(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）シクロスポリン、（Ｂ）ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルおよびポリオキシエチレンアルキルエーテルならびにそれらの混合物から選択された界面活性剤、（Ｃ）セルロース濃厚剤、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルポリマーおよびポリビニルピロリドンから選択された濃厚剤および（Ｄ）水を含み、シクロスポリンが溶解状態で存在する、水溶性眼科用組成物であって、シクロスポリンの濃度が0.01〜0.075％（w/v）であり、界面活性剤の濃度が0.1〜3.0％（w/v）である組成物（ただし、シクロスポリンは斜方晶系シクロスポリンではない）。
【請求項２】
（１）0.01〜0.075％（w/v）のシクロスポリンA;（２）0.15〜2.5％（w/v）のポリオキシル40ステアレート；（３）0.1〜3.0％（w/v）のヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびヒドロキシエチルセルロースから選択されたセルロース濃厚剤；および（４）0.0001〜0.01％（w/v）のブチル化ヒドロキシトルエンおよびチオ硫酸ナトリウムから選択された抗酸化剤を含む、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
シクロスポリンがシクロスポリンＡである、請求項１記載の組成物。
【請求項４】
局所的投与に適した容器に収容された、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
局所的に眼へ投与することにより、眼または眼の周囲または関連する器官または組織の疾患または状態を処置するための、請求項１〜４のいずれかに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
本願は、活性成分としてシクロスポリンを含有し、眼および周辺の疾病の処置に好適な眼科用組成物、特に点眼製剤に関するものである。
シクロスポリン類は、薬理学的実用性、例えば免疫抑制剤、抗炎症剤および／または抗寄生虫活性および／または抗腫瘍または細胞静止薬治療に対する癌の耐性を消滅させる活性を有するペプチドの大きな認知された群からなる。シクロスポリンは、例えば、シクロスポリンＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＧのような天然発生の菌代謝物、および種々の合成および半合成シクロスポリン、例えばヒジドロ−およびイソ−シクロスポリン（例えば米国特許第4,108,985号、4,210,584号および第4,220,641号参照）、［（Ｄ）−Ser］８−シクロスポリン（米国特許第4,384,966号参照）、［Ｏ−アセチル，（Ｄ）−Ser］８−シクロスポリン（米国特許第4,764,503号参照）、［β−フルオロ−（Ｄ）Ala］８−シクロスポリン（英国特許第2,206,119A号参照）、［Val］２−［（Ｄ）メチルチオ−Ser］３−および［ジヒドロ−MeBmt］１−［Val］２−［（Ｄ）メチルチオ−Sar］３−シクロスポリン［米国特許第4,703,033号参照］、［Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）−（Ｄ）−Sar］８−シクロスポリンおよび［3'−デスヒドロキシ−3'−ケト−MeBmt］１−［Val］２−シクロスポリン等の多数を含む。
シクロスポリンの中で、今日まで最も広く研究されているシクロスポリンＡは、登録商標サンディミュン（SANDIMMUN）またはサンディミュン（SANDIMMUNE）の名で商業的に入手可能である。シクロスポリンＡは、細胞媒介免疫反応における感作Ｔ−リンパ球の成熟および発現の予防を含む種々のＴ−リンパ球機能に選択的な抑制を示し、現在移植組織拒絶反応の抑制において、好結果で広く使用されている。シクロスポリンＡはまたブドウ膜炎のような眼内炎症性または自己免疫疾患の処置に全身的に使用されている。しかしながら、全身的処置に関する副作用のために、シクロスポリンＡは、眼の状態の処置に限定的にしか使用されていない。
眼へのシクロスポリンＡの有効な局所投与は、活性を処置すべき状態にある局所に限定することにより全身的副作用を広い範囲で減少しまたは除き、この効果に対する提案がされている（例えば米国特許第4,649,047号参照）。しかしながら、眼の疾患または状態の処置におけるシクロスポリンＡの実用性および効果は、眼に適応可能な好適な点眼剤がないため、今日まで妨げられている。患者の不快の原因とならず、簡便な投与法であり、過度に高頻度の投与のが必要なく、一方眼の外部および特に内部への医薬物質の適切な伝達を提供する点眼剤が必要である。更に困難な問題は、シクロスポリンＡの水への非常に少ない溶解性である。これはしばしば、眼への強い刺激の原因となる水性基質点眼剤でのシクロスポリンＡの沈殿を導く。
シクロスポリンＡを植物油に溶解することにより（オフタルモロジー、96、1144−1150（1989））およびシクロスポリンＡをシクロデキストリンで包装（clatherating）することにより（日本特許公開昭和64年第85921号）これらの困難性に打ち勝つ努力がなされている。
しかしながら、油性溶液中ではシクロスポリンＡは眼に僅かにしか拡散せず（フォリア・オフタルモロジカ・ジャポニカ、40、（５）、902−908（1989））、高濃度（２％）のシクロスポリンＡが臨床処置に必要である（オフタルモロジー、96、1144−1150（1989））。更に、これらの油性点眼剤は、眼のひどくいやな感じの原因になり易い。
また、一方シクロデキストリンによるシクロスポリンの包装により可溶化した点眼剤は眼への改善された分散（フォリア・オフタルモロジカ・ジャポニカ、40、（５）、902−908（1989））を有するが、溶解したシクロスポリンＡは、しかしながら、再び沈殿する。ウサギでの試験で示唆されるように、これは少なくとも眼の前部で非常に強い刺激を引き起こし、瞼結膜の赤味および浮腫および結膜からの分泌物の原因となり、この形でのシクロスポリンＡの投与の問題となっている。
したがって、眼への刺激の原因にあまりならず、眼へのシクロスポリンＡの良好な分散を有し、シクロスポリンの沈殿の問題がない局所用、眼科用製剤の開発が緊急に要求されている。
これらの問題を解決する試みにおいて、研究は低い水への溶解性の医薬物質に通常使用されている種々の界面活性剤、特に最も慣用されている界面活性剤ポリソルベート80およびポリオキシエチレン水素化ヒマシ油で行われている。しかしながら、ポリソルベート80は、点眼剤として調剤した場合、少ない溶解性効果を有し、シクロスポリンの溶解は十分でないことが分かった。ポリオキシエチレン水素化ヒマシ油は、点眼剤として使用した場合、眼への強い刺激の原因となることが分かった。
従って、これらの慣用されている界面活性剤は、高濃度のシクロスポリンを含み、眼に対する刺激の減少した点眼剤の製剤を与えるのに適していないことが証明された。
驚くことに、これらの困難性は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルおよびポリオキシエチレンアルキルエーテルまたはそれらの混合物から選択された界面活性剤中のシクロスポリンを調剤することにより、克服し得る。
従って、一つの態様において、本発明は、シクロスポリン、特にシクロスポリンＡおよびポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルおよびポリオキシエチレンアルキルエーテルまたはそれらの混合物から選択された界面活性剤を含む眼科用組成物を提供する。
眼科用組成物は好ましくは点眼用製剤として調剤される。好ましくは、水性基質である。
これらの眼科用組成物により、シクロスポリンが低濃度；例えば約0.005から約1.0％（w/v）、好ましくは約0.005から約0.1％（w/v）および更に望ましくは約0.01から約0.075％（w/v）で存在している場合でさえ、非常に良好な治療結果が得られ得る。本明細書の使用において、１％（w/v）は100ml当たり1gと等量である。
好ましいポリオキシエチレン脂肪酸エステルは飽和脂肪酸を基本にしたものであり、好ましくは置換基を含まない。鎖の長さは、14から22炭素原子、好ましくは16から18炭素原子であり得る。好ましい脂肪酸はステアリン酸である。好ましくは、エステルはモノエステルである。好ましくはポリオキシエチレン部分の重合数は、約20から約60である。好ましい例はポリオキシル40ステアレートである。例は、Myrj 52（アトラス・ケミエ、エッセン、ドイツから入手可能）の商品名で既知のポリオキシル40ステアレートである。
好ましいポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルは、１個またはそれ以上のアルキル基（アルキル基は例えば４から10炭素原子、好ましくは８または９炭素原子を有する）で置換されたフェノールを基本にしている。好ましくはフェニル基はただ１個のアルキル基を置換基として有する。好ましくは、ポリオキシエチレン部分の重合数は約１から約50、更に好ましくは40付近である。好ましい例は、コスメティック、トイレトリー＆フラグランス・アソシエーション・インコーポレイテッド（CTFA）化粧品成分指導書に記載のような特性を有する。例は、例えば商品名“トリトン”として既知で、ローム・アンド・ハス、フィラデルフィア、アメリカ合衆国から入手可能なオクトキシノールである。
好ましいポリオキシエチレンアルキルエーテルは、例えば４から20炭素原子を有する脂肪族アルコールを基本にしている。好ましくはポリオキシエチレン部分の重合数は10から60である。例は、酸価0.5以下、ヒドロキシル価40から52.5および屈折指数1.448から1.452を有するセトマクロゴール1000として既知のポリオキシエチレンアルキルエーテルである。
好ましい界面活性剤はポリオキシエチレン脂肪酸エステルおよび更に好ましくはポリオキシル40ステアレートである。
好ましくは、界面活性剤対シクロスポリンの重量比は約10:1から約50:1である。
眼科用組成物中の界面活性剤の濃度は、望ましくは約0.1％から約3.0％（w/v）および更に望ましくは約0.15から約2.5％（w/v）および特に0.75％から2.5％（w/v）の範囲内である。
眼科用組成物は、濃厚（粘性増加または粘弾性）剤（thickening agent）を、これらの剤が眼へのシクロスポリンの分散の改善に有用なため、含み得る。好ましい濃厚剤は、アルキルセルロースおよびヒドロキシアルキルセルロースのようなセルロースおよびセルロース誘導体濃厚剤およびまたカルボキシビニルポリマー、ポリビニルポリマーおよびポリビニルピロリドンのような非セルロース濃厚剤である。好適な例はメチルセルロース、特に、例えば日本および米国薬局方の番号2208または2906に定義のようなヒドロキシプロピルメチルセルロース８およびヒドロキシエチルセルロースである。好適なポリビニルポリマーは、ポリビニルアセテートおよびポリビニルアルコールであり、好適なポリビニルビロリドンはポリ−Ｎ−ビニルピロリドンおよび、ビニルピロリドン−ビニルアセテート共重合体のようなビリルピロリドン共重合体である。
使用すべき濃厚剤の濃度は厳密ではない。一般的に約0.05から約5.0％（w/v）および更に望ましくは約0.1から約3.0％（w/v）の範囲である。
眼におけるシクロスポリンの分散を確認するために、シクロスポリンＡおよび濃厚剤を含む点眼剤をウサギに投与した。シクロスポリンＡがシクロデキストリンにより溶解されている点眼製剤を対照として使用した。試験は、濃厚剤を含む点眼剤が、対照と比較して1.7倍高い角膜におけるシクロスポリンＡの濃度を達成することを示した。
眼科用組成物により得られた眼におけるシクロスポリンの優れた分散により、組成物中のシクロスポリンが低濃度であっても、点眼剤中のシクロスポリンＡの十分な治療効果を得ることが可能である。
好ましくは抗酸化剤が存在するが、必須ではない。使用し得る抗酸化剤の選択は厳密はないが、ブチル化ヒドロキシアニソールまたはアスコルビン酸、好ましくはチオ硫酸ナトリウムまたはブチル化ヒドロキシトルエンを使用するのが望ましい。抗酸化剤の代わりに、眼科用組成物はまた窒素を含み、所望により遊離酸素吸収剤（例えば、Fe）を含むコンテナーに保存し得る。
安定性の研究は、ブチル化ヒドロキシアニソールを代表的な抗酸化剤として使用して行った。研究において、40℃で１カ月間、抗酸化剤なしで保存した後のシクロスポリン（特にシクロスポリンＡ）の量は、85.3％まで減少した。一方、上記の抗酸化剤を含む組成物におけるシクロスポリンの明白な損失はなかった。これは非常に高い安定性を示す。例えば後記の実施例5Dに示す組成物は25℃および40℃で３カ月後に、明らかな分解はなかった。しかし、すべての組成物が安定性のために抗酸化剤を必要とするわけではない。
当然抗酸化剤は眼への刺激の原因となる濃度以下で存在する。一般的に、抗酸化剤の濃度は、眼への刺激を避けるために約0.00005から約0.1％（w/v）、更に望ましくは約0.0001から約0.01％（w/v）の範囲内である。
好ましい眼科用組成物は、約0.01から約0.075％（w/v）のシクロスポリンA;約0.15から約2.5％（w/v）のポリオキシル40ステアレート；約0.1から約3.0％（w/v）の、ヒドロキシプロピルメチルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロースから選択されたセルロース濃厚剤；および約0.0001から約0.01％（w/v）の、ブチル化ヒドロキシトルエンまたはチオ硫酸ナトリウムから選択された抗酸化剤を含む。
ポリオキシル40ステアレートまたはポリオキシエチレンセチルエーテルまたはポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルのような界面活性剤とシクロスポリン（特にシクロスポリンＡ）との組み合わせは、眼への少ない刺激の原因となり、眼への良好な分散を提供し、シクロスポリンＡの低濃度を有し、その沈殿による問題を少なくし、更に高い安定性を有する優れた点眼製剤を産生する。更に、抗酸化剤およびセルロース濃厚剤の増加は、シクロスポリンの眼への分散および安定性を更に改善し得る。
所望により、他の賦形剤、例えば等張剤、緩衝液、防腐剤および／またはpH調整剤が存在し得る。好適な量の滅菌純水が、所望の点眼製剤を得るために存在し得る。
簡便にはエタノールが、例えば約0.01から0.5％（w/v）の濃度で存在し得る。
眼科用組成物のpHは、通常眼科用組成物で使用される範囲内であり得るが、望ましくは４から８の範囲内である。
眼科用組成物は、シクロスポリンと上記の界面活性剤と混合し、所望により濃厚剤および抗酸化剤および他の賦形剤中で混合することにより製造し得る。
眼科用組成物を、眼への投与が容易な好適な容器、例えば好適なピペットに接続している点眼器に満たす。
従って、他の態様において、本発明は、組成物の眼科的投与に好適な、例えば眼科用組成物を眼にまたは表面（例えば角膜または角膜上皮）に適応するのに好適な容器内の眼科用組成物を提供する。
本発明はまた、必要としている対象の眼または周辺または関連する器官または組織に関する疾病または状態を処置する、特に免疫媒介または炎症性疾患器官または組織を処置する方法を提供し、上記方法は上記の眼科用組成物を、局所的に眼へ、例えば眼へまたは表面（例えば角膜または角膜上皮）へ投与を含む。本方法が適応可能な具体的な眼の場所、部分または組織は本明細書に記載の通りである。本方法が適応可能な具体的な眼の疾患または状態は同様に本明細書に記載の通りである。
更なる態様において、本発明は上記の使用に適応する上記の眼科用組成物を提供する。
他の態様において、本発明は上記方法に使用するための眼科用組成物の製剤におけるシクロスポリンの使用を提供する。
以下の実施例は本発明の眼科用組成物の例である。成分の更なる詳細は、“レキシコン・フォー・ファルマチエ、コスメティック・アンド・アングレンツェンデ・ゲビエテ”、Ｈ・Ｐ・フィドラー、第３版、1989、エディシオ・カントール・アウレンドルフ、ドイツにより出版；ハンドブック・オブ・ファーマシューティカル・エクシピエンツ、第１版、1986、アメリカ・ファーマシューティカル・アソシエーション、ワシントン、アメリカ合衆国およびザ・ファーマシューティカル・ソサイエティー・オブ・グレート・ブリテン、ロンドン、イギリスの共同出版；または関連製品に記載されている。以下の実施例中、粘性は25℃でニュートン粘性として測定し、例えばハーケにより製造された粘性測定装置タイプCV20中で測定した。
実施例中で使用するポリオキシル40ステアレートは日本の日光ケミカルズ株式会社の生産物、キッコール（登録商標）MYS−40である。39から44℃の凝固点、１より少ない酸価および25から35の鹸化価を有する。
実施例中で使用するポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルは日本の日本油脂株式会社の生産物、ノニオンHS240である。平均重合数は40であり、平均分子量は1968である。
実施例中で使用するヒドロキシプロピルメチルセルロース（HPMCとも称す）は日本の信越化学工業株式会社の生産物、メトロース65SH−4000であり、ヒドロキシプロピルメチルセルロース2906に対応する。
実施例1:点眼用製剤（100ml中）
シクロスポリンＡ                    0.05g
ポリオキシル40ステアレート          2.0g
ヒドロキシプロピルメチルセルロース  0.3g
ブチル化ヒドロキシトルエン          0.001g
エタノール                          0.1g
塩化ナトリウム                      0.73g
リン酸２水素ナトリウム              0.2g
エデト酸ナトリウム                  0.1g
水酸化ナトリウム                    適量
滅菌純水                            適量
製造法：
シクロスポリンＡを、ブチル化ヒドロキシトルエン含有エタノール溶液に溶解し、ポリオキシル40ステアレートを加える。混合物を暖めた後、（予め少量の滅菌純水に溶解した）ヒドロキシプロピルメチルセルロースを加え、残った滅菌純水を混合物に加え、透明溶液を産生する。最後に塩化ナトリウム、リン酸２水素ナトリウムおよびエデト酸ナトリウムを混合物に加え、水酸化ナトリウム溶液を使用してpHを6.0に調整する。
以下の製剤が上記と同様の方法で調剤できる。
実施例2:点眼用製剤（100ml中）
シクロスポリンＡ                    0.025g
ポリオキシル40ステアレート          0.5g
ヒドロキシプロピルメチルセルロース  0.2g
ブチル化ヒドロキシトルエン          0.0005g
エタノール                          0.1g
塩化ナトリウム                      0.73g
リン酸２水素ナトリウム              0.2g
エデト酸ナトリウム                  0.1g
水酸化ナトリウム                    適量
滅菌純水                            適量
実施例3:点眼用製剤（100ml中）
シクロスポリンＡ                    0.075g
ポリオキシル40ステアレート          2.5g
ヒドロキシプロピルメチルセルロース  0.2g
ブチル化ヒドロキシトルエン          0.002g
エタノール                          0.1g
塩化ナトリウム                      0.73g
リン酸２水素ナトリウム              0.2g
エデト酸ナトリウム                  0.1g
水酸化ナトリウム                    適量
滅菌純水                            適量
実施例4:点眼用製剤（100ml中）
シクロスポリンＡ            0.1g
ポリオキシル40ステアレート  3.0g
ヒドロキシエチルセルロース  0.3g
チオ硫酸ナトリウム          0.01g
エタノール                  0.1g
塩化ナトリウム              0.73g
リン酸２水素ナトリウム      0.2g
エデト酸ナトリウム          0.1g
水酸化ナトリウム            適量
滅菌純水                    適量
実施例5:
0003631490.tif 000002
上記実施例中、ポリオキシル40ステアレートは等量のポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテルまたはポリオキシエチレンアルキルエーテルと置き換え得る。
眼科用組成物は他のシクロスポリン含有局所用眼科用組成物と同じ徴候、例えば角膜、水様液、レンズ、虹彩、毛様体、脈絡膜または網膜が犯されている疾病に有用である。本眼科用組成物は、特に眼または周辺または関連する器官または組織の、病因一部として望ましくなく上昇した免疫反応または炎症反応または事象を有する自己免疫または炎症性疾患または状態の処置に有用である。本眼科用組成物は好ましくは眼の前部または後部の処置に有用である。例えば、ぶどう膜炎、慢性角膜炎、乾性角結膜炎、春季カタル、アレルギー性結膜炎または角膜移植中を含む結膜炎の前部または後部の処置に。本眼科用組成物は、角膜移植後の免疫活性移植片拒絶反応、ベーチェット病およびモーレン潰瘍、眼の天疱瘡および眼のリューマチのような自己免疫疾患の処置にまた使用し得る。
本眼科用組成物の実用性および有利な治療特性は、標準動物モデルおよび標準臨床試験；例えば一日数回、0.005％から1.0％、好ましくは0.01％から0.5％（重量）のシクロスポリンを含む眼科用組成物を0.05mlから0.5ml、好ましくは0.1mlから0.2ml、上記の眼の疾病または状態を示す患者の眼に投与することにより観察できる。シクロスポリンの耐容性および眼内への移動は、下記の試験で示され得る。
特定の患者に投与すべき最適量は患者毎および病気毎に変わり、処置している医者により注意深く決定されるべきである。しかしながら、シクロスポリンを0.005％から1.0％、好ましくは0.01％から0.5％（重量）で含む眼科用組成物を0.05mlから0.5ml、好ましくは0.1mlから0.2mlの範囲で使用し得る。十分な結果が一日数回；例えば一日１から５回、約0.05mlの滴を投与することにより得られる。
本眼科用組成物の優れた耐容性は、既知の試験で決定し得る。例えば、組成物を局所的に６匹のウサギの群に投与する。一回、一滴（約50マイクロリットル）を一方の眼に眼内的に、30分毎に５時間（10回投与）滴下する。他方の眼（非処置）を対照として使用する。次いで、眼を、顕微鏡的に最終投与後１、５および18時間の刺激を試験し：角膜の不透明および透明領域：虹彩、眼瞼結膜炎の赤味および浮腫、球結膜炎の赤味、膜のミクテーティングおよび結膜の分泌に関する組成物の効果を判定する。
眼科用組成物は優れた耐容性を示す。例えば実施例5AおよびＢの化合物は、眼瞼結膜炎の赤味の増加以外、上記の評価の総てにおいて０点を示す。しかしながら、この評価において、眼瞼結膜炎のあまり重要でない赤味のみが最終投与の１時間後に示され、その結果は生理食塩水（0.9％塩化ナトリウム）で得られたものと非常に近いか同じである。
眼科用組成物からのシクロスポリンＡの角膜（上皮なし）への移動は既知の試験により評価し得る。一つの試験において、50マイクロリットルの試験溶液を５匹のウサギの群の眼に滴下し、角膜内のシクロスポリンＡを測定する。動物にペントバルビタールナトリウムを耳の静脈から注射することにより、投与後30分に殺す。眼球を核出し、その表面を生理食塩水1mlできれいにし、角膜上皮を良い剃刀で除去する。角膜を次いでその円周に沿って切ることにより切り取り、３回生理食塩水で洗浄し、完全に水がなくなるまで濾紙を使用して乾燥する。角膜を秤量し、−80℃に保存する。
角膜を、次いで氷で冷却しながら1mlのメタノール内に均質化し、均質物を室温で10分、3000rpmで遠心する。上清を回収する。1mlのメタノールを加え、混合物をボルテックス処理し、次いで再び遠心する。上清を合わせ、40℃から50℃で蒸発させ、メタノール1mlを残渣に加える。溶液50マイクロリットルを測り分け、その中のシクロスポリンＡの量を標準放射免疫測定法により測定する。
角膜への優れたシクロスポリンＡの移動が、上記試験において例えば実施例5Cの組成物により示される。平均値479.2ng/g（S.D.±245.8）が観察される。
このような試験または実際的な臨床的使用の目的で、好適には本眼科用組成物（例えば実施例１の組成物）は、特有の量で眼へまたは表面へ投与する。例えば、処置すべき具体的な疾病または状態に依存して、約0.1から0.2mlで毎日１から４×で、その臨床的信頼および効果は所望である。非処置対照と比較して著しく改善された状態は、例えば１から２週間およびそれ以上の期間にわたる連続処置により観察可能である。本眼科用組成物はこのような治療を受けている対象に対して、著しいまたは困った刺激がなく、非常に耐容性であることが分かる。