(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ペクチン酸またはペクチニン酸のカルボキシル基の１０％〜８５％が、ベンジルアルコールまたはデシルアルコールから選択されるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、＿ペクチン酸またはペクチニン酸の部分エステル体、
該部分エステル体におけるエステル化されていないカルボキシル基がさらに、１以上の前記エステル形成アルコール成分とは異なるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、ペクチン酸またはペクチニン酸の混合エステル体、または
該部分エステル体もしくは該混合エステル体のエステル化されていないカルボキシル基がさらに無機又は有機塩基と塩を形成している該部分エステル体もしくは混合エステル体の塩
を含む、泡立て剤の製造のための組成物。
【請求項２】
ペクチン酸またはペクチニン酸のカルボキシル基の１０％〜８５％が、ベンジルアルコールまたはデシルアルコールから選択されるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、ペクチン酸またはペクチニン酸の部分エステル体、
該部分エステル体におけるエステル化されていないカルボキシル基がさらに、１以上の前記エステル形成アルコール成分とは異なるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、ペクチン酸またはペクチニン酸の混合エステル体、または
該部分エステル体もしくは該混合エステル体のエステル化されていないカルボキシル基がさらに無機又は有機塩基と塩を形成している該部分エステル体もしくは混合エステル体の塩
を含む、微小球の製造のための組成物。
【請求項３】
ペクチン酸またはペクチニン酸のカルボキシル基の１０％〜８５％が、ベンジルアルコールまたはデシルアルコールから選択されるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、ペクチン酸またはペクチニン酸の部分エステル体、
該部分エステル体におけるエステル化されていないカルボキシル基がさらに、１以上の前記エステル形成アルコール成分とは異なるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、ペクチン酸またはペクチニン酸の混合エステル体、または
該部分エステル体もしくは該混合エステル体のエステル化されていないカルボキシル基がさらに無機又は有機塩基と塩を形成している該部分エステル体もしくは混合エステル体の塩
を含む、顆粒の製造のための組成物。
【請求項４】
ペクチン酸またはペクチニン酸のカルボキシル基の１０％〜８５％が、ベンジルアルコールまたはデシルアルコールから選択されるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、ペクチン酸またはペクチニン酸の部分エステル体、
該部分エステル体におけるエステル化されていないカルボキシル基がさらに、１以上の前記エステル形成アルコール成分とは異なるエステル形成アルコール成分でエステル化されている、ペクチン酸またはペクチニン酸の混合エステル体、または
該部分エステル体もしくは該混合エステル体のエステル化されていないカルボキシル基がさらに無機又は有機塩基と塩を形成している該部分エステル体もしくは混合エステル体の塩
を含む、乳剤の製造のための組成物。
【請求項５】
前記混合エステル体において、前記ベンジルアルコールまたはデシルアルコールから選択されるエステル形成アルコール成分でエステル化されたカルボキシル基と、前記異なるエステル形成アルコール成分でエステル化されたカルボキシル基の数の比率が、０．１：１〜１：０．１である、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項６】
前記部分エステル体または混合エステル体のエステル化されていないカルボキシル基と塩を形成する無機塩基が、アルカリ金属、アルカリ土類金属、またはアンモニア＿から誘導される、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記部分エステル体または混合エステル体の塩が、ナトリウム塩、アンモニウム塩またはマグネシウム塩である、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
発明の目的
本発明は、全体的にまたは部分的にエステル化されたペクチン酸およびペクチニン酸（以下、それぞれ、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘと称する）、部分的にエステル化されたＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの金属イオンまたは有機塩基との塩、その製造方法、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの全エステル体または部分エステル体、またはその塩を含有する医薬製品および／または薬物、およびＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの全エステル体または部分エステル体、またはその塩の、薬学、生物医薬、栄養学および化粧品の分野での使用に関する。
発明の概要および分野
本明細書および請求の範囲において、「部分エステル体」という語句は、部分的にエステル化された酸を指し、ペクチン酸またはペクチニン酸の利用可能な遊離のカルボキシル基の内、ある量だけがエステル化されていることを意味する。
本明細書および請求の範囲において、その意味するところが、この可能性を明白に排除していない場合、「ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル体」なる語句は、常にエステル体そのものと、それらの塩の両方を指すと考えるべきであり、「エステル体」なる語句は、特記しない限り、全エステル体と部分エステル体の両方を指すために用いられる。
本発明は、以下に示す製品のための、エステル体および方法をより詳細に説明するものである。
全てのカルボキシル基または一部のカルボキシル基のみがエステル化されている、天然の脱メトキシル化ペクチン、ペクチン酸またはポリガラクツロン酸（以下、ＰＧＡ）、および薬理学的な使用および食料への使用が許容される、部分エステル体の金属イオンおよび有機塩基との塩。
天然のペクチン、ペクチニン酸（以下、ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ）、即ち、ガラクツロン酸残基のカルボキシル基の一定画分（ｘ％）が天然状態でメチルエステル形であり、非−メトキシル化カルボキシル基が部分的または全体的にメチルアルコール以外のアルコールでエステル化されているＰＧＡ、および薬理学的な使用および食料における使用が許容される、部分エステル体の金属イオンおよび有機塩基との塩。
これらの新規なエステル体は、それらのエステル基の性質およびエステル化の程度に応じて、それぞれ、興味深い流動学的、ゲル化、乳化、バイオプラスチック、フィルム形成特性を有し、生物医学、衛生、作物−栄養、および化粧品の分野など多くの産業分野で用いることができる。本発明はまた、上記定義に従う、１またはそれ以上のＰＧＡおよび／またはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル体またはその塩の１つを活性成分として含有する組成物、並びに薬理活性物質または薬理活性物質の組み合わせを含有する薬物、およびＰＧＡおよび／またはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの部分または全エステル体によって構成されるビヒクル（vehicle）を包含する。
発明の簡単な説明
本発明は、新規な多糖類エステル体に関し、さらに詳しくは、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル体、並びにそれらの製造方法に関する。本発明はまた、様々な産業分野、特に製剤、化粧品および農業の分野、におけるＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの該エステル体の使用、並びに同エステル体を基として製造される生産物を包含する。本発明の新規なエステル体は、ＰＧＡの全エステル体および部分エステル体を包含する。部分エステル体では、非−エステル化カルボキシル基は、無機塩基由来の金属イオンまたは有機塩基によって塩化されていてもよく、そのような塩は、それらを含有する工業製品と同様、本発明の一部を構成する。
新規なエステル体はまた、カルボキシル基の遊離の部分がメチルアルコール以外のアルコールで、部分的にまたは完全にエステル化されているＰＧＡ−Ｍｅ−ｘを用いて作成される生成物を含む：部分エステル体の場合、残余遊離カルボキシル基は金属イオンまたは有機塩基で塩化されていてもよく、そのような塩も、それらを含有する工業製品と同様、本発明の一部を構成する。
特に、本発明のエステル体は全体的または部分的にエステル化されたペクチン酸またはペクチニン酸であり（ここに、エステル化の成分は、脂肪族アルコール、アリール脂肪族アルコール、脂環式（シクロアリファティック）アルコール、および複素環式アルコールである）、それら部分的にエステル化されたペクチン酸およびペクチニン酸と無機または有機塩基との塩から導かれる。
背景技術
ＰＧＡ類は、通常、植物中に存在する多糖類であり、構造的な観点からは、比較的不均一であり、基本的にはガラクツロングリカン類（ポリ（１−＞４）−α−Ｄ−ガラクトピラノシルウロン酸、時にはペクチン酸群と呼ばれる）と定義することができる。
極めて広範に２５−３０の逐次単位のブロックに存在するα−Ｄ−ガラクツロン酸残基とは別に、ＰＧＡ群はその鎖に沿って中性単糖類、特にβ−Ｌ−ラムノース、の幾つかの残基を有する（通常、約１５％を越えない）。
ＰＧＡの鎖はまた、主にラムノース残基と結合した（１−＞４）枝（例えば、短いアラビノガラクタン鎖）をも含有する。
ＰＧＡの特徴の１つは、それが、Ｃａ（ＩＩ）イオンの存在下、糖を添加しない場合でも、水性媒質中で安定なゲルを形成することである。Ｃａ（ＩＩ）イオンおよびショ糖を含有せず、ＰＧＡおよびアルギネートを含有する酸水溶液から調製した、温度可逆性混合ゲルも等しく注目に値する。
それらの成分が完全に生物適合性であるお陰で、食料、製剤、および化粧品の分野で、そのようなゲルに対して特に関心が寄せられている。
ＰＧＡ群はまた水性媒質中で、興味深い流動学的特性を示す。特定の野菜起源の、あるＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ（ｘは約５０％）はアセチル基（約２−９重量％）を含有し、それは一方では、これらポリマーのゲル形成特性を弱めるが、他方、それらに著しい張力活性を与え、とりわけ乳化特性（油／水エマルジョン）をも与える。
植物中に広範に存在するＰＧＡ−Ｍｅ−ｘはＰＧＡ群と実質上、同じ鎖を有しうるが、鎖のガラクツロン酸残基のｘ％画分はメチルエステル形である。
ｘ％の値は、このバイオポリマーの抽出に用いた天然起源に依存し、正常な場合、約１０％から約７５％の範囲内である。メチル化の程度（ｘ％Ｍｅと表す）に応じて、ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ群は、カルシウムイオンの非存在下のみならず、例えば、十分な濃度のショ糖の存在下でも、水性媒質中で特徴的なゲル形成特性を示す。様々なＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ群が、まさにこれらの性質のお陰で、食料産業に用いられている。
脱メトキシル化し、ポリマーの溶解度を増大することに基づくペクチン類の化学修飾法が知られている（米国特許第４，０１６，３５１号（１９７７年４月５日発効））。化学的な可能性に関する記述では、ヒドロキシおよび／またはジヒドロキシ基を介する全反応が考慮された訳ではなく、カルボキシル基のみが標的とされた。今日までのところ、ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ試料、特に柑橘類およびヒマワリのペクチン酸ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ試料を用い、ペクチンの単純な脂肪族アルコール、ことにエタノール、との部分エステル体の合成が行われたにすぎない［クラチノフら（C.G.Kratchnov et al.）Carbohydr.Res., 80, 350(1980);参考として、ケルテス（Z.I.Kertesz），”The Pectic substances”，Interscience, New York(1951);マクドネルら（R.McDonnell et al.），Arch. Biochem., 28, 260(1950);およびH.Duel, Ber. Schweiz, Bot. Ges., 53, 219(1943)]。しかしながら、用いられた合成法（アルコール性鉱酸中、ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ）は重大な鎖の分解を導き、不純物、過剰なトランスエステル化副反応のために、混合エステルを得ることができなかった。
発明の詳細な説明
遊離カルボキシル基の部分エステル化によって電荷密度とＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの親水性とを変化させることにより、得られたポリエステルの（群）の性質を、溶液中での溶解性および挙動の両方に関し、そしてゲルおよび／またはフィルム形成および／または乳化特性に関して劇的に変化させることが可能である。
実際、エステル化によってＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘに疎水性または親水性官能基を導入することにより、制御された方法でエステル誘導体の有機溶媒または水性溶媒と混じり合う傾向、並びに混合物の性質そのものに強い影響を及ぼすことが可能である。
本発明のエステル群の１グループは、アルコール部分が最高３４炭素原子までの、置換されていない、またはアミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルデヒド、ケト、カルボキシル、ヒドロカルビル、ジヒドロカルビルアミノ、エーテル、エステル、チオエーテル、チオエステル、アセタール、ケタール、カルバルコキシ、カルバミドおよび１または２個のヒドロカルビル基で置換されたカルバミド基からなる群から選択される１またはそれ以上の、特に２個の機能的単位で置換されている、飽和または不飽和脂肪族アルコール（そのような脂肪族アルコールは、炭素原子鎖中に酸素、硫黄および窒素からなる群から選択される異種原子を有していても良い）から導かれているペクチン酸およびペクチニン酸のエステル体、およびその塩である。
上記のエステル体のサブグループはペクチン酸およびペクチニン酸のエステル体およびその塩で構成される。ここに、エステル形成するアルコール成分は最高１２炭素原子までのアルコールから導かれ、機能的単位で置換されたアルコールの場合、アミノ、エーテル、エステル、チオエーテル、チオエステル、アセタール、およびケタール基のヒドロカルビル基はＣ1−Ｃ4アルキル基であり、置換されたエステル化カルボキシル基および置換されたカルバミド基のヒドロカルビル基はＣ1−Ｃ4アルキル基であり、置換されたアミノまたはカルバミド基は最高８炭素原子の炭素数のアルキレンアミノまたはアルキレンカルバミド基である。
上記エステル体のサブグループの具体的なエステルとして、エステル形成するアルコール成分がエチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、アミル、ペンチル、ヘキシル、オクチル、ノニル、デシルまたはドデシルアルコールから導かれたものがある。
置換アルコールの内、エチレングリコール、プロピレングリコールまたはブチレングリコールのような２価のアルコール、グリセリンのような３価のアルコール、タルトロン酸のようなアルデヒドアルコール、乳酸、例えば、α−オキシプロピオン酸、グリコール酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸のようなカルボキシルアルコール、アミノエタノール、アミノプロパノール、ｎ−アミノブタノールのようなアミノアルコール、およびそれらのアミン官能基におけるジメチルおよびジエチル誘導体、コリン、ピロリジニルエタノール、ピペリジニルエタノール、ピペラジニルエタノール、およびｎ−プロピルまたはｎ−ブチルアルコールの対応する誘導体、モノチオエチレングリコールまたはそのアルキル誘導体、例えばメルカプト官能基におけるエチル誘導体が列挙されるべきである。
高級飽和脂肪族アルコールの内、特に言及する価値のあるものは、例えば、セチルアルコールおよびミリスチルアルコールであるが、本発明にとって特に重要なものは、多くの精油に含有され、テルペン類と親和性を有する、１または２個の２重結合を有する高級不飽和アルコールであり、シトロネロール、ゲラニオール、ネロール、ネロリドール、リナロール、ファルネソール、フィトールが例示される。
低級不飽和アルコールの内、考慮されるべきは、プロパルギルアルコールである。
ペクチン酸およびペクチニン酸のグリセリンエステル体およびその塩は、特に言及されるべきである。
本発明の第２のエステル群は、アルコール成分が、メチル、ヒドロキシおよびハロゲンから選択される１−３個の置換基、特に塩素、臭素またはヨウ素によって置換されていてもよい、唯１個のベンゼン残基を有すると共に、脂肪族鎖が最高４個の炭素原子を有し、遊離アミノ基、モノまたはジエチル化アミノ基、ピロリジンおよびピペリジン基からなる群から選択される１または２単位によって置換されていてもよいものであるペクチン酸およびペクチニン酸のエステル体、およびその塩である。
上記エステル体群のサブグループは、エステル形成するアルコール成分がベンジルアルコール、フェネチルアルコール、エフェドリンまたはアドレナリンから導かれるものである、ペクチン酸およびペクチニン酸エステル体を包含するものである。
本発明の第３のエステル体群は、アルコール成分が、最高３４炭素原子までの脂環式アルコール、脂肪族−脂環式アルコールまたは複素環式アルコールから導かれるペクチン酸およびペクチニン酸エステル体である。脂環式アルコールは単環式または多環式のいずれであってもよい。単環式アルコールの内、特に言及すべきは、最高１２炭素原子数のものであり、好ましくは、５−７個の間の炭素原子を有する環を有し、例えば、メチル、エチル、プロピル、またはイソプロピル基などの１−３低級アルキル基で置換されていてもよい。このグループの具体的なアルコールは、シクロヘキサノール、シクロヘキサンジオール、１，２，３−シクロヘキサントリオール、および１，３，５−シクロヘキサントリオール（フロログルシトール）、イノシトール、ｐ−メタンから導かれるアルコール、例えば、カルボメタノール、メントール、αおよびγ−テルピネオール、１−テルピネオール、４−テルピネオール、およびピペリトール、あるいはこれら「テルピネオール」として知られているアルコール類の混合物、１，４−および１，８−テルピンである。好ましい脂環式アルコールは、シクロヘキシルアルコールである。本発明のエステル体を得るための多環式脂肪族脂環式アルコールは、ステロール、コール酸およびステロイド類、例えば性ホルモンおよび合成類似体、特にコルチコステロイドおよびその誘導体である。即ち、例えば、下記のものを用いることができる：コレステロール、ジヒドロコレステロール、エピジヒドロコレステロール、コプロスタノール、エピコプロスタノール、シトステロール、スティグマステロール、エルゴステロール、コール酸、デオキシコール酸、リトコール酸、エストリオール、エストラジオール、エキレニン、エキリンおよびそれらのアルキル誘導体、並びにそれらの１７位におけるエチニルまたはプロピニル誘導体、例えば、１７−α−エチニル−エストラジオールまたは７−α−メチル−１７−α−エチニル−エストラジオール、プレグネノロン、プレグナンジオール、テストステロン、およびその誘導体、例えば１７−α−メチルテストステロン、１，２−デヒドロテストステロンおよび１７−α−メチル−１，２−デヒドロテストステロン、テストステロンおよび１，２−デヒドロテストステロンの１７位のアルキル誘導体、例えば、１７−α−エチニルテストステロン、１７−α−プロピニルテストステロン、ノルゲストレル、ヒドロキシプロゲステロン、コルチコステロン、デオキシコロチコステロン、１９−ノルテストステロン、１９−ノル−１７−α−メチルテストステロンおよび１９−ノル−１７−α−エチニルテストステロン、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、６−α−メチルプレドニゾロン、フルドロコルチゾン、デキサミタゾン、ベータメタゾン、パラメタゾン、フルメタゾン、フルオシノロン、フルプレドニリデン、クロベータゾル、ベクロメタゾン、アルドステロン、デオキシコルチコステロン、アルファキソロン、アルファドロン、ボラステロンおよびシプロテロンのような抗ホルモン類。
本発明に従って用いられる他のアルコール類は、アクセロフトール、ビタミンＤ2およびＤ3、アノイリン、ラクトフラビン、チアミンおよびパントテン酸などのビタミンとしてのアルコールである。複素環アルコールの例として、以下のものに言及することができる。フルフリルアルコール；アトロピン、スコポラミン、シンコニン、シンコニジン、キニン、モルフィン、コデイン、ナロルフィン、Ｎ−ブチルスコポランモニウムブロミド、アジマリンなどのアルカロイドおよびその誘導体；エフェドリン、イソプロテレノール、エピネフィリンなどのフェニルエチルアミン；パーフェナジン、ピポチアジン、カルフェナジン、ホモフェナジン、アセトフェナジン、フルフェナジン、Ｎ−ヒドロキシエチルプロメタジンクロリドなどのフェノチアジン薬物；フルペンチキソール、クロペンチキソールなどのチオキサンテン薬物；メプロフェンジオールなどの抗痙攣剤；オピプラモールなどの抗精神病薬；オキシペンジルなどの制吐剤；カルベチジン、フェノペリジン、メタドールなどの鎮痛剤；エトドロキシジンなどの催眠薬；ベンズヒドロール、ジフェメトキシジンなどの食欲抑制剤；ヒドロキシジンなどのマイナートランキライザー；シンナメドリン、ジフィリン、メフェネシン、メトカルバモール、クロロフェネシン、２，２−ジエチル−１，３−プロパンジオール  クァイフェネシン（quaifenesin）、イドロシラミドなどの筋弛緩剤；ジピリダモール、オキシフェドリンなどの冠血管拡張剤；プロパノロール、チモロール、ピンドロール、ブプラノロール、アテノロール、メトプロロール、プラクトロールなどのアドレナリン遮断薬；６−アザウリジン、シタラビン、フロクスウリジンなどの抗新生物薬；クロラムフェニコール、チアンフェニコール、エリスロマイシン、オレアンドマイシン、リンコマイシンなどの抗生物質；イドクスウリジンなどの抗ウイルス剤；イソニコチニルアルコールなどの末梢血管拡張剤；スロカルビレートなどのカルボニックアンヒドラーゼ阻害剤；チアラミドなどの抗喘息薬または抗炎症剤；および２−ｐ−スルファニルアニリノエタノールなどのスルファミド剤。
ペクチン酸またはペクチニン酸が完全にエステル化されていない場合、エステル化の程度は、好ましくは５％から９５％の間であり、１０％から８５％の間であることが好ましく、より好ましくは、１５％から７５％の間である。
エステル化の程度はエステル化ペクチンまたはペクチニンの最終用途に応じて調整されるべきである。
本発明の１側面では、ペクチン酸またはペクチニン酸の全カルボキシル基がエステル化されている。
ペクチン酸またはペクチニン酸が部分的にのみエステル化されている場合、残る遊離のカルボキシル基は塩化（塩形成）されていてもよい。塩を形成するイオンは金属イオン、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、およびアンモニウムイオンからなる群から選択することができる。塩は有機塩基を用いても形成される。
塩を形成する金属イオンはナトリウムイオンおよびカリウムイオンなどのアルカリ金属イオン、およびカルシウムイオンおよびマグネシウムイオンなどのアルカリ土類イオンからなる群から選択することができる。塩を形成する有機塩基は、アミノ塩基、特に脂肪族、アリール脂肪族、脂環式または複素環式アミンからなる群から選択され、塩を形成するアミノ塩基は治療上許容されるものであることが好ましい。
化学的なエステル化工程は、望ましくは混合エステル体のエステル化度を容易に制御しながら、生成物を高収率で与えるのみならず、可能な限り鎖長を無傷に維持することが重要である。鎖長を減少し、分子量を減少させる既知のペクチンの化学修飾法とは対照的に、本発明方法では、ポリマーの鎖長の減少は、あっても僅かにすぎない。
さらに、文献記載の方法は制御された混合エステル体の取得、即ち、異なるエステル残基間の比率が定量的に一定である（例、０．１−０．９）こと、を可能にするものではない。
ここに、本発明範囲内で、使用し易く分解作用がない、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル体の製造のための方法であって、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの４級アンモニウム塩を、有機溶媒、好ましくは中性溶媒中で通常のエステル化剤と反応させる方法が発見された。この方法により、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの多数の新規エステル体、特に１価、脂肪族、アリール脂肪族、脂環式および複素環式アルコールのエステル体が得られた。
本発明の化学的に新規で独自の方法によれば、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの４級アンモニウム塩、好ましくは低級テトラアルキルアンモニウム塩、とりわけテトラブチルアンモニウム塩、を出発物質とし、Ｎ−メチル−ピロリドン、ジアルキルスルホキシド、特に低級アルキルジアルキルスルホキシド、中でもジメチルスルホキシドのような適当な有機溶媒中でエステル化剤と反応させることにより、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル体を都合良く高収率で製造することができる。必ずしも中性溶媒でなく、アルコール、エステル、エステルケトン、特にアルコールおよび低沸点の脂肪族または複素環式ケトン、例えば、ヘキサフルオロイソプロパノール、トリフルオロエタノールなどの他の溶媒も考慮すべきである。
反応は、好ましくは約０℃から１００℃の間、特に約２５℃から７５℃の間、例えば約３０℃で行うべきである。
エステル化は、好ましくは、上記の溶媒の１つ、例えば、ジメチルスルホキシドに溶解した該アンモニウム塩にエステル化剤を徐々に加えることにより行う。
エステル化剤として、アルキルまたはアリールアルキルハロゲン化物などのアルキル化剤を用いることも可能である。
ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの４級アンモニウム塩は、ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのナトリウム塩と、４級アンモニウム塩基（例えば、テトラブチルアンモニウムイオン）で塩化した樹脂とを水溶液中で反応させることにより調製される。ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのナトリウム塩は、これら天然産物の汎用版であり、容易に市販品を購入することができるので、出発物質として用いるのに便利である。平衡化の後、ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのテトラブチルアンモニウム塩の回収は、溶離、次いで、所望によりろ過および凍結乾燥によって行いうる。
これらの塩は上記の有機溶媒に易溶性である。続くエステル化反応に供する前に、反応系から水または酸素を除去する必要がある。この除去は、乾燥した不活性なガスを溶液に吹き込むことで行うことができる。この方法により、あらゆる水と一緒に酸素が除去される。特別の用心のために、フリーラジカル阻害剤として、３−tert−ブチル−４−ヒドロキシアニソールなどのアニソール誘導体を用いることができる。その後、上で具体的に示したタイプのエステル化剤を徐々に加えることにより、エステル化を行う。この方法によればエステル化を均一相で行うことができ、ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのカルボキシル基を所望のエステル化率（％）に調整することができる。
カルボキシル基の２またはそれ以上の特定の画分が異なるアルキル（またはアリールアルキル）残基でエステル化されたＰＧＡの混合エステル体を得るためには、上記の反応で、２またはそれ以上の対応するアルキル（またはアリールアルキル）ハロゲン化物を、同時または順番に用いることで十分である。
２個のエステル形成基(esterifying groups)を有するペクチン酸またはペクチニン酸のエステル体の製造が特に好ましい。この場合、２個のエステル形成基のモル比は０．１：１と１：０．１の間で変化する。エステル形成基のモル比が０．２：１と１：０．２の間、好ましくは約１：１である混合エステル体の製造が特に好ましい。これは、部分および全エステル化ペクチン酸およびペクチニン酸の両方に適用される。総エステル化度がたとえば６０％で、２個のエステル化アルコール基の比率が０．５：１ならば、ひとつめのアルコールが２０％のカルボキシル基においてエステル化し、２つめのアルコールが４０％のカルボキシル基においてエステル化していることを意味する。
上述の製造法の別の態様のひとつは、ジメチルスルホキシドなどの適当な溶媒に懸濁したＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのナトリウム塩またはカリウム塩などの金属塩を、触媒量の第四アンモニウム塩（特にヨウ化テトラブチルアンモニウム）の存在下、適当なアルキル化剤と反応させることである。
さらに別の態様においては、ＰＧＡ（ナトリウム塩など）またはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ塩（ナトリウム塩など）を、酸型のスルホン樹脂上でイオン交換を行うことにより、酸形状に転換する。次いで、遊離酸形状のＰＧＡを水性水酸化テトラブチルアンモニウムで中和する。
すべての製造法において、充分に長時間（１〜３日）反応させた後、酢酸エチルまたはアセトンなどの非溶剤中で冷却沈殿させることにより、ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−Ｘのエステル誘導体を反応混合物から回収する。
次に、該誘導体を非溶剤で繰り返し洗浄し、たとえば約５０℃にて減圧乾燥する。
エステル形成基の性質によって、ＰＧＡの部分エステル体が、容易に水に溶解する場合がある。この場合、濃食塩水に溶解し（これによって遊離カルボキシル基がナトリウムイオンで造塩される）、続いて蒸留水に透析を繰り返すことにより、誘導体をさらに精製することができる。ＰＧＡ−ナトリウム塩の部分エステル体は、凍結乾燥により、単離することができる。水溶性でないＰＧＡの部分エステル体は、ジメチルスルホキシドなどの有機溶媒に溶解することができる。全エステル体の場合も同様である。
ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの新規エステル類は、医薬、衛生、化粧および栄養の分野で有用である。
したがって、本発明のさらに別の態様は、新規エステル類およびその塩類の用途、および該エステル類または塩類で製造された化粧品、衛生用品、医薬品または栄養品などの工業的物品および製品が挙げられ、特に乳化剤および増粘剤としての用途である。
エステル形成成分が薬理学的活性アルコールから誘導されるならば、あるいは塩形成有機塩基が薬理学的活性化合物ならば、ペクチン酸またはペクチニン酸およびそれらの塩類は医薬組成物の有効成分として使用することができる。薬理学的活性塩形成有機塩基としては、下記のアゾ化および塩基性薬剤が挙げられる：アルカロイド、ペプチド、フェノチアジン、ベンゾジアゼピン、チオキサンチン、ホルモン、ビタミン、抗痙攣剤、抗精神病薬、制吐薬、麻酔薬、睡眠薬、食欲抑制薬、精神安定剤、筋肉弛緩剤、冠血管拡張剤、抗腫瘍剤、抗生物質、抗菌剤、抗ウイルス剤、抗マラリヤ剤、炭酸脱水素酵素抑制剤、非ステロイド性抗炎症剤、血管収縮薬、コリン作動作用薬、コリン作動拮抗薬、アドレナリン作動作用薬、アドレナリン作動拮抗薬および麻薬拮抗薬。
したがって、本発明のさらに他の態様は、活性成分として、薬理学的活性アルコールを有するペクチン酸またはペクチニン酸のエステル体、または薬理学的活性有機塩基から誘導されたペクチン酸またはペクチニン酸のエステル体の塩を含有する医薬組成物である。
療法に使用する興味深いエステル体は、アルコール成分の薬理学的特性が優れたエステル体であり、すなわち、ステロイド性アルコールなど（コルチゾン型アルコールなど）の薬理学的活性アルコールを有するペクチン酸およびペクチニン酸エステル体である。これらのエステル体は該アルコールの特性と同質の特性を有するが、作用の範囲が広い。このような医薬的活性アルコールの公知のエステルと比較においても、本発明の新規エステル体は、よりバランスのとれた、一定で規則正しい薬理作用を確実に示し、一般に、活性アルコール成分の抑制効果と同じ効果を著しく示す。
本発明の、特に独創的で有用な態様を表すさらに別の興味深いエステル体は、上述のエステル体と比較した場合、もっと特徴の混合されたエステル体である。すなわち、ペクチン酸またはペクチニン酸のカルボキシル基の一方が薬理学的活性アルコールでエステル化され、他方が薬理学的に不活性または活性が無視できるようなアルコールでエステル化されているエステルである。エステル形成成分として、２つのタイプのアルコールを適当な割合で混合することにより、薬理学的活性アルコールと同様の活性を有し、薬理学的活性アルコールの所望の特徴的な活性と比較した場合、さらに増加した安定性および生体有効性を有するエステル体を得ることができるが、それは薬理学的に不活性な酸のエステル体によるものである。
さらに別の態様のエステル体は、２つの異なる治療上有効な物質から誘導される混合特徴を有している。この場合も、エステル体は、部分エステル、すなわち、幾つかのカルボキシル基のみが２つの異なる治療上有効なアルコール、たとえばコルチゾンステロイドおよび抗生物質から誘導され、他のカルボキシル基が遊離状態かまたはアルカリ金属など（特にナトリウム）で造塩されたエステル体、あるいは全エステル体、すなわち、すべてのカルボキシル基が上述のアルコール類でエステル化されたエステル体である。しかし、３個またはそれ以上のアルコール成分を有するエステル体、たとえばカルボキシル基の一部が治療上有効なアルコールでエステル化され、他の部分が別の治療上有効なアルコールでエステル化され、第３の部分が治療上不活性なアルコールでエステル化され、第４の部分がおそらく金属または治療上有効または不活性な塩基で造塩されているかまたは遊離状態であるエステル体を製造することが可能である。さらなる本発明の態様は、有効成分として、薬理学的活性な２価の脂肪族アルコールで一部エステル化されたペクチン酸またはペクチニン酸を含有する医薬組成物である。
有効成分以外に、このような医薬組成物には、経口または非経口投与に適した賦形剤が含まれてもよい。たとえば、錠剤、ペレット、カプセル剤、座薬、溶液剤、乳液、水性懸濁液、吸入剤およびその他の適当な投与形態に用いる通常の担体とともに有効成分を製剤することができる。担体の例としては、グルコース、ラクトース、アラビアゴム、ゼラチン、マンニトール、スターチ、ケイ酸マグネシウム、タルク、および組成物を固体、半固体または液体あるいはマイクロカプセル剤の形態に製造するのに適したその他の担体が挙げられ、そしてさらに、補助剤、安定化剤、増粘剤、着色剤、フレーバーおよび保存剤を本発明組成物に配合することができる。
活性エステル体またはその塩（これらもまた有効成分となりうる）は、投与において所望の治療効果を生じさせるのに充分な量にて、本発明組成物に含まれる。活性エステル体および／またはその活性塩の一回の服用量または治療上効果的な分量は、治療される個々の患者の年令および状況に応じて変化する。
本発明の医薬組成物は、そのような便宜法での投与用としても製剤することができ、非経口投与、皮下投与、皮内投与あるいは経口、直腸内、膣内または鼻腔内投与などの局所または局部投与に応用できる。
本発明のＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類は、ヒトまたは動物に対する薬理学的活性物質（局部、経口または直腸内作用を有する物質）または植物に対する特異的生物学的活性を有する物質（除草剤など）のためのビヒクルの製剤においても利用することができる。
本発明は、前述のＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類およびその塩類の新規用途およびこれらのエステル類で製造した生成物、特に生物学的活性物質のビヒクルとして、ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル体またはその塩を含有する組成物に関するものである。
一種またはそれ以上の生物学的活性物質のビヒクルとして役立つように設計された製剤において特に、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの部分エステル類の遊離のカルボキシル基の一部または全部を造塩するために用いた塩基性の薬理学的活性物質を利用することにより、この結果に到達することができる。
本発明は、化粧品、衛生用品、医薬品、栄養品において、および増粘特性および／または乳化特性を利用しうる分野において使用される特殊な生成物に対して、より利用価値の高い効果を有する新規物質群を提供する。生成物の用途に応じて、これらの効果はもちろん状況により変化する。
１価のアルコール残基は、器官で代謝されてグリコールより低毒性の退化生成物となるので、本発明の１価のアルコールのエステル類の優勢を主張することが重要となる。この状況において、生体適合性グリコール（オリゴ−エチレングリコールなど）またはポリヒドロキシル化物質（グリセロールおよび糖類など）が除外されることは重要である。
本発明エステル体の中で特に好ましいサブグループは、毒性置換基を含まないアルコール、特に脂肪族または脂環式１価アルコールから誘導されたエステル体である。
それゆえに、脂肪族または脂環式１価アルコールのエステル体は、上述の用途のうち、特に食品工業において大きな利点を有している。
非常に低毒性の本発明のＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの多数のアルコールのエステル類は、主に医薬品、化粧品、衛生用品および農業および栄養品の分野において、有効に利用でき、該新規のＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類は、種々の機能を持つ生体適合性プラスチック物質として使用できる。したがって、たとえばＰＧＡおよび／またはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類は、衛生用品に用いる多種多様のポリマー物質（澱粉およびその誘導体、ポルウレタン、ポリエステル、ポリアミド、ポリシロキサン、幾つかのビニルおよびアクリルポリマーなど）用の添加剤として使用でき、得られるポリマー混合物の生体適合性の増加効果を有する。
化粧品および医薬品の分野では、本発明のＰＧＡおよび／またはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類は軟膏剤、クリーム剤および他の型の局所適用医薬あるいは化粧製品（日焼け止めクリームなど）の製造に使用でき、その場合エステル類は安定剤または乳化剤として作用する。
医薬品の分野では、本発明のＰＧＡおよび／またはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類およびその塩類は、錠剤の崩壊剤または結合剤として使用できるが、しかし、本発明の特に重要な態様においては、薬理学的活性物質のビヒクルとして使用できる。
ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの新規エステル類またはその塩類は、他の物質のビヒクルとして種々の方法で使用でき、特に（これらに限定されるものではない）：
ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類またはその塩類は、担体またはプロドラッグなど、その語句のすべての意味でのビヒクルとして使用し、化学的または物理的に活性物質と結合する（たとえば、マイクロスフェア形態など）；
ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの部分エステル体は活性物質で造塩される。
それゆえに、本発明の主要目的物は、脂肪族、アリール脂肪族、脂環式または複素環式アルコールを有するＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの全または部分エステル類および該部分エステル類の無機または有機塩基との塩類である。
本発明の第２の目的物は、中性溶媒中、ＰＧＡの第４アンモニウム塩をエステル化剤で処理し、要すれば、このようにして得られたＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの部分エステル類において、遊離カルボキシル基を予め選択した無機または有機塩基で造塩することを特徴とする、ＰＧＡおよびＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類の製造法である。
本発明の第３の目的物は、化粧品分野で使用される物質、薬理学的活性化合物および医薬製剤または薬剤（薬理学的活性物質または薬理学的活性物質の組み合わせを含む）のビヒクルとしてのＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル類の使用；および、ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの全または部分エステル体、ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの部分エステル体と無機または有機塩基との塩類を含み、他の生体適合性ポリマーとおそらく物理的に結合した運搬ビヒクルである。
このようにして、おそらく無機または有機塩基で造塩された（ここで少なくともカルボキシル基の１画分が医薬的活性塩基で造塩される）、ペクチン酸またはペクチニン酸の部分エステル体によって、医薬組成物または薬剤を構成することができる。
薬理学的活性物質は、鎮痛薬、麻酔薬、抗炎症剤、血管収縮薬、抗生物質、抗菌剤および抗ウイルス剤からなる群から選ぶことができる。
本発明の興味深い態様のひとつは、眼科、皮膚科あるいは歯科の分野における、ペクチン酸またはペクチニン酸の薬理学的活性エステル類またはその塩類の使用である。
本発明の化粧品は、ペクチン酸またはペクチニン酸のエステル体またはペクチン酸またはペクチニン酸の部分エステル体の塩を含有し、要すれば、水、乳化剤、オイル、芳香剤または着色剤などの通常化粧品に使用する他の成分を含有してもよい。本発明の化粧品において、エステル体は、全体的または部分的のどちらであろうと、治療上および薬理学的に不活性なアルコールから誘導される。
本発明の好ましい化粧品は、最大で１２個の炭素原子からなる脂肪族アルコールから誘導されたエステル体を含む。
本発明の他の態様は、本発明の上記のペクチン酸またはペクチニン酸のエステル体、または２価の脂肪族アルコールから誘導されたペクチン酸またはペクチニン酸を含有する衛生用品あるいは外科用品である。
衛生用品または外科用品における本発明の好ましい具体例は、ペクチン酸またはペクチニン酸のエステル類またはその塩類のフィルムまたは糸であり、それらのエステル化および造塩成分の両方は、治療上不活性な物質から誘導される。本発明のフィルムまたは糸において、ペクチン酸またはペクチニン酸においてカルボキシル基を全体的にまたは部分的にエステル化するアルコールは、最大炭素数１２の脂肪族アルコールである。ペクチン酸またはペクチニン酸のエステル体の糸は外科手術において縫合糸として使用できる。
本発明のさらに他の態様は、植物および野菜に有益な生物学的活性化合物の担体あるいは食品の保護包装材料として、農業−栄養分野で使用するためのフィルム、シートまたは糸の形状に製造されたペクチン酸またはペクチン酸のエステル類またはその塩類である。
本発明のフィルム・シートまたは糸は、ペクチン酸またはペクチニン酸のエステル体を有機溶媒に溶媒し、その溶液をシートまたはフィルムに成形、あるいは糸に紡ぎ、次いで第１の溶媒に可溶の第２の適当な有機あるいは水性溶液で処理して第１の有機溶媒を除去することからなる操作で製造することができる。フィルム、シートまたは糸は該第２溶媒に可溶であってはならない。好ましい第１の溶媒はジメチルスルホキシドである。
ＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル体をすりつぶして、空気中に懸濁させておくように十分に小さい粒子径、たとえば粒子径２５０μm以下、好まくは１００μm以下、特に好ましくは１０〜５０μmの粉末にして微粒を製造することができる。次いで、粉末粒子に造粒液（代表的な造粒液は、濃度０．１〜３％ｗ／ｖ、好ましくは０．５％ｗ／ｖのアルギン酸ナトリウムを含有する水である）を吹き付けることによって、造粒することができる。造粒前に、粉末を造粒生成物に通常使用される他の成分、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、セルロース誘導体などと混合することができる。造粒の結果満足できる粒子径がえられたら、粒子を温風などで乾燥する。
ペクチン酸およびペクチニン酸のエステル類の興味深い用途が、マイクロスフェアの製剤に存在する。マイクロスフェアは単独成分として該エステル類またはその塩類を含むことができ、あるいは本発明の一種あるいはそれ以上のエステル類またはその塩類に加えて他の成分を含むことができる。本発明エステル体またはその塩でない成分は、薬理学的活性物質であり、先に述べた物質から選択され、特にインシュリンが好ましい。本発明のエステル類および、要すれば、他の成分から製造されたマイクロスフェアは生医学分野または農業−栄養分野で使用しうる。本発明のエステル類またはその塩類を含むマイクロスフェアは、該エステル体またはその塩を５〜１０％／重量の濃度で溶媒、特にジメチルスルホキシドなどの中性溶媒に溶解し、そこに薬理学的活性物質などの他の成分を加え（要すれば溶解状態にて）ることにより、製造することができる。次いで、そのようにして製造した液相（不連続相）を、鉱物油などからなる連続層中、本明細書に記載の界面活性剤によって乳化することができる。乳化が完了したとき、本発明のエステル体および任意の他の成分が溶解しないが、不連続相の溶媒を抽出することができる液体を撹拌しながら加える。液体相の量は、全乳液体積の約２．５倍が好ましい。不連続相溶媒が抽出されると、不連続相の乳化生成物（粗マイクロスフェア）を単離し、乾燥することができる。
本発明エステル体がマイクロスフェアにおいて単独成分ならば、薬理学的活性成分（インシュリンなど）などの有効成分などの追加の成分を、適当な媒体に懸濁した粗マイクロスフェアに加えることができる。次いで、形成した生成物を単離し、乾燥することができる。
本発明エステル類または塩類の別の用途は、食品添加物である。エステル類は増粘剤、保存剤、乳化剤、安定化剤またはゲル化剤として使用することができる。たとえば、水に溶解した（約１％ｗ／ｖ）、脂肪族部分が１０〜１２個の炭素原子を有する本発明のＰＧＡまたはＰＧＡ−Ｍｅ−ｘの脂肪族部分エステル体は、非常に安定な水中油型乳剤を形成することができる（例えば、約２０％ｗ／ｖ落花生油含有）。同じ部分エステル体は、泡立つという別の性質も示す。ＰＧＡの部分ベンジルエステル体を７０〜８０℃にて水に溶解し（約１％ｗ／ｖ）、カルシウム塩を加えて、水生ゲルを製造することができる（例えば、ＣａＣｌ2、約１％ｗ／ｖ）。次いで、混合物をゆっくりと冷却して（約２４時間）ゲルにする。
新規エステル類の医薬組成物を製剤する場合、有効成分に対応する処方で使用する。一例として、薬理学的活性成分が、エステル形成アルコールとして用いるステロイド性アルコールである医薬組成物について述べる。このような組成物はステロイド性アルコールの公知の用途に対応する処方で使用される。
本発明は次の実施例でさらに詳しく説明されるが、それによって本発明の範囲が限定されるものではない。
ＰＧＡに関するデータは、ガラクトース酸の９７重量％であるＰＧＡサンプルについてのもである。実際、電位差計で測定したサンプル（ナトリウム塩）の当量は２００であった。上述したものと同じ特徴をもつサンプルはシグメ・ケミカル・コーポレイション（セントルイス、ＭＯ、米国）から入手した。
ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘに関するデータは、ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ（ｘ＝３５％）のサンプルについてのものである。電位差計で測定したサンプルの当量（ナトリウム塩、８０％のポリガラクトース酸および２０％の他の糖類を含有）は、３８６であった。同じ特徴をもつサンプルはカサルピナ（Casalpina）から入手した。
次の実施例は本発明のペクチン酸およびペクチニン酸のエステル類の製造法の解説にすぎない。
実施例１
ＰＧＡ及びＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのテトラブチルアンモニウム塩の製造
i）Ｈ＋型の強酸イオン交換樹脂Dowex５０×８の９５０meqと等価な６００mlを撹拌下に水酸化テトラブチルアンモニウム１．０Ｎの水溶液と接触させ、それをテトラブチルアンモニウム（ＴＢＡ）型に変換した。
１００meqと等価なＰＧＡ（ナトリウム塩）２０ｇを、先に詳述したようにして調製した樹脂を含有するカラムに通した。
溶出液を採取し、濾過し、凍結乾燥した。これにより、ＰＧＡ−ＴＢＡ３６ｇが得られた（収率８７％）。
ii）ＰＧＡ−ＴＢＡを入手するための別の手法は次の通りである：  １００．０meqと等価な乾燥ＰＧＡ（ナトリウム塩）２０．０ｇ試料を蒸留水１０００ml中に可溶化する。得られた溶液を酸型の強酸イオン交換樹脂６００ml（９５０meqと等価）を含有するカラムに通す。
得られた溶出液を、１．５Ｍ水酸化テトラブチルアンモニウムによって注意して中和し、次いで濾過し、凍結乾燥する。収量：３５．７ｇ（理論収量の８７％に等しい）。
iii）ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘ（ここにｘ＝３５、ナトリウム塩）３０．０ｇ（７８meqと等価）を蒸留水１０００ml中で可溶化させる。得られた溶液を、酸型の強酸イオン交換樹脂６００ml（９５０meqと等価）を含有するカラムに通す。
得られた溶出液を、１．５Ｍ水酸化テトラブチルアンモニウムによって注意して中和し、次いで濾過し、凍結乾燥する。収量：３９．０ｇ（理論収量の８５％に等しい）。
実施例２
ベンジルエステル型のカルボキシル基８５％を含有するＰＧＡの（部分）エステル体の製造
純粋な窒素流の存在下、２５℃にて、実施例１の（ｉ）により入手したＰＧＡのテトラブチルアンモニウム塩３５．４ｇ（８４meq）を無水ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）４００ml中で可溶化させる。
３−tert−ブチル−４−ヒドロキシアニソール（遊離ラジカルインヒビター）２ｇを加え、純粋な窒素を１２時間泡立たせる。
ベンジル・ブロミド１７．５２ｇ（１０２meq）を加える。得られた溶液を２５℃にて２日間、３７℃にて１日、充分に振盪させる。
過剰の冷凍酢酸エチル（約０℃）中にこの反応混合物を撹拌下に滴加により注ぎ、次いでさらに１時間振盪した。
沈澱物を濾過し、過剰の酢酸エチルで洗浄し、次いでエタノール／水１：１中、３％の塩化ナトリウム溶液と共に撹拌することにより、エステル化されていないカルボキシル基をナトリウム塩に変換した。
沈澱物を再び濾過し、エタノール／水１：１、エタノール及びアセトンによる連続洗浄を繰り返した。
次いで、得られた沈澱物を採取し、４０℃にて４８時間減圧乾燥した。このようにして生成物１７．０ｇを入手した。
ＰＧＡ誘導体のエステル化の程度の定量的測定はＮＭＲ及びガスクロマトグラフィーによって行った。
実施例３
ベンジルエステル型のカルボキシル基５０％を含有するＰＧＡの部分エステル体の製造
純粋な窒素流の存在下、２５℃にて、ＰＧＡのテトラブチルアンモニウム塩１０．９ｇ（２６．０meq）を無水ＤＭＳＯ１４０ml中で可溶化させる。
３−tert−ブチル−４−ヒドロキシアニソール０．７ｇを加え、純粋な窒素流を維持させ、次いで得られた溶液を１２時間振盪させた。
ベンジル・ブロミド２．２ｇ（１３meq）を加える。得られた溶液を２５℃にて４８時間、そして３７℃にて２４時間、充分に振盪させる。
過剰の冷凍酢酸エチル（約０℃）中にこの反応混合物を撹拌下に滴加により注ぎ、次いで約１時間振盪する。生成した沈澱物を濾過し、過剰の酢酸エチルで洗浄し、次いで水／エタノール１：１中、１％のテトラブチルアンモニウム・ブロミド溶液と共に撹拌することにより遊離のカルボキシル基を独占的にテトラブチルアンモニウム塩の形態とし、それにより、以後のＮＭＲ分析の際にＤＭＳＯに容易に可溶化する試料を入手した。
得られた試料をアセトンで洗浄し、４５℃にて４８時間減圧乾燥した。収量：７ｇ。
ＰＧＡ誘導体のエステル化の程度の定量的測定はガスクロマトグラフィー及びＮＭＲによって行った。
実施例４
デシルエステル型のカルボキシル基１０％を含有するＰＧＡの部分エステル体の製造
純粋な窒素流の存在下、２５℃にて、ＰＧＡのテトラブチルアンモニウム塩９．７Ｇ（２３．１meq）を無水ＤＭＳＯ１００ml中で可溶化させる。
３−terr−ブチル−４−ヒドロキシアニソール０．５ｇを加え、純粋な窒素流を１２時間維持させた。
ｎ−デシル・ヨーダイド０．９３ｇ（３．５meq）を加える。得られた溶液を２５℃にて４８時間、３７℃にて２４時間、充分に振盪させる。
過剰の冷凍アセトン（約０℃）中にこの反応混合物を滴加し、約１時間撹拌する。
沈澱物を濾過し、過剰のアセトンで洗浄し、次いで３％の塩化ナトリウム水溶液と共に撹拌することにより、エステル化されていないすべての基をナトリウム塩に変換した。
蒸留水に対して透析した生成物は、凍結乾燥によって分離される水に容易に可溶化することが判明した。収量：４．７ｇ。
ＰＧＡ誘導体のエステル化の程度の定量的測定はガスクロマトグラフィーによって行った。
実施例５
ベンジルエステル型のカルボキシル基５０％及びエチルエステル型のカルボキシル基５０％を含有するＰＧＡの混合エステル体の製造
純粋な窒素流の存在下、２５℃にて、ＰＧＡのテトラブチルアンモニウム塩１．０ｇ（２．４meq）を無水ＤＭＳＯ ３０ml中で可溶化させる。
３−tert−ブチル−４−ヒドロキシアニゾール０．１５ｇを加え、純粋な窒素流を１２時間維持させた。
ベンジル・ブロミド０．３ｇ（１．８meq）及びエチル・ヨーダイド０．２８ｇ（１．８meq）を加える。得られた溶液を２５℃にて４８時間、３７℃にて２４時間、充分に振盪させる。
過剰の冷凍アセトン（約０℃）中にこの反応混合物を撹拌下に滴加により加え、次いで得られた混合物を約１時間振盪させる。
沈澱物を濾過し、過剰のアセトンで洗浄し、次いで４５℃にて４８時間減圧乾燥する。収量：０．５ｇ。
ＰＧＡ誘導体のエステル化の程度の定量的測定はＮＭＲ及びガスクロマトグラフィーによって行った。
実施例６
ＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのベンジルエステル（Ｂｚ）（ｘ＝３５、及びベンジルエステル＝６５）の製造
純粋な窒素流の存在下、２５℃にて、ＰＧＡ−Ｍｅ３５のテトラブチルアンモニウム塩１．２５ｇ（２．０meq）を無水ＤＭＳＯ ５０ml中で可溶化させる。
３−tert−ブチル−４−ヒドロキシアニソール０．２５ｇを加え、純粋な窒素流を１２時間維持させた。
ベンジル・ブロミド０．７ｇ（４．０meq）を加える。得られた溶液を２５℃にて４８時間、３７℃にて２４時間、充分に振盪させる。過剰の冷凍アセトン（約０℃）中にこの反応混合物を滴加により加え、次いで得られた混合物を約１時間振盪させる。
沈澱物を濾過し、過剰のアセトンで洗浄し、次いで４５℃にて４８時間減圧乾燥する。収量：０．７５ｇ。
試料の鎖に沿って存在するベンジル基の定量的測定は、ＮＭＲ分析及びガスクロマトグラフィーによって行った。
実施例７
実施例４にて製造した誘導体の水性媒質中における泡立ち特性
実施例４の生成物３０mgを水２０mlに溶解し、気密栓を有する較正１００mlチューブ中にて３０秒間激しく、得られた溶液を振盪させた。
１０秒後に測定された泡の量とその下部の液体相の量との比率は２：５であった。その泡は、容量は減っても数日持続した。
塩化ナトリウムを溶液に添加すると、その溶液は濁ったが、泡の量はたいして影響を与えなかった。
実施例８
ＰＡＧの部分エステルから微小球（マイクロスフェア）を製造する方法
実施例２に記載したＰＧＡの部分エステルをジメチルスルホキシドなどの非プロトン系溶媒中に、５−１０重量／容量％、一般には７％ｗ／ｖの濃度で溶解した。このポリマーが可溶化したなら、ヒトインスリンなどのポリペプチドを設定濃度、ここではポリマー１mg当り５ＩＵでその溶液に加える。得られた混合物は以後、不連続相と呼称する。同時に、非イオン性界面活性剤、アルラセル（arlacel）を１％ｗ／ｖで含有する高い粘稠性の鉱油の混合物をリアクター内で調製した。
この混合物は以後、連続相と呼称する。それを制御温度２５℃に維持させ、１，０００ＲＰＭの速度で撹拌し、その間、上記の不連続相を連続相に加えた。
これらの条件下では、２つの相の乳化は即座である。これら２つの相（不連続及び連続）の比率は約１：１６である。１５分撹拌した後、酢酸エチルを加える。この溶媒は上記２つの乳化相と完全に混和することができるが、ポリマー又はヒトインスリンポリペプチドのための溶媒ではない。ＤＭＳＯを完全に抽出するには、抽出溶媒の量は乳化液総量の２．５倍とすべきであることが示された。抽出を行うには、撹拌速度は１，４００−１，５００ＲＰＭ、１０分と設定すべきであり、次いで５００ＲＰＭに減少させる。このようにして得られた懸濁液を、撹拌を続行しながらスクリューポンプでくみ出し、フィルタープレスにまで送り、そこで圧力を１気圧に設定する。濾過を行ったなら、ｎ−ヘキサンをくみ出してそのフィルターに送るが、それは、調製物を乾燥し、また微小球の表面に存在し得るあり得る残余の界面活性剤を可溶化するという二重の作用を有している溶媒である。次いで、得られた生成物を適当な容器中に採取し、４℃で保存する。
上記の作動条件では、平均粒子サイズは１５μmであった。
取り込まれたインスリン量は微小球１mg当たり４ＩＵであった。
実施例９
ＰＧＡの部分エステルから微小球を製造する方法
実施例２に記載したＰＧＡの部分エステルをジメチルスルホキシドなどの非プロトン系溶媒中に、５−１０重量／容量％、一般には７％ｗ／ｖの濃度で溶解した。得られた溶液を以後、不連続相と呼称する。同時に、非イオン性界面活性剤、アルラセル(arlacel)を１％ｗ／ｖで含有する高い粘稠性の鉱油の混合物をリアクター内で調製した。
この混合物を以後、連続相と呼称する。この混合物を２５℃に維持し、１，０００ＲＰＭの速度で撹拌し、上記のようにして製造した不連続相をその混合物に加えた。
これらの条件下では、２つの相の乳化は即座である。これら２つの相（連続及び不連続）の比率は約１：１６である。
１５分撹拌した後、酢酸エチルを加える。
この溶媒は上記２つの乳化相と完全に混合することができるが、上記のポリマーのための溶媒ではない。ＤＭＳＯを完全に抽出するには、抽出溶媒の量は乳化液総量の２．５倍とすべきであることが示された。抽出を行うには、撹拌速度は１，４００−１，５００ＲＰＭ、１０分と設定すべきであり、次いで５００ＲＰＭに減少させる。このようにして得られた懸濁液の撹拌を続行しながら、その懸濁液をスクリューポンプでくみ出し、フィルタープレスにまで送り、そこで圧力を１気圧に設定する。濾過を行ったなら、ｎ−ヘキサンをくみ出してそのフィルターに送るが、それは、調製物を乾燥し、また微小球の表面に存在し得るあり得る残余の界面活性剤を可溶化するという二重の作用を有している溶媒である。次いで、得られた生成物を適当な容器中に採取し、４℃で保存する。
このようにして得られた微小球を、懸濁する微小球１mg当たり５ＩＵのタンパク質力価を与える濃度のインスリンを含有するリン酸緩衝液の溶液中に懸濁する。半自動系によって１５分間撹拌した後、懸濁液が完全に凍結するまで、その容器を液体窒素中に浸漬する。
凍結したなら、２４時間凍結乾燥し、次いで凍結乾燥した生成物を４℃で保存する。
取り込まれたインスリン量は微小球１mg当たり５ＩＵであった。
実施例１０
ＰＧＡ又はＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステルの顆粒の製造
実施例２に記載のようにして製造したＰＧＡの部分エステルを流動層グラニュレーター中で顆粒化した。
顆粒を形成すべきポリマーを１０−５０ミクロンの粒子サイズにまで粉砕する。このようにして入手した粉末をリアクター中に導入し、空気による渦巻き懸濁を維持し、均一な混合物を入手した。５分後、約０．５％ｗ／ｖの濃度でアルギン酸ナトリウムを含有する水である顆粒化液の溶液を上記の懸濁物に噴霧した。ポリマー粒子は、縮合核として働く水滴の回りにゆっくりと広がる。
この最後の工程の間に空気を１００℃にまで加熱し、形成している顆粒から水分を蒸発させ、最終産物として乾燥顆粒を入手した。アトマイザー（噴霧器）の寸法及び噴霧圧に応じて、０．５mm及び１．５mmの寸法を有する顆粒を入手することができる。
実施例１１
ＰＧＡ又はＰＧＡ−Ｍｅ−ｘのエステル及び添加物の無刺激混合物(bland mix tures)を基礎とする顆粒の製造
実施例２に記載のようにして製造したＰＧＡの部分エステルを流動層グラニュレーターによって顆粒化した。
顆粒を形成すべきポリマーを１０−５０ミクロンの粒子サイズにまで粉砕する。このようにして入手した粉末を、顆粒化産物に普通に使用される賦形剤、例えばアルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、セルロース誘導体などと共にリアクター中に導入し、空気による渦巻き懸濁を維持し、均一な混合物を入手した。５分後、約０．５％ｗ／ｖの濃度でアルギン酸ナトリウムを含有する水である顆粒化液の溶液を上記の懸濁物に噴霧した。ポリマー粒子は、縮合核として働く水滴の回りにゆっくりと広がる。
この最後の工程の間に空気を１００℃にまで加熱し、形成している顆粒から水分を蒸発させ、最終産物として乾燥顆粒を入手した。アトマイザー（噴霧器）の寸法及び噴霧圧に応じて、０．５mm及び１．５mmの寸法を有する顆粒を入手することができる。
実施例１２
実施例４に記載の誘導体の水生媒質中における乳化特性
実施例４に記載の誘導体を１重量％含有する水溶液５mlにピーナツ油０．５mlを加えた。
この混合物をバイブラセル音波処理装置(Vibracell sonicator)［Sonics & Materials, USA］で処理し、最小出力で約３分間音波処理することによりエマルジョンを作成する。
このエマルジョン（乳剤）は４℃で保存すると４０日にわたって安定であることが判明した。