(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の一般式
【化１】
0003681637.tif 000015
（式中、Ｒ＝Ｒ１またはＲ≠Ｒ１であり、ＲおよびＲ１は、Ｈ、ＯＨ、Ｃｌおよび下記式のアルキリデン鎖から選択され、かつＲとＲ１の一方は該アルキリデン鎖である）。
【化２】
0003681637.tif 000016
（但し、ｎは１〜６であり、Ｒ２およびＲ３は、Ｈである。）
を有する、ジホスホン酸と、次式
【化３】
0003681637.tif 000017
で示されるアミノアルコールとの塩。
【請求項２】
下式
【化４】
0003681637.tif 000018
の４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸）であるジホスホン酸と式
【化５】
0003681637.tif 000019
の２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン）であるアミノアルコールとから得られる、請求項１に記載のジホスホン酸の塩。
【請求項３】
一般式(I)のジホスホン酸を適当な溶媒に溶解または懸濁したものを、場合によってはまた適当な溶媒に溶解したアミノ−アルコールと混合し、
得られた混合物を冷却し、および／または適当な溶媒を用いて可能な処理を行い、ジホスホネートまたは一般式(I)の上記ジホスホン酸と上記アミノ−アルコールの塩を得て、
上記生成物（塩）の濾過、洗浄、可能な精製および乾燥（凍結乾燥）する工程を含んでなる、請求項１に記載のジホスホン酸の塩の製造法。
【請求項４】
骨粗鬆症の治療用医薬を製造するための、請求項１に記された一般式(I)のジホスホン酸とアミノ−アルコールの塩の、使用。
【請求項５】
請求項１に記載の一般式(I)のジホスホン酸とアミノ−アルコールとの少なくとも１種類の塩を活性成分として含んでなる、骨粗鬆症の治療のための医薬組成物。
【請求項６】
リポソームまたはニオソーム、および活性成分の制御放出を行うことができる適当なキャリヤーを含むことを特徴とする、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
下記の組成
LECINOL LS（リポソーム）    20％
４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸）と２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン）の塩  15％
（アレンドロン酸とトロメタミンの比  約１：１）
トロメタミン塩基            １％
コレステロール              ４％
プロピレングリコール        10％
エタノール                  １％
CARBOPOL ETD 2020          0.5％
Ｎａ２ＥＤＴＡ             0.15％
NIPAGIN                    0.2％
PHENONIP（防腐剤）         0.3％
クエン酸                   0.2
ＢＨＴ                    0.01
水                総量を  100％とする
を有することを特徴とする、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
組成物がリポソームの形態であることを特徴とする、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
上記のジホスホン酸とアミノ−アルコールのモル比が、１：１〜１：２のモル比であることを特徴とする、請求項３に記載のジホスホン酸の塩の製造法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の対象
本発明の目的は、ジホスホン酸の塩またはジホスホネート、およびそれらの調製法である。
【０００２】
本発明の目的はまた、骨粗鬆症の治療のためのジホスホン酸の塩またはジホスホネートの使用でもある。
【０００３】
本発明の目的はまた、活性成分として上記ジホスホン酸の塩またはジホスホネートを含む医薬組成物、および骨粗鬆症の治療におけるこれらの組成物の使用でもある。
【０００４】
技術の状況
周知の骨粗鬆症は、骨組織の混乱と喪失を特徴とし、骨格の脆さや骨折の素因を増加させる骨格の疾患である。
【０００５】
例えば、米国では、2500万を上回る人がこの病気に罹っており、毎年1,300,000件の骨折が起きている。
【０００６】
従って、社会的経費は、年間100億米ドルを上回る極めて巨額になっている。 同じ数字は、欧州および日本でも報告されている。
【０００７】
高齢者は、その危険性が最も高い集団である。不運なことには、この問題は、人口の高齢化の進行により次第に重大なものとなってきている。将来の60年間に骨折事故の予測は、少なくとも３倍に増加すると思われている。女性は、男性と比較して、特に閉経期後の最初の５年間は危険性が高い。
【０００８】
現在のところ、治療薬の観点からは、Melmon & Morrelli, 臨床薬理学：治療 薬の基本的原理(Clinical Pharmacology: Basic Principles in Therapeutics), 497 (1992), N. Engl. J. Med. 306, 446 (1982)によって報告されているよう に、フッ化物を用いる単一療法(mono-therapy)が用いられており、またはカルシウム、フッ化物およびエストロゲンを用いる併用療法の追加使用は、単一療法と比較して幾つかの利点を有することが報告されている。
【０００９】
あるいは、骨粗鬆症の治療に処方された別の種類の化合物としては、ジホスホネートが挙げられ、これらの薬剤はほとんどが経口経路によって投与されるが、その上に不溶物が不都合なことには吸収されにくく（１〜５％）、主要な副作用として、食道炎や中−重度の消化器系疾患も引き起こす。
【００１０】
この不都合を解決するため、高薬理活性と、既知の利用可能な化合物と比較して一層良好なトレラビリティー(tolerability)、すなわち増加した生物学的利用能を併せ持つ新規化合物の調査において、幾つかの臨床的研究を行った。
【００１１】
例えば、尿結石の治療や骨吸収を抑制する目的で、ジホスホン酸およびその塩が米国特許第４，６２１，０７７号明細書に記載されており、すなわち上記ホスホン酸またはその相当するナトリウム塩の生物学的活性が報告されている。しかしながら、これらの化合物の吸収の程度、すなわち生物学的利用能は極めて低いため、活性成分の体内活性濃度を得るために高用量を投与しなければならず、その結果循環器傷害を生じ、トレラビリティーが低下する。
ＪＰ０６，１００，５７６（９４，１００，５７６）号明細書には、骨粗鬆症の治療および予防に有用な薬剤として、１，３，５（10）−エストラトリエン−３，17β−ジオール  17−（３，３−ジホスホノ）プロピオネートまたはその塩が開示されている。例えば、トリエチルアミン塩が記載されている。
【００１２】
発明の目的
本発明の目的は、経口投与により高い生物学的利用能を示す利用可能なジホスホネートを作成することである。
【００１３】
本発明の目的はまた、骨粗鬆症の治療において、既に入手可能な既知化合物と比較して、一層効果が高くかつ食道や胃腸傷害の発生率を低く抑える利用できるジホスホネートを作成することでもある。
【００１４】
また、本発明の目的は、経口または静脈内経路のいずれによっても投与することができる利用可能なジホスホネートを作成することである。
【００１５】
また、本発明の目的は、骨粗鬆症の治療において、医療において現在用いられている既知薬剤と比較して、治療指数が向上した利用できるジホスホネートを作成することである。
【００１６】
本発明の目的はまた、ジホスホネートの利用できる製造法を提供することでもある。
【００１７】
本発明の目的はまた、投与が容易であり、十分なトレラビリティーがあり、かつ治療指数を高くすることができる少なくとも１種類のジホスホネートを活性成分として含む利用できる医薬処方物を作成することでもある。
【００１８】
発明の説明
これらおよび他の目的は、以下の説明において明らかにされる他の利点と共に、ジホスホネート、またはジホスホン酸と、線状、分岐状の、置換および未置換の環式、複素環式の芳香族アミノ−アルコール誘導体との塩であって、上記ジホスホネートが下記の一般式
【化１０】
0003681637.tif 000002
（式中、Ｒ＝Ｒ1またはＲ≠Ｒ1であり、ＲおよびＲ1は、Ｈ、ＯＨ、Ｃｌ、線状 または分岐状の置換または未置換アルキル基、線状または分岐状の置換または未置換アルキリデン鎖から選択され、またはそれらは
【化１１】
0003681637.tif 000003
から選択される）を有するものによって得られる。
【００１９】
更に詳細には、本発明によれば、上記アミノ−アルコールは、線状および分岐状のアミノ−アルコールから選択され、特に、それらは、下記から選択される。
【化１２】
0003681637.tif 000004
本発明によれば常に、上記のアミノ−アルコールは環式および複素環式アミノ−アルコールであり、
【化１３】
0003681637.tif 000005
から選択される。
【００２０】
また、本発明によれば、式(I)で定義された上記の置換アルキリデン鎖は、
【化１４】
0003681637.tif 000006
から選択され、但し、ｎは１〜６であり、Ｒ2＝Ｒ3またはＲ2≠Ｒ3であり、Ｒ2 およびＲ3は、Ｈ、線状または分岐状の環式の置換または未置換アルキル基から 選択され、またはＲ2およびＲ3は、窒素原子Ｎと一緒に脂肪族または芳香族複素環を表す。
【００２１】
また、本発明によれば、式(I)で定義された置換アルキリデン鎖は、
【化１５】
0003681637.tif 000007
（式中、ｎは１〜６であり、Ｒ4は
【化１６】
0003681637.tif 000008
から選択される）からも選択される。
【００２２】
本発明によれば、一般式(I)［式中、Ｒ≠Ｒ1であり、ＲはＯＨに等しくなるように選択され、Ｒ1は式(X)（式中、下式
【化１７】
0003681637.tif 000009
によりｎ＝３であり、Ｒ2およびＲ3はＨに等しい）の置換した線状アルキリデン鎖として選択される］のジホスホン酸、または４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸（alendronic acid））と式
【化１８】
0003681637.tif 000010
の１個の分岐アミノ−アルコールまたは２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン（trometamine））とから得られた塩が 特に重要と思われた。
【００２３】
上記の塩は、本発明によれば常に調製法によって変化し、様々なモル比でのジホスホン酸とアミノ−アルコールとに相当する残基によって形成されるが、それらは骨粗鬆症の治療に好都合に用いることができる。上記のモル比は、１：１〜１：２（ジホスホン酸：アミノ−アルコール）の間で変化することができる。
【００２４】
ジホスホン酸とアミノアルコールとの幾つかの誘導体が知られている。例えば、ＪＰ０９  ５３，１９３（９７  ５３，１９３）号明細書（金属表面からのスケールの除去に使用）、ＦＲ２１４２０５１号明細書（循環水と接触している金属表面の腐食を減少させるための上記水のコンディショニングに使用）、ＥＰ２９２１９０号明細書には、例えばトリエタノールアミンとのジホスホン酸塩を含んでなる電気伝導性コーティング組成物が開示されている。米国特許第４，８３０，７７９号明細書には、ジホスホン酸とトリエタノールアミンとの塩であるジホスホン酸誘導体を含んでなる電気伝導性樹脂組成物が開示されており、米国特許第５，３８９，２６１号明細書には、カチオン交換樹脂中にアルカノールアミンとジホスホン酸誘導体との塩である有機塩の水溶液を通じることを含んでなる上記樹脂の再生法が開示されている。ＥＰ７８１８０４号明細書には、ジホスホン酸または例えばトリエタノールアミンとの塩を含んでなる超吸収性ポリマー組成物が開示されており、ＤＤ２７３６５０号明細書には、還元性を有するジホスホン酸誘導体のトリエタノールアミン塩を含んでなる幾つかの組成物が開示されている。従来の技術によるジホスホネートは、胃腸管からの吸収が極めて低く、全身的生物学的利用能は経口投与量の１〜５％であることを特徴とする不満足な薬物動態特性を有する。次いで、吸収された投与量の約50％は、24時間以内に尿と共に排出されるが、残りの投与量は骨組織に保持され、後で極めてゆっくりと排出される。吸収されなかったジホスホネートは、代わりに糞便と共に排出される。
【００２５】
この挙動は、水溶性が極めて高く、脂質膜をほとんど透過しないという生成物の物理化学的特性によるものである。従って、標的部位（骨）において治療上有効濃度に達しかつ保持するには、生物学的に利用可能な量より遙かに高い経口投与量が必要であり、その結果、吐き気や下痢のような局所的消化管傷害が増加する。
【００２６】
本発明によるジホスホネートは、塩の解離度が低いこととアミノ−アルコールの物理化学的特性により、既知のジホスホネート（ナトリウム塩）と比較して、水溶性が低くかつ脂質溶解性が増加していることを特徴とする。
【００２７】
これらの特徴により、生物学的膜を介する吸収工程が著しく有利になり、従って生物学的利用能が向上する。
【００２８】
更に、本発明のジホスホネートは、骨粗鬆症の治療に使用されるという予測に関して有望な薬物毒性学的特性を示した。
【００２９】
本発明のジホスホネートは、骨成長の促進において良好な効果を示し、これは反応種によって生成される毒性基を抜き取るアミノ−アルコールの既知特性によるものと思われる。
【００３０】
本発明のジホスホネートは、静脈内および経口のいずれの経路によっても容易に投与することができる。この後者の場合には、活性成分の放出を制御することができる製薬系を使用するのが特に有利である。これらの系としては、リポソーム、ニオソームおよび類似のマトリックスであって、場合によっては、使用が容易でありかつ活性成分を持続的に放出できる適当なキャリヤーを加えたものが挙げられる。
【００３１】
本発明のジホスホネートは、一般式(I)のジホスホン酸の溶液または懸濁液を 適当な溶媒に溶解したアミノ−アルコールと反応させることによって好都合に調製することができ、生成する溶液を冷却することによって得たジホスホン酸とアミノ−アルコールとの反応生成物（塩）を次いで既知の手法に従って精製する。
【００３２】
本発明の非制限的例として、式
【化１９】
0003681637.tif 000011
のジホスホン酸と、式
【化２０】
0003681637.tif 000012
のアミノ−アルコールを反応させることによって得た塩の調製に関する幾つかの例を、以下に説明する。
【００３３】
実施例１
４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸、1 g、4.016ミリモル）を、ＣＨ2Ｃｌ2／メチルアルコール（９：１）20 mlに 溶解した。２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン、486 mg、4.016ミリモル）をＣＨ2Ｃｌ2／メチルアルコール（９： １）５mlに溶解したものを、攪拌しながらアレンドロン酸溶液に加えた。形成した白色沈澱を、真空下にて濾過して乾燥した。
【００３４】
アレンドロン酸トロメタミン塩1.263 gを得た。収率85％。
【００３５】
実施例２
４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸、1 g、4.016ミリモル）を、20 mlの水に懸濁した。２−アミノ−２−ヒドロキ シメチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン、486 mg、4.016ミリモル ）を攪拌しながらアレンドロン酸の水溶液に加えた。固形物は速やかに水に溶解し、懸濁液が透明になったならば、ｐＨ＝4.18の生成溶液を凍結して凍結乾燥し、白色粉末を得た。
アレンドロン酸トロメタミン塩1.480 gを得た。収率99％。
【００３６】
実施例３
４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸、1 g、4.016ミリモル）を、水40 mlに溶解した。２−アミノ−２−ヒドロキシ メチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン、972 mg、8.032ミリモル） を、攪拌しながらアレンドロン酸の水溶液に加えた。固形物は速やかに水に溶解し、懸濁液が透明になったならば、ｐＨ＝7.14の生成溶液を凍結して凍結乾燥し、白色粉末を得た。
アレンドロン酸トロメタミン塩1.97 gを得た。収率99％。
【００３７】
実施例４
４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸、1 g、4.016ミリモル）を、水５ mlに溶解した。２−アミノ−２−ヒドロキシ メチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン、486 mg、4.016ミリモル） を、攪拌しながらアレンドロン酸の水溶液に加えた。固形物は速やかに水に溶解し、懸濁液が透明になり、生成溶液はｐＨ＝4.18となった。イソプロピルアルコールを加え、生成溶液−10℃の温度に一晩冷却した。生成した沈澱を濾過して、冷イソプロピルアルコールで２回洗浄した後、真空乾燥した。
アレンドロン酸トロメタミン塩743 mgを得た。収率50％。
【００３８】
実施例１、２および４に記載の方法によって得た生成物を、ＩＲおよび1Ｈ− ＮＭＲ分光分析法によって分析した。
【００３９】
融点は180.53℃であった。
1Ｈ−ＮＭＲ（300 MHz），（Ｄ2Ｏ）δ＝3.615 (s, 6H, CH2O); 2.920 (t, 2H, N+-CH2, J=6.5 Hz); 1.900 (m, 2H, NCH2CH2CH2); 1.890 (t, 2H, NCH2CH2CH2, J=6.5 Hz)。
【００４０】
一例として、式
【化２１】
0003681637.tif 000013
のジホスホン酸と、式
【化２２】
0003681637.tif 000014
のアミノ−アルコールを反応させることによって得られる塩の医薬処方物の調製に関して、非制限的例を、以下に記載する。
【００４１】
実施例５
リポソームマトリックス中で処方したアレンドロン酸トロメタミン塩。
LECINOL LS（リポソーム）    20％
４−アミノ−１−ヒドロキシブタン−１，１−ビホスホン酸（アレンドロン酸）と２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール（トロメタミン）の塩      15％
（アレンドロン酸とトロメタミンの比  約１：１）
トロメタミン塩基     １％
コレステロール     ４％
プロピレングリコール     10％
エタノール      １％
CARBOPOL ETD 2020     0.5％
Ｎａ2ＥＤＴＡ      0.15％
NIPAGIN      0.2％
PHENONIP（防腐剤）     0.3％
クエン酸      0.2
ＢＨＴ      0.01
水     総量を  100％とする。
【００４２】
一般式(I)のジホスホン酸と本発明によるアミノ−アルコールを反させて得た 塩の薬物毒性学的活性の評価に関して、上記実施例に記載の方法で得た生成物アレンドロン酸トロメタミンを試験化合物として用いて、生物学的試験を行った。
【００４３】
薬効
組織培養物（A. Togari, Gen. Pharmacol. 24, 1133, 1993に記載の方法に準 じて調製した新生マウスの頭皮切片）について、検討を行った。培養期間が終了したならば、標記生成物をμモル濃度で加えた組織を食塩水に0.1％Triton X-100を加えたものの中でホモジナイズした。得られたホモジネートを用いて、アル カリホスファターゼ（骨芽細胞活性指数として）およびＮ−アセチルグリコースアミニダーゼ（破骨細胞活性指数として）を測定した。
10μモル濃度から出発した試験生成物は、骨芽細胞活性（アルカリホスファターゼ）を有意に活性化しかつ破骨細胞活性（Ｎ−アセチルグリコサミニダーゼを阻害することができることが示された。
【００４４】
毒性
化合物を、マウスに、ヒト治療投与量の何倍（300倍）にもなる50 mg/kgの投 与量を経口投与したとき、明らかな毒性症状の開始は見られなかった。
【００４５】
生物学的利用能
試験化合物であるアレンドロン酸トロメタミンを10 mg/kgの投与量で経口および静脈内投与したラットで行った検討では、平均絶対生物学的利用能の計算値は８％となった。計算は、J. of Chromatography, 533, 183-193, 1992: 「自動化プレカラム・デリバタイゼーションおよび蛍光および電気化学検出器を備えたＨＰＬＣによるヒト血漿および尿中のビホスホン酸アレンドロネートの改良決定法(Improved determination of the biphosphonate alendronate in human plasmaand urine by automated pre-column derivatisation and HPLC with fluorescent and electro-chemical detection)」に記載の方法に従ってアレンドロン酸の０〜24時間尿中排泄について行った。