液１２５ｍｌと一緒にしたヒドロキソコバラミン塩基約２．５ｇ）のバイアルの再構成後に得られるヒドロキソコバラミン溶液を種々の保管時間経過後集められたサンプルについて行われたＨＰＬＣ分析の詳細な結果を示す。
・  表  １：  大気中での実験室温度と光の条件下に保管された再構成溶液について。
・  表  ２：  ３６６ｎｍのＵＶランプの下での再構成溶液について。
【００３９】
再構成溶液で測定された関連物質の量の絶対値は完全に正確というわけではない。それは正確な最終容量１２５ｍｌに対して計算される。しかし、それは同じ溶液の全保管期間で似ている。
ヒドロキソコバラミン溶液の安定性を評価するために、以下のことを考慮すべきである。
・  時間Ｔ０で同じ溶液について測定されたヒドロキソコバラミンのピーク面積と比較された各保管時間で測定されたヒドロキソコバラミンのピーク面積の変化；
・  時間Ｔ０で同じ溶液ついて測定された関連物質の量と比較された各保管中に測定された関連物質の量の変化。
【００４０】
保管中に見られる未変化ヒドロキソコバラミン量の変化：
８時間実験室の温度と光の条件下に再構成溶液を保管した後、および５時間３６６ｎｍのＵＶランプの下で保存した後、なんら有意な減少が時間Ｔ０で再構成溶液ついて行われた分析と比較したヒドロキソコバラミンのピーク面積において観察されない。
ヒドロキソコバラミン含量の減少があるとしても、減少は低く、分析方法の精度内でＨＰＬＣにより検出されるほどではない。
【００４１】
保管中のヒドロキソコバラミン関連物質量の変化：
ヒドロキソコバラミン関連物質量の増加は、８時間大気中での実験室温度と光の条件下に保管した後、および５時間３６６ｎｍのＵＶランプの下で保管した後、非常に限られていて、約１パーセントである。
【００４２】
【表１】
表１
再構成物の日光照射後のヒドロキソコバラミンおよび関連物質の試験
0003699223.tif 000004
【００４３】
【表２】
表２
再構成物の３６６ｎｍＵＶランプ照射後のヒドロキソコバラミンおよび関連物質の試験
0003699223.tif 000005
【００４４】
３）  結論
本研究の結果は、投与のために選ばれた１０００に対して９の塩化ナトリウム水溶液で再構成された凍結乾燥ヒドロキソコバラミン製造物がゆっくりした注入によって凍結乾燥製造物のバイアルを投与するために必要な時間を実質的にみたす間、十分安定であることを示している。
３６６ｎｍのＵＶランプの下で行われた保管試験は、光の因子が注入による製造物の投与のために必要な間、ヒドロキソコバラミン溶液の保管に対してそれほど厳密な要素ではないことを確かめている。