(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１段階において、構造式Ｉ
【化１】
0003717962.tif 000013
［但し、構造式Ｉにおいて、Ａは−ＯＨ基の保護基である。］で示される化合物Ｉとハロゲン化アルキルホスホリルジクロライドとを、塩基の存在下、溶媒中で反応させて、構造式ＩＩ
【化２】
0003717962.tif 000014
［但し、構造式ＩIにおける、Ａは前述と同様である。］で示される化合物ＩＩを合成し、次いで、
第２段階において、前述のようにして得られた化合物ＩＩとトリメチルアミンとを溶媒中で反応させて、構造式ＩＩＩ
0003717962.tif 000015
【化３】
［但し、構造式ＩＩＩにおける、Ａは前述と同様である。］で示される化合物ＩＩＩを合成し、最後に、
第３段階において、前述のようにして得られた化合物ＩＩＩを水添触媒の存在下に水素と接触させて構造式ＩＶ
【化４】
0003717962.tif 000016
で示される化合物ＩＶを生成することを特徴とするホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物の製造法。
【請求項２】
構造式ＩＩＩ
【化５】
0003717962.tif 000017
［但し、構造式ＩＩＩにおいては、Ａは−ＯＨ基の保護基である。］で示されるホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物誘導体。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、マイコプラズマ・フェルメンタンス（Mycoplasma fermentans)−ＨＴＬＶ−Ｉ（Human T-lymphotropic virus type Ｉ) に重複感染したヒトヘルパーＴ細胞の脂質画分から見出された新規な『ホスホリルコリン含有α−グルコース（糖）脂質化合物』を新たに化学的に合成する方法、並びに、その合成法における新規な中間体化合物を提供するものである。
【０００２】
【従来技術の説明】
従来からウイルス感染によって細胞の糖脂質糖鎖に大きな変化が生じることが知られていた。ヒトレトロウイルスであるＨＴＬＶ−Ｉ、およびＨＩＶ（human immunodeficiency virus）はいずれもリンパ球のなかでもとくにヘルパーＴ細胞に感染しやすく、ＨＴＬＶ−Ｉではこれをモノクローナルに腫瘍化し、ＨＩＶではこれを破壊することにより発症する。
【０００３】
これらのウイルス感染により細胞の脂質に変化があることを見出すことにより病態解明への手掛かりを得ようという試みられてきたが、前述のヒトレトロウイルス感染によって生じる細胞の糖脂質変化を詳しく調べているうちに、ＨＴＬＶ−Ｉ感染細胞において、中性スフィンゴ糖脂質が大きく減少し、一方、アルカリ不安定な糖リン脂質が特徴的にしかも異常に増加していること見出された。また、この細胞へは、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ−Ｉの病態との関連が注目されているマイクロプラズマ・フェルメンタンス（Mycoplasma fermentans)が感染していることもわかってきた。
【０００４】
最近、山本直樹、松田和洋により、前述の感染による発症と密接な関連を有する可能性のある『前記の増加物質の糖リン脂質』が分離、精製されて構造解析が試みられた結果、生理活性を有する可能性のある新規な構造の物質であるホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物が見出され、特願平６−２１４２９号として特許出願された。
【０００５】
【本発明が解決しようとする問題点】
発明者らは、前記の天然に分離、精製されて構造解析がなされた新規な構造物質であるホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物を化学的に合成する方法について鋭意研究を行った結果、この発明の合成法を見出し、発明を完成した。
【０００６】
【問題点を解決する手段】
本願における第１の発明は、第１段階において、構造式Ｉ
【０００７】
【化６】
0003717962.tif 000002
【０００８】
〔但し、構造式Ｉにおいて、Ａは−ＯＨ基の保護基であり、Ｒ1 及びＲ2 は炭素数６〜２６の炭化水素基である。〕で示される化合物Ｉとハロゲン化アルキルホスホリルジハライドとを、塩基の存在下、溶媒中で反応させて、構造式ＩＩ
【０００９】
【化７】
0003717962.tif 000003
【００１０】
〔但し、構造式ＩＩにおけるＡ、Ｒ1 及びＲ2 は前述と同様である。〕で示される化合物ＩＩを合成し、次いで、
第２段階において、前述のようにして得られた化合物ＩＩとトリメチルアミンとを溶媒中で反応させて、構造式ＩＩＩ
【００１１】
【化８】
0003717962.tif 000004
【００１２】
〔但し、構造式ＩＩＩにおけるＡ、Ｒ1 及びＲ2 は前述と同様である。〕で示される化合物ＩＩＩを合成し、最後に、
第３段階において、前述のようにして得られた化合物ＩＩＩを水添触媒の存在下に水素と接触させて構造式ＩＶ
【００１３】
【化９】
0003717962.tif 000005
【００１４】
〔但し、構造式ＩＶにおけるＲ1 及びＲ2 は前述と同様である。〕で示される化合物ＩＶを生成することを特徴とするホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物の製造法に関する。
また、第２の発明は、構造式ＩＩＩ
【００１５】
【化１０】
0003717962.tif 000006
【００１６】
〔但し、構造式ＩＩＩにおいて、Ａ、Ｒ1 及びＲ2 は前述と同様である。〕で示されるホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物誘導体に関する。
【００１７】
前記の構造式ＩＩＩで示される化合物ＩＩＩの代表的なものとして、次に示す構造式Ｖ（Ａがベンジル基である）で示される１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔2, 3, 4-トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−トリメチルアミノエトキシ）−ホスフィナ−ト−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ルを挙げることができる。
【００１８】
【化１１】
0003717962.tif 000007
【００１９】
本発明におけるホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物誘導体（即ち、構造式ＩＩＩで示される化合物ＩＩＩ）は、水添触媒の存在下で水素と接触させることによって、前述のようにして得られた新規な構造物質であるホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物〔即ち、前記の構造式ＩＶで示される化合物ＩＶにおいて、Ｒ1 及びＲ2 が−（ＣＨ2)14ＣＨ3 である化合物を例示できる〕などを容易に得ることができる。
【００２０】
前記の各構造式において、保護基Ａは、−ＯＨ基を、−ＯＡ基の状態で保護することができればどのよう種類の保護基であってもよく、例えば、そのような保護基としては、ベンジル基、パラメトキシベンジル基、トリチル基のような置換基を有してもよいアラルキル基が好適である。
【００２１】
また、各構造式において、炭素数６〜２５の炭化水素基Ｒ1 及びＲ2 は、互いに異なっていても同じであってもよく、そして直鎖状又は分岐状炭化水素基のいずれであってもよく、あるいは炭素−炭素不飽和結合を内部に有している炭化水素であってもよく、例えば、−（ＣＨ2)13−ＣＨ3 、−（ＣＨ2)14−ＣＨ3 、−（ＣＨ2)15−ＣＨ3 などの炭素数１０〜２０を有する直鎖状アルキル基であることが好ましく、特に−（ＣＨ2)14−ＣＨ3 が最適である。
【００２２】
本発明の製造法は、例えば、次に示す反応式１（１）〜（３）によって示すことができる。なお、反応式１（１）〜（３）における各構造式中のＡ、Ｒ1 及びＲ2 は、前述に説明したとおりの定義と同じである。
【００２３】
【数１】
0003717962.tif 000008
【００２４】
【数２】
0003717962.tif 000009
【００２５】
本発明の製造法における第１段階の反応としては、前記の構造式Ｉで示される化合物Ｉとハロゲン化アルキルホスホリルジハライドとを、トリエチルアミン、トリメチルアミン、エチルジイソプロピルアミンのようなトリアルキルアミン等の有機塩基と共に、ハロゲン化炭化水素等の有機溶媒中へ添加して、反応溶液を調製し、その反応溶液を約０〜６０℃、特に５〜５０℃の反応温度に維持して、約１〜２５時間、特に２〜２０時間攪拌しながら、化合物Ｉとハロゲン化アルキルホスホリルジハライドとを反応させて、前記の構造式ＩＩで示される化合物ＩＩを合成することが好ましい。
【００２６】
前記のハロゲン化アルキルホスホリルジハライドとしては、例えば、２−ブロモエチルホスホリルジクロライド、２−イオドエチルホスホリルジクロライド、２−クロロエチルホスホリルジクロライドなどを挙げることができる。
前記の第１段階の反応において有機溶媒として使用されるハロゲン化炭化水素としては、トリクロロエチレン、１，２−ジクロルエタン、ジクロルメタンなどを挙げることができる。
【００２７】
前記の第１段階の反応において、反応溶液中の化合物Ｉの濃度は、約１〜５０重量％、特に２〜２０重量％程度であることが好ましい。
また、前記のトリアルキルアミンの使用割合は、１モルの化合物Ｉに対して約０．１〜５モル、特に０．２〜２モル程度であることが好ましい。
【００２８】
前記の第１段階の反応において、反応が終了した後に反応液から目的物の化合物ＩＩを回収するためには、公知の回収方法を採用することができるが、例えば、反応が終了した後に、反応液を塩酸等の無機酸で酸性として、目的物である化合物ＩＩをエチルエーテル等で抽出して、食塩水等で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥して、更に、その乾燥された溶液を濃縮しそして精製することによって化合物ＩＩ（液状物）を得ることが好ましい。
【００２９】
本発明の製造法における第２段階において、前述のようにして得られた化合物ＩＩを、トリメチルアミンガスで飽和した有機溶媒に溶解させ、その反応溶液を、約３０〜１００℃、特に４０〜８０℃の反応温度に加熱し、その温度で約１〜２０時間、特に２〜１５時間で化合物ＩＩとトリメチルアミンとを反応させて、さらに、必要であれば、その反応液を冷却した後、反応液へ炭酸銀などの銀塩を臭素陰イオン除去のために加えて、再度、４０〜７０℃の温度に加熱し、約０．１〜１０時間、特に０．２〜５時間還流させて、前記の構造式ＩＩＩで示される化合物ＩＩＩを合成することが好ましい。
【００３０】
前記の第２段階の反応において、反応溶液中の化合物ＩＩの濃度は約１〜５０重量％、特に２〜２０重量％程度であることが好ましい。
また、前記のトリアルキルアミンの使用割合は、１モルの化合物ＩＩに対して約１．０〜５．０モル、特に３〜４モル程度であることが好ましい。
【００３１】
前記の有機溶媒としては、クロロホルム、四塩化炭素、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素溶媒、エタノール、プロパノール、ブタノール等の低級脂肪族アルコール、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジエチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ジエチルアセトアミドなどのアミド系溶媒、あるいは、それらの混合溶媒（例えば、クロロホルム−２−プロパノール−ＤＭＦの混合溶媒、１，２−ジクロロエタン−２−プロパノール−ＤＭＦ）が好適である。
【００３２】
前記の第２段階の反応において、反応が終了した後に反応液から目的物の化合物ＩＩＩを回収するためには、公知の回収方法を採用することができるが、例えば、反応が終了した後に、反応液を室温（約０〜４０℃）まで冷却し、セライト等のフィルターを通して濾過し、その濾液を濃縮し、精製して、目的物の化合物ＩＩＩ（液状物）を得ることが好ましい。
【００３３】
本発明の製造法における第３段階において、前述のようにして得られた化合物ＩＩＩを有機溶媒などの溶媒に溶解した溶液にパラジウム系触媒等の水添触媒を添加した混合物を、０〜５０℃、特に５〜４０℃の温度で、約１〜２０時間、特に２〜１５時間、水素ガスと接触させて水添反応を行わせることによって化合物ＩＩＩの−ＯＡ基をすべて−ＯＨ基に変換させて、構造式ＩＶで示される化合物ＩＶを生成させることが好ましい。
【００３４】
前記の水添触媒としては、水素添加反応に使用できるものであればどのようなものであってもよいが、特に、水酸化パラジウム〔Ｐｄ（ＯＨ）2 〕、パラジウムブラック、パラジウムカーボン、酢酸パラジウム、シュウ酸パラジウムなどのパラジウム系触媒を好適に挙げることができ、さらに、ニッケル系触媒、白金系触媒も挙げることができる。
その水添触媒の使用割合は、公知の水添反応における使用割合で用いればよいが、特にパラジウム系触媒の場合には、１モルの化合物ＩＩＩに対して約０．１〜０．５モル、特に０．３〜０．４モル程度であることが好ましい。
【００３５】
前記の第３段階の反応において使用する溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ケトン、メチルエーテル、酢酸、酢酸メチルエステルなどの有機溶媒、水、あるいは、それらの有機溶媒と水との混合液を挙げることができ、特に、メタノール−水−酢酸の混合溶媒（例えば、メタノール：水：酢酸が、１０：１：１である混合溶媒）を好適に挙げることができる。
前記の第３段階の反応において、反応が終了した後に反応液から目的物の化合物ＩＶを回収するためには、公知の回収方法を採用することができるが、例えば反応液を濾過し、精製した後、濃縮して、目的物である化合物ＩＶ（固体：ワックス状）のを得ることができる。
【００３６】
本発明の製造法によって得られる構造式ＩＶで示される化合物ＩＶとしては、次に示す構造式ＶＩで示される化合物ＶＩ〔１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔６−Ｏ−（２−トリメチルアミノエトキシ）−ホスフィナ−ト−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル〕を挙げることができる。
【００３７】
【化１２】
0003717962.tif 000010
【００３８】
この発明の製造法に使用する構造式Ｉで示される化合物Ｉは、反応式２（１）〜（３）、及び、反応式３（１）〜（３）に従って、製造することができる。
反応式２及び３の各構造式において、Ａ、Ｒ1 及びＲ2 は、前述の定義と同様であり、Ｘ1 およびＸ2 は、−ＯＨ基の保護基である。
【００３９】
【数３】
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【００４０】
【数４】
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【００４１】
前述の反応式２で示される反応では、グルコース環の２位、３位及び４位の−ＯＨ基が保護基Ａ及び１位及び６位の−ＯＨ基がＸ1 で保護されているα−Ｄ−グルコピラノース誘導体（構造式ＶＩＩ：化合物ＶＩＩ）を出発原料として、まず、第１段階（１）で、化合物ＶＩＩとハロゲン化水素とを溶媒中で反応させて化合物ＶＩＩにおけるグルコース環の１位の−ＯＸ1 基のみをＢｒ等のハロゲン原子に変換し構造式ＶＩＩＩの化合物ＶＩＩＩを生成し、次いで、第２段階（２）で、（Ｓ）−グリシドール（グリシド）と有機塩基化合物と化合物ＶＩＩＩとを溶媒中で反応させて、化合物ＶＩＩＩのグルコース環の１位のハロゲン原子を無水グリセロール基に変換して構造式ＩＸの化合物ＩＸを生成し、最後に、第３段階（３）で、その化合物ＩＸとアルカリ金属アルコラートとをアルコール溶媒中で反応させて該化合物ＩＸのグルコース環の６位の−ＯＸ1 基のみを−ＯＨ基に変換して、1,2-アンヒドロ−3-Ｏ−〔α−Ｄ−グルコピラノシル〕−Ｓｎ−グリセロール誘導体（構造式Ｘ：化合物Ｘ）を生成することができる。
【００４２】
前述の反応式２で示される反応において、出発物質である化合物ＶＩＩのグルコース環の１位及び６位に−ＯＸ1 基を形成するための水酸基の保護剤としては、ｐ−メトキシベンジルクロライド、ｐ−メトキシベンジルブロマイドなどのベンジルハライド、トリフェニルメチルクロライド、tert−ブチルジメチルシリルクロライド、tert−ブチルジフェニルシリルクロライドなどの『Ｘ1 −Ｈａｌ化合物』を挙げることができる。
【００４３】
前述の反応式２で示される第１段階の反応で使用するハロゲン化水素としては塩化水素、臭化水素、ヨウ化水素などを挙げることができるが、特に、臭化水素が好適である。
また、前記の第１段階の反応で使用する溶媒としては、塩化メチレン、トリクロロメタン等のハロゲン化炭化水素溶媒、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル等のエーテル系溶媒などを挙げることができる。
【００４４】
前述の反応式２で示される第２段階の反応で使用する有機塩基化合物としては、テトラメチル尿素、テトラエチル尿素などの尿素化合物、塩化テトラメチルアンモニウム、臭化テトラメチルアンモニウム、塩化テトラエチルアンモニウム、臭化テトラエチルアンモニウムなどのハロゲン化テトラアルキルアンモニウムなどの窒素系化合物を好適に挙げることができ、特にテトラメチル尿素等の尿素化合物と臭化テトラメチルアンモニウム等のテトラアルキルアンモニウム化合物を併用することが好適である。又、この第２段階の反応で使用する溶媒としては、前述の第１段階の反応で使用する溶媒と同様の溶媒を使用することができる。
【００４５】
前述の反応式２における第３段階の反応で使用するアルカリ金属アルコラートとしては、ナトリウムメチラート、ナトリウムエチラートなどを好適に挙げることができ、又、その第３段階の反応で使用するアルコール溶媒としては、メチルアルコール、エチルアルコールなどの低級脂肪族アルコール（炭素数１〜５を有する）を挙げることができる。
【００４６】
また、前記の反応式２における反応は、いずれの段階に反応においても反応温度がそれぞれ０〜６０℃、特に５〜５０℃程度、さらに１０〜４０℃であることが好ましく、一方、前記反応式２の反応における反応時間が、第１段階では１〜６０分間、特に５〜５０分間、また、第２段階では１〜６０分間、特に２〜３０分間、さらに、第２段階では、１〜５０時間、特に２〜４０時間程度であることが好ましい。
【００４７】
反応式３で示される反応では、前述の反応式２（１）〜（３）の反応で得られた『グルコース環の２位、３位及び４位が保護基Ａで保護されている1,2-アンヒドロ−3-Ｏ−〔α−Ｄ−グルコピラノシル〕−Ｓｎ−グリセロール誘導体（構造式Ｘ：化合物Ｘ）』を出発原料として、まず、第１段階（１）で、化合物Ｘと、高級カルボン酸金属塩（Ｒ1 −ＣＯＯＭ）との混合物を溶媒中で高温で反応反応させ、化合物Ｘのグリシジル基のエポキシ環を開環させて、ハーフエステル構造を有する構造式ＸＩで示される化合物ＸＩを生成さる。
【００４８】
次いで、反応式３の第２段階（２）で、化合物ＸＩと、トリアルキルアミン、アルキルアミノピリジン等の有機塩基とを溶解した塩化メチレン等の溶媒の溶液に、水酸基の保護剤（Ｘ2 −Ｈａｌ）および高級カルボン酸ハライド（Ｒ2 −ＣＯ−Ｈａｌ）の塩化メチレン等の溶媒の溶液を添加して、その結果、化合物ＸＩと保護剤（Ｘ2 −Ｈａｌ）と高級カルボン酸ハライド（Ｒ2 −ＣＯ−Ｈａｌ）とを反応させて、化合物ＸＩのグルコース環の６位の−ＯＨ基を−ＯＸ2 基に変換すると共に該化合物ＸＩのグリセロール構造の２位の−ＯＨ基をエステル結合に変換させて構造式ＸＩＩで示される化合物ＸＩＩを生成させる。
【００４９】
最後に、反応式３の第３段階（３）で、前記の化合物ＸＩＩをトリフルオロ酢酸のアルコール溶液に添加して、０〜５０℃、特に５〜４０℃、さらに室温付近で約１〜２０時間、特に２〜１５時間、十分に反応させて、前記の化合物ＸＩＩのグルコース環の６位の−ＯＸ2 基を再度−ＯＨ基に変換させて、本発明の製造法に出発物質として使用される『構造式Ｉで示される化合物Ｉ』を生成させるのである。
【００５０】
前記の反応式３の第１段階（１）で使用される高級カルボン酸金属塩（Ｒ1 −ＣＯＯＭ）としては、ラウリン酸、トリデシル酸、ミスチン酸、ペンタデシル酸、パルミチン酸、ヘプタデシル酸、ステアリン酸等の高級脂肪族カルボン酸と、炭酸セシウム、炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウム、炭酸カリウム等の炭酸金属塩とから得られた炭素数１０〜２０を有する高級脂肪族カルボン酸金属塩（例えば、パルミチン酸セシウム）を好適に挙げることができる。
【００５１】
前記反応式３の第１段階（１）においては、反応温度が８０〜２００℃、特に１００〜１５０℃程度であり、また、反応時間が１〜２０時間、特に２〜１５時間程度であることが好ましく、さらに、反応溶媒として、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ヘキサメチルホスホニウムアミド、エチレングリコールを挙げることができる。
【００５２】
前記反応式３の第２段階（２）で使用される水酸基の保護剤（Ｘ2 −Ｈａｌ）としては、tert−ブチルジメチルシリルクロライド、tert−ブチルジフェニルシリルクロライドなどのトリアルキルシリルハライドが好ましい。
また、前記反応式３の第２段階（２）で使用される高級カルボン酸ハライドとしては、ラウリン酸クロライド、トリデシル酸クロライド、ミスチン酸クロライド、ペンタデシル酸クロライド、パルミチン酸クロライド、ヘプタデシル酸クロライド、ステアリン酸クロライドなどの炭素数１０〜２０を有するカルボン酸ハライドを好適に挙げることができる。
【００５３】
前記の反応式２及び３の反応において、反応中間体又は目的物である各化合物のグルコース環の２位、３位及び４位の−ＯＡ基は、いずれも−ＯＨ基に変換されることなく各反応が行われることが好ましく、前記の−ＯＡ基が各反応条件に対してかなり安定であることが好ましい。
【００５４】
以下、本発明の製造法に関する実施例、及び参考例を示す。
前記の実施例及び参考例において、得られた反応生成物の融点は未補正のまま使用し、ＩＲスペクトルはＪＡＳＣＯ  Ａ−２０２分光計で測定し、 1Ｈ−ＮＭＲスペクトルはＪＥＯＬ  ＧＸ−４００または２７０  ＭＨｚの分光計を用い、溶媒としてＣＤＣｌ3 （重水素化クロロホルム）を用い、また内部標準（物質）としてＴＭＳ（テトラメチルシラン）を用いて測定し、さらに、旋光度は、波長５８６ｎｍでＪＡＳＣＯ  Ｊ−２０で測定した〔K8sel gel 60  Ｆ254 （メルク社製）をＴＬＣ分析に用いた。〕
【００５５】
前記の実施例及び参考例において、濃縮は減圧下に揮発分の蒸発によって行い、濾過はセライトを通して行った。
さらに、実施例及び参考例において、反応液の後処理は、塩化メチレンで希釈し、水で洗浄し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、濃縮することによって行った。
【００５６】
参考例１
〔反応式２−（１）の反応〕
２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−ｐ−ニトロベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシルブロミド（化合物ＶＩＩＩ）の合成
２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１，６−ジ−Ｏ−ｐ−ニトロベンゾイル−Ｄ−グルコピラノ−ス（１．４５ｇ、１．９４ｍｍｏｌ）の臭化水素で飽和した塩化メチレン液（１５ｍｌ）を室温中で、３０分間攪拌した。セライトを通して濾過した後、溶液を減圧下濃縮し、塩化メチレン（５ｍｌ）を加えて減圧下濃縮を繰り返して、得られた化合物ＶＩＩＩ1,2)のシロップ状の残渣を、更なる精製をすることなく次の参考例２の反応〔反応式２−（２）〕に供した。
【００５７】
1)T.Ishikawa and H.G.Fletcher,J.Am.Chem.Soc.,34,563(1969).
2)R.U.Lemieux, K.B.Hendrix, R.V.Stick and k.James,J.Am.Chem.Soc.,97,4056(1975).
【００５８】
〔反応式２−（２）の反応〕
１，２−アンヒドロ−３−Ｏ−〔２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−ｐ−ニトロベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物ＩＸ）の合成
塩化メチレン中の（Ｓ）−グリシド−ル（グリシド）（７２０ｍｇ，９．７ｍｍｏｌ）、テトラメチル尿素（３３８ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）、臭化テトラエチルアンモニウム（４４０ｍｇ，３．８ｍｇ）および粉状モリキュラ−シ−ブ３Ａ（３００ｍｇ）の混合物の塩化メチレン溶液（１０ｍｌ）を室温で１５分間攪拌した。上記参考例１のようにして合成した１．４５ｇの２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−１, ６−Ｏ−ｐ−ニトロベンゾイル−α−Ｄ−グルコピラノシルブロマイド（化合物ＶＩＩ１）の塩化メチレン溶液５ｍｌを室温下５分間で該混合物の塩化メチレン溶液に添加し、反応混合物を一夜攪拌した。混合液は通常の後処理を行い、そして得られたシロップはシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（溶媒；トルエン：酢酸エチル＝１０：１）で精製して、シロップ状の化合物ＩＸを９７２ｍｇ（収率：７８％）得た。
1Ｈ−ＮＭＲ(ppm) ：4.96（1H, d, J＝3.8Hz,  H-1') 、2.60(1H, dd, J＝2.8, 4.9Hz, H-1a) 、2.79（1H, dd,  J＝4.3, 4.9Hz, H-1b）、3.22（1H, m, H-2）、3.83（1H, dd,  J＝3.0, 12.0Hz, H-3a ）、3.50（1H, dd,  J＝6.3, 12.0Hz, H-3b ）
【００５９】
〔反応式２−（３）の反応〕
１，２−アンヒドロ−３−Ｏ−〔２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物Ｘ）の合成
参考例２で得られた化合物ＩＸの粗製シロップ（５００ｍｇ）とナトリウムメチラ−ト１０ｍｇを含むメタノ−ル溶液（１０ｍｌ）との混合物を３時間攪拌し、Ａｍｂｅｒｌｙｓｔ  １５（Ｈ +型）で中和処理し、そしてシロップ状の化合物Ｘを３８４ｍｇ（収率：１００％）得た。
〔α〕22D ：＋３８°（ＣＨＣｌ3 ，ｃ  ０．１）、
1Ｈ−ＮＭＲ(ppm) ：4.90（1H, d, J＝3.6Hz,  H-1') 、2.60(1H, dd, J＝4.6, 4.8Hz, H-1a) 、2.80（1H, dd,  J＝4.5, 4.5Hz, H-1b）、3.21（1H, m, H-2）、3.83（1H, dd,  J＝3.1, 11.8Hz, H-3a ）、3.50（1H, dd,  J＝6.3, 11.8Hz, H-3b ）
【００６０】
参考例２
〔反応式３−（１）の反応〕
１−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物ＸＩ）の合成
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中の化合物Ｘ（３００ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）、パルミチン酸（１ｇ）および炭酸セシウム（６５０ｍｇ）との混合物を、８時間、１２０〜１３０℃で攪拌した。混合物を濾過しそして通常の後処理を行い、化合物ＸＩをワックス状の固体として３９０ｍｇ（収率：８５％）得た。
〔α〕22D ：＋２５°（ＣＨＣｌ3 ，ｃ  ０．２）、ｍｐ．：３８℃、
1Ｈ−ＮＭＲ：4.74（1H, d, J＝3.5Hz, H-1）、3.40(1H, dd, J＝7.5, 10.2Hz, H-1a)、3.77（1H, H-1b）、4.05（1H, m, H-2）、4.14（1H, dd,  J＝5.6, 11.7Hz, H-3a ）、4.18（1H, dd,  J＝4.5, 11.7Hz, H-3b ）、ＦＢ−ＭＳ：７０４（Ｍ＋１）
【００６１】
〔反応式３−（２）の反応〕
１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物ＸＩＩ）の合成
化合物ＸＩ（２００ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．２ｍｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（１００ｍｇ）の塩化メチレン溶液１０ｍｌに攪拌下、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライド（５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液０．５ｍｌを添加した。室温で１２時間攪拌後、塩化パルミトイル（１５０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を添加し、さらに６時間攪拌した。混合物に水０．２ｍｌを加え、そして３０分間攪拌した。有機層を分離し、通常の後処理を行った。シリカゲルカラムクロマトグラフィ−（溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝５０：１）で精製して、シロップ状の化合物ＸＩＩを２５２ｍｇ（収率：８６％）得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 、ppm ）：4.75（1H, d, J＝3.6Hz, H-1) 、3.53(1H, dd,  J ＝6.1, 11.2Hz, H-3a)、3.74（1H, dd,  J＝5.3, 11.2Hz, H-3b ）、5.24（1H, m, H-2）、4.40（1H, dd,  J＝3.5, 11.9Hz, H-1a ）、4.20（1H, dd,  J＝5.8, 11.9Hz, H-1b ）、ＦＢ−ＭＳ：８７８（Ｍ＋１）
【００６２】
〔反応式３−（３）の反応〕
１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物Ｉ）
化合物ＸＩＩ（２００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）とトリフルオロ酢酸（０．１ｍｌ）との混合物のメタノ−ル溶液（０．９ｍｌ）を、室温で、１２時間攪拌した。そして、その後減圧濃縮し、トルエンを加えて減圧下に繰り返し濃縮した。残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（溶媒；トルエン：酢酸エチル＝５：１）で精製して、ワックス状の固体として化合物Ｉを１７０ｍｇ（収率：９５％）得た。
〔α〕22D ：＋２３°（ｃ  ０．２，ＣＨＣｌ3 ）、 1Ｈ−ＮＭＲ(ppm) ：4.71（1H, d, J＝3.6Hz, H-1) 、4.42（1H, dd,  J＝3.7, 12.0Hz, H-1a)、4.19(1H, dd,  J ＝6.2, 12.0Hz, H-1b)、3.96（1H, t, J＝9.2Hz, H-3')、0.88（6H, t, J＝7Hz, CH3）、5.24（1H, m, H-2）、3.55（1H, dd,  J＝5.1, 10.8Hz, H-3a)、3.74（1H, dd,  J＝6.0, 10.8Hz, H-3b)、ＦＢ−ＭＳ：１００２（Ｍ＋１）
【００６３】
実施例１
〔反応式１−（１）の反応〕
１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−ブロモエトキシ）−フォスフィナ−ト−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物ＩＩ）の合成
トリエチルアミン（０．１２ｍｌ）と２−ブロモエチル−ホスホリル−ジクロライド（１００ｍｇ）とのトリクロロエチレン溶液２ｍｌを化合物Ｉ（１５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のトリクロルエチレン溶液（３．２ｍｌ）に添加した。そして混合物は室温下で１２時間攪拌した。エチルエ−テル（５ｍｌ）とトリエチルアミン（０．１ｍｌ）を添加した後、混合物を２時間還流した。冷却後、反応混合物は５％塩酸で酸性とし、エチルエ−テルで抽出し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィ−（溶媒；クロロホルム：メタノ−ル＝１０：１）で精製して、シロップ状の化合物ＩＩを１４１ｍｇ（収率：７９％）得た。
〔α〕22D ：＋１１．４°（ｃ  ０．３５，ＣＨＣｌ3 ）、 1Ｈ−ＮＭＲ(ppm) ：0.88（6H, t, CH3) 、4.72（1H, d, J＝3.7Hz, H-1')、4.40(1H, dd, J＝3.3, 12.1Hz, H-1a)、4.19（1H, dd,  J＝6.1, 12.1Hz, H-1b)、5.23（1H, m, H-2) 、3.95（1H, t, J＝9.3Hz, H-3')、4.10（2H, m, -CH2-O-P)、3.42（2H, t,-CH2-Br)、ＦＢ−ＭＳ：１１８８（Ｍ＋１）
【００６４】
〔反応式１−（２）の反応〕
１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔2, 3, 4-トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−トリメチルアミノエトキシ）−ホスフィナ−ト−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物ＩＩＩ）の合成
トリメチルアミン（ガス）で飽和しているクロロホルム−２−プロパノ−ル−ＤＭＦ（３：５：５）混合溶液３ｍｌに化合物ＩＩ（１００ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を溶解した後、７０℃で８時間加熱し、その後冷却し、炭酸銀を加えた。反応混合液は加熱下（７０℃）で１時間還流し、その後室温まで冷却した。そしてセライトを通して濾過した。濾液を濃縮し、残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（溶媒；クロロホルム：メタノ−ル＝１：１）で精製して、シロップ状の化合物ＩＩＩを６１ｍｇ（収率：６２％）得た。
〔α〕22D ：＋３０．０°（ｃ  ０．０４，ＣＨＣｌ3)、 1Ｈ−ＮＭＲ(ppm) ：0.88（6H, t, CH3) 、3.17(9H, S, N(CH3)3)、3.92(1H, t, J ＝9.3Hz, H-3')、4.18（1H, dd,  J＝6.0, 12.1Hz, H-1b)、4.39（1H, dd,  J＝3.3, 12.1Hz, H-1a)、5.23（1H, m, H-2）、ＦＢ−ＭＳ：１１７５（Ｍ＋１）
【００６５】
〔反応式１−（３）の反応〕
１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔６−Ｏ−（２−トリメチルアミノエトキシ）−ホスフィナ−ト−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ル（化合物ＩＶ）（ＧＧＰＬ−Ｉ）の合成
化合物ＩＩＩ（５０ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）および水酸化パラジウム〔Ｐｄ（ＯＨ）2 〕（５０ｍｇ）の混合物を室温で１２時間水素ガスと処理した（メタノール：水：酢酸＝１０：１：１である混合溶媒、５ｍｌ）。その反応液を濾過し、溶媒を濃縮してワックス状の固体として化合物ＩＶ（ＧＧＰＬ−Ｉ）を３５ｍｇ（収率：９１％）得た。
〔α〕22D ：２４．９゜（ｃ  ０．０６，ＣＨＣｌ3 ：ＭｅＯＨ＝２：１）、
ＦＢ−ＭＳ  ８９７（Ｍ＋１）
1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6 ）：  3.13（9H, S, N(CH3)3) 、3.53（1H, dd, J ＝5.4, 11.0Hz, H-3a ）、3.68（1H, dd,  J＝5.2, 11.0Hz, H-3b ）、4.32
（1H, dd,  J＝3.2, 11.8Hz, H-1a)、4.14（1H, dd,  J＝6.7, 11.8Hz, H-1b)、4.65（1H, d, J＝3.6Hz, H-1' ）
【００６６】
【本発明の作用効果】
本発明の製造法は、水酸基が保護されているグリセロ糖脂質化合物誘導体を出発原料として天然にしか得られなかったホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物を化学的に製造することができる新規な製造法を提供するものである。
また、本発明は、その中間体である１，２−ジ−Ｏ−パルミトイル−３−Ｏ−〔2, 3, 4-トリ−Ｏ−ベンジル−６−Ｏ−（２−トリメチルアミノエトキシ）−ホスフィナ−ト−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−ｓｎ−グリセロ−ルを含む新規な化合物に関する。