(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料が供給されるフローセルに対し、光を照射し、前記フローセルを通過した光を出力する光学系と、
その光学系の出力側に配置される検知器と、
その検知器に接続された信号処理部と、を備え、
前記光学系は、光を波長分散する機能を有し、
前記検知器は、その波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器であり、
前記信号処理部は、前記検知器から出力される測定対象の波長の光量からクロマトグラムを求めるに際し、前記測定対象の波長と異なる長い波長領域の波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を備えたことを特徴とするクロマトグラフィーシステム。
【請求項２】
試料が供給されるフローセルに対し、光を照射し、前記フローセルを通過した光を出力する光学系と、その光学系の出力側に配置される検知器を備え、前記光学系は光を波長分散する機能を有し、前記検知器はその波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器である、マルチチャンネル検出器と、
そのマルチチャンネル検出器から出力される時系列のデータであるクロマトグラムに対してデータ解析を行うデータ処理端末と、
を備えたクロマトグラフィーシステムであって、
前記データ処理端末は、前記マルチチャンネル検出器から出力される前記クロマトグラムに対し、測定対象の波長と異なる長い波長領域の波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を備えたことを特徴とするクロマトグラフィーシステム。
【請求項３】
前記複数の異なる波長は、連続する少なくとも３２波長であることを特徴とする請求項１または２に記載のクロマトグラフィーシステム。
【請求項４】
前記補正機能は、前記測定対象の波長の光量をＩ、参照光量をＩ０とし、
吸光度＝−ｌｏｇ１０（Ｉ／Ｉ０）
により吸光度を求めるものであり、
前記参照光量が、前記複数の異なる波長の光量の平均に基づいて設定されることを特徴とする請求項１から３のいずれかに記載のクロマトグラフィーシステム。
【請求項５】
試料が供給されるフローセルに対し、光を照射し、前記フローセルを通過した光を出力する光学系と、その光学系の出力側に配置される検知器を備え、前記光学系は光を波長分散する機能を有し、前記検知器はその波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器である、マルチチャンネル検出器における前記検知器に接続され、その検知器から出力される測定対象の波長の光量からクロマトグラムを求める信号処理装置であって、
前記測定対象の波長と異なる長い波長領域の波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を備えたことを特徴とする信号処理装置。
【請求項６】
マルチチャンネル検出器にて波長分散された各波長の光を同時に受光して得られたクロマトグラムに対して設定されたパラメータを適用してデータ解析を行うクロマトグラフィー・データ処理端末であって、
測定対象の波長と異なる長い波長領域の波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいて前記クロマトグラムのベースラインの補正を行う補正機能を備えたことを特徴とするクロマトグラフィー・データ処理端末。
【請求項７】
コンピュータに、
波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器の出力に基づき、測定対象の波長の光量からクロマトグラムを求めるに際し、前記測定対象の波長と異なる波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を実現させるためのプログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、クロマトグラフィーシステム、信号処理装置、クロマトグラフィー・データ処理端末およびプログラムに関するもので、より具体的には、ベースラインの変動を抑制する技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフィーに用いられる汎用検出器の一つとて、フォトダイオードアレイや固体撮像素子などを使用したマルチチャンネル検出器（以下、「ＰＤＡ検出器」と称する）がある。このＰＤＡ検出器は、試料が持つ特定の波長の光を吸収する性質を利用して検出する。例えば試料に入射した光の強度と、試料から出射した光の強度を測定し、その差から吸光度を求めたり、その求めた吸光度から、試料の濃度を計算したりすることができる。
【０００３】
ＰＤＡ検出器では、フローセルに分析対象成分を流して測定する。液体クロマトグラフィーの分析手法の一つにグラジエント溶出法がある。このグラジエント溶出法は、異なる特性（ｐＨ・極性など）を持つ複数の溶離液を用いて、分析の進行にしたがって連続的に溶離液の組成を変える。よってグラジエント溶出法では、分析の進行に伴ってフローセル内部の液体の種類や組成が変化していくが、液体はそれぞれ固有の屈折率を持っているため、フローセル内部の屈折率が変化する。この変化により、フローセルを出射する光の屈折度合いも変化し、検知器に届く光の強度も変化する。このように検知器に届く光量が変化するので、あたかも吸光度が変化したかのような現象が現れる。この現象により、グラジエント溶出法を使った分析では、溶離液が光を吸収しない場合であっても、屈折率の影響によりベースラインの形状が曲線に変化してしまう。そしてＰＤＡ検出器のような吸光度を測定する検出器では、このような変化は、定性分析や定量分析の精度に悪影響を与えてしまう。
【０００４】
このようなグラジエント溶出法に起因するベースライン変動を抑止するため、例えば図１（ａ）に示すような一般的な流路が円筒状のフローセル（ストレート型フローセル）に換えて、例えば図１（ｂ）に示すようなテーパー型フローセルを用いることが行われている。これらのフローセルは、例えばステンレス製の本体１を貫通する流路４の一端（図では左側）に例えば石英ガラス製の入射側窓板２を配置し、流路４の他端（図では右側）に例えば石英ガラス製の出射側窓板３を配置する構造となる。図から明らかなように、ストレート型フローセルの流路４は全長にわたり内径が均一の円筒形からなり（図１（ａ）参照）、テーパー型フローセルの流路４は、その内形状が光の進行方向に沿って広くなる円錐台形状になるように設定している。この種のテーパー型フローセルは、例えば特許文献１に開示されている。
【０００５】
例えば図１（ａ）に示すような一般的な流路が円筒状のフローセル（ストレート型フローセル）を使用するとき、フローセルの入り口付近で入射光を結像すると、流路の下流側で入射光が壁面に当たってロスを生じるため、検知器に届く光の強度が小さくなる。
【０００６】
これに対し、図１（ｂ）に示すような特許文献１のような、テーパー型フローセルは、例えば入射光の角度とフローセルの流路４の内周面の壁面の角度が一致し、壁面に入射光を当たりにくい設計になっている。それにより、屈折率の変化による出射光量の変化を抑制することができる。
【０００７】
一方、一般にＰＤＡ検出器では、重水素ランプやタングステンランプなどを使用する。これらは、環境温度の変化によって、発光強度が変化する特性を持っている。発光強度の変化は、ベースラインのドリフトとして測定結果に現れる。ランプは発光源であるとともに発熱源でもあり、連続して発光すると、自己が発する熱により周囲の環境温度も上昇する。特に液体クロマトグラフィーでは、数分間から数十分間の連続測定を行うので、環境温度の変化によるベースラインのドリフトの影響は大きくなる。係る問題を解決するため、例えば特許文献２に開示するように光源を収納した光源室に空冷機構を設け、光源室の温度が一定になるように制御するものが提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特公平８−３４８３号公報
【特許文献２】特許第４４１９６３７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上述したように、従来からベースラインのドリフトを改善するために様々な手段が提案されているが、いずれも十分な効果が得られなかった。例えば、特許文献１に開示されたテーパー型のフローセルを用いる方法では、フローセルに入射した光は、空気・石英などのセル窓板・溶離液（液体）の各界面で、それぞれの屈折率の違いにより屈折する。グラジエント溶出法では、分析が進行するに伴い溶離液の種類が変わることで、セル窓板と溶離液との屈折率が変化する。これにより、フローセルの壁面に当たって出られなかった光が出られるようになり、検知器に届く光量が増える。
【００１０】
上述したように、テーパー型フローセルは、入射光の角度とフローセルの壁面の角度が一致し、壁面に入射光を当たりにくい設計になっている。しかし、例えば図１（ｃ）に示すように、屈折率の変化が大きい場合には、完全に制御することはできない。
【００１１】
また、特許文献２に開示されたランプの動作温度の安定化方法では、部品点数が増えるためコストが上がることと、室温がエアコンなどにより変化した場合に温度調整機能が正常に動作しない場合があることがある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上述した課題を解決するために、本発明に係るクロマトグラフィーシステムは、（１）試料が供給されるフローセルに対し、光を照射し、前記フローセルを通過した光を出力する光学系と、その光学系の出力側に配置される検知器と、その検知器に接続された信号処理部と、を備え、前記光学系は、光を波長分散する機能を有し、前記検知器は、その波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器であり、前記信号処理部は、前記マルチチャンネル検出器から出力される測定対象の波長の光量からクロマトグラムを求めるに際し、前記測定対象の波長と異なる長い波長領域の波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を備えるようにした。
【００１３】
（２）試料が供給されるフローセルに対し、光を照射し、前記フローセルを通過した光を出力する光学系と、その光学系の出力側に配置される検知器を備え、前記光学系は光を波長分散する機能を有し、前記検知器はその波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器である、マルチチャンネル検出器と、そのマルチチャンネル検出器から出力される時系列のデータであるクロマトグラムに対してデータ解析を行うデータ処理端末と、を備えたクロマトグラフィーシステムであって、前記データ処理端末は、前記マルチチャンネル検出器から出力される前記クロマトグラムに対し、測定対象の波長と異なる長い波長領域の波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を備えるようにした。
【００１４】
例えばグラジエント溶出法での屈折率の変化等によるベースラインの変動は、測定レンジの波長の全体にわたって発生し、しかも、ベースラインの変動量は、波長により異なることはあるものの、各波長で同じような変動の傾向が発生する。例えば測定対象の波長でベースラインがプラス方向に増加するような変化があった場合、同時刻の測定対象以外の波長におけるベースラインもプラス方向に増加する変化が発生し、逆方向のマイナス側に変化することはない。そこで、（１），（２）の発明によれば、測定対象の波長の光量と同じ方向にベースラインの変動を生じている同時刻の測定対象と異なる波長の光量を用いて補正をすることで、ベースラインの変動の影響が低減する。これは、例えばグラジエント溶出法における屈折率変化によるベースラインの変動に限らず、例えば、光源の動作温度の変化によるベースラインの変動など、各種の要因により発生するベースラインの変動の影響を抑えることが出来る。
【００１５】
また、前記補正機能が用いる前記測定対象の波長と同時刻の異なる波長は、複数の異なる波長としたため、測定波長と異なる波長の光量に含まれるノイズの影響を抑制することができる。
（３）前記複数の異なる波長は、連続する少なくとも３２波長とするとよい。
（４）前記補正機能は、前記測定対象の波長の光量をＩ、参照光量をＩ０とし、
吸光度＝−ｌｏｇ１０（Ｉ／Ｉ０）
により吸光度を求めるものであり、
前記参照光量が、前記複数の異なる波長の光量の平均に基づいて設定されるようにするとよい。
【００１６】
（５）本発明に係る信号処理装置は、試料が供給されるフローセルに対し、光を照射し、前記フローセルを通過した光を出力する光学系と、その光学系の出力側に配置される検知器を備え、前記光学系は光を波長分散する機能を有し、前記検知器はその波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器である、マルチチャンネル検出器における前記検知器に接続され、その検知器から出力される測定対象の波長の光量からクロマトグラムを求める信号処理装置であって、前記測定対象の波長と異なる波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均同時刻の異なる波長の光量に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を備えるようにした。
【００１７】
（６）本発明に係るクロマトグラフィー・データ処理端末は、マルチチャンネル検出器にて波長分散された各波長の光を同時に受光して得られたクロマトグラムに対して設定されたパラメータを適用してデータ解析を行うクロマトグラフィー・データ処理端末であって、測定対象の波長と異なる波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいて前記クロマトグラムのベースラインの補正を行う補正機能を備えるようにした。
【００１８】
（７）本発明に係るプログラムは、コンピュータに、波長分散された各波長の光を同時に受光するマルチチャンネルの検知器の出力に基づき、測定対象の波長の光量からクロマトグラムを求めるに際し、前記測定対象の波長と異なる波長であって、前記測定対象の波長と同時刻の複数の異なる波長の光量の平均に基づいてベースラインの補正処理を行う補正機能を実現させるためのプログラムとした。
【発明の効果】
【００１９】
本発明は、測定対象の波長と同時刻に発生する測定対象の波長と異なる波長の光量を用いてベースラインの補正を行うため、各種の要因により生じるベースラインの変動・ドリフトを効果的に抑制できる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】フローセルの構造を示すとともに、フローセルのタイプによる屈折率の影響を説明する図である。
【図２】本発明の好適な一実施形態を示すブロック図である。
【図３】フローセルの一例を示す図である。
【図４】実験結果を示すグラフである。
【図５】実験結果を示すグラフである。
【図６】実験結果を示すグラフである。
【図７】実験結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
図２は、この発明が適用されるクロマトグラフィーシステムの一形態を示している。図に示すように、液体クロマトグラフィー，超臨界流体クロマトグラフィー等の分析を行うマルチチャンネル検出器１０と、そのマルチチャンネル検出器１０から出力されるデータ（クロマトグラム）を取得し、データ解析を行うクロマトグラフィー・データ処理端末２０とを備えている。
【００２２】
マルチチャンネル検出器１０は、分析対象の未知の試料や標準試料を、カラムを経由して検出装置内のフローセル１２に送り、その後、それら試料を排出する機構を備える。検出装置は、光源１１と、その光源１１からの光をフローセル１２に照射したり、フローセル１２（フローセル１２内の試料）を通過した光を検出したりする光学系と、その光学系の出力側に設置される検知器１３を備える。検知器１３には、例えばフォトダイオードアレイ（ＰＤＡ）を良く用いるが、ＣＭＯＳやＣＣＤなどの固体撮像素子を用いることもある。この検知器１３には、信号処理回路１４が接続される。
【００２３】
光源１１とフローセル１２の間の光学系、あるいはフローセル１２と検知器１３の間の光学系に、例えば回折格子などの波長を分散する光学部品等を備え、分散された各波長の光が検知器１３で受光される。検知器１３から出力された光強度に応じた電気信号は、信号処理回路１４にて所定の信号処理がされ、時系列で出力される。この出力される時系列のデータが、クロマトグラムとなる。
【００２４】
フローセル１２は、例えば、図３に示すような構造のフローセルユニット１２′を用いるとよい。すなわち、フローセルユニット１２′は、ステンレス鋼材などを加工して作られる本体１２ａを有する。本体１２ａ内には、試料・溶離液を流す流路１２ｂが貫通するように配置される。また、本体１２ａの前面側に配置されるパネル１２ｈには、入り口用配管接続部１２ｉと出口用配管接続部１２ｊが設けられている。各配管接続部１２ｉ，１２ｊには、図外のクロマトグラフ用のステンレス配管が接続され、試料・溶離液が本体１２ａに対して流入・流出する。各配管接続部１２ｉ，１２ｊは、本体１２ａ内に設けられた内部流路１２ｋ，１２ｍにつながる。
【００２５】
流路１２ｂの入口側の孔と同じ面に、フローセル手前の内部流路１２ｋの出口が設置される。同様に流路１２ｂの出口側の孔と同じ面に、フローセル直後の内部流路１２ｍの入り口が設置される。流路１２ｂの入口側の面と出口側の面は、それぞれガスケット１２ｃ，１２ｇによりシールされる。ガスケット１２ｃ，１２ｇには孔１２ｃ′，１２ｇ′が形成され、フローセル手前の内部流路１２ｋの出口とフローセル内の流路１２ｂの入口、フローセル内の流路１２ｂの出口とフローセル直後の内部流路１２ｍの入口をそれぞれ結ぶ流路を形成する。本実施形態では、フローセル１２の流路１２ｂはテーパー型としているため、フローセル１２の入口側の孔と出口側の孔の大きさが異なるので、それに合わせガスケット１２ｃの孔１２ｃ′とガスケット１２ｇの孔１２ｇ′の寸法・形状は異なる。
【００２６】
さらにガスケット１２ｃ，１２ｇの外側には、それぞれセル窓板１２ｄが密着して配置される。セル窓板１２ｄは、石英ガラスなどが素材として使われる。ガスケット１２ｃ，１２ｇの孔１２ｃ′，１２ｇ′の外側（フローセル１２の流路１２ｂと反対側）は、セル窓板１２ｄにより閉塞され、孔１２ｃ′，１２ｇ′の内側の一部は本体１２ａにより閉塞され、内部流路１２ｋ，ｍと流路１２ｂを結ぶ試料・溶離液の流路となる。
セル窓板１２ｄのさらに外側には、ガスケット１２ｃ，１２ｇとセル窓板１２ｄを固定する留め具１２ｅが配置される。そして、留め具１２ｅで直接セル窓板１２ｄを締め付けると、力のかかり具合によってはセル窓板１２ｄが破損してしまうことがあるので、力が均等に加わるようにＯリング１２ｆなどを設置する。また、留め具１２ｅの中央には厚さ方向に貫通する開口部１２ｅ′が形成されており、この開口部１２ｅ′内を光が通過し、フローセル１２を構成する流路１２ｂへ光を入射したり、フローセルを通過した光が出射したりする。なお、本発明に用いるフローセルは、上述したテーパー型のものに限ることはなく、従来から用いられる流路が円筒のストレート型のフローセルとしてもよい。
【００２７】
クロマトグラフィー・データ処理端末２０は、取得したクロマトグラムに対して各種のデータ解析を行うもので、そのハードウェア構成は、例えば制御部（ＣＰＵ）と、メモリと、外部記憶装置と、キーボード・ポインティングデバイス等の入力装置と、表示装置やプリンタ等の出力装置等を備える。マルチチャンネル検出器から出力される多チャンネルの時系列のデータが、メモリに格納される。
【００２８】
制御部は、メモリに格納された所定のデータ（クロマトグラム）を読み出し、表示装置に描画する。なお、メモリに一旦格納されたデータを読み出して表示装置に描画しても良いし、マルチチャンネル検出器１０から出力されてくるデータをリアルタイムで表示装置に描画するようにしても良い。また、メモリは、制御部が演算実行する際のワークメモリ（バッファメモリ）としても利用される。外部記憶装置は、不揮発性メモリであり、データ解析結果や、各種のデータ解析のためのパラメータ（メソッド）が保存される。
【００２９】
制御部は、上記のクロマトグラムに対し、設定されたメソッド（複数のパラメータ）を適用し、所定のデータ解析を行うと共に、そのデータ解析結果を表示装置に描画したり、プリンタからプリントアウトしたりする機能を備える。さらにクロマトグラフィー・データ処理端末２０（制御部）は、マルチチャンネル検出器１０の動作を司る機能も備える。
［吸光度算出］
【００３０】
信号処理回路１４は、グラジエント溶出法での測定中の吸光度（ＡＢＳ）を算出する機能を備える。ベースラインの補正を行うべく、信号処理回路１４は、測定時の測定対象の波長の光量をＩ、参照光量をＩ０とし、下記式から吸光度を算出する。
ＡＢＳ＝−ｌｏｇ１０（Ｉ／Ｉ０）
【００３１】
そして、参照光量Ｉ０は、従来は、測定対象の波長についての測定開始時の光量や、ハーフミラーなどで分別した同じ波長の光の一部を用いるが、本発明では、測定対象の波長と同時刻の異なる波長の光量に基づいて参照光量Ｉ０を求めるようにした。具体的には、測定対象とならないある波長を選択し、そのある波長を中心に、例えば前後１６個分（合計３２個分）の範囲の光量を平均した値を参照光量Ｉ０とする。波長の分解能が１ｎｍとすると、合計３２ｎｍ分の範囲の光量の平均となり、例えば、下記式により求める。実際には、ある波長λｘを指定した場合、当該波長λｘも３２個分の波長の一つとなるため、例えば指定したある波長λｘの１５個前のλ（ｘ−１５）から１６個後のλ（ｘ＋１６）までの３２個分の波長の光量を取得するとともに、その平均を求める。下記式では、波長λ（ｘ−１５）の光量がＩ１であり、波長λ（ｘ＋１６）の光量がＩ３２である。そして、本実施形態では、検知器１３は、フォトダイオードアレイや固体撮像素子等のマルチチャンネル検出器であるため、各波長に対応する検知器１３の出力信号が既知であるため、信号処理回路１４は対応する出力信号から各Ｉｎの値を取得し、Ｉ０を算出する。
【００３２】
【数１】
0005448224.tif 000002
【００３３】
この参照光量Ｉ０を求めるための波長（例えば、上記の波長λｘ）は、測定対象の波長にあわせてユーザが設定する。この設定は、例えば、クロマトグラフィー・データ処理端末２０の表示装置に設定画面を表示し、入力装置からの入力信号により決定し、クロマトグラフィー・データ処理端末２０がマルチチャンネル検出器１０に設定する。
【００３４】
例えばグラジエント溶出法での屈折率の変化によるベースラインの変動は、測定レンジの波長の全体にわたって発生し、しかも、ベースラインの変動量は、波長により異なることはあるものの、各波長で同じような変動の傾向が発生する。すなわち、例えば測定対象の波長でベースラインがプラス方向に増加するような変化があった場合、同時刻の測定対象以外の波長におけるベースラインもプラス方向に増加する変化が発生し、逆方向のマイナス側に変化することはない。そこで、上述した参照光量Ｉ０を用いたベースラインの補正を行って吸光度を求めることで、測定対象の波長におけるベースラインの変動の影響が低減する。
【００３５】
［変形例］
上述した実施形態では、参照光量は、測定対象の波長と同時刻の異なる波長を中心とした前後の合計３２個分の波長の光量の平均を用いて求めたが、本発明はこれに限ることはなく、例えば倍の６４個分としても良いし、それ以外の個数でも良い。また、係る参照光量Ｉ０を求める際に使用する波長の数は、固定値でも良いし、ユーザによる設定値としても良い。ユーザによる設定値とした場合、数値入力等により任意の数値の入力を受け付けるようにしても良いし、あらかじめ用意した複数の数値の中から選択させるようにしても良い。この波長の数の設定も、波長の指定と併せて行うようにすると良い。また、参照光量を求めるための波長は、１つとしても良い。
【００３６】
さらに本実施形態では、参照光量Ｉ０を求めるのに際し、１つの波長の光量ではなく、複数の波長の光量の平均値を用いることで、ノイズを低減できる。さらに参照光量Ｉ０は同時刻に測定されているため、例えば動作温度の変化に伴う光源１１であるランプの光量変化を補正する効果も発揮する。
【００３７】
ノイズの影響を抑制するためには、参照光量Ｉ０を求めるために用いる波長の数を多くするのが好ましい。上述した実施形態では、サンプル数を３２個や６４個としたが、さらに多い数としても良い。但し、あまり数を増やすと、参照光量Ｉ０を求める際に指定する波長λｘと測定対象の波長との関係とも相まって参照光量Ｉ０を求める波長の範囲内に測定対象の波長も含まれる恐れがある。係る事態が生じないように適宜の値に設定すると良い。例えば、上述したように端数の分解能が１ｎｍとした場合、個数は１００程度とすると良い。
【００３８】
測定対象の波長は、測定可能レンジ内の比較的短い波長領域のものを使用することが多いので、かかる場合、参照光量Ｉ０は、測定対象の波長よりも長い波長領域の光量に基づいて決定すると良い。また、逆に測定対象の波長が長い領域のものを要する場合には、参照光量Ｉ０は、測定対象の波長よりも短い波長領域の光量に基づいて決定すると良い。
【００３９】
また、参照光量Ｉ０を求めるために指定する波長は、上述した実施形態では、中心の波長とし、前後に所定個数分の波長に基づいて参照光量Ｉ０を求めたが、本発明は係るものに限ることはなく、例えば、先頭の波長λ１を指定し、そこから後側に３２個分などの所定個数分の波長に基づいて参照光量Ｉ０を求めたり、あるいはその逆としたりしても良い。特に、参照光量Ｉ０を、測定対象の波長よりも長い波長領域を用いる場合には、先頭の波長を指定するようにすると、測定対象の波長が参照光量Ｉ０を求めるための波長に含まれる恐れがなくなるので良い。逆に参照光量Ｉ０を、測定対象の波長よりも短い波長領域を用いる場合には、最後の波長を指定するようにするとい。
【００４０】
さらにまた、上述した実施形態では、ベースラインの補正を信号処理回路１４で行うようにしたが、本発明はこれに限ることはなく、データ処理端末２０側で行っても良い。
【００４１】
［実験結果］
本発明の効果を実証するため、以下の実験を行った。まず、基本となる「ベースライン変動の抑制」の効果を確認するため、グラジエント溶出法を行い、従来のベースラインと、発明した技術を使用したベースラインとの変動の度合いを比較した。
【００４２】
図４は、液体クロマトグラフィーで一般的に使用される水とメタノールによるグラジエント溶出法で、測定波長２５０ｎｍにおけるベースライン変動を比較した結果を示している。線１は、時間の経過に伴うメタノールの組成割合の変化を示し、線２は、本発明を適用してベースラインの補正をした結果を示し、線３は補正をしない場合のベースラインの変動を示している。補正を行う場合に用いる参照光量Ｉ０の算出は、波長４００ｎｍから４３１ｎｍの３２波長分を使用した。図４から明らかなように、補正を行わない場合にはベースラインの変動幅が６０００μＡＵあったのに対し、補正をすることでベースラインの変動幅が２１００μＡＵまで改善された。
【００４３】
図５は、使用する溶媒を水とアセトニトリルを変え、グラジエント溶出法で、測定波長２５０ｎｍにおける変動を比較した結果を示している。グラフ１は、時間の経過に伴うアセトニトリルの組成割合の変化を示し、線２は、本発明を適用してベースラインの補正をした結果を示し、線３は補正をしない場合のベースラインの変動を示している。補正を行う場合に用いる参照光量Ｉ０の算出は、波長４００ｎｍから４３１ｎｍの３２波長分を使用した。図５から明らかなように、補正を行わない場合にはベースラインの変動幅が２４０００μＡＵあったのに対し、補正をすることでベースラインの変動幅が９０００μＡＵまで改善された。
【００４４】
次に、「ベースラインの安定性向上」の効果を確認するため、環境温度を変化させ、従来のベースラインと、発明した技術を使用したベースラインとのドリフトの度合いを比較した。まず、図６は、水を送液しながら、環境温度を１８℃から２８℃に変化させ、再び１８℃に戻したときの、測定波長２５０ｎｍにおけるドリフトを比較した結果を示している。線１が、時間経過に伴う装置の外気温の変化を示し、線２は、本発明を適用してベースラインの補正をした結果を示し、線３は補正をしない場合のベースラインの変動を示している。補正を行う場合に用いる参照光量Ｉ０の算出には、測定波長４００ｎｍから４３１ｎｍの３２波長を使用した。図６から明らかなように、補正を行わない場合にはベースラインの変動幅が２８００μＡＵあったのに対し、補正をすることでベースラインの変動幅が１４００μＡＵまで改善された。
【００４５】
図７は、水を送液しながら、環境温度を２０℃から２８℃に変化させたときの測定波長４００ｎｍにおけるドリフトを比較した結果を示している。線１が時間経過に伴う装置の外気温の変化を示し、線２は、本発明を適用してベースラインの補正をした結果を示し、線３は補正をしない場合のベースラインの変動を示している。補正を行う場合に用いる参照光量Ｉ０の算出には、測定波長３００ｎｍから３３１ｎｍの３２波長を使用した。図７から明らかなように、補正を行わない場合にはベースラインの変動幅が１３００μＡＵあったのに対し、補正をすることでベースラインの変動幅が５００μＡＵまで改善された。なお、この例では、参照光量Ｉ０の算出に使用した波長が、測定波長よりも短いため、ドリフトの正負が逆転している。
【００４６】
すなわち、ベースラインの変動は、変動方向は同じであるものの、その絶対値は短波長側の方が大きくなる傾向にある。そのため、図７に示すように正負が逆転する結果となっているが、重要なのは補正後のベースラインの変動幅の絶対値が小さくなることである。よって、本発明では、測定対象の波長に対し、参照光量を求める際に使用する波長が長い場合と短い場合のいずれでも良いことが確認できた。
【符号の説明】
【００４７】
１０  マルチチャンネル検出器
１１  光源
１２  フローセル
１３  検出器
１４  信号処理回路
２０  クロマトグラフィー・データ処理端末
【要約】
【課題】  データ解析のためのパラメータの設定が容易に行えるようにすること
【解決手段】  試料が供給されるフローセル１２に対し、光源１１からの光を照射し、フローセルを通過した光を出力する光学系（光路中で光を波長分散する機能を備える）と、その光学系の出力側に配置され、波長分散された光を受光するマルチチャンネルの検知器１３と、その検出器に接続された信号処理部１４と、を備えたマルチチャンネル検出器１０と、データ処理端末２０を備えたクロマトグラフィーシステムである。信号処理回路は、検出器から出力される測定対象の波長の光量Ｉと、測定対象の波長と同時刻の異なる複数の波長の光量の平均値の参照光量Ｉ０を用い、吸光度＝−ｌｏｇ１０（Ｉ／Ｉ０）により吸光度を求める機能を備える。
【選択図】        図２【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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