(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
サウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）に属する植物の地上部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするチロシナーゼ阻害剤。
【請求項２】
サウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）に属する植物の地上部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするメラニン産生抑制剤。
【請求項３】
サウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）に属する植物の地上部からの抽出物を配合したことを特徴とする美白化粧料。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、シミ、ソバカスや皮膚色素沈着等の原因となるメラニンの産生を抑制することによって美白作用を発揮することができ、皮膚色素沈着症の予防・治療に有効であるチロシナーゼ阻害剤、メラニン産生抑制剤および美白化粧料に関する。
【０００２】
【従来の技術】
シミ、ソバカスや日焼け後の皮膚色素沈着は、皮膚内に存在する色素細胞（メラノサイト）の活性化によりメラニン産生が著しく亢進した結果として生ずるものであり、中高年齢層における肌の悩みの一つになっている。
【０００３】
一般に、メラニンは色素細胞の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、ついで５,６−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成されるものとされている。従って、皮膚の色黒（皮膚色素沈着症）を予防・治療するためには、メラニン産生過程を阻害すること、あるいは既に産生したメラニンを淡色漂白することが考えられる。
【０００４】
このような考えに基づき、従来から種々の美白成分が提案されてきた。例えば、チロシナーゼ活性を阻害してメラニン産生を抑制するものとして、コロイド硫酸やグルタチオンに代表される硫黄化合物が用いられてきた。また、産生したメラニンを淡色漂白化するものとして、アスコルビン酸類、過酸化水素、ハイドロキノン、カテコール等が用いられてきた。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
しかしながら、皮膚色素沈着症の予防・治療に関し、アスコルビン酸類は、含水化粧料の如き水分を多く含む系においては酸化され易く不安定であり、変色の原因となる。また、過酸化水素水は保存上の安定性および使用上の安全性に問題があり、グルタチオンおよびコロイド硫黄は著しい異臭を放つ点で問題がある。更には、ハイドロキノンおよびカテコールのようなものは皮膚刺激およびアレルギー性などの使用上の安全性に問題がある。従って、これらの美白成分を化粧料等の製品に使用することは制約されており、未だ充分に満足できる美白成分は得られていない。
【０００６】
そこで、本発明は、第一に、天然物の中からチロシナーゼ活性阻害作用を有するものを見出し、それを有効成分としたチロシナーゼ阻害剤を提供することを目的とする。
また、本発明は、第二に、天然物の中からメラニン産生抑制作用を有するものを見出し、それを有効成分としたメラニン産生抑制剤を提供することを目的とする。
さらに、本発明は、第三に、天然物の中から美白作用を有するものを見出し、それを含有した美白化粧料を提供することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、本発明は、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を有効成分として含有するチロシナーゼ阻害剤およびメラニン産生抑制剤、並びにサウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を配合した美白化粧料を提供する。
本発明のチロシナーゼ阻害剤、メラニン産生抑制剤および美白化粧料の好ましい実施形態において、サウスレア(Saussurea）属に属する植物が、サウスレア・インボルクラタ（Saussurea involucrata (Kar.et Kir.) Sch. Blp.）、サウスレア・メデュサ（Saussurea medusa Maxim.）およびサウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）からなる群より選択される１種以上の植物である。
【０００８】
【発明の実施の形態】
以下、本発明について詳細に説明する。
【０００９】
〔チロシナーゼ阻害剤・メラニン産生抑制剤〕
本発明のチロシナーゼ阻害剤およびメラニン産生抑制剤は、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【００１０】
「サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物」には、サウスレア（Saussurea）属に属する植物から抽出処理によって得られる抽出液、該抽出液の希釈液もしくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、またはこれらの粗精製物もしくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１１】
抽出処理においては、抽出原料としてサウスレア（Saussurea）属に属する植物を使用する。抽出原料として使用する植物の部位は、好ましくは地上部分であり、さらに好ましくは葉および／または茎である。
【００１２】
サウスレア（Saussurea）属に属する植物の具体例としては、サウスレア・インボルクラタ（Saussurea involucrata (Kar.et Kir.) Sch.Blp.）（中国名：大苞雪蓮）、サウスレア・メデュサ（Saussurea medusa Maxim.）（中国名：水母雪蓮）、サウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）（中国名：綿頭雪蓮）、サウスレア・グナパロイデス（Saussurea gnaphaloides (Royle) Sch.-Bip.）、サウスレア・ステラ（Saussurea stella Maxim.）、サウスレア・トリダクタイラ（Saussurea tridactyla Sch.-Bip.ex Hook.f.）、サウスレア・ナミカワエ（Saussurea namikawae Kitam.）、サウスレア・ゴッシピポラ（Saussurea gossypiphora D.Don）、サウスレア・ニシオカエ（Saussurea nishiokae Kitam.）、サウスレア・レウコマ（Saussurea leucoma Diels）、サウスレア・クゥエルキフォリア（Saussurea quercifolia W.W.Smith）、サウスレア・エリオケパラ（Saussurea eriocephala Franch.）、サウスレア・キンギイ（Saussurea kingii J.R.Drumm.ex C.E.C.Fisch.）、サウスレア・シムプソニアナ（Saussurea simpsoniana (Field.et Gardn.) Lipsch.）、サウスレア・オブウァラタ（Saussurea obvallata (DC.) Edgew.）、サウスレア・ウェットステイニアナ（Saussurea wettsteiniana Hand.-Mazz.）、サウスレア・グロボサ（Saussurea globosa Chen）、サウスレア・ロンギフォリア（Saussurea longifolia Franch.）等を例示することができる。
【００１３】
抽出原料としては、上記サウスレア（Saussurea）属に属する植物をそれぞれ単独で使用することもできるし、異なるもの２種以上組み合わせて使用することもできる。
抽出原料としては、サウスレア・インボルクラタ（Saussurea involucrata (Kar.et Kir.) Sch.Blp.）（中国名：大苞雪蓮）、サウスレア・メデュサ（Saussurea medusa Maxim.）（中国名：水母雪蓮）およびサウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）（中国名：綿頭雪蓮）のうちの１種以上を使用することが好ましく、サウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）（中国名：綿頭雪蓮）を使用するのがさらに好ましい。
【００１４】
サウスレア・インボルクラタ（Saussurea involucrata (Kar.et Kir.) Sch.Blp.）（中国名：大苞雪蓮）、サウスレア・メデュサ（Saussurea medusa Maxim.）（中国名：水母雪蓮）およびサウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）（中国名：綿頭雪蓮）は、主に中国の新疆自治区、四川省、崑崙山およびチベットの各省区等に分布するキク科の草本であり、これまでに関節リュウマチ、インポテンツ、月経不順、子宮出血、女性の下腹部の冷えと痛み、無色の帯下、腎虚および雪盲に使用されており、創傷出血に外用できることが知れられていた。
なお、サウスレア・インボルクラタ（Saussurea involucrata (Kar.et Kir.) Sch.Blp.）、サウスレア・メデュサ（Saussurea medusa Maxim.）およびサウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）の全草をそれぞれ「大苞雪蓮花」、「水母雪蓮花」および「綿頭雪蓮花」と呼ぶこともあるが、本明細書においては、それぞれの全草を「大苞雪蓮」、「水母雪蓮」および「綿頭雪蓮」と呼び、それぞれの地上部（特に葉および／または茎）を「大苞雪蓮花」、「水母雪蓮花」および「綿頭雪蓮花」と呼ぶこととする。
【００１５】
上記サウスレア（Saussurea）属に属する植物のうち、サウスレア・インボルクラタ（Saussurea involucrata (Kar.et Kir.) Sch.Blp.）は中国の新疆自治区等で、サウスレア・グナパロイデス（Saussurea gnaphaloides (Royle) Sch.-Bip.）は中国の四川省、チベット自治区等で、サウスレア・ステラ（Saussurea stella Maxim.）は中国の青海省、甘粛省、四川省、チベット自治区等で、サウスレア・メデュサ（Saussurea medusa Maxim.）は中国の四川省、雲南省、青海省、チベット自治区、香港、ネパール等で、サウスレア・ラニセプス（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）は中国の四川省、チベット自治区等で、サウスレア・トリダクタイラ（Saussurea tridactyla Sch.-Bip.ex Hook.f.）は中国のチベット自治区等で、サウスレア・ナミカワエ（Saussurea namikawae Kitam.）は中国のチベット自治区等で、サウスレア・ゴッシピポラ（Saussurea gossypiphora D.Don）はネパール等で、サウスレア・ニシオカエ（Saussurea nishiokae Kitam.）はネパール等で、サウスレア・レウコマ（Saussurea leucoma Diels）は中国の雲南省等で、サウスレア・クゥエルキフォリア（Saussurea quercifolia W.W.Smith）は中国の四川省、雲南省等で、サウスレア・エリオケパラ（Saussurea eriocephala Franch.）は中国の雲南省等で、サウスレア・キンギイ（Saussurea kingii J.R.Drumm.ex C.E.C.Fisch.）は中国のチベット自治区等で、サウスレア・シムプソニアナ（Saussurea simpsoniana (Field.et Gardn.) Lipsch.）はネパール等で、サウスレア・オブウァラタ（Saussurea obvallata (DC.) Edgew.）は中国の雲南省、四川省、チベット自治区等で、サウスレア・ウェットステイニアナ（Saussurea wettsteiniana Hand.-Mazz.）は中国の雲南省等で、サウスレア・グロボサ（Saussurea globosa Chen）は中国の四川省等で、サウスレア・ロンギフォリア（Saussurea longifolia Franch.）は中国の雲南省等で入手可能である。
【００１６】
抽出原料とするサウスレア（Saussurea）属に属する植物は、採取後ただちに乾燥し粉砕したものが適当である。乾燥は、天日で行ってもよいし、通常用いられる乾燥機を使用して行ってもよい。
【００１７】
抽出処理においては、抽出溶媒として極性溶媒を使用することが好ましい。サウスレア（Saussurea）属に属する植物に含まれるチロシナーゼ阻害作用またはメラニン産生抑制作用を示す成分は未だ特定されていないが、その成分は極性溶媒を用いた抽出処理によって、サウスレア（Saussurea）属に属する植物から容易に抽出することができる。
【００１８】
極性溶媒の具体例としては、水、水溶性有機溶媒等を例示でき、これらを単独で又は２種類以上を組み合わせて使用してもよい。
抽出溶媒としては、これら極性溶媒のうち、水溶性有機溶媒または含水水溶性有機溶媒を使用することが好ましい。
【００１９】
抽出溶媒として使用し得る水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。従って、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２０】
抽出溶媒として使用し得る水溶性有機溶媒としては、低級脂肪族アルコール、アセトン、テトラヒドロフラン等を例示することができる。低級脂肪族アルコールの具体例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等の一価アルコール、１,３−ブチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、イソプレングリコール等の多価アルコールを例示することができる。
【００２１】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、抽出溶媒として含水水溶性有機溶媒を使用する場合、一価アルコール、多価アルコール、アセトン、テトラヒドロフラン等を好ましくは５０重量％以上含有する含水水溶性有機溶媒を使用することができる。
【００２２】
抽出溶媒としては、酢酸エチル、酢酸ブチル、メチルセロソルブ等の中間極性溶媒を使用してもよい。
【００２３】
抽出処理は、サウスレア（Saussurea）属に属する植物に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定されず、常法に従って行うことができる。抽出処理の際には、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温ないし還流加熱下において任意の装置を使用することができる。
【００２４】
抽出方法としては、抽出溶媒中に抽出原料を長時間常温で浸漬して抽出する方法や、抽出溶媒の沸点以下の温度に加熱し攪拌しながら抽出する方法、あるいは抽出溶媒の沸点付近で加熱還流下にて抽出する方法を例示することができる。この際、抽出溶媒量は、抽出原料の通常５〜５０倍量（重量比）、好ましくは５〜１５倍量（重量比）であり、抽出時間は、通常１〜１０時間、好ましくは１〜４時間であり、抽出温度は、通常５０〜９５℃、好ましくは８０〜９５℃である。
【００２５】
抽出処理の際、極性溶媒による抽出を行う前に、ヘキサン、ヘプタン、ベンゼン等の非極性溶媒を用いた脱脂処理を施してもよく、かかる前処理を行うことにより、極性溶媒による抽出処理を効率良く行うことができる。
【００２６】
抽出処理により可溶性成分を溶出させた後、ろ過、遠心分離等の処理を施して抽出残渣を除くことにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００２７】
サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は特有の匂いと味を有するため、脱色、脱臭等を目的とする精製を行なってもよい。精製は、具体的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等によって行うことができ、これらの処理は、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物の生理作用（チロシナーゼ阻害作用またはメラニン産生抑制作用）の低下を招かない範囲で行う。
【００２８】
以上のようにして得られるサウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は、チロシナーゼ阻害作用またはメラニン産生抑制作用を有する。これらの作用の作用機序および作用成分は、現在までのところ判明していないが、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物がこれらの作用を有することは後述する実施例から明らかである。
【００２９】
サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は、そのままでもチロシナーゼ阻害剤またはメラニン産生抑制剤として使用することができるが、常法に従って製剤化して使用することもできる。製剤化する場合、保存や取扱いを容易にするために、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容され得るキャリアーその他任意の助剤を添加することができる。サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は、常法に従った製剤化により粉剤、錠剤、液剤、カプセル剤等、任意の剤形とすることができる。
【００３０】
本発明のチロシナーゼ阻害剤は、チロシナーゼの活性を阻害することができる。メラニンは、色素細胞の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、ついで５,６−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成されるものとされている。従って、本発明のチロシナーゼ阻害剤によれば、メラニン産生に関与するチロシナーゼの活性を阻害することにより、メラニンの産生を抑制することができる。また、本発明のチロシナーゼ阻害剤によれば、メラニン産生の抑制を通じて、美白効果を得ることができる。さらに、本発明のチロシナーゼ阻害剤は、皮膚に適用した場合の安全性に優れている。
【００３１】
本発明のメラニン産生抑制剤は、メラノサイトからのメラニン産生を抑制することができる。メラノサイトの活性化によるメラニン産生の亢進は、シミ、ソバカスや日焼け後の皮膚色素沈着の原因となる。従って、本発明のメラニン産生抑制剤によれば、メラニン産生を抑制することにより、シミ、ソバカスや皮膚色素沈着を予防および／または治療することができ、これによって美白効果を得ることができる。さらに、本発明のメラニン産生抑制剤は、皮膚に適用した場合の安全性に優れている。なお、本発明のメラニン産生抑制剤によるメラニン産生抑制作用は、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物のチロシナーゼ阻害作用を通じて発揮されるメラニン産生抑制作用に限定されるものではない。
【００３２】
上述のように、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は、チロシナーゼ阻害作用および／またはメラニン産生抑制作用を通じて美白作用を発揮し得るので、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は、美白剤の有効成分として使用することもできる。
【００３３】
〔美白化粧料〕
本発明の美白化粧料は、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を配合したことを特徴とする。
【００３４】
「美白化粧料」とは、肌を美しく白くするために使用される化粧料を意味し、美白化粧料の具体例としては、クリーム、乳液、化粧水、パック等を例示することができる。
【００３５】
サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は、美白作用を有するとともに、皮膚に適用した場合の安全性に優れているため、美白化粧料に配合するのに好適である。
サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物は、チロシナーゼ阻害作用および／またはメラニン産生抑制作用を通じて美白作用を発揮するので、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を化粧料に配合することによって、美白作用を化粧料に付与することができ、これを美白化粧料として使用することができる。
【００３６】
本発明の美白化粧料は、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を、その生理活性を妨げないような任意の主剤、助剤に配合したものであってもよいし、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を主成分とするものであってもよい。本発明の美白化粧料には、本発明のチロシナーゼ阻害剤および／またはメラニン産生抑制剤を含有していてもよい。
【００３７】
サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を配合して美白化粧料を製造する際には、任意の助剤を添加して、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物を、クリーム、乳液、化粧水、パック等の任意の剤形に製剤化することができる。
【００３８】
本発明の美白化粧料におけるサウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物の配合量は、該抽出物の活性の強さや該抽出物を配合する化粧料の種類によって適宜調整し得るが、乾燥物に換算して、通常０．００１〜１０重量％、好ましくは０．０１〜５重量％である。配合量が０．００１重量％より少ないと美白効果が十分に得られにくく、配合量が１０重量％を超えても増加分に見合った美白効果の向上が得られにくい。
【００３９】
本発明の美白化粧料には、必要に応じて任意の薬効成分、生理活性物質などを併せて配合することができ、特に抗炎症剤および／または美白剤を配合することが好ましい。皮膚化粧料に配合するのに好適な抗炎症剤としては、例えば、アラントイン、グアイアズレンまたはその誘導体、グリチルリチン酸またはその塩類若しくは誘導体、グリチルレチン酸またはその塩類若しくは誘導体、イプシロンアミノカプロン酸またはその誘導体、トラネキサム酸、イブプロフェン、インドメタシン、酸化亜鉛、アルニカ抽出物、インチンコウ抽出物、オウゴン抽出物、甘草抽出物、シャクヤク抽出物、ジュウヤク抽出物、シラカバ抽出物、セイヨウトチノミ抽出物、ムクロジ抽出物およびローズマリー抽出物からなる群より選ばれる１種または２種以上の抗炎症剤が挙げられる。また、皮膚化粧料に配合するのに好適な美白剤としては、例えば、アスコルビン酸またはその誘導体、プラセンタエキス、コウジ酸、ルシノール、エラグ酸およびカミツレ抽出物からなる群より選ばれる１種または２種以上の美白剤が挙げられる。
【００４０】
本発明の美白化粧料において、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物とともに構成成分として利用可能なものとしては、水性成分、油性成分、粉末成分、界面活性剤、保湿剤、色剤、香料、防腐剤、抗酸化剤、紫外線カット剤、キレート剤、抗炎症剤、本抽出物以外の美白成分等を例示でき、具体的には以下のものを例示することができる。なお、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物とともに以下の構成成分を併用した場合、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物と併用された構成成分との間の相乗作用が、通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。
【００４１】
収斂剤：クエン酸またはその塩類、酒石酸またはその塩類、乳酸またはその塩類、塩化アルミニウム、硫酸アルミニウム・カリウム、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、パラフェノールスルホン酸亜鉛、硫酸亜鉛、チユエキス、エイジツエキス、ハマメリスエキス、ゲンノショウコエキス、チャカテキン類、ガイヨウエキス、オドリコソウエキス、オトギリソウエキス、ダイオウエキス、ヤグルマソウエキス、スギナエキス、キズタエキス、キューカンバーエキス、マロニエエキス、サルビアエキス、メリッサエキス等。
【００４２】
殺菌・抗菌剤：安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、塩化ジステアリルメチルアンモニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化アルキルジアミノエチルグリシン液、塩酸クロルヘキシジン、オルトフェニルフェノール、感光素１０１号、感光素２０１号、サリチル酸、サリチル酸ナトリウム、ソルビン酸、ハロカルバン、レゾルシン、パラクロロフェノール、フェノキシエタノール、ビサボロール、ヒノキチオール、メントール、キトサン、キトサン分解物、チユエキス、クジンエキス、エンメイソウエキス、ビワエキス、ウワウルシエキス、ホップエキス、ユッカエキス、アロエエキス、ケイヒエキス、ガジュツエキス等。
【００４３】
美白剤：アスコルビン酸およびその誘導体、イオウ、胎盤抽出物、エラグ酸およびその誘導体、コウジ酸およびその誘導体、グルコサミンおよびその誘導体、アゼラインおよびその誘導体、アルブチンおよびその誘導体、ヒドロキシケイヒ酸およびその誘導体、グルタチオン、アルニカエキス、オウゴンエキス、センキュウエキス、ソウハクヒエキス、サイコエキス、ボウフウエキス、ハマボウフウエキス、マンネンタケ菌糸体培養物またはその抽出物、ギムネマエキス、シナノキエキス、モモ葉エキス、エイジツエキス、クジンエキス、チユエキス、トウキエキス、ヨクイニンエキス、カキ葉エキス、ダイオウエキス、ボタンピエキス、ハマメリスエキス、マロニエエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、油溶性カンゾウエキス（カンゾウ疎水性フラボノイド、グラブリジン、グラブレン、リコカルコンＡ）等。
【００４４】
紫外線吸収剤：β−イソプロピルフラノン誘導体、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、オキシベンゾン、オキシベンゾンスルホン酸、テトラヒドロキシベンゾフェノン、ジヒドロキシジメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシベンゾフェノン、シノキサート、ジイソプロピルケイヒ酸メチル、メトキシケイヒ酸オクチル、パラアミノ安息香酸グリセリル、パラジメチルアミノ安息香酸アミル、パラジメチル安息香酸オクチル、パラアミノ安息香酸、パラアミノ安息香酸エチル、ブチルメトキシジベンゾイルメタン、酸化チタン、β−カロチン、γ−オリザノール、コメヌカエキス、アロエエキス、カバノキエキス、シラカンバエキス、カミツレエキス、コゴメグサエキス、セイヨウサンザシエキス、ヘンナエキス、チョウチグルミエキス、マロニエエキス、イチョウ葉エキス、カミツレエキス、セイヨウサンザシエキス、油溶性カンゾウエキス等。
【００４５】
保湿剤：セリン、グリシン、スレオニン、アラニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ビドロネクチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ローヤルゼリー、コンドロイチン硫酸、ヘパリン、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、リノール酸またはそのエステル類、エイコサペンタエン酸またはそのエステル類、ペクチン、アルゲコロイド、ビフィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体培養物またはその抽出物、小麦胚芽油、アボガド油、米胚芽油、ホホバ油、ダイズリン脂質、γ−オリザノール、ビロウドアオイエキス、ヨクイニンエキス、ジオウエキス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエキス、ゴボウエキス、マロニエエキス、マンネンロウエキス、アルニカエキス、小麦フスマ、コメヌカエキス等。
【００４６】
細胞賦活剤：リボフラビンまたはその誘導体、ピリドキシンまたはその誘導体、ニコチン酸またはその誘導体、パントテン酸またはその誘導体、α−トコフェロールまたはその誘導体、アルニカエキス、ニンジンエキス、オタネニンジンエキス、エゾウコギエキス、ヘチマエキス（サポニン）、シコンエキス、シラカンバエキス、オオバクエキス、ボタンピエキス、シャクヤクエキス、ムクロジエキス、ベニバナエキス、アシタバエキス、ビワ葉エキス、ヒキオコシエキス、ユキノシタエキス、黄杞エキス、サルビアエキス、ニンニクエキス、マンネンロウエキス等。
【００４７】
消炎・抗アレルギー剤：アズレン、アラントイン、アミノカプロン酸、インドメタシン、塩化リゾチーム、イプシロンアミノカプロン酸、オキシベンゾン、グリチルリチン酸またはその誘導体、グリチルレチン酸またはその誘導体、感光素３０１号、感光素４０１号、塩酸ジフェンヒドラミン、トラネキサム酸またはその誘導体、アデノシンリン酸、エストラジオール、エスロン、エチニルエストラジオール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾロン、プロゲステロン、コルチコステロン、アルニカエキス、インチンコウエキス、サンシシエキス、ジュウヤクエキス、セイヨウトチノキエキス、カンゾウエキス、トウキエキス、ヨモギエキス、ワレモコウエキス、リンドウエキス、サイコエキス、センキュウエキス、ボウフウエキス、セイヨウノコギリソウエキス、オウレンエキス、シソエキス等。
【００４８】
抗酸化・活性酸素消去剤：ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピル、バイカリン、バイカレイン、スーパーオキサイドディスムターゼ、カタラーゼ、ローズマリーエキス、メリッサエキス、オウゴンエキス、エイジツエキス、ビワ葉エキス、ホップエキス、ハマメリスエキス、シャクヤクエキス、セージエキス、キナエキス、カミツレエキス、ユーカリエキス、シソエキス、イチョウ葉エキス、タイムエキス、カルダモンエキス、キャラウェイエキス、ナツメグエキス、メースエキス、ローレルエキス、クローブエキス、ターメリックエキス、ヤナギタデエキス等。
【００４９】
油脂類：大豆油，アマニ油，キリ油，ゴマ油，ヌカ油，綿実油，菜種油，サフラワー油，トウモロコシ油，オリーブ油，椿油，アーモンド油，ヒマシ油，落花生油，カカオ油，モクロウ，ヤシ油，パーム核油，牛脂，ミンク油，卵黄油，ホホバ油，月見草油、馬油。
【００５０】
ロウ類：カルナウバロウ，キャンデリラロウ，蜜ロウ，サラシ蜜ロウ，鯨ロウ，セラックス，ラノリン類。
【００５１】
炭化水素類：流動パラフィン，ワセリン，マイクロクリスタリンワックス，セレシン，スクワラン，ポリエチレン末。
【００５２】
脂肪酸類：ステアリン酸，リノール酸，ラウリン酸，ミリスチン酸，パルミチン酸，ヘベニン酸，ラノリン酸，オレイン酸，ウンデシレン酸，イソステアリン酸。
【００５３】
アルコール類：ラウリルアルコール，セチルアルコール，ステアリルアルコール，ラノリンアルコール，水添ラノリンアルコール，オレイルアルコール，ヘキサデシルアルコール，２−オクチルドデカノール，グリセリン，ソルビトール，プロピレングリコール，１，３−ブチレングリコール，エチレングリコールおよびその重合体，ブドウ糖，白糖，コレステロール，フィトステロール，セトステアリルアルコール。
【００５４】
エステル類：オレイン酸デシル，ステアリン酸ブチル，ミリスチン酸ミリスチル，ラウリン酸ヘキシル，パルミチン酸イソプロピル，ミリスチン酸イソプロピル，ミリスチン酸オクチルドデシル，ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル，ジオレイン酸プロピレングリコール，フタル酸ジエチル，モノステアリン酸プロピレングリコール，モノステアリン酸エチレングリコール，モノステアリン酸グリセリン，トリミリスチン酸グリセリン，酢酸ラノリン，乳酸セチル。
【００５５】
界面活性剤：陰イオン性界面活性剤，陽イオン性界面活性剤，両イオン性界面活性剤，非イオン性界面活性剤。
【００５６】
香料：メントール，カルボン，オイゲノール，アネトール，ハッカ油，スペアミント油，ペパーミント油，ユーカリ油，アニス油。
【００５７】
以上説明した本発明のチロシナーゼ阻害剤、メラニン産生抑制剤および美白化粧料は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それらの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用されてもよい。
【００５８】
【実施例】
以下、実施例等により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例等に限定されるものではない。
【００５９】
〔製造例１〕
抽出原料として綿頭雪蓮（Saussurea laniceps Hand.-Mazz.）の地上部の乾燥粉砕物３００ｇを、表１に示す４種類の抽出溶媒２０００ｍｌに投入し、穏やかに攪拌しながら３時間、７０℃に保った後、濾過した。濾液を４０℃で減圧下に濃縮し、さらに減圧乾燥機で乾燥して抽出物（粉末状）を得た。４種類の抽出溶媒を用いて上記抽出処理を行ったところ、得られた抽出物（試料ａ〜ｄ）の収率は表１のとおりであった。なお、抽出溶媒が混合物の場合、以下に示す混合比は重量基準によるものである。
【００６０】
0003658548.tif 000002
【００６１】
〔製造例２〕
製造例１で用いたものと同じ抽出原料の乾燥粉砕物３００ｇを１,３−ブチレングリコール−水（１：１混合液）２０００ｍｌに投入し、攪拌しながら８０℃で３時間保持したのち濾過して、固形分濃度２．０重量％の抽出液（試料ｅ）１５６０ｍｌを得た。
【００６２】
〔製造例３〕
抽出溶媒をグリセリン−水（１：１混合液）に変更したほかは製造例２と同様にして、固形分濃度１．６重量％の抽出液（試料ｆ）１５２０ｍｌを得た。
【００６３】
〔製造例４〕
抽出溶媒をプロピレングリコール−水（１：１混合液）に変更したほかは製造例２と同様にして、固形分濃度１．３重量％の抽出液（試料ｇ）１４９０ｍｌを得た。
【００６４】
以下に、サウスレア（Saussurea）属に属する植物からの抽出物の作用効果を評価するために行った各種試験例を挙げて、本発明をさらに詳細に説明する。
【００６５】
〔試験例１〕チロシナーゼ阻害作用
製造例1で得られた試料ａ〜ｄについて、メラニン産生過程で重要な作用をもっている酵素チロシナーゼの阻害作用を評価した。
具体的には以下のようにして試験を行った。
【００６６】
（１）Mcllvaine氏緩衝液（ｐＨ６．８）１．０ｍｌ、チロシン溶液（０．３ｍｇ／ｍｌ）０．３ｍｌおよび試料ａ〜ｄを蒸留水、ＤＭＳＯまたはそれらの混合液に溶解した試料溶液０．９ｍｌを試験管に入れよく混合し、３７℃で１０分間、プレインキュベーションした後、チロシナーゼ溶液（１ｍｇ／ｍｌ）０．１ｍｌを加え、３７℃で１５分間インキュベーションした。その後、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「試料添加・酵素添加時の吸光度」という。
【００６７】
（２）試料溶液およびチロシナーゼ溶液の代わりにMcllvaine氏緩衝液を用いる他は上記（１）と同様にして４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「試料添加・酵素無添加添加時の吸光度」という。
【００６８】
（３）試料溶液の代わりに試料溶液の溶媒を用いる他は上記（１）と同様にして４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「試料無添加・酵素添加時の吸光度」という。
【００６９】
（４）試料溶液の代わりに試料溶液の溶媒を用いるとともにチロシナーゼ溶液の代わりにMcllvaine氏緩衝液を用いる他は上記（１）と同様にして４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「試料無添加・酵素無添加時の吸光度」という。
【００７０】
（５）吸光度は、チロシンから生成したメラニン等一群の着色成分の濃度に比例するので、得られた吸光度より、下記の式を用いてチロシナーゼ活性阻害率を算出した。
【００７１】
【式１】
阻害率（％）=｛１−（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）｝×１００
【００７２】
上記式中、「Ａ」は試料添加・酵素添加時の吸光度を、「Ｂ」は試料添加・酵素無添加時の吸光度を、「Ｃ」は試料無添加・酵素添加時の吸光度を、「Ｄ」は試料無添加・酵素無添加時の吸光度を表わす。
【００７３】
試料濃度を段階的に変更して、チロシナーゼ活性阻害率（％）を測定した結果を表２に示す。チロシナーゼ阻害剤阻害率が５０％を示す試料濃度（重量％）を内挿法で求め、ＩＣ５０（重量％）とした。試料ａのＩＣ５０は０．９７（重量％）、試料ｂのＩＣ５０は０．４９（重量％）、試料ｃのＩＣ５０は０．３９（重量％）、試料ｄのＩＣ５０は０．５３（重量％）であった。
【００７４】
0003658548.tif 000003
【００７５】
表２に示すように、サウスレア（Saussurea）属に属する植物（試験例では綿頭雪蓮（Saussurea laniceps Hand.- Mazz.））からの抽出物が、チロシナーゼ活性阻害作用を有することが確認された。
【００７６】
〔試験例２〕メラニン産生抑制作用
製造例１で得られた試料ｂについて、Ｂ−１６メラノーマ細胞に対するメラニン産生抑制作用を評価した。
具体的には以下のようにして試験を行った。
【００７７】
（１）Ｂ−１６メラノーマ細胞１×１０６個を、２５ｍｌの培養フラスコで、１０％FBS-DURBECCO培地、５％二酸化炭素および９５％空気の下、前培養し、トリプシン処理して細胞を集め、そのうち４×１０６個を、１０％FBS-DURBECCO培地５ｍｌを入れた直径６０ｍｍのシャーレに播種し、２４時間培養した。その後、製造例１で得られた試料ｂを溶解させた０．２５ｍＭテオフィリン添加１０％FBS-DURBECCO培地５ｍｌで４日間培養を行った。培養後、トリプシン処理をして細胞を集め、細胞数を数えた後、培地を遠心分離により除き、細胞を１０％ＤＭＳＯ含有２Ｎ水酸化ナトリウム溶液２ｍｌで超音波処理により破砕した。これを濾紙で濾過した後、分光光度計で４７５ｎｍにおける吸光度を測定し、あらかじめ数えておいた細胞数より単位細胞あたりの吸光度を算出した。以下、この吸光度を「単位細胞あたりの試料添加時の吸光度」という。
【００７８】
（２）試料ｂを添加しない他は上記（１）と同様にして細胞を処理し、４７５ｎｍにおける吸光度を測定した。以下、この吸光度を「単位細胞あたりの試料無添加時の吸光度」という。
【００７９】
（３）測定した吸光度に基づいて下記の計算式によりメラニン産生抑制率（％）を算出した。
【００８０】
【式２】
抑制率（％）=｛（Ａ−Ｂ）／Ａ｝×１００
【００８１】
上記式中、「Ａ」は単位細胞あたりの試料無添加時の吸光度を、「Ｂ」は単位細胞あたりの試料添加時の吸光度を表す。
【００８２】
試料濃度を段階的に変更して、メラニン産生抑制率（％）を測定した結果を表３に示す。なお、表３には、培養後の細胞数から算出したＢ−１６メラノーマ細胞の生存率（％）を併せて示す。
【００８３】
0003658548.tif 000004
【００８４】
表３に示すように、サウスレア（Saussurea）属に属する植物（試験例では綿頭雪蓮（Saussurea laniceps Hand.- Mazz.））からの抽出物が、メラノサイト（試験例ではＢ−１６メラノーマ細胞）に対してメラニン産生抑制作用を有することが確認された。
【００８５】
〔試験例３〕色素沈着改善作用（美白作用）
後述する配合例１に示す組成からなるクリームａ（本発明品）と、クリームａ中の綿頭雪蓮（Saussurea laniceps Hand.- Mazz.）からの抽出物を同量の精製水で置換したクリームｂ（比較品）とを用い、色黒、シミ又はソバカスに悩む女性ボランティア４０名を、統計的に同等な２群に分け、それぞれに３ヶ月間、長期連用させ、色素沈着に対する改善効果を肉眼観察により評価した。
その結果を表４に示す。なお、やや改善以上の効果が認められた場合を有効とした。
【００８６】
0003658548.tif 000005
【００８７】
表４に示すように、サウスレア（Saussurea）属に属する植物（試験例では綿頭雪蓮（Saussurea laniceps Hand.- Mazz.））からの抽出物を配合したクリームａ（本発明品）は、クリームｂ（比較品）と比較して顕著な色素沈着改善作用（美白作用）を有することが確認された。また、クリームａ（本発明品）はテスト期間中、サンプル塗布部位において皮膚に好ましくない反応は観察されず、安全性の高いことが確かめられた。
【００８８】
〔試験例４〕美白作用
後述する配合例２〜４に示す組成からなる乳液、化粧水、パックについても試験例３と同様に色素沈着改善作用を評価したところ、表４に示す結果と同等もしくはそれに準じる結果が得られた。
【００８９】
〔配合例１〕
下記の組成のクリームを常法により製造した。
流動パラフィン                                      ５．０重量部
サラシミツロウ                                      ４．０重量部
セタノール                                          ３．０重量部
スクワラン                                        １０．０重量部
ラノリン                                            ２．０重量部
アラントイン                                        ０．１重量部
シャクヤク抽出物                                    ０．１重量部
ジュウヤク抽出物                                    ０．１重量部
コウジ酸                                            ０．１重量部
ルシノール                                          ０．１重量部
ステアリン酸                                        １．０重量部
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0）     １．５重量部
モノステアリン酸グリセリル                          ３．０重量部
１，３−ブチレングリコール                          ６．０重量部
パラオキシ安息香酸メチル                            １．５重量部
香料                                                ０．１重量部
試料ｂ                                              ０．１重量部
試料ｅ                                              １．０重量部
精製水                            残部（全量を１００重量部とする）
【００９０】
〔配合例２〕
下記の組成の乳液を常法により製造した。
ホホバオイル                                        ４．０重量部
オリーブオイル                                      ２．０重量部
スクワラン                                          ２．０重量部
セタノール                                          ２．０重量部
モノステアリン酸グリセリル                          ２．０重量部
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.0）           ２．５重量部
グリチルリチン酸ジカリウム                          １．０重量部
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0）     ２．０重量部
１，３−ブチレングリコール                          ３．０重量部
パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１５重量部
香料                                                ０．０５重量部
試料ｃ                                              ０．１重量部
試料ｅ                                              １．０重量部
イプシロンアミノカプロン酸                          ０．１重量部
インドメタシン                                      ０．０５重量部
ムクロジエキス                                      ０．１重量部
プラセンターエキス                                  ２．０重量部
黄杞エキス                                          ０．２重量部
藤茶エキス                                          ０．２重量部
コンドロイチン硫酸                                  ０．１重量部
オウゴンエキス                                      ０．３重量部
ワレモコウエキス                                    ０．２重量部
セイヨウトチノミエキス                              ０．１重量部
精製水                            残部（全量を１００重量部とする）
【００９１】
〔配合例３〕
下記の組成の化粧水を常法により製造した。
グリセリン                                          ３．０重量部
１，３−ブチレングリコール                          ３．０重量部
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.0）     ０．５重量部
パラオキシ安息香酸メチル                            ０．１５重量部
トラネキサム酸                                      ０．１重量部
イブプロフェン                                      ０．１重量部
エラグ酸                                            ０．１重量部
クエン酸                                            ０．１重量部
クエン酸ソーダ                                      ０．１重量部
油溶性甘草エキス（ロシア産甘草）                    ０．５重量部
アスコルビン酸リン酸マグネシウム                    ３．０重量部
香料                                                ０．０５重量部
試料ａ                                              ０．２重量部
試料ｅ                                              ２．０重量部
フェノキシエタノール                                ０．５重量部
ヒアルロン酸ナトリウム                              ０．０５重量部
ニンジンエキス                                      ０．２重量部
カミツレエキス                                      ０．２重量部
コラーゲン                                          ０．５重量部
精製水                            残部（全量を１００重量部とする）
【００９２】
〔配合例４〕
下記組成のパックを常法により製造した。
ポリビニルアルコール                              １５．０重量部
ポリエチレングリコール                              ３．０重量部
プロピレングリコール                                ７．０重量部
エタノール                                        １０．０重量部
パラオキシ安息香酸エチル                            ０．０５重量部
酢酸ｄｌトコフェノール                              ０．５重量部
香料                                                ０．０５重量部
試料ｅ                                              ２．０重量部
試料ｆ                                              ３．０重量部
グリチルレチン酸ステアリル                          ０．５重量部
クジンエキス                                        ０．５重量部
酵母エキス                                          ０．２重量部
加水分解コンキオリン                                ０．１重量部
シラカバエキス                                      ０．１重量部
ローズマリーエキス                                  ０．１重量部
酸化亜鉛                                            ０．１重量部
アルニカエキス                                      ０．１重量部
インチンコウエキス                                  ０．１重量部
センキュウエキス                                    ０．３重量部
オウバクエキス                                      ０．２重量部
ヨクイニンエキス                                    ０．５重量部
精製水                            残部（全量を１００重量部とする）
【００９３】
【発明の効果】
本発明によれば、メラニン産生に関与するチロシナーゼの活性を阻害することができるチロシナーゼ阻害剤、メラニン産生を抑制することができるメラニン産生抑制剤、およびチロシナーゼ阻害作用またはメラニン産生抑制作用を有する美白化粧料が提供される。