(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
0003727334.tif 000065
または
【化２】
0003727334.tif 000066
［式中、Ｒ1およびＲ2はそれぞれ独立して水素または炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはアシルを表す。
ＹはＣ、Ｏ、Ｓ、Ｎ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯまたはＳＯ2を表す。
Ｒ3は水素または炭素原子数１−４個の低級アルキルであり、ＹはＣまたはＮを表す。
Ｒ4は水素または炭素原子数１−４個の低級アルキルであり、ＹはＣを表す。ただし、ＹがＮであるとき、Ｒ4は存在せず、またＹがＳ、Ｏ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯまたはＳＯ2であるとき、Ｒ3またはＲ4のいずれも存在しない。
Ｒ’およびＲ"は水素、炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはアシル、ＯＨ、炭素原子数１−４個のアルコキシ、チオールまたはチオエーテル、またはアミノを表す。
あるいはＲ'およびＲ"は一緒になってオキソ（ケト）、メタノ、チオケト、ＨＯ−Ｎ＝、ＮＣ−Ｎ＝、（Ｒ7Ｒ8）Ｎ−Ｎ＝、エポキシ、シクロプロピルまたはシクロアルキル基を形成する（ここにエポキシ、シクロプロピルおよびシクロアルキル基は炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはハロゲンで置換されていてもよい）。
Ｒ'"およびＲ""は水素、ハロゲン、炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはアシルを表す。
あるいはＲ'"およびＲ""は一緒になって炭素原子数３−１０個のシクロアルキル基を形成する（ここに該シクロアルキル基は炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはハロゲンで置換されていてもよい）。
Ｒ5は炭素原子数１−４個の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ7、ＳＲ7またはＮＲ7Ｒ8を表す。
Ｒ6は水素、炭素原子数１−４個の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ7、ＳＲ7、ＮＲ7Ｒ8または（ＣＦ2）nＣＦ3を表す。
Ｒ7は水素または炭素原子数１−６個の低級アルキルを表す。
Ｒ8は水素または炭素原子数１−６個の低級アルキルを表す。
Ｒ9は炭素原子数１−４個の低級アルキル、フェニル、芳香族アルキル、ｑ-ヒドロキシフェニル、ｑ-ブロモフェニル、ｑ−クロロフェニル、ｑ−フルオロフェニルまたはq−ヨードフェニルを表し、ここにｑは２−４である。
ＸはＣＯＯＨ、テトラゾール、ＰＯ3Ｈ、ＳＯ3Ｈ、ＣＨＯ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＳＨ、ＣＯＯＲ9、ＣＯＳＲ9、ＣＯＮＨＲ9、またはＣＯＯＷを表す。ここにＷは製剤的に許容される塩であり、Ｘは環上の任意のＣまたはＮと結合していてよい。
Ｚ、Ｚ'、Ｚ"、Ｚ'"およびＺ""はそれぞれ独立してＣ、Ｓ、ＯまたはＮを表す。ただし、別のＺと２重結合で結合しているかＯまたはＳである他のＺと結合しているとき、それはＯまたはＳではなく、他のＮであるＺと１重結合で結合しているとき、それはＮではない。
ｎは０−３を表す。］
で示される化合物、またはその製剤的に許容される塩。
【請求項２】
レチノイン酸受容体よりも優先的にレチノイドＸ受容体を選択的に活性化する、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
レチノイン酸受容体よりも優先的に、レチノイドＸ受容体に選択的に仲介される工程を調節する、請求項１または２記載の化合物。
【請求項４】
該化合物が、レチノイン酸受容体よりもレチノイドＸ受容体に対して少なくとも５倍強い活性の活性化物質である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
4-[(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）カルボニル］安息香酸、
4-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］安息香酸、
4-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル)シクロプロピル］安息香酸、
4-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］ベンゼンテトラゾール、
2-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］ピリジン-5-カルボン酸、
エチル2-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］ピリジン-5-カルボキシレート、
5-[1-3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］ピリジン-2-カルボン酸、
2-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）シクロプロピル］ピリジン-5-カルボン酸、
メチル2-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）シクロプロピル］ピリジン-5-カルボキシレート、
4-[1-3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］-N-（4-ヒドロキシフェニル）ベンズアミド、
4-[(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］安息香酸、
2-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）エテニル］ピリジン-5-カルボン酸、および
2-[1-(3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル）シクロプロピル］ピリジン-5-カルボン酸からなる群から選択される化合物。
【請求項６】
式：
【化８】
0003727334.tif 000067
で示される化合物。
【請求項７】
１またはそれ以上の請求項１〜６のいずれかに記載の化合物と、製剤的に許容される担体とを含有する医薬組成物。
【請求項８】
製剤的に許容される担体が、経腸投与、非経口投与、または局所投与に適したビヒクルである、請求項７記載の医薬組成物。
【請求項９】
ヒト以外の哺乳動物における１またはそれ以上のレチノイドＸ受容体に選択的に仲介される工程を調節する方法であって、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物を有効量で投与することを含み、該化合物がレチノイドＸ受容体を選択的に活性化することによりレチノイドＸ受容体に仲介される工程を調節する方法。
【請求項１０】
該レチノイドＸ受容体が、レチノイドＸ受容体−アルファ、レチノイドＸ受容体−ベータ、またはレチノイドＸ受容体−ガンマである、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
該工程が脂質代謝のインビボ調節、皮膚関連工程のインビボ調節、悪性細胞発生のインビボ調節、前癌病巣のインビボ調節、またはプログラムされた細胞死のインビボ調節である、請求項９記載の方法。
【請求項１２】
該工程がインビトロ細胞増殖および分化またはインビボ四肢形態発生である、請求項９記載の方法。
【請求項１３】
哺乳動物対象における、１またはそれ以上のレチノイドＸ受容体に仲介される工程を調節するための組成物であって、該１またはそれ以上のレチノイドＸ受容体に仲介される該工程を調節するに有効な量の請求項１〜６のいずれか１項に記載の１またはそれ以上の化合物を含有する組成物。
【請求項１４】
レチノイン酸受容体よりも優先的にレチノイドＸ受容体を選択的に活性化する、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物である、第１化合物と、レチノイドＸ受容体よりも優先的にレチノイン酸受容体を選択的に活性化する第２化合物との組み合わせを含有する組成物。
【請求項１５】
レチノイン酸受容体よりも優先的にレチノイドＸ受容体を選択的に活性化する、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物である第１化合物と、レチノイドＸ受容体以外の１またはそれ以上の細胞内受容体を活性化する第２化合物との組み合わせを含有する組成物。
【請求項１６】
レチノイン酸受容体よりも優先的にレチノイドＸ受容体を選択的に活性化する、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物である第１化合物と、レチノイドＸ受容体以外の１またはそれ以上の細胞内受容体を選択的に活性化する第２化合物との組み合わせを、経腸、非経口または局所投与のための製剤的に許容されるビヒクル中に含有する医薬組成物。
【請求項１７】
該第２化合物がレチノイドＸ受容体よりも優先的にレチノイン酸受容体を選択的に活性化するものである、請求項１６記載の医薬組成物。
【請求項１８】
請求項３に記載の化合物と、製薬上許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項１９】
哺乳動物対象に投与して１またはそれ以上のレチノイドＸ受容体に仲介される工程を調節するための、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項２０】
悪性細胞発生のインビボ調節のための、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項２１】
過剰増殖性疾患の治療のための、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項２２】
皮膚癌の治療のための、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項２３】
哺乳動物対象に投与して１またはそれ以上のレチノイドＸ受容体に仲介される工程を調節するための、請求項６に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
関連出願
本願は、出願番号第872,707号(1992年4月22日出願)の１部継続出願である出願、第944,783号（1992年9月11日出願)の1部継続出願である出願、第08/003,223号（1993年1月11日出願)の１部継続出願である出願、第08/027,747号（1993年3月5日出願）の１部継続出願である。
発明の分野
本発明は、細胞内受容体およびそのリガンドに関する。さらに詳しくは、本発明は、レチノール酸の特異的な受容体に対して選択的な活性を有する化合物およびそのような化合物の使用に関する。
発明の背景
ビタミンＡ代謝産物であるレチノイン酸は、かなり以前から広域スペクトルの生物学的作用を誘発することが知られていた。レチノイン酸の様々な構造類似体が合成され、それらも生物活性を有することが見出された。その幾つか、例えば、Retin-A（Johonson & Johnsonの登録商標）およびAccutane（Hoffmann-LaRocheの登録商標）は様々な病理学的な状態の治療に有用であることが分かった。ビタミンＡの代謝産物およびその合成類似体を、本明細書では、「レチノイド」と総称する。
合成レチノイドはレチノイン酸の様々な薬理作用を模倣することが知られている。しかしながら、いかなる合成レチノイドによっても、レチノイン酸の広範囲に及ぶ薬理作用を完全に再現することはできなかった。
医療の専門家たちはレチノイドの医薬としての適用に非常な関心を抱くに至った。ＦＤＡが承認したその用途には、重篤なざ瘡（アクネ）および乾癬が含まれる。これらの化合物が、長期の日光暴露が引き起こす皮膚損傷作用を阻止する、またはある程度、該作用を逆行させるために使用できることを示す多くの証拠がある。また、これらの化合物を、メラノーマ、子宮頸ガン、ある種の形の白血病、および基底細胞腫または扁平上皮細胞腫などの様々な重篤なガンの治療に使用し得ることを示す多くの証拠もある。レチノイドはまた、口腔の白斑症のような前悪性細胞疾患の治療効果をも有し、悪性化を予防しうることが知られている。
レチノイドの使用は、多くの重大な副作用を伴う。最も重大な副作用は、それらが最も強力な催奇形物質クラスに属することである。催奇形物質は、特定の胎児期に重篤な生まれつきの障害をもたらす化合物である。他の副作用には、処置した組織の刺激が含まれ、これも患者が耐えられないほど重い場合がある。
合成レチノイドが、レチノイン酸による様々な薬理学効果をもたらす作用を支配する、構造−活性相互関係の評価のために様々な研究が行われて来た。しかしながら、研究者が利用し得る検定手段は無傷の動物または摘出組織を用いるバイオアッセイであり、複雑な仕事であった。技術上の制限から、しばしば異なる検定のために異なる小動物種が使用されていた。薬物速度論および代謝作用の相異の可能性、および関連受容体における種間における相違の可能性により、結果の解釈は複雑であった。それにもかかわらず、様々な合成レチノイドの薬理作用が観察されている。
レチノイン酸シグナルトランスダクションの主な分子機構に関する洞察は１９８８年に得られた。それ以前は、数種の極めて豊富にある細胞性レチノイド結合タンパク質が、誤ってレチノイン酸のシグナル伝達受容体と推定されていた。１９８８年にステロイド／チロイドホルモン細胞内受容体スーパーファミリーの１員（Evans, Science, 240: 889-95(1988)）が、レチノイン酸シグナルを伝達すること［Ｇiguere et al., Nature, 330: 624-29（1987); Petkovich et al., Nature, 330: 444-50(1987)］が見出された。この予想外の発見は、レチノイン酸を他の非ペプチドホルモン類に関連づけるものであり、細胞の機能の変化におけるレチノイン酸効果を評価するものであった。今日、レチノイドは２つの異なる細胞内受容体サブファミリー：レチノイン酸受容体（ＲＡＲ）およびレチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）、を調節することが分かっている。
第１のレチノイン酸受容体、ＲＡＲ−アルファ(ＲＡＲ−alpha)と命名は、ステロイド／チロイドホルモン細胞内受容体スーパーファミリーの多くのメンバーの場合に示されたように、リガンド依存性の方法で特異的標的遺伝子の転写を調節するよう作用することが明らかにされた。ＲＡＲ−アルファの転写調節活性が依存している内因性低分子量リガンドは、全−トランス−レチノイン酸(all-trans-retinoic acid)である。遺伝子発現におけるレチノイン酸受容体を介する（仲介される）変化は細胞表現型の特徴的な変化をもたらし、次いで多くの組織のレチノイン酸への生物学的応答が表れる。最近、ＲＡＲ−アルファに密接に関連している２つの遺伝子が同定され、それらは極めて密接に関連しており、ＲＡＲ−ベータおよびＲＡＲ−ガンマと命名され［Brand et al., Nature, 332:850-53（1988); Ishikawa et al., Mol. Endocrin., 4:837-44（1990)］。レチノイド受容体類のリガンド結合を付与することが示される領域における一次アミノ酸配列の３種のＲＡＲサブタイプ間または異性体（isoform）間の相違は１５％以内である。全−トランス−レチノイン酸はレチノイン酸受容体類（ＲＡＲ）の天然のリガンドであり、これらの受容体と高い親和性で結合し、遺伝子発現を調節し得る。新たに発見されたレチノイド代謝産物である９−シス−レチノイン酸もＲＡＲの活性化剤である。
最近、他のステロイド／チロイド受容体スーパーファミリーの他のメンバーも、レチノイン酸に応答し得るという、関連した、しかし予想外の観察がなされた［Ｍangelsdorf et al., Nature, 224-29（1990)］。この新しいレチノイド受容体サブタイプは、全−トランス−レチノイン酸の誘導体がＲＸＲの内因性リガンドであり得ることを示唆する過去のデータから、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）と命名された。ＲＡＲ類と同様、ＲＸＲ類も、特有の発現パターンに対応する少なくとも３つのサブタイプまたは異性体、即ち、ＲＸＲ−アルファ、ＲＸＲ−ベータおよびＲＸＲ−ガンマを有することが知られている［Ｍangelsdorf et al., Genes & Devel., 6:329-44（1992)］。
ＲＡＲおよびＲＸＲのいずれも、インビボで全−トランス−レチノイン酸に応答するが、これら受容体はいくつかの受要な点で異なっている。第１にＲＡＲ類とＲＸＲ類は、一次構造が非常に異なる（例えば、ＲＡＲαとＲＸＲαのリガンド結合ドメインのアミノ酸の相同性はわずか２７％である）。これらの構造上の相異はＲＡＲ類とＲＸＲ類の様々なビタミンＡ代謝物および合成レチノイドに対する応答性の相対度の違いに反映されている。加えて、ＲＡＲとＲＸＲには、組織分布における明白な相異が観察される。例えば、内臓で高度に発現されないＲＡＲと異なり、ＲＸＲαｍＲＮＡは肝臓、腎臓、肺、筋肉および腸に最も多く示された。最後に、ＲＡＲとＲＸＲは標的遺伝子特異性において異なっている。例えば、最近、ＲＡＲでなくＲＸＲに対する応答性を付与する応答要素（エレメント）が、細胞のＩＩ型レチナル結合タンパク質（ＣＲＢＰＩＩ)およびアポリポタンパク質ＡＩ遺伝子に同定された。さらに、また、ＲＡＲがＣＲＢＰＩＩＲＸＲ応答要素を通してＲＸＲ−仲介活性化を抑制することが示された［Manglesdorf et al., Cell, 66: 555-61（1991)］。これらのデータは、２つのレチノイン酸応答経路は、単に付加的に存在するのではなく、複雑な相互作用を表していることを示している。最近、ハイマンら［Heyman et al., Cell 68:397-406(1992)］とレビンら［Levin et al., Nature, 355:359-61（1992)］は、独自に９−シス−レチノイン酸がＲＸＲ類の天然の内因性リガンドであることを独立に証明した。９−シス−レチノイン酸はＲＡＲのみならずＲＸＲとも結合してトランス活性化する、即ち、「二機能性」リガンドとして作用することが示された。
関連した、しかし明確に異なるこれら受容体の性質を考慮すると、レチノイドＸ受容体サブファミリーに、より高い選択性を有するリガンドは、１またはそれ以上のＲＸＲ異性体を介する工程を選択的に制御する上で非常に価値が高く、ＲＸＲ類を介す生理学的工程を別個に制御することができる。１またはそれ以上の（しかし全部ではない）受容体異性体に優先的に影響し得るリガンドも、医療適用に用いると、治療効率を高め得る。
上記および以下で引用する出版物および文献の全開示内容を本明細書に引用して組み込む。
発明の要約
本発明は１またはそれ以上のレチノイドＸ受容体を介する工程を調節するための化合物、組成物および方法を提供するものである。さらに詳しくは、本発明は、レチノイン酸受容体との比較において、選択的に、または優先的にレチノイドＸ受容体を活性化する化合物に関する。これらの化合物は選択的にレチノイドＸ受容体を介する工程を調節する。従って、本発明はまた、レチノイン酸受容体との比較において、１またはそれ以上のレチノイドＸ受容体を介する選択的な工程を、本発明化合物を用いて調節する方法に関する。本発明に用いられ、その一部を形成する化合物の例には、二環式ベンジル、ピリジニル、チオフェン、フラニル、およびピロール誘導体が含まれる。開示された化合物を含有する医薬組成物も本発明の範囲に包含される。また本発明化合物を用いてレチノイドＸ受容体を同定または精製する方法も包含される。
【図面の簡単な説明】
以下に説明する添付の図面を参照することにより、当業者は本発明をよりよく理解し、その利点を認識することができるであろう。
図１はＲＡＲおよびＲＸＲの異性体の、３−メチル−ＴＴＮＣＢによるトランス活性化を示す、規格化（標準化）された用量応答曲線である。
図２はＲＡＲおよびＲＸＲの異性体の、全−トランス−レチノイン酸によるトランス活性化を示す、規格化された用量応答曲線である。
図３はＲＡＲおよびＲＸＲの異性体の、９−シス−ＴＴＮＣＢによるトランス活性化を示す、規格化された用量応答曲線である。
図４はＲＡＲおよびＲＸＲの異性体の、３−メチル−ＴＴＮＥＢによるトランス活性化を示す、規格化された用量応答曲線である。
図５はＲＡＲおよびＲＸＲの異性体の、３−ブロモ−ＴＴＮＥＢによるトランス活性化を示す、規格化された用量応答曲線である。
図６はＲＡＲおよびＲＸＲの異性体の、３−メチル−ＴＴＮＣＨＢＰによるトランス活性化を示す、規格化された用量応答曲線である。
図７はＲＡＲおよびＲＸＲの異性体の、３−メチル−ＴＴＮＥＨＢＰによるトランス活性化を示す、規格化された用量応答曲線である。
図８は9-シス−レチノイン酸、全−トランス−レチノイン酸および3-メチル−ＴＴＮＣＢによる、トランスグルタミナーゼ活性に対する阻害作用を示す。
図９はRhinoマウスを用いた試験に基づく、９−シス−レチノイン酸、全−トランス−レチノイン酸、３−メチル−ＴＴＮＣＢ、及び１，２５−ジヒドロキシビタミンＤに関する局所用量応答（Topical Dose Response)を示す。
図１０は全−トランス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、３−メチル−ＴＴＮＣＢ、および３−メチル−ＴＴＮＥＢの、ラットＨＤＬコレステロールへの作用を示す。
図１１は３−メチル−ＴＴＮＥＢおよびＴＴＮＰＢそれぞれの、放射能標識チミジンのＤＮＡへの取り込みにおける濃度に関連した効果を表す。
図１２は３−メチル−ＴＴＮＥＢおよびＴＴＮＰＢ併用の、放射能標識チミジンのＤＮＡの取り込みにおける濃度に関連した効果を表す。
発明の詳細な説明
本発明は、レチノイン酸受容体（ＲＡＲ）サブファミリーのメンバーとの比較において、レチノイドＸ受容体サブファミリーのメンバーに選択的な活性を有するレチノイド様化合物またはリガンドを開示するものである。そのような化合物の例は、下記の式で表される、二環式ベンジル、ピリジニル、チオフェン、フラニル、およびピロール誘導体である。
0003727334.tif 000002
0003727334.tif 000003
［式中、Ｒ1およびＲ2はそれぞれ独立して水素または炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはアシルを表し；
ＹはＣ、Ｏ、Ｓ、Ｎ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯ、ＳＯ2、または製剤学的に許容し得る塩を表し；
Ｒ3は水素または炭素原子数１−４個の低級アルキルであり、ＹはＣまたはＮを表し；
Ｒ4は水素または炭素原子数１−４個の低級アルキルであり、ＹはＣを表す。ただし、ＹがＮであるとき、Ｒ4は存在せず、またＹがＯ、Ｓ、ＣＨＯＨ、ＣＯ、ＳＯまたはＳＯ2であるとき、Ｒ3またはＲ4のいずれも存在しない。；
Ｒ'およびＲ"は水素、炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはアシル、ＯＨ、炭素原子数１−４個のアルコキシ、チオールまたはチオエーテル、またはアミノを表し；
あるいはＲ'およびＲ"は一緒になってオキソ（ケト）、メタノ、チオケト、ＨＯ−Ｎ＝、ＮＣ−Ｎ＝、（Ｒ7Ｒ8）Ｎ−Ｎ＝、エポキシ、シクロプロピルまたはシクロアルキル基を形成し、ここにエポキシ、シクロプロピルおよびシクロアルキル基は炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはハロゲンで置換されていてもよい。；
Ｒ'"およびＲ""は水素、ハロゲン、炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはアシルを表す；
またはＲ'"およびＲ""は一緒になって炭素原子数３−１０個のシクロアルキル基を形成し、ここに該シクロアルキル基は炭素原子数１−４個の低級アルキルまたはハロゲンで置換されていてもよい；
Ｒ5は水素、炭素原子数１−４個の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ7、ＳＲ7、ＮＲ7Ｒ8、または（ＣＦ）nＣＦ3を表す。ただし、Ｒ6、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13の全てが共に水素でありＺ、Ｚ'、Ｚ"、Ｚ'"、またはＺ""が全部炭素であるとき、Ｒ5は水素ではあり得ない；
Ｒ6、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12、Ｒ13はそれぞれ独立して水素、炭素原子数１−４個の低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、ＯＲ7、ＳＲ7、ＮＲ7Ｒ8または（ＣＦ）nＣＦ3を表し、それが結合しているＺ、Ｚ、Ｚ'、Ｚ"、Ｚ'"、またはＺ""がＣである場合のみ存在し、あるいはそれが結合しているＺ'、Ｚ"、Ｚ'"、またはＺ""がＮであり、Ｒ6、Ｒ10、Ｒ11、Ｒ12またはＲ13のいずれか１つがＸである場合、それぞれ独立して水素または炭素原子数１−４個の低級アルキルを表し；
Ｒ7は水素または炭素原子数１−６個の低級アルキルを表し；
Ｒ8は水素または炭素原子数１−６個の低級アルキルを表し；
Ｒ14は水素、炭素原子数１−４個の低級アルキル、オキソ、ヒドロキシ、炭素原子数１−４個のアシル、ハロゲン、チオールまたはチオケトンを表し；
ＸはＣＯＯＨ、テトラゾール、ＰＯ3Ｈ、ＳＯ3Ｈ、ＣＨＯ、ＣＨ2ＯＨ、ＣＯＮＨ2、ＣＯＳＨ、ＣＯＯＲ9、ＣＯＳＲ9、ＣＯＮＨＲ9、またはＣＯＯＷを表す。ここにＲ9は炭素原子数１−４個の低級アルキル、フェニル、芳香族アルキルまたはq-ヒドロキシフェニル、q-ブロモフェニル、q-クロロフェニル、q-フルオロフェニル、またはq-ヨードフェニルを表し、ここにｑは２−４、Ｗは製剤的に許容される塩であり、Ｘは環上の任意のＣまたはＮと結合していてよい。；
Ｚ、Ｚ'、Ｚ"、Ｚ'"およびＺ""はそれぞれ独立してＣ、Ｓ、Ｏ、Ｎまたは製剤的に許容される塩を表す。ただし、別のＺと２重結合で結合しているかＯまたはＳである他のＺと結合しているとき、それはＯまたはＳではなく、他のＮであるＺと１重結合で結合しているとき、それはＮではない；
ｎは０−３；そして
第２および第７の構造式における点線は２重結合であってもよいことを表す。］
本明細書に用いられる製剤的に許容される塩には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、弗化水素酸、硫酸、クエン酸、マレイン酸、酢酸、乳酸、ニコチン酸、琥珀酸、蓚酸、リン酸、マロン酸、サリチル酸、フェニル酢酸、ステアリン酸、ピリジン、アンモニウム、ピペラジン、ジエチルアミン、ニコチンアミド、ギ酸、尿素、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、リチウム、桂皮酸、メチルアミノ、メタンスルホン酸、ピクリン酸、酒石酸、トリエチルアミノ、ジメチルアミノ、およびトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンの塩が含まれるがこれらに限定されない。その他の製剤的に許容される塩は当業者に既知である。
本発明の代表的な化合物には以下のものが含まれる。
4-[3,5,5,8,8-ペンタメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-2-ナフチル)カルボニル)］安息香酸として知られており、「3-メチル-TTNCB」と命名される、p[3,5,5,8,8-ペンタメチル-1,2,3,4-テトラヒドロ-2-ナフチル-(2-カルボニル)]安息香酸；
4−[(3−イソプロピル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸として知られており、“3−ＩＰＲ−ＴＴＮＣＢ”または化合物37と命名される、p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−３−イソプロピル−２−ナフチル−(2−カルボニル)]安息香酸；
4−[1−(3−イソプロピル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸として知られており、“3−ＩＰＲ−ＴＴＮＥＢ”または化合物42と命名される、p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−３−イソプロピル−2−ナフチル−(2−メタノ)]安息香酸；
4−[1−(3−エチル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸として知られており、“3−エチル−ＴＴＮＥＢ”または化合物45と命名される、p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−3−エチル−2−ナフチル−(2−メタノ)]安息香酸；
4−[1−(3−ブロモ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸として知られており、“3−ブロモ−ＴＴＮＥＢ”または化合物46と命名される、p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−3−ブロモ−2−ナフチル−(2−メタノ)]安息香酸；
4−[1−(3−クロロ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸として知られており、“3−クロロ−ＴＴＮＥＢ”または化合物43と命名される、p[5,5,8,8-テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−3−クロロ−2−ナフチル−(2−メタノ)]安息香酸；
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸として知られており、“3−メチル−ＴＴＮＥＢ”と命名される、p[3,5,5,8,8−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−2−ナフチル−(2−メタノ)]安息香酸；
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)ヒドロキシメチル]安息香酸として知られており、“3−メチル−ＴＴＮＨＭＢ”と命名される、p[3,5,5,8,8−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−2−ナフチル−(2−ヒドロキシメチル)]安息香酸；
4−[(3−ブロモ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸として知られており、“3−ブロモ−ＴＴＮＣＢ”または化合物41と命名される、p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−3−ブロモ−2−ナフチル−(2−カルボニル)]安息香酸；
4−[(3−クロロ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸として知られており、“3−クロロ−ＴＴＮＣＢ”または化合物38と命名される、p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−3−クロロ−2−ナフチル−(2−カルボニル)]安息香酸；
4−[(3−ヒドロキシ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸として知られており、“3−ヒドロキシ−ＴＴＮＣＢ”または化合物39と命名される、p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−3−ヒドロキシ−2−ナフチル−(2−カルボニル)]安息香酸；
4−[(3−エチル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸として知られており、“3−エチル−ＴＴＮＣＢ”または化合物40と命名される。p[5,5,8,8−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−3−エチル−2−ナフチル−(2−カルボニル)]安息香酸；
4−[(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)チオケト]安息香酸として知られており、“チオケトン”と命名される、p[3,5,5,8,8−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−2−ナフチル−(2−チオケト)]安息香酸；
4−[(3,5,5,8,8−ペンタメチル-5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]−Ｎ−(4−ヒドロキシフェニル)ベンズアミドとして知られており、“3−メチル−ＴＴＮＣＨＢＰ”と命名される、p[3,5,5,8,8−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−2−ナフチル−(2−カルボニル)]−Ｎ−(4−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド；
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]−Ｎ−(4−ヒドロキシフェニル)ベンズアミドとして知られており、“3−メチル−ＴＴＮＥＨＢＰ”または化合物63と命名される、p[3,5,5,8,8−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロ−2−ナフチル−(2−メタノ)]−Ｎ−(4−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド；
“ＴＰＮＥＰ”または化合物58と命名される、2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−5−カルボキシ酸；
“ＴＰＮＥＰＥ”または化合物Ｅt−58と命名される、エチル2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−5−カルボキシレート；
“ＴＴＮＥＰ”または化合物56と命名される、2−[1−(5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−5−安息香酸；
“ＴＰＮＥＢ”または化合物47と命名される、4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エポキシ]安息香酸；
“ＴＰＮＣＢ”または化合物48と命名される、4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)シクロプロピル]安息香酸；
“3−メチル−ＴＴＮＥＢＴ”または化合物55と命名される、4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ベンゼンテトラゾール；
“ＴＰＮＥＰＣ”または化合物60と命名される、5−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−2−カルボン酸；
“ＴＰＮＣＰ”または化合物62と命名される、2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)シクロプロピル]ピリジン−5−カルボン酸；
化合物Ｍe−62と命名される、メチル2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)シクロプロピル]ピリジン−5−カルボキシレート。
そのような化合物の代表的な構造式は以下の通りである。
0003727334.tif 000004
0003727334.tif 000005
化合物37
4−[(3−イソプロピル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸(3−ＩＰＲ−ＴＴＮＣＢ)
0003727334.tif 000006
化合物38
4−[(3−クロロ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸(3−クロロ−ＴＴＮＣＢ)
0003727334.tif 000007
化合物39
4−[(3−ヒドロキシ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸(3−ヒドロキシ−ＴＴＮＣＢ)
0003727334.tif 000008
化合物40
4−[(3−エチル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸(3−エチル−ＴＴＮＣＢ)
0003727334.tif 000009
化合物41
4−[(3−ブロモ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]安息香酸(3−ブロモ−ＴＴＮＣＢ)
0003727334.tif 000010
化合物42
4−[1−(3−イソプロピル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸(3−ＩＰＲ−ＴＴＮＥＢ)
0003727334.tif 000011
化合物43
4−[1−(3−クロロ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸(3−クロロ−ＴＴＮＥＢ)
0003727334.tif 000012
化合物44
4−[1−(3−ヒドロキシ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸(3−ヒドロキシ-ＴＴＮＥＢ)
0003727334.tif 000013
化合物45
4−[1−(3−エチル−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸(3−エチル−ＴＴＮＥＢ)
0003727334.tif 000014
化合物46
4−[1−(3−ブロモ−5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]安息香酸(3−ブロモ−ＴＴＮＥＢ)
0003727334.tif 000015
化合物47
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エポキシ]安息香酸(ＴＰＮＥＢ)
0003727334.tif 000016
化合物48
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)シクロプロピル]安息香酸(ＴＰＮＣＢ)
0003727334.tif 000017
化合物49
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エチル]安息香酸(ＴＰＮＥＢ)
0003727334.tif 000018
化合物50
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)メチリジンシクロペンタン]安息香酸(ＰＴＮＣＢ)
0003727334.tif 000019
化合物51
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)−2−メチルプロパニル]安息香酸(ＰＴＮＩＢ)
0003727334.tif 000020
化合物52
2−[(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)−2−カルボキシル]チオフェン−5−カルボン酸(ＴＴＮＣＴＣ)
0003727334.tif 000021
化合物53
2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エチニル]チオフェン−5−カルボン酸(ＴＴＮＥＴＣ)
0003727334.tif 000022
化合物54
4−[(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]ベンゼンテトラゾール(3−メチル−ＴＴＮＣＢＴ)
0003727334.tif 000023
化合物55
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ベンゼンテトラゾール(3−メチル−ＴＴＮＥＢＴ)
0003727334.tif 000024
化合物56
2−[1−(5,5,8,8−テトラメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−5−カルボン酸(ＴＴＮＥＰ)
0003727334.tif 000025
化合物57
2−[3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボキシル]ピリジン−5−カルボン酸
0003727334.tif 000026
化合物58
2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−5−カルボン酸(ＴＰＮＥＰ)
0003727334.tif 000027
化合物59
5−[(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボキシル]ピリジン−2−カルボン酸(ＴＰＮＣＰ)
0003727334.tif 000028
化合物60
5−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−2−カルボン酸(ＴＰＮＥＰＣ)
0003727334.tif 000029
化合物61
5−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]ピリジン−2−カルボン酸(ＴＰＮＥＰＣ)
0003727334.tif 000030
化合物62
2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)シクロプロピル]ピリジン−5−カルボン酸(ＴＰＮＣＰ)
0003727334.tif 000031
化合物Ｍe−62
メチル2−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)シクロプロピル]ピリジン−5−カルボキシレート
0003727334.tif 000032
化合物63
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]−Ｎ−(4−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド(3−メチル−TTNEHBP)
0003727334.tif 000033
化合物64
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]−Ｎ−(4−フルオロフェニル)ベンズアミド(3−Ｍe−ＴＴＮＥＦＢＰ)
0003727334.tif 000034
化合物65
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]−Ｎ−(4−カルボキシフェニル)ベンズアミド(3−Ｍe−ＴＴＮＥＣＢＰ)
0003727334.tif 000035
4−[(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]−Ｎ−(3−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド(3−Ｍe−ｍ−TTNCHBP)
0003727334.tif 000036
化合物67
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]−Ｎ−(3−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド(3−Ｍe−ｍ−TTNEHBP)
0003727334.tif 000037
化合物68
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]−Ｎ−(2−ヒドロキシフェニル)ベンズアミド(3−Ｍe−ｅ−TTNCHBP)
0003727334.tif 000038
化合物69
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル]−Ｎ−(3−カルボキシフェニル)ベンズアミド(3−Ｍe−ｍ−TTNECBP)
0003727334.tif 000039
化合物70
4−[1−(3,5,5,7,7−ペンタメチル−2−インデニル)エテニル]安息香酸
0003727334.tif 000040
化合物71
4−[1−(3,5,5,6,7,7−ベンズメチル−2−インデニル)エテニル]安息香酸
0003727334.tif 000041
化合物72
4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)メチル]安息香酸
加えて、チオフェン、フラニル、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、タジアゾールおよびピロール基はフェニル基の類似体として機能し、上記二環式ベンジル誘導体のフェニル基と置換し得る。本発明の代表的な誘導体は以下に例示する反応式に従って調製することができる。
0003727334.tif 000042
式１におけるＲ5が低級アルキルである化合物は、米国特許第2,897,237号の方法で調製することができる。Ｒ5がハロゲン、ＯＨ、アミノまたはチオである場合、適当な置換ベンゼンと２,５−ジクロロ−２,５−ジメチルヘキサンとをアルミニウムトリクロライドの存在下、標準的なフリーデルクラフツの反応条件下で結合させることにより、生成物を得る。
化合物１とモノメチルテレフタレート２との縮合は、室温で、ＣＨ2Ｃｌ2中で化合物１および２にＰＣｌ5を加えた後、ＡｌＣｌ3を加えることにより行う。
得られたメチルエステル３を水性ＫＯＨ−ＭｅＯＨ中で還流して加水分解した後、酸性にすることによりカルボン酸４を得る。
0003727334.tif 000043
ケトン４をＮａＢＨ4で処理することによりアルコール５を得た。
メチルエステル３をＴＨＦ中、メチルトリホスホニウムブロマイド−ナトリウムアミドで処理することにより、メタノ化合物６を得た。
メタノ化合物６にＫＯＨを加え、次いで酸性にすることによりカルボン酸７を得た。
0003727334.tif 000044
メチルエステル６を、酢酸エチル中、水素ガスと５％パラジウム／炭素により処理することにより、水素添加された化合物９を得た。
化合物９を、還元させたＭｅＯＨ中、ＫＯＨ水溶液で処理し、次いで酸性にすることにより、カルボン酸１０を得た。
0003727334.tif 000045
化合物１とチオフェン２,５−モノメチル二カルボン酸またはフラニル２,５−モノメチル二カルボン酸との縮合を、室温でＣＨ2Ｃｌ2中のＰＣｌ5を加え、次いでＡｌＣｌ3を加えることにより行い、エステル１１または１２を得、これらをＫＯＨで加水分解した後、対応する酸を得た。
0003727334.tif 000046
化合物型１３および１４の４,４−ジメチルクロマンおよび４,４−ジメチル−７−アルキルクロマン化合物、並びに４,４−ジメチルチオクロマン、４,４−ジメチル−７−アルキルクロマン、４,４−ジメチル１,２,３,４−テトラヒドロキノリンおよび４,４−ジメチル−７−アルキル−１,２,３,４−テトラヒドロキノリン類似体は、化合物３と同様の方法で合成された。即ち、適当なジメチルクロマン、ジメチルチオクロマンまたはジメチルテトラヒドロキノリンと、モノ−メチルテレフタラート酸クロリドとをＡｌＣｌ3またはＳｎＣｌ3の存在下、フリーデルクラフツの条件下で結合させ、次いで、塩基性加水分解および酸性化を行い、対応するカルボン酸を得る。テトラヒドロキノリン類似体の合成のためには、モノメチルテレフタール酸クロライドとのフリーデル−クラフツカップリングの前に、アミンをアシル化することが必要であった。適当なジメチルクロマン、ジメチルチオクロマンおよびテトラヒドロキノリンの合成は、米国特許第5,053,523号および第5,023,341号、並びに欧州特許公開第0284288号を参照されたい。
0003727334.tif 000047
化合物１８型の化合物は、グリチャール試薬１６をブロモテトラロン、ブロモインダンまたは他の二環式ケトン誘導体に求核付加することにより合成できる。得られたアルコールをメタノール性ＨＣｌで処理すると中間体１７が得られる。臭素をキノリン中でＣｕＣＮで置換するとニトリルが得られ、これを還流ＫＯＨ中で加水分解し、酸１８を得る。臭素化合物１５は、２,５−ジクロロ−２,５−ジメチルヘキサンおよび２−ブロモトルエンから、触媒量のＡｌＣｌ3を用いて合成された。
0003727334.tif 000048
化合物３−メチル−ＴＴＮＣＢおよび３−メチル−ＴＴＮＥＢをＤＣＣ、ｐ−アミノフェノールおよびＤＭＡＰで処理すると、アミノエステル１９および２０が得られた。
0003727334.tif 000049
代表的なピリジナル（pyridinal)誘導体（化合物２１、２３、２６および２７）は上記の例示合成反応式に従って調製できる。化合物２１の合成法は化合物７に関して記載した上記方法と同様である。ペンタメチルテトラヒドロナフタレン１、ピリジナル酸クロライド２４およびＡｌＣｌ3をＣＨ2Ｃｌ2中で撹拌し、ケトン２５を得た。ケトン２５をＴＨＦ中、メチルトリホスホニウムブロマイド−ナトリウムアミドで処理することにより、エテニル化合物２６を得た。化合物２６を加水分解（ＫＯＨ、ＭｅＯＨ）した後、酸性化し、酸２１を得た。シクロプロピル類似体２３はエテニル化合物２６を還流エーテル中、ＣＨ2Ｉ2、亜鉛末、ＣｕＣｌで処理することにより合成された（Ｓimmons-Smith反応）。得られたシクロプロピルエステル２７の加水分解は、メタノール性ＫＯＨ処理で行い、次いで酸性化することにより化合物２３を得た。Ｒ1−Ｒ2がメチルの場合、例えば、化合物６２（ＴＰＮＣＰ）は、以下の実施例３３のごとくにして得られる。
ＴＰＮＣＢ（化合物４８）のような他のシクロプロピル誘導体は類似体２３について記載した方法と同様にして調製できる。オレフィン６を上記のＳimmons-Smith試薬で処理した後、メタノール性ＫＯＨで加水分解し、酸性化（ＨＣｌ）し、所望のシクロプロピル誘導体を得る。ＴＰＮＥＢ（化合物４７）のようなエポキシ誘導体は、化合物７を、ＣＨ2ＣＩ2中、室温で数時間、ｍ−クロロ過安息香酸で処理することにより合成できる。
別法として、化合物５８（ＴＰＮＥＰ）、化合物６０（ＴＰＮＥＰＣ）、化合物６１（３ＴＴＮＥＰＥ）などのピリジナル類似体は以下の合成経路で調製できる。
0003727334.tif 000050
0003727334.tif 000051
以下に実施例を挙げ、本発明を詳しく説明するが、これらは本発明を制限するものではない。
実施例１  化合物３（Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＭｅ）の製造
ＣＨ2Ｃｌ2２００ml中の１,１,４,４,６−ペンタメチル−１,２,３,４−テトラヒドロナフタレン７mg（３４．７mmol）とモノメチルテレフタレート６ｇ（３３．３mmol）にＰＣｌ5８ｇ（３８．８mmol）を加えた。反応混合物を激しく沸騰させると、１０分以内に清澄になった。さらに１時間撹拌した後、ＡｌＣｌ3６ｇ（４３．５mmol）を１ｇづつ、１５分間かけて加え、反応混合物を一夜撹拌した。混合物を２０％水性ＨＣｌ  ３００mlに注加し、５％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンで抽出し、乾燥（ＭｇＳＯ4）し、濃縮し、ＭｅＯＨから結晶化し、メチルエステル３を約６ｇ（１６．５mmol）得た。
1HNMR (CD3OCD3)δ:1.20(s,2(CH3)),1.35(s,2(CH3)),1.75(s,2(CH2)),2.31(s,CH3),3.93(s,COOCH3),7.21(s,Ar-CH),7.23(s,Ar-CH),7.85(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.18(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例２  化合物４(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−メチル−ＴＴＮＣＢ))の製造
ＭｅＯＨ１００ml中に懸濁したメチルエステル３(６g、１６．５mmol)に５Ｎの水性水酸化カリウム５０mlを加えた。その混合物を１時間加熱還流し、冷却し、酸性化し(２０％水性ＨＣｌ）、そしてＥｔＯＡｃで有機物を抽出した。乾燥(ＭｇＳＯ4)後、生成物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン(１:４)から沈澱させ、酸４を約５g(１４．３mmol)得た。
1HNMR(CD3OCD3)δ:1.20(s,2(CH3)),1.35(s,2(CH3)),1.75(s,2(CH2)),2.31(s,CH3),7.21(s,Ar-CH),7.23(s,Ar-CH),7.91(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.21(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例３  化合物５(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'はＨ、Ｒ"はＯＨ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−メチル−ＴＴＮＨＭＢ))の製造
ケトン４(１g、２．８６mmol)を含むＴＨＦ−ＭｅＯＨ(１:１）溶液にＮａＢＨ4１００mgを加えた。その混合物を１０分間で５０℃に加熱し、冷却し、酸性化し（２０％水性ＨＣｌ）、そしてＥｔＯＡｃで有機物を抽出した。乾燥(ＭｇＳＯ4)後、生成物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン(１:３)から沈澱させ、アルコール５を５５０mg(１．５６mmol)得た。
1HNMR(CD3OCD3)δ:1.20(s,CH3),1.22(s,(CH3)),1.22(s,2(CH3)),1.65(s,2(CH2)),2.21(s,CH3),6.00(s,-CHOH-),7.09(s,Ar-CH),7.41(s,Ar-CH),7.53(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.01(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例４  化合物６(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＭｅ)の製造
乾燥ＴＨＦ２５ml中の１g(２．７mmol)のメチルエステル３にメチルトリホスホニウムブロミドナトリウムアミド１．２g(３．０８mmol)を加えた。その溶液を３時間またはＴＬＣにより反応が完了するまでＲＴで攪拌した(２０％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン)。水を加え、有機物をＥｔＯＡｃで抽出し、乾燥(ＭｇＳＯ4)し、濃縮し、ＳｉＯ2クロマトグラフィー(５％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン)により精製し、次いでＭｅＯＨから結晶化させ、メタノ化合物６を７００mg(１．９３mmol)得た。
1HNMR(CD3OCD3)δ:1.22(s,2(CH3)),1.30(s,2(CH3)),1.72(s,2(CH2)),1.95(s,CH3),3.85(s,COOCH3,5.29(s,=CH),5.92(s,=CH),7.19(s,Ar-CH),7.20(s,Ar-CH),7.39(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),7.96(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例５  化合物７(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−メチル−ＴＴＮＥＢ))の製造
ＭｅＯＨ２０ml中のメタノ化合物６(５００mg、１．３８mmol)に５Ｎ水性ＫＯＨ５mlを加え懸濁液を１時間還流した。酸性化(２０％水性ＨＣｌ)の後、その有機混合物を抽出(ＥｔＯＡｃ)し、乾燥(ＭｇＳＯ4)し、濃縮し、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン(１:５)から固形物を再結晶して３５０mg(１．０mmol)のカルボン酸７を得た。
1HNMR(CD3OCD3)δ:1.22(s,2(CH3)),1.30(s,2(CH3)),1.72(s,2(CH2)),1.95(s,CH3),5.22(s,=CH),5.89(s,=CH),7.19(s,Ar-CH),7.20(s,Ar-CH),7.39(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),7.96(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例６  化合物３７(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はイソプロピル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−ＩＰＲ−ＴＴＮＣＢ))の製造
実施例１および２の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−イソプロピル−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物を、化合物４と同様の方法で製造した。MP:254℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.19(d,J=7Hz,CH(CH3)2),1.21(s,2(CH3)),1.33(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),3.12(q,J=7Hz,CH(CH3)2),7.14(s,Ar-CH),7.37(s,Ar-CH),7.92(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.18(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例７  化合物３８(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はクロロ、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−クロロ−ＴＴＮＣＢ))の製造
実施例１および２中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−クロロ−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物４と同様の方法で製造した。MP:254℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.26(s,2(CH3)),1.32(s,2(CH3)).1.72(s,2(CH2)),7.35(s,Ar-CH),7.36(s,Ar-CH),7.91(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.19(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例８  化合物３９(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はヒドロキシ、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−ヒドロキシ−ＴＴＮＣＢ))の製造
実施例１および２中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−ヒドロキシ−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物４と同様の方法で製造した。MP:264℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.17(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.68(s,2(CH2)),7.02(s,Ar-CH),7.44(s,Ar-CH),7.77(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.27(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),11.50(s,-OH)
実施例９  化合物４０(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はエチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−Ｅｔ−ＴＴＮＣＢ))の製造
実施例１および２中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−エチル−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物４と同様の方法で製造した。MP:226℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.16(t,J=7.5Hz,-CH2CH3),1.19(s,2(CH3)),1.32(s,2(CH3)),1.69(s,2(CH2)),2.69(q,J=7.5Hz,-CH2CH3),7.20(s,Ar-CH),7.25(s,Ar-CH),7.87(brd,Ar-2(CH)),8.20(brd,Ar-2(CH))
実施例１０  化合物４１(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はブロモ、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−ブロモ−ＴＴＮＣＢ))の製造
実施例１および２中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−ブロモ−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンをに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物４と同様の方法で製造した。MP:275℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.25(s,2(CH3)),1.32(s,2(CH3)),1.71(s,2(CH2)),7.30(s,Ar-CH),7.54(s,Ar-CH),7.90(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.18(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例１１  化合物４２(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はイソプロピル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−ＩＰＲ−ＴＴＮＥＢ))の製造
実施例１、２、４および５中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−イソプロピル−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物７と同様の方法で製造した。MP:252℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.05(d,J=7Hz,CH(CH3)2),1.27(s,2(CH3)),1.32(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),2.73(q,J=7Hz,CH(CH3)2),5.32(s,=CH),5.87(s,=CH),7.06(s,Ar-CH),7.23(s,Ar-CH),7.40(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.040(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例１２  化合物４３(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はクロロ、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−クロロ−ＴＴＮＥＢ))の製造
実施例１、２、４および５中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−クロロ−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物７と同様の方法で製造した。MP:233℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.28(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.71(s,2(CH2)),5.42(s,=CH),5.89(s,=CH),7.23(s,Ar-CH),7.28(s,Ar-CH),7.37(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.03(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例１３  化合物４４(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はヒドロキシ、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−ヒドロキシ−ＴＴＮＥＢ))の製造
実施例１、２、４および５中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−ヒドロキシ−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物７と同様の方法で製造した。MP:216℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.21(s,2(CH3)),1.30(s,2(CH3)),1.68(s,2(CH2)),5.54(s,=CH),5.94(s,=CH),6.86(s,Ar-CH),7.00(s,Ar-CH),7.48(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)),8.07(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH))
実施例１４  化合物４５(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はエチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−Ｅｔ−ＴＴＮＥＢ))の製造
実施例１、２、４および５中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−エチル−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物７と同様の方法で製造した。MP:236℃。
1HNMR(CDCl3)δ:0.99(t,J=7.6Hz,-CH2CH3),1.27(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),2.29(q,J=7.6Hz,-CH2CH3),5.34(s,=CH),5.83(s,=CH),7.08(s,Ar-CH),7.12(s,Ar-CH),7.38(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.00(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例１５  化合物４６(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ5はブロモ、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(3−ブロモ−ＴＴＮＥＢ))の製造
実施例１、２、４および５中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを6−ブロモ−1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物７と同様の方法で製造した。MP:235℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.27(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.71(s,CH3),5.40(s,=CH),5.90(s,=CH),7.26(s,Ar-CH),7.36(s,Ar-CH),7.43(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.04(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例１６  化合物４７(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"は一緒になってＣＨ2−Ｏ（エポキシド）、そしてＸはＣＯＯＨ(ＴＲＮＥＢ))の製造
上記の化合物は、化合物６(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル）から製造する。ＣＨ2Ｃｌ2５ml中のオレフィン６(１g、２．７６mmol)にｍＣＰＢＡ(６００mg、３．４６mmol)を加え、反応混合物を室温で２時間撹拌する。水を加え、次いでエーテルで有機物を抽出する。そのエーテル層を水、１ＮのＮａ2ＣＯ3、ブラインで洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ4)し、濾過し、濃縮する。ＭｅＯＨから結晶化し、所望のエポキシドメチルエステルを得る。そのメチルエステルを還流メタノール性ＫＯＨ中で加水分解し、次いで酸性化(１Ｎ  ＨＣｌ)し、粗製のエポキシド酸４７を得、ＥｔＯＡｃ−ｈｅｘで結晶化することにより白色粉末６００mg(１．６４mmol)を得る(収率５９％)。MP:168℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.26(s,CH3),1.27(s,CH3),1.30(s,CH3),1.31(s,=CH3),1.69(s,2(CH2)),2.14(s,CH3),3.15(d,J=5.6Hz,CH-O),3.41(d,J=5.6Hz,CH-O),7.09(s,Ar-CH),7.28(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)),7.32(s,Ar-CH),8.01(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH))
実施例１７  化合物４８(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"は一緒になってＣＨ2−ＣＨ2(シクロプロピル)、そしてＸはＣＯＯＨ(ＴＰＮＣＢ))の製造
上記の化合物は、化合物６(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル）から製造する。還流冷却器、滴下ロートおよび磁気撹拌棒を備えた乾燥している１００ml三頚丸底フラスコに、亜鉛末７２２mg(１１．６５mmol)、塩化銅(ＣｕＣｌ)１０９mg(１．１０５mmol)、乾燥ＴＨＦ７．５mlおよびジヨードメタン１．４８g(５．５２mmol)を加える。添加ロートに乾燥ＴＨＦ５ml中の化合物６(１g、２．７６mmol)を加える。そのフラスコを８０℃になるまで熱し、次いで化合物６を滴下した。化合物６を完全に滴下した後、反応混合物を３０時間または反応が完了するまで還流し、次いでエーテル５０mlと飽和水性塩化アンモニウム溶液２０mlで希釈する。有機層を１０％ＮａＯＨ(３×２０ml)、ブラインおよび乾燥無水ＭｇＳＯ4で洗浄する。生成物を濃縮し、調製用ＴＬＣ(２％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン)で精製し、メチルエステル４８を２２０mg(０．５９mmol)得る。還流メタノール性ＫＯＨでメチルエステルを加水分解し、次いで酸性化(１Ｎ  ＨＣｌ)し、ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化した後、所望の化合物４８を１５０mg(０．４１mmol)得た(収率１５％)。MP:244℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.28(s,4(CH3)),1.39(s,CH2-CH2),1.69(s,2(CH2)),2.12(s,CH3),6.98(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)),7.06(s,Ar-CH),7.29(s,Ar-CH),7.91(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH))
実施例１８  化合物４９(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'はＨ、Ｒ"はＣＨ3、そしてＸはＣＯＯＨ(ＰＴＮＥＢ))の製造
上記の化合物は、１g(２．８７mmol)の化合物７(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル）から製造する。ＥｔＯＡｃ２５ml中の化合物７(１ｇ，２．８７mmol)に１０mgの１０％Ｐｄ／Ｃを加える。その混合物を減圧下で脱気し、次いでＨ2を加え、Ｈ2下で２時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、生成物をＥｔＯＡｃ−ヘキサンで結晶化し、所望の生成物４９を７５０mg(２．１４mmol)得た(収率７５％)。MP:208℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.24(s,CH3),1.25(s,CH3),1.26(s,CH3),1.29(s,CH3),1.61(d,J=7.2Hz,CH3),1.67(s,2(CH2)),2.12(s,CH3),4.30(q,J=7.2Hz,CH),7.02(s,Ar-CH),7.20(s,Ar-CH),7.24(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)),7.99(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH))
実施例１９  化合物５０(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメチリデン、シクロペンタン、そしてＸはＣＯＯＨ(ＰＴＮＣＢ))の製造
上記の化合物は、化合物４(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル）から製造する。０℃のＴＨＦ２５ml中の化合物４(１g、２．８７mmol)に１Ｍシクロペンテニルマグネシウムクロライド溶液８．６ml(８．６mmol)を加える。３０分撹拌後、水を加え、５Ｎ  ＨＣｌで酸性化する。酸性化した混合物を５分間熱し、冷却し、有機生成物をＥｔＯＡｃで抽出する。ＥｔＯＡｃ層を水とブラインで洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ4)し、濾過し、濃縮して、粗製の生成物を得る。ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化し、白色粉末として化合物５０を３４０mg(０．８５mmol)得た(収率３０％)。MP:201℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.27(s,4(CH3)),1.64(br t,CH2),1.68(s,2(CH2)),1.70(br t,CH2),1.97(s,CH3),2.15(br t,CH2),2.56(br t,CH2),7.04(s,Ar-CH),7.05(s,Ar-CH),7.29(d,J=8Hz,Ar-2(CH),7.97(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例２０  化合物５１(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はイソプロピリジン、そしてＸはＣＯＯＨ(ＰＴＮＩＢ))の製造
上記の化合物は、化合物４(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル)から製造する。０℃のＴＨＦ２５ml中の化合物４(１g、２．８７mmol)に１Ｍイソプロピルマグネシウムクロライド溶液８．６ml(８．６mmol)を加える。３０分撹拌後、水を加え、５Ｎ  ＨＣｌで酸性化する。酸性化した混合物を５分間熱し、冷却し、有機生成物をＥｔＯＡｃで抽出する。ＥｔＯＡｃ層を水とブラインで洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ4)し、濾過し、濃縮して、粗製のイソプロピリデン生成物を得る。ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化し、白色粉末として化合物５１を５５０mg(１．４６mmol)得た(収率５１％)。MP:297℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.25(br s,4(CH3)),1.64(s,=CCH3),1.66(s,=CCH3),1.87(s,2(CH2)),1.96(s,CH3),7.00(s,Ar-CH),7.03(s,Ar-CH),7.25(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),7.97(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例２１  化合物５２(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、ＺはＳ、そしてＸはＣＯＯＨ(ＴＴＮＣＴＣ))の製造
ＣＨ2Ｃｌ2２５ml中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレン１g(４．９mmol)とモノメチルチオフェンカルボン酸クロライド１g(４．９mmol)にＡｌＣｌ3１g(７．５mmol)を加える。反応混合物を１５分間加熱還流し、次いで冷却し、２０％水性ＨＣｌを加える。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、洗浄(水とブライン)し、乾燥(ＭｇＳＯ4)し、濾過し、濃縮して、ＭｅＯＨから結晶化して精製し、メチルエステル５２を４５０mg(１．２１mmol)得た(収率２５％)。そのメチルエステルをメタノール性ＫＯＨで加水分解し、次いで酸性化(２０％ＨＣｌ)し、ＥｔＯＡｃで抽出し、洗浄(水とブライン)し、乾燥(ＭｇＳＯ4)し、濾過し、濃縮して、ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化して精製し、化合物５２を３７５mg(１．０５mmol)を得た(収率８７％)。MP:206℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.26(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.71(s,2(CH2)),2.38(s,CH3),7.21(s,Ar-CH),7.44(s,Ar-CH),7.48(d,J=4Hz,Thio Ar-CH),7.85(d,J=4Hz,Thio Ar-CH)
実施例２２  化合物５３(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ＺはＳ、そしてＸはＣＯＯＨ(ＴＴＮＥＴＣ))の製造
化合物５３は、実施例４および５と同様の方法で、化合物５２のメチルエステルから製造した。MP:200℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.26(s,2(CH3)),1.30(s,2(CH3)),1.69(s,2(CH2)),2.10(s,CH3),5.21(S,=CH),5.88(S,=CH),6.76(d,J=4Hz,Thio Ar-CH),7.23(s,Ar-CH),7.68(d,J=4Hz,Thio Ar-CH)
実施例２３  化合物５４(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはテトラゾール(3−メチル−ＴＴＮＣＢＴ))の製造
トルエン中の５００mg(１．５１mmol)の4−[(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)カルボニル]ベンゾニトリル(ＣＨ2Ｃｌ2中で、1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンと4−シアノ安息香酸クロライドからＡｌＣｌ3で触媒される縮合により合成したもの)にトリメチルチンアジド３４２mg(１．６６mmol)を加える。混合物を２３時間還流し、冷却して、白色沈殿として所望のテトラゾール５４を５３７mg(１．４４mmol)得た(収率９６％)。LRMS:374.15。
1HNMR(CDSOCD3)δ:1.19(s,2(CH3)),1.32(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),2.25(s,CH3),3.19(s,,N-H),7.30(s,Ar-CH),7.32(s,Ar-CH),7.90(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.20(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例２４  化合物５５(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはテトラゾール(3−メチル−ＴＴＮＥＢＴ))の製造
トルエン中の５００mg(１．５２mmol)の4−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エチニル]ベンゾニトリル(ＣＨ2Ｃｌ2中で、1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンと4−シアノ安息香酸クロライドからＡｌＣｌ3を触媒として縮合させ、次いでＣＨ3ＰＰｈ3Ｂｒ−ＮａＮＨ2でケトンを処理したもの)にトリメチルチンアジド３４２mg(１．６７mmol)を加える。混合物を２３時間還流し、冷却して、白色沈殿として所望のテトラゾール５５を５３５mg(１．４４mmol)得た(収率９５％)。LRMS:372.25;
1HNMR(CDSOCD3)δ:1.21(s,2(CH3)),1.24(s,2(CH3)),1.68(s,2(CH2)),1.92(s,CH3),2.55(s,N-H),5.27(=CH),5.97(s,=CH),7.10(s,Ar-CH),7.18(s,Ar-CH),7.47(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.00(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
実施例２５  化合物２５(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＭｅ)の製造
実施例１および２の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを1,1,4,4−テトラメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンで置換すること、およびモノメチルテレフタル酸塩化物を4−メチルエステルピリジン−二−酸クロライドに置換することを除いて、上記の化合物は、化合物４と同様の方法で製造した。
実施例２６  化合物５６(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(ＴＴＮＥＰ))の製造
実施例４と同様に化合物２５をＣＨ3ＰＰｈ3Ｂｒ−ＮａＮＨ2で処理する。得られたオレフィン系メチルエステルをメタノール性ＫＯＨとで加水分解し、次いで酸性化(２０％ＨＣｌ)し、ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化し、化合物５６を得る。MP:173℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.26(s,CH3),1.27(s,CH3),1.30(s,2(CH3)),1.70(s,(CH2)),5.70(S,=CH),6.10(s,=CH),7.08(d,J=8Hz,Pyr-CH),7.27(s,Ar-CH),7.19(d,J=8Hz,Ar-CH),7.39(d,J=8Hz,Ar-CH),8.28(d,J=8Hz,Pyr-CH),9.31(s,Pyr-CH)
実施例２７  化合物５７(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、そしてＸはＣＯＯＨ)の製造
実施例１および２中のモノメチルテレフタル酸クロライドを4−メチルエステルピリジン−2−酸クロライドに置換することを除いて、化合物５７は、化合物６(実施例４)と同様の方法で製造した。得られたメチルエステルを実施例５と同様に加水分解し、化合物５７を得る。
1HNMR(CDCl3)δ:1.22(s,2(CH3)),1.30(s,2(CH3)),1.69(s,2(CH2)),2.40(s,CH3),7.22(s,Ar-CH),7.43(s,Ar-CH),8.13(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),8.54(d,J=8Hz,Pyr-CH),9.34(s,Pyr-CH)
実施例２８  化合物５８(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ(ＴＰＮＥＰ))の製造
実施例２６からのメチルエステルを実施例４と同様の方法でＣＨ3ＰＰｈ3Ｂｒ−ＮａＮＨ2で処理し、次いで、１時間還流してメタノール性ＫＯＨで加水分解し、２０％水性ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化し、化合物５８を得る。MP:235℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.27(s,2(CH2)),1.31(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),2.00(s,CH3),5.55(s,=CH),6.57(s,=CH),7.06(d,J=8.3Hz,Pyr-CH),7.12(s,Ar-CH),7.14(s,Ar-CH),8.20(d,J=8.1Hz,Pyr-CH),9.29(s,Pyr-CH)
実施例２９  メチル2−アセチル−5−ピリジンカルボキシレート３２の製造
０℃のメタノール１２０ml中の2,5−ピリジンジカルボン酸２９(３４g，０．２mmol)のスラリーにチオニルクロライド１５mlを滴下し、得られたスラリーを室温に温め、透明な溶液を得る。それから、その混合物を１２時間加熱還流し、黄色スラリーにする。濾過した反応混合物から黄色結晶性固形物として、ジメチル−2,5−ピリジンジカルボキシレート３０を得る。
ピリジンジカルボキシレート３０(１９．５g，０．１mol)をメタノール３００ml中の固形物ＫＯＨ(６．５１g，０．１mol)で室温で２時間処理し、濃厚な薄白色の懸濁液を得、それを濾過し、乾燥して、一カリウムピリジンカルボキシレート３を定量的な収量で得た。
粗製モノピリジンカルボキシレート３１(８８０mg，４mmol)を、２時間還流温度でチオニルクロライド３mlにより処理し、過剰ＳＯＣｌ2を通常の方法で除去した。−７８℃のＴＨＦ８ml中の粗製酸クロライドに新たに調製したＭｅ2ＣｕＬｉの１．０Ｍエーテル溶液(５．５ml，５．５mmol)をゆっくり加えた。得られた暗色スラリーを−７８℃で６０分間撹拌し、その後、２％ＨＣｌで反応を止めた。標準的な後処理をし、粗製混合物をクロマトグラフィーにかけて、メチル−2−アセチル−5−ピリジンカルボキシレート３２を黄色固形物として５６％以上の収率で得た。
実施例３０  （実施例２８と異なる反応式での)化合物５８(ＴＰＮＥＰ)の製造と、対応するエステルＥｔ−５８(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、そしてＸはＣＯＯＨ)の製造
１００mlのジクロロエタン中の2−ブロモトルエン(８．５g，５０mmol)と2,2−ジクロロ−2,2−ジメチルヘキサン(９．１５ｇ，５０mmol)の溶液をアルミニウムトリクロライド(０．６６g，５mmol)で処理する。得られた暗褐色の溶液を室温で３０分間撹拌し、その後、氷で反応を止めた。溶媒を除去し、メタノールから再結晶して、2−ブロモ−3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトロヒドロナフタレン３３を白色固形物として９５％の収率で得た。−７８℃の臭素化合物３３(１４１mg，０．５mmol)を含有するＴＨＦ溶液(４ml)をｎ−ＢｕＬｉの１．６Ｍヘキサン溶液(０．４ml，０．６mmol)で処理し、得られた混合物をその後、−７８℃で、2−アセチル−5−ピリジンカルボキシレート３２(７２mg，０．４mmol)のＴＨＦ(２ml)溶液にカニューレ挿入する。混合物を−７８℃で６０分間撹拌し、２％ＨＣｌで反応を止めた。溶媒を除去し、粗製混合物をクロマトグラフィーにかけて、中間生成物３４を得、それを５％ＨＣｌにより還流温度で処理し、次いで７０℃でＫＯＨ−ＭｅＯＨにより３０分間処理した。粗製混合物を標準的に後処理し、クロマトグラフィーにかけて2−[１−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル］ピリジン−5−カルボン酸５８を白色固形物として５０％以上の収率で得た。
1HNMR(CDCl3)δ:1.27(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),2.00(s,CH3),5.56(s,=CH),6.55(s,=CH),7.08(d,J=8.3Hz,Pyr-CH),7.12(s,Ar-CH),7.15(s,Ar-CH),8.23(d,J=8.3Hz,Pyr-CH),9.32(s,Pyr-CH)
ピリジンカルボン酸５８(１５mg，０．００４mmol)を６０分間、還流温度で５mlエタノール中においてＳＯＣｌ2一滴によって処理し、次いでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、定量的な収量でエチルエステルＥｔ−５８を白色固形物として得た。
1HNMR(CDCl3)δ:1.27(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.40(t,J=7.1Hz,-CH2CH3),1.70(s,2(CH2)),1.99(s,CH3),4.40(q,J=7.1Hz,-CH2CH3),5.51(s,=CH),6.53(s,=CH),7.01(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),7.12(s,Ar-CH),7.14(s,Ar-CH),8.15(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),9.23(s,Pyr-CH)
実施例３１  3−アセチル−2−ピリジンカルボン酸N,N−ジイソプロピルアミド３６ａの製造
一カリウムピリジンカルボキシレート３１(１．１g，５mmol)を７０℃においてＳＯＣｌ2(５ml，過剰)で２時間処理し、過剰のチオニルクロライドを除去し、黄色がかった固形物を得る。０℃の１０mlメチレンクロライド１０ml中のジイソプロピルアミン溶液(１g，１０mmol)に上記の酸クロライドのＣＨ2Ｃｌ2溶液(１０ml)を加える。得られたスラリーを室温で３時間撹拌し、アンモニウム塩から濾過する。溶媒を除去し粗製残渣をクロマトグラフィーにかけ、白色固形物として９０％の収率で生成物３６ａを得る。
実施例３２  化合物６０(ＴＰＮＥＰＣ)と化合物６１(３ＴＴＮＥＰＥ)の製造
2−ブロモ−3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8−テトラヒドロナフタレン３３(６２０mg，２．２mmol)とアセチルピリジンアミド３６Ａ(５００mg，２mmol)を上記の中間生成物３４を得た方法と同じ方法で８０％以上の収率で変換した。−７８℃のＴＨＦ５ml中ピリジンアミド３４(４３２mg，１mmol)溶液に１．５ＭのＤＩＢＡＬトルエン溶液(０．７ml，１．０５mmol)を加え、得られた黄色透明の溶液を６０分間ゆっくりと−２０℃になるまで温め、そして、水で反応を止めた。溶媒を除去し、粗製混合物をクロマトグラフィーにかけ、ピリジンアルデヒド３５を白色固形物として８３％の収率で得た。
1HNMR(CDCl3)δ:1.25(s,2(CH3)),1.29(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),1.96(s,CH3),5.47(s,=CH),5.92(s,=CH),7.10(s,Ar-CH),7.11(s,Ar-CH),7.70(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),7.88(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),8.72(s,Pyr-CH),10.06(s,CHO)
ピリジンアルデヒド３５(１０mg，０．０３mmol)をメタノール−水１：１の混合物２ml中のＨ2Ｏ2２．０mlで１０時間室温で処理し、１０％ＨＣｌで反応を止めた。ＥtＯＡc(４０ml)で混合物を抽出し、溶媒を除去し、5−[1−(3,5,5,8,8−ペンタメチル−5,6,7,8-テトラヒドロ−2−ナフチル)エテニル］ピリジン−2−カルボキシル酸６０を白色固形物としてほとんど定量的な収量で得た。
1HNMR(CDCl3)δ:1.26(s,2(CH3)),1.30(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),1.94(s,CH3),5.47(s,=CH),5.92(s,=CH),7.10(s,Ar-2(CH)),7.76(bs,Pyr-CH),8.16(bs,Pyr-CH),8.65(s,Pyr-CH)
ピリジンカルボン酸６０(５mg)を６０分間、還流温度においてエタノール１ml中でＳＯＣｌ2一滴によって処理し、次いでフラッシュクロマトグラフィーにかけ、定量的な収量でエチルエステル６１を白色固形物として得た。
1HNMR(CDCl3)δ:1.26(s,2(CH3)),1.29(s,2(CH3)),1.44(t,J=7.1Hz,-CH2CH3),1.69(s,2(CH2)),1.95(s,CH3),4.46(q,J=7.1Hz,-CH2CH3),5.43(s,=CH),5.88(s,=CH),7.09(s,Ar-CH),7.10(s,Ar-CH),7.64(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),8.03(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),8.68(s,Pyr-CH)
実施例３３  化合物６２(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"は共にＣＨ2ＣＨ2(ＴＰＮＣＰ))の製造
乾燥エーテル３ml中の１６２mg(２．４８mmol)の亜鉛末、２５mg(０．２５mmol)のＣｕＣｌ、およびＣＨ2Ｉ2３３２mg(１．２４mmol)に、乾燥エーテル５ml中のオレフィン２６(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル)１５０mg(０．４１３mmol)を滴下する。混合物を１２時間またはＨ−ＮＭＲによって反応が終わるまで加熱還流する。水を加え有機物をエーテルで抽出し、ＮＨ4Ｃｌおよびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥する。所望のシクロプロピル化合物をエーテル−ＭｅＯＨから結晶化することによって精製し、化合物６２のメチルエステル６０mg(０．１５９mmol)を薄黄色固形物として得た(収率３９％)。MP:177℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.27(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.35(s,CH2)),1.70(s,2(CH2)),1.85(s,CH2),2.11(s,CH3),3.90(s,CH3),6.75(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),7.14(s,Ar-CH),7.26(s,Ar-CH),7.98(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),9.23(s,Pyr-CH)
ＭｅＯＨ１０ml中の過メチルエステル６０mg(０．１６mmol)に水性６Ｎ  ＫＯＨ溶液１mlを加える。１時間室温で撹拌した後、完全に加水分解し、反応混合物を１Ｎ水性ＨＣｌで、固形物が沈澱するまで酸性化した。生成物をエーテルで抽出し、水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥した。ＥｔＯＡｃ−ヘキサンから結晶化し、３３mg(０．０９４mmol)のピリジンカルボン酸６２を得た(収率５９％)。MP:275℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.25(s,2(CH3)),1.35(s,2(CH3)),1.40(s,CH2)),1.72(s,2(CH2)),1.85(s,CH2),2.15(s,CH3),6.78(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),7.14(s,Ar-CH),7.26(s,Ar-CH),8.02(d,J=8.0Hz,Pyr-CH),9.15(s,Pyr-CH)
実施例３４  化合物６３(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ＸはＣＯＮＨＲ9、そしてＲ9は4−ヒドロキシフェニル(3−メチル−ＴＴＮＥＨＢＰ))の製造
無水エーテル２２ml中の７５０mg(１０mmol)のＤＭＦにオキザリルクロリド１．３mg(１０mmol)を加える。反応混合物を１時間撹拌し、次いで溶媒を除去し、粗製白色固形物(ジメチルクロロホルマジニウムクロライド)を得た。そのジメチルクロロホルマジニウムクロライドに乾燥ＤＭＦ１２ml中の化合物７(２．８７g、８．２４mmol)を加えた。反応混合物を２０分間室温で撹拌し、次いで０℃まで冷却した。冷却した酸化クロライド７の溶液に、4−アミノフェノール３．６２ｇ(３３mmol)とトリエチルアミン１．６８g(１６．３mmol)を含む、冷却した(０℃)ＤＭＦ溶液を滴下した。０℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を室温になるまで１２時間温めた。２０％水性ＨＣｌを加え、得られた固形物を濾過し、水、アセトンおよびＥｔＯＡｃで洗浄し、６００mg(１．３６mmol)の所望の化合物６３を得た(収率１７％)。
1HNMR(CDCl3)δ:1.29(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.71(s,CH2),1.99(s,CH3),5.31(s,=CH),5.80(s,=CH),6.85(d,Ar-2(CH)),7.09(s,Ar-CH),7.16(s,Ar-CH),7.40(d,Ar-2(CH)),7.48(d,Ar-2(CH)),8.40(d,Ar-2(CH))
実施例３５  化合物６４(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ＸはＣＯＮＨＲ9、そしてＲ9は4−フルオロフェニル(3−メチル−ＴＴＮＥＦＢＰ))の製造
上記化合物は4−アミノフェノールを4−フルオロアニリンに置換することを除いて、化合物６３と同様の方法で製造する。MP:203℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.28(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),1.96(s,CH3),5.33(s,=CH),5.81(s,=CH),7.05(d,J=9Hz,Ar-2(CH)),7.09(s,Ar-CH),7.13(s,Ar-CH),7.39(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)),7.59(dd,J=5.9Hz,Ar-2(CH)),7.75(br s,NH),7.78(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH))
実施例３６  化合物６５(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ＸはＣＯＮＨＲ9、そしてＲ9は4−フェニルカルボン酸(3−メチル−ＴＴＮＥＣＢＰ))の製造
上記化合物は4−アミノフェノールを4−アミノフェニルカルボキシレートに置換することを除いて、化合物６３と同様の方法で製造する。得られたエステルをメタノール性ＫＯＨ中で加水分解し、次いで酸性化(２０％ＨＣｌ)し、所望の化合物６５を得る。MP:200℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.28(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.71(s,2(CH2)),1.97(s,CH3),5.34(s,=CH),5.85(s,=CH),7.09(s,Ar-CH),7.14(s,Ar-CH),7.40(d,J=8Hz,Ar-CH),7.80(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),7.87(br s,Ar-2(CH)),8.14(br s,Ar-2(CH))
実施例３７  化合物６６(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はオキソ、ＸはＣＯＮＨＲ9、そしてＲ9は3−ヒドロキシフェニル(3−メチル−ｍ−ＴＴＮＣＨＢＰ))の製造
無水エーテル２２ml中の７５０mg(１０mmol)のＤＭＦにオキザリルクロライド１．３mg(１０mmol)に加える。反応混合物を１時間撹拌し、次いで溶媒を除去し、粗製白色固形物(ジメチルクロロホルマジニウムクロライド)を得た。そのジメチルクロロホルマジニウムクロライドに乾燥ＤＭＦ１２ml中の化合物４(２．８８g、８．２４mmol)を加えた。反応混合物を２０分間室温で撹拌し、次いで０℃に冷却した。冷却した酸化クロリド７の溶液を、4−アミノフェノール３．６２ｇ(３３mmol)とトリエチルアミン１．６８g(１６．３mmol)を含む、冷却した(０℃)ＤＭＦ溶液に滴下した。０℃で３０分間撹拌した後、反応混合物を室温になるまで１２時間温めた。２０％水性ＨＣｌを加え、得られた固形物を濾過し、水、アセトンおよびＥｔＯＡｃで洗浄し、７５０mg(１．７０mmol)の所望の化合物６６を得た(収率２１％)。MP:182℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.22(s,2(CH3)),1.32(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),2.37(s,CH3),6.58(m,Ar-2(CH)),7.20(d,J=8Hz,Ar-CH),7.22(s,Ar-CH),7.28(s,Ar-CH),7.91(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)),8.26(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH))
実施例３８  化合物６７(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ＸはＣＯＮＨＲ9、そしてＲ9は3−ヒドロキシフェニル(3−メチル−ｍ−ＴＴＮＥＨＢＰ))の製造
上記化合物は4−アミノフェノールを3−アミノフェノールに置換することを除いて、化合物６３と同様の方法で製造する。MP:136℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.28(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.70(s,2(CH2)),1.97(s,CH3),5.35(s,=CH),5.84(s,=CH),6.57(m,Ar-2(CH)),7.09(s,Ar-CH),7.14(s,Ar-CH),7.16(m,Ar-CH),7.39(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)),8.09(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH))
実施例３９  化合物６８(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ＸはＣＯＮＨＲ9、そしてＲ9は2−ヒドロキシフェニル(3−メチル−ｏ−ＴＴＮＣＨＢＰ))の製造
上記化合物は4−アミノフェノールを2−アミノフェノールに置換することを除いて、化合物６３と同様の方法で製造する。MP:180℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.28(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.71(s,2(CH2)),1.97(s,CH3),5.35(s,=CH),5.84(s,=CH),6.9(m,Ar-CH),7.08-7.2(m,Ar-CH),7.09(s,Ar-CH),7.13(s,Ar-CH),7.42(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)),7.83(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH))8.03(br s,Ar-CH),8.64(s,NH)
実施例４０  化合物６９(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ＸはＣＯＮＨＲ9、そしてＲ9は３−フェニルカルボン酸(3−メチル−ｍ−ＴＴＮＥＣＢＰ))の製造
上記化合物は4−アミノフェノールをメチル−3−アミノフェニルカルボキシレートに置換することを除いて、化合物６３と同様の方法で製造する。得られたエステルをメタノール性ＫＯＨ中で加水分解し、次いで酸化(２０％ＨＣｌ)し、所望の化合物６９を得る。MP:250℃。
1HNMR(CDCl3)δ:1.28(s,2(CH3)),1.31(s,2(CH3)),1.71(s,2(CH2)),1.97(s,CH3),5.34(s,=CH),5.85(s,=CH),7.09(s,Ar-CH),7.14(s,Ar-CH),7.40(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),7.55(m,Ar-CH),7.76(m,Ar-CH),7.80(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),7.87(s,Ar-CH),8.14(s,NH)
実施例４１  化合物７０(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ｎは０、そしてＸはＣＯＯＨ)の製造
上記化合物は実施例１、２、４および５中の1,1,3,3,5−ペンタメチリンダンを1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンに置換することを除いて、化合物７と同様の方法で製造する。MP:145℃
1HNMR(CDCl3)δ:1.05(s,2(CH3)),1.28(s,CH3),1.31(s,CH3),1.38(s,CH2),1.98(s,CH3),5.34(s,CH),5.84(s,CH),6.90(s,Ar-CH),6.92(s,Ar-CH),7.36(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH)),8.00(d,J=8.4Hz,Ar-2(CH))
実施例４２  化合物７１(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5およびＲ14はメチル、Ｒ'およびＲ"はメタノ、ｎは０、そしてＸはＣＯＯＨ)の製造
上記化合物は実施例１、２、４および５中の1,1,4,4,6−ペンタメチル−1,2,3,4−テトラヒドロナフタレンを1,1,2,3,3,5−ペンタメチリンダンに置換することを除いて、化合物７と同様の方法で製造する。MP:217℃
1HNMR(CDCl3)δ:1.01(d,J=7.3Hz,CH3),1.08(s,CH3),1.10(s,CH3),1.27(s,CH3),1.30(s,CH3),1.88(q,CH),2.00(s,CH3),5.35(s,=CH),5.85(s,=CH),6.95(s,Ar-CH),6.98(s,Ar-CH),7.38(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH)),8.00(d,J=8.3Hz,Ar-2(CH))
実施例４３  化合物７２(Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＲ5はメチル、Ｒ'およびＲ"はＨ、そしてＸはＣＯＯＨ)の製造
上記化合物は実施例１および２中の一メチルテレフタル酸クロライドをメチル−4−(ブロモメチル)安息香酸塩に置換することを除いて、化合物４と同様の方法で製造する。MP:237℃
1HNMR(CDCl3)δ:1.23(s,2(CH3)),1.27(s,2(CH3)),1.67(s,2(CH2)),2.16(s,CH3),4.06(s,CH2),7.01(s,Ar-CH),7.08(s,Ar-CH),7.25(d,J=8Hz,Ar-2(CH)),8.01(d,J=8Hz,Ar-2(CH))
レチノイド受容体サブタイプ選択性の評価
代表的な本発明の合成レチノイド化合物を分析した結果、レチノイド受容体のサブタイプ選択性を表し、レチノイドＸ受容体によって選択的に仲介される工程を調節し得ることが分かった。以下に詳しく説明する。
本明細書中、「レチノイドＸ受容体により選択的に仲介される（選択的にレチノイドＸ受容体を介する）工程」という語句は生物学的、生理学的、内分泌学的な工程、および、レチノイドＸ受容体に選択的な工程、例えば、１個および／または複数のＲＸＲサブファミリーメンバーを選択的に活性化する化合物、に応答する受容体または受容体混合物を介する他の身体の工程を指す。そのような工程の調節はインビボまたはインビトロで行われ得る。インビボ調節は、例えば、ヒト、ウマ、ヒツジ、ブタ、ウシ等広範な対象で行うことができる。
レチノイドＸ受容体に選択的なリガンドに応答性の受容体には、以下のものが含まれる。レチノイドＸ受容体アルファ、レチノイドＸ受容体ベータ、レチノイドＸ受容体ガンマ、およびそれら受容体の遺伝子にコードされている様々なスプライシング変異体およびその種々の組み合わせ（即ち、ホモ二量体、ホモ三量体、ヘテロ二量体、ヘテロ三量体など）。また、レチノイドＸ受容体とステロイド／チロイドスーパーファミリーの受容体の他のメンバーであって、レチノイドＸ受容体が相互作用してヘテロ二量体、ヘテロ三量体、およびより高次のヘテロ多量体を形成するような受容体との組み合わせも包含される。例えば、レチノイン酸受容体アルファ、ベータまたはガンマ異性体は、任意のレチノイドＸ受容体異性体（即ち、アルファ、ベータ、ガンマおよび様々な受容体異性体の任意の組み合わせを含む）とヘテロ二量体を形成し、様々なレチノイドＸ受容体はチロイド受容体とヘテロ二量体を形成し、ビタミンＤ受容体とヘテロ二量体を形成する。レチノイドＸ受容体サブファミリーのメンバーはＰＰＡＲ［イッセマンおよびグリーン（Issemann & Green）, Nature, 347: 645-49（1990)］；ＨＮＦ４［スラデクら(Sladek et al.）, Genes & Development, 4:2353-65（1990)］；受容体のＣＯＵＰファミリー［例、ミヤジマら（Miyajima et al.）, Nucleic Acids Research 16: 11057-74（1988); およびウオンら（Wang et al.）, Nature, 340: 163-66（1989)］；およびＣＯＵＰ-様受容体およびＣＯＵＰ相同体［例、ムルジクら（Mlodzik et al.）, Cell, 60: 211-24（1990);およびラヂアスら（Ladias et al.）, Science, 251: 5561-65（1991)記載］；および超気孔(ultraspiracle)受容体［例、オロら（Oro et al.）, Nature, 347:298-301（1990)］等を含むある種の「オルファン（孤児の）」受容体とヘテロ二量体を形成する。
本明細書中、「ステロイド／チロイドスーパーファミリー受容体（「核受容体」または「細胞内受容体」としても知られている）のメンバー」という語句は、リガンド依存性転写因子として機能するホルモン結合タンパク質を指す。また、この分類には、それに特異的なリガンドはまだ同定されていないが、既に同定されているステロイド／チロイドスーパーファミリー受容体（以下、オルファン受容体と称する）のメンバーも含まれる。細胞内受容体スーパーファミリーのメンバーはすべて、特異的なＤＮＡ配列に結合する固有の能力を備えている。結合した後、受容体に結合したリガンドの機能により、標的遺伝子（即ち、特異的なＤＮＡに関連した遺伝子）の転写活性を調節する。ハインマン(Heynman et al., Cell, 68:397-406)および出願中の米国特許第809,980号(これらはいずれも本願に引用して組み込む)をも参照されたい。
リガンドレチノイン酸およびその受容体による遺伝子発現の調節は、細胞培養物中の再構成系によって調べることができる。そのような系を用いて本発明の合成レチノイド化合物を、レチノイド受容体サブタイプ類、ＲＡＲα、ＲＡＲβ、ＲＡＲγ、ＲＸＲα，ＲＸＲβおよびＲＸＲγとの相互作用に関して評価した。
再構成リガンド依存性転写コントロールのための系は、エバンスら（Evans et al., Science, 240: 889-95(1988)によって開発され、「コトランスフェクション（同時トランスフェクション）」または「シストランス」アッセイと命名された。このアッセイについては、本明細書に組み込まれる米国特許第4,981,784号および第5,071,773号に詳細に記載されている。ハインマンら（Heynman, Cell, 68:397-406(1992)）をも参照。コトランスフェクションアッセイは、細胞内受容体によって開始される転写応答を調節する化合物の能力を評価するための機構を提供する。コトランスフェクションアッセイは、ホルモンまたはリガンド活性を監視する機能的で迅速なアッセイであり、インビボ系の良好な予試験である。
簡単に述べると、コトランスフェクションアッセイには、レチノイド受容体陰性の哺乳動物細胞バックグラウンドに、一時的なトランスフェクションによって２つのプラスミドを導入する。第１プラスミドはレチノイド受容体ｃＤＮＡを含み、コードしている受容体の構成的な発現を指令する。第２プラスミドはレチノイン酸応答エレメントを含有するプロモーター、それはリポーターの転写にレチノイド依存性を付与する、の制御下に、定量が容易なタンパク質、例えば、蛍ルシフェラーゼまたはクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）をコードするｃＤＮＡを含有している。このコトランスフェクションアッセイでは、全レチノイド受容体が全−トランス−レチノイン酸と、同様の方法で応答する。このアッセイにより、レチノイン酸および合成レチノイドの、個々のレチノイド受容体サブタイプと相互反応するリガンドとしての効率および能力を正確に測定することができる。
従って、ＣＶ−１細胞をレチノイド受容体サブタイプの１つ、リポーター構築物、および応答をトランスフェクション効率に関して規格化（標準化）するための内部対照を用いてコトランスフェクションすることからなるコトランスフェクションアッセイを用いて、本発明の合成レチノイド化合物を、それらのレチノイド受容体サブタイプとの相互反応に関して評価した。以下の実施例は例示のためのものである。
実施例４４
レチノイド：全−トランス−レチノイン酸（ＲＡ）および13-cis-レチノイン酸(13-cis-RA)はシグマ社から得た。9-cis-レチノイン酸(RA9-cis-RA)はハインマンら（Heyman et al., Cell, 68:397-406（1992)）の記載に従って合成した。レチノイドの純度は逆相高速液体クロマトグラフィーによって９９％以上にした。レチノイドを転写活性化アッセイに用いるためにジメチルスルホキシドに溶解した。
プラスミド：コトランスフェクションアッセイに用いる受容体発現ベクターは既述のものである［ｐＲＳｈＲＡＲ−α:ギグレら（Giguere et al(1987)）；ｐＲＳｈＲＡＲ−βおよびｐＲＳｈＲＡＲ−γ:イシカワら（Ishikawa et al（1990)）；ｐＲＳｈＲＸＲ−α：マンゲルスドルフら（Mangelsdorf et al.（1990)）；ｐＲＳｍＲＸＲ−βおよびｐＲＳｍＲＸＲ−γ:マンゲルスドルフら（Mangelsdorf et al., Genes & Devel., 6:329-44(1992)］。ＴＲＥ−回文(palindromic)応答エレメント:5'-TCAGGTCATGACCTGA-3'［ウメソノら(Umesono et al.）, Nature, 336:262-65（1988)］２コピーを含有する基礎的なリポータープラスミド△−ＭＴＶ−ＬＵＣ［ホレンバーグおよびエヴァンス（Hollenberg & Evans）, Cell, 55: 899-906(1988)］をＲＡＲ類のトランスフェクションに用い、ＲＸＲＥ（レチノイドＸ受容体応答エレメント［マンゲルスドルフら（Mangelsdorf et al.）, Cell、66:555-61(1991)］を含有するＣＲＢＰＩＩＦＫＬＵＣをＲＸＲ類のトランスフェクションに用いた。
ＣＶ−１細胞内のコトランスフェクションアッセイ：サル腎細胞株ＣＶ−１をシス−トランスアッセイに用いた。細胞を２つのプラスミドでトランスフェクトした。トランス−ベクターは、通常はレチノイド受容体タンパク質を発現しないこれらの細胞に、受容体タンパク質を効率よく産生させた。シス−ベクターはレチノイド応答性プロモーター、即ちＲＡＲＥまたはＲＸＲＥ、と結合した容易に検定できる遺伝子産物（この場合、蛍ルシフェラーゼ）を含有している。レチノイン酸または適当な合成レチノイドを加えると、ルシフェラーゼ遺伝子の発現を活性化するレチノイド−ＲＡＲまたはレチノイド−ＲＸＲ複合体が生成し、細胞エキスが光りを放つ原因になる。ルシフェラーゼ活性の程度は、レチノイド−受容体複合体の遺伝子発現活性化における有効性と正比例している。この敏感で再現性あるコトランスフェクション法によって様々な受容体異性体と相互作用するレチノイドを同定することができる。
細胞を１０％炭素樹脂で除去したウシ胎児血清を補充したＤＭＥＭ中で培養し、９６−ウエルプレートを用いて実験を行った。リン酸カルシウム法［ウメソノおよびエヴァンス（Umesono & Evans）, Cell, 57: 1139-46（1989)およびバーガーら（Berger et al.）, J.Steroid Biochem.Molec.Biol. 41:733-38（1992)］により、ｐＲＳ(ラウス（Rous）サルコーマウイルスプロモーター）受容体発現プラスミドベクター１０ng、リポータールシフェラーゼ（ＬＵＣ）プラスミド５０ng、内部対照としてのｐＲＳβ−ＧＡＬ（β−ガラクトシダーゼ）５０ng、およびキャリアープラスミドｐＧＥＭ９０ngを用いて、プラスミドを一時的にトランスフェクトした。細胞を６時間トランスフェクトし、次いで洗浄して沈殿を除去した。次いで細胞をレチノイドの存在下または不在下、３６時間インキュベートした。トランスフェクション後の工程はすべてBeckman Biomek Automated Workstationを用いて行った。細胞抽出物を調製し、次いでルシフェラーゼおよびβ−ガラクトシダーゼ活性をＢergerら(1992)が記載したようにして分析した。測定は、すべて独立した２つの実験で３回ずつ行い、内部対照としてβ−ガラクトシダーゼを用いてトランスフェクション効率に関して規格化した。レチノイド活性を全−トランス−レチノイン酸のそれに関して規格化し、全−トランス−レチノイン酸の濃度１０-5Ｍで観察された最大応答および効果（％）の５０％を与えるに必要なレチノイド濃度である、力価（ＥＣ50）として表した。得られたデータは少なくとも４回の独立した実験の平均値である。５％以下の効果は０％のバックグラウンドとの比較で統計学的に有意差がない。濃度１０-5Ｍにおける効果が２０％以下である化合物は非活性と考えられる。例えば、１０-4Ｍのように化合物濃度が高くなると、通常、これらの化合物は細胞に有毒であるので、本明細書の表および図には１０-5における最大効果が記載されている。
上記のごとく、合成レチノイド化合物３−メチル−ＴＴＮＣＢを、レチノイド受容体を介する遺伝子発現の調節能力に関して評価した。図１に示すように、この化合物はＲＸＲサブファミリーのメンバー、即ち、ＲＸＲα、ＲＸＲβ、およびＲＸＲγを活性化することができたが、ＲＡＲサブファミリーのメンバー、即ち、ＲＡＲα、ＲＸＲβおよびＲＸＲγは、有意に活性化しなかった。参考のために、全−トランス−レチノイン酸（図２）、および９−シスレチノイン酸（図３）を用いてアッセイを行い、これらのレチノイン酸異性体がＲＡＲおよびＲＸＲサブファミリー両方を活性化することが示された。
３−メチル−ＴＴＮＣＢ化合物について力価および効果を計算し、以下の表にまとめた。参考のために、９−シス−レチノイン酸に関するデータも記載する。
0003727334.tif 000052
表１のデータに示されているように、３−メチル−ＴＴＮＣＢは容易にかつ低濃度でＲＸＲ類を活性化する。さらに、３−メチル−ＴＴＮＣＢはＲＡＲよりもＲＸＲに対する強力な活性化物質であり、ＲＡＲよりもＲＸＲを優先的に活性化し、ＲＡＲを活性化するには、はるかに高濃度の化合物が必要である。対照的に、表１に示されているように、９−シス−レチノイン酸はＲＸＲを優先的に活性化しなかった。むしろ、９−シス−レチノイン酸はＲＸＲβおよびＲＸＲγ異性体よりもＲＡＲβおよびＲＡＲγ異性体をより低濃度でより迅速に活性化し、測定精度の範囲内で、ＲＸＲα異性体との比較ではＲＡＲα異性体を実質上同程度に活性化した。
以前に９−シス−レチノイン酸を含有すると報告された抽出物は、ＲＡＲαよりもＲＸＲαを、少なくとも１０倍強く誘導すると報告された（Heyman et al., Cell, 68:397, 399(1992年1月24日))。本明細書に記載のデータは、上記で議論したように、９−シス−レチノイン酸は、ＲＡＲよりもＲＸＲえお優先的に活性化しないということを示している。本発明の化合物はＲＡＲとの比較においてＲＸＲを優先的に活性化し、好ましくは、ＲＡＲよりもＲＸＲに対して少なくとも３倍強い活性化物質であり、より好ましくは、ＲＡＲよりもＲＸＲに対して少なくとも５倍強い活性化物質である。
力価および効果を３−メチル−ＴＴＮＥＢ、３−ブロモ−ＴＴＮＥＢ、３−メチル−ＴＴＮＣＨＢＰ、３−メチル−ＴＴＮＥＨＢＰ、ＴＰＮＥＰ、およびＴＰＮＣＰ化合物についても計算し、以下の表２に示す。
0003727334.tif 000053
0003727334.tif 000054
0003727334.tif 000055
表２のデータに示されているように、３−メチル−ＴＴＮＥＢ、３−ブロモ−ＴＴＮＥＢ、３−メチル−ＴＴＮＣＨＢＰ、３−メチル−ＴＴＮＥＨＢＰ、ＴＰＮＥＰ、およびＴＰＮＣＰはそれぞれＲＸＲを容易かつ優先的に活性化し、ＲＡＲよりもＲＸＲに対してより強力な活性化物質である。図４−７には、これら化合物群の幾つかについて、ＲＸＲよりもＲＡＲに対する活性化作用が低いことが示されている。レチノイン酸受容体異性体の全部ではないが、幾つかに優先的に作用する表１および表２に例示した合成レチノイドリガンドは、医薬組成物に含有せしめて、今日用いられているレチノイドよりもより治療効果が高く副作用像が改善された医薬として提供され得る。例えば、本発明化合物は標準的なレチノイドよりも皮膚に対する刺激が少ないことが観察されている。
本発明のレチノイド化合物はある種の皮膚科症状、例えば、角質形成異常、即ち、分化／増殖異常の治療に有用である。これら化合物の活性を測定するための標準的なアッセイはトランスグルタミナーゼの酵素活性の測定である。これはレチノイドの抗増殖作用の測定である。レチノイドは分化経路の抑制作用、これはトランスグルタミナーゼなどの扁平上皮細胞表現形の発現に関連する幾つかの生物化学マーカーの減少によって示される、を有することが示された［ユスパら（Yuspa et al.）, Cancer Research, 43: 5707-12（1983)］。図８から明らかなように、３−メチル−ＴＴＮＣＢ化合物はトランスグルタミナーゼ活性を阻害することができ、酵素活性を１ｘ１０-7Ｍで５０％阻害する。
本発明の化合物はライノ（Rhino）マウスを用いた試験［クリグマンら(Kligman et al.）, J. of Inves.Derm., 73:354-58（1979); メジクら（Mezick et al.）, J. of Inves.Derm., 83:110-13（1984)により記載］で良好な面ぼう分解活性を示した。Rhinoマウスを用いた試験は面ぼう分解剤のスクリーニングのためのモデルであった。３−メチル−ＴＴＮＣＢレチノイド化合物の活性を、９−シスおよび全−トランス−レチノイン酸の活性と共に図９に示す。３−メチル−ＴＴＮＣＢの０．１％溶液で卵形嚢の直径が約５０％減少した。また、３−メチル−ＴＴＮＣＢは、９−シスおよび全−トランス−レチノイン酸よりもRhinoマウスへの皮膚刺激が少ないことも観察された。
本発明の合成レチノイドを放射性リガンド置換アッセイでも試験した。大腸菌またはバキュロウイルスで過剰に発現されたＲＡＲおよびＲＸＲ異性体は放射性標識９−シス−レチノイン酸と、哺乳動物細胞で過剰に発現された受容体の結合パラメーターと実質上同様の結合パラメーターで結合した。種々の受容体異性体に対する結合における、様々な合成レチノイドの放射性標識レチノイン酸との競合を試験することにより、受容体そのものに関する相対的な解離定数を決定することができる。これにより、コトランスフェクションアッセイにおけるレチノイド活性における様々な決定因子によって生じる重大な矛盾点が検出できるので、これはコトランスフェクションアッセイに対する重要な補助分析である。これらの決定因子には、以下のものがあるであろう。（１）試験化合物における、活性化または不活化、代謝性変化、（２）遊離状態の試験化合物の濃度を変化させる、血清タンパク質との結合、（３）試験化合物間の細胞透過性の相違、（４）試験化合物の受容体タンパク質との親和性、即ち、Ｋd、における本質的な相違、および（５）試験化合物が結合した後の受容体に起きる立体配座の変化、これはリポーター遺伝子の発現に反映される。
３−メチル−ＴＴＮＣＢ化合物はＲＸＲ類に結合した3Ｈ−９−シス−レチノイン酸と置換し得るが、ＲＡＲ類と結合した放射性標識リガンドとは置換し得ない。これは、３−メチル−ＴＴＮＣＢ化合物がＲＡＲと比較してＲＸＲと優先的に結合すること、即ちＲＸＲに選択的なリガンドであると予測される性質を有することを示している。
コトランスフェクションアッセイにより、リガンドが、その影響を調べている特異的な遺伝的工程におけるアゴニストまたはアンタゴニストのいずれであるかについての機能的な評価が得られることが認められている。コトランスフェクションアッセイで他の細胞内受容体とは有意に反応しないことが決定されたリガンドは、薬理学的な副作用がより少ないと予測される。コトランスフェクションアッセイは生きている細胞内で行われるので、リガンドの評価により、候補物質の治療効果が期待される濃度における可能な毒性についての早期インジケーターを提供することができる。
本発明により、レチノイド受容体によって調節され得る工程には、インビトロ細胞分化、四肢形態発生などの形態発生学的工程の調節、細胞レチノイド結合タンパク質（ＣＲＢＰ）の調節などが含まれる。当業者には容易に理解できることであるが、レチノイドＸ受容体のためのリガンドが手に入ることにより、初めて、レチノイドＸ受容体サブファミリーのメンバーによって制御されている工程を解明することが可能となるのである。加えて、これらの受容体に対する抗体の同定のためのアッセイを開発させるのである。
本発明に従い、レチノイド受容体によって調節し得る工程には、さらに、脂質代謝のインビボ調節；皮膚関連工程（例、ざ瘡、乾癬、老化、皺等）のインビボ調節；プログラムされた細胞死（アポプトーシス）のインビボ調節；悪性細胞の発達、例えば、急性前骨髄細胞性白血病、乳癌、前立腺癌、肺ガン、食道および気道の癌、皮膚癌、膀胱癌、および肉腫などの発現のインビボ調節；例えば口腔白斑症のような前ガン状態のインビボ調節；リウマチ様関節炎のような自己免疫疾患のインビボ調節；脂肪酸代謝のインビボ調節；などが含まれる。そのような適用により、催奇形発生作用、皮膚刺激、粘膜乾燥、脂質障害等の望ましくない副作用の発生を減少させつつ、様々な生物学的工程が調節できると予測される。インビボ適用は、例えば、ヒト、齧歯類、羊、豚、牛等の広範な対象に用いることができる。
例えば、上記インビボ脂質代謝調節に関しては、アポリポタンパクＡＩは血漿高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）コレステロールの主要な成分である。ヒトにおけるＨＤＬの循環濃度は冠血管疾患の危険性と逆比例関係にあるので、アポリポタンパクＡＩの合成の調節は、冠血管疾患の治療に有用であると考えられる。アポリポタンパクＡＩの転写の調節は細胞内受容体スーパーファミリーのメンバーによって制御されており、さらに、アポリポタンパクＡＩ遺伝子転写開始部位ＡはＲＸＲαに優先的に応答する高度に選択的なレチノイド応答性エレメント（ＲＸＲＥ）であることが、確立されている。ロットマンら（Rottman et al.）, Mol.Cell.Biol., 11:3814-20（1991)。従って、レチノイン酸受容体のＲＸＲファミリーのメンバーを選択的に活性化するリガンドはアポリポタンパクＡＩの転写を調節し得る。本発明者らは以下の実施例に示すように、インビボ研究で、ＲＸＲに選択的な活性を有するリガンドは血漿ＨＤＬ濃度を有意に上昇させるために使用できることを証明した。
実施例４５
雄性Sprague-Dawleyラット(160-200g)をハーランドから得た。動物を標準的な実験室食(Harlan/Teklad)を与え、環境をコントロールした動物室に維持した（照明期間；午前６時から午後６時まで）。動物にオリーブ油に懸濁して調製した化合物を与えた。
ＲＸＲ活性化によりＨＤＬコレステロールが調節し得ることを評価するために、最初の研究として、ラットに４日間ＲＡＲ選択性化合物、全−トランス−レチノイン酸、非選択性ＲＡＲ／ＲＸＲアゴニスト、９−シス−レチノイン酸、および２つのＲＸＲ選択性化合物、３−メチル−ＴＴＮＣＢまたは３−メチル−ＴＴＮＥＢのいずれかを４日間投与することを含む実験を行った。各薬物は１００mg／kg、i.p.投与であった。正の対照群はビヒクルであるオリーブ油を投与された。最後の治療から２４時間後、ラットをＣＯ2吸入で致死させ、０．１５％ＥＤＴＡ０．１mlを入れた管に、下大静脈から採血し、１５００ｘｇで２０分間、４℃において遠心した。血漿を分離し、血漿全コレステロールおよび高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−コントロール）の評価のために保存した。
血漿全コレステロールはBoeringer Mannheim Diagnostics High Performance Chlesterol Methodsにより、ABBOTT VP Bichromatic Analyzerを用いて行った。血漿をヘパリン−マンガン沈殿処理してＨＤＬ−含有画分を調製した後、ＨＤＬを測定した。この画分中のＨＤＬ−コレステロールは以前に述べたごとくに見積もられた。全ＨＤＬ分離物を、アガロースゲル電気泳動により、リポタンパク質による汚染に関してチェックした。
この研究の結果を図１０に示す。図に示されているように、ＲＸＲ選択的な化合物、特に、３−メチル−ＴＴＮＥＢ、を投与されたラットは実質的で統計学的に有意なＨＤＬ濃度上昇を示した。ＲＸＲ選択的リガンドである３−メチル−ＴＴＮＥＢは最も有効なので、この化合物を、さらに４日間、オリーブ油０．５ml中０．３、１、３、６、１０、３０、１００または３００mg／kg i.p.投与するか、オリーブ油０．５ml中１、３、１０、３０、１００または３００mg／kg p.o.投与した。さらに、その薬理作用に耐性が生じるか否かを調べるために、３０日間、１０、３０または１００mg／kgの３−メチル−ＴＴＮＥＢを投与（p.o.）した。また、種々の用量の３−メチル−ＴＴＮＥＢを４日間投与されたラットに関して、大抵の場合、比較的低用量（５mg／kg以下）の３−メチル−ＴＴＮＥＢによってＨＤＬ上昇が得られることが観察された。３−メチル−ＴＴＮＥＢの３０日間投与で、その薬理作用に対する耐性の出現を示すものはなかった。
さらに、以下の実施例に示すように、ＲＸＲ選択的リガンドがアポリポタンパクＡＩの転写調節に及ぼす影響を示すために、既述の本発明の範囲に含まれるコトランスフェクションアッセイを用いてインビトロ研究をも行った。
実施例４６
本実施例はレチノイド受容体類ＲＡＲおよびＲＸＲの、アポリポタンパクＡＩ遺伝子由来のＲＸＲ応答エレメント（”Ａ”部位）を含有する基礎的なプロモーターの制御下におけるリポーター分子（例、ルシフェラーゼ）に対する転写特性についての研究に関する。種々の受容体をコードするプラスミド構築物を、リポータープラスミドと一緒にヒト肝細胞株（ＨｅｐＧ−２）にトランスフェクトした。アポリポタンパクＡＩの”Ａ”部位（転写開始部位に対し、−２１４〜−１９２）の多量体（マルチマー）を含有するリポータープラスミドはＲＸＲと結合することが示された。ウイドムら（Widom et al.）, Mol. Cell. Biol. 12:3380-89（1992); ラヂアスおよびカラサンサス（Ladias & Karathanasis）, Science, 251: 561-65（1991)。トランスフェクション、処理、収穫およびアッセイの後、得られたデータをトランスフェクション効率に関して調節するために、データをトランスフェクトされたβ−ガラクトシダーゼ活性に関して規格化（normalize）した。結果は、ＲＸＲ−特異的リガンド類、３−メチル−ＴＴＮＣＢおよび３−メチル−ＴＴＮＥＢ使用系での活性化を証明するものであり、これはＲＸＲ特異的リガンドがアポリポタンパクＡＩ遺伝子由来の”Ａ”部位を介して転写特性を調節し得ることを証明するものであった。これらの化合物は、トランスフェクションにＲＡＲを用いたときは効果がなく、そのリポーター特異性が証明された。ＲＸＲによる転写調節はホルモン応答エレメントの存在に依存している。
ＲＡＲ類に特異的な活性を有するがＲＸＲ類には実質上活性を持たないものと比較して、ＲＸＲ類に特異的な活性を有するがＲＡＲには実質上活性を持たないリガンドを含む化合物を投与することにより、個々のリガンドによっては有意な応答が得られないような非常に低濃度の用量で細胞応答が得られるという驚くべき発見があった。具体的に、チミジン取り込みアッセイを用いるインビトロ研究で、ミエローマ細胞株（ＲＰＭＩ８２２６）の増殖に関するＲＸＲ特異的リガンドとＲＡＲ特異的リガンドの濃度−関連効果が研究された。ブラッドレー（L.M.Bradley）, Selected Methods in Cellular Immunology, Ch. 10.1, pp. 235-38, Mishell & Shiigi（編), Freeman & Co., New York,1980。このアッセイは放射能標識チミジンのＤＮＡへの組み込み試験であり、化合物の、ＤＮＡへのチミジンの取り込み阻害能力を調べることで、細胞増殖に関する手段を与える。細胞増殖を阻害する化合物はある種の癌の治療に有用であることがよく知られている。
既述（表２）のごとく、３−メチル−ＴＴＮＥＢはＲＸＲサブファミリーのメンバーを活性化するがＲＡＲサブファミリーのメンバーを活性化しない。ミエローマ細胞の増殖に対する３−メチル−ＴＴＮＥＢの作用の試験により、チミジン取り込みにおける濃度依存性の阻害作用が示された。ＩＣ50（最大応答の５０％阻害をもたらすに必要な３−メチル−ＴＴＮＥＢの濃度）は図１１に示すように、１０-7Ｍである。図１１に示すように、１０-8Ｍ以下の濃度では、細胞増殖には、実質上何ら影響を及ぼさない。
化合物ＴＴＮＰＢがＲＡＲサブファミリーのメンバーを活性化するが、ＲＸＲサブファミリーのメンバーにはなんら活性を持たないことは周知である。以下に化合物ＴＴＮＰＢを示し、その活性を表３に示す。
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ＴＴＮＰＢの細胞増殖に対する効果を図１１に示す。ＴＴＮＰＢのＩＣ50値は約５×１０-11Ｍであり、１０-11Ｍ以下の濃度では、細胞増殖には、実質上何ら影響を及ぼさない。
しかしながら、これら２つの化合物（３−メチル−ＴＴＮＥＢとＴＴＮＰＢ）が併存する場合、それぞれが単独では実質上なんら抗増殖作用を表し得ないような濃度で、２つの化合物の組み合わせによって細胞増殖が効果的に阻害される。この２化合物の組み合わせは、相加作用以上の効果、即ち、相乗効果を与えるようである。
例えば、図１２に示すように、濃度１０-11ＭのＴＴＮＰＢのチミジン取り込み阻害作用は９％である。しかしそれを濃度１０-8Ｍ（細胞増殖には効果がない）の３−メチル−ＴＴＮＥＢと組み合わせると、４９％という非常に高い阻害効果を示す。同様に、３−メチル−ＴＴＮＥＢの阻害作用はそれ単独では効果を示さない濃度のＴＴＮＰＢの存在により大いに増大されることも見出された。
ＴＴＮＰＢのような化合物の毒性副作用は濃度依存性であることが周知であるので、そのようなＲＡＲ特異的化合物とＲＸＲ特異的化合物との併用による相乗効果は、低用量で有効ならしめると共に、その結果、毒性副作用を減少することができると期待される。例えば、癌の化学療法では、そのような２つの化合物を併用することで、比較的低用量で、高用量の化合物により得られる望ましくない副作用を最小限に抑えて、所望の有利な効果をもたらすことができると予測される。
コトランスフェクションアッセイを用いるインビトロ研究によってもこの同じ相乗効果が示された。例えば、既述のコトランスフェクションアッセイを、ＲＡＲ−αおよびＲＸＲ−αと、ＡｐｏＡ１応答エレメント”Ａ”部位（前後関係ＴＫＬＵＣにおける）［ラヂアスおよびカラサンサス（Ladias & Karathanasis）, Science, 251: 561-65（1991)］からなるリポーターを用い、ＨＥＰＧ２細胞内で行う。この研究では、既述のリポーター１００ngを用い、ＲＳＶプロモーターの量を一定に保つために担体としてＲＳＶＣＡＴを用いた。すべての化合物を、最終濃度１０-7Ｍで加えた。ＲＸＲ特異的化合物である３−メチル−ＴＴＮＥＢ（上記表２）およびＲＡＲ特異的化合物であるＴＴＮＰＢ（上記表３）を用いた。下記の表４に示すように、コトランスフェクションアッセイを用いて観察される、相対的に規格化した応答は、２化合物を併用したとき、これら化合物を個別に使用した場合と比較して、相乗的な効果のあることを証明していた。
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以上の説明から、当業者ならば認識できるように、ＲＡＲ選択性化合物の特定の濃度における生物学的応答は該化合物をＲＸＲ選択性化合物と併用することにより相乗的に高められる。同様に、ＲＸＲ選択性化合物の生物学的応答も、ＲＡＲ選択性化合物を併用することにより高め得る。このように、ＲＡＲおよびＲＸＲに選択的な化合物を用いることにより、化合物を単独で用いる場合よりも低濃度で所望の生物学的応答を達成することが可能になった。そのようなＲＡＲとＲＸＲとの組み合わせによって得られる利点には、少ない副作用で所望の治療効果を達成できることがある。加えて、ＲＡＲとＲＸＲの併用により、それぞれの化合物単独では得られない新規な効果を得ることができるかもしれない。
さらに、ＲＸＲ−特異的化合物はまた、他のホルモン系の応答を相乗的に高めることも証明された。具体的には、ペルオキシソーム増殖因子−活性化受容体（peroxisome proliferator−activated receptor）（ＰＰＡＲ）は脂質ホメオスタシスでの役割を有する細胞内受容体スーパーファミリーのメンバーである。ＰＰＡＲはクロフィブリン酸のような両親媒性カルボキシレートによって活性化されることが示されており、ペルオキシソーム増殖因子と称されるこれらの物質は低脂血化剤としてヒトに用いられて来た。ＲＸＲαおよびＰＰＡＲ発現プラスミドでトランスフェクトされたＨｅｐＧ２細胞に９−レチノイン酸（ＲＡＲとＲＸＲの両者を活性化するレチノイドリガンド）とクロフィブリン酸を投与すると、受容体遺伝子は、各リガンド独自による活性化の合計よりも高く活性化された。クリーワーら（Kliewer et al.）, Nature, 358: 771(1992)。同様に、ＨｅｐＧ２細胞を、上記の２つの受容体でコトランスフェクションすると、表５に示すように、標的リポーター遺伝子の活性化に基づいて決定される応答は、ＲＸＲ−特異的リガンド（３−メチル−ＴＴＮＥＢ）およびクロフィブリン酸の両者を添加した場合、相加的な応答以上の応答が得られることが見出された。
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同様の相乗効果は、ＲＸＲおよびＲＸＲ特異的リガンドおよびビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）およびその同類リガンドを用いても観察された。ホルモン応答エレメントを有するＣＶ１細胞をＲＸＲβとＶＤ受容体でコトランスフェクションし、ＲＸＲ選択的な３−メチル−ＴＴＮＣＢおよび１,２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ（１,２５−Ｄ）を加えると、下記表６に示すように、それぞれのリガンド単独で観察されるよりも大きい相加効果が観察された。
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上記の結果は、各受容体対（ＲＸＲα／ＰＰＡＲおよびＲＸＲβ／ＶＤＲの各々）は、それら各受容体を特異的に活性化することが既知であるリガンドの存在下、相乗性の応答を産生することができることを示している。結果は、単一物質の応答が、２つの物質の併用で上昇されること、あるいは混合物に含まれる各物質を低用量で使用することにより、もとの用量に匹敵する生物学的および治療的応答を達成し得ることを示している。
ＲＸＲ特異的リガンドがＲＡＲリガンド、ＰＰＡＲリガンド、およびビタミンＤリガンドと相乗的に作用し得るという観察は、ＲＸＲ特異的リガンドが単独で治療剤として有用であるのみならず、ＲＸＲ特異的リガンドを加えることで、上昇した生物学的および治療的応答を得るための併用治療においても有用であることを示している。そのような併用治療はまた、低用量の各物質を用いることで、各物質に関連した副作用を減少するというさらなる利点をも与える。例えば、皮膚病（ざ瘡、乾癬）、過剰増殖性疾患（良性および悪性の腫瘍）およびカルシウムホメオスタシスの異常などの様々な疾患の治療のために、ビタミンＤまたは関連のビタミンＤ受容体リガンドをＲＸＲ選択的化合物と併用することにより、ビタミンＤ単独治療に起因する副作用を減少することができるかもしれない。
ＲＸＲは様々な細胞内受容体スーパーファミリーのメンバーとヘテロ二量体を形成することが知られているので、ＲＸＲ選択性リガンドの使用において観察される相乗的な応答は、ヘテロ二量体を形成することができる他の受容体を用いても達成できるかもしれないと予測される。そのような受容体には、上記のごとく、ＰＰＡＲ類、ＲＡＲ類、ビタミンＤ、チロイドホルモン受容体、ＨＮＦ４、ＣＯＵＰ受容体ファミリー、並びに、その他の未だ細胞内受容体スーパーファミリーのメンバーであると同定されていないものが含まれる。
また当業者ならば理解できるように、上に開示された化合物は、選択的なレチノイド受容体活性が要望される場面、および他の近縁の細胞内受容体との交差反応を最小限にすることが望まれる場面での、薬剤適用に容易に使用し得る。本発明のインビボ適用には、開示した化合物の哺乳動物、特にヒトへの投与が含まれる。
本発明の化合物は相対的に脂肪に可溶の、あるいは親油性の小分子であり、細胞質膜を通過する受動拡散によって侵入する。従って、これらのリガンドは経口、注射および局所適用に適する。適用されると、これらのリガンドは選択的にレチノイドＸ受容体を活性化し、それにより選択的にこれら受容体を介する工程を調節する。
本発明の医薬組成物は、本発明の活性化合物またはそのような化合物の混合物を、哺乳動物、特にヒト対象内で所望の薬理学的活性を生産するに十分で無毒な量、当該技術分野で受容されている方法で組み込むことにより調製される。好ましくは、組成物は、一回投与剤あたり約５mgから約５００mgの範囲から選択される活性であるが無毒な量の活性物質を含有する。この量は、望まれる具体的な生物学的活性および患者の症状に応じて変化する。
使用し得る製剤的な担体またはビヒクルは、例えば、固体または液体であってよい。様々な製剤形を用いることができる。即ち、固体担体を用いる場合、製剤は単純な粉砕、油中での微細化、打錠、ゼラチン硬カプセルまたは腸溶性−コーディングカプセルへの充填、微細粉末あるいはペレット形、トローチ、口内錠、または坐薬の形であってよい。液体担体を用いる場合、組成物はアンプルのような液剤、または水性または非水性懸濁液であってよい。局所投与には、柔らかく湿気のある、軟膏やクリームのような基剤を用い、活性成分を製剤化することができる。適当な軟膏基剤の例として、石油ろう、石油ろう＋揮発性シリコン類、ラノリン、およびEucerin(Beiersdorf)のような水中油エマルジョンがある。適当なクリーム基剤の例として、Nivea Cream（Beiersdorf)、コールドクリーム（USP)、Purpose Cream（Johnson & Johonson)、疎水性軟膏（USP)およびLubriderm(Warner-Lambert)がある。
以下の実施例は医薬組成物を例示するものである。
実施例４７
以下の成分からゼラチン硬カプセルを製造する。
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上記成分を混合し収容量２５０mgのゼラチン硬カプセルに充填する。
実施例４８
以下の成分から錠剤を製造する。
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上記成分を混合し、各３６０mgの錠剤に打錠する。
実施例４９
以下の成分から、それぞれ活性成分６０mgを含有する錠剤を以下の通り製造する。
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活性成分、澱粉、およびセルロースをNo.45メッシュのUSふるいに通し、よく混合する。得られた粉末にＰＶＰ溶液を混合した後、No.14メッシュのUSふるいに通す。生成した顆粒を５０℃で乾燥し、No.18メッシュのU.S.ふるいに通す。予めNo.60メッシュUSふるいに通しておいたＳＣＭＳ、ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを顆粒に加え、混合した後、打錠機によって打錠し、それぞれ１５０mgの錠剤を得る。
実施例５０
それぞれ活性成分２２５mgを含有する坐剤を以下の通りに製造する。
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活性成分をNo.60メッシュのU.S.ふるいに通し、予め、最小必要量の熱を用いて融解しておいた飽和脂肪酸グリセリドに懸濁する。次いで、混合物を容積が公称２ｇである坐剤型に注加し、放冷する。
実施例５１
以下のごとくにして静脈内投与のための製剤を製造する。
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化合物をグリセロールに溶解し、溶液を徐々に等張性食塩水で希釈する。次いで、上記成分の溶液を、１ml／分の速度で患者に静脈内投与する。
本発明化合物はまた標識してＲＸＲの存在を調べるためのアッセイに用いることができる。それらは、選択的にＲＸＲサブファミリーのメンバーと結合するので、他の近縁受容体の存在下でのＲＸＲ異性体の存在を調べるのに有用である。
本発明化合物は、そのレチノイドＸ受容体に対する選択的特異性の故に、インビトロでのレチノイドＸ受容体の試料の精製にも使用できる。そのような精製はレチノイドＸ受容体を含有する試料を１またはそれ以上の、開示された二環式誘導体化合物と混合し、化合物（リガンド）を受容体に結合させ、次いで結合したリガンド／受容体の組み合わせを、当業者既知の方法を用いる分離法によって分離することにより行うことができる。これらの方法には、カラム分離、ろ過、遠心、標識および物理的分離、および抗体複合体形成などが含まれる。
ここに好ましい実施態様を説明し、例示したので、本発明の範囲を逸脱することなく様々な置換および修飾を行うことができる。したがって、本明細書は本発明を例示する目的で記載したものであり、限定するものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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