(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｎ−（３−メトキシ−５−メチルピラジン−２−イル）−２−（４−［１，３，４−オキサジアゾール−２−イル］フェニル）ピリジン−３−スルホンアミド又はその製剤的に許容される塩の、温血動物における前立腺癌の治療に使用する医薬品の製造における使用。
【請求項２】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、温血動物における前立腺癌細胞において異常増殖を低下させること又は前立腺癌の分化を誘導することに使用する医薬品の製造における使用。
【請求項３】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、温血動物における前立腺癌細胞においてアポトーシスを誘導することに使用する医薬品の製造における使用。
【請求項４】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、温血動物における前立腺癌細胞の供給血管において抗血管新生及び血管標的剤として使用する医薬品の製造における使用。
【請求項５】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、前立腺癌を有する温血動物における抗血管新生剤として使用する医薬品の製造における使用。
【請求項６】
癌が転移状態にある、請求項１〜５項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
癌が非転移状態にある、請求項１〜５項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
癌が骨転移を生じている、請求項１〜５項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、前立腺癌を有する温血動物における骨転移の阻害剤と浸潤の阻害剤として使用する医薬品の製造における使用。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、前立腺癌を有する温血動物における骨転移の阻害剤として使用する医薬品の製造における使用。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、前立腺癌を有する温血動物における骨転移の予防に使用する医薬品の製造における使用。
【請求項１２】
請求項１に記載の化合物又はその製剤的に許容される塩の、前立腺癌を有する温血動物における骨転移の治療に使用する医薬品の製造における使用。
【請求項１３】
温血動物がヒトである、請求項１〜１２項のいずれか１項に記載の使用
【請求項１４】
Ｎ−（３−メトキシ−５−メチルピラジン−２−イル）−２−（４−［１，３，４−オキサジアゾール−２−イル］フェニル）ピリジン−３−スルホンアミド又はその製剤的に許容される塩を有効成分として含む前立腺癌治療剤。
【請求項１５】
前立腺癌細胞において異常増殖を低下させる又は前立腺癌細胞の分化を誘導する、請求項１４に記載の癌治療剤。
【請求項１６】
前立腺癌細胞においてアポトーシスを誘導する、請求項１４に記載の癌治療剤。
【請求項１７】
前立腺癌細胞の供給血管における抗血管新生及び血管標的剤である、請求項１４に記載の癌治療剤。
【請求項１８】
抗血管新生剤である、請求項１４に記載の癌治療剤。
【請求項１９】
前立腺癌が転移状態にある、請求項１４〜１８項のいずれか１項に記載の癌治療剤。
【請求項２０】
前立腺癌が非転移状態にある、請求項１４〜１８項のいずれか１項に記載の癌治療剤。
【請求項２１】
前立腺癌が骨転移を生じている、請求項１４〜１８項のいずれか１項に記載の癌治療剤。
【請求項２２】
骨転移の阻害剤および浸潤の阻害剤である、請求項１４に記載の癌治療剤。
【請求項２３】
骨転移の阻害剤である、請求項１４に記載の癌治療剤。
【請求項２４】
骨転移の予防剤である、請求項１４に記載の癌治療剤。
【請求項２５】
骨転移の治療剤である、請求項１４に記載の癌治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、Ｎ−（３−メトキシ−５−メチルピラジン−２−イル）−２−（４−［１，３，４−オキサジアゾール−２−イル］フェニル）ピリジン−３−スルホンアミド（N-(3-methoxy-5-methylpyrazin-2-yl)-2-(4-[1,3,4-oxadiazol-2-yllphenyl)pyridine-3-sulphonamide、以下「化合物（Ｉ）」とも記載する）又はその製剤的に許容される塩と、ヒトのような温血動物における癌の治療におけるその使用に関する。本発明はまた、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を含有する医薬組成物の、ヒトのような温血動物において癌を治療する方法における使用と、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物において癌を治療する方法に使用する医薬品の製造における使用に関する。本発明はまた、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を含有する医薬組成物の、ヒトのような温血動物において疼痛を治療する方法における使用と、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物において疼痛を治療することに使用する医薬品の製造における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌には、全世界で推定１０００万人が罹患している。この数字には、発症数、罹患数、及び死亡数が含まれる。アジアからは４４０万より多い癌症例が報告され、これには世界で最高の発症率を有する東アジアからの２５０万症例が含まれる。比較すると、ヨーロッパは２８０万症例、北米は１４０万症例、そしてアフリカは６２７，０００症例を有する。
【０００３】
例えば、英国と米国では、３人のうち１人以上がその人生のある時点で癌を発症する。米国における癌死亡数は、年あたり約６００，０００を数えると推定され、４名の死亡の約１名であり、全死亡率において心臓病に次いで二番目であり、１〜１４歳の年齢の子どもの死因としては不慮の事故に次いで二番目である。米国における癌の推定発症数は、約９０万症例の非メラニン性（基底及び扁平細胞）皮膚癌を除き、現在、年間約１，３８０，０００例の新患である。
【０００４】
癌は英国でも主たる死因であり、１９９７年には（非メラノーマ性皮膚癌を除き）ほぼ２６０，０００例の新患が記録されている。癌は、主に高齢者が罹患する疾患であり、６５％の症例が６５歳以上の人々に起きている。英国の平均寿命は１９世紀の半ば以来ほとんど倍になったので、癌のリスク集団が増加している。心臓病のような他の死因による死亡率が近年低下したのに対し、癌による死亡数は比較的安定したままである。この結果、３人に１人がその生存期間の間に癌と診断され、４人に１人が癌で死亡することになる。７５歳未満の人々では、癌による死亡数が、虚血性心疾患及び卒中を含む循環系の疾患による死亡数を上回る。２０００年には、１５１，２００の癌死亡数があった。このうち１／５以上（２２％）が肺癌であり、１／４（２６％）が大腸癌、乳癌、及び前立腺癌であった。
【０００５】
全世界で、ある特定のタイプの癌（胃癌、乳癌、皮膚癌、等）の発症及び死亡率にはかなり地理的な格差があり、これは人種、文化、及び特に環境の影響に帰せられている。２００種以上の異なるタイプの癌が存在するが、英国と米国で診断される全症例の半数以上を、４つの主要タイプである肺癌、乳癌、前立腺癌、及び結直腸癌が占める。前立腺癌は全世界の男性で四番目に多い悪性腫瘍であり、年間推定４００，０００例の新患が診断され、すべての新しい癌症例の３．９％を占める。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
癌を治療する現行の選択肢には、外科的切除、外部ビーム放射線療法、及び／又は全身化学療法が含まれる。これらはある形態の癌では一部成功しているが、他の癌では成功していない。新たな治療上の療法への明瞭なニーズが存在する。
【０００７】
非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）とアヘン剤は、疼痛緩和において主要クラスの薬剤である。しかしながら、両方とも望ましくない副作用を保有することが知られている。ＮＳＡＩＤＳは胃腸の刺激を引き起こすことが知られていて、アヘン剤は習慣性となることが知られている。従って、疼痛の管理及び処置についても新たな療法への明瞭なニーズが存在する。
【０００８】
最近、エンドセリンＡ受容体アンタゴニストが癌の治療において潜在的に有用であるものとして同定された（Cancer Research, 56, 663-668, 1996年2月15日、及び Nature Medicine, 第1巻、第9号、1999年9月9日、944-949）。
【０００９】
エンドセリンは、３つのアイソフォーム、エンドセリン−1（ＥＴ−１）、エンドセリン−２、及びエンドセリン−３を含む、内因性の２１アミノ酸ペプチドのファミリーである。これらのエンドセリンは、それぞれの対応するプロエンドセリンのＴｒｐ２１−Ｖａｌ２２結合がエンドセリン変換酵素で切り離されて形成される。これらのエンドセリンは、これまで知られている中で最も強力な血管収縮剤であり、特徴的な長い作用時間を有する。これらは、細胞の増殖及び有糸分裂誘発、血管外遊走（extravasation）、及び化学遊走を含む、広範囲の他の活性を示し、いくつかの他の血管作用剤とも相互作用する。
【００１０】
エンドセリンは、血管内皮、血管平滑筋、腎臓、肝臓、子宮、気道、腸、及び白血球を含む、ある範囲の組織及び細胞ソースから放出される。放出は、低酸素状態、せん断ストレス（shear stress）、身体損傷、及び広範囲のホルモン及びサイトカインにより刺激することが可能である。癌を含む、ヒトの多数の疾患状態において、エンドセリンレベルの上昇が見出されてきた。
【００１１】
本発明は、化合物（Ｉ）が特に強力な抗癌剤であるという驚くべき知見に関わる。化合物（Ｉ）は、ＷＯ９６／４０６８１号においてエンドセリン受容体アンタゴニストとして記載されている。ＷＯ９６／４０６８１号においては、ある種の癌を含むヒトのいくつかの疾患状態では、エンドセリンレベルの上昇が見出されたことが認められてはいるが、この化合物が、それをかくも強力な抗癌剤にする、特別に有益な効能、代謝、及び毒性学上のプロフィールを保有するというヒントも示唆もない。ＷＯ９６／４０６８１号に記載のエンドセリン受容体は、心臓血管系疾患のためにのみクレームされている。例えば、ＷＯ９６／４０６８１号の導入部の記載においては、これらの化合物が、「高血圧、肺性高血圧、心臓若しくは脳循環系の疾患、及び腎臓病」を含む疾患及び医学的状態の治療に有用であると述べられている。特許請求の範囲は以下の医学的疾患状態を列挙する：「高血圧、肺性高血圧、うっ血性心不全、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、急性及び慢性腎不全、虚血性卒中、くも膜下出血、間欠性跛行、臨界四肢虚血（critical limb ischaemia）、喘息、又は一般外科若しくは移植後の臓器不全」。ＷＯ９６／４０６８１号からは、この化合物がそれをかくも強力な抗癌剤にする、特に有益な効能、代謝、及び毒性学上のプロフィールを保有するというヒントも示唆もない。実は、本発明者らは、驚くべきことに、化合物（Ｉ）が特異的なエンドセリン−Ａ（ＥＴＡ）アンタゴニストであり、エンドセリン−Ｂ（ＥＴＢ）に対しては測定可能な活性を有さないことを確証したのである。
【００１２】
ＥＴＡ受容体は、同定された２つのエンドセリン受容体のうち、腫瘍学においてより重要な病理学上の受容体であることが、以下の多様な機序により示されてきた：異常な細胞増殖の低下において（Bagnato et al., (1995), Clin Cancer Res 1, 1059-1066）；抗アポトーシス剤として（Wu Wang et al., (1997), Biochem J., 328, 733-737）；抗血管新生剤として（Spinella et al., (2002), J. Biol. Chem, 227 (31), 27850-27855）；及び、骨転移の阻害剤として（Guise et al., ASCO (2000) 抄録331、及び Nelson, et al., (1999), Urology 53, 1063-1069）、さらに、癌における一般的な合併罹患状態である疼痛を仲介することにおいて。大量のエンドセリン−１は疼痛を引き起こし、疼痛感作状態を引き起こすが、これはＥＴＡアンタゴニストによって阻害することが可能である（例えば、Davar et al., (1998), Neuroreport 9, 2279-2283 及び De Mello et al., (1998), Pain, 77, 261-269）ことが示された（Dahlof et al., (1990), J Hypertens, 8, 811-817）。故に、本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）は、エンドセリン系により仲介される疼痛、特にエンドセリン−１レベルの上昇に関連した疼痛の予防又は治療のために投与される。
【００１３】
一方、ＥＴＢ受容体はアポトーシスのシグナル伝達に関与しているという証拠が現れている（例えば、Cattaruzza et al., (2002), FASEB J. 14 (7), 991-998 及び Okazawa et al., (1998), J. Biol Chem, 273, 12581-12592）。プロアポトーシス経路を遮断することは癌の治療において望ましくはないので、ＥＴＢ受容体は影響を受けない一方で、ＥＴＡ受容体を特異的に標的とする化合物ならば、癌の治療において最高に有用であろう。化合物（Ｉ）は、そのような化合物である。
【００１４】
化合物（Ｉ）は、ＥＴＡ受容体に特異的に作用することによって、測定可能なＥＴＢ活性を有するエンドセリンアンタゴニストに優る多くの利点を有する。例えば、化合物（Ｉ）は、投与者又は処方医師がＥＴＢ活性の徴候（例えば、浮腫）に用心しつつ化合物（Ｉ）用量の力価を判定することなく、患者へ投与することが可能であろう。さらに、ＥＴＢ副作用はないであろうから、より高用量を投与することが潜在的に可能であろう。
【００１５】
ＥＴＢ阻害のもう１つの欠点は、それが血漿エンドセリンの上昇を引き起こすことである。そのため、混合ＥＴＡ／ＥＴＢ阻害剤、あるいはＥＴＡ受容体を選択的に標的とするが依然として測定可能なＥＴＢ活性を有する化合物では、同一の有益なＥＴＡ効果を生じるためには、治療の経過につれてより高用量の阻害剤や化合物が必要となる可能性がある。特異的なＥＴＡ阻害剤であれば、この問題に遭遇しないだろう。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
したがって、本発明によれば、ヒトのような温血動物における癌の治療に使用するための化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩が提供される。
１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩が言及される場合、これは化合物だけに言及する。もう１つの側面において、これは化合物（Ｉ）の製剤的に許容される塩に言及する。
【００１７】
本発明のもう１つの特徴によれば、ヒトのような温血動物における癌の治療に使用する医薬品の製造における、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩が提供される。
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、癌を治療する方法が提供される。
【００１８】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における癌の治療に使用するための医薬組成物が提供される。
【００１９】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における癌細胞において異常増殖を低下（reduction)させること又は癌細胞の分化を誘導することにおける使用が提供される。
【００２０】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における癌細胞において異常増殖を低下させること又は癌細胞の分化を誘導することに使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００２１】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、癌細胞において異常増殖を低下させるか又は癌細胞の分化を誘導するための方法が提供される。
【００２２】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における癌細胞において異常増殖を低下させること又は癌細胞の分化を誘導することに使用する医薬組成物が提供される。
【００２３】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における癌細胞においてアポトーシスを誘導することにおける使用が提供される。
【００２４】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における癌細胞においてアポトーシスを誘導することに使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００２５】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、癌細胞においてアポトーシスを誘導する方法が提供される。
【００２６】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における癌細胞においてアポトーシスを誘導することに使用する医薬組成物が提供される。
【００２７】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物において癌細胞の供給血管における抗血管新生及び血管標的剤としての使用が提供される。
【００２８】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物において癌細胞の供給血管における抗血管新生及び血管標的剤として使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００２９】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、癌細胞の供給血管における抗血管新生及び血管標的剤を提供する方法が提供される。
【００３０】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物において癌細胞の供給血管における抗血管新生及び血管標的剤として使用される医薬組成物が提供される。
【００３１】
用語「血管標的剤」により、化合物（Ｉ）の作用部位が腫瘍ではなく血管構造そのものにあると理解されるべきである。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における抗血管新生剤としての使用が提供される。
【００３２】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における抗血管新生剤として使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００３３】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、抗血管新生効果を提供する方法が提供される。
【００３４】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物において抗血管新生剤として使用される医薬組成物が提供される。
【００３５】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の阻害剤と浸潤の阻害剤としての使用が提供される。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の阻害剤と浸潤の阻害剤として使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００３６】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、骨転移の阻害と浸潤の阻害をする方法が提供される。
【００３７】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における骨転移の阻害剤と浸潤の阻害剤として使用される医薬組成物が提供される。
【００３８】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の阻害剤としての使用が提供される。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の阻害剤として使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００３９】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、骨転移を阻害する方法が提供される。
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における骨転移の阻害剤として使用する医薬組成物が提供される。
【００４０】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の予防における使用が提供される。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の予防に使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００４１】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、骨転移を予防する方法が提供される。
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における骨転移の予防に使用する医薬組成物が提供される。
【００４２】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の治療における使用が提供される。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における骨転移の治療に使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００４３】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、骨転移を治療する方法が提供される。
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における骨転移の治療に使用する医薬組成物が提供される。
【００４４】
本発明のさらなる側面において、骨転移の阻害、治療、及び／又は予防が提供され、ここで該骨転移は、腎臓癌、甲状腺癌、肺癌、乳癌、又は前立腺癌から生じるものである。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における上昇したエンドセリン−１産生に関連した疼痛の予防又は治療における使用が提供される。
【００４５】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における上昇したエンドセリン−１産生に関連した疼痛の予防又は治療に使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００４６】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、上昇したエンドセリン−１産生に関連した疼痛を治療する方法が提供される。
【００４７】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物における上昇したエンドセリン−１産生に関連した疼痛の予防又は治療に使用する医薬組成物が提供される。
【００４８】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における疼痛の予防又は治療における使用が提供される。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物における疼痛の予防又は治療に使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００４９】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、疼痛を治療する方法が提供される。
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物におけるＥＴＡ受容体の刺激に関連した疼痛の予防又は治療における使用が提供される。
【００５０】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の、ヒトのような温血動物におけるＥＴＡ受容体の刺激に関連した疼痛の予防又は治療に使用する医薬品の製造における使用が提供される。
【００５１】
本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の有効量をヒトのような温血動物へ投与することを含む、ＥＴＡ受容体の刺激に関連した疼痛を治療する方法が提供される。
【００５２】
癌に言及する場合、それは特に、食道癌、骨髄腫、肝細胞癌、膵臓癌、子宮頚部癌、ユーイング腫瘍、神経芽細胞腫、カポシ肉腫、卵巣癌、乳癌、結直腸癌、前立腺癌、膀胱癌、メラノーマ、肺癌−非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）及び小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、胃癌（gastric cancer）、頭頚部癌、腎癌、リンパ腫、及び白血病を意味する。より特別には、それは前立腺癌を意味する。さらに、より特別には、それは、ＳＣＬＣ、ＮＳＣＬＣ、結直腸癌、卵巣癌、及び／又は乳癌を意味する。さらに、より特別には、それはＳＣＬＣを意味する。さらに、より特別には、それはＮＳＣＬＣを意味する。さらに、より特別には、それは結直腸癌を意味する。さらに、より特別には、それは卵巣癌を意味する。さらに、より特別には、それは乳癌を意味する。さらに、より特別には、それは膀胱癌、食道癌、胃癌（gastric cancer）、メラノーマ、子宮頚部癌、及び／又は腎癌を意味する。さらにそれは、子宮内膜、肝臓、胃（stomach)、甲状腺、直腸、及び／又は脳の癌を意味する。本発明のもう１つの側面において、癌はメラノーマでない。本発明のもう１つの態様において、特別には、癌が転移状態（metastatic state）にあり、そしてさらに特別には、癌が骨への転移をおこす。本発明のさらなる態様において、特別には癌が転移状態にあり、そしてさらに特別には、癌が皮膚転移をおこす。本発明のさらなる態様において、特別には癌が転移状態にあり、そしてさらに特別には、癌がリンパ転移をおこす。本発明のさらなる態様においては、癌が非転移状態（non-metastatic state）にある。
【００５３】
癌が転移状態にあるときに、化合物（Ｉ）は原発腫瘍部位と転移巣の両方に作用すると理解されるべきである。化合物（Ｉ）は、転移を予防し、治療し、そして阻害する。
本発明の１つの側面において、疼痛に言及する場合、これは上昇したエンドセリン−１レベルに関連した疼痛である。本発明のもう１つの側面において、これは、ＥＴＢダウンレギュレーション（異常なＥＴＡ刺激及び／又はエンドセリン−１レベルの上昇をもたらす）が起こった状況から生じる、ＥＴＡ受容体の刺激に関連した疼痛である。特別には、これは癌に関連した疼痛である。より特別には、前立腺癌に関連した疼痛である。
【００５４】
本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩を製剤的に許容される希釈剤又は担体とともに含む、ヒトのような温血動物におけるＥＴＡ受容体の刺激に関連した疼痛の予防又は治療に使用する医薬組成物が提供される。
【００５５】
さらに、化合物（Ｉ）は、急性並びに慢性の疼痛状態を含む、様々な起源及び原因の疼痛の治療及び／又は予防に有用であると期待される。化学的、機械的、放射線（日焼けを含む）、熱性（火傷を含む）、感染性、又は炎症性の組織外傷又は癌により引き起こされる疼痛、術後疼痛、分娩後疼痛、関節状態（慢性関節リウマチや骨関節炎のような）に関連した疼痛、歯の状態（虫歯や歯肉炎のような）に関連した疼痛、筋筋膜性及び腰の疼痛、骨障害（骨粗鬆症、悪性腫瘍の高カルシウム血症、及びページェット病のような）に関連した疼痛、ならびに、スポーツ外傷及び捻挫に関連した疼痛等が例示される。
【００５６】
また、中枢若しくは末梢起源の神経性疼痛（neuropathie pain）も化合物（Ｉ）で治療するか又は予防することが可能であろう。これらの疼痛状態の例は、三叉神経痛に関連した疼痛、帯状疱疹後神経痛（ＰＨＮ、postherpetic neuralgia）に関連した疼痛、糖尿病性単／多発神経障害に関連した疼痛、神経外傷に関連した疼痛，脊髄損傷に関連した疼痛、卒中後中枢神経（central post stroke）に関連した疼痛、多発性硬化症に関連した疼痛、及びパーキンソン病に関連した疼痛である。
【００５７】
潰瘍、月経困難、子宮内膜症、過敏性腸症候群、消化不良等により引き起こされるような、内臓起源の他の疼痛状態も化合物（Ｉ）で治療するかまたは予防することが可能であろう。
【００５８】
本発明のさらなる側面は、神経障害性（neuropathic）の疼痛状態または中枢性の疼痛状態の経口治療に化合物（Ｉ）を使用することである。
好適な製剤的に許容される塩には、例えば、アルカリ金属（ナトリウム、カリウム、又はリチウムのような）との塩、アルカリ土類金属（カルシウム又はマグネシウムのような）との塩、アンモニウムとの塩、及び、生理学的に許容されるカチオンを提供する有機塩基との塩（メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、ピペリジン、モルホリンとの塩のような）が含まれる。さらに、好適な製剤的に許容される塩には、ハロゲン化水素、硫酸、リン酸との製剤的に許容される酸付加塩や、クエン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、及びｐ−トルエンスルホン酸のような有機酸との製剤的に許容される酸付加塩が含まれる。
【実施例】
【００５９】
以下のin vivo 及び in vitro 試験は、化合物（Ｉ）の腫瘍学における効力を決定するために使用することが可能である。
１）ヒトエンドセリン受容体結合アッセイ
ヒト組換えＥＴＡ若しくはＥＴＢ受容体をマウス赤白血病（ＭＥＬ）細胞において発現させ、１２５Ｉ−標識ＥＴ−１を放射リガンドとして使用する競合結合試験用に膜を調製した。化合物（Ｉ）の存在下（１０−１０〜１０−４Ｍ、片対数増加）、インキュベーションを行い（３組で）、９５％信頼限界で、幾何平均ｐＩＣ５０値としてＥＴ−１結合の阻害を表した。
【００６０】
（結果）
化合物（Ｉ）のＥＴＡ受容体でのｐＩＣ５０（リガンドの５０％を置き換えるのに必要とされる化合物の濃度の負の対数）は、８．２７［８．２３〜８．３２］（ｎ＝４）であった。置換曲線は、ほぼ単一の勾配を有する正規曲線であった。化合物（Ｉ）のＥＴＢ受容体への測定可能な親和性（affinity）は認められず、このアッセイの感度限界内に十分に入る濃度１０−４Ｍでの平均置換率は、１．２±０．７％（ｎ＝３）であった。
【００６１】
（結論）
化合物（Ｉ）はヒトＥＴＡ受容体への高親和性リガンドであり、ＥＴＡ受容体に特異的であり、有意なＥＴＢ受容体親和性は示さない。
【００６２】
２）転移癌の治療薬としての化合物（Ｉ）：骨芽細胞データ
ＥＴ−１誘導性ＭＡＰＫ刺激の化合物（Ｉ）を用いた阻害
化合物（Ｉ）は、原発性腫瘍の治療だけでなく、転移性腫瘍の治療や転移性沈着物（deposit）の中及び周囲における新骨の病理学的産生の治療にも、ある役割を担う可能性がある。以下に記載するのは、骨芽細胞の骨病理の治療における化合物（Ｉ）の有用性を示す実験である。
【００６３】
進行性前立腺癌を有する患者の骨転移領域に見られる重要な臨床病理は、不適切な骨芽細胞の刺激として表れる。即ち、前立腺腫瘍の転移が骨に存在すると、新骨の正味の産生（net production）と、最終的には、転移性沈着物の周囲における骨密度の増加をもたらす（Cancer Metastasis Rev. 2001; 20 (3-4): 333-49 に概説される）。この病理の背後にある仮説の機序は、二次性骨腫瘍の確立初期に転移性前立腺細胞からＥＴ−１が放出されることである。
【００６４】
骨芽細胞のＥＴ−１刺激は、前立腺腫瘍の骨転移における新骨の病理学的形成における重要なステップとして記載されている（Invest New Drugs. 2002; 20 (2): 173-82）。ＥＴ−１は、ＥＴＡ受容体の刺激と後続するのＭＡＰキナーゼのリン酸化により、骨芽細胞の増殖及び分化を直接誘導するだけでなく、他の成長因子（growth factors)を産生するように骨芽細胞を刺激するように作用することが示された（Bone. 1999; 24(4): 315-20 と J Bone Miner Res. 2002; 17(10): 1774-84）。このようにして、ＥＴＡ受容体の刺激は骨の成長と、成長因子の局部環境への放出により、転移性腫瘍細胞の生存及び増殖を引き起こす。故に、転移性沈着物中の腫瘍細胞及び骨芽細胞は、その増殖応答で互いを助け、骨形成を制御および制限する正常な調節機序を打破する、「悪循環」に参画するのである（Nat Rev Cancer. 2002; 2(8): 584-93）。
【００６５】
以下に記載の実験において、本発明者は、骨芽細胞においてＭＡＰキナーゼを刺激するＥＴ−１の能力を最初に示す。この刺激は、この細胞の増殖と、成長因子の骨芽細胞からの放出において重要であることが示された経路の活性化と、を促進する。
【００６６】
次いで、発明者は、ＥＴＡアンタゴニストである化合物（Ｉ）がこのＥＴ−１刺激の有効なアンタゴニストであることを示す。
（方法）
ＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１細胞株は、Ｃ５７ＢＬ／６マウス新生仔頭蓋冠由来の親細胞株、ＭＣ３Ｔ３−Ｅ１（インビトロゲンから入手可能）から単離された。ＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１細胞株は骨芽細胞株として記載される。以下に記載の実験を開始するために、ＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１細胞を、血清含有培地において２．４ｘ１０４細胞／ウェル（２４穴プレート）の密度でプレート培養し、４８時間インキュベートした。この細胞をＰＢＳにおいて２回洗浄し、血清不足培地において約１７時間再インキュベートした。
【００６７】
この段階で、細胞を、化合物（Ｉ）と共に又は化合物（Ｉ）なしで３０分間インキュベートしてから、成長因子（ＰＤＧＦ又はＥＴ−１）で３分間刺激した。次いで、すべての培地を除去し、細胞を溶解し、電気泳動／ウェスタンブロット用に−２０℃で保存した。電気泳動／ウェスタンブロットでは、抗ホスホ−ｐ４４／４２ＭＡＰＫ（Ｔｈｒ２０２／２０４）抗体と抗ホスホＡＫＴ（Ｓｅｒ４７３）抗体（いずれもセル・シグナリング・テクノロジーから市販されている）を用いたプロービングにより、リン酸化ＭＡＰＫとリン酸化Ａｋｔを位置決定した。このタンパク質のバンドを密度測定により定量し、任意密度測定単位（arbitrary densitometry units）としてプロットした。リン酸化ＭＡＰＫレベルを全ＭＡＰＫレベルに対して正規化した。
【００６８】
（結果）
細胞をＥＴ−１で３分間刺激すると、骨芽細胞株ＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１においてＭＡＰＫリン酸化が増加した。標準的な成長因子であるＰＤＧＦでこの細胞を刺激しても、ＭＡＰＫリン酸化が増加した。化合物（Ｉ）は、骨芽細胞におけるＥＴ−１誘導性ＭＡＰＫリン酸化を阻害した。
【００６９】
表１  骨芽細胞株ＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１におけるＥＴ−１誘導性ＭＡＰＫリン酸化の化合物（Ｉ）による阻害
【００７０】
【表１】
0003663202.tif 000002
【００７１】
このデータは図１及び図２に示される。
註：上記の実験は、特別なＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１細胞株の使用には依存するものではないので、例えば、市販の親細胞株ＭＣ３Ｔ３−Ｅ１を使用して実施することも可能であろう。
【００７２】
３）血管新生の阻害剤としての化合物（Ｉ）
ＥＴ−１によるＥＴＡ受容体活性化は、文献記載の様々な機序により仲介される腫瘍の増殖及び進行へ寄与するから、ＥＴＡを特異的に阻害することは、骨転移に対するその効果とはまた別に、原発性腫瘍に対しても有益な効果をもたらすだろう。上記の機序には、抗アポトーシス、直接的及び間接的な増殖促進、及び細胞運動性の促進が含まれる（Nat Rev Cancer. 2003; 3(2): 110-6）。
【００７３】
より最近、ますます注目されているのは、腫瘍の血管新生における主要プレーヤーとしてのＥＴＡ受容体により仲介されるＥＴ−１の役割である（J Cardiovasc Pharmacol. 2000; 36: S135-9）。機序の研究により、低酸素誘導因子、ＨＩＦ−１α（J Biol Chem. 2002; 277: 27850-5）の直接的な誘導による強力な血管新生因子ＶＥＧＦ（Life Sci. 1998; 63(6): 477-84）の産生において、ＥＴＡ受容体が重要であることが示されている。エンドセリン及びＥＴＡ受容体の腫瘍血管形成におけるこの役割を裏付ける文献が増加しているが、これらについても、ごく最近Bagnato と Spinella により概説された（Trends Endocrinol Metab. 2003; 14(1): 44-50）。
【００７４】
以下に記載の実験において、我々は、ヒト腫瘍細胞を動物モデルに接種した後に新たに形成された腫瘍により誘導される血管新生に及ぼす化合物（Ｉ）の効果を示す。
（方法）
腫瘍細胞をヌードマウスの皮内へ接種し、化合物（Ｉ）を２５ｍｇ／ｋｇ若しくは５０ｍｇ／ｋｇ、又は担体を、１日１回経口で与えた。初回用量は細胞移植後の当日に与え、マウスは５日後に屠殺した。腫瘍を中心とする１ｃｍ２領域を検査し、腫瘍を供給するその領域内の血管分岐部の数を計数した。試験薬（化合物（Ｉ））で処置した動物の腫瘍供給血管の数と担体で処置した動物の腫瘍供給血管の数を比較し、化合物（Ｉ）の効果を血管数の低下率として算出した。
【００７５】
（結果）
化合物（Ｉ）で処置した動物においては、担体を投与した対照に比較して、腫瘍周囲の血管密度の低下が生じた。化合物（Ｉ）による血管カウントの低下は、５回の in vivo 試験において、結腸の細胞株と前立腺の細胞株により誘導された腫瘍の周囲で認められた。
【００７６】
【表２】
0003663202.tif 000003
【００７７】
上記の細胞株は市販されている。１つの供給元はＡＴＣＣ（アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション）である。ＬＯＶＯのＡＴＣＣ番号はＣＣＬ−２２９である。ＤＵ１４５のＡＴＣＣ番号はＨＴＢ−８１である。
【００７８】
（考察）
我々は、化合物（Ｉ）が、in vitro においてＥＴ−１仲介性の骨芽細胞ＭＡＰキナーゼ活性化の有効な阻害剤であること、並びに、in vivo において原発性腫瘍の血管新生を阻害するのに有効であることを示した。このことにより、転移性前立腺癌の治療法としてのこの薬剤の潜在能力が確かめられる。なぜなら、この薬剤には、ＭＡＰＫ経路により仲介される病理学的な骨密度増加を防ぐこと（骨芽細胞増殖の阻害により）並びに骨ミクロ環境において腫瘍細胞の生存及び増殖を助ける成長因子の放出を阻害することに有益な効果を有する可能性があり、さらに原発腫瘍での抗血管新生効果を有する可能性があるからである。
【００７９】
４）ヒトエンドセリン系におけるエンドセリン受容体アンタゴニストとしての化合物（Ｉ）
ヒト前腕血流は、上腕に圧迫帯を当ててから静脈圧より少し上に加圧して、腕からの静脈ドレナージを一時的に妨げることによって、評価できる。対応する静脈ドレナージがなくなるため、腕への動脈血流により前腕には血液がたまり腫脹するが、これを鋭敏な圧力ゲージで検出できる。動脈血管収縮剤であるＥＴ−１を上腕動脈へ注入すると、動脈流入量の低下により前腕膨張が低下する。この血管収縮は、血管内皮や関連する平滑筋にあるエンドセリン受容体により仲介される。
【００８０】
（方法）
エンドセリン受容体を介したＥＴ−１の血管収縮効果に拮抗する化合物（Ｉ）の能力をこのモデルで検討する試験を、１８〜６５歳の健常男性被検者において実施した。８名の被検者に、化合物（Ｉ）１０ｍｇ、化合物（Ｉ）３０ｍｇ、及びプラセーボを、無作為の二重盲検法で、少なくとも７日間離れた試験日に単回経口投与した。化合物（Ｉ）の投薬後２〜４時間の間に、ＥＴ−１へ反応する前腕血管収縮を評価した。
【００８１】
（結果）
全体的に、化合物（Ｉ）は、注入ＥＴ−１へ反応する前腕血流量において、プラセーボと比較して統計的に有意な（ｐ＝０．０２１０）低下をもたらし、試験で用いた用量の間には明らかに用量反応関係が認められた。このことは、化合物（Ｉ）がヒトエンドセリン系におけるエンドセリン受容体アンタゴニストであることを示す。
【００８２】
５）耐容性を評価する用量漸増試験における化合物（Ｉ）と、転移性前立腺癌の患者に１日１回経口投与した化合物（Ｉ）の薬物動態
以下の試験を実施して、転移性前立腺癌の被検者における最大耐容量（ＭＷＴＤ、maximum well tolerated dose）を決定することが可能である。この試験は、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）に対する化合物（Ｉ）の効果を観察し、骨転移の血清学的バイオマーカーに対する化合物（Ｉ）の効果を観察し、そして転移性前立腺癌を有する被検者における化合物（Ｉ）の薬物動態的特性を決定することを可能にする。
【００８３】
（方法）
骨転移の証拠（試験エントリーの３ヶ月以内の骨スキャンにより確定される）がある前立腺癌の患者がこの試験に使用できる。化合物（Ｉ）は錠剤の形態で１日１回経口投与することが可能である。開始用量として１２０ｍｇが使用可能である。被検者には２８日間か、又は中止基準が満たされるまで試験薬を投与することが可能である。各用量レベルにつき転移性前立腺癌を有する被検者を３名まで登録することが可能である。
【００８４】
化合物（Ｉ）投与の１週間後に、各被検者において耐容性の正式評価を行うことが可能である。ある一団の２名の被検者が、化合物（Ｉ）の１週間連続投与後に用量制限毒性（ＤＬＴ）を経験しなかったときには、用量漸増が可能である。用量は各ステップで２倍にする。特定の用量レベルで１名の被検者がＤＬＴを経験する場合には、次の用量レベルへ漸増させるためには、２名の追加被検者は同じ用量でＤＬＴを経験してはならない。
【００８５】
被検者は、中止基準が満たされなければ、２８日間治療を継続することが可能である。ある一団の少なくとも２名の被検者が、投与後のどの時点でも十分に耐えられないと考えられる用量を与えられたときは、用量漸増を終了させ、その用量未満で最も近い用量をＭＷＴＤとする。
【００８６】
以下の結果が観察可能である：
・有害事象の発症率及び重篤性；
・化合物（Ｉ）で治療した被検者における、１、２、及び４週目のＰＳＡ濃度（全体と、フリーの全体に対する比率）；
・化合物（Ｉ）投与前から化合物（Ｉ）投与後１、２、及び４週までのＰＳＡ（全体とフリーの全体に対する比率）の変化
・化合物（Ｉ）投与前のレベルから化合物（Ｉ）投与の１、２、及び４週後のレベルまでの、骨転移に関与する血清マーカー（骨アルカリホスファターゼ）の変化；及び
・単回投薬と頻回投薬後の定常状態での化合物（Ｉ）の血清濃度及び諸変数。
【００８７】
（疼痛緩和の試験）
化合物（Ｉ）の鎮痛効果は、例えば、Wacnik et al., Journal of Neuroscience (2001), 21, 9355 に記載される癌疼痛のマウスモデルにおいて測定することが可能である。
【００８８】
本発明のさらなる態様において、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩は、癌の発症に先立って、細胞又は個体へ投与される。例えば、癌を発症するリスクのある人を、癌の発症を予防するか又は阻害する、及び／又は転移の発症を予防するために、化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩で処置することが可能である。
【００８９】
化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩は、当技術分野で知られた方法により、治療若しくは予防上の使用のためにヒトのような温血動物へ投与することが可能である。投与は、腫瘍部位に直接的に、又は特に、全身投与で行うことが可能である。
【００９０】
化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩は、通常の医薬組成物の形態で、治療若しくは予防上の使用のためにヒトのような温血動物へ投与することが可能である。この組成物は、例えば錠剤又はカプセル剤として経口投与に、無菌の溶液剤、懸濁液剤、又は乳化剤として非経口投与（静脈内、皮下、筋肉内、血管内、又は注入等）に、軟膏剤又はクリーム剤として局所投与に、又は坐剤として直腸投与に適した形態であってよい。一般に、上記の組成物は、通常の賦形剤を使用する通常のやり方で調製することが可能である。例えば、化合物（Ｉ）は、以下のように賦形剤を使用して、錠剤として製剤化することが可能である。
【００９１】
化合物（Ｉ）；
ラクトース一水和物（充填剤）；
クロスカルメロースナトリウム（崩壊剤）；
ポビドン（結合剤）；
ステアリン酸マグネシウム（滑沢剤）；
ヒプロメロース（フィルムコート成分）；
ポリエチレングリコール３００（フィルムコート成分）；及び
二酸化チタン（フィルムコート成分）。
【００９２】
化合物（Ｉ）又はその製剤的に許容される塩の投与される量は、所望の医薬効果を提供するのに十分なものであろう。例えば、化合物（Ｉ）は、毎日１ｇ未満の単位用量で温血動物へ経口的に投与することが可能であろう。特に、化合物（Ｉ）は、１日につき２５０ｍｇ未満の単位用量で温血動物へ投与することが可能であろう。本発明のもう１つの側面において、化合物（Ｉ）は、１日につき１３０ｍｇ未満の単位用量で温血動物へ投与することが可能であろう。化合物（Ｉ）は、１日につき５０ｍｇ未満の単位用量で温血動物へ投与することが可能であろう。
【図面の簡単な説明】
【００９３】
【図１】試験２からの、骨芽細胞株ＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１におけるＥＴ−１誘導性ＭＡＰＫリン酸化の化合物（Ｉ）による阻害を示すウェスタンブロットである。タンパク質をゲルに泳動させてからニトロセルロース膜へ移し、ここで一次及び二次抗体を使用してプローブする。以下の略号を使用する：    ＳＣＭ：血清含有培地    ＳＦＭ：無血清培地
【図２】試験２からの、骨芽細胞株ＭＣ３Ｔ３．Ｅ１／Ｊ１におけるＥＴ−１誘導性ＭＡＰＫリン酸化の化合物（Ｉ）による阻害を図示するグラフである。
【図１】
0003663202.tif 000004
【図２】
0003663202.tif 000005