(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
シアリターゼ融合タンパク質を含むマイクロ粒子を含有する組成物の作製方法であって：
ａ）  水性溶媒中にシアリターゼ融合タンパク質を含む溶液に対イオンを添加するステップと；
ｂ）  ステップ（ａ）の溶液に有機溶媒を含む揮発性組成物を添加するステップと；
ｃ）  前記溶液を漸次的に２５℃未満の温度にまで冷却するステップと；
を具え、これによって、前記シアリターゼ融合タンパク質を含むマイクロ粒子を含有する組成物が得られ、ステップａ）、ｂ）及びｃ）が、同時に、連続的に、断続的に、又はあらゆる順序で行われ、前記組成物を作製可能な前記対イオンと前記有機溶媒の組合せが、クエン酸とイソプロパノールとの組合せ、クエン酸とアセトンとの組合せ、イタコン酸と１−プロパノールとの組合せ、グリシンとジオキサンとの組合せ、グリシンと１−プロパノールとの組合せ、ルビジウムと１−プロパノールとの組合せ、及び過塩素酸と１−プロパノールとの組合せからなる群から選択される方法。
【請求項２】
ステップａ）及びｂ）が、同時に、又はあらゆる順序で連続して行われ、その後に、ステップｃ）が行われる、請求項１記載の方法。
【請求項３】
ステップａ）、ｂ）及びｃ）が、ａ）、次いでｂ）、次いでｃ）の順序で連続して行われる、請求項１記載の方法。
【請求項４】
ステップｃ）の後に、前記溶液から前記マイクロ粒子を分離して、前記マイクロ粒子以外の成分を除去することを更に含む、請求項１記載の方法。
【請求項５】
前記組成物が、前記タンパク質を含むマイクロ粒子から成る、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記分離が、沈澱又はろ過によって達成される、請求項４記載の方法。
【請求項７】
前記分離が、凍結乾燥によって達成される、請求項４記載の方法。
【請求項８】
前記マイクロ粒子が、沈澱、相分離又はコロイド形成により得られる、請求項１ないし７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記溶液のｐＨが、前記タンパク質のｐＩ以下である、請求項１ないし７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記溶液のｐＨが、４．０ないし９．０である、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
前記溶液のｐＨが、４．５ないし８．０である、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１２】
前記溶液のｐＨが、４．５ないし６．５である、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１３】
前記溶液のｐＨが、４．５ないし５．５である、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１４】
前記シアリダーゼ融合タンパク質が、シアリダーゼシアリダーゼの触媒ドメイン及びアンカードメインを含み、ここで、前記シアリダーゼの触媒ドメインが、前記シアリダーゼ融合タンパク質中の唯一のシアリダーゼ部位である、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記シアリダーゼが、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓシアリダーゼ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓシアリダーゼ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｕｒｅａｆａｃｉｅｎｓシアリダーゼ、Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｖｉｒｉｄｉｆａｃｉｅｎｓシアリダーゼ、ヒトＮｅｕ２シアリダーゼ又はヒトＮｅｕ４シアリダーゼである、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記シアリダーゼが、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓシアリダーゼである、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記触媒ドメインのアミノ酸配列が、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７０番目のアミノ酸ないし２９０番目のアミノ酸のいずれかのアミノ酸に始まり、６６５番目のアミノ酸ないし９０１番目のアミノ酸のいずれかのアミノ酸に終わる、アミノ酸残基の配列を含む、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前記シアリダーゼの触媒ドメインの配列が、配列番号２に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
前記触媒ドメインの配列が、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７４番目のアミノ酸に始まり、６８１番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸残基の配列を含む、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
前記触媒ドメインの配列が、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７４番目のアミノ酸に始まり、６６６番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸残基の配列を含む、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
前記触媒ドメインの配列が、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２９０番目のアミノ酸に始まり、６８１番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸の配列を含む、請求項１７記載の方法。
【請求項２２】
前記融合タンパク質が、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ドメインであるアンカードメインを含む、請求項１４及び１６ないし２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＧＡＧ結合ドメインが、ヒト血小板因子４のＧＡＧ結合ドメイン、ヒトインターロイキン８のＧＡＧ結合ドメイン、ヒト抗トロンビンＩＩＩのＧＡＧ結合ドメイン、ヒトアポ蛋白ＥのＧＡＧ結合ドメイン、ヒト血管関連遊走タンパク質（ｈｕｍａｎ ａｎｇｉｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｉｇｒａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ）のＧＡＧ結合ドメイン及びヒトアンフィレギュリンのＧＡＧ結合ドメインから選択される、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記ＧＡＧ結合ドメインのアミノ酸配列が、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７又は配列番号８に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
前記ＧＡＧ結合ドメインのアミノ酸配列が、配列番号８に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
前記シアリダーゼ融合タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号９に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項１記載の方法。
【請求項２７】
前記シアリダーゼ融合タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号１０に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項１記載の方法。
【請求項２８】
前記シアリダーゼ融合タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号１１又は配列番号１２に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項１記載の方法。
【請求項２９】
前記シアリダーゼ融合タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号１３又は配列番号１４に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３０】
前記シアリダーゼ融合タンパク質のアミノ酸配列が、配列番号１７に示すアミノ酸残基の配列を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３１】
前記マイクロ粒子中のタンパク質量が、ステップａ）の溶液中の総タンパク質量に対して、８０％ないし９９％又は９９％を超える量である、請求項１ないし７、１４、１６ないし２１、及び２３ないし３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記温度が、４℃ないし−４５℃である、請求項１ないし７、１４、１６ないし２１、及び２３ないし３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記温度が、２℃ないし−２０℃である、請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
前記温度が、２℃ないし−１５℃である、請求項３３記載の方法。
【請求項３５】
前記温度が、０℃ないし−２℃、ないし−１５℃ないし−２０℃の範囲にある、請求項３４記載の方法。
【請求項３６】
前記生じるタンパク質系組成物が、５５℃、５０℃、４５℃、４４℃、４２℃、４０℃、３９℃、３８℃、３７℃又はこれを下回る温度において、１週間ないし１月、１月ないし６月、６月ないし１年、１年ないし２年、又は２年ないし５年の保存寿命を有する、請求項１ないし７、１４、１６ないし２１、２３ないし３０、及び３２ないし３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記タンパク質の少なくとも９０％の活性が、２５℃の温度での６月ないし１年の保存の後に保持されるように、前記マイクロ粒子の含水率が、調節される、請求項１ないし７、１４、１６ないし２１、２３ないし３０、及び３２ないし３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記マイクロ粒子の少なくとも９０％が、２５℃の温度での６月ないし１年の保存の後に凝集を起こさないように、前記マイクロ粒子の含水率が、調節される、請求項１ないし７、１４、１６ないし２１、２３ないし３０、及び３２ないし３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記タンパク質が、シアリダーゼの触媒ドメインとアンカードメインとを含む融合タンパク質であり、ここで、前記シアリダーゼの触媒ドメインが、前記融合タンパク質中の唯一のシアリダーゼ部位であり；前記有機溶媒が、５体積％ないし２０体積％で添加され；前記対イオンは、１ｍＭないし５ｍＭの量で添加され；そして前記溶液のｐＨが、４．５ないし５．５に調節される、請求項１記載の方法。
【請求項４０】
前記シアリダーゼの触媒ドメインが、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓに由来し、前記アンカードメインが、ヒトアンフィレギュリン由来のＧＡＧ結合ドメインである、請求項３９記載の方法。
【請求項４１】
前記ｐＨが、５．０である、請求項３９又は４０記載の方法。
【請求項４２】
前記溶液から前記マイクロ粒子を分離して、前記マイクロ粒子以外の成分を除去することを更に含む、請求項３９又は４０記載の方法。
【請求項４３】
前記生じる組成物が、前記タンパク質を含むマイクロ粒子から成る、請求項４２記載の方法。
【請求項４４】
前記分離が、沈澱又はろ過による、請求項４２記載の方法。
【請求項４５】
前記分離が、凍結乾燥による、請求項４２記載の方法。
【請求項４６】
前記マイクロ粒子の含水率が、６％ないし１２％である、請求項４２記載の方法。
【請求項４７】
前記マイクロ粒子の含水率が、７％ないし１０．５％である、請求項４６記載の方法。
【請求項４８】
添加される有機溶媒の量が、０．１体積％ないし５０体積％である、請求項１ないし７、３９又は４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
添加される有機溶媒の量が、１体積％ないし３０体積％である、請求項４８記載の方法。
【請求項５０】
添加される有機溶媒の量が、５体積％ないし３０体積％である、請求項４９記載の方法。
【請求項５１】
添加される有機溶媒の量が、１０体積％ないし３０体積％である、請求項５０記載の方法。
【請求項５２】
添加される有機溶媒の量が、１５体積％ないし２０体積％である、請求項５１記載の方法。
【請求項５３】
前記溶液に添加される対イオンの濃度が、０．１ｍＭないし１００ｍＭである、請求項１ないし７、３９又は４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記溶液に添加される対イオンの濃度が、０．２ｍＭないし５０ｍＭである、請求項５３記載の方法。
【請求項５５】
前記溶液に添加される対イオンの濃度が、０．３ｍＭないし３０ｍＭである、請求項５４記載の方法。
【請求項５６】
前記溶液に添加される対イオンの濃度が、０．５ｍＭないし２０ｍＭである、請求項５５記載の方法。
【請求項５７】
前記溶液に添加される対イオンの濃度が、１ｍＭないし１０ｍＭである、請求項５６記載の方法。
【請求項５８】
前記溶液に添加される対イオンの濃度が、５ｍＭである、請求項５７記載の方法。
【請求項５９】
前記漸次的な冷却が、０．０１℃／分ないし２０℃／分の速度で行われる、請求項１ないし７、１４、１６ないし２１、２３ないし３０、及び３２ないし３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６０】
前記漸次的な冷却が、０．０５℃／分又は０．１℃／分ないし１０℃／分又は１５℃／分の速度で行われる、請求項５９記載の方法。
【請求項６１】
前記漸次的な冷却が、０．２℃／分ないし５℃／分の速度で行われる、請求項６０記載の方法。
【請求項６２】
前記漸次的な冷却が、０．５℃／分ないし２℃／分の速度で行われる、請求項６１記載の方法。
【請求項６３】
前記漸次的な冷却が、１℃／分の速度で行われる、請求項６２記載の方法。
【請求項６４】
前記マイクロ粒子のサイズが、０．５μｍないし２μｍである、請求項１ないし７、１４、１６ないし２１、２３ないし３０、及び３２ないし３５のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
「高分子マイクロスフェアの調製技術」と表題される、２００６年１月２４日に出願した米国仮出願第６０／７６２，００２号に係る優先権を主張する。許容される場合、上記出願は、参照によりその全文が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本出願は、米国特許出願第１１／６５７，８１２号（代理人Ｄｏｃｋｅｔ、第２１８６５−００４００１／６５０４号、２００７年１月２４日提出）にも関連する。本出願は、米国特許公開公報ＵＳ２００５０００４０２０ Ａ１及びＵＳ２００５０１１２７５１ Ａ１にも関する。許容される場合、上記の各出願は、参照によりその全文が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
以前より、栄養補給剤又は治療剤として、ヒトを含む動物にタンパク質を投与することが知られている。治療剤又は栄養剤として投与されるタンパク質は、一般的に、（１）直接若しくは使用前に選択した液体中に再溶解して投与される濃縮物若しくは粉末として；又は（２）液体製剤として、入手可能である。
【０００４】
目的の治療用タンパク質を粉末又は粒子形態に調製して送達することは、製薬業界での集中的な研究開発活動の分野である。治療効果のため、均一な剤形を有することが望ましい。例えば、肺投与の場合、タンパク質は、理想的には、０．５ないし５．０ミクロンの直径を有する固体粒子又は半固体粒子の、分離したマイクロスフェアの形態で調製される。この粒子が、可能な限り高いタンパク質含有量を有し、濃縮送達用の活性と治療効能を維持することも望まれる。
【０００５】
タンパク質マイクロ粒子又はナノ粒子の従来の作製方法は、有機ポリマーとの混合及び／又はポリマーを用いた格子状アレイの形成；スプレードライ、スプレーフリーズドライ又は特別かつ複雑な装置を用いる超臨界液体逆溶媒技術（ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｌｕｉｄ ａｎｔｉｓｏｌｖｅｎｔ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）；又は凍結乾燥、及びその後の、多くの場合、更にソーティングする必要のある不均一な粒子を生じる粉末化若しくはミリングといった、複雑な工程を必要としている。多くの場合、従来の固体のタンパク質製剤の作製方法では、タンパク質を変性させてその活性を弱める加熱等の加工工程が含まれる。更に、いくつかの方法では、溶液から固形製剤への高い回収率が得られない。
【０００６】
従って、複雑装置又は特別な装置を必要とせず、一様なサイズを有する送達用マイクロ粒子を作り出す、タンパク質及び他の高分子マイクロ粒子の製造方法に対する需要が存在する。また、タンパク質又は高分子を他の成分に対して高い濃度で含み、周囲温度で保存した場合に安定であり、長期間にわたってその活性を維持し、有意量の変性タンパク質を含まないマイクロ粒子の製造方法に対する需要も存在する。また、タンパク質及び他の高分子のマイクロ粒子の製造方法であって、出発物質中の実質的に全てのタンパク質又は高分子が、最小の喪失量で、マイクロ粒子製剤として回収される方法に対する需要も存在する。更に、例えば、治療剤又は栄養補給剤として投与するための、上記の特徴を含むタンパク質又は他の高分子から成るマイクロ粒子に対する需要も存在する。
【発明の開示】
【０００７】
複雑な装置又は特別な装置を必要とせず、一様なサイズの送達用マイクロ粒子を作り出す、タンパク質及び他の高分子マイクロ粒子の作製方法：他の成分に対して、高い濃度でタンパク質又は高分子を含み、周囲温度で保存した場合に安定であり、長期間にわたってその活性を維持し、有意量の変性タンパク質を含まないマイクロ粒子の製造方法、が本明細書中に提供される。また、タンパク質及び他の高分子のマイクロ粒子の製造方法であって、出発物質中の実質的に全てのタンパク質又は高分子が、最小の喪失量で、マイクロ粒子製剤として回収される方法も提供される。また、例えば治療剤又は栄養補給剤として投与するための、上記の特徴を含むタンパク質及び他の高分子から成るマイクロ粒子も提供される。
【０００８】
下記に提示するタンパク質系組成物の作製方法、該タンパク質系組成物自体、配合及び製品は、種々の成分、調製工程、並びに生物物理学的、物理学的、生化学的及び化学的パラメーターによって特徴付けられる。当業者にとって明らかなように、本明細書中に提供される組成物及び方法には、下記の成分、工程及び／又はパラメーターのいずれか及び全ての順列並びに組み合わせが含まれる。
【０００９】
本明細書中には、タンパク質系組成物の作製方法が提供される。ここに提供される方法を用いて、タンパク質以外にも、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＰＮＡ、脂質、オリゴ糖及びこれらの組合せを含む他の高分子を含む組成物を作製できる。
【００１０】
ここに提供される方法は、ａ）水性溶媒中に前記タンパク質を含む溶液に対イオンを添加する工程；ｂ）前記溶液に有機溶媒を添加する工程；及びｃ）前記溶液を漸次的に約２５℃未満の温度にまで冷却する工程を含み、これによって、前記タンパク質を含むマイクロ粒子を含有する組成物が形成され、ここで、工程ａ）、ｂ）及びｃ）が、同時に、連続的に、断続的に、又はあらゆる順序で行われる。
【００１１】
ある態様では、前記工程は、ａ）、ｂ）次いでｃ）の順序で連続的に行われる。別の態様では、タンパク質系組成物の作製方法は、ａ）及びｂ）を、同時に、又はあらゆる順序で連続して行い、その後に、工程ｃ）を行うことを含む。生じるマイクロ粒子は、沈殿、相分離又はコロイド形成によって得ることができる。ある局面では、ここに提供される方法は、更に、溶液からマイクロ粒子を分離して、前記マイクロ粒子以外の成分を除去することを含む。この分離工程は、上記の工程ｃ）の後に行うことができる。前記分離は、例えば、沈降、ろ過及び／又は凍結乾燥によって達成できる。
【００１２】
ここに提供される方法は、前記タンパク質を含む水性溶媒への有機溶媒の添加を含む。特定の態様では、前記有機溶媒は、前記水性溶媒と混和可能であるか又は部分的に混和可能である。ここに提供される方法の更なる態様では、前記有機溶媒は、脂肪族アルコール、芳香族アルコール、クロロホルム、塩化ジメチル、多価糖アルコール、芳香族炭化水素、アルデヒド、ケトン、エステル、エーテル、ジオキサン、アルカン、アルケン、共役ジエン、ジクロロメタン、アセトニトリル、酢酸エチル、ポリオール、ポリイミド、ポリエステル、ポリアルデヒド及びこれらの混合物から選択される。例えば、前記有機溶媒が、脂肪族アルコールの場合には、前記有機溶媒はイソプロパノールでもよい。添加する有機溶媒の量は、ここに提供される方法によって変化する場合がある。添加する有機溶媒の量は、例えば約０．１体積％又は０．１体積％ないし約５０体積％又は５０体積％であってもよい。他の態様では、添加する有機溶媒の量は、約１体積％若しくは１体積％ないし約３０体積％若しくは３０体積％、約５体積％若しくは５体積％ないし約３０体積％若しくは３０体積％、約１０体積％若しくは１０体積％ないし約３０体積％若しくは３０体積％、又は約１５体積％若しくは１５体積％ないし約２０体積％若しくは２０体積％となる。
【００１３】
ここに提供される方法で用いる対イオンは、陰イオン性化合物、陽イオン性化合物及び／又は双性イオン性化合物であってもよい。例えば、対イオンが、陰イオン化合物の場合、対イオンは、グリシン、クエン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸亜鉛、硫酸マグネシウム、硫酸カリウム又は硫酸カルシウムであってもよい。溶液に添加する有機溶媒の濃度は、ここに提供される方法によって変化する場合がある。例えば、溶液に添加する対イオンの濃度は、約０．１ ｍＭ又は０．１ ｍＭないし約１００ ｍＭ又は１００ ｍＭであってもよい。他の態様では、溶液に添加する対イオンの濃度は、約０．２ ｍＭ若しくは０．２ ｍＭないし約５０ ｍＭ若しくは５０ ｍＭ、約０．３ ｍＭ若しくは０．３ ｍＭないし約３０ ｍＭ若しくは３０ ｍＭ、約０．５ ｍＭ若しくは０．５ ｍＭないし約２０ ｍＭ若しくは２０ ｍＭ、又は約１ ｍＭ若しくは１ ｍＭないし約１０ ｍＭ若しくは１０ ｍＭとなる。特定の態様では、溶液に添加する対イオンの濃度は、約５ ｍＭ又は５ ｍＭである。
【００１４】
ここに提供される方法のある局面では、タンパク質を含む溶液のｐＨは、タンパク質のｐｌであるか又はｐｌを下回る。また、いくつかの局面では、前記溶液のｐＨは、約４．０若しくは４．０ないし約９．０若しくは９．０である。他の局面では、前記溶液のｐＨは、約４．５若しくは４．５ないし約８．０若しくは８．０、約４．５若しくは４．５ないし約６．５若しくは６．５、又は約４．５若しくは４．５ないし約５．５若しくは５．５である。
【００１５】
ここに提供される、タンパク質系組成物の作製方法で用いられるタンパク質は、シアリダーゼ、シアリダーゼ融合タンパク質、プロテアーゼ、プロテアーゼ阻害剤、サイトカイン、インシュリン、ヒト成長ホルモン、カルシトニン、組換えヒトＤＮａｓｅ、インターフェロン及び副甲状腺ホルモンから選択することができる。ある態様では、前記タンパク質がプロテアーゼ阻害剤の場合には、前記タンパク質は、ヒトプロテアーゼインヒビター８（ＰＩ８）となる。別の態様では、前記タンパク質は、シアリダーゼ融合タンパク質である。いくつかの局面において、前記タンパク質が、シアリダーゼ融合タンパク質である場合には、該シアリダーゼ融合タンパク質は、シアリダーゼシアリダーゼの触媒ドメイン及びアンカードメインを含み、この場合、前記シアリダーゼシアリダーゼの触媒ドメインが、前記シアリダーゼ融合タンパク質中の唯一のシアリダーゼシアリダーゼ部位となる。前記シアリダーゼシアリダーゼは、例えば、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓシアリダーゼシアリダーゼ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓシアリダーゼシアリダーゼ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｕｒｅａｆａｃｉｅｎｓシアリダーゼシアリダーゼ、Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｖｉｒｉｄｉｆａｃｉｅｎｓシアリダーゼシアリダーゼ、ヒトＮｅｕ２シアリダーゼシアリダーゼ又はヒトＮｅｕ４シアリダーゼシアリダーゼであってもよい。
【００１６】
ある局面では、前記シアリダーゼシアリダーゼが、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓシアリダーゼシアリダーゼである場合、前記触媒ドメインのアミノ酸配列は、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７０番目のアミノ酸ないし２９０番目のアミノ酸のいずれかのアミノ酸に始まり、６６５番目のアミノ酸ないし９０１番目のアミノ酸のいずれかのアミノ酸に終わる、アミノ酸残基の配列を含む。例えば、ある態様では、前記シアリダーゼの触媒ドメインの配列は、配列番号２に示すアミノ酸残基の配列を含む。別の態様では、前記触媒ドメインの配列は、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７４番目のアミノ酸に始まり、６８１番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸残基の配列を含む。異なる態様では、前記触媒ドメインの配列は、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７４番目のアミノ酸に始まり、６６６番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸残基の配列を含む。別の態様では、前記触媒ドメインの配列は、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２９０番目のアミノ酸に始まり、６８１番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸の配列を含む。
【００１７】
ある局面において、ここに提供される、タンパク質系組成物の作製方法で用いられるタンパク質が、アンカードメインを含むシアリダーゼ融合タンパク質である場合、該アンカードメインは、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ドメインとなる。更なる局面では、ＧＡ結合ドメインは、ヒト血小板因子４のＧＡＧ結合ドメイン、ヒトインターロイキン８のＧＡＧ結合ドメイン、ヒト抗トロンビンＩＩＩのＧＡＧ結合ドメイン、ヒトアポ蛋白ＥのＧＡＧ結合ドメイン、ヒト血管関連遊走タンパク質（ｈｕｍａｎ ａｎｇｉｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｉｇｒａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ）のＧＡＧ結合ドメイン及びヒトアンフィレギュリンのＧＡＧ結合ドメインから選択される。特定の態様では、ＧＡＧ結合ドメインのアミノ酸配列は、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７又は配列番号８に示すアミノ酸残基の配列を含む。
【００１８】
いくつかの局面において、ここに提供される、タンパク質系組成物の作製方法で用いられるタンパク質が、シアリダーゼ融合タンパク質である場合、前記シアリダーゼ融合タンパク質のアミノ酸配列は、配列番号９に示すアミノ酸残基の配列、配列番号１０に示すアミノ酸残基の配列、配列番号１１に示すアミノ酸残基の配列、配列番号１２に示すアミノ酸残基の配列、配列番号１３に示すアミノ酸残基の配列、配列番号１４に示すアミノ酸残基の配列、又は配列番号１７に示すアミノ酸残基の配列を含む。
【００１９】
ある局面では、ここに提供される方法で作製されたマイクロ粒子中のタンパク質の量は、工程ａ）の溶液中の総タンパク質量に対して、約８０％又は８０％ないし約９９％又は９９％を超える量である。別の局面では、ここに提供される方法で作製されたマイクロ粒子組成物は、更に、酸耐性コーティング剤、プロテアーゼ耐性コーティング剤、腸溶コーティング剤、充填剤、賦形剤、非活性成分、安定促進剤、味及び／又は芳香の調節剤若しくはマスキング剤、ビタミン類、治療剤、抗酸化剤、免疫調節剤、膜透過輸送調節剤、固結防止剤、キトサン又は流動促進剤を含む。
【００２０】
ここに提供される方法に係る溶液及び／又は生じる組成物は、ある局面では、更に、活性薬剤を含む。ある態様では、この活性薬剤は、抗糖尿病剤、抗痙攣薬、鎮痛剤、抗パーキンソン薬、抗炎症剤、カルシウムアンタゴニスト、麻酔薬、抗菌剤、抗マラリア剤、駆虫剤、血圧降下剤、抗ヒスタミン剤、解熱剤、α−アドレナリンアゴニスト、α遮断薬、殺生物剤、殺菌剤、呼吸器作用剤、β−アドレナリン遮断薬、避妊薬、心臓脈管薬、カルシウムチャネル阻害剤、抑制剤、診断剤、利尿剤、電解質、酵素、催眠剤、ホルモン、血糖降下剤、血糖上昇剤、筋収縮剤、筋弛緩剤、組織形成剤、糖タンパク質、核タンパク質、リポタンパク質、眼病薬、精神興奮剤、鎮静剤、ステロイド、交感神経様作用薬、副交感神経様作用薬、トランキライザー、経尿路剤、ワクチン、経膣剤、ビタミン類、ミネラル、非ステロイド系抗炎症剤、アンギオテンシン変換酵素、ポリヌクレオチド、ポリペプチド及び多糖から選択される。別の態様では、活性薬剤は、栄養補給剤である。
【００２１】
ここに提供される方法は、溶液を約２５℃未満の温度にまで漸次的に冷却することを含む。ある態様では、温度は、約４℃ないし約−４５℃である。別の態様では、温度は、約２℃ないし約−２０℃である。更なる態様では、温度は、約２℃ないし約−１５℃である。別の態様では、温度は、約０℃又は０℃ないし約−２℃又は−２℃から約−１５℃又は−１５℃ないし約−２０℃又は−２０℃の範囲にある。漸次的な冷却は、種々の速度で行うことができる。例えば、冷却は、約０．０１℃／分若しくは０．０１℃／分ないし約２０℃／分若しくは２０℃／分の速度で行ってもよい。別の態様では、漸次的な冷却は、約０．０５℃／分若しくは０．０５℃／分又は約０．１℃／分若しくは０．１℃／分ないし約１０℃／分若しくは１０℃／分又は約１５℃／分若しくは１５℃／分、約０．２℃／分若しくは０．２℃／分ないし約５℃／分若しくは５℃／分、又は約０．５℃／分若しくは０．５℃／分ないし約２℃／分若しくは２℃／分の速度で行われる。特定の態様では、漸次的な冷却は、約１℃／分又は１℃／分の速度で行われる。
【００２２】
ある局面では、ここに提供される方法で作製されるマイクロ粒子のサイズは、約０．００１ μｍ又は０．００１ μｍないし約５０ μｍ又は５０ μｍである。別の態様では、マイクロ粒子のサイズは、約０．３ μｍ若しくは０．３ μｍないし約３０ μｍ若しくは３０ μｍ、約０．５ μｍ若しくは０．５ μｍないし約１０ μｍ若しくは１０ μｍ、約０．５ μｍ若しくは０．５ μｍないし約５．０ μｍ若しくは５．０ μｍ、約１．０ μｍ若しくは１．０ μｍないし約５．０ μｍ若しくは５．０ μｍ、又は約１．０ μｍないし約２．０、３．０、４．０若しくは５．０ μｍである。
【００２３】
ここに提供される方法のある局面では、生じるタンパク質系組成物は、約５５℃、５０℃、４５℃、４４℃、４２℃、４０℃、３９℃、３８℃、３７℃又はこれを下回る温度において、約１週間ないし約１月、約１月ないし約６月、約６月ないし約１年、約１年ないし約２年、又は約２年ないし約５年の保存寿命を有する。別の局面では、前記タンパク質の少なくとも約９０％の活性が、約２５℃の温度での約６月ないし約１年の保存の後に保持されるように、前記マイクロ粒子の含水率が、調節される。別の局面では、前記マイクロ粒子の少なくとも約９０％が、約２５℃の温度での約６月ないし約１年の保存の後に凝集を起こさないように、前記マイクロ粒子の含水率が、調節される
【００２４】
ここに提供される方法の特定の局面では、前記タンパク質は、シアリダーゼの触媒ドメインとアンカードメインとを含む融合タンパク質であり、この場合、前記シアリダーゼの触媒ドメインが、前記融合タンパク質中の唯一のシアリダーゼ部位であり、前記有機溶媒は、約５体積％又は５体積％ないし約２０体積％又は２０体積％で添加され、前記対イオンは、約１ ｍＭ又は１ ｍＭないし約５ ｍＭ又は５ ｍＭの量で添加され、そして前記溶液のｐＨが、約４．５又は４．５ないし約５．５又は５．５に調製される。この局面の一態様では、前記シアリダーゼの触媒ドメインが、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓに由来し、前記アンカードメインが、ヒトアンフィレギュリン由来のＧＡＧ結合ドメインである。更に、ｐＨは、約５．０であり、そして／又は対イオンは、グリシン、クエン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸亜鉛、硫酸マグネシウム、硫酸カリウム又は硫酸カルシウムから選択される。この局面の別の態様では、前記有機溶媒は、イソプロパノールである。この局面の一態様では、生じる組成物は、唯一の有効成分として、前記タンパク質を含むマイクロ粒子を含有する（即ち、本質的に、このマイクロ粒子から成る）。別の態様では、前記方法は、更に、溶液から前記マイクロ粒子を分離して、前記マイクロ粒子以外の成分を、沈降、ろ過及び／又は凍結乾燥により除去することを含む。この局面のある態様では、前記マイクロ粒子の含水率は、約６％ないし約１２％、又は約７％ないし約１０．５％である。
【００２５】
また、本明細書中には、シアリダーゼ又はシアリダーゼ融合タンパク質のマイクロ粒子を含む組成物が提供される。前記タンパク質が、シアリダーゼ融合タンパク質である場合、前記シアリダーゼ融合タンパク質は、シアリダーゼの触媒ドメインとアンカードメインとを含んでいてもよい。ある局面では、組成物中のシアリダーゼは、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓシアリダーゼ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓシアリダーゼ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｕｒｅａｆａｃｉｅｎｓシアリダーゼ、Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｖｉｒｉｄｉｆａｃｉｅｎｓシアリダーゼ、ヒトＮｅｕ２シアリダーゼ又はヒトＮｅｕ４シアリダーゼである。
【００２６】
ある局面では、組成物中のシアリダーゼが、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓシアリダーゼである場合、前記触媒ドメインのアミノ酸配列が、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７０番目のアミノ酸ないし２９０番目のアミノ酸のいずれかのアミノ酸残基に始まり、６６５番目のアミノ酸ないし９０１番目のアミノ酸のいずれかのアミノ酸残基に終わる、アミノ酸の配列を含む。例えば、前記触媒ドメインの配列は、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２７４番目のアミノ酸に始まり、６８１番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸の配列、配列番号１に示すアミノ酸配列の、２９０番目のアミノ酸に始まり、６６６番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸の配列、又は配列番号１に示すアミノ酸配列の、２９０番目のアミノ酸に始まり、６８１番目のアミノ酸に終わる、アミノ酸の配列を含む。別の態様では、前記シアリダーゼの触媒ドメインの配列は、配列番号２に示すアミノ酸の配列を含む。
【００２７】
ある局面では、前記組成物が、シアリダーゼ融合タンパク質のマイクロ粒子を含む場合、該シアリダーゼ融合タンパク質のアンカードメインは、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合ドメインである。更なる局面では、ＧＡＧ結合ドメインは、ヒト血小板因子４のＧＡＧ結合ドメイン、ヒトインターロイキン８のＧＡＧ結合ドメイン、ヒト抗トロンビンＩＩＩのＧＡＧ結合ドメイン、ヒトアポ蛋白ＥのＧＡＧ結合ドメイン、ヒト血管関連遊走タンパク質のＧＡＧ結合ドメイン及びヒトアンフィレギュリンのＧＡＧ結合ドメインから選択される。特定の態様では、ＧＡＧ結合ドメインのアミノ酸配列が、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７又は配列番号８に示すアミノ酸残基の配列を含む。
【００２８】
ここに提供される組成物のシアリダーゼ融合タンパク質は、例えば、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４又は配列番号１７に示すアミノ酸残基の配列を含んでいてもよい。
【００２９】
ここに提供される組成物のマイクロ粒子中のタンパク質の量は、変化する場合がある。例えば、マイクロ粒子中のタンパク質量は、約６０重量％ないし約９９重量％を超える量であってもよい。ある態様では、マイクロ粒子中のタンパク質量は、約６５重量％ないし約９０重量％である。別の態様では、マイクロ粒子中のタンパク質量は、約７０重量％ないし約８５重量％、８６重量％、８７重量％、８８重量％、８９重量％又は９０重量％である。また、ここに提供される組成物のマイクロ粒子中のタンパク質量は、約９０重量％ないし約９９重量％であってもよい。
【００３０】
ここに提供される組成物中のマイクロ粒子は、更に、酸耐性コーティング剤、プロテアーゼ耐性コーティング剤、腸溶コーティング剤、充填剤、賦形剤、非活性成分、安定促進剤、味及び／又は芳香の調節剤若しくはマスキング剤、ビタミン類、治療剤、抗酸化剤、免疫調節剤、膜透過輸送調節剤、固結防止剤、キトサン又は流動促進剤を含んでいてもよい。
【００３１】
ある局面では、ここに提供される組成物は、更に、活性薬剤を含んでいてもよい。活性薬剤は、栄養補給剤、抗糖尿病剤、抗痙攣薬、鎮痛剤、抗パーキンソン薬、抗炎症剤、カルシウムアンタゴニスト、麻酔薬、抗菌剤、抗マラリア剤、駆虫剤、血圧降下剤、抗ヒスタミン剤、解熱剤、α−アドレナリンアゴニスト、α遮断薬、殺生物剤、殺菌剤、呼吸器作用剤、β−アドレナリン遮断薬、避妊薬、心臓脈管薬、カルシウムチャネル阻害剤、抑制剤、診断剤、利尿剤、電解質、酵素、催眠剤、ホルモン、血糖降下剤、血糖上昇剤、筋収縮剤、筋弛緩剤、組織形成剤、糖タンパク質、核タンパク質、リポタンパク質、眼病薬、精神興奮剤、鎮静剤、ステロイド、交感神経様作用薬、副交感神経様作用薬、トランキライザー、経尿路剤、ワクチン、経膣剤、ビタミン類、ミネラル、非ステロイド系抗炎症剤、アンギオテンシン変換酵素、ポリヌクレオチド、ポリペプチド及び多糖であってもよい。
【００３２】
ここに提供される組成物は、異なる長さの保存寿命を有していてもよい。ある局面では、保存寿命は、約５５℃、５０℃、４５℃、４４℃、４２℃、４０℃、３９℃、３８℃、３７℃又はこれを下回る温度において、約１週間ないし約１月、約１月ないし約６月、約６月ないし約１年、約１年ないし約２年、又は約２年ないし約５年である。特定の局面では、前記タンパク質の少なくとも約９０％の活性が、約２５℃の温度での約６月ないし約１年の保存の後に保持されるように、前記マイクロ粒子の含水率が、調節される。
【００３３】
ここに提供される組成物中のマイクロ粒子は、例えば、陰イオン、陽イオン、又は双性イオン等の対イオンを更に含んでいてもよい。特定の態様では、対イオンは、グリシン、クエン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸亜鉛、硫酸マグネシウム、硫酸カリウム又は硫酸カルシウムから選択される。マイクロ粒子中の対イオンの量は、変化してもよい。例えば、マイクロ粒子中の対イオンの量は、約０．５重量％若しくは０．５重量％ないし約５重量％若しくは５重量％、約０．５重量％若しくは０．５重量％ないし約２重量％若しくは２重量％、又は約１重量％若しくは１重量％ないし約２重量％若しくは２重量％である。
【００３４】
ある態様では、ここに提供される組成物中のマイクロ粒子の含水率は、約６％若しくは６％ないし約１２％若しくは１２％、又は約７％若しくは７％ないし約１０．５％若しくは１０．５％である。
【００３５】
ここに提供される組成物は、種々の投与方法用に製剤することができる。例えば、組成物は、例えば、摂取等による経口投与、静脈内、鼻腔内、非経口、皮下又は筋肉内投与により投与できる。組成物は、経肺投与又は点眼投与用に製剤してもよい。特定の局面では、ここに提供される製剤は、吸入用である。
【００３６】
ここに提供される組成物は、錠剤、カプセル剤、ゲル、バイアル、充填済みシリンジ（ｐｒｅ−ｆｉｌｌｅｄ ｓｙｒｉｎｇｅ）、吸入器、静電装置及びその他の送達用装置として、製剤できる。組成物の投与量は、１回の投与当たりタンパク質が約０．５ ｍｇないし約１００ ｍｇ、又は１回の投与当たりタンパク質が約０．７５ ｍｇ、１ ｍｇ、１．５ ｍｇ、２ ｍｇ、３ ｍｇ、５ ｍｇ、１０ ｍｇ、１５ ｍｇ、２０ ｍｇ、３０ ｍｇ、４０ ｍｇ、４５ ｍｇ、５０ ｍｇ、５５ ｍｇ又は６０ ｍｇであってもよい。１回投与量の投与の頻度は、例えば、インフルエンザの治療又は予防では、１日に３回又は４回以上、ないし１日に２回、ないし１日に１回、ないし１週間に２回、ないし１週間に１回、ないし２週間に１回、又は２週間に１回よりも低頻度であってもよい。予防の場合、投与は、おおよそ２週間に１回又はこれよりも低頻度であってもよく、例えば、３週間に１回又は４週間もしくはこれより長い期間に１回であってもよい。
【００３７】
ここに提供される組成物中のマイクロ粒子のサイズは、変化してもよい。例えば、マイクロ粒子のサイズは、約０．００１ μｍ又は０．００１ μｍないし約５０ μｍ又は５０ μｍであってもよい。特定の態様では、マイクロ粒子のサイズは、約０．３ μｍ若しくは０．３ μｍないし約３０ μｍ若しくは３０ μｍである、約０．５ μｍ若しくは０．５ μｍないし約１０ μｍ若しくは１０ μｍである、約０．５ μｍ若しくは０．５ μｍないし約５．０ μｍ若しくは５．０ μｍである、約１．０ μｍ若しくは１．０ μｍないし約５．０ μｍ若しくは５．０ μｍ、又は約１．０ μｍないし約２．０、３．０、４．０若しくは５．０ μｍである。。
【００３８】
また、本明細書中には、シアリダーゼ又はシアリダーゼ融合タンパク質のマイクロ粒子を含む組成物と、前記組成物用の包装材料と、前記組成物が治療に適用されることを示す表示とを含む製品が提供されている。ある態様では、前記治療の適用は、インフルエンザに対するものである。前記製品は、組成物の経肺投与用の吸入器を含んでもよい。特定の態様では、前記吸入器は、乾燥粉末用吸入器、定量吸入器又は静電送達用装置である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３９】
定義
他に規定されない限り、本明細書で用いる全ての技術用語及び専門用語は、本発明が属する技術分野の当業者が通常理解する意味と同様の意味を有する。本明細書の全開示内容を通じて参照される全ての特許、特許出願、公開公報及び論文、Ｇｅｎｂａｎｋ配列、ウェブサイト並びにその他の公開された資料は、他に特記のない限り、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に含まれる用語に複数の定義が存在する場合には、本章に記載する定義が優先される。参照が、ＵＲＬ又は別の識別子若しくはアドレス等で表示されている場合、そのような識別子は変化する場合があり、インターネット上での特定の情報は去来する可能性があるが、インターネット上でのサーチを行うことで、同等の情報を見つけ出せることが理解されるべきである。これらについての参照が、その情報の入手可能性と公的伝搬性を証拠立てるものである。
【００４０】
ここで用いられる「高分子」という用語は、結合によって連結された２又は３個以上のモノマーサブユニット又はこれらの誘導体から構成される分子、又は三次構造を形成可能なあらゆる高分子を意味するものとして用いられる。例えば、高分子は、ポリヌクレオチド、ＤＮＡ、ＲＮＡ及びペプチド核酸（ＰＮＡ）を含む核酸分子、ポリペプチド、タンパク質、炭水化物、若しくは脂質、又はこれらの誘導体若しくは組み合わせ（例えば、それぞれ、ペプチド核酸部分を含む核酸分子もしくは糖タンパク質等）であってもよい。本明細書中に提供される方法、組成物、配合、キット及び製品は、タンパク質に関して記載されてはいるものの、本明細書に定義され、提供されるその他の高分子と共に使用するために調整することも可能である。
【００４１】
本明細書に用いる「実質的に（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ）」又は「実質的な（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌ）」という用語は、一般的に、例えば核酸配列若しくはタンパク質配列又は物質の元々の組成といった参照との比較において、少なくとも約６０％若しくは６０％、約７０％若しくは７０％、又は約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％、又はこれを超えるパーセンテージを意味する。従って、他の全ての夾雑物及び／又は対イオン、塩及びカクテル溶液からの溶媒を含む成分から「実質的に」分離されたマイクロ粒子を含む組成物は、少なくとも約６０％若しくは６０％、約７０％若しくは７０％、又は約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％、又はこれを超える量の夾雑物及び／又は試薬が、マイクロ粒子が形成されたカクテル溶液から取り除かれたことを意味する。「実質的に同一」又は「実質的に相同的」という用語又はこれらの類語は、関連する分野の当業者が理解するように、文脈によって変化し、一般的には、少なくとも約６０％若しくは６０％、約７０％若しくは７０％、又は約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％、又はこれを超える同一性を意味する。
【００４２】
ここで用いられる「〜から本質的に成る（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」又は「〜から本質的に成っている（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」という用語は、その物質若しくはその物質の特性と関連性のない他の実質的に全ての構成物／成分が、その物質から除去されるか又は分離された状態にある物質を指す。従って、マイクロ粒子「から本質的に成っている」組成物は、夾雑物及び溶媒といった、他の全ての成分が、該マイクロ粒子を含む溶液／懸濁液から実質的に除去されたことを意味する。
【００４３】
ここで用いられる「マイクロ粒子」という用語は、「マイクロスフェア」と互換性を以て使用可能であり、約０．００１又は０．００１ミクロン（μｍ）ないし約５００又は５００ミクロンのサイズ範囲（平均の長さ、幅又は直径）を有し、高分子を含み、対象に薬物又は栄養補給剤等の目的の薬剤を送達する粒子を指す。薬剤は、例えば、タンパク質、核酸、脂質又は多糖等の高分子であってもよく、マイクロ粒子を形成する高分子は、薬剤又は栄養補給剤といった活性薬剤の担体となる場合もある。マイクロ粒子には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ乳酸グリコール酸（ＰＬＧＡ）といったポリマーを含む合成分子、並びにアルブミン、ゼラチン、キトサン及びデキストランといった天然ポリマーを含んでいてもよい。また、本明細書に記載する「マイクロ粒子」は、特定の１種類のみの天然高分子若しくは合成高分子、又は複数種類の同天然高分子若しくは合成高分子（例えば、複数種類のタンパク質）、又は複数の異なる種類の天然若しくは合成高分子の組み合わせ（例えば、タンパク質と核酸又はタンパク質と合成ポリマー）を含むか、これらから作製可能なものであってもよい。
【００４４】
また、ここで用いられる「マイクロ粒子」という用語については、高分子を含む溶液の凍結及び／又は乾燥した粒子もここでは意図されているが、一般的に、この粒子が作り出される溶液全体からの固体形体ではない粒子を指すこともある。むしろ、ここで用いるマイクロ粒子とは、一般的に、これらに限定されるわけではないが、沈殿、沈降、相分離及びコロイド形成を含むプロセスによって形成され、塩、対イオン、溶媒及び他の成分を含む溶液の成分の分画の集合物である。ここで用いる「沈殿」という用語は、溶液中の目的の溶質、例えば、マイクロ粒子の成分などが、もはや溶液中に留まることができず、溶液の形成に用いた溶媒とは別の相を形成するプロセスを指す。マイクロ粒子の沈殿と、沈殿するマイクロ粒子のサイズの制御は、温度、イオン強度、ｐＨ、誘電率、対イオン濃度、有機溶媒濃度の調整、高分子電解質若しくはポリマー、界面活性剤、洗剤の添加、又はこれらの組合せを含む種々の手段により達成可能であるが、これらの手段に限定されるわけではない。
【００４５】
ここで用いられる「相分離」という用語は、溶液等の単一の均一な相を、例えば、溶媒又は溶液中の固体粒子の懸濁液といった、２又は３種類以上の相に変換することを指す。
【００４６】
ここで用いられる「沈降」という用語は、液体中に懸濁されるか、又は重力、遠心力又は電気力といった外力に応じて溶液中に形成した、マイクロ粒子等の粒子の移動を指す。
【００４７】
本明細書では「溶液」という用語は、「カクテル溶液」と互換性を以て使用され、単一の相、固体、液体又は気体中の２又は３種類以上の成分の均一な混合物であって、個々の成分は、分子レベルでのみ認識可能な、混合物を指す。溶液は、塩等の１又は２種類以上の溶質が、水又はアルコール等の溶媒中に溶解しているか、又は水とエチルアルコールの混合物等の混和可能な溶媒の混合物中に溶解している液体であってもよい。溶液は、液体溶液が凍結した形態にあるものでもよい。
【００４８】
本明細書で用いる「混和可能」という用語は、液体、固体及び気体等の１又は２種類以上の成分が、共に混合されて、単一の均一な相を形成する能力を指す。従って、２種類の液体が、混合されて単一の均一な相を形成可能であり、その個々の成分が、分子レベルでのみ認識される場合には、混和可能なものとなる。成分が「部分的に混和可能」な場合、これらの成分は、一定の濃度範囲において、混合されて単一の均一な相を形成可能であるが、他の濃度範囲では不可能であることを意味する。ここで用いるように、溶媒が別の溶媒と「部分的に混和可能」な場合、この溶媒は、他の溶媒と混合した際に、約５０体積％若しくは５０体積％、約４５体積％若しくは４５体積％、約４０体積％若しくは４０体積％、約３５体積％若しくは３５体積％、約３０体積％若しくは３０体積％、約２５体積％若しくは２５体積％、約２０体積％若しくは２０体積％、約１５体積％若しくは１５体積％、約１０体積％若しくは１０体積％、約９体積％若しくは９体積％、約８体積％若しくは８体積％、約７体積％若しくは７体積％、約６体積％若しくは６体積％、約５体積％若しくは５体積％、約４体積％若しくは４体積％、約３体積％若しくは３体積％、約２体積％若しくは２体積％、約１体積％若しくは１体積％、約０．５体積％若しくは０．５体積％又はこれを下回る濃度で混和可能であることを意味する。
【００４９】
本明細書で用いる「混和不可能」とは、液体、固体又は気体等の２又は３種類以上の成分を混合した場合に、これらが複数の相を形成することを意味する。例えば、有機溶媒が、水性溶媒と混和不可能な場合（例えば、ヘキサンと水）、有機溶媒は、水性溶媒の相と混和されない個別の相として視認できる。
【００５０】
本明細書で用いる場合、「ポリペプチド」という用語は、ペプチド結合（修飾ペプチド結合であってもよい）により連結された、少なくとも２個のアミノ酸又はアミノ酸誘導体（質量修飾アミノ酸及びアミノ酸類似体を含む）を意味する。当業者であれば、ペプチドは、通常、約５０個ないし約１００個よりも少ないアミノ酸残基を含み、タンパク質は多くの場合、天然供給源から得られ、翻訳後修飾を含む場合があることを把握しているであろうが、本明細書では、「ポリペプチド」、「ペプチド」及び「タンパク質」という用語は、本質的に同義語として用いられる。ポリペプチド又はタンパク質は、少なくとも、コーディング配列の一部、又は例えばリーディングフレーム内のコーディングフレーム以外に位置しているため、若しくは、イントロン配列、３’若しくは５’非翻訳配列、プローモーター等の調節因子配列であるために自然に翻訳されないヌクレオチド配列の一部を包含していてもよいポリヌクレオチドから翻訳することができる。ポリペプチドは、化学的に合成することも可能であり、翻訳後又は化学合成後に化学的方法又は酵素的方法により修飾を施すことも可能である。ポリペプチドは、リン酸化（リンタンパク質）、グリコシル化（糖タンパク質、プロテオグリカン）等により、翻訳後修飾を施すことが可能であり、これらの修飾は、細胞内又はｉｎ ｖｉｔｒｏでの反応において行うことが可能である。
【００５１】
本明細書で用いる場合、「融合タンパク質」という用語は、２つ以上のタンパク質又はポリペプチドから得られたドメインの複合体であるタンパク質を指す。ドメインは、Ｈｉｓ６タグのような、ポリペプチドタグであってもよい。複合体は、ドメインを、化学結合、ＤＮＡ組換え技術、又は組換え発現と化学結合の組合せによって連結させることで、調製可能である。
【００５２】
種々の化学リンカーが当業者に知られており、これらのリンカーには、以下に限定されるわけではないが、典型的には、１ないし約６０個のアミノ酸、より一般的には、約１０ないし３０個のアミノ酸を含むアミノ酸及びペプチドによる結合、Ｎ−スクシンイミジル(４−ヨードアセチル)アミノベンゾエート、スルホスクシンイミジル(４−ヨードアセチル)アミノベンゾエート、４−スクシンイミジルオキシカルボニル−ａ−(２−ピリジルジチオ)トルエン、スルホスクシンイミジル−６− [ａ−メチル−ａ−(ピリジルジチオ)トルアミド]ヘキサノエート、Ｎ−スクシンイミジル−３−(−２−ピリジルジチオ)−プロピオネート、スクシンイミジル−６−[３(−(−２−ピリジルジチオ)プロピオンアミド] ヘキサノエート、スルホスクシンイミジル−６−[３(−(−２−ピリジルジチオ)プロピオンアミド] ヘキサノエート、３−(２−ピリジルジチオ)プロピオニルヒドラジド、Ｅｌｌｍａｎ試薬、ジクロロトリアジン酸、及びＳ−(２−チオピリジル)−Ｌ−システインを含むが、これらに限定されない、ヘテロ２機能性（ｈｅｔｅｒｏｂｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ）の切断可能な架橋が含まれる。
【００５３】
本明細書で用いる「シアリダーゼ融合タンパク質」という用語は、１又は２つ以上のドメインが、少なくとも約６０％若しくは６０％、約７０％若しくは７０％、又は約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％、又はこれを超えるシアリダーゼの触媒活性を保持するシアリダーゼ又はその一部である融合タンパク質を指す。本明細書で用いるシアリダーゼ融合タンパク質は、シアリダーゼと実質的に相同的なタンパク質又はポリペプチドを含み、そしてシアリダーゼの酵素活性を保持する融合タンパク質を指す場合もある。
【００５４】
本明細書で用いるタンパク質の「触媒ドメイン」という用語は、シアリダーゼと実質的に相同的な配列の一部だけが、そのタンパク質の触媒活性を示すドメイン（例えば、配列番号１の２７４−６６６番目の残基は、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓシアリダーゼの触媒ドメインとして同定されている）又はその触媒活性断片を含むアミノ酸残基の配列である、タンパク質又はポリペプチドを指す。触媒ドメイン又はその触媒活性断片は、少なくとも約６０％若しくは６０％、約７０％若しくは７０％、又は約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％、又はこれを超える、前記タンパク質の触媒活性を保持する。
【００５５】
本明細書で用いる場合、「流動特性」という用語は、「流動する」能力を付与する特性を指し、この場合、「流動する」とは、物質を、凝集等による障害を伴うことなく、注ぎ込み、注ぎ込まれた容器の形状と同じ形状になることを可能にできる特性である。流体は、一般的に「流動する」特性を有しており、この特性によって、流体は一般的に変形しやすく、即ち、その形状を変化させることができる。ここで用いる「流体」という用語には、液体、エマルジョン、エアロゾル及びガスを含むコロイドが包含される。マイクロ粒子等の固体粒子の懸濁液を含む液体、エアロゾル及びガスも、ここに定義する「流体」として考慮される。
【００５６】
本明細書で用いる場合、エマルジョンは、第１の液体と第２の液体の２種類の混和不可能な液体から成るコロイドとして定義され、この場合、第１の液体は、第２の液体中に分散している。
【００５７】
本明細書で用いる場合、界面活性剤（又は「表面活性剤」）は、化学物質又は天然物質であり、水性溶液に溶解した場合、その溶液の表面張力、又は溶液中の２つ以上の相の間の界面張力を低下させる。界面活性分子は、一般的には両親媒性を示し、親水性の頭部と疎水性の尾部を含む。界面活性分子は、本明細書に提供されるマイクロ粒子の安定剤として作用可能であり、そして／又はその流動特性を向上できる。
【００５８】
本明細書で用いる場合、組み合わせとは、２又は３個以上の目的のアイテム間の何らかの連関を指す。例えば、マイクロ粒子と吸入器の組み合わせは、治療剤の肺送達に用いることができる。
【００５９】
本明細書で用いる場合、組成物とは、あらゆる混合物を指す。組成物は、溶液、懸濁液、液体、粉末、ペースト、水溶性、非水溶性又はこれらのいずれかの組合せであってもよい。
【００６０】
本明細書で用いる場合、キットとは、成分の組み合わせであって、随意に使用説明書並びに／又はその組み合わせと共に使用する試薬及び装置と共にパッケージングされていてもよいものを指す。
【００６１】
本明細書で用いる場合、「酵素」という用語は、化学反応又は生物学的プロセスを触媒するタンパク質を指す。酵素は、一般的にこのような反応及びプロセスを促進し、そして／又はその速度を増加させる。加えて、酵素は、一般的に、特定の反応又はプロセスに対する特異性を示し、一連の特定の反応物を特定の生成物に変換する。
【００６２】
本明細書で用いる場合、「コロイド」という用語は、マイクロ粒子等の固体粒子の、このマイクロ粒子が形成された溶液等の液体中での分散体を指す。「コロイド安定性」という用語は、粒子が実質的に凝集を起こさないコロイドを指す。例えば、安定なコロイドは、マイクロ粒子等の固体粒子の約３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、４％、３％、２％、１ ％、０．５％又は０．５％未満が凝集を形成したコロイドである。
【００６３】
「凝塊（Ａｇｇｌｏｍｅｒａｔｅ）」という用語は、マイクロ粒子等の１又は２個以上の粒子が、ｖａｎ ｄｅｒ Ｗａａｌｓ力又は表面張力又は静電気力又はその組み合わせにより相互に緩やかに保持し合った会合体を指す。場合によっては、静電気力で保持された会合体は、「凝集塊（Ｆｌｏｃｃｕｌａｔｅ）」として定義される場合がある。本明細書では、「凝塊（Ａｇｇｌｏｍｅｒａｔｅ）」には、「凝集塊（Ｆｌｏｃｃｕｌａｔｅ）」が包含される。凝塊は、一般的に、空気又は液体中のせん断力により直ちに分解することができる。「分散する」又は「分散性」という用語は、粒子が「流動する」能力、即ち、例えば、凝集の存在によって移動が妨害されない程度を指す。
【００６４】
「凝集体（ａｇｇｒｅｇａｔｅ）」という用語は、マイクロ粒子、アモルファス沈殿物、結晶様粒子若しくはガラス様粒子又はこれらの組合せのような１又は２つ以上の粒子の会合体を指す。凝集体は、一般に、分散するか、又は所望の特性を有する均一な懸濁液若しくはエアロゾルを形成する能力を阻害し、容易に分解されることはない。
【００６５】
本明細書で用いる「非変性」という用語は、タンパク質に関する用語であり、タンパク質のコンフォメーション、即ち、タンパク質の２次構造、３次構造、４次構造又はこれらの組合せが、そのタンパク質の天然の状態から本質的に変化していないことを意味する。「非変性」と「天然」という用語は、本明細書では互換性を以て使用され、そのタンパク質の長さ及び／又は天然コンフォメーションの全て、又は少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％ ９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％を保持しているタンパク質を意味する。ここで互換性を以て使用される「非変性」と「天然」という用語には、そのタンパク質の長さ、並びに２次構造、３次構造及び４次構造を含むコンフォメーションといった、細胞内のタンパク質の天然状態が包含される。ここに定義される場合、「非変性」又は「天然」のタンパク質には、例えば、アミノ酸構成単位を提供する栄養物、抗酸化剤、酵素、抗体、遺伝子発現の制御因子、スキャフォールド等の、本明細書中に提供される組成物中のタンパク質であって、一般的に、その天然状態にあるタンパク質の正常な活性又は機能の少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％ ９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％を保持しているタンパク質が含まれる。
【００６６】
本明細書で用いる場合、「活性」又は「機能」という用語は、「生物活性」と互換性を以て使用可能であり、タンパク質、ビタミン、ミネラル若しくは薬物等の化合物のｉｎ ｖｉｖｏでの活性、又は化合物、組成物若しくは他の混合物のｉｎ ｖｉｖｏでの投与により生じる生理反応を指す。従って、活性には、化合物、組成物及び混合物による治療効果と薬剤活性が包含される。生物活性は、このような活性を試験又は使用するために設計されたｉｎ ｖｉｔｒｏの系でも観察できる。
【００６７】
本明細書で用いる場合、「機能活性」は、「活性」、「生物活性」又は「機能」と互換性を以て使用可能であり、天然若しくは非変性タンパク質を関連する１又は２種類以上の活性を示すポリペプチド又はその一部を指す。機能活性には、以下に限定されるわけではないが、生物活性、触媒若しくは酵素活性、抗原性（抗ポリペプチド抗体に結合するポリペプチドに結合するか又はこれと競合する能力）、免疫原性、多量体形成能、及びポリペプチドのレセプター若しくはリガンドに特異的に結合する能力が含まれる。
【００６８】
本明細書で用いる「変性」という用語は、その天然若しくは非変性コンフォメーション、即ち、２次構造、３次構造若しくは４次構造又はこれらの組合せから変化しているタンパク質を指す。コンフォメーションの変化は、通常、低温殺菌、放射線、熱、化学物質、酵素作用、酸若しくはアルカリへの曝露、及びイオン交換並びにこれらのいずれかの組合せを含む加工工程により生じる。タンパク質の変性は、一般的に、その天然又は非変性状態にあるタンパク質の活性及び機能を含む元々の特性の全て又は一定部分、通常、５０％超及び少なくとも約７０％、８０％、８５％、９０％ ９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％を失わせることになる。
【００６９】
本明細書で用いる場合、「栄養補給剤」という用語は、ビタミン、ミネラル、脂肪酸、アミノ酸、炭水化物、酵素、タンパク質、生化学物質及びその代謝物、ハーブ並びに植物を含む栄養素を、ヒトを含む動物等の宿主に提供する物質又は組成物を意味する。栄養補給剤を通じて宿主に供給される栄養素には、宿主の食習慣に無い若しくは欠けている、生存、良好な健康状態、疾患の治癒又は疾患の予防のために必須の栄養素、並びに、良好な健康状態を増強し、疾患を予防若しくは治癒すると信じられているが、生存又は良好な健康状態に必須であるとは考えられていない栄養素が含まれる場合がある。
【００７０】
本明細書で用いる場合、「疎水性」とは、帯電していないか、若しくは帯電−分極しない物質、又は水若しくは他の極性溶媒に結合する程には帯電していないか、若しくは帯電−極性を示さない物質を指す。疎水性リガンドは、疎水性相互作用を通じて、相互に会合するか、又は水若しくは極性溶媒の存在下で非極性の分子若しくは溶媒と会合することができる。疎水性リガンドは、一般的に、極性溶媒よりも非極性溶媒中に溶解しやすい。非極性溶媒の例としては、ヘキサン等のアルカン、ジエチルエーテル等のアルキルエーテル、ベンゼン等の芳香族炭化水素並びに塩化メチレン及び四塩化炭素等のハロゲン化アルキル、モノ‐、ジ‐及びトリグリセリド、オレイン酸、リノール酸、パルミチン酸、ステアリン酸等の脂肪酸、これらの結合型及びこれらのエステルが挙げられる。
【００７１】
本明細書で用いる場合、「治療剤」という用語は、ヒトを含む宿主に投与した際に、遺伝性疾患若しくは後天性疾患の症状若しくは兆候を効果的に緩和するか若しくは取り除き、又は該疾患を治療する薬剤を意味する。
【００７２】
本明細書で用いる場合、「保存寿命」又は「安定性」とは、マイクロ粒子組成物の調製後に、この組成物が、組成物中に存在するタンパク質の初期活性と、その他の、サイズ、形状及び空気力学的な粒径分布等のマイクロ粒子の一般的な物理的特徴の少なくとも約７０％、８０％、８５％、９０％ ９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％を保持している時間を指す。従って、例えば、ここでは約１８℃ないし約２５℃、２６℃、２７℃又は２８℃の範囲として定義される室温で、３０日間安定であるか、又は３０日間の保存寿命を有する組成物は、１８℃ないし約２５℃、２６℃、２７℃又は２８℃で３０日間保存した後に、組成物中に存在するタンパク質の初期の活性量の少なくとも約７０％、８０％、８５％、９０％ ９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％を保持しているであろう。本明細書に提供されるマイクロ粒子組成物の保存寿命は、一般的に、５５℃で少なくとも約１０日間、４２℃で少なくとも約２‐３週間、そして２５℃で少なくとも約８月以上であるが、本明細書中に提供される方法で作製した、あらゆる温度において、あらゆる長さの保存寿命を有するマイクロ粒子組成物も、ここに考慮される。
【００７３】
本明細書で用いる場合、「生物活性薬剤」、「活性薬剤」、「生物薬剤」又は「薬剤」は、生体内に導入した際に、細胞、組織若しくは器官レベルでの生体機能の変化、及び／又は体重及び体型等の表面的外観の変化といった、所望の生体反応を生じさせる任意の物質である。このような物質は、医薬、薬物、治療薬、栄養補給剤、ハーブ、ホルモン等又はこれらのいずれかの組合せを含む、任意の、合成若しくは天然要素、又は化合物、タンパク質、細胞又は組織であってもよい。これらの用語には、ここに具体的に言及される活性薬剤の医薬的に許容可能で、薬理学的に活性な誘導体、例えば、以下に限定されるわけではないが、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、活性代謝物、異性体、断片、類似体等も包含される。「生物活性薬剤」、「生物薬剤」又は「薬剤」という用語を用いた場合、又は特定の活性薬剤が具体的に同定されている場合には、活性薬剤自体と、医薬的に許容可能で薬理学的に活性な塩、エステル、アミド、プロドラッグ、活性代謝物、異性体、断片及び類似体も含むことが意図されている。
【００７４】
本明細書で用いる場合、「対象」とは、哺乳動物、典型的にはヒトを含む動物として定義される。
【００７５】
本明細書で用いる場合、「治療上有効量」とは、組成物を対象に１回投与した際に、所望の治療上、予防上、又は他の生物学的な作用若しくは反応を生じさせるための活性薬剤の量を指す。投与における活性薬剤の特定の量は、活性薬剤の特性、治療する状態の特性、対象の年齢やサイズ等の条件によって大きく変化する。
【００７６】
本明細書で用いる場合、化合物の「医薬的に許容可能な誘導体」には、その化合物の塩、エステル、エノールエーテル、エノールエステル、酸、塩基、溶媒和物、水和物又はプロドラッグが含まれる。このような誘導体については、当業者であれば、既知の誘導体化の方法を用いて、直ちに調製できる。作り出された化合物は、実質的な毒性作用を生じることなく、動物又はヒトに投与可能であり、医薬的に活性であるか又はプロドラッグである。医薬的に許容可能な塩には、以下に限定されるわけではないが、アミン塩、例えば、これらに限定されるわけではないが、Ｎ，Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、アンモニア、ジエタノールアミン及びその他のヒドロキシアルキルアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、１−パラ−クロロベンジル−２−ピロリジン−１'−イルメチルベンズイミダゾール、ジエチルアミン及びその他のアルキルアミン、ピペラジン及びトリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン；アルカリ金属塩、例えば、これらに限定されるものではないが、リチウム、カリウム、及びナトリウム等；アルカリ土類金属塩、例えば、これらに限定されるものではないが、バリウム、カルシウム及びマグネシウム等；遷移金属塩例えば、これらに限定されるものではないが、亜鉛等；並びに他の金属塩、例えば、これらに限定されるものではないが、リン酸水素ナトリウム及びリン酸二ナトリウムが含まれ、そして、以下に限定されるわけではないが、鉱酸の塩、例えば、これらに限定されるものではないが、塩酸塩及び硫酸塩；並びに有機酸の塩、例えば、これらに限定されるものではないが、酢酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、酪酸塩、吉草酸塩及びフマル酸塩が含まれる。医薬的に許容可能なエステルには、以下に限定されないが、カルボン酸、リン酸、ホスフィン酸、スルホン酸、スルフィン酸及びボロン酸等の酸性基の、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、シクロアルキル及びヘテロシクリルエステルが含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００７７】
本明細書で用いる場合、「治療」とは、状態、障害又は疾患の１又は２つ以上の症状を緩和するか又は有益な方向に変化させる、いずれかの手法を意味する。治療には、本明細書中の組成物の、インフルエンザの治療用の使用等、何らかの医薬的使用も包含される。
【００７８】
本明細書で用いる場合、「有機溶媒」とは、その分子が炭素と水素を含む化合物の巨大なクラスの任意のメンバーである有機化合物である溶媒を指す。このような溶媒には、例えば、以下のクラスの化合物が含まれていてもよい：脂肪族又は芳香族アルコール、ポリオール、アルデヒド、アルカン、アルケン、アルキン、アミド、アミン、芳香族、アゾ化合物、カルボン酸、エステル、ジオキサン、エーテル、ハロアルカン、イミン、イミド、ケトン、ニトリル、フェノール及びチオール。
【００７９】
本明細書で用いる場合、「水性溶媒」とは、水、又は、少なくとも約５０％若しくは５０％、少なくとも約６０％若しくは６０％、少なくとも約７０％若しくは７０％、又は約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％、又はこれを超える量の水を含む溶媒の混合物を指す。ここで用いる「水性溶媒」という用語は、例えば、バッファー、塩溶液、対イオン、及びその他の水に溶解する溶質を含む溶液といった、溶媒として水を含む溶液も指す。
【００８０】
本明細書で用いる場合、「ｐＩ」又は「等電点」という用語は、タンパク質又はポリペプチド上に実効電荷が存在しないｐＨを指す。
【００８１】
本明細書で用いる場合、「対イオン」という用語は、タンパク質、核酸、脂質又はオリゴ糖等の高分子からのマイクロ粒子の形成を開始させることができる、帯電した分子又は帯電−分極可能な分子を指す。例えば、ＤＡＳ１８１融合タンパク質（配列番号１７）の場合には、硫酸ナトリウムが本明細書に提供される方法でのマイクロ粒子の形成を開始させることができるので、これが対イオンとなり、一方、グリシン、塩化ナトリウム又は酢酸ナトリウムは、一般的にＤＡＳ１８１の対イオンとしては適していない。ある帯電分子が対イオンとなるかどうかは、以下に限定されないが、タンパク質の種類、ｐＨ、イオン強度、使用する有機溶媒の種類、並びに塩及び活性薬剤などの追加成分の存在を含むパラメーターに基づいて、経験的に決定できる。本明細書に提供され、記載されるように、対イオンは、陰イオン又は全体として負の電荷を有するか若しくは全体的に負に帯電−分極可能な基を有するイオン、陽イオン又は全体として正の電荷を有するか若しくは全体的に正に帯電−分極可能な基を有するイオン、又は双性イオン並びに負と正の両方の電荷を有するか若しくは負と正の両方に帯電−分極可能な基を有するイオンであってもよい。
【００８２】
本明細書で用いる場合、「冷却」という用語は、マイクロ粒子を得るための所望の温度まで温度を低下させること、又は所望の大きさのマイクロ粒子が得られた後に、溶媒を揮発させることによりマイクロ粒子の乾燥製剤を得る（例えば、凍結乾燥する）ための所望の温度にまで更に温度を低下させることを指す。また、ここで用いる「漸次的な冷却」又は「徐々に冷却する」又は「徐々に冷却された」という用語は、周囲温度（約１８℃又は１８℃ないし約３０℃又は３０℃）から、マイクロ粒子を形成させるための所望の温度までの温度の低下が、溶液が凍結する前に溶液中でマイクロ粒子を作り出すために適切な速度で、又は適切な時間をかけて行われることを意味する。従って、漸次的な冷却とは、溶液全体が、個々のマイクロ粒子を作り出すことなく固体状態に変換されるような、即時冷凍、スプレードライ又はスプレーフリーズドライ等とは異なっている。
【００８３】
漸次的冷却の速度は、高分子の種類、溶媒、対イオン及び他の成分並びに冷却方法（例えば、熱交換器、冷蔵庫又は冷凍庫又は凍結乾燥器等）に基づいて、経験的に決定され、例えば、約１分若しくは１分、約２分若しくは２分、約３分若しくは３分、約５分若しくは５分、約７分若しくは７分、約１０分若しくは１０分、約１５分若しくは１５分、約２０分若しくは２０分、約２５分若しくは２５分、約３０分若しくは３０分、約１時間若しくは１時間、約２時間若しくは２時間、約５時間若しくは５時間又は約１０時間若しくは１０時間ないし約１．５分若しくは１．５分、約２分若しくは２分、約３分若しくは３分、約５分若しくは５分、約７分若しくは７分、約１０分若しくは１０分、約１５分若しくは１５分、約２０分若しくは２０分、約２５分若しくは２５分、約３０分若しくは３０分、約１時間若しくは１時間、約２時間若しくは２時間、約５時間若しくは５時間、約１０時間若しくは１０時間又は約１５時間若しくは１５時間のマイクロ粒子形成時間の範囲で変化してもよい。
【００８４】
本明細書で用いる場合、「冷却」という用語は、マイクロ粒子を得るための所望の温度まで温度を低下させること、又はマイクロ粒子が得られた後に、溶媒を揮発させることによりマイクロ粒子の乾燥製剤を得る（例えば、凍結乾燥する）ための所望の温度にまで更に温度を低下させることを指す。また、ここで用いる「漸次的な冷却」又は「徐々に冷却する」又は「徐々に冷却された」という用語は、溶液カクテルが形成された周囲温度（約１５℃又は１５℃ないし約５０℃又は約５０℃、一般的には約１８℃又は１８℃ないし約３０℃又は３０℃）から、マイクロ粒子を形成させるための所望の温度までの温度の低下が、溶液が凍結する前に溶液中で所望の大きさのマイクロ粒子を作り出すために適切な速度で、又は適切な時間をかけて行われることを意味する。従って、漸次的な冷却とは、溶液全体が、個々のマイクロ粒子を作り出すことなく固体状態に変換されるような、即時冷凍、スプレードライ又はスプレーフリーズドライ等とは異なっている。
【００８５】
漸次的冷却の速度は、高分子の種類、溶媒、対イオン及び他の成分並びに冷却方法（例えば、熱交換器、冷蔵庫又は冷凍庫又は凍結乾燥器等）に基づいて、経験的に決定され、例えば、約０．１秒若しくは０．１秒、約０．２秒若しくは０．２秒、約０．５秒若しくは０．５秒、約１秒若しくは１秒、約１０秒若しくは１０秒、約２０秒若しくは２０秒、約３０秒若しくは３０秒、約４０秒若しくは４０秒、約５０秒若しくは５０秒、約１分若しくは１分、約２分若しくは２分、約３分若しくは３分、約５分若しくは５分、約７分若しくは７分、約１０分若しくは１０分、約１５分若しくは１５分、約２０分若しくは２０分、約２５分若しくは２５分、約３０分若しくは３０分、約１時間若しくは１時間、約２時間若しくは２時間、約５時間若しくは５時間又は約１０時間若しくは１０時間ないし約１．５分若しくは１．５分、約２分若しくは２分、約３分若しくは３分、約５分若しくは５分、約７分若しくは７分、約１０分若しくは１０分、約１５分若しくは１５分、約２０分若しくは２０分、約２５分若しくは２５分、約３０分若しくは３０分、約１時間若しくは１時間、約２時間若しくは２時間、約５時間若しくは５時間、約１０時間若しくは１０時間又は約１５時間若しくは１５時間のマイクロ粒子形成時間の範囲で変化してもよい。
【００８６】
例えば、カクテル溶液（例えば、熱交換器を用いて）を迅速に冷却して、マイクロ粒子の懸濁液を著しい温度変化を伴うことなく一定の時間放置し、次いで、前記カクテル溶液を即時冷凍することにより、所望のサイズのマイクロ粒子を形成できる。
【００８７】
マイクロ粒子を形成する温度は、高分子の種類、溶媒、対イオン及び他の成分並びに冷却方法及び冷却の一様性に基づいて、経験的に決定され、約１５℃若しくは１５℃、約１０℃若しくは１０℃、約８℃若しくは８℃、約５℃若しくは５℃、約３℃若しくは３℃、約２℃若しくは２℃、約１℃若しくは１℃、約−２℃若しくは−２℃、約−５℃若しくは−５℃、約−７．５℃若しくは−７．５℃、約−１０℃若しくは−１０℃、約−１５℃若しくは−１５℃、約−２０℃若しくは−２０℃、約−２５℃若しくは−２５℃、約−３０℃若しくは−３０℃、約−３５℃若しくは−３５℃、約−４０℃若しくは−４０℃又は約−４５℃若しくは−４５℃の範囲で変化してもよい。
【００８８】
本明細書で用いる場合、「スプレードライ」という用語は、タンパク質等の高分子を含む溶液が、通常、約２、３ミリ秒ないし１−２秒ないし数十秒間の間、高温の乾燥媒体中に噴霧されることで、乾燥した粒子型に変換されるプロセスを指す。本明細書で用いる「スプレーフリーズドライ」という用語は、タンパク質等の高分子を含む溶液が、液体窒素等の極低温の媒体中に噴霧されることで、後に凍結乾燥により乾燥させことが可能な溶液の凍結液滴が得られるプロセスを指す。本明細書で互換性を以て用いられる「即時冷凍」又は「急速凍結」又は「迅速凍結」という用語は、溶媒又はタンパク質等の高分子を含有する溶液を含む溶液を保持する良好な熱伝導特性を有する容器（例えば、薄壁のガラス又は金属製の試験管等）を液体窒素中に浸漬させるか、又は溶液を直接液体窒素中に注ぎ込むことにより、このような溶媒又は溶液を凍結させることを指す。「即時冷凍」及び「急速凍結」は、通常、約２、３ミリ秒ないし１−２秒ないし数十秒間以内に起こる。
【００８９】
本明細書で用いる「凍結乾燥する」又は「凍結乾燥」という用語は、「フリーズドライ」と同義語であり、エマルジョン、コロイド又は懸濁液を含む溶液が凍結され、溶媒が直接気相に揮発して、固体成分が残るプロセスを指す。
【００９０】
Ｂ．  高分子マイクロ粒子組成物の調製方法
本明細書には、高い含有率でタンパク質等の高分子を含むマイクロスフェアの作製方法が提供される。本明細書に提供されるマイクロスフェアは、対イオンと有機溶媒の存在下で沈殿を制御することにより調節される。マイクロスフェアは、経肺、非経口及び経口投与経路を含む送達経路により患者に送達可能な医薬組成物の調製に適している。前記方法は、効率性と生産性を高めるため、バッチモード又は連続モードで行うことが可能である。本明細書中に提供される方法により得られたマイクロスフェアは、ｉｎ ｖｉｖｏ又はｉｎ ｖｉｔｒｏで対象内の疾患状態を治療又は診断するための予防剤、治療剤又は診断剤として有用である。有機溶媒の種類及び濃度、タンパク質又は高分子の濃度、イオン強度、対イオンの種類及び濃度、冷却の速度および時間を含むパラメーターを調整することにより本明細書中に提供される方法により得られたマイクロスフェアのサイズを制御することで、経肺（例えばインフルエンザ、及び他の呼吸器感染を治療のために、咽喉、気管及び気管支へ送達するための１ミクロンないし５ミクロンの粒子）、皮下、筋肉内、静脈内及び他の経路を含む所望の経路を介して治療剤を送達し（例えば、数十ミクロンのサイズの粒子を用いて）、ヒト対象用の吸入薬物の活性成分を提供することが可能な、０．００１ミクロンないし５０ミクロン以上の広いサイズ範囲にあるマイクロスフェアを提供することが可能である。
【００９１】
本明細書中に提供される方法の工程には、以下のものが含まれる：高分子を含む溶液を対イオン及び有機溶媒と配合し、生じた溶液を、マイクロ粒子が形成される温度にまで徐々に冷却すること。ある態様では、これらの工程は、以下のように説明できる：
１）タンパク質、核酸、オリゴ糖又は脂質等の高分子を含む溶液に、高分子が周囲温度で沈殿を生じない濃度で対イオンと有機溶媒を添加すること；
２）沈澱：前記高分子／溶媒カクテルを冷却してマイクロスフェアの形成を開始させること；及び
３）脱水：懸濁液を凍結させ、有機溶媒と水を昇華により取り除くこと（例えば、約−２０℃ないし約−８０℃、又は約−３０℃ないし約−８０℃、又は約−４０℃ないし約−８０℃、又は約−４５℃ないし約−８０℃、又は約−４５℃ないし約−７５℃の温度でフリーズドライする）。
【００９２】
前記方法の上記工程は、あらゆる順序で、連続的に、断続的に又は同時に行うことができる。ある態様では、対イオンと有機溶媒は、高分子を含む溶液に、同時に、又はいずれかの順序で連続的に添加され、次いで、溶液が冷却される。別の態様では、対イオンと有機溶媒を添加する前に、高分子を含む溶液を、マイクロスフェア形成に適した温度まで事前に冷却していてもよい。例えば、事前に冷却したタンパク質等の高分子の水溶液を、硫酸アンモニウム及びアセトニトリルと配合して、マイクロスフェアを形成することが可能である。
【００９３】
生じたマイクロ粒子の懸濁液を、更に凝固点未満の温度にまで冷却して、次いで、例えば、標準的な凍結乾燥器を用いて昇華させることにより揮発性成分（水、有機溶媒、そして可能な場合には対イオン）を除去することで、乾燥粉末に変換することができる。
【００９４】
ある態様では、高分子を対イオン及び有機溶媒と接触させることで形成され、低温に暴露されたマイクロスフェアは、沈降又はろ過技術を含む方法により、懸濁液から分離される。元の沈澱混合物からの分離の後、マイクロスフェアを洗浄し、そして／又は、高分子及びマイクロスフェアの特徴を向上及び／又は修飾する他の物質と配合してもよい。
【００９５】
別の態様では、本明細書に提供される方法により調製したマイクロスフェアは、直接的な治療効果を有しないが、他の治療剤又は栄養供給剤を含む活性薬剤のマイクロ担体として機能する。治療剤は、沈澱時に添加してもよく、又は形成されたマイクロスフェアの懸濁液に、凍結乾燥前に添加してもよい。これに代わり、治療剤は、マイクロスフェアから成る乾燥粉末に添加してもよい。ある局面では、いかなる理論にも縛られることなく、本明細書に提供される方法では、以下によりマイクロスフェアを形成できる：（１）対イオンによる高分子の表面電荷の中和、及び（２）添加した有機溶媒と漸次的冷却の効果の組合せによる高分子の溶解性の低下。高分子、対イオン、及び有機溶媒に応じて、適切な量の対イオン、相当な数の帯電基の存在下において約ｐＨ ２．０又はｐＨ ２．０ないし約ｐＨ １０．５又はｐＨ １０．５以上の範囲で適切なｐＨを選択することにより、いくつかの態様では、該高分子の表面上の全ての帯電基を中和することが可能である。適切な有機溶媒の添加によって溶液の極性を低下させることで、沈澱、相分離、コロイド形成、又は他のこのような方法によるマイクロスフェアの形成を開始させることができる。
【００９６】
これに代わり、いかなる理論にも縛られることなく、ある態様では、観察されるマイクロスフェアの沈澱現象は、低温下での高分子含有水溶液の水分子との相互作用に起因する、対イオンと有機溶媒のコスモトロピック（ｋｏｓｍｏｔｒｏｐｉｃ）（構造形成）な効果により説明できる。
【００９７】
本明細書に提供される方法では、その根幹となるメカニズムとは関係なく、高分子を含む水溶液又は他の親水性溶液へ比較的少量の有機溶媒と対イオンを添加し、そしてその溶液を冷却することにより、前記高分子のマイクロスフェアを含む組成物が生成される。
【００９８】
ある態様では、カクテル溶液を熱交換器中に通過させることによりカクテル溶液の漸次的冷却を行うことができる。熱交換器の温度と、熱交換器を通るカクテル溶液の流速を調節して、カクテル溶液をマイクロスフェアの形成前に事前冷却するか、又はマイクロスフェアが形成される温度まで冷却することができる。
【００９９】
別の態様では、本明細書に提供される方法により形成されたマイクロスフェアは、沈降又はろ過の技術といった方法により、濃縮されるか又は懸濁液から分離される。マイクロスフェアの形成時において、イオン強度、極性、ｐＨ又は懸濁液の他のパラメーターを調節することで、マイクロスフェアの成長（サイズ）を調節できる。カクテル溶液の液相からのマイクロスフェアの分離は、遠心分離、ろ過（中空糸繊維、接線方向の流動等）又は他の技術により、実施可能である。生じるマイクロスフェア又はその濃縮懸濁液は、凍結乾燥するか又は風乾してもよい。
【０１００】
ある態様では、元々の沈澱混合物から分離したマイクロスフェア又は乾燥したマイクロスフェアは、治療剤又は担体として投与する前に再溶解してもよく、又はマイクロスフェアの特性を修飾する薬剤を含む溶液中に懸濁してもよい。修飾薬剤としては、以下に限定されないが、充填剤、賦形剤、非活性成分、安定促進剤、味及び／又は芳香の調節剤若しくはマスキング剤、ビタミン類、治療剤、抗酸化剤、免疫調節剤、膜透過輸送調節剤、固結防止剤、腸溶コーティング剤、消化系の酸に対する耐性等、酸耐性を与える薬剤、プロテアーゼ耐性を与える薬剤、キトサン、ポリマー及び流動促進剤が挙げられる。
【０１０１】
本明細書に提供される方法により作製されるマイクロスフェアの形成と特徴は、以下を含むパラメーターを変化させることにより経験的に決定できる：高分子の特性と濃度、カクテル溶液のｐＨ、対イオンの特性と濃度、有機溶媒の特性と濃度、イオン強度、及び漸次的な冷却に影響する冷却速度。本明細書に提供される方法の工程により、この方法は、高分子、有機溶媒、対イオン、ｐＨ、イオン強度及び冷却勾配のマイクロスフェアの作製に適した組合せを決定するための、マイクロプレートフォーマット等でのハイスループットスクリーニングに適したものになる。
【０１０２】
高分子
本明細書に提供される方法に係るマイクロスフェアの形成に使用可能な高分子には、種々の治療剤、診断剤、栄養剤及び他の活性薬剤が含まれる。治療剤には、抗生物質、ワクチン、造血薬、抗感染症薬、抗潰瘍薬、抗アレルギー薬、解熱剤、鎮痛剤、抗炎症剤、抗認知症薬、抗ウィルス剤、抗腫瘍剤、抗鬱剤、向精神薬、強心剤、抗不整脈剤、血管拡張剤、血圧降下剤、抗糖尿病剤、抗凝固剤、及びコレステロール低下剤が含まれる。適切な高分子の他の例には、タンパク質、ペプチド、核酸、炭水化物、タンパク質複合体、ウィルス、ウィルス粒子及びこれらの混合物が含まれる。
【０１０３】
高分子は、対イオン及び有機溶媒、例えば、クエン酸（対イオン）及びイソプロパノール（溶媒）と相互作用して、高い含有量で高分子を含む、完全な個別のマイクロスフェアを形成する能力により特徴付けることができる。マイクロスフェア中の高分子の含有率は、マイクロスフェア重量に対する重量（ｗ／ｗ）として、約３０％若しくは３０％、約４０％若しくは４０％、約４５％若しくは４５％、約５０％若しくは５０％、約５５％若しくは５５％、約６０％若しくは６０％、約６５％若しくは６５％、約７０％若しくは７０％、約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９１％若しくは９１％、約９２％若しくは９２％、約９３％若しくは９３％、約９４％若しくは９４％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％又はこれを超える範囲で変化してもよい。ある態様では、マイクロスフェアの高分子含有率は、マイクロスフェアの形成前に最初に溶液中に存在した高分子の量と、実質的に同一となる。
【０１０４】
本明細書に提供される方法によるマイクロスフェアの調製に用いる高分子には、ポリペプチドとタンパク質を含むペプチド、多糖を含む炭水化物、及び核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ又はＰＮＡ）が含まれる。ある態様では、高分子は、ＤＡＳ１８１（配列番号１７に示すアミノ酸残基の配列を有するシアリダーゼ融合タンパク質）、α１−抗トリプシン、ＰＩ８、ｅｇｌｉｎ ｃ、Ｅｃｏｔｉｎ、アプロチニン、組換えヒトＤＮａｓｅ、インシュリン、インターフェロン、組換えヒトＤＮＡｓｅ（例えば、吸入治療剤として嚢胞性線維症の治療に有用なｒｈＤＮＡｓｅ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；Ｓｈａｋ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ， ８７：９１８８−９１９２ (１９９０)も参照）、ヒト血清アルブミン、ヒト増殖ホルモン、副甲状腺ホルモン及びカルシトニン等の治療用タンパク質を含む、タンパク質である。ある態様では、タンパク質がＤＡＳ１８１であり、対イオンが硫酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウムであり、そして有機溶媒がイソプロパノールである。
【０１０５】
本明細書に提供される方法により、タンパク質を変性させてその活性を低下させる恐れのある熱等の条件の使用が回避できる。従って、本明細書に提供される方法により提供されるマイクロスフェアを用いて、タンパク質又はペプチドが、その天然コンフォメーションで存在することが要求されるワクチン又は他の治療剤を調製することができる。
【０１０６】
マイクロスフェアの沈澱において用いられる、溶液中の高分子の濃度は、約０．１若しくは０．１ ｍｇ／ｍｌないし約０．２若しくは０．２、約０．５若しくは０．５、約０．８若しくは０．８、約１．０若しくは１．０、約２．０若しくは２．０、約５．０若しくは５．０、約１０．０若しくは１０．０、約１２．０若しくは１２．０、約１５．０若しくは１５．０、約２０．０若しくは２０．０、約２５．０若しくは２５．０、約３０．０若しくは３０．０、約３５．０若しくは３５．０、約４０．０若しくは４０．０、約４５．０若しくは４５．０、約５０．０若しくは５０．０、約６０．０若しくは６０．０、約７０．０若しくは７０．０、約８０．０若しくは８０．０、約９０．０若しくは９０．０、約１００若しくは１００、約２００若しくは２００ ｍｇ／ｍｌの範囲にあってもよい。ある態様では、前記濃度は約１若しくは１ ｍｇ／ｍｌないし約２０若しくは２０ ｍｇ／ｍｌである。高分子の特性（ｐＩ、疎水性、溶解性、安定性等）及びプロセスに関する他のパラメーターに応じて、高分子の濃度を経験的に決定して、所望のサイズのマイクロスフェアを形成することができる。一般的に、対イオンと有機溶媒の添加前に溶媒（通常は、水性溶媒）中で低い溶解性を示す高分子を低濃度（０．１ − ５ ｍｇ／ｍｌ）で用いて本明細書中の方法によりマイクロスフェアを形成することが可能であるが、より高い溶解度を示す高分子を１ − ２０ ｍｇ／ｍｌ又はこれを超える濃度で用いることも可能である。アモルファス凝集体又は凝集したマイクロスフェアの形成が観察された場合、一般的に高分子の濃度を低下させて、このような凝集を減少させるか又は防ぐべきである。
【０１０７】
対イオンの特性と濃度
対イオンは、本発明の方法を実施するｐＨで、高分子上の逆に帯電した１又は２つ以上の基を中和可能ないずれの化合物であってもよい。高分子の特性（ｐＫ、ｐＩ、帯電基の特性と量、表面の帯電基の分布、異なるｐＨ条件下での溶解性及び構造安定性）に応じて、マイクロスフェア形成のためのｐＨを経験的に決定できる。一般的に、高分子のｐＫを下回るｐＨで沈殿を行う場合、陰イオン性対イオンを用いることができる。一般的に、高分子のｐＫを上回るｐＨで沈殿を行う場合、陽イオン性対イオンを用いることができる。対イオンは、マイクロスフェア形成を開始させる適性に応じて経験的に選択できる。ある態様では、対イオンは、６０ Ｄａ以上又は約７５ Ｄａ以上の分子量を有していてもよい。
【０１０８】
対イオンは、陰イオン性、陽イオン性又は双性イオン性であってもよい。陰イオン性対イオンは、エノール基、ヒドロキシ基、−ＳＨ基、カルボキシル基、カルボキシメチル基、スルホプロピル基、スルホン基、及びリン酸基を含む帯電−分極可能な基を担持する無機化合物（リン酸、硫酸、チオシアン酸、チオ硫酸、次塩素酸、硝酸、臭素、ヨウ素等）又は有機化合物であってもよい。他の陰イオン基を担持するか又は他の分子特性により負電荷を有する有機化合物を用いることもできる。陰イオン性対イオンとして使用可能な化合物には、これらに限定されないが、以下のものが含まれる：オキサロ酢酸、リンゴ酸、マレイン酸、シュウ酸、ピルビン酸、クエン酸、コハク酸、フマル酸、ケトグルタル酸、ブタントリカルボン酸、ヒドロムコン酸、シクロブタンジカルボン酸、マレイン酸ジメチル、デオキシリボ核酸、ポリグルタミン酸、葉酸、乳酸、アスコルビン酸、カルミン酸、ソルビン酸、マロン酸、ＥＤＴＡ、ＭＯＰＳ、ＴＥＳ、ＭＥＳ、ＰＩＰＥＳ、ピリジン、トリシン、グリシン、グリシルグリシン、ベタイン、硫酸、チオ硫酸、リン酸、アデノシン三リン酸、硝酸、イタコン酸、ピバル酸、ジメチルマロン酸、及び過塩素酸。ある態様では、本明細書に提供される方法において、イタコン酸、ピバル酸、ジメチルマロン酸及びコハク酸を対イオンとして用いることができる。
【０１０９】
陰イオン性対イオンは、アミン、アミド、イミン、イミド、グアニジン、イミダゾール、ジオキサン、アニリンとして知られる基を担持する無機化合物（アンモニウム、ホスホニウム、スルホニウム、セシウム、ルビジウム等）又は有機化合物であってもよい。他の陽イオン基を担持するか又は他の分子特性により正電荷を有する有機化合物を用いることもできる。陽イオン性対イオンとして使用可能な化合物には、これらに限定されないが、以下のものが含まれる：Ｔｒｉｓ、Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ、Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓプロパン、ジアミノプロパン、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ）、ピペラジン（ｐｉｐｅｒａｄｉｎｅ）、ペンチルアミン、ジアミノブタン、プロピルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、スペルミン、スペルミジン、プトレシン、カダベリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、イミダゾール、テトラメチルアンモニウム、トリメチルアンモニウム、アンモニウム、セシウム、ルビジウム、イミダゾール、ポリエチレンイミン、ＤＥＡＥ、ＴＥＡＥ、ＱＡＥ。
【０１１０】
いずれかの帯電基をいずれかの組合せで保持する双性イオン性対イオンを用いることもできる。双性イオン性対イオンとして使用可能な化合物には、これらに限定されないが、以下のものが含まれる：ＨＥＰＥＳ、ＢＩＣＩＮＥ、グリシン、グリシルグリシン、６−アミノヘキサン酸、ｐｉｐｅｒｉｄｉｃ ａｃｉｄ、天然及び非天然アミノ酸（例えば、ヒスチジン、グルタミン、アルギニン、リジン）。
【０１１１】
対イオンは、酸（例えば、硫酸）又は塩基（例えば、イミダゾール）又はそれらの塩（例えば、硫酸ナトリウム又はイミダゾール−ＨＣｌ）として使用することができる。本明細書に提供される方法において使用可能な対イオンには臨床上の安全性が証明された、米国国民医薬品集、米国薬局方、日本国薬局方、又は欧州薬局方に列挙される対イオン（クエン酸、リンゴ酸、アミノ酸、硫酸等）が含まれる。ある態様では、本明細書に提供される方法で使用される対イオンには、安全性が確立しているか、又はＧＲＡＳ（一般的に安全と考えられる）カテゴリーに分類される対イオンが含まれる。対イオン（又はその塩）は、室温（約２５℃）又は使用及び保存に意図される温度では固体であってもよい。２種類以上の対イオンの組合せを用いることもできる。揮発性対イオンと液体対イオンを本明細書に提供される方法で用いることもできる。
【０１１２】
対イオンの濃度は、一般的に約０．１ ｍＭないし約０．２、０．５、０．８、１．０、２．０、３．０、５．０、７．０、１０．０、１５．０、２０．０、３０．０、４０．０、５０．０、６０．０、７０．０、８０．０、９０．０及び１００．０ ｍＭの範囲に維持される。ある態様では、対イオンの濃度は、約０．５ ｍＭ又は０．５ ｍＭないし約２０ ｍＭ又は２０ ｍＭである。高分子の特性（ｐＩ、疎水性、溶解性、安定性等）及びプロセスに関する他のパラメーターに応じて、対イオンの濃度は、例えば、本明細書に提供されるハイスループットフォーマットを用いて、経験的に決定することができる。一般的に、過剰サイズのマイクロスフェア、アモルファス凝集体又は凝集したマイクロスフェアの形成は、対イオンの濃度を減少させるべきことを示しており、マイクロスフェア形成の失敗（壊れたガラス様結晶又はフレーク）又は所望のサイズより小さなマイクロスフェアの形成は、対イオンの濃度を増加させるべきことを示している。
【０１１３】
有機溶媒の特性及び濃度
本明細書に提供される方法においてカクテル溶液に添加される有機溶媒は、一般的に水混和性であってもよく、アルコール（メタノール、エタノール、１−プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール）、クロロホルム、塩化ジメチル、多価糖アルコール（グリセリン、エリトリオール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール）、芳香族炭化水素、アルデヒド、ケトン、エステル、エーテル（ジエチルエーテル）、アルカン（ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル）、アルケン、結合ジエン、トルエン、ジクロロメタン、アセトニトリル、酢酸エチル、ポリオール、ポリイミド、ポリエステル、ポリアルデヒド及びこれらの混合物の中から選択できる。ある態様では、有機溶媒は、揮発性のものでもよい。他の態様では、マイクロスフェアへの有機溶媒の取り込みが所望される場合、例えば、マイクロスフェアに新たな特性を与える（例えば、徐放性又は機械的強度の付与）不揮発性の有機溶媒を用いることができる。有機溶媒の濃度は、一般的に、約０．１体積％若しくは０．１体積％ないし約０．５体積％若しくは０．５体積％、約１ 体積％若しくは１ 体積％、約２体積％若しくは２体積％、約５体積％若しくは５体積％、約１０体積％若しくは１０体積％、約１５体積％若しくは１５体積％、約２０体積％若しくは２０体積％、約２５体積％若しくは２５体積％、約３０体積％若しくは３０体積％、約４０体積％若しくは４０体積％又は約５０体積％若しくは５０体積％で維持されてもよい。ある態様では、有機溶媒の濃度は、約１体積％又は１体積％ないし約３０体積％又は３０体積％である。水に対して部分的に混和性を示すか、完全に非混和性の有機化合物も使用可能である。
【０１１４】
本明細書に提供される方法で使用可能な有機溶媒には、アルコールの他に、製薬業界及び食品業界で安全な取り扱い法が確立された、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｈａｒｍｏｎｉｓａｔｉｏｎ（ＩＣＨ）のＨａｒｍｏｎｉｓｅｄ Ｔｒｉｐａｒｔｉｔｅ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ（Ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ： Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ｆｏｒ Ｒｅｓｉｄｕａｌ Ｓｏｌｖｅｎｔｓ）のクラス３及びクラス２溶媒として列挙されるものが含まれる。高分子の特性（疎水性、溶解性、安定性等）及びプロセスに関する他のパラメーターに応じて、例えば、マイクロタイタープレート又はこれに類似するチップ又は他の装置上でのハイスループットスクリーニングを用いて有機溶媒の選別と濃度を最適化することができる。一般的に、冷却開始前の制御されない沈澱、過剰サイズのマイクロスフェア、アモルファス凝集体、凝集したマイクロスフェア又は粘着性のある凝集体の形成は、有機溶媒の濃度を減少させるべきことを示しており、マイクロスフェア形成の失敗（壊れたガラス様結晶又はフレーク）又は所望のサイズより小さなマイクロスフェアの形成は、有機溶媒の濃度を増加させるべきことを示している。
【０１１５】
ｐＨ
マイクロスフェア形成の開始に加えて、対イオンは、バッファーとしても機能する。これに代わる場合、ある態様では、緩衝化合物を用いて所望のｐＨを得ることもできる。ある態様では、緩衝化合物は、６０ Ｄａ以上である。高分子の特性（ｐＩ、特定のｐＨでの疎水性、溶解性、安定性等）及びプロセスに関する他のパラメーターに応じて、所望の大きさのマイクロスフェアの形成を可能にし、高分子の活性を保持するように、最適ｐＨを経験的に調整できる。一般的に、マイクロスフェア形成の失敗（壊れたガラス様結晶又はフレーク）は、用いた条件下においてタンパク質の溶解度が高すぎる可能性を示している。アモルファス凝集体の形成は、沈澱がうまく制御されておらず、用いたｐＨにおいてタンパク質が安定でないか又は溶解できないかもしれないことを示している場合がある。
【０１１６】
高分子がタンパク質である場合、特定のタンパク質／対イオンの組合せが、特定のｐＨ値において、直ちに非制御下での沈澱を生じさせる場合があることが観察されている。本明細書に提供されるハイスループットスクリーニング方法を用いて、所望の大きさのマイクロスフェアを形成させるのに適切なタンパク質、ｐＨ及び対イオンの組合せを経験的に決定することができる。このことは、カクテル溶液のｐＨを変化させるか、異なる対イオンを用いるか又はカクテル溶液中のタンパク質濃度を低下させることによって容易に改善できる。一般的に、タンパク質系マイクロスフェアを形成する場合には、そのタンパク質のｐＩを下回るｐＨ値において、マイクロスフェア形成が最適化される。
【０１１７】
イオン強度
カクテル溶液のイオン強度は、対イオンの濃度又は塩化物若しくは酢酸塩等の他の塩により調節することができる。ある態様では、マイクロスフェアの作製に塩の添加は必要とされない。特定の態様では、イオン強度を調節して、高分子の構造完全性と活性を保存することが可能である。特定の塩の存在が有益となり得るような、その他の用途の例には、非経口薬物及び他の薬物の製剤、マイクロスフェアの再溶解に際して特定の等張性又は緩衝能が必要とされる場合のある食品が含まれる。
【０１１８】
冷却勾配
高分子、対イオン及び有機溶媒を含むカクテル溶液を、冷却する前に、高分子が溶解可能な温度、一般的には約−１５℃ないし約３０℃にて、最初に調製する。ある態様では、冷却前の開始温度は、周囲温度（１８−２５℃）である。マイクロスフェアは、高分子が溶液中に溶解される温度を下回る温度にまで徐々に冷却すると、マイクロスフェアが、沈澱、相分離又はコロイド形成等のプロセスにより形成される。冷却を行う速度により、マイクロスフェアの形成とサイズ等の他の特徴を制御することが可能である。一般的に、高分子がタンパク質である場合には、液体窒素中での瞬間冷凍ではマイクロスフェアは生成されない。
【０１１９】
カクテル溶液の冷却及び凍結を行う速度（冷却勾配）により、マイクロスフェアの最終的なサイズを決定できる。一般的に、より速い冷却勾配ではより小さなマイクロスフェアが得られ、より遅い冷却勾配ではより大きなマイクロスフェアが得られる。いかなる理論にも縛られることなく、冷却勾配は、以下の速度を決定できる：（１）初期のより小さなマイクロスフェアを作り出す核形成、及び（２）初期のマイクロスフェアが合体（凝集）してより大きなマイクロスフェアへとアニールする融合プロセス。より小さな粒子からより大きな粒子への融合は、例えば、凍結前にマイクロスフェアの液体懸濁物が存在する時間等により測定可能な、時間依存的なプロセスである。本明細書に提供されるマイクロスフェア組成物中の、ある種のタンパク質等の特定の高分子間の結合の可逆的な特性により、より大きな粒子にアニールするより小さなマイクロスフェアは、滑らかな表面を有するマイクロスフェアを作り出せる。所望のマイクロ粒子のサイズにもよるが、冷却速度は、約０．０１℃／分若しくは０．０１℃／分ないし約２０℃／分若しくは２０℃／分；約０．０５℃／分若しくは０．０５℃／分又は約０．１℃／分若しくは０．１℃／分ないし約１０℃／分若しくは１０℃／分又は約１５℃／分若しくは１５℃／分、約０．２℃／分若しくは０．２℃／分ないし約５℃／分若しくは５℃／分、約０．５℃／分若しくは０．５℃／分ないし約２℃／分若しくは２℃／分、又は約１℃／分若しくは１℃／分の範囲内にあってもよい。ある態様では、冷却勾配は、毎分０．１℃ないし毎分約４０℃であってもよい。別の態様では、冷却勾配は、毎分０．５℃ないし毎分約１５℃であってもよい。
【０１２０】
具体的な必要性にもよるが、態様によっては、特別な装置へ製造方法を適合させることが望ましい場合がある。ある態様では、冷却に温度制御棚を備えた凍結乾燥器を用いることができる。作製したマイクロスフェアが所望のサイズより大きな場合、高分子の濃度、有機溶媒、対イオン、イオン強度及び／又はｐＨを含む他のパラメーターを修飾してマイクロスフェアを所望のサイズに低下させることができる。
【０１２１】
より迅速な冷却勾配（より小さな粒径）のためには、カクテル溶液を、連続モードで使用した熱交換器等に通してもよい。マイクロスフェアのサイズを増加させる必要がある場合には、カクテル溶液成分（高分子、有機溶媒、対イオン）の１つの濃度を増加することにより、マイクロスフェアを所望のサイズに増大させることができる。
【０１２２】
一般的に、冷却は、凝集体や結晶の形成を防ぐために一様で一定の速度で行うべきである。有機溶媒の濃度にもよるが、高分子のマイクロスフェア内への沈澱は、複数の方法で生じさせることが可能である。比較的高い濃度の有機溶媒（実際に使用する成分にもよるが、約５％‐４０％）では、一般的に、カクテル溶液が未だ液体の状態にある時点で、マイクロスフェアの形成が可能である。比較的低い濃度の有機溶媒（実際に使用する化合物にもよるが、約２％‐２５％）では、最初に氷の結晶が形成される場合があり、その後、放出された高分子と有機溶媒が、臨界局所濃度に達して沈澱することが可能になる。凍結乾燥器トレーの下端層近辺の温度を更に低下させると、懸濁液を完全に凝固させ、有機溶媒を更に最上層へ放出させることが可能になる。最上層内での過剰量の有機溶媒は、高分子の非制御下での沈澱と、マイクロスフェアの凝集を生じさせる可能性がある。通常、この効果は、カクテル溶液中の成分−高分子、対イオン、有機溶媒、塩等の適切な比率を選択することで緩和できる。これに加え、凍結乾燥トレー中のカクテル溶液の薄い層を維持するか、又は冷却状態でカクテル溶液を混和することにより、凝集体と結晶の形成を防いで、均一なマイクロスフェアを得ることができる。例えば、比較的低濃度のイソプロパノール（例えば、２−６％）を用いて、カクテル溶液の薄い層（１０−２０ ｍｍ）をトレイ内に充填し、そしてトレイを事前に冷却した棚（−３０ないし−７５℃）上に静置した場合には、均一なマイクロスフェアを得ることができる。
【０１２３】
本明細書に提供される方法により、実質的に全ての又は全てのタンパク質若しくは他の高分子を、溶液からマイクロスフェア内へ取り込ませることが可能になる。
【０１２４】
マイクロ粒子形成条件のハイスループットスクリーニングと粒子形成の最適化
高分子の特性にもよるが、本明細書に提供される方法によるマイクロスフェアの調製に用いられるカクテル溶液の組成は、最適化することができる。最適化は、媒体中か、又は、例えば、数十ないし数百ないし数千ないし数万のカクテル溶液を同時にスクリーニングできるマイクロタイタープレート又はチップを用いたハイスループットフォーマット中で、迅速に行うことができる。ある態様では、多くのｐＨ値、並びに種々の濃度の陽イオン性、陰イオン性又は双性イオン性対イオン及び有機溶媒をスクリーニングできる。例えば、スクリーニングは、目的の高分子が種々の濃度で添加された複数の同一のマイクロタイタープレートを用いて行うことができる。試験条件の各セットは、重複する二つの系でスクリーニングしてもよい。ある態様では、平坦な底部のウェルを有するマイクロプレートを、このマイクロタイタープレートの縁部分が取り除かれることで、凍結乾燥器の棚とウェルの底面の間での良好な熱伝導を可能にした状態で用いることができる。マイクロプレートを凍結乾燥器の棚の上に静置して、冷却してマイクロスフェアを形成させ、次いで懸濁液を凝固させることが可能である。ウェルの内容物の凍結の際には、真空を適用できる。凍結乾燥の終了時に、２つの重複する系のうち１つを水又は選択したバッファーに再溶解して、特定の条件により高分子が不溶性になったか、又はその活性を低下させたかを観察することができる。直ちに再溶解可能であるか又は所望の特性を有するマイクロスフェアを提供可能な物質を生じる条件を、分光アッセイ、クロマトグラフィー、酵素アッセイ又は他のアッセイによる更なる分析に付して、未変性の構造と活性が保存されていることを確認することができる。２つの重複する系の凍結乾燥した物質を顕微鏡観察に用いて、マイクロスフェアが形成されたかどうかを決定できる。マイクロスフェアを生成した条件を更に修飾して微調整を加えることで、所望のサイズと特性を有するマイクロスフェアを作り出すことができる。ハイスループットスクリーニングを行うためのキットを提供でき、このキットには、１又は２種類以上のタンパク質等の高分子、バッファー、事前に調製した既知の組成（有機溶媒、対イオン）を有するカクテル及び／又は塩を含む、本明細書に提供される方法で使用する全ての成分が含まれていてもよい。キットには、各マイクロタイタープレート中に、事前にｐＨ、対イオン、イオン強度及び有機溶媒が決定された３、４、５、１０、１５、２０、３０、４０、５０、１００種類又はこれを超える（典型的には９６種類以上）バッファーが含まれていてもよい。キットと共に供給されるマイクロタイタープレートは、ウェルの低部が、凍結乾燥器の棚と直接接触するように改変されていてもよい。
【０１２５】
Ｃ．  高分子マイクロ粒子組成物
本明細書に提供される方法で得られるマイクロ粒子組成物に含まれる高分子は、この方法によっては、実質的に構造的及び化学的な変化を受けない。例えば、高分子が緑色蛍光タンパク質又は赤色蛍光タンパク質であった場合、その蛍光並びにタンパク質固有のコンフォメーション及び活性は、マイクロ粒子中で保持されている。マイクロスフェアと結合した溶媒及び他の成分以外の実質的に全ての溶媒及び／又は水分を揮発させることにより得られた乾燥マイクロスフェアは、保存が可能であり、その活性は、再溶解により実質的に回復できる。本明細書に提供されるマイクロ粒子の比較的低い含水率、例えば、約０．１％若しくは０．１％、ないし約０．２％若しくは０．２％、約０．３％若しくは０．３％、約０．５％若しくは０．５％、約１．０％若しくは１．０％、約２．０％若しくは２．０％、約３．０％若しくは３．０％、約４．０％若しくは４．０％、約５．０％若しくは５．０％、約５．５％若しくは５．５％、約６．０％若しくは６．０％、約６．５％若しくは６．５％、約７．０％若しくは７．０％、約７．５％若しくは７．５％、約８．０％若しくは８．０％、約８．５％若しくは８．５％、約９．０％若しくは９．０％、約９．５％若しくは９．５％、約１０．０％若しくは１０．０％、約１０．５％若しくは１０．５％、約１１．０％若しくは１１．０％、約１１．５％若しくは１１．５％、約１２．０％若しくは１２．０％、約１２．５％若しくは１２．５％、約１４％若しくは１４％、約１５％若しくは１５％、約１６％若しくは１６％、約１７％若しくは１７％、約１８％若しくは１８％、約１９％若しくは１９％、又は約２０％若しくは２０％の範囲の含水率は、安定性を向上させることができる。本明細書に提供される方法で得られたマイクロスフェアは、サイズと形状が均一であり、所望の特性と共に再現性を以て得ることが可能である。乾燥製剤の調製に従来より用いられてきた別の技術（塩沈澱、アルコール又はアセトン沈澱、凍結乾燥等）は、タンパク質等の高分子の完全に又は部分的に変性させる可能性がある。加えて、本明細書に提供される方法で調製されたマイクロスフェアは、複雑又は特殊なスプレードライ、スプレーフリーズドライ、超臨界流体抗溶媒系プロセス（ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｆｌｕｉｄ ａｎｔｉ−ｓｏｌｖｅｎｔ ｂａｓｅｄ ｐｒｏｃｅｓｓ）又はミリングプロセスを必要としない（例えば、以下を参照：Ｌａｕｂｅ ＢＬ． Ｔｈｅ ｅｘｐａｎｄｉｎｇ ｒｏｌｅ ｏｆ ａｅｒｏｓｏｌｓ ｉｎ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ， ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ， ａｎｄ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ． Ｒｅｓｐｉｒ Ｃａｒｅ ２００５； ５０(９)： １１６１−１１７６； Ｔａｙｌｏｒ Ｇ， Ｇｕｍｂｌｅｔｏｎ Ｍ． Ａｅｒｏｓｏｌｓ ｆｏｒ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ： Ｄｅｓｉｇｎ Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ａｎｄ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ． Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ２００４； ２(３)： １４３−１５５； Ｓｍｙｔｈ ＨＤＣ， Ｈｉｃｋｅｙ ＡＪ． Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｐｏｗｄｅｒ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ． Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ Ｄｅｓｉｇｎ． Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ２００５； ３(２)： １１７−１３２； Ｃｒｙａｎ ＳＡ． Ｃａｒｒｉｅｒ−ｂａｓｅｄ ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｆｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｐｅｐｔｉｄｅ ｄｒｕｇｓ ｔｏ ｔｈｅ ｌｕｎｇｓ． ＡＡＰＳ Ｊ ２００５； ７(１)：Ｅ２０−Ｅ４１ ； ＬｉＣａｌｓｉ Ｃ， Ｍａｎｉａｃｉ ＭＪ， Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎ Ｔ， Ｐｈｉｌｌｉｐｓ Ｅ， Ｗａｒｄ ＧＨ， Ｗｉｔｈａｍ Ｃ． Ａ ｐｏｗｄｅｒ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅａｓｌｅｓ ｖａｃｃｉｎｅ ｆｏｒ ａｅｒｏｓｏｌ ｄｅｌｉｖｅｒｙ． Ｖａｃｃｉｎｅ ２００１ ； １９(１７−１９)：２６２９−２６３６； Ｍａａ ＹＦ， Ｐｒｅｓｔｒｅｌｓｋｉ ＳＪ． Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐｏｗｄｅｒｓ： ｐａｒｔｉｃｌｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ． Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ２０００； １(３)：２８３−３０２； Ｍａａ ＹＦ， Ｎｇｕｙｅｎ ＰＡ， Ｈｓｕ ＳＷ． Ｓｐｒａｙ−ｄｒｙｉｎｇ ｏｆ ａｉｒ−ｌｉｑｕｉｄ ｉｎｔｅｒｆａｃｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ． Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ １９９８； ８７(２)： １５２−１５９； Ｖａｎｂｅｖｅｒ Ｒ， Ｍｉｎｔｚｅｓ ＪＤ， Ｗａｎｇ Ｊ ｅｔ ａｌ． Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌａｒｇｅ ｐｏｒｏｕｓ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ． Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ １９９９； １６(１１)：１７３５−１７４２； Ｂｏｔ ＡＩ． Ｔａｒａｒａ ＴＥ， Ｓｍｉｔｈ ＤＪ， Ｂｏｔ ＳＲ， Ｗｏｏｄｓ ＣＭ， Ｗｅｅｒｓ ＪＧ． Ｎｏｖｅｌ ｌｉｐｉｄ−ｂａｓｅｄ ｈｏｌｌｏｗ− ｐｏｒｏｕｓ ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｓ ａ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｔｏ ｔｈｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｔｒａｃｔ． Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ ２０００； １７(３)：２７５−２８３； Ｍａａ ＹＦ， Ｎｇｕｙｅｎ ＰＡ， Ｓｗｅｅｎｅｙ Ｔ， Ｓｈｉｒｅ ＳＪ， Ｈｓｕ ＣＣ． Ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ ｐｏｗｄｅｒｓ： ｓｐｒａｙ ｄｒｙｉｎｇ ｖｓ ｓｐｒａｙ ｆｒｅｅｚｅ ｄｒｙｉｎｇ． Ｐｈａｒｍ Ｒｅｓ １９９９； １６(２)：２４９−２５４； Ｓｅｌｌｅｒｓ ＳＰ， Ｃｌａｒｋ ＧＳ， Ｓｉｅｖｅｒｓ ＲＥ， Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ ＪＦ． Ｄｒｙ ｐｏｗｄｅｒｓ ｏｆ ｓｔａｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ａｑｕｅｏｕｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｕｓｉｎｇ ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ＣＯ(２)−ａｓｓｉｓｔｅｄ ａｅｒｏｓｏｌｉｚａｔｉｏｎ． Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ ２００１ ； ９０(６)：７８５−７９７； Ｇａｒｃｉａ−Ｃｏｎｔｒｅｒａｓ Ｌ， Ｍｏｒｃｏｌ Ｔ， Ｂｅｌｌ ＳＪ， Ｈｉｃｋｅｙ ＡＪ． Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｓ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍｓ ｆｏｒ ｉｎｓｕｌｉｎ ｉｎ ｒａｔｓ． ＡＡＰＳ ＰｈａｒｍＳｃｉ ２００３； ５(２)：Ｅ９； Ｐｆｕｔｚｎｅｒ Ａ， Ｆｌａｃｋｅ Ｆ， Ｐｏｈｌ Ｒ ｅｔ ａｌ． Ｐｉｌｏｔ ｓｔｕｄｙ ｗｉｔｈ ｔｅｃｈｎｏｓｐｈｅｒｅ／ＰＴＨ(１−３４)−− ａ ｎｅｗ ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ ｈｏｒｍｏｎｅ (１−３４)． Ｈｏｒｍ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｓ ２００３； ３５(５)：３１９−３２３； Ａｌｃｏｃｋ Ｒ， Ｂｌａｉｒ ＪＡ， Ｏ'Ｍａｈｏｎｙ ＤＪ， Ｒａｏｏｆ Ａ， Ｑｕｉｒｋ ＡＶ． Ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ ｔｈｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ ｆｒｏｍ ｓｐｒａｙ ｄｒｉｅｄ ＯＥＤ ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ． Ｊ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｒｅｌｅａｓｅ ２００２； ８２(２−３)：４２９−４４０； Ｇｒｅｎｈａ Ａ， Ｓｅｉｊｏ Ｂ， Ｒｅｍｕｎａｎ−Ｌｏｐｅｚ Ｃ． Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ ｃｈｉｔｏｓａｎ ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ ｌｕｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｅｌｉｖｅｒｙ． Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ ２００５； ２５(４−５)：４２７−４３７； Ｅｄｗａｒｄｓ ＤＡ， Ｈａｎｅｓ Ｊ， Ｃａｐｏｎｅｔｔｉ Ｇ ｅｔ ａｌ． Ｌａｒｇｅ ｐｏｒｏｕｓ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｏｒ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｄｒｕｇ ｄｅｌｉｖｅｒｙ． Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９７； ２７６(５３２０)：１８６８−１８７１ ； ＭｃＫｅｎｎａ ＢＪ， Ｂｉｒｋｅｄａｌ Ｈ， Ｂａｒｔｌ ＭＨ， Ｄｅｍｉｎｇ ＴＪ， Ｓｔｕｃｋｙ ＧＤ． Ｍｉｃｒｏｍｅｔｅｒ−ｓｉｚｅｄ ｓｐｈｅｒｉｃａｌ ａｓｓｅｍｂｌｉｅｓ ｏｆ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｂｙ ａｃｉｄ−ｂａｓｅ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ． Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ ｌｎｔ Ｅｄ Ｅｎｇｌ ２００４； ４３(４２)：５６５２−５６５５； Ｏｈ Ｍ， Ｍｉｒｋｉｎ ＣＡ． Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ ｔａｉｌｏｒａｂｌｅ ｃｏｌｌｏｉｄａｌ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｆｒｏｍ ｉｎｆｉｎｉｔｅ ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｏｎ ｐｏｌｙｍｅｒｓ． Ｎａｔｕｒｅ ２００５； ４３８(７０６８)：６５１−６５４； 米国特許第５，９８１，７１９号； 米国特許第５，８４９，８８４号及び米国特許第６，０９０，９２５号； 米国特許出願第２００５０２３４１１４号； 米国特許第６，０５１，２５６号）。
【０１２６】
本明細書に提供される方法で得られるマイクロ粒子は、どのような形状を有していてもよく、そして、約０．００１若しくは０．００１ミクロンないし約０．００２若しくは０．００２、約０．００５若しくは０．００５、約０．０１若しくは０．０１、約０．０２若しくは０．０２、約０．０３若しくは０．０３、約０．０５若しくは０．０５、約０．１若しくは０．１、約０．２若しくは０．２、約０．３若しくは０．３、約０．５若しくは０．５、約１．０若しくは１．０、約２．０若しくは２．０、約２．５若しくは２．５、約３．０若しくは３．０、約３．５若しくは３．５、約４．０若しくは４．０、約４．５若しくは４．５、約５．０若しくは５．０、約５．５若しくは５．５、約６．０若しくは６．０、約６．５若しくは６．５、約７．０若しくは７．０、約７．５若しくは７．５、約８．０若しくは８．０、約８．５若しくは８．５、約９．０若しくは９．０、約９．５若しくは９．５、約１０．０若しくは１０．０、約１５．０若しくは１５．０、約２０．０若しくは２０．０、約２５．０若しくは２５．０、約３０．０若しくは３０．０、約３５．０若しくは３５．０、約４０．０若しくは４０．０、約４５．０若しくは４５．０、約５０．０若しくは５０．０ミクロン又はこれを超える大きさの範囲内のサイズ（平均の幅又は直径）を有していてもよい。肺胞への経肺投与の場合には、サイズは、約０．１ミクロン又は０．１ミクロン未満ないし約０．５ミクロンであってもよい。咽喉、気管及び気管支への経肺投与の場合、サイズは、約０．５ミクロン若しくは０．５ミクロンないし約１．０ミクロン若しくは１．０ミクロン、約１．５ミクロン若しくは１．５ミクロン、約２．０ミクロン若しくは２．０ミクロン、約２．５ミクロン若しくは２．５ミクロン、約３．０ミクロン若しくは３．０ミクロン、約３．５ミクロン若しくは３．５ミクロン、約４．０ミクロン若しくは４．０ミクロン、約４．５ミクロン若しくは４．５ミクロン、約５．０ミクロン若しくは５．０ミクロン、約５．５ミクロン若しくは５．５ミクロン、約６．０ミクロン若しくは６．０ミクロン又は約６．５ミクロン若しくは６．５ミクロンであってもよく、又は別の態様では、約１．０ミクロン若しくは１．０ミクロンないし約２．０ミクロン若しくは２．０ミクロンであってもよい。ある態様では、マイクロ粒子は実質的に球体の形状にある。
【０１２７】
本明細書に提示される方法によるマイクロ粒子の形成に使用可能な高分子には、治療剤及び診断剤、加工食品、栄養補助食品並びにポリマーが含まれる。ある態様では、マイクロスフェアの溶解性を修飾し、そして／又はその機械的強度を向上させるために、製剤カクテル中に架橋剤、塩又は他の化合物が含まれていてもよい。ある態様では、殆どの水性又は有機溶媒に不溶性のマイクロスフェアを用いて、クロマトグラフィー用樹脂及び分散性の研磨剤といった粒子を製造できる。別の態様では、送達用医薬担体といった、溶媒に部分的な溶解性を示すマイクロスフェアが、徐放性活性薬剤又は治療用製剤の製造に有用となる場合がある。
【０１２８】
ある態様では、本明細書に提供されるマイクロ粒子を、吸入装置との組合せで用いて、対象の呼吸気管及び肺に治療用量の高分子マイクロスフェアを送達することができる。例えば、高分子がＤＡＳ１８１タンパク質（配列番号１７に示す配列）である場合、対イオンとして硫酸ナトリウムを用い、有機溶媒としてイソプロパノールを用いた、本明細書に提示される方法によって、約０．５ミクロンないし約８ミクロン、又は約１ミクロンないし約５ミクロンのマイクロスフェアを得ることが可能である。インフルエンザ等の気道内で発症するウィルス感染の予防又は治療のために投与されるＤＡＳ１８１マイクロスフェアについては、咽喉、気管及び気管支内へマイクロスフェアを沈着させることが望ましい場合もある。マイクロスフェアとして製剤したＤＡＳ１８１融合タンパク質は、咽喉／気管／気管支内でのレセプターであるシアル酸を分解することで、これらの部位におけるウィルスの結合と感染を防ぐことにより作用できる。呼吸器系ウィルス感染が開始可能な部位、即ち、咽喉、気管又は気管支内へのＤＡＳ１８１マイクロスフェアの最適化された送達のためには、マイクロスフェアは、（ａ）口の前端で捕獲される程度の大きさを有するか（即ち、マイクロスフェアが大きすぎ、約８ミクロン又はこれを超えること）；又は（ｂ）肺深部に吸収され、肺胞を通じて、これらのマイクロスフェアが不活性であるか、そして／又は毒性を示す可能性のある血流へと全身的に吸収される程に小さいもの（即ち、０．５ミクロン又はこれを下回る）であってはならない。咽喉、気管及び気管支へのＤＡＳ１８１マイクロスフェアの送達には、約１ミクロンないし約５．５−６ミクロンのサイズ範囲が、一般的に適しているであろう。
【０１２９】
吸入器を用いて、吸入治療により、タンパク質又は他の高分子を投与してもよいいずれかの医学的状態を治療することができる。典型的な吸入装置には、乾燥粉末用吸入器、定量吸入器又は静電送達用装置が含まれる場合がある。送達装置の典型的な用途には、インシュリン及び他の治療用タンパク質の肺深部送達が含まれる。
【０１３０】
ある態様では、本明細書に提示される方法で得られるマイクロスフェアは、経口摂取、鼻腔内、静脈内、筋肉内、皮下及び他の治療用分子の送達に適した送達方法により送達できる。経肺送達用のマイクロスフェア製剤は、一般的に約０．５ミクロンないし約５−６ミクロンのサイズ範囲にあってもよく、一方で、皮下送達、非経口送達又は筋肉内送達等の、他の種類の送達に望ましいマイクロスフェア製剤は約１０ミクロン若しくは１０ミクロンないし約３０ミクロン若しくは３０ミクロン、約４０ミクロン若しくは４０ミクロン、又は約５０ミクロン若しくは５０ミクロンの範囲内にあってもよい。
【０１３１】
ある態様では、本明細書に提供されるマイクロスフェアは、直接的な治療効果は有してなくとも、他の治療剤のマイクロ担体として機能できる。このようなマイクロスフェアの調製に有用な高分子の例には、これらに限定されないが、多糖、グリカン、タンパク質、ペプチド、ポリマー又はこれらの組合せが含まれる。治療剤又は他の活性薬剤は、マイクロスフェアの製剤時に添加してもよいし、又は形成したマイクロスフェアの懸濁液に添加してもよい。これに代わり、治療剤は、混和、タンブリング又は製薬業界及び食品業界で実践される他の技術によって乾燥マイクロスフェア組成物と配合してもよい。
【０１３２】
ある態様では、マイクロスフェアの溶解性を修飾し、そして／又は、その機械的強度を向上させるために、架橋剤、親油性物質、水性溶媒中で低い溶解度を示すような塩若しくはこれらの組合せ、又は他の化合物を製剤カクテル溶液中に含ませてもよい。遅延溶解は、経口摂取、吸入、鼻腔内、静脈内、筋肉内、経皮送達、及び治療用分子の送達に適切な他の送達方法により送達される治療剤の徐放に有用な場合がある。ある態様では、マイクロスフェアは、腸溶コーティングされた丸剤又はカプセル剤の形態で経口摂取により送達され、十二指腸から取り込まれ、高分子を血流又は他の作用部位へと放出することが可能になる。
【０１３３】
ある態様では、マイクロスフェアを、高分子の部分的変性により不溶性にして、送達の際に未変性に回復させて生体利用可能な状態とすることも可能である。
【０１３４】
他の態様では、マイクロスフェアは、実質的に球状の形体を有し、約０．１ミクロンないし３０．０ミクロンの範囲内の平均直径を有していてもよい。更に別の態様では、マイクロスフェアの平均直径は、約０．５ミクロンないし５．０ミクロン、又は約１．０ミクロンないし２．０ミクロンの範囲内にあってもよい。
【０１３５】
更に別の局面では、本明細書には、医学的治療が必要な動物又はヒトの患者等の対象に前記マイクロスフェアを送達するための装置と方法が提供される。適切な送達経路には、筋肉内、静脈内及び皮下等の非経口経路、並びに、経口、舌下、くも膜下、経鼻、経肺、経皮、経粘膜等の非経口以外の経路が含まれる場合がある。送達装置には、無針シリンジと有針シリンジの両方、並びに吸入器が含まれる。
【０１３６】
送達装置には、ｉｎ ｖｉｖｏでの高分子の迅速な放出又は持続的な放出により治療可能な状態を治療するための一回投与分のマイクロスフェアが含まれていてもよい。一回投与量に存在するマイクロスフェアの数は、高分子の種類と活性に依存する。特定の医学的状態の治療に最適化された時間にわたる持続的放出を達成するために、一回投与を選択してもよい。例えば、高分子がＤＡＳ１８１融合タンパク質（配列番号１７）である場合、ＤＡＳ１８１を含むマイクロスフェア組成物の送達用量は、１回の投与当たり約０．５ ｍｇのタンパク質ないし１回の投与当たり約１００ ｍｇのタンパク質、又は約１回の投与当たり約０．７５ ｍｇ、１ ｍｇ、１．５ ｍｇ、２ ｍｇ、３ ｍｇ、５ ｍｇ、１０ ｍｇ、１５ ｍｇ、２０ ｍｇ、３０ ｍｇ、４０ ｍｇ、４５ ｍｇ、５０ ｍｇ、５５ ｍｇ若しくは６０ ｍｇのタンパク質であってもよい。
【０１３７】
マイクロスフェアの高分子成分は、本明細書に提示される方法でマイクロスフェアを形成可能なあらゆる分子であってよい。態様によっては、高分子は、酵素及び組換えタンパク質を含むタンパク質、ペプチド、炭水化物、多糖、炭水化物−タンパク質複合体若しくは多糖−タンパク質複合体、核酸、ウィルス、ウィルス粒子、低分子（ハプテン等）とタンパク質の複合体、又はこれらの混合物となる。有機又は無機の、天然又は合成の医薬用化合物又は薬物は、この薬物をタンパク質等の高分子に結合させ、次いで、この高分子薬物複合体又は結合体からマイクロスフェアを形成することで、マイクロスフェアに取り込ませることが可能である。当業者であれば、３次構造及び４次構造を保てない化合物は、この化合物を３次構造及び４次構造を有する担体分子内に取り込ませるか、又は結合させることにより、マイクロスフェア内に形成できることを理解するであろう。また、更に、当業者であれば、高分子は、例えば、ペプチド、２本鎖核酸分子の１本鎖セグメント、若しくはウィルス粒子といった分子、又は３次構造及び４次構造を有する他の高分子の一部分であってもよいことを理解するであろう。
【０１３８】
「高分子」という用語には、複数の高分子が含まれる場合もあり、例えば、医薬用化合物と、この医薬用化合物を治療が必要な組織、器官又は腫瘍にターゲッティングするためのアフィニティー分子（ａｆｆｉｎｉｔｙ ｍｏｌｅｃｕｌｅ）との組み合わせといった、異なる高分子の組合せが含まれる。アフィニティー分子は、例えば、リガンド又はレセプターとなる場合もある。リガンドの例には、動物に投与された際に抗原として作用して免疫反応を生じさせ、抗体を生成させる、ウィルス、バクテリア、多糖、又は毒素が含まれる。
【０１３９】
ある態様では、高分子は、以下に限定されないが、シアリダーゼ、シアリダーゼ融合タンパク質、ＧＡＧ結合ドメインに融合したシアリダーゼ触媒ドメインを含む融合タンパク質、プロテアーゼ、プロテアーゼ阻害剤、インシュリン、インターフェロン、ヒト成長ホルモン、カルシトニン、ｒｈＤＮａｓｅ又は副甲状腺ホルモンを含む治療用タンパク質であり、マイクロスフェアのタンパク質含有率は、約５０％若しくは５０％ないし約６０％若しくは６０％、約６５％若しくは６５％、約７０％若しくは７０％、約７５％若しくは７５％、約８０％若しくは８０％、約８５％若しくは８５％、約９０％若しくは９０％、約９５％若しくは９５％、約９６％若しくは９６％、約９７％若しくは９７％、約９８％若しくは９８％、約９９％若しくは９９％又はこれを超えるパーセンテージであってもよい。経肺投与の場合には、マイクロスフェアは、約０．５ミクロン若しくは０．５ミクロンないし約５．０ミクロン若しくは５．０ミクロンの範囲のサイズを有していてもよく、態様によっては、約１ミクロン若しくは１ミクロンないし約２ミクロン若しくは２ミクロンの範囲の平均サイズを有していてもよい。
【０１４０】
本明細書に提示される方法によるマイクロスフェアの形成に使用可能な他のタンパク質には、以下に限定されないが、ＤＡＳ１８１（ＤＡＳ１８１；配列番号１７）、ａ１−抗トリプシン、Ｅｃｏｔｉｎ、ｅｇｌｉｎ ｃ、セルピン（ｓｅｒｐｉｎ）、Ｐｕｌｍｏｚｙｍｅ（ｒｈＤＮａｓｅ）、ｂｅｔａｘｏｌｏｌ（商標）、ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ（商標）、ドキソルビシン、アセチルシステイン、ｒｉｆａｍｐｉｎ（商標）、酢酸ロイプロリド、黄体化ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）、（Ｄ−Ｔｒｙｐ６）−ＬＨＲＨ、酢酸ナファレリン、インシュリン、ナトリウムインシュリン、亜鉛インシュリン、プロタミン、リゾチーム、α−ラクトアルブミン、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、β−ラクトグロブリン、トリプシン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、カルボニックアンヒドラーゼ、オボアルブミン、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、ホスホリラーゼｂ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、ＩｇＧ、フィブリノゲン、ポリ−Ｌ−リジン、ＩｇＭ、ＤＮＡ、酢酸デスモプレシン、成長ホルモン放出因子（ＧＨＲＦ）、ソマトスタチン、ａｎｔｉｄｅ、ＶＩＩＩ因子、Ｇ−ＣＳＦ／ＧＭ−ＣＳＦ、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、β−インターフェロン、アンチトロンビンＩＩＩ、α−インターフェロン、α−インターフェロン２ｂを含む治療用タンパク質が含まれる。
【０１４１】
吸入器を用いて、対象の呼吸気道及び肺へ上記に列挙する治療用タンパク質又は他の高分子系マイクロスフェアを送達することができる。タンパク質マイクロスフェアは、例えば、タンパク質の水溶液をクエン酸等のカルボン酸、若しくは硫酸又は他の対イオン及びイソプロパノール等の有機溶媒と接触させ、この溶液を冷却してマイクロスフェアを形成させることにより、調製可能である。タンパク質は、シアリダーゼ、プロテアーゼ阻害剤、インシュリン、ヒト成長ホルモン、カルシトニン、ｒｈＤＮａｓｅ又は副甲状腺ホルモンといった治療用タンパク質であってもよく、マイクロスフェアのタンパク質含有量は、約７０％若しくは７０％ないし約９０％若しくは９０％若しくは９０％を超えるか、９５％若しくは９５％を超えるか、又は少なくとも約９９％又は９９％を超える量であってもよい。経肺投与の場合、例えば、ＤＡＳ１８１マイクロスフェア等のマイクロスフェアは、約０．５ミクロンないし５．０ミクロン、又は約１ミクロンないし約２ミクロンの範囲内の平均直径を有するサイズにあってもよい。
【０１４２】
マイクロスフェアを形成させるためのインキュベーション条件は、ｐＨ、温度、高分子の濃度、又は反応若しくはインキュベーションの時間を含むパラメーターを調整することにより、マイクロスフェアの形成前に溶液中に存在する全高分子量の、少なくとも約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、若しくは９９％又はこれを超える量を取り込むように最適化できる。
【０１４３】
ある態様では、所望の特徴を有するマイクロスフェアを生成しない分子又は化合物は、この化合物を所望の特徴を有するマイクロスフェアを形成可能な担体分子に取り込ませるか又は結合させることにより、例えば、サイズ、送達特性、機械的強度等の所望の特徴を有するマイクロスフェア内に取り込ませることが可能である。ある態様では、担体分子がタンパク質であり、その分子又は化合物が、マイクロスフェアの内側及び／又は表面上に結合している。ある態様では、前記分子又は化合物は、対イオンとして機能し、マイクロスフェアの形成を開始させ、そして／又は促進することが可能である。
【０１４４】
タンパク質を含むマイクロスフェアを調製する場合には、グリセロール、脂肪酸、スクロース等の糖、亜鉛等のイオン、塩化ナトリウムといったタンパク質安定剤、又は当業者に知られる他のいずれかのタンパク質安定剤を、マイクロスフェア形成中に、カクテルを冷却する前に添加して、タンパク質変性を最小化することが可能である。
【０１４５】
ある態様では、マイクロスフェアは、更に、その表面が、消化酸等の酸又はプロテアーゼに対する耐性を与えるような適切な分子及び／又はコーティング剤でコーティングされていてもよい。別の態様では、マイクロスフェアは、脂肪酸又は脂質等の化合物で非供有結合的にコーティングされていてもよい。コーティングは、可溶化されたコーティング物質内への浸潤、次いで、マイクロスフェアにこの物質をスプレーすることによるか、又は当業者に知られる別の方法により、マイクロスフェアに塗布することが可能である。ある態様では、脂肪酸又は脂質が、マイクロスフェア形成用カクテル溶液に直接添加される。温度低下によマイクロスフェアの形成は、多くの従来方法により、バッチモード又は連続モードで行うことが可能である。マイクロスフェアの形成は、以下に限定されないが、大気圧、ｇ力又は表面張力の調節、及び播種を含む他の方法により開始できる。マイクロスフェア形成は、上記条件に晒すことで直ちに起こるかもしれないが、又は本明細書に提示されるように、より長い時間を要するかもしれない。
【０１４６】
タンパク質
本明細書に提示される方法によるマイクロ粒子の形成に使用可能な代表的なタンパク質について、以下で説明する。
【０１４７】
シアリダーゼ
ノイラミニダーゼ及びＮ−アシルノイラミノシルグリコヒドロラーゼ（Ｎ−ａｃｙｌｎｅｕｒａｍｉｎｏｓｙｌｇｌｙｃｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ）とも称されるシアリダーゼは、シアロ‐グリコ複合体からの末端シアル酸残基の除去を触媒するエキソグリコシダーゼファミリーである。シアル酸は、９個の炭素骨格を有するαケト酸のファミリーであり、通常、糖タンパク質及び糖脂質に結合したオリゴ糖鎖の最も外側部分に見出される。これらの分子は、先天性免疫、細胞接着、並びに炎症細胞と標的細胞間の相互作用といった、種々の生物機能と生物プロセスに、恐らく多くのレクチンの結合を介することで、関与している（Ｖａｒｋｉ ｅｔ ａｌ． (１９９２) Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ ４：２５７−２６６）。シアル酸は、炭素、窒素、エネルギーの良好な供給源であり、細胞壁生合成の前駆体でもある。更にまた、真核細胞上のシアル酸は、以下に限定されないが、インフルエンザウィルス、パラインフルエンザウイルス、いくつかのコロナウィルス及びロタウィルス、インフルエンザ菌、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ並びにＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａを含む病原性微生物のレセプター又は補助レセプターとして用いられる場合がある。最も顕著なシアル酸ファミリーのメンバーは、他の大部分の種類の生合成前駆体の、Ｎ−アセチルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ａｃ）である。Ｎｅｕ５Ａｃと、炭水化物側鎖の末端から２番目のガラクトース残基との間の２つの主たる結合；Ｎｅｕ５Ａｃ α(２，３)−Ｇａｌ及びＮｅｕ５Ａｃ α(２，６)−Ｇａｌが、天然で見いだされる。Ｎｅｕ５Ａｃ α(２，３)−Ｇａｌ分子及びＮｅｕ５Ａｃ α(２，６)−Ｇａｌ分子の両方は、インフルエンザウィルスに認識可能であり、これを通じてウィルスが結合して感染を開始するレセプターとして用いられる。しかしながら、ヒトインフルエンザウィルスは、Ｎｅｕ５Ａｃ α(２，６)−Ｇａｌを好むと考えられ、一方で、鳥インフルエンザウィルスとウマインフルエンザウィルスは、Ｎｅｕ５Ａｃ α(２，３)−Ｇａｌを優先的に認識する（Ｉｔｏ ｅｔ ａｌ． (２０００) Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ ４４：４２３− ７３０）。ヒトの気道上皮では、これら両方の形態のシアル酸が発現しているが、α(２，６)結合型のシアル酸が、α(２，３)結合型のシアル酸よりも豊富に存在している。
【０１４８】
α(２，３)結合型シアル酸がより少量で存在することは、恐らくトリウィルスに対する異種間の障壁の根拠となるものであり、気道上皮で発現するレセプターとしてのシアル酸のレベルを低下することで、恐らくインフルエンザウィルスの感染性が低下するであろうことを示唆するものである。従って、シアロ−グリコ複合体から末端シアル酸残基を除去するシアリダーゼは、それ自体が、レセプターであるシアル酸のレベルを低下する機能を有する、潜在的なインフルエンザウィルス治療薬を提供するものである。シアリダーゼは、他にも、その感染過程でシアル酸を利用するあらゆる病原体、例えば、以下に限定されないが、Ｍ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｍ． ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、Ｈ． ｐｙｌｏｒｉ、インフルエンザ菌、Ｓ． ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｐ． ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、パラインフルエンザウィルス並びにいくつかのコロナウィルス及びロタウィルスを含む病原体に対する治療薬として作用できる。
【０１４９】
シアリダーゼは、非常に高い基質特異性を示す傾向がある。シアリダーゼは、特定の種類の複合分子、例えば、糖タンパク質又は糖脂質；特定の糖結合（例えば、２−３、２−６、又は２−８）をターゲッティング可能であるか、又は結合糖自体（例えば、Ｄ−ガラクトース、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン）の特性に対して感受性を示す場合がある。基質分子には、以下に限定されないが、オリゴ糖、多糖、糖タンパク質、ガングリオシド及び合成分子が含まれる。例えば、シアリダーゼは、シアル酸残基と基質分子の残部との間のα(２，３)−Ｇａｌ、α(２，６)−Ｇａｌ又はα(２，８)−Ｇａｌ結合を切断可能である。また、シアリダーゼは、シアル酸残基と基質分子の残部との間のいかなる結合又は全ての結合を切断可能である。微生物及び高等真核生物から数多くのシアリダーゼタンパク質が精製されているが、これらのうち、複数が、病原性微生物のレセプターとして機能可能な末端シアル酸残基の除去を触媒することが証明されている。例えば、インフルエンザレセプターであるシアル酸Ｎｅｕ５Ａｃ α(２，６)−Ｇａｌ及びＮｅｕ５Ａｃ α(２，３)−Ｇａｌを分解可能な巨大バクテリア由来シアリダーゼには、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｕｒｅａｆａｃｉｅｎｓ、及びＭｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ ｖｉｒｉｄｉｆａｃｉｅｎｓ由来のシアリダーゼが含まれる。治療剤として機能可能な他のシアリダーゼには、ＮＥＵ２及びＮＥＵ４の遺伝子にコードされるようなヒトシアリダーゼが含まれる。
【０１５０】
シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質
シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質は、シアリダーゼタンパク質、又はその触媒活性を示す部分が、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）結合配列に融合したものから構成されるタンパク質である。これらのタンパク質は、それ自体として、アンカードメイン（ＧＡＧ結合配列）と治療用ドメイン（シアリダーゼタンパク質又はその触媒活性を示す部分）を効果的に含む。シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質は、上皮に結合して周囲のシアル酸を除去するように設計されているので、その感染プロセスにおいてシアル酸を利用する病原体に対する治療剤として使用することができる。融合タンパク質が上皮に結合する能力により、融合タンパク質が、例えば、インフルエンザ感染症を治療する吸入剤として投与された際の、その保持時間を高めることができる。ＧＡＧ結合配列は、シアリダーゼを気道上皮に繋ぎ止める上皮アンカードメインとして機能し、その保持と能力を向上させる。
【０１５１】
へパリンの近縁種であるヘパラン硫酸は、グリコサミノグリカン（ＧＡＧ）の一種であり、気道上皮の表面を含む、細胞膜状に普遍的に存在する。多くのタンパク質が、へパリン／へパラン硫酸に特異的に結合し、これらのタンパク質のＧＡＧ結合配列が同定されている。例えば、ヒト血小板因子４（ＰＦ４）（配列番号３）、ヒトインターロイキン８（ＩＬ８）（配列番号４）、ヒト抗トロンビンＩＩＩ（ＡＴ ＩＩＩ）（配列番号５）、ヒトアポ蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）（配列番号６）、ヒト血管関連遊走タンパク質（ｈｕｍａｎ ａｎｇｉｏ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｉｇｒａｔｏｒｙ ｐｒｏｔｅｉｎ）（ＡＡＭＰ）（配列番号７）、又はヒトアンフィレギュリン（配列番号８）のＧＡＧ結合配列が、へパリンに対する高い親和性を示すことが証明されている（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ． (１９９１) ＰＮＡＳ ８８：２７６８− ２７７２； Ｇｏｇｅｒ ｅｔ ａｌ．． (２００２) Ｂｉｏｃｈｅｍ． ４１：１６４０−１６４６； Ｗｉｔｔ ｅｔ ａｌ． (１９９４) Ｃｕｒｒ Ｂｉｏ ４：３９４−４００； Ｗｅｉｓｇｒａｂｅｒ ｅｔ ａｌ． (１９８６) Ｊ Ｂｉｏ Ｃｈｅｍ ２６１ ：２０６８−２０７６）。これらのタンパク質のＧＡＧ結合配列は、そのレセプター結合配列とは異なっているため、ＧＡＧ結合配列は、完全長タンパク質又はレセプター結合ドメインと関連する生物活性を誘導しない。これらの配列、又はへパリン／へパラン硫酸に結合可能な他の配列を、シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質中の上皮アンカードメインとして用いることができる。
【０１５２】
シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質との関係において、シアリダーゼには、完全なシアリダーゼタンパク質、又はその触媒活性を示す部分が含まれていてもよい。例えば、シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質は、配列番号１に示すＡ． ｖｉｓｃｏｓｕｓ由来の９０１アミノ酸から成るシアリダーゼタンパク質を含んでいてもよい。別の例では、シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質は、配列番号２に示すＡ． ｖｉｓｃｏｓｕｓ由来の３９４アミノ酸から成るシアリダーゼタンパク質の触媒活性を示す部分を含んでいてもよい。ＧＡＧ結合配列は、組換え手法によりシアリダーゼに結合することもできる。いくつかの例では、融合タンパク質は、４個のグリシン残基といった、アミノ酸リンカーを含んでいてもよい。更にまた、結合は、ＧＡＧ結合配列のＮ末端若しくはＣ末端、又はシアリダーゼのＮ末端若しくはＣ末端を介するものであってもよい。シアリダーゼ−ＧＡＧ融合タンパク質の代表例には、配列番号９ないし１３及び１７に示すポリペプチドが含まれる。更なる例では、シアリダーゼ成分とＧＡＧ結合配列成分は、当該技術分野で知られる何らかの方法により、化学リンカー又はペプチドリンカーを用いて結合させることができる。
【０１５３】
プロテアーゼインヒビター８
セルピンＢ８としても知られるプロテアーゼインヒビター８（ＰＩ８）は、セリンプロテアーゼ阻害剤（セルピン（ｓｅｒｐｉｎ））である。セルピンは、構造上の関連性を有するタンパク質の巨大なスーパーファミリーであり、ウィルス、昆虫、植物及び高等生命体で発現しているが、細菌又は酵母内では発現していない。セルピンは、凝固、フィブリン溶解、炎症、細胞遊走及び腫瘍形成を含む多くの生物学的過程に関与しているプロテアーゼの活性を兆節している。セルピンは、表面に露出した反応部位ループ（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｓｉｔｅ ｌｏｏｐ：ＲＳＬ）を有しており、この反応部位ループは、プロテアーゼの基質配列を模倣することでプロテアーゼの「おとり」として機能する。セルピンに標的プロテアーゼが結合すると、ＲＳＬが切断され、これに続いて、プロテアーゼがセルピンに共有結合される。新たに形成されたセルピン−プロテアーゼ複合体中のプロテアーゼは不活性である（Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ ｅｔ ａｌ． (２０００) Ｎａｔｕｒｅ ４０７：９２３−９２６）。ＰＩ８は、チキンオボアルブミンが原型となる、セルピンのサブファミリーメンバーである。このファミリーに属する他のセルピンと同様に、ＰＩ８は、主として細胞内に存在する３７４アミノ酸のタンパク質（配列番号１４）を生じる、典型的な切断性のＮ末端シグナル配列を欠いている。このヒトオボアルブミン様サブファミリーの他のメンバーには、プラスミノゲンアクチベーターインヒビター２型（ＰＡＩ−２）、単球好中球エラスターゼインヒビター（ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ｅｌａｓｔａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）（ＭＮＥＩ）、扁平上皮癌抗原（ＳＣＣＡ）−Ｉ、ロイピン（ＳＣＣＡ−２）マスピン（ＰＩ５）、プロテアーゼインヒビター（ＰＩ６）、プロテアーゼインビビター（ＰＩ９）及びボマピン（ｂｏｍａｐｉｎ）（ＰＩ１０）が含まれる。このファミリーの中でも、セルピンであるＰＩ６、ＰＩ８及びＰＩ９は、最も高い構造相同性を示す（最高で６８％のアミノ酸同一性）（Ｓｐｒｅｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ． (１９９５) Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７０：２９８５４− ２９８６１）。ＰＩ−８は、トリプシン、トロンビン、Ｘａ因子、サブチリシンＡ、フューリン（ｆｕｒｉｎ）及びキモトリプシンをｉｎ ｖｉｔｒｏで阻害することが示されている。ＰＩ−８は、血小板から放出され、フューリンの活性化と、従って、血小板凝集の調整に関与していると考えられている（ＬｅＢｌｏｎｄ ｅｔ ａｌ． (２００６) Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ ９５：２４３−２５２）。
【０１５４】
凝固等の内因性の生物学的プロセスの調節における役割に加え、セリンプロテアーゼインヒビターは、外来性の微生物の生物活性を阻害するよう機能することもできる。例えば、数多くのセリンプロテアーゼ阻害剤が、培養細胞、ニワトリ胚及びインフルエンザ感染したマウスの肺内でのインフルエンザウィルスの活性化を低下させることが示されている。セルピンは、インフルエンザウィルスの表面上の赤血球凝集素（ＨＡ）分子に結合して、ウィルスの活性を阻害することで、ウィルスの感染性を低下させる。例えば、トリプシンインヒビターである、アプロチニン（Ｚｈｉｍｏｖ ｅｔ ａｌ． (２００２) Ｊ Ｖｉｒｏｌ ７６：８６８２−８６８９）、ロイペプチン（Ｚｈｉｍｏｖ ｅｔ ａｌ． (２００２) Ｊ Ｖｉｒｏｌ ７６：８６８２−８６８９； Ｔａｓｈｉｒｏ ｅｔ ａｌ． (１９８７) Ｊ Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ ６８：２０３９−２０４３）、大豆プロテアーゼインヒビター（Ｂａｒｂｅｙ−Ｍｏｒｅｌ ｅｔ ａｌ． (１９８７) Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ １５５：６６７−６７２）、イプシロンアミノカプロン酸（Ｚｈｉｍｏｖ ｅｔ ａｌ．， １９８２． Ａｒｃｈ Ｖｉｒｏｌ ７３：２６３−２７２）及びｎ−ｐ−トシル−Ｌ−リジンクロロメチルケトン（ｎ−ｐ−ｔｏｓｙｌ−Ｌ−ｌｙｓｉｎｅ ｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈｙｌｋｅｔｏｎｅ：ＴＬＣＫ）（Ｂａｒｂｅｙ−Ｍｏｒｅｌ ｅｔ ａｌ． (１９８７) Ｊ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ １５５：６６７−６７２）は、全てインフルエンザウィルス感染を阻害することが証明されており、インフルエンザウィルス感染の治療に用いる治療剤の候補である。従って、関連するトリプシンインヒビターとして、ＰＩ８も、インフルエンザウィルス感染の治療における治療剤として用いることが可能である。
【０１５５】
界面活性剤
本明細書に提供される組成物は、安定なエマルジョンを形成するのに十分な量で添加された１又は２種類以上の界面活性剤を含んでいてもよい。いくつかの薬剤は、自己乳化特性を有し、他の薬剤及び成分は表面張力に影響する場合もあるので、適切な量の界面活性剤は、非変性タンパク質、随意に添加される送達用活性薬剤及びエマルジョン中に存在するその他の成分による。ここで用いる界面活性剤は、水性溶液中に溶解した際にその溶液の表面張力又は水相と油相間の界面張力を低下させて水性エマルジョン中に油、又は油性エマルジョン中に水を安定に形成する物質である。界面活性分子は、両親媒性であり、親水性の頭部基と疎水性の尾部を有する。界面活性分子は、ミセル、逆ミセル、脂質２重膜（リポソーム）及びキュボソーム（ｃｕｂｏｓｏｍｅ）といった、種々の高分子構造をエマルジョン中に形成する。形成される厳密な高分子構造は、界面活性分子の親水性領域と疎水性領域の相対的なサイズに依存する。特定の態様では、界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム；ラウリン酸ソルビタン、パルミチン酸ソルビタン、ステアリン酸ソルビタン（商品名Ｓｐａｎ（登録商標）２０−４０−６０等で入手可能）；モノラウリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン、モノパルミチン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン、モノステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン（商品名ＴＷＥＥＮＳ（登録商標）２０−４０−６０等で入手可能)；塩化ベンザルコニウム、混合鎖リン脂質（ｍｉｘｅｄ ｃｈａｉｎ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ）、陽イオン性脂質、オリゴ脂質、リン脂質、カルニチン、スフィンゴシン、スフィンゴミエリン、セラミド、糖脂質、リポタンパク質、アポ蛋白、両親媒性タンパク質、両親媒性ペプチド、両親媒性合成ポリマー及びこれらの組合せから選択される。ここで用いる他の代表的な界面活性剤には、以下に限定されないが、以下のものが含まれる：
ｉ）天然脂質、即ち、コレステロール、スフィンゴシン及び誘導体、ガングリオシド、スフィンゴシン誘導体（大豆）、フィトスフィゴシン及び誘導体（酵母）、コリン（ホスファチジルコリン）、エタノールアミン（ホスファチジルエタノールアミン）、グリセロール（ホスファチジル−ＤＬ−グリセロール）、イノシトール（ホスファチジルイノシトール）、セリン（ホスファチジルセリン（ナトリウム塩））、カルジオリピン、ホスファチジン酸、卵子由来、リソ（モノアシル）誘導体（リソホスファチド）、水素化リン脂質、脂質組織抽出物、
ｉｉ）合成脂質、即ち、非対称脂肪酸、対称脂肪酸−飽和系、対称脂肪酸−不飽和系、アシルコエンザイムＡ（アセトイルコエンザイムＡ、ブタノイルコエンザイムＡ、クロタノイルコエンザイムＡ（Ｃｒｏｔａｎｏｙｌ Ｃｏｅｎｚｙｍｅ Ａ）、ヘキサノイルコエンザイムＡ、オクタノイルコエンザイムＡ、デカノイルコエンザイムＡ、ラウロイルコエンザイムＡ、ミリストイルコエンザイムＡ、パルミトイルコエンザイムＡ、ステアロイルコエンザイムＡ 、オレオイルコエンザイムＡ、アラキドイルコエンザイムＡ、アラキドノイルコエンザイムＡ、ベヘノイルコエンザイムＡ、トリコサノイルコエンザイムＡ、リグノセロイルコエンザイムＡ、ネルボノイルコエンザイムＡ、ヘキサコサノイルコエンザイムＡ、
ｉｉｉ）スフィンゴ脂質、即ち、Ｄ−エリスロ (Ｃ−１８) 誘導体（スフィンゴシン、例えば：Ｄ−エリスロスフィンゴシン（合成）、スフィンゴシン−１−リン酸、Ｎ，Ｎ−ジメチルスフィンゴシン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルスフィンゴシン、スフィンゴシルホスフォリルコリン、スフィンゴミエリン及びグリコシル化スフィンゴシン）、セラミド誘導体（セラミド、Ｄ−エリスロセラミド−１−リン酸、グリコシル化セラミド）、スフィンガニン（ジヒドロスフィンゴシン）（スフィンガニン−１−リン酸、スフィンガニン(Ｃ２０)、Ｄ−エリスロスフィンガニン、Ｎ−アシルスフィンガニンＣ２、Ｎ−アシルスフィンガニンＣ８、Ｎ−アシルスフィンガニンＣ１６、Ｎ−アシルスフィンガニンＣ１８、Ｎ−アシルスフィンガニンＣ２４、Ｎ−アシルスフィンガニンＣ２４：１）、グリコシル化(Ｃ１８)スフィンゴシン及びリン脂質誘導体（グリコシル化スフィンゴシン）（β Ｄ−グルコシルスフィンゴシン，β Ｄ−ガラクトシルスフィンゴシン，β Ｄ−ラクトシルスフィンゴシン)、グリコシル化セラミド（Ｄ−グリコシル−β１−１'セラミド(Ｃ８)、Ｄ−ガラクトシル−β１−１'セラミド(Ｃ８)、Ｄ−ラクトシル−β１−１'セラミド(Ｃ８)、Ｄ−グルコシル−β１−１'セラミド(Ｃ１２)、Ｄ−ガラクトシルβ１−１'セラミド(Ｃ１２)、Ｄ−ラクトシル−β１−１'セラミド(Ｃ１２)）、グリコシル化ホスファチジルエタノールアミン（１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−ラクトース)、Ｄ−エリスロ(Ｃ１７)誘導体（Ｄ−エリスロスフィンゴシン、Ｄ−エリスロスフィンゴシン−１−リン酸）、Ｄ−エリスロ(Ｃ２０)誘導体（Ｄ−エリスロスフィンゴシン)、Ｌ−スレオ(Ｃ１８)誘導体（Ｌ−スレオスフィンゴシン、サフィンゴール（Ｌ−スレオジヒドロスフィンゴシン））、スフィンゴシン誘導体（Ｅｇｇ、Ｂｒａｉｎ & Ｍｉｌｋ）（Ｄ−エリスロ−スフィンゴシン、スフィンゴミエリン、セラミド、セレブロシド、脳スルファチド）、ガングリオシド（ガングリオシド構造体、ガングリオシド−ヒツジ脳、ガングリオシド−ブタ脳）、スフィンゴシン誘導体（大豆）(グルコシルセラミド)、フィトスフィンゴシン誘導体（酵母）（フィトスフィンゴシン、Ｄ−リボフィトスフィンゴシン−１−リン酸、Ｎ−アシルフィトスフィンゴシンＣ２、Ｎ−アシルフィトスフィンゴシンＣ８、Ｎ−アシルフィトスフィンゴシンＣ１８、
ｉｖ）アシルコエンザイムＡ、即ち、アセトイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ブタノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、クロタノイルコエンザイムＡ（Ｃｒｏｔａｎｏｙｌ Ｃｏｅｎｚｙｍｅ Ａ）（アンモニウム塩）、ヘキサノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、オクタノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、デカノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ラウロイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ミリストイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、パルミトイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ステアロイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、オレオイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、アラキドイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、アラキドノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ベヘノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、トリコサノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、リグノセロイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ネルボノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ヘキサコサノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、ドコサヘキサノイルコエンザイムＡ（アンモニウム塩）、
ｖ) 酸化脂質、即ち、１−パルミトイル−２−アゼラオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１−Ｏ−ヘキサデシル−アゼラオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１−パルミトイル−２−グルタロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン（ＰＧＰＣ）、１−パルミトイル−２− (９'−オキソ−ノナノイル)−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、１−パルミトイル−２−(５'−オキソ−バレロイル)−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン、
ｖｉ）エーテル脂質、即ち、ジエーテル脂質（ジアルキルホスファチジルコリン、ジフィタニルエーテル脂質）、アルキルホスホコリン（ドデジルホスホコリン)、Ｏ−アルキルジアシルホスファチジルコリニウム（１，２−ジアシル−ｓｎ−グリセロ−３−エチルホスホコリン）、合成ＰＡＦ及び誘導体（１−アルキル−２−アシルグリセロ−３−ホスホコリン及び誘導体）、
ｖｉｉ）蛍光脂質、即ち、グリセロール系（ホスファチジルコリン（ＮＢＤ）、ホスファチジン酸(ＮＢＤ)、ホスファチジルエタノールアミン（ＮＢＤ）、ホスファチジルグリセロール（ＮＢＤ）、ホスファチジルセリン（ＮＢＤ））、スフィンゴシン系（セラミド（ＮＢＤ）、スフィンゴミエリン（ＮＢＤ）、フィトスフィンゴシン（ＮＢＤ）、ガラクトシルセレブロシド（ＮＢＤ））、頭部基が標識された脂質（グリセロール系）（ホスファチジルエタノールアミン（ＮＢＤ）、ホスファチジルエタノールアミン（リサミンローダミンＢ）、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ダンシル、ピレン、フルオレセイン）、ホスファチジルセリン（ＮＢＤ）、ホスファチジルセリン（ダンシル））、２５−ＮＢＤ−コレステロール、
ｖｉｉｉ）レシチン、Ｕｌｔｒａｌｅｃ−Ｐ（ＡＤＭ）、大豆粉末を含むが、これらに限定されない他の脂質、
ｉｘ）ポリエチレングリコール４００；ラウリル硫酸ナトリウム；ラウリン酸ソルビタン、パルミチン酸ソルビタン、ステアリン酸ソルビタン（商品名Ｓｐａｎ（登録商標）２０−４０−６０等で入手可能）；モノラウリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン、モノパルミチン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン、モノステアリン酸ポリオキシエチレン（２０）ソルビタン等のポリソルベート（商品名ＴＷＥＥＮＳ（登録商標）２０−４０−６０等で入手可能)；塩化ベンザルコニウムを含むがこれらに限定されない界面活性剤。
【０１５６】
特定の態様では、使用するリン脂質は、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジン酸、混合鎖リン脂質、リソリン脂質、水素化リン脂質、部分水素化リン脂質及びこれらの混合物である。特定の態様では、界面活性剤は、ポリソルベート８０、レシチン及びホスファチジルコリンから選択される。界面活性剤は、安定なエマルジョンを形成するのに十分な量で存在する。
【０１５７】
界面活性剤の量は、経験に基づいて決定可能であり、選択する薬剤と、生じる組成物の所望の形態による。含有量は、０．１重量％未満から３５重量％以下又はこれを超える量であってもよい。特定の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の約１ 重量％、２重量％、３重量％、４重量％、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％、９重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２５重量％から約３０重量％以下の濃度で存在する。特定の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１重量％から約２０重量％以下の濃度で存在する。特定の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１重量％から約１５重量％以下の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１重量％から約１０重量％以下の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１重量％から約８重量％以下の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１重量％から約６重量％以下の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１重量％から約４重量％以下の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約２０重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１５重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１３重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１１重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約８重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約６重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約４重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約２重量％の濃度で存在する。別の態様では、界面活性剤は、組成物の総重量の、約１重量％の濃度で存在する。
【０１５８】
本明細書に提供される安定なエマルジョンには、更なる栄養素又は活性薬剤を封入可能な、ミセル、リポソーム及びキュボソーム並びにこれらの混合物から選択される１又は２種類以上の送達用媒体、又は管状、ヘリックス状、球状等の非変性タンパク質から成る高分子アセンブリーが含まれていてもよい。次いで、活性薬剤を封入した送達用媒体は、上皮で吸収され、非変性タンパク質及び／又は更なる栄養素／活性薬剤が送達される。
【０１５９】
随意の追加的薬剤
本明細書に提供される組成物には、非変性タンパク質に加えて、対象が摂取するための１又は２種類以上の医薬又は栄養補助剤又はその他のこのような薬剤が随意に含まれていてもよい。一般的に、薬剤は、宿主内で、例えば、免疫制御、生化学的プロセスの制御、又は酵素活性といった機能を有するものである。ここに記載されるような、製剤可能なあらゆる薬剤は、本明細書に提供される組成物中で投与可能である。薬剤が治療剤の場合には、組成物には、送達される薬剤が治療上有効量で含まれる。投与における活性薬剤の特定の量は、その活性薬剤の特性、治療する状態の特性、対象の年齢及び大きさ、そして他のパラメーターによって大きく変化することになる。
【０１６０】
一般的に、組成物中の非変性タンパク質の他の追加的活性薬剤又は栄養素の量は、組成物に対して約０．０１重量％未満から約２０重量％、又はこれ以上の量の範囲で変化し、典型的には一回投与用に製剤される。一回投与量は、宿主の体重１キログラム当たり、約０．０１ μｇないし１０ ｍｇの薬剤で変化してもよいが、約０．１ μｇ／ｋｇないし１ ｍｇ／ｋｇの投与量が一般的に用いられる。しかしながら、これらの濃度は、単なる一般的なガイドラインであり、投与する薬剤、治療する状態に応じて特定の量及び投与量を選択してもよく、用いる治療計画は、いずれかの医療処置を施す対象に対して、妥当な有益性／リスク比率で、所望の局所的若しくは全身的効果と効能を提供するのに十分な薬物又は活性薬剤の量を意味する。
【０１６１】
薬剤は、これらに限定されないが、末梢神経， アドレナリン作動性レセプター， コリン作動性レセプター， 神経系， 骨格筋， 心血管系， 平滑筋， 血管系， シナプス部位， 神経効果器接合部， 内分泌系， ホルモン系， 免疫系， 生殖器系， 骨格系， オータコイド系， 消化器系及び排出系， ヒスタミン系等に対して作用する薬物を含む無機薬物及び有機薬物から選択できる。本明細書に提供される組成物を用いて送達可能な活性薬剤には、以下に限定されないが、抗痙攣薬、鎮痛剤， 抗パーキンソン薬， 抗炎症剤， カルシウムアンタゴニスト， 麻酔薬、抗菌剤、抗マラリア剤、駆虫剤、血圧降下剤、抗ヒスタミン剤、解熱剤、α−アドレナリンアゴニスト、α遮断薬、殺生物剤、殺菌剤、呼吸器作用剤、β−アドレナリン遮断薬、避妊薬、心臓脈管薬、カルシウムチャネル阻害剤、抑制剤、診断剤、利尿剤、電解質、酵素、催眠剤、ホルモン、血糖降下剤、血糖上昇剤、筋収縮剤、筋弛緩剤、組織形成剤、糖タンパク質、核タンパク質、リポタンパク質、眼病薬、精神興奮剤、鎮静剤、ステロイド、交感神経様作用薬、副交感神経様作用薬、トランキライザー、経尿路剤、ワクチン、経膣剤、ビタミン類、ミネラル、非ステロイド系抗炎症剤、アンギオテンシン変換酵素、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、多糖及びハーブ系サプリメントを含む栄養補給剤が含まれる。送達される薬剤のレベルは、組成物の重量に対して、約０．０１％ないし約５０％以下、約０．１％ないし約４０％以下、約０．１％ないし約３０％以下、約０．１％ないし約２０％以下、約０．１％ないし約１０％以下、約０．１％ないし約９％以下、約０．１％ないし約８％以下、約０．１％ないし約７％以下、約０．１％ないし約６％以下、約０．１％ないし約５％以下、約０．１％ないし約４％以下、約０．１％ないし約３％以下、約０．１％ないし約２％以下、約０．１％ないし約１％以下である。送達される薬剤は、水溶性、微水溶性、又は油溶性であってもよい。特定の態様では、送達される薬剤は、抗痙攣薬、鎮痛剤， 抗パーキンソン薬， 抗炎症剤， カルシウムアンタゴニスト， 麻酔薬、抗菌剤、抗マラリア剤、駆虫剤、血圧降下剤、抗ヒスタミン剤、解熱剤、α−アドレナリンアゴニスト、α遮断薬、殺生物剤、殺菌剤、呼吸器作用剤、β−アドレナリン遮断薬、避妊薬、心臓脈管薬、カルシウムチャネル阻害剤、抑制剤、診断剤、利尿剤、電解質、酵素、催眠剤、ホルモン、血糖降下剤、血糖上昇剤、筋収縮剤、筋弛緩剤、組織形成剤、糖タンパク質、核タンパク質、リポタンパク質、非変性ホエイタンパク質、眼病薬、精神興奮剤、鎮静剤、ステロイド、交感神経様作用薬、副交感神経様作用薬、トランキライザー、経尿路剤、ワクチン、経膣剤、ビタミン類、ミネラル、非ステロイド系抗炎症剤、アンギオテンシン変換酵素、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、多糖及びハーブ系サプリメントを含む栄養補給剤から選択される。
【０１６２】
特定の態様では、活性薬剤は、以下から選択される：
α−アドレナリンアゴニスト、例えば、アドラフィニル、アドレノロン（Ａｄｒｅｎｏｌｏｎｅ）、アミデフリン（Ａｍｉｄｅｐｈｒｉｎｅ）、アプラクロニジン、ブドララジン、クロニジン、シクロペンタミン（Ｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｍｉｎｅ）、デトミジン、ジメトフリン（Ｄｉｍｅｔｏｆｒｉｎｅ）、ジピベフリン、エフェドリン、エピネフリン、フェノキサゾリン（Ｆｅｎｏｘａｚｏｌｉｎｅ）、グアナベンズ、グアンファシン、ヒドロキシアンフェタミン、イボパミン、インダナゾリン（Ｉｎｄａｎａｚｏｌｉｎｅ）、イソメテプテン、メフェンテルミン、メタラミノール、塩酸メトキサミン、メチルヘキサンアミン、メチゾレン（Ｍｅｔｉｚｏｌｅｎｅ）、ミドドリン、ナファゾリン、ノルエピネフリン、ノルフェネフリン、オクトドリン（Ｏｃｔｏｄｒｉｎｅ）、オクトパミン、オキシメタゾリン、塩酸フェニレフリン、塩酸フェニルプロパノールアミン、フェニルプロピルメチラミン、フォレドリン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、リルメニジン、シネフリン、テトラヒドロゾリン、チアメニジン（Ｔｉａｍｅｎｉｄｉｎｅ）、トラマゾリン、ツアミノヘプタン、チマゾリン、チラミン及びキシロメタゾリン；
【０１６３】
β−アドレナリンアゴニスト、例えば、アルブテロール、バンブテロール、ビトルテロール、カルブテロール、クレンブテロール、クロルプレナリン、デノパミン、ジオキセテドリン（Ｄｉｏｘｅｔｈｅｄｒｉｎｅ）、ドペキサミン、エフェドリン、エピネフリン、エタフェドリン、エチルノルエピネフリン、フェノテロール、ホルモテロール、ヘキソプレナリン、イボパミン、イソエタリン、イソプロテレノール、マブテロール、メタプロテレノール、メトキシフェナミン、オキシフェドリン、ピルブテロール、プレナルテロール（Ｐｒｅｎａｌｔｅｒｏｌ）、プロカテロール、プロトキロール、レプロテロール、リミテロール、リトドリン、ソテレノール、テルブテロール（Ｔｅｒｂｕｔｅｒｏｌ）及びキサモテロール；
【０１６４】
α−アドレナリン遮断薬、例えば、アモスラロール、アロチノロール、ダピプラゾール、ドクサゾシン、エルゴロイドメシレート（Ｅｒｇｏｌｏｉｄ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、フェンスピリド、インドラミン、ラベタロール、ニセルゴリン、プラゾシン、テラゾシン、トラゾリン、トリマゾシン及びヨヒンビン；
【０１６５】
β−アドレナリン遮断薬、例えば、アセブトロール、アルプレノロール、アモスラロール、アロチノロール、アテノロール、ベフノロール、ベタキソロール、ベバントロール、ビソプロロール、ボピンドロール、ブクモロール、ベフェトロール（Ｂｅｆｅｔｏｌｏｌ），ブフラロール（Ｂｕｆｕｒａｌｏｌ）、ブニトロロール、ブプラノロール、塩酸ブチドリン（Ｂｕｔｉｄｒｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ブトフィロロール（Ｂｕｔｏｆｉｌｏｌｏｌ）、カラゾロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、セタモロール（Ｃｅｔａｍｏｌｏｌ），クロラノロール（Ｃｌｏｒａｎｏｌｏｌ）、ジレバロール、エパノロール（Ｅｐａｎｏｌｏｌ）、エスモロール、インデノロール、ラベタロール、レボブノロール、メピンドロール（Ｍｅｐｉｎｄｏｌｏｌ）、メチプラナロール（Ｍｅｔｉｐｒａｎａｌｏｌ）、メトプロロール、モプロロール（Ｍｏｐｒｏｌｏｌ）、ナドキソロール（Ｎａｄｏｘｏｌｏｌ）、ニフェナロール（Ｎｉｆｅｎａｌｏｌ）、ニプラジロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プラクトロール、プロネタロール、プロプラノロール、ソタロール、スルフィナロール（Ｓｕｌｆｉｎａｌｏｌ）、タリノロール、テトラトロール（Ｔｅｒｔａｔｏｌｏｌ）、チモロール、トリプロロール（Ｔｏｌｉｐｒｏｌｏｌ）及びキシベノロール（Ｘｉｂｅｎｏｌｏｌ）；
【０１６６】
嫌酒薬、例えば、クエン酸添加カルシウムシアナミド（Ｃａｌｃｉｕｍ Ｃｙａｎａｍｉｄｅ Ｃｉｔｒａｔｅｄ）、ジスルフィラム、ナダイド及びニトレファゾール（Ｎｉｔｒｅｆａｚｏｌｅ）；
【０１６７】
アルドースレダクターゼ阻害剤、例えば、エパルレスタット、ポナルレスタット（Ｐｏｎａｌｒｅｓｔａｔ）、ソルビニル及びトルレスタット；
【０１６８】
同化剤、例えば、アンドロイソキサゾール（Ａｎｄｒｏｉｓｏｘａｚｏｌｅ）、アンドロステンジオール、ボランジオール、ボラステロン、クロステボール、エチルエストレノール；ホルミルジエノロン（Ｆｏｒｍｙｌｄｉｅｎｏｌｏｎｅ）、４−ヒドロキシ−１９−ノルテストステロン、メタンドリオール、メテノロン、メチルトリエノロン、ナンドロロン、デカン酸ナンドロロン、ｐ−ヒドロキシフェニルプロピオン酸ナンドロロン（Ｎａｎｄｒｏｌｏｎｅ ｐ−Ｈｅｘｙｌｏｘｙｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、ナンドロロンフェンプロピオネート（Ｎａｎｄｒｏｌｏｎｅ Ｐｈｅｎｐｒｏｐｉｏｎａｔｅ）、ノルボレトン（Ｎｏｒｂｏｌｅｔｈｏｎｅ）、オキシメステロン、ピゾチリン（Ｐｉｚｏｔｙｌｉｎｅ）、キンボロン、ステンボロン（Ｓｔｅｎｂｏｌｏｎｅ）及びトレンボロン；
【０１６９】
鎮痛剤（歯科用）、例えば、クロロブタノール、チョウジ及びオイゲノール；
【０１７０】
鎮痛剤（麻酔性）、例えば、アルフェンタニル、アリルプロジン、アルファプロジン、アニレリジン、ベンジルモルフィン（Ｂｅｎｚｙｌｍｏｒｐｈｉｎｅ）、ベジトラミド、ブプレノルフィン、ブトルファノール、クロニタゼン、コデイン、コデイン メチルブロマイド、リン酸コデイン、硫酸コデイン、デソモルヒネ、デキストロモラミド、デゾシン、ジアンプロミド、ジヒドロコデイン、ジヒドロコデイノン エノール アセテート、ジヒドロモルヒネ、ジメノキサドール、ジメヘプタノール、ジメチルチアムブテン（Ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｍｂｕｔｅｎｅ）、ジオキサフェチルブチラート、ジピパノン、エプタゾシン、エトヘプタジン、エチルメチルチアムブテン（Ｅｔｈｙｌｍｅｔｈｌｙｔｈｉａｍｂｕｔｅｎｅ）、エチルモルヒネ、エトニタゼン、フェンタニル、ヒドロコドン、重酒石酸ヒドロコドン、ヒドロモルフォン、ヒドロキシペチジン、イソメタドン（Ｉｓｏｍｅｔｈａｄｏｎｅ）、ケトベミドン、レボルファノール、ロフェンタニル（Ｌｏｆｅｎｔａｎｉｌ）、メペリジン、メプタジノール（Ｍｅｐｔａｚｉｎｏｌ）、メタゾシン、塩酸メタドン、メトポン、モルヒネ、モルヒネ誘導体、ミロフィン（Ｍｙｒｏｐｈｉｎｅ）、ナルブフィン、ナルセイン、ニコモルヒネ、ノルレボルファノール（Ｎｏｒｌｅｖｏｒｐｈａｎｏｌ）、ノルメタドン、ノルモルヒネ、ノルピパノン、アヘン、オキシコドン、オキシモルホン、パパベレタム、ペンタゾシン、フェナドキソン、フェナゾシン、フェオペリジン（Ｐｈｅｏｐｅｒｉｄｉｎｅ）、ピミノジン、ピリトラミド、プロヘプタジン、プロメドール（Ｐｒｏｍｅｄｏｌ）、プロペリジン、プロピラム、プロポキシフェン、スフェンタニル及びチリジン；
【０１７１】
鎮痛剤（非麻酔性）、例えば、アセトアミノフェン、アセトアミノサロール、アセトアニリド、アセチルサリチルサリチル酸、アルクロフェナック、アルミノプロフェン、アロキシプリン、アルミニウムビス(アセチルサリチレート)（Ａｌｕｍｉｎｕｍ Ｂｉｓ(ａｃｅｔｙｌｓａｌｉｃｙｌａｔｅ)）、アミノクロロテノキサジン（Ａｍｉｎｏｃｈｌｏｒｔｈｅｎｏｘａｚｉｎ）、２−アミノ−４−ピコリン、アミノプロピロン、アミノピリン、サリチル酸アンモニウム、アンチピリン、サリチル酸アンチピリン、アントラフェニン、アバゾン、アスピリン、ベノリレート、ベノキサプロフェン、ベンズピペリロン、ベンジダミン、ｐ−ブロモアセトアニリド、５−ブロモサリチル酸アセテート（５−Ｂｒｏｍｏｓａｌｉｃｙｌｉｃ Ａｃｉｄ Ａｃｅｔａｔｅ）、ブセチン、ブフェキサマク、ブマジゾン、ブタセチン、アセチルサリチル酸カルシウム、カルバマゼピン、カルベチジン、カルビフェン（Ｃａｒｂｉｐｈｅｎｅ）、カルサラム（Ｃａｒｓａｌａｍ）、クロラランチピリン（Ｃｈｌｏｒａｌａｎｔｉｐｙｒｉｎｅ）、クロルテノキサジン、サリチル酸コリン、シンコフェン、シラマドール、クロメタシン（Ｃｌｏｍｅｔａｃｉｎ）、クロプロパミド、クロテタミド、デキソキサドロール、ジフェナミゾール、ジフルニサル、アセチルサリチル酸ジヒドロキシアルミニウム、ジピロセチル、ジピロン、エモルファゾン、エンフェナム酸、エピリゾール、エテルサレート（Ｅｔｅｒｓａｌａｔｅ）、エテンザミド、エトキサゼン、エトドラク、フェルビナク、フェノプロフェン、フロクタフェニン、フルフェナム酸、フルオレソン、フルピルチン、フルピロクアゾン（Ｆｌｕｐｒｏｑｕａｚｏｎｅ）、フルルビプロフェン、フォスフォサル、ゲンチジン酸、グラフェニン、イブフェナック、イミダゾール サリチラート、インドメタシン、インドプロフェン、イソフェゾラク、イソラドール（Ｉｓｏｌａｄｏｌ）、イソニキシン、ケトプロフェン、ケトロラク、ｐ−ラクトフェネチド、レフェタミン、ロキソプロフェン、アセチルサリチル酸リジン、アセチルサリチル酸マグネシウム、メトトリメプラジン、メトフォリン、ミロプロフェン、モラゾン、モルホリン サリチラート、ナプロキセン、ネフォパム、ニフェナゾン、５'ニトロ−２' プロポキシアセトアニリド、パルサルミド、ペリソキサール、フェナセチン、塩酸フェナゾピリジン、フェノコール、フェノピラゾン、アセチルサリチル酸フェニル、サリチル酸フェニル、フェニラミドール、ピペブゾン、ピペリロン、プロジリジン、プロパセタモール、プロピフェナゾン、プロキサゾール、サリチル酸キニーネ、ラミフェナゾン、メチル硫酸リマゾリウム（Ｒｉｍａｚｏｌｉｕｍ Ｍｅｔｉｌｓｕｌｆａｔｅ）、サラセタミド、サリシン、サリチルアミド、サリチルアミドＯ−酢酸（Ｓａｌｉｃｙｌａｍｉｄｅ Ｏ−Ａｃｅｔｉｃ Ａｃｉｄ）、サリチル硫酸、サルサルテ（Ｓａｌｓａｌｔｅ）、サルベリン、シメトリド、サリチル酸ナトリウム、スルファミピリン、スプロフェン、タルニフルメート、テノキシカム、テロフェナメート、テトラドリン（Ｔｅｔｒａｄｒｉｎｅ）、チノリジン、トルフェナム酸、トルプロニン、トラマドール、ビミノール、キセンブシン及びゾメピラク；
【０１７２】
アンドロゲン、例えば、アンドロステロン、ボルデノン、デヒドロエピアンドロステロン、フルオキシメステロン、メスタノロン、メステロロン、メタアンドロステノロン、１７−メチルテストステロン、１７α−メチルテストステロン３−シクロペンチルエノールエーテル、ノルエタンドロロン、ノルメタンドロン、オキサンドロロン、オキシメステロン、オキシメトロン、プラステロン、スタンロロン、スタノゾロール、テストステロン、テストステロン１７−クロラルへミアセタール（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ １７−Ｃｈｌｏｒａｌ Ｈｅｍｉａｃｅｔａｌ）、テストステロン １７β−シピオネート（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ １７β−Ｃｙｐｉｏｎａｔｅ）、エナント酸テストステロン、テストステロン ニコチネート、フェニル酢酸テストステロン、プロピオン酸テストステロン及びチオメステロン；
【０１７３】
麻酔薬、例えば、アセトアミドオイゲノール（Ａｃｅｔａｍｉｄｏｅｕｇｅｎｏｌ）、アルファドロンアセテート、アルファキサロン、アムカイン（Ａｍｕｃａｉｎｅ）、アモラノン、塩酸アミロカイン、ベノキシネート、ベンゾカイン、ベトキシカイン、ビフェナミン、ブピバカイン、ブタカイン、ブタベン（Ｂｕｔａｂｅｎ）、ブタニリカイン、ブレタミン（Ｂｕｒｅｔｈａｍｉｎｅ）、ブタリタールナトリウム、ブトキシカイン、カルチカイン、２−クロロプロカインヒドロクロリド（２−Ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｃａｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、コカエチレン、コカイン、シクロメチカイン、塩酸ジブカイン、ジメチソキン、ジメトカイン（Ｄｉｍｅｔｈｏｃａｉｎｅ）、ジぺラドンヒドロクロリド（Ｄｉｐｅｒａｄｏｎ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ディクロニン、エクゴニジン、エクゴニン、アミノ安息香酸エチル、塩化エチル、エチドカイン、エトキサドロル（Ｅｔｏｘａｄｒｏｌ）、β−オイカイン、オイプロシン（Ｅｕｐｒｏｃｉｎ）、フェナルコミン、フォモカイン、ヘキソバルビタール、塩酸ヘキシルカイン、ヒドロキシジオン ナトリウム、ヒドロキシプロカイン、ヒドロキシテトラカイン、ｐ−アミノ安息香酸イソブチル、ケンタミン、ロイシノカインメシレート（Ｌｅｕｃｉｎｏｃａｉｎｅ Ｍｅｓｙｌａｔｅ）、レボキサドロール、リドカイン、メピバカイン、塩酸メプリルカイン、塩酸メタブトキシカイン（Ｍｅｔａｂｕｔｏｘｙｃａｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、メトヘキシタールナトリウム、塩化メチル、ミダゾラム、ミルテカイン、ネーパイン、オクタカイン、オルトカイン、オキセサゼイン、パレトキシカイン、塩酸フェナカイン（Ｐｈｅｎａｃａｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、フェンシクリジン、フェノール、ピペロカイン、ピリドカイン、ポリドカノール、プラモキシン、プリロカイン、プロカイン、プロパニジド、プロパノカイン、プロパラカイン、プロピポカイン、プロポフォール、塩酸プロボキシカイン、プソイドコカイン、ピロカイン、キニーネ尿素塩酸塩（Ｑｕｉｎｉｎｅ Ｕｒｅａ Ｈｙｄｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、リソカイン、サリチルアルコール、テトラカイン塩酸塩、チアルバルビタール、チミラール（Ｔｈｉｍｙｌａｌ）、チオブタバルビタール、チオペンタールナトリウム、トリカイン、トリメカイン及びゾラミン
【０１７４】
食欲抑制薬、例えば、アミノレックス、アンフェクロラール、アンフェタミン、ベンズアフェタミン（Ｂｅｎｚａｐｈｅｔａｍｉｎｅ）、クロルフェンテルミン、クロベンゾレックス、クロフォレックス（Ｃｌｏｆｏｒｅｘ）、クロルテルミン、シクルエキセドリン、デストロアンフェタミンスルフェート（Ｄｅｓｔｒｏａｍｐｈｅｔａｍｉｎｅ Ｓｕｌｆａｔｅ）、ジエチルプロピオン、ジフェメトキシジン、Ｎ−エチルアンフェタミン、フェンブトラゼート、フェンフルラミン、フェンプロポレクス、フルフリルメチルアンフェタミン（Ｆｕｒｆｕｒｙｌｍｅｔｈｙｌａｍｐｈｅｔａｍｉｎｅ）、レボファセトペレート（Ｌｅｖｏｐｈａｃｅｔｏｐｅｒａｔｅ）、マチンドール、メフェノレクス、メタンフェプロアモン（Ｍｅｔａｍｆｅｐｒｏａｍｏｎｅ）、メタンフェタミン、ノルプソイドエフェドリン、フェンジメトラジン、酒石酸フェンジメトラジン、フェンメトラジン、フェンペンテルミン（Ｐｈｅｎｐｅｎｔｅｒｍｉｎｅ）、塩酸フェニルプロパノールアミン及びピシロレックス（Ｐｉｃｉｌｏｒｅｘ）；
【０１７５】
駆虫薬剤（条虫類）、例えば、アレコリン、アスピジン、アスピジノール、ジクロロフェン(ｅ)、エンベリン（Ｅｍｂｅｌｉｎ）、コスリン（Ｋｏｓｌｎ）、ナフタレン、ニクロサミド、ペレルチエリン（Ｐｅｌｌｅｒｔｉｅｒｉｎｅ）、ペレルチエリンタネート（Ｐｅｌｌｅｒｔｉｅｒｉｎｅ Ｔａｎｎａｔｅ）及びキナクリン；
【０１７６】
駆虫薬剤（線虫類）、例えば、アラントラクトン（Ａｌａｎｔｏｌａｃｔｏｎｅ）、アモスカネート（Ａｍｏｓｃａｎａｔｅ）、アスカリドール、ベフェニウム、ビトスカネート（Ｂｉｔｏｓｃａｎａｔｅ）、四塩化炭素、カルバクロール、シクロベンダゾール（Ｃｙｃｌｏｂｅｎｄａｚｏｌｅ）、ジエチルカルバマジン、ジフェナン、ヨウ化ジチアザニン、ヂマンチン（Ｄｙｍａｎｔｈｉｎｅ）、ゲンチアナバイオレット、４−ヘキシルレゾルシノール、カイニン酸、メベンダゾール、２−ナフトール、オキサンテル、パパイン、ピペラジン、アジピン酸ピペラジン、クエン酸ピペラジン、エデト酸ピペラジンカルシウム、酒石酸ピペラジン（Ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ Ｔａｒｔｒａｔｅ）、ピランテル、パモ酸ピルビニウム、α−サントニン、ヨウ化スチルバジウム（Ｓｔｉｌｂａｚｉｕｍ Ｉｏｄｉｄｅ）、四塩化エチレン、テトラミソール、チアベンダゾール、チモール、チミルＮ−イソアミルカルバメート（Ｔｈｙｍｙｌ Ｎ−ｌｓｏａｍｙｌｃａｒｂａｍａｔｅ）、トリクロフェノールピペラジン及びウレアスチバミン（Ｕｒｅａ Ｓｔｉｂａｍｉｎｅ）；
【０１７７】
駆虫薬剤（回旋糸状虫）、例えば、イベルメクチン（Ｉｖｅｒｍｅｃｔｉｎ）及びスラミンナトリウム；
【０１７８】
駆虫薬剤（住血吸虫）、例えば、アモスカネート（Ａｍｏｓｃａｎａｔｅ）、アンフォタリド（Ａｍｐｈｏｔａｌｉｄｅ）、吐酒石、グルコン酸アンチモンナトリウム、酒石酸アンチモンナトリウム、チオグリコール酸アンチモンナトリウム（Ａｎｔｉｍｏｎｙ Ｓｏｄｉｕｍ Ｔｈｉｏｇｌｙｃｏｌｌａｔｅ）、アンチモンチオグリコールアミド（Ａｎｔｉｍｏｎｙ Ｔｈｉｏｇｌｙｃｏｌｌａｍｉｄｅ）、ベカントン（Ｂｅｃａｎｔｈｏｎｅ）、ヒカントン、ルカントンヒドロクロリド（Ｌｕｃａｎｔｈｏｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ニリダゾール（Ｎｉｒｉｄａｚｏｌｅ）、オキサムニキン（Ｏｘａｍｎｉｑｕｉｎｅ）、プラジカンテル、スチボカプテート、スチボフェン及びウレアスチバミン（Ｕｒｅａ Ｓｔｉｂａｍｉｎｅ）；
【０１７９】
駆虫薬剤（住血吸虫）、例えば、アンチオリミン及びテトラクロロエチレン；
【０１８０】
にきび抑制剤、例えば、アダペレン（Ａｄａｐｅｌｅｎｅ）、アルゲストンアセトフェニド、アゼライン酸、過酸化ベンゾイル、シオクトール（Ｃｙｏｃｔｏｌ）、シプロテロン、モトレチニド（Ｍｏｔｒｅｔｉｎｉｄｅ）、レゾルシノール、レチノイン酸、テトロキノン（Ｔｅｔｒｏｑｕｉｎｏｎｅ）及びトレチノニン（Ｔｒｅｔｉｎｏｎｉｎｅ）；
【０１８１】
抗アレルギー剤、例えば、アンレキサノクス、アステミゾール（Ａｓｔｅｍｉｚｏｌｅ）、アゼラスチン、クロモリン、フェンピプラン、ヒスタミン、イブジラスト、ネドクロミル（Ｎｅｄｏｃｒｏｍｉｌ）、オキサトミド、ペンチゲチド（Ｐｅｎｔｉｇｅｔｉｄｅ）、ウルシツタ抽出物、アメリカツタウルシ抽出物、ドクウルシ抽出物、レピリナスト、トラニラスト、トラザノックス及びウルシオール；
【０１８２】
抗アメーバ剤、例えば、アルスチノール、ビアラミコール、カルバルソン、セファエリン（Ｃｅｐｈａｅｌｉｎｅ）、クロルベタミド（Ｃｈｌｏｒｂｅｔａｍｉｄｅ）、クロロキン、クロルフェノキサミド、クロルテトラサイクリン（Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）、デヒドロエメチン、ジブロモプロパミジン（Ｄｉｂｒｏｍｏｐｒｏｐａｍｉｄｉｎｅ）、ジロキサニド、デフェタルソン（Ｄｅｐｈｅｔａｒｓｏｎｅ）、エメチン、フマギリン、グラウカルビン、グリコビアルゾール、８−ヒドロキシ−７−ヨード−５−キノリン硫酸、ロドクロルヒドロキシキン（ｌｏｄｏｃｈｌｏｒｈｙｄｒｏｘｙｑｕｉｎ）、ロドキノール（ｌｏｄｏｑｕｉｎｏｌ）、パロモマイシン、ファンキノン（Ｐｈａｎｑｕｉｎｏｎｅ）、フェアルソンスルホキシレート（Ｐｈｅａｒｓｏｎｅ Ｓｕｌｆｏｘｙｌａｔｅ）、ポリベンザルソール（Ｐｏｌｙｂｅｎｚａｒｓｏｌ）、プロパミジン、キンファミド（Ｑｕｉｎｆａｍｉｄｅ）、セクニダゾール（Ｓｅｃｎｉｄａｚｏｌｅ）、スルファルシド、テクロザン（Ｔｅｃｌｏｚａｎ）、テトラサイクリン、チオカルバミジン、チオカルバルソン及びチニダゾール；
【０１８３】
抗アンドロゲン、例えば、ビフルラノール、シオクトール、シプロテロン、デルマジノンアセテート（Ｄｅｌｍａｄｉｎｏｎｅ Ａｃｅｔａｔｅ）、フルチミド、ニルタミド及びオキセンドロン；
【０１８４】
抗狭心症薬、例えば、アセブトロール、アルプレノロール、アミオダロン、アムロジピン、アロチノロール（Ａｒｏｔｉｎｏｌｏｌ）、アテノロール、ベプリジル（Ｂｅｐｒｉｄｉｌ）、ベバントロール、ブクモロール、ブフェトロール、ブフラロール（Ｂｕｆｕｒａｌｏｌ)、ブニトロロール、ブプラノロール、カロゾロール（Ｃａｒｏｚｏｌｏｌ）、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、シネパゼットマレエート（Ｃｉｎｅｐａｚｅｔ Ｍａｌｅａｔｅ）、ジルチアゼム、エパノロール(Ｅｐａｎｏｌｏｌ)、フェロジピン、ガロパミル（Ｇａｌｌｏｐａｍｉｌ）、イモールアミン、インデノロール、二硝酸イソソルビド、イスラジピン、リマプロスト（Ｌｉｍａｐｒｏｓｔ）、メピンドロール(Ｍｅｐｉｎｄｏｌｏｌ)、メトプロロール、モルシドミン、ナドロール、ニカルジビン、ニフェジピン、ニフェナロール(Ｎｉｆｅｎａｌｏｌ)、ニルバジピン、ニプラジロール、ニソルジピン、ニトログリセリン、オクスプレノロール、オキシフェドリン、オザグレル（Ｏｚａｇｒｅｌ）、ペンブトロール、ペンタエリトリトール 四硝酸塩、ピンドロール、プロネタロール、プロプラノロール、ソタロール、テロジリン（Ｔｅｒｏｄｉｌｉｎｅ）、チモロール、トリプロロール(Ｔｏｌｉｐｒｏｌｏｌ)及びベラパミル；
【０１８５】
抗不整脈剤、例えば、アセブトール（Ａｃｅｂｕｔｏｌ）、アセカイン（Ａｃｅｃａｉｎｅ）、アデノシン、アジュマリン、アルプレノロール、アミオダロン、アモプロキサン（Ａｍｏｐｒｏｘａｎ）、アプリジン（Ａｐｒｉｎｄｉｎｅ）、アロチノロール、アテノロール、ベバントロール、ブレチリウムトシレート、ブブモロール（Ｂｕｂｕｍｏｌｏｌ）、ブフェトロール、ブナフチン（Ｂｕｎａｆｔｉｎｅ）、ブニトロロール、ブプラノロール、ブチドリンヒドロクロリド（Ｂｕｔｉｄｒｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ブトベンジン（Ｂｕｔｏｂｅｎｄｉｎｅ）、カポベニックアシッド（Ｃａｐｏｂｅｎｉｃ Ａｃｉｄ）、カラゾロール、カルテオロール、シフェンリン（Ｃｉｆｅｎｌｉｎｅ）、クロラノロール(Ｃｌｏｒａｎｏｌｏｌ)、ジソピラミド、エンカイニド、エスモロール、フレカイニド（Ｆｌｅｃａｉｎｉｄｅ）、ガロパミル（Ｇａｌｌｏｐａｍｉｌ）、ヒドロキニジン、インデカイニド（Ｉｎｄｅｃａｉｎｉｄｅ）、インデノロール、臭化イプラトロピウム、リドカイン、ロラジミン（Ｌｏｒａｊｍｉｎｅ）、ロルカイニド（Ｌｏｒｃａｉｎｉｄｅ）、メオベンチン（Ｍｅｏｂｅｎｔｉｎｅ）、メチプラノロール（Ｍｅｔｉｐｒａｎｏｌｏｌ）、メキシレチン、モリシジン（Ｍｏｒｉｃｉｚｉｎｅ）、ナドキソロール(Ｎａｄｏｘｏｌｏｌ)、ニフェナロール(Ｎｉｆｅｎａｌｏｌ)、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、ピルメノール（Ｐｉｒｍｅｎｏｌ）、プラクトール（Ｐｒａｃｔｏｌｏｌ）、パラジマリン（Ｐｒａｊｍａｌｉｎｅ）、塩酸プロカインアミド、プロネタロール、プロパフェノン（Ｐｒｏｐａｆｅｎｏｎｅ）、プロプラノロール、ピリノリン（Ｐｙｒｉｎｏｌｉｎｅ）、硫酸キニジン、キニジン、ソタロール、タリノロール、チモロール、トカイニド（Ｔｏｃａｉｎｉｄｅ）、ベラパミル、ビキジル（Ｖｉｑｕｉｄｉｌ）及びキシベノロール(Ｘｉｂｅｎｏｌｏｌ)；
【０１８６】
抗動脈硬化剤、例えば、ピリジノールカルバメート（Ｐｙｒｉｄｉｎｏｌ Ｃａｒｂａｍａｔｅ）；
【０１８７】
抗関節炎剤／抗リウマチ剤、例えば、アロクプレイドナトリウム（Ａｌｌｏｃｕｐｒｅｉｄｅ Ｓｏｄｉｕｍ）、オーラノフィン、金チオグルコース、金チオグリカニド、アザチオプリン、３−金チオ−２−プロパノール−１−スルホン酸カルシウム、セレコシキブ（Ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ）、クロロキン、クロブザリト（Ｃｌｏｂｕｚａｒｉｔ）、クプロキソリン（Ｃｕｐｒｏｘｏｌｉｎｅ）、ジアセレイン（Ｄｉａｃｅｒｅｉｎ）、グルコサミン、金チオリンゴ酸ナトリウム、金チオ硫酸ナトリウム、ヒドロキシクロロキン、ケブゾン、ロベンザリット、メリチン、メトトレキセート、ミオラル（Ｍｙｏｒａｌ）及びペニシラミン；
【０１８８】
以下を含む抗菌剤（抗生物質）：アミノグリコシド、例えば、アミカシン、アピラマイシン（Ａｐｒａｍｙｃｉｎ）、アルベカシン（Ａｒｂｅｋａｃｉｎ）、バンメルマイシン（Ｂａｍｂｅｒｍｙｃｉｎ）、ブチロシン、ジベカシン、ジヒドロストレプトマイシン、フォルチマイシン(Ｆｏｒｔｉｍｉｃｉｎ)、ゲンタマイシン、イスパミシン（Ｉｓｐａｍｉｃｉｎ）、カナマイシン、ミクロノマイシン、ネオマイシン、ネオマイシンウンデシレネート、ネチルマイシン、パロモマイシン、リボスタマイシン、シソマイシン、スペクチノマイシン、ストレプトマイシン、ストレプトニコジド及びトブラマイシン；
【０１８９】
アンフェニコール類、例えば、アジダンフェニコール（Ａｚｉｄａｍｆｅｎｉｃｏｌ）、クロラムフェニコール、パルミチン酸クロラムフェニコール、クロラムフェニコール パントテナート、フロルフェニコール及びチアンフェニコール；
【０１９０】
アンサマイシン類、例えば、リファミド、リファンピン、リフォマイシン及びリファキシミン；
以下を含むβ−ラクタム類：カルバペネム、例えば、イミペネム；
セファロスポリン類、例えば、セファクター、セファドロキシル、セファマンドール、セファトリジン、セファゼドン（Ｃｅｆａｚｅｄｏｎｅ）、セファゾリン、セフィキシム、セフメノキシム、セフォジザイム（Ｃｅｆｏｄｉｚｉｍｅ）、セフォニシド（Ｃｅｆｏｎｉｃｉｄ）、セフォペラゾン、セフォラニド（Ｃｅｆｏｒａｎｉｄｅ）、セフォタキシム、セフォチアム、セフピミゾール（Ｃｅｆｐｉｍｉｚｏｌｅ）、セフピリミド（Ｃｅｆｐｉｒｉｍｉｄｅ）、セフポドキシムプロキセチル、セフロキサジン、セフスロジン、セフタジジム、セフテラム（Ｃｅｆｔｅｒａｍ）、セフテゾール、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアキソン（Ｃｅｆｔｒｉａｘｏｎｅ）、セフロキシム、セフゾナム（Ｃｅｆｕｚｏｎａｍ）、セファセトリル ナトリウム、セファレキシン、セファログリシン、セファロリジン（Ｃｅｐｈａｌｏｒｉｄｉｎｅ）、セファロスポリン、セファロチン、セファピリンナトリウム、セフラジン及びピブセファレキシン（Ｐｉｖｃｅｆａｌｅｘｉｎ）；
【０１９１】
セファマイシン類、例えば、セフブペラゾン、セフメタゾール、セフミノックス（Ｃｅｆｍｉｎｏｘ）、セファタン（Ｃｅｆｅｔａｎ）及びセホキシチン；
モノバクタム類、例えば、アズトレオナム、カルモナム及びチゲモナム；
オキサセフェム類、例えば、フルモキセフ及びモキソラクタム；
【０１９２】
ペニシリン類、例えば、アミジノシリン、アムジノシリンピボキシル、アモキシシリン、アンピシラン、アパルシリン、アスポキシシリン、アジドシラン、アジロシラン、バカンピシリン、ベンジルペニシリン酸、ベンジルペニシリンナトリウム、カルベニシリン、カルフェシリンナトリウム、カリンダシリン、クロメトシリン、クロキサシリン、シクラシリン、ジクロキサシリン、ジフェニシリン ナトリウム、エピシリン、フェンベニシリン、フロキシシリン、ヘタシリン、レナンピシリン、メタンピシリン、メチシリンナトリウム、メズロシリン、ナフシリンナトリウム、オキサシリン、ペナンピシリン、ペネタメートヒドリオジド（Ｐｅｎｅｔｈａｍａｔｅ Ｈｙｄｒｉｏｄｉｄｅ）、ペニシリンＧベネタミン、ペニシリンＧベンザチン、ペニシリンＧベンズヒドリルアミン、ペニシリンＧ カルシウム、ペニシリンＧヒドラバミン、ペニシリンＧ カリウム、ペニシリンＧ プロカイン、ペニシリンＮ、ペニシリンＯ、ペニシリンＶ、ベンザチンペニシリンＶ、ヒドラバミンペニシリンＶ、ペニメピサイクリン（Ｐｅｎｉｍｅｐｉｃｙｃｌｉｎｅ）、フェネチシリンカリウム、ピペラシリン、ピバピシリン、プロピシリン、キナシリン、スルベニシリン、タランピシリン、テモシリン及びチカルシリン；
【０１９３】
リンコサミド類、例えば、クリンダマイシン及びリンコマイシン；
マクロライド類、例えば、アジスロマイシン（Ａｚｉｔｈｒｏｉｍｙｃｉｎ）、カルボマイシン、クラリスロマイシン、エリスロマイシン、エリスロマイシンアシステトレート（Ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ Ａｃｉｓｔｒａｔｅ）、エリスロマイシンエストレート、エリスロマイシングルコヘプトネート（Ｅｒｙｔｈｒｏｍｙｃｉｎ Ｇｌｕｃｏｈｅｐｔｏｎａｔｅ）、ラクトビオン酸エリスロマイシン、プロピオン酸エリスロマイシン、ステアリン酸エリスロマイシン、ジョサマイシン、ロイコマイシン、ミデカマイシン、ミオカマイシン、オレアンドマイシン、プリマイシン（Ｐｒｉｍｙｃｉｎ）、ロキタマイシン、ロザラミシン（Ｒｏｓａｒａｍｉｃｉｎ）、ロキシスロマイシン、スピラマイシン及びトロレアンドマイシン；
【０１９４】
ポリペプチド、例えば、アンホマイシン、バシトラシン、カプレオマイシン、コリスチン、エンジュラシジン（Ｅｎｄｕｒａｃｉｄｉｎ）、エンビオマイシン、フサフンギン（Ｆｕｓａｆｕｎｇｉｎｅ）、グラミシジン、グラミシジンＳ、ミカマイシン、ポリミキシン、ポリミキシンＢ−メタンスルホン酸、プリスチナマイシン、リストセチン、テイコプラニン、チオストレプトン、ツベラクチノマイシン（Ｔｕｂｅｒａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、チロシジン、チロトリシン、バンコマイシン、バイオマイシン、バイオマイシンパントテナート（Ｖｉｏｍｙｃｉｎ Ｐａｎｔｏｔｈｅｎａｔｅ）、バージニアマイシン及び亜鉛バシトラシン；
【０１９５】
テトラサイクリン、例えば、アピサイクリン（Ａｐｉｃｙｃｌｉｎｅ）、クロルテトラサイクリン（Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）、クロモサイクリン（Ｃｌｏｍｏｃｙｃｌｉｎｅ）、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、グアメサイクリン（Ｇｕａｍｅｃｙｃｌｉｎｅ）、リメサイクリン、メクロサイクリン（Ｍｅｃｌｏｃｙｃｌｉｎｅ）、メタサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、ペニメピサイクリン（Ｐｅｎｉｍｅｐｉｃｙｃｌｉｎｅ）、ピパサイクリン（Ｐｉｐａｃｙｃｌｉｎｅ）、ロリテトラサイクリン、サンサイクリン（Ｓａｎｃｙｃｌｉｎｅ）、セノサイクリン（Ｓｅｎｏｃｉｃｌｉｎ）及びテトラサイクリン；及び
【０１９６】
他の抗生物質、例えば、シクロセリン、ムピロシン及びルベリン；
【０１９７】
以下を含む抗菌剤（合成）：２，４−ジアミノピリミジン、例えば、ブロジモプリム（Ｂｒｏｄｉｍｏｐｒｉｍ）、テトロキソプリム（Ｔｅｔｒｏｘｏｐｒｉｍ）及びトリメトプリム；
【０１９８】
ニトロフラン、例えば、フラルタドン、フラゾリウムクロリド（Ｆｕｒａｚｏｌｉｕｍ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ニフラデン（Ｎｉｆｕｒａｄｅｎｅ）、ニフラテル、ニフルフォリン（Ｎｉｆｕｒｆｏｌｉｎｅ）、ニフルピリノール（Ｎｉｆｕｒｐｉｒｉｎｏｌ）、ニフルプラジン、ニフルトイノール（Ｎｉｆｕｒｔｏｉｎｏｌ）及びニトロフラントイン；
【０１９９】
キノロン及び類似体、例えば、アミフロキサシン、シノキサシン、シプロフロキサシン、ジフロキサシン、エノキサシン、フレロキサシン、フルメキン（Ｆｌｕｍｅｑｕｉｎｅ）、ロメフロキサシン、ミロキサシン（Ｍｉｌｏｘａｃｉｎ）、ナリジクス酸、ノルフロキサシン、オフロキサシン、オキソリン酸、ペフロキサシン（Ｐｅｆｌｏｘａｃｉｎ）、ピペミド酸、ピロミド酸、ロソキサシン（Ｒｏｓｏｘａｃｉｎ）、テマフロキサシン（Ｔｅｍａｆｌｏｘａｃｉｎ）及びトスフロキサシン（Ｔｏｓｕｆｌｏｘａｃｉｎ）；
【０２００】
スルホンアミド、例えば、アセチルスルファメトキシピラジン、アセチルスルフィソキゾール、アゾスルファミド、ベンジルスルファミド、クロラミン‐Ｂ、クロラミン‐Ｔ、ジクロラミン−Ｔ、ホルモスルファチアゾール、Ｎ２ホルミルスルフィソミジン、Ｎ２−β−Ｄ−グルコシルスルファニルアミド、マフェナイド、４'−(メチルスルファモイル)スルファニルアニリド、ｐ−ニトロスルファチアゾール、ノプリルスルファミド（Ｎｏｐｒｙｌｓｕｌｆａｍｉｄｅ）、フタリルスルファセタミド、フタリルスルファチアゾール、サラゾスルファヂミジン（Ｓａｌａｚｏｓｕｌｆａｄｉｍｉｄｉｎｅ）、スクシニルスルファチアゾール、スルファベンザミド、スルファセタミド、スルファクロルピリダジン（Ｓｕｌｆａｃｈｌｏｒｐｙｒｉｄａｚｉｎｅ）、スルファクリソイジン（Ｓｕｌｆａｃｈｒｙｓｏｉｄｉｎｅ）、スルファシチン（Ｓｕｌｆａｃｙｔｉｎｅ）、スルファジアジン（Ｓｕｌｆａｄｉａｚｉｎｅ）、スルファジクラミド（Ｓｕｌｆａｄｉｃｒａｍｉｄｅ）、スルファジメトキシン、スルファドキシン、スルファエチドール、スルファグアニジン、スルファグアノール（Ｓｕｌｆａｇｕａｎｏｌ）、スルファレン、スルファイオキシックアシッド（Ｓｕｌｆａｉｏｘｉｃ Ａｃｉｄ）、スルファメラジン、スルファメーター、スルファメタジン、スルファメチゾール、スルファメトミジン、スルファメトキサゾール、スルファメトキシピリダジン、スルファメトロール（Ｓｕｌｆａｍｅｔｒｏｌｅ）、スルファミドクリソイジン（Ｓｕｌｆａｍｉｄｏｃｈｒｙｓｏｉｄｉｎｅ）、スルファモキソール、スルファニルアミド、スルファニルアミドメタンスルホン酸トリエタノールアミン塩、４−スルファニルアミドサリチル酸、Ｎ−スルファニリルスルファニルアミド、スルファニリルウレア、Ｎ−スルファニリル−３，４−キシルアミド、スルファニトラン、スルファぺリン（Ｓｕｌｆａｐｅｒｉｎｅ）、スルファフェナゾール、スルファプロキシリン、スルファピラジン、スルファピリジン、スルファソミゾール（Ｓｕｌｆａｓｏｍｉｚｏｌｅ）、スルファシマジン（Ｓｕｌｆａｓｙｍａｚｉｎｅ）、スルファチアゾール、スルファチオ尿素、スルファトラミド、スルフイソミジン及びスルフイソキサゾール；
【０２０１】
スルホン、例えば、アセダプソン、アセジアスルホン、アセトスルホンナトリウム、ダプソン、ジアチモスルホン、グルコスルホンナトリウム、ソラスルホン、スクシスルホン、スルファニル酸、ｐ−スルファニリルベンジルアミン、ｐ，ｐ'−スルホニルジアニリン−Ｎ，Ｎ'−ジガラクトシド、スルホキソンナトリウム及びチアゾールスルホン；及び
【０２０２】
その他の、例えば、クロフォクロール（Ｃｌｏｆｏｃｔｏｌ）、ヘキセジン（Ｈｅｘｅｄｉｎｅ）、メテナミン、メテナミン無水メチレンクエン酸（Ｍｅｔｈｅｎａｍｉｎｅ Ａｎｈｙｄｒｏｍｅｔｈｙｌｅｎｅ−ｃｉｔｒａｔｅ）、メテナミンヒプレート（Ｍｅｔｈｅｎａｍｉｎｅ Ｈｉｐｐｕｒａｔｅ）、マンデル酸メテナミン、メテナミンスルホサリチレート（Ｍｅｔｈｅｎａｍｉｎｅ Ｓｕｌｆｏｓａｌｉｃｙｌａｔｅ）、ニトロキソリン及びキシボモール（Ｘｉｂｏｍｏｌ）；
【０２０３】
抗コリン作動性薬、例えば、塩酸アジフェニン、アルベリン、臭化アムブトノミウム（Ａｍｂｕｔｏｎｏｍｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、アミノペンタミド、アミキセトリン、リン酸アンプロトロピン、臭化メチルアニソトロピン、アポアトロピン、アトロピン、アトロピン Ｎ−オキシド、ベナクチジン、ベナプリジン、ベンゼチミド、臭化ベンジロニウム、メタンスルホン酸ベンズトロビン、ベボニウムメチルサルフェート、ビペリデン、臭化ブトロピウム、Ｎ−ブチルスコポルアンモニウムブロミド（Ｎ−Ｂｕｔｙｌｓｃｏｐｏｌａｍｍｏｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、ブゼピド、カミロフィン、カラミフェンヒドロクロリド、クロルベンゾキサミン、クロルフェノキサミン、臭化シメトロピウム（Ｃｉｍｅｔｒｏｐｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、臭化クリジニウム、シクロドリン、ヨウ化シクロニウム、塩酸シクリミン、デプトロピン、デキセチミド、硫酸ジブトリン、塩酸ジシクロミン、ジエタジン、ジフェメリン、ジヘキシベリン、メチル硫酸ジフェマニル、Ｎ−(１，２−ジフェニルエチル) ニコチンアミド、ジピプロベリン、臭化ジポニウム、臭化エメプロニウム（Ｅｍｅｐｒｏｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、臭化エンドベンジリン（Ｅｎｄｏｂｅｎｚｙｌｉｎｅ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、エトプロパジン、エチベンズトロピン（Ｅｔｈｙｂｅｎｚｔｒｏｐｉｎｅ）、エチルベンズヒドラミン（Ｅｔｈｙｌｂｅｎｚｈｙｄｒａｍｉｎｅ）、エトミドリン、オイカトロピン、臭化フェンピベリニウム（Ｆｅｎｐｉｖｅｒｉｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、臭化フェントニウム（Ｆｅｎｔｏｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、臭化フルトロピウム、グリコピロレート、臭化ヘテロニウム（Ｈｅｔｅｒｏｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、ヘキソサイクリウムメチルサルフェート（Ｈｅｘｏｃｙｃｌｉｕｍ Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ）、ホマトロピン、ヒオスシアミン、臭化イプラトロピウム、イソプロパミド、レボメペート（Ｌｅｖｏｍｅｐａｔｅ）、メクロキサミン（Ｍｅｃｌｏｘａｍｉｎｅ）、臭化メペンゾレート、メトカラフェン、臭化メタンテリン、メチキセン、臭化メトスコポラミン、オクタミルアミン、塩化オキシブチニン、オキシフェンサイクリミン、臭化オキシフェノニウム、ペンタピペリド、臭化ペンチエネート、フェンカルバミド、フェングルタリミド、ピペンゾレートブロミド（Ｐｉｐｅｎｚｏｌａｔｅ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、ピペリドレート、ピペリレート、ポルジンメチスルフェート（Ｐｏｌｄｉｎｅ Ｍｅｔｈｙｓｕｌｆａｔｅ）、プリジノール、臭化プリフィニウム、プロシクリジン、臭化プロパンテリン、プロペンゾレート（Ｐｒｏｐｅｎｚｏｌａｔｅ）、プロピロマジン、スコポラミン、スコポラミンＮ−オキシド（Ｓｃｏｐｏｌａｍｉｎｅ Ｎ−Ｏｘｉｄｅ）、ヨウ化スチロニウム（Ｓｔｉｌｏｎｉｕｍ Ｉｏｄｉｄｅ）、ストラモニウム（Ｓｔｒａｍｏｎｉｕｍ）、スルトロポニウム（Ｓｕｌｔｒｏｐｏｎｉｕｍ）、チヘキシノール（Ｔｈｉｈｅｘｉｎｏｌ）、チフェナミル、ヨウ化チエモニウム、臭化チメピジウム、臭化チキジウム、ヨウ化トリジヘキセチル（Ｔｒｉｄｉｈｅｘｅｔｈｙｌ Ｉｏｄｉｄｅ）、トリヘキシフェニジルヒドロクロリド（Ｔｒｉｈｅｘｙｐｈｅｎｉｄｙｌ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、���ロパシン（Ｔｒｏｐａｃｉｎｅ）、トロペンジル（Ｔｒｏｐｅｎｚｉｌｅ）、トロピカミド、塩化トロスピウム、臭化バレタメート及びキセニトロピウムブロミド（Ｘｅｎｙｔｒｏｐｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）；
【０２０４】
抗痙攣剤、例えば、アセチルフェネトライド、アルブトイン（Ａｌｂｕｔｏｉｎ）、アロキシドン（Ａｌｏｘｉｄｏｎｅ）、アミノグルテチミド（Ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ）、４−アミノ−３−ヒドロキシ酪酸、アトロラクダミド（Ａｔｒｏｌａｃｔａｍｉｄｅ）、ベクラミド（Ｂｅｃｌａｍｉｄｅ）、ブラメート（Ｂｕｒａｍａｔｅ）、臭化カルシウム、カルバマゼピン、シンロミド（Ｃｉｎｒｏｍｉｄｅ）、クロメチアゾール、クロナゼパム、デシメミド（Ｄｅｃｉｍｅｍｉｄｅ）、ジエタジオン、ジメタジオン（Ｄｉｍｅｔｈａｄｉｏｎｅ）、ドキセニトイン（Ｄｏｘｅｎｉｔｏｉｎ）、エテロバルブ（Ｅｔｅｒｏｂａｒｂ）、エタジオン、エトスクシミド、エトトイン、フルオレソン、ガルバペンチン（Ｇａｒｂａｐｅｎｔｉｎ）、５− ヒドロキシトリプトファン、ラモトリジン（Ｌａｍｏｔｒｉｇｉｎｅ）、ロマクチル（Ｌｏｍａｃｔｉｌ）、臭化マグネシウム、硫酸マグネシウム、メフェニトイン、メフォバルビタール、メタルビタール、メテトイン（Ｍｅｔｈｅｔｏｉｎ）、メトスクシミド、５−メチル−５−(３−フェナントリル)ヒダントイン、３−メチル−５−フェニルヒドアントイン（３−Ｍｅｔｈｙｌ−５−ｐｈｅｎｙｌｈｙｄａｎｔｏｉｎ）、ナルコバルビタール（Ｎａｒｃｏｂａｒｂｉｔａｌ）、ニメタゼパム、ニトラゼパム、パラメタジオン、フェナセミド、フェネタルビタール、フェネツリッド、フェノバルビタール、フェノバルビタールナトリウム、フェンスクシミド、フェニルメチルバルビツル酸、フェニトイン、フェセニレートナトリウム（Ｐｈｅｔｈｅｎｙｌａｔｅ Ｓｏｄｉｕｍ）、臭化カリウム、プレガバチン（Ｐｒｅｇａｂａｔｉｎ）、プリミドン、プロガビド（Ｐｒｏｇａｂｉｄｅ）、臭化ナトリウム、バルプロ酸ナトリウム、ソラナム（Ｓｏｌａｎｕｍ）、臭化ストロンチウム、スクロフェニド（Ｓｕｃｌｏｆｅｎｉｄｅ）、スルチアム、テトラントイン（Ｔｅｔｒａｎｔｏｉｎ）、チアガビン（Ｔｉａｇａｂｉｎｅ）、トリメタジオン、バルプロ酸、バルプロミド（Ｖａｌｐｒｏｍｉｄｅ）、ビガバトリン（Ｖｉｇａｂａｔｒｉｎ）及びゾニサミド；
【０２０５】
以下を含む抗うつ剤：二環系、例えば、ビネダリン、カロキサゾン、シタロプラム、ジメタザン（Ｄｉｍｅｔｈａｚａｎ）、インダルピン（Ｉｎｄａｌｐｉｎｅ）、フェンカミン、マレイン酸フルボキサミン、塩酸インデロキサジン、ネフォパム、ノミフェンシン、オキシトリプタン、オキシペルチン、パロキセチン、セルトラリン、チアゼシム（Ｔｈｉａｚｅｓｉｍ）、トラゾドン、ベンラファキシン及びゾメタピン（Ｚｏｍｅｔａｐｉｎｅ）；
【０２０６】
ヒドラジド／ヒドラジン、例えば、ベンモキシン、イプロクロジド、イプロニアジド、イソカルボキサジド、ニアラミド、オクタモキシン及びフェネルジン；
【０２０７】
ピロリドン、例えば、コチニン、ロリシプリン及びロリプラム；
【０２０８】
四環系、例えば、マプロチリン、メトラリンドール、ミアンセリン及びオキサプロチリン；
【０２０９】
三環系、例えば、アジナゾラム、アミトリプチリン、アミトリプチリノキシド（Ａｍｉｔｒｉｐｔｙｌｉｎｏｘｉｄｅ）、アモクサピン、ブトリプチリン、クロミプラミン、デメキシプチリン、デシプラミン、ジベンゼピン、ジメトラクリン（Ｄｉｍｅｔｒａｃｒｉｎｅ）、ドチエピン、ドキセピン、フルアシジン、イミプラミン、イミプラミンＮ−オキシド（Ｉｍｉｐｒａｍｉｎｅ Ｎ−Ｏｘｉｄｅ）、イプリンドール、ロフェプラミン、メリトラセン、メタプラミン、ノルトリプチリン、ノキシプチリン（Ｎｏｘｉｐｔｉｌｉｎ）、オピプラモール、ピゾチリン(Ｐｉｚｏｔｙｌｉｎｅ)、プロピゼピン（Ｐｒｏｐｉｚｅｐｉｎｅ）、プロトリプチリン、キヌプラミン、チアネプチン及びトリミプラミン；及び
【０２１０】
その他の、例えば、アドラフィニル、ベナクチジン、ブプロピオン、ブタセチン、デアノール、デアノールアセグルメート（Ｄｅａｎｏｌ Ａｃｅｇｌｕｍａｔｅ）、デアノルアセトアミドベンゾエート、ジオキサドロール（Ｄｉｏｘａｄｒｏｌ）、エトペリドン、フェバルバメート（Ｆｅｂａｒｂａｍａｔｅ）、フェモキセチン、フェンペンタジオール、フルオキセチン、フルボキサミン、ヘマトポルフィリン、ハイパーシニン（Ｈｙｐｅｒｃｉｎｉｎ）、レボファセトペラン、メジフォキサミン（Ｍｅｄｉｆｏｘａｍｉｎｅ）、ミナプリン（Ｍｉｎａｐｒｉｎｅ）、モクロベミド、オキサフロザン（Ｏｘａｆｌｏｚａｎｅ）、ピベラリン（Ｐｉｂｅｒａｌｉｎｅ）、プロリンタン（Ｐｒｏｌｉｎｔａｎｅ）、ピリスクシデアノール（Ｐｙｒｉｓｕｃｃｉｄｅａｎｏｌ）、塩化ルビジウム、スルピリド、スルトプリド、テニロキサジン、トザリノン（Ｔｈｏｚａｌｉｎｏｎｅ）、テフェナシン（Ｔｏｆｅｎａｃｉｎ）、トロキサトン（Ｔｏｌｏｘａｔｏｎｅ）、トラニルシプロミン、Ｌ−トリプトファン、ビロキサジン（Ｖｉｌｏｘａｚｉｎｅ）及びジメルジン（Ｚｉｍｅｌｄｉｎｅ）；
【０２１１】
以下を含む抗糖尿病剤：ビグアニド、例えば、ブホルミン、メトホルミン及びフェンホルミン；
【０２１２】
ホルモン、例えば、グルカゴン、インシュリン、インシュリン注射、インシュリン亜鉛懸濁液、イソフェンインシュリン懸濁液、プロタミン亜鉛インシュリン懸濁液及び亜鉛インシュリン結晶；
【０２１３】
スルホニル尿素誘導体、例えば、アセトヘキサミド、１−ブチル−３−メタニル尿素、カルブタミド、クロルプロパミド、グリボルヌリド、グリクラジド、グリピジド、グリキドン、グリソキセピド（Ｇｌｉｓｏｘｅｐｉｄ）、グリブリド、グリブチアゾール（Ｇｌｙｂｕｔｈｉａｚｏｌ(ｅ)）、グリブゾール、グリヘキサミド（Ｇｌｙｈｅｘａｍｉｄｅ）、グリミジン、グリピナミド（Ｇｌｙｐｉｎａｍｉｄｅ）、フェンブタミド（Ｐｈｅｎｂｕｔａｍｉｄｅ）、トラザミド、トルブタミド及びトルシクラミド（Ｔｏｌｃｙｃｌａｍｉｄｅ）；及び
その他の、例えば、アカルボース、メソシュウ酸カルシウム及びミグリトール；
【０２１４】
抗下痢薬、例えば、アセチルタンニン酸、タンニン酸アルブミン、アルコファノン（Ａｌｋｏｆａｎｏｎｅ）、サリチル酸アルミニウム−塩基性、カテキン、ジフェノキシン、ジフェノキシレート、リダジミン（Ｌｉｄａｍｉｄｉｎｅ）、ロペラミド、メビキン（Ｍｅｂｉｑｕｉｎｅ）、トリリウム（Ｔｒｉｌｌｉｕｍ）及びウザリン（Ｕｚａｒｉｎ）；
【０２１５】
抗利尿薬、例えば、デスモプレシン、フェリプレシン、リプレッシン、オルニプレッシン（Ｏｒｎｉｐｒｅｓｓｉｎ）、オキシシンコフェン、下垂体後葉製剤、テルリプレッシン（Ｔｅｒｌｉｐｒｅｓｓｉｎ）及びバソプレシン；
【０２１６】
抗エストロゲン、例えば、デルマジノンアセテート（Ｄｅｌｍａｄｉｎｏｎｅ Ａｃｅｔａｔｅ、エタモキシトリフェトール、タモキシフェン及びトレミフェン；
【０２１７】
以下を含む抗真菌剤（抗生物質）：ポリエン、例えば、アンフォテリシン−Ｂ、カンジシジン、デルモスタチン（Ｄｅｒｍｏｓｔａｔｉｎ）、フィリピン、フンギクロミン、ハチマイシン、ハマイシン（Ｈａｍｙｃｉｎ）、ルセンソマイシン、メパルトリシン、ナタマイシン、ナイスタチン、ペチロシン及びペリマイシン（Ｐｅｒｉｍｙｃｉｎ）；
【０２１８】
その他の、例えば、アザセリン、グリセオフルビン、オリゴマイシン、ネオマイシンウンデシレネート、ピロルニトリン、シッカニン、ツベルシジン及びビリジン（Ｖｉｒｉｄｉｎ）；
【０２１９】
以下を含む抗真菌剤（合成）：アリルアミン、例えば、ナフチフィン及びテルビナフィン；
【０２２０】
イミダゾール、例えば、ビホナゾール、ブトコナゾール、クロルダントイン、クロルミダゾール、クロコナゾール、クロトリマゾール、エコナゾール、エニルコナゾール、フェンチコナゾール、イソコナゾール、ケトコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、オキシコナゾール、硝酸塩、スルコナゾール及びチオコナゾール；
【０２２１】
トリアゾール、例えば、フルコナゾール、イトラコナゾール及びテルコナゾール；及び
【０２２２】
その他の、例えば、アクリゾルシン、アモロルフィン、ビフェナミン、ブロモサリチルクロラニリド（Ｂｒｏｍｏｓａｌｉｃｙｌｃｈｌｏｒａｎｉｌｉｄｅ）、ブクロサミド、プロピオン酸カルシウム、クロフェネシン、シクロピロックス、クロキシキン（Ｃｌｏｘｙｑｕｉｎ）、コパラフィネート、ディアムタゾール、ジヒドロクロリド（Ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、エキサラミド、フルシトシン、ハレタゾール、ヘキセチジン、ロフルカルバン（Ｌｏｆｌｕｃａｒｂａｎ）、ニフラテル、ヨウ化カリウム、プロピオン酸、ピリチオン、サリチルアニリド、プロピオン酸ナトリウム、スルベンチン（Ｓｕｌｂｅｎｔｉｎｅ）、テノニトロゾール（Ｔｅｎｏｎｉｔｒｏｚｏｌｅ）、トルシクラート、トリンデート（Ｔｏｌｉｎｄａｔｅ）、トルナフテート、トリセチン（Ｔｒｉｃｅｔｉｎ）、ウジョチオン（Ｕｊｏｔｈｉｏｎ）、ウンデシレン酸及びプロピオン酸亜鉛；
【０２２３】
抗緑内障薬、例えば、アセタゾラミド、ベフノロール、ベタキソロール、ブプラノロール、カルテオロール、ダピプラゾーク（Ｄａｐｉｐｒａｚｏｋｅ）、ジクロルフェナミド、ジピベフリン、エピネフリン、レボブノロール、メタゾルアミド、メチプラノロール、ピロカルピン、ピンドロール及びチモロール；
【０２２４】
抗ゴナドトロピン、例えば、ダナゾール、ゲストリノン及びパロキシプロピオン
【０２２５】
抗痛風薬、例えば、アロプリノール、カルプロフェン、コルヒチン、プロべネシド及びスルフィンピラゾン；
【０２２６】
以下を含む抗ヒスタミン剤；アルキルアミン誘導体、例えば、アクリバスチン、バミピン、ブロムフェニラミン、クロルフェニラミン、ジメチンデン、メトロンＳ、フェニラミン、ピロブタミン、テナルジン、トルプロパミン及びトリプロリジン；
【０２２７】
アミノアルキルエステル、例えば、ビエタノーチン（Ｂｉｅｔａｎａｕｔｉｎｅ）、ブロモジフェンヒドラミン（Ｂｒｏｍｏｄｉｐｈｅｎｈｙｄｒａｍｉｎｅ）、カルビノキサミン、クレマスチン、ジフェニルピラリン、ドキシルアミン、エンブラミン、メドリラミン、メフェンフィドラミン（Ｍｅｐｈｅｎｐｈｙｄｒａｍｉｎｅ）、ｐ−メチルジフェンヒドラミン（ｐ−Ｍｅｔｈｙｌｄｉｐｈｅｎｈｙｄｒａｍｉｎｅ）、オーフェナドリン、フェニルトロキサミン、ピプリンヒドリナート及びセタシン（Ｓｅｔａｓｉｎ）；
【０２２８】
エチレンジアミン誘導体、例えば、アロクラミド、ｐ−ブロムトリペレナミン（ｐ−Ｂｒｏｍｔｒｉｐｅｌｅｎｎａｍｉｎｅ）、クロロピラミン、クロロテン、ヒスタピロジン（Ｈｉｓｔａｐｙｒｒｏｄｉｎｅ）、メタフリレン（Ｍｅｔｈａｆｕｒｙｌｅｎｅ）、メタフェニレン、メタピリレン、フェンベンザミン（Ｐｈｅｎｂｅｎｚａｍｉｎｅ）、ピリラミン、タラスチン（Ｔａｌａｓｔｉｎｅ）、テニールジアミン、トンジラミンヒドロクロリド（Ｔｈｏｎｚｙｌａｍｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、トリペレナミン及びゾラミン；
【０２２９】
ピペラジン、例えば、セチリジン（Ｃｅｔｉｒｉｚｉｎｅ）、クロルサイクリジン、シンナリジン、クロシニジン（Ｃｌｏｃｉｎｉｚｉｎｅ）及びヒドロキシジン；
【０２３０】
以下を含む、三環系：フェノチアジン、例えば、アヒスタン（Ａｈｉｓｔａｎ）、エチメマジン、フェネタジン、Ｎ−ヒドロキシエキルプロメタジンクロリド（Ｎ−Ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌｐｒｏｍｅｔｈａｚｉｎｅ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、イソプロメタジン、メキタジン、プロメタジン、ピラチアジン及び硫酸メチルチアジナミウム（Ｔｈｉａｚｉｎａｍｉｕｍ Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ）；及び
【０２３１】
その他の、例えば、アザタジン、クロベンぜパム（Ｃｌｏｂｅｎｚｅｐａｍ）、シプロヘプタジン、デプトロピン（Ｄｅｐｔｒｏｐｉｎｅ）、イソチペンジル、ロラタジン及びプロチペンジル；及び
他の抗ヒスタミン剤、例えば、アンタゾリン、アステミゾール、アゼラスチン、セトキシム（Ｃｅｔｏｘｉｍｅ）、塩酸クレミゾール、クロベンズトロピン、ジフェナゾリン、ジフェンヒドラミン、プロピオン酸フルチカゾン、メブヒドロリン、フェニンダミン、テルフェナジン及びトリトカリン；
【０２３２】
以下を含む、抗高リポ蛋白血症薬：アリールオキシアルカン酸誘導体、例えば、ベクロルブラート（Ｂｅｃｌｏｒｂｒａｔｅ）、バザフィブラート（Ｂａｚａｆｉｂｒａｔｅ）、ビニフィブラート（Ｂｉｎｉｆｉｂｒａｔｅ）、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラート、クロフィブリン酸、エトンフィブラート（Ｅｔｏｎｆｉｂｒａｔｅ）、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル（Ｇｅｍｆｉｂｒｏｚｉｌ）、ニコフィブラート（Ｎｉｃｏｆｉｂｒａｔｅ）、ピリフィブラート（Ｐｉｒｉｆｉｂｒａｔｅ）、ロニフィブラート（Ｒｏｎｉｆｉｂｒａｔｅ）、シンフィブラート及びテオフィブラート；
【０２３３】
胆汁酸分離物、例えば、コレスチラミン樹脂、コレスチポール及びポリデキシド；
【０２３４】
ＨＭＧ ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、例えば、フルバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチンナトリウム及びシンバスタチン；
【０２３５】
ニコチン酸誘導体、アルミニウムニコチネート、アシピモックス（Ａｃｉｐｉｍｏｘ）、ニセリトロール、ニコクロネート（Ｎｉｃｏｃｌｏｎａｔｅ）、ニコモール及びオキシニアシックアシッド（Ｏｘｉｎｉａｃｉｃ Ａｃｉｄ）；
【０２３６】
甲状腺ホルモン及び類似体、例えば、エチロキセート、チロプロプ酸及びチロキシン；及び
【０２３７】
その他の、例えば、アシフラン（Ａｃｉｆｒａｎ）、アザコステロール（Ａｚａｃｏｓｔｅｒｏｌ）、ベンフルオレックス（Ｂｅｎｆｌｕｏｒｅｘ）、β−ベンザルブチラミド（β−Ｂｅｎｚａｌｂｕｔｙｒａｍｉｄｅ）、カルニチン、コンドロイチン硫酸、クロメストン（Ｃｌｏｍｅｓｔｏｎｅ）、デタクストラン（Ｄｅｔａｘｔｒａｎ）、デキストラン硫酸ナトリウム、５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸、エリタデニン（Ｅｒｉｔａｄｅｎｉｎｅ）、フラズボール（Ｆｕｒａｚｂｏｌ）、メクルトール（Ｍｅｇｌｕｔｏｌ）、メリナミド、ミタトリエンジオール（Ｍｙｔａｔｒｉｅｎｅｄｉｏｌ）、オルニチン、γ−オリザノール、パンテチン、ペナタエリスリトールテトラアセテート（Ｐｅｎａｔａｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ Ｔｅｔｒａａｃｅｔａｔｅ）、α−フェニルブチラミド（α−Ｐｈｅｎｙｌｂｕｔｙｒａｍｉｄｅ）、ピロザジル（Ｐｉｒｏｚａｄｉｌ）、プロブコール、α−シトステロール、スルトシリックアシッド（Ｓｕｌｔｏｓｉｌｉｃ Ａｃｉｄ）、ピペラジン塩、チアデノール（Ｔｉａｄｅｎｏｌ）、トリパラノール及びキセンブシン；
【０２３８】
以下を含む抗高血圧薬：アリールエタノールアミン誘導体、例えば、アモスラロール、ブフラロール(Ｂｕｆｕｒａｌｏｌ)、ジレバロール、ラベタロール、プロネタロール、ソタロール及びスルフィナロール(Ｓｕｌｆｉｎａｌｏｌ)；
【０２３９】
アリールオキシプロパノールアミン誘導体、例えば、アセブトロール、アルプレノロール、アロチノロール、アテノロール、ベタキソロール、ベバントロール、ビソプロロール（Ｂｉｓｏｐｒｏｌｏｌ）、ボピンドロール、ブニトロロール、ブプラノロール、ブトフィロロール(Ｂｕｔｏｆｉｌｏｌｏｌ)、カラゾロール、カルテゾロール（Ｃａｒｔｅｚｏｌｏｌ）、カルベジロール、セリプロロール、セタモロール（Ｃｅｔａｍｏｌｏｌ）、エパノロール(Ｅｐａｎｏｌｏｌ)、インデノロール、メピンドロール(Ｍｅｐｉｎｄｏｌｏｌ)、メチプラノール（Ｍｅｔｉｐｒａｎｏｌｏｌ）、メトプロロール、モプロロール(Ｍｏｐｒｏｌｏｌ)、ナドロール、ニプラジロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、タリノロール、テトラオノール（Ｔｅｔｒａｏｌｏｌ）、チモロール及びトリプロロール(Ｔｏｌｉｐｒｏｌｏｌ)；
【０２４０】
ベンゾチアジアジン誘導体、例えば、アルチアジド（Ａｌｔｈｉａｚｉｄｅ）、ベンドロフルメサイアザイド、ベンズサイアザイド、ベンチルヒドロクロロチアジド、ブチアジド、クロロサイアザイド、クロルタリドン（Ｃｈｌｏｒｔｈａｌｉｄｏｎｅ）、シクロペンチアジド、シクロチアジド、ジアゾキシド、エピサイアザイド、エチアジド、フェンキゾン（Ｆｅｎｑｕｉｚｏｎｅ）、ヒドロクロロチアジド、ヒドロフルメチアジド、メチクロチアジド、メチクラン、メトラゾン、パラフルチジド（Ｐａｒａｆｌｕｔｉｚｉｄｅ）、ポリチアジド、テトラクロルメチアジド及びトリクロルメチアジド；
【０２４１】
Ｎ−カルボキシアルキル（ペプチド／ラクタム）誘導体、例えば、アラセプリル、カプトプリル、シラザプリル、デラプリル（Ｄｅｌａｐｒｉｌ）、エナラプリル、エナラプリラト（Ｅｎａｌａｐｒｉｌａｔ）、フォシノプリル（Ｆｏｓｉｎｏｐｒｉｌ）、リシノプリル、モベルチプリル（Ｍｏｖｅｌｔｉｐｒｉｌ）、ペリンドプリル、キナプリル（Ｑｕｉｎａｐｒｉｌ）及びラミプリル；
【０２４２】
ジヒドロピリジン誘導体、例えば、アムロジピン、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジビン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニソルジピン及びニトレンジピルネ（Ｎｉｔｒｅｎｄｉｐｉｒｎｅ）；
【０２４３】
グアニジン誘導体、例えば、ベタニジン、デブリソキン（Ｄｅｂｒｉｓｏｑｕｉｎ）、グアナベンズ、グアナクリン（Ｇｕａｎａｃｌｉｎｅ）、グアナドレル（Ｇｕａｎａｄｒｅｌ）、グアナゾジン（Ｇｕａｎａｚｏｄｉｎｅ）、グアネチジン（Ｇｕａｎｅｔｈｉｄｉｎｅ）、グアンファシン、グアノクロル（Ｇｕａｎｏｃｈｌｏｒ）、グアノキサベンズ及びグアノキサン；
【０２４４】
ヒドラジン及びフタラジン、例えば、ブドララジン、カドララジン、ジヒドララジン、エンドララジン（Ｅｎｄｒａｌａｚｉｎｅ）、ヒドラカルバジン（Ｈｙｄｒａｃａｒｂａｚｉｎｅ）、ヒドララジン、フェニプラジン、ピルドララジン（Ｐｉｌｄｒａｌａｚｉｎｅ）及びトドララジン；
【０２４５】
イミダゾール誘導体、例えば、クロニジン、ロフェキシジン（Ｌｏｆｅｘｉｄｉｎｅ）、フェントラミン、フェントラミンメシレート、チアメニジン（Ｔｉａｍｅｎｉｄｉｎｅ）及びトロニジン（Ｔｏｌｏｎｉｄｉｎｅ）；
【０２４６】
４級アンモニウム化合物、例えば、臭化アザメトニウム、塩化クロルイソンダミン（Ｃｈｌｏｒｉｓｏｎｄａｍｉｎｅ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ヘキサメトニウム（Ｈｅｘａｍｅｔｈｏｎｉｕｍ）、ペンタシニウムビス(硫酸メチル)（Ｐｅｎｔａｃｙｎｉｕｍ Ｂｉｓ(ｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ)）、臭化ペンタメトニウム、酒石酸ペントリニウム、フェナクトピニウムクロリド（Ｐｈｅｎａｃｔｏｐｉｎｉｕｍ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）及びトリメチジウナムメトサルフェート（Ｔｒｉｍｅｔｈｉｄｉｕｎｕｍ Ｍｅｔｈｏｓｕｌｆａｔｅ）；
【０２４７】
キナゾリン誘導体、例えば、アルフゾシン（Ａｌｆｕｚｏｓｉｎ）、ブナゾシン、ドキサゾシン、プラゾシン（Ｐｒａｓｏｓｉｎ）、テラゾシン（Ｔｅｒａｚｏｓｉｎ）及びトリマゾシン；
【０２４８】
レセルピン誘導体、例えば、ビエタセルピン（Ｂｉｅｔａｓｅｒｐｉｎｅ）、デセルピジン、レシンナミン、レセルピン及びシロシンゴピン；
【０２４９】
スルホンアミド誘導体、例えば、アンブシド（Ａｍｂｕｓｉｄｅ）、クロパミド、フロセミド、インダパミド、キネサゾン、トリパミド及びキシパミド；及び
【０２５０】
その他の、例えば、アジュマリン、γ−アミノ酪酸、ブフェニオード（Ｂｕｆｅｎｉｏｄｅ）、カンデサルタン（Ｃａｎｄｅｓａｒｔａｎ）、クロルタリドン（Ｃｈｌｏｒｔｈａｌｉｄｏｎｅ）、シクレタイン（Ｃｉｃｌｅｔａｉｎｅ）、シクロシドミン（Ｃｉｃｌｏｓｉｄｏｍｉｎｅ）、タンニン酸クリプテナミン（Ｃｒｙｐｔｅｎａｍｉｎｅ Ｔａｎｎａｔｅ）、エプロサルタン（Ｅｐｒｏｓａｒｔａｎ）、フェノルドパム（Ｆｅｎｏｌｄｏｐａｍ）、フロセキナン（Ｆｌｏｓｅｑｕｉｎａｎ）、インドラミン（Ｉｎｄｏｒａｍｉｎ）、イルベサルタン（Ｉｒｂｅｓａｒｔａｎ）、ケタンセリン、ロサルタン、メトブタメート（Ｍｅｔｂｕｔａｍａｔｅ）、メカミルアミン、メチルドパ、メチル ４−ピリジルケトンチオセミカルバルゾン（Ｍｅｔｈｙｌ ４−Ｐｙｒｉｄｙｌ Ｋｅｔｏｎｅ Ｔｈｉｏｓｅｍｉｃａｒｂａｒｚｏｎｅ）、メトラゾン、ミノキシディル、ムゾリミン（Ｍｕｚｏｌｉｍｉｎｅ）、パルギリン、ペンピジン、ピナシジル（Ｐｉｎａｃｉｄｉｌ）、ピペロキサン、プリマペロン（Ｐｒｉｍａｐｅｒｏｎｅ）、プロトベラトリン、ラウバシン、レシメトール（Ｒｅｓｃｉｍｅｔｏｌ）、リルメニデン（Ｒｉｌｍｅｎｉｄｅｎｅ）、サララシン、ニトロプルシドナトリウム、チクリナフェン、カンシル酸トリメタファン、チロシナーゼ、ウラピジル及びバルサルタン；
【０２５１】
抗甲状腺機能亢進症剤、例えば、２−アミノ−４−メチルチアゾール、２−アミノチアゾール、カルビマゾール、３，５−ジブロモ−Ｌ−チロシン、３，５−ジヨードチロシン、ヒンデリン（Ｈｉｎｄｅｒｉｎ）、ヨウ素、ヨーチオウラシル（Ｉｏｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ）、メチマゾール、メチルチオウラシル、プロピルチオウラシル、過塩素酸ナトリウム、チベンザソリン（Ｔｈｉｂｅｎｚａｚｏｌｉｎｅ）、チオバルビタール（Ｔｈｉｏｂａｒｂｉｔａｌ）及び２−チオウラシル；
【０２５２】
血圧降下剤、例えば、アメジニウムメチル硫酸塩、アンギオテンシンアミド、ジメトフリン（Ｄｉｍｅｔｏｆｒｉｎｅ）、ドーパミン、エチフェルミン、エチレフリン、ゲペフリン、メタラミノール、ミドドリン、ノルエピネフリン、フォレドリネアド（Ｐｈｏｌｅｄｒｉｎｅａｄ）及びシネフリン；
【０２５３】
抗甲状腺機能低下剤、例えば、レボチロキシンナトリウム、リオチロニン、チロイド（Ｔｈｙｒｏｉｄ）、チロイジン（Ｔｈｙｒｏｉｄｉｎ）、チロキシン、チラトリコール（Ｔｉｒａｔｒｉｃｏｌ）及びＴＳＨ；
【０２５４】
以下を含む抗炎症剤（非ステロイド系）：アミノアリールカルボン酸誘導体、例えば、エンフェナム酸、エトフェナメート、フルフェナム酸、イソニキシン、メクロフェナム酸、メファナム酸、ニフルム酸、タルニフルメート、テロフェナメート及びトルフェナム酸
【０２５５】
アリール酢酸誘導体、例えば、アセメタシン、アルクロフェナック、アンフェナク、ブフェキサマク、シンメタシン（Ｃｉｎｍｅｔａｃｉｎ）、クロピラック（Ｃｌｏｐｉｒａｃ）、ジクロフェナクナトリウム、エトドラク、フェルビナク、フェンクロフェナック（Ｆｅｎｃｌｏｆｅｎａｃ）、フェンクロラック（Ｆｅｎｃｌｏｒａｃ）、フェンクロズ酸、フェンチアザク、グルカメタシン（Ｇｌｕｃａｍｅｔａｃｉｎ）、イブフェナック、インドメタシン、イソフェゾラク、イソキセパック（Ｉｓｏｘｅｐａｃ）、ロナゾラック（Ｌｏｎａｚｏｌａｃ）、メチアジン酸、オキサメタシン、プログルメタシン（Ｐｒｏｇｌｕｍｅｔａｃｉｎ）、スリンダク、チアラミド（Ｔｉａｒａｍｉｄｅ）、トルメチン及びゾメピラク
【０２５６】
アリール酪酸誘導体、例えば、ブマジゾン、ブチブフェン（Ｂｕｔｉｂｕｆｅｎ）、フェンブフェン及びキセンブシン；
【０２５７】
アリールカルボン酸、例えば、クリダナク、ケトロラク及びチノリジン；
アリールプロピオン酸、例えば、アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロキシ酸（Ｂｕｃｌｏｘｉｃ Ａｃｉｄ）、カルプロフェン、フェノプロフェン、フルノキサプロフェン（Ｆｌｕｎｏｘａｐｒｏｆｅｎ）、フルルビプロフェン、イブプロフェン、イブプロキサム（Ｉｂｕｐｒｏｘａｍ）、インドプロフェン、ケトプロフェン、ロキソプロフェン、ミロプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピケトプロフェン（Ｐｉｋｅｔｏｐｒｏｆｅｎ）、ピルプロフェン、プラノプロフェン、プロチジン酸、スプロフェン及びチアプロフェン酸；
【０２５８】
ピラゾール、例えば、ジフェナミゾール及びエピリゾール；
【０２５９】
ピラゾロン、例えば、アパゾン、ベンズピペリロン、フェプラゾン、モフェブタゾン、モラゾン、オキシフェンブタゾン、フェニブタゾン（Ｐｈｅｎｙｂｕｔａｚｏｎｅ）、ピペブゾン、プロピフェナゾン、ラミフェナゾン、スキシブゾン（Ｓｕｘｉｂｕｚｏｎｅ）及びチアゾリノブタゾン（Ｔｈｉａｚｏｌｉｎｏｂｕｔａｚｏｎ）；
【０２６０】
サリチル酸誘導体、例えば、アセトアミノサロール、アスピリン、ベノリレート、ブロモサリゲニン（Ｂｒｏｍｏｓａｌｉｇｅｎｉｎ）、アセチルサリチル酸カルシウム、ジフルニサル、エテルサレート(Ｅｔｅｒｓａｌａｔｅ)、フェンドサール（Ｆｅｎｄｏｓａｌ）、ゲンチシン酸、サリチル酸グリコール、サリチル酸イミダゾール、リジンアセチルサリチル酸、メサラミン（Ｍｅｓａｌａｍｉｎｅ）、サリチル酸モルホリン、１−ナフチルサリチレート、オルサラジン、パルサルミド、アセチルサリチル酸フェニル、サリチル酸フェニル、サラセタミド、サリチルアミンＯ−酢酸、サリチル硫酸、サルサレート及びスルファサラジン；
【０２６１】
チアジンカルボキサミド、例えば、ドロキシカム、イソキシカム、ピロキシカム及びテノキシカム；及び
【０２６２】
その他の、例えば、ε−アセトアミドカプロン酸、Ｓ‐アデノシルメチオニン、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸、アミキセトリン（Ａｍｉｘｅｔｒｉｎｅ）、ベンダザック、ベンジダミン、ブコローム、ジフェンピラミド（Ｄｉｆｅｎｐｉｒａｍｉｄｅ）、ジタゾール（Ｄｉｔａｚｏｌ）、エモルファゾン、グアイアズレン（Ｇｕａｉａｚｕｌｅｎｅ）、ナブメトン、ニメスリド（Ｎｉｍｅｓｕｌｉｄｅ）、オルゴテイン（Ｏｒｇｏｔｅｉｎ）、オキサセプロール（Ｏｘａｃｅｐｒｏｌ）、パラニリン（Ｐａｒａｎｙｌｉｎｅ）、ペリソキサール、ピフォキシム（Ｐｉｆｏｘｉｍｅ）、プロカゾン（Ｐｒｏｑｕａｚｏｎｅ）、プロキサゾール及びテニダップ（Ｔｅｎｉｄａｐ）；
【０２６３】
抗マラリア剤、例えば、アセタプソン、アモジアキン（Ａｍｏｄｉａｑｕｉｎ）、アルテエーテル（Ａｒｔｅｅｔｈｅｒ）、アルテメテル（Ａｒｔｅｍｅｔｈｅｒ）、アルテミシニン（Ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ）、アルテスネート（Ａｒｔｅｓｕｎａｔｅ）、ベベリン、ベルベリン、チラータ（Ｃｈｉｒａｔａ）、クロルグアニイド、クロロキン、クロルプルグアニル（Ｃｈｌｏｒｐｒｏｇｕａｎｉｌ）、キナ皮、シンコニジン、シンコニン、シクログアニル、ゲンチオピクリン（Ｇｅｎｔｉｏｐｉｃｒｉｎ）、ハロファントリン（Ｈａｌｏｆａｎｔｒｉｎｅ）、水酸化クロロキン、塩酸メフロキン、３−メチルアルサセチン（３−Ｍｅｔｈｙｌａｒｓａｃｅｔｉｎ）、パマキン、プラスモシド（Ｐｌａｓｍｏｃｉｄ）、プリマキン、ピリメタミン、キナクリン、キニーネ、二硫酸キニーネ、炭酸キニーネ、キニーネジヒドロブロミド（Ｑｕｉｎｉｎｅ Ｄｉｈｙｄｒｏｂｒｏｍｉｄｅ）、二塩酸キニーネ、エチル炭酸キニーネ、ギ酸キニーネ、グルコン酸キニーネ、キニーネヒドリオジド（Ｑｕｉｎｉｎｅ Ｈｙｄｒｉｏｄｉｄｅ）、塩酸キニーネ、サリチル酸キニーネ、硫酸キニーネ、タンニン酸キニーネ、塩酸キニーネ尿素、キノシド、キノリン及びヒ酸二ナトリウム；
【０２６４】
抗片頭痛薬、例えば、アルピロプリド（Ａｌｐｉｒｏｐｒｉｄｅ）、ジヒドロエルゴタミン、エレトリプタン（Ｅｌｅｔｒｉｐｔａｎ）、エルゴコルニン、エルゴコルニニン、エルゴクリプチン、麦角、エルゴタミン、フルメドロキソンアセテート（Ｆｌｕｍｅｄｒｏｘｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ）、フォナジン、リスリド、メチセルジド（Ｍｅｔｈｙｓｅｒｇｉｄ(ｅ)）、ナラトリプタン（Ｎａｒａｔｒｉｐｔａｎ）、オキセトロン（Ｏｘｅｔｏｒｏｎｅ）、ピゾチリン(Ｐｉｚｏｔｙｌｉｎｅ)、リザトリプタン（Ｒｉｚａｔｒｉｐｔａｎ）及びスマトリプタン（Ｓｕｍａｔｒｉｐｔａｎ）；
【０２６５】
制吐薬、例えば、アセチルロイシンモノエタノールアミン、アリザプリド（Ａｌｉｚａｐｒｉｄｅ）、ベンズキナミド、ビエタノーチン（Ｂｉｅｔａｎａｕｔｉｎｅ）、ブロモプリド（Ｂｒｏｍｏｐｒｉｄｅ）、ブクリジン、クロルプロマジン、クレボプリド、シクリジン、ジメンヒドリナート、ジフェニオドール、ドンペリドン、グラニセトロン（Ｇｒａｎｉｓｅｔｒｏｎ）、メクリジン、メタルタール（Ｍｅｔｈａｌｌｔａｌ）、メトクロプラミド、メトピマジン（Ｍｅｔｏｐｉｍａｚｉｎｅ）、ナビロン（Ｎａｂｉｌｏｎｅ）、オンダンステロン（Ｏｎｄａｎｓｔｅｒｏｎ）、オキシペンジル（Ｏｘｙｐｅｎｄｙｌ）、ピパマジン、ピプリンヒドリナート、プロクロルペラジン、スコポラミン、テトラヒドロカンナビノール、チエチルベラジン、チオプロペルザイン及びトリメトベンズアミド；
【０２６６】
以下を含む抗腫瘍剤：アルキル化剤、例えば、ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン等のスルホン酸アルキル；
【０２６７】
アジリジン、例えば、ベンゾデパ（Ｂｅｎｚｏｄｅｐａ）、カルボコン、メツレデパ及びウレデパ（Ｕｒｅｄｅｐａ）；
【０２６８】
エチレンイミン及びメチルメラミン、例えば、アルトレタミン（Ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド及びトリメチルオロメラミン（Ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）；
【０２６９】
ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、シクロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシドヒドロクロリド（Ｍｅｃｈｌｏｒｅｔｈａｍｉｎｅ Ｏｘｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、メルファラン、ノベンビチン（Ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（Ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン（Ｐｒｅｄｎｉｍｕｓｔｉｎｅ）、トロフォスファミド（Ｔｒｏｆｏｓｆａｍｉｄｅ）及びウラシルマスタード
【０２７０】
ニトロソ尿素、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン（Ｃｈｌｏｒｏｚｏｔｏｃｉｎ）、フォテムスチン（Ｆｏｔｅｍｕｓｔｉｎｅ）、ロムスチン、ニムスチン及びラニムスチン；並びに
【０２７１】
その他の、例えば、カンプトテシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール（Ｍｉｔｏｌａｃｔｏｌ）及びピポブロマン；
【０２７２】
抗生物質、例えば、アクラシノマイシン（Ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｃｉｎｓ）、アクチノマイシンＦ１、アントラマイシン（Ａｎｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カルビシン（Ｃａｒｕｂｉｃｉｎ）、カルチノフィリン、クロモマイシン（Ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ドキソルビシン（Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、エピルビシン（Ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、プリカマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン及びゾルビシン（Ｚｏｒｕｂｉｃｉｎ）；
【０２７３】
以下を含む代謝拮抗剤：葉酸類似体、例えば、デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン及びトリメトレキセート（Ｔｒｉｍｅｔｒｅｘａｔｅ）；
【０２７４】
プリン類似体、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン及びチオグアナイン（Ｔｈｉｏｇｕａｎａｉｎｅ）；及び
【０２７５】
ピリミジン類似体、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、フルオロウラシル及びテガフール；
【０２７６】
酵素、例えば、Ｌ−アスパラギナーゼ：及び
その他の、例えば、アセグラトン、アムサクリン（Ａｍｓａｃｒｉｎｅ）、ベストラブシル（Ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）、ビサントレン（Ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）、ブリオスタチン１（Ｂｒｙｏｓｔａｔｉｎ １）、カルボプラチン、シスプラチン、デフォファミド（Ｄｅｆｏｆａｍｉｄｅ）、デメコルチン、ジアジコン（Ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、エルフォルニチン（Ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、エリプチニウムアセテート（Ｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ Ａｃｅｔａｔｅ）、エトグルシド（Ｅｔｏｇｌｕｃｉｄ）、エトポシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、インターロイキン−２、レンチナン、レトロゾール、ロニダミン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダモール、ニトラクリン（Ｎｉｔｒａｃｒｉｎｅ）、ペントスタチン、フェナメット（Ｐｈｅｎａｍｅｔ）、ピラルビシン（Ｐｉｒａｒｕｂｉｃｉｎ）、ポドフィリン酸、２−エチルヒドラジド、ポリニトロクバン（Ｐｏｌｙｎｉｔｒｏｃｕｂａｎｅｓ）、プロカルバジン、ＰＳＫ７、ラゾキサン、シゾフィラン、スピロゲルマニウム、タキソール、テニポシド、テヌアゾン酸、トリアジクオン、２，２'，２"−トリクロロトリエチルアミン、ウレタン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン及びビノレルビン；
【０２７７】
以下を含む抗腫瘍剤（ホルモン系）：アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン及びテストラクトン；
【０２７８】
抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド（Ａｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ）、ミトタン及びトリロスタン；
抗アンドロゲン剤、例えば、フルタミド及びニルタミド；並びに
抗エストロゲン剤、例えば、タモキシフェン及びトレミフェン；
【０２７９】
抗腫瘍剤補助剤、例えば、フロリン酸などの葉酸補充液；
【０２８０】
抗パーキンソン病薬、例えば、アマンタジン、ベンセラジド、ビエタノーチン（Ｂｉｅｔａｎａｕｔｉｎｅ）、ビペリデン、ブロモクリプチン、ブジピン（Ｂｕｄｉｐｉｎｅ）、カベルゴリン、カルビドパ、デプレニール (ａ／ｋ／ａ Ｌ−デプレニール（Ｌ−ｄｅｐｒｅｎｙｌ）、Ｌ−デプレニル（Ｌ−ｄｅｐｒｅｎｉｌ）、Ｌ−デプレナリン（Ｌ−ｄｅｐｒｅｎａｌｉｎｅ）及びセレギリン（ｓｅｌｅｇｉｌｉｎｅ）)、デキセチミド（Ｄｅｘｅｔｉｍｉｄｅ）、ジエタジン、ジフェンヒドラミン、ドロキシドパ、エトプロパジン、エチルベンズヒドラミン、レボドーパ、ナキサゴリド（Ｎａｘａｇｏｌｉｄｅ）、ペルゴリド（Ｐｅｒｇｏｌｉｄｅ）、ピロヘプチン、プラミペキソール（Ｐｒａｍｉｐｅｘｏｌｅ）、プリジノール、プロジピン（Ｐｒｏｄｉｐｉｎｅ）、キンピロール（Ｑｕｉｎｐｉｒｏｌｅ）、レマセミド（Ｒｅｍａｃｅｍｉｄｅ）、ロピニロール（Ｒｏｐｉｎｉｒｏｌｅ）、テルグリド、チグロイジン（Ｔｉｇｌｏｉｄｉｎｅ）及び塩酸トリヘキシフェニジル；
【０２８１】
抗クロム親和細胞腫剤、例えば、メチロシン、フェノキシベンザミン及びフェントラミン；
【０２８２】
抗ニューモシスティス剤、例えば、エフォルニチン（Ｅｆｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）、ペンタミジン及びスルファメトキサゾール；
【０２８３】
抗前立腺肥大薬、例えば、カプロン酸ゲストノロン、メパルトリシン、オキセンドロン及びプロスカー７；
【０２８４】
抗原生動物薬（Ｌｅｓｈｍａｎｉａ用）、例えば、アンチモングルコン酸ナトリウム（Ａｎｔｉｍｏｎｙ Ｓｏｄｉｕｍ Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ）、エチルスチバミン、ヒドロキシスチルバミジン、Ｎ−メチルグルカミン、ペンタミジン、スチルバミジン及び尿素スチバミン；
【０２８５】
抗原生動物薬（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ用）、例えば、アセタルゾン、アミニトロゾール、アニソマイシン、アザニダゾール（Ａｚａｎｉｄａｚｏｌｅ）、ホルミニトラゾール、フラゾリドン（Ｆｕｒａｚｏｌｉｄｏｎｅ）、ハチマイシン、ラウログアジン（Ｌａｕｒｏｇｕａｄｉｎｅ）、メパルトリシン、メトロニダゾール、ニフラテル、ニフロキシム、ニモラゾール、セクニダゾール、ピクリン酸銀、テノニトロゾール（Ｔｅｎｏｎｉｔｒｏｚｏｌｅ）及びチニダゾール；
【０２８６】
抗原生動物薬（Ｔｒｙｐａｎｏｓｍａ用）、例えば、ベンズニダゾール、エフロルニチン（Ｅｆｌｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、メラルソプロール、ニフルチモックス（Ｎｉｆｕｒｔｉｍｏｘ）、オキソフェナルシン、塩酸、ペンタミジン、プロパミジン、ピューロマイシン、キナピラミン、スチルバミジン、スラミンナトリウム、トリパンレッド及びトリパラスミド；
【０２８７】
アンチピューリティックス（Ａｎｔｉｐｕｒｉｔｉｃｓ）、例えば、カンフル、シプロヘプタジン、ジクロリゾン、グリシン、ハロメタゾン、３−ヒドロキシカンフル（３−Ｈｙｄｒｏｘｙｃａｍｐｈｏｒ）、メントール、メスルフェン、メトジラジン、フェノール、ポリドカノール、リゾカイン、カンフルの酒精剤、テナルジン、トルプロパミン及びトリメプラジン；
【０２８８】
抗乾癬薬、例えば、アシトレチン、サリチル酸アンモニウム、アントラリン、６−アザウリジン、ベルガプテン、クリサロビン、エトレチナート及びピロガロール；
【０２８９】
以下を含む向精神薬：ブチロフェノン、例えば、ベンペリドール、ブロムペリドール、ドロペリドール、フルアニソン、ハロペリドール、メルペロン（Ｍｅｌｐｅｒｏｎｅ）、モペロン、ピパンペロン、スニペロン（Ｓｎｉｐｅｒｏｎｅ）、チミペロン及びトリフルペリドール；
【０２９０】
フェノチアジン、例えば、アセトフェナジン、ブタペラジン、カルフェナジン（Ｃａｒｐｈｅｎａｚｉｎｅ）、クロルプロエタジン（Ｃｈｌｏｒｐｒｏｅｔｈａｚｉｎｅ）、クロルプロマジン、クロスピラジン、シアメマジン、ジキシラジン、フルフェナジン、イミクロパジン（Ｉｍｉｃｌｏｐａｚｉｎｅ）、メパジン、メソリダジン、メトキシプロマジン、メトフェナゼート（Ｍｅｔｏｆｅｎａｚａｔｅ）、オクサフルマジン（Ｏｘａｆｌｕｍａｚｉｎｅ）、ペラジン、ペリシアジン、ペリメタジン（Ｐｅｒｉｍｅｔｈａｚｉｎｅ）、ペルフェナジン、ピペラセタジン、ピポチアジン（Ｐｉｐｏｔｉａｚｉｎｅ）、プロクロルペラジン、プロマジン（Ｐｒｏｍａｚｉｎｅ）、スルホリダジン（Ｓｕｌｆｏｒｉｄａｚｉｎｅ）、チオプロパゼート、チオリダジン、トリフロペラジン及びトリフルプロマジン；
【０２９１】
チオキサンテン、例えば、クロルプロチキセン、クロペンチキソール、フルペンチキソール及びチオチキセン；並びに
他の三環系、例えば、ベンズキナミド、カルピプラミン、クロカプラミン、クロマクラン（Ｃｌｏｍａｃｒａｎ）、クロチアピン、クロザピン、オピプラモール、プロチペンジル、テトラベナジン及びゾテピン；及び
【０２９２】
その他の、例えば、アリザプリド（Ａｌｉｚａｐｒｉｄｅ）、アミスルプリド（Ａｍｉｓｕｌｐｒｉｄｅ）、ブラメート（Ｂｕｒａｍａｔｅ）、フルスピリレン、モリンドン、ペンフルリドール、ピモジド、スピリレン（Ｓｐｉｒｉｌｅｎｅ）及びスルピリド；
【０２９３】
解熱剤、例えば、アセトアミノフェン、アセトアミノサロール、アセトアニリド、アコニン（Ａｃｏｎｉｎｅ）、アコニット、アコニチン、アルクロフェナック、アルミニウムビス(アセチルサリチレート)（Ａｌｕｍｉｎｕｍ Ｂｉｓ(ａｃｅｔｙｌｓａｌｉｃｙｌａｔｅ)）、アミノクロルテノキサジン（Ａｍｉｎｏｃｈｌｏｒｔｈｅｎｏｘａｚｉｎ）、アミノピリン、アスピリン、ベノリレート、ベンジダミン、ベルベリン、ｐ−ブロモアセトアニリド、ブフェキサマク、ブマジゾン、アセチルサリチル酸カルシウム、クロルテノキサジン、サリチル酸コリン、クリダナク、アセチルサリチル酸ジヒドロキシアルミニウム、ジピロセチル、ジピロン（Ｄｉｐｙｒｏｎｅ）、エピリゾール、エテルサレート(Ｅｔｅｒｓａｌａｔｅ)、イミダゾール サリチラート、インドメタシン、イソフェゾラク、ｐ−ラクトフェネチド、アセチルサリチル酸リジン、アセチルサリチル酸マグネシウム、メクロフェナム酸、モラゾン、サリチル酸モルホリン、ナプロキセン、ニフェナゾン、５'−ニトロ−２'−プロポキシアセトアニリド、フェナセチン、フェニカルバジド、フェノコール、フェノピラゾン、アセチルサリチル酸フェニル、サリチル酸フェニル、ピペブゾン、プロパセタモール、プロピフェナゾン、ラミフェナゾン、サラセタミド、サリチルアミドＯ−酢酸、サリチル酸ナトリウム、スルファミピリン、テトランドリン（Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ）及びチノリジン；
【０２９４】
抗リケッチア薬、例えば、ｐ−アミノ安息香酸、クロラムフェニコール、パルミチン酸クロラムフェニコール、クロラムフェニコール パントテナート及びテトラサイクリン；
【０２９５】
抗脂漏薬、例えば、クロロキシン、３−Ｏ−ラウロイルピリドキソール（３−Ｏ−Ｌａｕｒｏｙｌｐｙｒｉｄｏｘｏｌ）、ジアセテート、ピロクトン、ピリチオン、レゾルシノール、硫化セレン及びチオキソロン；
【０２９６】
以下を含む防腐剤：グアニジン、例えば、アレキシジン、アンバゾン（Ａｍｂａｚｏｎｅ）、クロルヘキシジン及びピクロキシジン（Ｐｉｃｌｏｘｙｄｉｎｅ）；
【０２９７】
ハロゲン及びハロゲン化合物、例えば、ヨウ化ビスマスオキシド（Ｂｉｓｍｕｔｈ Ｉｏｄｉｄｅ Ｏｘｉｄｅ）、ビスマスロドスブガレート（Ｂｉｓｍｕｔｈ ｌｏｄｏｓｕｂｇａｌｌａｔｅ）、ビスマストリブロモフェネート（Ｂｉｓｍｕｔｈ Ｔｒｉｂｒｏｍｏｐｈｅｎａｔｅ）、塩化ボルニル（Ｂｏｒｎｙｌ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ヨウ素酸カルシウム、クロル石灰、クロフルカルバン（Ｃｌｏｆｌｕｃａｒｂａｎ）、フルロサラン（Ｆｌｕｒｏｓａｌａｎ）、ヨウ素酸、ヨウ素、一塩化ヨウ素、三塩化ヨウ素、ヨードホルム、四ヨウ化メテナミン、オキシクロロセン、ポビドン−ヨウ素、次亜塩素酸ナトリウム、ヨウ素酸ナトリウム、シムクロセン、チモールヨード、トリクロカルバン、トリクロサン及びトロクロセンカリウム（Ｔｒｏｃｌｏｓｅｎｅ Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ）；
【０２９８】
水銀化合物、例えば、ヒドラガフェン（Ｈｙｄｒａｇａｐｈｅｎ）、メラレインナトリウム（Ｍｅｒａｌｅｉｎ Ｓｏｄｉｕｍ）、メルブロミン、塩化水銀(ＩＩ)、塩化水銀(ＩＩ)、アンモニア処理した水銀化合物、ｐ−フェノールスルホン酸ナトリウム水銀(ＩＩ)（Ｍｅｒｃｕｒｉｃ ｐ−Ｐｈｅｎｏｌｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、スクシンイミド水銀(ＩＩ)、硫化水銀(ＩＩ)、レッド（Ｒｅｄ）、マーキュロフェン、酢酸水銀(Ｉ)、塩化水銀(Ｉ)、ヨウ化水銀(Ｉ)、ニトロメルソール、四ヨード水銀(ＩＩ)カリウム（Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ Ｔｅｔｒａｉｏｄｏｍｅｒｃｕｒａｔｅ(ＩＩ)）、三ヨード水銀(ＩＩ)カリウム溶液、チメルホネートナトリウム及びチメロサール；
【０２９９】
ニトロフラン、例えば、フラゾリドン（Ｆｕｒａｚｏｌｉｄｏｎｅ）、２−(メトキシメチル)−５−ニトロフラン、ニドロキシゾン、ニフロキシム、ニフルジド及びニトロフラゾン；
【０３００】
フェノール、例えば、アセトメロクトル、ビチオノール、サリチル酸カドミウム、カルバクロール、クロロキシレノール、クロロフェン、クレゾート（Ｃｒｅｓｏｔｅ）、クレゾール、ｐ−クレゾール、フェンチクロール、ヘキサクロロフェン、１−ナプチルサリチラート、２−ナプチルサリチラート、２，４，６−トリブロモ−ｍ−クレゾール及び３'，４'，５'−トリクロロサリチルアニリド；
【０３０１】
キノリン、例えば、アミノキヌリド、ベンゾキシキン、ブロキシキノリン、クロロキシン、クロルキナルドール、クロキシキン、エチルヒドロクプレイン（Ｅｔｈｙｌｈｙｄｒｏｃｕｐｒｅｉｎｅ）、オイプロシン（Ｅｕｐｒｏｃｉｎ）、ハルキノール、ヒドラスチン、８−ヒドロキシキノリン、８−ヒドロキシキノリン硫酸塩及びヨードクロルヒドロキシキン（Ｉｏｄｏｃｈｌｏｒｈｙｄｒｏｘｙｑｕｉｎ）；並びに、
【０３０２】
その他の、例えば、酢酸アルミニウム溶液、塩基性酢酸アルミニウム溶液、硫酸アルミニウム、３−アミノ−４−ヒドロキシ酪酸、ホウ酸、クロルヘキシジン、クロロアゾジン、ｍ−クレシルアセテート、硫酸銅、ジブロモプロパミジン、イクタモール、ネガトール７（Ｎｅｇａｔｏｌ ７）、ノキシチオリン（Ｎｏｘｙｔｉｏｌｉｎ）、オルニダゾール、β−プロビオラクトン、α−テルピネオール；
【０３０３】
鎮痙薬、例えば、アリベンドール（Ａｌｉｂｅｎｄｏｌ）、アンブセタミド、アミノプロマジン、アポアトロピン、ベボニウムメチルサルフェート、ビエタミベリン（Ｂｉｅｔａｍｉｖｅｒｉｎｅ）、ブタベリン、臭化ブトロピウム、Ｎ−ブチルスコポルアンモニウムブロミド（Ｎ−Ｂｕｔｙｌｓｃｏｐｏｌａｍｍｏｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、カロベリン（Ｃａｒｏｖｅｒｉｎｅ）、臭化シメトロピウム（Ｃｉｍｅｔｒｏｐｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、シンナメドリン、クレボプリド、コニインヒドロブロミド（Ｃｏｎｉｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｂｒｏｍｉｄｅ）、コニインヒドロクロリド（Ｃｏｎｉｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ヨウ化シクロニウム、ジフェメリン（Ｄｉｆｅｍｅｒｉｎｅ）、ジイソプロミン、ジオキサフェチルブチラート、臭化ジポニウム、ドロフェニン（Ｄｒｏｆｅｎｉｎｅ）、臭化エメプロニウム、エタベリン、フェクレミン、フェナラミド（Ｆｅｎａｌａｍｉｄｅ）、フェノベリン（Ｆｅｎｏｖｅｒｉｎｅ）、フェンピプラン、臭化フェンピベリニウム、フェントニウムブロミド（Ｆｅｎｔｏｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、フラボキセート、フロプロピオン、グルコン酸、グアイアクタミン（Ｇｕａｉａｃｔａｍｉｎｅ）、ヒドラミトラジン（Ｈｙｄｒａｍｉｔｒａｚｉｎｅ）、ヒメクロモン、レイオピロール（Ｌｅｉｏｐｙｒｒｏｌｅ）、メベベリン（Ｍｅｂｅｖｅｒｉｎｅ）、モキサベリン、ナフィベリン（Ｎａｆｉｖｅｒｉｎｅ）、オクタミルアミン、オクタベリン（Ｏｃｔａｖｅｒｉｎｅ）、ペンタピペリド、フェナマシドヒドロクロリド（Ｐｈｅｎａｍａｃｉｄｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、フロログルシノール、臭化ピナベリウム、ピペリレート、塩酸ピポキソラン、プラミベリン、臭化プリフィニウム、プロペリジン、プロピバン、プロピロマジン、プロザピン、ラセフェミン、ロシベリン、スパスモリトール、ヨウ化スチロニウム、スルトロポニウム、ヨウ化チエモニウム、臭化チキジウム、チロプラミド、トレピブトン、トリクロミル、トリフォリウム、トリメブチン、Ｎ，Ｎ−１−トリメチル−３，３−ジフェニル−プロピルアミン、トロペンジル（Ｔｒｏｐｅｎｚｉｌｅ）、塩化トロスピウム及びキセニトロピウムブロミド（Ｘｅｎｙｔｒｏｐｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）；
【０３０４】
抗血栓薬、例えば、アナグレリド、アルガトロバン、シロスタゾール、クリソプチン（Ｃｈｒｙｓｏｐｔｉｎ）、ダルトロバン（Ｄａｌｔｒｏｂａｎ）、デフィブロチド（Ｄｅｆｉｂｒｏｔｉｄｅ）、エノキサパリン、フラキシパリン７（Ｆｒａｘｉｐａｒｉｎｅ ７）、インドブフェン、ラモパラン（Ｌａｍｏｐａｒａｎ）、オザグレル、ピコタミド、プラフィブリド、レビパリン、テデルパリン（Ｔｅｄｅｌｐａｒｉｎ）、チクロピジン、トリフルサール（Ｔｒｉｆｌｕｓａｌ）及びワルファリン；
【０３０５】
鎮咳薬、例えば、アロカミド、アミシボン、ベンプロペリン、ベンゾナテート、臭化ビベンゾニウム、ブロモホルム、ブタミレート、ブテタメート、エタンジスルホン酸カラミフェン（Ｃａｒａｍｉｐｈｅｎ Ｅｔｈａｎｅｄｉｓｕｌｆｏｎａｔｅ）、カルベタペンタン、クロフェジアノール、クロブチノール、クロペラスチン、コデイン、コデイン メチルブロマイド、コデインＮ−オキシド、リン酸コデイン、硫酸コデイン、シクレキサノン、デキストロメトルファン、ジブネートナトリウム、ジヒドロコデイン、ジヒドロコデイノンエノールアセテート（Ｄｉｈｙｄｒｏｃｏｄｅｉｎｏｎｅ Ｅｎｏｌ Ａｃｅｔａｔｅ）、ジメモルファン、ジメトキサネート、α，α−ジフェニル−２−ピペリジンプロパノール、ドロプロピジン、ドロテバノール、エプラジノン、ジブナートエチル（Ｅｔｈｙｌ Ｄｉｂｕｎａｔｅ）、エチルモルヒネ、ホミノベン、ギアイアペート（Ｇｕｉａｉａｐａｔｅ）、ヒドロコドン、イソアミニル、レボプロポキシフェン（Ｌｅｖｏｐｒｏｐｏｘｙｐｈｅｎｅ）、モルクロフェン（Ｍｏｒｃｌｏｆｏｎｅ）、ナルセイン、ノルメタドン、ノスカピン、オキセラジン、オキソラミン、フォルコジン、ピコぺリン（Ｐｉｃｏｐｅｒｉｎｅ）、ピパゼタート、ピぺリジオン（Ｐｉｐｅｒｉｄｉｏｎｅ）、プレノクスジアジンヒドロクロリド（Ｐｒｅｎｏｘｄｉａｚｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ラセメトルファン（Ｒａｃｅｍｅｔｈｏｒｐｈａｎ）、タジプリノンヒドロクロリド（Ｔａｚｉｐｒｉｎｏｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、チペピジン及びジペプロール；
【０３０６】
抗潰瘍剤、例えば、アセグルタミドアルミニウム錯体、ε−アセトアミドカプロン酸亜鉛塩、アセトキソロン（Ａｃｅｔｏｘｏｌｏｎｅ）、アルバプロスチル（Ａｒｂａｐｒｏｓｔｉｌ）、ベネキセートヒドロクロリド（Ｂｅｎｅｘａｔｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ビスマススブシトレート（Ｂｉｓｍｕｔｈ Ｓｕｂｃｉｔｒａｔｅ）ゾル (乾燥)、カルベノキソロン、セトラキセート、シメチジン、エンプロスチル、エスプラゾール、ファモチジン、フタキシリド、ゲファルナート、グアイアズレン（Ｇｕａｉａｚｕｌｅｎｅ）、イルソグラジン、ミソプロストール、ニザチジン、オメプラゾール、オルノプロスチル、γ−オリザノール、ピファルニン（Ｐｉｆａｒｎｉｎｅ）、ピレンゼピン、プラウノトール、ラニチジン、リオプロスチル（Ｒｉｏｐｒｏｓｔｉｌ）、ロサプロストール（Ｒｏｓａｐｒｏｓｔｏｌ）、ロトラキセート（Ｒｏｔｒａｘａｔｅ）、ロキサチジン酢酸エステル、ソファルコン、スピゾフロン、スクラルファート、テプレノン、トリモプロスチル、トリチオジン（Ｔｈｒｉｔｈｉｏｚｉｎｅ）、トロキシピド及びゾリミジン（Ｚｏｌｉｍｉｄｉｎｅ）；
【０３０７】
抗尿結石剤、例えば、アセトヒドロキサム酸、アロプリノール、クエン酸カリウム及びスクシンイミド；
【０３０８】
抗蛇毒素、例えば、リオバック７抗蛇毒素；
【０３０９】
以下を含む抗ウィルス剤；プリン及びピリミジノン、例えば、アシクロビル、シタラビン、ジデオキシアデノシン、ジデオキシシチジン、ジデオキシイノシン、エドクスジン（Ｅｄｏｘｕｄｉｎｅ）、フロクスウリジン、ガンシクロビル、イドクスウリジン、イノシンプラノベックス（ｌｎｏｓｉｎｅ Ｐｒａｎｏｂｅｘ）、ＭＡＤＵ、ペンシクロビル、トリフルリジン、ビドラルビン（Ｖｉｄｒａｒｂｉｎｅ）及びジドブジイン（Ｚｉｄｏｖｕｄｉｉｎｅ）；並びに
【０３１０】
その他の、例えば、アセチルロイシンモノエタノールアミン、アマンタジン、アミジノマイシン、コサラン（Ｃｏｓａｌａｎｅ）、クミンアルデヒドチオセミカルバゾン、フォスカーネットナトリウム（Ｆｏｓｃａｒｎｅｔ Ｓｏｄｉｕｍ）、イミキモド（Ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ）、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、ケトキサール、リゾチーム、メチサゾン、モロキシジン、ポドフィロトキシン、リバビリン、リマンタジン、スタリマイシン（Ｓｔａｌｌｉｍｙｃｉｎ）、スタトロン、トロマンタジン（Ｔｒｏｍａｎｔａｄｉｎｅ）及びゼナゾイックアシッド（Ｘｅｎａｚｏｉｃ Ａｃｉｄ）；
【０３１１】
以下を含む抗不安薬：アリールピペラジン、例えば、ブスピロン（Ｂｕｓｐｉｒｏｎｅ）、ゲピロン（Ｇｅｐｉｒｏｎｅ）、イプサピロン（ｌｐｓａｐｉｒｏｎｅ）及びトンドスピロン（Ｔｏｎｄｏｓｐｉｒｏｎｅ）；
【０３１２】
ベンゾジアゼピン誘導体、例えば、アルプラゾラム、ブロマゼパム、カマゼパム、クロルジアゼポキシド、クロバザム、クロラゼペート、コチアゼパム（Ｃｈｏｔｉａｚｅｐａｍ）、クロキサゾラム、ジアゼパム、ロフラゼプ酸エチル、エチゾラム、フルイダゼパム（Ｆｌｕｉｄａｚｅｐａｍ）、フルタゾラム、フルトプラゼパム、ハラゼパム（Ｈａｌａｚｅｐａｍ）、ケタゾラム、ロラゼパム、ロクサピン、メダゼパム、メタクラゼパム（Ｍｅｔａｃｌａｚｅｐａｍ）、メキサゾラム、ノルダゼパム、オキサゼパム、オキサゾラム、ピナゼパム、プラゼパム及びトフィソパム；
【０３１３】
カルバメート、例えば、シクラルバメート、エミルカメート、ヒドロキシフェナメート、メプロバメート、フェンプロバメート及びチバメート；
【０３１４】
その他の、例えば、アルピデム（Ａｌｐｉｄｅｍ）、ベンゾクタミン、カプトジアミン、クロルメザノン、エチフォキシン（Ｅｔｉｆｏｘｉｎｅ）、フレジノキサン、フルオレソン、グルタミン酸、ヒドロキシジン、レソピトロン、メクロラル尿素（Ｍｅｃｌｏｒａｌｕｒｅａ）、メフェノキサロン、ミルタゼピン（Ｍｉｒｔａｚｅｐｉｎｅ）、オキサナミド、フェナグリコドール、スリクロン（Ｓｕｒｉｃｌｏｎｅ）及びザトセトロン（Ｚａｔｏｓｅｔｒｏｎ）；
【０３１５】
ベンゾジアゼピンアンタゴニスト、例えば、フルマゼニル；
【０３１６】
以下を含む気管支拡張剤：エフェドリン誘導体、例えば、アルブテロール（Ａｌｂｕｔｅｒｏｌ）、バンブテロール（Ｂａｍｂｕｔｅｒｏｌ）、ビトルテロール、カルブテロール（Ｃａｒｂｕｔｅｒｏｌ）、クレンブテロール、クロルプレナリン、ジオキセテドリン（Ｄｉｏｘｅｔｈｅｄｒｉｎｅ）、エフェドリン、エピネフリン、エプロジノール（Ｅｐｒｏｚｉｎｏｌ）、エタフェドリン、エチルノルエビネフリン、フェノテロール、ヘキソプレナリン、イソエタリン、イソプロテレノール、マブテロール、メタプロテレノール、Ｎ−メチルエフェドリン、ピルブテロール、プロカテロール、プロトキロール、レプロテロール（Ｒｅｐｒｏｔｅｒｏｌ）、リミテロール、サルメテロール（Ｓａｌｍｅｔｅｒｏｌ）、ソテレノール、テルブタリン及びツロブテロール；
【０３１７】
４級アンモニウム化合物、例えば、ベボニウムメチルサルフェート、臭化クルトロピウム（Ｃｌｕｔｒｏｐｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、臭化イプラトロピウム及び臭化オキシトロピウム；
【０３１８】
キサンチン誘導体、例えば、アセフィリン、アセフィリンピラジン、アンブフィリン、アミノフィリン、バミフィリン、テオフィリン酸コリン、ドキソフィリン、ダイフィリン、エンプロフィリン（Ｅｎｐｒｏｆｙｌｌｉｎｅ）、エタミフィリン（Ｅｔａｍｉｐｈｙｌｌｉｎ）、エトフィリン（Ｅｔｏｆｙｌｌｉｎｅ）、ガイチリン（Ｇｕａｉｔｈｙｌｉｎｅ）、プロキシフィリン、テオブロミン、１−テオブロミン酢酸及びテオフィリン；並びに
【０３１９】
その他の、例えば、フェンスピリド（Ｆｅｎｓｐｉｒｉｄｅ）、メジバジン（Ｍｅｄｉｂａｚｉｎｅ）、モンテクラスト（Ｍｏｎｔｅｋｕｌａｓｔ）、メトキシフェナミン、トレトキノール及びザフィルクラスト（Ｚａｆｉｒｋｕｌａｓｔ）；
【０３２０】
以下を含むカルシウムチャネル遮断薬：アリールアルキルアミン、例えば、ベプリジル、ジチアゼム（Ｄｉｔｉａｚｅｍ）、フェンジリン、ガロパニル（Ｇａｌｌｏｐａｎｉｌ）、プレニラミン、テロジリン及びベラパミル；
【０３２１】
ジヒドロピリジン誘導体、例えば、フェロジピン、イスラジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニルバジピン、ニモジピン（Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ）、ニソルジピン及びニトレンジピン；
【０３２２】
ピペラジン誘導体、例えば、シンナリジン、フルナリシン（Ｆｌｕｎａｒｉｓｉｎｅ）及びリドフラジン；並びに
その他の、例えば、ベンシクラン、エタフェノン及びペルヘキシリン；
【０３２３】
カルシウム調節剤、例えば、カルシフェジオール、カルシトニン、カルシトリオール、クロドロン酸、ジヒドロタキステロール、エルカトニン、エチドロン酸、イプリフラボン、パミドロン酸、副甲状腺ホルモン及び酢酸テリパラチド；
【０３２４】
強心剤、例えば、アセフィリン、アセチルジギチトキシン（Ａｃｅｔｙｌｄｉｇｉｔｉｔｏｘｉｎｓ）、２−アミノ−４−ピコリン、アムリノン、ベンフロジルヘミスクシネート（Ｂｅｎｆｕｒｏｄｉｌ Ｈｅｍｉｓｕｃｃｉｎａｔｅ）、ブクラスデシン（Ｂｕｃｌａｓｄｅｓｉｎｅ）、セレブロシド、カンフォタミド、コンバラトキシン、シマリン、デノパミン、デスラノシド、ジタリン（Ｄｉｔａｌｉｎ）、ジギタリス、ジギトキシン、ジゴキシン、ドブタミン、ドーパミン、ドペキサミン、エノキシモン、エリトロフレイン、フェナルコミン（Ｆｅｎａｌｃｏｍｉｎｅ）、ギタリン、ギトキシン、グリコシアミン、ヘプタミノール、ヒドラスチニン、イボパミン、ラノトジス（Ｌａｎｏｔｏｄｉｓｅｓ）、メタミバム（Ｍｅｔａｍｉｖａｍ）、ミルリノン、ネリイフォリン（Ｎｅｒｉｉｆｏｌｉｎ）、オレアンドリン、ウアバイン、オキシフェドリン、プレナルテロール（Ｐｒｅｎａｌｔｅｒｏｌ）、プロシラリジン、レジブフォゲニン、シラレン、シラレニン、ストロファンチン、スルマゾール（Ｓｕｌｍａｚｏｌｅ）、テオブロミン及びキサモテロール；
【０３２５】
キレート剤、例えば、デフェロズミン、ディチオカルブナトリウム（Ｄｉｔｉｏｃａｒｂ Ｓｏｄｉｕｍ）、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸二ナトリウム、エデト酸ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、ペニシラミン、ペンテテートトリナトリウムカルシウム、ペンテト酸、サクシマー（Ｓｕｃｃｉｍｅｒ）及びトリエンチン；
【０３２６】
コレシストキニンアンタゴニスト、例えば、プログルミド；
コレステロール胆石溶解剤、例えば、ケノジオール（Ｃｈｅｎｏｄｉｏｌ）、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、モノオクタノイン（Ｍｏｎｏｏｃｔａｎｏｉｎ）及びウルソジオール（Ｕｒｓｏｄｉｏｌ）；
【０３２７】
胆汁分泌薬、例えば、アリベンドール（Ａｌｉｂｅｎｄｏｌ）、アネトールトリチオン（Ａｎｅｔｈｏｌｅ Ｔｒｉｔｈｉｏｎ）、アジンタミド（Ａｚｉｎｔａｍｉｄｅ）、コール酸、シクロト酸、クラノブチン（Ｃｌａｎｏｂｕｔｉｎ）、シクロブチロール、シクロバロン（Ｃｙｃｌｏｖａｌｏｎｅ）、シナリン（Ｃｙｎａｒｉｎ(ｅ)）、デヒドロコール酸、デオキシコール酸、ジメクロト酸、α−エチルベンジルアルコール、エキシプロベン（Ｅｘｉｐｒｏｂｅｎ）、フェグプロール（Ｆｅｇｕｐｒｏｌ）、フェンシブチロール（Ｆｅｎｃｉｂｕｔｉｒｏｌ）、フェニペントール、フロランチロン、ヒメクロモン、メンブトン（Ｍｅｎｂｕｔｏｎｅ）、３−(ｏ−メトキシフェニル)−２−フェニルアクリル酸、メトカルコン、モキゾン（Ｍｏｑｕｉｚｏｎｅ）、オサルミド、ウシ胆汁抽出物、４，４'−オキシジ−２−ブタノール、ピプロゾリン、プロザピン、４−サリチロイルモルフォリン（４−Ｓａｌｉｃｙｌｏｙｌｍｏｒｐｈｏｌｉｎｅ）、シンカリド、タウロコール酸、チモナシク、トカンフィル、トレピブトン及びバニチオリド；
【０３２８】
コリン作動薬、例えば、アセクリジン、臭化アセチルコリン、塩化アセチルコリン、ナパジシル酸アクラトニウム、臭化ベンズピリニウム、塩化ベタネコール、カルバコール、塩化カルプロニウム、臭化デメカリウム、デクスパンテノール、ジイソプロピルパラオクソン（Ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌ Ｐａｒａｏｘｏｎ）、ヨウ化エコチオフェート、塩化エドロフォニウム、エセリジン、フルトレトニウム、イソフルロフェート、塩化メタコリン、ムスカリン、ネオスチグミン、ヨウ化オキサプロパニウム、フィゾスチグミン及び臭化ピリドスチグミン；
【０３２９】
コリンエステラーゼ阻害剤、例えば、塩化アンベノニウム、臭化ジスチグミン及びガランタミン；
【０３３０】
コリンエステラーゼ再賦活薬、例えば、オビドキシミンクロリド（Ｏｂｉｄｏｘｉｍｉｎｅ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）及び塩化プラリドキシム；
【０３３１】
中枢神経系興奮剤及び中枢神経系薬剤、例えば、アミネプチン、アンフェタミン、アンフェタミニル（Ａｍｐｈｅｔａｍｉｎｉｌ）、ベメグリド、ベンズフェタミン、ブルシン、カフェイン、クロルフェンテルミン、クロフェンシクラン（Ｃｌｏｆｅｎｃｉｃｌａｎ）、クロルテルミン（Ｃｌｏｒｔｅｒｍｉｎｅ）、コカ、デマニルホスフェート（Ｄｅｍａｎｙｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、デキソキサドロール、硫酸デキストロアンフェタミン、ジエチルプロピン、Ｎ−エチルアンフェタミン、エタミバン（Ｅｔｈａｍｉｖａｎ）、エチフェルミン（Ｅｔｉｆｅｌｍｉｎ）、エトリプタミン、フェンカンファミン、フェネチリン、フェノソロン（Ｆｅｎｏｓｏｌｏｎｅ）、フルロチル、ガランタミン、ヘキサシクロネートナトリウム（Ｈｅｘａｃｙｃｌｏｎａｔｅ Ｓｏｄｉｕｍ）、ホモカムフィン（Ｈｏｍｏｃａｍｆｉｎ）、マジンドール、メガキサミド（Ｍｅｇｅｘａｍｉｄｅ）、メタンフェタミン、メチルフェニデート、ニケタミド、ペモリン、ペンチレンテトラゾール、フェニジメトラジン（Ｐｈｅｎｉｄｉｍｅｔｒａｚｉｎｅ）、フェンメトラジン、フェンテルミン、ピクロトキシン、ピプラドロール、プロリンタン（Ｐｒｏｌｉｎｔａｎｅ）及びピロバレロン
【０３３２】
うっ血除去剤、例えば、アミデフリン、カファミノール（Ｃａｆａｍｉｎｏｌ）、シクロペンタミン、エフェドリン、エピネフリン、フェノキサゾリン（Ｆｅｎｏｘａｚｏｌｉｎｅ）、インダナゾリン（Ｉｎｄａｎａｚｏｌｉｎｅ）、メチゾリン（Ｍｅｔｉｚｏｌｉｎｅ）、ナファゾリン、塩酸ノルデフリン、オクトドリン（Ｏｃｔｏｄｒｉｎｅ）、オキシメタゾリン、塩酸フェニレフリン、塩酸フェニルプロパノールアミン、フェニルプロピルメチラミン、プロピルヘキセドリン、プソイドエフェドリン、テトラヒドロゾリン、チマゾリン及びキシロメタゾリン；
【０３３３】
以下を含む歯科用薬剤：ビスホスホネート（抗歯槽膿漏剤及び骨吸収剤）、例えば、アレンドロネート、クロドロネート（Ｃｌｏｄｒｏｎａｔｅ）、エチドロネート、パミドロネート（Ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ）及びチルドロネート（Ｔｉｌｕｄｒｏｎａｔｅ）；担体予防薬、例えば、アルギニン及びフッ化ナトリウム；
【０３３４】
知覚鈍麻剤、例えば、硝酸カリウム及びクエン酸カリウム、シュウ酸カリウム；
【０３３５】
脱色剤、例えば、ヒドロキニン、ヒドロキノン、及びモノベンゾン；
【０３３６】
以下を含む利尿剤：有機水銀化合物、例えば、クロルメロドリン、メラルリド、メルカンファミド（Ｍｅｒｃａｍｐｈａｍｉｄｅ）、メルカプトメリンナトリウム、メルクマリリックアシッド（Ｍｅｒｃｕｍａｌｌｙｌｉｃ Ａｃｉｄ）、マーキュマチリンナトリウム（Ｍｅｒｃｕｍａｔｉｌｉｎ Ｓｏｄｉｕｍ）、塩化水銀(Ｉ)及びマーサリル；
【０３３７】
プテリジン、例えば、フルテレン及びトリアムテレン；
プリン、例えば、アセフィリン、７−モルフォリノメチルテオフィリン、パマブロム、プロテオブロミン及びテオブロミン；
【０３３８】
ステロイド、例えば、カンレノン、オレアンドリン及びスピロノラクトン；
スルホンアミド誘導体、例えば、アセトゾルミド（Ａｃｅｔａｚｏｌｍｉｄｅ）、アンブシド（Ａｍｂｕｓｉｄｅ）、アゾセミド、ブメタニド、ブタゾールアミド、クロラミノフェナミド、クロフェナミド、クロパミド、クロレクソレン（Ｃｌｏｒｅｘｏｌｅｎｅ）、ジフェニルメタン−４，４'−ジスルホンアミド、ジスルファミド、エトキシゾラミド、フロセミド、インダパミド、メフルシド、メタゾルアミド、ピレタニド、キネサゾン、トラセミド、トリパミド及びキシパミド（Ｘｉｐａｍｉｄ）；
【０３３９】
ウラシル、例えば、アミノメトラジン及びアミソメトラジン；
その他の、例えば、アマノジン（Ａｍａｎｏｚｉｎｅ）、アミロライド、アルブチン、クロラザニル、エタクリン酸、エトゾリン、ヒドラカルバジン（Ｈｙｄｒａｃａｒｂａｚｉｎｅ）、イソソルビド、マンニトール、メトカルコン、ムゾリミン（Ｍｕｚｏｌｉｍｉｎｅ）、ペルヘキシリン（Ｐｅｒｈｅｘｉｌｉｎｅ）、チクリナフェン及び尿素；
【０３４０】
ドーパミンレセプターアンタゴニスト、例えば、ブロモクリプチン、ドペキサミン、フェノルドパム、イボパミン、リスリド、ナキサゴリド及びペルゴリド；
【０３４１】
外部寄生虫撲滅薬、例えば、アミトラズ、安息香酸ベンジル、カルバリル、クロタミトン、ＤＤＴ、ジキサントジェン（Ｄｉｘａｎｔｈｏｇｅｎ）、チオシアノ酢酸イソボルニル‐テクニカル（Ｉｓｏｂｏｒｎｙｌ Ｔｈｉｏｃｙａｎｏａｃｅｔａｔｅ−Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ）、石灰硫黄溶液、リンダン（Ｌｉｎｄａｎｅ）、マラチオン、オレイン酸水銀（ＩＩ）、メスルフェン及び硫黄系製剤；
【０３４２】
以下を含む酵素：消化酵素、例えば、α‐アミラーゼ（ブタ膵臓由来）、リパーゼ、パンクレリパーゼ、ペプシン及びレニン；
粘膜分解性酵素、例えば、リゾチーム；
ペニシリン不活性化酵素、例えば、ペニシリナーゼ；並びに
タンパク質分解酵素、例えば、コラゲナーゼ、キモパパイン、キモトリプシン、パパイン及びトリプシン；
酵素誘導物質（肝臓由来）、例えば、フルメシノール；
【０３４３】
以下を含むエストロゲン：非ステロイド系エストロゲン、例えば、ベンゼストロール、ブロパロエストロール（Ｂｒｏｐａｒｏｅｓｔｒｏｌ）、クロロトリアニセン、ジエネストロール、ジエチルスチルベストロール、ジエチルスチルベストロールジプロピオネート（Ｄｉｅｔｈｙｌｓｔｉｌｂｅｓｔｒｏｌ Ｄｉｐｒｏｐｒｉｏｎａｔｅ）、ジメストロール（Ｄｉｍｅｓｔｒｏｌ）、ホスフェストロール、ヘキセストロール、メタレネストリル及びメテストロール；並びに
【０３４４】
ステロイド系エストロゲン、例えば、コルポルモン（Ｃｏｌｐｏｒｍｏｎ）、抱合卵胞ホルモン、エキレニン、エキリン、エストラジオール、安息香エストラジオール、エストラジオール １７β−シピオネート、エストリオール、エストロン、エチニルエストラジオール、メストラノール、モキセステロール（Ｍｏｘｅｓｔｒｏｌ）、ミタトリエンジオール（Ｍｙｔａｔｒｉｅｎｅｄｉｏｌ）、キネストラジオール及びキネストロール；
【０３４５】
胃腸分泌阻害剤、例えば、エンテロガストロン及びオクトレオチド（Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）；
【０３４６】
グルココルチコイド、例えば、２１−アセトキシプレフネノロン（２１−Ａｃｅｔｏｘｙｐｒｅｆｎｅｎｏｌｏｎｅ）、アールクロメタゾン（Ａａｌｃｌｏｍｅｔａｓｏｎｅ）、アルゲストン、アミシノシド（Ａｍｉｃｉｎｏｎｉｄｅ）、ベクロメタゾン（Ｂｅｃｌｏｍｅｔｈａｓｏｎｅ）、ベタメタゾン、ブデソニド、クロロプレドニゾン、クロベタゾール、ブロベスタゾン（Ｂｌｏｖｅｔａｓｏｎｅ）、クロコルトロン（Ｃｌｏｃｏｒｔｏｌｏｎｅ）、クロプレドノール（Ｃｌｏｐｒｅｄｎｏｌ）、コルチコステロン、コルチゾン、コルチバロール、デフラザコルト、デソニド、デソキシメタゾン、デキサメタゾン、ジフロラゾン、ジフルコルトロン、ジフルプレドナート、エノキソロン、フルアザコルト（Ｆｌｕａｚａｃｏｒｔ）、フルクロロニド（Ｆｌｕｃｌｏｒｏｎｉｄｅ）、フルメタゾン、フルニソリド、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルオコルチンブチル（Ｆｌｕｏｃｏｒｔｉｎ Ｂｕｔｙｌ）、フルオコルトロン、フルオロメトロン、酢酸フルペロロン、酢酸フルプレドニデン、フルプレドニソロン、フルランドレノリド、フォルモコルタル（Ｆｏｒｍｏｃｏｒｔａｌ）、ハルシノニド、ハロメタゾン、酢酸ハロプレドン、ハイドロコルタメート、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン ２１−コハク酸ナトリウム、ヒドロコルチゾンテブテート、マジプレドン、メドリゾン、メプレドニゾン、メチオルプレドニゾロン（Ｍｅｔｈｙｏｌｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ）、フロ酸モメタゾン、パラメタゾン、プレドニカルベート（Ｐｒｅｄｎｉｃａｒｂａｔｅ）、プレドニゾロン、プレドニゾロン ２１−ジメチルアミノアセテート（Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ ２１−Ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｃｅｔａｔｅ）、プレドニゾンリン酸ナトリウム、コハク酸プレドニゾロンナトリウム、プレドニゾロンナトリウム ２１−ｍ−スルホベンゾエート（Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ Ｓｏｄｉｕｍ ２１−ｍ−Ｓｕｌｆｏｂｅｎｚｏａｔｅ）、プレドニゾロン ２１−ステアロイルグリコレート（Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ ２１−Ｓｔｅａｒｏｙｌｇｌｙｃｏｌａｔｅ）、プレドニゾロンテブテート、プレドニゾロン ２１−トリメチルアセテート（Ｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ ２１−Ｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ）、プレドニゾン、プレドニバル（Ｐｒｅｄｎｉｖａｌ）、プレドニリデン、プレドニリデン ２１−ジエチルアミノアセテート（Ｐｒｅｄｎｙｌｉｄｅｎｅ ２１−Ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏａｃｅｔａｔｅ）、チキソコルタール（Ｔｉｘｏｃｏｒｔａｌ）、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンベネトニド及びトリアムシノロンヘキサセトニド；
【０３４７】
生殖線刺激成分、例えば、ブセレリン（Ｂｕｓｅｒｅｌｉｎ）、クロミフェン、シクロフェニル、エピメストロール（Ｅｐｉｍｅｓｔｒｏｌ）、ＦＳＨ、ＨＣＧ及びＬＨ−ＲＨ；
【０３４８】
性腺刺激ホルモン、例えば、ＦＨ及びＰＭＳＧ；
【０３４９】
成長ホルモン阻害剤、例えば、オクトレオチド（Ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）及びソマトスタチン；
成長ホルモン放出因子、例えば、セモレリン；
成長ホルモン放出因子、例えば、セモレリン；
成長促進剤、例えば、ソマトトロピン；
【０３５０】
溶血剤、例えば、フェニルヒドラジン及び塩酸フェニルヒドラジン；
へパリンアンタゴニスト、例えば、臭化ヘキサジメトリン及びプロタミン；
【０３５１】
肝臓保護剤、例えば、Ｓ‐アデノシルメチオニン、ベタイン、カテキン、シトロン（Ｃｉｔｏｌｏｎｅ）、マロチラート、オラザミド（Ｏｒａｚａｍｉｄｅ）、ホスホリルコリン、プロトポルフィリンＩＸ、シリマリングループ、チオチックアシッド（Ｔｈｉｏｔｉｃ Ａｃｉｄ）及びチオプロニン；
【０３５２】
免疫調節剤、例えば、アミプリローズ（Ａｍｉｐｒｉｌｏｓｅ）、ブシラミン、ジチオカルブナトリウム（Ｄｉｔｉｏｃａｒｂ Ｓｏｄｉｕｍ）、イノシンプラノベックス（Ｉｎｏｓｉｎｅ Ｐｒａｎｏｂｅｘ）、インターフェロン−ｙ、インターロイキン−２、レンチナン、ムロクタシン（Ｍｕｒｏｃｔａｓｉｎ）、プラトニン、プロコダゾール（Ｐｒｏｃｏｄａｚｏｌｅ）、テトラミソール、チモモジュリン（Ｔｈｙｍｏｍｏｄｕｌｉｎ）、チモペンチン及びウベニメクス；
免疫抑制剤、例えば、アザチオプリン、シクロスポリン及びミゾリビン；
【０３５３】
イオン交換樹脂、例えば、カルバクリル樹脂、コレスチラミン樹脂、コレスチポール、ポリデキシド（Ｐｏｌｉｄｅｘｉｄｅ）、レソデック（Ｒｅｓｏｄｅｃ）及びポリスチレンスルホン酸ナトリウム；
【０３５４】
乳汁分泌促進ホルモン、例えば、プロラクチン； 
【０３５５】
ＬＨ−ＲＨアゴニスト、例えば、ブセレリン（Ｂｕｓｅｒｅｌｉｎ）、ゴセレリン（Ｇｏｓｅｒｅｌｉｎ）、ロイプロリド（Ｌｅｕｐｒｏｌｉｄｅ）、ナファレリン（Ｎａｆａｒｅｌｉｎ）、及びトリプトレリン（Ｔｒｉｐｔｏｒｅｌｉｎ）；
【０３５６】
脂向性薬剤、例えば、Ｎ−アセチルメチオニン、塩化コリン、コリンデヒドロコレート（Ｃｈｏｌｉｎｅ Ｄｅｈｙｄｒｏｃｈｏｌａｔｅ）、二水素性クエン酸コリン、イノシトール、レシチン及びメチオニン；
【０３５７】
エリテマトーデス抑制剤、例えば、トリグリコラメートナトリウムビスマス（Ｂｉｓｍｕｔｈ Ｓｏｄｉｕｍ Ｔｒｉｇｌｙｃｏｌｌａｍａｔｅ）、次サリチル酸ビスマス、クロロキン及びヒドロキシクロロキン；
【０３５８】
ミネラルコルチコイド、例えば、アルドステロン、デオキシコルチコステロン、酢酸デオキシコルチコステロン及びフルドロコルチゾン；
【０３５９】
縮瞳薬、例えば、カルバコール、フィゾスチグミン、ピロカルピン及びピロカルプス；
【０３６０】
モノアミンオキシダーゼ阻害剤、例えば、デプレニール、イプロクロジド、イプロニアジド、イソカルボキサジド、モクロベミド（Ｍｏｃｌｏｂｅｍｉｄｅ）、オクトモキシン（Ｏｃｔｏｍｏｘｉｎ）、パルギリン、フェネルジン（Ｐｈｅｎｅｌｚｉｎｅ）、フェノキシプロパジン、ピバリルベンズヒドラジン、プロジピン（Ｐｒｏｄｉｐｉｎｅ）、トロキサトン（Ｔｏｌｏｘａｔｏｎｅ）及びトラニルシプロミン；
【０３６１】
粘膜分解剤、例えば、アセチルシステイン、ブロムヘキシン、カルボシステイン、ドミオドール、レトステイン（Ｌｅｔｏｓｔｅｉｎｅ）、リゾチーム、塩酸メシステイン（Ｍｅｃｙｓｔｅｉｎｅ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、メスナ、ソブレノール、ステプロニン、チオプロニン及びチロキサポール；
【０３６２】
筋弛緩剤（骨格筋）、例えば、アフロクァロン、アルクロニウム、ベシル酸アトラクリウム、バクロフェン、ベンゾクタミン、塩化ベンゾキノニウム、Ｃ−カレバシン（Ｃ−Ｃａｌｅｂａｓｓｉｎｅ）、カリソプロドール、クロルメザノン、カルバミン酸クロルフェネシン、クロルプロエタジン、クロゾキサゾン（Ｃｈｌｏｚｏｘａｚｏｎｅ）、クラーレ、シクラルバメート、シクロベンザプリン（Ｃｙｃｌｏｂｅｎｚａｐｒｉｎｅ）、ダントロレン、臭化デカメトニウム、ジアゼパム、エペリゾン、臭化ファザジニウム、フルメトラミド、ガラミントリエチオダイド、臭化ヘキサカルバコリン、臭化ヘキサフルオレニウム、イドロシラミド（Ｉｄｒｏｃｉｌａｍｉｄｅ）、ラウエキシウムメチルスルフェート（Ｌａｕｅｘｉｕｍ Ｍｅｔｈｙｌ Ｓｕｌｆａｔｅ）、レプトダクチリン、メマンチン（Ｍｅｍａｎｔｉｎｅ）、メフェネシン、メフェノキサロン、メタキサロン、メトカルバモール、ヨウ化メトクリン、ニメタゼパム、オーフェナドリン、臭化パンクロニウム、フェンプロバメート、フェニラミドール、ピペクリウムブロミド（Ｐｉｐｅｃｕｒｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ ）、プロモキソラン（Ｐｒｏｍｏｘｏｌａｎｅ）、硫酸キニーネ、スチラメート、スクシニルコリンブロミド（Ｓｕｃｃｉｎｙｌｃｈｏｌｉｎｅ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、スクシニルコリンクロリド（Ｓｕｃｃｉｎｙｌｃｈｏｌｉｎｅ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、スクシニルコリンイオジン（Ｓｕｃｃｉｎｙｌｃｈｏｌｉｎｅ Ｉｏｄｉｎｅ）、スクセトニウムブロミド（Ｓｕｘｅｔｈｏｎｉｕｍ Ｂｒｏｍｉｄｅ）、テトラゼパム、チオコルチコシド（Ｔｈｉｏｃｏｌｃｈｉｃｏｓｉｄｅ）、チザニジン（Ｔｉｚａｎｉｄｉｎｅ）、トルペリゾン、塩化ツボクラリン、臭化ベクロニウム及びゾボラミン（Ｚｏｘｏｌａｍｉｎｅ）；
【０３６３】
麻薬拮抗薬、例えば、アミフェナゾール、シクラゾシン（Ｃｙｃｌａｚｏｃｉｎｅ）、レバロルファン、ナダイド、ナルムフェン（Ｎａｌｍｆｅｎｅ）、ナロルフィン、ナロルフィン ジニコチナート、ナロキソン及びナルトレキソン（Ｎａｌｔｒｅｘｏｎｅ）；
【０３６４】
神経保護剤、例えば、ジゾシルピン；
【０３６５】
向知性薬、例えば、アセグルタミド（Ａｃｅｇｌｕｔａｍｉｄｅ）、アセチルカルニチン、アニラセタム（Ａｎｉｒａｃｅｔａｍ）、ビフェマトラン（Ｂｉｆｅｍａｔｌａｎｅ）、エキシフォン（Ｅｘｉｆｏｎｅ）、フィペキシド（Ｆｉｐｅｘｉｄｅ）、イデベノン（Ｉｄｅｂｅｎｏｎｅ）、塩酸インデロキサジン、ニゾフェノン（Ｎｉｚｏｆｅｎｏｎｅ）、オキシラセタム（Ｏｘｉｒａｃｅｔａｍ）、ピラセタム、プロペントフィリン、ピリチノール及びタクリン；
【０３６６】
眼病薬、例えば、１５−ケトプロスタグランジン；
【０３６７】
卵巣ホルモン、例えば、リラキシン；
分娩促進薬、例えば、カルボプロスト、カルグトシン、デアミノオキシトシン、エルゴノビン、ゲメプロスト、メチルエルゴノヴィン、オキシトシン、下垂体後葉製剤、プロスタグランジン Ｅ２、プロスタグランジン Ｆ２ａ及びスパルテイン；
【０３６８】
ペプシン阻害剤、例えば、ナトリウムアミロスルフェート（Ｓｏｄｉｕｍ Ａｍｙｌｏｓｕｌｆａｔｅ）；
【０３６９】
ぜん動促進剤、例えば、シサプリド；
【０３７０】
プロゲストーゲン、例えば、アリルエストレノール、アナゲストン（Ａｎａｇｅｓｔｏｎｅ）、酢酸クロマジノン、酢酸デルマジノン、デメゲストン（Ｄｅｍｅｇｅｓｔｏｎｅ）、デソゲストレル（Ｄｅｓｏｇｅｓｔｒｅｌ）、ジメチステロン、ジドロゲステロン、エチステロン、エチノジオール、酢酸フルロゲストン、ゲストデン（Ｇｅｓｔｏｄｅｎｅ）、カプロン酸ゲストノロン、ハロプロゲステロン、１７−ヒドロキシ−１６−メチレン−プロゲステロン、１７α−ヒドロキシプロゲステロン、１７α−ヒドロキシゲステロンカプロエート、リネストレノール、メドロゲストン、メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、メレンゲストロール（Ｍｅｌｅｎｇｅｓｔｒｏｌ）、ノルエチンドロン、ノルエチノドレル、ノルゲステロン、ノルゲスティメート（Ｎｏｒｇｅｓｔｉｍａｔｅ）、ノルゲストレル、ノルゲストリエノン（Ｎｏｒｇｅｓｔｒｉｅｎｏｎｅ）、ノルビニステロン（Ｎｏｒｖｉｎｉｓｔｅｒｏｎｅ）、ペンタゲストロン（Ｐｅｎｔａｇｅｓｔｒｏｎｅ）、プロゲステロン、プロメゲストン（Ｐｒｏｍｅｇｅｓｔｏｎｅ）、キンゲストロン及びトレンゲストン（Ｔｒｅｎｇｅｓｔｏｎｅ）；
【０３７１】
プロラクチン阻害剤、例えば、メテルゴリン；
【０３７２】
プロスタグランジン及びプロスタグランジン類似体、例えば、アルバプロスチル（Ａｒｂａｐｒｏｓｔｉｌ）、カルボプロスト、エンプロスチル、ベメプロスト、リマプロスト、ミソプロストール、オルノプロスチル、プロスタサイクリン、プロスタグランジンＥ１、プロスタグランジン Ｅ２、プロスタグランジン Ｆ２ａ、リオプロスチル（Ｒｉｏｐｒｏｓｔｉｌ）、ロサプロストール（Ｒｏｓａｐｒｏｓｔｏｌ）、スルプロストン（Ｓｕｌｐｒｏｓｔｏｎｅ）及びトリモプロスチル（Ｔｒｉｍｏｐｒｏｓｔｉｌ）；
【０３７３】
プロテアーゼ阻害剤、例えば、アプロチニン、カモスタット、ガベキセート及びナファモスタット；
【０３７４】
呼吸促進薬、例えば、アルミトリン（Ａｌｍｉｔｒｉｎｅ）、ベメグリド、二酸化炭素、クロプロパミド、クロテタミド、ジメフリン、ジモルホラミン、ドキサプラム、エタミバン（ｔｈａｍｉｖａｎ）、ホミノベン、ロベリン、メピキサノックス（Ｍｅｐｉｘａｎｏｘ）、メタミバム（Ｍｅｔａｍｉｖａｍ）、ニケタミド、ピクロトキシン、ピメクロン（Ｐｉｍｅｃｌｏｎｅ）、ピリドフィリン、コハク酸ナトリウム及びタクリン；
【０３７５】
硬化薬、例えば、エタノールアミン、エチルアミン、２−ヘキシルデカン酸、ピリドカノール、二硫酸キニーネ、キニーネ尿素塩酸塩（Ｑｕｉｎｉｎｅ Ｕｒｅａ Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、リシノール酸ナトリウム、テトラデシル硫酸ナトリウム及びトリベノシド；
【０３７６】
以下を含む、鎮静剤及び催眠剤：非環式ウレイド、例えば、アセカルブロマル（Ａｃｅｃａｒｂｒｏｍａｌ）、アプロナリド、ボミソバルム（Ｂｏｍｉｓｏｖａｌｕｍ）、カプリド、カルブロマール及びエクチルウレア；
【０３７７】
アルコール、例えば、クロルヘキサドール、エトクロルビノール、メパルフィノール、４−メチル−５−チアゾールエタノール、ｔｅｒｔ−ペンチルアルコール及び２，２，２−トリクロロエタノール；
【０３７８】
アミド、例えば、ブトクタミド、ジエチルブロモアセトアミド、イブロタミド、イソバレリルジエチルアミド（Ｉｓｏｖａｌｅｒｙｌ Ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｄｅ）、ニアプラジン（Ｎｉａｐｒａｚｉｎｅ）、トリアセトアミド、トリメトジン、ゾルピデム（Ｚｏｌｐｉｄｅｍ）及びゾピクロン；
【０３７９】
バルビツル酸誘導体、例えば、アロバルビタール、アモバルビタール、アプロバルビタール、バルビタール、ブララバルビタール（Ｂｒａｌｌａｂａｒｂｉｔａｌ）、ブタバルビタールナトリウム、ブタルビタール、ブタリロナール、ブテタール、カルブバルブ（Ｃａｒｂｕｂａｒｂ）、シクロバルビタール、シクロペントバルビタール、エナリルプロプマール（Ｅｎａｌｌｙｌｐｒｏｐｙｍａｌ）、５−エチル−５−(１−ピペリジル)バルビツール酸、５−フルフリル−５−イソプロピルバルビツール酸、ヘプタバルビタール、ヘキセタールナトリウム、ヘキソバルビタール、メフォバルビタール、メチツラール、ナルコバルビタール、ネアルバルビタール、ペントバルビタールナトリウム、フェナリマール（Ｐｈｅｎａｌｌｙｍａｌ）、フェノバルビタール、フェノバルビタールナトリウム、フェニルメチルバルビツール酸、プロバルビタール、プロパリロナール（Ｐｒｏｐａｌｌｙｌｏｎａｌ）、プロキシバルバール（Ｐｒｏｘｉｂａｒｂａｌ）、レポサール（Ｒｅｐｏｓａｌ）、セコバルビタールナトリウム、タルブタール、テトラバルビタール、ビンバルビタール ナトリウム及びビニルビタール；
【０３８０】
ベンゾジアゼピン誘導体、例えば、ブロチゾラム、ドキセファゼパム（Ｄｏｘｅｆａｚｅｐａｍ）、エスタゾラム、フルニトラゼパム、フルラゼパム、ハロキサゾラム、ロプラゾラム、ロルメタゼパム、ニトラゼパム、クアゼパム、テマゼパム及びトリアゾラム；
【０３８１】
臭化物、例えば、臭化アンモニウム、臭化カルシウム、カルシウムブロモラクトビオネート（Ｃａｌｃｉｕｍ  Ｂｒｏｍｏｌａｃｔｏｂｉｏｎａｔｅ）、臭化リチウム、臭化マグネシウム、臭化カリウム及び臭化ナトリウム
【０３８２】
カルバメート、例えば、カルバミン酸ｔｅｒｔ−アミル(Ａｍｙｌ Ｃａｒｂａｍａｔｅ−Ｔｅｒｔｉａｒｙ)、エチナメート、ヘキサプロピメート、メパルフィノール カルバミン酸塩、ノボナール（Ｎｏｖｏｎａｌ）及びトリクロロウレタン；
【０３８３】
クロラール誘導体、例えば、カルボクロラール、クロラールベタイン、クロラールホルムアミド、抱水クロラール、クロラールアンチピリン（Ｃｈｌｏｒａｌａｎｔｉｐｙｒｉｎｅ）、ジクロラールフェナゾン、ペンタエリスリトールクロラール（Ｐｅｎｔａｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ Ｃｈｌｏｒａｌ）及びトリクロホス；
【０３８４】
ピペリジンジオン、例えば、グルテヒミド（Ｇｌｕｔｅｈｉｍｉｄｅ）、メチプリロン、ピぺリジオン（Ｐｉｐｅｒｉｄｉｏｎｅ）、ピリチルジオン（Ｐｙｒｉｔｈｙｌｄｉｏｎｅ）、タグルチミド（Ｔａｇｌｕｔｉｍｉｄｅ）及びサリドマイド；
【０３８５】
キナゾロン誘導体、例えば、エタカロン（Ｅｔａｑｕａｌｏｎｅ）、メクロカロン及びメタカロン（Ｍｅｔｈａｑｕａｌｏｎｅ）；並びに
その他の、例えば、アセタール、アセトフェノン、アルドール、吉草酸アンモニウム、アンフェニドン（Ａｍｐｈｅｎｉｄｏｎｅ）、ｄ−ボルニルα−ブロイソバレレート、ｄ−ボルニルイソバレレート、ブロモホルム、２−エチルブタン酸カルシウム、カルフィネート（Ｃａｒｆｉｎａｔｅ）、α−クロロロース（α−Ｃｈｌｏｒｏｌｏｓｅ）、クロメチアゾール、シプリペジウム（Ｃｙｐｒｉｐｅｄｉｕｍ）、ドキシルアミン、エトドロキシジン（Ｅｔｏｄｒｏｘｉｚｉｎｅ）、エトミデート、フェナジアゾール（Ｆｅｎａｄｉａｚｏｌｅ）、ホモフェナジン（Ｈｏｍｏｆｅｎａｚｉｎｅ）、臭化水素酸、メクロキサミン（Ｍｅｃｌｏｘａｍｉｎｅ）、吉草酸メチル、アヘン、パラアルデヒド、ペルラピン、プロピオマジン、リルマザホン、ナトリウムオキシベート（Ｓｏｄｉｕｍ Ｏｘｙｂａｔｅ）、スルホンエチルメタン及びスルホメタン；
【０３８６】
血栓溶解剤、例えば、ＡＰＳＡＣ、プラスミン、プロウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、組織プラスミノゲン活性化因子及びウロキナーゼ；
【０３８７】
甲状腺刺激ホルモン、例えば、ＴＲＨ及びＴＳＨ；
【０３８８】
尿酸排泄薬、例えば、ベンズブロマロン、エテベネシド（Ｅｔｈｅｂｅｎｅｃｉｄ）、オロト酸、オキシシンコフェン（Ｏｘｙｃｉｎｃｈｏｐｈｅｎ）、プロベネシド（Ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄ）、スルフィンピラゾン、チクリナフェン及びゾキサゾラミン；
【０３８９】
血管拡張剤（大脳）、例えば、ベンシクラン、シンナリジン、シチコリン、シクランデラート、シクロニケート（Ｃｉｃｌｏｎｉｃａｔｅ）、ジクロロ酢酸ジイソプロピルアミン、エブルナモリン（Ｅｂｕｒｎａｍｏｒｉｎｅ）、フェノキセジル（Ｆｅｎｏｘｅｄｉｌ）、フルナリジン、イブジラスト、イフェンプロジル、ナフロニル（Ｎａｆｒｏｎｙｌ）、ニカメタート、ニセルゴリン（Ｎｉｃｅｒｇｏｌｉｎｅ）、ニモジピン（Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ）、パパベリン、ペンチフィリン、チノフェドリン（Ｔｉｎｏｆｅｄｒｉｎｅ）、ビンカミン（Ｖｉｎｃａｍｉｎｅ）、ビンポセチン及びビキジル（Ｖｉｑｕｉｄｉｌ）；
【０３９０】
血管拡張剤（冠状動脈）、例えば、アモトリフェン（Ａｍｏｔｒｉｐｈｅｎｅ）、ベンダゾール、ヘミコハク酸ベンフロジル、ベンズヨーダロン、クロアシジン、クロモナール（Ｃｈｒｏｍｏｎａｒ）、クロベンフロール（Ｃｌｏｂｅｎｆｕｒｏｌ）、クロニトレート（Ｃｌｏｎｉｔｒａｔｅ）、ジラゼブ、ジピリダモール、ドロプレニルアミン（Ｄｒｏｐｒｅｎｉｌａｍｉｎｅ）、エフロキサート、エリトリトール、四硝酸エリトリチル、エタフェノン、フェンジリン（Ｆｅｎｄｉｌｉｎｅ）、フロレジル（Ｆｌｏｒｅｄｉｌ）、ガングレフェン（Ｇａｎｇｌｅｆｅｎｅ）、ビス(β−ジエチルアミノエチルエーテル) ヘキセストロール（Ｈｅｘｅｓｔｒｏｌ Ｂｉｓ(β−ｄｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｅｔｈｙｌ ｅｔｈｅｒ)）、ヘキソベンジン（Ｈｅｘｏｂｅｎｄｉｎｅ）、トシル酸イトラミン、ケリン（Ｋｈｅｌｌｉｎ）、リドフラジン、六硫酸マンニトール、メジバジン、ニコランジル、ニトログリセリン、ペンタエリトリトール四硝酸塩、ペントリニトロール（Ｐｅｎｔｒｉｎｉｔｒｏｌ）、ペルヘキシリン、ピメフィリン（Ｐｉｍｅｆｙｌｌｉｎｅ）、プレニラミン、硝酸プロパチル、ピリドフィリン、トラピジル、トリクロミル（Ｔｒｉｃｒｏｍｙｌ）、トリメタジジン、トロルニトレートホスフェート（Ｔｒｏｌｎｉｔｒａｔｅ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）及びビスナジン（Ｖｉｓｎａｄｉｎｅ）；
【０３９１】
血管拡張剤（末梢）、例えば、ニコチン酸アルミニウム、バメタン、ベンシクラン、ベタヒスチン、ブラジキニン、ブロビンカミン、ブフォニオード（Ｂｕｆｏｎｉｏｄｅ）、ブフロメジル（Ｂｕｆｌｏｍｅｄｉｌ）、ブタルアミン（Ｂｕｔａｌａｍｉｎｅ）、セチエジル（Ｃｅｔｉｅｄｉｌ）、シクロニケート（Ｃｉｃｌｏｎｉｃａｔｅ）、シネパジド、シンナリジン、シクランデラート、ジクロロ酢酸ジイソプロピルアミン、エレドイシン、 フェノキシジル（Ｆｅｎｏｘｉｄｉｌ）、フルナリシン（Ｆｌｕｎａｒｉｓｉｎｅ）、ヘロニケート（Ｈｅｒｏｎｉｃａｔｅ）、イフェンプロジル、ニコチン酸イノシトール、イソキシスプリン、カリジン、カリクレイン、モキシシリート、ナフロニル（Ｎａｆｒｏｎｙｌ）、ニカメタート、ニセルゴリン（Ｎｉｃｅｒｇｏｌｉｎｅ）、ニコフラノース、ニコチニルアルコール、ニリドリン、ペンチフィリン、ペントキシフィリン、ピリベジル（Ｐｉｒｉｂｅｄｉｌ）、プロスタグランジンＥ１、スロクチジル（Ｓｕｌｏｃｔｉｄｉｌ）及びニコチン酸キサンチノール；
【０３９２】
血管保護剤、例えば、ベンザロン、ビオフラボノイド、クロモカルブ（Ｃｈｒｏｍｏｃａｒｂ）、クロベオシド（Ｃｌｏｂｅｏｓｉｄｅ）、ジオスミン（Ｄｉｏｓｍｉｎ）、ドベシル酸カルシウム、エスシン（Ｅｓｃｉｎ）、ロレスクトール（Ｒｏｌｅｓｃｕｔｏｌ）、ロイコシアニジン（Ｌｅｕｃｏｃｙａｎｉｄｉｎ）、メテスクフィリン（Ｍｅｔｅｓｃｕｆｙｌｌｉｎｅ）、ケルセチン、ルチン及びトロキセルチン；
【０３９３】
ビタミン、ビタミン供給源、及びビタミン抽出物、例えば、ビタミンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ及びＫ、並びにこれらの誘導体、カルシフェロール、甘草並びにメコバラミン；
【０３９４】
傷薬、例えば、アセチルシステイン、アラントイン、アシアチコシド（Ａｓｉａｔｉｃｏｓｉｄｅ）、カデキソマーイオジン（Ｃａｄｅｘｏｍｅｒ Ｉｏｄｉｎｅ）、キチン、デクストラノマー（Ｄｅｘｔｒａｎｏｍｅｒ）及びオクサセプロール（Ｏｘａｃｅｐｒｏｌ）；
【０３９５】
抗凝固剤、例えば、へパリン；
【０３９６】
種々の、例えば、エリスロポエチン（造血剤）、フィルグラスチム、フィナステリド（良性前立腺肥大症）及びインターフェロンβ１−α（多発性硬化症）。
【０３９７】
特定の態様では、送達される薬剤は、１又は２種類以上のタンパク質、ホルモン、ビタミン又はミネラルである。特定の態様では、送達される薬剤は、インシュリン、ＩＧＦ−１、テストステロン、ビンポセチン、ヘキサレリン、ＧＨＲＰ−６又はカルシウムから選択される。特定の態様では、組成物には、２又は３種類以上の薬剤が含まれる。
【０３９８】
上記の活性薬剤のリストは、Ｍｅｒｃｋ Ｉｎｄｅｘ， １２ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｍｅｒｃｋ & Ｃｏ． Ｒａｈｗａｙ， Ｎ．Ｊ． (１９９６)のページＴＨＥＲ−１ないしＴＨＥＲ−２８に示される薬物のカテゴリーと種類に基づくものである。この文献は、参照によりその全部が本明細書に組み込まれる。
【０３９９】
Ｄ．  組成物の使用
マイクロスフェアの治療用途及び診断用途には、薬物送達、ワクチン接種、遺伝子治療、及びｉｎ ｖｉｖｏでの組織又は腫瘍のイメージングが含まれる。投与経路には、経口投与又は非経口投与；粘膜投与；点眼投与；静脈内投与、皮下投与、動脈内投与又は筋肉内投与；吸入投与；及び局所投与が含まれる。
【０４００】
疾患及び障害には、以下に限定されないが、神経障害、呼吸障害、免疫系障害、筋肉障害、生殖障害、胃腸障害、肺障害、消化障害、代謝障害、心臓血管障害、腎臓障害、増殖性障害、癌性疾患及び炎症が含まれていてもよい。
【０４０１】
本明細書中に提供されるマイクロ粒子を用いることで、感染性疾患、例えば、アルボウィルス感染、ボツリヌス中毒、ブルセラ症、カンジダ症、キャンピロバクター症、水痘、クラミジア、コレラ、コロノウィルス感染、ブドウ球菌感染、コクサッキーウィルス感染、クロイツフェルト・ヤコブ病、クリプトスポリジウム症、シクロスポラ感染、サイトメガロウイルス感染、Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒウイルス感染、デング熱、ジフテリア、耳感染、脳炎、インフルエンザウイルス感染、パラインフルエンザウィルス感染、ジアルジア鞭毛虫症、淋病、インフルエンザ菌感染、ハンタウィルス感染、ウイルス性肝炎、単純疱疹ウイルス感染、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、ヘリコバクター感染、ヒトパピローマウィルス(ＨＰＶ)感染、伝染性単核球症、レジオネラ症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病、リンパ球性脈絡髄膜炎、マラリア、麻疹、マルブルグ出血熱、脳膜炎、サル痘、ムンプス、ミコバクテリア感染、マイコプラズマ感染、ノーウォークウイルス感染、百日咳、蟯虫感染、肺炎球菌の 疾病、肺炎連鎖球菌感染、肺炎マイコプラズマ感染、カタラリス菌感染、緑膿菌感染症、ロタウイルス感染、オウム病、狂犬病、呼吸合包体ウイルス感染 (ＲＳＶ)、白癬、ロッキー山発疹熱風疹、サルモネラ症、ＳＡＲＳ、疥癬、性感染病、細菌性赤痢、帯状ヘルペス、スポロトリクム症 、連鎖菌感染、梅毒、破傷風、旋毛虫症、結核、野兎病、腸チフス、ウイルス髄膜炎、細菌性髄膜炎、西ナイルウイルス感染、黄熱病、エルジニア症、人獣共通伝染病、 並びに、他のあらゆる感染症、呼吸器疾患、肺疾患、皮膚疾患、胃腸疾患及び尿路疾患を治療可能である。
【０４０２】
その他の疾患及び状態には、関節炎、喘息、アレルギー状態、アルツハイマー病、癌、循環器疾患、多発性硬化症 (ＭＳ)、パーキンソン病、嚢胞性繊維症 (ＣＦ)、糖尿病、非ウイルス性肝炎、血友病、出血性疾患、血液疾患、遺伝子障害、ホルモン性障害、腎臓病、肝臓病、神経障害、代謝病、皮膚状態、甲状腺疾患、骨粗鬆症、肥満、ストローク、貧血、炎症性疾患及び自己免疫疾患が含まれる。
【０４０３】
Ｅ．  組み合わせ、キット、製品
本明細書に提示される組成物を含み、マイクロ粒子、又はタンパク質若しくは他の高分子、対イオン。溶媒、バッファー若しくは塩等のマイクロ粒子形成用の成分を含み、随意に投与の手引きを含んでいてもよい、組み合わせ及びキットが提供される。組み合わせには、例えば、本明細書に提供される組成物及び試薬、又はヒトを含む宿主対象への投与に望ましい濃度まで該組成物を希釈するための溶液が含まれる。組み合わせには、本明細書に提供される組成物と、本明細書に提供される薬物を含む、更なる栄養剤及び／又は治療剤とが含まれていてもよい。
【０４０４】
また、本明細書中には、上記の組合せと、随意に、タンパク質及び随意に追加的に送達される薬剤に応じて、経口、皮下、経皮、静脈内、筋肉内、点眼又は他の経路により投与するための手引きとを含むキットが提供される。
【０４０５】
本明細書中に提供される組成物は、包装材、本明細書に提供される組成物、及び、例えば、ＤＡＳ１８１等の、組成物が、経口、経肺又は他の送達用に製剤されていることを示すラベルを含む製品としてパッケージングされてもよい。
【０４０６】
本明細書中に提供される製品には、包装材が含まれていてもよい。医薬品の包装に使用するための包装材は、当業者によく知られている。米国特許第５，３２３，９０７号、同第５，０５２，５５８号及び同第５，０３３，２５２号参照。医薬品用包装材の例には、以下に限定されないが、ブリスター包装、ビン、管、吸入器、ポンプ、袋、バイアル、容器、ビン、そして、選択される製剤並びに意図する投与及び治療の方法に適したあらゆる包装材が含まれる。
【０４０７】
以下の実施例は、単に例示を目的とするために含まれており、本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【０４０８】
実施例１
シアリダーゼ融合タンパク質ＤＡＳ１８１のマイクロスフェアの調製
Ａ．  ＤＡＳ１８１の精製
ＤＡＳ１８１は、ヒトインフィレギュリン由来のへパリン（グルコサミノグリカン、又はＧＡＧ）結合ドメインが、そのＮ末端を介して、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓ由来の触媒ドメインのＣ末端に融合した配列を含む融合タンパク質である（配列番号１７）。Ｍａｌａｋｈｏｖ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．， １４７０−１４７９， ２００６（この文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるように、ＤＡＳ１８１を精製した。簡潔に述べると、ＤＡＳ１８１をコードするＤＮＡ断片を、ＩＰＴＧ （イソプロピル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド）誘導性プロモーター制御下のｐＴｒｃ９９ａ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ；配列番号１６)プラスミドベクターにクローニングした。得られたコンストラクトは、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ（Ｅ． ｃｏｌｉ）のＢＬ２１株内で発現させた。
【０４０９】
発現コンストラクトを含むＥ． ｃｏｌｉ細胞を、５０ ｍＭのリン酸バッファー（ｐＨ ８．０）；０．３ ＭのＮａＣｌ及び１０％グリセロール中で超音波処理により溶解した。透明になった溶解物を、ＳＰ−セファローズカラムに通した。タンパク質は、０．８ ＭのＮａＣｌを含む溶解バッファーでカラムから溶離させた。ＳＰ−セファローズから溶離した分画を、１．９ Ｍの硫酸アンモニウム（(ＮＨ４)２ＳＯ４）に調整し、遠心によって透明化させてから、ブチル‐セファロースカラム上にローディングした。カラムを、２当量の１．３ Ｍ (ＮＨ４)２ＳＯ４で洗浄し、０．６５ Ｍ の(ＮＨ４)２ＳＯ４でＤＡＳ１８１融合タンパク質を溶離した。
【０４１０】
最終工程として、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で平衡化したセファクリルＳ−２００上で、サイズ排除クロマトグラフィーを行った。タンパク質純度は、硫酸ドデシルナトリウム‐ポリアクリルアミドゲル電気泳動、逆相高圧液体クロマトグラフィー、及びＥ． ｃｏｌｉ細胞由来タンパク質に対して作製した抗体を用いた酵素結合イムノソルベントアッセイで評価したところ、９８％を超える値が測定された。精製されたＤＡＳ１８１（分子量４４，８００ Ｄａ）は、２ ｍＭの酢酸ナトリウムバッファー（ｐＨ ５．０）に対して透析した。
【０４１１】
Ｂ．  ＤＡＳ１８１の活性
ＤＡＳ１８１のシアリダーゼ活性は、蛍光原基質である４−メチルウンベリフェリル−Ｎ−アセチル−α−Ｄ−ノイラミン酸（４−ＭＵ−ＮＡＮＡ；Ｓｉｇｍａ）を用いて測定した。シアリダーゼの１ユニットは、０．２ ｍｌの体積中に２０ ｎｍｏｌの４−ＭＵ−ＮＡＮＡを含む反応系において、３７℃（５０ ｍＭ ＣＨ３ＣＯＯＨ−ＮａＯＨバッファー、ｐＨ ５．５）で１０分間に４−ＭＵ−ＮＡＮＡから１０ ｎｍｏｌのＭＵを遊離する酵素量として定義されている（Ｐｏｔｉｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ａｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．， ９４：２８７−２９６， １９７９）。ＤＡＳ１８１の比活性は、タンパク質１ｍｇ当たり１，３００ Ｕ（１ユニットの活性当たり０．７７ μｇのＤＡＳ１８１タンパク質）であると測定された。
【０４１２】
Ｃ．  精製ＤＡＳ１８１を用いたマイクロスフェアの調製
上記のセクションＡの記載で精製して調製したＤＡＳ１８１（１０ ｍｇ／ｍｌ）を用いて、以下に示す２００ μｌのカクテルを形成した。カクテルには、対イオンとしてグリシン又はクエン酸のいずれかと、有機溶媒としてイソプロパノールが含まれており、以下の通りであった：
１） ＤＡＳ１８１ ＋ ５ ｍＭ グリシン、ｐＨ ５．０； 
２） ＤＡＳ１８１ ＋ ５ ｍＭ グリシン、ｐＨ ５．０ ＋ １０％ イソプロパノール；
３） ＤＡＳ１８１ ＋ ５ ｍＭ クエン酸ナトリウム、ｐＨ ５．０；
４） ＤＡＳ１８１ ＋ ５ ｍＭ クエン酸ナトリウム、ｐＨ ５．０ ＋ １０％ イソプロパノール；
【０４１３】
上の１）− ４）に記載する成分を有するカクテルを含むプラスチック製マイクロ遠心チューブを以下のように漸次的に冷却した：
（ａ）カクテルを冷蔵庫内に静置して、周囲温度（約２５℃）から４℃まで冷却し、次いで：
（ｂ）（ａ）により得られたカクテルを、冷凍庫内に静置して−２０℃まで冷却し、次いで：
（ｃ）（ｂ）により得られたカクテルを、冷凍庫内に静置して−８０℃まで冷却した。
【０４１４】
最適条件では、マイクロスフェアは、約４℃ないし約‐２０℃の間で形成することが期待される（一般的には、約−２℃ないし約−１５℃の範囲において）。−８０℃までの凍結は、凍結乾燥により、マイクロスフェア以外の成分（例えば、溶媒等）をカクテルから取り除くために行われる。カクテル４）は、３つの系で調製を行い、２つのアリコートをプラスチック製チューブ内で、１つのアリコートをガラス製チューブ内で調製した。１つのアリコート（プラスチック製チューブ内）を、上記のように冷却し、残りのアリコート（１つがプラスチック製チューブ内、１つがガラス製チューブ内）は、チューブを液体窒素内に浸漬して、瞬間冷却／凍結させた。
【０４１５】
凍結する際に、全てのチューブを凍結乾燥器内に静置し、昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、乾燥ペレットが残った。
【０４１６】
結果：上記の処理を行ったカクテルから回収された乾燥ペレットを、マイクロスフェアの存在について検査した。上記サンプルのうち、良好な分散特性を有し、約２ミクロン（μｍ）のサイズにあるマイクロスフェアが、クエン酸対イオンとイソプロパノールを含み、漸次的冷却に付されたカクテル４）のみに観察された。グリシンの対イオンでは、ほんの２、３のマイクロスフェアを含むガラス様結晶と凝集体の混合物が示され、ＤＡＳ１８１タンパク質にとっては最適ではないことが証明された（カクテル２））。有機溶媒が存在しない場合には、凍結乾燥したＤＡＳ１８１タンパク質からガラス様の塊が得られるが、マイクロスフェアは観察されなかった（カクテル１）及び３））。ガラス製チューブ内のカクテル４）の瞬間凍結では、ガラス様の結晶が生じ、マイクロスフェアは得られなかったが、一方で、プラスチック製チューブ内のカクテル４）の瞬間凍結（プラスチックは、ガラスよりも熱分散能生が低いため、冷却速度が僅かに遅い）では、凝塊したマイクロスフェアが生じた。
【０４１７】
本実施例により、本明細書に提供される方法を用いることで、狭いサイズ分布と良好な分散能（最小の凝塊形成）を有するマイクロスフェアを、適切なタンパク質、対イオン、有機溶媒及び漸次的冷却の組み合わせにより作製可能であることが証明される。
【０４１８】
実施例２
有機溶媒濃度の関数としてのＤＡＳ１８１マイクロスフェアのサイズ
ＤＡＳ１８１タンパク質（１０ ｍｇ／ｍｌ）、クエン酸対イオン（クエン酸ナトリウム、５ ｍＭ）及びイソプロパノール有機溶媒（１０％、２０％又は３０％）の組合せを用いて、実施例１（カクテル４）を参照）に記載したようにＤＡＳ１８１を精製し、これを用いてマイクロスフェアを調製した。得られたカクテル溶液は、実施例１の記載と同様に、周囲温度（約２５℃）から４℃に冷却し、次いで−２０℃に冷却し、次いで−８０℃まで凍結させた。−８０℃まで凍結する際に、チューブを凍結乾燥器内に静置し、昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４１９】
結果：マイクロスフェアの形成は、３種類の濃度の全てで観察された：１０％、２０％、又は３０％の有機溶媒イソプロパノール。しかしながら、マイクロスフェアの大きさは、有機溶媒の濃度によって異なっていた。マイクロスフェアの大きさは、粒子を血球計算計の格子と比較することで測定したところ、１０％のイソプロパノールを用いた場合には２ミクロン、２０％のイソプロパノールを用いた場合には４ミクロン、そして３０％のイソプロパノールを用いた場合には５−６ミクロンと測定された。これらの結果は、適切な濃度の有機溶媒を用いることで、所望のマイクロ粒子のサイズを工学的に作り出すことが可能なことを示している。
【０４２０】
実施例３
タンパク質濃度の関数としてのＤＡＳ１８１マイクロスフェアのサイズ
ＤＡＳ１８１タンパク質（５ ｍｇ／ｍｌ又は１０ ｍｇ／ｍｌ）、クエン酸対イオン（クエン酸ナトリウム、５ ｍＭ）及びイソプロパノール（５％又は２０％）の組合せを用いて、実施例１（カクテル４）を参照）に記載したようにＤＡＳ１８１を精製し、これを用いてマイクロスフェアを調製した。得られたカクテル溶液は、実施例１の記載と同様に、周囲温度（約２５℃）から４℃に冷却し、次いで−２０℃に冷却し、次いで−８０℃まで凍結させた。−８０℃まで凍結する際に、チューブを凍結乾燥器内に静置し、昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４２１】
結果：マイクロスフェアの形成は、両濃度のタンパク質（５ ｍｇ／ｍｌ及び１０ ｍｇ／ｍｌ）と両濃度の有機溶媒（５％又は２０％）で観察された。しかしながら、マイクロスフェアの大きさは異なっていた。５ ｍｇ／ｍｌ又は１０ ｍｇ／ｍｌのタンパク質と５％のイソプロパノールを含むカクテルでは、生じたマイクロスフェアは約１．５ミクロンのサイズと測定された。５ ｍｇ／ｍｌのタンパク質と２０％のイソプロパノールを含むカクテルでは、生じたマイクロスフェアは約３ミクロンのサイズと測定され、１０ ｍｇ／ｍｌのタンパク質と２０％のイソプロパノールを含むカクテルでは、生じたマイクロスフェアは約４ミクロンのサイズと測定された。これらの結果は、適切な濃度のタンパク質、又は適切な有機溶媒濃度とタンパク質濃度の組合せを用いることで、所望のマイクロ粒子のサイズを工学的に作り出すことが可能なことを示している。
【０４２２】
実施例４
対イオン濃度の関数としてのＤＡＳ１８１マイクロスフェアのサイズ
ＤＡＳ１８１タンパク質（１０ ｍｇ／ｍｌ）、クエン酸対イオン（クエン酸ナトリウム；２ ｍＭ、３ ｍＭ又は６ ｍＭ）及びイソプロパノール（２０％）の組合せを用いて、実施例１（カクテル４）を参照）に記載したようにＤＡＳ１８１を精製し、これを用いてマイクロスフェアを調製した。カクテル溶液をガラスバイアル内で混合し、Ｍｉｌｌｒｏｃｋ Ｌａｂ Ｓｅｒｉｅｓ凍結乾燥器内で、１℃／分の凍結勾配にて、＋２０℃から−４０℃まで冷却した。−３０℃で１２時間の１次乾燥と３０℃で３時間の２次乾燥を行うとともに、１００ ｍＴｏｒｒでの昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４２３】
結果：マイクロスフェアの形成は、試験した３種類のクエン酸濃度の全てで観察された。しかしながら、マイクロスフェアの大きさは、２ ｍＭのクエン酸で１ミクロンから、３ ｍＭのクエン酸で３ミクロンまで、そして６ ｍＭのクエン酸で５ミクロンのへと増加した。２ ｍＭのクエン酸を含むカクテルに１ ｍＭの酢酸ナトリウム又は１ ｍＭの塩化ナトリウムを添加しても、クエン酸対イオンにより開始されるマイクロスフェアの形成に影響は無かった。これらの結果は、適切な濃度の対イオンを用いることで、所望のマイクロ粒子のサイズを工学的に作り出すことが可能なことを示している。
【０４２４】
実施例５
界面活性剤の存在下でのＤＡＳ１８１マイクロスフェア形成
多くの場合、高分子（例えば、タンパク質）のマイクロスフェアへ界面活性剤を添加することにより、マイクロスフェアの対象への投与の適性を左右する特性、例えば、鼻腔内又は経口吸入といった特定の経口経路用の流動性、分散性及び沈着といった特性を向上させることが可能である。本明細書中に提供するマイクロスフェアの製造方法に界面活性剤を組み込むことが可能かどうかを検証するため、溶液に更に、界面活性剤を添加したことを除いては、実施例１の記載と同様にＤＡＳ１８１マイクロスフェアの製造を行った。
【０４２５】
５ ｍｇ／ｍｌのＤＡＳ１８１、５ ｍＭのクエン酸ナトリウム及び２０％のイソプロパノールを含むカクテル溶液に界面活性剤（３．５重量％のレシチン、０．７重量％のＳｐａｎ−８５（登録商標）（三オレイン酸ソルビタン）、又は３．５重量％のオレイン酸）を添加した。実施例１の記載と同様に、溶液を４℃に冷却し、次いで‐２０℃に冷却し、次いで凍結乾燥用に−８０℃まで凍結させることでマイクロスフェアを形成させた。凍結の際、チューブを凍結乾燥器内に静置し、昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４２６】
結果：上の各カクテルに上記の処理を行って得られたマイクロスフェアは、カバースリップを用いて、円形に動かすことで、ガラススライド上に広げた。全ての場合において、効率的なマイクロスフェア形成が観察された。界面活性剤を含むサンプルを、界面活性剤は添加していないが残りの全ての成分を含むサンプルと比較した場合、界面活性剤の存在下で形成したマイクロスフェアでは、分散性が向上していた（凝塊又は凝集体がより少ない）ことが顕著であった。
【０４２７】
実施例６
適切な種類と濃度の有機溶媒及び対イオンの選択によるウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）のマイクロスフェアの調製
ここに記載するように、本明細書に提供される方法を、ハイスループットフォーマットで、経験的に最適化することにより、サイズ、流動性及び分散性を含む所望の特性を有するマイクロスフェアを得ることが可能である。本実験の目的は、有機溶媒と対イオンの種類と濃度、並びにカクテルのｐＨを変えることにより、目的のタンパク質、この場合は、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）から成るマイクロスフェアのサイズと品質を調節できることを証明することにある。
【０４２８】
５ ｍｇ／ｍｌのＢＳＡと、表示されるｐＨ及び濃度で種々の有機溶媒及び対イオンとを含むカクテル溶液（表１参照）を、マイクロタイタープレート内に静置した（１ウェル当たりの最終体積は、０．１ ｍｌ）。カクテル溶液を、Ｍｉｌｌｒｏｃｋ Ｌａｂ Ｓｅｒｉｅｓ凍結乾燥器内で、１℃／分の凍結勾配にて、＋２０℃から−４０℃まで冷却した。−３０℃で１２時間の１次乾燥と３０℃で３時間の２次乾燥を行うとともに、１００ ｍＴｏｒｒでの昇華により揮発性物質を除去した。
【０４２９】
結果：結果を、以下の表１に示す。ＢＳＡタンパク質の場合に、最小の結晶化と凝集で、最も均一なマイクロスフェアを作り出した組合せ（それぞれ、対イオン及び有機溶媒の組合せ）には、以下のものが含まれる：
（１） クエン酸 ＋ イソプロパノール
（２） クエン酸 ＋ アセトン
（３） イタコン酸 ＋ １−プロパノール
（４） グリシン ＋ ジオキサン
（５） グリシン ＋ １−プロパノール
（６） ルビジウム ＋ １−プロパノール
（７）過塩素酸 ＋ １−プロパノール
【０４３０】
【表１】
0005457680.tif 000002
0005457680.tif 000003
【０４３１】
これらの結果は、ハイスループットフォーマットで、最適なマイクロスフェア形成を対象として（所望の大きさ、均一性、分散性、最小の凝集体及び結晶形成等）、各タンパク質について複数の製剤を直ちにスクリーニングできることを示している。最初のスクリーニングから選択された試薬と条件の組合せ（対イオン、有機溶媒、ｐＨ、濃度）は、次いで、更に、望ましいように微調整可能である。
【０４３２】
実施例７
種々のタンパク質を用いたマイクロスフェア形成
本明細書に提供される方法を用いることにより、種々のタンパク質を用いたマイクロスフェアを調整できる。上で例示したＤＡＳ１８１及びＢＳＡに加え、本方法を用いて、トリプシン、ヘモグロビン、ＤＮａｓｅ Ｉ、リゾチーム、オボアルブミン、ＲＮａｓｅ Ａ、ヘキサヒスチジン−タグ化ヒトプロテイナーゼインヒビター８（ＰＩ８、配列番号１５に示すアミノ酸配列を有する）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）及び緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）からマイクロスフェアを調製した。
【０４３３】
ＤＮａｓｅ Ｉ、トリプシン及びヘモグロビンは、Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ社から購入した。リゾチーム、オボアルブミン、及びＲＮａｓｅ Ａは、Ｓｉｇｍａ社から購入した。
６ｘＨｉｓタグ化したＰＩ８、ＧＦＰ及びＲＦＰの精製：６ｘＨｉｓタグ化したＰＩ８、ＧＦＰ及びＲＦＰは、基本的には、上の実施例１でＤＡＳ１８１について記載したように発現させて精製したが、以下の変更を加えた：
【０４３４】
６ｘＨｉｓタグ化ＧＦＰと６ｘＨｉｓタグ化ＲＦＰの精製：それぞれＮ末端にＨｉｓ６タグを有する赤色蛍光タンパク質と緑色蛍光タンパク質をコードするコンストラクトを、６ｘＨｉｓタグ化タンパク質としてＥ．ｃｏｌｉ中で発現させた。赤色蛍光タンパク質の発現は、１ ｍＭ ＩＰＴＧを含むＬＢ培地中で一晩かけて進行させた。緑色蛍光タンパク質の発現は、１ ｍＭ ＩＰＴＧを含むＬＢ培地中で３時間誘導した。誘導培養物４リットル分の細胞溶解物を遠心により透明化させて、ニッケルで帯電させてＣ−１０ カラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）に充填したＦａｓｔ−Ｆｌｏｗ Ｃｈｅｌａｔｉｎｇ樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）上での金属キレートアフィニティークロマトグラフィーによりタンパク質を精製した。
【０４３５】
リン酸緩衝食塩水で平衡化させた０．５ ｃｍ ｘ ７０ ｃｍのＳｅｐｈａｃｒｙｌ ２００ カラムでのゲルろ過クロマトグラフィーにより、更にタンパク質を精製した。タンパク質は、２ ｍＭの酢酸ナトリウムバッファー（ｐＨ ５．０）に対して透析を行い、そして、Ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐ（Ａｍｉｃｏｎ社）で濃縮した。
【０４３６】
６ｘＨｉｓタグ化ＰＩ８の精製： Ｎ末端にＨｉｓ６タグを有するＰＩ８をコードするコンストラクトを、６ｘＨｉｓタグ化タンパク質としてＥ．ｃｏｌｉ中で発現させた。精製は、上の６ｘＨｉｓ ＲＦＰと６ｘＨｉｓ ＧＦＰの記載と同様に行ったが、種々のクロマトグラフィー生成工程で用いた全てのバッファーが１ ｍＭのＴＣＥＰ（トリス(２−カルボキシエチル)ホスフィン塩酸塩）を含んでいた点で異なっていた。
【０４３７】
マイクロスフェアの調製：５ ｍｇ／ｍｌのタンパク質と以下に列挙する種々の対イオン、有機溶媒及びｐＨとを含むカクテル溶液を、上記の実施例６と同様にマイクロタイタープレート内で調製した。
【０４３８】
【表２】
0005457680.tif 000004
【０４３９】
マイクロタイタープレートは、Ｍｉｌｌｒｏｃｋ Ｌａｂ Ｓｅｒｉｅｓ凍結乾燥器内で、１℃／分の凍結勾配にて、＋２０℃から−４０℃まで冷却した。−３０℃で１２時間の１次乾燥と３０℃で３時間の２次乾燥を行うとともに、１００ ｍＴｏｒｒでの昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４４０】
乾燥粉末をガラススライド上に広げ、３２ｘ又は１００ｘのいずれかの対物レンズを通して顕微鏡観察を行った。上記の表２に列挙する全ての組合せで、良好な性質（一様なサイズ分布、分散性、並びに少ない凝集及び／又は結晶）のマイクロスフェアが作り出された。マイクロスフェアは、タンパク質によって、そのサイズが、約０．４−１ミクロン（ＲＮＡｓｅ Ａ、ＤＮＡｓｅ Ｉ）ないし約２−５ミクロン（６ｘＨｉｓ ＰＩ８、リゾチーム）で異なっていた。本実施例により、本明細書に提供される方法を用いて、多種多様なタンパク質からマイクロスフェアを作製できることが証明された。
【０４４１】
実施例８
吸入用ＤＡＳ１８１マイクロスフェアの空気力学的粒子サイズ分布：本明細書に提供される方法のスプレードライとの比較  
ここに記載するように、本明細書に提供される方法を用いて、約０．５ミクロンないし約６−８ミクロンの範囲を含む、あらゆる所望のサイズ範囲にある、吸入による送達用のマイクロスフェアを作製することができる。
【０４４２】
Ａ．  マイクロスフェアの調製
吸入による送達用に製剤されたＤＡＳ１８１乾燥粉末（マイクロスフェア）の空気力学的粒子サイズ分布を検証するため、以下の２種類の方法によりＤＡＳ１８１マイクロスフェアを調製した：
（ａ）１４ ｍｇ／ｍｌのＤＡＳ１８１， ５ ｍＭのクエン酸ナトリウムを含むＤＡＳ１８１水溶液（ｐＨ ５．０）を５５℃で空気流内へとスプレードライして、マイクロスフェアを作製した。
（ｂ）これに代わり、ＤＡＳ１８１マイクロスフェアを本明細書に提供される方法に従って作製した。１４ ｍｇ／ｍｌのＤＡＳ１８１， ５ ｍＭのクエン酸ナトリウムを含むＤＡＳ１８１水溶液（ｐＨ ５．０）に、５％のイソプロパノールを有機溶媒として添加した。得られた溶液をＭｉｌｌｒｏｃｋ Ｌａｂ Ｓｅｒｉｅｓ凍結乾燥器内で、１℃／分の凍結勾配にて、＋２０℃から−４０℃まで冷却した。−３０℃で１２時間の１次乾燥と３０℃で３時間の２次乾燥を行うとともに、１００ ｍＴｏｒｒでの昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４４３】
Ｂ．  マイクロスフェアの空気力学的粒子サイズ分布
実施例８Ａの記載で調製したマイクロスフェアを、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクションにより試験した。気道内での薬物の沈着は、カスケードインパクターのステージ／回収プレート上での粒子（マイクロスフェア）の空気力学的挙動により予想することができる。
【０４４４】
上記のセクションＡに記載する２種類の異なる方法の一つ、即ち、スプレードライ又は本明細書に提供される方法のいずれかによって調製したＤＡＳ１８１マイクロスフェアを用いてカスケードインパクション実験を行った。マイクロスフェア（１０ ｍｇ）をゼラチンカプセル中に注入した。このゼラチンカプセルをＣｙｃｌｏＨａｌｅｒ（ＰｈａｒｍａＣｈｅｍｉｅ社）乾燥粉末吸入器内に入れてカスケードインパクションに付した。８段階からなり、細菌が生存不可能なＡｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクター（Ｔｈｅｒｍｏ Ｅｌｅｃｔｒｏｎ、ボストン、米国）を用いたが、これは、毎分９０リットルの空気流を用いるように変更が施され、ＵＳＰスロート、誘導コーンを具備するが、事前分離装置を有していなかった。吸入後の種々の沈着領域／段階を（気管、第１及び第２気管支、終末細気管支、肺胞等）表すインパクターの回収プレートを、シリコンスプレーでコーティングしてマイクロスフェアのバウンドを防いだ。ステージ及び回収プレートからのマイクロスフェアを、０．１％のＴｗｅｅｎを含むリン酸緩衝食塩水中に回収し、各ステージ及び回収プレートから回収された沈着ＤＡＳ１８１量を、２８０ ｎｍの吸光度を測定することにより定量した。
【０４４５】
前記２種類の方法で作製したマイクロスフェアの幾何学径を、光学顕微鏡観察により評価したところ、両方の方法で基本的に同一（１．５ − ３．０ミクロンの範囲）であることが判明した。しかしながら、下の表３に示すように、この２種類の試料の空気力学的粒子サイズ分布は、２種類の方法の間で有意に異なっている。本明細書に提供される方法で作製したマイクロスフェア（即ち、上記のセクションＡに説明する方法（ｂ））の場合では、２５％未満が口腔内（インパクターアセンブリーのスロート／コーン）に捕獲され、７０％を超えるマイクロスフェアが、気管と肺に送達された（４０％超が終末細気管支と肺胞内に送達された）。対照的に、スプレードライ（上記のセクションＡに説明する方法（ａ））により形成されたＤＡＳ１８１マイクロスフェアでは、５０％未満が気管と肺に送達された（２０％未満が終末細気管支と肺胞内に送達された）。これらの結果は、本明細書に提供される方法により、肺深部への送達用のマイクロスフェアの作製が可能であること、そして本明細書に提供される方法により作製したマイクロスフェアが、スプレードライ法で作製したマイクロスフェアとの比較において、より優れた抗凝塊形成特性と流動特性を有する（より高い送達用量を提供する）ことを示している。
【０４４６】
【表３】
0005457680.tif 000005
【０４４７】
実施例９
マイクロスフェアの大量製造
本実施例では、本明細書に提供される方法を、ＤＡＳ１８１の大量製造に拡大できることを証明する。本明細書に記載するバッチプロセスは、例えば、数ミリグラムないし約１キログラムの範囲の量での大量の乾燥粉末マイクロスフェアの製造に適しており、混合タンク及び／又は凍結乾燥シェルフのスペースによって制限される。本明細書に記載される別の「連続」プロセスを用いて、例えば、数百グラムないし１００キログラム又はこれを超える量（１００グラムないし１００ ｋｇ、これを超える量）の範囲の量を製造できる。連続プロセスの更なる利点は、より優れたカクテルの冷却の制御にある。バッチプロセス又は連続プロセスによる大量製造は、例えば、以下に記載する１もしくは２以上の工程をいずれかの工程の組合せに従ってもよく、又は特定の代替方法に従ってもよい：
【０４４８】
・マイクロスフェア内へのタンパク質の沈澱。この工程は、所望の濃度のタンパク質、有機溶媒及び対イオンを含むカクテル溶液を凍結乾燥トレイ中に静置し、このトレイを凍結乾燥器のシェルフ上に静置することにより、バッチモードで行うことが可能である。これに代わり、トレイを、冷却した台又は別の種類の装置（例えば、冷凍庫）上で冷却して凍結させ、凍結した状態で一定期間保存して、後で凍結乾燥することもできる。これに代わり、マイクロスフェアを、撹拌しながら容器内で沈殿させて形成することが可能であり、この場合、容器を冷表面上に静置するか若しくは冷却コイルを液体中に浸すか、又はぜん動式ポンプを用いてカクテルを熱交換器中に再循環させる。これに代わる場合には、マイクロスフェアは、ぜん動式ポンプを用いてカクテル溶液を熱交換器に一度通して、連続モードで沈殿させることにより形成することができる。
【０４４９】
・バルク液体の除去。マイクロスフェアの懸濁液は、標準的な遠心、連続流動遠心（例えば、ＣＡＲＲ ＶｉａＦｕｇｅ Ｐｉｌｏｔ）又はろ過（例えば、グラスファイバー、焼結ガラス、ポリマーフィルター、中空糸繊維カートリッジ（例えば、ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社の製品等）又は接線流ろ過カセット（ｔａｎｇｅｎｔｉａｌ ｆｌｏｗ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｃａｓｓｅｔｔｅ）（ＴＦＦカセット、例えば、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社又はＳａｒｔｏｒｉｕｓ社の製品））により濃縮可能である。バルク液体の除去（５０％以上）により、乾燥サイクルを速め、効率と処理能力を高めることが可能である。
【０４５０】
・マイクロスフェアの乾燥。いずれかのモードで形成して回収したマイクロスフェアは、従来の凍結乾燥法により乾燥できる。これに代わる場合、マイクロスフェアは、凍結乾燥器を用いることなく、周囲温度と大気圧の下で乾燥できる。
【０４５１】
結果：ここに記載するように連側モードによりＤＡＳ１８１タンパク質を乾燥粉末（マイクロスフェア）に加工することに成功した。１０ ｍｇ／ｍｌのＤＡＳ１８１、２０％のイソプロパノール、２ ｍＭの硫酸ナトリウムを含むカクテルを、ぜん動式ポンプの使用によりＮＥＳＬＡＢ循環式クリオスタットと連結させた３５ ＳＥＲＩＥＳ熱交換器（Ｅｘｅｒｇｙ社、ガーデンシティー、ニューヨーク州）に通過させ、通過時にカクテルを約２５℃から約−１２℃に冷却した。熱交換器から出てきて得られたマイクロスフェア懸濁液は、事前に冷却した凍結乾燥トレイ（−４０℃）内にポンプで送らて、凍結され、そして凍結乾燥されるか、又は、これに代わる場合には、直接液体窒素内にポンプで送られ、次いで凍結乾燥される。顕微鏡観察とカスケードインパクションで分析した生じたマイクロスフェアは、最小の凝集形成と良好な分散性と共に均一なマイクロスフェアを示し、その大きさと、空気力学的粒子サイズ分布において、バッチモードで作製したマイクロスフェアと近似していた。製剤したＤＡＳ１８１カクテル溶液を冷却せずに（熱交換器に通さないので、マイクロスフェアの沈澱が誘導されなかった）液体窒素内へ直接注ぎこんだ場合には、マイクロスフェアが観察されず、代わりに、凍結乾燥後にガラス様の結晶が観察された。
【０４５２】
実施例１０
気道上部及び中央部に送達するためのＤＡＳ１８１マイクロスフェアのバッチモード製法と製剤
本実施例では、ＤＡＳ１８１マイクロスフェアの製剤と製造方法を記載する。ＤＡＳ１８１カクテル溶液の含有物とその相対量を、下記の表４に示す。
【０４５３】
【表４】
0005457680.tif 000006
【０４５４】
Ａ．   バルク製剤原料の製造
製剤原料（Ｄｒｕｇ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅ）、活性医薬成分（Ａｃｔｉｖｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ）及びＡＰＩという用語は、本実施例では互換性を以て使用され、ＤＡＳ１８１タンパク質を指している。ＤＡＳ１８１タンパク質の大量製造は、以下のように行った。最初に大量のＤＡＳ１８１を、基本的に実施例１の記載と同様にＥ． ｃｏｌｉ（ＢＬ２１株）内で発現させた。ＤＡＳ１８１タンパク質を発現するＥ． ｃｏｌｉ細胞を、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌバッファー１、ＵＦＰ−５００−Ｅ５５中空糸繊維カートリッジ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）及びＷａｔｓｏｎ−Ｍａｒｌｏｗぜん動式ポンプを用いた発酵回収洗浄工程において、ダイアフィルトレーションにより洗浄した。
【０４５５】
次いで、この細胞から、組み換えＤＡＳ１８１タンパク質を大量に精製した。ＤＡＳ１８１の大量精製で用いた成分とバッファーの詳細な特定を、下記の表５と表６に提示する。回収して洗浄した細胞は、ホモジェナイゼーション工程で、Ｎｉｒｏ−Ｓｏａｖｅ Ｐａｎｄａ細胞破壊器に２回通すことで溶解した。このようにして得られたホモジェネートは、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌバッファ−１、Ｈｙｄｒｏｓａｒｔ ０．２ミクロンＴＦＦカセット及びＷａｔｓｏｎ Ｍａｒｌｏｗポンプを用いたマイクロフィルトレーションにより透明化した。透明化したホモジェネートは、次いで、溶解物を、新たにバッファーを供給することなく再循環させて濃縮した。次いで、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ ＳＰ−５５０Ｃ 樹脂上で透明化したホモジェネートからＤＡＳ１８１タンパク質を捕獲して、この樹脂を一連のバッファー（表５参照）で洗浄し、その後、樹脂からＤＡＳ１８１タンパク質を溶離した。溶離物の塩化ナトリウム濃度を５０ ｍＭのリン酸から成る最終バッファー（ｐＨ ８．０）中で１．０ Ｍに調整した。次いで、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌバッファー４を用いて更に精製を行うため、ＤＡＳ１８１含有溶離物を、再度Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ Ｈｅｘｙｌ−６５０Ｃ樹脂に通した。次いで、ＤＡＳ１８１タンパク質を含む樹脂溶離物については、ダイアフィルトレーション行程（表５の工程８を参照）にて５ ｍＭの酢酸ナトリウムにバッファー交換した。次に、貫流モードでＤＮＡを取り除くために濃縮タンパク質をＳａｒｔｏｒｉｕｓ社のＱ ＳｉｎｇｌｅＳｅｐフィルターに通して、イソプロパノールを２０体積％の終濃度でＱ ＳｉｎｇｌｅＳｅｐフィルターに添加した。バッファー中のＤＡＳ１８１タンパク質を、Ａｍｂｅｒｃｈｒｏｍバッファーで平衡化させたＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍｅ ＣＧ３００Ｍ樹脂に通した（表５の工程１１を参照）。次いで、精製したバルクＤＡＳ１８１タンパク質を製剤用バッファーにバッファー交換し、ジアフィルトレーションにより濃縮した（表５の工程１２参照）。
【０４５６】
【表５】
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【０４５７】
【表６】
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【０４５８】
Ｂ．  バッチ製造方法
上記の表４に示す成分を組み合わせて、下記のように大量のバッチ製法でＤＡＳ１８１マイクロスフェアを形成した。
【０４５９】
工程Ｉ：バルク製剤原料の融解
プラスチックボトル内の凍結した０．２ μｍフィルターを通したバルク製剤原料を、周囲温度（２５±３℃）で一晩かけて融解した。
【０４６０】
工程ＩＩ：賦形剤の計量と溶液の調製
３５．５１ ｇの無水硫酸ナトリウムを計量し、洗浄用に５００ ｍＬに十分量の水で希釈し、次いで、撹拌して透明な溶液を得た。１８．３８ ｇの無水塩化カルシウムを計量し、洗浄用に２５０ ｍＬに十分量の水で希釈し、次いで、撹拌して透明な溶液を得た。
【０４６１】
工程ＩＩＩ：ＤＡＳ１８１カクテル溶液の調製
３．３ Ｌの濃縮製剤原料（１９．５５ ｇ／Ｌ）に、洗浄用の１．７９ Ｌの水を撹拌しながらゆっくりと添加して、次いで０．０２１５ Ｌ の硫酸ナトリウム溶液、０．００２８ Ｌの塩化カルシウム溶液及び０．２６９ Ｌのイソプロパノールを添加した。溶液を撹拌して、成分を確実に完全に混合した。
【０４６２】
工程ＩＶ：０．２ μｍフィルターを通した製剤カクテル溶液のろ過
粒子と生物汚染度を調節するため、工程ＩＩＩの製剤カクテル溶液を０．２ μｍフィルターに通して滅菌培地バッグ内にろ過した。
【０４６３】
工程Ｖ：凍結乾燥トレイへの充填
製剤したろ過溶液を、オートクレーブしたＬｙｏｇｕａｒｄ凍結乾燥トレイに分取した。溶液を均一に冷却して、良好な性質のマイクロスフェアを形成させるため、６つのトレイには、それぞれ０．９Ｌ以下のカクテル溶液を充填した。
【０４６４】
工程ＶＩ：冷凍及び凍結乾燥
トレイを−４５ ± ５℃に事前に冷却した凍結乾燥器（Ｈｕｌｌ １２０ＦＳＸ２００）シェルフ上に静置し、溶液を冷却して凍結させた。溶液が凍結する時に、マイクロスフェアの形成が起こった。冷凍は、完全に凝固させるため、１−２時間進行させた。生成物の温度は、６個のトレイのうち２つに取り付けた熱電対の計測により確認した。
【０４６５】
凍結乾燥のサイクルステップは以下の通り：
ａ）１６０ミクロンにバキュームを設定して、１００−２００ミクロンまで排気する；
ｂ）３時間以上かけてシェルフ温度を＋１０℃にまで勾配させる；
ｃ）シェルフ温度を＋１０℃に３６時間に維持する（１次乾燥）；
ｄ）１次乾燥相が完了して、精製物の温度が、＋１０℃±５℃で１５−３０時間安定していたことを電熱線追跡の検査により確認する。
ｅ）１時間以上かけてシェルフ温度を＋３０℃にまで勾配させ、３−５時間維持する（２次乾燥）。
【０４６６】
工程ＶＩＩ：容器へのバルクＤＡＳ１８１マイクロスフェアの移動と混合
各Ｌｙｏｇｕａｒｄ凍結乾燥トレイのボトムフィルム上のセクションを消毒用ウェットティッシュでクリーニングして、メスで３ ｘ ３ ｃｍの開口を設けた。乾燥マイクロスフェアをプラスチックボトルに移した。ボトルにキャップを取り付けて、転倒するたびに方向を変えながら４０回転倒混和した。転倒混和は、ボトル内容物を均一にするために行った。分析試験に用いるサンプルを取り出し、ボトルに再度キャップを取り付けて、保存用のプラスチックバッグ内に密封した。
【０４６７】
上記のＤＡＳ１８１マイクロスフェアバルク製法において、硫酸は、対イオンとして使用する上で安全な物質であることが証明され、再現性を持って狭いサイズ範囲でマイクロスフェアを作り出した。更に、有機溶媒としてのイソプロパノールは、（１）クラス３溶媒であり、（２）種々の濃度（２−３０体積％）でマイクロスフェアを生成可能であり、そして（３）比較的高い凝固点を有しており、その蒸気は凍結乾燥中に効率的に捕獲できることから、溶媒の選択対象として良好であった。
【０４６８】
最終製剤中のタンパク質濃度は、マイクロスフェアの物理特性又はマイクロスフェア内のＤＡＳ１８１タンパク質の活性に実質的な影響を与えることなく、変化させることが可能であり（１０ − １４ ｍｇ／ｍｌ）、同様に対イオンの濃度（１ − ５ ｍＭ）とイソプロパノールの濃度（２ − ３０体積％）も変化させてもよい。より高いイソプロパノール濃度（１５ − ３０％）では、カクテルが完全に液体のままでもマイクロスフェアが形成した。より低い濃度（２ − １５％）では、最初に氷晶が形成し始め、次いで沈澱によりマイクロスフェアが形成した。
【０４６９】
Ｃ．  マイクロスフェア中のＤＡＳ１８１の収量
乾燥マイクロスフェア中の理論上のＤＡＳ１８１収量は、以下の式に従って計算される：
【０４７０】
収量の理論値 ＝ ＤＡＳ１８１タンパク質のグラム数  ÷   乾燥粉末（マイクロスフェア）中のタンパク質フラクション
【０４７１】
タンパク質フラクションの値（０．８６６）は、ＤＡＳ１８１マイクロスフェアの複数の製造バッチを分析することにより経験的に確証できる。表２に示す量の理論値は、６４．５６ ｇ ÷ ０．８６６ ＝ ７４．５５ ｇである。ＤＡＳ１８１乾燥粉末の実際の収量は、６４ ｇであることが判明した。
【０４７２】
結果：経口吸入による投与用に上記のセクションＢの記載で調製したマイクロスフェアの適性を、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクションによって試験した。結果を下記の表７にまとめる。気道内での薬物の沈着は、カスケードインパクターのステージ／回収プレート上での粒子（マイクロスフェア）の沈着により予想することができる。インフルエンザのように、気道内で引き起こされるウィルス感染を予防又は治療するために投与される、例えば、ＤＡＳ１８１等の医薬の場合、咽喉、気管及び気管支（気道の上部と中央部）に薬剤が沈着することが望ましい。気道上部及び中央部に送達されたＤＡＳ１８１融合タンパク質は、粘膜からレセプターであるシアル酸を切除し、それによってこれらの部位におけるウィルスの結合と感染を防ぐ。呼吸器系のウィルス感染が引き起こされる可能性のある部位、即ち、咽喉、気管又は気管支へＤＡＳ１８１マイクロスフェアを最適に送達するためには、マイクロスフェアは、（ａ）口の前端で捕獲される程度の大きさを有するか（即ち、マイクロスフェアが大きすぎ、約８ミクロン又はこれを超えること）；又は（ｂ）肺深部に吸着して、血流へと全身的に吸収される程に小さいもの（即ち、０．５ミクロン又はこれを下回る）であってはならない。咽喉、気管及び気管支へのＤＡＳ１８１マイクロスフェアの送達には、約１ミクロンないし約５．５−６ミクロンのサイズ範囲が、一般的に適している。
【０４７３】
上記で製造したＤＡＳ１８１マイクロスフェアを、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクションによりキャラクタライズしたところ、気道上部と中央部への送達に適しており、肺胞へは十分に低いパーセンテージ（＜５％）しか沈着しないことが判明した。
【０４７４】
【表７】
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【０４７５】
更に、ＤＡＳ１８１マイクロスフェアをレーザー回折によりキャラクタライズすると、本実施例に記載する方法で作製したマイクロスフェアの大部分が、１ミクロンないし５ミクロンのサイズの範囲にあったことが示され、これはカスケードインパクションの結果と一致するものであった。本明細書に記載する方法に従って調製したＤＡＳ１８１の走査性電子顕微鏡観察（ＦＥＩ Ｑｕａｎｔａ ２００走査型電子顕微鏡Ｅｖｅｒｈａｒｔ Ｔｈｏｒｎｌｅｙ（ＥＴ）検出器）により、マイクロスフェアが、約０．５−３ミクロンのサイズにある数百から数千の個々の粒子から成る凝塊として存在していることが判明した。しかしながら、凝塊は、乾燥粉末吸入器の作動において生じる空気の乱流によって容易に散逸する（Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクション又はレーザー回折に示されるように）。液体界面活性剤（例えば、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００又はＴｗｅｅｎ ２０）又はマイクロスフェアを溶解させない非極性溶媒（例えば、アルコール、アセトン又はアセトニトリル）中に分散したマイクロスフェアの光学顕微鏡観察により、凝集体が、容易に個々の均一なマイクロスフェアに散逸されることが確認された。
【０４７６】
実施例１１
ナトリウム塩以外の硫酸塩を用いたＤＡＳ１８１マイクロスフェアの調製
特定の場合、例えば、いくつかの喘息薬においては、経肺投与用の製剤中のナトリウムの存在により、気道過敏性を誘発するリスクがある（Ａｇｒａｗａｌ ｅｔ ａｌ．， Ｌｕｎｇ， １８３：３７５−３８７ (２００５)）。従って、本実施例では、カリウム、マグネシウム及びカルシウム等の他の金属の塩のような、代わりとなる塩を試験した。
【０４７７】
ＤＡＳ１８１は、実施例１と同様に製造した。１２ ｍｇ／ｍＬのＤＡＳ１８１と５体積％のイソプロパノールを含むカクテル溶液は、対イオンとして、表示する硫酸塩を２ ｍＭの濃度で、ｐＨ ４．５ないし５．０で含んでいた。この溶液を＋２５℃から−４５℃まで冷却することでマイクロスフェアを形成した。凍結の際、昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４７８】
乾燥粉末の空気力学的粒子サイズ分布を、Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクションによって評価し、各ステージ当たりのＤＡＳ１８１の量を、２２６ ｎｍのＵＶ測定（Ａ２２６）により決定した。結果を下記の表８に示す。結果は、ナトリウム塩以外の硫酸塩を対イオンとして用いても、その大部分が、ナトリウム硫酸を対イオンとして用いた場合に送達される量と、同程度の量で、咽喉、気管及び気管支に送達されるサイズ範囲にあるＤＡＳ１８１マイクロスフェアを得られることを示している。
【０４７９】
【表８】
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【０４８０】
乾燥粉末を、表９に表示する時間をかけて＋３７℃又は＋５３℃でインキュベートし、実施例１と参照により本明細書に組み込ませた文献に記載するように、４−ＭＵ−ＮＡＮＡを用いてシアリダーゼ活性について試験した。−８０℃で保存した非凍結乾燥ＤＡＳ１８１との比較における相対活性を表９に示す。結果は、対イオンとして種々の金属硫酸塩を用いて兆セ氏したマイクロスフェアの安定性については、３７℃で２カ月以上に渡って殆ど全て又は全ての活性が保持され、５３℃で１０日以上に渡って、殆ど全ての活性（硫酸ナトリウムと硫酸カリウム）若しくは８５％以上の活性（硫酸マグネシウムと硫酸亜鉛）が保持されており、硫酸ナトリウムで調製したマイクロスフェアと同程度のものであったことを示している。この実験により、種々の非ナトリウム含有対イオンを使用して、所望の特性を有するマイクロスフェアを作製可能なことが示されている。
【０４８１】
【表９】
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【０４８２】
実施例１２
ＤＡＳ１８１マイクロスフェアの安定性
マイクロスフェア内のＤＡＳ１８１タンパク質の安定性について、実施例１と参照により本明細書に組み込ませた文献に記載するように、４−ＭＵ−ＮＡＮＡ活性アッセイを用いて、経時的にシアリダーゼ活性を測定することで評価した。乾燥ＤＡＳ１８１マイクロスフェアの作製は、１０ ｍｇ／ｍＬのＤＡＳ１８１、２ ｍＭの硫酸ナトリウム 、５体積％のイソプロパノールを含むカクテル溶液中で行った。いくつかの溶液には、０．０１重量／体積％の糖（ソルビトール、マンニトール、トレハロース又はスクロース）を添加した。この溶液を＋２５℃から−４５℃まで冷却することでマイクロスフェアを形成した。凍結の際、昇華により揮発性物質（水及びイソプロパノール）を除去すると、マイクロスフェアを含む乾燥粉末が残った。
【０４８３】
Ａ．  糖を含まないＤＡＳ１８１マイクロスフェアの安定性
糖無しで製剤したＤＡＳ１８１乾燥粉末マイクロスフェアを、Ｄｒｉｅｒｉｔｅ乾燥剤（Ｈａｍｍｏｎｄ Ｄｒｉｅｒｉｔｅｓ社、ゼニア（Ｘｅｎｉａ）、オハイオ州、米国)に隣接する容器内で、室温（２５℃）にて保存した。この乾燥粉末は、少なくとも８か月の間、当初の効力（実施例１と参照により本明細書に組み込ませた文献に記載するように、４−ＭＵ−ＮＡＮＡ活性アッセイを用いてシアリダーゼ活性により測定；結果を表１０に示す）と空気力学的粒子サイズ分布（Ａｎｄｅｒｓｅｎカスケードインパクションにより測定：表１１）を保持していた。
【０４８４】
【表１０】
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【０４８５】
【表１１】
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【０４８６】
Ｂ．  糖と共に製剤したＤＡＳ１８１マイクロスフェアの安定性
糖を含む乾燥粉末マイクロスフェア製剤と、−８０℃で保存した非凍結乾燥マイクロスフェア製剤中のＤＡＳ１８１のシアリダーゼ活性を、実施例１と参照により本明細書に組み込ませた文献に記載するように、蛍光基質４−ＭＵ−ＮＡＮＡを用いて測定した。糖を含まない乾燥粉末製剤と、下記の表１２に示す種々の糖を含む乾燥粉末製剤を、＋４２℃で４週間保存した（強制分解）。結果を表１２に示す。−８０℃で保存した非凍結乾燥製剤との比較において、糖を含まない製剤は、その活性を約８０％維持していた。種々の糖の添加により安定性が増加し、糖にもよるが、約８８％ないし約９８％の活性が保持されている。
【０４８７】
【表１２】
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【０４８８】
当業者にとって変更を行うことは自明であるため、本発明は、添付する請求項の範囲によってのみ制限されることを意図する。
【配列表】
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