(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
幼児の母親、または近親者、もしくは幼児と身体的に親密な接触をすると予期される人から採取された血液、唾液、歯垢、大便、もしくは排気された空気のサンプル中のヘリコバクテルピロリ感染の決定によって、幼児のSIDSのかかりやすさを識別する方法。
【請求項２】
幼児の母親、親類もしくは上記の他人から採られた血液サンプル中の、ヘリコバクテルピロリに対するＩgA、IgGまたはIgM型の抗体の決定によって、上記の感染が検出されることを特徴とする、請求項１記載の方法。
【請求項３】
試験的投与量の尿素の経口投与により、幼児の母親、親類もしくは該他人から排気された空気中の尿素から形成される二酸化炭素を決定することによって、上記の感染が検出されることを特徴とする、請求項１記載の方法。
【請求項４】
尿素の試験的投与量が13Cで標識された尿素を含むことを特徴とする、請求項３記載の方法。
【発明の詳細な説明】
発明の技術分野
本発明は突然死（突然死症候群;SIDS）の危険性が増加した幼児の識別と、SIDSの予防方法及び手段に関する。
発明の背景
幼児突然死症候群（SIDS）は、幼児に短い期間内に起こり、その範囲は、生後３カ月で最大となり、生後約２年を越えるまで続く。それは比較的に一般的なことである（米国では年間7000人の死者がいる）。たいてい、それは消極的に定義される：“病歴から予期せぬ、また徹底的な死体解剖により十分な死亡の原因が示されない、あらゆる幼児または小さな子供の突然死”。
SIDSは、最大の原因の体系を有すると信じられ、様々な理論が出された。SIDSの一つの潜在的な原因は、排気の突然の停止である（Thach B T,調査のための無呼吸（apnea;for a survey）;Saunders N ＆ Sullivan C,Eds.,“無呼吸および幼児突然死症候群（Apnea and the Sudden Infant Death Syndrome）",“健康と病気（Health and Diseasa）",Vol.7/I,の“肺の生物学（Lung Biology）",Marcel Dekker,New York 1994,p.649−671を参照）。無呼吸がすぐに発見され、且つ発見後すぐに適切な処置がとられるなら、ほとんどの場合、幼児の無呼吸という生命の危機の出来事は、刺激を与えるかまたは人工呼吸によってなんとかすることができる。このように危険な状態にある幼児の綿密な監視が必要とされる。
SIDSの疫学的研究で認識されたいくつかの因子は、幼児が伝染病、特に上部呼吸管の伝染病にかかりやすくなっていることに関係する。幼児が最も高い危険にさらされている期間は、だいたい幼児の体内の母親の抗体が減少している期間と一致し、その期間、その未熟な免疫系は最大限の代償作用を提供できない。SIDSに関連する死亡の大部分は２歳より下の年齢で起きる。母乳で育てられた幼児は、伝染病に対しより無防備でないだけでなく、SIDSにもかかりにくい。SIDSで死亡した多くの乳児は、死亡の少し前に軽い胃腸管の伝染病にかかっていた；彼らの十二指腸の粘膜のIgA反応が、かなり増加しているのが発見された（Stoltenberg L et al.,Pediatr.Res.32（1992）372−375）。
SIDSの無呼吸仮説では、死亡の原因は窒息と考えられている。幼児が突然呼吸を止めるのである。これは、例えば、急性上部気道障害、胃食道逆流もしくは心肺制御異常により起こり得る。
SIDSに陥りやすい幼児の識別手段が欠けている。SIDSの危険にさらされていると識別されている幼児の綿密な監視は、死亡率をかなり減少させると期待される。幼児のSIDSを予防する薬学的手段が欠けている。それらの実行可能な使用法は、危険にさらされている幼児の識別を必要とする。
発明の目的
本発明の目的は、SIDSにかかりやすい幼児の識別手段を提供することである。
本発明のもう一つの目的は、SIDSの予防のための薬学的手段とそれらの使用法とを提供することである。
発明の概要
本発明は、SIDSの発生率が、母親のヘリコバクテルピロリ（H.pyloriに対するIgG抗体が陽性である幼児においてかなり増加しているという洞察、及び、母親がヘリコバクテルピロリを有する伝染病をその子供に伝染させているかもしれないという洞察に基づいている。それは、少しは、ヘリコバクテルピロリの伝染が、家族の他の一員、もしくは幼児と頻繁に且つ身体的に親密な接触をしている人々によって引き起こされるかもしれないという洞察にもまた基づいている。さらに、本発明は、幼児のSIDSに対する予防的方法として、子供よりもむしろ、ヘリコバクテルピロリに感染している母親を取り扱うべきとする洞察に基づいている；同一の概念が、家族の他の一員もしくは幼児と親密な接触をしている人々にもあてはまる。しかし、幼児がいったんヘリコバクテルピロリに感染してしまえば、幼児を取り扱わない理由はない。いったんこれらの洞察が得られれば、予防的方法が、できるだけ早く、好ましくは分娩前にとられるべきであるということは明らかである。感染した人々の少数だけしか、おそらく15％から20％だけしか、その生涯の内に潰瘍を生じないということを、本文で指摘するべきである。このように、ヘリコバクテルピロリに感染した人々の大部分がその感染に気づかない。
すでに上述したように、SIDSによる死亡が有り得るひとつの原因は窒息である。このような窒息は、例えば、ヘリコバクテルピロリによる感染により誘発されるかもしれない胃食道の逆流によって引き起こされるかもしれない。
本発明により、SIDSにかなりかかりやすい幼児の識別方法が提供される。それは、幼児の母親、または幼児の家族の一員、もしくは幼児と身体的に親密な接触をすると予想される人のヘリコバクテルピロリ感染の決定を含む。その結果、このような危険は胎児にもすでに存在し、該感染の決定は好ましくは分娩前に実行されるべきであり、それにより、母親、もしくは幼児と身体的に親密な接触をすると予想される他の人々に有り得るヘリコバクテルピロリ感染を、分娩前に治療することが可能となる。これにより、伝染病の幼児への伝染の危険は最小化される。SIDSの危険にさらされている幼児を識別するために、ヘリコバクテルピロリ感染に対し無症候性の幼児を検査することもまた好ましい。
本発明の一側面によると、幼児の母親またはその近親者、もしくは他人から採取された血液サンプル中のヘリコバクテルピロリに対する抗体、特にIgG型の抗体、の決定が、上記の方法に含まれることが好ましい。検査が対応するIgGまたはIgM抗体に対しなされるのもまた好ましい。
本発明のもう一つの側面によると、試験的投与量の尿素を経口投与した後の、幼児の母親または近親者もしくは他人から排気された空気中の尿素から形成された二酸化炭素の検出が、該方法に含まれることが好ましい。尿素の試験的投与量は、好ましくは、13Cの標識のついた尿素を含む。14Cの標識のついた尿素は、あまり好ましくない。ヘリコバクテルピロリによる感染は、唾液、歯垢、血液または大便中のヘリコバクテルピロリに特異なDNAの識別によって、例えばPCR法によってもまた示すことができる。
本発明によって、胃潰瘍の徴候の無いヘリコバクテルピロリに感染し、また、免疫系が発達中の幼児を持つ、母親もしくは母親となる人に投与する医薬の製造のために、ヘリコバクテルピロリに対し効果的な抗生物質または抗生物質の組み合わせの使用法もまた開示される。幼児の母親のヘリコバクテルピロリ感染の治療は、胃潰瘍の存在とは独立して、必要である。該抗生物質を、幼児または幼児と母親の両方に投与することもまた好ましい。親類または上記の他人に胃潰瘍の徴候がなくとも、幼児のヘリコバクテルピロリに感染した親類、または幼児と身体的に親密な接触をすると予想される感染した他人に対し、同様に使用することもまた好ましい。本明細書での「胃潰瘍」という用語は、十二指腸潰瘍もまた含む。もし胃潰瘍と十二指腸潰瘍とを区別する理由がある場合のみ、十二指腸潰瘍を特定して言及する。
本発明によって、幼児のSIDSの予防方法が提供される。該方法は、治療に有効量の、ヘリコバクテルピロリに対し有効な抗生物質もしくは抗生物質の組み合わせを、胃潰瘍の徴候は無い妊娠中の婦人もしくは未完成の免疫系を有する幼児の母親へ投与することを含む。同様に、近親者、及び幼児と身体的に親密な接触をすることになると予想される他人に対するこのような投与も好ましい。
本発明によって、さらに、免疫系が発達中の幼児のSIDSの予防方法が提供される。該方法は、治療として有効量の、ヘリコバクテルピロリに対し有効な抗生物質もしくは抗生物質の組み合わせを、幼児へ投与することを含む。
本発明は、以下の好ましい態様を参照することによって、より十分に説明される。これは、しかし例示のためだけであり、発明を限定することを意図したものではない。
発明の好ましい態様
例1.  SIDSにより死亡した幼児の母親のコントロールされた臨床学的研究
SIDSの母親（28人）は白色人種の女性であり、1989年から1994年の期間にSIDSで子供を失っており、スウェーデンのゴートボルグ地域に住んでいた。対照体として、同じ地域から、同じ期間に生まれた子供を持っていた53人の女性がサンプルとして選ばれた。全ての女性が、喫煙習慣、教育期間及び職業についてのアンケートに答えた。
静脈穿刺により血液が採取され、血清のサンプルが、家庭室内（in  house）標準ELISA法（特異性98％、感度94％）により、ヘリコバクテルピロリIgGの存在について分析された。SIDSの母親と対照体との比較が、フィッシャー（Fisher）の置換テスト［Od  ｎ  Ａ外，アニュアル  オブ  スタティスティックス（Annals  of  Statistics）３（1975）518−520］、及び年齢を外したマンテル（Mantel）のテスト（Mantel  N,J.American  Stat.Ass.58（1963）690−700）によってなされた。年齢を調整したオッズ比が、論理的退化モデルによって概算された。二つを合わせたテスト（two−tailed  tests）が用いられた。
結果を表１に示す。
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SIDSの母親の年齢（平均36歳）は、対照体の年齢（平均33歳）よりもかなり高く、ｐ＜0.05であった。喫煙習慣（ｐ＞0.30）及び教育期間（ｐ＞0.30）に関しては大きな差異は無かった。年齢の影響を除くと、SIDSの母親の間でのヘリコバクテルピロリの浸透率は、対照体の間よりかなり高かった（ｐ＝0.0073）。年齢を調整したオッズ比は5.2であった（信頼区間95％:1.7−15.9）。対照体の母親の間でのヘリコバクテルピロリ血清陽性の浸透率は13％であり、この数字はスウェーデンの全人口に対する浸透率と一致する。
ヘリコバクテルピロリ血清陽性を有する20％の人口の中で、母親の感染を除くと、SIDSは46％減少し、オッズ比は5.2である。
例2.  尿素呼吸テスト
尿素呼吸テスト（UBT）は、胃の酸性環境中のヘリコバクテルピロリによるウレアーゼの圧出（expression）に基づく。ウレアーゼは、尿素の加水分解に接触作用を及ぼしてアンモニアと二酸化炭素とに変え、該二酸化炭素は体内の二酸化炭素／炭素塩と均衡する。13Cまたは14Cで標識され、ヘリコバクテルピロリに感染した患者へ経口投与された尿素は、胃に入るとそれぞれ13CO2または14CO2を形成する。同位体で標識された二酸化炭素は均衡し、排気中で検出することができる。14Cは、シンチログラフィーにより簡単に検出できるが、放射性であるという欠点を有する。安定した同位体13Cの検出には、質量分析法のようなより費用のかかる検出技術が必要となるが、例えば最近のIR及びレーザー分析法における開発は、13Cの分析の費用を削減するはずである。
ヘリコバクテルピロリウレアーゼ活性の検出及び測定の重要な側面は、口腔内及び下部胃腸管内に存在するこのような活性の妨害である。この問題は、胃で分解するカプセル内に上記の標識尿素を入れること、及び適切なタイミングの測定によって解決できる。測定は、好ましくは経口投与の時点から10分から60分以内に実行される。
以下のテストプロトコールが推薦される：
1.  絶食状態の患者に関して、排気された空気を分析する、
2.  カロリーの豊富な食事を与える、
3.  食事を取り終えてから10分後に、患者に50mlの水に100mgの13C−尿素を溶かした溶液を飲ませる、
4.  患者を横臥状態にし、そしてひっくりかえして、ある時間をおいてもう一方の横臥状態へと交互にさせる、
5.  投与20分後に開始して５分の間隔で、２リットルの排気された空気を採取する、
6.  20mlの採取された空気のサンプルを、例えば、遊離塩基形の弱塩基性のイオン交換樹脂のような弱塩基性の物質へ吸着させることによって、二酸化炭素を分離した後、質量分析計で分析する。ｍ＝44及びｍ＝45でのピークは、C12及びC13の二酸化炭素を表す。ｍ＝44/45のピーク比率における増加を、ウレアーゼにより13C標識尿素から形成された二酸化炭素の検出のために監視する。
この方法は、胃のpHを4.0以上に増加させるプロトンポンプ抑制剤型の医薬のようなある種の医薬によって潰瘍治療を受けている患者には信頼できないことが観察されるであろう。
13C呼吸テストの詳細な記載は、Masrshall  B.J.外による“Am.J.Gastroenterology"86、（1991）、438−445;Graham  D.Y.外による“Lancet"1987,1174−1177;Logan  R.P.H.外による“Eur.J.Gastroenterol.Heoatol"3（1991）、915−021;に述べられており、これらの出版物は参照としてここに取り入れられる。
例3.  ヘリコバクテルピロリ感染の治療
本文では、Walsh,J.H.及びPetersonによる“Ｗ  L,N.Engl.J.Med."333（1995）、984−991が参照され、参考に本願に含められる。この参考文献は、関連する主要な文献の最新の案内もまた提供する。著者が無条件で、十二指腸潰瘍または胃潰瘍の明確な診断のある患者のヘリコバクテルピロリの根絶だけを薦めていることに注目すべきである。この点において、本発明の教示はWalsh及びPetersonのそれと異なる。それは、ヘリコバクテルピロリに感染した無症候性の人々は、他人、彼らの子供もしくは近親者を死の危険にさらすかもしれないからである。ヘリコバクテルピロリの伝染によるSIDSの危険が明白である状況では、このように無症候性の人々のヘリコバクテルピロリも根絶することが重要である。
感染が完全に、好ましくは分娩前に、根絶されることが不可欠である。次サリチル酸ビスマスまたは二クエン酸ビスマス酸三カリウム（tripotassium dicitrato bismuthate）のようなビスマス化合物を含む組み合わせ治療もまた薦められる。ヘリコバクテルピロリ感染の治療に薦められる抗生物質には、メトロニダゾール（metronidazole）、チニダゾール（tinidazole）、クラリチロマイシン（clarithromycin）、テトラサイクリン（tetracyclin）及びアモキシシリン（amoxicillin）を含む。抗生物質もしくはいくつかの抗生物質と、オメプラゾール（omeprazole）またはランソプラゾール（lansoprazole）のようなプロトンポンプ抑制剤との組み合わせを用いた治療は、胃潰瘍または十二指腸潰瘍の徴候のある人々に対し特に薦められる。明白な胃潰瘍もしくは十二指腸潰瘍の軽い症状の場合、上記の組み合わせのプロトンポンプ抑制剤は、シメチヂン、ファモチヂン及びラニチヂンのようなH2−阻止抗体で代用することができる。ヘリコバクテルピロリに対する抗生物質の効果は、実質的にpHの増加とともに徐々に増加する。