(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）：
【化１】
0005564054.tif 000063
[式中、Xは、-O-又は-NH-を表し、
R1は、メチル、エチル、プロピル又はイソプロピル基を表し、
R2及びR3は、お互い独立して、水素、メチル又はエチル基を表し、そして
R4は、C1-C6‐アルキル基又はC3-C7‐シクロアルキル環を表す]で表される化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体。
【請求項２】
Xが、-O-を表すことを特徴とする、請求項１記載の化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体。
【請求項３】
R1が、メチル基を表すことを特徴とする、請求項１又は２記載の化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体。
【請求項４】
R2が、メチル基を表すことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項記載の化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体。
【請求項５】
R3が、水素又はメチル基を表すことを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項記載の化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体。
【請求項６】
R4が、メチル又はエチル基、又はシクロプロピル環を表すことを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項記載の化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体。
【請求項７】
Xが、-O-又は-NH-を表し、
R1が、メチル基を表し、
R2が、メチル基を表し、
R3が、水素又はメチル基を表し、そして
R4が、メチル又はエチル基、又はシクロプロピル環を表す、請求項１記載の一般式（I）の化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体。
【請求項８】
下記一般式（II）で示される化合物から、下記一般式（Ｉａ）で示される化合物の製造方法：
【化９】
0005564054.tif 000064
（上記式の置換基R1、R2、R3及びR4は、請求項１〜７のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）に記載される意味を有し、そしてPGは、トリメチルシリル、トリエチルシリル、tert−ブチルシリルジメチル、tert−ブチルシリルジフェニル、トリイソプロピル、ベンジル、p−メトキシベンジル、トリチル、アリル、アリルオキシカルボニル、メトキシメチル、メチルチオメチル、（２−メトキシエトキシ）メチル、ベンジルオキシメチル、β−（トリメチルシリル）エトキシメチル、又はテトラヒドロピラニルから選択される保護基を意味する）
において、当該一般式（II）で示される化合物の保護基を切断して、当該一般式（Ｉａ）で示される化合物を形成する、ことを含んで成る方法。
【請求項９】
下記一般式（IIｂ）で示される化合物から、下記一般式（Ｉｂ）で示される化合物の製造方法：
【化１６】
0005564054.tif 000065
（上記式の置換基R1、R2、R3及びR4は、請求項１〜７のいずれか１項記載の一般式（Ｉ）に記載される意味を有する）
において、当該一般式（IIｂ）で示される化合物のスルホキシミン上の保護基を切断して、当該一般式（Ｉｂ）で示される化合物を形成する、ことを含んで成る方法。
【請求項１０】
医薬製品としての使用のための請求項１〜７のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１１】
癌の処理のための医薬製品の生成のためへの請求項１〜７のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項１２】
癌に対する医薬製品としての使用のための請求項１〜７のいずれか１項記載の化合物。
【請求項１３】
請求項１〜７のいずれか１項記載の化合物を含む医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、選択されたスルホキシミン−置換されたアニリノ−ピリミジン誘導体類、それらの製造方法、及び種々の疾病の処理のための医薬としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ピリミジン及び類似体は、活性成分、例えば殺真菌剤としての２−アニリノ−ピリミジン（DE4029650号）、又は神経学的又は神経変性疾病の処理のための置換されたピリミジン誘導体（WO99/19305号）としてすでに記載されている。非常に多くのピリミジン誘導体が、CDKインヒビター、例えば２−アミノ−４−置換されたピリミジン（WO01/14375号）、プリン（WO99/02162号）、５−シアノ−ピリミジン（WO 02/04429号）、アニリノピリミジン（WO00/12486号）及び２−ヒドロキシ−３−N, N−ジメチルアミノプロポキシ−ピリミジン（WO00/39101号）として記載されている。
【０００３】
特に、CDKに関して阻害効果を有するピリミジン誘導体が、WO02/096888号及びWO03/076437号に開示されている。フェニルスルホンアミド基を含む化合物は、ヒトカルボアンヒドラーゼ（特に、カルボアンヒドラーゼ−２）の既知インヒビターであり、そして中でも、緑内障の処理のための利尿剤として使用される。スルホンアミドの窒素原子及び酸素原子は、水素結合を通して、カルボアンヒドラーゼ−２の活性中心におけるZn2+イオン及びアミノ酸Thr199に結合し、そして従って、その酵素機能を阻止する（A. Casini, F. Abbate, A. Scozzafava, CT. Supuran, Bioorganic. Med. Chem. Lett. 2003, 1 , 2759）。フェニルスルホンアミド基を含むCDKインヒビターの臨床使用は、カルボンアンヒドラーゼの阻害の可能性及び得られる範囲の副作用により制限される。
【０００４】
スルホキシミン活性物質の例は、殺真菌剤としてのスルホンイミドイル−変性トリアゾール（H. Kawanishi, H. Morimoto, T. Nakano, T. Watanabe, K. Oda, K. Tsujihara, Heterocycles 1998, 49, 181）、又は除草剤及び殺虫剤としてのアラルキルスルホキシミン（Shell International Research, Ger. P. 2 129 678）である。
WO2005/037800号は、サイクリン−依存性キナーゼのインヒビターとして開環スルホキシミン−置換されたアニリノ−ピリミジン誘導体を開示する。与えられる例は、置換されてないか、又はハロゲン、特にピリミジンの５−位置における臭素により置換されている構造体である。特別に開示される構造体は、５−トリフルオロメチル置換基を有さない。
【０００５】
この従来技術から出発して、本発明により直面される問題は、有能なCDKインヒビターのみならず、また腫瘍増殖を効果的に阻害することができる化合物を供給することである。実際、有能なCDK阻害は必要であるが、しかし効果的な腫瘍阻害のためには十分な必要条件ではない。前記構造体はまた、他の性質、例えば腫瘍細胞中への侵入の性質を必要とする。
【発明の概要】
【０００６】
現在、下記一般式（Ｉ）：
【化１】
0005564054.tif 000002
【０００７】
[式中、Xは、-O-又は-NH-を表し、
R1は、メチル、エチル、プロピル又はイソプロピル基を表し、
R2及びR3は、お互い独立して、水素、メチル又はエチル基を表し、そして
R4は、C1-C6‐アルキル基又はC3-C7‐シクロアルキル環を表す]で表される化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体が、CDKを効果的に阻害するのみならず、また、腫瘍増殖を、特に効果的に阻害することが見出された。
Xが-O-を表す化合物は、下記式（Ia）：
【０００８】
【化２】
0005564054.tif 000003
【０００９】
により表される。
Xが-NH-である化合物は、下記式（Ib）：
【００１０】
【化３】
0005564054.tif 000004
により表される。
本出願は次の定義に基づかれる：
C1-C6−アルキル：
C1-C6−アルキル基は、個々の場合、線状又は枝分れしたアルキル残基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、ペンチル、イソペンチル又はヘキシル残基として理解されるべきである。
【００１１】
C3-C7−シクロアルキル：
C3-C7−シクロアルキル環は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル又はシクロヘプチル環として理解されるべきである。
一般式（I）においては、Xは-O-又は-NH-を表す。好ましくは、Xは-O-を表す。
一般式（I）においては、R1は、メチル、エチル、プロピル又はイソプロピル基を表すことができる。好ましくは、R1はメチル基を表す。
【００１２】
一般式（I）においては、R2及びR3はお互い独立して、水素、メチル又はエチル基を表すことができる。好ましくは、R2及びR3はお互い独立して、水素又はメチル基を表す。特に好ましくは、R2はメチル基を表し、そしてR3は水素又はメチル基を表す。
一般式（I）において、R4は、C1-C6−アルキル残基又はC3-C7−シクロアルキル環を表すことができる。好ましくは、R4はメチル又はエチル基、又はシクロプロピル環を表す。
【００１３】
一般式（I）の化合物の好ましいサブグループは、一般式（I）：
[式中、Xは、-O-又は-NH-を表し、
R1は、メチル基を表し、
R2は、メチル基を表し、
R3は、水素又はメチル基を表し、そして
R4は、メチル又はエチル基、又はシクロプロピル環を表す」で表される化合物、及びその塩、ジアステレオマー及び鏡像異性体を含んで成る。
【００１４】
本発明の化合物は、下記の処理のために適切である：
・   癌、例えば固形腫瘍、腫瘍転移、及び血液学的腫瘍、特に頭及び首腫瘍；肺及び気管支腫瘍；胃腸腫瘍、例えば胃癌、結腸直腸癌、膵臓癌、肝細胞癌；エンドキン活性腫瘍；乳癌及び婦人科学的腫瘍、尿生殖器腫瘍、例えば腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌；皮膚腫瘍；肉腫；白血病及びリンパ腫；
・ウィルス性疾患、及び
・   心血管疾患、例えば狭窄、動脈硬化及び再狭窄、ステント−誘発された再狭窄。
【００１５】
医薬調製に従っての化合物の配合は、生薬のために使用される通常の賦形剤と共に活性物質を、所望する投与形に転換することにより、それ自体知られている態様で実施される。
【００１６】
キャリヤー、充填剤、砕解剤、結合剤、保湿剤、潤滑剤、吸着剤、希釈剤、溶媒、補助溶媒、乳化剤、溶解剤、改善剤、着色剤、保存剤、安定剤、湿潤剤、浸透圧を変性するための塩又は緩衝液が例えば、賦形剤として使用され得る。Remington's Pharmaceutical Science, 15th ed. Mack Publishing Company, East Pennsylvania (1980)を参照のこと。
【００１７】
医薬製剤は、下記の形で存在することができる：
固体形、例えば錠剤、糖−被覆された錠剤、ピル、坐薬、カプセル、経皮システム、又は
半固体形、例えば軟膏、クリーム、ゲル、坐薬、エマルジョン、又は
液体形、例えば溶液、チンキ、懸濁液又はエマルジョン。
【００１８】
本発明の賦形剤は例えば、塩、糖類（単、ニ、三、オリゴ及び/又は多糖類）、タンパク質、アミノ酸、ペプチド、脂肪、ワックス、油、炭化水素及びその誘導体であり得、ここで前記賦形剤は天然起源のものであり得るか、又は合成的に又は一部合成的に得れる。
錠剤、糖−被覆された錠剤、カプセル、ピル、粉末、顆粒、香錠、懸濁液、エマルジョン又は溶液は特に、経口適用のために考慮され得る。
懸濁液、エマルジョン及び何よりも溶液が非経口適用のために特に考慮され得る。
【００１９】
本発明の化合物の調製：
原則として、スルホキシミンは、構造及び形状に関して、高い安定性を有する（C. BoIm, J.P. Hildebrand, J. Org. Chem. 2000, 65, 169）。官能基のそれらの性質はしばしば、さらに劇的な反応条件を可能にし、そしてイミン窒素及びα−炭素上でのスルホキシミンの単純な誘導体化を可能にする。鏡像異性体的純粋なスルホキシミンはまた、ジアステレオ選択性合成において助剤としても使用され得る（(a) S. G. Pyne, Sulfur Reports 1992, 12, 57; (b) CR. Johnson, Aldrichimica Acta 1985, 18, 3）。
【００２０】
鏡像異性体的に純粋な樟脳−10−スルホン酸によるそのラセミ体の分解を通しての鏡像異性体的に純粋なスルホキシミンの調製が記載されている（(a) CR. Johnson, CW. Schroeck, J. Am. Chem. Soc. 1973, 95, 7418; (b) CS. Shiner, A.H. Berks, J. Org. Chem. 1988, 53, 5542）。光学的活性のスルホキシミンのもう１つの調製方法は、光学的活性のスルホキシドの立体選択イミン化である（(a) C BoIm, P. Muller, K. Harms, Acta Chem. Scand. 1996, 50, 305; (b) Y. Tamura, J. Minamikawa, K. Sumoto, S. Fujii, M. Ikeda, J. Org. Chem. 1973, 38, 1239; (c) H. Okamura, C. BoIm, Org. Lett. 2004, 6, 1305）
【００２１】
スルホキシミンについての再考文献については、（a) M. Regglin, C. Zur, Synthesis 2000, 1 ; (b) CR. Johnson, Aldrichimica Acta 1985, 18, 3を参照のこと。
次の例は、本発明の化合物の調製を説明するものであり、本発明の範囲を制限するものではない。
【００２２】
式（Ia）（４−０誘導体）の化合物の調製：
本発明の化合物は、次の段階：
ａ）式（IVc）のスルホキシドへの式（IVd）の化合物の酸化：
【化４】
0005564054.tif 000005
【００２３】
b1）式（IVa）の保護されたスルホキシミンへの式（IVc）のスルホキシドの直接的なイミン化：
【化５】
0005564054.tif 000006
【００２４】
b2）式（IVb）の保護されていないスルホキシミンへの式（IVc）のスルホキシドのイミン化及び式（IVa）の化合物への保護基の続く導入：
【化６】
0005564054.tif 000007
【００２５】
ｃ）式(IV)の化合物への式（IVa）の化合物の還元：
【化７】
0005564054.tif 000008
【００２６】
ｄ）式（IV）の一保護されたジオールとの反応による２，４−ジクロロ−５−ヨード−ピリミジン（VII）の４−位置の官能化、及び式（Va）の中間体の形成：
【化８】
0005564054.tif 000009
【００２７】
ｅ）5-CF3中間体（V）の生成：
【化９】
0005564054.tif 000010
【００２８】
ｆ）式（IV）及び（V）の化合物のカップリング、式（III ）の中間体の形成：
【化１０】
0005564054.tif 000011
【００２９】
ｇ）保護基PGの切断、及び（II）の形成：
【化１１】
0005564054.tif 000012
【００３０】
ｈ）スルホキシミン上の保護基の切断、及び（Ia）の形成：
【化１２】
0005564054.tif 000013
【００３１】
（上記式の置換基R1, R2, R3及びR4は、一般式（Ｉ）に記載される意味を有する）により特徴づけられる方法により調製され得る。
【００３２】
段階ａ）
式（IVd）の化合物は、式（IVc）のスルホキシドに酸化される。多くの方法、例えば立体選択的方法が、スルホキシドにチオエーテルを転換するために利用できる（(a) M. H. Ali et al, Synthesis 1997, 764; b) M.C. Carreno, Chem. Rev. 1995, 95, 1717; c) I. Patel et al, Org. Proc. Res. Dev. 2002, 6, 225; c) N. Khiar et al, Chem. Rev. 2003, 103, 3651）。過ヨウ素酸/塩化鉄III ）の記載される使用は、式（IVc）の化合物の調製のために特に適切である。
【００３３】
段階b1)
ヨードベンゼンジアセテート、酸化マグネシウム及び触媒量のロジウム（II）アセテートダイマーと組合してのトリフルオロアセトアミドとの式（IVc）のスルホキシドの反応は、式（IVa）の保護されたスルホキシミンの調製を可能にする。この反応は、立体特異的であり、そして立体中心でのその形状を保持する（(a) H. Okamura, C. BoIm, Org. Lett. 2004, 6, 1305を参照のこと）。
【００３４】
段階b2)
最初に、式（IVb）の保護されていないスルホキシミンへの式（IVc）のスルホキシドの反応が存在する。適切な方法は、例えば下記の通りである：
ａ）アジ化ナトリウム/濃硫酸とのスルホキシドの反応（例えば、(a) CR. Johnson, P.E. Rogers, J. Org. Chem. 1973, 38, 1793を参照のこと）。
【００３５】
ｂ）アジ化ナトリウム/発煙硫酸とスルホキシドとの反応（例えば、(a) N.V. Kondratenko, O.A. Radchenko, L. M. Yagupol<'>ski, J. Org. Chem. USSR 1984, 20, 2051を参照のこと）。
ｃ）o−メシチレンスルホニルヒドロキシルアミン(MSH)とのスルホキシドの反応（例えば、(a) CR. Johnson, R.A. Kirchhoff, H.G. Corkins, J. Org. Chem. 1974, 39, 2458を参照のこと）。式（IVa）の化合物の形成を伴っての保護基の続く導入は例えば、塩基性条件下での無水トリフルオロ酢酸との反応により、記載のようにして生じる。
【００３６】
段階ｃ）
式（IV）の化合物への芳香族ニトロ基の続く還元に関しては、主に多くの反応条件が利用できる（例えば、R.C Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH, New York, 1989, 411を参照のこと）。木炭上パラジウムを用いての塩化チタン（III ）又は水素化の記載される使用が特に適切である。
【００３７】
段階ｄ）
式（VI）のアルコールと２，４−ジクロロ−５−ヨード−ピリミジン（VII）との反応が、式（Va）の中間体の調製を可能にする（例えば、U. Lucking et al, WO2007/071455号を参照のこと）。
【００３８】
段階ｅ）
原則的に、種々の方法が、窒素含有複素芳香族化合物におけるトリフルオロメチル基によるハロゲンの置換のために利用できる（例えば、a) G.E. Carr, R.D. Chambers, T.F. Holmes, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 , 1988, 921 ; b) F. Cottet, M. Schlosser, Eur. J. Org. Chem. 2002, 327; c) F.G. Njoroge et al, J. Med. Chem 1997, 40, 4290を参照のこと）。
【００３９】
特に、N−メチル−２−ピロリジノン及びTHF中、ヨウ素化銅（I）、弗化カリウム及び（トリフルオロメチル）−トリメチルシランの記載される使用が、５−位置におけるピリミジン（Va）の導入のために適切であり、そして中間体（V）の形成が伴う。
【００４０】
段階ｆ）
式（V）の２−クロロ−ピリミジンは、式（III ）の中間体を得るために、式（IV）のアニリンと反応せしめられ得る（例えば、(a) J. Bryant et al, WO 2004/048343号を参照のこと）。
【００４１】
段階g）
中間体（III ）からの保護基（PG）の切断は、中間体（II）を生成する（例えば、PJ. Kocienski, Protecting Groups, Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York, 1994を参照のこと）。
記載される水素化は、ベンジル基の記載される切断のために特に適切である。THP基の切断は、必要なら、段階ｆ）の条件下ですでに生じ得る。
【００４２】
段階ｈ）
スルホキシミン（II）上のトリフルオロアセト基の切断により、式（Ia）の化合物が得られる。室温でのメタノール中、炭酸カリウムを用いての記載される方法は、このために特に適切である（例えば、(a) H. Okamura, C. BoIm, Org. Lett. 2004, 6, 1305を参照のこと）。
【００４３】
一般情報：
スルホキシミン導入体を除いて、物質は、MPL ISIS Drawに包含される、プログラムAutonom 2000 Nameを用いて命名された。Autonom 2000 Nameはいずれのスルホキシミンも受け入れず、従ってスルホキシミンは、IUPAC規則（IUPAC, Nomenclature of Organic Chemistry, 1979 Edition, C-6.3. Sulfoxides and Sulfones, RuIe C-633, 633.1 Sulfimide and Sulfoximide）に従って命名された。
略語：
【００４４】
【表１】
0005564054.tif 000014
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】図１は、例5-SI-2による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、4日目で開始した。処理は、次の投与量及び適用レジメで実施された：  グループ１：（対照グループ）−溶解剤（40％PEG400/60％水）；  グループ２：例5-SI-2, 周期的処理レジメ、１日当たり２度、経口、４，５，11，12日目、投与量5mg/kg  A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。  B)17日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対する処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【００４６】
【図２】図２は、V11による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、4日目で開始した。処理は、次の投与量及び適用レジメで実施された：
【００４７】
グループ１：（対照グループ）−溶解剤（30％HPβCD/70％水、４〜17日目、１日当たり１度の経口投与）；
グループ２：V11,周期的処理レジメ、１日当たり２度、経口、４，５，11，12日目、投与量８mg/kg。
A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。
B)17日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対するそれぞれの処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【００４８】
【図３】図３は、例6-SI-2による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、4日目で開始した。処理は、次の投与量で及び４，５，11，12,17及び18日目、１日当たり２回の経口適用から成る周期的処理レジメで実施された：
【００４９】
グループ１：（対照グループ）−溶解剤（40％PEG400/60％水）；
グループ２：例6-SI-2、投与量3mg/kg
グループ３：例6-SI-2、投与量４mg/kg
グループ４：例6-SI-2、投与量５mg/kg
A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。
B)２０日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対するそれぞれの処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【００５０】
【図４】図４は、V12による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、4日目で開始した。処理は、次の投与量で及び４，５，11，12,17,18,23及び24日目、１日当たり２回の経口適用から成る周期的処理レジメで実施された：
【００５１】
グループ１：（対照グループ）−溶解剤（40％PEG400/60％水）；
グループ２：V12、投与量７mg/kg
グループ３：V12、投与量8.5mg/kg
グループ４：V12、投与量10mg/kg
A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。
B)28日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対するそれぞれの処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【００５２】
【図５】図５は、2-SI-2による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、5日目で開始した。処理は、次の投与量で及び５，６，12,13,19及び20日目、１日当たり２回の経口適用から成る周期的処理レジメで実施された：
【００５３】
グループ１：（対照グループ）−溶解剤（40％PEG400/60％水）；
グループ２：2-SI-2、投与量1.5mg/kg
グループ３：2-SI-2、投与量２mg/kg
グループ４：2-SI-2、投与量2.5mg/kg
A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。
B)20日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対するそれぞれの処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【００５４】
【図６】図６は、V13による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、5日目で開始した。処理は、次の投与量で及び５，６，12,13,19及び20日目、１日当たり２回の経口適用から成る周期的処理レジメで実施された：
【００５５】
グループ１：（対照グループ）−溶解剤（40％PEG400/60％水）；
グループ２：V13、投与量６mg/kg
グループ３：V13、投与量８mg/kg
グループ４：V13、投与量10mg/kg
A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。
B)20日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対するそれぞれの処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【００５６】
【図７】図７は、1-SI-2による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、5日目で開始した。処理は、次の投与量で及び５，６，12,13,19及び20日目、１日当たり２回の経口適用から成る周期的処理レジメで実施された：
【００５７】
グループ１：（対照グループ）−溶解剤（40％PEG400/60％水）；
グループ２：1-SI-2、投与量1.5mg/kg
グループ３：1-SI-2、投与量２mg/kg
グループ４：1-SI-2、投与量2.5mg/kg
A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。
B)20日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対するそれぞれの処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【００５８】
【図８】図８は、V14による処理の間、ヒトHeLa-MaTu頸部腫瘍異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の阻害を示す。HeLa-MaTu細胞を、0日目にNMRIヌードマウスに皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに達した後、5日目で開始した。処理は、次の投与量で及び５，６，12,13,19及び20日目、１日当たり２回の経口適用から成る周期的処理レジメで実施された：
【００５９】
グループ１：（対照グループ）−溶解剤（40％PEG400/60％水）；
グループ２：V14、投与量６mg/kg
グループ３：V14、投与量８mg/kg
グループ４：V14、投与量10mg/kg
A)時間の関数としてのHeLa-MaTu異種移植片腫瘍の増殖。
B)20日目でのHeLa-MaTu腫瘍の重量、及び対照グループにおける平均腫瘍重量に対するそれぞれの処理グループにおける平均腫瘍重量の比（T/C）。
【実施例】
【００６０】
例１：(RS)-S-シクロプロピル-S-(4-｛[4‐｛[（lR,2R）‐2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]オキシ｝‐5- (トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)スルホキシミド：
【化１３】
0005564054.tif 000015
【００６１】
1a）中間体の調製：
化合物1.1：１−シクロプロピルスルファニル−４−ニトロベンゼン：
【化１４】
0005564054.tif 000016
【００６２】
1.78g（44.6mモル）の水素化ナトリウム（60％）を、100mlのTHF/100mlのジエチルエーテル中、3.00g（40.5mモル）のシクロプロパンチオール（E. Block et al, J. Am. Chem. Soc. 1992, 114, 3492に従って調製された）の溶液に少しずつ添加し、そして室温で30分間、撹拌した。次に、6.00g（38.7mモル）の１−フルオロ−４−ニトロベンゼンを少しずつ添加した。その混合物を40℃で２時間、撹拌した。それを冷却した後、その混合物を水に置き、そしてベンゼン（３×）により抽出した。組合された有機相を、蒸発により濃縮し、そして残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル95：5）により精製した。4.6g（23.6mモル；収率61％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 8.12 (m, 2H), 7.54 (m, 2H), 2.35 (m, 1 H), 1.16 (m, 2H), 0.61 (m, 2H)。
【００６３】
化合物1.2：（RS）−１−シクロプロパンスルフィニル−４−ニトロベンゼン：
【化１５】
0005564054.tif 000017
【００６４】
179mg（1.11mモル）の塩化鉄（III ）を、140mlのアセトニトリル中、7.2g（36.88mモル）の１−シクロプロピルスルファニル−４−ニトロベンゼンの混合物に添加し、そしてそれを室温で15分間、撹拌した。次に、9.25g（40.57mモル）の過ヨウ素酸を25℃で少しずつ添加した。その混合物を30分間、撹拌し、そして次に、撹拌しながら、冷却された飽和チオ硫酸ナトリウム溶液に添加した。次に、それを酢酸エチル（２×）により抽出した。組合された有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル１：１）により精製した。5.93g (28.07mモル；収率76％)の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 8.41 (m, 2H), 7.98 (m, 2H), 2.60 (m, 1 H), 1.01 (m, 3H), 0.86 (m, 1 H)。
【００６５】
化合物1.3：（RS）−S−シクロプロピル−S−（４−ニトロフェニル）−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシド：
【化１６】
0005564054.tif 000018
【００６６】
1.58g（3.58mモル）の酢酸ロジウム（II）ダイマーを、アルゴン下で、801mlのDCM中、15.1g（71.53mモル）の（RS）−１−シクロプロパンスルフィニル−４−ニトロベンゼン、17.8g（157.37mモル）のトリフルオロアセトアミド、38.0g（118.02mモル）のヨードベンゼンジアセテート及び12.7g（314.73mモル）の酸化マグネシウムの懸濁液に添加し、そして室温で一晩、撹拌した。その混合物を吸引によりセライトを通して濾過し、そして蒸発により濃縮した。残る残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル２：１）により精製した。18.0g（55.97mモル；収率78％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 8.49 (m, 2H), 8.25 (m, 2H), 3.56 (m, 1 H), 1.51 (m, 1H), 1.41 (m, 1 H), 1.18 (m, 2H)。
【００６７】
化合物1.4：（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド：
【化１７】
0005564054.tif 000019
【００６８】
1.4gの木炭上パラジウム（10％/50％湿分）を、214mlのエタノール及び39mlのTHF中、6.9g（21.44mモル）の（RS）−S−シクロプロピル−S−（4−ニトロフェニル）−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシドの溶液に添加し、そして25℃で通常の圧力下で１時間、水素化した。さらに、木炭上パラジウム（1.4g）を添加し、そしてそれを室温でさらに4.5時間、水素化した。その混合物を濾過し、1.4gの木炭上のパラジウムを再び濾液に添加し、そして最終的に、45分間、水素化した。その混合物を濾過し、そして蒸発により濃縮した。5.8g（19.91mモル；収率93％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 7.53 (m, 2H), 6.71 (m, 2H), 6.40 (br, 2H), 3.21 (m, 1 H), 1.28 (m, 2H), 1.08 (m, 2H)。
【００６９】
化合物1.5：（2R，3R）−３−ベンジルオキシ−ブタン−２−オール：
【化１８】
0005564054.tif 000020
【００７０】
5.00g（44.6mモル）のカリウムtert−ブチレートを、300mlのTHF中、4.00g（44.4mモル）の(2R, 3R)−ブタン−２，３−ジオールの溶液に室温で添加し、そしてその混合物を15分間、還流した。その混合物を約50℃に冷却し、そして5.3ml（44.6mモル）の臭化ベンジルを添加した。それを３時間、還流し、そして次に、室温で一晩、撹拌した。その混合物を酢酸エチル及び塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして次に、1Nの塩化水素溶液（１×）及び塩化ナトリウム溶液（2×）により洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル１：１）により精製した。3.41g（18.9mモル、収率43％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 7.35 (m, 4H), 7.28 (m, 1 H), 4.52 (m, 3H), 3.67 (m, 1 H), 3.37 (m, 1 H), 1.05 (d, 3H), 1.01 (d, 3H)。
【００７１】
化合物1.6：４−（（1R, 2R）−２−ベンジルオキシ−１−メチル−プロポキシ）−２−クロロ−５−ヨード−ピリミジン：
【化１９】
0005564054.tif 000021
【００７２】
2.07gの水素化ナトリウム（55％）を、0℃で撹拌しながら、56mlのジエチルエーテル中、8.55g（47.4mモル）の（2R, 3R）−３−ベンジルオキシ−ブタン−２−オールに少しずつ添加した。10分後、氷浴を除き、そしてそれを室温でさらに３分間、撹拌した。形成される懸濁液を、6.52g（23.7mモル）の２，４−ジクロロ−５−ヨード−ピリミジンの溶液に0℃で添加した。その混合物を40℃で４時間、撹拌し、そして次に、希塩化ナトリウム溶液を添加した。次に、それを酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル４：１）により精製した。4.12g（9.8mモル、収率41％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 8.78 (s, 1 H), 7.29 (m, 5H), 5.27 (m, 1 H), 4.64 (d, 1 H), 4.53 (d, 1 H), 3.73 (m, 1 H), 1.30 (d, 3H), 1.19 (d, 3H)。
【００７３】
化合物1.7：4-((1R,2R)-2-ベンジルオキシ-1-メチル-プロポキシ)-2-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン：
【化２０】
0005564054.tif 000022
【００７４】
3.82g（20.0mモル）のヨウ化銅（I）、0.97g（16.7mモル）の弗化カリウム及び2.47ml（16.7mモル）の（トリフルオロメチル）−トリメチルシランを撹拌下で、15.8mlのNMP及び15.8mlのTHF中、4.66g（11.1mモル）の４−（（1R, 2R）−２−ベンジルオキシ−１−メチル−プロポキシ）−２−クロロ−５−ヨード−ピリミジンの溶液に室温で添加した。その混合物を80℃で5.5時間、撹拌した。冷却の後、その混合物を希塩化ナトリウム溶液に添加し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル４：１）により精製した。2.17g（6.0mモル、収率54％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 8.81 (s, 1 H), 7.21 (m, 5H), 5.40 (m, 1 H), 4.57 (d, 1 H), 4.42 (d, 1 H), 3.70 (m, 1 H), 1.28 (d, 3H), 1.13 (d, 3H)。
【００７５】
化合物1.8：(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-(ベンジルオキシ)-1-メチルプロピル]オキシ｝-5-(トリフルオロメチル) ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-シクロプロピル-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミド：
【化２１】
0005564054.tif 000023
【００７６】
ジオキサン中、塩化水素の4N溶液0.96mlを、18.8mlのアセトニトリル中、1.39g（3.85mモル）の4-((1R,2R)-2-ベンジルオキシ-1-メチル-プロポキシ)-2-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン及び1.35g（4.62mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドに添加し、そして80℃で５時間、撹拌した。冷却の後、その混合物を酢酸エチルにより希釈し、そして飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び飽和塩化ナトリウム溶液により洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル４：１）により精製した。1.32g（2.14mモル、収率56％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 10.71 (s, 1 H), 8.84 (s, 1 H), 8.08 (m, 2H), 7.93 (m, 2H), 7.26 (m, 5H), 5.52 (m, 1 H), 4.62 (d, 1 H), 4.51 (d, 1 H), 3.78 (m, 1 H), 3.35 (m, 1 H), 1.37 (m, 5H), 1.16 (m, 5H)。
【００７７】
化合物1.9：(RS)-S-シクロプロピル-S-(4-｛[4-｛[(1R, 2R)-2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]オキシ｝-5- (トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミド：
【化２２】
0005564054.tif 000024
【００７８】
1.64gの木炭上パラジウム（10％）を、66mlのエタノール中、1.31g（2.12mモル）の(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-(ベンジルオキシ)-1-メチルプロピル]オキシ｝-5-(トリフルオロメチル) ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-シクロプロピル-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミドの溶液に添加し、そして室温で、通常の圧力下で水素化した。その混合物を濾過し、そして蒸発により濃縮した。0.88g（1.67mモル；収率79％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 10.65 (s, 1 H), 8.58 (s, 1 H), 8.04 (m, 2H), 7.89 (m, 2H), 5.28 (m, 1 H), 4.86 (d, 1 H), 3.82 (m, 1 H), 3.35 (m, 1 H), 1.45 (m, 5H), 1.15 (m, 5H)。
【００７９】
1b）最終生成物の調製：
1130mg（8.20mモル）の炭酸カリウムを、35mlのメタノール中、863mg（1.64mモル）の(RS)-S-シクロプロピル-S-(4-｛[4-｛[(1R, 2R)-2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]オキシ｝-5- (トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミドに添加し、そして室温で1.5時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（３×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。709mg（1.64mモル）の原生成物を得た。
【００８０】
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.50 (s, 1 H), 8.59 (s, 1 H), 7.94 (m, 2H), 7.84 (m, 2H), 5.32 (m, 1 H), 4.91 (d, 1 H), 4.07 (s, 1 H), 3.86 (m, 1 H), 2.63 (m, 1 H), 1.30 (d, 3H), 1.11 (m, 4H), 0.91 (m, 3H). MS: 431 (ES+)。
【００８１】
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak IA 5μ 250x30 mm
溶離剤：ヘキサン/エタノール８：２
流速：40.0ml/分
検出器：UV254nm
温度：室温
保持時間：10.8-13.4分；立体異性体１（＝例1-SI-1）
13.6-18.5分；立体異性体２（＝例1-SI-2）
【００８２】
例２：(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1 R,2R)-2-ヒドロキシ-1 -メチルプロピル]オキシ｝-5- 
(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-メチルスルホキシミド：
【化２３】
0005564054.tif 000025
【００８３】
2a）中間体の調製：
化合物2.1：（RS）−S−（４−ニトロフェニル）−S−メチルスルホキシミド：
【化２４】
0005564054.tif 000026
【００８４】
0.70g（10.76mモル）のアジ化ナトリウムを、20mlのDCM中、1.56g（8.42mモル）の１−（メチルスルフィニル）−４−ニトロベンゼンに添加した。2.3mlの濃硫酸を前記混合物に0℃でゆっくり添加し、そして次にそれを45℃に加熱した。16時間後、前記混合物を室温に冷却し、そして水の添加の後、それをDCMにより抽出した。水性相を、15％水酸化ナトリウム溶液によりpH11に調節し、そしてDCM（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。1.08g（5.39mモル；収率63％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ = 8.43 (m, 2H), 8.17 (m, 2H), 4.62 (s, 1 H), 3.18 (s, 3H)。
【００８５】
化合物2.2：（RS）−S−メチル−S−（４−ニトロフェニル）−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド：
【化２５】
0005564054.tif 000027
【００８６】
1.00ml（7.08mモル）の無水トリフルオロ酢酸を、氷による冷却下で、32mlのDCM中、1000mg（4.99mモル）の（RS）−S−（４−ニトロフェニル）−S−メチルスルホキシド、55mg（0.45mモル）のDMAP及び0.76ml（5.49mモル）のトリエチルアミンの溶液に滴下した。その混合物を氷浴上でさらに２時間、撹拌した。それをDCMにより希釈し、そして半濃縮された塩化ナトリウム溶液により洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル60：40）により精製した。得られる生成物を最終的にジイソプロピルエーテルと共に撹拌した。固形物を吸引により濾過し、そして乾燥した。1444mg（4.87mモル；収率98％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 8.50 (m, 2H), 8.24 (m, 2H), 3.87 (s, 3H)。
【００８７】
化合物2.3：（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−メチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド：
【化２６】
0005564054.tif 000028
【００８８】
292mgの木炭上パラジウム（10％/50％湿分）を、45mlのエタノール及び８mlのTHF中、1.34g（4.52mモル）の（RS）−S−メチル−S−（4−ニトロフェニル）−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシドの溶液に添加し、そして24℃で通常の圧力下で４５分間、水素化した。その混合物を濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣を、ジイソプロピルエーテルと共に撹拌した。固形物を吸引下し、そして乾燥した。1.07g（4.03mモル；吸率89％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 7.54 (m, 2H), 6.67 (m, 2H), 6.35 (s, 2H), 3.55 (s, 3H)。
【００８９】
化合物2.4：(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-(ベンジルオキシ)-1-メチルプロピル]オキシ｝-5-(トリフルオロメチル) ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-メチル-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミド：
【化２７】
0005564054.tif 000029
【００９０】
ジオキサン中、塩化水素の4N溶液0.97mlを、19.0mlのアセトニトリル中、1.40g（3.88mモル）の4-((1R,2R)-2-ベンジルオキシ-1-メチル-プロポキシ)-2-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン及び1.20g（4.51mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−メチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドに添加し、そして80℃で６時間、撹拌した。冷却の後、その混合物を酢酸エチルにより希釈し、そして飽和炭酸水素ナトリウム溶液及び飽和塩化ナトリウム溶液により洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル１：１）により精製した。1.76g（2.98mモル、収率77％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ =10.66 (s, 1 H), 8.60 (s, 1 H), 8.02 (m, 2H), 7.93 (m, 2H), 7.21 (m, 5H), 5.46 (m, 1 H), 4.57 (d, 1 H), 4.46 (d, 1 H), 3.72 (m, 1 H), 3.68 (s, 3H), 1.31 (d, 3H), 1.16 (d, 3H)。
【００９１】
化合物2.5：(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]オキシ｝-5-(トリフルオロメチル) ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-メチル-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミド：
【化２８】
0005564054.tif 000030
【００９２】
0.18gの木炭上パラジウム（10％）を、35mlのエタノール中、1.75g（2.96mモル）の(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-(ベンジルオキシ)-1-メチルプロピル]オキシ｝-5-(トリフルオロメチル) ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-メチル-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミドの溶液に添加し、そして室温で、通常の圧力下で水素化した。その混合物を濾過し、そして蒸発により濃縮した。1.40gの原生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 10.65 (s, 1 H), 8.58 (s, 1 H), 8.04 (m, 2H), 7.93 (m, 2H), 5.28 (m, 1 H), 4.86 (d, 1 H), 3.83 (m, 1 H), 3.70 (s, 3H), 1.26 (d, 3H), 1.07 (d, 3H)。
【００９３】
2b）最終生成物の調製：
1.92g（13.89mモル）の炭酸カリウムを、60mlのメタノール中、1.39g（2.78mモル）の(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]オキシ｝-5-(トリフルオロメチル) ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-メチル-N-(トリフルオロアセチル)スルホキシミドに添加し、そして室温で1.5時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（DCM/エタノール９：１）により精製した。862mg（2.13mモル；収率77％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.47 (s, 1 H), 8.55 (s, 1 H), 7.90 (m, 2H), 7.83 (m, 2H), 5.27 (m, 1 H), 4.86 (d, 1 H), 4.04 (s, 1 H), 3.82 (m, 1 H), 3.00 (s, 3H), 1.26 (d, 3H), 1.07 (d, 3H)。
【００９４】
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak IC 5μ 250x20 mm
溶離剤：ヘキサン/エタノール８：２
緩衝液：ヘキサン/0.1％DEA
流速：25.0ml/分
検出器：UV280nm
温度：室温
保持時間：9.5-12.1分；立体異性体１（＝例1-SI-1）
13.1-16.0分；立体異性体２（＝例2-SI-2）
【００９５】
例３：(RS)-S-(4-｛[4-｛[(R)-2-ヒドロキシ-1,2-ジメチルプロピル]オキシ｝-5- 
(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-メチルスルホキシミド：
【化２９】
0005564054.tif 000031
【００９６】
3a)中間体の調製：
化合物3.1：（R）−２−メチル−ブタン−２，３−ジオール：
【化３０】
0005564054.tif 000032
【００９７】
20mlのTHF中、10.0g（96.1mモル）の（R）−（＋）−メチルラクテートの溶液を、THF中、塩化メチルマグネシウムの氷冷却された3N溶液160ml（480.0mモル）に滴下した。まず、その混合物を室温にゆっくり加熱し、そして次に、30分間、還流した。冷却後、その混合物を、飽和塩化アンモニウム溶液に添加し、そして酢酸エチル（３×）により抽出した。組合された有機相を、Whatmanフィルター上で濾過し、そして蒸発により濃縮した。4.5g（43.1mモル）の原生成物を得、そしてさらに精製しないで、それを使用した。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 4.21 (d, 1 H), 3.93 (s, 1 H), 3.29 (m, 1 H), 0.97 (m, 9H)。
【００９８】
化合物3.2：（R）−３−（２−クロロ−５−ヨード−ピリミジン−４−イルオキシ）−２−メチル−ブタン−２−オール：
【化３１】
0005564054.tif 000033
【００９９】
1.84g（42.3mモル）の水素化ナトリウム（55％）を、0℃での撹拌下で、83mlのジエチルエーテル中、4.40g（42.3mモル）の（R）−２−メチル−ブタン−２，３−ジオールの溶液に少しずつ添加し、そして10分間、撹拌した。それを室温でさらに３分間、撹拌し、そしてその混合物を、97mlのアセトニトリル中、9.68g（35.2mモル）の２，４−ジクロロ−５−ヨード−ピリミジンの氷冷却された溶液に添加した。その混合物を40℃で４時間、撹拌し、そして冷却の後、氷及び飽和NaCl溶液を添加した。次に、それを酢酸エチル（3×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル４：１）により精製した。4.96g（14.5mモル、収率41％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 8.73 (s, 1 H), 4.96 (q, 1 H), 4.62 (s, 1 H), 1.21 (d, 3H), 1.13 (s, 6H). ES: 343 (Cl+)。
【０１００】
化合物3.3：2-クロロ-4-[(R)-1,2-ジメチル-2-(テトラヒドロ-ピラン-2-イルオキシ)-プロポキシ]-5-ヨード-ピリミジン：
【化３２】
0005564054.tif 000034
【０１０１】
2.64ml（29.0mモル）のジヒドロピラン及び0.36g（1.5mモル）のピリジニウムトシレートを、30mlのDCM中、4.96g（14.5mモル）の（R）−３−（２−クロロ−５−ヨード−ピリミジン−４−イルオキシ）−２−メチル−ブタン−２−オールの溶液に添加し、そして室温で22時間、撹拌した。その混合物をDCMにより希釈し、そして飽和炭酸水素ナトリウム溶液により洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル４：１）により精製した。5.50g（12.9mモル、収率89％）のジアステレオマーの混合物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 8.75 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 5.15 (m, 2H), 4.91 (m, 2H), 3.70 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 1.31 (m, 30H)。
【０１０２】
化合物3.4：2-クロロ-4-[(R)-1,2-ジメチル-2-(テトラヒドロ-ピラン-2-イルオキシ)-プロポキシ]-5- トリフルオロメチル-ピリミジン：
【化３３】
0005564054.tif 000035
【０１０３】
1.61g（8.44mモル）のヨウ化銅（I）、0.41g（7.03mモル）の弗化カリウム及び1.04ml（7.03mモル）の（トリフルオロメチル）−トリメチルシランを室温で、3.3mlのNMP及び3.3mlのTHF中、1.00g（2.34mモル）の2-クロロ-4-[(R)-1,2-ジメチル2-(テトラヒドロ-ピラン-2-イルオキシ)-プロポキシ]-5-ヨード-ピリミジンの溶液に室温で添加した。その混合物を90℃で２時間、撹拌した。冷却の後、その混合物を希塩化ナトリウム溶液に添加し、そして酢酸エチル（３×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル４：１）により精製した。0.53g（1.43mモル、収率６１％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 8.84 (s, 1 H)1 5.32 (m, 1 H), 4.85 (m, 1 H), 3.68 (m, 1 H), 3.30 (m, 1 H), 1.31 (m, 15H)。
【０１０４】
3b）最終生成物の調製：
5mlのエタノール中、200mg（0.54mモル）の2-クロロ-4-[(R)-1,2-ジメチル2-(テトラヒドロ-ピラン-2-イルオキシ)-プロポキシ]-5- トリフルオロメチル-ピリミジン及び87mg（0.33mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−メチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドを、70℃で６時間、撹拌した。その混合物を回転蒸発器において蒸発乾燥し、そして残渣を11.6ml採取した。373mg（2.70mモル）の炭酸カリウムを前記溶液に添加し、そしてそれを室温で1.5時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。残渣をHPLCにより精製した。31mg（0.07mモル、収率14％）の生成物を得た。
【０１０５】
カラム：XBridge C18 5μ 100x30 mm
溶離剤A：水/0.1％HCOOH
溶離剤B：アセトニトリル
グラジエント：      0分      70％A      30％B
1.00分      70％A      30％B
7.50分      40％A      60％B
7.52分       1％A      99％B
10.00分       1％A      99％B
流速：50.0ml/分
【０１０６】
検出：DAD 走査範囲 210-400 nm;
MS ESI+, ESI-,走査範囲160-1000 m/z
温度：室温
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 10.48 (s, 1 H), 8.56 (s, 1 H), 7.90 (m, 2H), 7.83 (m, 2H), 5.13 (q, 1 H), 4.67 (s, 1 H), 4.06 (s, 1 H), 3.01 (s, 3H), 1.28 (d, 3H), 1.12 (m, 6H)。
【０１０７】
一般式（Ib）（４−N誘導体）の化合物の調製：
本発明の化合物を、次の段階により特徴づけられる方法により調製され得る：
ａ）式（IVc）のスルホキシドへの式（IVd）の化合物の酸化：
【化３４】
0005564054.tif 000036
【０１０８】
b1）式（IVa）の保護されたスルホキシミンへの式（IVc）のスルホキシドの直接的なイミン化：
【化３５】
0005564054.tif 000037
【０１０９】
b2）式（IVb）の保護されていないスルホキシミンへの式（IVc）のスルホキシドのイミン化及び式（IVa）の化合物への保護基の続く導入：
【化３６】
0005564054.tif 000038
【０１１０】
ｃ）式(IV)の化合物への式（IVa）の化合物の還元：
【化３７】
0005564054.tif 000039
【０１１１】
ｄ）式（VIa）のアミンとの反応による２，４−ジクロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン（VIIb）の４−位置の官能化、及び式（Vb）の中間体の形成：
【化３８】
0005564054.tif 000040
【０１１２】
e）式（Vb）及び（IV）の化合物のカップリング、式（IIｂ）の中間体の形成：
【化３９】
0005564054.tif 000041
【０１１３】
ｆ）スルホキシミン上の保護基の切断、及び（Ib）の形成：
【化４０】
0005564054.tif 000042
【０１１４】
（上記式の置換基R1, R2, R3及びR4は、一般式（Ｉ）に記載される意味を有する）。
段階ａ）−ｃ）：
それらの段階は、一般式（Ia）の化合物の調製のための段階ａ）−ｄ）と同一である。
【０１１５】
段階ｄ）：
式（VIa）のアミンと、２，４−ジクロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン（VIIb）との反応は、生成物（Vb）及び（Vc）の混合物を提供する。所望する生成物（Vb）は、例えばクロマトグラフィーにより分離され得る（例えば、(a) J. Bryant et al, WO 2004/048343号を参照のこと）。
【０１１６】
段階ｅ）：
式（Vb）の２−クロロ−ピリミジンが式（IV）のアニリンと反応され、式（IIb）の中間体が得られる（例えば、(a) J. Bryant et al, WO 2004/048343号を参照のこと）。
【０１１７】
段階ｆ）：
スルオキシミン（IIb）上のトリフルオロアセト基の切断は、式（Ib）の化合物を提供する。室温でのメタノール中、炭酸カリウムを用いての記載される技法はこのために特に適切である。
【０１１８】
例４：(RS)-S-シクロプロピル-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]アミノ｝ -5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)スルホキシミド：
【化４１】
0005564054.tif 000043
【０１１９】
4a)中間体の調製：
化合物4.1：（2R, 3R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−ブタン−２−オール：
【化４２】
0005564054.tif 000044
【０１２０】
72.2ml（520.70mモル）のトリエチルアミンを、1035mlのアセトニトリル中、56.5g（260.35mモル）の２，４−ジクロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン及び32.7g（260.35mm）の（2R, 3R）−３−アミノ−ブタン−２−オール塩酸塩に0℃で滴下した。その混合物を室温に一晩、ゆっくり加熱した。その混合物を半濃縮された塩化ナトリウム溶液に添加し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（ヘキサン/酢酸エチル0−100％）により精製した。18.6g（68.97mモル、収率27％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 8.38 (s, 1 H), 6.71 (d, 1 H), 5.00 (d, 1 H), 4.08 (m, 1 H), 3.71 (m, 1 H), 1.12 (d, 3H), 1.01 (d, 3H)。
（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルオキシミドの調製は、化合物1.4の調製と同じである。
【０１２１】
4b)最終生成物の調製：
ジオキサン中、塩化水素の4Nの溶液0.21mlを、3.75mlのアセトニトリル中、250mg（0.86mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルオキシミド及び231mg（0.86mモル）の（2R, 3R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）ブタン−２−オールに添加し、そして次に、60℃で3.5時間、撹拌した。その混合物を蒸発乾燥した。18.4mlのメタノール及び590mg（4.28mモル）の炭酸カリウムを添加し、そしてそれを室温で１時間、撹拌した。それを、飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣をクロマトグラフィー（DCM/メタノール４：１）により精製した。242mg（0.56mモル、収率65％）の生成物を得た。
【０１２２】
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.04 (s, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 7.91 (m, 2H), 7.74 (m, 2H), 6.05 (d, 1 H), 5.07 (d, 1 H), 4.14 (m, 1 H), 3.97 (s, 1 H), 3.77 (m, 1 H), 2.56 (m, 1 H), 1.19 (d, 3H), 1.05 (m, 4H), 0.86 (m, 3H). MS: 430 (ESI+)。
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak IA 5μ 250x20 mm
溶離剤：ヘキサン/2−プロパノール50：50
緩衝液：ヘキサン/0.1％DEA
流速：15.0ml/分
検出器：UV254nm
温度：室温
保持時間：5.9-6.6分；立体異性体１（＝例4-SI-1）
7.1-8.8分；立体異性体２（＝例４-SI-2）
【０１２３】
例５：(RS)-S-シクロプロピル-S-(4-｛[4-｛[(R)-2-ヒドロキシ-1,2-ジメチルプロピル]アミノ｝ -5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)スルホキシミド：
【化４３】
0005564054.tif 000045
【０１２４】
5a)中間体の調製：
化合物5.1：(R)-3-(2-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン-4-イルアミノ)-2-メチル-ブタン-2-オール：
【化４４】
0005564054.tif 000046
【０１２５】
3.6g（35.03mモル）の（R）−３−アミノ−２−メチル−ブタン−２−オールを、139mlのアセトニトリル中、7.6g（35.03mモル）の２，４−ジクロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジンの溶液に滴下した。9.7ml（70.1mモル）のトリエチルアミンを0℃で滴下し、そしてその混合物を室温に一晩ゆっくり加熱した。それを室温でさらに２日間、撹拌した。その混合物を半濃縮された塩化ナトリウム溶液に添加し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣を分離用HPLCにより精製した。3.0g（10.65mモル、収率30％）の生成物を得た。
【０１２６】
カラム：XBridge C18 5μ 150x20 mm
溶離剤A：水/0.2％NH3
溶離剤B：アセトニトリル
グラジエント：70%A+30%B(2') 30->60%B(10') 60->99%B(0.1')
流速：50.0ml/分
検出：DAD (200-400 nm) TAC ; MS-ESI+ (160-1000 m/z) TIC
温度：室温
保持時間：5.6−6.4分
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 8.42 (s, 1 H), 6.52 (d, 1 H), 5.01 (s, 1 H), 4.10 (m, 1 H), 1.11 (m, 9H)。
（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドの調製は、化合物1.4の調製と同じである。
【０１２７】
5b)最終生成物の調製：
ジオキサン中、塩化水素の4Nの溶液0.34mlを、6.0mlのアセトニトリル中、400mg（1.37mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド及び388mg（1.37mモル）の(R)-3-(2-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン-4-イルアミノ)-2-メチル-ブタン-2-オールに添加し、そして次に、60℃で3.5時間、撹拌した。その混合物を蒸発乾燥した。29.4mlのメタノール及び950mg（6.84mモル）の炭酸カリウムを添加し、そしてそれを室温で１時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。600mg（1.35mモル）の粗生成物を得た。
【０１２８】
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.08 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 7.94 (m, 2H), 7.80 (m, 2H), 6.07 (d, 1 H), 4.95 (s, 1 H), 4.16 (m, 1 H), 4.02 (s, 1 H), 2.62 (m, 1 H), 1.20 (m, 6H), 1.10 (m, 4H), 0.89 (m, 3H). MS: 444 (ESI+)。
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak AD-H 5μ 250x20 mm
溶離剤：ヘキサン/2−プロパノール60：40
緩衝液：ヘキサン/0.1％DEA
流速：20.0ml/分
検出器：UV280nm
温度：室温
保持時間：5.1-6.3分；立体異性体１（＝例5-SI-1）
8.0-10.8分；立体異性体２（＝例5-SI-2）
【０１２９】
例６：(RS)-S-エチル-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]アミノ｝-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)スルホキシミド：
【化４５】
0005564054.tif 000047
6a)中間体の調製：
化合物6.1：１−エチルスルファニル−４−ニトロベンゼン：
【化４６】
0005564054.tif 000048
【０１３０】
16.56g（106.72mモル）の４−ニトロチオフェノールを、水により冷却しながら、320mlのエタノール中、4.27g（106.76mモル）の水酸化ナトリウムの溶液に添加し、そしてそれを室温で15分間、撹拌した。次に、水により冷却しながら、8.63ml（106.79mモル）のヨウ化エチルを添加し、そしてその混合物を室温で一晩、撹拌した。その混合物を飽和塩化ナトリウム溶液に添加し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組合された有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。次に、それをDCMに溶解し、そして再び濾過し、そして蒸発乾燥した。16.86g（92.02mモル）の原生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 8.14 (m, 2H), 7.49 (m, 2H), 3.14 (q, 2H), 1.31 (tr, 3H)。
【０１３１】
化合物6.2：（RS）−１−エチルスルフィニル−４−ニトロベンゼン：
【化４７】
0005564054.tif 000049
【０１３２】
428mg（2.64mモル）の塩化鉄（III ）を、75mlのアセトニトリル中、16.86g（92.02mモル）の１−エチルスルファニル−４−ニトロベンゼンの混合物に添加し、そしてそれを室温で10分間、撹拌した。次に、22.44g（98.44mモル）の過ヨウ素酸を、温度が30℃を超えないよう、少しずつ添加した。その混合物を50分間、撹拌し、そして次に、撹拌しながら、170mlのDCM、500mlの氷水及び100gのチオ硫酸ナトリウム五水和物の混合物に添加した。次に、それをDCM（２×）により抽出した。組合された有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。得られる残渣を酢酸エチル/ヘキサンから再結晶化した。12.49g (62.69mモル；収率68％)の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 8.35 (m, 2H), 7.88 (m, 2H), 3.12 (m, 1 H), 2.84 (m, 1 H), 0.99 (tr, 3H)。
【０１３３】
化合物6.3：（RS）−S−エチル−S−（４−ニトロフェニル）スルホキシミド：
【化４８】
0005564054.tif 000050
【０１３４】
30.5mlの発煙硫酸（20％SO3）を、氷浴上で注意して、6.00g（30.12mモル）の（RS）−１−エチルスルフィニル−４−ニトロベンゼンに添加した。次に、アルゴン下で、2.35g（36.14mモル）のアジ化ナトリウムを、少しずつ及び撹拌下で、注意して添加し、そして次にその混合物を45℃に加熱した。６時間後、混合物を室温に冷却し、そして注意して氷上に注いだ。その混合物を炭酸水素ナトリウムによりアルカリ性にし、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。5.74g（26.79mモル；収率89％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ = 8.37 (m, 2H), 8.09 (m, 2H), 4.56 (s, 1 H), 3.18 (q, 2H), 1.04 (tr, 3H)。
【０１３５】
化合物6.4：（RS）−S−エチル−S−（４−ニトロフェニル）−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド：
【化４９】
0005564054.tif 000051
【０１３６】
4.53ml（32.04mモル）の無水トリフルオロ酢酸を、氷による冷却下で、175mlのDCM中、5.72g（26.70mモル）の（RS）−S−エチル−S−（４−ニトロフェニル）スルホキシミド、及び4.07ml（29.37mモル）のトリエチルアミンの溶液に滴下した。その混合物を氷浴上でさらに３時間、撹拌し、個々で温度は約10℃に上昇した。それをDCMにより希釈し、そして半濃縮された塩化ナトリウム溶液により洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。8.17g（26.33mモル）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 8.52 (m, 2H), 8.22 (m, 2H), 3.99 (m, 2H), 1.16 (tr, 3H)。
【０１３７】
化合物6.5：（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−エチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシド：
【化５０】
0005564054.tif 000052
【０１３８】
約10％塩酸中、塩化チタン（III ）の15％溶液88.5mlを、191mlのTHF中、4.05g（13.05mモル）の（RS）−S−エチル−S−（４−ニトロフェニル）−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドの溶液に、氷冷却下でゆっくり添加した。その混合物を室温で3.5時間、撹拌し、酢酸エチルにより希釈し、そして次に、半濃縮された塩化ナトリウム溶液（３×）により洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。3.17g（11.31mモル）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO):δ= 7.48 (m, 2H), 6.68 (m, 2H), 3.64 (m, 2H), 1.06 (tr, 3H)。
（2R,3R）-3-(2-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン-4-イルアミノ)-ブタン-2-オールの調製は、化合物4.1の調製と同じである。
【０１３９】
6b)最終生成物の調製：
ジオキサン中、塩化水素の4Nの溶液0.36mlを、7.0mlのアセトニトリル中、400mg（1.43mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−エチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド及び385mg（1.43mモル）の（2R,3R）-3-(2-クロロ-5-トリフルオロメチル-ピリミジン-4-イルアミノ)-ブタン-2-オールに添加し、そして次に、60℃で4.5時間、撹拌した。その混合物を蒸発乾燥した。19.0mlのメタノール及び608mg（4.40mモル）の炭酸カリウムを添加し、そしてそれを室温で１時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。590mg（1.41mモル）の原生成物を得た。
【０１４０】
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.10 (s, 1H), 8.30 (s, 1 H), 7.96 (m, 2H), 7.78 (m, 2H), 6.10 (d, 1 H), 5.11 (d, 1 H), 4.19 (m, 1H), 4.00 (s, 1 H), 3.82 (m, 1 H), 3.07 (q, 2H), 1.24 (d, 3H), 1.06 (m, 6H). MS: 418 (ESI+)。
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak AD-H 5μ 250x20 mm
溶離剤：ヘキサン/2−プロパノール60：40
緩衝液：ヘキサン/0.1％DEA
流速：20.0ml/分
検出器：UV280nm
温度：室温
保持時間：6.2-6.8分；立体異性体１（＝例6-SI-1）
7.2-8.9分；立体異性体２（＝例6-SI-2）。
【０１４１】
例７：(RS)-S-エチル-S-(4-｛[4-｛[(R)-2-ヒドロキシ-1,2-ジメチルプロピル]アミノ｝-5-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)スルホキシミド：
【化５１】
0005564054.tif 000053
【０１４２】
7a）中間体の調製：
（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−エチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドの調製は、化合物6.5の調製と同じであった。
（R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−２−メチル−ブタン−２−オールの調製は、化合物5.1の調製と同じであった。
7b）最終生成物の調製：
ジオキサン中、塩化水素の4Nの溶液0.36mlを、7.0mlのアセトニトリル中、400mg（1.43mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−エチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド及び405mg（1.43mモル）の（R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−２−メチル−ブタン−２−オールに添加し、そして次に、60℃で4.5時間、撹拌した。その混合物を蒸発乾燥した。25.0mlのメタノール及び788mg（5.70mモル）の炭酸カリウムを添加し、そしてそれを室温で１時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。620mg（1.43mモル）の粗生成物を得た。
【０１４３】
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.06 (s, 1 H), 8.28 (s, 1 H), 7.92 (m, 2H), 7.74 (m, 2H), 6.03 (d, 1 H), 4.90 (s, 1 H), 4.12 (m, 1 H), 3.96 (s, 1 H), 3.03 (q, 2H), 1.16 (m, 6H), 1.08 (m, 3H), 1.02 (tr, 3H). MS: 432 (ESI+)。
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak AD-H 5μ 250x20 mm
溶離剤：A:ヘキサンB:2−プロパノール
緩衝液：ヘキサン/0.1％DEA
グラジエント：20->40%B(20')+40%B(5')
流速：10.0ml/分
検出器：UV280nm
温度：室温
保持時間：17.5-19.8分；立体異性体１（＝例7-SI-1）
20.1-22.0分；立体異性体２（＝例7-SI-2）。
【０１４４】
例８：(RS)-S-(4-｛[4-｛[(1R,2R)-2-ヒドロキシ-1-メチルプロピル]アミノ｝-5-(トリフルオロメチル) ピリミジン-2-イル]アミノ｝フェニル)-S-メチルスルホキシミド：
【化５２】
0005564054.tif 000054
【０１４５】
8a）中間体の調製：
（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−メチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドの調製は、化合物2.3の調製と同じであった。
（2R,3R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−ブタン−２−オールの調製は、化合物4.1の調製と同じであった。
【０１４６】
8b）最終生成物の調製：
ジオキサン中、塩化水素の4Nの溶液0.38mlを、7.3mlのアセトニトリル中、399mg（1.50mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−メチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド及び404mg（1.50mモル）の（2R,3R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−ブタン−２−オールに添加し、そして次に、60℃で９時間、撹拌した。その混合物を蒸発乾燥した。32.2mlのメタノール及び1040mg（7.50mモル）の炭酸カリウムを添加し、そしてそれを室温で1.5時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。565mg（1.40mモル）の粗生成物を得た。
【０１４７】
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.09 (s, 1 H), 8.30 (s, 1 H), 7.96 (m, 2H), 7.83 (m, 2H), 6.10 (d, 1 H), 5.11 (d, 1 H), 4.18 (m, 1 H), 4.03 (s, 1 H), 3.82 (m, 1 H), 3.03 (s, 3H), 1.25 (d, 3H), 1.10 (d, 3H)。
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak IC 5μ 250x20 mm
溶離剤：ヘキサン/2−プロパノール50:50
緩衝液：ヘキサン/0.1％DEA
流速：20.0ml/分
検出器：UV254nm
温度：室温
保持時間：5.1-5.8分；立体異性体１（＝例8-SI-1）
6.1-6.7分；立体異性体２（＝例8-SI-2）。
【０１４８】
例９：
【化５３】
0005564054.tif 000055
【０１４９】
9a）中間体の調製：
（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−メチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドの調製は、化合物2.3の調製と同じであった。
（R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−２−メチル−ブタン−２−オールの調製は、化合物5.1の調製と同じであった。
【０１５０】
9b）最終生成物の調製：
ジオキサン中、塩化水素の4Nの溶液0.38mlを、7.3mlのアセトニトリル中、399mg（1.50mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−メチル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミド及び425mg（1.50mモル）の（R）−３−（２−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イルアミノ）−２−メチル−ブタン−２−オールに添加し、そして次に、60℃で４時間、撹拌した。その混合物を蒸発乾燥した。32.2mlのメタノール及び1040mg（7.50mモル）の炭酸カリウムを添加し、そしてそれを室温で1.5時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸エチル（２×）により抽出した。組み合わされた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発により濃縮した。600mg（1.44mモル）の粗生成物を得た。
【０１５１】
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.05 (s, 1 H), 8.26 (s, 1 H), 7.91 (m, 2H), 7.79 (m, 2H), 6.03 (d, 1 H), 4.91 (s, 1 H), 4.11 (m, 1 H), 3.99 (s, 1 H), 2.99 (s, 3H), 1.16 (m, 6H), 1.10 (m, 3H). MS: 418 (ESI+)。
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak IC 5μ 250x20 mm
溶離剤：ヘキサン/エタノール80:20
流速：30.0ml/分
検出器：UV254nm
温度：室温
保持時間：6.0-6.7分；立体異性体１（＝例9-SI-1）
7.1-8.9分；立体異性体２（＝例9-SI-2）。
【０１５２】
比較物質の調製：
ピリミジンの位置５での５−CF3置換基により特徴づけられる本発明の化合物を、インビトロ及びインビボ効能に関して、WO2005/037800号に明白に開示されているか、又は他方では、その一般的開示により保護されている、それらの５−Br類似体と比較した。
【０１５３】
V11＝例11における５−Br比較物質：
【化５４】
0005564054.tif 000056
【０１５４】
例11における比較物質は、WO2005/037800号（p.35）における例1.6に開示される、ジアステレオマー（RS）−S−[４−（｛５−ブロモ−４−[（R）−（２−ヒドロキシ−１，２−ジメチルプロピル）アミノ]ピリミジン−２−イル｝アミノ）フェニル]−S−シクロプロピル−スルホキシミドの混合物のより活性的立体異性である。インビボ比較に関しては、（S）−S−[４−（｛５−ブロモ−４−[（R）−（２−ヒドロキシ−１，２−ジメチルプロピル）アミノ]ピリミジン−２−イル｝アミノ）フェニル]−S−シクロプロピル−スルホキシミドよりもインビトロで高い効能を有するジアステレオマー（R）−S−[４−（｛５−ブロモ−４−[（R）−（２−ヒドロキシ−１，２−ジメチルプロピル）アミノ]ピリミジン−２−イル｝アミノ）フェニル]−S−シクロプロピル−スルホキシミドが、例11に使用された。
このためには、V11を次の方法により調製した：
【０１５５】
V11a）中間体の調製：
【化５５】
0005564054.tif 000057
【０１５６】
ジオキサン中、塩化水素の4N溶液0.07mlを、16.50mlのブタノール及び1.65mlのメタノール中、988mg（3.35mモル）の（R）−３−（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イルアミノ）−２−メチル−ブタン−２−オール及び750mg（2.79mモル）の（R）−S−（４−アミノフェニル）−N−（エトキシカルボニル）−S−シクロプロピルスルホキシミド（U. Luecking et al., WO 2007 / 071455号, p. 112, 例 4に従って調製された）に添加し、そして60℃で３日間、撹拌した。冷却の後、その混合物を蒸発乾燥し、そしてクロマトグラフィー（DCM/エタノール９：１）により精製した。319mg（0.61mモル：収率22％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 9.96 (s, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 7.92 (m, 2H), 7.73 (m, 2H), 6.28 (d, 1 H), 4.05 (m, 1 H), 3.84 (m, 2H), 2.96 (m, 1 H), 1.05 (m, 16H)。
【０１５７】
V11b)最終生成物の調製：
2.0mlの新しく調製された1.5Mのナトリウムエタノール溶液を、4.3mlのエタノール中、319mg（0.61mモル）の中間体に添加し、そして60℃で18時間、撹拌した。冷却の後、その混合物を、飽和塩化ナトリウム溶液に添加し、そして酢酸エチル（3×）により抽出した。組合された有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾燥した。最終再結晶化（DCM/酢酸エチル）の後、215mg（0.47mモル；収率78％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 9.68 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.86 (m, 2H), 7.70 (m, 2H), 6.07 (d, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.93 (s, 1 H), 2.55 (m, 1 H), 1.15 (m, 6H), 1.10 (m, 3H), 1.03 (m, 1 H), 0.83 (m, 3H)。
【０１５８】
カラム：Chiralpak AD-H 5μ 150x4.6 mm
溶離剤：ヘキサン/エタノール80:20
流速：1.0ml/分
検出器：PDA280nm
温度：25℃
保持時間：11.64分
【０１５９】
V12＝例12における５−Br比較物質：
【化５６】
0005564054.tif 000058
【０１６０】
例12における比較物質は、WO2005/037800号における例1.52に従って調製された。例1.52は、例1.53よりも高いインビトロ効能を有する。
【０１６１】
V13＝例13における５−Br比較物質：
【化５７】
0005564054.tif 000059
【０１６２】
例13における比較物質は、WO2005/037800号における例3.13に従って調製された。例3.13は、例3.12よりも高いインビトロ効能を有する。
【０１６３】
V14＝例14における５−Br比較物質：
【化５８】
0005564054.tif 000060
【０１６４】
V14a)中間体の調製：
【化５９】
0005564054.tif 000061
【０１６５】
ジオキサン中、塩化水素の4N溶液1.5mlを、13.1mlのアセトニトリル中、845mg（3.00mモル）の（2R, 3R）−３−（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イルオキシ）−ブタン−２−オール（WO2005/037800号、p.93に従って調製された）及び877mg（3.00mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドに添加し、そして80℃で5時間、撹拌した。さらに422mg（1.50mモル）の（2R, 3R）−３−（５−ブロモ−２−クロロ−ピリミジン−４−イルオキシ）−ブタン−２−オールを前記混合物に添加し、そしてそれを80℃でさらに撹拌した。
【０１６６】
３時間後、ジオキサン中、塩化水素の4N溶液0.75mlを再び添加し、そして80℃でさらに撹拌した。33時間後、175mg（0.60mモル）の（RS）−S−（４−アミノフェニル）−S−シクロプロピル−N−（トリフルオロアセチル）スルホキシミドを再び添加し、そして最終的にそれを80℃で18時間、撹拌した。冷却の後、その混合物を蒸発濃縮し、そして残存する残渣をクロマトグラフィー（DCM/エタノール９：１）により精製した。740mg（1.38mモル；収率46％）の生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ = 10.31 (s, 1 H), 8.44 (s, 1 H), 8.01 (m, 2H), 7.84 (m, 2H), 5.19 (m, 1H), 4.88 (d, 1H), 3.81 (m, 1H), 3.31 (m, 1H), 1.40 (m, 1H), 1.29 (m, 4H), 1.08 (m, 5H)。
【０１６７】
V14b）最終生成物の調製：
950mg（6.84mモル）の炭酸カリウムを、29mlのメタノール中、735mg（1.37mモル）の前記中間体に添加し、そしてそれを室温で1.5時間、撹拌した。それを飽和塩化ナトリウム溶液により希釈し、そして酢酸（３×）により抽出した。組合された有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾燥した。607mg（1.37mモル）の原生成物を得た。
1H-NMR (400 MHz, DMSO): δ= 10.08 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 7.86 (m, 2H), 7.75 (m, 2H), 5.19 (m, 1 H), 4.87 (d, 1 H), 3.97 (s, 1 H), 3.82 (m, 1 H), 2.56 (m, 1 H), 1.25 (d, 3H), 1.09 (d, 3H), 1.05 (m, 1 H), 0.86 (m, 3H)。
【０１６８】
ジアステレオマーの混合物を、分離用HPLCにより純粋な立体異性体に分離した：
カラム：Chiralpak IC 5μ 250x20 mm
溶離剤：ヘキサン/エタノール７：３
流速：20.0ml/分
検出器：UV280nm
温度：室温
保持時間：9.6-11.2分；立体異性体１
11.3-14.9分；立体異性体２
立体異性体２は立体異性体１よりも高いインビトロ効能を示し、そして従って、例14において比較物質として使用した。
【０１６９】
例10：
10.1アッセイ１：CDK1/CycBキナーゼアッセイ：
バキュロウィルス−感染された昆虫細胞（Sf9）から精製された、組換えCDK1−及びCycB−GST融合タンパク質を、ProQinase GmbH, Freiburgから購入した。キナーゼ基質として使用されるヒストンIII Sは、Sigma Companyから市販されている。
【０１７０】
CDK1/CycB（200ng/測定）を、アッセイ緩衝液（50mモルのトリス/HCl、pH8.0、10mモルのMgCl2、0.1mモルのNaオルト−バナデート、1.0mモルのジチオトレイトール、0.5μmのアデノシン三リン酸（ATP）、10μg/測定点のヒストンIII S、0.2μCi/測定点の33P-γATP、0.05％のNP40, 12.5％のジメチルスルホキシド）における種々の濃度の試験物質（Oμm、及び0.01〜100μm以内）の存在下で22℃で10分間インキュベートした。反応は、EDTA溶液（250mモル、pH8.0、15μl/測定点）を添加することにより停止された。
【０１７１】
個々の反応混合物から、15μlを、P30フィルターストリップ（Wallac からの）に適用し、そして組込まれなかった33P−ATPを、0.5％のリン酸におけるそれぞれ10分間のフィルターストリップの３回の洗浄サイクルにより除去した。フィルターストリップを70℃で１時間、乾燥した後、フィルターストリップを、シンチレーターストリップ（MeltiLexTMA、Wallacからの）により被覆し、そして90℃で１時間、貯蔵した。組込まれる33P（基質リン酸化）の量を、γ−線測定装置（Wallac）により決定した。測定されたデータを、0％阻害率（インヒビターを伴わないでの酵素反応）及び100％阻害率（酵素を除くすべてのアッセイ成分）に標準化した。IC50値を、前記会社自体のソフトウェアを用いて、４−パラメーター適合により決定した。
【０１７２】
10.2アッセイ２：CDK2/CycEキナーゼアッセイ：
バキュロウィルス−感染された昆虫細胞（Sf9）から精製された、組換えCDK2−及びCycE−GST融合タンパク質を、ProQinase GmbH, Freiburgから購入した。キナーゼ基質として使用されるヒストンIII Sは、Sigma Companyから市販されている。
【０１７３】
CDK2/CycE（50ng/測定点）を、アッセイ緩衝液（50mモルのトリス/HCl、pH8.0、10mモルのMgCl2、0.1mモルのNaオルト−バナデート、1.0mモルのジチオトレイトール、0.5μmのアデノシン三リン酸（ATP）、10μg/測定点のヒストンIII S、0.2μCi/測定点の33P-γATP、0.05％のNP40, 1.25％のジメチルスルホキシド）における種々の濃度の試験物質（Oμm、及び0.01〜100μm以内）の存在下で22℃で10分間インキュベートした。反応は、EDTA溶液（250mモル、pH8.0、15μl/測定点）を添加することにより停止された。
【０１７４】
個々の反応混合物から、15μlを、P30フィルターストリップ（Wallac Company）に適用し、そして組込まれなかった33P−ATPを、0.5％のリン酸におけるそれぞれ10分間のフィルターストリップの３回の洗浄サイクルにより除去した。フィルターストリップを70℃で１時間、乾燥した後、フィルターストリップを、シンチレーターストリップ（MeltiLexTMA、Wallac Company）により被覆し、そして90℃で１時間、乾燥した。組込まれる33P（基質リン酸化）の量を、γ−線測定装置（Wallac）におけるシンチレーション測定により決定した。測定されたデータを、0％阻害率（インヒビターを伴わないでの酵素反応）及び100％阻害率（酵素を除くすべてのアッセイ成分）に標準化した。IC50値を、前記会社自体のソフトウェアを用いて、４−パラメーター適合により決定した。
【０１７５】
10.3アッセイ３：VEGF受容体−２キナーゼアッセイ：
組換えVEGF受容体チロシンキナーゼ−２を、バキュロウィルス−感染された昆虫細胞（Sf9）からGST−融合タンパク質として精製した。キナーゼ基質として使用されるポリ−（Glu4Tyr）は, Sigma Companyから購入された。
【０１７６】
VEGF受容体チロシンキナーゼ（90ng/測定点）を、30μlのアッセイ緩衝液（40mモルのトリス/HCl、pH5.5、10mモルのMgCl2、１mモルのMgCl2、３μモルのNaオルト−バナデート、1.0mモルのジチオトレイトール、８μmのアデノシン三リン酸（ATP）、0.96μg/測定点のポリ−（Glu4Tyr）、0.2μCi/測定点の33P-γATP、1.4％のジメチルスルホキシド）における種々の濃度の試験物質（Oμm、及び0.01〜30μM以内）の存在下で22℃で10分間インキュベートした。反応は、EDTA溶液（250mモル、pH8.0、15μl/測定点）を添加することにより停止された。
【０１７７】
個々の反応混合物から、15μlを、P30フィルターストリップ（Wallac Company）に適用し、そして組込まれなかった33P−ATPを、0.5％のリン酸におけるそれぞれ10分間のフィルターストリップの３回の洗浄サイクルにより除去した。フィルターストリップを70℃で１時間、乾燥した後、フィルターストリップを、シンチレーターストリップ（MeltiLexTMA、Wallac Company）により被覆し、そして90℃で１時間、乾燥した。組込まれる33P（基質リン酸化）の量を、γ−線測定装置（Wallac）におけるシンチレーション測定により決定した。測定されたデータを、0％阻害率（インヒビターを伴わないでの酵素反応）及び100％阻害率（酵素を除くすべてのアッセイ成分）に標準化した。IC50値を、前記会社自体のソフトウェアを用いて、４−パラメーター適合により決定した。
【０１７８】
10.4アッセイ４：増殖アッセイ：
培養されたHela-MaTu頸部癌細胞（EPO−GmbH, Berlinから得られた）を、200μlの増殖培地（DMEM/HAMS F12、2mMのL−グルタミン、10％ウシ胎児血清）を含む96ウェルマルチタイタイープレートに、3000個の細胞/測定点の密度でプレートした。24時間後、１つのプレート（ゼロ点プレート）の細胞を、クリスタルバイオレットにより染色し（下記参照のこと）、そして他のプレートの培地を、試験物質が種々の濃度（0μm、及び0.01〜30μモル；溶媒ジメチルスルホキシドの最終濃度は0.5％であった）で添加されている新鮮な培地（200μl）により置換した。
【０１７９】
細胞を、試験物質の存在下で４日間インキュベートした。細胞増殖を、クリスタルバイオレットによる細胞の染色により決定した：細胞を20μl/測定点の11％グルタルアルデヒド溶液を室温で15分間、添加することにより固定した。水による前記固定された細胞の３回の洗浄サイクルの後、プレートを室温で乾燥した。細胞を100μl/測定点の0.1％クリスタルバイオレット溶液（pH は、酢酸の添加により３に設定された）の添加により染色した。水による前記染色された脂肪の３回の洗浄サイクルの後、プレートを室温で乾燥した。
【０１８０】
色素を、100μl/測定点の10％酢酸溶液の添加により溶解した。吸光度を、595nmの波長で、測光法により測定した。％での細胞増殖の変化を、ゼロ点プレート（＝0％）の吸光度及び未処理（0μm）の細胞（＝100％）の吸光度値への測定された値の標準化により計算した。測定されたデータを、0％阻害率（インヒビターを伴わないでの細胞増殖）及び100％阻害率（ゼロ点プレート）に標準化した。IC50値を、前記会社自体のソフトウェアを用いて、４−パラメーター適合により決定した。
【０１８１】
10.5酵素及び増殖アッセイからの結果：
【表２】
0005564054.tif 000062
【０１８２】
酵素及び増殖アッセイからの結果は、従来技術の化合物に対して本発明の化合物のいずれの組織的卓越性を示さない。
【０１８３】
インビボ比較：
例5-SI-2のインビボ効力を、比較のためにV11と例11において調査した。
例6-SI-2のインビボ効力を、比較のためにWO2005/037800号（＝比較物質V12）からの例1.52と例12において調査した。
例2-SI-2のインビボ効力を、比較のためにWO2005/037800号（＝比較物質V13）からの例3.13と例13において調査した。
例1-SI-2のインビボ効力を、比較のためにV14と例14において調査した。
【０１８４】
例11：
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約150mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０１８５】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（40％PEG400/60％水）による処理
グループ２：例５に従って調製された立体異性体２（＝例5-SI-2）(5mg/kg, 経口、４，５，11，12日で１日当たり２度)
【０１８６】
研究を、例5-SI-2による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。例5-SI-2を、溶解剤40％ポリエチレングリコール（PEG）400/60％水に完全に溶解し、0.5mg/mlの最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、４日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約150mm2のサイズを越えた後、17日目に停止された。研究からの結果（図１）は、周期的処理レジメ（１日当たり２回の２日間の処理、続く５日間の処理のない日）での5mg/kgの選択された経口投与量での例5-SI-2が、腫瘍増殖を高く阻害したことを示す（グループ３、対照グループの７％への研究の最後での腫瘍重量の低下、P＜0.05）。
【０１８７】
5-Br比較物質（＝V11）:
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約150mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０１８８】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（30％HPβCD/70％水）による処理
グループ２：上記に開示される調製物V11に従って調製された、WO2005/037800号に従っての化合物(8mg/kg, 経口、４，５，11，12日で１日当たり２度)
【０１８９】
研究を、5-Br比較物質V11による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。V11を、溶解剤30％β‐ヒドロキシプロピル‐シクロデキストリン（HPβCD）/70％水に完全に溶解し、0.8mg/mlの最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、４日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約150mm2のサイズを越えた後、17日目に停止された。研究からの結果（図２）は、１日当たり２回の２日間の処理、続く５日間の処理のない日での8mg/kgの選択された経口投与量でのV11が、HeLa-MaTu異種移植片モデルにおいて腫瘍増殖を阻害したことを示す（グループ２、対照グループの39％への研究の最後での腫瘍重量の低下、P＜0.05）。
【０１９０】
結論：
例5の立体異性体２（例5-SI-2(5-CF3)）は、２日間連続して、5mg/kgの用量での１日当たり２回の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る周期的処理レジメにおいて、HeLa-MaTu異種動物移植片モデルにおける腫瘍増殖の完全な阻害を達成する（処理/対照比 T/C=0.07）。8mg/kgの用量でのその対応する十分に許容できる周期的処理レジメにおいては、5-Br比較物質（＝V11）は単に、HeLa−MaTu異種移植片モデルにおいて腫瘍増殖の遅延を達成する（処理/対照比 T/C＝0.39）。驚くべきことには、V11（5-Br）との比較においては、例5-SI-2（5-CF3）は、高い能力（V11についての8mg/kgと比較して例5-SI-2について5mg/kgの用量）、及びかなり良好な抗腫瘍効力（V11についてのT/C＝0.39を伴っての腫瘍増殖の遅延に比較して、例5-SI-2について、T/C＝0.07を伴っての腫瘍増殖の完全な阻害）を示す。
【０１９１】
例12:
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約150mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０１９２】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（40％PEG400/60％水）による処理
グループ２：例６に従って調製された立体異性体２（＝例6-SI-2）(3mg/kg, 経口、４，５，11，12,17,18日で１日当たり２度)
グループ３：例６に従って調製された立体異性体２（＝例6-SI-2）(4mg/kg, 経口、４，５，11，12,17,18日で１日当たり２度)
グループ４：例６に従って調製された立体異性体２（＝例6-SI-2）(5mg/kg, 経口、４，５，11，12,17,18日で１日当たり２度)
【０１９３】
研究を、例6-SI-2による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。例6-SI-2を、溶解剤40％ポリエチレングリコール400（PEG400）/60％水に完全に溶解し、0.3mg/ml（グループ２）、0.4mg/ml（グループ３）又は0.5mg/ml（グループ４）の最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、４日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約150mm2のサイズを越えた後、20日目に停止された。
【０１９４】
研究からの結果（図３）は、２日間の連続した日、１日当たり２回の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る処理レジメにおいて、例6-SI-2がHeLa-MaTu異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の用量依存性阻害を提供することを示す。最高の用量グループ（グループ４）においては、腫瘍増殖は、ほとんど完全に阻害され、そして対照グループの８％への研究の最後での腫瘍重量の低下が達成される（T/C＝0.08、p＜0.05）。
【０１９５】
5-Br比較物質（＝V12）：
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約150mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０１９６】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（40％PEG400/60％水）による処理
グループ２：WO2005/037800号からの例1.52に従っての化合物（＝V12）(7mg/kg, 経口、４，５，11，12,17,18,23,24日で１日当たり２度)
グループ３：WO2005/037800号からの例1.52に従っての化合物（＝V12）(8.5mg/kg, 経口、４，５，11，12,17,18,23,24日で１日当たり２度)
グループ４：WO2005/037800号からの例1.52に従っての化合物（＝V12）(10mg/kg, 経口、４，５，11，12,17,18,23,24日で１日当たり２度)
【０１９７】
研究を、5-Br比較物質V12による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。V12を、溶解剤40％ポリエチレングリコール400（PEG400）/60％水に完全に溶解し、0.7mg/ml（グループ２）、0.85mg/ml（グループ３）又は1.0mg/ml（グループ４）の最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、４日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約150mm2のサイズを越えた後、28日目に停止された。研究からの結果（図４）は、１日当たり２回の２日間の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る処理レジメにおいては、V12が、HeLa-MaTu異種移植片モデルにおいて用量−依存性の弱い阻害性を生成したことを示す。最高の用量グループ（グループ４）においては、腫瘍増殖は、対照グループに比較して、約半分に阻害される（T/C=0.51）。
【０１９８】
結論：
２日間連続して、5mg/kgの用量での１日当たり２回の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る周期的処理レジメにおいて、例６の立体異性体２（例6-SI-2(5-CF3)）は、HeLa-MaTu異種動物移植片モデルにおける腫瘍増殖のほとんど完全な阻害を達成する（処理/対照比 T/C=0.08）。10mg/kgの用量でのその対応する十分に許容できる周期的処理レジメにおいては、WO2005/037800号からの例1.52に従っての化合物（＝V12）（5-Br））は単に、HeLa−MaTu異種移植片モデルにおいて腫瘍増殖の遅延を達成する（処理/対照比 T/C＝0.51）。驚くべきことには、V12（5-Br）との比較においては、例6-SI-2（5-CF3）は、高い能力（V12についての10mg/kgと比較して例6-SI-2について5mg/kgの用量）、及びかなり良好な抗腫瘍効力（V12についてのT/C＝0.51を伴っての腫瘍増殖の遅延に比較して、例6-SI-2について、T/C＝0.08を伴っての腫瘍増殖の完全な阻害）を示す。
【０１９９】
例13：
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約160mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０２００】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（40％PEG400/60％水）による処理
グループ２：例２に従って調製された立体異性体２（＝例2-SI-2）(1.5mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ３：例２に従って調製された立体異性体２（＝例2-SI-2）(2.0mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ４：例２に従って調製された立体異性体２（＝例2-SI-2）(2.5mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
【０２０１】
研究を、例2-SI-2による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。例2-SI-2を、溶解剤40％ポリエチレングリコール400（PEG400）/60％水に完全に溶解し、0.15mg/ml（グループ２）、0.2mg/ml（グループ３）又は0.25mg/ml（グループ４）の最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、５日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約160mm2のサイズを越えた後、20日目に停止された。
【０２０２】
研究からの結果（図５）は、２日間の連続した日、１日当たり２回の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る処理レジメにおいて、例2-SI-2がHeLa-MaTu異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の用量依存性阻害を提供することを示す。最高の用量グループ（2.5mg/ml、グループ４）においては、腫瘍増殖は、ほとんど完全に阻害され、そして対照グループの１８％への研究の最後での腫瘍重量の低下が達成される（T/C＝0.18、p＜0.05）。
【０２０３】
5-Br比較物質（＝V13）：
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約160mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０２０４】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（40％PEG400/60％水）による処理
グループ２：WO2005/037800号からの例3.13に従っての化合物（＝V13）(６mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ３：WO2005/037800号からの例3.13に従っての化合物（＝V13）(8mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ４：WO2005/037800号からの例3.13に従っての化合物（＝V13）(10mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
【０２０５】
研究を、5-Br比較物質V13による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。V13を、溶解剤40％ポリエチレングリコール400（PEG400）/60％水に完全に溶解し、0.6mg/ml（グループ２）、0.8mg/ml（グループ３）又は1.0mg/ml（グループ４）の最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、５日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約160mm2のサイズを越えた後、20日目に停止された。
【０２０６】
研究からの結果（図６）は、１日当たり２回の２日間の処理、続く５日間の処理のない日から成る処理レジメにおいては、V13が、HeLa-MaTu異種移植片モデルにおいて腫瘍増殖の用量−依存性阻害を生成したことを示す。最高の用量グループ（10mg/kg、グループ４）においては、腫瘍増殖は、非常に著しく阻害され、そして、対照グループに対して23％への研究の最後での腫瘍重量の低下が達成される。（T/C=0.23、p＜0.05）。
【０２０７】
結論：
２日間連続して、2.5mg/kgの用量での１日当たり２回の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る周期的処理レジメにおいて、例２の立体異性体２（例2-SI-2(5-CF3)）は、HeLa-MaTu異種動物移植片モデルにおける腫瘍増殖のほとんど完全な阻害を達成する（処理/対照比 T/C=0.18）。10mg/kgの用量でのその対応する十分に許容できる周期的処理レジメにおいては、WO2005/037800号からの例3.13に従っての化合物（＝V13）（5-Br））は、HeLa−MaTu異種移植片モデルにおいて腫瘍増殖のわずかに少々の遅延を達成する（処理/対照比 T/C＝0.23）。驚くべきことには、V13（5-Br）との比較においては、例2-SI-2（5-CF3）は、かなり高い能力（V13についての10mg/kgと比較して例2-SI-2について2.5mg/kgの用量）、及び幾分良好な抗腫瘍効力（V13についてのT/C＝0.23を伴っての腫瘍増殖の阻害に比較して、例2-SI-2について、T/C＝0.18を伴っての腫瘍増殖の阻害）を示す。
【０２０８】
例14：
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約160mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０２０９】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（40％PEG400/60％水）による処理
グループ２：例１に従って調製された立体異性体２（＝例1-SI-2）(1.5mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ３：例１に従って調製された立体異性体２（＝例１-SI-2）(2.0mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ４：例１に従って調製された立体異性体２（＝例1-SI-2）(2.5mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
【０２１０】
研究を、例1-SI-2による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。例1-SI-2を、溶解剤40％ポリエチレングリコール400（PEG400）/60％水に完全に溶解し、0.15mg/ml（グループ２）、0.2mg/ml（グループ３）又は0.25mg/ml（グループ４）の最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、５日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約160mm2のサイズを越えた後、20日目に停止された。
【０２１１】
研究からの結果（図７）は、２日間の連続した日、１日当たり２回の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る処理レジメにおいて、例1-SI-2がHeLa-MaTu異種移植片モデルにおける腫瘍増殖の用量依存性阻害を生成したことを示す。最高の用量グループ（2.5mg/kg、グループ４）においては、腫瘍増殖は、ほとんど完全に阻害され、そして対照グループに対して19％への研究の最後での腫瘍重量の低下が達成される（T/C＝0.19、p＜0.05）。
【０２１２】
5-Br比較物質（＝V14）：
細胞培養において増殖された、HeLa-MaTu (EPO-GmbH、Berlin)ヒト頸部癌細胞を、雌のNMRIヌードマウスの側面に皮下移植した。処理は、腫瘍が約20mm2のサイズに増殖するとすぐに開始された。研究は、グループの１つにおける腫瘍が約160mm2のサイズに達するとすぐに停止された。
【０２１３】
次の試験グループを使用した：
グループ１：対照、安定剤（40％PEG400/60％水）による処理
グループ２：上記に開示される調製物V14に従って調製されたWO2005/037800号の化合物 (６mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ３：上記に開示される調製物V14に従って調製されたWO2005/037800号の化合物 (８mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
グループ４：上記に開示される調製物V14に従って調製されたWO2005/037800号の化合物 (10mg/kg, 経口、５，６，12,13,19,20日で１日当たり２度)
【０２１４】
研究を、5-Br比較物質V14による処理に対するヒト頸部癌異種移植片モデルの初期応答を決定するために企画した。化合物の増殖阻害効果を、NMRIヌードマウス上の異種移植片としてのHeLa-MaTu頸部腫瘍モデルにおいて試験した。V14を、溶解剤40％ポリエチレングリコール400（PEG400）/60％水に完全に溶解し、0.6mg/ml（グループ２）、0.8mg/ml（グループ３）又は1.0mg/ml（グループ４）の最終濃度にした。確立された腫瘍の処理は、腫瘍の接種の後、５日目に開始された。研究は、グループ１（対照）における動物の腫瘍サイズが約160mm2のサイズを越えた後、20日目に停止された。
【０２１５】
研究からの結果（図８）は、１日当たり２回の２日間の処理、続く５日間の処理のない日から成る処理レジメにおいては、V14が、HeLa-MaTu異種移植片モデルにおいて腫瘍増殖の用量−依存性阻害を生成したことを示す。最高の用量グループ（10mg/kg、グループ４）においては、腫瘍増殖は、弱く阻害され、そして対照グループに対して44％への研究の最後での腫瘍重量の低下が達成される。（T/C=0.44、統計学的有意性は達成されなかった）。
【０２１６】
結論：
２日間連続して、2.5mg/kgの用量での１日当たり２回の経口適用、続く５日間の処理のない日から成る周期的処理レジメにおいて、例１の立体異性体２（例1-SI-2(5-CF3)）は、HeLa-MaTu異種動物移植片モデルにおける腫瘍増殖のほとんど完全な阻害を達成する（処理/対照比 T/C=0.19）。10mg/kgの用量でのその対応する十分に許容できる周期的処理レジメにおいては、WO2005/037800号の5-Br化合物（＝V14（5-Br））は、HeLa−MaTu異種移植片モデルにおいて弱い腫瘍増殖阻害を達成する（処理/対照比 T/C＝0.44）。驚くべきことには、V14（5-Br）との比較においては、例1-SI-2（5-CF3）は、かなり高い能力（V14についての10mg/kgと比較して例1-SI-2について2.5mg/kgの用量）、及びかなり卓越した抗腫瘍効力（V14についてのT/C＝0.44を伴っての腫瘍増殖阻害に比較して、例1-SI-2について、T/C＝0.19を伴っての腫瘍増殖の阻害）を示す。
【図１】
0005564054.tif 000066
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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