(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
水溶性成分を除去したケール又はその乾燥物である前処理ケールの、低級アルコール抽出物を有効成分とするリパーゼ阻害剤。
【請求項２】
ケール又はその乾燥物を水に浸漬し、水溶性成分と残渣とに分配する前処理工程と、
前記残渣を低級アルコールに浸漬し、有効成分を低級アルコールで抽出するアルコール抽出工程とを備えていることを特徴とするリパーゼ阻害剤の製造方法。
【請求項３】
請求項２に記載の製造方法において、アルコール抽出工程が、エタノール濃度が６０〜８０容量％のエタノールにより加熱抽出する工程であることを特徴とするリパーゼ阻害剤の製造方法。
【請求項４】
請求項１に記載のリパーゼ阻害剤を含む抗肥満症用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はリパーゼ阻害剤、その製造方法、及び抗肥満症用組成物、特にケール成分を含むリパーゼ阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
経口摂取された脂質は、膵臓より分泌される消化酵素リパーゼにより加水分解され、体内へ吸収される。脂質はエネルギーが高く、近年摂取量が増加する傾向にあるため、これが肥満を引き起こす一因となっている。肥満は、高血圧、耐糖能異常、高脂血症等を合併しやすく、虚血性心疾患、脳卒中、糖尿病、動脈硬化症、脂肪肝、胆石症、腎臓障害等の発症要因であるとされている。
【０００３】
そこで脂質の吸収を抑制するべく、リパーゼの活性阻害機能を有するリパーゼ阻害剤が種々開発されており、これまで各種植物抽出物、例えば各種香辛料の抽出物（特開２００１−１２０２３７号公報）、ヤーコン抽出物（特開２００１−２９９２７２号公報）、芍薬の花の抽出物（特開２００２−５３４８４号公報）、マテ葉抽出物（特開２００４−１６１６４４号公報）等がリパーゼ阻害剤として開示されている。また特開平０３−２１９８７２号公報では、ピーマン、かぼちゃ等の水抽出物が、リパーゼ阻害剤として有効であることも開示されている。
【特許文献１】特開２００１−１２０２３７号公報
【特許文献２】特開２００１−２９９２７２号公報
【特許文献３】特開２００２−５３４８４号公報
【特許文献４】特開２００４−１６１６４４号公報
【特許文献５】特開平０３−２１９８７２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、前記技術においては、効果が低かったり、有効摂取量が非常に多量であったり、あるいは原料が入手しにくく高価であったりして、日常的に継続摂取することは実質的に不可能であった。このように充分満足できるものは未だ開発されていなかった。
本発明は前記従来技術の課題に鑑みなされたものであり、その目的は、安全で効果が高く、日常的に継続摂取可能なリパーゼ阻害剤、その製造方法、及び抗肥満症用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
前記目的を達成するために本発明者等が検討を行った結果、アブラナ科植物のケールがリパーゼ阻害剤として働き、特に水溶性成分を除去したケールの低級アルコール抽出物が非常に有効であることを見出し、本発明を完成するに至った。
本発明の第一の主題は、水溶性成分を除去したケール又はその乾燥物である前処理ケールの、低級アルコール抽出物を有効成分とするリパーゼ阻害剤である。
【０００６】
本発明の第二の主題は、ケール又はその乾燥物を水に浸漬し、水溶性成分と残渣とに分配する前処理工程と、
前記残渣を低級アルコールに浸漬し、有効成分を低級アルコールで抽出するアルコール抽出工程とを備えていることを特徴とするリパーゼ阻害剤の製造方法である。
前記製造方法において、アルコール抽出工程が、エタノール濃度が６０〜８０容量％のエタノールにより加熱抽出する工程であることが好適である。
本発明の第三の主題は、前記リパーゼ阻害剤を含む抗肥満症用組成物である。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、水溶性成分を除去したケールを低級アルコールで抽出することにより、安全で効果が高く、日常的に継続摂取可能なリパーゼ阻害剤、その製造方法、及び抗肥満症用組成物を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明で使用されるケール（Brassica oleracea var.acephala）は、南ヨーロッパ原産の野菜であり、アブラナ科の植物でキャベツの原種といわれている。キッチンケール、マローケール、ブッシュケール、ツリーケール、コラード、緑葉カンラン等の種類がある。
ケールは、適宜、生葉を用いることも乾燥物を用いることもできる。
本発明のリパーゼ阻害剤は、水溶性成分を除去したケール又はその乾燥物である前処理ケールの、低級アルコール抽出物を有効成分とすることを特徴とする。
本発明のリパーゼ阻害剤の製造方法は、ケール又はその乾燥物を水に浸漬し、水溶性成分と残渣とに分配する前処理工程と、前記残渣を低級アルコールに浸漬し、有効成分を低級アルコールで抽出するアルコール抽出工程とを備えていることを特徴とする。
前処理工程に使用するの水の量は特に限定されないが、ケール乾燥物に対して、質量で１〜５０倍、好ましくは１０倍程度が好ましい。１倍未満では水溶性成分が十分に除去できないことがあり、５０倍を超えると作業性に劣る。
【０００９】
アルコール抽出工程にて用いられる低級アルコールとしては、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、イソブチルアルコール、t-ブチルアルコール等が挙げられるが、エタノール、特にエタノール濃度が６０〜８０容量％のエタノールを用いることが好ましい。
有効成分を抽出する際の低級アルコールの量は特に限定されないが、原料のケール乾燥物に対して、質量で１〜５０倍、好ましくは１０倍程度が好ましい。１倍未満では有効成分が十分に抽出されない恐れがあり、５０倍を超えると多量のアルコールを蒸発させる必要があり、作業性に劣る。
例えば、ケールの葉の乾燥粉末１００ｇに水１Ｌを加え１時間加熱還流し、ろ過後その残渣を乾燥させ、８０容量％エタノール１Ｌを加え、１時間加熱還流し、低級アルコール抽出液を得る。
【００１０】
本発明のリパーゼ阻害剤は、優れたリパーゼの活性阻害作用を有し、且つ安全性が非常に高いため、日常的に摂取することにより、脂質の体内吸収を抑制して、肥満症やそれに伴う疾患を予防・改善することができる。
【００１１】
本発明のリパーゼ阻害剤は、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等の固形剤；溶液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤；凍結乾燥製剤等の形態にし、摂取することができる。これらの製剤は常套手段により調製することができる。また必要に応じて、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングルコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、ビタミン類、アルブミン、水、生理食塩水、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤等を添加することができる。
また、本発明のリパーゼ阻害剤は、種々の食品、例えば油脂類（サラダ油、バター、マーガリン、ラード）、調味料、クリーム類、乳製品、肉類、魚介類、食肉加工食品（ハム、ソーセージ等）、水産加工食品（かまぼこ、ちくわ等）、卵類、菓子類、飲料類、パン、健康食品、加工食品等に添加して、摂取することもできる。
【００１２】
本発明のリパーゼ阻害剤の有効投与量は、患者の年齢、体重、投与時間、形態等により、適宜選択・決定されるが、有効成分が凝縮されているため、少量で済み、無理なく継続的に摂取できる。また１日に数回に分けて摂取してもよく、特に食事の前後１時間以内に摂取することが好ましい。
なお、特開２００４−４３３７５号公報では、ケール又その抽出物が、ＮＰＹ受容体あるいはＭＣＨ受容体に拮抗作用を有し、食欲の異常亢進を抑制することが報告されている。しかしながら、リパーゼ活性を阻害し、摂取された脂質の消化吸収を抑制する作用については記載されていない。さらに上記技術においては、水抽出により水溶性成分を除去することなく、直接エタノール抽出を行っているため、十分な肥満予防・治療効果を得るためには、投与量が多くなり、事実上継続摂取が不可能であった。
【００１３】
さらに本発明のリパーゼ阻害剤は、脂質を含む飲食品や皮膚外用剤中に添加すれば、微生物が産生するリパーゼによる脂質の分解を抑制し、変敗臭等の脂質の劣化を抑制することができる。また本発明のリパーゼ阻害剤は、皮膚上において、皮膚常在菌が産生するリパーゼによる皮脂の分解を抑制し、体臭や皮膚疾患を抑制することができる。
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。配合量については特に断りのない限り質量％を示す。
【実施例１】
【００１４】
初めに、下記予備試料１〜７を調製した（図１）。
予備試料１  ケールの葉を凍結乾燥させ粉砕したケール乾燥粉末(１４ｇ)。
予備試料２  ケール乾燥粉末１４ｇを、水１４０ｍＬで１時間加熱抽出(還流)した抽出液。
予備試料３  試験例２の抽出液のエタノール沈殿物を乾燥させたもの(０．７ｇ)
予備試料４  ケール乾燥粉末１４ｇを、水１４０ｍＬで１時間加熱抽出(還流)し、その残渣を乾燥させたもの(６．６ｇ)。
予備試料５  試験例４の乾燥残渣６．６ｇを、８０容量％エタノール１４０ｍＬで１時間加熱抽出(還流)し、その残渣を乾燥させたもの(５．８ｇ)。
予備試料６  試験例４の乾燥残渣６．６ｇを、８０容量％エタノール１４０ｍＬで１時間加熱抽出(還流)した抽出液。
予備試料７  ケール乾燥粉末１４ｇを、８０容量％エタノール１４０ｍＬで１時間加熱抽出(100℃)した抽出液。
【００１５】
＜リパーゼ阻害試験＞
上記試料を用いて、リパーゼ阻害試験を行なった。
（各試験例の試料の調製）
試験例１：予備試料１に水１２０ｍＬを加えた。
試験例２：予備試料２をロータリーエバポレーターにかけ、水を適宜除去し１２０ｍＬにした。
試験例３：予備試料３に水１２０ｍＬを加えた。
試験例４：予備試料４に水１２０ｍＬを加えた。
試験例５：予備試料５に水１２０ｍＬを加えた。
試験例６：予備試料６をロータリーエバポレーターにかけエタノールを除去し、水１２０ｍＬを加えた。
試験例７：予備試料７をロータリーエバポレーターにかけエタノールを除去し、水１２０ｍＬを加えた。
（試験方法）
試験管に試料０．１ｍＬ、McIlvain緩衝液０．７ｍＬ、トリオレイン０．１ｍＬを入れよく攪拌し、豚膵リパーゼ０．１ｍＬを加え、３７℃で1時間振とうした。
エタノール２ｍＬを加え反応を停止後、発色試液を加え、５５０ｎｍで吸光度を測定し、下記式より血清遊離脂肪酸濃度を求めた。
また下記のように阻害率を計算した(ｎ＝３)。
血清遊離脂肪酸濃度(mEq／L)＝Ｓ／(Std−BI)
（Ｓ:検体の吸光度、Std:標準、BI:試薬盲検）
リパーゼ阻害率(％)＝{(ブランクの値−各試料の値)／ブランクの値}×100
【００１６】
結果を表１に示す。
（表１）                                                        
試  験  例
１      ２      ３      ４      ５      ６      ７      
リパーゼ阻害率（％）
73.7     47.0      0       0      0      78.9    78.0      
試験例６は、本発明のリパーゼ阻害剤に相当する。
試験例６は、試験例４の収量と試験例５の収量の差から計算すると、ケール固形分０．８ｇとなる。これは元のケール乾燥粉末の５．５質量％に相当する。
リパーゼ阻害率を比較すると、驚くべきことに試験例６は量が少ないにも関わらず、試験例１のケール乾燥粉末を上回る値であった。
また、試験例６と試験例７とを比較すると、直接エタノールで抽出した試験例７ではケール固形分が４．７ｇであるのに対し、水溶性成分除去後にエタノール抽出した試験例６ではケール固形分が０．８ｇであり、量は１／６程度であるにもかかわらず、同等のリパーゼ阻害効果が得られることが確認された。試験例７には水溶性成分が含まれるが、試験例６では水溶性成分は除去されている。このことから本発明のリパーゼ阻害剤による効果は、過剰な栄養素の吸収を抑制するとされている水溶性食物繊維に由来する効果ではないことがわかる。
このように、本発明のリパーゼ阻害剤は、水溶性食物繊維等の水溶性成分を除去したケールの低級アルコール抽出物であるにもかかわらず、高いリパーゼ阻害効果が発揮され、少量で優れたリパーゼ阻害効果を有することがわかった。
試験例２，６，７のＩＲ分析結果をそれぞれ図２〜４に、試験例２，６，７のＬＣ分析結果をそれぞれ図５〜７に示す。
【実施例２】
【００１７】
ケール抽出物の濃度と、リパーゼ阻害活性との関係を調べた。
（試料の調製）
ケール乾燥粉末１００ｇを水１Ｌで加熱抽出（還流）し、ろ過後得られた乾燥残渣を８０容量％エタノール１Ｌで１時間加熱抽出(還流)し、該抽出物を８０％エタノールで固形分濃度2.6、5.2、10.4、20.9(mg/mL)となるように調製し、これらの試料を用いて上記と同様にして、各濃度におけるリパーゼ阻害効果を検討した。結果を以下の表２に示す。
【００１８】
（表２）                                                       
濃度(mg/mL)             1.6       3.2         6.3        12.6
リパーゼ阻害活性(%)    37.8      50.5        88.8        92.0  
濃度依存的にリパーゼ阻害効果が高くなることが確認された。
【００１９】
＜ラット試験＞
次に、上記各試料をラットに投与し、抗肥満症効果を試験した。
（１）試験ラットの飼育、及び試料の投与方法
予備飼育（６〜７週齢）
Zucker-fattyラットは生後４週齢頃より体重が急速に増加し、外観上も同腹の正常仔と区別が付くほどの肥満状態を呈し始め、加齢に従い正常個体との体重差は拡大する。このためZucker-fattyラットは肥満症のモデルとして有用である。
遺伝形式は常染色体性の単純劣性遺伝様式を取り、病因遺伝子をホモに持つ固体のみが肥満を呈し(Zucker-fattyラット)、ヘテロ接合体及び野生型は肥満を示さない(Zucker-leanラット)。
日本チャールスリバー（株）より購入した６週齢の雄性Zucker-fattyラット、及び雄性Zucker-leanラットを、室温２２±１℃、湿度６０±１０％に調節された飼育室において、白色蛍光灯で１日１２時間（７〜１９時明期）の光調節を行い、飼料及び水道水を自由摂取させ１週間予備飼育した。
予備飼育後、各個体の体重測定を行い、Zucker-fattyラットを、体重の平均値がほぼ等しくなるように１群５頭のＡ〜Ｈ群に分類した。またZucker-leanラット２頭をＩ群とした。
【００２０】
試料投与方法（７〜１７週齢）
下記の要領で、各群のラットに試料投与を行い、さらに１０週間、１７週齢まで飼育した。飼料と水道水を各群とも自由摂取させた。飼育室の環境は、温度２２±１℃、湿度６０±１０％、白色蛍光灯で１日１２時間の採光下（７〜１９時明期）とした。
各試料はすべて経口投与とし、毎日午前１０時より施行し、投与後は滅菌水を自由摂取させた。なお、どの群においても試料投与により、飼料摂取量は変化しなかった。
【００２１】
Zucker-fattyラット
Ａ群：１日に体重１ｋｇ当たり試験例１の試料を２ｍＬ投与する。
Ｂ群：１日に体重１ｋｇ当たり試験例２の試料を２ｍＬ投与する。
Ｃ群：１日に体重１ｋｇ当たり試験例３の試料を２ｍＬ投与する。
Ｄ群：１日に体重１ｋｇ当たり試験例４の試料を２ｍＬ投与する。
Ｅ群：１日に体重１ｋｇ当たり試験例５の試料を２ｍＬ投与する。
Ｆ群：１日に体重１ｋｇ当たり試験例６の試料を２ｍＬ投与する。
Ｇ群：無投与
Zucker-leanラット
Ｈ群：無投与
【００２２】
（２）結果
体重変動
体重測定は週１回、試料投与前に行い、各群ラットの体重の平均値を求めた。結果を図８に示す。
図８より、Zucker-fattyラットはZucker-leanラットと比較して、体重の増加が激しかったが、Zucker-fattyラット無投与群（Ａ群）と比較して、ケール投与群（Ｂ〜Ｇ群）では８週齢当たりから体重増加の抑制が見られた。特に、本発明のリパーゼ阻害剤を投与したＦ群では、体重増加の抑制効果が最も高かった。また体重増加は抑制されたが、Zucker-leanラットの値以下になることはなかった。
以上より、水溶性成分を除去したケールの低級アルコール抽出物を投与することにより、特に優れた抗肥満症効果が見られることがわかった。また体重は、正常ラットの値以下にまで異常に抑制されることはなく、服用が安全であることが確認された。
【００２３】
血液検査
実験最終日の前日に全ラットを絶食させ、翌日に深麻酔（ネンブタール,45mg/kg,i.p.）し、左心室から20Ｇ採血針で可能な限り採血を行った。
採取した血液を用いて、下記の項目において生化学的検査（自動化学分析装置：Auto Lab, Radio lmmuno Assay 法）を行い、平均値を求めた。
結果を図９に示す。
【００２４】
図９のＧ群とＨ群とを比較すると、Zucker-fattyラットはZucker-leanラットと比較して、脂質関連の数値が高いが、Zucker-fattyラット無投与群（Ａ群）と比較して、ケール投与群（Ｂ〜Ｇ群）では改善が見られた。
特に本発明のリパーゼ阻害剤を投与したＦ群では、中性脂肪、βリポ蛋白、遊離コレステロール値等が他の群よりも大きく低下し、正常ラットのＨ群の値に近づいた。また、細胞膜の構成成分であるリン脂質等と比較し、多くが動脈硬化を促進するＬＤＬコレステロールであるβリポ蛋白や、中性脂肪においては、低下の割合が大きかった。
これらのことから、本発明のリパーゼ阻害剤は、肥満症やそれに伴う疾患を抑制する効果が期待できる。
【００２５】
また、肝細胞障害や肝・胆道系疾患の診断に有用である総ビリルビン・直接ビリルビンの値についても、本発明のリパーゼ阻害剤を投与したＦ群では有意に低下し、正常ラットのＨ群の値に近づいた。
その他の値について、本発明のリパーゼ阻害剤を投与したことによる異常は全く見られなかった。
【００２６】
＜ヒト臨床検査＞
モニター３名に、本発明のリパーゼ阻害剤である前記試験例６の試料を１日１．６ｇ（乾固物換算）、あるいは試験例７の試料を１日５．５ｇ（乾固物換算）、毎日服用してもらい、服用前、服用２週間目、服用１ヶ月目にそれぞれ採血し、中性脂肪値を測定した。結果を表３に示す。
【００２７】
（表３）                                                                
服  用  後  
年齢    性別      服用前    2週間   1ヶ月      服用試料    
パネラー1： ３０代  男性       288       151      90      試験例６:1.6g
パネラー2： ４０代  男性       218       111     157      試験例６:1.6g
パネラー3： ３０代  男性       149       133     135      試験例６:1.6g
パネラー3： ２０代  女性       175       133     140      試験例７:5.5g 
【００２８】
中性脂肪値の標準範囲は30〜149mg/dlとされている。服用前は３人が正常範囲を超えていたが、服用２週間目で早くも低下が見られ、服用１ヶ月目には全員が標準範囲内になった。また、驚くべきことに本発明のリパーゼ阻害剤である前記試験例６の試料は、１日１．６ｇしか服用しなかったのにも関わらず、試験例７の試料を１日５．５ｇと多量に服用したのと同様の効果が発揮された。
さらに、元々中性脂肪値が標準範囲内であったパネラー3においても、服用により中性脂肪値の低下が見られた。すなわち中性脂肪値が標準範囲内の人に対しても、標準範囲内において積極的に作用することが確認された。
よって、ヒト臨床検査においても、本発明のリパーゼ阻害剤は、少量で優れたリパーゼ阻害効果が発揮され、その効果は中性脂肪値が異常な人はもちろん、標準範囲内の人に対しても、正常範囲内において発揮されることが確認された。また服用によって、下痢、嘔吐、排尿異常等の副作用は一切起こらず、安全に服用できるものであった。
【実施例３】
【００２９】
＜抽出温度条件とリパーゼ阻害効果＞
次に、水溶性成分除去工程における水の温度、及びアルコール抽出工程における低級アルコールの温度と、リパーゼ阻害効果との関係を試験した。
（試料の調製）
試験例９−１（水加熱抽出→エタノール加熱抽出）
ケール乾燥粉末１０ｇを、水１００ｍＬで１時間加熱抽出(還流)し、ろ過後得られた残渣を乾燥させ、８０容量％エタノール１００ｍＬで１時間加熱抽出(還流)した。
試験例９−２（水冷蔵抽出→エタノール加熱抽出）
ケール乾燥粉末１０ｇを、水１００ｍＬで４８時間冷蔵抽出(５℃)し、ろ過後得られた残渣を乾燥させ、８０容量％エタノール１００ｍＬで１時間加熱抽出(還流)した。
試験例９−３（水冷蔵抽出→エタノール冷蔵抽出）
ケール乾燥粉末１０ｇを、水１００ｍＬで４８時間冷蔵抽出(５℃)し、得られた残渣を乾燥させ、８０容量％エタノール１００ｍＬで４８時間冷蔵抽出(５℃)した。
試験例９−４（水加熱抽出→エタノール冷蔵抽出）
ケール乾燥粉末１０ｇを、水１００ｍＬで１時間加熱抽出(還流)し、ろ過後得られた残渣を乾燥させ、８０容量％エタノール１００ｍＬで４８時間冷蔵抽出(５℃)した。
【００３０】
試験例９−１〜９−４で得られた抽出液を用いて、上述したリパーゼ阻害試験を行ない、リパーゼ阻害率が５０％となる抽出液中の固形分の濃度（ＩＣ５０）(mg/mL)を調べた。この値が少ないほど、一定量当たりのリパーゼ阻害効果が高いことを表す。
（表４）
試験例９−１  試験例９−２  試験例９−３  試験例９−４
ＩＣ５０(mg/mL)       2.9           6.2           5.6           7.8      
加熱によりリパーゼ阻害効果は低下せず、むしろ加熱抽出した方が効果の高い物が得られることがわかった。またエタノール抽出を冷蔵条件で行うと、得られる固形分が少なくなる。よってアルコール抽出は、加熱下で行うことが好ましい。
【実施例４】
【００３１】
＜抽出アルコール濃度とリパーゼ阻害効果＞
次に、抽出アルコール濃度と、リパーゼ阻害効果との関係を試験した。
ケール乾燥粉末１００ｇを水１Ｌで加熱抽出（還流）し、ろ過後得られた乾燥残渣を各エタノール濃度のエタノール溶液１Ｌで１時間加熱抽出(還流)し、ろ過後抽出液を得た。
得られた抽出液を用いて、上述したリパーゼ阻害試験を行ない、リパーゼ阻害率が５０％となる抽出液中の固形分の濃度（ＩＣ５０）(mg/mL)を調べた。この値が少ないほど、一定量当たりのリパーゼ阻害効果が高いことを表す
【００３２】
（表５）                                  
エタノール濃度            ＩＣ５０(mg/mL)
５０容量％              11.5      
６０容量％               5.0
７０容量％               5.0
８０容量％               2.9
９０容量％               7.6
９９．５容量％           6.3          
エタノール濃度が６０〜８０容量％の時、阻害効果の高いものが得られた。
よってエタノール濃度は６０〜８０容量％が好ましいことが確認された。
【実施例５】
【００３３】
＜各種野菜のリパーゼ阻害効果＞
各種野菜について、抽出液を用いて実施例1の試験例７と同様にして、リパーゼ阻害率を測定した。結果を表６に示す。
（表６）
野菜名                  リパーゼ阻害率（％）
ケール（アブラナ科）          ７６．０
キャベツ（アブラナ科）        ４４．０
白菜（アブラナ科）            ３１．６
辛味大根（アブラナ科）        ４３．８
ナス（ナス科）                ５７．１
カボチャ（ウリ科）              ２．９          
【００３４】
他の野菜では、どれもリパーゼ阻害活性が低かった。また同じアブラナ科の野菜でも、ケール以外はほとんど活性がなかった。このように本発明では、ケールの驚くべきリパーゼ阻害活性を見出したのである。
【実施例６】
【００３５】
＜散剤＞
（処方）
（１）本発明のリパーゼ阻害剤（試験例７の抽出物）    ２質量部
（２）乾燥コーンスターチ                          ３８質量部
（３）微結晶セルロース                            ６０質量部
（製法）（１）〜（３）を混合し、２ｇずつ分封し、散剤を得た。
【実施例７】
【００３６】
＜錠剤＞
（処方）
（１）本発明のリパーゼ阻害剤（試験例７の抽出物）    １５質量部
（２）乳糖                                          ８０質量部
（３）合成ケイ酸アルミニウム                          ４質量部
（４）ステアリン酸マグネシウム                        １質量部
（製法）
上記の各成分を混合し、その混合物を打錠機で１錠３００ｍｇに打錠し、錠剤を得た。
【実施例８】
【００３７】
＜液剤＞
（処方）
（１）本発明のリパーゼ阻害剤（試験例７の抽出物）    １１０ｇ
（２）エリスリトール                                ２００ｇ
（３）スクラロース                                      ２ｇ
（４）クエン酸                                        ２８ｇ
（５）リンゴ酸                                        ２０ｇ
（６）安息香酸ナトリウム                                ４ｇ
（７）パラオキシ安息香酸ブチル                      ０．３ｇ
（８）パラオキシ安息香酸エチル                      ０．７ｇ
（９）香料                                              適量
（１０）精製水                                          適量
（製法）
（２）〜（８）を精製水６Ｌに加熱溶解後、冷却し、５０℃付近で（１）、（２）、（９）を加えて、更に精製水を加えて１０Ｌとした。この液を１００ｍＬずつ容器に分注した。
【実施例９】
【００３８】
＜マーガリン＞
（処方）
（１）なたね油                                    ８１．２質量部 
（２）水                                          １０．０質量部
（３）食塩                                          １．５質量部
（４）脱脂粉乳                                      ２．０質量部
（５）レシチン                                      ０．３質量部
（６）本発明のリパーゼ阻害剤（試験例７の抽出物）    ５．０質量部
（７）香料                                            適量
（８）着色料                                          適量 
（製法）
常法により製造した。
【実施例１０】
【００３９】
＜保湿クリーム＞
（処方）
油相成分；                                          
ホホバ油                                              ３．０質量％
流動パラフィン                                        ４．０質量％
ＰＯＥ（４０）硬化ヒマシ油                            ２．０質量％
ミリスチン酸イソステアリン酸ジクリセライド          １５．０質量％
メチルフェニルポリシロキサン                          ５．０質量％
香料                                                    適量
水相成分；
ステアロイルメチルタウリンナトリウム                  ０．５質量％
グリセリン                                          ２０．０質量％
メチルパラベン                                        ０．１質量％
本発明のリパーゼ阻害剤（試験例７の抽出物）            ５．０質量％
精製水                                                  残余
（製法）
上記水相成分を加熱混合して、７０℃に保った。上記油相成分も同様に７０℃で加熱溶解分散した。この油相部に上記の水相部を加え、乳化機にて乳化し、２５℃まで冷却した。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】本発明に用いた各予備試料の調製方法を示した図である。
【図２】試料２の赤外線分析結果を示した図である。
【図３】試料６の赤外線分析結果を示した図である。
【図４】試料７の赤外線分析結果を示した図である。
【図５】試料２の液体クロマトグラフィー分析結果を示した図である。
【図６】試料６の液体クロマトグラフィー分析結果を示した図である。
【図７】試料７の液体クロマトグラフィー分析結果を示した図である。
【図８】各試料を投与したラットの体重変化を比較した図である。
【図９】各試料を投与したラットの血液検査の結果を示した図である。
【要約】
【課題】安全で効果が高く、日常的に継続摂取可能なリパーゼ阻害剤、その製造方法、及び抗肥満症用組成物を提供する。
【解決手段】  水溶性成分を除去したケール又はその乾燥物である前処理ケールの、低級アルコール抽出物を有効成分とするリパーゼ阻害剤。
ケール又はその乾燥物を水に浸漬し、水溶性成分と残渣とに分配する前処理工程と、
前記残渣を低級アルコールに浸漬し、有効成分を低級アルコールで抽出するアルコール抽出工程とを備えていることを特徴とするリパーゼ阻害剤の製造方法。
前記製造方法において、アルコール抽出工程が、エタノール濃度が６０〜８０容量％のエタノールにより加熱抽出する工程であることが好適である。
前記リパーゼ阻害剤を含む抗肥満症用組成物。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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