(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
８．３、１６．８、および１８．５±０．２度２θの反射を有するＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の形態１、または７．９、１５．５、および２６．１±０．２度２θの反射を有するＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の形態３であるベンダムスチン塩酸塩の固体形態。
【請求項２】
１４．０、２２．０、２２．９、２５．１、および２８．３±０．２度２θの反射をさらに有するＸ線粉末回折パターンを生成する、請求項１に記載のベンダムスチン塩酸塩の形態１の固体形態。
【請求項３】
１４．０±０．２度２θの反射をさらに有するＸ線粉末回折パターンを生成する、請求項１に記載のベンダムスチン塩酸塩の形態１の固体形態。
【請求項４】
１０．６、１９．７および／または２３．３±０．２度２θの反射をさらに有するＸ線粉末回折パターンを生成する、請求項１に記載のベンダムスチン塩酸塩の形態３の固体形態。
【請求項５】
請求項１、２、３、または４のいずれか一項に記載のベンダムスチン塩酸塩の固体形態と少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む薬学的組成物。
【請求項６】
請求項１、２、３、または４のいずれか一項に記載のベンダムスチン塩酸塩の固体形態と少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含み、ベンダムスチン塩酸塩の他の固体形態を実質的に含まない、薬学的組成物。
【請求項７】
前記薬学的に許容される賦形剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、グリシン、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、グリセリン、デキストロース、デキストラン、トレハロース、ヘタスターチ、またはこれらの混合物である、請求項５または６に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
前記賦形剤はマンニトールである、請求項７に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
請求項１、２、３、または４のいずれか一項に記載のベンダムスチン塩酸塩の固体形態を含む凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１０】
前記組成物は、ベンダムスチン塩酸塩の他の固体形態を実質的に含まない、請求項９に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１１】
慢性リンパ性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫または乳癌の治療における使用を目的とした、請求項５、６、７、８、９、または１０のいずれか一項に記載の薬学的組成物または凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１２】
前記非ホジキンリンパ腫は、無痛性Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫である、請求項１１に記載の薬学的組成物または凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１３】
少なくとも１つのベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を含む凍結乾燥医薬組成物を調製するための方法であって、
請求項１に記載のベンダムスチン塩酸塩の形態１、マンニトール、水、および有機溶媒を混合する工程であって、溶液を形成するものである、前記混合する工程と、
前記溶液を凍結乾燥化する工程であって、ベンダムスチン塩酸塩を有する凍結乾燥医薬組成物を形成するものである、前記凍結乾燥化する工程と、
を含む、方法。
【請求項１４】
前記有機溶媒は、メタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、またはこれらの混合物である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記有機溶媒はｔｅｒｔ−ブタノールである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記凍結乾燥化する工程は以下の凍結乾燥サイクルを有するものである、請求項１３に記載の方法。
0005536753.tif 000022
【請求項１７】
請求項１３、１４、１５、または１６のいずれか一項に記載の方法に従って調製される凍結乾燥医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベンダムスチン含有組成物、ベンダムスチンを含む医薬組成物、それらを再現性良く作製するためのプロセス、およびそれらを使用して患者を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬品有効成分（ＡＰＩ）は、種々の異なる形態、たとえば、化学誘導体、溶媒和物、水和物、共結晶、または塩において調製することが可能である。ＡＰＩはまた、それらが非晶質でありえ、異なる結晶多形体として、および／または異なる溶媒和または水和状態で存在しうる点で、異なる固体形態において調製することが可能である。ＡＰＩの形態を変化させることにより、その物理特性を変化させることが可能である。たとえば、ＡＰＩの固体形態は、典型的には、熱力学的に安定な方の固体形態が熱力学的に安定でない方の固体形態より可溶性が低いように、異なる溶解度を有する。固体形態はまた、貯蔵寿命、バイオアベイラビリティ、形態、蒸気圧、密度、色、および圧縮率などの特性が異なりうる。したがって、ＡＰＩの固体状態のバリエーションは、その物理および薬理特性を調節するための多数の方法の１つである。
【０００３】
ベンダムスチン、４−｛５−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−１−メチル−２−ベンジミダゾリル｝酪酸：
【化１】
0005536753.tif 000002
【０００４】
が、ドイツ民主共和国（ＧＤＲ）において１９６３年に最初に合成され、商標名Ｃｙｔｏｓｔａｓａｎ（登録商標）の下で１９７１年から１９９２年までそこで入手可能であった。たとえば、ベンダムスチン塩酸塩一水和物の合成について記載する、Ｗ．ＯｚｅｇｏｗｓｋｉおよびＤ．Ｋｒｅｂｓ、ＩＭＥＴ３３９３  γ−［１−ｍｅｔｈｙｌ−５−ｂｉｓ−（β−ｃｈｌｏｒｏｅｔｈｙｌ）−ａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｏ−（２）］−ｂｕｔｙｒｙｌ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ，ａ  ｎｅｗ  ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ  ａｇｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｒｏｕｐ  ｏｆ  ｂｅｎｚｉｍｉｄａｚｏｌｅ  ｎｉｔｒｏｇｅｎ  ｍｕｓｔａｒｄｓ．  Ｚｂｌ．Ｐｈａｒｍ．１１０，（１９７１年）  Ｈｅｆｔ  １０、１０１３−１０１９頁を参照のこと。当時から、それは商標名Ｒｉｂｏｍｕｓｔｉｎ（登録商標）の下、ドイツで市場化されている。ベンダムスチンは、慢性リンパ性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、および乳癌などの疾患の治療において治療的有用性を有することが示されているアルキル化剤である。
【０００５】
ベンダムスチンが有効であることが示されている一方、それは特に水溶液中で不安定であり、その調製および投与における技術的困難につながることが知られている。したがって、研究者は、ベンダムスチンの調製および安定性を改善する方法ならびにその調合について検討している。たとえば、独国特許第１５９８７７号明細書は、ビス−ヒドロキシル前駆体を塩化チオニルと反応させた後、水から再結晶化することによる、ベンダムスチン遊離塩基を調製するための方法を開示する。
【０００６】
独国特許第３４７２７号明細書は、ベンダムスチンの誘導体を調製する方法を開示する。記述される誘導体は、１−位置の置換基においてベンダムスチンと異なる。
【０００７】
独国特許第８０９６７号明細書は、ベンダムスチン塩酸塩一水和物、アスコルビン酸、および水の注射可能な調製物を開示する。独国特許第８０９６７号明細書は、ベンダムスチンなどの化合物の凍結乾燥が、化合物が処理条件に耐えられるだけの十分な安定性がある場合にのみ可能であることを記載する。独国特許第８０９６７号明細書に記載の調製物は凍結乾燥されない。
独国特許第１５９２８９号明細書は、凍結乾燥を回避するベンダムスチン塩酸塩の使用準備済の注射可能溶液を開示する。独国特許第１５９２８９号明細書は、１，２−プロピレングリコールまたはエタノール中のベンダムスチン塩酸塩の無水溶液について記載する。
Ｃｅｐｈａｌｏｎ，Ｉｎｃ．（Ｆｒａｚｅｒ，ＰＡ）に交付された２００６年１月１２日出願の米国特許出願第１１／３３０，８６８号明細書は、ベンダムスチン塩酸塩を含む凍結乾燥医薬組成物を調製する方法を開示する。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある（国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】  国際公開第ＷＯ２００６／０７６６２０号
【特許文献２】  独国特許出願公開第０１５９２８９号明細書
【特許文献３】  独国特許出願公開第０１５９８７７号明細書
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】  ＲＩＢＯＳＥＰＨＡＲＭ："Ｐｒｏｄｕｃｔ  ｍｏｎｏｇｒａｐｈ  ｒｉｂｏｓｅｐｈａｒｍ  ｐａｓｓａｇｅ"ＰＲＯＤＵＣＴ  ＭＯＮＯＧＲＡＰＨ  ＲＩＢＯＳＥＰＨＡＲＭ，ＸＸ，ＸＸ，１  Ｊａｎｕａｒｙ  ２００５（２００５−０１−０１），ｐａｇｅｓ  ３−７３，ＸＰ００２３６８４３７
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
ＡＰＩの異なる固体形態の潜在的な利点およびベンダムスチンの有効性を考慮すると、ベンダムスチン塩酸塩の新規の固体形態を同定し、調製するという需要が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
ベンダムスチン塩酸塩の固体形態ならびにそれらを調製する方法が記載される。たとえば、一部の実施形態では、本発明は、ベンダムスチン塩酸塩の形態１、ベンダムスチン塩酸塩の形態３、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、非晶質ベンダムスチン塩酸塩、またはこれらの混合物の少なくとも１つを含むベンダムスチン塩酸塩の固体形態を対象とする。ベンダムスチン塩酸塩のこの固体形態は、次の反射：２５．１、２４．９、２２．９、２２．０、および／または１４．１±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成するか、あるいは次の反射：１６．８、１７．５、１８．５、２４．９、および／または２８．３±０．２度２θの１つ以上をさらに含むＸ線粉末回折パターンを生成するものでありうる。あるいは、ベンダムスチン塩酸塩の固体形態は、次の反射：２６．１、２７．９、および／または２８．１±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成しうるか、あるいは次の反射：１０．６、１５．６、および／または１９．８±０．２度２θの１つ以上をさらに含むＸ線粉末回折パターンを生成する。他の実施形態は、次の反射：１０．８、１５．５、２０．５、および／または２３．６±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成しうるか、あるいは次の反射：１０．３、１９．６、２０．７、２１．２、２５．８および／または２７．６±０．２度２θの１つ以上をさらに含むＸ線粉末回折パターンを生成しうる。
【００１２】
本発明の別の実施形態は、上記のようなベンダムスチン塩酸塩の固体形態を含む組成物を対象とする。特定の実施形態では、組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤をさらに含む医薬組成物である。他の実施形態では、組成物は、凍結乾燥組成物である。特定の実施形態では、組成物は、ベンダムスチン塩酸塩の単一の固体形態を含み、他の固体形態を実質的に含まない。あるいは、組成物は、固体形態の混合物、たとえばベンダムスチン塩酸塩の結晶形態と非晶質ベンダムスチンの混合物を含有しうる。したがって、組成物は、たとえば、次の反射：７．９８、１０．５８、１５．４３、１９．６４、および／または１９．８９±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成する凍結乾燥組成物でありうる。
【００１３】
組成物を調製する方法および、慢性リンパ性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫または乳癌の治療における用途としてそれを使用する方法についても記載される。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】ベンダムスチン塩酸塩の１Ｈ  ＮＭＲスペクトルである。
【図２】ベンダムスチン塩酸塩の形態１のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）である。
【図３】ベンダムスチン塩酸塩の形態１の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）サーモグラムである。
【図４】ベンダムスチン塩酸塩の形態１の熱重量分析（ＴＧＡ）サーモグラムである。
【図５】ベンダムスチン塩酸塩の形態１の重量測定による蒸気収着（Ｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ  Ｖａｐｏｒ  Ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＧＶＳ）トレースである。
【図６】ベンダムスチン塩酸塩の形態２のＸ線粉末回折である。
【図７Ａ】ベンダムスチン塩酸塩の形態２のＤＳＣサーモグラムである。
【図７Ｂ】２℃／分の加熱速度を使用するベンダムスチン塩酸塩の形態２のＤＳＣサーモグラムである。
【図８】ベンダムスチン塩酸塩の形態２のＴＧＡサーモグラムである。
【図９】ベンダムスチン塩酸塩の形態２のＧＶＳトレースである。
【図１０】ベンダムスチン塩酸塩の形態３のＸ線粉末回折である。
【図１１】ベンダムスチン塩酸塩の形態４のＸ線粉末回折である。
【図１２】ベンダムスチン塩酸塩の形態４のＤＳＣサーモグラムである。
【図１３】非晶質ベンダムスチン塩酸塩のＸ線粉末回折である。
【図１４】非晶質ベンダムスチン塩酸塩、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、およびマンニトール（ロット番号４２６８０４）を含む本発明の一実施形態のＸ線粉末回折である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
例示的な実施形態の詳細な説明
結晶性ベンダムスチン塩酸塩の４つの多形体は、本明細書で開示される（本明細書中で形態１、形態２、形態３、および形態４と称される）。また、非晶質（すなわち非結晶）ベンダムスチン塩酸塩が説明される。ベンダムスチン塩酸塩のこれらの固体形態に関するスペクトルデータが図１〜１４に示され、かつこれらの形態の各々を調製する方法が示される。
【００１６】
好ましい実施形態は、形態１、形態２、形態３、形態４、またはこれらの混合物を含むベンダムスチン塩酸塩の固体形態である。より好ましい実施形態は、形態１、形態３、形態４、非晶質ベンダムスチン塩酸塩、またはこれらの混合物であるベンダムスチン塩酸塩の固体形態である。他の実施形態では、本発明の固体形態は、ベンダムスチン塩酸塩の形態２をさらに含む場合がある。これらの多形性固体形態は、たとえばＸ線粉末回折によって同定され、かつ各多形形態の特性を示す１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれより多い反射ピークによって特徴づけられる場合がある。４つの結晶多形体（形態１、形態２、形態３、形態４）および非晶質ベンダムスチン塩酸塩はまた、そのＤＳＣサーモグラム、ＴＧＡサーモグラム、および／またはＧＶＳトレースを参照することによって同定することが可能であり、それらは図１〜１４に示される。記載の各多形体または多形体の混合物、および非晶質ベンダムスチン塩酸塩を含むベンダムスチンの固体形態を作製する方法は、本明細書中に記載の技術を用いて実施することが可能である。
【００１７】
本明細書中に記載のベンダムスチン塩酸塩の固体形態のいずれかは、ベンダムスチン塩酸塩を含む組成物の成分でありうる。一部の実施形態では、本明細書中に記載のベンダムスチン塩酸塩の固体形態の少なくとも１つを含むこれらの組成物は、ベンダムスチン塩酸塩の他の固体形態を実質的に含まない。
【００１８】
本発明の特定の好ましい実施形態は、少なくとも部分的にＸ線粉末回折によって特徴づけることが可能である。当該技術分野で公知のように、結晶固体は、ディフラクトグラム（ｄｉｆｆｒａｃｔｏｇｒａｍ）と称されるもので表される、特有の回折ピークパターンを生成する。所与の結晶材料におけるピーク帰属、たとえば度２θ値は、ディフラクトグラムを得るために使用される計装および特定の他の要素、たとえば試料調製に応じてやや変動しうる。それに対し、これらの変動は＋／−０．２度２θ以下である必要があり、回折におけるピーク間の相対間隔は、使用される計装または試料調製の方法などと無関係に、常に同じとなる。
【００１９】
好ましい実施形態では、本発明の組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤をさらに含む医薬組成物である。好ましい賦形剤は、たとえば、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、グリシン、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、グリセリン、デキストロース、デキストラン、トレハロース、ヘタスターチ、またはこれらの混合物を含む。より好ましい薬学的賦形剤は、マンニトールである。
【００２０】
本発明の別の実施形態は、ベンダムスチン塩酸塩の形態１、形態２、形態３、形態４、またはこれらの混合物を含む医薬組成物である。より好ましい実施形態は、ベンダムスチン塩酸塩の形態１、形態３、形態４、非晶質、またはこれらの混合物を含む組成物、好ましくは医薬組成物である。他の実施形態では、医薬組成物は、形態２またはベンダムスチン塩酸塩をさらに含む。本発明のより好ましい実施形態は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩とともに形態１、形態２、形態３、および形態４の１つ以上を含む医薬組成物である。
【００２１】
本発明の別の実施形態は、本明細書中に記載のベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つの固体形態を含む凍結乾燥組成物である。本発明の好ましい凍結乾燥組成物は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩とベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つの結晶形態の混合物を含むものを含む。本発明のより好ましい凍結乾燥組成物は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩とベンダムスチン塩酸塩の形態４の混合物を含むものを含む。
【００２２】
本発明の凍結乾燥組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤をさらに含みうる。好ましい賦形剤は、たとえば、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、グリシン、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、グリセリン、デキストロース、デキストラン、トレハロース、ヘタスターチ、またはこれらの混合物を含む。より好ましい薬学的賦形剤は、マンニトールである。本発明の好ましい凍結乾燥組成物は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、および好ましくはマンニトールである少なくとも１つ薬学的に許容される賦形剤の混合物を含む。本質的に非晶質ベンダムスチン塩酸塩、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、およびマンニトールからなる凍結乾燥組成物はより好ましい（たとえば図１４を参照）。
【００２３】
形態１は、短冊状粒子からなる白色粉末として特徴づけられた。形態１は、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）によると結晶であり、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは分子の構造に一致し、かつ純度は９７．２％であった。熱分析は、融解事象（ピーク＝１７０℃）に対応する開始の１６７℃（ΔＨ１０３Ｊ／ｇ）で吸熱を示した。この温度を超えると、分解が生じた。試料は、ＸＲＰＤ（図１３）によると、１８０℃（融解）への加熱時、非晶質になり、周囲温度への冷却時、非晶質状態を保持した。形態１は、低い吸湿性を有することが見出され、それは０〜９０％の間の相対湿度（ＲＨ）で０．７％の重量増加を示した。これは、周囲条件下での再分析時、ＸＲＰＤパターンにおける有意な変化をもたらさなかった。４０℃／７５％ＲＨでの１週間の保存または４０℃／１１％ＲＨでの３週間の保存の間では、有意な変化は全く認められなかった。ＸＲＰＤからのデータは、下記に示される。
【００２４】
【表１】
0005536753.tif 000003
【００２５】
形態１は、２５℃／９４％ＲＨでの２か月間の保存の間、ベンダムスチン塩酸塩の水和物（形態２）に変換された。水溶解度は２．１６の溶液ｐＨで４．５ｍｇ／ｍｌであったが、この実験における試料に対して有意な分解が生じた。水性条件下、ＵＶにより、この材料に対して見出されたｐＫａ値は、０．８８（塩基）、４．１７（酸）および６．９４（塩基）であった。見出されたＬｏｇＰ値は１．１０であるとともに、ｐＨ７．４のＬｏｇＤは０．６８であった。この形態の単一の結晶構造が得られた。
【００２６】
ベンダムスチンＨＣｌの形態１の単一の結晶構造の表示
【化２】
0005536753.tif 000004
【００２７】
【表２】
0005536753.tif 000005
【００２８】
形態１は、光での分解に対して形態２より安定であることが示された。
【００２９】
形態２（一水和物）は、棒状粒子からなる白色粉末として特徴づけられた。形態２は、ＸＲＰＤによると結晶であり、純度は９８．３％であった。ＸＲＰＤデータは下記に示される。
【００３０】
【表３】
0005536753.tif 000006
【００３１】
熱分析は、水分損失により、開始の３７℃で幅広い吸熱を示した。これは周囲温度〜１００℃の間での加熱時の５．２％の重量減少に対応し、それは水の１．２当量の減少および形態４への変換に一致した。試料は、ＧＶＳ分析の間、１０〜１５％ＲＨで４％の取り込みを示し、それは水の１モルに一致した。ＧＶＳサイクル後のＸＲＰＤ再分析時、１４°２θでのピークが認められた。このピークは形態１の存在を示唆し、それは部分的変換がＧＶＳ実験の間に生じたことを示唆している。純粋な形態１を２５℃／９４％ＲＨで１か月保存後、試料は形態２への変換プロセスの最中であったことから、同様のＸＲＰＤトレースが認められた。４０℃／７５％ＲＨでの１か月の保存後、ＸＲＰＤによると、試料に対する有意な変化は全く認められなかったが、４０℃／１１％ＲＨでの１か月間では試料はあまり結晶化しなかった。光安定性実験の間では、結晶化度および純度における有意な低下が認められた。
【００３２】
先行技術のレビューによると、ベンダムスチン塩酸塩の一水和物が以前に調製されていることが示される。Ｗ．ＯｚｅｇｏｗｓｋｉおよびＤ．Ｋｒｅｂｓ、上記を参照のこと。その一水和物は、１５２〜５６℃の報告された融点を有する。この融点は、ベンダムスチン塩酸塩の形態２で認められる融点（１５３〜１５７℃と観察された）と類似する。確実ではないが、形態２および先行技術で報告されたベンダムスチン塩酸塩一水和物が同じ多形体であると考えられる。しかし、さらなる特性化の詳細、たとえばＸＲＰＤについては全く報告されていないか、または、先行技術において報告されたベンダムスチン塩酸塩一水和物に対して利用できないことから、先に報告された一水和物が形態２のベンダムスチン塩酸塩であったか否かについては知られていない。
【００３３】
形態１、形態２および１：１混合物の最大で６週間の保存では、高湿度で保存後に、形態１が２に変換することのみが示された（６０℃／９５％ＲＨ、２５℃／９４％ＲＨおよび場合によって４℃／８８％ＲＨ（それぞれ、６、６および２週間に対応））。これらの試験では、６週間後、形態２から形態１への変換が全く認められなかった。動的要素は、試験された６週間以内での完全な熱力学的安定性を判定することを極めて困難にし、両形態は、４℃／３４〜７６％ＲＨ、２５℃／４３〜７５％ＲＨおよび６０℃／１１〜７５％ＲＨで、６週間、動的に安定であった。
【００３４】
形態３は、ＸＲＰＤによると部分的に結晶である白色粉末として特徴づけられた。ＸＲＰＤの再分析に対し、周囲条件下での１か月の保存後、有意な変化は全く認められなかったが、４０℃／７５％ＲＨで１週間の間に形態２への変換が生じた。純度は９５．９％であった。形態３におけるＸＲＰＤデータは下記に示される。
【００３５】
【表４】
0005536753.tif 000007
【００３６】
形態４は、ＸＲＰＤによると結晶である白色粉末として特徴づけられた。熱分析は、１５３℃での融解（ピーク＝１５７℃）による吸熱を示した。形態４は、周囲条件下で、２４時間の間に形態２に変換された。形態４におけるＸＲＰＤデータは下記に示される。
【００３７】
【表５】
0005536753.tif 000008
【００３８】
非晶質ベンダムスチン塩酸塩は、約５０℃のガラス転移温度を有し、周囲条件下で２４時間の間に粘着性を示すようになり、それが吸湿性であることが示される。また、部分的結晶化が、場合によって形態２および３の混合物に対し、４０℃／７５％ＲＨで１週間の間に生じた。ＧＶＳの湿度サイクルを経た後、非晶質ベンダムスチン塩酸塩は、形態２に変換された。
【００３９】
本発明の好ましい医薬組成物は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩を含む。ベンダムスチン塩酸塩は、主にベンダムスチン塩酸塩の非晶質形態からなる組成物または非晶質ベンダムスチン塩酸塩を含む組成物、ならびに結晶形態、たとえば結晶性ベンダムスチン塩酸塩の形態１、形態２、形態３、形態４、またはこれらの混合物として提供されうる。本発明の好ましい医薬組成物は、実質的に結晶性ベンダムスチン塩酸塩を含まないベンダムスチン塩酸塩を含む。
【００４０】
好ましい実施形態では、形態１、形態２、形態３、形態４、および非晶質ベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つ、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が提供される。好ましくは、医薬組成物は、形態１、形態３、形態４、および非晶質ベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つ、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む。非晶質ベンダムスチン塩酸塩の形態４、および少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物がより好ましい。
【００４１】
薬学的に許容される賦形剤は、当該技術分野で公知であり、たとえばその内容全体が本明細書中に援用される米国特許出願第１１／２６７，０１０号明細書中に記載されるものを含む。これらの医薬組成物は、液体溶液または懸濁液、ならびに固体形態、たとえば、カプセル、タブレット、ロゼンジ、トローチ、粉末、懸濁剤などのいずれかとしての注射可能物として調製することが可能である。
【００４２】
好ましい実施形態では、医薬組成物は、昇華され、好ましくは凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）または凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）組成物である。形態１、形態２、形態３、形態４、またはこれらの混合物を含有するベンダムスチン塩酸塩の、かかる昇華され、好ましくは凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）または凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）調製物を調製する方法はまた、本発明の範囲内に含まれる。形態１、形態３、形態４、非晶質ベンダムスチン塩酸塩、またはこれらの混合物を含有するベンダムスチン塩酸塩の、かかる昇華され、好ましくは凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）または凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）調製物を調製する方法はまた、本発明の範囲内に含まれる。形態２をさらに含有するベンダムスチン塩酸塩の、かかる昇華され、好ましくは凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）または凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）調製物を調製する方法はまた、本発明の範囲内に含まれる。
【００４３】
凍結乾燥は、水の化合物への添加、その後の得られる懸濁液または溶液の凍結、および化合物からの水の昇華を含む。好ましい実施形態では、少なくとも１つの有機溶媒が懸濁液／溶液にさらに加えられる。他の好ましい実施形態では、懸濁液／溶液は、凍結乾燥賦形剤をさらに含む。本発明のベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥調製物は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩をさらに含みうる。
【００４４】
典型的な凍結乾燥手順では、水、薬学的に許容される凍結乾燥賦形剤、有機溶媒、および化合物が結合され、溶液が形成され、次いでそれは好ましくは無菌濾過方法を用いて滅菌される。次いで、この溶液は、標準の凍結乾燥機器および技術を用いて凍結乾燥される。
【００４５】
本発明の好ましい実施形態がベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥を含む一方、他の昇華技術もまた利用可能であることが想定される。たとえば、ベンダムスチン塩酸塩の記載される形態の１つ以上が溶媒中に溶解、分散または懸濁され、得られる混合物（溶液、分散液または懸濁液である）が凍結され、溶媒が昇華によって除去されうる。
【００４６】
凍結乾燥賦形剤は、凍結乾燥プロセスの間に使用される場合、改善された特性、たとえば、改善された処理特性、溶解度特性などを有する凍結乾燥産物をもたらす任意の薬学的に許容される賦形剤でありうる。凍結乾燥賦形剤は、たとえば、膨張性薬剤であってもよく、好適な膨張性薬剤は当該技術分野で公知である。好適な凍結乾燥賦形剤の例として、たとえば、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、グリシン、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、グリセリン、デキストロース、デキストラン、トレハロース、ヘタスターチ、またはこれらの混合物があげられる。凍結乾燥賦形剤はまた、薬学的に許容される抗酸化剤、たとえば、アスコルビン酸、アセチルシステイン、システイン、亜硫酸水素ナトリウム、ブチル−ヒドロキシアニソール、ブチル−ヒドロキシトルエン、またはα−酢酸トコフェロールなどを含みうる。好ましい凍結乾燥賦形剤は、マンニトールである。
【００４７】
本発明での使用が意図される溶媒は、ベンダムスチンを著しく分解することなくベンダムスチン塩酸塩を有する安定な溶液を形成し、かつ凍結乾燥を通じて蒸発／昇華可能な水および有機溶媒を含む。好適な有機溶媒の例として、たとえば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、またはこれらの混合物があげられる。好ましい有機溶媒は、ｔｅｒｔ−ブタノールである。
【００４８】
本発明の一実施形態は、ベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つの結晶形態を含む凍結乾燥組成物を調製する方法である。好ましくは、ベンダムスチン塩酸塩の結晶形態は、ベンダムスチン塩酸塩の形態１、ベンダムスチン塩酸塩の形態２、ベンダムスチン塩酸塩の形態３、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、またはこれらの混合物である。本発明の他の実施形態では、凍結乾燥組成物は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩をさらに含む。本発明のより好ましい方法は、ベンダムスチン形態４と非晶質ベンダムスチン塩酸塩の混合物を含む凍結乾燥組成物を生成する。
【００４９】
ベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つの結晶形態を含む凍結乾燥組成物を調製する好ましい方法は、ベンダムスチン塩酸塩を少なくとも１つの溶媒と結合させ、溶液を形成し、次いで溶液を凍結乾燥化する工程を含む。一部の実施形態では、溶液は、少なくとも１つの凍結乾燥賦形剤をさらに含む。好ましい凍結乾燥賦形剤は、たとえば、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、グリシン、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、グリセリン、デキストロース、デキストラン、トレハロース、ヘタスターチ、またはこれらの混合物を含む。より好ましくは、薬学的に許容される賦形剤は、マンニトールである。一部の実施形態では、溶媒は、水、有機溶媒、またはこれらの混合物である。好ましくは、有機溶媒は、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、またはこれらの混合物である。より好ましくは、有機溶媒は、ｔｅｒｔ−ブタノールである。特定の実施形態では、溶媒は、水と有機溶媒の混合物、たとえば約１：１〜約３：１（ｖ／ｖ）、好ましくは約７：３（ｖ／ｖ）の水と有機溶媒の比を有する混合物である。
【００５０】
本明細書中に記載の方法のいずれかに従って生成される凍結乾燥組成物はまた、本発明の範囲内に含まれる。本明細書中に記載の凍結乾燥手順に従って調製され、非晶質ベンダムスチン塩酸塩、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、およびマンニトールを含む１つのかかる組成物のＸ線粉末回折が図１４に示される。この回折に対応するＸＰＲＤデータは、下記に示される。
【００５１】
【表６】
0005536753.tif 000009
【００５２】
また、本発明の範囲内に、たとえば、慢性リンパ性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、または乳癌などの疾患を本発明の医薬組成物で治療する方法が含まれる。好ましくは、本発明の固体形態を使用し、慢性リンパ性白血病が治療される。また、本発明の固体形態を使用し、無痛性Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫、特に、たとえばリツキシマブまたはリツキシマブを含有するレジメンでの治療の間または６か月以内に進行している無痛性Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫を治療する方法が好ましい。特定の実施形態では、本方法は、本発明の医薬組成物を患者に直接的に治療有効量で投与する工程を含む（たとえば、医薬組成物が錠剤またはカプセルである場合）。他の実施形態では、本方法は、本発明の医薬組成物を、たとえば組成物を投与前に水または別の溶媒に溶解させることにより、投与前に修飾する工程を含む。これらの実施形態では、本方法は、患者に、本発明の医薬組成物から調製される調製物を治療有効量で投与する工程を含む。好ましくは、調製物は、注射可能調製である。注射可能調製物は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、滑液嚢内、胸骨内（ｉｎｔｒａｓｔｅｒｎａｌｌｙ）、くも膜下（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌｌｙ）、病巣内（ｉｎｔｒａｌｅｓｉｏｎａｌｌｙ）、頭蓋内に、または注入を介して投与してもよい。本発明の組成物および注射可能調製物を使用する治療に適した他の症状は、小細胞肺癌、過増殖性疾患、および自己免疫病、たとえば関節リウマチ、多発性硬化症、およびループスを含む。
【００５３】
好ましくは、投与される用量は、静脈内に投与される約１００ｍｇ／ｍ２もしくは約１２０ｍｇ／ｍ２である。静脈内に投与される約２５ｍｇ／ｍ２、６０ｍｇ／ｍ２、５０ｍｇ／ｍ２および９０ｍｇ／ｍ２の用量はまた、本発明の範囲内に含まれる。好ましくは、用量は、約３０分間もしくは約６０分間かけて静脈内に投与される。また、用量が２８日周期で１日目および２日名に投与される投与の方法が好ましい。一部の実施形態では、用量は、１〜６または１〜８周期で投与される。
【００５４】
本明細書中に記載の注射可能調製物は、たとえば当該技術分野で公知の技術に従って調合される無菌の注射可能水性または油性の懸濁液または溶液としての無菌注射可能調製物の形態である。典型的には、形態１、形態２、形態３、形態４、または非晶質ベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つ、好ましくは形態１、形態３、形態４、または非晶質ベンダムスチン塩酸塩の少なくとも１つを含有する本発明の医薬組成物は、凍結乾燥粉末として調合され、それはたとえば、５０ｍＬもしくは２０ｍＬのバイアルあたり１００ｍｇの薬剤を有するバイアル内に提供することが可能である。注射可能調製物は、凍結乾燥（ｆｒｅｅｚｅ−ｄｒｉｅｄ）または凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）組成物を無菌注射用水で再構成し、次いで薬学的に許容される静脈内溶液、たとえば、０．９％塩化ナトリウム、水中５％デキストロース（Ｄ５Ｗ）、乳酸リンガー溶液、または０．４５％塩化ナトリウム／２．５％デキストロースなどでさらに希釈することによって調製することが可能である。
【００５５】
好ましくは、本明細書中に記載のベンダムスチン塩酸塩の医薬組成物は、たとえば滅菌水で、注射可能調製物中で、約２０分未満で再構成される。より好ましくは、再構成は、約１０分未満、最も好ましくは約５分で生じる。
【００５６】
典型的な再構成プロセスであれば、好ましくは無菌で、１００ｍｇのベンダムスチン塩酸塩を２０ｍＬの無菌注射用水で再構成することを含むことになる。これは５ｍｇ／ｍＬのベンダムスチン塩酸塩濃度を有する澄んだ無色から淡黄色の溶液をもたらす。凍結乾燥ベンダムスチン塩酸塩が再構成されている場合、ベンダムスチン塩酸塩は約５分以内に完全に溶解する必要がある。（５ｍｇ／ｍＬの濃度に基づく）必要用量に対して必要とされる容量は、無菌で回収し、注入用の０．９％塩化ナトリウム（または他の薬学的に許容される静脈内溶液）の５００ｍＬの注入バッグに移してもよい。好ましくは、再構成された溶液は、再構成の３０分以内に注入バッグに移される。移した後、注入バッグの内容物は、徹底的に混合される。静脈内注入による投与は、典型的には約３０分間〜約６０分間にわたって提供される。
【００５７】
本発明の医薬組成物が１つ以上の抗新生物剤（ａｎｔｉ−ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）と併せて投与可能であり、ここで抗新生物剤は、本発明の組成物の投与に対して前、同時、または後に投与されることが想定される。薬学的に許容される抗新生物剤は、当該技術分野で公知である。好ましい抗新生物剤は、その全体は参照により本明細書中に援用される、２００６年１月１２日に出願された同時係属中の米国特許出願第１１／３３０，８６８号明細書中に開示されるものである。
【００５８】
ベンダムスチンの治療有効量は、従来の技術の使用により、担当診断医によって容易に決定することが可能である。有効用量は、疾患または障害の進行のタイプおよび範囲、特定の患者の全体健康、ベンダムスチンの生物学的有効性、ベンダムスチンの調合、ならびにベンダムスチンの複数の形態の投与の経路を含む複数の要素に依存して変化しうる。ベンダムスチンはまた、所望される効果が得られるまで、漸増するより低い用量レベルで投与することが可能である。
【００５９】
用語
用語「抗溶媒」は、本明細書で使用される場合、化合物が実質的に不可溶性である溶媒を意味する。
【００６０】
用語「結晶」は、本明細書で使用される場合、分子の規則的に繰り返す配置または外面（ｅｘｔｅｒｎａｌ  ｆａｃｅ  ｐｌａｎｅｓ）を有することを意味する。
【００６１】
用語「結晶組成物」は、本明細書で使用される場合、Ｘ線粉末回折によって分析される場合、ピークの特徴的パターンを提供する固体化合物または化合物の混合物を示し、これは、限定はされないが、多形体、溶媒和物、水和物、共結晶、および脱溶媒和された溶媒和物を含む。
【００６２】
用語「単離する」は、本明細書で使用される場合、溶媒、抗溶媒、または溶媒と抗溶媒の混合物から化合物を分離し、固体、半固体またはシロップを提供することを意味する。これは、典型的には、遠心分離、真空を伴う場合または伴わない場合での濾過、陽圧下での濾過、蒸留、蒸発あるいはこれらの組み合わせなどの手段によって行われる。単離は、精製（その間に、単離物の化学的純度、キラルまたは化学的純度およびキラル純度が増大する）を伴うかまたは伴わない場合もある。精製は、典型的には、結晶化、蒸留、抽出、酸性、塩基性もしくは中性アルミナを通す濾過、酸性、塩基性もしくは中性炭を通す濾過、キラル定常期が詰め込まれたカラムでのカラムクロマトグラフィー、多孔質紙、プラスチックもしくはグラスバリアを通す濾過、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、再結晶化、順相高性能液体クロマトグラフィー、逆相高性能液体クロマトグラフィー、粉砕などの手段によって行われる。
【００６３】
用語「薬学的に許容される賦形剤」は、本明細書で使用される場合、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張性および吸収遅延剤などを含む。医薬活性物質におけるかかる媒体および作用剤の使用は、当該技術分野で周知であり、たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：「Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版；Ｇｅｎｎａｒｏ  Ａ．Ｒ．編；Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  &  Ｗｉｌｋｉｎｓ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ）、２０００年があげられる。任意の従来の媒体または作用剤が活性成分に適合しないような場合を除き、治療組成物におけるその使用が考えられる。補助活性成分もまた、組成物中に組み込んでもよい。
【００６４】
用語「溶液」は、本明細書で使用される場合、少なくとも１つの溶媒および溶媒中に少なくとも部分的に溶解された少なくとも１つの化合物を含有する混合物を示す。
【００６５】
用語「溶媒和物」は、本明細書で使用される場合、本明細書で定義される溶質および有機溶媒によって形成される可変化学量論の結晶組成物を意味する。
【００６６】
用語「溶媒」は、本明細書で使用される場合、別の物質、典型的には固体を完全または部分的に溶解させる能力がある物質、典型的には液体を意味する。本発明の実施のための溶媒は、限定はされないが、水、酢酸、アセトン、アセトニトリル、ベンゼン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロメタン、ジメチルスルホキシド、１，４−ジオキサン、エタノール、酢酸エチル、ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ホルムアミド、ギ酸、ヘプタン、ヘキサン、イソプロパノール、メタノール、メチルエチルケトン（ブタノン）、１メチル−２−ピロリジノン、メシチレン、ニトロメタン、ポリエチレングリコール、プロパノール、２−プロパノン、プロピオニトリル、ピリジン、テトラヒドロフラン、トルエン、キシレン、これらの混合物などを含む。
【００６７】
用語「昇華」は、本明細書で使用される場合、中間の液体段階を伴わない固相から気相への転移を示す。
【００６８】
用語「実質的に含まない」は、ベンダムスチン塩酸塩の特定の形態を含有する組成物に関して本明細書で使用される場合、化合物の他の形態を「実質的に含まない」一方、列挙される形態が、ベンダムスチン塩酸塩の他の列挙される形態の１０％未満、好ましくは５％未満、特に２％未満および最も好ましくは１％未満に関連することを意味する。
【００６９】
用語「治療有効量」は、本明細書で使用される場合、確立された薬物動態学的方法および技術に従って測定される場合、所与の投与経路での所与の薬剤に関連した、意図される生理的効果をもたらすのに必要とされる、決定される量を示す。適切な特定の治療有効量は、従来の技術の使用により、当業者としての担当診断医によって容易に決定されうる。有効用量は、疾患または障害の進行のタイプおよび範囲、特定の患者の全体健康状態、選択される化合物の相対的な生物学的有効性、活性物質と適切な賦形剤との調合、および投与の経路を含む複数の要素に応じて変化することになる。
【００７０】
計装
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
ベンダムスチン塩酸塩の新規の結晶形態は、特定の結晶形態のフィンガープリント（ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔ）を生成するＸＲＰＤによって特徴づけられている。２θ値の測定値は、典型的には±０．２°以内の精度である。
【００７１】
Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ／Ｄｉｅｍｅｎｓ  Ｄ５０００
Ｘ線粉末回折パターンは、ＣｕＫα放射（４０ｋＶ、４０ｍＡ）、θ−θゴニオメーター、自動発散および受光スリット、グラファイト二次モノクロメーターおよびシンチレーション計数管を使用し、Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｄ５０００回折計で収集された。機器は、認証されたコランダム標準（ＮＩＳＴ１９７６）を使用して性能検査される。
【００７２】
周囲条件
周囲条件下で実行される試料は、平板標本として調製された。約３５ｍｇの試料は、研磨されたバックグラウンド０（５１０）のシリコンウエーハ内に切断された空洞に緩やかに詰め込まれ、Ｍｙｌａｒカバーが試料上に設けられた。分析の間、試料はそれ自体の面で回転された。
【００７３】
Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ
Ｘ線粉末回折パターンは、ＣｕＫα放射（４０ｋＶ、４０ｍＡ）、自動化ＸＹＺステージ、オートサンプルポジショニング（ａｕｔｏｓａｍｐｌｅ  ｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇ）用レーザービデオ顕微鏡およびＨｉＳｔａｒ二次元領域検出器を使用し、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ回折計で収集された。Ｘ線光学は、０．３ｍｍのピンホールコリメータと連携した単一のＧｏｅｂｅｌ多層ミラーからなる。
【００７４】
ビーム発散、すなわち試料に対するＸ線ビームの有効なサイズは、約５ｍｍであった。θ−θ連続走査モードは、３．２°〜２９．７°の有効な２θ範囲を与える２０ｃｍの試料−検出器距離の場合に用いられる。典型的にいえば、試料はＸ線ビームに１２０秒間暴露されることになる。
【００７５】
周囲条件
周囲条件下で実行される試料は、粉砕されていない粉末を使用し、平板標本として調製された。約１〜２ｍｇの試料は、スライドグラス上に軽く押し付けられ、平面が得られた。
【００７６】
非周囲条件
非周囲条件下で実行される試料は、熱伝導性化合物とともにシリコンウエーハ上に載せられた。次いで、試料は、約２０℃／分で適切な温度に加熱され、次いでデータ収集が開始される前に約１分間、等温的に保持された。
【００７７】
単一の結晶Ｘ線回折（ＳＣＸＲＤ）
選択された結晶は、パラトーン（ｐａｒａｔｏｎｅ）油でコーティングされ、Ｂｒｕｋｅｒ  ＳＭＡＲＴ  ＣＣＤ回折計で急速冷凍された。データは、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｃｒｙｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ｃｒｙｏｓｔｒｅａｍ冷却装置を備えたＢｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  １Ｋ  ＳＭＡＲＴ  ＣＣＤ回折計で収集された。構造は、ＳＨＥＬＸＳまたはＳＨＥＬＸＤプログラムのいずれかを使用して解明され、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  ＳＨＥＬＸＴＬ一式の一部としてのＳＨＥＬＸＬプログラムを用いて精密化された。特に指定のない限り、炭素に結合される水素原子は、幾何学的に配置され、ライディング（ｒｉｄｉｎｇ）等方性変位パラメータを用いて精密化可能であった。ヘテロ原子に結合される水素原子は、差フーリエ合成で位置づけられ、等方性変位パラメータで自由に精密化可能であった。
【００７８】
１Ｈ  ＮＭＲ
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、オートサンプラーを備えたＢｒｕｋｅｒ製４００ＭＨｚ用機器で収集され、ＤＲＸ４００コンソールによって制御された。自動化実験が、標準のＢｒｕｋｅｒに負荷される実験値を使用し、Ｔｏｐｓｐｉｎ  ｖ１．３（パッチレベル６）で作動するＩＣＯＮ−ＮＭＲ  ｖ４．０．４（ビルド１）を使用して得られた。非ルーチンの分光においては、データは、Ｔｏｐｓｐｉｎの単独使用を通じて得られた。特に指定のない限り、試料はｄ６−ＤＭＳＯで調製された。オフライン分析は、ＡＣＤ  ＳｐｅｃＭａｎａｇｅｒ  ｖ９．０９（ビルド７７０３）を使用して実施された。
【００７９】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
ＤＳＣデータは、５０位置のオートサンプラーを備えたＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ１０００で収集された。機器は、認証されたインジウムを使用し、エネルギーおよび温度較正のために較正された。典型的には、０．５〜２ｍｇの各試料は、ピンホールが設けられた（ｐｉｎ−ｈｏｌｅｄ）密封アルミニウムパンで、２５℃から２００℃へ１０℃／分で加熱された。５０ｍｌ／分での窒素パージが試料上で維持された。機器制御ソフトウェアはＴｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ｖ４．６．６であり、データは、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｖ４．３Ａを使用して分析された。
【００８０】
熱重量分析（ＴＧＡ）
ＴＧＡデータは、１６位置のオートサンプラーを備えたＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ５００  ＴＧＡで収集された。機器は、認証されたアルメル（Ａｌｕｍｅｌ）を使用し、温度較正された。典型的には、１〜２ｍｇの各試料は、予め風袋を量った（ｐｒｅ−ｔａｒｅｄ）白金るつぼ上のピンホールが設けられた密封アルミニウムＤＳＣパンに負荷され、周囲温度から２００℃へ１０℃／分で加熱された。６０ｍｌ／分での窒素パージが試料上で維持された。機器制御ソフトウェアはＴｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ｖ４．６．６であり、データは、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｖ４．３Ａを使用して分析された。
【００８１】
純度分析
純度分析は、ダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ１１００シリーズシステム上でＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎソフトウェアｖＢ．０２．０１−ＳＲ１を使用して実施された。
【００８２】
【表７】
0005536753.tif 000010
【００８３】
ＨＰＬＣによる熱力学的水溶解度
水溶解度は、十分な化合物を０．２５ｍｌの水中に懸濁することによって測定され、最大最終濃度≧１０ｍｇ／ｍｌの化合物の親遊離形態（ｐａｒｅｎｔ  ｆｒｅｅ−ｆｏｒｍ）がもたらされた。懸濁液は、２５℃で２４時間（特に指定のない限り）平衡化され、その後、ｐＨが測定された。次いで、懸濁液は、グラスファイバのＣフィルタを通して濾過され、９６ウェルプレートに入れられた。次いで、濾過液は１００倍に希釈された。定量は、ＤＭＳＯ中、約０．１ｍｇ／ｍｌの標準溶液に関連したＨＰＬＣによって行われた。さまざまな容量の標準の希釈および不希釈の試料溶液が注入された。溶解度は、標準注入における主なピークの場合と同じ保持時間で見出されるピークの取り込みによって判定されるピーク面積を用いて計算された。
【００８４】
【表８】
0005536753.tif 000011
【００８５】
重量測定による蒸気収着（ＧＶＳ）
収着等温線が、ＣＦＲＳｏｒｐソフトウェアによって制御されるＨｉｄｅｎ  ＩＧＡＳｏｒｐ水分収着分析計を使用して得られた。試料温度は、Ｈｕｂｅｒ再循環水槽によって２５℃で維持された。水分は、乾燥窒素流と湿った窒素流を２５０ｍｌ／分の全流速で混合することによって制御された。相対湿度は、試料付近に位置する較正されたＶａｉｓａｌａ  ＲＨプローブ（０〜９５％ＲＨの動的範囲）によって測定された。％ＲＨの関数としての試料の重量変化（質量緩和）は、微量天秤（精度±０．００１ｍｇ）によって常時モニタリングされた。典型的には、１〜３ｍｇの試料は、周囲条件下で風袋を量った（ｔａｒｅｄ）メッシュステンレス鋼バスケット内に入れられた。試料は、４０％ＲＨおよび２５℃（典型的な室内条件）で負荷および無負荷にされた。水分収着等温線は、下記の概要に従って作成された（２回の走査で１つの全サイクルが得られる）。標準等温線は、２５℃、１０％ＲＨの間隔で０〜９０％ＲＨ範囲にわたって作成された。
【００８６】
【表９】
0005536753.tif 000012
【００８７】
ソフトウェアでは、質量緩和のモデルを伴う最小自乗最小化手法が使用され、漸近値が予測される。測定される質量緩和値は、次の％ＲＨ値が選択される前にソフトウェアによって予測される５％以内でなければならない。最小平衡化時間は１時間に、また最大平衡化時間は４時間に設定された。
【００８８】
ｐＫａの測定および予測
データは、Ｄ−ＰＡＳを備えたＳｉｒｉｕｓ  ＧｌｐＫａ機器で収集された。測定は、ＵＶにより、水溶液中、２５℃でなされた。化合物は、最初に５ｍｇ／ｍｌでＤＭＳＯに溶解され、ここで５０μｌ（０．２５ｍｇ）がｐＨ１．３〜９．０の滴定のために使用された。滴定媒体は、０．１５Ｍ  ＫＣｌ（水性）で、イオン強度調整（ＩＳＡ）がなされた。データは、Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  Ｐｒｏソフトウェアｖ１．０を使用して精密化された。ｐＫａ値の予測は、ＡＣＤ  ｐＫａ予測ソフトウェアｖ９を使用してなされた。
【００８９】
ＬｏｇＰの判定
データは、オクタノール：イオン強度調整（ＩＳＡ）水の３つの比を用い、Ｓｉｒｉｕｓ  ＧｌｐＫａ機器での電位差滴定によって収集され、ＬｏｇＰ、Ｌｏｇ  Ｐｉｏｎ、およびＬｏｇＤ値が得られた。データは、Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  Ｐｒｏソフトウェアｖ１．０を使用して精密化された。ＡＣＤ  ｖ９およびＳｙｒａｃｕｓｅ  ＫＯＷＷＩＮ  ｖ１．６７ソフトウェアを使用し、ＬｏｇＰ値の予測がなされた。
【００９０】
ベンダムスチン塩酸塩（粗）の調製
工程１：４−｛５−［ビス−（２−ヒドロキシ−エチル）−アミノ］−１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−ｙｌ｝−酪酸エチルエステル（２７．０ｋｇ）が２７０ｋｇのクロロホルムに溶解された。０〜５℃に冷却後、１９．２ｋｇの塩化チオニルが約１時間かけて加えられた。混合物は、２５℃±５℃に温められ、２０〜２４時間撹拌された。次いで、７５．６ｋｇの塩酸（３２％水溶液）が加えられた。相分離後、有機（下方）相が除去された。生成物は水相中で保持された。
【００９１】
工程２：塩酸中の活性炭の懸濁液が、工程１で得られた水相に加えられた。混合物は、８５〜９０℃に１時間かけて加熱され、還流下で４〜５時間撹拌された。次いで、懸濁液は濾過され、水性塩酸ですすがれた。溶媒は、減圧下、６５℃以下の温度で蒸留除去された。１０８ｋｇ〜３２４ｋｇ（１０８ｋｇが好ましい）の温かい（３５〜４５℃）脱イオン水が加えられ、結晶化が誘導された。
【００９２】
結晶化後、混合物は、２０℃±５℃に冷却され、さらに１〜２時間または一晩撹拌された。生成物は、フィルタドライヤでの濾過によって回収され、１０８〜３２４ｋｇ（１０８ｋｇが好ましい）の脱イオン水および１０８〜２１６ｋｇ（１０８ｋｇが好ましい）の冷却アセトンで、それぞれ３回に分けて洗浄された。粗生成物は、フィルタドライヤにおいて、少なくとも１時間の還流下で、５４〜１０８ｋｇ（５４ｋｇが好ましい）のアセトンで４回ずつ処理された。懸濁液は濾過され、生成物は、減圧下、４０℃以下の温度で乾燥され、２１．４ｋｇ±２．１ｋｇのベンダムスチン塩酸塩（粗）が得られた（７０％±１０％、乾燥物質として計算）。
【００９３】
工程３（オプション）：工程２から得られた生成物は、塩酸（３２％水溶液）に溶解され、加熱され、少なくとも４時間還流された（８５〜９０℃）。色を改善するため、活性炭が塩酸に加えられ、混合物は加熱され、少なくとも４時間還流されうる（８５〜９０℃）。活性炭とともに、懸濁液は濾過され、水性塩酸ですすがれた。溶媒は、減圧下、６５℃以下の温度で蒸留除去された。次いで、混合物は脱イオン水で希釈された。１５分以内に結晶化が全く生じなかった場合、混合物は播種された。結晶化後、懸濁液は４０℃±５℃で１時間撹拌され、次いで２０℃±５℃に冷却された。２０℃±５℃でさらに１〜２時間攪拌後、生成物は、濾過によって収集され、冷却脱イオン水で３回および冷却アセトンで少なくとも３回洗浄された。粗生成物は、少なくとも１時間の還流下で、アセトンで４回処理された。懸濁液は濾過され、生成物は、減圧下、４０℃以下の温度で乾燥された。ベンダムスチン塩酸塩（粗）の収率は８０％±１０％であった。
【００９４】
精製ベンダムスチン塩酸塩の調製
ベンダムスチンＨＣｌ（粗）（１５．０ｋｇ）は、室温で、エタノール／水（ｖｏｌ／ｖｏｌ＝９７／３）中の０．４５ｋｇの活性炭で懸濁された。混合物は、７５〜８０℃まで迅速に温められ、還流条件下において１０分以下で撹拌された。混合物は濾過され、活性炭が除去された。濾過後、３３．０ｋｇの濾過されたアセトンは、４０〜５０℃で迅速に加えられ、結晶化が誘導された。
【００９５】
結晶化後、混合物は、４０〜５０℃で３０〜６０分間撹拌され、次いで０〜５℃に冷却され、少なくともさらに３０分間または一晩撹拌された。精製物は、濾過によって収集され、４５ｋｇの冷却アセトンで３回洗浄された。その後、粗生成物は、少なくとも１時間の還流下で、３０ｋｇのアセトンで４回ずつ処理された。懸濁液は濾過され、生成物は減圧下、４０℃以下の温度で乾燥され、１１．３±１．５ｋｇのベンダムスチン塩酸塩が得られた（７５％±１０％）。
【００９６】
ベンダムスチン塩酸塩のバルク溶液（１Ｌ）の調製
無菌条件下で、注射用水（「ＷＦＩ」、全バッチサイズの約６５％）は、ミキサーを備えたステンレス鋼の複合容器に移された。複合タンク内でのＷＦＩの温度が、１５〜２５℃に調節された。マンニトール（２５．５ｇ）が複合容器に加えられ、最低５分間混合される間、溶液温度が１５〜２５℃で維持された。三級ブチルアルコール（「ＴＢＡ」、２３４．２ｇ）が複合容器に加えられた。溶液は、１５〜２５℃で最低５分間混合された。精製ベンダムスチンＨＣｌ（１５．０ｇ）が複合容器に加えられ、最低１０分間混合される間、溶液温度が１５〜２５℃で維持された。バッチを１Ｌにするのに十分な注射用水ＵＳＰが加えられ、最低１０分間混合された。バルク溶液は、１〜２バールの窒素を使用し、０．２２μｍのフィルタを通す濾過によって滅菌された。
【００９７】
ベンダムスチン塩酸塩の濾過されたバルク溶液の凍結乾燥
工程１：調合した無菌濾過ベンダムスチンＨＣｌのバルク溶液は、完全自動化された充填／ストッパリング装置によって充填された。バイアルは、続いてストッパリングステーションに移され、そこでは、予め滅菌されたストッパーで部分的にストッパリングがなされた。ベンダムスチンＨＣｌ製剤は、２０ｃｃ  タイプＩのホウケイ酸塩のチュービンググラス・アンバーバイアル（ｔｕｂｉｎｇ  ｇｌａｓｓ  ａｍｂｅｒ  ｖｉａｌ）内に、約６．４７ｇ（６．６７ｍＬ）まで充填された。充填され、部分的にストッパリングがなされたバイアルは、凍結乾燥領域内に位置する凍結乾燥機に移された。
【００９８】
工程２：工程１からの、充填され、部分的にストッパリングがなされたバイアルは、生成物充填トレイ（ｐｒｏｄｕｃｔ−ｆｉｌｌｅｄ  ｔｒａｙ）で装填することが可能な８つの棚（ｓｈｅｌｖｅ）を備えた凍結乾燥機に移される。充填され、部分的にストッパリングがなされた製剤バイアルは凍結乾燥された。ベンダムスチンＨＣｌ製剤の凍結乾燥の間に用いられる凍結乾燥サイクルの概要は、下記の表１に提供される。
【００９９】
【表１０】
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【０１００】
凍結乾燥サイクルの最後に、チャンバ圧は、無菌濾過窒素で約０．６バールに昇圧された。バイアルは、油圧作動的に、無菌濾過窒素雰囲気下で棚をストッパリング位置に調節することにより、ストッパリングがなされた。バイアルのストッパリング後、棚は上昇され、チャンバは、未装填においては、無菌濾過空気が充填され（ｂａｃｋｆｉｌｌｅｄ）、大気圧にされた。この方法により、約１００ｍｇのベンダムスチンＨＣｌ／バイアルがもたらされる。
【０１０１】
ベンダムスチン塩酸塩の溶液の調製
５０ｍｇのベンダムスチン塩酸塩の形態１は、スクリュートップバイアル内で秤量された。溶媒が、透明溶液が得られるまで一定分量で加えられた（さらに５０℃まで加熱）。観察結果が表２に記録されている。
【０１０２】
【表１１】
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【０１０３】
成熟実験
約１０ｍｇの形態１のベンダムスチン塩酸塩は、表３にあげられる溶媒中でスラリー化された。スラリーは、５０℃および周囲温度で、交互に４時間で、４８時間振とうされた。次いで、任意の固体材料が、濾過によって単離され、ＸＲＰＤによって分析された。溶液は蒸発させておいた。結果は、下記の表３に示される。
【０１０４】
【表１２】
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【０１０５】
急速蒸発によるベンダムスチンの結晶化
ベンダムスチン塩酸塩をエタノール、酢酸、メタノール、ホルムアミド、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、およびＤＭＡに入れた溶液を、キャップなしバイアルの溶液を蒸発させ、乾燥させておくことにより、周囲条件下で蒸発させておいた（本明細書中で「急速蒸発」と称される）。得られた固体は、ＸＲＰＤによって分析された。結果は表４に示される。
【０１０６】
【表１３】
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【０１０７】
遅延蒸発（Ｓｌｏｗ  ｅｖａｐｏｒａｔｉｏｎ）によるベンダムスチンの結晶化
ベンダムスチン塩酸塩をエタノール、酢酸、メタノール、ホルムアミド、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、およびＤＭＡに入れた溶液を、周囲条件下でキャップ付きバイアル（バイアルキャップはピンホールを有する）の溶液を蒸発させ、乾燥させておくことにより、周囲条件下で蒸発させておいた。蒸発の速度は、小穴を有する気密性フィルムカバーの使用によって制限された。得られた固体は、ＸＲＰＤによって分析された。結果は表５に示される。
【０１０８】
【表１４】
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【０１０９】
抗溶媒による結晶化
トルエンは、ベンダムスチン塩酸塩をエタノール、酢酸、メタノール、ホルムアミド、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、およびＤＭＡに入れた溶液に対する抗溶媒として加えられ、結晶化が促進された。加えられるトルエンの容量および抗溶媒の添加に対する観察結果は、表６に記録されている。固体は濾過によって単離された。得られた固体は、ＸＲＰＤによって分析された。結果は表６に示される。
【０１１０】
【表１５】
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【０１１１】
ベンダムスチン塩酸塩の形態１からの形態２の調製
１ｍＬの水が３０ｍｇのベンダムスチン塩酸塩の形態１に加えられ、混合物は２５℃に温められ、透明溶液が得られた。約４分後、形態２が白色固体として溶液から沈殿した。固体は、濾過によって回収された。
【０１１２】
ベンダムスチン塩酸塩の形態１および２の安定性
１０ｍｇのベンダムスチン塩酸塩の形態１（Ａ）、ベンダムスチン塩酸塩の形態２（Ｂ）、および形態１および２の１：１混合物（Ｃ）が、表７にあげられる条件下で保存された。試料は、１日目、２週目、および６週目時点で、ＸＲＰＤによって分析された。結果は、表７Ａに示される。高湿度条件（約９０％ＲＨ）下で、ベンダムスチン塩酸塩の形態１の形態２への変換が認められた。この変換の速度は、温度とともに増加するようにみられる。形態１および２の純度は、４℃／８７％ＲＨ（５）および６０℃／７５％ＲＨ（１３）での６週間の保存後測定された。純度の低下は大して認められなかった。
【０１１３】
【表１６】
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【０１１４】
【表１７】
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【０１１５】
ベンダムスチン塩酸塩の光安定性
ベンダムスチン塩酸塩の形態１および形態２の試料は、Ｓｕｎｔｅｓｔ  Ｌｉｇｈｔ  Ｂｏｘ内で、２５℃に設定された黒体温度、２５０ワット／ｍ２の光強度で１週間ストレスが加えられた。保護用にホイルで包まれた各試料のブランクもまた、実験において含められた。実験後、試料はＸＲＰＤによって分析され、純度はＨＰＬＣによって測定された。結晶化度と純度の双方における有意な低下が、光ストレス試験の間、形態２において認められた。それに対し、形態１は、純度におけるわずかな低下を示しただけであった。表８を参照のこと。
【０１１６】
【表１８】
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【０１１７】
特定の実施形態では、本発明は、ベンダムスチン塩酸塩の形態１、ベンダムスチン塩酸塩の形態２、ベンダムスチン塩酸塩の形態３、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、またはこれらの混合物を含む医薬組成物を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態１である医薬組成物を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態２である医薬組成物を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態３である医薬組成物を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態４である医薬組成物を対象とする。本発明はまた、非晶質ベンダムスチン塩酸塩をさらに含む医薬組成物を対象とする。
【０１１８】
本発明の他の実施形態は、ベンダムスチン塩酸塩の形態１、ベンダムスチン塩酸塩の形態２、ベンダムスチン塩酸塩の形態３、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、またはこれらの混合物であるベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態１である結晶形態を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態２である結晶形態を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態３である結晶形態を対象とする。本発明はまた、ベンダムスチン塩酸塩がベンダムスチン塩酸塩の形態４である結晶形態を対象とする。
【０１１９】
本発明の他の実施形態は、次の反射：２５．１２、２４．８５、２２．９２、２１．９７、および／または１４．０５±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、次の反射：１６．８２、１７．５１、１８．４５、２４．８５、および／または２８．３３±０．２度２θの１つ以上をさらに含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、実質的に図２に示されるＸ線粉末回折パターンを有するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、本明細書中に示されるベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を含む医薬組成物を対象とする。
【０１２０】
本発明の他の実施形態は、次の反射：１０．６４、２０．１２、２０．４５、および／または２３．１１±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、次の反射：１０．１７、１５．０６、１８．８２、２０．９５、２５．２０、２６．５４、および／または２９．０５±０．２度２θの１つ以上をさらに含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、実質的に図６に示されるＸ線粉末回折パターンを有するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、本明細書中に示されるベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を含む医薬組成物を対象とする。
【０１２１】
本発明の他の実施形態は、次の反射：２６．０８、２７．８５、および／または２８．１１±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、次の反射：１０．５８、１５．５５、および／または１９．７５±０．２度２θの１つ以上をさらに含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、実質的に図１０に示されるＸ線粉末回折パターンを有するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、本明細書中に示されるベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を含む医薬組成物を対象とする。
【０１２２】
本発明の他の実施形態は、次の反射：１０．８３、１５．５２、２０．４５、および／または２３．５８±０．２度２θの１つ以上を含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、次の反射：１０．２７、１９．６４、２０．７３、２１．２３、２５．８１および／または２７．６３±０．２度２θの１つ以上をさらに含むＸ線粉末回折パターンを生成するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、実質的に図１１に示されるＸ線粉末回折パターンを有するベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を対象とする。本発明はまた、本明細書中に示されるベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を含む医薬組成物を対象とする。
【０１２３】
本発明の他の実施形態は、ベンダムスチン塩酸塩の形態１、ベンダムスチン塩酸塩の形態２、ベンダムスチン塩酸塩の形態３、ベンダムスチン塩酸塩の形態４、またはこれらの混合物を含む凍結乾燥組成物を対象とする。特定の実施形態では、ベンダムスチン塩酸塩は、ベンダムスチン形態１である。他の実施形態では、ベンダムスチン塩酸塩は、ベンダムスチン形態２である。他の実施形態では、ベンダムスチン塩酸塩は、ベンダムスチン形態３である。他の実施形態では、ベンダムスチン塩酸塩は、ベンダムスチン形態４である。本発明はまた、非晶質ベンダムスチン塩酸塩をさらに含む、本明細書中に記載の凍結乾燥組成物を対象とする。
【０１２４】
本発明の好ましい実施形態は、非晶質ベンダムスチン塩酸塩、ベンダムスチン塩酸塩の形態２、および薬学的に許容される賦形剤を含む、本明細書中に記載の凍結乾燥組成物を含む。
【０１２５】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の結晶形態を含む凍結乾燥組成物を調製するための方法であって、ベンダムスチン塩酸塩を少なくとも１つの溶媒と結合させ、混合物を形成する工程と、
混合物を凍結乾燥化する工程と、を含む、方法が含まれる。好ましくは、本発明の方法は、溶液が凍結乾燥賦形剤をさらに含むものを含む。好ましくは、凍結乾燥賦形剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、グリシン、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、グリセリン、デキストロース、デキストラン、トレハロース、ヘタスターチ、またはこれらの混合物である。より好ましくは、凍結乾燥賦形剤はマンニトールである。好ましくは、本発明の方法は、溶媒が、水、有機溶媒、またはこれらの混合物であるものを含む。好ましくは、有機溶媒は、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、またはこれらの混合物である。より好ましくは、有機溶媒は、ｔｅｒｔ−ブタノールである。本発明の他の方法では、溶媒は、水と有機溶媒の混合物である。本発明の好ましい方法では、水と有機溶媒の比は約１：１（ｖ／ｖ）である。本発明の好ましい方法では、水と有機溶媒の比は約２：１（ｖ／ｖ）である。本発明の好ましい方法では、水と有機溶媒の比は約３：１（ｖ／ｖ）である。本発明の好ましい方法では、水と有機溶媒の比は約７：３（ｖ／ｖ）である。
【０１２６】
本発明の好ましい方法では、ベンダムスチン塩酸塩の結晶形態は形態１である。本発明の他の好ましい方法では、ベンダムスチン塩酸塩の結晶形態は形態２である。本発明のさらに他の好ましい方法では、ベンダムスチン塩酸塩の結晶形態は形態３である。本発明のさらに他の好ましい方法では、ベンダムスチン塩酸塩の結晶形態は形態４である。本発明の他の好ましい方法は、凍結乾燥組成物が非晶質ベンダムスチン塩酸塩をさらに含むものを含む。
【０１２７】
また、本発明の範囲内に、慢性リンパ性白血病、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫または乳癌を治療する方法であって、それを必要とする患者に、本明細書中に記載の組成物から調製される調製物を治療有効量で投与する工程を含む、方法が含まれる。
【０１２８】
また、本発明の範囲内に、形態１のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩を、エタノール、酢酸エチル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、イソ−プロピルアルコール、酢酸イソプロピル、ジクロロメタン、酢酸メチル、アセトン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、ヘプタン、トルエン、メタノール、ジオキサン、ジエチルエーテル、アニソール、ニトロメタン、またはジ−イソプロピルエーテルに入れた溶液を提供する工程と、溶液を周囲条件下で蒸発させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１２９】
また、本発明の範囲内に、形態１のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩を、エタノール、メタノール、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはジメチルアミンに入れた溶液を提供する工程と、溶液を周囲条件下で乾燥するまで迅速に蒸発させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３０】
また、本発明の範囲内に、形態１のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩を、エタノール、酢酸、メタノール、またはジメチルスルホキシドに入れた溶液を提供する工程と、溶液を周囲条件下で乾燥するまで徐々に蒸発させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３１】
また、本発明の範囲内に、形態１のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩を、酢酸、ホルムアミド、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、またはジメチルアミンに入れた溶液を提供する工程と、結晶化を誘発するのに十分な量のトルエンを加える工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３２】
また、本発明の範囲内に、形態２のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩を、ジメチルホルムアミド、メタノール、またはジメチルアミンに入れた溶液を提供する工程と、溶液を周囲条件下で蒸発させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３３】
また、本発明の範囲内に、形態２のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩を、酢酸またはメタノールに入れた溶液を提供する工程と、溶液を周囲条件下で乾燥するまで迅速に蒸発させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３４】
また、本発明の範囲内に、形態２のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩をメタノールに入れた溶液を提供する工程と、溶液を周囲条件下で乾燥するまで緩徐に蒸発させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３５】
また、本発明の範囲内に、形態２のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ある量の形態１のベンダムスチン塩酸塩を提供する工程と、形態１を形態２に変換するだけの十分な期間、少なくとも約８８％の相対湿度で同量を保存する工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３６】
また、本発明の範囲内に、形態２のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩の形態１を水と結合させ、溶液を形成する工程と、形態２の溶液からの沈殿を可能にする工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３７】
また、本発明の範囲内に、形態３のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ある量の非晶質ベンダムスチン塩酸塩を提供する工程と、非晶質ベンダムスチン塩酸塩を形態３に変換するだけの十分な期間、約４０℃および約７５％の相対湿度で同量を保存する工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３８】
また、本発明の範囲内に、形態４のベンダムスチン塩酸塩を調製する方法であって、ある量の形態２のベンダムスチン塩酸塩を提供する工程と、形態２を形態４に変換するだけの十分な期間、約１００℃まで形態２を加熱する工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１３９】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の医薬組成物を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩の形態１を調製する工程と、形態１を薬学的に許容される賦形剤と結合させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１４０】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の医薬組成物を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩の形態２を調製する工程と、形態２を薬学的に許容される賦形剤と結合させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１４１】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の医薬組成物を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩の形態３を調製する工程と、形態３を薬学的に許容される賦形剤と結合させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１４２】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の医薬組成物を調製する方法であって、ベンダムスチン塩酸塩の形態４を調製する工程と、形態４を薬学的に許容される賦形剤と結合させる工程と、を含む、方法が含まれる。
【０１４３】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥組成物を調製する方法であって、形態１のベンダムスチン塩酸塩を溶媒と結合させ、混合物を形成する工程と、混合物を凍結乾燥化する工程と、を含む、方法が含まれる。本発明によると、形態１のベンダムスチン塩酸塩は、本明細書中に記載の方法のいずれかに従って調製される。
【０１４４】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥組成物を調製する方法であって、形態２のベンダムスチン塩酸塩を溶媒と結合させ、混合物を形成する工程と、混合物を凍結乾燥化する工程と、を含む、方法が含まれる。本発明によると、形態１のベンダムスチン塩酸塩は、本明細書中に記載の方法のいずれかに従って調製される。
【０１４５】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥組成物を調製する方法であって、形態３のベンダムスチン塩酸塩を溶媒と結合させ、混合物を形成する工程と、混合物を凍結乾燥化する工程と、を含む、方法が含まれる。本発明の特定の方法では、形態３のベンダムスチン塩酸塩は、ある量の非晶質ベンダムスチン塩酸塩を提供し、非晶質ベンダムスチン塩酸塩を形態３に変換するだけの十分な期間、約４０℃および約７５％の相対湿度で同量を保存することによって調製される。
【０１４６】
また、本発明の範囲内に、ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥組成物を調製する方法であって、形態４のベンダムスチン塩酸塩を溶媒と結合させ、混合物を形成する工程と、混合物を凍結乾燥化する工程と、を含む、方法が含まれる。本発明の特定の方法では、形態４のベンダムスチン塩酸塩は、ある量の形態２のベンダムスチン塩酸塩を提供し、形態２を形態４に変換するだけの十分な期間、約１００℃まで形態２を加熱することによって調製される。
【０１４７】
また、本発明の範囲内に、非晶質ベンダムスチン塩酸塩を含む凍結乾燥組成物が含まれ、ここで前記組成物は、任意の結晶性ベンダムスチン塩酸塩を実質的に含まない。
【０１４８】
ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥組成物を調製する好ましい方法では、記載される混合物は、凍結乾燥賦形剤をさらに含む。好ましくは、凍結乾燥賦形剤は、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、グリシン、マンニトール、ラクトース、スクロース、マルトース、グリセリン、デキストロース、デキストラン、トレハロース、ヘタスターチ、またはこれらの混合物である。より好ましい方法では、凍結乾燥賦形剤は、マンニトールである。
【０１４９】
ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥組成物を調製する好ましい方法では、溶媒は、水、有機溶媒、またはこれらの混合物である。好ましくは、有機溶媒は、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、またはこれらの混合物である。より好ましい方法では、有機溶媒は、ｔｅｒｔ−ブタノールである。
【０１５０】
ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥組成物を調製する好ましい方法では、溶媒は、水と有機溶媒の混合物である。好ましくは、水と有機溶媒の比は約１：１（ｖ／ｖ）である。また、水と有機溶媒の比が約２：１（ｖ／ｖ）である方法は好ましい。他の好ましい方法では、水と有機溶媒の比は約３：１（ｖ／ｖ）である。他の好ましい方法では、水と有機溶媒の比は約７：３（ｖ／ｖ）である。
【０１５１】
当業者が理解するように、上記教示内容を考慮すると、本発明の極めて多くの修飾および変形が可能である。したがって、添付の特許請求の範囲内で、本発明は、本明細書中で詳述される以外で実施することは可能であり、かつ、本発明の範囲は、すべてのかかる変形を包含するように意図されていることは理解されている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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