(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0005405019.tif 000025
［式中、Ｒ１は２−インダニルであり、Ｒ２は１−メチルプロピルであり、Ｒ３は２,６−ジメチル−３−ピリジルであり、Ｒ４とＲ５はそれらの結合する窒素原子と一緒になってモルホリノを表す］
で示される化合物またはその医薬上許容される酸付加塩（ここで、該酸付加塩は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、リン酸、硫酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ピルビン酸、酢酸、コハク酸、フマル酸およびマレイン酸から選択される酸により形成されたものである）。
【請求項２】
（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオン・ベンゼンスルホン酸塩。
【請求項３】
（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオン。
【請求項４】
請求項１記載の化合物および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項５】
請求項２記載の化合物および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項６】
請求項３記載の化合物および医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項７】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、式（ＩＩＩ）：
【化２】
0005405019.tif 000026
［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は請求項１の記載と同意義であり、Ｒ６は２−ヒドロキシフェニルを意味する］
で示される化合物を、１,１'−カルボニルジイミダゾールまたは１,１'−チオカルボニルジイミダゾールと、適当な溶媒中で反応させ、その後、こうして形成された生成物をアミン：ＨＮＲ４Ｒ５（Ｒ４およびＲ５は請求項１の記載と同意義である）と反応させることを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オキシトシン受容体にて強力かつ選択的なアンタゴニスト作用を有する新規なジケトピペラジン誘導体に、その製法に、該化合物を含有する医薬組成物に、およびその医学における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
オキシトシンホルモンは子宮の強力な収縮剤であり、陣痛の誘発または増幅に使用される。また、子宮オキシトシン受容体の密度は妊娠の間に１００倍より大きく有意に増加し、陣痛（早期および満期）にてピークに達する。
早産／早期陣痛（２４週と３７週の間）は約６０％の乳児の死亡／死亡率を生じさせる。かくしてオキシトシンの子宮作用を阻害する化合物、例えばオキシトシンアンタゴニストは、早期陣痛の防止または制御に有用であるはずである。
【０００３】
国際特許出願ＷＯ９９／４７５４９は、フルクトース１,６−ビスホスフェート（ＦＢＰａｓｅ）の阻害剤としての３−ベンジル−２,５−ジケトピペラジン誘導体を含むジケトピペラジン誘導体を記載する。
【０００４】
国際特許出願ＷＯ０３／０５３４４３は、オキシトシン受容体にて選択的なアンタゴニストとして特に有用なレベルの活性を示す一連のジケトピペラジン誘導体を記載する。そこに記載の一連の好ましい化合物は、式（Ａ）：
【化１】
0005405019.tif 000002
で示される。
かかる化合物は、とりわけ、Ｒ１が２−インダニルであり、Ｒ２がＣ３−４アルキルであり、Ｒ３が環中の炭素原子を介して分子の残基に結合した５または６員のヘテロアリール基であり、Ｒ４がＮＲ５Ｒ６基（Ｒ５およびＲ６は、各々、アルキル、例えばメチルであるか、またはＲ５およびＲ６はその結合する窒素原子と一緒になって３−ないし７−員の飽和複素環式環を形成し、その複素環は酸素より選択される付加的なヘテロ原子を含有してもよい）を表すところの、化合物を包含する。
【０００５】
国際特許出願ＷＯ２００５／０００８４０は、式（Ｂ）：
【化２】
0005405019.tif 000003
［式中、Ｒ１は２−インダニルであり、Ｒ２は１−メチルプロピルであり、Ｒ３は２−メチル−１,３−オキサゾール−４−イルであり、Ｒ４およびＲ５はその結合する窒素原子と一緒になってモルホリノを表す］
で示されるジケトピペラジン誘導体を記載する。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
この度、本発明者らは、特に有利な薬物動態プロファイルを示す、一群の新規な選択的オキシトシン受容体アンタゴニストを見出した。
本発明は、かくして、式（Ｉ）：
【化３】
0005405019.tif 000004
［式中、Ｒ１は２−インダニルであり、Ｒ２は１−メチルプロピルであり、Ｒ３は２,６−ジメチル−３−ピリジルまたは４,６−ジメチル−３−ピリジルから選択される基であり、Ｒ４はメチルを表して、Ｒ５は水素またはメチルを表すか、あるいはＲ４とＲ５はそれらの結合する窒素原子と一緒になってモルホリノを表す］
で示される化合物およびその医薬上許容される誘導体より選択される少なくとも１つの化学物質を提供する。
【０００７】
式（Ｉ）の化合物は、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３基を有する不斉炭素原子が、すなわち、これらの位置での空間的配置が常に（Ｒ）であるように示される、絶対立体化学を有することが分かるであろう。それでも、かかる化合物は実質的にはＲ１、Ｒ２およびＲ３の各々で（Ｓ）−エピマーを含まないが、各エピマーは少量にて存在しうること、例えば、１％以下の（Ｓ）−エピマーが存在してもよいことも認識すべきである。
【０００８】
Ｒ２基が不斉炭素原子を含有し、本発明がその（Ｒ）−および（Ｓ）−エピマーの両方を含むことも理解されよう。
本発明の一の実施形態においては、Ｒ２は（１Ｓ）−１−メチルプロピルである。本発明のもう一つ別の実施形態においては、Ｒ２は（１Ｒ）−１−メチルプロピルである。
【０００９】
本発明の一の実施形態は、その調製が実施例１、２、３および６に具体的に記載されている、化合物である。本発明のもう一つ別の実施形態は、その調製が実施例１、２および３に具体的に記載されている化合物である。本発明のさらなる実施形態は、その調製が実施例３および６に具体的に記載されている化合物である。本発明のさらなる別の実施形態は、その調製が実施例３に具体的に記載されている化合物である。本発明のもう一つ別の実施形態は、その調製が実施例１に具体的に記載されている化合物である。
【００１０】
一の態様において、本発明にて有用な化学物質は：
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−メチルエタンアミド；
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミド；
（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオン；
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミド；
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−メチルエタンアミド；
（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオン；
ならびにその医薬上許容される誘導体
より選択される少なくとも１つの化学物質であってもよい。
【００１１】
本明細書にて用いる場合、「医薬上許容される」なる語は、医薬用途に適する化合物を意味する。医薬用途に適する本発明の化合物の塩および溶媒和物は、そのカウンターイオンまたは結合溶媒が医薬上許容されるものである。しかし、医薬上許容されないカウンターイオンまたは結合溶媒を有する塩および溶媒和物も、例えば、本発明の他の化合物ならびにその医薬上許容される塩および溶媒和物の調製における中間体として用いるため、本発明の範囲内にある。
【００１２】
本明細書にて用いる場合、「医薬上許容される誘導体」なる語は、被験者に投与されると、本発明の化合物あるいはその活性代謝物または残基の提供能を（直接的または間接的に）有する、本発明の化合物の医薬上許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグ、例えばエステルのいずれをも意味する。かかる誘導体は、当業者であれば過度の実験を行うことなく理解しうる。とは言っても、Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5 th Edition, Vol 1： Principles and Practiceの教示に言及するものであり、かかる誘導体に対する教示を出典を明示することでその内容を本明細書の一部とする。一の態様において、医薬上許容される誘導体は、塩、溶媒和物、エステル、カルバメートおよびホスフェートエステルである。もう一つ別の態様において、医薬上許容される誘導体は塩、溶媒和物、エステル、カルバミン酸エステルおよびリン酸エステルである。一の態様において、医薬上許容される誘導体は塩、溶媒和物およびエステルである。さらなる態様において、医薬上許容される誘導体は塩および溶媒和物である。もう一つ別の態様において、医薬上許容される誘導体は生理学的に許容される塩である。
【００１３】
本発明の化合物の適当な生理学的に許容される塩として、生理学的に許容される無機酸または有機酸とで形成される酸付加塩が挙げられる。かかる酸の例として、塩酸、臭化水素酸、硝酸、リン酸、硫酸、スルホン酸、例えばメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ピルビン酸、酢酸、コハク酸、フマル酸およびマレイン酸が挙げられる。
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の溶媒和物、例えば、水和物、または、限定されるものではないが、アルコール、例えばエタノール、イソプロパノール、アセトン、エーテル、エステル、例えば酢酸エチルを含む、医薬上許容される溶媒との溶媒和物に関する。
【００１４】
本発明の化合物はまた、他の治療薬と組み合わせて用いてもよい。かくして、本発明は、さらなる態様において、本発明の化合物またはその医薬上許容される誘導体をさらなる治療薬と一緒に含む組み合わせを提供する。
【００１５】
本発明の化合物またはその医薬上許容される誘導体を、同じ病態に対して活性である第二治療薬と組み合わせて用いる場合、各化合物の用量は、その化合物を単独で用いる用量とは異なるかもしれない。当業者であれば、適量を容易に認識するであろう。治療に用いるのに必要な本発明の化合物の量は、治療される状態の性質、患者の年齢および状態で変化するであろうし、最終的には顧問医または獣医の判断であろう。本発明の化合物は子宮収縮阻害薬または予防薬と組み合わせて用いてもよい。これらは、限定されるものではないが、テルブタリンまたはリトドリンなどのベータ−アゴニスト、カルシウムチャネル遮断薬、例えばニフェデピン、非ステロイド系抗炎症薬、例えばインドメタシン、マグネシウムの塩、例えば硫酸マグネシウム、他のオキシトシンアンタゴニスト、例えばアトシバン、およびプロゲステロンアゴニストおよび処方を包含する。加えて、本発明の化合物はベータメタゾンおよびデキサメタゾンを含む出生前ステロイド、妊婦用ビタミン、特に葉酸補充剤、抗生物質、限定されるものではないが、アンピシリン、アモキシリン／クラブラン酸塩、メトロニダゾール、クリンダマイシンおよび不安解消薬と組み合わせて用いられてもよい。
【００１６】
上記の組み合わせは、都合よくは、医薬処方の形態における使用のために供されてもよく、上記した組み合わせと医薬上許容される担体または賦形剤とを含む医薬処方は本発明のさらなる態様を形成する。かかる組み合わせの個々の成分は、都合のよい経路により、連続的に、あるいは同時に、別々のまたは組み合わせた医薬処方のいずれで投与されてもよい。
連続的に投与する場合、本発明の化合物または第二治療薬のいずれが最初であってもよい。同時に投与する場合、その組み合わせは同じまたは異なる医薬組成物のいずれで投与されてもよい。
【００１７】
同じ処方中に組み合わせる場合、２種の化合物は安定しており、相互におよび処方の他の成分と混和性でなければならない。別々に処方される場合、それらは都合よくは当該分野にてかかる化合物に対して公知の方法にて、いずれか都合のよい処方にて提供されてもよい。
【００１８】
式（Ｉ）の化合物はラットおよびヒトの子宮上のオキシトシン受容体に対して強いアフィニティを有しており、このことは一般的手段を用いて測定され得る。例えば、ラットの子宮上のオキシトシン受容体に対するアフィニティは、Pettiboneら、Drug Development Research 30. 129-142（1993）の操作により測定され得る。本発明の化合物はまた、ＣＨＯ細胞のヒト組換えオキシトシン受容体で高いアフィニティを示し、このことは、都合よくは、Wyattら、Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters、2001（11）1301-1305頁に記載の操作を用いて測定され得る。
【００１９】
本発明の化合物は、良好な水溶性を伴う良好な生体利用能を含め、有利な薬物動態プロファイルを示す。一の態様にて、本発明の化合物は良好な効能および固有の低クリアランスを示す。もう一つ別の態様において、本発明の化合物は固有の低クリアランスを示す。
本発明の化合物は、したがって、オキシトシンの作用を介して媒介される疾患および／または症状の治療または予防にて有用である。かかる疾患および／または症状の例として、早期陣痛、月経困難症、子宮内膜症および良性前立腺過形成が挙げられる。
【００２０】
該化合物はまた、選択しうる帝王切開または患者を三次医療センターに移す前に、性的機能不全（男性および女性）、特に早漏、肥満、食事障害、鬱血性心不全、動脈性高血圧、肝硬変、腎臓性高血圧または高眼圧症、強迫障害および神経精神障害の治療の前に、陣痛を遅らせるのに有用でもある。本発明の化合物はまた、動物、例えば家畜の出産率を改良するのにも有用である。
したがって、本発明は、治療にて用いるための、特にヒトまたは家畜の治療にて用いるための、とりわけオキシトシンのオキシトシン受容体に対する作用を拮抗するための医薬として用いるための、式（Ｉ）の化合物および／またはその医薬上許容される誘導体より選択される少なくとも１種の化学物質を提供する。
【００２１】
本発明はまた、オキシトシンのオキシトシン受容体に対する作用を拮抗するための医薬の製造における、式（Ｉ）の化合物および／またはその医薬上許容される誘導体より選択される少なくとも１種の化学物質の使用を提供する。
【００２２】
さらなる態様によれば、本発明はまた、オキシトシンのオキシトシン受容体に対する作用を拮抗する方法であって、その必要とする患者に、拮抗量の少なくとも一つの式（Ｉ）の化合物および／またはその医薬上許容される誘導体より選択される化学物質を投与することを含む、方法を提供する。
本明細書の治療に対する言及は予防ならびに確立された疾患または徴候の治療にまで及ぶことは当業者に明らかであろう。
【００２３】
さらには、治療にて用いるのに必要とされる本発明の化合物の量は、治療される症状の特性、投与形路および患者の年齢および状態で変化し、最終的には顧問医の判断であろう。一般に、成人の治療に利用される用量は、典型的には、投与形路に応じて、２ないし１０００ｍｇ／日の範囲にあるであろう。
かくして、非経口投与の場合、一日の用量は、典型的には、２ないし５０ｍｇ、好ましくは５ないし２５ｍｇ／日の範囲にあるであろう。経口投与の場合、一日の用量は、典型的には、１０ないし１０００ｍｇ、例えば５０ないし５００ｍｇ／日の範囲内にあるであろう。
【００２４】
望ましい用量は、都合よくは、単回用量にて、あるいは適当な間隔で投与される分割された用量として、例えば一日に付き２回、３回、４回またはそれ以上の細分用量として提供されてもよい。
治療にて用いる場合、本発明の化合物は原料として投与されることも可能であるが、医薬処方の活性成分として投与されることが好ましい。
【００２５】
かくして、本発明は、さらには、式（Ｉ）の化合物および／またはその医薬上許容される誘導体と、１個または複数の医薬上許容される担体と、所望により他の治療および／または予防成分とを一緒に含む医薬処方を提供する。担体は、処方の他の成分と適合しうるという意味で「許容される」ものでなければならず、その受容者に有害であってはならない。
本発明の組成物は、経口、バッカル、非経口、吸入または注入、インプラント、膣または直腸投与用に特に処方された形態のものを包含する。
【００２６】
経口投与用の錠剤およびカプセルは、結合剤、例えばシロップ、アカシア、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、澱粉粘液またはポリビニルピロリドン；充填剤、例えばラクトース、ショ糖、微結晶セルロース、トウモロコシ澱粉、リン酸カルシウムまたはソルビトール；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコールまたはシリカ；崩壊剤、例えばイモ澱粉または澱粉グリコール酸ナトリウム、またはラウリル硫酸ナトリウムなどの湿潤剤等の慣用的な賦形剤を含有してもよい。錠剤は当該分野にて周知の方法によりコーティングされていてもよい。経口用液体製剤は、例えば水性または油性の懸濁液、溶液、エマルジョン、シロップまたはエリキシルの形態であってもよく、あるいは使用前に水または他の適当なビヒクルで復元される乾燥生成物として与えられてもよい。かかる液体製剤は、懸濁化剤、例えばソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／ショ糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲルまたは硬化食用脂；乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノオレエートまたはアカシア；非水性ビヒクル（食用油を含んでいてよい）、例えばアーモンド油、分別ココヤシ油、油性エステル、プロピレングリコールまたはエチルアルコール；界面活性剤、例えばポリソルベートまたはシクロデキストリンなどの可溶化剤；および保存剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルまたはプロピルあるいはアスコルビン酸などの慣用的な添加剤を含有してもよい。該組成物はまた、例えばカカオ脂または他のグリセリドなどの慣用的な坐剤用基剤を含有する坐剤として処方されてもよい。
【００２７】
バッカル投与の場合、該組成物は慣用的操作にて処方された錠剤またはロゼンジの形態を取ることができる。
本発明の組成物は注射または点滴による非経口投与用に処方されてもよい。注射用の処方は、単回投与のアンプルの形態にて、あるいは保存剤を加えた複数回投与用の容器にて与えられてもよい。該組成物は、かかる形態を油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液またはエマルジョンとして取ってもよく、懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤などの処方剤を含有してもよい。また、活性成分は、使用前に適当なビヒクル、例えば滅菌した発熱物質不含水で復元する粉末形態であってもよい。
【００２８】
本発明の組成物は、０．１−９９％の活性成分、都合よくは錠剤およびカプセルの場合に１−５０％の活性成分、液体製剤の場合に３−５０％の活性成分を含有してもよい。
本発明の化合物の有利な薬物動態プロファイルは、生物学的に活性な化合物の薬物動態特性を測定する通常の操作を用いて容易に測定される。
本発明の化合物およびその医薬上許容される誘導体は、本発明のさらなる態様を構成する、以下に記載の操作により調製される。以下の記載において、基は、特記しない限り、本発明の化合物について上記したとおりである。
【００２９】
式（Ｉ）の化合物は、カルボン酸（ＩＩ）：
【化４】
0005405019.tif 000005
（ここで、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ３のキラリティは（Ｒ）または（Ｓ）あるいはその混合物である）またはその活性化誘導体を、アミン  ＨＮＲ４Ｒ５（ここで、Ｒ４およびＲ５は式（Ｉ）の記載と同意義である）と、カルボン酸またはその活性化誘導体とアミンとからアミドを調製する標準条件下で、反応させて調製することができる。
【００３０】
上記の反応より得られる式（Ｉ）の化合物のジアステレオマーの混合物は、当該分野にて周知の標準的分割技法、例えばカラムクロマトグラフィーを用いて分離することができる。
かくして、式（Ｉ）のアミドは、式（ＩＩ）のカルボン酸を、ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘテロフルオロリン酸塩）、ＴＢＴＵ（２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・テトラフルオロホウ酸塩）、ＢＯＰ−Ｃｌ（ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド）、塩化オキサリルまたは１，１’−カルボニルジイミダゾールなどの活性化剤と、トリエチルアミンなどの非プロトン性溶媒中、所望によりトリエチルアミンなどの第三アミンの存在下で処理し、その後、こうして形成された生成物、すなわち式（ＩＩ）の化合物の活性化誘導体を、アミン  ＨＮＲ４Ｒ５と反応させることで調製され得る。
【００３１】
別法として、式（Ｉ）のアミドは、カルボン酸（ＩＩ）（ここで、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は式（Ｉ）の記載と同意義である）から誘導される混合無水物をアミン  ＨＮＲ４Ｒ５とテトラヒドロフランなどの非プロトン性溶媒中で反応させることで調製することができる。都合よくは、該反応は低温、例えば２５℃ないし−９０℃、都合よくは約−７８℃で実施される。
混合無水物は、都合よくは、カルボン酸（ＩＩ）を、適当な酸塩化物、例えば塩化ピバロリルと、トリアルキルアミン、例えばトリエチルアミンなどの第三有機塩基の存在下、低温、例えば２５℃ないし−９０℃、都合よくは約−７８℃で、酢酸エチルなどの非プロトン性溶媒中で反応させることで調製される。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物はまた、式（ＩＩＩ）：
【化５】
0005405019.tif 000006
［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ６は２−ヒドロキシフェニルを意味する］
で示される化合物を、１,１'−カルボニルジイミダゾールまたは１,１'−チオカルボニルジイミダゾールと、ジクロロメタンなどの適当な溶媒中で反応させ、その後、このように形成された生成物をアミン  ＨＮＲ４Ｒ５と反応させることで調製され得る。
【００３３】
式（ＩＩ）の化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物（式中、Ｒ６は２−ヒドロキシフェニルである）を、１,１'−カルボニルジイミダゾールまたは１,１−チオカルボニルジイミダゾールと、ジクロロメタンなどの適当な溶媒中で反応させ、その後、こうして形成された生成物を水性アセトンと反応させることで調製され得る。
式（ＩＩＩ）の化合物（式中、Ｒ６は２−ヒドロキシフェニルである）は、対応する式（ＩＩＩ）の化合物（式中、Ｒ６は２−ベンジルオキシフェニル基である）を水素およびパラジウム触媒を用いて水素添加分解することで調製され得る。
【００３４】
別法として、式（ＩＩＩ）の化合物（式中、Ｒ６は２−ヒドロキシフェニルである）は、式（ＩＶ）：
【化６】
0005405019.tif 000007
［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ６は２−ベンジルオキシフェニルであり、Ｒ７はベンジルオキシカルボニルであり、Ｒ８はＣ１−６アルキルを意味する］
で示される化合物を、パラジウム／チャコール触媒の存在下で水素と、そして酢酸と反応させることで調製され得る。この反応は、都合よくは、エタノール、トリフルオロエタノールまたはその混合液などの溶媒中で実施される。
【００３５】
式（ＩＶ）の化合物は、アミノエステル塩酸塩（Ｖ）：
【化７】
0005405019.tif 000008
［ここで、Ｒ２は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ８はＣ１−６アルキルである］
を、アルデヒド：Ｒ３ＣＨＯ（ＶＩ）［ここで、Ｒ３は式（Ｉ）の記載と同意義である］と、トリエチルアミンの存在下、トリフルオロエタノールなどの溶媒中で反応させ、ついで得られた生成物を、化合物（ＶＩＩ）：
【化８】
0005405019.tif 000009
［ここで、Ｒ１は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ７はｔ−ブチルオキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルである］
およびイソシアニド：ＣＮＲ６（ＶＩＩＩ）［ここで、Ｒ６は２−ベンジルオキシフェニル基である］と、トリフルオロエタノールなどの溶媒中で反応させることにより調製され得る。
【００３６】
式（ＩＩＩ）の化合物［式中、Ｒ６は２−ベンジルオキシフェニル基である］は、式（ＩＶ）の化合物［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ６は２−ベンジルオキシフェニルであり、Ｒ７はｔ−ブチルオキシカルボニルである］を、塩化水素と、ジオキサン中で反応させ、つづいてトリエチルアミンとジクロロメタンなどの溶媒中で反応させることにより調製され得る。
式（ＩＶ）の化合物［式中、Ｒ７はｔ−ブチルオキシカルボニルである］は、式（ＶＩＩ）の化合物［式中、Ｒ７はｔ−ブチルオキシカルボニルである］を用い、上記した反応経路により調製され得る。
【００３７】
Ｒ２置換基は１−メチルプロピル基であり、式（Ｉ）の化合物［式中、Ｒ２は（Ｓ）または（Ｒ）配置の１−メチルプロピル基である］は、アミノエステル塩酸塩（Ｖ）［ここで、Ｒ２基は必要とされる（Ｓ）または（Ｒ）配置である］を用いて開始することで調製され得る。
アミノエステル塩酸塩（Ｖ）［ここで、Ｒ１は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ８はＣ１−６アルキルである］は、Schmidt, U；Kroner, M；Griesser, H.  Synthesis（1989）、（11）、832-5の方法により、その対応する市販のアミノ酸、Ｄ−アロイソロイシンまたはＤ−イソロイシンより調製され得る。
【００３８】
アルデヒド：Ｒ３ＣＨＯ（ＶＩ）［ここで、Ｒ３は式（Ｉ）の記載と同意義である］は、市販されているか、文献記載の方法（Comins, Daniel L.；Weglarz, Michael A.；J.Org.Chem.；53；19；1988；4437-4442）により調製されるかのいずれかである。
【００３９】
アミノ酸誘導体（ＶＩＩ）［ここで、Ｒ１は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ７はｔ−ブチルオキシカルボニルである］は商業的に入手可能であり；アミノ酸誘導体（ＶＩＩ）［ここで、Ｒ１は式（Ｉ）の記載と同意義であり、Ｒ７はベンジルオキシカルボニルである］は、対応する市販のアミノ酸：（Ｒ）−Ｒ１ＣＨ（ＮＨ２）ＣＯ２Ｈ（ＩＸ）［ここで、Ｒ１は式（Ｉ）の記載と同意義である］をＮ−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミドおよびトリエチルアミンと水中ジオキサンなどの溶媒中で処理することで調製され得る。
【００４０】
イソシアニドＣＮＲ６（ＶＩＩＩ）は文献記載の方法に従って調製することができる（Obrecht, Roland；Herrmann, Rudolf；Ugi, Ivar、Synthesis、1985、4、400-402）。
式（Ｉ）の化合物の酸付加塩は、慣用的手段、例えば、該化合物のジクロロメタンまたはアセトンなどの適当な溶媒中溶液を、適当な無機または有機酸の適当な溶液で処理することにより調製することができる。
以下の実施例は例示であり、本発明の実施形態を限定するものではない。
【００４１】
実験
命名法
中間体および実施例のすべては、イジスドロー（ISISDraw）のＡＣＤ  Ｎａｍｅ  Ｐｒｏ６．０２を用いて命名した。
略語
ＣＶ：カラム容量；一のカラム容量を充填カラム中で吸着剤により占められる容量として定義する。これは使用される個々の吸着剤の質量および密度より大体の容量として計算することができる（１ＣＶ＝質量を密度で割ったものである）。
【００４２】
一般的精製および分析方法
分析用ＨＰＬＣは、Ｓｕｐｅｌｃｏｓｉｌ  ＬＣＡＢＺ＋ＰＬＵＳカラム（３.３ｃｍｘ４.６ｍｍＩＤ）上で、水中０.１％ＨＣＯ２Ｈおよび０.０１Ｍ酢酸アンモニウム（溶媒Ａ）、およびアセトニトリル中０.０５％ＨＣＯ２Ｈおよび５％水（溶媒Ｂ）で、溶出勾配１：０−０.７分の０％Ｂ、０.７−４.２分の０％−１００％Ｂ、４.２−５.３分の１００％Ｂ、５.３−５.５分の０％Ｂあるいは溶出勾配２：０−０.７分の０％Ｂ、０.７−４.２分の０％−１００％Ｂ、４.２−４.６分の１００％Ｂ、４.６−４.８分の０％Ｂを３ｍｌ／分の流速を用いて溶出して行われた。保持時間（Ｒｔ）は分で示される。マススペクトル（ＭＳ）は、エレクトロスプレーポジティブ［ＭＨ＋およびＭ（ＮＨ４）＋分子イオンを得るのにＥＳ＋ｖｅ］モードまたはエレクトロスプレーネガティブ［（Ｍ−Ｈ）−分子イオンを得るのにＥＳ−ｖｅ］モードを用いてＷａｔｅｒｓ  ＺＱ  ２０００マススペクトロメーターに記録された。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、外部標体としてテトラメチルシランを用い、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ  ４００ＭＨｚを利用して記録された。
【００４３】
シリカカートリッジを用いる精製は、Presearchより供給されるＲｅｄｉｓｅｐ（登録商標）カートリッジでのＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（登録商標）ＣｏｍｐａｎｉｏｎＴＭを用いて行われるクロマトグラフィーをいう。疎水性フリットはWhatmanより販売されている濾過チューブをいう。ＳＰＥ（固相抽出法）はInternational Sorbent Technology Ltdより販売されているカートリッジの使用をいう。ＴＬＣ（薄層クロマトグラフィー）はシリカゲル６０Ｆ２５４でコーティングされたMerckより販売されているＴＬＣプレートの使用をいう。
【００４４】
中間体１
【化９】
0005405019.tif 000010
Ｎ−［（２Ｒ）−２−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−２−（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）アセチル］−Ｎ−［１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−オキソ−２−（｛２−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝アミノ）エチル］−Ｄ−アロイソロイシン酸メチル
【００４５】
メタノール（５０ｍＬ）および２,２,２−トリフルオロエタノール（５０ｍＬ）中の２,６−ジメチルピリジン−３−カルボキシアルデヒド（Aurora Feinchemie GmbH）（２.００ｇ、１６.１ミリモル）および（Ｄ）−アロイソロイシンメチルエステル塩酸塩（２.９３ｇ、１６.１ミリモル）をトリエチルアミン（２.２４ｍＬ、１６.１ミリモル）で処理し、その混合物を窒素下室温で２０時間攪拌した。
（２Ｒ）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）エタン酸（５.２４ｇ、１６.１ミリモル）および２−ベンジルオキシフェニルイソニトリル（３.３７ｇ、１６.１ミリモル）を添加し、該混合物を窒素下室温で４日間攪拌した。該混合物を減圧下で濃縮し、ついで水性炭酸水素ナトリウム（６ｍＬ）を加えた酢酸エチル（１５０ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）の間に分配した。その水相を酢酸エチル（５０ｍＬ）で逆抽出し、合した有機抽出液を炭酸水素ナトリウム半飽和水溶液、塩化アンモニウムおよび塩化ナトリウム（各々、１００ｍＬ）で連続して抽出し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧下で蒸発させて粗生成物（１２.０１ｇ）を得た。これをシクロヘキサン中２０−５０％酢酸エチルで溶出するRedisepシリカカラム（３３０ｇ）に付して精製し、７.４６ｇの標記化合物を一対のジアステレオマーとして得た。
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝３.８８および３.９６分（勾配１）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝７９７
【００４６】
中間体２
【化１０】
0005405019.tif 000011
２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド
【００４７】
Ｎ−［（２Ｒ）−２−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−２−（｛［（フェニルメチル） オキシ］カルボニル｝アミノ）アセチル］−Ｎ−［１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−オキソ−２−（｛２−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝アミノ）エチル］−Ｄ−アロイソロイシン酸メチル粗製物（中間体１）（７.４６ｇ）をエタノール（１５０ｍＬ）および酢酸（１０ｍＬ）に溶かし、該混合物を炭素上１０％パラジウム（Degussa型）（１：１（ｗ：ｗ）の水で湿らせて１．８ｇ）上、１気圧のＨ２下で１８時間水素添加した。該反応混合物を減圧下で蒸発させて残渣を酢酸エチルと水の間に分配し、水相が塩基性（ｐＨ８）になるまで炭酸水素ナトリウム飽和水溶液を添加した。水相を酢酸エチルで抽出し、合した有機抽出液を炭酸水素ナトリウム飽和水溶液：水（３：１、１００ｍＬ）で、ついで飽和ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧下で蒸発させた。粗生成物を酢酸エチル中０−１０％メタノールで溶出するRedisepシリカカラム（１２０ｇ）に付して精製し、標記化合物を一対のジアステレオマーとして得た（２.９４ｇ）。
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.７５および２.８１分（勾配２）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５４１。
【００４８】
中間体３
【化１１】
0005405019.tif 000012
２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］−フェニル｝アセトアミド
【００４９】
４,６−ジメチル−３−ピリジンカルボアルデヒド１（２.５２ｇ）およびＤ−アロイソロイシン酸メチル塩酸塩（３.４ｇ）を２,２,２−トリフルオロエタノール（５０ｍｌ）に溶かした。これに、トリエチルアミン（２.６１ｍｌ）を添加し、該反応混合物を１８時間放置した。（２Ｒ）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル（｛［（１,１−ジメチルエチル）オキシ］−カルボニル｝アミノ）エタン酸（５.４４ｇ）および２−［（フェニルメチル）オキシ］フェニルイソシアニド（４.１８ｇ）をメタノール（１０ｍｌ）と一緒に該反応混合物に加え、その溶液を室温で３日間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣をジクロロメタンと水の間で分離させた。有機相を疎水性フリットに通し、真空下で蒸発させた。残渣をジオキサン中４Ｎ塩化水素（５０ｍｌ）に溶かし、該反応混合物を４時間放置した。溶媒を真空下で除去し、残渣をジクロロメタン（２００ｍｌ）に溶かした。これにトリエチルアミン（２０ｍｌ）を加え、該反応混合物を２０時間放置した。該反応混合物をジクロロメタンと水の間で分離させた。有機相を疎水性フリットに通し、真空下で蒸発させた。残渣を４ｘ９０ｇのBiotageカラムに充填し、シクロヘキサン／酢酸エチル（１：１、１：２ｖ／ｖ）および酢酸エチルで溶出した。必要とされるフラクションを合し、真空下で蒸発させて２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝アセトアミド（５.５５ｇ、４７％）を黄褐色の泡沫体として得た。
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝３.４３、３.４５分、勾配１）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝６３１。
参考資料：
１.  Comins, Daniel L.；Weglarz, Michael A.；J. Org. Chem.；53；19；1988；4437-4442
【００５０】
中間体４
【化１２】
0005405019.tif 000013
２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド
【００５１】
２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−｛２−［（フェニルメチル）オキシ］フェニル｝アセトアミド（中間体３）（３.３０ｇ）をエタノール（７５ｍｌ）に溶かし、パラジウム／チャコール（湿った状態の１０％Ｐｄ、０.５０ｇ）上で２０時間水素添加に付した。触媒を濾過で除去し、ジクロロメタンで洗浄した。合した濾液および洗液を真空下で蒸発させた。残渣を９０ｇのBiotageカラムに充填し、酢酸エチルで溶出した。必要とされるフラクションを合し、真空下で蒸発させて２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（２.４３ｇ、８７％）を淡黄色固体として得た。
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.８６分（勾配１）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５４１。
【００５２】
中間体５
｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）酢酸 塩酸塩
【化１３】
0005405019.tif 000014
【００５３】
２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（２４.２５ｇ、４５ミリモル）（中間体２）および１,１'−カルボニルジイミダゾール（１１.７ｇ、７２ミリモル）を乾燥ジクロロメタン（２００ｍｌ）に溶かし、窒素下で２０時間放置した。溶媒を真空下で除去し、残渣をアセトン（２００ｍｌ）および２Ｎ塩酸（２０ｍｌ）に溶かした。２０時間攪拌した後、溶媒を真空下で除去し、残渣をメタノール（５０ｍｌ）に溶かした。該溶液をアミノプロピルカートリッジ（２ｘ７０ｇ）に充填し、メタノール（２５０ｍｌ）で、ついでメタノール中１０％酢酸（２５０ｍｌ）で溶出した。必要とされるフラクションを合し、真空下で蒸発させた。残渣を２Ｎ塩酸で処理し、得られた溶液を真空下で蒸発させ、標記化合物の｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）酢酸・塩酸塩を黄褐色固体として得た（１２.２１ｇ、５６％）。
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.４８分（勾配２）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５０。
【００５４】
中間体６
【化１４】
0005405019.tif 000015
（２Ｒ）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル（｛［（フェニルメチル）オキシ］カルボニル｝アミノ）エタン酸
【００５５】
（２Ｒ）−アミノ（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）エタン酸（１.９１ｇ、１０ミリモル）をジオキサン（１０ｍｌ）および水（１０ｍｌ）に懸濁させた。これにトリエチルアミン（１.７ｍｌ）およびＮ−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）−スクシンイミド（２.５４ｇ）を添加し、該反応混合物を室温で２日間速やかに攪拌した。該反応混合物を水（５０ｍｌ）中に注ぎ、クロロホルム（１００ｍｌ）で抽出した。有機相を１Ｎ塩酸（５０ｍｌ）および水（５０ｍｌ）で洗浄した。これを硫酸マグネシウム上で乾燥させ、溶媒を真空下で除去して標記化合物（３.０６ｇ、９４％）を得た：１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７.４０−７.２９（ｍ，５Ｈ）、７.２１−７.１１（ｍ，４Ｈ）、５.２８（ｄ，１Ｈ，Ｊ=８.６Ｈｚ）、５.１１（ｓ，２Ｈ）、４.５７（ｍ，１Ｈ）、３.１４−２.７９（ｍ，５Ｈ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ３２６（ＭＨ＋）、Ｒｔ  ３.３５分（勾配２）
【００５６】
実施例１
【化１５】
0005405019.tif 000016
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−メチルエタンアミド
【００５７】
乾燥ジクロロメタン（１０ｍＬ）中の２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（中間体２）（０.４００ｇ、０.７４ミリモル）および１,１'−カルボニルジイミダゾール（０.１９２ｇ、１.１８ミリモル）を、窒素下、室温で７時間攪拌した。該混合物をメチルアミンのテトラヒドロフラン中２Ｍ溶液（１.８４９ｍＬ、３.７０ミリモル）で処理し、室温で一夜放置した。溶媒をＮ２で吹き飛ばし、残渣を酢酸エチル中０−１０％メタノールで溶出するRedisepシリカカラム（３５ｇ）に付して精製し、つづいて０.１％ギ酸含有の水性アセトニトリル（２０−４５％ＭｅＣＮ）で溶出するKromasil KR100-10-C18逆相カラムに付して精製した。この操作により、標記化合物を１,４−ジオキサンからの凍結乾燥により、白色凍結乾燥体（３０％）として得た。
【００５８】
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.４４分（勾配１）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６３。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７.６３（ｄ，１Ｈ）、７.２５−７.１５（ｍ，４Ｈ）、７.０５（ｄ，１Ｈ）、６.７９（ｄ，１Ｈ）、５.９６（ｑ，１Ｈ）、５.３５（ｓ，１Ｈ）、４.０７（ｄｄ，１Ｈ）、３.８８（ｄ，１Ｈ）、３.１９−２.８８（ｍ，４Ｈ）、２.８５（ｄ，３Ｈ）、２.８１−２.７３（ｍ，１Ｈ）、２.５６（ｓ，３Ｈ）、２.５５（ｓ，３Ｈ）、１.８２−１.６７（ｍ，２Ｈ）、１.２０−１.０８（ｍ，１Ｈ）、０.９９（ｄ，３Ｈ）、０.９０（ｔ，３Ｈ）。
【００５９】
同様にして、中間体２およびジメチルアミン（テトラヒドロ中２.０Ｍ）より次の化合物を調製した：
実施例２
【化１６】
0005405019.tif 000017
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミドを、１,４−ジオキサンからの凍結乾燥により、白色凍結乾燥体（３３％）として得た。
【００６０】
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.６９分（勾配１）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７７
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７.４９（ｄ，１Ｈ）、７.２７−７.１５（ｍ，４Ｈ）、７.０８（ｄ，１Ｈ）、６.６６（ｓ，１Ｈ）、６.３０（ｄ，１Ｈ）、４.１０（ｄｄ，１Ｈ）、４.０５（ｄ，１Ｈ）、３.２２−３.０８（ｍ，３Ｈ）、２.９９−２.８４（ｍ，４Ｈ）、２.８０−２.７０（ｍ，４Ｈ）、２.６３（ｓ，３Ｈ）、２.５８（ｓ，３Ｈ）、１.６５−１.５３（ｍ，１Ｈ）、０.９７−０.７８（ｍ，２Ｈ）、０.７１（ｔ，３Ｈ）、０.４６（ｄ，３Ｈ）。
【００６１】
同様にして、中間体２およびモルホリン（３.７ミリモル）より次の化合物を調製した：
実施例３（方法Ａ）
【化１７】
0005405019.tif 000018
（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオンを、１,４−ジオキサンからの凍結乾燥により、白色凍結乾燥体（８８ｍｇ、２３％）として得た。
【００６２】
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.７０分（勾配２）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１９
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７.４９（ｄ，１Ｈ）、７.２７−７.１５（ｍ，４Ｈ）、７.１０（ｄ，１Ｈ）、６.６８（ｓ，１Ｈ）、６.４０（ｄ，１Ｈ）、４.１０（ｄｄ，１Ｈ）、４.０１（ｄ，１Ｈ）、３.７４−３.５２（ｍ，５Ｈ）、３.２８−３.０７（ｍ，５Ｈ）、２.９７−２.８４（ｍ，２Ｈ）、２.７９−２.７１（ｍ，１Ｈ）、２.６２（ｓ，３Ｈ）、２.５９（ｓ，３Ｈ）、１.６５−１.５３（ｍ，１Ｈ）、０.９８−０.８０（ｍ，２Ｈ）、０.７０（ｔ，３Ｈ）、０.４５（ｄ，３Ｈ）。
【００６３】
実施例３（方法Ｂ）
【化１８】
0005405019.tif 000019
（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオン
【００６４】
｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）酢酸・塩酸塩（５.０ｇ、１０.３ミリモル）（中間体５）の乾燥ジクロロメタン（５０ｍｌ）中懸濁液を１,１−カルボニルジイミダゾール（２.６ｇ、１６ミリモル）で処理し、該反応混合物を窒素下で１８時間攪拌した。モルホリン（４.８ｍｌ、５５ミリモル）を加え、得られた溶液を窒素下で１８時間放置した。溶媒を真空下で除去し、残渣を酢酸エチルと水の間で分離した。有機相をブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を真空下で除去し、残渣をジクロロメタンに溶かした。これを塩基性アルミナカートリッジ（２４０ｇ）に充填し、ジエチルエーテル中０−７.５％メタノール（９ＣＶ）、ジエチルエーテル中７.５−１０％メタノール（１ＣＶ）およびジエチルエーテル中１０％メタノール（１ＣＶ）の勾配を用いて溶出した。必要とされるフラクションを合し、真空下で蒸発させて（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（２,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオンを白色固体として得た（２.４ｇ、４５％）。
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.７２分（勾配２）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１９
【００６５】
実施例４
【化１９】
0005405019.tif 000020
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミド
【００６６】
２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシフェニル）アセトアミド（中間体４）（０.７００ｇ）および１,１'−カルボニルジイミダゾール（０.３２４ｇ）を乾燥ジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶かし、２０時間放置した。この溶液の半分（１０ｍｌ）に、ジメチルアミンのテトラヒドロフラン（５ｍｌ）中２.０Ｍ溶液を添加し、その反応混合物を３日間放置した。該反応混合物をジクロロメタンと炭酸水素ナトリウム飽和水溶液の間に分離させた。有機相を疎水性フリットに通し、真空下で蒸発させた。残渣をシリカカートリッジ（１０ｇ）に充填し、酢酸エチルで、ついで酢酸エチル５％メタノールで溶出した。必要とされるフラクションを真空下で蒸発させ、残渣をさらにMass Directed AutoPrepを用いて精製した。この操作により（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ,Ｎ−ジメチルエタンアミド（０.１０ｇ、３２％）を白色泡沫体として得た。
【００６７】
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.８２分（勾配１）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７７
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８.３２（ｓ，１Ｈ）、７.２６−７.１５（ｍ，４Ｈ）、７.０８（ｓ，１Ｈ）、６.７１（ｓ，１Ｈ）、６.１６（ｄ，１Ｈ）、４.１７（ｄ，１Ｈ）、４.１０（ｄｄ，１Ｈ）、３.２２−３.０６（ｍ，３Ｈ）、２.９８（ｓ，３Ｈ）、２.９１（ｍ，１Ｈ）、２.７４（ｄｄ，１Ｈ）、２.６７（ｓ，３Ｈ）、２.５７（ｓ，３Ｈ）、２.３９（ｓ，３Ｈ）、１.５６（ｍ，１Ｈ）、０.９３（ｍ，１Ｈ）、０.８５（ｍ，１Ｈ）、０.６８（ｔ，３Ｈ）、０.４５（ｄ，３Ｈ）。
【００６８】
同様にして、中間体４とメチルアミンより、次の化合物を調製した：
実施例５
【化２０】
0005405019.tif 000021
（２Ｒ）−２−｛（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ジオキソ−１−ピペラジニル｝−２−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−Ｎ−メチルエタンアミド
【００６９】
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.６０分（勾配１）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６３
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８.４８（ｓ，１Ｈ）、７.２５−７.１４（ｍ，４Ｈ）、７.０４（ｓ，１Ｈ）、６.７２（ｄ，１Ｈ）、６.０７（ｑ，１Ｈ）、５.４５（ｓ，１Ｈ）、４.０７（ｄｄ，１Ｈ）、３.９０（ｄ，１Ｈ）、３.１７−３.０４（ｍ，３Ｈ）、２.９２（ｍ，１Ｈ）、２.８６（ｄ，３Ｈ）、２.７６（ｄｄ，１Ｈ）、２.５３（ｓ，３Ｈ）、２.３３（ｓ，３Ｈ）、１.７０（ｍ，２Ｈ）、１.１２（ｍ，１Ｈ）、０.９４（ｄ，３Ｈ）、０.８７（ｔ，３Ｈ）。
【００７０】
同様にして、中間体４とモルホリンより、次の化合物を調製した：
実施例６
【化２１】
0005405019.tif 000022
（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−１−［（１Ｒ）−１−（４,６−ジメチル−３−ピリジニル）−２−（４−モルホリニル）−２−オキソエチル］−６−［（１Ｓ）−１−メチルプロピル］−２,５−ピペラジンジオン
【００７１】
ＨＰＬＣ  Ｒｔ＝２.９４分（勾配２）；ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１９
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ８.３４（ｓ，１Ｈ）、７.２５−７.１５（ｍ，４Ｈ）、７.０９（ｓ，１Ｈ）、６.７１（ｓ，１Ｈ）、６.２１（ｄ，１Ｈ）、４.１４−４.０７（ｍ，２Ｈ）、３.７３−３.４７（ｍ，５Ｈ）、３.２３−３.０５（ｍ，５Ｈ）、２.９５−２.８３（ｍ，２Ｈ）、２.７４（ｄｄ，１Ｈ）、２.５８（ｓ，３Ｈ）、２.３８（ｓ，３Ｈ）、１.５６（ｍ，１Ｈ）、０.９４（ｍ，１Ｈ）、０.８６（ｍ，１Ｈ）、０.６８（ｔ，３Ｈ）、０.４４（ｄ，３Ｈ）。
【００７２】
生物学的活性
本発明の実施例１ないし６を以下に記載のあらゆるアッセイにて試験した。各化合物の結果を以下の表１に示す。表１はまた比較のための化合物Ｘを包含する。
【００７３】
アッセイ１
ＦＬＩＰＲを用いるヒトオキシトシン−１受容体でのアンタゴニストアフィニティの測定
細胞培養
組換えヒトオキシトシン１（ｈＯＴ）受容体を安定して発現する接着チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を、１０％熱不活化ウシ胎仔血清（Gibco／Invitrogen、カタログ番号０１０００−１４７）、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン（Gibco／Invitrogen、カタログ番号２５０３０−０２４）および０．２ｍｇ／ｍｌ  Ｇ４１８（Gibco／Invitrogen、カタログ番号１０１３１−０２７）を補足したＤＭＥＭ：Ｆ１２培地（Sigma、カタログ番号Ｄ６４２１）の培養液に維持した。細胞を、９５％：５％の空気：ＣＯ２の下、３７℃で単層として増殖させ、TrypLE（登録商標）Express（Gibco／Invitrogen、カタログ番号１２６０４−０１３）を用いて３−４日毎に継代させた。
【００７４】
ＦＬＩＰＲＴＭを用いる［Ｃａ２＋］ｉの測定
ＣＨＯ−ｈＯＴ細胞を、ウェル当たり１００００細胞の密度で上記した培地中のブラックウォールクレアベースの３８４−ウェルのプレート（Ｎｕｎｃ）に播種し、（９５％：５％の空気：ＣＯ２、３７℃）を一夜維持した。培地を除去した後、細胞を３７℃で１時間、プロベネシド（０．７ｍｇ／ｍｌ）、細胞質カルシウム指示薬であるＦｌｕｏ−４（４μＭ；Teflabs、USA）および消光剤であるブリリアントブラック（Brilliant Black）（２５０μＭ；Molecular Devices、UK）含有のTyroad培地（NaCl、145mM；KCl、2.5mM；HEPES、10mM；Glucose、10mM；MgCl2、1.2mM；CaCl2、1.5mM）にてインキュベートした。ついで、細胞を３７℃でさらに３０分間、バッファーだけか、ＯＴアンタゴニスト含有のバッファーと一緒にインキュベートし、ＦＬＩＰＲＴＭ（Molecular Devices、UK）に置き、最大下濃度のオキシトシン（ＥＣ８０）を添加する前後での細胞蛍光（λｅｘ＝４８８ｎｍ、λＥＭ＝５４０ｎｍ）をモニター観察した。
【００７５】
データ解析
ＦＬＩＰＲを用いる機能応答をActivity Base Version5.0.10を用いて解析した。
【００７６】
アッセイ２
オキシトシン結合アッセイ
調製
ヒト組換えオキシトシン受容体を発現するＣＨＯ細胞より膜を調製した。該膜調製物を使用まで−７０℃でアリコートにて凍結させた。
膜調製物は使用されるまで−７０℃でアリコートにて凍結された。
【００７７】
結合アッセイプロトコル
１μＭの標識されていないオキシトシンの存在しない（全結合）または存在する（非特異結合）状態にて約２．４ｎＭの［３Ｈ］−オキシトシンと、増加する濃度の実施例１ないし６の化合物あるいは比較化合物とを含有する２００μｌのアッセイバッファー（５０ｍＭ  トリス、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２および０.１％のウシ血清アルブミン、ｐＨ７.５）中で膜（約５０μｇ）をインキュベートした。インキュベーションを室温で６０分間行った。反応を３ｍｌの氷冷バッファーで停止させ、０．３％ポリエチレンイミンに予浸させた、Whatman GF／Cフィルターペーパーを介して濾過した。該フィルターをBrandel細胞ハーベスターを用いて３ｍｌのバッファーで４回洗浄した。フィルターを３ｍｌのReady Safeシンチレーション流体（Beckman）中で計数した。
特異結合は全結合の約９０％を示した。
【００７８】
データ解析
非線形回帰分析（GraphPad）を用いて競合結合実験よりＩＣ５０値を測定し、ChengおよびPrusoff、１９７４の方法を用いてＫｉに変換した。データは平均値で報告されている。
【００７９】
アッセイ３
ミクロソームにおけるインビトロ固有クリアランスの測定
インキュベーションに用いるためのＮＡＤＰ再生バッファーをアッセイの日に新たに調製した。それは、２％炭酸水素ナトリウム１ｍＬに付き、７．８ｍｇのグルコース−６−ホスフェート（一ナトリウム塩）、１．７ｍｇのＮＡＤＰおよび６ユニットのグルコース−６−ホスフェート・デヒドロゲナーゼを含有した。ミクロソーム（ヒト、女性；カニクイザル、雌；イヌ、雌；ラット、雌）をｐＨ７．４のリン酸バッファー中にて調製し、それは１ｍＬ当たり０.６２５ｍｇの蛋白を含有した。特記しない限り、その後のすべての工程はTecan Genesis 150/8 RSPで行われた。１.２５ｍＭの該化合物のストック溶液をアセトニトリル／水（１：１）中に調製した。２５μｌの１.２５ｍＭのストック溶液を６００μｌのアセトニトリル／水（１：１）に加え、５０μＭの溶液を得た。その５０μＭの溶液（１０μＬ）をマイクロプレート（Porvair、９６個の深底ウェル、四角型）にある各種のミクロソーム（７９０μＬ）に添加した。
【００８０】
該化合物を含有する４００μＬのミクロソーム溶液をマイクロプレート（Porvair、９６個の深底ウェル、丸型）に移し、インキュベーションを開始する前に３７℃で５分間予め加温した。インキュベーションはすべて１００μＬのＮＡＤＰ再生システムを予め加温したミクロソームに添加することで開始された。Techne加熱ブロックにて該混合物を３７℃でインキュベートした。インキュベーションを０、３、６、１２および３０分行った後、２０μＬのアリコートを取り、内部標体含有の１００μＬのアセトニトリルに添加した。
【００８１】
代謝率を測定するために、インキュベーションを０．５μＭの化合物の濃度および０．５ｍｇ／ｍＬの蛋白の濃度で行った。該インキュベーションにおける溶媒の濃度は０．５％であった。
試験化合物の濃度をＬＣ／ＭＳ／ＭＳで測定した；結果は分析物：内部標体のピーク面積割合として報告された。
喪失速度は指数関数的減衰（single exponential decay）をエクセルを用いて濃度−時間曲線に適合させることで算定され、固有クリアランスは以下の式を用いて算定された：
【数１】
0005405019.tif 000023
【００８２】
結果
本発明の実施例１ないし６およびまた比較化合物［Ｘ＝（２Ｒ）−２−［（３Ｒ,６Ｒ）−３−（２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）−６−イソブチル−２,５−ジオキソピペラジン−１−イル］−Ｎ,Ｎ−ジメチル−２−（６−メチルピリジン−３−イル）エタンアミド（WＯ  ０３／０５３４４３の実施例２０９）］を上記アッセイにて試験した。
【００８３】
アッセイ１および２にて試験した場合の比較化合物Ｘは、本発明の化合物１ないし６が示す効能と同様の効能を示した。実際、これらの化合物は、各々、８．１と９．２の間のｆｐＫｉ（アッセイ１）および８．８と１０．５の間のｐＫｉ（アッセイ２）を示した。
しかし、本発明の化合物は、比較化合物Ｘと比較した場合、ミクロソームにおけるインビトロ固有クリアランス（アッセイ３）にて意外な改善を示した。
【００８４】
【表１】
0005405019.tif 000024
【００８５】
表１の符号
＋  １−８ｍｌ／分／ｍｇに相当する
＋＋  ９−１５ｍｌ／分／ｍｇに相当する
＋＋＋  １６−２０ｍｌ／分／ｍｇに相当する
＋＋＋＋  ２１−３０ｍｌ／分／ｍｇに相当する
＋＋＋＋＋  ＞３１ｍｌ／分／ｍｇに相当する