(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
プロテイン混合物の部分水解物であって、該プロテイン混合物はホエープロテイン及びカゼインよりなり、該部分水解物は加水分解の程度が４％から１０％の間にあり、平均分子量が２，０００、最大分子量が１９，０００であり、且つこれらのモル質量の成分として下記の分布で分散しているペプチドからなることを特徴とするプロテイン混合物の部分水解物。
モル質量（ｇ／モル） 分子量分布（％）
ＭＭ≧５０００ ８．２
５０００＞ＭＭ≧３０００ １４．５
３０００＞ＭＭ≧２０００ １５．８
２０００＞ＭＭ≧１０００ ２６．２
１０００＞ＭＭ≧５００ １７．８
５００＞ＭＭ １７．５
【請求項２】
酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）による検定で、対応する非加水分解プロテイン混合物と比較してその抗原性が少なくとも８０％低下した請求項１記載の部分水解物。
【請求項３】
酵素結合免疫吸着検定法による検定で、対応する非加水分解プロテイン混合物と比較してその抗原性が少なくとも８５％低下した請求項１記載の部分水解物。
【請求項４】
酵素結合免疫吸着検定法による検定で、対応する非加水分解プロテイン混合物と比較してその抗原性が少なくとも９０％低下した請求項１記載の部分水解物。
【請求項５】
酵素結合免疫吸着検定法による検定で、対応する非加水分解プロテイン混合物と比較してその抗原性が少なくとも９５％低下した請求項１記載の部分水解物。
【請求項６】
該プロテイン混合物が、ホエープロテインを６０から８０重量％及びカゼインを４０から２０重量％を含有する請求項１記載の部分水解物。
【請求項７】
該プロテイン混合物が、ホエープロテインを４０から６０重量％及びカゼインを６０から４０重量％を含有する請求項１記載の部分水解物。
【請求項８】
ホエープロテイン及びカゼインの混合物を、水性けん濁液中少なくと１８００米国局方トリプシン単位／ｍｇ及び少なくとも３５０米国局方キモトリプシン単位／ｍｇよりなる酵素混合物と、加水分解の程度が４％から１０％の間になるような条件で接触させることからなプロテイン混合物の部分水解物を製造する方法であり、該部分水解物が２，０００の平均分子量、１９，０００の最大分子量をもち、且つこれらのモル質量として下記の分布で分散しているペプチドからなることを特徴とするプロテイン混合物の部分水解物を製造する方法。
モル質量（ｇ／モル） 分子量分布（％）
ＭＭ≧５０００ ８．２
５０００＞ＭＭ≧３０００ １４．５
３０００＞ＭＭ≧２０００ １５．８
２０００＞ＭＭ≧１０００ ２６．２
１０００＞ＭＭ≧５００ １７．８
５００＞ＭＭ １７．５
【請求項９】
トリプシンのキモトリプシンに対する米国局方単位での比率が１．５から１０である請求項８記載の方法。
【請求項１０】
酵素混合物の量が混合物中のプロテインの重量を基準として０．４％から１．２％の間である請求項８記載の方法。
【請求項１１】
反応温度が３０℃から５０℃、ｐＨが６．５から８．０、反応時間が２時間から６時間で実施される請求項８記載の方法。
【請求項１２】
プロテイン混合物を７５℃から８５℃で１０分から３０分加熱することによりなる前処理を含む請求項８記載の方法。
【請求項１３】
酵素混合物を不活性化する更なる工程が続く請求項８記載の方法。
【請求項１４】
８５℃で１０分、又は１３０℃で４５秒加熱することによって酵素混合物を不活性化する請求項８記載の方法。
【請求項１５】
蒸発又は噴射乾燥で水を除去する更なる工程が続く請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
プロテイン混合物の部分水解物を含有する乳児用調合剤であって、該プロテイン混合物がホエープロテイン及びカゼインを含有し、該水解物は加水分解の程度が４％から１０％の間であり、平均分子量が２，０００、最大分子量が１９，０００であり、且つこれらのモル質量の成分として下記の分布で分散しているペプチドからなることを特徴とする乳児用調合剤。
モル質量（ｇ／モル） 分子量分布（％）
ＭＭ≧５０００ ８．２
５０００＞ＭＭ≧３０００ １４．５
３０００＞ＭＭ≧２０００ １５．８
２０００＞ＭＭ≧１０００ ２６．２
１０００＞ＭＭ≧５００ １７．８
５００＞ＭＭ １７．５
【請求項１７】
無菌的に滅菌された請求項１６記載の乳児用調合剤。
【請求項１８】
レトルト滅菌された請求項１６記載の乳児用調合剤。
【請求項１９】
粉末形態である請求項１６記載の乳児用調合剤。
【請求項２０】
酵素結合免疫吸着検定法による検定で、対応した非加水分解プロテイン混合物に対して抗原性が少なくとも８０％低下した請求項１６記載の乳児用調合剤。
【請求項２１】
部分水解したホエープロテインによって調製された対応する乳児用調合剤と比較してその味覚が改善された請求項１６記載の乳児用調合剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、ミルクプロテイン部分水解物及び該部分水解物を含んだ抗原性の減少した乳児用調合乳の酵素的製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
多くの乳児用調合乳は、ウシのミルクに由来するプロテインを基本としている。実際にミルクプロテインに対してアレルギーである乳児には、プロテインの多くが加水分解され、加水分解されていないプロテインが最少量である乳児用調合乳が必要である。抗原性物質の減少した乳児用調合乳は、アレルギーでない乳児に対して臨床的なアレルギーの症状を引き起こす感作を遅延したり又は防ぐことが出来る予防の利点を有するものである。ウシミルクプロテインを基本とした調合乳の潜在的なアレルギー性は、プロテインを加水分解することによって減少させることができる。
【０００３】
ヒトのミルクの組成に理想的に合わせる為には、乳児用調合乳中のウシミルクプロテインは、ホエープロテイン及びカゼインの両方を適宜な比率で含んでいなければならない。未処理のミルクプロテインを基本とした多くの製品は、望ましいカゼインとホエープロテインとの比でよく調和しているが、市販の殆どの部分水解した調合乳は１００％ホエープロテインを基本としている。
【０００４】
文献に見られる部分水解物の製造法は、通常多段階の加水分解工程と、加水分解した後の酵素及び／又は加水分解されていないプロテインを分離する為の物理的な分離操作が含まれている。また大抵の工程は加水分解中一定のｐＨを保つことが含まれている。他の工程を使用しない限り生成した加水分解物は通常高濃度で塩が存在する。この塩は乳児用調合乳にとっては困った問題となるのでこれらのミネラルの濃度は適宜なレベルに調整される。
【０００５】
米国特許第５，０３９，５３２号に望ましい性質を持った水解物にする二つの工程の酵素加水分解が開示されている。該明細書には又超高温（ＵＨＴ）滅菌された乳児用調合乳の製造法が開示されている。米国特許第４，２９３，５７１号及び米国特許第４，９８１，７０４号の両者には、膵臓の酵素を使用して調製した部分水解物を開示している。この工程には加水分解されなかったプロテイン及び酵素を分離する水解後の膜処理工程が含まれている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
プロテイン水解物の通常の性質、特にカゼインを含んだ水解物の通常の性質は、疎水性の末端基を有するペプチドが遊離することによると考えられる苦い味がするようになる。更にまた水解が進むにつれてプロテインの乳化する性質が通常減少する。特許第１１６０４５８号明細書には、ミルクプロテイン水解物（５−２０％加水分解されている）が開示されており、このものは界面活性体であり、アイスクリームやホイッピングクリームのような食品中で乳化活性を示す。しかし滅菌工程を経た水性乳幼児用調合剤のような製品ではプロテイン水解物は更に変性し乳化機能が低下する。このことは製品中で乳清とクリーム層に分離した生成物が生じることで明らかである。ＵＨＴ滅菌、即ち高温瞬時滅菌の条件は、不利益な過熱を防ぐ便宜な加熱滅菌法として通常のレトルト滅菌法よりは好ましい。
【０００７】
このように、抗原性が低下したヒトミルクの成分と同様な組成のカゼイン対ホエープロテインの成分比を有し、改善された味覚及び／又は改善された乳化活性を有するプロテイン部分水解物を得ることは、非常に好ましいこととなるであろう。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明は、プロテイン混合物の部分水解物であって、該プロテイン混合物はホエープロテイン及びカゼインよりなり、該水解物は加水分解の程度が４％から１０％の間にあり、平均分子量が２，０００、最大分子量が１９，０００であり、これらのモル質量の成分として下記の分布で分散しているペプチドからなることを特徴とするプロテイン混合物の部分水解物を提供する。また、本発明は該水解物を含有する乳児用調合剤を提供する。
モル質量（ｇ／モル） 分子量分布（％）
ＭＭ≧５０００ ８．２
５０００＞ＭＭ≧３０００ １４．５
３０００＞ＭＭ≧２０００ １５．８
２０００＞ＭＭ≧１０００ ２６．２
１０００＞ＭＭ≧５００ １７．８
５００＞ＭＭ １７．５
【０００９】
本発明は又、ホエープロテイン及びカゼインの混合物を水性懸濁液中少なくとも１８００米国局方トリプシン単位／ｍｇ及び少なくとも３５０米国局方キモトリプシン単位／ｍｇを含む酵素混合物とを、水解物が４％から１０％の間になるような条件下で接触させることを含む製造法に関する。
【００１０】
詳細な説明：
本発明は抗原性を減少させた栄養食品の製造に適宜であるホエープロテインとカゼインの混合物の部分水解物、及びその製造法を提供する。本発明の部分水解物は、先行技術のプロテイン水解物と比較するとヒトミルクのホエープロテイン／カゼインプロテインの比により近いものである。これに加えて本発明の部分水解物は好ましいことに、改善された味、及び改善された乳化活性を有している。
【００１１】
本発明に従えば、該製造法は出発物質として、ヒトミルクに見られると同様な比率であるホエープロテインとカゼインより成る混合物を出発物質にして行ってもよい。好ましくはプロテイン混合物は、約６０％から約８０％のホエープロテイン及び約４０％から約２０％のカゼインを含有する。更に好ましくは約４０％から約６０％のホエープロテイン及び約６０％から約４０％のカゼインを含有する。カゼイン及びホエープロテインの百分率は重量を基礎にしたものである。ホエープロテインはチーズ製造工程より得られたものであってもよい。特に甘いホエープロテイン、例えばレンネットによるカゼインの共凝固物に由来するものであってもよい。ホエープロテインは限外濾過（ＵＦホエープロテイン）によって得られる約３５−８０％範囲のプロテイン濃縮物で使用する事が出来る。このホエープロテインは、所望ならばイオン交換樹脂及び／又は電気透析（ＥＤ  ホエープロテイン）によって脱塩されてもよい。カゼインは、酸カゼイン又は固形脱脂乳（ＮＦＤＭ）のいずれであってもよい。ホエープロテイン及びカゼインは溶液又は粉末のいずれであってもよい。本発明の製造法の為に、プロテインは希釈されるか又は再構築されて１リットルにつき約１０ｇから６０ｇのプロテイン濃度、好ましくは１リットルにつき４０ｇから６０ｇのプロテイン濃度として使用される。
【００１２】
本発明の製造法にはトリプシン及びキモトリプシンの混合物、その酵素混合物の特性は相補性である、を使用する。酵素混合物は好ましくは、カルボキシペプチダーゼＡ及びＢ、或いはロイシンアミノペプチダーゼのような他のプロテアーゼは全く含まれていないものである。混合物中のトリプシンは、８００米国局方単位／ｍｇ以上であり、好ましくは１０００米国局方単位／ｍｇ以上、さらに好ましくは１８００米国局方単位／ｍｇ以上である。１米国局方トリプシン単位は、５分間の検定時間、ｐＨ７．６、反応温度２５±０．１℃及び基質としてＮ−ベンゾイル−Ｌ−アルギニンエチルエステル塩酸塩（ＢＡＥＥ）の条件下で、１分に付き吸光係数を０．００３変化させる活性である。
【００１３】
混合物中のキモトリプシンは、１５０米国局方単位／ｍｇ以上であり、好ましくは２００米国局方単位／ｍｇ以上であり、更に好ましくは３５０米国局方単位／ｍｇ以上である。１米国局方キモトリプシン単位は、５分間の検定時間、ｐＨ７．６、反応温度２５±０．１℃及び基質としてＮ−アセチル−Ｌ−チロシンエチルエステル（ＡＴＥＥ）の条件下で、１分に付き吸光係数を０．００７５変化させる活性である。
【００１４】
本発明に使用するに適宜な酵素の供給源は、ノボノルディスク生化学工業社（Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋ  Ｂｉｏｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｓ  Ｉｎｃ．）、ダンブリ市、コネチカット州、アメリカ合衆国、（特に、ＰＥＭ  ２５００Ｓ）、エンザイムディブロップメント社（Ｅｎｚｙｍｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｃｏｒｐ．）、ニューヨーク市、ニューヨーク州、アメリカ合衆国、インタージェン（Ｉｎｔｅｒｇｅｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、パーチェイス市、ニューヨーク州、アメリカ合衆国、及びサイエンティフィックプロテインラボ（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｌａｂｓ．）、ワナキー市、ウイスコンシン州、アメリカ合衆国などである。
【００１５】
望ましい性質をもった水解物を得るためにはトリプシン及びキモトリプシンの混合物が、トリプシン対キモトリプシンの比が上記の米国局方単位で約１．３から約１８、好ましくは約１．５から約１０、更に好ましくは約４から約６であることが概して必要なことである。本発明の目的の為に酵素混合物は、重量で、加水分解される全プロテインの約０．４％から約１．２％，好ましくは約０．６％から約０．８％のレベルで概して使用される。
【００１６】
加水分解前の任意の最初の工程は、血清アルブミン（ＢＳＡ）及びイムノグロブリン（特にＩｇＧ）であるホエープロテインフラクションの変性を確かなものにするプロテイン溶液の前加熱である。この工程は通常免疫化学的に検定（後述）すると残余の抗原性を減少させる結果となる。前処理工程は、概して約７５℃から約８５℃で約１０分から約３０分加熱することによって達成される。加水分解そのものは概して反応温度は約３０℃から約５０℃で、約２時間から約６時間行われる。より低い温度限界は、より上限の時間限界に対応し、またその逆も同じである。加水分解中ｐＨの維持は通常必要としない、というのはｐＨを特に調整しなくても加水分解反応は通常ｐＨ６．５−６．８を保って進行する。そのｐＨは、調整してもよいし、しなくてもよいが、約６．５から８．０の範囲内に保たなければならない。
【００１７】
加水分解条件に関係なく水解物は、好ましくは更に酵素不活化反応の工程をおこなう。この酵素不活化工程は、約８５℃で約１０分間加熱することを含む加熱処理であってもよい。別法として、酵素は超高温（例えば約１３０℃で約４５秒）で不活化してもよく、その後、生成物は溶液状態で保存してもよい。水解物は蒸発又は噴射乾燥によって濃縮してもよい。
【００１８】
加水分解の程度を監視するために、米国薬局方ホルモル滴定法（ｆｏｒｍｏｌｔｉｔｒａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）が用いられ、この方法ではペプチド結合の加水分解による遊離のアミノ基の増加を水酸化ナトリウムで滴定することにより評定される。加水分解の程度は４％から１０％の間であり、好ましくは５％から７％の間である。本発明の特徴は、加水分解が先行技術よりもより低いことであり、それでいて抗原性が有意に低下したものが得られることである。
【００１９】
加水分解されたペプチドの分子量の分布を決定する為に分子分別クロマトグラフ法（Ｓｉｚｅ  ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ＳＥＣ）が使用される。水解物中のペプチドは、ＴＳＫ  Ｇ−２０００  ＳＷＸＬ  カラムを使用し、３７℃を保ち、ＫＣｌ中のトリフルオロ酢酸及びアセトニトリルで溶出することにより分子量に応じて分離される。２１４ｎｍの吸光によりＵＶ検出器で保持時間を記録し、既知の分子量の標準プロテイン及びペプチドのそれと比較する。本発明の部分水解物は、望ましくは平均分子量は２，０００であり、最高分子量は１９，０００であり、そしてモル質量の成分として以下の分布でペプチドを含有している：
【００２０】
【表２】
0003650420.tif 000002
【００２１】
本発明の水解物は、望ましくは検出可能な未変化のミルクプロテインが存在しないものである。水解物中未変化のミルクプロテインが存在しないことは、ドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）で判明する。ＳＤＳ−ＰＡＧＥは、４％から２０％のトリス−グリシングラジエントゲルで行われる。１５μｇの加水分解されたプロテインはＳＤＳで処理され、２−メルカプトエタノールで還元され、加熱されてそれぞれのレーンに設定される。電気泳動分離の完了時そのゲルは、加水分解されないペプチドを検出する為に銀で着色させる。５μｇの加水分解されていないプロテインを対照物質として使用し、同じゲル中で直接比較を行う。
【００２２】
水解物の残余の抗原性は、酵素結合免疫吸着検定法（ｅｎｚｙｍｅ−ｌｉｎｋｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ  ａｓｓａｙ：ＥＬＩＳＡ）を用いて決定される。水解されていないミルクプロテインは検定によって確立された直線関係を示す検量線領域以内の濃度で固相上に固定される。水解物も同様にして固定される。これに続いてウサギ抗ウシミルクプロテインとの連続したインキュベーション及びウサギＩｇＧと酵素結合反応させることにより、抗原として認識されるプロテイン及びペプチドの存在を明らかにする。水解物について得られた結果は、水解されていないプロテインについて得られたものを基本にして比較される。それから、水解物の抗原性の低下率が計算される。本発明による水解物は少なくとも約８０％の抗原性の低下を示し、好ましくは少なくとも約８５％、更に好ましくは少なくとも９０％、最も好ましくは少なくとも約９５％の低下を示す。
【００２３】
本発明による水解物は乳児用調合乳として使用するのに好適であり、食品工業で通常使用されている製造設備で生産される。このような調合乳の抗原性の低下は、これに対応した非水解プロテインと比較して上記のＥＬＩＳＡ法に依って決定される。
【００２４】
本発明の水解物によって調製される本発明の乳児用調合乳は、対応した非水解プロテイン混合物と比較して少なくとも約８０％、好ましくは少なくとも約８５％、更に好ましくは少なくとも約９０％、最も好ましくは少なくとも約９５％抗原性が低下している。本発明の乳児用調合乳は、粉末、濃縮された溶液、又はそのまま使用出来る溶液であってもよい。
【００２５】
更に本発明の乳児用調合乳は、部分的に水解されたホエープロテインを使用して調製した、対応した調合乳と比較して改善された味覚を有している。
【００２６】
本発明による乳児用調合乳は、ヒト乳児の栄養物摂取の要求によく適合するように考案された有効成分を含有している。而して、部分的プロテイン水解物に加えて典型的な乳児用調合乳は、脂質源、炭水化物源、及びビタミン類及びミネラル類のような他の栄養物をも含有するであろう。典型的な例としては、動物油、植物油、デンプン、蔗糖、乳糖、及び／又は固形コーンシロップが上記の栄養物の一部又は全部に対して補足するために調合乳に加えられるであろう。
【００２７】
本発明の乳児用調合乳は栄養的に完全であることが好ましい。“栄養的に完全”であると言うことは、その組成が長期間に亘って健康にヒトの生命を維持する適宜な栄養物を含有する事を意味している。
【００２８】
全調合乳の１００ｋｃａｌあたりの部分プロテイン水解物の量は、典型的には約１．８ｇから約４．５ｇであり；全調合乳１００ｋｃａｌあたりの脂質源の量は、典型的には約３．３ｇから約６ｇであり；全調合乳１００ｋｃａｌあたりの炭水化物源の量は、典型的には約７ｇから約１４ｇである。
【００２９】
乳児用調合乳中の炭水化物源は、当業者によってよく知られた、乳児用調合乳に使用するに便宜であるいかなる適宜な炭水化物であってもよい。炭水化物源の典型的な例としては、蔗糖、果糖、ぶどう糖、麦芽デキストリン、乳糖、コーンシロップ、固形コーンシロップ、固形ライスシロップ、ライスデンプン、改良コーンスターチ、改良タピオカスターチ、米粉、大豆粉などが包含される。
【００３０】
乳児用調合乳中の脂質源は、乳児用調合乳に使用するに適宜である当業者によく知られた脂質又は油脂であればいずれであってもよい。典型的な脂質源としては、乳脂肪、ベニバナ油、卵黄脂質、オリーブ油、ココナッツ油、ヤシ油、ヤシ仁油、大豆油、ヒマワリ油、魚油及び、ヤシ油オレインや中級鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）のようなものから誘導されたフラクション、及び脂肪酸のエステルを包含し、その脂肪酸としては、例えばアラキドン酸、リノレイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキソン酸、エイコサペンタン酸、リノール酸、オレイン酸、ラウリン酸、カプリン酸、カプリル酸、カプロン酸である。種々の油脂の高級オレインは、例えばヒマワリ油高級オレイン、ベニバナ油高級オレインのようなものがここでは有用であると考えられる。中級鎖のトリグリセリド類は、通常の油脂類に典型的に見られるよりはより高濃度のカプリル酸及びカプリン酸を含有する、例えば、含有する全脂肪酸の約４分の３がカプリル酸であり、又４分の１がカプリン酸である。
【００３１】
本発明に依る部分プロテイン水解物を含有する乳児用調合乳は、栄養学的にバランスのとれたアミノ酸含有物にするために種々の遊離アミノ酸を補足してもよい。そのような遊離アミノ酸の例の中には、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−シスチン、Ｌ−チロシン及びＬ−アルギニンが包含される。
【００３２】
栄養的に完全な組成は、日々の食事に必要欠くべからざるものと考えられる全てのビタミン類、ミネラル類を含有し、そしてこれらは栄養的に有意な量で存在しなければならない。当業者は、正常な身体機能に対して必要なものとして知られているビタミン類及びミネラル類に対して最少の必要量が確立されていることを理解すべきである。医師もまた、そのような組成物の製造工程及び貯蔵の間に失われる活性を補償する為に加えるビタミン及びミネラルの有効成分の適宜な追加量を考慮すべきである。
【００３３】
乳児用調合乳に使用出来る適宜なビタミン又はミネラルを選択するには、製造工程及び保存についての適合性に関して化合物の化学的性質を考慮しなければならない。
【００３４】
本発明の組成中のミネラル類、ビタミン類、及びその他の随意に加えた栄養物の例としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビタミンＣ、葉酸、チアミン、イノシトール、リボフラビン、ナイアシン、ビオチン、パントテン酸、コリン、カルシウム、リン、ヨード、鉄、マグネシウム、銅、亜鉛、マンガン、塩素イオン、カリウム、ナトリウム、セレニウム、クロム、モリブデン、タウリン、及びＬ−カルニチンが包含される。ミネラル類は通常塩の形で加えられる。適合性及び安定性についての考慮に加えて、特定のミネラル類や他のビタミン類の使用量は、使用対象の乳児集団に依存することもありまちまちであろう。
【００３５】
本発明の乳児用調合乳はまた典型的には乳化剤及び大豆レクチン、カラゲーニンなどのような安定化剤を含有する。
【００３６】
本発明の乳児用調合乳は、ラクトフェリン、ヌクレオチド類、ヌクレオシド類のような有益な効果をもたらすであろう他の物質を随意含有してもよい。
【００３７】
本発明の液体乳児用調合乳（使用の用意のできた）の浸透圧は、典型的には約１００から約５００ｍＯｓｍ／ｋｇ  Ｈ２Ｏであり、より典型的には約２００から約４００ｍＯｓｍ／ｋｇ  Ｈ２Ｏである。
【００３８】
本発明の乳児用調合乳は、所望ならば、当業者によく知られた技術、例えばオートクレイブ滅菌又はレトルト滅菌等のような熱処理によって滅菌する事が出来る。
【００３９】
本発明の乳児用調合乳は、栄養製品を保存するのに使用されるこの分野ではよく知られたいかなるタイプの容器、例えばガラス容器、厚紙容器、プラスチック容器、コーティングした金属缶等の様な容器中に充填する事が出来る。
【００４０】
以下の実施例は本発明を説明するものであってその範囲を限定するものと解すべきではない。
【００４１】
【実施例】
実施例１：  プロテインは４−６％プロテインの濃度で５０℃で可溶化された。これは、使用するプロテインのタイプにより１０−２５％の固体に対応した。前加熱処理は７５℃で３０分保つことであった。混合物は再び５０℃に冷却し、酵素混合物を加えた。加水分解は、温度３０℃−５０℃で２時間−６時間行った。加水分解の時間と温度は相関関係があった。より低い温度の限界はよりながい時間の限界に対応しその逆も同じであった。混合物のｐＨは加水分解反応中調節してもよいし調節しなくても良かった。酵素を不活化する為に水解物は１３０℃、４５分間スチームインジェクションを行った。この高温工程は、加熱前処理及び酵素加水分解とともに抗原性の低下した水解物を生成した。ｐＨは、熱処理の間の熱凝固を防ぐ為に６．６に水酸化カリで調節した。
【００４２】
実施例２：  実施例１と同じ操作を行った。但し８５℃１０分間の前熱処理を行う前にＫＯＨでｐＨを７．５に調節した。酵素を不活化する為に部分水解物は８５℃で１０分加熱した。実施例１のように次の工程の前にｐＨを６．６に調節した。
実施例１及び２に従って、水解物の製造法を説明する為に色々変化させた工程を以下の表に示す。全ての場合、ホエープロテイン：カゼインの重量比は８０：２０であった。
【００４３】
【表３】
0003650420.tif 000003
【００４４】
実施例３：  溶液乳児用調合乳を調製する為に実施例１で調製した部分水解物に前もって溶解した乳糖とミネラルを加えた。混合物はプレート型熱交換器で７０℃に加熱した。続いてヤシ油オレイン、ヒマワリ油、ココナッツ油、大豆油、レシチン、モノー及びジグリセリド、及び脂溶性ビタミンよりなる脂質を加えた。これらの油脂は、混合物に加える前に溶解した。７５℃に前加熱した後、混合物は蒸気を直接導入して１４０℃で４５秒加熱し、そしてプレート型冷却器で７０℃に冷却した。それから続いて二段階で均一化した。まず最初に１７５バールで、次に３５バールで行った。それから混合物は５−７℃にプレート型冷却器で冷却し、中間体貯蔵タンクに貯蔵し、そこで水溶性ビタミンを加えた。この工程よりのバルク生成物は３０分以上の熱凝固時間を持っていた。この生成物を通常のレトルト形式で滅菌した。
この溶液は以下のような組成であった：
ペプチド類            １．６５％
脂質                  ３．６０％
炭水化物類            ６．５２％
ミネラル類            ０．４８％
ビタミン類            痕跡
【００４５】
実施例４：  溶液乳児用調合乳調製の別法。工程は実施例３と同じ工程であり、部分水解物は実施例２より得られたものであった。但し直接蒸気導入の温度は１２１℃であり、得られた溶液は１４５℃で４．９７秒滅菌した。そして滅菌的に容器に充填した。組成は実施例３と同じであった。
【００４６】
実施例５：  乳児用調合乳粉末の調製。実施例１又は２のいずれかで得られた部分水解物を用い、実施例３と同じ工程で行った。但し生成物は１２５バール及び５０バールの二段階の均一化工程の前に蒸気導入加熱は行はなかった。粉末ベースは噴射乾燥の前に蒸発乾燥して５０％固体とした。
この粉末は以下のような組成であった。
ペプチド類          １３．１％
脂質                ２８．６％
炭水化物類          ５１．８％
ミネラル類            ３．８％
ビタミン類            ０．２％
水分                  ２．５％
実施例１から５の工程で調製された乳児用調合乳は以下の表に示されているように抗原性の低下を示した。
【００４７】
【表４】
0003650420.tif 000004
【００４８】
実施例６：  ４０名グループの消費者回答者が、実施例４記載の本発明による調合乳を評価し、又プロテイン組成が部分水解された１００％ホエープロテインである以外は同じ有効成分を含有する市販の調合乳（商品名：グッドスタート、鉄強化乳児用調合乳；カーネーション社製、グレンダール、カリフォルニア州、アメリカ合衆国）と比較した。試料は室温で提供され、回答者（ｐａｎｅｌ）によって評価された。苦み、後味、口当たりのような特定の、感覚的な特質を、全般的な風味採点法と同じようにして９点趣向採点法（９点＝非常に好む、１点＝非常に嫌い）を用いて比較した。その結果は以下の表に示されている。
【００４９】
【表５】
0003650420.tif 000005
【００５０】
本発明による調合乳はグッドスタートよりも有意に好まれた。回答者の批評は、グッドスタートの苦みが、本発明の調合乳がグッドスタートを凌いで好まれた第一の理由であることを示唆した。
【００５１】
本発明は、その好ましい具体例を特定な参照として記述してきたが、その変形や修正は、本発明の精神及び範囲内で有効であることが理解されるであろう。