(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
レバウディオシドＡを精製するための方法であって、
レバウディオシドＡ溶液を形成するために、粗レバウディオシドＡと水性有機溶媒とを混合する工程であって、前記粗レバウディオシドＡは、４０重量％から８５重量％の純度のレバウディオシドＡを備え、前記水性有機溶媒が１０重量％から２５重量％の量の水及び少なくとも２つの有機溶媒を含み、前記少なくとも２つの有機溶媒がエタノールとメタノールの混合物を備える工程と、
前記レバウディオシドＡ溶液を、室温から４０℃の範囲の温度で加熱する工程と、
前記レバウディオシドＡ溶液から、乾燥ベースで９５重量％より高い純度でレバウディオシドＡを含むレバウディオシドＡ組成物を単一の工程で結晶化する工程と、
を含む方法。
【請求項２】
前記レバウディオシドＡ溶液を冷却する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記結晶化工程において、レバウディオシドＡ溶液が攪拌されるか又は攪拌されない、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
レバウディオシドＡの結晶化を促進するのに十分な量のレバウディオシドＡを用いて、適切な温度で前記レバウディオシドＡ溶液にシード添加する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記レバウディオシドＡ組成物を分離及び洗浄する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記レバウディオシドＡ組成物を乾燥させる工程をさらに含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記粗レバウディオシドＡがレバウディオシドＤ不純物を実質的に含まず、水性有機溶媒又は有機溶媒中で前記レバウディオシドＡ組成物をスラリー化する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記レバウディオシドＡ組成物を分離及び洗浄する工程をさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記レバウディオシドＡ組成物を乾燥させる工程をさらに含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記エタノール及びメタノールが、１重量部の前記メタノールに対して２０から１重量部の前記エタノールの重量比で前記水性有機溶媒中に存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記エタノール及びメタノールが、１重量部の前記メタノールに対して３から１重量部の前記エタノールの重量比で前記水性有機溶媒中に存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記水性有機溶媒及び前記粗レバウディオシドＡが、１重量部の前記粗レバウディオシドＡに対して４から１０重量部の前記水性有機溶媒の重量比で前記レバウディオシドＡ溶液中に存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記水性有機溶媒及び前記粗レバウディオシドＡが、１重量部の前記粗レバウディオシドＡに対して３から５重量部の前記水性有機溶媒の重量比で前記レバウディオシドＡ溶液中に存在する、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記粗レバウディオシドＡ混合物がレバウディオシドＡを６０重量％から８５重量％の純度で含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記レバウディオシドＡ溶液を冷却する工程が、前記レバウディオシドＡ溶液を４℃から２５℃の範囲内の温度まで冷却する工程を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１６】
前記レバウディオシドＡ溶液を冷却する工程が、前記レバウディオシドＡ溶液を０．５時間から２４時間冷却する工程を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１７】
前記レバウディオシドＡ組成物が、乾燥ベースで９７重量％のレバウディオシドＡより高い純度でレバウディオシドＡを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記レバウディオシドＡ溶液を加熱する工程と、
前記レバウディオシドＡ溶液を冷却する工程と、
前記レバウディオシドＡ組成物を分離及び洗浄する工程と、
前記レバウディオシドＡ組成物を乾燥させる工程と、
をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記レバウディオシドＡ組成物の非晶質形態を形成する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記非晶質のレバウディオシドＡが、前記レバウディオシドＡ組成物をボールミル加工、沈殿、凍結乾燥、冷凍研削、又は噴霧乾燥することにより形成される、請求項１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概して、多形体及び非晶質形態のレバウディオシドＡ、レバウディオシドＡを精製するための方法、並びに多形体及び非晶質形態のレバウディオシドＡを調製するための方法に関する。より詳細には、本発明は、多形体及び非晶質形態のレバウディオシドＡ、並びに、高収率及び高純度の製品を得るために水性有機溶液又は有機溶媒を使用したレバウディオシドＡの精製又は結晶化方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
レバウディオシドＡは、以下の構造を有する高甘味度ジテルペノイドグリコシド甘味料である。
【化１】
0005536449.tif 000002
レバウディオシドＡは、日本、シンガポール、台湾、マレーシア、韓国、中国、イスラエル、インド、ブラジル、オーストラリア、及びパラグアイで商業的に栽培されているステビアレバウディアナ（ベルトーニ）植物（「ステビア」）から、他のステビオールグリコシドと共に分離及び抽出される。これは、多くの高甘味度甘味料よりも優れた機能及び感覚特性を備えた代替ノンカロリー甘味料である。加工されたステビアの甘味度は砂糖の７０倍から４００倍の可能性があるが、ステビアは苦味成分も有する。ステビア中に存在する４つの主要なジテルペノイドグリコシドのうちで、レバウディオシドＡは、最も苦味が少なく、最も後味が残らないものと認定されている。苦味は、しばしば、主に抽出物における不純物によるものである。
【０００３】
レバウディオシドＡは、通常、８０％以下の純度で入手可能である。主な不純物としては、ステビオシド、ステビオールビオシド、レバウディオシドＢ、レバウディオシドＣ、レバウディオシドＤ、ズルコシドＡ、レバウディオシドＦ、及び他のステビオールグリコシドが含まれる。レバウディオシドＡ及び不純物は類似の溶解度を有するため、高回収率で高純度のレバウディオシドＡを得ることは非常に困難である。
【０００４】
レバウディオシドＡ及びステビオシドの混合物からレバウディオシドＡを精製するための以前に報告された取り組みでは、多数の反復精製工程が必要である。米国特許第５，９６２，６７８号に、純度８０％のレバウディオシドＡを得るための無水メタノール溶液を使用したレバウディオシドＡの再結晶化が開示されている。無水メタノールを使用した再結晶化を何回も繰り返すことによって、レバウディオシドＡの純度を９５％以上に上げることが可能である。米国特許公報第２００６／００８３８３８号に、エタノールと４から１５％の水とを含む溶液を使用した、再結晶化を通じたレバウディオシドＡの精製が開示されている。日本特許出願第５５−２３７５６号に、純度８０％のレバウディオシドＡを得るために、水性エタノール（７０％を超える）からの結晶化によって、レバウディオシドＡ及びステビオシドを精製するための方法が開示されている。米国特許公報第２００７／００８２１０３号に、水性エタノールからの再結晶化によってレバウディオシドＡを精製するための方法が開示されており、粗レバウディオシド（６０％）からの２工程再結晶化の結果として、収率９７％で、純度が９８％を超えるレバウディオシドＡが形成されることを明言している。しかし、これらの従来技術の方法は、一回の再結晶化工程を行うだけでは実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物を提供しない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、実質的に純粋なレバウディオシドＡを製造するための、単純、効率的、及び経済的な方法が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の例示的実施形態は、実質的に純粋なレバウディオシドＡ、多形体及び非晶質形態のレバウディオシドＡ、レバウディオシドＡを精製するための方法、並びに多形体及び非晶質形態のレバウディオシドＡを調製するための方法を提供することによって上記要求に対処する。
【０００７】
特定の実施形態では、レバウディオシドＡを精製するための方法は、単純な結晶化を含む。一実施形態では、レバウディオシドＡを精製するための方法は、レバウディオシドＡ溶液を形成するために、粗レバウディオシドＡと水性有機溶液とを混合する工程を含み、この水性有機溶液は、約１０重量％から約２５重量％の量の水を含み、さらに、粗レバウディオシドＡ溶液から、単一の工程で、乾燥ベースで約９５重量％より高い純度の実質的に純粋なレバウディオシドＡを結晶化する工程を含む。
【０００８】
他の特定の実施形態では、異なる多形体及び非晶質形態のレバウディオシドＡ、並びに異なる多形体及び非晶質形態のレバウディオシドＡを調製するための方法が提供される。
【０００９】
本発明の他の目的、特徴、及び利点は、以下の詳細な説明、図面、及び特許請求の範囲から明らかとなろう。特に定義されていない限り、本明細書で使用されるすべての技術及び科学用語並びに略語は、本発明が属する分野の当業者が一般に理解する意味と同じ意味を有する。本発明を実施するにあたり、本明細書に記載されたものと同様又は均等な方法及び組成物が使用可能であるが、好ましい方法及び組成物について、いかなるこうした方法及び組成物も本明細書における本発明を限定するものであることを意図することなく説明される。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】本発明の実施形態による、レバウディオシドＡを精製するための方法を示す概略図である。
【図２】本発明の実施形態による、レバウディオシドＡの形成及び変換、レバウディオシドＡの多形体及び非晶質形態を示す概略図である。
【図３】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上の４つのレバウディオシドＡ多形体である形態１、２、３Ａ、及び３Ｂを比較する粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図４】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態１及び形態２を比較する粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図５】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態３Ａ及び形態３Ｂを比較する粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図６】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態２、３Ａ、及び３Ｂを比較する粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図７】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態１の粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図８】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態２の粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図９】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態３Ａの粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図１０】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態３Ｂの粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【図１１】本発明の実施形態による、散乱角度２θに対する散乱強度のプロット上のレバウディオシドＡ多形体である形態４の粉末Ｘ線回折スキャンを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
レバウディオシドＡは、一般に、純度８０％以下では中程度の価格で、純度が８０％より高いと高い価格でのみ入手可能な天然の高甘味度甘味料である。レバウディオシドＡの商用サンプルは、しばしば、不純物によると考えられる苦味を有する。従って、実質的に純粋なレバウディオシドＡ、並びに、天然の高甘味度甘味料として使用するのに適切な実質的に純粋なレバウディオシドＡを得るためにレバウディオシドＡを精製するための単純で経済的な方法が求められている。
【００１２】
本明細書で使用される場合、「実質的に」又は「実質的に純粋」という用語は、乾燥に基づいて少なくとも約８５％、他の実施形態では乾燥重量に基づいて少なくとも約９０％、他の実施形態では乾燥重量に基づいて約９５％から約９８％、さらに他の実施形態では乾燥重量に基づいて約９９％から約１００％のレバウディオシドＡを含むレバウディオシドＡ組成物を意味する。
【００１３】
本発明の例示的実施形態では、約１０重量％から約２５重量％の量の水を含む水性有機溶液から粗レバウディオシドＡを結晶化すること、及び、少なくとも１回の工程で実質的に純粋なレバウディオシドＡを結晶化することによって、粗レバウディオシドＡから実質的に純粋なレバウディオシドＡを精製するための方法を提供することでこれらの要求を満たす。本発明の他の例示的実施形態は、実質的に純粋なレバウディオシドＡの組成物と、１つ又は複数の多形体のレバウディオシドＡを含む組成物を包含する。本発明のさらに他の例示的実施形態は、非晶質形態のレバウディオシドＡと、非晶質形態のレバウディオシドＡを調製する方法とを包含する。さらに他の実施形態では、１つの多形体を他の多形体又は非晶質形態に変換するための方法が提供される。本発明の例示的実施形態は以下で詳細に説明され、図１〜図１１に示される。
【００１４】
粗レバウディオシドＡ混合物を精製する方法
約４０重量％から約９５重量％、約６０重量％から約８５重量％、又は約７０重量％から約８５重量％の純度のレバウディオシドＡを含む粗レバウディオシドＡ製品が市販されている。ステビア植物から抽出されるようなその未加工の形の粗レバウディオシドＡは、再結晶化によって精製できるものと想定される。ＨＰＬＣによって同定される主な不純物は、ステビオシド、レバウディオシドＢ、レバウディオシドＣ、及びレバウディオシドＤである。レバウディオシドＤ不純物は、水性有機再結晶化溶媒における水の量を増やすことによって除去可能であるが、結晶化溶媒中に過度の水が含有することにより、結果としてレバウディオシドＡの回収率はより低くなる。レバウディオシドＢの不純物は、有機溶媒又は水性有機溶液中で粗レバウディオシドＡをスラリー化することによって、又は粗レバウディオシドＡ溶液を陰イオン交換樹脂で処理することによって、大幅に削減することができる。従って、この精製方法は、粗レバウディオシドＡの出発原料中に存在する不純物に依存する。
【００１５】
図１に示されたレバウディオシドＡを精製するための方法１１０の例示的実施形態では、粗レバウディオシドＡ  １１２を水性有機溶液１１６と混合して、レバウディオシドＡ溶液１１８を形成することができる。水性有機溶液１１６は、約１０重量％から約２５重量％の量の水と、少なくとも１つの有機溶媒とを含む。または、水性有機溶液１１６は、約１５重量％から約２０重量％の量の水と、少なくとも１つの有機溶媒とを含むこともできる。
【００１６】
本明細書で使用される水性有機溶液とは、水と少なくとも１つの有機溶媒との混合物を意味する。有機溶媒の非限定的な例としては、アルコール、アセトン、及びアセトニトリルが挙げられる。本明細書で使用されるアルコールとは、少なくとも１つのヒドロキシル部分に結合した任意の直鎖、分岐、又は環状、置換又は非置換のアルキル、アルケニル、又はアルキニル基を意味する。アルコールの非限定的な例としては、エタノール、メタノール、イソプロパノール、１−プロパノール、１−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、及びイソブタノールが挙げられる。
【００１７】
例示的実施形態では、水性有機溶液１１６は、水と少なくとも１つの有機溶媒との混合物を含む。他の例示的実施形態では、少なくとも１つの有機溶媒はアルコールを含み、アルコールはエタノール、メタノール、又はこれらの混合物を含む。少なくとも１つの有機溶媒がエタノールとメタノールとの混合物を含む例示的実施形態では、エタノール及びメタノールは、水性有機溶媒中で、メタノール１重量部に対して、エタノールが約２０から約１重量部の重量比で混合することができる。他の例示的実施形態では、エタノール及びメタノールは、水性有機溶媒中で、メタノール１重量部に対して、エタノールが約３から約１重量部の重量比で混合することができる。
【００１８】
例示的実施形態では、レバウディオシドＡ溶液１１８は、粗レバウディオシドＡ１重量部に対して、水性有機溶液が約１０から約４重量部の重量比で、水性有機溶液１１６及び粗レバウディオシドＡ  １１２を含む。他の例示的実施形態では、粗レバウディオシドＡ１重量部に対して、水性有機溶液が約５から約３重量部の重量比で、水性有機溶液１１６及び粗レバウディオシドＡ  １１２を含む。
【００１９】
例示的実施形態では、方法１１０は、ほぼ室温で実施可能である。他の実施形態では、方法１１０は、レバウディオシドＡ溶液１１８を加熱する工程１２０をさらに含む。他の実施形態では、レバウディオシドＡ溶液１１８を加熱する工程１２０は、レバウディオシドＡ溶液を、約２０℃から約７０℃まで、約２０℃から６０℃まで、約２０℃から約４０℃まで、又は約４０℃から６０℃までの範囲内の温度に加熱する工程を含む。他の実施形態では、レバウディオシドＡ溶液１１８を加熱する工程１２０は、レバウディオシドＡ溶液をおよそ還流温度まで加熱する工程を含む。レバウディオシドＡ溶液１１８を加熱する工程１２０は、レバウディオシドＡ溶液を約０．２５時間から約８時間加熱する工程を含む。レバウディオシドＡを精製するための方法１１０がレバウディオシドＡ溶液１１８を加熱する工程１２０を含む他の例示的実施形態では、この方法は、レバウディオシドＡ溶液を冷却する工程１２２をさらに含む。ある実施形態では、溶液１１８を冷却する工程１２２は、レバウディオシドＡ溶液を、約４℃から約２５℃までの範囲内の温度に冷却する工程を含む。レバウディオシドＡ溶液１１８を冷却する工程１２２は、レバウディオシドＡ溶液を約０．５時間から約２４時間冷却する工程を含む。
【００２０】
レバウディオシドＡを精製するための方法１１０は、乾燥ベースで約８５重量％を超える、乾燥ベースで約９０重量％を超える、乾燥ベースで約９５重量％を超える、乾燥ベースで約９７重量％を超える、乾燥ベースで約９８重量％を超える、又は乾燥ベースで約９９重量％を超える量のレバウディオシドＡを含む実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６を、単一工程でレバウディオシドＡ溶液１１８から結晶化する工程１２４をさらに含む。単一の結晶化工程時に、レバウディオシドＡ溶液１１８は攪拌してもよいり又は攪拌しなくてもよい。
【００２１】
例示的実施形態では、方法１１０は、純粋なレバウディオシドＡを形成するために、レバウディオシドＡの結晶化を促進するのに十分な実質的に純粋なレバウディオシドＡの結晶１３０を、適切な温度でレバウディオシドＡ溶液１１８にシード添加する任意の工程１２８をさらに含むことができる。実質的に純粋なレバウディオシドＡ  １２６の結晶化を促進するのに十分なレバウディオシドＡ  １３０の量としては、溶液中に存在するレバウディオシドＡに対して約０．０００１重量％から約１重量％の量が挙げられる。他の実施形態では、実質的に純粋なレバウディオシドＡ  １２６の組成物を形成するために、レバウディオシドＡの結晶化を促進するのに十分なレバウディオシドＡ  １３０の量としては、約０．０１重量％から約１重量％のレバウディオシドＡの量が挙げられる。シード添加の工程１２８に適切な温度は、約１８℃から約３５℃までの範囲内の温度を含む。
【００２２】
他の例示的実施形態では、この方法は、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６を分離する工程１３２及び洗浄する工程１３４をさらに含む。実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６は、垂直及び水平の孔あきバスケット型遠心機、ソリッドボウル型遠心機、デキャンタ型遠心機、ピーラータイプ遠心機、プッシャータイプ遠心機、ハインケルタイプ遠心機、ディスクスタック型遠心機、及びサイクロン分離を含むが、これに限定されない、遠心力を利用する様々な固液分離技術によって水性有機溶液１１８から分離することができる。さらに、分離は、ベルト、ドラム、ヌッツェタイプ、リーフ、プレート、ローゼンムントタイプ、スパークラータイプ、並びにバッグフィルタ及びフィルタプレスの使用を含むが、これに限定されない、任意の圧力、真空、又は重力ろ過方法によって機能強化することができる。レバウディオシドＡの固液分離装置の操作は、連続、半連続、又はバッチモードとすることができる。実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６は、種々の水性有機溶媒１３６及びこれらの混合物を使用する分離装置で洗浄することもできる１３４。実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６は、残留液体溶媒１３６を蒸発させるために、窒素又はアルゴン等の、これに限定されない、任意の数の気体を使用する分離装置で部分的又は全体的に乾燥することができる。実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６は、固体を溶解するか又は固体のままで液体、気体、又は機械的手段を使用して、分離装置から自動又は手動で除去することができる。
【００２３】
さらに他の実施形態では、方法１１０は、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６を乾燥させる工程１３８をさらに含む。こうした方法は当業者にとって周知であり、回転真空乾燥機、流動床乾燥機、回転トンネル乾燥機、プレート乾燥機、トレイ乾燥機、ナウタタイプ乾燥機、スプレイ乾燥機、フラッシュ乾燥機、ミクロン乾燥機、パン乾燥機、高低速パドル乾燥機、及びマイクロ波乾燥機の使用を含むが、これに限定されない。例示的実施形態では、乾燥工程１３８は、残留溶媒１２０を除去するために、窒素又はアルゴンパージを使用して、約４０℃から約６０℃の範囲内の温度で、約５時間から約１００時間、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６を乾燥させる工程を含む。
【００２４】
粗レバウディオシドＡ混合物１１２が実質的にレバウディオシドＤ不純物を含まない、さらに他の例示的実施形態では、方法１１０は、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物を乾燥させる工程１３８に先立って、実質的に純粋なレバウディオシドＡの組成物１２６を有機溶媒又は水性有機溶液１４２でスラリー化する工程１４０をさらに含む。スラリーは、固体及び水性有機溶液又は有機溶媒を含む混合物とすることができ、該固体は、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６を含み、水性有機溶液又は有機溶媒１４２にわずかに溶解するのみである。ある実施形態では、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６及び水性有機溶液又は有機溶媒１４２は、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物が約１重量部に対して水性有機溶液が約１５から約１重量部の範囲内の重量比でスラリー内に存在することができる。一実施形態では、スラリーは室温で保持することができる。他の実施形態では、スラリー化する工程１４０は、約２０℃から約４０℃の範囲内の温度までスラリーを加熱する工程を含む。実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６は、約０．５時間から約２４時間スラリー化することができる。
【００２５】
さらに他の例示的実施形態では、この方法は、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物１２６を、スラリーの水性有機溶液１４２から分離する工程１３２と、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物を洗浄する工程１３４と、それに続く実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物を乾燥させる工程１３８とをさらに含む。
【００２６】
他の精製が望ましい場合、本明細書で説明するレバウディオシドＡを精製する方法１１０を繰り返すか、又はカラムクロマトグラフィなどの代替精製方法を使用して実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物をさらに精製することができる。
【００２７】
本明細書で使用される純度とは、未加工又は精製された形のレバウディオシドＡ組成物内に存在するレバウディオシドＡの重量百分率を表す。一実施形態では、レバウディオシドＡ組成物は、特定の純度でレバウディオシドＡを含み、組成物の残りの部分が他のステビオールグリコシドの混合物又はレバウディオシドＡでない任意の成分を含む。組成物の純度は、当業者に知られた方法を使用して測定することができる。こうした方法の１つとして、高性能液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）が挙げられる。当業者であれば、サンプル中の水分が純度測定の精度に影響を与える可能性があることも理解されたい。従って、組成物は、純度を測定する場合に実質的に乾燥しているものとする。本明細書で使用される場合、実質的に乾燥した組成物は、約１０重量％までの水分を含む。
【００２８】
レバウディオシドＡの多形体及び非晶質形態
上記方法を使用するレバウディオシドＡの精製により、結果として、形態１：レバウディオシドＡ水和物、形態２：無水レバウディオシドＡ、及び形態３：レバウディオシドＡ溶媒和物という少なくとも３つの異なる多形体のレバウディオシドＡが生じる。当業者であれば、本明細書で説明された水性有機溶液と精製プロセスの温度との両方が、結果として生じる実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物の多形に影響を与える可能性があることを理解されよう。
【００２９】
多形性は、結晶格子中で分子が異なる配置構成及び／又は配座を有する２つ又はそれ以上の結晶状態として存在することのできる物質の能力として定義される。有機化合物のほぼ３０％が、多形性を示すと考えられる（Ｚｅｌｌ他によるＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ５６（３６）６６０３−１６（２０００））。多形性は、調合薬、色素及び染料、甘味料、爆発物、及び農薬の配合において重要である。多形性は、密度、融点、及び溶解速度などの物理的性質を変化させる可能性がある。
【００３０】
レバウディオシドＡの多形体は、当業者にとって周知の技術である粉末Ｘ線回折（ＸRＰＤ）を使用したサンプルの分析によって識別された。図３〜図１１は、本明細書で説明された精製プロセスから取得された実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物のＸＲＰＤスキャンである。レバウディオシドＡ多形体のＸＲＰＤスキャンは、散乱強度を散乱角度２θに対してプロットすることによって作成された。サンプルは、Ｃｕ  Ｋα放射線を使用するＳｈｉｍａｄｚｕ  ＸＲＤ−６０００  Ｘ線粉末回折計を使用したＸＲＰＤによって分析された。この計器には、長高精度焦点Ｘ線管が装備された。管の電圧及びアンペア数は、それぞれ４０ｋＶ及び４０ｍＡに設定された。発散スリット及び散乱スリットは、１°に設定され、受入れスリットは０．１５ｍｍに設定された。回折放射線はＮａＩシンチレーション検出器によって検出された。２θが２．５から４０°まで３°／分でθ−２θの連続スキャン（０．４秒／０．０２°ステップ）が使用された。計器アラインメントをチェックするために、シリコン標準が分析された。データはＸＲＤ−６００００  ｖ．４．１を使用して収集及び分析された。このパターンは、サンプルが結晶性材料からなることを示す反射の分解を示す。
【００３１】
図３は、形態１、形態２、並びに形態３Ａ（メタノール溶媒和物）及び３Ｂ（エタノール溶媒和物）に関する代表的なパターンを示す。形態２に関するパターン（一番上のパターン）は、他のパターンと明らかに異なる。形態１、２、及び３の各分類において、複数の多形体が存在する可能性があることに留意されたい。
【００３２】
図４は、形態１と２の相違点を強調したものである。さらに、多形体の再結晶化条件を変化させたときの、異なる多形体の生成における再現性を示すために、形態２の２つのパターンが示されている。
【００３３】
図５は、形態３Ａ及び３ＢのＸＲＰＤパターン間での顕著な類似性を示す。いかなる理論にも縛られないことを望むが、これらの多形体は親近構造の溶媒和物である可能性があり、パターン間の唯一の相違点は溶媒和物の属性の違いによる一定のピークの偏移である。形態３Ａと３Ｂとの間のこの親近構造の関係は、必要であれば、パターンにインデックス付けすることによって検証可能である。アスタリスクは、形態３Ａに関するパターンにおいて、２θを約０．２度だけ右に偏移したピークを識別する。さらに、形態３Ｂのいくつかのピークは、形態３Ａの対応するピークよりも強い。例えば、５．５度、１１．０度、１４．２度、及び１９．４度のピークは、形態３Ａよりも形態３Ｂの方が強い。
【００３４】
図６では、図５の形態３Ａ及び３Ｂと形態２とを比較する。形態２は、形態３Ｂよりも形態３Ａに類似している。図５で形態３Ａよりも形態３Ｂの方が強いと識別されたピークは、形態２のパターンでは観察されないが、逆の傾向を示す（すなわち、形態３Ａでは小さく、形態３Ｂでは大きいピークが形態２に存在する）少なくとも３つのピーク（パターンの下に２つのアスタリスクでマーク付け）が存在する。最終的に、１７．６度にある形態３Ｂの大きなピークは、形態３Ａではわずかに右に偏移し（１７．９度）、形態２ではさらに右に偏移している（１８．０度）ことがわかる。２１度と２３度の間の２つの他のピークセットも同様にこの偏移を示す。いかなる理論にも縛られていないことを望むが、ピークの偏移は、形態３Ａが部分的に脱溶媒和され、溶媒和物と形態２の結晶との両方の混合物を含むことを示している可能性がある。
【００３５】
図７〜図１０は、それぞれ、上記精製プロセスから得られた実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物からの形態１、形態２、形態３Ａ、及び形態３Ｂの個々の多形体のＸＲＰＤスキャンである。
【００３６】
図２に示されるように、形成される多形体の種類は、水性有機溶液の組成物、結晶化工程の温度、及び乾燥工程中の温度などの要素に依存する可能性がある。いかなる理論にも縛られていないことを望むが、形態１及び形態３は単一の結晶化工程中に形成されるものと考えられるが、形態２は形態１及び形態３からの変換後の乾燥工程中に形成されるものと考えられる。
【００３７】
結晶化工程中の温度が約２０℃から約５０℃の範囲内の低温であること、並びに、水性有機溶液中において有機溶媒に対して水が低比率であることにより、結果として形態３が形成される。結晶化工程中の温度が約５０℃から約８０℃の範囲内の高温であること、並びに、水性有機溶液中において有機溶媒に対して水が高比率であることにより、結果として形態１が形成される。形態１は、およそ室温で約２時間から約１６時間無水溶媒中でスラリー化することによって、又は、およそ還流温度で約０．５時間から約３時間無水溶媒中でスラリー化することによって形態３に変換することができる。形態３は、およそ室温で約１６時間、又は、およそ還流温度で約２時間から約３時間水中で多形体をスラリー化することによって形態１に変換することができる。形態３は、乾燥プロセス中に形態２に変換できるが、乾燥温度を約７０℃より高くするか、又は実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物の乾燥時間を増やすと、結果として、レバウディオシドＡの分解と、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物中の残余のレバウディオシドＢ不純物の増加とを発生させる可能性がある。形態２は、水の添加によって形態１に変換することができる。
【００３８】
レバウディオシドＡの少なくとも３つの多形体に加えて、レバウディオシドＡの精製の結果、図４に示されるような、レバウディオシドＡの非晶質形態である形態４が形成される可能性がある。形態４は、組成物が非晶質であることを示す広範な非晶質ハローを有する。
【００３９】
本明細書において、非晶質とは、非結晶性の固体材料を示す。レバウディオシドＡの非晶質形態（形態４）は、レバウディオシドＡの多形体（形態１、２、又は３）に比べて、速い溶解速度を有する。当業者であれば、非限定的な例として、チューインガム、焼き菓子、及び飲料が挙げられる、固体及び液体の甘味付与可能な組成物を処方する際に、甘味料組成物の溶解速度が重要であろうことを理解されたい。
【００４０】
前述のように、形態４は、レバウディオシドＡの初期精製時に、又は任意の個々の多形体又は多形体の組合せから直接、当業者に周知の方法を使用して得ることができる。さらに、形態４は、粗レバウディオシドＡ組成物、又は上記手段以外の精製手段を介して得られた実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物からも得ることができる。レバウディオシドＡの非晶質形態を調製するための方法の非限定的な例としては、レバウディオシドＡ組成物のボールミル加工、沈殿、凍結乾燥、冷凍研削、及び噴霧乾燥が挙げられる。
【００４１】
特定の実施形態では、上記レバウディオシドＡの精製の結果、形態４の非晶質形態のレバウディオシドＡを含む組成物が生じる。当業者であれば、結晶化手順におけるパラメータは、形態４の形成を強化するように修正可能であることを理解されたい。
【００４２】
他の特定の実施形態では、形態４は、レバウディオシドＡ組成物の溶液を噴霧乾燥することによって、レバウディオシドＡ組成物から調製することができる。簡単に説明すると、噴霧乾燥は、一般に、レバウディオシドＡの溶液を、一定流量の窒素／空気を活用して溶液を液滴の噴霧に霧化するノズル噴霧器内に、供給ポンプを介して供給する必要がある。水分は、乾燥室内の制御された温度条件及び空気流条件の下で液滴から蒸発し、結果として、非晶質形態のレバウディオシドＡの乾燥粒子を形成する。非晶質形態のレバウディオシドＡの純度は、レバウディオシドＡ溶液の純度に依存することになる。
【００４３】
他の特定の実施形態では、形態４は、非非晶質形態のレバウディオシドＡをミル加工することによって、レバウディオシドＡ組成物から調製することができる。ミル加工とは、レバウディオシドＡの結晶質形態を非晶質形態に変換するエネルギーの局在領域を生成すると考えられる機械的プロセスである。ミル加工技術の具体例としては、ボールミル加工又はエアジェットミル加工が挙げられ、どちらの技術も当業者には周知である。簡単に説明すると、非晶質形態でないレバウディオシドＡは、非晶質形態のレバウディオシドＡを形成するために、ある期間、ある速度でミル加工される。これらのパラメータは、当業者によって決定可能である。典型的なミル加工期間は、約１５分から約２時間までの範囲とすることができるが、他の期間も採用可能である。
【００４４】
３つのレバウディオシドＡ多形体及びレバウディオシドＡ非晶質形態の材料特性を以下の表にまとめる。
【表１】
0005536449.tif 000003
上記材料特性は、レバウディオシドＡの多形体及び非晶質形態の特定実施形態を単に例示したものである。当業者であれば、無水レバウディオシドＡ多形体（形態２）、レバウディオシドＡ溶媒和物多形体、及び非晶質形態のレバウディオシドＡが、吸湿性であり、乾燥ベースで約１０重量％の量まで水分を吸収できることを理解されたい。
【００４５】
当業者であれば、レバウディオシドＡ組成物の所望の品質（すなわち溶解速度など）に応じてレバウディオシドＡの多形体及び非晶質形態の所望の混合物を得るように、レバウディオシドＡ組成物を修正できることを理解されたい。一実施形態では、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物は、約１重量％から約１００重量％の範囲内の量の特定の多形体又は非晶質形態のレバウディオシドＡを含むことができる。例えば、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物は、約２５重量％より多くの量の、具体的に言えば約５０重量％より多くの量の、さらに具体的に言えば約７５重量％より多くの量の、又はさらに具体的に言えば約８５重量％より多くの量の多形体又は非晶質形態のレバウディオシドＡを含むことができる。適切な量のレバウディオシドＡの多形体又は非晶質形態をこれらの範囲内で使用することもできる。他の実施形態では、実質的に純粋なレバウディオシドＡ組成物は、特定の多形体及び／又は非晶質形態のレバウディオシドＡの組合せを含むことができる。
【００４６】
さらに本発明について、以下の実施例によって例示するが、これらはいかなる場合もその範囲を制限するものとは企図されない。反対に、本明細書の説明を読んだ後に、本発明の精神及び／又は添付の特許請求の範囲を逸脱することなく、当業者が思いつく種々の他の実施形態、修正形態、及びその均等物であり得ることを明確に理解されよう。特に記載されていない限り、パーセンテージ（％）は重量％である。
【００４７】
実施例
以下の例で説明するレバウディオシドＡ組成物の純度は、ＨＰＬＣを使用して決定された。ＨＰＬＣ分析を実行する方法は、当業者には周知である。簡単に説明すると、ＨＰＬＣ分析は、３０℃の温度でＺＯＲＢＡＸ  ＮＨ２カラム（１５０×４．６ｍｍ、５μｍ）を使用して実行された。移動相は、流速１．５ｍＬ／分の２０％緩衝液（０．０１２５％の酢酸及び０．０１２５％の酢酸アンモニウム）及び８０％アセトニトリルの溶液を含む。１２μＬの各サンプルが２重反復試験片に注入され、このサンプルが、２１０ｎｍ（４ｎｍ帯域幅）で２６０ｎｍ（１００ｎｍ帯域幅）の基準を用いてＵＶ検出器を使用して分析された。ＨＰＬＣ分析は、４０から６０分までのランタイムを必要とした。
【００４８】
０．１２５ｇの酢酸アンモニウム及び１２５μＬの氷酢酸を１リットルの水に溶解させることによって、０．０１２５％の酢酸及び０．０１２５％の酢酸アンモニウムの緩衝液が調製された。両方を足して合計０．０２５％を維持しながら、酢酸アンモニウム対酢酸の比率を変化させることによって、レバウディオシドＢの保持時間が調節された。酢酸の量を増やすことで、レバウディオシドＢの保持時間が減少した。
【００４９】
レバウディオシドＡの保持時間７．０±０．５分を達成するために、緩衝液とアセトニトリルとを混合することによって移動相が調製された。初めは、これは約２０％緩衝液（２００ｍＬの緩衝液及び８００ｍＬのアセトニトリル）であった。アセトニトリルの量を１から２％増加することによって、レバウディオシドＡの保持時間が約１分増加した。
【００５０】
７５０ｍＬのアセトニトリル及び２５０ｍＬの緩衝液を混合することによって、希釈溶液が調製された。レバウディオシドＡ標準は、約５０００ｍｇ／Ｌの標準溶液を作るために、２０．０±０．５ｍｇ（最近隣０．１ｍｇを記録）のレバウディオシドＡ標準を４ｍＬの希釈溶液で希釈することによって調製された。レバウディオシドＡ標準溶液が、１０．８、１１．４、１２．６、及び１３．２μＬで注入された。水分含有量は、標準が調製されるごとにカールフィッシャ分析によって測定され、分析証明書に従った溶媒純度に基づいて訂正された。別の方法としては、レバウディオシドＡ標準は、１８、１９、２１、及び２２（それぞれ±０．２）ｍｇのレバウディオシドＡ標準の個々のサンプルを４ｍＬの希釈溶液で希釈することによって調整された（水分及び純度を補正するため）。個々に調製されたサンプルは、サンプルと同じレベル（１２μＬ）で注入された。
【００５１】
ステビオシド標準は、約２５００ｍｇ／Ｌ標準の標準溶液（ストックＡ）を作るために、１２．５±０．５ｍｇ（最近隣０．１ｍｇを記録）のステビオシド標準を、５ｍＬの希釈溶液で希釈することによって調整された（水分及び純度を補正するため）。次に、ステビオシド標準は、２５０ｍｇ／Ｌ標準（ストックＢ）を生成するために１０ｍＬの希釈剤に対して１ｍＬのストックＡを使用して希釈され、ストック標準は最終濃度２．５から５０ｍｇ／Ｌまで希釈された。
【００５２】
レバウディオシドＡ組成物のサンプルは、約５０００ｍｇ／Ｌのサンプル溶液を作るために、１２５±２ｍｇ（最近隣０．１ｍｇを記録）のレバウディオシドＡ組成物を２５ｍＬの希釈溶液で希釈することによって調整された（水分を補正するため）。サンプルは即時に分析されない場合、窒素下でヘッドスペースなしで保管され、乾燥された。
【００５３】
以下の表は、レバウディオシドＡ及び他のステビオールグリコシドに関するガイドラインを提供する。しかし、当業者であれば、必要に応じて保持時間が修正可能であることを理解されたい。
【表２】
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【００５４】
実施例セットＡ
【表３】
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実施例Ａ１
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度）混合物は、商用ソースから得られた。不純物（６．２％ステビオシド、５．６％レバウディオシドＣ、０．６％レバウディオシドＦ、１．０％他のステビオールグリコシド、３．０％レバウディオシドＤ、４．９％レバウディオシドＢ、０．３％ステビオールビオシド）は、乾燥ベース（水分含有率４．７％）でＨＰＬＣを使用して同定及び定量化された。
【００５５】
粗レバウディオシドＡ（４００ｇ）、エタノール（９５％、１２００ｍＬ）、メタノール（９９％、４００ｍＬ）、及び水（３２０ｍＬ）が混合され、５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶はろ過され、エタノールで２回洗浄され（２×２００ｍＬ、９５％）、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥された。
【００５６】
実質的に純粋なレバウディオシドＡの最終組成物（１３０ｇ）は、すべて重量に基づいて、９８．９１％レバウディオシドＡ、０．０６％ステビオシド、０．０３％レバウディオシドＣ、０．１２％レバウディオシドＦ、０．１３％他のステビオールグリコシド、０．１％レバウディオシドＤ、０．４９％レバウディオシドＢ、及び０．０３％ステビオールビオシドを含んでいた。
【００５７】
実施例Ａ２
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％）は、商用ソースから得られた。不純物（６．２２％ステビオシド、２．２８％レバウディオシドＣ、０．３５％ズルコシドＡ、０．７８％レバウディオシドＦ、０．７２％他のステビオールグリコシド、３．３３％レバウディオシドＢ、０．０７％ステビオールビオシド）は、ＨＰＬＣによって乾燥ベース（水分含有率３．４％）で同定及び定量化された。
【００５８】
粗レバウディオシドＡ（１００ｇ）、エタノール（９５％、３２０ｍＬ）、メタノール（９９％、１２０ｍＬ）、及び水（５０ｍＬ）が混合され、３０〜４０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶はろ過され、エタノールで２回洗浄された（２×５０ｍＬ、９５％）。湿式ろ過ケーキ（８８ｇ）がエタノール（９５％、１３２０ｍＬ）内で１６時間スラリー化され、ろ過され、エタノール（９５％、２×１００ｍＬ）で洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥された。
【００５９】
実質的に純粋なレバウディオシドＡの最終組成物（７２ｇ）は、９８．２９％レバウディオシドＡ、０．０３％ステビオシド、０．０２％レバウディオシドＣ、０．１７％レバウディオシドＦ、０．０６％レバウディオシドＤ、及び１．０９％レバウディオシドＢを含んでいた。
【００６０】
実施例Ａ３
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％）は、商用ソースから得られた。不純物（６．２２％ステビオシド、２．２８％レバウディオシドＣ、０．３５％ズルコシドＡ、０．７８％レバウディオシドＦ、０．７２％他のステビオールグリコシド、３．３３％レバウディオシドＢ、０．０７％ステビオールビオシド）は、ＨＰＬＣによって乾燥ベース（水分含有率３．４％）で同定及び定量化された。
【００６１】
粗レバウディオシドＡ（５０ｇ）、エタノール（９５％、１６０ｍＬ）、メタノール（９９％、６０ｍＬ）、及び水（２５ｍＬ）が混合され、約３０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶はろ過され、エタノールで２回洗浄された（２×２５ｍＬ、９５％）。湿式ろ過ケーキ（４０ｇ）がメタノール（９９％、６００ｍＬ）内で１６時間スラリー化され、ろ過され、メタノール（９９％、２×２５ｍＬ）で洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥された。
【００６２】
実質的に純粋なレバウディオシドＡの最終組成物（２７．３ｇ）は、９８．２２％レバウディオシドＡ、０．０４％ステビオシド、０．０４％レバウディオシドＣ、０．１８％レバウディオシドＦ、０．０８％レバウディオシドＤ、及び１．０３％レバウディオシドＢを含んでいた。ＨＰＬＣによってステビオールビオシドは検出されなかった。
【００６３】
実施例セットＢ
【表４】
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実施例Ｂ１
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（２ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５ｍＬ、４：１．５、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．２ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００６４】
実施例Ｂ２
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（４ｍＬ）、及び水（２ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５ｍＬ、４：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．１ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００６５】
実施例Ｂ３
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、９．５ｍＬ）、１−ブタノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：１−ブタノール（５ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．２ｇの精製物（＞９５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００６６】
実施例Ｂ４
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、９．５ｍＬ）、メタノール（９ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．５ｇの精製物（＞９６％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００６７】
実施例Ｂ５
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１２．５ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（２ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで冷却された。溶液は、１０ｍｇの９８％純度のレバウディオシドＡでシード添加され、混合物は２２℃で１６時間放置された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５ｍＬ、４：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．３ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００６８】
実施例Ｂ６
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１２．５ｍＬ）、アセトニトリル（６ｍＬ）、及び水（１．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで冷却された。溶液は、１０ｍｇの９８％純度のレバウディオシドＡでシード添加され、混合物は２２℃で１６時間放置された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：アセトニトリル（５ｍＬ、６：３、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．４ｇの精製物（＞９５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００６９】
実施例Ｂ７
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１４．５ｍＬ）、酢酸エチル（４ｍＬ）、及び水（１．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで冷却された。溶液は、１０ｍｇの９８％純度のレバウディオシドＡでシード添加され、混合物は２２℃で１６時間放置された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：アセトニトリル（５ｍＬ、７：２、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．４ｇの精製物（＞９５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７０】
実施例Ｂ８
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（２ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．５ｍＬ、４：１．５、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．２ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７１】
実施例Ｂ９
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（４ｍＬ）、及び水（２ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、４：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．１ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７２】
実施例Ｂ１０
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１４．５ｍＬ）、メタノール（４ｍＬ）、及び水（１．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、７：２、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．４ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７３】
実施例Ｂ１１
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（１．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、８：３、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．２ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７４】
実施例Ｂ１２
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（２ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで冷却され、１０ｍｇの純粋なレバウディオシドＡ（＞９８％）でシード添加された。混合物は室温で１６時間維持された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、８：３、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．２ｇの精製物（＞９８％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７５】
実施例Ｂ１３
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（２ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで冷却され、１０ｍｇの純粋なレバウディオシドＡ（＞９８％）でシード添加された。混合物は、攪拌しながら室温で１６時間維持された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、８：３、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．４ｇの精製物（＞９６％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７６】
実施例Ｂ１４
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１５ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）、及び水（２．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間攪拌しながら冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、３：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．２ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７７】
実施例Ｂ１５
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１５ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）、及び水（３．０ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間攪拌しながら冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、３：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２．７ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７８】
実施例Ｂ１６
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１５ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）、及び水（３．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間攪拌しながら冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、３：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２．６ｇの精製物（＞９９％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００７９】
実施例Ｂ１７
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１５ｍＬ）、メタノール（５ｍＬ）、及び水（４．０ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで１６時間攪拌しながら冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、３：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２．３ｇの精製物（＞９９％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８０】
実施例Ｂ１８
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（２．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで冷却された。混合物は室温で１５〜３０分間攪拌され、その間に結晶が現れ始めた。攪拌が停止され、混合物は室温で１６時間維持された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、８：３、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．０ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８１】
実施例Ｂ１９
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、１６ｍＬ）、メタノール（６ｍＬ）、及び水（２．５ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された。その間に結晶が現れ始めた。混合物は室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、８：３、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．２ｇの精製物（＞９８％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８２】
実施例セットＣ
【表５】
0005536449.tif 000007
実施例Ｃ１
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、メタノール（９９％、９．５ｍＬ）、イソプロパノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、約４０〜５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：メタノール（５．０ｍＬ、８：３、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．８５ｇの精製物（＞９１．０％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８３】
実施例Ｃ２
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、メタノール（９９％、９．５ｍＬ）、ｓｅｃ−ブタノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、約４０〜５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、メタノール：ｓｅｃ−ブタノール（１０．０ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、４．０ｇの精製物（＞９１．０％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８４】
実施例Ｃ３
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、メタノール（９９％、９．５ｍＬ）、１−プロパノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、約４０〜５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、メタノール：１−プロパノール（１０．０ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．５５ｇの精製物（＞９１．２１％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８５】
実施例Ｃ４
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、９．５ｍＬ）、１−プロパノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、約４０〜５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：１−プロパノール（１０．０ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２．５ｇの精製物（＞９４．０％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８６】
実施例Ｃ５
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、メタノール（９９％、９．５ｍＬ）、１−ブダノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、約４０〜５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、メタノール：１−ブタノール（１０．０ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．７ｇの精製物（＞９１．５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８７】
実施例Ｃ６
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、９．５ｍＬ）、２−プロパノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、約４０〜５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：２−プロパノール（１０．０ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２．４ｇの精製物（＞９３．５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８８】
実施例Ｃ７
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、９．５ｍＬ）、ｓｅｃ−ブタノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール：ｓｅｃ−ブタノール（１０．０ｍＬ、１：１、ｖ／ｖ）の混合物で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２．９ｇの精製物（＞９３．０％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００８９】
実施例Ｃ８
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度、５ｇ）、メタノール（９９％、９．５ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブタノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、約４０〜５０℃まで１０分間加熱された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、メタノール（９９％、７．０ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３．９ｇの精製物（＞８３．０％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９０】
実施例Ｃ９
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度、５ｇ）、エタノール（９５％、９．５ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブタノール（９．５ｍＬ）、及び水（１ｍＬ）が混合され、加熱され、１０分間還流された。透明溶液が２２℃まで２時間冷却された後、室温で１６時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、７．０ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、５０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２．９ｇの精製物（＞８８．０％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９１】
実施例セットＤ
【表６】
0005536449.tif 000008
実施例Ｄ１
粗レバウディオシドＡ（７７．４％純度、５０ｇ）、メタノール（９９％、１８０ｍＬ）、及び水（２０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、メタノール（９９％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２９．８ｇの精製物（９６．２％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９２】
実施例Ｄ２
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、メタノール（９９％、１６０ｍＬ）、及び水（４０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１週間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、メタノール（９９％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３１．２ｇの精製物（９５．５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９３】
実施例Ｄ３
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１８８ｍＬ）、及び水（１２ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３７．３ｇの精製物（９３．４％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９４】
実施例Ｄ４
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１８４ｍＬ）、及び水（１６ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３１．７ｇの精製物（９５．３％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９５】
実施例Ｄ５
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１８０ｍＬ）、及び水（２０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３５．７ｇの精製物（９４．７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９６】
実施例Ｄ６
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１７６ｍＬ）、及び水（２４ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３８．２ｇの精製物（９７．３％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９７】
実施例Ｄ７
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１７２ｍＬ）、及び水（２８ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３２．０ｇの精製物（９８．１％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９８】
実施例Ｄ８
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１６０ｍＬ）、及び水（４０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、１９．８ｇの精製物（９９．５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【００９９】
実施例Ｄ９
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、１−プロパノール（１８０ｍＬ）、及び水（２０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、１−プロパノール（２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２７．０ｇの精製物（９２．９％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【０１００】
実施例Ｄ１０
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、２−プロパノール（１８０ｍＬ）、及び水（２０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、２−プロパノール（２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、３４．９ｇの精製物（９１．４％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【０１０１】
実施例Ｄ１１
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、１−ブタノール（１８０ｍＬ）、及び水（２０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、１−ブタノール（２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、４０．６ｇの精製物（９３．１％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【０１０２】
実施例Ｄ１２
粗レバウディオシドＡ（８０．３７％純度、５０ｇ）、２−ブタノール（１８０ｍＬ）、及び水（２０ｍＬ）が混合され、加熱され、３０分間還流された。その後、混合物は大気温度まで１６〜２４時間冷却された。白色結晶生成物はろ過され、２−ブタノール（２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、４０．４ｇの精製物（９０．５％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【０１０３】
実施例セットＥ
【表７】
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実施例Ｅ１
粗レバウディオシドＡ（４１％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１６０ｍＬ）、メタノール（９９．８％、６０ｍＬ）、及び水（２５ｍＬ）が、２２℃で攪拌することによって混合された。白色生成物が５〜２０時間で結晶化された。混合物は、さらに４８時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄された。その後、白色結晶生成物の湿式ケーキはメタノール（９９．８％、２００ｍＬ）内で１６時間スラリー化され、ろ過され、メタノール（９９．８％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、１２．７ｇの精製物（９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【０１０４】
実施例Ｅ２
粗レバウディオシドＡ（４８％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１６０ｍＬ）、メタノール（９９．８％、６０ｍＬ）、及び水（２５ｍＬ）が、２２℃で攪拌することによって混合された。白色生成物が３〜６時間で結晶化された。混合物は、さらに４８時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄された。その後、白色結晶生成物の湿式ケーキはメタノール（９９．８％、３００ｍＬ）内で１６時間スラリー化され、ろ過され、メタノール（９９．８％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、１８．６ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【０１０５】
実施例Ｅ３
粗レバウディオシドＡ（５５％純度、５０ｇ）、エタノール（９５％、１６０ｍＬ）、メタノール（９９．８％、６０ｍＬ）、及び水（２５ｍＬ）が、２２℃で攪拌することによって混合された。白色生成物が１５〜３０分で結晶化された。混合物は、さらに４８時間攪拌された。白色結晶生成物はろ過され、エタノール（９５％、２５ｍＬ）で２回洗浄された。白色結晶生成物の湿式ケーキはメタノール（９９．８％、３５０ｍＬ）内で１６時間スラリー化され、ろ過され、メタノール（９９．８％、２５ｍＬ）で２回洗浄され、減圧下（２０ｍｍ）で１６〜２４時間、６０℃の真空オーブン内で乾燥されて、２２．２ｇの精製物（＞９７％、ＨＰＬＣによる）が収量された。
【０１０６】
実施例Ｆ
上記精製技術を使用して得られた実質的に純粋なレバウディオシドＡの溶液（＞９７％純度、ＨＰＬＣによる）を、再蒸留水（５０ｍＬ中１２．５ｍｇ、２５％濃度）中で混合物を４０℃で５分間攪拌することによって調製された。Ｌａｂ−Ｐｌａｎｔ噴霧乾燥器ＳＤ−０４機器（Ｌａｂ−Ｐｌａｎｔ  Ｌｔｄ．，Ｗｅｓｔ  Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ，Ｕ．Ｋ．）を用いた噴霧乾燥に、透明溶液を即時に適用することによって、レバウディオシドＡの非晶質形態が形成された。溶液は、一定流量の窒素／空気を活用してレバウディオシドＡ溶液を液滴の噴霧に霧化するノズル噴霧器内に、供給ポンプを介して供給された。水分は、乾燥室内の制御された温度条件（約９０から約９７℃）及び空気流条件の下で液滴から蒸発し、結果として乾燥粒子が形成された。この乾燥粒子（１１〜１２ｇ、Ｈ２Ｏ  ６．７４％）は乾燥室から連続して排出され、ボトルに収集された。室温での水中への溶解速度は、＞３５．０％であった。
【０１０７】
以上、本発明について、その特定の実施形態に関して詳細に説明してきたが、当業者は上記内容を達成及び理解すれば、これらの実施形態の代替形態、変形形態、及び均等物を容易に考案できることを理解されよう。従って本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲及びその任意の均等物の範囲であると評価されるものとする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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