(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルである化合物又はその塩。
【請求項２】
結晶形態である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
結晶形態が７０℃と３００℃との間で開始する少なくとも１つの吸熱事象を有する、請求項２に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
２シータ＝１３．５１°に少なくとも１つの特異的な回折ピークを含むＸ線粉末回折パターンを有する結晶形態である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
以下の回折ピーク：１１．２７、１２．００、１３．５１、１５．５３、１６．８２、１７．９１、及び２３．７２°（２シータ）を含む結晶形態である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
２−（６−［18Ｆ］−フルオロ−５−メチルアミノ−ピリジン−２−イル）−ベンゾフラン−５−オール又はその塩である標識された化合物を製造するための合成前駆体としての、請求項１又は２に記載の化合物又はその塩の使用。
【請求項７】
［６−（５−エトキシメトキシ−ベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを製造する方法であって、該方法は：
塩基の存在下で保護基を使用して化合物５中のアミノ基を保護することを含む工程により化合物５を化合物６に変換すること；
塩基の存在下でアルキル化剤を使用して化合物６をアルキル化することを含む工程により化合物６を化合物７に変換すること；並びに
溶媒中でパラジウム触媒及び塩基の存在下にて化合物７と化合物４とを反応させること；
を含み、ここで；
化合物４は：
【化１】
0005613669.tif 000033
に相当し；
化合物５は：
【化２】
0005613669.tif 000034
に相当し；
化合物６は：
【化３】
0005613669.tif 000035
に相当し；そして
化合物７は：
【化４】
0005613669.tif 000036
に相当する、方法。
【請求項８】
ナトリウムヘキサメチルジシラジドの存在下で二炭酸ｔ−ブチルを使用して化合物５中のアミノ基を保護することを含む工程により化合物５を化合物６に変換すること；
ＮａＨの存在下でＣＨ3Ｉを使用して化合物６をアルキル化することを含む工程により
化合物６を化合物７に変換すること；並びに
エタノール中でジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）及び（ＣＨ3ＣＨ2）3Ｎの存在下にて化合物７と化合物４とを反応させること
を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
［５−（５−エトキシメトキシ−ベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルである化合物又はその塩。
【請求項１０】
結晶形態である、請求項９に記載の化合物又はその塩。
【請求項１１】
結晶形態が７０℃と３００℃との間で開始する少なくとも１つの吸熱事象を有する、請求項１０に記載の化合物又はその塩。
【請求項１２】
２シータ＝６．１８°に少なくとも１つの特異的な回折ピークを含むＸ線粉末回折パターンを有する結晶形態である、請求項１０に記載の化合物又はその塩。
【請求項１３】
以下の回折ピーク：６．１８、９．１４、１１．６７、１４．９８、及び１６．４４°（２シータ）を含む結晶形態である、請求項１０に記載の化合物又はその塩。
【請求項１４】
２−（２−［18Ｆ］−フルオロ−６−メチルアミノ−ピリジン−３−イル）−ベンゾフラン−５−オール又はその塩である標識された化合物を製造するための合成前駆体としての、請求項９又は１０に記載の化合物又はその塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本特許は、米国仮出願６１／０９２，８５１号（２００８年８月２９日出願）の利益を主張する。上記特許出願の文章全体が参照により本特許に加入される。
【０００２】
本発明は、生存患者のような哺乳動物においてアミロイド沈着物を画像化するために有用な化合物の前駆体として適した新規な誘導体、それらの組成物、使用方法及びこのような化合物を製造する方法に関する。これらの前駆体から誘導される化合物は、陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）のような画像化技術を用いてアルツハイマー病の生前診断を可能にする、インビボで脳中のアミロイド沈着物を画像化する方法において有用である。これらの化合物はまた、アルツハイマー病治療剤の臨床的有効性を測定するために使用することもできる。さらに、本発明はまた、結晶形態である前駆体化合物も開示する。
【背景技術】
【０００３】
アミロイドーシスは、１つ又はそれ以上の臓器又は体組織におけるタンパク質の異常沈着を特徴とする原因不明の進行性で、不治の代謝性疾患である。アミロイド蛋白は、例えば骨髄が機能不全になることによってつくられる。アミロイドーシスは、蓄積されたアミロイド沈着物が正常な体機能を損なう場合に生じ、臓器不全を引き起こし又は死に至ることがある。それは、百万人につき約８人に生じるまれな疾患である。男性及び女性では等しく影響を受け、通常、４０歳を過ぎて発症する。少なくとも１５種のアミロイドーシスが確認されている。それぞれのものは、異なる種類のタンパク質の沈着と関連がある。
【０００４】
アミロイドーシスの主要な形態は、原発性全身性、続発性、及び家族性又は遺伝性アミロイドーシスである。
【０００５】
また、アルツハイマー病と関連する別の形態のアミロイドーシスもある。原発性全身性アミロイドーシスは、通常、５０〜６０歳の間で発症する。米国において毎年診断される約２千件の新しい症例では、原発性全身性アミロイドーシスがこの疾患の最も一般的な形態である。それは、軽鎖関連アミロイドーシス（ｌｉｇｈｔ−ｃｈａｉｎ−ｒｅｌａｔｅｄ  ａｍｙｌｏｉｄｏｓｉｓ）としても知られており、多発性骨髄腫（骨髄癌）に関連して生じることがある。続発性アミロイドーシスは、慢性感染症又は炎症性疾患の結果である。それは、家族性地中海熱（悪寒、衰弱、頭痛、及び再帰熱を特徴とする細菌感染症）、肉芽腫性回腸炎（小腸の炎症）、ホジキン病、ハンセン病、骨髄炎及び関節リウマチと関連していることも多い。
【０００６】
家族性又は遺伝性アミロイドーシスは、その疾患の唯一の遺伝形態である。それは、ほとんどの民族の一部で生じ、そして各家系は、症状及び臓器病変の特徴的なパターンを有する。遺伝性アミロイドーシスは、常染色体優性であると考えられており、これは、疾患が生じるには欠陥遺伝子の１つのコピーで十分であるということを意味する。家族性アミロイドーシスをもつ親の子は、疾患を発症する危険性が５０−５０である。
【０００７】
アミロイドーシスは、体のあらゆる臓器又は体組織に影響を及ぼし得る。心臓、腎臓、胃腸系及び神経系は、影響を受けることが最も多い。アミロイド蓄積の他の一般的な部位としては、脳、関節、肝臓、脾臓、膵臓、呼吸系及び皮膚が挙げられる。
【０００８】
アルツハイマー病（ＡＤ）は、認知症のもっとも一般的な形態であり、日常生活の正常な活動を妨げるのに十分なほど重篤な精神的能力の喪失を特徴とし、少なくとも６月間持続し、そして生まれつき存在しない神経疾患である。ＡＤは、通常、老年期に生じ、そして記憶、推論及び計画のような認知機能の低下を特徴としている。
【０００９】
２００〜４００万人の米国人がＡＤを有しており；その数は、全年齢を母集団として２１世紀の中頃までに１４００万人もの数に増えることが予想される。それらの４０代及び５０代では少数の人々しか疾患を発症しないが、ＡＤは主に高齢者に影響を及ぼす。ＡＤは、６５〜７４歳のすべての人々の約３％、７５〜８４歳の人々の約２０％、そして８５歳以上の人々の約５０％に影響を及ぼす。
【００１０】
脳内でのアミロイドＡβペプチドの蓄積は、ＡＤのすべての形態の病理学的特徴である。大脳アミロイドＡβペプチドの沈着が、ＡＤの発症機序を駆動させるのに主要な影響を及ぼすことは一般に認められている。（非特許文献１）。
【００１１】
画像化技術、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）及び単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）は、脳内でのアミロイド沈着物の蓄積をモニタリングするのに有効であり、ＡＤの進行との相関を測定するために有用な技術である（例えば非特許文献２を参照のこと）。これらの技術の適用には、脳に容易に入り、インビボでアミロイド沈着物と選択的に結合する放射性リガンドが必要である。
【００１２】
血液脳関門を通過することができ、その結果、診断に用いることができるアミロイド結合化合物の必要性が存在する。さらに、ＡＤ斑レベルの変化を測定することにより前記処置の効果を評価することによってＡＤ患者に施される処置の有効性をモニタリングできることは重要である。
【００１３】
検出可能なアミロイド結合化合物の特に関心ある性質としては、インビボでのアミロイド沈着物に対する親和性が高く、脳への移行が高度かつ迅速であるほかに、正常組織に対する非特異的結合が低く、そして正常組織からのクリアランスが迅速であるということが含まれる。これらの性質は、一般に化合物の親油性に左右される（非特許文献３）。アミロイド斑を画像化するために提案された小分子の中で、チオフラビンＴのいくつかの非荷電類似体が合成されている（非特許文献４）。種々の等電子構造の（ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ）複素環が可能性あるアミロイド結合リガンドとして報告されている（非特許文献５；非特許文献６）。ベンゾフラン誘導体は、アミロイド造影剤としての使用について（非特許文献７；非特許文献８；非特許文献９；特許文献１）及びβアミロイド凝集の予防における使用について（非特許文献１０；非特許文献１１；非特許文献１２；非特許文献１３；特許文献２）以前に記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】ＷＯ２００３０５１８５９
【特許文献２】ＷＯ９５１７０９５
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Ｈａｒｄｙ  Ｊ  ａｎｄ  Ｓｅｌｋｏｅ  Ｄ．Ｊ．、Ｓｃｉｅｎｃｅ．２９７：３５３−３５６、２００２
【非特許文献２】Ｍｉｌｌｅｒ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２００６、３１３、１３７６
【非特許文献３】Ｃｏｉｍｂｒａ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６、６、６２９
【非特許文献４】Ｍａｔｈｉｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３、４６、２７４０
【非特許文献５】Ｃａｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００４、４７、２２０８
【非特許文献６】Ｋｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００３、４６、２３７
【非特許文献７】Ｏｎｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６、４９、２７２５
【非特許文献８】Ｌｏｃｋｈａｒｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００５、２８０（９）、７６７７
【非特許文献９】Ｋｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．２００２、２９（６）、６３３
【非特許文献１０】Ｔｗｙｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．１９９９、４０（５２）、９３８３
【非特許文献１１】Ｈｏｗｌｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １９９９、３４０（１）、２８３
【非特許文献１２】Ｃｈｏｉ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２００４、２７（１）、１９
【非特許文献１３】Ｔｗｙｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２００１、１１（２）、２５５
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明の一実施態様において、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。別の実施態様において、塩は薬学的に許容しうる塩である。
【００１７】
本発明のさらなる実施態様において、化合物［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。別の実施態様において、塩は薬学的に許容しうる塩である。
【００１８】
これらの化合物の化学構造は：
【化１】
0005613669.tif 000002
である。
【００１９】
化合物Ｉは［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを指し、そして化合物ＩＩは［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを指す。
【００２０】
Ｈａｌｅｂｌｉａｎ  ａｎｄ  ＭｃＣｒｏｎｅ  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ  １９６９、５８、ｐ９１１−９２９、特にｐ９１３に記載されるように、化合物は、非晶質状態の同じ化合物と比較して結晶状態で化学的により安定であると期待され得る。Ｐｉｋａｌ  ａｎｄ  Ｒｉｇｓｂｅｅ、Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１９９７、１４、ｐ  １３７９−１３８７、特にｐ１３７９に記載されるように、この所見は小分子（すなわち非タンパク質）について一般的であるが、タンパク質のような高分子について常に当てはまるというわけではない。従って、結晶状態は、それぞれ［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル及び（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルのような小分子については有益である。
【００２１】
Ｘ線は、化合物中の原子における電子により散乱される。結晶性物質は、Ｘ線を回折して建設的干渉の方向にピークを生じる。これらの方向は、単位格子の寸法及び形状を含む結晶構造により決定される。本明細書において開示されかつ／又は特許請求される全ての回折ピーク°（２シータ）は、Ｃｕ  Ｋα線を指す。無定形（非結晶性）物質はこのような回折ピークを生じない。例えば、Ｋｌｕｇ、Ｈ．Ｐ．＆  Ａｌｅｘａｎｄｅｒ、Ｌ．Ｅ．、Ｘ−Ｒａｙ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  Ｆｏｒ  Ｐｏｌｙｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  ａｎｄ  Ａｍｏｒｐｈｏｕｓ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ、１９７４、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓを参照のこと。
【００２２】
化合物が勝手放題にひとまとめになるか又は固まる能力は、その化合物がその融点付近まで加熱される場合に増加する。塊及びケーキは、粉末と比較して異なる流動特性及び溶解特性を有する。粒径低減の間のような粉末の機械的処理はエネルギーを物質にもたらし、従って温度が上昇する可能性を生じる。化合物の貯蔵、さらには化合物の輸送もまた、意図せず温度上昇をもたらし得る。
【００２３】
融解は吸熱事象である。吸熱事象は例えば示差走査熱量測定により測定することができる。
【００２４】
従って［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩；及び［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩がそれぞれ、これら化合物が望ましくない塊又はケーキを形成するのを防ぐために正常な使用の間に予測される最高温度よりも高い温度においてこのような吸熱事象を有することが有益である。
【００２５】
本発明の別の実施態様において、結晶形態である、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩；及び［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。
【００２６】
本発明の別の実施態様において、７０℃〜３００℃の間に開始する少なくとも１つの吸熱事象を有し、特徴のあるＸ線回折ピークを有する、結晶形態である［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩；及び［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。
【００２７】
本発明の別の実施態様において、２シータ＝約１３．５１°に少なくとも１つの特異的回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する、結晶形態である化合物［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。
【００２８】
本発明の別の実施態様において、以下の回折ピーク：１１．２７、１２．００、１３．５１、１５．５３、１６．８２、１７．９１及び２３．７２°（２シータ）を含む、結晶状態である化合物［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。
【００２９】
さらなる実施態様において、上記結晶形態は、以下の回折ピーク：６．９７、９．２４、１１．２７、１２．００、１３．５１、１５．５３、１６．８２、１７．９１及び２３．７２°（２シータ）を含む。
【００３０】
本発明の別の実施態様において、２シータ＝約６．１８°に少なくとも１つの特異的な回折ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する、結晶形態である化合物［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。
【００３１】
本発明の別の実施態様において、以下の回折ピーク：６．１８、９．１４、１１．６７、１４．９８及び１６．４４°（２シータ）を含む、結晶形態である化合物［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩が提供される。
【００３２】
さらなる実施態様において、上記結晶形態は、以下の回折ピーク：６．１８、９．１４、１１．６７、１２．３２、１４．６５、１４．９８、１６．４４、１７．５２及び２０．６６°（２シータ）を含む。
【００３３】
本発明の別の実施態様において、生存患者のような哺乳動物においてアミロイド沈着物を画像化するために有用な最終化合物の製造における合成前駆体としての、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩及び［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩の使用が提供される。一実施態様において、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩又は［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩は結晶形態である。さらなる実施態様において、上記化合物は上記の回折パターンを有する。
【００３４】
本発明の別の実施態様において、標識された化合物の製造方法における合成前駆体としての［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩又は［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩の使用が提供される。さらなる実施態様において、標識は18Ｆ原子である。一実施態様において、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩又は［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩は結晶形態である。さらなる実施態様において、上記化合物は上記の回折パターンを有する。
【００３５】
化合物［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩及び［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル又はその塩は、以下の式の（放射）標識された化合物の製造において有用である：
【００３６】
２−（６−フルオロ−５−メチルアミノ−ピリジン−２−イル）−ベンゾフラン−５−オール
【化２】
0005613669.tif 000003
【００３７】
２−（２−フルオロ−６−メチルアミノ−ピリジン−３−イル）−ベンゾフラン−５−オール
【化３】
0005613669.tif 000004
【００３８】
一実施態様において、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩又は［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩は結晶形態である。さらなる実施態様において、上記化合物は上記の回折パターンを有する。
【００３９】
本発明の別の実施態様において、化合物２−（６−［18Ｆ］−フルオロ−５−メチルアミノ−ピリジン−２−イル）−ベンゾフラン−５−オール及び２−（２−［18Ｆ］−フルオロ−６−メチルアミノ−ピリジン−３−イル）−ベンゾフラン−５−オールの製造における、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩又は［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩の使用が提供される。
【００４０】
一実施態様において、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩又は［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル若しくはその塩は結晶形態である。さらなる実施態様において、上記化合物は上記の回折パターンを有する。
【００４１】
別の実施態様において、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル及び［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの塩は薬学的に許容しうる塩である。
【００４２】
一実施態様において、上記の検出は、ガンマ線イメージング、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）、磁気共鳴画像法及び磁気共鳴分光法より選択される技術により行われる。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルのＸ線粉末回折パターンを示す。縦軸は強度（カウント）を表し、そして横軸は位置（Ｃｕ  Ｋα線についての°（２シータ））を表す。
【図２】［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの、図１と比較して横軸において異なるスケールのＸ線粉末回折パターンを示す。縦軸は強度（カウント）を表し、そして横軸は位置（Ｃｕ  Ｋα線について°（２シータ））を表す。
【図３】［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルのＸ線粉末回折パターンを示す。縦軸は強度（カウント）を表し、そして横軸は位置（Ｃｕ  Ｋα線について°（２シータ））を表す。
【図４】［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの、図１と比較して横軸において異なるスケールのＸ線粉末回折パターンを示す。縦軸は強度（カウント）を表し、そして横軸は位置（Ｃｕ  Ｋα線について°（２シータ））を表す。
【図５】［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ａ）；  ［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｂ）；硫酸ナトリウム（Ｃ）；及び塩化ナトリウム（Ｄ）のＸ線粉末回折パターンを示す。縦軸は強度（カウント）を表し、そして横軸は位置（Ｃｕ  Ｋα線について°（２シータ））を表す。
【発明を実施するための形態】
【００４４】
一実施態様は、図１に記載される化合物［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルに関する。
【００４５】
別の実施態様は、図３に記載される化合物［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルに関する。
【００４６】
本明細書で使用される「薬学的に許容しうる」は、音響医学的（ｓｏｕｎｄ  ｍｅｄｉｃａｌ）評価の範囲内で、哺乳動物の組織と接触する使用に適しており、過剰な毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症なく、かつ妥当なベネフィット／リスク比に見合う、化合物及び／又は物質、組成物、及び／又は投薬形態を指すために使用される。
【００４７】
本明細書で使用される「遊離塩基または薬学的に許容しうる塩」は、無水物及び脱溶媒和した溶媒和物を含む無溶媒物（ａｎｓｏｌｖａｔｅｓ）、ならびに水和物を含む溶媒和物を指す。
【００４８】
本明細書で使用される「薬学的に許容しうる塩」は、親化合物がその酸塩もしくは塩基塩または共結晶を作製することにより改変されている、開示された化合物の誘導体を指す。薬学的に許容しうる塩の例としては、限定されないが、アミン類のような塩基性残基の鉱酸塩または有機酸塩；カルボン酸のような酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが挙げられる。薬学的に許容しうる塩には、例えば非毒性無機酸または有機酸から形成された、親化合物の従来の非毒性塩または第四級アンモニウム塩が含まれる。例えば、このような従来の非毒性塩としては、塩酸、リン酸などのような無機酸から誘導されたもの；及び乳酸、マレイン酸、クエン酸、安息香酸、メタンスルホン酸などのような有機酸から製造された塩が挙げられる。
【００４９】
本発明の化合物の薬学的に許容しうる塩は、塩基性部分または酸性部分を含む親化合物から従来の化学的方法により合成することができる。一般的に、このような塩は、遊離酸形態または遊離塩基形態のこれらの化合物を化学量論量の適切な塩基または酸と水中もしくは有機溶媒中、または２つの混合物中で反応させることにより製造することができ；一般的に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水性媒体が使用される。
【００５０】
「同位体標識された」、「放射標識された」、「標識された」、「検出可能」または「検出可能なアミロイド結合」化合物若しくは薬剤、または「放射リガンド」は、１個またはそれ以上の原子が、天然で典型的に見出される（すなわち天然に存在する）原子量または質量数と異なる原子量または質量数を有する原子で置き換えられかまたは置換された化合物である。１つの非限定的な例外は19Ｆであり、これは天然に存在するものより高い程度まで富化させることなくこの元素を含む分子の検出を可能にする。従って置換基19Ｆを有する化合物を「標識された」などのように呼んでもよい。本発明の化合物中に組み込まれ得る適切な放射性核種（すなわち「検出可能な同位体」）としては、限定されないが、2Ｈ（重水素に対してＤとも記述される）、3Ｈ（トリチウムに対してＴとも記述される）、11Ｃ、13Ｃ、14Ｃ、13Ｎ、15Ｎ、15Ｏ、17Ｏ、18Ｏ、18Ｆ、35Ｓ、36Ｃｌ、82Ｂｒ、75Ｂｒ、76Ｂｒ、77Ｂｒ、123Ｉ、124Ｉ、125Ｉ及び131Ｉが挙げられる。当然のことながら、同位体標識された化合物は、特定の適用に適した技術での検出を可能にする程度まで、またはそのより高い程度まで検出可能な同位体で富化されることのみを必要とし、例えば11Ｃで標識された検出可能な化合物において、標識された化合物の標識された基の炭素原子は、わずかな分子において12Ｃまたは他の炭素同位体で構成されていてもよい。放射標識された化合物に組み込まれる放射性核種は、その放射標識された化合物の特定の適用に依存する。例えば、インビトロプラークまたは受容体標識について、及び競合アッセイでは、3Ｈ、14Ｃ、または125Ｉを組み込んだ化合物が一般的に最も有用だろう。インビボ画像化適用には、11Ｃ、13Ｃ、18Ｆ、19Ｆ、120Ｉ、123Ｉ、131Ｉ、75Ｂｒまたは76Ｂｒが一般的に最も有用である。
【００５１】
「有効量」の例には、医薬若しくは画像化用途のためのバイオアベイラビリティレベルでインビボでアミロイド沈着物の画像化を可能にし、かつ／またはフィブリル形成に関連する細胞変性及び毒性を防止する量が含まれる。
【００５２】
本発明の化合物は、動物またはヒトの臓器または身体領域（脳を含む）における１つまたはそれ以上のアミロイド沈着物の存在、位置及び／または量を決定するための、放射リガンドの前駆体としてまたは放射リガンドとして使用され得る。アミロイド沈着物としては、限定することなく、Ａβ（アミロイドベータ）の沈着物が挙げられる。アミロイド沈着の時系列を追跡することを可能にする際、放射リガンドの前駆体または放射リガンドとしての本発明の化合物は、疾患、障害または状態に関連する臨床症状の開始とアミロイド沈着とを関連付けるためにさらに使用され得る。本発明の化合物は、最終的に、アミロイド沈着を特徴とする疾患、障害または状態、例えばＡＤ、家族性ＡＤ、ダウン症候群、アミロイドーシス及びアポリポタンパク質Ｅ４対立遺伝子についてのホモ接合体を処置及び診断するために最終的に使用され得る。
【００５３】
従って放射リガンドの前駆体または放射リガンドとしての本発明の化合物は、哺乳動物においてアミロイド沈着物を測定するためのインビボでの方法において使用することができ、この方法は：（ａ）検出可能な量の、上の段落に記載の医薬組成物を投与する工程、及び（ｂ）：被験体における化合物のアミロイド沈着物に対する結合を検出する工程を含む。
【００５４】
この方法は、臓器または身体領域、好ましくは患者の脳におけるアミロイド沈着物の存在及び位置を決定する。本方法は、「検出可能な化合物」と呼ばれる本発明のアミロイド結合化合物またはその薬学的に許容しうる水溶性塩を含む検出可能な量の医薬組成物を患者に投与することを含む。
【００５５】
「検出可能な量」は、投与される検出可能な化合物の量が、化合物のアミロイドへの結合の検出を可能にするために十分であることを意味する。「画像化有効量」は、投与される検出可能な化合物の量が、化合物のアミロイドへの結合の画像化を可能にするために十分であることを意味する。
【００５６】
本発明はアミロイドプローブを使用し、これは非侵襲性神経画像処理技術、例えば磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）若しくは画像化（ＭＩＮＩ）、又はガンマ線イメージング、例えば陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）若しくは単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）と併用して、インビボでアミロイド沈着を定量するために使用される。用語「インビボ画像化」又は「画像化」は、本明細書に記載されるような標識されたヘテロアリール置換ベンゾフラン又はベンゾチオフェン誘導体の検出を可能にするいずれかの方法を指す。ガンマ線イメージングについては、試験される臓器又は領域から放出される放射線が測定され、そして総結合として、又は１つの組織における総結合を同じインビボ画像化手順での同じ被験体の別の組織における総結合に対して正規化した（例えば総結合で割った）比率のいずれかとして表される。インビボでの総結合は、組織において、同量の標識された化合物を大過剰の未標識であるがその他は化学的に同一な化合物とともに第二の注入をすることにより補正する必要なく、インビボ画像化技術により検出されるシグナル全体として定義される。「被験体」は哺乳動物、好ましくはヒトであり、最も好ましくは認知症を有することが疑われるヒトである。
【００５７】
インビボ画像化の目的のために、利用可能な検出機器の型は、所定の標識を選択する際の主要な因子である。例えば、放射性同位体及び19Ｆはインビボ画像化に特に適している。使用される機器の型により放射性核種又は安定同位体の選択が導かれる。例えば、選択される放射性核種は所定の型の機器により検出可能な崩壊の型を有していなければならない。
【００５８】
別の考慮すべき点は放射性核種の半減期に関連する。半減期は、標的による最大取り込みの時点でまだ検出可能であるように十分長くあるべきだが、宿主が有害な放射線を持続しないように十分短くあるべきである。本発明の放射標識された化合物は、適切な波長の放射されたガンマ線が検出されるガンマ線イメージングを使用して検出することができる。ガンマ線イメージングの方法としては、限定されないがＳＰＥＣＴ及びＰＥＴが挙げられる。好ましくは、ＳＰＥＣＴ検出については、選択された放射標識は粒子放出をしないが１４０−２００ｋｅＶの範囲に多数の光子を生じる。
【００５９】
ＰＥＴ検出については、放射標識は18Ｆ又は11Ｃのような陽電子放出放射性核種であり
、これらは崩壊して２つのガンマ線を形成し、これがＰＥＴカメラにより検出される。
【００６０】
本発明において、アミロイド結合化合物／プローブの前駆体が製造され、そしてこれらの化合物／プローブはインビボ画像化及びアミロイド沈着の定量に有用である。これらの化合物は磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）又は画像化（ＭＲＩ）、陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）、及び単一光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）のような非侵襲性神経画像処理技術と併用して使用される。本発明によれば、２−ヘテロアリール置換ベンゾフラン誘導体は、当該分野で公知の一般的な有機化学技術によりＭＲＳ／ＭＲＩのために19Ｆ又は13Ｃで標識され得る。これら化合物はまた、「Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｓｉｏｎ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ  ａｎｄ  Ａｕｔｏｒａｄｉｏｇｒａｐｈｙ」３９１−４５０  （Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８６）においてＦｏｗｌｅｒ、Ｊ．及びＷｏｌｆ、Ａ．により記載されるような当該分野で周知の技術により、ＰＥＴのために例えば18Ｆ、11Ｃ、75Ｂｒ、76Ｂｒ、又は120Ｉでも放射標識され得る。これら化合物はまた、当該分野で公知のいくつかの技術のいずれかによりＳＰＥＣＴのために123Ｉ及び131Ｉで放射標識され得る。例えば、Ｋｕｌｋａｒｎｉ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄ．Ａｐｐｌ．＆Ｉｎｓｔ．（Ｐａｒｔ  Ｂ）１８：６４７（１９９１）を参照のこと。これら化合物はまた、公知の金属放射標識、例えばテクネチウム−９９ｍ（99mＴｃ）で放射標識され得る。金属放射標識された化合物を使用して、アミロイド沈着物を検出することができる。Ｔｃ−９９ｍの放射標識された誘導体の製造は当該分野で周知である。例えば、Ｚｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２６（２）：２１７−２４、（１９９９）；Ｏｙａ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２５（２）：１３５−４０、（１９９８）、及びＨｏｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ＆Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４（６）：４８５−９８、（１９９７）を参照のこと。さらに、これら化合物は、インビトロ及び死後のサンプルでアミロイド斑を検出するために、当業者に周知の方法により3Ｈ、14Ｃ及び125Ｉで標識され得る。さらに、蛍光性化合物は、蛍光の検出に基づく周知の技術の使用によるインビトロ及び死後のサンプルに存在するプラークの検出のために使用され得る。
【００６１】
磁気共鳴分光法において特に有用な元素としては19Ｆ及び13Ｃが挙げられる。
【００６２】
本発明の目的に適した放射性同位体には、ベータ放射体、ガンマ放射体、陽電子放射体及びｘ線放射体が含まれる。これらの放射性同位体には120Ｉ、123Ｉ、131Ｉ、125Ｉ、18Ｆ、11Ｃ、75Ｂｒ、及び76Ｂｒが含まれる。本発明に従う磁気共鳴画像化（ＭＲＩ）又は分光法（ＭＲＳ）における使用に適切な安定同位体には19Ｆ及び13Ｃが含まれる。生検又は死後組織のホモジネートにおけるアミロイドのインビトロ定量に適した放射性同位体には125Ｉ、14Ｃ及び3Ｈが含まれる。好ましい放射標識は、ＰＥＴインビボ画像化における使用のための11Ｃ及び18Ｆ、ＳＰＥＣＴ画像化における使用のための123Ｉ、ＭＲＳ／ＭＲＩのための19Ｆ、並びにインビトロ研究のための3Ｈ及び14Ｃである。しかし、診断プローブを可視化するためのいずれの従来の方法も本発明にしたがって利用することができる。
【００６３】
本発明の化合物から誘導される放射標識された最終化合物は、当業者に公知のいずれかの手段により投与され得る。例えば、動物への投与は局所的でも全身的でもよく、経口、非経口、吸入スプレーにより、局所的、直腸、吸入、鼻腔、頬側、膣又は移植されたレザバを介して達成される。本明細書で使用される用語「非経口」には、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、脳室内、胸骨内、頭蓋内、及び骨内の注射及び注入の技術が含まれる。
【００６４】
用量レベルは、約０．００１μｇ／ｋｇ／日〜約１０，０００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲におよび得る。一実施態様において、用量レベルは約０．００１μｇ／ｋｇ／日〜約１０ｇ／ｋｇ／日である。別の実施態様において、用量レベルは約０．０１μｇ／ｋｇ／日〜約１．０ｇ／ｋｇ／日である。さらに別の実施態様において、用量レベルは約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日である。
【００６５】
正確な投与プロトコル及び用量レベルは、患者の年齢、体重、全身的な健康、性別及び食事を含む種々の因子に依存して変動する；具体的な投与手順の決定は、当業者のいずれにとっても通常のことである。
【００６６】
レジメンには、例えば治療剤のようなさらなる化合物を用いた予備処置及び／又は同時投与が含まれ得る。
【００６７】
本発明の化合物を製造する方法
スキーム１．５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−ボロン酸（４）の合成
【化４】
0005613669.tif 000005
【００６８】
本発明の一実施態様は、５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−ボロン酸を製造する方法に関し、この方法は：
溶媒中で脱保護試薬を用いて化合物１を化合物２に変換すること；
溶媒中で塩基及び保護試薬を用いて化合物２を化合物３に変換すること；並びに
塩基を用いて化合物３を脱保護すること、及び脱保護生成物とトリアルキルボレートとを溶媒中で混合することを含む工程により化合物３を５−エトキシメトキシ−ベンゾフラン−２−ボロン酸に変換すること
を含み、ここで；
化合物１は：
【化５】
0005613669.tif 000006
に相当し；
化合物２は：
【化６】
0005613669.tif 000007
に相当し；そして
化合物３は：
【化７】
0005613669.tif 000008
に相当する。
【００６９】
様々な反応工程の最終生成物は、必要な場合さらに精製又は再結晶され得る。
【００７０】
工程ａ）に適した溶媒は、例えば、限定されないが、塩素化溶媒、例えばジクロロメタン、芳香族溶媒、例えばトルエン、アミド類、例えばジメチルホルムアミド及びＮ−メチルピロリドン、並びにアルカン類、例えばヘキサン及びヘプタン、又はそれらの混合物である。
【００７１】
工程ｂ）に適した溶媒は、例えば、限定されないが、塩素化溶媒、例えばジクロロメタン、芳香族溶媒、例えばトルエン、アミド類、例えばジメチルホルムアミド及びＮ−メチルピロリドン、エーテル類、例えばテトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、シクロペンチルメチルエーテル及びジエチルエーテル、並びにアルカン類、例えばヘキサン及びヘプタン、又はそれらの混合物である。
【００７２】
工程ｃ）に適した溶媒は、例えば、限定されないが、芳香族溶媒、例えばトルエン及びキシレン、エーテル類、例えばテトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、シクロペンチルメチルエーテル及びジエチルエーテル、並びにアルカン類、例えばヘキサン及びヘプタン、又はそれらの混合物である。
【００７３】
一実施態様において、工程ａ）に使用される溶媒は、ジクロロメタン、トルエン又はＮ−メチルピロリドンである。
別の実施態様において、工程ｂ）で使用される溶媒は、シクロペンチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン又は２−メチルテトラヒドロフランである。
さらなる実施態様において、工程ｃ）で使用される溶媒は、ヘキサン、テトラヒドロフラン又は２−メチルテトラヒドロフランである。
【００７４】
工程ａ〜ｃにおいて使用される溶媒の総量は、出発物質の質量あたり体積約２〜１００（ｖ／ｗ）の範囲、特に出発物質の質量あたり体積６−２０（ｖ／ｗ）の範囲で変動し得る。
【００７５】
工程ａ）に適した試薬は、例えば、限定されないが、ルイス酸、例えばＢＢｒ3及びＢＣｌ3、アルキルチオラート類、例えばナトリウムチオメチラート及びナトリウムチオオクチラートならびにピリジン塩酸塩である。
【００７６】
工程ｂ）に適した試薬は、例えば、限定されないが、エトキシメトキシハライド、例えばエトキシメトキシブロミド又はエトキシメトキシクロリド及び金属水素化物、例えば水素化ナトリウム又は水素化リチウムである。
【００７７】
工程ｃ）に適した試薬は、例えば、限定されないが、アルキルリチウム試薬、例えばメチルリチウム、ブチルリチウム、及びヘキシルリチウム、ならびにトリアルキルボレート、例えばホウ酸トリメチル、ホウ酸トリイソプロピル、ホウ酸トリブチルである。
【００７８】
一実施態様において、工程ａ）で使用される試薬はＢＢｒ３又はピリジン塩酸塩である。
別の実施態様において、工程ｂ）で使用される試薬はエトキシメトキシクロリドとともに水素化ナトリウム又は水素化リチウムである。
さらなる実施態様において、工程ｃ）で使用される試薬はブチルリチウム及びホウ酸トリイソプロピルである。
【００７９】
一実施態様において、工程ａ）における試薬は三臭化ホウ素である。
別の実施態様において、工程ａ）における試薬はピリジン塩酸塩である。
別の実施態様において、工程ｂ）における試薬はクロロメチルエチルエーテルとの混合物の水素化ナトリウムである。
別の実施態様において、工程ｂ）における試薬はクロロメチルエチルエーテルとの混合物の水素化リチウムである。
別の実施態様において、工程ｃ）における試薬はホウ酸トリイソプロピルとの混合物のｎ−ブチルリチウムである。
【００８０】
別の実施態様は、スキーム１における上記の方法に関し、この方法は：
ジクロロメタン中でＢＢｒ3を使用して化合物１を化合物２に変換すること；
ジメチルホルムアミド中でＮａＨ及びＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2Ｃｌを使用して化合物２を化合物３に変換すること；並びに
ｎ−ブチルリチウムを使用して化合物３を脱保護すること及び脱保護生成物をホウ酸トリイソプロピルとテトラヒドロフラン中で混合することを含む工程により化合物３を５−エトキシメトキシ−ベンゾフラン−２−ボロン酸に変換すること
を含む。
【００８１】
工程ａ〜ｃの温度は、約−７８〜２５０℃の範囲、特に約−２５〜２００℃の範囲であり得る。
【００８２】
スキーム２．［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８）の合成
【化８】
0005613669.tif 000009
【００８３】
本発明の一実施態様は、［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを製造する方法に関し、この方法は：
塩基の存在下で保護基を使用して化合物５中のアミノ基を保護することを含む工程により化合物５を化合物６に変換すること；
塩基の存在下でアルキル化剤を使用して化合物６をアルキル化することを含む工程により化合物６を化合物７に変換すること；並びに
溶媒中でパラジウム触媒及び塩基の存在下にて化合物７と化合物４とを反応させること；
を含み、ここで；
化合物４は：
【化９】
0005613669.tif 000010
に相当し；
化合物５は：
【化１０】
0005613669.tif 000011
に相当し；
化合物６は：
【化１１】
0005613669.tif 000012
に相当し；そして
化合物７は：
【化１２】
0005613669.tif 000013
に相当する。
【００８４】
様々な反応工程の最終生成物は、必要な場合さらに精製又は再結晶され得る。
【００８５】
適切な溶媒は、例えば、限定されないが、工程ｄ）ではＴＨＦ若しくはジエチルエーテル；工程ｅ）ではＤＭＦ若しくはＴＨＦ；工程ｆ）ではエタノール若しくはＤＭＦ、又はそれらの混合物である。
【００８６】
一実施態様において、工程ｄ）における溶媒はＴＨＦである。
別の実施態様において、工程ｅ）における溶媒はＤＭＦである。
さらなる実施態様において、工程ｆ）における溶媒はエタノールである。
【００８７】
適切な塩基は、例えば、限定されないが、工程ｄ）ではＮａＨＭＤＳ、ＫＨＭＤＳ、又はＮａＨ、工程ｅ）ではＮａＨ、ＮａＨＭＤＳ；工程ｆ）ではＥｔ3−Ｎ又はＫ2ＣＯ3である。
【００８８】
別の実施態様において、工程ｄ）における塩基はＮａＨＭＤＳである。
一実施態様において、工程ｅ）における塩基はＮａＨである。
さらなる実施態様において、工程ｆ）における塩基はＥｔ3−Ｎである。
【００８９】
工程ｆ）に適した触媒は、例えば、限定されないが、Ｐｄ（ＰＰｈ３）2Ｃｌ2又はＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ2である。
【００９０】
別の実施態様は、スキーム２における上記の方法に関連し、この方法は：
ナトリウムヘキサメチルジシラジドの存在下で二炭酸ｔ−ブチルを使用して化合物５中のアミノ基を保護することを含む工程により化合物５を化合物６に変換すること；
ＮａＨの存在下でＣＨ3Ｉを使用して化合物６をアルキル化することを含む工程により化合物６を化合物７に変換すること；並びに
エタノール中でジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）及び（ＣＨ3ＣＨ2）3Ｎの存在下にて化合物７と化合物４とを反応させること
を含む。
【００９１】
工程ｄ〜ｆの反応温度は−８０から室温の間である。
【００９２】
スキーム３．（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）の合成
【化１３】
0005613669.tif 000014
【００９３】
本発明の一実施態様は、（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを製造する方法に関し、ここでこの方法は：
（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを製造する方法であって、該方法は：
臭素化試薬を使用して溶媒中で化合物９を臭素化することを含む工程により化合物９を化合物１０に変換すること；
塩基の存在下にて溶媒中で化合物１０と化合物１１とを混合し、続いて二炭酸ｔ−ブチルを加えることを含む工程により化合物１０を化合物１１に変換すること；及び
溶媒中で塩基の存在下にてアルキル化試薬を使用して化合物１１をアルキル化することを含む工程により化合物１１を（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルに変換すること；
を含み、ここで；
化合物９は：
【化１４】
0005613669.tif 000015
に相当し；
化合物１０は：
【化１５】
0005613669.tif 000016
に相当し；
化合物１１は：
【化１６】
0005613669.tif 000017
に相当する。
【００９４】
様々な反応工程の最終生成物は、必要な場合さらに精製又は再結晶され得る。
【００９５】
工程ｇ〜ｉに適した溶媒は、例えば、限定されないが、ニトリル類、例えばアセトニトリル及びプロピオニトリル、塩素化溶媒、例えばジクロロメタン、芳香族溶媒、例えばトルエン及びキシレン、エーテル類、例えばテトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、シクロペンチルメチルエーテル及びジエチルエーテル、アミド類、例えばジメチルホルムアミド及びＮ−メチルピロリドン並びにアルカン類、例えばヘキサン及びヘプタン、又はそれらの混合物である。
【００９６】
一実施態様において、工程ｇ）において使用される溶媒は水、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、トルエン、テトラヒドロフラン、又はそれらの混合物である。
【００９７】
別の実施態様において、工程ｈ）において使用される溶媒はテトラヒドロフラン、ヘプタン、２−メチルテトラヒドロフラン又はそれらの混合物である。
【００９８】
さらなる実施態様において、工程ｉ）において使用される溶媒は、水、ヘキサン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、又はそれらの混合物である。
【００９９】
一実施態様において、工程ｇ）における溶媒は水と混合されたＭｅＣＮである。
別の実施態様において、工程ｈ）における溶媒はヘプタンと混合されたＴＨＦである。
別の実施態様において、工程ｈ）における溶媒は、ヘキサンと混合されたＴＨＦである。
さらなる実施態様において、工程ｉ）における溶媒は水と混合されたＤＭＦである。
別の実施態様において、工程ｉ）における溶媒はヘプタンと混合されたＴＨＦである。
さらなる実施態様において、工程ｉ）における溶媒は水と混合されたＭｅＣＮである。
【０１００】
工程ｇ）〜ｉ）において使用される溶媒の総量は、出発物質の質量あたり体積約２〜１００（ｖ／ｗ）の範囲、特に出発物質の質量あたり体積６〜２０（ｖ／ｗ）の範囲で変動し得る。
【０１０１】
工程ｇ）に適した試薬は、例えば、限定されないが、Ｎ−ブロモコハク酸イミドのような臭素化試薬である。
【０１０２】
工程ｈ）に適した試薬は、例えば、限定されないが、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル及び塩基、例えばナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド、水素化ナトリウム又は水素化リチウムである。
【０１０３】
一実施態様において、工程ｈ）において使用される試薬は、水素化ナトリウム、水素化リチウム又はナトリウムビス（トリメチルシリル）アミドとともに二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルである。
【０１０４】
工程ｉ）に適した試薬は、例えば、限定されないが、アルキル化試薬、例えばヨウ化メチル及び硫酸ジメチル、並びに塩基、例えば水素化ナトリウム、水素化リチウム、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド及び１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンである。
【０１０５】
別の実施態様において、工程ｇ）における試薬はＮ−ブロモコハク酸イミドである。
一実施態様において、工程ｈ）における塩基はＮａＨＭＤＳ及びＢｏｃ2Ｏである。
さらなる実施態様において、工程ｉ）における塩基はＤＢＵである。
さらなる実施態様において、工程ｉ）における塩基はＮａＨである。
【０１０６】
別の実施態様は、スキーム３における上記の方法に関し、この方法は：
ＣＨ3ＣＮ中でｎ−ブロモコハク酸イミドを使用して化合物９を臭素化することを含む工程により化合物９を化合物１０に変換すること；
溶媒中でナトリウムヘキサメチルジシラジドの存在下にて化合物１０と化合物１１とを混合し、続いて二炭酸ｔ−ブチルを加えることを含む工程により化合物１０を化合物１１に変換すること；及び
ジメチルホルムアミド中でＮａＨの存在下にてＣＨ3Ｉを使用して化合物１１をアルキル化することを含む工程により化合物１１を（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルに変換すること
を含む。
【０１０７】
工程ｇ〜ｉの温度は、約−７８〜１５０℃の範囲、特に約０℃〜５０℃の範囲で（ｉｎ  ｔｈｅ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｒａｎｇｅ）あり得る。
【０１０８】
工程ｉ）における生成物、（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）は、ＤＭＦ／水混合物又はＭｅＣＮ／水混合物からの沈殿により精製され得る。
【０１０９】
一実施態様において、（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）はＭｅＣＮ／水混合物から精製される。
【０１１０】
スキーム４．（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）への代替の経路：
【化１７】
0005613669.tif 000018
（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）は、２つの代替の経路で製造され得る。例えば、化合物１２は、６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（９）から、Ｎ−メチル−６−ニトロピリジン−２−アミン（１４）又はｔｅｒｔ−ブチル  メチル  （６−ニトロピリジン−２−イル）カルバメート（１６）のいずれかを経由して製造され得、ここで臭素化は両方の順序の最後に導入される。
【０１１１】
スキーム４．［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）の合成
【化１８】
0005613669.tif 000019
【０１１２】
本発明の一実施態様は、適切な触媒の存在下で適切な塩基を使用して適切な溶媒中で化合物１２と化合物４とを混合し、続いて抽出することにより化合物１３を製造する方法に関する。
【０１１３】
最終生成物は、必要な場合さらに精製又は再結晶され得る。
【０１１４】
適切な溶媒は、例えば、限定されないが、アルコール類、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール及びブタノール、エーテル類、例えばジオキサン、テトラヒドロフラン及び２−メチルテトラヒドロフラン、並びに芳香族溶媒、例えばベンゼン、トルエン及びキシレン、又はこれらの混合物である。
【０１１５】
一実施態様において、工程ｊ）における溶媒はエタノールである。
【０１１６】
工程ｊ）で使用される溶媒の総量は、出発物質の質量あたり体積約２〜１００（ｖ／ｗ）の範囲、特に出発物質の質量あたり体積６〜２０（ｖ／ｗ）の範囲で変動し得る。
【０１１７】
適切な試薬は、例えば、限定されないが、アミン類、例えばトリエチルアミン、炭酸塩、例えば炭酸セシウム、炭酸カリウム、及び炭酸ナトリウム、リン酸塩、例えばリン酸カリウム及びリン酸ナトリウム又はパラジウム触媒と一緒でのフッ化カリウムである。また、過剰の適切なホスフィンリガンド及びイミダゾール−２−イリデンリガンドが考慮され得る。
【０１１８】
別の実施態様において、工程ｊ）における試薬はトリエチルアミン及びＰｄＣｌ2（ＰＰｈ3）2である。
【０１１９】
工程ｊ）の温度は、約−０℃〜１５０℃の範囲、特に約２５℃〜１００℃の範囲であり得る。
【０１２０】
スキーム５．直接アリール化を経由する、［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）の代替の合成
【化１９】
0005613669.tif 000020
［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）は、適切な触媒の存在下で５−エトキシメトキシベンゾフラン（３）の（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）との直接アリール化を経由して製造され得る。
【０１２１】
適切な溶媒は、例えば、限定されないが、アミド類、例えばジメチルアセトアミド、芳香族溶媒、例えばトルエン、及びキシレンである。
【０１２２】
工程ｇ〜ｉで使用される溶媒の総量は、出発物質の質量あたりの体積約２〜１００（ｖ／ｗ）の範囲、特に出発物質の質量あたりの体積６〜２０（ｖ／ｗ）の範囲で変動し得る。
【０１２３】
適切な試薬は、例えば、限定されないが、パラジウム触媒系、例えば酢酸カリウム又は酢酸パラジウムと、トリシクロヘキシルホスフィン、ピバロイルアルコール及び炭酸カリウムと共にＰｄ（ＰＰｈ３）４である。
【実施例】
【０１２４】
化合物実施例
以下は本発明の前駆体化合物の多数の非限定的実施例である。
【０１２５】
一般的方法
全ての溶媒は市販されており、そしてこれらをさらに生成することなく使用した。反応は典型的には窒素の不活性雰囲気下で無水溶媒を使用して行った。
【０１２６】
1Ｈ及び13ＣＮＭＲスペクトルを、プロトンについて４００ＭＨｚそして炭素−１３について１００ＭＨｚでＶａｒｉａｎ  ４００  ＡＴＢ  ＰＦＧプローブを備えたＶａｒｉａｎ  Ｍｅｒｃｕｒｙ  Ｐｌｕｓ  ４００  ＮＭＲ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒにて記録した。全ての重水素化溶媒は、典型的には０．０３％〜０．０５％ｖ／ｖのテトラメチルシランを含有し、これらを参照シグナルとして使用した（1Ｈ及び13Ｃの両方についてδ
０．００に設定した）。
【０１２７】
質量スペクトルを、Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２７９５（ＬＣ）及びＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ検出器からなるＷａｔｅｒｓ  ＭＳで１２０℃にて記録した。質量分析計は、ポジティブ又はネガティブイオンモードで操作されるエレクトロスプレーイオン源（ＥＳ）を備えていた。質量分析計をｍ／ｚ１００〜１０００の間で０．３秒の走査時間で走査した。
【０１２８】
ＨＰＬＣ分析を、Ｗａｔｅｒｓ  ７１７  Ｐｌｕｓオートサンプラー及びＷａｔｅｒｓ  ２９９６フォトダイオード（Ｐｈｏｔｏｄｉｉｏｄｅ）アレイ検出器を備えたＷａｔｅｒ  ６００  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｒシステムで行った。使用したカラムはＡＣＥ  Ｃ18，５μｍ、４  ６０Ｘ１５０ｍｍであった。２０分の実行で６分かけて９５％Ａ（Ａ：水中０．１％  Ｈ3ＰＯ4）から開始して９０％Ｃ（Ｃ：ＭｅＣＮ）で終了する線形グラジエントを適用し、９０％Ｃで４分間保持し、次いで９５％Ａに戻して終了した。カラムは周囲温度で１．０ｍＬ／分の流量であった。ダイオードアレイ検出器を２００〜４００ｎｍで走査した。
【０１２９】
マイクロ波加熱をＣＥＭ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ  ＬａｂＭａｔｅ又はＢｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒシステムのいずれかで示された温度にて推奨されるマイクロ波チューブで行った。
【０１３０】
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、Ｍａｎｃｈｅｒｅｙ−ＮａｇｅｌからのＡｌｕｇｒａｍ（登録商標）（Ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ６０  Ｆ254）で行い、典型的にはスポットを可視化するためにＵＶを使用した。さらなる可視化方法もいくつかの場合に使用した。これらの場合に、ＴＬＣプレートを展開して、ヨウ素（約１ｇのＩ2をシリカゲル１０ｇに加えて十分に混合することにより生成した）、バニリン（バニリン約１ｇを１００ｍＬ  １０％Ｈ2ＳＯ4に溶解することにより生成した）、ニンヒドリン（Ａｌｄｒｉｃｈから市販されている）、又はＭａｇｉｃ  Ｓｔａｉｎ  （２５ｇ  （ＮＨ4）6Ｍｏ7Ｏ24.４Ｈ2Ｏ、５ｇ  （ＮＨ4）2Ｃｅ（ＩＶ）（ＮＯ3）6、４５０ｍＬ  Ｈ2Ｏ及び５０ｍＬ濃Ｈ2ＳＯ4を十分に混合することにより生成した）を用いて化合物を可視化した。フラッシュクロマトグラフィーを、Ｓｉｌｉｃｙｃｌｅからの４０−６３μｍ（２３０−４００メッシュ）シリカゲルを使用して、Ｓｔｉｌｌ、Ｗ．Ｃ．；Ｋａｈｎ、Ｍ．；及びＭｉｔｒａ、Ｍ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９７８、４３、２９２３−２９２５に開示される技術と類似の技術にしたがって前もって形成した。フラッシュクロマトグラフィー又は薄層クロマトグラフィーに使用される典型的な溶媒は、ジクロロメタン／メタノール、酢酸エチル／メタノール及びヘキサン／酢酸エチルの混合物であった。
【０１３１】
分取クロマトグラフィーを、Ｗａｔｅｒｓ  ２４８７ダイオードアレイを使用するＷａｔｅｒｓ  Ｐｒｅｐ  ＬＣ  ４０００システム又はＷａｔｅｒｓ  ＬＣ  Ｍｏｄｕｌｅ  １  ｐｌｕｓのいずれかで行った。使用したカラムはＷａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ  Ｐｒｅｐ  Ｃ18、５μｍ、３０Ｘ１００ｍｍ（流量４０ｍＬ／分）又はＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ18、５μｍ、２１．６Ｘ２５０ｍｍ（流量２０ｍＬ／分）のいずれかであった。アセトニトリル／水（水は０．１％トリフルオロ酢酸又は１０ｍＭ酢酸アンモニウムのいずれかを含有する）の狭いグラジエントを使用して２０〜３０分の間の合計実行時間で化合物を溶出した。
【０１３２】
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを、ロングファインフォーカス（ｌｏｎｇ−ｆｉｎｅ−ｆｏｃｕｓ）Ｃｕ  Ｋα線（４０ｋＶ、５０ｍＡ）及びＸ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ検出器を使用するＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ  Ｘ’Ｐｅｒｔ  ＰＲＯ  ＭＰＤシータ−シータシステムで収集した。２０ｍｍの照射長を生じるプログラム可能発散スリット及びプログラム可能散乱防止スリットを使用した。０．０２  ｒａｄ  Ｓｏｌｌｅｒスリットを入射及び回折ビーム路で使用した。２０ｍｍ固定マスクを入射ビーム路で使用し、そしてニッケルフィルターを検出器の前に配置した。薄くて平らなサンプルを、スパチュラを使用して平らなシリコンのゼロバックグラウンドプレート上にて用意した。このプレートをサンプルホルダーにマウントし、そして測定の間水平位置で回転させた。回折パターンを２°（２シータ）と８０°（２シータ）の間で連続走査モードにて収集した。合計走査時間は２５分３０秒であった。Ｘ線粉末回折の熟練者には、ピークの相対強度が、例えば約３０マイクロメートルより大きいサイズの粒子及び非ユニタリー（ｎｏｎ−ｕｎｉｔａｒｙ）アスペクト比（サンプルの分析に影響を及ぼし得る）の影響を受け得ることが理解されるだろう。さらに、当然のことながら、強度はサンプル中の粒子の好ましい配向のような実験条件及びサンプル調製に依存して変動し得る。自動又は固定発散スリットの使用はまた、相対強度計算に影響を及ぼす。当業者は、回折パターンを比較した場合にこのような効果に対処することができる。
【０１３３】
当業者はまた、反射の位置が、回折計においてサンプルが位置する正確な高さ、温度及び回折計のゼロ較正に影響を受け得ることも理解する。サンプル表面の平面性もまた小さい影響を有し得る。反射の位置の正確な値は、例えば物質の結晶化度の差異に起因してサンプルごとにわずかに変わり得る。自動ピーク検出プログラムの使用又は手動の主観的なピーク決定もまた、反射の報告された位置にわずかに影響を及ぼし得る。機器の性能の差異がピーク分解能に影響を及ぼし得ることは当業者に明らかである。従って示される回折パターンデータは、絶対値として解釈されるべきではない。
【０１３４】
一般に、Ｘ線粉末ディフラクトグラムにおける回折角の測定誤差は、Ｃｕ  Ｋα線を使用した場合約５％又はそれ以下、特に＋０．５°（２シータ）から−０．５°（２シータ）の範囲内であり、そしてこのような程度の測定誤差は、図１〜５のＸ線粉末回折パターンについて考える場合、並びに表１及び２を読む場合に考慮に入れるべきである。
【０１３５】
サンプル物質の製造に由来する微量の結晶不純物、例えば塩残留物、例えば乾燥、塩析及び／又はｐＨ調節工程からの硫酸ナトリウム又は塩化ナトリウムが回折を引き起こし得ること、そしてこのような結晶不純物からの、期待されるピークの近傍に回折角を有するピークがこのような結晶不純物から全体的に又は部分的に生じ得るということも当業者は理解するだろう。
【０１３６】
多くの化合物からの回折パターンは、例えばＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｒｅ  ｆｏｒ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｄａｔａ（ＩＣＤＤ）からのＰｏｗｄｅｒ  Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｆｉｌｅ（ＰＤＦ）データベースのようなデータベースからシミュレートすることができる。当業者はこのようなシミュレートされた回折パターンを実験から得たパターンと比較することができる。
【０１３７】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を３０℃〜３００℃で窒素下にて穴のあいた蓋を備えたアルミニウムサンプルカップでＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｄｉａｍｏｎｄ  ＤＳＣ機器を使用して行った。走査速度は毎分１０℃であった。サンプルサイズは１ｍｇ未満であった。ＤＳＣ開始温度及びピーク温度、さらにはエネルギー値が、例えばサンプルの純度及びサンプルサイズに起因して、そして機器のパラメータ、特に温度走査速度に起因して変化し得ることは周知である。従って、示されるＤＳＣデータは絶対値と解釈されるべきではない。
【０１３８】
当業者は、本明細書に示されるデータと比較できるデータを標準的な方法（例えば、Ｈｏｅｈｎｅ、Ｇ．Ｗ．Ｈ．ｅｔ  ａｌ（１９９６）、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｓｃａｎｎｉｎｇ  Ｃａｌｏｒｉｍｅｔｒｙ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ、Ｂｅｒｌｉｎに記載されるような方法）に従って収集することができるように、示差走査熱量計に関する機器パラメータを調整することができる。
【０１３９】
周囲温度から２５０℃の熱重量分析（ＴＧＡ）を、窒素下にて白金サンプルカップ中でＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｐｙｒｉｓ  １  ＴＧＡ熱重量分析計を使用して行った。走査速度は毎分１０℃であった。サンプルサイズは１ｍｇ未満であった。ＴＧＡトレース（ｔｒａｃｅ）が、例えばサンプルサイズに起因して、そして機器パラメータ、特に温度走査速度に起因して変動し得ることは周知である。従って、示されるＴＧＡデータは絶対値として解釈されるべきではない。
【０１４０】
以下の略号が使用されている：
Ａｃ          アセチル；
ａｑ．        水性；
Ｂｏｃ2Ｏ     二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル；
ＤＣＭ        ジクロロメタン；
ＤＩＰＥＡ    Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；
ＤＭＦ        Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
ＤＭＳＯ      ジメチルスルホキシド；
ＤＳＣ        示差走査熱量測定
ＥｔＯＨ      エタノール；
ＭｅＯＨ      メタノール；
ＨＭＤＳ      ビス（トリメチルシリル）アミド；
ＮＢＳ        Ｎ−ブロモコハク酸イミド；
ｒ．ｔ．      室温；
ＴＨＦ        テトラヒドロフラン；
ＴＦＡ        トリフルオロ酢酸；
ＴＧＡ        熱重量分析
ＸＲＰＤ      Ｘ線粉末回折
ＤＢＵ        １，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン
Ｅｔ3Ｎ       トリエチルアミン
【０１４１】
使用した出発物質は、販売業者から入手可能であったか又は文献の手順にしたがって製造され、そして報告されたデータと一致する実験データを有していた。
【０１４２】
中間体実施例１：５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−ボロン酸（４）
【化２０】
0005613669.tif 000021
【０１４３】
ａ）  ベンゾフラン−５−オール（２）
５−メトキシベンゾフラン（１）（０．５０ｇ、３．３８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）中撹拌溶液に、三臭化ホウ素（１６．８７ｍＬ、１６．８７ｍｍｏｌ、１Ｍジクロロメタン溶液）をゆっくりと０℃で加えた。反応混合物を室温まで温め、そして４時間撹拌した。次いで反応混合物を０℃に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ3水溶液でクエンチし、そしてジクロロメタン（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブライン（２５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして減圧下で濃縮して化合物（２）をオフホワイト固体（３００ｍｇ）として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δ：７．５９（ｄ、Ｊ＝１．９５Ｈｚ、１Ｈ）、７．３５（ｄ、Ｊ＝８．５９Ｈｚ、１Ｈ）、７．００（ｄ、Ｊ＝２．７３Ｈｚ、１Ｈ）、６．８０（ｄｄ、８．５９、２．７４Ｈｚ、１Ｈ）、６．６７（ｍ、１Ｈ）、４．６６（ｓ、１Ｈ）
【０１４４】
ｂ）  ５−エトキシメトキシベンゾフラン（３）
ベンゾフラン−５−オール（２）（２５７ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中撹拌溶液に、ＮａＨ（８１ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ、５７％油中分散）を０℃で加えた。反応混合物を室温まで温めて１時間撹拌した。次いでクロロメチルエチルエーテル（２１４μＬ、２．３０ｍｍｏｌ）を０℃までで滴下し、そしてこの混合物を室温でさらに１時間撹拌した。水（１０ｍＬ）を加え、そして反応混合物を酢酸エチル（２ｘ５０ｍＬ）で抽出した。有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして真空で濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりヘキサン中１０％酢酸エチルを使用して精製し、化合物（３）（２７３ｍｇ）を無色油状物として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δ：７．５９（ｄ、Ｊ＝１．９５Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｄ、Ｊ＝８．１６Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄ、Ｊ＝２．７３Ｈｚ、１Ｈ）、６．９９（ｄｄ、Ｊ＝８．９８、２．３４Ｈｚ、１Ｈ）、６．７０（ｍ、１Ｈ）、５．２４（ｓ、２Ｈ）、３．７７（ｑ、Ｊ＝７．０３Ｈｚ、２Ｈ）、１．２５（ｔ、Ｊ＝７．０３Ｈｚ、３Ｈ）。
【０１４５】
ｃ）  ５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−ボロン酸（４）
５−エトキシメトキシベンゾフラン（３）（２６５ｍｇ、１．３８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中撹拌溶液に、−７８℃でｎ−ブチルリチウム（２．５Ｍヘキサン溶液、０．５６ｍＬ、１．４４ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を１時間撹拌した後、ホウ酸トリイソプロピル（０．６３５ｍＬ、２．７６ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、そしてさらに２０分間−７８℃で撹拌を続けた。反応混合物を飽和塩化アンモニウム溶液（１０ｍＬ）でクエンチし、そして室温まで昇温させた。水（１０ｍＬ）を加え、そして得られた混合物をジエチルエーテル（２ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。酢酸エチル及びヘキサンから再結晶して粗生成物を精製し、所望の化合物（４）（１７０ｍｇ）を白色固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ6、４００ＭＨｚ）  δ：８．５４（ｓ、２Ｈ）、７．４８（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．３０（ｄ、Ｊ＝２．７Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２（ｄｄ、Ｊ＝８．８、２．５Ｈｚ、１Ｈ）、５．２３（ｓ、２Ｈ）、３．６８（ｑ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、２Ｈ）、１．１４（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ、３Ｈ）
【０１４６】
最終前駆体実施例１：［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８）の合成
【化２１】
0005613669.tif 000022
【０１４７】
６−ブロモ−２−ニトロ−ピリジン−３−イルアミン（５）
【化２２】
0005613669.tif 000023
２−ニトロ−ピリジン−３−イルアミン（５．０６ｇ、３６．４０ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（２．９９ｇ、３６．４６ｍｍｏｌ）の酢酸（４０ｍＬ）中撹拌懸濁液に、臭素（２．５ｍＬ、４８．７９ｍｍｏｌ）の酢酸（８ｍｌ）中溶液を滴下し、そして反応混合物を終夜撹拌した。酢酸を減圧下で除去した。残留物を０℃に冷却し、飽和炭酸水素溶液で中和してｐＨを約７に調節し、そして酢酸エチル（４ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、無水Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残留物を酢酸エチルを用いてトリチュレーションして化合物（５）（５．１ｇ）を黄色固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ6、４００ＭＨｚ）  δ：７．６６（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．５８（ｓ、２Ｈ）、７．４９（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ  ２１６．３３  ［Ｍ−１］-
【０１４８】
ｄ）  （６−ブロモ−２−ニトロ−ピリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６）
【化２３】
0005613669.tif 000024
６−ブロモ−２−ニトロ−ピリジン−３−イルアミン（５）（８５４ｍｇ、３．９２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中撹拌溶液に、ＮａＨＭＤＳ（５．０９ｍＬ．５．０９ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中１Ｍ）を０℃で加えた。１５分間撹拌した後、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（８５３ｍｇ、３．９１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を３０分かけて加えた。反応混合物を３．５時間室温で撹拌し、次いで飽和ＮａＨＣＯ3水溶液を加えた。反応混合物を酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりヘキサン中１０％酢酸エチルを使用して精製し、化合物（６）（２９３ｍｇ）をオフホワイト固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）  δ：９．４１（ｂｒ．ｓ．、１Ｈ
）、９．００（ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．７３（ｄ、Ｊ＝９．０Ｈｚ、１Ｈ）、１．５５  ｐｐｍ（ｓ、９Ｈ）
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ  ３１８．３６［Ｍ＋１］+
【０１４９】
ｅ）  （６−ブロモ−２−ニトロ−ピリジン−３−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７）
【化２４】
0005613669.tif 000025
（６−ブロモ−２−ニトロ−ピリジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６）（２９０ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中撹拌溶液に、ＮａＨ（５７ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ、５７％油中分散）を０℃で加えた。１５分撹拌した後、ヨウ化メチル（７９μＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を１時間撹拌した。次いで反応混合物を飽和塩化アンモニウム溶液（１５ｍＬ）でクエンチし、そして酢酸エチル（２ｘ４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し、そして真空で濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりヘキサン中２０％酢酸エチルを使用して精製し、化合物（７）（２６８ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）  δ：７．７８（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．６６（ｄ、Ｊ＝８．２Ｈｚ、１Ｈ）、３．２９（ｓ、３Ｈ）、１．３９（ｂｒ．ｓ．、９Ｈ）
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ  ２７６．３６  ［Ｍ−５６］-
【０１５０】
ｆ）  ［６−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロ−ピリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８）
【化２５】
0005613669.tif 000026
５−エトキシメトキシベンゾフランボロン酸（４）（１４０ｍｇ、０．５９３ｍｍｏｌ）の脱気したエタノール（１０ｍＬ）溶液に、（６−ブロモ−２−ニトロ−ピリジン−３−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（７）（１５１ｍｇ、０．４５５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）2Ｃｌ2（４２ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）及びＥｔ3Ｎ（１２７μＬ、０．９０９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１００℃で３０分間マイクロ波反応器において撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去した。残留物を水（１５ｍＬ）で希釈し、そして混合物を酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりヘキサン中２０％酢酸エチルを使用して精製した。溶媒を蒸発させて表題化合物８（１７０ｍｇ）を淡黄色固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δ：８．１０（ｄ、Ｊ＝８．２０Ｈｚ、１Ｈ）、７．８４（ｄ、Ｊ＝８．２０Ｈｚ、１Ｈ）、７．５０（ｓ、１Ｈ）、７．４５（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３２（ｄ、Ｊ＝１．９５Ｈｚ、１Ｈ）、７．０２−７．１６（ｍ、１Ｈ）、５．２７（ｓ、２Ｈ）、３．７８（ｑ、Ｊ＝６．６３Ｈｚ、２Ｈ）、３．３２（ｓ、３Ｈ）、１．３６（ｂｒ．ｓ．、９Ｈ）、１．２６（ｔ、Ｊ＝７．２２Ｈｚ、３Ｈ）
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ  ４４４．５１［Ｍ＋１］+
ＤＳＣ：１０９．５℃で開始して１１０．８℃がピークの吸熱事象  ΔＨ  ８９．６Ｊｇ-1  ＴＧＡ：室温と１６０℃の間に顕著な事象はなかった
【０１５１】
【表１】
0005613669.tif 000027
【０１５２】
中間体実施例２：（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）
【化２６】
0005613669.tif 000028
【０１５３】
ｇ）  ５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（１０）
６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（１．０ｇ、７．１８ｍｍｏｌ）のＣＨ3ＣＮ（１００ｍＬ）中撹拌溶液に、遮光して窒素雰囲気下にてＮ−ブロモコハク酸イミド（６３６ｍｇ、３．５９ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。１時間後、追加分のＮ−ブロモコハク酸イミド（６３６ｍｇ、３．５９ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温まで昇温させて、撹拌を終夜続けた。次いでこの混合物に飽和Ｎａ2Ｓ2Ｏ3水溶液を加えてクエンチし、そして酢酸エチル  （３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ4（無水）で乾燥し、そして真空で濃縮した。粗生成物をＢｉｏｔａｇｅによりヘキサン中１０％酢酸エチルを使用して精製し、５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（１０）  １．２ｇを得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6）  δ  ｐｐｍ：７．８４（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３（ｓ、２Ｈ）、６．６６（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）
【０１５４】
ｈ）  （５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１）
５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（９００ｍｇ、４．１２ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に、ＮａＨＭＤＳ（ＴＨＦ中１Ｍ、５．８ｍＬ）を０℃で加えた。１５分間撹拌した後、Ｂｏｃ2Ｏ（９０１ｍｇ、４．１２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を０℃で３０分かけてゆっくりと加えた。得られた混合物を室温まで温め、３時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ3水溶液でクエンチして酢酸エチル（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水そしてブラインで洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。残留物をＢｉｏｔａｇｅによりヘキサン中５〜１０％酢酸エチルを使用して精製し、（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１）７８６ｍｇを得た。
1Ｈ  ＮＭＲ  （４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ：８．１４（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝８．５９Ｈｚ、１Ｈ）、７．５２（ｓ、１Ｈ）、１．５３（ｓ、９Ｈ）
【０１５５】
ｉ）  （５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）
（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１）（８００ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（１５ｍＬ）溶液に、ＮａＨ（６０％鉱油中分散、１９１ｍｇ、４．５３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。得られた混合物を３０分間０℃で撹拌し、次いでヨウ化メチル（０．２３ｍＬ、３．６８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３０分間１０℃で撹拌した後、飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（１５ｍＬ）を加えた。反応混合物を酢酸エチル（３ｘ３０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物を水、ブラインで抽出し、ＭｇＳＯ4（無水）で乾燥し、そして減圧下で濃縮した。粗生成物をＢｉｏｔａｇｅによりヘキサン中１０％酢酸エチルを使用して精製し、（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１２（７８９ｍｇ）を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ：８．１２（ｄ、Ｊ＝８．６０Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｄ、Ｊ＝８．９９Ｈｚ、１Ｈ）、３．４０（ｓ、３Ｈ）、１．５５（ｓ、９Ｈ）
【０１５６】
または（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）についての代替の手順：
【化２７】
0005613669.tif 000029
【０１５７】
ｇ）  ５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（１０）
６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（９）（５．１ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（１２５ｍＬ）中撹拌溶液に、窒素雰囲気下にてＮ−ブロモコハク酸イミド（３．４３ｇ、１９．３ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。１時間後、Ｎ−ブロモコハク酸イミド（３．５７ｇ、２０．１ｍｍｏｌ）をさらに加えた。反応混合物を室温まで昇温させ、撹拌を終夜続けた。水（１２５ｍＬ）を加えて生成物を沈殿させた。このスラリーを０℃に冷却し、そして沈殿した生成物をろ過により単離し、予め混合したＭｅＣＮ：水（１：１）で洗浄し、そして真空下で４０℃にて乾燥して５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（２）３．８ｇを得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ6）δｐｐｍ：７．８４（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、７．０３（ｓ、２Ｈ）、６．６６（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）
【０１５８】
ｈ）  （５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１）
５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イルアミン（１０）（３．８ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に、ＮａＨＭＤＳ（ＴＨＦ中１Ｍ、４５ｍＬ、４５ｍｍｏｌ）を０℃で加えた。１５分間撹拌した後、Ｂｏｃ2Ｏの溶液（ＴＨＦ中２８．３質量％、１４．２ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）を０℃で１時間かけてゆっくりと加えた。得られた混合物をＮａＨＳＯ4水溶液（１Ｍ、１１０ｍＬ、１１０ｍｍｏｌ）でクエンチし、そして室温まで温めた。水相を廃棄し、そして生成物を含有する有機相を減圧下で濃縮した。残留物をＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解し、そして不純物をヘプタン（１６０ｍＬ）を加えて沈殿させてろ過により除去した。透明なろ過した生成物を含有する溶液を蒸発乾固して４．２ｇ（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１）を暗赤褐色残留物として得、これをさらに精製することなく次の工程で使用した。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ：８．１４（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、８．０３（ｄ、Ｊ＝８．５９Ｈｚ、１Ｈ）、７．５２（ｓ、１Ｈ）、１．５３（ｓ、９Ｈ）
【０１５９】
ｉ）  （５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）
（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１１）（４．２ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（２１ｍＬ）溶液に、ＤＢＵ（５．０２ｇ、３３．０ｍｍｏｌ）！を０℃で加えた。ヨウ化メチル（３．７５ｇ、２６．４ｍｍｏｌ）を０℃でゆっくりと加えた。３時間０℃で撹拌した後、反応混合物をクエンチし、そして生成物をＮａＨＳＯ4水溶液（１Ｍ）を加えて沈殿させた。粗生成物をろ過により単離し、そしてＭｅＣＮと水との混合物から再結晶することにより精製して（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１２（１．５５  ｇ）を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ：８．１２（ｄ、Ｊ＝８．６０Ｈｚ、１Ｈ）、７．９５（ｄ、Ｊ＝８．９９Ｈｚ、１Ｈ）、３．４０（ｓ、３Ｈ）、１．５５（ｓ、９Ｈ）
【０１６０】
最終前駆体実施例２：［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）の合成
【化２８】
0005613669.tif 000030
【０１６１】
ｊ）  ［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）
【化２９】
0005613669.tif 000031
【０１６２】
実施例１（工程ｄ）に記載される手順と同じ手順に従って、（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１２）（１００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）及び５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−ボロン酸（４）（９２．５ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を使用して製造した。実施例１ｄに記載されるように後処理し、続いて粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりヘキサン中１０〜２５％酢酸エチルを使用して精製した。溶媒を蒸発させて所望の化合物（１３）１２０ｍｇを黄色がかった固体として得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン）δ  ｐｐｍ：８．４８（ｄ、Ｊ＝８．５９Ｈｚ、１Ｈ）、８．３６（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、７．４８（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝２．７３Ｈｚ、１Ｈ）、７．２３（ｓ、１Ｈ）、７．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．９８、２．３４Ｈｚ、１Ｈ）、５．２８（ｓ、２Ｈ）、３．７４（ｑ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、９Ｈ）、１．１９（ｔ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、３Ｈ）
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ  ４４４．４４［Ｍ＋１］+；３８８．４５［（Ｍ−５６）＋１］+
ＤＳＣ：８１．０℃で開始して８３．４℃がピークの吸熱事象、ΔＨ  ７６．４  Ｊｇ-1ＴＧＡ：室温と１６０℃との間で顕著な事象はなかった。
【０１６３】
又は［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）についての代替ｊ）  ［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３）
５−エトキシメトキシベンゾフランボロン酸（４）（０．６９ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）の脱気したエタノール（１７．５ｍＬ）溶液に、（５−ブロモ−６−ニトロ−ピリジン−２−イル）−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル１２（０．５０ｇ、１．５１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ3）2Ｃｌ2（０．１４ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）及びＥｔ3Ｎ（０．４８ｍＬ、３．４６ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を９０℃で３０分間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、きれいに（ｃｌｅａｒ）ろ過した。揮発性物質を減圧下で除去した。残留物を水で希釈し、そして混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物をブラインで洗浄し、そして減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。溶媒を蒸発させて表題化合物１３（収率５８％）を得た。
1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、アセトン）δ  ｐｐｍ：８．４８（ｄ、Ｊ＝８．５９Ｈｚ、１Ｈ）、８．３６（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、７．４８（ｄ、Ｊ＝８．９８Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝２．７３Ｈｚ、１Ｈ）、７．２３（ｓ、１Ｈ）、７．０９（ｄｄ、Ｊ＝８．９８、２．３４Ｈｚ、１Ｈ）、５．２８（ｓ、２Ｈ）、３．７４（ｑ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、２Ｈ）、３．４３（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、９Ｈ）、１．１９（ｔ、Ｊ＝７．０２Ｈｚ、３Ｈ）
ＥＳＭＳ：ｍ／ｚ  ４４４．４４［Ｍ＋１］+；３８８．４５［（Ｍ−５６）＋１］+
【０１６４】
【表２】
0005613669.tif 000032
【０１６５】
放射標識実施例１
［５−（５−エトキシメトキシベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロ−ピリジン−２−イル］−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルからの［18Ｆ］（２−（２−18Ｆ−フルオロ−６−（メチルアミノ）ピリジン−３−イル）ベンゾフラン−５−オールの製造手順
18Ｆ−フッ化物を、炭酸カリウム水溶液（０．５Ｍ、１０ｍＬ）及び水（１８ＭΩ、１５ｍＬ）を用いてプレコンディショニングした（ｐｒｅ−ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ）ＱＭＡ  ＳｅｐＰａｋ  Ｌｉｇｈｔカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）でサイクロトロンターゲット溶液からオンラインで単離した。３分後、ＱＭＡ  ＳｅｐＰａｋ  ｌｉｇｈｔを、２ｍＬずつのｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアゾビシクロ［８．８．８］ヘキサコサン）（９９ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液及び炭酸カリウム（１６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）水（０．８５ｍＬ）溶液及び乾燥アセトニトリル（２０ｍＬ）を用いてフラッシングした。溶出液を窒素気流下（１１０ｍＬ／分）で乾燥するまで１６０℃にて加熱し、ＲＴまで冷却し、そして５−（５−（エトキシメトキシ）ベンゾフラン−２−イル）−６−ニトロピリジン−２−イル（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３ｍｇ、６．８μｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１ｍＬ）溶液を加えた。混合物を８５℃で１５分間加熱し、次いで７０℃に冷却し、そして塩酸（６Ｍ、０．２５ｍＬ）を加えた。３０分後、反応混合物を水（０．５ｍＬ）で希釈し、そして半分取ＨＰＬＣカラム（ＡＣＥ  Ｃ−１８カラム、５＊２５０ｍｍ、５μｍ）上にロードし、これをＭｅＯＨ／ＨＣＯ2ＮＨ4（０．１Ｍ）（５０：５０（ｖ／ｖ））で６ｍＬ／分で溶出した。３４分に溶出したフラクションを集め、蒸発乾固させて、残留物をリン酸緩衝化生理食塩水（ｐＨ７．４）及びプロピレングリコール中エタノール（７０％）の５：３（ｖ／ｖ）混合物に再溶解し、そして滅菌フィルター（０．２２μｍ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を通してろ過した。見積もられた放射化学的収率：３％。放射化学的純度（ＨＰＬＣ）：＞９９％。生成物のＭＳ／ＭＳスペクトルは標準品の未標識２−（２−フルオロ−６−メチルアミノ−ピリジン−３−イル）−ベンゾフラン−５−オールのスペクトルと適合していた。
【０１６６】
未標識２−（２−フルオロ−６−メチルアミノ−ピリジン−３−イル）−ベンゾフラン−５−オールは、ＷＯ２００７／０８６８００に記載される競合結合アッセイにおいて１３ｎＭのＩＣ50を示す。
【０１６７】
Ｎ−［６−［５−（エトキシメトキシ）ベンゾフラン−２−イル］−２−ニトロ−３−ピリジル］−Ｎ−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルからの［18Ｆ］２−（６−フルオロ−５−メチルアミノ−２−ピリジル）ベンゾフラン−５−オールの製造手順
18Ｆ−フッ化物を、炭酸カリウム水溶液（０．５Ｍ、１０ｍＬ）及び水（１８ＭΩ、１５ｍＬ）を用いてプレコンディショニングしたＱＭＡ  ＳｅｐＰａｋ  Ｌｉｇｈｔカートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ）でサイクロトロンターゲット溶液からオンラインで単離した。３分後、ＱＭＡ  ＳｅｐＰａｋ  ｌｉｇｈｔを、２ｍＬずつのｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアゾビシクロ［８．８．８］ヘキサコサン）（９９ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液及び炭酸カリウム（１６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）水（０．８５ｍＬ）溶液及び乾燥アセトニトリル（２０ｍＬ）を用いてフラッシングした。溶出液を窒素気流下（１１０ｍＬ／分）で乾燥するまで１６０℃にて加熱し、ＲＴまで冷却し、そして６−（５−（エトキシメトキシ）ベンゾフラン−２−イル）−２−ニトロピリジン−３−イル（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１ｍＬ）溶液を加えた。混合物を８５℃で１５分間加熱し、次いで７０℃に冷却し、そして塩酸（２Ｍ、１ｍＬ）を加えた。３０分後、反応混合物を水（０．５ｍＬ）で希釈し、そして半分取ＨＰＬＣカラム（Ｗａｔｅｒｓ  μＢｏｎｄａｐａｋ  Ｃ−１８カラム、７．８＊３００ｍｍ、１０μｍ）上にロードし、これをＭｅＯＨ／ＨＣＯ2ＮＨ4（０．１Ｍ）（３０：７０  （ｖ／ｖ））で６ｍＬ／分で溶出した。２４分に溶出したフラクションを集め、蒸発乾固させて、残留物をリン酸緩衝化生理食塩水（ｐＨ７．４）に再溶解し、そして滅菌擬ルター（０．２２μｍ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に通してろ過した。放射化学的収率：１１％。放射化学的純度（ＨＰＬＣ）：＞９９％。生成物のＭＳ／ＭＳスペクトルは、標準品の未標識２−（６−フルオロ−５−メチルアミノ−２−ピリジル）ベンゾフラン−５−オールのスペクトルと適合した。
【０１６８】
未標識２−（６−フルオロ−５−メチルアミノ−２−ピリジル）ベンゾフラン−５−オール    ＷＯ２００７／０８６８００に記載される競合結合アッセイにおいて４４ｎＭのＩＣ50
【図１】
0005613669.tif 000037
【図２】
0005613669.tif 000038
【図３】
0005613669.tif 000039
【図４】
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【図５】
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