(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（式ＩA）：
【化１】
0005438028.tif 000075
〔式中：
Ｒが次式：
【化２】
0005438028.tif 000076
Ｒ１は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、アルキル、アリール、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシル、アリールオキシル及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ２は、水素及びアルキルからなる群から選択され、前記アルキルはシクロアルキルおよびアリールからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
あるいは、Ｒ３及びＲ４は、Ｎ原子と一緒に結合して３〜８員ヘテロ環を形成し、この場合の３〜８員ヘテロ環は、さらに、Ｎ、Ｏ及びＳ原子からなる群から選択される１個又はそれ以上の異種原子を含有し、且つ３〜８員環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン及び−ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ５は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、水素、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル及びハロゲンからなる群から選択され、
ＷはＣ、Ｓ又はＯ原子であり、前記ＣはさらにＲ６又はＲ７で置換されていてもよい］
で表わされる化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項２】
化合物が、式（ＩＢ）：
【化３】
0005438028.tif 000077
〔式中、Ｒ、Ｒ１及びＲ２は請求項１のＲ、Ｒ１及びＲ２と同意義である。〕
で表わされる化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項３】
化合物が、式（ＩＣ）：
【化４】
0005438028.tif 000078
〔式中、Ｒ、Ｒ１及びＲ２は請求項１のＲ、Ｒ１及びＲ２と同意義である。〕
で表わされる化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項４】
Ｒ１は、Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル及びヒドロキシアルキルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項５】
Ｒ５は水素である、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項６】
少なくともＲ６およびＲ７の一つは水素である、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項７】
少なくともR６およびR７の一つはシアノである、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項８】
WはCであり、Cがハロゲンで置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項９】
塩が、塩酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、マレイン酸、乳酸、メタンスルホン酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酢酸及びトリフルオロ酢酸からなる群から選択される酸である、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容し得る塩。
【請求項１０】
酸がｐ−トルエンスルホン酸、塩酸、酒石酸又はトリフルオロ酢酸である、請求項
９に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項１１】
化合物が、下記の化合物からなる群から選択されるもの
【化５】
0005438028.tif 000079
である、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項１２】
【化６】
0005438028.tif 000080
からなる群から選択される化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項１３】
化合物が、下記の化合物からなる群から選択されるもの
【化７】
0005438028.tif 000081
である、請求項１に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項１４】
【化８】
0005438028.tif 000082
からなる群から選択される化合物又はその製薬学的に許容し得る塩。
【請求項１５】
治療有効量の請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩と、製薬学的に許容し得る担体とを含有してなる医薬組成物。
【請求項１６】
式（ＩD）
【化９】
0005438028.tif 000083
〔式中：
Ｒ１は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、
Ｒ１は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４であるとき、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコシキル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
あるいは、Ｒ３及びＲ４は、Ｎ原子と一緒に結合して３〜８員へテロ環を形成し、この場合の３〜８員ヘテロ環は、さらに、Ｎ、Ｏ及びＳ原子からなる群から選択される１個又はそれ以上の異種原子を含有し、且つ３〜８員環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン及び−ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ１は、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３又は−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３であるとき
Ｒ１は、シクロアルキル、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記シクロアルキル、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコシキル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよい〕で表わされる化合物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の式（ＩD）の化合物の製造方法であって、
【化１０】
0005438028.tif 000084
５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルのｔｅｒｔ−ブチルエステル基を切断してヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタートを得る工程と、
【化１１】
0005438028.tif 000085
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタートを、アシルクロリド又はエステルと反応させて式（ID）の化合物を得る工程とを含む、製造方法〔式中、Ｒ１は請求項１６のＲ１と同意義である。〕。
【請求項１８】
前記切断反応がジクロロメタンで行なわれることを特徴とする、請求項１７に記載の製造方法。
【請求項１９】
【化１２】
0005438028.tif 000086
式（ID）の化合物を式（IB）の化合物に変換する工程を含む式（IB）の化合物の製造方法〔式中、Ｒ、Ｒ１及びＲ２は請求項２のＲ、Ｒ１及びＲ２と同意義である。〕。
【請求項２０】
前記変換がメタノール又はエタノールの存在下で行われることを特徴とする、請求項１９に記載の製造方法。
【請求項２１】
請求項３に記載の式（ＩC）の化合物の製造方法であって
【化１３】
0005438028.tif 000087
式（ID）の化合物をアザビシクロアルケニル化合物に変換する工程と
【化１４】
0005438028.tif 000088
アザビシクロアルケニル化合物をアザビシクロシアノ化合物に変換する工程と
【化１５】
0005438028.tif 000089
アザビシクロシアノ化合物をアザビシクロアミン化合物に変換する工程と
【化１６】
0005438028.tif 000090
アザビシクロアミン化合物をハロ化合物と反応させて式（ＩC）の化合物を得る工程とを含む式（ＩC）の化合物の製造方法〔式中、Ｒ、Ｒ１及びＲ２は請求項３のＲ、Ｒ１及びＲ２と同意義である。〕。
【請求項２２】
アザビシクロアルケニル化合物の変換反応はジクロロメタンの存在下、アザビシクロシアノ化合物の変換反応はエタノールおよび塩酸の存在下で行われることを特徴とする、請求項２１に記載の製造方法。
【請求項２３】
請求項２に記載の式（ＩB）の化合物の製造方法であって
【化１７】
0005438028.tif 000091
式（ＩＤ）の化合物をアザビシクロシアノ化合物に変換する工程と
【化１８】
0005438028.tif 000092
アザビシクロシアノ化合物をＲ２置換のアザビシクロシアノ化合物に変換する工程と
【化１９】
0005438028.tif 000093
酸の存在下Ｒ２置換のアザビシクロシアノ化合物をＲ２置換のアザビシクロカルボキシル化合物に変換する工程と
【化２０】
0005438028.tif 000094
Ｒ２置換のアザビシクロカルボキシル化合物を置換のアザビシクロアジド化合物に変換する工程と
【化２１】
0005438028.tif 000095
アザビシクロアジド化合物をＲ２置換のアザビシクロアミン化合物に変換する工程と
【化２２】
0005438028.tif 000096
Ｒ２置換のアザビシクロアミン化合物を式（ＩＢ）の化合物に変換する工程とを含む
（IＢ）の化合物の製造方法〔式中、Ｒ、Ｒ１及びＲ２は請求項２のＲ、Ｒ１及びＲ２と同意
義である。〕。
【請求項２４】
請求項３に記載の式（ＩC）の化合物の製造方法であって
【化２３】
0005438028.tif 000097
式（ID）の中間体をアザビシクロヒドロキシ化合物に還元する工程と
【化２４】
0005438028.tif 000098
アザビシクロヒドロキシ化合物をアザビシクロメチルスルフォン酸化合物に変換する工程と
【化２５】
0005438028.tif 000099
アザビシクロメチルスルフォン酸化合物をフタルイミド置換のアザビシクロ化合物に変換する工程と
【化２６】
0005438028.tif 000100
フタルイミド置換のアザビシクロ化合物をアザビシクロアミン化合物に変換する工程と
【化２７】
0005438028.tif 000101
アザビシクロアミン化合物を式（IC）の化合物に変換する工程とを含む式（IC）の化合物の製造方法〔式中、Ｒ、Ｒ１及びＲ２は請求項３のＲ、Ｒ１及びＲ２と同意義である。〕。
【請求項２５】
前記還元が水素化トリ-tert-ブトキシアルミニウムリチウムの存在下行われることを特徴とする、請求項２４に記載の製造方法。
【請求項２６】
式（IB）又は式（IC）の化合物を酸と反応させて、対応酸付加塩を得る工程を含む請求項１８ないし２５のいずれかの請求項に記載の製造方法。
【請求項２７】
ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としての医薬の製造における請求項１ないし１４のいずれかの請求項に記載の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩の使用。
【請求項２８】
ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としての医薬の製造における請求項１５に記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アザビシクロオクタンの誘導体、その製造方法、及びそれを含有する組成物並びにその用途、特にジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）の阻害剤としての医薬用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病とは、多数の原因因子に由来し且つインスリンの分泌及び／又機能欠陥によって引き起こされる糖、脂質及びタンパク質代謝障害と共に血漿グルコース値の上昇又は高血糖によって特徴付けられる疾患過程を指す。糖尿病は、古くからの疾患であり、人体のインスリンの完全な又は相対的な欠乏によって、より多い飲料、より多い尿、より多い食物と共に主として尿中に排出する血中のグルコースの濃度の上昇、体重減少、めまい、脱力及びその他の症状を招く。
【０００３】
ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰＩＶ）は、好ましくは最後から２番目の位置のプロリン残基を含有するペプチド鎖からＮ末端ジペプチドを切断するセリンプロテアーゼである。哺乳動物系におけるＤＰＰＩＶの生物学的な役割は完全に確証されていないが、神経ペプチドの代謝、Ｔ細胞の活性化、内皮に対する癌細胞の付着及びリンパ球様細胞内へのＨＩＶの侵入において重要な役割を果たすと考えられる（国際公開第ＷＯ９８／１９９９８号明細書）。
【０００４】
最近になって、ＤＰＰＩＶがグルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ）−１の分泌の阻害に関与することが発見された。さらに詳しくは、ＤＰＰＩＶは、ＧＬＰ−１のアミノ末端Ｈｉｓ−Ａｌａジペプチドを切断し、活性ＧＬＰ−１（７−３６）ＮＨ２を不活性ＧＬＰ−１（９−３６）ＮＨ２に分解する（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１９９９，１４０：５３５６−５３６３）。生理学的条件下では、血液循環中の全ＧＬＰ−１の半減期は短く、ＤＰＰＩＶによって分解されたＧＬＰ−１由来の不活性代謝産物は、ＧＬＰ−１受容体と結合して活性ＧＬＰ−１をアンタゴナイズすることができ、従ってＧＬＰ−１に対する生理学的反応が短縮される。内因性及び外因性ＧＬＰ−１は、ＤＰＰＩＶ阻害剤によって、ＤＰＰＩＶによって不活性化されることから完全に保護されることができ、ＧＬＰ−１生物活性は著しく高められることができる（５〜１０倍）。ＧＬＰ−１は、膵臓のインスリン分泌の主要な刺激物質であり、グルコース処理に直接に影響を及ぼすことができることから、ＤＰＰＩＶ阻害剤は非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）を治療するのに十分に有用である（米国特許第６１１０９４９号明細書）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】国際公開第ＷＯ９８／１９９９８号明細書
【特許文献２】米国特許第６１１０９４９号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１９９９，１４０：５３５６−５３６３
【発明の概要】
【０００７】
従って、本発明は、式（Ｉ）
【化１】
0005438028.tif 000002
〔式中：
Ｒは、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノカルボニルアルキル、アミドアルキル、複素環を有するアミノカルボニルアルキル及びアミノアルキルからなる群から選択され、前記複素環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド基、アミノカルボニル、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシル、アミノアルキル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル及びハロゲンからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換された５員又は６員ヘテロ環であり、
Ｒ１は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、アルキル、アリール、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシル、アリールオキシル及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ２は、水素及びアルキルからなる群から選択され、前記アルキルはシクロアルキルおよびアリールからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ３及びＲ４は、Ｎ原子と一緒に結合して３〜８員ヘテロ環を形成し、この場合の３〜８員へテロ環は、さらに、Ｎ、Ｏ及びＳ原子からなる群から選択される１個又はそれ以上の異種原子を含有し、且つ３〜８員環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン及び−ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
ｎは０〜４の整数である〕
を有する化合物又はその製薬学的に許容し得る塩に関する。
【０００８】
また、本発明は、式（ＩＡ）：
【化２】
0005438028.tif 000003
〔式中：
Ｒは、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノカルボニルアルキル、アミドアルキル、複素環を有するアミノカルボニルアルキル及びアミノアルキルからなる群から選択され、前記複素環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、アミド基、アミノカルボニル、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシル、アミノアルキル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル及びハロゲンからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換された５員又は６員ヘテロ環であり、
Ｒ１は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、アルキル、アリール、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシル、アリールオキシル及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ２は、水素及びアルキルからなる群から選択され、前記アルキルはシクロアルキルおよびアリールからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ３及びＲ４は、Ｎ原子と一緒に結合して３〜８員ヘテロ環を形成し、この場合の３〜８員ヘテロ環は、さらに、Ｎ、Ｏ及びＳ原子からなる群から選択される１個又はそれ以上の異種原子を含有し、且つ３〜８員環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン及び−ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよい〕の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩を包含する。
【０００９】
好ましくは、式（Ｉ）を有する化合物又はその製薬学的に許容し得る塩において、Ｒは
次式：
【化３】
0005438028.tif 000004
（式中、Ｒ５は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換されていてもよく、
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル及びハロゲンからなる群から選択され、
ＷはＣ、Ｓ又はＯ原子であり、前記ＣはさらにＲ６及びＲ７で置換されていてもよい。
【００１０】
また、本発明は、式（ＩＢ）：
【化４】
0005438028.tif 000005
〔式中、Ｒは、次式：
【化５】
0005438028.tif 000006
であり、
Ｒ１は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、アルキル、アリール、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシル、アリールオキシル及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ２は、水素及びアルキルからなる群から選択され、前記アルキルはシクロアルキルおよびアリールからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコシキル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ３及びＲ４は、Ｎ原子と一緒に結合して３〜８員ヘテロ環を形成し、この場合の３〜８員ヘテロ環は、さらに、Ｎ、Ｏ及びＳ原子からなる群から選択される１個又はそれ以上の異種原子を含有し、且つ３〜８員環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、エステル、ハロゲン及び−ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ５は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル及びハロゲンからなる群から選択され、
Ｗは、Ｃ、Ｓ又はＯ原子であり、前記ＣはさらにＲ６及びＲ７で置換されていてもよい］の化合物またはその製薬学的に許容し得る塩を包含する。
【００１１】
また、本発明は、式（ＩＣ）：
【化６】
0005438028.tif 000007
〔式中、Ｒは、次式：
【化７】
0005438028.tif 000008
であり、
Ｒ１は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、アルキル、アリール、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシル、アリールオキシル及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
R２は、水素及びアルキルからなる群から選択され、前記アルキルはシクロアルキルおよびアリールからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコシキル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ３及びＲ４は、Ｎ原子と一緒に結合して３〜８員ヘテロ環を形成し、この場合の３〜８員ヘテロ環は、さらに、Ｎ、Ｏ及びＳ原子からなる群から選択される１個又はそれ以上の異種原子を含有し、且つ３〜８員環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン及び−ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ５は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル及びハロゲンからなる群から選択され、
Ｗは、Ｃ、Ｓ又はＯ原子であり、前記ＣはさらにＲ６及びＲ７で置換される］の化合物又はその製薬学的に許容し得る塩を包含する。
【００１２】
本発明は、式（Ｉ）を有する化合物又は製薬学的に許容し得る塩であって、前記塩が塩酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酒石酸、マレイン酸、乳酸、メタンスルホン酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酢酸及びトリフルオロ酢酸からなる群から選択される酸を用いて形成される塩からなり、好ましくは酸がｐ−トルエンスルホン酸、塩酸、酒石酸およびトリフルオロ酢酸である式（Ｉ）を有する化合物又は製薬学的に許容し得る塩を提供する。
【００１３】
特に好ましい実施形態においては、式（Ｉ）を有する化合物又は製薬学的に許容し得る塩としては、以下が挙げられる。
【００１４】
【表１】
0005438028.tif 000009
0005438028.tif 000010
0005438028.tif 000011
0005438028.tif 000012
【００１５】
さらにまた、本発明は、式（Ｉ）を有する化合物の合成における中間体としての次式（ID）：
【化８】
0005438028.tif 000013
〔式中：
Ｒ１は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３及び−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、アルキル、アリール、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシル、アリールオキシル及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコシキル、トリフルオロメチル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ３及びＲ４は、Ｎ原子と一緒に結合して３〜８員ヘテロ環を形成し、この場合の３〜８員ヘテロ環は、さらに、Ｎ、Ｏ及びＳ原子からなる群から選択される１個又はそれ以上の異種原子を含有し、且つ３〜８員環は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル、ハロゲン及び−ＮＲ３Ｒ４からなる群から選択される１つ又はそれ以上の基でさらに置換される〕
の化合物に関する。
【００１６】
さらにまた、本発明は、式（ID）の化合物の製造方法であって、
【化９】
0005438028.tif 000014
出発原料５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを、氷水浴中、ジクロロメタンのような溶媒中でトリフルオロ酢酸と反応させて、ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタートを得る工程と、
【化１０】
0005438028.tif 000015
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタートを、塩基の存在下でアシルクロリドと反応させて式（ID）の化合物を得る工程とを含む式（ID）の化合物の製造方法に関する。
【００１７】
本発明は、式（ID）の中間体を、アミン、置換水素化ホウ素ナトリウムと及びトリエチルアミンのような塩基と、メタノール又はエタノールの溶媒中で反応させて、式（IB）の化合物を得る工程を含む式（IB）の化合物の製造方法に関する。
【化１１】
0005438028.tif 000016
【００１８】
本発明は、tert-ブトキシドカリウムとヨウ化メチルトリフェニルホスホニウムのトルエンの溶液を加熱し、式（ID）の中間体を加えて、室温で反応させて、アザビシクロ  アルケニル化合物を得る工程と
【化１２】
0005438028.tif 000017
アザビシクロ  アルケニル化合物をシクロロメタンのような溶媒で過塩素酸銀の存在下室温でシアン化トリメチルシリルと反応させてアザビシクロ  シアノ化合物を得る工程と
【化１３】
0005438028.tif 000018
アザビシクロ  シアノ化合物をエタノールのような溶媒で室温で適当な酸と反応させてアザビシクロ  アミン化合物を得る工程と
【化１４】
0005438028.tif 000019
アザビシクロ  アミン化合物をＮ，Ｎ−ジメチルフルムアミドのようなアルカリ性溶媒の存在下でハロ化合物と反応させて式（ＩＢ）の化合物を得る工程とを含む式（ＩＢ）の化合物の製造方法に関する。
【化１５】
0005438028.tif 000020
【００１９】
本発明は、式（ＩＤ）の中間体をエチエン  グリコール  ジメチル  エーテルのような溶媒でイソシアン化トシルメチルと反応させてアザビシクロ  シアノ化合物を得る工程と
【化１６】
0005438028.tif 000021
アザビシクロ  シアノ化合物をテトラヒドロフランのような溶媒でヘキサメチルジシラジドリチウムと反応させてＲ２置換のアザビシクロ  シアノ化合物を得る工程と
【化１７】
0005438028.tif 000022
酸の存在下Ｒ２置換のアザビシクロ  シアノ化合物を加水分解し、Ｒ２置換のアザビシクロ  カルボキシル化合物を得る工程又は
Ｒ２置換のアザビシクロ  シアノ化合物をシクロロメタンの溶媒で氷水浴で冷却しながらＤＩＢＡＬ−Ｈのような還元剤と反応させてアルデヒート化合物を得て、アルデヒート化合物をテトラヒドロフラン/水の混合溶媒で氷水浴で冷却しながら、燐酸二水素ナトリウム、亜塩素酸ナトリウムおよび２−メチルー２−ブテンと反応させてＲ２置換のアザビシクロ  カルボキシル化合物を得る工程と
【化１８】
0005438028.tif 000023
Ｒ２置換のアザビシクロ  カルボキシル化合物をトリエチルアミンのような塩基の存在下、クロロギ酸エチルと反応させてアザビシクロ  アジド化合物を含む工程
【化１９】
0005438028.tif 000024
アザビシクロ  アジド化合物をトルエンのような溶媒で酸性溶液で加熱撹拌し、Ｒ２置
換のアザビシクロ  アミン化合物を得る工程と
【化２０】
0005438028.tif 000025
Ｒ２置換のアザビシクロ  アミン化合物をＮ，Ｎ−ジメチルフルムアミドのようなア
ルカリ性溶媒の存在下でハロ置換化合物と反応させて式（ＩＢ）の化合物を得る工程とを含む式（ＩＢ）の化合物の製造工程に関する。
【化２１】
0005438028.tif 000026
【００２０】
本発明は、式（ID）の中間体をテトラヒドロフナンのような溶媒で氷水浴で冷やしながら、水素化トリ-tert-ブトキシアルミニウム
リチウムのような還元剤と反応させてアザビシクロ  ヒドロキシ化合物を得る工程と
【化２２】
0005438028.tif 000027
アザビシクロ  ヒドロキシ化合物をジクロロメタンのような溶媒でトリメチルアミンのような塩基および塩化メチルスルホニルと反応させてアザビシクロ  メチル  スルフォン酸化合物を得る工程と
【化２３】
0005438028.tif 000028
アザビシクロ  メチル  スルフォン酸化合物およびフタルイミド カリウムをN,N-ジメチルホルムアミドのような塩基の存在下で加熱してフタルイミド置換のアザビシクロ化合物を得る工程と
【化２４】
0005438028.tif 000029
フタルイミド置換のアザビシクロ化合物およびヒドラジンをエタノールのような溶媒で加熱してアザビシクロアミン化合物を得る工程と
【化２５】
0005438028.tif 000030
アザビシクロアミン化合物およびハロゲン化合物をジクロロメタンのような溶媒で加熱して式（IC）の化合物を得る工程とを含む式（IC）の化合物の製造方法に関する。
【化２６】
0005438028.tif 000031
【００２１】
好ましくは、前記の製造方法において、Ｒは、次式：
【化２７】
0005438028.tif 000032
〔式中：
Ｒ５は、水素、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール及びヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又はヘテロシクロアルキルは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルコキシル、シクロアルコキシル、アリールオキシル、ヘテロアリールオキシル、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、アルキルアミノ、シアノ、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルコキシル、カルボン酸及びカルボン酸エステルからなる群から選択される１個又はそれ以上の基でさらに置換され、
Ｒ６及びＲ７は、それぞれ独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、ハロアルキル、ハロアルコキシル、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、アルキニル、アルコキシル、アリールオキシル、ヒドロキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、カルボン酸、カルボン酸エステル及びハロゲンからなる群から選択され、
Ｗは、Ｃ、Ｓ又はＯ原子であり、ＣはさらにＲ６又はＲ７で置換される〕
である。
【００２２】
精製した式（ＩＢ）及び式（ＩＣ）の化合物をさらにメタノール、ジクロロメタン又はエチル  アセテートの溶媒で酸と反応させて酸の附加塩を得ることができる。
【００２３】
さらにまた、本発明は、有効治療量の本発明の化合物又はその塩と、製薬学的に許容し得る担体とを含有してなる医薬組成物に関する。
【００２４】
さらにまた、本発明は、ジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰＩＶ）阻害剤としての医薬の製造における式（Ｉ）を有する化合物又はその製薬学的に許容し得る塩の使用に関する。
【００２５】
本発明は、式（Ｉ）を有する化合物が製薬学的に許容し得る遊離の形及び酸付加塩の形である式（Ｉ）を有する化合物又は製薬学的に許容し得る塩に関し、且つその製薬学的に許容し得る（無毒性の、生理学的に許容し得る）塩であって、製薬学的に許容し得る塩が、塩酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、及びトリフルタートからなる群から選択されるものである製薬学的に許容し得る（無毒性の、生理学的に許容し得る）塩を提供する。好ましくは、前記塩は、ｐ−トルエンスルホン酸塩、塩酸塩、酒石酸塩及びトリフルオロ酢酸塩である。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
特に明記しない限りは、明細書及び特許請求の範囲で使用する次の用語は、以下に記載の意味を有する。
【００２７】
「アルキル」とは、飽和脂肪族炭化水素基、例えばＣ１−Ｃ２０直鎖及び分岐鎖基を指す。好ましくは、アルキル基は、１〜１０個の炭素原子を有する中間サイズのアルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチルなどである。さらに好ましくは、アルキル基は、１〜４個の炭素原子を有する低級アルキル、例えば、メチル、エチル、プロピル、２−プロピル、ｎ−ブチル、ｉｓｏ−ブチル、又はｔｅｒｔ−ブチルなどである。アルキル基は、置換されていてもよいし又は非置換であってもよい。置換される場合には、置換基は、独立して、ハロ、ヒドロキシル、低級アルコキシル、アリール、アリールオキシル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒ３及びＣ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４であるのが好ましい。
【００２８】
「シクロアルキル」とは、全体が炭素からなる３〜８員単環式環、全体が炭素素からなる５員／６員又は６員／６員縮合二環式環を指すか、あるいは多重縮合環（「縮合」環系とは、その系のそれぞれの環が炭素原子と系内のその他の環との隣り合った対を共有することを意味する）であって１個又はそれ以上の環が１個又はそれ以上の二重結合を含有していてもよいが、環のいずれも完全に共役したπ電子系を有していない多重縮合環基を指す。シクロアルキル基の例は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサン、シクロヘキサジエン、アダマンタン、シクロヘプタン、シクロヘプタトリエンなどである。シクロアルキル基は、置換されていてもよいし又は非置換であってもよい。置換される場合には、置換基は、低級アルキル、トリハロアルキル、ハロ、ヒドロキシ、低級アルコキシル、アリール（場合により、それぞれ独立してハロ、ヒドロキシ、低級アルキル又は低級アルコキシル基である１個又はそれ以上の基で置換されていてもよい）、アリールオキシル（場合により、それぞれ独立してハロ、ヒドロキシ、低級アルキル又は低級アルコキシル基である１個又はそれ以上の基で置換されていてもよい）、６員ヘテロアリール（環上に１〜３個の窒素原子を有し、環上の炭素は、場合により、それぞれ独立してハロ、ヒドロキシ、低級アルキル又は低級アルコキシル基である１個又はそれ以上の基で置換されていてもよい）、５員ヘテロアリール（窒素、酸素及び硫黄からなる群から選択される１〜３個の異種原子を有し、この基の炭素原子及び窒素原子は、場合により、それぞれ独立してハロ、ヒドロキシ、低級アルキル又は低級アルコキシル基である１個又はそれ以上の基で置換されていてもよい）、５員又は６員ヘテロシクロアルキル（窒素、酸素及び硫黄からなる群から選択される１〜３個の異種原子を有し、この基の炭素原子及び窒素原子（存在する場合）は、場合により、それぞれ独立してハロ、ヒドロキシ、低級アルキル又は低級アルコキシル基である１個又はそれ以上の基で置換されていてもよい）、メルカプト、（低級アルキル）チオ、アリールチオ（場合により、それぞれ独立してハロ、ヒドロキシ、低級アルキル又は低級アルコキシル基である１個又はそれ以上の基で置換されていてもよい）、シアノ、アシル、チオアシル、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、ニトロ、Ｎ−スルホンアミド、Ｓ−スルホンアミド、Ｃ（Ｏ）Ｒ３、Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４及びＣ（Ｏ）ＯＲ３からなる群から独立して選択される１つ又はそれ以上であることが
好ましい。
【００２９】
「アルケニル」とは、少なくとも２個の炭素原子及び少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する前記で定義したようなアルキル基を指す。代表的な例としては、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−、２−、３−ブテニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３０】
「アルキニル」とは、少なくとも２個の炭素原子及び少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有する前記で定義したようなアルキル基を指す。代表的な例としては、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−、２−、３−ブチニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３１】
「アリール」とは、少なくとも１個の芳香族環を有する基、すなわち共役π電子系を有する基、例えば全部が炭素からなる環式アリール、ヘテロアリール及びビアリール基を指す。前記アリール基は、場合により、ハロ、トリハロメチル、ヒドロキシ、ＳＲ、ニトロ、シアノ、アルコキシル及びアルキルからなる群からそれぞれ独立して選択される１つ又はそれ以上の基で置換されていてもよい。
【００３２】
「ヘテロアリール」とは、環原子としてＮ、Ｏ及びＳからなる群から選択される１〜３個の異種原子を有し、残りの還原子がＣであるアリールを指す。前記の環は、５員又は６員環である。ヘテロアリール基の例としては、フリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、Ｎ−アルキルピロリル、ピリミジニル、ピラジニル、イミダゾリルなどが挙げられる。
【００３３】
「ヘテロシクロアルキル」とは、５〜９個の環原子からなる単環式基又は縮合環基であって、その１個又は２個の環異種原子がＮ、Ｏ及びＳ（Ｏ）ｎ（ｎは０〜２の整数である）からなる群から選択され、残りの環原子がＣである５〜９個の環原子からなり、さらに、環が１個又はそれ以上の二重結合を有していていもよいが、完全に共役したπ電子系を有していないものである５〜９個の環原子からなる単環式基又は縮合環基を指す。非置換ヘテロシクロアルキルとしては、ピロリジル、ピペリジン下位塩基、ピペラジン下位塩基、モルホリニル、チオモルホリニル、ホモピペラジニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルは、置換されていてもよいし又は非置換であってもよい。置換される場合には、置換基は、それぞれ独立して低級アルキル、トリハロアルキル、ハロ、ヒドロキシ、低級アルコキシ、シアノ及びアシルからなる群から選択される１個又はそれ以上の基であることが好ましく、１個、２個又は３個の基であることがさらに好ましく、１個又は２個の基であることがさらにより好ましい。好ましくは、ヘテロシクロアルキルは、場合により、ハロ、低級アルキル、トリハロアルキル、ヒドロキシ、メルカプト、シアノ、Ｎ−アミド、及びカルボキシからなる群から独立して選択される１個又は２個の基で置換されていてもよい。
【００３４】
「ヒドロキシ」とは、−ＯＨ基を指す。
【００３５】
「アルコキシル」とは、−Ｏ−（アルキル）基及び−Ｏ−（非置換シクロアルキル）基の両方を指す。代表的な例としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３６】
「ハロアルコキシ」とは、−Ｏ−（ハロアルキル）を指す。代表的な例としては、例えば、トリフルオロメトキシ、トリブロモメトキシなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３７】
「アリールオキシル」とは、アリール及びヘテロアリールが上記で定義した通りである−Ｏ−アリール基及び−Ｏ−ヘテロアリール基の両方を指す。代表的な例としては、例えば、フェノキシ、ピリジニルオキシ、フラニルオキシ、チエニルオキシ、ピリミジニルオキシ、ピラジニルオキシなど及びこれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３８】
「メルカプト」とは、−ＳＨ基を指す。
【００３９】
「アルキルチオ」とは、−Ｓ−（アルキル）基及び−Ｓ−（非置換シクロアルキル）基を指す。代表的な例としては、例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、シクロプロピルチオ、シクロブチルチオ、シクロペンチルチオ、シクロヘキシルチオなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
「アリールチオ」とは、アリール及びヘテロアリールが上記で定義した通りであるＳ−アリール基及び−Ｓ−ヘテロアリール基を指す。代表的な例としては、例えば、フェニルチオ、ピリジニルチオ、フラニルチオ、チエニルチオ、ピリミジニルチオなど及びこれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
「アシル」とは、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ″基を指し、この場合のＲ″は、水素、低級アルキル、トリハロメチル、非置換シクロアルキル、アリール（場合により、低級アルキル基、トリハロメチル基、低級アルコキシル基及びハロ基からなる群から選択される１個又はそれ以上の置換基、好ましくは１個、２個又は３個の置換基で置換されていてもよい）、ヘテロアリール（環炭素を介して結合される）（場合により、低級アルキル基、トリハロアルキル基、低級アルコキシル基及びハロ基からなる群から選択される１個又はそれ以上の置換基、好ましくは１個、２個又は３個の置換基で置換されていてもよい）、及びヘテロ脂環式基（環炭素を介して結合される）（場合により、低級アルキル基、トリハロアルキル基、低級アルコキシル基及びハロ基からなる群から選択される１個又はそれ以上の置換基、好ましくは１個、２個又は３個の置換基で置換されていてもよい）からなる群から選択される。代表的なアシル基としては、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンゾイルなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４２】
「チオアシル」とは、−Ｃ（Ｓ）−Ｒ″基（式中、Ｒ″は上記で定義した通りである）
を指す。
【００４３】
「アセチル」とは、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３基を指す。
【００４４】
「ハロ」とは、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨード、好ましくはフルオロ又はクロロを指す。
【００４５】
「トリフルオロメチル」とは、−ＣＦ３基を指す。
【００４６】
「シアノ」とは、−Ｃ≡Ｎ基を指す。
【００４７】
「アミノ」とは、−ＮＨ２基を指す。
【００４８】
「カルボン酸」とは、−ＣＯＯＨ基を指す。
【００４９】
「カルボン酸エステル」とは、−ＣＯＯＲ基（式中、Ｒはアルキル又はシクロアルキルである）を指す。
【００５０】
「ヒドロキシルアルキル」とは、−（ＣＨ２）ｒＮＨ２基（式中、ｒは１〜４の整数である）を指す。
【００５１】
「任意の」又は「場合により」とは、後に記載の事象又は状況が生じてもよいし又は生じなくてもよいことを意味し、また記載が前記の事象又は状況が生じてもよいし又は生じなくてもよい場合を包含することをする。例えば、「場合によりアルキル基で置換されていてもよい複素環基」とは、アルキルが存在していてもよいし又は存在しなくてもよいことを意味し、また記載が、前記複素環基がアルキル基で置換されている状況及びヘテロシクロ基がアルキル基で置換されていない状況を包含することを意味する。
【００５２】
「医薬組成物」とは、本明細書に記載の化合物又はその生理学的に／製薬学的に許容し得る塩又はプロドラッグの１つ又はそれ以上と、その他の化学成分、例えば生理学的に／製薬学的に許容し得る担体及び賦形剤との混合物を指す。医薬組成物の目的は、生体に対する化合物の投与を促進することにある。
【００５３】
発明の化合物の合成方法
発明の目的を達成するために、本発明は以下の技術的解決策を適用する：
本発明の式（ＩＢ）の化合物又は製薬学的に許容し得る塩の製造方法であって、
【００５４】
【化２８】
0005438028.tif 000033
出発原料５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを、氷水浴中、ジクロロメタンの溶媒中でトリフルオロ酢酸と反応させてヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタートを得る工程と、ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタートを、塩基の存在下でアシルクロリド又はエステルと反応させて式（ＩD）の化合物を得る工程と、式（ＩD）の化合物を、当量の種々のアミン、置換した水素化ホウ素ナトリウム及びトリエチルアミンのような塩基と、メタノール又はエタノールの溶媒中で室温で反応させて、式（ＩＢ）の化合物を得る工程と
【化２９】
0005438028.tif 000034
tert-ブトキシドカリウムとヨウ化メチルトリフェニルホスホニウムのトルエンの溶液を加熱し、式（ID）の中間体を加えて、室温で反応させて、アザビシクロ  アルケニル化合物を得る工程と、アザビシクロ  アルケニル化合物をシクロロメタンのような溶媒で過塩素酸銀の存在下室温でシアン化トリメチルシリルと反応させてアザビシクロ  シアノ化合物を得る工程と、アザビシクロ  シアノ化合物をエタノールのような溶媒で室温で塩酸のようなな酸と反応させてアザビシクロ  アミン化合物を得る工程と、アザビシクロ  アミン化合物をＮ，Ｎ−ジメチルフルムアミドのようなアルカリ性溶媒の存在下でハロ置換の化合物と反応させて式（ＩＢ）の化合物を得る工程と
【化３０】
0005438028.tif 000035
式（ＩＤ）の中間体をエチエン  グリコール  ジメチル  エーテルのような溶媒でイソシアン化トシルメチルと反応させてアザビシクロ  シアノ化合物を得る工程と、アザビシクロ  シアノ化合物をテトラヒドロフランのような溶媒でヘキサメチルジシラジドリチウムと反応させてＲ２置換のアザビシクロ  シアノ化合物を得る工程と、酸の存在下Ｒ２置換のアザビシクロ  シアノ化合物を加水分解し、Ｒ２置換のアザビシクロ  カルボキシル化合物を得る工程又はＲ２置換のアザビシクロ  シアノ化合物をシクロロメタンの溶媒で氷水浴で冷却しながらＤＩＢＡＬ−Ｈのような還元剤と反応させてアルデヒート化合物を得て、アルデヒート化合物をテトラヒドロフラン/水の混合溶媒で氷水浴で冷却しながら、燐酸二水素ナトリウム、亜塩素酸ナトリウムおよび２−メチルー２−ブテンと反応させてＲ２置換のアザビシクロ  カルボキシル化合物を得る工程と、Ｒ２置換のアザビシクロ  カルボキシル化合物をトリエチルアミンのような塩基の存在下、クロロギ酸エチルと反応させてアザビシクロ  アジド化合物を含む工程、アザビシクロ  アジド化合物をトルエンのような溶媒で酸性溶液で加熱撹拌し、反応液のｐHを塩基性まで中和し、Ｒ２置換のアザビシクロ  アミン化合物を得る工程と、Ｒ２置換のアザビシクロ  アミン化合物をＮ，Ｎ−ジメチルフルムアミドのようなアルカリ性溶媒の存在下でハロ置換の化合物と反応させて式（ＩＢ）の化合物を得る工程と、
【化３１】
0005438028.tif 000036
式（ID）の中間体をテトラヒドロフナンのような溶媒で氷水浴で冷やしながら、水素化トリ-tert-ブトキシアルミニウム
リチウムのような還元剤と反応させてアザビシクロ  ヒドロキシ化合物を得る工程と、アザビシクロ  ヒドロキシ化合物をジクロロメタンのような溶媒でトリメチルアミンのような塩基および塩化メチルスルホニルと反応させてアザビシクロ  メチル  スルフォン酸化合物を得る工程と、アザビシクロ  メチル  スルフォン酸化合物およびフタルイミド カリウムをN,N-ジメチルホルムアミドのような塩基の存在下で加熱してフタルイミド置換のアザビシクロ化合物を得る工程と、
フタルイミド置換のアザビシクロ化合物およびヒドラジンをエタノールのような溶媒で加熱してアザビシクロアミン化合物を得る工程と、アザビシクロアミン化合物およびハロゲン化合物をジクロロメタンのような溶媒で加熱して式（IC）の化合物を得る工程とを含む式（IC）の化合物の製造方法。  精製した式（ＩＢ）及び式（ＩＣ）の化合物をさらにメタノール、ジクロロメタン又はエチル  アセテートの溶媒で酸と反応させて酸の附加塩を得ることができる。
【００５５】
本発明は、治療有効量の式（Ｉ）を有する化合物又は塩と、製薬学的に許容し得る担体とを含有してなる医薬組成物に関するか、又は本発明は、ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としての医薬の製造における前記化合物又は塩の使用に関する。言い換えれば、本発明はまた、治療有効量の上記化合物を含有してなる組成物、及びジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としての医薬の製造における前記化合物の使用を提供する。
【００５６】
具体的な実施方法
以下の実施例は、本発明を例証するのに役立つが、実施例は発明の範囲を限定するとみなされるべきではない。
【実施例】
【００５７】
化合物の構造決定は、ＮＭＲ及びＭＳで確認した。ＮＭＲの化学シフトは、ｐｐｍ（１
０−６）で示した。ＮＭＲは、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ−４００装置で測定した。溶媒は、重水素化クロロホルム（ＣＤＣｌ３）及び重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）であり、テトラメチルシラン（ＴＭＳ）を内部標準として使用した。化学シフトは、ｐｐｍ（１０−６）で示した。
【００５８】
ＭＳは、ＦＩＮＮＩＧＡＮ  ＬＣＱ  Ａｄ（ＥＳＩ）質量分光計で測定した。
【００５９】
キナーゼ及びＩＣ５０の阻害率の平均は、ＮｏｖｏＳｔａｒ  ＥＬＩＡＳＡ（ＢＭＧ  
Ｃｏ．Ｇｅｒｍａｎ）で測定した。
【００６０】
薄層シリカゲルは、ｙａｎｔａｉ  ｈｕａｎｇｈａｉ  ＨＳＧＦ２Ｓ４又はｑｉｎｇｄａｏ  ＧＦ２５４シリカゲルプレートであった。
【００６１】
カラムクロマトグラフィーは、一般にｙａｎｔａｉ  ｈｕａｎｇｈａｉ  ２００−３００メッシュシリカゲルを担体として使用した。
【００６２】
ＤＭＳＯ−ｄ６：重水素化ジメチルスルホキシド
ＣＤＣｌ３：重水素化クロロホルム
【実施例１】
【００６３】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド塩酸塩
【化３２】
0005438028.tif 000037
【００６４】
【化３３】
0005438028.tif 000038
［２−（２−カルバモイル−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１ｂの製造
Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルグリシン１ａ（５ｇ、２８．５６ミリモル）及びＬ−プロリンアミド（３．２５ｇ、２８．５０ミリモル）を、７５ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、得られた溶液を０℃（摂氏温度）に冷却し、次いで１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１１．８ｇ、８７．３ミリモル）、Ｎ−エチル−Ｎ’−（ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド（１１．３ｇ、５９ミリモル）及びトリエチルアミン（１２．１ｍＬ、８７．３ミリモル）を攪拌しながら加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温まで上昇させ、一夜攪拌した。薄層クロマトグラフィーが出発原料が消失したことを示した後に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを５０℃以下で蒸発させ、反応溶液を酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、酢酸エチルを用いて再結晶により精製して、表題化合物［２−（２−カルバモイル−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１ｂ（７．４２ｇ、収率９５．８％）を白色粉末として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２７２．１（Ｍ＋１）
【００６５】
［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１ｃの製造
窒素雰囲気下の乾燥三つ口フラスコに、２８６ｍＬのピリジン、［２−（２−カルバモイル−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１ｂ（１３．５ｇ、４９．８ミリモル）及びイミダゾール（７．１１ｇ、１０４．６ミリモル）を連続的に加えた。この反応系を−３５℃に冷却し、次いでこの溶液に攪拌しながらオキシ塩化リン（１９ｍＬ、２０４．２ミリモル）を滴加した。−３５℃で１時間攪拌した後に、反応混合物を室温まで上昇させ、さらに０．５時間攪拌した。ピリジンを低い温度下で蒸発させ、反応混合物を水で希釈し、次いで酢酸エチル（２００ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１ｃ（１０．７ｇ、収率８４．９％）を白色粉末として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２５４．３（Ｍ＋１）
【００６６】
１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄの製造
［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１ｃ（１３．７ｇ．５４．２ミリモル）を、１４０ｍＬのエーテルと４０ｍＬの水との溶媒混合物に溶解し、次いで得られた溶液に３７％塩酸（９０ｍＬ）を滴加した。滴加の完了時に、反応混合物を氷水浴中で１時間攪拌し、溶媒を蒸発させ、残留物にエーテルを加え、遠心分離して１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（１０ｇ、収率９８％）を白色粉末として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：１５４．４（Ｍ＋１）
【００６７】
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆの製造
５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１ｃ（０．３２ｇ、１．４２ミリモル）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、次いで得られた溶液にトリフルオロ酢酸（３．２７ｍＬ、４２．７ミリモル）を氷水浴中で加えた。添加の完了時に、反応混合物を０℃で３０分間攪拌し、次いで溶媒を蒸発乾固して表題化合物ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆを得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：１２６．４（Ｍ＋１）
【００６８】
５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｇの製造
上記で得られたヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆの粗生成物を１５ｍＬのアセトニトリルに溶解し、得られた溶液に炭酸カリウム（０．２４ｇ、１．７１ミリモル）を氷水浴中で加え、次いでＮ，Ｎ−ジメチルカルバミン酸クロリド（０．１４ｍＬ、１．５６ミリモル）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温まで上昇させ、２時間攪拌し、溶媒を蒸発させ、次いで残留物に５０ｍＬの水を加えた。得られた混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｇ（０．１９ｇ、収率６８．３％）を淡黄色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：１９７．４（Ｍ＋１）
【００６９】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｈの製造
１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．３６ｇ、１．９１ミリモル）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、次いで得られた溶液に、５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｇ（０．２５ｇ、１．２８ミリモル）とトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．２２ｇ、５．７４ミリモル）を攪拌しながら加えた。室温で３時間攪拌した後に、得られた混合物を濃縮し、次いで得られた混合物に２０ｍＬの飽和炭酸ナトリウム溶液を加えた。反応混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ×１０）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、１０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｈ（０．３ｍｇ、収率５３％）を白色粉末として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３３４．５（Ｍ＋１）
【００７０】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド塩酸塩１の製造
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｈ（２００ｍｇ、０．６８７ミリモル）を１０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、次いで得られた溶液に、２ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を氷水浴中で加えた。溶媒を蒸発乾固し、次いで残留物に１０ｍＬのエーテルを加えた。生成した沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド塩酸塩１（１８０ｍｇ、収率８０％）を白色粉末として得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ４．８２（ｄｄ，１Ｈ、Ｊ１＝４Ｈｚ、Ｊ２＝５．２Ｈｚ），４．０２（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ１＝Ｊ２＝１６．４Ｈｚ），３．６２−３．２５（ｍ，７Ｈ），２．７６（ｓ，６Ｈ），２．５１−１．４９（ｍ，１０Ｈ）。
【実施例２】
【００７１】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル塩酸塩、
【化３４】
0005438028.tif 000039
【００７２】
【化３５】
0005438028.tif 000040
５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル２ａの製造
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆ（０．５５９ｇ、２．３４ミリモル）を２０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、次いで得られた溶液に、氷水浴中で、炭酸カリウム（０．６４６ｇ、４．６８ミリモル）とクロロギ酸メチル（０．２２ｍＬ、２．８ミリモル）を連続的に加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温まで上昇させ、一夜攪拌した。溶媒を蒸発させ、次いで残留物に５０ｍＬの水を加えた。混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水及び５０ｍＬの水で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル２ａ（０．２５ｇ、収率５８．４％）を無色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：１８４（Ｍ＋１）
【００７３】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル２ｂの製造
１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．４３ｇ、２．２９ミリモル）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、次いで得られた溶液に、攪拌しながら、５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル２ａ（０．２８ｇ、１．５３ミリモル）とトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．４６ｇ、６．８８ミリモル）を加えた。室温で３時間攪拌した後に、反応混合物を濃縮し、次いで得られた混合物に飽和炭酸ナトリウム溶液（２０ｍＬ）を加えた。反応混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、１０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル２ｂ（０．２２ｇ、収率４１％）を白色粉末として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５７（Ｍ＋１）
【００７４】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル塩酸塩２の製造
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル２ｂ（２００ｍｇ、０．６８７ミリモル）を１０ｍＬのエーテルに分散させ、次いで得られた溶液に、２ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を氷水浴中で加えた。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸メチルエステル塩酸塩２（２００ｍｇ）を白色粉末として得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ４．７１（ｍ，１Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），３．５９−３．２８（ｍ，１０Ｈ），２．６４（ｍ，２Ｈ），２．３４（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ）。
【実施例３】
【００７５】
シス−１−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩
【化３６】
0005438028.tif 000041
【００７６】
【化３７】
0005438028.tif 000042
２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン３ａの製造
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆ（７６４．８ｍｇ、３．２ミリモル）と２−ヒドロキシ酢酸（２６７．５ｍｇ、３．５２ミリモル）とを１０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、次いで得られた溶液に、氷水浴中で、ヒドロキシ酢酸（１．３ｇ、９．６ミリモル）、１−エチル−３−ジメチルアミノプロピル−カルボジイミド塩酸塩（１．２３ｇ、６．４ミリモル）及びトリエチルアミン（１．３ｍＬ、９．６ミリモル）を加えた。次いで、氷水浴を取り去り、反応混合物を２５℃で一夜攪拌した。溶媒を蒸発させ、次いで残留物に２０ｍＬの酢酸エチルを加えた。混合物を濾過し、濾液を２０ｍＬの水で洗浄した。一緒にした有機抽出液を、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン３ａ（０．３７５ｇ、収率６４％）を無色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：１８４（Ｍ＋１）
【００７７】
シス−１−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル３ｂの製造
２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン３ａ（０．３７５ｇ、２．０５ミリモル）と１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．７８ｇ、４．１ミリモル）とを、５ｍＬのメタノールと１０ｍＬのテトラヒドロフランとの溶媒混合物に溶解した。反応混合物を室温で０．５時間攪拌し、次いで得られた混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．８７ｇ、４．１ミリモル）を加え、混合物を室温で一夜攪拌した。得られた混合物を減圧下で濃縮し、次いで得られた混合物にメタノール（５０ｍＬ）と炭酸カリウム（２ｇ、７ミリモル）を加えた。０．５時間攪拌した後に、混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物シス−１−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル３ｂを得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３５７（Ｍ＋１）
【００７８】
シス−１−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩３の製造
シス−１−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル３ｂを１０ｍＬのエーテルに分散させ、次いで得られた溶液に、氷水浴中で、２ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を加えた。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−１−｛２−［２−（２−ヒドロキシ−アセチル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩３（１００ｍｇ）を白色粉末として得た。
【実施例４】
【００７９】
シス−１−｛２−［２−（ピペリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩
【化３８】
0005438028.tif 000043
【００８０】
【化３９】
0005438028.tif 000044
２−（ピペリジン−１−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン４ａの製造
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆ（４７８ｍｇ、２ミリモル）を２０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、次いで得られた溶液に１−メチル−３−（ピペリジン−１−カルボニル）−１Ｈ−イミダゾール−３−イウムヨージド（０．９６ｇ、３ミリモル）とトリエチルアミン（０．８４ｍＬ、６ミリモル）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で一夜攪拌し、次いで得られた混合物に２０ｍＬの水を加えて反応を停止させ、混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、１０％クエン酸溶液（５０ｍＬ）及び５０ｍＬの飽和食塩水で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物２−（ピペリジン−１−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン４ａ（０．４１ｇ、収率８７％）を無色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２３７（Ｍ＋１）
【００８１】
シス−１−｛２−［２−（ピペリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル４ｂの製造
２−（ピペリジン−１−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン４ａ（０．４１ｇ、１．７４ミリモル）と１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．５ｇ、２．６ミリモル）とを５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、次いで得られた溶液に硫酸ナトリウム（５ｇ）と酢酸（０．０５ｍＬ）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で０．５時間攪拌し、次いでこの混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．１ｇ、５．２ミリモル）を加え、混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いでこの混合物に飽和炭酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水及び５０ｍＬの水で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物シス−１−｛２−［２−（ピペリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル４ｂを得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：４１０（Ｍ＋１）
【００８２】
シス−１−｛２−［２−（ピペリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩４の製造
シス−１−｛２−［２−（ピペリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル４ｂを１０ｍＬのエーテルに分散させ、次いで得られた溶液に、氷水浴中で、２ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を加えた。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−１−｛２−［２−（ピペリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩４（０．１６ｇ）を白色粉末として得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ４．８３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ１＝３．０Ｈｚ，
Ｊ２＝５．８Ｈｚ），４．０９（ｄｄ，２Ｈ，Ｊ１＝Ｊ２＝１３．１Ｈｚ），３．７０−３．３０（ｍ，１０Ｈ），２．７２（ｍ，２Ｈ），２．４７（ｍ，２Ｈ），２．３１−２．００（ｍ，５Ｈ），１．６６−１．５２（ｍ，８Ｈ）。
【実施例５】
【００８３】
シス−１−［２−（２−アセチル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル］−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩
【化４０】
0005438028.tif 000045
【００８４】
【化４１】
0005438028.tif 000046
２−アセチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン５ａの製造
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆ（７１７ｍｇ、３ミリモル）を２０ｍＬのアセトニトリルに溶解し、次いでこの溶液に、氷水浴中で、無水酢酸（０．４２ｍＬ、４．５ミリモル）とトリエチルアミン（０．９８ｍＬ、９ミリモル）を加えた。次いで、添加の完了時に、反応混合物を氷水浴中で一夜攪拌した。溶媒を蒸発させ、次いで残留物に水（５０ｍＬ）を加えた。混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物２−アセチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン５ａ（０．３６ｇ、収率７２％）を無色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：１６８．４（Ｍ＋１）
【００８５】
シス−１−［２−（２−アセチル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル］−ピロリジン−２−カルボニトリル５ｂの製造
２−アセチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン５ａ（０．３６ｇ、２．１５ミリモル）と１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．６１４ｇ、３．２３ミリモル）を、５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、次いでこの溶液に硫酸ナトリウム（５ｇ）と酢酸（０．０５ｍＬ）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で０．５時間攪拌し、次いでこの混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．３７ｇ、６．４６ミリモル）を加え、混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、次いでこの混合物に飽和炭酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水及び５０ｍＬの水で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物シス−１−［２−（２−アセチル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル］−ピロリジン−２−カルボニトリル５ｂを得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３０５．５（Ｍ＋１）
【００８６】
シス−１−［２−（２−アセチル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル］−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩５の製造
得られたシス−１−［２−（２−アセチル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル］−ピロリジン−２−カルボニトリル５ｂを２０ｍＬのエーテルに分散させ、次いでこの溶液に、氷水浴中で、４ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を加えた。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−１−［２−（２−アセチル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ）−アセチル］−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩５（０．２３ｇ）を白色粉末として得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ４．７１（ｍ，１Ｈ），３．９２（ｍ，２Ｈ），３．６９−３．３７（ｍ，７Ｈ），２．６９（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｍ，２Ｈ），
２，１３（ｍ，２Ｈ），２．０４−２．００（ｍ，５Ｈ），１．４８（ｍ，２Ｈ）。
【実施例６】
【００８７】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド塩酸塩
【化４２】
0005438028.tif 000047
【００８８】
【化４３】
0005438028.tif 000048
５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド６ａの製造
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆ（７１７ｍｇ、３ミリモル）を２０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、次いでこの溶液に、氷水浴中で、２−イソシアナトプロパン（９ｍＬ、９ミリモル）とトリエチルアミン（１．７ｍＬ、１２ミリモル）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で一夜攪拌し、次いでこの混合物に水（５０ｍＬ）を加えた。混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、１０％クエン酸溶液（５０ｍＬ）及び５０ｍＬの飽和食塩水で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド６ａ（０．３ｇ、収率４７．６％）を無色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２１１（Ｍ＋１）
【００８９】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド６ｂの製造
５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド６ａ（０．３ｇ、１．４３ミリモル）と（ｓ）−１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．４０７ｇ、２．１４ミリモル）とを、５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、次いでこの溶液に硫酸ナトリウム（５ｇ）と酢酸（０．０５ｍＬ）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で０．５時間攪拌し、次いでこの混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．９ｇ、４．３ミリモル）を加え、混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、次いでこの混合物に飽和炭酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水及び５０ｍＬの水で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド６ｂを得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３８４（Ｍ＋１）
【００９０】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド塩酸塩６の製造
得られたシス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド６ｂを１０ｍＬのエーテルに分散させ、次いでこの溶液に、氷水浴中で、２ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を加えた。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸イソプロピルアミド塩酸塩６（８０ｍｇ）を白色粉末として得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ４．７０（ｍ，１Ｈ），３．９２（ｍ，２Ｈ），３．７６−３．３２（ｍ，８Ｈ），２．６３−１．４１（ｍ，１０Ｈ），１．０１（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝６Ｈｚ）。
【実施例７】
【００９１】
シス−１−｛２−［２−（モルホリン−４−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩
【化４４】
0005438028.tif 000049
【００９２】
【化４５】
0005438028.tif 000050
２−（モルホリン−４−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン７ａの製造
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆ（５７４ｍｇ、２．４ミリモル）を２０ｍＬのアセトニトリルに攪拌しながら溶解し、次いでこの溶液に、氷水浴中で、炭酸カリウム（０．３９７ｇ、２．８８ミリモル）を加え、次いでモルホリン−４−カルボニルクロリド（０．３２３ｍＬ、２，６４ミリモル）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を氷水浴中で一夜攪拌し、次いで溶媒を蒸発させ、残留物に水（５０ｍＬ）を加えた。混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物２−（モルホリン−４−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン７ａ（０．５７２ｇ、収率７７．３％）を無色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２３９（Ｍ＋１）
【００９３】
シス−１−｛２−［２−（モルホリン−４−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル７ｂの製造
２−（モルホリン−４−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン７ａ（０．６４ｇ、２，６９ミリモル）と１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．７６４ｇ、４．０３ミリモル）とを、５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、この溶液に硫酸ナトリウム（５ｇ）と酢酸（０．０５ｍＬ）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で０．５時間攪拌し、次いでこの混合物にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．７１ｇ、８．０７ミリモル）を加え、混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いで残留物に飽和炭酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水及び５０ｍＬの水で連続的に洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物シス−１−｛２−［２−（モルホリン−４−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル７ｂを得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：３７６．７（Ｍ＋１）
【００９４】
シス−１−｛２−［２−（モルホリン−４−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩７の製造
得られたシス−１−｛２−［２−（モルホリン−４−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル７ｂを１０ｍＬのエーテルに分散させ、次いでこの溶液に、２ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を氷水浴中で加えた。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−１−｛２−［２−（モルホリン−４−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩７（３０ｍｇ、収率３％）を白色粉末として得た。
【実施例８】
【００９５】
シス−１−｛２−［２−（ピロリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩
【化４６】
0005438028.tif 000051
【００９６】
【化４７】
0005438028.tif 000052
２−（ピロリジン−１−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン８ａの製造
ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オントリフルタート１ｆ（４７８ｍｇ、２ミリモル）を２０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、次いでこの溶液に、氷水浴中で、ピロリジン−１−カルボニルクロリド（０．２７６ｍＬ、２．５ミリモル）とトリエチルアミン（０．８４ｍＬ、６ミリモル）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で一夜攪拌し、次いでこの溶液に１０％クエン酸溶液を加えてｐＨ４に調節した。混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物２−（ピロリジン−１−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン８ａ（０．２６ｇ、収率５８．５％）を無色油状物として得た。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）：２２３（Ｍ＋１）
【００９７】
シス−１−｛２−［２−（ピロリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル８ｂの製造
２−（ピロリジン−１−カルボニル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−オン８ａ（０．２６ｇ、１．１７ミリモル）と１−（２−アミノ−アセチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩１ｄ（０．３３ｇ、１．７５ミリモル）とを、５０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、次いでこの溶液に硫酸ナトリウム（５ｇ）と酢酸（０．０５ｍＬ）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を室温で０．５時間攪拌し、この溶液にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．７５ｇ、３．５ミリモル）を加え、混合物を室温で３時間攪拌した。反応混合物を、減圧下で濃縮し、次いでこの混合物に飽和炭酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水及び５０ｍＬの水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、シス−１−｛２−［２−（ピロリジン−ｌ−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル８ｂを得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳｍ／ｚ（ＥＳＩ）；３９６（Ｍ＋ｌ）
【００９８】
シス−１−（２−［２−（ピロリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩８の製造
得られたシス−１−｛２−［２−（ピロリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル８ｂを１０ｍＬのエーテルに分散させ、次いでこの溶液に、氷水浴中で、２ｍＬのエーテルに溶解した０．５Ｎ塩酸の溶液を加えた。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−１−（２−［２−（ピロリジン−１−カルボニル）−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルアミノ］−アセチル｝−ピロリジン−２−カルボニトリル塩酸塩８（９０ｍｇ）を白色粉末として得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ、４００ＭＨｚ）δ４．７２（ｍ，１Ｈ），４．０９（ｍ，２Ｈ），３．４３−３．３０（ｍ，１１Ｈ），２．６２（ｍ，２Ｈ），２．３５（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ），１．７７（ｍ，４Ｈ）
【実施例９】
【００９９】
シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］
−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドトリフルタート
【化４８】
0005438028.tif 000053
【０１００】
実施例１から得られたシス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｈ（１５７ｍｇ、０．５４ミリモル）を１０ｍＬのジクロロメタンに分散させ、次いでこの溶液に、氷水浴中で、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えた。反応混合物を０．５時間攪拌した。沈殿物を遠心分離して、表題化合物シス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドトリフルタート９（２０１ｍｇ）を白色粉末として得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）δ４．７４（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），３．９８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ），３．７９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ），３．５７−３．２５（ｍ，７Ｈ），２．７５（ｓ，６Ｈ），２．５５（ｍ，２Ｈ），２．３３（ｍ，２Ｈ），２．２０−２．０８（ｍ，４Ｈ），１．７４（ｍ，２Ｈ）
【実施例１０】
【０１０１】
トランス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドトリフルタート
【化４９】
0005438028.tif 000054
【０１０２】
【化５０】
0005438028.tif 000055
シス−５−ヒドロキシ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ａの製造
窒素雰囲気下の乾燥三つ口フラスコに、５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１ｇ（１．５８ｇ、８．０６ミリモル）を３０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、次いで３０ｍＬのテトラヒドロフラン中の水素化リチウムトリｔｅｒｔ−ブトキシアルミニウム（２．４５ｇ、９．６ミリモル）に溶液を−２５℃で攪拌しながら滴加した。添加の完了時に、反応混合物を−２５℃で２．５時間攪拌し、水を加えて反応を停止させた。混合物に２０ｍＬの飽和塩化アンモニウムを加え、次いで反応混合物を室温まで上昇させ、ジクロロメタン（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して表題化合物シス−５−ヒドロキシ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ａ（１．２７ｇ、収率８０％）を無色油状物として得た。
ＭＳ（ｍ／ｚ）（ＥＳＩ）：１９９（Ｍ＋１）
【０１０３】
シス−メタンスルホン酸２−ジメチルカルバモイル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルエステル１０ｂの製造
窒素雰囲気下の乾燥一口フラスコに、シス−５−ヒドロキシ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ａ（１．６９ｇ．８．５ミリモル）を３０ｍＬのジクロロメタンに溶解し、次いで氷水中で、トリエチルアミン（１．６６ｍＬ、１４．４５ミリモル）とメタンスルホニルクロリドｅ（２．２ｇ．２１．７４ミリモル）を連続的に加えた。反応混合物を０．５時間攪拌し、室温まで上昇させ、次いで反応混合物を２時間攪拌し、減圧下で濃縮し、この混合物に水（２０ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×６）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物シス−メタンスルホン酸２−ジメチルカルバモイル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルエステル１０ｂ（１．９４ｇ、収率８３％）を白色粉末として得た。
ＭＳ（ｍ／ｚ）（ＥＳＩ）：２７７（Ｍ＋１）
【０１０４】
トランス−５−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｃの製造
窒素雰囲気下の乾燥一口フラスコに、シス−メタンスルホン酸２−ジメチルカルバモイル−オクタヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−５−イルエステル１０ｂ（１ｇ、３．６ミリモル）を２０ｍＬのＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、次いでこの溶液にフタルイミドカリウム塩（９９３ｍｇ、５．４ミリモル）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を７０℃まで上昇させ、３時間攪拌した。混合物を、減圧下で濃縮し、得られた混合物に水（２０ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。一緒にした有機抽出液を、５０ｍＬの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、表題化合物トランス−５−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｃ（１．０６ｇ、収率９０％）を白色粉末として得、これを次の反応に直接に使用した。
ＭＳ（ｍ／ｚ）（ＥＳＩ）：３２８（Ｍ＋１）
【０１０５】
トランス−５−アミノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｄの製造
一口フラスコに、トランス−５−（１，３−ジオキソ−１，３−ジヒドロ−イソインドール−２−イル）−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｃ（１ｇ、３．０６ミリモル）を２０ｍＬの９５％エタノールに溶解し、次いでこの溶液にヒドラジン（４９０ｍｇ、１５．３ミリモル）を加えた。添加の完了時に、反応混合物を８時間加熱還流し、室温まで冷却し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮して白色粉末を得た。メタノール（２５ｍＬ）を加え、得られた混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を塩基性アルミナカラムクロマトグラフィーで精製して、トランス−５−アミノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｄ（２９０ｍｇ、収率４８％）を無色油状物として得た。
ＭＳ（ｍ／ｚ）（ＥＳＩ）：１９８（Ｍ＋１）
【０１０６】
トランス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドトリフルタート１０の製造
一口フラスコに、トランス−１−（２−クロロ−エチル）−ピロリジン−２−カルボニトリル（３３４ｍｇ、１．９４ミリモル）を加え、次いで５−アミノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｄ（２９０ｍｇ、１．４６ミリモル）を２０ｍＬのジクロロメタンに溶解した溶液を加えた。添加の完了時に、反応混合物を４８時間加熱還流し、減圧下で濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、トランス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｅを得た。次いで、トランス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド１０ｅを１０ｍＬのジクロロメタンに攪拌しながらに溶解し、次いでこの溶液に氷水浴中でトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えた。反応混合物を０．５時間攪拌して、表題化合物トランス−５−［２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ］−ヘキサヒドロ−シクロペンタ［ｃ］ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドトリフルタート１０（２０１ｍｇ）を白色固体として得た。
ＭＳ（ｍ／ｚ）（ＥＳＩ）：３３４（Ｍ＋１）
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３、４００ＭＨｚ）δ４．６５（ｍ，１Ｈ），３．９３（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），３．７４（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ），３，６９−３．１９（ｍ，７Ｈ），２．７７（ｓ，６Ｈ），２．１８−１．９６（ｍ，１０Ｈ）。
実施例１１
【０１０７】
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩
【化５１】
0005438028.tif 000056
【０１０８】
【化５２】
0005438028.tif 000057
ステップ１
５−メチレン−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
tert−ブトキサイドカリウム(7.17 g, 0.064 mol)及びヨウ化メチルトリフェニールホスホニウム(25.8
g, 0.064 mol)を窒素環境下で150 mLのトルエンに溶解させた。この反応混合物を加熱し、３時間還流させたのち、室温に冷却させた。それにN,N―ジメチル−５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸1g (5.0 g, 0.0255 mol)のトルエン溶液を添加した。この反応混合物を30分間攪拌し、TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、30 mLの水及び30 mLの飽和食塩水でこの混合物を希釈し、酢酸エチルで抽出(200 mL×4)した。有機の抽出液を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。それをろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色オイルの上記化合物５−メチレン−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11aを得た(4.0 g, 収率：80%)。
MS m/z (ESI): 195.2 [M+1]
【０１０９】
ステップ２
５−イソシアノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−メチレン−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11a (1.6 g, 8.23 mmol)を攪拌しながら30 mLのジクロロメタンに溶解させ、シアン化トリメチルシリル(4.08 g, 41.2
mmol)及び過塩素酸銀(5.12 g, 24.7 mmol) を窒素環境下で添加した。この反応混合物を室温下で終夜攪拌した。その後一部の反応混合物を飽和した炭酸ナトリウム水溶液で処理した。TLCで反応をモニターし、大部分の原料が残留していたことを確認した。その後、氷―水浴中で冷却しながら20 mLの飽和した炭酸ナトリウム水溶液で混合物を処理した。この反応は発熱した。10分後にこの混合物をろ過し、残渣を除去した。分離した水層を酢酸エチルで抽出(50 mL×4)した。有機層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し薄い黄色オイルの上記化合物５−イソシアノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11bを得た(0.33 g, 収率：18.1%)。
GC-MS:
221.1 [M+]
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 3.31 (m, 4H), 2.97 (m,
2H), 2.84 (s, 6H), 2.32 (m, 2H), 1.52 (s, 3H), 1.46 (m, 2H)
【０１１０】
ステップ３
５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−イソシアノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11b(0.388 g, 1.75 mmol)のエタノール溶液15 mLに氷水浴で冷却しながら0.38 mLの塩酸(6 N)を添加した。この反応混合物を室温まで加熱し、1.5時間攪拌した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、20 mLの飽和した炭酸ナトリウム水溶液で反応を停止させた。ジクロロメタンで混合物を抽出(50 mL×3)した。有機層を合わせ、蒸発乾固させた。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、黄色オイルの上記化合物５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11cを得た(0.28 g, 収率：75.7%)。
MS
m/z (ESI): 212.2 [M+1]
【０１１１】
ステップ４
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11c(200 mg, 0.92 mmol)を8 mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解させ、１−（２−クロロ−アセチル）−ピロリジン−２−シアノ(175 mg, 1.02 mmol)を添加した。この反応混合物は室温で終夜反応し、その後、減圧下で濃縮し、N,N-ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11dを得た(0.135 g, 収率：42.3%)。また、５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11cを回収した(130 mg)。
MS
m/z (ESI): 348.2 [M+1]
【０１１２】
ステップ５
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドローシクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩の製造
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11d(20 mg, 0.057 mmol)及びｐ−トルエンスルホン酸水和物(12 mg, 0.063 mmol)を氷―水浴中冷却しながら2 mLのジクロロメタンに溶解させた。この混合物を同じ温度下で10分間攪拌したのち、氷水浴を撤去した。減圧下で混合物を濃縮し、オイル状物質を得た。これを攪拌しながら5 mLの酢酸エチルで処理し、沈殿を産出させた。これを減圧下でろ過し、白色固体の上記化合物５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドローシクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩11を得た(0.026 g, 収率：86.8%)。
MS
m/z (ESI): 348.2 [M+1]
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 7.68 (d, 2H), 7.17 (d,
2H), 3.72 (m, 1H), 3.68 (m, 1H), 3.58 (m, 1H), 3.30 (m, 4H), 2.98 (s, 2H), 2.81
(s, 6H), 2.55 (m, 2H), 2.22 (m, 4H), 2.05 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.56 (s, 3H).
実施例１２
【０１１３】
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩
【化５３】
0005438028.tif 000058
【０１１４】
【化５４】
0005438028.tif 000059
ステップ１
５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
N,N−ジメチル−５−オキソ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボキシアミド1g  (12.9
g, 0.066 mol)及び４−トルエンスルホニルメチルイソシアン化物  (14.2 g, 0.0727
mol)を氷―水浴中冷却し、攪拌しながら、240 mLの１，２−ジメトキシエタンに溶解させた。その後、tert−ブトキサイドカリウム(14.8 g, 0.132 mol)のtert−ブタノール溶液を滴加した。その後、氷―水浴を撤去した。反応混合物を室温まで加熱し、終夜反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、混合物を100 mLの水及び50 mL飽和食塩水で希釈した。この混合物を酢酸エチルで抽出(200 mL×3)した。有機層を合わせ、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。ろ過し、減圧下で濃縮させた。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色オイルの上記化合物５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12aを得た(7.0 g, 収率：51%)。
MS
m/z (ESI): 208.1 [M+1]
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 3.5-3.0 (m, 4H), 2.75 (s,
6H), 2.6 (m, 1H), 2.1-1.5 (m, 6H)
【０１１５】
ステップ２
５−シアノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12a(4.2 g, 20.2 mmol)及びヨードメタン(11.5 g, 80.8
mmol)を100 mLのテトラヒドロフランに溶解させ、室温下、窒素環境下でリチウムヘキサメチルジシラジド(80.8 mL, 80.8 mmol)を滴加した。この混合物はMSで原料は消失するまで２時間反応させた。100 mLの水でこの混合物を希釈し、酢酸エチルで抽出(200 mL×3)した。その後、有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。それをろ過し、減圧下で濃縮させ、オイル状の物質を得た。これはTLC上で二つの隣接したスポットを示した。このオイルをシロカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色オイルの上記化合物５−シアノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12bを得た(2.411 g)。
MS
m/z (ESI): 222.2 [M+1]
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ 3.44 (m, 2H), 3.3 (m,
2H), 2.85 (s, 6H), 2.77 (m, 2H), 2.06 (m, 2H), 2.00 (m, 2H), 1.36 (s, 3H)
【０１１６】
ステップ３
２−ジメチルカルバモイル−５−メチル−オクタヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸の製造
５−シアノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12b(6.99 g, 31.6 mmol)を90 mLの塩酸(36%)に溶解させた。この反応混合物を油浴中50℃まで加熱し、48時間攪拌した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、100 mLの水でこの混合物を希釈し、氷水浴中で冷却しながら、炭酸カリウムで混合物をｐＨ6に調節し、連続的に酢酸エチル(1500 mL×3)及びジクロロメタン(150
mL×3)で抽出した。有機層の抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。それをろ過し、減圧下で濃縮し、黄色液体の上記化合物２−ジメチルカルバモイル−５−メチル−オクタヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸12cを得た(7.0 g, 収率：92%)。これを次のステップに直接に用いた。
MS
m/z (ESI): 241.2 [M+1]
【０１１７】
ステップ４
２−ジメチルカルバモイル−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジドの製造
氷水浴中で冷却しながら、２−ジメチルカルバモイル−５−メチル−オクタヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸12c(1.0 g, 4.2 mmol)を攪拌しながら25 mLのアセトンに溶解させ、その後、-5℃でトリエチルアミン(463.5 mg, 4.58 mmol)及びクロロギ酸エチル(497 mg , 4.58 mmol)のアセトン溶液10 mLを滴加した。この反応混合物は-5℃で15分間反応した。その後に、アジ化ナトリウム(546 mg, 8.4 mmol)の水溶液10 mLを添加した。その後、-5℃でこの反応混合物を更に30分間攪拌した。25 mLの水で反応を停止させ、酢酸エチルでこの混合物を抽出(50 mL×3)した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。黄色オイルの粗製精製物２−ジメチルカルバモイル−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジド12dを得た(700 mg)。
【０１１８】
ステップ５及びステップ６
２−ジメチルカルバモイル−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−５−カルボニルアジド12d(700 mg)を20 mLのトリエンに加え、反応混合物を加熱し、２時間還流させた。トルエンを蒸発させ、(3aS,5r,6aR)5-イソシアナト−５−メチル-N,N,５−トリメチル―ヘキサヒドロ―シクロペンタ[c]ピロール−2(1H)-２−カルボキサミド12eが生成された。氷水浴中で冷却しながら、8 mLの塩酸(8 N)を上記の混合物に添加した。この反応混合物を30分間攪拌した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、氷―水浴中で冷却しながら、3 N水酸化ナトリウム水溶液でこの混合物をｐＨ12以上に調節した。その後、酢酸エチルで抽出(15 mL×3)した。有機抽出物は無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色オイルの上記化合物５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12fを得た(500 mg)。
MS
m/z (ESI): 212.2 [M+1]
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 3.5-3.0 (m, 4H), 2.72 (s,
6H), 1.7-1.3 (m, 6H), 1.04 (s, 3H)
【０１１９】
ステップ７
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12f(332 mg, 1.57 mmol)を10 mLのN,N-ジメチルホルムアミド
/ ジクロロメタン混合溶媒(1:1)に溶解させ、その後、１−（２−クロロ−アセチル）−ピロリジン−２−シアノ(217 mg, 1.26 mmol)を添加した。この反応混合物を室温下で終夜反応し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグタフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12gを得た(240 mg, 収率：55%)。
MS
m/z (ESI): 348.2 [M+1]
【０１２０】
ステップ８
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩の製造
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12g (150 mg, 0.43 mmol)及びｐ−トルエンスルホン酸水和物(82 mg, 0.43 mmol)を攪拌しながら4 mLのジクロロメタンに溶解させた。この反応混合物を10分間攪拌し、減圧下で濃縮し、薄い黄色固体の上記化合物５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩12を得た(0.022 g, 収率：95.3%)。
MS
m/z (ESI): 348.2 [M+1]
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 4.82 (m, 1H), 3.97 (s,
2H), 3.79 (m, 2H), 3.49 (m, 2H), 3.21 (m, 4H), 2.75 (s, 6H), 2.62 (m, 2H), 2.19
(m, 2H), 1.92-1.61 (m, 3H), 2.06 (m, 3H), 1.2 (s, 3H)
実施例１３  
【０１２１】
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−N,N,５−トリメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボキシアミド酒石酸塩
【化５５】
0005438028.tif 000060
【０１２２】
【化５６】
0005438028.tif 000061
ステップ１
(2S,4R)
−１−（tert−ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸の製造
L-ヒドロキシプロリン13a
(60 g, 0.458 mol)を750 mLのテトラヒドロフラン / 水の混合溶媒(2:1)に加え、その後、252 mLの水酸化ナトリウム水溶液(10%)及び750 mLのジ−tert−ブチルジカルボン酸塩(136 g, 0.624 mol)のテトラヒドロフラン / 水の混合溶媒(2:1)を添加した。この反応混合物は室温下で終夜反応した。その後、500 mLの酢酸エチルで希釈した。層を分離し、有機層を廃棄した。水層を濃塩酸でｐＨ２に調節した。この混合物を1.5 Lの酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和した食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧下で濃縮し、無色オイルの上記化合物(2S,4R) −１−（tert-ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸13bを得た(86.4 g, 収率：80%)。
【０１２３】
ステップ２
(2S,4R)-tert-ブチル２−カルバモイル−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸塩の製造
(2S,4R) −１−（tert-ブトキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸13b(86.4 g, 0.374 mol)を1.2 Lのテトラヒドロフランに溶解させ、その後、アルゴンガス環境下でトリエチルアミン(41 g, 0.411 mol)を加えた。この反応混合物を-15 ℃まで冷却し、クロロギ酸エチル(43.84 g, 0.411 mol)を添加した。この混合物を10分間攪拌した後、アモニア水(236.8 mL)を添加した。反応混合物を2時間かけて徐々に5 ℃まで加熱した。その後、塩化アモニウム(32 g)を添加した。この反応混合物を30分間攪拌した後、分離させた。その有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、水層を酢酸エチルで抽出(100 mL×2)した。有機層を合わせ、減圧下で濃縮し、白色固体の上記化合物(2S,4R) −tert−ブチル２−カルバモイル−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸塩13cを得た(74 g, 収率：86%)。
【０１２４】
ステップ３
(2S,4R)-tert-ブチル２−シアノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸塩の製造
(2S,4R)-tert-ブチル２−カルバモイル−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸塩13c(74 g, 0.3217 mol)をアルゴンガス環境下で攪拌しながら、740
mLのピリジンに溶解させた。この混合物を-20℃に冷却し、トリフロロ酢酸無水物(169 g, 0.804 mol)を滴加した。その後、反応混合物を室温まで加熱し、TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、水を加え反応を停止させた。0.8 Lの酢酸エチルでこの混合物を希釈した。分離した有機層を500 mLの飽和食塩水で洗浄し、400 mLの濃塩酸で中和し、弱酸性に調節した。得られた混合物を300 mLの水酸化ナトリウム水溶液(2 M)及び500 mLの飽和食塩水で連続に洗浄した。その後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、褐色オイルの上記化合物(2S,4R)-tert-ブチル２−シアノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸塩13dを得た(49.7 g, 収率：73%)。
【０１２５】
ステップ４
(2S,4S)-tert−ブチル２−シアノ−４−フロロピロリジン−１−カルボン酸塩の製造
(2S,4R)-tert-ブチル２−シアノ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸塩13d(49.7 g, 0.2344 mol)をアルゴンガス環境下で攪拌しながら、1130
mLのジクロロメタンに溶解させた。この混合物を-30℃に冷却させた後、三フッ化ジエチルアミノスルフォ(56.7 g, 0.3516 mol)を添加した。45分間攪拌した後、この反応混合物を-5℃まで加熱し、その後、室温で終夜反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、飽和した炭酸ナトリウム水溶液で温度が20℃以下に保つような速度で混合物をpH > 7に調節した。その後、氷水及び500 mLのジクロロメタンを添加した。分離した有機層を500 mLの飽和した硫酸水素ナトリウム水溶液及び500 mLの飽和食塩水で連続に洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、38℃以下の減圧下で濃縮し、薄い黄色固体の上記化合物(2S,4S)-tert−ブチル２−シアノ−４−フロロピロリジン−１−カルボン酸塩13eを得た(50 g, 収率：100%)。
【０１２６】
ステップ５
(2S,4S)−４−フロロピロリジン−２−カルボニトリルの製造
(2S,4S)-tert−ブチル２−シアノ−４−フロロピロリジン−１−カルボン酸塩13e(1 g, 4.6 mmol) をアルゴンガス環境下で攪拌しながら、2 mLの酢酸エチルに溶解させた。この混合物を15℃まで冷却し、その後、2.5 mLの塩酸の1,4−ジオキサン溶液 (3 M)を添加した。この反応混合物を室温で２時間攪拌し、更に25℃で５時間反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物をろ過し、残渣を室温で２時間攪拌し、白い沈殿が生じた。この混合物を再度ろ過し、ろ液を更に２時間攪拌し、ろ過した。残渣を合わせ、白色固体の上記化合物(2S,4S)−４−フロロピロリジン−２−カルボニトリル13fを得た(15.6 g, 収率：76.6%)。
【０１２７】
ステップ６
(2S,4S)−１−（２−クロロアセチル)−４−フロロピロリジンー２−カルボニトリルの製造
塩化クロロアセチル(11.13 g, 98.5 mmol) をアルゴンガス環境下で攪拌しながら、120 mLのジクロロメタンに溶解させた。それを0℃に冷却し、(2S,4S)−４−フロロピロリジン−２−カルボニトリル13f
(11.4 g, 75.7 mmol) を400 mLのジクロロメタンに溶解させた。その後、トリエチルアミン(16.1 g, 158.97 mmol) を添加した。塩化クロロアセチルのジクロロメタン溶液に上記混合物を30分間内に加えた。この反応混合物を0℃で２時間反応し、200 mLの氷水及び150 mLのジクロロメタンで希釈した。分離した有機層を飽和した硫酸二ナトリウムで中和し、300 mLの水及び300 mLの飽和食塩水で連続に洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、白色結晶の上記化合物(2S,4S)-1-(2-クロロアセチル)−４−フロロピロリジンー２−カルボニトリル13gを得た(8 g, 収率：60%)。
【０１２８】
ステップ７
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]-N,N,５−トリメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボキシアミドの製造
５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12f  (130 mg, 0.616
mmol)、(2S,4S)−１−（２−クロロアセチル）−４−フロロピロリジンー２−カルボニトリル13g (117.4 mg, 0.616 mmol)及びカルボン酸カリウム (85
mg, 0.616 mmol)を攪拌しながら窒素環境下で2 mLのジクロロメタン及び2 mLのN,N-ジメチルホルムアミドの混合溶媒に溶解させた。この反応混合物を室温で終夜反応し、TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物を減圧下で濃縮し、N,N-ジメチルホルムアミド及びジクロロメタンを除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]-N,N,５−トリメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２（１Ｈ）−カルボキシアミド13hを得た(0.13 g, 収率：58%)。
【０１２９】
ステップ８
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]-N,N,５−トリメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２（１H）−カルボキシアミド酒石酸塩の製造
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ] −N,N,５−トリメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２（１Ｈ）−カルボキシアミド13h
(0.16 g, 0.44 mmol) を攪拌しながら、5 mLのジクロロメタンに溶解させた。その後、5 mLの酒石酸(65.6 mg, 0.44 mmol) のアセトン溶液を滴加した。30分間反応し、白い沈殿が生じた。この混合物をろ過し、残渣をアセトンで洗浄し、白色固体の上記化合物５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ] −N,N,５−トリメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボキシアミド酒石酸塩13を得た(0.18 g, 収率：82%)。
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 5.76 (m, 1H), 5.46 (m,
1H), 5.0 (m, 1H), 4.08-4.05 (m, 4H), 3.97 (m, 2H), 3.69 (m, 2H), 2.73 (s, 6H),
2.61 (m, 2H), 1.87 (m, 3H), 1.57 (m, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.9 (m, 2H)
実施例１４
【０１３０】
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩
【化５７】
0005438028.tif 000062
【０１３１】
【化５８】
0005438028.tif 000063
ステップ１
５−ベンジル−５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12a(4.0 g, 19.3 mmol) を攪拌しながら、60 mLのテトラヒドロフランに溶解させた。その後、窒素環境下で塩化ベンジル(5.4 g, 42.5 mmol) 及びリチウムヘキサメチルジシラジド(42.5
mL, 42.5 mmol) を添加した。この反応混合物を室温で４時間攪拌し、TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、50 mLの水で反応を停止させた。この混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色固体の上記化合物５−ベンジル−５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14aを得た(2.6 g, 収率：46%)。
【０１３２】
ステップ２
５−ベンジル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−ベンジル−５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14a (2.0 g, 6.7 mmol) を攪拌しながら100 mLのジクロロメタンに溶解させた。これを０℃に冷却し、水酸化ジイソブチルアルミニウム(20.2 mL, 20.2 mmol)を滴加した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、水で反応を停止させた。この混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−ベンジル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14bを得た(729 mg, 収率：36%)。
【０１３３】
ステップ３
５−ベンジル−２−ジメチルカバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−５−カルボン酸の製造
５−ベンジル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14b (0.729 g, 2.43 mmol)を窒素環境下で28 mLのテトラヒドロフラン及び14 mLの水の混合溶媒に溶解させ、その後、0 °Cに冷却し、燐酸二水素ナトリウム２水和物(1.14 g, 7.29 mmol)、亜塩素酸ナトリウム (0.66 g, 7.29 mmol) 及び２−メチル−２−ブテン(0.513 g, 7.32
mmol)を添加した。この反応混合物を0 °Cで２時間攪拌した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−ベンジル−２−ジメチルカバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−５−カルボン酸14cを得た(0.76 g, 収率：98%)。
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 7.5-7.0 (m, 5H), 3.24 (m,
2H), 3.1 (m, 2H), 2.76 (s, 2H), 2.7 (s, 6H), 2.68 (m, 2H), 1.99-1.55 (m, 4H)
【０１３４】
ステップ４
５−ベンジル−２−ジメチルカバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−５−カルボニルアジドの製造
５−ベンジル−２−ジメチルカバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−５−カルボン酸14c (0.86 g, 2.72 mmol)を氷―水浴中で冷却しながら、30 mLのアセトンに溶解させた。この混合物を-5℃に冷却した後、トリエチルアミン(0.303 g, 2.99 mmol)及びクロロギ酸エチル(0.325 g, 2.99 mmol) のアセトン溶液15 mLを連続に滴加した。反応混合物を１５分間攪拌した後、アジ化ナトリウム(0.353 g, 5.44 mmol)の水溶液15 mL を滴加した。この反応混合物を更に３０分間攪拌した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、減圧下でこの混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、薄い黄色オイルの上記化合物５−ベンジル−２−ジメチルカバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−５−カルボニルアジド14dを得た(0.9 g, 収率：97%)。
【０１３５】
ステップ５
５−ベンジル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−ベンジル−２−ジメチルカバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−５−カルボニルアジド14d (1.0 g, 2.72 mmol) を攪拌しながら、20 mLのトルエンに溶解させ、この反応混合物を加熱し1.5時間還流させた。溶媒を蒸発させ、粗製精製物として上記化合物５−ベンジル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14eを得た。これを次のステップに直接に用いた。
【０１３６】
ステップ６
５−アミノ−５−ベンジル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
室温下で12 mLの塩酸溶液(8 N)に上記ステップで得られた５−ベンジル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14e を滴加した。当該反応混合物を30分間攪拌し、4 N 水酸化ナトリウム水溶液でpH 9に調節した。この混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−アミノ−５−ベンジル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14fを得た(0.55 g, 収率：70%)。
【０１３７】
ステップ７
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−アミノ−５−ベンジル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14f (0.1 g, 0.35 mmol) を4 mLのジクロロメタン / N,N-ジメチルホルムアミド(V/V=1/1)の混合溶媒に溶解させた。その後、 (2S,4S)−１−（２−クロロアセチル）−４−フロロピロリジン−２−カルボニトリル13g (66.5 mg, 0.35 mmol) 及び炭酸カリウム(49 mg,
0.35 mmol)を添加した。この反応混合物を40℃で12時間反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、白色固体の上記化合物５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14gを得た(87 mg, 収率：56%)。
MS
m/z (ESI): 442.2 [M+1]
【０１３８】
ステップ８
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩の製造
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14g (87 mg, 0.197 mmol) を攪拌しながら、3 mLのジクロロメタンに溶解させた。その後、3 mLの酒石酸のアセトン溶液を滴加した。この反応混合物は室温で30分間反応した後、濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル / アセトンの混合溶媒から再結晶し、白色固体の上記化合物５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩14を得た(80 mg, 収率：68%)。
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 7.32-7.2 (m, 5H), 5.55
(d, 1H), 5.41 (d, 1H), 4.97 (m, 1H), 4.31 (s, 2H), 4.08 (m, 1H), 4.0-3.5 (m,
6H), 2.81 (s, 2H), 2.78 (s, 6H), 2.5 (m, 2H), 2.0 (m, 3H), 1.6-1.3 (m, 6H)
実施例１５
【０１３９】
５−シクロヘキシルメチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩
【化５９】
0005438028.tif 000064
【０１４０】
【化６０】
0005438028.tif 000065
ステップ１
５−シアノ−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12a (3.66 g, 17.6 mmol) を攪拌しながら、150 mLのテトラヒドロフランに溶解させた。その後、臭化シクロヘキシメチル(6.2 g, 35.2 mmol) 及びリチウムヘキサメチルジシアジド(35.2
mL, 32.5 mmol)を滴加した。この反応混合物は室温で２時間反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、150 mLの飽和した塩化アモニウム水溶液を添加した。この混合物を酢酸エチルで抽出(60
mL×3)した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、黄色固体の上記化合物５−シアノ−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド 15aを得た(2.2 g, 収率：41.5%)。
MS
m/z (ESI): 304.5 [M+1]
【０１４１】
ステップ２
５−シクロヘキシルメチル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
氷水浴中で0℃に冷却しながら、５−シアノ−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド 15a (1.2 g, 3.95 mmol)を攪拌しながら30 mLのジクロロメタンに溶解させた。その後、水酸化ジイソブチルアルミニウム (11.8 mL, 11.8 mmol)を滴加した。この反応混合物は１時間反応した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、酒石酸ナトリウムカリウムの飽和水溶液を添加した。当該混合物を澄明になるまでに攪拌し、酢酸エチルで抽出 (100 mL×3)した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色オイルの上記化合物５−シクロヘキシルメチル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15bを得た(0.4 g, 収率：33%)。
MS
m/z (ESI): 307.4 [M+1]
【０１４２】
ステップ３
５−シクロヘキシルメチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸の製造
５−シクロヘキシルメチル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15b (0.713 g, 2.33 mmol)を 60 mL のテトラヒドロフラン及び30 mLの水の混合溶媒に溶解させた。その後、0℃に冷却しながら、燐酸二水素ナトリウム二水和物(1.09 g, 6.99 mmol)、亜塩素酸ナトリウム(0.79 g, 6.99 mmol)及び２−メチル−２−ブテン(0.62 mL,
7.0 mmol)を添加した。この反応混合物は0℃で２時間反応した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、この混合物を濃縮し、テトラヒドロフランを除去し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層の抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、黄色固体の上記化合物５−シクロヘキシルメチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸15cを得た(0.75 g, 収率：100%)。
MS
m/z (ESI): 323.3 [M+1]
【０１４３】
ステップ４
５−シクロヘキシルメチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジドの製造
氷水浴で冷却しながら、５−シクロヘキシルメチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸15c (0.75 g, 2.33 mmol) を攪拌しながら20 mLのアセトンに溶解させた。その後、トリエチルアミン(0.36 mL, 2.56 mmol) 及び2 mLのクロロギ酸エチル(0.25 mL, 2.56 mmol)のアセトン溶液を滴加した。この反応混合物を15分間攪拌し、2 mLのアジ化ナトリウム(0.303 g, 4.66 mmol) の水溶液を加えた。その後、反応混合物は0℃-5℃で更に30分間反応した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、混合物を濃縮し、アセトンを除去し、10
mLの水で希釈した。この混合物を酢酸エチルで抽出(10 mL×5)した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、黄色オイルの上記化合物５−シクロヘキシルメチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジド15dを得た(0.79 g)。これを次のステップに直接に用いた。
【０１４４】
ステップ５
５−シクロヘキシルメチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シクロヘキシルメチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジド15d (0.79 g, 2.27 mmol) を20 mLのトルエンに溶解させ、反応混合物を加熱し１時間還流させた。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、この混合物を濃縮し、灰色固体の上記化合物５−シクロヘキシルメチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15eを得た(0.65 g)。これを次のステップに直接に用いた。
MS
m/z (ESI): 320.4 [M+1]
【０１４５】
ステップ６
５−アミノ−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
氷水浴中で冷却しながら、10 mLの塩酸(8 N)を５−シクロヘキシルメチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15e (0.65 g, 2.03 mmol)に滴加した。その後、氷水浴を撤去し、反応混合物は50 ℃で20分間反応した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、濃アモニアでこの混合物をpH > 8に調節した。その後、酢酸エチルで抽出(30 mL×5)し、合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。ろ過し、減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製した。灰色オイルの上記化合物５−アミノ−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15fを得た(0.5 g, 収率：84%)。
MS
m/z (ESI): 294.3 [M+1]
【０１４６】
ステップ７
５−シクロヘキシルメチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−アミノ−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15f (0.115 g, 0.39 mmol)
を攪拌しながら、10 mLのジクロロメタン / N,N &#8211;ジメチルホルムアミドの混合溶媒(V/V=1/1)に溶解させた。その後、１−（２−クロロ−アセチル）−ピロリジン−２−シアノ (54 mg, 0.31 mmol)を添加した。この反応混合物は50℃で２時間反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物を減圧下で濃縮し、ジクロロメタン及びN,N &#8211;ジメチルホしたルムアミドを除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−（シクロヘキシルメチル）−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15gを得た(113 mg, 収率：67%)。
MS
m/z (ESI): 430.5 [M+1]
【０１４７】
ステップ８
５−シクロヘキシルメチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩の製造
５−（シクロヘキシルメチル）−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−シクロヘキシルメチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド15g (113 mg, 0.263 mmol)
を10 mLの酢酸エチルに溶解させ、2 mLの酒石酸のアセトン溶液を滴加した。この反応混合物を30分間攪拌し、ろ過した。白色固体の上記化合物５−（シクロヘキシルメチル）−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩15を得た(40 mg)。
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 5.2 (m, 1H), 4.77 (s,
2H), 4.18 (m, 3H), 4.02 (m, 1H), 3.63 (m, 2H), 3.32 (m, 2H), 2.73 (s, 6H), 2.58
(m, 2H), 2.16-1.87 (m, 9H), 1.59-1.19 (m, 8H)
実施例１６
【０１４８】
５−シクロペンチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩
【化６１】
0005438028.tif 000066
【０１４９】
【化６２】
0005438028.tif 000067
ステップ１
５−シアノ−５−シクロペンチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12a を30 mLのN,N-ジメチルホルムアミドに溶解させ、窒素環境下でヨウド−シクロペンタン (5.4 g, 27.5 mmol)及びリチウムヘキサメチルジシラジド (27.5
mL, 27.5 mmol)を添加した。 反応混合物を室温下で2時間攪拌した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、10 mLの水でこの混合物を希釈した。濃縮し、N,N-ジメチルホルムアミドを除去した。酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色固体の上記化合物５−シアノ−５−シクロペンチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16aを得た(2.6 g, 収率：42%)。
MS
m/z (ESI): 276.2 [M+1]
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 3.35-3.0 (m, 4H), 2.24
(s, 6H), 1.34-2.5 (m, 15H)
【０１５０】
ステップ２
５−シクロペンチル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シアノ−５−シクロペンチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16a (0.817 g, 2.97 mmol)を0℃下で攪拌しながら、40 mL のジクロロメタンに溶解させた。その後、水素化ジイソブチルアルミニウム(8.9 mL, 8.9 mmol)を滴加し、この反応混合物を45分間攪拌した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、混合物を濃縮し、ジクロロメタンを除去した。その残渣を100 mLの飽和した酒石酸カリウム・ナトリム水溶液で希釈した。この混合物を澄明になるまでに攪拌し、酢酸エチルで抽出 (100 mL×4)した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色オイルの上記化合物５−シクロペンチル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド 16bを得た(0.266 g, 収率：32%)。
MS
m/z (ESI): 279.3 [M+1]
【０１５１】
ステップ３
５−シクロペンチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸の製造
５−シクロペンチル−５−ホルミル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド 16b (0.266 g, 0.955
mmol)を20 mLのテトラヒドロフランと10 mLの水の混合溶媒に溶解させた。その後、0℃で燐酸二水素ナトリウム二水和物(0.448 g, 2.87 mmol)、亜塩素酸ナトリウム (0.26 g, 2.87 mmol) 及び２−メチル−２−ブテン(0.24 mL,
2.88 mmol)を添加した。0℃でこの反応混合物を２時間攪拌した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、混合物を濃縮し、テトラヒドロフランを除去し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、黄色固体の上記化合物５−シクロペンチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸16cを得た(0.28 g, 収率：99.6%)。
MS
m/z (ESI): 295.5 [M+1]
【０１５２】
ステップ４
５−シクロペンチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジドの製造
５−シクロペンチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸16c (0.28 g, 6.95 mmol)を氷―水浴中で冷却しながら、20 mLのアセトンに溶解させた。その後、0℃ー５℃でトリエチルアミン (0.15 mL, 1.05 mmol)及び2 mLのクロロギ酸エチル(0.1 mL, 1.05 mmol)のアセトン溶液を加えた。15分間攪拌した後、アジ化ナトリウム水溶液 (0.124 g, 1.9 mmol)を滴加した。この反応混合物を更に30分間攪拌した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、この混合物を濃縮し、残渣を10 mLの水で希釈した。この混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。ろ過し、減圧下で濃縮し、黄色オイルの上記化合物５−シクロペンチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジド16dを得た(0.287 g, 収率：95%)。これを次のステップに直接に用いた。  
【０１５３】
ステップ５
５−シクロペンチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シクロペンチル−２−ジメチルカルバモイル−オクタヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジド16d (0.287 g, 0.9 mmol)を攪拌しながら、10 mLのトルエンに溶解させた。この反応混合物を加熱し、１時間還流させた。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、この混合物を濃縮し、上記化合物５−シクロペンチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16eを得た。
MS
m/z (ESI): 292.3 [M+1]
【０１５４】
ステップ６
５−アミノ−５−シクロペンチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
氷水浴中で冷却しながら、10 mLの塩酸(8 N)溶液に先のステップで得られた５−シクロペンチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16eを滴加した。その後、氷−水浴を撤去した。この反応混合物は50℃で15分間反応した。 TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、濃アモニアでこの混合物をpH > 8に調節し、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、黄色オイルの上記化合物５−アミノ−５−シクロペンチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16fを得た(0.18 g, 収率：81.8%)。
MS
m/z (ESI): 266.2 [M+1]
【０１５５】
ステップ７
５−シクロペンチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−アミノ−５−シクロペンチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16f (0.108 g, 0.407 mmol)及び１−（２−クロロ−アセチル）−ピロリジン−２−シアノ (70 mg, 0.407 mmol)を攪拌しながら、3 mLのN,N−ジメチルホルムアミドに溶解させた。その後、窒素環境下で炭酸カリウム(57 mg,
0.407 mmol)を添加した。油浴で加熱し、この反応混合物を80℃で終夜反応した。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、 混合物を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−シクロペンチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16gを得た(100 mg, 収率：61.3%)。
MS
m/z (ESI): 402.3 [M+1]
【０１５６】
ステップ８
５−シクロペンチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドローシクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩の製造
５−シクロペンチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド16g (102 mg, 0.254 mmol)
を2 mLの酢酸エチルに溶解させ、3 mLの酒石酸のアセトン溶液を添加した。この反応混合物を30分間攪拌し、白い沈殿物が生じた。その後、n-ヘキサンを加え、更に攪拌した。この混合物をろ過し、白色固体の上記化合物５−シクロペンチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドローシクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩16を得た(88 mg, 収率：65%)。
実施例１７
【０１５７】
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩
【化６３】
0005438028.tif 000068
【０１５８】
【化６４】
0005438028.tif 000069
ステップ１
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−アミノ−５−ベンジル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[c]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド14f (0.1 g, 0.35 mmol)、１−（２−クロロ−アセチル）−ピロリジン−２−シアノ(120.4 mg, 0.7 mmol)及び炭酸カリウム (49 mg, 0.35
mmol)を窒素環境下で3 mLのN,N−ジメチルホルムアミドに溶解させ、油浴で加熱しながら、80℃で終夜反応させた。TLCで反応をモニターした。原料が消失した後、この混合物を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド17aを得た(56 mg, 収率：40%)。      
MS
m/z (ESI): 424.3 [M+1]
【０１５９】
ステップ２
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩の製造
５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド17a (56 mg, 0.132 mmol)を攪拌しながら、1 mLの酢酸エチルに溶解させ、その後1 mLの酒石酸のアセトン溶液を添加した。この反応混合物を30分間攪拌し、白い沈殿物が生じた。その後、n-ヘキサンを加え、再度攪拌した。この混合物をろ過し、白色固体の上記化合物５−ベンジル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩17を得た(50 mg, 収率：67%)。
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 7.32-7.19 (m, 5H), 4.78
(m, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.8-3.0 (m, 8H), 2.75 (s, 2H), 2.73 (s, 6H), 2.18 (m,
2H), 2.16 (m, 2H), 1.87 (m, 3H), 1.35 (m, 3H)
実施例１８
【０１６０】
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩
【化６５】
0005438028.tif 000070
【０１６１】
【化６６】
0005438028.tif 000071
ステップ１
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
窒素環境下で５−アミノ−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド11c (1.3 g, 7.58 mmol)、(2S,4S)−１−（２−クロロアセチル）−４−フロロピロリジン−２−カルボニトリル13g (1.74 g, 9.1 mmol)、炭酸カリウム(1.26 g, 9.1
mmol)、30 mLのN,N−ジメチルホルムアミド及び18 mLのジクロロメタンをフラスコに入れ、油浴で加熱し、30℃で終夜反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物を濃縮し、N,N−ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、白色固体の上記化合物５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド18aを得た(1.39 g, 収率：50%)。
MS
m/z (ESI): 348.2 [M+1]
【０１６２】
ステップ２
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩の製造
５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド18a (0.9 g, 2.47 mmol) を室温で攪拌しながら5 mLのジクロロメタンに溶解させた。その後、3 mLのｐ−トルエンスルホン酸一水和物(469 mg, 2.47 mmol)のアセトン溶液に上記の溶液を加え、白い沈殿物が生じた。この反応混合物を30分間攪拌し、その後、1 mLのn-ヘキサンを加えた。この混合物をろ過し、白色固体の上記化合物５−[２−（２−シアノ−４−フロロ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−メチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドｐ−トルエンスルホン酸塩18を得た(1.3 g, 収率：93%)。
MS
m/z (ESI): 366.1 [M+1]
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 7.74 (d, 2H), 7.29 (d,
2H), 5.57-5.44 (m, 1H), 5.07 (m, 1H), 4.19-4.07 (m, 4H), 3.49 (m, 2H), 3.35 (m,
2H), 3.0 (m, 2H), 2.9 (s, 6H), 2.6 (m, 2H), 2.39 (m, 5H), 1.57 (m, 2H), 1.34
(s, 3H)
実施例１９
【０１６３】
５−エチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩
【化６７】
0005438028.tif 000072
【０１６４】
【化６８】
0005438028.tif 000073
ステップ１
５−シアノ−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−シアノ−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド12a (3.0 g, 14.5 mmol)を攪拌しながら、60 mLのテトラヒドロフランに溶解させ、その後、窒素環境下でエチルヨード(4.52
g, 29 mmol)及びリチウムヘキサメチルジシルアジド(29 mL, 29 mmol)を添加した。この反応混合物は室温で２時間反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物を20 mLの水で希釈し、酢酸エチルで抽出 (200 mL×3)した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、オイル状物質を得た。これはTLC上で隣接した二つのスポットを示した。その後、このオイルをシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色固体の上記化合物５−シアノ−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド19aを得た(1.64 g)。
MS
m/z (ESI): 236.3 [M+1]
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 3.5-3.0 (m, 4H), 2.7 (s,
6H), 1.9-1.2 (m, 8H), 1.19 (m, 3H)
【０１６５】
ステップ２
５−エチル−５−ホルミル−N,N−ジメチルーヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボキシアミドの製造
５−シアノ−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド19a (1.54 g, 6.55 mmol) を60 mLのジクロロメタンに溶解させ、0℃でジイソブチルアルミニウム水和物(19.6 mL, 19.6 mmol)を滴加した。この反応混合物を0℃で30分間攪拌した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、1.5 mLの水で反応を停止させ、無水硫酸マグネシウムでこの混合物を乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。薄い黄色オイルの上記化合物５−エチル−５−ホルミル−N,N−ジメチルーヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボキシアミド19bを得た(0.4 g, 収率：26%)。
MS
m/z (ESI): 239.1 [M+1]
【０１６６】
ステップ３
５−エチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸の製造  
５−エチル−５−ホルミル−N,Nージメチルヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド19b (0.4 g, 1.68 mmol) を18 mLのテトラヒドロフラン及び9 mLの水の混合溶媒に溶解させた。その後、0℃で燐酸二水素ナトリウム二水和物(787 mg, 5.04 mmol)、亜塩素酸ナトリウム(0.454 g, 5.04
mmol)及び２−メチル−２−ブテン(354 mg, 5.06 mmol)を添加した。 窒素環境下0℃で２時間反応した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を合わせて、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。黄色固体の上記化合物５−エチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸19cを得た(0.426
g, 収率：100%)。
MS
m/z (ESI): 255.2 [M+1]
【０１６７】
ステップ４
５−エチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジドの製造
５−エチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボン酸19c (0.56 g, 2.2 mmol) を氷−水浴で冷却しながら、60 mLのアセトンに溶解させた。-５℃まで冷却し、トリエチルアミン(0.245 mg, 2.43 mmol)及び2 mLのクロロギ酸エチル(263 mg, 2.43 mmol)のアセトン溶液を滴加した。この反応混合物を15分間攪拌し、2 mLのアジ化ナトリウム (0.286 g, 4.4 mmol) の水溶液を添加した。この反応混合物を-５℃ー０℃で更に30分間攪拌した。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、10 mLの水でこの混合物を希釈し、酢酸エチルで抽出(10 mL×5)した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮し、薄い黄色オイルの上記化合物５−エチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジド 19dを得た(0.5 g)。これを次のステップに直接に用いた。
【０１６８】
ステップ５
５−エチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
５−エチル−２−ジメチルカルバモイル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−５−カルボニルアジド 19d (0.5 g, 1.86
mmol) を30 mLのトルエンに溶解させ、この反応混合物を加熱し２時間還流させた。TLCで反応をモニターし、原料が消失した後、この混合物を濃縮し、上記化合物５−エチル−５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド19eを得た。これを次のステップに直接に用いた。
【０１６９】
ステップ６
５−アミノ−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
室温で12 mLの塩酸(8 N)溶液に先のステップにおいて得られた５−エチルー５−イソシアナト−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド19e を加えた。この反応混合物を30分間攪拌し、8 N水酸化ナトリウム水溶液でpH 9-10に調節した。分離した水層をジクロロメタンで抽出(30 mL×5)した。合わせた有機抽出物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、無色オイルの上記化合物５−アミノ−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド 19fを得た(0.3 g, 収率：71%)。
MS
m/z (ESI): 226.2 [M+1]
【０１７０】
ステップ７
５−エチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミドの製造
窒素環境下で、５−アミノ−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド 19f (0.202 g,
0.897 mmol)、１−（２−クロロ−アセチル）−ピロリジン−２−シアノ (185 mg, 1.07 mmol)、炭酸カリウム (148 mg, 1.07
mmol)及び9 mLのN,N−ジメチルホルムアミド / ジクロロメタン の混合溶媒(V/V=1/1)をフラスコに入れた。この反応混合物を60℃で２時間反応した。TLCで反応をモニターし、原料は消失した後、この混合物を減圧下で濃縮し、N,N−ジメチルホルムアミドを除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムのクロマトグラフィで精製し、薄い黄色オイルの上記化合物５−エチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド19gを得た(120 mg, 収率：40%)。
MS
m/z (ESI): 362.2 [M+1]
【０１７１】
ステップ８
５−エチル−５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩の製造
５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド19g (120 mg, 0.33
mmol) を1 mLの酢酸エチルに溶解させた。その後、2 mLの酒石酸(50 mg, 0.33 mmol)のアセトン溶液を滴加した。この反応混合物を30分間攪拌し、ろ過し、白色固体の上記化合物５−[２−（２−シアノ−ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチルアミノ]−５−エチル−ヘキサヒドロ−シクロペンタ[ｃ]ピロール−２−カルボン酸ジメチルアミド酒石酸塩19を得た(160 mg, 収率：94%)。
MS
m/z (ESI): 362.2 [M+1]
1H NMR (DMSO-D6, 400 MHz) δ 4.79 (m, 1H), 4.11 (s,
2H), 3.65 (m, 2H), 3.49 (m, 2H), 3.22 (m, 4H), 2.75 (s, 6H), 2.55 (m, 2H), 2.19
(m, 2H), 2.09 (m, 2H), 1.99 (m, 2H), 1.51 (m, 4H), 0.86 (t, 3H)
【０１７２】
生物アッセイ
活性阻害ＤＰＰＩＶアッセイ
アッセイ手順
以下の方法が、ＤＰＰ−ＩＶの酵素活性を阻害する本発明の化合物の活性を測定するのに使用できる。本発明の化合物を、精製ＤＰＰ−ＩＶの酵素活性を阻害するその能力について試験する。それぞれの化合物の阻害率又はＩＣ５０（酵素活性の５０％を阻害する試験化合物の濃度）を、一定量の酵素を混合した基質を数種の濃度の試験化合物と共にインキュベートすることによって測定する。
【０１７３】
材料及び方法：
材料として、以下が挙げられる：
ａ．Ｗｈｉｔｅ９６ウエルプレート（ＢＭＧ）、
ｂ．トリス緩衝液、ｄＨ２Ｏ中２ｍＭのトリス緩衝液１０００ｍｌを調製するために、
０．０２４２ｇのトリスを約９０ｍｌのｄＨ２Ｏに溶解し、ＨＣｌ及びＮａＯＨを用いてｐＨを８．００に調整し、少なくともｄＨ２Ｏを１００ｍｌまで加えた、
ｃ．トリス緩衝液に２ｍＭまで溶解したＤＰＰＩＶ酵素（ＣａｌＢｉｏｃｈｅｍカタログ番号３１７６３０）
ｄ．ｄＨ２Ｏに１ｍＭまで溶解したＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏ（商標）基質（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
ｅ．ＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏ．緩衝液（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
ｆ．ルシフェリン検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
ｇ．ＤＭＳＯ、及び
ｈ．ｄＨ２Ｏ
【０１７４】
プロトコール：
アッセイは、以下のステップの順序で行った：
１．ＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏ．を解凍し、それを使用前に緩衝し及び室温に平衡化させる；
２．凍結乾燥ルシフェリン検出試薬を使用前に室温に平衡化させる；
３．ＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏ．を懸濁させ、超純水を基質バイアルに加えて手短に混合し、
次いで１ｍＭ基質を得る；
４．ルシフェリン検出試薬をアンバーボトルに加え、次いでＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏ．緩衝液を加える、この場合にルシフェリン検出試薬は１分未満で溶解されるべきである；
５．試験化合物を、ＤＭＳＯを用いて所望の最終濃度の５０倍まで溶解し；
６．２μＬの試験化合物をそれぞれの試験管に５０倍濃度で加え、陰性対照及びブランク対照では２μＬのＤＭＳＯを加える；
７．４６μＬのトリス緩衝液をそれぞれの試験管に加え、ブランク対照では４８μＬのトリス緩衝液を加える；
８．陰性対照及び試験化合物については、２μＬのＤＰＰＩＶ酵素をそれぞれの試験管に加える；
９．試験管を旋回させ、遠心分離し、次いでこの試験管の物質を９６ウエルプレートに移す；
１０．基質とＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏａｔを１：４９の比率で混合し、次いで基質を旋回
せるか又は反転させて均質溶液を得、それを使用前に室温で３０〜６０分間放置する；
１１．溶液のＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏ．と基質の混合溶液５０μＬをそれぞれの９６ウエルプレートに加え、このプレートを密封フィルムで覆う；
１２．９６ウエルの物質をプレートシェーカーを使用して３００〜５００ｒｐｍで３０秒間穏やかに混合し、次いでそれを室温で３０分〜３時間インキュベートし；そして
１３．発光を記録する。
【０１７５】
阻害率は、［１−（Ｓ−Ｂ）／（Ｎ−Ｂ）］＊１００％として定義することができる。
Ｓ：試料
Ｂ：ブランク対照
Ｎ：陰性対照
【０１７６】
ＤＰＰ―ＶＩＩＩ活性阻害のアッセイ
【０１７７】
材料及び方法：
材料として、以下が挙げられる：
i．Ｗｈｉｔｅ９６ウエルプレート（ＢＭＧ）、
j．トリス緩衝液、ｄＨ２Ｏ中２ｍＭのトリス緩衝液１０００ｍｌを調製するために、０．０２４２ｇのトリスを約９０ｍｌのｄＨ２Ｏに溶解し、ＨＣｌ及びＮａＯＨを用いてｐＨを８．００に調整し、少なくともｄＨ２Ｏを１００ｍｌまで加えた、
k．トＤＰＰ-ＶＩＩＩ酵素（Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅカタログ番号８００８０）を２５％のトリスーＨＣｌ、ｐＨ＝８．０、１００ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のtween-20、５０％のグリセール及び３ｍＭのDTT緩衝液に溶解した。最終濃度は０．１ｎｇ／１００μＬアッセイである。
l．ｄＨ２Ｏに１ｍＭまで溶解したＤＰＰ-ＶＩＩＩ（商標）基質（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
m．ＤＰＰ-ＶＩＩＩ−Ｇｌｏ．緩衝液（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
n．ルシフェリン検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
o．ＤＭＳＯ、及び
p．ｄＨ２Ｏ
【０１７８】
プロトコール：
アッセイは、以下のステップの順序で行った：
14．ＤＰＰ-ＶＩＩＩ−Ｇｌｏ．を解凍し、それを使用前に緩衝し及び室温に平衡化させる；
15．凍結乾燥ルシフェリン検出試薬を使用前に室温に平衡化させる；
16．ＤＰＰ-ＶＩＩＩ−Ｇｌｏ．を懸濁させ、超純水を基質バイアルに加えて手短に混合し、
次いで１ｍＭ基質を得る；
17．ルシフェリン検出試薬をアンバーボトルに加え、次いでＤＰＰ-ＶＩＩＩ−Ｇｌｏ．緩衝液を加える、この場合にルシフェリン検出試薬は１分未満で溶解されるべきである；
18．試験化合物を、ＤＭＳＯを用いて所望の最終濃度の５０倍まで溶解し；
19．２μＬの試験化合物をそれぞれの試験管に５０倍濃度で加え、陰性対照及びブラン
ク対照では２μＬのＤＭＳＯを加える；
20．４６μＬのトリス緩衝液をそれぞれの試験管に加え、ブランク対照では４８μＬのトリス緩衝液を加える；
21．陰性対照及び試験化合物については、２μＬのＤＰＰ-ＶＩＩＩ酵素をそれぞれの試験管に加える；
22．試験管を旋回させ、遠心分離し、次いでこの試験管の物質を９６ウエルプレートに移す；
23．基質とＤＰＰＩＶ−Ｇｌｏａｔを１：４９の比率で混合し、次いで基質を旋回せるか又は反転させて均質溶液を得、それを使用前に室温で３０〜６０分間放置する；
24．溶液のＤＰＰ-ＶＩＩＩ−Ｇｌｏ．と基質の混合溶液５０μＬをそれぞれの９６ウエルプレートに加え、このプレートを密封フィルムで覆う；
25．９６ウエルの物質をプレートシェーカーを使用して３００〜５００ｒｐｍで３０秒間穏やかに混合し、次いでそれを室温で３０分〜３時間インキュベートし；そして
26．発光を記録する。
ＤＰＰ-ＩＸ活性阻害のアッセイ
【０１７９】
材料及び方法：
材料として、以下が挙げられる：
q．Ｗｈｉｔｅ９６ウエルプレート（ＢＭＧ）、
r．トリス緩衝液、ｄＨ２Ｏ中２ｍＭのトリス緩衝液１０００ｍｌを調製するために、０．０２４２ｇのトリスを約９０ｍｌのｄＨ２Ｏに溶解し、ＨＣｌ及びＮａＯＨを用いてｐＨを８．００に調整し、少なくともｄＨ２Ｏを１００ｍｌまで加えた、
s．ＤＰＰ-ＩＸ酵素（Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅカタログ番号８００９０）を２５ｍｌのトリスーＨＣｌ、ｐＨ＝８．０、１００ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％のtween-20、５０％のグリセール及び３ｍＭのDTT緩衝液に溶解した。最終濃度は０．１ｎｇ／１００μＬアッセイである。
t．
u．ｄＨ２Ｏに１ｍＭまで溶解したＤＰＰ-ＩＸ（商標）基質（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
v.  ＤＰＰ-ＩＸ−Ｇｌｏ．緩衝液（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
w．ルシフェリン検出試薬（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ８３５０）、
x．ＤＭＳＯ
y．ｄＨ２Ｏ
【０１８０】
プロトコール：
アッセイは、以下のステップの順序で行った：
27．ＤＰＰ-ＩＸ−Ｇｌｏ．を解凍し、それを使用前に緩衝し及び室温に平衡化させる；
28．凍結乾燥ルシフェリン検出試薬を使用前に室温に平衡化させる；
29．ＤＰＰ-ＩＸ−Ｇｌｏ．を懸濁させ、超純水を基質バイアルに加えて手短に混合し、次いで１ｍＭ基質を得る；
30．ルシフェリン検出試薬をアンバーボトルに加え、次いでＤＰＰ-ＩＸ−Ｇｌｏ．緩衝液を加える、この場合にルシフェリン検出試薬は１分未満で溶解されるべきである；
31．試験化合物を、ＤＭＳＯを用いて所望の最終濃度の５０倍まで溶解し；
32．２μＬの試験化合物をそれぞれの試験管に５０倍濃度で加え、陰性対照及びブランク対照では２μＬのＤＭＳＯを加える；
33．４６μＬのトリス緩衝液をそれぞれの試験管に加え、ブランク対照では４８μＬのトリス緩衝液を加える；
34．陰性対照及び試験化合物については、２μＬのＤＰＰ-ＩＸ酵素をそれぞれの試験管に加える；
35．試験管を旋回させ、遠心分離し、次いでこの試験管の物質を９６ウエルプレートに移す；
36．基質とＤＰＰ−ＩＸ−Ｇｌｏａｔを１：４９の比率で混合し、次いで基質を旋回せるか又は反転させて均質溶液を得、それを使用前に室温で３０〜６０分間放置する；
37．溶液のＤＰＰ-ＩＸ−Ｇｌｏ．と基質の混合溶液５０μＬをそれぞれの９６ウエルプレートに加え、このプレートを密封フィルムで覆う；
38．９６ウエルの物質をプレートシェーカーを使用して３００〜５００ｒｐｍで３０秒間穏やかに混合し、次いでそれを室温で３０分〜３時間インキュベートし；そして
39．発光を記録する。
【０１８１】
阻害率は、［１−（Ｓ−Ｂ）／（Ｎ−Ｂ）］＊１００％として定義することができる。
Ｓ：試料
Ｂ：ブランク対照
Ｎ：陰性対照
試験化合物のＤＰＰ−ＩＶ／ＤＰＰ−ＶＩＩＩ／ＤＰＰ−ＩＸのＩＣ５０を表２に示した：
【０１８２】
0005438028.tif 000074
【０１８３】
ＤＰＰＩＶ阻害剤の血糖低下作用の予備評価
目的：
健常なＩＣＲマウスにおいてＤＰＰＩＶ阻害剤ＳＨＲ１０３９（実施例１）及びＳＨＲ１０４０（実施例２）の経口ブドウ糖負荷に対する効果を観察するために、生体内血糖低下作用を評価した。
試験動物：
種、系統：  ＩＣＲマウス
供給源：    Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，
Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ，Ｑｕａｌｉｆｉｅｄ  Ｎｏ．：ＳＹＸＫ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）２００４−
２００５
体重：      ２５〜３０ｇ
性別：      雄性動物
動物数：    ４０匹
飼育条件：  ＳＰＦ−クラス動物室内飼育、温度：２２〜２４℃、湿度：４５〜８０％、
照明：１５０〜３００Ｌｘ、１２時間の間隔で日中及び夜間サイクル
【０１８４】
薬剤：
名前：      ＳＨＲ１０３９（実施例１）
ロット番号：０１
色、形状：  白色粉末
純度：      ９６．９７％
供給：      Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｈｅｎｇｒｕｉ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．
製造方法：  化合物を正確に秤量し、次いで再蒸留水に溶解した。０．５、０．１５及び０．０５ｍｇ／ｍｌの懸濁液をそれぞれ調製した（注：製品取扱説明書に示されているが、試験化合物は水に可溶性であったが、実験では水溶性が不十分であった、すなわち低濃度では溶解させることができるが、０．５ｍｇ／ｍｌの濃度では未だ肉眼で見える粒子が存在している。１％ＣＭＣを化合物を懸濁させるために試みたが、再蒸留水よりも良くなかった。）
用量：      胃管栄養法で１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ。
容量は２０ｍｌ／ｋｇである。
名前：      ＳＨＲ１０４０（実施例２）
ロット番号：０１
色、形状：  白色粉末
純度：      ９６．６２％
供給：      Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｈｅｎｇｒｕｉ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．
製造方法：  化合物を正確に秤量し、次いで再蒸留水に溶解し、十分に混合して
１．５ｍｇ／ｍｌ溶液を調製し、次いでそれぞれ０．５ｍｇ／ｍｌ、
０．１５ｍｇ／ｍｌ及び０．０５ｍｇ／ｍｌの透明溶液に希釈した。
用量：      胃管栄養法で１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ。
容量は２０ｍｌ／ｋｇである。
【０１８５】
方法；
１．健常なＩＣＲマウスにおける血糖に対する化合物の効果
健常な雄性ＩＣＲマウスを、体重に従って無作為に、それぞれの群に６匹のマウスにグループ分けした。それぞれの群は、以下の通りのブランク対照群及び種々の用量の処理群を含んでいた：
【０１８６】
試験１：
ブランク対照：胃管栄養法による再蒸留水
群１：        胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）１ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）３ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）１０ｍｇ／ｋｇ
群２：        胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）１ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）３ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）１０ｍｇ／ｋｇ
【０１８７】
試験２：
ブランク対照：胃管栄養法による再蒸留水
群１：        胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）１ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）３ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）１０ｍｇ／ｋｇ
群２：        胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）１ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）３ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）１０ｍｇ／ｋｇ
【０１８８】
それぞれの群の動物を６時間絶食させ、次いで化合物又は再蒸留水を用いてそれぞれ胃管栄養法で１回投与で予備処理した。３０分後に、動物に胃管栄養法で２．５ｇ／ｋｇのグルコースを投与した。グルコースの投与前及び投与後３０分、６０分及び１２０分に血液を採取して血糖値を測定した。
【０１８９】
２．血中グルコース測定：
血中グルコースをグルコースキットで測定する。２５０μｌの作用酵素溶液を採取し、
次いでこの溶液に５μｌの血清を加えた。ブランク試験管（５μｌの再蒸留水を加えた）
及び標準試験管（５μｌのグルコース標準溶液を加えた）を同時に作り、それぞれ３７℃
の水浴中で２０分間振盪した。ブランク試験管を調製し、次いで比色アッセイをＯＤ５０５ｎｍで測定した。
【０１９０】
血中グルコース濃度（ＢＧ、ミリモル／ｌ）＝ＯＤ試料試験管／ＯＤ標準試験管×５．
５５
データ処理及び統計的分析：
１．平均±ＳＤ及びＳｔｕｄｅｎｔ−ｔ検定をデータ統計的分析で使用した。
２．糖の投与後３０分の血中グルコース減少の割合及び曲線下面積（ＡＵＣ）を算出した。
【０１９１】
結果：
試験１：
雄性ＩＣＲマウスを６時間絶食させ、次いで再蒸留水、種々の用量の実施例１及び実施
例２の化合物を用いて胃管栄養法で処理した。投与後３０分に、経口ブドウ糖負荷試験を行った。結果は、対照群の血糖値が２．５ｇ／ｋｇのグルコースを胃管栄養法で投与した後に著しく上昇し、３０分でピークに達したことを示した。実施例１の化合物の低用量、中間用量及び高用量では、血糖は３０分で対照群よりも著しく低く、その血糖の割合はそれぞれ１９．１６％、２２．８５％及び３１．８５％まで低下した。実施例２の化合物のそれぞれの用量では、血糖はグルコース（＜Ｐ０．０１）の投与後３０分で対照群よりも著しく低かった。対照群と比較して、その血糖の割合は２５．５４％、２５．９２及び２６．９３％まで低下した。
【０１９２】
試験２：
雄性ＩＣＲマウスを６時間絶食させ、次いで再蒸留水、種々の用量の試験化合物ＳＨＲ１０３９（実施例１）及びＳＨＲ１０４０（実施例２）を用いて胃管栄養法で処理した。投与後３０分に、経口ブドウ糖負荷試験を行った。結果は、対照群の血糖値が、２．５ｇ／ｋｇのグルコースを胃管栄養法で投与した後に著しく上昇し、３０分でピークに達したことを示した。ＳＨＲ１０３９のそれぞれの用量では、血糖は、グルコース（Ｐ＜０．０１）の投与後３０分で対照群よりも著しく低く、その血糖の割合はそれぞれ２６．１０％、３０．２４及び３２．０５％まで低下した。ＳＨＲ１０４０の低用量、中間用量及び高用量では、血糖は、グルコース（Ｐ＜０．０１）の投与後３０分で対照群よりも著しく低く、その血糖の割合は２４．５１％、２６．９６％及び２７．７５％％まで低下した。
【０１９３】
結論：
この報告書の２つの実験結果は、試験化合物ＳＨＲ１０３９（実施例１）、ＳＨＲ１０４０（実施例２）が健常なＩＣＲマウスでの経口ブドウ糖負荷試験に対して顕著な血糖低下作用を有することを示している。また、試験化合物ＳＨＲ１０３９（実施例１）は、よりよい用量−効果の関係を示し、化合物ＳＨＲ１０４０（実施例２）は劣る用量−効果の関係を有する。
【０１９４】
ＫＫＡｙマウスでの経口ブドウ糖負荷に対するＤＰＰＩＶ阻害剤の効果
目的：
ＩＩ型糖尿病のＫＫＡｙマウスでの経口ブドウ糖負荷に対するＤＰＰＩＶ阻害剤ＳＨＲ１０３９（実施例１）及びＳＨＲ１０４０（実施例２）の効果を観察するために、その生体内での血糖低下作用の予備的評価を評価した。
【０１９５】
試験動物：
種、系統：  ＫＫＡｙマウス
供給源：    Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ，
Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｑｕａｌｉｆｉｅｄ  Ｎｏ．：ＳＹＸＫ（Ｓｈａｎｇｈａｉ）２００４−２００５
体重：      ４０〜５５ｇ
性別：      雌：５２匹；  雄：３３匹
飼育条件：  ＳＰＦ−クラス動物室内飼育、温度：２２〜２４℃、湿度：４５〜８０％、
照明：１５０〜３００Ｌｘ、１２時間の間隔で日中及び夜間サイクル
【０１９６】
薬剤：
名前：      ＳＨＲ１０３９（実施例１）及びＳＨＲ１０４０（実施例２）
製造方法：  化合物を正確に秤量し、次いで再蒸留水に溶解し、十分に混合して３ｍｇ／ｍｌ溶液を調製し、次いで１ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ及び０．１ｍｇ／ｍｌの透明溶液それぞれに希釈した。
用量：      胃管栄養法で１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ。
容量は１０ｍｌ／ｋｇである。
【０１９７】
方法：
健常なＫＫＡｙマウスにおける血糖に対する化合物の効果
健常なＫＫＡｙマウスを６時間絶食させ、次いで体重及び絶食血糖に従って無作為にそれぞれの群に５匹のマウスにグループ分けした。それぞれの群は、以下の通りにブランク対照群及び種々の用量の処理群を含んでいた：
【０１９８】
試験１：雄性０７０４
ブランク対照：  胃管栄養法による再蒸留水
ＳＨＲ１０３９：胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）１０ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）３０ｍｇ／ｋｇ
【０１９９】
試験２：雌性０８１６
ブランク対照：  胃管栄養法による再蒸留水
ＳＨＲ１０３９：胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）３ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０３９（実施例１）１０ｍｇ／ｋｇ
【０２００】
試験３：雄性０７１２
ブランク対照：  胃管栄養法による再蒸留水
ＳＨＲ１０４０：胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）１０ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）３０ｍｇ／ｋｇ
【０２０１】
試験４：雌性０９０７
ブランク対照：  胃管栄養法による再蒸留水
ＳＨＲ１０４０：胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）３ｍｇ／ｋｇ
胃管栄養法によるＳＨＲ１０４０（実施例２）１０ｍｇ／ｋｇ
【０２０２】
それぞれの群の動物を６時間絶食させ、次いで化合物又は再蒸留水を用いてそれぞれ胃管栄養法で１回投与で予備処理した。３０分後に、動物に胃管栄養法で２．５ｇ／ｋｇ（雌性ＫＫＡｙマウス）のグルコースを投与するか又は１．５ｇ／ｋｇ（雄性ＫＫＡｙマウス）のグルコースを投与した。グルコースの投与後３０分、６０分及び１２０分に、血糖値をグルコメーターで測定した。
【０２０３】
データ処理及び統計的分析：
３．平均±ＳＤ及びＳｔｕｄｅｎｔ−ｔ検定又はＡｎｏｖａをデータ統計的分析で使用した。
４．糖の投与後３０分の血糖減少の割合及び曲線下面積（ＡＵＣ）を算出した。
【０２０４】
結果：
１．化合物ＳＨＲ１０３９（実施例１）：試験１、試験２：
雄性ＫＫＡｙマウスを６時間絶食させ、次いで再蒸留水及び種々の用量の試験化合物ＳＨＲ１０３９（実施例１）を用いて胃管栄養法で処理した。投与後３０分に、経口ブドウ糖負荷試験を行った。結果は、対照群の血糖値が１．５ｇ／ｋｇグルコースを胃管栄養法で投与した後に著しく上昇し、３０分でピークに達したことを示した。ＳＨＲ１０３９（実施例１）群の１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇの用量では、その血糖値は、両方共にグルコース投与後３０分で対照群よりも著しく低かった。対照群と比較して、その血糖の割合はぞれぞれ１６．２２％及び１７．１５％まで低下した。
【０２０５】
雌性ＫＫＡｙマウスを６時間絶食させ、次いで再蒸留水及び種々の用量の試験化合物ＳＨＲ１０３９（実施例１）を用いて胃管栄養法で処理した。投与後３０分に、経口ブドウ糖負荷試験を行った。結果は、対照群の血中ブドウ糖値が２．５ｇ／ｋｇのグルコースを胃管栄養法で投与した後に著しく上昇し、３０分でピークに達したことを示した。ＳＨＲ１０３９（実施例１）群の３ｍｇ／ｋｇ及び１０ｍｇ／ｋｇの用量では、その血糖値は、両方共にグルコース投与後３０分で対照群よりも著しく低かった。その血糖の割合はぞれぞれ４０．６３％及び２４．６８％まで低下した。
【０２０６】
２．化合物ＳＨＲ１０４０（実施例２）：試験３、試験４：
雄性ＫＫＡｙマウスを６時間絶食させ、次いで再蒸留水及び種々の用量の試験化合物ＳＨＲ１０４０（実施例２）を用いて胃管栄養法で処理した。投与後３０分に、経口ブドウ糖負荷試験を行った。結果は、対照群の血糖値が１．５ｇ／ｋｇのグルコースを胃管栄養法で投与した後に著しく上昇し、３０分でピークに達したことを示した。ＳＨＲ１０４０（実施例１）群の１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇの用量では、その血糖値は、両方共にグルコース投与後３０分での対照群よりも著しく低かった。対照群と比較して、その血糖の割合はぞれぞれ１３．７９％及び１２．２３％まで低下した。
【０２０７】
雌性ＫＫＡｙマウスを６時間絶食させ、次いで再蒸留水及び種々の用量の試験化合物ＳＨＲ１０４０（実施例２）を用いて胃管栄養法で処理した。投与後３０分に、経口ブドウ糖負荷試験を行った。結果は、対照群の血糖値が２．５ｇ／ｋｇのグルコースを胃管栄養法で投与した後に著しく上昇し、３０分でピークに達したことを示した。ＳＨＲ１０４０（実施例２）群の１０ｍｇ／ｋｇの用量では、その血糖値は、グルコース（Ｐ＝０．０７５、ａｎｏｖａ）投与後３０分での対照群よりも著しく低かった。その血糖の割合はぞれぞれ２１．５５％まで低下した。しかし、マウスでは大きな個体差があるので、結果は顕著な相違を有していなかった。
【０２０８】
結論：
試験化合物ＳＨＲ１０３９（実施例１）及びＳＨＲ１０４０（実施例２）は共に、ＩＩ型糖尿病のＫＫＡｙマウスでの経口ブドウ糖負荷に対して若干の血糖低下作用を有する。