(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも４つの個別のクロマトグラフィーカラムによる多成分混合物（Ｆｄ）の連続又は準連続精製法であって、前記混合物は少なくとも１つの溶媒を用いて前記カラムを通して供給され、前記多成分混合物（Ｆｄ）が整数ｎ個の画分（Ｆｉ）に分離され、ｎは少なくとも５であり、
前記カラムは、少なくとも６個のセクション（α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δ）にグループ分けされ、各セクション（α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δ）は、複数のセクションの機能が連続的に実行でき、単一のカラムによって実現できることを条件に、少なくとも１つのカラムを含む方法において、
少なくとも２つの収集セクション（α１,...,αｎ−３）には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口（Ｓ）と、少なくとも１つの、画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−２）に溶出される中間吸着成分用の出口とが設けられ、それぞれ、各中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−２）を系から洗い出すが、より吸着の強い成分をセクション（α１,...,αｎ−３）内に保持し、
少なくとも２つの再循環セクション（β１,...,βｎ−３）には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口（Ｓ）と、それぞれ、後続の下流側の再循環セクションの入口、又は後続の下流側の再循環セクションが存在しなければ供給セクション（δ）に接続される少なくとも１つの出口が設けられ、それぞれ、画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−３）を介して溶出されるより吸着の強い成分で汚染されている各中間吸着成分を、後続の下流側の再循環セクション、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しなければ前記供給セクション（δ）へと、前記出口を通して洗い流すが、それぞれ、溶出されるより吸着の強い成分（Ｆ１,...,Ｆｎ−３）それぞれを、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）内に保持し、
強吸着成分収集セクション（γ）には、少なくとも１つの溶媒入口と、画分Ｆ１に溶出される最も吸着の強い成分用の出口とが設けられ、画分（Ｆ１）を前記出口を通して洗い流し、
前記供給セクション（δ）には、最も下流側の再循環セクション（βｎ−３）の出口の排出物（ｏｕｔｐｕｔ）を受けるための少なくとも１つの入口と、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むための少なくとも１つの入口と、少なくとも２つの最も吸着の弱い画分（Ｆｎ−１，Ｆｎ）のための少なくとも１つの出口とが設けられ、吸着の弱い成分を系から画分Ｆｎ−１，Ｆｎへと洗い出すが、より吸着の強い中間吸着成分画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２をセクションδ内に保持し、
前記セクション（α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δ）の機能は、同期して又は連続して（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）実行され、
カラムは、少なくとも２つの収集セクションカラム（α１,...,αｎ−３）の出口が中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−３）を収集するために用いられる、少なくとも１つのバッチモードポジションと、少なくとも２つの再循環セクションカラム（β１,...,βｎ−３）の出口が後続の下流側の再循環セクションの対応する入口に、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合には前記供給セクションに流体的に接続される、少なくとも連続又は準連続モードポジションで運転され（ｒｕｎ）、
前記バッチモード及び前記連続又は準連続モードは、同期して又は連続的に（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）実現され、
前記カラムは、切り替え時間（ｔ＊）後又は切り替え時間内に、溶媒の流れの通常方向に対して逆方向に、それらのポジションが動かされ、
切り替え時間（ｔ＊）の後又は切り替え時間内に、各収集セクション（α１,...,αｎ−３）の第１のカラムは、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）の最後のポジションに動かされ、最も上流側の再循環セクション（β１）の第１のカラムは、強吸着成分収集セクション（γ）の最後のポジションへと動かされ、さらなる再循環セクション（β２,...,βｎ−３）の第１のカラムは、次の上流側の収集セクション（α１,...,αｎ−４）の最後のポジションへと動かされ、強吸着成分収集セクション（γ）の第１のカラムは、供給セクション（δ）の最後のポジションへと動かされ、供給セクション（δ）の第１のカラムは、最も下流側の収集セクション（αｎ−３）の最後のカラムとなるように動かされ、
前記セクション（γ，β１；α１，β２；,...；αｎ−３，δｇ；δｆ，δｒ）のグループ分けが単一のカラムによって実現される場合、個々のセクションの機能及び／又はサブ機能は、１切り替え時間（ｔ＊）内に、連続又は準連続溶出の工程とバッチ溶出を有する工程を交互に行いながら、連続して（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）実行される方法。
【請求項２】
少なくとも２つのカラムを含む供給セクション（δ）には、最も下流側の再循環セクション（βｎ−３）の出口の排出物を受け入れるための少なくとも１つの入口、及び、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むための少なくとも２つの入口と、少なくとも２つの最も吸着の弱い成分画分（Ｆｎ−１，Ｆｎ）用の少なくとも２つの出口とが設けられ、吸着の弱い成分を系から画分Ｆｎ−１，Ｆｎ中へと洗い出すが、画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−２）を介して溶出されるより吸着の強い中間吸着成分を、セクションδ内に保持し、
前記セクション（γ，β；α，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ）の機能及びサブ機能は連続的に実行され、前記バッチモード及び前記連続又は準連続モードは連続的に実現され、
前記準連続溶出の工程では、再循環セクション（βｎ−３）の少なくとも１つのカラムが、前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の入口に流体的に接続され、前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の出口は、前記供給セクションの最後のカラム（δｒ）の入口に流体的に接続されるが、前記供給セクションの第２の中間カラム（δｆｂ）は、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むための入口を用いてバッチモードで運転され、
前記バッチ溶出の工程では、前記強吸着成分収集（γ）及び前記収集セクション（α）のカラム、及び前記供給セクションの第１のカラム（δｆａ）及び第３のカラム（δｆｃ）が、バッチモードで運転され、前記供給セクション（δｆａ，δｆｂ，δｆｃ）の入口の少なくとも１つは、前記多成分混合物（Ｆｄ）を供給するために使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記セクションの一対の連続的機能は１つのカラム内で連結され、
１切り替え時間内に、連続又は準連続溶出の工程及びバッチ溶出を有する工程が、これらの機能を連続的に実行しながら交互に起こり、
前記供給セクションは３つのサブセクション（δｇ，δｆ，δｒ）を含み、
全系において、４つのカラムが提供され、これら４つのカラムは、１切り替え時間の第１の部分（ｆｒａｃｔｉｏｎ）内には、連続又は準連続溶出の工程（ＣＣＬ）で、連続的に接続され、切り替え時間の第２の部分内には、前記多成分混合物（Ｆｄ）の個々の画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−１）を取り出すためにバッチ工程（ＢＬ）で駆動される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記セクション（γ，β１；α１，β２；...；αｎ−３，δｇ；δｆ，δｒ）の機能及びサブ機能が、連続的に実行され、前記バッチモードと前記連続又は準連続モードが連続的に実現され、
前記連続的又は準連続溶出の工程では、前記再循環セクションのカラムが、次の下流側の再循環セクションに流体的に接続されるか、又は、前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の入口に流体的に接続され、前記供給セクションの第１のカラム（ｆｇ）の出口が、前記供給セクションの最後のカラム（δｒ）の入口に流体的に接続され、
前記バッチ溶出の工程では、前記強吸着成分収集（γ）、及び前記収集セクション（α）のカラムと、前記供給セクションのカラム（δｆ）がバッチモードで運転され、前記供給セクションのカラム（δｆ）は、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むためのその入口を用いて運転され、
好ましくは、２つの収集セクションと２つの再循環セクションがあって、この方法が４つのカラムを用いて実現されるか、又は３つの収集セクションと３つの再循環セクションがあって、この方法が６つのカラムを用いて実現される、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
少なくとも４つの個別のクロマトグラフィーカラムによる多成分混合物（Ｆｄ）の連続又は準連続精製法であって、前記混合物は少なくとも１つの溶媒を用いて前記カラムを通して供給され、前記多成分混合物（Ｆｄ）は整数ｎ個の画分（Ｆｎ）に分離され、ここでｎは少なくとも６であり、
前記カラムは、少なくとも４つのセクション（α，β，γ，δ）にグループ分けされ、このうち、少なくとも１つの収集セクション（α１,...,αｎ−３）には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口と、少なくとも１つの中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２用の出口が設けられ、それぞれ、各中間成分を系から洗い出すが、より吸着の強い成分を前記セクションα１,...,αｎ−３内に保持し、
少なくとも１つの再循環セクション（β１,...,βｎ−３）には、少なくとも１つの溶媒入口と、後続の下流側の再循環セクションの入口か、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は供給セクション（δ）へ接続される少なくとも１つの出口が設けられ、画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−３）を介して溶出されるより吸着の強い成分で汚染されている中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−２）に溶出される各中間吸着成分を、後続の下流側の再循環セクションか、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は前記供給セクション（δ）へ、前記出口を通して洗い流すが、画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−３）に溶出されるより吸着の強い成分それぞれを、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）内に保持し、
強吸着成分収集セクション（γ）には、少なくとも１つの溶媒入口と、最も吸着の強い成分画分（Ｆ１）用の出口が設けられ、この画分（Ｆ１）を有する最も吸着の強い成分を前記出口を通して洗い出し、
少なくとも３つのカラムを含む供給セクション（δ）には、最も下流側の再循環セクション（βｎ−３）の出口からの排出物を受けるための少なくとも１つの入口、及び、前記多成分混合物（Ｆｄ）を供給するための少なくとも２つの入口と、少なくとも２つの最も吸着の弱い成分画分（Ｆｎ−１，Ｆｎ）用の少なくとも２つの出口とが設けられ、吸着の弱い成分を系から画分（Ｆｎ−１，Ｆｎ）へと洗い出すが、画分（F２,...,Fｎ−２）用のより吸着の強い中間吸着成分を、セクションδ内に保持し、
前記セクション（γ，β；α，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ）の機能及びサブ機能は、連続的に実行され、
カラムは、少なくとも１つの収集セクションカラム（α１,...,αｎ−３）の出口が、中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−３）を収集するために使用される、少なくとも１つのバッチモードポジション、及び、少なくとも１つの再循環セクションカラム（β１,...,βｎ−３）の出口が、後続の下流側の再循環セクションの対応する入口と、又は後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は前記供給セクションへと接続される少なくとも１つの準連続モードポジションで運転され、
前記バッチモードと前記連続又は準連続モードが連続的に実現され、
切り替え時間（ｔ＊）の後又は切り替え時間内に、前記カラムはポジションが、溶媒の通常の流れ方向に対し逆方向に動かされ、
切り替え時間ｔ＊の後又は切り替え時間内に、前記収集セクション（α１,...,αｎ−３）の第１のカラムは、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）の最後のポジションへ動かされ、最も上流側の再循環セクション（β１）の第１のカラムは、前記強吸着成分収集セクション（γ）の最後のポジションへ動かされ、もし存在するならば、さらなる再循環セクション（β２,...,βｎ−３）の第１のカラムが、次の上流側の収集セクション（α１,...,αｎ−４）の最後のポジションへ動かされ、前記強吸着成分収集セクション（γ）の第１のカラムは、前記供給セクション（δ）の最後のポジションへ動かされ、前記供給セクション（δ）の第１のカラムは、最も下流側の収集セクション（αｎ−３）の最後のカラムになるように動かされ、
前記セクション（γ，β１；α１，β２；...；αｎ−３，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ）のグループ分けは、単一のカラムによって実現され、個々のセクションの機能又はサブ機能は、１切り替え時間（ｔ＊）内に、連続又は準連続溶出の工程とバッチ溶出を有する工程を交互に行いながら連続的に実行され、
その場合、前記準連続溶出の工程では、再循環セクションの少なくとも１つのカラムが前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の入口に流体的に接続され、前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の出口が、前記供給セクションの最後のカラム（δｒ）の入口に流体的に接続され、一方、前記供給セクションの第２の中間カラム（δｆｂ）は、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むためのその入口を用いて、バッチモードで運転され、
前記バッチ溶出の工程では、前記強吸着成分収集（γ）及び前記収集セクション（α）のカラム、及び前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）及び第３のカラム（δｒ）がバッチモードで運転され、前記供給セクション（δｆａ，δｆｂ，δｆｃ）の入口の少なくとも１つは、前記多成分混合物（Ｆｄ）を供給するために用いられる方法。
【請求項６】
前記セクションの少なくとも１つへ送り込まれる溶媒は、前記切り替え時間（ｔ＊）中、ほぼ連続的に組成が変化し、及び／又は、超臨界溶媒の場合には、前記切り替え時間（ｔ＊）中に、前記セクションの少なくとも１つに送り込まれる超臨界溶媒の密度が、ほぼ連続的に変化する、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
少なくとも１つ又は好ましくは全ての前記セクションへ送り込まれる溶媒は、前記切り替え時間（ｔ＊）中、モディファイア濃度の増減に伴い、ほぼ連続的に組成が変化し、及び／又は、超臨界溶媒の場合は、前記切り替え時間（ｔ＊）中、密度の増減に伴い、ほぼ連続的に密度が変化し、
最も下流側のセクション（δ）から最も上流側のセクション（α）への一連のカラムに沿って、前記カラムの移動後、各カラム内のモディファイア濃度（Ｃｍｏｄ）／密度が、実質的に、カラムの新しいポジションでのベースのモディファイア濃度／超臨界溶媒の密度であり、次の切り替え時間（ｔ＊）中に、各カラム内のモディファイア濃度／密度が、カラムのさらなる移動後、次のポジションのベースのモディファイア濃度／密度へと増加または減少されるように、モディファイア濃度（Ｃｍｏｄ）／密度が増加又は減少する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記供給セクションが、３つのサブセクション（δｇ；δｆ；δｒ）にグループ分けされる少なくとも３つのカラムを含み、又は、これらのサブセクションの機能を連続して提供するより少ないカラムを含み、
第１のサブセクション（δｆ）が、好ましくは、系の全流量より低い流量で前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むための少なくとも１つの入口と、画分（Ｆｎ−１）用の少なくとも１つの出口とを含み、
第２のサブセクション（δｇ）が、最も下流側の再循環セクション（βｎ−３）の排出物を取り上げるための少なくとも１つの入口と、第３のサブセクション（δｒ）の少なくとも１つの入口に接続される少なくとも１つの出口とを含み、
第３のサブセクション（δｒ）が、前記第２のサブセクション（δｇ）の排出物を取り上げるための少なくとも１つの入口と、画分（Ｆｎ）用の少なくとも１つの出口とを含み、
切り替え時間（ｔ＊）後又は切り替え時間内に、前記第１のサブセクション（δｆ）の第１のカラムは、前記第２のサブセクション（δｇ）の最後のポジションへと動かされ、前記第２のサブセクション（δｇ）の第１のカラムは、前記収集セクションの最後のポジションへと動かされ、前記強吸着成分収集セクション（γ）の第１のカラムは、前記第３のサブセクション（δｒ）の最後のポジションへと動かされ、前記第３のサブセクション（δｒ）の第１のカラムは前記第１のサブセクション（δｆ）のカラムとなるように動かされ、
前記セクションの機能が、同期して又は連続して実行される、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記セクションの対となる連続的機能は、１つのカラム内で連結され、１切り替え時間内に、連続的又は準連続的溶出の工程と、バッチ溶出を有する工程が、これらの機能を連続的に実施しながら交互に起こる、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記供給セクションは、請求項８に記載の３つのサブセクションを含み、全系において４つのカラムが供給され、これら４つのカラムは、１切り替え時間の第１の部分内に、連続又は準連続溶出の工程（ＣＣＬ）にて連続的に接続され、前記切り替え時間の第２の部分内に、前記多成分混合物（Ｆｄ）の個々の画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−１）を取り出すために、バッチ工程（ＢＬ）にて駆動される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記供給は、１切り替え時間（ｔ＊）内で、連続的、パルス状、又は成形された濃度／密度プロフィールを有するものであり、及び／又は、溶媒の流れが、１切り替え時間（ｔ＊）内に変えられ、及び／又は、個々の入口／出口の切り替えが、１切り替え時間（ｔ＊）内で段階的である、請求項１〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
個々のカラム内の流量が異なる、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
少なくとも４つの、好ましくは少なくとも５つの個別のクロマトグラフィーカラムの接続形態（ｔｏｐｏｌｏｇｙ）を備え、これらカラムが、バルブによって液体的に接続及び切断されるとともに、溶媒の供給手段と、多成分混合物の供給手段と、収集された画分の収集手段とを備えた、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法を実施するための装置であって、前記接続形態を通して、混合物を少なくとも１つの溶媒を用いて供給し、多成分混合物（Ｆｄ）を整数ｎ個の画分（Ｆｉ）に分離することができ、ここでｎは少なくとも５であり、
前記カラムは、少なくとも６個のセクション（α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δ）にグループ分けされ、各セクション（α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δ）は、セクションの機能が連続的に実行でき、その結果単一のカラムによって実現できることを条件に、少なくとも１つのカラムを含み、
少なくとも２つの収集セクション（α,...,αｎ−３）にはそれぞれ、少なくとも１つの溶媒入口と、画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−２）に溶出される中間吸着成分用の少なくとも１つの出口とが設けられ、それぞれ、各中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−２）を系から洗い出すが、より吸着の強い成分をセクション（α１,...,αｎ−３）内に保持し、
少なくとも２つの再循環セクション（β１,...,βｎ−３）には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口と、それぞれ、後続の下流側の再循環セクションの入口に、又は後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は供給セクション（δ）へ接続される少なくとも１つの出口が設けられ、それぞれ、Ｆ１,...,Ｆｎ−３に溶出されるより吸着の強い成分で汚染されている各中間吸着成分を、後続の下流側の再循環セクション、又は後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は前記供給セクション（δ）へと、前記出口を通して洗い流すが、それぞれ、Ｆ１,...,Ｆｎ−３を介して溶出される純粋なより吸着の強い成分をそれぞれ、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）内に保持し、
強吸着成分収集セクションγには、少なくとも１つの溶媒入口と、画分（Ｆ１）に溶出される最も吸着の強い成分用の出口とが設けられ、画分（Ｆ１）を前記出口を通して洗い出し、
前記供給セクション（δ）には、最も下流側の再循環セクション（βｎ−３）の出口からの排出物を受けるための少なくとも１つの入口と、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むための少なくとも１つの入口と、少なくとも２つの最も吸着の弱い成分（Ｆｎ−１，Ｆｎ）のための少なくとも１つの出口とが設けられ、吸着の弱い成分を系から画分Ｆｎ−１，Ｆｎへと洗い出すが、より吸着の強い中間吸着成分画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２をセクションδ内に保持し、
前記セクション（α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δ）の機能は、同期して又は連続して実行され、
カラムは、少なくとも２つの収集セクションカラム（α１,...,αｎ−３）の出口が中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−３）を収集するために用いられる、少なくとも１つのバッチモードポジションと、少なくとも２つの再循環セクションカラム（β１,...,βｎ−３）の出口を後続の下流側の再循環セクションの対応する入口と、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合には前記供給セクションへ流体的に接続される、少なくとも連続又は準連続モードポジションで運転され、
前記バッチモード及び前記連続又は準連続モードは、同期して又は連続的に実現され、
前記カラムは、切り替え時間（ｔ＊）後又は切り替え時間内に、通常の溶媒の流れ方向に対して逆方向に、それらのポジションが動かされ、
切り替え時間ｔ＊の後又は切り替え時間内に、各収集セクション（α１,...,αｎ−３）の第１のカラムが、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）の最後のポジションに動かされ、最も上流側の再循環セクション（β１）の第１のカラムは、前記強吸着成分収集セクション（γ）の最後のポジションへと動かされ、さらなる再循環セクション（β２,...,βｎ−３）の第１のカラムは、次の上流側の収集セクション（α１,...,αｎ−４）の最後のポジションへと動かされ、前記強吸着成分収集セクション（γ）の第１のカラムは、前記供給セクション（δ）の最後のポジションへと動かされ、前記供給セクション（δ）の第１のカラムは、最も下流側の収集セクション（αｎ−３）の最後のカラムとなるように動かされ、
前記セクション（γ，β１；α１，β２；...；αｎ−３，δｇ；δｆ，δｒ）のグループ分けが単一のカラムによって実現される場合、個々のセクションの機能及び／又はサブ機能は、１切り替え時間ｔ＊内に、連続又は準連続溶出の工程とバッチ溶出を有する工程を交互に行いながら連続して実行される装置。
【請求項１４】
少なくとも４つの、好ましくは少なくとも５つの個別のクロマトグラフィーカラムの接続形態（ｔｏｐｏｌｏｇｙ）を備え、これらカラムが、バルブによって液体的に接続及び切断されるとともに、溶媒の供給手段と、多成分混合物の供給手段と、収集された画分の収集手段とを備えた、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法を実施するための装置であって、前記接続形態を通して、多成分混合物（Ｆｄ）が整数ｎ個の画分（Ｆｉ）に分離され、ここでｎは少なくとも６であり、
前記カラムは、少なくとも４つのセクション（α，β，γ，δ）にグループ分けされ、このうち、少なくとも１つの収集セクション（α１,...,αｎ−３）には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口と、少なくとも１つの中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２用の出口が設けられ、それぞれ、各中間成分を系から洗い出すが、より吸着の強い成分をセクション（α１,...,αｎ−３）内に保持し、
少なくとも１つの再循環セクション（β１,...,βｎ−３）には、少なくとも１つの溶媒入口と、後続の下流側の再循環セクションの入口か、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は供給セクション（δ）へ接続される少なくとも１つの出口が設けられ、画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−３）を介して溶出されるより吸着の強い成分で汚染されている中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−２）に溶出される各中間吸着成分を、後続の下流側の再循環セクションか、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は前記供給セクション（δ）へ、前記出口を通して洗い流すが、画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−３）に溶出される純粋なより吸着の強い成分をそれぞれ、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）内に保持し、
強吸着成分収集セクション（γ）には、少なくとも１つの溶媒入口と、最も吸着の強い成分画分（Ｆ１）用の出口が設けられ、この画分（Ｆ１）を有する最も吸着の強い成分を前記出口を通して洗い出し、
少なくとも２つのカラムを含む供給セクション（δ）には、最も下流側の再循環セクションβｎ−３の出口からの排出物を受けるための少なくとも１つの入口、及び、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むための少なくとも２つの入口と、少なくとも２つの最も弱い吸着画分（Ｆｎ−１，Ｆｎ）用の少なくとも２つの出口とが設けられ、吸着の弱い成分を系から画分（Ｆｎ−１，Ｆｎ）へと洗い出すが、より吸着の強い中間吸着成分画分（F１,...,Fｎ−２）を、セクションδ内に保持し、
前記セクション（γ，β；α，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ）の機能及びサブ機能は、連続的に実行され、
カラムは、少なくとも１つの収集セクションカラム（α１,...,αｎ−３）の出口が、中間画分（Ｆ２,...,Ｆｎ−３）を収集するために使用される、少なくとも１つのバッチモードポジション、及び、少なくとも１つの再循環セクションカラム（β１,...,βｎ−３）の出口が、後続の下流側の再循環セクションの対応する入口と、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は前記供給セクションへ接続される少なくとも連続又は準連続モードポジションで運転され、
前記バッチモードと前記連続又は準連続モードは連続的に実現され、
切り替え時間ｔ＊の後又は切り替え時間内に、前記カラムはそれらのポジションが、溶媒の通常の流れ方向に対し逆方向に動かされ、
切り替え時間ｔ＊の後又は切り替え時間内に、前記収集セクション（α１,...,αｎ−３）の第１のカラムは、対応する再循環セクション（β１,...,βｎ−３）の最後のポジションへ動かされ、最も上流側の再循環セクション（β１）の第１のカラムは、前記強吸着成分収集セクション（γ）の最後のポジションへ動かされ、もし存在するならば、さらなる再循環セクション（β２,...,βｎ−３）の第１のカラムが、次の上流側の収集セクション（α１,...,αｎ−４）の最後のポジションへ動かされ、前記強吸着成分収集セクション（γ）の第１のカラムが、前記供給セクション（δ）の最後のポジションへ動かされ、前記供給セクション（δ）の第１のカラムが、最も下流側の収集セクション（αｎ−３）の最後のカラムになるように動かされ、
前記セクション（γ，β１；α１，β２；...；αｎ−３，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ）のグループ分けは、単一のカラムによって実現され、個々のセクションの機能又はサブ機能は、１切り替え時間（ｔ＊）内に、連続又は準連続溶出の工程とバッチ溶出を有する工程を交互に行いながら連続的に実行され、この場合（ｉｎ  ｔｈａｔ）、
前記準連続溶出の工程では、前記再循環セクションのカラムが前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の入口に流体的に接続され、前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の出口が、前記供給セクションの最後のカラム（δｒ）の入口に流体的に接続され、一方、前記供給セクションの第２の中間カラム（δｆｂ）は、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むためのその入口を用いて、バッチモードで運転され、
前記バッチ溶出の工程では、前記強吸着成分収集（γ）及び前記収集セクション（α）のカラム、及び前記供給セクションの第１のカラム（δｆａ）及び第３のカラム（δｆｃ）がバッチモードで運転され、少なくとも前記供給セクションの第１の（δｆａ）のカラムは、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むためのその入口を用いて運転される装置。
【請求項１５】
カラムを４つだけ使用し、
前記セクション（γ，β；α、δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ）の機能及びサブ機能が連続的に実行され、前記バッチモード及び前記連続又は準連続モードが連続的に実現され、
前記準連続溶出の工程において、ただ１つの再循環セクションのカラムが、前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の入口に流体的に接続され、前記供給セクションの第１のカラム（δｇ）の出口が、前記供給セクションの最後のカラム（δｒ）の入口に流体的に接続され、一方で、同時に、前記供給セクションの第２の中間カラム（δｆｂ）は、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むためのその入口と画分（Ｆ４）の収集用の出口とを用いてバッチモードで運転され、前記バッチ溶出工程において、前記強吸収成分収集（γ）及び前記収集セクション（α）のカラム、及び前記供給セクションの第１及び第３の中間カラム（δｆａ，δｆｃ）が、前記多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むためのそれらの入口の少なくとも１つを用いて、バッチモードで運転される、請求項３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マルチカラム精製方法及びそれらの最適化の分野に関する。
【背景技術】
【０００２】
バッチクロマトグラフィーは周知であり、工業生産において定常的且つ予備的に利用されている。しかしながら、この技術は、溶媒消費量が多くカラム材料が高価であるため、特に大規模な分離及び精製に対してはかなりコスト高となり、収益を高めるためにはクロマトグラフ装置の最適な使用が求められる。
【０００３】
実際の生産における大規模な分離に対しては、バッチ法より連続法のほうがはるかに経済的である。連続法の利点としては、例えば、高収率且つ高純度の同時達成、溶媒消費量がより少ない、分画及び分析がより安価である、精製される量に対しより融通性が高い等が挙げられる。
【０００４】
連続クロマトグラフ法を実現するための１つの方法は、いわゆる擬似移動床法（ＳＭＢ、例えば、Ｍａｒｋｕｓ  Ｊｕｚａ、Ｍａｒｃｏ  Ｍａｚｚｏｔｔｉ  ａｎｄ  Ｍａｓｓｉｍｏ  Ｍｏｒｂｉｄｅｌｌｉ、擬似移動床クロマトグラフィーと、キラルテクノロジーへのその応用、Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｂ．Ｖ．、ＴＩＢＴＥＣＨ、２０００年３月、第１８巻、１０８〜１１８頁を参照）である。この方法では、２つの流入ストリーム（供給物、溶離液）及び２つの流出ストリーム（ラフィネート、エクストラクト）を調節することにより、混合物を２つの画分に分離することができる。ＳＭＢ法は向流であるため、２つの画分の明確な分離が高収率で可能である。業界におけるＳＭＢ技術の典型的な例としては、キラル分離が挙げられるが、この場合、２つの光学異性体がラセミ混合物から分離される。選択性が非常に小さい場合、バッチ法は、回収（収率）及び生産性に関して性能が低いが、ＳＭＢは高い性能を持ち得る。
【０００５】
最適化及び特定の分離問題に合うように、ＳＭＢ法の各種改良が提案されてきた。例えば、流入ストリーム及び流出ストリームの個々の接続及び切断の瞬間（ｉｎｓｔａｎｔ）を変える、すなわち、流入ストリームと流出ストリームを従来のＳＭＢでのように同期して切り替えるのではなく、特定の段階的なスキームに従って切り替えることが提案された（いわゆるＶａｒｉｃｏｌテクニック、例えば、ＷＯ−Ａ−２００４／０３９４６８参照）。
【０００６】
Ｍｏｒｂｉｄｅｌｌｉらにより、別の変形が提案され（例えば、「擬似移動床ユニットのパワーフィード操作：切り替え間隔中に流量を変える」、Ｚｉｙａｎｇ  Ｚｈａｎｇ、Ｍａｒｃｏ  Ｍａｚｚｏｔｔｉ、Ｍａｓｓｉｍｏ  Ｍｏｒｂｉｄｅｌｌｉ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ａ、１００６（２００３）８７−９９、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｂ．Ｖ．参照）、この場合、各サイクル時間後の個別切り替えによるエクストラクト及びラフィネートの排出物（ｏｕｔｐｕｔ）の濃度の時間変化を補償するために、溶離液の流量を切り替え間隔に合わせて補償するように変化させて、純度をより高くすることが可能となる（いわゆる、パワーフィードテクニック）。
【０００７】
溶離液の流量ではなく供給物の濃度を補償的に変化させて、同じ目的を達成する、第３の準類似の変形が提案された（いわゆるＭｏｄｉｃｏｎテクニック、例えばＷＯ２００４／０１４５１１参照）。
【０００８】
既に述べたように、特に大規模なクロマトグラフィーは、面倒で高価な技術である。主に、価値ある分子の大規模な分離に有益である。市場において最も価値のある医薬品分子は、例えばペプチド、プロテイン及び抗体のような生体分子である。これらの分子は、通常、溶媒グラジエントバッチ式クロマトグラフィーを用いて精製される。本明細書においては、成分の混合物を２つの画分に分離することを表す「分離」という用語に対し、本明細書における「精製」とは、少なくともｍ個の成分の混合物をｍ個の画分に分離することを表し（ｍは３以上）、目的とする生成物（ｐｒｏｄｕｃｔ）は、１つ以上の吸着の弱い不純物及び吸着の強い不純物の間で中間的に吸収されるため、少なくとも３つの画分が生じ、生成物成分だけが純粋な形で得られることを表す。
【０００９】
１回のＳＭＢサイクルでは、供給物ストリームを２つの画分に分割することしかできないが、精製のためには、中間画分に目的とする成分を含んだ３つの画分が求められる。中間の目的とする生体分子と、吸着の強い不純物と吸着の弱い不純物とを含む多成分混合物を精製するには、２つの段階的又は逐次的ＳＭＢが必要とされるが、例えば、第１段階のＳＭＢで第１のラフィネートと第１のエクストラクトが生成され、第２段階のＳＭＢで第１のエクストラクトが第２のラフィネート（目的生成物）と第２のエクストラクトに分離される場合、第１段階で分離されるべきであった（第１のラフィネートで終わるべきであった）すべての不要な成分が、第２のラフィネートで確実に終わることになり、特に目的とする画分の濃度が低い場合、このようなプロセスを無益にするという問題を伴う。
【００１０】
上記とは別に、他のモディファイア変動もＳＭＢスキームに適用され、例えば、ここ数年、ＳＭＢ法は、いわゆる「溶媒グラジエントモード」で操作される（例えば、ＵＳ  ４，０３１，１５５参照）。この「溶媒グラジエント」の意味は、ＳＭＢが、異なるモディファイアレベルで操作するセクションを含むということである。この種のグラジエントは、「ステップグラジエント」である。しかしながら、生体分子の精製には、（線形）溶媒グラジエントバッチ精製で通常適用されるような、なめらかな線形グラジエントが望まれる。
【００１１】
ＷＯ２００６／１１６８８６には、ＳＭＢとバッチテクニックを組み合わせて用い、再循環又は「ショートサーキット（ｓｈｏｒｔ−ｃｉｒｃｕｉｔ）」工程を含む改良が開示されている。この文献では、多成分混合物の連続又は準連続精製を、少なくとも１つの溶媒を用いて混合物が供給される個別のクロマトグラフィーカラムによって行う方法が提案されている。多成分混合物は、少なくとも、吸着の弱い不純物Ａと、精製されるべき中間生成物Ｂと、吸着の強い不純物Ｃとを含み、カラムを少なくとも４つのセクション（α，β，γ，δ）にグループ分けし、これらのセクションのうち、第１のセクションαには、少なくとも１つの溶媒入口と、精製された中間生成物Ｂ用の少なくとも１つの出口が設けられ、この精製された中間生成物Ｂは系から洗い出すが、吸着の強い不純物Ｃはセクションα内に保持する。第２のセクションβには、少なくとも１つの溶媒入口と、第４のセクションδの入口に連結される少なくとも１つの出口とが設けられ、吸着の強い不純物Ｃで汚染されている中間生成物Ｂを、前記出口を通して第４のセクションδへと洗い流すが（ショートサーキット）、純粋な吸着の強い不純物Ｃはセクションβ内に保持する。第３のセクションγには、少なくとも１つの溶媒入口と、吸着の強い不純物Ｃ用の出口とが設けられ、吸着の強い不純物Ｃを、前記出口を通して洗い出して、クロマトグラフィーカラムを洗浄する。第４のセクションδには、第２のセクションβの出口の排出物を受け入れるための少なくとも１つの入口と、多成分混合物を送り込むための少なくとも１つの入口と、吸着の弱い不純物Ａ用の少なくとも１つの出口とが設けられ、吸着の弱い不純物Ａを系から洗い出すが、中間生成物Ｂはセクションδ内に保持する。この系では、切り替え時間の後又は切り替え時間内に、第１のセクションの最後のカラムは、第２のセクションの第１のポジションへと動かされ、第２のセクションの最後のカラムは、第３のセクションの第１のポジションへと動かされ、第３のセクションの最後のカラムは、第４のセクションの第１のポジションへと動かされ、第４のセクションの最後のカラムは、第１のセクションの第１のカラムになるように動かされる。
【００１２】
ＵＳ  ５，０９３，００４（ＥＰ  ０  ４１５  ８２１と同等）は、「言い換えれば、本発明の目的は、擬似向流グラジエントと溶出グラジエントテクニックとを、たった１つの連続操作プロセスに一体化することであり、［・・・］」と明示するように、液相及び固相の擬似向流操作にのみ関係する。この擬似向流操作の核となる特徴は、液体の流れ方向に見られる、後続のカラムが、前のカラム、及び場合によっては外部の溶媒源からのみ流入を受け入れることである。この核になる特徴は、この先行技術（例えば図２）でも強調されている。明細書中で詳しく説明されているように、セクションの外側にある全ての再循環ストリーム（例えば、図２の連結部７）は、純粋な溶媒だけを含む。ＥＰ  ４１５  ８２２は、実質的にＵＳ  ５，０９３，００４と同じであり、５つのゾーンしか備わっておらず、ここではＵＳ  ５，０９３，００４のゾーン１（吸着剤の再生）が省かれている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明の目的は、特にＷＯ  ２００６／１１６８８６による方法にさらなる改良を提供することである。具体的には、本発明は、この改良に関する２つの主な態様に関し、つまり、一方において、真の多生成物成分混合物の分離を可能にする、前記方法への主要な修正に関し、ＷＯ  ２００６／１１６８８６によるような４つの画分だけに分離できるのではなく（ＷＯ  ２００６／１１６８８６は実際のところ、４つの画分、つまりＡ、Ｂ、Ｃ及びトレーサーを有する第４の画分を分離できる）、少なくとも５つの画分の分離、原理的には、任意のより大きな整数個の画分の分離まで可能である。従って、４つ（１つの画分に成分が実質的に１つだけの場合）より多い成分を、純粋な形で得ることができる。なお、成分の数は、画分の数と同じか又はそれより大きい。他方において、精製サイクルへの導入の前にカラムを効果的に洗浄することが可能で、及び／又は、この方法が非連続的モードで、つまり２以上の交互のフローシートを用いて実行される場合でさえ、供給物の連続的な流入を可能にする、ＷＯ  ２００６／１１６８８６による方法への主要な修正を提案する。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
そのため、本改良は、ＷＯ  ２００６／１１６８８６によるセットアップ（ｓｅｔｕｐ）に関し、ここから出発する。このセットアップには、３つの画分Ａ、Ｂ、Ｃの分離のために、以下のような、機能によって定義される複数のセクションがある：
セクションα：精製された中間生成物を系から洗い出すが、吸着の強い不純物Ｃはこのセクション内に保持する。
セクションβ：吸着の強い不純物で汚染されている中間生成物Ｂをセクションδに洗い流すが、吸着の強い不純物はこのセクション内に保持する。
セクションγ：吸着の強い不純物を洗い出し、このセクションのクロマトグラフィーカラムを洗浄する。
セクションδ：吸着の弱い不純物を系から洗い出すが、目的とする生成物をこのセクション内に保持する。供給物を精製系に与える。
【００１５】
６つのカラムを用いる場合（図２も参照）、これは次のことを意味する：１つのカラム（セクションγ）は、吸着の強い不純物Ｃを全てカラムから取り出す機能を有し、１つのカラム（セクションβ）は、中間生成物Ｂを全てこのカラムから取り出すが、吸着の強い不純物Ｃはこのカラムに保持する機能を有し、１つのカラム（セクションα）は、確実に、このカラムから、吸着の強い不純物Ｃは取り出さずに中間生成物Ｂだけを取り出す機能を有し、１つのカラム（セクションδの１つ、δｇ）は、吸着の弱い不純物Ａを全てカラムから取り出すが、中間生成物Ｂはカラムに保持する機能を有し、１つのカラム（セクションδのさらなる１つ、δｆ）は、供給物Ｆｄをカラムに入れて、第１の吸着の弱い不純物Ａをカラムから取り出す機能を有し、１つのカラム（セクションδのさらなる１つ、δｒ）は、確実に、中間生成物Ｂをカラムから出さず、カラムからトレーサーを取り除く機能を有する。
【００１６】
このような装置は、３つの相互接続したカラムと３つの接続されていないカラムに分割することもできるが、６つのカラムのセットアップと同一である。３つの相互接続したカラムを備えるレーンを「ＣＣＬ」（向流レーン）と呼び、接続されていないカラムを備えるレーンを「ＢＬ」（バッチレーン）と呼ぶ。ＣＣＬは、カラムポジション２，４，６（β，δｇ，δｒ）からなり、ＢＬは、カラムポジション１，３，５（γ，α，δｆ）からなる。６カラム系が２つの状態ＣＣＬ及びＢＬの間で切り替わると、ＣＣレーンの全てのカラムは「バッチレーン」のカラムとなり、バッチレーンの全てのカラムはＣＣレーンのカラムになる。バッチレーンの局所的な切り替え時間は、全体の切り替え時間ｔ＊と等しい。これにより、全体のプロセスが連続的となる。バッチカラム及び向流カラムは、同じプラント内で、同時に操作される。
【００１７】
本明細書に提示する発明は、上に挙げたものに比べて、改良された分離法を提供し、連続又は非連続的に、混合物を４つ以上の画分に分離することができる。この方法は、並列及び／又は連続的に異なるタスクを実行するセクションにグループ分けされたマルチカラムを含む。これらのセクションは、特定の方法で、バルブによって流体的に接続及び切断することができる。
【００１８】
本発明は、特に、少なくとも４つの個別のクロマトグラフィーカラムによる多成分混合物Ｆｄの連続又は準連続精製法に関し、カラムを通して混合物を少なくとも１つの溶媒を用いて供給し、多成分混合物Ｆｄは、整数ｎ個の画分Ｆｉに分離され、ここでｎは少なくとも５である。
【００１９】
カラムは、少なくとも６つのセクション、α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δにグループ分けされ、各セクションは、複数のセクションの機能が連続して実行でき、単一のカラムによって実現できることを条件に、少なくとも１つのカラムを含む。そのため、この機能は、同時に実行されるか、又は連続して実行され、連続して行う場合は、単一のカラムが、１つの工程（例えば、ＣＣＬ）における１セクションの機能と、後の工程（例えば、ＢＬ）における他の機能を担ってもよい。
【００２０】
少なくとも２つの収集セクションα１,...,αｎ−３には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口と少なくとも１つの中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２用の出口とが設けられ、それぞれ、各中間成分を系から洗い出すが、より吸着の強い成分をセクションα１,...,αｎ−３内に保持する。
【００２１】
少なくとも２つの再循環セクションβ１,...,βｎ−３には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口と、それぞれ、後続の下流側の再循環セクションの入口、又は、後続の下流側の再循環セクションがなければ供給セクションδに接続される少なくとも１つの出口が設けられ、それぞれが、より吸着の強い成分で汚染されている各中間吸着成分を、後続の下流側の再循環セクション、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しなければ前記供給セクションδへと、前記出口を通して洗い流すが、それぞれ、画分Ｆ１,...,Ｆｎ−３を介して溶出されるより吸着の強い成分をそれぞれ、対応する再循環セクションβ１,...,βｎ−３内に保持する。
【００２２】
強吸着成分収集セクションγには、少なくとも１つの溶媒の入口と最も吸着の強い成分（画分Ｆ１）用の出口とが設けられ、最も吸着の強い成分を含む画分Ｆ１を、前記出口を通して洗い流す。
【００２３】
供給セクションδには、最も下流側の再循環セクションβｎ−３の出口からの排出物を受けるための少なくとも１つの入口と、多成分混合物Ｆｄを送り込むための少なくとも１つの入口と、少なくとも最も吸着の弱い成分（画分Ｆｎ−１，Ｆｎ）のための少なくとも１つの出口とが設けられ、吸着の弱い成分を系から画分Ｆｎ−１、Ｆｎへと洗い出すが、より吸着の強い中間吸着成分の画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２をセクションδ内に保持する。
セクションα１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δの機能は、同期して又は連続して（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）実行することができる。
【００２４】
カラムは、少なくとも２つの収集セクションカラムα１,...,αｎ−３の出口が中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−３を収集するために用いられる、少なくとも１つのバッチモードポジションと、少なくとも２つの再循環セクションカラムβ１,...,βｎ−３の出口が後続の下流側の再循環セクションの対応する入口に、又は、後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合には前記供給セクションに流体的に接続される、少なくとも１つの相互接続された（連続又は準連続モード）ポジションで運転される（ｒｕｎ）。
バッチモード及び連続又は準連続モードは、同期して又は連続的に（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）実行することができる。
【００２５】
カラムは、切り替え時間ｔ＊内に、溶媒の流れの通常方向に対し逆方向に、ポジションが動かされる。
切り替え時間ｔ＊の後又は切り替え時間内に、各収集セクションα１,...,αｎ−３の第１のカラム（溶媒の流れ方向において）は、対応する再循環セクションβ１,...,βｎ−３の最後のポジション（溶媒流れ方向において）に動かされ、最も上流側の再循環セクションβ１の第１のカラムは、強吸着成分収集セクションγの最後のポジションへと動かされ、さらなる再循環セクションβ２,...,βｎ−３の第１のカラムは、次の（ｎｅｘｔ）上流側の収集セクションα１,...,αｎ−４の最後のポジションへと動かされ、強吸着成分収集セクションγの第１のカラムは、供給セクションδの最後のポジションへと動かされ、供給セクションδの第１のカラムは、最も下流側の収集セクションαｎ−３の最後のカラムとなるように動かされる。
【００２６】
セクション（例えば、γ，β１；α１，β２；...；αｎ−３，δｇ；δｆ，δｒ等）のグループ分けが単一のカラムによって実現される場合、個々のセクションの機能又はサブ機能は、１切り替え時間ｔ＊内に、連続又は準連続溶出の工程とバッチ溶出を有する工程を交互に行いながら連続的に（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）実行される。このようなグループ分けでない場合には、機能は同時に実行される。
【００２７】
この明細書を通して使用される用語を明らかにし、一義的に理解するために、以下に用語の定義を挙げておく：
−多成分混合物：  Ｆｄ（供給物）と表す。液体キャリア中にｍ個の成分Ｋを含む混合物である。多成分混合物は、本発明の精製法では、１供給物としてプロセスに導入され、ｎ個の画分（ここで、ｍはｎより大きいか又は同じ）に分離される。
−画分：  クロマトグラフ法において規定の工程で取り出される規定の容量。理想的には、画分は１つの単一成分だけを含むことができるが、実際には、通常、画分には１つより多い成分が含まれる。１画分当たり実質的に単一成分１つだけの場合、ｎ成分の多成分混合物は、それぞれ１つの単一成分だけを実質的に含むｎ個の画分に分離される。画分には添え字ｎで番号を付けてあり、本明細書において、最も小さい添え字を持つ画分Ｆ１は、最も吸着の強い成分を含む画分を表し、最も大きい添え字を持つ画分Ｆｎは、最も吸着の弱い成分を含む画分を表し、画分Ｆ２,...,Ｆｎ−１は、吸着が中間的な画分又は中間成分を含む画分を示し、これらが提案する方法の内容において、主要な関心（ｉｎｔｅｒｅｓｔ）である。
−吸着の強い成分：  高い保持力を示し、そのため、クロマトグラフ系の固体固定相としっかり又は強く相互作用しクロマトグラフ法の後期で溶出する、多成分混合物中の成分。保持力は分子量に一般的に関連づけられないという事実にもかかわらず、吸着の強い成分は、多くの場合、重い成分とも呼ばれるので、このクロマトグラフの内容における重い成分は、必ずしも高分子量の成分ではない。
−吸着の弱い成分：  低い保持力を示し、そのため、クロマトグラフ系の固相と軽くしか相互作用せずに従来のクロマトグラフ法の初期段階で溶出する、多成分混合物中の成分。保持力が分子量には一般的に関連づけられないという事実にもかかわらず、吸着の弱い成分は、多くの場合、軽い成分とも呼ばれるので、このクロマトグラフの内容における軽い成分は、必ずしも低分子量の成分ではない。
−セクション：  クロマトグラフ法の一部分、というよりも一機能（α１,...,αｎ−３，β１,...,βｎ−３，γ，δと表す）。１セクションの機能は、１つのカラム、又は、連続して又は並行して配置することのできる複数のカラムによって担うことができ、連続配置の場合、カラムは通常少なくとも部分的に相互接続される。「カラム」という言い方に関しては、カラムの代わりに、又はカラムと組み合わせて、膜吸収体又は吸着原理を使用する他の固相を用いてもよい。概説したように、１セクションの機能は、全時間中（ｄｕｒｉｎｇ  ｔｈｅ  ｗｈｏｌｅ  ｔｉｍｅ）（同期して）担うことができ、この場合、各セクションに対し少なくとも１つのカラムがあるが、１セクションの機能を連続的に担うこともできるので、工程（例えば、バッチ工程及び連続工程）が交互に起こってもよく、その場合、カラムは異なるセクションの機能を交互に担う。例えば、２つの異なるタイムスパン（ＣＣＬ及びＢＬ）で、カラムが異なる機能を持つ場合、２つの工程において各カラムが異なる機能を実行するので、セクションの数の半分のカラムがあればよい。しかしながら、１つのカラムが異なる機能を実行する工程が２より多い場合には、カラムをさらに少なくすることもできる。セクション（又はサブセクション）の内容において、１つのセクション内に相互接続されたカラムの列がある場合、カラムの「第１の」ポジションとあれば、これは、移動相流のことを意味するので、セクションの第１カラムとは、セクションの最も上流側のカラムのことであり、最後のカラムとは最も下流側のカラムのことである。
−サブセクション：  セクションの一部、というよりもサブ機能である（例えば、δのサブセクションは、δｇ；δｆ，δｒと表す）。サブセクションの機能は、１つのカラム、又は、連続して又は並行して配置することのできる複数のカラムによって担うことができ、連続配置の場合、カラムは通常相互接続される。サブセクションの機能は、全時間中（同期して）担うことができ、この場合、各サブセクションに対し少なくとも１つのカラムが存在する。しかしながら、サブセクションの機能を連続的に担うこともできるので、工程（例えば、バッチ工程及び連続工程）が交互に起こってもよく、その場合、カラムは異なるサブセクションの機能を交互に担う。
−準連続溶出：  準連続溶出とは、カラムの少なくとも２つが相互接続されるものの、バッチモードで操作されるカラムもある工程のことをいう。これは、例えば、図８の５ｂで表されるカラムによって示される。つまり、準連続モードポジションとは、少なくとも１つのセクションの出口が、少なくとも１つの他のセクションの入口と流体的に接続されているポジションのことである。
−移動相（しばしば、溶媒又は液体と呼ばれる）：移動相（溶離液）としては、液体、気体、又は超臨界流体、及びこれらの混合物を使用することができる。カラム中の溶離液組成は、プロセスの２以上のセクション内、及びセクションのカラム内で、異なっていても、同じであってもよい。特に、グラジエントを行うことができる。
【００２８】
上記を考慮すれば、セクションの機能の全てが、少なくとも１つのカラムによって常に（ａｔ  ａｎｙ  ｔｉｍｅ）担われるセットアップが選ばれた場合、６個のカラムを有することが必要となる（２×α，２×β，γ，δｇ，δｆ，δｒ）ことに注意する。これに対して、セクションデルタに、３つではなく１つのカラムだけを要する図３を参照する。上述のように、これらの機能は連続的に実行することもできるので、その場合カラムの最小個数は４となる（α→β；α→β；δ→δ；γ→δ；ここで矢印は、ＢＬからＣＣＬへの切り替え時、同じカラムによって担われる機能を示す）。これに対して、セクションデルタに対し、３つではなく２つのカラムだけを要する図１２を参照する。
【００２９】
これを、上記の先行技術ＵＳ５，０９３，００４、むしろ、その核となる特徴の１つと比べると、本願はいわゆるショートサーキット（ｓｈｏｒｔ−ｃｉｒｃｕｉｔｔｉｎｇ）であり、つまり、カラムを離れる流れは、必ずしも下流側の次のセクションへと送り込まれず、１つ先のカラムへと供給される（例えば図３参照）。液相及び固相の従来の擬似向流操作と、「ショートサーキット」操作との違いについての詳しい考察は、ＷＯ２００６／１１６８８６に見つけることができる。
【００３０】
ＵＳ５，０９３，００４と本願とのさらなる違いは、２，３例を挙げると：
−本発明は、供給混合物を少なくとも５つの画分に分離することに関するが（クレーム１を参照）、ＵＳ５，０９３，００４は、３つの画分への分離しか考えていない（クレーム１）。
−ＵＳ５，０９３，００４は、本願にクレームしたような、セクションα（溶媒入口と系を完全に離れる中間画分用の出口のみ）、セクションδｆ（供給物の入口と系を完全に離れる１つの画分用の出口のみ）、及びセクションγ（溶媒入口と系を完全に離れる最後の溶出画分用の出口のみ）のいずれをも含まない。
【００３１】
第１の好ましい実施形態によると、少なくとも２つのカラムを含む、少なくとも２つのサブ機能を持つ供給セクションδには、最も下流側の再循環セクションβｎ−３の出口の排出物を受け入れるための少なくとも１つの入口、及び、多成分混合物Ｆｄを送り込むための少なくとも１つ又は２つの入口と、最も吸着の弱い成分（画分Ｆｎ−１，Ｆｎ）用の少なくとも２つの出口とを設けることができ、吸着の弱い成分を系から画分Ｆｎ−１，Ｆｎ中へと洗い出すが、画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２（及びＦ１）のためのより吸着の強い中間吸着成分を、セクションδ内に保持する。セクション（γ，β；α，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ等）の機能及びサブ機能は連続的に実施され、前記バッチモード及び前記連続又は準連続モードは連続的に実現可能である。準連続溶出の工程では、この場合、再循環セクションのカラムが、供給セクションの第１のカラムδｇの入口に流体的に接続され、供給セクションの第１のカラムδｇの出口は、供給セクションの最後のカラムδｒの入口に流体的に接続されるが、供給セクションの第２の中間カラムδｆｂは、多成分混合物Ｆｄを送り込むための入口を用いてバッチモードで運転される。バッチ溶出の工程では、吸着の強い成分収集γと、収集セクションαのカラム、及び供給セクションの第１のカラムδｆａ及び第３のδｆｃカラムが、バッチモードで運転され、少なくとも、供給セクションの第１のδｆａカラムは、多成分混合物Ｆｄを送り込むための入口を用いて運転される。これらのセクション又はサブセクションのそれぞれに対し、１つ又は複数のカラムを使用できる。
【００３２】
さらなる好ましい実施形態によると、セクションの一対の連続的機能が１つのカラム内で連結されており、その際、１切り替え時間内に、連続又は準連続溶出の工程及びバッチ溶出を有する工程が、これらの機能を連続的に実行しながら交互に起こり、供給セクションは３つのサブセクションを含み、全系において、４つのカラム（又はカラムのスタック又は列）だけが提供され、これら４つのカラムが、１切り替え時間の第１の部分（Ｆｒａｃｔｉｏｎ）内には、連続又は準連続溶出の工程（ＣＣＬ）で連続的に接続され、切り替え時間の第２の部分内には、多成分混合物（Ｆｄ）の個々の画分Ｆ１,...,Ｆｎ−１を取り出すためにバッチ工程（ＢＬ）で駆動される。これは、例えば、図７に示すようなプロセスであり、以下でさらにより詳細に説明する。
【００３３】
さらなる好ましい実施形態によると、セクションの一対の連続的機能は１つのカラム内で連結されており、その際、１切り替え時間内に、連続又は準連続溶出の工程及びバッチ溶出を有する工程が、これらの機能を連続的に実行しながら交互に起こり、供給セクションは少なくとも５つのサブセクションを含み、全系において、５つのカラム（又はカラムのスタック又は列）だけが設けられ、これらのうち４つは、１切り替え時間の第１の部分内に、ＣＣＬ工程（準連続溶出の）で連続的に接続され、切り替え時間の第２の部分内に、多成分混合物（Ｆｄ）の個々の画分Ｆ１,...,Ｆｎ−１を取り出すためにバッチ工程（ＢＬ）で駆動される。これは、例えば、図１２に示すようなプロセスであり、これは、供給セクションにおいて、５ｂで示した第５のカラムは、ＣＣＬ工程（供給セクションには、準連続溶出中にバッチモードで運転される１つのカラムが設けられる）中にバッチモードで運転されるという事実により、連続的及び実質的に途切れない供給を可能にする。
【００３４】
さらに別の好ましい実施形態によると、セクションγ，β１；α１，β２；...；αｎ−３，δｇ；δｆ，δｒの機能及びサブ機能は連続的に実行され、前記バッチモードと前記連続又は準連続モードが連続的に実現され、その際、連続又は準連続溶出の工程では、再循環セクションのカラムが、次の下流側の再循環セクションに流体的に接続されるか、又は、供給セクションの第１のカラムδｇの入口に流体的に接続され、供給セクションの第１のカラムｆｇの出口は、供給セクションの最後のカラムδｒの入口に流体的に接続され、バッチ溶出の工程では、強吸着成分収集γと収集セクションαのカラムと、供給セクションのカラムδｆがバッチモードで運転され、供給セクションのカラムδｆは、多成分混合物Ｆｄを送り込むための入口を用いて運転され、好ましくは、２つの収集セクションと２つの再循環セクションがあって、この方法が４つのカラムを用いて実現されるか、又は３つの収集セクションと３つの再循環セクションがあって、この方法が６つのカラムを用いて実現される。
【００３５】
全く独立に、本発明はさらに、少なくとも１つの溶媒を用いて混合物が送り入れられる少なくとも４つの個別のクロマトグラフィーカラムによって、多成分混合物Ｆｄを連続的又は準連続的に精製するための方法に関し、多成分混合物Ｆｄは、整数ｎ個の画分Ｆｎに分離され、ここでｎは少なくとも６である。連続供給、及び、精製プロセス導入前にカラムを最も効率的に洗浄することを可能にするこの方法は、上記多成分精製方法とは独立したものであり、この発明は、単独でも（ｔａｋｅｎ  ａｌｏｎｅ）、技術水準の点から新規で独創性がある。
【００３６】
具体的には、この方法では、カラムは少なくとも４つのセクションα、β、γ、δにグループ分けされ、少なくとも１つの収集セクションα１,...,αｎ−３には、それぞれ、少なくとも１つの溶媒入口と、少なくとも１つの中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２用の出口が設けられ、それぞれ、各中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２を系から洗い出すが、より吸着の強い成分をセクションα１,...,αｎ−３内に保持し、少なくとも１つの再循環セクションβ１,...,βｎ−３には、少なくとも１つの溶媒入口と、後続の下流側の再循環セクションの入口、あるいは後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は供給セクションδへと接続される少なくとも１つの出口が設けられ、画分Ｆ１,...,Ｆｎ−３を介して溶出されるより吸着の強い成分で汚染されている中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−２内に溶出される中間吸着成分それぞれを、後続の下流側の再循環セクションか、あるいは後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は前記供給セクションδへ、前記出口を通して洗い流すが、画分Ｆ１,...,Ｆｎ−３内に溶出される（純粋な）より吸着の強い成分それぞれを、対応する再循環セクションβ１,...,βｎ−３内に保持し、強吸着成分収集セクション（γ）には、少なくとも１つの溶媒の入口と、最も吸着の強い成分（画分Ｆ１）用の出口が設けられ、画分Ｆ１を有する最も吸着の強い成分を前記出口を通して洗い出し、少なくとも２つのカラムを含む供給セクションδには、最も下流側の再循環セクションβｎ−３の出口からの排出物を受けるための少なくとも１つの入口、及び、多成分混合物Ｆｄを送り込むための少なくとも１つ又は２つの入口と、少なくとも２つの最も吸着の弱い画分Ｆｎ−１、Ｆｎ用の少なくとも２つの出口とが設けられ、吸着の弱い成分を系から画分Ｆｎ−１、Ｆｎ内に洗い流すが、画分F２、．．．、Fｎ−２（並びにＦ１）用のより吸着の強い中間吸着成分を、セクションδ内に保持し、その際、セクションγ、β；α、δｇ；δｆａ、δｆｂ；δｆｃ、δｒの機能及びサブ機能は、連続的に実行される。カラムは、少なくとも１つの収集セクションカラムα１,...,αｎ−３の出口が、中間画分Ｆ２,...,Ｆｎ−３を収集するために使用される、少なくとも１つのバッチモードポジション、並びに、少なくとも１つの再循環セクションカラムβ１,...,βｎ−３の出口が、後続の下流側の再循環セクションの対応する入口と、あるいは後続の下流側の再循環セクションが存在しない場合は、前記供給セクションへ流体的に接続される、少なくとも連続又は準連続モードポジションで運転され、その際、前記バッチモードと前記連続又は準連続モードが連続的に実現される。
【００３７】
切り替え時間ｔ＊の後又は切り替え時間内に、カラムのポジションが、溶媒の通常の流れ方向に対し逆方向に動かされる。
切り替え時間ｔ＊の後又は切り替え時間内に、収集セクションα１,...,αｎ−３の第１のカラムは、対応する再循環セクションβ１,...,βｎ−３の最後のポジションへ動かされ、最も上流側の再循環セクションβ１の第１のカラムは、強吸着成分収集セクションγの第１のポジションへ動かされ、もし存在するならば、さらなる再循環セクションβ２,...,βｎ−３の第１のカラムが、次の上流側の収集セクションα１,...,αｎ−４の最後のポジションへ動かされ、強吸着成分収集セクションγの第１のカラムが、供給セクションδの最後のポジションへ動かされ、供給セクションδの第１のカラムが最も下流側の収集セクションαｎ−３の最後のカラムになるように動かされる。
【００３８】
γ，β１；α１，β２；...；αｎ−３，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒのグループ分けは、単一のカラムによって実現され、個々のセクションの機能又はサブ機能は、１切り替え時間ｔ＊中に、連続又は準連続溶出の工程とバッチ溶出を有する工程を交互に行いながら連続的に実行され、この場合（ｉｎ  ｔｈａｔ）、連続又は準連続溶出の工程では、再循環セクションのカラムが供給セクションの第１のカラムδｇの入口に流体的に接続され、供給セクションの第１のカラムδｇの出口が、供給セクションの最後のカラムδｒの入口に流体的に接続され、一方、供給セクションの第２の中間カラムδｆｂは、多成分混合物Ｆｄを送り込むためのその入口を用いて、バッチモードで稼動され、バッチ溶出の工程では、吸着の強い成分収集γと、収集セクションαのカラム、及び供給セクションの第１のカラムδｆａ及び第３のカラムδｆｃがバッチモードで運転され、供給セクションδｆａ、δｆｂ、δｆｃの少なくとも１つのカラムが、多成分混合物Ｆｄを送り込むためのその入口を用いて運転される。
【００３９】
この内容においては、カラムを４つだけ使用する方法が特に有利である。この態様の好ましい実施形態によると、セクション（γ，β；α，δｇ；δｆａ，δｆｂ；δｆｃ，δｒ）の機能及びサブ機能は連続的に実行され（図８も参照）、前記バッチモードと前記連続又は準連続モードが連続的に実現され、この場合（ｉｎ  ｔｈａｔ）、準連続溶出の工程では、１つの再循環セクションのカラムが供給セクションの第１のカラムδｇの入口に流体的に接続され、供給セクションの第１のカラムδｇの出口が供給セクションの最後のカラムδｒの入口に流体的に接続され、一方、同時に、供給セクションの第２の中間カラム（δｆｂ）は、多成分混合物（Ｆｄ）を送り込むためのその入口と、画分（Ｆ４）の収集用の出口とを用いて、バッチモードで運転され、バッチ溶出の工程では、強吸着成分収集γと収集セクションαのカラム、及び供給セクションの第１及び第３の中間カラム（δｆａ，δｆｃ）が、多成分混合物Ｆｄを送り込むためのそれらの入口の少なくとも１つを用いて、バッチモードで運転される。この内容において、再循環セクションが２つのこともあり得、その場合は、カラムは全部で５個となる。
【００４０】
次に示す好ましい実施形態は、上述の方法の両方に関するものであり、つまり、多成分精製法並びに連続供給を可能にする方法に関する。
【００４１】
好ましい実施形態によると、セクションの少なくとも１つへ送り込まれる溶媒は、切り替え時間（ｔ＊）中、ほぼ連続的に組成が変えられ、及び／又は超臨界溶媒の場合には、切り替え時間（ｔ＊）中に、セクションの少なくとも１つに送り込まれる超臨界溶媒の密度が、ほぼ連続的に変えられる。
【００４２】
さらに好ましい実施形態によると、少なくとも１つ又は好ましくは全てのセクションへ送り込まれる溶媒は、切り替え時間（ｔ＊）中、モディファイア濃度を増減させて、ほぼ連続的に組成が変えられ、及び／又は、超臨界溶媒の場合は、切り替え時間（ｔ＊）中、密度を増減させて、ほぼ連続的に密度が変えられ、最も下流側のセクション（δ）から最も上流側のセクション（α）への一連のカラムに沿って、カラムが動いた後、各カラム内のモディファイア濃度（Ｃｍｏｄ）／密度が、実質的に、カラムの新しいポジションでのベースのモディファイア濃度／超臨界溶媒の密度となり、次の切り替え時間（ｔ＊）中に、各カラム内のモディファイア濃度／密度が、カラムのさらなる移動後に次のポジションのベースの濃度／密度へと増加または減少されるように、モディファイア濃度（Ｃｍｏｄ）／密度を増加又は減少させる。
【００４３】
各溶媒入口にて、個々の一定のベースのモディファイア濃度（Ｃｍｏｄ，ｃ）を持つ溶媒を供給することができ、その際、流量及び／又は組成が変化する、好ましくはモディファイア濃度（Ｃｍｏｄ，Ｖ）が変化する溶媒流れを、複数の入口に供給し、個々の一定のベースのモディファイア濃度（Ｃｍｏｄ，ｃ）を有する溶媒と混合して、系に沿ってグラジエントを構築する。
【００４４】
セクションの全て又はいくつかに送り込まれる溶媒は、組成及び／又は密度を、切り替え時間（ｔ＊）中、線形又は準線形又は非線形に、ほぼ連続的に変えることができ、その際、好ましくは、モディファイア濃度が、そのように変えられる。
【００４５】
供給セクションは、３つのサブセクションにグループ分けされる少なくとも３つのカラム、又は、３つのサブセクションの機能を連続して提供するより少ないカラムを含むことができ、その際、第１のサブセクションδｆが、好ましくは、系の全流量より低い流量で多成分混合物を送り込むための少なくとも１つの入口と、画分Ｆｎ−１用の少なくとも１つの出口とを含み、第２のサブセクションδｇが、最も下流側の再循環セクションβｎ−３の排出物を取り上げるための少なくとも１つの入口と、第３のサブセクションδｒの少なくとも１つの入口に接続される少なくとも１つの出口とを含む。
第３のサブセクションδｒは、第２のサブセクションδｇの排出物を取り上げるための少なくとも１つの入口と、画分Ｆｎ用の少なくとも１つの出口とを含んでもよい。
【００４６】
切り替え時間（ｔ＊）後又は切り替え時間内に、第１のサブセクション（δｆ）の第１のカラムは、第２のサブセクション（δｇ）の最後のポジションへと動かされ、第２のサブセクション（δｇ）の第１のカラムは、収集セクションの最後のポジションへと動かされ、吸着の強い成分収集セクション（γ）の第１のカラムは、第３のサブセクション（δｒ）の最後のポジションへと動かされ、第３のサブセクション（δｒ）の第１のカラムは第１のサブセクション（δｆ）のカラムとなるように動かされ、セクションの機能を、同期して又は連続的に実行することができる。
【００４７】
セクションの一対の連続的機能は、１つのカラム内で連結することができ、１切り替え時間内に、連続的又は準連続的溶出の工程と、バッチ溶出を有する工程が、これらの機能を連続的に実施しながら、交互に起こる。
【００４８】
供給セクションは、３つのサブセクションを含むことができ、全系において、４つのカラムを供給することができ、これら４つのカラムは、１切り替え時間の第１の部分内には、連続又は準連続溶出の工程（ＣＣＬ）にて連続的に接続され、切り替え時間の第２の部分内に、多成分混合物（Ｆｄ）の個々の画分（Ｆ１,...,Ｆｎ−１）を取り出すために、バッチ工程（ＢＬ）にて駆動される。
【００４９】
上記のような全てのセクションのように、この特定の場合における第１のサブセクションには、少なくとも２つの並行なカラムを含むことができ、及び／又は、第２の及び／又は第３のサブセクションは、少なくとも２つの向流の並行な又は連続するカラムを含むことができる。
【００５０】
供給は、１切り替え時間（ｔ＊）内で、連続的、パルス状、又は成形された濃度／密度プロフィールを有するものであってよく、及び／又は、溶媒の流れを、１切り替え時間（ｔ＊）内に変えてもよく、及び／又は、個々の入口／出口の切り替えが、１切り替え時間（ｔ＊）内で段階的であってもよい。
個々のカラム内の流量は同じであっても異なっていてもよい。
【００５１】
さらに、本発明は、上に定義した方法のいずれかを実行するための装置に関する。この装置の仕様は、対応するクレームに定義する。通常、このような装置は、少なくとも４つ、好ましくは少なくとも５つの個別のクロマトグラフィーカラムの接続形態（ｔｏｐｏｌｏｇｙ）を含む。
【００５２】
本発明のさらなる実施形態は、従属請求項に記載する。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】図１は、６つのカラムを使用する連続精製法のフローシートである。
【図２】図２は、向流レーン及びバッチレーンを有する非連続的な６カラムユニットを示し、ａ）はシーケンシャル図であり、ｂ）は、バッチレーン（ＢＬ）と向流レーン（ＣＣＬ）を個別の工程として示した図である。
【図３】図３は、連続多画分分離法の図である。
【図４】図４は、連続多画分分離法の一般的なフローシートである。
【図５】図５は、連続５画分分離法のフローシートである。
【図６】図６は、連続６画分分離法のフローシートである。
【図７】図７は、相互接続された向流レーン（ＣＣＬ）とバッチレーン（ＢＬ）を有する非連続的多画分分離法の図である。
【図８】図８は、連続供給を有する非連続的４カラム法の図である。
【図９】図９は、連続供給を有する連続４カラム法のフローシートである。
【図１０】図１０は、洗浄セクション／連続供給を有する連続多画分分離法の略図である。
【図１１】図１１は、洗浄セクション／連続供給を有する連続多画分分離法のフローシートである。
【図１２】図１２は、洗浄セクション及び連続供給を有する、相互接続された向流レーン（ＣＣＬ）とバッチレーン（ＢＬ）を備えた非連続的多画分分離法の図である。
【図１３】図１３は、洗浄セクション及び連続供給を有する、相互接続された向流レーン（ＣＣＬ）とバッチレーン（ＢＬ）を備えた非連続的多画分分離法のフローシートである。
【図１４】図１４は、切り替え時間の最後で、且つカラムが切り替えられる前の、カラム内の成分の内部液相濃度プロフィールを示す。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
本発明の好ましい実施形態を、図を参照して以下に説明するが、これらの図は、本発明の好ましい実施形態を示すためのものであって、本発明を制限するためのものではない。
【００５５】
図２ａ）には、従来技術、特にＷＯ２００６／１１６８８６で定義されるような６カラムのセットアップが示されており、単一のカラムのそれぞれによって具体化されたセクションが図に表示されている。図２によるセットアップの全体的な形状（ｔｏｐｏｇｒａｐｈｙ）を、図１に挙げる。
【００５６】
セクションは特定の役割を持ち、それらは以下のとおりである：
−セクションα：精製された中間生成物を系から洗い出すが、吸着の強い不純物はセクション内に保持する。
−セクションβ：吸着の強い不純物で汚染されている中間生成物をセクションδへと洗い流すが、吸着の強い不純物はセクション内に保持する。
−セクションγ：吸着の強い不純物を洗い出し、セクションのクロマトグラフィーカラムを洗浄する。定置洗浄（ＣＩＰ）。
−セクションδ：吸着の弱い不純物を系から洗い出すが、目的とする生成物はセクション内に保持する。供給物を精製系に送り込む。
【００５７】
具体的に言えば、図２の場合、以下の作業が、番号付けしたカラムによって実行される：
１．吸着の強い不純物Ｃを全て、カラムから取り出す。
２．中間生成物Ｂの全てをこのカラムから取り出すが、吸着の強い不純物Ｃはこのカラム内に保持する。
３．吸着の強い不純物Ｃをこのカラムから決して取り出さないが、中間生成物Ｂだけを取り出す。
４．吸着の弱い不純物Ａを全てカラムから取り出すが、中間生成物Ｂはカラム内に保持する。
５．供給物Ｆｄをカラムに入れ、第１の吸着の弱い不純物Ａをカラムから取り出す。
６．中間生成物Ｂをカラムから決して出さず、トレーサーをカラムから取り除く。
【００５８】
図２ｂ）では、６カラムのセットアップが、３つの相互接続したカラムと、３つの接続されていないカラムとに分割されているが、図２ａ）に示した６カラムのセットアップと同一である。３つの相互接続したカラムを備えるレーンを「ＣＣＬ」（向流レーン）と呼び、接続されていないカラムを備えたものを「ＢＬ」（バッチレーン）と呼ぶ。
【００５９】
ＣＣＬは、カラムポジション２，４，６（β，δｇ，δｒ）からなり、バッチレーンはカラムポジション１，３，５（γ，α，δｆ）からなる。６カラム系が２つの状態ＣＣＬとＢＬの間で切り替わるとき、ＣＣレーンの全てのカラムが「バッチレーン」のカラムとなり、バッチレーンの全てのカラムがＣＣレーンのカラムとなるのは明らかである。両レーンの局所的な切り替え時間は、全体の切り替え時間ｔ＊に等しい。これにより全体のプロセスが連続となる。バッチカラムと向流カラムは、同じプラントで同時に操作される。
【００６０】
本明細書に表した発明は、図１及び２に示すものに比べて改良された分離法を提供し、混合物を連続又は非連続的に４以上の画分へと分離できる。この方法には、並行して及び／又は連続的に異なる作業を実行するセクションにグループ分けされたマルチカラムを含む。セクションは、特定の方法で、バルブによって液体的に接続及び切断することができる。
【００６１】
一般に、図３及び４の場合、ｎは整数であり、画分の数を表す。ｎは５以上である。ｉは添え字であり、５に始まり角括弧内に与えられるユニットの繰り返しに伴って増える。ｍは成分Ｋの数で、ｎ以上である。Ｆは画分を表す。図５の場合、ｎは５に等しくなるように選ばれ、ゆえにｉは５に等しく、図６の場合、ｎは６に等しくなるように選ばれ、その結果、ｉは５及び６の値をとる。図１０の場合、ｎは６以上となるように選ばれ、添え字ｉは５に始まり、図１１に対しても同様である。図１２の場合、ｎは７以上であり、図１３に対しても同様である。
【００６２】
カラムは、セクションγ、α、β及びδにグループ分けされる。セクションα、βは、プロセスの一対の中間セクションを表し、プロセスが供給混合物をより多くの画分に分離することができるように繰り返すことができる。セクション対（α，β）の繰り返しにより、セクションαは、次の繰り返し対（α，β）のセクションαに接続される。最後の繰り返し対（α，β）のセクションαは、セクションδに接続される。プロセス内の対（α，β）の数は、第１の対（α，β）によって与えられ、少なくとも１つの以上の繰り返し対（α，β）である。
各対（α，β）は、セクションからの成分の溶出順に基づき、サブ画分化する（ｓｕｂ−ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ）ことのできる１つの画分を生成する。
【００６３】
セクションγは、１つの流体入口を含み、溶出順序に基づきサブ画分化することのできる１つの画分を生成する。
【００６４】
セクションδは、溶出順序に基づいてサブ画分化することのできる少なくとも２つの画分を生成し、少なくとも１つの流体入口を含む。セクションδでは、保持挙動の異なる少なくとも４つの異なる成分からなる供給混合物が加えられる。セクションδは、前記供給混合物が与えられるカラムと、流体的に接続される２つのカラムの少なくとも１つを含む。
【００６５】
流体的に相互接続されるセクションα及びδの目的は、成分のさらなる精製と高い収率のために、部分的に精製された成分を内部再循環することである。
【００６６】
所定の切り替え時間後又は切り替え時間内に、プロセスのカラムは、δ，β，α，γの順で、流体流れに反対の方向に切り替えられ、これが固定相と移動相の擬似向流移動につながる。内部再循環と組み合わせると、これは、生成画分の純度を高めることにつながる。
【００６７】
セクションγ及びβの目的は、生成物及び／又は不純物画分の溶出である。
【００６８】
図３に示すプロセスの連続的な実施形態では、セクションγ，α，β及びδの作業は並行して行われ、切り替え時間の後又は切り替え時間内に、カラムが、δ，β，α，γ，δ・・・の順番で進む。カラムの動きを、図４に、この実施形態を示すフローシートに示す。１つの繰り返し対（α，β）を有する、５画分分離（ｎ＝５）のためのこの実施形態の例を、図５のフローシートに示す。２つの繰り返し対（α，β）を有する、６画分分離（ｎ＝６）のためのこの実施形態の例を、図６のフローシートに示す。
【００６９】
図７に示すプロセスの非連続的な実施形態では、セクションαとδの作業は、セクションが流体的に切断された状態で、並行して実施される。切り替え時間後又は切り替え時間内に、セクションαのカラムはセクションγの方向に切り替えられ、先の繰り返し対（α，β）のセクションβの作業を行う。セクションβ１の第１のカラムは、セクションγの最後のカラムのポジションに切り替えられる。同時に、セクションδの第１のカラムは、最後の繰り返し対（α，β）のセクションαの最後のカラムのポジションに切り替えられる。セクションδ内では、サブセクション６から５、５から４の順にカラムが切り替わる。
【００７０】
ここに表す発明は、また、混合物を不連続的に４つの画分に分離できる改良された精製法を提供し、これによって、混合物を含む供給物が、連続的に投入される。このプロセスは、並行して又は連続的に異なる作業を実行するセクションにグループ分けされる４つのカラムを含む。セクションは、図８に概略する特定の方法で、バルブによって流体的に接続及び切断することができる。
【００７１】
カラムは、セクションγ、α、β及びδにグループ分けされる。
セクションγは、１つの流体入口を含み、溶出順序に基づきサブ画分化することのできる１つの画分を生成する。
セクションδは、溶出順序に基づきサブ画分化することのできる少なくとも２つの画分を生成し、少なくとも１つの流体入口を含む。セクションδでは、保持挙動の異なる少なくも４つの異なる成分からなる供給混合物が投入される。セクションδは、前記供給混合物が与えられるカラムと、流体的に接続される２つのカラムの少なくとも１つを含む。
【００７２】
流体的に接続されたセクションα及びδの目的は、成分のさらなる精製と高い収率のために、部分的に精製された成分を内部再循環することである。
【００７３】
所定の切り替え時間後又は切り替え時間内に、プロセスのカラムは、δ、β、α、γの順で、流体流れに反対の方向に切り替えられ、これが固定相と移動相の擬似向流移動につながる。内部再循環と組み合わせると、これは、生成画分の純度を高めることにつながる。
【００７４】
セクションγ及びβの目的は、生成物及び／又は不純物画分の溶出である。γ及びβから得られた画分は、セクションからの成分の溶出順序に基づきサブ画分化することができる。
【００７５】
図８に示すプロセスの実施形態では、セクションγ、α、β及びδの作業は連続的に行われ、切り替え時間の後又は切り替え時間内に、カラムが、δ、β、α、γ、δ・・・の順番で進む。カラムの動きを、図９に、フローシートで示す。
【００７６】
セクションα、γ、βのそれぞれは、１サイクルδ、β、α、γの間に、少なくとも１つのカラムによって通過される。セクションδは、各所定の時点で、少なくとも２つのカラムを含む。
【００７７】
カラムの代わりに、膜吸収体又は吸着原理を使用する他の固相を用いることもできる。
【００７８】
移動相としては、液体又は超臨界流体を使用することができる。カラム中の溶離液組成は、プロセスの２以上のセクションにおいて及びセクションのカラム内で同じであっても変えることもできる。特に、グラジエントを行うことができる。
【００７９】
もちろん、このコンセプトを、上に定義したような多成分分離法と連結できるし、その逆も可能である。
【００８０】
図１０に示す連続的な実施形態では、セクションδのサブセクションのカラムが、６−５ｂ−５ａ−４の順で切り替わる。この実施形態は、洗浄又は付加的な供給を目的として、少なくとも１つのカラムを含むセクション５ｂを加えた改良したセクションδを備えたプロセスを示す。洗浄又は供給のための第１のセクションを５ａと表示する。対応するフローシートを図１１に示す。
【００８１】
図１２に示す非連続的な実施形態では、セクションδのサブセクションのカラムが６−５ｃ−５ｂ−５ａ−４の順で切り替わる。洗浄又は供給のための３つのセクションは、５ａ、５ｂ、５ｃと表示する。
【００８２】
セクションα、γ、βのそれぞれは、少なくとも１つのカラムを含む。セクションδは、図３、図５、図６及び図７に示すプロセスの場合、少なくとも２つのカラムを含み、図１２及び図１３に示すプロセスの場合は３カラム、図１０および図１１に示すプロセスの場合は４カラム含む。
【００８３】
カラムの代わりに、膜吸収体又は吸着原理を使用する他の固相を用いることもできる。
【００８４】
移動相としては、液体又は超臨界流体を使用することができる。カラム中の溶離液組成は、プロセスの２以上のセクションにおいて及びセクションのカラム内で同じであっても変えることもできる。特に、グラジエントを行うことができる。
【実施例】
【００８５】
以下、５つの画分への分離のための例を、図５に示すフローシートを用いて表す。
【００８６】
このシミュレーションは多成分の競合ラングミュア等温式（ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅ  Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ｉｓｏｔｈｅｒｍ）を用いる集中型キネティックモデル（ｌｕｍｐｅｄ−ｋｉｎｅｔｉｃ  ｍｏｄｅｌ）に基づく。ヘンリー係数Ｈを、モディファイア（成分１）濃度のべき関数Ｈ＝ａ＊ｃＭｂと仮定し、パラメータａ及びｂ、並びに等温飽和度を、表Ｔ１に挙げる。
【００８７】
【表１】
0005600688.tif 000002
【００８８】
さらなるシミュレーションパラメータを、表Ｔ２にまとめる。
【表２】
0005600688.tif 000003
【００８９】
図３に示すフローシートの構成の操作条件を表Ｔ３に表す。１切り替え中、各供給ポンプによって、線形グラジエントが、開始モディファイア濃度と最終モディファイア濃度の間で操作されることに注目する。成分２〜６は、セクションδｆでのみ系に送り込まれる。
【００９０】
【表３】
0005600688.tif 000004
【００９１】
この実施例においては、操作条件が完全には最適化されていないことに注意しなければならない。
図１４には、６つのカラムｃ１−ｃ６の内部の、上の表の定義に従って、成分ｃｏ１−ｃｏ６の内部液相濃度プロフィールを計算したものを、切り替え時間の最後の最後と、カラムを切り替える直前にて示す（切り替え数：４９、切り替えパーセント：１００％）。この時点で、成分２は、セクションδｒを介してほぼ完全に系を去った。カラムの名称と、図３に使用した名称は一致しており、セクション１〜４（ｓｃｔ１〜ｓｃｔ４）も同様である。
【００９２】
得られたカラム排出物純度を、全濃度の合計で割った各成分の濃度として計算し、１切り替えにわたって平均したものを、表Ｔ４に示す。
【表４】
0005600688.tif 000005
【００９３】
上の実施例において、成分３（ｃｏ３）は、δｆから非吸着成分２（ｃｏ２）とともに溶出されるため、特に高い純度で得られないことがわかる。しかしながら、供給濃度をより高くすれば、供給流量を減らすことが可能となって、非吸着不純物がδｆからは溶出せずδｒからのみ溶出する。このような場合、成分３（ｃｏ３）も、高純度で得ることができた。
【符号の説明】
【００９４】
ＢＬ      バッチレーン
ＣＣＬ    向流レーン
α        精製プロセスの収集セクション
β        精製プロセスの再循環セクション
γ        精製プロセスの吸着の強い成分収集セクション
δ        精製プロセスの供給セクション
Ａ，Ｂ，Ｃ    画分
Ａ        吸着の弱い成分を含む画分
Ｂ        吸着が中間的な成分を含む画分、通常目的とする生成物
Ｃ        吸着が強い成分を含む画分
ｓ        溶媒
Ｆｄ      全ての成分を混合物として含む供給物
ｔｒ      トレーサー
Ｓｃｔ    セクション
Ｆｉ      画分ｉ
Ｋｉ      Ｆの混合物中の成分ｉ
Ｗ        洗浄
ｎ        画分の数
ｉ        添え字
ｍ        Ｆ内の成分の数
【図１】
0005600688.tif 000006
【図２ａ）】
0005600688.tif 000007
【図２ｂ）】
0005600688.tif 000008
【図３】
0005600688.tif 000009
【図４】
0005600688.tif 000010
【図５】
0005600688.tif 000011
【図６】
0005600688.tif 000012
【図７】
0005600688.tif 000013
【図８】
0005600688.tif 000014
【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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