(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
局所麻酔剤に添加する局所麻酔用組成物であって、デクスメデトミジン若しくはその塩及びアドレナリン若しくはその塩を含むことを特徴とする局所麻酔用組成物。
【請求項２】
デクスメデトミジン若しくはその塩の濃度が、１×１０−１５Ｍ以上１×１０−６Ｍ以下である、請求項１に記載の局所麻酔用組成物。
【請求項３】
アドレナリン若しくはその塩の濃度が、１×１０−２０Ｍ以上２．７×１０−５Ｍ以下である、請求項１又は２に記載の局所麻酔用組成物。
【請求項４】
局所麻酔剤が、リドカイン若しくはその塩を有効成分として含む請求項１〜３のいずれか１に記載の局所麻酔用組成物。
【請求項５】
局所麻酔剤及び請求項１〜４のいずれか１に記載の局所麻酔用組成物を含む配合局所麻酔剤。
【請求項６】
局所麻酔剤及び請求項１〜４のいずれか１に記載の局所麻酔用組成物を構成物として含む、局所麻酔用キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、局所麻酔剤に添加する局所麻酔用組成物に関し、より具体的にはα２アドレナリン受容体（以下、単に「α２受容体」という。）作動薬を含むことを特徴とする局所麻酔用組成物に関する。【０００２】
本出願は、参照によりここに援用されるところの日本出願特願２００８−２７９１４２号優先権を請求する。
【背景技術】
【０００３】
麻酔の歴史は、公には1846年、歯科医師E. G. T. Mortonによるエーテル全身麻酔で始まったとされている。局所麻酔はそれより38年も遅れ、1884年に眼科で臨床応用されたのが始まりである。このように、局所麻酔の歴史は全身麻酔よりも浅い。翌年の1885年には、歯科処理にも応用されるようになり、多彩な外科手術に応用されるに伴い、主として長時間持続作用さらには強力な局所麻酔が求められてきたが、まだまだ発展途上の技術である。同じ局所麻酔剤であれば、効果は使用量に比例することから、大量に使用すれば効果も増強するが、大量使用による中毒は生命の危険を引き起こすため、おのずと使用量に限界がある。【０００４】
そこで、臨床の現場では、局所麻酔作用の持続時間延長や麻酔増強を目的として、局所麻酔用組成物（主として血管収縮）が添加された局所麻酔剤を使用する場合がある。例えば、歯科治療では、骨の中に埋まっている歯根先端の神経に麻酔を効かせるための強力な局所麻酔が必要であり、さらには、骨に埋まっている親知らず（智歯）を抜歯するためには長時間の局所麻酔作用が必要である。そこで、局所麻酔用組成物が添加された局所麻酔剤を使用することが一般的である。【０００５】
局所麻酔用組成物の添加は、(1)局所麻酔の効果を増強する、(2)局所麻酔剤を局所に貯留させ、麻酔持続時間を延長する、(3)局所麻酔の吸収を遅らせ、中毒の発現を防止する、(4)局所麻酔剤の使用量を減少させる、(5)手術野からの出血を抑制し、十分な視野を得る等の目的を有している（歯科麻酔学第６版、第４章局所麻酔法参照）。このように局所麻酔用組成物は、作用持続時間の延長や麻酔増強作用だけでなく、様々な利点を有している。現在では、局所麻酔用組成物として、アドレナリン類（アドレナリン、酒石酸エピネフリンや他のカテコラミンを含む）やフェリプレッシン等のポリペプチド等が使用されている。一般に使用できるものの中では、アドレナリン若しくはその塩が最も効果的であり、2.73〜7.6×10-5 Mの濃度で多用されている。【０００６】
局所麻酔用組成物として、血管収縮薬として2.73〜7.6×10-5 M濃度のアドレナリン若しくはその塩が効果的であるため、従来から現在に至るまで最も多用されている。しかし、アドレナリン若しくはその塩を含む局所麻酔用組成物を添加した局所麻酔剤の投与により、局所麻酔用組成物中のアドレナリンが、注射した部位だけでなく全身にも作用して、血圧の上昇、あるいは心臓への悪影響を及ぼす等の特有の重大な副作用が報告されている。そのため、高齢者には慎重に投与する必要がある（局所麻酔剤：塩酸リドカイン・アドレナリン注射剤、添付文書参照）。さらに、アドレナリン若しくはその塩による血管収縮薬が添加された局所麻酔剤は、高血圧、動脈硬化、心不全、甲状腺機能亢進、糖尿病等の患者は、これらの病状が悪化する恐れがあるため、その使用は原則禁忌になっている（局所麻酔剤：塩酸リドカイン・アドレナリン注射剤、添付文書参照）。また、薬物相互作用において、患者がβ受容体遮断剤、三環系抗うつ剤、ブチロフェノン系薬物、α受容体遮断薬、ジギタリス製剤、ジキニン、β受容体作用薬、抗糖尿病薬等を常用している場合、併用に注意しなければならない（局所麻酔剤：塩酸リドカイン・アドレナリン注射剤、添付文書参照）。【０００７】
アドレナリン若しくはその塩に代わる局所麻酔用組成物の開発が進められており、ポリペプチドであるフェリプレシンは、アドレナリン以外で一般に使用されている局所麻酔用組成物であるが、効力はアドレナリン若しくはその塩と比較すると弱く、多用されていない。その他、酸性ムコ多糖類、セルロース誘導体、マルトシルβシクロデキストリン、サリチル酸、抗ヒスタミン剤等がその作用を有するとされているが、現在のところ、実用化一般化には至っていないのが現状である（特許文献１−５）。いずれも、単体ではアドレナリン若しくはその塩に代わるほどの優位性がないものと考えられる。一方、アドレナリン若しくはその塩の量を減らすことにより、副作用を抑える観点からの組成物の研究も進められてきたが、こちらも薬物の特殊性や煩雑さなどから実用的とはいえない（特許文献６、７）。【０００８】
新たな局所麻酔用組成物として、α２受容体作動薬であるデクスメデトミジンを、局所麻酔剤に添加することによって、局所麻酔作用が増強されるという報告がある（非特許文献１）。また、α−２レセプターアゴニスト（α２受容体作動薬）の治療可能な分野の一つとして、疼痛の制御および神経性炎症のための麻酔剤に対する補助剤が挙げられている（特許文献８）。多くの報告よりα２受容体作動薬は麻酔前投薬として鎮静、抗不安作用があり、周術期の鎮痛薬必要量を減少させる事が示されている。しかしながら、局所麻酔剤について、アドレナリン及びα２受容体作動薬を含む局所麻酔用組成物については、今までは報告されていなかった。アドレナリンはα１受容体とα２受容体の両者に作用する作動薬であるが、デクスメデトミジンはα２受容体に選択性の強い作動薬である。α１受容体作動薬とα２受容体作動薬の作用について、交換神経反応ではα１受容体作動薬の効果は相加的であり、α２受容体作動薬はそれを減じる（Starke K: α-Adrenoceptor subclassification.：非特許文献２）という考えが一般的であり、また、受容体への結合を調べた研究（Wright IK, et al.：非特許文献３）でも、大血管においてα１受容体とα２受容体への結合は、やはり相加的あるいは弱い相殺的であることが示されている。また、アドレナリンの局所麻酔増強作用に対して、α２受容体拮抗薬であるヨヒンビンを前投与しても増強効果に影響がなかったことも報告されている（後藤吉平：局所麻酔作用増強物質としての血管収縮薬の作用機序に関する研究：非特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開2002-275093号公報
【特許文献２】特開2005-255663号公報
【特許文献３】特開2002-69006号公報
【特許文献４】特開平11-315029号公報
【特許文献５】国際公開パンフレットWO2004/052399号公報
【特許文献６】特許第406884号公報
【特許文献７】国際公開パンフレットWO97/07794号公報
【特許文献８】国際公開パンフレットWO2004/010894号公報（特表2006-504661号公報）
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Anesth Analg 107:96-101 (2008)
【非特許文献２】Physiol Biochem Pharmacol 88: 199-236 (1981)
【非特許文献３】Br J Pharmacol 114: 678-688 (1995)
【非特許文献４】東北大学歯学雑誌 7: 1-12 (1988)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、局所麻酔剤に添加する局所麻酔用組成物であって、局所麻酔効果が持続し、かつ安全性の高い局所麻酔用組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、アドレナリンの全身的作用に拮抗する薬剤、即ちα２受容体作動薬を局所麻酔用組成物に含ませることで、上記課題を解決しうることを見出し、本発明を完成した。【００１３】
即ち本発明は、以下よりなる。
１．局所麻酔剤に添加する局所麻酔用組成物であって、α２受容体作動薬を含むことを特徴とする局所麻酔用組成物。
２．α２受容体作動薬が、デクスメデトミジン若しくはその塩である前項１に記載の局所麻酔用組成物。
３．α２受容体作動薬の濃度が、1×10-15 M以上1×10-6 M以下である、前項１又は２に記載の局所麻酔用組成物。
４．さらにアドレナリン若しくはその塩を含む、前項１〜３のいずれか１に記載の局所麻酔用組成物。
５．アドレナリン若しくはその塩の濃度が、1×10-20 M以上2.7×10-5 M以下である、前項４に記載の局所麻酔用組成物。
６．局所麻酔剤が、リドカイン若しくはその塩を有効成分として含む前項１〜５のいずれか１に記載の局所麻酔用組成物。
７．局所麻酔剤及び前項１〜６のいずれか１に記載の局所麻酔用組成物を含む配合局所麻酔剤。
８．局所麻酔剤及び前項１〜６のいずれか１に記載の局所麻酔用組成物を構成物として含む、局所麻酔用キット。
【発明の効果】
【００１４】
アドレナリン若しくはその塩を局所麻酔剤に添加して使用する場合に、本発明のα２受容体作動薬を含む局所麻酔用組成物を用いることで、アドレナリン若しくはその塩の使用量を軽減化することができる。その結果、アドレナリン若しくはその塩単剤を用いた場合に危惧される血圧の上昇、又は心臓への悪影響等が軽減化される。アドレナリンは、生体内でα受容体とβ受容体に結合し、様々な作用を及ぼす。α受容体にはα１受容体とα２受容体の２つがあり、α１受容体は血管収縮作用を引き起こし、局所のみならず全身の血管も収縮させ、血圧を上昇させる作用がある。一方、α２受容体は局所的には血管収縮作用があるが、全身的には血管拡張作用があり、フィードバックによる調節機能として、α１受容体を介した作用に拮抗するとされている。そこで、本発明の局所麻酔用組成物に含まれるα２受容体作動薬は、アドレナリン若しくはその塩による全身的な血圧上昇作用を抑制させることができ、アドレナリン若しくはその塩による副作用を軽減化させることができる。【００１５】
また、α２受容体作動薬とアドレナリン若しくはその塩の併用により、アドレナリン若しくはその塩、又はα２受容体作動薬を単剤として局所麻酔剤に添加する場合よりも、より効果的に局所麻酔効果が得られるので、アドレナリン若しくはその塩の使用量を低減化させることができ、その結果アドレナリン若しくはその塩による副作用を軽減化させることもできる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】アイソボログラム(isobologram)による分析結果を示す図である。（実施例１）
【図２】本発明の局所麻用組成物の血管収縮に及ぼす作用を示す図である。（実施例４）
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明において、局所麻酔用組成物とは、局所麻酔剤に添加する組成物をいい、(1)局所麻酔の効果を増強する、(2)局所麻酔剤を局所に貯留させ、麻酔持続時間を延長する、(3)局所麻酔の吸収を遅らせ、中毒の発現を防止する、(4)局所麻酔剤の使用量を減少させる、(5)手術野からの出血を抑制し、十分な視野を得る等の目的で用いられる。
【００１８】
本発明の局所麻酔用組成物は、少なくともα２受容体作動薬を含む。α２受容体は、α受容体におけるα１受容体作用に対して拮抗作用を有する物質である。α１受容体が血管収縮作用をはじめとして収縮反応全般に係るのに対して、α２受容体は、中枢にて神経終末に存在し、アドレナリンの遊離を抑制して交感神経興奮伝達を抑制する。本発明において、α２受容体作動薬は特に限定されないが、具体的にはデクスメデトミジン若しくはその薬学的に許容できる塩を挙げることができる。本発明において、アドレナリン若しくはその塩とα２受容体作動薬とともに用いることで、アドレナリンによる副作用を軽減させることが期待される。従って、本発明の局所麻酔剤を使用する場合には、α２受容体作動薬のほかに、アドレナリンを用いることが必要である。このことから、本発明の局所麻酔用組成物にはα２受容体作動薬の他、アドレナリン若しくはその塩を含むことができる。局所麻酔用組成物にα２受容体作動薬のみが含まれ、アドレナリン若しくはその塩を含まない場合にも、局所麻酔剤には別途アドレナリン若しくはその塩を添加して使用するのが好適である。
【００１９】
本発明の局所麻酔用組成物に含まれるα２受容体作動薬は、1×10-15 M以上、好ましくは1×10-10 M以上含まれていればよい。またα２受容体作動薬の使用濃度の上限については特に限定されないが、1×10-6 M以下の濃度で十分に効果を発揮しうる。
【００２０】
本発明の局所麻酔用組成物に含まれるアドレナリン若しくはその塩は、微量含まれていればよく、特に限定されないが、例えば1×10-20 M以上含まれていればよい。また、アドレナリン若しくはその塩は、従来用いていた量、即ち2.7〜7.6×10-5 Mよりも低い濃度で使用することができ、1×10-5 M以下であってもよい。
【００２１】
α２受容体作動薬の添加により、アドレナリン若しくはその塩の使用量を軽減化できる。局所麻酔用組成物に含まれるアドレナリン若しくはその塩とα２受容体作動薬との濃度は、各々1×10-5 M以下及び1×10-6 M以下の組み合わせで効果が得られ、各々1×10-6 M及び1×10-7 Mの組み合わせ、各々1×10-6 M及び1×10-8 M以下の組み合わせ、さらには各々1×10-7 M及び1×10-7 M以下の組み合わせであっても十分に効果が得られる。
【００２２】
本発明において、局所麻酔剤に含まれる有効成分としての局所麻酔薬は、アドレナリン若しくはその塩とともに使用可能な局所麻酔薬であればよく、特に限定されないが、具体的にはリドカイン若しくはその薬学的に許容できる塩が挙げられる。
【００２３】
背景技術の欄でも説明したが、多くの報告よりα２受容体作動薬は麻酔前投薬として鎮静、抗不安作用があり、周術期の鎮痛薬必要量を減少させる事が示されている。しかしながら、局所麻酔剤において、アドレナリン及びα２受容体作動薬を含む局所麻酔用組成物については今までは報告されていなかった。その理由は、α１受容体とα２受容体との関係から、それらの作動薬の合剤に相乗効果があることが予測できなかったからである。アドレナリンはα１受容体とα２受容体の両者に作用する作動薬であるが、デクスメデトミジンはα２受容体に選択性の強い作動薬である。α１受容体作動薬とα２受容体作動薬の作用について、交換神経反応ではα１受容体作動薬の効果は相加的であり、α２受容体作動薬はそれを減じる（Starke K: α-Adrenoceptor subclassification.：非特許文献２）という考えが一般的であり、また、受容体への結合を調べた研究（Wright IK, et al.：非特許文献３）でも、大血管においてα１受容体とα２受容体への結合は、やはり相加的あるいは弱い相殺的であることが示されている。
【００２４】
これらの見解から、局所麻酔薬の作用を増強する大きな要因を血管収縮作用と考えると、α１受容体とα２受容体の両者の作動薬であるアドレナリンと、α２受容体作動薬であるデクスメデトミジンを含む合剤は、相加的あるいは相殺的（拮抗的）に作用することが予測される。また、アドレナリンの局所麻酔増強作用に対して、α２受容体拮抗薬であるヨヒンビンを前投与しても増強効果に影響がなかったことを報告している文献があり（後藤吉平：局所麻酔作用増強物質としての血管収縮薬の作用機序に関する研究：非特許文献４）、α１受容体を介する血管収縮作用が、α２受容体を介する作用よりも大きいことが示されている。よって、これまでの見解、文献から考えれば、局所麻酔剤にアドレナリンとデクスメデトミジンを含む局所麻酔用組成物を追加して使用しても、相乗作用どころか相加作用も期待できないことが考えられる。しかしながら、本発明の実施態様であるアドレナリンとデクスメデトミジンを局所麻酔用組成物とした場合は、アドレナリン単独での血管収縮作用を抑制する傾向にあり（実施例４参照）、血管収縮作用による局所麻酔増強効果ではなく、新規なメカニズムによる麻酔増強効果であると考えられ、極めて予測されがたいものであった。
【００２５】
本明細書において、薬学的に許容される塩とは、薬理学的及び製剤学的に許容される一般的な塩が挙げられる。そのような塩として、具体的には以下が例示される。
塩基性付加塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；例えばカルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；例えばアンモニウム塩；例えばトリメチルアミン塩、トリエチルアミン塩；ジシクロヘキシルアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、ブロカイン塩等の脂肪族アミン塩；たとえばＮ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン等のアラルキルアミン塩；例えばピリジン塩、ピコリン塩、キノリン塩、イソキノリン塩等の複素環芳香族アミン塩；例えばテトラメチルアンモニウム塩、テトラエチルアモニウム塩、ベンジルトリメチルアンモニウム塩、ベンジルトリエチルアンモニウム塩、ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチルトリオクチルアンモニウム塩、テトラブチルアンモニウム塩等の第４級アンモニウム塩；アルギニン塩；リジン塩等の塩基性アミノ酸塩等が挙げられる。
【００２６】
酸付加塩としては、例えば塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、過塩素酸塩等の無機酸塩；例えば酢酸塩、プロピオン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、フマール酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩等の有機酸塩；例えばメタンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等のスルホン酸塩；例えばアスパラギン酸塩、グルタミン酸塩等の酸性アミノ酸等を挙げることができる。
【００２７】
本発明は、局所麻酔剤に、上述の局所麻酔用組成物が添加された配合局所麻酔剤も含まれる。配合局所麻酔剤の調製方法は特に限定されないが、例えば局所麻酔薬の有効濃度の２倍濃縮溶液と上記局所麻酔用組成物を等量混合することにより調製することができる。
【００２８】
さらに、本発明は、局所麻酔剤及び上述の局所麻酔用組成物を構成物として含む局所麻酔用キットにも及ぶ。キットの場合は、用時若しくは予め、局所麻酔剤に局所麻酔用組成物を適当量混合させて使用することができる。この場合は、必要に応じて、局所麻酔剤と局所麻酔用組成物の配合比を適宜変更させることができる。キットには、その他の溶液、カートリッジ、注射用シリンジや注射針等の器具等を適宜含めることができる。
【実施例】
【００２９】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明は下記の実施例の範囲に限定されることはない。【００３０】
［実施例１］局所麻酔用組成物
本実施例では、各種濃度のα２受容体作動薬（デクスメデトミジン）とアドレナリンとを混合したものを局所麻酔用組成物とし、リドカインを有効成分とする局所麻酔剤に添加したときの局所麻酔増強効果を確認した。本実施例の実験を行うにあたり、以下の実験１及び２において、まずデクスメデトミジン又はアドレナリン各々単体で局所麻酔剤に添加したときの、局所麻酔増強作用を評価した。その後、実験３において、各薬剤の50 %有効量(Effective dose 50:ED50)に基づき、各薬剤を混合したものを局所麻酔用組成物とし、局所麻酔剤に添加したときの局所麻酔増強効果を確認した。【００３１】
＜実験１＞デクスメデトミジンを単体で局所麻酔剤に添加したときの、局所麻酔増強作用
試薬：
・塩酸デクスメデトミジン（プレセデックス(R)：丸石製薬株式会社）
１バイアル2 ml中236μg含有
・塩酸リドカイン（Sigma Aldrich社）
・生理食塩水（大塚製薬株式会社）【００３２】
試薬の調合：
塩酸デクスメデトミジン（プレセデックス(R)）1.0 mlに生理食塩水123.6 mlを加え、4×10-6 Mの溶液（a）を調製した。この溶液を10倍、100倍、1000倍に生理食塩水にて希釈して4×10-7 Mの溶液(b)、4×10-8 Mの溶液(c)、4×10-9 M の溶液(d)を調製した。次に、塩酸リドカイン200 mgを生理食塩水10 mlに溶解して、2 %の溶液（e）を調製した。以上の溶液を用いて、表１のとおり試薬を調合した。【００３３】
【表１】
0005536661.tif 000002
【００３４】
実験方法：
モルモット丘疹法を用いた。体重500〜600グラムのHartley系の雄性モルモットの背部を剃毛したのちに、上記配合して得た溶液１〜５の各溶液0.1 mlずつを皮内注射し、皮内に生じた丘疹の周囲にマジックで印を施した。定量知覚針で丘疹内部を６箇所刺激し、収縮反応の生じなかった回数、即ち麻酔効果があると判断された回数を測定した。この刺激を5分ごとに60分まで行い、麻酔効果のあった回数を合計したものをスコアとし、局所麻酔作用の持続性を判定した。溶液１〜５についての各スコアから、デクスメデトミジンの50 %有効量(Effective dose 50:ED50)を算出した。その結果、表２に示すごとく、塩酸デクスメデトミジンのED50値は、7.83×10-8 Mであった。【００３５】
【表２】
0005536661.tif 000003
【００３６】
＜実験２＞アドレナリンを単体で局所麻酔剤に添加したときの、局所麻酔増強作用
試薬：
・日本薬局方アドレナリン注射液（ボスミン注(R)：第一製薬株式会社）
1 ml中1 mg含有
・塩酸リドカイン（sigma aldrich）
・生理食塩水（大塚製薬株式会社）【００３７】
試薬の調合：
日本薬局方アドレナリン注射液（ボスミン注(R)）1.0 mlに、生理食塩水12.7 mlを加えて4.0×10-4 Mの溶液（f）を調製した。溶液（f）を10倍、100倍、1000倍に希釈して4×10-5 Mの溶液（g）、4×10-6 Mの溶液（h）、4×10-7 Mの溶液（i）を調製し、アドレナリンの効果を調べるために以下のとおり試薬を調合した。塩酸リドカインは、上記実験１と同様の溶液（e）を用いた。以上の溶液を用いて、以下のとおり試薬を調合した。【００３８】
【表３】
0005536661.tif 000004
【００３９】
実験方法：
上記実験１と同様にモルモット丘疹法を用いた。溶液６〜１０についての各スコアからアドレナリンのED50値を算出した。その結果、表４に示すごとく、アドレナリンのED50値は、5.91×10-6 Mであった。【００４０】
【表４】
0005536661.tif 000005
【００４１】
＜実験３＞各濃度のデクスメデトミジン及びアドレナリンを混合したものを局所麻酔用組成物とし、局所麻酔剤に添加したときの、局所麻酔増強作用を評価した。
試薬として、上記実験１及び２と同様の塩酸デクスメデトミジン、日本薬局方アドレナリン注射液、塩酸リドカイン及び生理食塩水を用いた。各試薬について、上記実験１及び２より得られた、塩酸デクスメデトミジンとアドレナリンのそれぞれのED50値をもとに、溶液の最終濃度がそれぞれの薬物のED50値の1/2、1/4、1/8、1/16の濃度になるように、以下のとおり試薬を調合した。塩酸リドカイン溶液は、上記実験１及び２と同様に、溶液（e）を用いた。【００４２】
【表５】
0005536661.tif 000006
【００４３】
実験方法：
上記実験１及び２と同様にモルモット丘疹法を用いた。溶液１１〜１５についての各スコアを確認した（表６）。【００４４】
【表６】
0005536661.tif 000007
【００４５】
溶液１１〜１５についての各スコア並びに実験１及び２から得られたED50値から、デクスメデトミジン（薬剤１）及びアドレナリン（薬剤２）の相互作用を、アイソボログラム(Tallarida RJ, et al, Statistical analysis of drug-drug and site-site interactions with isobolograms. Life Sci, 45: 947-961, 1989)により分析した。併用時ED50値の理論値に対する実測値の比を相乗効果評価値（Total dose fraction value）とし、以下の式を用いて算出した(Roerig SC and Fujimoto JM, Morphine antinociception in different strains of mice: relationship of supraspinal-spinal multiplicative interaction to tolerance. J. Pharmacol. Exp. Ther. 247: 603-608, 1988)。【００４６】
相乗効果評価値（Total dose fraction value）＝［併用時ED50値の理論値に対する実測値の比］＝［薬剤１の併用量のED50/薬剤１の単独量のED50］＋［薬剤２の併用量のED50/薬剤２の単独量のED50］ 
相乗効果評価値（Total dose fraction value）が１の場合は両薬剤の相互作用は相加的、１未満の場合は相乗的、１を越える場合は相殺的（拮抗的）であると評価した (Tallarida RJ, et al, Statistical analysis of drug-drug and site-site interactions with isobolograms. Life Sci, 45: 947-961, 1989; Roerig SC and Fujimoto JM, Morphine antinociception in different strains of mice: relationship of supraspinal-spinal multiplicative interaction to tolerance. J. Pharmacol. Exp. Ther. 247: 603-608, 1988; Tallarida RJ: Drug synergism and dose-effect data analysis. Chapman & Hall/CRC, Florida, USA, 2000)。【００４７】
図１は、２薬剤の相互作用を評価するためのアイソボログラム(Isobologram)とよばれるものである。図１において、グラフ直線と縦軸との切片はアドレナリン単独でのED50を示し、横軸との切片はデクスメデトミジン単独でのED50を示している。アドレナリン及びデクスメデトミジンを併用した際の理論的ED50値は、各々2.96×10-6 M（0.30×10-6 〜 5.21×10-6 M）及び3.92×10-8 M（1.98×10-8 〜 5.21×10-8 M）は、グラフ直線上で示されている（白丸）。この理論値に対して、実験で得られたED50値は、各々7.88×10-7 M（5.99×10-7 〜 1.04×10-6 M）及び1.13×10-8 M（7.64×10-9 〜 1.66×10-8 M）であった（黒丸）。この結果は理論的ED50値に対して有意差があった（P< 0.05（T-test））。範囲は平均値±95 %信頼区間を示している。アイソボログラム分析によって、２薬剤を併用した際に実験で得られたED50がそれぞれの単独でのED50を結んだ直線上にあれば、相乗効果評価値（Total dose fraction value）が１になり、その併用薬剤は相加作用（両薬剤の作用が単に加算される作用）と判断でき、直線より大きい値（直線より上方の領域）であれば、相乗効果評価値（Total dose fraction value）が１を越え、その併用薬剤は相殺作用（拮抗作用：両薬剤の作用が減じてしまう作用）と判断でき、直線より小さい値（直線より下方の領域）であれば、相乗効果評価値（Total dose fraction value）が１未満になり、併用薬物は相乗作用（両薬剤の作用の加算よりさらに大きい作用）であると判断できる（Tallarida RJ, et al, Statistical analysis of drug-drug and site-site interactions with isobolograms. Life Sci, 45: 947-961, 1989; Roerig SC and Fujimoto JM, Morphine antinociception in different strains of mice: relationship of supraspinal-spinal multiplicative interaction to tolerance. J. Pharmacol. Exp. Ther. 247: 603-608, 1988; Tallarida RJ: Drug synergism and dose-effect data analysis. Chapman & Hall/CRC, Florida, USA, 2000）。【００４８】
本実験結果では、アドレナリン及びデクスメデトミジンにおける理論的ED50値は、各々2.96×10-6 M（0.30×10-6 〜 5.21×10-6 M）及び3.92×10-8 M（1.98×10-8 〜 5.21×10-8 M）であるのに対し、実験で得られたED50値は、各々7.88×10-7 M（5.99×10-7 〜 1.04×10-6 M）及び1.13×10-8 M（7.64×10-9 〜 1.66×10-8 M）であった。これらの結果は理論的ED50値に対して有意差があった（P< 0.05（T-test））。なお、上記各濃度範囲は平均値±95 %信頼区間を示す。また、アドレナリン及びデクスメデトミジンにおける相乗効果評価値（Total dose fraction value）は0.55であった。
以上の結果、相乗効果評価値（Total dose fraction value）は１未満であり、図１に示すように、アドレナリンとデクスメデトミジンのそれぞれ単独で得られたED50（縦軸の切片：アドレナリンのED50；横軸の切片：デクスメデトミジンのED50）を結んだ直線より、統計学的に有意に下方の領域であったことから、アドレナリンとデクスメデトミジンの併用、つまり合剤は相乗作用を有していることが明らかになった。【００４９】
以上のとおり、アイソボログラム分析の結果、アドレナリンとデクスメデトミジンを混合した局所麻酔用組成物を、塩酸リドカインを有効成分とする局所麻酔剤に添加した場合、局所麻酔増強作用が相乗的に認められた。よって、アドレナリンとデクスメデトミジンの配合比を調整した局所麻酔用組成物（アドレナリンとデクスメデトミジンの合剤）は、局所麻酔剤に添加するアドレナリンを従来よりも低減化させることができ、かつ、同等あるいはそれ以上の局所麻酔増強作用を有することが確認された。【００５０】
［実施例２］局所麻酔用組成物２
本実施例では、アドレナリンの単体を局所麻酔用組成物として局所麻酔剤に添加したときの局所麻酔増強効果と、アドレナリンにα２受容体作動薬（デクスメデトミジン）を混合したものを局所麻酔用組成物として局所麻酔剤に添加したときの局所麻酔増強効果を比較した。本実施例では、実施例１と同様に、日本薬局方アドレナリン注射液（ボスミン注(R)：第一製薬株式会社）、塩酸デクスメデトミジン（プレセデックス(R)：丸石製薬株式会社）１バイアル2 ml中236μg含有、塩酸リドカイン（Sigma Aldrich社）及び生理食塩水（大塚製薬株式会社）を用いて実験を行なった。アドレナリン及びデクスメデトミジンを含まない溶液（溶液２１、２７）をコントロールとし、アドレナリンのみを含み、デクスメデトミジンを含まない溶液（溶液１６、２２）を比較例とした。【００５１】
試薬として、塩酸リドカインは、実施例１の実験１と同様の溶液（e）を用い、アドレナリンは同実験２の溶液（h）および溶液（i）を用いた。デクスメデトミジンは同実験１の溶液（b）、溶液（c）、溶液（d）および溶液（d）をさらに10倍希釈した4×10-10 Mの溶液（j）を用いて、以下のとおり試薬を調製した。【００５２】
【表７】
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【００５３】
【表８】
0005536661.tif 000009
【００５４】
実験方法：
上記実施例１の実験１〜３と同様に、モルモット丘疹法を用いた。溶液１６〜２１、及び溶液２２〜２７についての各スコアスコアを算出し、局所麻酔効果を判定した。その結果、表９及び表１０に示すごとく、アドレナリンに低濃度のデクスメデトミジンを混合する本発明の局所麻酔用組成物のほうが、アドレナリン単体（比較例）と比べて、局所麻酔効果がさらに増強されることが確認された。【００５５】
【表９】
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【００５６】
【表１０】
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【００５７】
［実施例３］局所麻酔用組成物３
本実施例では、局所麻酔組成物として通常使用されている濃度でのアドレナリン単体を局所麻酔剤に添加したときの局所麻酔増強効果と、低濃度のアドレナリンにα２受容体作動薬（デクスメデトミジン）を混合した本発明の局所麻酔組成物を局所麻酔剤として添加したときの局所麻酔増強効果を比較し、従来と同等の局所麻酔増強効果が得られるかを確認した。本実施例では、実施例１と同様に、日本薬局方アドレナリン注射液（ボスミン注(R)：第一製薬株式会社）、塩酸デクスメデトミジン（プレセデックス(R)：丸石製薬株式会社）１バイアル2 ml中236μg含有、塩酸リドカイン（Sigma Aldrich社）及び生理食塩水（大塚製薬株式会社）を用いて実験を行なった。アドレナリン及びデクスメデトミジンを含まない溶液（溶液３１）をコントロールとし、アドレナリンのみを含み、デクスメデトミジンを含まない溶液（溶液２８）を比較例とした。【００５８】
試薬として、試薬として、塩酸リドカインは、実施例１の実験１と同様の溶液（e）を用い、アドレナリンは実験２の溶液（h）および溶液（i）を用いた。デクスメデトミジンは同実験２の溶液（b）と溶液（c）を用いて、さらに、比較例のために、臨床で使用されているアドレナリン濃度が4×7.6×10-5 Mの溶液（k）を準備し、以下表１１のとおり試薬を調製した。【００５９】
【表１１】
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【００６０】
実験方法：
上記実施例１の実験１〜３と同様に、モルモット丘疹法を用いた。溶液２８〜３１について、スコアを算出し、局所麻酔効果を判定した。その結果、表１２に示すごとく、臨床で使用されているアドレナリン濃度（7.6×10-5 M）よりも約７０〜７００倍低い濃度のアドレナリン濃度であっても、低濃度のデクスメデトミジンを混合することで、同程度の局所麻酔増強効果があることが確認された。【００６１】
【表１２】
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【００６２】
［実施例４］局所麻酔用組成物の血管収縮に及ぼす効果
局所麻酔剤にアドレナリンを添加したときの、アドレナリンの局所麻酔増強効果は、末梢血管収縮による局所麻酔剤の吸収阻害によるものであるとされている。このため、デクスメデトミジンがアドレナリンの末梢血管増強作用をさらに増強することによって、相乗効果が現れているのか、それとも別の機序によって相乗効果が現れているのか評価するために、アドレナリンの末梢血管収縮作用に対するデクスメデトミジンの影響を調べた。【００６３】
試薬として、上記実施例１の実験１及び２と同様の塩酸デクスメデトミジン、日本薬局方アドレナリン注射液、塩酸リドカイン及び生理食塩水を用いた。塩酸リドカインは、上記実験１と同様の溶液（e）を用い、アドレナリンは実験２の溶液（h）を用いた。デクスメデトミジンは実験１の溶液（b）を用いて、表１３のとおり試薬を調製した。【００６４】
【表１３】
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【００６５】
実験方法：
体重500〜600グラムのHartley系の雄性モルモットに、全身麻酔薬であるペントバルビタールナトリウム注射液（ネンブタール注射液、大日本住友製薬、大阪）20mgを腹腔内注射し、不動状態にした。背部を剃毛したのちに、背部中央付近に十分に間隔を開けて３箇所に、マジックで印を施し、ドップラー血流計（ALF21RD; アドバンス社、東京）のプローブを当てて血流値を測定し、ベースライン値（時間０）とした。この際、３箇所の血流値に差がないことを確認した。配合して得た溶液３２、３３、３４の各溶液を、３箇所にそれぞれ0.1ml皮内注射し、同部位にドップラー血流計のプローブを固定し、注射後５分間隔で３０分後まで経時的に血流値を測定した。ベースライン値に対する血流値の割合（０〜１．０）を末梢血流度として表し、それぞれの注射部位での経時的変化を求めた。【００６６】
その結果、図２に示すごとく、溶液３２（0.5%リドカイン：コントロール）に対して、溶液３３（最終濃度1×10-6 Mのアドレナリン添加0.5%リドカイン）は、著明に血流が低下していることが確認された。しかし、溶液３４（最終濃度1×10-6 Mのアドレナリン添加0.5%リドカインに、最終濃度1×10-7 Mのデクスメデトミジンが混合されたもの）では、アドレナリンの末梢血管収縮は抑制され、デクスメデトミジンはアドレナリンの末梢血管収縮作用を抑制することが示された。【００６７】
以上の結果から、デクスメデトミジンはアドレナリンの末梢血管収縮作用を抑制する傾向があることが示された。そもそも、デクスメデトミジンが特異的に結合するα２アドレナリン受容体の作用として、α１アドレナリン受容体を介した作用に対して、ネガティブフィードバック機能として働くことが知られている。結果から、デクスメデトミジンとアドレナリンによる局所麻酔増強作用の相乗効果は、血管収縮作用の増強効果によるものではなく、想定外の機序によるものであると考えられる。
【産業上の利用可能性】
【００６８】
以上詳述したように、アドレナリン若しくはその塩を局所麻酔剤に添加して使用する場合に、本発明のα２受容体作動薬を含む局所麻酔用組成物を用いることで、アドレナリン若しくはその塩の使用濃度を５倍以上希釈することができ、使用量を軽減化することができる。本発明の局所麻酔用組成物は、α２受容体作動薬（例えば、デクスメデトミジン）とアドレナリン若しくはその塩とを混合する割合を工夫することによって、アドレナリン若しくはその塩を単体で用いるよりも、副作用を増すことなく、強力な局所麻酔増強作用を発揮する。これによって、局所麻酔で行うことのできる外科手術及び処置の適応拡大が期待できる。これまで、全身麻酔で行われていた手術及び処置が、局所麻酔で行われ、さらに日帰りで手術できるようになれば、医療費の削減も可能である。【００６９】
本発明の局所麻酔用組成物によって、局所麻酔による麻酔作用が増強されることから、長時間の局所麻酔作用が求められる外科手術、処置、歯科治療に応用することができる。また、上記以外にもペインクリニックへの応用も可能である。例えば癌性疼痛の制御、緩和医療への応用も期待できる。【００７０】
本発明の局所麻酔用組成物は、アドレナリン若しくはその塩単体での従来の添加量に比べてアドレナリン若しくはその塩を低減化しても同等の局所麻酔増強作用が得られることから、十分な局所麻酔作用を保持しながら、安全な局所麻酔を提供することができる。本発明の局所麻酔用組成物は、高齢者や従来の使用濃度では望ましくない作用を及ぼす患者等に対して、安全な局所麻酔を提供することができる。本発明の局所麻酔用組成物はこれらの者に対して大きな利点があることから、高齢者・有病者が益々増加する長寿国日本社会のみならず、世界の医療に大きく貢献することができる。【００７１】
また、局所麻酔剤及び局所麻酔用組成物を予め配合した配合局所麻酔剤は、医療の現場で局所麻酔剤と局所麻酔用組成物を調合する必要がない点で便利である。さらに、局所麻酔剤及び局所麻酔用組成物を構成物として含む局所麻酔用キットは、用時調合する必要があるものの、必要に応じて適宜配合比を調整可能な点で便利である。
【図１】
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【図２】
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