(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｎ−３系高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むリン脂質を１〜５０００ｍｇ／５０ｋｇ体重／日で投与するように、有効成分として含有する、減退した性機能の回復に使用するための性機能改善剤（ただし、飲食品として使用する場合を除く）。
【請求項２】
ｎ−３系高度不飽和脂肪酸がエイコサペンタエン酸又はドコサヘキサエン酸である、請求項１に記載の性機能改善剤。
【請求項３】
リン脂質がホスファチジルセリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジン酸、ホスファチジルグリセロール、及びホスファチジルイノシトールからなる群から選ばれる、請求項１又は２に記載の性機能改善剤。
【請求項４】
オキアミ油を有効成分として使用する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の性機能改善剤。
【請求項５】
精製されたオキアミ油を有効成分として使用する、請求項４に記載の性機能改善剤。
【請求項６】
オキアミ油がオキアミの熱凝固物を経て精製されたオキアミ油である、請求項５に記載の性機能改善剤。
【請求項７】
オキアミ油を１〜５０００ｍｇ／５０ｋｇ体重／日で対象に投与するための、請求項４〜６のいずれか１項に記載の性機能改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂質を含有する性機能改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代社会における晩婚化に伴い、‘不妊症’に悩まされるカップルが増えており、その割合は１０組中１組にまで増加している。不妊症において、男性側に問題があるのは４０％以上であると言われている。主な一原因としては、精子減少症、欠精子症、精子無力症、無精子症、或いは精子の奇形、いわゆる「造精機能障害」が挙げられている。また、高齢男性に限らず、成人男性全体の性機能の減退も社会的な問題となっている。特に近年不妊症並びに性機能減退の一因とされる病気や悩み（例えば、メタボリックシンドローム、ストレス等）を有する人の割合も上昇している。このようなことから、不妊症や性機能を改善する手段が求められている。
【０００３】
性機能に関連する報告がいくつか存在する。特開平１０−２４５３４０には、コルディセプス・シネンシスの培養菌糸体の熱水抽出物を有効成分とする、強精強壮作用を有する組成物が記載されている（特許文献１）。特開２００４−０００１７１には、マカのアルコール抽出物を含有する機能性食品が、生殖機能低下の抑制に有効と考えられる成長ホルモンの血中濃度を上昇させることが記載されている（特許文献２）。特開２００５−３０６７５４には、マカ由来のベンジル類グルコシノレート及びベンジル類イソチオシアネートを含有する組成物等が、血中テストステロン値を上昇させることによって男性性機能回復作用を有することが記載されている（特許文献３）。特開２００７−１１２７８２には、ベンジル類グルコシノレート及び／又はベンジル類イソチオシアネートを含有する組成物が、血中のエストロゲン濃度を増加させることによって、月経不順や不妊等を改善し得ることが記載されている（特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平１０−２４５３４０
【特許文献２】特開２００４−０００１７１
【特許文献３】特開２００５−３０６７５４
【特許文献４】特開２００７−１１２７８２
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかし、これまでに報告されている組成物や市販されている商品は、その殆どが性機能を強化することを目的とする精力増強系のものであり、体を構成する成分に近い物質を用いることによって、栄養機能の側面から性機能の減退を抑制するもの、又は減退した性機能を回復させるものは知られていない。本発明は、性機能改善剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記の事情に鑑み、本発明者は脂質の栄養機能に注目した。鋭意検討の結果、エイコサペンタ塩酸（ＥＰＡ）やドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）等のｎ−３系高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含む脂質やリン脂質に性機能改善効果があることを見出した。かかる知見に基づいて、本発明を完成させた。
【０００７】
本発明は以下の（１）〜（１２）の性機能改善剤を提供する。
【０００８】
（１）リン脂質を有効成分として含有する、性機能改善剤。
【０００９】
（２）多価不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むリン脂質を含有する、性機能改善剤。
【００１０】
（３）高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むリン脂質を含有する、性機能改善剤。
【００１１】
（４）リン脂質が高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むリン脂質からなる、（１）〜（３）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００１２】
（５）高度不飽和脂肪酸がｎ−３系高度不飽和脂肪酸である、（１）〜（４）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００１３】
（６）ｎ−３系高度不飽和脂肪酸がエイコサペンタエン酸又はドコサヘキサエン酸である、（５）に記載の性機能改善剤。
【００１４】
（７）リン脂質がホスファチジルセリン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジン酸、ホスファチジルグリセロール、及びホスファチジルイノシトールからなる群から選ばれる、（１）〜（６）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００１５】
（８）減退した性機能の回復に使用される、（１）〜（７）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００１６】
（９）生殖機能の改善に使用される、（１）〜（８）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００１７】
（１０）大豆リン脂質を有効成分として使用する、（１）〜（９）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００１８】
（１１）精製されたオキアミ油を有効成分として使用する、（１）〜（９）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００１９】
（１２）リン脂質を１〜５０００ｍｇ／５０ｋｇ体重／日で対象に投与するための、（１）〜（１１）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００２０】
本発明の別の側面によれば、以下の（１３）〜（１８）の方法が提供される。
【００２１】
（１３）（１）〜（１２）のいずれかに記載の性機能改善剤を動物に経口投与することを含む、性機能の改善方法。
【００２２】
（１４）（１）〜（１２）のいずれかに記載の性機能改善剤を動物に経口投与することを含む、減退した性機能の回復方法。
【００２３】
（１５）（１）〜（１２）のいずれかに記載の性機能改善剤を動物に経口投与することを含む、生殖機能の改善方法。
【００２４】
（１６）（１）〜（１２）のいずれかに記載の性機能改善剤をヒト以外の動物に経口投与することを含む、性機能の改善方法。
【００２５】
（１７）（１）〜（１２）のいずれかに記載の性機能改善剤をヒト以外の動物に経口投与することを含む、減退した性機能の回復方法。
【００２６】
（１８）（１）〜（１２）のいずれかに記載の性機能改善剤をヒト以外の動物に経口投与することを含む、生殖機能の改善方法。
【００２７】
本発明の別の側面によれば、以下の（１９）及び（２１）の使用が提供される。
【００２８】
（１９）性機能改善のための医薬の製造における、リン脂質の使用。
【００２９】
（２０）性機能改善が減退した性機能の回復である、（１９）に記載のリン脂質の使用。
【００３０】
（２１）性機能改善が生殖機能の改善である、（１９）又は（２０）に記載のリン脂質の使用。
【００３１】
本発明の別の側面によれば、以下の（２２）の食品、飼料、又は医薬品を提供がされる。
【００３２】
（１）〜（１２）のいずれかに記載の性機能改善剤を含有する、食品、飼料、又は医薬品。
【００３３】
本発明の別の側面によれば、以下の（２３）〜（２９）の性機能改善剤が提供される。
【００３４】
（２３）大豆リン脂質を有効成分として含有する、性機能改善剤。
【００３５】
（２４）オキアミ油を有効成分として含有する、性機能改善剤。
【００３６】
（２５）オキアミ油が精製されたオキアミ油である、（２４）に記載の性機能改善剤。
【００３７】
（２６）オキアミ油がオキアミの熱凝固物を経て精製されたオキアミ油である、（２４）又は（２５）に記載の性機能改善剤。
【００３８】
（２７）減退した性機能の回復に使用される、（２３）〜（２６）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００３９】
（２８）生殖機能の改善に使用される、請求項２３〜２７のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００４０】
（２９）リン脂質又はオキアミ油を１〜５０００ｍｇ／５０ｋｇ体重／日で対象に投与するための、（２３）〜（２８）のいずれかに記載の性機能改善剤。
【００４１】
本発明別の側面によれば、以下の（３０）〜（３５）の方法が提供される。
【００４２】
（３０）（２３）〜（２９）のいずれかに記載の性機能改善剤を動物に経口投与することを含む、性機能の改善方法。
【００４３】
（３１）（２３）〜（２９）のいずれかに記載の性機能改善剤を動物に経口投与することを含む、減退した性機能の回復方法。
【００４４】
（３２）（２３）〜（２９）のいずれかに記載の性機能改善剤を動物に経口投与することを含む、生殖機能の改善方法。
【００４５】
（３３）（２３）〜（２９）のいずれかに記載の性機能改善剤をヒト以外の動物に経口投与することを含む、性機能の改善方法。
【００４６】
（３４）（２３）〜（２９）のいずれかに記載の性機能改善剤をヒト以外の動物に経口投与することを含む、減退した性機能の回復方法。
【００４７】
（３５）（２３）〜（２９）のいずれかに記載の性機能改善剤をヒト以外の動物に経口投与することを含む、生殖機能の改善方法。
【００４８】
本発明の別の側面によれば、以下の（３６）〜（３９）の使用が提供される。
【００４９】
（３６）性機能改善のための医薬の製造における、大豆リン脂質の使用。
【００５０】
（３７）性機能改善のための医薬の製造における、オキアミ油の使用。
【００５１】
（３８）性機能改善が減退した性機能の回復である、（３６）又は（３７）に記載の使用。
【００５２】
（３９）性機能改善が生殖機能の改善である、（３６）〜（３８）のいずれかに記載の使用。
【００５３】
本発明の別の側面によれば、以下の（４０）の食品、飼料、又は医薬品が提供される。
【００５４】
（４０）（２３）〜（２９）のいずれかに記載の性機能改善剤を含有する、食品、飼料、又は医薬品。
【発明の効果】
【００５５】
本発明によれば、動物の性機能が改善される。特に、加齢によって減退した性機能を回復及び／又は加齢による性機能の減退を抑制することにおいて有益である。さらに、本発明は加齢による生殖機能を改善することにおいて有益である。本発明は血液中の性ホルモン濃度に影響を及ぼすことなくその効果を発揮することが示されている。このような特性は、強壮的な効果を有する既存の精力増強剤とは大きく異なる。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】試験例１における投与群ごとのマウンティング潜伏期間（マウント潜伏期間）を計測した結果を示す図である。Ｃｏｎｔ．：性機能改善剤を投与されていない、退勢した高齢のオスの動物；Ｂａｓｅ：正常な性機能を有する若齢の動物；Ｋ−ＰＳＬ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図２】試験例１における投与群ごとのマウンティング回数（マウント回数）を計測した結果を示す図である。Ｃｏｎｔ．：性機能改善剤を投与されていない、退勢した高齢のオスの動物；Ｂａｓｅ：正常な性機能を有する若齢の動物；Ｋ−ＰＳＬ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図３】試験例１における投与群ごとの交尾潜伏期間（挿入潜伏期間）を計測した結果を示す図である。Ｃｏｎｔ．：性機能改善剤を投与されていない、退勢した高齢のオスの動物；Ｂａｓｅ：正常な性機能を有する若齢の動物；Ｋ−ＰＳＬ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図４】試験例１における投与群ごとの交尾回数（挿入回数）を計測した結果を示す図である。Ｃｏｎｔ．：性機能改善剤を投与されていない、退勢した高齢のオスの動物；Ｂａｓｅ：正常な性機能を有する若齢の動物；Ｋ−ＰＳＬ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図５】試験例１における投与群ごとの交尾率（挿入能力）の計算結果を示す図である。Ｃｏｎｔ．：性機能改善剤を投与されていない、退勢した高齢のオスの動物；Ｂａｓｅ：正常な性機能を有する若齢の動物；Ｋ−ＰＳＬ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図６】試験例１における投与群ごとの睾丸（＋副睾丸）の重量を計測した結果を示す図である。Ｃｏｎｔ．：性機能改善剤を投与されていない、退勢した高齢のオスの動物；Ｋ−ＰＳＬ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図７】試験例１における投与群ごとの精嚢（＋前立腺）の重量を計測した結果を示す図である。Ｃｏｎｔ．：性機能改善剤を投与されていない、退勢した高齢のオスの動物；Ｋ−ＰＳＬ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図８】試験例２における精巣（睾丸）、特に曲精細管の病理切片を示す図である。（Ａ）正常群（Ｂａｓｅ）、（Ｂ）高齢群（Ｃｏｎｔ．）、（Ｃ）Ｋ−ＰＣ低投与群（Ｋ−ＰＣＬ）、（Ｄ）Ｋ−ＰＣ中投与群（Ｋ−ＰＣＭ）、（Ｅ）Ｋ−ＰＣ高投与群（Ｋ−ＰＣＨ）。
【図９】試験例２における各群のマウスより得られた曲精細管の厚みを示す図である。Ｂａｓｅ：正常群、Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群。
【図１０】試験例３における各群のマウスより得られた精子数を示す図である。Ｂａｓｅ：正常群、Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群。
【図１１】試験例３における各群のマウスより得られた運動精子率を示す図である。Ｂａｓｅ：正常群、Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群。
【図１２】試験例３における各群のマウスより得られた前進精子率を示す図である。Ｂａｓｅ：正常群、Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群。
【図１３】試験例３における各群のマウスより得られた精巣上体の重量を示す図である。Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群。
【図１４】試験例３における各群のマウスより得られた前立腺の重量を示す図である。Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群。
【図１５】試験例４における投与群ごとの血液中のＩｎｈｉｂｉｎ  Ｂ濃度の比較を示す図である。Ｂａｓｅ：正常群、Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群。
【図１６】試験例４における投与群ごとの血液中のＦＳＨ（Follicle-Stimulating Hormone、卵胞刺激ホルモン）濃度の比較を示す図である。Ｂａｓｅ：正常群、Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ高投与群、Ｋ−ＰＳＭ：Ｋ−ＰＳ中投与群、Ｋ−ＰＳＨ：Ｋ−ＰＳ低投与群、Ｋ−ＰＣＨ：Ｋ−ＰＣ高投与群、Ｋ−ＰＣＭ：Ｋ−ＰＣ中投与群、Ｋ−ＰＣＬ：Ｋ−ＰＣ低投与群。
【図１７】試験例５における投与群ごとの精子数の比較を示す図である。Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｆ−Ｏｉｌ：魚油、Ｓ−ＰＣ：大豆ＰＣ、Ｆ＋Ｓ：魚油＋大豆ＰＣ。
【図１８】試験例５における投与群ごとの運動精子率の比較を示す図である。Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｆ−Ｏｉｌ：魚油、Ｓ−ＰＣ：大豆ＰＣ、Ｆ＋Ｓ：魚油＋大豆ＰＣ。
【図１９】試験例５における投与群ごとの前進精子率の比較を示す図である。Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｆ−Ｏｉｌ：魚油、Ｓ−ＰＣ：大豆ＰＣ、Ｆ＋Ｓ：魚油＋大豆ＰＣ。
【図２０】試験例５における投与群ごとの睾丸の重量の比較を示す図である。Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｆ−Ｏｉｌ：魚油、Ｓ−ＰＣ：大豆ＰＣ、Ｆ＋Ｓ：魚油＋大豆ＰＣ。
【図２１】試験例５における投与群ごとの副睾丸の重量の比較を示す図である。Ｃｏｎｔ．：高齢群、Ｆ−Ｏｉｌ：魚油、Ｓ−ＰＣ：大豆ＰＣ、Ｆ＋Ｓ：魚油＋大豆ＰＣ。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
以下、本発明をより具体的に記載する。
【００５８】
本発明は、リン脂質を有効成分として含有する性機能改善剤を提供する。そして本発明は、多価不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むリン脂質を有効成分として含有する性機能改善剤を提供する。さらに本発明は、高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含む脂質を有効成分として含有する性機能改善剤を提供する。本発明の性機能改善剤は、脂質を含有する大豆由来の成分、又はオキアミ由来の成分、例えば、オキアミの粉砕物、オキアミミール、オキアミの剥き身等を含有してもよい。
【００５９】
本発明の性機能改善剤は、有効量のリン脂質又は脂質を含有する。ここでいう有効量とは、性機能を改善させるために必要な量をいい、例えば、動物の体重１ｋｇあたり、１日あたり、１〜５０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは２．５〜２５００ｍｇ／ｋｇ、特に好ましくは１０〜１０００ｍｇ／ｋｇである。特にヒト成人の場合、有効量は１日あたり１〜１００００ｍｇ／５０ｋｇ体重、好ましくは２．５〜５０００ｍｇ／５０ｋｇ体重、更に好ましくは５〜３０００ｍｇ／５０ｋｇ体重、特に好ましくは１０〜１０００ｍｇ／５０ｋｇ体重である。ヒト成人の場合は、より顕著な性機能改善効果のためにはより多くの量を摂取するほうが好ましいが、多すぎると油っぽくなりすぎてしまい、吸収が遅れる、消化不良になる、胃腸がもたれる、摂食を好まなくなる、などの好ましくない性質が生じる。これらの摂取量は１回当たりの摂取量としてもよく、数回、例えば２回又は３回当たりの摂取量としてもよい。
【００６０】
タンパク質、核酸、及び糖類（糖質）と同様に、脂質は生体の主要な構成成分である。そして、すべての生体系において、脂質は、エネルギー源としての機能を果たすだけでなく、生命体の基本単位である細胞の膜構造を構成する、重要な化合物群である。述べた通り、脂質は、生体の重要な成分であり、アルコールと脂肪酸のエステル結合を有している。アルコールとしては直鎖アルコールの他グリセロール（グリセリン）、ステロールなどが挙げられる。脂肪酸としては多様な飽和脂肪酸または不飽和脂肪酸が挙げられる。脂質のうち、アルコールとしてグリセロールの水酸基と脂肪酸のカルボキシル基のエステル結合を有する脂質を生体脂質という。生体脂質としては、グリセリドとリン脂質が挙げられる。
【００６１】
グリセリドとしては、グリセロールの３つの水酸基の全てが脂肪酸とエステル結合したトリアシルグリセロール（トリグリセリド）、グリセロールの３つの水酸基のうち２つが脂肪酸とエステル結合し、他の１つの水酸基がそのままであるジアシルグリセロール（ジグリセリド）、グリセロールの３つの水酸基のうち１つが脂肪酸とエステル結合し、他の２つの水酸基がそのままであるモノアシルグリセロール（モノグリセリド）が挙げられる。
【００６２】
リン脂質とは、グリセロールの３つの水酸基のうち少なくとも１つが脂肪酸とエステル結合し、他の１つの水酸基がリン酸と共有結合しているものをいう。リン酸は通常、グリセロールの１位又は３位の水酸基と共有結合する。生体脂質としてはトリアシルグリセロールとリン脂質が量も多く、特に重要である。
【００６３】
リン脂質は、細胞膜を構成する主要成分として知られており、親水性のリン酸部及び疎水性の脂肪酸部を有する。リン脂質は、グリセロール骨格の１位と２位に脂肪酸部を有するジアシルグリセロリン脂質、及びリゾアシルグリセロリン脂質に分けられる。リゾアシルグリセロリン脂質としては、グリセロール骨格の１位のみに脂肪酸部を有する１−アシルグリセロリゾリン脂質、及びグリセロール骨格の２位のみに脂肪酸部を有する２−アシルグリセロリゾリン脂質に分けられる。本明細書でいうリン脂質には、これらのいずれも包含されるが、ジアシルグリセロリン脂質が特に好ましい。ジアシルグリセロリン脂質としては、例えばホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、ホスファチジルグリセロール（ＰＧ）、カルジオリピン（ＣＬ）、ホスファチジン酸（ＰＡ）、及びそれらの２種以上の混合物、好ましくはＰＣ、ＰＥ、ＰＳ、ＰＩ、ＰＡ、及びそれらの２種以上の混合物、特に好ましくはＰＣ、ＰＳ、及びそれらの混合物が挙げられる。リゾアシルグリセロリン脂質としては、例えば１−又は２−リゾＰＣ、１−又は２−リゾＰＥ、１−又は２−リゾＰＳ、１−又は２−リゾＰＩ、１−又は２−リゾＰＧ、１−又は２−リゾＣＬ、１−又は２−リゾＰＡ、及びそれらの２種以上の混合物、好ましくは１−又は２−リゾＰＣ、１−又は２−リゾＰＥ、１−又は２−リゾＰＳ、１−又は２−リゾＰＩ、１−又は２−リゾＰＡ、及びそれらの２種以上の混合物、特に好ましくは１−又は２−リゾＰＣ、１−又は２−リゾＰＳ、及びそれらの混合物が挙げられる。
【００６４】
本発明に係る脂質は、脂肪酸部に多価不飽和脂肪酸を有する。本明細書でいう多価不飽和脂肪酸とは、二重結合を２つ以上有する脂肪酸をいう。多価不飽和脂肪酸にはリノール酸（１８：２、ＬＡ）及び高度不飽和脂肪酸が包含される。
【００６５】
本発明に係る脂質は、脂肪酸部に高度不飽和脂肪酸を有する。本明細書でいう高度不飽和脂肪酸とは、二重結合を３つ以上有し、炭素数が１８以上、好ましくは２０以上の脂肪酸をいう。高度不飽和脂肪酸としては、ｎ−３系高度不飽和脂肪酸が好ましい。本明細書でいうｎ−３系高度不飽和脂肪酸とは、脂肪酸分子のカルボキシル側とは逆の末端炭素から数えて３番目と４番目の炭素が二重結合している脂肪酸を意味する。そのような脂肪酸として、α−リノレン酸（１８：３、ＡＬＡ）、エイコサペンタエン酸（２０：５、ＥＰＡ）、ドコサペンタエン酸（２２：５、ＤＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（２２：６、ＤＨＡ）等が挙げられ、好ましくはＥＰＡ、及びＤＨＡである。本発明の脂質の構成脂肪酸に占めるｎ−３系高度不飽和脂肪酸の割合は、脂肪酸組成比として例えば１〜１００％、好ましくは１０〜９０％、より好ましくは２０〜８０％である。ｎ−３系高度不飽和脂肪酸は流動性が高いため、脂質中に多く含むほど低温でのより良い物性を与える上で有効である。しかしながら、ｎ−３系高度不飽和脂肪酸は未精製の天然素材には多くても６０％程度しか含まれず、濃度を高くしようとすると濃縮のためのコストがかかることになる。
【００６６】
さらに、ｎ−６系高度不飽和脂肪酸は高度不飽和脂肪酸として好ましい。本明細書でいうｎ−６系高度不飽和とは、脂肪酸分子のカルボキシル側とは逆の末端炭素から数えて６番目と７番目の炭素が二重結合している脂肪酸を意味する。そのような脂肪酸として、γ−リノレン酸（１８：３、ＧＬＡ）、ジホモ−γ−リノレン酸（２０：３、ＤＧＬＡ）、アラキドン酸（２０：４、ＡＡ）等が挙げられ、好ましくはＧＬＡ、及びＡＡである。本発明の脂質の構成脂肪酸に占めるｎ−６系高度不飽和脂肪酸の割合は、脂肪酸組成比として例えば１〜１００％、好ましくは１０〜９０％、より好ましくは２０〜８０％である。ｎ−６系高度不飽和脂肪酸は流動性が高いため、脂質中に多く含むほど低温でのより良い物性を与える上で有効である。
【００６７】
上記のような脂質を含有する素材は、いずれも本発明の脂質として使用することができる。そのような素材としては、例えば、魚介類抽出物、動物抽出物、卵黄抽出物、植物抽出物、菌類抽出物等、具体的にはオキアミ油、魚油、魚抽出物、イカ抽出物、カツオ卵巣抽出物、ｎ−３系高度不飽和脂肪酸を配合した飼料を与えた動物の抽出物又はその動物の卵黄抽出物、大豆抽出物、アマニ油、遺伝子組み換えをした植物の抽出物等、ラビリンチュラ類の抽出物等が挙げられる。特に脂質を多く含む素材として、オキアミ油、イカ抽出物、カツオ卵巣抽出物、大豆抽出物が挙げられる。当該技術分野において一般的に知られている濃縮、抽出、及び／又は精製、配合等の技術を用いることによって、これらの素材中の脂質濃度や純度を任意に調節することができる。例えば、高度不飽和脂肪酸を含むオキアミ油、魚油、アマニ油、大豆油、シソ油と、脂質を含むオキアミ油、植物油（大豆由来リン脂質、ナタネ由来リン脂質）、動物性抽出物（卵黄由来リン脂質）、海洋性抽出物（イカ抽出物由来リン脂質、魚抽出物由来リン脂質、オキアミ抽出物リン脂質）等を適宜配合することによって高度不飽和脂肪酸と脂質をどちらも高い濃度で含む脂質を製造することができる。
【００６８】
一般的に、経口摂取された脂質は、トリアシルグリセロール又はジアシルグリセロールであれば胃リパーゼや膵リパーゼにより遊離脂肪酸とモノアシルグリセロールに、またリン脂質の場合は遊離脂肪酸とリゾアシルグリセロリン脂質、ホスファチジン酸又はリゾホスファチジン酸に加水分解される。これら加水分解物は、胆汁酸とともに胆汁酸ミセルを形成することによって溶解する。小腸上皮細胞は、この胆汁酸ミセルから加水分解物を取り込み、取り込まれた前記加水分解物からトリアシルグリセロールやジアシルグリセロリン脂質が再合成される。従って、遊離の高度不飽和脂肪酸が生体に摂取されると、胆汁酸とのミセル形成を経て小腸上皮細胞に取り込まれ、生体内にあるグリセロール及び／又はリン酸と結合することによって、再度トリアシルグリセロール及び／又はジアシルグリセロリン脂質の構成脂肪酸として取り込まれる。このため、高度不飽和脂肪酸と共にリン脂質又はトリアシルグリセロールを摂取することにより、生体内で再合成されるリン脂質又はトリアシルグリセロールに占める高度不飽和脂肪酸を含有するリン脂質の割合を高めることができ、より高い性機能改善効果を得ることができる。
【００６９】
例えば、高度不飽和脂肪酸と共にリン脂質を摂取させる場合には、それぞれを含有する油脂を適宜配合した脂質を用いてもよいし、高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むリン脂質を用いてもよいが、吸収のしやすさ、物質としての安定性、品質管理のしやすさから高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むリン脂質が特に好ましい。また、高度不飽和脂肪酸と共にトリアシルグリセロールを摂取させる場合には、それぞれを含有する油脂を適宜配合した脂質を用いてもよいし、高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むトリアシルグリセロールを用いてもよいが、吸収のしやすさ、物質としての安定性、品質管理のしやすさから高度不飽和脂肪酸を構成脂肪酸として含むトリアシルグリセロールが特に好ましい。
【００７０】
本発明の性機能改善剤は、オキアミ油に含まれる他の成分、例えばアスタキサンチン、ステロール等を含有していてもよい。アスタキサンチンは、カニやエビなどの甲殻類に一般に見出されるカロテノイドに属する化合物である。アスタキサンチンは遊離の状態で存在していても、エステル結合を介して脂質の状態で存在していてもよい。また、アスタキサンチンを遊離状態で１〜１００００ｐｐｍ、好ましくは５〜５０００ｐｐｍ、より好ましくは１０〜１０００ｐｐｍで性機能改善剤に別途添加してもよい。アスタキサンチンは内在性の抗酸化剤として高度不飽和脂肪酸の安定化に寄与するため、より多く含まれることが好ましい。ただし、アスタキサンチンが多すぎると色や風味の点で問題が生じやすくなる。ステロールは脂質の流動性に寄与し、本発明の性機能改善剤の吸収に寄与する。
【００７１】
本明細書でいうオキアミとは、節足動物門甲殻綱軟甲亜綱に属する節足動物であればよく、節足動物門甲殻綱軟甲亜綱ホンエビ上目オキアミ目に属する節足動物、例えばナンキョクオキアミ（Euphausia superba）、節足動物門甲殻綱軟甲亜綱フクロエビ上目アミ目に属する節足動物、例えば日本近海などで漁獲されるアミ類を含む。ただし漁獲量の安定性、脂質成分の均一性の点から南極オキアミが特に好ましい。本明細書でいうオキアミ由来の脂質は、上記のオキアミから得られるものをいう。
【００７２】
本発明で使用するオキアミ由来の脂質は公知の製造方法により入手することができる。例えばＷＯ２０００／０２３５４６Ａ１、ＷＯ２００９／０２７６９２Ａ１、ＷＯ２０１０／０３５７４９Ａ１、又はＷＯ２０１０／０３５７５０Ａ１等に記載された公知の方法を参照して製造することができる。少なくとも、当該国際公開公報に記載された方法によって製造することのできる脂質は、本発明において、本発明において性機能改善剤として好ましく用いることができる。
【００７３】
本発明の性機能改善剤は、例えば上記の国際公開公報に記載された方法に従って、オキアミ由来の原料としての固形分から適切な有機溶媒を用いて抽出することによって得ることができる。適切な有機溶媒としては、例えばメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、プロピレングリコール、ブチレングリコール等のアルコール類、酢酸メチル、酢酸エチル、アセトン、クロロホルム、トルエン、ペンタン、ヘキサン、シクロヘキサン等の単独あるいは２種以上の組み合わせが挙げられる。その際、溶媒の混合比、あるいは原料と溶媒の比率は任意に設定することができる。
【００７４】
上記オキアミ由来の原料としての固形分は、例えば乾燥物、ミール、生のオキアミ、冷凍のオキアミの他、オキアミ全体又はその部分を圧搾することにより圧搾液を得、この圧搾液を加熱して固形分と水溶性成分を分離させることによって得ることができる。当該圧搾においては、一般的に使用される機器を用いることができ、例えば油圧式圧搾機、スクリュープレス、採肉機、プレス脱水機、遠心分離機等、あるいはこれらの組み合わせを用いることができる。
【００７５】
上記圧搾液は、大気圧条件下、加圧条件下、又は減圧条件下において、５０℃以上、好ましくは７０〜１５０℃、特に好ましくは８５〜１１０℃で加熱してもよい。この加熱によって固形分（熱凝固物）と水溶性成分を分離させ、ろ過又は遠心分離等により熱凝固物を得る。当該熱凝固物はさらに、適宜乾燥して用いることができる。乾燥は、熱風乾燥、蒸気を用いる乾燥、高周波・マイクロ波加熱による乾燥、真空・減圧乾燥、凍結融解による乾燥、及び乾燥剤を用いる乾燥のいずれか１つ、又はこれらの組み合わせを用いて行うことができる。乾燥する際に高温になりすぎると酸化した脂質が悪臭を発するので、乾燥は９０℃以下、好ましくは７５℃以下、より好ましくは５５℃以下で行うとよい。乾燥により揮発性の不純物が除去されるため、好ましい。当該熱凝固物又はその乾燥品は、アスタキサンチンを含有するので、本発明の性機能改善剤として好ましく適用することができる。
【００７６】
また、不純物の残存量が少ない精製方法が望まれる。当該オキアミ圧搾液の熱凝固物又はその乾燥品は、水洗いにより水溶性成分の濃度を低下させることができ、このような目的に好適である。水洗いは熱凝固物中又はその乾燥品の乾物重量に対して４倍量、好ましくは１０倍量以上の真水又は海水で行うことができる。好ましくは２回以上、より好ましくは３回以上洗浄するとよい。水洗いは、容器に入れた熱凝固物又はその乾燥品に対して注水し、5分以上置いてから、水分を分離することで行うことができる。熱凝固物又はその乾燥品の形状によっては十分に攪拌することも有効である。また水洗いは、容器に入れた熱凝固物又はその乾燥品を流水で洗うことで行うこともできる。
【００７７】
さらに、上記熱凝固物若しくはその乾燥品又はこれらの洗浄物を例えば、次のように処理することによって、ＰＣの含量が高められた画分を得ることができる。例えば、熱凝固物若しくはその乾燥品又はこれらの洗浄物をエタノール、ヘキサン、クロロホルム、アセトン等の溶媒で処理することによって抽出油を得る。次に、当該抽出油をシリカゲル等を用いるクロマトグラフィーに供することによって不純物とリン脂質画分を分離させ、リン脂質画分を濃縮する。当該画分はＰＣを豊富に含有している。
【００７８】
ＰＳは、動物の組織から抽出することによって得ることもできるが、別のリン脂質を出発材料とすることによってより効率的に得ることができる。例えば、ＰＣとセリンを、ホリパーゼＤの触媒作用を利用して酵素的に反応させることによってＰＳを得ることができる。当該反応におけるリン脂質の使用量に対するセリンの使用量は、０．５〜３重量比、好ましくは１〜２重量比とすることができる。ホスホリパーゼＤは、リン脂質１ｇ当たり、０．０５〜０．２重量比、好ましくは０．１〜０．１５重量比で使用することができる。ホスホリパーゼＤは、微生物由来、キャベツ等の植物由来のものを使用することができる。
【００７９】
上記の酵素反応は、当該技術分野において公知の方法を用いて行うことができ、例えば３５〜４５℃で２０〜２４時間、酢酸エチル等の溶媒中で行うことができる。
【００８０】
本発明において、性機能には性行為及び生殖機能が包含される。性行為とは、例えば乗駕行動、交尾行動等の回数又は持続時間のような生殖行動をいう。生殖機能とは、性行為以外の性機能、例えば精子の数、精子の運動性、精子への分化のための初期精母細胞の能力等のような生殖能力に関連する機能をいう。
【００８１】
本発明の性機能改善剤による性機能改善効果の評価は、特に記載のない限り、以下の各項目の試験結果に基づいて行う：
１．マウンティング潜伏期間：交配試験開始後、第１回目のマウンティングが行われるまでに要する時間；
２．交尾（射精）潜伏期間：交配試験開始後、第１回目の交尾が行われるまでに要する時間；
３．マウンティング回数：試験時間中に行われるマウンティングの回数；
４．交尾回数：試験時間中に行われる交尾の回数；
５．マウンティング回数と交尾回数の割合（交尾率）：交尾回数をマウティング回数で割る；
６．睾丸（＋副睾丸）、及び精嚢（＋前立腺）の重量；
７．精子数、運動精子率、前進精子率、前進移動速度、及び直線地点移動速度等の精子状態に関する評価；
８．精子中の性ホルモン濃度。
【００８２】
オスの動物に性機能改善剤を投与し（被験動物）、投与後に上記の項目について試験を行う。
【００８３】
得られる試験結果を、比較対象としての性機能改善剤を投与されていない退勢した高齢のオスの動物（Ｃｏｎｔｒｏｌ）、及び正常な性機能を有する若齢の動物（Ｂａｓｅ）の試験結果と比較し、次のような基準で性機能改善剤の効果を判断した。
【００８４】
・被験動物の結果が、Ｃｏｎｔｒｏｌを上回るがＢａｓｅと有意差がない又はＢａｓｅ以下の場合、性機能の改善効果があると判断する；
・被験動物の結果が、Ｃｏｎｔｒｏｌを上回り、且つＢａｓｅを有意差を持って上回る場合、性機能の強壮的効果があると判断する；
・被験動物の結果が、Ｃｏｎｔｒｏｌと有意差がない又はＣｏｎｔｒｏｌ以下となる場合、性機能改善効果がないと判断する。
【００８５】
本発明の性機能改善剤を投与されたオスの動物において、投与されていない退勢した高齢のオスの動物に比べて、マウンティング潜伏期間の短縮及びマウンティング回数の増加；交尾潜伏期間の短縮及び交尾回数の増加；及び交尾率の上昇が観察される。従って、本発明は、性機能改善剤をヒト等のオスの動物に投与することを含む、性機能の改善方法を提供することができる。
【００８６】
さらに、本発明の性機能改善剤は、投与されたオスの動物の生殖器官、特に精嚢（＋前立腺）の重量を増加させることから、精子の形成を活性化させることが示唆される。従って、本発明は、性機能改善剤をヒト等のオスの動物に投与することを含む、精子形成の活性化方法を提供することができる。
【００８７】
本明細書でいうヒト以外の動物とは、家畜：ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ロバ、
ラクダ、ラマ、アジアゾウ、アルパカ、トナカイ（カリブー）、ゼブウ（コブウシ）、スイギュウ、ヤク、モルモット、ウサギ（ラビット）、ミンク、ニワトリ、アヒル、ガチョウ、シチメンチョウ、バリケン、ウズラ、ダチョウ、ドバト、キジ、ウミウ、イヌ、ネコ、ハムスター、モルモット、フェレット、リス、サル等、魚類：タイ、マグロ、ブリ、カンパチ、ヒラマサ、アジ、サバ、スズキ、ウナギ、カレイ、ヒラメ、フグ、サケ、マス、ナマズ、ハタ、バラマンディ、コビア等であり、これらの動物の飼料又は餌として本発明の性機能改善剤を適用することもできる。
【００８８】
本発明の性機能改善剤は、必要に応じ、従来公知の強壮作用のある成分、例えば、マカ、亜鉛、マムシエキス、高麗人参、ニクジョヨウ等と組み合わせて用いてもよい。本発明の性機能改善剤は、必要に応じ、従来公知の着色剤、保存剤、香料、風味剤、コーティング剤、抗酸化剤、ビタミン、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、及びミネラル分（鉄、亜鉛、マグネシム、ヨード等）等の成分を含有していてもよい。
【００８９】
ここで、抗酸化剤の例としては、トコフェロール、乾燥酵母、グルタチオン、リポ酸、ケルセチン、カテキン、コエンザイムＱ１０、エンゾジノール、プロアントシアニジン類、アントシアニジン、アントシアニン、カロチン類、リコピン、フラボノイド、リザベラトロール、イソフラボン類、亜鉛、メラトニン、イチョウ葉、月桃葉、ハイビスカス、又はそれらの抽出物が挙げられる。
【００９０】
ビタミンの例としては、ビタミンＡ群（例えば、レチナール、レチノール、レチノイン酸、カロチン、デヒドロレチナール、リコピン、及びそれらの塩）、ビタミンＢ群（例えば、チアミン、チアミンジスルフィド、ジセチアミン、オクトチアミン、シコチアミン、ビスイブチアミン、ビスベンチアミン、プロスルチアミン、ベンフォチアミン、フルスルチアミン、リボフラビン、フラビンアデニンジヌクレオチド、ピリドキシン、ピリドキサール、ヒドロキソコバラミン、シアノコバラミン、メチルコバラミン、デオキシアデノコバラミン、葉酸、テトラヒドロ葉酸、ジヒドロ葉酸、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ニコチニックアルコール、パントテン酸、パンテノール、ビオチン、コリン、イノシトール、パンガミン酸及びそれらの塩、ビタミンＣ群（アスコルビン酸及びその誘導体、エリソルビン酸及びその誘導体、及び薬理学的に許容されるそれらの塩）、ビタミンＤ群（例えば、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、ヒドロキシコレカルシフェロール、ジヒドロキシコレカルシフェロール、ジヒドロタキステロール、及び薬理学的に許容されるそれらの塩）、ビタミンＥ群（例えば、トコフェロール及びその誘導体、ユビキノン誘導体及びそれらの薬理学的に許容される塩）、その他のビタミン（例えば、カルニチン、フェルラ酸、γ−オリザノール、オロチン酸、ルチン（ビタミンＰ）、エリオシトリン、ヘスペリジン、及び薬理学的に許容されるそれらの塩が挙げられる。
【００９１】
アミノ酸の例としては、ロイシン、イソロイシン、バリン、メチオニン、トレオニン、アラニン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、セリン、グルタミン、グルタミン酸、プロリン、チロシン、システイン、ヒスチジン、オルニチン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、グリシルグリシン、アミノエチルスルホン酸（タウリン）、シスチン、又は薬理学的に許容されるそれらの塩が挙げられる。
【００９２】
本発明の性機能改善剤は、医薬組成物、機能性食品、健康食品、サプリメント等に適した形態、例えば顆粒剤（ドライシロップを含む）、カプセル剤（軟カプセル剤、硬カプセル剤）、錠剤（チュアブル剤などを含む）、散剤（粉末剤）、丸剤などの各種の固形製剤、又は内服用液剤（液剤、懸濁剤、シロップ剤を含む）などの液状製剤などの形態で調製してもよい。
【００９３】
製剤化のための添加物としては、例えば、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、流動化剤、分散剤、湿潤剤、防腐剤、粘稠剤、ｐＨ調整剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、溶解補助剤が挙げられる。また、液剤の形態にする場合は、ペクチン、キサンタンガム、グアガムなどの増粘剤を配合することができる。また、コーティング剤を用いてコーティング錠剤にしたり、ペースト状の膠剤とすることもできる。さらに、他の形態に調製する場合であっても、従来の方法に従えばよい。
【００９５】
さらに、本発明の性機能改善剤は、ヒト以外の動物の飼料又はその添加成分として使用することができる。飼料はそれぞれの動物に通常投与する飼料に配合すればよく、マッシュ、フレーク、クランブル、微粉砕、顆粒、モイストペレット、ドライペレット、ＥＰペレット等、飼料の性状は問わず使用することができる。これらの飼料の製造方法は、本発明の効果を損なわないものであれば特に限定されず、各用途で当業者によって使用されている方法に従えばよい。
【実施例】
【００９６】
以下に示す実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲はこれに限定されるものではない。
【００９７】
［実施例１］  ホスファチジルコリンの製造
２００９年２月から１１月に南極海にて漁獲したナンキョクオキアミ（１０ｔ）を漁獲直後に採肉機（バーダー社製、型式ＢＡＡＤＥＲ６０５）にて圧搾し、圧搾液（３ｔ）を得た。この圧搾液を８００ｋｇずつステンレスタンクに収納し、１４０℃の水蒸気を直接投入することにより加熱した。約６０分の加熱において８５℃達温を確認して加熱を停止した。タンク底部のバルブを開放し、目合い２ｍｍメッシュを通過する液状成分を自然落下により除去し、固形分（熱凝固物）は同量の水をシャワリングすることにより洗浄した後、アルミ製のトレイに１２ｋｇずつ収納してコンタクトフリーザにより急速冷凍した。得られた凝固物の総重量は２．２５ｔであった。
【００９８】
当該冷凍品（１ｔ）を水（３０００リットル）に投入し、これを撹拌しながら加熱して６５℃に達温後１０分保持した。２４メッシュナイロンを用いて水切りし、固形分を３０００リットルの水（２０℃）に投入した。１５分の撹拌後、２４メッシュナイロンにて水切りし、さらに遠心脱水機（タナベ製遠心分離機  Ｏ−３０、１５秒）で処理して水分７３％程度の固形分を得た。この固形分にトコフェロール０．３％を添加し、ミキサーでよく混和し、熱風温度７０〜７５℃にて３．２時間乾燥し、洗浄・乾燥物を得た（１７０ｋｇ）。同様にして他の冷凍品を処理した。
【００９９】
当該洗浄・乾燥物（３００ｋｇ）に９９％エタノール（１２００リットル）を添加し、６０℃に加温して２時間撹拌した。その後ナイロンの１００メッシュを用い自然落下法により固液分離して抽出液Ａおよび抽出粕Ａを得た。抽出粕Ａに９９％エタノール（８００リットル）を添加し、６０℃に加温して２時間撹拌後ナイロン１００メッシュを用いて固液分離し、抽出液Ｂおよび抽出粕Ｂを得た。抽出粕Ｂに９９％エタノール（７００リットル）を添加し、６０℃に加温して２時間撹拌後ナイロン１００メッシュを用いて固液分離し、抽出液Ｃおよび抽出粕Ｃを得た。抽出液ＡおよびＢおよびＣを合一すると２０２１ｋｇとなった。これを液温６０℃以下で減圧濃縮し、エタノールおよび水を溜去し、抽出脂質（１４５．０ｋｇ）を得た。得られた抽出脂質の成分及び脂肪酸組成を表１及び表２に示す。
【０１００】
【表１】
0005579333.tif 000002
【０１０１】
【表２】
0005579333.tif 000003
【０１０２】
当該抽出脂質をシリカゲル（旭硝子株式会社、マイクロスフェアゲル、型番：Ｍ．Ｓ．  ＧＥＬ  ＳＩＬ、３００ｇ）カラムに吸着させた。カラムにクロロホルムを添加して中性脂質を洗い流した後、メタノールを添加することによってリン脂質画分（０．２２８ｇ）を回収した。熱凝固物の乾燥品１０ｇ中の脂質含量は、４．７２ｇであった。
【０１０３】
当該リン脂質画分をクロロホルム：メタノール：水＝６５：２５：４の展開溶媒を用いる薄層クロマトグラフィーに供することによって脂質成分を分離させた。薄層自動検出装置（株式会社三菱化学ヤトロン、型式イアトロスキャン（登録商標）ＭＫ−６）を用いて脂質成分を定量した。その結果、当該リン脂質画分には、ホスファチジルコリン（９６重量％）及びホスファチジルエタノールアミン（４重量％）が存在することがわかった。
【０１０４】
上記リン脂質画分中の脂肪酸を三フッ化ホウ素中でメチルエステル化し、以下の条件に設定したガスクロマトグラフィーに供することにより、脂肪酸組成を分析した。
【０１０５】
ガスクロマトグラフィー：アジレント・テクノロジー株式会社、型式６８９０Ｎ
カラム：ＤＢ−ＷＡＸ（Ｊ＆Ｗ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、型番：１２２−７０３２）
キャリアガス：ヘリウム
検出器：水素イオン化検出器
分析結果を以下に示す（表３）。
【０１０６】
【表３】
0005579333.tif 000004
【０１０７】
当該組成物をＰＣ含有組成物として以下の検討に使用した。
【０１０８】
［実施例２］  ホスファチジルセリン含有組成物の製造
Ｌ−セリン（２００ｇ）を酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．６、４００ｍｌ）に入れ、放線菌由来のホスホリパーゼＤ（４０００ｕｎｉｔ／ｇ、２ｇ）を加えた後、４０℃で攪拌してセリンを完全に溶解させた。当該溶解液を、アスタキサンチン（３４０ｐｐｍ）、及びＰＣ（３５重量％）を含有するオキアミ由来のリン脂質（１００ｇ）が溶解された酢酸エチル（５００ｍｌ）と混合し、２００ｒｐｍで攪拌しながら４０℃で２４時間反応させた。
【０１０９】
反応終了後、反応溶液を静置することによって分離した上層部を回収した。これを水で３回洗浄することによって残余のセリンと酵素を除去した。溶媒層を濃縮することによってＰＳを含有する組成物（８５．２ｇ、リン脂質に対する収率：８５．２％）を得た。当該組成物中のＰＳ、ＥＰＡ、及びＤＨＡ含量を分析した結果を以下に示す（表４）。
【０１１０】
【表４】
0005579333.tif 000005
【０１１１】
［実施例３］  ホスファチジルセリン含有組成物の製造
Ｌ−セリン（２００ｇ）を酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．６、４００ｍｌ）に入れ、放線菌由来のホスホリパーゼＤ（４，０００ｕｎｉｔ／ｇ、２ｇ）を加えた後、４０℃で攪拌してセリンを完全に溶解させた。当該溶解液に、アスタキサンチン（４５０ｐｐｍ）、及びＰＣ（５５重量％）を含有するオキアミ由来のリン脂質（１００ｇ）を酢酸エチル（５００ｍｌ）に溶解させた溶液を混合した後、２００ｒｐｍで攪拌しながら４０℃で２４時間反応させた。
【０１１２】
反応終了後、反応溶液を静置することによって分離した上層部を回収した。これを水で３回洗浄することによって残余のセリンと酵素を除去した。溶媒層を濃縮することによってＰＳを含有する組成物（８５．９ｇ、リン脂質に対する収率：８５．９％）を得た。当該組成物中のＰＳ含量をＨＰＬＣを用いて分析したところ、５０．１重量％であった。
【０１１３】
［実施例４］  ホスファチジルセリン含有組成物の製造
アスタキサンチン（３４０ｐｐｍ）、及びＰＣ（３５重量％）を含有するオキアミ由来のリン脂質（１５０ｇ）をアセトンで洗浄することによって中性脂質を除去した。沈殿物を濃縮することによって得られたリン脂質（５０ｇ）を酢酸エチル（５００ｍｌ）中に溶解させた。
【０１１４】
当該酢酸エチルに、Ｌ−セリン（２００ｇ）と酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．６）（４００ｍｌ）を添加し、さらに放線菌由来のホスホリパーゼＤ（４０００ｕｎｉｔ／ｇ、２ｇ）を添加し、２００ｒｐｍで攪拌しながら４０℃で２４時間反応させた。
【０１１５】
反応溶液を静置した後、上層部を回収して水で３回洗浄することにより残余のセリンと酵素を除去した。溶媒層を濃縮し、アセトンを添加してろ過した。得られたろ液を減圧乾燥することにより粉末状のＰＳ含有組成物（３５．１ｇ、収率：７０．２％）を得た。当該組成物中のＰＳ、ＥＰＡ、及びＤＨＡ含量を分析した結果を以下に示す（表５）。
【０１１６】
【表５】
0005579333.tif 000006
【０１１７】
［試験例１］  性機能改善試験
実施例１〜４に記載の方法を用いて調製したＰＣ含有組成物及びＰＳ含有組成物を、退勢したオスの高齢マウスに経口で連続投与し、性機能の改善効果を評価した。
【０１１８】
（１）試験動物
特定病原体未感染（ＳＰＦ）のインプリンティングコントロール領域（imprinting control region、ＩＣＲ）マウスを使用した。１０ヶ月齢のオスのマウスを退勢したマウスとして、３ヶ月齢のオスのマウスを正常マウスとして飼育を開始し、５週間の飼育の後に交配実験に使用した。３ヶ月齢のメスのマウスを各群のオスと交配させるために使用した。
【０１１９】
マウスは、以下に示す条件で単独飼育した。
【０１２０】
温度：  室温（２２〜２４℃）；
相対湿度：  ４０〜７０％；
照明時間：  １２時間；
飼料：  ＳＰＦ級飼料、自由摂取；
飲料水：  滅菌水、自由摂取。
【０１２１】
購入したマウスを上記の飼育条件で３日間馴化させた後、ランダムに以下のように群分けした（表６）。
【０１２２】
【表６】
0005579333.tif 000007
【０１２３】
（２）試験サンプルの調製
ＰＣ含有組成物及びＰＳ含有組成物をそれぞれＭＣＴ（中鎖脂肪酸トリグリセリド）で希釈し、２ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、及び２００ｍｇ／ｍｌの溶液を調製した。
【０１２４】
（３）試験サンプルの投与
試験サンプルを、ゾンデを用いてオスのマウスに経口投与した。投与回数は一日一回、投与期間は５週間で試験サンプルを投与した。試験サンプルの投与量は、ＰＣＬ及びＰＳＬについては（１０ｍｇ／ｋｇ）、ＰＣＭ及びＰＳＭについては（１００ｍｇ／ｋｇ）、ＰＣＨ及びＰＳＨについては（１，０００ｍｇ／ｋｇ）とした。正常比較群及び高齢比較群においては、ＰＣ又はＰＳの代わりに生理食塩水を投与した。その投与量は、正常比較群のマウスに対しては０．１５ｍｌ／匹（マウスの体重を約３０ｇと推定）、高齢比較群のマウスに対しては０．２０ｍｌ／匹（マウスの体重を約４０ｇと推定）とした。
【０１２５】
（４）交配試験
交配試験の開始４８時間前に、安息香酸エストラジオール（Estradiol  Benzoate）（２０ｍＭ／匹）、４時間前にプロゲステロン（Progesterone）（５００ｍＭ／匹）を交配用のメスのマウスに注射した。
【０１２６】
これらメスのマウスを１匹ずつ、オスのマウスが飼育されているケージに移すことによって交配試験を開始した。試験開始から２０分間、オスのマウスの行動を観察し、下記の項目１〜５について評価した。
【０１２７】
さらに、オスのマウスの睾丸（＋副睾丸）、精嚢（＋前立腺）を摘出し、重量を計測した（下記の評価項目６）。
【０１２８】
評価項目：
１．マウンティング潜伏期間；
２．交尾（射精）潜伏期間；
３．マウンティング回数；
４．交尾回数；
５．マウンティング回数と交尾回数の割合（交尾率）
６．睾丸（＋副睾丸）、及び精嚢（＋前立腺）の重量；
（５）結果
本実験において上記の評価項目の全てにおいて高齢比較群（Ｃｏｎｔｒｏｌ）と正常比較群（Ｂａｓｅ）の間では明確な有意差が確認された。
【０１２９】
（５−１）マウンティング潜伏期間とマウンティング回数（図１、図２）
全ての投与群において、オスの高齢動物のマウンティング潜伏時間は、同じく高齢の比較群（Control）に比べて大幅に短縮され、その程度は若い正常比較群（Base）のマウンティング潜伏時間に近づくことが示された。特に、PSH、PSL、PCH及びPCM群においては顕著な改善効果が示された。
【０１３０】
また、マウンティングの潜伏時間だけではなく、殆どの投与群において、オスの高齢動物のマウンティングの回数も、同じく高齢の比較群（Control）に比べて大幅に増加し、その増加程度は若い正常比較群（Base）のマウンティング回数と同じレベルに達していることが示された。中には、PSM、PCH、PCM及びPCL群においては有意な改善効果が示された。
【０１３１】
（５−２）交尾（射精）潜伏期間と交尾回数（図３、図４）
一方、オスの高齢動物の交尾潜伏時間と交尾回数を測定したところ、同じく高齢の比較群（Control）に比べて、PCとPSの投与により交尾潜伏時間の短縮傾向が観察された。そして、PSM、PCH及びPCL投与群においては顕著な交尾（回数）の改善効果が確認された（図４）。なお、このオスの高齢動物に対する交尾の改善効果は若い正常比較群（Base）に匹敵していることが分かった。
【０１３２】
（５−３）交尾率（図５）
全ての投与群において、オスの高齢動物の交尾率は、同じく高齢の比較群（Control）に比べて大幅に増加し、その程度は若い正常比較群（Base）の交尾率に近づくことが示された。低投与群及び高投与群においては、PS投与群よりPC投与群の方がより確実な改善効果を示した。
【０１３３】
（５−４）睾丸（＋副睾丸）の重量と精嚢（＋前立腺）の重量（図６、図７）
オスの高齢動物の生殖器官の重量を測定したところ、同じく高齢の比較群（Control）に比べて、睾丸（＋副睾丸）の重量は殆ど変わっていなかったが、精嚢（＋前立腺）の重量はPCとPSの投与より顕著に増加されたことが確認できた。
【０１３４】
以上の結果より、本発明の性機能改善剤を投与されたオスの動物においては、投与されていない退勢した高齢のオスの動物に比べて、マウンティング潜伏期間の短縮及びマウンティング回数の増加；交尾潜伏期間の短縮及び交尾回数の増加；及び交尾率の上昇が起こった。これらのことから、オスの動物の性的行動が活性化されることが示された。さらに、性機能改善剤は、投与されたオスの動物の生殖器官、特に精嚢（＋前立腺）の重量を増加させることから、精子の形成を活性化することが示唆される。
【０１３５】
しかし、これらの効果は、正常な性機能を有する若齢動物に匹敵することはあっても、それを超えないことも明らかになった。
【０１３６】
これらのことから、本発明の性機能改善剤は、オスの動物の減退した性機能を回復させることにより正常な性機能へと改善することができるが、正常な性機能を超えるような強壮的な効果は有さないことが示唆された。このような効果は、脂質、特に脂肪酸部に高度不飽和脂肪酸を有する脂質の栄養機能に基づいていると考えられ、強壮的な効果を有する既存の精力増強剤と異なる。当該事項は全くの予想外であった。
【０１３７】
［試験例２］
（１）試験動物
ＳＰＦ動物（Specific Pathogen Free animal）であるＩＣＲマウスを試験に使用した。１１ヶ月齢のオスのマウスを対照マウス（control mice）及び各群として使用するために飼育した。３ヶ月齢のオスのマウスを正常マウスとして飼育した。３ヶ月齢のメスのマウスを各群のオスと交配させるために使用した。
【０１３８】
（２）マウスの飼育条件
マウスは、以下に示す条件で単独飼育した。
【０１３９】
温度：  室温（２２〜２４℃）；
相対湿度：  ４０〜７０％；
人工光：  １２時間毎に明暗；
飼料：  ＳＰＦ級飼料；
飲料水：  滅菌水。
【０１４０】
（３）群分け
購入したマウスを３日間馴化させた後、マウスの体重に基づき、ランダムに以下のように群分けした（表７）。
【０１４１】
【表７】
0005579333.tif 000008
【０１４２】
（４）試験サンプル
以下のサンプルを各動物群に使用した。
【０１４３】
Ｋ−ＰＣ群：オキアミ油（オキアミ  ホスファチジルコリン又はオキアミ  コリンとも称される）
比較群（control group）：生理食塩水
（５）試験サンプルの調製
Ｋ−ＰＣをそれぞれＭＣＴで希釈し、２ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、及び２００ｍｇ／ｍｌの溶液を調製した。これらのサンプルを試験サンプルとして使用した。
【０１４４】
（６）試験サンプルの投与
試験サンプルを、一日一回、ゾンデを用いてオスのマウスに経口投与した。
【０１４５】
（７）投与量及び投与期間
試験サンプルを、低投与群に対して１０ｍｇ／ｋｇ、中投与群に対して１００ｍｇ／ｋｇ、及び高投与群に対して１０００ｍｇ／ｋｇで動物に投与した。すなわち、投与量は個々の動物の体重に依存する。生理食塩水を正常比較群の動物及び高齢比較群の動物に投与した。その投与量は、正常比較群の動物に対しては０．１５ｍｌ／匹（マウスの体重を約３０ｇと推定）、高齢比較群の動物に対しては０．２０ｍｌ／匹（マウスの体重を約４０ｇと推定）とした。
【０１４６】
（８）交配試験
交配試験の開始４８時間前に、安息香酸エストラジオール（Estradiol  Benzoate）（２０μＭ／匹）、４時間前にプロゲステロン（Progesterone）（５００μＭ／匹）を交配用のメスのマウスに注射した。
【０１４７】
これらメスのマウスを１匹ずつ、オスのマウスが飼育されているケージに移すことによって交配試験を開始した。試験開始から２０分間、オスのマウスの行動を観察した。
【０１４８】
睾丸（＋副睾丸）及び精嚢（＋前立腺）を動物から摘出した。睾丸（＋副睾丸）及び精嚢（＋前立腺）の重量を計測した。精巣（睾丸）の病理切片を作成した。
【０１４９】
（９）評価項目
交配試験において、以下の項目を評価した：
マウンティング潜伏期間（交配試験の開始後、最初のマウンティングが行われるのに要する時間）；
交尾（射精）潜伏期間（交配試験開始後、最初の交尾が行われるのに要する時間）；
マウンティング回数（試験時間（２０分）の間に行われるマウンティング回数）；
交尾回数（試験時間（２０分）の間に行われる交尾回数）；
マウンティング回数と交尾回数の割合（交尾率）（マウンティング回数で除された交尾回数）；
睾丸（＋副睾丸）、及び精嚢（＋前立腺）の重量、及び重量比；
精巣（睾丸）の組織における曲精細管の病理学的観察。
【０１５０】
（１０）結果
試験群ごとに摘出された曲精細管の状態を精巣（睾丸）の病理切片を用いて観察した。高齢マウスにおける精子形成が縮小することが観察され（図８（Ｂ））、Ｋ−ＰＣの投与により退縮が改善されることが観察された（図８（Ｃ）〜（Ｅ））。
【０１５１】
正常なマウスでは、曲精細管において精子形成の進行がはっきりと観察された（図８（Ａ））。加えて、正常なマウスでは、曲精細管の外側から中心にむかって、精子形成における段階ごとの細胞（精原細胞（spermatogenia）、一次精母細胞、二次精母細胞、精子細胞、及び精子）がはっきりと観察された。さらに、正常なマウスでは、産出された多くの精子も観察された。
【０１５２】
一方で、高齢マウスでは、曲精細管が萎縮した。加えて、高齢マウスでは、精子形成における段階ごとの成熟分裂は曖昧であり、曲精細管における精子の数はほとんどなかった（図８（Ｂ））。
【０１５３】
Ｋ−ＰＣの投与は萎縮を改善し、高齢マウスの曲精細管において多くの精子を誘導する（Ｋ−ＰＣＬについての図８（Ｃ），Ｋ−ＰＣＭについての図８（Ｄ）、及びＫ−ＰＣＨについての図８（Ｅ））。加えて、曲精細管壁の厚みを計測することにより得られる結果は、高齢マウスでの曲精細管における萎縮現象の他に、Ｋ−ＰＣの投与によって衰えた曲精細管における改善効果も明らかにする（図９）。
【０１５４】
［試験例３］
（１）試験動物
ＳＰＦ動物（Specific Pathogen Free animal）であるＩＣＲマウスを試験に使用した。１１ヶ月齢のオスのマウスを対照マウス（control mice）及び各群として使用するために飼育した。３ヶ月齢のオスのマウスを正常マウスとして飼育した。３ヶ月齢のメスのマウスを各群のオスと交配させるために使用した。
【０１５５】
（２）マウスの飼育条件
マウスは、以下に示す条件で単独飼育した。
【０１５６】
温度：  室温（２２〜２５℃）；
相対湿度：  ４０〜７０％；
人工光：  １２時間毎に明暗；
飼料：  ＳＰＦ級飼料；
飲料水：  滅菌水。
【０１５７】
（３）群分け
購入したマウスを３日間馴化させた後、マウスの体重に基づき、ランダムに以下のように群分けした（表８）。
【０１５８】
【表８】
0005579333.tif 000009
【０１５９】
（４）試験サンプル
以下のサンプルを各動物群に使用した。
【０１６０】
Ｋ−ＰＣ群：オキアミ油（オキアミ  ホスファチジルコリン又はオキアミ  コリンとも称される）
比較群（control group）：生理食塩水
Ｋ−ＰＣをＭＣＴで希釈し、２ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、及び２００ｍｇ／ｍｌの溶液を調製した。これらのサンプルを試験サンプルとして使用した。
【０１６１】
（６）試験サンプルの投与
試験サンプルを、一日一回、ゾンデを用いてオスのマウスに経口投与した。
【０１６２】
（７）投与量及び投与期間
試験サンプルを、低投与群に対して１０ｍｇ／ｋｇ、及び中投与群に対して１００ｍｇ／ｋｇで動物に投与した。すなわち、投与量は個々の動物の体重に依存する。サンプルごとの容量は５ｍｌ／ｋｇであった。
【０１６３】
０．２０ｍｌ／匹（マウスの体重を約４０ｇと推定）の生理食塩水を正常群のマウス及び高齢比較群のマウスに投与した。
【０１６４】
（８）交配試験
交配試験の開始４８時間前に、安息香酸エストラジオール（Estradiol  Benzoate）（２０μＭ／匹）、４時間前にプロゲステロン（Progesterone）（５００μＭ／匹）を交配用のメスのマウスに注射した。
【０１６５】
これらメスのマウスを１匹ずつ、オスのマウスが飼育されているケージに移すことによって交配試験を開始した。試験開始から３０分間、オスのマウスの行動を観察した。
【０１６６】
交配試験後２４時間以内に、試験動物を安楽死させ、精巣（睾丸）、精巣上体（副睾丸）、及び前立腺などの生殖機能に関わる器官を摘出した。これらの器官の重量を計測した。
【０１６７】
動物から摘出した精巣上体部の一つを、受精能獲得培地（Ｍｅｄｉｕｍ  １９９）において３７℃で分裂させた。５分間培養後、精子の原液を得た。精子の原液をＴＯＸ  ＩＶＯＳ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｔｈｏｒｎｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）にさらし、精子生存率、運動精子率、及び前進精子率などの精子状態についての評価に関する項目を測定した。
【０１６８】
（９）評価項目
交配試験において、以下の項目を評価した：
マウンティング潜伏期間（交配試験の開始後、最初のマウンティングが行われるのに要する時間）；
交尾（射精）潜伏期間（交配試験開始後、最初の交尾が行われるのに要する時間）；
マウンティング回数（試験時間（３０分）の間に行われるマウンティング回数）；
交尾回数（試験時間（３０分）の間に行われる交尾回数）；
マウンティング回数と交尾回数の割合（交尾率）（マウンティング回数で除された交尾回数）；
精巣、精巣上体、及び前立腺の重量；
精子数、運動精子率、前進精子率、前進移動速度（ＶＡＰ）、及び直線地点移動速度（ＶＳＬ）の測定。
【０１６９】
（１０）結果
この試験により、以下の結果が得られた。
【０１７０】
動物群間のデータにおいて有意差は認められなかったが、オスのマウスの行動に関する結果では、高齢マウスにおいて低下した性機能現象、及びＫ−ＰＣの投与により低下した性機能の改善が示された（表９）。
【０１７１】
【表９】
0005579333.tif 000010
【０１７２】
精子数（図１０）、運動精子率（図１１）、前進精子率（図１２）などの精子状態に関連する因子を測定することにより（表１０）、高齢マウスにおいて精子形成における状態の他に、精子活性が低下することが認められた。Ｋ−ＰＣの投与は、このような低下を改善し、特に精子活性を著しく改善した。
【０１７３】
【表１０】
0005579333.tif 000011
【０１７４】
さらに、精子を産生する精巣、精子を蓄える精巣上体、及び前立腺液を産生し、精子に栄養を与える前立腺の重量を計測することにより、Ｋ−ＰＣ群における精巣上体（図１３）、及び前立腺（図１４）の重量が高齢群よりも重くなることが示された。
【０１７５】
これらのことから、オキアミリン脂質の性機能改善における効果は、性機能の増進に基づくものではなく、加齢により低下する、精子形成能力、精子数の維持、運動精子率、前進精子率、前進移動速度、直線地点移動速度の改善に基づくものであることが示唆された。すなわち、オキアミリン脂質は、加齢により低下する、精子形成能力、精子数の維持、運動精子率、前進精子率、前進移動速度、及び直線地点移動速度の改善に利用できるであろう。
【０１７６】
［試験例４］
本発明の性機能改善剤をマウスに投与した後、血清中の性フェロモン濃度を測定した。
【０１７７】
（１）交配試験を試験例１に記載の実験条件に従って行った。交配試験後、血液０．５〜０．８ｍｌを動物から採取し、温度４℃以下、３０００ｒｐｍ／分にて、１５分間遠心分離を行った。上清、血清を回収し、以下の生物学的指標を計測するために使用した。
【０１７８】
（２）血清中の性フェロモン濃度の測定
試験完了後の各投与群に関して、血清中のＩｎｈｉｂｉｎ  Ｂ及び卵胞刺激ホルモン（Follicle-Stimulating Hormone）の濃度を計測した。Ｉｎｈｉｂｉｎ  Ｂ（ＩｎＢ）濃度を、市販の計測キット（Ｂｅｉｊｉｎｇ  Ｓｉｎｏ−ｕｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（北京、中国））を使用し、説明書に基づいて計測した。卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）濃度を、卵胞刺激ホルモンラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）キット（（Ｂｅｉｊｉｎｇ  Ｓｉｎｏ−ｕｋ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（北京、中国））を使用し、説明書に基づいて計測した。
【０１７９】
（３）結果（図１５及び図１６）
結果は、異なる投与群ごとの間で差異が存在しないことを明確に示した。
【０１８０】
それらは、本発明の性機能改善剤の効果が、Ｉｎｈｉｂｉｎ  Ｂや卵胞刺激ホルモンなどの性フェロモンの増加によりもたらされるものではないことを示した。
【０１８１】
［試験例５］
本発明の性機能改善剤をマウスに投与後、マウスの生殖機能を評価した。魚油（Ｆ−Ｏｉｌ）、大豆リン脂質（Ｓ−ＰＣ）、及びＭＣＴ（ｃｏｎｔｒｏｌ）を高齢マウスに経口で連続投与し、生殖機能の改善効果を評価した。
【０１８２】
（１）試験動物
特定病原体未感染（ＳＰＦ）のインプリンティングコントロール領域（imprinting control region、ＩＣＲ）マウスを使用した。
１２ヶ月齢のオスのマウスを退勢したマウスとして使用するために飼育した。４週間の飼育後、生殖機能を評価するためにマウスを使用した。
【０１８３】
マウスは、以下に示す条件で単独飼育した。
【０１８４】
温度：  室温（２２〜２５℃）；
相対湿度：  ４０〜７０％；
照明時間：  １２時間；
飼料：  ＳＰＦ級飼料、自由摂取；
飲料水：  滅菌水、自由摂取。
【０１８５】
購入したマウスを上記の飼育条件で３日間馴化させた後、ランダムに以下のように群分けした（表１１）。
【０１８６】
【表１１】
0005579333.tif 000012
【０１８７】
（２）試験サンプルの調製
魚油（脂質としてトリグリセリド  ９９．０％（Ｗ／Ｗ）、トコフェロール  １．０％（ｗ／ｗ）、ＥＰＡ  ２８．８％（ｗ／ｗ）及びＤＨＡ  １４．７％（ｗ／ｗ）を含む水  ０．０％（ｗ／ｗ））、及び大豆リン脂質（和光純薬工業株式会社より購入した大豆由来のレシチン、製品番号：１２０−００８３２）をそれぞれＭＣＴで希釈し、２０ｍｇ／ｍｌの溶液を調製した。
【０１８８】
（３）試験サンプルの投与
試験サンプルを、ゾンデを用いてオスのマウスに経口投与した。投与回数は一日一回、投与期間は４週間で試験サンプルを投与した。試験サンプルを、各動物の体重に基づいて５ｍｇ／ｋｇで投与し、１００ｍｇ／ｋｇ（中投与群）とした。
【０１８９】
（４）生殖機能の評価
交配試験後２４時間以内に、試験動物を安楽死させ、睾丸、副睾丸、及び前立腺などの生殖機能に関わる器官を摘出した。これらの器官の重量を計測した。動物から摘出した精巣上体部の一つを、受精能獲得培地（Ｍｅｄｉｕｍ  １９９）において３７℃で分裂させた。５分間培養後、精子の原液を得た。精子の原液をＴＯＸ  ＩＶＯＳ（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｔｈｏｒｎｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）にさらし、精子生存率、運動精子率、及び前進精子率などの精子状態についての評価に関連する項目を測定した。
【０１９０】
評価項目：
１．睾丸、副睾丸、及び前立腺の重量；
２．精子数、運動精子率、及び前進精子率。
【０１９１】
（５）結果
（５−１）精子数（図１７）
Ｆ−Ｏｉｌ群、Ｓ−ＰＣ群、及びＦ＋Ｓ群における精子数はすべて対照群（control group、cont.）に比べて増加した。Ｓ−ＰＣ群、及びＦ＋Ｓ群における精子数は対照群に比べて顕著に増加した。Ｓ−ＰＣ群の精子数が最も高かった。
【０１９２】
（５−２）投与群ごとの運動精子率（図１８）
Ｓ−ＰＣ群、及びＦ＋Ｓ群における運動精子率は対照群に比べて増加した。特に、Ｓ−ＰＣ群の運動精子率は顕著に増加した。
【０１９３】
（５−３）投与群ごとの前進精子率
Ｓ−ＰＣ群、及びＦ＋Ｓ群における前進精子率は対照群に比べて増加した。特に、Ｓ−ＰＣ群の前進精子率は顕著に増加した。
【０１９４】
（５−４）投与群ごとの睾丸の重量（図２０）
Ｆ−Ｏｉｌ群、Ｓ−ＰＣ群、及びＦ＋Ｓ群における睾丸の重量はすべて対照群に比べて顕著に増加した。
【０１９５】
（５−５）投与群ごとの副睾丸の重量（図２１）
Ｆ−Ｏｉｌ群、Ｓ−ＰＣ群、及びＦ＋Ｓ群における副睾丸の重量はすべて対照群に比べて顕著に増加した。Ｓ−ＰＣ群、及びＦ＋Ｓ群における副睾丸は対照群に比べて顕著に増加した。
【０１９６】
上記の結果は、リン脂質を有効成分として含有する本発明の性機能改善剤が生殖機能を改善することを示している。
【０１９７】
試験例１〜５の上記結果から、オキアミリン脂質及び大豆リン脂質などの不飽和脂肪酸を含むリン脂質の性機能改善における効果は、性機能の増進に基づくものではなく、加齢により低下する、生体における精子形成能力及び精子数の維持を防ぐか、又は回復することに基づくものであると推測された。
【図１】
0005579333.tif 000013
【図２】
0005579333.tif 000014
【図３】
0005579333.tif 000015
【図４】
0005579333.tif 000016
【図５】
0005579333.tif 000017
【図６】
0005579333.tif 000018
【図７】
0005579333.tif 000019
【図８】
0005579333.tif 000020
【図９】
0005579333.tif 000021
【図１０】
0005579333.tif 000022
【図１１】
0005579333.tif 000023
【図１２】
0005579333.tif 000024
【図１３】
0005579333.tif 000025
【図１４】
0005579333.tif 000026
【図１５】
0005579333.tif 000027
【図１６】
0005579333.tif 000028
【図１７】
0005579333.tif 000029
【図１８】
0005579333.tif 000030
【図１９】
0005579333.tif 000031
【図２０】
0005579333.tif 000032
【図２１】
0005579333.tif 000033