(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（Ｉ）：
【化１】
0005613156.tif 000044
（ここで、
Ａは−Ｃ（Ｒ１）（Ｈ）−又は−Ｎ（Ｒ２）−であり；
Ｒ１は−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４  及び  −Ｎ（Ｒ３）Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され；
Ｒ２は水素、シクロアルキル及び−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され；
Ｒ３及びＲ４は各々独立に水素及びアルキルからなる群から選択される）で表される化合物。
【請求項２】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（Ｉａ）：
【化２】
0005613156.tif 000045
（ここで、
Ｒ１は−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４及び−Ｎ（Ｒ３）Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は各々独立に水素及びアルキルからなる群から選択される）で表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（Ｉｂ）：
【化３】
0005613156.tif 000046
（ここで、
Ｒ２は水素、シクロアルキル及び−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は各々独立に水素及びアルキルからなる群から選択される）で表される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−アミノ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−［（（（ジメチル）アミノ）メチル）カルボニルアミノ］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−（シクロペンチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−［（（ジメチル）アミノ）メチルカルボニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−（シクロペンチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（ＩＩ）：
【化４】
0005613156.tif 000047
（ここで、
Ｂは、直接結合又は−ＣＨ２−であり、
Ｒ６  は、水素、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ及びアルキルからなる群から選択され、但し、式（Ｉ）の化合物は、１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（３−フルオロ−４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンではない）で表される化合物。
【請求項６】
１−（６，９−エタノ−４−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ピリド［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（４−フルオロフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（３−フルオロフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（３−メトキシフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
１−（１，４−エタノ−８−（２−メチルフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンからなる群から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（ＩＩＩ）：
【化５】
0005613156.tif 000048
（ここで、
Ｒ７  は、−Ｎ（Ｒ１２）Ｒ１３及び−Ｎ（Ｒ１２）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１３からなる群から選択され、
Ｒ１２及びＲ１３は各々独立して、水素、アルキル及びシクロアルキルからなる群から選択される）で表される化合物。
【請求項８】
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジエチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジメチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（イソプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（シクロブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（イソブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−ｙｌ）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジイソブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンからなる群から選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジエチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンである、請求項８記載の化合物。
【請求項１０】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（イソプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンである、請求項８記載の化合物。
【請求項１１】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンである、請求項８記載の化合物。
【請求項１２】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（ＩＶ）：
【化６】
0005613156.tif 000049
（ここで、
Ｒ８は、ハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソリル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にシアノ及びアルキルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよい）で表される化合物。
【請求項１３】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（ＩＶａ）：
【化７】
0005613156.tif 000050
（ここで、
Ｒ８は、ハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソリル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にシアノ及びアルキルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよい）で表される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（ＩＶｂ）
【化８】
0005613156.tif 000051
（ここで、
Ｒ８は、ハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソリル及びフェニルからなる群から選択され、それらはシアノ及びアルキルからなる群から選択される置換基で任意に置換れていてもよい）で表される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１５】
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（３−シアノフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；及び
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ５−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンからなる群から選択される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１６】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（Ｖ）：
【化９】
0005613156.tif 000052
（ここで、
Ｒ９は、ハロ、ピリジニル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にハロ及びアルキルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよい）で表される化合物。
【請求項１７】
（３Ｓ）−１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（３Ｓ）−１−（４−フェニル−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（３Ｓ）−１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（３Ｓ）−１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
（３Ｓ）−１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンからなる群から選択される、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（ＶＩ）：
【化１０】
0005613156.tif 000053
（ここで、
Ｒ１０はハロ、ピリジニル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にハロ、シアノ、アルコキシ及びアルキルからなる群から選択される１又は複数の置換基で置換されていてもよい）で表される化合物。
【請求項１９】
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−フェニル−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（３−シアノフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（２−エトキシ−５−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（４−フルオロ−２−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンからなる群から選択される、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、下記式（ＶＩＩ）：
【化１１】
0005613156.tif 000054
（ここで、
Ｒ１１は、以下：
【化１２】
0005613156.tif 000055
からなる群から選択される）で表される化合物。
【請求項２１】
１−（４−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロキナゾリン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニルｌ）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；及び
１−（５，８−エタノ−４−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンからなる群から選択される、請求項２０に記載の化合物。
【請求項２２】
薬学的に許容できる添加剤と、単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいは薬学的に許容できる塩としての請求項１から２１のいずれか一項に記載の化合物の治療有効量を含む医薬組成物。
【請求項２３】
哺乳動物において、Ａｘｌ活性に関連する疾患または状態の治療に使用される組成物であって、単離された立体異性体又はそれらの混合物あるいは薬学的に許容できる塩としての請求項１から２１のいずれか一項に記載の化合物、あるいは請求項２２に記載の医薬組成物を含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ａｘｌとして既知である受容体タンパク質チロシンキナーゼの阻害剤として有用な多環式ヘテロアリール置換トリアゾールおよびその医薬組成物に関する。本発明はまた、Ａｘｌ活性に関連する疾患および状態の治療、特に、血管新生および／または細胞増殖に関連する疾患および状態の治療に該化合物および組成物を使用する方法にも関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトゲノムにおいてこれまでに同定されているタンパク質キナーゼはすべて、約３００ａａの高度に保存された触媒ドメインを共有している。このドメインは、ＡＴＰ結合部位および触媒部位がある二葉構造に折り畳まれている。タンパク質キナーゼ調節の複雑性は、活性化リガンドとの競合、正および負の調節因子の変調、タンパク質の二量化への干渉、ならびに基質またはＡＴＰ結合部位におけるアロステリックまたは競合的阻害を含む多くの潜在的な阻害機構を可能にしている。
【０００３】
Ａｘｌ（ＵＦＯ、ＡＲＫおよびＴｙｒｏ７としても既知、ヌクレオチド受託番号ＮＭ＿０２１９１３およびＮＭ＿００１６９９、タンパク質受託番号ＮＰ＿０６８７１３およびＮＰ＿００１６９０）は、Ｃ末端細胞外リガンド結合ドメインと、触媒ドメインを含有するＮ末端細胞質領域とを含む受容体タンパク質チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）である。Ａｘｌの細胞外ドメインは、免疫グロブリンおよびフィブロネクチンＩＩＩ型反復を並置し、神経細胞接着分子の構造を連想させる独特の構造を有する。Ａｘｌおよびその２つの近縁であるＭｅｒ／ＮｙｋおよびＳｋｙ（Ｔｙｒｏ３／Ｒｓｅ／Ｄｔｋ）は、総称的にＲＴＫのＴｙｒｏ３ファミリーとして既知であり、いずれも同じリガンド、凝固カスケード調節因子のタンパク質Ｓに対して顕著な相同性を有する約７６ｋＤａの分泌タンパク質であるＧａｓ６（成長停止特異的６）と結合し、それによって様々な程度に刺激される。リガンドとの結合に加えて、Ａｘｌ細胞外ドメインは、細胞集合を媒介する同種親和性相互作用を受けることが示されており、Ａｘｌの１つの重要な機能は細胞間接着を媒介することであり得ると示唆している。
【０００４】
Ａｘｌは、内皮細胞（ＥＣ）および血管平滑筋細胞（ＶＳＭＣ）の両方の血管系において、ならびに骨髄細胞系列の細胞において主に発現され、乳房上皮細胞、軟骨細胞、セルトリ細胞およびニューロンでも検出される。血清飢餓、ＴＮＦ−αまたはウイルスタンパク質Ｅ１Ａによって引き起こされるアポトーシスからの保護、ならびに移動および細胞分化を含むいくつかの機能は、細胞培養におけるＡｘｌシグナル伝達が原因であるとされている。しかしながら、Ａｘｌ−／−マウスは顕性発生表現型を呈さず、インビボにおけるＡｘｌの生理学的機能は、文献において明瞭に確立されていない。
【０００５】
血管新生（新たな血管の形成）は、創傷治癒および健康な成人における女性の生殖周期等の機能に限定される。この生理学的過程は、腫瘍によって取り込まれ、それにより、腫瘍成長の糧となり転移を容易にする十分な血液供給を確保するとされている。無秩序な血管新生はまた、多くの他の疾患（例えば、乾癬、関節リウマチ、子宮内膜症、ならびに加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）、未熟児網膜症および糖尿病による失明）の特色であり、多くの場合、状態の進行または病理に寄与する。
【０００６】
Ａｘｌおよび／またはそのリガンドの過剰発現は、乳房、腎、子宮内膜、卵巣、甲状腺、非小細胞肺癌およびブドウ膜黒色腫を含むがこれらに限定されない多種多様な固形腫瘍型において、ならびに骨髄白血病においても報告されている。さらに、これは、ＮＩＨ３Ｔ３および３２Ｄ細胞における形質転換活性を保有する。腫瘍細胞におけるＡｘｌ発現の喪失は、インビボＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植モデルにおける固形ヒト新生物の成長を遮断することが実証されている。まとめると、これらのデータは、Ａｘｌシグナル伝達がＥＣ血管新生および腫瘍成長を独立に調節することができ、故に、腫瘍治療薬開発の新規標的クラスを表すことを示唆している。
【０００７】
ＡｘｌおよびＧａｓ６タンパク質の発現は、子宮内膜症、血管損傷および腎臓疾患を含む多様な他の疾患において上方調節され、Ａｘｌシグナル伝達は後者２つの適応症に機能的に関与する。Ａｘｌ−Ｇａｓ６シグナル伝達は、血小板応答を増幅し、血栓形成に関与する。故に、Ａｘｌは、乳房、腎、子宮内膜、卵巣、甲状腺、非小細胞肺癌およびブドウ膜黒色腫を含むがこれらに限定されない固形腫瘍；白血病（特に骨髄白血病）およびリンパ腫を含むがこれらに限定されない液性腫瘍；子宮内膜症、血管疾患／損傷（再狭窄、アテローム性動脈硬化症および血栓症を含むがこれらに限定されない）、乾癬；黄斑変性による視覚障害；糖尿病性網膜症および未熟児網膜症；腎臓疾患（糸球体腎炎、糖尿病性腎症および腎移植拒絶反応を含むがこれらに限定されない）、関節リウマチ；骨粗しょう症、変形性関節症および白内障を含む、いくつかの多様な病的状態の治療標的を潜在的に表し得る。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、Ａｘｌ阻害剤として有用なある特定の架橋した二環ヘテロアリール置換トリアゾール、Ａｘｌ活性に関連する疾患および状態の治療にそのような化合物を使用する方法、ならびにそのような化合物を含む医薬組成物に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
したがって、一態様において、本発明は、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、式（Ｉ）の化合物に係る。
【化１】
0005613156.tif 000002
ここで、
Ａは  −Ｃ（Ｒ１）（Ｈ）−又は−Ｎ（Ｒ２）−であり；
Ｒ１は  −Ｎ（Ｒ３）Ｒ４  及び  −Ｎ（Ｒ３）Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され；
Ｒ２は水素、シクロアルキル及び−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され；
Ｒ３及びＲ４は各々独立に水素及びアルキルからなる群から選択される。
【００１０】
本発明の他の態様では、単離された立体異性体又はそれらの混合物としての、式（ＩＩ）の化合物に係る。
【化２】
0005613156.tif 000003
ここで、
Ｂは、直接結合又は−ＣＨ２−であり、
Ｒ６  は、水素、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ及びアルキルからなる群から選択され、但し、式（Ｉ）の化合物は、１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（３−フルオロ−４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジン−１−イル）フェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンではない。
【００１１】
本発明の他の態様では、単離された立体異性体又はそれらの混合物としての、式（ＩＩＩ）の化合物に係る。
【化３】
0005613156.tif 000004
ここで、
Ｒ７  は、−Ｎ（Ｒ１２）Ｒ１３及び−Ｎ（Ｒ１２）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１３からなる群から選択され、
Ｒ１２及びＲ１３は各々独立して、水素、アルキル及びシクロアルキルからなる群から選択される。
【００１２】
本発明の他の態様では、単離された立体異性体又はそれらの混合物としての、式（ＩＶ）の化合物に係る。
【化４】
0005613156.tif 000005
ここで、
Ｒ８は、ハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソリル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にシアノ及びアルキルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよい。
【００１３】
本発明の他の態様では、単離された立体異性体又はそれらの混合物としての、式（Ｖ）の化合物に係る。
【化５】
0005613156.tif 000006
ここで、
Ｒ９は、ハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソリル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にハロ及びアルキルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよい。
【００１４】
本発明の他の態様では、単離された立体異性体又はそれらの混合物としての、式（ＶＩ）の化合物に係る。
【化６】
0005613156.tif 000007
ここで、
Ｒ１０はハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソリル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にハロ、シアノ、アルコキシ及びアルキルからなる群から選択される１又は複数の置換基で置換されていてもよい。
【００１５】
本発明の他の態様では、単離された立体異性体又はそれらの混合物としての、式（ＶＩＩ）の化合物に係る。
【化７】
0005613156.tif 000008
ここで、
Ｒ１１は、以下：
【化８】
0005613156.tif 000009
からなる群から選択される。
【００１６】
別の態様において、本発明は、薬学的に許容できる添加剤と、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、上記した通りの式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、あるいは、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、上記した通りの式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩とを含む医薬組成物に関する。
【００１７】
別の態様において、本発明は、哺乳動物において、Ａｘｌ活性に関連する疾患または状態を治療する方法であって、該哺乳動物に、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、治療有効量の上記した通りの式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、あるいは、薬学的に許容できる添加剤と、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、上記した通りの式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、または、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、上記した通りの式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩とを含む治療有効量の医薬組成物、あるいは、薬学的に許容できる添加剤と、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、上記した通りの式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩とを含む治療有効量の医薬組成物を投与するステップを含む方法に関する。
【００１８】
別の態様において、本発明は、本発明の化合物の、細胞ベースアッセイでのＡｘｌ活性の阻害における有効性の検定（アッセイ）法を提供する。
【００１９】
別の態様において、本発明は、下記の式の（Ｓ）−鏡像異性体：
【００２０】
【化９】
0005613156.tif 000010
［式中、ｎおよびｍは同じであり、０、１または２であり、
Ｒ７は、ニトロ、ハロまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２であり、
Ｒ２は、水素、アルキル、アルケニル、場合により置換されているアラルキル、場合により置換されているシクロアルキル、場合により置換されているシクロアルキルアルキルおよび場合により置換されているヘテロアリールである］
を調製する方法であって、
式（ｉ）の化合物：
【００２１】
【化１０】
0005613156.tif 000011
［式中、ｎおよびｍは同じであり、０、１または２であり、
Ｒ７は、ニトロ、ハロまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２であり、
Ｒ２は、水素、アルキル、アルケニル、場合により置換されているアラルキル、場合により置換されているシクロアルキル、場合により置換されているシクロアルキルアルキルおよび場合により置換されているヘテロアリールである］
を、適切な条件下、触媒量の（Ｓ）−特異的トランスアミナーゼの存在下においてアミノ供与体分子で処理して、（Ｓ）−鏡像異性体を形成するステップを含む方法を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
定義
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用される場合、そうでないと指定しない限り、下記の用語は示されている意味を有する。
【００２３】
「アミノ」は−ＮＨ２ラジカルを指す。
【００２４】
「カルボキシ」は−Ｃ（Ｏ）ＯＨラジカルを指す。
【００２５】
「シアノ」は−ＣＮラジカルを指す。
【００２６】
「ニトロ」は−ＮＯ２ラジカルを指す。
【００２７】
「オキサ」は−Ｏ−ラジカルを指す。
【００２８】
「オキソ」は＝Ｏラジカルを指す。
【００２９】
「チオキソ」は＝Ｓラジカルを指す。
【００３０】
「アルキル」は、炭素および水素原子だけからなり、不飽和を含有せず、１〜１２個の炭素原子、好ましくは１〜８個の炭素原子または１〜６個の炭素原子を有し（「低級アルキル」）、単結合によって分子の残りと結合している直鎖または分枝炭化水素鎖ラジカル、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）、３−メチルヘキシル、２−メチルヘキシル等を指す。
【００３２】
「アルキレン」または「アルキレン鎖」は、炭素および水素だけからなり、不飽和を含有せず、１〜１２個の炭素原子を有する、分子の残りをラジカル基に連結させている直鎖または分枝鎖の二価炭化水素鎖、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ｎ−ブチレン等を指す。アルキレン鎖は、単結合を介して分子の残りと、および単結合を介してラジカル基と結合している。アルキレン鎖の、分子の残りとのおよびラジカル基との結合点は、アルキレン鎖中の１個の炭素を介するものであってよく、または該鎖内の任意の２個の炭素を介するものであってもよい。
【００３３】
「アルコキシ」は、式−ＯＲａ（Ｒａは上記で定義した１〜１２の炭素原子を含むアルキル基である）の基である。
【００３４】
「アミノ供与体（ドナー）分子」は、第一級アミン（−ＮＨ２）基を含み、本明細書において開示されている過程に適した有機分子を指す。アミノ供与体分子の例は、アラニンおよびフェニルアラニン等のα−アミノ酸、イソプロピルアミン、１−エチルプロピルアミン、１，１，３，３−テトラメチルブチルアミン、１，２−ジメチルブチルアミン、ｓｅｃ−ブチルアミン、１−フェニルエチルアミン等を含むがこれらに限定されない。
【００３５】
「シクロアルキル」は、炭素および水素原子だけからなり、スピロまたは架橋環系を含み得、３〜１５個の炭素原子を有し、好ましくは、３〜１０個の炭素原子、より好ましくは５〜７個の炭素を有し、飽和または不飽和であり、単結合によって分子の残りと結合している安定な非芳香族単環式または多環式炭化水素ラジカルを指す。本発明の目的のために、架橋環系は、その２個の非隣接環原子が、原子または原子団を介して結合している系である。単環式シクロアルキルラジカルは、非架橋シクロアルキルラジカル、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを含む。多環式ラジカルは、縮合、スピロまたは架橋シクロアルキルラジカル、例えば、アダマンタニル（架橋）およびデカリニル（縮合）等のＣ１０ラジカル、ならびにビシクロ［３．２．０］ヘプタニル（縮合）、ノルボルナニルおよびノルボルネニル（架橋）等のＣ７ラジカル、また、置換多環式ラジカル、例えば、ビシクロ［２．２．１］ヘプテニル（架橋）および７，７−ジメチルビシクロ［２．２．１］ヘプタニル（架橋）等の置換Ｃ７ラジカル等を含む。
【００３６】
「シクロアルキルアルキル」は、式−ＲｂＲｇのラジカル［式中、Ｒｂは上記で定義された通りのアルキレン鎖であり、Ｒｇは上記で定義された通りのシクロアルキルラジカルである］を指す。
【００３７】
「鏡像体（エナンチオマー）過剰率」または「ｅｅ」は、一方の鏡像異性体が他方より過剰に存在する生成物を指し、各鏡像異性体のモル分率における絶対差として定義される。鏡像体過剰率は、典型的には、混合物中に存在する鏡像異性体の、他の鏡像異性体に対するパーセンテージとして表現される。本発明の目的のために、本発明の（Ｓ）−鏡像異性体が、８０％より大きい、好ましくは９０％より大きい、より好ましくは９５％より大きい、最も好ましくは９９％より大きい鏡像体過剰率で存在する場合、該（Ｓ）−鏡像異性体には、（Ｒ）−鏡像異性体が実質的にないとみなされる。
【００３８】
「ハロ」は、ブロモ、クロロ、フルオロまたはヨードを指す。
【００３９】
「ハロアルキル」は、上記で定義された通りの１個または複数のハロラジカルによって置換されている上記で定義された通りのアルキルラジカル、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１−フルオロメチル−２−フルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、１−ブロモメチル−２−ブロモエチル等を指す。
【００４０】
「ケト酸」は、ケトン官能基をさらに含有するカルボン酸を指す。「２−ケト酸」は、ケトン官能基がカルボン酸（−Ｃ（Ｏ）ＯＨ）基に隣接しているカルボン酸を指す。
【００４１】
本明細書において命名されるある特定の化学基は、示されている化学基中に見られるべき炭素原子の総数を示す省略表記が先行し得る。例えば、Ｃ７〜Ｃ１２アルキルは、計７〜１２個の炭素原子を有する以下で定義する通りのアルキル基を記述しており、Ｃ４〜Ｃ１２シクロアルキルアルキルは、計４〜１２個の炭素原子を有する以下で定義する通りのシクロアルキルアルキル基を記述している。省略表記中の炭素の総数は、記述されている基の置換基中に存在し得る炭素を含まない。
【００４２】
「安定化合物」および「安定構造」は、反応混合物から有用な純度までの単離、および効果的な治療剤への製剤化に耐え抜くのに十分強固な化合物を示すように意図されている。
【００４３】
「哺乳動物」は、ヒト、およびネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ウサギ等の家畜を含む。好ましくは、本発明の目的のために、哺乳動物はヒトである。
【００４４】
「任意選択の」または「場合により」は、その後に記述されている状況のイベントが発生してもしなくてもよいこと、ならびに該記述が、前記イベントまたは状況が発生する事例および発生しない事例を含むことを意味する。例えば、「場合により置換されているフェニル」は、フェニル基が置換されていてもいなくてもよいこと、ならびに該記述が置換フェニル基および置換を有さないフェニル基の両方を含むことを意味する。
【００４５】
「薬学的に許容できる添加剤」は、ヒトまたは家畜における使用のために許容できるとして米国食品医薬品局によって承認された任意のアジュバント、担体、添加剤、流動促進剤、甘味剤、賦形剤、保存剤、染料／着色剤、調味料、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、安定剤、等張剤、溶媒または乳化剤を含むがこれらに限定されない。
【００４６】
「薬学的に許容できる塩」は、酸付加塩および塩基付加塩の両方を含む。
【００４７】
「薬学的に許容できる酸付加塩」は、遊離塩基の生物学的効果および特性を保持する塩を指し、これらは、生物学的にまたは別様に望ましくないものではなく、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等であるがこれらに限定されない無機酸、および、酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、ショウノウ酸、ショウノウ−１０−スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシルスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２−オキソ−グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、粘液酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸等であるがこれらに限定されない有機酸と形成される。
【００４８】
「薬学的に許容できる塩基付加塩」は、遊離酸の生物学的効果および特性を保持する塩を指し、これらは、生物学的にまたは別様に望ましくないものではない。これらの塩は、遊離酸への無機塩基または有機塩基の付加から調製される。無機塩基に由来する塩は、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、アルミニウム塩等を含むがこれらに限定されない。好ましい無機塩は、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩およびマグネシウム塩である。有機塩基に由来する塩は、第一級、第二級および第三級アミン、自然発生的な置換アミンを含む置換アミン、環状アミンならびに塩基性イオン交換樹脂（アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂等）の塩を含むがこれらに限定されない。特に好ましい有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリンおよびカフェインである。
【００４９】
「医薬組成物」は、本発明の化合物と、哺乳動物、例えばヒトへの生物活性化合物の送達のための当技術分野において一般に認められている媒質との製剤を指す。そのような媒質は、そのための薬学的に許容できる担体、賦形剤または添加剤をすべて含む。
【００５０】
「治療有効量」は、哺乳動物、好ましくはヒトに投与された場合に、該哺乳動物、好ましくはヒトにおける関心対象の疾患または状態の、以下で定義する通りの治療を達成するのに十分な本発明の化合物の量を指す。「治療有効量」を構成する本発明の化合物の量は、化合物、疾患または状態およびその重症度、ならびに治療される哺乳動物の年齢に応じて変動することになるが、当業者により、自身の知識および本開示を考慮して日常的に決定され得る。
【００５１】
「治療すること」または「治療」は、本明細書において使用される場合、関心対象の疾患または状態を有する哺乳動物、好ましくはヒトにおける該関心対象の疾患または状態の治療を包括し、
（ｉ）特に、哺乳動物が該状態にかかりやすいが未だ罹患しているとの診断が為されていない場合、そのような哺乳動物において該疾患または状態が発生するのを予防すること、
（ｉｉ）該疾患または状態を阻害すること、すなわちその発症を阻止すること、
（ｉｉｉ）該疾患または状態を軽減すること、すなわち該疾患または状態の後退を引き起こすこと、あるいは
（ｉｖ）該疾患または状態を安定させること
を含む。
【００５２】
本明細書において使用される場合、用語「疾患」および「状態」は交換可能に使用されることがあり、あるいは、特定の疾病または状態が既知の病原体を有し得ず（そのため未だ病因が解明されていない）、したがって、疾患としてだけでなく、ほぼ特異的な一連の症状が臨床医によって同定されている望ましくない状態または症候群としても未だ認識されていないという点で異なることもある。
【００５３】
「トランスアミナーゼ」は、本明細書において使用される場合、光学活性分子を生成するために、アミノ供与体分子からケトン含有分子への、好ましくは芳香族環と縮合した環式ケトンへのアミノ基の転移を触媒する、自然発生的または非天然酵素を指す。トランスアミナーゼ、つまりアミノトランスフェラーゼは、所与の鏡像異性体に対する高立体選択性を有する。故に、トランスアミナーゼを利用するアミノ基転移の過程は、分割ではなくキラル合成である。
【００５４】
本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容できる塩は、１つまたは複数の不斉中心を含有し得、それにより、鏡像異性体、ジアステレオマー、および絶対立体化学の観点からアミノ酸について（Ｒ）−もしくは（Ｓ）−として、または（Ｄ）−もしくは（Ｌ）−として定義され得る他の立体異性形態を生じ得る。本発明は、すべてのそのような考えられる異性体、ならびにそれらのラセミおよび光学的に純粋な形態を含むように意図されている。光学活性（＋）および（−）、（Ｒ）−および（Ｓ）−、または（Ｄ）−および（Ｌ）−異性体は、キラルシントンまたはキラル試薬を使用して調製でき、あるいはキラルカラムを使用するＨＰＬＣ等の従来の技術を使用して分割できる。本明細書において記載されている化合物がオレフィン二重結合または他の幾何不斉中心を含有する場合で別段の指定がない限り、該化合物はＥおよびＺ幾何異性体の両方を含むことが意図されている。同様に、すべての互変異性形態も含まれることが意図されている。
【００５５】
「立体異性体」は、同じ結合によって結合した同じ原子で構成されているが異なる三次元構造を有する、交換可能ではない化合物を指す。本発明は、種々の立体異性体およびその混合物を企図しており、分子が互いの重ね合わせることができない（nonsuperimposeable）鏡像である２つの立体異性体を指す「鏡像異性体」を含む。
【００５７】
本明細書において使用される化学命名プロトコールおよび構造図は、Ｉ．Ｕ．Ｐ．Ａ．Ｃ．命名システムの修正形態であり、ここで、本発明の化合物は、本明細書において、中核構造、すなわちトリアゾール構造の誘導体と命名される。本明細書において用いられる複雑な化学名について、置換基の名前はそれが結合している基の前に付けられる。例えば、シクロプロピルエチルは、シクロプロピル置換基を有するエチル骨格を含む。化学構造図においては、原子価を満たすのに十分な水素原子と結合していると推定されるいくつかの炭素原子を除き、すべての結合が同定されている。
【００５９】
本発明の目的のために、フタラジン部分を以下に示す式（ＩＶ）：
【化１１】
0005613156.tif 000012
の中心ジアミノトリアゾール部分に結合する結合の表示は、以下の２つの位置異性体、即ち、式（ＩＶａ）及び（ＩＶｂ）：
【化１２】
0005613156.tif 000013
及び
【化１３】
0005613156.tif 000014
を含むものと解する。
【００６０】
式（ＩＶａ）に示す化合物におけるトリアゾール原子の番号付けシステムは以下に示す通りである。
【化１４】
0005613156.tif 000015
例えば、式（ＩＶａ）でＲ８が２−クロロフェニルである化合物は、本明細書では１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンと称する。
【００６１】
式（ＩＶｂ）に示す化合物における環原子の番号付けシステムは以下に示す通りである。
【化１５】
0005613156.tif 000016
【００６２】
例えば、式（ＩＶｂ）でＲ８  がクロロである化合物は、本明細書では１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ５−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンと称する。
【００６３】
発明の実施形態
「発明の概要」において上記で説明した通りの本発明の化合物の種々の態様のうち、ある特定の実施形態が好ましい。
【００６４】
本発明の一実施形態は、単離された立体異性体もしくはその混合物としての、「発明の概要」において上記で説明した通りの式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩である。
【００６５】
本発明の他の実施態様は、前記発明の概要に述べた式（Ｉ）の化合物であり、以下の式（Ｉａ）を有するものである。
【化１６】
0005613156.tif 000017
ここで、
Ｒ１は−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４及び−Ｎ（Ｒ３）Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４  は各々独立に水素及びアルキルからなる群から選択される化合物であって、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはその製薬的に許容される塩である。
【００６６】
本発明の他の実施態様では、前記式（Ｉａ）の化合物であり、それは以下からからなる群から選択される単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩である。
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−アミノ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−［（（（ジメチル）アミノ）メチル）カルボニルアミノ］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−（シクロペンチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００６７】
本発明の他の実施態様は、前記発明の概要に述べた式（Ｉ）の化合物であり、以下の式（Ｉｂ）を有するものである。
【化１７】
0005613156.tif 000018
ここで、
Ｒ２は水素、シクロアルキル及び−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ３）Ｒ４からなる群から選択され、
Ｒ３及びＲ４は各々独立に水素及びアルキルからなる群から選択される化合物であって、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはその製薬的に許容される塩である。
【００６８】
本発明の他の実施態様では、前記式（Ｉｂ）の化合物であり、それは以下からからなる群から選択される単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩である。
【００６９】
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−［（（ジメチル）アミノ）メチルカルボニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−（シクロペンチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００７０】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＩＩ）の化合物である。
【００７１】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＩＩ）の化合物であり、以下からなる群から選択される。
１−（６，９−エタノ−４−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ピリド［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジンイル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（４−フルオロフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（３−フルオロフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（１，４−エタノ−８−（３−メトキシフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
１−（１，４−エタノ−８−（２−メチルフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００７２】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＩＩＩ）の化合物である。
【００７３】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＩIＩ）の化合物であり、以下からなる群から選択される。
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジエチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジメチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（イソプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（シクロブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（イソブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−ｙｌ）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジイソブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００７４】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＩＶ）の化合物である。
【００７５】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＩＶ）の化合物であり、以下の式（ＶＩａ）のものである。
【化１８】
0005613156.tif 000019
ここで、
Ｒ８は、ハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソリル及びフェニルからなる群から選択され、それらは任意にシアノ及びアルキルからなる群から選択される置換基で置換されていてもよい。
【００７６】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記式（ＩＶａ）の化合物であり、以下からなる群から選択される。
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（３−シアノフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；及び
１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００７７】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＩＶ）の化合物であり、以下の式（ＶＩｂ）のものである。
【化１９】
0005613156.tif 000020
ここで、
Ｒ８は、ハロ、ピリジニル、ベンゾジオキソニル及びフェニルからなる群から選択され、それらはシアノ及びアルキルからなる群から選択される置換基で任意に置換れていてもよい。
【００７８】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記式（ＩＶｂ）の化合物であり、それは次のものである。
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ５−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００７９】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（Ｖ）の化合物である。
【００８０】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（Ｖ）の化合物であり、以下からなる群から選択される。
（３Ｓ）−１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（３Ｓ）−１−（４−フェニル−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（３Ｓ）−１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
（３Ｓ）−１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
（３Ｓ）−１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００８１】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＶＩ）の化合物である。
【００８２】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＶＩ）の化合物であり、以下からなる群から選択される。
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−フェニル−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（３−シアノフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（２−エトキシ−５−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；
１−（４−（４−フルオロ−２−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；  及び
１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００８３】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＶＩＩ）の化合物である。
【００８４】
本発明の他の実施態様は、単離された立体異性体又はそれらの混合物、あるいはそれらの製薬的に許容される塩としての、前記発明の概要に述べた式（ＶＩＩ）の化合物であり、以下からなる群から選択される。
１−（４−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロキナゾリン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニルｌ）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン；及び
１−（５，８−エタノ−４−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン。
【００８５】
「発明の概要」において上記で説明した通りの、薬学的に許容できる添加剤と本発明の化合物とを含む本発明の医薬組成物の種々の態様のうち、ある特定の実施形態が好ましい。
【００８６】
哺乳動物において、Ａｘｌ活性に関連する疾患または状態を治療する方法であって、それを必要とする哺乳動物に、治療有効量の本発明の化合物を投与するステップを含む方法の種々の態様のうち、ある特定の実施形態が好ましい。
【００８７】
これらの方法の一実施形態は、該疾患または状態が、関節リウマチ、血管疾患、血管損傷、乾癬、黄斑変性による視覚障害、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、腎臓疾患、変形性関節症および白内障からなる群から選択される方法である。
【００８８】
これらの方法の一実施形態は、該疾患または状態の兆候が、前記哺乳動物における固形腫瘍形成である方法である。
【００８９】
これらの方法の一実施形態は、該疾患または状態が、乳癌、腎癌、子宮内膜癌、卵巣癌、甲状腺癌、非小細胞肺癌およびブドウ膜黒色腫からなる群から選択される方法である。
【００９０】
これらの方法の一実施形態は、該疾患または状態の兆候が、前記哺乳動物における液性腫瘍形成である方法である。
【００９１】
これらの方法の一実施形態は、該疾患または状態が、骨髄白血病またはリンパ腫である方法である。
【００９２】
これらの方法の一実施形態は、該疾患または状態が、子宮内膜症である方法である。
【００９３】
これらの方法の一実施形態は、該疾患または状態が、肝臓への転移である方法である。
【００９４】
本発明の別の実施形態は、哺乳動物に、「発明の概要」において上記で説明した通りの、治療有効量の本発明の医薬組成物を投与することにより、Ａｘｌ活性に関連する疾患または状態を治療する方法であり、ここで、該疾患または状態は、関節リウマチ、血管疾患／損傷（再狭窄、アテローム性動脈硬化症および血栓症を含むがこれらに限定されない）、乾癬、黄斑変性による視覚障害、糖尿病性網膜症または未熟児網膜症、腎臓疾患（糸球体腎炎、糖尿病性腎症および腎移植拒絶反応を含むがこれらに限定されない）、変形性関節症および白内障からなる群から選択される。
【００９５】
本発明の別の実施形態は、哺乳動物に、「発明の概要」において上記で説明した通りの、治療有効量の本発明の医薬組成物を投与することにより、Ａｘｌ活性に関連する疾患または状態を治療する方法であり、ここで、該疾患または状態は、乳癌、腎癌、子宮内膜癌、卵巣癌、甲状腺癌、非小細胞肺癌、黒色腫、前立腺癌、肉腫、胃癌、ブドウ膜黒色腫、骨髄白血病およびリンパ腫からなる群から選択される。
【００９６】
本発明の別の実施形態は、哺乳動物に、「発明の概要」において上記で説明した通りの、治療有効量の本発明の医薬組成物を投与することにより、Ａｘｌ活性に関連する疾患または状態を治療する方法であり、ここで、該疾患または状態は子宮内膜症である。
【００９７】
本発明の具体的な実施形態を、下記の項においてさらに詳細に記述する。
【００９８】
本発明の化合物の効用および試験
発癌性ＲＴＫであるＡｘｌは、レトロウイルスベースの機能的遺伝子スクリーニングプロトコールを使用し、血管新生における主要イベントである走触性移動の調節因子として最近同定された。ＲＮＡｉ媒介性サイレンシングによるＡｘｌ阻害は、内皮細胞移動、増殖およびインビトロ管形成を遮断した。Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ、２００５年４月１６〜２０日、Ａｎａｈｅｉｍ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａおよび第７回Ａｎｎｕａｌ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  ｏｎ  Ａｎｔｉ−Ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ、２００５年２月１０〜１３日、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ；（Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ  ｆｏｒ  Ｔｈｅ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｔｙｒｏｓｉｎｅ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａｘｌ  ｉｎ  Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｕｍｏｒ  Ｇｒｏｗｔｈ、Ｈｏｌｌａｎｄ，Ｓ．Ｊ．、Ｐｏｗｅｌｌ，Ｍ．Ｊ．、Ｆｒａｎｃｉ，Ｃ．、Ｃｈａｎ，Ｅ．、Ｆｒｉｅｒａ，Ａ．Ｍ．、Ａｔｃｈｉｓｏｎ，Ｒ．、Ｘｕ，Ｗ．、ＭｃＬａｕｇｈｌｉｎ，Ｊ．、Ｓｗｉｆｔ，Ｓ．Ｅ．、Ｐａｌｉ，Ｅ．、Ｙａｍ，Ｇ．、Ｗｏｎｇ，Ｓ．、Ｘｕ，Ｘ．、Ｈｕ，Ｙ．、Ｌａｓａｇａ，Ｊ．、Ｓｈｅｎ，Ｍ．、Ｙｕ，Ｓ．、Ｄａｎｉｅｌ，Ｒ．、Ｈｉｔｏｓｈｉ，Ｙ．、Ｂｏｇｅｎｂｅｒｇｅｒ，Ｊ．、Ｎｏｒ，Ｊ．Ｅ．、Ｐａｙａｎ，Ｄ．ＧおよびＬｏｒｅｎｓ，Ｊ．Ｂ）において開示されたこれらの知見は、安定なｓｈＲＮＡｉ媒介性Ａｘｌノックダウンが、ヒト血管新生のマウスモデルにおいて機能的ヒト血管の形成を損なうことを実証したインビボ研究によって立証された。これらの知見は、論文審査のある学術誌（Ｈｏｌｌａｎｄ  ＳＪ、Ｐｏｗｅｌｌ  ＭＪ、Ｆｒａｎｃｉ  Ｃ、Ｃｈａｎ  ＥＷ、Ｆｒｉｅｒａ  ＡＭ、Ａｔｃｈｉｓｏｎ  ＲＥ、ＭｃＬａｕｇｈｌｉｎ  Ｊ、Ｓｗｉｆｔ  ＳＥ、Ｐａｌｉ  ＥＳ、Ｙａｍ  Ｇ、Ｗｏｎｇ  Ｓ、Ｌａｓａｇａ  Ｊ、Ｓｈｅｎ  ＭＲ、Ｙｕ  Ｓ、Ｘｕ  Ｗ、Ｈｉｔｏｓｈｉ  Ｙ、Ｂｏｇｅｎｂｅｒｇｅｒ  Ｊ、Ｎｏｒ  ＪＥ、Ｐａｙａｎ  ＤＧ、Ｌｏｒｅｎｓ  ＪＢ、「Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｒｏｌｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ａｘｌ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ」、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２００５）、第６５巻、９２９４〜３０３頁において公開された。これらの知見は、米国公開特許出願第２００５／０１１８６０４号および欧州特許出願第１５６３０９４号においても開示されており、これらの開示は、参照により全体が組み込まれる。したがって、Ａｘｌシグナル伝達は、インビトロにおける新血管形成のために必要な複数の機能に影響を及ぼし、インビボにおける血管新生を調節する。これらの前血管新生過程の調節には、Ａｘｌの触媒活性が必要であった。このように、Ａｘｌ媒介性血管新生刺激は、Ａｘｌ触媒活性の小分子阻害剤による変調の影響を受けやすい。
【００９９】
したがって、本発明の化合物は、Ａｘｌ触媒活性の小分子阻害剤（inhibtiors）であり、そのため、血管新生および／または細胞増殖を特徴とする疾患および状態を含む、Ａｘｌ触媒活性に関連する疾患および状態を治療することにおいて有用である。特に、本発明の化合物および本発明の医薬組成物は、Ａｘｌ活性の変調によって緩和される疾患および状態を治療することにおいて有用である。本発明の目的のために、「Ａｘｌ活性の変調」によって緩和される疾患および状態は、Ａｘｌ活性の減少によって緩和される疾患および状態ならびにＡｘｌ活性の増加によって緩和される疾患および状態を含む。好ましくは、そのような疾患および状態は、Ａｘｌ活性の減少によって緩和される。Ａｘｌ活性の変調によって緩和される疾患および状態は、乳房、腎、子宮内膜、卵巣、甲状腺および非小細胞肺癌、黒色腫、前立腺癌、肉腫、胃がんならびにブドウ膜黒色腫を含むがこれらに限定されない固形腫瘍；白血病（特に骨髄白血病）およびリンパ腫を含むがこれらに限定されない液性腫瘍；子宮内膜症、血管疾患／損傷（再狭窄、アテローム性動脈硬化症および血栓症を含むがこれらに限定されない）、乾癬；黄斑変性による視覚障害；糖尿病性網膜症および未熟児網膜症；腎臓疾患（糸球体腎炎、糖尿病性腎症および腎移植拒絶反応を含むがこれらに限定されない）、関節リウマチ；変形性関節症、骨粗しょう症および白内障を含むがこれらに限定されない。
【０１００】
前述に加えて、本発明の化合物は、下記の生物学的過程の影響を受ける疾患および状態を治療することにおいて有用である：がんにおいて現れるような浸潤、移動、転移または薬物耐性；がんにおいて現れるような幹細胞の生態；子宮内膜症において現れるような浸潤、移動、接着または血管新生；心血管疾患、高血圧症または血管損傷において現れるような血管リモデリング；骨粗しょう症または変形性関節症において現れるような骨恒常性（homeostatasis）；例えばエボラウイルス感染において現れるようなウイルス感染；または肥満において現れるような分化。本発明の化合物は、敗血症を治療し、ワクチンアジュバントとして作用し、かつ／または免疫不全患者における免疫応答を増強することにより、炎症過程を変調するためにも使用され得る。
【０１０１】
一実施形態において、本発明の化合物は、肝臓への転移を治療することにおいて有効である。例えば、本発明の化合物による治療は、肝微小転移巣の発生の著しい減少をもたらし得る。本発明の一方法は、肝臓への転移を減少させるための本発明の化合物による患者の治療である。この方法は、所望の治療的利益を生じさせるために、本発明の化合物を、単独で、または他の作用物質と組み合わせて用いて為され得る。
【０１０２】
本発明の化合物は、細胞増殖性障害を治療することにおいても有用である。細胞増殖性障害は、異常な細胞増殖を特徴とする障害を指す。増殖性障害は、細胞成長速度に関して何ら制限を暗示するものではなく、単に成長および細胞分裂に影響する正常な制御の喪失を示す。故に、いくつかの実施形態において、増殖性障害の細胞は、正常細胞と同じ細胞分裂速度を有し得るが、そのような成長を制限するシグナルに応答しない。「細胞増殖性障害」の範囲内にあるのは、組織の異常成長である新生物または腫瘍である。がんは、周囲組織に浸潤し、かつ／または新たなコロニー形成部位に転移する能力を有する細胞の増殖を特徴とする種々の悪性新生物のいずれかを指す。
【０１０３】
概して、本発明の化合物で治療可能な細胞増殖性障害は、正常でない細胞増殖を特徴とする任意の障害に関わる。これらは、良性または悪性、転移性または非転移性の、種々の腫瘍およびがんを含む。組織侵襲性または転移等、がんの特異的特性は、本明細書において記載されている方法を使用して標的とすることができる。細胞増殖性障害は、数ある中でも、乳がん、卵巣がん、腎がん、消化管がん、腎臓がん、膀胱がん、膵がん、肺扁平上皮癌および腺癌を含む多様ながんを含む。
【０１０４】
したがって、前述に加えて、本発明の化合物は、腎細胞癌、腎臓の明細胞癌および腎細胞腺癌；浸潤性腺管癌、浸潤性小葉癌、腺管癌、上皮内小葉癌および転移性乳がん；基底細胞癌、扁平上皮癌、悪性黒色腫およびカポジ（Karposi’s）肉腫；小細胞および非小細胞肺癌、気管支浮腫（adema）、胸膜肺芽腫ならびに悪性中皮腫；脳幹および視床下部（hyptothalamic）膠腫、小脳および大脳星細胞腫、髄芽腫（medullablastoma）、上衣腫瘍、乏突起膠細胞系、髄膜腫ならびに神経外胚葉性および松果体腫瘍；前立腺がん、精巣がんおよび陰茎がん；子宮がん（子宮内膜）、頸部、卵巣、膣、外陰がん、子宮肉腫、卵巣胚細胞腫瘍；肛門、結腸、結腸直腸、食道、胆のう、胃（stomach）（胃（gastric））、膵がん、膵がん−島細胞、直腸、小腸および唾液腺がん；肝細胞癌、胆管癌、混合型肝細胞胆管癌および原発性肝がん；眼内黒色腫、網膜芽細胞腫および横紋筋肉腫；喉頭、下咽頭、鼻咽頭、口腔咽頭がん、ならびに口唇および口腔がん；頸部扁平上皮がん；転移性副鼻腔がん；Ｂ細胞およびＣ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキン病、ならびに中枢神経系のリンパ腫；急性骨髄性（骨髄）白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性白血病および有毛細胞白血病；甲状腺がん、胸腺腫および悪性胸腺腫；膀胱がん；ならびに軟組織の肉腫、骨肉腫、悪性線維性組織球腫、リンパ肉腫および横紋筋肉腫を治療することにおいて有用である。
【０１０５】
本発明の化合物は、Ｂ細胞リンパ腫疾患および状態群のうち、前駆Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫（前駆Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病）、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病／小リンパ球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病、形質細胞性骨髄腫／形質細胞腫、ＭＡＬＴ型節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫およびバーキットリンパ腫／バーキット細胞白血病を治療することにおいて有用である。
【０１０６】
本発明の化合物は、Ｔ細胞リンパ腫疾患および状態群のうち、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫／白血病（前駆Ｔ細胞急性リンパ芽球性白血病）、Ｔ細胞前リンパ球性白血病Ｔ細胞顆粒リンパ球性白血病、侵攻性ＮＫ細胞白血病、成人Ｔ細胞リンパ腫／白血病（ＨＴＬＶ−１）、節外性ＮＫ／Ｔ細胞リンパ腫、鼻型、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、肝脾ガンマ・デルタＴ細胞リンパ腫、皮下脂肪織炎様Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫／セザリー症候群、未分化大細胞リンパ腫、Ｔ／ヌル細胞、皮膚原発型、特定不能の末梢Ｔ細胞リンパ腫、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、Ｔ／ヌル細胞、全身原発型を治療することにおいて有用である。
【０１０７】
本発明の化合物は、ホジキン疾患群のうち、結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫、結節硬化型ホジキンリンパ腫（悪性度１および２）、リンパ球豊富型古典的ホジキンリンパ腫、混合細胞型ホジキンリンパ腫、およびリンパ球減少型ホジキンリンパ腫を治療することにおいて有用である。
【０１０８】
本発明の化合物は、骨髄性白血病（例えば、フィラデルフィア染色体陽性（ｔ（９；２２）（ｑｑ３４；ｑ１１））、慢性好中球性白血病、慢性好酸球性白血病／好酸球増加症候群、慢性特発性骨髄線維症、真性赤血球増加症、および本態性血小板血症、慢性骨髄単球性白血病、非定型慢性骨髄性白血病、および若年性骨髄単球性白血病、不応性貧血（環状鉄芽球を伴うものおよび環状鉄芽球を伴わないもの）、多血球系異形成を伴う不応性血球減少（骨髄異形成症候群）、過剰芽細胞を伴う不応性貧血（骨髄異形成症候群）、５ｑ−症候群、ならびにｔ（９；１２）（ｑ２２；ｐ１２）を伴う骨髄異形成症候群を治療することにおいても有用である。
【０１０９】
本発明の化合物は、ｔ（８；２１）（ｑ２２；ｑ２２）を伴う急性骨髄性白血病、ＡＭＬ１（ＣＢＦ−アルファ）／ＥＴＯ、急性前骨髄球性白血病（ｔ（１５；１７）（ｑ２２；ｑ１１−１２）を伴うＡＭＬおよび変異体ＰＭＬ／ＲＡＲ−アルファ）、異常な骨髄好酸球（ｉｎｖ（１６）（ｐ１３ｑ２２）またはｔ（１６；１６）（ｐ１３；ｑ１１）、ＣＢＦｂ／ＭＹＨ１１Ｘ）を伴う急性骨髄性白血病、および１１ｑ２３（ＭＬＬ）異常を伴う急性骨髄性白血病、最未分化型急性骨髄性白血病、成熟を伴わない急性骨髄性白血病、成熟を伴う急性骨髄性白血病、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、急性巨核球性白血病、急性好塩基球性白血病、および骨髄線維症を伴う急性汎骨髄症を治療することにおいても有用である。
【０１１０】
下記の動物モデルは、本発明の化合物を試験する当業者に、示されている疾患または状態を治療することにおけるそれらに使用についてのガイダンスを提供する。
【０１１１】
本発明の化合物は、ＨｅＬａ、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＳＫ−ＯＶ−３、ＯＶＣＡＲ−８、ＤＵ１４５、Ｈ１２９９、ＡＣＨＮ、Ａ４９８およびＣａｋｉ−１を含むがこれらに限定されないヒトＡｘｌ発現がん細胞株を使用して、ＳＣＩＤマウスモデルの異種移植片において化合物を試験することにより、白血病およびリンパ腫を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る。
【０１１２】
本発明の化合物は、ヒトＡｘｌ発現ＡＭＬおよびＣＭＬ白血病細胞株を使用して、ＳＣＩＤまたはｎｕ／ｎｕマウスモデルの異種移植片における白血病を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る。
【０１１３】
本発明の化合物は、子宮内膜症の同系マウスモデルを使用して子宮内膜症を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｓｏｍｉｇｌｉａｎａ，Ｅ．ら、「Ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ  ａｂｉｌｉｔｙ  ｔｏ  ｉｍｐｌａｎｔ  ｉｎ  ｅｃｔｏｐｉｃ  ｓｉｔｅｓ  ｃａｎ  ｂｅ  ｐｒｅｖｅｎｔｅｄ  ｂｙ  ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−１２  ｉｎ  ａ  ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ」、Ｈｕｍ．Ｒｅｐｒｏｄ．（１９９９）、第１４巻、第１２号、２９４４〜５０頁を参照）。化合物は、子宮内膜症のラットモデルを使用して子宮内膜症を治療することにおけるそれらの使用についても試験され得る（Ｌｅｂｏｖｉｃ，Ｄ．Ｉ．ら、「Ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｇａｍｍａ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌ  ｅｘｐｌａｎｔｓ  ｉｎ  ａ  ｒａｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｅｎｄｏｍｅｔｒｉｏｓｉｓ」、Ｆｅｒｔｉｌ．Ｓｔｅｒｉｌ．（２００４）、８２付録３、１００８〜１３頁を参照）。
【０１１４】
本発明の化合物は、バルーン損傷ラット（rate）頸動脈モデルを使用して再狭窄を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｋｉｍ，Ｄ．Ｗ．ら、「Ｎｏｖｅｌ  ｏｒａｌ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｎｅｏｉｎｔｉｍａｌ  ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ  ｉｎ  ａ  ｒａｔ  ｃａｒｏｔｉｄ  ａｒｔｅｒｙ  ｉｎｊｕｒｙ  ｍｏｄｅｌ」、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ（２００４）、第１０９巻、第１２号、１５５８〜６３頁、２００４年３月８日電子出版を参照）。
【０１１５】
本発明の化合物は、ａｐｏＥ欠損マウスモデルにおいて経皮経管冠動脈形成術を使用して再狭窄を治療することにおけるそれらの使用についても試験され得る（ｖｏｎ  ｄｅｒ  Ｔｈｕｓｅｎ，Ｊ．Ｈ．ら、「Ａｄｅｎｏｖｉｒａｌ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｏｆ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ｌｅｓｉｏｎ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｕｒｉｎｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｐｏｓｔａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ  ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ」、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．（２００４）、第２４巻、第２号、３５７〜６２頁を参照）。
【０１１６】
本発明の化合物は、ＡｐｏＥ欠損マウスモデルにおいてアテローム性動脈硬化症／血栓症を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｎａｋａｓｈｉｍａ，Ｙ．ら、「ＡｐｏＥ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ  ｄｅｖｅｌｏｐ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ｏｆ  ａｌｌ  ｐｈａｓｅｓ  ｏｆ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｔｈｒｏｕｇｈｏｕｔ  ｔｈｅ  ａｒｔｅｒｉａｌ  ｔｒｅｅ」、Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．（１９９４）、第１４巻、第１号、１３３〜４０頁を参照）。
【０１１７】
本発明の化合物は、コラーゲン−エピネフリン誘発肺血栓塞栓症モデルおよびうっ血誘発静脈血栓症モデルを使用して血栓症を治療することにおけるそれらの使用についても試験され得る（Ａｎｇｅｌｉｌｌｏ−Ｓｃｈｅｒｒｅｒ  Ａ．ら、「Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｇａｓ６  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｐｌａｔｅｌｅｔ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｄｕｒｉｎｇ  ｔｈｒｏｍｂｕｓ  ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ  ｔｈｅｒａｐｙ」、Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．（２００５）、第１１５巻、２３７〜４６頁を参照）。
【０１１８】
本発明の化合物は、ＳＣＩＤマウスモデルまたは乾癬のヒト皮膚モデルを使用して乾癬を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｎｉｃｋｏｌｏｆｆ，Ｂ．Ｊ．ら、「Ｓｅｖｅｒｅ  ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｍｏｕｓｅ  ａｎｄ  ｈｕｍａｎ  ｐｓｏｒｉａｔｉｃ  ｓｋｉｎ  ｃｈｉｍｅｒａｓ．Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｎｅｗ  ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌ」、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．（１９９５）、第１４６巻、第３号、５８０〜８頁を参照）。
【０１１９】
本発明の化合物は、ラット角膜血管新生モデル（Ｓａｒａｙｂａ  ＭＡ、Ｌｉ  Ｌ、Ｔｕｎｇｓｉｒｉｐａｔ  Ｔ、Ｌｉｕ  ＮＨ、Ｓｗｅｅｔ  ＰＭ、Ｐａｔｅｌ  ＡＪ、Ｏｓａｎｎ  ＫＥ、Ｃｈｉｔｔｉｂｏｙｉｎａ  Ａ、Ｂｅｎｓｏｎ  ＳＣ、Ｐｅｒｓｈａｄｓｉｎｇｈ  ＨＡ、Ｃｈｕｃｋ  ＲＳ、Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｏｒｎｅａｌ  ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａ  ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｇａｍｍａ  ｌｉｇａｎｄ．Ｅｘｐ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓ．２００５年３月、８０（３）：４３５〜４２を参照）またはレーザー誘発マウス脈絡膜新血管形成（neovasculation）モデル（Ｂｏｒａ，Ｐ．Ｓ．ら、「Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ｃｈｏｒｏｉｄａｌ  ｎｅｏｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ａ  ｌａｓｅｒ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｓｉｍｕｌａｔｉｎｇ  ｅｘｕｄａｔｉｖｅ（ｗｅｔ）ｍａｃｕｌａｒ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ」、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ（２００３）、第１００巻、第５号、２６７９〜８４頁、２００３年２月１４日電子出版を参照）を使用して加齢性黄斑変性または糖尿病性網膜症を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る。
【０１２０】
本発明の化合物は、マウス未熟児網膜症モデルの未熟児網膜症を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｓｍｉｔｈ，Ｌ．Ｅ．ら、「Ｏｘｙｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｏｕｓｅ」、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．（１９９４）、第３５巻、第１号、１０１〜１１頁を参照）。
【０１２１】
本発明の化合物は、ラット抗−Ｔｈｙ１．１誘発実験的メサンギウム（mesengial）増殖性糸球体腎炎モデルの糸球体腎炎または糖尿病性腎症を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｓｍｉｔｈ，Ｌ．Ｅ．ら、前掲を参照）。
【０１２２】
本発明の化合物は、慢性腎移植拒絶反応のラットモデルを使用して腎移植（tranplant）拒絶反応を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｙｉｎ，Ｊ．Ｌ．ら、「Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｒｒｅｓｔ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｇｅｎｅ  ６  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ａ  ｒａｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ｒｅｊｅｃｔｉｏｎ」、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（２００２）、第７３巻、第４号、６５７〜６０頁を参照）。
【０１２３】
本発明の化合物は、ＣＡＩＡマウスモデルを使用して関節リウマチを治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｐｈａｄｋｅ，Ｋ．ら、「Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｖａｒｉｏｕｓ  ａｎｔｉ−ａｒｔｈｒｉｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ  ｏｎ  ｔｙｐｅ  ＩＩ  ｃｏｌｌａｇｅｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｍｏｕｓｅ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ｍｏｄｅｌ」、Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（１９８５）、第１０巻、第１号、５１〜６０頁を参照）。
【０１２４】
本発明の化合物は、ＳＴＲ／ＯＲＴマウスモデルを使用して変形性関節症を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る（Ｂｒｅｗｓｔｅｒ，Ｍ．ら、「Ｒｏ  ３２−３５５５，ａｎ  ｏｒａｌｌｙ  ａｃｔｉｖｅ  ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｄａｍａｇｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＳＴＲ／ＯＲＴ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ」、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ．Ｒｈｅｕｍ．（１９９８）、第４１巻、第９号、１６３９〜４４頁を参照）。
【０１２５】
本発明の化合物は、卵巣摘出ラットモデル（Ｗｒｏｎｓｋｉ，Ｔ．Ｊ．ら、「Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ａｎｄ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｓ  ｏｆ  ｂｏｎｅ  ｔｕｒｎｏｖｅｒ  ｐｒｏｔｅｃｔ  ａｇａｉｎｓｔ  ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ  ｉｎ  ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｉｚｅｄ  ｒａｔｓ」、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ（１９８９）、第１２５巻、第２号、８１０〜６頁を参照）または卵巣摘出マウスモデル（Ａｌｅｘａｎｄｅｒ，Ｊ．Ｍ．ら、「Ｈｕｍａｎ  ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ  ｈｏｒｍｏｎｅ  １−３４  ｒｅｖｅｒｓｅｓ  ｂｏｎｅ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｉｚｅｄ  ｍｉｃｅ」、Ｊ  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ．（２００１）、第１６巻、第９号、１６６５〜７３頁；Ｆｕｊｉｏｋａ，Ｍ．ら、「Ｅｑｕｏｌ，ａ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｏｆ  ｄａｉｄｚｅｉｎ，ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｂｏｎｅ  ｌｏｓｓ  ｉｎ  ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｉｚｅｄ  ｍｉｃｅ」、Ｊ  Ｎｕｔｒ．（２００４）、第１３４巻、第１０号、２６２３〜７頁を参照）を使用して骨粗しょう症を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る。
【０１２６】
本発明の化合物は、Ｈ２Ｏ２誘発モデル（Ｋａｄｏｙａ，Ｋ．ら、「Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｃａｌｐａｉｎ  ｉｎ  ｈｙｄｒｏｇｅｎ  ｐｅｒｏｘｉｄｅ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｃａｔａｒａｃｔ」、Ｃｕｒｒ．ＥｙｅＲｅｓ．（１９９３）、第１２巻、第４号、３４１〜６頁を参照）またはエモリーマウスモデル（Ｓｈｅｅｔｓ，Ｎ．Ｌ．ら、「Ｃａｔａｒａｃｔ−ａｎｄ  ｌｅｎｓ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＡＲＫ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｋｉｎａｓｅ  ｉｎ  Ｅｍｏｒｙ  ｍｏｕｓｅ  ｃａｔａｒａｃｔ」、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．（２００２）、第４３巻、第６号、１８７０〜５頁を参照）を使用して白内障を治療することにおけるそれらの使用について試験され得る。
【０１２７】
本発明の医薬組成物および投与
本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容できる塩の、純粋形態または適切な医薬組成物での投与は、同様の有用性をもたらす作用物質の認められている投与モードのいずれかによって行われ得る。本発明の医薬組成物は、本発明の化合物を、適切な薬学的に許容できる担体、賦形剤または添加剤と組み合わせることによって調製でき、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、軟膏剤、液剤、坐剤、注射剤、吸入剤、ゲル剤、マイクロスフェア剤およびエアゾール剤等、固体、半固体、液体または気体形態の調製物に製剤化され得る。そのような医薬組成物を投与する典型的な経路は、経口、局所、経皮、吸入、非経口、舌下、口腔、直腸、膣内および鼻腔内を含むがこれらに限定されない。非経口という用語は、本明細書において使用される場合、皮下注射、静脈、筋肉内、胸骨内注射または注入技術を含む。本発明の医薬組成物は、その中に含有されている活性成分が、患者への組成物の投与時に生物学的に利用可能であるように製剤化される。対象または患者に投与される組成物は、１種または複数の投薬単位の形態をとり、ここで、例えば、錠剤は単一投薬単位であってよく、エアゾール剤形態の本発明の化合物の容器は複数の投薬単位を収納し得る。そのような剤形を調製する実際の方法は、当業者には既知であるか、または明白であろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０００）を参照されたい。投与される組成物は、いずれの場合も、本発明の教示に従う関心対象の疾患または状態の治療のための、治療有効量の本発明の化合物または薬学的に許容できるその塩を含有する。
【０１２８】
本発明の医薬組成物は、固体または液体の形態であってよい。一態様において、担体（複数可）は粒子であるため、組成物は例えば錠剤または散剤形態である。担体（複数可）は液体であってよく、このとき組成物は、例えば、経口油、注射用液体、または例えば吸入投与において有用なエアゾール剤である。
【０１２９】
経口投与が意図されている場合、医薬組成物は好ましくは固体または液体形態のいずれかであり、ここで、半固体、半液体、懸濁剤およびゲル剤形態は、本明細書において固体または液体のいずれかとみなされる形態の中に含まれる。
【０１３０】
経口投与用の固体組成物として、医薬組成物は、散剤、顆粒剤、圧縮錠剤、丸剤、カプセル剤、チューインガム剤、ウエハー剤等の形態に製剤化され得る。そのような固体組成物は、典型的には、１種または複数の不活性賦形剤または食用担体を含有することになる。加えて、下記のうちの１種または複数が存在し得る：カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微結晶性セルロース、トラガカントガムまたはゼラチン等の結合剤；デンプン、乳糖またはデキストリン等の添加剤、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、プリモゲル、コーンスターチ等の崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはステロテックス等の滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素等の流動促進剤；精製白糖またはサッカリン等の甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジ香味剤等の香味剤；および着色剤。
【０１３１】
医薬組成物が、カプセル剤、例えばゼラチンカプセル剤の形態である場合、該組成物は、上記種類の材料に加えて、ポリエチレングリコールまたは油等の液体担体を含有し得る。
【０１３２】
医薬組成物は、液体、例えば、エリキシル剤、シロップ剤、液剤、乳剤または懸濁剤の形態であってよい。液体は、２つの例として、経口投与用または注射による送達用であり得る。経口投与が意図されている場合、好ましい組成物は、本化合物に加えて、甘味剤、保存剤、染料／着色剤および調味料の１つまたは複数を含有する。注射によって投与されることが意図されている組成物には、界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、緩衝剤、安定剤および等張剤の１つまたは複数が含まれ得る。
【０１３３】
本発明の液体医薬組成物は、それらが液剤、懸濁剤または他の類似形態のいずれであろうと、下記のアジュバントの１つまたは複数を含み得る：注射用水、食塩溶液、好ましくは生理食塩水、リンゲル液、等張塩化ナトリウム、溶媒もしくは懸濁媒として働き得る合成モノもしくはジグリセリド等の固定油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒等の無菌賦形剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベン等の抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウム等の酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸等のキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩等の緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロース等の張度調整のための作用物質。非経口調製物は、ガラスまたはプラスチック製の、アンプル、使い捨て注射器または複数回用量バイアルに封入されてよい。生理食塩水は、好ましいアジュバントである。注射用医薬組成物は、好ましくは無菌である。
【０１３４】
非経口または経口投与のいずれかが意図されている本発明の液体医薬組成物は、適切な投薬が取得されるような量の本発明の化合物を含有すべきである。典型的には、この量は、組成物中少なくとも０．０１％の本発明の化合物である。経口投与が意図されている場合、この量は、組成物の重量の０．１〜約７０％で変動し得る。好ましい経口医薬組成物は、約４％〜約７５％の本発明の化合物を含有する。本発明による好ましい医薬組成物および調製物は、非経口投薬単位が、本発明の希釈前に０．０１〜１０重量％の化合物を含有するように調製される。
【０１３５】
本発明の医薬組成物は、局所投与が意図されていてよく、その場合、担体は、液剤、乳剤、軟膏剤またはゲル剤基剤を適宜含み得る。基剤は、例えば、下記の１つまたは複数を含み得る：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、ミツロウ、鉱油、水およびアルコール等の賦形剤、ならびに乳化剤および安定剤。局所投与用の医薬組成物においては、増粘剤が存在し得る。経皮投与が意図されている場合、組成物は、経皮パッチまたはイオントフォレーシスデバイスを含み得る。典型的な製剤は、約０．１〜約１０％ｗ／ｖ（単位体積当たりの重量）の濃度の本発明の化合物を含有し得る。
【０１３６】
本発明の医薬組成物は、例えば、直腸内で融解して薬物を放出する坐剤の形態での直腸投与が意図されていてよい。直腸投与用の組成物は、適切な非刺激性の添加剤として脂肪性基剤を含有し得る。そのような基剤は、ラノリン、ココアバターおよびポリエチレングリコールを含むがこれらに限定されない。
【０１３７】
本発明の医薬組成物は、固体または液体投薬単位の物理的形態を修正する種々の材料を含み得る。例えば、組成物は、活性成分の周囲にコーティングシェルを形成する材料を含み得る。コーティングシェルを形成する材料は、典型的には不活性であり、例えば、砂糖、セラックおよび他の腸溶性コーティング剤から選択され得る。代替として、活性成分は、ゼラチンカプセル剤に入れられていてよい。
【０１３８】
固体または液体形態の本発明の医薬組成物は、本発明の化合物と結合し、それによって化合物の送達を補助する作用物質を含み得る。この性能で作用し得る適切な作用物質は、モノクローナルもしくはポリクローナル抗体、タンパク質またはリポソームを含む。
【０１３９】
本発明の医薬組成物は、エアゾール剤として投与され得る投薬単位からなってよい。エアゾール剤という用語は、コロイド的性質の系〜加圧包装からなる系の範囲にわたる多様な系を表すために使用される。送達は、液化もしくは圧縮ガスによるものであってよく、または活性成分を分注する適切なポンプ系によるものであってよい。本発明の化合物のエアゾール剤は、活性成分（複数可）を送達するために、単相、二相または三相系で送達され得る。エアゾール剤の送達は、必要な容器、活性剤、弁、サブ容器等を含み、これらが一緒になってキットを形成し得る。当業者であれば、必要以上の実験をすることなく、好ましいエアゾール剤を決定することができる。
【０１４０】
本発明の医薬組成物は、薬学技術分野において周知の方法論によって調製できる。例えば、注射によって投与されることが意図されている医薬組成物は、液剤を形成するように、本発明の化合物を滅菌蒸留水と組み合わせることによって調製できる。均質な液剤または懸濁剤の形成を容易にするために、界面活性剤を添加してよい。界面活性剤は、水性送達系における化合物の溶解または均質な懸濁を容易にするように本発明の化合物と非共有結合的に相互作用する化合物である。
【０１４１】
本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容できる塩は、治療有効量で投与され、該量は、用いられる特定化合物の活性；該化合物の代謝安定性および作用の長さ；患者の年齢、体重、全般的健康、性別および食習慣；投与のモードおよび時間；排泄率；薬物組合せ；特定の障害または状態の重症度；ならびに療法を受けている対象を含む多様な要因に応じて変動する。概して、治療有効１日用量は、（７０ｋｇの哺乳動物について）約０．００１ｍｇ／ｋｇ（すなわち０．０７ｍｇ）〜約１００ｍｇ／ｋｇ（すなわち７．０ｇｍ）であり；好ましくは（preferaby）、治療有効用量は、（７０ｋｇの哺乳動物について）約０．０１ｍｇ／ｋｇ（すなわち０．７ｍｇ）〜約５０ｍｇ／ｋｇ（すなわち３．５ｇｍ）であり；より好ましくは、治療有効用量は（７０ｋｇの哺乳動物について）約１ｍｇ／ｋｇ（すなわち７０ｍｇ）〜約２５ｍｇ／ｋｇ（すなわち１．７５ｇｍ）である。
【０１４２】
本発明の化合物または薬学的に許容できるその塩は、１種または複数の他の治療剤の投与と同時に、その前に、または後に投与してもよい。そのような併用療法は、本発明の化合物および１種または複数のさらなる活性薬剤を含有する単一の医薬投薬製剤の投与、ならびに本発明の化合物および各活性薬剤の、その独自の別個の医薬投薬製剤での投与を含む。例えば、本発明の化合物および他の活性薬剤は、患者に、錠剤もしくはカプセル剤等の単一の経口投薬組成物中で一緒に投与され得、または各作用物質は、別個の経口投薬製剤で投与され得る。別個の投薬製剤が使用される場合、本発明の化合物および１種または複数のさらなる活性薬剤は、本質的に同じ時間に、すなわち同時発生的に、または別個に時間差で、すなわち順次に投与され得、併用療法はこれらのレジメンをすべて含むものと理解される。
【０１４３】
本発明の化合物の調製
下記の反応スキームは、前記の発明の概要に記載した本発明の化合物を、単離された立体異性体又はその混合物として、互変異性体又はその混合物として、あるいは製薬的に許容される塩又はＮ−オキサイドとして、製造するための方法を例示する。以下の反応スキームにおいて、置換基の組み合わせ及び／又は表示した式の変数は、そのような寄与(contributions)が安定な化合物をもたらす場合に限り許されると解される。
【０１４４】
以下に記載する過程において、中間化合物の官能基は適切な保護基によって保護されることが必要となり得ることも当業者には分かるであろう。そのような官能基は、ヒドロキシ、アミノ、メルカプトおよびカルボン酸を含む。ヒドロキシに適切な保護基は、トリアルキルシリルまたはジアリールアルキルシリル（例えば、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリルまたはトリメチルシリル）、テトラヒドロピラニル、ベンジル等を含む。アミノ、アミジノおよびグアニジノに適切な保護基は、ベンジル、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル等を含む。メルカプトに適切な保護基は、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ”（式中、Ｒ”は、アルキル、アリールまたはアリールアルキルである）、ｐ−メトキシベンジル、トリチル等を含む。カルボン酸に適切な保護基は、アルキル、アリールまたはアリールアルキルエステルを含む。
【０１４５】
当業者に既知であり、本明細書において記載されている通りの標準的な技術に従って、保護基を付加または除去してよい。
【０１４６】
保護基の使用は、Ｇｒｅｅｎ，Ｔ．Ｗ．およびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９９）、第３版、Ｗｉｌｅｙにおいて詳細に記述されている。当業者ならば分かるように、保護基は、ワング樹脂、リンク樹脂または２−クロロトリチル−クロリド樹脂等のポリマー樹脂であってもよい。
【０１４７】
本発明の化合物のそのような保護誘導体は、それ自体では薬理活性を保有し得ないが、哺乳動物に投与され、その後、体内で代謝されて薬理学的に活性な本発明の化合物を形成し得ることも、当業者には分かるであろう。したがって、そのような誘導体は「プロドラッグ」と記述され得る。
【０１４８】
当業者は、本明細書に記載された方法に類似する方法により、あるいは当業者に周知の方法により、本発明の化合物を製造することができると理解される。また、当業者は、以下に記載するのと類似する方法において、適当な出発成分を用い、合成パラメータを適宜変更することにより、以下に明示されていない本発明の他の化合物を製造することができると理解される。概して、出発成分は、Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｉｎｃ．、Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｔｒｉｘ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＴＣＩおよびフルオロｃｈｅｍ  ＵＳＡ等の供給源から入手するか、または当業者に既知の資料（例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ、第５版（Ｗｉｌｅｙ、２０００年１２月）を参照）に従って合成するか、または本発明において記述されている通りに調製することができる。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、Ｇｅｍｉｎｉの３００ＭＨｚ機器を使用し、トリメチルシラン（ＴＭＳ）を内部基準として用いて、ＣＤＣｌ３、ＤＭＳＯ−ｄ６、ＣＤ３ＯＤ、アセトン−ｄ６で記録した。試薬および溶媒は、商業的供給源から購入し、さらに精製することなく使用した。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、窒素陽圧下、シリカゲル（２３０〜４００メッシュ）を使用して行った。純度および質量のＬＣＭＳスペクトルは、ＷａｔｅｒｓのＬＣＭＳ機器を使用して記録した。脱イオン水を使用して反応物を希釈し、生成物を洗浄した。使用したブラインは、塩化ナトリウムを脱イオン水に飽和点まで溶解することによって調製した。
【０１４９】
以下の反応スキーム１は、本発明の化合物であって、Ｒ１４が本発明の化合物の中心ジアミノトリアゾール部分のＮ３位置にある置換基を示し、Ｒ１５が本発明の化合物の中心ジアミノトリアゾール部分の１−位における置換基を示す化合物の一般的な製造方法を例示する。
【化２０】
0005613156.tif 000021
【０１５０】
式（Ａ）、式（Ｂ）および式（Ｄ）の化合物は、市販されているか、または当業者に既知の方法によって、もしくは本明細書において開示されている方法によって調製できる。
概して、本発明の化合物は、反応スキーム１によって説明されている通り、最初に式（Ａ）の化合物（ここで、該化合物中のフェニル基は、当業者に既知の他の適切な基または適切に置換された基で置き換えられていてよい）（１．１当量）を、当量の式（Ｂ）のアニリンで、イソプロピルアルコールを含むがこれらに限定されない極性溶媒中、周囲温度にて終夜処理することによって調製される。式（Ｃ）のジアリールイソウレア生成物は概して沈殿するため、単離は、濾過し、適切な溶媒で洗浄し、乾燥させることによって遂行できる。式（Ｄ）のヒドラジン水和物（２当量）を、アルコールまたは他の適切な溶媒中の式（Ｃ）の化合物のスラリーに添加する。概して、環形成反応は周囲温度で生起し、得られた本発明の化合物は標準的な単離技術によって単離できる。
【０１５１】
本発明の化合物であって、Ｒ１５置換基が（例示されている１−位ではなく）２−位で窒素に結合しているものは、反応スキーム１において概説されている合成経路を使用して、その上の置換基の立体的および電子的性質ならびに用いられる特定の反応条件に応じて変動する量で調製できる。いくつかの事例において、Ｒ１５置換基が２−位で窒素に結合している本発明の化合物は、例えば本明細書において記載されているようなカラムクロマトグラフィー中に、多量の異性体としてのＲ１５置換基が１−位にある本発明の化合物とともに、少量の異性体として単離される。
【０１５２】
以下の反応スキーム２は、前記発明の概要に記載した式（ＩＩＩ）の化合物を製造する特定の方法であり、Ｒ７は式（ＩＩＩ）の化合物について述べた通りであり、ｐＨはフェニル基である。
【化２１】
0005613156.tif 000022
【０１５３】
式（Ａ−１）、式（Ｂ−１）および式（Ｄ−１）の化合物は、市販されているか、または当業者に既知の方法によって、もしくは本明細書において開示されている方法によって調製できる。
概して、式（ＩＩＩ）の化合物は、前記反応スキーム２によって説明されている通り、最初に式（Ａ−１）の化合物（ここで、該化合物中のフェニル基は、当業者に既知の他の適切な基または適切に置換された基で置き換えられていてよい）（１．１当量）を、当量の式（Ｂ）のアニリンで、イソプロピルアルコールを含むがこれらに限定されない極性溶媒中、周囲温度にて終夜処理することによって調製される。式（Ｃ−１）のジアリールイソウレア生成物は概して沈殿するため、単離は、濾過し、適切な溶媒で洗浄し、乾燥させることによって遂行できる。式（Ｄ−１）のヒドラジン水和物（２当量）を、アルコールまたは他の適切な溶媒中の式（Ｃ−１）の化合物のスラリーに添加する。概して、環形成反応は周囲温度で生起し、生成物の式（ＩＩＩ）のトリアゾールは標準的な単離技術によって単離できる。
【０１５４】
当業者は、本発明の他の化合物が、この方法及び適当な出発原料を用いて同様に製造できることを認めるであろう。
式（Ｂ−１）の化合物は、立体特異的トランスアミナーゼを用いて対応するケトンから調製できる。トランスアミナーゼ（アミノトランスフェラーゼとしても既知）は、アミノ供与体分子（アミンまたはアミノ酸等）とアミノアクセプター分子（ケトンまたはα−ケト酸等）との間のアミノ基転移反応を触媒する酵素である。具体的には、酵素的アミノ基転移は、アミノ基をアミノ供与体（ドナー）分子から除去すること（カルボニル基は残す）、およびその中のケトン部分をアミン（またはアミノ酸）に変換することによってアミノ基をアミノアクセプター分子（またはα−ケト酸）に転移させることを要する。トランスアミナーゼおよび立体選択的合成におけるその使用の記述は、参照により全体が本明細書に組み込まれる、「Ｔｒａｎｓｍｉｎａｔｉｏｎｓ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（第２版）（２００２）」、Ｊ．Ｄａｖｉｄ  ＲｏｚｚｅｌｌおよびＡｎｄｒｅａｓ  Ｓ．Ｂｏｍｍａｒｉｕｓ著、８７３〜８９３頁に見出すことができる。
【０１５５】
トランスアミナーゼは、対応するケトン前駆体からのキラルアミンの酵素的合成に特に適している。市販のトランスアミナーゼを使用して、本発明の化合物の調製における所望の出発原料のキラル酵素的アミノ化を実現することができる。特に、下記の式（ｉ）のケトン［式中、ｎおよびｍは同じであり、０、１または２であり、Ｒ１２は、ニトロ、ハロまたは−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６（ここで、Ｒ１６は水素又はアルキルである）である］は、以下で示す通り、適切な条件下、（Ｓ）−特異的トランスアミナーゼ（tranasminase）およびＬ−アラニン等のアミノ供与体分子、または（Ｒ）−特異的トランスアミナーゼおよびＬ−アラニン等のアミノ供与体分子を利用することにより、対応する（Ｓ）−鏡像異性体および（Ｒ）−鏡像異性体［ここで、アミノ基が結合している炭素は、それぞれ（Ｓ）または（Ｒ）配置のいずれかで結合している］に変換できる。
【化２２】
0005613156.tif 000023
【０１５６】
当業者であれば、（Ｓ）−鏡像異性体および（Ｒ）−鏡像異性体上のアミノ基は、当業者に既知の標準的な手順によってさらに官能化され得ることが分かるであろう。例えば、上記（Ｓ）−鏡像異性体の適切なアルキル化条件下における１，４−ジブロモブタンでの処理は、アミノ基を１−ピロリジニル基に変換させることになる。あるいは、上記（Ｓ）−鏡像異性体の適切なアシル化剤での処理は、アミノ基を結果としてアシル化させる等になる。
式（ｉ）の環式ケトンを適切な鏡像異性体に変換するために適切なトランスアミナーゼを利用して、適切な鏡像異性体を、８０％より大きいｅｅ、好ましくは９０％より大きいｅｅで単離することができる。
【０１５７】
式（Ｄ−１）の化合物は、以下の反応スキーム３に開示される方法に従って調製できる。
【化２３】
0005613156.tif 000024
【０１５８】
ピリジン、２−クロロアセタミド及びキヌクリジンは、市販されているか当業者に周知の方法に従って調製できる。一般に式（Ｄ−１）の化合物は、前記反応スキーム３に示すように、最初に極性非プロトン溶媒中、例えば限定されないがアセニトリル中の２−クロロアセトアミドの懸濁物を等モル量のピリジンで処理する。反応混合物を約７０℃から約１００℃の間の適切な温度で、約４時間から約１０時間の間の適切な時間攪拌する。濾過、再結晶等の標準的な単離技術により反応混合物から式（Ｄａ）の化合物を単離する。
非プロトン溶媒、例えば限定されないがエタノール中の３−キヌクリジン及び等モル量のベンズアルデヒド（ＰｈＣＨＯ）の混合物を、水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）等の塩基存在下で、約１時間から約３時間の間の適当な時間還流させる。得られた溶液を室温まで冷却した後、式（Ｄｂ）の化合物を標準的単離技術により単離する。
非プロトン溶媒、例えば限定されないがｎ−ブタノール中の式（Ｄｂ）の化合物と過剰モル量の式（Ｄａ）の化合物の溶液を、塩基、例えば限定されないがピリジンと、弱酸、例えば限定されないが酢酸の存在下で、約１１０℃から約１２５℃の間の適切な温度で、約１０時間から約２０時間の間の適切な時間攪拌する。反応混合物を室温まで冷却した後、式（Ｄｃ）の化合物を、濃縮、抽出及び再結晶等の標準的な単離技術により単離する。
【０１５９】
適量の塩化チオニル中の式（Ｄｃ）の化合物溶液に、触媒量のジアルキルホルムアミド、好ましくはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を添加する。得られた反応混合物を約４０℃から約１００℃、好ましくは約６０℃から約８０℃、より好ましくは約６５℃から約７５℃の間の適切な温度で、約２時間から約２０時間、好ましくは約５時間から約１５時間、より好ましくは約８時間から約１２時間の間の適切な時間加熱する。得られた反応混合物を室温まで冷却して濃縮する。得られた残渣を氷水に投入し、炭酸ナトリウム飽和溶液を添加して得られる溶液のｐＨを約１０から１１の間のｐＨに調整する。得られた溶液から、濃縮等の標準的単離技術により式（Ｄｄ）の化合物を単離し、フラッシュクロマトグラフィにより精製する。
【０１６０】
次いで、式（Ｄｄ）の化合物を、酸、例えば限定されないが塩酸の存在下で、無水エタノール及び無水ヒドラジンで処理する。得られた反応混合物を、約１４０℃から約１６０℃の間の適切な温度で、約８０時間から約１００時間の間の適切な時間加熱することにより、式（Ｄ−１）の化合物が生成され、それを濃縮、抽出、水分除去及び濃縮といった標準的単離技術により反応混合物から単離する。
【０１６１】
下記の反応４［ここで、式（Ｂ−１ａ）の化合物は上記した通りの式（ｉ）の化合物であり、ＰＧは窒素保護基、例えば−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１３（但しＲ１３は前記発明の概要で式（ＩＩＩ）の化合物について記載した通りである）を表す］は、上記したトランスアミナーゼを利用して、前記発明の概要の式（ＩＩＩ）の化合物である式（ＩＩＩ−２）の化合物を調製する方法を例示するものである。
【化２４】
0005613156.tif 000025
【０１６２】
式（Ｂ−１ａ）の化合物は、市販されているか、または当業者に既知の方法によって調製できる。式（Ｄ−１）の化合物は、当業者に既知の方法に従って、または本明細書において開示されている方法によって調製できる。（Ｓ）−特異的トランスアミナーゼは、Ｃｏｄｅｘｉｓから市販されている。好ましくは、（Ｓ）−特異的トランスアミナーゼは、Ｃｏｄｅｘｉｓ製のＡＴＡ−１０３である。
概して、式（ＩＩＩ−１）の化合物は、反応スキーム４において上記で開示されている方法により、最初に式（Ｂ−１ａ）のケトンを式（Ｂ−１ｂ）のキラル化合物に変換することによって調製され、ここで、アミノ供与体分子、好ましくはＬ−アラニンからのアミノ基を、適切な条件下での酵素的アミノ基転移反応によって式（Ｂ−１ａ）のケトンに転移させる。特に、式（Ｂ−１ａ）のケトンを、触媒量のトランスアミナーゼ、好ましくは（Ｓ）−特異的トランスアミナーゼ、および２−ケト酸副生成物を還元する（失活させる）化学量論または過剰化学量論量のピルベートレダクターゼ混合物の存在下、過剰モル量のアミノ供与体分子で処理し、それによって反応を所望の方向に駆動する。好ましくは、ピルベートレダクターゼ混合物はＣｏｄｅｘｉｘ製のＰＲＭ−１０２である。反応は、周囲温度にて、約７．５〜約８．０のｐＨで、約２４時間〜約６日間の期間、好ましくは約４日間行う。式（Ｂ−１ｂ）のキラル化合物を、当業者に既知の標準的な単離技術によって反応混合物から単離する。
【０１６３】
あるいは、アミノ基転移反応は、「Ｔｒａｎｓｍｉｎａｔｉｏｎｓ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｃａｔａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（第２版）（２００２）」、Ｊ．Ｄａｖｉｄ  ＲｏｚｚｅｌｌおよびＡｎｄｒｅａｓ  Ｓ．Ｂｏｍｍａｒｉｕｓ著、８７３〜８９３頁においてさらに詳細に記述されている通り、該反応を、本質的に不可逆のステップにおいて２−ケト酸副産物を消費する第２の反応と共役させることによって完了まで駆動され得る。
次いで、式（Ｂ−１ｂ）のキラル化合物のアミノ基を標準的な窒素保護手順によって保護して、式（Ｂ−１ｃ）の化合物を生成し、これを当業者に既知の標準的な単離技術によって反応混合物から単離する。次いで、式（Ｂ−１ｃ）の化合物を、Ｈ２／Ｐｄによる処理等の標準的な還元条件に供して式（Ｂ−１）の対応するアニリン化合物を生成し、これを当業者に既知の標準的な単離技術によって反応混合物から単離する。次いで、式（Ｂ−１）の化合物を式（Ａ）のシアノカルボンイミド酸ジフェニルで処理して式（Ｃ−１ａ）の化合物を生成し、これを当業者に既知の標準的な単離技術によって反応混合物から単離する。
次いで、（Ｃ−１ａ）の化合物を、式（Ｄ−１）の化合物で、非プロトン性溶媒、好ましくはトルエンの存在下、約８０℃〜約１００℃の温度にて、約１２時間〜約３６時間の期間、好ましくは約２４時間処理して式（ＩＩＩ−１）の化合物を生成し、これを当業者に既知の標準的な単離技術によって反応混合物から単離する。式（ＩＩＩ−１）の化合物は、上記で説明した通りの式（ＩＩＩ）の化合物である。
【０１６４】
式（ＩＩＩ−１）の化合物上の保護基を、酸加水分解等、当業者に既知の標準的な脱保護条件下で除去して式（ＩＩＩ−２）の化合物を生成することができ、これを当業者に既知の標準的な単離技術によって反応混合物から単離する。式（ＩＩＩ−２）の化合物を、標準的な還元的アミノ化条件下、適切なアルデヒドまたはケトンでさらに処理して、前記発明の概要に記載した式（ＩＩＩ）の更なる化合物を生成することができる。
によって反応混合物から単離する。
遊離塩基または酸形態で存在する本発明のすべての化合物は、当業者に既知の方法による適切な無機または有機の塩基または酸での処理によって、それらの薬学的に許容できる塩に変換できる。本発明の化合物の塩は、当業者に既知の標準的な技術によって、それらの遊離塩基または酸形態に変換できる。
下記の具体的な「合成的調製例」（中間体用）および「合成実施例」（本発明の化合物用）は、本発明の実践を補助するためのガイドとして提供するものであり、本発明の範囲の制限を意図しない。以下の各化合物に続く番号は、以下でさらに詳細に論じる通り、表１〜９におけるその番号を指す。
【０１６５】
合成的調整例１
１−（２−アミノ−２−オキソエチル）ピリジニウムクロリド（Ｄａ）の合成
【化２５】
0005613156.tif 000026
１００ｍＬのアセトニトリル中の２−クロロアセトアミド（５０．００ｇ，５２４．０１ｍｍｏｌ）の懸濁物にピリジン（４１．４５ｇ，５２４．０１ｍｍｏｌ）を添加した。９０℃で１０時間攪拌した後、懸濁物を
２２℃まで冷却し、吸引濾過して１００ｍＬのヘキサで洗浄した。エタノールからの再結晶の後、生成物、１−（２−アミノ−２−オキソエチル）ピリミジンクロリド（７９．１０ｇ，収率：８７％，ｍｐ２０５．２℃）を色結晶として得た。
【０１６６】
合成的調整例２
（Ｚ）−２−ベンジリデンキヌクリジン−３−オン（Ｄｂ）の合成
【化２６】
0005613156.tif 000027
３−キヌクリジノン（２０．９ｇ，１６７ｍｍｏｌ）、ベンズアルデヒド（１７．７ｇ，１６７ｍｍｏｌ）、及び７５ｍＬエタン−ル中の水酸化ナトリウムの１ペレットの混合物を、１．５時間還流させた。溶液を冷却し、黄色沈殿物を回収し、エタノールで洗浄して乾燥させることにより、（Ｚ）−２−ベンジリデンキヌクリジン−３−オン（Ｄｂ）（３２．５ｇ，収率：９１．２％，  ｍｐ１３０−１３２℃）を得た。
【０１６７】
合成的調整例３
１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−オン（Ｄｃ）の合成
【化２７】
0005613156.tif 000028
２−ベンジリデンキクリジン−３−オン（３．０ｇ，１４．１ｍｍｏｌ）及び１−（２−アミノ−２−オキソエチル）ピリジニウムクロリド（７．３ｇ，４２．３ｍｍｏｌ）のブタン−１−オール（１００  ｍＬ）中の溶液で、ピペリジン（５ｍＬ）及びＨＯＡｃ（３ｍＬ）を含む溶液を１１５−１２０℃で１８時間攪拌した。室温まで冷却した後、混合物を真空で濃縮し、得られた残渣をＣＨＣｌ３中５％ＭｅＯＨ（２ｘ１５０ｍＬ）及び水の間に分割した。有機相ｗｐ濃縮して結晶性残渣を得、それをＭｅＯＨから再結晶させて１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−オン（２．９１  ｇ，収率：８２％，ｍｐ２２０  ℃）を得た。
【０１６８】
合成的調整例４
６−クロロ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン（Ｄｄ）の合成
【化２８】
0005613156.tif 000029
２．５ｍＬの塩化チオニル中の１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−オン（４３５ｍｇ，１．７２ｍｍｏｌ）溶液に、１００  μＬのＤＭＦを添加し、反応混合物を７０℃で１０時間加熱し、真空で濃縮した。残渣を氷水に投入し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を添加してｐＨを１０〜１１に調整した。混合物をＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮してフラッシュクロマトグラフィにより精製し、  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄ  ａｎｄ  ｐｕｒｉｆｉｅｄ  ｂｙ  ｆｌａｓｈ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  （ＥｔＯＡｃ：ｈｅｘａｎｅ，  １：４）により精製し、６−クロロ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン（３１０ｍｇ，６６％）を破棄色固体として得た。1H NMR (CDCl3, 300 MHz) 7.58 (m, 2H), 7.43 (m, 3H), 7.29 (s, 1H), 3.35 (s, 1H), 3.18 (m, 2H), 2.63 (m, 2H), 1.99 (m, 2H), 1.73 (m, 2H) ppm; MS (ES) 271.39 (M+H).
【０１６９】
合成的調整例５
６−ヒドラジノ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン（Ｄ−１）及びＮ，Ｎ−ｄｉ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−ヒドラジノ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジンの合成
【化２９】
0005613156.tif 000030
Ａ．６−クロロ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン（１．０３ｇ）を、無水エタノール（１０ｍＬ）、無水ヒドラジン（Ａｌｄｒｉｃｈ，４．０ｍＬ）及び濃ＨＣｌ（０．４ｍＬ）で処理した。次いでスクリューキャップ加圧チューブ中で反応混合物を１５０℃で、ＬＣＭＳがヒドラジンへの完全変換を示すまで（約９６時間）加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、次いで、真空で濃縮した。残渣をクロロホルムと塩水の間に分配させた。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して６−ヒドラジノ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジンを薄黄色固体として得た（０．６８ｇ）。
Ｂ．あるいは、Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．（２００１），Ｖｏｌ．３，Ｎｏ．９，ｐｐ．１３５１−１３５４に記載されてものと同様の方法で、６−クロロ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン（３７５ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ），Ｃｓ２ＣＯ３（４６０ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ），ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ヒドラゾジホルメート（３２５ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ，  Ａｌｄｒｉｃｈ），トルエン（５．０ｍＬ），Ｐｄ２（ｄｂａ）３（９０  ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ，Ｓｔｅｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ），及びＤＰＰＦ（８０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ，Ｓｔｅｒｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を、乾燥スクリューキャップ加圧チューブにアルゴンとともに配した。反応混合物を１００℃で４８時間、完全にＮ，Ｎ−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−ヒドラジノ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジンに変換されるまで加熱した。変換はＴＬＣで追跡した。２４時間後、約５０％の変換が起こった。この時点で、Ｃｓ２ＣＯ３（２３０ｍｇ，０．７ｍｍｏｌ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ヒドラゾジホルメート（１６０ｍｇ，０．７ｍｍｏｌ，  Ａｌｄｒｉｃｈ），Ｐｄ２（ｄｂａ）３（４５ｍｇ，０．０５ｍｍｏｌ）及びＤＰＰＦ（４０ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）の別の一部を添加した。反応混合物を室温まで冷却し、真空下で濃縮し、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）で精製して、Ｎ，Ｎ−ジ（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−ヒドラジノ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン（３４０ｍｇ，５２％）を固体として得た。1H NMR (CDCl3, 300 MHz) 7.59 (d, 2H), 7.40 (m, 3H), 7.02 (s, 1H), 3.28 (s, 1H), 3.17 (m, 2H), 2.65 (m, 2H), 1.96 (m, 2H), 1.73 (m, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.48 (s, 9H) ppm; MS (ES) 467 (M+H).
【０１７０】
合成的調整例６
フェニルＮ’−シアノ−Ｎ−（７−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）カルバミミデート（Ｃ−１ａ）の合成
微細に砕いた２−ニトロ−８，９−ジヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−７（６Ｈ）−オン（８．００ｇ，３９．０ｍｍｏｌ）及びＬ−アラニン（３４．７ｇ，３９０ｍｍｏｌ）を、反応バッファー（１０００ｍＬ，Ｃｏｄｅｘｉｓ／ＢｉｏＣａｔａｌｙｔｉｃｓ）に添加した。混合物を約２０分間激しく攪拌して均一な懸濁物（明黄色）を得た。ピルベートレダクターゼ混合物（４０．０ｇ，ＰＲＭ−１０２，Ｃｏｄｅｘｉｓ／ＢｉｏＣａｔａｌｙｔｉｃｓ）及びトランスアミナーゼ（０．８５  ｇ，〜１０．６ｗｔ％，ＡＴＡ−１０３）を添加した。反応混合物のｐＨは〜７であった。攪拌をゆっくりと続け、１日に１回ｐＨをチェックし、必要に応じて１ＭのＮａＯＨを用いてｐＨ７．０〜７．５に調整した。反応の間、混合物の色は黄色−オレンジ色に変化した。６日後、ＨＰＬＣ分析によると９９％の返還を示した。飽和ＮａＨＣＯ３溶液（２００ｍＬ）及びＣＨＣｌ３（６００ｍＬ）の添加により反応が進行した。混合物を激しく攪拌して、生成物を有機層に完全に移動させた。終夜攪拌した後、２つの層が形成され、有機層は多量のゲル様固体を含んでいた。有機層を分離し、大型ガラスフリット（中程度）を通して濾過することによりゲル様固体を除去した。水層をＤＣＭで３回抽出した。まとめた有機層をＭｇＳＯ４を通して濾過し、溶媒を留去して乾燥アミン、（７Ｓ）−２−ニトロ−７−アミノ−７，８，９−トリヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン  （７．２７ｇ，９１％，暗赤オイル）を得た。
次いで、単一の鏡像異性体をＢＯＣ−保護し、ニトロ基をＨ２／Ｐｄでの処理で還元し、第一級アニリンを、２０ｍＬイソプロパノール中のジフェニルシアノカルボジイミド（僅かに過剰）で、室温で終夜攪拌しながら処理した。固体を濾過し、イソプロパノール及びエーテルで洗浄して乾燥し、フェニル（７Ｓ）−Ｎ’−シアノ−Ｎ−（７−アミノ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）カルバミミデートを、白色固体として、高収率で（アミノ基転移を解する単一鏡像異性体から）得た。
【０１７１】
合成実施例１
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンの合成
フェニル  （７Ｓ）−Ｎ’−シアノ−Ｎ−（７−アミノ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）カルバミミダート（０．８２ｇ，１．９５ｍｍｏｌ）及び６−ヒドラジノ−１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン（０．５２ｇ，１．９５ｍｍｏｌ）を乾燥トルエン（２５ｍＬ）中で混合した。懸濁物を９０℃に加熱し、２４時間攪拌した。透明溶液を室温に冷却し、トルエンをエバポレータを用いて蒸発させた。粗生成物をＨＰＬＣ及びＴＬＣでチェックした。カラムクロマトグラフィ、
Ｃｏｌｕｍｎ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  ｏｎ  ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ｕｓｉｎｇ  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ  （２０／１）  を用いたシリカゲル上のカラムクロマトグラフィにより透明は画分が得られ、そこから１１４ｍｇ（１０％）の所望化合物（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンを得た。化合物＃２５。不純画分を逆相ＨＰＬＣで更に精製し更に７８ｍｇ（７％）の所望化合物を得た。1H NMR (CDCl3): 8.71-9.02 (m, 3H), 7.67-7.89 (m, 1H), 7.43-7.62 (m, 5H), 7.30-7.43 (m, 1H), 7.00-7.17 (m, 2H), 4.41-4.64 (m, 1H), 3.51-3.82 (m, 4H), 2.97-3.23 (m, 2H), 2.61-2.83 (m, 5H), 2.07-2.34 (m, 4H), 1.86-2.04 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.14-1.37 (m, 2H) ppm; MS (ES) 593.29 (M+H).
【０１７２】
合成実施例２
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジエチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンの合成
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン（２３ｍｇ，０．０３８ｍｍｏｌ）を、ジオキサン中のＨＣｌの４Ｍ溶液に添加した。溶解性を高めるため、２ｍＬのＭｅＯＨを添加した結果、透明な溶液となった。反応混合物を室温で６時間攪拌し、次いで２ＭのＮａＯＨで中和して、遊離アミンの沈殿を生じさせた。生成物を濾過し、水で洗浄し、ＨＶ中で終夜乾燥させて、アミノ化合物、（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−アミノ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン（１８ｍｇ，９６％）を得た。次いで生成物をＤＣＭに溶解させた。続いてアセトアルデヒド（〜５ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）及びＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（２１ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２日間攪拌した後、溶媒を留去して所望化合物、（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジエチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンを得た。化合物＃３５。これを逆相ＨＰＬＣで単離した（１０．８ｍｇ，５２％  ２ステップ）。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.04 (s, 1H), 8.69 (s br, 1H), 7.75 (s br, 2H), 7.54-7.66 (m, 5H), 7.41 (d, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.01 (d, 1H), 2.87-3.18 (m, 8H), 2.60-2.81 (m, 4H), 2.51-2.55 (m, 2H), 2.00-2.28 (m, 4H), 1.66-1.87 (m, 2H), 1.30-1.56 (m, 2H), 1.12-1.28 (m, 6H) ppm; MS (ES) 549.22 (M+H).
【０１７３】
合成実施例３
上記と同様の方法において、適切に置換された原料及び試薬を用いて、以下の化合物を調製した。
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−アミノ−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン、化合物＃１。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 10.06 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.10 (s, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.88 (s, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.53 (m, 4H), 7.40 (s, 1H), 7.12 (t, 1H), 6.72 (d,  1H),  3.53 (s, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.16 (m, 1H), 2.06 (s, 2H), 1.90 (m, 1H), 1.72 (s, 4H), 1.21 (s, 6H) ppm; MS (ES) 480.58 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジンｅ−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz)  9.56 (s, 1H), 9.09 (s, 2H), 8.73 (d, 1H), 7.82 (d, 3H), 7.64 (d, 2H), 7.53 (m, 4H), 4.32 (s, 2H), 3.44 (m, 3H), 3.28 (s, 2H), 2.99 (t, 2H), 2.81 (s, 2H), 2.06 (s, 2H), 1.72 (s, 2H)  ppm; MS (ES) 466.20(M+H);
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−［（（（ジメチル）アミノ）メチル）カルボニルアミノ］−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 10.11 (s, 1H), 9.68 (s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.66 (d, 1H), 8.00(s, 1H), 7.87 (s, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.51 (d, 3H), 4.16 (t, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.51 (s, 1H), 3.15 (d, 2H), 3.03 (t, 2H), 2.79 (s, 6H), 2.73 (m, 3H), 2.05 ( m, 3H), 1.88 (m, 1H), 1.70 (t, 2H) ppm; MS (ES) 565.34 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−［（（ジメチル）アミノ）メチルカルボニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジンｅ−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃４。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.81 (s, 1H), 9.56 (s, 1H), 8.84 (d, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.87 (d, 2H), 7.65 (d, 2H), 7.58 (d, 1H), 7.52 (d,3H), 4.74 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 4.35(m, 2H), 3.84 (t, 1H), 3.66 (t, 1H), 3.50 (s, 1H), 3.30 (s, 2H), 3.02 (t, 2H), 2.90 (t, 1H), 2.80 (d, 7H), 1.06 (s, 2H), 1.70 (s, 2H) ppm; MS (ES) 551.29 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−（シクロペンチルアミノ）−５，６，７，８−テトラヒドロキノリン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，  化合物＃５。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 10.03 ( s, 1H), 8.91 ( s, 1H), 8.75 (d, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.85 (s, 2H), 7.63 (d, 2H), 7.57 (s, 1H), 7.50 ( d, 3H), 3.70 (s, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.35 (d, 2H), 3.03 (s, 2H), 2.90 (m, 1H), 2.71 ( s, 1H), 2.26 ( m, 2H), 2.04 (s, 4H), 1.89 (t, 1H), 1.73 ( d, 4H), 1.57 ( s, 1.57) ppm; MS (ES) 548.28 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（６−（シクロペンチル）−５，６，７，８−テトラヒドロ−１，６−ナフチリジンｅ−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，  化合物＃６。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 10.05 (s, 1H), 9.65 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 7.83 (d, 4H), 7.63 (s, 2H), 7.54 (m, 5H), 4.59 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.67 (m, 4H), 3.41 (m, 1H), 3.08 (m, 4H), 2.10 (s, 4H), 1.75 (m, 7H), 1.60 (s, 2H) ppm; MS (ES) 534.26 (M+H);
１−（６，９−エタノ−４−フェニル−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ピリド［３，２−ｃ］アゼピン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃７。1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz)  7.52 (m, 3H), 7.44 (m, 2H), 7.38 (m, 1H), 7.37 (m, 1H), 7.20 (m, 1H), 6.93 (m, 1H), 3.28-3.54 (m, 10H), 3.10 (m, 2H), 2.65 (m, 2H), 2.23 (m, 4H), 1.98-2.15 (m, 6H), 1.88 (m, 2H), 1.76 (m, 2H) ppm; MS (ES) 594.75 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−（４−フルオロフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃８。1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz)   7.66-7.73 (m, 3H), 7.52 (s, 1H), 7.42 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.21 (m, 1H), 7.13 (t, 1H), 6.92 (t, 1H), 6.73 (m, 1H), 3.14 (m, 3H), 2.45-2.60 (m, 10H), 1.85-2.00 (m, 5H), 1.50-1.70 (m, 8H) ppm ; MS (ES) 598.27 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−（３−フルオロフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃９。1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz)   9.05 (s, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.46-7.60 (m, 3H), 7.41 (m, 1H), 7.29 (m, 1H), 7.20 (m, 1H), 6.92 (m, 1H),  3.14 (m, 3H), 2.45-2.65 (m, 10H), 1.92 (m, 5H), 1.40-1.70 (m, 8H) ppm; MS (ES) 598.25 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−（３−トリフルオロメチルフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１０。1H-NMR (CDCl3-MeOD4, 300 MHz) 7.79 (m, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.63 (m, 2H), 7.56 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.04 (m, 1H), 6.83 (t, 1H), 3.34 (m, 2H), 3.26 (m, 2H), 3.15 (m, 4H), 2.60 (m, 6H), 1.80-2.05 (m, 10H), 1.69 (m, 2H) ppm; MS (ES) 647.82 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−（３−メトキシフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１１。1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz)   9.05 (s, 1H), 7.66 (broad s, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.36-7.50 (m, 2H), 7.20 (m, 2H), 7.02 (m, 1H), 6.92 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.34 (m, 2H), 3.14 (m, 3H), 2.52 (m, 8H), 1.91 (m, 5H), 1.40-1.70 (m, 8H) ppm;  MS (ES) 610.28 (M+H);
１−（１，４−エタノ−８−（２−メチルフェニル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１２。1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz)   7.41 (m, 1H), 7.30-7.40 (m, 3H), 7.28 (m, 1H), 7.18-7.24 (m, 2H), 6.94 (t, 1H), 3.55 (m, 4H), 3.28 (m, 4H), 3.11 (m, 3H), 2.80 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.11 (m, 7H), 1.70-1.90 (m, 4H) ppm;   MS (ES) 594.34 (M+H);
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−アミノ−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２６。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 8.80-9.00 (m, 1H), 7.60-7.76 (m, 4H), 7.40-7.58 (m, 4H), 7.25-7.38 (m, 2H), 6.88-7.00 (m, 1H), 3.02-3.16 (m, 2H), 2.86-2.99 (m, 1H), 2.59 (s br, 7H), 1.83-2.06 (m, 4H), 1.52-1.72 (m, 2H), 0.99-1.27 (m, 2H) ppm; MS (ES) 493.53 (M+H), 491.37 (M-H);
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジメチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３６。MS (ES) 261.32 (M+2H/2);
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（イソプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３７。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.00 (s, 1H), 8.17 (s br, 2H), 7.72 (s br, 2H), 7.59-7.67 (m, 2H), 7.47-7.58 (m, 2H), 7.40 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.26 (s br, 1H), 7.00 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.20-3.60 (m, 5H), 2.56-2.97 (m, 8H), 2.14-2.32 (m, 2H), 1.92-2.14 (m, 2H), 1.63-1.81 (m, 2H), 1.23 (d, J = 6.1 Hz, 6H) ppm; MS (ES) 535.12 (M+H), 533.30 (M-H);
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（シクロブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３８。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.00 (s, 1H), 8.63 (s br, 2H), 7.72 (s br, 2H), 7.59-7.67 (m, 2H), 7.53 (s, 4H), 7.39 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26 (s br, 1H), 6.99 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.74-3.93 (m, 1H), 3.52 (s br, 1H), 3.14-3.43 (m, 3H), 2.54-2.97 (m, 6H), 1.95-2.28 (m, 8H), 1.60-1.87 (m, 4H), 1.11-1.40 (m, 2H) ppm; MS (ES) 547.14 (M+H);
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジプロピルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３９。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 8.86 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.61-7.71 (m, 3H), 7.40-7.58 (m, 4H), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.00-3.16 (m, 2H), 2.71-2.85 (m, 2H), 2.53-2.70 (m, 4H), 2.27-2.43 (m, 5H), 1.84-2.05 (m, 5H), 1.52-1.71 (m, 2H), 1.27-1.45 (m, 4H), 1.07-1.27 (m, 2H), 0.81 (t, J = 7.2 Hz, 6H) ppm; MS (ES) 577.24 (M+H), 576.52 (M);
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（イソブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃４０。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 8.88 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.61-7.78 (m, 4H), 7.40-7.60 (m, 4H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.01-3.16 (m, 7H), 2.76-2.90 (m, 1H), 2.54-2.72 (m, 5H), 2.16-2.31 (m, 1H), 1.84-2.13 (m, 4H), 1.52-1.77 (m, 3H), 1.08-1.35 (m, 2H), 0.88 (d, J = 6.6 Hz, 6H) ppm; MS (ES) 549.16 (M+H);
（７Ｓ）−１−（１，４−エタノ−８−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−１，５−ナフチリジン−６−イル）−Ｎ３−（７−（ジイソブチルアミノ）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃４１。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 8.88 (s, 1H), 7.65 (s br, 3H), 7.39-7.59 (m, 5H), 7.34 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.94 (d, J = 8.0 Hz, 1H),  2.99-3.17 (m, 4H), 2.52-2.69 (m, 5H), 1.85-2.09 (m, 9H), 1.48-1.71 (m, 4H), 0.98-1.21 (m, 2H), 0.80 (d, J = 6.3 Hz, 12H) ppm; MS (ES) 605.26 (M+H);
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１３。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.18 (s, 1H, NH), 7.25 (d, 1H), 7.12 (s, 2H), 7.05 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 4.12 (s, 1H), 3.22-3.04 (m, 9H), 2.62-2.22 (m, 4H), 2.04-1.82 (m, 2H), 1.88-1.21 (m, 11H) ppm; MS (ES) 538.20 (M+H);
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ５−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１４。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.71 (s, 1H, NH), 7.71 (m, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.95 (t, 1H), 5.75 (s, 2H, NH2), 4.05 (d, 1H), 4.01 (s, 1H), 3.44-3.17 (m, 9H), 2.71-2.41 (m, 5H), 2.08-1.18 (m, 11H) ppm; MS (ES) 538.66 (M+H), 536.48 (M-H);
（３Ｓ）−１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２０。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8.84 (s, 1H, NH), 8.41 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.10 (s br, 2H, NH2), 6.78 (d, 1H), 4.21 (s, 1H), 3.79 (t, 2H), 3.38-3.30 (m, 4H), 3.02 (d, 1H), 2.92 (t, 1H), 2.58-2.24 (m, 3H), 2.05 (m, 1H), 1.86 (d, 4H), 1.37 (d, 4H), 0.81 (m, 1H), 0.43 (m, 2H) ppm; MS (ES) 521.22 (M+H);
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２７。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 8.96 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.24 (s br, 2H), 7.07-7.18 (m, 1H), 6.72 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.38 (s br, 1H), 3.36-3.43 (m, 1H), 2.73-2.96 (m, 2H), 2.42 (s br, 2H), 1.84 (s br, 7H), 1.65 (s br, 5H), 1.37 (s br, 7H) ppm; MS (ES) 505.18 (M);
１−（４−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロキナゾリン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃４２。1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.14 (s, 1H), 7.65-7.62 (m, 3H), 7.54-7.50 (m, 5H), 7.15 (d, 1H), 6.94 (t, 1H), 3.53 (m, 2H), 3.30-3.28 (m, 2H), 3.24-3.16 (m, 1H), 3.14-3.00 (m, 2H), 2.95-2.91 (m, 2H), 2.69-2.58 (m, 4H), 2.16-2.10 (m, 4H), 1.86 (m, 4H), 1.70 (m, 4H) ppm; MS (ES) 554.12 (M+H); 及び
１−（５，８−エタノ−４−フェニル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［３，２−ｄ］ピリミジン−２−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃４３。1H-NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.19 (s, 1H), 8.25-8.21 (m, 2H), 7.75 (br. s, 2H), 7.66 (d, 1H), 7.54-7.52 (m, 3H), 7.20 (d, 1H), 6.97 (t, 1H), 3.32-3.30 (m, 4H), 3.18-3.04 (m, 8H), 2.71-2.59 (m, 5H), 2.27-2.25 (m, 1H), 2.16-2.02 (m, 4H), 1.88-1.86 (m, 2H), 1.76-1.74 (m, 2H) ppm; MS (ES) 581.60 (M+H).
【０１７４】
合成実施例４
１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミンの合成
１−（４−クロロ−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン（５０ｍｇ，０．０９ｍｍｏｌ）及び４−ピリジンホウ酸（１６．４ｍｇ，０．１３５ｍｍｏｌ）をＤＭＥ／ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ  （７／３／２）（２．５  ｍＬ）と混合した。次いで、０．５ｍＬの２ＭのＮａ２ＣＯ３溶液及びＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（１０ｍｇ）を添加した。反応混合物をマイクロウェーブを用いて１５０℃で１５分間加熱した。粗生成物を固体（Ｎａ２ＣＯ３）からデカントし  、ガラスフリット（Ｍ）を通して濾過した。溶媒を留去し、粗生成物に逆相ＨＰＬＣ精製を施して所望化合物、１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン  （２９．８  ｍｇ，  ５７％）を得た。化合物＃１８。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.21 (s, 1H, NH), 8.79 (d, 1H), 8.15 9 (s br, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.23 (s, 2H), 7.13 (d, 1H), 6.94 (t, 1H), 4.22 (s, 1H), 3.61-3.06 (m, 9H), 2.63-2.41 (m, 6H), 2.18-1.19 (m 11H) ppm; MS (ES) 581.27 (M+H), 679.42 (M-H).
【０１７５】
合成実施例５
上記の合成実施例４と同様の方法において、適切に置換された原料及び試薬を用いて、以下の化合物を調製した。
１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１５。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.13 (s, 1H, NH), 7.68-7.48 (m, 5H), 7.38 (s, 2H), 7.18 (d, 1H), 6.95 (t, 1H), 4.31 (s, 1H), 3.52 (s br, 2H), 3.38-3.01 (m, 8H), 2.71-2.42 (m, 8H), 2.18-1.17 (m, 9H) ppm; MS (ES) 614.29 (M+H), 612.30 (M-H);
１−（４−（３−シアノフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１６。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.10 (s, 1H, NH), 8.11 (s, 1H), 8.04-7.95 (m, 2H), 7.77 (m, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.25 (s, 2H), 7.10 (d, 1H), 6.91 (t, 1H), 4.14 (s, 1H), 3.18 (m, 4H), 2.82 (m, 4H), 2.55 (m, 6H), 2.01-1.38 (m, 12H) ppm; MS (ES) 605.23 (M+H), 603.40 (M-H);
１−（４−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソル−５−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１７。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 9.17 (s, 1H), 7.55 (d, J = 15.4 Hz, 2H), 7.02-7.29 (m, 5H), 6.93 (t, 1H), 6.52 (s br, 1H), 6.12 (s, 2H), 4.19 (s br, 1H), 3.00-3.16 (m, 4H), 2.76-2.95 (m, 2H), 2.55-2.70 (m, 2H), 1.97-2.15 (m, 2H), 1.85 (s br, 9H), 1.55-1.73 (m, 3H), 1.30-1.52 (m, 4H) ppm; MS (ES) 624.30 (M+H), 622.45 (M-H);
１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（４−（４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジニル）−３−フルオロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃１９。MS (ES) 594.33 (M+H), 593.61 (M);
（３Ｓ）−１−（４−フェニル−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２１。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8.89 (s, 1H, NH), 8.32 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.62-7.52 (m, 5H), 7.11 (s, 2H, NH2), 6.78 (d, 1H), 4.21 (s, 1H), 3.78 (t, 2H), 3.22 (s, 1H), 3.04 (d, 1H), 2.84 (t, 1H), 2.61-2.38 (m, 7H), 2.11 (q, 1H), 1.82 (m, 4H), 1.40 (s br, 4H), 1.10 (d, 2H), 0.82 (m, 1H), 0.43 (m, 2H) ppm; MS (ES) 563.25 (M+H), 561.26 (M-H);
（３Ｓ）−１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２２。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8.92 (s, 1H, NH), 8.35 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.64-7.45 (m, 3H), 7.35 (s, 2H, NH2), 6.79 (d, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.82 (t, 2H), 3.20 (d, 1H), 2.96 (t, 1H), 2.71-2.41 (m, 7H), 2.23 (q, 1H), 1.80 (m, 4H), 1.40 (s br, 4H), 1.41-1.01 (m, 3H), 0.88 (m, 1H), 0.48 (m, 2H) ppm; MS (ES) 597.19 (M+H), 596.66 (M-H);
（３Ｓ）−１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２３。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8.84 (s, 1H, NH), 8.37 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.43-7.23 (m, 3H), 7.19 (s, 2H, NH2), 6.78 (d, 1H), 4.20 (s, 1H), 3.81 (t, 2H), 3.22 (s br, 1H), 3.08 (d, 2H), 2.96 (t, 1H), 2.75-2.37 (m, 8H), 2.20 (q, 1H), 1.83 (m, 4H), 1.41 (s br, 4H), 1.05 (d, 2H), 0.82 (m, 1H), 0.43 (m, 2H), 0.06 m, 1H) ppm; MS (ES) 577.27 (M+H), 576.26 (M);
（３Ｓ）−１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（６−（４−（シクロプロピルメチル）−３−メチルピペラジン−１−イル）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２４。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) 8.89 (s, 1H), 8.77 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 8.31 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.78-7.89 (m, 1H), 7.64 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 7.28 (s br, 2H), 6.77 (d, 1H), 4.27 (s br, 2H), 3.82 (t, J = 11.4 Hz, 3H), 3.22 (s br, 1H), 3.09 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.89 (t, 1H), 2.32-2.69 (m, 6H), 2.18 (dd, J = 12.9, 6.6 Hz, 1H), 1.73-1.95 (m, 4H), 1.28-1.49 (m, 4H), 1.04 (d, J = 5.8 Hz, 3H), 0.78-0.91 (m, 1H), 0.39-0.54 (m, 2H), 0.02-0.18 (m, 2H) ppm; MS (ES) 564.23 (M+H);
１−（４−フェニル−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２８。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.71 (s br, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.45-7.74 (m, 6H), 7.26-7.43 (m, 1H), 7.22 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.00 (d, 1H), 4.34 (s br, 1H), 3.25 (s, 1H), 2.99-3.18 (m, 2H), 2.57-2.85 (m, 4H), 2.43-2.56 (m, 1H), 2.17-2.38 (m, 2H), 1.67-2.03 (m, 10H), 1.22-1.58 (m, 6H) ppm; MS (ES) 547.26 (M+H);
１−（４−（２−クロロフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃２９。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.55 (s br, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.61-7.72 (m, 1H), 7.46-7.62 (m, 4H), 7.37 (s br, 1H), 7.15-7.28 (m, 1H), 7.01 (d, 1H), 4.37-4.51 (m, 1H), 2.98-3.22 (m, 2H), 2.57-2.82 (m, 5H), 2.18-2.37 (m, 2H), 1.67-2.04 (m, 10H), 1.14-1.64 (m, 7H) ppm; MS (ES) 581.25 (M+H);
１−（４−（３−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３０。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.71 (s br, 1H), 9.09 (s, 1H), 7.27-7.59 (m, 6H), 7.16-7.27 (m, 1H), 7.00 (d, 1H), 4.33 (s, 1H), 3.20-3.31 (m, 1H), 3.00-3.20 (m, 2H), 2.57-2.87 (m, 4H), 2.41 (s, 3H), 2.11-2.36 (m, 2H), 1.69-2.04 (m, 10H), 1.23-1.56 (m, 7H) ppm; MS (ES) 561.30 (M+H);
１−（４−（３−シアノフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３１。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.84 (s br, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.01 (d, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.72-7.88 (m, 1H), 6.98 (d, 1H), 4.39 (s br, 1H), 2.96-3.25 (m, 3H), 2.55-2.84 (m, 4H), 2.43-2.55 (m, 1H), 2.17-2.39 (m, 2H), 1.69-2.03 (m, 10H), 1.24-1.55 (m, 6H) ppm; MS (ES) 572.27 (M+H);
１−（４−（２−エトキシ−５−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３２。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.52 (s br, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.44-7.55 (m, 1H), 7.38 (s br, 1H), 7.10-7.33 (m, 2H), 6.95-7.10 (m, 1H), 6.86 (d, 1H), 4.35 (s br, 1H), 2.95-3.16 (m, 3H), 2.56-2.87 (m, 4H), 2.28 (m, 3H), 2.19 (m, 4H), 1.65-2.02 (m, 10H), 1.47-1.64 (m, 2H), 1.31 (m, 5H), 1.04-1.21 (m, 3H) ppm; MS (ES) 605.31 (M+H);
１−（４−（４−フルオロ−２−メチルフェニル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３３。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.76 (s br, 1H), 9.14 (s, 1H), 7.48 (s br, 2H), 7.10-7.36 (m, 4H), 6.95-7.04 (m, 1H), 4.27-4.45 (m, 1H), 2.98-3.22 (m, 2H), 2.57-2.84 (m, 5H), 2.42-2.55 (m, 1H), 2.20-2.39 (m, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.69-2.02 (m, 9H), 1.21-1.58 (m, 7H) ppm; MS (ES) 579.30 (M+H), 577.31 (M-H); 及び
１−（４−（ピリジン−４−イル）−５，８−エタノ−５，６，７，８−テトラヒドロフタラジン−１−イル）−Ｎ３−（７−（ピロリジン−１−イル）−６，７，８，９−テトラヒドロ−５Ｈ−ベンゾ［７］アヌレン−２−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３，５−ジアミン，化合物＃３４。1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 9.62 (s br, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.94 (d, 2H), 7.99 (d, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.00 (d, 2H), 4.36-4.48 (m, 1H), 3.30-3.53 (m, 4H), 2.98-3.16 (m, 2H), 2.56-2.81 (m, 4H), 2.42-2.51 (m, 2H), 2.15-2.38 (m, 2H), 1.71-2.04 (m, 8H), 1.26-1.54 (m, 4H) ppm; MS (ES) 548.24 (M+H), 546.22 (M-H).
【０１７６】
生物学的実施例１
ホスホ−Ａｋｔ細胞内ウエスタンアッセイ
本発明の化合物を、下記のアッセイにおいて、Ａｘｌ活性を阻害するそれらの能力について試験した。
【０１７７】
試薬および緩衝剤：
細胞培養プレート：９６ウェルアッセイプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ３６１０）、白色、透明底、組織培養処理済。
細胞：Ｈｅｌａ細胞
飢餓培地：Ａｘｌ刺激用：ＤＭＥＭ中０．５％ＦＣＳ（ウシ胎仔血清）、プラスＡｘｌ／Ｆｃ（免疫グロブリン（imunoglobulin）Ｆｃ領域と縮合したＡＸＬの細胞外ドメイン）（Ｒ＆Ｄ、１５４−ＡＬ）５００ｎｇ／ｍＬ。
ＥＧＦ（上皮成長因子）刺激用：ＤＭＥＭ（ダルベッコ変法イーグル培地）中０．５％ＦＣＳ。
ポリ−Ｌ−リジン０．０１％溶液（希釈標準溶液）：１０μｇ／ｍｌ、ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）中で希釈。
Ａｘｌ抗体架橋：
第１：マウス抗Ａｘｌ（Ｒ＆Ｄ、ＭＡＢ１５４）。
第２：ビオチン−ＳＰ共役アフィニピュアヤギ抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ、１１５−０６５−００３番）。
固定緩衝剤：ＰＢＳ中４％ホルムアルデヒド。
洗浄緩衝剤：ＰＢＳ中０．１％トリトンＸ−１００。
クエンチ緩衝剤：洗浄緩衝剤中３％Ｈ２Ｏ２、０．１％アジド、アジドおよび過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）は、新鮮なものを添加する。
ブロック緩衝剤：ＴＢＳＴ（トリス緩衝生理食塩水プラス０．１％ツイン２０）中５％ＢＳＡ。
一次抗体：ウサギ抗ヒトホスホ−Ａｋｔ抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ９２７１）：ブロック緩衝剤中で１×２５０希釈。
二次抗体：ＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）共役ヤギ抗ウサギ二次、ストック溶液：Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ（ヤギ抗ウサギＨＲＰ、１１１−０３５−１４４番）をグリセロール中１：１希釈、−２０℃で保存する。希釈標準溶液：ストックのブロック緩衝剤中１×２０００希釈物。
化学発光希釈標準溶液（Ｐｉｅｒｃｅ、３７０３０）：スーパーシグナルＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着剤（immunosorbant）アッセイ）ピコ化学発光基質。
クリスタルバイオレット溶液：ストック：メタノール中２．５％クリスタルバイオレット、濾過し周囲温度で保つ。希釈標準溶液：使用直前にストックをＰＢＳで１：２０に希釈。
１０％ＳＤＳ：希釈標準溶液：５％ＳＤＳ（ドデシル硫酸ナトリウム）、ＰＢＳ中で希釈。
【０１７８】
方法：
第１日目：
９６ウェルＴＣ（組織培養処理済）プレートを、１０μｇ／ｍＬポリ−Ｌ−リジンにより３７℃で３０分間コーティングし、ＰＢＳで２回洗浄し、５分間風乾させた後、細胞を添加した。Ｈｅｌａ細胞を１０，０００細胞／ウェルで播種し、細胞を、Ａｘｌ／Ｆｃを含有する１００μＬの飢餓培地中で２４時間飢餓させた。
【０１７９】
第２日目：
細胞上の飢餓培地に１００μＬの２×試験化合物を添加することにより、細胞を試験化合物で前処理した。細胞を刺激前に３７℃で１時間インキュベートした。
【０１８０】
細胞を、Ａｘｌ抗体架橋によって次の通りに刺激した：５×第１／第２のＡｘｌ抗体混合物を飢餓培地中で作製（３７．５μｇ／ｍＬの第１／１００μｇ／ｍＬの第２）し、クラスター形成のために１〜２時間完全に混合しながら４℃で揺動させた。得られた混和物を３７℃に加温した。５０μＬの５×Ａｘｌの第１／第２抗体クラスターを細胞に添加し、細胞を３７℃で５分間インキュベートした。
【０１８１】
５分間の刺激後、プレートを振って培地を除去し、プレートをペーパータオル上で軽くたたいた。ホルムアルデヒド（ＰＢＳ中４．０％、１００μＬ）を添加して細胞を固定し、細胞を振とうすることなく周囲温度で２０分間インキュベートした。
【０１８２】
細胞をプレート洗浄器緩衝剤（plate washer buffer）で洗浄して、ホルムアルデヒド溶液を除去した。プレートを振って過剰な洗浄緩衝剤を除去し、ペーパータオル上で軽くたたいた。クエンチ緩衝剤（１００μＬ）を各ウェルに添加し、細胞を振とうすることなく周囲温度で２０分間インキュベートした。
【０１８３】
細胞をプレート洗浄器緩衝剤で洗浄して、クエンチ緩衝剤を除去した。ブロック緩衝剤（１００μＬ）を添加し、細胞を穏やかに振とうしながら周囲温度で少なくとも１時間インキュベートした。
【０１８４】
細胞をプレート洗浄器緩衝剤で洗浄し、希釈した一次抗体（５０μＬ）を各ウェルに添加した（陰性対照ウェルには代わりにブロック緩衝剤を添加した）。プレートを穏やかに振とうしながら４℃で終夜インキュベートした。
【０１８５】
第３日目：
洗浄緩衝剤を除去し、希釈した二次抗体（１００μＬ）を添加し、細胞を穏やかに振とうしながら周囲温度で１時間インキュベートした。インキュベーション中に、化学発光試薬を周囲温度にした。
【０１８６】
プレート洗浄器によって、細胞を洗浄緩衝剤で１回、ＰＢＳで１回洗浄することにより、二次抗体を除去した。ＰＢＳをプレートから除去し、化学発光試薬（８０μＬ：４０μＬのＡおよび４０μＬのＢ）を周囲温度で各ウェルに添加した。
【０１８７】
得られた化学発光を、シグナル強度の変化を最小化するために１０分以内でルミノメーター（Luminomitor）により読み取った。化学発光を読み取った後、プレート洗浄器によって、細胞を洗浄緩衝剤で１回、ＰＢＳで１回洗浄した。プレートをペーパータオル上で軽くたたいてウェルから過剰な液体を除去し、周囲温度で５分間風乾させた。
【０１８８】
クリスタルバイオレット希釈標準溶液（６０μＬ）を各ウェルに添加し、細胞を周囲温度で３０分間インキュベートした。クリスタルバイオレット溶液を除去し、ウェルをＰＢＳですすぎ、次いでＰＢＳ（２００μＬ）で３回、それぞれ５分間ずつ洗浄した。
【０１８９】
５％ＳＤＳ溶液（７０μＬ）を各ウェルに添加し、細胞を周囲温度で３０分間振とう機上にてインキュベートした。
【０１９０】
吸光度をＷａｌｌａｃのフォトスペックで５９０ｎＭにおいて読み取った。５９０ｎＭでの読み取り値は、各ウェルにおける相対的な細胞数を示した。次いで、この相対的な細胞数を使用して、各化学発光読み取り値を正規化した。
【０１９１】
上記アッセイにおいて試験した際の、Ａｘｌ活性を阻害する本発明の化合物の能力の結果を下記の表に示し、ここで、各化合物についての活性レベル（すなわちＩＣ５０）が各表に示されている。表中の化合物番号は、本明細書において開示されている方法によって調製される通りの、本明細書において開示されている化合物を称したものである。
【０１９２】
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
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【表６】
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【表７】
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【表８】
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【表９】
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【表１０】
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【表１１】
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【表１２】
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【表１３】
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【０１９３】
本明細書において参照され、かつ／または出願データシートに掲載されている、米国特許、米国特許出願公開、米国特許出願、外国特許、外国特許出願および非特許刊行物はすべて、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１９４】
前述の発明は、理解を容易にするためにある程度詳細に記述されているが、ある特定の変更および修正が添付の請求項の範囲内で実践され得ることが明白であろう。したがって、記述されている実施形態は、制限的ではなく例示的なものとみなされるべきであり、本発明は、本明細書において書かれている詳細に限定されず、添付の請求項の範囲および均等物内で修正され得る。