(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
リジンまたはリジンの塩酸塩や燐酸塩、リジングルタミン酸、リジンアスパラギン酸塩、Ｌ-リジンリン酸から選ばれるリジン誘導体、と塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、トリクロサン、イソプロピルメチルフェノール、フッカ物、天然の抗菌剤から選ばれる抗菌活性を示す化合物、ノニオン界面活性剤および両性界面活性剤から選ばれる少なくとも１種の界面活性剤からなることを特徴とする抗菌製剤
【請求項２】
ノニオン界面活性剤がポリエチレンオキシドポリプロピレンオキシドブロックコポリマー類またはショ糖脂肪酸エステルである請求項１記載の抗菌製剤
【請求項３】
フッカ物がフッカナトリウムまたはフッカスズである請求項１記載の抗菌製剤
【請求項４】
天然の抗菌剤がチモール、油溶性甘草エキス、プロポリス、カミツレ、ポリフェノール、桑白皮エキス、アロエエキス、茶エキスから選ばれる１種以上である請求項１記載の抗菌製剤
【請求項５】
用途が口腔用である請求項１〜４記載の抗菌製剤
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、抗菌剤が単独では作用しにくいバイオフィルムやプラークなど微生物の集合体や塊に対し優れた抗菌活性を示す抗菌製剤に関する。
【０００２】
【従来の技術および問題点】
抗菌剤には種々のタイプのものがあり、それぞれ種々の感染症の予防や治療、医療用具の滅菌、医薬品、食品工場など無菌性が要求される場所の殺菌・消毒などに幅広く用いられている。しかし、その抗菌効果には限界があり、バイオフィルムやプラークなど微生物の集合体や塊に応用した場合や蛋白成分が共存した場合などにはその効果が充分発揮されず、抗菌剤の濃度を上げたり、処理時間を長くするなどの必要があり、安全性、経済性、抗菌効率の面から、必ずしも満足できるものばかりではなかった。
【０００３】
【問題点を解決するための手段】
本発明者らはかかる事情に鑑み鋭意検討をかさねた結果、その作用機序は明らかではないが、リジンまたはその誘導体と抗菌活性を示す化合物から選ばれる１種または２種以上を配合し、さらにノニオン界面活性剤および両性界面活性剤から選ばれる少なくとも１種の界面活性剤を追加配合することにより、共存蛋白の影響をほとんど受けず、微生物の懸濁液はもとよりバイオフィルムやプラークなど微生物の集合体や塊に対しても優れた抗菌効果を発揮することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００４】
尚、特開平３ー１７８９２５ならびに特開平２−５６４１３には、リジンを配合した口腔用組成物が開示されているが、前者はその歯周疾患の慢性炎症時の出血予防、浮腫抑制効果について述べたものであり、後者は歯表面の変色を防止する効果について述べたものであり、いずれも本出願の効果を容易に類推できるものではない。以下本発明を具体的に説明する。
【０００５】
本発明はリジンまたはその誘導体及び抗菌活性を示す化合物を配合し、さらにはこれらとノニオン界面活性剤または両性界面活性剤から選ばれる少なくとも１種の界面活性剤を配合してなる抗菌製剤を提供するものである。本発明の抗菌製剤は医療用具の滅菌、医薬品、食品工場など無菌性が要求される場所の殺菌・消毒などに利用されるだけでなく、う蝕、歯周病、口内炎などの口腔感染症をはじめとする種々の感染症の原因菌やそれらの菌塊を抑制し、これら感染症の予防や治療およびこれら原因菌が関与した口臭や体臭の抑制に非常に有用である。
【０００６】
本発明のリジンの誘導体はリジンの塩酸塩や燐酸塩、リジンエチルエステル、リジンメチルエステル、リジングルタミン酸、リジンアスパラギン酸塩、Ｌ−リジンリン酸など製造上許容されるものなら何れでもよく、これらを２種以上配合してもかまわない。本発明中リジンまたはその誘導体の配合量は抗菌製剤中０．００１〜１０重量％が好ましく、０．０１〜５重量％がより好ましい。０．００１重量％未満では本発明の効果が十分得られず、１０重量％を越えると製剤上あるいはコスト的に不利である。
【０００７】
また本発明の抗菌活性を示す化合物とは塩化セチルピリジニウム、塩化デカリニウム、塩化ベンザルコニウム、クロルヘキシジンの塩酸塩またはグルコン酸塩などのカチオン性の抗菌剤のほか、トリクロサン、イソプロピルメチルフェノール、オフロキサシン、アレキシジン、ヘキセチジン、ヨウ素、ポピドンヨ−ド、フッカナトリウムやフッカスズ、モノフルオロリン酸ナトリウムなどのフッカ物、チモール、メントール、オイゲノール、タンニン、ポリフェノール、ラタニア、カミツレ、ミルレ、セージ、茶エキス、ヒノキエキス、油溶性甘草エキス、桑白皮エキス、アロエエキス、プロタミン、プロポリス、リゾチームなどの天然抗菌剤、ミノサイクリン、テトラサイクリンなどの抗生物質が挙げられるがこれらに限定されるものではない。好ましくは塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム、トリクロサン、イソプロピルメチルフェノール、フッカナトリウム、フッカスズ、チモール、油溶性甘草エキス、プロポリス、カミツレ、ポリフェノール、桑白皮エキス、アロエエキス、茶エキスである。これらの抗菌剤は単独で、またはこれらを組み合わせて用いることができ、その配合量は抗菌剤の総量で抗菌製剤中０．００１〜１０重量％が好ましく、０．０１〜５重量％がより好ましい。０．００１重量％未満では本発明の効果が十分得られず、１０重量％を越えると製剤上あるいはコスト的に不利である。
【０００８】
本発明で用いるノニオン界面活性剤としては、例えば、ポリエチレンオキシドポリプロピレンオキシドのブロックコポリマー類、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ソルビタン脂肪酸エステル類、ショ糖脂肪酸エステル、脂肪酸アミドジエタノ−ル、アシルグルコシド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などが挙げられるが、特に好ましくは、ポリエチレンオキシドポリプロピレンオキシドのブロックコポリマー類またはショ糖脂肪酸エステルである。
【０００９】
両性界面活性剤も特に限定されるものではなく、アルキルベタイン型、アルキルアミドベタイン型、イミダゾリン型、グリシン型などが挙げられる。好ましくは、２ーアルキルーＮーカルボキシメチルーＮーヒドロキシエチルイミダゾリニウムベタインまたはヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタインである。これらのノニオン界面活性剤および両性界面活性剤は単独で、またはこれらを組み合わせて用いることができ、その配合量は界面活性剤の総量として、抗菌製剤全量に基づいて０．００５〜５重量％、好ましくは、０．０５〜３重量％である。
【００１０】
ノニオン界面活性剤と両性界面活性剤を組み合わせて用いる場合、その配合比はノニオン界面活性剤：両性界面活性剤の重量比で１：６０から６０：１の範囲が好ましい。
【００１１】
本発明の抗菌製剤は、常法により製造することができ、液体、液状、ゲル状、ペースト状、ガム状、固形物とすることができる。例えば、口腔に応用する場合には、歯磨（練歯磨、潤性歯磨、液状歯磨、液体歯磨、マウスウオッシュ等）、ペースト状組成物（例えば、口腔用パスタ、歯肉マッサージクリーム等）、口腔清涼剤（例えば錠剤、スプレ−等）、イリゲーター用溶液等の形態にすることができる。更に、前記の成分に加え、抗菌製剤の形態に応じて通常の有効基剤を用いてもよい。例えば、トラネキサム酸、グリチルリチン酸ジカリウム、ビタミンＥ、アズレンなどの薬効剤やその他界面活性剤、溶剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、甘味剤、香料、粘結剤、研磨剤等を配合することができる。
【００１２】
【実施例】
次に、実験例および実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。実験例においては、本発明の抗菌性剤の有する微生物の集合体や塊に対する抗菌活性を評価した。
【００１３】
実験例１
方法：
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ６５３８菌株をＴｒｙｐｔｉｃａｓｅ  ｓｏｙ  ｂｒｏｔｈ（ＴＳＢ）培地１００ｍｌで３７℃、２４時間培養後、遠心（７０００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）洗浄、滅菌蒸留水に懸濁したものを試験菌液とした。
【００１４】
この試験菌液１０ｍｌをメンブランフィルター（直径１０ｍｍ，ポアサイズ０．４５μｍ、ミリポア社製）に吸引固着させたものを微生物の菌塊モデルとした。
【００１５】
この菌塊モデルを塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣと略す）溶液、塩化セチルピリジニウムとリジン（ＬＹＳと略す）の混合溶液、あるいはこれらにプルロニック（ＰＬＵと略す）を加えた溶液中に一定時間浸漬し、滅菌蒸留水で軽く洗浄後、１０ｍｌの滅菌蒸留水中でＶｏｒｔｅｘ  ｍｉｘｅｒにより分散し、この一白金耳をＴｒｙｐｔｉｃａｓｅ  ｓｏｙ  ａｇａｒ（ＴＳＡ）培地に塗抹、３７℃で２４時間培養後、生育の有無を肉眼で判定した。
【００１６】
結果を表１に示す。
【００１７】
【表１】
0003717960.tif 000002
組成Ｎｏ．１に対し、組成Ｎｏ．２から７において示されるように、ＬＹＳの添加あるいはＬＹＳとＰＬＵの両方の添加により殺菌に必要な時間が短縮され、優れた抗菌効果が認められた。しかし、対照である組成８、９においてはなんら抗菌効果は認められなかった。
【００１８】
実験例２
方法：
試験菌をＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｍｕｔａｎｓ  ＡＴＣＣ２５１７５とし、抗菌剤としてチモール、界面活性剤としてショ糖脂肪酸エステル（ＳＦＥと略す）を用い、実験例１と同様な実験を行なった。
【００１９】
結果を表２に示す。
【００２０】
【表２】
0003717960.tif 000003
組成Ｎｏ．１に対し、組成Ｎｏ．２から７において示されるように、ＬＹＳの添加あるいはＬＹＳとＳＦＥの両方の添加により殺菌に必要な時間が短縮され、優れた抗菌効果が認められた。しかし、対照である組成８、９においてはなんら抗菌効果は認められなかった。
【００２１】
実験例３
方法：
試験菌としてＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｋ１２を用い、種々の抗菌剤とリジン塩酸塩（ＬＹＳ−Ｃｌ）トプルロニック（ＰＬＵ）の組み合わせ溶液の抗菌活性を実験例１と同様な方法により評価した。
【００２２】
結果を表３に示す。
【００２３】
【表３】
0003717960.tif 000004
いずれの組み合わせにおいても、抗菌剤単独に比べリジン塩酸塩の添加により、殺菌に要する時間が短縮され、優れた抗菌活性が発揮されることが認められた。
【００２４】
実験例４
方法：
Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ  ３８１菌株を５μｇ／ｍｌヘミンと１μｇ／ｍｌメナジオンを添加したＢｒａｉｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｆｕｓｉｎ（ＢＨＩ）培地１００ｍｌで３７℃４８時間嫌気培養後、菌液１ｍｌを４７℃に保温した１．５％寒天を含むＢＨＩ２０ｍｌに混釈し、直径１０ｃｍシャーレに分注、冷却した菌入りプレートを作成した。本プレート上に内径８ｍｍ、高さ１ｃｍのステンレス製円筒をたて、それに種々の抗菌剤とリジン塩酸塩（ＬＹＳ−Ｃｌ）およびプルロニック（ＰＬＵ）の組み合わせ溶液を満たし、３７℃４８時間嫌気培養後、形成された発育阻止帯の直径を測定した。
【００２５】
結果を表４に示す。
【００２６】
【表４】
0003717960.tif 000005
いずれの組み合わせにおいても、抗菌剤単独に比べリジン塩酸塩（ＬＹＳ−Ｃｌ）の添加およびプルロニック（ＰＬＵ）の添加により、発育阻止帯の直径が大きくなり、優れた抗菌活性が発揮されることが認められた。
実施例１
殺菌・消毒液                  配合量（重量％）
イソプロピルメチルフェノール      ５．０
リジン                            １．０
ショ糖脂肪酸エステル              ２．０
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン０．２
香料                              ０．５
精製水                            残量
実施例２
洗口液                        配合量（重量％）
トリクロサン                    ０．２
リジン塩酸塩                    １．０
エタノール                      ７．０
プルロニック                    １．０
香料                            １．０
精製水                            残量
【００２７】
【発明の効果】
本発明によれば、共存蛋白の影響をほとんど受けず、微生物の懸濁液はもとよりバイオフィルムやプラークなど微生物の集合体や塊に対しても優れた抗菌効果を発揮する抗菌製剤を得ることができる。