(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0005513126.tif 000002
を有するキサントフモールまたは
式
【化２】
0005513126.tif 000003
を有するイソキサントフモールの少なくとも一方を活性物質として含む非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）を予防および／または制御するための製剤。
【請求項２】
薬学的に許容される担体を更に含む請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
液剤、懸濁剤もしくは乳剤の形態、ナノ粒子の形態、または粉末剤もしくはゲル剤の形態である請求項１または２に記載の製剤。
【請求項４】
前記活性物質が０．０１ｍｇ／ｋｇ（人の体重）／日より大きい量で投与されることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の製剤。
【請求項５】
前記活性物質の含有量が、０．１重量％〜９９重量％であることを特徴とする請求項１〜４の少なくとも一項に記載の製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肝疾患を予防および／または制御するため、キサントフモールまたはイソキサントフモールを活性物質として使用することに関する。
【背景技術】
【０００２】
キサントフモールは、ホップに発生するプレニルフラボノイドである。種々の研究により、キサントフモールの生物学的作用が証明されている。
【０００３】
例えば、ＥＰ １ ５４３ ８３４ Ａ１（特許文献１）には、キサントフモールの抗発癌作用が記載されている。
【０００４】
キサントフモールは、強い骨吸収阻害作用を有しており、そのため骨粗鬆症を治療する薬剤として使用され得ることがＥＰ ０ ６７９ ３９３ Ｂ１(特許文献２）により知られている。
【０００５】
ＤＥ １０３ ０８ ８６４ Ａ１（特許文献３）は、特別な醸造工程により、キサントフモールを高濃度に含有することで健康増進効果が向上したビールを製造する新規な醸造方法を記載している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】欧州特許出願公開第１５４３８３４号明細書
【特許文献２】欧州特許第０６７９３９３ 号明細書
【特許文献３】西独国特許第１０３０８８６４号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、キサントフモールおよびイソキサントフモールのさらなる健康増進用途を発見することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
この目的は、肝疾患を予防および／または制御するための製剤を製造するため、キサントフモールを活性物質として使用することにより達成される。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、キサントフモールを用いる治療目的を示している。
【図２】図２は、特にＢ型およびＣ型肝炎の結果、肝臓に与えるウィルス損傷に対するキサントフモールおよび／またはイソキサントフモールの効能の概略説明図を示している。
【図３】図３は、Ｃ型肝炎に感染していない肝細胞と比較して、Ｃ型肝炎に感染した肝細胞に対するキサントフモールまたはイソキサントフモールの使用の選択的効能を示している。
【図４】図４は、正常な肝細胞（ヒト肝細胞）と比較して、肝臓癌細胞（ＨｅｐＧ２）のアポトーシス（プログラム細胞死）に関し、キサントフモールの使用の効能のグラフ図を示している。
【図５】図５は、キサントフモールの投与量の関数として、長期にわたる肝臓癌細胞（ＨｅｐＧ２）の成長の比較を示している。
【図６】図６は、肝硬変症における肝臓の瘢痕化の原因となる、自身の体の肝細胞の肝星細胞への変換を防止するため、キサントフモールを添加することの効果を示している。
【図７】図７は、肝硬変症における肝臓の瘢痕化の原因となる、自身の体の肝細胞の肝星細胞への変換を防止するため、キサントフモールを添加することの効果を示している。
【図８】図８は、キサントフモールの投与量を増加させることによる既存の活性化肝星細胞への効果を示している。
【図９】図９は、キサントフモールの投与量が活性化肝星細胞の成長に及ぼす影響を示している。
【図１０】図１０は、キサントフモールを純粋な形（＞９８％）あるいはキサントフモールが６０％の割合で存在している形態で投与した後の肝臓癌細胞の生存期間（増殖）の比較を示している。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
上記目的はさらに、肝疾患を予防および／または制御するための製剤を製造するため、イソキサントフモールを活性物質として使用することにより達成される。
【００１１】
請求項に記載されている使用は、天然の活性物質を用いて肝疾患を予防し、治療を通して効果的に除去および制御し得るという利点を有する。キサントフモールまたはイソキサントフモールに副作用はない。このため、長期に渡り、特に定期的に摂取する場合、慢性肝疾患に対する効果的な予防・防御が可能となる。
【００１２】
キサントフモールおよびイソキサントフモールは、急性肝硬変症や肝線維症の予防や治療に特に適している。驚いたことに、キサントフモールは、脂肪過多症（肥満）や糖尿病により媒介される肝損傷にとって非常に重要な代謝機序を阻害することが研究により示されている。脂肪過多症や糖尿病は、大多数の場合の肝硬変症の原因となっており、この傾向は増加している。総じて、慢性肝疾患は、重大な経済問題を象徴するようになってきている。キサントフモールまたはイソキサントフモールを継続的に投与することで、副作用を伴うことなく、効果的な予防・防御を全人口に提供することができる。
【００１３】
さらに、キサントフモールまたはイソキサントフモールは、抗ウィルス性も有しており、肝炎、特にＢ型肝炎およびＣ型肝炎に対する活性が非常に高いことが研究により示されている。Ｂ型肝炎やＣ型肝炎は、慢性肝疾患における最も一般的な病原体である。ドイツの疫学的研究において、人口の約２％が慢性Ｂ型肝炎かＣ型肝炎に感染していることが示されている。このことも重要な社会的意義のある問題である。キサントフモールまたはイソキサントフモールを予防投与することで、一方では肝炎患者、すなわちＢ型およびＣ型肝炎患者の数を効果的に減らし、他方では肝炎の既存患者の経過に好ましい影響を及ぼすことができる。
【００１４】
現在のところ、肝線維症を治療するための治療的投与形態は実証されていない。有害な根本的原因、すなわち、例えば肝炎ウィルス感染の場合、肝炎ウィルスを除去することでしか線維症を阻害または停止することはできない。しかしながら、根本的原因の除去は、ごく一部の慢性肝疾患患者において成功するに過ぎず、一般的に、遺伝的肝疾患患者には不可能である。肝炎ウィルス感染の場合、今までは強い副作用のある薬物を用いる必要があった。このような薬物を用いても、ウィルスの除去はごく一部の患者において実現されるに過ぎない。幸いに、キサントフモールまたはイソキサントフモールを使用することで、治療を提供し得る。
【００１５】
最後に、キサントフモールおよびイソキサントフモールは、抗発癌作用も有する。現在のところ、肝臓癌や肝細胞癌（ＨＣＣ）に関し、患者の生存率を向上する療法は、外科手術以外に実証されていない。ＨＣＣは、通常、診断時までに大きくなり過ぎているか、転移してしまっているため、現在のところ、外科的切除は、ごく一部のＨＣＣ患者において成功しているに過ぎない。キサントフモールを肝臓癌の治療に使用し得ることが示されている。
【００１６】
さらに、キサントフモールまたはイソキサントフモールを、具体的にはリスク因子の高い人（遺伝的リスク、脂肪過多症、糖尿病患者）に対して予防薬として使用し得る。
【００１７】
投与に関し、本発明は、マンニット、スクロース、ラクト−ス、グルコース、フルクトース、マルトース等の薬学的に許容される担体と共に、キサントフモールまたはイソキサントフモールを医薬組成物の活性成分として供給することで使用を提供する。
【００１８】
キサントフモールまたはイソキサントフモールは、活性物質として食物に添加したり、飲料と混ぜる場合に特に適している。
【００１９】
本発明にかかる使用の一実施形態によると、活性物質としてのキサントフモールまたはイソキサントフモールは、特に、具体的には肝臓における遊離酸素ラジカルの活性を低減または抑制するために添加される。いかなる形態であれ、すなわち（例えば、ウィルス、過度のアルコール消費、肥満および／または糖尿病や放射線被曝による）炎症の結果として肝損傷が存在する場合、遊離酸素ラジカルが形成され、これらが肝炎、肝線維症や肝硬変症および肝臓癌の発症に重要な役割を果たし得ることが判明している。キサントフモールまたはイソキサントフモールは、遊離酸素ラジカルの形成を阻害したり、その活性を妨害する。このため、肝臓に対する３つの上記損傷機構のすべてが、同等にキサントフモールまたはイソキサントフモールの影響を効果的に受けるという利点がある。
【００２０】
特に、キサントフモールまたはイソキサントフモールの添加は、ＮＦ−カッパＢ因子に決定的な影響を及ぼす、すなわち、特にＮＦ−カッパＢ因子の活性を低減または抑制するのに特に適していることが判明している。ＮＦ−カッパＢは、細胞内のシグナル伝達物質であり、多数の細胞機能の調節に関与している。ＮＦ−カッパＢ因子は、具体的には肝臓に対する３つの上記損傷機構において大きな役割を果たすことが判明している。ＮＦ−カッパＢは、ＮＡＳＨの発症および進行においても重要な役割を果たす。
【００２１】
さらに、驚いたことに、キサントフモールまたはイソキサントフモールは、比較的多量に投与され得ることが判明している。知見によると、投与量が多くても、キサントフモールまたはイソキサントフモールによる悪影響はいずれの細胞においても発生せず、よって選択的活性を生じる。
【００２２】
キサントフモールまたはイソキサントフモールの投与量を、例えば、下限値５μＭから始めて増やしていくと、特に上限値１００μＭまで、効能の継続的な増加を確認できることが判明している。このため、治療剤の使用目的に応じて（予防薬または治療用薬物として日常的に摂取する量のキサントフモールまたはイソキサントフモールを含有した食物）、投与量の異なる製剤を特定の目的で販売し得るという利点がある。
【００２３】
例えば、慢性感染症において、幾つかの活性機構が同時に存在し得るため、本発明にかかる製剤は、肝炎、肝硬変症や肝線維症および肝臓癌の発症や肝臓癌の進行に対する３つの活性機構をすべて同時に適切に制御するために使用され得る。
【００２４】
活性物質、すなわちキサントフモールもしくはイソキサントフモールまたはその代謝産物もしくはその前駆物質を、肝臓内の活性物質濃度が≧５μＭ、特に≧１０μＭ、特に≧２０μＭ、特に≧３０μＭ、特に≧４０μＭ、特に≧５０μＭとなる投与形態（適用および／または投与量）で使用することが実用的である。
【００２５】
活性物質を、肝臓内の活性物質濃度が最大で１００μＭとなる投与形態で使用することが好ましい。
【００２６】
用途に応じ、特定の活性物質を、肝臓内の活性物質濃度が以下の範囲となるような投与形態で使用すべきである：１〜１００μＭ、好ましくは１〜２５μＭ、好ましくは１〜１０μＭまたは５〜１００μＭ、好ましくは１０〜５０μＭ、好ましくは１０〜２５μＭ。用途に応じて適用範囲を選択しても良い。特に、線維症の治療には比較的低用量で十分であるが、肝臓癌の治療には投与量を増やすことが実用的である。
【００２７】
キサントフモールまたはイソキサントフモールを、例えば、食物に混ぜて、または錠剤として投与すると、腸による吸収のため、キサントフモールまたはイソキサントフモールは比較的高濃度となるが、肝臓通過後には急速に希釈される。すなわち、他の臓器がこのような高濃度のキサントフモールを有することはない。
【００２８】
ホップの草からキサントフモールを回収することに関し、ＥＰ ０ ６７９ ３９３ Ｂ１およびＥＰ １ ５４３ ８３４ Ａ１の全開示を参照する。
【００２９】
本発明によると、キサントフモールまたはイソキサントフモールの代わりに、その代謝産物、特にＰ４５０酵素複合体により肝臓内で生成される代謝産物を使用しても良い。このような代謝産物は、主にキサントフモールグルクロニド（glucoronides）や硫酸塩およびキサントフモールのメチル化体やナリンゲニン、特に８−プレニルナリンゲニンである。ナリンゲニン、特に８−プレニルナリンゲニンは、キサントフモールの最終代謝産物である。
【００３０】
同様に、キサントフモールまたはイソキサントフモールの代わりに、その前駆物質を使用しても良く、これは、化学的および／または生理学的条件において再生してキサントフモールを生成する。
【００３１】
したがって、肝疾患を治療をするための、本特許出願に記載されているキサントフモールまたはイソキサントフモールの使用はすべて、上記代謝産物および前駆物質にも適用される。
【００３２】
本発明によると、キサントフモールおよび／またはイソキサントフモールが純粋な形ではなく、ホップ抽出産物の形態で存在している組成物を活性物質として使用しても良い。生産工程の結果、キサントフモールまたはイソキサントフモールの他に、活性物質の有機体への吸収の助けとなり、効能を高める一助となる担体成分が存在することが判明している。
【００３３】
活性物質の各（純粋）画分に対する活性物質の投与量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ体重／日より大きいことが有益であり、０．１ｍｇ／ｋｇ体重／日より大きいことが好ましく、１ｍｇ／ｋｇ体重／日より大きいことが好ましく、１０ｍｇ／ｋｇ体重／日より大きいことが好ましく、５０ｍｇ／ｋｇ体重／日より大きいことが好ましく、１００ｍｇ／ｋｇ体重／日より大きいことが好ましく、体重は人の体重を意味する。
【００３４】
活性物質の各（純粋）画分に対する投与量は、１６１ｍｇ／ｋｇ体重／日未満であることが有益であり、５０ｍｇ／ｋｇ体重／日未満であることが好ましく、１０ｍｇ／ｋｇ体重／日未満であることが好ましく、１ｍｇ／ｋｇ体重／日未満であることが好ましく、０．１ｍｇ／ｋｇ体重／日未満であることが好ましく、体重は人の体重を意味する。
【００３５】
活性物質の各（純粋）画分に対する投与量は、０．０１〜１６１ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲であることが有益であり、０．０５〜１２０ｍｇ／ｋｇ体重／日であることが好ましく、０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日であることが好ましく、０．５〜８０ｍｇ／ｋｇ体重／日であることが好ましく、１〜８０ｍｇ／ｋｇ体重／日であることが好ましく、５〜８０ｍｇ／ｋｇ体重／日であることが好ましく、１０〜８０ｍｇ／ｋｇ体重／日であることが好ましく、体重は人の体重を意味する。
【００３６】
キサントフモールまたはイソキサントフモールの割合は、０．１重量％〜９９重量％の範囲であることが有益であり、５重量％〜９９重量％であることが好ましく、１０重量％〜９９重量％であることが好ましく、２０重量％〜９９重量％であることが好ましく、３０重量％〜９９重量％であることが好ましく、４０重量％〜９９重量％であることが好ましく、５０重量％〜９９重量％であることが好ましく、６０重量％〜９９重量％であることが好ましく、７０重量％〜９９重量％であることが好ましい。
【００３７】
活性物質としてのキサントフモールの他に、さらなる成分、特に、ホップからキサントフモールを回収することで生じる天然成分が存在する場合、これらの成分は、活性物質の有機体への吸収を向上させる結果をもたらすため、効能がさらに高められ得る。
【００３８】
あるいは、純粋な形のキサントフモールまたはイソキサントフモールを使用しても良い。
【００３９】
さらに、本発明によると、合成した形のキサントフモールまたはイソキサントフモールを使用することもできる。
【００４０】
さらなる実施形態によると、キサントフモール、イソキサントフモール、その代謝産物および／またはその前駆物質は、少なくとも一つの追加的活性物質と組み合わせて使用される。この活性物質は、体における耐性および／もしくは吸収、ならびに／または投与される活性物質の効能および／もしくは安定性および／もしくは取扱特性に肯定的な影響を及ぼすものであることが好ましい。
【００４１】
キサントフモール、イソキサントフモール、その代謝産物および／またはその前駆物質は、塩、特にアルカリ塩やアルカリ土類塩と組み合わせたり、それを基礎として使用され得る。
【００４２】
投与される薬剤は、特に液剤、懸濁剤もしくは乳剤の形態、ナノ粒子の形態、または粉末剤やゲル剤として使用され得る。治療かそれとも予防を所望するかに応じ、独立した薬物、あるいは液剤や固形食に対する添加物として投与を行なっても良い。
【００４３】
活性物質を、溶剤、担体物質、または製薬、栄養素もしくは食物に適したデンプン、デキストリン、特にシクロデキストリンやマルトデキストリン、タンパク質、メチルセルロース、カルボメトキシセルロースまたはキサンタンガム等の添加物を用いて投与しても良い。
【００４４】
純粋な形のキサントフモール（＞９８％）を用いて以下に示す図１〜図９による研究を行った。
【実施例１】
【００４５】
一例に、薬物の組成物を以下に提示する。
直接圧粉する粉末剤混合物
キサントフモール（純物質）                ５ｇ
微結晶性セルロース                        １０重量％
カルボキシメチルデンプンナトリウム        ３重量％
高分散シリカ                              １重量％
ステアリン酸マグネシウム                  １重量％
タブレトース（ラクトース一水和物）        １００重量％となる値
【実施例２】
【００４６】
一例に、活性物質としてキサントフモールが添加された食物の組成物を以下に提示する。
【００４７】
キサントフモール（粉末状の純物質）        ２００ｍＬ当たり５００ｍｇ
牛乳製品（クリーム状、例えばヨーグルト）
クリーム状の食物への混合が容易であるため、食物の上記組成物により必要量のキサントフモールを最適に投与することが可能となる。
【００４８】
図１は、キサントフモールを用いる治療目的を示している。説明図は、例えば、アルコール、ウィルス、放射線、脂肪過多症および／または糖尿病に起因する肝疾患を発端として肝臓癌に至る活性機構の連鎖を示している。キサントフモールおよび／またはイソキサントフモールを含有する製剤を使用することで、図１による活性連鎖の全ての段階が有益に妨害される。しかしながら、キサントフモールまたはイソキサントフモールは、活性部位の個々の段階の治療においても、目標とする方法でうまく使用され得る。
【００４９】
図２は、特にＢ型およびＣ型肝炎の結果、肝臓に与えるウィルス損傷に対するキサントフモールおよび／またはイソキサントフモールの効能の概略説明図を示している。上記活性物質により、ウィルスの複製が有益に阻害されるだけでなく、正常な肝細胞を無損傷のまま残しながら、すでにウィルスに冒された自身の体の肝細胞が選択的に破壊されることが判明している。よって、本発明を用いることで、ウィルスに感染した肝細胞を削減または除去する標的療法が可能となる。
【００５０】
比較図に基づき、図３は、Ｃ型肝炎に感染していない肝細胞と比較して、Ｃ型肝炎に感染した肝細胞に対するキサントフモールまたはイソキサントフモールの使用の選択的効能を示している。
【００５１】
図４は、正常な肝細胞（ヒト肝細胞）と比較して、肝臓癌細胞（ＨｅｐＧ２）のアポトーシス（プログラム細胞死）に関し、キサントフモールの使用の効能のグラフ図を示している。
【００５２】
図５は、キサントフモールの投与量の関数として、長期にわたる肝臓癌細胞（ＨｅｐＧ２）の成長の比較を示している。説明図に明白に示されているように、癌細胞の成長は、キサントフモールの濃度が上昇するにつれて、徐々に阻害されている。
【００５３】
図６および図７は、肝硬変症における肝臓の瘢痕化の原因となる、自身の体の肝細胞の肝星細胞への変換を防止するため、キサントフモールを添加することの効果を示している。
【００５４】
図７に示すように、瘢痕組織の形成は、キサントフモールの投与量が増加するにつれて次第に抑制されている。
【００５５】
図８は、キサントフモールの投与量を増加させることによる既存の活性化肝星細胞への効果を示している。図６による説明図から、キサントフモールの投与量を増加させることで、活性化肝星細胞の破壊（ＬＤＨ）の効果が高まっていることが分かる。
【００５６】
図９は、キサントフモールの投与量が活性化肝星細胞の成長に及ぼす影響を示している。
【００５７】
図１０は、キサントフモールを純粋な形（＞９８％）あるいはキサントフモールが６０％の割合で存在している形態で投与した後の肝臓癌細胞の生存期間（増殖）の比較を示している。後者は、従来の商業的プロセス中にホップ抽出物から回収したキサントフモールを示しており、追加的な天然成分を含有している。図において、棒が低いほど、多くの細胞で成長が阻害されている。
【００５８】
キサントフモール６０％を使用することで、純粋な形のキサントフモールよりもより強力な効果が得られることが証明されている。これは、天然のキサントフモールにおいて、残り成分は担体機能を有しており、そのために活性物質がより効果的に有機体に供給されるためである。
【図１】
0005513126.tif 000004
【図２】
0005513126.tif 000005
【図３】
0005513126.tif 000006
【図４】
0005513126.tif 000007
【図５】
0005513126.tif 000008
【図６】
0005513126.tif 000009
【図７】
0005513126.tif 000010
【図８】
0005513126.tif 000011
【図９】
0005513126.tif 000012
【図１０】
0005513126.tif 000013