(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の全ての皮膚糸状菌由来の抗原性物質と、生理的に許容される担体とを含有することを特徴とする皮膚糸状菌症用ワクチン：
・トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410（承認番号DSM 7277）、
・トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032（承認番号DSM 7279）、
・トリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovii)菌株No．551/68（承認番号DSM 7278）、
・トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)菌株No．VKPGF-929/381（承認番号DSM 7276）、
・ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)菌株No．VKPGF-928/1393（承認番号DSM 7281）、
・ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)菌株No．VKPGF-727/1311（承認番号DSM 7280）、
・ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)菌株No．VKPGF-728/120（承認番号DSM 7275）、および
・ミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)菌株No．VKPGF-729/59（承認番号DSM 7274）。
【請求項２】
以下の全ての皮膚糸状菌由来の抗原性物質と、生理的に許容される担体とを含有することを特徴とする皮膚糸状菌症用ワクチン：
・トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410（承認番号DSM 7277）、
・トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032（承認番号DSM 7279）、
・トリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovi)菌株No．551/68（承認番号DSM 7278）。
【請求項３】
以下の皮膚糸状菌の少なくとも１種由来の抗原性物質と、生理的に許容される担体とを含有することを特徴とする皮膚糸状菌症用ワクチン：
・トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410（承認番号DSM 7277）、
・トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032（承認番号DSM 7279）、
・トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)菌株No．VKPGF-929/381（承認番号DSM 7276）、
・ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)菌株No．VKPGF-928/1393（承認番号DSM 7281）、
・ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)菌株No．VKPGF-727/1311（承認番号DSM 7280）、
・ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)菌株No．VKPGF-728/120（承認番号DSM 7275）、
・ミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)菌株No．VKPGF-729/59（承認番号DSM 7274）。
【請求項４】
40〜120×106個／ccの小分生子を含有することを特徴とする請求の範囲第１〜３項の何れか１項に記載のワクチン。
【請求項５】
使用する該生理的に許容される担体が、0.2〜２重量％の醗酵させ、かつ加水分解した筋肉タンパク、５〜12重量％のグルコースおよび0.1〜1.2重量％の酵母抽出液を含む水性溶液であることを特徴とする請求の範囲第１〜４項の何れか１項に記載のワクチン。
【請求項６】
皮膚糸状菌症の予防並びに治療用の薬理組成物の調製における請求の範囲第１〜４項の何れか１項に記載のワクチンの使用。
【請求項７】
皮膚糸状菌による感染に対する免疫性および／または耐性を樹立するための薬理処方物の調製のための請求の範囲第１〜４項の何れか１項に記載のワクチンの使用。
【請求項８】
ａ．以下の菌株の少なくとも１種の培養物を調製し：
・トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410（承認番号DSM 7277）、
・トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032（承認番号DSM 7279）、
・ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)菌株No．VKPGF-928/1393（承認番号DSM 7281）、
・ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)菌株No．VKPGF-727/1311（承認番号DSM 7280）、
・ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)菌株No．VKPGF-728/120（承認番号DSM 7275）、
・ミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)菌株No．VKPGF-729/59（承認番号DSM 7274）；
ｂ．前記培養物を水性溶液中でホモジナイズし；
ｃ．前記ホモジナイズした培養物を１日〜２日間インキュベーションし；
ｄ．前記ホモジナイズした培養物を、不活化試薬を添加することによって不活化し；および、
ｅ．前記不活化した培養物を生理的に許容される担体と混合する、
ことを特徴とするワクチンの製造法。
【請求項９】
試薬が、チオマーサル、ホルムアルデヒドまたは2-プロピオラクトンである請求の範囲第８項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
本発明は皮膚糸状菌症を特異的に予防し、かつ治療するためのワクチン類の調製並びにそのための組成物の調製における該ワクチンの利用に関する。
動物の皮膚糸状菌症は、その皮膚並びに関連する組織の人畜伝染性の疾患である。臨床的症状は感染領域の脱毛、充血、鱗屑形式およびアスベスト−状の痂皮形成により特徴付けられる。炎症はしばしば化膿を伴う。皮膚糸状菌症は、またしばしば皮膚の局部的感染によっても特徴付けられる。
動物における皮膚糸状菌症は社会経済的な衝撃を与える。罹患した動物は長期に及ぶ治療を要し、しかも動物およびヒト両者への感染を蔓延させる可能性がある。
これまでは、皮膚の罹患領域に局所的に適用される種々の型の薬物を使用して皮膚糸状菌症を治療していた。該薬物は軟膏YaM、ユグロン(Yuglon)(I)および幾つかの他の軟膏、リニメント剤、溶液並びに殺真菌剤または静真菌剤を含有する他の物質などを包含する。
このような治療の諸欠点は以下の通りである。
・該治療はそれ程効果的でない。
・該治療は、検疫上の方策の採用および動物を飼育している領域（飼育用の檻、飼育場、農場、動物園、サーカス等）の消毒を必要とする。
・該治療では、薬物の調製および獣医学的治療にかなりの資金を費やす必要がある。
・該治療では、該動物の抑留（野性動物を監禁状態にすること）に関連する難点をもつ。
後に、家畜の白癬症（USSR特許No．268593，1970参照）、毛皮収穫用の動物およびウサギの白癬症（USSR特許No．835446，1980参照）、ラクダの白癬症（USSR特許No．1190574，1985参照）等の治療のためにワクチンが開発された。
以前にウマの白癬症の予防並びに治療のためのワクチンも開発された：S-P-I（USSR特許No．548947，1976参照）（2）。
このS-P-Iワクチンは、寒天／ウワート中で、26〜28℃にて、20〜25日間培養された菌株、即ちUSSRオール−ユニオンサイエンティフィックコントロールインスチチュートオブベターリナリープリパレーションズ(All-Union State Scientific Control Institute of Veterinary Preparations)に寄託されているワクシニア性の菌株トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)No．2251/71を含む。該真菌の集団を該栄養培地の表面から取り出し、無菌蒸留水と混合し、ホモジナイズし、細胞の濃度を１ml当たり600-900×106個とする。このホモジネートを別のフラスコに移し、2-8%のゼラチン（ゲラトース）および10-40%のスクロースを1:1（±25%）の比率で含有する混合物で安定化し、次いで凍結乾燥する。
予防並びに治療の目的で、このワクチンを若年のおよび成熟したウマの首部分の筋肉組織中に、該ウマの年齢に応じて1-2ccの２回の投与量で、10-14日の間隔で注射する。治療のためには、該投与量を２倍にした。
この方法を利用して調製したワクチンは、他の薬物により生ずる小胞子菌および白癬菌に対する免疫性を与えないという欠点を有する。
生ワクチンを注射した領域が特徴的な病巣となる可能性があることが知られており、該病巣中では時としてワクシニア性の菌株の培養物が生成される可能性がある。ワクシニア性の菌株は残留ビルレンスを有する。幾種類かの家畜がヒトと頻繁に接触するような場合には、該家畜における上記の如き特徴的な病巣の発生は許容し得ないものである。
本発明は、動物の皮膚糸状菌症を特異的に予防し、かつ治療するための普遍的なワクチンおよび対応する免疫原性真菌菌株を提供することを目的とする。
この目的は、ワクシニア性菌株として以下の如き真菌菌株を使用することにより達成される。即ち、トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)（特に、VKPGF-931/410）、T.メンタグロフィテス(T. mentagrophytes)（特に、No．VKPGF-930/1032）、トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)（特に、No．VKPGF-929/381）、T.サルキソビー(T. sarkisovii)（特に、No．VKPGF-551/68）、ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)（特に、No．VKPGF-928/1393）、M.カニスバールオベスム(M. canis var. obesum)（特に、No．VKPGF-727/1311）、M.カニスバールジストルツム(M. canis var. distortum)（特に、No．VKPGF-728/120）、M.ジプシウム(M. gypseum)（特に、No．VKPGF-729/59）。ワクチンは上記菌株由来の抗原性物質と適当な担体との種々の組み合わせを使用することにより作成できる。
好ましい組み合わせは、トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)No．VKPGF-931/410、T.メンタグロフィテス(T. mentagrophytes)No．VKPGF-930/1032、トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)No．VKPGF-551/68、ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)No．VKPGF-928/1393）、M.カニスバールオベスム(M. canis var. obesum)No．VKPGF-727/1311、M.カニスバールジストルツム(M. canis var. distortum)No．VKPGF-728/120およびM.ジプシウム(M. gypseum)No．VKPGF-729/59からなり、特に犬、猫およびウマで使用するのに適している。
もう一つの好ましい組み合わせはトリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)No．VKPGF-931/410、T.メンタグロフィテス(T.mentagrophytes)No.VKPGF-930/1032およびT.サルキソビー(T. sarkisovii)No．VKPGF-551/68からなり、特に畜牛で使用するのに適している。
この抗原性物質は皮膚糸状菌、およびより具体的には上記の皮膚糸状菌の少なくとも１種の単一抗原もしくは複数の抗原を含むことができる。但し、皮膚糸状菌の感染に対する耐性を与えるのに十分な免疫応答性を刺激できることを条件とする。このような目的で使用する抗原物質は従来技術において公知の方法、例えば上記皮膚糸状菌またはその一部のホモジネート、皮膚糸状菌処方物の分画、組み換えDNA技術による抗原性皮膚糸状菌物質の製造等により調製できる。40〜120×106、好ましくは90×106個の小分生子を有するホモジナイズされた培養物質を使用することが好ましい。
このワクチンを投与するのに適した生理的に許容される担体は従来技術から公知であり、その例はバッファー、ゲル、極微粒子、移植可能な固体、溶液および他のアジュバントを包含する。
皮膚糸状菌を殺すためには、チオマーサル(thiomersal:C9H9O2SNaHg)、ホルムアルデヒドまたは2-プロピオラクトンを使用することができる。
ワクチンの調製のためには、例えば以下の手順を使用できる。
該菌株の培養物を、0.2〜2.0%の醗酵し、かつ加水分解した筋肉タンパク（FGM-s)、５〜12%のグルコースおよび0.1〜1.2%の酵母抽出液を含む水性溶液中でホモジナイズする。該小分生子の濃度を40〜120×106個／mlに調節し、１〜２日後にこの混合物を例えば1:10,000〜1:25,000の比率でのチオマーサル(C9H9O2SNaHg)により、あるいは従来技術において公知の他の物質を使用して不活性化する。得られた懸濁液を包装し、これをそのまま動物に使用する。
このワクチンの調製、与えるべき投与量および予防並びに治療のための投与法は実施例１〜３で説明する。
かくして、本発明は不活性化したワクチンの調製を可能とし、該ワクチンは再感染の確率を減じ、かつ高い免疫性を付与する。公知のワクチンとは異なり、本発明のワクチンは実際に動物の皮膚糸状菌症のあらゆる重大な原因に対して免疫性を付与する。
簡単にいえば、本発明のワクチンは以下のような諸利点をもたらす。
・罹患した動物の多くの種において、筋肉内注射後に免疫性を確立する。
・このワクチンは動物の皮膚糸状菌症の殆ど全ての原因に対して免疫性を付与する。
・このワクチンは安定な免疫原特性をもつ。
・このワクチンは製造が容易である。
・このワクチンは皮膚糸状菌の内性および外性抗原の完全な組を有し、かつ動物中で副反応を生じない。
このワクチンを、主として罹患領域における、異なる種の500匹の動物につき首尾よくテストした。
このワクチンの製造に使用した菌株はレニングラードの「オール−ユニオンコレクションオブパソゲニックフンギウイズインザUSSR, ミニストリーオブヘルスセンターフォーディープマイコセス(All-Union Collection of Pathogenic Fungi within USSR, Ministry of Health Centre for Deep Mycoses)」およびドイツ国、ブラウンシュバイヒ(Braunschweig)W-3300,マッシェローダーウエヒ(Mascheroder Weg)1Bの「DSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレン(DSM-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen)」に寄託されている。
これら菌株の諸特徴を以下に示す。
トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)No．VKPGF-931/410
この菌株は1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7277の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
この菌株は胞子生成に基く管理選別および1978年に鹿について同定された動物間流行性の菌株No．410の弱毒化により得られた。この菌株はレーベル−タプリンキー(Rebell-Taplin key)(レーベル（Rebell), G. &タプリン(Taplin), D., 皮膚糸状菌、その識別および同定(Dermatophytes, their recognition and identification), 1978)およびカシュキン(Kashkin), P.N. 等の方法(Opredelitel patogennykh, toksigenykh vrednykh dlya cheloveka gribov, 1979)に従って同定された。
この菌株の生物学的な特徴を表１に記載する。
菌株No．VKPGF-931/410は、栄養培地中で迅速に成育する点、大量の小分生子を生産する点、より低いビルレンスをもつ点およびその抗原との反応性をもたない点において該動物間流行性菌株とは異なっている。
トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)No．VKPGF-930/1032
この菌株は1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7279の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
この菌株は胞子生成に基く管理選別および1985年に馬に見られた動物間流行性の菌株No．1032の弱毒化により得られた。この菌株は上記の如く同定された（レーベル（Rebell）, G. &タプリン(Taplin)の上記文献およびカシュキン(Kashkin), P.N. 等の上記文献）。この菌株の生物学的な特徴を表２に記載する。
菌株No．VKPGF-930/1032は、栄養培地中で迅速に成育する点、大量の小分生子を生産する点、より低いビルレンスをもつ点およびその抗原との反応性をもたない点において該動物間流行性菌株とは異なっている。
トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)No．VKPGF-929/381
この菌株は1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7276の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
この菌株は胞子生成に基く管理選別および1986年に馬に見られた動物間流行性の菌株No．381の弱毒化により得られた。この菌株は上記の如く同定された（レーベル（Rebell）, G. &タプリン(Taplin)の上記文献およびカシュキン(Kashkin), P.N. 等の上記文献）。この菌株の生物学的な特徴を表３に記載する。
菌株No．VKPGF-929/381は、栄養培地中で迅速に成育する点、より低いビルレンスをもつ点およびその抗原との反応性をもたない点において該動物間流行性菌株とは異なっている。
ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)No．VKPGF-928/1393
この菌株は1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7281の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
この菌株は胞子生成に基く管理選別および1988年に猫に見られた動物間流行性の菌株No．1393の弱毒化により得られた。この菌株は上記の如く同定された（レーベル(Rebell), G. &タプリン(Taplin)の上記文献およびカシュキン(Kashkin), P.N. 等の上記文献）。この菌株の生物学的な特徴を表４に記載する。
菌株No．VKPGF-928/1393は、栄養培地中で迅速に成育する点、著しく高い胞子担持能を有する点、より低いビルレンスをもつ点およびその抗原との反応性をもたない点において該動物間流行性菌株とは異なっている。
ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)No．VKPGF-727/1311
この菌株は1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7280の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
この菌株は胞子生成に基く管理選別および1986年にトラに見られた動物間流行性の菌株No．1311の弱毒化により得られた。この菌株は上記の如く同定された（レーベル(Rebell), G. &タプリン(Taplin)の上記文献およびカシュキン(Kashkin), P.N. 等の上記文献）。この菌株の生物学的な特徴を表５に記載する。
菌株No．VKPGF-727/1311は、栄養培地中で迅速に成育する点、著しく高い胞子担持能を有する点、より低いビルレンスをもつ点およびその抗原との反応性をもたない点において該動物間流行性菌株とは異なっている。
ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)No．VKPGF-728/120
この菌株は1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7275の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
この菌株は胞子生成に基く管理選別および1987年に黒豹に見られた動物間流行性の菌株No．120の弱毒化により得られた。この菌株は上記の如く同定された（レーベル(Rebell), G. &タプリン(Taplin)の上記文献およびカシュキン(Kashkin), P.N. 等の上記文献）。この菌株の生物学的な特徴を表６に記載する。
菌株No．VKPGF-728/120は、栄養培地中で迅速に成育する点、大量の小分生子を生産する点、より低いビルレンスをもつ点およびその抗原との反応性をもたない点において該動物間流行性菌株とは異なっている。
ミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)No．VKPGF-729/59
この菌株は1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7274の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
この菌株は胞子生成に基く管理選別および1985年に馬に見られた動物間流行性の菌株No．120の弱毒化により得られた。この菌株は上記の如く同定された（レーベル(Rebell), G. &タプリン(Taplin)の上記文献およびカシュキン(Kashkin), P.N. 等の上記文献）。この菌株の生物学的な特徴を表７に記載する。
菌株No．VKPGF-729/59は、栄養培地中で迅速に成育する点、大量の小分生子を生産する点、より低いビルレンスをもつ点およびその抗原との反応性をもたない点において該動物間流行性菌株とは異なっている。
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このワクチンは菌株トリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovii)No．551/68を使用して調製できる。これは、例えば1985年８月５日付けのUSSR特許No．1177972に記載されている。その開示全体を本発明の参考とする。
この菌株も1992年１月10日付けで、承認番号DSM 7278の下でドイツ国、ブラウンシュバイヒW-3300,マッシェローダーウエヒ1BのDSM-ドイッチェサムルングフォンミクロオルガニズメンウントツェルクルツレンに寄託した。
特に、本発明は以下のことに関連する。
・以下の皮膚糸状菌の少なくとも１種由来の抗原性物質と、生理的に許容される担体とを含有することを特徴とする皮膚糸状菌症用ワクチン：
・トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)、特にトリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410、および／または
・トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)、特にトリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032、および／または
・トリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovii)、特にトリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovii)菌株No．551/68、
・ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)、特にミクロスポルムカニス(Microsporum canis)菌株No．VKPGF-928/1393、
・ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)特にミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)菌株No．VKPGF-727/1311、
・ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)、特にミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)菌株No．VKPGF-728/120および／または
・ミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)、特にミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)菌株No．VKPGF-729/59。
・特に犬、猫および馬を治療するための薬物であり、皮膚糸状菌菌株トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410、トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032、トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)菌株No．VKPGF-929/381、トリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovii)菌株No.551/68、ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)菌株No.VKPGF-928/1393、ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)菌株No．VKPGF-727/1311、ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)菌株No．VKPGF-728/120およびミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)菌株No．VKPGF-729/59からの抗原物質を、生理的に許容される担体と共に含有する皮膚糸状菌症用ワクチン。
・より特定的には畜牛を治療するための、皮膚糸状菌菌株トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410、トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032およびトリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovii)菌株No.551/68からの抗原物質を、生理的に許容される担体と共に含む皮膚糸状菌症用ワクチン。
・40〜120×106、好ましくは90×106個の小分生子を含有することを特徴とする、上記の如き皮膚糸状菌症用ワクチン。
・チオマーサルまたはホルムアルデヒドまたは2-プロピオラクトンを不活化剤として含有することを特徴とする、上記の如き皮膚糸状菌症用ワクチン。
・使用する生理的に許容される担体が、0.2〜2.0重量％の醗酵させ、かつ加水分解した筋肉タンパク、５〜12重量％のグルコースおよび0.1〜1.2重量％の酵母抽出液を含む水性溶液であることを特徴とする、上記の如き皮膚糸状菌症用ワクチン。
・皮膚糸状菌菌株：トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410、トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No．VKPGF-930/1032、トリコフィトンエキヌム(Trichophyton equinum)菌株No．VKPGF-929/381、ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)菌株No．VKPGF-928/1393、ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)菌株No．VKPGF-727/1311、ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)菌株No．VKPGF-728/120およびミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)菌株No．VKPGF-729/59。
・a.以下の菌株の少なくとも１種から抗原物質を調製し：
・トリコフィトンベルコスム(Trichophyton verrucosum)菌株No．VKPGF-931/410、
・トリコフィトンメンタグロフィテス(Trichophyton mentagrophytes)菌株No.VKPGF-930/1032、
・トリコフィトンサルキソビー(Trichophyton sarkisovii)菌株No．551/68、
・ミクロスポルムカニス(Microsporum canis)菌株No．VKPGF-928/1393、
・ミクロスポルムカニスバールオベスム(Microsporum canis var. obesum)菌株No．VKPGF-727/1311、
・ミクロスポルムカニスバールジストルツム(Microsporum canis var. distortum)菌株No．VKPGF-728/120および
・ミクロスポルムジプシウム(Microsporum gypseum)菌株No．VKPGF-729/59、および
b.  該抗原物質を生理的に許容される担体と混合することを特徴とするワクチンの製造法。
・該皮膚糸状菌を不活化するために、試薬特にチオマーサル、ホルムアルデヒドまたは2-プロピオラクトンを添加することを特徴とする上記の如き方法。
以下本発明を実施例により説明する。
実施例
実施例１
１ｌのワクチンを製造するために、菌株VKPGF-931/410、930/1032、929/381、551/68、928/1393、727/1311、728/120および729/59の培養物を採取し、寒天／ウワート培地中で26℃にて15日間成長させる。各培養物は８個のマットレスフラスコ中で育成する。次いで、真菌塊を取り出し、ホモジナイズし、200mlの溶液中に入れ、各ミキサーに添加する。使用したこの溶液は1%の醗酵させ、かつ加水分解した筋肉タンパク、10％のグルコースおよび1%の酵母抽出液を含む水性溶液である。小分生子の濃度をホモジネート１ml当たり90×106個とする。２日後に、各培養懸濁液125mlを採取し、単一の容器内で混合する。本発明のワクチンは所定の菌株の種々の組み合わせを一緒に混合することにより調製できる。
該ホモジネート混合物を不活化するために、チマーサル(Timersal)を該細胞懸濁液に直接、1:20000の比率で添加する。該ホモジネート１ｌ当て50mgのチマーサルを添加する。この細胞混合物を室温にて２日間放置する。
得られたワクチンをビン詰めし、一般に受入れられている方法に従って無菌性、安全性および免疫原性につき検査し、４℃にて凍結状態に維持する。
このような方法により製造されたワクチンを動物を免疫化するのに使用した。
予防並びに治療の目的に対して、このワクチンを以下の投与量で使用した（表８参照）。
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実施例２
実施例１に記載の方法により製造したワクチンを、疾病の予防並びに治療における有効性に関して、実験動物および種々の他の動物につきテストした。得られた結果を表９に与える。
実施例３
実施例１に記載の方法により製造したワクチンを、更に皮膚糸状菌症に罹患した動物を治療するのに使用した。得られた結果を表10に与える。
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参考文献
(1)アイゼンベルグ(Aisenberg), A.A., ノスコウ(Noskow), A.I., コロバトスキー(Kolovatsky), P.P., 「プリメネニーユグロナブイベターリナリー(Primenenie Yuglona v Veterinarii)」インサイエンティフィック＆テクニカルインフォーメーションブレタンオブザステートサイエンティフィックコントロールコミッティアンダーザモルダビアンカウンシルオブミニスターズ(in Scientific and Technical Information Bulletin of the State Scientific Control Committee under the Moldavian Council of Ministers)（1958）, p. 88.
(2)USSR特許No．548947（1976）