(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
５−アミノレブリン酸（ＡＬＡ）又はその塩を含有し、投与量がＡＬＡ塩酸塩換算で体重１ｋｇあたり１０ｍｇ〜５０ｍｇであることを特徴とする膀胱がん検出のための経口投与剤である増感剤。
【請求項２】
膀胱がんが、ｐＴｉｓ（上皮内がん）、ｐＴａ（浸潤なし）、ｐＴ１（粘膜下結合組織までの浸潤あり）、ｐＴ２（筋層浸潤あり）、又はｐＴ３（膀胱周囲脂肪組織への浸潤あり）の病期のステージであることを特徴とする請求項１記載の増感剤。
【請求項３】
投与から検出までの保持時間が２時間から５時間であることを特徴とする請求項１又は２記載の増感剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、膀胱がん検出に用いる増感剤及び膀胱がんの検出方法に関する。さらに詳しくは、５−アミノレブリン酸（ＡＬＡ）及びその誘導体並びにこれらの塩（以下、「ＡＬＡ類」ということがある。）を含有することを特徴とする経口、膀胱内注入、静脈注射等で投与する膀胱がん診断のための増感検出剤及びこれらの増感検出剤を用いる膀胱がんの検出方法等に関する。
【背景技術】
【０００２】
１９８６年にカナダクイーンズ大ケネディー教授が、ＡＬＡを塗布し、光を照射することで皮膚がんの治療ができることを報告（例えば、非特許文献１参照）して以来、ＡＬＡを用いた様々な部位の病変部等の診断及び治療方法が報告されており、例えば、ＡＬＡ若しくはその誘導体又はこれらの塩（ＡＬＡ類）を体内に投与すると、がんにＡＬＡ類から誘導されるプロトポルフィリンIX（ＰｐＩＸ）が蓄積し、光照射で蛍光を発することから開発された腫瘍診断剤（例えば、特許文献１参照）や、ＡＬＡ類を体内に投与し、光照射で蛍光を発する血清や尿中のＰｐＩＸを測定する腫瘍診断剤（例えば、特許文献２参照）が提案されている。脳腫瘍ではＡＬＡ類を経口投与し、開頭後に患部に光を照射することで腫瘍部位が特定できることが知られている。これは、腫瘍につながる部位の脳関門が腫瘍により破たんしているため、経口投与でも腫瘍選択的にＰｐＩＸが蓄積されるものとされている。他のがんについては皮膚がんでは直接塗布で、口腔がんではＡＬＡ類の溶液を口内に含むことで診断が可能であるという報告がある。【０００３】
また、膀胱においては、尿道からＡＬＡ類を含む増感剤溶液を膀胱に充填し、一定時間を経たのちに光を照射し膀胱鏡にて蛍光を観察することで、膀胱がんの検出が可能であることが知られており（例えば、非特許文献２参照）、さらに、例えば膀胱注入後の保持時間を短縮することを目的として、ＡＬＡ類として、ＡＬＡエステル等を用いた診断又は治療に使用できる調剤薬が提案されている（例えば、特許文献３参照）。これらの検出方法は膀胱がんの他の検出方法、たとえば白色光下の内視鏡による診断に比べると、がんの検出感度が高く、内視鏡手術の際の摘出率向上に有効であるといえる。【０００４】
その他、５−アミノレブリン酸、その塩、及びそれらのエステル誘導体から選ばれる１種又は２種以上の化合物と鉄化合物とを有効成分として含有することを特徴とする、育毛剤（例えば、特許文献４参照）や、肌荒れ予防・改善剤（例えば、特許文献５参照）が提案されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第２７３１０３２号公報
【特許文献２】特開２００６−１２４３７２号公報
【特許文献３】特表２００２−５１２２０５号公報
【特許文献４】特許第３８１００１８号公報
【特許文献５】特許第３９９１０６３号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】J.C Kennedy, R.H Pottierand DC Pross, Photodynamic therapy with endogeneous protoprophyrin IX: basic principles and present clinical experience, J. Photochem., Photobiol. B: Biol., 6 (1990) 143-148
【非特許文献２】５−アミノレブリン酸（５−ＡＬＡ）膀胱内注入による蛍光膀胱鏡を用いた膀胱癌の光力学的診断、井上 啓史、 辛島 尚、 鎌田 雅行、執印 太郎、 倉林 睦、 大朏 祐治、日本泌尿器科學會雜誌、Vol.97、pp. 719-729
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
現在実用化されているＡＬＡ又はその誘導体を用いた検出方法は、初期がんを検出できるレベルにはなく、また、尿道より膀胱に溶液を満たすこと、及び、その後一定時間保持しなくてはならないことは、患者に負担であり、とりわけ、一定時間の保持は排尿を催したまま、長いときは数時間我慢を強いられるという耐えがたい苦痛を伴うため改善が切望されていた。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者等は、脳関門の選択性により可能になったと説明され、他の部位のがんの検出には利用できないと信じられてきた経口投与による膀胱がんの検出法に関して鋭意検討した結果、全く意外にも、脳関門による選択の関与が全く期待できない膀胱がんでもＡＬＡ類の経口投与又は静脈よりの投与により膀胱がんの検出が可能であることを見い出した。さらに、ＡＬＡ類の選択、投与量の検討、投与から検出までの時間など様々な検討を加えることで、従来のＡＬＡ類溶液の尿道からの注入に比してはるかに感度の高い検出感度の実現に成功し、本発明を完成した。【０００９】
すなわち本発明は、（１）５−アミノレブリン酸（ＡＬＡ）又はその塩を含有し、投与量がＡＬＡ塩酸塩換算で体重１ｋｇあたり１０ｍｇ〜５０ｍｇであることを特徴とする膀胱がん検出のための経口投与剤である増感剤や、（２）膀胱がんが、ｐＴｉｓ（上皮内がん）、ｐＴａ（浸潤なし）、ｐＴ１（粘膜下結合組織までの浸潤あり）、ｐＴ２（筋層浸潤あり）、又はｐＴ３（膀胱周囲脂肪組織への浸潤あり）の病期のステージであることを特徴とする上記（１）記載の増感剤や、（３）投与から検出までの保持時間が２時間から５時間であることを特徴とする上記（１）又は（２）記載の増感剤に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ＡＬＡ膀胱内注入による画像を示す図である。
【図２】ＡＬＡ内服（経口投与）による画像を示す図である。
【図３】ｐＴｉｓ（上皮内がん）患者に、ＡＬＡを膀胱内注入した場合の画像(ａ）及びＡＬＡを経口投与した場合の画像(ｂ）を示す図である。
【図４】ｐＴａ（浸潤なし）患者に、ＡＬＡを膀胱内注入した場合の画像(ａ）及びＡＬＡを経口投与した場合した場合の画像(ｂ）を示す図である。
【図５】ｐＴ１（粘膜下結合組織までの浸潤あり）患者に、ＡＬＡを膀胱内注入した場合の画像(ａ）及びＡＬＡを経口投与した場合の画像(ｂ）を示す図である。
【図６】ｐＴ３（膀胱周囲脂肪組織への浸潤があり）患者にＡＬＡを膀胱内注入した場合の画像(ａ）、及び、ｐＴ２（筋層浸潤あり）患者に、ＡＬＡを経口投与した場合の画像(ｂ）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の膀胱がん検出のための経口投与剤である増感剤や、膀胱がん検出のための静脈注射剤である増感剤としては、一種以上のＡＬＡ類を含有するものであれば特に制限されず、また、本発明の膀胱がんの検出方法としては、一種以上のＡＬＡ類を含有する経口投与剤又は静脈注射剤である増感剤を用いる方法であれば特に制限されず、これらＡＬＡ類は化学合成、微生物による生産、酵素による生産等のいずれの公知の方法によっても製造することができる。さらに、本発明は、ＡＬＡ類を膀胱がん検出のための経口投与剤や静脈注射剤である増感剤を製造するために使用する方法にも関する。
【００１３】
ＡＬＡ類のうち、ＡＬＡの誘導体としては、ＡＬＡのエステル基とアシル基を有するものを挙げることができ、好ましくはメチルエステル基とホルミル基、メチルエステル基とアセチル基、メチルエステル基とｎ−プロパノイル基、メチルエステル基とｎ−ブタノイル基、エチルエステル基とホルミル基、エチルエステル基とアセチル基、エチルエステル基とｎ−プロパノイル基、エチルエステル基とｎ−ブタノイル基の組合せを例示することができる。
【００１４】
ＡＬＡ類のうち、ＡＬＡ又はその誘導体の塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、トルエンスルホン酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、メタンスルホン酸塩、酪酸塩、吉草酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩等の酸付加塩、及びナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩等の金属塩、アンモニウム塩、アルキルアンモニウム塩等を挙げることができるが、ＡＬＡ塩酸塩を好適に例示することができる。なお、これらの塩は使用時において溶液として用いられ、その作用はＡＬＡ及びその誘導体の場合と同一である。以上のＡＬＡ類は、水和物又は溶媒和物を形成していてもよく、またいずれかを単独で又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【００１５】
本発明の増感剤（増感検出剤）は、経口投与剤型と静脈注射剤型があるが、本発明の経口投与剤型の増感剤の剤型としては、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、懸濁液等を挙げることができ、本発明の静脈注射剤型の増感剤の剤型としては、注射剤、点滴剤等を挙げることができる。本発明の増感剤には、必要に応じて他の薬効成分、栄養剤、担体等の他の成分を加えることができる。例えば、薬学的に許容される通常の担体、結合剤、安定化剤、溶剤、分散媒、増量剤、賦形剤、希釈剤、ｐＨ緩衝剤、崩壊剤、可溶化剤、溶解補助剤、等張剤などの各種調剤用配合成分を添加することができる。
【００１６】
本発明の増感剤を水溶液として調製する場合には、ＡＬＡ類の分解を防ぐため、水溶液がアルカリ性とならないように留意する必要がある。アルカリ性となってしまう場合は、酸素を除去することによって有効成分の分解を防ぐことができる。本発明の増感剤に配合できる担体としては、摂取するために適した有機又は無機の固体又は液体の、通常は不活性な製薬学的に許容できる担体材料を用いてもよく、具体的には、例えば、結晶性セルロース、ゼラチン、乳糖、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物性及び動物性脂肪、油脂、ガム、ポリアルキレングリコールがある。本発明の増感剤に含まれるＡＬＡ類のうち、もっとも望ましいものとしては５−アミノレブリン酸、同メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、ブチルエステル、ペンチルエステル、又はこれらの塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩などを挙げることができる。
【００１７】
本発明の増感剤の望ましい投与法は、舌下投与も含む経口投与及び点滴を含む静脈注射であり、増感剤に含まれるＡＬＡ類の量は、モル数換算でＡＬＡ類の合計が、ＡＬＡ塩酸塩換算で体重１ｋｇあたり、０．１ｍｇ〜１０００ｍｇであればよく、望ましくは１ｍｇ〜１００ｍｇ、さらに望ましくは１０ｍｇ〜５０ｍｇである。
【００１８】
本検出法の増感剤投与から検出までの保持時間は、３０分〜８時間、望ましくは１時間から６時間、さらに望ましくは２時間から５時間が望ましい。本発明に必要な検出は、光を照射し蛍光を検出するものであればすべて使用することができるが、たとえば励起光としては３８０ｎｍ〜４３０ｎｍ程度のいわゆるソーレーバンド帯の光を照射し、６００ｎｍ〜７００ｎｍ程度の蛍光を検出することで可能である。検出は機器的な検出だけでなく、肉眼による検出やＣＣＤカメラによる検出も有用である。
【００１９】
以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
【実施例１】
【００２０】
膀胱がん進行状態がほぼ同じ被験者２名に対して、５-アミノレブリン酸塩酸塩（ＡＬＡ−ＨＣｌ）を用いた術中診断を行った。各被験者に対してＡＬＡ−ＨＣｌの投与方法を膀胱内注入と内服によって行った。膀胱内注入は、術当日ＡＬＡ−ＨＣｌ１．５ｇを８．４％重炭酸ナトリウム（sodium hydrogen carbonate：NaHCO3)５０ｍＬに溶解してｐＨを調節し(中央値ｐＨ８．０ (ｐＨ７．８〜８．２))、０．２２μｍフィルターでろ過し、その溶解液５０ｍＬを膀胱内に注入した。膀胱内貯留時間は１２０〜１５０分を目安として(平均約９０分)、術直前にＡＬＡを排出した。一方、内服は、ＡＬＡ２０ｍｇ／ｋｇ（最大１ｇまで）を５０ｍＬの５％ブドウ糖液で溶解し、朝食抜きで、朝（手術開始４時間前）にＡＬＡ溶解液（５０ｍＬ）を経口投与した。診断は、ビデオカメラシステム：Ｅｎｄｏｖｉｓｉｏｎ ＴＥＬＥＣＡＭ ＳＬ／ＩＰＭ−ＰＰＤＳｙｓｔｅｍ（KARL STORZ社製）とＶＬＤ−Ｍ１（エムアンドエム社製）を用いて画像診断と蛍光強度により行った。尿道よりビデオカメラシステムを挿入し、３８０〜４４０ｎｍの青色の蛍光をあて赤色光部位を観察した。さらにＶＬＤ−Ｍ１を挿入して４０５ｎｍの青色の蛍光をあて赤色光部位の蛍光強度（相対強度）を観察した。【００２１】
その結果、図１及び図２に示すように、膀胱内注入よりも内服したほうが顕著に膀胱がん部位を識別できることを確認した。さらにプロトポルフィリンIX（ＰｐＩＸ）の励起波長である６３５ｎｍは表１に示すとおり、膀胱内注入よりも内服したほうが、蛍光強度が高いことを確認した。本結果よりＡＬＡ内服によってＡＬＡが膀胱がんに取り込まれて代謝され、プロトポルフィリンIXに変換される量、及び膀胱がんの識別が容易であることが確認された。【００２２】
【表１】
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【００２３】
以上より明らかであるように、本発明は従来法に比して患者の苦痛が少ないばかりでなく、明らかに感度が高く、実用上有用であることがわかる。
【実施例２】
【００２４】
膀胱がん患者の原発腫瘍の壁内深達度別に病期分類したｐＴｉｓ（上皮内がん）６例、ｐＴａ（浸潤なし）２７例、ｐＴ１（粘膜下結合組織までの浸潤あり）９例、ｐＴ２（筋層浸潤あり）６例、ｐＴ３（膀胱周囲脂肪組織への浸潤あり）２例に対し（総患者数５０例）、実施例１同様にＡＬＡを膀胱内注入した場合と経口投与した場合では、いずれも膀胱内注入したよりも、経口投与したほうが、蛍光が強かった（図３、４、５及び６参照）。このことより、膀胱がんの各病期のステージにおいて経口投与は有効な診断方法であることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００２５】
経口又は静脈投与が可能な本発明の増感剤を用いると、患者の苦痛がなく、より高感度に膀胱がんの検出が可能である。また、従来は、膀胱内の薬液保持時間を少しでも短くし、患者の苦痛を軽減したいがために、極めて毒性の強いＡＬＡヘキシルエステル塩酸塩が使用されてきたが、他の毒性の低いＡＬＡ類に代替することが可能になった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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