(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式[１]
【化１】
0003678366.tif 000017
[式中、Ｘ1およびＸ2はそれぞれ異なって水素原子、ハロゲン原子または水酸基を示し、Ｙはエチニレン基を示し、Ｚは式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q、
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t、
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
または
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
（式中、k は１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、ｒは０〜４の整数を示し、ｔは０〜２の整数を示し、
ＡおよびＡ'は同一または異なって、エチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、
ＢおよびＢ'は同一または異なって、酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ1は水酸基、Ｃ1-10のアルキルオキシ基、Ｃ3-10のシクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基またはアリールアルキルオキシ基を示し、
Ｗ2はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または
式
【化２】
0003678366.tif 000018
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5アルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ3は水素原子またはメチル基を示すか、
あるいはＷ3がＷ2および隣接する炭素原子と一緒になってＣ3-10のシクロアルキル基を形成し、ｍは０または１を示す。]で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする掻痒性症状の予防または治療用薬剤。
【請求項２】
式[１]
【化３】
0003678366.tif 000019
[式中、Ｘ1およびＸ2はそれぞれ異なって水素原子、ハロゲン原子または水酸基を示し、Ｙはエチニレン基を示し、Ｚは式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q、
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t、
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
または
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
（式中、k は１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、ｒは０〜４の整数を示し、ｔは０〜２の整数を示し、
ＡおよびＡ'は同一または異なって、エチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、
ＢおよびＢ'は同一または異なって、酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ1は水酸基、Ｃ1-10のアルキルオキシ基、Ｃ3-10のシクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基またはアリールアルキルオキシ基を示し、
Ｗ2はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または
式
【化４】
0003678366.tif 000020
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5アルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ3は水素原子またはメチル基を示し、
あるいはＷ3がＷ2および隣接する炭素原子と一緒になってＣ3-10のシクロアルキル基を形成し、ｍは０または１を示す。]で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とするアトピー症状の予防または治療用薬剤。
【請求項３】
掻痒性症状が乾皮症である、請求項１に記載の薬剤。
【請求項４】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q
[式中、k は１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、Ａはエチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、Ｂは酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。]であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項５】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q
（式中に示される k 、ｈおよびｑが、k＋ｈ＋ｑ＝３である。）で表される基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項４に記載の薬剤。
【請求項６】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t
[式中、k は１〜４の整数を示し、ｒは０〜４の整数を示し、ｔは１〜４の整数を示し、ＡおよびＡ'は同一または異なってエチレン基、ビニレン基またはエチニレンを示す。]であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項７】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t
（式中に示される k、ｒおよびｔが、k＋ｒ＋ｔ＝２である。）で表される基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項６に記載の薬剤。
【請求項８】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
[式中、k は１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、ＢおよびＢ'は同一または異なって酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。]であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項９】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
（式中に示される k 、ｈおよびｑが、k＋ｈ＋ｑ＝４である。）で表される基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項８に記載の薬剤。
【請求項１０】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
[式中、k は１〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、Ａ'はエチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、Ｂ'は酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。]であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１１】
式[１]において、Ｚが式
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
（式中に示される k およびｑが、k＋ｑ＝５である。）で表される基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項１０に記載の薬剤。
【請求項１２】
式[１]においてＸ1がハロゲン原子であり、Ｘ2が水酸基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項１〜１１のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１３】
式[１]においてＷ2がＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または
式
【化５】
0003678366.tif 000021
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5アルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基であり、Ｗ3は水素原子またはメチル基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする請求項１〜１２のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１４】
【化６】
0003678366.tif 000022
上記のいずれかの式で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１５】
式
【化７】
0003678366.tif 000023
で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする、請求項１〜３のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１６】
アトピー症状が、アトピー性皮膚炎またはアトピー性結膜炎である請求項２及び４〜１５項のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１７】
外用剤である請求項１〜１６項のいずれかに記載の薬剤。
【請求項１８】
掻痒性症状の予防または治療剤の製造における式[１]
【化８】
0003678366.tif 000024
[式中、Ｘ1およびＸ2はそれぞれ異なって水素原子、ハロゲン原子または水酸基を示し、Ｙはエチニレン基を示し、Ｚは式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q、
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t、
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
または
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
（式中、k は１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、ｒは０〜４の整数を示し、ｔは０〜２の整数を示し、
ＡおよびＡ'は同一または異なって、エチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、
ＢおよびＢ'は同一または異なって、酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ1は水酸基、Ｃ1-10のアルキルオキシ基、Ｃ3-10のシクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基またはアリールアルキルオキシ基を示し、
Ｗ2はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または式
【化９】
0003678366.tif 000025
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5アルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ3は水素原子またはメチル基を示すか、
あるいはＷ3がＷ2および隣接する炭素原子と一緒になってＣ3-10のシクロアルキル基を形成し、ｍは０または１を示す。]で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物の使用。
【請求項１９】
アトピー症状の予防または治療剤の製造における式[１]
【化１０】
0003678366.tif 000026
[式中、Ｘ1およびＸ2はそれぞれ異なって水素原子、ハロゲン原子または水酸基を示し、Ｙはエチニレン基を示し、Ｚは式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q、
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t、
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
または
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
（式中、k は１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、ｒは０〜４の整数を示し、ｔは０〜２の整数を示し、
ＡおよびＡ'は同一または異なって、エチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、
ＢおよびＢ'は同一または異なって、酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ1は水酸基、Ｃ1-10のアルキルオキシ基、Ｃ3-10のシクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基またはアリールアルキルオキシ基を示し、
Ｗ2はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または式
【化１１】
0003678366.tif 000027
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5アルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ3は水素原子またはメチル基を示すか、
あるいはＷ3がＷ2および隣接する炭素原子と一緒になってＣ3-10のシクロアルキル基を形成し、ｍは０または１を示す。]で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物の使用。
【請求項２０】
掻痒性症状が乾皮症である、請求項１８に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
技術分野
本発明は、掻痒性症状の予防または治療用薬剤（以下、止痒剤ともいう）に関し、特にアトピー症状による掻痒感の解消に効果がる止痒剤に関する。
背景技術
近年、アトピー性皮膚炎、アトピー性結膜炎、老人性乾皮膚症などの掻痒性症状の患者数が急激に増加してきている。これらの疾患は原因不明の強い痒み感を有し、また掻痒行動（引っ掻き行動）により粘膜または皮膚に炎症を発生するものと考えられている。したがって、これら症状の解消には掻痒感を解消することが非常に重要である。
従来、慢性皮膚炎に対しては、外用ステロイド剤、抗ヒスタミン剤、抗アレルギー剤などの薬剤が使用されている。しかし、ステロイド剤は長期連用による副作用からその使用が制限されており、抗ヒスタミン剤、抗アレルギー剤は、治療効果の点で十分満足のいくものが得られていない。
また、これまで止痒剤の評価は、ヒスタミン、セロトニン等の痒み惹起物質を動物の皮膚内に投与し掻痒行動を測定していたが、近年アトピー性皮膚炎などの掻痒性症状による痒みの発症は、単なる肥満細胞から放出されるヒスタミン等による反応ではないと報告されている（J.Dermatological Science25,20-28,2001）。
したがって、アトピー性皮膚炎などの掻痒性症状の予防および治療に対して新たな作用機序に基づく止痒剤の開発が望まれている。
一方、プロスタグランジン類が痒み惹起成分であるという報告はなされているが止痒剤としての使用は知られていない（J.Am.Acad.Dermatol.47,28-32,2002）。
発明の開示
本発明の目的は、新たな作用機序に基づく掻痒性症状の予防または治療用薬剤、特にアトピー症状の予防または治療用薬剤を提供することである。
本発明者らは、上記目的を達成するために、後述の評価方法を用いて検討した結果、ある種のプロスタグランジン類は優れた止痒効果を有すること、特にアトピー症状に伴う掻痒感を効果的に抑制することを見いだし、本発明を完成した。
すなわち、本発明の１態様によると、式[１]
0003678366.tif 000002
［式中、Ｘ1およびＸ2はそれぞれ異なって水素原子、ハロゲン原子または水酸基を示し、Ｙはエチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、Ｚは式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q、
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t、
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
または
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
（式中、ｋは１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、ｒは０〜４の整数を示し、ｔは０〜２の整数を示し、
ＡおよびＡ'は同一または異なって、エチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、
ＢおよびＢ'は同一または異なって、酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ1は水素基、Ｃ1-10のアルキルオキシ基、Ｃ3-10のシクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基またはアリールアルキルオキシ基を示し、
Ｗ2はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または式
0003678366.tif 000003
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ3は水素原子またはメチル基を示すか、あるいはＷ3がＷ2および隣接する炭素原子と一緒になってＣ3-10のシクロアルキル基を形成し、ｍは０または１を示す。］で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする掻痒性症状の予防または治療用薬剤を提供する。
また、本発明の他の態様によると、式[１]
0003678366.tif 000004
［式中、Ｘ1およびＸ2はそれぞれ異なって水素原子、ハロゲン原子または水酸基を示し、Ｙはエチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、Ｚは式
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）q、
（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）t、
（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）q
または
（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'
（式中、ｋは１〜４の整数を示し、ｈは０〜４の整数を示し、ｑは１〜４の整数を示し、ｒは０〜４の整数を示し、ｔは０〜２の整数を示し、
ＡおよびＡ'は同一または異なって、エチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、
ＢおよびＢ'は同一または異なって、酸素原子または式Ｓ（Ｏ）u（式中、ｕは０〜２の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ1は水酸基、Ｃ1-10のアルキルオキシ基、Ｃ3-10のシクロアルキルオキシ基、アリールオキシ基またはアリールアルキルオキシ基を示し、
Ｗ2はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または式
0003678366.tif 000005
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5アルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、
Ｗ3は水素原子またはメチル基を示すか、あるいはＷ3がＷ2および隣接する炭素原子と一緒になってＣ3-10のシクロアルキル基を形成し、ｍは０または１を示す。］で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とするアトピー症状の予防または治療用薬剤を提供する。
また、本発明の他の態様によると、式[１]で表されるプロスタグランジン誘導体（但し、7-[(1R,2R,3R,5R)-5-クロロ-2-[(1E,3S)-3-シクロヘキシル-3-ヒドロキシ-1-プロペニル]-3-ヒドロキシシクロペンチル]-(5Z)-5-ヘプテン酸を除く。）、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする掻痒性症状の予防または治療用あるいはアトピー症状の予防または治療用薬剤を提供する。
また、本発明の他の態様によると、式[１]においてＸ1がハロゲン原子であり、Ｘ2が水酸基であり、Ｙがエチニレン基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする、掻痒性症状の予防または治療用あるいはアトピー症状の予防または治療用薬剤を提供する。
また、本発明の他の態様によると、式[１]においてＸ1がハロゲン原子であり、Ｘ2が水酸基であり、Ｙがビニレン基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする、掻痒性症状の予防または治療用あるいはアトピー症状の予防または治療用薬剤を提供する。
また、本発明の他の態様によると、式[１]においてＷ2がＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基、Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基または式
0003678366.tif 000006
（式中、Ｗ4はＣ1-10のアルキル基、Ｃ2-10のアルケニル基、Ｃ2-10のアルキニル基またはＣ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基を示し、ｖは０〜４の整数を示す。）で表される基であり、Ｗ3は水素原子またはメチル基であるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とする、掻痒性症状の予防または治療用あるいはアトピー症状の予防または治療用薬剤を提供する。
また、本発明の他の態様によると、アトピー症状が、アトピー性皮膚炎またはアトピー性結膜炎である上記アトピー症状の予防または治療用薬剤を提供する。
また、本発明の他の態様によると、外用剤である上記掻痒性症状の予防または治療用あるいはアトピー症状の予防または治療用薬剤を提供する。
【図面の簡単な説明】
図１は、薬物投与後４週間目に観察した皮膚炎症状（皮膚炎スコア）の結果を表す。図中、Nonは無処置、BtOHはエタノール、FK506はタクロリムスを表す。また、*はp<0.05を示す。
図２は、化合物No.3投与による自発掻痒行動抑制試験の結果を表す。
図３は、化合物No.11投与による自発掻痒行動抑制試験の結果を表す。
図４は、化合物No.12投与による自発掻痒行動抑制試験の結果を表す。
発明を実施するための最良の形態
発明者らは、自然発症的にアトピー性皮膚炎様の皮膚疾患を発症するNC/Ngaマウスを用いて、その掻痒行動を測定することにより、自然発症的に惹起される掻痒行動に対する種々の薬剤の止痒効果について評価を行った。
薬剤塗布前後２４時間の各動物個体における掻痒回数について比較検討を行ったところ、式[１]で表されるプロスタグランジン類で優れた効果が確認された。
以下、本発明の止痒剤について説明する。
本発明は、式[１]で表されるプロスタグランジン誘導体、その製薬学的に許容される塩またはその水和物を有効成分とすることを特徴とする。
式[１]において、ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。
ビニレン基とは、シスまたはトランスのビニレン基を意味する。
Ｃ1-10のアルキルオキシ基とは、炭素原子数１〜１０の直鎖状または分枝鎖状のアルキルオキシ基を示し、例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、ｓｅｃ−ブトキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基、５−メチルヘキシルオキシ基、オクチルオキシ基、デシルオキシ基などを挙げることができる。
Ｃ3-10のシクロアルキルオキシ基の例としては、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、シクロヘプチルオキシ基、シクロノニルオキシ基などを挙げることができる。
アリールオキシ基の例としては、フェノキシ基、ブロモフェノキシ基、クロロフェノキシ基、トリルオキシ基、クメニルオキシ基、メトキシフェノキシ基などを挙げることができる。
アリールアルキルオキシ基の例としては、ベンジルオキシ基、ブロモベンジルオキシ基、クロロベンジルオキシ基、ニトロベンジルオキシ基、ジニトロベンジルオキシ基、メトキシベンジルオキシ基、フェネチルオキシ基、フェニルプロピルオキシ基、フェニルペンチルオキシ基などを挙げることができる。
Ｃ1-10のアルキル基とは、炭素原子数１〜１０の直鎖状または分枝鎖状のアルキル基を示し、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、イソヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、デシル基などを挙げることができる。
Ｃ2-10のアルケニル基とは、炭素原子数２〜10の直鎖状または分枝鎖状のアルキル基の任意の位置に１または２個以上の二重結合を有する基を意味し、例えばビニル基、アリル基、１−プロペニル基、イソプロペニル基、３−ブテニル基、１，３−ブタジエニル基、７−オクテニル基などを挙げることができる。
Ｃ2-10のアルキニル基とは、炭素原子数２〜10の直鎖状または分枝鎖状のアルキル基の任意の位置に１または２個以上の三重結合を有する基を意味し、例えばエチニル基、２−プロピニル基、２−ペンチニル基、４−オクチニル基などを挙げることができる。
Ｃ3-10のシクロアルキル基の例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロノニル基のなどの無置換のシクロアルキル基の他、４−フルオロシクロヘキシル基、４，４−ジフルオロシクロヘキシル基、４−メトキシシクロヘキシル基、２−メチルシクロヘキシル基、４−トリフルオロメチルシクロヘキシル基など、ハロゲン原子、Ｃ1-10のアルキル基、Ｃ1-10のアルキルオキシ基などの１以上の置換基を有するシクロアルキル基を挙げることができる。
Ｃ3-10のシクロアルキル基で置換されたＣ1-5のアルキル基の例としては、シクロプロピルメチル基、シクロブチルエチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシルメチル基、シクロヘプチルメチル基、シクロノニルブチル基、４−フルオロシクロヘキシルメチル基などを挙げることができる。
製薬学的に許容される塩としては、例えば、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属との塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属との塩、アンモニア、メチルアミン、ジメチルアミン、シクロペンチルアミン、ベンジルアミン、ピペリジン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、モノメチルモノエタノールアミン、トロメタミン、リジン、トリス（ヒドロキシメチル）アミンメタンなどとの塩を挙げることができる。
なお、Ｚが式（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）hＢ（ＣＨ2）qであるときは、
ｋ＋ｈ＋ｑ＝３であることが好ましく、さらに好ましくはｋ＝１、ｈ＝１、ｑ＝１である。Ｚが式（ＣＨ2）kＡ（ＣＨ2）rＡ'（ＣＨ2）tであるときは、
ｋ＋ｒ＋ｔ＝２であることが好ましく、さらに好ましくはｋ＝１、ｒ＝１、ｔ＝０である。Ｚが式（ＣＨ2）kＢ（ＣＨ2）hＢ'（ＣＨ2）qであるときは、
ｋ＋ｈ＋ｑ＝４であることが好ましく、さらに好ましくは、ｋ＝１、ｈ＝２、ｑ＝１である。Ｚが式（ＣＨ2）k-1Ｂ'（ＣＨ2）q-1Ａ'であるときは、
ｋ＋ｑ＝５であることが好ましく、さらに好ましくは、ｋ＝２、ｑ＝３である。
本発明の有効成分となるプロスタグランジン誘導体の１部は以下の公報に開示された公知化合物である。
ＷＯ９４／０２４５７、ＷＯ９４／０８９５９、ＷＯ９５／１８１０１、ＷＯ９９／６１０２９、ＷＯ９９／６１４１９、ＷＯ０１／１９７９０、ＵＳ５８０７８９２、特表平２−５０２００９号、特開平６−１９２２１８号、特開平７−２４２６２２号、特開平７−２４２６２３号、特開平７−２３３１４４号、特開平７−２８５９２９号、特開平８−２０８５９９号、特開平９−２８６７７５号、特開昭５８−８０５９号、特表昭６０−５０１８１３号、特表昭６１−５００７８７号、特開２０００−９５７５５号、特開２０００−１２８８５８号、特開２０００−２７３０８３号、特開２００１−１２２７８６号、特開２００１−８９４４３号、特開２００１−１３５９４４号、特開２００１−１５１７４９号
なお、下記の式
0003678366.tif 000007
（式中、Ｘはαまたはβ置換のハロゲン原子を示し、Ｙはエチレン基、ビニレン基またはエチニレン基を示し、Ｒ1はＣ3-10のシクロアルキル基、Ｃ1-4の直鎖または分枝鎖状アルキル基で置換されたＣ3-10のシクロアルキル基、Ｃ4-13のシクロアルキルアルキル基を示し、Ｒ2はＣＯ2Ｒ3で表される基を示し、Ｒ3は水素原子、Ｃ1-4の直鎖または分枝鎖状アルキル基またはＣ2-4の直鎖または分枝鎖状アルケニル基を示し、ｎは１〜４の整数を示し、ｐは０、１または２を示す。）で表されるプロスタグランジン誘導体は反応式１および２の製法により製造することができる。
0003678366.tif 000008
0003678366.tif 000009
（反応式中、ＴＢＳはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基を示し、Ｙ’はエチレン基またはビニレン基を示し、Ｒ31はＣ1-4アルキル基またはＣ2-4アルケニル基を示し、ｐｌは１または２を示し、Ｚ’はハロゲン原子を示し、Ｘ，Ｙ，Ｒ1，ｎは前記と同意義である。）
上記反応式を説明すると、
（１）まず、佐藤らの方法［ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．），第５３巻、第５５９０ページ（１９８８年）］により公知の式（ＩＩ）の化合物に、式（ＩＩＩ）または式（ＩＩＩ’）で示される化合物０．８〜２．０当量を−７８〜３０℃で不活性溶媒（例えば、ベンゼン、トルエン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、塩化メチレン、ｎ−ヘキサンなど）中で反応させることにより立体特異的に式（ＩＶ）の化合物を得る。ここで、Ｙがエチレン基またはビニレン基の化合物（即ち、ＹがＹ’である化合物）を得るには式（ＩＩＩ’）の化合物を用い、−７８〜０℃で、Ｙがエチニレン基の化合物を得るには式（ＩＩＩ）の化合物を用い、０〜３０℃で反応させる。
（２）式（ＩＶ）の化合物を式（Ｖ）で表される化合物１〜６当量と必要に応じてラジカル発生剤（例えば、アゾビスイソブチロニトリル、アゾビスシクロヘキサンカルボニトリル、過酸化ベンゾイル、トリエチルボランなど）０．０５〜２当量、さらに必要に応じて、ラジカル性還元剤（例えば、水素化トリブチルスズ、水酸化トリフェニルスズ、水素化ジブチルスズ、水素化ジフェニルスズなど）１〜５当量を用い、有機溶媒（例えば、ベンゼン、トリエン、キシレン、ｎ−ヘキサン、ｎ−ペンタン、アセトンなど）中、−７８〜１００℃で反応させることにより、式（ＶＩ）の化合物を得る。また、場合によっては塩基（例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、ピリジン、ジメチルアニリンなどの有機アミン、ポリビニルピロリドン、ジイソプロピルアミノメチル−ポリスチレン、（ピペリジノメチル）ポリスチレンなどの塩基レジン）０．０５〜２当量を用い、有機溶媒（例えば、ベンゼン、トルエン、キシレン、ｎ−ヘキサン、ｎ−ペンタン、アセトンなど）中、−７８〜１００℃で反応させることによっても、式（ＶＩ）の化合物を得ることができる。
（３）式（ＶＩ）の化合物を水素化ホウ素カリウム、水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、リチウム  トリｓｅｃ−ブチルボロヒドリド、水素化ジイソブチルアルミニウム−ＢＨＴ（２，６−ジ−tert−ブチル−ｐ−クレゾール）などの還元剤０．５〜５当量を有機溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、エチルアルコール、メチルアルコール、トルエンなど）中、−７８〜４０℃で反応させ、式（ＶＩＩ）および式（ＶＩＩ’）の化合物を得る。これらの式（ＶＩＩ）および式（ＶＩＩ’）の化合物はカラムクロマトグラフィーなど通常用いられる分離法にて精製することができる。
（４）式（ＶＩＩ）（または式（ＶＩＩ’））の化合物を、例えばメタンスルホニルクロリドあるいはｐ−トルエンスルホニルクロリド１〜６当量をピリジンなどの適当な溶媒中、必要に応じて０．８〜６当量の４−ジメチルアミノピリジン存在下、−２０〜４０℃でメシル化あるいはトシル化した後、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムクロリド１〜１６当量でクロル化し式（ＶＩＩＩ）（または式（ＶＩＩＩ’））の化合物（Ｘは塩素原子）を得る。ここでブロム化、フッ素化も通常の方法で行うことができる。例えば、ブロム化は、１〜１０当量の四臭化炭素を用い、トリフェニルホスフィン１〜１０当量およびピリジン１〜１０当量の存在下、アセトニトリル中反応させることにより得られる。フッ素化は例えば、塩化メチレン中、ジエチルアミノサルファートリフロリド（ＤＡＳＴ）５〜２０当量を反応させることにより得られる。
（５）式（ＶＩＩＩ）（または式（ＶＩＩＩ’））の化合物を、適当な不活性有機溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなど）中、塩基（例えばｎ−ブチルリチウムなどのアルキルリチウムなど）を、−７８℃〜室温で反応させた後、式（ＩＸ）の化合物を−７８〜４０℃で反応させることにより式（Ｘａ）（または式（Ｘａ’））の化合物を、また式（ＩＸ）の代わりに炭酸ガスを反応させることにより式（ＸＩ）（または式（ＸＩ’））の化合物を得ることができる。
（６）式（Ｘａ）（または式（Ｘａ’））の化合物をフッ化水素酸、ピリジニウム  ポリ（ハイドロゲンフロリド）、塩酸などを用い通常行われる条件にて、メタノール、エタノール、アセトニトリルあるいはこれらの混合溶媒または、これらと水との混合溶媒中、水酸基の保護基であるｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基をはずし、本発明の式（Ｉａ）（または式（Ｉａ’））のＰＧ誘導体を得ることができる。
（７）式（Ｉａ）（または式（Ｉａ’）の化合物をリン酸緩衝液、トリス−塩酸緩衝液などの緩衝液中、必要に応じて有機溶媒（アセトン、メタノール、エタノールなどの水と混和するもの）を用いて酵素と反応させることにより加水分解することにより、本発明に係わるＰＧ誘導体、式（Ｉｂ）（または式（Ｉｂ’））を得ることができる。酵素としては、微生物が生産する酵素（例えば、キャンディダ属、シュードモナス属に属する微生物が生産する酵素）、動物の臓器から調製される酵素（例えば、ブタ肝臓やブタ膵臓より調製される酵素）などであり、市販の酵素で具体例を挙げると、リパーゼＶＩＩ（シグマ社製、キャンディダ属の微生物由来）、リパーゼＡＹ（天野製薬製、キャンディダ属の微生物由来）、リパーゼＰＳ（天野製薬製、シュードモナス属の微生物由来）、リパーゼＭＦ（天野製薬製、シュードモナス属の微生物由来）、ＰＬＥ（シグマ社製、ブタ肝臓より調製）、リパーゼＩＩ（シグマ社製、ブタ膵臓より調製）、リポプロテインリパーゼ（東京化成工業社製、ブタ膵臓より調製）などである。
酵素の使用量は、酵素の力価および基質［式（Ｉａ）（または式Ｉａ’）］の化合物］の量に応じて適宜選択すればよいが、通常は基質の０．１〜２０倍重量部である。反応温度は、２５〜５０℃、好ましくは３０〜４０℃である。
また、式（Ｉａ）（または式（Ｉａ’））の化合物を、塩基を用い通常加水分解に用いられる溶媒中にて加水分解することにより、本発明に係わるＰＧ誘導体、式（Ｉｂ）（または式（Ｉｂ’））を得ることもできる。ここで用いられる塩基としては、水酸化リチウム、炭酸カリウムなどが例示され、溶媒としては、アセトニトリル、アセトン、メタノール、エタノール、水あるいはこれらの混合溶媒などが例示される。
また、式（ＸＩ）（または式（ＸＩ’））の化合物を上記（６）と同様に脱保護することにより本発明に係るＰＧ誘導体、式（Ｉｂ）（または式（Ｉｂ’））を得ることもできる。
（８）式（Ｉａ）（または式（Ｉａ’））の化合物をメタ過ヨウ素酸ナトリウム、過酸化水素水、過酢酸、ｍ−クロロ過安息香酸、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドなどの酸化剤を用い、ジエチルエーテル、メタノール、エタノール、塩化メチレン、水あるいはこれらの混合溶媒中、−２０〜５０℃で反応させ本発明に係わる式（Ｉｃ）（または式（Ｉｃ’））のＰＧ誘導体を得る。
（９）式（Ｉｃ）（または式（Ｉｃ’））の化合物を上記（７）と同様に加水分解することにより本発明に係わる式（Ｉｄ）（または式（Ｉｄ’））のＰＧ誘導体が得られる。また、式（Ｉｂ）（または式（Ｉｂ’））を用い上記（８）と同様にして酸化することによっても本発明に係わる式（Ｉｄ）（または式（Ｉｄ’））のＰＧ誘導体が得ることができる。
本発明に係る代表的な式[１]の化合物としては下記の化合物をあげることができる。
0003678366.tif 000010
0003678366.tif 000011
0003678366.tif 000012
0003678366.tif 000013
り
本発明の止痒剤は、掻痒感を軽減・解消するものであれば限定はないが、特にアトピーによる痒みに有効である。この点から本発明の止痒剤は、アトピー症状の予防または治療用薬剤を包含するものである。
なお、本発明において「掻痒性症状」とは、限局性ないし汎発性のかゆみおよびそれに関連する炎症を皮膚および粘膜に有する症状をいう。例えば、疥癬、蕁麻疹、湿疹、乾皮症（老人性乾皮症、皮膚欠乏性湿疹など）、乾癬、皮膚掻痒症、痒疹があげられる。
本発明において「アトピー症状」とは、アトピーによる限局性ないし汎発性のかゆみおよびそれに関連する炎症を皮膚および粘膜に有する症状、すなわち、アトピーによる掻痒性症状（神経性掻痒症を含む）をいう。例えば、アトピー性皮膚炎およびアトピー性結膜炎があげられる。
本発明において「アトピー性皮膚炎」とは、増悪・寛解を繰り返す、掻痒のある湿疹を主病変とする疾患をいい、アトピー素因の個体に発生しやすい。
本発明の止痒剤は、経口、非経口または局所投与のいずれかによって投与することができる。
本発明の止痒剤における有効成分の投与量は患者の体重、年齢、性別等により適宜増減できるが、通常１回投与あたり１ｎｇ〜１０ｍｇ、好ましくは０．１〜１００μｇであり１日に１回〜数回投与できる。
本発明の止痒剤は、有効成分に通常の製剤化に用いられる担体、賦形剤、その他の添加剤を用いて医薬組成物として調製することができる。
製剤用の担体や賦形剤としては、例えば、水、エタノール、乳糖、微晶性セルロース、流動パラフィン、硬化油、蜜蝋、スクワラン、ステアリルアルコール、エチレングリコールなどやその他常用されるものをあげることができる。
添加剤としては、例えば、崩壊剤（デンプンなど）、結合剤｛ヒドロキシプロピルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース｝、滑沢剤（タルク、ステアリン酸グリセリンなど）、抗酸化剤、保存剤（パラベンなど）、コーティング剤（ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロースなど）、着色料、矯味矯臭剤、美白剤（エラグ酸ナトリウムなど）、界面活性剤（ソルビタン脂肪酸エステルなど）、可塑剤、保湿剤（グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ヒヤルロン酸など）などの通常使用される成分があげられる。
本発明の止痒剤は、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、液剤、ゲル剤、硬膏剤、軟膏剤、クリーム剤、貼付剤、エアゾール剤などの剤形で、内服剤、注射剤、外用剤（点鼻剤、点眼剤）などの剤形で投与することができる。
好ましい剤形としては、患部に直接投与できる点、投与が容易な点、全身副作用発生の可能性が低減する点などから外用剤があげられる。
ここで「外用剤」とは、外用液剤、エアゾール剤、外用散剤、軟膏剤、クリーム剤、ゲル剤、硬膏剤、貼付剤などがあげられる。
本発明を以下の実施例および試験例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。本発明の記載に基づき種々の変更、修飾が当業者には可能であり、これらの変更、修飾も本発明に含まれる。
なお、特に断らない限り薬剤の濃度（％）は、w/v％（weight/volume％）を意味する。
実施例１
下記の成分を秤量し均一に混合した後、精製水とエタノールの下記容量を加え１０００ｍｌの液剤を得た。
化合物No.７                               ０．１ｇ
エタノール                                ２００ｍｌ
精製水                                    ８００ｍｌ
実施例２
下記の成分をそれぞれ混合し均一に乳化し、更に香料を加えクリーム剤５００ｇを得た。
化合物No.3                                ０．５ｇ
マレイン酸カルビノキサミン                    ５ｇ
エラグ酸ナトリウム                            ５ｇ
ヒヤルロン酸ナトリウム                        ３ｇ
メチルパラベン                                ２ｇ
精製水                                ２１８．５ｇ
流動パラフィン（＃７０）                    ５０ｇ
スクワラン                                １００ｇ
セトステアリルアルコール                    ６０ｇ
蜜蝋                                        ２０ｇ
モノステアリン酸グリセリン                  １５ｇ
ソルビタンモノラウレート                    ２０ｇ
プロピルパラベン                              １ｇ
試験例１：NCマウス自発掻痒行動に対する作用
（実験方法）
体重約30ｇの約20週齢のアトピー性皮膚炎を発症したNC/Ngaマウス（購入元ＳＬＣ）の両足に磁石を植え込み、その磁力感知により、足の動きを掻痒測定システム（ニューロサイエンス社製：マウスが行動するとそれに併せて磁石も動き、コイルに電流が生じる。そして磁石の動きによって電流の変化が生じ、これを検出し測定および解析する）により測定した。引っ掻き行為の内、1.5秒以上のものを掻痒行動としてその回数を継続的に測定した。掻痒行動には日内リズムがあるため、試験前日から24時間の各動物個体の日内掻痒リズムを測定後、100％エタノールに溶解した各薬物を0.2ml/mouseの割合で背部皮膚に塗布した。その後24時間の掻痒行動を測定し薬物投与前後の掻痒行動数を比較した。実験データは、薬物塗布前後24時間の総掻痒回数から掻痒抑制率を算出した。有意差検定は、各薬物濃度塗布群の個々動物における薬物塗布前後の掻痒回数について対応のあるｔ検定(paired t-test)を用いて処理した。
掻痒抑制率（％）＝（塗布前掻痒回数−塗布後掻痒回数）x100／塗布前掻痒回数
（実験結果）
試験に用いた化合物の構造を下記に、試験結果を表５に示した。
0003678366.tif 000014
0003678366.tif 000015
試験例２：NCマウス皮膚炎症モデルに対する作用
当業者に公知な方法（Jpn.J.Pharmacol.76,175-183(1998)Jun Hiroi,et al.Effects of Tacrolimus Hydrate(FK-506)Ointment on Spontaneous Dermatitis in NC/Nga Mice参照）に準じた方法を用いて、止痒効果を確認するために以下の試験を行った。
（実験方法）
動物：４週齢のSPF NCマウス（雄性）を日本SLCより購入し、入荷後直ちに皮膚炎を発症した雄性NCマウス（20週齢以上）と以下のような状態で２週間同居させ掻痒行動を誘発させた。１ケージ当たり皮膚炎発症マウスおよび皮膚炎未発症マウス各４匹ずつをおが屑ケージ（34×17×39cm）に同居させ、室温23±3℃、湿度55±15％、照明12時間（am7:00-pm7:00）に設定された動物舎において飼育した。
２週間同居後、購入したマウスを取り出し、別ケージで１ケージ当たり８匹で約14週間飼育した。薬剤塗布開始直前にそれぞれのケージの皮膚炎スコアが均等になるようにマウスを振り分け、１ケージ当たり４匹で飼育した。
タクロリムス（藤沢薬品工業）は購入したものを使用した。
薬物投与：皮膚炎症を発症したNCマウスと同居により皮膚炎症を発症した20週齢のNCマウス背部皮膚に100％エタノール、100％エタノールに可溶化した、化合物No.７（0.01％）、タクロリムス（0.1％）をエッペンドルフピペットを用いてそれぞれ200μｌずつ、7回/週、４週間塗布した。なお、無処置群は何も処置を施さなかった。各群とも１群あたり８匹で試験し、皮膚炎症状の観察を行った。
皮膚炎スコア：１回/週、皮膚炎症状の観察および測定を行った。
毛並み、脱毛、出血、痂皮形成の４項目について、それぞれ無症状：0，軽度：1，中度：2，重度：3にスコア化（合計の最小：0，合計の最大：12）した。
（実験結果）
皮膚炎症状についての観察結果を図１に示す。
タクロリムスおよび化合物No.７投与群において溶媒投与群に比較し有意な皮膚炎スコア抑制作用が認められた。
試験例３：NCマウス自発掻痒行動に対する作用
（実験方法）
体重約30ｇの約20週齢のアトピー性皮膚炎を発症したNC/Ngaマウス（購入元ＳＬＣ）の両足に磁石を植え込み、その磁力感知により、足の動きを掻痒測定システム（ニューロサイエンス社製）により測定した。引っ掻き行為の内、1.5秒以上のものを掻痒行動としてその回数を継続的に測定した。掻痒行動には日内リズムがあるため、試験前日から24時間の各動物個体の日内掻痒リズムを測定後、100％エタノールに溶解した化合物３（0.1%）、化合物11（0.1%）または化合物12（0.1%）を0.2ml/mouseの割合で背部皮膚に塗布した。その後24時間の掻痒行動を測定し薬物投与前後の掻痒行動数を比較した。各々の化合物の構造を下記に、化合物投与前後の自発掻痒行動の経時的変化および24時間の総自発掻痒行動を図２〜４に示した。有意差検定は、各薬物濃度塗布群の個々動物における薬物塗布前後の掻痒回数について対応のあるｔ検定(paired t-test)を用いて処理した。
0003678366.tif 000016
産業上の利用可能性
本発明により皮膚炎を惹起する掻痒行動を低減させることが可能になったので、アトピー性皮膚炎、アトピー性結膜炎、疥癬、蕁麻疹および乾皮症などの皮膚炎を予防または改善することができる薬剤の提供が可能になった。
【図１】
0003678366.tif 000028
【図２】
0003678366.tif 000029
【図３】
0003678366.tif 000030
【図４】
0003678366.tif 000031