(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラン科植物のエビネ属に属するジエビネ全草又はニオイエビネの花の少なくとも１種からのエビネ抽出物を有効成分として含むことを特徴とする抗アレルギー性皮膚外用組成物。
【請求項２】
エビネ抽出物に加えて、ビタミン類、動植物油、グリコール酸、塩化ナトリウムを含むことを特徴とする請求項１記載の抗アレルギー性皮膚外用組成物。
【請求項３】
ビタミン類がパントテン酸ナトリウム、ニコチンアミド、酢酸トコフェロール、アスコルビン酸、ビオチン、ビタミンＢ６であり、動植物油が胚芽油と馬油であることを特徴とする請求項２記載の抗アレルギー性皮膚外用組成物。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、植物抽出物を有効成分として含む新規な抗アレルギー性皮膚外用組成物、特にアトピー性疾患治療に適した抗アレルギー性皮膚外用組成物に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
これまで、アトピー性皮膚炎のようなアレルギー疾患に対する治療法は、抗ヒスタミン剤の内服、免疫グロプリン製剤の皮下注射、ステロイド軟膏のような外用薬が用いられてきた。しかしながら、これらの医薬療法は顕著な効果の反面副作用が強く長期の治療には不向きであった。一方、誰もが日常いつでも手軽に利用できる抗アレルギー性の皮膚外用組成物、浴用剤、化粧料等も、広く提案されている。その多くは有効成分として植物抽出物を用いている。たとえば、ハイビスカスの葉及びアロエの葉肉の汁を用いたもの（特開平５−３０６２１０号）、アマチャ抽出物を用いたもの（特開平５−４３４４５号）、シソ科植物の抽出物を用いたもの（特開平６−２９３６５２号）、ビワの葉の抽出物を用いたもの（特開平８−７３３１４号）、ヒユ科植物のエキスを用いたもの（特開平８−９９８８９号）など、多数知られている。
【０００３】
これらの植物由来の抗アレルギー性抽出物は、天然物由来でも単一の単離化合物とは異なり、いずれもその生理及び薬理作用は複雑で比較的マイルドなのが特徴であり、幼児のような敏感な皮膚のアトピー性疾患の日常のケアに、長期にわたって利用しやすい利点がある。また植物抽出物の場合、原料植物の種類によって、その生理及び薬理活性も微妙に異なるのが普通であり、皮膚の美容効果を奏するものもある。したがって、その剤形もローション、乳液、クリーム、パック、軟膏、化粧水、浴用剤など多様である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
近年は、多くの抗アレルギー性組成物が開発されつつあるにもかかわらず、食生活の変化、環境破壊をはじめ、医薬品、化粧品、あるいはその他の身のまわりの合成樹脂、繊維、食物への添加剤など多数の化学薬品との接触から、食餌アレルギー、花粉アレルギー、薬剤アレルギー、接触アレルギー等のアレルギー症状を訴える人はなお増加の傾向にある。
【０００５】
本発明者は、上記のごとき現況に鑑み、各種の植物、特にラン科植物につき鋭意研究の結果、驚くべきことに、ある属のラン科植物抽出液がアトピー性皮膚炎のようなアレルギー性疾患に対し顕著な効果があり、しかも毒性がないことを見いだし、本発明にいたった。
【０００６】
本発明は、かかる知見に基づくもので、抗アレルギー効果があり且つ無毒性の皮膚外用組成物を提供することを目的としている。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
前記目的を達成した本発明の抗アレルギー性皮膚外用組成物は、ラン科植物のエビネ属に属するジエビネ全草又はニオイエビネの花の少なくとも１種からのエビネ抽出物を有効成分として含むことを特徴としている。
【０００８】
抽出物を有効成分とするものとしては、各種の抗アレルギー性組成物、アトピー性皮膚炎治療剤、抗アレルギー性浴用剤、抗アレルギー化粧料として有用である。また、抗アレルギー以外の皮膚外用組成物、例えば痔疾治療剤、草まけ、漆まけ、虫まけ治療剤、床ずれ治療剤、水虫治療剤、火傷治療剤においても有効である。また搾汁した原液そのまま、あるいは適宜水で希釈したものを、口腔用組成物、特に歯槽膿漏、口内炎治療用うがい液等に使用すると著効がある。乳酸菌に対しては、選択的に増殖抑制効果がある。
【０００９】
【発明の実施の形態】
本発明において、ラン科植物のエビネ属のエビネとしては、次のものを例示できる。
（１）．ジエビネ型：ジエビネ（Ｃ．ｄｉｓｃｏｌｏｒ）、キエビネ（Ｃ．ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）、キリシマエビネ（Ｃ．ａｒｉｓｔｕｌｉｆｅｒａ）、アマミエビネ（Ｃ．ａｍａｍｉａｎａ）、ニオイエビネ（Ｃ．ｉｚｕ−ｉｎｓｕｌａｒｉｓ）、サルメンエビネ（Ｃ．ｔｒｉｃａｒｉｎａｔａ）、トクノシマエビネ（Ｃ．ｔｏｋｕｎｏｓｈｉｍａｅｎｓｉｓ）、アリサンエビネ（Ｃ．ａｒｉｓａｎｅｎｓｉｓ）、ホソバナエビネ（Ｃ．ｇｒａｃｉｌｉｆｌｏｒａ）、ヒマラヤニオイエビネ（Ｃ．ｐｌａｎｔａｇｉｎｅａ）、クロロレウカ（Ｃ．ｃｈｌｏｒｏｌｅｕｃａ）、トガリバエビネ（Ｃ．ｃａｕｄａｔｉｌａｂｅｌｌａ）。
（２）．スズフリエビネ型：スズフリエビネ（Ｃ．ｌｉｕｋｉｕｅｎｓｉｓ）、タマザキエビネ（Ｃ．ｄｅｎｓｉｆｌｏｒａ）、プルクラ（Ｃ．ｐｕｌｃｈｒａ）。
（３）．タガネラン型：タガネラン（Ｃ．ｂｕｎｇｏａｎａ）、ホワイテアナ（Ｃ．ｗｈｉｔｅａｎａ）。
（４）．サクラジマエビネ型：サクラジマエビネ（Ｃ．ｏｂｌａｎｃｅｏｌａｔａ）、マンニイ（Ｃ．ｍａｎｎｉ）。
（５）．キソエビネ型：キソエビネ（Ｃ．ｓｃｈｌｅｃｈｔｅｒｉ）、アルピナ（Ｃ．ａｌｐｉｎａ）。
（６）．キンセイラン型：キンセイラン（Ｃ．ｎｉｐｐｏｎｉｃａ）。
（７）．ヒロハノカラン型：ヒロハノカラン（Ｃ．ｊａｐｏｎｉｃａ）。
（８）．アサヒエビネ型：アサヒエビネ（Ｃ．ｈａｔｔｏｒｉｉ）。
（９）．ナツエビネ型：ナツエビネ（Ｃ．ｒｅｆｌｅｘａ）。
（１０）．ツルラン型：ツルラン（Ｃ．ｆｕｒｃａｔａ）、オナガエビネ（Ｃ．ｌｏｎｇｉｃａｌｃａｒａｔａ）、オキナワエビネ（Ｃ．ｏｋｉｎａｗａｅｎｓｉｓ）、マスカ（Ｃ．ｍａｓｕｃａ）、マダガスカリエンシス（Ｃ．ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、ナタレンシス（Ｃ．ｎａｔａｌｅｎｓｉｓ）。
（１１）．トクサラン型：トクサラン（Ｃ．ｖｅｎｕｓｔａ）、シロトクサラン（Ｃ．ｌｏｎｇｉｐｅｓ）、ビロバ（Ｃ．ｂｉｌｏｂａ）。
（１２）．ペステイタ型：ベステイタ（Ｃ．ｖｅｓｔｉｔａ）、ロゼア（Ｃ．ｒｏｓｅａ）、エルメリ（Ｃ．ｅｌｍｅｒｉ）、ルベンス（Ｃ．ｒｕｂｅｎｓ）、カージオグロッサ（Ｃ．ｃａｒｄｉｏｇｌｏｓｓａ）。
【００１０】
本発明の有効成分であるエビネ抽出液は、前記エビネ属に属するエビネの少なくとも１種の花、根、茎、葉または全草から得られる抽出エキスである。抽出溶媒としては、低級アルキルアルコール、特に安全性の面からエチルアルコールが望ましい。エチルアルコールとしては純粋のエチルアルコールでもよいが、工業的には含水エチルアルコールが好適である。蒸留酒のような酒精を用いることもできる。含水エチルアルコール中のアルコール濃度は特に限定されないが、約３０〜９０％、望ましくは約４０〜７０％程度が実用的である。
【００１１】
本発明では、口腔用組成液のような例外的な場合を除いて、これらのエビネ抽出液を単独で使用するよりも、次のような添加剤と混合して使用することで、その作用効果は飛躍的に向上する。添加剤としては、ビタミン類、動植物油、グリコール酸、塩化ナトリウム等があげられる。ビタミン類としては、ビタミンＡ（アクセロフトール）、ビタミンＢ１（チアミン）、ビタミンＢ２（リボフラビン）、ビタミンＢ６（ピリドキシン）、ビタミンＣ（Ｌ−アスコルビン酸）、
ビタミンＥ（トコフェロール）、ビタミンＨ（ビオチン）、ニコチン酸、ニコチンアミド、パントテン酸、パントテン酸ナトリウム、パントテン酸カリウム等がある。動植物油としては、馬油、胚芽油、卵油、オリーブ油、ツバキ油、ナタネ油、ゴマ油等があるが、馬湯と胚芽油の組み合わせが好適である。
【００１２】
添加剤の種類及び添加量は、使用目的によって異なるので特定できないが、抗アレルギー組成液にあっては、エビネ抽出液１，０００ｍｌに対して、酢酸トコフェノールが約５〜１０ｇ、馬油が約７〜１３ｇ、パントテン酸ナトリウムが約１〜４ｇ、ニコチン酸アミドが約１〜４ｇ、アスコルビン酸が約５〜１０ｇ、グリコール酸が約０．５〜２ｇ、ビオチンが約０．５〜１ｇ、ビタミンＢ６が約０．５〜２ｇ、塩化ナトリウムが約１２〜１８ｇであることが望ましい。また抗アレルギー性化粧用組成液にあっては、好ましくはエビネ抽出液１，０００ｍｌに対して、酢酸トコフェノールが約６〜１２ｇ、馬油が約４〜８ｇ、パントテン酸ナトリウムが約１〜４ｇ、ニコチンアミドが約１〜３ｇ、アスコルビン酸が約８〜１５ｇ、グリコール酸が約０．５〜２ｇ、ビタミンＢ６が約０．５〜２ｇである。また上記物質以外であっても、通常抗アレルギー組成液や化粧料に添加される補助的添加剤は適宜使用することができる。またローション、乳液、クリーム、パック、軟膏、化粧水、浴用剤など、使用目的あるいは剤形に応じて、通常使われている材料は任意に用いてもよい。
【００１３】
エビネ抽出液と添加剤組成液の混合比は、使用目的に応じて異なるので特定できないが、抗アレルギー用組成液にあっては、エビネ抽出液が全体の１０〜２０容量％、抗アレルギー性化粧液にあっては５〜１０％が好適である。
【００１４】
エビネ抽出液の製造は、たとえば次のごとく行う。エビネの地下茎などに付着した泥を落とし、全草を水洗する。次いで、カッター、ミキサーなどで細片にして、プレスにより圧縮搾汁する。プレスの圧縮圧力は、５００〜５，０００ｋｇ／ｃｍ２程度で行う。搾汁液に対して２０〜９０％の含水エチルアルコールを約１：１（容量）の割合で混合する。使用目的によっては、例えば抗アレルギー性化粧料のような場合、香りの高いエビネの花のみを前記同様の方法で処理して、抽出液を得ることが望ましい。また、前記同様に泥を落とし水洗したエビネの全草をカッターで細切りしたのちミキサーですりつぶし、タンク内でエビネ約１０，０００ｇに対して約２０〜９０％エチルアルコール約２０，０００ｍｌを混合、７〜１０日間冷暗所において密閉保存した後、固液分離し濾過してもよい。これらの抽出液は、約１〜２週間冷暗所で密封熟成することにより、さらに効果的になる。
【００１５】
エビネ抽出液と他の添加剤との混合は、ビタミン類には水溶性のものもあれば油溶性のものもあり、使用動植物油との関係も含めて、溶媒には水、温水、エチルアルコールまたはそれらの混合液を用い、大略後述する実施例に準ずるのが望ましい。操作としては、加温は原則的に湯煎で行い、要すれば攪拌する。
【００１６】
各添加剤の作用は、必ずしも明確ではないが、一般的にビタミン類は粘膜、神経の保健に役立ち、皮膚の角質化の防止機能がある。ビタミンＢ１、ビタミンＢ２皮膚、粘膜の神経を安定化させるとともに活性化し、細胞呼吸を助ける。ビタミンＣは皮膚の新陳代謝を促し、ビタミンＥは血行促進、細胞活性化作用がある。ビタミンＨ、ニコチン酸、ニコチンアミド、パントテン酸とその塩類は、いずれも代謝機能を改善し、ビオチンは皮膚疾患の予防作用がある。動植物油は皮膚をやわらかくし、特に馬湯と胚芽油は効果的である。グリコール酸はｐＨ調製のために使用し、塩化ナトリウムはその浸透圧的な作用により、抽出物が皮膚の深部まで吸収されやすくなる。
【００１７】
【実施例１】
（１）．エビネ抽出液の調製：原料として宮崎県の山野に自生するジエビネを用いた。まずエビネの地下茎などに付着した泥を落とし、全草を水洗した。次いで、ミキサーで砕片にした。砕片１０，０００ｇをプレスにより圧縮搾汁し、搾汁液を得た。プレスの圧縮圧力は１，０００ｋｇ／ｃｍ２であった。搾汁液に対して７０％の含水エチルアルコールを約２０，０００ｍｌ加えて、冷暗所で１０日間熟成した。熟成後、固液分離して濾過し、エビネ抽出液を得た。
（２）．添加剤組成液の調製：エビネ抽出液１，０００ｍｌに対して、各成分を個別的に下記の工程で調製した。
▲１▼．精製水４５３ｍｌと９９％エチルアルコールを用意した。精製水のみは、湯煎にかけ加温しておいた。
▲２▼．容器に酢酸トコフェノール７．３ｇを入れ、９９％エチルアルコール２５０ｍｌを加え、７０℃の湯煎にかけて溶かした。次いで胚芽油７ｇ加えた。
▲３▼．容器に馬油１０．３ｇを入れ、９９％エチルアルコール２４７ｍｌを加え、７０℃の湯煎にかけて溶かした。
▲４▼．容器に加温精製水１００ｍｌを入れ、パントテン酸ナトリウム２．３ｇとニコチン酸アミド２．３ｇを加えて攪拌した。
▲５▼．容器に加温精製水１２０ｍｌを入れ、アスコルビン酸７．７ｇとグリコール酸１ｇを加えて攪拌した。
▲６▼．容器に精製水７０ｍｌと９９％エチルアルコール５０ｍｌを入れ、ビオチン０．８ｇを加えて、７０℃の湯煎にかけ、透明になるまで溶かした。
▲７▼．容器に加温精製水５０ｍｌを入れ、１ｇのビタミンＢ６を加え攪拌した。
▲８▼．容器に加温精製水１１３ｍｌをいれ、塩化ナトリウム１５．４ｇ加えて攪拌した。
▲９▼．容器に▲２▼▲３▼の溶液を入れ、これに▲６▼の溶液を加え、残り▲４▼▲５▼▲７▼▲８▼をこの順で加えて混合液を得た。この混合液に▲１▼を加えて１，０００ｍｌとした。１，０００ｍｌの混合液を２週間熟成した。
（３）．抗アレルギー組成液の調製：（１）のエビネ抽出液を精製水で２倍に希釈して、（２）の添加剤組成液に加えた。エビネ抽出液と添加剤組成液は１：１の割合で混合、エビネ抽出液の割合が１５容量％（１，０００ｍｌ中１５０ｍｌ）となるように調製した。
【００１８】
【対照例１】
実施例１からエビネ抽出液のみを除き、その他は実施例１と同一の工程で同一の組成に調製した組成液を得た。
【００１９】
【治験例１】
実施例１と対照例１の組成液をアトピー性皮膚炎の患部に１日２回、直接塗布した。治験者は各４０人で、内各２０人はアトピー症状が発症して１〜５年以内（病歴Ａ群）の患者、残り各２０人は６〜１５年（病歴Ｂ群）の患者であった。治験期間は、最高６ヶ月であった。結果を表１に示す。
【００２０】
【表１】
0003702307.tif 000002
【００２１】
【実施例２】
（１）．エビネ抽出液の調製：原料にニオイエビネの花のみを使用した以外は、実施例１と同じ方法でエビネ抽出液を得た。
（２）．添加剤組成液の調製：この花エビネ抽出液１，０００ｍｌに対して、下記の成分を実施例１と同じ方法で個別的に調製した。
▲１▼．精製水９００ｍｌ
９９％エチルアルコール１００ｍｌ
▲２▼．胚芽油                        ４．０ｇ
酢酸トコフェロール            ８．５ｇ
９９％エチルアルコール      ５０．０ｍｌ
▲３▼．馬油                          ６．０ｇ
９９％エチルアルコール      ５０．０ｍｌ
▲４▼．パントテン酸ナトリウム        ２．５ｇ
ニコチンアミド                １．８ｇ
精製水                    ４００．０ｍｌ
▲５▼．アスコルビン酸              １１．４ｇ
グリコール酸                  １．０ｇ
精製水                    ４００．０ｍｌ
▲６▼．ビタミンＢ６                  １．０ｇ
精製水                    １００．０ｍｌ
▲９▼．容器に▲２▼▲３▼の溶液を入れ、残り▲４▼▲５▼▲６▼をこの順で加えて混合液を得た。この混合液に▲１▼を加えて１，０００ｍｌとした。１，０００ｍｌの混合液を２週間熟成した。
（３）．抗アレルギー性組成液の調製：（１）の花エビネ抽出液と（２）の添加剤組成液を１：２の割合で混合し、混合液中の花エビネ抽出液の割合が７容量％（１，０００ｍｌ中７０ｍｌ）になるように調製した。得られた化粧水は、エビネの花のみを原料とした。この化粧水を６ヶ月間、４０人の治験者（女性のみ）の手及び顔に１日に朝晩各１回つけてもらった。その結果、治験例１と略同様の抗アレルギー効果が得られた。加えて、肌のかさつきがなくなり、うるおいとつやがで、香りもよく、抗アレルギー性化粧料としても好適であった。
【００２２】
【安全性試験】
エビネ全草抽出エキスの安全性に関する試験として、医薬品毒性試験法ガイドライン（平成５年８月１０日付薬新薬第８８号「単回及び反復投与毒性試験ガイドラインの改正について」）に基づき、エビネ全草抽出エキスを雌雄ラットに１回経口投与した。この試験は、昭和５７年３月３１日付薬発３１３号「医薬品の安全性試験の実施に関する基準について」およびその改正基準に従って実施した。試験方法及び結果は下記の通りである。
（１）．被験物質：製造後１年以上経過し、安定したエビネ全草抽出エキス。
（２）．対照物質：注射用水（株式会社大塚製薬製）。
（３）．使用動物：Ｃｒｊ：ＣＤ（ＳＤ）系の雌雄ラット（ＳＰＦ）。４週齢の雌雄各１４匹。体重雄７７〜８６ｇ、雌６８〜７７ｇであった。
（４）．投与方法：前記エビネ全草抽出エキスをラットに注射筒を用いて強制的に経口投与した。投与液量は投与日の体重を基準とし、２ｍｌ／ｇで算出した。投与回数は１日１回、午前１０時頃に投与、１４日間継続した。
（５）．観測及び検査方法と結果：
▲１▼．一般状態は、投与日は投与前及び投与後、翌日からは１日１回観察したが、表２に示すように、雌雄いずれの群からも異常は認められなかった。
▲２▼．体重測定：体重は、投与日及び投与後１日、３日、７日、１０日、１４日に測定した。その結果、表３及び表４に示すように、雌雄いずれの群も対照群とほぼ同様の推移を示し、体重にも有意差は認められなかった。有意差検定は、各群で平均値及び標準偏差を算出し、分散の同等性をＰ検定で確認した後、分散が等しい場合は、Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定を用いて、対照群と被験物質投与群との間で行った。有意水準は危険率５％未満（ｐ＜０．０５）とした。
▲３▼．剖験：観測終了時に全例をエーテル麻酔下で腹大動脈から放血致死させた後に剖験したが、表５に示すように、雌雄いずれの群にも異常は認められなかった。以上の結果、安全性試験の上限量として通常用いられる２，０００ｇ／ｋｇにおいても、雌雄ともに死亡例は認められず、体重推移、剖験のいずれにおいてもエビネ全草抽出エキス投与による影響は認められなかったので、エビネ抽出エキスは、毒性がなく安全であると推定される。
【００２３】
【表２】
0003702307.tif 000003
【００２４】
【表３】
0003702307.tif 000004
【００２５】
【表４】
0003702307.tif 000005
注：表３，表４におけるＴＴ＝Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓｔ−ｔｅｓｔ
【００２６】
【表５】
0003702307.tif 000006
【００２７】
【ヒト皮膚一時刺激性試験】
エビネ全草抽出エキスの安全性に関する試験として、クローズドパッチによるヒト皮膚一時刺激性試験を下記の通り実施した。
（１）．被験物質：エビネ全草抽出エキス（８．８％含有）。原体、無調整、室温保存。
（２）．対象物質：パッチテスト用絆創膏（リバーテープ株式会社製）円形布地部（ブランク）
（３）．試験系：ヒト皮膚
（４）．試験方法：男女計２０人（うち男子１２人、女子８人）の被験者を対象にして、被験物質（エビネ全草抽出エキス）０．１ｍｌを上腕部皮膚面に接着し、その上からヒトパッチテスト用絆創膏（リバーテープ株式会社製）にて固定した。さらにブランク対照としてパッチテスト用絆創膏円形布地部を上記被験物質に並列して同皮膚面に接着した。４８時間後に絆創膏を取り除き、被験物質及び対照負荷部の皮膚症状を肉眼的に観察、評価した。被験物質負荷部の皮膚所見については、刺激症状の有無（紅斑、浮腫、水疱）を確認し、日本パッチテスト研究会の基準により判定した。
（５）．試験結果：被験物質のヒト皮膚に対する４８時間のクローズドパッチテストの結果は、絆創膏の除去直後において刺激性反応は全く認められなかった。したがって、被験物質は無刺激性と評価される。
【００２９】
【表６】
0003702307.tif 000007
【００３０】
【発明の効果】
本発明によるエビネ抽出液を有効成分とする皮膚外用組成物によれば、しかも毒性がないので、家庭内で長期にわたり外用薬、化粧料、浴用剤として安全に使用できる。特に．アレルギー性疾患、たとえば発赤、湿疹、蕁麻疹、浮腫、腫脹、なかでもアトピー性皮膚炎の治療に顕著な効果がある。また、これに加えて、肌荒れ、かさつき、肌の肌理を改善し、肌にうるおいとつやを与え、肌の老化防止にも役立つなど、スキンケアの効果がある。