(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程：（A）原料を、原料の0.1〜300重量部の溶媒であってアルカリを含むもので原料の細胞壁を著しく破壊することなく抽出処理する工程；および
（B）処理液から、フコイダン含有抽出物を回収する工程
を含む、褐藻類原料からフコイダンを含む抽出物を製造するための方法であって、溶媒が0.08M〜1Mのアルカリを含み、フコイダン含有抽出物のヒ素含量がlppm以下である、前記の方法。
【請求項２】
溶媒が、さらに過酸化水素を含む、請求項1に記載された方法。
【請求項３】
原料が湿潤モズクである場合、原料の0.1〜50重量部の溶媒を用い、または原料が湿潤モズク以外のモズクである場合、原料の1〜300重量部の溶媒を用い；溶媒が、0.08M〜1Mの水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム、および0.005〜5％の過酸化水素を含み；かつ溶媒で処理する工程が、50℃〜100℃の温度において10分〜120分間実施される、請求項2に記載された方法。
【請求項４】
以下の工程：（a）原料モズクを、メタノール、エタノール、n-プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、n-ブチルアルコール、イソブチルアルコール、sec-ブチルアルコール、およびtert-ブチルアルコール、並びにこれらの混合物からなる群から選択される低級アルコールを含み、最終アルコール濃度が10〜90％である溶媒を用いて脱水処理する工程；
（b）所望により、脱水処理したモズクを乾燥する工程；
（A）脱水処理モズク（または所望により、乾燥したモズク）を、その0.1〜300重量部の溶媒であってアルカリを含むものでモズクの細胞壁を著しく破壊することなく抽出処理する工程；および
（B）処理液から、フコイダン含有抽出物を回収する工程
を含む、モズクからフコイダンを含む抽出物を製造するための方法であって、工程（Ａ）の溶媒が0.04M〜1Mのアルカリを含み、フコイダン含有抽出物のヒ素含量がlppm以下である、前記の方法。
【請求項５】
工程（A）において、溶媒がさらに過酸化水素水を含む、請求項4に記載された方法。
【請求項６】
工程（a）において、低級アルコールがエタノールであり、最終エタノール濃度が41〜80％であり；工程（A）において、脱水処理モズクの場合は原料の0.2〜200重量部の溶媒を用い、または乾燥モズクの場合は原料の1〜300重量部の溶媒を用い、溶媒が0.04M〜1Mの水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムと0.005〜5％の過酸化水素とを含み、処理が50℃〜100℃の温度において10分〜120分間実施される、請求項5に記載された方法。
【請求項７】
工程（A）において、処理後の溶媒のpHが、9．5以上である、請求項3または6に記載された方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、褐藻類（例えば、モズク）からのフコイダン含有抽出物を製造するための簡易な方法に関する。本発明の方法により得られたフコイダン含有抽出物はヒ素を実質的に含まない。本発明の方法により得られたフコイダン含有抽出物は、食品・飲料、および化粧品等に添加することができ、また、精製フコイダンの原料として用いることができる。
【０００２】
【従来の技術】
フコースを主構成糖とする硫酸化多糖類であるフコイダンは、抗腫瘍（Maruyama, F. et al., Kitasato Arch. of Exp. Med., 60, 105-121, 1987、Ellouali, M. et al, Anticancer Research, 13, 2011-2019, 1993）、抗胃潰瘍（特開平7-138166、特開平10-59860）、 抗ウイルス（Bana, M. et al., Antimicrob. Agents Chemother., 32, 1742-1745, 1988、Bana, M. et a1., Antiviral Res., 9, 335-343, 1988、Clark, G. F. et al., FASEB J., 6, 233, 1992）、抗炎症（特開平8-92103、Heinzelmann, M. et al., Infect, lmmun., 66, 5842-5847, 1998、Gan, L. et al., Invest. Ophthalmol. Vis Sci., 40, 575-581, 1999）、抗血液凝固（Colliec, S. et al., Phytochemistry, 35, 697-700, 1994、Millet, J. et al., Thrombo. Haemost., 81, 391-395, 1999）、免疫増強（特開平11-228602）、抗I型アレルギー（特開平10-72362）、抗高脂血症など種々の薬理的作用を有することが明らかにされている。したがって、食品・飲料、および化粧品等へ積極的に利用されることが期待されている。
【０００３】
一方、モズク等の褐藻類は、フコイダンを多く含むことが知られている。褐操類中のフコイダンはアルギン酸と共存し、高い粘度を有している。そのため、褐藻類からフコイダンを得るには、酸性下（pH3以下）で粘性を低下させた状態で加熱抽出するのが一般的である（特開平10-191940、および特開平10-195106の実施例参照）。しかし、このような抽出条件では、褐藻類に含まれているヒ素が一緒に抽出されることとなる。したがって従来の方法を用いて褐藻類からフコイダンを得る場合は、ヒ素等の低分子物質を除去する工程が必要とされていた。
【０００４】
そのような低分子物質を除去する方法としては、限外ろ過法、電気透析法等がある。しかし、限外ろ過法はフコイダンの回収率を低下させ、また電気透析法は多大な労力を必要とする等の問題があった。
【０００５】
また、食品原材料から食品衛生上問題とならなくなるまでヒ素を除去する技術としては、アルコールを用いる方法、イオン交換法、CaまたはMg等の2価の陽イオンを用いる方法、逆浸透圧法等、種々の方法が開発されている。しかし、これらの方法はいずれも処理に長時間を要したり、高度な技術・装置を必要とするものであった。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ヒ素を実質的に含まないフコイダンを含む抽出物を、原料から簡易に抽出する方法を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
原料からフコイダンを抽出する際、ヒ素を溶出させなければ、ヒ素を除去する工程を簡略化または削除することができる。本発明者らは、モズクを熱水で処理してフコイダンを抽出すると、同時にヒ素が溶出してしまうが、抽出溶媒にある濃度以上のアルカリを加えてpHを高くすることにより、ヒ素の溶出がほとんどみられなくなることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
すなわち、本発明は、
（A）原料を、原料の0.2〜100重量部の溶媒であってアルカリを含むもので抽出処理する工程；および
（B）処理液から、フコイダン含有抽出物を回収する工程、
を含む、褐藻類原料からフコイダンを含む抽出物を製造するための方法を提供する。
【０００９】
工程（A）について：
工程（A）に原料として供されるのは褐藻類（単に「褐藻」ということもある。）であり、これには、モズク、コンブ、ワカメ、ホンダワラ等が含まれる。本発明の方法の出発原料としては、目的とするフコイダンが多く含まれるモズクが好ましい。本明細書で「モズク」というときは、褐藻（Pharophyta）の、ながまつも科（Chordariaceae）、にせモズク科（Acrohtricaeae）またはモズク科（Spermatochnaceae）に属する藻、例えばモズク（Nemacystus decipiens  OKAM）を含む。また、天然モズク、養殖モズクのいずれでもよい。また、収穫直後の新鮮モズク、収穫後特別な処理を行っていない生モズクの他、冷蔵モズク、冷凍モズク、塩蔵モズク等の処理・加工等されたモズクでもよい。
【００１０】
本発明の方法の出発原料としては、特願2000-371041号（発明の名称「乾燥モズクの製造方法」）に開示された方法、すなわち
（a）モズクを、メタノール、エタノール、n-プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、n-ブチルアルコール、イソブチルアルコール、sec-ブチルアルコール、およびtert-ブチルアルコール、並びにこれらの混合物からなる群から選択される低級アルコールを含み、最終アルコール濃度が10〜90％である溶媒を用いて脱水処理する工程；および
（b）脱水処理したモズクを乾燥する工程、
を含む方法により得られた乾燥モズク、このような方法に準じて得られたセミドライモズク、上記工程（a）より得られた脱水処理モズクを用いることができる。特願2000-371041号の方法の詳細については後述する。
【００１１】
本明細書でいう「湿潤モズク」は、モズクのうち、収穫直後の新鮮モズクまたは収穫後特別な処理を行っていない生モズクと水分含量が同程度であるモズクである。「湿潤モズク以外のモズク」には、特願2000-371041号に開示された方法で得られた乾燥モズク、また、本明細書の実施例1に記載されたような方法で得られたセミドライモズクを含む。乾燥モズクを本発明に用いる際は、乾燥物の約20〜30倍の水に浸漬し、必要であれば軽く水分を除去して用いることができる。このようなモズクは「湿潤モズク」として本発明の方法に供することができる。
【００１２】
工程（A）で用いられる「溶媒」は、工程（A）が実施される条件下で、目的のフコイダン含有抽出物が溶解することのできるものである。フコイダンの抽出のために用いられてきた、水等の従来の溶媒を用いることができる。
【００１３】
工程（A）で用いられる「アルカリ」は、溶媒に溶解して溶媒pHを塩基性側に変動させうるものであり、MOH（Mは、アルカリ金属、アルカリ土類金属、またはアンモニウム基）の形式で表されるもの、炭酸ナトリウム、炭酸アンモニウム、リン酸ナトリウムを含む。安全性、コスト等の観点から、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムが好ましい。
【００１４】
ここでのアルカリは、主として原料から所望のフコイダンを溶出させ、かつヒ素等の好ましくない成分の溶出を抑えるために添加される。したがってアルカリ濃度の下限値は、フコイダンの溶出の程度、ヒ素等の溶出の程度、用いる原料の量等に応じて適宜決定することができる。上限値は、フコイダンの分解の有無、コスト等に応じて適宜決定することができる。原料が湿潤モズクであって原料の約0.2〜30重量部（好ましくは、約2〜3重量部）の溶媒を用いた場合、または原料が乾燥モズクであって原料の約2〜100重量部（好ましくは、約20〜30重量部）の溶媒を用いた場合において、アルカリとして水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムを用いるとき、溶媒中の濃度は、好ましくは約0.01〜1M、より好ましくは約0.03〜0.1M、最も好ましくは約0.04〜0.06Mである。あるいは、工程（A）におけるアルカリの濃度は、抽出溶媒のpH、好ましくは抽出処理後の溶媒のpHに着眼して決定することができる。抽出処理後の溶媒のpHは、好ましくはアルカリ性であり、より好ましくは約8．0以上であり、さらに好ましくは約9．5以上、最も好ましくは約12以上である。
【００１５】
必要であれば、工程（A）の後の適切な時期に、抽出物を含む系を適切な酸で中和することができる。この中和のための酸としては、無機酸および有機酸、たとえば、塩酸、硫酸、硝酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、酢酸、乳酸、クエン酸、酒石酸塩等を用いることができる。安全性、コスト等の観点から、塩酸が好ましい。
【００１６】
工程（A）におけるフコイダンを抽出するための処理溶媒には、過酸化水素を添加することができる。この過酸化水素は、主としてフコイダン抽出物を漂白する目的で添加される。過酸化水素はまた、フコイダンと共存しているアルギン酸を部分酸化分解し、若干粘度を低下させる作用も有すると考えられる。過酸化水素は、溶媒に、好ましくは約0.005〜5％、より好ましくは約0.05〜0.5％となるように添加される。過酸化水素を添加するには、予め適当な濃度に調製された過酸化水素水（例えば、市販の35％過酸化水素水）を用いてもよい。35％過酸化水素水を用いる場合は、溶媒に対し、好ましくは約0.014〜14％、より好ましくは約0.14〜1．4％、最も好ましくは約0．4〜0．7％となるように添加される。抽出処理後に得られる抽出液中に残留する過酸化水泰は、従来技術（例えば、カタラーゼ等の酵素を用いる）により完全に除去することができる。
【００１７】
また、本発明の工程（A）は、主としてフコイダン含有抽出物の抽出効率を高めるために、加熱条件下で実施することができる。工程（A）は、好ましくは約50〜100℃、より好ましくは約80〜95℃の温度において実施する。また、抽出処理のための時間は、用いる原料の量や目的とするフコイダン抽出物収量等に応じて適宜決定することができる。処理時間は、約3分〜数日間、好ましくは約10分〜約120分間、さらに好ましくは約30分〜約60分間である。抽出効率を高めるため、工程（A）は、撹拌、振とう、および浸漬・搬出の繰り返し、並びにこれらの組合せ等の操作を行いながら実施することができる。
【００１８】
工程（B）について：
工程（B）においては、フコイダン含有抽出物を回収する操作が行われるが、ここでいう「回収」は、必要であれば他の画分と分離して、フコイダン含有抽出物（および／またはフコイダン）が含まれる画分を得る操作をいう。これには、（1）フコイダン含有抽出物の溶解した溶液（抽出液、または処理液ということもある。）と不溶物とを遠心分離、ろ過等により分離してフコイダン含有抽出物の溶解した溶液を得ること、（2）フコイダン含有抽出物の溶解した溶液から溶媒を凍結乾燥等により除き、濃縮された溶液または固体のフコイダン含有抽出物を得ること、および（3）フコイダン含有抽出物の溶解した溶液（濃縮されていることもある。）または固体のフコイダン含有抽出物を精製して、さらに精製されたフコイダン含有抽出物（またはフコイダン）の溶解物または固形物を得ること、並びにこれらの組み合わせが含まれる。遠心分離、凍結乾燥、精製等の操作は、従来技術により行うことができる。
【００１９】
特願2000-371041号の方法との組み合わせ：
本発明は、上述したように出発原料として特願2000-371041号（発明の名称「乾燥モズクの製造方法」）に開示された方法で得られた乾燥モズクを用いることができ、また、特願2000-371041号に開示された方法と組み合わせて実施することができる。すなわち、本発明は、
（a）原料モズクを、メタノール、エタノール、n-プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、n-ブチルアルコール、イソブチルアルコール、sec-ブチルアルコール、およびtert-ブチルアルコール、並びにこれらの混合物からなる群から選択される低級アルコールを含み、最終アルコール濃度が10〜90％である溶媒を用いて脱水処理する工程；
（b）所望により、脱水処理したモズクを乾燥する工程；
（A）脱水処理（所望により乾燥）モズクを、その0.1〜300重量部の溶媒であってアルカリを含むもので抽出処理する工程；および
（B）処理液から、フコイダン含有抽出物を回収する工程、
を含む、モズクからフコイダンを含む抽出物を製造するための方法をも提供する。特願2000-371041号に開示された方法は、原料もずくの輸送や保存コストの低減を図ることができ、また、もずく藻体のNaClを除去する効果も有する。したがって特願2000-371041号に開示された方法と組み合わされた本発明の方法は、安価でより安全性のより高いフコイダン含有抽出物の製造を可能にする。この方法においては、好ましくは、低級アルコールはエタノールである。
【００２０】
アルコール濃度は適宜決定することができる。上限値は、モズク中の有用な成分（例えば、フコイダン）の溶出の有無、モズクの水分含量、コスト、および／または意図するモズクの脱水率などに応じて決定してもよい。下限値は、モズク中の好ましくない成分（例えば、ヒ素）の溶出の有無、および／または意図するモズクの脱水率などに応じて決定してもよい。好ましくは最終アルコール濃度が約10〜95％、更に好ましくは約40〜80％、最も好ましくは約45〜60％である。本明細書において、モズク処理に関して「最終アルコール（またはエタノール）濃度」（単に「アルコール濃度」ということもある）というときは、特別の場合を除き、式：最終アルコール濃度（％）＝（アルコール容積）／（アルコール容積＋水容積）×100により得られる容積に基づいた濃度（v／v）をいう。
【００２１】
また、処理するモズクとアルコールを含む溶媒との比も適宜決定することができる。コスト、処理のための時間、アルコール濃度、モズクの水分含量、意図するモズクの脱水率、および／またはモズク中の有用な成分（例えば、フコイダン）の溶出の有無などに応じて決定してもよい。モズク1（重量）に対して、好ましくは約0．1〜10，000倍、更に好ましくは約0．5〜1，000倍、最も好ましくは約1〜100倍量（重量または容積）の溶媒を加える。
【００２２】
上記工程（a）においては、新鮮モズクの特徴的色調である褐〜緑色を維持させる観点から、溶媒にアルカリを添加するとよい。ここでのアルカリ濃度は、適宜設定することができる。好ましくは、溶媒における最終濃度が約0．01〜1000mM、より好ましくは約0．1〜100mM、最も好ましくは約1〜50mMである。または、溶媒のpHを弱アルカリ付近とする量であり、例えばpHを約7．1〜9．0、好ましくは約7．1〜8．5、より好ましくは約7．5〜8．0とする量である。
【００２３】
工程（a）においては、撹拌、振とう、および浸漬・搬出の繰り返し、並びにこれらの組合せ等の操作を適宜行うことができる。工程（a）のための時間も適宜設定することができる。
【００２４】
工程（a）は、主としてアルコールの有する脱水作用およびモズクの保水力を消失させる作用に基づいて、モズクを脱水処理する工程である。本工程の処理を経たモズクの脱水率は、アルコール濃度および／または処理時間等を変動させることにより目的の値とすることができる。続く工程（b）において簡易に乾燥を行うためには、工程（a）処理後のモズクの脱水率は、好ましくは約20％以上（例えば約20％〜99．9％）、より好ましくは約40％以上（例えば約40％〜99．9％）、さらに好ましくは約60％以上（例えば約60％〜99．9％）である。本明細書でいう脱水率（％）は、式：脱水率（％）＝［（未処理モズク重量）−（処理モズク重量）］／（未処理モズク重量）×100により得られた値をいう。ここでいう未処理モズクとは、工程（a）に供する前のモズクであり、処理モズクとは工程（a）を経た直後、すなわち工程（b）の乾燥工程等を経ていないモズクをいう。重量測定は、当業者が通常行う方法による。軽く水切りすることが適切な場合もある。
【００２５】
工程（a）は、また、アルギン酸やフコイダン等の有用成分を消失することなく、原料モズクからのNaClの除去を可能とする工程でもある。したがって、工程（a）は、脱塩のための工程を不要にしうる。
【００２６】
工程（b）は、工程（a）により処理したもずくを乾燥させて、乾燥もずくを得るための工程である。本工程でいう「乾燥」は、水分含量を低下させるような処理（例えば、水切り）を広く含む。本工程の乾燥には、従来技術を用いることができる。例えば、遠心、圧搾、吸収体との接触またはメッシュ上に維持すること等による水分除去、天日乾燥、温風乾燥、冷風乾燥、および減圧乾燥、並びにこれらの組合せを用いることができる。水戻しの際、生もずくと同様の食感を再現し、製造コストを低減させる観点からは、約40〜50℃の温風乾燥が好ましい。
【００２７】
工程（a）および工程（b）は、工程（A）および工程（B）が実施される場所および／または時間とは隔たった場所および／または時間において実施することができる。すなわち工程（a）（所望により工程（b））を実施し、得られた中間物（乾燥モズクまたはセミドライのモズク）を得て、中間物を保存、運搬等して、他の場所および／または時間においてさらに工程（A）および工程（B）を実施することができる。たとえば、原料の生産地近くで工程（a）（所望により工程（b））を実施し、中間物の消費地または中間物の加工地において工程（A）および工程（B）を実施することができる。これらの態様もまた本発明の範囲に含まれる。
【００２８】
工程（A）、工程(B）、工程（a）および／または工程（b）は、各々を複数回繰り返し実施することができ、また、工程の順番、繰り返しの回数を適宜組み合わせて実施することができる。これらの態様もまた本発明の範囲に含まれる。
【００２９】
ヒ素を含まないフコイダン含有抽出物：
本発明の方法は、原料褐藻類からフコイダン含有抽出物を効率的に抽出することができ、かつ原料褐藻類に含まれる、食品または医薬品としては一般的に好ましくないと考えられる種々の成分を抽出しないでおくことができる。このような成分の例としては、例えば、ヒ素（As）および有害性重金属（Pb、Bi、Cu、Cd、Sb、Sn、またはHg等）が挙げられる。特に、ヒ素は褐藻類で問題視されることがあり、フコイダン含有抽出物中に許容できない程度に含まれる場合は、除去操作を要し、フコイダン含有抽出物およびフコイダンを高価にする原因となっていた。本発明の方法により得られるフコイダン含有抽出物は、驚くべきことにヒ素含量が非常に低いか、またはヒ素を実質的に含まない。これは、本発明の方法が、セルロースを主体とする褐藻類の細胞壁を著しく破壊することなくフコイダン含有抽出物を抽出しうるからであろう。褐藻類中でヒ素はATP-ATPaseでのエネルギー生産系に関与していると考えられ、したがってヒ素のほとんどは細胞質内に存在していると予想される。
【００３０】
本明細書で「ヒ素をほとんど含まない」というときは、ヒ素含量が原料に比較して非常に低い場合をいい、例えば、得られた抽出物中のヒ素含量が約30ppm以下、約5ppm以下、約3ppm以下である場合をいう。本明細書で「ヒ素を実質的に含まない」というときは、安全性等の観点からはヒ素含量を無視しうる程度にヒ素含量が低い場合、および／または定法によっては検出できない程度にヒ素含量が低い場合をいい、例えば、得られた抽出物中のヒ素含量が約1ppm以下である場合をいう。ヒ素量は定法、例えば、原子吸光光度法、グトツァイト法、および市販のキットを用いた方法等により測定することができる。測定に供する試料の前処理（乾式灰化、湿式灰化、溶媒抽出等）にも定法を用いることができる。
【００３１】
このようなヒ素をほとんど含まないか、あるいはヒ素を実質的に含まない褐藻類由来フコイダン含有抽出物は新規なものであり、本発明によって初めて提供されるものである。本発明の褐藻類由来フコイダン含有抽出物のヒ素含量は、好ましくは約30ppm以下、より好ましくは約5ppm以下、さらに好ましくは約3ppm以下、最も好ましくは約1ppm以下である。
【００３２】
ヒ素に関する以下の文は、新訂・加工食品と食品衛生，pp.600，新潮社（1984）から抜粋したものである：
”無機ヒ素のみを念頭に置いた場合、WHO（1971）勧告では飲料水中のヒ素を0．05mg／L（亜ヒ酸としては0．07mg／L）としている。わが国でもこれと同じである。英国、米国では食品中の亜ヒ酸を1．4ppm以下、飲料水中を0．14ppm以下としている。”
ヒ素に関する以下の文は、衛生試験法・注解，pp.582，金原出版（1990）から抜粋したものである：”三酸化ヒ素の人に対する致死量が70〜180mgである。山内らは食品をアルカリで加熱処理した後にAsを形態別に定量し、…海藻中からアルセノシュガーが同定されている（石西  伸，他，ヒ素−化学・代謝・毒性，恒星社厚生閣，1985）。”。また以下は、食品衛生辞典，pp.468，中央法規出版（昭和59年）からの抜粋である：”器具・容器包装の成分規格、発酵乳、乳酸菌飲料および乳飲料、ヒ素2ppm以下（As2O3として）”。また以下は、THE MERCK INDEX・TENTH EDITIONからの抜粋である：”ヒ酸（Aesenic Acid）のLD50（兎、静注）6mg／kg”。さらに、フコイダンのヒ素含量に関する公的な規格はないが、現在市販されている褐藻類由来のフコイダンのヒ素含量は10〜20ppmであるといわれる。このようなことからも、本発明のヒ素含量がlppm以下である褐藻類由来フコイダン含有抽出物の有用性が理解されよう。
【００３３】
本発明の褐藻類由来フコイダン含有抽出物（「フコイダン粗精製物」ということもある。）、とりわけモズク由来フコイダン含有抽出物は、食品・飲料、および化粧品用途に供することができる。例えば、スープ類（インスタント味噌汁等）、ふりかけ類、発酵乳および乳飲料（ヨーグルト等）、調味料、ドレッシング、健康食品、並びに機能性食品（タブレット、顆粒等）に用いることができる。また精製フコイダンの原料とすることもできる。
【００３４】
【実施例】
実施例にて本発明を詳細に説明する。
＜実施例1＞
モズク（Nano社、トンガ王国）を、（特願2000-371041号）にて開示された乾燥モズクの製造方法に準じて、セミドライの状態に加工した。すなわち、生モズクに、最終濃度が45％になるように99．5％エタノールと水とを加え、室温下で10分間攪拌した。これを遠心脱水機（H120B型、国産遠心社）で脱水して可能な限り含水エタノールを除いた。メッシュトレーに広げ、減圧しながら40〜50℃の温風下で約2時間乾燥し、加工モズクを得た。
【００３５】
この加工モズク100gに、過酸化水素水を0．6％（35％過酸化水素水（関東化学社）を使用。以下の実施例において同じ。本実施例での最終過酸化水素濃度は0．21％）含み、水酸化ナトリウムを下表の各々の濃度で含む溶媒2kgを加え、撹拌しながら90〜95℃で40分間処理した。処理物を室温まで冷却した後、遠心分離してフコイダンを含有する抽出液（処理液）を得た。得られた抽出液を塩酸で中和した後、カタラーゼ（カタラーゼU5L、阪急バイオインダストリー社）を0．4ml添加し、室温で30分間反応させて残留過酸化水素を除去した。これを凍結乾燥し、フコイダン含有抽出物（淡緑色粉末）を得た。
【００３６】
抽出物に含まれる、フコイダン、ヒ素、および硫酸含量を測定した。フコイダンは硫酸−チオグリコール法（M.M.Gibbns, Analyst (London), 80, 268, 1995）法でフコース量を測定し、フコース量×1．7で算出した。ヒ素は、測定キット（メルコクァントヒ素、メルク・ジャパン社）で測定した。硫酸含量はロジゾン酸法で測定した。結果を表1に示した。
【００３７】
【表１】
0003676682.tif 000002
ヒ素含量は、NaOH濃度が0．03Mの場合、3ppmであり、NaOH濃度がそれ以上の場合（処理後の溶媒pHがpH9．6以上である場合）は1ppm以下であった。ヒ素含量の非常に低い、またはヒ素を実質的に含まないフコイダン含有抽出物を得ることができた。
【００３８】
＜実施例2＞
実施例1と同様の方法により得た加工モズク100gに、過酸化水素水を0．6％含み、水酸化カリウムを下表の各々の濃度で含む溶媒2kgを加え、撹拌しながら90〜95℃で40分間処理した。処理物を室温にまで冷却した後、遠心分離にてフコイダンを含有する抽出液を得た。得られた抽出液を塩酸で中和した後、カタラーゼ（カタラーゼU5L、阪急バイオインダストリー社）を0．4ml添加し、室温で30分間反応させて残留過磯化水素を除去した。これを凍結乾燥し、乾燥物に含まれるフコイダン、ヒ素、および硫酸含量を、実施例1に記載したのと同様の方法で測定した。結果を表2に示した。
【００３９】
【表２】
0003676682.tif 000003
Na0Hの代わりにKOHを用いた本実施例においても、実施例1の場合と同様にヒ素含量は、KOH濃度が0．03Mである場合は5ppmであり、KOH濃度がそれ以上である場合（処理後の溶媒pHがpH9．5以上である場合）はlppm以下であった。
【００４０】
＜実施例3＞
冷凍モズク（Nano社、トンガ王国）lkgに、0．5％過酸化水素水を含み、水酸化カリウムを下表の各々の濃度で含む溶液lkgを加え、撹拌しながら90〜95℃で40分間処理した。処理物を室温まで冷却した後、遠心分離にてフコイダンを含有する抽出液を得た。抽出液を塩酸で中和した後、カタラーゼ（カタラーゼU5L、阪急バイオインダストリー社）を0．4ml添加し、室温で30分間反応させて残留過酸化水素水を除去した。これを凍結乾燥し、乾燥物に含まれているフコイダン、ヒ素、および硫酸含量を実施例1に記載したのと同様の方法で測定した。
【００４１】
フコイダンおよび硫酸含量は、実施例1および2で得られた結果とほとんど差が認められなかった。ヒ素含量についての結果を泰3に示した。
【００４２】
【表３】
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冷凍モズクを出発原料に用いた場合においても、溶出されるヒ素含量は、KOH濃度が0．04〜0．06Mでは3ppmであり、0．08M以上では1pmm以下であり、ヒ素含量の非常に低い、またはヒ素を実質的に含まないフコイダン含有抽出物を得ることができた。
【００４３】
【発明の効果】
本発明の方法によれば、褐藻類原料から、限外ろ過・電気透析等の低分子物質を除去するための特別な工程を経ることなく、ヒ素をほとんど含まないか、またはヒ素を実質的に含まないフコイダン含有抽出物を安価に得ることができる。
【００４４】
溶媒に過酸化水素を添加する本発明の方法によれば、褐藻類原料から、ヒ素をほとんど含まないか、またはヒ素を実質的に含まず、かつ外観に優れたフコイダン含有抽出物を安価に得ることができる。
【００４５】
本発明は、出発原料として特願2000-371041号（発明の名称「乾燥モズクの製造方法」）に開示された方法またはそれに準ずる方法で得られた加工モズク等を用いることができ、また、特願2000-371041号に開示された方法と組み合わせて実施することができ、このような方法により、安価で安全なモズク由来フコイダンを得ることができる。
【００４６】
本発明の方法により得られた、褐藻類由来のヒ素を実質的に含まないフコイダン含有抽出物は、食品・飲料、および化粧品等に用いる際に有用であり、安価で安全な精製フコイダン原料としても有用である。