(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
0003696629.tif 000007
（式中、Ｒは、アルケニルオキシ基で置換されていてもよいアルキル基、アルケニル基、ハロゲン原子で置換されていてもよいアリール基、またはアラルキル基を示す）
で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体または（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物またはその処理物を、前記エポキシドのエナンチオマー混合物に作用させ、生成する（Ｓ）体または（Ｒ）体の光学活性エポキシドを採取する光学活性エポキシドの製造方法であって、
エポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物が、キャンディダ（Candida)属、ロドスポリデウム(Rhodosporidium)属、ロドコッカス(Rhodococcus) 属、ノサルデオイデス(Nosardioides ) 属、サッカロポリスポラ(Saccharopolyspora )属、アセトバクター(Acetobacter )属、シトロバクター(Citrobacter )属、エンテロバクター(Enterobacter ) 属、エシェリヒア(Escherichia )属、グルコノバクター(Gluconobacter )属、ストレプトアラテイカス(Streptoallateichus ) 属、アニキシエラ(Anixiella )属、コルチシウム(Corticium )属、コリエスポラ(Coryespora ) 属、ドラトマイセス(Doratomyces )属、ドレッチスレラ(Drechslera ) 属、ヘルミンソスポリウム(Helminthosporium ) 属、マクロホミナ(Macrophomina ) 属、ミクロアスカス(Microascus ) 属、ペリコニア(Periconia )属、スコプラリオプシス(Scopulariopsis ) 属、スタックニィボトリス(Stacnybotrys ) 属、ウエステルディケラ(Westerdykella )属、フィアロフォラ(Phialophora )属、ポドスポラ(Podospora )属、チレチオプシス (Tilletiopsis )属およびグロエオフィラム (Gloeophyllum )属に属する微生物群から選ばれた微生物であり、
エポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物が、トリコスポロン（Trichosporon) 属、ゲオトリカム(Geotrichum)属、コリネバクテリウム(Corynebacterium) 属、ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属、グリソマイセス(Glysomyces ) 属、サッカロスリックス(Saccharothrix )属、ストレプトマイセス(Streptomyces ) 属およびペリキュラリア(Pellicularia ) 属に属する微生物群から選ばれた微生物である光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項２】
エポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物が、キャンディダ・パラプシロシス（Candida parapsilosis）、キャンディダ・ファマタ（Candida famata）、ロドスポリデウム・トルロイデス(Rhodosporidium toruloides) 、ロドコッカス・ルブロペルチンクタス(Rhodococcus rubropertinctus) 、ロドコッカス・コプロフィラス(Rhodococcus coprophilus) 、ロドコッカス・エリスロポリス(Rhodococcus erythropolis)、ノサルデオイデス・フラバス(Nosardioides flavus) 、サッカロポリスポラ・ヒラスタ(Saccharopolyspora hirasta) 、アセトバクター・パステウリアナス(Acetobacter pasteurianus)、アセトバクター・アセチ・サブスピーシーズ・キシリナム(Acetobacter aceti subsp xylinum) 、シトロバクター・フレウンディ(Citrobacter freundii)、エンテロバクター・エアロゲネス(Enterobacter aerogenes)、エンテロバクター・クロアセー(Enterobacter cloacae)、エシェリヒア・コリ(Escherichia coli)、グルコノバクター・セリナス(Gluconobacter cerinus) 、ストレプトアラテイカス・ヒンダスタナス(Streptoallateichus hindustanus)、アニキシエラ・レチキュラタ(Anixiella reticulata)、コルチシウム・ロルフシー(Corticium rolfsii) 、コリエスポラ・カシジコラ(Coryespora cassjicola) 、ドラトマイセス・ステモニチス(Doratomyces stemonitis)、ドレッチスレラ・アベナエ(Drechslera avenae) 、ヘルミンソスポリウム・シグモイデウム・バライティ・イレグル(Helminthosporium sigmoideum var irregul) 、マクロホミナ・ファセオリ(Macrophomina phaseoli) 、ミクロアスカス・デスモスポラス(Microascus desmosporus)、ペリコニア・ビソイデス(Periconia byssoides) 、スコプラリオプシス・ブレビカウリス(Scopulariopsis brevicaulis)、スタックニィボトリス・チャルタルム(Stacnybotrys chartarum)、ウエステルディケラ・ムルチスポラ(Westerdykella multispora)、フィアロフォラ・ペドロソイ(Phialophora pedrosoi)、ポドスポラ・カルドナリア(Podospora cardonaria)、チレチオプシス・クレメア(Tilletiopsis cremea) およびグロエオフィラム・ストリアタム(Gloeophyllum striatum) に属する微生物群から選ばれた微生物である請求項１記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項３】
エポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物が、トリコスポロン・クタネウム（Trichosporon cutaneum)、ゲオトリカム・カンディダム(Geotrichum candidum) 、ゲオトリカム・フラグランス(Geotrichum fragrans)、コリネバクテリウム・グルタミカム(Corynebacterium glutamicum)、ブレビバクテリウム・リネンス(Brevibacterium linens) 、グリソマイセス・ルツゲルセンシス(Glysomyces rutgersensis) 、サッカロスリックス・アウストラリエンシス(Saccharothrix australiensis) 、ストレプトマイセス・アルボスポレウス(Streptomyces albosporeus)およびペリキュラリア・フィラメントサ(Pellicularia filamentosa)に属する微生物群から選ばれた微生物である請求項１記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項４】
請求項１記載の一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物またはその処理物を、前記エポキシドのエナンチオマー混合物に作用させ、生成する（Ｓ）体の光学活性エポキシドを採取する光学活性エポキシドの製造方法であって、エポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物が、セラチア・プリムシカム(Serratia plymuthicum)、セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens)、アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger)、バチラス・ズブチリス(Bacillus subtilis) 、バチラス・セレウス(Bacillus cereus) 、ミクロコッカス・ルテウス（Micrococcus luteus）、およびシュードモナス・プチダ(Pseudomonas putida)に属する微生物群から選ばれた微生物であり、前記セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens)がセラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens)ＡＨＵ  １７２０であり、前記ミクロコッカス・ルテウス（Micrococcus luteus）がミクロコッカス・ルテウス（Micrococcus luteus）ＡＨＵ  １４２７である光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項５】
請求項１記載の一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物またはその処理物を、前記エポキシドのエナンチオマー混合物に作用させ、生成する（Ｒ）体の光学活性エポキシドを採取する光学活性エポキシドの製造方法であって、エポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物が、バチラス・スファエリカス(Bacillus sphaericus)、ミクロコッカス・ルーテウス(Micrococcus luteus)、シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)、セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens)、アスペルギルス・オリゼー・バライティ・マグナスポラス（Aspergillus oryzae var magnasporus) 、およびアスペルギルス・ソジャー（Aspergillus sojae)に属する微生物群から選ばれた微生物であり、前記ミクロコッカス・ルーテウス(Micrococcus luteus)が、ミクロコッカス・ルーテウス(Micrococcus luteus)ＩＦＯ  １２９９２であり、前記セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens)が、セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens) ＩＡＭ  １１０５である光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項６】
エポキシドのエナンチオマー混合物として、前記エポキシドのラセミ体を用いる請求項１〜５のいずれかの項に記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項７】
微生物を液体培地で培養し、培地から分離した菌体を含む分散液を調製し、分散した菌体をエポキシドのエナンチオマー混合物に作用させる請求項１〜５のいずれかの項に記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項８】
微生物またはその処理物を、ｐＨ３〜９、温度１０〜６０℃の条件下、エポキシドのエナンチオマー混合物に作用させる請求項１〜５のいずれかの項に記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項９】
微生物またはその処理物を、濃度０．１〜２０重量％のエポキシドのエナンチオマー混合物に作用させる請求項１〜５のいずれかの項に記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項１０】
Ｒが、アルケニルオキシ基で置換されていてもよい炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数２〜１２のアルケニル基、ハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基、または炭素数７〜１８のアラルキル基である請求項１〜５のいずれかの項に記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項１１】
Ｒがハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基である請求項１〜５のいずれかの項に記載の光学活性エポキシドの製造方法。
【請求項１２】
一般式（Ｉ）
【化２】
0003696629.tif 000008
（式中、Ｒは、アルケニルオキシ基で置換されていてもよいアルキル基、アルケニル基、ハロゲン原子で置換されていてもよいアリール基、またはアラルキル基を示す）
で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物に、（１）前記エナンチオマーのうち（Ｒ）体を選択的に低減するかまたは（Ｒ）体を（Ｓ）体に転化する能力を有する微生物またはその処理物、または（２）前記エナンチオマーのうち（Ｓ）体を選択的に低減するかまたは（Ｓ）体を（Ｒ）体に転化する能力を有する微生物またはその処理物を作用させて、（Ｓ）体または（Ｒ）体の光学純度を増大させる光学活性エポキシドの光学純度の増大方法であって、
（１）前記エナンチオマーのうち（Ｒ）体を選択的に低減するかまたは（Ｒ）体を（Ｓ）体に転化する能力を有する微生物が、キャンディダ（Candida)属、ロドスポリデウム(Rhodosporidium)属、ロドコッカス(Rhodococcus)属、ノサルデオイデス(Nosardioides)属、サッカロポリスポラ(Saccharopolyspora)属、アセトバクター(Acetobacter)属、シトロバクター(Citrobacter)属、エンテロバクター(Enterobacter)属、エシェリヒア(Escherichia)属、グルコノバクター(Gluconobacter)属、ストレプトアラテイカス(Streptoallateichus)属、アニキシエラ(Anixiella)属、コルチシウム(Corticium)属、コリエスポラ(Coryespora)属、ドラトマイセス(Doratomyces)属、ドレッチスレラ(Drechslera)属、ヘルミンソスポリウム(Helminthosporium)属、マクロホミナ(Macrophomina)属、ミクロアスカス(Microascus)属、ペリコニア(Periconia)属、スコプラリオプシス(Scopulariopsis)属、スタックニィボトリス(Stacnybotrys)属、ウエステルディケラ(Westerdykella)属、フィアロフォラ(Phialophora)属、ポドスポラ(Podospora)属、チレチオプシス(Tilletiopsis)属およびグロエオフィラム(Gloeophyllum)属に属する微生物群から選ばれた微生物であり、
（２）前記エナンチオマーのうち（Ｓ）体を選択的に低減するかまたは（Ｓ）体を（Ｒ）体に転化する能力を有する微生物が、トリコスポロン（Trichosporon)属、ゲオトリカム(Geotrichum)属、コリネバクテリウム(Corynebacterium) 属、ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属、グリソマイセス(Glysomyces)属、サッカロスリックス(Saccharothrix)属、ストレプトマイセス(Streptomyces)属およびペリキュラリア(Pellicularia)属に属する微生物群から選ばれた微生物である光学活性エポキシドの光学純度の増大方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は微生物を利用した光学活性エポキシドの製造方法に関する。光学活性エポキシドは、種々の医薬品や光学活性な生理活性物質、およびそれらの誘導体の中間体として重要である。
【０００２】
【従来の技術と発明が解決しようとする課題】
従来、光学活性エポキシドの製造方法として、対応するオレフィンから、化学的な不斉エポキシ化により得る方法（J. Chem. Soc., Perkin Trans.,  2, 353(1990) 等）、および微生物により得る方法（有機合成化学協会誌、第４５巻、第２号、第１６２頁、１９８７年、等）が知られている。しかし、これらの方法は、経済性、操作性、収率などの点で十分満足できる方法とは言えない。そこで、経済的に優れ、かつ簡便な手段により光学活性エポキシドを製造する方法の確立が望まれている。
【０００３】
したがって、本発明の目的は、簡便且つ効率的に光学活性エポキシドを製造する方法を提供することにある。
【０００４】
本発明の他の目的は、光学純度の高い光学活性エポキシドを、工業的に有利に製造できる方法を提供することにある。
【０００５】
本発明のさらに他の目的は、簡易な手段により、（Ｓ）体または（Ｒ）体のエポキシドの光学純度を増大させる方法を提供することにある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは経済的に優れ、且つ簡便な手段で、光学純度の高い光学活性エポキシドを得る方法について鋭意検討した結果、微生物およびその処理物を、エポキシドのエナンチオマー混合物に作用させると、光学純度の高い（Ｓ）体または（Ｒ）体の光学活性エポキシドが効率的に得られることを見出だし、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、一般式（Ｉ）
【０００８】
【化３】
0003696629.tif 000002
（式中、Ｒは、アルケニルオキシ基で置換されていてもよいアルキル基、アルケニル基、ハロゲン原子で置換されていてもよいアリール基、またはアラルキル基を示す）
で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物またはその処理物を、前記エポキシドのエナンチオマー混合物に作用させ、生成する光学活性エポキシドを採取する光学活性エポキシドの製造方法を提供する。
【０００９】
本発明は、また、前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物に、（１）前記エナンチオマーのうち（Ｒ）体を選択的に低減するかまたは（Ｒ）体を（Ｓ）体に転化する能力を有する微生物またはその処理物、または（２）前記エナンチオマーのうち（Ｓ）体を選択的に低減するかまたは（Ｓ）体を（Ｒ）体に転化する能力を有する微生物またはその処理物を作用させて、（Ｓ）体または（Ｒ）体の光学純度を増大させる光学活性エポキシドの光学純度の増大方法であって、
（１）前記エナンチオマーのうち（Ｒ）体を選択的に低減するかまたは（Ｒ）体を（Ｓ）体に転化する能力を有する微生物が、キャンディダ（Candida)属、ロドスポリデウム(Rhodosporidium)属、ロドコッカス(Rhodococcus)属、ノサルデオイデス(Nosardioides)属、サッカロポリスポラ(Saccharopolyspora)属、アセトバクター(Acetobacter)属、シトロバクター(Citrobacter)属、エンテロバクター(Enterobacter)属、エシェリヒア(Escherichia)属、グルコノバクター(Gluconobacter)属、ストレプトアラテイカス(Streptoallateichus)属、アニキシエラ(Anixiella)属、コルチシウム(Corticium)属、コリエスポラ(Coryespora)属、ドラトマイセス(Doratomyces)属、ドレッチスレラ(Drechslera)属、ヘルミンソスポリウム(Helminthosporium)属、マクロホミナ(Macrophomina)属、ミクロアスカス(Microascus)属、ペリコニア(Periconia)属、スコプラリオプシス(Scopulariopsis)属、スタックニィボトリス(Stacnybotrys)属、ウエステルディケラ(Westerdykella)属、フィアロフォラ(Phialophora)属、ポドスポラ(Podospora)属、チレチオプシス(Tilletiopsis)属およびグロエオフィラム(Gloeophyllum)属に属する微生物群から選ばれた微生物であり、
（２）前記エナンチオマーのうち（Ｓ）体を選択的に低減するかまたは（Ｓ）体を（Ｒ）体に転化する能力を有する微生物が、トリコスポロン（Trichosporon)属、ゲオトリカム(Geotrichum)属、コリネバクテリウム(Corynebacterium) 属、ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属、グリソマイセス(Glysomyces)属、サッカロスリックス(Saccharothrix)属、ストレプトマイセス(Streptomyces)属およびペリキュラリア(Pellicularia)属に属する微生物群から選ばれた微生物である光学活性エポキシドの光学純度の増大方法を提供する。
【００１０】
前記Ｒにおけるアルキル基には、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ドデシル基などの炭素数１〜１２の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基等が含まれる。これらのなかでも、好ましいアルキル基には、炭素数１〜１０の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基、特に、炭素数１〜６の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基などが含まれる。
【００１１】
Ｒにおけるアルケニル基には、ビニル、アリル、１−プロペニル、イソプロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、４−ペンテニル、５−ヘキセニル、７−オクテニル、９−デセニル基などの炭素数２〜１２の直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基等が含まれる。これらのなかでも、炭素数２〜６の直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基、とりわけ、炭素数２〜４の直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基等が好ましい。
Ｒにおけるシクロアルキル基には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル基などの炭素数３〜１０のシクロアルキル基等が含まれる。これらのなかでも、炭素数３〜８のシクロアルキル基、特に炭素数５〜７のシクロアルキル基などが好ましい。
【００１２】
Ｒにおけるアリール基には、フェニル基、ナフチル基などが含まれる。好ましいアリール基にはフェニル基が含まれる。
【００１３】
Ｒにおけるアラルキル基には、ベンジル、１−メチルベンジル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、４−フェニルブチル、５−フェニルペンチル、６−フェニルヘキシル、１−ナフチルメチル、２−ナフチルメチル、２−（１−ナフチル）エチル基などの炭素数７〜１８のアラルキル基等が含まれる。好ましいアラルキル基には、ベンジル、１−メチルベンジル、２−フェニルエチル、３−フェニルプロピル、４−フェニルブチル、１−ナフチルメチル、２−ナフチルメチル基などの炭素数７〜１２のアラルキル基が含まれる。
【００１４】
Ｒにおける複素環基には、窒素原子、酸素原子または硫黄原子を含有する５〜７員の複素環基などが含まれる。前記複素環には、ベンゼン環、シクロペンタン環、シクロヘキサン環などの炭素数３〜７の炭素環等が縮合していてもよい。前記複素環基として、例えば、３−フリル、フルフリル、３−チエニル、３−ピロリル、３−ピロリジニル、２−ピリジル、３−ピリジル、４−ピリジル、３−ピペリジニル、４−ピペリジニル、２−モルホリニル、２−キノリル、３−キノリル、６−キノリル、４−イソキノリル、４−オキサゾリル、４−イソオキサゾリル、４−チアゾリル、１−イミダゾリル、４−イミダゾリル、４−ピラゾリル、２−ピラジニル、５−ピリミジニル、４−ピリダジニル、５−キナゾリニル、３−ベンゾフラニル、１−（２−ピロリドニル）、９−カルバゾリル基などが挙げられる。
【００１５】
前記アルキル基、アルケニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、複素環基は、置換基を有していてもよい。このような置換基としては、ハロゲン原子（フッ素、塩素、臭素、ヨウ素原子）、ヒドロキシル基、メルカプト基、置換または無置換アミノ基（例えば、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ基など）、ニトロ基、アルコキシ基（例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、オクチルオキシ基等の炭素数１〜８のアルコキシ基など）、アルケニルオキシ基（例えば、ビニルオキシ、アリルオキシ、３−ブテニルオキシ、５−ヘキセニルオキシ基等の炭素数２〜８のアルケニルオキシ基など）、アリールオキシ基（例えば、フェノキシ、２−メチルフェノキシ、３−メチルフェノキシ、４−メチルフェノキシ、２−アリルフェノキシ、２−クロロフェノキシ、３−クロロフェノキシ、４−クロロフェノキシ、４−メトキシフェノキシ、２−アリルオキシフェノキシ、α−ナフチルオキシなどの、炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１〜４のアルコキシ基、ハロゲン原子などの置換基を有していてもよいフェノキシ基、ナフチルオキシ基など）、アラルキルオキシ基（例えば、ベンジルオキシ、２−フェニルエチルオキシ基などの炭素数７〜１８のアラルキルオキシ基など）、アルキルチオ基（例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソブチルチオなどの炭素数１〜８のアルキルチオ基など）、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基（メトキシカルボニル、エトキシカルボニル基等の炭素数２〜６のアルコキシカルボニル基など）、置換または無置換のカルバモイル基（例えば、カルバモイル、メチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル基など）、シアノ基、アシル基（例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ベンゾイル等の炭素数１〜１０のアシル基など）などが例示できる。
【００１６】
また、前記シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、複素環基は、上記置換基のほか、アルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル基等の炭素数１〜５のアルキル基など）、アルケニル基（ビニル、アリル基等の炭素数２〜５のアルケニル基など）、ハロアルキル基（クロロメチル、２−クロロエチル、トリフルオロメチル、１，１，２，２，２−ペンタフルオロエチル基等の炭素数１〜５のハロアルキル基など）などを有していてもよい。
【００１７】
これらの置換基のなかでも、前記アルキル基、アルケニル基が有していてもよい置換基として、ヒドロキシル基；炭素数１〜８のアルコキシ基；炭素数２〜８のアルケニルオキシ基；炭素数１〜４のアルキル基、炭素数１〜４のアルコキシ基、ハロゲン原子などの置換基を有していてもよいアリールオキシ基；炭素数７〜１８のアラルキルオキシ基などが好ましい。また、前記シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、複素環基が有していてもよい置換基として、ハロゲン原子、炭素数１〜５のアルコキシ基、炭素数１〜５のアルキル基、炭素数１〜５のハロアルキル基、ニトロ基などが好ましく、特に塩素原子などのハロゲン原子などが好ましい。
【００１８】
前記アルキル基等が置換基を有している場合、置換基の数は１または２以上の何れであってもよく、置換基が複数の場合には、その置換基は同一または異なっていてもよい。
【００１９】
前記Ｒのなかでも、特に、ハロゲン原子、炭素数１〜５のアルコキシ基、炭素数１〜５のアルキル基、炭素数１〜５のハロアルキル基、ニトロ基などの置換基で置換されていてもよいフェニル基などのアリール基、とりわけ、ハロゲン原子などで置換されていてもよいフェニル基などが好ましい。このようなＲを有するエポキシドは、抗肥満薬、糖尿病治療薬を得るための合成中間体として極めて有用である［ジャーナル  オブ  メディシナル  ケミストリー（J. Med. Chem）、第３５巻、第３０８１頁（１９９２年）、および米国特許第５０６１７２７号明細書等参照］。
【００２０】
前記式（Ｉ）で表されるエポキシドには、(1) Ｒが置換基を有していてもよいアルキル基である化合物、(2) Ｒが置換基を有していてもよいアルケニル基である化合物、(3) Ｒが置換基を有していてもよいシクロアルキル基である化合物、(4) Ｒが置換基を有していてもよいアリール基である化合物、および(5) Ｒが置換基を有していてもよいアラルキル基である化合物、(6) Ｒが置換基を有していてもよい複素環基である化合物が含まれる。
【００２１】
前記(1) に含まれる化合物としては、例えば、１，２−エポキシプロパン、１，２−エポキシブタン、１，２−エポキシ−３−メチルブタン、１，２−エポキシペンタン、１，２−エポキシヘキサン、１，２−エポキシヘプタン、１，２−エポキシデカンなどの１，２−エポキシアルカン類；グリシドール、１，２−エポキシ−４−ヒドロキシブタン、１，２−エポキシ−５−ヒドロキシペンタンなどの１，２−エポキシアルカノール類；メチルグリシジルエーテル、エチルグリシジルエーテル、プロピルグリシジルエーテル、ブチルグリシジルエーテル、ビニルグリシジルエーテル、アリルグリシジルエーテル、フェニルグリシジルエーテル、ｏ−メチルフェニルグリシジルエーテル、ｍ−メチルフェニルグリシジルエーテル、ｐ−メチルフェニルグリシジルエーテル、ｏ−アリルフェニルグリシジルエーテル、ｏ−アリロキシフェニルグリシジルエーテル、ベンジルグリシジルエーテル、α−ナフチルグリシジルエーテルなどのグリシジルエーテル類などが挙げられる。
【００２２】
前記(2) に含まれる化合物としては、例えば、３，４−エポキシ−１−ブテン、４，５−エポキシ−１−ペンテン、４，５−エポキシ−２−ペンテン、５，６−エポキシ−１−ヘキセン、７，８−エポキシ−１−オクテンなどのエポキシアルケン類が例示できる。
【００２３】
前記(3) に含まれる化合物としては、例えば、２−シクロプロピルオキシラン、２−シクロペンチルオキシラン、２−シクロヘキシルオキシラン、２−シクロヘプチルオキシランなどの２−シクロアルキルオキシラン類等が挙げられる。
【００２４】
前記(4) に含まれる化合物としては、例えば、スチレンオキシド；２−クロロスチレンオキシド、３−フルオロスチレンオキシド、３−クロロスチレンオキシド、３−ブロモスチレンオキシド、４−クロロスチレンオキシド、２，３−ジフルオロスチレンオキシド、２，３−ジクロロスチレンオキシド、３−クロロ−２−メチルスチレンオキシド、２，４−ジクロロスチレンオキシド、２，５−ジクロロスチレンオキシド、２，６−ジクロロスチレンオキシド、３，４−ジフルオロスチレンオキシド、３，４−ジクロロスチレンオキシド、３，５−ジクロロスチレンオキシド、２，３，４−トリフルオロスチレンオキシド、２，３，４−トリクロロスチレンオキシド、２，３，５−トリクロロスチレンオキシド、２，３，６−トリクロロスチレンオキシド、２，４，５−トリクロロスチレンオキシド、２，４，６−トリクロロスチレンオキシド、３，４，５−トリクロロスチレンオキシド、２，３，４，５−テトラクロロスチレンオキシド、２，３，４，６−テトラクロロスチレンオキシド、２，３，５，６−テトラクロロスチレンオキシド、２，３，４，５，６−ペンタクロロスチレンオキシドなどのベンゼン環にハロゲン原子を有するスチレンオキシド類；２−メチルスチレンオキシド、３−メチルスチレンオキシド、４−メチルスチレンオキシド、４−ｔ−ブチルスチレンオキシドなどのベンゼン環に炭素数１〜５のアルキル基を有するスチレンオキシド類；２−クロロメチルスチレンオキシド、３−トリフルオロメチルスチレンオキシドなどのベンゼン環に炭素数１〜５のハロアルキル基を有するスチレンオキシド類；２−メトキシスチレンオキシド、３−メトキシスチレンオキシド、４−エトキシスチレンオキシドなどのベンゼン環に炭素数１〜５のアルコキシ基を有するスチレンオキシド類；３−ニトロスチレンオキシド等のスチレンオキシド類、および１，２−エポキシ−２−（１−ナフチル）エタン、１，２−エポキシ−２−（２−ナフチル）エタンなどの１，２−エポキシ−２−ナフチルエタン類等が例示できる。前記(4) に含まれる化合物のなかでも、前記スチレンオキシド、およびハロゲン原子を１〜５個有するスチレンオキシド類などを用いる場合が多い。
【００２５】
前記(5) に含まれる化合物としては、例えば、２，３−エポキシプロピルベンゼン、１−（２，３−エポキシプロピル）−２−メチルベンゼン、１−クロロ−３−（２，３−エポキシプロピル）ベンゼン、３，４−エポキシブチルベンゼン、１−クロロ−３−（３，４−エポキシブチル）ベンゼン、４，５−エポキシペンチルベンゼン、５，６−エポキシヘキシルベンゼン、１−（２，３−エポキシプロピル）ナフタレン、２−（２，３−エポキシプロピル）ナフタレン、１−（３，４−エポキシブチル）ナフタレンなどのエポキシアルキルアレーン類が例示できる。
【００２６】
前記(6) に含まれる化合物としては、例えば、３−（２−オキシラニル）フラン、３−（２−オキシラニル）ピロール、２−（２−オキシラニル）ピリジン、３−（２−オキシラニル）ピリジン、４−（２−オキシラニル）ピリジン、２−（２−オキシラニル）キノリン、６−（２−オキシラニル）キノリン、１−（２−オキシラニル）イミダゾール、１−（２−オキシラニル）−２−ピロリドン、３−（２−オキシラニル）ピペリジン、２−（２−オキシラニル）ピラジン、９−（２−オキシラニル）カルバゾールなどが例示できる。
【００２７】
前記微生物は、前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物であればよい。このような微生物には、前記エポキシドの両エナンチオマーのうち、一方のエナンチオマーを、資化またはエポキシ環の開環などにより選択的に低減する微生物、および一方のエナンチオマーを選択的に他の化合物（他方のエナンチオマーを含む）に転化する微生物が含まれる。
【００２８】
前記能力を有する微生物としては、前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物、例えば、キャンディダ（Candida)属、ロドスポリデウム(Rhodosporidium)属、ロドコッカス(Rhodococcus) 属、セラチア(Serratia)属、アスペルギルス（Aspergillus)属、ノサルデオイデス(Nosardioides ) 属、サッカロポリスポラ(Saccharopolyspora )属、バチラス(Bacillus ) 属、アセトバクター(Acetobacter )属、シトロバクター(Citrobacter )属、エンテロバクター(Enterobacter ) 属、エシェリヒア(Escherichia )属、ミクロコッカス(Micrococcus )属、シュードモナス(Pseudomonas )属、グルコノバクター(Gluconobacter )属、ストレプトアラテイカス(Streptoallateichus ) 属、アニキシエラ(Anixiella )属、コルチシウム(Corticium )属、コリエスポラ(Coryespora ) 属、ドラトマイセス(Doratomyces )属、ドレッチスレラ(Drechslera ) 属、ヘルミンソスポリウム(Helminthosporium ) 属、マクロホミナ(Macrophomina ) 属、ミクロアスカス(Microascus ) 属、ペリコニア(Periconia )属、スコプラリオプシス(Scopulariopsis ) 属、スタックニィボトリス(Stacnybotrys ) 属、ウエステルディケラ(Westerdykella )属、フィアロフォラ(Phialophora )属、ポドスポラ(Podospora )属、チレチオプシス (Tilletiopsis )属およびグロエオフィリウム (Gloeophyllum )属に属する微生物群から選ばれた微生物等であって、一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物；および、一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物、例えば、トリコスポロン（Trichosporon) 属、ゲオトリカム(Geotrichum)属、バチラス(Bacillus)属、コリネバクテリウム(Corynebacterium) 属、ミクロコッカス(Micrococcus) 属、ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属、シュードモナス(Pseudomonas) 属、セラチア(Serratia)属、アスペルギルス（Aspergillus)属、グリソマイセス(Glysomyces ) 属、サッカロスリックス(Saccharothrix )属、ストレプトマイセス(Streptomyces ) 属およびペリキュラリア(Pellicularia ) 属に属する微生物群から選ばれた微生物等であって、一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物が挙げられる。
【００２９】
具体的には、一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｓ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物として、例えば、次のような微生物が挙げられる。
【００３０】
（１）キャンディダ（Candida)属：キャンディダ・パラプシロシス（Candida parapsilosis）ＩＦＯ  １０６８、キャンディダ・ファマタ（Candida famata）ＩＦＯ  ０８５６など、
（２）ロドスポリデウム(Rhodosporidium)属：ロドスポリデウム・トルロイデス(Rhodosporidium toruloides) ＩＦＯ  １５３５など、
（３）ロドコッカス(Rhodococcus) 属：ロドコッカス・ルブロペルチンクタス(Rhodococcus rubropertinctus) ＩＦＭ  ００３３、ロドコッカス・コプロフィラス(Rhodococcus coprophilus) ＩＦＭ  ０１４３、ロドコッカス・エリスロポリス(Rhodococcus erythropolis)ＪＣＭ  ６８２３など、
（４）セラチア(Serratia)属：セラチア・プリムシカム(Serratia plymuthicum)ＩＦＯ  ３０５５、セラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens ）ＡＨＵ  １７２０など、
（５）アスペルギルス（Aspergillus)属：アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger)  ＡＴＣＣ  ６２７５など、
（６）ノサルデオイデス(Nosardioides ) 属：ノサルデオイデス・フラバス（Nosardioides flavus ）ＩＦＯ  １４３９６など、
（７）サッカロポリスポラ(Saccharopolyspora )属：サッカロポリスポラ・ヒラスタ（Saccharopolyspora hirasta ）ＩＦＯ  １３９１９など、
（８）バチラス(Bacillus ) 属：バチラス・ズブチリス（Bacillus subtilis ）ＩＦＯ  ３１０８、バチラス・セレウス(Bacillus cereus) ＡＨＵ  １３５５など、
（９）アセトバクター(Acetobacter )属：アセトバクター・パステウリアナス（Acetobacter pasteurianus）ＡＴＣＣ  １０２４５、アセトバクター・アセチ・サブスピーシーズ・キシリナム(Acetobacter aceti subsp xylinum) ＩＦＯ
３２８８など、
（１０）シトロバクター(Citrobacter )属：シトロバクター・フレウンディ（Citrobacter freundii）ＡＨＵ  １５３４など、
（１１）エンテロバクター(Enterobacter ) 属：エンテロバクター・エアロゲネス（Enterobacter aerogenes）ＡＨＵ  １３４０、エンテロバクター・クロアセー（Enterobacter cloacae）ＩＡＭ  １６１５など、
（１２）エシェリヒア(Escherichia )属：エシェリヒア・コリ（Escherichia coli）ＡＨＵ  １５２０など、
（１３）ミクロコッカス(Micrococcus )属：ミクロコッカス・ルテウス（Micrococcus luteus）ＡＨＵ  １４２７など、
（１４）シュードモナス(Pseudomonas )属：シュードモナス・プチダ（Pseudomonas putida）ＩＦＯ  ３７３８など、
（１５）グルコノバクター(Gluconobacter )属：グルコノバクター・セリナス（Gluconobacter cerinus ）ＩＦＯ  ３２６４など、
（１６）ストレプトアラテイカス(Streptoallateichus ) 属：ストレプトアラテイカス・ヒンダスタナス（Streptoallateichus hindustanus）ＩＦＯ  １４０５６など、
（１７）アニキシエラ(Anixiella )属：アニキシエラ・レチキュラタ（Anixiella reticulata）ＩＦＯ  ５８１４など、
（１８）コルチシウム(Corticium )属：コルチシウム・ロルフシー（Corticium rolfsii ）ＩＦＯ  ４４７６など、
（１９）コリエスポラ(Coryespora ) 属：コリエスポラ・カシジコラ（Coryespora cassjicola ）ＩＦＯ  ６７２４など、
（２０）ドラトマイセス(Doratomyces )属：ドラトマイセス・ステモニチス（Doratomyces stemonitis）ＩＦＯ  ５８７８など、
（２１）ドレッチスレラ(Drechslera ) 属：ドレッチスレラ・アベナエ（Drechslera avenae ）ＩＦＯ  ６６３６など、
（２２）ヘルミンソスポリウム(Helminthosporium ) 属：ヘルミンソスポリウム・シグモイデウム・バライティ・イレグル（Helminthosporium sigmoideum var irregul ）ＩＦＯ  ５２７３など、
（２３）マクロホミナ(Macrophomina ) 属：マクロホミナ・ファセオリ（Macrophomina phaseoli ）ＩＦＯ  ６６９６など、
（２４）ミクロアスカス(Microascus ) 属：ミクロアスカス・デスモスポラス（Microascus desmosporus）ＩＦＯ  ６７６１など、
（２５）ペリコニア(Periconia )属：ペリコニア・ビソイデス（Periconia byssoides ）ＩＦＯ  ９４４４など、
（２６）スコプラリオプシス(Scopulariopsis ) 属：スコプラリオプシス・ブレビカウリス（Scopulariopsis brevicaulis）ＩＦＯ  ４８４３など、
（２７）スタックニィボトリス(Stacnybotrys ) 属：スタックニィボトリス・チャルタルム（Stacnybotrys chartarum）ＩＦＯ  ５３６９など、
（２８）ウエステルディケラ(Westerdykella )属：ウエステルディケラ・ムルチスポラ（Westerdykella multispora）ＩＦＯ  ５８１３など、
（２９）フィアロフォラ(Phialophora )属：フィアロフォラ・ペドロソイ（Phialophora pedrosoi）ＩＦＯ  ６０７１など、
（３０）ポドスポラ(Podospora )属：ポドスポラ・カルドナリア（Podospora cardonaria）ＩＦＯ  ３０２９４など、
（３１）チレチオプシス (Tilletiopsis )属：チレチオプシス・クレメア（Tilletiopsis cremea ）ＩＦＯ  ６８３１など、
（３２）グロエオフィラム (Gloeophyllum )属：グロエオフィラム・ストリアタム（Gloeophyllum striatum ）ＩＦＯ  ６５０６など
これらの微生物は少なくとも一種使用される。これらの微生物またはその処理物を、前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物に作用させると、両エナンチオマーのうち（Ｒ）体が選択的に低減されるかまたは他の化合物（（Ｓ）体を含む）に変換されるため、（Ｓ）体の光学純度が増大する。そのため、前記微生物により、（Ｓ）体の光学活性エポキシドを収率よく得ることができる。
【００３１】
一方、一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から（Ｒ）体の光学活性エポキシドを生成する能力を有する微生物として、例えば、次のような微生物が挙げられる。
【００３２】
（３３）トリコスポロン（Trichosporon) 属：トリコスポロン・クタネウム（Trichosporon cutaneum)ＩＦＯ  １１９８など、
（３４）ゲオトリカム(Geotrichum)属：ゲオトリカム・カンディダム(Geotrichum candidum) ＪＣＭ  ７３８９、ゲオトリカム・フラグランス(Geotrichum fragrans) ＪＣＭ  ２４５０など、
（３５）バチラス(Bacillus)属：バチラス・スファエリカス(Bacillus sphaericus) ＩＦＯ  ３３４１など、
（３６）コリネバクテリウム(Corynebacterium) 属：コリネバクテリウム・グルタミカム(Corynebacterium glutamicum)ＡＴＣＣ  １３０３２など、
（３７）ミクロコッカス(Micrococcus) 属：ミクロコッカス・ルーテウス(Micrococcus luteus)ＩＦＯ  １２９９２など、
（３８）ブレビバクテリウム(Brevibacterium)属：ブレビバクテリウム・リネンス(Brevibacterium linens) ＩＦＯ  １２１４１など、
（３９）シュードモナス(Pseudomonas) 属：シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)ＩＦＯ  ３４５２など、
（４０）セラチア(Serratia)属：セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens) ＩＡＭ  １１０５など、
（４１）アスペルギルス（Aspergillus)属：アスペルギルス・オリゼー・バライティ・マグナスポラス（Aspergillus oryzae var magnasporus) ＩＡＭ  ２７５０、アスペルギルス・ソジャー（Aspergillus sojae)ＩＡＭ  ２６３１など、
（４２）グリソマイセス(Glysomyces ) 属：グリソマイセス・ルツゲルセンシス（Glysomyces rutgersensis ）ＩＦＯ  １４４８８など、
（４３）サッカロスリックス(Saccharothrix )属：サッカロスリックス・アウストラリエンシス（Saccharothrix australiensis ）ＩＦＯ  １４４４４など、
（４４）ストレプトマイセス(Streptomyces ) 属：ストレプトマイセス・アルボスポレウス（Streptomyces albosporeus）ＨＵＴ  ６１３０など、
（４５）ペリキュラリア(Pellicularia ) 属：ペリキュラリア・フィラメントサ（Pellicularia filamentosa）ＩＦＯ  ６２５４など
これらの微生物は少なくとも一種使用される。これらの微生物またはその処理物を、前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物に作用させると、両エナンチオマーのうち（Ｓ）体が選択的に低減されるかまたは他の化合物（（Ｒ）体を含む）に変換されるため、（Ｒ）体の光学純度が増大する。そのため、前記微生物により、（Ｒ）体の光学活性エポキシドを収率よく得ることができる。
【００３３】
なお、ＩＦＯ番号の付された微生物は、（財）発酵研究所（ＩＦＯ）が発行した「List of cultures、第８版（１９８８）」に記載されており、該ＩＦＯから入手することができる。ＪＣＭ番号の付された微生物は、理化学研究所微生物系保存施設が発行した「微生物株カタログ第４版（１９８９年）」に記載されており、該保存施設から入手することができる。ＡＴＣＣ番号の付された微生物は、American Type Culture Collection( ＡＴＣＣ）が発行した「Catalogue of Bacteria Phages rDNA Vecters,第１６版（１９８５）」および「Catalogue of Fungi/Yeast, 第１７版（１９８７）」に記載されており、該ＡＴＣＣから入手することができる。ＡＨＵ番号の付された微生物は、日本微生物株保存連盟（ＪＦＣＣ）が発行した「Catalogue of cultures 、第５版（１９９２）」に記載されており、北海道大学農学部から入手することができる。また、ＩＡＭ番号の付された微生物は東京大学応用微生物研究所、ＩＦＭ番号の付された微生物は千葉大学、ＨＵＴ番号の付された微生物は広島大学からそれぞれ入手することができる。
【００３４】
本発明で使用する微生物は、前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から、光学活性エポキシドを生成する能力を有する限り、野生株、変異株、または細胞融合もしくは遺伝子操作法等の遺伝子的手法により誘導される組換え株など、何れの株でも用いることができる。
【００３５】
微生物は、通常、培地で培養して前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物との反応に供される。
【００３６】
本発明に用いる微生物を培養するための培地は、微生物が増殖し得る培地であれば特に制限はない。培地は、通常、炭素源、窒素源その他の栄養源を含む液体培地であることが多い。培地の炭素源としては、上記微生物が利用可能であればいずれも使用でき、具体的には、例えば、グルコース、フルクトース、シュクロース、デキストリン、デンプンなどの糖類；ソルビトール、メタノール、エタノール、グリセロールなどのアルコール類；フマル酸、クエン酸、酢酸、プロピオン酸などの有機酸類及びその塩類；パラフィンなどの炭化水素類；これらの混合物などが使用できる。窒素源としては、例えば、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウムなどの無機酸のアンモニウム塩；フマル酸アンモニウム、クエン酸アンモニウムなどの有機酸のアンモニウム塩；肉エキス、酵母エキス、麦芽エキス、ペプトン、コーンスティープリカー、カゼイン加水分解物、尿素などの無機又は有機含窒素化合物；これらの混合物が使用できる。培地には、無機塩、微量金属塩、ビタミン類などの通常の培養に用いられる栄養源を適宜添加してもよい。また、必要に応じて、培地には、微生物の増殖を促進する因子、培地のｐＨ保持に有効な緩衝物質、本発明の目的化合物の生成能力を高める因子、例えば前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドなどを添加してもよい。
【００３７】
微生物の培養は、生育に適した条件下、例えば、培地のｐＨ３．０〜９．５、好ましくは４〜８、温度２０〜４５℃、好ましくは２５〜３７℃で行うことができる。微生物の培養は、嫌気的又は好気的条件下で行うことができる。培養時間は、例えば、５〜１２０時間、好ましくは１２〜７２時間程度である。
【００３８】
前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物における（Ｒ）体と（Ｓ）体との割合は特に制限されないが、一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのラセミ体を用いるのが工業的に有利である。
【００３９】
前記一般式（Ｉ）で表されるエポキシドのエナンチオマー混合物から対応する光学活性なエポキシドを生成させる方法としては、例えば、(1) 培養液に前記エポキシドのエナンチオマー混合物を添加して反応させる方法、(2) 培養液から遠心分離などにより分離した菌体を、そのまま又は洗浄した後、緩衝液、水などに再懸濁し、得られた菌体を含む懸濁液に、前記エポキシドのエナンチオマー混合物を添加し反応させる方法、(3) 生菌体ではなく、菌体処理物、例えば、菌体破砕物、アセトン処理、凍結乾燥などの処理を施した処理物と前記エポキシドのエナンチオマー混合物とを反応させる方法、(4) 前記菌体または菌体処理物を、例えば、ポリアクリルアミドゲル法、含硫多糖ゲル法（カラギーナンゲル法など）、アルギン酸ゲル法、寒天ゲル法などの慣用の方法で固定化し、前記エポキシドのエナンチオマー混合物と反応させる方法などが挙げられる。さらに、菌体処理物から取得した酵素も使用できる。前記酵素は、慣用の方法を適宜組み合わせて精製することにより得ることができる。
【００４０】
反応の際、エネルギー源として、グルコース、シュクロース、エタノール、メタノール、パラフィンなどの炭素源を添加すると、目的の光学活性エポキシドの収率が向上する場合がある。
【００４１】
前記エポキシドのエナンチオマー混合物は、そのまま使用してもよく、溶媒を含む溶液、懸濁又は分散液として使用してもよい。前記溶媒としては、水、反応に悪影響を及ぼさない有機溶媒が使用できる。懸濁又は分散液では、界面活性剤などを必要に応じて使用できる。エポキシドのエナンチオマー混合物は、反応当初から反応系に一括して存在させてもよく、反応系に分割して添加してもよい。
【００４２】
菌体量は、目的化合物の光学純度、生成速度が低下しない範囲で適宜選択できる。１つの例において、菌体濃度は、乾燥菌体として、例えば０．１〜１００ｇ／Ｌ、好ましくは１〜５０ｇ／Ｌ程度である。基質である前記エポキシドのエナンチオマー混合物の使用濃度は、特に制限されないが、例えば０．１〜２０重量％、好ましくは０．２〜１０重量％程度である。
【００４３】
反応条件は、目的化合物の生成を損なわない範囲で選択できる。反応系のｐＨは、例えば、ｐＨ３〜９、好ましくはｐＨ４〜８程度、反応温度は、例えば、１０〜６０℃、好ましくは２０〜４０℃程度である。前記反応は、攪拌下または静置下、１〜１２０時間程度行うことができる。反応時間が長いと、目的化合物の光学純度が高くなる場合が多い。
【００４４】
反応によって生成した光学活性エポキシドは、慣用の分離精製手段により採取できる。例えば、反応液から直接又は菌体を分離した後、膜分離、有機溶媒（例えば、ヘキサン、クロロホルム、酢酸エチルなど）による抽出、カラムクロマトグラフィー、減圧濃縮、蒸溜などの通常の精製方法に供することにより、光学活性エポキシドを容易に得ることができる。なお、光学活性エポキシドの光学純度は、例えば、光学異性体分離カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定できる。
【００４５】
【発明の効果】
本発明の製造方法によれば、微生物又はその処理物の作用により、光学活性エポキシドを簡便かつ効率よく製造することができる。また、光学純度の高い光学活性エポキシドを工業的に有利に製造することができる。
【００４６】
【実施例】
以下に、実施例に基いて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。
【００４７】
なお、実施例において、各エポキシドの定量は、ガスクロマトグラフィー（カラム：サーモン３０００、クロモゾルブ  Ｗ、２ｍ、カラム温度１４０℃）により行った。また、光学純度の測定は、反応液をｎ−ヘキサンで抽出し、得られた抽液（ｎ−ヘキサン層）を、光学分割カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー［カラム：ダイセル化学工業（株）製、商品名：キラルセルＯＢ、移動相：ｎ−ヘキサン／イソプロパノール＝９９．９／０．１、波長２５４ｎｍ、流速１ｍｌ／分）に付すことにより行った。
【００４８】
実施例１〜５４
下記組成の菌体調製用培地(1) および(2) を調製した。
【００４９】
［菌体調製用培地(1) ：酵母用］
グルコース                ２．０重量％
酵母エキス                ０．３重量％
麦芽エキス                ０．３重量％
ポリペプトン              ０．５重量％
脱イオン水              ９６．９重量％
（ｐＨ６．０）
［菌体調製用培地(2) ：細菌用］
グルコース                ２．０重量％
酵母エキス                ０．５重量％
肉エキス                  ０．３重量％
ポリペプトン              ０．３重量％
硫酸アンモニウム          ０．２重量％
リン酸二水素一カリウム    ０．１重量％
脱イオン水              ９６．６重量％
（ｐＨ７．０）
上記の菌体調製用培地５ｍｌを内径２１ｍｍφの試験管に入れ、滅菌後、下記の微生物を、酵母については前記培地(1) 、細菌については前記培地(2) にそれぞれ植菌し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。続いて遠心分離により菌体を分離し、生菌体を得た。
【００５０】
実施例１：キャンディダ・パラプシロス（Candida parapsilosis）ＩＦＯ  １０６８
実施例２：キャンディダ・ファマタ（Candida famata）ＩＦＯ  ０８５６
実施例３：ロドスポリデウム・トルロイデス(Rhodosporidium toruloides) ＩＦＯ  １５３５
実施例４：ロドコッカス・ルブロペルチンクタス(Rhodococcus rubropertinctus) ＩＦＭ  ００３３
実施例５：ロドコッカス・コプロフィラス(Rhodococcus coprophilus) ＩＦＭ  ０１４３
実施例６：ロドコッカス・エリスロポリス(Rhodococcus erythropolis)ＪＣＭ  ６８２３
実施例７：セラチア・フィリムシカム(Serratia plymuthicum)ＩＦＯ  ３０５５
実施例８：セラチア・マルセッセンス（Serratia marcescens ）ＡＨＵ  １７２０
実施例９：アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger)  ＡＴＣＣ  ６２７５
実施例１０：ノサルデオイデス・フラバス（Nosardioides flavus ）ＩＦＯ１４３９６
実施例１１：サッカロポリスポラ・ヒラスタ（Saccharopolyspora hirasta ）ＩＦＯ  １３９１９
実施例１２：バチラス・ズブチリス（Bacillus subtilis ）ＩＦＯ  ３１０８
実施例１３：バチラス・セレウス(Bacillus cereus) ＡＨＵ  １３５５
実施例１４：アセトバクター・パステウリアナス（Acetobacter pasteurianus）ＡＴＣＣ  １０２４５
実施例１５：アセトバクター・アセチ・サブスピーシーズ・キシリナム(Acetobacter aceti subsp xylinum) ＩＦＯ  ３２８８
実施例１６：シトロバクター・フレウンディ（Citrobacter freundii）ＡＨＵ  １５３４
実施例１７：エンテロバクター・エアロゲネス（Enterobacter aerogenes）ＡＨＵ  １３４０
実施例１８：エンテロバクター・クロアセー（Enterobacter cloacae）ＩＡＭ  １６１５
実施例１９：エシェリヒア・コリ（Escherichia coli）ＡＨＵ  １５２０
実施例２０：ミクロコッカス・ルテウス（Micrococcus luteus）ＡＨＵ  １４２７
実施例２１：シュードモナス・プチダ（Pseudomonas putida）ＩＦＯ  ３７３８
実施例２２：グルコノバクター・セリナス（Gluconobacter cerinus ）ＩＦＯ  ３２６４
実施例２３：ストレプトアラテイカス・ヒンダスタナス（Streptoallateichus hindustanus）ＩＦＯ  １４０５６
実施例２４：アニキシエラ・レチキュラタ（Anixiella reticulata）ＩＦＯ５８１４
実施例２５：コルチシウム・ロルフシー（Corticium rolfsii ）ＩＦＯ  ４４７６
実施例２６：コリエスポラ・カシジコラ（Coryespora cassjicola ）ＩＦＯ６７２４
実施例２７：ドラトマイセス・ステモニチス（Doratomyces stemonitis）ＩＦＯ  ５８７８
実施例２８：ドレッチスレラ・アベナエ（Drechslera avenae ）ＩＦＯ  ６６３６
実施例２９：ヘルミンソスポリウム・シグモイデウム・バライティ・イレグル（Helminthosporium sigmoideum var irregul ）ＩＦＯ  ５２７３
実施例３０：マクロホミナ・ファセオリ（Macrophomina phaseoli ）ＩＦＯ６６９６
実施例３１：ミクロアスカス・デスモスポラス（Microascus desmosporus）ＩＦＯ  ６７６１
実施例３２：ペリコニア・ビソイデス（Periconia byssoides ）ＩＦＯ  ９４４４
実施例３３：スコプラリオプシス・ブレビカウリス（Scopulariopsis brevicaulis）ＩＦＯ  ４８４３
実施例３４：スタックニィボトリス・チャルタルム（Stacnybotrys chartarum）ＩＦＯ  ５３６９
実施例３５：ウエステルディケラ・ムルチスポラ（Westerdykella multispora）ＩＦＯ  ５８１３
実施例３６：フィアロフォラ・ペドロソイ（Phialophora pedrosoi）ＩＦＯ６０７１
実施例３７：ポドスポラ・カルドナリア（Podospora cardonaria）ＩＦＯ  ３０２９４
実施例３８：チレチオプシス・クレメア（Tilletiopsis cremea ）ＩＦＯ  ６８３１
実施例３９：グロエオフィラム・ストリアタム（Gloeophyllum striatum ）ＩＦＯ  ６５０６
実施例４０：トリコスポロン・クタネウム（Trichosporon cutaneum)ＩＦＯ１１９８
実施例４１：ゲオトリカム・カンディダム(Geotrichum candidum) ＪＣＭ  ７３８９
実施例４２：ゲオトリカム・フラグランス(Geotrichum fragrans) ＪＣＭ  ２４５０
実施例４３：バチラス・スファエリカス(Bacillus sphaericus) ＩＦＯ  ３３４１
実施例４４：コリネバクテリウム・グルタミカム(Corynebacterium glutamicum)ＡＴＣＣ  １３０３２
実施例４５：ミクロコッカス・ルーテウス(Micrococcus luteus)ＩＦＯ  １２９９２
実施例４６：ブレビバクテリウム・リネンス(Brevibacterium linens) ＩＦＯ  １２１４１
実施例４７：シュードモナス・アエルギノサ(Pseudomonas aeruginosa)ＩＦＯ  ３４５２
実施例４８：セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens) ＩＡＭ  １１０５
実施例４９：アスペルギルス・オリゼー・バライティ・マグナスポラス（Aspergillus oryzae var magnasporus) ＩＡＭ  ２７５０
実施例５０：アスペルギルス・ソジャー（Aspergillus sojae)ＩＡＭ  ２６３１
実施例５１：グリソマイセス・ルツゲルセンシス（Glysomyces rutgersensis ）ＩＦＯ  １４４８８
実施例５２：サッカロスリックス・アウストラリエンシス（Saccharothrix australiensis ）ＩＦＯ  １４４４４
実施例５３：ストレプトマイセス・アルボスポレウス（Streptomyces albosporeus）ＨＵＴ  ６１３０
実施例５４：ペリキュラリア・フィラメントサ（Pellicularia filamentosa）ＩＦＯ  ６２５４
次に、内径２１ｍｍφの試験管に、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．０）２．５ｍｌを入れ、これに上記で得られた生菌体（乾燥菌体換算で約１０〜３０ｍｇ／ｍｌ）を懸濁した後、３−クロロスチレンオキシドのラセミ体１２．５μｌを添加し、３０℃で４８時間往復振盪して反応させた。
【００５１】
反応終了後、反応液１ｍｌにｎ−ヘキサン２ｍｌを添加して抽出を行い、ｎ−ヘキサン層をガスクロマトグラフィーに付し、残存する３−クロロスチレンオキシドを定量した。また、前記ｎ−ヘキサン層を高速液体クロマトグラフィーに付して、得られた光学活性３−クロロスチレンオキシドの絶対配置及び光学純度を測定した。結果を表１〜３に示す。なお、表中、「量」は、反応液中に含まれる光学活性３−クロロスチレンオキシドの量（ｍｇ／ｍｌ）を示す。
【００５２】
【表１】
0003696629.tif 000003
【００５３】
【表２】
0003696629.tif 000004
【００５４】
【表３】
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実施例５５〜７２
３−クロロスチレンオキシドに代えて、以下の反応基質（何れもラセミ体）を用いると共に、下記の微生物Ａ、ＢまたはＣを用いる以外は、実施例１〜５４と同様の操作で反応を行った。
【００５５】
［反応基質］
実施例５５〜５７：グリシドール
実施例５８〜６０：アリルグリシジルエーテル
実施例６１〜６３：３，４−エポキシ−１−ブテン
実施例６４〜６６：１，２−エポキシヘキサン
実施例６７〜６９：２，３−エポキシプロピルベンゼン
実施例７０〜７２：スチレンオキシド
［微生物］
Ａ：アスペルギルス・オリゼー・バライティ・マグナスポラス（Aspergillu        s oryzea var magnasporus) ＩＡＭ  ２７５０
Ｂ：アスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger)  ＡＴＣＣ  ６２７５
Ｃ：ロドコッカス・ルブロペルチンクタス(Rhodococcus rubropertinctus) ＩＦＭ  ００３３
反応終了後、実施例１〜５４と同様にして、各エポキシドの定量および光学活性エポキシドの絶対配置及び光学純度の測定を行った。結果を表４に示す。なお、表中、「量」は、反応液中に含まれる各光学活性エポキシドの量（ｍｇ／ｍｌ）を示す。
【００５６】
【表４】
0003696629.tif 000006