(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニューロンエキソサイトーシスを抑制する活性を有する下記ペプチド、その立体異性体
若しくはその混合物、又は化粧品的及び医薬的に許容できるその塩。
ＣＨ３−（ＣＨ２）８−ＣＯ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
ＣＨ３−（ＣＨ２）１０−ＣＯ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
ＣＨ３−（ＣＨ２）１２−ＣＯ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
ＣＨ３−（ＣＨ２）１４−ＣＯ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
ＣＨ３−（ＣＨ２）１６−ＣＯ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
ＣＨ３−（ＣＨ２）１８−ＣＯ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
ＣＨ３−（ＣＨ２）２０−ＣＯ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
Ａｃ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ−（ＣＨ２）１１−ＣＨ３
Ａｃ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ−（ＣＨ２）１３−ＣＨ３
Ａｃ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ−（ＣＨ２）１５−ＣＨ３
Ａｃ−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ−（ＣＨ２）１７−ＣＨ３
Ａｃ−ＰＥＧ１−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
Ａｃ−ＰＥＧ２−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
Ａｃ−ＰＥＧ３−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
Ａｃ−ＰＥＧ４−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２
Ａｃ−ＰＥＧ５−ＥＥＭＱＲＲ−ＮＨ２，
【請求項２】
請求項１に記載のペプチドの製造を固相上で行うことを特徴とするペプチドの製造方法。
【請求項３】
化粧品的又は医薬的に有効な量の１つ以上の請求項１に記載のペプチドを含み、１つ以上の化粧品的又は医薬的に許容される賦形剤又は補助剤を含むことを特徴とする化粧品又は医薬組成物。
【請求項４】
前記ペプチドが、リポソーム、ミリカプセル、マイクロカプセル、ナノカプセル、スポンジ、小胞、ミセル、ミリスフェア、マイクロスフェア、ナノスフェア、リポスフェア、マイクロエマルジョン、ナノエマルジョン、ミリ粒子、マイクロ粒子及びナノ粒子から成る群より選択される化粧品的又は医薬的に許容される徐放性システム又はキャリアに組み
込まれていることを特徴とする請求項３に記載の化粧品又は医薬組成物。
【請求項５】
前記ペプチドが、タルク、ベントナイト、シリカ、デンプン及びマルトデキストリンから成る群より選択される化粧品的又は医薬的に許容される有機高分子又は固体の無機担体上に吸着していることを特徴とする請求項３に記載の化粧品又は医薬組成物。
【請求項６】
化粧品的又は医薬的に有効な量の１つ以上の請求項１に記載のペプチドを含み、更に、ピーリング剤、保湿剤、脱色又はホワイトニング剤、色素形成促進剤、抗妊娠線剤、しわ取り剤、抗酸化剤、抗糖化剤、ＮＯ合成酵素阻害剤、アンチエイジング剤、目の下のたるみを減少又は除去する薬剤、皮膚や表皮の分子合成を誘導及び／又はそれらの分解を抑制する薬剤、線維芽細胞及び／又はケラチノサイトの増殖を誘導する薬剤及びケラチノサイトの分化を誘導する薬剤、皮膚と表皮の結合改善の薬剤、皮膚弛緩剤、安定剤、抗大気汚染剤及び／又は抗フリーラジカル剤、毛細血管循環及び／又は微小循環に作用する薬剤、鎮静剤、抗炎症剤、抗菌剤、抗真菌剤、細胞代謝に作用する薬剤、毛細血管循環及び／又は微小循環に作用する薬剤、ビタミン、キレート剤、紫外線Ａ及びＢ照射に対して機能する有機又は無機の光防護剤並びにその混合物から成る群より選択される化粧品的又は医薬的に有効な量の活性剤を含むことを特徴とする化粧品又は医薬組成物。
【請求項７】
哺乳類のニューロンエキソサイトーシス制御が必要な状態を治療するための化粧品又は医薬組成物の製造における請求項１に記載のペプチドの使用。
【請求項８】
皮膚の治療、クリーニング又はケアのための化粧品又は医薬組成物の製造における請求項１に記載のペプチドの使用。
【請求項９】
顔のしわ及び／又は顔面非対称を減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における請求項１に記載のペプチドの使用。
【請求項１０】
顔の表情じわを減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における請求項９に記載のペプチドの使用。
【請求項１１】
筋痙直を減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における請求項１に記載のペプチドの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ニューロンエキソサイトーシスを制御するペプチド及び、例えば筋痙直、顔面非対称及び／又は、顔のしわ、好ましくは表情じわ等のニューロンエキソサイトーシスの制御が必要な状態の処置に有用な前記ペプチドを含む化粧品又は医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
人間の加齢で最も目に見える兆候の１つは、乾燥、しみ、弛緩及びしわなど皮膚によって認められる変化である。これらの影響は、日光への持続的な曝露、大気汚染又は例えば洗浄剤に含まれる化学物質との接触などの外的因子によって引き起こされる場合があるが、コラーゲン又はエラスチンなどのタンパク質合成の減少、タンパク質分解の増加並びに皮膚保護、結合組織及び結合性の一般的な破壊に起因する内的な生理学的、生化学的及び組織学的な人体の変化の結果でもある。
【０００３】
例えば、レチノイド、ヒドロキシ酸、フラボノイド又はビタミンＣ及びビタミンＥ誘導体など、加齢の兆候を抑制及び減少させる様々な活性成分が伝えられている。前記化合物は、通常、皮膚の水分補強の改善、細胞の修復の増加又は皮膚形成組織の変性の抑制をすることによって作用する。しかしながら筋収縮によって引き起こされた顔のしわの予防や治療における有効性は限られている。顔の表情じわの形成の原理又はメカニズムは、内部で皮膚を引っ張る表皮筋肉の緊張である。この筋肉の緊張は、顔の筋肉を衰弱させる神経の過剰活動の結果である。神経の過剰活動は、筋繊維を興奮させる神経伝達物質の制御できない過度の放出によって特徴付けられる。そのため、ニューロンエキソサイトーシスを制御する分子は、筋肉の緊張を緩和させ、顔のしわを排除することに貢献する。
【０００４】
したがって、ニューロンエキソサイトーシスを制御するための、ひいては筋痙直の治療並びに顔面非対称及び／又は顔のしわ、特に表情じわの減少及び／又は除去のための化粧品又は医薬組成物を調製するために、有効性が証明された新しい活性成分を開発する必要がある。
【０００５】
表情じわは、顔の皮膚上で起こる顔の表情に関与する顔の筋肉の収縮によって加えられた圧力から生じるしわである。通常、表情じわは、額、まゆの間、口の周り及び／又は目の周りにできる。顔の形、表情の頻度及びチックの存在（１つ以上の筋肉、この場合は顔の筋肉の不随収縮によって引き起こされ、頻繁に繰り返される痙攣運動）によって、青年期の間にも表情じわは現れる。日光への曝露などの外的要因はそれらの深さと可視性を強くする。
【０００６】
ボツリヌス毒素、特に血清型Ａ［ＢＯＴＯＸ（登録商標）Ｃｏｓｍｅｔｉｃ，Ａｌｌｅｒｇａｎ  Ｉｎｃ．］は、表情じわの減少、及び／又は、排除する目的で広く用いられる（非特許文献１、非特許文献２）。ＢＯＴＯＸを用いた治療と美容整形は、希釈された薬剤（ボツリヌスＡ‐赤血球凝集素複合体、５００ｋＤａ）を筋肉の緊張がある領域に局所注射することで構成される。毒素の麻痺効果は平均６カ月持続し、可逆的である（非特許文献３、非特許文献４）。したがって、治療としてはボツリヌス毒素を繰り返して注射する必要がある。この治療の主な問題点は、その分子サイズが患者の免疫システムによって認識されるために薬剤に対する免疫反応が惹起される可能性があることである。ボツリヌス毒素に対する抗体が現れることは、有効性の明らかな低下に寄与するので深刻な問題である（非特許文献５〜非特許文献１２）。ＢＯＴＯＸの治療効果の低下により、その後の処置において薬剤の濃度を高める必要性が生じるが、それは同じ様に免疫反応の増強を引き起こす。ボツリヌス毒素血清型Ａによる治療に代わる手段として、ＢｏＴｏｘ  Ｂ、ＢｏＴｏｘ  Ｆ及びＢｏＴｏｘ  Ｅなどの異なったボツリヌス毒素血清型の使用が考えられた。それでもやはり免疫反応が遅かれ早かれ再度起こるために、異なった血清型の薬剤の使用は問題の解決にはならない。その上、ボツリヌス毒素を用いる治療は、主にそれらを含む薬剤の不安定性のために高価である。
【０００７】
したがって、免疫反応を惹起せず、生産費用が費用対効果に優れており、より簡単で、安定した構造であるボツリヌス毒素の麻痺状態の効果を模倣する分子の開発が急務である。ペプチドの性質を有する分子はこれらの特性に適合する。
【０００８】
分子レベルでは、ボツリヌス毒素は、カルシウムイオン活性化エキソサイトーシスメカニズムに関連する神経タンパクを分解するプロテアーゼである（非特許文献１３〜非特許文献１５）。例えば、痙性疾患の徴候の軽減や顔のしわと顔面非対称の除去に適用されるために、主に臨床診療や美容整形に用いられるボツリヌス毒素Ａは、ニューロンタンパク質ＳＮＡＰ‐２５を切断する。このＳＮＡＰ‐２５タンパク質は、小胞に蓄積されたアセチルコリンの放出の誘導や制御を行う蛋白質複合体（ＳＮＡＲＥ又は融合複合体として知られている）の形成に関連していることから神経分泌において重要な役割を担っている。前記融合複合体の中心は、シナプス前細胞膜に局在するシンタキシンとＳＮＡＰ‐２５タンパク質及び小胞膜に局在するシナプトブレビン又はＶＡＭＰタンパク質によって形成されている（非特許文献１６、非特許文献１７）。融合複合体の主な機能は、神経伝達物質（アセチルコリン）を含んだ小胞を近くまで移動させて、シナプス前細胞膜と接触するように置くことである（非特許文献１８、非特許文献１９）。即ち、カルシウム濃度の上昇に反応した両者の膜融合は好ましく、その結果、神経伝達物質の放出が起こる。したがって、前記小胞の融合体とアンカリングＳＮＡＲＥタンパク質複合体は神経分泌を制御するための主要なターゲットを形成する。融合複合体を形成するタンパク質のいずれの切断もその集合を妨げ、したがって小胞の放出を抑制し、ニューロンエキソサイトーシスを制御する。
【０００９】
当該技術分野では、ＳＮＡＲＥ複合体を形成するタンパク質の配列に由来する特定のペプチドがニューロンエキソサイトーシスを抑制できることが知られている。例えば、ＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ領域及びカルボキシル領域に由来するペプチド（非特許文献２０〜非特許文献２５）、シンタキシンのアミノ酸配列に由来するペプチド（非特許文献２６）、シナプトブレビンのアミノ酸配列に由来するペプチド（非特許文献２７）、シナプトタグミンのアミノ酸配列に由来するペプチド（非特許文献２８）及びｓｎａｐｉｎタンパク質のアミノ酸配列に由来するペプチド（非特許文献２９）である。同様に、ニューロンエキソサイトーシスを抑制するＳＮＡＲＥ複合体の形成を阻害する合理的なデザイン又は合成化合物ライブラリーによって得られた合成ペプチドも記載されている（非特許文献３０）。
【００１０】
このタイプの化合物の工業的応用は制限されている。表情じわの形成の治療と予防専用のボツリヌス毒素の作用を模倣する化合物を開発するために、美容産業が相当な努力を行った（非特許文献３１）。特に、Ｌｉｐｏｔｅｃ，Ｓ．Ａ．社の特許文献１では、しわ取り効果を有するＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ末端断片に由来するペプチドについて記載しており、特許文献２でもＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に由来するペプチド、特に、そのカルボキシ末端領域に由来するか、ニューロンエンドサイトーシスを抑制できるシナプトブレビン又はシンタキシンに由来するペプチドについて記載している。
【００１１】
上述の特許文献のいずれもが、ニューロンエキソサイトーシスの制御薬物としての、不可逆的に化学的に修飾されたＳＮＡＰ‐２５タンパク質誘導体と無関係である。特許文献１は、血液脳関門と上皮組織の通過を容易にし、生物利用率を向上させることを目的としたＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ末端のペプチドの可逆的化学修飾、例えばアスパラギン酸及びグルタミン酸残基の側鎖のエステル化について記載している。これは、後に細胞内エステラーゼによってｉｎ  ｖｉｖｏで分解され、生物活性に必要な非修飾ペプチドに戻る。驚くべきことに、本発明の出願人は、前記ペプチドのアミノ酸及びカルボキシル末端の不可逆的な化学的修飾が、細胞内プロテアーゼの分解に対して大きな抵抗性を与え、ニューロンエキソサイトーシスの制御因子としての効果をより長く持続させるだけでなく、驚くべきことに、それらは対応する非修飾ペプチドに比して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの効果を２〜３０倍に増大できることを発見した。
【００１２】
脂質鎖を有するタンパク質の修飾がアミノ末端又はリジン残基の側鎖のいずれかの配列に存在するアミノ基で行われるとき、それは不可逆的修飾であると記載されているが、システイン残基のチオール基で行われるときには、修飾ペプチド又はタンパク質が対応するチオエステラーゼによってｉｎ  ｖｉｖｏで加水分解されるために、可逆的であると考えられる（非特許文献３２、非特許文献３３）。当該技術では、脂肪酸鎖の誘導体を有するペプチドの不可逆的修飾の例が示されており、それらは皮膚の浸透性を高めてそれらのｉｎ  ｖｉｖｏ効果を改善することを目的としている（非特許文献３４）。また、有用なワクチンとして開発するために、より良い免疫応答を達成することを目的としている（非特許文献３５）。そのほかに、細菌に対して高い毒性効果を生じさせること（非特許文献３６）又は真菌に対して高い毒性効果を生じさせることを目的としている（非特許文献３７）。このタイプの修飾は、前記ペプチドのｉｎ  ｖｉｔｒｏでの有効性について、いつも変化を生じさせるわけではない。例えば、ＧＨＫトリペプチドのパルミトイル化は、繊維芽細胞のコラーゲン合成を誘導する能力を改善しない（非特許文献３８）。即ち、炭化水素基を有するペプチドの修飾が、対応する非修飾ペプチドに照らして、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの変わらない有効性を増加させるか、減少させるか、又はそのままとするかどうかについて、本発明時点での当業者は予測できなかった。
【００１３】
「ＰＥＧ化」として知られている、ポリエチレングリコールの繰り返し単位の共有結合的な導入の手段によるペプチド及びタンパク質の不可逆的化学修飾は、一般的にペプチドとタンパク質のｉｎ  ｖｉｖｏでの半減期の増大、毒性の減少及び免疫原性と抗原性の減少を目的としており、当該技術分野で公知である（非特許文献３９〜非特許文献４５）。当該技術分野に存在する例では、それらの分布と排泄の薬理学的特性を改善すること、即ちｉｎ  ｖｉｔｒｏの生物活性を変化させることなくｉｎ  ｖｉｖｏ活性を改善することを目的としたペプチドとタンパク質の修飾を示している。それらはＰＥＧ化がタンパク質のｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物活性を増大できる可能性を示唆するものでは決してなく、むしろ反対に、ＰＥＧ化されたインターフェロンのｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性が元のインターフェロンに比べて低下した例などが示されている（非特許文献４６）。
【００１４】
驚くべきことに、本発明では、ＳＮＡＰ‐２５タンパク質に由来するペプチド配列の不可逆的な化学修飾が、ニューロンエキソサイトーシスの抑制についての前記配列の有効性を増大できることを示している。前記修飾が前記ペプチドの抑制効果を増大するであろうことは当該技術分野では示されていない。したがって、当業者はニューロンエキソサイトーシスを抑制するそれらの能力を増大させるために必要なペプチドの修飾の本質を推論できなかった。
【特許文献１】欧州特許第１１８０５２４号明細書
【特許文献２】国際公開番号ＷＯ９７／３４６２０パンフレット
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【非特許文献１８】Calakos N. and Scheller R.H. (1996) “Synaptic vesicle biogenesis, docking and fusion: a molecular description” Physiol. Rev. 76, 1-29
【非特許文献１９】Sutton R.B., Fasshauer D., Jahn R. and Brunger A.T. (1998) “Crystal structure of a SNARE complex involved in synaptic exocytosis at 2.4A resolution” Nature 395, 347-353
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【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
したがって、本発明は既存のニーズに対して新規な解決方法を提供する。そこには、当該分野で公知の対応する非修飾ペプチドに比べて、より効果的で長期的な方法でニューロンエキソサイトーシスを抑制できるＳＮＡＰ‐２５タンパク質由来の不可逆的に化学修飾されたペプチド配列の発見が含まれる。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、ニューロンエキソサイトーシスを制御するための簡単で効果的でリスクのない解決手段を提供する。そこには、ＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列を有する１つ以上のペプチドを含む組成物の哺乳動物体内への適用及びそのアミノ末端及び／又はカルボキシル末端の不可逆的な化学的修飾が含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】０．１ｍＭ濃度の本発明のペプチド存在下において、ラットの海馬初代培養からの［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸の放出が４０％以上抑制され、この化合物がニューロンエキソサイトーシスの抑制物質であることを示す図である。同じ濃度の配列番号１１で定義されるＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に由来する非修飾ペプチドでは、［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸放出の抑制はわずか５％であり、不可逆的に化学修飾されたペプチドと同等のレベルの抑制に達するためには３０倍以上（３ｍＭ）の濃度が必要である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
発明の詳細な説明
即ち、本発明の第一の実施形態は、ニューロンエキソサイトーシスを制御できる一般式（Ｉ）：Ｒ１‐ＡＡ‐Ｒ２のペプチドに係り、
その立体異性体、そのラセミ混合物又は非ラセミ混合物及び化粧品的又は医薬的に許容できるその塩であり、
式中、
ＡＡは、配列番号１のアミノ酸配列に含まれる３〜４０の隣接アミノ酸配列であり、
Ｒ１は、Ｈ、アルキル基、アリール基、アラルキル基及びアシル基から成る群より選択され、
Ｒ２は、脂肪族基又は環状基で置換された又は置換されていないアミノ基、ヒドロキシル基及びチオール基から成る群より選択され、
Ｒ１がＨ又はアセチル基であるとき、Ｒ２は置換されていないアミノ基、ヒドロキシル基及びチオール基ではない。
【００１９】
一般式（Ｉ）に示されたペプチドの好ましい構造は、
式中、
Ｒ１は、Ｈ、アセチル基、飽和若しくは不飽和の、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ３〜Ｃ２４アシル基又はポリエチレングリコールポリマーであり、
Ｒ２は、アミノ基又はヒドロキシル基であり、任意に、飽和又は不飽和の、直鎖、分岐鎖又は環状のＣ３〜Ｃ２４脂肪族基で置換されており、
Ｒ１がＨ又はアセチル基であるとき、Ｒ２は置換されていないアミノ基及びヒドロキシル基ではない。
【００２０】
より好ましい構造は、ポリエチレングリコールポリマーが以下の構造であり、
【００２１】
【化１】
0005647413.tif 000002
【００２２】
式中、
ｎは、１〜１００とすることができ、更に好ましくは１〜５である。
【００２３】
更に、好ましい構造は、式中、Ｒ１が式ＣＨ３‐（ＣＨ２）ｍ‐ＣＯ-のアシル基であり、ｍは１〜２２とすることができる。
【００２４】
本発明のペプチドは、立体異性体又は立体異性体の混合物として存在できる。例えば、それらを形成するアミノ酸は、Ｌ又はＤの立体配置を持つことができるし、相互に独立したラセミ体であることもできる。したがって、不斉炭素の数及び異性体や異性体混合物の存在によって、異性体混合物のほかに、ラセミ体やジアステレオ異性体混合物、又は純粋なジアステレオ異性体や光学異性体を得ることができる。本発明のペプチドの好ましい構造は、純粋な異性体、すなわち光学異性体やジアステレオ異性体である。
【００２５】
本明細書では、「脂肪族基」という用語は、飽和又は不飽和の直鎖基又は環状基に対応する。
【００２６】
「炭化水素基」という用語は、本発明においては、例えばアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を網羅するために用いられる。
【００２７】
「アルキル基」という用語は、飽和の直鎖又は分岐炭化水素基に対応する。例えば、メチル基、エチル基、イソプロピル基、イソブチル基、ｔ‐ブチル基、ヘプチル基、ドデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、アミル基、２‐エチルヘキシル基、２‐メチルブチル基及び５‐メチルヘキシル基等が含まれる。
【００２８】
「アルケニル基」という用語は、１つ以上のビニル基のような炭素‐炭素二重結合を有する不飽和の直鎖又は分岐炭化水素基に対応する。
【００２９】
「アルキニル基」という用語は、１つ以上の炭素‐炭素三重結合を有する不飽和の直鎖又は分岐炭化水素基に対応する。
【００３０】
「環状基」という用語は、脂環基、芳香族基又は複素環基として分類できる閉じた炭化水素環に対応する。
【００３１】
「脂環基」という用語は、脂肪族基と同様の特性を有する環状炭化水素基に対応する。
【００３２】
「芳香族基」又は「アリル基」という用語は、単環又は多環の芳香族炭化水素基に対応する。
【００３３】
「複素環基」という用語は、環の１つ以上の原子が炭素以外の原子（例えば、窒素、酸素、硫黄など）である閉じた炭化水素環に対応する。
【００３４】
「ポリエチレングリコールポリマー」という用語は、‐ＣＨ２ＣＨ２Ｏ‐基の繰り返し単位を含む置換又は非置換の炭化水素鎖に対応する。
【００３５】
この技術領域で理解されるように、置換の度合いが高いことは、許容さるだけでなく、推奨される。したがって、本発明のペプチドに置換があってもよい。本発明の明細書の記載を簡略化する目的で、「基」や「ブロック」という用語は、置換を許容する又は置換される化学種（基）と、置換を許容しない又は置換されない化学種（ブロック）を区別するために使用される。このように「基」という用語が、化学置換基についての記載に使用されるとき、記載された化学物質には、非置換基とＯ、Ｎ又はＳ原子を含む基の両方が含まれる。
【００３６】
一方、「ブロック」という用語が化合物又は官能基を表すために使用される場合、非置換の化学物質のみが含まれる。例えば「アルキル基」という表現は、メチル基、エチル基、プロピル基及びイソブチル基などの開鎖の飽和アルキル化合物だけではなく、ヒドロキシル基、アルコキシル基、アミノ基、カルボキシル基、カルボキサミド基、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基及びアルキルスルフォニル基など当該技術分野で公知の他の置換基を含むアルキル置換基も含まれる。このように「アルキル基」にはエーテル基、ハロアルキル基、アルコール基、チオール基、カルボキシル基、アミン基、ハイドロキシアルキル基、スルフォアルキル基、グアニジン基及びその他のものが含まれる。それに対して「アルキルブロック」という表現は、メチル、エチル、プロピル及びイソブチルなどの開鎖の飽和アルキル官能基のみを含むことに制限される。
【００３７】
本明細書では、「ＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に由来するアミノ酸配列」は、ＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に含まれる任意のアミノ酸配列又は断片を意味する。その配列はＳＮＡＰ‐２５タンパク質活性を有するペプチドに対応するものであって、配列番号１又は１つ以上のアミノ酸の変異、挿入、欠失、置換若しくは遺伝子コードの縮重という点で配列番号１の配列とは異なる任意のアミノ酸配列によって定義される。変異、挿入又は置換は、天然又は合成の遺伝的にコード化されたアミノ酸又は非コード化されたアミノ酸によって起こる。例えばアミノ酸は、非限定的な意味で、特に、シトルリン、オルニチン、ザルコシン、デスモシン、ノルバリン、４‐アミノ酪酸、２‐アミノ酪酸、２‐アミノイソ酪酸、６‐アミノヘキサン酸、１‐ナフチルアラニン、２‐ナフチルアラニン、２‐アミノ安息香酸、４‐アミノ安息香酸、４‐クロロフェニルアラニン、２，３‐ジアミノプロピオン酸、２，４‐ジアミノ酪酸、シクロセリン、カルニチン、シスチン、ペニシラミン、ピログルタミン酸、チエニルアラニン、ヒドロキシプロリン、アロイソロイシン、アロトレオニン、イソニペコチン酸、イソセリン、フェニルグリシン、スタチン、β‐アラニン、ノルロイシン、Ｎ‐メチルアミノ酸、β‐アミノ酸又はγ‐アミノ酸及びそれらの誘導体である。合成アミノ酸のリストは、Roberts D.C.及びVellaccio Fの「Unusual amino acids in peptide synthesis」という記事（The Peptides, Vol. 5 (1983), Chapter VI, Gross E. and Meienhofer J., Eds., Academic Press, New York, USA）又は、この産業分野の専門会社、例えば、特に、NeoMPS, Bachem, Novabiochem, Sigma-Aldrich, Peptides International, Advanced ChemTech, Chem-Impex, Maybridge Chemical, Chirotech Technology, Peninsula Laboratories又はRSP Amino Acid Analoguesなどの商業用カタログで見られる。
【００３８】
配列番号１によって定義され、不可逆方法で化学的に修飾されるＳＮＡＰ‐２５のアミノ酸配列に由来する本発明のペプチドの中で好ましい配列は、配列番号２によって定義されるＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ末端領域の配列に含まれるアミノ酸配列又は配列番号３によって定義されるカルボキシ末端領域の配列に含まれるアミノ酸配列を有するものであり、より好ましいのは、配列番号４によって定義される１０〜２２残基間に含まれる領域に含まれ、配列番号５によって定義される２５〜４０残基間に含まれる領域に含まれ、配列番号６によって定義される６５〜８１残基間に含まれる領域に含まれ、又は配列番号７によって定義される１８１〜２０６残基間に含まれる領域に含まれるアミノ酸配列を有し、更に好ましいのは、配列番号８によって定義される１２〜１９残基間に含まれる領域に含まれ、配列番号９によって定義される２６〜３８残基間に含まれる領域に含まれ、又は配列番号１０によって定義される６８〜７９残基間に含まれる領域に含まれるアミノ酸配列を有し、また特に、配列番号１１によって定義される１２〜１７残基間に含まれる領域に含まれるアミノ酸配列を有するものである。
【００３９】
また本発明には、本質的にＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に由来する不可逆的に化学修飾されたペプチドと相同であるペプチドが含まれる。「本質的に相同なペプチド」とは、少なくとも６０％、好ましくは８０％、より好ましくは９５％が配列番号１と同じであるアミノ酸配列として理解される。「同一割合」とは、２つのアミノ酸配列を最適な並びで比較したときに同じであるアミノ酸の割合に対応する。そこでは、前記割合は単に統計的なものであり、２つのアミノ酸配列の異なる部分は配列内でランダムに分散されている。「最適な並び」とは、より高い同一割合となるアミノ酸配列の並びとして理解される。同一割合は、２つの比較される配列においてアミノ酸が同一である同一箇所の数を測定し、その数を比較した箇所の数で割り、得られた結果に１００を掛けることによって、２つの配列間の同一割合を得ることによって算出される。２つのアミノ酸配列の比較は、手動で、又は、例えばウェブサイト（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/）上でインターネットを通してアクセスできるBLAST (Basic Local Alignment Search Tool)アルゴリズムなどのコンピュータプログラムの方法を用いて実施できる。
【００４０】
本発明で提供された化粧品的又は医薬的に許容されるペプチドの塩は、本発明の範囲に含まれる。「化粧品的又は医薬的に許容できる」という用語には、通常、金属塩又は酸付加塩、有機の酸付加塩（例えば、特に、酢酸塩、クエン酸塩、オレイン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、しゅう酸塩又はグルコン酸塩など）又は無機の酸付加塩（例えば、特に、塩化物、硫酸塩、ほう酸塩又は炭酸塩など）のいずれかを形成するのに用いられる塩が含まれる。化粧品的又は医薬的に許容できれば、塩の性質は重要でない。化粧品的又は医薬的に許容できる本発明のペプチドの塩は、当該技術分野で周知の一般的な方法で得ることができる。
【００４１】
本発明のペプチドの合成は、当該技術分野で公知の一般的な方法に従って実施できる。例えば、固相ペプチド合成法の適応（Stewart J.M. and Young J.D. (1984) “Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd edition”, Pierce Chemical Company, Rockford, Illinois. Bodanzsky M. and Bodanzsky A. (1984) “The practice of Peptide Synthesis”, Springer Verlag, New York; Lloyd-Williams, P., Albericio, F. and Giralt, E. (1997) “Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins” CRC, Boca Raton (FL, USA)）、液相合成法、固相合成法と液相合成法の組み合わせ又は酵素合成法（Kullmann W. (1980) “Proteases as catalysts for enzymic syntheses of opioid peptides” J.Biol.Chem. 255, 8234-8238）などである。またペプチドは、所望の配列を作製する目的で遺伝子工学的に改良された又は改良されていない細菌株による発酵や、少なくとも所望の配列を含むペプチド断片を放出する動物起源や植物起源（好ましくは植物起源）のタンパクの制御された加水分解によっても得ることができる。
【００４２】
例えば、本発明のペプチドを得るためのひとつの方法では、フリーのカルボキシル基を有する本発明のペプチド断片又はその反応誘導体が、１つ以上のフリーの水素原子を持つアミノ基を有する相補的な断片と反応し、その後アミド結合を形成し、アミド結合の形成に寄与しない前記断片の官能基が存在する場合には、一時的に又は永久的に保護基によって都合よく保護される。
【００４３】
本発明のペプチドを得るための別の方法では、例えば、特にトシル基、メシル基及びハロゲン基などの脱離基を有する本発明のペプチド断片が、１つ以上のフリーの水素原子を持つアミノ基を有する相補的な断片と求核置換反応によって反応し、Ｎ‐Ｃ結合の形成に寄与しない前記断片の官能基が存在する場合には、一時的に又は永久的に保護基によって都合よく保護される。保護基、それらの挿入及び除去の例は、文献に記載されている（Greene T.W. (1981) “Protective groups in organic synthesis” John Wiley & Sons, New Cork; Atherton B. and Sheppard R.C. (1989) “Solid Phase Peptide Synthesis: A practical approach” IRL Oxford University Press）。また「保護基」という用語は、固相合成に使用される高分子支持体を含む。
【００４４】
合成を固相で完全に又は部分的に行うとき、本発明の方法で用いられる固体支持体として以下のものを挙げることができる：ポリスチレン及びポリエチレングリコールでグラフトされたポリスチレン等で作製された支持体、例えば、ｐ‐メチルベンズヒドリルアミン樹脂（ＭＢＨＡ）（Matsueda G.R. and Stewart J.M. (1981) “A p-methylbenzhydrylamine resin for improved solid-phase synthesis of peptide amides” Peptides 2, 45-50）、２‐クロロトリチル樹脂（(a) Barlos K., Gatos D., Kallitsis J., Papaphotiu G., Sotiriu P., Wenqing Y. and Schafer W. (1989) “Darstellung geschutzter peptid-fragmente unter einsatz substituierter triphenylmethyl-harze” Tetrahedron Lett. 30, 3943-3946;(b) Barlos K., Gatos D., Kapolos S., Papaphotiu G., Schafer W. and Wenqing Y. (1989) “Veresterung von partiell geschutzten peptid-fragmenten mit harzen. Einsatz von 2-chlorotritylchlorid zur synthese von Leu15 -gastrin I” Tetrahedron Lett. 30, 3947-3951）、ＴｅｎｔａＧｅｌ（商標）樹脂（Rapp Polymere GmbH）及びＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ（商標）樹脂（Matrix Innovation, Inc）等である。これらは、高分子支持体からの化合物の脱保護と、それと同時の切断を可能にする不安定スペーサー（labile spacer）を含んでいても、含んでいなくてもよい。不安定スペーサーとは、５‐（４‐アミノメチル‐３，５‐ジメトキシフェノキシ）バレリアン酸（ＰＡＬ）（Albericio F., Kneib-Cordonier N., Biancalana S., Gera L., Masada R.I., Hudson D. and Barany G. (1990) “Preparation and application of the 5-(4-(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)aminomethyl-3,5-dimethoxy-phenoxy)-valeric acid (PAL) handle for the solid-phase synthesis of C-terminal peptide amides under mild conditions” J. Org. Chem. 55, 3730-3743）、２‐［４‐アミノメチル‐（２，４‐ジメトキシフェノキシ）フェノキシ酢酸（ＡＭ）（Rink H. (1987) “Solid-phase synthesis of protected peptide fragments using a trialkoxy-diphenyl-methylester resin” Tetrahedron Lett. 28, 3787-3790）及びワング（Wang S.S. (1973) “p-Alkoxybenzyl Alcohol Resin and p-Alkoxybenzyloxycarbonylhydrazide Resin for Solid Phase Synthesis of Protected Peptide Fragments” J.Am.Chem.Soc. 95, 1328-1333）等である。
【００４５】
ニューロンエキソサイトーシスを制御するために、化合物が、哺乳動物、好ましくはヒトの体内のそれの作用部位と接触を起こす何らかの方法によって、本発明のペプチドはそれらを含む組成物の形で投与される。この意味で、本発明は、１つ以上の一般式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容できるその塩を含む化粧品又は医薬組成物を提供する。前記組成物は、当業者に公知の一般的な方法によって製造できる。
【００４６】
本発明のペプチドは、本発明の化粧品的又は医薬的組成において、所望の効果を発揮するために化粧品的又は医薬的に有効な濃度で使用される。好ましくは、０．０００００００１％〜２０％（重量として）、より好ましくは０．００００１％〜１０％（重量として）、更に好ましくは０．０００１％〜５％（重量として）である。
【００４７】
本発明のペプチド対象物は、それらの配列の特性又はそれらが有するアミノ末端及びカルボキシ末端の修飾によって多様な水溶性を示す。水溶性でないものは、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、プロピレングリコール、グリセリン、ブチレングリコール又はポリエチレングリコールなど従来からの化粧品的又は医薬的に許容できる溶媒に溶解できる。
【００４８】
病的状態を治療するために投与される、本発明のペプチド及び／又は医薬組成物の医薬的に有効な量及びその投与量は、年齢、患者の状態、障害又は疾病の重症度、投与の方法及び頻度及び使用されるペプチドの特徴を含む多くの因子に依存する。
【００４９】
本発明のペプチドを含む医薬組成物は、例えば固体又は液体の任意の投与形態を持つことができ、例えば、経口、経鼻、非経口、経直腸、局所又は経皮など任意の適切な経路で投与できる。それには、所望の投与形態の製剤のために必要な賦形剤が含まれる。本明細書中、「非経口の」という用語には、皮下、皮内、血管内注射、例えば、静脈内、筋肉内、脊髄、頭蓋内、関節内、髄腔内及び腹腔内注射並びに他の同様の注射又は注入技術のどれもが含まれる。医薬品及びそれらを得るために必要な賦形剤のいろいろな投与形態の概説は、例えば、“Tratado de Farmacia Galenica”, C. Fauli i Trillo, 1993, Luzan 5, S.A. Ediciones, Madridで見ることができる。
【００５０】
また本発明のペプチドは、活性成分のより優れた浸透性を達成すること、及び／又は、その薬物動態的及び薬力学的な特性を改善することを目的として、リポソーム、ミリ粒子、マイクロ粒子、ナノ粒子、スポンジ、小胞、ミセル、ミリスフェア、マイクロスフェア、ナノスフェア、リポスフェア、ミリカプセル、マイクロカプセル及びナノカプセルに加え、マイクロエマルジョンやナノエマルジョンなどの化粧品的又は医薬的な徐放性システム及び／又はキャリアシステムに前もって組み込むことができる。コントロールされた徐放製剤は、当該技術分野で公知の方法によって製造でき、例えば、貼付剤を含む局所投与、経口投与、直腸内投与、皮下移植又は身体の特定の部分への直接移植によって投与でき、好ましくは、本発明のペプチドを相対的に一定の量で放出しなければならない。コントロールされた徐放製剤に含まれるペプチドの量は、例えば、本発明のペプチドの投与部位、動態及び徐放期間に加え、治療又は予防の状態に依存する。
【００５１】
また、本発明のペプチドは、特に、タルク、ベントナイト、シリカ、デンプン又はマルトデキストリンなどの固体の有機高分子又は無機担体上に吸着できる。
【００５２】
本発明のペプチドを含む化粧品又は医薬品は、例えば、非限定的な意味で、クリーム、水中油滴型及び／又は水中シリコン型エマルジョン、油中水滴型及び／又はシリコン中水滴型エマルジョン、油、ミルク、香油、泡、ローション、ゲル、塗布薬、セラム、石鹸、軟膏（unguents）、ムース、軟膏（ointments）、棒状のもの、ペンシル及びスプレーなど、付けたまま及び洗い落とせる処方を含む局所適用のための様々なタイプの製剤に使用できる。また、当業者に公知の手法によって、ウェットティッシュ、ヒドロゲル、粘着性（又は非粘着性）のパッチ若しくはフェイスマスクなどの様々なタイプの固形品に含ませること、又は、特に、メークアップファンデーション、ローション、メーク落としミルク、コンシーラー、アイシャドー及び口紅などの様々なメークアップ製品に含ませることができる。
【００５３】
また、織物に固着させるシステムの生物分解、身体と衣料の摩擦、身体の水分、皮膚のｐＨ又は体温によって、本発明のぺプチドが放出されるように、身体の皮膚と直接接触する衣料を作る布に当該ペプチドを含ませることができる。衣料と布、及びマイクロカプセル化を含むペプチドを織物中に固定する手段の例は、文献に記載されており、当該技術分野で公知である（Schaab C.K. (1986) "Impregnating Fabrics With Microcapsules", HAPPI May 1986; Nelson G. (2002) “Application of microencapsulation in textiles” Int. J. Pharm. 242, 55-62）。好ましくは、衣料は包帯である。
【００５４】
本発明の化粧品又は医薬組成物の対象は、皮下注射、皮内注射、スチームラップ又は活性成分をより浸透させるためのイオン導入によって、治療又はケアを必要とする体の部位に適用できる。適用領域は処置される状態に決定される。適用される好ましい部位は、表情じわがある額の部分に加え、まゆの間の領域、口の周り及び／又は目の周りのしわと細い線である。
【００５５】
本発明でクレームされる化粧品又は医薬組成物には、皮膚のケア、クリーニング及び治療用の組成物、例えば非限定的な意味で、エマルジョン薬剤、柔軟化粧水、オーガニック溶液、スキンコンディショナーなどで一般的に使用される追加成分を含むことができる。例えば、保湿剤、αハイドロキシ酸、保湿成分、ビタミン、顔料又は染料、ゲル化ポリマー、増粘剤、軟化剤、しわ取り剤、目の下のたるみを減少又は治療できる薬剤、ホワイトニング又は脱色剤、ピーリング剤、アンチエイジング剤、フリーラジカル捕捉剤及び／又は抗大気汚染剤、ＮＯ合成酵素阻害剤、抗酸化剤、抗糖化剤、抗菌剤、抗真菌剤、例えばコラーゲン合成を誘導する薬剤、エラスチン合成を誘導する薬剤、デコリン合成を誘導する薬剤、ラミニン合成を誘導する薬剤、コラーゲン分解を阻害する薬剤、エラスチン分解を阻害する薬剤、線維芽細胞の増殖を誘導する薬剤、ケラチノサイトの増殖を誘導する薬剤、ケラチノサイトの分化を誘導する薬剤、脂質や角質層（セラミド、脂肪酸など）の成分の合成を誘導する薬剤など、皮膚や表皮の高分子合成を誘導及び／又はそれらの分解を阻害できる薬剤、皮膚弛緩剤、グリコサミノグリカン合成を誘導する薬剤、安定剤、抗妊娠線剤、鎮静剤、抗炎症剤、毛細血管循環及び／又は微小循環に作用する薬剤、細胞代謝に作用する薬剤、メラニン合成を誘導及び／又は阻害する薬剤、皮膚と表皮の結合改善の薬剤、防腐剤、香料、キレート剤、植物抽出物、精油、海洋抽出物、生物発酵から得られる薬剤、ミネラル塩、細胞抽出物、日焼け止め剤（紫外線Ａ及びＢ照射に対して機能する有機又は無機の光防護剤）などである。何よりも、これらは組成物の他の成分と物理的及び化学的に混合可能であり、特に、本発明の組成物に含まれる一般式（Ｉ）のペプチドと混合可能である。前記追加成分の特性は、合成物、若しくは例えば植物抽出物など天然のもの、又は生物発酵過程から得られるものである。
【００５６】
本発明の更なる実施形態は、化粧品的又は医薬的に有効な量の１つ以上の本発明のペプチドと、化粧品的又は医薬的に有効な量のしわ取り及び／又はアンチエイジングに用いる１つ以上の抽出物、例えば非限定的な意味で、特にＶｉｔｉｓ  ｖｉｎｉｆｅｒａ、Ｒｏｓａ  ｃａｎｉｎａ、Ｃｕｒｃｕｍａ  ｌｏｎｇａ、Ｉｒｉｓ  ｐａｌｌｉｄａ、Ｔｈｅｏｂｒｏｍａ  ｃａｃａｏ、Ｇｉｎｋｇｏ  ｂｉｌｏｂａ若しくはＤｕｎａｌｉｅｌｌａ  ｓａｌｉｎａの抽出物など、又はしわ取り及び／又はアンチエイジング活性を有する１つ以上の合成化合物、抽出物若しくは発酵生産物、例えば非限定的な意味で、特にＳｅｄｅｒｍａ社が販売するＭａｔｒｉｘｙｌ（商標）、Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ社が販売するＶｉａｌｏｘ（商標）、Ｓｙｎ‐ａｋｅ（商標）、Ｃｏｇｎｉｓ社が販売するＭｙｏｘｉｎｏｌ（商標）、Ｅｘｓｙｍｏｌ社が販売するＡｌｇｉｓｕｍ  Ｃ（商標）、Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｓｉｌａｎｅ  ＣＮ（商標）、Ｌｉｐｏｔｅｃ社が販売するＡｒｇｉｒｅｌｉｎｅ（商標）、Ｌｅｕｐｈａｓｙｌ（商標）、Ａｌｄｅｎｉｎｅ（商標）、Ｄｅｃｏｒｉｎｙｌ（商標）、Ｄｅｃｏｒｉｎｏｌ（商標）、Ｌｉｐｏｃｈｒｏｍａｎ（商標）、Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  Ｅｕｒｏｐｅｅｎ  ｄｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｅ  Ｃｅｌｌｕｌａｉｒｅ社が販売するＫｏｌｌａｒｅｎ（商標）、Ｖｉｎｃｉｅｎｃｅ社が販売するＣｏｌｌａｘｙｌ（商標）、Ｑｕｉｎｔｅｓｃｉｎｅ（商標）、アルベリン、マンガナーゼ、マグネシウム塩などのＣａ２＋チャンネルアンタゴニスト、特定の第二級、第三級アミン、レチノール及びその誘導体、イデベノン及びその誘導体、コエンザイムＱ１０及びその誘導体、ボスウェリア酸及びその誘導体、γアミノ酪酸若しくは塩素イオンチャネルアゴニストなどを含む化粧品又は医薬組成物である。
【００５７】
本発明の組成物は、過敏な皮膚に関連する腫れや刺激を軽減する目的で鎮痛剤及び／又は抗炎症剤に含まれるか、又は、それと一緒に投与できる。ヒドロコルチゾンなどのステロイドタイプ化合物、パラセタモールやアセチルサリチル酸などの非ステロイドタイプ化合物、天然抽出物又は精油が鎮痛活性と抗炎症剤活性を有する。
【００５８】
本発明のペプチドは、ボツリヌス毒素と同様にニューロンエキソサイトーシスを抑制する作用メカニズムを有する。したがって、このペプチドは、顔のしわ及び／又は顔面非対称の治療に加え、失調症、斜視、眼瞼痙攣、斜頸、チックなどの筋肉痙攣状態の治療においても有効性を示すと考えられる。
【００５９】
したがって、本発明の更なる実施形態は、ニューロンエキソサイトーシスの制御を必要とする哺乳動物、好ましくはヒトの状態を治療するための化粧品又は医薬組成物の製造において、一般式（Ｉ）の１つ以上のペプチドを使用することである。本発明の別の実施形態は、皮膚のトリートメント、クリーニング又はケアのための化粧品又は医薬組成物の製造において、一般式（Ｉ）の１つ以上のペプチドを使用することである。本発明の更なる実施形態は、顔面非対称と顔のしわ、好ましくは表情じわの減少及び／又は除去のための化粧品又は医薬組成物の製造において、不可逆的に化学的に修飾された、ＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に由来する１つ以上のペプチドを使用することである。本発明の更なる別の実施形態は、失調症、斜視、眼瞼痙攣、斜頸、チックなどの筋肉痙攣を示す神経障害又は病理を治療するための化粧品又は医薬組成物の製造において、不可逆的に化学的に修飾された、ＳＮＡＰ‐２５タンパク質のアミノ酸配列に由来する１つ以上のペプチドを使用することである。
【００６０】
本発明の別の実施形態は、ニューロンエキソサイトーシスの制御を必要とする哺乳動物の状態、好ましくはヒトの状態を治療するための美容的又は医薬的手法であり、有効な量の一般式（Ｉ）の１つ以上のペプチドの投与、好ましくはそれを含む化粧品又は医薬組成物の形での投与が含まれる。更に、本発明は顔のしわの減少及び／又は除去、又は顔面非対称の治療のための美容的又は医薬的方法を提供する。その方法には、本発明の１つ以上のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩を含む化粧品又は医薬組成物の顔の皮膚への適用が含まれる。また本発明は、失調症、斜視、眼瞼痙攣、斜頸、チックなどの筋肉痙攣を示す神経障害又は病理を治療するための美容的又は医薬的な方法を提供する。その方法には、本発明の１つ以上のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩を含む化粧品又は医薬組成物の適用が含まれる。
【００６１】
適用の頻度は、それぞれの対象のニーズによって広範囲であり、月に１回から１日１０回まで、好ましくは、週に１回から１日４回まで、より好ましくは、週に３回から１日２回まで、更に好ましくは、１日１回が推奨される。
【００６２】
好ましい美容的又は医薬的方法は、表情じわが出る顔や額のスペース、好ましくは、口及び／又は目の周りのしわ、及び／又は額のしわ及び／又はまゆの間のスペースのしわに適用することである。
【実施例】
【００６３】
本明細書で示す以下の特定の実施例は、本発明の本質を説明するために有用である。これらの実施例は、説明の目的のためだけに含まれており、本明細書でクレームされた発明を限定するものと解釈されるべきではない。
【００６４】
一般手法
化学合成
すべての合成過程は、多孔性のポリエチレンディスクを備えたポリプロピレンシリンジ内で実施される。すべての試薬と溶媒は、合成用の品質であり、追加の処理なしで使用される。溶媒と試薬は吸引によって除去される。Ｆｍｏｃ基の除去はピペリジン‐ＤＭＦ（２：８，ｖ／ｖ）（１×１分間，１×５分間；５ｍｌ／ｇ樹脂）を用いて実施される（Lloyd-Williams P., Albericio F. and Giralt, E. (1997) “Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins” CRC, Boca Raton (FL, USA)）。脱保護、カップリング及び再脱保護のステップの間の洗浄は、１ｇの樹脂あたり１０ｍｌの溶媒を用いたＤＭＦで実施する（３×１分間）。カップリング反応は、１ｇの樹脂あたり３ｍｌの溶媒を用いて行われた。カップリングの調節はニンヒドリン試験によって実施する（Kaiser E., Colescott R.L., Bossinger C.D. and Cook P.I. (1970) “Color test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides” Anal. Biochem. 34, 595-598）。すべての合成反応と洗浄は２５℃で実施した。
【００６５】
エレクトロスプレー質量分析は、島津製作所製の装置ＬＣＭＳ-ＱＰ８０００（京都、日本）にて、移動相としてＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ  ４：１（＋０．１％ＴＦＡ）の混合液を用いて、流速０．２ｍｌ／分で実施した。
【００６６】
略語
アミノ酸に使用される略語は、「Eur. J. Biochem. (1984) 138, 9-37 and in J. Biol. Chem. (1989) 264, 633-673」の生化学用語に指定されたＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ委員会の規則に従う。
ＡＭ，２‐［４‐アミノメチル‐（２，４‐ジメトキシフェニル）］‐フェノキシ酢酸；ＢｏＮＴ  Ａ，ボツリヌス毒素血清型Ａ；ｃｐｓ，センチポアズ；ＤＣＭ，ジクロロメタン；ＤＩＥＡ，Ｎ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミン；ＤＩＰＣＤＩ，Ｎ，Ｎ’‐ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＭＦ，Ｎ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド；ＤＰＰＣ，ジパルミトイルホスファチジルコリン；ｅｑ．，等価；Ｆｍｏｃ，フルオレニルメトキシカルボニル；ＨＯＢｔ，１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＩＮＣＩ，化粧品原料の国際命名法；ＭＢＨＡ，ｐ‐メチルベンズヒドリルアミン；ＭｅＣＮ，アセトニトリル；ＭＬＶ，多層小胞；ＭｅＯＨ，メタノール；ＮＭＰ，Ｎ‐メチルピロリドン；Ｐｂｆ，２，２，４，６，７‐ペンタメチルジヒドロベンゾフラン‐５‐スルホニル；ＰＥＧ，ポリエチレングリコール；ＰＥＧｎ，‐［ＮＨ‐ＣＨ２‐（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）３‐（ＣＨ２）３‐ＮＨ‐ＣＯ‐ＣＨ２ＣＨ２‐ＣＯ‐］ｎ；ｒｐｍ，毎分回転数；ＳＮＡＰ‐２５，シナプトソーム関連タンパク質（２５ｋＤａ）；ｔＢｕ，ｔｅｒｔ‐ブチル；ＴＦＡ，トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ，テトラヒドロフラン；ＵＬＶ，単層小胞。
【００６７】
実施例１
Ｆｍｏｃ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＡＭ‐ＭＢＨＡの作製
一般的に記述されたＦｍｏｃ基を除去するためのプロトコルに従って、０．６２８ｍｍｏｌ／ｇ（９５ｍｍｏｌ，１ｅｑ．）の機能化した１５１．３ｇのＦｍｏｃ‐ＡＭ‐ＭＢＨＡ樹脂をピペリジン‐ＤＭＦで処理する。ＤＩＰＣＤＩ（３６．６ｍｌ，２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）及びＨＯＢｔ（３５．６ｇ，２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）の存在下で、ＤＭＦを溶媒として用いて、１５４．１ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＯＨ（２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）を、非保護樹脂に１時間かけて導入する。
【００６８】
次に樹脂を一般的に記述された方法で洗浄し、Ｆｍｏｃ基の脱保護のための処理を次のアミノ酸を導入するために繰り返す。以下のプロトコルに従い、１５４．１ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＯＨ（２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）、８７．５ｇのＦｍｏｃ‐Ｇｌｎ‐ＯＨ（４７４ｍｍｏｌ，５ｅｑ．）、８８．２ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｍｅｔ‐ＯＨ（２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）、１０５．３ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐ＯＨ（２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）及び１０５．３ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐ＯＨ（２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）を、７１．３ｇのＨＯＢｔ（４７４ｍｍｏｌ，５ｅｑ．）を用いるＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｇｌｎ‐ＯＨを導入するステップを除いて、３６．５ｇのＨＯＢｔ（２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）及び３６．６ｍｌのＤＩＰＣＤＩ（２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）存在下で順次結合させる。
【００６９】
得られたＦｍｏｃ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＡＭ‐ＭＢＨＡをＤＭＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（４×１分間）、ジエチル・エーテル（４×１分間）で洗浄し、真空下で乾燥する。
【００７０】
実施例２
ＣＨ３‐（ＣＨ２）ｍ‐ＣＯ‐Ｇｌｕ‐Ｇｌｕ‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ‐Ａｒｇ‐ＮＨ２の作製
１．６８ｇのＦｍｏｃ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＡＭ−ＭＢＨＡ（０．５ｍｍｏｌ，０．２９６ｍｍｏｌ／ｇ，１ｅｑ．）のアミノ末端Ｆｍｏｃ基を、一般的に記述された方法で脱保護し、ＤＭＦ（１０ｍｌ）に前もって溶解させたＣＨ３‐（ＣＨ２）ｍ‐ＣＯＯＨ（５ｍｍｏｌ，１０ｅｑ．）を、７７０ｍｇのＨＯＢｔ（５ｍｍｏｌ，１０ｅｑ．）及び７７０μｌのＤＩＰＣＤＩ（５ｍｍｏｌ，１０ｅｑ．）の存在下で導入する。１５時間反応させ、その後、樹脂をＴＨＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（５×１分間）、ＤＭＦ（５×１分間）、ＭｅＯＨ（５×１分間）、ＤＭＦ（５×１分間）、ＴＨＦ（５×１分間）、ＤＭＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（４×１分間）、エーテル（３×１分間）で洗浄し、真空下で乾燥する。
【００７１】
１．００ｇの乾燥したペプチジル樹脂を１５ｍｌのＴＦＡ‐ｉＰｒ３Ｓｉ‐Ｈ２Ｏ（９０：５：５）を用いて室温で２時間処理する。ろ液を冷ジエチルエーテル（１００ｍｌ）に集め、４０００ｒｐｍで５分間遠心し、エーテル溶液を静かに注ぐ。エーテルで５回洗浄を繰り返す。最終的な沈殿物を真空下で乾燥する。
【００７２】
【表１】
0005647413.tif 000003
【００７３】
実施例３
Ａｃ‐ＰＥＧｎ‐Ｇｌｕ‐Ｇｌｕ‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ‐Ａｒｇ‐ＮＨ２の作製
３２１．０ｍｇのＦｍｏｃ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＡＭ−ＭＢＨＡ（０．０９５ｍｍｏｌ，０．２９６ｍｍｏｌ／ｇ，１ｅｑ．）のアミノ末端Ｆｍｏｃ基を一般的に記述された方法で脱保護し、ＮＭＰに前もって溶解したＦｍｏｃ‐ＰＥＧ１‐ＯＨ（２．５ｅｑ．）を、３６．５ｍｇのＨＯＢｔ（０．２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）及び３６．６μｌのＤＩＰＣＤＩ（０．２３７ｍｍｏｌ，２．５ｅｑ．）の存在下で、４０〜６０分間かけて加える。一般的な方法に記述されたアミノ末端Ｆｍｏｃ基、Ｆｍｏｃ‐ＰＥＧ１‐ＯＨを組み込む反応及びＦｍｏｃの脱保護を（ｎ−１）回実施する。異なる誘導体を得るために、ｎ＝１〜１００である。アミノ末端のアセチル化をＤＭＦ中のＡｃ２Ｏ（２．５ｅｑ．）及びＤＩＥＡ（２．５ｅｑ．）を用いて３０分間実施する。
【００７４】
Ａｃ‐ＰＥＧｎ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＡＭ‐ＭＢＨＡ樹脂は、ＤＭＦ（５×１分）、ＤＣＭ（４×１分）、ジエチルエーテル（４×１分）で洗浄し、真空下で乾燥する。
【００７５】
２２．４ｍｇのＡｃ‐ＰＥＧｎ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＡＭ‐ＭＢＨＡを、１．５７ｍｌのＴＦＡ‐ｉＰｒ３Ｓｉ-Ｈ２Ｏ（９５：２．５：２．５）混合物を用いて０℃で５分間、続いて室温で９０分間処理する。ろ液を冷ジエチルエーテル（１０ｍｌ）に集め、４０００ｒｐｍで５分間遠心し、エーテル溶液を静かに注いだ。エーテルで５回洗浄を繰り返す。油性の最終残留物をＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ（１：１）に再溶解し、凍結乾燥する。
【００７６】
【表２】
0005647413.tif 000004
【００７７】
実施例４
Ａｃ‐Ｇｌｕ‐Ｇｌｕ‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ‐Ａｒｇ‐ＮＨ‐（ＣＨ２）ｓ‐ＣＨ３の作製
５００μｌのＤＩＥＡ（２．９ｍｍｏｌ，０．９０ｅｑ．）を添加した２０ｍｌのＤＣＭに溶解した２．１０ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＯＨ（３．２３ｍｍｏｌ，１ｅｑ．）を乾燥２‐クロロトリチル樹脂に加える。それを５分間攪拌し、１ｍＬのＤＩＥＡ（５．９ｍｍｏｌ，１．８１ｅｑ．）を加える。それを４０分間反応させる。残りの塩化基は１．６ｍｌのメタノールで処理することにより保護される。
【００７８】
アミノ末端Ｆｍｏｃ基を一般的に記述された方法で脱保護し、ＤＭＦを溶媒として用いたＤＩＰＣＤＩ（７７０μｌ，５ｍｍｏｌ，５ｅｑ．）及びＨＯＢｔ（７７０ｇ，５ｍｍｏｌ，５ｅｑ．）の存在下で、３．２４ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＯＨ（５ｍｍｏｌ，５ｅｑ．）を、１ｍｍｏｌのアミノアシル樹脂  Ｆｍｏｃ‐Ｌ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＣｌＴｒｔ（商標）に１時間かけて導入する。次に、一般的に記述された方法で樹脂を洗浄し、Ｆｍｏｃ基を脱保護する処理を次のアミノ酸導入のために繰り返す。記述されたプロトコルに従い、１．８４ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｇｌｎ‐ＯＨ（５ｍｍｏｌ、５ｅｑ．）、１．８６ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｍｅｔ‐ＯＨ（５ｍｍｏｌ、５ｅｑ．）、２．１２ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐ＯＨ及び２．１２ｇのＦｍｏｃ‐Ｌ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐ＯＨ（５ｍｍｏｌ，５ｅｑ．）を、７７０ｍｇのＨＯＢｔ（５ｍｍｏｌ，５ｅｑ．）及び７７０μｌのＤＩＰＣＤＩ（５ｍｍｏｌ，ｅｑ．）の各カップリングの存在下で、Ｆｍｏｃ‐Ｌ‐Ｇｌｎ‐ＯＨを導入するステップを除いて、１．５４ｇのＨＯＢｔ（１０ｍｍｏｌ，１０ｅｑ．）を加えて順次カップリングさせる。
【００７９】
一般的に記述された方法でアミノ末端Ｆｍｏｃ基を脱保護し、ＤＭＦを溶媒として用いた４．２８ｍｌのＤＩＥＡ（２５ｍｍｏｌ，２５ｅｑ．）存在下で、ペプチジル樹脂を、２．３６ｍｌの無水酢酸（２５ｍｍｏｌ、２５ｅｑ．）で３０分間処理する。これをＤＭＦ（５×１分間）、ＤＣＭ（４×１分間）、ジエチルエーテル（４×１分間）で洗浄し、真空下で乾燥する。
【００８０】
３％ＴＦＡのＤＣＭ溶液を用いて、ＫＯＨの存在下で前もって真空で乾燥したペプチジル樹脂を５分間処理することによって、完全に保護されたペプチド［Ａｃ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＯＨ］を得る。ろ液を冷ジエチルエーテルに集め、その処理を３回繰り返す。室温で、エーテル溶液をロータリーエバポレーターで乾燥させる。析出物を５０％ＭｅＣＮ水溶液で再懸濁し、凍結乾燥する。得られた生成物を２７９ｍｇバルーン（balloon）に量り取り、３ｅｑ．のＣＨ３‐（ＣＨ２）ｓ‐ＮＨ２及び３０ｍｌの無水ＤＭＦを加える。１２０μｌのＤＩＰＣＤＩ（２ｅｑ．）を加え、４７℃でマグネチックスターラーを用いて反応させる。その反応は、最初の生成物が消滅するまでＨＰＬＣで制御し、２４時間後に終了する。溶媒を乾燥するまで濃縮し、ＤＣＭを用いて２回共濃縮する。得られた残渣［Ａｃ‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐Ａｒｇ（Ｐｂｆ）‐ＮＨ‐（ＣＨ２）ｓ‐ＣＨ３］を５０ｍｌのＴＦＡ‐ｉＰｒ３Ｓｉ‐Ｈ２Ｏ（９０：５：５）混合物で再懸濁し、室温で３０分間反応させる。２５０ｍｌの冷ジエチルエーテルを加え、溶媒をロータリーエバポレーターで濃縮し、更に２回、エーテルを用いて共濃縮する。残渣を５０％ＭｅＣＮ水混合液で溶解し、凍結乾燥する。
【００８１】
【表３】
0005647413.tif 000005
【００８２】
実施例５
実施例１〜４に記載された一般的なプロトコルに従って、機械的に繰り返して、試薬の特性とペプチド配列を変えることによって、更に、本発明の範囲に含まれるＳＮＡＰ‐２５タンパク質の配列に由来する不可逆的に化学修飾された以下のペプチドが得られた。
【００８３】
【表４】
0005647413.tif 000006
【００８４】
【表５】
0005647413.tif 000007
【００８５】
【表６】
0005647413.tif 000008
【００８６】
【表７】
0005647413.tif 000009
【００８７】
【表８】
0005647413.tif 000010
【００８８】
【表９】
0005647413.tif 000011
【００８９】
【表１０】
0005647413.tif 000012
【００９０】
【表１１】
0005647413.tif 000013
【００９１】
【表１２】
0005647413.tif 000014
【００９２】
【表１３】
0005647413.tif 000015
【００９３】
【表１４】
0005647413.tif 000016
【００９４】
【表１５】
0005647413.tif 000017
【００９５】
【表１６】
0005647413.tif 000018
【００９６】
【表１７】
0005647413.tif 000019
【００９７】
【表１８】
0005647413.tif 000020
【００９８】
【表１９】
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【００９９】
【表２０】
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【０１００】
【表２１】
0005647413.tif 000023
【０１０１】
実施例６
［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸のニューロンエキソサイトーシスにおける不可逆的に化学修飾されたＳＮＡＰ‐２５タンパク質由来ペプチドの活性評価
本発明のペプチドが、神経伝達物質のニューロンエキソサイトーシスを抑制するか否かを評価するために、ラット海馬ニューロンの初代培養のＬ−グルタミン酸神経伝達物質の放出におけるペプチドの活性を調べた。培養ニューロンにおける神経伝達物質のエキソサイトーシスは、細胞の電気的脱分極によって得ることができる。ラット胎児の海馬初代培養は、従来の方法（Blanes-Mira C., Merino J.M., Valera E., Fernandez-Ballester G., Gutierrez L.M., Viniegra S., Perez-Paya E. and Ferrer-Montiel A. “Small peptides patterned after the N-terminus domain of SNAP25 inhibit SNARE complex assembly and regulated exocytosis” J. Neurochem. 88, 124-135）で行い、５％ＣＯ２、３７℃のインキュベーターで１４日間培養し、維持した。［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸を海馬初代培養にロードするために［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸とともに培養物を３７℃で３時間インキュベートする。その後、過剰な［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸を洗浄し、０．１ｍＭの評価されるペプチドとともに３７℃で１時間インキュベートする。［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸は、３７℃で１０分間、生理的な緩衝液で緩衝した７５ｍＭ  ＫＣｌ及び２ｍＭ  ＣａＣｌ２溶液を用いた脱分極によって放出される。培養液を集めて、［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸量をβ放射線測定器で定量する。その結果を、ペプチド非存在下での［３Ｈ］‐Ｌ‐グルタミン酸放出量で標準化し、カルシウム非存在下でのベースの放出量で補正する。
【０１０２】
実施例７
ＣＨ３‐（ＣＨ２）１４‐ＣＯ‐Ｇｌｕ‐Ｇｌｕ‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ‐Ａｒｇ‐ＣＯＮＨ２を含む化粧品組成物の製造
以下の処方を本発明の記載通りに行った。
Ａ相の成分を十分に大きい反応槽に量り取り、ワックスを溶かすためにその混合物を８０℃で加熱する。Ｂ相の成分を全体の内容量に適した容器に量り取り、それらを７０℃で加熱する。激しくかき混ぜながらＡ相をＢ相にゆっくりと加える。その後、かき混ぜながらＣ相を前記混合物に加える。一旦添加を終了し、緩やかにかき混ぜながら冷却する。混合物が室温になったら、ＣＨ３‐（ＣＨ２）１４‐ＣＯ‐Ｇｌｕ‐Ｇｌｕ‐Ｍｅｔ‐Ｇｌｎ‐Ａｒｇ‐Ａｒｇ‐ＣＯＮＨ２とレシチンの水溶液を加え、ホモジナイズする。必要な場合はトリエタノールアミンを用いてｐＨを調整する。
【０１０３】
得られるクリームは、ｐＨ６〜７、粘度１０，０００〜１５，０００ｃｐｓ（６／５０）である。
【０１０４】
【表２２】
0005647413.tif 000024
【０１０５】
実施例８
ＣＨ３‐（ＣＨ２）１４‐ＣＯ‐ＥＬＥＥＭＱＲＲＡＤＱＬＡ‐ＮＨ２を含むリポソームの作製
ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）を量り取り、クロロホルムに溶解する。溶媒を真空下でリン脂質の薄層が得られるまで気化し、所望の濃度のペプチドを含む水溶液（Ｐｈｅｎｏｎｉｐ（商標）を含む）を用いて５５℃で処理することによって、該薄層を水和し、ＭＬＶリポソームを得る。ＵＬＶリポソームは超音波洗浄器に５５℃で２分間、５分間隔で８サイクル、ＭＬＶリポソームを浸すことによって得られる。
【０１０６】
【表２３】
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【０１０７】
第一の実施形態では、本発明は一般式（Ｉ）：Ｒ１‐ＡＡ‐Ｒ２のペプチドに係り、その立体異性体、化粧品的及び医薬的に許容できるその塩及びその混合物であり、
式中、
ＡＡは、配列番号１のアミノ酸配列に含まれる３〜４０の隣接アミノ酸配列であり、
Ｒ１は、Ｈ、アルキル基、アリール基、アラルキル基及びアシル基から成る群より選択され、
Ｒ２は、脂肪族基又は環状基で置換された又は置換されていないアミノ基、ヒドロキシル基及びチオール基から成る群より選択され、
Ｒ１がＨ又はアセチル基であるとき、Ｒ２は置換されていないアミノ基、ヒドロキシル基及びチオール基ではない。
【０１０８】
第二の重要な実施形態では、一般式（Ｉ）のペプチドにおいて、Ｒ１は、好ましくは、飽和若しくは不飽和の、直鎖、分岐鎖若しくは環状のＣ３〜Ｃ２４アシル基である。Ｒ１は、好ましくは、式ＣＨ３‐（ＣＨ２）ｍ‐ＣＯ-のアシル基であり、ｍは１〜２２とすることができる。
【０１０９】
本発明の別の重要な実施形態では、一般式（Ｉ）のペプチドにおいて、Ｒ１は、好ましくは、ポリエチレングリコールポリマーである。
【０１１０】
本発明の別の重要な実施形態では、一般式（Ｉ）のペプチドにおいて、Ｒ１は、好ましくは、分子量が２００〜３５０００ダルトンのポリエチレングリコールポリマーである。
【０１１１】
本発明の別の重要な実施形態では、一般式（Ｉ）のペプチドにおいて、Ｒ１は、好ましくは、以下の構造のポリエチレングリコールポリマーであり、
【０１１２】
【化２】
0005647413.tif 000026
【０１１３】
式中、ｎは、１〜１００とすることができ、本発明の更に好ましい実施形態では、ｎは、１〜５とすることができる。
【０１１４】
本発明の重要な実施形態では、一般式（Ｉ）のペプチドにおいて、Ｒ２は、好ましくは、飽和又は不飽和の、直鎖、分岐鎖又は環状のＣ１〜Ｃ２４脂肪族基で置換された又は置換されていないアミノ基又はヒドロキシル基である。
【０１１５】
本発明の重要な実施形態では、一般式（Ｉ）のペプチドにおいて、ＡＡは、好ましくは、以下のアミノ酸配列から成る群より選択される配列に含まれる３〜４０の隣接アミノ酸配列から成る：ＭＡＥＤＡＤＭＲＮＥＬＥＥＭＱＲＲＡＤＱＬ，ＡＤＥＳＬＥＳＴＲＲＭＬＱＬＶＥＥＳＫＤＡＧＩ，ＥＬＥＥＭＱＲＲＡＤＱＬＡ，ＥＬＥＥＭＱＲＲＡＤＱＬ，ＥＬＥＥＭＱＲＲＡＤＱ，ＥＬＥＥＭＱＲＲＡＤ，ＥＬＥＥＭＱＲＲＡ，ＥＬＥＥＭＱＲＲ，ＬＥＥＭＱＲＲＡＤＱＬ，ＬＥＥＭＱＲＲＡＤＱ，ＬＥＥＭＱＲＲＡＤ，ＬＥＥＭＱＲＲＡ，ＬＥＥＭＱＲＲ，ＥＥＭＱＲＲＡＤＱＬ，ＥＥＭＱＲＲＡＤＱ，ＥＥＭＱＲＲＡＤ，ＥＥＭＱＲＲＡ，ＥＥＭＱＲＲ，ＬＥＳＴＲＲＭＬＱＬＶＥＥ，ＮＫＤＭＫＥＡＥＫＮＬＴ，ＫＮＬＴＤＬ，ＩＭＥＫＡＤＳＮＫＴＲＩＤＥＡＮＱＲＡＴＫＭＬＧＳＧ，ＳＮＫＴＲＩＤＥＡＮＱＲＡＴＫＭＬＧＳＧ，ＴＲＩＤＥＡＮＱＲＡＴＫＭＬＧＳＧ，ＤＥＡＮＱＲＡＴＫＭＬＧＳＧ，ＮＱＲＡＴＫＭＬＧＳＧ及びＱＲＡＴＫＭＬＧＳＧ。
【０１１６】
別の重要な実施形態では、本発明は、固相ペプチド合成に基づいて、一般式（Ｉ）のペプチドを製造する方法である。
【０１１７】
別の重要な実施形態では、本発明は、Ｆｍｏｃ／ｔ‐ブチル、Ｆｍｏｃ／トリチル及びＦｍｏｃ／アリルから成る群より選択される保護基を用いた一般式（Ｉ）のペプチドを製造する方法である。
【０１１８】
別の重要な実施形態では、本発明は、化粧品的又は医薬的に有効な量の１つ以上の式（Ｉ）のペプチド及び１つ以上の化粧品的又は医薬的に許容される賦形剤又は補助剤を含む化粧品又は医薬組成物である。
【０１１９】
別の重要な実施形態では、本発明は、リポソーム、ミリカプセル、マイクロカプセル、ナノカプセル、スポンジ、小胞、ミセル、ミリスフェア、マイクロスフェア、ナノスフェア、リポスフェア、マイクロエマルジョン、ナノエマルジョン、ミリ粒子、マイクロ粒子及びナノ粒子から成る群より選択される化粧品的又は医薬的に許容される徐放性システム又はキャリアに組み込まれた１つ以上の一般式（Ｉ）のペプチドを含む化粧品又は医薬組成物である。
【０１２０】
別の重要な実施形態では、本発明は、タルク、ベントナイト、シリカ、デンプン及びマルトデキストリンから成る群より選択される固体の有機高分子又は無機担体上に吸着した１つ以上の一般式（Ｉ）のペプチドを含む化粧品又は医薬組成物である。
【０１２１】
別の重要な実施形態では、本発明は、一般式（Ｉ）のペプチドが、クリーム、水中油滴型及び／又は水中シリコン型エマルジョン、油中水滴型及び／又はシリコン中水滴型エマルジョン、油、ミルク、香油、泡、ローション、ゲル、塗布薬、セラム、石鹸、軟膏（unguents）、ムース、軟膏（ointments）、棒状のもの、ペンシル及びスプレーから成る群より選択される製剤中に存在する化粧品又は医薬組成物である。
【０１２２】
別の重要な実施形態では、本発明は、一般式（Ｉ）のペプチドが、ウェットティッシュ、ヒドロゲル、粘着性のパッチ、非粘着性のパッチ及びフェイスマスクから成る群より選択される固体保持体に含まれる化粧品又は医薬組成物である。
【０１２３】
別の重要な実施形態では、本発明は、一般式（Ｉ）のペプチドが、布、好ましくは包帯形状に含まれる化粧品又は医薬組成物である。
【０１２４】
別の重要な実施形態では、本発明は、コンシーラー、メークアップファンデーション、メーク落としローション及びミルク、アイシャドー並びに口紅から成る群より選択されるメークアップ製品に含まれた一般式（Ｉ）のペプチドを含む化粧品又は医薬組成物である。
【０１２５】
別の重要な実施形態では、本発明は、０．０００００００１〜２０％の濃度（重量）で、一般式（Ｉ）のペプチドを含む化粧品又は医薬組成物である。
【０１２６】
別の重要な実施形態では、本発明は、好ましくは０．０００１〜５％の濃度（重量）で、一般式（Ｉ）のペプチドを含む化粧品又は医薬組成物である。
【０１２７】
別の重要な実施形態では、本発明は、ピーリング剤、保湿剤、脱色又はホワイトニング剤、色素形成促進剤、しわ取り剤、目の下のたるみを減少又は除去する薬剤、抗酸化剤、抗糖化剤、ＮＯ合成酵素阻害剤、アンチエイジング剤、皮膚や表皮の分子合成を誘導及び／又はそれらの分解を抑制する薬剤、線維芽細胞及び／又はケラチノサイトの増殖を誘導する薬剤又はケラチノサイトの分化を誘導する薬剤、皮膚弛緩剤、安定剤、抗大気汚染剤及び／又は抗フリーラジカル剤、毛細血管循環及び／又は微小循環に作用する薬剤、鎮静剤、抗炎症剤、細胞代謝に作用する薬剤、紫外線Ａ及び／又はＢ照射に対して機能する有機又は無機の光防護剤並びにその混合物から成る群より選択される化粧品的又は医薬的に有効な量の活性剤を含む化粧品又は医薬組成物である。この活性剤は、好ましくは、合成物又は植物抽出物や生物発酵由来のものである。
【０１２８】
別の重要な実施形態では、本発明は、しわ取り剤及び／又はアンチエイジング剤が、Ｌｉｐｏｔｅｃ社が販売するＡｒｇｉｒｅｌｉｎｅ（商標）、Ｌｅｕｐｈａｓｙｌ（商標）、Ｄｅｃｏｒｉｎｙｌ（商標）、Ｄｅｃｏｒｉｎｏｌ（商標）、Ｌｉｐｏｃｈｒｏｍａｎ（商標）及びＡｌｄｅｎｉｎｅ（商標）から成る群より選択される化粧品又は医薬組成物である。
【０１２９】
重要な実施形態では、本発明は、ニューロンエキソサイトーシスを制御する化粧品又は医薬組成物の製造における式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【０１３０】
別の重要な実施形態では、本発明は、皮膚の治療、クリーニング又はケアのための化粧品又は医薬組成物の製造における式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【０１３１】
別の重要な実施形態では、本発明は、顔のしわ及び／又は顔面非対称を減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における一般式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【０１３２】
別の重要な実施形態では、本発明は、顔の表情じわを減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における一般式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【０１３３】
別の重要な実施形態では、本発明は、額、まゆの間のスペース及び／又はしわ並びに口の周り及び／又は目の周りの細い線に局所的に適用する方法によって顔の表情じわを減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における一般式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【０１３４】
別の重要な実施形態では、本発明は、額、まゆの間のスペース及び／又はしわ並びに口の周り及び／又は目の周りの細い線にイオン導入によって適用する方法によって顔の表情じわを減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における一般式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【０１３５】
別の重要な実施形態では、本発明は、額、まゆの間のスペース及び／又はしわ並びに口の周り及び／又は目の周りの細い線に皮下注射又は皮内注射によって適用する方法によって顔の表情じわを減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における一般式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【０１３６】
別の重要な実施形態では、本発明は、筋痙直を減少及び／又は除去する化粧品又は医薬組成物の製造における一般式（Ｉ）のペプチド又は化粧品的若しくは医薬的に許容されるその塩の使用である。
【図１】
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【配列表】
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