(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
サッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物、および、バチルス・ズブチリス、および任意にキャリアーを含む、トリにおけるクロストリジウム・パーフリンジェンスにより引き起こされる壊死性腸炎を予防および／または制御するための組成物。
【請求項２】
７５質量％〜９９質量％の前記サッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物；１質量％〜３質量％の前記バチルス・ズブチリス；および、０質量％〜２４質量％の前記キャリアーを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
８０質量％の前記サッカロミセス・セレビジエ由来の細胞壁分画；２．５質量％の前記バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株；および、１７．５質量％の前記キャリアーを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記キャリアーが、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、または、それらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物、および、動物用食糧を含み、前記組成物は、動物用食糧１トンあたり０．５ポンド〜１０ポンドの範囲の量で存在する、動物用飼料組成物。
【請求項６】
前記請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物が、該動物用食糧１トンあたり１．２５ポンドの量で存在する、請求項５に記載の動物用飼料組成物。
【請求項７】
前記動物用食糧が、トリ用食糧である、請求項５に記載の動物用飼料組成物。
【請求項８】
動物に、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物の有効量を投与することを含む、トリにおけるクロストリジウム・パーフリンジェンスにより引き起こされる壊死性腸炎を予防および／または制御する方法。
【請求項９】
イオノフォア系抗コクシジウム剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物を含む組成物。
【請求項１０】
前記イオノフォア系抗コクシジウム剤が、サリノマイシンである、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記サリノマイシンが、前記組成物の６６ｐｐｍのレベルで存在する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
請求項９〜１１のいずれか一項に記載の組成物、および、動物用食糧を含み、前記組成物が、該動物用食糧１トンあたり０．５ポンド〜１０ポンドの量で存在する、動物用飼料組成物。
【請求項１３】
トリに、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の組成物を投与することを含む、該トリにおける壊死性腸炎の治療におけるイオノフォアの性能を改善する方法。
【請求項１４】
トリにおけるクロストリジウム・パーフリンジェンスにより引き起こされる壊死性腸炎を予防する方法であって、該方法は、
該動物にコクシジウム症ワクチンを接種させること；および、
該動物に、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物を含む組成物を投与すること、
を含む、上記方法。
【請求項１５】
前記ワクチンが、弱毒化していない生きた胞子形成オーシストのコクシジウム症ワクチンを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
バチルス・ズブチリスがバチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株を含む、請求項１に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、合衆国法典第３５巻第１１９条（ｅ）に基づき、２００９年６月３日付けで出願された米国仮特許出願第６１／１８７，３１６号、２００９年３月３日付けで出願された米国仮特許出願第６１／１５６，９０２号、および、２００８年１２月１０日付けで出願された米国仮特許出願第６１／１２１，２５８号の利点を請求する。
【背景技術】
【０００２】
［０００１］ブタおよびトリ、特に集約飼育された、または、大規模な操業で飼育されたものは、様々な病気および感染に罹る傾向、または、それらを取り込む危険を有しており、このような病気および感染としては、例えばブタおよびトリにおけるマイコプラスマ病、ブタにおけるローソニア感染症（回腸炎）およびブタ赤痢、および、トリにおける壊死性腸炎が挙げられる。これらのタイプの病気または感染それぞれを治療するための医薬品が提唱されているか、または、使用されている。
【０００３】
［０００２］豚増殖性腸炎（ＰＰＥ；または、いわゆるブタの回腸炎）の原因因子であるＬ．イントラセルラリス（Ｌ．ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｓ）は、例えばウサギ、フェレット、ハムスター、キツネ、ウマなど実質的に全ての動物に影響を与え、加えてダチョウおよびエミューのような多種多様なその他の動物にも影響を与える。ＰＰＥは、食肉用の豚と若い飼育されたブタの下痢を伴う一般的な病気であり、これは、回腸および結腸の過形成および炎症を特徴とする。これらは軽度で自己制御されることが多いが、時々、高い死亡率の持続的な下痢、重度の壊死性腸炎または出血性腸炎を引き起こす。
【０００４】
［０００３］トリにおける壊死性腸炎（ＮＥ）は、グラム陽性の嫌気性細菌クロストリジウム・パーフリンジェンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）によって引き起こされる。この病気は急性腸毒血症の状態をもたらし、主として２〜５週齢のブロイラーのニワトリ、および、７〜１２週齢のシチメンチョウに影響を及ぼす。この疾患の持続時間は極めて短く、病気の唯一の兆候は、典型的には鳥の死亡率の突然の増加である。
【０００５】
［０００４］Ｃ．パーフリンジェンスは、土壌、ほこり、便、飼料、および、使用済みの養鶏用敷きわらに見出されるほぼ至る所に存在する細菌であり、さらに健康なニワトリの腸の定住菌でもある。壊死性腸炎を引き起こす腸毒血症は、腸のミクロフローラが変化した後に発生するか、または、腸粘膜へのダメージを引き起こす状態（例えば、コクシジウム症、マイコトキシン症、サルモネラ症、回虫の幼虫）から発生するかのいずれかである。餌中の動物副産物、コムギ、大麦、オートムギまたはライの量が多いと、トリをこのような病気に罹りやすくなる。壊死性腸炎の出現を高める要因は、過剰な細菌増殖や毒素産生の促進、または、小腸での飼料の通過速度の低下などの可能性がある。
【０００６】
［０００５］壊死性腸炎の診断は、肉眼的病変、および、大きいグラム陽性桿菌を示す粘膜擦過物の塗抹標本のグラム染色に基づく。肉眼的病変は主として小腸に見出され、このような小腸は膨脹しており、もろく、悪臭のする茶色の流体を含むこともある。このような粘膜は、通常、黄褐色〜黄色の偽膜で覆われており、これは「トルコタオル」のような様相と称されることが多い。この偽膜は、小腸中に張り巡らされている場合もあるし、または、局部的な領域にしか存在しない場合もある。この病気は群れのなかで５〜１０日間留まり、死亡率は２〜５０％である。トリにおける壊死性腸炎を予防するための従来の製品は、バージニアマイシン（２０ｇ／トン（飼料））、バシトラシン（５０ｇ／トン）、および、リンコマイシン（２ｇ／トン）を含む薬用飼料である。またイオノフォア系の抗コクシジウム化合物を含む薬用飼料も、壊死性腸炎予防に有用であった。壊死性腸炎の治療は、典型的には、飲用水中のバシトラシン、ペニシリンおよびリンコマイシンを５〜７日間投与することによる。ＮＥが、直接給与生菌（ＤＦＭ）製品の使用が禁じられているか、または、制御されている可能性がある病気の状態であると証明されており、これはなぜなら、それらは腸のミクロフローラに作用するためである。
【０００７】
［０００６］コクシジウム症は、鶏肉産業において顕著な経済的損失を引き起こす。この病気は、Ｅ．テネラ（Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ）、Ｅ．ネカトリックス（Ｅ．ｎｅｃａｔｒｉｘ）、Ｅ．アセルブリナ（Ｅ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ）、Ｅ．ブルネッテイ（Ｅ．ｂｒｕｎｅｔｔｉ）、および、Ｅ．マキシマ（Ｅ．ｍａｘｉｍａ）などの数種のアイメリア属（Ｅｉｍｅｒｉａ）によって引き起こされる。ニワトリにおけるコクシジウム症の段階は、宿主内と宿主の外側との両方に現れる。ニワトリの発生段階で顕微鏡レベルの卵（オーシストと呼ばれる）が生じ、これは糞中に排出される。通常、ほとんどのトリは、病的な作用を引き起こすことなく糞中に少数のオーシストを排出するが、家禽の集約飼育は、その環境で感染性オーシストの形成を許容する状態をもたらし、それによってコクシジウム症感染の可能性を高めてしまう。コクシジウム症感染は、感染から三日目に顕在化する可能性がある。症状としては、ニワトリの衰弱、餌を食べなくなること、および、一緒になって群がることが挙げられる。４日目には糞中に血液が見え始め、８日目には、ニワトリは死亡するか、または回復し始める。
【０００８】
［０００７］コクシジウム症の予防としては、飼料に抗コクシジウム剤を混合することが挙げられる。米国で、コクシジウム症予防に最も一般的に用いられる薬物は、サリノマイシンのようなイオノフォアである。サリノマイシンおよびそれらの塩は、典型的には、約４０〜約６０グラム／トン（動物用飼料）（０．００４４％〜０．００６６％）の濃度で動物用飼料に添加される。サリノマイシンナトリウムは、米国で用いられているサリノマイシンの好ましい形態である。ナラシンは、最も一般的に報告されているイオノフォアであり、ＮＥ予防の補助剤として販売促進されている。また、特に抗生物質未使用のニワトリを市販したい人は、コクシジウム症ワクチン（コクシバック（Ｃｏｃｃｉｖａｃ（登録商標））−Ｂ）を用いてもよい。コクシバック−Ｂは、Ｅ．アセルブリナ、Ｅ．ミバチ（ｍｉｖａｔｉ）、Ｅ．マキシマ、および、Ｅ．テネラを含む、弱毒化していない生きた胞子形成オーシストのコクシジウム症ワクチンである。
【０００９】
［０００８］動物における複数の病気、特に細菌由来の病気を治療するための組成物および方法の必要性がある。これらの組成物は、その他の病気の治療に用いられるその他の治療および／または組成物と組み合わせても使用できると予想される。最も有利には、病気を治療するための組成物が、その他の組成物またはその他の治療計画のいずれかと併用されると相乗効果を有すると予想される。
【発明の概要】
【００１０】
［０００９］本発明は、動物、具体的にはトリにおける病気を治療するための組成物および方法に関する。本発明の一実施態様は、サッカロミセス・セレビジエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）由来の酵母抽出物、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）の胞子、および任意にキャリアーを含む、動物における病気を治療するための組成物を対象とする。本発明の実施態様はまた、動物に、サッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物、バチルス・リケニフォルミスの胞子、および任意にキャリアーを含む組成物を投与することを含む、動物における病気を予防する方法も対象とする。
【００１１】
［００１０］また本発明は、サッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物、および、バチルス・ズブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＱＳＴ−７１３株、ならびに任意にキャリアーを含む、動物における病気を予防および／または制御するための組成物も対象とする。本発明の実施態様はまた、動物に、サッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物、および、バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株、および任意にキャリアーを含む組成物の有効量を投与することを含む、動物における病気を予防および／または制御する方法も対象とする。
【００１２】
［００１１］本発明はさらに、約５０質量％〜約９０質量％のサッカロミセス・セレビジエ由来の細胞壁分画；約５質量％〜約５０質量％のバチルス・リケニフォルミスの胞子（約４．５×１０９〜約２．５×１０１０胞子／グラムを含む）；および、イオノフォア系抗コクシジウム剤を含む組成物に関する。本発明の実施態様はまた、動物にコクシジウム症ワクチンを接種させること、および、動物に、約５０質量％〜約９０質量％のサッカロミセス・セレビジエ由来の細胞壁分画；約５質量％〜約５０質量％のバチルス・リケニフォルミスの胞子（約４．５×１０９〜約２．５×１０１０胞子／グラムを含む）；および、約０質量％〜４５質量％のキャリアーを含む組成物を投与することを含む、動物における病気を予防する方法も対象とする。本発明の実施態様は、加えてＣ．パーフリンジェンスに攻撃された動物における死亡率を低減させる方法にも関し、本方法は、動物にコクシジウム症ワクチンを接種させること、および、動物に、約５０質量％〜約９０質量％のサッカロミセス・セレビジエ由来の細胞壁分画；約５質量％〜約５０質量％のバチルス・リケニフォルミスの胞子（約４．５×１０９〜約２．５×１０１０胞子／グラムを含む）；および、約０質量％〜４５質量％のキャリアーを含む組成物を投与することを含む。本発明の実施態様はさらに、Ｃ．パーフリンジェンスに攻撃された動物における壊死性腸炎の病変を低減させる方法を対象とし、本方法は、動物にコクシジウム症ワクチンを接種させること、および、動物に、約５０質量％〜約９０質量％のサッカロミセス・セレビジエ由来の細胞壁分画；約５質量％〜約５０質量％のバチルス・リケニフォルミスの胞子（約４．５×１０９〜約２．５×１０１０胞子／グラムを含む）；および、約０質量％〜４５質量％のキャリアーを含む組成物を投与することを含む。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
［００１２］本明細書において、コクシジウム抑制薬またはコクシジウム症ワクチンと併用されるＢ．リケニフォルミス（Ｂ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）のようなプロバイオティック細菌と、壊死性腸炎の予防、制御および治療に用いられるβ−グルカンおよびマンナンを含む免疫を高める酵母細胞壁抽出物との予想外の相乗効果を示す組み合わせを開示する。動物における病気を治療するのに適したこれらの組成物（一方で、動物用飼料添加剤とも称する）は、Ｌ．イントラセルラリス、または、Ｃ．パーフリンジェンスのような細菌での感染によって引き起こされる病気の治療に特に有用である。
【００１４】
［００１３］直接給与生菌（ＤＦＭ）は、動物の腸内環境を調節することによって、および、消化を改善することによって生産高を改善するために動物に供給される生きた微生物である。これは、正常な消化管内のフローラの適切なバランスの維持を助ける。科学者はＤＦＭの作用機序を完全に理解していないが、ＤＦＭは、それ自身が消化管表面に付着して、有害生物が消化管表面に付着して定着することを減少させるか、または予防し；腸の免疫を刺激することによって、病気に対する防御を提供し；消化に役立つ酵素を放出し；消化管のｐＨを変更し、有益な生物を刺激する有機酸を生産し；および、ビタミンのような栄養素を生産することによって作用する可能性があると考えられる。アルケア（ＡｌＣａｒｅＴＭ）（アルファーマ社（Ａｌｐｈａｒｍａ  Ｉｎｃ．），ニュージャージー州ブリッジウォーター）は、Ｂ．リケニフォルミスの改変株（ＮＣＴＣ１３１２３）を含むＤＦＭである。アルケアＴＭは、７０質量％の炭酸カルシウムキャリアー中に、Ｂ．リケニフォルミスの胞子を１×１０１０個／グラム含む。飼料１トン当たり１ポンドのアルケアＴＭは、飼料１ポンド当たり２．２×１０９コロニー形成単位（ｃｆｕ）のＢ．リケニフォルミスを供給する。
【００１５】
［００１４］ビール酵母は、Ｓ．セレビジエとして知られている真菌の一種である。アルファミューン（Ａｌｐｈａｍｕｎｅ（登録商標））（アルファーマ社，ニュージャージー州ブリッジウォーター）は、食品グレードのビール酵母の細胞壁から生産された架橋された天然多糖類繊維である。またアルファミューン（登録商標）の成分は、ベータモス（Ｂｅｔａ  Ｍｏｓ（登録商標））（アルファーマ社，ニュージャージー州ブリッジウォーター）の名称でも製造されており、これは、細胞を可溶化して、自己分解後に細胞内から生物学的な活性物質を抽出した後のＳ．セレビジエの細胞壁分画である。アルファミューン（登録商標）は、β−グルカンとマンナンとの組み合わせである。アルファミューン（登録商標）中に存在するβ−グルカンは側鎖（１，３−１，６）を有し、それによりグルカナーゼで壊すことのできない特異的な複雑な構造が生じる。β−グルカンは、動物において強い免疫増強作用を有しており、これは、マクロファージに結合してマクロファージを活性化することによってサイトカインを分泌させる。Ｓ．セレビジエのマンナンは、部分的にリン酸化されたＤ−マンノース残基を含む多糖類−ポリペプチド複合体である。マンナンは、免疫刺激作用を有することが示されている。アルファミューン（登録商標）は、一般的に、約２４質量％より多いまたはそれに等しいβ−グルカン、および、約１５質量％未満またはそれに等しいマンナンを含む。
【００１６】
［００１５］驚くべきことに、バイオ系殺真菌剤（ｂｉｏｆｕｎｇｉｃｉｄｅ）として販売されているバチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株と、酵母抽出物、例えばβ−グルカンおよびマンナンを含むサッカロミセス・セレビジエ、すなわちビール酵母由来の酵母抽出物の組み合わせおよびそれらの組成物が、例えばＬ．イントラセルラリスまたはクロストリジウム・パーフリンジェンスのような細菌によって引き起こされる動物における感染などの病気を予防および／または制御するのに用いられる可能性がある。
【００１７】
［００１６］上記で説明されているように、本発明はさらに、例えば感染、具体的にはトリにおける壊死性腸炎、および、ブタにおけるブタ回腸炎のような動物における病気を予防および／または制御するための、バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株、および、酵母抽出物（例えばサッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物）、ならびに任意にキャリアーを含む組成物を提供する。
【００１８】
［００１７］バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株は、セレナーデ（登録商標）マックス（Ｓｅｒｅｎａｄｅ（登録商標）ＭＡＸ，アグラクエスト社（ＡｇｒａＱｕｅｓｔ  Ｉｎｃ．），カリフォルニア州デービス）という商標名でバイオ系殺真菌剤として市販されている。セレナーデ（登録商標）マックスは、天然に存在するバチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株をベースとした微生物殺虫剤である。これは、相乗的に作用して発芽管、菌糸体および細菌細胞を阻害するイツリン（ｉｔｕｒｉｎ）、アグラスタチン（ａｇｒａｓｔａｔｉｎ）／プリパスタチン（ｐｌｉｐａｓｔａｔｉｎ）、および、サーファクチンという３群のリポペプチドを生産する。セレナーデ（登録商標）マックスは、不活性で非反応性の成分の混合物を含むキャリアー中に１０〜１５質量％の乾燥バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１５を含み、混合物１グラムあたり最低限で７．３×１０９ｃｆｕのバチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１５を提供する。セレナーデ（登録商標）マックスは、その他のあらゆる葉面散布する殺真菌剤のように適用される水和剤、可溶性の顆粒、および、水性懸濁液として配合が可能である。セレナーデ（登録商標）マックスは標的および有益な生物以外には毒性ではない。セレナーデの複雑な作用機序、環境への適合性、および、広域スペクトルの制御のために、セレナーデは、総合的害虫管理に使用するのに非常によく適している。
【００１９】
［００１８］上記で示したように、本発明の組成物は、バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株、および、酵母抽出物（例えばサッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物）、ならびに任意にキャリアーを含む。好ましくは、本発明の組成物は、バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株を、組成物の総質量に基づき約５質量％〜約５０質量％の範囲の量で、より好ましくは約１０質量％〜約１５質量％の範囲の量で含む。好ましくは、本発明の組成物の構成要素であるバチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株は、約４．５×１０９〜約２．５×１０１０ｃｆｕのバチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株／グラムを含み、より好ましくは、最低限で約７．３×１０９ｃｆｕのバチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株／グラムを含む。上記で説明したように、本発明はさらに、例えば動物における感染、具体的にはトリにおける壊死性腸炎、および、ブタにおけるブタ回腸炎のような病気を予防および／または制御するための、バチルス・ズブチリスＱＳＴ−７１３株と、酵母抽出物（例えばサッカロミセス・セレビジエ由来の酵母抽出物）との組み合わせを含む動物用飼料組成物を提供する。
【００２０】
［００１９］本発明の一実施態様は、酵母（例えばＳ．セレビジエ）由来の酵母抽出物、プロバイオティック細菌、および、イオノフォア系抗コクシジウム剤を含む、動物における病気を予防するための組成物を含む。イオノフォア系抗コクシジウム剤としては、これらに限定されないが、サリノマイシン、モネンジン、ナイジェリシン、ナラシン、ライドロマイシン、ノボリトマイシン（ｎｏｂｏｒｉｔｏｍｙｃｉｎ）、ｇｒｉｓｏｒｉｘｉｎ、ｍｕｔａｌｏｍｙｃｉｎ、ａｌｂｏｒｉｘｉｎ、ラノマイシン（ｌｏｎｏｍｙｃｉｎ）、ラサロシド、マデュラマイシン（ｍａｄｕｒａｍｉｃｉｎ）アンモニウム、センデュラマイシン、および、リセセリン（ｌｙｓｅｃｅｌｌｉｎ）が挙げられる。好ましい本発明の実施態様は、サリノマイシン（バイオ−コックス（Ｂｉｏ−Ｃｏｘ（登録商標））；アルファーマ社，ニュージャージー州ブリッジウォーター）を含む。イオノフォア系抗コクシジウム剤は、約０．００３３質量％〜約０．００９９質量％の範囲の量で、好ましくは約０．００４４質量％〜約０．００６６質量％の範囲の量で存在する。
【００２１】
［００２０］本発明の実施態様は、動物にコクシジウム症ワクチンを接種させること、および、動物に、酵母（例えばＳ．セレビジエ）、プロバイオティック細菌、および、キャリアーを含む組成物を投与することを含む、動物における病気を予防する方法を対象とする。好ましいコクシジウム症ワクチンは、コクシバック（登録商標）−Ｂ（シェリング・プラウ・アニマルヘルス社（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  Ｐｌｏｕｇｈ  Ａｎｉｍａｌ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ））、Ｅ．アセルブリン（Ｅ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎｅ）、Ｅ．ミバチ、Ｅ．マキシマおよびＥ．テネラを含む弱毒化していない生きた胞子形成オーシストのコクシジウム症ワクチンである。
【００２２】
［００２１］本組成物は、任意にキャリアーを含んでいてもよい。多数の適切な乾燥キャリアーは、有機物質でもよいし、または無機物質でもよい。典型的な無機キャリアーとしては、例えば、炭酸カルシウム、硫酸カルシウムなどの塩が挙げられる。適切な有機キャリアーとしては、ラクトースなどが挙げられる。また、例えばシリカのような少量のその他の流れ調整剤も使用できる。また、これら上述したものの１種またはそれより多くを含む混合物も使用できる。
【００２３】
［００２２］本組成物は、酵母抽出物、例えばＳ．セレビジエ由来の酵母抽出物を含む。具体的に言えば、細胞壁分画は、β−グルカンおよびマンナンを含む。細胞壁分画は、例えば機械的に破壊した細胞から生産される。酵母抽出物は、組成物の総質量に基づき、約５０質量％〜約９０質量％、具体的には約５０質量％〜約８５質量％、より具体的には約５０質量％〜約５５質量の量で存在する。一実施態様において、β−グルカンは（１，３−１，６）側鎖を有し、グルカナーゼによる切断に対して耐性を有する。その他の実施態様において、マンナンは、部分的にリン酸化されたＤ−マンノース残基を含む多糖類−ポリペプチド複合体である。酵母抽出物は、約４０質量％〜約８５質量％の細胞壁、具体的には約４０質量％〜約４５質量％の細胞壁を含む。
【００２４】
［００２３］Ｂ．リケニフォルミスは、組成物の総質量に基づき、約５質量％〜約５０質量％、および、具体的には約７．５質量％〜約１２．５質量％の量で存在する。構成要素であるＢ．リケニフォルミスは、組成物の総質量に基づき、約４．５×１０９〜約２．５×１０１０ｃｆｕ／グラム、具体的には約５×１０９〜約１．２５×１０１０ｃｆｕ／グラムを含む。
【００２５】
［００２４］キャリアーは、組成物の総質量に基づき、０質量％〜４５質量％、具体的には約５質量％〜約４０質量％、および、より具体的には約３７．５質量％〜約４２．５質量％の量で存在する。
【００２６】
［００２５］一実施態様において、動物における病気の治療に適した本組成物は、動物用食糧中に投与される。通常、ウシ、ブタおよびトリのような加工された動物用食糧はペレットまたは類似の微粒子材料の形態で提供される。ペレットは、典型的には、穀類のベースを油およびタンパク質のような成分と組み合わせ、このような混合物の状態を水蒸気で整え（例えば、７０℃で５分間）、この混合物を円形の型（典型的には、直径２ｍｍ〜１５ｍｍ）で押出し成形し、適切なサイズの長さ（例えば５〜２０ｍｍ）に切断し、乾燥させることによって製造される。完成したペレットは、一般的に、円柱状に成型され、比較的滑らかな表面を有する。
【００２７】
［００２６］一実施態様において、動物用飼料組成物は、動物用食糧に動物用飼料添加剤組成物を添加することによって製造される。動物用飼料添加剤組成物は、様々な方法で食物に添加することができる。所定量の飼料に、所定量の活性成分を含む動物用飼料添加剤組成物を添加して、混合またはブレンドして、実質的に均一な薬用飼料組成物を提供することもできる。この方式で、多数の動物を治療するための大規模な試料のロットを製造することもできる。あるいは、１匹の動物または１回の食事のための飼料を含む飼料のバッチは、予め決められた量の動物用飼料添加剤組成物と、動物用飼料とを混合することによって製造してもよいし、または、動物の飼料に追加して添加するもの（top dressing）として予め決められた量の予備混合物を添加することによって製造してもよい。
【００２８】
［００２７］その他の実施態様において、動物用飼料組成物は、動物における病気を治療するのに適した組成物、および、動物用食糧を含み、ここで、動物における病気の治療に適した本組成物は、動物用食糧（マッシュまたはペレット状）１トンあたり、約０．５ポンド〜約１０ポンド、具体的には約１ポンド〜約５ポンド、より具体的には約１．５ポンド〜約２．５ポンド、および、最も具体的には２ポンドの量の動物における病気の治療に適した本組成物を含む。一実施態様において、動物用食糧は、トリ用食糧であり得る。その他の実施態様において、動物用食糧は、ブタ用食糧であり得る。
【００２９】
［００２８］以下の非限定的な実施例で、本発明をさらに説明する。
【実施例】
【００３０】
［００２９］実施例１．
［００３０］１日齢の健康なブロイラーの雄のニワトリ（Ｃｏｂｂ×Ｃｏｂｂ）ニワトリを、ジョージア州クリーブランドのコッブ−バントレス孵化場（Ｃｏｂｂ−Ｖａｎｔｒｅｓｓ  Ｈａｔｃｈｅｒｙ）から得た。ニワトリが到着したら、それらをピーターサイム（Ｐｅｔｅｒｓｉｍｅ）のバッテリーケージで飼育した。各ケージに８匹のトリを入れた。温度制御されたガス炉／空気調節装置で一定の温度を維持し、むらのない継続的な照明を提供した。試験中ずっと水を適宜利用できるようにした。ニワトリを４８匹のニワトリを含む群に分けた。２つのコントロール処理群に、薬用成分の入っていない市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料を供給した。１つの群（アルケア０．５群と名付けられた）に、アルケアＴＭ（アルファーマ，ニュージャージー州ブリッジウォーター）、１グラムあたり１．０×１０１０個のＢ．リケニフォルミス胞子を含むＤＦＭ製品を、０．５ポンド／トンの割合で供給した。その他の群（アルケア１群）に、アルケアＴＭを１．０ポンド／トンの割合で供給した。２つの別の群に、アルファミューン（登録商標）（アルファーマ，ニュージャージー州ブリッジウォーター）、動物飼料に使用するためのビール酵母（サッカロミセス・セレビジエ）抽出物を、それぞれ１ポンド／トン（アルファミューン１群）、および、２ポンド／トン（アルファミューン２群）の割合で供給した。追加の群に、アルケアおよびアルファミューンの両方を、アルケア０．５ポンド／トン＋アルファミューン１ポンド／トン、アルケア１ポンド／トン＋アルファミューン１ポンド／トン、アルケア０．５ポンド／トン＋アルファミューン２ポンド／トン、および、アルケア１ポンド／トン＋アルファミューン２ポンド／トンの割合で供給した。
【００３１】
［００３１］ニワトリに２８日間餌を与えた。実験中に死亡した全てのトリの体重を量り、壊死性腸炎（ＮＥ）病変の存在に関して解剖して調べた。１４日目に、全ての群をアイメリア・マキシマ（トリ１羽あたり５，０００個のオーシスト）を経口投与し攻撃した。１９、２０および２１日目に、コントロール（ＮＣ）を除く全ての処理群を、Ｃ．パーフリンジェンス（Ｃ．パーフリンジェンスの液体培地での培養物，１０８ｃｆｕ／ｍｌ）で攻撃した。２２日目に、各ケージから３羽のトリの病変をＮＥに関してスコア付けした。２８日目に試験を止めた。表１に試験結果を示す。
【００３２】
【表１】
0005645843.tif 000002
【００３３】
［００３２］実施例２．
［００３３］１日齢の健康なブロイラーの雄ニワトリ（Ｃｏｂｂ×Ｃｏｂｂ）ニワトリを、ジョージア州クリーブランドのコッブ−バントレス孵化場から得た。トリが到着したら、トリを５０羽ずつ各処理用の畜舎にブロックで割り振った。環境制御のために、周囲湿度にして、２４時間照明した。主要な熱源はガスヒーターであり、卵を孵化させる期間中は必要に応じ補足の熱源として、各畜舎に加熱ランプを置いた。ファンおよび側壁のカーテンを操作することによって、換気してトリを冷やした。試験中ずっと水を適宜利用できるようにした。２つのコントロール処理群に、薬用成分の入っていない市販タイプの、米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用、育成用および仕上げ用（ｆｉｎｉｓｈｅｒ）飼料を供給した。ＳＭ群と名付けた１つの群に、セレナーデ（登録商標）マックスを９１ｇ／トン（食糧）の割合で供給した。ＳＭ＋アルファミューン（登録商標）（ＡＭ）群と名付けたその他の群に、セレナーデ（登録商標）マックスを９１ｇ／トン（食糧）の割合で、および、アルファミューン（登録商標）を１ｌｂ／トン（食糧）の割合で供給した。この処理を６ブロックで繰り返し、ランダム化した。
【００３４】
［００３４］ニワトリの到着日付から実験４２日目まで、ニワトリに適宜餌を与えた。実験中に死亡した全てのトリの体重を量り、壊死性腸炎（ＮＥ）病変の存在に関して解剖して調べた。１４日目に、全ての群をアイメリア・マキシマ（トリ１羽あたり５，０００個のオーシスト）を経口投与し攻撃した。１９、２０および２１日目に、コントロール群（ＮＣ）の１つを除く全ての処理群を、Ｃ．パーフリンジェンス（ＣＰ，Ｃ．パーフリンジェンスの液体培地での培養物，１０８ｃｆｕ／ｍｌ）で攻撃した。２２日目に、各畜舎からのトリ５羽の病変をＮＥに関してスコア付けした。４２日目に試験を終結させ、結果を表２に示した。
【００３５】
【表２】
0005645843.tif 000003
【００３６】
［００３５］実施例３．
［００３６］１日齢の健康なブロイラーの雄ニワトリ（Ｃｏｂｂ×Ｃｏｂｂ）を孵化場から得て、それらの性別を分け、慣例的なワクチン（ＨＶＴＳＢ１）を接種させた。この研究では見た目が健康なニワトリを用いた。研究の経過中にトリの交換は無かった。ニワトリが到着したら、それらを床がわら敷きの畜舎で飼育した。畜舎ごとに５０羽のトリを置いた。屋内で畜舎を場所ごとにブロックで仕切った。各ブロック内で処理はそれぞれ一回行われた。温度制御されたガス炉を一定の温度に維持した。試験中ずっと水を適宜利用できるようにした。
【００３７】
［００３７］０、２１および４２日目に、畜舎で全てのトリの体重を量った。幼鳥用、育成用および仕上げ用飼料の、それぞれ０〜２１日間、２１〜３５日間および３５〜４２日間の消費を測定した。４２日目に研究を終結させた。２２日目に、各畜舎からのトリ５羽の病変をＮＥに関してスコア付けした。スコア付けは０〜３のスコアに基づき行われ、ここで０は正常であり、３は最も重度である。スコア付けは以下の通りであった：正常な腸は０、粘液での被覆がわずかであり正常な状態が失われている場合は１、重度の壊死性腸炎の場合は２、および、内腔で出血している最も重症な壊死性腸炎の場合は３とした。実験中に死亡したトリの体重を量り、ＮＥの存在に関して解剖して調べた。これらの研究による全てのトリを調査施設で処分した。死亡率を、全体の死亡率と、および、ＮＥに起因する死亡率としてまとめた。
【００３８】
［００３８］合計で８種の異なる処方計画を試験した。１４日目に、全ての群をアイメリア・マキシマ（トリ１羽あたり５，０００個のオーシスト）を経口投与し攻撃した。１９、２０および２１日目に、コントロール（ＮＣ）を除く全ての処理、および、アルケアおよびアルファミューン（ＡＡ〜ＮＣ群）を用いた処理群を、Ｃ．パーフリンジェンス（Ｃ．パーフリンジェンスの液体培地での培養物，１０８ｃｆｕ／ｍｌ）で攻撃した。コントロール飼料は、アルケアＴＭ（ＡＣ）、アルファミューン（登録商標）（ＡＭ）、または、サリノマイシン（Ｓ）を含んでいなかった。コントロール群には、孵化した日に、ラベルで推奨している投与量でスプレーコックス（Ｓｐｒａｙｃｏｘ（登録商標））（シェリング・プラウ・アニマルヘルス社）装置を用いた噴霧によるワクチン接種を行わなかった。この群を以下のように名付けた：
［００３９］ＮＣ群（攻撃を受けていないコントロール）：ＮＣ群に、薬用成分の入っていない市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料を供給し、Ｃ．パーフリンジェンスでの攻撃を行わなかった。
【００３９】
［００４０］ＣＰ群（攻撃を受けたコントロール）：ＣＰ群に、薬用成分の入っていない市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料を供給し、上述したようにこれをＣ．パーフリンジェンスで攻撃した。
【００４０】
［００４１］ＡＡ、ＮＣ群（アルケアＴＭおよびアルファミューン（登録商標）を供給；攻撃しなかった）：ＡＡ、ＮＣ群に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルケアＴＭを１．０ポンド／トンの割合で、および、アルファミューン（登録商標）を１ポンド／トンの割合で供給した。この群には攻撃を行わなかった。
【００４１】
［００４２］ＡＡ、ＣＰ群（アルケアＴＭおよびアルファミューン（登録商標）を供給；攻撃あり）に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルケアＴＭを１．０ポンド／トンの割合で、および、アルファミューン（登録商標）を１ポンド／トンの割合で供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００４２】
［００４３］Ｓ、ＣＰ群（サリノマイシンで処理；攻撃した）に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋サリノマイシン（６６ｐｐｍ）を供給し、上述のようにして攻撃した。
【００４３】
［００４４］Ｓ、ＡＡ、ＣＰ群（サリノマイシンで処理；アルケアＴＭおよびアルファミューン（登録商標）を供給；攻撃あり）に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルケアＴＭを１．０ポンド／トンの割合で、および、アルファミューン（登録商標）を１ポンド／トン＋サリノマイシン（６６ｐｐｍ）の割合で供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００４４】
［００４５］ＣＶ、ＣＰ群（コクシバック（登録商標）−Ｂで処理；攻撃あり）に、孵化した日に、スプレーコックス（登録商標）装置（シェリング・プラウ・アニマルヘルス社）を用いてラベルで推奨している投与量で噴霧によるワクチン接種を行い、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料を供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００４５】
［００４６］ＣＶ、ＡＡ、ＣＰ群（コクシバック（登録商標）−Ｂで処理；攻撃あり）に、孵化した日に、ラベルで推奨している投与量で、スプレーコックス（登録商標）装置を用いて噴霧によるワクチン接種を行い、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルケアＴＭを１．０ポンド／トンの割合で、および、アルファミューン（登録商標）を１ポンド／トンの割合で供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００４６】
［００４７］データ解析でＳＡＳ（登録商標）（ＳＡＳインスティテュート社（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，  Ｉｎｃ．）、ケアリー，ノースカロライナ州，米国，２００２）を用いて統計を行った。ＡＡ使用および不使用の抗コクシジウムのプログラムでＡＡを比較する追加の解析を行った。
【００４７】
［００４８］ＳＡＳを用いて統計分析で用いられた畜舎データの計算を行った。０〜２１、０〜４２および２１〜４２日の期間におけるトリの平均体重増加を計算した。ＮＥ病変スコアに関して、２２日目でのＮＥ病変スコア付けに関して選択された５羽のトリの畜舎平均を計算した。基準として畜舎ごとに、０〜２１、０〜４２および２１〜４２日の期間における飼料要求率（ＦＣＲ）を計算した（ここで、死亡したトリおよび除去されたトリに関して調整が行われた）。全体の死亡率とＮＥによって引き起こされる死亡率との比率を計算した。ニワトリの性能について述べられる場合は全て、体重増加および／またはＦＣＲに対する作用を意味することとする。
【００４８】
［００４９］この研究は、無作為の完備ブロック計画を用いて行われた。これは６ブロックで行われた。実験単位はトリの畜舎とした。このモデルは、ブロックモデルおよび処理モデルを含む。ブロックは、ランダム効果である。処理は固定効果であり、従ってこのモデルを混合した。
【００４９】
［００５０］まとめた変数は、畜舎ごとの性能データ、および、ＮＥ攻撃に関するデータを含む。これらのデータに対して、ＳＡＳのＰＲＯＣ  ＭＩＸＥＤ法を用いて混合モデル解析を行った。
【００５０】
［００５１］表３−８に試験結果を示す。
表では以下の略語を用いた：
ＡＡ＝アルケア＋アルファミューン
Ｓ＝サリノマイシン
ＣＶ＝コクシバック（登録商標）−Ｂ
ＣＰ＝攻撃あり
ＮＣ＝攻撃なし
【００５１】
【表３】
0005645843.tif 000004
【００５２】
【表４】
0005645843.tif 000005
【００５３】
【表５】
0005645843.tif 000006
【００５４】
【表６】
0005645843.tif 000007
【００５５】
【表７】
0005645843.tif 000008
【００５６】
【表８】
0005645843.tif 000009
【００５７】
［００５２］表３、４および５中のデータは、それぞれＡＡ使用および不使用のＡＡＣＰ処理とＳおよびＣＶ処理との比較である。概して、Ｓ＋ＡＡの組み合わせが全ての処理に関して最良の性能を示した。Ｓ＋ＡＡの組み合わせは、Ｓ処理およびＡＡＣＰ処理の両方と比較したところ、０〜２１、０〜４２、２１〜４２日間でより大きい体重増加を示し、０〜２１、０〜４２および２１〜４２日間でより優れたＦＣＲを示し、より低いＮＥ死亡率を示した。またＳ＋ＡＡの組み合わせは、ＡＡＣＰ処理と比較したところ、より低いＮＥ病変スコアも示した。
【００５８】
［００５３］ＣＶ＋ＡＡの組み合わせが、ＣＶおよびＡＡＣＰ処理の両方と比較したところ（表３および４）、０〜２１、０〜４２、２１〜４２日間でより大きい体重増加を示し、０〜２１、０〜４２および２１〜４２日間でより優れたＦＣＲを示した。ＣＶ＋ＡＡの組み合わせは、ＣＶおよびＡＡＣＰ処理と比較したところ（表５）、０〜４２日間でより低い全体の死亡率を示し、より低いＮＥ死亡率を示した。
【００５９】
［００５４］ＡＡ使用および不使用のサリノマイシンが投与されたトリは、全般的に、最良の性能およびより低いＮＥ病変スコアを示し、ＮＣに匹敵する、またはそれよりもより優れた死亡率を示した。サリノマイシンが供給されたトリ飼料にＡＡを添加すると、性能を改善する傾向が見られたが、ＮＥ病変スコアまたは死亡率をさらに減少させることななかった。一般的に、ＣＶ単独で処理したトリと比較したところ、ＣＶで処理したトリの飼料へＡＡを添加することによって性能が改善され、死亡率が減少した。ＮＥで攻撃し、従来のコクシジウム抑制薬プログラム、または、コクシジウム症ワクチンプログラムで処理したトリは、それらの飼料にＡＡを添加することによって利益を得る可能性がある。表６、７および８中のデータによれば、コクシジウム症コントロールプログラム（ＡＡ使用および不使用）を互いに直接比較することができ、さらにコントロール（攻撃あり、および、攻撃なし）と直接比較することができる。０〜２１の期間中に、Ｓ＋ＡＡを供給したトリは、その他の処理と比較したところ（表６）、より大きい体重増加を示した。０〜２１の期間中に、Ｓが供給されたトリは、ＮＣに匹敵するが、ＣＰよりも大きい体重増加を示した。０〜２１の期間中に、ＣＶでワクチン接種されたトリは、体重増加を示した（これは、ＮＣまたはＣＰトリと違いはなかった）。０〜４２および２１〜４２日の期間中に、ＣＶで処理したトリは、ＣＰトリと比較したところ、より大きい体重増加を有していた。
【００６０】
［００５５］０〜２１の期間中に、Ｓ＋ＡＡが供給されたトリは、ＮＣおよびＣＰトリよりも優れたＦＣＲを有していた（表７）。０〜２１の期間中に、Ｓ、ＣＶおよびＣＶ＋ＡＡが投与されたトリは、ＣＰトリよりも優れたＦＣＲを有していた。０〜４２および２１〜４２日の期間中に、Ｓ、Ｓ＋ＡＡ、ＣＶ、および、ＣＶ＋ＡＡで処理したトリは、ＮＣおよびＣＰトリよりも優れたＦＣＲを有していた（表７）。０〜４２の期間中に、ＳおよびＣＶで処理したトリの食物へＡＡを添加することによって、それぞれＳおよびＣＶ単独と比較したところ、ＦＣＲが改善された。２１〜４２の期間中に、ＣＶでワクチン接種されたトリの食物にＡＡを添加することによって、ＣＶ単独と比較したところ、ＦＣＲが改善された。
【００６１】
［００５６］ＳおよびＣＶトリ（ＡＡ使用および不使用）のＮＥ病変スコアは、ＮＣに匹敵する程度であったが、ＣＰトリよりも低かった（表８）。この処理は、０〜２１の期間中の死亡率に影響を与えなかった（表８）。Ｓ、Ｓ＋ＡＡおよびＣＶ＋ＡＡトリの死亡率（全体およびＮＥ）は、ＮＣに匹敵する程度であったが、ＣＰトリよりも低かった（表６）。ＣＶトリの死亡率（全体およびＮＥ）は、ＣＰトリよりも低かったが、ＮＣトリよりも高かった。ＣＶ＋ＡＡで処理したトリの死亡率（全体およびＮＥ）は、ＣＶ単独よりも低かった。
【００６２】
［００５７］実施例４．
［００５８］１日齢の健康なブロイラーの雄ニワトリ（Ｃｏｂｂ×Ｃｏｂｂ）を孵化場から得て、それらの性別を分け、慣例的なワクチン（ＨＶＴＳＢ１）を接種させた。この研究では見た目が健康なニワトリだけを用いた。研究の経過中にトリの交換は無かった。ニワトリが到着したら、それらを床がわら敷きの畜舎で飼育した。畜舎ごとに５０羽のトリを置いた。屋内で畜舎を場所によってブロックした。各ブロック内で処理はそれぞれ一回行われた。温度制御されたガス炉を一定の温度に維持した。試験中ずっと水を適宜利用できるようにした。
【００６３】
［００５９］０、２１および４２日目に、畜舎で全てのトリの体重を量った。０〜２１、２１〜３５、および、３５〜４２日間それぞれにわたり、幼鳥用、育成用および仕上げ用飼料の消費を測定した。４２日目に研究を終結させた。２２日目に、各畜舎からのトリ５羽の病変をＮＥに関してスコア付けした。スコア付けは０〜３のスコアに基づき行われ、ここで０は正常であり、３は最も重度である。スコア付けは以下の通りであった：正常な腸は０、粘液での被覆がわずかであり正常な状態が失われている場合は１、重度の壊死性腸炎の場合は２、および、内腔で出血している最も重症な壊死性腸炎の場合は３とした。実験中に死亡したトリの体重を量り、ＮＥの存在に関して解剖して調べた。これらの研究による全てのトリを調査施設で処分した。死亡率を、全体の死亡率と、および、ＮＥに起因する死亡率としてまとめた。
【００６４】
［００６０］９種の異なる処方計画の全てを試験した。１４日目に、全ての群をアイメリア・マキシマ（トリ１羽あたり５，０００個のオーシスト）を経口投与し攻撃した。１９、２０および２１日目に、攻撃を受けていないコントロール（ＮＣ）を除く全ての処理群を、Ｃ．パーフリンジェンス（Ｃ．パーフリンジェンスの液体培地での培養物，１０８ｃｆｕ／ｍｌ）で攻撃した。コントロール飼料は、セレナーデ（登録商標）マックス（ＱＳＴ）、アルファミューン（登録商標）（ＡＭ）、または、サリノマイシン（Ｓ）を含んでいなかった。コントロール群には、孵化した日に、ラベルで推奨している投与量でスプレーコックス（登録商標）装置を用いて噴霧によるワクチン接種を行わなかった。これらの群を以下のように名付けた：
［００６１］ＮＣ群（攻撃を受けていないコントロール）：ＮＣ群に、薬用成分の入っていない市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料を供給し、Ｃ．パーフリンジェンスでの攻撃を行わなかった。
【００６５】
［００６２］ＣＰ群（攻撃を受けたコントロール）：ＣＰ群に、薬用成分の入っていない市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料を供給し、上述したようにこれをＣ．パーフリンジェンスで攻撃した。
【００６６】
［００６３］ＡＭ、ＣＰ群（アルファミューン（登録商標）を供給；攻撃あり）：ＡＭ、ＣＰ群に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルファミューン（登録商標）を１ポンド／トンの割合で供給した。この群は攻撃した。
【００６７】
［００６４］ＱＳＴ、ＣＰ群（セレナーデ（登録商標）マックスを供給；攻撃あり）に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋セレナーデ（登録商標）マックスを０．２５ポンド／トンの割合で供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００６８】
［００６５］ＡＱＳＴ、ＣＰ群（アルファミューン（登録商標）およびセレナーデ（登録商標）マックスを供給；攻撃あり）に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルファミューン（登録商標）を１ポンド／トンの割合で、および、セレナーデ（登録商標）マックスを０．２５ポンド／トンの割合で供給し、これを上述のようにして攻撃した。
【００６９】
［００６６］Ｓ、ＣＰ群（サリノマイシンで処理；攻撃あり）に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋サリノマイシン（６６ｐｐｍ）を供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００７０】
［００６７］Ｓ、ＡＱＳＴ、ＣＰ群（サリノマイシンで処理；アルファミューン（登録商標）およびセレナーデ（登録商標）マックスを供給；攻撃あり）に、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルファミューン（登録商標）およびセレナーデ（登録商標）マックスを１．２５ポンド／トンの割合で供給し、サリノマイシン（６６ｐｐｍ）で処理した。この群を上述したように攻撃した。
【００７１】
［００６８］ＣＶ、ＣＰ群（コクシバック（登録商標）−Ｂで処理；攻撃あり）に、孵化した日に、ラベルで推奨している投与量で、スプレーコックス（登録商標）装置を用いて噴霧によるワクチン接種を行い、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料を供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００７２】
［００６９］ＣＶ、ＡＱＳＴ、ＣＰ群（コクシバック（登録商標）−Ｂで処理した、アルファミューン（登録商標）およびセレナーデ（登録商標）マックスを供給；攻撃あり）に、孵化した日に、ラベルで推奨している投与量で、スプレーコックス（登録商標）装置を用いて噴霧によるワクチン接種を行い、市販タイプの米国で一般的に使用されている食糧を配合した幼鳥用飼料＋アルファミューン（登録商標）およびセレナーデ（登録商標）マックスを１．２５ポンド／トンの割合で供給した。この群を上述したように攻撃した。
【００７３】
［００７０］データ解析で、ＳＡＳ（登録商標）（ＳＡＳインスティテュート社，ケアリー，ノースカロライナ州，米国，  ２００２）を用いて統計を行った。ＡＡ使用および不使用の抗コクシジウムのプログラムでＡＡを比較する追加の解析を行った。
【００７４】
［００７１］ＳＡＳを用いて統計分析で用いられた畜舎データの計算を行った。０〜２１、０〜４２および２１〜４２日の期間におけるトリの平均体重増加を計算した。ＮＥ病変スコアに関して、２２日目でのＮＥ病変スコア付けに関して選択された５羽のトリの畜舎平均を計算した。基準として畜舎ごとに、０〜２１、０〜４２および２１〜４２日の期間における飼料要求率（ＦＣＲ）を計算した（ここで、死亡したトリおよび除去されたトリに関して調整が行われた）。全体の死亡率とＮＥによって引き起こされる死亡率との比率を計算した。ニワトリの性能についてなされるあらゆる言及は、体重増加および／またはＦＣＲに対する作用を参照することとする。
【００７５】
［００７２］この研究は、無作為の完備ブロック計画を用いて行われた。これは６ブロックで行われた。実験単位はトリの畜舎とした。このモデルは、ブロックモデルおよび処理モデルを含む。ブロックは、ランダム効果である。処理は固定効果であり、従ってこのモデルを混合した。
【００７６】
［００７３］まとめた変数は、畜舎ごとの性能データ、および、ＮＥ攻撃に関するデータを含む。これらのデータに対して、ＳＡＳのＰＲＯＣ  ＭＩＸＥＤ法を用いて混合モデル解析を行った。
【００７７】
［００７４］表９−１７に試験結果を示す。
表では以下の略語を用いた：
ＡＭ＝アルファミューン（登録商標）
ＱＳＴ＝  セレナーデ（登録商標）マックス
ＡＱＳＴ＝  アルファミューン＋セレナーデ（登録商標）マックス
Ｓ＝サリノマイシン
ＣＶ＝コクシバック（登録商標）−Ｂ
ＣＰ＝攻撃あり
ＮＣ＝攻撃なし
【００７８】
【表９】
0005645843.tif 000010
【００７９】
【表１０】
0005645843.tif 000011
【００８０】
【表１１】
0005645843.tif 000012
【００８１】
【表１２】
0005645843.tif 000013
【００８２】
【表１３】
0005645843.tif 000014
【００８３】
【表１４】
0005645843.tif 000015
【００８４】
【表１５】
0005645843.tif 000016
【００８５】
【表１６】
0005645843.tif 000017
【００８６】
【表１７】
0005645843.tif 000018
【００８７】
ブロイラーのニワトリ用飼料にＡＭ、ＱＳＴおよびＡＱＳＴを添加することによって、ＣＣと比較したところ性能が改善された。ＡＱＳＴを含む、および、ＡＱＳＴを含まないサリノマイシンが投与されたトリは、全般的に、最良の性能を示し、より低いＮＥ病変、およびＮＣに匹敵する、またはそれよりもより優れた死亡率を示した。一般的に、コクシバックで処理したトリの飼料にＡＱＳＴを添加することによって、コクシバック単独で処理したトリと比較したところ、性能が改善され、死亡率が低くなった。