(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
魚が産卵する産卵用の水槽と、
前記水槽内の受精卵を前記魚から分離する受精卵分離手段と、
前記水槽から前記受精卵を回収する受精卵回収手段と、
を備える受精卵採取装置において、
前記水槽の照度を制御する照度制御手段とを有し、
前記照度制御手段は、所定の産卵予定時点の直前に前記水槽の照度を増加させ、
前記受精卵回収手段は、前記照度の増加と同期して前記受精卵を回収する動作を開始し、
前記受精卵分離手段は、魚隔離用の網と排水手段とを有し、前記網は、受精卵通過可能かつ魚通過不能な多数の孔を有して前記水槽の高さ方向中間部に配設され、
前記排水手段は、少なくとも前記照度が増加した直後の所定期間に、前記受精卵を含む水を前記水槽の底部から排出し、
前記受精卵回収手段は、前記水槽から排水される水から受精卵を採取し、
前記排水手段は、少なくとも前記水槽の照度を増加させる直前において、前記水槽の水の排出により前記水槽内の異物を外部に排出し、
前記排水手段は、異物回収管路と受精卵回収管路と切換手段とを有し、
前記異物回収管路は、前記水槽から排出された前記水を異物回収のための異物回収手段へ流し、
前記受精卵回収管路は、前記異物回収管路から分岐して前記水槽内の水を前記受精卵回収手段に流し、
切換手段は、前記異物回収管路への排水と前記受精卵回収管路への排水とを切り換え、
前記受精卵回収手段は、前記切換手段を制御することにより、前記産卵促進のための前記照度増加の直後の所定期間に前記水槽内の水を前記受精卵回収管路へ流すことを特徴とする受精卵採取装置。
【請求項２】
前記照度制御手段は、産卵促進のために前記水槽の照度をステップ状に増加させる請求項１記載の受精卵採取装置。
【請求項３】
前記照度制御手段は、前記照度が増加する時点以前の所定期間の間、外部から前記水槽へ入射する外光を遮断する請求項２記載の受精卵採取装置。
【請求項４】
前記排水手段は、前記水槽から水を外部に流す排水管路を有し、
前記受精卵回収手段は、水は通過しかつ前記受精卵は通過できない流路をもつ受精卵回収容器を有し、
前記受精卵回収容器は、前記排水管路の途中に着脱自在に配置される請求項１記載の受精卵採取装置。
【請求項５】
一個の受精卵だけを収容可能な大きさをもつ凹部が一主面に多数配列された受精卵保持プレートを有し、
前記凹部内の水は、前記受精卵保持プレートの底部に形成された貫通孔により前記受精卵保持プレートの他主面側から排出され、
前記貫通孔は、前記受精卵が通過不能な径をもち、
前記受精卵は、前記受精卵保持プレートの凹部から前記排水孔を通じて排出される水の流れにより前記凹部に収容される受精卵採取装置において、
上端が開口する箱形のプレート保持ケースを有し、
前記プレート保持ケースの側壁部は、前記ケースの底部から離れた位置にて前記受精卵保持プレートの周縁部を支持し、
前記プレート保持ケースは、前記プレート保持ケースの底部と前記受精卵保持プレートとの間に形成された排水室の水を外部に排出する排出孔を有することを特徴とする受精卵採取装置。
【請求項６】
前記受精卵保持プレートは、前記プレート保持ケースから離脱可能に前記プレート保持ケースに保持される請求項５記載の受精卵採取装置。
【請求項７】
前記プレート保持ケースの前記側壁部は、前記受精卵保持プレートの前記周縁部が置かれる台座部を有する請求項６記載の受精卵採取装置。
【請求項８】
前記プレート保持ケースの前記側壁部は、前記受精卵保持プレートよりも所定距離だけ高く形成されている請求項６記載の受精卵採取装置。
【請求項９】
一個の受精卵だけを収容可能な大きさをもつ凹部が一主面に多数配列された受精卵保持プレートを有し、
前記凹部内の水は、前記受精卵保持プレートの底部に形成された貫通孔により前記受精卵保持プレートの他主面側から排出され、
前記貫通孔は、前記受精卵が通過不能な径をもち、
前記受精卵は、前記受精卵保持プレートの凹部から前記排水孔を通じて排出される水の流れにより前記凹部に収容される受精卵採取装置において、
前記受精卵保持プレートに隣接して前記受精卵保持プレートに対して平行に配置されるシャッタプレートを有し、
前記シャッタプレートは、前記受精卵保持プレートと平行に移動することにより、前記受精卵保持プレートの前記凹部を受精卵通過不能に閉鎖することを特徴とする受精卵採取装置
【請求項１０】
前記シャッタプレートは、前記受精卵保持プレートの前記各凹部と等しい位置に前記受精卵が通過可能な各受精卵通過孔を有し、
前記シャッタプレートは、前記シャッタプレート及び前記受精卵保持プレートと平行な方向へ移動可能であり、
前記シャッタプレートは、前記移動により前記受精卵通過孔と前記凹部との位置をずらすことにより、前記凹部を遮蔽する請求項９記載の受精卵採取装置。
【請求項１１】
前記受精卵通過孔の径は、前記シャッタプレートの移動方向において互いに隣接する２つの前記受精卵通過孔の間の距離の半分以下である請求項１０記載の受精卵採取装置。
【請求項１２】
前記受精卵保持プレート及び前記シャッタプレートは、上端が開口する箱形のプレート保持ケース内に収容され、
前記ケースの側壁部は、前記プレート保持ケースの底部から離れた位置にて前記受精卵保持プレートの周縁部を支持し、
前記プレート保持ケースは、前記プレート保持ケースの底部と前記受精卵保持プレートとの間に形成された排水室の水を外部に排出する排出孔を有する請求項９記載の受精卵採取装置。
【請求項１３】
前記側壁部は、前記受精卵保持プレートよりも所定距離だけ高く形成されている請求項１２記載の受精卵採取装置。
【請求項１４】
前記受精卵に遺伝子を注入するためのニードルを、前記シャッタプレートの前記受精卵通過孔を通じて前記受精卵に挿入するインジェクション手段を有する請求項１０記載の受精卵採取装置。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
１．発明の分野
本発明は、受精卵を採取するための受精卵採取装置に関し、特に、蛋白質生産などのために遺伝子を注入するための魚卵を採取する装置に関する。
【０００２】
２．関係技術の記載
受精卵に遺伝子を注入することにより有益な物質を生産する技術分野において、ゼブラフィッシュなどの魚卵が有用である。特許文献１（特表２００１−５０１４８２号公報）は、魚卵を用いる蛋白質生産の一例について記載している。
【０００３】
遺伝子注入用途において、魚が魚卵を食べるのを避けるために魚卵を魚から分離する必要がある。特許文献２（特開２００１−１２０１１０号公報）は、魚が通過不能なネットをもつ逆ピラミッド形の水槽を提案している。魚卵は、下方へ流れる水流により水槽の下部にて回収される。
【０００４】
けれども、魚の排泄物や残餌などの異物が水槽内に存在する。更に、これらの異物は水槽の底部に堆積する。その結果、魚卵と異物との分離が困難となる。排泄物や残餌は遺伝子操作上有害な細菌やウイルスを随伴する可能性ももつ。したがって、魚卵は異物から分離されたのち、回収される必要がある。
【０００５】
魚卵と上記異物とを満足すべき精度で分離できる技術はまだ知られていない。このため、魚卵は、多数の熟練作業者の手作業により採取されていた。しかしながら、たとえばゼブラフィッシュの魚卵は非常に小さい（たとえば、長径０．７〜１．４ｍｍ）。魚卵の受精卵膜は薄く柔らかい。したがって、ピンセットを使うその採取作業は簡単ではない。
【０００６】
遺伝子物質は、魚卵に刺されたニードルを通じて魚卵内に注入される。この遺伝子注入技術は、インジェクション方式と呼ばれる。ニードルの挿入ミスを防止するために、魚卵は安定に保持される必要がある。
【０００７】
多数の魚卵を保持するための魚卵保持プレートが知られている。多数の凹部が魚卵保持プレートの上面に形成されている。半球形状の各凹部は、魚卵保持プレートに行列状に配置される。各凹部の底部は、貫通孔により魚卵保持プレートの下面に連通する。貫通孔は魚卵が通過不能な径をもつ。凹部の水を貫通孔を通じて下方へ吸引することにより、魚卵保持プレートの上部の魚卵は、凹部に捕捉される。
【０００８】
けれども、浅い凹部をもつ従来の魚卵保持プレートは、魚卵保持プレートが動く時、凹部内の魚卵が容易に凹部から外部に飛び出してしまうという問題があった。逆に、深い凹部をもつ従来の魚卵保持プレートは、複数の魚卵が一つの凹部に落ち込むという問題があった。更に、凹部内の魚卵にニードルを刺す時、魚卵が凹部から飛び出す問題もあった。
【０００９】
特許文献３（特開２００７−２２２１３２号公報）は、１個の受精卵だけを収容可能な凹部の開口部を狭くすることにより、凹部内の魚卵が凹部から外部へ飛び出すのを防止することを記載している。魚卵を凹部に収容する時だけ強い負圧が凹部に与えられる。魚卵は、この強い負圧により変形した状態で狭い凹部の開口部を通過する。
【００１０】
けれども、魚卵は、凹部の開口を通過する時、大きく変形せねばならない。その結果、魚卵の受精卵膜はしばしば破損する。更に、凹部開口の周囲の壁部は、魚卵の受精卵膜を傷つける。
【００１１】
更に、凹部の開口が狭いので、魚卵保持プレートのすべての凹部に魚卵を収容するのに長い時間が必要になる。発生速度が大きいゼブラフィシュなどの受精卵はただちに分割を開始するので、産卵からニードルインジェクション動作までの作業に許可される時間は短い（たとえば１時間以内）。結局、開口が狭い凹部をもつ魚卵保持プレートは、実際の製造に使用することが困難である。
【００１２】
更に、凹部に収容された魚卵に他の魚卵が密着するという問題もあった。結局、上記未だ解決されていない種々の問題点があるため、現在の魚卵インジェクション技術は、熟練作業者のハンドワークによってのみ実施されていた。その結果、受精魚卵を用いる蛋白質生産の実用化が難しかった。
【発明の概要】
【００１３】
（発明の目的）
本発明の目的は  簡素な装置により安全性及び生産性に優れた遺伝子注入用の受精卵採取装置を実現することである。
【００１４】
（発明の特徴）
遺伝子注入のために用いられる本発明の受精卵採取装置が以下に説明される。本発明の受精卵採取装置は下記に説明される３つの特徴をもつ。本発明の第１の特徴において、所望の受精卵産卵予定時期に合わせて水槽照度を増加させる。本発明の第２の特徴において、水流から分離された各受精卵を収容する凹部をもつ受精卵保持プレートが、上端が開口する浅底のケースに収容される。本発明の第３の特徴において、受精卵保持プレートの凹部は、シャッターにより遮蔽される。これら３つの発明は、遺伝子注入用の受精卵採取装置として一緒に実施されることが好適である。各発明が以下に説明される。
【００１５】
（第１発明の説明）
第１発明は、水槽、受精卵分離手段、受精卵回収手段及び照度制御手段をもつ。受精卵分離手段は、水槽内に産卵された受精卵を魚から分離する。受精卵回収手段は、水槽から受精卵を回収する。照度制御手段は、所定の産卵予定時点の直前に水槽の照度を増加させる。水槽の照度の増加により魚は産卵行動を行う。したがって、この発明によれば、受精卵回収に同期して産卵を開始させることができるので、受精卵回収手段による受精卵回収動作を効率的に行うことができる。
【００１６】
第１態様において、受精卵回収手段は、照度の増加と同期して前記受精卵を回収する動作を開始する。これにより、照度増加による産卵の前に受精卵回収動作を行うことを防止することができる。産卵前の受精卵回収は、受精卵に類似する糞や残餌などの異物を回収することを意味する。その結果、異物に付着したバクテリアなどの好ましくない遺伝子が後で行われる受精卵への遺伝子注入操作により受精卵に注入される危険を防止することができる。
【００１７】
第２態様において、照度制御手段は、産卵促進のために水槽の照度をステップ状に増加させる。照度増加をステップ状に行うことにより、産卵の確率を向上することができる。これは、魚の光感受性がその産卵行動に影響するためであると思われる。
【００１８】
第３態様において、照度が増加する時点以前の所定期間の間、外部から前記水槽へ入射する外光を遮断する。すなわち、夜間に近い照度が水槽に与えられる。好適には、水槽の照度が増加された後、照度は約１０ー１４時間維持される。その後、照度は、１４ー１０時間低下される。好適には、照明はオフされる。これにより、魚に自然環境に近い照度を与えることができる。
【００１９】
第４態様において、受精卵分離手段は、魚隔離用の網と排水手段とを有する。水槽の高さ方向中間部に配設される網は、受精卵通過可能かつ魚通過不能な多数の孔を有する。排水手段は、少なくとも照度増加直後の所定期間に、受精卵を含む水を水槽の底部から排出する。受精卵回収手段は、排水から受精卵を採取する。すなわち、網（受精卵分離手段）及び受精卵回収手段を通過する水流を用いることにより、魚と受精卵との分離と、水流からの受精卵の収集とを簡単な機構により実現することができる。
【００２０】
第５態様において、排水手段は、少なくとも前記水槽の照度を増加させる直前において、水槽の水の排出により水槽内の異物を外部に排出する。これにより、照度増加前に水槽に残留する異物が、照度増加後の受精卵回収により受精卵とともに回収されるのを防止することができる。
【００２１】
第６態様において、排水手段は、異物回収管路と受精卵回収管路と切換手段とを有する。異物回収管路は、水槽から排出された水を異物回収のための異物回収手段へ流す。異物回収管路から分岐する受精卵回収管路は、水槽内の水を受精卵回収手段に流す。切換手段は、水槽内の水を異物回収管路及び受精卵回収管路の一方に流す。受精卵回収手段は、照度増加の直後の所定期間に水槽内の水を受精卵回収管路へ流す。これにより、受精卵回収管路に異物が流入するのを減らすことができるので、受精卵回収管路を清浄に保つことができる。
【００２２】
第７態様において、排水手段は、水槽から水を外部に流す排水管路を有する。受精卵回収手段は、水は通過しかつ受精卵は通過できない流路をもつ受精卵回収容器を有する。受精卵回収容器は、排水管路の途中に着脱自在に配置される。これにより、照度増加直後の所定期間だけ受精卵回収容器を排水管路に装着することができる。この所定期間経過後、受精卵回収容器を排水管路から取り外すことにより、受精卵回収容器が排水管路を流れる異物により汚染されるのを防止することができる。
【００２３】
（第１発明の追加説明）
以下、第１発明の特徴と効果が更に具体的に説明される。第１発明は、水槽からの排水は水槽を照明するタイミングと同期して受精卵回収を行う点にその特徴がある。このようにすれば、水槽中の糞や餌などの異物が受精卵に混じって受精卵回収手段に混入するのを大幅に低減することができる。回収された受精卵の遺伝子汚染を低減することができる。
【００２４】
更に具体的な説明が以下に記載される。水槽には、蛋白質生産に適することが知られているたとえばゼブラフィッシュなどの魚が雌雄一対又は二対収容されている。この種の魚は照明照度を増大することにより、産卵、受精行動を取る。そこで、たとえば水槽の水を常時循環することにより、水槽内の異物を取り除いた状態を保持しておく。次に、水槽の照度を増大することにより、産卵直後の所定期間（たとえば３０分程度）だけ、水槽内の水を受精卵回収管路に流す。
【００２５】
上記した異物回収管路から分岐して水槽内の水を受精卵回収手段に流す受精卵回収管路とは、水槽内の水を水槽から直接採取する態様を含む。
ゼブラフィッシュなどの魚が照明照度の急増により産卵、受精行動を取ること自体は知られていた。けれども、照明装置点灯に同期して受精卵回収動作を行うことにより、異物混入量が少ない受精卵を受精卵回収手段に送り込むという発想は知られていなかった。なお、受精卵回収手段としては、たとえばネットなどを採用することができる。
【００２６】
好適には、照明装置は、複数の水槽グループに区分された多数の水槽が、各水槽グループごとに個別に照明する。切換手段は、各水槽グループごとに個別に排水を切り換える。照度制御手段は、所定時間ごとに各水槽グループを順番に照明する。照度制御手段は、各水槽グループの点灯タイミングに同期して照明が開始された水槽グループの排水を点灯直後の所定時間だけ異物回収管路から前記受精卵回収管路へ切り換える。
【００２７】
この態様によれば、各水槽グループごとに、順番に産卵を実施するので、その後の受精卵の採取、インジェクションなどの作業を分散させることができる。受精卵は、その受精卵分割が進む前の短期間（たとえば産卵から３０分以内）に遺伝子の注入を完了する必要がある。その結果、各水槽の産卵が同時に行われると、処理能力が小さい遺伝子注入装置では受精卵への遺伝子注入処理を完了することができない。処理能力が大きい遺伝子注入装置は、高価となる。この態様によれば、処理能力が小さい受精卵処理系により多量の受精卵を処理することができる。
【００２８】
好適な態様において、水槽は、逆円錐形状または逆楕円錐形状を有する。これにより、ほぼ水に等しく、重力沈降が容易でない受精卵が水槽の角部に引っ掛かって水槽内に滞留するのを防止できるため、頻繁な水槽の掃除を防止することができる。
【００２９】
好適な態様において、受精卵回収管路は、異物回収管路から水平方向よりも上方へ向けて配置されている。これにより、水槽から異物回収管路へ異物を排水とともに流す際に、異物が受精卵回収管路側に落ち込み、その後の受精卵回収時に異物が受精卵採取装置に流れるのを防止することができる。
【００３０】
好適な態様において、点灯から遡って１２時間以内に受精卵採取用水槽への餌を投入しない。この種の魚は食餌から所定時間以内に食べた餌を排泄するので、排泄量ができるだけ少ないタイミングで照明を点灯することにより、異物が受精卵回収管路に混入するのを良好に抑止することができる。
【００３１】
好適な態様において、受精卵分離手段をなす魚隔離用の網は、受精卵の１．５〜４倍の孔を有して斜設される。網の底部は、異物回収装置に接続される。これにより、魚隔離用多孔部材は、水槽内の降下水流などにより沈降する受精卵を魚から隔離できる。更に、受精卵より大きな異物も沈降受精卵から分離することができる。
【００３２】
好適な態様において、受精卵通過不能な多数の孔を有する受精卵回収用の網が受精卵分離用の網の下方に斜めに配置される。受精卵回収用の網の底部は、受精卵回収管路に接続される。この受精卵回収用の網の孔は、受精卵径の０．３〜０．９倍とされることが好適である。これにより、水槽から回収する排水の大部分と受精卵より小さい異物の両方を受精卵から分離することができるため、回収受精卵の清潔性を向上できる。
【００３３】
好適な態様において、水槽の底部は、斜設されて異物回収装置に接続される。これにより、受精卵回収用の網を通過して水槽底部に降下した水に含まれる小異物を受精卵と分離して排出することができる。
【００３４】
好適な態様において、照明装置は、可視光スペクトルに加えて紫外線スペクトルを発生する。照明装置としては白色ＬＥＤ群に紫外光ＬＥＤを混ぜて用いることができる。照明装置から出て一つの水槽又は一つの水槽グループを照射する照明光は、他の水槽や他の水槽グループに産卵行動に影響を与えるレベルで漏洩しないように遮蔽されるべきである。これにより、紫外光の殺菌効果により水に混入する細菌レベルや水槽内壁面に繁殖する細菌数を低減することができる。更に、魚に自然環境に近い棲息環境を与えることができる。ＬＥＤ照明装置は水槽内に設置されることができる。
【００３５】
好適な態様において、異物回収装置から出た水は殺菌された後、水槽内へ戻る。これにより、循環水に含まれる細菌数を低減することができる。殺菌装置としては紫外線利用式液体殺菌装置など従来公知の種々の装置を利用することができる。
【００３６】
好適な態様において、排水が異物回収管路へ流れる期間に、異物回収装置から出た清浄な水は受精卵回収手段に流される。受精卵回収手段から排出された水は水槽に戻されることができる。これにより、受精卵回収手段により捕捉された受精卵は清浄水により保護されるので、受精卵への遺伝子注入により、受精卵にのぞましくない遺伝子が注入されるのを減らすことができる。更に、受精卵回収手段や受精卵回収管路を定期的に清浄水により洗浄することになるため、これら受精卵回収手段や受精卵回収管路に細菌が繁殖するのを防止することができる。
【００３７】
（第２発明の説明）
第２発明の受精卵採取装置の特徴は、上端が開口する箱形のケースに受精卵保持プレートを保持する点にある。一個の受精卵だけを収容可能な大きさをそれぞれもつ多数の凹部が受精卵保持プレートの一主面に配列されている。凹部の開口から凹部内に流入した水は受精卵保持プレートの底部の貫通孔から外部に排出される。貫通孔は受精卵が通過不能な径をもつ。その結果、水に含まれる受精卵は、凹部に捕捉される。
【００３８】
ケースの側壁部は、ケースの底部から離れた位置にて受精卵保持プレートの周縁部を支持する。これにより、各凹部から各貫通孔を通じて排出された水は、ケースの底部と受精卵保持プレートとの間に形成された排水室に集められる。ケースはこの排水室の水を外部に排出する排出孔を有する。この発明によれば、受精卵保持プレートの各凹部を通過する水流の速度をほぼ等しくすることができるので、各凹部の受精卵捕捉確率を均一化することができる。更に、ケースは受精卵保持プレートに保持された受精卵が空気に触れるのを防止するので、受精卵保持プレートの安全なハンドリングが可能となる。
【００３９】
第１態様において、受精卵保持プレートは、ケースから離脱可能にケースに保持される。これにより、受精卵保持プレートをケースから外した状態でケースを洗浄することができるので、排水室の細菌による汚染を防止することができる。第２態様において、ケースの側壁部は、受精卵保持プレートの周縁部が置かれる台座部を有する。これにより、ケースによる受精卵保持プレートの支持及び取り外しが容易となる。第３態様において、側壁部は、受精卵保持プレートよりも所定距離だけ高く形成されている。これにより、受精卵を含む水をケースの上方から受精卵保持プレートの上に流す時、水が急速に周囲に流れるのを防止することができる。
【００４０】
（第３発明の説明）
第３発明の受精卵採取装置の特徴は、受精卵保持プレートにシャッタプレートを設けた点にある。一個の受精卵だけを収容可能な大きさをそれぞれもつ多数の凹部が受精卵保持プレートの一主面に配列されている。凹部内の水は、凹部の開口から凹部内に流入した水は受精卵保持プレートの底部の貫通孔から外部に排出される。貫通孔は受精卵が通過不能な径をもつ。その結果、水に含まれる受精卵は、凹部に捕捉される。
【００４１】
シャッタプレートは、受精卵保持プレートに隣接して前記受精卵保持プレートに対して平行に配置される。シャッタプレートは、受精卵保持プレートと平行に移動することができる。シャッタプレートを移動させることにより、受精卵保持プレートの凹部は受精卵通過不能に閉鎖される。
【００４２】
この発明によれば、受精卵を保持する凹部の開口がシャッタプレートにより遮蔽されるので、凹部に落ち込んだ受精卵が凹部から再び飛び出るのを防止することができる。このような受精卵の飛び出しは、受精卵保持プレートのハンドリング時にしばしば発生する。更に、凹部がシャッタプレートにより遮蔽されるので、外部から凹部内の受精卵に雑菌が付着するのを減らすことができる。
【００４３】
第１態様において、シャッタプレートは、受精卵保持プレートの各凹部と等しい位置に受精卵が通過可能な受精卵通過孔をもつ。これにより、シャッタプレートを僅かに動かすことにより、シャッタプレートは凹部を閉鎖することができる。
【００４４】
第２態様において、受精卵通過孔の径は、シャッタプレートの移動方向において互いに隣接する２つの受精卵通過孔の間の距離の半分以下である。これにより、受精卵通過孔のピッチの約半分だけシャッタプレートを動かすだけで、凹部を閉鎖することができる。
【００４５】
第３態様において、受精卵保持プレート及びシャッタプレートは、上端が開口する箱形のケース内に収容される。ケースの側壁部は、ケースの底部から離れた位置にて受精卵保持プレートの周縁部を支持する。ケースは、ケースの底部と受精卵保持プレートとの間に形成された排水室の水を外部に排出する排出孔を有する。これにより、既述した第２発明の効果を更に奏することができる。
【００４６】
第４態様において、受精卵に遺伝子を注入するためのニードルを、シャッタプレートの受精卵通過孔を通じて受精卵に挿入するインジェクション手段を有する。すなわち、シャッタプレートの受精卵通過孔は、遺伝子注入のためのニードル挿入孔を兼ねる。これにより、凹部に挿入されたニードルにより受精卵が凹部から凹部の開口へ向けて移動するのが、シャッタプレートにより防止される。これにより、遺伝子注入の成功確率が向上する。
【００４７】
（第２発明及び第３発明の追加説明）
第３発明の特徴は、受精卵保持プレートの凹部の開口を開閉するシャッタプレートをもつ点にある。受精卵としては、たとえばゼブラフィッシュ産生の受精卵を持ちうることができるがそれに限定されるものではなく、マイクロインジェクションによる遺伝子操作可能であり、液体（たとえば水）により流動操作可能な受精卵であればよい。
【００４８】
凹部の開口側から貫通孔を通じて流れる水により、受精卵は受精卵保持プレートの凹部に誘導される。凹部は、インジェクション装置のニードル位置に合わせて二次元配列されている。これにより、採取した受精卵を遺伝子注入までニードル位置に安定に保持することができる。その結果、その後のニードル（微細針）によるマイクロインジェクションを正確に実行することができる。
【００４９】
第２発明の特徴は、受精卵保持プレートを保持するケースを用いる点にある。このケースは、受精卵保持プレートの各凹部の底部から排出される水を集める排水室と、排水室の水を外部に排出する排出孔とを有する。
【００５０】
これにより、受精卵保持プレートの多数の凹部は、良好に受精卵を捕捉することができる。受精卵保持プレートとケースとは一体に形成されても良い。受精卵保持プレートとケースとは、別々に形成されても良い。
【００５１】
受精卵を含む水は、受精卵保持プレートの一主面の全部に流されるべきである。受精卵保持プレートは、水平に配置される代わりに、種々の姿勢をもつことができる。シャッタプレートは、受精卵保持プレート又はケースにスライド可能に保持されることが好ましい。受精卵保持プレート上の水はその自重及び排水室の排水により、凹部及び貫通孔を通じてケースの排水室に落下する。受精卵が落ち込んだ凹部を流れる水流は、受精卵により遮断される。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】実施例１の受精卵採取装置の水槽配列を示す模式平面図である。
【図２】図１の受精卵採取装置のブロック図である。
【図３】図１の排水切り換え部を示す拡大模式断面図である。
【図４】実施例２の受精卵採取装置を示すブロック図である。
【図５】実施例３の受精卵採取装置の水槽構造を示す模式断面図である。
【図６】実施例４の受精卵採取装置の原理を説明する模式斜視図である。
【図７】図６の受精卵整列プレートの凹部近傍を示す部分拡大断面図である。
【図８】図６の受精卵整列プレートをもつ受精卵採取装置の要部を示す模式斜視図である。
【図９】図８の装置の断面図である。
【図１０】実施例５の受精卵採取装置の長手方向断面図である。
【図１１】図１０の受精卵採取装置の幅方向断面図である。
【図１２】図１０の受精卵採取装置の幅方向断面図である。
【図１３】実施例６の受精卵採取装置の模式断面図である。
【図１４】実施例６の受精卵採取装置の受精卵収集前の状態を示す模式断面図である。
【図１５】実施例６の受精卵採取装置の受精卵保持状態を示す模式断面図である。
【図１６】実施例７の受精卵採取装置の一部を示す模式断面図である。
【図１７】図１６に示される回転ディスクの平面図である。
【図１８】図１６に示される回転ディスクの拡大断面図である。
【図１９】実施例８の受精卵採取装置のケースを示す模式断面図である。
【図２０】実施例８の受精卵採取装置のケースを示す模式断面図である。
【発明を実施するための好適な形態】
【００５３】
本発明の受精卵採取装置の好適な実施形態が図面を参照して説明される。実施例１-３は、本発明の第１の特徴をなす光同期式受精卵回収装置を説明する。実施例４-６は、本発明の第２の特徴をなすケース入りの受精卵保持プレート、並びに、第３の特徴をなすシャッタプレート付きの受精卵保持プレートを説明する。なお、実施例１-３で用いた符号と、実施例４-６で用いた符号とは互いに無関係である。
【００５４】
（実施例１）
実施例１の受精卵採取装置を図１-図２を参照して説明する。図１はこの受精卵採取装置の水槽配列を示す模式平面図である。図２は図１に示される受精卵採取装置の模式ブロック図である。
【００５５】
受精卵採取装置は、５列１０行に配列された合計５０個の水槽１を有し、雌雄一対又は二対のゼブラフィッシュが各水槽１にそれぞれ収容されている。水槽列（水槽グループ）１１〜１５が行列状に配列されている。水槽列１１〜１５は、順番に配置された１０個の水槽１により構成されている。合計５個の照明装置２は水槽列１１〜１５を個別に照明する。各照明装置２は水槽列１１〜１５の上方に配置されている。防水型ＬＥＤ装置である各照明装置２は、多数の白色ＬＥＤと少数の紫外線ＬＥＤとにより構成されている。５つの照明装置２は直下の水槽列だけを照明し、他の水槽列を照明しないように光シールド壁（図示せず）により遮蔽されている。
【００５６】
水槽１の上半部は角筒形状をもつ。水槽１の下半部は下向きに尖った円錐もしくは楕円錐形状をもつ。ネット３が水槽１の高さ方向の中間位置に設けられている。ゼブラフィッシュは網（受精卵分離手段）３の上方に収容されている。ネット３は受精卵通過可能かつゼブラフィッシュ通過不能な孔をもつ。
【００５７】
給水管４は、ポンプ４０に加圧された水を各水槽１にそれぞれ供給する。異物回収管路５は各水槽１の底部から水槽内の水を排出する。異物回収管路５は排水切り換え部（切換手段）６を通じて異物回収装置７に排水を送る。異物回収装置７は、流入する排水から異物を回収する。異物回収装置７により清浄化された水は、殺菌された後、ポンプ４０に送られる。異物回収装置７は、異物を濾過するフィルタと、フィルタから出た水を殺菌する紫外線殺菌装置とにより構成されている。
【００５８】
受精卵回収管路８は、排水切り換え部６から分岐して受精卵回収部（受精卵回収手段）９へ排水を送る。受精卵回収部９は受精卵を収集するネットにより構成されている。排水切り換え部６の詳細が図３を参照して説明される。図３は、排水切り換え部（切換手段）６を示す正面図である。排水切り換え部６は、異物回収管路５の途中に配置された分岐ジョイント６１と、異物回収管路開閉用のバルブ６２と、受精卵回収管路開閉用のバルブ６３とにより構成されている。
【００５９】
異物回収管路５の上流部は、分岐ジョイント６１の下端開口に接続されている。異物回収管路５の下流部は、分岐ジョイント６１の一つの上端開口に接続されている。異物回収管路５の下流部はバルブ６２を通じて異物回収装置７に排水を送る。分岐ジョイント６１のもう一つの上端開口は受精卵回収管路８に接続されている。受精卵回収管路８はバルブ６３を通じて受精卵回収部９に受精卵を送る。
【００６０】
バルブ６２及び６３は、シリコンゴムチューブを電気信号により挟んだり、はなしたりすることにより開閉動作を行う電磁ピンチバルブからなる。バルブ６２及び６３は、図１に示すコントローラ（制御手段）１０により制御されて異物回収管路５の下流部及び受精卵回収管路８を開閉する。なお、バルブ６２、６３は通常の電磁開閉バルブでもよい。コントローラ１０は照度制御手段を兼ねる。
【００６１】
（動作）  コントローラ１０により制御されるこの装置の動作が以下に説明される。
（産卵制御）
コントローラ１０は各照明装置２を制御することにより、各水槽列１１〜１５を所定時間ごとに照明する。各水槽列１１〜１５の点灯期間は１２時間とされ、その後の消灯期間も１２時間とされている。
【００６２】
照明装置２に含まれる紫外線ＬＥＤから放射される紫外線は、空気から水槽１の水面に落下する細菌及び水槽の内壁面やネット３の表面に付着する細菌の繁殖を抑止する。紫外線量は、ゼブラフィッシュの産卵行動に悪影響を与えないレベルである。これにより、これらの細菌が受精卵に付着するのを抑止することができる。
【００６３】
５つの照明装置２は、約１時間の時間差をおいて順番に行われる。これにより、受精卵を回収し、整列させ、遺伝子を注入する作業は分散される。大量生産する場合には、たとえば２４列の水槽列が設けられる。これにより、その後の受精卵処理作業は１時間ごとに実施される。
【００６４】
（バルブ切り換え）
ポンプ４０は、異物回収装置７により清浄化された水を、合計５０個の水槽１に常時供給する。すなわち、水は、異物回収管路５を通じて水槽１と異物回収装置７との間を循環する。異物回収装置７に内蔵される公知の濾過装置や紫外線殺菌装置が水の清浄化のために採用されている。
【００６５】
各水槽１で発生する糞や残餌などの異物は、異物回収管路５を通じて異物回収装置７のフィルタにすべて集められる。したがって、異物は水槽１内にほとんど存在しない。ゼブラフィッシュへの給餌は、２４時間に１回、水槽１内の受精卵の回収が完了した直後に行われる。ゼブラフィッシュの排泄行動は、給餌の後に行われることが多いので、受精卵回収時における水槽１内の異物存在確率は最小となる。
【００６６】
コントローラ１０は、水槽列の照明開始と同時に、照明が開始される水槽列のバルブ６２を閉じ、バルブ６３を開く指令を排水切り換え部６に与える。その結果、照明が開始された水槽列の排水は、排水切り換え部６から受精卵回収管路８を通じて受精卵回収部（受精卵回収手段）９に送られる。
【００６７】
受精卵回収部９は受精卵を集めるネットにより構成されている。このネットを通過した排水は異物回収装置７に送られる。受精卵回収部９をなすネットで集められた受精卵は、バルブ付きの管路などにより、遺伝子注入処理装置に送られる。受精卵回収部９において、遺伝子注入用の処理を行うこともできる。
【００６８】
次に、コントローラ１０は、照明開始から所定時間（好適には３０-４０分）遅れて、バルブ６３を閉じ、バルブ６２を開く。その結果、水槽列の排水は異物回収装置７へ送られる。受精卵回収部９に異物が混じること、及び、受精卵や水に細菌が付着することが抑制される。その結果、インジェクションのためのニードルが細菌や異物により汚染することが減るので、受精卵への遺伝子注入を清潔に行うことができる。
【００６９】
受精卵回収管路８は、排水切り換え部６の分岐ジョイント６１から上方へのびている。その結果、異物回収管路５の上流部から分岐ジョイント６１に入った異物が受精卵回収管路８に滞留するのが抑止される。その他、分岐ジョイント６１から異物回収装置７に向かう異物回収装置７の下流部は、分岐ジョイント６１の下方に設けられることができる。異物回収管路５の上流部は分岐ジョイント６１の上方に設けられることができる。この実施例によれば、受精卵回収完了直後に給餌を行うので、受精卵回収開始時における水槽内の異物存在確率が減少する。
【００７０】
（実施例２）
実施例２の受精卵採取装置が図４を参照して説明される。図４はこの受精卵採取装置の模式ブロック図である。この受精卵採取装置は、実施例１のそれと本質的に同じであるため、実施例１と異なる点が説明される。図４の受精卵採取装置は、実施例１と同様に、水槽１、照明装置（図示せず）、受精卵分離のためのネット（図示せず）、給水管４、ポンプ（図示せず）、異物回収管路５、排水切り換え部６、異物回収装置７、受精卵回収管路８及び受精卵回収部９をもつ。
【００７１】
更に、受精卵採取装置は、上記ポンプを通じて受精卵回収部９に清浄殺菌水を供給する回収受精卵給水管路８Ａと、この回収受精卵給水管路８Ａの水量を調節するバルブ６４とを有する。回収受精卵給水管路８Ａは実際には、水槽１に給水する給水管４の延長部分により構成されている。
【００７２】
受精卵回収部９は、上端開口の水槽に収容された受精卵回収用のネット（図示せず）をもつ。受精卵回収部９からオーバーフローした水は、水槽状の異物回収装置７に戻される。すなわち、排水切り換え部６から受精卵回収管路８を通じて受精卵回収部９に流入した受精卵は、受精卵回収部９内のネットで収集される。収集された受精卵は、回収受精卵給水管路８Ａから受精卵回収部９内に常時供給される清浄な殺菌水により洗浄され、更に空気との接触から保護される。受精卵回収部９のネットは、受精卵通過不能な孔をもつので、受精卵より小さい異物はこのネットを通過して異物回収装置７に排出される。
【００７３】
この実施例２では、受精卵回収部９内に収集した受精卵は、常に清浄な殺菌水により洗浄され、保護される。その結果、受精卵の清潔性と受精卵の汚染とが防止される。フィルタが水槽（異物回収装置）７に設置されている。このフィルタを通過した水が図略の紫外線殺菌装置を通じて図略のポンプにより給水管４に戻される。これは実施例１と同じである。
【００７４】
（実施例３）
実施例３の受精卵採取装置が図５を参照して説明される。図５はこの受精卵採取装置の水槽を示す模式縦断面図である。この実施例は、水槽１を除いて既述した実施例１又は２と同じであるため、水槽１の構造及び機能について詳しく説明する。図５に示される水槽１は、実施例１の水槽と本質的に同じ構造をもつ。ただし、図５に示される水槽は、実施例１の受精卵分離用のネット３の代わりに上下２層のネット３１、３２をもつ。
【００７５】
図５に示されるように、上側のネット３１は水槽の中間部から四角錐（逆ピラミッド）の形をもつ。ネット３１は実施例１のネット３と同様に、魚と受精卵とを分離するただし、ネット３１は、単にゼブラフィッシュを含む受精卵より大きな異物の通過も阻止する。好適には、０．７〜１．５ｍｍの大きさの受精卵はネット３１の孔を通過する。受精卵より大きな異物はネット３１を通過することができない。好適には、ネット３１の孔は、たとえば３ｍｍとされる。ネット３１の底部３１Ａは、異物回収管路５Ａを通じて外部の異物回収装置７に直接接続されている。ネット３１により通過を阻止された異物は異物回収管路５Ａを通じて異物回収装置７に排出される。
【００７６】
下側のネット３２も、図５に示すように水槽の中間部から四角錐（逆ピラミッド）の形をもつ。下側のネット３２の多数の孔は、受精卵の通過を阻止する大きさをもつ。好適には、ネット３２の孔（編目）は、０．６ｍｍの大きさをもつ。これにより、受精卵より小さい異物の多くは、ネット３２を通過して水槽１の底部へ流れる。ネット３２の底部３１Ｂは、異物回収管路５を通じて外部の排水切り換え部６に送られる。
【００７７】
逆ピラミッド形状の水槽１の底部は異物回収管路５Ｂを通じて異物回収装置７に接続されている。下側のネット３２を通過した小さい異物を含む排水は、異物回収管路５Ｂを通じて異物回収装置７に排出される。ネット３１、３２は金属製であり、その上端部は、水槽１の上縁部に架けられている。異物回収管路５Ａ、５もネット３１、３２と同じく、水槽１の上縁部を超えて外部に延在している。異物回収管路５Ａ、５の出口開口は、異物回収管路５の入り口開口よりも下方に設けられている。水はサイフォン効果を利用して流れる。
【００７８】
この実施例によれば、上側の粗いネット３１を通過し、下側の細かいネット３２で阻止された受精卵及びそれと同様のサイズの異物のみが、実施例１で説明された排水切り換え部６に送られる。その結果、排水切り換え部６、受精卵回収管路８及び受精卵回収部９の汚染は更に低減される。ネット３１で捕獲された大きな異物及びネット３２を通過した小さい異物は受精卵回収系を経由せず、異物回収装置７に直接送られるので、水槽１内の清浄性も維持される。
【００７９】
（実施例４）
実施例４の受精卵採取装置が図６-図９を参照して説明される。図６はこの実施例の受精卵保持プレートの基本構成を示す模式斜視図である。図７は図６に示される受精卵保持プレートの凹部近傍を図示する部分拡大縦断面図である。
【００８０】
図６に示される受精卵採取装置は、受精卵保持プレート１、散布水槽２、戻し配管系３及び供給管４を有する。散布水槽２は、受精卵保持プレート１の上面に受精卵入りの水を流下させるための水槽である。戻し配管系３は、受精卵保持プレート１から下方に出た水を散布水槽２に戻す。戻し配管系３は、ポンプ（図示せず）を内蔵している。供給管４は、実施例１により回収された受精卵を含む水を散布水槽２に供給する。供給管４は、受精卵を含む水を散布水槽２に供給する。
【００８１】
散布水槽２は、受精卵保持プレート１の幅に略等しい幅をもつ。散布水槽２は下方へ向けて尖った逆台形形状をもつ。散布水槽２の底部は、受精卵保持プレート１の幅に略等しい図略の長孔をもつ。散布水槽２内の受精卵入りの水はこの長孔から受精卵保持プレート１の上面へ落下する。
【００８２】
多数の凹部５が、受精卵保持プレート１の平板部１０の上面に設けられている。凹部５は、散布水槽２の直下から図１の右方向へ向けて行列状に配置されている。受精卵保持プレート１の上面は略水平に保持されているが、水の流れを促進するために傾斜していてもよい。
【００８３】
受精卵保持プレート１に設けられた凹部の形状が、図７を参照して説明される。受精卵保持プレート１は長方形の平板部１０を有している。平板部１０は、上面（一主面）１１と下面（他主面）１２とをもつ。凹部５は、浅底の円筒形状をもつ。凹部５は、受精卵の最大直径（１．５ｍｍ）よりもわずかに大きい直径（好適には約２ｍｍ）をもつ。凹部５は、底面５１をもつ。凹部５は、受精卵の最大直径（１．５ｍｍ）よりもわずかに大きい深さ（好適には１．７ｍｍ程度）をもつ。凹部５の底面５１の近傍において、凹部５の径は下方に向けて狭くなっている。凹部５の上端縁は面取りされている。
【００８４】
凹部５はゼブラフィッシュの受精卵を１個だけ収容することができる。貫通孔６が凹部５の底面５１の中央部に設けられている。貫通孔６の直径は受精卵の最小直径（たとえば０．７ｍｍ）より小さい。好適には、貫通孔６の直径は０．２-０．５ｍｍである。貫通孔６の下部は、末広テーパ状に面取りされている。凹部５及び貫通孔６による受精卵確保自体は公知事項である。
【００８５】
受精卵保持プレート１を含むこの実施例の受精卵採取装置の全体構造が図８-図９を参照して説明される。図８はこの受精卵採取装置の模式斜視図である。図９は図３に示される受精卵採取装置の縦断面図である。受精卵保持プレート１は、行列状の凹部５をもつ平板部１０の３辺から上方へ伸びる側壁部１３を有している。受精卵保持プレート１は、オーバーフロー用障壁１４を有している。オーバーフロー用障壁１４は、側壁部１３よりも低い高さをもつ。凹部５は、オーバーフロー用障壁１４よりも左側に設けられている。
【００８６】
C字状の側壁部１３とオーバーフロー用障壁１４との間の空間は、オーバーフロー用障壁１４を越えてオーバーフローした受精卵入りの水を蓄積する回収凹部（受精卵回収水路）１５を構成している。回収凹部１５の水は、C字状の側壁部１３に設けられた排水孔（図示せず）を通じて再び散布水槽２に戻される。
【００８７】
この実施例の受精卵採取装置は、受精卵保持プレート１を支持するケース７を有する。上端が開口するケース７は、受精卵採取装置の下面の周縁部に密着して締結されている。ケース７は、平坦で長方形の底板部７１と、底板部７１の周縁部から立設された長方形の角枠部７２とからなる。ケース７は、受精卵保持プレート１とほぼ等しい水平断面形状をもつ。ケース７の角枠部７２の上端面は受精卵保持プレート１の周縁部に密着している。
【００８８】
受精卵保持プレート１はケース７に締結されている。これにより、ケース７には底板部７１及び角枠部７２により区画形成された排水室７３が形成される。排液プール７３の上側の開口は受精卵保持プレート１により覆われている。ケース７の角枠部７２は、排水室７３の水を外部に排出する排水孔（図示せず）をもつ。
【００８９】
この実施例の受精卵採取装置は、シャッタプレート８をもつ。シャッタプレート８は、受精卵保持プレート１の上面に沿いつつスライド可能にケース７に保持されている。シャッタプレート８は、受精卵保持プレート１の各凹部５の上端開口を閉鎖することができる。シャッタプレート８は、平板部８１と、平板部８１の前端部に設けられた仕切り壁部８２とをもつ。平板部８１は、受精卵保持プレート１のC字状の側壁部１３間の幅に等しい幅をもつ。
【００９０】
シャッタプレート８の仕切り壁部８２は、C字状の側壁部１３に等しい高さを有する。仕切り壁部８２は、受精卵保持プレート１の側壁部１３とともに受精卵保持プレート１の平板部１０を囲んでいる。これにより、受精卵保持プレート１の平板部１０の上に水を貯めることができる。
【００９１】
図９は、シャッタプレート８が開かれた状態の受精卵採取装置の模式縦断面図である。シャッタプレート８がこの開放状態から右方向にスライドした後、オーバーフロー用障壁１４に達する時、受精卵保持プレートの凹部はシャッタプレート８により遮蔽される。受精卵保持プレート１の側壁部１３は、シャッタプレート８のスライドをガイドする。
【００９２】
シャッタプレート８の平板部８１は、多数のニードル挿入孔８３をもつ。シャッタプレート８が凹部５を遮蔽する閉状態において、各ニードル挿入孔８３は受精卵保持プレート１の各凹部５の直上に位置する。受精卵への遺伝子の注入のために、図略のインジェクション装置のニードルはこのニードル挿入孔８３を通じて凹部５に挿入される。ニードル挿入孔８３は、ニードル挿入を容易とするため上方へ向けて末広状に面取りされている。ニードル挿入孔８３の孔径はたとえばニードル直径の２〜４倍とされている。
【００９３】
この実施例の受精卵採取装置の動作が以下に説明される。まず、ケース７の角枠部７２に設けられ導液孔（図示せず）から排液プール７３に清浄水が導入される。これにより、排液プール７３、受精卵保持プレート１の凹部５及び貫通孔６に残留する空気が上方へ排出される。次に、散布水槽（受精卵供給部）２に受精卵入りの水を流下させる。散布水槽２の水面高さはオーバーフローにより一定に保たれる。
【００９４】
散布水槽２は、オーバーフロー用障壁１４からもっとも離れてオーバーフロー用障壁１４と略平行に延設されている。散布水槽２から落下した受精卵を含む水は、受精卵保持プレート１の上面に溜められる。排液プール７３の水を排出することにより、受精卵保持プレート１の上面上の水は凹部５及び貫通孔６を通じて排液プール７３に落下する。その結果、水に含まれる受精卵は凹部５に押し込まれる。
【００９５】
ほぼすべての凹部５に受精卵が落ち込んだ段階にて、シャッタプレート８がスライドする。シャッタプレート８はすべての凹部５の開口を閉鎖する。これにより、各凹部５内の受精卵は凹部５に確実に保持される。更に、シャッタプレート８のスライドにより、仕切り壁部８２は受精卵保持プレート１上の水をオーバーフロー用障壁１４を越えて回収凹部１５へ押し出す。
【００９６】
その後、シャッタプレート８の上方から公知のインジェクション装置のニードル（図示せず）を垂直に降下させる。各受精卵に遺伝子が注入される。その後、受精卵保持プレートをもつケースは、一定温度で所定時間保持される。
【００９７】
この実施例によれば、受精卵を収容する凹部５の開口をシャッタプレート８により閉鎖するので、凹部５からの受精卵の逸脱が防止される。更に、シャッタプレート８にニードル挿入孔８３を設けているので、シャッタプレート８により閉鎖された凹部５内の受精卵にニードルを挿入することができる。したがって、ニードルによる受精卵の移動を防止することができる。
【００９８】
（実施例５）
実施例５の受精卵採取装置が図１０-図１２を参照して説明される。図１０は受精卵採取装置の長手方向の断面図である。図１１-図１２は、受精卵採取装置の幅方向の断面図である。図１１は受精卵を収集する状態を示す。図７はシャッタプレートが閉鎖された状態を示す。
【００９９】
この受精卵採取装置は、受精卵保持プレート１、ケース７及びシャッタプレート８をもつ。受精卵保持プレート１は、本質的に実施例４の受精卵保持プレートと同じである。長方形の平板からなる受精卵保持プレート１は、多数の凹部と貫通孔とのペアをもつ。受精卵捕捉用の凹部は受精卵保持プレート１の下面１２に行列状に設けられている。貫通孔は、凹部と受精卵保持プレート１の上面１１とを接続している。
【０１００】
シャッタプレート８は、受精卵保持プレート１の下面１２に接しつつ水平方向にスライド自在に配置されている。ただし、このシャッタプレート８はニードル挿入孔をもたない。ケース７は、長方形の底板部７１と、底板部７１の周縁部から立ち上がる長方形の角枠部７２とを有する。台部７４が、底板部７１の右半分に形成されている。シャッタプレート８が台部７４にスライド自在に載置されている。吸液プール７５が底板部７１の左半分に形成されている。
【０１０１】
吸液プール７５は角枠部７２と台部７４とによりその周囲を囲まれている。吸液プール５の上端開口は受精卵保持プレート１により閉鎖されている。ケース７は、受精卵保持プレート１及びシャッタプレート８の上方に排液プール７６を有する。排液プール７６は角枠部７２に囲まれている。給水管７７は、外部の受精卵入り水を貯留する容器（図示せず）から吸液プール７５に受精卵入りの水を供給する。排水管７８は、排液プール７６から外部の異物回収装置に液を排出する。
【０１０２】
（動作）
この装置の受精卵収集動作が図１０及び図１１を参照して説明される。まず、給水管７７が吸液プール７５に受精卵入りの水を供給する。吸液プール７５の水は受精卵保持プレート１の凹部及び貫通孔を通じて排液プール７６に排出される。
【０１０３】
吸液プール７５内の受精卵は、上昇水流により凹部に接近し、凹部に入る。凹部に入った受精卵は、受精卵保持プレート１の各凹部に安定に保持される。下向きに開口する各凹部は受精卵を１個だけ収容する。受精卵保持プレート１及びシャッタプレート８の上の排液プール７６に排出された水は、排出管７８を通じて外部の異物回収装置に送られる。
【０１０４】
次に、この装置の受精卵保持動作を図１０-図１２を参照して説明される。シャッタプレート８のスライドにより、シャッタプレート８は各凹部の開口を閉鎖する。各凹部内の受精卵は凹部内に安定に保持される。受精卵保持プレート１の上面１１に開口する排水用の貫通孔は、インジェクション装置のニードル挿入孔をなす。
【０１０５】
（実施例６）
実施例６の受精卵採取装置が図１３-図１５を参照して説明される。図１３は受精卵収集前の状態を示す断面図である。図１４は受精卵収集中の状態を示す断面図である。図１５は受精卵保持状態を示す断面図である。この受精卵採取装置は、受精卵保持プレート１及びケース７をもつ。受精卵保持プレート１は、本質的に実施例５のそれと同じである。
【０１０６】
受精卵保持プレート１は多数の凹部及びそれと連通する貫通孔を有する。受精卵捕捉用の凹部は受精卵保持プレート１の下面１２に行列状に設けられている。貫通孔は、各凹部と受精卵保持プレート１の上面１１とを接続している。受精卵保持プレート１の側面は、斜設されている。
【０１０７】
ケース７は、底板部７１と、角枠部７２と、角枠リブ７９とをもつ。底板部７１は、受精卵保持プレート１より僅かに大きく形成されている。角枠部７２は底板部７１の周縁部から立設されている。ストッパ用の角枠リブ７９は角枠部７２の上端から受精卵保持プレート１を囲むように水平に突出する。角枠リブ７９は、受精卵保持プレート１がケース７から上方へ離脱するのを阻止している。
【０１０８】
ケース７の角枠部７２の高さは、受精卵保持プレート１の厚さより所定幅だけ大きい。受精卵保持プレート１はケース７内で昇降することができる。複数の給水孔７７Ａがケース７の角枠部７２の底部に形成されている。給水孔７７Ａは、受精卵保持プレート１の下方に受精卵入りの水を供給する。給水孔７７Ａは、外部の受精卵入り水を貯留する容器（図示せず）から受精卵保持プレート１の下方に受精卵入りの水を供給する給水管に連通している。排液プール７６が、受精卵保持プレート１の上部に形成されている。角枠部７２は排液プール７６の側面を形成する。
【０１０９】
（動作）
最初に、受精卵保持プレート１は、ケース７の底板部７１に未着している（図８参照）。次に、受精卵入りの水が給水孔７７Ａから供給される。水は、受精卵保持プレート１の下面１２とケース７の底板部７１との間に供給される。その結果、受精卵保持プレート１は、角枠リブ７９に接触するまで浮き上がる（図１４参照）。受精卵保持プレート１の下方に受精卵入りの水が充満する吸液プール７５が形成される。吸液プール７５の受精卵は、受精卵保持プレート１の凹部に集められる。凹部は受精卵を安定に保持する。受精卵がほぼすべての凹部に収容された段階で、受精卵保持プレート１を降下させる。
【０１１０】
受精卵保持プレート１の降下により、受精卵保持プレート１の下面１２はケース７の底板部７１に密着する（図１５参照）。ケース７の底板部７１は、シャッタプレートを兼ねる。受精卵保持プレート１の凹部内の受精卵は底板部７１により遮蔽される。その後、受精卵保持プレート１の上面１１に開口する貫通孔にインジェクション装置のニードルが挿入される。遺伝子がニードルから受精卵に注入される。その後、弱い微振動がケース７の外側面に与えられる。その結果、インジェクション済みの受精卵は受精卵保持プレート１下に落下する。
【０１１１】
（実施例７）
実施例７の受精卵採取装置が図１６-図１８を参照して説明される。図１６は回転ディスク１００を示す垂直断面図である。
上部排水管５Aは、図４に示される水槽１から受精卵を含む水を落下させる。下部排水管５Bは、上部排水管５Aの直下に配置されている。下部排水管５Bは、上部排水管５Aから落下する水を排水する。
【０１１２】
回転ディスク１００は、上部排水管５A及び下部排水管５Bの間の隙間に配置されている。図１７は、回転ディスク１００の平面図である。回転ディスク１００は軸心Mを中心として回転する。回転ディスク１００は、ケース収容孔１０１と排水孔１０２とをもつ。後述されるケース１０３がケース収容孔１０１に収容されている。排水孔１０２はケース１０３をもたない。ケース１０３の上端は開口している。ケース１０３の底部は網により構成されている。網は受精卵を回収する。
【０１１３】
回転ディスク１００の回転により、ケース収容孔１０１と排水孔１０２とが交互に上部排水管５Aと下部排水管５Bとの間の隙間に配置される。ケース収容孔１０１が上部排水管５Aと下部排水管５Bとの間に配置される時、上部排水管５Aから落下した水は、ケース収容孔１０１に収容されたケース１０３を通じて下部排水管５Bに落下する。ケース収容孔１０１が上部排水管５Aと下部排水管５Bとの間に配置されない時、回転ディスク１００は上部排水管５Aからの水の落下を防止する。排水孔１０２が上部排水管５Aと下部排水管５Bとの間に配置される時、上部排水管５Aから落下した水は、排水孔１０２を通じて下部排水管５Bに落下する。
【０１１４】
水槽を照明する照明装置を点灯すると同時に、ケース収容孔１０１が上部排水管５Aと下部排水管５Bとの間に配置される。ケース１０３は受精卵を回収する。受精卵の回収が終了したら、回転ディスク１００が回転し、排水は遮断される。受精卵回収の直前の所定期間に、排水孔１０２が上部排水管５Aと下部排水管５Bとの間に配置される。水槽内の水は交換され、清浄な水が水槽内に充填される。
【０１１５】
回転ディスク１００のケース収容孔１０１及びケース１０３が図１８に示されている。段差部１０４がケース収容孔１０１の側面に設けられている。ケース１０３は鍔部１０５をもつ。ケース１０３がケース収容孔１０１に収容されるとき、鍔部１０５は段差部１０４に載せられる。
【０１１６】
（実施例８）
実施例８の受精卵採取装置が図１９-図２０を参照して説明される。図１９-図２０は、内部に受精卵保持プレートを有するケース２０１の断面図である。図１９はシャッタプレート２０２を開いた状態を示す。図２０はシャッタプレート２０２を閉じた状態を示す。このケース２０１は、図７に示されるケース７の変形例を示す。このケース２０１は、図７に示されるケース７と異なるシャッタプレート２０２をもつ。シャッタプレート２０２を除くケース２０１及び受精卵保持プレート２０３の構造は図７のケース７及び受精卵保持プレート１と本質的に同じである。従って、ケース２０１及び受精卵保持プレート２０３の説明は省略される。この実施例のシャッタプレート２０２が以下に説明される。
【０１１７】
多数の凹部５が、受精卵保持プレート１の上面に設けられている。凹部５は、浅底の円筒形状をもつ。凹部５は、受精卵の最大直径（１．５ｍｍ）よりもわずかに大きい直径（好適には約２ｍｍ）をもつ。凹部５はゼブラフィッシュの受精卵が１個だけ収容することができる。貫通孔６が凹部５の底面５１の中央部に設けられている。貫通孔６の直径は受精卵の最小直径（たとえば０．７ｍｍ）より小さい。
【０１１８】
ケース２０１は側壁部２０４を有している。角枠形の側壁部２０４は底板部２０５の周縁部に設けられている。受精卵保持プレート２０３の周縁部は、側壁部２０４の高さ方向中間部分に設けられた台座部２０６に載せられている。受精卵保持プレート２０３の下の排水室（排液プール）２０７の水は、外部に排出される。
【０１１９】
シャッタプレート２０２は、受精卵保持プレート２０３の上面に沿いつつスライド可能に載せられている。シャッタプレート２０２は、多数の受精卵通過孔２０８をもつ。受精卵通過孔２０８は、図１９に示されるように、受精卵保持プレート２０３の凹部５と同じ位置に設けられている。受精卵通過孔２０８は凹部５と同じ直径をもつ。受精卵通過孔２０８は受精卵を通過させる。シャッタプレート２０２のスライド方向において、互いに隣接する２つの受精卵通過孔２０８の間のピッチは、受精卵通過孔２０８の２倍以上の長さをもつ。
【０１２０】
シャッタプレート２０２が受精卵通過孔２０８のピッチの約半分だけスライドされる時、シャッタプレート２０２は受精卵保持プレート２０３の凹部５を遮蔽することができる。この実施例によれば、シャッタプレートのスライド距離が少ないので、コンパクトなケース２０１を実現することができる。更に、ケース２０１の側壁部がシャッタプレート２０２の上の水が周辺に拡散するのを防止する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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