(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
0005641436.tif 000015
［式中、Ｒ１はＨであり、且つＲ２は炭素数１〜３個のアルコキシ基であり、又はＲ１及びＲ２が一緒になって、−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−の環を形成し、Ｒ３はＨ又は炭素数１〜３個のアルキル基である］
で表される化合物を含有する抗ＨＩＶ薬。
【請求項２】
式Ｉで表される化合物が、式ＩＩ
【化２】
0005641436.tif 000016
で表される化合物である請求項１に記載の抗ＨＩＶ薬。
【請求項３】
式Ｉで表される化合物が、式ＩＩＩ
【化３】
0005641436.tif 000017
で表される化合物である請求項１に記載の抗ＨＩＶ薬。
【請求項４】
式Ｉで表される化合物が、式ＩＶ
【化４】
0005641436.tif 000018
で表される化合物である請求項１に記載の抗ＨＩＶ薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＡＩＤＳ患者の予後は、逆転写酵素阻害薬やプロテアーゼ阻害薬の開発により大幅に改善したが、慢性毒性や薬剤耐性ウイルスの出現等の問題点が生じており、新たな作用機序を有する抗ＨＩＶ薬の開発が必要とされている。例えば（特許文献１）には、ペルオキシソーム増殖因子活性化レセプター（ＰＰＡＲ）類に対して活性な下記の化合物が開示されており、対象となる疾患としてＨＩＶ感染症が挙げられている。
【化１】
0005641436.tif 000002
【０００３】
また、（特許文献２）には、ＨＩＶ感染症のようなレトロウイルス感染症の治療用医薬の製造に使用できる化合物として、下記の（３Ｓ）テトラヒドロ−３−フラニル（１Ｓ，２Ｒ）−３−［［（４−アミノフェニル）スルホニル］（イソブチル）アミノ］−１−ベンジル−２−（ホスホノオキシ）プロピルカルバミン酸カルシウムが開示されている。
【化２】
0005641436.tif 000003
【０００４】
一方、プロウイルスＤＮＡからＲＮＡへの転写過程は、ＨＩＶの複製に必須であるが、この段階を阻害する薬剤はまだ開発されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表２００９−５０７０７９号公報
【特許文献２】特表２００３−５２１４４７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
そこで本発明は、プロウイルスＤＮＡからＲＮＡへの転写過程を阻害する新たな抗ＨＩＶ薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
ＨＩＶ−１の転写過程は、宿主細胞因子のｃｙｃｌｉｎ  Ｔ１とＣＤＫ９、そしてＨＩＶ−１由来のＴａｔ及びＴＡＲ  ＲＮＡにより形成される複合体によって開始される。そこで本発明者らは、これらの相互作用領域を標的とする低分子化合物を、３，０００，０００化合物のデータベースの中から、コンピューターを用いたｉｎ  ｓｉｌｉｃｏスクリーニング（docking simulation）により選択した上で、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける抗ＨＩＶ−１アッセイにより同定することに成功し、本発明を完成させるに至った。すなわち、本発明の要旨は以下の通りである。
【０００８】
（１）式Ｉ
【化３】
0005641436.tif 000004
［式中、Ｒ１はＨであり、且つＲ２は炭素数１〜３個のアルコキシ基であり、又はＲ１及びＲ２が一緒になって、−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−の環を形成し、Ｒ３はＨ又は炭素数１〜３個のアルキル基である］
で表される化合物を含有する抗ＨＩＶ薬。
【０００９】
（２）式Ｉで表される化合物が、式ＩＩ
【化４】
0005641436.tif 000005
で表される化合物である前記（１）に記載の抗ＨＩＶ薬。
【００１０】
（３）式Ｉで表される化合物が、式ＩＩＩ
【化５】
0005641436.tif 000006
で表される化合物である前記（１）に記載の抗ＨＩＶ薬。
【００１１】
（４）式Ｉで表される化合物が、式ＩＶ
【化６】
0005641436.tif 000007
で表される化合物である前記（１）に記載の抗ＨＩＶ薬。
【発明の効果】
【００１２】
本発明における化合物は、高い抗ＨＩＶ活性を有し、抗ＨＩＶ薬として好適に用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の化合物についての抗ＨＩＶ−１活性及び細胞毒性の試験結果を示すグラフである。
【図２】本発明の化合物についての抗ＨＩＶ−１活性及び細胞毒性の試験結果を示すグラフである。
【図３】本発明の化合物についての抗ＨＩＶ−１活性及び細胞毒性の試験結果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の抗ＨＩＶ薬は、式Ｉで表される化合物を含有する。
【化７】
0005641436.tif 000008
【００１５】
ここで、式Ｉ中、Ｒ１はＨであり、且つＲ２は炭素数１〜３個のアルコキシ基であり、又はＲ１及びＲ２が一緒になって、−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−の環を形成し、Ｒ３はＨ又は炭素数１〜３個のアルキル基である。
【００１６】
炭素数１〜３個のアルコキシ基は、直鎖状又は分岐状のいずれであってもよく、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、ｉ−プロピルオキシ基等を挙げることができる。
【００１７】
また、炭素数１〜３個のアルキル基としては、直鎖状又は分岐状のいずれであってもよく、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基等を挙げることができる。
【００１８】
上記式Ｉで表される化合物の中でも、抗ＨＩＶ活性及び細胞毒性の観点から、特に、式ＩＩで表されるＮ−［（６−メトキシ−２−オキソ−１Ｈ−キノリン−３−イル）メチル］−Ｎ−（ピリジン−３−イルメチル）−２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−スルホンアミドが好ましい。
【化８】
0005641436.tif 000009
【００１９】
また、別の好ましい化合物として、式ＩＩＩで表されるＮ−［（７−オキソ−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｇ］キノリン−８−イル）メチル］−Ｎ−（ピリジン−３−イルメチル）−２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−スルホンアミドが挙げられる。
【化９】
0005641436.tif 000010
【００２０】
さらに、別の好ましい化合物として、式ＩＶで表される５−メチル−Ｎ−［（７−オキソ−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］ジオキシノ［２，３−ｇ］キノリン−８−イル）メチル］−Ｎ−（ピリジン−３−イルメチル）−２，１，３−ベンゾチアジアゾール−４−スルホンアミドが挙げられる。
【化１０】
0005641436.tif 000011
【００２１】
上記の各化合物は、慣用の有機合成法により得ることができる。また、Ａｓｉｎｅｘ社（Moscow, Russia, http://www.asinex.com/library-gold.html）から入手可能である。
【００２２】
上記の化合物は、抗ＨＩＶ薬として、慣用の製剤担体と組み合わせて製剤化することができる。投与形態としては、特に限定はなく、必要に応じ適宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、徐放性製剤、液剤、懸濁剤、エマルジョン剤、シロップ剤、エリキシル剤等の経口剤、注射剤、坐剤等の非経口剤が挙げられる。
【００２３】
経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用いて常法に従って製造される。また、これらに加えて、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を適宜添加することができる。
【００２４】
結合剤としては、例えばデンプン、デキストリン、アラビアゴム、ゼラチン、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、結晶セルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴール等が挙げられる。
【００２５】
崩壊剤としては、例えばデンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。
【００２６】
界面活性剤としては、例えばラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、ポリソルベート８０等が挙げられる。
【００２７】
滑沢剤としては、例えばタルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコール等が挙げられる。
【００２８】
流動性促進剤としては、例えば軽質無水ケイ酸、乾燥水酸化アルミニウムゲル、合成ケイ酸アルミニウム、ケイ酸マグネシウム等が挙げられる。
【００２９】
注射剤は、常法に従って製造され、希釈剤として一般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、オリーブ油、ゴマ油、ラッカセイ油、ダイズ油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等を用いることができる。さらに必要に応じて、殺菌剤、防腐剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤等を加えてもよい。また、注射剤は、安定性の観点から、バイアル等に充填後冷凍し、通常の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することもできる。式Ｉ〜式ＩＶの化合物の注射剤中における割合は、５〜５０重量％の間で変動させ得るが、これに限定されるものではない。
【００３０】
その他の非経口剤としては、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って製造される。
【００３１】
製剤化した抗ＨＩＶ薬は、剤形、投与経路等により異なるが、例えば、１日１〜４回を１週間から３ヶ月の期間、投与することが可能である。
【００３２】
経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人の場合、式Ｉ〜式ＩＶの化合物の重量として、例えば０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜５００ｍｇを、１日数回に分けて服用することが適当である。
【００３３】
非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人の場合、式Ｉ〜式ＩＶの化合物の重量として、例えば０．１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜５００ｍｇを、静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射により投与することが適当である。
【実施例】
【００３４】
以下、実施例に基づき本発明をさらに詳細に説明するが、これに限定されるものではない。
（Ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏスクリーニング）
全てのＩｎ  ｓｉｌｉｃｏ実験は、コンピュータソフトＭＯＥ（Chemical Computing Group Inc., Quebec, Canada）を用いて行った。Ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏドッキングの標的として用いられたヒトｃｙｃｌｉｎ  Ｔ１のモデル構造は、ウマｃｙｃｌｉｎ  Ｔ１とequine infectious anemia virus（ＥＩＡＶ）ＴａｔとＥＩＡＶ  ＴＡＲ  ＲＮＡの複合体構造（Protein Data Bank ID: 2w2h）を基にホモロジー・モデリングにより構築した（Anand K. et al., Nat. Struct. Mol. Biol. 2008 Dec; 15(12): 1287-92）。３，０００，０００化合物のデータベース（Namiki shoji, Tokyo, Japan）の中から薬剤としての性質を有する化合物をスクリーニングするために、分子量が３５０から６００  Ｄａ、水素結合のドナー／アクセプター数が１３個より少なく、回転可能な結合が７個より少なく、ｌｏｇＰ値が０から６の間をとる化合物を選別した。このようにして選別した化合物のドッキングシミュレーションを、ヒトｃｙｃｌｉｎ  Ｔ１におけるＨＩＶ−１  ＴａｔとＴＡＲ  ＲＮＡが結合する部位に対して行った。その結果、最適なスコア値を示した２５４の化合物を合成し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける抗ＨＩＶ−１活性を評価した。なお、合成した化合物は、Ａｓｉｎｅｘ社（Moscow, Russia, http://www.asinex.com/library-gold.html）から市販されているものを購入して使用した。
【００３５】
（抗ＨＩＶ−１試験）
抗ＨＩＶ−１試験は、ＨＩＶ−１慢性感染細胞株であるＯＭ１０．１細胞を用いた。１００μｌの段階希釈された薬剤を含む９６穴プレートに５０μｌのＯＭ１０．１細胞（４×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）を加え、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間培養した。その後、５０μｌのＴＮＦ−α（４ｎｇ／ｍｌ、Roche Diagnostics、Mannheim、Germany）を加え、３７℃、５％ＣＯ２でさらに４８時間培養した。１００μｌの培養上清を回収し、ＥＬＩＳＡ（ZeptoMetrix、Buffalo、NY）によりＨＩＶ−１  ｐ２４の産生量を定量して、産生を抑制する濃度（ＥＣ５０）を測定した。また、化合物の細胞毒性（ＣＣ５０）は、ＭＴＴ法（Sigma-Aldrich、St. Louis、MO）により定量した。化合物Ａ〜Ｊについての測定結果を下表及び図１〜３に示す。
【００３６】
【表１】
0005641436.tif 000012
【表２】
0005641436.tif 000013
【表３】
0005641436.tif 000014
【００３７】
表及び図１〜３に示すように、本発明の化合物Ａ〜Ｃは、それ以外の化合物に比べて、高い抗ＨＩＶ−１活性を有し、細胞毒性が低いため、抗ＨＩＶ−１薬として優れた化合物である。また、ＨＩＶ−２においても、ＨＩＶ−１と同じメカニズムによりウイルス遺伝子の転写が起こるため、上記実験結果より、本発明の化合物は抗ＨＩＶ−２薬としても優れた活性を有し得るものである。
【図１】
0005641436.tif 000019
【図２】
0005641436.tif 000020
【図３】
0005641436.tif 000021