(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
線維芽細胞における損傷ＤＮＡの修復を促進するためのＤＮＡ修復促進剤であって、損傷ＤＮＡが、ＤＮＡ損傷によって生成した修飾ヌクレオチド及び修飾ヌクレオチド残基を含むポリヌクレオチドであり、キナ抽出物を含有することを特徴とするＤＮＡ修復促進剤。
【請求項２】
線維芽細胞における損傷ＤＮＡの生成を抑制するためのＤＮＡ損傷抑制剤であって、損傷ＤＮＡが、ＤＮＡ損傷によって生成した修飾ヌクレオチド及び修飾ヌクレオチド残基を含むポリヌクレオチドであり、キナ抽出物を含有することを特徴とするＤＮＡ損傷抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＤＮＡ修復促進剤およびＤＮＡ損傷抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚が紫外線に曝されると、皮膚細胞において、ＤＮＡ損傷が引き起こされることがある。このとき、皮膚細胞のＤＮＡには、シクロブタン型ピリミジン二量体、６−４光産物などの損傷ＤＮＡが形成される。このような損傷ＤＮＡは、通常、生体のＤＮＡ修復機構によって修復されている。
【０００４】
一方、皮膚の損傷ＤＮＡの修復を促進するために、スギノリ（Ｇｉｇａｒｔｉｎａ  ｔｅｎｅｌｌａ）の抽出物を含有するＤＮＡ修復促進剤が提案されている（例えば、特許文献１参照）。また、ＤＮＡ損傷を防ぐために、サルカンドラ  グラブラ（Ｓａｒｃａｎｄｒａ  ｇｌａｂｒａ）、サラカ  ディベス（Ｓａｒａｃａ  ｄｉｖｅｓ）、クドラニア  プベセンス（Ｃｕｄｒａｎｉａ  ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ）、タキソディウム  ディスティチュム（Ｔａｘｏｄｉｕｍ  ｄｉｓｔｉｃｈｕｍ）、ルビジア  オクトバリス（Ｌｕｄｗｉｇｉａ  ｏｃｔｏｖａｌｉｓ）、ドイチャンタス  トンキネンシス（Ｄｅｕｔｚｉａｎｔｈｕｓ  ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ）、アルコルネア  トレビオイデス（Ａｌｃｈｏｒｎｅａ  ｔｒｅｗｉｏｉｄｅｓ）、ベルケミア  ポリフィラ（Ｂｅｒｃｈｅｍｉａ  ｐｏｌｙｐｈｙｌｌａ）、グロチディオン  プベルム（Ｇｌｏｃｈｉｄｉｏｎ  ｐｕｂｅｒｕｍ）、ササフラス  ツム（Ｓａｓｓａｆｒａｓ  ｔｚｕｍｕ）などの植物の抽出物を含むＤＮＡ損傷抑制剤が提案されている（例えば、特許文献２参照）。
【０００５】
しかしながら、損傷ＤＮＡの修復に対する促進性および／または損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性に優れる他のＤＮＡ修復促進剤やＤＮＡ損傷抑制剤が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００６−２７３７６１号公報
【特許文献２】特開２００８−２４７８５４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、前記従来技術に鑑みてなされたものであり、損傷ＤＮＡの修復に対する促進性に優れたＤＮＡ修復促進剤を提供することを目的とする。また、本発明は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性に優れたＤＮＡ損傷抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
すなわち、本発明は、
（１）損傷ＤＮＡの修復を促進するＤＮＡ修復促進剤であって、キナ抽出物を含有することを特徴とするＤＮＡ修復促進剤、ならびに
（２）損傷ＤＮＡの生成を抑制するＤＮＡ損傷抑制剤であって、キナ抽出物、コンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、ゴボウ抽出物、オウレン抽出物、クララ抽出物、クロレラ抽出物、ラベンダー抽出物、メマツヨイグサ抽出物、バラ抽出物、アマチャヅル抽出物、エンメイソウ抽出物、オドリコソウ抽出物、カロット抽出物、シナノキ抽出物、ジユ抽出物、ハス抽出物、茶抽出物およびオクラ抽出物からなる群より選ばれた少なくとも１種の抽出物を含有することを特徴とするＤＮＡ損傷抑制剤
に関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のＤＮＡ修復促進剤は、損傷ＤＮＡの修復に対する促進性に優れるという効果を奏する。また、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性に優れるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】試験例２において、ＵＶ−Ｂ照射終了時からの経過時間とＣＰＤ残存率との関係を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
１．ＤＮＡ修復促進剤
本発明のＤＮＡ修復促進剤は、損傷ＤＮＡの修復を促進するＤＮＡ修復促進剤であって、キナ抽出物を含有することを特徴とする。
【００１２】
なお、本明細書において、「損傷ＤＮＡ」とは、ＤＮＡ損傷によって生成した修飾ヌクレオシド及び前記修飾ヌクレオシド残基を含むポリヌクレオチドをいう。前記修飾ヌクレオシド残基としては、例えば、シクロブタン型ピリミジン二量体（ＣＰＤ）、６−４光産物（６−４ＰＰ）〔例えば、ピリミジン（６−４）ピリミドン二量体等〕などが挙げられる。ＤＮＡ損傷は、例えば、紫外線、活性酸素、変異原性物質などに対して細胞の正常なＤＮＡが曝露されることなどにより起こる。
【００１３】
本発明のＤＮＡ修復促進剤は、キナ抽出物を含有しているので、損傷ＤＮＡの修復に対する優れた促進性を発現する。
【００１４】
また、前記キナ抽出物は、ヒトに対して実質的に負荷がかからないキナ植物から得られた抽出物であることから、食品、生薬などの原料として用いることができる。したがって、前記抽出物を含有する本発明のＤＮＡ修復促進剤は、ヒトに対する負荷が小さいという優れた性質を有する。
【００１５】
前記キナ抽出物は、損傷ＤＮＡの修復を促進する成分または損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。
【００１６】
前記キナ抽出物の植物原料となるキナ植物の部位としては、例えば、樹皮などが挙げられる。抽出に際しては、植物原料をそのまま用いてもよく、乾燥させて用いてもよい。また、植物原料は、粉砕して用いてもよい。抽出は、例えば、植物原料を抽出溶媒に浸漬させ、必要により加熱および／または加圧することなどにより行なうことができる。また、抽出温度および抽出時間は、抽出溶媒の種類、植物の種類、抽出物の用途などにより異なるので一概には決定することができない。
【００１７】
抽出溶媒としては、水、メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコールなどの低級アルコール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリンなどの多価アルコール、ジエチルエーテル、ジプロピルエーテルなどのエーテル類、酢酸ブチルエステル、酢酸エチルエステルなどのエステル類、アセトン、エチルメチルケトンなどのケトン類などが挙げられる。これらの抽出溶媒は、単独で用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。
【００１８】
前記キナ抽出物は、例えば、キナ属植物〔例えば、アカキナ（Ｃｉｎｃｈｏｎａ  ｓｕｃｃｉｒｕｂｒａ）〕の樹皮などを、水、エチルアルコールなどの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる。キナ抽出物は、例えば、キニジン、キニーネ、シンコニンなどを含有している。本発明においては、キナ抽出物として、市販のキナ抽出物を用いてもよい。
【００１９】
本発明のＤＮＡ修復促進剤は、乾燥状態のキナ抽出物などのように前記キナ抽出物以外の物質などを含まない剤型であってもよく、精製水、緩衝液などの溶媒に前記乾燥状態のキナ抽出物を混合した液剤の剤型であってもよい。
【００２０】
本発明のＤＮＡ修復促進剤が前記液剤である場合、前記ＤＮＡ修復促進剤中における前記乾燥状態のキナ抽出物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ修復促進剤中における前記乾燥状態のキナ抽出物の含有量は、損傷ＤＮＡの修復に対する促進性を十分に確保する観点から、０．００００３質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、３質量％以下が好ましく、０．３質量％以下がより好ましい。
【００２１】
本発明のＤＮＡ修復促進剤は、必要により、例えば、キナ抽出物による損傷ＤＮＡの修復に対する促進性を発現するための助剤などを含有していてもよい。
【００２２】
本明細書において、損傷ＤＮＡの修復に対する促進性は、例えば、本発明のＤＮＡ修復促進剤と接触させていない細胞（例えば、対照と接触させた細胞）における損傷ＤＮＡの減少速度に対して、損傷ＤＮＡの修復に対するより高い促進性を確保する観点から、対照と接触させた細胞における損傷ＤＮＡの減少速度を１００としたときに、損傷ＤＮＡの減少速度が１１０以上、好ましくは、１５０以上、より好ましくは２００以上となるように、損傷ＤＮＡの修復を促進することをいう。
【００２３】
前記損傷ＤＮＡの減少速度は、例えば、本発明のＤＮＡ修復促進剤または対照を細胞群と接触させ、得られた処理細胞中における損傷ＤＮＡの量を経時的に定量し、単位時間あたりの損傷ＤＮＡの量の変化量を算出することによって求めることができる。
【００２４】
なお、損傷ＤＮＡの量は、例えば、（Ａ）細胞群を固定して固定細胞群を得るステップ、
（Ｂ）前記ステップ（Ａ）で得られた固定細胞群の細胞にＤＮＡ変性処理を施し、処理細胞群を得るステップ、
（Ｃ）前記ステップ（Ｂ）で得られた処理細胞群と、抗損傷ＤＮＡ抗体と、前記抗損傷ＤＮＡ抗体に特異的に結合し、かつ蛍光を発する抗体検出試薬と、前記細胞群の細胞に結合し、かつ蛍光を発する細胞染色試薬とを混合して、前記細胞中の損傷ＤＮＡと前記抗損傷ＤＮＡ抗体とを抗原抗体反応させるとともに前記細胞と前記細胞染色試薬と結合させるステップ、
（Ｄ）前記ステップ（Ｃ）で得られた混合物中の抗損傷ＤＮＡ抗体に結合した抗体検出試薬から放出される蛍光の強度及び細胞に結合した細胞染色試薬から放出される蛍光の強度を測定するステップ、および
（Ｅ）前記ステップ（Ｄ）で測定された細胞染色試薬から放出される蛍光の強度によって、前記ステップ（Ｄ）で測定された抗体検出試薬から放出される蛍光の強度を正規化し、正規化された蛍光強度から損傷ＤＮＡの量を算出するステップ
を含む定量方法により求めることができる。
【００２５】
損傷ＤＮＡの修復を促進する対象物との接触時における本発明のＤＮＡ修復促進剤の使用量は、本発明のＤＮＡ修復促進剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ修復抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００２６】
本発明のＤＮＡ修復促進剤は、損傷ＤＮＡの修復を促進することができるため、例えば、ヒトの組織中の損傷ＤＮＡを低減して損傷ＤＮＡに起因する組織状態などを改善または予防する用途に有用である。
【００２７】
２．ＤＮＡ損傷抑制剤
本発明のＤＮＡ損傷抑制剤は、損傷ＤＮＡの生成を抑制するＤＮＡ損傷抑制剤であって、キナ抽出物、コンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、ゴボウ抽出物、オウレン抽出物、クララ抽出物、クロレラ抽出物、ラベンダー抽出物、メマツヨイグサ抽出物、バラ抽出物、アマチャヅル抽出物、エンメイソウ抽出物、オドリコソウ抽出物、カロット抽出物、シナノキ抽出物、ジユ抽出物、ハス抽出物、緑茶抽出物およびオクラ抽出物からなる群より選ばれた少なくとも１種の抽出物を含有することを特徴とする。
【００２８】
本発明のＤＮＡ損傷抑制剤は、前記抽出物を含有しているので、損傷ＤＮＡの生成に対する優れた抑制性を発現する。
【００２９】
また、前記抽出物は、ヒトに対して実質的に負荷がかからない植物から得られた抽出物であることから、食品、生薬などの原料として用いることができる。したがって、前記抽出物を含有する本発明のＤＮＡ修復促進剤は、ヒトに対する負荷が小さいという優れた性質を有する。
【００３０】
前記抽出物は、キナ（キナ属植物）、コンフリー、コーヒーノキ（コーヒーノキ属植物）、カッコン（くず）、ゴボウ、オウレン、クララ、クロレラ、ラベンダー、メマツヨイグサ、バラ、アマチャヅル、エンメイソウ、オドリコソウ、カロット（オタネニンジン）、シナノキ（ボダイジュ）、ジユ（ワレモコウ）、ハス、茶およびオクラからなる群より選ばれた少なくとも１種から得られる抽出物である。
【００３１】
抽出物の植物原料となる植物の部位としては、例えば、葉、花、種子、根、茎、芽などが挙げられる。抽出に際しては、植物原料をそのまま用いてもよく、乾燥させて用いてもよい。また、植物原料は、粉砕して用いてもよい。抽出は、例えば、植物原料を抽出溶媒に浸漬させ、必要により加熱および／または加圧することなどにより行なうことができる。また、抽出温度および抽出時間は、抽出溶媒の種類、植物の種類、抽出物の用途などにより異なるので一概には決定することができない。
【００３２】
抽出溶媒としては、水、メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコールなどの低級アルコール、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリンなどの多価アルコール、ジエチルエーテル、ジプロピルエーテルなどのエーテル類、酢酸ブチルエステル、酢酸エチルエステルなどのエステル類、アセトン、エチルメチルケトンなどのケトン類などが挙げられる。これらの抽出溶媒は、単独で用いてもよく、２種以上を混合して用いてもよい。
【００３３】
キナ抽出物は、前記ＤＮＡ修復促進剤に用いられるキナ抽出物と同様である。
【００３４】
コンフリー抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。コンフリー抽出物は、例えば、コンフリーの葉、根などを、水、エチルアルコール、イソブチルアルコールなどの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。コンフリー抽出物は、例えば、アライントン、コムソリジン、ロスマリン酸、パントテン酸、タンニン、ニコチン酸などを含有している。本発明においては、コンフリー抽出物として、市販のコンフリー抽出物を用いてもよい。
【００３５】
コーヒーノキ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。コーヒーノキ抽出物は、コーヒーノキ属植物の種子などを、アスコルビン酸酸性水溶液、クエン酸酸性水溶液などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。コーヒーノキ抽出物は、例えば、クロロゲン酸、ポリフェノールなどを含有している。本発明においては、コーヒーノキ抽出物として、市販のコーヒーノキ抽出物を用いてもよい。
【００３６】
カッコン抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。カッコン抽出物は、例えば、くずの根を、１，３−ブチレングリコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。カッコン抽出物は、例えば、イソフラボン配糖体、サポニンなどを含有している。本発明においては、カッコン抽出物として、市販のカッコン抽出物を用いてもよい。
【００３７】
ゴボウ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。ゴボウ抽出物は、例えば、ゴボウの根などを、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。ゴボウ抽出物は、例えば、イヌリン、タンニン、多糖類などを含有している。本発明においては、ゴボウ抽出物として、市販のゴボウ抽出物を用いてもよい。
【００３８】
オウレン抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。オウレン抽出物は、例えば、オウレンの根茎などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。オウレン抽出物は、例えば、ベルベリン、オーレニン、パルマチンなどを含有している。本発明においては、オウレン抽出物として、市販のオウレン抽出物を用いてもよい。
【００３９】
クララ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。クララ抽出物は、例えば、クララの根などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。クララ抽出物は、例えば、マトリン、オキシマトリン、トリホリルヒジンなどを含有している。本発明においては、クララ抽出物として、市販のクララ抽出物を用いてもよい。
【００４０】
クロレラ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。クロレラ抽出物は、例えば、クロレラの藻体を、１，３−ブチレングリコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。クロレラ抽出物は、例えば、糖タンパク質、核酸関連物質、多糖類などを含有している。本発明においては、クロレラ抽出物として、市販のクロレラ抽出物を用いてもよい。
【００４１】
ラベンダー抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。ラベンダー抽出物は、例えば、ラベンダーの花などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。ラベンダー抽出物は、例えば、タンニン、リナロール、リモネンなどを含有している。本発明においては、ラベンダー抽出物として、市販のラベンダー抽出物を用いてもよい。
【００４２】
メマツヨイグサ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。メマツヨイグサ抽出物は、例えば、メマツヨイグサの種子などを、１，３−ブチレングリコールなどの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。メマツヨイグサ抽出物は、例えば、ポリフェノールなどを含有している。本発明においては、メマツヨイグサ抽出物として、市販のメマツヨイグサ抽出物を用いてもよい。
【００４３】
バラ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。バラ抽出物は、例えば、バラ属植物の花びらなどを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。バラ抽出物は、例えば、オイゲニンなどを含有している。本発明においては、バラ抽出物として、市販のバラ抽出物を用いてもよい。
【００４４】
アマチャヅル抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。アマチャヅル抽出物は、例えば、アマチャヅル属植物の葉、全草などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。アマチャヅル抽出物は、例えば、サポニンなどを含有している。本発明においては、アマチャヅル抽出物として、市販のアマチャヅル抽出物を用いてもよい。
【００４５】
エンメイソウ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。エンメイソウ抽出物は、例えば、エンメイソウの葉などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。エンメイソウ抽出物は、例えば、エンメイン、イソドカルピン、ノドシン、オリニドンなどを含有している。本発明においては、エンメイソウ抽出物として、市販のエンメイソウ抽出物を用いてもよい。
【００４６】
オドリコソウ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。オドリコソウ抽出物は、例えば、オドリコソウの花、茎、葉などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。オドリコソウ抽出物は、例えば、タンニン、フラボノイドなどを含有している。本発明においては、オドリコソウ抽出物として、市販のオドリコソウ抽出物を用いてもよい。
【００４７】
カロット抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。カロット抽出物は、例えば、オタネニンジンの根などを、プロピレングリコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。カロット抽出物は、例えば、ビタミン、リンゴ酸、アミノ酸またはその誘導体、糖類、ペクチン、レシチンなどを含有している。本発明においては、カロット抽出物として、市販のカロット抽出物を用いてもよい。
【００４８】
シナノキ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。シナノキ抽出物は、例えば、ボダイジュの花、葉などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。シナノキ抽出物は、例えば、タンニン、フラボノイドなどを含有している。本発明においては、シナノキ抽出物として、市販のシナノキ抽出物を用いてもよい。
【００４９】
ジユ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。ジユ抽出物は、例えば、ワレモコウの根、根茎などを、１，３−ブチレングリコール、エチルアルコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。ジユ抽出物は、例えば、タンニン、サポニンなどを含有している。本発明においては、ジユ抽出物として、市販のジユ抽出物を用いてもよい。
【００５０】
ハス抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。ハス抽出物は、例えば、ハスの葉、胚芽などを、１，３−ブチレングリコール、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。ハス抽出物は、例えば、デメチルコクラウリン、ヌシフェリンなどを含有している。本発明においては、ハス抽出物として、市販のハス抽出物を用いてもよい。
【００５１】
茶抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制用する成分である。茶抽出物は、例えば、チャの葉などを、水、酸性水溶液、エチルアルコール、エチルアルコール水溶液、メチルアルコール、メチルアルコール水溶液、アセトン、酢酸エチルエステル、グリセリン水溶液などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。茶抽出物は、例えば、カテキン、テアニン、タンニンなどを含有している。本発明においては、茶抽出物として、市販の茶抽出物を用いてもよい。
【００５２】
オクラ抽出物は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する成分である。オクラ抽出物は、例えば、オクラの果実、種子などを、水などの抽出溶媒を用いて抽出することによって得られる抽出物である。オクラ抽出物は、例えば、多糖類などを含有している。本発明においては、オクラ抽出物として、市販のオクラ抽出物を用いてもよい。
【００５３】
なお、本発明の目的が阻害されない範囲内で、前記抽出溶媒として、他の溶媒を用いてもよい。
【００５４】
本発明のＤＮＡ損傷抑制剤に用いられる抽出物のなかでは、損傷ＤＮＡの生成に対するより高い抑制性を確保する観点からコンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、クララ抽出物、クロレラ抽出物、ラベンダー抽出物、メマツヨイグサ抽出物、バラ抽出物、アマチャヅル抽出物、エンメイソウ抽出物、オドリコソウ抽出物、カロット抽出物、シナノキ抽出物、ジユ抽出物、ハス抽出物、茶抽出物、オクラ抽出液が好ましく、コンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、クララ抽出物、クロレラ抽出物、メマツヨイグサ抽出物、エンメイソウ抽出物、ジユ抽出物、ハス抽出物、茶抽出物、オクラ抽出物がより好ましく、コンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、ハス抽出物、オクラ抽出物が特に好ましい。
【００５５】
本発明のＤＮＡ修復促進剤は、前記抽出物の乾燥物などのように前記抽出物以外の物質などを含まない剤型であってもよく、精製水、緩衝液などの溶媒に前記抽出物の乾燥物を混合した液剤の剤型であってもよい。
【００５６】
本発明のＤＮＡ修復促進剤が前記液剤である場合、前記ＤＮＡ修復促進剤中における前記抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの修復に対する促進性を十分に発現させる観点から、０．０００００１質量％以上が好ましく、０．０００００３質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、５質量％以下が好ましく、３質量％以下がより好ましい。
【００５７】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がキナ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のキナ抽出物中におけるキナ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記キナ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００３質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、３質量％以下が好ましく、０．３質量％以下がより好ましい。なお、キナ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００５８】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がコンフリー抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のコンフリー抽出物中におけるコンフリー抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記コンフリー抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１５質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１．５質量％以下が好ましく、０．１５質量％以下がより好ましい。なお、コンフリー抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００５９】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がコーヒーノキ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のコーヒーノキ抽出物中におけるコーヒーノキ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記コーヒーノキ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００６質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．６質量％以下が好ましく、０．０６質量％以下がより好ましい。なお、コーヒーノキ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６０】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がカッコン抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のカッコン抽出物中におけるカッコン抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記カッコン抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００３質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．３質量％以下が好ましく、０．０３質量％以下がより好ましい。なお、カッコン抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６１】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がゴボウ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のゴボウ抽出物中におけるゴボウ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記ゴボウ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１．１質量％以下が好ましく、０．１１質量％以下がより好ましい。なお、ゴボウ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６２】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がオウレン抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のオウレン抽出物中におけるオウレン抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記オウレン抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００５質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．５質量％以下が好ましく、０．０５質量％以下がより好ましい。なお、オウレン抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６３】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がクララ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のクララ抽出物中におけるクララ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記クララ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１質量％以下が好ましく、０．１質量％以下がより好ましい。なお、クララ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６４】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がクロレラ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のクロレラ抽出物中におけるクロレラ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記クロレラ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００３５質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．３５質量％以下が好ましく、０．０３５質量％以下がより好ましい。なお、クロレラ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６５】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がラベンダー抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のラベンダー抽出物中におけるラベンダー抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記ラベンダー抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００３５質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．３５質量％以下が好ましく、０．０３５質量％以下がより好ましい。なお、ラベンダー抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６６】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がメマツヨイグサ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のメマツヨイグサ抽出物中におけるメマツヨイグサ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記メマツヨイグサ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１質量％以下が好ましく、０．１質量％以下がより好ましい。なお、メマツヨイグサ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６７】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がバラ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のバラ抽出物中におけるバラ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記バラ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１質量％以下が好ましく、０．１質量％以下がより好ましい。なお、バラ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６８】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がアマチャヅル抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のアマチャヅル抽出物中におけるアマチャヅル抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記アマチャヅル抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００５質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．５質量％以下が好ましく、０．０５質量％以下がより好ましい。なお、アマチャヅル抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００６９】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がエンメイソウ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のエンメイソウ抽出物中におけるエンメイソウ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記エンメイソウ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００８質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．８質量％以下が好ましく、０．０８質量％以下がより好ましい。なお、エンメイソウ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７０】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がオドリコソウ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のオドリコソウ抽出物中におけるオドリコソウ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記オドリコソウ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１質量％以下が好ましく、０．１質量％以下がより好ましい。なお、オドリコソウ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７１】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がカロット抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のカロット抽出物中におけるカロット抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記カロット抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００７５質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．７５質量％以下が好ましく、０．０７５質量％以下がより好ましい。なお、カロット抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７２】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がシナノキ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のシナノキ抽出物中におけるシナノキ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記シナノキ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１質量％以下が好ましく、０．１質量％以下がより好ましい。なお、シナノキ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７３】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がジユ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のジユ抽出物中におけるジユ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記ジユ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１質量％以下が好ましく、０．１質量％以下がより好ましい。なお、ジユ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７４】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がハス抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のハス抽出物中におけるハス抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記ハス抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１質量％以上が好ましく、０．０００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１質量％以下が好ましく、０．１質量％以下がより好ましい。なお、ハス抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７５】
本発明のＤＮＡ修復促進剤が茶抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中の茶抽出物中における茶抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記茶抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．００００１６質量％以上が好ましく、０．０００１６質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、１．６質量％以下が好ましく、０．１６質量％以下がより好ましい。なお、茶抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７６】
本発明のＤＮＡ修復促進剤がオクラ抽出物を含む前記液剤である場合、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中のオクラ抽出物中におけるオクラ抽出物の乾燥物の含有量は、当該ＤＮＡ修復促進剤の用途によって異なるので、一概には決定することができないため、ＤＮＡ損傷抑制剤の用途などに応じて適宜設定することが好ましい。通常、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤中における前記オクラ抽出物の乾燥物の含有量は、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を十分に発現させる観点から、０．０００００３５質量％以上が好ましく、０．００００１質量％以上がより好ましく、使用時における取り扱いの容易性の観点から、０．３５質量％以下が好ましく、０．０３５質量％以下がより好ましい。なお、オクラ抽出物を含有するＤＮＡ損傷抑制剤を用いる場合、損傷ＤＮＡの生成を抑制する対象物との接触時の使用量は、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて異なるので一概に決定することができないことから、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤の用途に応じて適宜設定することが好ましい。
【００７７】
本発明のＤＮＡ損傷抑制剤は、必要により、例えば、前記抽出物による損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性を発現するための助剤などを含有していてもよい。
【００７８】
本明細書において、損傷ＤＮＡの生成に対する抑制性は、例えば、本発明のＤＮＡ損傷抑制剤と接触させていない細胞（例えば、対照と接触させた細胞）における損傷ＤＮＡの量（モル数）を１００としたときに、損傷ＤＮＡの生成に対するより高い抑制性を確保する観点から、損傷ＤＮＡの量（モル数）が少なくとも９０、好ましくは８０以下、より好ましくは７０以下となるように、損傷ＤＮＡの生成を抑制することをいう。
【００７９】
本発明のＤＮＡ損傷抑制剤は、損傷ＤＮＡの生成を抑制することができるため、例えば、ヒトの組織中の損傷ＤＮＡを低減して損傷ＤＮＡに起因する組織状態を改善または予防する用途に有用である。
【実施例】
【００８０】
以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明は、かかる実施例に限定されるものではない。
【００８１】
（試験例１）
９６ウェルプレート〔ナルジェ  ヌンク  インターナショナル（株）製、商品名：９６穴マイクロプレート（平底）〕の各ウェル中の培地〔和光純薬工業（株）製、商品名：Ｄ−ＭＥＭ〕１００μＬに、１×１０4細胞の正常ヒト線維芽細胞を播種した。その後、線維芽細胞が播種された９６ウェルプレートを、二酸化炭素濃度：５体積％及び３７℃に保たれたＣＯ2インキュベータに入れ、１日間インキュベーションした。
【００８２】
つぎに、培養後の線維芽細胞が入った９６ウェルプレートの各ウェルに、培地〔和光純薬工業（株）製、商品名：Ｄ−ＭＥＭ〕１００μＬをさらに添加し、培地添加後の９６ウェルプレートを、前記と同様にして、１００％コンフルエンシーの状態になるように１日間インキュベーションした。
【００８３】
その後、培養後の細胞が入った９６ウェルプレートの各ウェルから培地を除去し、各ウェル中の細胞を生理的食塩水１００μＬで２回洗浄した。
【００８４】
洗浄後の細胞に対して、培地表面より２８〜４０ｃｍ離れた上方位置から４０ｍＪ／ｍ2のＵＶ−Ｃを照射したときにＤＮＡ中に生じる損傷ＤＮＡの量と同量の損傷ＤＮＡを生じさせる相当量のＵＶ−Ｂを照射した。
【００８５】
ＵＶ−Ｂの照射後の線維芽細胞が入った９６ウェルプレートに、被験試料含有培地を添加し、二酸化炭素濃度：５体積％及び３７℃に保たれたＣＯ2インキュベータに入れ、インキュベーションした。なお、被験試料として、約１５０種類の植物由来抽出物それぞれを用いた。被験試料含有培地中における被験試料の濃度は、１質量％である。
【００８６】
つぎに、細胞固定液〔メチルアルコール−アセトン混合溶媒（メチルアルコール／アセトン（体積比）＝１／１）、−２０℃〕１００μＬを、前記９６ウェルプレートのウェルに加え、この９６ウェルプレートを室温で１０分間放置することにより、ウェル中の線維芽細胞の固定を行なった。
【００８７】
その後、前記９６ウェルプレートの各ウェルを、洗浄液（組成：１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水）で２回洗浄し、さらに超純水で１回洗浄した。
【００８８】
洗浄後の９６ウェルプレートの各ウェル中に、２Ｍ塩酸水溶液１００μＬを加え、この９６ウェルプレートを３０分間室温で放置することにより、ＤＮＡ変性処理を行なった。
【００８９】
その後、前記９６ウェルプレートの各ウェルを、洗浄液（組成：１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水）で３回洗浄した。
【００９０】
洗浄後の９６ウェルプレートの各ウェルに、ブロッキング溶液（１質量％スキムミルクを含むリン酸緩衝化生理的食塩水）１５０μＬを添加した後、この９６ウェルプレートを３７℃で３０分間静置して、ブロッキングを行なった。
【００９１】
その後、前記９６ウェルプレートの各ウェルを、洗浄液（組成：１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水）で３回洗浄した。
【００９２】
洗浄後の９６ウェルプレートの各ウェルに、一次抗体として抗ＣＰＤ抗体を含む一次抗体溶液の２００倍希釈物〔一次抗体濃度（タンパク質濃度基準）：８８．５μｇ／１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水１ｍＬ〕４０μＬを入れた後、この９６ウェルプレートを３７℃で６０分間静置した。なお、前記抗ＣＰＤ抗体として、市販の抗ＣＰＤ抗体〔コスモバイオ（株）製、商品名：Ａｎｔｉ−Ｃｙｃｌｏｂｕｔａｎｅ  ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ  ｄｉｍｍｅｒｓ（ＣＰＤｓ）、コード番号：ＮＭＤＮＤ００１〕を産生するハイブリドーマであるｃｌｏｎｅ  ＴＤＭ−２を用いて、文献［森俊雄ら、「紫外線照射ＤＮＡで免疫した同じマウス由来のシクロブタンピリミジンダイマー特異的または（６−４）光産物特異的モノクローナル抗体の同時樹立〔Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｆｏｒ  ｅｉｔｈｅｒ  ｃｙｃｌｏｂｕｔａｎｅ  ｐｙｒｉｍｉｄｉｎｅ  ｄｉｍｅｒ  ｏｒ  （６−４）  ｐｈｏｔｏｐｒｏｄｕｃｔ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ｓａｍｅ  ｍｏｕｓｅ  ｉｍｍｕｎｉｚｅｄ  ｗｉｔｈ  ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ−ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ  ＤＮＡ．〕」、フォトケミストリー・アンド・フォトケミストリー（Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ．Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．）、第５４巻、ｐ．２２５−２３２、および松永司ら、「（６−４）光産物のＤｅｗａｒアイソマーを認識するモノクローナル抗体の樹立およびキャラクタリゼーション〔Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｄｅｗａｒ  ｉｓｏｍｅｒｓ  ｏｆ  （６−４）  ｐｈｏｔｏｐｒｏｄｕｃｔｓ．〕」、フォトケミストリー・アンド・フォトケミストリー、第57巻、ｐ．９３４−９４０］に記載の製造方法と同様に製造され、かつ前記市販の抗ＣＰＤ抗体と同じ性質を示す抗体（ＴＤＭ−２）を用いた。
【００９３】
静置後の９６ウェルプレートを、洗浄液（組成：１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水）で３回洗浄した。
【００９４】
洗浄後の９６ウェルプレートの各ウェルに、二次抗体としてビオチン標識抗マウスＩｇＧ抗体〔インビトロジェン（株）製、商品名：Ｂｉｏｔｉｎ−Ｇｏａｔ  Ｆ（ａｂ’）２  ａｎｔｉ-ｍｏｕｓｅ  ＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（カタログ番号６２−６３４０）〕を含む二次抗体溶液の２００倍希釈物〔二次抗体濃度（タンパク質濃度基準）：２．０μｇ／１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水１ｍＬ〕の種々の希釈物４０μＬを入れた後、この９６ウェルプレートを３７℃で３０分間静置した。
【００９５】
その後、前記９６ウェルプレートの各ウェルを、洗浄液（組成：１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水）１００μＬで３回洗浄した。
【００９６】
標識ストレプトアビジン（ＬＩ−ＣＯＲバイオサイエンシス社製、商品名：ＩＲＤｙｅ  ８００ＣＷ  Ｌａｂｅｌｅｄ  Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ）を含む三次試薬である標識ストレプトアビジン溶液（標識ストレプトアビジン濃度：１．０ｍｇ／ｍＬ）に対して、かかる標識ストレプトアビジン溶液における標識ストレプトアビジン濃度が１／２５００倍の濃度となるように、前記細胞染色試薬（ＬＩ−ＣＯＲバイオサイエンシス社製、商品名：Ｓａｐｐｈｉｒｅ７００  Ｓｔａｉｎを１／１０００濃度となるように１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水で希釈した希釈物）を添加し、混合物を得た。つぎに、前記洗浄後の９６ウェルプレートの各ウェルに、前記混合物５０μＬを加え、この９６ウェルプレートを、３７℃で３０分間静置した。
【００９７】
その後、前記９６ウェルプレートの各ウェルを、洗浄液（組成：１０ｍＭリン酸緩衝化生理的食塩水）１００μＬで３回洗浄した。
【００９８】
洗浄後の９６ウェルプレートの各ウェル中の混合物の波長６８０ｎｍ及び７８０ｎｍそれぞれでの蛍光強度を測定した。なお、ＵＶ−Ｂが照射された線維芽細胞に代えて、対照用の線維芽細胞ＮＨＦを用いたことを除き、前記と同様の操作を行ない、ウェル中の混合物の波長６８０ｎｍ及び７８０ｎｍそれぞれでの蛍光強度を測定した。また、ＵＶ−Ｂの照射後の細胞が入った９６ウェルプレートをインキュベーションした後、ウェルに前記細胞固定液を加えたことに代えて、ＵＶ−Ｂの照射直後の細胞が入った９６ウェルプレートのウェルに前記細胞固定液を加えたことを除き、前記と同様の操作を行ない、ウェル中の混合物の波長６８０ｎｍ及び７８０ｎｍそれぞれでの蛍光強度を測定した。そして、紫外線として、ＵＶ−Ｂを照射した場合の波長７８０ｎｍでの蛍光強度の値からＵＶ−Ｂ非照射の場合の波長７８０ｎｍでの蛍光強度の値を差し引いた値を算出した。さらに、各ウェルの励起波長６８０ｎｍにおける細胞染色試薬に基づく蛍光強度によって、各ウェルの励起波長７８０ｎｍにおける標識ストレプトアビジンの標識物質に基づく蛍光強度を正規化し、ウェル間の誤差を補正した。その後、予め作成しておいた検量線に基づいて、ＣＰＤ量を算出した。
【００９９】
ＵＶ−Ｂの照射直後の線維芽細胞のＤＮＡ中のＣＰＤ量を１００として、ＵＶ−Ｂの照射終了時から所定時間経過したときのＣＰＤ残存率を求めた。そして、被験試料として用いた約１５０種類の植物由来抽出物のなかから、ＵＶ−Ｂ照射終了直後における線維芽細胞のＤＮＡ中のＣＰＤ量を低減させる被験試料をＤＮＡ損傷修復促進剤の候補としてスクリーニングした。
【０１００】
その結果、キナ抽出物〔丸善製薬（株）製、商品名：キナ抽出液ＢＧ〕がＤＮＡ損傷修復促進剤の候補として得られた。
【０１０１】
（実施例１）
培地〔和光純薬工業（株）製、商品名：Ｄ−ＭＥＭ〕に、被験試料としてキナ抽出物〔丸善製薬（株）製、商品名：キナ抽出液ＢＧ、キナ抽出物の組成：植物由来抽出物（乾燥物）３質量％、１，３−ブチレングリコール４８．５質量％、精製水４８．５質量％〕を添加して、実施例１の被験試料含有培地を得た。なお、被験試料含有培地中のキナ抽出物の濃度が０．０１質量％、０．１質量％または１質量％となるように調整した。
【０１０２】
（試験例２）
試験例１において、被験試料含有培地として、実施例１の被験試料含有培地を用い、試験例１と同様の操作を行ない、ＣＰＤ量を算出した。
【０１０３】
また、ＵＶ−Ｂの照射後の線維芽細胞が入った９６ウェルプレートに、被験試料含有培地を添加する代わりに、培地〔和光純薬工業（株）製、商品名：Ｄ−ＭＥＭ〕を対照培地として添加したことを除き、前記と同様の操作を行ない、ＣＰＤ量を算出した。
【０１０４】
ＵＶ−Ｂの照射直後の線維芽細胞のＤＮＡ中のＣＰＤ量を１００として、ＵＶ−Ｂの照射終了時から所定時間経過したときのＣＰＤ残存率を求めた。
【０１０５】
試験例２において、ＵＶ−Ｂ照射終了時からの経過時間とＣＰＤ残存率との関係を図１に示す。なお、図１は、被験試料の濃度が１質量％である被験試料含有培地を用いた場合の結果を代表例として示す。図中、黒丸は実施例１の被験試料含有培地で培養した場合の線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率、白四角は対照培地で培養した場合の線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率を示す。
【０１０６】
図１に示された結果から、ＵＶ−Ｂ照射終了時からの８時間経過後および２４時間経過後のいずれの場合においても、対照培地で培養した場合の線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率と比べて、実施例１の被験試料含有培地で培養した場合の線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率が低くなっていることがわかる。
【０１０７】
つぎに、実施例１の被験試料含有培地で培養した場合のＵＶ−Ｂの照射直後の線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率および実施例１の被験試料含有培地で培養した場合のＵＶ−Ｂの照射終了時から所定時間経過した線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率を用いて、修復速度を算出した。また、対照培地で培養した場合のＵＶ−Ｂの照射直後の線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率および対照培地で培養した場合のＵＶ−Ｂの照射終了時から所定時間経過した線維芽細胞のＤＮＡのＣＰＤ残存率を用いて、修復速度を算出した。その後、実施例１の被験試料含有培地で培養した場合の線維芽細胞における損傷ＤＮＡの修復速度と、対照培地で培養した場合の線維芽細胞における損傷ＤＮＡの修復速度とを比較した。
【０１０８】
その結果、キナ抽出物含有培地でＵＶ−Ｂの照射後の線維芽細胞を培養した場合、対照培地でＵＶ−Ｂの照射後の線維芽細胞を培養した場合と比べて、ＣＰＤ量の減少速度が高くなっていることがわかる。したがって、かかる結果から、キナ抽出物は、損傷ＤＮＡの修復を促進する性質を有していることから、損傷ＤＮＡの修復を促進するＤＮＡ修復促進剤として有用であることがわかる。
【０１０９】
以上の結果から、キナ抽出物が損傷ＤＮＡの修復を促進することから、当該キナ抽出物を含有するＤＮＡ修復促進剤は、損傷ＤＮＡに起因する皮膚状態を改善するための紫外線刺激抑制剤に有用であることが示唆される。
【０１１０】
（実施例２〜２０、比較例１〜３）
培地〔和光純薬工業（株）製、商品名：Ｄ−ＭＥＭ〕に、被験試料として表１に示される植物由来抽出物を添加し、実施例２〜２０、比較例１〜３の被験試料含有培地を得た。なお、各植物由来抽出物の組成を表２に示す。各実施例および各比較例において、被験試料含有培地中の被験試料の濃度が０．０１質量％、０．１質量％または１質量％となるように調整した。
【０１１１】
【表１】
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【０１１２】
【表２】
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【０１１３】
（試験例３）
（１）ＤＮＡ中のＣＰＤ量に基づく被験試料の評価
試験例１において、実施例１〜２０、比較例１〜３の被験試料含有培地を用い、ＵＶ−Ｂ照射終了時からの培養時間を０時間、８時間または２４時間としたことを除き、試験例１と同様の操作を行ない、ＤＮＡ中のＣＰＤ量を算出した。また、対照として、培地〔和光純薬工業（株）製、商品名：Ｄ−ＭＥＭ〕を用いたことを除いて、前記と同様の操作を行ない、ＤＮＡ中のＣＰＤ量を算出した。
【０１１４】
つぎに、表３に示される実験番号１〜９の各評価ポイントについて、対照の培地で培養した線維芽細胞のＤＮＡ中のＣＰＤ量を１００として、対照におけるＤＮＡ中のＣＰＤ量に対する被験試料試料含有培地で培養した線維芽細胞のＤＮＡ中のＣＰＤ量の割合を算出した。
【０１１５】
【表３】
0005553660.tif 000004
【０１１６】
前記割合に基づいて、被験試料によってＣＰＤの生成が抑制されているかどうかを評価した。評価基準は、以下のとおりである。
【０１１７】
＜評価基準＞
○：全評価ポイントのうちの１／３以上の評価ポイントにおいて、前記割合が９０以下である。
×：前記○の評価基準を満たさないものである。
【０１１８】
被験試料によってＣＰＤの生成が抑制されているかどうかを評価した結果を表４に示す。
【０１１９】
（２）ＤＮＡ中の６−４ＰＰの量に基づく被験試料の評価
前記（１）において、ＵＶ−Ｂの照射量を、１６０ｍＪ／ｍ2のＵＶ−Ｃを照射したときにＤＮＡ中に生じる損傷ＤＮＡの量と同量の損傷ＤＮＡを生じさせる相当量としたことおよび抗ＣＰＤ抗体を含む一次抗体溶液の２００倍希釈物に代えて、ＤＮＡ中の損傷ＤＮＡ内に存在する６−４光産物部分に対する抗体（以下、「抗６−４ＰＰ抗体」という）を含む一次抗体溶液の２００倍希釈物を用いたことを除き、試験例１と同様の操作を行ない、ＤＮＡ中の６−４ＰＰの量を算出した。
【０１２０】
つぎに、表３に示される実験番号１〜９の各評価ポイントについて、対照の培地で培養した線維芽細胞のＤＮＡ中の６−４ＰＰ量を１００として、対照におけるＤＮＡ中の６−４ＰＰ量に対する被験試料を含む培地で培養した線維芽細胞のＤＮＡ中の６−４ＰＰ量の割合を算出した。前記割合に基づいて、被験試料によって６−４ＰＰの生成が抑制されているかどうかを評価した。評価基準は、以下のとおりである。
【０１２１】
＜評価基準＞
○：全評価ポイントのうちの１／３以上の評価ポイントにおいて、前記割合が９０以下である。
×：前記○の評価基準を満たさないものである。
【０１２２】
被験試料によって６−４ＰＰの生成が抑制されているかどうかを評価した結果を表４に示す。
【０１２３】
（３）被験試料のＤＮＡ損傷抑制効果の評価
前記（１）における評価結果および前記（２）における評価結果から、被験試料が損傷ＤＮＡの生成を抑制する効果（ＤＮＡ損傷抑制効果）を示すかどうかを評価した。評価基準は、以下のとおりである。
【０１２４】
＜評価基準＞
○：前記（１）における評価結果および前記（２）における評価結果の両方またはいずれかが○であり、被験試料がＤＮＡ損傷抑制効果を示す。
×：前記（１）における評価結果および前記（２）における評価結果の両方が×であり、被験試料がＤＮＡ損傷抑制効果を示さない。
【０１２５】
被験試料がＤＮＡ損傷抑制効果を示すかどうかを評価した結果を表４に示す。
【０１２６】
【表４】
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【０１２７】
表２に示された結果から、実施例１〜２０の被験試料含有培地で線維芽細胞を培養した場合、当該線維芽細胞のＤＮＡ中の損傷ＤＮＡの生成が抑制されていることがわかる。したがって、かかる結果から、キナ抽出物（実施例１）、コンフリー抽出物（実施例２）、コーヒーノキ抽出物（実施例３）、カッコン抽出物（実施例４）、ゴボウ抽出物（実施例５）、オウレン抽出物（実施例６）、クララ抽出物（実施例７）、クロレラ抽出物（実施例８）、ラベンダー抽出物（実施例９）、メマツヨイグサ抽出物（実施例１０）、バラ抽出物（実施例１１）、アマチャヅル抽出物（実施例１２）、エンメイソウ抽出物（実施例１３）、オドリコソウ抽出物（実施例１４）、カロット抽出物（実施例１５）、シナノキ抽出物（実施例１６）、ジユ抽出物（実施例１７）、ハス抽出物（実施例１８）、茶抽出物（実施例１９）およびオクラ抽出物（実施例２０）は、損傷ＤＮＡの生成を抑制する性質を有するので、ＤＮＡ損傷抑制剤として有用であることがわかる。これらのなかでは、コンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、クララ抽出物、クロレラ抽出物、ラベンダー抽出物、メマツヨイグサ抽出物、バラ抽出物、アマチャヅル抽出物、エンメイソウ抽出物、オドリコソウ抽出物、カロット抽出物、シナノキ抽出物、ジユ抽出物、ハス抽出物、茶抽出物およびオクラ抽出液は、損傷ＤＮＡに対し、高い抑制性を示した。なかでも、コンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、クララ抽出物、クロレラ抽出物、メマツヨイグサ抽出物、エンメイソウ抽出物、ジユ抽出物、ハス抽出物、茶抽出物およびオクラ抽出物、これらのなかでも、特に、コンフリー抽出物、コーヒーノキ抽出物、カッコン抽出物、ハス抽出物およびオクラ抽出物それぞれによる損傷ＤＮＡに対し、より高い抑制性を示した。
【図１】
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