(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物
【化１】
0005539323.tif 000035
（式中、
Ｒ１は、水素、クロロ、シアノ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、およびトリフルオロメトキシからなる群より選択され、
Ｒ２は、水素、ハロ、シアノ、１〜５個のフルオロ基で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、および１〜５個のフルオロ基で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシからなる群より選択され、
Ｒ３は、水素、フルオロ、およびクロロからなる群より選択され、
Ｒ４は、トリフルオロメチル、シアノおよびシクロプロピルからなる群より選択され、
ただし、Ｒ１が水素、クロロ、シアノ、またはトリフルオロメチルである場合、Ｒ２は、１〜５個のフルオロ基で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシである）
またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項２】
Ｒ２が、トリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、および１，１，２，２−テトラフルオロエトキシからなる群より選択され、Ｒ３が水素である、請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項３】
Ｒ１が、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシである、請求項１または請求項２のいずれかに記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項４】
Ｒ２が、１〜５個のフルオロ基で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシである、請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項５】
Ｒ３が水素である、請求項４に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項６】
（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オンである、請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項７】
（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オンである、請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項８】
（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オンである、請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項９】
（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−エチルアミノ］−５−フェニル−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オンである、請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩。
【請求項１０】
請求項１〜９のうちのいずれか１項に記載の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩、および薬理学的に許容できる担体、希釈剤または賦形剤を含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＣＢ−１リガンドとしての１，５−ジフェニル−ピロリジン−２−オン化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
カンナビノイドＣＢ−１受容体（ＣＢ−１）は主に、中枢神経系および末梢神経系において見られ、そして、いくつかの末梢器官においてはより少ない程度に見られる。カンナビノイドＣＢ−２受容体（ＣＢ−２）は主に免疫系に見られる。カンナビノイド受容体リガンドについての薬理学および治療可能性は概説されている（非特許文献１）。ＣＢ−１受容体アンタゴニスト／逆アゴニストは、肥満の動物モデルにおいて摂餌および体重を減少させる効果が示されている。ＣＢ−１アンタゴニスト／逆アゴニストは、種々のアッセイにおいて抗精神病薬の活性をさらに高めることが示されており、統合失調症の陰性症状および認知的症状の両方の治療に有効であり得る。さらに、ＣＢ−１アンタゴニスト／逆アゴニストの体重減少の効果は、抗精神病薬治療により誘発される体重増加の動物モデルにおいて実証されており、従って、現在の抗精神病薬療法で見られる治療により発生した体重増加および代謝症候群を制御するのに有効であり得る。さらに、ＣＢ−１受容体アンタゴニスト／逆アゴニストは、飲酒の動物モデルにおいてアルコール消費を減少させることが示されており、従って、アルコール依存症および／または薬物乱用の治療に有用であり得る。
【０００３】
ＣＢ−２受容体において作用する化合物は、免疫機能に対する効果を有し得る。従って、ＣＢ−１受容体において活性な治療薬を開発する際に、望ましくない効果を回避するために、ＣＢ−２受容体と比較してＣＢ−１受容体についての高い選択性を有することが望ましい。
【０００４】
多くの中枢作用性のＣＢ−１受容体アンタゴニスト／逆アゴニストは、肥満および／または他の障害の治療のために研究されている。例えば、特許文献１は、ＣＢ−１アンタゴニストとして特定の置換ピロリジン−２−オン化合物を開示している。
【０００５】
経口投与は典型的に、肥満および／または統合失調症の治療のための薬剤についての好ましい投与経路である。良好な経口バイオアベイラビリティを示す化合物に関して、それらは典型的に、肝臓における初回通過分解を最小化するために、良好な水溶解度および十分な代謝的安定性を有さなければならない。内因性カンナビノイドリガンドおよびＣＢ−１受容体においてそれらが結合する相補的部位は、高い親油性である。結果として、公知のＣＢ−１受容体リガンドもまた、親油性である傾向があり、不十分な溶解性を生じる。また、多くのＣＢ−１受容体リガンドは、比較的、代謝的に不安定である。多くのＣＢ−１化合物のこれらの溶解性および／または代謝特性は、制限された経口吸収およびバイオアベイラビリティを生じる。
【０００６】
一部の化合物の酸化的代謝は、反応性の求電子性代謝中間体の形成を生じる場合がある。このような中間体は、タンパク質、グルタチオン、ＤＮＡ、ＲＮＡなどの身体における他の求核試薬と反応する傾向があり、それらは、望ましくない毒性効果を生じ得る。
【０００７】
治療剤の薬物動態特性は、他の薬剤の同時投与により影響を受ける場合がある。これらのいわゆる薬物−薬物相互作用は、薬剤の許容性および／または効果に関する問題を引き起こす、治療剤の血漿曝露の増加または減少のいずれかを生じる場合がある。飽和機構を介して代謝的に除かれる化合物（例えば、ＣＹＰ３Ａ４、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｃ９、およびＣＹＰ１Ａ２）は特に、このような薬物−薬物相互作用を被る傾向がある。反対に、これらの飽和機構を阻害する化合物は、このような薬物−薬物相互作用を引き起こす傾向がある。一部の公知のＣＢ−１アンタゴニスト／逆アゴニストは、このような傾向を示す。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００７／０２０５０２号パンフレット
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｐａｃｈｅｒら，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．，２００６，５８，３８９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
ＣＢ−２受容体より高い選択性を有し、高いインビボでの有効性（低いｎＭ  Ｋｂ）を有し、許容可能なバイオアベイラビリティを有し、反応性の代謝中間体を形成せず、薬物−薬物相互作用の可能性を減少させる、ＣＢ−１受容体アンタゴニストまたは逆アゴニストについての必要性が存在する。本発明の化合物は、これらの利点の一部または全てを提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物
【化１】
0005539323.tif 000002
（式中、
Ｒ１は、水素、クロロ、シアノ、トリフルオロメチル、ジフルオロメトキシ、およびトリフルオロメトキシからなる群より選択され、
Ｒ２は、水素、ハロ、シアノ、１〜５個のフルオロ基で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、および１〜５個のフルオロ基で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシからなる群より選択され、
Ｒ３は、水素、フルオロ、およびクロロからなる群より選択され、
Ｒ４は、トリフルオロメチル、シアノおよびシクロプロピルからなる群より選択され、
ただし、Ｒ１が水素、クロロ、シアノ、またはトリフルオロメチルである場合、Ｒ２は、１〜５個のフルオロ基で置換された（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシである）
およびその薬理学的に許容できる塩を提供する。
【００１２】
当業者は、本発明の化合物が、特定の水素原子の異なる結合点を有する形態で存在することができるので、互変異性であることを認識するだろう。個々の互変異性体およびそれらの混合物は、具体的に描かれる場合、式（Ｉ）の化合物の範囲内であることが意図される。互変異性体の各々の形態が、指定された条件下で、存在し、相互変換し、互変異性化を受けてもよい。
【００１３】
本発明の別の態様は、式（Ｉ）による化合物、またはその薬理学的に許容できる塩、および薬理学的に許容できる担体、希釈剤または賦形剤を含む、医薬組成物を提供する。
【００１４】
本発明のこの態様の一実施形態は、式（Ｉ）による化合物、またはその薬理学的に許容できる塩、および薬理学的に許容できる担体、希釈剤または賦形剤を含む、医薬組成物を提供し、ここで、式（Ｉ）の化合物またはその塩の単一の立体異性体の光学純度は、９０％より高く、好ましくは９５％より高く、例えば９９％より高い。
【００１５】
本発明の別の態様は、治療に使用するための、式（Ｉ）による化合物、またはその薬理学的に許容できる塩を提供する。
【００１６】
本発明のこの態様の一実施形態は、過剰食物摂取に関連する摂食障害、体重増加、肥満、統合失調症、統合失調症に関連する認識機能障害、統合失調症に関連する陰性症状、薬物乱用、アルコール依存症、および／または抗精神病薬での治療に関連する体重増加の治療、あるいは禁煙支援に使用するための、式（Ｉ）による化合物、またはその薬理学的に許容できる塩を提供する。
【００１７】
本発明のこの態様の別の実施形態は、体重増加、肥満、統合失調症、統合失調症に関連する認識機能障害、統合失調症に関連する陰性症状、および／または抗精神病薬での治療に関連する体重増加のための治療において、抗精神病薬とともに同時、別々、または連続的に併用療法に使用するための式（Ｉ）による化合物、またはその薬理学的に許容できる塩を提供する。
【００１８】
本発明の別の態様において、過剰食物摂取に関連する摂食障害、体重増加、肥満、統合失調症、統合失調症に関連する認識機能障害、統合失調症に関連する陰性症状、薬物乱用、アルコール依存症、および／または抗精神病薬での治療に関連する体重増加の治療、あるいは禁煙支援のための医薬の製造における、式（Ｉ）による化合物、またはその薬理学的に許容できる塩の使用が提供される。
【００１９】
本発明のこの態様の一実施形態は、体重増加、肥満、統合失調症、統合失調症に関連する認識機能障害、統合失調症に関連する陰性症状、および／または抗精神病薬での治療に関連する体重増加のための併用療法に使用するための医薬の製造における、式（Ｉ）による化合物、またはその薬理学的に許容できる塩の使用を提供し、ここで、前記医薬は、抗精神病薬とともに同時、別々または連続して投与される。
【００２０】
本発明のこの態様の別の態様において、哺乳動物、特にヒトにおける過剰食物摂取に関連する摂食障害、体重増加、肥満、統合失調症、統合失調症に関連する認識機能障害、統合失調症に関連する陰性症状、薬物乱用、アルコール依存症、および／または抗精神病薬での治療に関連する体重増加の治療、あるいは禁煙支援のための方法が提供され、そのような治療を必要とする哺乳動物に、有効量の式（Ｉ）による化合物またはその薬理学的に許容できる塩を投与することを含む。
【００２１】
本発明のこの態様の別の実施形態は、ヒトにおける体重増加、肥満、統合失調症、統合失調症に関連する認識機能障害、統合失調症に関連する陰性症状、および／または抗精神病薬での治療に関連する体重増加を治療するための方法を提供し、そのような治療を必要とするヒトに、有効量の式（Ｉ）による化合物またはその薬理学的に許容できる塩を、抗精神病薬とともに同時、別々または連続して投与することを含む。
【００２２】
さらに、本発明は、過剰食物摂取に関連する摂食障害、体重増加、肥満、統合失調症、統合失調症に関連する認識機能障害、統合失調症に関連する陰性症状、薬物乱用、アルコール依存症、および／または抗精神病薬での治療に関連する体重増加の治療、あるいは禁煙支援のために適合された医薬製剤を提供し、その医薬製剤は、薬理学的に許容できる担体、希釈剤または賦形剤と併せて式（Ｉ）の化合物、またはその薬理学的に許容できる塩を含む。
【００２３】
抗精神病薬での同時、別々、または連続的な併用療法における本発明の化合物の使用において、非定型抗精神病薬、例えばオランザピン、クロザピン、および／またはリスペリドンが好ましい。
【００２４】
式（Ｉ）の化合物は、ＣＢ−１受容体についての選択的逆アゴニストまたはアンタゴニストである。その化合物は特に、ＣＢ−２受容体よりもＣＢ−１受容体に対して選択的である。ＣＢ−１受容体の逆アゴニスト（またはアンタゴニスト）として、その化合物は、ＣＢ−１受容体に関連する症状の治療および／または予防に有用である。そのような症状としては、例えば、過剰食物摂取に関連する摂食障害、肥満、統合失調症、特に統合失調症に関連する陰性症状、例えば統合失調に関連する認識機能障害、薬物乱用、アルコール依存症、禁煙および抗精神病薬での治療に関連する体重増加が挙げられる。ＤＳＭ−ＩＶ−ＴＲ．，Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｒｅｖｉｓｅｄ，第４版，Ｔｅｘｔ  Ｒｅｖｉｓｉｏｎ（２０００）を参照のこと。当業者は、病的な精神状態に関して、代替の体系、疾病分類学、および分類系が存在し、それらの系が医科学の進歩とともに進化することを認識するだろう。
【００２５】
式（Ｉ）の化合物はまた、被験体が臨床的に肥満として分類され得る関連する体重増加であるか否かに関わらず、体重増加を改善するために使用されてもよい。
【００２６】
本発明の別の態様は、体重の減少を誘発する美容的方法を提供し、その方法は式（Ｉ）の化合物をヒトに投与することを含む。
【００２７】
有効量の式（Ｉ）の化合物が、本方法の治療を実施するために、そのような治療または予防を必要とする被験体に投与され得る。本発明の方法による予防的投与についての必要性は、周知の危険因子の使用を介して決定される。個々の化合物の有効量は、治療を担当する医師によって、最終的な分析において決定されるが、治療される障害、障害の重症度、および存在する他の疾患または症状、選択される投与経路、患者が併用して必要とされ得る他の薬物および治療などの要因、ならびに医師の判断における他の要因に依存する。式（Ｉ）の化合物の治療的または予防的用量の程度は、もちろん、患者の大きさおよび年齢、治療される症状の性質および重症度、使用される特定の化合物、ならびに所望の投与経路により変化するだろう。
【００２８】
用量は１日１回の用量で投与されてもよいか、または１日総投与量が、分割された複数回投与量、例えば、１日あたり２回、３回または４回として投与されてもよい。さらに、投薬形態（すなわち、調節された放出）の投与および／または特性について選択される個々の化合物の性質に基づいて、用量が、少ない頻度、例えば、週に１回、２週に１回、月に１回などで投与されてもよい。それに応じて、用量単位は少ない頻度の投与に関して、より大きくてもよい。経皮経路を介して、または連続的な静脈注射用の溶液によって投与される場合、用量投与は、もちろん、投薬計画全体にわたって断続的というよりむしろ連続的であるだろう。
【００２９】
上記および本発明の詳細な説明全体にわたって用いる場合、以下の用語は、他に示されない限り、以下の意味を有する。
【００３０】
本明細書で用いる場合、用語「（Ｃ１−Ｃ３）アルキル」とは、メチル、エチル、プロピル、およびイソプロピルを指す。
【００３１】
「ハロ」とは、フルオロ、クロロ、またはブロモを指す。
【００３２】
「（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ」とは、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、およびイソプロポキシを指す。
【００３３】
「逆アゴニスト」とは、受容体の構成的活性を反転することによって負の内因性活性を有するそれらの化合物を指す。逆アゴニストは、アゴニストの活性を阻害または反転するように作用する。
【００３４】
「肥満」とは、多くの量の身体の脂肪を有する状態を指す。男性または女性が３０ｋｇ／ｍ２以上の肥満度指数（ＢＭＩ）を有する場合、ヒトは肥満であるとみなされる。ＢＭＩ＝２７〜３０を有するヒトは一般に過体重とみなされる。通常、正常な体重を有するそれらのヒトは、１９．９〜２６．９のＢＭＩを有する。肥満は、遺伝的または環境的に関わらず、あらゆる要因に起因し得る。肥満を生じ得るか、または肥満の要因となり得る障害の例としては、過食、低下した身体活動および低下した代謝活性を示す病状が挙げられる。本発明はＢＭＩ標準による肥満の正確な定義によって影響を受けず、全てのそのような定義は同等とみなされる。
【００３５】
形容詞として本明細書で用いる場合、用語「薬理学的」または「薬理学的に許容できる」とは、受容者に対して実質的に非毒性で、実質的に有害でないことを意味する。
【００３６】
「医薬組成物」とは、さらに、担体、溶媒、賦形剤、および／または塩が、組成物（例えば式（Ｉ）の化合物）の活性成分と適合性でなければならないことを意味する。用語「医薬製剤」および「医薬組成物」は一般に交換可能であり、それらは本出願の目的のために使用されることは、当業者により理解される。本発明による医薬組成物は式（Ｉ）の１つ以上の化合物を有し、所定の医薬組成物に望まれる場合、１つ以上の他の活性成分も含み得ることもまた、理解されるだろう。
【００３７】
（肥満または体重増加の）「予防」とは、肥満の症状の発症前に治療が施される場合、肥満を生じることを防ぐことを指す。さらに、治療が、すでに肥満の被検体に開始される場合、そのような治療は、さらなる体重増加の進行を予防することが予期される。このような予防の一例は、抗精神病薬で治療を受けているヒトにおけるさらなる体重増加を予防することである。
【００３８】
本明細書で用いる略語は以下のように定義される。
「ＴＨＦ」とはテトラヒドロフランを意味する。
「ＭＴＢＥ」とはメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを意味する。
「ＨＯＡｃ」とは酢酸を意味する。
「Ｅｔ２Ｏ」とはジエチルエーテルを意味する。
「ＢＳＡ」とはウシ血清アルブミンを意味する。
「ＧＤＰ」とはグアノシン二リン酸を意味する。
「ＧＴＰ」とはグアノシン−５’−三リン酸を意味する。
「ＧＴＰ−γ３５Ｓ」とはグアノシン−５’（γ−チオ）−三リン酸を意味する。
「ＨＥＰＥＳ」とは（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）を意味する。
「ＨＯＡｃ」とは酢酸を意味する。
「ｉ．ｖ」または「ｉｖ」とは静脈内を意味する。
「ｐ．ｏ．」または「ｐｏ」とは経口を意味する。
「ＴＨＦ」とはテトラヒドロフランを意味する。
「Ｔｒ」とは保持時間を意味する。
【００３９】
本発明の化合物の全ては、ＣＢ−１逆アゴニスト（またはアンタゴニスト）として有用であるが、特定の種類、例えば、以下に列挙した置換基の選択のいずれかを有する化合物が好ましい。
１）Ｒ１は−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、−ＣＦ３または−ＣＮである。
２）Ｒ１は−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２または−ＣＦ３である。
３）Ｒ１は−ＯＣＦ３または−ＯＣＨＦ２である。
４）Ｒ１は−ＯＣＦ３または−ＣＦ３である。
５）Ｒ２は水素、フルオロ、クロロ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、または１，１，２，２−テトラフルオロエトキシである。
６）Ｒ２はトリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、または１，１，２，２−テトラフルオロエトキシである。
７）Ｒ２はトリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、または１，１，２，２−テトラフルオロエトキシであり、Ｒ３は水素である。
８）Ｒ２は−ＯＣＦ３または−ＣＦ３である。
９）Ｒ２は−ＯＣＦ３または−ＣＦ３であり、Ｒ３は水素である。
１０）Ｒ２は−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、または１，１，２，２−テトラフルオロエトキシである。
１１）Ｒ２は−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２、または１，１，２，２−テトラフルオロエトキシであり、Ｒ３は水素である。
１２）Ｒ３は水素である。
１３）Ｒ４は−ＣＦ３である。
１４）Ｒ１は−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２であり、Ｒ２は水素、フルオロ、クロロ、シアノ、トリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、または１，１，２，２−テトラフルオロエトキシである。
１５）Ｒ１は−ＯＣＦ３、−ＯＣＨＦ２であり、Ｒ２はトリフルオロメチル、１，１−ジフルオロエチル、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、または１，１，２，２−テトラフルオロエトキシであり、Ｒ３は水素である。
１６）Ｒ１は−ＯＣＦ３、−ＣＦ３または−ＣＮであり、Ｒ２は水素、−ＯＣＦ３または−ＣＦ３であり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は−ＣＦ３である。
１７）Ｒ１は−ＯＣＦ３または−ＣＦ３であり、Ｒ２は水素、−ＯＣＦ３または−ＣＦ３であり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は−ＣＦ３である。
１８）Ｒ１は−ＯＣＦ３、−ＣＦ３または−ＣＮであり、Ｒ２は−ＯＣＦ３または−ＣＦ３であり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は−ＣＦ３である。
１９）Ｒ１は−ＯＣＦ３または−ＣＦ３であり、Ｒ２は−ＯＣＦ３または−ＣＦ３であり、Ｒ３は水素であり、Ｒ４は−ＣＦ３である。
【００４０】
本発明の特定の好ましい化合物は、本明細書の実施例に記載されるものであり、それらの化合物の遊離塩基および薬理学的に許容できる塩を含む。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
一般的スキーム
本発明の化合物は、当該分野において周知かつ理解されている方法によって以下の合成スキームに従って調製できる。これらのスキームの工程の適切な反応条件は当該分野において周知であり、溶媒および共試薬の適切な置換は当該分野の技術範囲内である。同様に、合成中間体が、必要または望まれる場合、様々な周知の技術によって分離および／または精製され得ること、およびしばしば、ほとんどまたは全く精製せずに後の合成工程において様々な中間体を直接使用することが可能であることは、当業者によって理解されるだろう。さらに、当業者は、一部の状況において、導入する部分の順序が重要でないことを理解するだろう。式Ｉの化合物を生成するのに必要とされる工程の特定の順序は、熟練した化学者によってよく理解されているように、合成される特定の化合物、出発化合物、および置換された部分の相対的不安定性に依存する。他に示さない限り、全ての置換基は以前に定義される通りであり、全ての試薬は当該分野において周知かつ理解されている。
【００４２】
【化２】
0005539323.tif 000003
スキーム１において、式（ＩＩ）の化合物は、Ａｎｄｒｅｉｃｈｉｋｏｖおよび共同研究者（Ａｎｄｒｅｉｃｈｉｋｏｖら，Ｚｈｕｒｎａｌ  Ｏｒｇａｎｉｃｈｅｓｋｏｉ  Ｋｈｉｍｉｉ  ２２（１０），２２０８−１３（１９８６））に記載される方法によって調製でき、それにおいて、式（１）のアミンと式（２）のアルデヒドとの混合物は、氷冷ＨＯＡｃなどの適切な溶媒において、ピルビン酸（３）のエステルで処理される（ここで、Ｑ１はＣ１−３アルキル基である）。ピルビン酸の適切なエステルとしてはピルビン酸エチルが挙げられる。その反応は室温と溶媒の沸点との間の温度で進行できる。一部の場合において、生成物（ＩＩ）は、反応過程の間、または溶媒の添加時に沈殿する場合があり、その生成物は高い溶解性ではない。それらの溶媒としては、イソプロピルアルコールおよび水ならびにそれらの混合物が挙げられる。沈殿物が形成される場合、式（ＩＩ）の化合物は、濾過および真空乾燥により、または濾過およびクロマトグラフィーにより分離できる。あるいは、その化合物は、反応物の濃縮および残渣のクロマトグラフィーにより、または有機抽出物の水系後処理（ａｑｕｅｏｕｓ  ｗｏｒｋｕｐ）および濃縮およびクロマトグラフィーにより分離できる。
【００４３】
【化３】
0005539323.tif 000004
スキームＩＩにおいて、式（ＩＩＩ）の化合物は、必要に応じて酸の存在下で、水での式（ＩＩ）の化合物の処理によって調製できる。この反応はまた、必要に応じて、テトラヒドロフラン、酢酸およびエタノールまたはそれらの混合物などのさらなる溶媒の存在下で実施できる。適切な酸としては、トリフルオロ酢酸および塩酸が挙げられる。少なくとも１当量の２，５−ジメトキシテトラヒドロフランの存在下で、この反応を実施することがしばしば有利である。式（ＩＩＩ）の化合物が一旦形成されると、それは、水を加え、冷却して、沈殿物を形成させ、その後、その沈殿物を濾過により分離することによって、またはトルエンおよびイソプロピルアセテートなどの溶媒の混合物を加え、水および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄することによって分離できる。有機層は、硫酸ナトリウムなどの乾燥剤で乾燥し、濃縮して、粗混合物として生成物を得ることができる。有機層はまた、さらに濃縮または精製せずに、次の反応において直接使用できる。
【００４４】
【化４】
0005539323.tif 000005
スキームＩＩＩにおいて、式（ＩＶ）の化合物は、トルエン、メタノール、イソプロピルアセテートまたはそれらの溶媒の混合物などの適切な溶媒において、式（４）の化合物での式（ＩＩＩ）の化合物の溶液の処理によって調製できる。この反応はまた、ＨＯＡｃなどの触媒の存在下で実施できる。式（ＩＶ）の化合物は、所望の場合、沈殿またはシリカゲルクロマトグラフィーなどの当該分野において公知の方法によって、分離できる。
【００４５】
【化５】
0005539323.tif 000006
スキームＩＶにおいて、式（Ｉａ）の化合物は、適切な還元条件下で式（ＩＶ）の化合物の処理によって形成できる。適切な還元条件としては、テトラヒドロフランなどの溶媒中のＨＯＡｃの存在下でのＮａＣＮＢＨ３での処理が挙げられる。式（Ｉａ）の化合物は、生成物の水系後処理または沈殿などの手段によって分離できる。さらなる精製は、シリカゲルクロマトグラフィーなどの技術の使用によって実施できる。
【００４６】
式（Ｉａ）の化合物の合成において、式（ＩＩＩ）または式（ＩＶ）の中間体のいずれかは、粗中間体を精製せずに後の反応において直接使用できる。
【００４７】
式（Ｉａ）の化合物の単一の鏡像異性体は一般に、対応するラセミ体より好ましい。これらの鏡像異性体は、キラル固定相を利用する分取クロマトグラフィーなどの技術を用いる式（Ｉａ）の化合物の分解によって調製できる。鏡像異性体はまた、光学的に活性な酸でのラセミ混合物の塩の形成を含む分解および所望のジアステレオマー塩の精製によって調製できる。所望のジアステレオマー塩は、結晶化により精製できる。あるいは、式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の中間体のいずれかは、分解されて、式（Ｉ）の化合物などの式（Ｉａ）の化合物の鏡像異性的に精製された形態でその式（Ｉａ）の化合物を得るために、上記の方法を用いて次に変換され得る実質的に単一の鏡像異性体を得ることができる。式（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の中間体は、キラル固定相を利用する分取クロマトグラフィーなどの技術を用いて対応するラセミ化合物の化合物の分解によって調製できる。
【００４８】
【化６】
0005539323.tif 000007
式（ＩＩＩ）の化合物の精製された鏡像異性体の調製のための代替かつしばしば好ましい方法をスキームＶに概説する。式（ＩＩＩ）のラセミ化合物を、式（５）の化合物と反応する（ここで、式（Ｖａ）および（Ｖｂ）の化合物のジアステレオマー混合物を形成するためにＱ２は水素またはハロである）。式（５）の好ましい化合物としては、Ｒ−α−メチルベンジルアミンまたはＳ−α−メチルベンジルアミンが挙げられる。この濃縮は、不活性溶媒中で式（ＩＩＩ）の化合物と化合物（５）を混合することによって、スキームＩＩＩにおいて以前に記載されるように実施できる。この反応はまた、ＨＯＡｃなどの触媒の存在下で実施できる。次いで、式（Ｖａ）および（Ｖｂ）のジアステレオマーを、シリカゲルクロマトグラフィーまたはイソプロパノールもしくはメタノール／ＫＯＨなどの不活性溶媒からの結晶化などの技術を用いて分離する。次いで、スキームＶにおける所望のジアステレオマー（（Ｖａ）と指定）を加水分解して、式（ＩＩＩａ）の精製された鏡像異性体を形成させる。適切な加水分解条件としては、塩酸水溶液またはトリフルオロ酢酸ならびに水および必要に応じて２，５−ジメトキシテトラヒドロフランでＨＯＡｃ中の所望のジアステレオマーの溶液を処理することが挙げられる。一部の場合において、粗（ＩＩＩａ）は、十分な量の式（ＶＩ）の二量体を含み得る。
【００４９】
スキームＶにおいて、式（ＩＩＩ）のラセミ化合物は、スキームＩＩに概説したプロセスから生じる粗生成物であってもよい。さらに、式（ＩＩＩａ）の精製された鏡像異性体（必要に応じて（ＶＩ）を含む）は、スキームＩＩＩに概説したプロセスにおいて、さらに精製せずに、加水分解反応から直接使用できる。
【００５０】
スキームＶにおいて、化合物（５）の（Ｒ）−鏡像異性体を、プロセスを例示するために選択した。当業者は、化合物（５）の（Ｓ）−鏡像異性体もまた、このプロセスにおいて使用できることを認識するだろう。（Ｒ）または（Ｓ）鏡像異性体を使用するか否かの選択は、より容易に分離される所望のジアステレオマーを生じることに依存して行われ得る。
【００５１】
【化７】
0005539323.tif 000008
スキームＶＩにおいて、式（ＩＶｂ）の化合物はまた、化合物（ＩＩＩ）と（４）との反応（スキームＩＩＩ）について記載されるものと同じ条件下で化合物（４）での式（ＶＩ）の化合物の処理によって形成できる。
【００５２】
【化８】
0005539323.tif 000009
スキームＶＩＩにおいて、化合物（４）は、酸の存在下でアセトニトリルでの化合物（９）（式中、Ｒ１０は、水素、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３または−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３である）の処理によって調製されて、式（１０）の化合物を得る。適切な酸としては、硫酸または三フッ化ホウ素エーテルなどの適切なルイス酸が挙げられる。上記を混合した後、反応物を加熱し、ほぼ室温まで冷却し、水酸化ナトリウム水溶液でクエンチする。化合物（１０）は、酢酸エチルなどの適切な溶媒での抽出および有機層の濃縮などの従来の手段により分離される。化合物（１０）を約１００℃まで塩酸水溶液中で加熱する。その化合物をジエチルエーテルで抽出する。水層を水酸化ナトリウム水溶液でアルカリ性にし、ジエチルエーテルで抽出する。有機層を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して化合物（４）を得る。
【００５３】
（調製物および実施例）
「調製物および実施例」を通して参照される高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法の条件を以下に示す。
【００５４】
（方法１）
ＬＣカラム：  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）  Ｇｅｍｉｎｉ（登録商標）Ｃ１８  ２．０×  ５０ｍｍ  ３．０μＭ
グラジェント：  重量５〜１００％のアセトニトリル／０．１％の蟻酸で７．０分間。その後、１００％にて１分間保持。
カラム温度：  ５０ｏＣ＋／−１０ｏＣ
オートサンプラー温度：周囲温度
フローレート：  １．０ｍＬ／分
シグナルを２１４および３００ｎＭの波長にて検出。
【００５５】
（方法２）
ＬＣカラム：  Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）  Ｇｅｍｉｎｉ（登録商標）Ｃ１８  ２．０×  ５０ｍｍ  ３．０μｍ
グラジェント：  重量５〜１００％のアセトニトリル／０．１％の蟻酸で３．５分間。その後、１００％にて０．５分間保持。
カラム温度：  ５０ｏＣ＋／−１０ｏＣ
オートサンプラー温度：  周囲温度
フローレート：  １．０ｍＬ／分
シグナルを２１４および３００ｎＭの波長にて検出。
【００５６】
（方法３）
ＬＣカラム：  Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）ＲＸ−Ｃ１８  ４．６×  ２５０ｍｍ  ５μｍ
グラジェント：  重量５０〜９０％のアセトニトリル／０．０３Ｍのリン酸バッファー（リン酸バッファー＝５．５２ｇのＮａＨ２ＰＯ４および１．４ｍＬのＨ３ＰＯ４入りの２ＬのＭｉｌｌｉ−Ｑ水）で１５分間。
カラム温度：  ４０℃
オートサンプラー温度：  周囲温度
フローレート：  １．５ｍＬ／分
シグナルを２６０ｎＭの波長にて検出。
【００５７】
（方法４）
ＬＣカラム：  Ｚｏｒｂａｘ（登録商標）ＳＢ−フェニル  ４．６×  １５０ｍｍ  ５μｍ
アイソクラテック：  ３６％のＡおよび６４％のＢ、ここで、Ａ＝０．０５ＭのＮＨ４ＯＡｃ入り水（ｐＨ５．０）およびＢ＝アセトニトリルで１０分間。
カラム温度：  ３５℃
オートサンプラー温度：  周囲温度
フローレート：  ２．０ｍＬ／分
シグナルを２０６ｎＭの波長にて検出。
【００５８】
調製物１：  （±）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン
【化９】
0005539323.tif 000010
３−（トリフルオロメトキシ）−ベンズアルデヒド（２５．０ｇ，１３２ｍｍｏｌ）およびピルビン酸エチル（１５．３ｇ，１３２ｍｍｏｌ）を氷酢酸（１２５ｍＬ）内で周囲温度にて１０分間撹拌する。４−（トリフルオロメチル）アニリン（４６．７ｇ，２９０ｍｍｏｌ）液滴を１５分間以上撹拌したまま加え、溶液を３０℃まで温め、約２２時間撹拌する。溶液を２６℃まで冷却し、イソプロパノール（１２５ｍＬ）および水（１２５ｍＬ）を加える。溶液を室温にて１５分間撹拌し、沈殿物を濾過し、イソ−プロピルアルコール−水の１：１の混合物（１００ｍＬ×２）で洗浄する。真空下で４０℃にて乾燥し、（±）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（６０．４６ｇ，８４％）を白色粉末として得る。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５４５．１（Ｍ−Ｈ）−，Ｒｔ＝１０．９分間、方法３。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．７６（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．７０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．５６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．４７（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５Ｈｚ），７．４４〜７．４１（ｍ，１Ｈ），７．３７（ｓ，１Ｈ），７．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），６．６６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），６．２９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．５Ｈｚ）。
【００５９】
調製物２：  （±）−５−フェニル−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン
【化１０】
0005539323.tif 000011
４−（トリフルオロメトキシ）アニリン（１．８６Ｌ，１３．７５ｍｏｌ）を、ベンズアルデヒド（５５９ｍＬ，５．５０ｍｏｌ）およびピルビン酸エチル（６０５ｍＬ，５．５０ｍｏｌ）入りの氷酢酸（５．０Ｌ）の溶液に分けて加える。４３℃まで発熱を観察する。周囲温度にて１８時間撹拌する。沈殿物を濾過し、ウェットケーキを氷酢酸（５００ｍＬ）で洗浄する。真空下で３時間乾燥し、（±）−５−フェニル−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（１９９９ｇ，７４％）を白色結晶性固体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４３（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，２Ｈ），７．１９〜７．３８（ｍ，１１Ｈ），６．４２（ｓ，１Ｈ），６．０８（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ４９５．０（Ｍ＋１）＋，４９３．０（Ｍ−１）−，Ｔｒ＝６．６０分間、方法１。
【００６０】
調製物３：  （±）−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン
【化１１】
0005539323.tif 000012
３−フルオロベンズアルデヒド（１０．０ｍＬ，９４．３ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメトキシ）アニリン（３１．９ｍＬ，２３５．７ｍｍｏｌ）およびピルビン酸エチル（１０．４ｍＬ，９４．３ｍｍｏｌ）を氷酢酸（１５０ｍＬ）内で混合する。周囲温度にて１８時間撹拌する。沈殿物を濾過し、ヘキサンで洗浄し、（±）−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（２３．４ｇ，４８％）を得る。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５１１（Ｍ−１）−，Ｔｒ＝５．４５分間、方法１。
【００６１】
調製物４：  １−（４−トリフルオロメチルフェニル）−３−［（１Ｒ）−１−（４−クロロフェニル）−エチルアミノ］−５（Ｒ）−（３−トリフルオロメトキシフェニル）−１，５−ジヒドロピロール−２−オン
【化１２】
0005539323.tif 000013
エタノール（１２０ｍＬ）、氷酢酸（１５ｍＬ）、水（３．０ｍＬ，１６４．７ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（６．２ｍＬ，８２．４ｍｍｏｌ）、（±）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−（４−トリフルオロメチル−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（３０．０ｇ，５４．９ｍｍｏｌ）、および２，５−ジメトキシ−テトラヒドロフラン（１０．７ｍＬ，８２．４ｍｍｏｌ）を混合する。溶液を５０℃まで温め、反応混合物を１８時間撹拌する。溶液の加熱を終了し、水（３５ｍＬ）を加え、−１９℃まで反応混合物を冷却する。スラリーを濾過し、固体を水−メタノールの１：４の混合物（２０ｍＬ）で洗浄する。濾過物を分液漏斗に移し、６％の塩水（２８０ｍＬ）で洗浄し、６％の塩水（１００ｍＬ）、メタノール（４０ｍＬ）、ジエチルエーテル（１００ｍＬ）、および飽和炭酸水素ナトリウム溶液（４３ｍＬ）を有機相に加える。層を分離し、メタノール（６０ｍＬ）を有機相に加え、溶液を（±）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２，３−ジオンを含有する約１容量まで濃縮する。メタノール（６０ｍＬ）および（Ｒ）−４−クロロ−α−メチルベンジルアミン（７．８ｍＬ，５５．０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて２４時間撹拌する。ＨＰＬＣによる反応の完了をモニターし（方法４）、その後、溶液を−７℃まで冷却し、この温度で７２時間撹拌を続ける。予め混合した水酸化カリウム（０．６９ｇ，１０．５ｍｍｏｌ）入りのメタノール（１１ｍＬ）の溶液を反応混合物に加え、溶液を１０℃まで温め、更に４時間撹拌する。溶液を−７℃まで冷却し、スラリーを濾過し、終局産物をメタノール（５ｍＬ×３）でリンスする。固体を真空下で乾燥し、１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−［１（Ｒ）−（４−クロロ−フェニル）−エチルアミノ］−５（Ｒ）−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（１２．３ｇ，４７．７％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５３９．０（Ｍ−Ｈ）−，Ｔｒ＝４．３分間、方法４。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７６（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．５  Ｈｚ），７．６２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．０Ｈｚ），７．３８〜７．３６（ｍ，２Ｈ），７．３０〜７．２７（ｍ，３Ｈ），７．１０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．５，１．０Ｈｚ），７．０５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），６．９５（ｓ，１Ｈ），６．０６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），５．９６（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），５．２２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），４．３５〜４．３２（ｍ，１Ｈ），１．４３（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．５Ｈｚ）。
【００６２】
調製物５：  １−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−５（Ｒ）−フェニル−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン
【化１３】
0005539323.tif 000014
酢酸（４６４ｍＬ，８．０９ｍｏｌ）、２，５−ジメトキシテトラヒドロフラン（３９３ｍＬ，３．０３ｍｏｌ）、水（２．２７Ｌ）、および、トリフルオロ酢酸（１５３ｍＬ，２．０２ｍｏｌ）を、（±）−５−フェニル−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（１０００ｇ，２．０２ｍｏｌ）入りのＴＨＦ（８．４３Ｌ）の溶液に連続的に加える。反応混合物を周囲温度にて１８時間混合する。トルエン（４．０Ｌ）および酢酸イソプロピル（２．０Ｌ）を加える。混合物を水（８．０Ｌ）および飽和炭酸水素ナトリウム溶液（６．０Ｌ）で洗浄する。水層は捨てる。有機層に（Ｒ）−（＋）−α−メチルベンジルアミン（３９０ｍＬ，３．０３ｍｏｌ）を加える。溶液を周囲温度にて３時間撹拌する。反応混合物を濃縮し、１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−（５）−（Ｓ）−フェニル−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン、および、１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−（Ｒ）−５−フェニル−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オンの混合物をブラックオイルとして得る。混合物（８８８ｇ，２．０２ｍｏｌ）をイソプロパノール（２．０Ｌ）に溶解し、−７℃まで冷却する。沈殿物を濾過し、冷イソプロパノールで洗浄する。真空下で１２時間乾燥し、１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−（Ｒ）−５−フェニル−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（１３０ｇ，２９％）をオフホワイト固体として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．６４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），７．２４（ｍ，４Ｈ），７．１１（ｍ，４Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，２Ｈ），５．７８（ｍ，２Ｈ），５．１３（ｓ，１Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），１．４４（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ４３９（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝６．３０分間、方法１。
【００６３】
調製物６：  １−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−５（Ｒ）−（３−フルオロ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン
【化１４】
0005539323.tif 000015
水（４６．８ｍＬ，２．６ｍｏｌ）、酢酸（１０．５ｍＬ，１８２．７ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（６．９ｍＬ，９１．３ｍｏｌ）、および、２，５−ジメトキシテトラヒドロフラン（６．５ｍＬ，５０．２ｍｍｏｌ）を、（±）−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（４−トリフルオロメトキシ−フェニルアミノ）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（２３．４ｇ，４５．７ｍｍｏｌ）入りのＴＨＦ（４５ｍＬ）の溶液に加える。反応混合物を３０℃にて１８時間撹拌する。（Ｒ）−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２，３−ジオンの顕著な形成を観察する（ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ３５２（Ｍ−Ｈ）−，方法１）。反応混合物をトルエン（２００ｍＬ）、酢酸イソプロピル（５０ｍＬ）、および、水（１００ｍＬ）へ注ぎ、５分間撹拌する。層を分離し、水（５０ｍＬ）および５％の炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍＬ）で有機層を洗浄する。有機層に（Ｒ）−（＋）−α−メチルベンジルアミン（７．７ｍＬ，５９．９ｍｍｏｌ）を加える。溶液を周囲温度にて１８時間撹拌する。（Ｒ）−（＋）−α−メチルベンジルアミン（３．０ｍＬ，２４．８ｍｍｏｌ）を加え、３０℃で３時間加熱する。反応混合物を水および塩水で洗浄する。反応混合物を濃縮し、１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−５（Ｓ）−（３−フルオロ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン、および、１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−５（Ｒ）−（３−フルオロ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オンの混合物を得る。混合物をイソプロパノール（７０ｍＬ）に溶解し、周囲温度にて７２時間撹拌する。沈殿物を濾過し、イソプロパノールで洗浄し、１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−５（Ｒ）−（３−フルオロ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（６．３０ｇ，３０％）を白色固体として得る。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ４５７（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝５．１３分間、方法１。
【００６４】
調製物７：  ２−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オル
【化１５】
0005539323.tif 000016
ＴＨＦ（２００ｍＬ）およびメチル臭化マグネシウム（３．０Ｍのジエチルエーテル，８１ｍＬ，２４３ｍｍｏｌ）の溶液を０℃まで冷却する。トリフルオロメチルピリミジン−４−カルボン酸メチルエステル（１６．７ｇ，８１ｍｍｏｌ）入りのＴＨＦ（１００ｍＬ）の溶液に５分間以上加える。３０分間０℃にて撹拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液にゆっくりと注ぐ。ジエチルエーテルで水層を抽出し、有機層と混ぜ合わせ、硫酸ナトリウムを通して乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、２−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オル（１６．７ｇ，１００％）を無色透明オイルとして得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：  ２０７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６５】
調製物８：  Ｎ−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチル］−アセトアミド
【化１６】
0005539323.tif 000017
アセトニトリル（３００ｍＬ）および２−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オル（１６．５ｇ，８０ｍｍｏｌ）の溶液を９０℃まで加熱する。分離反応槽内で、アセトニトリル（７０ｍＬ）を０℃まで冷却し、硫酸（１９．２ｍＬ，３６０ｍｍｏｌ）を１０℃を超えない温度にて加える。冷却された硫酸溶液を加熱された２−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オルおよびアセトニトリルの溶液に加え、９０℃にて６０分間攪拌する。室温まで冷却し、元の容量の約１／３まで濃縮し、５ＮのＮａＯＨ水溶液（１５０ｍＬ）を加える。酢酸エチルおよび塩水間を分離し、その後、酢酸エチル（３×）で水層を抽出する。混ぜ合わされた有機層を減圧下で濃縮し、Ｎ−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチル］−アセトアミド（１５．４ｇ，７８％）を黄色固体として産出する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：  ２４８．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６６】
調製物９：  １−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミン
【化１７】
0005539323.tif 000018
Ｎ−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチル］−アセトアミド（１５．４ｇ，６２ｍｍｏｌ）および５ＮのＨＣｌ水溶液（１５０ｍＬ）の溶液を１００℃まで２０時間加熱し、その後、室温まで冷却する。反応物をジエチルエーテル（２×）で抽出しその後、５ＮのＮａＯＨ水溶液でアルカリン水層を作る。ジエチルエーテル（３×）で水層を抽出し、混ぜ合わされた有機層を硫酸ナトリウムを通して乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミン（７．２ｇ，５６％）をブラウンオイルとして得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ８．８０（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），１．７６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），１．４９（ｓ，６Ｈ）。
【００６７】
調製物１０：  （Ｅ）−４−エトキシ−２−オキソ−ブタ−３−エン酸エチルエステル
【化１８】
0005539323.tif 000019
参考文献：  Ｄｕｊａｒｄｉｎ，Ｇ；Ｒｏｓｓｉｇｎｏｌ，Ｓ．；Ｂｒｏｗｎ，Ｅ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９８，７６３−７７０。エチルクロロオキソ酢酸（６７ｍＬ，６００ｍｍｏｌ）をパラジウム酢酸（１．３５ｇ，６ｍｍｏｌ）、エチルビニルエーテル（３１５ｍＬ，３．３ｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（１２５ｍＬ，９００ｍｍｏｌ）の溶液に周囲温度にて加える。５５℃まで２４時間加熱し、室温まで冷却し、その後、反応混合物をジエチルエーテルおよび水の間で分離する。減圧下で有機層を濃縮し、（Ｅ）−４−エトキシ−２−オキソ−ブタ−３−エン酸エチルエステル（７２ｇ，７０％）をブラウンオイルとして得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ７．８４（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），６．１５（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．２９（ｑ，Ｊ＝７．６  Ｈｚ，２Ｈ），４．０３（ｑ，Ｊ＝６．８  Ｈｚ，２Ｈ），１．３４（ｍ，６Ｈ）。
【００６８】
調製物１１：  ２−シクロプロピル−ピリミジン−４−カルボン酸エチルエステル
【化１９】
0005539323.tif 000020
参考文献：  Ｒｉｌｅｙ，Ｔ．Ａ．；Ｈｅｎｎｅｎ，Ｗ．Ｊ．；Ｄａｌｌｅｙ，Ｎ．Ｋ．；Ｗｉｌｓｏｎ，Ｂ．Ｅ．；Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．，１９８７，２４，９５５−９６４。シクロプロピルカルバミジン塩酸塩（２．０５ｇ，１７ｍｍｏｌ）、（Ｅ）−４−エトキシ−２−オキソ−ブタ−３−エン酸エチルエステル（４．３９ｇ，２５．５ｍｍｏｌ）、エタノール（１２ｍＬ）、およびナトリウムエトキシド（１．１６ｇ，１７ｍｍｏｌ）の混合物を電子レンジ内で１４０℃にて２０分間加熱する。反応混合物を減圧下で濃縮し、酢酸エチルおよび塩水の間で残留物を分離する。有機層を分離し減圧下で濃縮する。残留物をシルカゲルクロマトグラフィー（１０〜３０％の酢酸エチル／ヘキサン）により精製し、２−シクロプロピル−ピリミジン−４−カルボン酸エチルエステル（１．５ｇ，４６％）をライトイエローオイルとして得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：  １９３．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００６９】
調製物１２：  ２−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オル
【化２０】
0005539323.tif 000021
ＴＨＦ（１５０ｍＬ）およびメチル臭化マグネシウム（３．０Ｍのジエチルエーテル，５２ｍＬ，２４３ｍｍｏｌ）の溶液を０℃まで冷却する。２−シクロプロピル−ピリミジン−４−カルボン酸エチルエステル（９．９ｇ，５２ｍｍｏｌ）入りのＴＨＦ（５０ｍＬ）の溶液を５分間以上加える。４５分間０℃にて攪拌し、その後、飽和塩化アンモニウム水溶液内へゆっくりと注ぐ。水層をジエチルエーテルで抽出し、混ぜ合わされた有機層を硫酸ナトリウムを通して乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、２−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オル（９．１５ｇ，１００％）をオレンジ色固体として得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：  １７９．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００７０】
調製物１３：  Ｎ−［１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチルエチル］−アセトアミド
【化２１】
0005539323.tif 000022
アセトニトリル（１５０ｍＬ）および２−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オル（８．８５ｇ，５０ｍｍｏｌ）の溶液を９０℃まで加熱する。分離反応槽内で、アセトニトリル（５０ｍＬ）を０℃まで冷却し、硫酸（１１．９ｍＬ，２２３ｍｍｏｌ）を１０℃を超えない温度にてを加える。冷却された硫酸溶液を加熱された２−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−プロパン−２−オルおよびアセトニトリルの溶液に加え、９５℃にて４日間撹拌する。室温まで冷却し、５ＮのＮａＯＨ水溶液（１００ｍＬ）を加える。水層を酢酸エチル（３×）で抽出する。減圧下で混ぜ合わされた有機層を濃縮し、Ｎ−［１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチル］−アセトアミド（４．５ｇ，４１％）をイエローオイルとして産出する。ＭＳ（ｍ／ｚ）：  ２２０．０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００７１】
調製物１４：  １−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチルアミン
【化２２】
0005539323.tif 000023
Ｎ−［１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチル］−アセトアミド（４．５ｇ，２０．５ｍｍｏｌ）および５ＮのＨＣｌ水溶液（１２５ｍＬ）の溶液を１００℃まで１８時間加熱する。混合物を室温まで冷却する。反応物をジエチルエーテル（２×）で抽出し、その後、アルカリン水層を５ＮのＮａＯＨ水溶液で作る。水層をジエチルエーテル（３×）で抽出し，混ぜ合わされた有機層を硫酸ナトリウムを通して乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチルアミン（１．３ｇ，３６％）をダークイエローオイルとして得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ８．４５（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），２．３０（ｍ，１Ｈ），１．７６（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），１．４１（ｓ，６Ｈ），１．０９（ｍ，２Ｈ），１．０２（ｍ，２Ｈ）。
【００７２】
調製物１５：  （Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン
【化２３】
0005539323.tif 000024
トリフルオロ酢酸（７．５６ｍＬ，１００ｍｍｏｌ）を１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−３−［（Ｒ）−１−（４−クロロ−フェニル）−エチルアミノ］−５（Ｒ）−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（１０．８ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）入りの酢酸（１００ｍＬ）および水（５ｍＬ）の溶液に加える。周囲温度にて６０分間撹拌する。（Ｒ）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２，３−ジオンの顕著な形成を観察する（ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ４２６（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｔｒ＝２．７６分間、方法２）。反応物をトルエン（２００ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）で希釈する。有機層を水および飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムを通して濾過する。酢酸（９．１７ｍＬ，１６０ｍｍｏｌ）および１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミン（４．５１ｇ，２２ｍｍｏｌ）を、（Ｒ）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２，３−ジオンを含有するこのトルエン溶液に加える。５５℃まで１８時間加熱する。反応混合物を減圧下で濃縮し、ダークパープルオイルを得る。残留物をシルカゲルクロマトグラフィー（２５％の酢酸エチル−ヘキサン）により精製し、（Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（７．７０ｇ，６５％）を紫色泡として得る。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ６１３（Ｍ＋Ｎａ）＋，Ｔｒ＝３．３５分間、方法２。
【００７３】
調製物１６：  （Ｒ）−３−［１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン
【化２４】
0005539323.tif 000025
標題の化合物を、１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチルアミンを用いて、調製物１５の方法において基本的に記載されるように調製する。収率３８％、ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５６３（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝３．４６分間、方法２。
【００７４】
実施例１：  （３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン
【化２５】
0005539323.tif 000026
（Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（７．５ｇ，１２．７ｍｍｏｌ）入りの酢酸（６０ｍＬ）およびＴＨＦ（１５ｍＬ）の溶液を０℃まで冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１．６０ｇ，２５．４ｍｍｏｌ）を加える。冷却槽を５分後に除去し、６０分間周囲温度にて撹拌する。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液内にゆっくりと注ぐ。有機層を分離し、減圧下で濃縮する。残留物をシルカゲルクロマトグラフィー（１５〜４０％の酢酸エチル−ヘキサン）により精製し、（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン（５．２０ｇ，６９％）を紫色泡として得る。紫色を除くために、（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オンをメタノール（１５０ｍＬ）に溶解し、活性炭を加える。周囲温度にて２０分間撹拌し、濾過し、減圧下で濃縮し、白色泡（４．６ｇ，８８％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ８．７９（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２７（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），５．０４（ｄｄ，Ｊ＝６．２，９．７Ｈｚ，１Ｈ），３．５１〜３．４５（ｍ，１Ｈ），２．９０〜２．８１（ｍ，１Ｈ），１．８９〜１．８１（ｍ，１Ｈ），１．５６（ｓ，３Ｈ），１．５０（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５９３（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝３．０７分間、方法２。
【００７５】
実施例２：  （３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−（２−シクロプロピル−ピリミジン−４−イル）−１−メチル−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン
【化２６】
0005539323.tif 000027
標題の化合物を、−１０℃における反応を維持し、シアノ水素化ホウ素ナトリウムの１当量を用いて、実施例１の方法において基本的に記載されるように調製する。収率４２％，１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．４６（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２８〜７．２４（ｍ，２Ｈ），７．０８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），５．００（ｄｄ，Ｊ＝６．２，１０．１Ｈｚ，１Ｈ），３．３６（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１０．６Ｈｚ，１Ｈ），３．３０〜３．２５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），２．８４〜２．７７（ｍ，１Ｈ），２．２３〜２．１６（ｍ，１Ｈ），１．９１〜１．８２（ｍ，１Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ），１．４２（ｓ，３Ｈ），１．１８〜１．０８（ｍ，２Ｈ），１．０５〜０．９７（ｍ，２Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５６５（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝２．４９分間、方法２。
【００７６】
実施例３：  （３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オン
【化２７】
0005539323.tif 000028
１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−３−（（Ｒ）−１−フェニル−エチルアミノ）−５（Ｒ）−（３−フルオロ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（６８５ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（４ｍＬ）、水（１ｍＬ）、２，５−ジメトキシテトラヒドロフラン（０．２３ｍＬ，１．８ｍｍｏｌ）、酢酸（０．３４ｍＬ，６．０ｍｍｏｌ）、およびトリフルオロ酢酸（０．２３ｍＬ，３．０ｍｍｏｌ）の混合物を３５℃にて１８時間撹拌する。（Ｒ）−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２，３−ジオンの顕著な形成を観察する（ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ３５４（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝２．６５分間、方法２）。反応物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液内に注ぎ、１０ｍＬのトルエン：酢酸イソプロピル（１：１）で希釈する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムを通して濾過する。酢酸（０．６９ｍＬ，１２．０ｍｍｏｌ）および１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミン（３３９ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）を、（Ｒ）−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２，３−ジオンを含有するこの溶液に加える。５５℃まで２４時間加熱する。反応混合物を濃縮し、ダークパープルオイルを得る。３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−１−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−５（Ｒ）−（３−フルオロ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オンの顕著な形成を観察する（ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５４１（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝３．３２分間、方法２）。粗３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−１−（４−トリフルオロメトキシフェニル）−５（Ｒ）−（３−フルオロ−フェニル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オンを酢酸（６ｍＬ）およびＴＨＦ（１．５ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却し、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１８９ｍｇ，３．０ｍｍｏｌ）を加える。冷却槽を５分後に除去し、３０分間周囲温度にて撹拌する。反応物を酢酸エチルで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液内へゆっくりと注ぐ。有機層を減圧下で濃縮し、残留物をシルカゲルクロマトグラフィー（１０〜３５％の酢酸エチル−ヘキサン）により精製し、（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−フルオロ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オン（３４０ｍｇ，４１％）を泡として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ８．７９（ｄＪ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２９〜７．２６（ｍ，２Ｈ），７．２２〜７．１８（ｍ，１Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９０〜６．８３（ｍ，２Ｈ），４．９６（ｄｄ，Ｊ＝６．２，９．７Ｈｚ，１Ｈ），３．４５（ｄｄ，Ｊ＝８．１，１０．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８４〜２．７７（ｍ，１Ｈ），１．８８〜１．８０（ｍ，１Ｈ），１．５６（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５４３（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝２．９７分間、方法２。
【００７７】
実施例４：  （３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル）−エチルアミノ］−５−フェニル−１−（４−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オン
【化２８】
0005539323.tif 000029
標題の化合物を、実施例３の方法において基本的に記載されるように調製する。収率４７％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：  δ８．７７（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２５〜７．１７（ｍ，２Ｈ），７．１６〜７．１３（ｍ，３Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．９６（ｄｄ，Ｊ＝６．２，９．７Ｈｚ，１Ｈ），３．４６（ｄｄ，Ｊ＝７．９，１０．６Ｈｚ，１Ｈ），２．８３〜２．７６（ｍ，１Ｈ），１．９１〜１．８３（ｍ，１Ｈ），１．５６（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ）。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５２５（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝２．９２分間、方法２。
【００７８】
実施例５：  （３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オントシレート
【化２９】
0005539323.tif 000030
（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン（４．５７ｇ，７．７１ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（１０ｍＬ）に溶解する。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（１．４９ｇ，７．７１ｍｍｏｌ）を加え、４５℃まで溶液が均質になるまで加熱する。周囲温度まで冷却し、種晶を加える。周囲温度にてそのまま６４時間置く。沈殿物を濾過し、ヘプタンで洗浄する。真空下で４時間乾燥し、（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オントシレート（５．０６ｇ，８６％）を白色粉末として得る。ＬＣ−ＭＳ  ＥＳＩ  ｍ／ｚ：  ５９３（Ｍ＋Ｈ）＋，Ｔｒ＝４．９２分間、方法１。
【００７９】
（種晶形成）
（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン（６１．４ｍｇ，１０４μｍｏｌ）をイソプロパノール（１ｍＬ）に溶解する。ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２０．０ｍｇ，１０４μｍｏｌ）を加え、均質な溶液を得る。（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（６−トリフルオロメチル−ピリジン−３−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オントシレート（＜１ｍｇ）を加え、結晶化を開始する。溶液を空気にさらし、１８時間以上蒸発乾燥し、（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オントシレート（７７ｍｇ，９７％）をオフホワイト固体として得る。
【００８０】
実施例６：（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オンアジピン酸塩
【化３０】
0005539323.tif 000031
（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン（１０５ｍｇ，０．１７７ｍｍｏｌ）をメタノール（０．８ｍＬ）および酢酸エチル（２ｍＬ）に溶解する。アジピン酸（３０ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）を加え、室温にて一晩蒸発させ、定量的物質収支の（３Ｒ，５Ｒ）−３−［１−メチル−１−（２−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル）−エチルアミノ］−５−（３−トリフルオロメトキシ−フェニル）−１−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オンアジピン酸塩（１２９ｍｇ，１００％）を氷砂糖状に固まった固体（ｃａｎｄｉｅｄ  ｓｏｌｉｄ）として得る。ＥＳ／ＭＳ  ｍ／ｚ：  ５９３．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８１】
上述のように、本発明の化合物は、ＣＢ−１受容体の選択的かつ非常に強力な逆アゴニストまたはアンタゴニストであり、従って、この薬理学のおかげで様々な障害の治療に有用である。以下のアッセイを、特許請求した化合物のＣＢ−１受容体活性、ＣＢ−１受容体についてのそれらの選択性、およびＣＢ−１受容体逆アゴニストまたはアンタゴニストによって治療可能であると考えられる様々な障害の動物モデルにおけるそれらの活性を実証するために使用することができる。
【００８２】
定義により、純粋なアンタゴニストが受容体のリガンドにより媒介される活性化を阻害する（すなわち、アゴニスト依存性受容体刺激を遮断する）ことが記される。ＣＢ−１受容体を含む、一部の受容体は、受容体の定常活性または構成的活性と称される、アゴニスト（内因性／外因性）の非存在下でさえシグナル伝達を生じる。このような受容体について、逆アゴニストは、受容体のアゴニスト依存性刺激を阻害するだけでなく、受容体の定常活性も減少／阻害する。ＣＢ−１受容体が基礎的なシグナル伝達活性を有するという点において、逆アゴニストは、ＣＢ−１により媒介される障害についての治療剤として純粋なアンタゴニストより好ましい。本発明の化合物は、ＣＢ−１受容体の選択的逆アゴニストまたはアンタゴニストである。
【００８３】
ＣＢ１およびＣＢ２のインビトロでの機能アッセイ
本発明の化合物は、ＳＰＡ（シンチレーション近接アッセイ）ベースのＧＴＰ−γ−３５Ｓ結合アッセイを用いてアゴニストおよびアンタゴニスト様式の両方においてＣＢ−１およびＣＢ−２受容体での機能アッセイに関して試験できる。全てのアッセイ成分を、室温でアッセイ緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４）中で調製する。試験化合物の半対数希釈を、アゴニスト様式アッセイのためにＢＳＡ（０．１２５％最終濃度）を含むアッセイ緩衝液中で調製する。アンタゴニスト様式アッセイに関して、試験化合物を同じ方法で調製するが、完全なアゴニスト（メタンアンダミド）の８０％有効用量も含む。アンタゴニストアッセイのためのＧＴＰ−γ３５Ｓ結合は、以前に記載された抗体捕捉技術（ＤｅＬａｐｐ，ＮＷら（１９９９）Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ２８９：９４６−９５５）の変更を用いる９６ウェルフォーマットで測定できる。ＣＢ−２受容体アゴニスト活性は、ｈＣＢ２−Ｓｆ９膜を用いる同様の方法を用いて測定できる。ＣＢ−１受容体アゴニスト活性は、ｈＣＢ１−ＣＨＯ膜を用いる全膜捕捉技術を用いて測定できる。全てのインキュベーションは室温で行う。
【００８４】
アンタゴニスト様式アッセイ
ｈＣＢ１−ＣＨＯおよびｒＣＢ１−ＣＨＯアンタゴニストアッセイ
ｈＣＢ１−ＣＨＯまたはｒＣＢ１−ＣＨＯ膜（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ）およびＧＤＰ（最終１μＭ）を、氷冷アッセイ緩衝液に加え、ホモジナイズする。希釈した化合物、ＧＴＰ−γ−３５Ｓ（最終濃度５００ｎＭ）および膜をアッセイプレートのウェルに加え、室温で３０分間、インキュベートする。次に、Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０界面活性剤（最終濃度０．２％）、ウサギポリクローナルＩｇＧ  Ｇαｉ−３抗体（Ｃｏｖａｎｃｅ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，ＮＪによって供給された）、および１．２５ｍｇの抗ウサギ抗体シンチレーション近接アッセイビーズ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を含む混合物を加える。プレートを密閉し、ボルテックスし、さらに２時間、インキュベートする。次いで、プレートを１０分間、７００×ｇで遠心分離し、放射能を計数する。
【００８５】
ｈＣＢ１−Ｓｆ９およびｈＣＢ２−Ｓｆ９アンタゴニストアッセイ
ｈＣＢ１−Ｓｆ９およびｈＣＢ２−Ｓｆ９膜（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を、ｈＣＢ１−Ｓｆ９について１μＭ（最終濃度）のＧＤＰおよびｈＣＢ２−Ｓｆ９について０．０５μＭ（最終濃度）のＧＤＰを用いて上記のように本質的に調製する。このアッセイを、上記のＣＨＯ膜について記載されるように本質的に行う。希釈した膜を１５分間、試験化合物でプレインキュベートし、続いて、ＧＴＰ−γ−３５Ｓを加え、さらに３５分、インキュベーションを行う。Ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０および抗Ｇｉ抗体を連続して加え、各々を加えた後、１５分、インキュベーションを行う。次いで、ＳＰＡビーズを加え、プレートを密閉し、ボルテックスし、次いで、１時間室温で、インキュベートする。
【００８６】
アゴニスト様式アッセイ
ｈＣＢ１−ＣＨＯアゴニストアッセイ
ｈＣＢ１−ＣＨＯ膜、ＧＤＰ（最終濃度１μＭ）、およびサポニン（最終濃度１０μｇ／ｍＬ、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を合わせ、上記のアンタゴニストアッセイのように氷上で調製する。希釈した試験化合物、ＧＴＰ−γ−３５Ｓ（最終濃度５００ｎＭ）および膜をアッセイプレートに合わせて、３０分間、インキュベートする。次いで、１ｍｇ／ウェルのＷｈｅａｔｇｅｒｍ  Ａｇｇｌｕｔｉｎｉｎ  ＳＰＡビーズ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を加え、プレートを密閉し、ボルテックスし、１時間インキュベートし、その後、回転させ、上記のアンタゴニストアッセイと同じ様式で計数する。
【００８７】
ｈＣＢ２−Ｓｆ９アゴニストアッセイ
ｈＣＢ２−Ｓｆ９アッセイを、試験する（ｃｈａｌｌｅｎｇｉｎｇ）アゴニストを加えずに、上記のｈＣＢ１−ｓｆ９およびｈＣＢ２−ｓｆ９アンタゴニストアッセイに関して本質的に行う。１μＭ（最終濃度）のＧＤＰを膜溶液に加え、ｎｏｎｉｄｅｔ  Ｐ４０、抗Ｇｉ抗体、およびＳＰＡビーズをカクテルに一緒に加える。
【００８８】
データを以下のように解析する：バックグランドを全てのウェルから差し引く。アゴニストの有効性の割合を、完全なアゴニスト（メタンアンダミド）について得た反応に対してアゴニスト／逆アゴニスト用量反応データを正規化することによって決定する。アンタゴニストの阻害の割合を、完全なアゴニスト（メタンアンダミド）の飽和濃度によって生じる信号に対してデータを最初に正規化することによって算出する。次いで、そのデータを、４−パラメーターロジスティック減算フィット（４−ｐａｒａｍｅｔｅｒ  ｌｏｇｉｓｔｉｃ  ｒｅｄｕｃｅｄ  ｆｉｔ）（ＩＤＢＳ，Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，ＣＡから提供されるＡｃｔｉｖｉｔｙ  Ｂａｓｅ（商標）およびＸＬＦｉｔ３（商標））を用いて解析する。Ｋｂ値を、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆの相関関係：Ｋｂ＝ＩＣ５０／（１＋［アゴニスト］／ＥＣ５０）（式中、「ＩＣ５０」は、置換曲線の４つのパラメーターフィットから決定され、「［アゴニスト］」はアゴニスト試験濃度（ｎＭ）であり、「ＥＣ５０」は、完全なアゴニスト濃度反応曲線の４つのパラメーターフィットから決定される）の変更を用いて算出する（ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ  １９７３）。平均Ｋｂ値を、少なくとも３つの独立測定の平均±標準誤差（ＳＥＭ）として計算する（Ｃｈｅｎｇ  ＹＣおよびＰｒｕｓｏｆｆ  ＷＨ．（１９７３），Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２２：３０９９−３１０８）。例示的な化合物は、有効なＣＢ−１逆アゴニスト（Ｋｂは１０ｎｍ以下、典型的に２ｎＭ未満）であり、ＣＢ−２受容体より選択的（ＫｂＣＢ−２／ＫｂＣＢ−１＞５００、典型的に１０００より大きい）であることが見出される。
【００８９】
表６および７は、本発明の特定の化合物のアンタゴニスト／逆アゴニスト特性を要約する。このデータは、試験化合物が、ラットおよびヒトの受容体の両方において有効なＣＢ−１逆アゴニストであり、ヒトＣＢ−２受容体より選択的であることを示す。０未満であるアゴニストの有効性は、その化合物が、インビトロにおいてＣＢ−１受容体の定常（構成的）活性を低下させることを示し、これは、ＣＢ−１受容体における逆アゴニストとしてその化合物を特徴付ける。
【００９０】
【表１】
0005539323.tif 000032
【００９１】
【表２】
0005539323.tif 000033
【００９２】
強制水泳試験（ＦＳＴ）
強制水泳試験は、鬱病、不安および意欲消失（意欲の欠如）のために十分に確立された動物モデルである（Ｐｏｒｓｏｌｔら，Ｎａｔｕｒｅ（１９７７）２６６，７３０）（Ｊ．Ｍ．Ｗｉｔｋｉｎら，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ．２００５  ２６：６０９−１７）。それはまた、統合失調症の陰性症状の治療のためのモデルとして使用できる。
【００９３】
雄性ＮＩＨ  Ｓｗｉｓｓマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）を、試験前に７〜１０日間、１つのケージ当たり１２匹のマウスで収容する。試験の日に、体重２５〜３０ｇのマウスを、投与の少なくとも１時間前に試験室に入れる。マウスに６〜８分の間隔で、ビヒクル（ＣＢ１逆アゴニストのための、１％ＣＭＣ／０．５％ＳＬＳ／０．０８％ポビドン／０．０５消泡剤）または試験化合物のいずれかを投与（ｐ．ｏ．）し、そのマウスを無菌のケージに入れておく（１つのケージ当たり４匹のマウス）。
【００９４】
試験するために、マウスを、６分間、２２〜２５℃の水を６ｃｍまで充填した透明なプラスチックシリンダー（約１０ｃｍ直径×２５ｃｍ高さ）に個々に入れる。最後の４分の間の不動持続時間を記録する。動かないで浮いている場合、またはマウスが水の上に頭を維持するために必要な動きのみを行っている場合、それらのマウスを不動とみなす。
【００９５】
不動の時間（秒単位）を、ダネット検定を用いてＡＮＯＶＡにより解析する。最小有効量（ＭＥＤ）は試験化合物の最も低い用量であるとみなし、その用量で、不動の時間の統計的に有意な減少が、ビヒクルコントロールに対してよりも観測される。
【００９６】
バイオアベイラビリティ
バイオアベイラビリティを利用するための方法は当該分野において十分に理解されている。１つのそのような参考文献は、Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｖｏｌ２１  Ｎｏ．５  ３８２−３９６（２００１）である。化合物のバイオアベイラビリティは本質的に以下のように推定され得る。
【００９７】
３または４匹の２５０〜４５０ｇの雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットまたは約１０ｋｇのビーグル犬（雌または雄）の集団を用いる。静脈内の一部の研究のために、動物を絶食させる必要はない。イヌに、カニューレを挿入した橈側皮静脈により静脈内投与し、血液回収を頸静脈により行う。まず、動物に０．２５ｍｇ／ｋｇで静脈内投与し、次いで、血液サンプル（０．２ｍＬ）を、０．０８３０、０．２５、０．５０、１、２、４、８、１２、２４、４８、７２、９６および１２０時間にて、抗凝固剤としてＥＤＴＡを用いて回収する。次に、少なくとも２日、かつ１８〜２４時間の絶食後、動物に強制経口投与（ｏｒａｌ  ｇａｖａｇｅ）により１．０ｍｇ／ｋｇを投与する。研究過程の間、回収した血液の全量（ｍｌ）は、全体重（ｇ単位）の１％を超えない。より多くの血液量を必要とする場合、サンプリングされる血液量を、ドナー動物由来のヘパリン化された全血と取り替える。交差研究設計を用いる場合、ラットに、研究の間に取り除いたものとほぼ等量を各研究の日の最終サンプルの後に、一定量のヘパリン化された全血を与える。
【００９８】
化合物の血漿濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳアッセイにより測定する。次いで、データを、標準的なノンコンパートメンタル（ｎｏｎ−ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｌ）薬物動態解析を用いて解析する。経口バイオアベイラビリティは以下のように算出する。
（ＡＵＣ０−無限，経口／ＡＵＣ０−無限，ｉ．ｖ．）×（用量，ｉ．ｖ．／用量，経口）×１００％
【００９９】
実施例５の化合物を試験して、以下のようなラットの経口バイオアベイラビリティを有することを見出す。
絶食した雄のＳＤラット
ＩＶ：０．２５ｍｇ／ｋｇ、製剤：２０％ｖ／ｖ  ＭＥＯＰ／８０％ｖ／ｖ  精製水
ＰＯ：１ｍｇ／ｋｇ、製剤：精製水中の、１％  ＮａＣＭＣ／０．５％  ＳＬＳ／０．０５％  消泡剤
経口バイオアベイラビリティは５１＋／−１９％（平均の標準偏差、ｎ＝３のラット）であり、ＡＵＣ０−２４ｈに基づく。
【０１００】
ヒトＣＹＰフィンガープリント法
ＣＹＰフィンガープリント法は十分に確立された技術であり、薬学において薬物−薬物相互作用の潜在的リスクの指標として使用される。本発明の化合物は、本質的に以下のように、周知の方法によって評価できる。化合物を、ＣＹＰ阻害剤を１つも含まないものと、３０分間別のインキュベーション中の各々のＣＹＰ阻害剤を含むものとで、０および３０分間、プールし、混合した性別のヒトの肝臓ミクロソームおよび１ｍＭ  ＮＡＤＰＨ（ニコチンアデニンジヌクレオチドリン酸）（最終濃度）とともに、４μＭの最終濃度で３７℃にてインキュベートする。各々の阻害剤は個々のシトクロムＰ４５０に特異的である。ＣＹＰ  ２Ｃ９、２Ｄ６および３Ａに使用される特異的な阻害剤は、それぞれ、スルファフェナゾール、キニジンおよびケトコナゾールであった。ケトコナゾール（ＣＹＰ３Ａ）はＤＭＳＯ中に２５ｍＭで構成し、次いで緩衝液中で１０μＭの最終濃度まで希釈する。キニジン（ＣＹＰ２Ｄ６）は５０／５０アセトニトリル／水中に５ｍＭで構成し、次いで緩衝液中で１０μＭの最終濃度まで希釈する。スルファフェナゾール（ＣＹＰ２Ｃ９）はＤＭＳＯ中に１００ｍＭで構成し、次いで緩衝液中で５μＭの最終濃度まで希釈する。サンプルを、ＭｉｃｒｏＭａｓｓ  Ｑ−Ｔｏｆ−２質量分析計に接続されたＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｕｌｔｒａ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ＬＣを用いる陽イオンまたは陰イオンエレクトロスプレイ法においてＬＣ−ＭＳにより解析する。
【０１０１】
データをＭｅｔａｂｏＬｙｎｘ（商標）バージョン４．１を用いて解析する。存在する阻害剤とともに、（阻害されないコントロールインキュベーションに対して）３０％未満の代謝産物のピーク領域の減少が、薬物−薬物相互作用（ＤＤＩ）の低い危険性の指定を受け、３０％〜７０％の間のピーク領域の減少が、ＤＤＩの中程度の危険性を受け、７０％より多くの減少がＤＤＩの高い危険性を受ける。
【０１０２】
例示的な化合物を記載されるように本質的に試験し、以下のようなＣＹＰフィンガープリントを有することを見出す。
【０１０３】
【表３】
0005539323.tif 000034
【０１０４】
給餌モデルにおけるインビボでの効果
体重を減少させる本発明の化合物の能力を、以下のように本質的にラット給餌モデルにおいて試験することができる。約４０％の脂肪、約３９％の炭水化物および約２１％のタンパク質のカロリー含量からなる食事で、少なくとも１２週間、離乳から自由に餌を与えることによって食事性肥満（ＤＩＯ）の雄性Ｌｏｎｇ−Ｅｖａｎｓラットを確立する。２週間、ラットの集団に試験化合物またはビヒクルを、（経口で、１日に１回）投与する。２週間処置後のビヒクル群と比べて、１７ｇの差を生じるのに必要とする用量として化合物の効果（Ｔ１７効果）を決定する。これは、２週間後のビヒクル処置と比較して体重の３〜４％の最低限の生物学的に関連する減少を示す。
【０１０５】
抗精神病薬での体重増加モデル
抗精神病薬での処置の間に体重を維持／減少させる本発明の化合物の能力は、本質的に以下のようにラット給餌モデルにおいて試験できる。成体の脂肪の少ない雌性Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、通常のげっ歯動物の餌であるＰｕｒｉｎａ  ＬａｂＤｉｅｔ  ５００１（１２．３％の脂肪）および水を自由に取れるように維持する。１つの群（ｎ〜７）をビヒクル（１％の乳酸）で１〜１４日に処置し、一方、残りの群をオランザピン（２ｍｇ／ｋｇ、ｐｏ）で処置する。食物摂取後、２週間の処置にわたって体重および脂肪量の変化を監視する。薬物送達の１４日後、オランザピンで処置した動物を分け（１つの群当たりｎ〜８）、１５〜２８日間、第１の群を０．３ｍｇ／ｋｇの試験化合物およびオランザピンで処置し、第２の群を１ｍｇ／ｋｇの試験化合物およびオランザピンで処置し、最後の群をビヒクルおよびオランザピンで処置する。