(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0003628258.tif 000053
〔式中、Ｒ１は、グアニジノ、トリ低級アルキルアンモニオ、
【化２】
0003628258.tif 000054
であり；
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、水素；１又は２個のアミノで置換されたヘテロアリール；１個又はそれ以上のアミノ、アミノ低級アルキル、シアノ、グアニジノ、含窒素複素環、又はアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルから選ばれ；
Ｒ１３は、天然又は非天然アミノ酸から誘導される残基であり；
Ｒ１４は、１個又はそれ以上のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、又はアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で置換された低級アルキルであり；
Ｒ１５は、水素、１個又はそれ以上のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、又はアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルであり；
Ｒ２は、水素、ヒドロキシスルホニル、低級アルキル又は低級アルケニル（ここで、低級アルキル及び低級アルケニルは、アシル、カルバモイル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ若しくはジ低級アルキルアミノで場合により置換されていてよい）であり；
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、（低級アルキルカルバモイル）アミノ、カルボキシル、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルキル、低級アルケニル、又は低級アルキニル（ここで、低級アルキル、低級アルケニル及び低級アルキニルは、場合により、ヒドロキシル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、低級アルコキシカルボニル若しくはカルバモイルで置換されていてもよい）であり；
Ｒ４は、低級アルキル、アリール、シクロアルキル若しくはフッ素原子で場合により置換されていてよい、アルキル、アルケニル、アルコキシ又はアルケニルオキシ基であり；
Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２、−ＣＮ又は−ＣＨ２ＮＨ２であり；
Ｘは、単結合、或いは１個若しくはそれ以上のヘテロ原子を場合により含み、及び／又はハロゲン原子若しくは低級アルキルで場合により置換された、アリール、ビフェニル又はテルフェニル基であり；
Ｙは、単結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ（低級アルキル）−、−ＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮ（低級アルキル）−であり；
Ｚは、−Ｏ−、−ＮＨ−又は−Ｎ（低級アルキル）−であり；
ｍは、０〜４の整数であり；そして
ｎは、２〜５の整数であるが；
−Ｙ−（ＣＨ２）ｍ−Ｘ−Ｒ４が非置換アルキル又はアラルキルであるとき、同時には、Ｒ１は、アミノではなく、Ｒ２及びＲ３は、水素ではなく、Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２ではなく、Ｚは、−Ｏ−又は−ＮＨ−ではない〕
で示されるアエロトリシン、及び薬学的に許容され得るその塩。
【請求項２】
Ｒ１が、−Ｎ（Ｒ１０）−Ｒ１１であって、Ｒ１０及びＲ１１が、請求項１に定義されたとおりである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項３】
Ｒ１が、−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３であって、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３及びＲ１５が、請求項１に定義されたとおりである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項４】
Ｒ１が、−ＮＨＣＯＣＨ（Ｒ１３）−ＮＨＣＯＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ１３であって、Ｒ１３が、請求項１に定義されたとおりである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項５】
Ｒ１が、
【化３】
0003628258.tif 000055
であって、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１５及びｎが、請求項１に定義されたとおりである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項６】
Ｒ１が、
【化４】
0003628258.tif 000056
であって、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１５及びｎが、請求項１に定義されたとおりである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項７】
Ｒ１が、−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−Ｒ１４であって、Ｒ１４及びＲ１５が、請求項１に定義されたとおりである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項８】
Ｒ１が、
【化５】
0003628258.tif 000057
であって、Ｒ１０及びＲ１５が、請求項１に定義されたとおりである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項９】
Ｒ１が、アミノ又はグアニジノである、請求項１記載のアエロトリシン。
【請求項１０】
Ｒ２が、水素、ヒドロキシスルホニル又は低級アルキルである、請求項１〜９のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１１】
Ｒ３が、水素、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ又はアシルアミノである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１２】
Ｒ３が、（低級アルキルカルバモイル）アミノ、カルボキシル、低級アルコキシ又は低級アルコキシカルボニルである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１３】
Ｒ５が、−ＣＯＮＨ２又は−ＣＨ２ＮＨ２である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１４】
Ｘが、単結合、又はハロゲン原子若しくは低級アルキルで更に置換されていてよい下記の基：
【化６】
0003628258.tif 000058
のうち一つである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１５】
Ｘが、単結合、ハロゲン原子若しくは低級アルキルで更に置換されていてよい、フェニル、ビフェニル、又はナフチルである、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１６】
Ｒ４が、低級アルキル、アリール、シクロアルキル若しくはフッ素原子で場合により置換されていてよい、アルキル又はアルコキシである、請求項１〜１５のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１７】
ｍが、０〜２の整数である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１８】
Ｙが、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＯＮ（ＣＨ３）−、−ＣＯＮＨ−、−ＣＨ２−又は単結合である、請求項１〜１７のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項１９】
Ｚが、−ＮＨ−である、請求項１〜１８のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項２０】
Ｚが、−Ｏ−である、請求項１〜１８のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項２１】
アエロトリシン２、４〜３２、６３、９６〜９９、１０１〜１３１よりなる群から選ばれる、請求項１〜２０のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項２２】
アエロトリシン１４、１５、２１、２６〜２９、６３、９８、９９、及び１０１〜１３１よりなる群から選ばれる、請求項１〜２０のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項２３】
医学治療に用いるための、請求項１〜２２のいずれか１項に記載のアエロトリシン。
【請求項２４】
式（ＩＩＩ）：
【化７】
0003628258.tif 000059
〔式中、Ｒ２、Ｒ３及びＲ５は、請求項１に定義されたとおりであり、Ｒ６は、アミノ保護基であるが、Ｒ５が−ＣＯＮＨ２のとき、Ｒ２又はＲ３は、水素以外である〕で示される化合物、及びその塩。
【請求項２５】
式（ＩＸ）：
【化８】
0003628258.tif 000060
で示される化合物、及びその塩。
【請求項２６】
式（Ｘ）：
【化９】
0003628258.tif 000061
〔式中、Ｒ７は、アミノ保護基である〕
で示される化合物、及びその塩。
【請求項２７】
式（ＸＩＩ）：
【化１０】
0003628258.tif 000062
〔式中、Ｒ６は、アミノ保護基である〕
で示される化合物、及びその塩。
【請求項２８】
請求項１〜２２のいずれか１項に記載の化合物、及び薬学的に許容され得る担体を含む医薬組成物。
【請求項２９】
真菌症の治療又は予防用医薬の製造のための、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項３０】
ＤｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａＮＲ７３７９株（ＦＥＲＭ第ＢＰ−６３９１号）の生物学的に純粋な培養体。
【請求項３１】
請求項１〜２２のいずれか１項に記載のアエロトリシンを製造する方法であって、
（ａ）Deuteromycotina属に属する微生物を培養し、アエロトリシン１、２、及び／又は請求項２５に記載の式（IX）の線状ペプチドを培養ブロスから単離する工程；或いは
（ｂ）式（III）：
【化１１】
0003628258.tif 000063
〔式中、Ｒ2、Ｒ3及びＲ5は、請求項１に定義されたとおりであり、Ｒ6は、アミノ保護基である〕
で示される化合物と、式（IV）：
【化４４】
0003628258.tif 000064
〔式中、Ｒ7は、アミノ保護基であり、Ｒ8は、水素又は低級アルキルであり、Ｒ4、Ｘ、Ｙ及びｍは、請求項１に定義されたとおりである〕
で示される化合物とを縮合させた後、アミノ保護基Ｒ7を除去し、逐次環化し、アミノ保護基Ｒ6を除去する工程；或いは
（ｃ）式（Ｉ）：
【化１２】
0003628258.tif 000065
〔式中、Ｒ3は、水素原子であり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、請求項１に定義されたとおりである〕
で示されるアエロトリシンのＲ3をニトロ化する工程、或いは
（ｄ）Ｒ3がニトロ基であり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのニトロ基を還元する工程、或いは
（ｅ）Ｒ3がアミノ基であり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基をアシル化した後、必要ならば、アミノ保護基を除去する工程、或いは
（ｆ）Ｒ1がアミノ基又は−Ｎ（Ｒ15）−ＣＯＣＨ（ＮＨ2）−Ｒ13であり、Ｒ13、Ｒ15、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基をシアノエチル化若しくは２，２−ジシアノエチレン化した後、シアノ基を還元し、必要ならば、保護基を除去する工程、或いは
（ｇ）Ｒ1がアミノ、（２−シアノエチル）アミノ又は−Ｎ（Ｒ15）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ10）Ｒ11〕−Ｒ13であって、Ｒ10及びＲ11が、それぞれ独立に、水素又は（２−シアノエチル）アミノから選ばれ、Ｒ13、Ｒ15、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、上記に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基を、式（Ｖ）：
【化１３】
0003628258.tif 000066
〔式中、Ｒ9は、水素、１個又はそれ以上の保護されたアミノ、含窒素複素環、若しくは保護されたアミノを含むフェニル基で更に置換されていてよい低級アルキルである〕
で示されるアルデヒドで還元的アルキル化した後、必要ならば、アミノ保護基を除去するか、又はシアノ基を還元する工程、或いは
（ｈ）Ｒ1がアミノ基であり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基を、式（VI）：
【化１４】
0003628258.tif 000067
〔式中、Ｒ12は、保護されたアミノ若しくはニトロ基で更に置換されていてよい含窒素へテロアリールであり、Ｑは、クロロ若しくはブロモのようなハロゲン原子である〕
で示される化合物でアリール化した後、必要ならば、アミノ保護基を除去するか、又はニトロ基を還元する工程、或いは
（ｉ−１）Ｒ1がアミノであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基をアシル化した後、必要ならば、アミノ保護基を除去する工程、或いは
（ｉ−２）Ｒ1が−Ｎ（Ｒ10）−Ｒ11〔式中、Ｒ10、及びＲ11は、両者とも、アミノ基で置換された低級アルキルである〕、又は−Ｎ（Ｒ15）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ10）Ｒ11〕−Ｒ13〔式中、Ｒ15は、アミノ基で置換された低級アルキルであり；Ｒ10、Ｒ11及びＲ13は、請求項１に定義されたとおりであるが、Ｒ10、Ｒ11及びＲ13中に存在するアミノ基は、保護されている〕である上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基をアシル化した後、アミノ保護基を除去する工程、或いは
（ｊ）Ｒ1がアミノであり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンを、モノＮ−アルキル化し、続いてＮ−アシル化した後、必要ならば、アミノ保護基を除去する工程、或いは、
（ｋ）Ｒ1がアミノ基；−Ｎ（Ｒ10）−Ｒ11〔式中、Ｒ10及びＲ11は、それぞれ独立に、１個又はそれ以上のアミノ基、又はアミノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルから選択される〕；−Ｎ（Ｒ15）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ10）Ｒ11〕−Ｒ13〔式中、Ｒ10、Ｒ11及びＲ13は、請求項１に定義されたとおりであり、Ｒ15は、１個又はそれ以上のアミノ基、含窒素複素環基、又はアミノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルである〕；又は−ＮＨＣＯ−Ｒ14〔式中、Ｒ14は、１個又はそれ以上のアミノ基、含窒素複素環基、又はアミノ基を有するフェニル基で置換された低級アルキルである〕であり、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基を、活性化されたアミジン誘導体による処理によってグアニジノ基へと変換する工程、或いは
（ｌ）Ｒ2が水素であり、Ｒ1、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのフェノール性ヒドロキシル基をＯ−アルキル化する工程、或いは、
（ｍ）Ｒ2及びＲ3が水素であり、Ｒ1、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンをヨウ素化した後、Ｒ3がヨードであり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである、得られた式（Ｉ）のヨード誘導体を、パラジウム（０）触媒でカップリングさせ、必要ならば、アミノ保護基を除去する工程、或いは、
（ｎ）Ｒ5が−ＣＯＮＨ2であり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのカルバモイル基を脱水した後、必要ならば、アミノ保護基を除去する工程、或いは
（ｏ）Ｒ5が−ＣＯＮＨ2又は−ＣＮであり、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのカルバモイル基又はシアノ基を還元した後、必要ならば、アミノ保護基を除去する工程、或いは
（ｐ）Ｒ2が水素であり、Ｒ1、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍが、請求項１に定義されたとおりである上記の式（Ｉ）のアエロトリシンのチロシン残基をヒドロキシスルホン化した後、保護基を除去する工程、或いは
（ｑ）上記の式（IX）の線状ペプチドを、上記の式（Ｉ）のアエロトリシンへと、ペプチド合成によって変換した後、上記の工程（ｃ）〜（ｏ）から選ばれる方法に従って修飾する工程
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、抗真菌活性を有する新規環状化合物（以下、アエロトリシンと称する）、医学治療におけるアエロトリシンの使用、アエロトリシンを含有する医薬組成物、並びにアエロトリシンを製造するための方法及び中間体に関する。
【０００２】
アゾール抗真菌剤は、現在、全身性真菌症の処置に広く用いられている。しかし、アゾール抗真菌剤の長期の予防的使用は、その静真菌作用のために、アゾール耐性であるＣａｎｄｉｄａ ｓｐｐ．の発生を招く。そのため、殺真菌剤は、重い全身性真菌症の処置には特に重要である。更に、現在入手できる抗真菌剤は、免疫低下の患者間に出現する病原体の一つである、Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｐ． に対して有効ではない。アムホテリシンＢは、現在臨床的に用いられている、非常に有効な殺真菌剤であるが、その治療指数（有効用量対毒性用量）は、かなり狭い。ＬＹ３０３３６６（ＥＰ ７３６５４１）、ＷＦ１１２４３（ＥＰ ５８４３６０）のようなある種の環状化合物は、β−１，３−グルカンシンターゼの阻害により、殺真菌活性を示すことが知られている。しかし、それらは、依然として、抗真菌スペクトル及び／又は安全性プロフィールに関して何らかの短所を有する。したがって、より優れた安全性プロフィールと、新たに出現する Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｐ． のような病原体を包含する、主要な全身性病原体に対する有効性とを有する、新規な殺真菌剤の開発が、緊急に要請されている。
【０００３】
詳しくは、本発明は、式（Ｉ）：
【０００４】
【化１５】
0003628258.tif 000002
【０００５】
〔式中、Ｒ１は、グアニジノ、トリ低級アルキルアンモニオ、
【０００６】
【化１６】
0003628258.tif 000003
【０００７】
であり；
Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、水素；１又は２個のアミノで置換されたヘテロアリール；１個又はそれ以上、好ましくは１又は２個のアミノ、アミノ低級アルキル、シアノ、グアニジノ、含窒素複素環、又はアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルから選ばれ；
【０００８】
Ｒ１３は、天然又は非天然アミノ酸から誘導される残基であり；
【０００９】
Ｒ１４は、１個又はそれ以上、好ましくは１又は２個のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、又はアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で置換された低級アルキルであり；
【００１０】
Ｒ１５は、水素、１個又はそれ以上、好ましくは１又は２個のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、又はアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルであり；
【００１１】
Ｒ２は、水素、ヒドロキシスルホニル、低級アルキル又は低級アルケニル（ここで、低級アルキル及び低級アルケニルは、アシル、カルバモイル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ若しくはジ低級アルキルアミノで場合により置換されていてよい）であり；
【００１２】
Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、ニトロ、アミノ、アシルアミノ、（低級アルキルカルバモイル）アミノ、カルボキシル、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニル、低級アルキル、低級アルケニル、又は低級アルキニル（ここで、低級アルキル、低級アルケニル及び低級アルキニルは、場合により、ヒドロキシル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、低級アルコキシカルボニル若しくはカルバモイルで置換されていてもよい）であり；
【００１３】
Ｒ４は、低級アルキル、アリール、シクロアルキル若しくはフッ素原子で場合により置換されていてよい、アルキル、アルケニル、アルコキシ又はアルケニルオキシ基を表し；
【００１４】
Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２、−ＣＮ又は−ＣＨ２ＮＨ２であり；
【００１５】
Ｘは、単結合、或いは１個若しくはそれ以上のヘテロ原子を場合により含み、及び／又はハロゲン原子若しくは低級アルキルで場合により置換された、アリール、ビフェニル又はテルフェニル基であり；
【００１６】
Ｙは、単結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ（低級アルキル）−、−ＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮ（低級アルキル）−であり；
【００１７】
Ｚは、−Ｏ−、−ＮＨ−又は−Ｎ（低級アルキル）−であり；
【００１８】
ｍは、０〜４の整数であり；そして
【００１９】
ｎは、２〜５の整数であるが；
【００２０】
−Ｙ−（ＣＨ２）ｍ−Ｘ−Ｒ４が非置換アルキル又はアラルキルであるとき、同時には、Ｒ１は、アミノではなく、Ｒ２及びＲ３は、水素ではなく、Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２ではなく、Ｚは、−Ｏ−又は−ＮＨ−ではない〕
で示される新規アエロトリシン、及び薬学的に許容され得るその塩に関する。
【００２１】
本発明は、式（Ｉ）のアエロトリシン、及び薬学的に許容され得る単体を含む医薬組成物にも関する。更に、本発明は、医薬の製造のためのそのようなアエロトリシンの使用はもとより、式（Ｉ）のアエロトリシンの製造のための方法及び中間体にも関する。加えて、本発明は、病原性微生物によって生じる感染症の予防及び／又は治療処置の方法に関する。
【００２２】
本明細書中、用語「低級」は、別途指示されない限り、１〜６個、好ましくは１〜４個の炭素原子よりなる基を意味するのに用いられる。
【００２３】
用語「アルキル」は、１〜２０個の炭素原子、好ましくは１〜１６個の炭素原子の分枝鎖又は直鎖状の一価の飽和脂肪族炭化水素の基を意味する。用語「低級アルキル」は、１〜６個の炭素原子、好ましくは１〜４個の炭素原子の分枝鎖又は直鎖状の一価アルキル基を意味する。この用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルなどのような基によって更に例示される。
【００２４】
用語「アルケニル」は、１つ又はそれ以上の二重結合をアルキレン鎖中に有するアルキル基を意味する。
【００２５】
用語「アルキニル」は、１つ又はそれ以上の三重結合をアルキレン鎖中に有するアルキル基を意味する。
【００２６】
用語「アルコキシ」は、基−Ｏ−Ｒ′（Ｒ′はアルキル）を意味する。用語「低級アルコキシ」は、Ｒ′が低級アルキルである、基−Ｏ−Ｒ′を意味する。
【００２７】
用語「アルケニルオキシ」は、１つ又はそれ以上の二重結合をアルキレン鎖中に有するアルコキシ基を意味する。
【００２８】
用語「アシル」は、基−Ｃ（Ｏ）−Ｒ′（Ｒ′は低級アルキル）を意味する。用語「アシルアミノ」は、イミノ基、すなわち−ＮＨ−に結合したアシル基を意味する。
【００２９】
用語「モノ低級アルキルアミノ」は、イミノ基、すなわち−ＮＨ−に結合した低級アルキル基を意味する。用語「ジ低級アルキルアミノ」は、窒素原子に結合した、二つの独立に選ばれる低級アルキル基、すなわち−Ｎ（−低級アルキル）−低級アルキルを意味する。用語「トリ低級アルキルアンモニオ」は、３個の独立に選ばれる（Ｃ１〜Ｃ３）アルキル基を有する、トリ低級アルキルアンモニオを意味する。
【００３０】
用語「低級アルコキシカルボニル」は、基−Ｃ（Ｏ）ＯＲ′（Ｒ′は低級アルキル）を意味する。
【００３１】
用語「（低級アルキルカルバモイル）アミノ」は、基−ＮＨＣＯＮＨ−Ｒ′（Ｒ′は低級アルキル）を意味する。
【００３２】
用語「ハロゲン原子」は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。
【００３３】
用語「アリール」は、場合により、低級アルキル、トリフルオロメチル、ハロゲンなどで独立にモノ−、ジ−若しくはトリ−置換された、１つの一価炭素環式芳香族基（例えばフェニル）、又は二つの融合炭素環式環（例えばナフチル）を意味する。
【００３４】
用語「含窒素複素環」は、少なくとも１個の窒素原子を含む、飽和、不飽和若しくは芳香族の一価の環状基を意味する。
【００３５】
用語「ヘテロアリール」は、少なくとも１個のヘテロ原子、すなわち窒素、硫黄若しくは酸素を含む、芳香属の一価モノ−又はポリ−炭素環基を意味する。１個又はそれ以上の窒素原子を有するヘテロアリール基の例は、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、トリアジニル及びイミダゾイルである。
【００３６】
用語「シクロアルキル」は、３〜１０個の炭素原子、好ましくは３〜６個の炭素原子の一価炭素環基を意味する。
【００３７】
用語「薬学的に許容され得る塩」は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、マレイン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、コハク酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などのような、生命体に無害である無機又は有機酸との式（Ｉ）のアエロトリシンの塩を包含する。
【００３８】
以下、上記の式（Ｉ）の各置換基を、より詳しく説明する。
【００３９】
Ｒ１の定義中、用語「トリ低級アルキルアンモニオ」は、好ましくは、トリメチルアンモニオ及びトリエチルアンモニオを意味する。
【００４０】
Ｒ１０及びＲ１１の定義中、用語「ヘテロアリール」は、好ましくは、２−ピリジル、２−ピラジニル、２−ピリミジニル、２−ピリダジニル、２−トリアジニル、２−イミダゾイルなど、より好ましくは２−ピリジル及び２−イミダゾリル、最も好ましくは２−ピリジルを意味する。用語「低級アルキル」は、好ましくは、１〜６個の炭素原子よりなるアルキル鎖、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル及びｎ−ヘキシル；好ましくはメチル、エチル、ｎ−プロピル又はｎ−ブチル、最も好ましくはメチル、エチルまたはｎ−プロピルを意味する。用語「含窒素複素環」は、好ましくは、モルホリノ、ピペラジニル、Ｎ−メチルピペラジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピリジニル、ピラジニルなど、より好ましくはピペラジニル及びモルホリノ、最も好ましくはピペラジニルを意味する。用語「アミノ、アミジノ又はグアニジノ基を有するフェニル基」は、好ましくは、４−アミノフェニル、４−アミジノフェニル、４−グアニジノフェニルなどを意味する。
【００４１】
Ｒ１３の定義中、用度「天然又は非天然アミノ酸から誘導される残基」は、好ましくは、水素、又はヒドロキシル、アミノ、グアニジノ、メチルチオ、メルカプト、カルバモイル、カルボキシル、フェニル、ヒドロキシフェニル、アミノフェニル、イミダゾリル若しくはインドリルなどで置換されていてよい低級アルキルを意味する。Ｒ１３の好ましい実施態様は、アミノ又はグアニジノで置換された低級アルキル、例えばアミノメチル、２−アミノエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチル、４−グアニジノブチルである。
【００４２】
Ｒ１４の定義中、用語「低級アルキル」は、Ｒ１０及びＲ１１について定義されたのと同じものを意味する。好ましくは、２〜５個の炭素原子よりなるアルキル鎖、例えばエチル、プロピル、ブチル及びペンチルを意味する。用語「含窒素複素環」は、Ｒ１０及びＲ１１について定義されたのと同じものを意味する。好ましくは、モルホリノ、ピペラジニル、Ｎ−メチルピペラジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピリジニル、ピラジニルなど、より好ましくはピペラジニル及びモルホリノを意味する。用語「アミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基」は、好ましくは、４−アミノフェニル、４−アミジノフェニル、４−グアニジノフェニルなどを意味する。Ｒ１４の好ましい実施態様は、２−アミノエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチル、２−グアニジノエチル、３−グアニジノプロピル、２−ピペラジノエチル、２−モルホリノエチル、４−アミノフェネチルなどである。
【００４３】
Ｒ１５の定義中、用語「低級アルキル」、「含窒素複素環」及び「アミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基」は、Ｒ１４について定義されたのと同じである。Ｒ１５の好ましい実施態様は、２−アミノエチル、３−アミノプロピル、４−アミノブチル、２−グアニジノエチル、３−グアニジノプロピル、２−ピペラジノエチル、２−モルホリノエチル、４−アミノフェネチルなどである。
【００４４】
−Ｎ（Ｒ１０）−Ｒ１１〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、上記に定義されたとおりである〕の好ましい実施態様は、アミノ、５−アミノピリド−２−イルアミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、（２−アミノエチル）アミノ、（３−アミノプロピル）アミノ、〔３−〔（３−アミノプロピル）アミノ〕プロピル〕アミノ、（２−ピペラジニルエチル）アミノ、（２−モルホリノエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジプロピルアミノ、Ｎ，Ｎ−エチルメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−アミノエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（３−アミノプロピル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（４−アミノブチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ピペラジニルエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（モルホリノエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−グアニジノエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（３−グアニジノプロピル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ピリジン−２−イルエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（イミダゾール−２−イルメチル）アミノ、Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−（３−アミノプロピル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２−ピペラジニルエチル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２−ピリジン−２−イルエチル）アミノなどである。より好ましい実施態様は、アミノ、５−アミノピリド−２−イルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ、（２−アミノエチル）アミノ、（３−アミノプロピル）アミノ、〔３−〔（３−アミノプロピル）アミノ〕プロピル〕アミノ、（２−ピペラジニルエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−アミノエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（３−アミノプロピル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（４−アミノブチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ピペラジニルエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−グアニジノエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（３−グアニジノプロピル）アミノ、Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−（３−アミノプロピル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２−ピペラジニルエチル）アミノなどである。最も好ましい実施態様は、（３−アミノプロピル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（２−アミノエチル）アミノ、Ｎ，Ｎ−ビス（３−アミノプロピル）アミノ及びＮ，Ｎ−ビス（２−ピペラジニルエチル）アミノである。
【００４５】
−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３の定義中、基−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、水素であり；Ｒ１３は、天然又は非天然アミノ酸から誘導される残基である〕は、好ましくは、サルコシル、グリシル、アラニル、オルニチニル、リシル、バリル、ロイシル、イソロイシル、トリプトフィル、フェニルアラニル、メチオニル、セリル、チロシル、トレオニル、システイニル、アスパラギニル、グルタミニル、アスパルチル、グルタミル、アルギニル、ヒスチジル、２，３−ジアミノプロピオニル、２，４−ジアミノブチリル、２−アミノ−４−トリアゾール−１−イルブチリルなどを意味する。
【００４６】
−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３の好ましい実施態様は、塩基性アミノ酸から誘導されるアシルアミノ基である。そのようなアシルアミノ基の例は、オルニチニルアミノ、リシルアミノ、アルギニルアミノ、ヒスチジルアミノ、３−アミノプロリルアミノ、２，３−ジアミノプロピオニルアミノ、２，４−ジアミノブチリルアミノ、２−アミノ−４−トリアゾール−１−イルブチリルアミノ、〔３−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕プロピオニル〕アミノ、〔４−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕ブチリル〕アミノ、〔５−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕バレリル〕アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，３−ジアミノプロピオニル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，４−ジアミノブチリル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，５−ジアミノバレリル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，６−ジアミノヘキサノイル）アミノなどであり；より好ましくは、オルニチニルアミノ、リシルアミノ、アルギニルアミノ、ヒスチジルアミノ、２，３−ジアミノプロピオニルアミノ、２，４−ジアミノブチリルアミノ、〔３−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕プロピオニル〕アミノ、〔４−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕ブチリル〕アミノ、〔５−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕バレリル〕アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，３−ジアミノプロピオニル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，４−ジアミノブチリル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，５−ジアミノバレリル）アミノ及びＮ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，６−ジアミノヘキサノイル）アミノであり；最も好ましくはオルニチニルアミノ、リシルアミノ、２，４−ジアミノブチリルアミノ、〔４−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕ブチリル〕アミノ、〔５−アミノ−２−〔ビス（２−アミノエチル）アミノ〕バレリル〕アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，４−ジアミノブチリル）アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，５−ジアミノバレリル）アミノ及びＮ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−（２，６−ジアミノヘキサノイル）アミノである。
【００４７】
Ｒ１の定義中、
【００４８】
【化１７】
0003628258.tif 000004
【００４９】
の好ましい実施態様は、ビス〔２−（オルニチルアミノ）エチル〕アミノ、ビス〔３−（オルニチルアミノ）プロピル〕アミノ、〔２−（リシルアミノ）エチル〕アミノ、ビス〔３−（リシルアミノ）プロピル〕アミノなどである。
【００５０】
Ｒ１の定義中、
【００５１】
【化１８】
0003628258.tif 000005
【００５２】
の好ましい実施態様は、Ｎ−オルニチル−Ｎ−〔２−（オルニチルアミノ）エチル〕アミノ、Ｎ−オルニチル−Ｎ−〔３−（オルニチルアミノ）プロピル〕アミノ、Ｎ−オルニチル−Ｎ−〔３−（リシルアミノ）プロピル〕アミノ、Ｎ−オルニチル−Ｎ−〔３−（リシルアミノ）プロピル〕アミノ、Ｎ−リシル−Ｎ−〔２−（オルニチルアミノ）エチル〕アミノ、Ｎ−リシル−Ｎ−〔３−（オルニチルアミノ）プロピル〕アミノ、Ｎ−リシル−Ｎ−〔２−（リシルアミノ）エチル〕アミノ、Ｎ−リシル−Ｎ−〔３−（リシルアミノ）プロピル〕アミノなどである。
【００５３】
Ｒ１の定義中、
【００５４】
【化１９】
0003628258.tif 000006
【００５５】
の好ましい実施態様は、プロリルアミノ、３−アミノプロリルアミノ、４−アミノプロリルアミノ、Ｎ−（３−アミノプロピル）−Ｎ−プロリルアミノ、（２−アミノエチル）プロリルアミノなどである。
【００５６】
用語「−ＮＨＣＯＣＨ（Ｒ１３）−ＮＨＣＯＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ１３」〔式中、Ｒ１３は、上記に定義されたとおりである〕は、好ましくは、オルニチル−オルニチルアミノ、リシル−オルニチルアミノ、オルニチル−リシルアミノ、リシル−リシルアミノなどを意味する。
【００５７】
用語「−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−Ｒ１４」〔式中、Ｒ１４及びＲ１５は、上記に定義されたとおりである〕中、用語「含窒素複素環」及び用語「アミノ、アミジノ又はグアニジノ基を有するフェニル基」は、上記に定義されたとおりである。
【００５８】
−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−Ｒ１４の好ましい実施態様は、３−アミノプロピオニルアミノ、３−グアニジノプロピオニルアミノ、３−ピペラジニルプロピオニルアミノ、（３−ピリジン−３−イルプロピオニル）アミノ、〔３−（４−アミノフェニル）プロピオニル〕アミノ、Ｎ−（３−アミノプロピオニル）−Ｎ−（３−アミノプロピル）アミノなどである。
【００５９】
好適な態様では、Ｒ１は、Ｒ１０及びＲ１１が上記に定義されたとおりである、−Ｎ（Ｒ１０）−Ｒ１１である。もう１つの好適な態様では、Ｒ１は、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３及びＲ１５が上記に定義されたとおりである、−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３である。もう１つの好適な態様では、Ｒ１は、Ｒ１４及びＲ１５が上記に定義されたとおりである、−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−Ｒ１４である。もう１つの好適な態様では、Ｒ１は、Ｒ１０及びＲ１５が上記に定義されたとおりである、
【００６０】
【化２０】
0003628258.tif 000007
【００６１】
である。もう１つの好適な態様では、Ｒ１は、Ｒ１３が上記に定義されたとおりである、−ＮＨＣＯＣＨ（Ｒ１３）−ＮＨＣＯＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ１３である。もう１つの好適な態様では、Ｒ１は、トリ低級アルキルアンモニオである。更にもう１つの好適な態様では、Ｒ１は、アミノ又はグアニジノである。
【００６２】
Ｒ２の定義中、用語「アシル、カルボキシル、カルバモイル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ若しくはジ低級アルキルアミノで場合により置換された低級アルキル」は、好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、オキソ低級アルキル、カルボキシ低級アルキル、カルバモイル低級アルキル、アミノ低級アルキルなど、より好ましくは、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、２−オキソプロピル、カルボキシメチル、カルバモイルメチル、３−アミノプロピルなどを意味する。
【００６３】
用語「アシル、カルボキシル、カルバモイル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ若しくはジ低級アルキルアミノで場合により置換された低級アルケニル」は、好ましくは、アリル、２−ブテニル、３−ブテニルなど、より好ましくはアリルを意味する。
【００６４】
好適な態様では、Ｒ２は、水素、ヒドロキシスルホニル、又はメチル若しくはエチルのような低級アルキルである。
【００６５】
Ｒ３の定義中、用語「アシルアミノ」は、好ましくは、低級アルキルカルボニルアミノ、例えばアセチルアミノ、プロピオニルアミノ若しくはイソブチリルアミノ、又は天然若しくは非天然アミノ酸から誘導されるアシルアミノ基、例えばサルコシルアミノ、グリシルアミノ、アラニルアミノ、オルニチルアミノ、リシルアミノ、プロリルアミノ、バリルアミノ、ロイシルアミノ、イソロイシルアミノ、トリプトフィルアミノ、フェニルアラニルアミノ、メチオニルアミノ、セリルアミノ、チロシルアミノ、トレオニルアミノ、システイニルアミノ、アスパラギニルアミノ、グルタミルアミノ、アスパルチルアミノ、グルタミルアミノ、アルギニルアミノ、ヒスチジルアミノなど；好ましくはサルコシルアミノ、グリシルアミノ、アラニルアミノ、リシルアミノ、プロリルアミノなどを意味する。
【００６６】
用語「（低級アルキルカルバモイル）アミノ」は、好ましくは、メチルカルバモイルアミノ、エチルカルバモイルアミノ、プロピルカルバモイルアミノ、ブチルカルバモイルアミノなど、より好ましくは、メチルカルバモイルアミノ又はエチルカルバモイルアミノを意味する。
【００６７】
用語「低級アルコキシ」は、好ましくは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシなど、より好ましくはメトキシ及びエトキシを意味する。
【００６８】
用語「低級アルコキシカルボニル」は、好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニルなど、より好ましくはメトキシカルボニル及びエトキシカルボニルを意味する。
【００６９】
用語「場合によりヒドロキシル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、低級アルコキシカルボニル若しくはカルバモイルで置換されていてよい低級アルキル」は、好ましくは、メチル、エチル、プロピル、アミノメチル、アミノエチル、アミノプロピル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、メチレンアミノメチル、２−（メチルアミノ）エチル、３−（メチルアミノ）プロピル、ジメチルアミノメチル、２−（ジメチルアミノ）エチル、３−（ジメチルアミノ）プロピル、２−（メトキシカルボニル）エチル、２−（カルバモイル）エチルなどを意味する。
【００７０】
用語「場合によりヒドロキシル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、低級アルコキシカルボニル若しくはカルバモイルで置換されていてよい、低級アルケニル」は、好ましくは、ビニル、２−（メトキシカルボニル）ビニル、２−（カルバモイル）ビニルなどを意味する。
【００７１】
用語「場合によりヒドロキシル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、低級アルコキシカルボニル若しくはカルバモイルで置換されていてよい、低級アルキニル」は、好ましくは、エチニル、プロピニル、ヒドロキシプロピニル、アミノプロピニル、ジエチルアミノプロピニルなどを意味する。
【００７２】
好適な態様では、Ｒ３は、水素、ヒドロキシル、ニトロ、アミノまたはアシルアミノである。もう１つの好適な態様では、Ｒ３は、（低級アルキルカルバモイル）アミノ、カルボキシル、低級アルコキシ又は低級アルコキシカルボニルである。
【００７３】
Ｒ４の定義中、用語「アルキル、アルケニル、アルコキシ又はアルケニルオキシ」は、好ましくは、３〜１６個の炭素原子を有する、アルキル、アルケニル、アルコキシ又はアルケニルオキシ基、例えば、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、オクト−４−エニル、オクト−６−エニル、ノナニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ、ヘプチルオキシ、オクチルオキシ、オクト−４−エニルオキシ、オクト−６−エニルオキシ、ノナニルオキシ、ノナ−５−エニルオキシ、デシルオキシなどを意味する。
【００７４】
用語「低級アルキル」は、好ましくは、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、より好ましくはメチル又はエチルを意味する。
【００７５】
用語「アリール」は、低級アルキル、トリフルオロメチル又はハロゲン原子で場合により置換されていてよいアリール基、例えば、フェニル、ナフチル、３−フルオロフェニル、３−ブロモフェニル、３−クロロフェニル、４−フルオロフェニル、４−ブロモフェニル、４−クロロフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、４−トリフルオロメチルフェニルを意味する。
【００７６】
用語「シクロアルキル」は、好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、アダマンチルなどを意味する。
【００７７】
用語「低級アルキル、アリール、シクロアルキル若しくはフッ素原子で場合により置換されていてよい、アルキル、アルケニル、アルコキシ又はアルケニルオキシ」は、好ましくは、５−メチルへキシル、１−メチルトリデシル、２−エチルブトキシ、４−メチルペンチルオキシ、２−プロピルペンチルオキシ、２−エチルヘキシルオキシ、３，７−ジメチルオクチルオキシ、２−フェニルエトキシ、２−（４−フルオロフェニル）エトキシ、２−（４−クロロフェニル）エトキシ、２−（３−フルオロフェニル）エトキシ、２−（４−トリフルオロフェニル）エトキシ、３−フェニルプロポキシ、２−ナフチルエトキシ、３−ナフチルプロポキシ、２−シクロプロピルエトキシ、２−シクロブチルエトキシ、２−シクロペンチルエトキシ、３−シクロペンチルプロポキシ、２−シクロヘキシルエトキシ、３−シクロヘキシルプロポキシ、３，３−ジフェニルプロポキシ、３，３，３−トリフルオロプロポキシ、４，４，４−トリフルオロブトキシ、５，５，５−トリフルオロペンチルオキシなどを意味する。
【００７８】
好適な態様では、Ｒ４は、低級アルキル、アリール、シクロアルキル若しくはフッ素原子で場合により置換されていてよい、アルキル又はアルコキシである。
【００７９】
Ｒ５の好ましい実施態様は、−ＣＯＮＨ２又は−ＣＨ２ＮＨ２である。
【００８０】
Ｘの定義中、用語「ヘテロ原子」は、好ましくは、窒素、硫黄及び酸素を意味する。
【００８１】
用語「１個若しくはそれ以上のヘテロ原子を場合により含む、アリール、ビフェニル若しくはテルフェニル」は、好ましくは、
【００８２】
【化２１】
0003628258.tif 000008
【００８３】
などを意味し、これらは、ハロゲン原子又は低級アルキルでさらに置換されていてよい。上式中、開放端の線は、対応する位置での好適な結合を示す。
【００８４】
Ｘの最も好ましい実施態様は、単結合、又はハロゲン原子若しくは低級アルキル、好ましくはメチルで更に置換されていてよい、
【００８５】
【化２２】
0003628258.tif 000009
【００８６】
である。
【００８７】
Ｙの定義中、用語「低級アルキル」は、好ましくは、１〜３個の炭素原子よりなるアルキル基、例えば、メチル、エチル又はプロピルを意味する。Ｙの好ましい実施態様は、単結合、−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮ（ＣＨ３）−、より好ましくは単結合、−ＣＨ（ＣＨ３）−、又は−ＣＯＮＨ−である。
【００８８】
Ｚの定義中、用語「−Ｎ（低級アルキル）−」は、好ましくは、１〜３個の炭素原子よりなるＮ−アルキル基、例えば、Ｎ−メチル、Ｎ−エチル又はＮ−プロピルを意味する。Ｚの好ましい実施態様は、−Ｏ−であり；Ｚのもう１つの好ましい実施態様は、−ＮＨ−である。
【００８９】
ｍは、０〜４、好ましくは０〜２の整数である。
【００９０】
本発明による好適なアエロトリシンは、下記の表１に例示されるアエロトリシン２及び４〜１３１である。
【００９１】
【化２３】
0003628258.tif 000010
【００９２】
【表１】
0003628258.tif 000011
【００９３】
【表２】
0003628258.tif 000012
【００９４】
【表３】
0003628258.tif 000013
【００９５】
【表４】
0003628258.tif 000014
【００９６】
【表５】
0003628258.tif 000015
【００９７】
【表６】
0003628258.tif 000016
【００９８】
特に好ましいのは、アエロトリシン２、４〜３２、６３、９６〜９９、１０１〜１３１よりなる群から選ばれるアエロトリシンである。やはり特に好ましいのは、アエロトリシン１４、１５、２１、２６〜２９、６３、９８、９９、及び１０１〜１３１よりなる群から選ばれるアエロトリシンである。
【００９９】
式（Ｉ）で示されるアエロトリシンは、下記の方法に従って製造することができる。
【０１００】
方法Ａ
式（ＩＩ）のアエロトリシンは、アエロトリシン１、２及び３〔アエロトリシン３（＝ＷＦ１１２４３）は、参考実施例１に記載されている〕を生産できる不完全菌類Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａに属する微生物を、好気的条件下、水性又は固体培地中で培養し、アエロトリシン１、２及び３を培養体から単離することにより製造することができる。
【０１０１】
【化２４】
0003628258.tif 000017
【０１０２】
〔式中、Ｒ３は、水素又はヒドロキシルであり、Ｙは、−ＣＨ（ＣＨ３）−又は−ＣＨ２−である〕
【０１０３】
方法Ｂ
式（Ｉ）のアエロトリシン〔式中、Ｒ１は、アミノであり；Ｙは、−ＣＯＮＨ−、−ＣＯＮ（低級アルキル）−、−ＣＨ２−又は単結合であり；Ｚは、−ＮＨ−又は−Ｎ（低級アルキル）−であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕は、式（ＩＩＩ）：
【０１０４】
【化２５】
0003628258.tif 000018
【０１０５】
〔式中、Ｒ６は、アミノ保護基であり；Ｒ２、Ｒ３及びＲ５は、上記に定義されたとおりである〕
で示される化合物と、式（ＩＶ）：
【０１０６】
【化２６】
0003628258.tif 000019
【０１０７】
〔式中、Ｒ７は、アミノ保護基であり、Ｒ８は、水素又は低級アルキルであり、Ｒ４、Ｘ、Ｙ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕
で示される化合物とを、ペプチド合成用のカルボキシル活性化剤を用いて縮合させた後、得られた線状ペプチドのアミノ保護基Ｒ７を選択的に除去し、ペプチド合成用のカルボキシル活性化剤で逐次環化し、そしてアミノ保護基Ｒ６を除去することによって製造することができる。
【０１０８】
方法Ｃ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、ニトロ基であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、水素であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのニトロ化によって製造することができる。
【０１０９】
方法Ｄ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、アミノ基であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、ニトロ基であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのニトロ基の還元によって製造することができる。
【０１１０】
方法Ｅ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、アシルアミノ又は（低級アルキルカルバモイル）アミノであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、アミノ基であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのアミノ基を、酸塩化物、酸無水物、カルボン酸／縮合剤、又は低級アルキルカルバモイル＝クロリドでアシル化した後、必要ならば、アミノ保護基を除去することによって製造することができる。
【０１１１】
方法Ｆ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、（３−アミノプロピル）アミノ、（２−シアノエチル）アミノ、３−アミノ−２−（アミノメチル）プロピル〕アミノ、又は−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯＣＨ〔ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ２〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１３及びＲ１５は、上記に定義されたとおり〕である〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、アミノ基又は−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ１３〔式中、Ｒ１３及びＲ１５は、上記に定義されたとおりである〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのアミノ基をアクリロニトリル、エトキシメチレンマロノニトリル、又は（１−エトキシエチリデン）マロノニトリルと反応させた後、得られたニトリル基をアミノ基へと還元し、必要ならば、保護基を除去することによって製造することができる。
【０１１２】
方法Ｇ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、−Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、水素、１個又はそれ以上のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、若しくはアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルから選ばれる〕、又は−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ、１個又はそれ以上のアミノ、アミノ低級アルキル、グアニジノ、含窒素複素環、若しくはアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルであり；Ｒ１３及びＲ１５は、上記に定義されたとおりである〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、アミノ、（２−シアノエチル）アミノ、又は−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、水素原子又は（２−シアノエチル）アミノであり；Ｒ１３及びＲ１５は、上記に定義されたとおりである〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのアミノ基を、式（Ｖ）：
【０１１３】
【化２７】
0003628258.tif 000020
【０１１４】
〔式中、Ｒ９は、水素、１個又はそれ以上の保護されたアミノ、含窒素複素環、若しくは保護されたアミノを含むフェニル基で更に置換されていてよい低級アルキルである〕
で示されるアルデヒドで還元的アルキル化した後、必要ならば、アミノ保護基を除去するか、又はシアノ基を還元することによって製造することができる。
【０１１５】
方法Ｈ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、−Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、水素、又は１若しくは２個のアミノ基で置換されたヘテロアリールから選ばれる〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、アミノ基であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのアミノ基を、式（ＶＩ）：
【０１１６】
【化２８】
0003628258.tif 000021
【０１１７】
〔式中、Ｒ１２は、保護されたアミノ若しくはニトロ基で更に置換されていてよい含窒素へテロアリールであり、Ｑは、クロロ若しくはブロモのようなハロゲン原子である〕
で示される化合物と反応させた後、必要ならば、アミノ保護基を除去するか、又はニトロ基を還元することによって製造することができる。
【０１１８】
方法Ｉ−１
式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、
【０１１９】
【化２９】
0003628258.tif 000022
【０１２０】
、−ＮＨＣＯ−ＣＨ（ＮＨ２）−Ｒ１３〔式中、Ｒ１３は、天然又は非天然アミノ酸から誘導される残基である〕、又は−ＮＨＣＯ−Ｒ１４〔式中、Ｒ１４は、上記に定義されたとおりである〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、アミノ基であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンを、式（ＶＩＩ）又は（ＶＩＩ′）：
【０１２１】
【化３０】
0003628258.tif 000023
【０１２２】
〔式中、Ｒ１３は、その官能基が適切に保護された、天然又は非天然アミノ酸から誘導される残基であり、Ｒ７は、アミノ保護基である〕
で示される酸、又は式（ＶＩＩＩ）：
【０１２３】
【化３１】
0003628258.tif 000024
【０１２４】
〔式中、Ｒ１４は、１個又はそれ以上の保護されたアミノ基、含窒素複素環、若しくは保護されたアミノ基を有するフェニル基を有する低級アルキル基である〕
で示される酸でアシル化した後、必要ならば、保護基を除去することによって製造することができる。
【０１２５】
方法Ｉ−２
Ｒ１が、
【０１２６】
【化３２】
0003628258.tif 000025
【０１２７】
〔式中、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１５及びｍは、上記に定義されたとおりである〕、又は
【０１２８】
【化３３】
0003628258.tif 000026
【０１２９】
〔式中、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１３、Ｒ１５及びｍは、上記に定義されたとおりである〕
である式（Ｉ）のアエロトリシンは、Ｒ１が−Ｎ（Ｒ１０）−Ｒ１１〔式中、Ｒ１０、及びＲ１１は、両者とも、アミノ基で置換された低級アルキルである〕、又は−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１５は、アミノ基で置換された低級アルキルであり；Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１３は、請求項１に定義されたとおりであるが、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１３中に存在するアミノ基は、保護されている〕である式（Ｉ）のアエロトリシンのアミノ基を式（ＶＩＩ）：
【０１３０】
【化３４】
0003628258.tif 000027
【０１３１】
〔式中、Ｒ１３は、その官能基が適切に保護された、天然又は非天然アミノ酸から誘導される残基であり、Ｒ７は、アミノ保護基である〕
で示される酸でアシル化した後、保護基を除去することによって製造することができる。
【０１３２】
方法Ｊ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、水素であり、Ｒ１３は、上記に定義されたとおりであり、Ｒ１５は、１個又はそれ以上のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、若しくはアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルである〕、
【０１３３】
【化３５】
0003628258.tif 000028
【０１３４】
〔式中、Ｒ１０は、水素であり、Ｒ１５は、１個又はそれ以上のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、若しくはアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルである〕、又は−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−Ｒ１４〔式中、Ｒ１５は、１個又はそれ以上のアミノ、グアニジノ、含窒素複素環、若しくはアミノ、アミジノ若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルであり、Ｒ１４は、上記に定義されたとおりである〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、方法Ｆに記載の式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、アミノ基であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのアミノ基をモノＮ−アルキル化した後、方法Ｉに記載の式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩ′）又は（ＶＩＩＩ）の対応する化合物でアシル化した後、必要ならば、保護基を除去することによって製造することができる。
【０１３５】
方法Ｋ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、グアニジノ基、−Ｎ（Ｒ１０）−Ｒ１１〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立にグアニジノ、又はグアニジノ基を有するフェニル基で置換された低級アルキルから選ばれる〕、−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１３は、上記に定義されたとおりであり、Ｒ１５は、１個又はそれ以上のグアニジノ基、含窒素複素環、若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルである〕、又は−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−Ｒ１４〔式中、Ｒ１４は、１個又はそれ以上のグアニジノ、含窒素複素環、若しくはグアニジノ基を有するフェニル基で置換された低級アルキルである〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ１は、アミノ基；−Ｎ（Ｒ１０）−Ｒ１１〔式中、Ｒ１０及びＲ１１は、それぞれ独立に、アミノ基、又はアミノ基を有するフェニル基で置換された低級アルキルから選ばれる〕、−Ｎ（Ｒ１５）−ＣＯ−ＣＨ〔Ｎ（Ｒ１０）Ｒ１１〕−Ｒ１３〔式中、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１３は、上記に定義されたとおりであり、Ｒ１５は、１個又はそれ以上のアミノ基、含窒素複素環、又はアミノ基を有するフェニル基で場合により置換された低級アルキルである〕、又は−ＮＨＣＯ−Ｒ１４〔式中、Ｒ１４は、１個又はそれ以上のアミノ基、含窒素複素環、若しくはアミノ基を有するフェニル基で置換された低級アルキルである〕であり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンを、活性化されたアミジン誘導体と反応させることによって製造することができる。
【０１３６】
方法Ｌ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ２は、低級アルキル、又はアシル、カルボキシル、カルバモイル、ヒドロキシル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ若しくはジ低級アルキルアミノで場合により置換された低級アルケニルであり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ２は、水素であり、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのフェノール性ヒドロキシル基を、アルキル化剤でＯ−アルキル化することによって製造することができる。
【０１３７】
方法Ｍ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、カルボキシル、低級アルコキシカルボニル、低級アルキル、アルケニル、又はヒドロキシル、アミノ、モノ低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、低級アルコキシカルボニル若しくはカルバモイルで場合により置換されていてよいアルキニルであり；Ｒ２は、水素であり；Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ２及びＲ３は、水素であり；Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンを、ヨウ素化剤でヨウ素化した後、得られた式（Ｉ）〔式中、Ｒ３は、ヨードであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のヨード誘導体を、一酸化炭素、アクリル酸メチルなどとパラジウム（０）触媒でカップリングさせた後、必要ならば、保護基を除去することによって製造することができる。
【０１３８】
方法Ｎ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ５は、−ＣＮであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのカルバモイル基を、脱水剤で脱水し、必要ならば、アミノ保護基を除去することによって製造することができる。
【０１３９】
方法Ｏ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ５は、−ＣＨ２ＮＨ２であり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２又は−ＣＮであり；Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのカルバモイル基又はシアノ基を、還元剤で還元し、必要ならば、アミノ保護基を除去することによって製造することができる。
【０１４０】
方法Ｐ
式（Ｉ）〔式中、Ｒ２は、ヒドロキシスルホニルであり；Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、式（Ｉ）〔式中、Ｒ２は、水素であり；Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｘ、Ｙ、Ｚ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンのチロシン残基を、ヒドロキシスルホン化した後、保護基を除去することによって製造することができる。
【０１４１】
方法Ｑ
式（Ｉ）〔式中、−Ｙ−（ＣＨ２）ｍ−Ｘ−Ｒ４は、ｎ−トリデカニル又は１−メチルトリデカニルであり；Ｒ５は、−ＣＯＮＨ２であり；Ｚは、酸素原子であり；Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、上記に定義されたとおりである〕のアエロトリシンは、スキーム１に概要を示した方法によって、式（ＩＸ）の線状ペプチドから製造することができる。
【０１４２】
Ｒ２、Ｒ３及びＲ５が、上記に定義されたとおりであり、Ｒ６が、アミノ保護基であるが、Ｒ５が−ＣＯＮＨ２であるとき、Ｒ２又はＲ３は、水素以外である、上記の式（ＩＩＩ）の化合物、及びその塩は、新規であり、やはり本発明の主題である。更に、スキーム１に示した式（ＩＸ）、（Ｘ）及び（ＸＩＩ）の線状ペプチド及び場合によりその塩も、新規であり、やはり本発明の主題である。
【０１４３】
【化３６】
0003628258.tif 000029
【０１４４】
方法Ａ〜Ｑは、下記のとおり、より詳しく説明することができる。
【０１４５】
方法Ａ
本発明に用いられる微生物は、アエロトリシン１、２及び３を生産できる、不完全菌類に属する、突然変異株及び変異株を包含する、いかなる菌株であることもできる。特に好ましいのは、日本の鹿児島県で採集された落葉から単離され、不完全菌類に属する菌株として同定された、ＮＲ７３７９株である。
ＮＲ７３７９株の培養及び形態学的特性は、下記のとおりである。
【０１４６】
１．培養特性
コーンミール寒天（ＣＭＡ）：増殖は、伸展性ではなかった。コロニーは、２５℃で１４日後に、接種物（寒天栓で直径４．５ｍｍ）から直径１１ｍｍに達し、平坦で淡黄白色であった。裏側は、淡黄白色であった。無色で粘質性の滲出物が存在した。
【０１４７】
三浦培地（ＬＣＡ）：増殖は、伸展性ではなかった。コロニーは、２５℃で１４日後に、接種物から直径１１ｍｍに達し、平坦で淡黄白色であった。裏側は、淡黄白色であった。滲出物は、不在であった。
【０１４８】
麦芽エキス寒天（ＭＥＡ）：増殖は、伸展性ではなかった。コロニーは、膿状であり、２５℃で１４日後に、接種物から直径１８ｍｍに達した。コロニーの色は、明るい帯黄褐色であった。裏側は、同じ色であった。滲出物は、無色かつ粘質性であった。
【０１４９】
馬鈴薯−デキストロース寒天（ＰＤＡ）：増殖は、伸展性ではなかった。コロニーは、膿状であり、２５℃で１４日後に、接種物から直径１４ｍｍに達した。コロニーの色及びきめは、ＭＥＡでのそれに似ていた。滲出物は、無色かつ粘質性であった。
【０１５０】
発芽は、ＣＭＡ、ＬＣＡ、ＭＥＡ及びＰＤＡで５〜３０℃の間で観察された。
【０１５１】
２．形態学的特性
菌糸体は、部分的に埋没し、部分的に表在し、分枝し、有隔であり、淡褐色ないし黄白色であった。分生子柄は、埋没した菌糸体から形成され、無紋、有隔であり、分枝し、不規則であった。分生子形成細胞は、明確な分生子柄か、又は不規則な菌糸に存在した。それらは、内生出芽型、フィアロ型、頂性又は亜頂性であった。頂性又は亜頂性フィアライドは、長さ及び形状が可変であり、円筒形ないし壺形（ｌａｇｅｎｉｆｏｒｍ）で、長さ及び幅は、それぞれ、５．５〜１０μｍ及び２．５〜５．５μｍに及んだ。隔壁直下に側生の分生子形成細胞を有する、不規則な糸状の分生子柄がしばしば形成された。分生子は、一細胞型、無色透明、平滑、球形ないし亜球形であり、長さが２．０〜５．５μｍ、幅が２．０〜５．０μｍであった。
【０１５２】
これらの明確な培養及び形態学的特性に基づき、本菌株は、不完全菌類ＮＲ７３７９株と呼ばれる不完全菌類に属した。
【０１５３】
不完全菌類ＮＲ７３７９と呼ばれる菌株は、ブダペスト条約の下、下記：不完全菌類ＮＲ７３７９株（ＦＥＲＭ第ＢＰ−６３９１号）のとおり、日本ロシュ株式会社（１０５，東京都港区芝２−６−１）から１９９８年６月１６日に工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託されている。
【０１５４】
本発明が提供する方法による培養は、培養しようとする微生物によって利用され得る、慣用の栄養素を含有する培地で実施することができる。炭素源としては、例えば、グルコース、ショ糖、澱粉、グリセリン、糖蜜、デキストリン、及びそれらの混合物を挙げることができる。窒素源は、例えば、大豆ミール、綿実ミール、肉エキス、ペプトン、乾燥酵母、酵母エキス、コーンスティープリカー、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、及びそれらの混合物である。その上、微生物の増殖を促進し、アエロトリシン１の生産を増強するために、その他の有機又は無機物質を培地に加えてもよい。そのような物質の例は、無機塩類、例えば炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、リン酸塩などである。
【０１５５】
培養は、好気的条件下、好ましくは液体培地で液内発酵によってか、又は固体培地で静的発酵によって実施する。２０〜３０℃の温度（最適温度２７℃）が、培養に適する。培養は、好ましくは、３〜９のｐＨで実施する。培養時間は、培養を実施する条件に依存する。一般的には、２０〜３６０時間培養を実施するのが充分である。
【０１５６】
目的のアエロトリシン１、２及び３を培養体から採集するには、微生物が生産した代謝物をその培養体から単離するのに常用される、分離方法を適正に用いることができる。例えば、アエロトリシン１は、メタノール抽出できる両性物質であって、好都合には、下記の手順で回収する。
【０１５７】
すなわち、固相発酵によって得られる全培養固型分を、適切な溶媒で抽出して、企図される産物を回収する。目的の化合物を全培養固型分から抽出するのに用い得る溶媒は、水溶性有機溶媒、又は水溶性有機溶媒の水溶液、例えばメタノール、エタノール、水性アルコールを包含する。
【０１５８】
得られた抽出物から塩類、水溶性物質等々を除去するには、水と水混和性有機溶媒、例えばｎ−ブタノール、酢酸エチル等々との間の溶媒分配を用いるのが好都合である。抽出物から着色物質、脂溶性物質などを除去するには、メタノール、エタノール、アセトニトリル−０．１％水性トリフルオロ酢酸の混合物等々による溶媒精製を実施するのが好都合である。
【０１５９】
アエロトリシンを完全に精製するには、カラムクロマトグラフィーを用いるのが好都合である。そのようなカラムクロマトグラフィーに用い得る担体は、ＹＭＣ−ＧＥＬ  ＯＤＳ（山村化学研究所）又は分取用Ｃ１８（Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）のようなものである。溶離液としては、水性トリフルオロ酢酸と、メタノール、エタノール、アセトニトリル等々のような、適切な水溶性有機溶媒との混合物で構成される溶媒系を用いる。こうして精製された溶出液画分は、各成分を含有していて、濃縮又は凍結乾燥に付して、アエロトリシン１、２及び３を微粉化する。
【０１６０】
アエロトリシン１、２及び３は、トリフルオロ酢酸塩として単離したが、遊離アエロトリシン１、２及び３は、下記の手順によって製造することができる。すなわち、アエロトリシン１、２及び３のトリフルオロ酢酸塩を、水に溶解し、これに、１当量の水酸化ナトリウムを加え、混合物を、セファデックスＬＨ−２０のカラムクロマトグラフィーに付した後、水性アルコール、例えばメタノール−水等々で溶出させて、それによって、それぞれ、アエロトリシン１、２及び３（遊離形態）を得る。
【０１６１】
方法Ｂ
式（ＩＩＩ）の出発化合物は、式（Ｉ）のアエロトリシン〔アエロトリシン１〜３はもとより、方法Ｃ〜Ｑから選ばれる方法の使用によって、アエロトリシン１〜３から変換されたものを含む〕から、ＷＯ９６／３０３９９に記載されたのと類似の方法によって製造することができる。この方法は、ラクトン環のアルカリ加水分解とそれに続く脂肪酸鎖の酵素切断を含む。式（ＩＩＩ）のＲ６、及び式（ＩＶ）のＲ８のための好ましいアミノ保護基は、それぞれｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）及び９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）である。
【０１６２】
式（ＩＩＩ）の出発化合物は、不完全菌類の発酵によって得られる式（ＩＸ）の線状ペプチドからも、以下に述べる慣用のペプチド合成によって製造することができる。
【０１６３】
式（ＩＶ）〔式中、Ｙは、−ＣＯＮＨ−であり；Ｒ４、Ｒ８及びＸは、上記に定義されたとおりである〕の出発化合物は、式（ＸＩＶ）：
【０１６４】
【化３７】
0003628258.tif 000030
【０１６５】
〔式中、Ｒ７は、アミノ保護基、例えばＦｍｏｃ基であり、Ｒ８は、上記に定義されたとおりである〕
で示される化合物を、式（ＸＶ）：
【０１６６】
【化３８】
0003628258.tif 000031
【０１６７】
〔式中、Ｒ４、Ｒ８及びＸは、上記に定義されたとおりである〕
で示される化合物と縮合させた後、ｔｅｒｔ−ブチル基を除去することによって製造することができる。式（ＸＩＶ）の化合物は、商業的に入手できる。
【０１６８】
式（ＸＶ）〔式中、Ｘは、単結合、場合により１個又はそれ以上のヘテロ原子を含むか、及び／又は場合によりハロゲン原子若しくは低級アルキルで置換されたアリール、ビフェニル、又はテルフェニル基である〕の出発化合物は、商業的に入手できるか、又はＥＰ ７３６，５４１、及びスキーム２に記載されたのと類似の方法、例えば、以下に述べるスキーム２のカルボン酸中間体から製造されるカルボキシアミドのＬｉＡｌＨ４還元後とそれに続く、塩化Ｆｍｏｃなどによるアミノ基の保護によって製造することができる。
【０１６９】
式（ＩＶ）〔式中、Ｙは、−ＣＯＮＨ−又は−ＣＯＮ（低級アルキル）−であり；Ｒ４、Ｒ７、Ｒ８及びＸは、上記に定義されたとおりである〕の代表的な化合物は、下記のとおりである：
【０１７０】
【化３９】
0003628258.tif 000032
【０１７１】
式（ＩＶ）〔式中、Ｙは、単結合又は−ＣＨ２−であり；Ｒ４、Ｒ８及びＸは、上記に定義されたとおりである〕の出発化合物は、（Ｒ）−（＋）−Ｎ−ベンジル−１−フェニルエチルアミンから式（ＸＶＩ）：
【０１７２】
【化４０】
0003628258.tif 000033
【０１７３】
〔式中、Ｒ４、Ｘ及びｍは、上記に定義されたとおりである〕
で示される化合物への、ＬＤＡのような強塩基の存在下でのマイケル付加〔Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ， ２（３）， １８３ （１９９１）を参照されたい〕とそれに続く、（ｉ）接触水素化によるＮ−脱ベンジル、（ｉｉ）得られた第一級アミンの塩化Ｆｍｏｃなどによる保護、及び（ｉｉｉ）ｔｅｒｔ−ブチル基の除去によって製造することができる。
【０１７４】
式（ＸＶＩ）の出発化合物は、下記のスキーム２に概要を示した方法によって製造することができる。
【０１７５】
【化４１】
0003628258.tif 000034
【０１７６】
ｍが４である式（ＸＶＩ）の化合物は、スキーム２の工程１〜３を反復してからの、最後のウィッティッヒ反応によって製造することができる。
【０１７７】
式（ＩＶ）〔式中、Ｙは、単結合又は−ＣＨ２−であり；Ｒ４、Ｒ７及びＸは、上記に定義されたとおりである〕の代表的な化合物は、下記のとおりである：
【０１７８】
【化４２】
0003628258.tif 000035
【０１７９】
【化４３】
0003628258.tif 000036
【０１８０】
最初のペプチド結合の形成反応はもとより、得られる線状ペプチドの環化も、ペプチド化学の当業者に公知の方法によって実施することができる〔Ｔｈｅ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｍ． Ｂｏｄａｎｓｋｙ ａｎｄ Ａ． Ｂｏｄａｎｓｋｙ ／２ｎｄ ｅｄ．， １９９４ （Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ）を参照されたい〕。好ましい縮合剤は、ＢＯＰ−ＨＯＢｔ、ＰｙＢＯＰ（登録商標）−ＨＯＢｔ、ＰｙＢｒｏＰ（登録商標）−ＨＯＢｔなどである〔カップリング剤：商業的に入手できる（Ｔｈｅ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｃａｔａｌｏｇ， Ｆｅｂ．， １９９７； Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ．を参照されたい）〕。
【０１８１】
反応は、メタノール、エタノール、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドンなどのような溶媒中で、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジンなどのような塩基の存在又は不在下で、−２０〜＋５０℃の温度、好ましくは０〜＋２５℃で実施することができる。
【０１８２】
方法Ｃ
式（Ｉ）のアエロトリシンのニトロ化は、当業者に公知の方法によって；代表的には、亜硝酸ナトリウム／酢酸、テトラニトロメタン／ピリジンなどによって実施することができる。
【０１８３】
反応は、−２０〜０℃の温度、好ましくは０℃で実施することができる。
【０１８４】
方法Ｄ
ニトロ基の還元は、当業者に公知の方法によって；代表的には、パラジウム−Ｃ、酸化白金などのような触媒を用いた、接触水素化によって実施することができる。
【０１８５】
反応は、メタノール、エタノール、酢酸などの溶媒中で、室温で実施することができる。
【０１８６】
方法Ｅ及びＩ
式（Ｉ）のＲ１又はＲ３中に存在するアミノ基のＮ−アシル化は、当業者に公知の方法によって、酸無水物若しくは塩化カルバモイルによるか、又はジシクロヘキシルカルボジイミド、ＢＯＰ、ＨＢＴＵ、ＴＮＴＵ、ＰｙＢｒｏＰ（登録商標）、ＰｙＢＯＰ（登録商標）、ＴＢＴＵ、ＴＳＴＵ、ＨＯＢｔなどのような縮合剤を用いて、カルボン酸によるか、或いはこれらの二つの組合せにより、実施することができる。
【０１８７】
反応は、メタノール、エタノール、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドンなどのような溶媒中で、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジンなどのような塩基の存在又は不在下で、−２０〜＋５０℃の温度、好ましくは０〜＋２５℃で実施することができる。
【０１８８】
アミノ保護基の除去は、縮合反応にＮ−保護アミノ酸を用いたときは、当業者に公知の方法によって、例えば、Ｂｏｃ基に対するトリフルオロ酢酸、又はＦｍｏｃ基に対するピペリジンによる処理によって実施することができる。
【０１８９】
方法Ｆ
式（Ｉ）のＲ１中に存在するアミノ基のＮ−モノアルキル化は、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｃｏｌ． Ｖｏｌ． ＩＩＩ， ｐ．９３に記載の方法に従って、アクリロニトリル、エトキシメチレンマロノニトリル又は（１−エトキシエチリデン）マロノニトリルを用い、次いで、得られたニトリル基の接触水素化による還元、又はホウ水素化ナトリウム／塩化コバルト、ボラン−硫化メチル錯体などによる還元によって実施することができる〔Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， ３７， ２２２ （１９９４）を参照されたい〕。
【０１９０】
方法Ｇ
式（Ｉ）のＲ１中に存在する第一級又は第二級アミノ基のＮ−アルキル化は、酢酸のような弱酸の存在又は不在下で、シアノホウ水素化ナトリウムのような還元剤を用いた、式（Ｖ）のアルデヒド誘導体による慣用の還元的アルキル化によって実施することができる。
【０１９１】
反応は、メタノール、エタノール、酢酸などのような溶媒中で、室温で実施することができる。
【０１９２】
方法Ｈ
置換反応のための式（ＶＩ）の化合物（Ｒ１２−Ｑ）の例は、２−ブロモ−５−ニトロピリジン、２−クロロピリミジン、クロロピラジンなどである。
【０１９３】
置換反応は、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドのような溶媒中で、炭酸カリウム、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンなどのような酸捕獲剤の存在又は不在下で、−２０〜＋５０℃、好ましくは０〜＋２５℃の間の温度で実施することができる。
【０１９４】
方法Ｊ
式（Ｉ）のＲ１中に存在するアミノ基の最初のモノ−Ｎ−アルキル化は、方法Ｆに記載した方法によって、実施することができる。続くＮ−アシル化は、方法Ｅ及びＩに記載した方法によって実施することができる。
【０１９５】
方法Ｋ
式（Ｉ）のＲ１中に存在するアミノ基のグアニジノ基への変換は、３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジン、ホルムアミジンスルホン酸、ベンゾトリアゾール−１−カルボキサミジニウム＝トシラートなどのような、活性化されたアミジン誘導体によって実施することができる。
【０１９６】
反応は、メタノール、エタノール、水、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどのような溶媒中で、０〜５０℃の間の温度、好ましくは２０〜３０℃で実施することができる。
【０１９７】
方法Ｌ
式（Ｉ）中のチロシン残基のヒドロキシル基のＯ−アルキル化は、当業者に公知の方法によって、炭酸ナトリウム、ジイソプロピルエチルアミンなどのような酸捕獲剤の存在下で実施することができる〔Ｃａｎ． Ｊ． Ｃｈｅｍ．， ３６， １５２１ （１９５８）〕。
【０１９８】
反応は、メタノール、エタノール、アセトン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどのような溶媒中で、０〜＋５０℃の間の温度、好ましくは０〜＋２５℃で実施することができる。
【０１９９】
方法Ｍ
チロシン残基中のフェノール基のオルト位でのヨウ素化は、メタノール、エタノールなどのような溶媒中で、室温での、一塩化ヨウ素又はヨウ化ナトリウム／水性次亜塩素酸ナトリウムによる、Ｒ２が水素である式（Ｉ）のアエロトリシンの処理によって実施することができる。
【０２００】
一酸化炭素、アクリル酸メチルなどとのパラジウム（０）触媒カップリング反応は、Ｐｄ（ＯＡｃ）２、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（ｄｐｐｐ）２のようなパラジウム（０）触媒を用いて、メタノール、エタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトニトリルなどのような溶媒中で、トリエチルアミンのような塩基の存在下、２０〜＋１００℃の間の温度、好ましくは２０〜＋７０℃で実施することができる〔Ｂｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ． Ｌｅｔｔ．， ７ （２２）， ２８７９ （１９９７）〕。
【０２０１】
方法Ｎ
式（Ｉ）のカルバモイル基（Ｒ５）の脱水は、バージェス試薬〔Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能〕、塩化シアヌル、塩化オキサリルなどによって実施することができる〔Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， ３７， ２２２ （１９９４）〕。
【０２０２】
反応は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドンなどのような溶媒中で、室温で実施することができる。
【０２０３】
方法Ｏ
式（Ｉ）のカルバモイル基又はシアノ基（Ｒ５）の還元は、ホウ水素化ナトリウム／塩化コバルト、ボラン−硫化メチル錯体などによる還元によって実施することができる〔Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．， ３７， ２２２ （１９９４）を参照されたい〕。
【０２０４】
反応は、メタノール、エタノールなどのような溶媒中で、室温で実施することができる。
【０２０５】
方法Ｐ
式（Ｉ）のチロシン残基のヒドロキシスルホン化は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフランなどのような溶媒中、−３０〜＋７０℃の間の温度、好ましくは室温で、三酸化硫黄−ＤＭＦ錯体、三酸化硫黄−ピリジン錯体又は三酸化硫黄−トリエチルアミン錯体によって実施することができる〔Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ． Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．， （６） １７３９ （１９９０）を参照されたい〕。
【０２０６】
方法Ｑ
この方法に関与する反応は、方法Ｂ〜Ｏに記載されたのと類似の方法によって実施することができる。
【０２０７】
出発材料、すなわち式（ＩＸ）の線状ペプチドは、不完全菌類に属する微生物を、好気的条件下、水性又は固体培地で培養し、培養体から式（ＩＸ）の線状ペプチドを単離することによって得ることができる。
【０２０８】
本発明に用いられる微生物は、式（ＩＸ）の線状ペプチドを生産できる、不完全菌類に属する、突然変異株及び変異株を包含する、いかなる菌株であることもできる。特に好ましいのは、鹿児島県で採集された落葉から単離され、不完全菌類に属する菌株として同定された、ＮＲ７３７９株である。
【０２０９】
不完全菌類ＮＲ７３７９と呼ばれる菌株は、ブダペスト条約の下、下記：不完全菌類ＮＲ７３７９株（ＦＥＲＭ第ＢＰ−６３９１号）のとおり、１９９８年６月１６日に工業技術院生命工学工業技術研究所に寄託されている。
【０２１０】
本発明が提供する方法による培養は、培養しようとする微生物によって利用され得る、慣用の栄養素を含有する培地で実施することができる。炭素源としては、例えば、グルコース、ショ糖、澱粉、グリセリン、糖蜜、デキストリン、及びそれらの混合物を挙げることができる。窒素源は、例えば、大豆ミール、綿実ミール、肉エキス、ペプトン、乾燥酵母、酵母エキス、コーンスティープリカー、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウム、及びそれらの混合物である。その上、微生物の増殖を促進し、式（ＩＸ）の線状ペプチドの生産を増強するために、その他の有機又は無機物質を培地に加えてもよい。そのような物質の例は、無機塩類、例えば炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、リン酸塩などである。
【０２１１】
培養は、好気的条件下、好ましくは液体培地で液内発酵によってか、又は固体培地で静的発酵によって実施する。２０〜３０℃の温度（最適温度２７℃）が、培養に適する。培養は、好ましくは、３〜９のｐＨで実施する。培養時間は、培養を実施する条件に依存する。一般的には、１２０〜６７２時間培養を実施するのが充分である。
【０２１２】
式（ＩＸ）の目的の線状ペプチドを培養体から採集するには、微生物が生産した代謝物をその培養体から単離するのに常用される、分離方法を適正に用いることができる。例えば、式（ＩＸ）の線状ペプチドは、メタノール抽出できる両性物質であって、好都合には、下記の手順で回収する。
【０２１３】
すなわち、液体発酵によって得られた培養ブロスを、適切な溶媒で抽出して、企図された産物を回収する。目的の化合物を培養されたブロスから抽出するのに用い得る溶媒は、水溶性有機溶媒、又は水溶性有機溶媒の水溶液、例えばメタノール、エタノール、水性アルコール、ｎ−ＢｕＯＨのような水混和性有機溶媒を包含する。
【０２１４】
得られた抽出物から塩類、水溶性物質等々を除去するには、水と水混和性有機溶媒、例えばｎ−ブタノール、酢酸エチル等々との間の溶媒分配を用いるのが好都合である。抽出物から着色物質、脂溶性物質などを除去するには、メタノール、エタノール、アセトニトリル−０．１％水性トリフルオロ酢酸の混合物等々による溶媒精製を実施するのが好都合である。
【０２１５】
式（ＩＸ）の線状ペプチドを完全に精製するには、カラムクロマトグラフィーを用いるのが好都合である。そのようなカラムクロマトグラフィーに用い得る担体は、Ｃａｐｃｅｌ Ｐａｋ Ｃ１８ ＵＧ８０（資生堂株式会社）のようなものである。溶離液としては、水性トリフルオロ酢酸と、メタノール、エタノール、アセトニトリル等々のような、適切な水溶性有機溶媒との混合物よりなる溶媒系を用いる。こうして精製された溶出液画分は、式（ＩＸ）の線状ペプチドを含有していて、濃縮又は凍結乾燥に付して、式（ＩＸ）の線状ペプチドを微粉化する。
【０２１６】
式（ＩＸ）の線状ペプチドは、トリフルオロ酢酸塩として単離したが、式（ＩＸ）の遊離線状ペプチドは、下記の手順によって製造することができる。すなわち、式（ＩＸ）の線状ペプチドのトリフルオロ酢酸塩を、水に溶解し、これに、１当量の水酸化ナトリウムを加え、混合物を、セファデックスＬＨ−２０のカラムクロマトグラフィーに付した後、水性アルコール、例えばメタノール−水等々で溶出させて、それによって、式（ＩＸ）の線状ペプチドを得る。
【０２１７】
本発明が提供する式（ＩＸ）の線状ペプチドは、様々な真菌に対してはいかなる殺真菌活性も示さないが、アエロトリシンのような強力な抗真菌剤を製造するための重要な中間体となることができる。
【０２１８】
本発明は、アエロトリシンの酸付加塩にも関する。該酸付加塩は、単離の正常な過程の後に、トリフルオロ酢酸塩として得ることができる。こうして得られた塩は、水に溶解し、望みの陰イオンを有する陰イオン交換カラムを通過させてよい。望みの塩を含有する溶出液は、濃縮して、塩を固体生成物として回収してよい。
【０２１９】
式（Ｉ）のアエロトリシンは、第三級窒素原子の存在の力で、対応する塩へと変換してよい。
【０２２０】
式（Ｉ）のアエロトリシンの酸付加塩は、少なくとも化学量論量の適切な酸、例えば、鉱酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など、及び有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などによる、アエロトリシンの遊離塩基の処理によって得ることができる。代表的には、遊離塩基は、エタノール、メタノールなどのような不活性有機溶媒に溶解し、類似の溶媒中で酸付加する。温度は、約４０℃に保つ。得られた塩は、自発的に沈澱するか、又はより低い極性の溶媒で溶液にさせてよい。
【０２２１】
式（Ｉ）のアエロトリシンの酸付加塩は、少なくとも化学量論量の、水酸化ナトリウム又はカリウム、炭酸カリウム、重炭酸ナトリウム、アンモニアなどのような適切な塩基で処理することによって、対応する遊離塩基に変換してよい。
【０２２２】
本発明が提供するアエロトリシンは、様々な真菌に対して幅広い殺真菌活性を示し、真菌感染症の治療及び予防のための薬剤として用いることができる。式（Ｉ）の代表的なアエロトリシンのｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ抗真菌活性（表２及び３を参照されたい）、並びに肝細胞に対する毒性を、下記に示す：
【０２２３】
１．ｉｎ ｖｉｔｒｏ抗真菌活性
本研究の代表的なアエロトリシンのｉｎ ｖｉｔｒｏ抗真菌活性を、５０％阻害濃度（ＩＣ５０）を決定することによって評価したが、これは、分光測光によって、真菌の増殖を薬物を含まない対照の増殖と比較して、２０％の濁度まで阻害するための抗真菌剤の最低濃度として算出した。
【０２２４】
ＩＣ５０値は、下記の僅かな変更を加えたＮＣＣＬＳ認可規格（臨床的研究室規格のための米国国家委員会（１９９７）、酵母に対するブロス希釈抗真菌剤感受性試験のための基準方法、認可規格、文書第Ｍ２７−Ａ号）に基づき、ブロス微量希釈手順によって決定した。１％グルコース及び０．２５％Ｋ２ＨＰＯ２を補強したＹｅａｓｔ Ｎｉｔｒｏｇｅｎ Ｂａｓｅ（ＹＮＢ；Ｄｉｆｃｏ Ｌａｂ．）を、酵母用試験培地として用い、０．２％低融点アガロース（ＢＲＬ）で固化した同じ培地を、糸状真菌に用いた。接種量は、１〜３×１０４細胞／ｍｌであり、インキュベーションは、３５℃で１〜２日間実施した。
【０２２５】
【表７】
0003628258.tif 000037
【０２２６】
２．Ｉｎ ｖｉｖｏ抗真菌有効性
本発明のアエロトリシンのｉｎ ｖｉｖｏ抗真菌有効性を、下記の表３に示す。慣用の免疫適格マウス系統であるＣｒｊ：ＣＤ−１（ＩＣＲ）系マウスを、全身性カンジダ症の実験的感染モデルに用いた。４週齢のＣｒｊ：ＣＤ−１（ＩＣＲ）系マウスを、１個体あたり分生子５×１０６個のカンジダ・アルビカンスＣａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓを尾静脈から注射することによって全身性カンジダ症に用いた。投与は、第１日に２回（感染後０、４時間）、その後２日間は毎日１回静脈内に（ｉ．ｖ．）実施して、全身性カンジダ症を発症させた（ｂ．ｉ．ｄ．×１日、その後ｑ．ｄ．×２日）。１４日目の各用量での生存数から、５０％有効用量（ＥＤ５０）値を算出した。
【０２２７】
【表８】
0003628258.tif 000038
【０２２８】
３．ｉｎ ｖｉｔｒｏ肝毒性試験
マウス肝細胞を、コラゲナーゼ消化によって単離し、微量試験プレートで培養した。肝細胞の単細胞層を、培養系内で試験アエロトリシンと１日間接触させた。培養期間の後、肝細胞を顕微鏡下で観察し、形態学的に評価した。試験アエロトリシンによる肝細胞の形態学的変化（変性）の程度を、ＷＦ１１２４３及びＬＹ３０３３６６と比較した。
【０２２９】
【表９】
0003628258.tif 000039
【０２３０】
５ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇのアエロトリシン１の、マウスに対する４週間の投与は、急性毒性を全く示さなかった。
【０２３１】
上記により、式（Ｉ）の新規アエロトリシンはもとより、薬学的に許容され得るその塩も、マウスにおいて、アスペルギルス症を包含する様々な真菌感染に対して強力な抗真菌活性を、広範囲の用量にわたって示し、抗真菌剤として有用である。その上、本発明が提供するアエロトリシンは、肝細胞に対し、公知の環状ペプチド誘導体（ＷＦ１１２４３及びＬＹ３０３３６６）よりはるかに弱い細胞毒性を示す。
【０２３２】
本発明のアエロトリシンは、免疫低下の患者におけるニューモシスティス・カリニＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｃａｒｉｎｉｉの感染を阻害又は緩和するのにも有用である。
【０２３３】
本発明は、更に、式（Ｉ）の新規アエロトリシン、及び薬学的に許容され得るその塩を含有する医薬組成物に関する。
【０２３４】
式（Ｉ）の新規アエロトリシン、及び薬学的に許容され得るその塩は、極めて活性な抗真菌剤である。それらは、Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ．， Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．， Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｐ．， Ｍｕｃｏｒ ｓｐｐ．及びＡｂｓｉｄｉａ ｓｐｐ． を包含する、様々な真菌種に対して活性を有する。
【０２３５】
したがって、本発明のアエロトリシンは、動物はもとより、ヒトの真菌症の局所的及び全身的治療に役立つ。例えば、それらは、Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ．， Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ． 及びＭｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｓｐｐ．によって生じる局所性及び粘膜性真菌感染を治療するのに役立つ。例えば Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ．， Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｓｐｐ．， 又はＦｕｓａｒｉｕｍ ｓｐｐ．によって生じる全身性真菌感染の治療にも用いてよい。
【０２３６】
臨床的用途には、式（Ｉ）の新規アエロトリシン及び薬学的に許容され得るその塩は、単独で投与することができるが、一般的には、特定の用途、及び望みの目的に適切であるように、賦形剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、コーティング材料、乳化剤、懸濁化剤、溶剤、安定剤、吸収強化剤及び／又は軟膏基剤を混合することによって配合された、医薬混合物として投与される。該混合物は、経口、注射用、経鼻、経直腸又は局所投与に用いることができる。
【０２３７】
経口投与のためのアエロトリシンの医薬配合物は、顆粒、錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、懸濁剤又はエマルションであってよい。例えば静脈内、筋内、又は皮下の、非経口注射のためには、式（Ｉ）のアエロトリシンを、溶液を等張にするためのその他の物質、例えば塩類又はグルコースを含有してよい、無菌水溶液の形態で用いてよい。これらの組成物は、好ましくは防腐剤を加えた、アンプルでの単位剤型、又は複数投与量容器中に存在してもよい。これに代えて、活性成分は、投与の前に適切な担体で再構成するための粉末形態であってもよい。アエロトリシンは、坐薬又はペッサリーの形態で投与することもでき、又はローション剤、液剤、クリーム剤、軟膏剤又はダスティングパウダーの形態で、局所的に適用してもよい。
【０２３８】
式（Ｉ）のアエロトリシンの１日当たりの投与量は、経口又は非経口いずれかの経路によって投与するときは、０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ（分割用量として）である。したがって、アエロトリシンの錠剤又はカプセル剤は、適切である限りで、一時に１回、又は２回若しくはそれ以上の投与のために、活性化合物５ｍｇ〜０．５ｇを含有することを期待することができる。いずれにしても、実際の投与量は、医師が決定することができ、個々の患者の年齢、体重及び応答に応じて変化し得る。
【０２３９】
アエロトリシンが抗真菌剤として使用されるときは、いかなる投与方法を用いてもよい。真菌感染の治療には、経口又は静脈内投与を用いるのを常とする。
【０２４０】
ニューモシスティス感染の制御にアエロトリシンを用いようとするときは、肺及び気管支に直接投与するのが望ましい。そのためには、吸入法が好適である。吸入又は経鼻での投与には、本発明のアエロトリシンを、好都合には、加圧パック又はネビュライザーからのエアゾルスプレーの形態で送達する。吸入又は経鼻の好適な送達系は、計量された用量の吸入エアゾルであって、適切な噴射剤、例えばフルオロカーボン又は炭化水素中の、式（Ｉ）の化合物の粉末、懸濁液又は溶液として配合してよい。
【０２４１】
本発明のアエロトリシンは、錠剤、カプセル剤、局所用組成物、吸入用粉末、坐剤などとして用いてよいが、本発明のアエロトリシンの水及び水性媒体中の溶解度のため、注射用配合物、及びエアゾルスプレーに適した液体組成物での用途に適合している。
【０２４２】
下記の実施例は、本発明のアエロトリシンの好適な製造法を例示するが、本発明の対象範囲をそれらに限定するものではない。
【０２４３】
下記の実施例中、生成物は、下記に列挙したものから選ばれる逆相カラムを用いたＨＰＬＣによって、分析かつ精製した。混合溶媒は、各実施例に記載された適切な比率での、０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリルで構成した。
【０２４４】
ＨＰＬＣカラム：
カラムＡ：  ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８， ＵＧ−１２０、４．６×２５０ｍｍ
カラムＢ：  ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８， ＵＧ−１２０、１０×２５０ｍｍ
カラムＣ：  ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８， ＵＧ−８０、２０×２５０ｍｍ
カラムＤ：  ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８， ＳＧ−１２０、４．６×２５０ｍｍ
カラムＥ：  ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８， ＳＧ−１２０、１０×２５０ｍｍ
カラムＦ：  ＴＳＫ ＧＥＬ ＯＤＳ−８０Ｔｓ、２０×２５０ｍｍ
【０２４５】
次の実施例においてアエロトリシンは、他に指示がない限りトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０２４６】
参考実施例１
（Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニルアミノ）−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）−ペンタン酸の調製
【０２４７】
ａ）４−ブロモ−４′−ヘプチルオキシビフェニルの調製
【０２４８】
ＤＭＦ（１００ｍｌ）中の４−ブロモ−４′−ヒドロキシビフェニル（５．０５ｇ、２０．２ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、Ｋ２ＣＯ３（４．２０ｇ、３０．４ｍｍｏｌ）および１−ブロモヘプタン（４．１４ｍｌ、２６．４ｍｍｏｌ）を添加し、その後混合物を８０℃に加熱した。８０℃で２０時間攪拌した後、混合物を室温に冷却した。混合物をＥｔ２Ｏ（２５０ｍｌ）で希釈し、その後溶液を飽和ブライン（１５０ｍｌ）で２回洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空下で濃縮した。ＣＨ２Ｃｌ２−石油エーテルから残渣を再結晶化して、４−ブロモ−４′−ヘプチルオキシビフェニル（６．２１ｇ、８８％）を白色固体として与えた；ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ３４７〔ＭＨ＋〕。
【０２４９】
ｂ）４−ホルミル−４′−ヘプチルオキシビフェニルの調製
ＴＨＦ（１２０ｍｌ）中の４−ブロモ−４′−ヘプチルオキシビフェニル（６．２１ｇ、１７．９ｍｍｏｌ）の低温（０℃）の攪拌した溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中の１．６６Ｍ溶液を３２．３ｍｌ、５３．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で２０分間攪拌した後、ＤＭＦ（４．８５ｍｌ、６２．６ｍｍｏｌ）を−７８℃で添加した。混合物を−７８℃でさらに２０分間攪拌し、その後飽和水性ＮＨ４Ｃｌで反応停止させた。混合物をＥｔＯＡｃ（２２０ｍｌ）で希釈し、その後飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（１２５ｍｌ）および飽和ブライン（１００ｍｌ）で順次洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：２０）で精製して、４−ホルミル−４′−ヘプチルオキシビフェニル（２．２１ｇ、４２％）を白色非晶質粉末として得た。
【０２５０】
ｃ）３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）アクリル酸エチルエステルの調製
ベンゼン（４０ｍｌ）中の４−ホルミル−４′−ヘプチルオキシビフェニル（２．２１ｇ、７．４６ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、Ｐｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯＯＥｔ（５．１９ｇ、１４．９ｍｍｏｌ）を添加し、その後混合物を６０℃に加熱した。６０℃で３時間攪拌した後、混合物を室温に冷却して真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサン、１：２）で精製して、３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）アクリル酸エチルエステル（２．６６ｇ、９７％）を白色非晶質粉末として得た。
【０２５１】
ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ３６７〔ＭＨ＋〕，
１Ｈ ＮＭＲ： δ ０．９０ （ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ３Ｈ）， １．２５−１．５５ （ｍ， ８Ｈ）， １．３５ （ｔ， Ｊ＝７．１Ｈｚ， ３Ｈ）， １．８１ （ｑｕｉｎｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．００ （ｔ， Ｊ＝６．４Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．２８ （ｑ， Ｊ＝７．１Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．４６ （ｄ， Ｊ＝１６．０Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９４−７．００ （ｍ， ２Ｈ）， ７．５０−７．６０ （ｍ， ６Ｈ）， ７．７２ （ｄ， Ｊ＝１６．０Ｈｚ， １Ｈ）．
【０２５２】
ｄ）３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロピオン酸エチルエステルの調製
ＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍｌ）中の３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）アクリル酸エチルエステル（２．６５ｇ、７．２３ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、パラジウム−活性炭（Ｐｄが約１０重量％、１．０７ｇ）を添加し、その後混合物を水素雰囲気下に置いた。２時間攪拌した後、混合物をセライトのパッドで濾過し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。濾液および洗液を混合して真空下で濃縮し、３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロピオン酸エチルエステル（粗製、２．７４ｇ）を得、さらに精製せずに次の段階で使用した。
【０２５３】
１Ｈ ＮＭＲ：δ ０．９０ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ３Ｈ）， １．２５ （ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ３Ｈ）， １．２９−１．５６ （ｍ， ８Ｈ）， １．７５−１．８６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．６５ （ｔ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．９８ （ｔ， Ｊ＝７．８Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９９ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１４ （ｑ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．９３−６．９８ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２５ （ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４３−７．５２ （ｍ， ４Ｈ）．
【０２５４】
ｅ）３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロパン−１−オールの調製
ＴＨＦ（２０ｍｌ）中のＬｉＡｌＨ４（０．４７ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）の低温（０℃）の攪拌した懸濁液に、ＴＨＦ（３０ｍｌ）中の３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロピオン酸エチルエステル（粗製、２．７４ｇ）の溶液を添加した。室温で３０分間攪拌した後、混合物を０℃のＨ２Ｏで反応停止させた。混合物をセライトのパッドで濾過して、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄した。濾液および洗液を混合して、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、２：３）で精製して、３−（４′−ヘプチルオキシ−ビフェニル−４−イル）プロパン−１−オール（２．２７ｇ、２段階で９６％）を白色非晶質粉末として得た。
【０２５５】
ＥＩ−ＭＳ： ｍ／ｚ ３２６〔Ｍ＋〕，
１Ｈ ＮＭＲ： δ ０．９０ （ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， ３Ｈ）， １．２１−１．５５ （ｍ， ８Ｈ）， １．８１ （ｑｕｉｎｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， １．８６−２．００ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７５ （ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．７１ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９９ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ６．９２−７．００ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２５ （ｄ， Ｊ＝７．９Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４４−７．５５ （ｍ， ４Ｈ）．
【０２５６】
ｆ）３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロピオンアルデヒドの調製
ＣＨ２Ｃｌ２（６０ｍｌ）中の３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロパン−１−オール（２．２６ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）の低温（０℃）の攪拌した溶液に、分子ふるい４Ａ粉末（５．１７ｇ）およびＰＣＣ（５．２５ｇ、２４．４ｍｍｏｌ）を添加した。室温で２時間攪拌した後、Ｅｔ２Ｏ（２０ｍｌ）を混合物に添加した。反応混合物をショートシリカゲルカラムに移して、ＣＨ２Ｃｌ２で溶出した。溶出液を真空下で濃縮して、３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロピオンアルデヒド（粗製、２．４５ｇ）を得、さらに精製せずに次の段階で使用した。
【０２５７】
ｇ）３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペント−２−エン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
ベンゼン（１５０ｍｌ）中の３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）プロピオンアルデヒド（粗製、２．４５ｇ）の攪拌した溶液に、Ｐｈ３Ｐ＝ＣＨＣＯＯｔ−Ｂｕ（５．２１ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を添加し、その後混合物を６０℃に加熱した。６０℃で３０分間攪拌した後、混合物を室温に冷却して真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：３０）で精製して、３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペント−２−エン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．９５ｇ、２段階で６７％）を白色非晶質粉末として与えた。
【０２５８】
ＥＩ−ＭＳ： ｍ／ｚ ４２２〔Ｍ＋〕，
１Ｈ ＮＭＲ： δ ０．９０ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ３Ｈ）， １．２１−１．５１ （ｍ， ８Ｈ）， １．４９ （ｓ， ９Ｈ）， １．７４−１．８７ （ｍ， ２Ｈ）， ２．４７−２．５８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．７９ （ｔ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ３．９９ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ５．８１ （ｄ．ｔ．， Ｊ＝１．５Ｈｚ， １５．５Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８７−７．０１ （ｍ， ３Ｈ）， ７．２３ （ｄ， Ｊ＝７．９Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．４４−７．５３ （ｍ， ４Ｈ）．
【０２５９】
ｈ）（Ｒ）−３−〔ベンジル（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミノ〕−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
ＴＨＦ（４０ｍｌ）中の（Ｒ）−Ｎ−ベンジル−１−フェニルエチルアミン塩酸塩（３．２８ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）の低温（０℃）の攪拌した懸濁液に、ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中の１．６１Ｍ溶液を１５．０ｍｌ、２４．２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃で２５分間攪拌した後、ＴＨＦ（３０ｍｌ）中の３−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペント−２−エン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．９４ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃で添加した。混合物を−７８℃でさらに２０分間攪拌した後、反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌで反応停止させて、真空下で濃縮した。残渣を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（２００ｍｌ）で希釈し、その後ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍｌ）で２回抽出した。混合した抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：４０）で精製して、（Ｒ）−３−〔ベンジル（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミノ〕−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．８３ｇ、定量（ｑｕａｎｔ．））を無色油状物として与えた。
【０２６０】
ＥＩ−ＭＳ： ｍ／ｚ ６３３〔Ｍ＋〕，
１Ｈ ＮＭＲ： δ ０．９１ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ３Ｈ）， １．２４−１．５５ （ｍ， １３Ｈ）， １．３８ （ｓ， ９Ｈ）， １．５７−２．０４ （ｍ， ６Ｈ）， ２．５２−２．６９ （ｍ， １Ｈ）， ２．９７−３．１Ｏ （ｍ， １Ｈ）， ３．３７−３．４９ （ｍ， １Ｈ）， ３．５５ （ＡＢｑ， Ｊ＝１５．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８５ （ＡＢｑ， Ｊ＝１５．０Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８８ （ｑ， Ｊ＝６．９Ｈｚ， １Ｈ）， ４．００ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， １Ｈ）， ６．９６ （ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．１６ （ｄ， Ｊ＝８．２Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．２１−７．５３ （ｍ， １６Ｈ）．
【０２６１】
ｉ）（Ｒ）−３−アミノ−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）中の（Ｒ）−３−〔ベンジル（（Ｒ）−１−フェニルエチル）アミノ〕−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．８２ｇ、４．４５ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、ＡｃＯＨ（２．５ｍｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２−炭素（Ｐｄ（ＯＨ）２が約２０重量％、１．０７ｇ）を添加して、その後混合物をＨ２雰囲気下に置いた。１５時間攪拌した後、混合物をセライトのパッドで濾過して、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液および洗液を混合して真空下で濃縮し、（Ｒ）−３−アミノ−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（粗製、３．１４ｇ）を得、さらに精製せずに次の段階で使用した。
【０２６２】
ｊ）（Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニルアミノ）−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
５０％水性１，４−ジオキサン（４０ｍｌ）中の（Ｒ）−３−アミノ−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（粗製、３．１４ｇ）の攪拌した懸濁液に、Ｎａ２ＣＯ３（１．１９ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃＣｌ（１．２８ｇ、４．９５ｍｍｏｌ）を添加した。１時間攪拌した後、混合物を飽和ブライン（１００ｍｌ）で希釈して、ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍｌ）で３回抽出した。混合した抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥して真空下で濃縮し、（Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニルアミノ）−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを得（粗製、３．３４ｇ）、さらに精製せずに次の段階で使用した。
【０２６３】
ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ６６８〔Ｍ＋＋Ｌｉ〕，
１Ｈ ＮＭＲ： δ ０．８１ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ３Ｈ）， １．１５−１．４４ （ｍ， ８Ｈ）， １．３５ （ｓ， ９Ｈ）， １．６２−１．９３ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２９−２．６８ （ｍ， ４Ｈ）， ３．８４−４．０２ （ｍ， １Ｈ）， ３．８８ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．１３ （ｔ， Ｊ＝６．８Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２５−４．４１ （ｍ， ２Ｈ）， ５．２７ （ｄ， Ｊ＝９．２Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８５ （ｄ， Ｊ＝８．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．０６−７．４２ （ｍ， １０Ｈ）， ７．５１ （ｄ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．６６ （ｄ， Ｊ＝７．６Ｈｚ， ２Ｈ）．
【０２６４】
ｋ）（Ｒ）−３−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニルアミノ）−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸の調製
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）中の（Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル−アミノ）−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（粗製、３．３４ｇ）の攪拌した溶液に、ＴＦＡ（２０ｍｌ）を滴下した。室温で１時間攪拌した後、混合物を真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２、１：２０）で精製して、（Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニルアミノ）−５−（４′−ヘプチルオキシビフェニル−４−イル）ペンタン酸（２．０７ｇ、３段階で７７％）を白色非晶質粉末として与えた。
【０２６５】
ＦＡＢ−ＭＳ： ｍ／ｚ ６０６〔ＭＨ＋〕，
１Ｈ ＮＭＲ： δ ０．８８ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ３Ｈ）， １．２１−１．５１ （ｍ， ８Ｈ）， １．６４−２．０４ （ｍ， ２Ｈ）， １．７８ （ｑ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．２７−２．７８ （ｍ， ４Ｈ）， ３．９１−４．０７ （ｍ， １Ｈ）， ３．９６ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， ２Ｈ）， ４．２０ （ｔ， Ｊ＝６．６Ｈｚ， １Ｈ）， ４．３４−４．５６ （ｍ， ２Ｈ）， ５．０９−５．２８ （ｍ， １Ｈ）， ６．９２ （ｄ， Ｊ＝８．９Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．１０−７．４９ （ｍ， １０Ｈ）， ７．５７ （ｄ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）， ７．７３ （ｄ， Ｊ＝７．３Ｈｚ， ２Ｈ）．
【０２６６】
工程Ｂで用いられた式（ＩＶ）（式中、Ｙは単結合または−ＣＨ２−）の出発化合物は、上述のものと同様の方法に従って調製した。
【０２６７】
参考実施例２
（Ｓ）−３−（９Ｈ−フルオレニルメトキシカルボニルアミノ）−Ｎ−ウンデシルスクシンアミド酸の調製
ａ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．２ｍｌ）中の、（Ｓ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニル−アミノ）コハク酸（１５０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ試薬（１６２ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、およびＨＯＢＴ水和物（５６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６４μｌ、０．３６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３０分間攪拌した後、１−アミノウンデカン（７９μｌ、０．３７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を水で希釈して、Ｅｔ２Ｏで抽出した。混合した抽出物を水で洗浄して、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤としてｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１を用いた）による残渣の精製により、（Ｓ）−３−（９Ｈ−フルオレン―９−イルメトキシカルボニルアミノ）−Ｎ−ウンデシルスクシンアミド酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６９ｍｇ、収率８２％）を無色非晶質固体として与えた。
【０２６８】
ＦＡＢ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ５６５〔ＭＨ＋〕，
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３） δ： ０．８８ （３Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， １．２４ （１６Ｈ， ｍ）， １．４５ （１１Ｈ， ｍ）， ２．５８ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ１＝１７Ｈｚ， Ｊ２＝７Ｈｚ）， ２．９１ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ１＝１７Ｈｚ， Ｊ２＝４Ｈｚ）， ３．２３ （２Ｈ， ｑ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ４．２２ （１Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ４．４２〜４．４５ （３Ｈ， ｍ）， ５．９４ （１Ｈ， ｂｒｏａｄ ｄ， Ｊ＝８Ｈｚ）， ６．４３ （１Ｈ， ｂｒｏａｄ ｓ）， ７．３１ （２Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ７．４１ （２Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ７．５８ （２Ｈ， ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ７．７７ （２Ｈ， ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ）．
【０２６９】
ｂ）ＴＦＡ（２ｍｌ）中の（Ｓ）−３−（９Ｈ−フルオレン―９−イルメトキシカルボニルアミノ）−Ｎ−ウンデシルスクシンアミド酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１３ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で３０分間攪拌した。反応の終了後、ＴＦＡを真空下での蒸発により除去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離剤としてジクロロメタン：メタノール＝９：１を用いた）による残渣の精製により、（Ｓ）−３−（９Ｈ−フルオレン―９−イルメトキシカルボニルアミノ）−Ｎ−ウンデシルスクシンアミド酸（１０１ｍｇ、収率９９％）を無色非晶質固体として与えた。
【０２７０】
ＦＡＢ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ５０７〔ＭＨ＋〕，
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３） δ： ０．８７ （３Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， １．２３ （１６Ｈ， ｍ）， １．４６ （２Ｈ， ｍ）， ２．６２〜２．８０ （１Ｈ， ｍ）， ２．９０〜３．０５ （１Ｈ， ｍ）， ３．２１ （２Ｈ， ｍ）， ４．２０ （１Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ４．４４ （２Ｈ， ｄ， Ｊ＝６Ｈｚ）， ４．５３ （１Ｈ， ｂｒｏａｄ ｓ）， ５．９８ （１Ｈ， ｍ）， ６．５２ （１Ｈ， ｂｒｏａｄ ｓ）， ７．３０ （２Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ７．４０ （２Ｈ， ｔ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ７．５６ （２Ｈ， ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ）， ７．７６ （２Ｈ， ｄ， Ｊ＝７Ｈｚ）．
【０２７１】
工程Ｂで用いられた一般式（ＩＶ）（式中、Ｙは−ＣＯＮＨ−または−ＣＯＮ（ＣＨ３）−）の出発化合物は、上述の方法に従って調製した。
【０２７２】
参考実施例３
Ｎ−Ｂｏｃ−アエロトリシン３（化合物Ａ）の調製
ＭｅＯＨ（１５００ｍｌ）中のアエロトリシン３（１０．０ｇ、６．０７ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（２．５４ｍｌ、１８．２ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート（１３．９ｍｌ、６０．７ｍｍｏｌ）を順次添加した。混合物を室温で１８時間攪拌した後、溶媒を真空下で蒸発させた。残渣をＭｅＯＨ（約１０ｍｌ）に溶解して、溶液をジエチルエーテル（１５００ｍｌ）に添加した。得られた沈殿を濾過してジエチルエーテルで洗浄し、Ｎ−Ｂｏｃ−アエロトリシン３（化合物Ａ、９．９ｇ）を薄黄色非晶質固体として得、さらに精製せずに以下の作業実施例での更なる構造修飾に使用した。
【０２７３】
実施例４
アエロトリシン１、２、および３の調製
ａ）固体発酵
１０容量％グリセロール溶液中の不完全菌類 Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａ ＮＲ７３７９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−６３９１）の凍結した培養液の一部０．１ｍｌを解凍して、２％グルコース、１％バレイショデンプン、１．５％グリセロール、１％焼き大豆粉末（ｔｏａｓｔ ｓｏｙａ）（Ｎｉｓｓｉｎ Ｓｅｉｙｕ）、０．３５％酵母抽出物（Ｎｉｐｐｏｎ Ｓｅｉｙａｋｕ）、０．２５％ポリペプトン（Ｎｉｈｏｎ Ｓｅｉｙａｋｕ）、０．３％ＮａＣｌ、０．５％ＣａＣＯ３、０．００５％ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．０００５％ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ、および０．０００５％ＭｎＳＯ４・４Ｈ２Ｏからなる培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに接種した。培地のｐＨは調整しなかった。種培養液を２２０ｒｐｍのロータリーシェーカーにて２７℃で７日間インキュベートした。種培養液２ｍｌを、押麦２００ｇ、酵母抽出物０．１２ｇ（Ｄｉｆｃｏ）、酒石酸ナトリウム０．０６ｇ、ＫＨ２ＰＯ４０．０６ｇ、および水１２０ｍｌからなる固体培地を含有する３Ｌ容三角フラスコに移した。静的条件下、２７℃で発酵を実施した。発酵の約２４０時間目に生成が最大量に達し、培養液をアエロトリシン１、２、および３の単離手順に供した。
得られた培養固体（１０ｋｇ）にメタノール（４０Ｌ）を添加して、混合物を攪拌した後、濾過による除去でメタノール抽出物（３９Ｌ）を得た。こうして得られたメタノール抽出物を減圧下で濃縮乾固し、残渣（６４．８ｇ）に酢酸エチル（１Ｌ）および水（１Ｌ）を添加した。さらに混合物を攪拌した後、酢酸エチル層を除去した。
その上、水層を同様に酢酸エチル（１Ｌ）で２回洗浄した。残った水層をｎ−ブタノール（１Ｌ）で３回抽出した。こうして得られた抽出物を混合して減圧下で濃縮乾固し、残渣（２８．５ｇ）をアセトニトリル−０．１％水性トリフルオロ酢酸（１：１）の混合物（２５０ｍｌ）に溶解した。遠心分離で不溶性物質を除去した後、こうして得られた溶液を減圧下で蒸発乾固して、残渣にメタノール（３００ｍｌ）を添加し、混合物を攪拌した後、濾過により除去してメタノール溶液（２８０ｍｌ）を得た。こうして得られたメタノール可溶性物質（９．３ｇ）を、その後逆相シリカゲルＣ１８（１Ｌ）のカラムクロマトグラフィーに供した。メタノール−０．１％水性トリフルオロ酢酸（２：８、４：６、５：５、６：４、７：３、および８：２）の混合物を用いて、カラムを段階的に溶出した。アエロトリシン１、２、および３をメタノール−０．１％水性トリフルオロ酢酸（７：３）でこの順序に溶出させ、真空下で濃縮乾固して、白色粉末状のアエロトリシン３トリフルオロ酢酸塩（７３１ｍｇ）およびアエロトリシン１トリフルオロ酢酸塩（７４７ｍｇ）をそれぞれ得た。アエロトリシン２を含有する画分を減圧下で濃縮して、以下の条件下のＨＰＬＣでさらに精製した：カラム： Ｃａｐｃｅｌｌ Ｐａｋ Ｃ１８（内径３０×２５０ｍｍ、Ｓｈｉｓｅｉｄｏ Ｃｏ．， ＬＴＤ．）；移動相：アセトニトリル−０．１％水性トリフルオロ酢酸（４５：５５）；流速：４０ｍｌ／分；検出：ＵＶ２２０ｎｍ。上記条件下で得られた適当な溶出液を真空下で濃縮乾固して、白色粉末状のアエロトリシン２のトリフルオロ酢酸塩（４２ｍｇ）を得た。
【０２７４】
ｂ）フラスコ発酵
１０容量％グリセロール溶液中のＤｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａＮＲ７３７９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−６３９１）の凍結した培養液の一部２ｍｌを解凍して、１％グルコース、１％えん麦粉、４％トマトペースト、０．５％コーンスティープリカー、（Ａｎｄｏ Ｋａｓｅｉ）、０．００１％ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．００１％ＭｎＳＯ４・４Ｈ２Ｏ、０．０００１％ＣａＣｌ２、０．０００２％ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．００００２％（ＮＨ４）６ＭｏＯ２・４Ｈ２Ｏ、および０．００００６％Ｈ３ＢＯ３からなる培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに接種した。滅菌前に培地のｐＨを６．８に調整した。種培養液を２２０ｒｐｍのロータリーシェーカーにて２７℃で３日間インキュベートした。最初の種培養液２ｍｌを、同様の培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに移し、ロータリーシェーカーにて同条件下で３日間インキュベートした。第二の種培養液２ｍｌを、８．５％グリセロール、１％カンキツ由来ペクチン、０．４％ピーナッツ粉、０．４％ミルクカゼイン（ビタミン不含）、０．４％トマトペースト、０．４％コーンスティープリカー（Ａｎｄｏ Ｋａｓｅｉ）、０．２％グリシン、および０．２％ＫＨ２ＰＯ４からなる培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに接種した。滅菌前に培地のｐＨを７．０に調整した。２２０ｒｐｍで攪拌しながら、２７℃で発酵を実施した。１０日間培養した後に生成が最大量に達し、全ての培養液をアエロトリシン１、２、および３の単離手順に供した。
【０２７５】
ｃ）ジャー発酵
１０容量％グリセロール溶液中のＤｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａ ＮＲ７３７９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−６３９１）の凍結した培養液の一部２ｍｌを解凍して、上述のものと同様の種培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに接種した。フラスコを２７℃で３日間２２０ｒｐｍで振とうした。最初の種培養液２ｍｌを同様の種培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに移し、ロータリーシェーカーにて同条件下で３日間インキュベートした。第二の種培養液６００ｍｌを、上述のものと同様の生成培地３０リットル、および０．４％ディスフォーム（０．４％ ｄｉｓｆｏａｍ）（Ｎｉｓｓａｎ Ｄｉｓｆｏａｍ ＣＡ−１２３）を含有する５０リットル容ジャーファーメンタに接種した。３０リットル／分での通気および４００ｒｐｍでの攪拌を行いながら、２７℃で発酵を実施した。発酵の約１６８時間後に生成が最大量に達し、全ての培養液をアエロトリシン１、２、および３の単離工程に供した。
【０２７６】
アエロトリシン１
１）外観：
白色固体
２）分子量（ＦＡＢ−ＭＳ法）：
ｍ／ｚ１５４７（Ｍ＋Ｈ）＋
３）分子式：
Ｃ７２Ｈ１１８Ｎ１４Ｏ２３
４）高分解能質量分析（（Ｍ＋Ｈ）＋として）：
実測値：１５４７．８５６８
計算値（Ｃ７２Ｈ１１９Ｎ１４Ｏ２３として）：１５４７．８５７２
５）ＵＶスペクトル（図１）：メタノール中：
λ（ε）ｍａｘ（メタノール中）：２２５±５（１０６００ｓｈ）、２７０±５（２０００）、２７８±５（２１００）
λ（ε）ｍａｘ（Ｎ／１０ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ中）：２４０±５（７７００）、２６８±５（１８００）、２９８±５（１８００）
６）ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）（図２）：
主な吸収波数（ｃｍ−１）は以下の通り：
３３７９、２９２７、２８５５、１７４０、１６６０、１５３５、１４５３、１２０３、１１３９、８３７
７）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（図３）：
ＣＤ３ＯＤ中で４００ＭＨｚ
８）１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図４）：
ＣＤ３ＯＤ中で１００ＭＨｚ
９）溶解度：
水、メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶
１０）呈色反応：
陽性：ニンヒドリン、アニスアルデヒド−硫酸、ヨウ素蒸気、バニリン−硫酸、リュードン−スミス試薬（Ｒｙｄｏｎ−Ｓｍｉｔｈ ｒｅａｇｅｎｔ）、モリブドリン酸
陰性：サカグチ試薬（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ ｒｅａｇｅｎｔ）、ブロモクレゾールグリーン、２，４−ジニトロフェニルヒドラジン−硫酸
１１）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：
0003628258.tif 000040
１２）高速液体クロマトグラフィー：
担体：Ｃａｐｃｅｌｌ Ｐａｋ Ｃ１８ｇｅｌＳ１２０Ａ、４．６×２５０ｍｍ（Ｓｈｉｓｅｉｄｏ， Ｃｏ．， ＬＴＤ）
移動相：アセトニトリル：０．０５％水性トリフルオロ酢酸＝１：１
流速：１ｍｌ／分
Ｒｔ＝１２．１±０．５
１３）アミノ酸分析：
アエロトリシン１を６ＮＨＣｌ中で１２０℃で２４時間加熱した後、アミノ酸分析に供して、トレオニン、３単位のアロトレオニン、グリシン、アラニン、バリン、チロシン、オルニチン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、３−ヒドロキシグルタミンを検出した。
【０２７７】
アエロトリシン２
１）外観：
白色固体
２）分子量（ＦＡＢ−ＭＳ法）：
ｍ／ｚ１５４９（Ｍ＋Ｈ）＋
３）分子式：
Ｃ７１Ｈ１１６Ｎ１４Ｏ２４
４）高分解能質量分析（（Ｍ＋Ｈ）＋として）：
実測値：１５４９．８３８４
計算値（Ｃ７１Ｈ１１７Ｎ１４Ｏ２４として）：１５４９．８３６５
５）ＵＶスペクトル（図５）：メタノール中：
λ（ε）ｍａｘ（ＭｅＯＨ中）：２２５±５（１０２００ｓｈ）、２７５±５（１９００）、２７８±５（２０００）
λ（ε）ｍａｘ（Ｎ／１０ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ中）：２４０±５（７７００）、２９３±５（２０００）
６）ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）（図６）：
主な吸収波数（ｃｍ−１）は以下の通り：
３３２３、２９２８、２８５６、１７４０、１６７０、１５３１、１４５０、１２０３、１１３７、８３７
７）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（図７）：
ＣＤ３ＯＤ中で４００ＭＨｚ
８）１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図８）：
ＣＤ３ＯＤ中で１００ＭＨｚ
９）溶解度：
水、メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶
１０）呈色反応：
陽性：ニンヒドリン、アニスアルデヒド−硫酸、ヨウ素蒸気、バニリン−硫酸、リュードン−スミス試薬、モリブドリン酸
陰性：サカグチ試薬、ブロモクレゾールグリーン、２，４−ジニトロフェニルヒドラジン−硫酸
１１）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：
0003628258.tif 000041
１２）高速液体クロマトグラフィー：
担体：Ｃａｐｃｅｌｌ ＰａｋＣ１８ｇｅｌ Ｓ１２０Ａ、４．６×２５０ｍｍ（Ｓｈｉｓｅｉｄｏ， Ｃｏ．， ＬＴＤ．製）
移動相：アセトニトリル：０．０５％水性トリフルオロ酢酸＝１：１
流速：１ｍｌ／分
Ｒｔ＝９．９±０．５
１３）アミノ酸分析：
アエロトリシン２を６ＮＨＣｌ中で１２０℃で２４時間加熱した後、アミノ酸分析に供して、トレオニン、３単位のアロトレオニン、グリシン、アラニン、バリン、３−ｈｙｄｒｏｘｙｔｙｒｏｓｍｌ（ＤＯＰＡ）、オルニチン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、３−ヒドロキシグルタミンを検出した。
【０２７８】
アエロトリシン３
１）外観：
白色固体
２）分子量（ＦＡＢ−ＭＳ法）：
ｍ／ｚ１５３３（Ｍ＋Ｈ）＋
３）分子式：
Ｃ７１Ｈ１１６Ｎ１４Ｏ２３
４）ＵＶスペクトル：メタノール中：
λ（ε）ｍａｘ（ＭｅＯＨ中）：２２５±５（１１０００ｓｈ）、２７５±５（２０００）、２８０±５（１９００）
λ（ε）ｍａｘ（Ｎ／１０ＮａＯＨ−ＭｅＯＨ中）：２４３±５（７８００）、２９５±５（１８００）
５）ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）：
主な吸収波数（ｃｍ−１）は以下の通り：
３３３４、２９２８、２８５２、１７４２、１６６２、１５２０、１４４９、１２０２、１１３６、８３６
６）溶解度：
水、メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶
７）呈色反応：
陽性：ニンヒドリン、アニスアルデヒド−硫酸、ヨウ素蒸気、バニリン−硫酸、リュードン−スミス試薬、モリブドリン酸
陰性：サカグチ試薬、ブロモクレゾールグリーン、２，４−ジニトロフェニルヒドラジン−硫酸
８）薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）：
0003628258.tif 000042
９）高速液体クロマトグラフィー：
担体：Ｃａｐｃｅｌｌ ＰａｋＣ１８ｇｅｌ Ｓ１２０Ａ、４．６×２５０ｍｍ（Ｓｈｉｓｅｉｄｏ， Ｃｏ．， ＬＴＤ．製）
移動相：アセトニトリル：０．０５％水性トリフルオロ酢酸＝１：１
流速：１ｍｌ／分
Ｒｔ＝９．１±０．５
１０）アミノ酸分析：
アエロトリシン３を６ＮＨＣｌ中で１２０℃で２４時間加熱した後、アミノ酸分析に供して、トレオニン、３単位のアロトレオニン、グリシン、アラニン、バリン、チロシン、オルニチン、３−ヒドロキシプロリン、４−ヒドロキシプロリン、３−ヒドロキシグルタミンを検出した。
【０２７９】
実施例５
化合物（ＩＸ）の調製
１）フラスコ発酵
１０容量％グリセロール溶液中の Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａ ＮＲ７３７９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−６３９１）の凍結した培養液の一部２ｍｌを解凍して、１％グルコース、１％えん麦粉、４％トマトペースト、０．５％コーンスティープリカー（Ａｎｄｏ Ｋａｓｅｉ）、０．００１％ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．００１％ＭｎＳＯ４・４Ｈ２Ｏ、０．０００１％ＣａＣｌ２、０．０００２％ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ、０．００００２％（ＮＨ４）６ＭｏＯ２・４Ｈ２Ｏ、および０．００００６％Ｈ３ＢＯ３からなる培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに接種した。滅菌前に培地のｐＨを６．８に調整した。種培養液を２２０ｒｐｍのロータリーシェーカーにて２７℃で４日間インキュベートした。種培養液２ｍｌを、８．５％グリセロール、１％カンキツ由来ペクチン、２％ピーナッツ粉、０．４％ミルクカゼイン（ビタミン不含）、０．４％トマトペースト、０．４％グリシン、および０．２％ＫＨ２ＰＯ４からなる培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに接種した。滅菌前に培地のｐＨを７．０に調整した。２２０ｒｐｍで攪拌しながら、２７℃で発酵を実施した。１４日間培養した後に生成が最大量に達し、全ての培養液を分離作業に供した。
得られた全ての培養ブロス（１．９Ｌ）にｎ−ブタノール（２Ｌ）を添加して、混合物を攪拌した。こうして得られた抽出物を減圧下で濃縮乾固した。さらに、残渣にヘキサン（５００ｍｌ）およびメタノール（５００ｍｌ）を添加して、こうして得られた混合物を攪拌した後、ヘキサン層を除去した。減圧下でメタノールを除去した後、こうして得られた残渣をヘキサンおよび酢酸エチル（１：１；２００ｍｌ）の混合物で２回洗浄して、減圧下で乾燥した。
残渣（３．９ｇ）に水（２０ｍｌ）を添加して、混合物を攪拌した後遠心分離して水溶液を得た。こうして得られた溶液を、その後逆相シリカゲルＣ１８（２００Ｌ）のカラムクロマトグラフィーに供した。最初に、カラムを０．１％水性トリフルオロ酢酸で溶出し、その後メタノール−０．１％水性トリフルオロ酢酸（１：９、３：７、５：５、６：４、７：３、および８：２）の混合物を用いて、段階的に溶出した。メタノール−０．１％水性トリフルオロ酢酸の混合物（７：３）で溶出された化合物（ＩＸ）を混合して、その溶液を１Ｎ水性水酸化ナトリウムで中和した後、真空下で濃縮乾固した。こうして得られた残渣に水（１０ｍｌ）およびｎ−ブタノール（１０ｍｌ）を添加して、混合物を攪拌した。こうして得られた抽出物を減圧下で濃縮して、化合物（ＩＸ）（９６．９ｍｇ）を白色粉末として得た。分光分析法で化合物（ＩＸ）を得るためのさらなる精製を、次の条件下でＨＰＬＣにより達成した：カラム：Ｃａｐｃｅｌｌ ＰａｋＣ１８  ＵＧ８０（内径２０×２５０ｍｍ、Ｓｈｉｓｅｉｄｏ ｃｏ．， ＬＴＤ．）；移動相：０．０５％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル−０．０５％トリフルオロ酢酸／水（３８：６２）；流速：２２．８６ｍｌ／分；検出：ＵＶ２１０ｎｍ。上記条件下で得られた適当な溶出液を真空下で濃縮乾固し、白色粉末状の化合物（ＩＸ）のトリフルオロ酢酸塩を得た。
【０２８０】
ｃ）ジャー発酵
１０容量％グリセロール溶液中の Ｄｅｕｔｅｒｏｍｙｃｏｔｉｎａ ＮＲ７３７９（ＦＥＲＭ  ＢＰ−６３９１）の凍結した培養液の一部２ｍｌを解凍して、上述のものと同様の種培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに接種した。フラスコを２７℃で４日間２２０ｒｐｍで振とうした。最初の種培養液２ｍｌを同様の種培地１００ｍｌを含有する５００ｍｌ容三角フラスコに移し、ロータリーシェーカーにて同条件下で３日間インキュベートした。第二の種培養液６００ｍｌを、上述のものと同様の生成培地３０リットルおよび０．４％ディスフォーム（Ｎｉｓｓａｎ Ｄｉｓｆｏａｍ ＣＡ−１２３）を含有する５０リットル容ジャーファーメンタに接種した。３０リットル／分での通気および４００ｒｐｍでの攪拌を行いながら、２７℃で発酵を実施した。発酵の約２７８時間後に生成が最大量に達し、全ての培養液を化合物（ＩＸ）の単離手順に供した。
【０２８１】
化合物（ＩＸ）
１）外観：
白色固体
２）分子量（ＦＡＢ−ＭＳ法）：
ｍ／ｚ１３１７（Ｍ＋Ｈ）＋
３）分子式：
Ｃ５９Ｈ１０４Ｎ１２Ｏ２１
４）高分解能質量分析（（Ｍ＋Ｈ）＋として）：
実測値：１３１７．７５５５
計算値（Ｃ５９Ｈ１０５Ｎ１２Ｏ２１として）：１３１７．７５１７
５）ＵＶスペクトル：メタノール中：
λ（ε）ｍａｘ（ＭｅＯＨ中）：末端吸収
６）ＩＲスペクトル（ＫＢｒ）（図９）：
主な吸収波数（ｃｍ−１）は以下の通り：
３４５０、２９２８、１６６５、１５２０、１４５０、１２２５、１１３５
７）１Ｈ−ＮＭＲスペクトル（図１０）：
ＤＭＳＯ−ｄ６中で５００ＭＨｚ
８）１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図１１）：
ＤＭＳＯ−ｄ６中で１２５ＭＨｚ
９）溶解度：
水、メタノール、ジメチルスルホキシドに可溶
１０）呈色反応：
陽性：ニンヒドリン、アニスアルデヒド−硫酸、ヨウ素蒸気、バニリン−硫酸、リュードン−スミス試薬、モリブドリン酸
陰性：サカグチ試薬、ブロモクレゾールグリーン、２，４−ジニトロフェニルヒドラジン−硫酸
１１）高速液体クロマトグラフィー：
担体：Ｃａｐｃｅｌｌ ＰａｋＣ１８  ＵＧ８０Ａ、４．６×２５０ｍｍ（Ｓｈｉｓｅｉｄｏ， Ｃｏ．， ＬＴＤ．製）
移動相：０．０５％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル：０．０５％トリフルオロ酢酸／水＝３８：６２
流速：１ｍｌ／分
Ｒｔ＝７．７±０．５
【０２８２】
実施例６
化合物（ＩＸ）のオルニチン残基のＮ−Ｂｏｃ誘導体（Ｎ（ｏｒｎ）−Ｂｏｃ−ＩＸ）（つまり式（ＸＩＩ：Ｒ６＝Ｂｏｃ）の化合物）の調製
ジオキサン−Ｈ２Ｏ（０．４３ｍｌ−０．５ｍｌ）中の実施例５で得られた化合物（ＩＸ）（１０．４ｍｇ、０．００７３ｍｍｏｌ）の溶液に、トリエチルアミン（３μｌ）とジオキサン中のｔｅｒｔ−ブチルＮ−スクシンイミジルカルボネート（０．００７３μｌ、０．００７３ｍｍｏｌ）の０．１Ｍ溶液とを室温で添加した。１．５時間攪拌した後、混合物を酢酸で酸化して減圧下で蒸発させた。ＨＰＬＣによる残渣の精製により、Ｎ（ｏｒｎ）−Ｂｏｃ−ＩＸ（４．８ｍｇ、収率４５％）を無色非晶質として得た；
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１８．０分（カラム：Ｓｏｋｅｎ−ＯＤＳ、２０×２５０ｍｍ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：Ｈ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ＝グラジエント１％酢酸）；ＦＡＢ−ＭＳ〔Ｍ＋Ｎａ〕＋１４４０。
【０２８３】
実施例７
化合物（ＩＸ）のバリン残基のＮ−Ｂｏｃ誘導体（Ｎ（ｖａｌ）−Ｂｏｃ−ＩＸ）（つまり式（Ｘ：Ｒ７＝Ｂｏｃ）の化合物）の調製
ＭｅＯＨ中（３ｍｌ）の、実施例５で得られた化合物（ＩＸ）（１５．０ｍｇ、０．０１０５ｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカルボネート（０．０７３Ｍメタノール溶液、０．２０ｍｌ、０．０１５ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（７．８μｌ）の混合物を、０℃で２４時間攪拌した。混合物をｎ−ヘキサンで洗浄して、減圧下で蒸発させた。逆相ＨＰＬＣによる残渣の精製により、Ｎ（ｖａｌ）−Ｂｏｃ−ＩＸ（１．０ｍｇ、収率６％）を無色非晶質として得た；
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１６．０分（カラム：Ｓｏｋｅｎ−ＯＤＳ、２０×２５０ｍｍ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：Ｈ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ＝グラジエント１％酢酸）；ＦＡＢ−ＭＳ〔Ｍ＋Ｈ〕＋１４１８。
【０２８４】
実施例８
アエロトリシン３３の調製
ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の（Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニルアミノ）−７−（４−ペンチルオキシフェニル）ヘプタン酸（２５．５ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、ＢＯＰ試薬（２１．３ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ水和物（７．５ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．００９５ｍｌ、０．０５５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間攪拌した後、ＤＭＦ（０．６ｍｌ）中の、化合物Ｂ〔ＷＯ９６／３０３９９に記載の手順に従ってアエロトリシン１または３から調製される式（ＩＩＩ）（式中、Ｒ２およびＲ３は水素であり、Ｒ５はカルバモイル基であり、Ｒ７はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルである）の線状ペプチド〕（５０．７ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．００９５ｍｌ、０．０５５ｍｍｏｌ）の溶液を、反応混合物に添加した。混合物を室温で２．５時間攪拌した後、ピペリジン（０．２０ｍｌ）を添加して、混合物を室温でさらに２時間攪拌した。溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（カラムＣ、流速：９ｍｌ／分、グラジエント：溶離剤：１％ＡｃＯＨ−Ｈ２Ｏ：１％ＡｃＯＨ−ＣＨ３ＣＮ＝８０：２０→２：９８）により精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、線状ペプチドＣ（環化の前駆体）（４９．５ｍｇ）を白色非晶質固体として得た。
ＤＭＦ（２７ｍｌ）中の上記綿状ペプチドＣ（４９．５ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、ＨＯＢＴ水和物（１１．３ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．０１８ｍｌ、０．１０５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ（４ｍｌ）中のＢＯＰ試薬（３３．１ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で３時間攪拌した後、溶媒を真空下で蒸発させた。
上述のように得られた残渣をＴＦＡ（６ｍｌ）に溶解して、０℃で３０分間攪拌した。その後ＴＦＡを真空下で蒸発させた。残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン３３（１９．４ｍｇ）を白色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１２．４分（カラムＣ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝６１：３９）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５６８〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン３４〜３８、４０〜５３、６４〜７３、８９〜９５、９７〜９９、および１２３は、式（ＩＶ）で表される対応する構成単位を用いて、この実施例８での記載と同様の方法に従って調製した。
【０２８５】
【表１０】
0003628258.tif 000043
【０２８６】
実施例９
アエロトリシン１６の調製
（ａ）ピリジン（２．５ｍｌ）中の化合物Ａ（参考実施例３に記載、１ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、テトラニトロメタン（０．３６５ｍｌ、３．０５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で４時間攪拌した後、反応混合物を真空下で濃縮した。暗褐色の残渣を、逆相ＨＰＬＣ（Ｌｏｂａｒ ＲＰ１８、１０ｍｌ／分、０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５０：５０→３３：６６、０．０５％ＴＦＡ）で精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、化合物Ａの粗製ニトロ誘導体（７１１ｍｇ）を薄黄色非晶質固体として得た。  （ｂ）上述のように得られた粗生成物（１２ｍｇ、０．００７１ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（０．５ｍｌ）の混合物を、０℃で３０分間攪拌した。ＴＦＡを乾燥窒素気流下で蒸発させた。黄色の残渣を分取逆相ＨＰＬＣで精製した。適当な分画を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１６のＴＦＡ塩（８ｍｇ）を薄黄色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１５．５分（カラムＢ、流速：４ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５５：４５）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５７８〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン３９、５４、５５、および７７は、出発物質として実施例８で得られたアエロトリシンを用い、実施例９での記載と同様の方法に従って調製した。
【０２８７】
【表１１】
0003628258.tif 000044
【０２８８】
実施例１０
アエロトリシン１７の調製
（ａ）ＭｅＯＨ（５ｍｌ）中の、実施例９（ａ）で得られた化合物Ａの粗製ニトロ誘導体（５５ｍｇ、０．０３３ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％パラジウム−木炭（２０ｍｇ）を添加して、反応器に水素を充填した。室温で１３．５時間攪拌した後、混合物をメンブランフィルター（孔径：０．２μｍ）で濾過し、溶媒を蒸発させて、アエロトリシン３の粗製アミノ誘導体（５２ｍｇ）を褐色非晶質物として得、さらに精製せずに次の段階で使用した。
（ｂ）上述のように得られた化合物Ａ（参考実施例３に記載）の粗製アミノ誘導体（３．４ｍｇ、０．００２１ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（０．２ｍｌ）の混合物を、０℃で３０分間攪拌した。ＴＦＡを乾燥窒素気流下で蒸発させた。褐色の残渣を分取逆相ＨＰＬＣで精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１７（１．３ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１２．８分（カラムＡ、流速：１ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５９：４１）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５４８〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン２９、５６、および７８は、出発物質として実施例９で得られたアエロトリシンを用い、実施例１０での記載と同様の方法に従って調製した。
【０２８９】
【表１２】
0003628258.tif 000045
【０２９０】
実施例１１
アエロトリシン１８の調製
（ａ）メタノール（０．０５ｍｌ）およびピリジン（０．０２５ｍｌ）中の実施例１０（ａ）で得られた化合物Ａの粗製アミノ誘導体の溶液に、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ（３０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、およびＨＯＢＴ水和物（２４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を順次添加した。混合物を室温で１５時間攪拌した後、溶媒を乾燥窒素気流で除去した。
（ｂ）上述のように得られた粗製の残渣をＴＦＡ（０．１ｍｌ）に溶解して、０℃で３０分間攪拌した。ＴＦＡを乾燥窒素気流で除去した。残渣を分取逆相ＨＰＬＣで精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１８（０．５４ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）８．９分（カラムＢ、流速：４ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５７：４３）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６０５〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン１９〜２３、３０、５７〜６２、７９および８１は、対応するアシル化剤および出発物質として実施例１０で得られたアエロトリシンを用い、実施例１１での記載と同様の方法に従って調製した。
【０２９１】
【表１３】
0003628258.tif 000046
【０２９２】
実施例１２
アエロトリシン１２の調製
ＭｅＯＨ（１．０ｍｌ）中の、アエロトリシン５（７．５ｍｇ、０．００４８ｍｍｏｌ）、３７％ホルマリン（１５０μｌ）、および酢酸（５０μｌ）の溶液に、ＭｅＯＨ（１００μｌ）中のナトリウムシアノボロヒドリド（７．５ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）を室温で添加し、混合物を室温で７時間攪拌した。溶媒を真空下で蒸発させた後残渣をｎ−ブタノールに溶解して、希塩酸および水で順次洗浄した。有機層を真空下で蒸発させた。残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１２（５．４ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）７．１分（カラムＢ、流速：４ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５０：５０）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５７５〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン１３、２５、３０、および７５は、実施例１２での記載と同様の方法に従って調製した。
【０２９３】
【表１４】
0003628258.tif 000047
【０２９４】
実施例１３
アエロトリシン１１１の調製
（ａ）ＭｅＯＨ（４５ｍｌ）中の、アエロトリシン３（５００ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）、（２−オキソエチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル＊（１．６６ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）、および酢酸（５ｍｌ）の溶液に、ＭｅＯＨ（５ｍｌ）中のナトリウムシアノボロヒドリド（４１０ｍｇ、６．５２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を室温で１８時間攪拌した。溶媒を真空下で蒸発させた後、残渣をｎ−ブタノールに溶解して、希塩酸および水で順次洗浄した。有機層を真空下で蒸発させた。
粗製の残渣をさらに精製せずに次の段階で使用した。
＊ＣＡＳ番号８９７１１−０８−０
（ｂ）ＴＦＡ（２０ｍｌ）中の上述のように得られた粗製の残渣の溶液を、０℃で３０分間攪拌した。ＴＦＡを真空下で蒸発させた。残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合し、凍結し、凍結乾燥して、アエロトリシン１１１（２５３ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１８．６分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５７：４３）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６１９〔Ｍ＋Ｈ〕＋。
以下のアエロトリシン１００、１１２、１１４、および１１５は、実施例１３での記載と同様の方法に従って調製した。
【０２９５】
【表１５】
0003628258.tif 000048
【０２９６】
実施例１４
アエロトリシン１２０の調製
ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中の、アエロトリシン３（５００ｍｇ、０．３２６ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（６８２μｌ、４．８９ｍｍｏｌ）の混合物に、アクリロニトリル（２１４μｌ、３．２７ｍｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を室温で２０時間攪拌した。溶媒を真空下で蒸発させた後、残渣をｎ−ブタノールに溶解して、希塩酸および水で順次洗浄した。有機層を真空下で蒸発させた。粗製の残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１２０（２０７ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２７．５分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５３：４７）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５８６〔Ｍ＋Ｈ〕＋。
【０２９７】
実施例１５
アエロトリシン１１３の調製
ＭｅＯＨ（５ｍｌ）中のアエロトリシン１２０（１００ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）の混合物に、１０％パラジウム−木炭（２０ｍｇ）を添加して、反応器に水素を充填した。室温で２０時間攪拌した後、混合物をメンブランフィルター（孔径：０．２μｍ）で濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗製の残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１１３（８７．２ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２３．０分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、移動相：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５７：４３）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５９０〔Ｍ＋Ｈ〕＋。
アエロトリシン１２９を、実施例１４〜１５での記載と同様の方法に従って調製した後、オルニチン残基のＢｏｃ基をトリフルオロ酢酸で除去した。この場合の出発物質は、実施例１６と同様の工程で得られたアエロトリシン１０６の（Ｄ）−オルニチン部分のＮδ−Ｂｏｃ誘導体であった。
【０２９８】
【表１６】
0003628258.tif 000049
【０２９９】
実施例１６
アエロトリシン１４の調製
ＣＨ３ＣＮ（１０ｍｌ）中の、Ｎ−Ｂｏｃ−サルコシン（１２３ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、ＷＳＣ・ＨＣｌ（２４０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（１５０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ３ＯＨ（３ｍｌ）中のアエロトリシン３（１００ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を室温で１５時間攪拌し、その後真空下で濃縮した。残渣をｎ−ＢｕＯＨ（１０ｍｌ）に溶解して、Ｈ２Ｏ（５ｍｌ、１ＮＨＣｌでｐＨ３〜４に調整したもの）で２回洗浄した。ｎ−ＢｕＯＨ層を真空下で濃縮して、残渣を０℃でＴＦＡ（５ｍｌ）に溶解した。溶液を室温で１時間攪拌した後、ＴＦＡを真空下で蒸発させた。残渣を分取逆相ＨＰＬＣで精製して、アエロトリシン１４（４０．８ｍｇ、収率３９％）を白色非晶質粉末として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２３．１分（カラムＣ、流速：９ｍｌ／分、０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝６０：４０）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６０５〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン１５、２１、２６〜２９、１０１〜１０７、１０９、１１０、１１８、１３０、および１３１は、構成単位として対応する酸を用い、実施例１６での記載と同様の方法に従って調製した。
【０３００】
【表１７】
0003628258.tif 000050
【０３０１】
実施例１７
アエロトリシン７４の調製
ＭｅＯＨ（１ｍｌ）中の、アエロトリシン６６（２０ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）、３，５−ジメチルピラゾール−１−カルボキシアミジン硝酸塩（１３ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（１８ｍｌ、０．１３ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１５時間攪拌した。溶媒を蒸発させた後、粗製の残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン７４（１０．２ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２１．２分（カラムＣ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５４：４６）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６４５〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン４および１１６は、それぞれ出発物質としてアエロトリシン３および１１１を用い、実施例１７での記載と同様の方法に従って調製した。
【０３０２】
【表１８】
0003628258.tif 000051
【０３０３】
実施例１８
アエロトリシン５の調製
（ａ）ＤＭＦ（１ｍｌ）中の、参考実施例３で得られた化合物Ａ（１０ｍｇ、０．００６１ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１０ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化メチル（８μｌ、０．１２９ｍｍｏｌ）を室温で添加し、混合物を室温で４３時間攪拌した。混合物をセライト・パッドで濾過して、濾液を真空下で蒸発させた。残渣をｎ−ブタノールに溶解して、希塩酸および水で順次洗浄した。有機層を真空下で蒸発させた。粗製の残渣をさらに精製せずに次の段階で使用した。
（ｂ）ＴＦＡ（１．０ｍｌ）中の、上述のように得られた粗製の残渣の溶液を、０℃で３０分間攪拌した。ＴＦＡを真空下で蒸発させた。残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合し、凍結し、凍結乾燥して、アエロトリシン５（３．８ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１４．５分（カラムＢ、流速：４ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５５：４５）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５４７〔ＭＨ＋〕。
以下のアエロトリシン６〜１０および７６は、対応するアルキル化剤を用い、実施例１８での記載と同様の方法に従って調製した。
【０３０４】
【表１９】
0003628258.tif 000052
【０３０５】
実施例１９
アエロトリシン２４の調製
（ａ）メタノール（２ｍｌ）中の、参考実施例３で得られた化合物Ａ（１００ｍｇ）、ヨウ化ナトリウム（２９．５ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）、および次亜塩素酸ナトリウム溶液（２５０μｌ）の低温混合物を、０℃で２時間攪拌した。反応混合物を飽和水性チオ硫酸ナトリウムで反応停止させ、１ＮＨＣｌで酸性化して、ｎ−ブタノールで抽出した。混合した有機抽出物を真空下で蒸発させた。この時点では、出発物質はまだ残存した。ヨウ素化反応を終了させるために、同様の実験手順を反復した。同様に処理した後、残渣を分取ＨＰＬＣで精製して、化合物Ａのヨウ素化誘導体（５４ｍｇ、収率５０％）を無色固体として得た。
（ｂ）アセトニトリル（２５０μｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７５０μｌ）中の、上述のように得られた化合物Ａのヨウ素化誘導体（２３．８ｍｇ）、アクリル酸メチル（１６μｌ）、トリエチルアミン（４０μｌ）、および酢酸パラジウム（２．１ｍｇ）の混合物を、７０℃で２８時間加熱した。得られた混合物をＣ−１８ショートカラムに通し、残渣をトリフルオロ酢酸（１ｍｌ）で０℃で１時間処理した。得られた混合物を真空下で蒸発させた。分取逆相ＨＰＬＣによる残渣の精製により、アエロトリシン２４（８．８ｍｇ、収率４０％）を無色固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）８６．３分（カラムＦ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５８：４２）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６１７〔ＭＨ＋〕。
【０３０６】
実施例２０
アエロトリシン９６の調製
脱気したジメチルスルホキシド（２ｍｌ）中の、実施例１９（ａ）で得られた化合物Ａのヨウ素化誘導体（３０ｍｇ）、酢酸カリウム（６．９ｍｇ）、およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４．６ｍｇ）の混合物を、一酸化炭素雰囲気下、６０℃で２０時間加熱した。得られた混合物をＣ−１８逆相ショートカラムに通し、残渣をトリフルオロ酢酸で０℃で１時間処理した。得られた混合物を減圧下で蒸発させた。分取逆相ＨＰＬＣによる残渣の精製により、アエロトリシン９６（２．３ｍｇ、収率８％）を無色固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２３．２分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５２．２：４７．８）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６７７〔ＭＨ＋〕。
【０３０７】
実施例２１
アエロトリシン３２の調製
（ａ）アセトニトリル（３ｍｌ）中の、参考実施例３で得られた化合物Ａ（２０ｍｇ）および（メトキシカルボニルスルファモイル）トリエチルアンモニウム水酸化物（２６．５ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で８時間攪拌した。反応混合物を１ＮＨＣｌで酸性化して、真空下で蒸発させた。残渣をｎ−ブタノールで抽出して、抽出物を真空下で蒸発させた。
（ｂ）粗生成物をトリフルオロ酢酸で０℃で１時間処理した。ＴＦＡを真空下で蒸発させた。分取逆相ＨＰＬＣによる残渣の精製により、アエロトリシン３２（２．０ｍｇ、収率１０％）を無色固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）４２．９分（カラムＢ、流速：４ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５５：４５）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５１６〔ＭＨ＋〕。
【０３０８】
実施例２２
アエロトリシン３１の調製
（ａ）テトラヒドロフラン（５ｍｌ）中の参考実施例３で得られた化合物Ａ（２５．７ｍｇ）の低温溶液に、ボラン−ジメチルスルフィド錯体（２５ｍｌ）を−１０℃で添加した。−１０℃で５時間攪拌した後、反応混合物を２ＮＨＣｌで反応停止させて、ｎ−ブタノールで抽出した。混合した抽出物を真空下で蒸発させた。  （ｂ）粗生成物をトリフルオロ酢酸で０℃で１時間処理した。ＴＨＦを減圧下で蒸発させた。分取逆相ＨＰＬＣによる残渣の精製により、アエロトリシン３１（３．７ｍｇ、収率１５％）を無色固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２５．１分（カラムＢ、流速：４ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝６２：３８）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５１９〔ＭＨ＋〕。
【０３０９】
実施例２３
アエロトリシン１２１の調製
ＤＭＦ（１ｍｌ）中のアエロトリシン３（５０ｍｇ）およびトリエチルアミン（０．０２５ｍｌ）の溶液に、ヨウ化メチル（０．０１０ｍｌ）を添加した。室温で１６時間攪拌した後、混合物にトリエチルアミン（０．０２５ｍｌ）およびヨウ化メチル（０．０５ｍｌ）をさらに添加して、室温で２４時間攪拌した。混合物のＬＣＭＳ分析で、所望の化合物への変換率が＞９０％であることが示された。溶媒を窒素気流で除去して、残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１２１（２３ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２０．５分（カラムＢ、流速：４ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５２：４８）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１５７６〔Ｍ＋〕。
【０３１０】
実施例２４
アエロトリシン１２２の調製
ピリジン（１ｍｌ）中のアエロトリシン３（５０ｍｇ）の溶液に、三酸化硫黄−Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド錯体（２３ｍｇ）を添加した。室温で２時間攪拌した後、溶媒を乾燥窒素気流で除去した。
ＴＦＡ（１ｍｌ）中の上述のように得られた粗製の残渣の溶液を、０℃で３０分間攪拌した。ＴＦＡを乾燥窒素気流で除去して、残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。純粋な画分を混合し、凍結して、凍結乾燥して、アエロトリシン１２２（５ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２４．６分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５２：４８）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６１３〔ＭＨ＋〕。
【０３１１】
実施例２５
アエロトリシン６３の調製
（ａ）ＤＭＦ（１０ｍｌ）中のＮα−Ｆｍｏｃ−Ｎβ−Ｂｏｃ−（Ｓ）−２，３−ジアミノプロピオン酸（３４３ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、ＢＯＰ試薬（３５５ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ水和物（１２４ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１７４ｍｌ、１．００ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１．５時間攪拌した後、ＤＭＦ（９．５ｍｌ）中の、アエロトリシン３（１．１０ｇ、０．６７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１７４ｍｌ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液を、混合物に添加した。室温でさらに１時間攪拌した後、混合物を真空下で濃縮した。
（ｂ）ＤＭＦ（２０ｍｌ）中の上述のように得られた残渣の攪拌した溶液に、ピぺリジン−４−カルボン酸ポリアミン樹脂（２００〜４００メッシュ）、ＨＬ（１．５０ｍｍｏｌ／ｇ、２．６６ｇ）を添加して、反応混合物に超音波音を６時間照射した。樹脂をセライト・パッドで濾過して除去し、ＭｅＯＨで洗浄して、混合した濾液および洗液を凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン３の粗製誘導体（１．０８ｇ）を白色非晶質固体として得、さらに精製せずに次の段階で利用した。
（ｃ）ＭｅＯＨ中（１ｍｌ）中の、上述のように得られたアエロトリシン３の粗製誘導体（２５．６ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、（２−オキソ−エチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（粗製、２０７ｍｇ）、ＡｃＯＨ（０．１ｍｌ）、およびＮａＢＨ３ＣＮ（１９．１ｍｇ）を添加した。混合物を室温で２時間攪拌した後、反応混合物を真空下で濃縮した。残渣をｎ−ＢｕＯＨ（４ｍｌ）で希釈して、Ｈ２Ｏ（１ｍｌ、０．１ＮＨＣｌでｐＨ３〜４に調整したもの）で２回洗浄した。ｎ−ＢｕＯＨ層を真空下で濃縮した。粗製の残渣をさらに精製せずに次の段階で使用した。
（ｄ）ＴＦＡ（２ｍｌ）中の上述のように得られた粗製の残渣の溶液を、０℃で２時間攪拌した。ＴＦＡを真空下で蒸発して、残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。純粋な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン６３（８．８ｍｇ）を白色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２４．８分（カラムＦ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５４：３６）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１７０６〔ＭＨ＋〕。
【０３１２】
実施例２６
アエロトリシン１２７の調製
アエロトリシン１２７は、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−Ｂｏｃ−（Ｄ）−オルニチンを使用し、アエロトリシン６３での記載と同様の方法により調製した。アエロトリシン１２７は、白色非晶質固体として得られた。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２３．９分（カラムＦ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５４：３６）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１７３４〔ＭＨ＋〕。
【０３１３】
実施例２７
アエロトリシン１２４の調製
（ａ）ＤＭＦ（２ｍｌ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（４６ｍｇ、０．１３８ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、ＢＯＰ試薬（６２ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ水和物（２２ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２４μｌ、０．１３８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３０分間攪拌した後、ＤＭＦ（２ｍｌ）中のアエロトリシン１２０（１００ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２４μｌ、０．１３８ｍｍｏｌ）の溶液を、反応混合物に添加した。室温で１８時間攪拌した後、溶媒を真空下で蒸発させた。
残渣をＴＦＡ（４ｍｌ）に溶解して、溶液を０℃で３０分間攪拌した。ＴＦＡを乾燥窒素気流で除去した後、残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。純粋な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、ニトリル誘導体（４８．６ｍｇ）を白色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２０．２分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５７：４３）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１７００〔Ｍ＋Ｈ〕＋。
（ｂ）ジオキサン（１ｍｌ）および水（１ｍｌ）中の上述のように得られたニトリル誘導体（４８．６ｍｇ、０．０２８６ｍｍｏｌ）の混合物に、１０％パラジウム−木炭（１０ｍｇ）を添加し、混合物を水素雰囲気下、室温で１４時間攪拌した。その後、混合物をメンブランフィルター（孔径：０．２μｍ）で濾過し、溶媒を真空下で蒸発させた。粗製の残渣を分取逆相ＨＰＬＣ（詳細な条件は以下に示す）で精製した。純粋な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１２４（２６．５ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１８．２分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝６０：４０）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１７０４〔Ｍ＋Ｈ〕＋。
【０３１４】
実施例２８
アエロトリシン１２５の調製
（ａ）ＤＭＦ（１ｍｌ）およびトリエチルアミン（０．１２６ｍｌ）中のアエロトリシン３のモノＴＦＡ塩（天然生成物：５０ｍｇ）の溶液に、２−ブロモ−５−ニトロピリジン（１８５ｍｇ）を添加した。室温で２５時間攪拌した後、溶媒を乾燥窒素気流で除去した。残渣を分取逆相ＨＰＬＣで精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン３の５−ニトロピリド−２−イル誘導体（２５ｍｇ）を淡黄色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２９．９分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝４７：５３）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６５５〔Ｍ＋Ｈ〕＋。
（ｂ）上述のように得られたアエロトリシン３の５−ニトロピリド−２−イル誘導体（１０ｍｇ）を、ジオキサン−Ｈ２Ｏ（１ｍｌ−５ｍｌ）に溶解した。５％パラジウム−木炭（２０ｍｇ）を添加し、反応器に水素を充填した。室温で３時間攪拌した後、メンブランフィルター（孔径：０．２μｍ）による濾過および溶媒の蒸発により粗生成物（１４ｍｇ）を得、分取逆相ＨＰＬＣにより精製した（詳細な条件は以下に示す）。純粋な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１２５（２．５ｍｇ）を無色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１８．７分（カラムＦ、流速：１０ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５２：４８）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１６２５〔Ｍ＋Ｈ〕＋。
【０３１５】
実施例２９
アエロトリシン１２８の調製
（ａ）ＤＭＦ（１０ｍｌ）中のＦｍｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（３８９ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、ＢＯＰ試薬（３７８ｍｇ、０．８５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ水和物（１３１ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１７１μｌ、０．９８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で４０分間攪拌した後、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中のアエロトリシン３（１．０８ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１７１μｌ、０．９８ｍｍｏｌ）の溶液を、混合物に添加した。室温で２．５時間攪拌した後、ピペリジン（４ｍｌ）を添加して、混合物を室温でさらに１時間攪拌した。混合物を真空下で濃縮した。残渣をｎ−ＢｕＯＨ（５０ｍｌ）で希釈して、Ｈ２Ｏ（２５ｍｌ、１ＮＨＣｌでｐＨ３に調整したもの）で２回洗浄した。ｎ−ＢｕＯＨ層を真空下で濃縮した。
（ｂ）ＤＭＦ（１ｍｌ）中のＢｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（９．６ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、ＢＯＰ試薬（１３．３ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ水和物（４．６ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．８μｌ、０．０２８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間攪拌した後、ＤＭＦ（１ｍｌ）中の、上述のように得られた粗製の残渣（３１．９ｍｇ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．８μｌ、０．０２８ｍｍｏｌ）の溶液を、混合物に添加した。室温で４時間攪拌した後、反応混合物を真空下で濃縮した。
（ｃ）上述のように得られた粗製の残渣をＴＦＡ（１．５ｍｌ）に溶解して、０℃で１時間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮して、残渣を分取逆相ＨＰＬＣで精製した。適当な画分を混合、凍結、凍結乾燥して、アエロトリシン１２８（１６．６ｍｇ）を白色非晶質固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）２７．２３分（カラムＦ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：０．０５％トリフルオロ酢酸−水：０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル＝５５：３５）；ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ）：１７６２〔ＭＨ＋〕。
【０３１６】
実施例３０
化合物（ＩＸ）からのアエロトリシン１０６の調製
（ａ）ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（Ｂｕｔ）（２１ｍｇ、０．０４５７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（６．６ｍｇ、０．０４３１ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ試薬（１８．８ｍｇ、０．０４２４ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、２０μｌ）の混合物を、室温で１時間攪拌し、その後ＤＭＦ（１ｍｌ）中の実施例６で得られたＮ（ｏｒｎ）−Ｂｏｃ−ＩＸ（１９．３ｍｇ、０．０１３１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１０μｌ）の混合物に添加した。室温で３時間攪拌した後、得られた混合物をピペリジン（０．３７５ｍｌ）で１時間処理し、その後真空下で濃縮した。残渣をジクロロメタンおよびジエチルエーテルで洗浄して、試薬を除去した。残渣をＨＰＬＣにより精製して、所望の線状ペプチドＡ（１６．６ｍｇ）を白色固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１９分（カラム：Ｓｏｋｅｎ−ＯＤＳ／２０×２５０ｍｍ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：Ｈ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ＝グラジエント、１％ＡｃＯＨ）
（ｂ）ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ａｌａ一水和物（１．２ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（４．７ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ試薬（１３．６ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（８μｌ）の混合物を、室温で１時間攪拌し、その後ＤＭＦ（１ｍｌ）中の上述のように得られた線状ペプチドＡ（１６．６ｍｇ、０．００９８ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６μｌ）の混合物に添加した。反応混合物を室温で攪拌して、出発物質がほとんど消費されるまでその活性化エステルを添加した。得られた混合物を真空下で濃縮した。残渣をジクロロメタンおよびジエチルエーテルで洗浄して、試薬を除去した。粗生成物をトリフルオロ酢酸で０℃で１時間処理した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＨＰＬＣで精製して、所望の線状ペプチドＢ（６．１ｍｇ）を白色固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１９分（カラム：Ｓｏｋｅｎ−ＯＤＳ／２０×２５０ｍｍ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：Ｈ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ＝グラジエント、１％ＡｃＯＨ）
（ｃ）ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中の、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｏｒｎ（Ｂｕｔ）（５．７ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（２．３ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）、ＢＯＰ試薬（５．４ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＥＡ（６μｌ）の混合物を、室温で１時間攪拌し、その後ＤＭＦ（１ｍｌ）中の、線状ペプチドＢ（６．１ｍｇ、０．００３３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３μｌ）の混合物に添加した。室温で２時間攪拌した後、得られた混合物をピペリジン（０．３７５ｍｌ）で１時間処理して、真空下で濃縮した。残渣をＨＰＬＣで精製して、線状ペプチドＣ（４．１ｍｇ）を白色固体として得た。
ＨＰＬＣ（Ｒｔ）１６．７分（カラム：Ｓｏｋｅｎ−ＯＤＳ／２０×２５０ｍｍ、流速：９ｍｌ／分、溶離剤：Ｈ２Ｏ：ＣＨ３ＣＮ＝グラジエント、１％ＡｃＯＨ）
（ｄ）線状ペプチドＣを０．０１Ｎ塩酸塩で酸性化して、ｎ−ブタノールで抽出した。ブタノール抽出物を真空下で濃縮した。抽出物をＤＭＦ（２ｍｌ）に溶解した。その後、ＨＯＢｔ一水和物（ＤＭＦ中０．１Ｍ、６０μｌ）、ＢＯＰ試薬（ＤＭＦ中０．１Ｍ、６０μｌ）およびＤＩＥＡ（２μｌ）を、混合物に添加した。室温で１時間攪拌した後、得られた混合物を真空下で濃縮した。残渣をトリフルオロ酢酸で０℃で１時間処理した。混合物を減圧下で濃縮した。残渣をＨＰＬＣで精製して、アエロトリシン１０６（２．２ｍｇ、Ｎ（ｏｒｎ）−Ｂｏｃ−ＩＸから９％）を白色固体として得た。
分析データを、実施例１６の表に記載した。
【０３１７】
実施例Ａ
以下の成分それぞれを含有する注射液は、それ自体慣用の方法で製造した：
アエロトリシン４５                              ２０ｍｇ
無水リン酸水素二ナトリウム                      ７．６ｍｇ
二リン酸ナトリウム二水和物                      ２．０ｍｇ
エチルアルコール                                １５０ｍｇ
蒸留水（脱イオン化および滅菌済み）              ８５０ｍｇ
総量                                            １０２９．６ｍｇ
【図面の簡単な説明】
【図１】アエロトリシン１のＵＶスペクトルを示す。
【図２】アエロトリシン１のＩＲスペクトルを示す。
【図３】アエロトリシン１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図４】アエロトリシン１の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図５】アエロトリシン２のＵＶスペクトルを示す。
【図６】アエロトリシン２のＩＲスペクトルを示す。
【図７】アエロトリシン２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図８】アエロトリシン２の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図９】化合物（ＩＸ）のＩＲスペクトルを示す。
【図１０】化合物（ＩＸ）の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図１１】化合物（ＩＸ）の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図１】
0003628258.tif 000068
【図２】
0003628258.tif 000069
【図３】
0003628258.tif 000070
【図４】
0003628258.tif 000071
【図５】
0003628258.tif 000072
【図６】
0003628258.tif 000073
【図７】
0003628258.tif 000074
【図８】
0003628258.tif 000075
【図９】
0003628258.tif 000076
【図１０】
0003628258.tif 000077
【図１１】
0003628258.tif 000078