(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
変圧顕微鏡（variable pressure microscope）中の試料撮像システムであって、
試料を撮像する検体チャンバを有する変圧顕微鏡と、
溶解液ソースと、
溶解液排水口と、
前記検体チャンバに内設し、試料井筒と、前記溶解液ソースに連結した第１流体ポートと、前記溶解液排水口に連結した第２流体ポートと、を有するとともに、前記第１流体ポートと前記第２流体ポートが前記試料井筒に連結された試料チャンバと、
を具備することを特徴とする試料撮像システム。
【請求項２】
前記試料井筒は、前記第１流体ポートが開口する第１アパーチャと、前記第２流体ポートが開口する第２アパーチャと、を含むとともに、前記第１アパーチャの方が前記第２アパーチャよりも前記試料井筒の底部に近いことを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
前記試料チャンバは、温度調節された流体ソースに連結した第３流体ポートを含むとともに、前記第３流体ポートは、前記試料井筒を少なくとも部分的に囲繞する通路に連結し、前記通路は温度調節された流体の排水口に連結していることを特徴とする、請求項１に記載のシステム。
【請求項４】
前記試料チャンバは、キャビティを形成した底部と、前記試料井筒を形成した試料井筒部位と、を含むとともに、前記キャビティの深度と幅が前記試料井筒の深度と幅よりも大きく、前記試料井筒部位が前記キャビティに隣接しながら覆設するように、且つ、前記試料井筒が前記キャビティ中に延出し、これによって前記通路を区画するように、前記試料井筒部位を前記底部に覆い被さって固定させることを特徴とする請求項３に記載のシステム。
【請求項５】
さらに、前記試料チャンバは、前記試料井筒を覆う試料井筒蓋を含むことを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項６】
さらに、前記溶解液ソースに連結したコントローラであって、前記変圧顕微鏡の溶解サイクル中に前記試料井筒を溶解液で充填するために前記溶解液ソースを作動させるように操作可能であるとともに、前記変圧顕微鏡の撮像サイクル以前に前記試料井筒から前記溶解液を排水するように操作可能である前記コントローラを具備することを特徴とする、請求項１に記載のシステム。
【請求項７】
さらに、バキュームジェネレータを具備するとともに、前記バキュームジェネレータと前記溶解液ソースを前記第１流体ポートに選択的に連結することを特徴とする、請求項２に記載のシステム。
【請求項８】
前記溶解液排水口は、前記溶解液を再循環させるために前記溶解液ソースに連結されることを特徴とする、請求項７に記載のシステム。
【請求項９】
前記温度調節された流体の排水口は、温度調節された流体を再循環させるために前記温度調節された流体のソースの前記ソースに連結したことを特徴とする、請求項３に記載のシステム。
【請求項１０】
さらに、前記溶解液ソースと前記バキュームジェネレータに連結したコントローラであって、前記変圧顕微鏡の溶解サイクル中に前記試料井筒を溶解液で充填するために前記溶解液ソースを前記第１流体ポートに選択的に連結するように操作可能であるとともに、前記変圧顕微鏡の撮像サイクル以前に前記試料井筒から前記溶解液を排水するために前記バキュームジェネレータを選択的に連結するように操作可能である前記コントローラを具備することを特徴とする、請求項７に記載のシステム。
【請求項１１】
前記変圧顕微鏡が環境走査電子顕微鏡であることを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項１２】
前記溶解液が水であることを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項１３】
前記溶解液が擬似胃液であることを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項１４】
前記溶解液が擬似腸液であることを特徴とする請求項１に記載のシステム。
【請求項１５】
さらに、前記蓋を開口位置と閉口位置に選択的に移動させるモータを含むことを特徴とする、請求項５に記載のシステム。
【請求項１６】
変圧顕微鏡の検体チャンバ中の試料溶解モニタ方法において、
ａ．  前記変圧顕微鏡の検体チャンバに内設した試料チャンバの試料井筒の中に試料を載置するステップと、
ｂ．  前記試料井筒を前記検体チャンバ中に残したまま溶解液を前記試料井筒中に連続的に投入するとともに前記試料井筒から前記溶解液を連続的に排水することによって溶解サイクル中に流動溶解槽を前記試料チャンバ中に生成するステップと、
ｃ．  前記試料井筒を前記検体チャンバ中に残したまま排水サイクル中に前記試料井筒から前記溶解液を排水するステップと、
ｄ．  前記変圧顕微鏡で前記試料を撮像するステップと、
ｅ．  ステップdで得た画像を画像蓄積装置に蓄積するステップと、
ｆ．  前記試料の複数の画像を得るためにaからeまでの各ステップを自動的に所定の時間間隔で反復するステップと、
から成ることを特徴とする試料溶解モニタ方法。
【請求項１７】
さらに、ステップｂが、前記溶解槽を生成する以前に前記試料井筒を覆うべく試料井筒蓋を移動させるステップを含むとともに、さらに、ステップdが、前記試料を撮像する以前に前記試料井筒を晒すべく前記試料井筒蓋を移動させるステップを含むことを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記試料が１００ミリグラムから１０００ミリグラムまでの重量を有する経口固形投薬量形態の薬剤であることを特徴とする、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
変圧顕微鏡と併用する試料チャンバにおいて、試料井筒と、溶解液ソースに連結する第１流体ポートと、溶解液排水口に連結する第２流体ポートと、を具備するとともに、前記第１流体ポートと前記第２流体ポートを前記試料井筒に連結したことを特徴とする試料チャンバ。
【請求項２０】
さらに、前記試料井筒を選択的に覆ったり晒したりすべく前記試料チャンバに滑動的に係合する試料井筒蓋を具備することを特徴とする、請求項１９に記載の試料チャンバ。
【請求項２１】
変圧顕微鏡の検体チャンバ中の試料溶解モニタ方法において、
ａ．  前記変圧顕微鏡の検体チャンバに内設した試料チャンバの試料井筒の中に試料を載置するステップと、
ｂ．  前記試料井筒を前記検体チャンバ中に残したまま溶解液を容器から前記試料井筒の中に循環させることによって溶解サイクル中に流動溶解槽を前記試料チャンバ中に生成するステップと、
ｃ．  前記試料井筒を前記検体チャンバ中に残したまま排水サイクル中に前記試料井筒から前記溶解液を排水するステップと、
ｄ．  前記変圧顕微鏡で前記試料を撮像するステップと、
ｅ．  ステップdで得た画像を画像蓄積装置に蓄積するステップと、
ｆ．  前記溶解液中の物質の量を前記容器から検出するステップと、
ｇ．  前記試料の複数の画像と、これに対応する複数の量の前記物質と、を得るためにaからfまでの各ステップを所定の時間間隔で自動的に反復するステップと、
から成ることを特徴とする試料溶解モニタ方法。
【請求項２２】
さらに、ステップｂが、前記溶解槽を生成する以前に前記試料井筒を覆うべく試料井筒蓋を移動させるステップを含むとともに、さらに、ステップdが、前記試料を撮像する以前に前記試料井筒を晒すべく前記試料井筒蓋を移動させるステップを含むことを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記試料が１００ミリグラムから１０００ミリグラムまでの重量を有する経口固形投薬量形態の薬剤であることを特徴とする、請求項２１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本願は、１９９８年５月２２日出願の米国仮出願第６０／０８６，４２７号の優先権を請求するものであり、同出願の開示内容全体を引用によってここに包含する。
【０００２】
（技術分野）
本発明は、環境走査電子顕微鏡の分野と、この環境走査電子顕微鏡の使用方法と、に関する。
【０００３】
（背景技術）
従来の走査電子顕微鏡（CSEM）の場合、ほとんどの試料は、水を全部蒸発させて、次に金属又は炭素でコーティングする必要がある。一般に、この処理は、溶解の効果等の動的事象を研究することができない。
【０００４】
対照的に、環境走査電子顕微鏡（ESE顕微鏡）及び同様の変圧顕微鏡（variable pressure microscope）は、高い水分含有量を有する試料を撮像することができる。ESE顕微鏡内では、試料の撮像は、水蒸気をチャンバに導入するとともにこの蒸気雲を直接前記試料に覆い被せてイオン化させることによって行われる。前記試料は、チャンバ圧力と試料温度の両方を調節することによって水で湿った状態に保持することができる。
【０００５】
物質の試料に対する効果を吟味するためには、溶解槽中の前記物質に単一の試料を晒した後にこの単一の試料を様々な時間間隔で観察することが望ましい。例えば、徐放性薬剤の溶解特性は、薬剤の有用性にとって極めて重要な場合が多い。さらに、徐放性薬剤の溶解を長時間（例えば、８時間、１２時間、又は２４時間以上）モニタすることが重要である場合が多い。
【０００６】
徐放性薬剤は溶解中湿っているので、かかる薬剤をESE顕微鏡又は他の変圧顕微鏡で観察することは有利である。但し、このアプローチには欠点が多い。先ず第１に、徐放性薬剤の試料は、溶解槽からESE顕微鏡に移動するときに破損しやすい。第２に、一旦、薬剤の試料をESE顕微鏡で観察するために溶解槽から取り出すと、この試料を溶解槽に戻すことができない。
【０００７】
かかる問題を軽減するために、従来のESE顕微鏡は、ESE顕微鏡の検体チャンバに内設した「ペルチエステージ」を提供し、このペルチエステージの温度を調節することによって前記ペルチエステージは水分を試料上に復水することができる。このようにして、前記ペルチエステージは、試料のための水の「溶解槽」になるように使用することができる。但し、このペルチエステージは、数多くの理由により、薬剤の溶解特性を吟味するには不適当である。
【０００８】
例えば、現在のペルチエステージは、小さすぎて薬剤錠剤を保持することができず、且つ、前記ペルチエステージがESE顕微鏡内で大気から水分を試料上に復水することによって機能するので、前記ペルチエステージは、有効な溶解実験にとって所望のレベルの「混合」を提供することができない。また、前記ペルチエステージは復水原理で作動するので、かかるペルチエステージを用いて溶解実験を擬似胃液又は擬似腸液等の他の溶解媒体で行うことができない。
【０００９】
さらに、ペルチエステージで溶解実験を行うためには、先ず、試料を水の中に浸漬させるのに十分な水がペルチエステージの試料井筒中に復水するようにESE顕微鏡でペルチエステージを冷却させる必要がある。次に、試料を撮像するためには、試料を撮像することができるように試料井筒中の水を蒸発させるぐらいペルチエステージを加熱する必要がある。この処理には欠点が多数ある。  先ず、実験の最初から最後まで試料を所望の温度（例えば華氏９８．６度、摂氏３７度）に保つことができるというよりも、むしろ、復水するように試料を繰り返し冷却し、次に、蒸発するように試料を加熱する必要がある。このため、人体の溶解環境をシュミレートすることができない。また、この復水／蒸発の技法は、試料のサイズと、したがって復水するとともに蒸発する水の量と、が増すにつれてさらにますます非実用的になる。
【００１０】
また、ESE顕微鏡の検体チャンバに内設した試料カップ中に試料を載置することも既知であり、注射器又は同様の装置を使用することによって液体を試料カップに導入することも既知である。但し、かかる方法も、所望のレベルの混合を得ることができず、さらに、試料カップを液体で再び充填するためにオペレータが居なくてはならないので長期間の自動化実験には適さない。さらに、この方法は、蒸発による脱水が必要なので、上述したペルチエステージと同じ欠陥がある。
【００１１】
（発明の開示）
本発明によると、液体中の単一試料の溶解中に前記試料を様々な時間間隔で撮像するシステムをESE顕微鏡又は他の変圧顕微鏡に内設している。このシステムは、試料井筒を有する試料チャンバを含む。この試料井筒は、第１流体ポートと、前記試料井筒中に溶解槽を形成する第２流体ポートと、を含む。本発明による前記システムによると、前記試料チャンバをESE顕微鏡の検体チャンバ中に載置するとともに、試料をこの試料チャンバの試料井筒中に載置する。この試料井筒は、固体の経口投薬量形態（例えば、＜５ミリグラムから１０００ミリグラムの錠剤）として調剤した通常の薬剤試料を完全に浸漬させるぐらい大きなものが望ましい。前記試料は、溶解サイクル中に第１流体ポートと第２流体ポートを介して試料井筒経由で流動する液体の中に漬浸させる。次に、この液体を排出サイクル中に試料井筒から前記第１流体ポートと前記第２流体ポートのどちらか一方のポート経由で排水し、次に、前記試料を撮像サイクル中にESE顕微鏡で撮像する。この溶解サイクルと排水サイクルと撮像サイクルは、全部、試料井筒がESE顕微鏡の検体チャンバに内在している間に発生する。試料の溶解を促進させる混合効果は、流動する液体中に前記試料を浸漬させることによって得られるが、その理由は、この混合効果が、試料の周りに形成して溶解を阻止する境界領域を減少させたり又は根絶したりするからである。さらに、前記試料井筒は、検体チャンバ中に残されたまま充填と排水を行うので、試料井筒を排水させるとともに試料を撮像して試料井筒を所定の時間間隔で再充填することによって単一の試料を様々な溶解段階で撮像することができる。また、本発明による試料チャンバは、水を溶解液として使用することに限定するものではない。擬似胃液又は擬似腸液等の他の溶解媒体も使用することができる。
【００１２】
試料井筒の第２流体ポートは、第１流体ポートよりも高い位置にあることが望ましい。この構造によって、i）試料井筒が溢れ出ることを防ぐこと、及び、ii）試料井筒中の水の液位を上下させ、これによって混合効果を高める「シッピング」（sipping）効果が得られること、を含む別の利点が若干数得られる。本実施例によると、溶解サイクル中に溶解液ソースを第１流体ポートに連結するとともに、次に、溶解液を試料井筒から排水するために排水サイクル中に第１流体ポートを排水ラインに連結することによって、試料井筒を充填する。また、流体を試料井筒からさらに早く且つ効果的に排水するために、バキュームソース（ポンプ等）を排水ホースに連結することもできる。この連結は、既知の方法で実行することができる。例えば、１つのポートを水道の蛇口に連結し、もう一つのポートを排水ホースに連結し、残りの１つのポートを試料井筒の第１流体ポートに連結した状態で３つのポートバルブを使用することができる。次に、溶解サイクル中に水道の蛇口を入口に連結するとともに排水サイクル及び撮像サイクル中に排水ホースを第１流体ポートに連結するように前記バルブを既知の方法で作動させることができる。このバルブは、機械で作動させたり又は電気で（又はその他の既知の方法で）作動させたりすることができるので、この作動を、オペレータが手動でトリガしたり、又は、例えばコンピュータ又はその他の自動制御システムを介して自動的にトリガしたりすることができる。
【００１３】
この発明の別の態様によれば、１つの通路が試料井筒を少なくとも部分的に囲繞しているので、前記通路を加熱及び／又は冷却ソースに連結し、試料井筒中に載置した試料の温度調節ができるようになっている。加熱と冷却の媒体として水を使うことが望ましい。この構造によって優れた熱伝導特性が得られるので、大型の試料を急速に加熱冷却することができる。
【００１４】
この発明の別の実施例によると、試料チャンバは、溶解サイクル中に試料井筒を覆うとともに、試料を撮像することができるように撮像サイクル中に試料井筒を晒す可動蓋を含む。一般に、ESE顕微鏡は、検体チャンバ中の圧力を指定レベルに保つように図る。溶解サイクル中に試料チャンバの試料井筒を晒す場合、水が蒸発して検体チャンバ中に入るので、検体チャンバ中の圧力が変化する。ESE顕微鏡は、圧力変化を検出すると、ESE顕微鏡のポンプを利用して圧力を指定圧力レベルに達するまで増減させる。これによって、溶解サイクル中に蒸発する比較的大量の水を補償するように作られていないポンプに望ましくないひずみが生じる。したがって、ESE顕微鏡のポンプのひずみは、試料チャンバの可動蓋を設けることによって低減する。あるいはその代わりに、顕微鏡のバキュームポンプをスタンバイするように設定することができ、試料井筒に蓋を載置する必要がない。
【００１５】
この発明の更に別の実施例によると、このシステムは、長期間の自動化溶解実験を実行するように構成されている。この実施例によると、このシステムは、制御装置と、ESE顕微鏡と、試料チャンバと、画像蓄積装置と、を含む。この画像蓄積装置と制御装置は既知の構造でよい。例えば、前記画像蓄積装置は、VCR又はコンピュータでよく、前記制御装置はコンピュータ又は簡単なプログラム作成可能なタイマーでもよい。
【００１６】
この構造によって、オペレータは、多種多様な溶解媒体を使ってチャンバ内の溶解実験を行うことができ、比較的大型の試料の熱調節を向上させ、従来の技術によるステージ槽に付随する混合問題を解消し、自動化を進めた長時間実施の実験（例えば８時間、１２時間、２４時間以上）が可能になり、長時間実施の実験中に自動撮像を行い、非撮像期間中にESE顕微鏡を過剰な量の水分から保護する。
【００１７】
（発明を実施するための最良の形態）
図１と図２は、ESE顕微鏡５と、制御卓４と、画像モニタ２と、制御モニタ３と、を含む先行技術によるESE顕微鏡システム１を示す図である。ESE顕微鏡システム１は、上述したように、高い水分含有量を有する試料を撮像することができる。ESE顕微鏡５は、電子銃９と、環境２次検出器７と、検体チャンバ８と、を含む。このESE顕微鏡は、検体チャンバ８内の圧力を調節するように作動可能な各ポンプと各バルブ（図示せず）を含む。電子銃９は、前記検体チャンバに格納した検体に当接する電子のビームを発生する。環境２次検出器７は、電子ビームと検体の間の相互作用によって生じるピコアンペアレベルの撮像信号を増幅収集する気体イオン化原理を利用している。ESE顕微鏡システム１が作動する前記原理は周知なので、したがってここでは説明しない。さらに留意すべきことは、例えば米国特許第５，４１２，２１１号と米国特許第５，３６２，９６４号と米国特許第４，９９２，６６２号と米国特許第４，８４２，００６号及びその他に記載のElectroScan Corporation製造のESE顕微鏡システムを始めとして、既知のESE顕微鏡又は変圧顕微鏡システムを本発明にしたがって使用することができるということである。
【００１８】
図２は、図１のESE顕微鏡５の顕微鏡チャンバドア６と環境２次検出器７と検体チャンバ８とを示す図である。顕微鏡チャンバドア６はプラットフォーム５６を含むとともに、このプラットフォーム５６は、通常、ペルチエステージ又は検体ホルダーを支持するために使用する。また、前記顕微鏡チャンバドアは、複数のポート５０、５１、５２、５３、５４、５５を含む。ポート５０からポート５３は、夫々、ホース５０．１からホース５３．１及びホース５０．２からホース５３．２の継ぎ手になる。ポート５４は、駆動軸等に連結する回転継ぎ手になる。ポート５５は、探針等の別の構成要素の連結になることができる。あるいはその代わりに、ポート５４又はその他の各ポートを、検体チャンバの各々の壁の内の任意の壁に貫設することができる。
【００１９】
図３は、この発明の好適な実施例による試料チャンバ１０を示す図である。この試料チャンバ１０は、底部１００と、中央部２００と、蓋ガイド３００と、蓋４００と、駆動軸５００と、駆動機構６００と、を含む。図４から図７を見ると、底部１００は、ESE顕微鏡で撮像する試料の温度を調節する水槽になるように構成したキャビティ１１０を含む。このキャビティから槽充填通路１０１と槽排水通路１０２が、各々、底部１００の外側のホース連結部１０１．１と１０２．１まで夫々延出している。このホース連結部１０１．１と１０２．１は、夫々、ホース５０．２と５１．２を介してポート５０と５１に連結している。
【００２０】
図３と図８と図９を見ると、中央部２００は、撮像する試料を収容する試料井筒２１０を含む。この試料井筒２１０の深度と幅は、キャビティ１１０の深度と幅よりも小さく、中央部を図３に示すように底部に覆設するときにトーラス（taurus）が前記試料井筒の周りに形成されるようになっている。前記試料井筒は、大部分の経口固形投薬量形態の薬剤を完全に浸漬させるぐらい大きなものが望ましい。実例として、深度及び直径が２０ミリメートルの試料井筒を使用することができる。中央部２００は、溶解槽入口２０１と、溶解槽出口２０３と、探針入口２０４と、を含む。この溶解槽入口２０１から通路２１０が下方に延出し、試料井筒の壁の内面２０７まで達する。前記溶解槽出口２０３から第２通路（図示せず）が延出し、試料井筒の壁の同開口部２０７から上方の内面まで達する。前記探針入口２０４から第３通路（図示せず）が延出し、試料井筒の内面まで達する。溶解槽入口２０１と溶解槽出口２０３は、夫々、ホース５２．２と５３．２を介して各ポート５２と５３に連結している。所望により、探針を探針入口２０４から挿入することができるので、各ポート５５の内の１つのポートから夫々のモニタ装置に連結することができる。
【００２１】
図３と図１０と図１１と図１２を見ると、中央部２００に蓋ガイド３００を覆設するとともに、この蓋ガイド３００と中央部２００の間に蓋４００を介設しており、蓋４００が、試料井筒２１０を代替的に覆ったり又は晒したりすべく中央部２００に覆い被さりながら左右に滑動することができるようになっている。蓋４００と試料井筒２１０の間のシールになるようにガスケット（図示せず）を使用することができる。このガスケットは、例えば、蓋４００に取り付けたり、又は試料井筒の開口部に周設したりすることができる。図１０から図１２を見ると、蓋４００と蓋ガイド３００は、傾斜部４０１と傾斜部３０１を含むとともに、この傾斜部４０１と傾斜部３０１は、蓋４００が試料井筒に覆い被さりながら滑動するとき、蓋４００を試料井筒に圧接させるとともにガスケットを圧縮してシールを形成することによって蓋４００と試料井筒２１０の間の固定ばめになる。蓋４００の移動は、駆動機構６００を介して駆動軸５００で制御する。駆動機構６００は既知の構造でよいが、簡単なラックとピニオンの構造体又は簡単な傘歯車構造体を使用することができる。範例的な傘歯車構造体を図１３に示す。駆動軸５００は回転継ぎ手５４に連結している。
【００２２】
ここで、試料チャンバ１０の作用を説明する。試料チャンバ１０を顕微鏡チャンバドア６のプラットフォーム５６に装着する。試料チャンバ１０をプラットフォーム５６に装着する方法は、使用するESE顕微鏡５のプラットフォームの構造によって左右される。図３〜図７は、１９９２年頃のElectroScanのモデルE−３のプラットフォーム５６に装着するように構成した試料チャンバ１０の底部１００を示す図である。なお、プラットフォーム５６に装着した各クランプ（図示せず）に係合する溝２２０をこの底部１００の左右両側に配設している。さらに、プラットフォーム５６において対応するノッチ５８中に取り付けるタブ２３０を底部１００の底面に載設している。
【００２３】
試料チャンバ１０をプラットフォーム５６に固定した後、５０．２から５３．２までの各ホースと、駆動軸５００と、を、顕微鏡チャンバドア６の内面上の５０から５３までの各ポートと、ポート５４と、に夫々接続する。ポート５０は、顕微鏡チャンバドア６の外側から水や擬似胃液又は擬似腸液等の溶解液ソースに連結する。ポート５２は、顕微鏡チャンバドア６の外側から、ポート５２に送給される前に通常の熱交換機を通過する水道水等の温度調節済み水源に連結する。キャビティ１１０の排水路の一部を形成するポート５３は、排水口に連結させたり、又は、温度調節済み水源経由で再循環させたりすることができる。試料井筒２１０の排水路の一部を形成するポート５１は、排水口に連結したり、又は、溶解液ソースの入口に連結したりすることができる。ポート５４は、ステッパーモータ等のモータ７００（図１４）に連結する。一旦、試料チャンバ１０をこのように構成すると、製薬錠剤等の試料を試料井筒中に載置し、ESE顕微鏡５の顕微鏡チャンバドア６を閉じて、蓋４００をモータ７００で制御しながら試料井筒２１０に覆い被せながら滑動させる。
【００２４】
次に、この試料チャンバ中に温度調節式溶解槽を以下のように生成させることができる。ポート５０と、ホース５０．２と、溶解槽入口２０１と、通路２１０と、開口部２０７と、によって形成した通路を介して溶解液を溶解液ソースから試料井筒に送給することによって試料井筒を前記溶解液で充填する。試料井筒中の液位が溶解槽出口２０３に達すると、直ちに、溶解液が試料井筒から溶解槽出口２０３経由で排出し、ホース５１．２とポート５１を通過した後に初めて排水口に達したり又は溶解液ソースによって再循環したりする。試料井筒２１０の底の溶解液を印加するとともにこの溶解液を試料井筒２１０の上端から排水させることによって、上記構造が試料井筒２１０中に混合効果を発生させるとともに、この混合効果によって、滞留液の中の試料、又は、上端から充填して底から排水した液の中の試料、の周りに形成する境界領域が減少する。さらに、開口部２０３の上端と下端の間で振動する試料井筒２１０中の液槽の液位によって生じる「シッピング」効果又は「パルシング」効果によって、試料井筒中の溶解液の混合が促進する。試料井筒２１０中の液槽の温度は、温度調節済み水源が調節する。選択温度に加熱したり冷却したりした水は、ポート５２とホース５３．２とポート１０２．１とを介してキャビティ１１０中に送給し、次に、キャビティ１１０からポート１０２．２とホース５３．２とポート５３とを経て排水する。このようにして、試料井筒中の液槽の温度は、キャビティ１１０中の水から試料井筒２１０の各々の壁を経由して伝達することによって急速に選択温度に達する。さらに、溶解槽の温度を直接モニタするために温度探針を各ポート５５の内の１つのポートを介して据え付けることができる。あるいはその代わりに、ポート５０とポート５１によって試料井筒に導入した溶解液を加熱又は冷却することによって試料チャンバの温度を維持することができる。
【００２５】
試料をオペレータの所望時間の間に溶解液中に浸漬させた後、溶解液ソースをポート５０から外し、ポート５０を減圧させて溶解液を試料井筒２１０から排水する。あるいはその代わりに、前記ポートを外さずに、ポート５０から流体を供給するポンプを逆回転させてもよい。溶解液を排水したら、直ちにモータを係合させて蓋４００を開口位置に滑動させ、これによって試料をESE顕微鏡５の検体チャンバにさらす。次に、ESE顕微鏡５を通常のように作動させて試料を撮像する。撮像後、蓋４００を（試料井筒を覆う）閉口位置に戻すことができ、溶解液ソースをポート５０に再び連結し、試料井筒２１０を溶解液で充填し、試料の溶解を継続させるようにする。次に、単一試料の画像が様々な溶解段階で得られるように上記手順全体を所定の時間間隔で反復することができる。
【００２６】
この発明の別の実施例によると、溶解実験中に単一の試料を選択時間間隔で撮像する自動化システムがある。図１５を見ると、この自動化システムは、上述したようにESE顕微鏡システム１と試料チャンバ１０を含むとともに、さらに、ESE顕微鏡１が生成した画像を記録するVCR８５０等の画像蓄積装置を含む。溶解液ソース(SDF)１５０とバキュームソース（VAC）２５０は、三方バルブ４５０（DFV）等の選択連結装置を介してESE顕微鏡１のポート５０に選択的に連結する。熱交換機等の温度調節装置（TC）３５０はポート５２に連結している。二方バルブ５５０（TCV）等の選択連結装置は、試料チャンバからの水の供給を遮断するように温度調節装置３５０とポート５２の間に連結することが望ましい。モータ７５０は、駆動軸５００を駆動させるためにポート５４に連結している。
【００２７】
図１４に示す実施例では、試料井筒から排水した溶解液を、連結ポート５１によって溶解液ソース１５０の入口１５１に再循環させるとともに、キャビティ１１０から排水した水を連結ポート５３によって温度調節装置３５０の入口に再循環させる。キャビティ１１０（及び／又は試料井筒）から水（及び／又は溶解液）を再循環させると、水（及び／又は溶解液）の節約と、さらにエネルギーの節約と、いう利点が得られるが、その理由は、一般に、キャビティ１１０（及び／又は試料井筒）から排水した流体が水道水よりも所望の温度に近いからである。また、SDF１５０からの溶解液の再利用は安全機能として役立つ。特に、全量の溶解液を制限しているので、漏れやその他の不良によって顕微鏡１が損傷する恐れは小さい。
【００２８】
また、溶解液を再循環させると、新しい流体を自動化システムの中に絶えず導入するよりもむしろ単一量の溶解液の中で試料を絶えず溶解させることによって通常の溶解槽（及び体（bodily）条件）により近づくという長所が得られる。これによって、ユーザは、溶解液中に溶解した物質（薬や希釈剤等）を分析するために、溶解液の試料を溶解実験の様々な段階においてSDF１５０から引き出すことができる。さらに、溶解液中の溶解物質の量は、溶解実験が継続するにつれて増加するので、比較的少量の溶解物質では実施することが困難であったり不可能であったりする別の化学分析を行うことができる。
【００２９】
バキュームソース２５０と溶解液ソース１５０と温度調節装置３５０と選択継ぎ手４５０、５５０とモータ７５０は、コントローラ６５０がコントローラ出力１〜６を介して制御する。例えば、コントローラ６５０は、コンピュータ、プログラム作成可能なタイマー、プロセッサ、シーケンス又はその他既知の制御装置でよい。VCR８５０は、このVCR固有の内部クロックでトリガしたり、又は、図１４に示すコントローラ出力７を介してコントローラ６５０でトリガしたりすることができる。
【００３０】
図１４の自動化システムの作動方式について、図１５のフローチャートと、以下の実例と、に基づいて説明する。以下の実例では、ユーザが、２４時間にわたって製薬錠剤の溶解を４時間おきにモニタすることを希望するものである。コントローラ６５０は、以下のように夫々の出力でトリガ信号を選択的に出力することによって１５０、２５０、３５０、４５０、５５０、７５０、８５０の各構成要素を作動させるようにプログラムされている。以下の表では、「高」は高電圧（例えば５ボルト）を表し、「低」は低電圧（例えば零ボルト）を表す。
【００３１】
【表１】
0003688202.tif 000002
【００３２】
上記実例によると、１５０、２５０、３５０、８５０の各構成要素は、「高」電圧で起動し、「低」電圧で停止する。「高」電圧を出力するとバルブ４５０がSDF１５０をESE顕微鏡５に連結し、「低」電圧を出力するとバルブ４５０がVAC２５０をESE顕微鏡５に連結する。「高」電圧を出力するとバルブ５５０が開弁し、「低」電圧を出力するとバルブ５５０は閉弁する。モータ７５０に出力した「低」電圧によって蓋４００が閉じるとともに、モータ７５０に出力した「高」電圧によって蓋４００が開く。
【００３３】
図１５を見ると、実験の開始時、製薬錠剤等の検体を試料チャンバ１０中に載置し（ステップ１０００）、ESE顕微鏡ドア６を閉じて（ステップ１０１０）、温度調節装置３５０中の溶解液の温度を設定する（ステップ１０２０）。ここで、この例証的実験の残りを表１と図１５に基づいて説明する。
【００３４】
時間「０Hr」では、コントローラ６５０の出力を次のように設定して試料の最初の画像を撮る（ステップ１０３０）。即ち、i）出力３＝高（TC３５０がオン）、ii）出力５＝高（バルブ５５０が開弁、水をTC３５０から試料チャンバ１０経由で流すことができる）、出力６＝高（蓋４００が開口）、及び出力７が高い（ＶＣＲをオン）。表１の例では、エネルギーを節約するために、SDF１５０とVAC２５０は、使用しない場合、オフにする。但し、この実験全体を通してSDF１５０とVAC２５０をオンにしたままにできることに留意する。
【００３５】
時間０＋（及び図１５のステップ１０４０）では、出力６は低く（蓋４００を閉じる）、出力７は高い（VCRをオフにする）。表１では、〔時間〕、〔時間〕＋、〔時間〕＋＋、〔時間〕＋＋＋等のシーケンスにおいて指定時間に発生する一連のイベントを表すために〔時間〕＋、〔時間〕＋＋等の名称を使う。なお、各々のイベントが発生する具体的な時間は、表示したシーケンスが維持される限り、重要ではない。
【００３６】
時間０＋＋（及び図１５のステップ１０５０）では、出力１と出力４が高く、SDF１５０をオンにし、バルブ４５０によってSDF１５０を試料チャンバ１０に連結し、これによってSDF１５０から溶解液を試料井筒２１０経由で循環させる。
【００３７】
この段階で、溶解サイクル（図１５のステップ１０６０）が始まり、試料井筒中の錠剤が時間＝０＋＋から時間＝４Hrまで溶解する。
【００３８】
時間＝４Hr（及びステップ１０７０）では、出力２は高く（VAC２５０をオンにする）、出力４は低い。したがって、バルブ４５０によってバキュームソース２５０を試料チャンバ１０に連結し、溶解液を試料井筒２１０から排水する。また、出力６は高く、モータ７５０によって蓋４００を開く（ステップ１０８０）。時間４＋では、出力７は高く、VCRによって試料井筒中の錠剤を撮像する（ステップ１０９０）。
【００３９】
時間４＋＋（及び図１５のステップ１０４０）では、出力６が低く（蓋４００を閉じる）、出力７が高い（VCRをオフにする）。次に、時間４＋＋＋（及び図１５のステップ１０５０）では、出力４が高く、バルブ４５０によってSDF１５０を試料チャンバ１０に連結し、これによってSDF１５０から流体を試料井筒２１０経由で循環させる。この段階で、溶解サイクル（図１５のステップ１０６０）が始まるので、試料井筒中の錠剤は、時間＝４＋＋＋から時間＝８Hrまで溶解する。次に、この処理を、２４時間にわたって錠剤の画像が４時間おきに得られるまで表１と図１５に示すように反復する。
【００４０】
コントローラ６５０と各バルブ４５０、５５０は、ESE顕微鏡の電子ビームに対する電磁界の影響を低減するために検体チャンバ８の外側に配設することが望ましい。５０．２、５１．２、５２．２、５３．２の各ホースと、駆動軸５００と、試料チャンバ１０と、だけが検体チャンバ８内に常駐する。さらに、試料チャンバ１０と駆動軸は、磁界の生成を防ぐために非磁性材料で製造したものが望ましい。例えば、試料チャンバ１０はアルミニウムで作ることができるとともに、駆動軸とホース継ぎ手は真鍮又は他の適切な非磁性材料で製造することができる。また、外部の制御装置を有する図１４の構造によって、試料チャンバ１０の制御装置をESE顕微鏡の操作システムから独立して設計することができる。
【００４１】
本発明の別の実施例によると、水洗充填サイクルと水洗排水サイクルを含む水洗処理を、蓋を開けるステップ（１０７０）と撮像ステップ（１０８０）の前に実施する。水洗充填サイクル中、試料井筒２１０を水で充填する。次に、水洗排水サイクル中に試料井筒から水を排水し、前述した溶解サイクル１０６０中に試料上に形成した（例えば塩の）沈積物を除去するようになっている。沈積物を除去することによって、試料と沈積物ではなくて試料だけを撮像ステップ（１０９０）中に撮像する。この処理は、擬似腸液又は擬似胃液を溶解液として使用する場合に特に有利であるが、その理由は、擬似腸液と擬似胃液が塩の沈積物を試料上に残留させやすいからである。
【００４２】
図１９は、水洗処理を行うように構成した例証的制御システムを示す図である。この制御システムは、図１４の制御システムと同一であるが、図１９の制御システムが、コントローラ６５０の別の制御ライン８と、別の各バルブ４５１、４５２、４５３と、を含む点が異なる。
【００４３】
図１９の制御システムが多くの点で図１４の制御システムと同一なので、ここでは、図１４の制御システムと異なる図１９の制御システムの構成要素及び処理ステップだけを説明する。
【００４４】
溶解液充填サイクル（図１５、ステップ１０５０）中に、制御ライン８の「高」信号によってバルブ４５１がSDF１５０をバルブ４５２に連結させる。バルブ４５２を（図１９に示すように）制御ライン４が制御するので、ステップ１０５０中に「高」信号がバルブ４５２に出力するとともに（表１と、それに対応する説明と、を参照）、溶解液をSDF１５０からずっと各バルブ４５２、４５０を介してポート５０まで連結し、試料井筒２１０を流体で充填するようになっている。また、制御ライン８が制御するバルブ４５３によってポート５１がずっとSDF１５０まで連結し、これによって溶解液が溶解槽出口２０３からずっとSDF１５０まで再循環する。
【００４５】
溶解液排水サイクル（図１５、ステップ１０７０）中に、「低」信号を各バルブ４５０、４５２に出力するとともに、ポート５０を、バルブ４５０とバキュームジェネレータ２５０とバルブ４５２とバルブ４５１（未だ「高」）とを介してSDF１５０中に連結し、試料井筒２１０から流体を排水するようになっている。
【００４６】
「水洗充填サイクル」（図１５のステップ１０７０の後であってステップ１０８０以前に発生）中に、「高」信号を各バルブ４５０、４５２に制御ライン４を介して出力するとともに、「低」信号を各バルブ４５１、４５３に制御ライン８を介して出力する。これによって、TC３５０（本実施例では自納式再利用温度調節済み水源であるが、この代わりに別個の洗浄水源でもよい）が各バルブ４５１、４５２、４５０を介してポート５０に連結し、これによって試料井筒２１０を水で充填する。溶解槽排水ライン２０３をTC３５０にポート５１とバルブ４５３を介して連結し、水が試料井筒２１０経由で循環するようになっている。次に、「水洗排水サイクル」中に、「低」信号を各バルブ４５０、４５２に制御ライン４を介して出力するとともに、「低」信号を各バルブ４５１、４５３に制御ライン８を介して出力する。このようにして、ポート５０をバルブ４５０とバキュームジェネレータ２５０とバルブ４５２とバルブ４５１とを介してTC３５０に連結するとともに、試料井筒２１０から水を排水し、試料井筒２１０中の試料から沈積物を除去する。次に、このシステムは、図１５のステップ１０８０に進むので、図１４と図１５に基づいて上述したように作動する。
【００４７】
図３に示す試料チャンバ１０の実施例によると、溶解期間中に試料井筒を覆うために蓋を設ける。これによって、顕微鏡の各ポンプに対する要求が減るので、実験の非撮像段階中に試料井筒環境と顕微鏡環境の両方が保護される。但し、試料チャンバの蓋を不要にすることは可能なので、永久無蓋の試料井筒を使用することができる。かかる実施例において、ESE顕微鏡の各ポンプは、試料から蒸発する過剰な水を処理する必要がある。
【００４８】
本発明による試料チャンバによってさらに多数の利点が得られる。前記試料チャンバは、この種のステージに必要な比較的長い作業距離でも、非常に向上した画質と、試料の安定性と、が得られる。さらに、前記試料チャンバは、様々な溶解段階で試料を観察する能力と、再循環モード又はフロースルーモードでチャンバ中の試料に液体を導入する能力と、様々な溶解段階中に個々の検体の同一領域に繰り返し戻る能力と、化学分析のために溶解中に、直接、試料井筒からサンプリングしたり又は排水ラインからサンプリングしたりする能力と、が得られる。
【００４９】
実例１から実例４まで：向上した画質と試料の安定性
実例１
薬剤装填溶融物押出ペレットを取付セメントで取付スタブに取り付けるとともに、この取付スタブとペレットを図３〜図１２にしたがって溶解ステージ中に載置した。ESE顕微鏡５は、ElectroScanのモデル番号E−３であり、コントローラ６５０は、モータ６５０を制御する５アンプ・ミンステップ・インデックサー・ドライブ（５Amp min-step indexer drive）と、残りの構成要素を制御するArtisanのプログラム作成可能なコントローラ／タイマーのモデル番号４６９６である。SDF１５０は、Masterflexのポンプのモデル番号１５２３−１０を介して送給した擬似腸液の容器であり、VAC２５０は、Masterflexのポンプのモデル番号５７６２−１０であり、VCR８５０は、日立の時間経過VCRのモデル番号TL２０００であり、TC３５０は、外部水槽／循環器で、ALUDAのモデル番号RMS  E４５０２８であり、モータ６５０は、NEMA３４のステッパーモータであり、各バルブ４５０、５５０は通常の電気制御式三方バルブである。前記コントローラ／タイマーはその出力に１１０ボルトの交流電流を出力したり又は除去したりすることによって１５０、２５０、３５０、４５０、５５０、７５０、８５０の各構成要素を作動させる。
【００５０】
試料を２０ミリメートルから３１ミリメートルまでの間の作業距離に載置するとともに、図１６に示すように５００倍の倍率で撮像した。次に、擬似腸液（SIF）を毎分約２０ミリリットルの割合で溶解槽に導入した。１時間後、SIFを排水し、水洗槽を印加して塩の沈積物を除去した。次に、SIFを試料井筒に再び導入し、溶解２時間後に試料井筒を排水して、ペレット表面上の同じ箇所を５２０倍と１０００倍の各倍率で撮像した。ペレットを溶解槽に浸漬した後に得られた画像の質（図１７と図１８）は、溶解前の画質（図１６）よりも驚くほど優れていることが分かった。
【００５１】
この実験で用いた比較的長い作業距離は、２次検出器７に異物が混入することによって試料井筒から液体がはね散ることを防ぐために望ましいものであり、試料井筒の蓋４００の空間を十分確保できるようにするために望ましく、撮像中に被写界深度を向上させるのに望ましい。残念なことに、ESE顕微鏡におけるかかる長い作業距離は、図１６に示すように、画質を大幅に低下させてしまう。但し、図１７に示すように、撮像前に試料を液体で「湿潤させる」ことによって画質が相当向上する。試料を湿潤させると明らかに画像の濃度が増す。さらに、試料を湿潤させるとチャンバ圧力を低下させることができ、したがって試料と検出器の間の水蒸気が減量する。撮像の水分は、試料自体から蒸発する水分によってある程度得られる。処理前に５００倍よりも高い倍率で撮像することが困難であった試料は、１０００倍以上の倍率の比較的良好な画質で観察することができる。試料を溶解させずに画質を向上させることが望ましい場合、試料が溶けにくい液体を使用することができる。但し、水蒸気によって最善の信号品質強化が生じるものと期待される。
【００５２】
実例２
擬薬溶融物押出ペレットを取付セメントで取付スタブに取り付けるとともに、この取付スタブとペレットを図３〜図１２にしたがって溶解ステージ中に設けた。ESE顕微鏡とそれに付随する各コントローラは、実例１の各構成要素と同一であるが、VCRを、ESE顕微鏡からの画像を蓄積するように構成したコンピュータに取り替えた点が異なる。前記擬薬ペレットを、３００倍の倍率と、１．２トルのチャンバ圧力と、１０キロボルトの加速電圧と、の各パラメータで撮像した。出来上がった画像を図２０に示す。次に、ESE顕微鏡チャンバを排気し、前記ペレットの溶解を本発明にしたがって１５分間毎分４０ミリリットルの流量で試料井筒２１０を介して再循環脱イオン水を使って実施した。次に、溶解ステージを排水し、図２１が生成するように試料を上述したものと同じパラメータで撮像した。図２０と図２１は、同じペレットの同じ位置の画像である。但し、図２０と図２１を比較すると、湿潤試料（図２１）の方が乾燥試料（図２０）よりも高品質の画像を生成したことが分かる。例えば、図２１では、明らかに、細部とトポグラフィーが比較的顕著であり、ペレットの縁が比較的はっきり区画されている。
【００５３】
試料を湿潤させると、過剰な電荷集積を試料表面に伝達することができる。また、このことによって撮像の質が向上する。試料表面上のマイナスの電荷を減少させることによって、撮像ビームの偏向量が減少する。これによって画像の解像度と画質が向上する。
【００５４】
実例３
溶融物押出擬薬ペレットを取付セメントで取付スタブに取り付けるとともに、この取付スタブとペレットを図３〜図１２にしたがって溶解ステージ中に設けた。ESE顕微鏡とそれに付随する各コントローラは、実例１の各構成要素と同一であるが、VCRを、ESE顕微鏡からの画像を蓄積するように構成したコンピュータに取り替えた点が異なる。前記擬薬ペレットを、１５０倍の倍率と、０．４トルのチャンバ圧力と、１５キロボルトの加速電圧と、の各パラメータで撮像した。出来上がった画像を図２２に示す。次に、ESE顕微鏡チャンバを排気し、前記ペレットの溶解を本発明にしたがって１５分間毎分４０ミリリットルの流量で試料井筒２１０を介して再循環脱イオン水を使って実施した。次に、溶解ステージを排水し、図２３を生成するように試料を上述したものと同じパラメータで撮像した。
【００５５】
図２２と図２３の各画像は、図２０と図２１の各画像のチャンバ圧力（１．２トル）に比べて低いチャンバ圧力（０．４トル）で生成した。低チャンバ圧力で撮像すると、気体分子のビーム干渉が減少するが、但し、信号も減少し、ぼやけた質の悪い画像になる。但し、撮像前に試料を湿潤すると、信号が復元し、画質が向上し、比較的高いチャンバ圧力にビーム干渉が付随することがない。非湿潤試料の画像（図２２）は、０．４トルで「洗い流した」ように見えるが、一方、湿潤試料の画像（図２３）は、向上したコントラストと解像度を示している。
【００５６】
実例４
ポリマー微小球体を粘着テープで取付スタブに取り付けるとともに、この取付スタブと微小球体を図３〜図１２にしたがって溶解ステージ中に設けた。ESE顕微鏡とそれに付随する各コントローラは、実例１の各構成要素と同一であるが、VCRを、ESE顕微鏡からの画像を蓄積するように構成したコンピュータに取り替えたことが異なる。前記微小球体を、１．５トルのチャンバ圧力と、１５．０キロボルトの加速電圧と、１０００倍（図２４a）、１５００倍（図２４b）、２０００倍（図２４c）の倍率と、の各パラメータで撮像した。微小球体は、非常に敏感な試料である。各々の微小球体のポリマー表面は、図２４a、図２４b、図２４cに示すように、撮像中に「泡立つ」ので、１０００倍、１５００倍、２０００倍の撮像によってビーム損傷が生じる。特に、このビーム損傷は図２４ｂで目立つ。
【００５７】
同じ組成のポリマー微小球体を同じように取り付けて、ESE顕微鏡チャンバを排気し、この微小球体の溶解を本発明にしたがって１５分間毎分４０ミリリットルの流量で試料井筒２１０を介して再循環脱イオン水を使って実施した。次に、溶解ステージを排水し、図２５（a）（１０００倍）、図２５（b）（１５００倍）、図２５（c）（２０００倍）を生成するように試料を上述したものと同じパラメータで撮像した。図２４aの非湿潤微小球体と比べて、図２５aの湿潤微小球体は、１０００倍でビーム損傷が表れない。同様に、１５００倍でも又は２０００倍でも、この湿潤試料は、泡立ちの欠如によって分かるように、ビーム損傷が表れない。
【００５８】
実例２から実例４までの実験中に、図２から図１２までの試料チャンバの試料井筒に蓋をかぶせなかった。このため、溶解サイクルが始まる前にESE顕微鏡を排気した。但し、可動蓋４００を利用した本発明の実施例によると、溶解サイクル前にESE顕微鏡を排気する必要はない。
【００５９】
実例５−自動化下流処理
また、上述したように、溶解液を再循環させると、この溶解液の中に溶解した物質（薬や希釈剤等）を分析するためにユーザが溶解実験の様々な段階でSDF１５０の溶解液の試料をモニタすることができるという長所が得られる。なお、例えば、１つの試料の活性剤（又はその他の成分）の溶解は、やがて、この発明による溶解ステージを利用してモニタすることができる。
【００６０】
例えば、１つの錠剤からの活性剤の溶解は、ESＥ微鏡において前記錠剤が試料チャンバ中で溶解しながらリアルタイムでモニタすることができる。定期的に試料チャンバの試料井筒を排水することができるので、ESE顕微鏡において錠剤を撮像することができる。
【００６１】
この特徴を実証するため、９００ミリリットルの水を収容する溶解容器をSDF１５０として使用した。溶解媒体（濾過済み脱イオン水）を試料井筒経由で循環させるために、２つのぜん動ポンプを使用した。一方のポンプは、水を試料井筒に（ポート５０経由で）毎分３０ミリリットルで送給するように設定するとともに、他方のポンプは、水を試料井筒からポート５１経由で吸引するように設定する（溢れ出さないように毎分４０ミリリットルに調節）。この容器中の温度は、保温調節式水槽を用いて摂氏３７度に維持した。
【００６２】
活性剤の溶解をOcean OpticsのUV最適化分光計（モデル番号S１０００）を用いて測定した。この分光計は、テキサスマイクロ（Texas Micro）ワークステーション上で実行するエクセル（Excel）スプレッドシートを介して制御した。このワークステーションは、１３３メガヘルツのペンティアム（Pentium）（登録商標）プロセッサと１２８キロバイトのRAMを装備している。
【００６３】
紫外線のスペクトルデータを前記溶解容器から指定時間に収集するためにフロースルーUVセルを使用し、輻射を前記フロースルーUVセル経由で通過させるために光ファイバケーブルを用いて行った。フローダイバータが流体を溶解容器から前記フロースルーUVセル経由で吸引するとともに、この流体を、溶解容器に挿入した別の入力チューブからの別のフローと合流させる。
【００６４】
２００ミリグラムの徐放性トラマドール（tramadol）錠剤を試料井筒の中に自由に載置した。トラマドールは、２７２ナノメートルの波長の吸収によって検知することができ、３００ナノメートルで吸収を減算することによってバックグランド信号を補正する。この溶解システムは、溶解液を溶解容器から試料井筒経由で循環させるとともに溶解媒体を前記フローセルでリアルタイムに１０分ごとにサンプリングすることによって、トラマドール錠剤（２００ミリグラム）から放出プロファイルを得るために使用した。測定した濃度は、原料基準に対して検量線作成を行った。結果は図２６に示す。また、図２６は、従来の技術による高圧液体クロマトグラフ（HPLC）法で測定した２００ミリグラムの徐放性トラマドール錠剤のリリースプロフィールも示す。前記フローセルで得られた溶解結果は、標準のHPLC溶解法によってトラマドール錠剤から得た溶解結果と略互角である。これによって、本発明による下流処理システムは、溶解中にESE顕微鏡の試料画像が選択回数だけ得られると同時に確実で正確な溶解結果を得ることができるということが実証される。
【００６５】
また、溶解媒体中の分析物の量を測定するために別の機器を使用することもできる。例えば、ここでは開示内容全体を引用で包含する「IMPROVEMENTS IN DETECTION SYSTEMS AND METHODS FOR PREDICTING THE DISSOLUTION CURVE OF A DRUG FROM A PHARMACEUTICAL DOSAGE FORM」という標題のＰＣＴ国際公開公報WO９７／４６８６０号に記載された探針等、光ファイバUV探針を溶解容器に内設することができる。但し、探針のアパーチャ中に気泡が形成しないように探針を改造したり又は別の構造体又は別の機構を設けたりすることが必要であると考えられる。例えば、前記UV探針を、取付ブロックによってポンプ管と一直線に取り付けたり、又は、溶解ビーカから流体を吸引するポンプラインの前に設けたりすることができ、気泡が液体の流動によって押し出されるようになっている。
【００６６】
この発明の別の実施例によると、２台のぜん動ポンプの代わりに単一のぜん動ポンプを使用することができ、前記フローセルから排出する流体を溶解容器に送り返す代わりに別の容器に戻すことができる。
【００６７】
この発明の他の実施例によると、オートサンプラー又は別タイプの検出システム等、他の下流処理装置又は別の下流処理装置を使用することができる。さらに、他種の溶解媒体又は別タイプの顕微鏡検査法を使用することができる。
【００６８】
例えば、オートサンプラーは、クロマトグラフィ法又は別の分析法で確認することができる指定時間に溶解容器から試料を引き出すために使用することができる。近赤外線伝導率や旋光又は屈折率の検出を含む化学分析の場合の他の検出器タイプをシステムに容易に連結することができる。溶解する試料に基づいて行う撮像は、（例えば）光顕微鏡検査や近赤外線顕微鏡検査又は偏光顕微鏡検査を使用するために手直しすることができる。さらに、擬似胃液（ＳＧＦ）又は擬似腸液SIFを含む別の溶解媒体を使用することができるが、但し、使用した溶解媒体で破損したり腐食したりすることがない材料を試料チャンバとそれに付随する構成要素に使用したという条件に限る。
【図面の簡単な説明】
【図１】  ESE顕微鏡と、制御卓と、画像モニタと、制御モニタと、を含む従来の技術に
よるESE顕微鏡システムを示す図である。
【図２】  図１のESE顕微鏡の顕微鏡チャンバドアを示す図である。
【図３】  本発明による試料チャンバの好適な実施例を示す図である。
【図４】  図３の試料チャンバの底部の平面図である。
【図５】  図４の試料チャンバの底部の側面図である。
【図６】  図４の試料チャンバの底部の背面図である。
【図７】  図４の試料チャンバの底部の底面図である。
【図８】  図３の試料チャンバの試料井筒の側面図である。
【図９】  図８の試料井筒の平面図である。
【図１０】  図３の試料チャンバの蓋トラックの平面図である。
【図１１】  図１０の蓋トラックの底面図である。
【図１２】  図３の試料チャンバの蓋の平面図である。
【図１３】  この発明による例証的駆動機構を示す図である。
【図１４】  この発明の別の実施例による自動化ESE顕微鏡システムを示す図である。
【図１５】  図１４のESE顕微鏡システムで自動化実験を行うフローチャートを示す図である。
【図１６】  ２０ミリメートルから３１ミリメートルまでの作業距離に設けた非湿潤試料を５００倍の倍率（比較）で撮像した写真である。
【図１７】  図１６の非湿潤試料を溶解槽中に２時間浸漬した後に５２０倍の倍率で撮像した写真である。
【図１８】  図１６の非湿潤試料を溶解槽中に２時間浸漬した後に１０００倍の倍率で撮像した写真である。
【図１９】  この発明の更に別の実施例による自動化ESE顕微鏡システムである。
【図２０】  非湿潤試料を３００倍の倍率（比較）で撮像した写真である。
【図２１】  図２０の非湿潤試料を溶解槽中に１５分間浸漬した後に３００倍の倍率で撮像した写真である。
【図２２】  非湿潤試料を０．４トルのチャンバ圧力にて１５０倍の倍率（比較）で撮像した写真である。
【図２３】  図２２の非湿潤試料を溶解槽中に１５分間浸漬した後に０．４トルのチャンバ圧力にて１５０倍の倍率で撮像した写真である。
【図２４A】  図２４aは非湿潤試料を１０００倍の倍率で撮像した写真である。
【図２４B】  図２４Ｂは非湿潤試料を１５００倍の倍率で撮像した写真である。
【図２４C】  図２４Cは図２４aの非湿潤試料を２０００倍の倍率で撮像した写真である。
【図２５A】  図２５aは試料を溶解槽中に１５分間浸漬した後に１０００倍の倍率で撮像した写真である。
【図２５B】  図２５bは図２５aの試料を１５００倍の倍率で撮像した写真である。
【図２５C】  図２５ｃは図２５aの試料を２０００倍の倍率で撮像した写真である。
【図２６】  図３から図１２までの試料チャンバにおいて１６時間にわたる徐放性トラマドール錠剤の溶解中に前記トラマドール錠剤から溶解したトラマドールの百分率対時間の図表であり、従来の技術によるHPLC法で２４時間にわたる徐放性トラマドール錠剤の溶解中に前記トラマドール錠剤から溶解したトラマドールの百分率対時間の図表である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４Ａ】
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【図２４Ｂ】
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【図２４Ｃ】
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【図２５Ａ】
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【図２５Ｂ】
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【図２５Ｃ】
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【図２６】
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