(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
人参の種子粕抽出物を有効成分として含有する皮膚外用剤組成物であって、該人参がPanax ginseng C.A. Meyerである、皮膚外用剤組成物。
【請求項２】
人参の花抽出物及び人参の種子油のうちの１つ以上をさらに含む、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項３】
前記人参の花抽出物は、皮膚外用剤組成物の総重量に対して０．００１〜１０重量％の濃度で含有される、請求項２に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項４】
前記人参の種子粕抽出物は、皮膚外用剤組成物の総重量に対して０．００１〜１０重量％の濃度で含有される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項５】
皮膚損傷を抑制して皮膚を保護するために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項６】
酸化または紫外線による皮膚損傷を減少させることによって皮膚を保護するための、請求項５に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項７】
前記皮膚は、頭皮または毛髪である、請求項５に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項８】
皮膚老化を予防または改善するために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項９】
酸化または紫外線による皮膚損傷抑制、コラーゲン生成促進またはマトリックスメタロプロテイナーゼ１（ＭＭＰ−１）の生合成阻害によって皮膚の老化を抑制するための、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１０】
皮膚しわを予防または改善させるために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１１】
コラーゲン生成促進またはマトリックスメタロプロテイナーゼ１（ＭＭＰ−１）の生合成阻害によって皮膚しわを予防または改善させる、請求項１０に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１２】
皮膚弾力を改善させるために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１３】
皮膚美白のために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１４】
メラニン生成抑制または皮膚に沈着された色素の美白化によって皮膚美白を遂行する、請求項１３に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１５】
皮膚保湿のために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１６】
角質形成細胞の分化促進またはトランスグルタミナーゼ発現促進によって皮膚水分を保持する、請求項１５に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１７】
アトピーまたは乾癬を含む皮膚乾燥疾患を予防または改善するために使用される、請求項１５に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１８】
皮膚角質除去のために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項１９】
皮膚の皮脂調節のために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２０】
皮脂の分泌を抑制することによって皮膚の皮脂を調節する、請求項１９に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２１】
炎症の予防または改善、または刺激緩和のために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２２】
前記皮膚は頭皮である、請求項２１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２３】
ニキビを含む皮膚トラブルを予防または改善するために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２４】
前記皮膚は頭皮である、請求項２３に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２５】
皮膚血色を改善するために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２６】
前記皮膚は、頭皮または毛髪である、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２７】
脱毛予防のために使用される、請求項２６に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２８】
抗ふけのために使用される、請求項２６に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項２９】
毛髪の光沢または柔らかさを改善するために使用される、請求項２６に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項３０】
顔またはボディーのボリューム及び弾力を改善するために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項３１】
脂肪細胞の分化促進によって顔またはボディーのボリューム及び弾力を改善する、請求項３０に記載の皮膚外用剤組成物。
【請求項３２】
顔またはボディーラインを改善するために使用される、請求項１に記載の皮膚外用剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、人参の花抽出物の用途と人参の種子抽出物の用途に関する。人参の種子抽出物は、人参の種子油または人参の種子粕抽出物を含む。より詳しくは、本発明は、人参の花抽出物または人参の種子抽出物の皮膚保護用途、抗老化用途、抗しわ用途、皮膚弾力改善用途、美白用途、皮膚保湿用途、アトピーなどの皮膚乾燥疾患の予防及び改善用途、皮脂調節用途、抗炎症用途、ニキビなどの皮膚トラブルの予防または改善用途、角質除去、皮膚血色改善、脱毛予防、抗ふけ、毛髪の光沢及び柔らかさの改善、顔またはボディーのボリュームや弾力増進、顔またはボディーのラインの改善に関する。
【背景技術】
【０００２】
人参（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ． Ｍｅｙｅｒ）は、ウコギ科人参属に属する植物で、韓国、中国、日本等にかけての地域において２、０００年余りの前から使われてきた生薬であり、経験的に疾病を予防し寿命をのばす目的から使われてきた。人参の今まで知られた効能や効果は、中枢神経系に対する作用、抗発癌作用と坑癌活性、免疫機能調節作用、抗糖尿作用、肝機能亢進効能、心血管障害改善及び抗動脈硬化作用、血圧調節作用、更年期障害改善及び骨粗鬆症に及ぼす効果、抗ストレス及び抗疲労作用、抗酸化活性及び老化抑制効能などが知られている。
【０００３】
人参の代表的な生理活性成分であるギンセノシドは、人参の地上及び地下部に一様に分布されている。しかし、人参の根、人参の葉、人参の実など、その部位によってギンセノシドの含量と組成には大きな差がある。特に、人参の花は、人参の根とは異なるギンセノシド成分含量と成分を基に、他の部位とは異なる優れた肝保護効能があることが報告された（Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ、６６；９２２−９２７、２００３．）。一方、人参の種子の場合には、人参を栽培するための手段のみとして使われたため、人参の種子、特に人参の種子に含有された種子油に関する研究は、人参の種子油の脂肪酸組成と植物ステロールの含量分析（Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．５０、７４４−７５０、２００２）に止まる程度である。
【０００４】
最近、天然化粧品に関する消費者の関心が高まりつつあり、且つ漢方素材を活用する多くの化粧品が発売される中で、人参も化粧品の重要な皮膚効能を持つ植物素材として研究されてきている。しかしながら、その大半は人参の根を利用したものである。具体的に、人参の根の抽出物または人参の根のギンセノシド成分と人参の多糖体を活用したものばかりであって、人参の花または人参の種子の成分による皮膚効能に関する研究は全くないといってもいい実情である。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、皮膚に有用な皮膚外用剤を提供することをその目的とする。
【０００６】
本発明の一実施例の目的は、皮膚を保護する組成物を提供することである。
【０００７】
本発明の他の一実施例の目的は、毛髪を保護する組成物を提供することである。
【０００８】
本発明のまた他の一実施例の目的は、老化を予防または改善する組成物を提供することである。
【０００９】
本発明のまた他の一実施例の目的は、しわを予防または改善する組成物を提供することである。
【００１０】
本発明のまた他の一実施例の目的は、皮膚弾力を改善する組成物を提供することである。
【００１１】
本発明のまた他の一実施例の目的は、皮膚美白用組成物を提供することである。
【００１２】
本発明のまた他の一実施例の目的は、皮膚保湿用組成物を提供することである。
【００１３】
本発明のまた他の一実施例の目的は、アトピーなどの皮膚乾燥疾患を予防または改善する組成物を提供することである。
【００１４】
本発明のまた他の一実施例の目的は、皮膚角質を除去する組成物を提供することである。
【００１５】
本発明のまた他の一実施例の目的は、皮膚の皮脂を調節する組成物を提供することである。
【００１６】
本発明のまた他の一実施例の目的は、炎症を予防または緩和する組成物を提供することである。
【００１７】
本発明のまた他の一実施例の目的は、頭皮の炎症を予防または緩和、または刺激を緩和する組成物を提供することである。
【００１８】
本発明のまた他の一実施例の目的は、ニキビなどの皮膚トラブルを予防または改善する組成物を提供することである。
【００１９】
本発明のまた他の一実施例の目的は、頭皮に発生するニキビなどの皮膚トラブルを予防または改善する組成物を提供することである。
【００２０】
本発明のまた他の一実施例の目的は、皮膚の血色を改善する組成物を提供することである。
【００２１】
本発明のまた他の一実施例の目的は、脱毛予防用組成物を提供することである。
【００２２】
本発明のまた他の一実施例の目的は、抗ふけ用組成物を提供することである。
【００２３】
本発明のまた他の一実施例の目的は、毛髪の光沢または柔らかさを改善する組成物を提供することである。
【００２４】
本発明のまた他の一実施例の目的は、顔またはボディーのボリューム及び弾力を改善させる組成物を提供することである。
【００２５】
本発明のまた他の一実施例の目的は、顔またはボディーのラインを改善する組成物を提供することである。
【００２６】
上記目的を達成するために、本発明による皮膚外用剤組成物は、人参の花抽出物または人参の種子抽出物を有効成分として含有する。
【００２７】
本発明の一実施例による皮膚外用剤組成物において、上記人参の種子抽出物は人参の種子油であればよい。上記人参の種子抽出物が人参の種子油の場合、その含量は皮膚外用剤組成物の総重量に対して０．００１ないし１００重量％であることが好ましい。
【００２８】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物において、上記人参の種子抽出物は人参の種子粕抽出物であればよい。上記人参の種子粕抽出物の含量は、皮膚外用剤組成物の総重量に対して０．００１ないし１０重量％であることが好ましい。
【００２９】
本発明の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、皮膚損傷を抑制して皮膚を保護する用途を持つことを特徴とする。ここで皮膚は頭皮または毛髪を含む。すなわち、本明細書では、頭皮または毛髪の損傷を抑制して毛髪を保護する皮膚外用剤組成物が開示される。
【００３０】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、酸化または紫外線による皮膚損傷を抑制する作用によって皮膚を保護することを特徴とする。ここで皮膚は頭皮または毛髪を含む。すなわち、酸化または紫外線による頭皮または毛髪の損傷を抑制することで頭皮または毛髪を保護する皮膚外用剤組成物が開示される。
【００３１】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、皮膚老化を予防または改善する用途を持つことを特徴とする。
【００３２】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、酸化または紫外線による皮膚損傷抑制、コラーゲン生成促進またはマトリックスメタロプロテイナーゼ１（ＭＭＰ−１）の生合成阻害によって皮膚の老化を抑制することを特徴とする。
【００３３】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、皮膚しわを予防または改善させる用途を持つことを特徴とする。
【００３４】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、コラーゲン生成促進またはマトリックスメタロプロテイナーゼ１（ＭＭＰ−１）の生合成阻害によって皮膚しわを予防または改善させることを特徴とする。
【００３５】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、皮膚弾力を改善させる用途を持つことを特徴とする。
【００３６】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、皮膚美白用途を持つことを特徴とする。
【００３７】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、メラニン生成抑制または皮膚に沈着された色素の美白化によって皮膚美白を遂行することを特徴とする。
【００３８】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、皮膚保湿用途を持つことを特徴とする。
【００３９】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、角質形成細胞の分化促進またはトランスグルタミナーゼ発現促進によって皮膚水分を保持することを特徴とする。
【００４０】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、アトピーまたは乾癬を含む皮膚乾燥疾患を予防または改善する用途を持つことを特徴とする。
【００４１】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、角質除去用途を持つことを特徴とする。
【００４２】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、皮膚の皮脂調節用途を持つことを特徴とする。
【００４３】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、皮脂の分泌を抑制することで皮膚の皮脂を調節することを特徴とする。
【００４４】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は炎症の予防または改善、または刺激緩和の用途を持つことを特徴とする。ここで皮膚は頭皮を含む。すなわち、本明細書では、頭皮の炎症を予防または改善し、頭皮への刺激を緩和する用途を持つ皮膚外用剤組成物が開示される。
【００４５】
本発明のまた他の一実施例による皮膚外用剤組成物は、ニキビを含む皮膚トラブルを予防または改善する用途を持つことを特徴とする。ここで皮膚は頭皮を含む。すなわち、本明細書では、頭皮にニキビを含む皮膚トラブルが発生することを予防し、既に発生した皮膚トラブルを改善させる用途を持つ皮膚外用剤組成物が提供される。
【００４６】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、皮膚血色を改善する用途を持つことを特徴とする。
【００４７】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、脱毛予防の用途を持つことを特徴とする。
【００４８】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、抗ふけ用途を持つことを特徴とする。
【００４９】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、毛髪の光沢または柔らかさを増進させる用途を持つことを特徴とする。
【００５０】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、顔またはボディーのボリューム及び弾力を増進させる用途を持つことを特徴とする。
【００５１】
本発明のまた他の一実施例において、皮膚外用剤組成物は、顔またはボディーのラインを改善させる用途を持つことを特徴とする。
【００５２】
本発明では、人参の地上部のうち、人参の根とは差別的成分と組成を有する人参の花抽出物または人参の種子抽出物を有効成分として含有することで、皮膚保護、抗老化、抗しわ、皮膚弾力改善、美白、皮膚保湿、アトピーなどの皮膚乾燥疾患の予防及び改善、角質除去、皮脂調節、抗炎症、ニキビなどの皮膚トラブル予防または改善、皮膚血色改善、脱毛予防、抗ふけ、毛髪の光沢及び柔らかさ改善、顔またはボディーのボリューム及び弾力増進、顔またはボディーのライン改善をする組成物を提供することができる効果がある。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１】図１は、本発明の一実施例による人参の花抽出物の活性酸素生成抑制実験結果を示すグラフである。
【図２】図２は、本発明の一実施例による人参の花抽出物のＤＮＡ酸化的損傷抑制活性を示すグラフである。
【図３】図３は、本発明の一実施例による人参の花抽出物がＩ型プロコラーゲン生成に及ぼす効果を示すグラフである。
【図４】図４は、本発明の一実施例による人参の花抽出物がＭＭＰ−１の発現に及ぼす効果を示すグラフである。
【図５】図５は、本発明の一実施例による人参の花抽出物がメラニン生成に及ぼす効果を示すグラフである。
【図６】図６は、本発明による人参の種子抽出物によるメラニン生成抑制効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
本明細書において「抽出物」とは、天然物からその中の成分を抽出して得られた物質であれば、抽出方法や成分の種類に関わらずその全てを含む。例えば、水や有機溶媒を利用して天然物から溶媒に溶解される成分を抽出して得られたもの、天然物の特定の成分、例えば、油のような特定の成分のみを抽出して得られたものなどを全て含む広義の概念である。
【００５５】
本明細書において「人参の種子油」とは、人参の種子から得られた油のことを意味する。例えば、ヘキサン、エーテル、塩化メチレンなどの有機溶媒を利用して人参の種子から抽出された抽出物であってよい。
【００５６】
本明細書において「人参の種子粕」とは、人参の種子から油を除去して残った残りの部分を意味する。例えば、ヘキサン、エーテル、塩化メチレンなどの有機溶媒を利用して人参の種子から油を抽出して残った残りの部分であってよい。
【００５７】
本明細書において「皮膚」とは、動物の体表を覆う組職を意味し、顔またはボディーなどの体表を覆う組職だけでなく、頭皮と毛髪を含む最も広義の概念である。
【００５８】
本発明の実施例において、上記人参は朝鮮人参（Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ．Ｍｅｙｅｒ）である。
【００５９】
本発明の実施例において、上記人参の花抽出物は、皮膚外用剤組成物の形態に応じて組成物の総重量に対して０．００１〜１０の重量％で混合されていてよいが、必ずしもこれに制限されることではない。
【００６０】
本発明の実施例による人参の花抽出物は、乾燥した人参の花に水、水を含む有機溶媒（エタノール、メタノール、ブタノール、エーテル、酢酸エチル、クロロホルムなど）、または人参の花の１〜１０倍（ｗｔ／ｖ％）の有機溶媒を入れて常温で一日間放置することで調製すればよい。好ましくは、同工程を２回繰り返して抽出液を得る。また、好ましくは、抽出液からクロロフィルを除去した後、そのろ過液を真空濃縮機で濃縮して人参の花抽出物の乾固物を得ることができる。
【００６１】
本発明のまた他の一実施例において、上記人参の種子抽出物は人参の種子油であり、その油は、皮膚外用剤組成物の形態に応じて組成物の総重量に対して０．００１〜１００重量％で混合されていてよい。上記人参の種子油が０．００１重量％未満であると、その効果が微々たるものとなるためである。
【００６２】
本発明のまた他の一実施例において、上記人参の種子油は、乾燥した人参の種子を粉砕した後、その粉砕物の１ないし１０倍（ｗｔ／ｖ％）の有機溶媒（ヘキサン、エーテル、塩化メチレンなど）を入れて常温で一日間放置して抽出することができる。例えば、同工程を３回繰り返して抽出液を得て、抽出液をろ過した後、そのろ過液を真空濃縮機で濃縮して人参の種子油を得ることができる。
【００６３】
本発明の一実施例による皮膚外用剤組成物において、上記人参の種子粕抽出物は、皮膚外用剤組成物の形態に応じて組成物の総重量に対して０．００１〜１０重量％で混合されていてよい。人参の種子粕抽出物が０．００１重量％未満であると、その効果が微々たるものとなるためであり、１０重量％を超えると、含量の増加に比べての効果の増加が大きくないためである。
【００６４】
上記人参の種子粕抽出物は、次のような方法にて調製すればよい。乾燥された人参の種子を粉碎した後、その粉砕物の１〜１０倍（wt/v％）のヘキサンなどの有機溶媒を入れて常温で一日間放置して抽出する。同工程を３回繰り返して人参の種子から油を除去し、油が除去されて残った人参の種子粕に、水、水を含む有機溶媒（エタノール、メタノール、ブタノール、エーテル、酢酸エチル、クロロホルムなど）、または１〜１０倍（ｗｔ／ｖ％）の有機溶媒を入れて常温で一日間放置して抽出することができる。同工程を３回繰り返して抽出液を得て、抽出液をろ過した後、そのろ過液を真空濃縮機で濃縮して人参の種子粕抽出物の乾固物を得ることができる。
【００６５】
人の皮膚は歳をとるにつれて様々な内的、外的要因によって変化を経験する。すなわち、内的には新陳代謝を調節する各種のホルモンの分泌が減少し、免疫細胞の機能と細胞の活性が低下することで生体に必要な免疫タンパク質及び生体構成タンパク質の生合成が低減し、外的にはオゾン層の破壊によって太陽光線のうち地表に到逹する紫外線の含量が増加し且つ環境汚染の深刻化に伴い、自由ラジカル及び活性有害酸素などが増加することで、皮膚の厚さが薄くなり、しわが増加し、弾力が落ちるのみならず、血色も悪くなって皮膚がくすんで見えるようになり、皮膚トラブルが多発し、染みしみやそばかす及び黒いしみも増加するなど、様々な変化を引き起こすようになる。
【００６６】
老化の進行に伴い、皮膚を構成する物質であるコラーゲン、エラスチン、ヒアルロン酸、及び糖蛋白質の含有量及び配列が変わったり減少したりする症状が現れ、自由ラジカル及び活性有害酸素による酸化的ストレスを受けるようになる。また、老化の進行や紫外線によって、皮膚を構成する大半の細胞では、炎症を起こすと知られている前炎症性サイトカインを生成する酵素であるシクロオキシゲナーゼ−２（Ｃｏｘ−２）の生合成が増加し、これら炎症性因子によって皮膚組職を分解する酵素であるマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）の生合成が増加し、誘導性酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）による一酸化窒素（ＮＯ）の生成が増加することと知られている。すなわち、自然的に進行する内因性老化による細胞活性の減少及び微細炎症によって基質物質の生合成が減少し、様々な有害環境によるストレスの増加や太陽光線による活性酸素種の増加といった外的要因によって分解及び変性が加速化して皮膚基質が破壊されて薄くなりながら、皮膚老化の諸症状が現われるようになる。
【００６７】
本明細書に開示された皮膚外用剤組成物は、活性酸素の生成を抑制し且つ活性酸素によって誘発された酸化的損傷を抑制する効能のある人参の花抽出物または人参の種子抽出物を有効成分として含有することで、活性酸素または紫外線などによる細胞の損傷を予防することができ、この結果、皮膚を保護することができる。また、活性酸素または紫外線による老化の進行を抑制することができる。さらに、人参の花抽出物及び人参の種子抽出物は、ＣＯＸ−２の生合成を抑制することで炎症を予防または改善させることができ、この結果、皮膚トラブルを緩和させることができる。ここで皮膚とは頭皮を含む。すなわち、本明細書に開示された人参の花抽出物または人参の種子抽出物は、頭皮または毛髪で発生する活性酸素または紫外線などによる細胞の損傷を予防し、頭皮の炎症を予防または改善させ、パーマや毛染めなどによる頭皮の刺激を緩和させる用途として使用されていてよい。また、本明細書に開示された人参の花抽出物または人参の種子抽出物は、皮膚のしわを予防または改善させる用途としても使用されていてよい。
【００６８】
人の肌色を決めるには様々な要因が関与するが、その中でもメラニン色素を作るメラノサイトの活動性、血管の分布、皮膚の厚さ及びカロチノイド、ビリルビンなどの人体内外の色素含有の有無などの要因が重要である。
【００６９】
その中でも特に重要な要因は、人体内のメラノサイトにおいてチロシナーゼなどの多くの酵素が作用して生成されるメラニンという黒色色素である。このメラニン色素の形成には、遺伝的要因、ホルモン分泌、ストレスなどに関連した生理的要因や紫外線の照射などのような環境的要因などが影響を及ぼす。
【００７０】
ヒト皮膚のメラニン細胞において生成されるメラニン色素は、黒い色素とタンパク質との複合体形態を有するフェノール系高分子物質であって、太陽から照射される紫外線を遮断して真皮の下の皮膚機関を保護するとともに、皮膚生体内にできた自由ラジカルなどを捕捉するなど、皮膚内タンパク質と遺伝子を保護する有用な役割を司る。
【００７１】
このように皮膚内外のストレス的刺激によってできたメラニンは、ストレスが消えても皮膚角質化によって外部に排出される前までは消えない安定した物質である。しかし、メラニンが必要以上に多くできると、しみやそばかす、斑点などのような色素沈着症を誘発し、美容上よくない結果をもたらすようになる。
【００７２】
本明細書に開示された人参の花抽出物または人参の種子抽出物は、メラニンの生成を抑制することで皮膚を美白させることができる。この結果、人参の花抽出物または人参の種子抽出物を有効成分として含有する、本明細書に開示された皮膚外用剤組成物は、皮膚美白の用途として使用されていてよい。
【００７３】
皮膚において最外郭に位置した表皮の最も重要な機能は、外部からの様々な刺激（化学物質、大気汚染物質、乾燥した環境、紫外線などの物理、化学的刺激因子）に対する防御や皮膚からの体内水分の過度な発散を防ぐ保護機能であり、このような保護機能は、角質形成細胞から構成された角質層が正常に形成されてはじめて発揮され得る。表皮においても最も外側に存在する角質層は、角質形成細胞から形成され、分化が完結した角質細胞とそれを覆う脂質層とで構成されている。角質細胞は、表皮最下層において持続的に増殖する基底細胞が段階的に形態や機能上の変化を経て、皮膚表面まで上がってきた特徴的な細胞であり、所定の期間が経過すると古い角質細胞は皮膚から脱落し、新しい角質細胞がその機能を担うようになるが、このような繰り返しの一連の変化過程を「表皮細胞の分化」または「角化」と呼ぶ。角化過程の際に角質形成細胞が天然保湿因子（ＮＭＦ）と細胞間脂肪質（セラミド、コレステロール、脂肪酸）を生成しながら角質層を形成して、該角質層が堅固さと柔軟性をもつことで皮膚障壁としての機能を果たせるようになる。
【００７４】
しかしながら、このような角質層は、過度な洗顔や、お風呂などの生活習慣的要素や、乾燥した大気、汚染物質などの環境的な要因、そしてアトピー性皮膚や老人性皮膚のような内因性疾患などによってその機能が損失され易く、実際のところ、現代に入ってさらに増えた多くの要因によって、最近、乾燥皮膚症状及びこれによる諸障害を訴える人が増えつつある。このため、適切な皮膚水分を保持するために外部から水分を供給したり、体内からの水分損失を防止するための研究が数多く進められてきており、実際に、保湿能のある数多くの保湿剤が開発され、主に化粧品分野において多用されている。
【００７５】
しかし、生活環境においてヒトに対する危害要因がますます増加してきており、また老齢人口の急増に伴い、角質層のターンオーバー速度が遅くなり、角質形成細胞の脂質合成能力が低下し、または表皮における正常な細胞の分裂、成熟及び分化が円滑に行われないことで、角質層の保湿因子や脂質の量が減少して正常な角質層の機能を保つことができない状態、すなわち、皮膚障壁機能が瓦解された状態の皮膚を持っている人が増加しつつある。
【００７６】
このような異常な表皮細胞の分裂、分化によって皮膚は皮膚乾燥症、アトピー、乾癬などの様々な皮膚疾患を誘発するようになり、かかる諸疾患は、保湿機能のみを有する通常の保湿剤だけではその症状を若干緩和させることはできるものの、根本的な治癒を期待することは難しい実情である。
【００７７】
本明細書に開示された人参の花抽出物または人参の種子抽出物は、角質形成細胞の分化を促進することで、古い角質細胞の脱落と新しい角質細胞の生成過程である「表皮細胞の分化」または「角化」過程を助け、この結果、角質を効果的に除去することができる効能を持つ。本明細書に開示された皮膚外用剤組成物は、上記のように優れた角質除去効能を持つ人参の花抽出物または人参の種子抽出物を有効成分として含有することで、角質除去用組成物として有効に使用することができる。
【００７８】
また、本明細書に開示された人参の花抽出物または人参の種子抽出物は、角質層のターンオーバー速度を正常範囲で保持することで角質層の保湿因子と脂質の量を正常に保持できるようにする。また、トランスグルタミナーゼ発現を促進する。この結果、皮膚の保湿を可能にする。
【００７９】
また、本明細書に開示された人参の花抽出物または人参の種子抽出物は、角質形成細胞の分化を促進し且つ皮膚水分を保持することで皮膚障壁機能を強化させることができ、この結果、アトピーや乾癬のような皮膚乾燥疾患を予防または治療することができる。
【００８０】
一般的に頭皮及び顔を含む皮膚における皮脂は、皮膚の保湿保持や微生物の侵入を防ぐ役割を司るが、皮脂か過剰分泌すると脱毛が促進し、ニキビが悪化し、ニキビによる毛穴の拡大が促進し、脂漏性皮膚炎が発生するなどの様々な疾患が誘発される。
【００８１】
このような皮脂の過分泌は様々な原因によって発生するが、その中でも最も重要なことは皮脂腺の活性において皮脂分泌を促進するのに関与するホルモンの一つであるジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）の量によって皮脂腺細胞が活性化して皮脂が過分泌する。すなわち、脱毛においては細胞内においてテストステロン（Ｔ）が５−α−レダクターゼタイプ２によって男性ホルモンの一つであるジヒドロテストステロンに転換されるとともに、細胞質内にある受容体タンパク質と結合して核内に入って脱毛を誘発するが、皮膚や皮脂腺ではテストステロンが５−α−レダクターゼタイプ１によってジヒドロテストステロンに転換され、皮脂腺細胞が活性化して分化が促進されることで皮脂腺内の皮脂を過分泌してニキビを誘発する。
【００８２】
単純な皮脂の過分泌の他、皮膚に発生するトラブルであるニキビ、脱毛などは、皮膚の微細な炎症反応によってさらに悪化するようになる。ニキビの発生原因をみると、過度な皮脂か毛嚢に蓄積されることでニキビ菌の活動が活性化し、炎症が誘発されるという段階を持っている。
【００８３】
本明細書に開示された人参の花抽出物または人参の種子抽出物は、皮脂分泌を抑制することで、皮脂の過分泌によるニキビ、毛穴拡大、脂漏性皮膚炎などを予防または改善させることができる。
【００８４】
本明細書に開示された皮膚外用剤組成物は、脂肪細胞の分化を促進することで顔とボディーのボリューム及び弾力を増進させることができる。顔とボディーのうちボリュームと弾力の増進が求められる部位に、本明細書に開示された皮膚外用剤組成物を塗布すると、ボリュームと弾力が増進する。ボリュームと弾力の増進が求められる部位は、老化によって陥没した部位であってよい。例えば、老化によって陥没した頬の肉などが挙げられる。陥没した頬に、本明細書に開示された皮膚外用剤組成物を塗布すると、脂肪細胞分化を促進することでボリュームを増進させることができる。また、ボリュームと弾力の増進が求められる部位の他の例として、胸と臀部が挙げられる。胸と臀部に本明細書に開示された皮膚外用剤組成物を塗布すると、胸と臀部が弾力があり豊満になるという効果が得られる。
【００８５】
また、本明細書に開示された皮膚外用剤組成物は、顔とボディーのラインを改善することができる。有効成分として含有された人参の花抽出物または人参の種子抽出物が脂肪細胞の分化を促進することで顔とボディーのボリューム及び弾力を増進させ、コラーゲンの生合成を促進し、且つコラーゲンの分解を抑制することで、老化などの原因によって損傷された顔とボディーのラインを改善させることができる。
【００８６】
本発明による化粧品の剤形は、化粧品学または皮膚科学的に許容可能な媒質または基材を含有する。これは、局所適用に適合したすべての剤形で、例えば、溶液、ゲル、固体、ペースト無水生成物、水相に油相を分散させて得たエマルジョン、懸濁液、マイクロエマルジョン、マイクロカプセル、微細顆粒球または、イオン型（リポソーム）及び非イオン型の小嚢分散剤の形態として、またはクリーム、スキン、ローション、パウダー、軟膏、スプレーまたはコンシールスティックの形態で提供されていてよい。これら組成物は、当該分野の通常的な方法によって調製されていてよい。また、本発明による組成物は、泡沫の形態でまたは圧縮された推進剤をさらに含有したエアロゾル組成物の形態で使用されていてもよい。
【００８７】
本発明の化粧品は、脂肪物質、有機溶媒、溶解剤、濃縮剤、ゲル化剤、軟化剤、抗酸化剤、懸濁化剤、安定化剤、発砲剤、芳香剤、界面活性剤、水、イオン型または非イオン型乳化剤、充填剤、金属イオン封鎖剤、キレート化剤、保存剤、ビタミン、遮断剤、湿潤化剤、必須油、染料、顔料、親水性または親油性活性剤、脂質小嚢または化粧品に通常的に使用される任意の他の成分のような化粧品学または皮膚科学分野において通常的に使用される補助剤を含有していてよい。上記補助剤は、化粧品学または皮膚科学分野において一般的に使用される量で導入される。
【００８８】
本発明の人参の花抽出物または人参の種子抽出物を含む皮膚外用剤は、その剤形において特に限定されることではなく、例えば、柔軟化粧水、収斂化粧水、栄養化粧水、栄養クリーム、マッサージクリーム、エッセンス、アイクリーム、アイエッセンス、クレンジングクリーム、クレンジングフォーム、クレンジングウォーター、パック、パウダー、ボディーローション、ボディークリーム、ボディーオイル及びボディーエッセンスなどの化粧料にて剤形化されていてよい。
【００８９】
本発明による皮膚外用剤組成物は、薬剤学的組成物であってよい。上記薬剤学的組成物は、防腐剤、安定化剤、水和剤または乳化促進剤、浸透圧の調節のための塩及び／または緩衝剤などの薬剤学的補助剤及びその他、治療的に有用な物質をさらに含有していてよい。上記薬剤学的組成物は、ローション、クリーム、軟膏、またはゲルなどに剤形化されていてよい。
【００９０】
上記薬剤学的組成物は、経皮投与されることが好ましい。
【００９１】
上記薬剤学的組成物の有効成分である人参の花抽出物または人参の種子抽出物の投与量は、治療を受ける対象の年齢、性別、体重と、治療する特定の疾患または病理状態、疾患または病理状態の深刻度、投与経路、及び処方者の判断によって変わり得る。このような因子に基づいた投与量の決定は当業者の水準内にある。一般的に投与量は、０．０００１ｍｇ／ｋｇ/日ないし略２０００ｇ／ｋｇ／日の範囲である。
【００９２】
以下、実施例及び実験例を挙げて本発明の構成及び効果をより具体的に説明する。なお、これら実験例及び実施例は本発明に関する理解を助けるための例示の目的として提供されたものに過ぎず、本発明の範疇及び範囲が下記実施例によって制限されるものではない。
【実施例】
【００９３】
［実施例１］人参の花抽出物の調製
乾燥した人参の花１ｋｇに７０％（ｖ／ｖ）エタノール１０Ｌを入れ、常温で一日間放置して抽出した。同工程を２回繰り返して抽出液を得て、得られた抽出液をろ過した後、そのろ過液を真空濃縮機で２Ｌに濃縮した。しかる後、同量のエーテルを添加してろ過液からエーテル層を除去することでクロロフィルを除去した。同工程を３回繰り返した後、残った抽出液を真空濃縮機で濃縮して乾固物１５０ｇを得た。
【００９４】
［実施例２］人参の種子油の調製
乾燥した人参の種子１ｋｇを粉砕した後、ヘキサン１０Ｌを入れ、常温で一日間放置して抽出した。同工程を３回繰り返して抽出液を得て、抽出液をろ過した後、そのろ過液を真空濃縮機で濃縮して人参の種子油１２０ｇを得た。このようにして得た抽出物油に水酸化ナトリウムを添加して遊離脂肪酸を除去し、蒸留水で３回水洗した後、カーボンを使用して脱色させてから、１００℃の真空状態で不活性ガスにて異臭成分を除去して人参の種子油１００ｇを得た。
【００９５】
［実施例３］人参の種子粕抽出物の調製
乾燥した人参の種子１ｋｇを粉砕した後、ヘキサン１０Ｌを入れ、常温で一日間放置して抽出した。同工程を３回繰り返して人参の種子から油を除去し、油が除去されて残った人参の種子粕に水１０Ｌを入れ、常温で一日間放置して抽出した。同工程を３回繰り返して抽出液を得て、抽出液をろ過した後、そのろ過液を真空濃縮機で濃縮して乾固物１００ｇを得た。
【００９６】
［試験例１］活性酸素種生成抑制
紫外線（ＵＶ）照射によって細胞から発生する活性酸素種（ＲＯＳ）を除去する能力を比較する実験を通じて、人参の花抽出物と人参の種子抽出物の抗酸化効果を調査した。
人参の花抽出物の陽性対照群として一般に抗酸化効果を比較するのに使用されるビタミンＣ（Ｓｉｇｍａ Ｃｏ．社製）を使用した。また試験物質を処理していない群を対照群として使用した。ヒトＨａＣａＴ角質形成細胞断層培養系（Ｐ Ｂｏｕｋａｍｐ、Ｇｅｒｍａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ．Ｇｅｒｍａｎｙ）を紫外線（ＵＶＢ ３０ｍＪ／ｃｍ2）で処理した後、実施例１に従って調製された抽出物１０ｐｐｍ、５０ｐｐｍ、１００ｐｐｍでそれぞれ処理した。しかる後、ジクロロジヒドロフルオロセイン・ジアセテート（ＤＣＦＨ−ＤＡ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｉｎｃ）を蛍光プレートリーダで測定した。紫外線で処理していない対照群を１００とし、これに対する割合でＲＯＳ生成の割合を計算した。その結果を表１と図１に示した。
【００９７】
【表１】
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【００９８】
人参の種子抽出物の陽性対照群として一般に抗酸化効果を比較するのに使用されるトロロックス（ｔｒｏｌｏｘ）（Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｏ．社製）を使用した。また試験物質を処理していない群を対照群として使用した。ヒトＨａＣａＴ角質形成細胞断層培養系（Ｐ Ｂｏｕｋａｍｐ、Ｇｅｒｍａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ．Ｇｅｒｍａｎｙ）を紫外線（ＵＶＢ ３０ｍＪ／ｃｍ2）で処理した後、実施例２に従って調製された人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物で下表２のようにそれぞれ処理した。しかる後、ＤＣＦＨ−ＤＡ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｉｎｃ）を蛍光プレートリーダで測定した。紫外線で処理した対照群に対する割合でＲＯＳ生成抑制の割合を計算した。その結果を下表２に表した。
【００９９】
【表２】
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【０１００】
上記実施例１に従って調製された人参の花抽出物、実施例２に従って調製された人参の種子油、及び実施例３の人参の種子粕抽出物は、ヒトＨａＣａＴ角質形成細胞断層培養系において対照群に比べてＵＶによって生成された活性酸素を有意に消去する効果を示した。これは、抗酸化物質の活性指標として使用されるビタミンＣまたはトロロックスとほぼ同じ程度の優れた活性である。すなわち、本発明の実施例１に従って調製された人参の花抽出物、実施例２に従って調製された人参の種子油、及び実施例３の人参の種子粕抽出物は、皮膚損傷の原因になる活性酸素を有意に消去することで頭皮と毛髪を含む皮膚を保護し、さらには、しわの生成、弾力の低下、及び色素沈着などを予防する効果を持つことができることを確認した。
【０１０１】
［試験例２］単細胞ゲル電気泳動（ＳＣＧＥ；コメットアッセイ）によるＤＮＡ酸化的損傷に対する阻害活性の評価
ヒトの正常線維芽細胞（自体一次培養）を２４時間培養した後、実施例１の人参の花抽出物、実施例２に従って調製された人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物とビタミンＥをそれぞれ濃度別に処理し、１２時間後に陽性対照群であるＨ2Ｏ2（最終濃度１０−３Ｍ）を処理した後、電気泳動法にて染色した結果を蛍光燎微鏡で観察した。このとき、イメージアナライザーであるＫＯＭＥＴ ３．１（Ｋｉｎｅｔｉｃ Ｉｍａｇｉｎｇ、Ｅｎｇｌａｎｄ）を使用して２５個の各細胞においてＤＮＡ切断の結果から示されたテール（ｔａｉｌ）の長さ（μｍ）を分析し、その結果を下表３及び図２に示した。
【０１０２】
【表３】
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【０１０３】
上記表３の結果において、細胞ゲル電気泳動による実施例１に従って調製された人参の花抽出物と、実施例２の人参の種子油、実施例３の人参の種子粕抽出物は、有意ある酸化的ＤＮＡ損傷抑制活性を示し、これにより、本発明による人参の花抽出物または人参の種子抽出物がヒドロキシルラジカル（・ＯＨ）によるＤＮＡの単鎖切断を抑制するＤＮＡ酸化的損傷抑制剤として作用することを確認することができた。これは、頭皮または毛髪を含む皮膚の細胞の遺伝子を保護する重要な防御効果である。
【０１０４】
［試験例３］Ｉ型プロコラーゲン生成分析（Ｉ型プロコラーゲンアッセイ）
ヒト線維芽細胞を１０5個の濃度で１２穴平板培養器にて培養した後、実施例１の人参の花抽出物１ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５０ｐｐｍを含む培地、または実施例２の人参の種子油、または実施例３の人参の種子粕抽出物１ｐｐｍ、１０ｐｐｍを含む培地と表４のように交換した。培養後三日目に細胞を収穫し、ＥＬＩＳＡ方法を用いて生成されたＩ型プロコラーゲンの量を定量した。陽性対照群としてＴＧＦ−β（ヒト形質転換因子−β１、Ｒｏｃｈｅ Ｃｏ．）を使用した。その結果は、人参の花抽出物と人参の種子抽出物を含んでいない対照群を０にし、陽性対照群を１００にして測定した値との比較値として算出した。これを表４と図３に示した。
【０１０５】
【表４】
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【０１０６】
ヒト正常線維芽細胞断層培養系における、実施例１の人参の花抽出物、および実施例２の人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物は、対照群に比べてＩ型プロコラーゲン生成を明らかに促進させる効果を示した。すなわち、本発明による人参の花抽出物または人参の種子抽出物を含有する皮膚外用剤組成物は、コラーゲン生成を促進することでヒト皮膚の老化によって発生するコラーゲン減少現象を緩和することができる。
【０１０７】
［試験例４］ＭＭＰ−１発現抑制分析
ヒト線維芽細胞を１０5個の濃度で１２穴平板培養器にて培養してから紫外線Ｂを４０ｍＪ／ｃｍ2で照射した後、実施例１の人参の花抽出物１ｐｐｍ、１０ｐｐｍ及び５０ｐｐｍを含む培地と交換した。培養後二日目に細胞を収穫してＥＬＩＳＡ方法を用いて生成されたマトリックスメタロプロテイナーゼ１（ＭＭＰ−１）の量を定量した。その結果は、試験物質を含まない紫外線を照射していない対照群を１００にして測定した値との比較値として算出し、陽性対照群は、レチノイン酸（ＲＡ、Ｓｉｇｍａ．Ｃｏ．）を使用した。これを表５及び図４に示した。
【０１０８】
【表５】
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【０１０９】
ヒト正常線維芽細胞断層培養系における、本発明による実施例１の人参の花抽出物は、ＵＶＢ ４０ｍＪ／ｃｍ2によって誘導されるＭＭＰ−１の発現を有意に抑制した。したがって、本発明による実施例１の人参の花抽出物は、内的老化または外的環境要因によって発生する皮膚組職分解酵素であるＭＭＰ−１の生合成を阻害することで皮膚内コラーゲンの減少を抑制し、しわを改善することができることが分かる。
【０１１０】
［試験例５］ヒト皮膚しわの改善効果
３０〜５０歳の顔面しわのある試験対象者１２０人に対し、下表６に表した組成を有する実施例１の人参の花抽出物を含有する栄養クリーム（実施例４）及び実施例２の人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物を含有する栄養クリーム（実施例５）、人参の花抽出物と人参の種子抽出物を含有していないことを除いては、上記実施例４、５と同じ組成物（比較例１）の栄養クリームを調製した後、これらの皮膚しわ改善効果を比較評価した（単位：重量％）。
【０１１１】
【表６】
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【０１１２】
被験者らは、それぞれ顔面の左部には実施例４または５を、右部には比較例１を３ヶ月間使用した。クリーム使用以前の顔面の両方部の皮膚状態を測定しておいた後、クリーム使用後３ヶ月後に同一部位を再測定して皮膚しわの変化を測定した。２４℃、相対湿度４０％の恒温・恒湿室で目尻部位のしわをレプルリカで写し取ってビジオメーター装置（Ｃ＋Ｋ社製）で皮膚しわを測定した。皮膚しわの変化量は次式１で計算した。
【０１１３】
【数１】
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【０１１４】
上記式１中、「Ｔｄｉ」はＤ９０での測定部位の値であり、「Ｔｄｏ」はＤ０での測定部位の値である。
【０１１５】
上記式１で結果を計算した結果、比較例１を使用した部位の皮膚しわは、６．１±７％（平均±標準偏差）の減少値を示すのに対し、実施例４を使用した部位の皮膚しわは、３５±８％、実施例５を使用した部位の皮膚しわは、３２±５％の減少値を示し、優れた皮膚しわ改善効果を示した。
【０１１６】
［試験例６］ヒトの皮膚弾力改善効果
上記表６の組成にて調製した実施例４、５及び比較例１の皮膚弾力改善効果を測定した。３０歳以上の女性６０人を対象に３つのグループに分けて、各組に上記実施例４または５及び比較例１の栄養クリームを毎日２回ずつ１２週間顔面に塗布した後、皮膚弾力測定器（Ｃｕｔｏｍｅｔｅｒ ＳＥＭ ５７５、Ｃ＋Ｋ Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ Ｃｏ．社製、Ｇｅｒｍａｎｙ）を利用して皮膚弾力を測定した。その結果を計算した結果、比較例１を使用した部位の弾力効果は、０．２１±０．１４（平均±標準偏差）を示したのに対し、実施例４を使用した部位の弾力効果は、０．３０±０．１０、実施例５を使用した部位の弾力効果は、０．２９±０．０８を示し、優れた皮膚弾力改善効果を示した。上記結果値は、皮膚弾力測定器の皮膚粘弾性（ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃｉｔｙ）の性質のことを意味する。
【０１１７】
上記結果から、実施例１の人参の花抽出物が含有された実施例４の栄養クリームを使用した場合、１４０％程度の皮膚弾力増進効果を示すことが分かる。
【０１１８】
［試験例７］鼠の色素細胞を利用したメラニン生成抑制の分析
実施例１の人参の花抽出物及び実施例２の人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物のメラニン生成抑制効果を調べるために鼠の色素細胞を利用した。
【０１１９】
先ず、Ｃ５７ＢＬ／６マウス来由の鼠色素細胞（Ｍｅｌ−Ａｂ細胞）（Ｄｏｏｌｅｙ、Ｔ．Ｐ．ｅｔ ａｌ、Ｓｋｉｎ ｐｈａｒｍａｃｏｌ、７、ｐｐ １８８−２００）をダルベッコ改変イーグル（ＤＭＥＭ）に１０％ウシ胎児血清、１００ｎＭ ２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート及び１ｎＭコレラ毒素を添加した培地で３７℃、５％ＣＯ2の条件下に培養した。培養したＭｅｌ−Ａｂ細胞を０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡで分離し、２４−ウェルプレートに１０5細胞／ウェルの濃度で細胞を培養した後、二日目から三日連続でそれぞれ１０ｐｐｍ、５０ｐｐｍ及び１００ｐｐｍの人参の花抽出物（実施例１）、人参の種子油（実施例２）と人参の種子粕抽出物（実施例３）を加えて培養した。このとき、アルブチン（Ｓｉｇｍａ Ｃｏ．社製）は、陽性対照群として使用した。次いで、培養液を除去し、ＰＢＳで洗浄した後、１Ｎ水酸化ナトリウムで細胞を溶解し、４００ｎｍで吸光度を測定した後、次式２によってメラニン生成抑制率を計算した。その結果を下表７、図５及び図６に示した（Ｄｏｏｌｅｙ法）。
【０１２０】
【数２】
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【０１２１】
【表７】
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【０１２２】
上記表７に表すように、本発明による実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油及び実施例３の人参の種子粕抽出物は、アルブチンとほぼ同じ程度のメラニン生成抑制率を示すことを確認した。このことから、本発明による実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油及び実施例３の人参の種子粕抽出物が、優れた美白効果を示すことを確認することができた。
【０１２３】
［試験例８］ヒト皮膚に対する美白
実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物のヒト皮膚に対する美白効果を調べるために下記のような実験を施した。
【０１２４】
先ず、健康な１２人の男性を対象に被験者の上膊部位に直径１．５ｃｍの穴があいた不透明テープを付着した後、各被験者の最小紅斑量の１．５〜２倍程度の紫外線（ＵＶＢ）を照射して皮膚の黒化を誘導した。
【０１２５】
上記紫外線の照射後、試験物質である実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油、実施例３の人参の種子粕抽出物とヒドロキノンをそれぞれ塗り、１ヶ所は何も塗らずに１０週間状態変化を観察した。１週単位で皮膚の色を色差計 ＣＲ２００２（日本のミノルタ社製）で測定した。
【０１２６】
その後、上記各試験物質の塗布開始時点と塗布完了時点とでの肌色の差（ΔＬ＊）を次式３によって計算し、その結果を下表８に表した。なお、美白効果は、試料塗布部位と対照群部位のΔＬ＊の比較で判定するが、ΔL＊値が２程度であると、沈着した色素の美白化が明らかと判定し、１．５程度以上であると、美白効果があると判定することができる。
【０１２７】
【数３】
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【０１２８】
【表８】
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【０１２９】
上記表８に表すように、本発明による実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油及び実施例３の人参の種子粕抽出物は、ヒドロキノンとほぼ同じ程度の肌色の明度を示すことを確認した。これは、上記人参の花抽出物、人参の種子油及び人参の種子粕抽出物が紫外線によって生成された色素沈着を改善し、肌色を明るくするためである。
【０１３０】
［試験例９］ヒト角質形成細胞の分化誘導
角質形成細胞及びヒト皮膚細胞株（ＨａＣａＴ）の分化時に生成される周辺帯（ＣＥ）の量を測定して、本発明による実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油及び実施例３の人参の種子粕抽出物の細胞分化促進効果を調べた。
【０１３１】
１次培養したヒトの角質形成細胞を培養用フラスコに入れて底部に付着させた後、下表９に表した試験物質を濃度別に培養液に添加し、細胞が底面積の７０〜８０％程度育成されるまで５日間培養した。この細胞を収穫してリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄した後、２％ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）と２０ｍＭ濃度のジチオスレイトール（ＤＴＴ）を含有した１０ｍＭ濃度のトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．４）１ｍｌを加えて超音波処理、加熱、遠心分離を施した沈殿物を、再びＰＢＳ １ｍｌに懸濁させ、３４０ｎｍでの吸光度を測定した。これとは別に、上記超音波処理後の溶液の一部を取ってタンパク質の含量を測定し、細胞分化程度の評価の際に基準にした。低カルシウム（０．０３ｍＭ）処理群と高カルシウム（１．２ｍＭ）処理群とをそれぞれ陰性／陽性対照群にし、低カルシウム濃度に試験物質を添加して実施した試験結果を、下表９に表した。
【０１３２】
【表９】
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【０１３３】
上記表９の結果から、実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油及び実施例３の人参の種子粕抽出物は、角質形成細胞において分化を促進することを確認することができた。これは、古い角質細胞の脱落と新しい角質細胞の生成周期のターンオーバー周期を正常化させ、皮膚保湿を強化することができることを意味する。また、人参の花抽出物、人参の種子油及び人参の種子粕抽出物が皮膚角質の除去を促進することができることを示すことである。
【０１３４】
［試験例１０］ヒト角質形成細胞のトランスグルタミナーゼの発現効果
ヒト角質形成細胞を９６穴型細胞培養プレートの各ウェルに５×１０4個を入れて２４時間付着させた。付着させた皮膚細胞株に試験物質を処理した後、二日経過した後、培地を除去し、−２０℃の冷蔵庫に保管した。細胞の凍結−解凍を２回繰り返し、細胞を破壊させた後、−２０℃で保管したアセトン：エタノール（１：１、ｖ／ｖ）を処理し、４℃で３０分間放置して細胞を固定させた。その後、室温で放置して有機溶媒を蒸発させ、ブロッキング（１％ウシ血清アルブミン）、トランスグルタミナーゼ抗体（１次抗体）、ＨＲＰアンチ−マウス抗体（二次抗体）を処理し、発色はｏ−フェニレンジアミン（ＯＰＤ）を添加して行った。発現量は４９０ｎｍで吸光度を測定し、補正は６３０ｎｍでバックグラウンドを測定して行った。低カルシウム（０．０３ｍＭ）処理群と高カルシウム（１．２ｍＭ）処理群とをそれぞれ陰性／陽性対照群にし、低カルシウム濃度に実施例１の人参の花抽出物１ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、１００ｐｐｍを添加して実施した試験結果を、下表１０に表した。
【０１３５】
【表１０】
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【０１３６】
上記表１０の結果において、本発明による実施例１の人参の花抽出物は、対照群に比べて優れた発現を示した。このことから、本発明による実施例１の人参の花抽出物がトランスグルタミナーゼの発現を向上させることが分かった。
【０１３７】
［試験例１１］ヒトでの皮膚保湿力の増加
皮膚乾燥症がある５０〜６０代の成人男女７５人を３つのグループに分け、各組に実施例４、実施例５と比較例１を毎日２回ずつ４週間顔面に塗布した。塗布開始前と、塗布後１週、２週、４週経過した時点、及び塗布を中止して２週経過（総６週経過）した後に、恒温、恒湿条件（２４℃、相対湿度４０％）下にコニオメーターで皮膚水分量を測定し、その結果を、下表１１に表した。試験結果は、試験開始直前に測定したコニオメーターの値を基準にし、一定期間措置した後の測定値の増加分を百分率で表したものである。
【０１３８】
【表１１】
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【０１３９】
コニオメーターは、表皮の電気伝導度値を測定して皮膚に存在する水分量を測定する皮膚水分測定器である。上記表１１に表されるように、実施例１の人参の花抽出物が含有された実施例４、実施例２の人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物が含有された実施例５の物質を塗布した群の方が、比較例１を塗布した対照群に比べて皮膚水分量がより増加した。また、実施例４及び実施例５の栄養クリームの塗布を中止して２週経過後（総６週経過）に皮膚水分を測定した数値が１〜２週経過後の数値とほぼ同じ数値を示しており、実施例４または実施例５を塗布しなくても所定期間にかけて本発明による人参の花抽出物、人参の種子油または人参の種子粕抽出物の塗布による皮膚水分が持続的に保持されることが分かった。
【０１４０】
［試験例１２］皮脂分泌抑制効果
脂性肌緩和効果を測定するために、２０〜４５歳の脂性肌女性３０人の額部分に、そのうち１０人に対しては実施例４（人参の花抽出物含有）を、他の１０人に対しては実施例５（人参の種子油と人参の種子粕抽出物含有）を、また他の１０人に対しては比較例１を朝、夕方の１日２回塗布して使用させた後、１週、２週、３週、及び４週後に皮膚の皮脂分測定器（Ｓｅｂｕｍｅｔｅｒ ＳＭ８１０）を利用して皮膚の皮脂分泌量を測定した。実験は２０℃、相対湿度２０％の条件下に行われ、下表１２にその測定結果を表した。結果は被験者１０人の平均値で示した。脂性肌の場合、測定値が２２０以上であり、正常肌の場合、１００ないし２２０の間である。
【０１４１】
【表１２】
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【０１４２】
上記表１２の結果において、本発明による実施例１の人参の花抽出物を含有する実施例４及び人参の種子抽出物を含有する実施例５の栄養クリームが過度な皮脂分泌を抑制する効果を示し、皮脂調節効果があることを確認することができた。これにより、頭皮を含む皮膚においてできる過度な皮脂によるニキビやトラブルも防止することができる。
【０１４３】
［試験例１３］リポ多糖（ＬＰＳ）誘導されたシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）の生合成抑制効果
ヒト線維芽細胞を１０5個の濃度で１２穴平板培養器にて培養してからＬＰＳ処理を施した後、実施例１の人参の花抽出物を１ｐｐｍ、１０ｐｐｍ及び１００ｐｐｍ含む培地、実施例２の人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物を１ｐｐｍ、５０ｐｐｍ含む培地に入れ替えした。培養後二日目に細胞を収穫してウエスタンプロット方法にて生成されたＣＯＸ−２の量を定量した。対照群を１００にし、濃度計で測定した値との比較値を下表１３に表した。このとき、対照群は実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油及び実施例３の人参の種子粕抽出物を処理せずに培養した未処理群である。
【０１４４】
【表１３】
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【０１４５】
上記表１３の結果から分かるように、本発明による実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油及び実施例３の人参の種子粕抽出物は、炎症反応誘発因子であるＬＰＳで誘導されたＣＯＸ−２の生合成を濃度依存的に減少させて炎症反応を抑制することが分かった。また、これにより、皮膚トラブルを緩和させることができる効能を示した。
【０１４６】
［試験例１４］ニキビ及び皮膚トラブル改善効果
実験への参加者は、平素ニキビを含めた皮膚トラブルのひどい女性１５人であって、恒温・恒湿室でせっけんでの洗顔後３０分間適応させ、ニキビの個数及び炎症が伴われた個数を比較して皮膚トラブルの程度を測定した。
【０１４７】
上記被験者に対して実施例４、実施例５及び比較例１の栄養クリームをそれぞれ４週間使用させた後ニキビ及び皮膚トラブルの程度を比較し、その結果を下表１４に表した。
【０１４８】
【表１４】
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【０１４９】
上記表１４の結果から分かるように、本発明による実施例１の人参の花抽出物を含む実施例４、実施例２の人参の種子油と実施例３の人参の種子粕抽出物を含む実施例５を４週間塗布した結果、既存のニキビ個数の減少及び炎症に伴うトラブルの改善効果が示された。
【０１５０】
［試験例１５］ヒト皮膚（顔）の血色改善効果
本発明の人参の花抽出物を含有する組成物に対し、皮膚での血液循環促進効果を評価するために、レーザードプラー灌流画像（ＬＤＰＩ）を利用して皮膚での血液循環位を測定した。ＬＤＰＩは皮膚での血液循環を測定する機器として広く知られており、現在も使用されている機器であり、皮膚の毛細管に対して血液の速度や量だけでなく小動脈と小静脈での血流まで測定することができる非常に敏感な機器である。
【０１５１】
恒温・恒湿室内でせっけんでの洗顔後３０分間適応させ、ＬＤＰＩと皮膚温度測定器具である赤外（ＩＲ）カメラを利用して初期値を測定した。実験への参加者は、平素手足冷え性のある女性４０人で、ＬＤＰＩで額の下部分の初期血流量を測定し、ＩＲカメラを利用して額、眼の下及び頬の皮膚温度初期値を測定した。
【０１５２】
実施例４と５を１週間被験者に対して使用させた後に血流量と皮膚温度（℃）を初期測定値と比較し、その結果をそれぞれ下表１５に表した。
【０１５３】
【表１５】
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【０１５４】
上記のように、本発明による人参の花抽出物を含有した実施例４及び人参の種子油と人参の種子粕抽出物を含有した実施例５を使用した結果、被験者らの顔から末梢血液循環改善効果によって血色が改善することを確認することができ、これは、究極的に本発明による人参の花抽出物または人参の種子抽出物を含有する場合、皮膚の栄養分を効果的に伝達し、皮膚老化を抑制し且つ遅延させるのに寄与することができることを示唆する。
【０１５５】
［実施例６〜８及び比較例２]
上記実施例１に従い調製された人参の花抽出物、実施例２と３に従い調製された人参の種子油及び人参の種子粕抽出物を含有する組成物を、下表１６の組成どおり混合して調製した。
【０１５６】
【表１６】
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【０１５７】
［試験例１６］脱毛防止効果
初期脱毛現象のある被験者３０人を対象にして脱毛防止効果に関する実験を１６週間施した。上記実施例６、７、８、及び比較例２の組成物を１日１回ずつ１６週間使用させてから１６週が経過した後、髪を洗う際に脱け毛を収集してその本数を数え、その結果を表１７に表した。
【０１５８】
【表１７】
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【０１５９】
上記表１７に表すように、人参の花抽出物、人参の種子油、または人参の種子粕抽出物を含有した組成物を処理した場合、比較例に比べて脱け毛の本数が有意に減少することを確認することができた。
【０１６０】
［試験例１７］ふけ菌抑制効果
上記実施例１（人参の花抽出物）、実施例２（人参の種子油）及び実施例３（人参の種子粕抽出物）がピチロスポルム・オバレ（Ｐｉｔｙｒｏｓｐｏｒｕｍ  ｏｖａｌｅ）（ＡＴＣＣ １２０８７）を抑制する効果があるか否かを調べるために液体培地希釈法を用いて実験を行った。このとき、二重希釈を行ってから、３２℃で２４時間及び４８時間定置培養した後、その懸濁された程度により菌の増殖有無を判断し、菌の増殖がない最小濃度を最小阻害濃度（ＭＩＣ）と決定した。なお、混合液が不透明で菌の増殖有無を判断しにくい場合は、顕微鏡観察を通じて確認した。その結果を下表１８に表した。
【０１６１】
【表１８】
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【０１６２】
上記表１８から、人参の花抽出物、人参の種子油及び人参の種子粕抽出物のＭＩＣの減少程度が優れていることが分かる。したがって、人参の花抽出物、人参の種子油及び人参の種子粕抽出物は、頭垢の治療及び防止に効果的に使用できる。
【０１６３】
［試験例１８］毛髪光沢改善効果
毛髪試料０．１ｇをシャンプー０．１ｇで洗浄してから流れる水にきれいに洗った後、毛髪試料を２５℃、５０％湿度条件下に６時間乾燥させた。しかる後、上記表１６の実施例６、７、８、及び比較例２の組成物をそれぞれ０．１ｇずつ塗布し、次のような方法にてゴニオフォトメーターを使用して光沢を測定した。
【０１６４】
毛髪試料をハロゲンランプが装着されているゴニオフォトメーターで光沢を測定した。上記ゴニオフォトメーターでは、光の入射角は３０度であり、０から９０度までの反射した値を得ることができる。光沢度は次式４で計算した。
【０１６５】
【数４】
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【０１６６】
光沢は、乱反射が少なくて正反射が多いほど良い結果を示しており、その測定結果を下表１９に示した。
【０１６７】
【表１９】
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【０１６８】
上記表１９の結果から、人参の花抽出物または人参の種子抽出物を含有した組成物を処理した場合、比較例に比べて毛髪光沢が有意に改善することを確認することができた。
【０１６９】
［試験例１９］脂肪細胞の分化促進効果
ヒトの骨髄中間葉幹細胞（ｈＢＭ−ＭＳＣｓ）をロンザ社（Ｌｏｎｚａ、Ｉｎｃ．Ｗａｌｋｅｒｓｂｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）から購入し、ロンザ社の指針書によって培養した。脂肪細胞分化は、インドメタシンの代わりにトログリタゾン（ＴＲＯ）を使用して中間葉幹細胞の脂肪細胞分化を誘導したことを除いては、ロンザ社で勧奨する方法にて行った。具体的に、中間葉幹細胞の培養液にインシュリン１ｇ／ｍｌ、デキサメタゾン（ＤＥＸＡ）１Ｍ、イソブチルメチルキサンチン（ＩＢＸ）０．５ｍＭ及びＴＲＯ ２Ｍを入れて培養して、中間葉幹細胞を脂肪細胞に分化させた。実験群の場合、脂肪細胞分化への誘導時に実施例１の人参の花抽出物、実施例２の人参の種子油、実施例３の人参の種子粕抽出物、トログリタゾン、及びグリベンクラミド（Ｓｉｇｍａ−ａｌｄｒｉｃｈ、Ｕ.Ｓ.Ａから購入）をそれぞれ１０Ｍ処理後（十日間二日置きに処理）、各１０Ｍを培地に添加した。中間葉幹細胞の脂肪細胞分化を誘導して十日後、細胞培養液を除去してＰＢＳで細胞を洗浄してから、１０％ホルマリン／ＰＢＳ溶液０．２ｍｌ／ｃｍ2を使用して細胞を１０分間固定させた。固定された細胞を６０％イソプロパノール溶液０．５ｍｌ／ｃｍ2で１回洗浄し、オイルレッドＯ（Ｏｉｌ Ｒｅｄ Ｏ）を６０％イソプロパノールに溶かしてなる染色液を０．２ｍｌ／ｃｍ2で１０分間脂肪細胞内の脂質体を染色した。染色されたオイルレッドＯを１００％イソプロパノール溶液で溶出させた後、５００ｎｍの波長で吸光度を測定した。その結果を下表２０に表した。各データ値は、ＩＤＸ（−）陰性対照群で補正した。
【０１７０】
【表２０】
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【０１７１】
上記表２０から分かるように、人参の花抽出物及び人参の種子抽出物は、脂肪細胞の分化を促進することを確認することができた（Ｐ値＜０．０１）。
【０１７２】
以下、本発明による組成物の剤形例を説明するが、これに限定されるものではない。
【０１７３】
［製剤例１］柔軟化粧水（スキンローション）
【０１７４】
【表２１】
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【０１７５】
［製剤例２］栄養化粧水（ミルクローション）
【０１７６】
【表２２】
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【０１７７】
［製剤例３］マッサージクリーム
【０１７８】
【表２３】
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【０１７９】
［製剤例４］パック
【０１８０】
【表２４】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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