(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
閉じ込めるべき水溶性物質を水に溶かし、それに表面活性シロキサンを添加することによって混合物を作成し、その混合物を攪拌することを含む方法であって、その表面活性シロキサンは本質的に４価のＳｉＯ2 単位、及び１価のＲ3 ＳｉＯ1/2 単位とＲ’Ｒ2 ＳｉＯ1/2 単位（Ｒは８までの炭素原子を有する１価の炭化水素基、Ｒ’は、ヒドロキシル基、アルキル基、アリール基、又はアシル基を末端とするポリオキシアルキレン基）からなり、１価の単位と４価の単位の比は０．４：１〜２：１であり、１価の単位の全体の４０〜９０％がＲ’Ｒ2 ＳｉＯ1/2 単位であることを特徴とする、表面活性シロキサンによって形成されたベシクル中に水溶性物質を閉じ込める方法。
【請求項２】
水溶性物質が、状態調節剤、装飾剤、制汗剤、防腐剤、日焼防止剤、保湿剤、着色剤、酵素、薬剤、及びヒドロキシカルボン酸からなる群より選択されたことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
水不溶性物質と表面活性シロキサンを混ぜ合わせることによって混合物を作成し、その混合物を攪拌することを含む方法であって、その表面活性シロキサンは本質的に４価のＳｉＯ2 単位、及び１価のＲ3 ＳｉＯ1/2 単位とＲ’Ｒ2 ＳｉＯ1/2 単位（Ｒは８までの炭素原子を有する１価の炭化水素基、Ｒ’は、ヒドロキシル基、アルキル基、アリール基、又はアシル基を末端とするポリオキシアルキレン基）からなり、１価の単位と４価の単位の比は０．４：１〜２：１であり、１価の単位の全体の４０〜９０％がＲ’Ｒ2 ＳｉＯ1/2 単位であることを特徴とする、表面活性シロキサンによって形成されたベシクル中に水不溶性物質を閉じ込める方法。
【請求項４】
水不溶性物質が、状態調節剤、防腐剤、日焼防止剤、保湿剤、着色剤、緩和剤、及び薬剤からなる群より選択されたことを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ポリオキシアルキレン基がオキシエチレン基とオキシプロピレン基を含み、ポリオキシアルキレン基の少なくとも８０％がオキシエチレン基であることを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項６】
表面活性シロキサンが式
【化１】
0003681806.tif 000005
（ｘ／ｙ／ｚの比は０．５〜１．５／０．３〜０．６／１、ｍは２〜８、ｎはポリオキシアルキレン基が３００〜１０００の数平均分子量を有するような値）を有することを特徴とする請求項１又は２に記載の方法。
【請求項７】
ベシクルが１〜９９．７重量％の表面活性シロキサンと０．３〜９９重量％の水溶性物質を含み、請求項１に記載の方法によって作成されたことを特徴とする組成物。
【請求項８】
水溶性物質が、ビタミンＣ、ビオチン、ゼラチン、加水分解コラーゲン、トリクロサン、塩化アルミニウム水和物、アルミニウム／ジルコニウムグリシン、サリチル酸、ＤＭＤＭヒダントイン、セチルトリメチルアンモニウムブロミド、4-アミノ安息香酸、2-フェニルベンズイミダゾール-5- スルホン酸、グリセリン、ソルビトール、プロピレングリコール、バイオレットＮｏ．２、Ｄ＆Ｄレッド２２、Ｄ＆Ｃグリーン８、パパイン、トリプシン、キモトリプシン、アスピリン、ニコチン、及びヒドロキシ酢酸からなる群より選択されたことを特徴とする請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
ベシクルが１〜９９．７重量％の表面活性シロキサンと０．３〜９９重量％の水不溶性物質を含み、請求項３に記載の方法によって作成されたことを特徴とする組成物。
【請求項１０】
水不溶性物質が、ビタミンＡ、ビタミンＥアセテート、ラノリンオイル、2-メルカプトピリジン-1- オキサイド、ホモメチルサリチレート、4-メトキシ桂皮酸イソアミルエステル、ラノリンアルコール、セテアリールオクタノエート、ナトリウムステアロイルラクチレート、ステアラミドＤＩＢＡステアレート、エチレングリコールモノステアレート、鉱物油、ホホパ油、ポリジメチルシロキサン、及びニトログリセリンからなる群より選択されたことを特徴とする請求項９に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、ポリエステルを基礎としたシロキサンＭＱ樹脂、及びビヒクルの作成に関する。より詳しくは、本発明は、特定の水分散性シロキサンＭＱ樹脂と水溶性又は水不溶性物質の閉じ込めによって作成されたベシクルに関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
ベシクルを作成するための特定の「線状」ポリジメチルシロキサンポリエステルコポリマーの有用性が米国特許第５３６４６３３号に示されている。この米国特許第５３６４６３３号に従うと、次の式の１つを有する線状有機ケイ素化合物を用いてベシクルが作成される。
【０００３】
【化２】
0003681806.tif 000002
【０００４】
この式において、Ｒはメチル、−（ＣＨ2 ）x Ｏ（Ｃ2 Ｈ4 Ｏ）y （Ｃ3 Ｈ6 Ｏ）z Ｒ’又は−（ＣＨ2 ）x Ｎ+ Ｒ”3 Ａ- であり、少なくとも１つのＲはメチルではない。Ｒ’は水素原子、メチル基又はアシル基である。Ｒ”はＣ1 〜Ｃ6 のアルキル基、フェニル、ベンジル又は−ＣＨ2 ＣＨ2 ＯＨである。対イオンＡ- は塩素、臭素、ヨウ素、シアン化物、メチルスルフェート、サリチレート、又はドデシルスルフェート基である。これら線状化合物の代表的な例には、Ｒ−〔Ｓｉ（Ｍｅ）2 Ｏ〕14−Ｓｉ（Ｍｅ）2 −Ｒ（ここでＲは−（ＣＨ2 ）3 （ＯＣＨ2 ＣＨ2 ）7 ＯＨ、Ｒ−〔Ｓｉ（Ｍｅ）2 Ｏ〕14−Ｓｉ（Ｍｅ）2 −Ｒ（ここでＲは−（ＣＨ2 ）3 （ＯＣＨ2 ＣＨ2 ）12ＯＨ）、Ｍｅ3 ＳｉＯ〔Ｓｉ（Ｍｅ）2 Ｏ〕22−〔ＳｉＭｅＲＯ〕2 −ＳｉＭｅ3 （ここでＲは−（ＣＨ2 ）3 （ＯＣＨ2 ＣＨ2 ）12ＯＨ）、及びＭｅ3 ＳｉＯ〔Ｓｉ（Ｍｅ）2 Ｏ〕103 −〔ＳｉＭｅＲＯ〕10−ＳｉＭｅ3 （ここでＲは−（ＣＨ2 ）3 （ＯＣＨ2 ＣＨ2 ）12ＯＨ）がある。
【０００５】
本発明と米国特許第５３６４６３３号とは、化学的により不活性な「架橋した(cross-linked)」シロキサンの提供と、従来はこのユニークな性能を有していることが知られていなかった架橋シロキサンからベシクルが作成することができるといった予想外の発見に基づく点で相違する。即ち、本発明の以前には、本願明細書で開示のポリエステルベースのＭＱ樹脂のような架橋シロキサン分子からベシクルを作成することは公知ではなく、また水溶性物質と水不溶性物質を閉じ込めるために水分散性架橋シロキサンＭＱ樹脂を使用することも公知でなかった。
【０００６】
シロキサンの架橋性のため、表面活性シロキサンは、凝集の生成や可溶化のような現象に関し、界面活性剤の活性の通常の法則に従わない。このため、ベシクルを形成することができるシロキサンを見つけることでさえ、非常に驚くべきであり且つ予想外のことである。さらに驚かされる予想外のことは、特定のシロキサン分子からベシクルを形成すると、得られたベシクルが物質の閉じ込めに有用なことである。
【０００７】
ベシクル生成と物質捕獲に表面活性シロキサンを使用することによってもたらされる効果と利点には、シロキサンが非炭化水素的特質を有し、このため現状で得られる炭化水素ベースの界面活性剤分子とは異なる組み合わせの物理的特性を提供するといった点ある。第２に、表面活性シロキサンは、水に接触すると「自発的に(spontaneously) 」ベシクルを形成し、非シロキサンベースの界面活性剤に必要な超音波処理のようなエネルギー消費量の多いプロセスの必要をなくすことが見出されている。第３に、シロキサン主鎖は化学反応座を提供するため、重合ベシクルの生成を容易に活用することができる点がある。
【０００８】
「リポソーム」と称されるラメラ構造を有する粒子状の脂質の水分散系は、医薬物質のカプセル封入や配送に、優れたビヒクルであることが知られている。化粧品系において、それらは脂質や水を角質層に供給することを助長し、モイスチャーライザーなしに乾燥肌の発生を防ぐことができる。また、これらはベシクルとして、モイスチャーライザー、日焼剤、日焼防止剤のような種々の物質が角質層に輸送されることを効果的に助長し、さらに水洗いよってその後で除去されることを軽減する。
【０００９】
その概念において、「脂質(lipid) 」とは、特には表面活性脂質を意味し、例えば水に分散してラメラ相の粒子又はリポソームを形成することができるリン脂質又はレシチンを意味する。リポソームは１層又は複数層の球形、丸形、又はチューブ形のベシクルであり、その膜は２層の両親媒性の脂質分子からなる。殆どの化粧品や薬剤用のリポソームは、天然、半合成、又は合成源の種々のリン脂質からなる。
【００１０】
用語「ベシクル(vesicle) 」は、閉じた２層膜の囲いからなる構造を言う。ベシクルは丸形又はチューブ形であることが多いが、非常に不規則なこともある。ここで、本願明細書において、表面活性シロキサンを用いて得られた「ベシクル」は、脂質と認識される物質から実際に調製されたリポソームのみを意味するものではない。どちらかと言えば、リポソームは、液体両親媒性物質から調製された特別な種類のベシクルである。
【００１１】
リポソームの大規模の生産、安定化、及び安全性に関わる未解決の問題は、この分野の技術の発達を妨げることがある。他方で、本発明の表面活性シロキサンを用いて作成したベシクルは、種々の物理的特性や明らかに脂質特性と異なる特質により、これらの問題を解決する可能性を提供するものである。
【００１２】
【課題を解決するための手段及び発明の効果】
本発明の目的は、シロキサンＭＱ樹脂材料から形成されたベシクル中に、水溶性物質を閉じ込める(entrap)方法を提供することである。この方法に従うと、閉じ込めるべき水溶性物質を水に溶かすことによって混合物を作成し、その後でこの混合物にシロキサンを添加する。混合物を穏やかに攪拌し、過剰の水と閉じ込めるべき水溶性物質を混合物から除去する。
【００１３】
また、本発明の目的は、シロキサンＭＱ樹脂物質から作成されたベシクル中に水不溶性物質を閉じ込める方法を提供する。この態様に従うと、閉じ込めるべき水不溶性物質をシロキサンに溶かし、この水不溶性物質とシロキサンを穏やかに攪拌する。
本発明の効果と長所は、本発明の以前にはベシクルを形成することが知られる界面活性剤は、主にジアルキルカチオン界面活性剤とリン脂質であったことを考慮すると認識することができる。これら部類の有機系界面活性剤と本願で使用する表面活性シロキサンの間には構造的類似性は全くない。
【００１４】
どちらかと言えば、本発明のシロキサンは、広範囲の分子種を含むポリマーの架橋分子である。このような多分散混合物が、ベシクルのような高度に組織された構造を形成することは驚くべきことである。さらに予想外で驚くべきことに、架橋した樹脂状シロキサンのような複合分子が、それら自身で一緒に規則正しく液晶状態に充填することができることである。
【００１５】
表面活性シロキサンは、ポリウレタンフォームの製造において湿潤剤や表面触感改質剤として有用であることが知られているが、シロキサンＭＱ樹脂ベースのポリエステルが、水溶性物質や水不溶性物質を閉じ込めるベシクルを形成可能なことは全く予想外である。同様な用途を有する類似の有機物質は、ベシクル形成と閉じ込めの付加的な能力を保有することが見出されていない。公知のジアルキルカチオン系界面活性剤とリン脂質からの安定なベシクルの形成は、それらの調製における高いエネルギーでの混合の必要を含む、付随した非常に特殊な操作を必要とする。しかしながら、本発明においては、水分散性シロキサンＭＱ樹脂から作成されるベシクルは割合に容易に作成され、単にシロキサンと水を混合するだけである。
【００１６】
場合によりリポソームと広義に称されるベシクルは、水に分散したときに閉じた層状構造を形成する界面活性剤分子である。これらは、ほぼ同心円に配置された水系の層又は区画によって隔てられた界面活性剤の二重層の交互の層からなる。多重層のベシクルが超音波や激しい攪拌に供された場合、多重層構造は分断されて１つだけの二重層アセンブリーを形成することができ、これは水系層の部分が１つだけの二重層アセンブリーの中に閉じ込められた単一ラメラ構造からなる。典型的に、ベシクルは３０〜１００ナノメートル（０．０３〜０．１μｍ）の直径を有する。
【００１７】
ベシクルは、それらの生成時に存在する水系相の一部をそれらアセンブリーの中に閉じ込めることができる。このことは、ベシクルの中に水溶性物質を含む好都合なベシクルを提供する。水と親水性化合物は、親水性頂部基の面間のベシクルの中央キャビティの中に閉じ込められるが、水不溶性物質もまた、ベシクル系の疎水性頂部基の面間にそれ自身で位置する。
【００１８】
本発明によって閉じ込められることができる水溶性物質のいくつかの種類の例としては、ビタミンＣ、ビタミンＨ（ビオチン）、ゼラチン、及び加水分解コラーゲンのような状態調節剤、トリクロサンのような装飾剤、塩化アルミニウム水和物やアルミニウム／ジルコニウムグリシンのような塩の制汗剤、サリチル酸、ＤＭＤＭヒダントイン、及びセチルトリメチルアンモニウムブロミドのような防腐剤、4-アミノ安息香酸や2-フェニルベンズイミダゾール-5- スルホン酸のような日焼防止剤、グリセリン、ソルビトール、及びプロピレングリコールのような保湿剤、バイオレットＮｏ．２、Ｄ＆Ｄレッド２２、及びＤ＆Ｃグリーン８のような着色剤、パパイン、トリプシン、及びキモトリプシンのような酵素、アスピリンやニコチンのような薬剤、ヒドロキシ酢酸（グリコール酸）のようなヒドロキシカルボン酸などがある。
【００１９】
本発明によって閉じ込められることができる水不溶性物質のいくつかの種類の例としては、ビタミンＡ、ビタミンＥアセテート、及びラノリンオイルのような状態調節剤、2-メルカプトピリジン-1- オキサイドのような防腐剤、ホモメチルサリチレート（ホモサレート）や4-メトキシ桂皮酸イソアミルエステルのような日焼防止剤、ラノリンアルコール、セテアリールオクタノエート、及びナトリウムステアロイルラクチレートのような保湿剤、ステアラミドＤＩＢＡステアレートやエチレングリコールモノステアレートのような着色剤、鉱物油、ホホパ油、及びポリジメチルシロキサンのような緩和剤、及びニトログリセリンのような薬剤などがある。
【００２０】
水溶性物質は、その物質を水に溶かし、表面活性シロキサンを添加し、その混合物を穏やかに振盪することによってわずかな攪拌に供し、遠心分離、透析、又はサイズ排除クロマトグラフィーによって外側相から余剰の水とその物質を除去することにより閉じ込められる。水不溶性物質は、その物質を表面活性シロキサンに添加し、次いでその混合物を穏やかに振盪することによってわずかな攪拌に供することにより閉じ込められる。遠心分離、透析、又はサイズ排除クロマトグラフィーによる除去工程は必要としない。ここで、クロロホルムのような適当な共溶媒を含めることもできる。閉じ込められた水不溶性物質を含むベシクルは、次に所望によりそれを水系に分散して用いることができる。
【００２１】
本発明のシロキサンＭＱ樹脂ベースのポリエステルは、ラメラ液晶相の約下限以下の濃度レベルまでの低濃度レベルで使用した場合、ベシクルを形成する。従って、シロキサンは、０．１重量％〜４０．０重量％、好ましくは０．５重量％〜２０．０重量％の範囲の量で使用される。これらのシロキサンから形成されるベシクルに閉じ込められるべき物質は、０．１重量％〜１０．０重量％の量で使用され、組成物の残りは水である。これらのシロキサンから形成されるベシクルに閉じ込められるべき水不溶性物質は、同様に０．１重量％〜１０．０重量％の量で使用されるが、この場合、組成物の残りはクロロホルムのような適当な共溶媒である。
【００２２】
水と共溶媒を除くと、本発明のベシクルは、１〜９９．７重量％の表面活性シロキサンと０．３〜９９重量％の水溶性又は水不溶性物質を含む。
本発明のベシクルを形成するに有用な有機ケイ素化合物は、式Ｒ3 ＳｉＯ1/2 とＲ’Ｒ2 ＳｉＯ1/2 の１価のシロキサン単位と式ＳｉＯ4/2 の４価の単位を有する物質である。少量の３価の単位のＲＳｉＯ3/2 と２価の単位のＲＳｉＯ2/2 もまた存在可能であるが、これらは化合物中に存在する全シロキサン単位の５％を超えるべきではない。１価の単位と４価の単位の比は０．４：１〜２：１である。適切な有機ケイ素化合物としては、外界温度の例えば２０℃において液体又は固体の化合物でよい。Ｒは水素原子又は８までの炭素原子を有する１価の炭化水素基である。Ｒはアルキル、アリール、アルケニル、アルキニル、アルカリル、又はアラルキル基であることができる。これらの基の例には、メチル、エチル、プロピル、ヘキシル、フェニル、ビニル、アリル、ヘキセニル、プロパルギル、トリル、フェニルエチル、及びスチリル基などがある。この有機ケイ素化合物の全てのＲ基の少なくとも８０％が低級アルキル又はアリール基であることが好ましく、最も好ましくはメチル基である。さらに好ましくは、実質的に全てのＲ基がメチル基である。
【００２３】
Ｒ’は、好ましくはヒドロキシル基を末端とするポリオキシアルキレン基を示す。使用可能な他の末端基は、メチル、エチル、又はプロピルのようなアルキル基、フェニルのようなアリール基、又はアセチルのようなアシル基である。ポリオキシアルキレン基の全オキシアルキレン基の少なくとも５０％がオキシエチレン基であることが好ましい。存在する他の全てのオキシアルキレン基は、好ましくはオキシプロピレン又はオキシテトラメチレン基である。最も好ましくは、全オキシアルキレン基の少なくとも８０％がオキシエチレン基である。また、ポリオキシアルキレン基は−ＳｉＣ−結合によってケイ素原子に結合していることが好ましく、理由はこの結合は−ＳｉＯＣ−結合よりも加水分解に安定と考えられるためである。ポリオキシアルキレン基は、好ましくは少なくとも３００、より好ましくは少なくとも５００の数平均分子量を有するが、このポリオキシアルキレン基は１０００を超えない数平均分子量を有することが好ましい。
【００２４】
本発明のベシクルを形成するに適する有機ケイ素化合物は、存在する全ての１価の単位の４０〜９０％が式Ｒ’Ｒ2 ＳｉＯ1/2 を有する。好ましくは、使用される有機ケイ素化合物は、１価と４価のシロキサン単位の比が１：１より高く、より好ましくは１．３：１〜１．８：１であり、最も好ましくは１．４：１〜１．６：１である。１価と４価のシロキサン単位の好ましい比を有する有機ケイ素化合物は、外界温度で液体である傾向にあり、従って容易に混合される。有機ケイ素化合物は液体の化合物であることが好ましい。固体の有機ケイ素化合物もまた使用可能であるが、適当な溶媒又は他の媒体中の溶液又は分散系として提供される必要があろう。
【００２５】
これらの有機ケイ素化合物は、公知の方法によって作成される。好ましい方法には、本質的に４価のＳｉＯ2 単位と式Ｒ3 ＳｉＯ1/2 とＨＲ2 ＳｉＯ1/2 の１価の単位の所望の比からなる有機ケイ素化合物と、アルキレンで末端をブロックされたポリオキシアルキレン化合物、例えばビニル又はアリルで末端をブロックされたポリオキシエチレンポリマー、又はビニル又はアリルで末端をブロックされたポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーとの反応がある。適当な有機ケイ素化合物の調製に使用されるＳｉＨ含有有機ケイ素化合物は公知の化合物であり、米国特許第４７７４３１０号（欧州特許第２５１４３５号）にそれらの調製方法と併せて開示されている。
【００２６】
【発明の実施の形態】
次に例によって本発明をさらに説明するが、特に明記していない限り、部と％は重量基準である。
例１
−ＭＱ有機ケイ素化合物の調製−
滴下漏斗、凝縮器、温度計、攪拌器を備えたフラスコに、ｙモルのＣＨ2 ＝ＣＨ−ＣＨ3 （ＯＣＨ2 ＣＨ2 ）12ＯＨを、イソプロパノール中の塩化白金酸の５％溶液の２５μｌ、トルエンの２００ｍｌ、及び酢酸ナトリウムの０．５ｇと共に入れた。滴下漏斗に式〔（ＣＨ3 ）3 ＳｉＯ1/2 〕x 〔（ＣＨ3 ）2 ＨＳｉＯ1/2 〕y 〔ＳｉＯ2 〕z の有機ケイ素樹脂の２００ｇを入れ、この樹脂はフラスコ内容物が９０℃の温度に達した直後に攪拌しながら混合物に添加した。添加を終えた後、その混合物を環流温度まで加熱し、全てのＳｉＨ基が反応するまでその温度に維持した。赤外分光分析によってこれらを監視した。得られた有機ケイ素化合物を分析し、式
【００２７】
【化３】
0003681806.tif 000003
【００２８】
を有することが分かり、ここでｍは３、ｎは１２、ｘ／ｙ／ｚの比は化合物ＭＱ１〜ＭＱ６について表１に示す値を有していた。好ましくは、ｘ／ｙ／ｚの比は０．５〜１．５／０．３〜０．６／１である。ｍとｎの値は、それぞれ２〜８と７〜３５の範囲にあることができ、それらは依然として適切な化合物を提供する。全ての化合物が液体物質であり、それらの粘度を表１に示す。
0003681806.tif 000004
この同じ方法をＭＱ７の作成に使用したところ、ＭＱ７のｘ／ｙ／ｚの比とオキシエチレン単位−（ＣＨ2 ）3 （ＯＣＨ2 ＣＨ2 ）32ＯＨを有していた。
例２
表面活性シロキサンによってベシクルを調製し、その閉じ込め効率を評価した。表１に示す表面活性シロキサンを使用した。最初に、６０ミリモル(mM)のカルセイン（Ｆｌｕｏｒｅｘｏｎとして知られる水溶性蛍光染料、化学的にはビス〔N,N-ビス（カルボキシメチル）アミノメチル〕フルオレセイ ン）を含む緩衝溶液中に各々のシロキサンを２重量％含む溶液を２ミリリットルほど調製した。採用した濃度においてカルセイン染料は自己消光性であり、蛍光性ではなかった。全ての溶液は茶色であった。各々の溶液は、過剰の溶液の溶液容積の一部を閉じ込めたシロキサンから形成されたベシクルを含んだ。カルセイン染料を、ベシクルの外にある溶液から、ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）カラムを用いたサイズ排除クロマトグラフィー分離とさらに超遠心分離によって除去した。ベシクルの外にあるカルセイン染料を除去した後は、ベシクルの外に出た染料の漏れは検出可能であり、これはカルセイン染料がベシクルの外の環境での低濃度において蛍光性になるためである。従って、蛍光を監視することによって時間の関数として漏れの割合を定量した。
【００２９】
例３
例２で調製した溶液の各々の半分を、４００００ｒｐｍ／１５００００Ｇ（４１８８ラジアン／秒(rad/s))で３０分間超遠心分離した。シロキサンから形成された小さな茶色のベシクルのペレットが、各々の溶液の底に観察された。上澄み液を流し出し、新しい緩衝溶液にそのベシクルを再分散させ、上記の条件下で再度遠心分離した。再び各々の溶液の底に小さな茶色のペレットが見られた。もう一度上澄み液を流し出し、さらにもう一度新しい緩衝溶液にベシクルを再分散させた。各々の溶液は明るい茶色に見え、濃厚なカルセイン染料溶液を閉じ込めたベシクルき存在を示唆した。蛍光が非常にゆっくりと増加し、シロキサンによって形成されたベシクルが迅速に漏れることはないことを示した。ナトリウムドデシルスルフェート（ＳＤＳ）の１０重量％溶液の２０μｌを添加してベシクルを溶かすと、突然に且つ劇的に蛍光が増加し、このことは各々のシロキサンに閉じ込めが生じていたことを明確に実証した。カルセイン染料の標準化曲線を利用して閉じ込め容積を測定した。
【００３０】
例４
例２で調製した溶液の各々の残りの半分を、小さなプレパックのサイズ排除ＳＥＰＨＡＤＥＸ（商標）カラムに２回通し、濁った中央部分を収集した。この溶液を、等浸透(iso-osmotic) 緩衝溶液を用い、カラムを通して洗浄した。ＳＥＰＨＡＤＥＸ（Pharmacia Biotechnology Group の商標、Piscataway, ニュージャージ州）は、多糖類デキストランから誘導された合成有機化合物である極微細なビーズからなるドライな不溶性粉末のカラム充填剤である。デキストラン鎖は架橋して３次元の網状構造を呈し、エーテル結合によって多糖鎖のグルコース単位に官能性イオン基が結合している。ＳＥＰＨＡＤＥＸサイズ排除カラムにおいて、小さなカルセイン染料分子がＳＥＰＨＡＤＥＸカラム充填剤の孔に「遭遇し」、従ってシロキサンで形成されたベシクルよりもはるかに遅い速度でカラムを通過する。ＳＥＰＨＡＤＥＸカラムで溶液を処理した後、その溶液の各々は明るい茶色に見え、このことは元の濃厚なカルセイン染料溶液を閉じ込めるシロキサンから形成されたベシクルの存在を示した。蛍光が非常にゆっくり増加し、このことはベシクルに急速な漏れがなかったことを示す。ナトリウムドデシルスルフェート（ＳＤＳ）の１０重量％溶液の２０μｌを添加してベシクルを溶かすと、突然に且つ劇的に蛍光が増加し、このことは各々のシロキサンに閉じ込めが生じていたことを明確に実証した。カルセイン染料の標準化曲線を利用して閉じ込め容積を測定した。
【００３１】
次の例は、表面活性ＭＱ樹脂シロキサンを用いた材料のより明らかな閉じ込めの証拠を提供する。
例５
例２の表面活性シロキサンを、ｐＨ４のＢｒｏｍｃｒｅｓｏｌ紫色染料(5',5"- ジブモ-o- クレゾール- スルホンフタレイン）の水溶液に添加した。Ｂｒｏｍｃｒｅｓｏｌ紫色染料の酸形態は暗い紫色を呈し、塩基形態は明るい黄色を呈する。ベシクルが溶液中に生成し、微分干渉コントラスト光学(Differential Interference Contrast optics) を用いた「Ａｘｉｏｓｋｏｐ」光学顕微鏡によって観察した。この顕微鏡は実時間でテレビの画面に像を映す装置を備え、ビデオに記憶する機能も有した。この顕微鏡は、１００倍のオイル浸漬レンズを備えると全体で１２５０倍の倍率で２００ナノメートル（０．２μｍ）までのベシクルを検出可能であった。顕微鏡を用いてベシクルを観察し、ベシクルの内側と外側の両方に紫色が観察された。サンプルに水酸化ナトリウム溶液を注入すると、瞬間的な色の変化が観察された。水酸化ナトリウムの拡散を、黄色の前部を観察することによって追跡した。黄色の前部がベシクルに接触してそれを囲むと、ベシクルの内側の紫色は１〜２分間保たれ、そしてゆっくりと黄色に変化した。このことは、シロキサンから形成したベシクルが水酸化ナトリウムの拡散のバリヤとして機能し、Ｂｒｏｍｃｒｅｓｏｌ紫色染料がベシクルの中に捕獲されていたことを示す。また、ベシクルを横切る水酸化ナトリウムの拡散速度は割合に大きいことを示す。