(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式
【化３】
0005520236.tif 000081
で表される化合物。
【請求項２】
下記式
【化４】
0005520236.tif 000082
で表される化合物。
【請求項３】
下記式
【化５】
0005520236.tif 000083
で表される化合物。
【請求項４】
下記式
【化６】
0005520236.tif 000084
で表される化合物。
【請求項５】
下記式
【化７】
0005520236.tif 000085
で表される化合物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含むＭｄｍ２阻害剤。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を含む、ｐ５３とＭｄｍ２の結合阻害剤。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を有効成分とする医薬。
【請求項９】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩および薬学的に許容し得る担体を含有する医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩の、医薬製造のための使用。
【請求項１１】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を有効成分とする抗癌剤。
【請求項１２】
癌が、肺癌、乳癌、前立腺癌、大腸癌、急性骨髄性白血病、悪性リンパ腫、網膜芽細胞腫、神経芽細胞腫および肉腫から選ばれるいずれかである請求項１１に記載の抗癌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｍｄｍ２（ｍｕｒｉｎｅ  ｄｏｕｂｌｅ  ｍｉｎｕｔｅ  ２）阻害による抗腫瘍活性を有するプロリン環構造を有する化合物またはその塩に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞の癌化を抑制する重要な因子の１つとして、ｐ５３が知られている。ｐ５３は、細胞周期や細胞のアポトーシスに関与する遺伝子の発現を、様々なストレスに応答して誘導する転写因子である。ｐ５３は、この転写調節機能により細胞の癌化を抑制すると考えられており、実際、ヒトの癌の約半数にｐ５３遺伝子の欠失または変異が観察されている。【０００３】
一方、ｐ５３が正常であるにもかかわらず癌化している細胞の癌化の要因の１つとして、Ｅ３ユビキチンリガーゼの１種であるＭｄｍ２（ｍｕｒｉｎｅ  ｄｏｕｂｌｅ  ｍｉｎｕｔｅ  ２）の過剰発現が知られている。Ｍｄｍ２は、ｐ５３によって発現が誘導される蛋白質である。Ｍｄｍ２は、ｐ５３の転写活性ドメインに結合してｐ５３の転写活性を低下させるとともに、ｐ５３を核外に排出し、さらには、ｐ５３に対するユビキチン化リガーゼとして作用してｐ５３の分解を媒介することにより、ｐ５３を負に制御している。このため、Ｍｄｍ２が過剰発現している細胞では、ｐ５３機能の不活化および分解が促進され、癌化が引き起こされると考えられている（非特許文献１）。【０００４】
このようなＭｄｍ２の機能に着目し、Ｍｄｍ２によるｐ５３の機能抑制を阻害する物質を抗腫瘍剤の候補とするアプローチが多数なされてきた。Ｍｄｍ２とｐ５３との結合部位を標的としたＭｄｍ２阻害剤としては、ハロゲノベンゼンで２箇所置換されたイミダゾリン誘導体（例えば、非特許文献１、２および特許文献１〜８を参照のこと。）、ハロゲノベンゼンで２箇所置換されたイミダゾチアゾール誘導体（特許文献９を参照のこと。）等が報告されているが、これらの化合物について実際に臨床で有効性が得られたという報告はまだない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第２００３／５１３５９号パンフレット
【特許文献２】国際公開第２００３／５１３６０号パンフレット
【特許文献３】国際公開第２００５／３０９７号パンフレット
【特許文献４】国際公開第２００５／２５７５号パンフレット
【特許文献５】国際公開第２００５／１１０９９６号パンフレット
【特許文献６】国際公開第２００５／１２３６９１号パンフレット
【特許文献７】国際公開第２００７／６３０１３号パンフレット
【特許文献８】国際公開第２００８／１２５４８７号パンフレット
【特許文献９】国際公開第２００８／０７２６５５号パンフレット
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００４，３０３，８４４−８４８
【非特許文献２】Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａ，２００６，１０３，１８８８−１８９３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、新規なＭｄｍ２阻害化合物を提供するものである。また、本発明は、当該Ｍｄｍ２阻害化合物を含有する抗腫瘍剤を提供するものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、鋭意検討した結果、下記一般式（１）で表される構造を有する化合物またはその塩が、強いＭｄｍ２阻害活性を有することを見出し、本発明を完成させた。【０００９】
すなわち、本発明は、
[１]一般式（１）【００１０】
【化１】
0005520236.tif 000002
【００１１】
［式（１）中、
Ａｒ１は、ハロゲン原子、シアノ基およびＣ１〜Ｃ６アルキル基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいフェニル基を示し、
Ａｒ２は、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいフェニル基、または、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいピリジル基を示し、
Ｒ１は、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルカノイル基、水素原子、または水酸基を示し、
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基、カルボキシ基または水素原子を示すか、あるいは、Ｒ２とＲ３が一緒になってオキソ基を形成してもよく、また、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ結合する炭素原子とともにスピロ型もしくは縮合型の３〜５員の飽和炭化水素環を形成してもよく、
Ｒ４は、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基を示し、
Ｒ５は、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基を示し、
Ｒ６は、ハロゲン原子または水素原子を示し、
Ｒ７は、ハロゲン原子を示す。］
で表される化合物またはその塩。
[２]一般式（２）【００１２】
【化２】
0005520236.tif 000003
【００１３】
［式（２）中、
Ｒ１は、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルカノイル基、水素原子、または水酸基を示し、
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基、カルボキシ基または水素原子を示すか、あるいは、Ｒ２とＲ３が一緒になってオキソ基を形成してもよく、また、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ結合する炭素原子とともにスピロ型もしくは縮合型の３〜５員の飽和炭化水素環を形成してもよく、
Ｒ４は、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基を示し、
Ｒ５は、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基を示し、
Ｒ６は、ハロゲン原子または水素原子を示し、
Ｒ７は、ハロゲン原子を示す。］
で表される化合物またはその塩。
[３]Ｒ１が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、１もしくは複数個のハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１〜Ｃ６アルカノイル基または水素原子である[１]または[２]に記載の化合物またはその塩。
[４]Ｒ４が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基である[１]〜[３]のいずれか１に記載の化合物またはその塩。
[５]Ｒ５が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基である[１]〜[４]のいずれか１に記載の化合物またはその塩。
[６]下記式【００１４】
【化３】
0005520236.tif 000004
【００１５】
で表される化合物。
[７]下記式【００１６】
【化４】
0005520236.tif 000005
【００１７】
で表される化合物。
[８]下記式【００１８】
【化５】
0005520236.tif 000006
【００１９】
で表される化合物。
[９]下記式【００２０】
【化６】
0005520236.tif 000007
【００２１】
で表される化合物。
[１０]下記式【００２２】
【化７】
0005520236.tif 000008
【００２３】
で表される化合物。
[１１][１]〜[１０]のいずれか１に記載の化合物またはその塩を含むＭｄｍ２阻害剤。
[１２] [１]〜[１０]のいずれか１に記載の化合物またはその塩を含む、ｐ５３とＭｄｍ２の結合阻害剤。
[１３] [１]〜[１０]のいずれか１に記載の化合物またはその塩を有効成分とする医薬。
[１４] [１]〜[１０]のいずれか１に記載の化合物またはその塩および薬学的に許容し得る担体を含有する医薬組成物。
[１５] [１]〜[１０]のいずれか１に記載の化合物またはその塩の、医薬製造のための使用。
[１６] [１]〜[１０]のいずれか１に記載の化合物またはその塩を有効成分とする抗癌剤。
[１７] [１]〜[１０]のいずれか１に記載の化合物またはその塩を投与することを特徴とする癌の治療方法。
[１８]癌が、肺癌、乳癌、前立腺癌、大腸癌、急性骨髄性白血病、悪性リンパ腫、網膜芽細胞腫、神経芽細胞腫および肉腫から選ばれるいずれかである[１６]に記載の抗癌剤。
[１９]癌が、肺癌、乳癌、前立腺癌、大腸癌、急性骨髄性白血病、悪性リンパ腫、網膜芽細胞腫、神経芽細胞腫および肉腫から選ばれるいずれかである[１７]に記載の癌の治療方法。
【発明の効果】
【００２４】
本発明によって、Ｍｄｍ２阻害活性を有する、上記式（１）で表される新規イミダゾチアゾール誘導体が提供される。このような新規化合物は、抗腫瘍剤として有用である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本発明において、「Ｍｄｍ２」とは、ｍｕｒｉｎｅ  ｄｏｕｂｌｅ  ｍｉｎｕｔｅ  ２遺伝子によってコードされる蛋白質のことをいう。「Ｍｄｍ２」は、完全長のＭｄｍ２遺伝子によってコードされるＭｄｍ２蛋白質またはＭｄｍ２遺伝子変異体（欠損変異体、置換変異体または付加変異体を含む）によってコードされるＭｄｍ２蛋白質等を含む。本発明において、「Ｍｄｍ２」とは、種々の動物種由来のホモログ、例えば、ヒトＭｄｍ２ホモログ（ＨＤＭ２）も含む。
【００２６】
本発明において、「ｐ５３」とは、ｐ５３遺伝子によってコードされる蛋白質のことをいう。「ｐ５３」とは、完全長のｐ５３遺伝子によってコードされるｐ５３蛋白質または変異（欠損、置換、付加による変異を含む）を有するが正常に機能するｐ５３蛋白質のことを意味する。
【００２７】
本発明において、「Ｍｄｍ２阻害剤」とは、Ｍｄｍ２およびｐ５３のいずれかに作用するか、ｐ５３およびＭｄｍ２の両方に作用して、Ｍｄｍ２によって抑制されているｐ５３の機能を回復させる因子をいう。ｐ５３の機能とは、正常なｐ５３が本来有する機能であれば特に限定されず、例えば、細胞周期や細胞のアポトーシスに関与する遺伝子の発現を誘導して細胞の癌化を抑制することが挙げられる。Ｍｄｍ２阻害剤としては、例えば、Ｍｄｍ２がｐ５３に結合することを阻害する因子（以下、ｐ５３とＭｄｍ２の結合阻害剤と称する。）またはＭｄｍ２によるｐ５３のユビキチン化を阻害する因子（以下、Ｍｄｍ２ユビキチンリガーゼ阻害剤と称する。）が挙げられる。
【００２８】
本発明において、「ｐ５３転写活性抑制の阻害剤」とは、Ｍｄｍ２によって抑制されているｐ５３の転写因子としての機能を回復させる因子をいう。
【００２９】
本発明において、「ｐ５３分解の阻害剤」とは、Ｍｄｍ２によるｐ５３のユビキチン化を阻害することにより、ｐ５３のプロテアソームにおける分解を阻害する因子をいう。
【００３０】
本発明において、用語「腫瘍」および「癌」は交換可能に使用される。また、本発明において、腫瘍、悪性腫瘍、癌、悪性新生物、癌腫、肉腫等を総称して、「腫瘍」または「癌」と表現する場合がある。
【００３１】
本発明において、
「Ｃ１〜Ｃ６アルキル基」とは、炭素数１〜６の直鎖、分岐鎖または環状のアルキル基を意味する。「Ｃ１〜Ｃ６アルキル基」としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、またはシクロヘキシル基などが挙げられる。
【００３２】
「Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基」とは、炭素数１〜６の直鎖、分岐鎖または環状のアルキル基を有するアルコキシ基を意味する。「Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基」としては、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、またはシクロペンチルオキシ基などが挙げられる。
【００３３】
「Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基」とは、炭素数１〜６の直鎖、分岐鎖または環状のアルキル基を有するアルカノイル基を意味する。「Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基」としては、例えば、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、またはメチルプロピオニル基などが挙げられる。
【００３４】
「ハロゲン原子」としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等が挙げられる。
【００３５】
「オキソ基」とは、特に言及されない限り、「＝Ｏ」で表される基を意味する。
【００３６】
以下に、式（１）中の各置換基について説明する。
【００３７】
下記一般式（１）中、
【００３８】
【化８】
0005520236.tif 000009
【００３９】
Ｒ１は、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルカノイル基、水素原子、または水酸基を示す。
【００４０】
ここで、「１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基」および「１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルカノイル基」における置換基は、０〜３個が好ましく、置換基としては、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基、またはシアノ基が好ましい。ハロゲン原子、水酸基またはＣ１〜Ｃ６アルコキシ基がさらに好ましい。
【００４１】
「１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基」としては、無置換または、１もしくは複数個のハロゲン原子、水酸基もしくはＣ１〜Ｃ６アルコキシ基を置換基として有するＣ１〜Ｃ６アルキル基がより好ましく、無置換または１〜３個のフッ素原子を置換基として有するＣ１〜Ｃ６アルキル基がさらに好ましい。
【００４２】
「１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルカノイル基」としては、無置換または、１〜３個のハロゲン原子を置換基として有するＣ１〜Ｃ６アルカノイル基が好ましく、ホルミル基、アセチル基、トリフルオロメチルカルボニル基が特に好ましい。
【００４３】
Ｒ１としては、無置換もしくはハロゲン原子で置換されたＣ１〜Ｃ６アルキル基、無置換もしくはハロゲン原子で置換されたＣ１〜Ｃ６アルカノイル基または水素原子が好ましい。
【００４４】
Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立して、ハロゲン原子、水酸基、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ基、カルバモイル基、アミノ基、Ｃ１〜Ｃ６アルカノイル基およびシアノ基から選ばれる１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基、カルボキシ基または水素原子を示すか、あるいは、Ｒ２とＲ３が一緒になってオキソ基を形成してもよく、また、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ結合する炭素原子とともにスピロ型もしくは縮合型の３〜５員の飽和炭化水素環を形成してもよい。
【００４５】
ここで、「１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基」は、Ｒ１における定義と同義であり、好ましい例示も同様である。
【００４６】
Ｒ２およびＲ３がともにカルボキシ基であるか、もしくは、Ｒ２およびＲ３のいずれかが、カルボキシ基である場合、カルボキシ基がエステル化もしくはアミド化された化合物も本発明の範囲に包含される。例えば、そのカルボキシ基がエチルエステル化、フェニルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ジメチルアミノメチルエステル化、ピバロイルオキシメチルエステル化、エトキシカルボニルオキシエチルエステル化、アミド化又はメチルアミド化された化合物等がその例として挙げられる。
【００４７】
「Ｒ２およびＲ３がそれぞれ結合する炭素原子とともにスピロ型若しくは縮合型の３〜５員の飽和炭化水素環を形成してもよい。」とは、Ｒ２とＲ３が同一の炭素原子に結合している置換基である場合に、Ｒ２およびＲ３が結合してスピロ型の３〜５員の飽和炭化水素環を形成してもよく、Ｒ２およびＲ３が異なる炭素原子上に結合している場合に、Ｒ２およびＲ３が結合して縮合型の３〜５員の飽和炭化水素環を形成してもよいことを意味する。「３〜５員の飽和炭化水素環」とは、シクロプロパン環、シクロブタン環、シクロペンタン環等が挙げられる。
【００４８】
Ｒ２およびＲ３としては、それぞれ独立して、水素原子、置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基、またはカルボキシ基が好ましく、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基に置換する置換基としてはフッ素原子または水酸基が好ましく、Ｒ２およびＲ３がそれぞれ水素原子であるか、Ｒ２およびＲ３のいずれかが水素原子であり他方がメチル基またはエチル基であるか、あるいは、同一の炭素原子に結合しているＣ１〜Ｃ６アルキル基であるＲ２およびＲ３が、これらが結合している炭素原子とともにスピロ型の３〜４員の飽和炭化水素環を形成することがより好ましい。Ｒ２およびＲ３は、ともにピペラジン環上の６位の置換基であることが好ましい。
【００４９】
Ｒ４は、１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基を示す。ここで、「１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基」は、上記Ｒ１における定義と同義である。
【００５０】
Ｒ４としては、無置換のＣ１〜Ｃ６アルキル基が好ましく、無置換のＣ１〜Ｃ３アルキル基がより好ましく、イソプロピル基がさらに好ましい。
【００５１】
Ｒ５は、１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基を示す。ここで、「１もしくは複数個の置換基を有していてもよいＣ１〜Ｃ６アルキル基」は、上記Ｒ１における定義と同義である。
【００５２】
Ｒ５としては、無置換のＣ１〜Ｃ６アルキル基が好ましく、無置換のＣ１〜Ｃ３アルキル基がより好ましく、メチル基またはエチル基がさらに好ましい。
【００５３】
Ｒ６は、ハロゲン原子または水素原子を示す。Ｒ６としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、または水素原子が好ましく、フッ素原子または水素原子がより好ましい。
【００５４】
Ｒ７は、ハロゲン原子を示す。Ｒ７としては、フッ素原子、塩素原子、または臭素原子が好ましく、フッ素原子がより好ましい。
【００５５】
Ａｒ１は、１もしくは複数個の置換基を有していてもよいフェニル基を示す。Ａｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、シアノ基またはハロゲン原子を置換基として１〜３個有するフェニル基であることが好ましく、ハロゲン原子を置換基として１〜３個有するフェニル基であることがより好ましい。置換基の位置はいずれでも良いが、よりこの好ましくは、４−クロロフェニル基、３−フルオロ−４−クロロフェニル基である。
【００５６】
Ａｒ２は、１もしくは複数個の置換基を有していてもよいフェニル基または１もしくは複数個の置換基を有していてもよいピリジル基を示す。Ａｒ２は、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、またはシアノ基を置換基として１〜３個有するフェニル基であるか、ハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基またはシアノ基を置換基として１〜３個有するピリジル基であることが好ましい。置換基の位置はいずれでもよいが、より好ましくは、４−クロロフェニル基または６−クロロピリジン−３−イル基である。
【００５７】
Ａｒ１とＡｒ２のイミダゾチアゾール骨格における絶対配置は、それぞれ、５Ｒ、６Ｓであることが好ましい。
【００５８】
さらに、本発明の式（１）で表される化合物は、下記一般式（２）
【００５９】
【化９】
0005520236.tif 000010
【００６０】
で示される化合物であることが好ましい。
【００６１】
尚、ここで、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７の定義、例示、好ましい例については、上記一般式（１）で述べたものと同様である。
【００６２】
さらには、本発明の化合物は、下記群
【００６３】
【化１０】
0005520236.tif 000011
【００６４】
から選ばれる１の化合物であることが好ましい。
【００６５】
本発明の式（１）で表される化合物には、立体異性体あるいは不斉炭素原子に由来する光学異性体が存在することもあるが、これらの立体異性体、光学異性体およびこれらの混合物のいずれも本発明に含まれる。
【００６６】
本発明の１つの実施形態において、式（３）
【００６７】
【化１１】
0005520236.tif 000012
【００６８】
（式中、Ａｒ１、Ａｒ２、Ｒ１〜Ｒ７は、上記と同義である。）で表される絶対配置を有する化合物が好ましい。
【００６９】
さらに、一般式（１）の化合物は、実施例のいずれかおよび／または、後述の表１〜１２に記載の化合物、その塩又はそれらの水和物が好ましい。
【００７０】
本発明の一般式（１）で表される化合物が、アミノ基等の塩基性基を有する場合、所望により医薬的に許容される塩とすることができる。そのような塩としては、例えば塩酸塩、ヨウ化水素酸塩等のハロゲン化水素酸塩；硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、燐酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩等の低級アルカンスルホン酸塩；ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等のアリ−ルスルホン酸塩；ギ酸、酢酸、りんご酸、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩；及びオルニチン酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩等のアミノ酸塩；を挙げることができ、ハロゲン化水素酸塩及び有機酸塩が好ましい。
【００７１】
本発明の一般式（１）で表される化合物が、カルボキシ基等の酸性基を有する場合、一般的に塩基付加塩を形成することが可能である。医薬的に許容される塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アンモニウム塩等の無機塩；ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、シクロヘキシルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−Ｎ−（２−フェニルエトキシ）アミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニウム塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩等の有機アミン塩、等を挙げることができる。
【００７２】
本発明の一般式（１）で表される化合物又はその塩は、遊離体もしくは溶媒和物として存在することもある。空気中の水分を吸収すること等により水和物として存在することもある。溶媒和物としては、医薬的に許容し得るものであれば特に限定されないが、具体的には、水和物、エタノール和物等が好ましい。また、一般式（１）で表される本発明化合物中に窒素原子が存在する場合にはＮ−オキシド体となっていてもよく、これら溶媒和物及びＮ−オキシド体も本発明の範囲に含まれる。
【００７３】
本発明の一般式（１）で表される化合物は、置換基の種類や組み合わせによって、シス体、トランス体等の幾何異性体、互変異性体又はｄ体、ｌ体等の光学異性体等の各種異性体が存在し得るが、本発明の化合物は、特に限定していない場合はそれら全ての異性体、立体異性体及びいずれの比率のこれら異性体及び立体異性体混合物をも包含するものである。
【００７４】
本発明の一般式（１）で表される化合物は、構成する原子の一つまたは複数で非天然の比率の原子同位体を含むこともある。原子同位体としては、例えば、重水素（２Ｈ)、トリチウム（３Ｈ)、ヨウ素−１２５、（１２５Ｉ）または炭素−１４（１４Ｃ）などが挙げられる。これらの化合物は、治療又は予防剤、研究試薬、例えば、アッセイ試薬、及び診断剤、例えば、インビボ画像診断剤として有用である。一般式（１）で表される化合物のすべての同位体変種は、放射性であるかどうかにかかわらず、本発明の範囲内に含まれる。
【００７５】
また、本発明は、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により本発明の医薬組成物の有効成分である化合物（１）に変換される化合物、すなわち、酵素的に酸化、還元、加水分解等を起こして化合物（１）に変化される化合物又は胃酸等により加水分解等を起こして化合物（１）に変化される「医薬的に許容されるプロドラッグ化合物」も本発明に包含する。
【００７６】
上記プロドラッグとしては、化合物（１）にアミノ基が存在する場合には、そのアミノ基がアシル化、アルキル化、リン酸化された化合物（例えば、そのアミノ基がエイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化、ｔｅｒｔ−ブチル化された化合物等である）等を挙げることができ、化合物（１）に水酸基が存在する場合には、その水酸基がアシル化、アルキル化、リン酸化、ホウ酸化された化合物（例えば、その水酸基がアセチル化、パルミトイル化、プロパノイル化、ピバロイル化、サクシニル化、フマリル化、アラニル化、ジメチルアミノメチルカルボニル化された化合物等である。）等を挙げることができる。また、化合物（Ｉ）にカルボキシ基が存在する場合には、そのカルボキシ基がエステル化、アミド化された化合物（例えば、そのカルボキシ基がエチル  エステル化、フェニル  エステル化、カルボキシメチル  エステル化、ジメチルアミノメチル  エステル化、ピバロイルオキシメチル  エステル化、エトキシカルボニルオキシエチル  エステル化、アミド化又はメチルアミド化された化合物等である。）等が挙げられる。
【００７７】
本発明の化合物のプロドラッグは公知の方法によって化合物（１）から製造することができる。また、本発明の化合物のプロドラッグは、広川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計１６３頁〜１９８頁に記載されているような、生理的条件で化合物（１）に変化するものも含まれる。
【００７８】
本発明の一般式（１）で表される化合物の具体例としては、例えば、下記の化合物表１〜１２に記載の化合物を挙げることができる。これらの化合物は、下記の［製造法１〜４］または実施例に記載の方法に従って合成することができる。表中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ａｒ１およびＡｒ２は、下記一般式（１ａ）に示される基を意味する。
【００７９】
【化１２】
0005520236.tif 000013
【００８０】
【表１】
0005520236.tif 000014
【００８１】
【表２】
0005520236.tif 000015
【００８２】
【表３】
0005520236.tif 000016
【００８３】
【表４】
0005520236.tif 000017
【００８４】
【表５】
0005520236.tif 000018
【００８５】
【表６】
0005520236.tif 000019
【００８６】
【表７】
0005520236.tif 000020
【００８７】
【表８】
0005520236.tif 000021
【００８８】
【表９】
0005520236.tif 000022
【００８９】
【表１０】
0005520236.tif 000023
【００９０】
【表１１】
0005520236.tif 000024
【００９１】
【表１２】
0005520236.tif 000025
【００９２】
次に、一般式（１）で表される化合物の代表的な製造法について説明する。本発明の化合物は種々の製造法により製造することができ、以下に示す製造法は一例であり、本発明はこれらに限定して解釈されるべきではない。なお、反応に際しては、必要に応じて置換基を適当な保護基で保護して行うことができ、保護基の種類は特に限定されない。
【００９３】
［製造法１］
【００９４】
【化１３】
0005520236.tif 000026
【００９５】
［式中、Ｚは塩素原子または臭素原子等のハロゲン原子を意味する。Ｒ１１は、カルボキシ基の保護基を意味し、Ｒ１２は、アミノ基の保護基を意味する。尚、これらの「保護基」は、「保護基」であれば、各反応工程を経る間において同一であっても異なるものとなってもよい。Ａｒ１、Ａｒ２、およびＲ１〜Ｒ７は前記と同義である。］
カルボキシ基の保護基としては、メチル基、エチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ベンジル基等の置換、無置換のアルキル基もしくはアラルキル基が挙げられる。
【００９６】
化合物（４）の合成
標記立体配置を有する光学活性ジアミン化合物（３）を、二硫化炭素または１，１´−チオカルボニルジイミダゾールと反応させることにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒は、エタノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、室温付近から１００℃までの範囲である。
【００９７】
化合物（５）の合成
化合物（４）を、化合物（Ａ）と反応させることにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒は、エタノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、クロロホルム、トルエン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、室温付近から１００℃までの範囲である。
【００９８】
化合物（６）の合成
Ｒ１１の脱保護工程である。
【００９９】
Ｒ１１の種類によって脱保護の反応条件は異なるが、加水分解すればよく、Ｒ１１が、メチル基、エチル基、ベンジル基等の場合、化合物（５）を、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、または、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等の塩基、あるいは塩酸、ｐ−トルエンスルホン酸等と処理することにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒は、メタノール、エタノール、水、テトラヒドロフラン、ジオキサン等、または、これらの混合溶媒が挙げられるが、水と任意の比率で混合可能な有機溶媒が好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、室温付近から１００℃までの範囲である。Ｒ１１がｔｅｒｔ−ブチル基等の場合、化合物（５）を、トリフルオロ酢酸または塩酸等と処理することが望ましい。ここで、反応に用いられる溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは−２０℃から室温付近までの範囲である。
【０１００】
化合物（７）の合成
化合物（６）を、塩化チオニル、塩化オキザリル、オキシ塩化リン、１−クロロ−Ｎ，Ｎ，２−トリメチル−１−プロペニルアミン等の酸ハロゲン化試薬と反応させることにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒は、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。または、無溶媒で反応することができる。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは０℃から１００℃までの範囲である。
【０１０１】
化合物（８）の合成
化合物（７）と化合物（Ｂ）を塩基存在下、反応させることにより得ることができる。用いる塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、２，６−ルチジン、ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンのような有機塩基、または炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等の無機塩基を挙げることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、トルエン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されないが、乾燥させたものが好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは−１０℃から室温付近までの範囲である。また別法として、本化合物（８）は、化合物（６）と化合物（Ｂ）を、縮合剤存在下に反応させても得ることができる。ここで、用いる縮合剤としては、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド等を挙げることができ、反応に用いられる溶媒としては、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、酢酸エチル等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは０℃から５０℃までの範囲である。また、必要に応じてトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、または４−ジメチルアミノピリジン等の塩基を添加することができる。さらに、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド等を反応促進剤として添加することも可能である。
【０１０２】
化合物（９）の合成
上記、化合物（６）の製造法に用いた反応条件により、脱保護を行うことにより得ることができる。
【０１０３】
化合物（１）の合成
上記、化合物（８）の製造法で別法として記載した、縮合剤を用いた反応条件により、化合物（９）と化合物（Ｃ）から得ることができる。また別法として、化合物（９）と化合物（Ｃ）を塩基存在下、１−クロロ−Ｎ，Ｎ，２−トリメチル−１−プロペニルアミン等の酸ハロゲン化試薬と反応させることにより得ることができる。ここで、用いる塩基としては、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、２，６−ルチジン、ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンのような有機塩基、または炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等の無機塩基を挙げることができる。反応に用いられる溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは−２０℃から５０℃までの範囲である。
【０１０４】
本発明化合物（１）は、以下の方法でも製造することができる。
［製造法２］
【０１０５】
【化１４】
0005520236.tif 000027
【０１０６】
［式中、Ｒ１２は、アミノ基の保護基を意味する。Ｒ１〜Ｒ３、Ｒ６およびＲ７は前記と同義である。］
アミノ基の保護基としては、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基、ベンジル基等が挙げられる。
【０１０７】
化合物（１０）の合成
上記製造法１で記載した、化合物（１）（化合物（９）と化合物（Ｃ）のアミド化）の製造法に用いた反応条件により、化合物（Ｂ’）と化合物（Ｃ）から得ることができる。
【０１０８】
化合物（１１）の合成
Ｒ１２の種類によって脱保護の反応条件は異なる。通常この分野で実施される反応条件で行えばよい。Ｒ１２がベンジルオキシカルボニル基またはベンジル基等の場合、パラジウム炭素等の還元触媒を加え、水素雰囲気下、あるいはギ酸アンモニウム等の水素源共存下で反応させることにより、脱保護することができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、メタノール、エタノール等のアルコール類、テトラヒドロフラン、ジオキサン、酢酸エチル、水等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、０℃から室温付近の温度である。また、Ｒ１２がｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基等の場合、トリフルオロ酢酸または塩酸等で処理することにより脱保護することができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノール、水等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、０℃から室温付近の温度である。
【０１０９】
化合物（１）の合成
上記製造法１で記載した化合物（８）（化合物（Ｂ）と化合物（６）または化合物（７）のアミド化）の製造法に用いた反応条件により、化合物（１１）と化合物（６）または化合物（７）から得ることができる。
【０１１０】
本発明化合物（１）のＲ１が、通常保護基として用いられている、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基またはトリフルオロアセチル基等の場合、上記製造法２で記載した化合物（１１）の製造法（化合物（１０）におけるＲ１２の脱保護）に用いた反応条件、または、メタノールまたはエタノールと水の混合溶媒中、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウム等の塩基で処理することにより、Ｒ１が水素原子である化合物（１）を得ることができる。さらに、Ｒ１が水素原子の場合、通常の有機化学的方法用いて、定義されている置換基に変換することができる。例えば、アルデヒド誘導体共存下、水素化シアノホウ素ナトリウムまたはトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤で処理することにより、Ｒ１をアルキル基等に変換できる。また、トリエチルアミン等の塩基存在下、酸クロリド誘導体と反応させることにより、Ｒ１をアルカノイル基またはアルキルスルホニル基に変換することができる。
【０１１１】
製造原料である化合物（３）は、文献（Ｓｙｎｌｅｔｔ，１９９８，６２３またはＵＳ２００５／２６９１６）記載の方法に従って合成できる。また，以下の方法でも合成できる。
【０１１２】
［製造法３］
【０１１３】
【化１５】
0005520236.tif 000028
【０１１４】
［式中、Ｚは塩素原子または臭素原子等のハロゲン原子を意味する。Ｒ１３は、トリクロロエチルオキシスルホニル基、ｐ−トルエンスルホニル基等を意味する。Ａｒ１、Ａｒ２、およびＲ５は前記と同義である。］
化合物（１３）の合成
化合物（１２）とトリフェニルホスフィンまたは亜リン酸トリエチル等の、有機リン化合物との反応から得られるホスホニウム塩またはホスホン酸エステルを、アルキルリチウム、リチウムジイソプロピルアミド、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、水素化ナトリウム、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等の塩基で処理した後、化合物（Ｄ）と反応させることにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、トルエン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されないが、乾燥させたものが好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、−７８℃から室温までの範囲である。
【０１１５】
化合物（１４）の合成
化合物（１４）は、種々の文献（例えば、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．，２００５，４６，４０３１、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００２，１２４，１３６６７２、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００１，１２３，７７０７、Ｓｙｎｌｅｔｔ，２００４，５２５、または特開２０００―７２７４３）で報告されている合成法に準じて合成できる。例えば、化合物（１３）と、アルコキシスルホンアミド誘導体またはアリールスルホンアミド誘導体を、ロジウム触媒存在下、酢酸ヨードソベンゼン等の酸化剤、および酸化マグネシウム等の塩基を添加し、反応させることにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、トルエン、アセトニトリル等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されないが、乾燥したものが好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、−２０℃から８０℃までの範囲である。
【０１１６】
化合物（１５）の合成
化合物（１４）を、アンモニア水と処理することにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、メタノール、エタノール、水、テトラヒドロフラン、ジオキサン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されないが、水と任意の比率で混合可能な有機溶媒が好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、室温から８０℃までの範囲である。
【０１１７】
化合物（３）の合成
化合物（１５）を、塩酸、硫酸、またはトリフルオロ酢酸等で処理することにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、メタノール、エタノール、水、テトラヒドロフラン、ジオキサン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されないが、水と任意の比率で混合可能な有機溶媒が好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、室温から８０℃までの範囲である。
【０１１８】
［製造法４］
【０１１９】
【化１６】
0005520236.tif 000029
【０１２０】
［式中、Ｒ１１は、カルボキシル基の保護基を意味し、Ｚは塩素原子または臭素原子等ハロゲン原子を意味する。Ａｒ１、Ａｒ２、およびＲ５は前記と同義である。］
化合物（１６）の合成
化合物（Ｄ）を、シアン化カリウムまたはシアン化ナトリウム、塩化アンモニウムおよびアンモニア水との反応（Ｓｔｒｅｃｋｅｒ反応）により得られるアミノニトリル体を、塩酸あるいは硫酸等の鉱酸、またはｐ−トルエンスルホン酸あるいはメタンスルホン酸等の有機酸と処理することにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、メタノール、エタノール、水、テトラヒドロフラン、ジオキサン等、または、これらの混合溶媒が挙げられる、特に限定されない。反応温度は、通常−２０℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、室温付近から１００℃までの範囲である。
【０１２１】
化合物（１７）の合成
化合物（１６）の、カルボキシル基およびアミノ基の保護は、それぞれ常法により得ることができる。ここで、保護基導入の順序は特に限定されない。以下、各反応について述べる。エステル化は、メタノールまたはエタノール等のＲ１１に対応する低級アルコール中、塩化水素、硫酸、または塩化チオニル等のハロゲン化試薬で処理することにより得ることができる。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは、０℃から１００℃までの範囲である。また、アミノ基のｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル化は、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、または４−ジメチルアミノピリジン等の塩基存在下、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ-ブチルと反応させることにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、アセトニトリル、トルエン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されないが、乾燥させたものが好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは０℃から１００℃までの範囲である。
【０１２２】
化合物（１８）の合成
化合物（１７）のエステル基の還元は、水素化リチウムアルミニウム等の禁水性試薬を用いた反応では、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等の非プロトン性溶媒中、室温以下の温度（好ましくは−４０℃から０℃）において反応させることによりアルコール体を得ることができる。また、水素化ホウ素ナトリウム等を用いて行う場合は、メタノール、エタノール、水等のプロトン性溶媒、または、これらと上記非プロトン性溶媒との混合溶媒を用いて、室温以下の温度（好ましくは−２０℃から室温付近）において反応させることにより同様にアルコール体を得ることができる。このようにして得られたアルコール体は、クロム酸［クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ），ニクロム酸ピリジニウム（ＰＤＣ）等］、ジメチルスルホキシドと塩化オキサリル（Ｓｗｅｒｎ酸化）、ジメチルスルホキシドと無水酢酸、ジメチルスルホキシドと三酸化硫黄ピリジン錯体、１，１，１−トリアセトキシ−１，１−ジヒドロ−１，２−ベンズヨードキソル−３（１Ｈ）−オン（Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ試薬）、または２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）と次亜塩素酸等の酸化剤と反応させることにより、化合物（１８）を得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、ジメチルスルホキシド、水、トルエン等、または、これらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは−７８℃から室温付近までの範囲である。
【０１２３】
化合物（１９）の合成
化合物（１８）を、アリールリチウム化合物（Ａｒ１Ｌｉ）またはグリニャール試薬（Ａｒ１ＭｇＺ）と反応させることにより得ることができる。対応するアリールリチウム化合物またはグリニャール試薬は、市販品であるか、または常法に従い、合成することができる。対応するアリールハロゲン化物と金属マグネシウムからグリニャール試薬を合成することができ、対応するアリールハロゲン化物と市販されているアルキルリチウム試薬等から、ハロゲン−メタル交換により、有機リチウム試薬を合成することができる。
【０１２４】
ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン等、またはこれらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されないが、乾燥させたものが好ましい。反応温度は、通常−７８℃から１００℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは−７８℃から室温付近までの範囲である。
【０１２５】
化合物（２０）の合成
上記化合物（１９）の製造法に記載した、酸化反応の反応条件を適宜選択して用いることにより得ることができる。
【０１２６】
化合物（２１）の合成
上記製造法２で記載した化合物（１１）の製造法において、Ｒ１２がｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基である場合の反応条件を用いることにより得ることができる。
【０１２７】
化合物（２２）の合成
化合物（２１）を、スルファミドと１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン等の塩基存在下、加熱することにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、酢酸エチル、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、エチレングリコール、アセトニトリル、トルエン等、またはこれらの混合溶媒が挙げられ、特に限定されない。反応温度は、通常−７８℃から１８０℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは７０℃から１５０℃までの範囲である。
【０１２８】
化合物（２３）の合成
化合物（２２）を、上記化合物（１８）の製造法に記載した、還元反応の反応条件を適宜選択して用いることにより得ることができる。
【０１２９】
化合物（３）の合成
化合物（２３）を、文献（Ｓｙｎｌｅｔｔ，１９９８，６２３−６２４，ＵＳ２００５／００２６９１６）に記載されている方法に準じて合成することができる。また別法として、化合物（２３）を、ピリジンまたはエチレンジアミン等の塩基存在下、加水分解することにより得ることができる。ここで、反応に用いられる溶媒としては、メタノール、エタノール、水、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコール等、または、これらの混合溶媒が挙げられるが、水と任意の比率で混合可能な有機溶媒が好ましい。反応温度は、通常０℃から１８０℃もしくは溶媒の沸点までの範囲であるが、好ましくは６０℃から１２０℃の範囲である。
【０１３０】
上記製造法により得た、ラセミ体化合物（３）は、文献（ＵＳ２００５／２６９１６，特開２００５―７５７５４，またはＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，１９９５，６，３）記載の方法に準じて、光学分割することができる。例えば、ラセミ体化合物（３）を、メタノールまたはエタノールと水の混合溶媒中、光学分割剤としてＬ−（＋）−酒石酸等と処理することにより、酒石酸塩を結晶として得ることができる。この酒石酸塩を、水酸化ナトリウム等の塩基で処理することにより、表記立体配置を有する光学活性ジアミン（３）が得られる。
製造原料である化合物（Ａ）は、市販品であるか、または文献（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ，１９９５，６，２１９９）記載の方法に従って合成できる。
【０１３１】
製造原料である化合物（Ｂ）および（Ｃ）は、市販品であるか、または参考例記載の方法に従って合成できる。
【０１３２】
製造原料である化合物（Ｄ）は、市販品であるか、または種々文献（例えば、Ｊ．，Ｍｅｄ．，Ｃｈｅｍ．，２０００，４３，４７８１）記載の方法に従って合成できる。
【０１３３】
本発明の１つの実施形態において、本発明の化合物は、ｐ５３とＭｄｍ２との結合を阻害し、Ｍｄｍ２によるｐ５３のユビキチン化を阻害するので、ｐ５３とＭｄｍ２の結合阻害剤および／またはＭｄｍ２ユビキチンリガーゼ阻害剤として使用することができる。
【０１３４】
ｐ５３とＭｄｍ２の結合状態は、蛋白質間の結合状態を調べるために当業者に通常用いられる方法（例えば、免疫学的手法または表面プラズモン共鳴技術等）を用いて検出することができる。免疫学的手法を用いてＭｄｍ２とｐ５３の結合状態を調べる方法としては、例えば、免疫沈降法またはＥＬＩＳＡ（Ｅｎｚｙｍｅ−Ｌｉｎｋｅｄ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｓｏｒｂｅｎｔ  Ａｓｓａｙ）が挙げられる。このような免疫学的手法に用いる抗体は、Ｍｄｍ２および／またはｐ５３を直接検出することができる抗Ｍｄｍ２抗体および／または抗ｐ５３抗体であってもよいし、Ｍｄｍ２および／またはｐ５３をタグ（例えば、ＧＳＴタグまたはヒスチジンタグ）等で標識する場合は、標識に適した抗体（例えば抗ＧＳＴ抗体または抗ヒスチジン抗体）を用いればよい。免疫学的手法を用いてｐ５３とＭｄｍ２の結合状態を調べる方法は、例えば、国際公開第２００３／５１３５９号パンフレット、国際公開第２００３／５１３６０号パンフレット、米国特許出願公開第２００４／２５９８６７号明細書または米国特許出願公開第２００４／２５９８８４号明細書または国際公開第２００５／１１０９９６号パンフレットに記載されている。表面プラズモン共鳴技術を用いてｐ５３とＭｄｍ２の結合状態を調べる方法については、例えば、Ｓｃｉｅｎｃｅ、第３０３巻、８４４−８４８頁、２００４年に記載されている。
【０１３５】
ｐ５３に対するＭｄｍ２のユビキチンリガーゼ活性は、当業者に通常用いられるユビキチンリガーゼアッセイを用いて調べることができる。ユビキチンリガーゼ活性は、例えば、ユビキチン活性化酵素（Ｅ１）、ユビキチン結合酵素（Ｅ２）およびユビキチンリガーゼ（Ｅ３）（Ｍｄｍ２）によるｐ５３のユビキチン化を、試験化合物の存在下と非存在下とで比較することによって検出することができる（例えば、国際公開第２００１／７５１４５号パンフレットまたは国際公開第２００３／７６６０８号パンフレット）。
【０１３６】
別の実施形態において、本発明の化合物は、ｐ５３転写活性化ドメインへのＭｄｍ２の結合を阻害することにより、Ｍｄｍ２によって抑制されていたｐ５３の転写因子としての機能を回復させるので、ｐ５３転写活性抑制の阻害剤として使用することができる。ｐ５３転写活性抑制の阻害剤は、例えば、試験化合物の存在下または非存在下において、ｐ５３によって転写が制御される蛋白質（例えば、ｐ２１Ｗａｆ１／Ｃｉｐ１）のｍＲＮＡ量または蛋白質量を当業者に通常用いられるｍＲＮＡ測定法（例えば、ノーザンブロット法）または蛋白質測定法（例えば、ウエスタンブロット法）を用いて測定し、試験化合物の存在下における該ｍＲＮＡ量または蛋白質量が試験化合物の非存在下における場合と比較して増加している場合に、該試験化合物をｐ５３転写活性抑制の阻害剤として選択することにより得ることができる。また、ｐ５３転写活性抑制の阻害剤は、ｐ５３応答配列を含むレポーター遺伝子のレポーター活性を指標としたレポーターアッセイにより同定することもできる。
【０１３７】
別の実施形態において、本発明の化合物は、Ｍｄｍ２によるｐ５３のユビキチン化を阻害し、ｐ５３のプロテアソームにおける分解を防ぐので、ｐ５３分解の阻害剤として使用することができる。ｐ５３分解の阻害剤は、例えば、試験化合物の存在下または非存在下において、ｐ５３の蛋白質量を当業者に通常用いられる蛋白質測定法（例えば、ウエスタンブロット法）を用いて測定し、試験化合物の存在下における該蛋白質量が試験化合物の非存在下における場合と比較して増加している場合に、該試験化合物をｐ５３分解の阻害剤として選択することにより得ることができる。
【０１３８】
別の実施形態において、本発明の化合物は、Ｍｄｍ２とｐ５３の結合阻害および／またはＭｄｍ２によるｐ５３ユビキチン化の阻害により、ｐ５３の癌抑制遺伝子としての機能を正常化させるので、抗腫瘍剤として使用することができる。
【０１３９】
細胞の増殖阻害活性は、当業者に通常用いられる増殖阻害試験法を用いて調べることができる。細胞の増殖阻害活性は、例えば、下記の試験例２に記載されるように、試験化合物の存在下または非存在下における細胞（例えば、腫瘍細胞）の増殖の程度を比較することによって実施することができる。増殖の程度は、例えば、生細胞を測定する試験系を用いて調べることができる。生細胞の測定方法としては、例えば、［３Ｈ］−チミジンの取り込み試験、ＢｒｄＵ法またはＭＴＴアッセイ等が挙げられる。
【０１４０】
また、ｉｎ  ｖｉｖｏでの抗腫瘍活性は、当業者に通常用いられる抗腫瘍試験法を用いて調べることができる。例えば、マウス、ラット等に各種腫瘍細胞を移植し、移植細胞の生着が確認された後に、本発明の化合物を経口投与、静脈内投与等し、数日〜数週間後に、薬剤無投与群における腫瘍増殖と化合物投与群における腫瘍増殖とを比較することにより本発明のｉｎ  ｖｉｖｏでの抗腫瘍活性を確認することができる。
【０１４１】
本発明の化合物は、腫瘍または癌、例えば、肺癌、消化器癌、卵巣癌、子宮癌、乳癌、肝癌、頭頚部癌、血液癌、腎癌または睾丸腫瘍等、より好ましくは、肺癌、乳癌、前立腺癌、大腸癌、急性骨髄性白血病、悪性リンパ腫、網膜芽細胞腫、神経芽細胞腫および肉腫の治療に使用することができるがこれらの癌に限定されない。
【０１４２】
本発明の医薬組成物は、本発明の化合物と薬学的に許容し得る担体を含み、静脈内注射、筋肉内注射、皮下注射等の各種注射剤として、あるいは、経口投与または経皮投与等の種々の方法によって投与することができる。薬学的に許容し得る担体とは、本発明の化合物または本発明の化合物を含む組成物を、ある器官または臓器から他の器官または臓器に輸送することに関与する、薬学的に許容される材料（例えば、賦形剤、希釈剤、添加剤、溶媒等）を意味する。
【０１４３】
製剤の調製方法としては投与法に応じ適当な製剤（例えば、経口剤または注射剤）を選択し、通常用いられている各種製剤の調製法にて調製できる。経口剤としては、例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、トローチ剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、または油性ないし水性の懸濁液等を例示できる。経口投与の場合では遊離体のままでも、塩の型のいずれでもよい。水性製剤は薬学的に許容される酸と酸付加物を形成させるか、ナトリウム等のアルカリ金属塩とすることで調製できる。注射剤の場合は製剤中に安定剤、防腐剤または溶解補助剤等を使用することもできる。これらの補助剤等を含むこともある溶液を容器に収納後、凍結乾燥等によって固形製剤として用時調製の製剤としてもよい。また、一回投与量を一の容器に収納してもよく、また複数回投与量を一の容器に収納してもよい。
【０１４４】
固形製剤としては、例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、またはトローチ剤が挙げられる。これらの固形製剤は、本発明の化合物とともに薬学的に許容し得る添加物を含んでもよい。添加物としては、例えば、充填剤類、増量剤類、結合剤類、崩壊剤類、溶解促進剤類、湿潤剤類または滑沢剤類が挙げられ、これらを必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。
【０１４５】
液体製剤としては、例えば、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、または懸濁剤が挙げられる。これらの液体製剤は、本発明の化合物とともに薬学的に許容し得る添加物を含んでもよい。添加物としては、例えば、懸濁化剤または乳化剤が挙げられ、これらを必要に応じて選択して混合し、製剤化することができる。
【０１４６】
本発明の化合物は、哺乳類、特にヒトの癌治療に用いることができる。投与量および投与間隔は、疾患の場所、患者の身長、体重、性別または病歴によって、医師の判断により適宜選択され得る。本発明の化合物をヒトに投与する場合、投与量の範囲は、１日当たり、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重〜約５００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重である。ヒトに投与する場合、好ましくは、１日あたり１回、あるいは２から４回に分けて投与され、適当な間隔で繰り返すのが好ましい。また、１日量は、医師の判断により必要によっては上記の量を超えてもよい。
【０１４７】
本発明の化合物は他の抗腫瘍剤と併用して用いてもよい。例えば、抗腫瘍抗生物質、抗腫瘍性植物成分、ＢＲＭ（生物学的応答性制御物質）、ホルモン、ビタミン、抗腫瘍性抗体、分子標的薬、その他の抗腫瘍剤等が挙げられる。
【０１４８】
より具体的に、アルキル化剤としては、例えば、ナイトロジェンマスタード、ナイトロジェンマスタードＮ − オキシドもしくはクロラムブチル等のアルキル化剤、カルボコンもしくはチオテパ等のアジリジン系アルキル化剤、ディブロモマンニトールもしくはディブロモダルシトール等のエポキシド系アルキル化剤、カルムスチン、ロムスチン、セムスチン、ニムスチンハイドロクロライド、ストレプトゾシン、クロロゾトシンもしくはラニムスチン等のニトロソウレア系アルキル化剤、ブスルファン、トシル酸インプロスルファンまたはダカルバジン等が挙げられる。
【０１４９】
各種代謝拮抗剤としては、例えば、６−メルカプトプリン、６−チオグアニンもしくはチオイノシン等のプリン代謝拮抗剤、フルオロウラシル、テガフール、テガフール・ウラシル、カルモフール、ドキシフルリジン、ブロクスウリジン、シタラビン若しくはエノシタビン等のピリミジン代謝拮抗剤、メトトレキサートもしくはトリメトレキサート等の葉酸代謝拮抗剤等が挙げられる。
【０１５０】
抗腫瘍性抗生物質としては、例えば、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、ペプロマイシン、ダウノルビシン、アクラルビシン、ドキソルビシン、ピラルビシン、ＴＨＰ−アドリアマイシン、４ ’−エピドキソルビシンもしくはエピルビシン等のアントラサイクリン系抗生物質抗腫瘍剤、クロモマイシンＡ 3 またはアクチノマイシンＤ 等が挙げられる。
【０１５１】
抗腫瘍性植物成分としては、例えば、ビンデシン、ビンクリスチン若しくはビンブラスチン等のビンカアルカロイド類、パクリタキセル、ドセタキセル等のタキサン類、またはエトポシドもしくはテニポシド等のエピポドフィロトキシン類が挙げられる。
【０１５２】
ＢＲＭとしては、例えば、腫瘍壊死因子またはインドメタシン等が挙げられる。
【０１５３】
ホルモンとしては、例えば、ヒドロコルチゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プラステロン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、オキシメトロン、ナンドロロン、メテノロン、ホスフェストロール、エチニルエストラジオール、クロルマジノンまたはメドロキシプロゲステロン等が挙げられる。
【０１５４】
ビタミンとしては、例えば、ビタミンＣまたはビタミンＡ等が挙げられる。
【０１５５】
抗腫瘍性抗体、分子標的薬としては、トラスツズマブ、リツキシマブ、セツキシマブ、ニモツズマブ、デノスマブ、ベバシズマブ、インフリキシマブ、メシル酸イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、スニチニブ、ラパチニブ、ソラフェニブ等が挙げられる。
【０１５６】
その他の抗腫瘍剤としては、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、タモキシフェン、カンプトテシン、イホスファミド、シクロホスファミド、メルファラン、Ｌ−アスパラギナーゼ、アセクラトン、シゾフィラン、ピシバニール、プロカルバジン、ピポブロマン、ネオカルチノスタチン、ヒドロキシウレア、ウベニメクスまたはクレスチン等が挙げられる。
【０１５７】
本発明には、本発明化合物又はその塩を投与することを特徴とする癌の予防方法及び／または治療方法も含まれる。
【０１５８】
さらに、本発明には、前記医薬を製造するための本発明の化合物、その塩又はそれらの溶媒和物の使用も含まれる。
【０１５９】
以下に示す実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではなく、これらはいかなる意味においても限定的に解釈されない。また、本明細書において、特に記載のない試薬、溶媒および出発材料は、市販の供給源から容易に入手可能である。
【実施例】
【０１６０】
実施例１【０１６１】
【化１７】
0005520236.tif 000030
【０１６２】
工程１：７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物（４７０ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）の１，２−ジクロロエタン（１０ｍｌ）懸濁液に、塩化チオニル（０．５０ｍｌ）、ジメチルホルムアミド（２滴）を加え、７０℃にて１時間加熱撹拌後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残さをテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）に溶解し、氷冷下、参考例３の工程２で得た化合物（３８０ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．４２ｍｌ，３．００ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液に滴下し、室温にて２０時間撹拌した。酢酸エチルで希釈し、有機層を飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをＮＨ−シリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：５（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（３９９ｍｇ，５１％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９８−１．１２（４Ｈ，ｍ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．０５−２．１５（１Ｈ，ｍ），２．５４−２．６０（１Ｈ，ｍ），２．６１−２．６７（１Ｈ，ｍ），３．４９−３．５７（２Ｈ，ｍ），３．６３−３．８３（５Ｈ，ｍ），３．８７−３．９７（１Ｈ，ｍ），５．０６−５．０９（１Ｈ，ｍ），５．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．７Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７３−６．７７（１Ｈ，ｍ），６．９１−６．９７（１Ｈ，ｍ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．７Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７７１［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物（３９０ｍｇ，０．５１ｍｍｏｌ）を１０％含水メタノール（８ｍｌ）に溶解し、炭酸カリウム（４００ｍｇ，２．８９ｍｍｏｌ）を加え、４０℃にて２時間加熱撹拌した。溶媒を減圧濃縮後、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝１５：１（ｖ／ｖ）］より精製し、標記化合物（１９０ｍｇ，５５％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．４４−０．５２（４Ｈ，ｍ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），０．９４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．０５−２．１５（１Ｈ，ｍ），２．５６−２．６４（１Ｈ，ｍ），２．６１−２．６９（１Ｈ，ｍ），２．７３−２．７９（２Ｈ，ｍ），３．３１−３．３９（２Ｈ，ｍ），３．４３−３．５０（２Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３５．８，１２．１Ｈｚ），３．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１９．２，１２．６Ｈｚ），５．０２−５．０６（１Ｈ，ｍ），５．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．７Ｈｚ），５．５２（１Ｈ，ｓ），６．７３−６．７８（１Ｈ，ｍ），６．９２−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．７Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．７Ｈｚ），８．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６７５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３２Ｈ３４Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ・０．２５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５６．５１；Ｈ，５．１１；Ｎ，１２．３６；Ｆ，５．５９；Ｃｌ，１０．４３；Ｓ，４．７１．
実測値：Ｃ，５６．３３；Ｈ，５．１０；Ｎ，１２．２０；Ｆ，５．５５；Ｃｌ，１０．２１；Ｓ，４．７３．
実施例２【０１６３】
【化１８】
0005520236.tif 000031
【０１６４】
工程１：（６Ｓ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物（２００ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）および参考例５の工程２で得た化合物（１５９ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（３ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（０．１２ｍｌ，０．８６ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１００ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５３ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）を加え室温にて２４時間撹拌した。反応液を酢酸エチルにて希釈し、飽和重曹水、水、飽和食塩水の順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（２８６ｍｇ，８５％）を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．７２−０．７４（２Ｈ，ｍ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．１２（３Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），１．３０（１Ｈ，ｍ），１．４９（１Ｈ，ｍ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．１７（１Ｈ，ｍ），２．５８−２．６５（２Ｈ，ｍ），３．５４−３．５７（３Ｈ，ｍ），３．７８−３．９２（３Ｈ，ｍ），４．６９（１Ｈ，ｍ），５．０１（１Ｈ，ｍ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．１Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．７Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７８５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｓ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．３５−０．４１（２Ｈ，ｍ），０．５７−０．５９（２Ｈ，ｍ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．２１−１．２２（３Ｈ，ｂｒｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），１．２８（１Ｈ，ｍ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．１４（１Ｈ，ｍ），２．５５−２．６６（３Ｈ，ｍ），３．２１−３．４４（２Ｈ，ｍ），３．７５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３６．６，１２．８，２．９Ｈｚ），３．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１８．２，１２．８Ｈｚ），４．３３（１Ｈ，ｍ），４．９７（１Ｈ，ｍ），５．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５２．９Ｈｚ），５．５０（１Ｈ，ｓ），６．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．６Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，０．６Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６８９［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３３Ｈ３６Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ・１．２５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５５．６５；Ｈ，５．４５；Ｎ，１１．８０．
実測値：Ｃ，５５．２５；Ｈ，５．２３；Ｎ，１１．３２．
実施例３【０１６５】
【化１９】
0005520236.tif 000032
【０１６６】
工程１：（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例７の工程２で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．７１−０．７３（１Ｈ，ｍ），０．８９−０．９２（１Ｈ，ｍ），０．９３（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．１０−１．１３（３Ｈ，ｍ），１．３０−１．３２（１Ｈ，ｍ），１．４７−１．４９（１Ｈ，ｍ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．０６−２．０８（１Ｈ，ｍ），２．６１−２．６８（１Ｈ，ｍ），３．５１−３．５４（３Ｈ，ｍ），３．７１−３．８１（１Ｈ，ｍ），３．９０−３．９５（２Ｈ，ｍ），４．６１（１Ｈ，ｂｒｓ），５．０４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），５．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５４．０Ｈｚ），５．５０（１Ｈ，ｓ），６．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．７Ｈｚ），７．３３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１．３Ｈｚ）．
工程２：（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．３５−０．３７（２Ｈ，ｍ），０．５５−０．５７（２Ｈ，ｍ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．２６（３Ｈ，ｂｒｓ），１．７６（３Ｈ，ｓ），１．９９−２．０２（１Ｈ，ｍ），２．３２−２．３４（１Ｈ，ｍ），２．６１−２．６８（３Ｈ，ｍ），２．８６−２．９２（１Ｈ，ｍ），３．３０−３．３２（１Ｈ，ｍ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３６．３，１１．９Ｈｚ），３．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１９．９，１２．８Ｈｚ），４．１７−４．２０（１Ｈ，ｍ），５．００（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），５．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．１Ｈｚ），５．４８（１Ｈ，ｓ），６．７３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），６．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．７Ｈｚ），８．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６８９［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３３Ｈ３６Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ・１．２５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５５．６５；Ｈ，５．４５；Ｎ，１１．８０．
実測値：Ｃ，５５．２６；Ｈ，５．１９；Ｎ，１１．８５．
実施例４【０１６７】
【化２０】
0005520236.tif 000033
【０１６８】
工程１：（６Ｓ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例９の工程２で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．６７−０．７４（２Ｈ，ｍ），０．８０−０．８５（３Ｈ，ｍ），０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．２５−１．３３（１Ｈ，ｍ），１．４３−１．５３（３Ｈ，ｍ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．１７−２．２７（２Ｈ，ｍ），２．５５−２．６３（１Ｈ，ｍ），３．３７−３．９７（６Ｈ，ｍ），４．０６−４．１３（１Ｈ，ｍ），４．４９−４．５３（１Ｈ，ｍ），５．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５２．２Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７２−６．７８（１Ｈ，ｍ），６．９２−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．６Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７９９［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｓ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−エチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．３１−０．３９（２Ｈ，ｍ），０．５０−０．５８（２Ｈ，ｍ），０．７８−０．８４（３Ｈ，ｍ），０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．６５−１．７３（２Ｈ，ｍ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．０９−２．２２（１Ｈ，ｍ），２．３０−２．３６（１Ｈ，ｍ），２．５６−２．６３（１Ｈ，ｍ），２．７２−２．７７（２Ｈ，ｍ），３．４６−３．５８（２Ｈ，ｍ），３．７０−３．９５（２Ｈ，ｍ），４．１２−４．２０（１Ｈ，ｍ），４．８９−４．９５（１Ｈ，ｍ），５．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．２Ｈｚ），５．５０（１Ｈ，ｓ），６．７２−６．７９（１Ｈ，ｍ），６．９１−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．６Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３４Ｈ３８Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ・０．２５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５７．６６；Ｈ，５．４８；Ｎ，１１．８７；Ｆ，５．３７；Ｃｌ，１０．０１；Ｓ，４．５３．
実測値：Ｃ，５７．５６；Ｈ，５．４９；Ｎ，１１．７４；Ｆ，５．３２；Ｃｌ，９．７８；Ｓ，４．４９．
実施例５ 【０１６９】
【化２１】
0005520236.tif 000034
【０１７０】
（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例１１の工程２で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．６９−０．７５（２Ｈ，ｍ），０．７９−０．８６（３Ｈ，ｍ），０．９４（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．０５−１．１４（１Ｈ，ｍ），１．２６−１．３３（１Ｈ，ｍ），１．４５−１．５３（３Ｈ，ｍ），１．７８（３Ｈ，ｓ），１．９２−２．１２（１Ｈ，ｍ），２．６０−２．７０（１Ｈ，ｍ），３．２７−３．４９（２Ｈ，ｍ），３．６４−３．８４（２Ｈ，ｍ），３．８９−３．９９（１Ｈ，ｍ），４．１４−４．２５（１Ｈ，ｍ），４．５８−４．６４（１Ｈ，ｍ），５．０６−５．１２（１Ｈ，ｍ），５．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５５．７Ｈｚ），５．５２（１Ｈ，ｓ），６．７４−６．７９（１Ｈ，ｍ），６．９２−６．９８（１Ｈ，ｍ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．３Ｈｚ），８．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７９９［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３６Ｈ３７Ｃｌ２Ｆ５Ｎ６Ｏ３Ｓ・０．５Ｈ２Ｏ
理論値：Ｃ，５３．４７；Ｈ，４．７４；Ｎ，１０．３９；Ｆ，１１．７５；Ｃｌ，８．７７；Ｓ，３．９７．
実測値：Ｃ，５２．９７；Ｈ，４．５２；Ｎ，１０．３７；Ｆ，１２．４５；Ｃｌ，７．９０；Ｓ，３．９４．
実施例６【０１７１】
【化２２】
0005520236.tif 000035
【０１７２】
（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−エチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
実施例５で得た化合物を、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，７０℃）δ：０．２５−０．３８（２Ｈ，ｍ），０．４９−０．５５（１Ｈ，ｍ），０．５７−０．６４（１Ｈ，ｍ），０．７８−０．９８（３Ｈ，ｍ），０．９３（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．６２−１．７２（１Ｈ，ｍ），１．７７（３Ｈ，ｓ），１．８６−２．１３（１Ｈ，ｍ），２．４０−２．４５（１Ｈ，ｍ），２．５９−２．６７（１Ｈ，ｍ），２．６９−２．８４（３Ｈ，ｍ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．３，６．５Ｈｚ），３．６３−３．８２（２Ｈ，ｍ），３．８６−３．９７（１Ｈ，ｍ），４．１７−４．２４（１Ｈ，ｍ），４．９８−５．０６（１Ｈ，ｍ），５．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５３．１，２０．１Ｈｚ），５．５３（１Ｈ，ｓ），６．７１−６．７５（１Ｈ，ｍ），６．９３−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．３Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３４Ｈ３８Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ・０．２５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５７．６６；Ｈ，５．４８；Ｎ，１１．８７；Ｆ，５．３６；Ｃｌ，１０．０１；Ｓ，４．５３．
実測値：Ｃ，５７．７１；Ｈ，５．４０；Ｎ，１１．６５；Ｆ，４．９９；Ｃｌ，９．４３；Ｓ，４．４３．
実施例７ 【０１７３】
【化２３】
0005520236.tif 000036
【０１７４】
（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−イソブチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例１３の工程２で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させた後、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．２２−０．７６（４Ｈ，ｍ），０．８３−１．０３（１３Ｈ，ｍ），１．４０−１．５６（１Ｈ，ｍ），１．５９−１．７６（１Ｈ，ｍ），１．７９（３Ｈ，ｓ），１．８１−３．０４（７Ｈ，ｍ），３．０６−３．２２（１Ｈ，ｍ），３．４４−３．６３（１Ｈ，ｍ），３．６４−３．８５（１Ｈ，ｍ），３．９２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１９．９，１２．８Ｈｚ），４．９２−５．１０（１Ｈ，ｍ），５．２２−５．４６（１Ｈ，ｍ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７３１［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３６Ｈ４２Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ・０．５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５８．３７；Ｈ，５．８５；Ｎ，１１．３５．
実測値：Ｃ，５８．４２；Ｈ，５．７７；Ｎ，１１．１７．
実施例８ 【０１７５】
【化２４】
0005520236.tif 000037
【０１７６】
４−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，９−ジアザスピロ［２．２．２．２］デカン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例１５の工程２で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させた後、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６０（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），０．８７（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），０．９４（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０８−１．２３（５Ｈ，ｍ），１．７９（３Ｈ，ｓ），２．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３６．３，６．２Ｈｚ），２．５９−２．７４（３Ｈ，ｍ），３．５８（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３４．９，１２．９Ｈｚ），３．７９−４．００（２Ｈ，ｍ），５．２１（１Ｈ，ｓ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．５Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．３Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０１［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３４Ｈ３６Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ２Ｓ・１．７５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５５．６９；Ｈ，５．４３；Ｎ，１１．４６．
実測値：Ｃ，５５．５８；Ｈ，５．３２；Ｎ，１１．０１．
実施例９【０１７７】
【化２５】
0005520236.tif 000038
【０１７８】
工程１：（６Ｓ）−７−（１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリル）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例１６の工程２で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．７３（２Ｈ，ｂｒｓ），０．９０−０．９５（６Ｈ，ｍ），１．１２（３Ｈ，ｂｒｓ），１．２５−１．３１（１Ｈ，ｍ），１．４８−１．５０（１Ｈ，ｍ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．３１−２．４５（２Ｈ，ｍ），２．５８−２．６５（１Ｈ，ｍ），２．９１−２．９６（２Ｈ，ｍ），３．３８−３．５８（３Ｈ，ｍ），３．９３−４．１９（２Ｈ，ｍ），４．６５（１Ｈ，ｂｒｓ），５．１０（１Ｈ，ｂｒ），５．５０（１Ｈ，ｓ），６．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），６．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．２Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８０３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｓ）−７−（１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリル）−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．３９（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），０．５７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），０．９２（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．１８−１．２９（５Ｈ，ｍ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．２８−２．４１（１Ｈ，ｍ），２．６２−２．６８（２Ｈ，ｍ），３．３９（３Ｈ，ｂｒ），３．９０−４．０１（１Ｈ，ｍ），４．０９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），４．２８（１Ｈ，ｂｒ），５．１０（１Ｈ，ｂｒ），５．５０（１Ｈ，ｓ），６．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．９６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），７．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．５Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．５Ｈｚ），８．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３３Ｈ３５Ｃｌ２Ｆ３Ｎ６Ｏ２Ｓ・０．５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５５．３１；Ｈ，５．０６；Ｎ，１１．７３．
実測値：Ｃ，５５．６９；Ｈ，５．２８；Ｎ，１１．５２．
実施例１０【０１７９】
【化２６】
0005520236.tif 000039
【０１８０】
工程１：（６Ｒ）−７−（１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリル）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例１７の工程２で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８０３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｒ）−７−（１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリル）−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、実施例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．３８（１Ｈ，ｂｒ），０．５８（３Ｈ，ｂｒ），０．９３（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．２３−１．２８（３Ｈ，ｍ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．３２（１Ｈ，ｂｒ），２．４６−２．５０（２Ｈ，ｍ），２．６６−２．７２（２Ｈ，ｍ），２．９３−３．０１（３Ｈ，ｍ），３．９４−４．１２（２Ｈ，ｍ），５．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，５．１Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８Ｈｚ），７．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，０．５Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．５Ｈｚ），８．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３３Ｈ３５Ｃｌ２Ｆ３Ｎ６Ｏ２Ｓ・０．５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５５．３１；Ｈ，５．０６；Ｎ，１１．７３．
実測値：Ｃ，５５．４９；Ｈ，５．１８；Ｎ，１１．４７．
実施例１１【０１８１】
【化２７】
0005520236.tif 000040
【０１８２】
工程１：（６Ｒ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例１９で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：−０．０１（３Ｈ，ｓ），０．００（３Ｈ，ｓ），０．６３−０．７６（２Ｈ，ｍ），０．８３（９Ｈ，ｓ），０．８８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．２３−１．３０（１Ｈ，ｍ），１．３８−１．４７（１Ｈ，ｍ），１．７４（３Ｈ，ｓ），２．０７−２．２９（２Ｈ，ｍ），２．５２−２．６２（１Ｈ，ｍ），３．４７−３．９６（７Ｈ，ｍ），４．１０−４．２２（１Ｈ，ｍ），４．４１−４．５３（１Ｈ，ｍ），４．９２−５．０４（１Ｈ，ｍ），５．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．０Ｈｚ），５．４９（１Ｈ，ｓ），６．７０−６．７４（１Ｈ，ｍ），６．８９−６．９５（１Ｈ，ｍ），７．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９１５［（Ｍ＋１）＋］．
工程２：｛（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−６−イル｝メタノール
上記工程１で得た化合物（２５５ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（４ｍｌ）溶液に、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオリド（１Ｍテトラヒドロフラン溶液）（０．４２ｍｌ，０．４２ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧濃縮後、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、有機層を飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をＮＨ−シリカゲルカラムクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝４０：１（ｖ／ｖ）］より精製し、標記化合物（１０２ｍｇ，５２％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．３３−０．４１（２Ｈ，ｍ），０．５１−０．５９（２Ｈ，ｍ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．１１−２．３１（２Ｈ，ｍ），２．５６−２．６４（１Ｈ，ｍ），３．５０−３．９７（６Ｈ，ｍ），４．０９−４．１８（１Ｈ，ｍ），４．４７−４．６４（１Ｈ，ｍ），４．８３−４．９４（１Ｈ，ｍ），５．０８−５．１９（１Ｈ，ｍ），５．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．２Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７２−６．７８（１Ｈ，ｍ），６．９３−７．００（１Ｈ，ｍ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝８．４，１．２Ｈｚ），８．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３３Ｈ３６Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ３Ｓ・０．５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５５．４６；Ｈ，５．２２；Ｎ，１１．６０；Ｆ，５．３２；Ｃｌ，９．９２；Ｓ，４．４９．
実測値：Ｃ，５５．４２；Ｈ，５．２４；Ｎ，１１．７３；Ｆ，５．２８；Ｃｌ，９．７７；Ｓ，４．４３．
実施例１２【０１８３】
【化２８】
0005520236.tif 000041
【０１８４】
工程１：（６Ｓ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例５の工程２で得た化合物の代わりに参考例２０で得た化合物を用いて、実施例２の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．００（３Ｈ，ｓ），０．０１（３Ｈ，ｓ），０．６７−０．７５（１Ｈ，ｍ），０．８２−０．８８（１Ｈ，ｍ），０．８４（９Ｈ，ｓ），０．８７−０．９４（６Ｈ，ｍ），１．２６−１．３６（１Ｈ，ｍ），１．３９−１．４７（１Ｈ，ｍ），１．７４（３Ｈ，ｓ），１．９０−２．１０（２Ｈ，ｍ），２．５６−２．６５（１Ｈ，ｍ），３．４０−３．９５（７Ｈ，ｍ），４．１６−４．２９（１Ｈ，ｍ），４．４４−４．５６（１Ｈ，ｍ），４．９９−５．１２（１Ｈ，ｍ），５．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５４．２Ｈｚ），５．４８（１Ｈ，ｓ），６．６９−６．７４（１Ｈ，ｍ），６．８８−６．９３（１Ｈ，ｍ），７．１４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．７Ｈｚ），８．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９１５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：｛（６Ｓ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−６−イル｝メタノール
上記工程１で得た化合物を、実施例１１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．２５−０．４０（２Ｈ，ｍ），０．４８−０．６６（２Ｈ，ｍ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），０．９４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．７８（３Ｈ，ｓ），１．９７−２．１５（２Ｈ，ｍ），２．６４−２．６９（１Ｈ，ｍ），２．７５−２．８５（２Ｈ，ｍ），３．４５−３．５３（１Ｈ，ｍ），３．６５−３．９７（４Ｈ，ｍ），４．２０−４．３０（１Ｈ，ｍ），４．４１−４．５１（１Ｈ，ｍ），５．０６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），５．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５７．１Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７１−６．７７（１Ｈ，ｍ），６．９１−６．９８（１Ｈ，ｍ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７０５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
元素分析：Ｃ３３Ｈ３６Ｃｌ２Ｆ２Ｎ６Ｏ３Ｓ・０．７５Ｈ２Ｏとして
理論値：Ｃ，５５．１１；Ｈ，５．２５；Ｎ，１１．６０；Ｆ，５．２８；Ｃｌ，９．８６；Ｓ，４．４６．
実測値：Ｃ，５５．００；Ｈ，５．１４；Ｎ，１１．６２；Ｆ，５．２７；Ｃｌ，９．７５；Ｓ，４．４５．
実施例１３【０１８５】
【化２９】
0005520236.tif 000042
【０１８６】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｒ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−４−カルボキシラート
参考例１の工程１３で得た化合物を、参考例３の工程２で得た化合物の代わりに、参考例２２で得た化合物を用いて、実施例１の工程１と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．０５（６Ｈ，ｓ），０．４６−０．５４（２Ｈ，ｍ），０．８８（９Ｈ，ｓ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０３−１．１０（１Ｈ，ｍ），１．２８−１．３５（１Ｈ，ｍ），１．４２（９Ｈ，ｓ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．１７−２．３６（２Ｈ，ｍ），２．５７−２．６３（１Ｈ，ｍ），３．１４−３．２６（２Ｈ，ｍ），３．４８−３．７７（２Ｈ，ｍ），３．８４−３．９９（４Ｈ，ｍ），４．３７−４．４８（１Ｈ，ｍ），４．９９−５．１３（１Ｈ，ｍ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５２．５Ｈｚ），５．５２（１Ｈ，ｓ），６．７４−６．７８（１Ｈ，ｍ），６．９３−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：９２０［（Ｍ＋１）］＋．
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−（ヒドロキシメチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−４−カルボキシラート
上記工程１で得た化合物を、実施例１１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を淡褐色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．４３−０．５３（２Ｈ，ｍ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），１．０１−１．０８（１Ｈ，ｍ），１．２９−１．３４（１Ｈ，ｍ），１．４２（９Ｈ，ｓ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．１７−２．３１（２Ｈ，ｍ），２．５６−２．６１（１Ｈ，ｍ），３．１７−３．２４（１Ｈ，ｍ），３．４６−３．５４（２Ｈ，ｍ），３．５６−３．６２（１Ｈ，ｍ），３．７０−３．７７（１Ｈ，ｍ），３．８４−４．０１（２Ｈ，ｍ），４．３２−４．３６（１Ｈ，ｍ），４．６４−４．７０（１Ｈ，ｍ），５．０９−５．１５（１Ｈ，ｍ），５．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５１．３Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７２−６．７９（１Ｈ，ｍ），６．９３−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．３１−７．３８（１Ｈ，ｍ），７．６２−７．６８（１Ｈ，ｍ），８．２４−８．２９（１Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８０５［（Ｍ＋１）］＋．
工程３：（６Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−６−カルボン酸
上記工程２で得た化合物（１００ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．５ｍｌ）と水（１．５ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、ヨードベンゼンジアセテート（８８ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン１−オキシル（２０ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）を加え、室温で４時間攪拌した。チオ硫酸ナトリウム水溶液（４ｍｌ）を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝４０：１〜１０：１（ｖ／ｖ）］より精製し、標記化合物（５８ｍｇ，５９％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．４９−０．６１（２Ｈ，ｍ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．０７−１．１６（１Ｈ，ｍ），１．２７−１．３４（１Ｈ，ｍ），１．３９（９Ｈ，ｓ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．０７−２．２０（２Ｈ，ｍ），２．５９−２．６５（１Ｈ，ｍ），３．１６−３．２２（１Ｈ，ｍ），３．３３−３．４１（１Ｈ，ｍ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３６．４，１１．０Ｈｚ），３．８７−４．０４（２Ｈ，ｍ），４．３５−４．４８（１Ｈ，ｍ），４．６７−４．７４（１Ｈ，ｍ），５．０３−５．１０（１Ｈ，ｍ），５．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．０Ｈｚ），５．５１（１Ｈ，ｓ），６．７４−６．７８（１Ｈ，ｍ），６．９３−６．９９（１Ｈ，ｍ），７．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．６Ｈｚ），８．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：８１９［（Ｍ＋１）］＋．
工程４：（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−６−カルボン酸  ２塩酸塩
上記工程３で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．８５−０．９０（１Ｈ，ｍ），０．９２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），０．９８−１．０２（１Ｈ，ｍ），１．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．１０−１．１９（２Ｈ，ｍ），２．００（３Ｈ，ｓ），２．１７−２．２３（１Ｈ，ｍ），２．２６−２．３３（１Ｈ，ｍ），２．６１−２．６８（１Ｈ，ｍ），３．２９−３．３５（２Ｈ，ｍ），３．６８−３．７４（１Ｈ，ｍ），３．７７−３．８６（１Ｈ，ｍ），４．０２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１９．８，１３．４Ｈｚ），５．１７−５．３１（２Ｈ，ｍ），５．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．５Ｈｚ），５．５２−５．５６（１Ｈ，ｍ），５．９３（１Ｈ，ｓ），６．８３−６．９０（１Ｈ，ｍ），７．１１−７．１７（１Ｈ，ｍ），７．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．４０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．６Ｈｚ），８．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：７１９［（Ｍ＋１）］＋．
参考例１の工程１３で得た化合物および参考例２３で得た化合物を用いて、上記実施例１３と同様に反応させ、下表化合物を得た。【０１８７】
【表１３】
0005520236.tif 000043
【０１８８】
実施例１５【０１８９】
【化３０】
0005520236.tif 000044
【０１９０】
７−［（４Ｒ）−１−｛［（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−イル］カルボニル｝−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
実施例１の工程２で得た化合物（３４０ｍｇ，０．５０３ｍｍｏｌ）および３７％パラホルムアルデヒド水溶液（０．４１ｍｌ，５．０５ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（１０ｍｌ）溶液に、室温にてトリアセトキシヒドロホウ酸ナトリウム（２６７ｍｇ，１．２６ｍｍｏｌ）を加え１７時間攪拌した。飽和重曹水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出、水、飽和食塩水の順に洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残さをシリカゲルクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝５０：１（ｖ／ｖ））にて精製し、標記化合物（３０９ｍｇ、８９％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，１００oＣ）δ：０．４３−０．４８（２Ｈ，ｍ），０．５６−０．６２（２Ｈ，ｍ），０．９３（６Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．７７（３Ｈ，ｓ），２．０３−２．１８（１Ｈ，ｍ），３．３０（３Ｈ，ｓ），２．６０−２．６７（２Ｈ，ｍ），２．７３−２．７８（２Ｈ，ｍ），３．３４（２Ｈ，ｂｒｓ），３．５４（２Ｈ，ｂｒｓ），３．６８−３．７８（１Ｈ，ｍ），３．８０−３．９５（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），５．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．０Ｈｚ），５．５０（１Ｈ，ｓ），６．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．３Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６８９［（Ｍ＋１）］＋．
実施例２の工程２で得た化合物あるいは、実施例３の工程２で得た化合物を用いて、上記実施例１５と同様に反応させ、下表化合物を得た。【０１９１】
【表１４】
0005520236.tif 000045
【０１９２】
下記化合物を一般製法の記載および実施例１〜１２に準じて合成した。【０１９３】
【表１５】
0005520236.tif 000046
【０１９４】
【表１６】
0005520236.tif 000047
【０１９５】
【表１７】
0005520236.tif 000048
【０１９６】
【表１８】
0005520236.tif 000049
【０１９７】
【表１９】
0005520236.tif 000050
【０１９８】
参考例１【０１９９】
【化３１】
0005520236.tif 000051
【０２００】
工程１：エチル  ２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパナート
氷冷下、シアン化カリウム（１０．７ｇ，１６１ｍｍｏｌ）の濃アンモニア水溶液（１００ｍｌ）に、塩化アンモニウム（６．８８ｇ，１２９ｍｍｏｌ）および１−（６−クロロピリジン−３−イル）エタノン（１０．０ｇ，６４．３ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍｌ）溶液を加え、室温に戻しながら３日間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、残さをジクロロメタンにて抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧留去した。氷冷下、得られた残さに濃塩酸（１００ｍｌ）を加えた後、２時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮後、トルエン共沸し、得られた残さのエタノール（１００ｍｌ）溶液に、氷冷下、塩化チオニル（１０ｍｌ）を滴下した。３時間加熱還流した後、反応液を減圧濃縮し、得られた残さをジクロロメタンで希釈後、飽和重曹水および飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去した。得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製し、標記化合物（７．２４ｇ，４９％）を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．７０（３Ｈ，ｓ），１．９８（２Ｈ，ｂｒｓ），４．１９（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），７．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
工程２：エチル  ２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパナート
上記工程１で得た化合物（１．００ｇ，４．３７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（１．２２ｍｌ，８．７５ｍｍｏｌ）および二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１．１２ｍｌ，４．８１ｍｍｏｌ）を加え、１８時間加熱還流した。更に二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．５１ｍｌ，２．１９ｍｍｏｌ）を加え、１８時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮後、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、１０％クエン酸水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１８（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（１．２０ｇ，８４％）を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．１９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．３８（９Ｈ，ｂｒｓ），１．９９（３Ｈ，ｓ），４．０８−４．２６（２Ｈ，ｍ），７．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．７Ｈｚ），８．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）
工程３：ｔｅｒｔ−ブチル  ［１−（６−クロロピリジン−３−イル）−１−メチル−２−オキソエチル］カルバマート
氷冷下、水素化リチウムアルミニウム（１．４３ｇ，３４．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）懸濁液に、上記工程２で得た化合物（５．７０ｇ，１７．３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１００ｍｌ）溶液を滴下し、同温で１時間撹拌した。氷冷下、反応液に１規定水酸化ナトリウム水（６ｍｌ）を加え、析出した不溶物をろ去した。ろ液を減圧濃縮し、得られた残さをジメチルスルホキシド（１００ｍｌ）に溶解し、室温でトリエチルアミン（６０ｍｌ）および三酸化硫黄ピリジン錯体（５．５２ｇ，３４．７ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌した。反応液を水に注いだ後、酢酸エチルで抽出し、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（２．７７ｇ，５６％）を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４３（９Ｈ，ｓ），１．７９（３Ｈ，ｓ），５．７３（１Ｈ，ｂｒｓ），７．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．７Ｈｚ），８．４２（１Ｈ，ｓ），９．３４（１Ｈ，ｓ）．
工程４：ｔｅｒｔ−ブチル  ［２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−１−（６−クロロピリジン−３−イル）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］カルバマート
氷冷下、４−クロロ−３−フルオロフェニルマグネシウムブロミド（０．５Ｍテトラヒドロフラン溶液）（１００ｍｌ，５０．０ｍｍｏｌ）に、上記工程３で得た化合物（６．４７ｇ，２２．７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液を滴下し、同温で１時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水を加えて反応を停止し、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧留去し、得られた残さにｎ−ヘキサン／酢酸エチルからなる混合溶媒を加え、生じた沈殿をろ取、乾燥させ、標記化合物（７．９２ｇ，８４％）を白色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４５（９Ｈ，ｂｒｓ），１．５６（３Ｈ，ｂｒｓ），５．０８（２Ｈ，ｂｒｓ），６．８６（１Ｈ，ｂｒｓ），７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．３１−７．３５（２Ｈ，ｍ），７．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），８．４４（１Ｈ，ｓ）．
ＭＳ（ＡＰＩ）ｍ／ｚ：４１５［（Ｍ＋１）＋］．
工程５：ｔｅｒｔ−ブチル  ［２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−１−（６−クロロピリジン−３−イル）−１−メチル−２−オキソエチル］カルバマート
氷冷下、上記工程４で得た化合物（１．１４ｇ，２．７５ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（８ｍｌ）溶液に、無水酢酸（２．３ｍｌ，２４．７ｍｍｏｌ）を加え、徐々に室温に戻しながら１８時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、６％過塩素酸ナトリウム水溶液、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（１．１０ｇ，９７％）を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．３１（９Ｈ，ｓ），２．０３（３Ｈ，ｓ），６．２８（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２６−７．３７（３Ｈ，ｍ），７．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），７．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），８．４５（１Ｈ，ｓ）．
工程６：２−アミノ−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパン−１−オン
氷冷下、４規定塩酸／ジオキサン溶液（５ｍｌ）に、上記工程５で得た化合物（１．２３ｇ，２．５５ｍｍｏｌ）のジオキサン（１ｍｌ）溶液を加え、徐々に昇温し、室温にて２時間撹拌した。反応液を水で希釈し、ｎ−ヘキサン／酢酸エチルからなる混合溶媒で洗浄後、水層へ１５％水酸化ナトリウム水を加えアルカリ性とした後、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（０．７５ｇ，９５％）を淡黄色固体として得た。
ＭＳ（ＡＰＩ）ｍ／ｚ：３１３［（Ｍ＋１）＋］．
工程７：２−クロロ−５−［４−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−メチル−１，１−ジオキシド−２，３−ジヒドロ−１，２，５−チアジアゾール−３−イル］ピリジン
上記工程６で得た化合物（２．９９ｇ，９．５５ｍｍｏｌ）のジオキサン（６０ｍｌ）溶液に、モレキュラーシーブ４Ａ（４．５ｇ）、スルファミド（２．７５ｇ，２８．６ｍｍｏｌ）および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（１．４５ｇ，９．５２ｍｍｏｌ）を加え、９５℃にて１８時間加熱撹拌した。スルファミド（２．７５ｇ，２８．６ｍｍｏｌ）を更に加え、２４時間加熱撹拌した。反応液を減圧濃縮した後、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、１０％クエン酸水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。得られた残さにジイソプロピルエーテル／酢酸エチルからなる混合溶媒を加え、生じた沈殿をろ取、乾燥し、標記化合物（２．８６ｇ，８０％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．２５（３Ｈ，ｓ），７．２９−７．４７（３Ｈ，ｍ），７．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．５，２．０Ｈｚ），７．６８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．９Ｈｚ），８．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ）．
工程８：２−クロロ−５−［（３Ｒ＊，４Ｓ＊）−４−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−メチル−１，１−ジオキシド−１，２，５−チアジアゾリジン−３−イル］ピリジン
氷冷下、上記工程７で得た化合物（７．１３ｇ，１９．１ｍｍｏｌ）のエタノール（６３ｍｌ）溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（１．００ｇ，２６．４ｍｍｏｌ）を徐々に加え、同温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮した後、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、１規定塩酸水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（４．３６ｇ，５９％）を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．８５（３Ｈ，ｓ），３．２３−３．３２（４Ｈ，ｍ），４．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），６．７４−６．７６（１Ｈ，ｍ），６．８０−６．８３（１Ｈ，ｍ），７．２３−７．２６（２Ｈ，ｍ），７．５５−７．６０（１Ｈ，ｍ），７．９４−７．９５（１Ｈ，ｍ）．
工程９：（１Ｒ＊，２Ｓ＊）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程８で得た化合物（４．１５ｇ，１１．０ｍｍｏｌ）のジオキサン（８０ｍｌ）溶液に、エチレンジアミン（７．４０ｍｌ，１１１ｍｍｏｌ）を加え、１００℃にて１８時間加熱撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残さをクロロホルムで希釈、１規定水酸化ナトリウム水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝９３：７（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（３．３５ｇ，９７％）を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５４（３Ｈ，ｓ），１．５８（４Ｈ，ｂｒｓ），４．０８（１Ｈ，ｓ），６．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．０Ｈｚ），６．９６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．３，２．０Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，０．７Ｈｚ），７．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．７Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．７，０．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１４［（Ｍ＋１）＋］．
工程１０：（１Ｒ，２Ｓ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程９で得た化合物（１２．６ｇ，４０．０ｍｍｏｌ）のエタノール（２００ｍｌ）溶液に、Ｌ−（＋）−酒石酸（６．３ｇ，４２．０ｍｍｏｌ）を加え、１１０℃で３０分間加熱還流した。水（８ｍｌ）を加え、さらに１０分間過熱還流した後に室温に戻し一晩放置後、析出した固体をろ取した。得られた固体に５規定水酸化ナトリウム水を加え、液性をアルカリ性とした後、ジエチルエーテルで抽出した。有機層を炭酸カリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去し、標記化合物（５．６８ｇ，４５％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５４（３Ｈ，ｓ），１．５６（４Ｈ，ｂｒｓ），４．０８（１Ｈ，ｓ），６．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．０Ｈｚ），６．９６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，２．１Ｈｚ），７．２０−７．２４（２Ｈ，ｍ），７．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．６Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．７，０．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１４［（Ｍ＋１）＋］．
［α］Ｄ＝＋５５．５°（Ｃ＝１．００，クロロホルム，２０℃）．
工程１１：（４Ｓ，５Ｒ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−４−（６−クロロピリジン−３−イル）−４−メチルイミダゾリジン−２−チオン
上記工程１０で得た化合物（１．９３ｇ，６．１４ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍｌ）溶液に、二硫化炭素（０．５８ｍｌ，９．２１ｍｍｏｌ）を室温で加え、２０時間加熱還流した。放冷後、反応液を減圧濃縮し、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝４０：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（１．９４ｇ，８９％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．９４（３Ｈ，ｓ），５．００（１Ｈ，ｓ），６．６７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），６．６８（１Ｈ，ｂｒｓ），６．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．５，２．０Ｈｚ），７．１０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．５，２．７Ｈｚ），８．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５６［（Ｍ＋１）＋］．
工程１２：エチル  （５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボキシラート
上記工程１１で得た化合物（１．９４ｇ，５．４５ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍｌ）溶液に、エチル  ２−クロロ−４−メチル−３−オキソペンタナート（１．３６ｇ，７．０９ｍｍｏｌ）を室温で加え、１６時間加熱還流した。反応液を室温に戻し、反応溶媒を減圧留去した。得られた残さを酢酸エチルで希釈し、有機層を飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムにて乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（２．０６ｇ，７６％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．０４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．３４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．８３（３Ｈ，ｓ），４．２６（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），５．１０（１Ｈ，ｓ），６．５１−６．６２（２Ｈ，ｍ），７．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ），７．５１−７．５５（１Ｈ，ｍ），８．２０−８．２２（１Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４９４［（Ｍ＋１）＋］．
工程１３：（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボン酸
上記工程１２で得た化合物（２．０６ｇ，４．１７ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍｌ）溶液に、１規定水酸化ナトリウム水（６ｍｌ）を加え、６０℃にて１６時間加熱撹拌した。放冷後、溶媒を減圧濃縮し、得られた残さを水で希釈後、ジエチルエーテルで洗浄した。氷冷下、水層に１規定塩酸水を徐々に加え、液性を酸性とした後、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残さにジエチルエーテル／ｎ−ヘキサンからなる混合溶媒を加え、生じた析出物をろ取、乾燥し、標記化合物（１．５１ｇ，８７％）を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．７９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．７３（３Ｈ，ｓ），３．３２−３．４０（１Ｈ，ｍ），５．７１（１Ｈ，ｓ），６．３８−６．４８（１Ｈ，ｍ），７．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．３４−７．４６（２Ｈ，ｍ），７．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．４Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４６６［（Ｍ＋１）＋］．
［α］Ｄ＝＋１２０．５°（Ｃ＝１．００，メタノール，２５℃）．
参考例２【０２０１】
【化３２】
0005520236.tif 000052
【０２０２】
工程１：エチル  Ｎ−ベンジル−Ｎ−［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）カルボニル］グリシナート
１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロパンカルボン酸（２３．５ｇ，１００ｍｍｏｌ），エチル  Ｎ−ベンジルグリシナート（１９．３ｇ，１００ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２３５ｍｌ）溶液に氷冷下、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２１．０ｇ，１１０ｍｍｏｌ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．７０ｇ，２０ｍｍｏｌ）を加え室温にて２４時間撹拌した。溶媒を減圧濃縮後、酢酸エチルにて希釈し、１規定塩酸水、飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（３５．７ｇ，８７％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．１３（２Ｈ，ｂｒ），１．２２（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．２５（２Ｈ，ｂｒ），１．６６（２Ｈ，ｓ），３．９１（１Ｈ，ｂｒ），４．１２（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），４．９１（２Ｈ，ｂｒｓ），５．３６（２Ｈ，ｂｒｓ），７．１９−７．３１（１０Ｈ，ｍ）．
工程２：７−ベンジル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程１で得た化合物（３５．５ｇ，８６．５ｍｍｏｌ）のエタノール（７００ｍｌ）溶液に、５％パラジウム炭素（３．６ｇ）を加え水素雰囲気下、２時間接触還元を行った。触媒をセライトろ過後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（２０ｇ，１００％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９３−１．００（２Ｈ，ｍ），１．５５−１．５９（２Ｈ，ｍ），３．９１（２Ｈ，ｓ），４．６０（２Ｈ，ｓ），７．２５−７．３７（５Ｈ，ｍ），７．８６（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３１［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程３：７−ベンジル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程２で得た化合物（２０ｇ，８６．８ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍｌ）溶液に，氷冷下ボラン−テトラヒドロフラン錯体（０．９３Ｍテトラヒドロフラン溶液）（３７５ｍｌ，０．３５ｍｏｌ）を加え，次いで１９時間加熱還流した。氷冷下、反応混合液にメタノール（１３０ｍｌ）を加え６０分間撹拌した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残さにエタノール（４５０ｍｌ）、水（１５０ｍｌ）およびトリエチルアミン（１５０ｍｌ）を加え、２時間加熱還流後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残さを酢酸エチルで希釈し、飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝１０：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（１０．４ｇ，５９％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．４１−０．４４（２Ｈ，ｍ），０．５７−０．６０（２Ｈ，ｍ），１．４９（１Ｈ，ｂｒ），２．２２（２Ｈ，ｓ），２．４５（２Ｈ，ｂｒｓ），２．９７（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ），３．５０（２Ｈ，ｓ），７．２２−７．３２（５Ｈ，ｍ）．
工程４：７−ベンジル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程３で得た化合物（１０．３ｇ，５０．９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１７ｍｌ，１２２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２００ｍｌ）溶液に、氷冷下無水トリフルオロ酢酸（８．５０ｍｌ，６１．１ｍｍｏｌ）を滴下し、同温にて１時間撹拌した。反応液に飽和重曹水を加え、クロロホルムにて希釈後、飽和食塩水にて洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、標記化合物（１５．５ｇ，１００％）を無色油状物として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２９９［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程５：４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩
上記工程４で得た化合物（１５．５ｇ，５１ｍｍｏｌ）のエタノール（２５０ｍｌ）溶液に，１規定塩酸／エタノール（１０５ｍｌ，１０５ｍｍｏｌ）および５％パラジウム炭素（３ｇ）を加え、水素雰囲気下１５時間接触還元を行った。触媒をセライトろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残さにエタノール／ジエチルエーテルからなる混合溶媒を加え、析出した固体をろ取し、標記化合物（１０．３ｇ，８３％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，８０℃）δ：１．１８（４Ｈ，ｓ），３．１６（２Ｈ，ｓ），３．２５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ），３．８９（２Ｈ，ｂｒｓ），９．７１（２Ｈ，ｂｒ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２０９［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例３【０２０３】
【化３３】
0005520236.tif 000053
【０２０４】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−｛［４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝ピロリジン−１−カルボキシラート
（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロ−Ｌ−プロリン（４００ｍｇ，１．７１ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（８ｍｌ）溶液に、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（４６ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（５０２ｍｇ，２．６１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５分間撹拌した。次いで、参考例２の工程５で得た化合物（４６０ｍｇ，２．０５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．４５ｍｌ，２．５７ｍｍｏｌ）を加え、室温で１６時間撹拌した。酢酸エチルで希釈し、有機層を飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（５６０ｍｇ，７７％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．９８−１．１０（４Ｈ，ｍ），１．３７（９Ｈ，ｓ），１．９５−２．０９（１Ｈ，ｍ），２．４９−２．５４（１Ｈ，ｍ），３．４１−３．５４（３Ｈ，ｍ），３．６０−３．７５（５Ｈ，ｍ），４．７３−４．８０（１Ｈ，ｍ），５．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２４［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物（５６０ｍｇ，１．３２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍｌ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１０ｍｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応溶媒を減圧濃縮後、飽和重曹水（３０ｍｌ）を加え、クロロホルムで３回抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、標記化合物（３８０ｍｇ，８９％）を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．９８−１．１１（４Ｈ，ｍ），２．００−２．０７（１Ｈ，ｍ），２．１０−２．１６（１Ｈ，ｍ），２．６８−２．７７（１Ｈ，ｍ），３．０４−３．１４（１Ｈ，ｍ），３．５１（２Ｈ，ｓ），３．６３−３．７８（４Ｈ，ｍ），４．０５−４．１３（１Ｈ，ｍ），５．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．５Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２４［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例４【０２０５】
【化３４】
0005520236.tif 000054
【０２０６】
工程１：メチル  Ｎ−ベンジル−Ｎ−［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）カルボニル］−Ｌ−アラニナート
氷冷下、メチル  Ｎ−ベンジル−Ｌ−アラニナート（５．２０ｇ，２６．９ｍｍｏｌ）および１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロパンカルボン酸（６．３０ｇ，２６．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５０ｍｌ）溶液にＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（６．０ｇ，２９．０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて一晩撹拌した。減圧濃縮後、酢酸エチルにて希釈し、不溶物をろ去した後、ろ液を１規定塩酸水および飽和食塩水にて洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：３（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（７．８０ｇ，７１％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，７０℃）δ：１．０３−１．１１（２Ｈ，ｍ），１．３７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．４３−１．４７（２Ｈ，ｍ），３．７２（３Ｈ，ｓ），４．４８（１Ｈ，ｂｒｓ），４．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．６Ｈｚ），４．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．６Ｈｚ），４．９９（２Ｈ，ｓ），５．２０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２０−７．３４（１０Ｈ，ｍ）．
工程２：（６Ｓ）−７−ベンジル−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程１で得た化合物を、参考例２の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９８−１．０７（２Ｈ，ｍ），１．３６（１Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．８５（１Ｈ，ｍ），３．９１（１Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），４．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），５．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），７．２６−７．３７（５Ｈ，ｍ）．
工程３：（６Ｓ）−７−ベンジル−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程２で得た化合物を、参考例２の工程３と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．３０−０．３４（１Ｈ，ｍ），０．３６−０．４０（１Ｈ，ｍ），０．４８−０．５３（１Ｈ，ｍ），０．５５−０．６１（１Ｈ，ｍ），１．１６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），２．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），２．２６−２．３３（２Ｈ，ｍ），２．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，９．３Ｈｚ），２．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，３．４Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），４．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），７．２０−７．３４（６Ｈ，ｍ）．
工程４：（６Ｓ）−７−ベンジル−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程３で得た化合物を、参考例２の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．６８（１Ｈ，ｍ），０．７９（１Ｈ，ｍ），０．９３（１Ｈ，ｍ），１．２１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），１．３３（１Ｈ，ｍ），２．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．５９（１Ｈ，ｍ），３．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），３．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．４，９．３Ｈｚ），３．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），４．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），７．２３−７．３４（５Ｈ，ｍ）．
工程５：（６Ｓ）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩
上記工程４で得た化合物を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９５（１Ｈ，ｂｒｓ），１．１２（１Ｈ，ｂｒｓ），１．２７（１Ｈ，ｍ），１．３３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），１．４１（１Ｈ，ｂｒｓ），２．９０（１Ｈ，ｍ），３．３８−３．５９（３Ｈ，ｍ），４．０３（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例５【０２０７】
【化３５】
0005520236.tif 000055
【０２０８】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−｛［（６Ｓ）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝ピロリジン−１−カルボキシラート
参考例２の工程５で得た化合物の代わりに参考例４の工程５で得た化合物を用い、参考例３の工程１と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６９−０．７１（２Ｈ，ｍ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．２８−１．３２（２Ｈ，ｍ），１．３７（９Ｈ，ｓ），１．４９（１Ｈ，ｍ），２．０５（１Ｈ，ｍ），３．４９−３．６８（５Ｈ，ｍ），３．８８（１Ｈ，ｂｒｓ），４．６７−４．７５（２Ｈ，ｍ），５．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５４．０Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４６０［（Ｍ＋Ｎａ）＋］．
工程２：（６Ｓ）−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６８−０．７７（２Ｈ，ｍ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．０，７．１Ｈｚ），１．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１７．０，７．１Ｈｚ），２．０１−２．２４（２Ｈ，ｍ），２．６５−２．６８（１Ｈ，ｍ），３．００−３．１４（１Ｈ，ｍ），３．４２−３．６１（３Ｈ，ｍ），３．９０（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），４．６６−４．６９（１Ｈ，ｍ），５．２５（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝５５．６，４．５Ｈｚ）．
参考例６【０２０９】
【化３６】
0005520236.tif 000056
【０２１０】
工程１：メチル  Ｎ−ベンジル−Ｎ−［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）カルボニル］−Ｄ−アラニナート
メチル  Ｎ−ベンジル−Ｌ−アラニナートの代わりにメチル  Ｎ−ベンジル−Ｄ−アラニナートを用いて、参考例４の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０７（２Ｈ，ｂｒｓ），１．３６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．４３（２Ｈ，ｂｒｓ），３．６１（３Ｈ，ｓ），４．４８−４．５２（１Ｈ，ｍ），４．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．４Ｈｚ），４．８７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．４Ｈｚ），４．９８（２Ｈ，ｓ），５．１２（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２０−７．３２（１０Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１１［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｒ）−７−ベンジル−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程１で得た化合物を、参考例２の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９７−１．０３（２Ｈ，ｍ），１．３４−１．４１（２Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．８１−１．８８（１Ｈ，ｍ），４．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），５．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），６．７４（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２５−７．３７（５Ｈ，ｍ）．
工程３：（６Ｒ）−７−ベンジル−６−メチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程２で得た化合物を、参考例２の工程３と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．３０−０．４０（２Ｈ，ｍ），０．４８−０．６１（２Ｈ，ｍ），１．１６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），１．５８（１Ｈ，ｂｒｓ），２．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ），２．２５−２．３３（２Ｈ，ｍ），２．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．１，９．３Ｈｚ），２．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．１，３．０Ｈｚ），３．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），４．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），７．２０−７．３３（５Ｈ，ｍ）．
工程４：（６Ｒ）−７−ベンジル−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程３で得た化合物を、参考例２の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．６４−０．９２（３Ｈ，ｍ），１．２０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ），１．３０−１．３６（１Ｈ，ｍ），２．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．５８（１Ｈ，ｂｒｓ），３．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），３．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．４，９．５Ｈｚ），３．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），４．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ），７．２３−７．３３（５Ｈ，ｍ）．
工程５：（６Ｒ）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩
上記工程４で得た化合物を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，７０℃）δ：０．９３（１Ｈ，ｂｒｓ），１．１７（１Ｈ，ｂｒｓ），１．２４−１．３０（１Ｈ，ｍ），１．３４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），１．４０（１Ｈ，ｂｒｓ），２．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），３．１４（１Ｈ，ｂｒｓ），３．４０−３．４６（２Ｈ，ｍ），４．０４（１Ｈ，ｂｒｓ），９．８４（２Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例７【０２１１】
【化３７】
0005520236.tif 000057
【０２１２】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−｛［（６Ｒ）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝ピロリジン−１−カルボキシラート
参考例２の工程５で得た化合物の代わりに参考例６の工程５で得た化合物を用い、参考例３の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６８−０．７１（２Ｈ，ｍ），１．０９（３Ｈ，ｂｒｓ），１．２８−１．３１（２Ｈ，ｍ），１．３６（９Ｈ，ｓ），１．４７（１Ｈ，ｍ），１．９５（１Ｈ，ｂｒｓ），３．４６−３．６８（５Ｈ，ｍ），３．９１（１Ｈ，ｂｒｓ），４．６９−４．７１（２Ｈ，ｍ），５．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５４．６Ｈｚ）．
工程２：（６Ｒ）−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６７−０．７３（１Ｈ，ｍ），０．８６（１Ｈ，ｂｒｓ），１．１２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ），１．２８（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１２．４，５．０Ｈｚ），１．４９（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１２．４，５．２Ｈｚ），１．９４−２．２２（２Ｈ，ｍ），２．６５−２．６８（１Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３２．５，１３．０，４．２Ｈｚ），３．４３−３．６１（３Ｈ，ｍ），３．９２（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０４−４．０６（１Ｈ，ｍ），４．６５（１Ｈ，ｂｒｓ），５．２４（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝５５．６，４．６Ｈｚ）．
参考例８【０２１３】
【化３８】
0005520236.tif 000058
【０２１４】
工程１：メチル（２Ｓ）−２−｛ベンジル［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）カルボニル］アミノ｝ブタナート
メチル  Ｎ−ベンジル−Ｌ−アラニナートの代わりにメチル（２Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）ブタナートを用いて、参考例４の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．７０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），０．８３−０．８９（１Ｈ，ｍ），１．００−１．０６（１Ｈ，ｍ），１．０９−１．１６（１Ｈ，ｍ），１．３０−１．３７（１Ｈ，ｍ），１．５８−１．６８（１Ｈ，ｍ），１．８３−１．９２（１Ｈ，ｍ），２．８７−２．９２（１Ｈ，ｍ），３．４８（３Ｈ，ｓ），４．５０−４．５６（１Ｈ，ｍ），４．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．９Ｈｚ），５．００（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ），７．１７−７．３３（１０Ｈ，ｍ），７．７６（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｓ）−７−ベンジル−６−エチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程１で得た化合物を、参考例２の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９３−０．９８（２Ｈ，ｍ），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．３５−１．４０（１Ｈ，ｍ），１．７９−１．８６（１Ｈ，ｍ），１．９１−１．９７（２Ｈ，ｍ），３．９０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），３．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），５．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），７．２５−７．３６（５Ｈ，ｍ），７．３９（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２５９［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程３：（６Ｓ）−７−ベンジル−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程２で得た化合物を、参考例２の工程３と同様に反応させた後、得られた化合物を参考例２の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．６５−０．７０（１Ｈ，ｍ），０．８５−０．９０（２Ｈ，ｍ），０．９１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．１８−１．２３（１Ｈ，ｍ），１．４６−１．５３（１Ｈ，ｍ），１．６６−１．７５（１Ｈ，ｍ），２．３１−２．３６（１Ｈ，ｍ），２．３８−２．４５（２Ｈ，ｍ），３．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ），３．４０−３．４７（１Ｈ，ｍ），３．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），３．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ），７．１８−７．２３（１Ｈ，ｍ），７．２７−７．３１（４Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程４：（６Ｓ）−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩
上記工程３で得た化合物を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．８９−０．９４（１Ｈ，ｍ），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．１６−１．２１（１Ｈ，ｍ），１．２５−１．３１（１Ｈ，ｍ），１．４１−１．４８（１Ｈ，ｍ），１．６６−１．７４（１Ｈ，ｍ），１．７７−１．８５（１Ｈ，ｍ），２．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），３．２４−３．３２（１Ｈ，ｍ），３．３７−３．４４（１Ｈ，ｍ），３．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），４．０６−４．１４（１Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例９【０２１５】
【化３９】
0005520236.tif 000059
【０２１６】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ，４Ｒ）−２−｛［（６Ｓ）−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝−４−フルオロピロリジン−１−カルボキシラート
氷冷下、（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロ−Ｌ−プロリン（５２０ｍｇ，２．２３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８ｍｌ）溶液に、１−クロロ−Ｎ，Ｎ，２−トリメチル−１−プロペニルアミン（０．３５ｍｌ，２．６８ｍｍｏｌ）を加えた。同温度にて１時間撹拌した後、参考例８の工程４で得た化合物（７３０ｍｇ，２．６８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．７８ｍｌ，５．５８ｍｍｏｌ）を加え、室温にてさらに３時間撹拌した。クロロホルムで希釈し、有機層を飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（７８０ｍｇ，７７％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．６７−０．７３（２Ｈ，ｍ），０．８３−０．８８（３Ｈ，ｍ），１．２９−１．３３（１Ｈ，ｍ），１．３９（９Ｈ，ｓ），１．４５−１．５２（３Ｈ，ｍ），２．０７−２．１７（１Ｈ，ｍ），２．４３−２．４７（１Ｈ，ｍ），３．３６−３．７７（６Ｈ，ｍ），４．４０−４．５５（１Ｈ，ｍ），４．７０−４．８６（１Ｈ，ｍ），５．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５４．９Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４５２［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｓ）−６−エチル−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．６６−０．７５（２Ｈ，ｍ），０．８３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．２４−１．３１（１Ｈ，ｍ），１．４３−１．５３（３Ｈ，ｍ），１．９６−２．０８（１Ｈ，ｍ），２．１６−２．３２（１Ｈ，ｍ），２．６７−２．７４（１Ｈ，ｍ），２．９１−２．９９（１Ｈ，ｍ），３．３８−３．５７（４Ｈ，ｍ），４．０５−４．１６（１Ｈ，ｍ），４．４３−４．５３（１Ｈ，ｍ），５．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５６．１Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５２［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１０【０２１７】
【化４０】
0005520236.tif 000060
【０２１８】
工程１：メチル  （２Ｒ）−２−｛ベンジル［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）カルボニル］アミノ｝ブタナート
メチル  Ｎ−ベンジル−Ｌ−アラニナートの代わりにメチル（２Ｒ）−２−（ベンジルアミノ）ブタナートを用いて、参考例４の工程１と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．７１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），０．８５−０．９０（１Ｈ，ｍ），１．０２−１．０８（１Ｈ，ｍ），１．１１−１．１６（１Ｈ，ｍ），１．３２−１．３８（１Ｈ，ｍ），１．５９−１．６８（１Ｈ，ｍ），１．８４−１．９３（１Ｈ，ｍ），３．４９（３Ｈ，ｓ），４．３０−４．３８（１Ｈ，ｍ），４．４９−４．５７（１Ｈ，ｍ），４．６５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ），５．０１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），７．１８−７．３４（１０Ｈ，ｍ），７．７７（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｒ）−７−ベンジル−６−エチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程１で得た化合物を、参考例２の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９３−０．９８（２Ｈ，ｍ），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．３５−１．４０（１Ｈ，ｍ），１．８０−１．８６（１Ｈ，ｍ），１．９１−１．９８（２Ｈ，ｍ），３．８９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），３．９４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），５．３５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），７．２５−７．３５（５Ｈ，ｍ），７．５１（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２５９［（Ｍ＋１）＋］．
工程３：（６Ｒ）−７−ベンジル−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程２で得た化合物を、参考例２の工程３と同様に反応させた後、得られた化合物を参考例２の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．６５−０．７０（１Ｈ，ｍ），０．８５−０．９０（２Ｈ，ｍ），０．９１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．１８−１．２３（１Ｈ，ｍ），１．４６−１．５３（１Ｈ，ｍ），１．６６−１．７５（１Ｈ，ｍ），２．３１−２．３６（１Ｈ，ｍ），２．３８−２．４５（２Ｈ，ｍ），３．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ），３．４０−３．４７（１Ｈ，ｍ），３．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），３．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ），７．１８−７．２３（１Ｈ，ｍ），７．２７−７．３１（４Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３２７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程４：（６Ｒ）−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩
上記工程３で得た化合物を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，７０℃）δ：０．８９−０．９４（１Ｈ，ｍ），０．９９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．１６−１．２１（１Ｈ，ｍ），１．２５−１．３１（１Ｈ，ｍ），１．４１−１．４８（１Ｈ，ｍ），１．６６−１．７４（１Ｈ，ｍ），１．７７−１．８５（１Ｈ，ｍ），２．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），３．２４−３．３２（１Ｈ，ｍ），３．３７−３．４４（１Ｈ，ｍ），３．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），４．０６−４．１４（１Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１１【０２１９】
【化４１】
0005520236.tif 000061
【０２２０】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ，４Ｒ）−２−｛［（６Ｒ）−６−エチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝−４−フルオロピロリジン−１−カルボキシラート
参考例８の工程４で得た化合物の代わりに参考例１０の工程４で得た化合物を用い、参考例９の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６９−０．７３（１Ｈ，ｍ），０．７６−０．８４（２Ｈ，ｍ），０．９３−０．９８（１Ｈ，ｍ），１．３０−１．３８（３Ｈ，ｍ），１．３９（９Ｈ，ｓ），１．４４−１．５１（２Ｈ，ｍ），１．８５−２．０８（２Ｈ，ｍ），３．２５−３．６１（４Ｈ，ｍ），３．６６−３．７７（１Ｈ，ｍ），４．００−４．０７（１Ｈ，ｍ），４．５８−４．８０（２Ｈ，ｍ），５．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５１．３Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７４［（Ｍ＋Ｎａ）＋］．
工程２：（６Ｒ）−６−エチル−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６５−０．７２（１Ｈ，ｍ），０．７９−０．８５（３Ｈ，ｍ），１．２４−１．３２（１Ｈ，ｍ），１．４２−１．５５（４Ｈ，ｍ），１．８９−２．０５（１Ｈ，ｍ），２．１２−２．２０（１Ｈ，ｍ），２．６４−２．６９（１Ｈ，ｍ），２．９１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），３．０７−３．２０（１Ｈ，ｍ），３．３８−３．５８（３Ｈ，ｍ），３．９７−４．０９（１Ｈ，ｍ），４．５１−４．６４（１Ｈ，ｍ），５．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５５．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５２［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１２【０２２１】
【化４２】
0005520236.tif 000062
【０２２２】
工程１：メチル  Ｎ−［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）メチル］−Ｄ−ロイシナート
ベンジル（１−ホルミルシクロプロピル）カルバマート（３．０ｇ，１３．７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２００ｍｌ）溶液に、メチル  Ｄ−ロイシナート塩酸塩（２．７３ｇ，１５．１ｍｍｏｌ）、塩化亜鉛（２．８ｇ，２０．５ｍｍｏｌ）、およびトリアセトキシヒドロホウ酸ナトリウム（９．１６ｇ，４１．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、飽和重曹水および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（２．２４ｇ，４７％）を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．６２−０．９４（４Ｈ，ｍ），０．８８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．３７−１．６６（２Ｈ，ｍ），１．７０−１．７７（１Ｈ，ｍ），２．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），２．８２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），３．２４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），３．６８（３Ｈ，ｓ），５．０８（１Ｈ，ｂｒｓ），５．１１（２Ｈ，ｓ），７．２２−７．４２（５Ｈ，ｍ）．
工程２：メチル  Ｎ−［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）メチル］−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−ロイシナート
上記工程１で得た化合物を、参考例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．６４−０．７６（１Ｈ，ｍ），０．７８−０．９７（２Ｈ，ｍ），０．８７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．９０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．３２−１．４０（１Ｈ，ｍ），１．４１（９Ｈ，ｓ），１．４２−１．６７（１Ｈ，ｍ），１．７２−１．８９（２Ｈ，ｍ），３．００−３．１９（１Ｈ，ｍ），３．３９−３．７２（１Ｈ，ｍ），３．７３（３Ｈ，ｓ），３．７４−４．１８（１Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），５．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），５．９２−６．０８（１Ｈ，ｍ），７．２５−７．４１（５Ｈ，ｍ）．
工程３：ベンジル  ［１−（｛（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）［（１Ｒ）−１−（ヒドロキシメチル）−３−メチルブチル］アミノ｝メチル）シクロプロピル］カルバマート
氷冷下、水素化リチウムアルミニウム（０．５０ｇ，１２．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）懸濁液に、上記工程２で得た化合物（１．９５ｇ，４．３５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）溶液を滴下し、同温で１時間撹拌した。水および１０％クエン酸水を加え反応を停止した後、酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：３（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（１．２６ｇ，６４％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．６９−１．０１（１０Ｈ，ｍ），１．３５−１．４３（１Ｈ，ｍ），１．４４（９Ｈ，ｓ），１．４５−１．５３（１Ｈ，ｍ），１．５６−１．６３（２Ｈ，ｍ），３．０９−４．００（５Ｈ，ｍ），４．９８−５．１３（２Ｈ，ｍ），５．６０（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２４−７．３８（５Ｈ，ｍ）．
工程４：４−ベンジル  ７−ｔｅｒｔ−ブチル（６Ｒ）−６−イソブチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４，７−ジカルボキシラート
上記工程３で得た化合物（１．２６ｇ，３．００ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍｌ）溶液に、氷冷下トリフェニルホスフィン（１．５７ｇ，５．９９ｍｍｏｌ）およびアゾジカンルボン酸ジイソプロピル（０．９３ｍｌ，４．４９ｍｍｏｌ）を加え、徐々に室温に戻しながら１８時間撹拌した。更に、トリフェニルホスフィン（１．５７ｇ，５．９９ｍｍｏｌ）およびアゾジカンルボン酸ジイソプロピル（０．９３ｍｌ，４．４９ｍｍｏｌ）を加え、４時間加熱還流した。反応液を減圧濃縮し、得られた残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（０．５７ｇ，４７％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，６０℃）δ：０．４５−０．５４（１Ｈ，ｍ），０．６１−０．７１（１Ｈ，ｍ），０．８５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．８６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），０．９６−１．０５（１Ｈ，ｍ），１．２１−１．６２（１３Ｈ，ｍ），３．１１−３．２６（２Ｈ，ｍ），３．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），３．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），４．１９（１Ｈ，ｓ），５．１２（２Ｈ，ｓ），７．２３−７．３９（５Ｈ，ｍ）．
工程５：ベンジル（６Ｒ）−６−イソブチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート塩酸塩
上記工程４で得た化合物（０．５７ｇ，１．４２ｍｍｏｌ）のジオキサン（１０ｍｌ）溶液に、氷冷下４規定塩酸／ジオキサン（８ｍｌ）を加え、徐々に室温に戻しながら２４時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、標記化合物を無色固体として得た。【０２２３】
参考例１３【０２２４】
【化４３】
0005520236.tif 000063
【０２２５】
工程１：ベンジル  （６Ｒ）−７−｛［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］カルボニル｝−６−イソブチル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート
参考例８の工程４で得た化合物の代わりに参考例１２の工程５で得た化合物を用い、参考例９の工程１と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．４４−０．５９（１Ｈ，ｍ），０．７６−０．９６（７Ｈ，ｍ），１．０４−１．５８（１５Ｈ，ｍ），１．６５−２．２３（１Ｈ，ｍ），２．８６−３．０９（２Ｈ，ｍ），３．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ），３．３４−３．８０（３Ｈ，ｍ），４．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），４．４５−４．８２（１Ｈ，ｍ），５．０３−５．３９（１Ｈ，ｍ），５．１１（２Ｈ，ｓ），７．２８−７．４５（５Ｈ，ｍ）．
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−｛［（６Ｒ）−６−イソブチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝ピロリジン−１−カルボキシラート
上記工程１で得た化合物（０．６５ｇ，１．２５ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍｌ）溶液に、５％パラジウム炭素（０．１０ｇ）を加え水素雰囲気下、室温で１８時間接触還元を行った。触媒をセライトろ過後、ろ液を減圧濃縮した。得られた残渣をジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶解し、ジイイソプロピルアミン（１．３ｍｌ，７．５２ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下無水トリフルオロ酢酸（０．５３ｍｌ，３．７６ｍｍｏｌ）を加えた。徐々に室温に戻しながら２時間撹拌し、反応液を減圧濃縮した。得られた残さを酢酸エチルで希釈し、飽和重曹水、１０％クエン酸水、および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残さをジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶解し、氷冷下トリフルオロ酢酸（１０ｍｌ）を加え、室温にて２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮後、得られた残さをクロロホルムで希釈し、飽和重曹水および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［酢酸エチル：エタノール＝４：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（０．２８ｇ，５９％）を淡黄色油状物として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８０［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１４【０２２６】
【化４４】
0005520236.tif 000064
【０２２７】
４，９−ジアザジスピロ［２．２．２．２］デカン  二塩酸塩
氷冷下、４，９−ジアザジスピロ［２．２．２．２］デカン−５，１０−ジオン（１．７０ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に、ボラン−テトラヒドロフラン錯体（１．０２Ｍテトラヒドロフラン溶液）（４１ｍｌ，４１．６ｍｍｏｌ）を滴下した後、１８時間半加熱還流した。氷冷下、反応混合液にメタノール（５０ｍｌ）を加え６０分間撹拌した後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残さにエタノール（５０ｍｌ）、水（２５ｍｌ）およびトリエチルアミン（２５ｍｌ）を加え、４時間加熱還流後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）に溶解し、氷冷下トリエチルアミン（４．３ｍｌ，３１．２ｍｍｏｌ）および二炭酸ジ‐ｔｅｒｔ−ブチル（６．８０ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）を加え、室温にて１４時間撹拌した。溶媒を減圧濃縮し、得られた残さを酢酸エチルで希釈し、飽和塩化アンモニウム水、飽和食塩水の順で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣のクロロホルム（２０ｍｌ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２０ｍｌ）を加え、室温にて１時間撹拌した。溶媒を減圧濃縮し、得られた残さに４規定塩酸／ジオキサン（５０ｍｌ）を加え、２時間撹拌した。溶媒を減圧留去し、残さにジエチルエーテルを加え、析出した固体をろ取し、標記化合物（２．００ｇ，９１％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．０２（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．２４（４Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ），３．４１（４Ｈ，ｓ），１０．３０（２Ｈ，ｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２１２［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１５【０２２８】
【化４５】
0005520236.tif 000065
【０２２９】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−｛［９−（トリフルオロアセチル）−４，９−ジアザジスピロ［２．２．２．２］デカン−４−イル］カルボニル｝ピロリジン−１−カルボキシラート
氷冷下、（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロ−Ｌ−プロリン（４６６ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）および参考例１４で得た化合物（４２２ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（１．１５ｍｌ，６．６０ｍｍｏｌ）および（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（１．１４ｇ，２．２０ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて１９時間撹拌後、反応液を酢酸エチルで希釈し、飽和塩化アンモニウム水、飽和重曹水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去した後、得られた残さをジクロロメタン（１０ｍｌ）に溶解しトリエチルアミン（０．５６ｍｌ，４．００ｍｍｏｌ）を加え、氷冷後、無水トリフルオロ酢酸（０．２８ｍｌ，２．００ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて７時間撹拌後、反応液を減圧濃縮し、酢酸エチルで希釈し、飽和塩化アンモニウム水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（３４９ｍｇ，３９％）を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：１．１５−１．３３（１８Ｈ，ｍ），２．０４（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝３５．５，７．０Ｈｚ），２．５３（１Ｈ，ｓ），３．５９−３．６９（５Ｈ，ｍ），４．９７（１Ｈ，ｓ），５．３１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５４．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７２［（Ｍ＋Ｎａ）＋］．
工程２：４−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−９−（トリフルオロアセチル）−４，９−ジアザジスピロ［２．２．２．２］デカン
上記工程１で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０８−１．２３（８Ｈ，ｍ），２．１３（１Ｈ，ｓ），２．６３（１Ｈ，ｓ），３．６７−３．７３（５Ｈ，ｍ），５．１６（１Ｈ，ｓ），５．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．５Ｈｚ），５．９１（２Ｈ，ｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５０［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１６【０２３０】
【化４６】
0005520236.tif 000066
【０２３１】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−｛［（６Ｓ）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝ピロリジン−１−カルボキシラート
（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロ−Ｌ−プロリンの代わりに１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリンを、また参考例２の工程５で得た化合物の代わりに参考例４の工程５で得た化合物を用い、参考例３の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，８０℃）δ：０．７２（２Ｈ，ｂｒｓ），１．１１（３Ｈ，ｂｒｓ），１．２５−１．２９（２Ｈ，ｍ），１．３８（９Ｈ，ｓ），１．４８（１Ｈ，ｂｒｓ），２．２１−２．３３（１Ｈ，ｍ），２．８７（１Ｈ，ｂｒｓ），３．０２−３．１０（２Ｈ，ｍ），３．５４（２Ｈ，ｂｒｓ），３．６５−３．７５（１Ｈ，ｍ），３．７９−３．８７（１Ｈ，ｍ），４．６４（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４５６［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：（６Ｓ）−７−（４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリル）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，８０℃）δ：０．７０−０．７４（２Ｈ，ｍ），１．１１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），１．２３−１．２９（１Ｈ，ｍ），１．４５−１．５１（１Ｈ，ｍ），２．３２−２．４５（２Ｈ，ｍ），２．９２−３．０８（２Ｈ，ｍ），３．１６−３．２６（１Ｈ，ｍ），３．５６（３Ｈ，ｂｒｓ），３．８８（１Ｈ，ｂｒｓ），４．０２−４．０７（１Ｈ，ｍ），４．６４（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５６［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１７【０２３２】
【化４７】
0005520236.tif 000067
【０２３３】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ）−４，４−ジフルオロ−２−｛［（６Ｒ）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］−オクタ−７−イル］カルボニル｝ピロリジン−１−カルボキシラート
（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−フルオロ−Ｌ−プロリンの代わりに１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリンを、また参考例２の工程５で得た化合物の代わりに参考例６の工程５で得た化合物を用い、参考例３の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．７２（２Ｈ，ｂｒｓ），１．１１（３Ｈ，ｂｒｓ），１．２５−１．３１（２Ｈ，ｍ），１．３８（９Ｈ，ｓ），１．４６−１．５２（２Ｈ，ｍ），２．０７（１Ｈ，ｂｒｓ），２．８２−２．９２（１Ｈ，ｍ），３．５３（２Ｈ，ｂｒｓ），３．６４−３．８６（３Ｈ，ｍ），４．８２（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７８［（Ｍ＋Ｎａ）＋］．
工程２：（６Ｒ）−７−（４，４−ジフルオロ−Ｌ−プロリル）−６−メチル−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程１で得た化合物を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，１００℃）δ：０．６６−０．８３（２Ｈ，ｍ），１．１０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ），１．２２−１．２８（１Ｈ，ｍ），１．４４−１．５１（１Ｈ，ｍ），２．２３−２．４６（２Ｈ，ｍ），２．９２−３．０１（２Ｈ，ｍ），３．２２−３．２６（１Ｈ，ｍ），３．４３−３．６０（３Ｈ，ｍ），４．１４（１Ｈ，ｂｒｓ），４．６１（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５６［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例１８【０２３４】
【化４８】
0005520236.tif 000068
【０２３５】
工程１：メチル  Ｎ−ベンジル−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルセリナート
メチル  Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリナート塩酸塩（１２．０ｇ，５７．０ｍｍｏｌ）のメタノール（３００ｍｌ）溶液に、トリエチルアミン（９．５ｍｌ，６８．０ｍｍｏｌ）、ベンズアルデヒド（６．３７ｍｌ，６３．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で６時間撹拌した。氷冷下、水素化ホウ素ナトリウム（３．２３ｇ，８６．０ｍｍｏｌ）を徐々に加えた後、室温にて２時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水（１００ｍｌ）を加え、減圧濃縮した後、残さを酢酸エチルで希釈し、析出した不溶物をろ去した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、標記化合物（１５．３ｇ，１００％）を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．１４（９Ｈ，ｓ），２．０９（１Ｈ，ｂｒｓ），３．４４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），３．５５−３．６３（２Ｈ，ｍ），３．７０−３．７３（１Ｈ，ｍ），３．７２（３Ｈ，ｓ），３．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），７．２３−７．３８（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６６［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程２：メチル  Ｎ−ベンジル−Ｎ−［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）カルボニル］−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルセリナート
メチル  Ｎ−ベンジル−Ｌ−アラニナートの代わりに上記工程１で得た化合物を用いて、参考例４の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．９４−０．９７（２Ｈ，ｍ），０．９８（９Ｈ，ｓ），１．１６−１．２４（２Ｈ，ｍ），３．５３（３Ｈ，ｓ），３．６３−３．７２（２Ｈ，ｍ），４．４６−４．５３（１Ｈ，ｍ），４．６０−４．７０（１Ｈ，ｍ），４．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．３Ｈｚ），４．９４−５．０１（２Ｈ，ｍ），７．１６−７．３５（１０Ｈ，ｍ），７．６６（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程３：７−ベンジル−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程２で得た化合物を、参考例２の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，５０℃）δ：０．８８−０．９７（２Ｈ，ｍ），１．１５（９Ｈ，ｓ），１．３６−１．４１（１Ｈ，ｍ），１．７７−１．８３（１Ｈ，ｍ），３．６９（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２０．５，９．６，３．１Ｈｚ），３．９６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），４．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ），５．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），６．６４（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２４−７．３４（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６１［（Ｍ−ｔＢｕ）＋］．
工程４：７−ベンジル−６−（ヒドロキシメチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程３で得た化合物（１０．５ｇ，３３．０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（５０ｍｌ）溶液に、トリフルオロ酢酸（３０ｍｌ）を加え室温で１時間攪拌した後、４０℃にてさらに６時間加熱撹拌した。溶媒を減圧濃縮後、トルエン共沸し、残さを酢酸エチルで希釈後、飽和重曹水、飽和食塩水の順に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［クロロホルム：メタノール＝１５：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（７．１５ｇ，８３％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９６−１．０６（２Ｈ，ｍ），１．３６−１．４２（１Ｈ，ｍ），１．７４−１．８０（１Ｈ，ｍ），２．９８−３．０５（１Ｈ，ｍ），３．９１（１Ｈ，ｓ），３．９１−４．００（１Ｈ，ｍ），４．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ），５．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ），７．２５−７．４２（６Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６１［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程５：７−ベンジル−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程４で得た化合物（７．１５ｇ，２７．０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．５ｍｌ，３２．０ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）溶液に、４−ジメチルアミノピリジン（６６０ｍｇ，５．００ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン（４．９０ｇ，３２．０ｍｍｏｌ）を加えた。室温にて１６時間撹拌した後、反応液に氷水（２００ｍｌ）を加え、析出した固体をろ取した。得られた固体を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（８．６３ｇ，８５％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．０４（３Ｈ，ｓ），０．０５（３Ｈ，ｓ），０．８９（９Ｈ，ｓ），０．９１−１．００（２Ｈ，ｍ），１．４０−１．４６（１Ｈ，ｍ），１．７４−１．８１（１Ｈ，ｍ），３．９０−３．９４（２Ｈ，ｍ），４．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．１，３．５Ｈｚ），４．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ），５．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ），７．２５−７．３８（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７５［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程６：７−ベンジル−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程５で得た化合物を、参考例２の工程３と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．０５（３Ｈ，ｓ），０．０６（３Ｈ，ｓ），０．３１−０．３８（２Ｈ，ｍ），０．５１−０．５９（２Ｈ，ｍ），０．８９（９Ｈ，ｓ），２．２３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），２．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），２．４０−２．４５（１Ｈ，ｍ），２．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，８．３Ｈｚ），３．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，３．４Ｈｚ），３．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ），３．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，６．５Ｈｚ），３．９６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．３，４．４Ｈｚ），４．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ），７．２１−７．３７（５Ｈ，ｍ）．．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３４７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程７：７−ベンジル−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程６で得た化合物を、参考例２の工程４と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．００（３Ｈ，ｓ），０．０１（３Ｈ，ｓ），０．６１−０．６８（１Ｈ，ｍ），０．８４（９Ｈ，ｓ），０．８５−０．９０（２Ｈ，ｍ），１．１８−１．２５（１Ｈ，ｍ），２．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），２．４５−２．４９（１Ｈ，ｍ），２．５４−２．５８（１Ｈ，ｍ），３．３４−３．４１（２Ｈ，ｍ），３．５０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．３，７．８Ｈｚ），３．９１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．５，５．１Ｈｚ），３．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ），４．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ），７．１６−７．２０（１Ｈ，ｍ），７．２４−７．２８（４Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４４３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程８：６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程７で得た化合物を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．０８（６Ｈ，ｓ），０．７６−０．８０（１Ｈ，ｍ），０．９０（９Ｈ，ｓ），０．９１−０．９４（１Ｈ，ｍ），１．１０−１．１６（１Ｈ，ｍ），１．３６−１．４２（１Ｈ，ｍ），２．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ），３．０４−３．０９（１Ｈ，ｍ），３．２２−３．２９（２Ｈ，ｍ），３．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．４，７．０Ｈｚ），３．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，４．９Ｈｚ），４．０４−４．１２（１Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５３［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
工程９：ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，４Ｒ）−２−｛［（６Ｒ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝−４−フルオロピロリジン−１−カルボキシラート（異性体Ａ）および  ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，４Ｒ）−２−｛［（６Ｓ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝−４−フルオロピロリジン−１−カルボキシラート（異性体Ｂ）
参考例８の工程４で得た化合物の代わりに上記工程８で得た化合物を用い、参考例９の工程１と同様に反応させた後、生成したジアステレオ混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー［ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１（ｖ／ｖ）］にて分離し、標記化合物をそれぞれ無色固体として得た。
異性体Ａ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．００（３Ｈ，ｓ），０．０１（３Ｈ，ｓ），０．６８−０．７６（１Ｈ，ｍ），０．８４（９Ｈ，ｓ），０．８５−０．８７（１Ｈ，ｍ），１．２３−１．３０（１Ｈ，ｍ），１．３５（９Ｈ，ｓ），１．４０−１．４５（１Ｈ，ｍ），１．９９−２．１６（１Ｈ，ｍ），２．３１−２．４９（１Ｈ，ｍ），３．３３−３．７７（７Ｈ，ｍ），４．１２−４．２８（１Ｈ，ｍ），４．３４−４．４８（１Ｈ，ｍ），４．６０−４．７６（１Ｈ，ｍ），５．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５２．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５９０［（Ｍ＋Ｎａ）＋］．
異性体Ｂ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：−０．０１（３Ｈ，ｓ），０．０１（３Ｈ，ｓ），０．６６−０．７５（１Ｈ，ｍ），０．８３（９Ｈ，ｓ），１．２６−１．３４（３Ｈ，ｍ），１．３５（９Ｈ，ｓ），１．７４−１．９６（２Ｈ，ｍ），３．２７−３．７３（７Ｈ，ｍ），４．１２−４．２８（１Ｈ，ｍ），４．３８−４．５２（１Ｈ，ｍ），４．６８−４．７８（１Ｈ，ｍ），５．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５５．２Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：５９０［（Ｍ＋Ｎａ）＋］．
参考例１９【０２３６】
【化４９】
0005520236.tif 000069
【０２３７】
（６Ｒ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１８の工程９で得た化合物（異性体Ａ）を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．０１（６Ｈ，ｓ），０．６６−０．７９（２Ｈ，ｍ），０．８３（９Ｈ，ｓ），１．２０−１．３１（１Ｈ，ｍ），１．３７−１．４７（１Ｈ，ｍ），１．９２−２．０７（１Ｈ，ｍ），２．０９−２．２６（１Ｈ，ｍ），２．８０−２．９２（２Ｈ，ｍ），３．３９−３．７１（６Ｈ，ｍ），３．９８−４．１８（１Ｈ，ｍ），４．３５−４．５３（１Ｈ，ｍ），５．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５５．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４６８［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例２０【０２３８】
【化５０】
0005520236.tif 000070
【０２３９】
（６Ｓ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
参考例１８の工程９で得た化合物（異性体Ｂ）を、参考例３の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．０１（６Ｈ，ｓ），０．６７−０．７３（１Ｈ，ｍ），０．８３（９Ｈ，ｓ），１．２０−１．２８（２Ｈ，ｍ），１．３８−１．４７（１Ｈ，ｍ），１．８９−２．１５（２Ｈ，ｍ），２．６８−２．８０（１Ｈ，ｍ），２．８５−２．９２（１Ｈ，ｍ），３．０８−３．１８（１Ｈ，ｍ），３．３９−３．７２（４Ｈ，ｍ），４．０２−４．１９（２Ｈ，ｍ），４．３９−４．５３（１Ｈ，ｍ），５．２１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５５．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４６８［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
参考例２１【０２４０】
【化５１】
0005520236.tif 000071
【０２４１】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  ７−ベンジル−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート
参考例１８の工程７の得た化合物を、実施例１の工程２と同様に反応させた後、参考例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．００（６Ｈ，ｓ），０．３９−０．４６（１Ｈ，ｍ），０．６０−０．７０（２Ｈ，ｍ），０．８４（９Ｈ，ｓ），０．９７−１．０２（１Ｈ，ｍ），１．３５（９Ｈ，ｓ），２．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），２．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），３．０８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．９，８．３Ｈｚ），３．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ），３．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，６．６Ｈｚ），３．７９−３．８８（２Ｈ，ｍ），３．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．２Ｈｚ），７．１３−７．１６（１Ｈ，ｍ），７．２１−７．２７（４Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４４７［（Ｍ＋１）］＋．

工程２：ｔｅｒｔ−ブチル  ６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート
上記工程１で得た化合物を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．０６（６Ｈ，ｓ），０．４８−０．５７（２Ｈ，ｍ），０．７８−０．８３（１Ｈ，ｍ），０．８９（９Ｈ，ｓ），１．１４−１．２０（１Ｈ，ｍ），１．４０（９Ｈ，ｓ），２．１６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ），２．６２−２．６８（１Ｈ，ｍ），２．７５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．５，１０．０Ｈｚ），２．９６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．５，２．０Ｈｚ），３．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．１，６．２Ｈｚ），３．５４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．０，５．１Ｈｚ），３．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．５，２．９Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５７［（Ｍ＋１）］＋．
工程３：ｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｒ）−７−（｛（２Ｓ，４Ｒ）−１−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−フルオロピロリジン−２−イルカルボニル）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート（異性体Ａ）およびｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｓ）−７−（｛（２Ｓ，４Ｒ）−１−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−４−フルオロピロリジン−２−イルカルボニル）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート（異性体Ｂ）
参考例８の工程４で得た化合物の代わりに、上記工程２で得た化合物を用い、参考例９の工程１と同様に反応させた後、参考例１８の工程９と同様に、生成したジアステレオ混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて分離し、標記化合物をそれぞれ無色固体として得た。
異性体Ａ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：−０．０６（３Ｈ，ｂｒｓ），０．００（３Ｈ，ｓ），０．４６−０．５２（１Ｈ，ｍ），０．８２（９Ｈ，ｓ），０．９４−１．０４（１Ｈ，ｍ），１．１５−１．２８（２Ｈ，ｍ），１．３６（９Ｈ，ｓ），１．９２−２．１２（２Ｈ，ｍ），２．７１−２．８３（１Ｈ，ｍ），３．２１−３．２９（１Ｈ，ｍ），３．４２−３．６４（４Ｈ，ｍ），３．６９−３．７８（１Ｈ，ｍ），４．１０−４．２４（１Ｈ，ｍ），４．５７−５．１２（４Ｈ，ｍ），５．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５２．７Ｈｚ），７．２４−７．３３（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６２８［（Ｍ＋Ｎａ）］＋．
異性体Ｂ：１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：−０．０１（３Ｈ，ｓ），０．００（３Ｈ，ｓ），０．７４−０．７９（１Ｈ，ｍ），０．７９−０．８５（１Ｈ，ｍ），０．８２（９Ｈ，ｓ），０．９５−１．０４（１Ｈ，ｍ），１．２２−１．３０（１Ｈ，ｍ），１．３７（９Ｈ，ｓ），１．８０−２．０１（２Ｈ，ｍ），３．１９−３．２６（１Ｈ，ｍ），３．３４−３．６０（４Ｈ，ｍ），３．６７−３．８３（２Ｈ，ｍ），３．９８−４．１３（１Ｈ，ｍ），４．３１−４．４５（１Ｈ，ｍ），４．７８−４．８４（１Ｈ，ｍ），４．８７−５．１０（２Ｈ，ｍ），５．２１，５．２８（１Ｈ，ｅａｃｈ  ｄ，Ｊ＝５５．２，５４．２Ｈｚ），７．２３−７．３４（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：６２８［（Ｍ＋Ｎａ）］＋．
参考例２２【０２４２】
【化５２】
0005520236.tif 000072
【０２４３】
ｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｒ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート
参考例２１の工程３で得た化合物（異性体Ａ）を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．０６（６Ｈ，ｓ），０．４９−０．５９（２Ｈ，ｍ），０．８７（９Ｈ，ｓ），１．０７−１．１４（１Ｈ，ｍ），１．３１−１．３９（１Ｈ，ｍ），１．４２（９Ｈ，ｓ），２．１６−２．３４（２Ｈ，ｍ），３．００−３．４３（６Ｈ，ｍ），３．５５−３．７７（２Ｈ，ｍ），３．９５−４．１７（１Ｈ，ｍ），４．２９−４．３８（１Ｈ，ｍ），５．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５４．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７２［（Ｍ＋１）］＋．
参考例２３【０２４４】
【化５３】
0005520236.tif 000073
【０２４５】
ｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｓ）−６−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝メチル）−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート
参考例２１の工程３で得た化合物（異性体Ｂ）を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，９０℃）δ：０．０５（６Ｈ，ｓ），０．５１−０．５８（１Ｈ，ｍ），０．８７（９Ｈ，ｓ），１．０７−１．１６（１Ｈ，ｍ），１．３０−１．４０（２Ｈ，ｍ），１．４３（９Ｈ，ｓ），１．９４−２．１３（２Ｈ，ｍ），３．０３−３．２０（３Ｈ，ｍ），３．２７−３．４１（１Ｈ，ｍ），３．４５−３．５６（１Ｈ，ｍ），３．５９−３．７４（１Ｈ，ｍ），３．９０−４．１１（２Ｈ，ｍ），４．４３−４．６３（２Ｈ，ｍ），５．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．５Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７２［（Ｍ＋１）］＋．
参考例２４【０２４６】
【化５４】
0005520236.tif 000074
【０２４７】
工程１：メチル  Ｎ−ベンジル−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリナート
メチル  Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリナート塩酸塩（１２ｇ，５６．７ｍｍｏｌ）をメタノール（１２０ｍｌ）に溶解し、酢酸（６．５０ｍｌ，１１４ｍｍｏｌ）、ベンズアルデヒド（６．２５ｍｌ，６１．８ｍｍｏｌ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（１Ｍテトラヒドロフラン溶液、７５ｍｌ）を加え、室温で４８時間攪拌した。反応液を濃縮、水にて希釈し氷冷下、炭酸水素ナトリウムにて中和、クロロホルムで抽出し無水硫酸マグネシウムで乾燥後、乾燥剤をろ去、溶媒を減圧濃縮した。得られた残さをシリカゲルクロマトグラフィー［酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（７．７５ｇ，５２％）を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．１４（９Ｈ，ｓ），２．０９（１Ｈ，ｂｒｓ），３．４４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），３．５５−３．６３（２Ｈ，ｍ），３．７０−３．７３（１Ｈ，ｍ），３．７２（３Ｈ，ｓ），３．９１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ），７．２３−７．３８（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６６［（Ｍ＋１）］＋．
工程２：メチル  Ｎ−ベンジル−Ｎ−［（１−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）カルボニル］−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル−Ｌ−セリナート
メチル  Ｎ−ベンジル−Ｌ−アラニナートの代わりに、上記工程１で得た化合物を用いて、参考例４の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９４−０．９８（２Ｈ，ｍ），０．９８（９Ｈ，ｓ），１．１６−１．２４（２Ｈ，ｍ），３．５３（３Ｈ，ｓ），３．６３−３．７２（２Ｈ，ｍ），４．４６−４．５３（１Ｈ，ｍ），４．６０−４．７０（１Ｈ，ｍ），４．８３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．３Ｈｚ），４．９４−５．０１（２Ｈ，ｍ），７．１６−７．３５（１０Ｈ，ｍ），７．６６（１Ｈ，ｂｒｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４８３［（Ｍ＋１）］＋．
工程３：（６Ｓ）−７−ベンジル−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−５，８−ジオン
上記工程２で得た化合物を、参考例２の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．８８−０．９７（２Ｈ，ｍ），１．１５（９Ｈ，ｓ），１．３６−１．４１（１Ｈ，ｍ），１．７７−１．８３（１Ｈ，ｍ），３．６９（２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝２０．５，９．６，３．１Ｈｚ），３．９６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝３．１Ｈｚ），４．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．１Ｈｚ），５．２９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．９Ｈｚ），６．６４（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２４−７．３４（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１７［（Ｍ＋１）］＋．
工程４：（６Ｒ）−７−ベンジル−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程３で得た化合物を、参考例２の工程３と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．３０−０．３８（２Ｈ，ｍ），０．４８−０．５９（２Ｈ，ｍ），１．１９（９Ｈ，ｓ），１．６２（１Ｈ，ｂｒ），２．２７（２Ｈ，ＡＢ  ｔｙｐｅ  ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），２．４０−２．４８（１Ｈ，ｍ），２．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．３，８．２Ｈｚ），３．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．３，３．２Ｈｚ），３．３４−３．４１（２Ｈ，ｍ），３．６９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．３，４．６Ｈｚ），４．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ），７．２１−７．３５（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２８９［（Ｍ＋１）］＋．
工程５：［（６Ｒ）−７−ベンジル−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−６−イル］メタノール
上記工程４で得た化合物を、参考例１８の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．３３−０．４３（２Ｈ，ｍ），０．５２−０．６１（２Ｈ，ｍ），１．７１（１Ｈ，ｂｒ），２．３６−２．４５（３Ｈ，ｍ），３．０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），３．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ），３．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．０，３．５Ｈｚ），３．９５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．０，４．５Ｈｚ），４．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ），７．２４−７．３２（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３３［（Ｍ＋１）］＋．
工程６：ｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｒ）−７−ベンジル−６−（ヒドロキシメチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート
上記工程５で得た化合物を、参考例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，１００oＣ）δ：０．４４−０．４９（１Ｈ，ｍ），０．６２−０．７２（２Ｈ，ｍ），１．００−１．０５（１Ｈ，ｍ），１．３９（９Ｈ，ｓ），２．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），２．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．７，１．２Ｈｚ），２．４１−２．４６（１Ｈ，ｍ），３．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，８．５Ｈｚ），３．３４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），３．４０−３．４６（１Ｈ，ｍ），３．６６−３．７２（１Ｈ，ｍ），３．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１３．２，３．５Ｈｚ），４．０２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ），４．１４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ），７．１６−７．３０（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３３３［（Ｍ＋１）］＋．
工程７：ｔｅｒｔ−ブチル  （６Ｒ）−７−ベンジル−６−（フルオロメチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン−４−カルボキシラート
上記工程６で得た化合物（３６０ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８ｍｌ）溶液を−７８℃に冷却した。次いで、ビス（２−メトキシエチル）アミノサルファートリフルオリド（０．２６ｍｌ，１．４１ｍｍｏｌ）を滴下、徐々に昇温し２０時間攪拌した。反応液を飽和重曹水溶液にて中和しクロロホルムにて抽出、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、乾燥剤をろ去、溶媒を減圧濃縮した。得られた残さをシリカゲルクロマトグラフィー［酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１０（ｖ／ｖ）］にて精製し、標記化合物（３２５ｍｇ，９０％）を無色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，１００oＣ）δ：０．６０−０．６７（２Ｈ，ｍ），０．７９−０．９０（２Ｈ，ｍ），１．４０（９Ｈ，ｓ），２．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ），２．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．７Ｈｚ），２．８３−２．９３（２Ｈ，ｍ），３．３５−３．４５（１Ｈ，ｍ），３．７１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ），３．７２−３．７９（１Ｈ，ｍ），４．６６−４．８１（１Ｈ，ｍ），７．１９−７．３１（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３３５［（Ｍ＋１）］＋．
工程８：（６Ｒ）−７−ベンジル−６−（フルオロメチル）−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン
上記工程７で得た化合物を、参考例１２の工程５と同様に反応させた後、参考例２の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，１００oＣ）δ：０．８４（２Ｈ，ｂｒｓ），０．９２（２Ｈ，ｂｒ），２．５５，２．７６（１Ｈ，ｅａｃｈ  ｂｒ），２．９４（２Ｈ，ｓ），２．９５−２．９８（１Ｈ，ｍ），３．７２（２Ｈ，ｓ），３．７３−３．９４（２Ｈ，ｍ），４．７４，４．８６（１Ｈ，ｅａｃｈ  ｂｒ），７．２０−７．３１（５Ｈ，ｍ）．
工程９：（６Ｒ）−６−（フルオロメチル）−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩
上記工程８で得た化合物を、参考例２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，１００oＣ）δ：１．０６−１．１１（４Ｈ，ｍ），２．６５−２．９０（３Ｈ，ｍ），３．３７−３．６５（２Ｈ，ｍ），３．９２（１Ｈ，ｂｒ），５．２１−５．３４（１Ｈ，ｍ），９．５５（２Ｈ，ｂｒ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４１［（Ｍ＋１）］＋．
参考例２５【０２４８】
【化５５】
0005520236.tif 000075
【０２４９】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  （２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−｛［（６Ｒ）−６−（フルオロメチル）−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタ−７−イル］カルボニル｝−４−フルオロピロリジン−１−カルボキシラート
参考例８の工程４で得た化合物の代わりに、参考例２４の工程９で得た化合物を用い、参考例９の工程１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４５６［（Ｍ＋１）］＋．
工程２：（６Ｒ）−６−（フルオロメチル）−７−［（４Ｒ）−４−フルオロ−Ｌ−プロリル］−４−（トリフルオロアセチル）−４，７−ジアザスピロ［２．５］オクタン塩酸塩
上記工程１で得た化合物を、参考例１２の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ，１００oＣ）δ：１．０７−１．１１（４Ｈ，ｍ），２．０４−２．３１（１Ｈ，ｍ），２．６５−２．７３（１Ｈ，ｍ），３．１３−３．２３（２Ｈ，ｍ），３．４３−３．５８（２Ｈ，ｍ），３．６２−３．７５（２Ｈ，ｍ），４．２０−４．３７（２Ｈ，ｍ），４．５７−４．７８（１Ｈ，ｍ），４．９２−４．９８（１Ｈ，ｍ），５．４６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５３．２Ｈｚ），９．７７（２Ｈ，ｂｒ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５６［（Ｍ＋１）］＋．
参考例２６【０２５０】
【化５６】
0005520236.tif 000076
【０２５１】
工程１：３，４−ビス（４−クロロフェニル）−１，２，５−チアジアゾール  １，１−ジオキシド
１，２−ビス（４−クロロフェニル）エタン−１，２−ジオンを原料に用い、参考例１の工程７と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．４７（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．５３（４Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ）．
工程２：３，４−ビス（４−クロロフェニル）−３−メチル−２，３−ジヒドロ−１，２，５−チアジアゾール  １，１−ジオキシド
上記工程１で得た化合物（１０．０ｇ，２９．５ｍｍｏｌ）のトルエン（２００ｍｌ）懸濁溶液に、０℃にてメチルマグネシウムブロマイド（０．８９Ｍテトラヒドロフラン溶液、４３．１ｍｌ）を滴下した。室温にて１時間撹拌後、１規定塩酸水溶液を加え、酢酸エチルにて抽出後、飽和重曹水溶液および飽和食塩水にて洗浄し、無水硫酸ナトリウムにて乾燥、溶媒を減圧留去し、標記化合物（１１．１ｇ、定量的）を無色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．０６（３Ｈ，ｓ），４．７０（１Ｈ，ｓ），７．３０−７．４８（６Ｈ，ｍ），７．６３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ）．
工程３：（３Ｓ＊，４Ｒ＊）−３，４−ビス（４−クロロフェニル）−３−メチル−１，２，５−チアジアゾリジン  １，１−ジオキシド
上記工程２で得た化合物を、参考例１の工程８と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．８５（３Ｈ，ｓ），４．６３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），４．７２（１Ｈ，ｓ），４．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），６．７７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．０１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．１７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．１８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ）．
工程４：（１Ｒ＊，２Ｓ＊）−１，２−ビス（４−クロロフェニル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程３で得た化合物を、参考例１の工程９と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４９（３Ｈ，ｓ），４．０８（１Ｈ，ｓ），６．９８（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．１７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．２５−７．２８（４Ｈ，ｍ）．
工程５：（１Ｒ，２Ｓ）−１，２−ビス（４−クロロフェニル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程４で得た化合物を、参考例１の工程１０と同様に光学分割し、標記化合物を無色固体として得た。
［α］Ｄ＝＋６９．２°（ｃ．１．０５，メタノール，２３℃）
工程６：（４Ｓ，５Ｒ）−４，５−ビス（４−クロロフェニル）−４−メチルイミダゾリジン−２−チオン
上記工程５で得た化合物を、参考例１の工程１１と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１．７１（３Ｈ，ｓ），４．９４（１Ｈ，ｓ），６．８９（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．９，２．１Ｈｚ），６．９７（２Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．９，２．１Ｈｚ），７．１７−７．１２（４Ｈ，ｍ），８．７４（１Ｈ，ｓ），８．９２（１Ｈ，ｓ）．
工程７：エチル  （５Ｒ，６Ｓ）−５，６−ビス（４−クロロフェニル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボキシラート
上記工程６で得た化合物を、参考例１の工程１２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．０３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ），１．３７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），２．１０（３Ｈ，ｓ），３．２８−３．４７（１Ｈ，ｍ），４．３３（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），５．５７（１Ｈ，ｓ），６．４５−７．１８（８Ｈ，ｍ）．
工程８：（５Ｒ，６Ｓ）−５，６−ビス（４−クロロフェニル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボン酸
上記工程７で得た化合物を、参考例１の工程１３と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．８３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．７８（３Ｈ，ｓ），２．９９−３．６７（１Ｈ，ｍ），５．７９（１Ｈ，ｓ），６．４４−７．４３（８Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４４７［（Ｍ＋１）］＋．
参考例２７【０２５２】
【化５７】
0005520236.tif 000077
【０２５３】
工程１：エチル  ２−アミノ−２−（４−クロロフェニル）プロパナート
１−（６−クロロピリジン−３−イル）エタノンの代わりに、４’−クロロアセトフェノンを用い、参考例１の工程１と同様に反応させ、標記化合物を黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２８［（Ｍ＋１）］＋．
工程２：エチル  ２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−（４−クロロフェニル）プロパナート
上記工程１で得た化合物を、参考例１の工程２と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．１７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．３７（９Ｈ，ｂｒｓ），１．９７（３Ｈ，ｓ），４．０８−４．２１（２Ｈ，ｍ），５．９２（１Ｈ，ｂｒ），７．２９−７．３３（２Ｈ，ｍ），７．３６−７．４１（２Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５０［（Ｍ＋Ｎａ）］＋．
工程３：ｔｅｒｔ−ブチル  ［１−（４−クロロフェニル）−１−メチル−２−オキソエチル］カルバマート
上記工程２で得た化合物を、参考例１の工程３と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４２（９Ｈ，ｂｒｓ），１．８１（３Ｈ，ｓ），５．７１（１Ｈ，ｂｒ），７．３１−７．３９（４Ｈ，ｍ），９．２７（１Ｈ，ｓ）．
工程４：ｔｅｒｔ−ブチル  ［２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］カルバマート
上記工程３で得た化合物を、参考例１の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４３（９Ｈ，ｂｒｓ），１．５５（３Ｈ，ｂｒｓ），５．０８（２Ｈ，ｂｒ），５．４０（１Ｈ，ｂｒ），６．８０（１Ｈ，ｂｒ），７．０２−７．０７（１Ｈ，ｍ），７．２４−７．３５（５Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４３６［（Ｍ＋Ｎａ）］＋．
工程５：ｔｅｒｔ−ブチル  ［２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−１−（４−クロロフェニル）−１−メチル−２−オキソエチル］カルバマート
上記工程４で得た化合物を、参考例１の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．２９（９Ｈ，ｂｒｓ），１．９６（３Ｈ，ｓ），６．１９（１Ｈ，ｂｒ），７．２８−７．４２（７Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４３４［（Ｍ＋Ｎａ）］＋．
工程６：２−アミノ−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−（４−クロロフェニル）プロパン−１−オン
上記工程５で得た化合物を、参考例１の工程６と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１２［（Ｍ＋１）］＋．
工程７：４−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−（４−クロロフェニル）−３−メチル−２，３−ジヒドロ−１，２，５−チアジアゾール  １，１−ジオキシド
上記工程６で得た化合物を、参考例１の工程７と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．０６（３Ｈ，ｓ），４．７４（１Ｈ，ｂｒ），７．３４−７．５４（７Ｈ，ｍ）．

工程８：（３Ｓ＊，４Ｒ＊）−４−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−（４−クロロフェニル）−３−メチル−１，２，５−チアジアゾール  １，１−ジオキシド
上記工程７で得た化合物を、参考例１の工程８と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．７８（３Ｈ，ｓ），４．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ），６．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．０７−７．１４（３Ｈ，ｍ），７．２１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．３５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ），７．９４−７．９７（２Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７５［（Ｍ＋１）］＋．
工程９：（１Ｒ＊，２Ｓ＊）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−（４−クロロフェニル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程８で得た化合物を、参考例１の工程９と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４９（３Ｈ，ｓ），１．５０（４Ｈ，ｒｂｓ），４．０８（１Ｈ，ｓ），６．７５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），６．９４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．５，１．３Ｈｚ），７．１９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．２６（４Ｈ，ｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１３［（Ｍ＋１）］＋．
工程１０：（１Ｒ，２Ｓ）−１−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−２−（４−クロロフェニル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程９で得た化合物を、参考例１の工程１０と同様に光学分割し、標記化合物を淡黄色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１３［（Ｍ＋１）］＋．
［α］Ｄ＝＋６７．４°（ｃ＝１．０，クロロホルム，２５℃）
工程１１：（４Ｓ，５Ｒ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−４−（４−クロロフェニル）−４−メチルイミダゾリジン−２−チオン
上記工程１０で得た化合物を、参考例１の工程１１と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物質として得た。本化合物は、精製することなく次の反応に用いた
工程１２：エチル  （５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボキシラート
上記工程１１で得た化合物を、参考例１の工程１２と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．９０（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），１．０２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．３４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．８０（３Ｈ，ｓ），３．３５−３．３７（１Ｈ，ｍ），４．２５（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），５．０３（１Ｈ，ｓ），６．５４（２Ｈ，ｂｒｓ），７．０７−７．１２（５Ｈ，ｍ）．
工程１３：（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−６−（４−クロロフェニル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボン酸
上記工程１２で得た化合物を、実施例１の工程１３と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．９１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ），０．９８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．１８（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝７．１，０．９Ｈｚ），１．８９（３Ｈ，ｓ），５．９８（１Ｈ，ｓ），７．２０−７．３８（７Ｈ，ｍ）．
参考例２８【０２５４】
【化５８】
0005520236.tif 000078
【０２５５】
工程１：ｔｅｒｔ−ブチル  ［２−（４−クロロフェニル）−１−（６−クロロピリジン−３−イル）−２−ヒドロキシ−１−メチルエチル］カルバマート
４−クロロ−３−フルオロフェニルマグネシウムブロミドの代わりに、４−クロロフェニルマグネシウムブロミドを用い、参考例１の工程４と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．４５（９Ｈ，ｂｒｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），４．８９（１Ｈ，ｂｒ），５．０１（１Ｈ，ｂｒ），５．１７（１Ｈ，ｂｒ），６．７４−６．８１（１Ｈ，ｍ），７．０９（１Ｈ，ｂｒｓ），７．１７−７．２１（１Ｈ，ｍ），７．２８−７．３６（２Ｈ，ｍ），７．６４（１Ｈ，ｂｒ），８．４０（１Ｈ，ｂｒ）．
工程２：ｔｅｒｔ−ブチル  ［２−（４−クロロフェニル）−１−（６−クロロピリジン−３−イル）−１−メチル−２−オキソエチル］カルバマート
上記工程１で得た化合物を、実施例１の工程５と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．３１（９Ｈ，ｂｒｓ），２．０４（３Ｈ，ｓ），６．４５（１Ｈ，ｂｒ），７．２８−７．３５（３Ｈ，ｍ），７．５４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．７１（１Ｈ，ｂｒ），８．４６（１Ｈ，ｓ）．
工程３：２−アミノ−１−（４−クロロフェニル）−２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパン−１−オン
上記工程２で得た化合物を、実施例１の工程６と同様に反応させ、標記化合物を無色油状物質として得た。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２９５［（Ｍ＋１）］＋．
工程４：２−クロロ−５−［４−（４−クロロフェニル）−３−メチル−１，１−ジオキシド−２，３−ジヒドロ−１，２，５−チアジアゾール−３−イル］ピリジン
上記工程３で得た化合物を、実施例１の工程７と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：２．０７（３Ｈ，ｓ），７．５３−７．６２（３Ｈ，ｍ），７．７２−７．８０（３Ｈ，ｍ），８．５３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ），９．１１（１Ｈ，ｂｒ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５６［（Ｍ＋Ｈ）］＋．
工程５：（３Ｓ＊，４Ｒ＊）−２−クロロ−５−［（３Ｓ，４Ｒ）−４−（４−クロロフェニル）−３−メチル−１，１−ジオキシド−１，２，５−チアジアゾリジン−３−イル］ピリジン
上記工程４で得た化合物を、実施例１の工程８と同様に反応させ、標記化合物を無色固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．７７（３Ｈ，ｓ），４．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），７．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．２５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ），７．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．４８−７．５０（１Ｈ，ｍ），７．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ），８．０１−８．０６（２Ｈ，ｍ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３５８［（Ｍ＋１）］＋．
工程６：（１Ｒ＊，２Ｓ＊）−１−（４−クロロフェニル）−２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程５で得た化合物を、実施例１の工程９と同様に反応させ、標記化合物を淡黄色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５８（４Ｈ，ｂｒｓ），４．０８（１Ｈ，ｓ），６．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１７−７．２２（３Ｈ，ｍ），７．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．６Ｈｚ），８．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２９６［（Ｍ＋１）］＋．
工程７：（１Ｒ，２Ｓ）−１−（４−クロロフェニル）−２−（６−クロロピリジン−３−イル）プロパン−１，２−ジアミン
上記工程６で得た化合物を、実施例１の工程１０と同様に光学分割し、標記化合物を無黄色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５８（４Ｈ，ｂｒｓ），４．０８（１Ｈ，ｓ），６．９６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１７−７．２２（３Ｈ，ｍ），７．５７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．６Ｈｚ），８．３３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ）．
［α］Ｄ＝＋６９．４°（ｃ＝２．０，クロロホルム，２４°Ｃ）
工程８：（４Ｓ，５Ｒ）−５−（４−クロロフェニル）−４−（６−クロロピリジン−３−イル）−４−メチルイミダゾリジン−２−チオン
上記工程７で得た化合物を、実施例１の工程１１と同様に反応させ、標記化合物を無固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：１．９３（３Ｈ，ｓ），５．０２（１Ｈ，ｓ），６．３６（１Ｈ，ｂｒｓ），６．７０（１Ｈ，ｂｒｓ），６．８５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．１５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．２５−７．３０（１Ｈ，ｍ），７．９７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３３８［（Ｍ＋１）］＋．
工程９：エチル  （５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボキシラート
上記工程８で得た化合物を、実施例１の工程１２と同様に反応させ、標記化合物を無固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：０．８８（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．０１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．３３（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．８３（３Ｈ，ｓ），３．３２−３．４３（１Ｈ，ｍ），４．２６（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），５．１２（１Ｈ，ｓ），６．６８−６．８１（２Ｈ，ｂｒｍ），７．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ），７．０９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．４９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．７Ｈｚ），８．２０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４７６［（Ｍ＋１）］＋．
工程１０：（５Ｒ，６Ｓ）−５−（４−クロロフェニル）−６−（６−クロロピリジン−３−イル）−３−イソプロピル−６−メチル−５，６−ジヒドロイミダゾ［２，１−ｂ］［１，３］チアゾール−２−カルボン酸
上記工程９で得た化合物を、実施例１の工程１３と同様に反応させ、標記化合物を無固体として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：０．７６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），０．９６（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ），１．７２（３Ｈ，ｓ），５．７０（１Ｈ，ｓ），６．４６−６．６２（２Ｈ，ｍ），７．１５−７．２９（３Ｈ，ｍ），７．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．３Ｈｚ），８．２５（１Ｈ，ｓ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４４８［（Ｍ＋１）］＋．
（試験例１  Ｍｄｍ２／ｐ５３結合アッセイ）
蛋白質緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．４，  １５０ｍＭ  ＮａＣｌ，  ０．１％  ＢＳＡ）を用いて、Ｈｉｓ−ｐ５３（ｐ５３の１〜１３２番目のアミノ酸からなるｐ５３部分蛋白質とヒスチジン蛋白質との融合蛋白質）およびＧＳＴ−Ｍｄｍ２（Ｍｄｍ２の２５〜１０８番目のアミノ酸であって、３３番目のロイシン残基をグルタミン酸に変換したＭｄｍ２部分蛋白質とグルタチオントランスフェラーゼとの融合蛋白質）の蛋白質をそれぞれ６．２５ｎＭ含む蛋白質希釈溶液を作成した。この蛋白質希釈溶液を、３８４ウェルプレート（３８４−ｗｅｌｌ  ｌｏｗ  ｖｏｌｕｍｅ  ＮＢＣ，Ｃｏｒｎｉｎｇ、カタログ番号３６７６）の各ウェルに８μＬずつ添加した。【０２５６】
次に、ＤＭＳＯを用いて試験化合物を希釈し、この希釈液を１０％含む蛋白質緩衝液を作製し、各ウェルに４μＬずつ添加した。【０２５７】
続いて、抗体希釈緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．４，  １５０ｍＭ  ＮａＣｌ，  ０．１％  ＢＳＡ，０．５Ｍ  ＫＦ）を用いて、ＸＬ６６５標識抗Ｈｉｓ抗体（ＨＴＲＦ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉ−６ＨＩＳ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｌａｂｅｌｅｄ  ｗｉｔｈ  ＸＬ６６５（カタログ番号６１ＨＩＳＸＬＢ）、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ／Ｃｉｓｂｏｉｏ  Ｂｉｏａｓｓａｙｓ）およびユーロピウム（Ｅｕ）標識抗ＧＳＴ抗体（ＨＴＲＦ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉ−ＧＳＴ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｌａｂｅｌｅｄ  ｗｉｔｈ  ｅｕｒｏｐｉｕｍ  ｃｒｙｐｔａｔｅ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ／Ｃｉｓｂｏｉｏ  Ｂｉｏａｓｓａｙｓ、カタログ番号６１ＧＳＴＫＬＢ）をそれぞれ２．５μｇ／ｍＬおよび０．３２５μｇ／ｍＬの濃度で含む溶液を作製し、各ウェルに８μＬずつ添加した（反応液総量：２０μｌ／ウェル）。その後、プレートを２５℃で１時間放置した。【０２５８】
励起波長３２０ｎｍにおける６２０ｎｍおよび６６５ｎｍの時間分解蛍光をプレートリーダー（ＡＲＶＯｓｘ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、またはＰＨＥＲＡｓｔａｒ，  ＢＭＧＬＡＢＴＥＣＨ）を用いて測定した。計測値（ＲＦＵ  ６２０ｎｍとＲＦＵ  ６６５ｎｍ）を用いて、以下の式にてＲａｔｉｏ（Ｒ）を算出した。
Ｒ＝（ＲＦＵ  ６６５ｎｍ−ＢＩ−Ｃ×ＲＦＵ  ６２０ｎｍ）／ＲＦＵ  ６２０ｎｍ
ＢＩ：各蛋白質、化合物、および抗体を添加していない反応液（各緩衝液のみ）の６６５ｎｍの計測値
Ｃ（補正係数）＝（Ａ−ＢＩ）／Ｄ
ＡおよびＤは、Ｅｕ標識抗ＧＳＴ抗体溶液のみを添加した反応液の６６５ｎｍおよび６２０ｎｍの各計測値
Ｈｉｓ−ｐ５３、ＧＳＴ−Ｍｄｍ２、試験化合物および各抗体を添加したウェルから算出したＲ値をＲ（ｓａｍｐｌｅ）とし、Ｈｉｓ−ｐ５３、ＧＳＴ−Ｍｄｍ２および各抗体を添加したが試験化合物を添加していないウェルから算出したＲ値をＲ（ｃｏｎｔｒｏｌ）とし、ＧＳＴ−Ｍｄｍ２、試験化合物および各抗体を添加したがＨｉｓ−ｐ５３を添加していないウェルから算出したＲ値をＲ（ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ）として、下記の式からＴ／Ｃを算出し、シグモイドフィッティングを行い、Ｍｄｍ２／ｐ５３結合に対するＩＣ５０値を算出した。結果を表１に示す。【０２５９】
Ｔ／Ｃ＝（Ｒ（ｓａｍｐｌｅ）−Ｒ（ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ））／（Ｒ（ｃｏｎｔｒｏｌ）−Ｒ（ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ））
結果を表２０に示す。【０２６０】
【表２０】
0005520236.tif 000079
【０２６１】
（試験例２  抗細胞試験）
野性型ｐ５３を有するヒト肺癌由来細胞株ＮＣＩ−Ｈ４６０を用いて抗細胞試験を実施した。【０２６２】
ＮＣＩ−Ｈ４６０細胞を、培地（１０％牛胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地）に懸濁し、９６ウェルのマルチウェルプレートにそれぞれ５００細胞／１５０μＬ／ウェルで播種した。試験化合物をＤＭＳＯに溶解し、これを培地で希釈して検体溶液とした（ＤＭＳＯ濃度  １％以下）。播種の翌日、試験化合物を添加していない培地または検体溶液を、各ウェルに５０μＬずつ添加した。細胞播種翌日に培地を５０μＬずつ添加した直後と、検体溶液または培地を細胞に添加し、３７℃、５％  ＣＯ２で３日間培養した後に、ＭＴＴアッセイを実施した。ＭＴＴアッセイは以下のように実施した。【０２６３】
リン酸緩衝液（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅｓ）を用いて５ｍｇ／ｍＬのＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド，Ｓｉｇｍａ，Ｍ−２１２８）溶液を作製し、このＭＴＴ溶液を２０μＬずつ各ウェルに添加した。その後、プレートを３７℃、５％  ＣＯ２下で４時間培養した。プレートを１２００ｒｐｍで５分間遠心処理した後、培養上清をディスペンサーにて吸引除去した。ＤＭＳＯを各ウェルに１５０μＬずつ添加し、生成されたフォルマザンを溶解した。プレートミキサーを用いてプレートを撹拌することにより、各ウェルの発色を均一にした。各ウェルの吸光度をＯＤ  ５４０ｎｍ、ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ６６０ｎｍの条件下、プレートリーダー（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘＰＬＵＳ３８４，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，ＣＡ  ＵＳＡ）を用いて測定した。【０２６４】
検体溶液添加当日に測定したＯＤ値をＳとし、検体溶液添加の３日後に測定したＯＤ値をＴとし、ＤＭＳＯ希釈液添加の３日後に測定したＯＤ値をＣとし、下記の計算式より各濃度におけるＴ／Ｃ（％）を求めて用量反応曲線を描き、５０％増殖抑制濃度（ＧＩ５０値）を算出した。【０２６５】
Ｔ／Ｃ（％）＝（Ｔ−Ｓ）／（Ｃ−Ｓ）×１００
実施例１〜６、８〜１０、１５、１６、１８〜２５、２７，２９、３１の化合物はＧＩ５０（μＭ）＜０．４の抗細胞効果を示した。実施例７、１１〜１４、１７、２６、２８、３０の化合物は０．４≦ＧＩ５０＜２．５（μＭ）の抗細胞効果を示した。【０２６６】
（試験例３  抗腫瘍試験）
ヒト骨肉腫細胞株ＳＪＳＡ−１またはＳＪＳＡ−１−ＲＥ（ＳＪＳＡ−１にｐ５３レポーター遺伝子を組み込んだ細胞）をヌードマウス（ＢＡＬＢ／Ｃ−ｎｕ／ｎｕ  ＳＬＣ、雄、日本エスエルシー）に皮下移植し、腫瘍の大きさが１００〜２００ｍｍ３程度に達した時点で群分けした（６匹／群）。試験化合物を０．５％  メチルセルロース溶液に懸濁させ、５０ｍｇ／ｋｇで一日二回（ｂｉｄ）、４日間連続経口投与した。２日間休薬後にマウスを解剖し、腫瘍を摘出後、その重量を測定した。【０２６７】
抗腫瘍効果（ＩＲ（％））は次式により算出した。【０２６８】
ＩＲ（％）＝[１―（化合物投与群の平均腫瘍重量／無処置対照群の平均腫瘍重量）]  ×１００
実施例２の化合物は５０＜ＩＲ（％）＜７０、実施例３、４、６、９の化合物は７０＜ＩＲ（％）＜１００の抗腫瘍効果を示した。【０２６９】
（試験例４  代謝安定性試験）
１００ｍＭ  ｐＨ７．４  リン酸緩衝液、３０ｍＭ  グルコース６リン酸、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ、３ｕｎｉｔ／ｍＬ  グルコース６リン酸  １−デヒドロゲナーゼ、０．３−１．５ｍｇＰ／ｍＬのヒト肝ミクロソームを含む反応液１００μＬに３μＭの試験化合物を含む１００ｍＭ  ｐＨ７．４  リン酸緩衝液１００μＬを添加し、３７℃で２０分間インキュベートした後、３ｍＭのＮＡＤＰ＋を含む１００ｍＭ  ｐＨ７．４  リン酸緩衝液７０μＬを加え、さらに３７℃で３０分間インキュベートすることによりミクロソーム代謝試験を実施した。化合物は、高速液体クロマトグラフ装置に接続した四重極型質量分析計を用いた内部標準法によって定量し、代謝安定性（化合物の残存率：ＭＳ％）は次式により求めた。【０２７０】
ＭＳヒト％＝（ＮＡＤＰ＋を添加し３０分間インキュベート後の試験化合物のピーク面積比）／（ＮＡＤＰ＋添加前の試験化合物のピーク面積比）×１００
（ピーク面積比＝試験化合物のピーク面積を内部標準物質のピーク面積で除したもの）
結果を表２１に示す。【０２７１】
【表２１】
0005520236.tif 000080
【０２７２】
（ＮＤ：Ｎｏｔ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ）