(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
イネばか苗病及びイネ苗立枯細菌病の防除に有効な、イネに対して病原性を有しないフザリウム・オキシスポラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）ＳＮＦ−３５６菌（受託番号ＦＥＲＭ  Ｐ−１６２８０）。
【請求項２】
請求項１に記載の微生物を有効成分として含有すること、を特徴とするイネばか苗病及び／又はイネ苗立枯細菌病の防除剤。
【請求項３】
請求項２に記載の病害防除剤を用いてイネ種子及び／又は土壌を処理すること、を特徴とするイネばか苗病及び／又はイネ苗立枯細菌病の防除方法。
【請求項４】
イネに対して病原性を有しないフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属に属する微生物であって、フザリウム・アクミナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ａｃｍｉｎａｔｕｍ）、フザリウム・アベナセアム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ａｖｅｎａｃｅｕｍ）、フザリウム・カルモラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｃｕｌｍｏｒｕｍ）、フザリウム・グラミネアラム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）、フザリウム・ニバーレ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｎｉｖａｌｅ）、フザリウム・ソラニ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉ）、のいずれかに属する菌から選ばれる少なくともひとつを有効成分として含有すること、を特徴とするイネばか苗病の防除剤。
【請求項５】
請求項４に記載の病害防除剤を用いてイネ種子及び／又は土壌を処理すること、を特徴とするイネばか苗病の防除方法。
【請求項６】
イネに対して病原性を有しないフザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）属に属する微生物であって、フザリウム・アクミナタム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ａｃｍｉｎａｔｕｍ）、フザリウム・アベナセアム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ａｖｅｎａｃｅｕｍ）、フザリウム・ニバーレ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｎｉｖａｌｅ）、フザリウム・ソラニ（Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉ）、のいずれかに属する菌から選ばれる少なくともひとつを有効成分として含有すること、を特徴とするイネ苗立枯細菌病の防除剤。
【請求項７】
請求項６に記載の病害防除剤を用いてイネ種子及び／又は土壌を処理すること、を特徴とするイネ苗立枯細菌病の防除方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、イネに対して病原性を示さないフザリウム属に属する微生物、及びそれを用いるイネの病害防除システムに関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
わが国の農業は就農人口の低下により農作業の機械化など、より省力的な作業技術が求められている。種子消毒による病害防除作業の軽減も省力化の一手法として近年定着してきている。機械移植のための箱育苗が普及するとともにイネ幼苗の病害による被害はわが国の重要な問題となっており、種子消毒はイネ栽培において重要な作業の一つとなっている。フザリウム・モニリホルメ（Fusarium moniliforme）に起因するイネばか苗病、ピリキュラリア・オリゼ（Pyricularia oryzae）に起因するイネいもち病、コクリオボラス・ミアベアナス（Cochliobolus miyabeanus）に起因するイネごま葉枯病、シュードモナス・グルメ（Pseudomonas glumae）に起因するイネもみ枯細菌病、シュードモナス・プランタリ（Pseudomonas plantarii）に起因するイネ苗立枯細菌病、シュードモナス・アベナエ（Pseudomonas avenae）に起因するイネ褐条病はイネの重要病害として知られている。これらの病害は種子感染により発病することが知られており、病害防除のための薬剤による種子消毒はイネ栽培において重要な作業の一つとなっている。イネばか苗病防除剤としてベンズイミダゾール系薬剤が長い間主要な薬剤であったが、ベンズイミダゾール系薬剤耐性菌の出現により、現在ではイミダゾール及びトリアゾール系化合物のエルゴステロール生合成阻害剤が主要な防除剤として使用されている。また、イネ細菌病に対してはオキソリニック酸剤や水酸化第二銅など各種薬剤による種子消毒が挙げられる。しかしながら、イネ科作物の重要病害であるイネばか苗病、イネいもち病、イネごま葉枯細菌病、イネ苗立枯細菌病及びイネ褐条病を同時に防除する薬剤は無く、各々に効果を示す薬剤の混合剤によって防除を行っているのが現状である。
【０００３】
一方、近年になって、化学農薬からより環境への安全性が高いと想定される微生物の利用（いわゆる生物農薬）も提案され、一部は実用化段階に達してきている。
【０００４】
イネ科作物の病害防除においても、生物農薬に関する研究が行われるようになり、例えば特開平５−６５２０９には、弱病原性フザリウム・モニリホルメの分生胞子懸濁液がイネ馬鹿苗病に対して防除効果を示すことが開示されている。
しかしながら、フザリウム・オキシスポラムはイネ馬鹿苗病に対して全く防除効果を示さなかったことが、同公報の実施例１において実験データをもって明記されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
前記したように、合成殺菌剤による病害防除は耐性菌の出現によって防除効果が低下する可能性が高く、その場合新たなる殺菌剤の開発を必要とする。さらに、従来の種子消毒剤では使用済み廃液を処理しなければならないという問題がある。
【０００６】
本発明は、このような問題を解決し、化学殺菌剤による防除に代わる手段、あるいは併用する手段として新しい生物農薬、しかも一種の微生物による各種イネ病害の同時防除を可能とする生物農薬を開発する目的でなされたものであり、本発明は、省資源、省力化、環境保全等につながるものである。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、上記目的を達成するために各方面から検討したが、目的とする微生物をスクリーニングするには至らなかった。
そこで発想の転換を行い、従来、イネの馬鹿苗病に対しては全く防除効果を示さなかったことが明らかにされ、イネの病害防除剤には使用不可能とされていたフザリウム・オキシスポラムにあえて着目した。
【０００８】
そして本発明者らは、フザリウム・オキシスポラムについての研究の課程において、フザリウム属菌について鋭意検討した結果、本発明者らは、病原性のないフザリウム菌（Fusarium）が細菌および糸状菌による種子伝染性病害に防除効果を有することを見出し、イネに病原性のないフザリウム属菌を選抜し、イネ幼苗の重要病害であるイネばか苗病、イネいもち病、イネごま葉枯病、イネ苗立枯細菌病、イネもみ枯細菌病、イネ褐条病及びイネ苗立枯病に対する防除効果について検討した。検討の結果、これらの菌株が各病害に対して高い防除効果を有することを見出し、本発明を完成するに至った。また、本発明では、各種野菜に病原性を示すサラダナ根腐病菌、メロンつる割病菌、トマト萎ちょう病菌、キュウリつる割病菌、ダイコン萎黄病菌などのフザリウム属菌もイネ幼苗の重要病害に対して防除効果を有することから、紫外線、放射線、化学薬品等で変異させて病原性を消失させた菌株も、イネの各種病害を防除することができ、病原性がない限り、本発明の菌株に包含される。
【０００９】
すなわち本発明は、フザリウム属（Fusarium）に属し、イネに対して病原性のない生菌体を用いてイネの病害を防除するシステムを基本とし、更に具体的には、本発明は、イネに対して病原性のない微生物フザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、フザリウム・ソラニ（Fusarium solani）、フザリウム・アクミナタム（Fusarium acuminatum）、フザリウム・アベナセアム（Fusarium avenaceum）、フザリウム・カルモラム（Fusarium culmorum）、フザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）、フザリウム・ニバーレ（Fusarium nivale、別名Micronectriella nivale）から選ばれる少なくともひとつの生菌体をイネの種子または育苗土壌に処理することにより育苗時の重要病害であるイネばか苗病、イネいもち病、イネごま葉枯病、イネ苗立枯細菌病、イネもみ枯細菌病、イネ褐条病及びイネ苗立枯病の少なくともひとつを防除する方法に関するものである。
【００１０】
本発明の微生物としては、上記したように、フザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum）、フザリウム・ソラニ（Fusarium solani）、フザリウム・アクミナタム（Fusarium acuminatum）、フザリウム・アベナセアム（Fusarium avenaceum）、フザリウム・カルモラム（Fusarium culmorum）、フザリウム・グラミネアラム（Fusarium graminearum）、フザリウム・ニバーレ（Fusarium nivale、別名Micronectriella nivale）に属し、イネに病原性を示さない微生物であればすべての微生物が単用又は併用できる。そのうちでも特に好ましい菌株ととしては、発明者らがトマト根圏土壌より分離したフザリウム・オキシスポラム（Fusarium oxysporum） SNF-356 が例示される。本菌株は、下記１）〜４）の性質を有するものであって、Fusarium oxysporum SNF-356として表示され既に工業技術院生命工学工業技術研究所にＦＥＲＭ  Ｐ−１６２８０として寄託されている。
【００１１】
１）培地上での性質
ＰＤＡ培地（ポテトデキストロース）上及びツァペック培地（ＮａＮＯ3 ２．０ｇ、Ｋ2ＨＰＯ4 １．０ｇ、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ  ０．５ｇ、ＫＣｌ  ０．５ｇ、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ  ０．０１ｇ、ショ糖３０ｇ、寒天１５ｇ、蒸留水１０００ｍｌ）上での菌糸伸長は早く、綿毛状の気中菌糸を僅かに生じ、培養子座は軟質である。ＰＤＡ培地上では桃色〜紫色の色素を培地中に生産する。
【００１２】
２）形態的性質
小型分生胞子は、隔壁を有する菌糸から生じる隔壁のない短い小梗（phialide）上に擬頭状をなして形成される。形は長楕円または卵型で、０〜１隔壁、大きさは２〜４×６〜１１μｍ（平均３．５×８μｍ）である。
大型分生胞子は、主にオレンジ色に着色した分生子座（Sprodochia）のモノフィアライド上に形成される。３〜５隔膜、３隔膜が主体であり、頂部は僅かにかぎ状に湾曲し、基部は踵状の形態を呈する。大きさは４〜６×４０〜５５μｍ（平均５×５０μｍ）である。
原膜胞子は菌糸上或るいは大型分生胞子上に形成され、大きさは直径７〜１２μｍである。
【００１３】
３）生理学的性質
生育温度は１０〜３５℃であり、最適温度は２５〜３０℃である。ｐＨ４．０〜８．０の間で生育可能であり、最適ｐＨは６．０〜７．０である。
【００１４】
４）イネに対する病原性
イネ種子を分生胞子懸濁液１．０×１０7個／ｍｌに２４時間浸漬後、浸種し、播種しても全く徒長苗及び腐敗症などを生じず、病原性が認められない。
【００１５】
本発明で用いる非病原性フザリウム属菌としては、フザリウム属菌自体のほか、その懸濁液ないし培養液、又はその処理物（濃縮物、ペースト状物、乾燥物、希釈物等）を広く包含するものである。イネの病害防除剤として用いる場合には、非病原性フザリウム属菌の菌体又は培養液を単独で用いてもよいが、通常は、担体、界面活性剤、分散剤または補助剤等を配合して常法により例えば、粉剤、水和剤、乳剤、フロアブル剤、粒剤などの形態に製剤化して使用すると更に好ましい。好適な担体としては、例えばクレー、タルク、ベントナイト、珪藻土、ホワイトカーボン、カオリン、バーミキュライト、消石灰、珪砂、硫安、尿素等の固体担体が挙げられ、界面活性剤及び分散剤としては、例えばアルキルベンゼンスルホン酸金属塩、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、アルキル硫酸ナトリウム、アルキルナフタレンスルホン酸ナトリウム、ジナフチルメタンジスルホン酸ナトリウム、リグニンスルホン酸ナトリウム等が挙げられる。補助剤としては、例えばカルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、アラビアゴム、澱粉、乳糖等が挙げられる。
【００１６】
これらの製剤は、病原菌に感染したイネ種子に粉衣、浸漬処理を行うか、または播種時あるいは発芽時に土壌、特に育苗土壌に処理することにより、発病苗が著しく減少し、優れた防除効果を示す。また、製剤の剤型、適用方法、適用場所、適用すべき病害の種類、所望の防除効果などに応じて使用量や希釈量は適宜選定されるが、粉剤、粒剤あるいは水で希釈する製剤の場合は、非病原性フザリウム属菌の胞子濃度が、１０2〜１０8程度、好ましくは１０4〜１０8の範囲で使用するのが望ましい。
【００１７】
本発明で用いる非病原性フザリウム属菌としては、液体培養等の公知の手段で増殖させたものを用いればよく、菌体が増殖するのであれば、特に培地に種類、培養条件等に制限されることはない。菌懸濁液あるいは生菌製剤の場合とも、病原菌に感染したイネ種子に粉衣、浸漬処理を行うか、または播種時あるいは発芽時に土壌、特に育苗土壌に処理することにより、発病苗が著しく減少し、優れた防除効果を示す。本菌の使用濃度に格別の限定はないが、例えば胞子懸濁液の場合、１０3ｃｆｕ／ｍｌ以上、好ましくは１０5ｃｆｕ／ｍｌ以上とするのがよい。
【００１８】
以下、本発明の実施例について述べる。
【００１９】
【実施例１：粉剤】
非病原性フザリウム属菌培養液１重量部、珪藻土１重量部及びクレー１重量部を均一に混合乾燥後、粉砕して粉剤とした。
【００２０】
【実施例２：水和剤】
非病原性フザリウム属菌培養液４０重量部、珪藻土４０重量部、クレー４０重量部及びジナフタレンジスルホン酸ナトリウム１重量部を混合乾燥後、粉砕して水和剤とした。
【００２１】
【実施例３：粒剤】
非病原性フザリウム属菌培養液３０重量部、リグニンスルホン酸ナトリウム１重量部、カルボキシメチルセルロース２重量部及びクレー９０重量部を均一に混合粉砕する。この混合物を、押出式造粒機を用いて１４〜３２メッシュの粒状に加工した後、乾燥して粒剤とした。
【００２２】
【実施例４】
下記表１に示したイネに病原性を示さないフザリウム（Fusarium）属に属する各菌株を供試菌とし、これらの菌株をＰＤ液体培地あるいはＰＤＡ平板培地上で３〜１４日間培養し、得られたｂｕｄ  ｃｅｌｌあるいは分生胞子より胞子懸濁液を調製した。この胞子懸濁液あるいは実施例２で作製した９０−２９１株およびＳＮＦ−３２６株の水和剤を２０倍希釈したものにイネの品種、短銀坊主の開花期にイネばか苗病菌を接種し、収穫したばか苗病罹病籾を２４時間浸漬した後、水に浸種し催芽した。播種後３〜４葉期の頃、発病の有無を調査し、防除効果を判定した。得られた結果を下記表１に示した。なお、供試菌の胞子濃度は１．０×１０5ｃｆｕ／ｍｌとし、菌株ＳＮＦ−３５６は寄託菌（ＦＥＲＭ  Ｐ−１６２８０）である。なお、水和剤は製造直後のものを使用した。
【００２３】
【表１】
0003717673.tif 000002
【００２４】
上記結果から明らかなように、無処理区と比較して、いずれのフザリウム属菌も、イネばか苗病に対して明らかな発病抑制効果を示した。また、フザリウム属菌の培養液を用いて調製した製剤においても同様の発病抑制効果が認められた。
【００２５】
【実施例５】
下記表２に示したイネに病原性を示さないフザリウム（Fusarium）属に属する各菌株をＰＤ液体培地で３日間培養し、得られたｂｕｄ  ｃｅｌｌよりｂｕｄ  ｃｅｌｌ懸濁液を調製した。このｂｕｄ  ｃｅｌｌ懸濁液に、イネの品種、短銀坊主の開花期にイネばか苗病菌を接種し、収穫したばか苗病罹病籾を２４時間浸漬した後、水に浸種し催芽した。播種後３〜４葉期の頃、発病の有無を調査し、防除効果を判定した。得られた結果を下記表２に示した。なお、供試菌の胞子濃度は１．０×１０5ｃｆｕ／ｍｌとし、菌株ＳＮＦ−３５６は寄託菌（ＦＥＲＭＰ−１６２８０）である。
表中、各供試菌の学名は次のとおりである。
サラダナ根腐病菌：Fusarium oxysporum f. sp lactucae
メロンつる割病菌：Fusarium oxysporum f. sp melonis
キュウリつる割病菌：Fusarium oxysporum f. sp cucumerinum
ダイコン萎黄病菌：Fusarium oxysporum f. sp raphani
トマト萎ちょう病菌：Fusarium oxysporum f. sp lycopersici
【００２６】
【表２】
0003717673.tif 000003
【００２７】
上記結果から明らかなように、無処理区と比較して、いずれのフザリウム属菌も、イネばか苗病に対して明かな発病抑制効果を示した。
【００２８】
【実施例６】
下記表３に示したイネに病原性を示さないフザリウム属菌をＰＤ液体培地或いはＰＤＡ平板培地上で３〜１４日間培養し、得られたｂｕｄ  ｃｅｌｌ懸濁液を調製した。この胞子懸濁液あるいは実施例２で作製した９０−２９１株およびＳＮＦ−３２６株の水和剤を２０倍希釈したものに、イネの品種、日本マサリの開花期にイネ苗立枯細菌病菌を接種し、収穫した苗立枯細菌病罹病籾を２４時間浸漬した後、水に浸種し催芽した。播種後３〜４葉期の頃、発病の有無を調査し、防除効果を判定した。得られた結果を下記表３に示した。なお、供試菌の胞子濃度は１．０×１０6ｃｆｕ／ｍｌとし、菌株ＳＮＦ−３５６は寄託菌（ＦＥＲＭＰ−１６２８０）である。なお、水和剤は製剤直後のものを使用した。
【００２９】
【表３】
0003717673.tif 000004
【００３０】
上記結果から明らかなように、無処理区と比較して、いずれのフザリウム属菌も、イネ苗立枯細菌病菌に対して明らかな発病抑制効果を示した。また、フザリウム属菌の培養液を用いて調製した製剤においても同様の発病抑制効果が認められた。
【００３１】
【実施例７】
下記表４に示したイネに病原性のないフザリウム属菌をＰＤ液体培地或いはＰＤＡ平板培地上で３〜１４日間培養し、得られたｂｕｄ  ｃｅｌｌ或いは分生胞子より胞子懸濁液を調製した。この胞子懸濁液に、イネの品種、短銀坊主の開花期にイネばか苗病菌を接種し、収穫したばか苗病罹病籾を２４時間浸漬した後、水に浸種し催芽した。播種後３〜４葉期の頃、発病の有無を調査し、防除効果を判定した。
なお、ＭＡＦＦは、微生物遺伝資源、すなわち、農業生物資源研究所試験研究用微生物遺伝資源の株番号を示し、ＭＡＦＦ番号が付された菌株については、農林水産省  農業生物資源研究所長より試験研究用として、広く、一般に配布されている。
【００３２】
【表４】
0003717673.tif 000005
【００３３】
上記結果から明らかなように、無処理区と比較して、何れのフザリウム属菌も、イネばか苗病に対して明らかな発病抑制効果を示した。
【００３４】
【実施例８】
下記表５に示したイネに病原性のないフザリウム属菌をＰＤ液体培地或いはＰＤＡ平板培地上で３〜１４日間培養し、得られたｂｕｄ  ｃｅｌｌ或いは分生胞子より胞子懸濁液を調製した。イネの品種、日本マサリの開花期にイネ苗立枯細菌病菌を接種し、収穫した苗立枯細菌病罹病籾を２４時間浸漬した後、水に浸種し催芽した。播種後３〜４葉期の頃、発病の有無を調査し、防除効果を判定した。
【００３５】
【表５】
0003717673.tif 000006
【００３６】
上記結果から明らかなように、無処理区と比較して、何れのフザリウム属菌も、イネ苗立枯細菌病に対して明らかな発病抑制効果を示した。
【００３７】
【発明の効果】
本発明に係るフザリウム属菌は、イネに対して病原性もなく、また病害防除方法は、イネばか苗病、イネいもち病、イネごま葉枯病、イネ苗立枯細菌病、イネもみ枯細菌病、イネ褐条病及びイネ苗立枯病に対して高い防除効果を示すことから、同時防除も可能となり、農業生産に有利である。