(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
顕微鏡を用い、細胞を構成する１つ以上の細胞構成要素を可視化する要素特定用色素と、複数の標的分子を可視化する分子標的色素とによって染色された標本を撮像した標本画像を取得する画像取得手段と、
前記標本画像の画素毎に、対応する標本上の位置を染色している前記要素特定用色素および前記分子標的色素の色素量を取得する色素量取得手段と、
前記要素特定用色素の色素量をもとに、前記標本画像内の前記細胞構成要素の領域を特定する要素領域特定手段と、
前記細胞構成要素の領域内の画素における前記分子標的色素の色素量をもとに、前記細胞構成要素上の前記複数の標的分子の発現部位を抽出する発現部位抽出手段と、
前記複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを設定する発現パターン設定手段と、
前記細胞の領域に含まれる前記複数の標的分子の発現部位の組み合わせをもとに、前記設定された標的分子の発現パターンに該当する細胞の領域を分類する発現パターン分類手段と、
前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域を他の細胞の領域と識別表示した表示画像を生成する表示画像生成手段と、
前記表示画像を表示する処理を行う表示処理手段と、
を備えることを特徴とする顕微鏡システム。
【請求項２】
前記発現パターン設定手段は、前記標的分子の発現パターンを複数設定し、
前記発現パターン分類手段は、前記設定された複数の前記標的分子の発現パターンのそれぞれに該当する細胞の領域を分類し、
前記表示画像生成手段は、前記複数の前記標的分子の発現パターンのそれぞれに分類された細胞の領域を、前記標的分子の発現パターン毎に識別表示して前記表示画像を生成することを特徴とする請求項１に記載の顕微鏡システム。
【請求項３】
前記標本は、所定の形態観察色素によって染色されており、
前記色素量取得手段は、前記標本画像の画素毎に対応する標本上の位置を染色している前記形態観察色素の色素量をさらに取得し、
前記表示画像生成手段は、前記標本画像の各画素における前記形態観察色素の色素量をもとに前記形態観察色素による前記標本の染色状態を表した画像を生成し、該画像中の前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域の画素値を所定の表示色で置き換えて前記表示画像を生成することを特徴とする請求項１または２に記載の顕微鏡システム。
【請求項４】
少なくとも前記発現パターン分類手段によって前記標的分子の発現パターンに分類された前記細胞の領域の数、または、該細胞の領域の数の前記標本内に存在する前記細胞の総数に対する割合を算出する統計量算出手段を備えることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１つに記載の顕微鏡システム。
【請求項５】
前記標本画像中の分類対象領域または非分類対象領域を設定する領域設定手段を備え、
前記発現パターン分類手段は、前記分類対象領域内の細胞の領域または前記非分類対象領域外の細胞の領域について前記標的分子の発現パターンに分類することを特徴とする請求項１〜４のいずれか１つに記載の顕微鏡システム。
【請求項６】
前記標本は、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体およびＨＥＲ２受容体を可視化する分子標的色素によって染色され、
前記発現パターン設定手段は、前記エストロゲン受容体、前記プロゲステロン受容体および前記ＨＥＲ２受容体の発現の有無を組み合わせて前記標的分子の発現パターンを設定することを特徴とする請求項１〜５のいずれか１つに記載の顕微鏡システム。
【請求項７】
前記標本は、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、ＨＥＲ２受容体およびＫｉ−６７を可視化する分子標的色素によって染色され、
前記発現パターン設定手段は、前記エストロゲン受容体、前記プロゲステロン受容体、前記ＨＥＲ２受容体および前記Ｋｉ−６７の発現の有無を組み合わせて前記標的分子の発現パターンを設定することを特徴とする請求項１〜６のいずれか１つに記載の顕微鏡システム。
【請求項８】
前記画像取得手段は、前記標本と対物レンズとを前記対物レンズの光軸と直交する面内で相対的に移動させながら、前記標本を部分毎に撮像して複数の標本画像を取得し、
前記複数の標本画像を繋ぎ合せて１枚の標本画像を生成する標本画像生成手段を備えることを特徴とする請求項１〜７のいずれか１つに記載の顕微鏡システム。
【請求項９】
顕微鏡を用い、細胞を構成する１つ以上の細胞構成要素を可視化する要素特定用色素と、複数の標的分子を可視化する分子標的色素とによって染色された標本を撮像した標本画像を取得する画像取得工程と、
前記標本画像の画素毎に、対応する標本上の位置を染色している前記要素特定用色素および前記分子標的色素の色素量を取得する色素量取得工程と、
前記要素特定用色素の色素量をもとに、前記標本画像内の前記細胞構成要素の領域を特定する要素領域特定工程と、
前記細胞構成要素の領域内の画素における前記分子標的色素の色素量をもとに、前記細胞構成要素上の前記複数の標的分子の発現部位を抽出する発現部位抽出工程と、
前記複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを設定する発現パターン設定工程と、
前記細胞の領域に含まれる前記複数の標的分子の発現部位の組み合わせをもとに、前記設定された標的分子の発現パターンに該当する細胞の領域を分類する発現パターン分類工程と、
前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域を他の細胞の領域と識別表示した表示画像を生成する表示画像生成工程と、
前記表示画像を表示する処理を行う表示処理工程と、
を含むことを特徴とする標本観察方法。
【請求項１０】
コンピュータに、
顕微鏡に対する動作指示を用い、細胞を構成する１つ以上の細胞構成要素を可視化する要素特定用色素と、複数の標的分子を可視化する分子標的色素とによって染色された標本を撮像した標本画像を取得する画像取得手順と、
前記標本画像の画素毎に、対応する標本上の位置を染色している前記要素特定用色素および前記分子標的色素の色素量を取得する色素量取得手順と、
前記要素特定用色素の色素量をもとに、前記標本画像内の前記細胞構成要素の領域を特定する要素領域特定手順と、
前記細胞構成要素の領域内の画素における前記分子標的色素の色素量をもとに、前記細胞構成要素上の前記複数の標的分子の発現部位を抽出する発現部位抽出手順と、
前記複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを設定する発現パターン設定手順と、
前記細胞の領域に含まれる前記複数の標的分子の発現部位の組み合わせをもとに、前記設定された標的分子の発現パターンに該当する細胞の領域を分類する発現パターン分類手順と、
前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域を他の細胞の領域と識別表示した表示画像を生成する表示画像生成手順と、
前記表示画像を表示する処理を行う表示処理手順と、
を実行させることを特徴とするプログラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、顕微鏡を用いて標本を撮像した標本画像を取得し、取得した標本画像を表示して標本を観察する顕微鏡システム、標本観察方法およびプログラムに関するものである。
【背景技術】
【０００２】
例えば病理診断では、臓器摘出や針生検によって得た組織検体を厚さ数ミクロン程度に薄切して標本を作成し、様々な所見を得るために光学顕微鏡を用いて拡大観察することが広く行われている。ここで、標本は光をほとんど吸収および散乱せず無色透明に近いため、観察に先立って色素による染色を施すのが一般的である。
【０００３】
染色手法としては種々のものが提案されているが、特に組織標本に関しては、標本の形態を観察するための形態観察染色として、ヘマトキシリンおよびエオジンの２つの色素を用いるヘマトキシリン・エオジン染色（以下、「ＨＥ染色」と呼ぶ。）が標準的に用いられている。例えば、ＨＥ染色された標本をマルチバンド撮像し、標本位置の分光スペクトルを推定することで標本を染色している色素の色素量を算出（推定）して、表示用のＲＧＢ画像を合成する手法が開示されている（特許文献１，２，３等を参照）。なお、この他の形態観察染色としては、例えば細胞診では、パパニコロウ染色（Ｐａｐ染色）等が知られている。
【０００４】
また、病理診断では、標本に分子情報の発現を確認するための分子標的染色を施し、遺伝子やタンパクの発現異常といった機能異常の診断に用いている。例えば、ＩＨＣ（immunohistochemistry：免疫組織化学）法、ＩＣＣ（immunocytochemistry：免疫細胞化学）法、ＩＳＨ（in  situ  hybridization）法等で標本を蛍光標識して蛍光観察し、あるいは酵素標識して明視野観察するといったことが行われている。ここで、蛍光標識による標本の蛍光観察では、例えば共焦点レーザ顕微鏡が使用される。この蛍光標識による観察では、感度の高いシャープな画像が得られ、標本を３次元的に観察し、あるいは標本を所望の方向から観察することができる。また、複数の標的分子（抗原）を同時に標識することができるといった利点がある。
【０００５】
また、酵素標識による明視野観察（ＩＨＣ法，ＩＣＣ法，ＣＩＳＨ法）では、光学顕微鏡を用いるため、その観察を形態観察と併せて行うことができる。
【０００６】
一方、近年では、癌等の治療として、特定の分子を標的として作用する治療薬（抗体治療薬）を用いた分子標的治療と呼ばれる治療が行われており、治療効果と副作用の軽減効果とが期待されている。この分子標的治療による癌治療では、癌細胞に特異的な分子（抗原タンパク質）を標的とする抗体治療薬が用いられ、治療に先立って、例えば、細胞の表面、すなわち細胞膜上に抗体治療薬の標的分子となる抗原が発現しているか否かをＩＨＣ法等で観察し、適応患者の選択が行われている。この抗体治療薬として使用が認められているものとしては、例えば、乳癌に対する抗ＨＥＲ２抗体製剤であるトラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標））や、大腸癌に対する抗ＥＧＦＲ抗体製剤であるセツキシマブ（アービタックス（登録商標））等が挙げられる。
【０００７】
また、複数の標的分子（抗原）に対する抗体を作用させて各抗原を標識し、その発現の有無の組み合わせ（発現パターン）を評価する（抗体パネル評価）といったことも行われている。例えば、細胞膜上で発現している抗原の組み合わせを評価することによって、癌幹細胞の同定が行われている。具体例としては例えば、乳癌の診断では、細胞膜上でＣＤ４４分子が発現しており、かつ、細胞膜上でＣＤ２４分子が発現していない（あるいは発現の程度が低い）細胞を幹細胞として同定している。一方、大腸癌の診断では、細胞膜上でＣＤ４４分子およびＣＤ１３３分子が発現している細胞を幹細胞として同定している。その他、原発巣不明癌における原発巣の推定（例えば大腸癌や乳癌、肺癌の上皮性癌の鑑別）や、Ｂ細胞リンパ腫とＴ細胞リンパ腫との鑑別、中皮腫の同定、扁平上皮細胞癌と腺癌との鑑別等、目的に応じた抗体を作用させて抗原を標識することで、各種抗体パネル評価が行われている。
【０００８】
さらに、近年の乳癌治療においては、抗体治療薬を選択的に用いたターゲット治療が進んでおり、腫瘍部における複数の標的分子の発現パターンに応じて病型（細胞亜型）を「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」と称す４つに分類し、治療法の基本的な選択をすることが一般的となっている（非特許文献１を参照）。例えば、ホルモン受容体であるエストロゲン受容体（以下、「ＥＲ」と略記する。）やプロゲステロン受容体（以下、「ＰｇＲ」と略記する。）の細胞核上での発現の有無によってホルモン依存性に増殖する癌か否かを判断し、内分泌療法（ホルモン療法）の適用可否を選択する。また、ＨＥＲ２受容体（以下、「ＨＥＲ２」と略記する。）の細胞膜上での発現の有無に応じて抗ＨＥＲ２抗体製剤であるトラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標））の適用可否を選択する。そして、ＥＲ、ＰｇＲ、ＨＥＲ２のいずれも発現していない所謂トリプルネガティブ乳癌（Ｔriple  Ｎegative  Ｂreast  Ｃancer：ＴＮＢＣ」と呼ばれるタイプでは、化学療法を中心に治療を行う。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００８−５１６５４号公報
【特許文献２】特開平７−１２０３２４号公報
【特許文献３】特表２００２−５２１６８２号公報
【特許文献４】特開平９−２８１４０５号公報
【特許文献５】特開２００６−３４３５７３号公報
【特許文献６】特開２００９−１７５３３４号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】圭友会  浜松オンコロジーセンター／渡辺  亨／田原  梨絵，“乳癌；新しい病型分類と分子標的薬剤の使い方”，［平成２２年５月７日検索］、インターネット＜ＵＲＬ：http://www.cancertherapy.jp/molecule/2009_spring/06.html＞
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
例えば、分子標的染色によって標的分子を標識する場合、あるいは分子標的染色によって複数の標的分子を標識する場合、特許文献１，２，３等に開示されている技術を適用することで、標本を染色している色素（分子標的染色によって可視化される色素）毎に色素量を算出することができ、表示用に合成したＲＧＢ画像を表示装置上に表示して観察することができる。
【００１２】
しかしながら、上記したように、癌等の診断・治療においては、複数の標的分子の発現パターンを観察・評価したい場合がある。例えば、乳癌治療では、細胞核上でのＥＲ，ＰｇＲの発現の有無および細胞膜上でのＨＥＲ２の発現の有無によって定まる細胞亜型に応じて治療法を選択している。このような場合、特許文献１，２，３等の技術を用いて単に分子標的色素による染色状態を表しただけでは、標本内の各細胞がどの細胞亜型に該当するのかを識別するのは難しく、医師等のユーザは、ＲＧＢ画像中の細胞の領域に順次着目して標的分子の発現パターンを確認しなければならなった。
【００１３】
また、複数の標的分子の発現を可視化するために複数の分子標的染色を標本に施す場合、これら複数の分子標的色素の色が重畳されて表示されてしまい、視認性が劣化して診断効率が悪化するという問題もあった。
【００１４】
本発明は、上記した従来の問題点に鑑みて為されたものであり、標本内の細胞における複数の標的分子の発現パターンを視認性良く表した画像を提示し、診断精度を向上させることができる顕微鏡システム、標本観察方法およびプログラムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
上述した課題を解決し、目的を達成するため、本発明にかかる顕微鏡システムは、顕微鏡を用い、細胞を構成する１つ以上の細胞構成要素を可視化する要素特定用色素と、複数の標的分子を可視化する分子標的色素とによって染色された標本を撮像した標本画像を取得する画像取得手段と、前記標本画像の画素毎に、対応する標本上の位置を染色している前記要素特定用色素および前記分子標的色素の色素量を取得する色素量取得手段と、前記要素特定用色素の色素量をもとに、前記標本画像内の前記細胞構成要素の領域を特定する要素領域特定手段と、前記細胞構成要素の領域内の画素における前記分子標的色素の色素量をもとに、前記細胞構成要素上の前記複数の標的分子の発現部位を抽出する発現部位抽出手段と、前記複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを設定する発現パターン設定手段と、前記細胞の領域に含まれる前記複数の標的分子の発現部位の組み合わせをもとに、前記設定された標的分子の発現パターンに該当する細胞の領域を分類する発現パターン分類手段と、前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域を他の細胞の領域と識別表示した表示画像を生成する表示画像生成手段と、前記表示画像を表示する処理を行う表示処理手段と、を備えることを特徴とする。
【００１６】
また、本発明にかかる顕微鏡システムは、上記の発明において、前記発現パターン設定手段は、前記標的分子の発現パターンを複数設定し、前記発現パターン分類手段は、前記設定された複数の前記標的分子の発現パターンのそれぞれに該当する細胞の領域を分類し、前記表示画像生成手段は、前記複数の前記標的分子の発現パターンのそれぞれに分類された細胞の領域を、前記標的分子の発現パターン毎に識別表示して前記表示画像を生成することを特徴とする。
【００１７】
また、本発明にかかる顕微鏡システムは、上記の発明において、前記標本は、所定の形態観察色素によって染色されており、前記色素量取得手段は、前記標本画像の画素毎に対応する標本上の位置を染色している前記形態観察色素の色素量をさらに取得し、前記表示画像生成手段は、前記標本画像の各画素における前記形態観察色素の色素量をもとに前記形態観察色素による前記標本の染色状態を表した画像を生成し、該画像中の前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域の画素値を所定の表示色で置き換えて前記表示画像を生成することを特徴とする。
【００１８】
また、本発明にかかる顕微鏡システムは、上記の発明において、少なくとも前記発現パターン分類手段によって前記標的分子の発現パターンに分類された前記細胞の領域の数、または、該細胞の領域の数の前記標本内に存在する前記細胞の総数に対する割合を算出する統計量算出手段を備えることを特徴とする。
【００１９】
また、本発明にかかる顕微鏡システムは、上記の発明において、前記標本画像中の分類対象領域または非分類対象領域を設定する領域設定手段を備え、前記発現パターン分類手段は、前記分類対象領域内の細胞の領域または前記非分類対象領域外の細胞の領域について前記標的分子の発現パターンに分類することを特徴とする。
【００２０】
また、本発明にかかる顕微鏡システムは、上記の発明において、前記標本は、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体およびＨＥＲ２受容体を可視化する分子標的色素によって染色され、前記発現パターン設定手段は、前記エストロゲン受容体、前記プロゲステロン受容体および前記ＨＥＲ２受容体の発現の有無を組み合わせて前記標的分子の発現パターンを設定することを特徴とする。
【００２１】
また、本発明にかかる顕微鏡システムは、上記の発明において、前記標本は、エストロゲン受容体、プロゲステロン受容体、ＨＥＲ２受容体およびＫｉ−６７を可視化する分子標的色素によって染色され、前記発現パターン設定手段は、前記エストロゲン受容体、前記プロゲステロン受容体、前記ＨＥＲ２受容体および前記Ｋｉ−６７の発現の有無を組み合わせて前記標的分子の発現パターンを設定することを特徴とする。
【００２２】
また、本発明にかかる顕微鏡システムは、上記の発明において、前記画像取得手段は、前記標本と対物レンズとを前記対物レンズの光軸と直交する面内で相対的に移動させながら、前記標本を部分毎に撮像して複数の標本画像を取得し、前記複数の標本画像を繋ぎ合せて１枚の標本画像を生成する標本画像生成手段を備えることを特徴とする。
【００２３】
また、本発明にかかる標本観察方法は、顕微鏡を用い、細胞を構成する１つ以上の細胞構成要素を可視化する要素特定用色素と、複数の標的分子を可視化する分子標的色素とによって染色された標本を撮像した標本画像を取得する画像取得工程と、前記標本画像の画素毎に、対応する標本上の位置を染色している前記要素特定用色素および前記分子標的色素の色素量を取得する色素量取得工程と、前記要素特定用色素の色素量をもとに、前記標本画像内の前記細胞構成要素の領域を特定する要素領域特定工程と、前記細胞構成要素の領域内の画素における前記分子標的色素の色素量をもとに、前記細胞構成要素上の前記複数の標的分子の発現部位を抽出する発現部位抽出工程と、前記複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを設定する発現パターン設定工程と、前記細胞の領域に含まれる前記複数の標的分子の発現部位の組み合わせをもとに、前記設定された標的分子の発現パターンに該当する細胞の領域を分類する発現パターン分類工程と、前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域を他の細胞の領域と識別表示した表示画像を生成する表示画像生成工程と、前記表示画像を表示する処理を行う表示処理工程と、を含むことを特徴とする。
【００２４】
また、本発明にかかるプログラムは、コンピュータに、顕微鏡に対する動作指示を用い、細胞を構成する１つ以上の細胞構成要素を可視化する要素特定用色素と、複数の標的分子を可視化する分子標的色素とによって染色された標本を撮像した標本画像を取得する画像取得手順と、前記標本画像の画素毎に、対応する標本上の位置を染色している前記要素特定用色素および前記分子標的色素の色素量を取得する色素量取得手順と、前記要素特定用色素の色素量をもとに、前記標本画像内の前記細胞構成要素の領域を特定する要素領域特定手順と、前記細胞構成要素の領域内の画素における前記分子標的色素の色素量をもとに、前記細胞構成要素上の前記複数の標的分子の発現部位を抽出する発現部位抽出手順と、前記複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを設定する発現パターン設定手順と、前記細胞の領域に含まれる前記複数の標的分子の発現部位の組み合わせをもとに、前記設定された標的分子の発現パターンに該当する細胞の領域を分類する発現パターン分類手順と、前記標的分子の発現パターンに分類された細胞の領域を他の細胞の領域と識別表示した表示画像を生成する表示画像生成手順と、前記表示画像を表示する処理を行う表示処理手順と、を実行させることを特徴とする。
【発明の効果】
【００２５】
本発明では、標本画像の画素毎に対応する標本上の位置を染色している１つ以上の細胞構成要素を可視化する要素特定用色素および複数の標的分子を可視化する分子標的色素の色素量を取得し、細胞構成要素の領域内の画素の分子標的色素の色素量をもとに、細胞構成要素の領域における複数の標的分子の発現部位を抽出することとした。また、複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを設定し、細胞の領域に含まれる複数の標的分子の発現部位の組み合わせをもとに設定した標的分子の発現パターンに該当する細胞の領域を分類することとした。そして、設定した標的分子の発現パターンに分類した細胞の領域を他の細胞の領域と識別表示した表示画像を生成することとした。これによれば、標本内の細胞における複数の標的分子の発現パターンを視認性良く表した表示画像を提示することができ、診断精度を向上させることが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は、細胞亜型の一例を示す図である。
【図２】図２は、実施の形態１における顕微鏡システムの全体構成例を説明する模式図である。
【図３】図３は、実施の形態１におけるホストシステムの主要な機能構成を示すブロック図である。
【図４】図４は、フィルタユニットの構成を説明する模式図である。
【図５】図５は、一方の光学フィルタの分光透過率特性を示す図である。
【図６】図６は、他方の光学フィルタの分光透過率特性を示す図である。
【図７】図７は、Ｒ，Ｇ，Ｂ各バンドの分光感度の例を示す図である。
【図８】図８は、擬似表示色の分光透過率特性の一例を示す図である。
【図９】図９は、顕微鏡システムの動作を示すフローチャートである。
【図１０】図１０は、スライドガラス標本の一例を示す図である。
【図１１】図１１は、標本領域画像の一例を示す図である。
【図１２】図１２は、フォーカスマップのデータ構成例を説明する図である。
【図１３】図１３は、ＶＳ画像ファイルのデータ構成例を説明する図である。
【図１４】図１４は、染色情報のデータ構成例を説明する図である。
【図１５】図１５は、ＶＳ画像データのデータ構成例を説明する図である。
【図１６】図１６は、実施の形態１におけるＶＳ画像表示処理の処理手順を示すフローチャートである。
【図１７】図１７は、色素量算出処理の処理手順を示すフローチャートである。
【図１８】図１８は、色素登録画面の一例を示す図である。
【図１９】図１９は、同定用色素選択画面の一例を示す図である。
【図２０】図２０は、細胞コンポーネント同定処理の処理手順を示すフローチャートである。
【図２１】図２１は、細胞核のマップデータのデータ構成例を説明する模式図である。
【図２２】図２２は、細胞膜のマップデータのデータ構成例を説明する模式図である。
【図２３】図２３は、細胞核の形態特徴データのデータ構成例を説明する図である。
【図２４】図２４は、細胞膜の形態特徴データのデータ構成例を説明する図である。
【図２５】図２５は、同定コンポーネント情報のデータ構成例を説明する図である。
【図２６】図２６は、同定コンポーネント一覧のデータ構成例を説明する図である。
【図２７】図２７は、細胞一覧テーブルのデータ構成例を説明する図である。
【図２８】図２８は、抽出条件設定画面の一例を示す図である。
【図２９】図２９は、実施の形態１における標的分子発現部位抽出処理の原理を説明する説明図である。
【図３０】図３０は、標的分子発現部位情報のデータ構成例を説明する図である。
【図３１】図３１は、名称設定画面の一例を示す図である。
【図３２】図３２は、発現パターン設定画面の一例を示す図である。
【図３３】図３３は、細胞亜型設定情報のデータ構成例を説明する図である。
【図３４】図３４は、実施の形態１における細胞亜型分類処理の原理を説明する説明図である。
【図３５】図３５は、細胞亜型分類テーブルのデータ構成例を説明する図である。
【図３６】図３６は、表示画像生成処理の処理手順を示すフローチャートである。
【図３７】図３７は、表示色選択画面の一例を示す図である。
【図３８】図３８は、ＶＳ画像観察画面の一例を示す図である。
【図３９】図３９は、表示切換ボタンの押下によって切り換えられるメイン画面の一例を示す図である。
【図４０】図４０は、変形例における細胞亜型の一例を示す図である。
【図４１】図４１は、実施の形態２におけるＶＳ画像表示処理部の機能ブロックを示す図である。
【図４２】図４２は、実施の形態２におけるＶＳ画像表示処理の処理手順を示すフローチャートである。
【図４３】図４３は、統計量算出処理の処理手順を示すフローチャートである。
【図４４】図４４は、実施の形態３におけるＶＳ画像表示処理部の機能ブロックを示す図である。
【図４５】図４５は、実施の形態３におけるＶＳ画像表示処理の処理手順を示すフローチャートである。
【図４６】図４６は、変形例における細胞亜型の一例を示す図である。
【図４７】図４７は、ＤＡＰＩの励起波長特性および蛍光波長特性を示す図である。
【図４８】図４８は、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５の蛍光波長特性を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下、図面を参照し、本発明の好適な実施の形態について詳細に説明する。なお、この実施の形態によって本発明が限定されるものではない。また、図面の記載において、同一部分には同一の符号を付して示している。
【００２８】
顕微鏡を用いて標本を観察する場合、１度に観察可能な範囲（視野範囲）は、主に対物レンズの倍率によって決定される。ここで、対物レンズの倍率が高いほど高精細な画像が得られる反面、視野範囲が狭くなる。この種の問題を解決するため、従来から、標本を載置する電動ステージを動かす等して視野範囲を移動させながら、倍率の高い対物レンズを用いて標本像を部分毎に撮像し、撮像した部分毎の画像を繋ぎ合わせることによって高精細でかつ広視野の画像を生成するといったことが行われており（例えば特許文献４や特許文献５を参照）、バーチャル顕微鏡システムと呼ばれている。以下、バーチャル顕微鏡システムで生成される高精細かつ広視野の画像（標本画像）を、「ＶＳ画像」と呼ぶ。
【００２９】
このバーチャル顕微鏡システムによれば、実際に標本が存在しない環境であっても観察が行える。また、生成したＶＳ画像をネットワークを介して閲覧可能に公開しておけば、時間や場所を問わずに標本の観察が行える。このため、バーチャル顕微鏡システムは、病理診断の教育現場、あるいは遠隔地に在る病理医間のコンサルテーション等で活用されている。以下では、本発明をこのバーチャル顕微鏡システムに適用した場合を例にとって説明する。
【００３０】
（実施の形態１）
実施の形態１は、所定の細胞コンポーネント上に発現する所定の標的分子の有無の組み合わせによって定義される細胞亜型を事前に設定し、設定した細胞亜型に従ってＶＳ画像中に映る細胞を分類するものである。ここで、細胞コンポーネントとは、細胞を構成する細胞構成要素である細胞核や細胞膜、細胞質等を包括した呼称である。
【００３１】
図１は、実施の形態１で例示する細胞亜型を示す図である。非特許文献１を参照して上記したように、乳癌の治療においては、ホルモン受容体であるエストロゲン受容体（ＥＲ）やプロゲステロン受容体（ＰｇＲ）、あるいはＨＥＲ２受容体（ＨＥＲ２）の発現に着目し、これら標的分子の発現パターンを４つの細胞亜型に分類することで治療法の選択が行われている。実施の形態１では、ＶＳ画像中に映る細胞をこの４つの細胞亜型に分類する場合を例にとって説明する。
【００３２】
具体的には、図１に示すように、細胞核上でホルモン受容体（ＥＲおよび／またはＰｇＲ）が発現しており陽性（＋）で、かつ、細胞膜上でＨＥＲ２が発現しており陽性（＋）である細胞を「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」と称す細胞亜型に分類する。非特許文献１に開示されているように、乳癌症例の約１０％がこの「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」に該当し、内分泌療法あるいは抗ＨＥＲ２療法が優先的に使用され、化学療法の効果も期待できるとされている。
【００３３】
また、細胞核上でホルモン受容体（ＥＲおよび／またはＰｇＲ）が発現しており陽性（＋）である一方、細胞膜上でＨＥＲ２が発現していないあるいは発現の程度が低く陰性（−）である細胞を「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」と称す細胞亜型に分類する。非特許文献１に開示されているように、乳癌症例の約７０％がこの「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」に該当し、内分泌療法の効果が期待できるとされている。一方で、化学療法の効果はあまり期待できないという見解がある。
【００３４】
また、細胞核上でホルモン受容体（ＥＲおよび／またはＰｇＲ）が発現していないあるいは発現の程度が低く陰性（−）である一方、細胞膜上でＨＥＲ２が発現しており陽性（＋）である細胞を「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」と称す細胞亜型に分類する。非特許文献１に開示されているように、乳癌症例の約１０％がこの「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」に該当し、抗ＨＥＲ２療法が優先的に使用され、化学療法の効果も期待できるとされている。
【００３５】
そして、細胞核上でホルモン受容体（ＥＲおよび／またはＰｇＲ）が発現していないあるいは発現の程度が低く陰性（−）であり、かつ、細胞膜上でＨＥＲ２が発現していないあるいは発現の程度が低く陰性（−）である細胞を「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」と称す細胞亜型に分類する。非特許文献１に開示されているように、乳癌症例の約１０％がこの「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」に該当する。上記したように、トリプルネガティブ乳癌と呼ばれるこのタイプは、効果の望める薬物療法は化学療法のみとされている。
【００３６】
次に、実施の形態１で観察・診断対象とする標本（以下、「対象標本」と呼ぶ。）について説明する。対象標本は、複数の色素で多重染色された多重染色標本である。より具体的には、対象標本は、その形態を観察するための形態観察染色と、分子情報の発現を確認するための分子標的染色とを施したものであり、組織診用の標本および細胞診用の標本を含む。また、細胞診では、例えば細胞集塊の立体構造等の細胞内の構造を観察するためにセルブロック法によって標本（セルブロック）を作製する場合があるが、細胞診用の標本は、このセルブロックを含む。
【００３７】
形態観察染色は、細胞核や細胞質、結合組織等を染色して可視化するものである。この形態観察染色によれば、組織を構成する要素の大きさや位置関係等を把握でき、標本の状態を形態学的に判断することが可能となる。ここで、形態観察染色としては、上記したＨＥ染色やＰａｐ染色の他、ヘマトキシリン染色（Ｅ染色）、ギムザ染色、エラスチカワンギーソン染色といった特殊染色、ＨＥ染色と併せて弾性繊維を特異的に染色するビクトリア青染色を施す３重染色等がある。なお、Ｐａｐ染色やギムザ染色は、細胞診用標本を対象とした染色手法である。
【００３８】
一方、分子標的染色の中のＩＨＣ法又はＩＣＣ法は、局在を検討したい物質（主にタンパク質）に対する特異的な抗体を組織に作用させてその物質に結合させることにより、その状態を可視化するものである。例えば、抗原に結合した抗体の局在を酵素反応による発色によって可視化する酵素抗体法が知られており、酵素としては、例えばペルオキシダーゼやアルカリホスファターゼが汎用的に用いられている。
【００３９】
すなわち、以下の説明において標本を染色する色素とは、染色によって可視化される色成分と、例えば酵素反応による発色等によって可視化される色成分とを含む意味である。以下、形態観察染色によって可視化される色素を「形態観察色素」と呼び、分子標的染色によって可視化される色素を「分子標的色素」と呼び、実際に対象標本を染色している色素を「染色色素」と呼ぶ。
【００４０】
また、実施の形態１では、前述のように対象標本を染色している染色色素である形態観察染色または分子標的染色のうちの少なくともいずれか１つが、細胞コンポーネントを同定するための細胞コンポーネント同定用染色に相当する。この細胞コンポーネント同定用染色は、細胞コンポーネントである細胞核、細胞膜または細胞質を特異的に染色するものであり、以下、細胞核を同定するための細胞コンポーネント同定用染色によって可視化される染色色素のことを適宜「細胞核同定用色素」と呼び、細胞膜を同定するための細胞コンポーネント同定用染色によって可視化される染色色素のことを適宜「細胞膜同定用色素」と呼び、細胞質を同定するための細胞コンポーネント同定用染色によって可視化される色素染色色素のことを適宜「細胞質同定用色素」と呼び、細胞核同定用色素と細胞膜同定用色素と細胞質同定用色素とを包括して「細胞コンポーネント同定用色素」と呼ぶ。この細胞コンポーネント同定用色素は、要素特定用色素に相当する。
【００４１】
より具体的には、実施の形態１で観察・診断対象として例示する対象標本は、形態観察染色としてヘマトキシリン（以下、「Ｈ色素」と呼ぶ。）およびエオジン（以下、「Ｅ色素」と呼ぶ。）の２つの色素を用いたＨＥ染色を施した組織標本である。加えて、この組織標本に、分子標的染色として、エストロゲン受容体（ＥＲ）を認識する抗ＥＲ抗体およびプロゲステロン受容体（ＰｇＲ）を認識する抗ＰｇＲ抗体を用い、ＤＡＢ反応による発色（以下、「ＤＡＢ色素」と呼ぶ。）で標識を施したものである。また、ＨＥＲ２受容体（ＨＥＲ２）を認識する抗ＨＥＲ２抗体を用い、Vector  Laboratories社製の「Ｖｅｃｔｏｒ  ＶＩＰ基質」による発色（以下、「ＶＶ色素」と呼ぶ。）で標識を施したものである。さらに、上皮細胞の細胞膜上に発現する糖蛋白の一種である上皮特異抗原ＥＳＡ（Epithelial  Specific  Antigen）を認識するＥＳＡ抗体を用い、Vector  Laboratories社製の「Ｖｅｃｔｏｒ  ＮｏｖａＲｅｄ基質」による発色（以下、「ＶＲ色素」と呼ぶ。）で標識を施したものである。すなわち、実施の形態１において観察・診断対象とする対象標本の染色色素は、Ｈ色素、Ｅ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素およびＶＲ色素の５種類であり、Ｈ色素によって細胞核が青紫色に染色され、Ｅ色素によって細胞質や結合組織が薄赤色に染色され、ＤＡＢ色素によってＥＲおよびＰｇＲが茶褐色に標識され、ＶＶ色素によってＨＥＲ２が紫色に標識され、ＶＲ色素によって上皮細胞の細胞膜が赤レンガ色に標識されたものである。そして、実施の形態１では、これら５つの染色色素のうちのＨ色素を細胞核同定用色素、ＶＲ色素を細胞膜同定用色素としてそれぞれ用い、ＥＲ，ＰｇＲやＨＥＲ２の発現パターン、具体的には、細胞核上でのＥＲおよび／またはＰｇＲの発現の有無と、細胞膜上でのＨＥＲ２の発現の有無との組み合わせに従ってＶＳ画像中に映る対象標本内の細胞を事前に設定される細胞亜型に分類する場合を例にとって説明する。
【００４２】
なお、本発明は、酵素抗体法によって染色された標本を観察する場合に限定されるものではなく、例えばＣＩＳＨ法で標識された標本にも適用できる。あるいは、ＩＨＣ法およびＣＩＳＨ法で同時標識された（多重に染色された）標本にも適用できる。
【００４３】
次に、実施の形態１の顕微鏡システム１の構成について説明する。図２は、顕微鏡システム１の全体構成例を説明する模式図である。また、図３は、顕微鏡システム１を構成するホストシステム４の主要な機能構成を示すブロック図である。図２に示すように、顕微鏡システム１は、顕微鏡装置２とホストシステム４とがデータの送受可能に接続されて構成される。以下、図２に示す対物レンズ２７１の光軸方向をＺ方向とし、Ｚ方向と垂直な平面をＸＹ平面として定義する。
【００４４】
顕微鏡装置２は、対象標本Ｓが載置される電動ステージ２０と、側面視略コの字状を有し、電動ステージ２０を支持するとともにレボルバ２７を介して対物レンズ２７１を保持する顕微鏡本体２３と、顕微鏡本体２３の底部後方（図２の右方）に配設された透過照明用光源２８１と、顕微鏡本体２３の上部後方（図２の右方）に配設された落射照明用光源２８３と、顕微鏡本体２３の上部に載置された鏡筒２９とを備える。また、鏡筒２９には、対象標本Ｓの標本像を目視観察するための双眼部３１と、対象標本Ｓの標本像を撮像するためのＴＶカメラ３２が取り付けられている。
【００４５】
また、顕微鏡装置２は、明視野観察と蛍光観察とに共用されるものであり、蛍光観察用の観察キューブ（蛍光キューブ）２６１を観察光の光路上（詳細には、観察光の光路が落射照明用光源２８３から射出された照明光（以下、「落射照明光」と呼ぶ。）の光路と交差する位置）に挿脱自在に配置するキューブ切換部２６を備える。このキューブ切換部２６は、観察キューブを装着するための装着部を２つ備え、一方の装着部において蛍光キューブ２６１が装着され、他方の装着部は、観察キューブが未装着の空穴２６５として構成されている。そして、キューブ切換部２６は、明視野観察時には、空穴２６５を観察光の光路上（前述の交差位置）に配置する一方、蛍光観察時には蛍光キューブ２６１を観察光の光路上（前述の交差位置）に配置する。ここで、蛍光キューブ２６１は、特定の励起波長の光（励起光）を透過させる励起フィルター２６２と、この励起光によって励起された対象標本Ｓから発せられる蛍光を透過させる吸収フィルター２６３と、励起光を反射し、蛍光を透過させるダイクロイックミラー２６４とを設置してユニット化したものである。
【００４６】
電動ステージ２０は、ＸＹＺ方向に移動自在に構成されている。具体的には、電動ステージ２０は、モータ２１１およびこのモータ２１１の駆動を制御するＸＹ駆動制御部２１３によってＸＹ平面内で移動自在である。ＸＹ駆動制御部２１３は、顕微鏡コントローラ３３の制御のもと、図示しないＸＹ位置の原点センサによって電動ステージ２０のＸＹ平面における所定の原点位置を検知し、この原点位置を基点としてモータ２１１の駆動量を制御することによって、対象標本Ｓ上の観察箇所を移動させる。そして、ＸＹ駆動制御部２１３は、観察時の電動ステージ２０のＸ位置およびＹ位置を適宜顕微鏡コントローラ３３に出力する。また、電動ステージ２０は、モータ２２１およびこのモータ２２１の駆動を制御するＺ駆動制御部２２３によってＺ方向に移動自在である。Ｚ駆動制御部２２３は、顕微鏡コントローラ３３の制御のもと、図示しないＺ位置の原点センサによって電動ステージ２０のＺ方向における所定の原点位置を検知し、この原点位置を基点としてモータ２２１の駆動量を制御することによって、所定の高さ範囲内の任意のＺ位置に対象標本Ｓを焦準移動させる。そして、Ｚ駆動制御部２２３は、観察時の電動ステージ２０のＺ位置を適宜顕微鏡コントローラ３３に出力する。
【００４７】
レボルバ２７は、顕微鏡本体２３に対して回転自在に設けられ、対物レンズ２７１を対象標本Ｓの上方に配置する。対物レンズ２７１は、レボルバ２７に対して倍率（観察倍率）の異なる他の対物レンズとともに交換自在に装着されており、レボルバ２７の回転に応じて観察光の光路上に挿入されて対象標本Ｓの観察に用いる対物レンズ２７１が択一的に切り換えられるようになっている。なお、実施の形態１では、レボルバ２７は、対物レンズ２７１として、例えば２倍，４倍といった比較的倍率の低い対物レンズ（以下、適宜「低倍対物レンズ」と呼ぶ。）と、１０倍，２０倍，４０倍といった低倍対物レンズの倍率に対して高倍率である対物レンズ（以下、適宜「高倍対物レンズ」と呼ぶ。）とを少なくとも１つずつ保持していることとする。ただし、低倍および高倍とした倍率は一例であり、少なくとも一方の倍率が他方の倍率に対して高ければよい。
【００４８】
顕微鏡本体２３は、底部において対象標本Ｓを透過照明するための照明光学系（透過照明光学系）を内設するとともに、上部において対象標本Ｓを落射照明するための照明光学系（落射照明光学系）を内設している。
【００４９】
対象標本Ｓを透過照明するための透過照明光学系は、透過照明用光源２８１から射出された照明光（以下、「透過照明光」と呼ぶ。）を集光するコレクタレンズ２４１、透過用フィルタユニット２４２、透過用視野絞り２４３、透過用開口絞り２４４、透過照明光の光路を対物レンズ２７１の光軸に沿って偏向させる折曲げミラー２４４、コンデンサ光学素子ユニット２４６、トップレンズユニット２４７等が、透過照明光の光路に沿って適所に配置されて構成される。透過照明用光源２８１からの透過照明光は、この透過照明光学系によって対象標本Ｓに照射され、観察光として対物レンズ２７１に入射する。
【００５０】
一方、対象標本Ｓを落射照明するための落射照明光学系は、コレクタレンズ２５１、落射用フィルタユニット２５２、落射シャッタ２５３、落射用視野絞り２５４、落射用開口絞り２５５等が、落射照明光の光路に沿って適所に配置されて構成される。ここで、落射照明光学系を構成する落射シャッタ２５３は、透過照明光学系によって対象標本Ｓを照明する場合に落射照明光の光路上に挿入され、落射照明光を遮断する。一方、落射照明光学系によって対象標本Ｓを照明する場合には、落射シャッタ２５３は、落射照明光の光路上から退避する。
【００５１】
また、顕微鏡本体２３は、その上部においてフィルタユニット３０を内設している。フィルタユニット３０は、標本像として結像する光の波長帯域を所定範囲に制限するための光学フィルタ３０３を回転自在に保持し、この光学フィルタ３０３を、適宜対物レンズ２７１後段において観察光の光路上に挿入する。対物レンズ２７１を経た観察光は、このフィルタユニット３０を経由して鏡筒２９に入射する。
【００５２】
鏡筒２９は、フィルタユニット３０を経た観察光の光路を切り換えて双眼部３１またはＴＶカメラ３２へと導くビームスプリッタ２９１を内設している。対象標本Ｓの標本像は、このビームスプリッタ２９１によって双眼部３１内に導入され、接眼レンズ３１１を介して検鏡者に目視観察される。あるいはＴＶカメラ３２によって撮像される。ＴＶカメラ３２は、標本像（詳細には対物レンズ２７１の視野範囲）を結像するＣＣＤやＣＭＯＳ等の撮像素子を備えて構成され、標本像を撮像し、標本像の画像データをホストシステム４に出力する。
【００５３】
実施の形態１では、以上のように構成される顕微鏡装置２において、キューブ切換部２６が空穴２６５を観察光の光路上に配置し、透過照明用光源２８１からの透過照明光を透過照明光学系によって対象標本Ｓに照射して、対象標本Ｓの明視野観察を行う。
【００５４】
ここで、フィルタユニット３０について詳細に説明する。フィルタユニット３０は、ＴＶカメラ３２によって標本像をマルチバンド撮像する際に用いられる。図４は、フィルタユニット３０の構成を説明する模式図である。図４に示すフィルタユニット３０は、光学素子を装着するための装着穴が例えば３つ形成された回転式の光学フィルタ切換部３０１を有し、この３つの装着穴のうちの２つにそれぞれ異なる分光透過率特性を有する２枚の光学フィルタ３０３（３０３ａ，３０３ｂ）が装着され、残りの１つの穴が空穴３０５として構成されている。
【００５５】
図５は、一方の光学フィルタ３０３ａの分光透過率特性を示す図であり、図６は、他方の光学フィルタ３０３ｂの分光透過率特性を示す図である。図５，６に示すように、各光学フィルタ３０３ａ，３０３ｂは、それぞれＴＶカメラ３２のＲ，Ｇ，Ｂ各バンドを２分割する分光特性を有している。対象標本Ｓをマルチバンド撮像する場合は先ず、光学フィルタ切換部３０１を回転させて光学フィルタ３０３ａを観察光の光路上に挿入し、ＴＶカメラ３２によって標本像の第１の撮像を行う。次いで、光学フィルタ切換部３０１の回転によって光学フィルタ３０３ｂを観察光の光路上に挿入し、ＴＶカメラ３２によって標本像の第２の撮像を行う。この第１の撮像及び第２の撮像によって、それぞれ３バンドの画像が得られ、双方を合わせることによって６バンドのマルチバンド画像（分光スペクトル画像）が得られる。
【００５６】
このように、フィルタユニット３０を用いて標本像をマルチバンド撮像する場合には、透過照明用光源２８１から射出されて透過照明光学系によって対象標本Ｓに照射された透過照明光は、観察光として対物レンズ２７１に入射し、その後光学フィルタ３０３ａまたは光学フィルタ３０３ｂを経由してＴＶカメラ３２の撮像素子上に結像する。図７は、標本像をＴＶカメラ３２で撮像する際のＲ，Ｇ，Ｂ各バンドの分光感度の例を示す図である。
【００５７】
なお、通常の撮像を行う場合（標本像のＲＧＢ画像を撮像する場合）には、図４の光学フィルタ切換部３０１を回転させて空穴３０５を観察光の光路上に配置すればよい。また、ここでは、光学フィルタ３０３ａ，３０３ｂを対物レンズ２７１後段に配置する場合を例示したが、これに限定されるものではなく、透過照明用光源２８１からＴＶカメラ３２に至る光路上のいずれかの位置に配置することとしてよい。また、光学フィルタの数は２枚に限定されず、適宜３枚以上の光学フィルタを用いてフィルタユニットを構成してよく、マルチバンド画像のバンド数も６バンドに限定されるものではない。例えば、特許文献１に開示されている技術を用い、１６枚のバンドパスフィルタを切り換えながら面順次方式でマルチバンド画像を撮像し、１６バンドのマルチバンド画像を撮像するようにしてもよい。また、マルチバンド画像を撮像する構成は、光学フィルタを切り換える手法に限定されるものではない。例えば、複数のＴＶカメラを用意する。そして、ビームスプリッタ等を介して各ＴＶカメラに観察光を導き、分光特性を相補的に補完する結像光学系を構成してもよい。これによれば、各ＴＶカメラで同時に標本像を撮像し、これらを合わせることによって１度にマルチバンド画像が得られるので、処理の高速化が図れる。
【００５８】
そして、顕微鏡装置２は、図２に示すように、顕微鏡コントローラ３３とＴＶカメラコントローラ３４とを備える。顕微鏡コントローラ３３は、ホストシステム４の制御のもと、顕微鏡装置２を構成する各部の動作を統括的に制御する。例えば、顕微鏡コントローラ３３は、レボルバ２７を回転させて観察光の光路上に配置する対物レンズ２７１を切り換える処理や、切り換えた対物レンズ２７１の倍率等に応じた透過照明用光源２８１あるいは落射照明用光源２８３の調光制御や各種光学素子の切り換え、あるいはＸＹ駆動制御部２１３やＺ駆動制御部２２３に対する電動ステージ２０の移動指示等、対象標本Ｓの観察に伴う顕微鏡装置２の各部の調整を行うとともに、各部の状態を適宜ホストシステム４に通知する。ＴＶカメラコントローラ３４は、ホストシステム４の制御のもと、自動ゲイン制御のＯＮ／ＯＦＦ切換、ゲインの設定、自動露出制御のＯＮ／ＯＦＦ切換、露光時間の設定等を行ってＴＶカメラ３２を駆動し、ＴＶカメラ３２の撮像動作を制御する。
【００５９】
一方、ホストシステム４は、入力部４１、表示部４３、処理部４５、記録部４７等を備える。
【００６０】
入力部４１は、例えば、キーボードやマウス、タッチパネル、各種スイッチ等によって実現されるものであり、操作入力に応じた操作信号を処理部４５に出力する。表示部４３は、ＬＣＤやＥＬディスプレイ等の表示装置によって実現されるものであり、処理部４５から入力される表示信号をもとに各種画面を表示する。
【００６１】
処理部４５は、ＣＰＵ等のハードウェアによって実現される。この処理部４５は、入力部４１から入力される入力信号や、顕微鏡コントローラ３３から入力される顕微鏡装置２各部の状態、ＴＶカメラ３２から入力される画像データ、記録部４７に記録されるプログラムやデータ等をもとにホストシステム４を構成する各部への指示やデータの転送等を行い、あるいは顕微鏡コントローラ３３やＴＶカメラコントローラ３４に対する顕微鏡装置２各部の動作指示を行い、顕微鏡システム１全体の動作を統括的に制御する。そして例えば、処理部４５は、電動ステージ２０をＺ方向に移動させながら、ＴＶカメラ３２から入力される画像データをもとに各Ｚ位置における画像のコントラストを評価し、合焦している焦点位置（合焦位置）を検出するＡＦ（自動焦点）の処理を行う。また、処理部４５は、ＴＶカメラ３２から入力される画像データの記録部４７への記録処理や表示部４３への表示処理に際し、ＪＰＥＧやＪＰＥＧ２０００等の圧縮方式に基づく圧縮処理や伸張処理を行う。この処理部４５は、ＶＳ画像生成部４５１と、表示処理手段としてのＶＳ画像表示処理部４５４とを備える。
【００６２】
ＶＳ画像生成部４５１は、標本像の低解像画像および高解像画像を取得してＶＳ画像を生成する。ここで、ＶＳ画像とは、顕微鏡装置２によって撮像した１枚または２枚以上の画像を繋ぎ合せて生成した画像のことであるが、以下では、高倍対物レンズを用いて対象標本Ｓを部分毎に撮像した複数の高解像画像を繋ぎ合せて生成した画像であって、対象標本Ｓの全域を映した広視野でかつ高精細のマルチバンド画像のことをＶＳ画像と呼ぶ。
【００６３】
このＶＳ画像生成部４５１は、低解像画像取得処理部４５２と、画像取得手段および標本画像生成手段としての高解像画像取得処理部４５３とを含む。低解像画像取得処理部４５２は、顕微鏡装置２各部の動作指示を行って標本像の低解像画像を取得する。高解像画像取得処理部４５３は、顕微鏡装置２各部の動作指示を行って標本像の高解像画像を取得する。ここで、低解像画像は、対象標本Ｓの観察に低倍対物レンズを用い、ＲＧＢ画像として取得される。これに対し、高解像画像は、対象標本Ｓの観察に高倍対物レンズを用い、マルチバンド画像として取得される。
【００６４】
ＶＳ画像表示処理部４５４は、ＶＳ画像をもとに対象標本Ｓ上の各標本位置を染色している染色色素毎の色素量を算出し、ＶＳ画像の表示用のＲＧＢ画像（表示画像）を生成して表示部４３に表示する処理を行う。このＶＳ画像表示処理部４５４は、染色色素設定部４５５と、細胞コンポーネント同定用色素設定部４５６と、色素量取得手段としての色素量算出部４５７と、要素領域特定手段としての細胞コンポーネント同定処理部４５８と、細胞認識部４５９と、発現部位抽出手段としての標的分子発現部位抽出部４６０と、発現パターン設定手段としての細胞亜型設定部４６１と、発現パターン分類手段としての細胞亜型分類判定部４６２と、表示画像生成手段としての表示画像生成部４６３とを含む。
【００６５】
染色色素設定部４５５は、入力部４１を介してユーザによる染色色素の登録操作を受け付け、操作入力に従って染色色素を設定する。細胞コンポーネント同定用色素設定部４５６は、入力部４１を介してユーザによる細胞コンポーネント同定用色素の選択操作を受け付け、操作入力に従って細胞コンポーネント同定用色素を設定する。
【００６６】
色素量算出部４５７は、ＶＳ画像を構成する画素毎に対応する対象標本Ｓ上の各標本位置における分光透過率を推定し、推定した分光透過率（推定スペクトル）をもとに各標本位置における染色色素毎の色素量を算出する。細胞コンポーネント同定処理部４５８は、細胞コンポーネント同定用色素設定部４５６によって細胞コンポーネント同定用色素が設定された細胞コンポーネントの同定を行う。
【００６７】
細胞認識部４５９は、細胞コンポーネント同定処理部４５８によって同定された細胞コンポーネントの領域をもとに、ＶＳ画像中の細胞の領域（細胞領域）を認識する。標的分子発現部位抽出部４６０は、入力部４１を介してユーザによる抽出条件の設定操作を受け付け、操作入力に従って標的部位の抽出条件を設定するとともに、設定した抽出条件を満たすＶＳ画像内の標的分子発現部位の領域を抽出する。
【００６８】
細胞亜型設定部４６１は、入力部４１を介してユーザによる細胞亜型の設定操作を受け付け、操作入力に従って複数の標的分子の発現の有無を組み合わせた標的分子の発現パターンを細胞亜型として設定する。細胞亜型分類判定部４６２は、ＶＳ画像中の細胞領域毎に標的分子の発現パターンを判定し、各細胞領域をその標的分子の発現パターンに該当する細胞亜型に分類する。各細胞領域における標的分子の発現パターンは、細胞領域に含まれる標的分子発現部位の組み合わせによって判定する。
【００６９】
表示画像生成部４６３は、表示対象の染色色素および／または細胞亜型を表したＶＳ画像の表示画像を生成し、表示部４３に表示する処理を行う。表示対象は、入力部４１を介してユーザによる表示対象の染色色素および／または細胞亜型の選択操作を受け付け、操作入力に従って選択する。表示対象として染色色素が選択された場合には、表示画像生成部４６３は、選択された染色色素の染色状態を表した表示画像を生成する。また、表示対象として細胞亜型が選択された場合には、表示画像生成部４６３は、選択された細胞亜型に分類された細胞領域を識別表示した表示画像を生成する。
【００７０】
記録部４７は、更新記憶可能なフラッシュメモリ等のＲＯＭやＲＡＭといった各種ＩＣメモリ、内蔵或いはデータ通信端子で接続されたハードディスク、ＣＤ−ＲＯＭ等の記憶媒体およびその読書装置等によって実現されるものである。この記録部４７には、ホストシステム４を動作させ、このホストシステム４が備える種々の機能を実現するためのプログラムや、このプログラムの実行中に使用されるデータ等が記録される。
【００７１】
そして、記録部４７には、処理部４５をＶＳ画像生成部４５１として機能させて実施の形態１のＶＳ画像生成処理を実現するためのＶＳ画像生成プログラム４７１と、処理部４５をＶＳ画像表示処理部４５４として機能させてＶＳ画像表示処理を実現するためのＶＳ画像表示処理プログラム４７３とが記録される。また、記録部４７には、ＶＳ画像ファイル５が記録される。このＶＳ画像ファイル５の詳細については後述する。
【００７２】
また、記録部４７には、擬似表示色データ４７５が記録される。図８は、擬似表示色の分光透過率特性（スペクトル）の一例を示す図であり、図８では、２種類の擬似表示色Ｃ１および擬似表示色Ｃ２のスペクトルとともに、染色色素であるＨ色素、Ｅ色素およびＤＡＢ色素のスペクトル（ＶＶ色素およびＶＲ色素のスペクトルについては不図示）を示している。実施の形態１では、図８にそれぞれ実線で示す擬似表示色Ｃ１や擬似表示色Ｃ２のように、各染色色素のスペクトルとは異なるスペクトルであって、例えば各染色色素と比べて彩度の高いスペクトルを有する擬似表示色のスペクトルを用意する。そして、擬似表示色データ４７５として予め記録部４７に記録しておき、この擬似表示色のスペクトルをユーザ操作に応じて適宜染色色素のスペクトルとして用いる。
【００７３】
なお、ホストシステム４は、ＣＰＵやビデオボード、メインメモリ等の主記憶装置、ハードディスクや各種記憶媒体等の外部記憶装置、通信装置、表示装置や印刷装置等の出力装置、入力装置、各部を接続し、あるいは外部入力を接続するインターフェース装置等を備えた公知のハードウェア構成で実現でき、例えばワークステーションやパソコン等の汎用コンピュータを利用することができる。
【００７４】
次に、実施の形態１におけるＶＳ画像生成処理およびＶＳ画像表示処理について順番に説明する。先ず、ＶＳ画像生成処理について説明する。図９は、ホストシステム４の処理部４５がＶＳ画像生成処理を行うことによって実現される顕微鏡システム１の動作を示すフローチャートである。なお、ここで説明する顕微鏡システム１の動作は、ＶＳ画像生成部４５１が記録部４７に記録されたＶＳ画像生成プログラム４７１を読み出して実行することによって実現される。
【００７５】
図９に示すように、先ずＶＳ画像生成部４５１の低解像画像取得処理部４５２が、対象標本Ｓの観察に用いる対物レンズ２７１を低倍対物レンズに切り換える指示を顕微鏡コントローラ３３に出力する（ステップａ１）。これに応答して顕微鏡コントローラ３３は、必要に応じてレボルバ２７を回転させ、低倍対物レンズを観察光の光路上に配置する。
【００７６】
続いて、低解像画像取得処理部４５２は、フィルタユニット３０を空穴３０５に切り換える指示を顕微鏡コントローラ３３に出力する（ステップａ３）。これに応答して、顕微鏡コントローラ３３は、必要に応じてフィルタユニット３０の光学フィルタ切換部３０１を回転させ、空穴３０５を観察光の光路上に配置する。
【００７７】
続いて、低解像画像取得処理部４５２は、顕微鏡コントローラ３３やＴＶカメラコントローラ３４に対する顕微鏡装置２各部の動作指示を行って、標本像の低解像画像（ＲＧＢ画像）を取得する（ステップａ５）。
【００７８】
図１０は、電動ステージ２０上に載置されるスライドガラス標本６の一例を示す図である。図２に示した電動ステージ２０上の対象標本Ｓは、実際には、図１０に示すように、スライドガラス６０上に対象標本Ｓを載置したスライドガラス標本６として電動ステージ２０上に載置される。対象標本Ｓは、スライドガラス６０上の予め定められた所定の領域（例えば、スライドガラス６０の図１０に向かって左側の例えば縦：２５ｍｍ×横：５０ｍｍの領域）である標本サーチ範囲６１に載置されるようになっている。そして、このスライドガラス６０には、標本サーチ範囲６１に載置した対象標本Ｓに関する情報を記載したシール６３が予め定められた所定の領域（例えば標本サーチ範囲６１の右側の領域）に貼付される。このシール６３には、例えば、対象標本Ｓを特定するための識別情報であるスライド標本番号を所定の規格に従ってコード化したバーコードが印字され、顕微鏡システム１を構成する図示しないバーコードリーダによって読み取られるようになっている。
【００７９】
図９のステップａ５の低解像画像取得処理部４５２による動作指示に応答して、顕微鏡装置２は、図１０に示すスライドガラス６０の標本サーチ範囲６１の画像を撮像する。具体的には、ステップａ１で切り換えた低倍対物レンズの倍率に応じて定まる視野範囲（換言すると、対象標本Ｓの観察に低倍対物レンズを用いたときのＴＶカメラ３２の撮像範囲）のサイズをもとに標本サーチ範囲６１を分割し、分割した区画サイズに従って電動ステージ２０をＸＹ平面内で移動させながら、標本サーチ範囲６１の標本像を区画毎にＴＶカメラ３２で順次撮像していく。ここで撮像された画像データはホストシステム４に出力され、低解像画像取得処理部４５２において標本像の低解像画像として取得される。
【００８０】
そして、低解像画像取得処理部４５２は、図９に示すように、ステップａ５で取得した区画毎の低解像画像を結合し、図１０の標本サーチ範囲６１を映した１枚の画像をスライド標本全体画像として生成する（ステップａ７）。
【００８１】
続いて、高解像画像取得処理部４５３が、対象標本Ｓの観察に用いる対物レンズ２７１を高倍対物レンズに切り換える指示を顕微鏡コントローラ３３に出力する（ステップａ９）。これに応答して顕微鏡コントローラ３３は、レボルバ２７を回転させ、高倍対物レンズを観察光の光路上に配置する。
【００８２】
続いて、高解像画像取得処理部４５３は、ステップａ７で生成したスライド標本全体画像をもとに、図１０の標本サーチ範囲６１内の実際に対象標本Ｓが載置されている標本領域６５を自動抽出して決定する（ステップａ１１）。この標本領域の自動抽出は、公知の手法を適宜採用して行うことができる。例えば、スライド標本全体画像の各画素を２値化して標本の有無を画素毎に判定し、対象標本Ｓを映した画素と判定された画素範囲を囲う矩形領域を標本領域として決定する。なお、入力部４１を介してユーザによる標本領域の選択操作を受け付け、操作入力に従って標本領域を決定することとしてもよい。
【００８３】
続いて、高解像画像取得処理部４５３は、スライド標本全体画像からステップａ１１で決定した標本領域の画像（標本領域画像）を切り出し、この標本領域画像の中から合焦位置を実測する位置を選出してフォーカス位置を抽出する（ステップａ１３）。
【００８４】
図１１は、スライド標本全体画像から切り出した標本領域画像７の一例を示す図であり、図１１では、図１０の標本領域６５の画像を示している。先ず高解像画像取得処理部４５３は、図１１に示すように、標本領域画像７を格子状に分割し、複数の小区画を形成する。ここで、小区画の区画サイズは、ステップａ９で切り換えた高倍対物レンズの倍率に応じて定まる視野範囲（換言すると、対象標本Ｓの観察に高倍対物レンズを用いたときのＴＶカメラ３２の撮像範囲）のサイズに相当する。
【００８５】
次いで高解像画像取得処理部４５３は、形成した複数の小区画の中から、図１１に示すように、フォーカス位置とする小区画を選出する。これは、全ての小区画について合焦位置を実測しようとすると処理時間が増大してしまうためであり、例えば各小区画の中から所定数の小区画をランダムに選出する。あるいは、フォーカス位置とする小区画を例えば所定数の小区画おきに選出する等、所定の規則に従って選出してもよい。また、小区画の数が少ない場合には、全ての小区画をフォーカス位置として選出するようにしてもよい。そして、高解像画像取得処理部４５３は、標本領域画像７の座標系（ｘ，ｙ）における選出した小区画の中心座標を算出するとともに、算出した中心座標を顕微鏡装置２の電動ステージ２０の座標系（Ｘ，Ｙ）に変換してフォーカス位置を得る。なお、この座標変換は、対象標本Ｓの観察に用いる対物レンズ２７１の倍率、あるいはＴＶカメラ３２を構成する撮像素子の画素数や画素サイズ等に基づいて行われ、例えば特許文献４に記載の公知技術を適用して実現できる。
【００８６】
続いて、高解像画像取得処理部４５３は、図９に示すように、顕微鏡コントローラ３３やＴＶカメラコントローラ３４に対する顕微鏡装置２各部の動作指示を行って、フォーカス位置の合焦位置を測定する（ステップａ１５）。このとき、高解像画像取得処理部４５３は、抽出した各フォーカス位置を顕微鏡コントローラ３３に出力する。これに応答して、顕微鏡装置２は、電動ステージ２０をＸＹ平面内で移動させて各フォーカス位置を順次対物レンズ２７１の光軸位置に移動させる。そして、顕微鏡装置２は、各フォーカス位置で電動ステージ２０をＺ方向に移動させながらＴＶカメラ３２によってフォーカス位置の画像データを取り込む。取り込まれた画像データはホストシステム４に出力され、高解像画像取得処理部４５３において取得される。高解像画像取得処理部４５３は、各Ｚ位置における画像データのコントラストを評価して各フォーカス位置における対象標本Ｓの合焦位置（Ｚ位置）を測定する。
【００８７】
高解像画像取得処理部４５３は、以上のようにして各フォーカス位置における合焦位置を測定したならば、続いて、各フォーカス位置の合焦位置の測定結果をもとにフォーカスマップを作成し、記録部４７に記録する（ステップａ１７）。具体的には、高解像画像取得処理部４５３は、ステップａ１３でフォーカス位置として抽出されなかった小区画の合焦位置を、近傍するフォーカス位置の合焦位置で補間演算することによって全ての小区画について合焦位置を設定し、フォーカスマップを作成する。
【００８８】
図１２は、フォーカスマップのデータ構成例を説明する図である。図１２に示すように、フォーカスマップは、配列番号と電動ステージ位置とを対応付けたデータテーブルである。配列番号は、図１１に示した標本領域画像７の各小区画を示している。具体的には、ｘで示す配列番号は、左端を初順としてｘ方向に沿って各列に順番に付した通し番号であり、ｙで示す配列番号は、最上段を初順としてｙ方向に沿って各行に順番に付した通し番号である。なお、ｚで示す配列番号は、ＶＳ画像を３次元画像として生成する場合に設定される値である。電動ステージ位置は、対応する配列番号が示す標本領域画像の小区画について合焦位置と設定された電動ステージ２０のＸ，Ｙ，Ｚの各位置である。例えば、（ｘ，ｙ，ｚ）＝（１，１，−）の配列番号は、図１１の小区画７１を示しており、座標系（ｘ，ｙ）における小区画７１の中心座標を電動ステージ２０の座標系（Ｘ，Ｙ）に変換したときのＸ位置及びＹ位置が、Ｘ11およびＹ11にそれぞれ相当する。また、この小区画について設定した合焦位置（Ｚ位置）がＺ11に相当する。
【００８９】
続いて高解像画像取得処理部４５３は、図９に示すように、フィルタユニット３０を光学フィルタ３０３ａ，３０３ｂに切り換える指示を顕微鏡コントローラ３３に順次出力するとともに、フォーカスマップを参照しながら顕微鏡コントローラ３３やＴＶカメラコントローラ３４に対する顕微鏡装置２各部の動作指示を行って、標本領域画像の小区画毎に標本像をマルチバンド撮像し、高解像画像（以下、適宜「標本領域区画画像」と呼ぶ。）を取得する（ステップａ１９）。
【００９０】
これに応答して、顕微鏡装置２は、フィルタユニット３０の光学フィルタ切換部３０１を回転させ、先ず光学フィルタ３０３ａを観察光の光路上に配置した状態で電動ステージ２０を移動させながら、標本領域画像の小区画毎の標本像をそれぞれの合焦位置においてＴＶカメラ３２で順次撮像していく。次いで、観察光の光路上に光学フィルタ３０３ｂを切り換えて配置し、同様にして標本領域画像の小区画毎の標本像を撮像する。ここで撮像された画像データはホストシステム４に出力され、高解像画像取得処理部４５３において標本像の高解像画像（標本領域区画画像）として取得される。
【００９１】
続いて高解像画像取得処理部４５３は、ステップａ１９で取得した高解像画像である標本領域区画画像を結合し、図１０の標本領域６５の全域を映した１枚の画像をＶＳ画像として生成する（ステップａ２１）。
【００９２】
なお、上記のステップａ１３〜ステップａ２１では、標本領域画像を高倍対物レンズの視野範囲に相当する小区画に分割することとした。そして、この小区画毎に標本像を撮像して標本領域区画画像を取得し、これらを結合してＶＳ画像を生成することとした。これに対し、隣接する標本領域区画画像がその隣接位置で互いに一部重複（オーバーラップ）するように小区画を設定するようにしてもよい。そして、隣接する標本領域区画画像間の位置関係が合うように貼り合わせて合成し、１枚のＶＳ画像を生成するようにしてもよい。具体的な処理は、例えば特許文献４や特許文献５に記載の公知技術を適用して実現できるが、この場合には、取得される各標本領域区画画像の端部部分がそれぞれ隣接する標本領域区画画像との間で重複するように、小区画の区画サイズを高倍対物レンズの視野範囲よりも小さいサイズに設定する。このようにすれば、電動ステージ２０の移動制御の精度が低く、隣接する標本領域区画画像間が不連続となる場合であっても、重複部分によって繋ぎ目が連続した自然なＶＳ画像を生成できる。
【００９３】
以上説明したＶＳ画像生成処理の結果、対象標本Ｓの全域を映した広視野でかつ高精細なマルチバンド画像が得られる。ここで、ステップａ１〜ステップａ２１の処理は自動的に行われる。このため、ユーザは、対象標本Ｓ（詳細には図１０のスライドガラス標本６）を電動ステージ２０上に載置し、入力部４１を介してＶＳ画像生成処理の開始指示操作を入力するだけでよい。なお、ステップａ１〜ステップａ２１の各ステップで適宜処理を中断し、ユーザの操作を介在可能に構成してもよい。例えば、ステップａ９の後の操作入力に従って、使用する高倍対物レンズを別の倍率の対物レンズに変更する処理や、ステップａ１１の後の操作入力に従って、決定した標本領域を修正する処理、ステップａ１３の後の操作入力に従って、抽出したフォーカス位置を変更、追加または削除する処理等を適宜行うようにしてもよい。
【００９４】
図１３〜図１５は、ＶＳ画像生成処理の結果得られて記録部４７に記録されるＶＳ画像ファイル５のデータ構成例を説明する図である。図１３（ａ）に示すように、ＶＳ画像ファイル５は、付帯情報５１と、スライド標本全体画像データ５２と、ＶＳ画像データ５３とを含む。
【００９５】
付帯情報５１には、図１３（ｂ）に示すように、観察法５１１やスライド標本番号５１２、スライド標本全体画像の撮像倍率５１３、染色情報５１４、細胞亜型設定情報５１８、データ種別５１９等が設定される。
【００９６】
観察法５１１は、ＶＳ画像の生成に用いた顕微鏡装置２の観察法であり、実施の形態１では、例えば「明視野観察法」が設定される。暗視野観察や蛍光観察、微分干渉観察等の他の観察法で標本の観察が可能な顕微鏡装置を用いた場合には、ＶＳ画像を生成したときの観察法が設定される。
【００９７】
スライド標本番号５１２には、例えば図１０に示したスライドガラス標本６のシール６３から読み取ったスライド標本番号が設定される。このスライド標本番号は、例えば、スライドガラス標本６に固有に割り当てられたＩＤであり、これによって、対象標本Ｓを個別に識別できる。スライド標本全体画像の撮像倍率５１３には、スライド標本全体画像の取得時に用いた低倍対物レンズの倍率が設定される。スライド標本全体画像データ５２は、スライド標本全体画像の画像データである。
【００９８】
染色情報５１４には、対象標本Ｓを染色している染色色素が設定される。すなわち、実施の形態１では、Ｈ色素、Ｅ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素、およびＶＲ色素が設定されるが、この染色情報５１４は、後述のＶＳ画像表示処理の過程でユーザが対象標本Ｓを染色している色素を操作入力して登録することで設定される。
【００９９】
具体的には、染色情報５１４は、図１４（ａ）に示すように、染色色素のうちの形態観察色素が設定される形態観察染色情報５１５と、分子標的色素が設定される分子標的染色情報５１６と、これら形態観察染色情報５１５または分子標的染色情報５１６に設定されている染色色素（形態観察色素または分子標的色素）の中から選択されて設定される細胞コンポーネント同定用染色情報５１７とを含む。
【０１００】
そして、図１４（ｂ）に示すように、形態観察染色情報５１５は、色素数５１５１と、色素数５１５１に相当する数の色素情報（１）〜（ｍ）５１５３とを含む。色素数５１５１には、対象標本Ｓを染色している形態観察色素の数が設定され、色素情報（１）〜（ｍ）５１５３には、例えば形態観察色素の色素名がそれぞれ設定される。実施の形態１では、色素数５１５１として「２」が設定され、「Ｈ色素」および「Ｅ色素」が２つの色素情報５１５３として設定される。分子標的染色情報５１６も同様に構成され、図１４（ｃ）に示すように、色素数５１６１と、色素数５１６１に相当する数の色素情報（１）〜（ｎ）５１６３とを含む。そして、色素数５１６１には、対象標本Ｓを染色している分子標的色素の数が設定され、色素情報（１）〜（ｎ）５１６３には、例えば分子標的色素の色素名がそれぞれ設定される。また、色素情報（１）〜（ｎ）５１６３には、後述する色素登録画面（図２３を参照）においてユーザが対応する分子標的色素について入力したコメント情報が適宜設定される。実施の形態１では、色素数５１６１として「３」が設定され、「ＤＡＢ色素」、「ＶＶ色素」、「ＶＲ色素」が３つの色素情報５１６３として設定される。
【０１０１】
また、図１４（ｄ）に示すように、細胞コンポーネント同定用染色情報５１７は、細胞核同定用色素情報５１７１と、細胞膜同定用色素情報５１７２と、細胞質同定用色素情報５１７３とを含む。細胞核同定用色素情報５１７１には、細胞核同定用色素の色素名や、細胞核を同定する際の基準として用いる色素量閾値が設定される。細胞膜同定用色素情報５１７２には、細胞膜同定用色素の色素名や、細胞膜を同定する際の基準として用いる色素量閾値が設定される。細胞質同定用色素情報５１７３には、細胞質同定用色素の色素名や、細胞質を同定する際の基準として用いる色素量閾値が設定される。なお、色素量閾値には、後述する同定用色素選択画面（図１９を参照）でユーザが対応する細胞コンポーネント（細胞核、細胞膜または細胞質）について入力した値が設定される。実施の形態１では、細胞核同定用色素情報５１７１として、「Ｈ色素」およびこのＨ色素である細胞核同定用色素についてユーザが入力した色素量閾値の値が設定される。そして、細胞膜同定用色素情報５１７２として、「ＶＲ色素」およびこのＶＲ色素である細胞膜同定用色素についてユーザが入力した色素量閾値の値が設定される。また、実施の形態１では、細胞質の同定は行わないため、細胞質同定用色素情報５１７３には「未使用」が設定される（あるいは何も設定されない）。
【０１０２】
図１３（ｂ）の細胞亜型設定情報５１８は、後述のＶＳ画像表示処理の過程でユーザが細胞亜型の呼称や該当する細胞亜型に分類する標的分子の発現パターン等を記録する。この細胞亜型設定情報５１８の詳細については、図３３に示して後述する。
【０１０３】
データ種別５１９は、ＶＳ画像のデータ種別を表す。例えば、ＶＳ画像データ５３において、画像データ５５２（図１５（ｂ）を参照）としてＶＳ画像の画像データ（生データ）５５３（図１５（ｄ）を参照）のみが記録されているのか、あるいは、各画素について既に色素量が算出されており、色素量データ５５４（図１５（ｄ））が記録されているのかを識別するためのものである。例えば、ＶＳ画像生成処理の実行時は、画像データ５５２としてその生データ５５３が記録されるのみであるので、データ種別５１９には、生データを示す識別情報が設定される。なお、後述のＶＳ画像表示処理の実行時においてＶＳ画像の各画素における色素毎の色素量が算出され、色素量データ５５４として記録される。このとき、データ種別５１９は、色素量データを示す識別情報に更新される。
【０１０４】
ＶＳ画像データ５３には、ＶＳ画像に関する各種情報が設定される。すなわち、図１５（ａ）に示すように、ＶＳ画像データ５３は、ＶＳ画像数５３１と、ＶＳ画像数５３１に相当する数のＶＳ画像情報（１）〜（ｉ）５３２とを含む。ＶＳ画像数５３１は、ＶＳ画像データ５３に記録されるＶＳ画像情報５３２の数であり、ｉに相当する。ここで、図１５（ａ）に示すＶＳ画像データ５３のデータ構成例は、１つの標本について複数のＶＳ画像を生成する場合を想定している。具体的には、図１０に示して上述した例では、スライドガラス標本６において実際に対象標本Ｓが載置されている領域として１つの標本領域６５を抽出する場合を説明したが、スライドガラス標本の中には、複数の標本が離れて点在しているものも存在する。このような場合には、標本が存在しない領域のＶＳ画像を生成する必要はない。このため、複数の標本がある程度離れて点在している場合には、これらの点在する標本の領域をそれぞれ個別に抽出し、抽出した標本の領域毎にＶＳ画像を生成するが、このときに生成するＶＳ画像の数がＶＳ画像数５３１として設定される。そして、各ＶＳ画像に関する各種情報が、それぞれＶＳ画像情報（１）〜（ｉ）５３２として設定される。なお、図１０の例においても、標本領域６５内に２つの標本の領域が含まれるが、これらの位置が近いために１つの標本領域６５として抽出される。
【０１０５】
各ＶＳ画像情報５３２には、図１５（ｂ）に示すように、撮影情報５４、フォーカスマップデータ５５１、画像データ５５２、同定コンポーネント情報５６、細胞一覧テーブル５７、標的分子発現部位情報５８、細胞亜型分類テーブル５９等が設定される。
【０１０６】
撮影情報５４には、図１５（ｃ）に示すように、ＶＳ画像の撮像倍率５４１、スキャン開始位置（Ｘ位置）５４２、スキャン開始位置（Ｙ位置）５４３、ｘ方向のピクセル数５４４、ｙ方向のピクセル数５４５、Ｚ方向の枚数５４６、バンド数５４７等が設定される。
【０１０７】
ＶＳ画像の撮像倍率５４１には、ＶＳ画像の取得時に用いた高倍対物レンズの倍率が設定される。また、スキャン開始位置（Ｘ位置）５４２、スキャン開始位置（Ｙ位置）５４３、ｘ方向のピクセル数５４４およびｙ方向のピクセル数５４５は、ＶＳ画像の撮像範囲を示している。すなわち、スキャン開始位置（Ｘ位置）５４２は、ＶＳ画像を構成する各標本領域区画画像の撮像を開始したときの電動ステージ２０のスキャン開始位置のＸ位置であり、スキャン開始位置（Ｙ位置）５４３は、スキャン開始位置のＹ位置である。そして、ｘ方向のピクセル数５４４はＶＳ画像のｘ方向のピクセル数であり、ｙ方向のピクセル数５４５はｙ方向のピクセル数であって、ＶＳ画像のサイズを示している。
【０１０８】
Ｚ方向の枚数５４６には、Ｚ方向のセクショニング数に相当し、ＶＳ画像を３次元画像として生成する際には、Ｚ方向の撮像枚数が設定される。実施の形態１では、このＺ方向の枚数５４６には「１」が設定される。また、ＶＳ画像は、マルチバンド画像として生成される。そのバンド数がバンド数５４７に設定され、実施の形態１では、「６」が設定される。
【０１０９】
また、図１５（ｂ）のフォーカスマップデータ５５１は、図１２に示したフォーカスマップのデータである。画像データ５５２は、ＶＳ画像の画像データである。この画像データ５５２には、図１５（ｄ）に示すように、６バンドの生データが設定される生データ５５３と、後述のＶＳ画像表示処理の過程で画素毎に算出される染色色素毎の色素量のデータが設定される色素量データ５５４とを含む。
【０１１０】
同定コンポーネント情報５６は、ＶＳ画像の各画素が細胞コンポーネントの画素か否かを設定したマップデータや細胞コンポーネントとして同定された領域の形態的な特徴量を設定した形態特徴データ、同定された細胞コンポーネントの領域内の画素位置の一覧等を記録する。この同定コンポーネント情報５６の詳細については、図２５および図２６に示して後述する。
【０１１１】
細胞一覧テーブル５７は、ＶＳ画像中で認識された個々の細胞領域を構成する細胞構成要素（細胞核や細胞膜、細胞質等）の領域を特定する細胞情報を記録する。この細胞一覧テーブル５７の詳細については、図２７に示して後述する。
【０１１２】
標的分子発現部位情報５８は、ＶＳ画像中で抽出された標的分子発現部位の領域を設定したマップデータや、標的分子発現部位を含む細胞コンポーネント（陽性細胞コンポーネント）の領域内の画素位置の一覧等を記録する。この標的分子発現部位情報５８の詳細については、図３０に示して後述する。
【０１１３】
細胞亜型分類テーブル５９は、ＶＳ画像中の各細胞領域の細胞亜型を記録する。この細胞亜型分類テーブル５９の詳細については、図３５に示して後述する。
【０１１４】
次に、実施の形態１におけるＶＳ画像表示処理について説明する。図１６は、実施の形態１におけるＶＳ画像表示処理の処理手順を示すフローチャートである。なお、ここで説明する処理は、ＶＳ画像表示処理部４５４が記録部４７に記録されたＶＳ画像表示処理プログラム４７３を読み出して実行することによって実現される。
【０１１５】
ＶＳ画像表示処理では、ＶＳ画像表示処理部４５４は先ず、ＶＳ画像ファイル５からデータ種別５１９（図１３（ｂ）を参照）を読み出し、ＶＳ画像のデータ種別を判定する（ステップｂ１）。データ種別５１９に色素量データを示す識別情報が設定されており、既にＶＳ画像の各画素について色素量が算出されている場合には（ステップｂ３：Ｙｅｓ）、ステップｂ１１に移行する。
【０１１６】
一方、データ種別５１９に生データを示す識別情報が設定されており、未だＶＳ画像の各画素について色素量が算出されていない場合には（ステップｂ３：Ｎｏ）、色素量算出処理に移る（ステップｂ５）。図１７は、色素量算出処理の処理手順を示すフローチャートである。
【０１１７】
色素量算出処理では、先ず、染色色素設定部４５５が、対象標本Ｓを染色している染色色素の登録依頼の通知を表示部４３に表示する処理を行う（ステップｃ１）。例えば、色素登録画面を表示部４３に表示する処理を行って染色色素の登録依頼を通知し、この色素登録画面上でユーザによる染色色素の登録操作を受け付ける。図１８は、色素登録画面の一例を示す図である。図１８に示すように、色素登録画面は、形態観察用登録画面Ｗ１１および分子標的用登録画面Ｗ１３の２画面で構成される。
【０１１８】
形態観察用登録画面Ｗ１１には、形態観察色素の数を入力する入力ボックスＢ１１３と、形態観察色素を選択するための複数（ｍ個）の選択ボックスＢ１１５とが配置されている。選択ボックスＢ１１５は、それぞれ色素名の一覧を選択肢として提示し、選択を促す。提示される色素については特に例示しないが、形態観察染色で知られている色素を適宜含む。ユーザは、入力部４１を操作し、入力ボックスＢ１１３において実際に対象標本Ｓを染色している形態観察色素の数を入力するとともに、選択ボックスＢ１１５でその色素名を選択することによって染色色素を登録する。形態観察色素が２以上の場合には、別個の選択ボックスＢ１１５で該当する色素名をそれぞれ選択する。
【０１１９】
また、形態観察用登録画面Ｗ１１は、定型染色選択部Ｂ１１１を備え、この定型染色選択部Ｂ１１１において、形態観察染色として代表的なＨＥ染色で用いる色素（ＨＥ）、Ｐａｐ染色で用いる色素（Ｐａｐ）、Ｈ染色で用いる色素（Ｈのみ）およびその他の４つの選択肢が提示されている。なお、この定型染色選択部Ｂ１１１で提示する選択肢は例示したものに限らず、ユーザが設定できるようにしてもよいが、ここで提示した色素については該当する項目をチェックすることで登録でき、登録操作が簡略化される。例えば図１８に示すように、「ＨＥ」をチェックすると、入力ボックスＢ１１３に「２」が自動入力されるとともに、色素（１）および（２）の選択ボックスＢ１１５にそれぞれ「Ｈ」と「Ｅ」とが自動入力される。実施の形態１では、対象標本ＳをＨＥ染色しているため、ユーザは、定型染色選択部Ｂ１１１で「ＨＥ」にチェックすることで染色色素（形態観察色素）を登録できる。
【０１２０】
一方、分子標的用登録画面Ｗ１３には、分子標的色素の数を入力する入力ボックスＢ１３３と、分子標的色素を選択するための複数（ｎ個）の選択ボックスＢ１３５と、各選択ボックスＢ１３５のそれぞれに対応する複数（ｎ個）のコメント入力欄Ｂ１３７が配置されている。選択ボックスＢ１３５は、色素名の一覧を選択肢として提示し、選択を促す。提示される色素については特に例示しないが、分子標的染色で知られている色素を適宜含む。ユーザは、入力部４１を操作して入力ボックスＢ１３３に実際に対象標本Ｓを染色している分子標的色素の数を入力するとともに、選択ボックスＢ１３５でその色素名を選択することによって染色情報を登録する。また、コメント入力欄Ｂ１３７には、例えば対応する選択ボックスＢ１３５で選択した分子標的色素に関する事項（コメント情報）をユーザが自由に記入できるようになっている。例えば、ユーザは、対応する分子標的色素によって染色された（可視化された）抗体の名称や、この抗体によって標識される抗原（すなわち標的分子）の名称等を適宜コメント情報としてコメント入力欄Ｂ１３７に入力する。
【０１２１】
また、分子標的用登録画面Ｗ１３は、形態観察用登録画面Ｗ１１と同様に、主要な標識酵素やその組み合わせを提示した定型染色選択部Ｂ１３１を備える。なお、この定型染色選択部Ｂ１３１で提示する選択肢は例示したものに限らず、ユーザが設定できるようにしてもよい。実施の形態１の分子標的色素はＤＡＢ色素、ＶＶ色素およびＶＲ色素であり、図１８に示すように、定型染色選択部Ｂ１３１において「ＤＡＢ（茶）＋ＶＶ（紫）＋ＶＲ（赤レンガ）」をチェックすることで、染色色素（分子標的色素）を登録できる。具体的にはこのとき、入力ボックスＢ１３３に「３」が自動入力されるとともに、色素（１）、色素（２）および色素（３）の選択ボックスＢ１３５にそれぞれ「ＤＡＢ」と「ＶＶ」と「ＶＲ」とが自動入力される。
【０１２２】
図１７に戻り、染色色素設定部４５５は、以上のようにして色素登録画面においてユーザが操作入力して登録した形態観察色素の情報を染色情報５１４（図１３（ｂ）を参照）の形態観察染色情報５１５（図１４（ａ），（ｂ）を参照）とし、分子標的色素の情報を分子標的染色情報５１６（図１４（ａ），（ｃ）を参照）としてＶＳ画像ファイル５に設定する（ステップｃ３）。実施の形態１では、ここでの処理によって、Ｈ色素、Ｅ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素およびＶＲ色素が染色色素として設定される。
【０１２３】
次に、細胞コンポーネント同定用色素設定部４５６が、細胞コンポーネント同定用色素の選択依頼の通知を表示部４３に表示する処理を行う（ステップｃ５）。例えば、同定用色素選択画面を表示部４３に表示する処理を行って細胞コンポーネント同定用色素の選択依頼を通知し、この同定用色素選択画面上でユーザによる細胞コンポーネント同定用色素の選択操作を受け付ける。このとき、ステップｃ３で設定した染色色素の一覧を提示し、この一覧の中から細胞コンポーネント同定用色素の選択操作を受け付けるようになっている。図１９は、同定用色素選択画面の一例を示す図である。
【０１２４】
図１９に示すように、同定用色素選択画面は、細胞核同定用色素を選択するための選択ボックスＢ２１およびその色素量閾値を入力する入力ボックスＢ２２と、細胞膜同定用色素を選択するための選択ボックスＢ２３およびその色素量閾値を入力する入力ボックスＢ２４と、細胞質同定用色素を選択するための選択ボックスＢ２５およびその色素量閾値を入力する入力ボックスＢ２６とが配置されている。
【０１２５】
ここで、選択ボックスＢ２１，Ｂ２３，Ｂ２５では、図１７のステップｃ３において染色色素として設定した形態観察色素および分子標的色素の一覧が選択肢として提示される。また、各入力ボックスＢ２２，Ｂ２４，Ｂ２６に入力された色素量閾値の値は、以降の処理において対応する細胞コンポーネントを同定する際の基準として用いられる。例えば細胞核を同定する際に、選択ボックスＢ２１で選択された細胞核同定用色素の色素量が入力ボックスＢ２２に入力された値以上の画素を細胞核の候補画素として選出する。同様に、細胞膜を同定する際に、選択ボックスＢ２３で選択された細胞膜同定用色素の色素量が入力ボックスＢ２４に入力された値以上の画素を細胞膜の候補画素として選出する。細胞質を同定する際には、選択ボックスＢ２５で選択された細胞質同定用色素の色素量が入力ボックスＢ２６に入力された値以上の画素を細胞質の候補画素として選出する。
【０１２６】
ユーザは、入力部４１を操作し、選択ボックスＢ２１，Ｂ２３，Ｂ２５において、染色色素の中から細胞核同定用色素、細胞膜同定用色素または細胞質同定用色素として用いる染色色素を選択するとともに、入力ボックスＢ２２，Ｂ２４，Ｂ２６において対応する細胞コンポーネントを同定する際の色素量閾値を入力する。実施の形態１では、例えば選択ボックスＢ２１で細胞核同定用色素である「Ｈ」を選択するとともに、その色素量閾値の値を入力する。また、選択ボックスＢ２３で細胞膜同定用色素である「ＶＲ」を選択するとともに、その色素量閾値の値を入力する。
【０１２７】
なお、図１９では、細胞コンポーネント毎にそれぞれ１種類の細胞コンポーネント同定用色素を設定する場合を例示したが、細胞コンポーネント同定用色素は必ずしも１種類とは限らない。例えば、細胞診の形態観察染色として知られ、子宮頸部細胞診標本等に対して施されるパパニコロウ染色では、ヘマトキシリンによって細胞核が暗紫色に染色される。一方、このパパニコロウ染色において、細胞質は、オレンジＧ、エオジンＹおよびライトグリーンＳＦＹの３種類の色素によって、細胞の種類毎、具体的には基底細胞の場合に濃青緑色、中層細胞の場合に淡青緑色、表層細胞の場合に淡赤色〜橙黄色に染め分けられる。このような場合に細胞コンポーネント同定用色素を複数種類設定できるように（例えば、前述の例において細胞質同定用色素としてオレンジＧ、エオジンＹおよびライトグリーンＳＦＹの３種類の色素を設定できるように）、図１９において、選択ボックスＢ２１，Ｂ２３，Ｂ２５や入力ボックスＢ２２，Ｂ２４，Ｂ２６を複数組配置し、細胞コンポーネント毎に複数種類の細胞コンポーネント同定用色素を設定できるようにしてもよい。
【０１２８】
図１７に戻り、細胞コンポーネント同定用色素設定部４５６は、以上のようにして同定用色素選択画面においてユーザが操作入力した色素名および色素量閾値を細胞コンポーネント同定用染色情報５１７（図１４（ａ），（ｄ）を参照）とし、ＶＳ画像ファイル５に設定する（ステップｃ７）。実施の形態１では、ここでの処理によってＨ色素およびその色素量閾値が細胞核同定用色素情報５１７１として設定され、ＶＲ色素およびその色素量閾値が細胞膜同定用色素情報５１７２として設定される。そして、以降の処理（図２０の細胞コンポーネント同定処理）では、細胞核および細胞膜について同定が行われることとなる。
【０１２９】
続いて、色素量算出部４５７が、生成したＶＳ画像の各画素の画素値をもとに、対応する対象標本Ｓ上の各標本位置における色素量をステップｃ３で設定した染色色素毎に算出する（ステップｃ９）。色素量の算出は、例えば特許文献１に記載の公知技術を適用して実現できる。
【０１３０】
簡単に処理手順を説明すると先ず、色素量算出部４５７は、ＶＳ画像の画素値をもとに、対応する対象標本Ｓ上の各標本位置のスペクトル（推定スペクトル）を画素毎に推定する。マルチバンド画像からスペクトルを推定する手法としては例えば、ウィナー（Wiener）推定を用いることができる。次いで色素量算出部４５７は、予め測定されて記録部４７に記録されている算出対象の色素（染色色素）の基準色素スペクトルを用いて対象標本Ｓの色素量を画素毎に推定（算出）する。
【０１３１】
ここで、色素量の算出について簡単に説明する。一般に、光を透過する物質では、波長λ毎の入射光の強度Ｉ0（λ）と射出光の強度Ｉ(λ)との間に、次式（１）で表されるランベルト・ベール（Lambert-Beer）の法則が成り立つことが知られている。
【数１】
0005451552.tif 000002
ｋ（λ）は波長に依存して決まる物質固有の値、ｄは物質の厚さをそれぞれ表す。また、式（１）の左辺は分光透過率ｔ（λ）を意味している。
【０１３２】
例えば、標本が色素１，色素２，・・・，色素ｎのｎ種類の色素で染色されている場合、ランベルト・ベールの法則により各波長λにおいて次式（２）が成立する。
【数２】
0005451552.tif 000003
ｋ1（λ），ｋ2（λ），・・・，ｋn（λ）は、それぞれ色素１，色素２，・・・，色素ｎに対応するｋ（λ）を表し、例えば、標本を染色している各色素の基準色素スペクトルである。またｄ1，ｄ2，・・・，ｄnは、マルチバンド画像の各画像位置に対応する対象標本Ｓ上の標本位置における色素１，色素２，・・・，色素ｎの仮想的な厚さを表す。本来色素は、標本中に分散して存在するため、厚さという概念は正確ではないが、標本が単一の色素で染色されていると仮定した場合と比較して、どの程度の量の色素が存在しているかを表す相対的な色素量の指標となる。すなわち、ｄ1，ｄ2，・・・，ｄnはそれぞれ色素１，色素２，・・・，色素ｎの色素量を表しているといえる。なお、ｋ1（λ），ｋ2（λ），・・・，ｋn（λ）は、色素１，色素２，・・・，色素ｎの各色素を用いてそれぞれ個別に染色した標本を予め用意し、その分光透過率を分光器で測定することによって、ランベルト・ベールの法則から容易に求めることができる。
【０１３３】
式（２）の両辺の対数を取ると、次式（３）となる。
【数３】
0005451552.tif 000004
【０１３４】
上記のようにしてＶＳ画像の画素毎に推定した推定スペクトルの波長λに対応する要素をｔ＾（ｘ，λ）とし、これを式（３）に代入すると、次式（４）を得る。なお、ｔ＾は、ｔの上に推定値を表すハット「＾」が付いていることを示す。
【数４】
0005451552.tif 000005
【０１３５】
式（４）において未知変数はｄ1，ｄ2，・・・，ｄnのｎ個であるから、少なくともｎ個の異なる波長λについて式（４）を連立させれば、これらを解くことができる。より精度を高めるために、ｎ個以上の異なる波長λに対して式（４）を連立させ、重回帰分析を行ってもよい。
【０１３６】
以上が、色素量算出の簡単な手順であるが、実施の形態１で算出対象とする染色色素はＨ色素、Ｅ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素およびＶＲ色素であり、ｎ＝５となる。色素量算出部４５７は、ＶＳ画像の各画素について推定した推定スペクトルをもとに、対応する各標本位置に固定されたＨ色素、Ｅ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素およびＶＲ色素それぞれの色素量を推定する。
【０１３７】
以上のようにして各染色色素の色素量を算出したならば、色素量算出部４５７は、データ種別に色素量データを示す識別情報を設定して更新し（ステップｃ１１）、色素量算出処理を終える。そして、図１６のステップｂ５にリターンし、その後ステップｂ７の細胞コンポーネント同定処理に移る。図２０は、細胞コンポーネント同定処理の処理手順を示すフローチャートである。
【０１３８】
細胞コンポーネント同定処理では、細胞コンポーネント同定処理部４５８が、図１７のステップｃ７において色素名および色素量閾値が設定された細胞コンポーネントを同定対象とし、同定対象の細胞コンポーネント毎にループＡの処理を行う（ステップｄ１〜ステップｄ１７）。以下、ループＡで処理対象とする細胞コンポーネントを「処理コンポーネント」と呼ぶ。実施の形態１では、細胞核および細胞膜を順次処理コンポーネントとしてループＡの処理を行う。
【０１３９】
すなわち、ループＡでは、細胞コンポーネント同定処理部４５８は先ず、細胞コンポーネント同定用染色情報５１７から処理コンポーネントについて設定されている細胞コンポーネント同定用色素の色素名および色素量閾値を読み出す（ステップｄ３）。例えば、細胞核を処理コンポーネントとして処理する場合には、細胞核同定用色素情報５１７１から色素名（実施の形態１ではＨ色素）およびその色素量閾値を読み出す。同様に、細胞膜を処理コンポーネントとして処理する場合であれば、細胞膜同定用色素情報５１７２から色素名（実施の形態１ではＶＲ色素）およびその色素量閾値を読み出す。なお、実施の形態１では細胞質を同定対象としないため行わないが、細胞質を処理コンポーネントとして処理する場合には、細胞質同定用色素情報５１７３から色素名およびその色素量閾値を読み出す。なお、細胞質同定用色素としては、例えば細胞質、結合組織等を染色するＥ色素が挙げられる。
【０１４０】
続いて、細胞コンポーネント同定処理部４５８は、色素量データ５５４を参照し、ＶＳ画像の各画素の中から、ステップｄ３で色素名を読み出した細胞コンポーネント同定用色素の色素量がステップｄ３で読み出した色素量閾値以上の値である画素を選出する（ステップｄ５）。そして、細胞コンポーネント同定処理部４５８は、選出結果を設定したマップデータを作成する（ステップｄ７）。
【０１４１】
図２１は、細胞核を処理コンポーネントとして図２０のステップｄ３〜ｄ７の処理を行った結果作成される細胞核のマップデータのデータ構成例を説明する模式図である。図２１に示すように、細胞核のマップデータは、ＶＳ画像を構成する各画素位置に対応するマスＭ３のそれぞれに「０」または「１」が設定されたデータ構成を有する。ステップｄ５で選出された画素に対応するマスＭ３には、例えばマスＭ３−１に示すように「１」が設定される。ステップｄ５で選出されなかった画素に対応するマスＭ３には、例えばマスＭ３−２に示すように「０」が設定される。
【０１４２】
一方、図２２は、細胞膜を処理コンポーネントとして図２０のステップｄ３〜ｄ７の処理を行った結果作成される細胞膜のマップデータのデータ構成例を説明する模式図である。細胞膜のマップデータも同様に、図２２に示すように、ＶＳ画像を構成する各画素位置に対応する複数のマスのそれぞれに「０」または「１」が設定されたデータ構成を有する。そして、ステップｄ５で選出された画素に対応するマスには「１」が設定され、ステップｄ５で選出されなかった画素に対応するマスには「０」が設定される。
【０１４３】
なお、図示しないが、細胞質を処理コンポーネントとして図２０のステップｄ３〜ｄ７の処理を行った結果作成される細胞質のマップデータも同様のデータ構成を有し、ＶＳ画像を構成する各画素位置に対応するマスのうち、ステップｄ５で選出された画素に対応するマスに「１」が設定される。ステップｄ５で選出されなかった画素に対応するマスには「０」が設定される。
【０１４４】
図２０に戻り、続いて細胞コンポーネント同定処理部４５８は、ステップｄ７で作成したマップデータを参照してステップｄ５で選出した画素を連結成分毎に区切り、区切った画素群毎に個々の処理コンポーネントを識別するための固有のラベルを付すことによって、各画素群のそれぞれを処理コンポーネントの候補領域として取得する（ステップｄ８）。続いて、細胞コンポーネント同定処理部４５８は、ステップｄ８で取得した処理コンポーネントの候補領域毎に形態特徴データを作成する（ステップｄ９）。そして、細胞コンポーネント同定処理部４５８は、作成した形態特徴データをもとに処理コンポーネントの候補領域が処理コンポーネントの領域か否かを判定することで、該当する処理コンポーネントの同定を行う（ステップｄ１１）。なお、この処理コンポーネントの同定は、例えば特許文献６に記載の公知技術を適用して実現できる。その後、細胞コンポーネント同定処理部４５８は、処理コンポーネントの同定結果をもとにマップデータおよび形態特徴データを修正して更新する（ステップｄ１３）。
【０１４５】
ここで、処理コンポーネントが細胞核、細胞膜および細胞質の場合のステップｄ８〜ステップｄ１３の処理について順次簡単に説明する。
【０１４６】
処理コンポーネントが細胞核の場合には先ず、ステップｄ８の処理として、細胞核のマップデータを参照し、細胞核の候補領域（細胞核候補領域）を取得する。具体的には、例えば連結して「１」が設定されている画素（マス）群に固有のラベル（細胞核識別ラベル）を付し、同一のラベル（細胞核識別ラベル）を付した画素群を１つの細胞核候補領域として取得する。
【０１４７】
次に、ステップｄ９の処理として、例えば先ず、輪郭追跡等の公知の手法を適用し、取得した細胞核候補領域毎に輪郭を抽出する。そして、抽出した細胞核候補領域の輪郭をもとにその形態的な特徴を表す形態特徴量を算出し、算出した形態特徴量を設定して細胞核の形態特徴データを作成する。
【０１４８】
図２３は、細胞核の形態特徴データのデータ構成例を説明する図である。図２３に示すように、細胞核の形態特徴量としては、例えば、外接長方形や重心、面積、周囲長、円形度、長径、短径、アスペクト比等が挙げられる。
【０１４９】
ここで、外接長方形は、その細胞核候補領域に外接し、各辺の向きがｘ座標軸およびｙ座標軸に平行である長方形であり、例えば左上の頂点のＶＳ画像中でのｘ座標、ｙ座標、ｘ方向の幅（ｘ方向のピクセル数：Ｗ）およびｙ方向の高さ（ｙ方向のピクセル数：Ｈ）として算出する。
【０１５０】
重心は、そのＶＳ画像中でのｘ座標およびｙ座標として算出する。面積は、その細胞核候補領域の面積である。周囲長は、その細胞核候補領域の外部輪郭の長さとして算出する。
【０１５１】
円形度は、例えば、次式（５）に従って算出する。ここで、この式（５）によって算出される値は、その細胞核候補領域の輪郭形状が真円のときに最大値（＝１）となり、輪郭形状が複雑になるほど小さな値として得られる。
円形度＝４π×面積／周囲長  ・・・（５）
【０１５２】
長径および短径は、その細胞核候補領域の外接する外接矩形が最小面積となるときの長軸の長さおよび短軸の長さとして算出する。
【０１５３】
アスペクト比は、長径と短径との比率であり、例えば次式（６）に従って算出する。
アスペクト比＝長径／短径  ・・・（６）
【０１５４】
細胞コンポーネント同定処理部４５８は、これら形態特徴量の各値をその細胞核候補領域に付されたラベル（細胞核識別ラベル）と対応付けて形態特徴データを作成する。例えば、図２１の例では、２つの画素群Ｂ３１，Ｂ３３にそれぞれ異なるラベル（細胞核識別ラベル）が付され、これら画素群Ｂ３１，Ｂ３３のそれぞれが細胞核候補領域として取得される。そして、これら２つの細胞核候補領域毎に形態特徴量が算出され、２レコード分の形態特徴データが作成される。
【０１５５】
次に、ステップｄ１１の処理として、作成した形態特徴データをもとに、細胞核候補領域が細胞核の領域か否かを判定する。一般的に、細胞核の大きさは１０μｍ前後といわれている。そこで、実施の形態１では、例えば各形態特徴量の値がこの大きさに当てはまる場合にその細胞核候補領域を細胞核の領域と判定し、当てはまらなければ細胞核の領域ではないと判定する。ここで、ＴＶカメラ３２の１画素（正方画素とする）の大きさと観察倍率とからＶＳ画像の１画素の実寸を求めることができ、画素数から実寸への変換は容易に行える。なお、ＶＳ画像中に映る細胞核の形態特徴量の標準的な値を基準値として予め設定しておき、この基準値との比較によって細胞核候補領域が細胞核の領域か否かを判定するようにしてもよい。
【０１５６】
次に、ステップｄ１３の処理として、細胞核の領域ではないと判定した細胞核候補領域をもとに細胞核のマップデータを修正するとともに、この細胞核候補領域の形態特徴データを削除し、細胞核のマップデータおよび形態特徴データを更新する。例えば、図２１に示す画素群Ｂ３１，Ｂ３３のうち、画素群Ｂ３１の細胞核候補領域が細胞核の領域と判定され、画素群Ｂ３３の細胞核候補領域が細胞核の領域ではないと判定されて画素群Ｂ３１の細胞核候補領域のみが細胞核として同定されたとする。この場合には、図２１の画素群Ｂ３３を構成する各画素（マス）の値を「１」から「０」に修正してマップデータを更新する。そして、図２０のステップｄ９で作成した形態特徴データ、画素群Ｂ３３の細胞核候補領域のラベル（細胞核識別ラベル）が設定された１レコード分の形態特徴データを削除し、形態特徴データを更新する。
【０１５７】
続いて、処理コンポーネントが細胞膜の場合について説明する。細胞膜の場合も、上記した処理コンポーネントが細胞核の場合と同様の処理手順でその同定を行うが、処理コンポーネントが細胞膜の場合には、図２０のステップｄ９において例えば外接長方形や重心、厚さ、周囲長、円形度、長径、短径、アスペクト比、核の有無（数）等を形態特徴量として算出し、形態特徴データを作成する。図２４は、細胞膜の形態特徴データのデータ構成例を説明する図である。ここで、細胞膜は、細胞の最外層を形成するものであり、所定の厚さを有する。細胞膜の形態特徴量として算出する厚さは、細胞膜候補領域の径方向の幅に相当する。外接長方形や重心、周囲長、円形度、長径、短径、アスペクト比は、例えば外側の輪郭をもとに算出する。算出手法は、細胞核の場合と同様である。また、核の有無には、細胞膜候補領域の内側に細胞核の領域を含むか否か（あるいはその数）が設定される。この核の有無（数）は、同定対象の細胞コンポーネントとして細胞核が含まれる場合には、上記した要領で作成した細胞核のマップデータを参照することで設定できる。具体的には、細胞膜候補領域の内側に細胞核の領域が含まれる場合に「あり（あるいはその数）」を設定し、含まれなければ「なし」を設定する。
【０１５８】
そして、例えば、予め標準的な細胞膜の厚さの範囲を設定しておき、形態特徴量の１つとして算出した厚さの値がこの範囲内の場合にその細胞膜候補領域を細胞膜の領域と判定し、含まれなければ細胞膜の領域ではないと判定する。あるいは、予め標準的な細胞の大きさの範囲を設定しておき、各形態特徴量の値がこの大きさに当てはまる場合にその細胞膜候補領域を細胞膜の領域と判定し、当てはまらない場合に細胞膜の領域ではないと判定するようにしてもよい。また、同定対象の細胞コンポーネントが細胞核を含み、形態特徴量として核の有無が求まっている場合には、「あり」が設定されている場合に細胞膜の領域と判定し、「なし」が設定されている場合に細胞膜の領域ではないと判定するようにしてもよい。
【０１５９】
続いて、処理コンポーネントが細胞質の場合について説明する。細胞質の場合も、上記した処理コンポーネントが細胞核や細胞膜の場合と同様の処理手順でその同定を行うが、処理コンポーネントが細胞質の場合には、図２０のステップｄ９において例えば外接長方形や重心、面積、周囲長、円形度、長径、短径、アスペクト比、核の有無（数）等を形態特徴量として算出し、形態特徴データを作成する。ここで、細胞質は、細胞膜の内側であって、細胞核の領域を除く領域を形成するものである。このため、これら形態特徴量の各値は、例えば外側の輪郭をもとに算出する。算出手法は、細胞核あるいは細胞膜の場合と同様である。
【０１６０】
そして、例えば、上記した要領で作成した細胞核のマップデータおよび／または細胞膜のマップデータを参照することで細胞質の領域を判定する。なお、この判定手法は、同定対象の細胞コンポーネントとして少なくとも細胞核または細胞膜が含まれることを前提としている。具体的には、細胞質候補領域の外側に細胞膜の領域が存在する場合にこの細胞質候補領域を細胞質の領域と判定し、細胞質候補領域の外側に細胞膜の領域が存在しない場合には、細胞質の領域ではないと判定する。あるいは、細胞質候補領域の内側に細胞核の領域が存在する場合にこの細胞質候補領域を細胞質の領域と判定し、細胞質候補領域の内側に細胞核の領域が存在しない場合には、細胞質の領域ではないと判定する。また、細胞質候補領域の外側に細胞膜の領域が存在し、細胞質候補領域の内側に細胞核の領域が存在する場合にこの細胞質候補領域を細胞質の領域と判定するようにしてもよい。
【０１６１】
図２０に戻り、続いて細胞コンポーネント同定処理部４５８は、マップデータにおいて「１」が設定されている画素の位置座標の一覧（画素位置一覧）を、割り振られたラベル毎に作成し（ステップｄ１５）、処理コンポーネントについてループＡの処理を終える。
【０１６２】
そして、同定対象の全ての細胞コンポーネントをそれぞれ処理コンポーネントとしてループＡの処理を行ったならば、細胞コンポーネント同定処理を終えて図１６のステップｂ７にリターンし、ステップｂ９に移行する。
【０１６３】
図２５は、この細胞コンポーネント同定処理の結果得られてＶＳ画像ファイル５に設定される同定コンポーネント情報５６（図１５（ｂ）を参照）のデータ構成例を説明する図である。図２５（ａ）に示すように、同定コンポーネント情報５６は、細胞核同定情報５６１と、細胞膜同定情報５６２と、細胞質同定情報５６３とで構成される。これら細胞核同定情報５６１、細胞膜同定情報５６２および細胞質同定情報５６３は同様のデータ構成を有し、図２５（ｂ）に示すように、それぞれマップデータ５６４と、形態特徴データ５６５と、同定コンポーネント一覧５６６とを含む。
【０１６４】
図２６は、同定コンポーネント一覧５６６のデータ構成例を説明する図である。同定コンポーネント一覧５６６は、図２６（ａ）に示すように、同定コンポーネント数５６７と、同定コンポーネント数５６７に相当する数の同定コンポーネント情報（１）〜（ｏ）５６８とを含む。
【０１６５】
同定コンポーネント数５６７には、同定された該当する細胞コンポーネントの数が設定される。例えば、細胞核同定情報５６１の同定コンポーネント一覧５６６に設定される同定コンポーネント数５６７には、細胞核の領域と判定された領域の数が設定される。そして、各細胞核の領域に関する情報が、それぞれ同定コンポーネント情報（１）〜（ｏ）５６８に設定される。具体的には、同定コンポーネント情報（１）〜（ｏ）５６８には、図２６（ｂ），（ｃ）に示すように、その細胞核の領域に付されたラベル（細胞核識別ラベル）５６８１と、その細胞核の領域内の画素位置一覧である位置座標（１）〜（ｐ）／（１）〜（ｑ）５６８２が設定される。
【０１６６】
実施の形態１では、細胞核同定情報５６１として、ステップｄ７およびステップｄ９で作成され、ステップｄ１３で修正されて更新された細胞核のマップデータ５６４および細胞核の形態特徴データ５６５が設定される。同定コンポーネント一覧５６６には、細胞核の領域数が同定コンポーネント数５６７として設定される。そして、同定コンポーネント情報（１）〜（ｏ）５６８のそれぞれにおいて、該当する細胞核の領域に付されたラベル（細胞核識別ラベル）５６８１が設定されるとともに、ステップｄ１５で作成された細胞核の画素位置一覧が位置座標（１）〜（ｐ）／（１）〜（ｑ）５６８２として設定される。同様に、細胞膜同定情報５６２として、ステップｄ７およびステップｄ９で作成され、ステップｄ１３で修正されて更新された細胞膜のマップデータ５６４および細胞膜の形態特徴データ５６５が設定される。同定コンポーネント一覧５６６には、細胞膜の領域数が同定コンポーネント数５６７として設定される。そして、同定コンポーネント情報（１）〜（ｏ）５６８のそれぞれにおいて、その細胞膜の領域に付されたラベル（細胞膜識別ラベル）５６８１が設定されるとともに、ステップｄ１５で作成された細胞膜の画素位置一覧が位置座標（１）〜（ｐ）／（１）〜（ｑ）５６８２として設定される。なお、実施の形態１では、細胞核および細胞膜の同定を行うので、細胞質同定情報５６３には特に値は設定されない。
【０１６７】
図１６に戻り、続くステップｂ９では、細胞認識部４５９が、図１６のステップｂ７で細胞コンポーネント同定処理部４５８によって同定された細胞コンポーネントの領域をもとに、ＶＳ画像中の細胞領域を認識する。
【０１６８】
ここで、細胞は、最外層を形成する細胞膜の内側に細胞質を有する。また、細胞質の内側には、通常１つの細胞核が存在する。また、複数の細胞が融合することで細胞膜の一部が消失し、１つの細胞膜で囲まれた細胞集塊を形成する場合があり、対象標本Ｓ内には、このような細胞集塊も存在する。すなわち、１つの細胞膜の内側に複数の細胞核が存在する場合もある。実施の形態１では、細胞膜と、この細胞膜の内側に存在する細胞核および細胞質とを１つの細胞とし、細胞膜で囲まれた領域を１つの細胞領域（細胞集塊の領域を含む）と認識する。
【０１６９】
処理手順としては、細胞核、細胞膜および細胞質について作成されている細胞核同定情報５６１や細胞膜同定情報５６２、細胞質同定情報５６３のマップデータ５６４あるいは位置座標（１）〜（ｐ）／（１）〜（ｑ）５６８２（図２５や図２６を参照）を参照して１つの細胞領域を認識し、各細胞領域に個々の細胞を識別するための固有のラベル（細胞識別ラベル）を付す。
【０１７０】
図２７は、ステップｂ９の処理の結果得られてＶＳ画像ファイル５に設定される細胞一覧テーブル５７（図１５（ｂ）を参照）のデータ構成例を説明する図である。図２７（ａ）に示すように、細胞一覧テーブル５７は、総細胞数５７１と、総細胞数５７１に相当する数の細胞情報（１）〜（ｓ）５７２とを含む。
【０１７１】
総細胞数５７１には、認識されたＶＳ画像中の細胞領域の数が設定される。そして、各細胞核の領域に関する情報が、それぞれ細胞情報（１）〜（ｓ）５７２に設定される。具体的には、細胞情報（１）〜（ｓ）５７２には、図２７（ｂ）に示すように、細胞識別ラベル５７３と、細胞核識別ラベル５７４と、細胞膜識別ラベル５７５と、細胞質識別ラベル５７６とが設定される。細胞識別ラベル５７３には、その細胞に付された細胞識別ラベルが設定される。細胞核識別ラベル５７４には、その細胞を構成する細胞核に対して図１６のステップｂ７の細胞コンポーネント同定処理で付されたラベル（細胞核識別ラベル）が設定される。細胞膜識別ラベル５７５には、その細胞を構成する細胞膜に対して図１６のステップｂ７の細胞コンポーネント同定処理で付されたラベル（細胞膜識別ラベル）が設定される。細胞質識別ラベル５７６には、その細胞を構成する細胞質に対して図１６のステップｂ７の細胞コンポーネント同定処理で付されたラベル（細胞質識別ラベル）が設定される。
【０１７２】
続いて、図１６に示すように、標的分子発現部位抽出部４６０が、標的分子発現部位を抽出する際の抽出条件の設定依頼の通知を表示部４３に表示する処理を行う（ステップｂ１１）。例えば、抽出条件設定画面を表示部４３に表示する処理を行って抽出条件の設定依頼を通知し、この抽出条件設定画面上でユーザによる抽出条件の設定操作を受け付ける。図２８は、抽出条件設定画面の一例を示す図である。
【０１７３】
図２８に示すように、抽出条件設定画面は、同様に構成された複数の抽出標的分子設定画面Ｗ４１（図２８では２つの抽出標的分子設定画面Ｗ４１−１，Ｗ４１−２）を備える。ユーザは、この抽出標的分子設定画面Ｗ４１において、標的分子の発現状況を抽出条件として設定する。なお、抽出標的分子設定画面Ｗ４１の配置数は１以上であればよく、適宜の数の抽出標的分子設定画面Ｗ４１を配置することで、１以上の標的分子についての発現状況を抽出条件として設定可能な画面構成を実現できる。
【０１７４】
抽出標的分子設定画面Ｗ４１は、標的分子を標識するために対象標本Ｓに施されている分子標的染色の色素（分子標的色素）を選択するための選択ボックスＢ４１を備え、この選択ボックスＢ４１の下方には、コメント表示欄Ｂ４３が配置されている。
【０１７５】
選択ボックスＢ４１は、図１７のステップｃ３において染色色素として設定された分子標的色素の一覧を選択肢として提示し、選択を促す。実施の形態１では、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素およびＶＲ色素の３つが選択肢として提示される。この選択ボックスＢ４１において、ユーザは、対象標本Ｓを染色している染色色素のうちのどの染色色素が標的分子を標識するための分子標的色素なのかを設定する。なお、染色色素として設定されている分子標的色素が細胞コンポーネント同定用色素を含む場合には、この細胞コンポーネント同定用色素を選択肢から外して提示する構成としてもよい。この構成の場合には、実施の形態１では、ＤＡＢ色素とＶＶ色素の２つが選択肢として提示されることとなる。このようにすれば、ユーザによる操作性が向上する。
【０１７６】
コメント表示欄Ｂ４３には、選択ボックスＢ４１で選択した分子標的色素について上記した色素登録画面（図１８を参照）で入力された抗体や抗原（標的分子）の名称等のコメント情報が表示される。したがって、観察・診断対象とする対象標本に対して異なる複数の分子標的染色が施され、異なる標的分子が標識されている場合であっても、ユーザは、このコメント表示欄Ｂ４３を参考にしながら、対応する選択ボックスＢ４１において所望の標的分子を標識するための分子標的色素を選択することができる。
【０１７７】
また、抽出標的分子設定画面Ｗ４１は、標的分子が発現する細胞コンポーネントを選択するための３つのチェックボックスＣＢ４１，ＣＢ４２，ＣＢ４３を備え、これら３つのチェックボックスＣＢ４１，ＣＢ４２，ＣＢ４３毎に、２つの入力ボックスＢ４５，Ｂ４７が配置されている。なお、これらチェックボックスＣＢ４１，ＣＢ４２，ＣＢ４３のチェックによって設定できるのは、図２０に示して説明した細胞コンポーネント同定処理で同定対象とした細胞コンポーネントに限定される。このため、同定対象としていない細胞コンポーネント（例えば実施の形態１では細胞質）のチェックボックスについては、選択できないように構成してもよい。これによれば、ユーザの操作性が向上する。
【０１７８】
入力ボックスＢ４５は、対応する細胞コンポーネント上での標的分子の発現濃度を抽出条件として設定するためのものであり、後述する図１６のステップｂ１３で標的分子発現部位を抽出する際に、この発現濃度を標的分子が発現しているか否かの判定基準として用いる。ユーザは、この入力ボックスＢ４５に、標的分子の発現濃度として例えば選択した分子標的色素の色素量の値を入力する。これによれば、対応する細胞コンポーネントの領域内の各画素のうち、選択した分子標的色素の色素量が所望の色素量の値以上である画素を、標的分子が発現している画素として抽出することができる。
【０１７９】
また、対象標本Ｓ内に発現する標的分子を観察・診断する場合、その標的分子がどの細胞コンポーネント上に発現するのかだけでなく、その発現濃度が重要な場合がある。例えば、所定の細胞コンポーネント上に発現する標的分子であっても、発現濃度が高濃度の場合に問題となり、発現濃度が低濃度であれば問題とならない場合がある。逆も同様である。このような場合には、ユーザは、入力ボックスＢ４５に、標的分子の発現濃度として例えば選択した分子標的色素の色素量の範囲を入力する。これによれば、対応する細胞コンポーネント上において標的分子が所望の発現濃度で発現している領域（すなわち、対応する細胞コンポーネントの領域内の各画素のうち、選択した分子標的色素の色素量が入力ボックスＢ４５で入力した色素量の範囲内である画素）を標的分子発現部位として抽出することが可能となる。なお、単に分子標的色素の色素量を含む画素を標的分子発現部位として抽出したい場合には、入力ボックスＢ４５に値を入力しなければよい。
【０１８０】
入力ボックスＢ４７は、対応する細胞コンポーネント上での標的分子の発現割合を抽出条件として設定するためのものである。対象標本Ｓ内に発現する標的分子を観察・診断する場合、前述の発現濃度の他にも、標的分子が所定の細胞コンポーネント上でどの程度の領域を占めているのかが重要な場合もある。このような場合に、ユーザは、この入力ボックスＢ４７に、細胞コンポーネント上での標的分子の発現割合の値を入力する。例えば、細胞膜内の１０％以上の領域で標的分子が発現していることを条件としたい場合であれば、細胞膜のチェックボックスＣＢ４２をチェックし、対応する入力ボックスＢ４７において、「１０％以上」を入力する。なお、単に細胞コンポーネント上に発現している標的分子を抽出したい場合には、入力ボックスＢ４７に値を入力しなければよい。
【０１８１】
ユーザは、以上のように構成される抽出条件設定画面において、抽出したい標的分子発現部位毎に抽出条件を設定する。具体的には、標的分子を標識するための分子標的色素を選択するとともに、その標的分子が発現する細胞コンポーネントを選択し、適宜選択した細胞コンポーネント上での発現濃度や発現割合を入力することによって抽出条件を設定する。
【０１８２】
上記したように、実施の形態１で観察・診断対象とする対象標本Ｓは、エストロゲン受容体（ＥＲ）を認識する抗ＥＲ抗体およびプロゲステロン受容体（ＰｇＲ）を認識する抗ＰｇＲ抗体を用い、ＤＡＢ反応による発色で標識を施すとともに、ＨＥＲ２受容体（ＨＥＲ２）を認識する抗ＨＥＲ２抗体を用い、ＶＶ色素で標識を施したものである。そして、この対象標本Ｓを撮像したＶＳ画像中の各細胞領域を、細胞核上でのＥＲおよび／またはＰｇＲの発現の有無と細胞膜上でのＨＥＲ２の発現の有無との組み合わせによって定義される細胞亜型に分類するものである。そこで、実施の形態１では、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所を１つ目の標的分子発現部位とし、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所を２つ目の標的分子発現部位とする。そして、１つ目の標的分子発現部位に対応する抽出条件（１）として、抽出標的分子設定画面Ｗ４１−１の選択ボックスＢ４１でＤＡＢ色素を選択する。また、チェックボックスＣＢ４１をチェックして細胞核を選択し、入力ボックスＢ４５において標的分子が発現していると判定するＤＡＢ色素の色素量の値を入力する。また、必要があれば、入力ボックスＢ４７において発現割合の値を入力する。さらに、２つ目の標的分子発現部位に対応する抽出条件（２）として、抽出標的分子設定画面Ｗ４１−２の選択ボックスＢ４１でＶＶ色素を選択する。また、チェックボックスＣＢ４２をチェックして細胞膜を選択し、入力ボックスＢ４５において標的分子が発現していると判定するＶＶ色素の色素量の値を入力する。また、必要があれば、入力ボックスＢ４７において発現割合の値を入力する。
【０１８３】
なお、この抽出条件設定画面は、異なる抽出標的分子設定画面Ｗ４１の選択ボックスＢ４１において同一の分子標的色素を選択する場合を妨げるものではない。すなわち、例えば、同じ標的分子について、細胞膜上で発現しているものと、細胞質上で発現しているものとをそれぞれ標的分子発現部位として抽出したい場合がある。この場合には、例えば抽出標的分子設定画面Ｗ４１−１の選択ボックスＢ４１でその標的分子を標識するための分子標的色素を選択し、チェックボックスＣＢ４２をチェックして細胞膜を選択するとともに、抽出標的分子設定画面Ｗ４１−２の選択ボックスＢ４１で同じ分子標的色素を選択し、チェックボックスＣＢ４３をチェックして細胞質を選択する。
【０１８４】
図１６に戻り、標的分子発現部位抽出部４６０は、以上のようにして抽出条件設定画面においてユーザが操作入力した内容をもとに、抽出条件を設定する（ステップｂ１３）。実施の形態１では、分子標的色素をＤＡＢ色素とし、細胞コンポーネントを細胞核とし、細胞核上での発現濃度を入力値とした抽出条件（１）と、分子標的色素をＶＶ色素とし、細胞コンポーネントを細胞膜とし、細胞膜上での発現濃度を入力値とした抽出条件（２）の２つの抽出条件を設定する。なお、図２８の抽出条件設定画面において入力ボックスＢ４７に対する入力があれば、この入力値を細胞核上または細胞膜上での発現割合として抽出条件を設定すればよい。
【０１８５】
そして、標的分子発現部位抽出部４６０が、ステップｂ１１で設定した抽出条件に従って標的分子発現部位を抽出する処理（標的分子発現部位抽出処理）を行い、標的分子発現部位マップを作成する（ステップｂ１５）。
【０１８６】
ここで、標的分子発現部位抽出処理の原理について説明する。この標的分子発現部位抽出処理では、標的分子発現部位抽出部４６０は先ず、抽出条件に従い、設定されている細胞コンポーネントのマップデータ５６４（図２５（ｂ）を参照）を読み出す。
【０１８７】
続いて、標的分子発現部位抽出部４６０は、抽出条件に従い、設定されている分子標的色素の色素量をもとに発現状況マップを作成する。具体的には、設定されている分子標的色素の色素量を含み、かつその色素量の値が設定されている発現濃度の値以上である画素を発現部位候補画素として選出する。あるいは、設定されている分子標的色素の色素量を含み、かつその色素量の値が設定されている発現濃度の値の範囲内である画素を発現部位候補画素として選出する。発現濃度が設定されていなければ、設定されている分子標的色素の色素量を含む画素を発現部位候補画素として選出すればよい。そして、選出した画素位置に「１」を設定した発現状況マップを作成する。
【０１８８】
そして、設定されている細胞コンポーネントのマップデータ５６４に「１」が設定されている画素のうち、発現状況マップに「１」が設定されている各発現部位候補画素を標的分子発現部位の領域の画素として抽出し、標的分子発現部位マップを作成する。ここで、抽出条件として発現割合が設定されている場合には、同一のラベル（細胞核識別ラベル／細胞膜識別ラベル／脂肪質識別ラベル）が付された１つの細胞コンポーネント毎に、発現割合を算出する。具体的には、同一のラベルが付された細胞コンポーネントを順番に処理対象とし、処理対象の細胞コンポーネントの領域内の画素数をもとに、この処理対象の細胞コンポーネントの領域内における発現部位候補画素数の割合を求めることで処理対象の細胞コンポーネントにおける発現割合を得る。なお、発現濃度を加味して発現割合を求めることとしてもよい。すなわち、処理対象の細胞コンポーネントの領域内における発現部位候補画素のうち、その発現濃度が予め設定される所定の発現濃度以上である（色素量の値が予め設定される所定値以上である）画素の数を計数することとしてもよい。そして、処理対象の細胞コンポーネントの領域内の画素数に対する計数した数の割合を求めることで発現割合を得ることとしてもよい。そして、算出した発現割合の値が設定されている発現割合の値以上の場合に、処理対象の細胞コンポーネントの領域内における発現部位候補画素を標的分子発現部位の領域の画素として抽出する。
【０１８９】
図２９は、実施の形態１における標的分子発現部位抽出処理の原理を説明する説明図であり、図２９（ａ）は細胞核のマップデータ５６４の一例を示し、図２９（ｂ）は抽出条件（１）に従って作成した発現状況マップの一例を示し、図２９（ｃ）は標的分子発現部位マップの一例を示している。
【０１９０】
実施の形態１では、先ず、抽出条件（１）に従い、図２９（ａ）に示す細胞核のマップデータ５６４を読み出す。続いて、図２９（ｂ）に示すように、ＶＳ画像の各画素の中から、ＤＡＢ色素の色素量を含み、かつその値が設定されている発現濃度の値以上である発現部位候補画素を選出し、選出した発現部位候補画素に「１」を設定した発現状況マップを作成する。そして、図２９（ｃ）に示すように、細胞核のマップデータ５６４において「１」が設定されている画素のうち、発現状況マップにおいて「１」が設定されている各発現部位候補画素を標的分子発現部位の領域の画素として抽出する。この結果、標的分子発現部位の領域の画素に「１」が設定された抽出条件（１）についての標的分子発現部位マップが得られる。なお、図示しないが、同様の要領で、ＶＶ色素についても発現状況マップを作成する。そして、細胞膜のマップデータ５６４と、作成した発現状況マップとをもとに標的分子発現部位の領域の画素を抽出し、抽出条件（２）についての標的分子発現部位マップを得る。
【０１９１】
以上、標的分子発現部位抽出処理の原理について説明したが、実際の標的分子発現部位抽出処理では、同一のラベル（細胞核識別ラベル／細胞膜識別ラベル／脂肪質識別ラベル）が付された個々の細胞コンポーネント毎に標的分子発現部位の抽出を行う。具体的には、その１つの細胞コンポーネントの領域内に発現部位候補画素が含まれれば、その細胞コンポーネントを標的分子発現部位を含む細胞コンポーネント（以下、「陽性細胞コンポーネント」と呼ぶ。）とし、その発現部位候補画素を標的分子発現部位の領域の画素として抽出する。例えば、設定されている細胞コンポーネントが細胞膜の場合であれば、細胞膜同定情報５６２（図２５を参照）を参照する。そして、その同定コンポーネント一覧５６６に設定されている同定コンポーネント情報（１）〜（ｏ）５６８（図２６を参照）毎に、その位置座標（１）〜（ｐ）／（１）〜（ｑ）５６８２の各画素が発現部位候補画素として選出されているか否かによって、標的分子発現部位の領域の画素を抽出する。
【０１９２】
図３０は、この標的分子発現部位抽出処理の結果得られてＶＳ画像ファイル５に設定される標的分子発現部位情報５８（図１５（ｂ）を参照）のデータ構成例を説明する図である。図３０（ａ）に示すように、標的分子発現部位情報５８は、抽出標的分子数５８１と、抽出標的分子数５８１に相当する数の抽出標的分子情報（１）〜（ｊ）５８２とを含む。
【０１９３】
抽出標的分子数５８１には、抽出された標的分子発現部位の数、すなわち、ステップｂ１３で設定された抽出条件の数が設定される。そして、各標的分子発現部位に関する情報が、それぞれ抽出標的分子情報（１）〜（ｊ）５８２に設定される。具体的には、抽出標的分子情報（１）〜（ｊ）５８２には、図３０（ｂ）に示すように、標的分子発現部位マップ５８３と、陽性細胞コンポーネント一覧５８４とが設定される。
【０１９４】
陽性細胞コンポーネント一覧５８４は、図３０（ｃ）に示すように、陽性細胞コンポーネント数５８５と、陽性細胞コンポーネント数５８５に相当する数の陽性細胞コンポーネント情報（１）〜（ｋ）５８６とを含む。
【０１９５】
陽性細胞コンポーネント数５８５には、標的分子発現部位を含む細胞コンポーネント（陽性細胞コンポーネント）の数が設定される。そして、各陽性細胞コンポーネントに関する情報が、それぞれ陽性細胞コンポーネント情報（１）〜（ｋ）５８６に設定される。具体的には、陽性細胞コンポーネント情報（１）〜（ｋ）５８６には、図３０（ｄ）に示すように、その陽性細胞コンポーネントの領域に付されたラベル（標的分子発現部位を含む細胞コンポーネントが細胞核であればその細胞核に付された細胞核識別ラベル、細胞膜であればその細胞膜識別ラベル、細胞質であればその細胞質識別ラベル）５８７と、その細胞コンポーネントの領域内の標的分子発現部位の画素位置一覧である位置座標（１）〜（ｌ）５８８が設定される。
【０１９６】
続いて、図１６に示すように、細胞亜型設定部４６１が、細胞亜型の設定依頼の通知を表示部４３に表示する処理を行う（ステップｂ１７）。例えば、名称設定画面および発現パターン設定画面を細胞亜型設定画面として順次表示部４３に表示する処理を行って細胞亜型の設定依頼を通知し、この名称設定画面および発現パターン設定画面上でユーザによる細胞亜型の設定操作を受け付ける。図３１は、名称設定画面の一例を示す図であり、図３２は、発現パターン設定画面の一例を示す図である。
【０１９７】
図３１に示す名称設定画面は、設定する細胞亜型の数を入力する入力ボックスＢ６１と、設定する細胞亜型の呼称（細胞亜型名称）を入力する入力ボックスＢ６２とを備える。ここで、入力ボックスＢ６２は、例えば、入力ボックスＢ６１に入力した細胞亜型数分表示され、各細胞亜型それぞれの細胞亜型名称の入力を受け付ける。実施の形態１では、ＶＳ画像中の各細胞領域を上記した「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」の４つの細胞亜型に分類するため、図３１に示すように、入力ボックスＢ６１において「４」を入力し、４つの入力ボックスＢ６２にそれぞれの細胞亜型名称を入力する。
【０１９８】
また、図３２に示す発現パターン設定画面は、図３１の名称設定画面で細胞亜型名称が入力された細胞亜型毎に、図１７のステップｃ３で設定された分子標的色素によって標識される標的分子の発現の有無を選択するための選択ボックスＢ６３が配列されて構成される。選択ボックスＢ６３は、「○：標的分子の発現あり」「×：標的分子の発現なし」「−：無関係」の３つの選択肢を提示し、選択を促す。
【０１９９】
この発現パターン設定画面において、ユーザは、４つの細胞亜型毎に、ＤＡＢ色素によって標識されるＥＲおよび／またはＰｇＲ、ＶＶ色素によって標識されるＨＥＲ２、およびＶＲ色素によって標識されるＥＳＡの発現の有無をそれぞれ対応する選択ボックスＢ６３で選択することで、各細胞亜型について標的分子の発現パターンを設定する。例えば、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」は、細胞核上にＥＲおよび／またはＰｇＲが発現しており、細胞膜上にＨＥＲ２が発現している細胞領域を分類する細胞亜型であり、図３２に示すように、ＥＲおよび／またはＰｇＲの発現の有無を選択するための選択ボックスＢ６３−１で「○」を選択し、ＨＥＲ２の発現の有無を選択するための選択ボックスＢ６３−２で「○」を選択する。また、実施の形態１において、ＶＲ色素は、細胞コンポーネント同定用色素（詳細には細胞膜同定用色素）であり、ＥＳＡの発現の有無を選択するための選択ボックスＢ６３−３では「−」を選択する。同様に、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」についても、各標的分子の発現の有無を図３２に示すようにそれぞれ対応する選択ボックスＢ６３で選択する。
【０２００】
なお、図３２では、細胞亜型毎に一組の標的分子の発現パターンを設定することとしたが、複数の標的分子の発現パターンのうちのいずれか１つに該当する細胞領域を分類する細胞亜型を設定したい場合もある。このような場合に１つの細胞亜型に対して複数通りの標的分子の発現パターンを設定できるように、図３２において、選択ボックスＢ６３を細胞亜型毎に複数組配置し、細胞亜型毎に標的分子の発現パターンを複数通り設定できるようにしてもよい。
【０２０１】
図１６に戻り、細胞亜型設定部４６１は、以上のようにして細胞亜型設定画面においてユーザが操作入力した内容をもとに、細胞亜型を設定する（ステップｂ１９）。具体的には、細胞亜型名称およびその細胞亜型についての標的分子の発現パターンを設定した細胞亜型設定情報５１８を作成し、ＶＳ画像ファイル５（図１３（ｂ）を参照）に設定する。
【０２０２】
図３３は、細胞亜型設定情報５１８のデータ構成例を説明する図である。図３３（ａ）に示すように、細胞亜型設定情報５１８は、細胞亜型数５１８１と、細胞亜型数５１８１に相当する数の細胞亜型情報（１）〜（ｔ）５１８２とを含む。細胞亜型数５１８１には、図３１の名称設定画面において入力ボックスＢ６１に入力された値が設定される。また、図３３（ｂ）に示すように、細胞亜型情報（１）〜（ｔ）５１８２は、細胞亜型名称５１８３と、標的分子発現パターン情報５１８４とを含む。細胞亜型名称５１８３には、図３１の名称設定画面において入力ボックスＢ６２に入力された細胞亜型名称が設定される。また、標的分子発現パターン情報５１８４には、図３２の発現パターン設定画面において、細胞亜型名称５１８３の細胞亜型について対応する選択ボックスＢ６３で選択された複数の標的分子の発現の有無の組み合わせが設定される。
【０２０３】
続いて、図１６に示すように、細胞亜型分類判定部４６２が、ステップｂ９で認識した細胞領域毎に標的分子の発現パターンを判定し、各細胞領域をステップｂ１９で設定した細胞亜型に分類する処理（細胞亜型分類処理）を行う（ステップｂ２１）。
【０２０４】
図３４は、実施の形態１における細胞亜型分類処理の原理を説明する説明図である。ここで、図３４（ａ）は、細胞核同定情報５６１のマップデータ５６４および細胞膜同定情報５６２のマップデータ５６４を重ねて示し、これらマップデータ５６４を用いて認識された８つの細胞領域Ｃ５１〜Ｃ５８を破線によって示している。また、図３４（ｂ）は、抽出条件（１）についての標的分子発現部位マップ（細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所）の一例を示し、図３４（ｃ）は、抽出条件（２）についての標的分子発現部位マップ（細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所）の一例を示している。
【０２０５】
前段の処理である図１６のステップｂ１５では、所定の細胞コンポーネント上で所定の標的分子が発現している箇所を標的分子発現部位として抽出している。ステップｂ２１の細胞亜型分類処理では、細胞亜型分類判定部４６２は、各細胞領域に含まれる標的分子発現部位の組み合わせによって各細胞領域における標的分子の発現パターンを判定し、各細胞領域をその標的分子の発現パターンに該当する細胞亜型に分類する。
【０２０６】
例えば、細胞領域Ｃ５３は、図３４（ｂ）に示すように細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所である標的分子発現部位を含み、かつ、図３４（ｃ）に示すように細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所である標的分子発現部位を含むため、図３４（ｄ）に示すように「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」に分類される。細胞領域Ｃ５７も同様である。
【０２０７】
また、細胞領域Ｃ５２は、図３４（ｂ）に示すように、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所である標的分子発現部位を含む。一方で、図３４（ｃ）に示すように、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所である標的分子発現部位を含まない。このため、細胞領域Ｃ５２は、図３４（ｅ）に示すように「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」に分類される。細胞領域Ｃ５５も同様である。
【０２０８】
また、細胞領域Ｃ５１は、図３４（ｂ）に示すように、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所である標的分子発現部位を含まない。一方で、図３４（ｃ）に示すように、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所である標的分子発現部位を含む。このため、細胞領域Ｃ５１は、図３４（ｆ）に示すように「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」に分類される。細胞領域Ｃ５４，Ｃ５６も同様である。
【０２０９】
そして、細胞領域Ｃ５８は、図３４（ｂ）に示すように細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所である標的分子発現部位を含まず、かつ、図３４（ｃ）に示すように細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所である標的分子発現部位を含まないため、図３４（ｇ）に示すように「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」に分類される。
【０２１０】
なお、実施の形態１では、全ての細胞領域がいずれかの細胞亜型に分類されるが、細胞亜型として設定される標的分子の発現パターンによっては、いずれにも分類されない細胞領域が存在する場合もあり得る。このような場合には、いずれにも分類されない細胞領域を例えば「Ｏｔｈｅｒｓ」とし、以降の処理を行えばよい。
【０２１１】
以上、細胞亜型分類処理の原理について説明したが、実際の細胞亜型分類処理では、同一の細胞識別ラベルが付された個々の細胞領域毎に標的分子の発現パターンを判定する。具体的には、細胞亜型分類判定部４６２は、細胞一覧テーブル５７に設定されている細胞情報（１）〜（ｓ）５７２（図２７を参照）を順番に参照していき、その細胞領域を構成する細胞核、細胞膜、細胞質の領域にそれぞれ付された細胞核識別ラベル５７４、細胞膜識別ラベル５７５、細胞質識別ラベル５７６が、標的分子発現部位情報５８の抽出標的分子情報（１）〜（ｊ）５８２の陽性細胞コンポーネント一覧５８４においていずれかの陽性細胞コンポーネント情報（１）〜（ｋ）５８６のラベル５８７（図３０を参照）として設定されている場合に該当する標的分子発現部位を含むと判定する。そして、含むと判定した標的分子発現部位の組み合わせをもとに、細胞亜型設定情報５１８に設定されている細胞亜型情報（１）〜（ｔ）５１８２の標的分子発現パターン情報５１８４（図３３を参照）において発現ありと設定されている標的分子の標的分子発現部位を含み、発現なしと設定されている標的分子の標的分子発現部位を含まない細胞領域をその細胞亜型に分類する。
【０２１２】
図３５は、この細胞亜型分類処理の結果得られてＶＳ画像ファイル５に設定される細胞亜型分類テーブル５９（図１５（ｂ）を参照）のデータ構成例を説明する図である。図３５（ａ）に示すように、細胞亜型分類テーブル５９は、細胞亜型分類数５９１と、細胞亜型分類数５９１に相当する数の細胞亜型分類情報（１）〜（ｕ）５９２とを含む。
【０２１３】
細胞亜型分類数５９１には、図１６のステップｂ１９で設定された細胞亜型の数、すなわち、図３３（ａ）の細胞亜型数５１８１が設定される。そして、各細胞亜型に分類された細胞領域に関する情報が、それぞれ細胞亜型分類情報（１）〜（ｕ）５９２に設定される。具体的には、細胞亜型分類情報（１）〜（ｕ）５９２には、図３５（ｂ）に示すように、細胞亜型名称５９３と、分類細胞一覧５９４とが設定される。分類細胞一覧５９４には、図３５（ｃ）に示すように、その細胞亜型名称５９３の細胞亜型に分類された細胞領域の一覧として、該当する細胞亜型に分類された各細胞領域に付された細胞識別ラベル（１）〜（ｖ）５９５が設定される。
【０２１４】
以上のようにしてＶＳ画像中の各細胞領域を細胞亜型に分類したならば、図１６に示すように、表示画像生成処理に移る（ステップｂ２３）。図３６は、表示画像生成処理の処理手順を示すフローチャートである。
【０２１５】
図３６に示すように、表示画像生成処理では、表示画像生成部４６３が、先ず、染色色素および／または細胞亜型に対する表示色の割当依頼の通知を表示部４３に表示する処理を行う（ステップｅ１）。例えば、表示画像生成部４６３は、表示色選択画面を表示部４３に表示する処理を行って表示色の選択依頼を通知し、この表示色選択画面上でユーザによる表示色の選択操作を受け付ける。
【０２１６】
図３７は、表示色選択画面の一例を示す図である。図３７に示すように、表示色選択画面は、色素表示用の表示色選択画面Ｗ６１と、亜型別表示用の表示色選択画面Ｗ６２とを備える。
【０２１７】
図３８および図３９を参照して後述するように、実施の形態１では、表示モードとして、「色素表示」と「亜型別表示」とを選択できるようになっており、「色素表示」を選択して表示対象の染色色素を選択すると、この表示対象とした染色色素の染色状態を表した表示画像を表示するようになっている。また、この「色素表示」と組み合わせて表示対象とする細胞亜型の選択も可能であり、細胞亜型を選択すると、この表示対象とした細胞亜型に分類された細胞領域について表示対象とした染色色素の染色状態を表した表示画像を表示する。図３７に示す色素表示用の表示色選択画面Ｗ６１では、染色状態を実際の染色色素の色とは別の色で表したい染色色素について、表示色を選択する。染色状態をその染色色素の色のまま表したい場合には、表示色を選択しなければよい。これによれば、染色色素同士が類似した色で可視化される場合であっても、これらを識別容易に表示することが可能となり、観察時の視認性を高めることができる。
【０２１８】
一方、「亜型別表示」を選択して表示対象の細胞亜型を選択すると、この表示対象とした細胞亜型に分類された細胞領域をその表示色によって識別表示した表示画像を表示するようになっている。「亜型別表示」を選択し、ＶＳ画像中の各細胞領域を分類された細胞亜型毎に色分けして表したい場合には、亜型別表示用の表示色選択画面Ｗ６２において、細胞亜型毎に表示色を選択する。なお、この「亜型別表示」と組み合わせて表示対象とする染色色素の選択も可能となっており、染色色素を選択すると、この表示対象とした染色色素の染色状態を表した表示画像上で、表示対象とした細胞亜型に分類された細胞領域をその表示色によって識別表示した表示画像を表示する。
【０２１９】
具体的には、図３７に示すように、色素表示用の表示色選択画面Ｗ６１は、染色色素毎に対応する表示色を選択するための選択ボックスＢ６１を備える。選択ボックスＢ６１は、擬似表示色データ４７５にスペクトルが記録されている擬似表示色の一覧を選択肢として提示し、選択を促す。実施の形態１では、Ｈ色素、Ｅ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素およびＶＲ色素の５種類を染色色素としており、図３７では、これら５つの染色色素毎に選択ボックスＢ６１が５つ配置されている。
【０２２０】
一方、亜型別表示用の表示色選択画面Ｗ６２は、細胞亜型毎に対応する表示色を選択するための選択ボックスＷ６２を備える。選択ボックスＷ６２は、予め亜型表示用に用意された表示色の一覧を選択肢として提示し、選択を促す。実施の形態１では、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」の４つを細胞亜型として例示しており、図３７では、これら４つの細胞亜型毎に選択ボックスＢ６２が４つ配置されている。
【０２２１】
そして、図３６に示すように、表示画像生成部４６３は、割当依頼の通知に応答したユーザの操作入力に応じて染色色素および／または細胞亜型に表示色を割り当てる（ステップｅ３）。
【０２２２】
続いて、表示画像生成部４６３は、表示モードの選択依頼の通知と、表示対象とする染色色素および／または細胞亜型の選択依頼の通知とを表示部４３に表示する処理を行う（ステップｅ５）。ユーザは、この選択依頼の通知に応答して表示モードを選択し、染色色素および／または細胞亜型のうちの１つまたは複数を表示対象として選択する。
【０２２３】
ここで、選択依頼の通知に応答した選択操作が入力されなければ（ステップｅ７：Ｎｏ）、ステップｅ２１に移行する。一方、表示モードおよび／または表示対象の選択操作が入力された場合には（ステップｅ７：Ｙｅｓ）、表示画像生成部４６３は、操作入力に従って表示モードを選択し、表示対象を選択する（ステップｅ９）。
【０２２４】
続いて、表示画像生成部４６３は、ステップｅ９において選択した表示モードを判定する。そして、表示モードとして「色素表示」を選択した場合には（ステップｅ１１：Ｙｅｓ）、表示画像生成部４６３は、表示対象の染色色素の色素量をもとに、その染色状態を表したＶＳ画像のＲＧＢ画像を合成する（ステップｅ１３）。具体的には、各画素における表示対象の染色色素の色素量をもとに各画素のＲＧＢ値を算出し、ＲＧＢ画像を合成する。
【０２２５】
このとき、表示対象の染色色素が、ステップｅ３で表示色（擬似表示色）を割り当てた染色色素を含む場合には、擬似表示色データ４７５から該当する擬似表示色のスペクトルを読み出して取得する。そして、この染色色素の基準色素スペクトルとして取得した擬似表示色のスペクトルを用い、ＲＧＢ値を算出する。具体的には、ＲＧＢ値の算出に際し、該当する分子標的色素の基準色素スペクトルｋn（λ）を擬似表示色のスペクトルに置き換えてスペクトル推定を行い、推定結果をもとにＲＧＢ値を算出する。
【０２２６】
また、染色色素と併せて細胞亜型のうちの１つまたは複数を表示対象として選択した場合には、表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域内の画素における表示対象の染色色素の色素量をもとに、この表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域内の画素のＲＧＢ値を算出し、ＲＧＢ画像を合成することで、表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域内における表示対象の染色色素の染色状態を表した表示画像を生成する。
【０２２７】
ここで、色素量をもとにＲＧＢ値を算出し、ＲＧＢ画像を合成する処理は、例えば特許文献１に記載の公知技術を適用して実現できる。簡単に処理手順を説明すると先ず、色素量データ５５４に設定されている（図１７のステップｃ９で算出した）色素量ｄ1，ｄ2，・・・，ｄnに選択係数α1，α2，・・・，αnをそれぞれ乗じて上記した式（２）に代入し、次式（７）を得る。そして、表示対象の染色色素に乗じる選択係数αnを１とし、表示対象としない染色色素に乗じる選択係数αnを０とすることで、表示対象の染色色素の色素量のみを対象とした分光透過率ｔ*（ｘ，λ）を得る。
【数５】
0005451552.tif 000006
【０２２８】
撮像されたマルチバンド画像の任意の点（画素）ｘについて、バンドｂにおける画素値ｇ（ｘ，ｂ）と、対応する標本上の点の分光透過率ｔ（ｘ，λ）との間には、カメラの応答システムに基づく次式（８）の関係が成り立つ。
【数６】
0005451552.tif 000007
λは波長、ｆ（ｂ，λ）はｂ番目のフィルタの分光透過率、ｓ（λ）はカメラの分光感度特性、ｅ（λ）は照明の分光放射特性、ｎ（ｂ）はバンドｂにおける観測ノイズをそれぞれ表す。ｂはバンドを識別する通し番号であり、ここでは１≦ｂ≦６を満たす整数値である。
【０２２９】
したがって、式（７）を上記した式（８）に代入し、次式（９）に従って画素値を求めることによって、表示対象の染色色素の色素量を表示した表示画像（表示対象の染色色素による染色状態を表した表示画像）の画素値ｇ*（ｘ，ｂ）を求めることができる。この場合、観測ノイズｎ（ｂ）をゼロとして計算してよい。
【数７】
0005451552.tif 000008
【０２３０】
なお、表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域の特定は、次のようにして行う。先ず、細胞亜型分類テーブル５９を参照し、表示対象の細胞亜型名称５９３が設定された細胞亜型分類情報５９１から分類細胞一覧５９４（図３５を参照）を読み出して表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域に付された細胞識別ラベルを取得する。続いて、細胞一覧テーブル５７を参照し、取得した細胞識別ラベルが付された細胞領域を構成する細胞核、細胞膜、細胞質の領域にそれぞれ付された細胞核識別ラベル５７４、細胞膜識別ラベル５７５、細胞質識別ラベル５７６（図２７を参照）を取得する。そして、同定コンポーネント情報５６を参照し、同定コンポーネント一覧５６６から、取得した細胞核識別ラベル、細胞膜識別ラベル、細胞質識別ラベルがラベル５６８１として対応付けられた位置座標（１）〜（ｐ）／（１）〜（ｑ）５６８２（図２５，図２６を参照）を読み出す。
【０２３１】
その後、ＶＳ画像表示処理部４５４が、ステップｅ１３で合成したＲＧＢ画像をＶＳ画像の表示画像として表示部４３に表示する処理を行う（ステップｅ１５）。その後、ステップｅ２１に移行する。
【０２３２】
一方、ステップｅ９において選択した表示モードが「色素表示」ではない場合、すなわち、表示モードが「亜型別表示」の場合には（ステップｅ１１：Ｎｏ）、表示対象として選択した細胞亜型に分類された細胞領域を識別表示したＶＳ画像の表示画像を生成する（ステップｅ１７）。具体的には、先ず、表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域を特定する。続いて、特定した細胞領域内の画素の画素値を、ステップｅ３で表示対象の細胞亜型に割り当てた表示色（亜型表示用の表示色）の値とした表示画像を生成する。
【０２３３】
また、細胞亜型と併せて染色色素のうちの１つまたは複数を表示対象として選択した場合には、先ず、表示対象の染色色素の色素量をもとに、その染色状態を表したＶＳ画像のＲＧＢ画像を合成する。そして、合成したＲＧＢ画像において、表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域内の画素の画素値をその表示対象の細胞亜型に割り当てた表示色の値で置き換えて、表示画像を生成する。
【０２３４】
そして、ＶＳ画像表示処理部４５４が、ステップｅ１７で生成した表示画像を表示部４３に表示する処理を行う（ステップｅ１９）。その後、ステップｅ２１に移行する。
【０２３５】
ステップｅ２１では、ＶＳ画像表示処理部４５４は、ＶＳ画像表示処理の終了判定を行う。例えば、表示終了操作を受け付けて、表示終了操作が入力されなければ（ステップｅ２１：Ｎｏ）、ステップｅ７に戻る。一方、表示終了操作が入力された場合には（ステップｅ２１：Ｙｅｓ）、図１６のステップｂ２３にリターンし、その後ステップｂ２５に移る。
【０２３６】
ステップｂ２５では、細胞亜型の変更指示操作を監視し、変更指示操作が入力された場合には（ステップｂ２５：Ｙｅｓ）、ステップｂ１７に戻る。一方、細胞亜型の変更指示操作が入力されない場合には（ステップｂ２５：Ｎｏ）、ＶＳ画像表示処理の終了判定を行い、終了する場合には（ステップｂ２７：Ｙｅｓ）、本処理を終える。終了しない場合には（ステップｂ２７：Ｎｏ）、ステップｂ２５に戻る。
【０２３７】
次に、表示画像を表示部４３に表示してＶＳ画像を観察する際の操作例について説明する。図３８は、ＶＳ画像観察画面の一例を示す図である。また、図３９は、表示切換ボタンＢ７７の押下によって切り換えられるメイン画面Ｗ７１−２の一例を示す図である。図３８に示すように、ＶＳ画像観察画面は、メイン画面Ｗ７１と、標本全体像ナビゲーション画面Ｗ７３と、倍率選択部Ｂ７１と、観察範囲選択部Ｂ７３と、表示切換ボタンＢ７７と、表示色変更ボタンＢ７８と、表示終了ボタンＢ７９とを備える。
【０２３８】
図３８のメイン画面Ｗ７１や図３９のメイン画面Ｗ７１−２（詳細にはメイン画面Ｗ７１−２の後述する各分割画面Ｗ７１１，Ｗ７１３）には、高解像画像である標本領域区画画像を結合して得たＶＳ画像をもとに、表示用に生成した表示画像が表示される。ユーザは、このメイン画面Ｗ７１等において、実際に顕微鏡装置２で高倍対物レンズを用いて対象標本Ｓを観察するのと同様の要領で、対象標本Ｓの全域あるいは対象標本Ｓを部分毎に高解像度で観察することができる。
【０２３９】
標本全体像ナビゲーション画面Ｗ７３には、スライド標本全体画像が縮小表示される。そして、スライド標本全体画像上において、現在メイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２に表示されている表示画像の範囲である観察範囲を示すカーソルＫ７３１が表示される。ユーザは、この標本全体像ナビゲーション画面Ｗ７３において、対象標本Ｓのどの部位を観察しているのかが容易に把握できる。
【０２４０】
倍率選択部Ｂ７１は、メイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２の表示画像の表示倍率を選択するためのものであり、図示の例では、「全体」「１倍」「２倍」「４倍」「１０倍」「２０倍」の各表示倍率を選択する倍率変更ボタンＢ７１１が配置されている。なお、この倍率選択部Ｂ７１では、例えば対象標本Ｓの観察に用いた高倍対物レンズの倍率を最大の表示倍率として提示する。ユーザが、例えば入力部４１を構成するマウスで所望する倍率変更ボタンＢ７１１をクリックすると、メイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２に表示されている表示画像が選択された表示倍率に従って拡縮されて表示される。
【０２４１】
観察範囲選択部Ｂ７３は、メイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２の観察範囲を移動させるためのものであり、例えば上下左右の各矢印をマウスでクリックすると、所望の移動方向に観察範囲が移動した表示画像がメイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２に表示される。また、例えば入力部４１を構成するキーボードが備える矢印キーの操作や、メイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２上でのマウスのドラッグ操作等に応じて観察範囲を移動させることができるようにしてもよい。ユーザは、この観察範囲選択部Ｂ７３を操作する等してメイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２の観察範囲を移動させることで、メイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２において対象標本Ｓを部位毎に観察できる。
【０２４２】
表示切換ボタンＢ７７は、メイン画面Ｗ７１，Ｗ７１−２の表示を切り換える。具体的には、図３８のメイン画面Ｗ７１および図３９のメイン画面Ｗ７１−２に示すように、表示切換ボタンＢ７７の押下によって、１枚の表示画像をメイン画面Ｗ７１に表示する単一モードと、メイン画面Ｗ７１−２を２以上の複数画面に分割して複数の表示画像を表示するマルチモードとを切り換えることができる。なお、図３９では、マルチモードとして２画面構成のメイン画面Ｗ７１−２を例示しているが、３つ以上に画面分割して３枚以上の表示画像を表示してもよい。
【０２４３】
このメイン画面Ｗ７１あるいはメイン画面Ｗ７１−２の各分割画面Ｗ７１１，Ｗ７１３に表示された表示画像上でマウスを右クリックすると、図３８や図３９に例示するような染色色素および／または細胞亜型の選択メニュー（以下、単に「表示対象の選択メニュー」と呼ぶ。）Ｂ７５１が表示されるようになっている。表示対象の選択メニューＢ７５１は、表示モードを選択するための選択ボックスＢ７５２を備える。選択ボックスＢ７５２は、表示モードの一覧を選択肢として提示し、選択を促す。表示モードは、例えば上記した「色素表示」および「亜型別表示」の２つであるが、図３８および図３９では、「亜型別表示」として「亜型別表示（細胞）」と「亜型別表示（核）」の２つが提示される。ここで、「亜型別表示（細胞）」は、表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域の全域をその表示対象の細胞亜型に割り当てた表示色で識別表示した表示画像を表示する。一方、「亜型別表示（核）」は、表示対象の細胞亜型に分類された細胞領域を構成する細胞核の領域をその表示対象の細胞亜型に割り当てた表示色で識別表示した表示画像を表示する。
【０２４４】
そして、図３８のメイン画面Ｗ７１では、表示モードとして「色素表示」を選択した場合の表示対象の選択メニューＢ７５１を示し、図３９の分割画面Ｗ７１３では、表示モードとして「亜型別表示（核）」を選択した場合の表示対象の選択メニューＢ７５１を示している。選択ボックスＢ７５２でいずれの表示モードを選択した場合も、表示対象の選択メニューＢ７５１には、染色色素の一覧および細胞亜型の一覧が選択肢として提示され、この表示対象の選択メニューＢ７５１でチェックされた染色色素および／または細胞亜型が表示対象として選択される。実施の形態１では、「Ｈ」「Ｅ」「ＤＡＢ」「ＶＶ」「ＶＲ」の５つが染色色素についての選択肢として提示され、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」の４つが細胞亜型についての選択肢として提示される。
【０２４５】
この表示対象の選択メニューＢ７５１において表示モードを選択し、表示対象とする染色色素および／または細胞亜型をチェックすると、図３６のステップｅ９〜ステップｅ１９の処理が行われ、図３８のメイン画面Ｗ７１や、図３９のメイン画面Ｗ７１−２の各分割画面Ｗ７１１，Ｗ７１３において個別に、所望の染色色素の染色状態を表した（所望の染色色素の色素量を表示した）表示画像、あるいは所望の細胞亜型を識別表示した表示画像を表示させることができる。
【０２４６】
例えば、図３８に示す表示対象の選択メニューＢ７５１では、表示モードとして「亜型別表示（核）」が選択され、表示対象の細胞亜型として４つの細胞亜型全てがチェックされるとともに、表示対象の染色色素として「Ｈ」がチェックされている。この場合には、表示画像生成部４６３が、ＶＳ画像の現在の観察範囲内の各画素におけるＨ色素の色素量をもとにＨ色素の染色状態を表したＲＧＢ画像を合成する。そして、表示画像生成部４６３は、合成したＲＧＢ画像上で、４つの各細胞亜型に分類された細胞領域を構成する細胞核の領域を、それぞれその細胞亜型に割り当てた表示色で識別表示した表示画像を生成する。Ｈ色素は、細胞核を主に染色するため、メイン画面Ｗ７１の表示画像は、細胞核を対比染色として各細胞亜型に分類された細胞領域の分布（存在状況）を表したものとなる。その後、ＶＳ画像表示処理部４５４が、表示画像を表示部４３（詳細にはメイン画面Ｗ７１）に表示する。表示対象の組み合わせを変更した場合も同様である。なお、ここでは、各細胞亜型に分類された細胞領域を異なる表示色で識別表示することとしたが、識別表示の態様はこれに限定されるものではなく、各細胞亜型に分類された細胞領域が視覚的に識別できればどのような態様であってもよい。
【０２４７】
ここで、メイン画面Ｗ７１では、別々のハッチングを付して示した領域Ａ７１１や領域Ａ７１３が、異なる細胞亜型に分類された細胞領域を表している。これによれば、ＶＳ画像中の各細胞領域を所望の細胞亜型毎に識別表示した表示画像をユーザに提示することができる。また、いずれか１つの細胞亜型を表示対象として選択すれば、対象標本Ｓ内の細胞領域うち、所望の細胞亜型に分類された細胞領域のみを識別表示した表示画像をユーザに提示することができる。これによれば、各細胞亜型に分類された細胞領域の分布、あるいは細胞亜型毎の分類を視認性良く表示させることができる。したがって、医師等のユーザは、所望の細胞亜型に分類される細胞が対象標本Ｓ内でどのように分布しているのかや、異なる細胞亜型に分類される細胞が対象標本Ｓ内でどのように分布（混在）しているのかを視覚的に容易に確認することができ、診断効率が向上する。
【０２４８】
また、図３９において、右側の分割画面Ｗ７１３上の表示対象の選択メニューＢ７５１では、表示モードとして「色素表示」が選択され、表示対象の染色色素として「Ｈ」「ＤＡＢ」「ＶＶ」がチェックされるとともに、表示対象の細胞亜型として「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」がチェックされている。この場合には、表示画像生成部４６３が、ＶＳ画像の現在の観察範囲内において、細胞亜型が「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」に分類された細胞領域内の画素におけるＨ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素の色素量をもとにこれら３つの染色色素の染色状態を表したＲＧＢ画像を表示画像として合成する。その後、ＶＳ画像表示処理部４５４が、表示画像を表示部４３（詳細には分割画面Ｗ７１３）に表示する。表示対象の組み合わせを変更した場合も同様である。なお、左側の分割画面Ｗ７１１では、図３８のメイン画面Ｗ７１と同じ表示モードで同じ表示対象を選択した様子を示している。
【０２４９】
ここで、分割画面Ｗ７１３では、例えば領域Ａ７３１がＨ色素の染色状態を表し、領域Ａ７３２がＤＡＢ色素の染色状態を表し、領域Ａ７３３がＶＶ色素の染色状態を表している。これによれば、対象標本Ｓの所望の染色色素による染色状態を、所望の細胞亜型に分類された細胞領域毎に表した表示画像をユーザに提示することができる。さらに、マルチモードでは、表示モードや表示対象の異なる表示画像を並べて、両者を比較しながら観察するといったことが可能となる。例えば、図３９の例では、左側の分割画面Ｗ７１１で各細胞領域の細胞亜型毎の分布を把握しながら、右側の分割画面Ｗ７１３で個々の細胞亜型に分類された細胞領域における標的分子の発現状況を詳細に観察することができる。
【０２５０】
なお、染色色素の表示色として擬似表示色を割り当てたい場合や、細胞亜型に対する表示色の割り当て・変更を行いたい場合には、図３８に示す表示色変更ボタンＢ７８を押下して図３７に示した表示色選択画面を表示させ、染色色素および／または細胞亜型に割り当てる表示色を選択する操作を行う。また、ＶＳ画像の観察を終える場合には、表示終了ボタンＢ７９を押下する。
【０２５１】
以上説明したように、実施の形態１では、所定の細胞コンポーネント上に発現する所定の標的分子の有無の組み合わせを細胞亜型として設定することとした。また、設定した細胞亜型に該当する標的分子の発現パターンを判定するため、所定の細胞コンポーネント上で所定の標的分子が発現している箇所（標的分子発現部位）を抽出することとした。そして、各細胞領域に含まれる標的分子発現部位の組み合わせによって各細胞領域における標的分子の発現パターンを判定し、各細胞領域を該当する細胞亜型に分類することとした。そして、各細胞領域をその分類された細胞亜型毎の表示色で識別表示したＶＳ画像中の表示画像を表示することとした。これによれば、対象標本Ｓ内の細胞における複数の標的分子の発現パターンを視認性良く表し、所望の細胞亜型に分類された細胞領域の分布や細胞亜型毎の分布を容易に視認することが可能な表示画像をユーザに提示することができる。したがって、医師等のユーザによる診断効率を向上させることができ、観察・診断結果を治療法の選択や予後予測、診断確定等に活用することができる。
【０２５２】
（実施の形態１の変形例）
実施の形態１では、ホルモン受容体であるエストロゲン受容体（ＥＲ）やプロゲステロン受容体（ＰｇＲ）、あるいはＨＥＲ２受容体（ＨＥＲ２）の発現に着目し、これら標的分子の発現パターンを４つの細胞亜型に分類する場合について説明したが、例示した標的分子は一例であって、細胞亜型として定義する標的分子の種類やその発現の有無の組み合わせは自由に設定できる。
【０２５３】
例えば、細胞増殖マーカであるＫｉ−６７は、分化度や血管浸襲、リンパ節転移といった腫瘍の悪性度や予後と相関することが知られている。このため、例えばホルモン感受性乳癌の治療では、前述のＫｉ−６７の発現の有無を加味して化学療法を治療に取り入れるか否かを判断するといったことが行われている。そこで、実施の形態１で例示した対象標本に対し、Ｋｉ−６７を認識する分子標的染色をさらに施すようにしてもよい。そして、Ｋｉ−６７の発現の有無をさらに組み合わせた細胞亜型を設定し、各細胞領域を分類するようにしてもよい。
【０２５４】
具体的には、実施の形態１の対象標本に対し、Ｋｉ−６７を認識する抗Ｋｉ−６７抗体を用い、Diagnostic  Biosystems社製の「ＰｅｒｍａＧｒｅｅｎ」による発色（以下、「ＰＧ色素」と呼ぶ。）で標識を施す。すなわち、本変形例において観察・診断対象とする対象標本の染色色素は、Ｈ色素、Ｅ色素、ＤＡＢ色素、ＶＶ色素、ＰＦ色素、およびＶＲ色素の６種類であり、Ｈ色素によって細胞核が青紫色に染色され、Ｅ色素によって細胞質や結合組織が薄赤色に染色され、ＤＡＢ色素によってＥＲおよびＰｇＲが茶褐色に標識され、ＶＶ色素によってＨＥＲ２が紫色に染色され、ＰＧ色素によってＫｉ−６７が緑色に染色され、ＶＲ色素によって上皮細胞の細胞膜が赤レンガ色に標識されたものである。
【０２５５】
図４０は、本変形例における細胞亜型の一例を示す図である。本変形例では、図４０に示すように、ＶＳ画像中の各細胞領域を「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ１」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ２」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ１」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ２」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ１」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ２」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ１」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ２」の８つの細胞亜型に分類する。
【０２５６】
例えば、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ１」は、ＥＲ，ＰｇＲについて発現ありとし、ＨＥＲ２について発現ありとし、Ｋｉ−６７について発現なしとし、ＥＳＡについて無関係としたものである。一方、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ２」は、ＥＲ，ＰｇＲについて発現ありとし、ＨＥＲ２について発現ありとし、Ｋｉ−６７について発現ありとし、ＥＳＡについて無関係としたものである。
【０２５７】
この場合の標的分子発現部位抽出処理（図１６のステップｂ１５）では、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所と、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所と、細胞核上でＫｉ−６７が発現している箇所とをそれぞれ標的分子発現部位として抽出する。そして、細胞亜型分類処理（図１６のステップｂ２１）では、各細胞領域に含まれる前述の３つの標的分子発現部位の組み合わせによって各細胞領域における標的分子の発現パターンを判定し、各細胞領域をその標的分子の発現パターンに該当する細胞亜型に分類する。
【０２５８】
また、図３８や図３９に示したＶＳ画像観察画面では、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ１」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ２」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ１」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ２」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ１」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ２」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ１」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ２」の８つの細胞亜型をそれぞれ表示対象として選択できるようにする。このとき、例えば、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ１」と「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ２」とに異なる表示色を割り当てておけば、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現し、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している細胞領域のうち、細胞核上でＫｉ−６７が発現しているもの（Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ２）と発現していないもの（Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ１）とを異なる表示色で表示させることが可能となる。また、いずれか一方のみを表示させることもできる。また、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ１」と「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ２」とに同じ表示色を割り当てておけば、これら２つを区別せずに、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現し、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している細胞領域を全て同じ表示色で表示させることも可能である。
【０２５９】
実際の診断では、例えば、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現し、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している細胞領域において細胞核上でＫｉ−６７が発現している場合（Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ２）には、化学療法の効果も高いと判断して治療に組み込む一方、細胞核上でＫｉ−６７が発現していなければ（Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ１）、化学療法の効果は低いと判断するといったことが行われており、本変形例によれば、より一層診断精度が向上する。
【０２６０】
（実施の形態２）
実施の形態１で説明した細胞核同定情報５６１、細胞膜同定情報５６２および細胞質同定情報５６３（図２５や図２６を参照）、細胞膜一覧テーブル５７（図２７を参照）、および細胞亜型分類テーブル５９（図３５を参照）を用いれば、各細胞亜型に該当する細胞の数やその割合といった統計量を算出することができる。
【０２６１】
図４１は、実施の形態２におけるホストシステムの処理部を構成するＶＳ画像表示処理部４５４ｂの機能ブロックを示す図である。実施の形態２のホストシステムは、実施の形態１のホストシステム４において、図３に示す処理部４５のＶＳ画像表示処理部４５４を図４１に示すＶＳ画像表示処理部４５４ｂで置き換えた構成で実現できる。また、図示しないが、記録部４７（図３を参照）には、ＶＳ画像表示処理プログラム４７３にかえて、処理部４５をＶＳ画像表示処理部４５４ｂとして機能させて実施の形態２のＶＳ画像表示処理を実現するためのＶＳ画像表示処理プログラムが記録される。
【０２６２】
そして、図４１に示すように、実施の形態２のＶＳ画像表示処理部４５４ｂは、染色色素設定部４５５と、細胞コンポーネント同定用色素設定部４５６と、色素量算出部４５７と、細胞コンポーネント同定処理部４５８と、細胞認識部４５９と、標的分子発現部位抽出部４６０と、細胞亜型設定部４６１と、細胞亜型分類判定部４６２と、表示画像生成部４６３と、統計量算出手段としての統計量算出部４６４ｂとを含む。統計量算出部４６４ｂは、細胞亜型分類判定部４６２によって分類された細胞亜型毎の細胞領域をもとに各細胞亜型についての統計量を算出する。
【０２６３】
図４２は、実施の形態２におけるＶＳ画像表示処理の処理手順を示すフローチャートである。なお、図４２において、実施の形態１と同様の処理工程には同一の符号を付する。図４２に示すように、実施の形態２のＶＳ画像表示処理では、ステップｂ２１において細胞亜型分類判定部４６２が細胞亜型分類処理を実行した後、統計量算出部４６４ｂが統計量算出処理を実行する（ステップｆ２２）。図４３は、統計量算出処理の処理手順を示すフローチャートである。
【０２６４】
図４３に示すように、統計量算出処理では、統計量算出部４６４ｂは、図４２のステップｂ１９において設定された細胞亜型を順次処理対象とし、細胞亜型毎にループＢの処理を行う（ステップｇ１〜ステップｇ１１）。
【０２６５】
すなわち、ループＢでは、統計量算出部４６４ｂは、先ず、処理対象の細胞亜型に分類された細胞領域の数を取得し、その出現割合を算出する（ステップｇ３）。処理対象の細胞亜型に分類された細胞領域の数は、ＶＳ画像ファイル５において細胞亜型分類テーブル５９に設定される細胞亜型分類数５９１（図３５を参照）を読み出して取得する。また、出現割合は、次式（１０）に従って算出する。ここで、細胞亜型分類数は、処理対象の細胞亜型に分類された細胞領域の数である。また、総細胞数は、図４２のステップｂ９で認識された細胞領域の数であり、ＶＳ画像ファイル５において細胞一覧テーブル５７に設定される総細胞数５７１（図２７を参照）を読み出して取得する。なお、設定した細胞亜型のいずれにも分類されない（Ｏｔｈｅｒｓ）の細胞領域が存在する場合には、この細胞領域を除いた細胞領域の数を総細胞数として出現割合を算出することとしてもよい。
出現割合（％）＝（細胞亜型分類数／総細胞数）×１００  ・・・（１０）
【０２６６】
続いて、統計量算出部４６４ｂは、処理対象の細胞亜型の形態特徴量を算出する（ステップｇ５）。具体的には、統計量算出部４６４ｂは、先ず、処理対象の細胞亜型に分類された各細胞領域の形態特徴量を算出する。細胞領域の形態特徴量としては、外接長方形、重心、面積、周囲長、円形度、長径、短径、アスペクト比、細胞核の数、細胞核の面積、核面積の分散、細胞核の円形度、細胞核におけるＨ色素の濃度等が挙げられる。そして、統計量算出部４６４ｂは、細胞領域毎に算出した形態特徴量の例えば平均値や分散値を算出し、処理対象の細胞亜型の形態特徴量とする。
【０２６７】
ここで、各細胞領域の外接長方形、重心、面積、周囲長、円形度、長径、短径およびアスペクト比の各値は、実施の形態１で説明した細胞核の形態特徴量の算出手法と同様に算出でき、これらの各値は、細胞領域の輪郭をもとに算出する。細胞領域の輪郭は、細胞の境界を形成する画素によって定めることができる。細胞領域が細胞膜によって完全に囲まれた状態であれば、細胞膜の外側の輪郭をその細胞領域の輪郭とすればよい。細胞膜が途中で途切れている場合には、途切れた部分を補間して輪郭とすればよい。
【０２６８】
細胞核の数は、その細胞領域の内側に存在している細胞核の領域数である。細胞核の面積は、その細胞領域の内側に存在している細胞核の面積であり、細胞集塊のように細胞核の領域が複数存在している場合には、それぞれの面積の平均値として算出する。核面積の分散は、その細胞領域の内側に細胞核の領域が複数存在している場合に、それぞれの面積の分散値として算出する。細胞核の円形度は、実施の形態１で細胞核の領域について算出した円形度に相当する。細胞核におけるＨ色素の濃度は、その細胞領域の内側に存在している細胞核の領域を構成する画素の色素Ｈ（すなわち細胞核同定用色素）の色素量の例えば平均値として算出する。
【０２６９】
続いて、統計量算出部４６４ｂは、処理対象の細胞亜型における標的分子の発現濃度を算出する（ステップｇ７）。具体的には、統計量算出部４６４ｂは、先ず、処理対象の細胞亜型に分類された細胞領域に含まれる標的分子発現部位の画素について算出した分子標的色素の色素量を取得する。処理手順としては、ＶＳ画像ファイル５の色素量データ５５４（図１５（ｄ）を参照）から該当する標的分子を標識する分子標的色素の色素量を読み出して取得する。そして、取得した色素量の例えば平均値を標的分子の発現濃度とする。処理対象の細胞亜型に分類された細胞領域が複数種類の標的分子発現部位を含む場合には、その標的分子毎に発現濃度を算出する。
【０２７０】
続いて、統計量算出部４６４ｂは、ステップｇ３〜ステップｇ７で算出した値を処理対象の細胞亜型の細胞亜型名称と対応付けた統計量情報を作成し（ステップｇ９）、処理対象の細胞亜型についてのループＢの処理を終える。そして、全ての細胞亜型についてループＢの処理を行ったならば、統計量算出処理を終えて図４２のステップｆ２２にリターンし、その後ステップｂ２３に移行する。
【０２７１】
なお、以上のように算出した細胞亜型毎の統計量は、例えばユーザが統計量の表示指示操作を入力した時点等の任意のタイミングで表示部４３に表示処理する。この細胞亜型毎の統計量の表示方法は特に限定されるものではないが、例えば、図３８のＶＳ画像観察画面に統計量を表示させるための統計量表示ボタンを配置する。そして、この統計量表示ボタンが押下された際に、細胞亜型毎の統計量を表示した統計量表示画面を図３８のメイン画面Ｗ７１や図３９のメイン画面Ｗ７１−２と並べて表示するようにする。これによれば、医師等のユーザは、メイン画面Ｗ７１やメイン画面Ｗ７１−２において所望の細胞亜型に分類された細胞領域の分布や細胞亜型毎の分布を確認しながら、統計量表示画面において各細胞亜型の統計量を確認することができる。
【０２７２】
以上説明したように、実施の形態２によれば、設定した細胞亜型毎の細胞領域をもとに、各細胞亜型についての統計量を算出することができる。そして、算出した統計量を表示部４３に表示してユーザに提示することができる。したがって、医師等のユーザは、ＶＳ画像中の各細胞領域がいずれの細胞亜型に分類されるのかに加えて、各細胞亜型の出現割合や、各細胞亜型に分類された細胞領域の形態的な特徴、あるいは各細胞亜型における標的分子の発現濃度といった統計量を加味した診断を行うことができる。したがって、医師等のユーザによる診断効率をさらに向上させることができ、観察・診断結果を治療法の選択や予後予測、診断確定等に活用することができる。
【０２７３】
（実施の形態３）
図４４は、実施の形態３におけるホストシステムの処理部を構成するＶＳ画像表示処理部４５４ｃの機能ブロックを示す図である。実施の形態３のホストシステムは、実施の形態１のホストシステム４において、図３に示す処理部４５のＶＳ画像表示処理部４５４を図４４に示すＶＳ画像表示処理部４５４ｃで置き換えた構成で実現できる。また、図示しないが、記録部４７（図３を参照）には、ＶＳ画像表示処理プログラム４７３にかえて、処理部４５をＶＳ画像表示処理部４５４ｃとして機能させて実施の形態３のＶＳ画像表示処理を実現するためのＶＳ画像表示処理プログラムが記録される。
【０２７４】
そして、図４４に示すように、実施の形態３のＶＳ画像表示処理部４５４ｃは、染色色素設定部４５５と、細胞コンポーネント同定用色素設定部４５６と、色素量算出部４５７と、細胞コンポーネント同定処理部４５８と、細胞認識部４５９と、標的分子発現部位抽出部４６０と、細胞亜型設定部４６１と、細胞亜型分類判定部４６２ｃと、表示画像生成部４６３と、領域設定手段としての分類対象領域設定部４６５ｃとを含む。分類対象領域設定部４６５ｃは、細胞亜型分類処理の対象とするＶＳ画像中の領域を分類対象領域として設定する。細胞亜型分類判定部４６２ｃは、分類対象領域設定部４６５ｃによって設定された分類対象領域内に存在する細胞領域について標的分子の発現パターンを判定し、この分類対象領域内の細胞領域をその標的分子の発現パターンに該当する細胞亜型に分類する。
【０２７５】
図４５は、実施の形態３におけるＶＳ画像表示処理の処理手順を示すフローチャートである。なお、図４５において、実施の形態１と同様の処理工程には同一の符号を付する。図４５に示すように、実施の形態３のＶＳ画像表示処理では、ステップｂ１９において細胞亜型設定部４６１が細胞亜型を設定した後、分類対象領域設定部４６５ｃが、分類対象領域の選択依頼の通知を表示部４３に表示する処理を行う（ステップｈ２０１）。例えば、ステップｅ１３で説明した処理手順でＶＳ画像のＲＧＢ画像を合成して表示する処理を行って分類対象領域の選択依頼を通知し、このＲＧＢ画像上でユーザによる分類対象領域の選択操作を受け付ける。
【０２７６】
実施の形態１では、ＶＳ画像の全域を対象として各細胞領域を細胞亜型に分類することとしたが、実際の癌の診断においては、腫瘍の領域（腫瘍部）内に存在する細胞領域がいずれの細胞亜型に分類されるのかを観察するといったことが一般的に行われている。ステップｈ２０１では、この腫瘍部等の分類対象領域の選択操作を受け付ける。なお、前述のような腫瘍部は、ＶＳ画像中において離れた箇所に複数存在する場合もあるため、ステップｈ２０１では、適宜複数の分類対象領域の選択操作を受け付ける。
【０２７７】
そして、分類対象領域設定部４６５ｃは、ステップｈ２０１で受け付けた分類対象領域の選択操作に従って分類対象領域を設定する（ステップｈ２０３）。その後、細胞亜型分類判定部４６２ｃが、ステップｂ９で認識した細胞領域のうち、ステップｈ２０３で設定した分類対象領域内に存在する細胞領域について標的分子の発現パターンを判定し、分類対象領域内の細胞領域をステップｂ１９で設定した細胞亜型に分類する（ステップｈ２１）。その後、ステップｂ２３に移行する。
【０２７８】
以上説明したように、実施の形態３によれば、ＶＳ画像中の分類対象領域内に存在する細胞領域について標的分子の発現パターンを判定し、該当する細胞亜型に分類することとした。したがって、ＶＳ画像中の例えば診断が必要な領域内に存在する細胞領域のみを対象として細胞亜型に分類することができるので、処理負荷を低減できる。また、医師等のユーザにとっては、所望の細胞亜型に分類される細胞が腫瘍部においてどのように分布しているのかや、異なる細胞亜型に分類される細胞が腫瘍部においてどのように分布（混在）しているのかを視覚的に容易に確認することができ、診断効率が向上する。
【０２７９】
（実施の形態３の変形例）
実施の形態３では、ユーザによる選択操作に従って分類対象領域を設定することとしたが、分類対象領域としない領域（非分類対象領域）の選択操作を受け付けるようにしてもよい。そして、受け付けた非分類対象領域の選択操作に従い、非分類対象領域外に存在する細胞領域を細胞亜型に分類するようにしてもよい。この場合には、ユーザは、ＲＧＢ画像上で例えば分類対象領域とする腫瘍部以外の領域を選択する操作を行う。
【０２８０】
また、実施の形態３では、ユーザによる選択操作に従って分類対象領域を設定することとしたが、所定の標的分子が発現している細胞領域を分類対象の細胞領域として選択し、選択した細胞領域について細胞亜型に分類するようにしてもよい。
【０２８１】
例えば、上皮細胞を細胞亜型に分類し、間質細胞は分類の対象外とする場合には、ＥＳＡ抗体を標識する分子標的色素によって染色された細胞領域を分類対象として細胞亜型に分類すればよい。上記したように、ＥＳＡ抗体は、上皮細胞の細胞膜上に発現する上皮特異抗原ＥＳＡを認識する標的分子である。図４６は、この場合の細胞亜型の一例を示す図である。図４６に示す各細胞亜型の標的分子の発現パターンでは、ＥＳＡの発現がありとして設定されている。例えば、「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」は、ＥＲ，ＰｇＲについて発現ありとし、ＨＥＲ２について発現ありとし、ＥＳＡについて発現ありとしたものである。実際の操作は、実施の形態１で図３２に示した発現パターン設定画面において、ＶＲ色素によって標識されるＥＳＡの発現の有無を対応する選択ボックスＢ６３において「○：標的分子の発現あり」を選択すればよい。
【０２８２】
そして、この場合の標的分子発現部位抽出処理（図１６のステップｂ１５）では、実施の形態１で説明した細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現している箇所および細胞膜上でＨＥＲ２が発現している箇所に加えて、細胞膜上でＥＳＡが発現している箇所を標的分子発現部位として抽出する。そして、細胞亜型分類処理（図１６のステップｂ２１）では、細胞核上でＥＲおよび／またはＰｇＲが発現しており、細胞膜上でＨＥＲ２が発現している細胞領域のうち、細胞膜上でＥＳＡが発現している細胞領域を「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」に分類し、細胞膜上でＥＳＡが発現していない細胞領域については、例えば「Ｏｔｈｅｒｓ」とする。これによれば、細胞膜上でＥＳＡが発現している上皮細胞の細胞領域のみを分類対象とし、分類対象の細胞領域を「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ｂ」「Ｌｕｍｉｎａｌ  Ａ」「ＨＥＲ２  ｄｉｓｅａｓｅ」「Ｂａｓａｌ  ｌｉｋｅ」の各細胞亜型に分類することができる。
【０２８３】
なお、ここでは、分類対象とする細胞領域をＥＳＡの発現の有無によって選択する場合について説明したが、これに限定されるものではない。例えば、癌細胞を同定するための所定の抗体（癌細胞に発現する標的分子を認識する所定の抗体）を用い、この抗体を標識する分子標的色素によって染色された細胞領域を分類対象とするようにしてもよい。
【０２８４】
また、本発明は、蛍光抗体法によって染色された標本を観察する場合、具体的には、所望の抗原等の標的分子に作用させる蛍光色素（染色色素）を用いて染色（蛍光標識）した標本を対象標本Ｓとして観察する場合にも同様に適用できる。
【０２８５】
例えば、分子標的染色として、蛍光色素であるＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５、Ｑｄｏｔ（登録商標）６０５およびＱｄｏｔ（登録商標）６５５を用い、ＤＡＰＩによって細胞核を蛍光標識し、Ｑｄｏｔ（登録商標）６５５によって上皮特異抗原ＥＳＡを標識し、Ｑｄｏｔ（登録商標）６０５によってエストロゲン受容体（ＥＲ）およびプロゲステロン受容体（ＰｇＲ）を標識し、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５によってＨＥＲ２受容体（ＨＥＲ２）を標識した標本を対象標本Ｓとして用意する。
【０２８６】
図４７は、ＤＡＰＩの励起波長特性および蛍光波長特性を示す図であり、励起波長特性の変化曲線Ｌ８１を破線で示し、蛍光波長特性の変化曲線Ｌ８３を実線で示している。図４７に示すように、ＤＡＰＩは、励起波長が３６０ｎｍ付近であり、蛍光波長が４６０ｎｍ付近であって、この３６０ｎｍ付近の励起光を照射すると、４６０ｎｍ付近の蛍光を発する。
【０２８７】
また、図４８は、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５の蛍光波長特性の変化曲線Ｌ９１、Ｑｄｏｔ（登録商標）６０５の蛍光波長特性の変化曲線Ｌ９２、およびＱｄｏｔ（登録商標）６５５の蛍光波長特性の変化曲線Ｌ９３を示す図である。図４８に示すように、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５の蛍光波長は５４５ｎｍ付近であり、Ｑｄｏｔ（登録商標）６０５の蛍光波長は６０５ｎｍ付近であり、Ｑｄｏｔ（登録商標）６５５の蛍光波長は６５５ｎｍ付近である。なお、図示しないが、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５は、いずれも励起波長が３５０ｎｍ〜４８８ｎｍである。したがって、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５は、３５０ｎｍ〜４８８ｎｍの励起光を照射すると、５４５ｎｍ付近の蛍光を発し、Ｑｄｏｔ（登録商標）６０５は、３５０ｎｍ〜４８８ｎｍの励起光を照射すると、６０５ｎｍ付近の蛍光を発し、Ｑｄｏｔ（登録商標）６５５は、３５０ｎｍ〜４８８ｎｍの励起光を照射すると、６５５ｎｍ付近の蛍光を発する。
【０２８８】
この場合には、図２に示した顕微鏡装置２において、キューブ切換部２６が蛍光キューブ２６１を観察光の光路上に配置し、落射照明用光源２８３からの落射照明光を落射照明光学系によって対象標本Ｓに照射して、対象標本Ｓの蛍光観察を行う。
【０２８９】
より詳細には、キューブ切換部２６が備える蛍光キューブ２６１として、対象標本Ｓを染色した蛍光色素の励起波長の光を透過させる励起フィルター２６２と、対象標本Ｓを染色した全ての蛍光色素の蛍光波長を含む波長の光を透過させる吸収フィルター２６３と、ダイクロイックミラー２６４とを設置してユニット化したものを用いる。ここでは、ＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５の励起波長（例えば３５０ｎｍ〜４８８ｎｍ）の光を透過させる励起フィルター２６２を用意する。そして、ＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５の蛍光波長を含む波長（例えば４６０ｎｍ〜６５５ｎｍ）の光を透過させる吸収フィルター２６３を用意し、蛍光キューブ２６１を構成する。なお、対象標本Ｓを染色した蛍光色素の励起波長が異なる場合には、各励起波長の光を透過させる励起フィルター２６２を設置した蛍光キューブを個別に用意し、キューブ切換部２６に装着すればよい。
【０２９０】
また、フィルタユニット３０の光学フィルタ切換部３０１として、光学素子を装着するための装着穴が少なくとも４つ形成されたものを用意する。そして、４つの装着穴にそれぞれＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５の蛍光波長の光を透過させる４枚の光学フィルタ３０３を装着する。
【０２９１】
落射照明用光源２８３から射出されて落射照明光学系によって対象標本Ｓに照射された落射照明光は、落射照明光学系を経て蛍光キューブ２６１に入射し、ＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５の励起波長（３５０ｎｍ〜４８８ｎｍ）の光が励起フィルター２６２を透過する。そして、励起フィルター２６２を透過した励起波長（３５０ｎｍ〜４８８ｎｍ）の励起光がダイクロイックミラー２６４によって反射され、対物レンズ２７１を経て対象標本Ｓに照射される。対象標本Ｓに励起光が照射されると、この励起光によって励起され、対象標本Ｓから発せられた蛍光（ＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５が発した蛍光）が観察光として対物レンズ２７１に入射する。対物レンズ２７１を経た観察光（蛍光）は、蛍光キューブ２６１に入射してダイクロイックミラー２６４を通過する。そして、吸収フィルター２６３を透過したＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５の蛍光波長（４６０ｎｍ〜６５５ｎｍ）の観察光（蛍光）が、フィルタユニット３０を経由して鏡筒２９に入射する。
【０２９２】
そして、この場合の対象標本Ｓの標本像のマルチバンド撮像は、光学フィルタ切換部３０１を回転させて４枚の光学フィルタ３０３を順次観察光の光路上に挿入し、ＴＶカメラ３２によって標本像を撮像する。これによって、ＤＡＰＩ、Ｑｄｏｔ（登録商標）５４５，６０５，６５５の蛍光波長毎の分光スペクトル画像が得られる。
【０２９３】
一方、ホストシステム４では、実施の形態１と同様に対象標本ＳのＶＳ画像を生成し、ＶＳ画像を表示する。具体的には、ＤＡＰＩを細胞核同定用色素、Ｑｄｏｔ（登録商標）６５５を細胞膜同定用色素としてそれぞれ用い、実施の形態１と同様に、細胞核上でのＥＲおよび／またはＰｇＲの発現の有無と、細胞膜上でのＨＥＲ２の発現の有無との組み合わせに従ってＶＳ画像中に映る対象標本内の細胞領域を事前に設定される細胞亜型に分類した後、各細胞領域をその分類された細胞亜型毎の表示色で識別表示したＶＳ画像中の表示画像を表示する。
【０２９４】
また、本発明は、上記した各実施の形態そのままに限定されるものではなく、各実施の形態に開示されている複数の構成要素を適宜組み合わせることによって、種々の発明を形成できる。例えば、実施の形態に示される全構成要素からいくつかの構成要素を除外して形成してもよい。あるいは、異なる実施の形態に示した構成要素を適宜組み合わせて形成してもよい。
【産業上の利用可能性】
【０２９５】
以上のように、本発明の顕微鏡システム、標本観察方法およびプログラムは、標本内の細胞における複数の標的分子の発現パターンを視認性良く表した画像を提示し、診断精度を向上させるのに適している。
【符号の説明】
【０２９６】
１      顕微鏡システム
２      顕微鏡装置
２０      電動ステージ
２１１，２２１      モータ
２１３      ＸＹ駆動制御部
２２３      Ｚ駆動制御部
２３      顕微鏡本体
２４１      コレクタレンズ
２４２      透過用フィルタユニット
２４３      透過用視野絞り
２４４      透過用開口絞り
２４５      折曲げミラー
２４６      コンデンサ光学素子ユニット
２４７      トップレンズユニット
２５１      コレクタレンズ
２５２      落射用フィルタユニット
２５３      落射シャッタ
２５４      落射用視野絞り
２５５      落射用開口絞り
２６      キューブ切換部
２６１      蛍光キューブ
２７      レボルバ
２７１      対物レンズ
２８１      透過照明用光源
２８３      落射照明用光源
２９      鏡筒
２９１      ビームスプリッタ
３０      フィルタユニット
３０３      光学フィルタ
３１      双眼部
３１１      接眼レンズ
３２      ＴＶカメラ
３３      顕微鏡コントローラ
３４      ＴＶカメラコントローラ
４      ホストシステム
４１      入力部
４３      表示部
４５      処理部
４５１      ＶＳ画像生成部
４５２      低解像画像取得処理部
４５３      高解像画像取得処理部
４５４，４５４ｂ，４５４ｃ      ＶＳ画像表示処理部
４５５      染色色素設定部
４５６      細胞コンポーネント同定用色素設定部
４５７      色素量算出部
４５８      細胞コンポーネント同定処理部
４５９      細胞認識部
４６０      標的分子発現部位抽出部
４６１      細胞亜型設定部
４６２，４６２ｃ      細胞亜型分類判定部
４６３      表示画像生成部
４６４ｂ      統計量算出部
４６５ｃ      分類対象領域設定部
４７      記録部
４７１      ＶＳ画像生成プログラム
４７３      ＶＳ画像表示処理プログラム
４７５      擬似表示色データ
５      ＶＳ画像ファイル
Ｓ      標本（対象標本）
【図１】
0005451552.tif 000009
【図２】
0005451552.tif 000010
【図３】
0005451552.tif 000011
【図４】
0005451552.tif 000012
【図５】
0005451552.tif 000013
【図６】
0005451552.tif 000014
【図７】
0005451552.tif 000015
【図８】
0005451552.tif 000016
【図９】
0005451552.tif 000017
【図１０】
0005451552.tif 000018
【図１１】
0005451552.tif 000019
【図１２】
0005451552.tif 000020
【図１３】
0005451552.tif 000021
【図１４】
0005451552.tif 000022
【図１５】
0005451552.tif 000023
【図１６】
0005451552.tif 000024
【図１７】
0005451552.tif 000025
【図１８】
0005451552.tif 000026
【図１９】
0005451552.tif 000027
【図２０】
0005451552.tif 000028
【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
0005451552.tif 000031
【図２４】
0005451552.tif 000032
【図２５】
0005451552.tif 000033
【図２６】
0005451552.tif 000034
【図２７】
0005451552.tif 000035
【図２８】
0005451552.tif 000036
【図２９】
0005451552.tif 000037
【図３０】
0005451552.tif 000038
【図３１】
0005451552.tif 000039
【図３２】
0005451552.tif 000040
【図３３】
0005451552.tif 000041
【図３４】
0005451552.tif 000042
【図３５】
0005451552.tif 000043
【図３６】
0005451552.tif 000044
【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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