(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳類の毛の成長を抑制するための組成物であって、塗布する皮膚の１平方センチメートル当たり少なくとも１００マイクログラムの量のシステイン経路酵素の抑制物質と、皮膚科学的に許容される毒性のない賦形剤もしくはキャリアとを含み、該抑制物質が、３-デアザネプラノシン、イソニコチン酸ヒドラジド、Ｏ-スクシニルセリン、６-アザウリジン-２′，３′，５′-トリアセテート、アデノシン、Ｄ，Ｌ-プロパルギルグリシン、もしくは３，３，３-トリフルオロ-Ｄ，Ｌ-アラニンである上記組成物。
【請求項２】
該組成物中の該抑制物質の濃度が、１〜３０％である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ゴールデンシリアハムスター評価法でテストした場合、組成物が毛の成長を少なくとも３０％低下させる、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
組成物が毛の成長を少なくとも５０％低下させる、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
組成物が毛の成長を少なくとも７０％低下させる、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
該抑制物質の量が、抑制物質を、皮膚１平方センチメートル当たり１００〜３，０００マイクログラムの量で皮膚に塗布するのに充分である、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
化粧用組成物である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
本発明は、哺乳類に於ける不要な毛の成長を低下させる方法に関する。
哺乳動物の毛の主な機能は、動物を環境から守ることである。しかしながら、そのような機能は、人間に於いては殆ど失われてしまっている。人間の身体の様々な部分の毛は、実質的には美容上の理由により、生やしたままにしたり、除去したりする。例えば、一般的には頭皮上に毛があるのが好ましく、顔にあるのは好ましくない。
不要な毛を除去する為に、シェービング、電気分解法、脱毛クリームやローション、ワックス塗布、引き抜き、及びその他の美容的処置、並びに抗男性ホルモン療法を含む、様々な方法が用いられてきた。これらの従来からの方法には、通常、欠点が伴う。例えばシェービングの場合には、剃り跡が付いたり切り傷ができたりすることがあり、また毛の再成長速度が増すような感じを与えることがある。シェービングでは、望ましくない剃り残しができることもある。一方、電気分解法の場合、処理した部分は長期にわたり毛のない状態に保たれるが、高価であり、痛みを伴い、また時には傷跡が残ることがある。脱毛クリームは非常に効果的ではあるが、刺激性が強いので、一般的には頻繁に使用することは勧められない。ワックス塗布や引き抜きは痛みや不快感を生じ、また短い毛は余り良く除去できないことがある。最後に、女性の多毛症の治療に用いられている抗男性ホルモンには、望ましくない副作用のあることがある。
或る種の酵素の阻害物質を皮膚に塗布することで、毛の成長速度や成長の特性を変えられることが既に開示されている。これらの阻害物質には、５−アルファレダクターゼ、オルニチンデカルボキシラーゼ、Ｓ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ、ガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼ、及びトランスグルタミナーゼの阻害物質が含まれる。例えば、Breuer等の米国特許第４，８８５，２８９号、Shanderの米国特許第４，７２０，４８９号、Ahluwaliaの米国特許第５，０９５，００７号、Ahluwalia等の米国特許第５，０９６，９１１号、Shander等の米国特許第５，１３２，２９３号、及びShander等の米国特許第５，１４３，９２５号各明細書を参照のこと。
システインは、以下の生化学的経路に従って、細胞中でメチオニンから合成される。
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経路の最初の段階で、Ｌ−メチオニンＳ−アデノシルトランスフェラーゼにより、ＡＴＰのアデノシル部がＬ−メチオニンに移動して、Ｌ−メチオニンがＳ−アデノシルメチオニンに転換される。第二段階で、Ｌ−ホモシステインＳ−メチルトランスフェラーゼにより、Ｓ−アデノシルメチオニンのメチル基が細胞中に存在する受容体分子に移動して、Ｓ−アデノシルメチオニンがＳ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインに転換される。次に、Ｓ−アデノシルホモシステインヒドロラーゼ（アデノシルホモシステイナーゼ）により、プロセス中にアデノシンが放出されて、Ｓ−アデノシル−Ｌ−ホモシステインがＬ−ホモシステインに転換される。その後、シスタチオニンシンターゼが、Ｌ−ホモシステインとＬ−セリンの縮合に触媒作用を及ぼして、Ｌ−シスタチオニンが形成される。最後に、シスタチオナーゼ（シスタチオニンガンマリアーゼ）によりＬ−シスタチオニンが加水分解されて、Ｌ−システインが形成される。
上記の生化学的経路に於ける酵素を、以下、「システイン合成経路酵素」という。今般、哺乳類（ヒトを含む）の不要な毛の成長、特に男性ホルモンにより刺激された毛の成長が、システイン合成経路酵素の抑制物質を含む組成物を、毛の成長を低下させるのに効果的な量、皮膚に塗布することによって抑制可能なことが見出された。低下させる不要な毛の成長は、美容上低下させようとする正常な毛の成長であってもよいし、異常な、もしくは疾患のある状態による毛の成長であってもよい。
使用できる抑制物質には、Ｌ−メチオニンＳ−アデノシルトランスフェラーゼの抑制物質、たとえばシクロロイシン、セロメチオニン、Ｌ−２−アミノ−４−メトキシ−シス−ブテン（３）酸、及び２−アミノビシクロ〔２．１．１〕ヘキサン−２−カルボン酸，Ｓ−アデノシルホモシステインヒドロラーゼの抑制物質、たとえば３−デアザネプラノシン、アデノシン−５’−カルボキシアルデヒド、３−デアザアデノシン、及びＳ−３−デアザアデノシル−Ｌ−ホモシステイン、シスタチオニンシンターゼの抑制物質、たとえばイソニコチン酸ヒドラジド、Ｏ−スクシニルセリン、アデノシン、及び６−アザウリジン−２’，３’，５’−トリアセテート、並びにシスタチオナーゼの抑制物質、たとえばＤ，Ｌ−２−アミノ−４−ペンチン酸（Ｄ，Ｌ−プロパルギルグリシン）、β，β−ジクロロ−Ｄ，Ｌ−アラニン、β，β，β−トリフルオロアラニン、及びＬ−アミノエトキシビニルグリシン、がある。これらの化合物は全て公知であり、多くは市販されている。非可逆的な抑制物質が好ましい。可逆的な抑制物質（競合性、及び非競合性）も使用できる。
システイン合成経路酵素の阻害物質は、皮膚に塗るのに適した、皮膚科学的に許容される毒性のない賦形剤もしくはキャリアを含む、局所用組成物もしくは化粧用組成物に配合するのが好ましい。適当な賦形剤の例は、アセトン、アルコール、又は有効な化合物を効果的に導出させることのできるクリーム、ローション、もしくはジェルである。このような賦形剤の一つは、同時係属中のＰＣＴ／ＵＳ出願第９３／０５０６８号明細書に開示されている。また、製剤の効果を更に高める為に、賦形剤に浸透増進剤を添加してもよい。
組成物中の阻害物質の濃度は、飽和溶液となる迄、広い範囲で変えることができるが、好ましくは０．１〜３０重量％、もしくはそれ以上である。毛の成長は、皮膚の単位面積当たりの阻害物質の塗布量が増すに連れて低下する。効果的な最大塗布量は、阻害物質が皮膚に浸透する率によってのみ決まる。通常、効果的な量は、皮膚１平方センチメートル当たり１００〜３，０００マイクログラム、もしくはそれ以上である。
組成物は、毛の成長を抑制しようとする身体の選ばれた部分に、局所的に塗布すべきである。例えば、組成物を顔、特に顔の髭の生える部分、すなわち頬、首、上唇、及び下顎に塗布することができる。組成物を足、腕、胴、もしくは腋の下に塗布することも可能である。組成物は、多毛症の、もしくはその他の状態の女性に於ける不要な毛の成長を低下させるのに特に適している。ヒトの場合、毛の成長をはっきりと分かるように低下させる為には、組成物を一日に一回もしくは二回、又はそれ以上の頻度で、少なくとも三ヵ月間塗布すべきである。毛の成長の低下は、毛を除去する頻度が減少するか、もしくは被験者が処理した部位の毛が少ないと感じるか、もしくは定量的には、シェービングにより除去した毛の重量（すなわち毛の質量）が減少することにより明らかになる。
雄の無傷のゴールデンシリアハムスターは、それぞれが長径約８ｍｍの卵形の側腹部器官を両側にそれぞれ一個づつ有していて、それがヒトの顎鬚の毛に似た、太くて黒く、粗い毛を生やすので、ヒトの顎鬚の毛の成長のモデルにすることができると考えられている。この器官は、ハムスターの男性ホルモンに反応して毛を生やす。抑制物質を含む組成物の効果を評価する為に、それぞれのハムスター群の側腹部器官を、チオグリコレートをベースとした化学的な脱毛剤（サージェックス）を塗布して脱毛する。それぞれの動物の一方の器官に、賦形剤のみを一日に一回２５μｌ塗布し、それぞれの動物のもう一方の器官に、システイン合成経路酵素の抑制物質を含む賦形剤を同量塗布する。１３回塗布した後（一日に一回、一週間に五日塗布）、側腹部器官の毛を剃り、それぞれの器官から回収した毛の量（毛の質量）を測る。毛の成長のパーセント低下を、賦形剤で処理した側の毛の質量（ｍｇ）の値から、テスト化合物で処理した側の毛の質量の値を引き、得られたデルタ値を賦形剤で処理した側の毛の質量の値で割り、得られた数に１００を掛けることにより求める。
上記の評価法を、以下、「ゴールデンシリアハムスター」評価法という。好ましい組成物は、ゴールデンシリアハムスター評価法でテストした場合、毛の成長を少なくとも約３２％、より好ましくは少なくとも約５０％、最も好ましくは少なくとも約７０％、抑制する。幾つかのシステイン合成経路酵素の抑制物質を、ゴールデンシリアハムスター評価法によりテストした。その結果を表１に示す。
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３−デアザネプラノシンを含む組成物を局所的に塗布した場合、抑制物質の投与量のレベルが増すと、毛の成長抑制が増すことが分かる。この結果を、表２に示す。
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システイン経路酵素の抑制物質、もしくはこの抑制物質を含まないキャリア（コントロール）のいずれかで処理した側腹部器官から、毛包を分離した。システイン合成の経路に関与するＬ−シスタチオニン、ホモシステイン、及びＳ−アデノシルホモシステインを、アミノ酸分析法により測定した。ハムスターの側腹部器官の毛包のアミノ酸分析は、市販のシステム（ピコ−タッグ、ウォーターズアソシエーツ社、ミルフォード、ＭＡ）を用いて行った。毛包のアミノ酸を０．１ＮのＨＣｌで抽出し、フェニルイソチオシアネートで誘導化して、それぞれのアミノ酸のフェニルチオヒダンチオン誘導体を得た。それをその後、Ｃ−１８逆相クロマトグラフィーで分離し、インラインＵＶ分光測光法により定量化した。
より詳しくは、２５０〜５００μｌの０．１ＮのＨＣｌを、側腹部器官の毛包の各サンプルに添加し、次いで音波粉砕器で処理して細胞抽出物を得た。この細胞抽出物を１２，０００ｘｇで５分間、遠心分離器にかけ、回収した上澄み液を０．４５μのフィルターに通してろ過した。ろ液を、ピコ−タッグワークステーションを用いて、窒素下で真空乾燥させた。その後、ウォーターズアソシエーツのピコ−タッグのマニュアルに記載されている方法に従って、サンプルをフェニルイソチオシアネート試薬で誘導化した。誘導化されたサンプルのアリコートをＣ−１８逆相カラム（ピコ−タッグカラム）に注入し、勾配緩衝液系を用いて溶離を行った。この方法により、アミノ酸Ｌ−シスタチオニン、ホモシステイン、及びＳ−アデノシルホモシステインが、毛包の抽出物中に存在している他のアミノ酸から分離された。アミノ酸の濃度を、インラインＵＶ分光光度計、及び専用のＨＰＬＣコントロールデータ分析システム（ウォーターズアソシエーツ）を用い、ＵＶ波長２５４ｎｍで測定した。その結果を、表３に示す。
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組成物及び条件の同等のパラメータの広い範囲内で、本発明の精神もしくは範囲、又は本発明のいずれの態様からも逸脱しない限りにおいて、本発明を実施することができるということが、当業者に分かるであろう。