(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
比重が１．０３〜１．０９である湿気硬化性成分を含有する血清又は血漿分離材。
【請求項２】
前記湿気硬化性成分が、反応性シリコーン系化合物、α―シアノアクリレート系化合物、及び一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂から選ばれる少なくとも１種を含むものである請求項１に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項３】
さらに補強材を含有する請求項１又は２に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項４】
前記補強材が、ポリスチレン、ポリウレタン、アクリル樹脂、ポリオレフィン及びシリコーン樹脂から選ばれる少なくとも１種である請求項３に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項５】
前記補強材の含有量が、前記湿気硬化性成分１００質量部に対して２〜９００質量部である請求項３又は４に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項６】
さらに血液隔離材を含有する請求項１〜５のいずれかに記載の血清又は血漿分離材。
【請求項７】
前記血液隔離材がカプセルであって、少なくとも前記湿気硬化性成分を、該カプセルに内包してなる請求項６に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項８】
前記カプセルがフィルムからなる請求項７に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項９】
さらに高比重固体を含有する請求項６〜８のいずれかに記載の血清又は血漿分離材。
【請求項１０】
前記高比重固体が前記血液隔離材の近傍に配された請求項９に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項１１】
前記高比重固体の比重が１．１〜１５．０である請求項９又は１０に記載の血清又は血漿分離材。
【請求項１２】
前記高比重固体が、プラスチック、セラミックス又は金属からなる請求項９〜１１のいずれかに記載の血清又は血漿分離材。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれかに記載の血清又は血漿分離材を配してなる採血管。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、全血液試料を血清又は血漿と血球に分離するための血清又は血漿分離材、及び該分離材を用いた採血管に関する。
【背景技術】
【０００２】
臨床検査における血液成分の検査は、全血を血清又は血漿（以下「血清等」と称する場合がある。）と血球を含む成分（以下「血球成分」と称する。）に分離することが要求される。その方法の一つとして、血清等と血球成分の中間の比重を有する物質を配した血液採取管（以下「採血管」と記載する。）に全血液試料を採取し、遠心分離操作によって該物質を血清等と血球成分の中間に位置させることで、分離する方法がある。この方法によれば、ピペット操作、デカンテーションなどにより、血球が血清等に混入することがなく、血清又は血漿を分取することができる。
これまで、この血清又は血漿分離材としては、主にゲル状のものが使用されており、例えば、特定の粘度範囲を有するα−オレフィン・マレイン酸ジエステル共重合体を主成分とし、比重が１．０３５〜１．０５５に調整された血清分離材などが提案されている（特許文献１参照）。
しかしながら、ゲルによる血清及び血漿の分離ではゲルが柔らかいために、検査部所で血清等を分離した後に、試料取扱時の振動や、分注時の分離材の誤吸入などにより、血清等と血球成分が混ざることがあり、検査結果が誤ったものになる原因となっていた。また、分離材がゲル状であるため、長期間保存した場合や冷凍保存時に、採血管の内壁と分離材の界面、もしくは分離材内部にできた隙間から血球に含まれる電解質成分などが血清等に混入することで、測定結果を誤らせる場合があった。【０００３】
また、特定の分子量を有するポリオキシアルキレングリコールとジイソシアネートを反応させて得られる特定の分子量、粘度、及び密度を有するポリエーテルポリウレタンを主成分とし、これにシリカ、アルミナなどの不活性充填剤を含む血液分離剤が提案されている（特許文献２参照）。特許文献２で用いる血液分離剤の比重（密度）は本発明の分離材の比重と重複し、遠心分離操作によって、血清部分と血球部分の間に移行する点で、同様の作用機構を有するものである。特許文献２によれば、ここに開示される分離剤は、上述のように、ポリエーテルポリウレタンを主成分とし、遠心分離終了時には、容器を傾斜しても、容器に弱い衝撃を与えても、容易に破壊されることのない安定な障壁になり、長期間放置しても、障壁は変化しない、と記載されている（特許文献２、第３カラム１３〜２５行）。しかしながら、特許文献２に記載の方法においても、特許文献１と同様に、長期の保存後や、冷凍保存後は、採血管の内壁と分離剤の界面、分離剤内部にできた隙間から、血清部分に血球部分が一部混合することを防止することができないという問題がある。【０００４】
上述の問題点を解決するために、血清等を分離した後に、分離材を紫外線照射などにより硬化させ、完全に分離する方法が提案されている（特許文献３〜６参照）。
しかしながら、紫外線照射による分離材の硬化においては、紫外線によって変質する成分（例えばビルビリンなど）の測定に影響することが考えられる。また、通常、採血管を滅菌する必要があり、γ線などによる滅菌を行う際に分離材が硬化してしまうために、滅菌操作を行えないという弊害がある。
一方、紫外線による成分の変質を避けるために、少量の紫外線で硬化させる方法もあるが、血液成分が分離材の上下に存在していることから、紫外線が樹脂の中心部分まで到達できず、採血管内部の樹脂まで完全に硬化させることが困難である。その結果、未硬化のゲルを使用する場合と同様に、血球成分の血清等への混入が問題となる。【０００５】
さらに、特定のポリマー繊維から形成された多孔質の三次元流体透過性結合繊維構造体を用い、血液成分を分離する方法が提案されている（特許文献７、請求の範囲参照）。該構造体は、複数の曲がりくねった流路からなる複雑な内部ネットワークを有し、流体によって運ばれる粒子はこれら流路を通り抜けることができないために、優れた濾過デバイスになるとしている（特許文献７、段落００３１参照）。また、具体的材料としてエラストマー成分多成分（ＥＣＭ）繊維が開示され、ＥＣＭ繊維のエラストマーとして、熱可塑性エラストマーが例示されている（特許文献７、段落００５０、００５４参照）。しかしながら、特許文献７に開示される方法では、用いられる材料がその比重によって、移動して血清部分と血球部分の間に位置するものではなく、あらかじめ、血漿と固体血液成分との間の境界線を特定し、その部分に該材料を配する必要があり、操作が煩雑であるとともに、現在行われている試験管を用いての検査方法にそのまま適用できない点で課題が多い。【０００６】
【特許文献１】特公昭６３−４８３１０号公報
【特許文献２】特公平１−３１５８８号公報
【特許文献３】米国特許第６２４８８４４号明細書
【特許文献４】米国特許出願公開第２００７／１８７３４１号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２００８／１０８４９３号明細書
【特許文献６】米国特許出願公開第２００８／１３２８７４号明細書
【特許文献７】特表２００８−５３８０８７号公報
【発明の開示】
【０００７】
本発明の目的は、採血管における血清又は血漿成分の分離に際し、遠心分離した後に血清等と血球成分の間に硬化した状態で存在し、採血管内において、血清等と血球成分が分離した状態で、長期間の保存安定性が良好であり、かつ冷凍や解凍時の安定性、試料取扱時の安定性に優れるとともに、紫外線等の照射を必要とせずに硬化させることのできる血清又は血漿分離材及び該分離材を用いた採血管を提供することにある。
【０００８】
本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、特定の比重を有する湿気硬化性成分を用いることで上記課題を解決し得ることを見出した。本発明はかかる知見に基づいて完成したものである。すなわち、本発明は、
（１）比重が１．０３〜１．０９である湿気硬化性成分を含有する血清又は血漿分離材、及び
（２）上記（１）に記載の血清又は血漿分離材を配してなる採血管、
を提供するものである。
【０００９】
本発明の血清又は血漿分離材を用いることで、採血管内において、血清等と血球成分が分離した状態で、長期間にわたって良好な保存安定性が得られ、また冷凍や解凍時の安定性、試料取扱時の安定性にも優れたものとすることができる。さらに、紫外線を用いることなく硬化させることができるため、紫外線の影響を考慮することなく血液の検査が行えるとともに、γ線照射による滅菌操作にも何ら支障を来たさない。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】採血管を用いて血清等と血球成分を分離する過程を示す模式図である。
【図２】採血管を用いて血清等と血球成分を分離する過程を示す模式図である。
【図３】採血管を用いて血清等と血球成分を分離する過程を示す模式図である。
【図４】採血管を用いて血清等と血球成分を分離する過程を示す模式図である。
【図５】採血管を用いて血清等と血球成分を分離する過程を示す模式図である。
【符号の説明】
【００１１】
１．採血管
２．管腔
３．蓋
４．湿気硬化性成分
５．血液隔離材
６．全血
７．血清又は血漿（血清等）
８．血球成分
９．カプセル
１０．高比重固体
１１．容器
１２．蓋
５１．成形体
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明の血清又は血漿分離材（以下、単に「分離材」と称することがある。）は、比重が１．０３〜１．０９である湿気硬化性成分を含むことを特徴とする。
本発明の血清又は血漿分離材は、比重が１．０３〜１．０９である湿気硬化性成分を含んでいれば特に制限はなく、比重が１．０３〜１．０９である湿気硬化性成分のみで構成されていてもよいし、その他の成分を含んでいてもよい。また、これらの成分の他に、カプセルや膜等の部材を含んでいてもよい。
湿気硬化性成分とは、水分の存在により硬化反応を生じる成分であり、例えば、分子内に一つ以上の加水分解性反応基あるいは水により反応を開始する官能基を有し、空気中の水分などによって硬化を開始する樹脂や化合物を含むものである。本発明の場合には、血液中の水分と接触することによって硬化を開始するものであれば、特に制限はないが、具体的には、例えば、反応性シリコーン系化合物、α―シアノアクリレート系化合物、一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂、湿気硬化性エポキシ樹脂、湿気硬化性ポリサルファイド樹脂などが挙げられる。これらのうち、硬化速度が早く、血液検査への影響が少ない点で、反応性シリコーン系化合物、α―シアノアクリレート系化合物、及び一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂を使用することが好ましく、特に濡れた面への接着に強く、弾性があるため温度変化による壁面との剥離が少ない点で反応性シリコーン系化合物がより好ましい。【００１３】
反応性シリコーン系化合物としては、ポリシロキサン構造を主鎖とし、末端に水と反応をすることで硬化反応を開始する反応性基を持つ湿気硬化性のシリコーン樹脂や、ポリシロキサン構造と共に主鎖にポリエーテル、ポリエステル、あるいはポリ（メタ）アクリル酸エステルなどの構造を持つ重合体で、重合体１分子あたり少なくとも１つの反応性硬化基を持つ変性シリコーン系樹脂などが好適に挙げられる。反応性硬化基は水と反応することによってシラノール基を生成する構造を有する官能基であり、脱離する基の種類によって、脱アルコール型シリコーン樹脂、酢酸などのカルボン酸脱離型シリコーン樹脂、脱オキシム型シリコーン樹脂、脱アミド型シリコーン樹脂、脱アミン型シリコーン樹脂、脱アセトン型シリコーン樹脂などを挙げることができる。その中でも、（株）カネカ製「カネカサイリルＳＡＸ２２０」や、「カネカサイリルＳＡＴ４００」等の脱アルコール型変性シリコーン樹脂が好ましい。【００１４】
次に、α―シアノアクリレート系化合物としては、代表的には次の一般式（Ｉ）で示されるものが好適に挙げられる。【００１５】
【化１】
0005516414.tif 000002
【００１６】
式中のＲとしては、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｎ−ペンチル基などのアルキル基；アルケニル基；シクロヘキシル基；アリール基；アルコキシアルキル基などが挙げられる。
一般に、α―シアノアクリレート系化合物は水を硬化触媒として急速にアニオン重合を開始し、硬化速度が非常に早いため、本発明の血清又は血漿分離材に用いる場合、遠心分離までの時間を短くすることが好ましい。また、後に詳述するように血液との接触を避けるための材料（以下「血液隔離材」と称する。）を用い、遠心分離を行う時点まで、α―シアノアクリレート系化合物と血液との接触を避ける方法も効果的である。
また、Ｒがメチル基や、エチル基などの低分子量アルキル基の場合、低粘度の液状であり、そのままでは分離材として取り扱い難い。分離材としての取扱い性の向上のためには、硬化速度や粘度を調整することが好ましい。α―シアノアクリレート系化合物を用いた場合の硬化速度や粘度の調整方法としては、湿気硬化に関与しない他の樹脂や化合物を多く配合したり、一般式（Ｉ）中のＲとして、炭素数８以上の長鎖の直鎖アルキル基又は分岐アルキル基で示される化合物を用いることで、粘度を高くしたり硬化速度を遅くするなどして、調整が可能である。他の樹脂として、具体的には、ポリ（メタ）アクリル酸エステル、ポリエステル、ポリアクリロニトリルなどが挙げられる。また、長鎖アルキル基の例としては、ｎ−オクチル基、ラウリル基、ステアリル基またはイソステアリル基などが挙げられる。【００１７】
一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂としては、ポリイソシアネート類とポリオール、ポリエーテルポリオール、多価フェノールなどを反応させて得られる末端に複数のイソシアネート基を有するポリイソシアネートウレタンプレポリマーなどを例示することができ、イソシアネート基が水と反応して、炭酸ガスを発生しながら、架橋反応するものである。具体的には、ポリイソシアネート類として、例えば、ヘキサメチレンジイソシアネート等の脂肪族ポリイソシアネート；ジシクロヘキシルメタンジイソシアネート、イソホロンジイソシアネート等の脂環式ポリイソシアネート；トリレンジイソシアネート、ジフェニルメタンジイソシアネート、ｐ−フェニレンジイソシアネート、ナフチレンジイソシアネート、キシリレンジイソシアネートなどの芳香族ポリイソシアネートが挙げられる。
ポリオールとしてはエチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，４−ブチレングリコール、ネオペンチルグリコール、水添ビスフェノールＡ、水添ビスフェノールＦ、ポリテトラメチレングリコール、ポリエステルジオール、トリメチロールプロパン、１，２，４−ブタントリオール、１，２，６−ヘキサントリオール、グリセリン、ペンタエリスリトール等が挙げられる。また、多価フェノールとしては、ビスフェノールＡ、ビスフェノールＦ等が、ポリエーテルポリオールとしては、前記のポリオール、多価フェノールとエチレンオキシドやプロピレンオキシドなどのアルキレンオキシドとの付加物などが挙げられる。【００１８】
本発明で使用できる一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂は、上記のポリイソシアネート類とポリオール等をＮＣＯ基／ＯＨ基比で、通常は１.５〜５.０の範囲で、好ましくは１.７〜３.０の範囲で配合し、通常の合成方法で得られる。一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂のイソシアネート基含有率は、通常は０．５〜２０質量％、好ましくは１〜１０質量％、より好ましくは２〜８質量％である。０．５質量％以上であると硬化速度向上効果が十分に認められ、血清又は血漿と血球成分の分離が十分に達成し得る。一方、２０質量％以下であると、硬化速度が早くなり過ぎず適当であるため好ましい。【００１９】
本発明の分離材には、必要に応じて、湿気硬化性成分の硬化触媒として、一般的な硬化触媒を含有させてもよい。硬化触媒の含有量は、湿気硬化性成分１００質量部に対して、通常０．０１〜２０質量部の範囲で用いることができる。０．０１質量部以上では十分な硬化速度が認められ、血清又は血漿と血球成分の分離が十分に達成し得る。一方、２０質量部以下であると硬化速度が早くなり過ぎず適当であるため好ましい。【００２０】
例えば、湿気硬化性成分として反応性シリコーン系化合物を用いる場合、本発明の分離材には、必要に応じて、有機スズ、金属錯体や有機リン酸化物などの硬化触媒を含有させることが可能である。具体的には、ジブチルスズジラウリレート、ジブチルスズフタレート、オクチル酸第一スズ等のスズ化合物；テトラブチルチタネート,テトライソプロピルチタネート等のチタンアルコキシド、マツモトファインケミカル（株）製「オルガチックスＴＣ−７５０」,「オルガチックスＴ−２９７０」等のチタンキレート、チタンアシレート、トリエタノールアミンチタネート等のチタネート化合物；ジルコニウムアルコキシド、ジルコニウムアシレート、ジルコニウムキレート等の有機ジルコニウム化合物；オクチル酸鉛、ナフテン酸鉛、ナフテン酸ニッケル、ナフテン酸コバルト等のカルボン酸金属塩；アルミニウムアセチルアセテート錯体，バナジウムアセチルアセトナート錯体等の金属アセチルアセテート錯体；ジブチルアミン−２−エチルヘキソエート等のアミン塩等が挙げられる。これらのうち、スズ化合物や、チタネート化合物が好ましく、チタネート化合物がより好ましい。さらにチタネート化合物のうち、チタンキレートが特に好ましい。これらの硬化触媒は検査項目によっては血液検査結果に影響を与える可能性もあるため、そのような場合には使用しないことが望ましい。
また、チタネート化合物を使用した場合には、湿気硬化性成分が黄色く着色するが、硬化により樹脂は白色、もしくは薄い黄色に変化する。この色の変化を用いて、採血管の外側から樹脂の硬化状態を確認することができ、好適である。
硬化触媒の含有量としては、十分な硬化速度を得るために、反応性シリコーン系化合物１００質量部に対して０．０１〜1０質量部が好ましく、０．１〜５質量部がより好ましく、０．２〜３質量部がさらに好ましい。０．０１質量部以上であると硬化速度向上効果が十分に認められ、１０質量部以下であると硬化速度が早くなり過ぎることがなく、また十分な保存安定性が得られる。【００２１】
また、湿気硬化性成分として一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂を用いる場合、本発明の分離材には、必要に応じて、ジブチルスズジラウリレート等のスズ化合物及びチタン化合物などの有機金属触媒、ならびにトリエチルアミン及びトリエチレンジアミン等の三級アミン化合物などの硬化触媒を配合することができる。
これらの硬化触媒は検査項目によっては血液検査結果に影響を与える可能性もあるため、そのような場合には使用しないことが望ましい。上記硬化触媒の配合量としては、十分な硬化速度を得るために、一液湿気硬化性ポリウレタン樹脂１００質量部に対して０．０１〜1０質量部が好ましい。０．０１質量部以上であれば十分な硬化速度向上効果が得られ、１０質量部以下では硬化速度が早くなり過ぎることがなく、また十分な保存安定性が得られる。【００２２】
本発明の分離材は、上記のような湿気硬化性の樹脂、化合物等の湿気硬化性成分に加え、それ自体は反応性を持たない他の樹脂や化合物、及び／又は熱硬化性や電子線硬化性などの他の硬化性を持つ樹脂や化合物などを、必要に応じて配合することも可能である。【００２３】
本発明の血清又は血漿分離材は、比重が１．０３〜１．０９である湿気硬化性成分を含有することを必須とする。比重がこの範囲から逸脱すると、遠心分離操作によって、血清又は血漿分離材を血清等と血球成分の中間に位置させることができず、本発明の効果を奏することができない。以上の観点から、比重は１．０３〜１．０７の範囲が好ましく、１．０３５〜１．０５５の範囲がさらに好ましい。
本発明の血清又は血漿分離材に用いられる湿気硬化性成分の比重を上記範囲内にするためには、主たる成分の樹脂又は化合物に使用する材料の種類、樹脂を構成するモノマーの種類等を選択することで調整することができ、これらの構成要件で調整することが分離材の安定性の観点からは望ましい。一方、その他の方法として、湿気硬化性成分中に比重調整材を配合して、比重を上記範囲内とすることもでき、この方法では比較的容易に比重を制御し得る点でメリットがある。【００２４】
比重調整材としては、具体的には、日本アエロジル（株）製「アエロジル１３０」や「アエロジルＲ９７２」、「アエロジルＯＸ５０」等のシリカ、ゼオライト、エレメンティス・スペシャリティーズ社製「ベントン３８」や「ベントンＳＤ−１」等のベントナイト、スメクタイト粘土、カオリン粘土、アンティゴライト粘土等の鉱物、炭酸カルシウムや二酸化チタン等を含む無機質微粉末、又はポリスチレン、ポリウレタン、ポリメチル（メタ）アクリレート、アクリロニトリル−スチレン共重合体、ゴムなどのポリマー微粒子などが挙げられる。この比重調整材は、粘度調整材としても使用でき、無機質微粉末はチキソトロピー付与剤としても使用できる。
湿気硬化性成分として用いる樹脂に比重調整材のみを添加するときの樹脂の粘度は、０．１〜１０００Ｐａ・ｓが好ましく、０．５〜５００Ｐａ・ｓがより好ましく、１〜１００Ｐａ・ｓがさらに好ましい。粘度が０．１Ｐａ・ｓ以上であると、遠心分離した際に比重調整材と樹脂が分離されないために好適である。一方、粘度が１０００Ｐａ・ｓ以下であると、樹脂の粘度が高くなりすぎず、適度であるために、遠心分離した際に壁面との接着性が低下することなく、十分な接着性を有する。【００２５】
本発明において用いられる湿気硬化性成分の硬化後の硬度については、ピペット等による分注の際にピペット先端が接触しても破れない強度を有することが好ましく、また運搬時や取扱時の振動などで破れない強度であり、採血菅内で用いられた時、採血菅の内壁面との剥離がない程度の強度と接着性を有していることが好ましい。【００２６】
本発明の分離材には、必要に応じ、補強材として、ビーズ、粉末、成形体等を加えることができる。分離材の硬化度が低い場合でも、補強材を加えることで分離材の強度が増し、例えば、臨床検査における血液成分の検査を自動分析装置で行う場合に、該自動分析装置のプローブが分離材を誤って吸入することを防ぐことができる。さらに、分離材の強度が強くなることで、分離材と壁面との接着強度を強くでき、分離材と壁面との界面から血球成分が血清もしくは血漿成分に漏出するのを防ぐことができる。
補強材としては、ポリスチレン、ポリウレタン、アクリル樹脂、ポリオレフィン、シリコーン樹脂等を用いることができるが、ポリスチレンがより好ましい。また、補強材として分離材中に含まれる湿気硬化性成分の硬化物である成形体を用いてもよい。
補強材は、血球成分と血漿もしくは血清成分の中間に位置させるために、比重が１．０３〜１．０９のものが好ましく、１．０３〜１．０７のものがより好ましく、１．０３５〜１．０５５のものがさらに好ましく、分離材の比重と同等の比重であることが特に好ましい。また、補強材を加える場合、その添加量としては、湿気硬化性成分１００質量部に対して２〜９００質量部とすることが好ましい。補強材の添加量が、湿気硬化性成分１００質量部に対して２質量部以上であれば分離材の強度が増し分離材と壁面との接着が確保でき、９００質量部以下であれば、分離材の流動性が低下することもなく、血球成分と血清等の分離が充分に行え、かつ管壁との接着力も確保される。以上の観点から、補強材の添加量は、湿気硬化性成分１００質量部に対して５〜２５０質部がより好ましく、１０〜１００質量部がさらに好ましい。
補強材の添加方法としては、湿気硬化性成分と混合して用いても、湿気硬化性成分とは別に添加してもかまわない。より具体的には、粉末の形態の補強材であれば、湿気硬化性成分にフィラーとして混合し、後述するカプセルや容器等に内包させる態様が好ましく、ビーズの場合には、湿気硬化性成分に混合してもよいし、カプセルや容器等に湿気硬化性成分とともに内包してもよいし、カプセルや容器等の血液隔離材の外側に配置してもよい。また、補強材として成形体を用いる場合にも、カプセルや容器等に湿気硬化性成分とともに内包してもよいし、カプセルや容器等の血液隔離材の外側に配置してもよい（図４及び図５参照）。そして、いずれの態様であっても該補強材は、湿気硬化性成分が硬化するに際して、該硬化体の内部に少なくともその一部が取り込まれる形で、分離材の強度を高めるものである。【００２７】
また、本発明の分離材には、試験管壁との接着力を向上させるための接着付与剤を加えることができ、例えば、シランカップリング剤などを用いることができる。シランカップリング剤としては、アミノプロピルトリメトキシシラン、グリシジルトリエトキシシランなどが挙げられる。【００２８】
本発明の血清又は血漿分離材は血液中の水分によって硬化が開始するため、遠心分離によって血清等と血球成分を分離する前は水分と接しないことが好ましい。分離材と血液を接触させない態様としては、血液隔離材を配して、湿気硬化性成分と血液とを接触させないようにすることが好ましく、例えば、湿気硬化性成分をカプセルに内包させる方法、容器に収納する方法、フィルター等の隔離壁を設ける方法などが挙げられる。血液隔離材の材料としては、湿気硬化性成分と血液とを接触させないものであり、遠心分離操作によって破られるものであれば、特に制限はない。具体的な材料及び態様については、後に詳述する。【００２９】
遠心分離によって湿気硬化性成分と血液とを接触させる方法として、遠心による重力によって血液隔離材と採血管内壁との結合が解除されるように血液隔離材を配する方法、比重の大きい固体（以下、「高比重固体」と称する）を血液隔離材の近傍に配する方法などがある（図２及び図３参照）。前者の方法では、血液隔離材を採血管内壁に結合させている物質（血液隔離材そのもの、接着剤、密着材、粘着剤等）の結合力が遠心分離の重力によって解除されるような物質を選択すればよい。また、後者の方法では、遠心分離前は、血液隔離材によって湿気硬化性成分と血液が接触することがなく硬化は進まないが、遠心分離によって、該高比重固体が該血液隔離材を破り、湿気硬化性成分と血液が接触して硬化が開始するものである。高比重固体の存在位置の態様としては、種々のものがあり、後に詳述するように、血液隔離材の上部に高比重固体を配置する方法がある。また、高比重固体を湿気硬化性成分とともにカプセルに内包させる場合も該カプセルの近傍に配するに含まれる概念である。
血液隔離材及び高比重固体の材質、大きさ、厚さ、質量等については、遠心分離操作前は、血液隔離材によって湿気硬化性成分と血液とが接触せず、遠心分離操作後は、高比重固体によって血液隔離材の少なくとも一部が容易に破られ、湿気硬化性成分と血液が接触するように、選定されることが肝要である。また、血液隔離材及び高比重固体は、遠心分離後は血球成分中に存在するように、湿気硬化性成分の比重よりも大きい比重を有するものを使用することが好ましい。血球成分は通常検査対象ではないために、血液隔離材及び高比重固体が含まれていても問題とはならないためである。
ここで用いられる高比重固体としては、プラスチック、シリカやガラス等のセラミックス、金属などが使用でき、該高比重固体の比重としては、１．１〜１５．０の範囲であることが好ましく、１．２〜１０．０の範囲がさらに好ましく、１．３〜８．０の範囲が特に好ましい。
高比重固体の形状としては、球体、多角体、円柱、直方体など様々な形を用いることができる。運搬時に物理的に破れにくいように面取り体が好ましく、さらには球体が好ましい。高比重固体は１つでもよいし、複数使用することもできる。
高比重固体の大きさとしては、採血管内に入る径であれば、特に制限なく用いることができる。具体的には、採血管直径より１ｍｍ以上小さい径を有するものであることが、遠心分離時に血液の移動を妨げずに好ましい。一方、下限値としては、湿気硬化性成分を放出させるのに十分な重さがあればよく、特に制限はないが、通常、０．５ｍｍ以上の径を有するものが、湿気硬化性成分を放出させるのに十分な重さになるために好ましい。
なお、高比重固体を用いた具体的態様については、図２及び図３を用いて、後に詳述する。【００３０】
湿気硬化性成分を内包させるカプセルの素材としては、湿気硬化性成分の硬化物と同じものであってもよいし、異なっていてもよい。また、弾性体であっても、非弾性体でもよく、具体的には、ポリエチレン、ポリプロピレン等のポリオレフィン類；ポリエチレンテレフタレート等のポリエステル類；ポリテトラフルオロエチレン等のフッ素樹脂；プルラン、カラギーナン、コラーゲン、ゼラチン、デンプン等の多糖類；タンパク質、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール等の水溶性高分子、アルミ等の金属などからなるフィルムを好適に挙げることができる。さらに、カプセルは、１種類の素材から構成されていてもよいし、また複数の素材から構成されていてもよい。
カプセルの膜厚は、湿気硬化性成分の内包が行えて、かつ遠心分離により破壊される程度の膜厚であることが好ましい。具体的には、１〜１００００μｍ程度が好ましく、５〜５００μｍの範囲がより好ましい。【００３１】
次に、湿気硬化性成分を容器に収納する方法について説明する。本発明において用いられる湿気硬化性成分を、遠心分離により破壊される程度の強度の膜等で蓋をされた容器に収納する方法である。該蓋付容器には、例えば、湿気硬化性成分と高比重固体を収納しておき、遠心分離時の重力により高比重固体が蓋を突き破るような構成としてもよい。【００３２】
次に、血液隔離材を用いて分離材と血液とを接触させないようにする方法について、図１を用いて説明する。
図１は、採血管を用いて血清等と血球成分を分離する過程を示す模式図である。（１−１）は採血管１を示した図であり、採血管１の底部に湿気硬化性成分４が配されている。湿気硬化性成分の表面には、血液との接触を防ぐために、血液隔離材５が配置されている。（１−２）は採血管１に全血６が採血された直後の状態図であるが、血液隔離材５によって、湿気硬化性成分と血液が接することがないために、硬化は開始されない。これに対して、遠心分離がなされると、血液隔離材５が移動するか又は破れるかして、湿気硬化性成分と血液が接触して硬化が開始されるものである。
すなわち、遠心分離によって、湿気硬化性成分が血球成分と入れ替わり、湿気硬化性成分が血液に接することで硬化が始まり、それと同時に（１−３）に示すように血清又は血漿７と血球成分８に分離され、湿気硬化性成分は血清等７と血球成分８の間に位置した後に、又は位置するに伴って硬化し、上下の成分の混合を防止するものである。【００３３】
血液隔離材としては、液状、固体状のいずれでも良く、運搬時の安定性や採血時の隔離性の面からフィルム状のものがより好ましい。液状血液隔離材の素材としては、鉱物オイルや植物オイル、シリコーンオイルなどがある。また、固体状血液隔離材の素材としては、湿気硬化性成分の硬化物と同じものであってもよいし、異なっていてもよい。また、弾性体であっても、非弾性体でもよく、具体的には、前述の高比重固体により構成されるものや、ポリエチレン、ポリプロピレン等のポリオレフィン類；ポリスチレン類；ポリメチルメタクリレート等のアクリレート類；ポリエチレンテレフタレート等のポリエステル類；ポリエチレングリコール等のポリエーテル類；ポリテトラフルオロエチレン等のフッ素樹脂；ポリジメチルシロキサンなどのシリコーン樹脂；プルラン、カラギーナン、コラーゲン、ゼラチン、デンプン等の多糖類；タンパク質、ポリビニルアルコール等の水溶性高分子、アルミ等の金属などからなるフィルムやゲルなどを好適に用いることができる。
さらに、血液隔離材は、１種類の素材から構成されていてもよいし、複数の素材から構成されていてもよい。血液隔離材が膜状の場合、その膜厚は１〜１００００μｍの範囲が好ましく、５〜５００μｍの範囲がより好ましい。
なお、血液隔離材５を移動させて湿気硬化性成分と血液を接触させるためには、例えば、血液隔離材５を高比重固体で作製しておき、遠心時の重力で移動させることができる。または、血液隔離材５の上部に高比重固体を配置し、遠心時の重力で高比重固体により血液隔離材５を移動させる又は破ることで分離材と血液を接触させることができる。【００３４】
本発明の血清又は血漿分離材の使用方法としては、採血管にあらかじめ配しておくことが、取り扱いが容易であり好ましい。使用する採血管としては特に制限はなく、従来使用されているものをそのまま用いることができる。材質についても従来使用されているものを用いることができ、例えば、ガラスや、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリメチルメタクリレートなどのプラスチックス等を使用することができる。市販品としては、テルモ（株）製の「ベノジェクトII」（登録商標）などがある。
また、採血管の内壁は、湿気硬化性成分が硬化時に接着しやすいように表面処理することができる。たとえば、酸やアルカリによる処理、シランカップリング剤による処理、光照射処理、オゾン処理などがある。これらの表面処理により、内壁に官能基を導入し、湿気硬化性成分と反応しやすくする効果がある。【００３５】
また、採血管には、検査項目に応じた添加剤を加えることができ、血液を凝固させるための血液凝固促進剤や血液の凝固を抑制するための血液抗凝固剤などを加えることができる。血液凝固促進剤としては、例えば、硫酸プロタミン、トロンビン、珪砂、結晶シリカ粉末、珪藻土、ガラス粉末、カオリン、ベントナイト等を挙げることができ、また、血液抗凝固剤としては、ヘパリンやＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）などが挙げられる。
なお、採血菅に血液採取後、遠心分離によって得られる上清として、血清を得たい場合には、血液に上述の凝固促進剤を用い、血漿を得る場合には、抗凝固剤を加えればよい。【００３６】
ここで用いられる添加剤の量は、添加剤の種類によって異なるが、通常、採血した血液１０ｍＬ当たり０．３〜１０．０ｍｇの範囲である。０．３ｍｇ以上であれば、それぞれの添加剤の効果を発揮することができ、１０．０ｍｇ以下であれば溶血の問題が生じない。【００３７】
本発明の血清又は血漿の採血管は、上記血清又は血漿分離材をあらかじめ採血管内に配し、これに血液を採取して、遠心分離するものである。遠心分離の方法としては、従来と同様の方法を用いることができ、例えば、１２００Ｇ程度の遠心力で、１０分間程度遠心分離することにより、血清又は血漿と血球成分を分離することができる。
すなわち、本発明の血清又は血漿分離材に含まれる湿気硬化性成分は、その比重が血清等と血球成分との中間であるので、採血管内において、血清等と血球成分とを分離させた状態で、上記湿気硬化性成分は未硬化のまま、もしくは硬化反応が進行しながらその中間に位置し、血液中の水分によって硬化がなされる。本発明で用いられる湿気硬化性成分は、血清等と血球成分との中間位置で、遠心操作終了時に湿気硬化性成分の表面が取扱時の振動や横置き、ピペットによる接触等により破れない程度に硬化していればよく、任意の硬化時間を設定することができるが、遠心操作終了時に湿気硬化性成分の硬化が完了していることが望ましい。【００３８】
本発明の血清又は血漿分離材を用いると、遠心分離操作を行うだけで、血清等と血球成分の分離が行われ、かつ血清等と血球成分の混合が生じない。したがって、分離後、病院から検査センター等に血液検体が輸送されるような場合でも、血清等と血球成分が混じり合うことがない。【００３９】
本発明の採血管においては、前述のとおり、採血により、分離材中の湿気硬化性成分が水分と接して硬化することがないように、該分離材中の硬化性成分を水分から隔離した状態としておき、遠心分離操作の段階で、硬化性成分と血液が接するように構成されることが好ましい。特に、本発明の血清又は血漿分離材として、湿気硬化性成分に加えて、上述の血液隔離材を配した採血管とすることが好ましい。
具体的には、前述のように、湿気硬化性成分をカプセルや蓋付の容器に内包した湿気硬化性成分を用い、遠心分離によってカプセル等が破壊されて、該湿気硬化性成分が水分に接するようにする方法が挙げられる。【００４０】
次に、図２及び図３を用いて、前記高比重固体によって血液隔離材の少なくとも一部を破り、湿気硬化性成分と血液とを接触させて、硬化を開始する態様について説明する。
図２は、湿気硬化性成分４を血液隔離材であるカプセル９に内包させ、該カプセル内に高比重固体１０を内包させておく方法である（２−１参照）。この方法では、（２−２）に示すように、全血６が採血されても、湿気硬化性成分が水分と接しないために、硬化が開始されない。この状態で遠心分離操作を行うと、遠心時の重力によって、高比重固体１０がカプセル９に孔を開け、内包されている湿気硬化性成分４をカプセル外に出すことができる。【００４１】
また、図３に示す態様では、湿気硬化性成分４を容器１１に入れた後、血液隔離材であるフィルム状の蓋１２をすることで密閉し、この容器１１の外部に高比重固体１０を配置する（３−１参照）。この方法では、（３−２）に示すように、全血６が採血されても、湿気硬化性成分が水分と接しないために、硬化が開始されない。そして、その後、遠心分離操作により高比重固体１０が蓋のフィルムを破ることで、容器１１から湿気硬化性成分４を容器外に出すことができる。このとき、フィルムを高比重固体１０が破りやすいように、フィルム上面に接着しておくこともできる（３−２）。遠心分離によってフィルム状の蓋１２が破れて、該湿気硬化性成分が血液と接することで硬化が開始し、（３−３）に示すように、遠心分離後は、血清等７と血球成分８を分離し、かつその間に配置された後に、又は配置されるに伴って湿気硬化性成分４が硬化するので、上下の成分の混合を防止することができる。
ここで、容器１１は成型品やフィルムからなる血液隔離材であって、蓋１２はフィルム等を用いることができる。この容器には、開口部を１ヶ所以上配置することができる。開口部が１ヶ所の時は、例えばＰｒｅｓｓ−Ｔｈｒｏｕｇｈ−Ｐａｃｋａｇｅ（ＰＴＰ）包装等のように、プラスチックの成形容器を血液隔離材として用い、これに湿気硬化性成分を充填し、アルミ蒸着フィルム、アルミ箔フィルム等の血液隔離材で蓋をすることができる。また、２ヶ所開口部を配置する場合には、筒状の容器の下部にフィルムを貼付、湿気硬化性成分を充填後、上部に蓋をする。このとき、高比重固体が容器上下に孔を開けることができるので、より湿気硬化性成分をカプセル外に出しやすくなる。【００４２】
ここで、蓋１２として使用するフィルムは、通常の状態では、十分に湿気硬化性成分４を密閉することが可能であり、かつ遠心分離操作の際に、高比重固体１０により容易に破断するものが好ましい。具体的には、破裂強さ（ＪＩＳ  Ｐ８１１２）が１〜１００００ｋＰａであり、破断伸びが１〜４０％であることが好ましい。破裂強さが１ｋＰａ以上であると、フィルムが脆くなることがなく、十分な密閉性が得られる。一方、破裂強さが１００００ｋＰａ以下であると、遠心分離の際に、高比重固体１０によりフィルムを破断することができるため好適である。以上の観点から、破裂強さが５〜１０００ｋＰａであることが、さらに密閉性を十分にし、かつ破断を確実にする点で好ましく、１０〜５００ｋＰａであることが特に好ましい。
また、破断伸び（ＪＩＳ  Ｐ８１１３）が１％以上であると、フィルムが脆くなることがなく、十分な密閉性が得られる。一方、破断伸びが４０％以下であると、遠心分離の際に、高比重固体１０によりフィルムを破断することができるため好適である。以上の観点から、破断伸びは５〜３５％であることが、さらに密閉性を十分にし、かつ破断を確実にする点で好ましく、１０〜３０％であることが特に好ましい。
上記フィルムは単独又は複数のポリマー及びフィラーなどからなり、これらを組み合わせ、含有量などを特定することで、上記破裂強さ及び破断伸びを制御するものである。【００４３】
次に、補強材として成形体を用いる場合の態様を図４及び図５を用いて説明する。図４の（４−１）に示すように、湿気硬化性成分４と成形体５１を採血管内に配置する。ここに、採血を行っても、血液隔離材５により湿気硬化性成分４は硬化しない（４−２）。遠心分離操作により、成形体５１が血液隔離材５を破壊もくしは移動させ、湿気硬化性成分４が血液と接触することで硬化が開始される。成形体５１は、図４に示すように、湿気硬化性成分４とともに血液隔離材５の中側にあってもよいし、図５に示すように、血液隔離材５の外側、例えば血液隔離材５の上部にあってもよい。成形体の数としては、１つ以上であればよく、複数あってもよい。また、成形体の形状は円柱状、円盤状、球状、直方体状など様々な形状を用いることができ、特に制限はないが、採血管の内壁に添って配置できるような形状が好ましい。成形体の素材は、湿気硬化性成分の硬化物と同じでも、異なっていてもよく、また、固体状の血液隔離材と同様の素材を用いることができる。また、高比重固体などを配置して、血液隔離材を壊すもしくは移動させてもよい。
【実施例】
【００４４】
以下、本発明の実施例をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら制限されるものではない。
実施例１
血液として、ウマの保存血液（コージンバイオ（株）、ウマの血液にアルセバー氏液を１：１の割合で混合したもの）を準備した。湿気硬化性成分として、湿気硬化性のシリコーン樹脂であるモメンティブ・パフォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社製「ＴＳＥ３９７」（１成分縮合型（脱アルコール型）シリコーン樹脂、比重１．０４、粘度５０Ｐａ・ｓ）を用いた。
採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに該湿気硬化性シリコーン樹脂を１ｍＬ入れた。次いで、上記ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で開口部に蓋をして遠心分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。血漿の分離が十分に行えたが、僅かに溶血が見られた。
また、血漿部分をデカンテーションにより取り除いた後、長さ１０ｃｍ、直径２ｍｍの木製の棒で、硬化した湿気硬化性成分を押したところ十分に硬化していることが確認された。【００４５】
実施例２
湿気硬化性のシリコーン樹脂として、モメンティブ・パフォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社製「ＴＳＥ３９２」（１成分縮合型（脱アルコール型）シリコーン樹脂、比重１．０４）を用いたこと以外は実施例１と同様にして分離操作を行った。その結果、血漿の分離が十分に行えたが、僅かに溶血が見られた。
また、血漿部分をデカンテーションにより取り除いた後、長さ１０ｃｍ、直径２ｍｍの木製の棒で、硬化した湿気硬化性成分を押したところ十分に硬化していることが確認された。【００４６】
実施例３
湿気硬化性のシリコーン樹脂として、モメンティブ・パフォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社製「ＴＳＥ３８９」（１成分縮合型（脱オキシム型）シリコーン樹脂、比重１．０４、粘度５．６Ｐａ・ｓ）を用いたこと以外は実施例１と同様にして分離操作を行った。その結果、血漿の分離が十分に行えたが、僅かに溶血が見られた。
また、血漿部分をデカンテーションにより取り除いた後、長さ１０ｃｍ、直径２ｍｍの木製の棒で、硬化した湿気硬化性成分を押したところ、十分に硬化していることが確認された。【００４７】
比較例１
採血管として、血清分離材入り真空採血管（テルモ（株）製）を用い、湿気硬化性シリコーン樹脂を用いなかったこと以外は実施例１と同様にして分離操作を行った。血漿の分離は行えたが、血漿部分をデカンテーションにより取り除いた後、長さ１０ｃｍ、直径２ｍｍの木製の棒を縦に載せたところ、棒が自重で沈んでいき血球成分中に潜った。【００４８】
実施例４
血液として、ウマの保存血液（コージンバイオ（株）、ウマの血液にアルセバー氏液を１：１の割合で混合したもの）を準備した。湿気硬化性成分として、湿気硬化性のシリコーン樹脂であるモメンティブ・パフォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社製「ＴＳＥ３９７」（１成分縮合型（脱アルコール型）シリコーン樹脂、比重１．０４、粘度５０Ｐａ・ｓ）２ｍＬを、低密度ポリエチレンチューブ（ＬＤＰＥチューブ、外径１１ｍｍ、厚み０．４ｍｍ、長さ２０ｍｍ）の両端をパラフィルム（Pechiney Plastic Packaging製Parafilm  PM-992）で上下に蓋をして作製したカプセルに内包させたものを用いた。
採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに上記湿気硬化性シリコーン樹脂が内包されたカプセルを入れ、そのカプセルの上に高比重固体（形状：球状、直径：６ｍｍ、材質：ガラス、比重：２．５）を入れた。次いで、上記ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で開口部に蓋をして、３時間静置した。その後遠心分離を行い、血漿と血球成分の分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。その後、３時間静置し、血漿部分をデカンテーションにより取り除いた後、長さ１０ｃｍ、直径２ｍｍの木製の棒で、硬化した湿気硬化性成分を押したところ十分に硬化していることが確認された。血漿の分離が行えたが、僅かに溶血が見られた。【００４９】
実施例５
血液として、ウマの保存血液（コージンバイオ（株）製）を準備した。湿気硬化性成分として、変性シリコーン（（株）カネカ製ＳＡＸ２２０、粘度４６Ｐａ・ｓ）９３．７５質量％と、比重調整材としての炭酸カルシウム（和光純薬工業（株）製）６．２５質量％とを混合し、比重を１．０５に調整した。該混合物（湿気硬化性成分）１００質量部に対して、チタン系硬化触媒（マツモトファインケミカル（株）製ＴＣ−７５０）を１質量部加えて分離材とした。
採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに上記分離材を１．７ｍＬ入れた。次いで、上記ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をして遠心分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。次いで、該採血管を冷蔵庫（４℃）に入れ、２日間保存した。
遠心分離によって得られた血漿部分について、自動生化学分析装置（日立化成工業（株）製  日立クリニカルアナライザー  Ｓ４０）を用い、分離直後と２日後（冷蔵庫保存後）に血漿の生化学項目を測定した。その結果を第１表に示す。長期保存によっても成分の変化の少ない、デカンテーションにより分離した場合（後述する参考例１）とほぼ同等の結果が得られた。
なお、ここで測定を行った生化学項目は、ＡＬＰ、ＡＳＴ、ＣＫ、ＬＤ、ＬＤＬ及びＨＤＬである。【００５０】
参考例１
血清分離材入り採血管（テルモ（株）製）に、実施例５で用いたのと同様のウマ保存血液８ｍＬを入れ、同様に遠心分離処理した後に、血漿部分をデカンテーションにより分離し、別の試験管に移した。該試験管を冷蔵庫（４℃）に入れ、２日間保存した。該血漿について、実施例５と同様にして、分離直後と２日後（冷蔵庫保存後）に血漿の生化学項目を測定した。その結果を第１表に示す。【００５１】
比較例２
採血管（テルモ（株）製血清分離材入り真空採血管）の蓋を開けて、ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をして遠心分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。この採血管を冷蔵庫（４℃）に入れ２日間保存した。
該血漿について、実施例５と同様にして、分離直後と２日後（冷蔵庫保存後）に血漿の生化学項目を測定した。その結果を第１表に示す。参考例１（デカンテーション）と比較したところ、２日後の測定結果において、ＡＬＰ、ＡＳＴ、ＬＤ値で上昇が見られた。【００５２】
【表１】
0005516414.tif 000003
【００５３】
実施例６
血液として、ウマの保存血液（コージンバイオ（株）製、実施例５とはロットの異なるもの）を準備した。
採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに実施例５で調製したのと同様の分離材を１．７ｍＬ入れた。次いで、上記ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をして、実施例５に記載するのと同様の条件で遠心分離を行った。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。次いで、該採血管を冷凍庫（−２０℃）に入れて凍結保存した。２日後に室温に戻したが、血球の血漿への漏出はなかった。
該血漿について、実施例５と同様にして、分離直後と２日間の凍結保存後に室温に戻して、それぞれの血漿の生化学項目を測定した。その結果を第２表に示す。本発明の方法を用いることで、２日間の凍結保存を行った後であっても、長期保存によっても成分の変化の少ない、デカンテーションにより分離した場合（後述する参考例２）と比較して変化が少なかった。【００５４】
参考例２
血清分離材入り採血管（テルモ（株）製）に、実施例６で用いたのと同様のウマ保存血液８ｍＬを入れ、同様に遠心分離処理した後に、血漿部分をデカンテーションにより分離し、別の試験管に移した。該試験管を冷凍庫（−２０℃）に入れて凍結保存した。実施例６と同様に、分離直後と２日間冷凍保存した後の該血漿について生化学項目を測定した。その結果を第２表に示す。【００５５】
比較例３
採血管（テルモ（株）製血清分離材入り真空採血管）の蓋を開けて、ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をして遠心分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。この採血管を冷凍庫（−２０℃）に入れて、２日間凍結保存し、室温に戻した。このとき、血球成分が分離材上部の血清部分に漏出しているのが、目視により確認できた。
該血漿について、実施例６と同様にして、分離直後と２日後（冷凍庫保存後）に血漿の生化学項目を測定した。その結果を第２表に示す。参考例２（デカンテーション）と比較したところ、２日後の測定結果において、ＡＬＰ、ＣＫ、ＬＤ値で大きく値が変化した。【００５６】
【表２】
0005516414.tif 000004
【００５７】
実施例７
血液として、ウマの保存血液（コージンバイオ（株）製）を準備した。湿気硬化性成分として、変性シリコーン（（株）カネカ製ＳＡＴ４００、粘度２４Ｐａ・ｓ）９４質量％と、比重調整材としての炭酸カルシウム（和光純薬工業（株）製）６．０質量％とを混合し、比重を１．０５に調整した。該混合物（湿気硬化性成分）１００質量部に対して、チタン系硬化触媒（マツモトファインケミカル（株）製ＴＣ−７５０）を０．５質量部加えたものを、ポリプロピレン製の容器（直径１ｃｍ、長さ２ｃｍの丸底チューブ）に、１．５ｍＬ充填し、血液隔離材としてのアルミフィルム（日本製箔（株）製、厚さ０．０２ｍｍ）を熱により接着して蓋をして、カプセルとした。
採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに該カプセルを入れ、高比重固体としてのガラスビーズ（直径６ｍｍ、比重２．５）をカプセルの上に配置した。次いで、上記ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をして遠心分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。遠心によりカプセルが壊れて湿気硬化性成分が放出され、血漿と血球成分の間に湿気硬化性成分が配置された。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。【００５８】
実施例８
実施例７において、ポリプロピレン製容器に充填する成分として以下のものを用い、再栓用蓋で蓋をした後、１日経過後に遠心分離操作を行ったこと以外は、実施例７と同様にして、分離操作を行った。
湿気硬化性成分として、変性シリコーン（（株）カネカ製ＥＳＴ２８０、粘度７Ｐａ・ｓ）８６．３５質量％と、比重調整材としてのベントン３８（エレメンティス・スペシャリティーズ社製）１３．６５質量％とを混合し、比重を１．０５に調整した。該混合物（湿気硬化性成分）１００質量部に対して、チタン系硬化触媒（マツモトファインケミカル（株）製ＴＣ−７５０）を０．５質量部加えて、ポリプロピレン製容器に充填する成分とした。
遠心分離操作によりカプセルが壊れて湿気硬化性成分が放出され、血漿と血球成分の間に湿気硬化性成分が配置された。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。【００５９】
実施例９
実施例７において、ポリプロピレン製容器に充填する成分として以下のものを用い、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をした後、１日経過後に遠心分離操作を行ったこと以外は、実施例７と同様にして、分離操作を行った。
湿気硬化性成分として、変性シリコーン（（株）カネカ製ＳＡＴ４００、粘度２４Ｐａ・ｓ）９１質量％と、比重調整材としてのシリカ粒子（日本アエロジル（株）製ＯＸ５０、粒径４０ｎｍ）９質量％とを混合し、比重を１．０５に調整した。該混合物（湿気硬化性成分）１００質量部に対して、チタン系硬化触媒（マツモトファインケミカル（株）製TC-750）を０．５質量部加えてポリプロピレン製容器に充填する成分とした。
遠心分離操作によりカプセルが壊れて湿気硬化性成分が放出され、血漿と血球成分の間に湿気硬化性成分が配置された。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。【００６０】
実施例１０
実施例９において、ポリプロピレン製容器に充填する成分として以下のものを用いたこと以外は実施例９と同様にして分離操作を行った。
湿気硬化性成分として、変性シリコーン（（株）カネカ製ＳＡＴ４００、粘度２４Ｐａ・ｓ）９１質量％と、比重調整材としてのシリカ粒子（日本アエロジル（株）製ＯＸ５０、粒径４０ｎｍ）９質量％とを混合し、比重を１．０５に調整した。該混合物（湿気硬化性成分）１００質量部に対して、チタン系硬化触媒（マツモトファインケミカル（株）製TC-750）を０．５質量部と、補強材としてのポリスチレンビーズ（直径０．３ｍｍの球状、日立化成工業（株）製）を３０質量部加えてポリプロピレン製容器に充填する成分とした。
遠心分離操作によりカプセルが壊れて湿気硬化性成分が放出され、血漿と血球成分の間に湿気硬化性成分が配置された。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。【００６１】
実施例１１
血液として、ウマの保存血液（コージンバイオ（株）製）を準備した。湿気硬化性成分として、モメンティブ・パフォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社製「ＴＳＥ３９７」（１成分縮合型（脱アルコール型）シリコーン樹脂、比重１．０４、粘度５０Ｐａ・ｓ）を用いた。補強材として、湿気硬化性のシリコーン樹脂であるモメンティブ・パフォーマンス・マテリアルズ・ジャパン合同会社製「ＴＳＥ３９７」（１成分縮合型（脱アルコール型）シリコーン樹脂、比重１．０４、粘度５０Ｐａ・ｓ）を硬化させて、円柱形の成形体（直径１１ｍｍ、高さ６ｍｍ、重さ０．６ｇ）を作製した。
採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに上記で作製した成形体の補強材を入れて、採血管内に配置し、そこに前記湿気硬化性成分を１ｍＬ入れ、上記ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をして遠心分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。血漿の分離が十分に行えたが、ごく僅かに溶血が見られた。【００６２】
実施例１２
血液として、ウマの保存血液（コージンバイオ（株）製）を準備した。湿気硬化性成分として、変性シリコーン（（株）カネカ製ＳＡＸ２２０、粘度４６Ｐａ・ｓ）９３．７５質量％と、比重調整材としての炭酸カルシウム（和光純薬工業（株）製）６．２５質量％とを混合し、比重を１．０５に調整した。該混合物（湿気硬化性成分）１００質量部に対して、チタン系硬化触媒（マツモトファインケミカル（株）製ＴＣ−７５０）を１質量部加え、これに、補強材としてポリスチレン製の円柱形の成形体（直径９ｍｍ、高さ６ｍｍ、比重１．０５、重さ０．４ｇ）をさらに加えて分離材とした。
採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに前記ポリスチレン製の成形体を入れて、採血管内に配置し、そこに前記湿気硬化性成分と硬化触媒の混合物を１．３ｍＬ入れ、上記ウマの保存血液８ｍＬを入れ、再栓用蓋（テルモ（株）製ベノジェクトII再栓キャップ）で蓋をして遠心分離を行った。遠心分離条件としては、３０００ｒｐｍ（１２００Ｇ）で１０分間行った。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。【００６３】
実施例１３
実施例１２と同様の血液、湿気硬化性成分、硬化触媒、及び補強材を用い、以下の手順としたこと以外は、実施例１２と同様に分離操作を行った。すなわち、採血管（テルモ（株）製硬化促進剤入り真空採血管）の蓋を開けて、これに湿気硬化性成分と硬化触媒の混合物を１．３ｍＬ入れ、その上に、補強材としてのポリスチレン製の円柱形の成形体（直径９ｍｍ、高さ６ｍｍ、比重１．０５、重さ０．４ｇ）を配置したこと以外、実施例１２と同様にして分離操作を行った。血漿の分離が十分に行え、血球成分は血漿に混入していなかった。
【産業上の利用可能性】
【００６４】
本発明によれば、取り扱いが簡便であり、採血管内において、血清又は血漿と血球成分が分離した状態で、長期間にわたって良好な保存安定性が得られ、また冷凍や解凍時の安定性、試料取扱時の安定性にも優れたものとすることができる。すなわち、時間が経過しても血清又は血漿と血球成分との混合が生じず、高い精度の検査が可能となる。
さらに、紫外線を用いることなく硬化させることができるため、紫外線の影響を考慮することなく血液の検査が行えるとともに、紫外線又はγ線照射による殺菌操作を行うことができる。
【図１】
0005516414.tif 000005
【図２】
0005516414.tif 000006
【図３】
0005516414.tif 000007
【図４】
0005516414.tif 000008
【図５】
0005516414.tif 000009