(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
０．５ｍｇ／ｍＬ以上の濃度でカルシトニンを含有する液剤において、クエン酸、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及びポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の何れ一種又は複数種の凝集抑制剤の添加によりカルシトニンの凝集を抑制する方法。
【請求項２】
液剤中の凝集抑制剤の濃度が、クエン酸では０．０５〜５％（Ｗ／Ｖ）、ポリビニルアルコールでは０．００１〜１０％（Ｗ／Ｖ）、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルでは０．００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、そしてポリオキシエチレン硬化ヒマシ油では０．００１〜１％（Ｗ／Ｖ）である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
経鼻投与剤である、請求項１又は２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は安定なカルシトニン医薬組成物及びその製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決すべき課題】
カルシトニンは、骨粗鬆症における疼痛改善、高カルシウム血症、ページェット病等の治療に用いられる、種々の薬理活性を有するポリペプチドホルモンである。カルシトニンは、通常は注射による投与が行われているが、疾患によっては長期間の連続投与が必要であり、注射以外の簡便な投与製剤が望まれている。経鼻投与もその方法のひとつであるが、その場合、一回の投与量は０．２ないし０．３ｍｌ以下が望ましく、液量が多いと鼻腔から漏出して有効に投与できない。
【０００３】
従って、有効な治療量を投与するためには、比較的高濃度の薬液が必要である。例えば、ヒトカルシトニンでは、望ましくは０．５ｍｇ／ｍｌ以上の薬液を調製する必要がある。しかし、カルシトニンは溶液中では凝集し易く、特に振盪のようなメカニカルストレスにより容易に凝集がおこる。また、濃度が高いほど不安定であり、治療に望ましいカルシトニン濃度の溶液を安定に調製することは困難である。
【０００４】
薬液が凝集により白濁沈澱を生じると均一な投与を不可能にし、また、鼻粘膜からの吸収は著しく阻害される。一般に蛋白質、ペプチドの凝集防止にはゼラチン、アルブミン、一部の界面活性剤等が報告されているが、局所刺激性が少なく、実用的でかつ安定なカルシトニン医薬組成物及びカルシトニン溶液を調製することは不可能であった。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは、医用への使用に許容される各種添加剤によるカルシトニン溶液の安定化を鋭意検討した結果、ある種の添加剤を配合することによって、治療に望ましい濃度の、安定でかつ吸収の良好なカルシトニン医薬組成物及びカルシトニン溶液を調製できることを見出し、本発明に至ったものである。
【０００６】
即ち、本発明は、安定なカルシトニン医薬組成物及びカルシトニン溶液の製造法に関するものであり、安定化剤としてクエン酸、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、を一種又は複数含有することを特徴とする。
【０００７】
これらの安定化剤（特にクエン酸）は単独で使用しても効果が認められるが、好ましくは、（１）クエン酸、並びに（２）ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及び、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油の何れか一種又は複数を含有することが望ましく、更に好ましくはこれらの組み合わせのうち、例えば、クエン酸とポリビニルアルコール、クエン酸とポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、又はクエン酸とポリオキシエチレン硬化ヒマシ油をそれぞれ組み合わせること等が望ましい。これらの安定化剤をカルシトニン医薬組成物又はカルシトニン溶液に加えることにより更に安定化の効果が認められる。
【０００８】
本発明で用いるクエン酸は、薬液に対して、通常０．０５〜５％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．１〜２％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
ポリビニルアルコールは、酢酸ビニルをラジカル重合して得られる合成高分子であり、薬液に対して、通常０．００１〜１０％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．０１〜５％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、ソルビタン脂肪酸エステルに酸化エチレンを付加重合させた非イオン性界面活性剤であり、例えばポリソルベート−４０、ポリソルベート−６０、ポリソルベート−８０等が挙げられる。
【０００９】
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、薬液に対して、通常０．００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．００５〜０．５％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油は、ヒマシ油に水素を添加して得た硬化油に、酸化エチレンを付加重合させた非イオン性界面活性剤であり、例えばニッコールＨＣＯ−１０、ニッコール  ＨＣＯ−４０、ニッコール  ＨＣＯ−５０、ニッコール  ＨＣＯ−６０等が挙げられる。
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油は、薬液に対して、通常０．００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、好ましくは０．００５〜０．５％（Ｗ／Ｖ）となるように添加混合する。
【００１０】
本発明の医薬組成物は、溶液の形態もしくは特定の溶解液で用時溶解して用いる粉末の形態とすることができる。溶解液に用時溶解して用いる粉末の場合は、クエン酸、ポリビニルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及び／又はポリオキシエチレン硬化ヒマシ油は、粉末あるいは溶解液の一方に添加してもよく、又、粉末及び溶解液の両方に添加してもよい。
【００１１】
添加剤としてはｐＨ調節剤、殺菌・防腐剤、粘度調整剤、凍結乾燥助剤、吸収促進剤等を必要に応じて加えることができる。
ｐＨ調節剤としては塩酸、酢酸等が用いられる。
殺菌・防腐剤としては医薬組成物に通常用いられるものであればよく、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ベンザルコニウム等が挙げられる。
粘度調整剤としてはポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられる。
【００１２】
凍結乾燥助剤としてはアミノ酢酸、マンニトール、白糖、ブドウ糖、デキストラン等が挙げられる。
吸収促進剤としてはカプリン酸ナトリウム、ベスタチン、アマスタチン、メシル酸ナファモスタット、メシル酸カモスタット、アプロチニン等が挙げられる。
【００１３】
本発明の医薬組成物の投与形態としては、液剤あるいは用時溶解して得た薬液を点鼻用滴下容器、スプレー容器または鼻用エアゾールアプリケーター等を用いて、滴下あるいは噴霧により投与することができる。
本発明において用いることができるカルシトニンは、ヒト、ブタ、ウシ、サケ、ウナギ、ラット由来等のものを用いることができるので特に限定されないが、以下の実施例においてはヒトカルシトニンを用いた例について示す。
【００１４】
【実施例】
以下に実施例および試験例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例１．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      １５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１５】
実施例２．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ポリビニルアルコール                        １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１６】
実施例３．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ポリソルベート８０                            １０ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１７】
実施例４．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      １５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１８】
実施例５．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ポリビニルアルコール                        １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００１９】
実施例６．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ポリソルベート８０                            １０ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２０】
実施例７．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      ６０ｍｇ
ポリビニルアルコール                        １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２１】
実施例８．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      ６０ｍｇ
ポリソルベート８０                              １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２２】
実施例９．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      ６０ｍｇ
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油＊１                １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊１：ニッコールＨＣＯ−６０（日光ケミカルズ株）
【００２３】
実施例１０．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      ６０ｍｇ
ポリビニルアルコール                        １００ｍｇ
アプロチニン                                    １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２４】
実施例１１．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      ６０ｍｇ
ポリソルベート８０                              １ｍｇ
メシル酸ナファモスタット                        １ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２５】
実施例１２．
ヒトカルシトニン２０ｍｇ、精製白糖１０００ｍｇを１０ｍｌの精製水に溶解し、無菌濾過した。濾液をバイアル瓶に無菌的に充填して凍結乾燥した。添付溶解液として、塩化ベンザルコニウム２ｍｇ、クエン酸１５ｍｇを１０ｍｌの精製水に溶解し、無菌濾過した液を調製した。
【００２６】
対照例１．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２７】
対照例２．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２８】
対照例３．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００２９】
比較例１．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
タウロコール酸                              １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３０】
比較例２．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
デオキシコール酸                            １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３１】
比較例３．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊２                      １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊２：リョートーシュガーエステルＳ１６７０（三菱化成食品）
【００３２】
比較例４．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊３                      １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊３：リョートーシュガーエステルＰ１６７０（三菱化成食品）
【００３３】
比較例５．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
タウロコール酸                              １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３４】
比較例６．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
デオキシコール酸                            １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３５】
比較例７．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊２                      １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊２：リョートーシュガーエステルＳ１６７０（三菱化成食品）
【００３６】
比較例８．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
マンニトール                                ５００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル＊３                      １２５ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
＊３：リョートーシュガーエステルＰ１６７０（三菱化成食品）
【００３７】
比較例９．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      ６０ｍｇ
ヒト血清アルブミン                          ２００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
【００３８】
比較例１０．
ヒトカルシトニン                              ２０ｍｇ
精製白糖                                  １０００ｍｇ
塩化ベンザルコニウム                            ２ｍｇ
クエン酸                                      ６０ｍｇ
ゼラチン                                    １００ｍｇ
精製水を加えて最終容量を１０ｍｌとした。
本発明における上記カルシトニン医薬組成物は、以下の試験例１〜３に示すように非常に安定である。
【００３９】
試験例１．
実施例１〜６、比較例１〜８、及び対照例１〜３で調製した試料溶液を、室温で振幅３ｃｍ、１００回／分の振盪回数で振盪し、外観（溶状）を観察した。その結果を表１に示す。
【００４０】
0003608802.tif 000002
表１に示すごとく、実施例では比較例及び対照例と比べて安定であった。
【００４１】
試験例２．
実施例７〜１１及び比較例９、１０で調製した試料溶液を、室温で振幅３ｃｍ、１００回／分の振盪回数で振盪し、外観（溶状）を観察した。また、溶液のヒトカルシトニン濃度を液体クロマトグラフィーで定量し、ヒトカルシトニンの残存率を求めた。その結果を表２に示す。
【００４２】
0003608802.tif 000003
表２に示すごとく、実施例では比較例及び対照例と比べて安定であった。
【００４３】
試験例３．
実施例７〜９で調製した試料溶液を、室温で振幅３ｃｍ、１００回／分の振盪回数で７日間振盪し、その後の溶液の生物活性を以下のように検討した。即ち、２４時間絶食後、引き続き２４時間低カルシウム食で飼育したＳ．Ｄ．系雄性ラット（６週齢）を、ペントバルビタール麻酔下、背位固定し、大腿動脈カニューレ及び気管カニューレを施した。試料溶液５μｌ（ヒトカルシトニン５０μｇ／ｋｇ）を鼻腔内に投与し、経時的に大腿動脈より採血し、血清カルシウム濃度をカルシウム測定用試薬（サンアッセイＣａ：三光純薬社製）で定量した。結果を表３に示す。
【００４４】
0003608802.tif 000004
表３に示すごとく、７日間振盪させた溶液においても血清カルシウム濃度の低下が認められた。
【００４５】
【発明の効果】
以上、本発明により、局所刺激性が少なく、実用的でかつ溶液で安定なカルシトニン溶液を提供するカルシトニン医薬組成物を製造することができる。