(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
経糸及び／又は緯糸が生糸の撚糸からなり、片面が起毛加工された絹織布である、マツタケ菌糸を培養するための担体。
【請求項２】
前記経糸の密度が３０〜２００本／１ｃｍであり、緯糸の密度が１０〜５０本／１ｃｍである、請求項１に記載のマツタケ菌糸を培養するための担体。
【請求項３】
前記絹織布が捩り織の絹織布である、請求項１又は２に記載のマツタケ菌糸を培養するための担体。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載の、寄生樹木の根に巻回して当該根にマツタケ菌を感染させてマツタケ菌糸の菌根を形成させるために用いられる担体であって、担体上にマツタケ菌糸塊が形成された状態の担体。
【請求項５】
液体又は固形培地において、マツタケ菌糸を培養する工程と、
前記工程で得られたマツタケ菌糸を、請求項１〜３のいずれかに記載のマツタケ菌糸培養担体と液体培地とが収容された培養容器に移植する工程と、
前記移植されたマツタケ菌糸培養体を、２０℃〜３０℃で２ヶ月〜５ヶ月間培養する工程とを含む、マツタケ菌糸塊が形成された担体の製造方法。
【請求項６】
前記培地として浜田氏培地を用いる、請求項５に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マツタケ菌糸を培養するためのマツタケ菌糸培養担体、及び、マツタケ菌糸塊が形成された担体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
マツタケは外生菌根菌に分類される菌類の一つであって、マツ科樹木を宿主として共生系を構築する。マツタケ菌（Tricholoma matsutake）は地中においてアカマツ等の根と菌根を形成し、シロと呼ばれる菌根と菌糸の集合体を発達させる。シロが生長し、適切な条件となった時に子実体原基が形成され、やがて子実体となって食用に供されるマツタケが得られることとなる。
【０００３】
従来から、マツタケ等の菌根性茸を人工的に作出するためのステップの一つとして、人為的な方法で菌糸の寄生樹木への感染を促進することが検討されている。大略的には、寄生樹木の根と菌糸とを何らかの方法で接触させることにより感染の促進が図られるが、その方法の一つのとして、予め何らかの担体上にマツタケ菌糸を培養しておき、マツタケ菌糸を担持した担体を寄生樹木の根に接触させることで、マツタケ菌を寄生樹木の根に感染させる方法がある。
【０００４】
マツタケ菌糸を培養するための担体として、例えば、特許文献１（特開平４−３５６１３４号）には、ロックウールや水苔等の繊維材料を用いることが記載されている。特許文献１の発明は、樹木の枝の表皮を剥ぎ、当該箇所に水分補給等を行って発根させた後に、キノコ菌根菌を感染させたロックウールや水苔等の繊維材料を巻き付けて新根にキノコ菌根菌を感染させるものである。
しかしながら、菌糸の担体として用いられるロックウールや水苔の詳細や、担体上に保持される菌糸の量、培養方法等については明らかでない。実施例においても、マツタケから分離した菌糸を寒天培地等で増殖しておき、これを水苔に接種、感染させる旨の記載があるのみである。
【０００５】
また、特許文献２（特許第３６９６５７９号）には、菌根性茸の菌糸を培養する培養工程と、該培養工程で培養された菌根性茸の菌糸をシート状の繊維材料に付着させる付着工程とを含む、菌根性茸用接種シートの製造方法が開示されている。繊維材料としては樹脂性の不織布が用いられ、具体的にはポリプロピレン、ポリエチレンテレフタラート、ポリアミドの１種もしくは２種以上で形成され、乾燥状態における厚さＴが０．０５ｍｍ≦Ｔ≦０．５ｍｍである不織布が好ましいことが開示されている。また、樹脂製の不織布は、木綿や和紙等の植物性のシートに比して、菌糸を不織布上で繁殖し難くすることで根への感染をより容易にできるため好ましいと記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開平４−３５６１３４号公報
【特許文献２】特許第３６９６５７９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、樹脂製の不織布は生分解性を有さないため、土中に埋め込まれた後に自然に分解されることがない。このため、樹脂製の不織布を用いる場合には、宿主根へ菌体を感染させた後に菌根近辺を掘り起こして不織布を取り除く工程が必要となる。しかしながら、菌根の近辺を掘り起こすことは土中環境の安定や作業の簡潔性の観点からは望ましくなく、また樹脂製の不織布を土中に残置することは環境負荷の観点からも好ましくなかった。
【０００８】
本発明はかかる実情に鑑みてなされたものであり、マツタケ菌糸培養体を宿主根に感染させるためのマツタケ菌糸培養担体であって、効率的にマツタケ菌糸の培養が可能であり、また、地中に埋め込まれた後は経時的に分解されて自然に悪影響を及ぼすことがなく、菌根の生長を妨げることの無い、マツタケ菌糸培養担体を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決するために検討を重ねた結果、生分解性を有する天然繊維からなる材料を培養担体として用いることに着想した。さらに、天然繊維である絹織布の中でも、特定の材質及び形態を有するものを用いればマツタケ菌糸が極めて効率的に生育することを見出し、本発明に至った。
【００１０】
すなわち本発明は、経糸及び／又は緯糸が生糸の撚糸からなり、片面が起毛加工された絹織布である、マツタケ菌糸を培養するための担体に関する。
本発明の担体上には極めて効率的にマツタケ菌糸が生育するため、特別の培養方法によらずとも、マツタケ菌糸を十分多量に含むマツタケ菌糸塊が形成された担体を得ることができ、当該担体は、アカマツ等の根に菌根を人為的に作出するために好適に用いることができる。また本発明の担体は、天然繊維である生糸からなるため、菌根の作出のために土中の宿主根に巻かれて残置された後、自然に分解される。すなわち掘り起こして除去する必要がなく、菌根の生育のために安定した環境が保たれるほか、合成繊維を用いる場合と異なって環境汚染の問題を生じることがない。
【００１１】
また本発明は、前記担体のうち、経糸の密度が３０〜２００本／１ｃｍであり、緯糸の密度が１０〜５０本／１ｃｍであるものに関する。さらに、絹織布は捩り織の絹織布であることがより好ましい。
これらの特徴を有する担体を用いれば、より効率的にマツタケ菌糸を増殖させることが可能である。
【００１２】
また本発明は、前記のいずれかに記載の担体であって、担体上にマツタケ菌糸塊が形成されており、寄生樹木の根に巻回して当該根にマツタケ菌を感染させてマツタケ菌糸の菌根を形成させるために用いられる担体に関する。
当該担体を用いると、マツタケ菌の寄生樹木である、アカマツ、エゾマツ、コメツガ等の根に効率良くマツタケ菌を感染させることが可能であり、マツタケ菌と寄生樹木の根との菌根を得ることができる。また前述のとおり本発明の担体は生糸からなるため、土中で経時的に分解され、一度埋め込んだシートを掘り起こして取り出す作業が原則として不要となる。さらに、本発明の担体は適切な堅牢さと柔軟さとを併せ持つため、担体上に多数のマツタケ菌糸塊を担持した状態で山地に運び入れ、地中の根に巻回する作業においても、担体が破断したり崩壊したりすることがなく、取り扱い性に優れる。
【００１３】
さらに本発明は、液体又は固形培地において、マツタケ菌糸を培養する工程と、前記工程で得られたマツタケ菌糸を、請求項１〜４のいずれかに記載のマツタケ菌糸培養担体と液体培地とが収容された培養容器に移植する工程と、前記移植されたマツタケ菌糸培養体を、２０℃〜３０℃で２ヶ月〜５ヶ月間培養する工程とを含む、マツタケ菌糸塊が形成された担体の製造方法に関する。
培地としては、浜田氏培地を用いることができる。
【００１４】
かかる製造方法によれば、汎用的な培養設備を用いてマツタケ菌糸を高効率で増殖させることが可能であり、この製造方法によって得られた担体は、アカマツやエゾマツ等の寄生樹木の根とマツタケ菌との菌根を形成させるために菌糸体を供給する担体として好適に用いられる。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の担体によればマツタケ菌糸を効率的に生育させることが可能であり、マツタケ菌糸塊を担持した担体を簡潔な手段によって提供することができる。本発明の担体を用いると、アカマツ等の寄生樹木とマツタケ菌との菌根を効率的に作出することが可能であり、マツタケの人工栽培を実現するための１ステップとなる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の実施例のマツタケ菌糸培養担体の表面である。
【図２】本発明の実施例のマツタケ菌糸培養担体の裏面である。
【図３】本発明の実施例のマツタケ菌糸培養担体の横面である。
【図４】本発明の実施例及び比較例の担体を用いて、マツタケ菌糸の培養を行った結果である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
（マツタケ菌糸培養担体）
本発明のマツタケ菌糸培養担体は、経糸及び／又は緯糸が生糸の織布からなる絹織布である。経糸と緯糸のいずれもが生糸からなることが好ましいが、経糸、緯糸のいずれか、又は、経糸、緯糸の一部を生糸以外の繊維、例えば、絹練糸や木綿糸、麻糸等で構成することも可能である。マツタケ菌糸培養担体はアカマツ等の根に巻回して地中に残置されることから、生分解性を有する材料が用いられる。
【００１８】
本発明に用いられる絹織布の経糸としては、１４〜６０中の撚糸の一種又は二種以上を組み合わせて用いることができ、例えば、１４〜４２中の２本諸撚り糸（２８〜８４デニール／１経糸）を用いることが好ましい。経糸は、上記の経糸を４〜１０本一組として整経し、製織することができる。
緯糸としては、１４〜６０中の撚糸の一種又は二種以上を組み合わせて用いることができ、例えば、１４〜４２中／２〜４本片撚糸（２８〜１６８デニール／１緯糸）と１４〜４２中／１０〜１００本片撚糸（１４０〜４２００デニール／１緯糸）とを二種以上組み合わせて用いることが好ましい。
【００１９】
これらの経糸及び緯糸は、公知の製織法により織布となすことができ、経糸の密度は３０〜２００本／１ｃｍ、好ましくは５０〜１００本／１ｃｍとすることができ、緯糸の密度は１０〜５０本／１ｃｍ、好ましくは１５〜４０本／１ｃｍとすることができる。織布をこれらの密度とすることで、適度な空隙が形成され、通気・保水性と菌糸の担持性が両立されて好適な担体となるものと考えられている。
織布の厚みは特に制限されないが、例えば、起毛状態での厚みが０．５〜３．０ｍｍとすることができ、０．６〜２．０ｍｍであることがより好ましい。
織布の種類は特に制限されず、平織、朱子織、斜文織やパイル、捩り織等を用いることができるが、組織に適度な凹凸を持たせること、また、堅牢性等の観点から、捩り織が特に好ましい。
【００２０】
これらの織布は片面に起毛加工がなされて、主に緯糸の一部が掻き起されて織布表面を覆っている。起毛されるのは織布の表面、裏面のいずれでもよいが、製造及び構造上の観点からは表面を起毛することが好ましい。起毛加工は例えば、針布起毛によって行うことができる。起毛の程度は、マツタケ菌糸が好適に生育できうる限りにおいて制限されないが、例えば２０％とし、起毛後の織布の厚みが、起毛前のものと比べて１．２〜５倍程度になっていることが好ましい。
【００２１】
担体はシート状の絹織布であることが好ましいが、その形状は特に制限されない。すなわち、三角形、四辺形、多角形、円形等の平面シート状であってもよく、培養や埋め込みの態様に合わせて、一部又は全体が立体的に形成されていても構わない。
【００２２】
（マツタケ菌糸培養担体の製造・使用）
上述の担体はその素材及び形態ゆえにマツタケ菌糸培養担体として好適であると考えられており、担体上にマツタケ菌糸を効率的に生育させ、マツタケ菌糸塊を形成させることが可能である。マツタケ菌糸塊が形成された担体は次のようにして製造することができる。
【００２３】
（１）前培養工程
液体又は固形培地において、マツタケ菌糸の前培養を行う。元になるマツタケ菌糸は保存株を用いてもよいし、公知の方法によってマツタケ子実体から取得することもできる。マツタケ子実体から菌糸を取得する場合には、例えば、マツタケ子実体をエタノールや次亜塩素酸ナトリウム等を用いて殺菌後、切片を培地に置床し、培養して菌糸を得ることができる。
菌糸を培養するための培地としては公知のものを用いることができ、例えば、浜田氏培地が好適に使用できる。固形培地とするには、浜田氏培地に寒天を添加したものを用いることができる。前培養条件は適宜選択することができるが、例えば、固形培地（寒天培地）にマツタケ菌糸を植菌し、２０℃〜３０℃で２ヶ月〜５ヶ月間程度、培養を行うとよい。
【００２４】
（２）移植及び培養工程
培養容器中に液体培地及び本発明の担体を収容し、前記工程で得られたマツタケ菌糸を本発明の担体に移植する。
培養容器としては公知のものを用いることができ、フラスコ培養（三角フラスコ、坂口フラスコ等）、ジャー培養（ジャーファーメンター）のいずれでもよい。いずれの場合も、培養容器中に液体培地と、適切な大きさの本発明の担体を収容する。担体の大きさは、培養スケールに応じて適宜選択することができるが、例えば、一辺が３〜１５ｃｍ、好ましくは５〜１０ｃｍの四辺形のシートとすることができる。
液体培地と担体とを収容した培養容器は予め滅菌しておき、滅菌後にマツタケ菌糸を投入する。滅菌方法は特に制限されないが、例えば、オートクレーブによって１２０℃、５〜３０分間の高温高圧を付与して滅菌を行うことができる。移植は、例えば、マツタケ菌糸が蔓延した寒天培地の一部を無菌下で切り出し、前記培養容器に投入することで行う。
培養は、振盪培養や通気下のジャー培養によって行うことができ、２０℃〜３０℃で２ヶ月〜５ヶ月間とすることができる。培養条件は、菌糸塊の生成を観察しながら適宜変更することも可能であるが、本発明の担体を用いると従来の担体（ポリエチレンテレフタラート・ポリエチレン不織布）と比較して迅速にマツタケ菌糸塊が生成されるという結果も得られている。特に１ヶ月〜２ヶ月程度の短期間の培養においては本発明の培養担体が優れている。培養の状態は、肉眼的に随時観察することができる。
【００２５】
前述の方法によってマツタケ菌糸塊が形成された担体は、培養容器から取り出され、シャーレやプラスチックパウチ、アルミパウチ等に収容して簡便に持ち運ばれ、使用或いは流通に供される。なおこれらシャーレやプラスチックパウチ、アルミパウチ等の容器には無菌的に収容することも可能である。
【００２６】
マツタケ菌糸塊が形成された担体は、アカマツ等の寄生樹木の根に巻回される。担体に担持されたマツタケ菌は当該根に感染し、やがて寄生樹木の根にマツタケ菌糸の菌根が形成される。寄生樹木は、山林に自生するものでもよいし、取り木処理等によって人為的に発根させた樹木を用いるのでもよい。
【実施例】
【００２７】
次の手順で本発明の実施例及び比較例の担体について、マツタケ菌糸の培養試験を行った。
［材料］
マツタケ菌糸：マツタケ菌糸培養体は京都府農林水産技術センター森林技術センターより分譲されたものを用いた。
培地：浜田氏培地を用いた。すなわち、グルコース１０ｇ、リン酸二水素カリウム１ｇ、イーストエクストラクト２ｇ、硫酸マグネシウム七水和物０．５ｇ、粉末ハイポネックス（登録商標）０．５ｇを１Ｌの純水に溶かし、ｐＨを５．０に調整した。寒天固形培地の場合は、これに粉末寒天を１５ｇ溶かした。これらの培地はすべて１２０℃で２０分間、高圧蒸気滅菌を行った後使用した。
担体：実施例の担体として、生糸捩り織（経糸：２１中２本諸、８０本／ｃｍ、緯糸：２１中／３本片・２１中／６０本片、２４本／ｃｍ）の表面を起毛した絹織布（図１〜図３参照）を用いた。比較例の担体として、羊毛、麻、木綿、絹（練糸、起毛）、絹（練糸、無起毛）の各布帛、ポリエチレンテレフタラート・ポリエチレン不織布を用いた。
【００２８】
［方法］
（１）前培養
試験管にいれた寒天固形培地に細かく裁断したマツタケ菌糸体をクリーンベンチ内で植菌し、２５℃の培養室あるいは培養箱中に静置して、２５℃で約２ヶ月間、培養を行った。菌糸の生長は肉眼にて確認した。
（２）移植・培養
液体浜田氏培地２５ｍＬ、及び、４ｃｍ×４ｃｍに裁断した各種の担体を、１００ｍＬ容量の三角フラスコに入れ、１２０℃で２０分、高圧蒸気滅菌を行った。各種の担体は、三角フラスコ底面を覆うように、折りたたむことなく、一枚に広げた状態で載置するようにした。
前記（１）で得られた寒天培地上のマツタケ菌糸塊を無菌的に取り出し、シャーレ内で約２ｍｍ×２ｍｍに細断し、滅菌後の前記培養容器中に移植した。
培養は、恒温振盪培養器内において２５℃で、旋回振盪培養で１００ＲＰＭの旋回培養を２カ月間行い、ついで２５℃で静置培養を行った。合わせて１４０日間培養した。
【００２９】
［結果］
１４０日間培養後の各種の担体を取り出し、担体上に生育したマツタケ菌糸塊の数及びサイズを計測した。結果を表１に示す。評価は、これらの結果を総合的に判断し×〜◎で分類した。
【００３０】
【表１】
0005645320.tif 000002
【００３１】
上表に示されるとおり、起毛加工をした生糸の絹織布（実施例）は、菌糸塊数がきわめて多く、安定した大きさの菌糸塊が多く得られた。つまり実施例の絹織布ではマツタケ菌糸塊の生育が極めて良好であることが確認された。図４に、実施例及び比較例６の培養後の担体の様子を示す。図４に示されるとおり、実施例は比較例６に比して菌糸塊の数が多く、良好な形態の菌糸塊が得られることが観察された。
【図１】
0005645320.tif 000003
【図２】
0005645320.tif 000004
【図３】
0005645320.tif 000005
【図４】
0005645320.tif 000006