(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩：
【化１】
0005505741.tif 000079
式中、
Ｒ１は水素原子、又はＣ１−４アルキル基であり、
Ｒ２は水素原子、又はメチル基であり、
Ｒ３は“アミノ基若しくはジＣ１−４アルキルアミノ基で置換されたＣ１−４アルキル基”、又はピペリジル基であり、
Ｒ４は水素原子であり、又はＲ３とＲ４は隣接する窒素原子と共にピペリジノ基若しくはピペラジニル基を形成し、それらはＣ１−４アルキル基若しくはジメチルアミノ基で置換されていてもよい。
【請求項２】
下記群から選択される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【化２】
0005505741.tif 000080
0005505741.tif 000081
【請求項３】
下記群から選択される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【化３】
0005505741.tif 000082
【請求項４】
請求項１乃至３記載の４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬。  
【請求項５】
請求項１乃至３記載の４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含むナトリウム依存性グルコース共輸送体１（ＳＧＬＴ１）活性阻害剤。
【請求項６】
請求項１乃至３記載の４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む食後高血糖改善薬。
【請求項７】
請求項１乃至３記載の４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む糖尿病の予防又は治療薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、小腸でのグルコ−ス及びガラクトースの吸収に関わるナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１（以下、適宜に「ＳＧＬＴ１」と略記する。）に特異的な阻害活性を有する４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
血糖値はメタボリックシンドロームのバイオマーカーの一つとなっており、空腹時血糖が１２６ｍｇ／ｄＬ以上を示すと糖尿病と診断される。また、空腹時血糖が正常であっても、食後２時間血糖値が１４０〜２００ｍｇ／ｄＬの場合には、耐糖能異常（又は食後高血糖）と診断される。近年の疫学的研究によれば、耐糖能異常が心血管障害のリスクを高めると報告されている(非特許文献１及び２参照)。さらに、運動療法や薬物治療を施すことで耐糖能異常から２型糖尿病への移行を抑制し、高血圧の発症も有意に抑制することが報告されている(非特許文献３参照)。
【０００３】
以上のことから、食後高血糖を抑制することが糖尿病やメタボリックシンドロームの発症抑制に重要であると考えられ、食後高血糖をコントロールする薬剤の需要が高まりつつある。
【０００４】
従来、食後高血糖改善薬としては、糖類の加水分解酵素を阻害し、小腸からの糖の吸収を遅延させるα−グルコシダ−ゼ阻害剤が汎用されてきたが、新しい作用機序を有する食後高血糖改善薬の開発も行われている。
【０００５】
哺乳動物の小腸上皮には高い頻度でナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１（ＳＧＬＴ１）が発現している。このＳＧＬＴ１は小腸において、ナトリウムに依存し、グルコ−ス又はガラクト−スの能動輸送を司ることが知られている。そこで、ＳＧＬＴ１活性を阻害することによって、食事由来のグルコ−ス吸収を抑制し、食後高血糖の予防又は治療に用いることができる、ピラゾ−ル誘導体が報告されている（特許文献１〜６参照）。一方で、腎臓には高頻度にナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体２（ＳＧＬＴ２）が発現しており、糸球体で一旦濾過されたグルコ−スはＳＧＬＴ２を介して再吸収される（非特許文献４参照）。そして、ＳＧＬＴ２活性を阻害することによって、尿への糖排泄が促進され、血糖低下作用を示すことが報告されている（非特許文献５参照）。ＳＧＬＴ２阻害剤の特徴として、随時血糖を低下させる作用が優れているが、ＳＧＬＴ１阻害剤の様に食後高血糖を是正する作用は低い。また、ＳＧＬＴ１活性に加えて、ＳＧＬＴ２活性も同時に阻害するＣ−フェニル  グルシトール誘導体についての報告もある（特許文献７参照）。
【０００６】
一方、食後高血糖改善薬のような持続投与が必要な薬剤にとっては、薬効量と、毒性、副作用の発現量との間の安全域が広いことが重要である。特に、体内残留性薬物の場合は、治療に必要な投与量をコントロールすることが難しく、体内に残留している薬物が加算されて過剰量の薬物の効果が発現されることになり、予期せぬ毒性及び副作用につながる。例えば、分子内に３級アミンの様な親水性基と芳香環の様な疎水性基をもつ、陽イオン性薬物は、リン脂質と疎水結合し、ライソゾーム内に取り込まれ全身の器官に蓄積されることがあることが知られている。代表例として、クロロキンでは網膜障害、パーヘキシリンでは肺や小脳に変化があり神経障害が問題となった（非特許文献６参照）。
【０００７】
したがって、薬物は、薬効を示した後に体内から速やかに排泄されることが望ましく、特に、持続投与が必須の食後高血糖改善薬では、体内残留性の問題のない薬物が望まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第ＷＯ２００２／０９８８９３号パンフレット
【特許文献２】国際公開第ＷＯ２００４／０１４９３２号パンフレット
【特許文献３】国際公開第ＷＯ２００４／０１８４９１号パンフレット
【特許文献４】国際公開第ＷＯ２００４／０１９９５８号パンフレット
【特許文献５】国際公開第ＷＯ２００５／１２１１６１号パンフレット
【特許文献６】国際公開第ＷＯ２００４／０５０１２２号パンフレット
【特許文献７】国際公開第ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレット
【非特許文献１】Pan XR, et al. Diabetes Care, 第20巻, 537項, 1997年
【非特許文献２】M Tominaga, et al. Diabetes Care, 第22巻, 920項, 1999年
【非特許文献３】J.−L. Chiasson, et al. Lancent, 第359巻, 2072項, 2002年
【非特許文献４】E. M. Wright, Am. J. Physiol. Renal. Physiol., 第280巻, F10項, 2001年
【非特許文献５】G. Toggenburger, et al. Biochem. Biophys. Acta., 第688巻, 557項, 1982年
【非特許文献６】日薬理誌  Folia Pharmacol. Jpn. 第113巻, 19項, 1999年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、薬効量と毒性、副作用の発現量との間の安全域が広いＳＧＬＴ１阻害作用を示す化合物又はその塩、及びそれらを含む医薬を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
特許文献７に記載のＣ−フェニル  グルシトール誘導体は排泄されず腎臓に残留する傾向が見られることがわかった。そこで本発明者らは体内蓄積性の問題がない化合物を探索し鋭意検討した。その結果、特に、糖部分に直接結合するベンゼン環にイソプロピル基を導入し、その他のベンゼン環に、アミノ基を有するブテノイル基を導入して得られる、下記一般式（Ｉ）で示される、４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物は、意外にも腎臓に残留する傾向がないことを見出し、本発明を完成した。
【００１１】
以下に、本発明の４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物（以下、「本発明化合物」という）の態様を述べる。
（１）下記式（Ｉ）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩：
【００１２】
【化１】
0005505741.tif 000002
【００１３】
式中、
Ｒ１は水素原子、又はＣ１−４アルキル基であり、
Ｒ２は水素原子、又はメチル基であり、
Ｒ３は“アミノ基若しくはジＣ１−４アルキルアミノ基で置換されたＣ１−４アルキル基”、又はピペリジル基であり、
Ｒ４は水素原子であり、又はＲ３とＲ４は隣接する窒素原子と共にピペリジノ基若しくはピペラジニル基を形成し、それらはＣ１−４アルキル基若しくはジメチルアミノ基で置換されていてもよい。
（２）下記群から選択される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【００１４】
【化２】
0005505741.tif 000003
【００１５】
0005505741.tif 000004
【００１６】
（３）下記群から選択される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【００１７】
【化３】
0005505741.tif 000005
【００１８】
（４）前記（１）〜（３）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬。
（５）前記（１）〜（３）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含むナトリウム依存性グルコース共輸送体１（ＳＧＬＴ１）活性阻害剤。
（６）前記（１）〜（３）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む食後高血糖改善薬。
（７）前記（１）〜（３）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む糖尿病の予防又は治療薬。
（８）糖尿病の予防又は治療用の薬剤の製造における、前記（１）〜（３）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩の使用。
（９）前記（１）〜（３）で表される４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩の予防又は治療に有効量を哺乳動物に投与することを含む糖尿病を予防又治療する方法。
【発明の効果】
【００１９】
本発明により、体内蓄積性の傾向がない、ＳＧＬＴ１活性を阻害する４−イソプロピルフェニル  グルシトール化合物を提供することが可能となった。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本発明において使用する用語を以下に定義する。
【００２１】
「Ｃ1-４アルキル基」とは、炭素原子を１−４個有する直鎖状又は分枝状のアルキル基を意味する。例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基が挙げられる。
【００２２】
「ジＣ1-４アルキルアミノ基」とは、２つのＣ1-４アルキル基で置換されたアミノ基を意味する。例えば、ジメチルアミノ基やジエチルアミノ基が挙げられる。
【００２３】
また、「製薬学的に許容される塩」とは、アルカリ金属類、アルカリ土類金属類、アンモニウム、アルキルアンモニウムなどとの塩、鉱酸又は有機酸との塩であり、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩、トリエチルアンモニウム塩、ぎ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ヘキサン酸塩、オクタン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、ラクトビオン酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、グルコヘプトン酸塩、グルタール酸塩、ピメリン酸塩、スベリン酸塩、アゼライン酸塩、セバシン酸塩、１，９−ノナンジカルボン酸塩、ドデカン二酸塩、トリデカン二酸塩、テトラデカン二酸塩、ペンタデカン二酸塩、ヘキサデカン二酸塩、ヘプタデカン二酸塩、安息香酸塩、２−ヒドロキシ安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、エタンジスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、１，５−ナフタレンジスルホン酸塩、ラウリル硫酸塩、乳酸塩、馬尿酸塩、フマル酸塩、マロン酸塩、トランスケイ皮酸塩、リンゴ酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、アジピン酸塩、システインとの塩、Ｎ−アセチルシステインとの塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、よう化水素酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、ピクリン酸塩、チオシアン酸塩、ウンデカン酸塩、アクリル酸ポリマーとの塩、カルボキシビニルポリマーとの塩を挙げることができる。
【００２４】
「食後高血糖改善薬」とは、食後高血糖を抑制することにより、食後高血糖に関連する疾患、例えば、糖尿病やメタボリックシンドロームの発症を抑制する、若しくは、それらの疾患を治療する薬物をいう。ここで、「食後高血糖」とは、食後に血糖値が異常に高くなる状態、具体的には、食後２時間の血糖値が１４０ｍｇ／ｄｌを上回る状態をいう。
【００２５】
本発明化合物の有用性について以下に説明する（詳細は以下の試験例参照）。
【００２６】
本発明化合物は、強いＳＧＬＴ１阻害活性を有し、また、ＳＧＬＴ２阻害活性も弱いがある程度の活性を有する。また、本発明化合物は、ＷＯ２００７／１３６１１６号に開示された化合物と同程度に強い血糖降下作用を有する。さらに、ＷＯ２００７／１３６１１６号に開示の化合物は、１ｍｇ／ｋｇ経口投与した７日後でも、化合物が排泄されず腎臓に残留する傾向が見られたのに対して、本発明化合物は、意外にも３ｍｇ／ｋｇの用量で３日間連続投与したにも関わらず、２日後に腎臓に残留しないという特徴を示した。
【００２７】
したがって、本発明化合物は、体内残留性の傾向がなく、連続投与による副作用及び毒性が少ない医薬品として実用性に優れた性質を有すると考えられる。
【００２８】
本発明化合物を医薬として提供する場合、固形剤、液剤等の種々の態様の製剤形態を適宜に採択することができる。その際、製薬学的に許容される担体を配合することも可能である。そのような担体の例としては、一般的な賦形剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、糖衣剤、ｐＨ調整剤、溶解剤又は水性若しくは非水性溶媒などが挙げられる。本発明の化合物とこれらの担体から、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、散剤、液剤、乳剤、懸濁剤等を調製することができる。
【００２９】
例えば、本発明化合物と固形製剤の製造等に用いられる一般的な賦形剤等を混合等した後に打錠し、経口投与用の錠剤として提供することができる。
【００３０】
また、本発明化合物は、α、β若しくはγ−シクロデキストリン又はメチル化シクロデキストリン等に包接させて、その溶解性を改善することも可能である。
【００３１】
本発明化合物の投与量は、疾患、症状、体重、年齢、性別、投与経路等により異なってくるが、成人に対し、１日当たり０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重であり、０．１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重が好ましく、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重がより好ましい。これを１日１回から数回に分けて投与することができる。
【００３２】
本発明の好ましい態様として、以下に示す実施例化合物があげられる。
【００３３】
【化４】
0005505741.tif 000006
【００３４】
以下に、本発明化合物（Ｉ）の製造方法を例を挙げて詳細に説明するが、例示されたものに特に限定されない。
【００３５】
製造法１
本発明化合物（Ｉ）は以下の方法で合成することができる。
【００３６】
ただし、Ｘはアセチル基またはＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ５はＲ３もしくはアミノ基がｔｅｒｔ−ブチルカーボネート（Ｂｏｃ）で保護されたＲ３を示し、その他の記号は前記と同義である。
【００３７】
【化５】
0005505741.tif 000007
【００３８】
（１）工程１（Ｈｅｃｋ反応）
化合物（ＩＩ）とオレフィンカルボン酸（ＩＩＩ）をパラジウム触媒とホスフィンリガンド、及び適当な塩基の存在下、Ｈｅｃｋ反応を行うことにより化合物（ＩＶ）を得ることができる。このとき用いるパラジウム触媒としては、酢酸パラジウム、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、ジベンジリデンアセトンパラジウム、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウムクロリド、パラジウム活性炭等が挙げられる。ホスフィンリガンドとしてはトリフェニルホスフィンやトリ−Ｏ−トリルホスフィン等が挙げられる。また、塩基にはトリエチルアミン、Ｎ−エチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミン、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸セシウム、カリウムｔ−ブトキシド等が用いられる。反応に用いられる溶媒としては、アセトニトリル、トルエン、テトラヒドロフラン等が挙げられる。反応温度は０℃から還流温度であるが、マイクロウェ−ブを用いることもある。
（２）工程２（アミド基への変換）
化合物（ＩＶ）をアミン（Ｒ５Ｒ４ＮＨ）と脱水縮合し、化合物（Ｖ）を得ることができる。この反応に使用する溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等が好ましく、脱水縮合剤としては、Ｎ，Ｎ´−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ´−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）、１、１´−カルボニルジイミダゾ−ル（CDI）、ＥＤＣ・ＨＣｌ／１−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ）等が好ましい。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。
（３）工程３（脱保護）
化合物（Ｖ）中のＢｏｃ基を酸性条件化除去し、アセチル（Ａｃ）基を塩基性条件下除去することで化合物（Ｉ）を得ることができる。Ｂｏｃ基には、ジクロロメタン、クロロホルム、ジオキサン等の溶媒中、または無溶媒で塩酸またはトリフルオロ酢酸を作用させる。アセチル基には、ナトリウムメトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、トリエチルアミン等の塩基を用いることができる。溶媒としては、メタノール、エタノール、含水メタノール等が好ましい。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。
【００３９】
製造法２
本発明化合物（Ｉ）は以下に示す別ルートによって合成することもできる。ただし、記号は前記と同義である。
【００４０】
【化６】
0005505741.tif 000008
【００４１】
（４）工程４（Ｈｅｃｋ反応）
化合物（ＩＩ）とオレフィンカルボン酸（ＶＩ）を用いて製造法１、工程１に記載したＨｅｃｋ反応を行うことにより、化合物（ＶＩＩ）を得ることができる。
（５）工程５（アミド基への変換）
化合物（ＶＩＩ）とアミン（ＶＩＩＩ）を用いて製造法１、工程２に記載した脱水縮合反応を行うことにより、化合物（Ｖ）を得ることができる。
（６）工程６（脱保護）
上記で得られた化合物（Ｖ）を製造法１、工程３に記載した脱保護反応によって化合物（Ｉ）へ導くことができる。
【００４２】
製造法３
中間体（ＩＩ）の製造法
本発明化合物（Ｉ）の製造に必要な中間体（ＩＩ）の製造法を以下に示す。
【００４３】
ただし、Ｘ１はベンジル基又はＣ１−４アルキル基を示し、Ｘ２はトリメチルシリル基又はＣ１−４アルキル基を示し、その他の記号は前記と同義である。
【００４４】
【化７】
0005505741.tif 000009
【００４５】
（７）工程７（カップリング）
化合物（ＩＸ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、グルコノラクトン（Ｘ）を加えることで化合物（ＸＩ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。
（８）工程８（酸加水分解）
化合物（ＸＩ）中のシリル基を酸性条件化メタノール中で除去すると共に、糖の１位をメチルエーテル化し化合物（ＸＩＩ）を得ることができる。このとき用いる酸としては、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸１水和物、ピリジニウムｐ−トルエンスルホン酸、フッ化水素ピリジン、ｎ−Ｂｕ４ＮＦ等を用いることができる。反応温度は用いる酸によって異なるが、０℃〜１００℃、好ましくは２５℃〜８０℃である。
（９）工程９（アセチル化）
化合物（ＸＩＩ）中の水酸基をアセチル基で保護することにより、化合物（ＸＩＩＩ）を得ることができる。化合物（ＸＩＩ）と、無水酢酸、またはアセチルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ化合物（ＸＩＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等が好ましい。反応の触媒として４−ジメチルアミノピリジンを用いることもできる。また、好ましい反応温度は０℃〜室温である。
（１０）工程１０（還元）
化合物（ＸＩＩＩ）とＥｔ３ＳｉＨ、ｉ−Ｐｒ３ＳｉＨ、ｔ−ＢｕＭｅ２ＳｉＨ又はＰｈ２ＳｉＨＣｌを、ルイス酸の存在下で反応させ、化合物（ＸＩＶ）を得ることができる。この反応に使用するルイス酸としては、ＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ、ＣＦ３ＣＯＯＨ、ＩｎＣｌ３、ＴｉＣｌ４、ＴＭＳＯＴｆ、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等が挙げられ、溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、トルエン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル又はそれらの混合溶媒が挙げられ、好ましい溶媒はアセトニトリル／クロロホルム、アセトニトリル／ジクロロメタン、アセトニトリル／テトラヒドロフラン、アセトニトリル／テトラヒドロフラン／トルエン等のアセトニトリルとの混合溶媒である。ここでの反応温度は−６０℃〜２５℃、好ましくは−３０℃〜２５℃である。  
（１１）工程１１（脱保護）
化合物（ＸＩＶ）中のＸ１がベンジル基の場合は、パラジウム活性炭、水酸化パラジウム、又は白金−パラジウム活性炭等の触媒を用いて水素雰囲気下にて接触水素添加することにより、脱ベンジル化を行うことができる。中でもパラジウム活性炭、水酸化パラジウムが触媒として好ましい。この反応に使用する溶媒としては、メタノ−ル、エタノ−ル、イソプロパノ−ル、酢酸エチル、酢酸、およびこれらの混合溶媒が挙げられる。反応温度は室温から還流温度であるが、室温が好ましい。
（１２）工程１２（ブロモ化）
化合物（ＸＩＶ）、または上記工程１１で得られた化合物と、臭素、Ｎ−ブロモスクシンイミド、臭化水素等を溶媒中反応させて、化合物（ＸＶ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。ここでの反応温度は０℃〜室温である。
（１３）工程１３（脱保護）
化合物（ＸＶ）中のアセチル基を塩基性条件下除去することで化合物（ＸＶＩ）を得ることができる。塩基としては、ナトリウムメトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、トリエチルアミン等の塩基を用いることができる。溶媒としては、メタノール、エタノール、含水メタノール等が好ましい。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。
（１４）工程１４（シリル化）
化合物（ＸＶＩ）中の水酸基をトリメチルシリル基等のシリル基で保護することにより、化合物（ＸＶＩＩ）を得ることができる。化合物（ＸＶＩ）と、トリメチルシリルクロリド、トリエチルシリルクロリド、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ化合物（ＸＶＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等が好ましい。また、好ましい反応温度は０℃〜室温である。
（１５）工程１５（カップリング）
化合物（ＸＶＩＩ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、アルデヒド（ＸＶＩＩＩ）を加えることで化合物（ＸＩＸ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。
（１６）工程１６（酸加水分解）
上記で得られた化合物（ＸＩＸ）を製造法３、工程８に記載した酸加水分解反応によって化合物（ＸＸ）へ導くことができる。
（１７）工程１７（アセチル化）
上記で得られた化合物（ＸＸ）を製造法３、工程９に記載したアセチル化反応によって化合物（ＸＸＩ）へ導くことができる。
（１８）工程１８（還元）
上記で得られた化合物（ＸＸＩ）を製造法３、工程１０に記載した還元反応によって中間体（ＩＩ）へ導くことができる。
【００４６】
製造法４
中間体（ＩＩ）の製造法
中間体（ＩＩ）は以下に示す別ルートによって合成することもできる。ここでは、工程１９から２１までワンポットで行い工程数を短縮することができる。
【００４７】
ただし、記号は前記と同義である。
【００４８】
【化８】
0005505741.tif 000010
【００４９】
（１９）工程１９（カップリング）
化合物（ＸＸＩＩ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、グルコノラクトン（Ｘ）を加えることで化合物（ＸＸＩＩＩ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。
（２０）工程２０（シリル化）
上記工程１９に引き続いて、化合物（ＸＸＩＩＩ）の１位水酸基をトリメチルシリル基等のシリル基で保護することができる。工程１９の反応液に、トリメチルシリルクロリドを反応させ化合物（ＸＸＩＶ）を得ることができる。反応に用いる溶媒および好ましい反応温度は、工程１９と同じである。
（２１）工程２１（カップリング）
上記工程２０に引き続いて、生成した化合物（ＸＸＩＶ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、アルデヒド（ＸＶＩＩＩ）を加えることで化合物（ＸＸＶ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒および好ましい反応温度は、工程１９と同じである。
（２２）工程２２（酸加水分解）
上記で得られた化合物（ＸＸＶ）を製造法３、工程８に記載した酸加水分解反応によって化合物（ＸＸＶＩ）へ導くことができる。
（２３）工程２３（アセチル化）
上記で得られた化合物（ＸＸＶＩ）を製造法３、工程９に記載したアセチル化反応によって化合物（ＸＸＶＩＩ）へ導くことができる。
（２４）工程２４（還元）
上記で得られた化合物（ＸＸＶＩＩ）を製造法３、工程１０に記載した還元反応によって化合物（ＸＸＶＩＩＩ）へ導くことができる。
（２５）工程２５（アセチル化またはアルキル化）
化合物（ＸＸＶＩＩＩ）の水酸基を、アセチル基で保護するまたはメチル化等のアルキル化を行うことで、中間体（ＩＩ）を製造することができる。化合物（ＸＸＶＩＩＩ）と、無水酢酸、またはアセチルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ中間体（ＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等が好ましい。触媒として４−ジメチルアミノピリジン等を用いることもできる。また、好ましい反応温度は０℃〜室温である。一方、化合物（ＸＸＶＩＩＩ）と、ヨウ化メチル、ヨウ化エチル、２−ヨードプロパン等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ中間体（ＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトン等である。塩基としては炭酸カリウム、炭酸セシウム等が好ましい。
【実施例】
【００５０】
以下に、参考例、実施例及び試験例を挙げ、本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの記載によって限定的に解釈されるものではない。
【００５１】
参考例１  中間体（Ａ）の製造
【００５２】
【化９】
0005505741.tif 000011
【００５３】
（１）参考例１−１  化合物（Ａ１）
【００５４】
【化１０】
0005505741.tif 000012
【００５５】
３−イソプロピルフェノール（２５．０ｇ，０．１８４ｍｏｌ）の酢酸（２００ｍＬ）溶液にヨウ素酸カリウム（７．８８ｇ，０．０３６８ｍｏｌ）の水懸濁溶液（７５ｍＬ）とヨウ素（１８．７ｇ，０．０７３６ｍｏｌ）を加え、この反応溶液を室温で２０時間攪拌した。ジエチルエーテル（４００ｍＬ）と水（３００ｍＬ）を加えた後に有機層を分離した。その有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−(ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、無色油状の化合物（Ａ１）（２７．６ｇ，５７％）を得た。
1H NMR (200 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.16 - 1.25 (m, 6 H) 2.64 - 2.98 (m, 1 H) 5.21 (s, 1 H) 6.57 (dd, J=8.13, 2.20 Hz, 1 H) 6.88 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 7.54 (d, J=8.13 Hz, 1 H).
（２）参考例１−２  化合物（Ａ２）
【００５６】
【化１１】
0005505741.tif 000013
【００５７】
化合物（Ａ１）（２６．５ｇ，０．１０１ｍｏｌ）と炭酸カリウム（２０．９ｇ，０．１５２ｍｏｌ）のアセトニトリル懸濁液に臭化ベンジル（１４．４ｍＬ，０．１２１ｍｏｌ）を加え室温で２時間攪拌した。メタノール（１．０ｍＬ）を加え３０分攪拌した。不溶物をろ過し、ろ液を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−(ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、無色油状の化合物（Ａ２）（３０．２ｇ，８５％）を得た。
1H NMR (200 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 (d, J=7.03 Hz, 6 H) 2.84 (sept, J=7.03 Hz, 1 H) 5.14 (s, 2 H) 6.62 (dd, J=8.35, 2.20 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 7.23 - 7.58 (m, 5 H) 7.68 (d, J=8.35 Hz, 1 H).
（３）参考例１−３  化合物（Ａ３）
【００５８】
【化１２】
0005505741.tif 000014
【００５９】
化合物（Ａ２）（３０．２ｇ，８５．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３３ｍＬ，８５．７ｍｍｏｌ）を滴下し、同温にて１５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（４０．０ｇ，８５．７ｍｍoｌ）のＴＨＦ（２３０ｍL）溶液を１５分かけて滴下し、同温にて２０分間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（１５０ｍＬ）と水（１００ｍＬ）を加えた。この混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【００６０】
得られた残渣をメタンスルホン酸（２．９ｇ）を含むメタノール（８４０ｍＬ）溶液に溶解し、室温で１４．５時間攪拌した。トリエチルアミン（２．５ｍＬ）で中和し、反応混合物を濃縮した。
【００６１】
得られた残渣（４６．４ｇ）をピリジン（１２５ｍＬ）に溶解し、４℃に冷却した。この溶液に無水酢酸（７５ｍＬ）と４−ジメチルアミノピリジン（１０２ｍｇ，０．８３５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１９時間攪拌した。氷水（５００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し粗化合物（５３ｇ）を得た。
【００６２】
この粗化合物のクロロホルム（２５０ｍＬ）とアセトニトリル（２５０ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下４℃にてＥｔ3ＳｉＨ（１３．７ｍＬ，８５．７ｍｍｏｌ）とＢＦ3・Ｅｔ2Ｏ（１０．９ｍＬ，８５．７ｍｍｏｌ）を加え、同温で１．５時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１→２：１）にて精製し、淡黄色のアモルファスとして化合物（Ａ３）（１９．１ｇ，４０％；４工程）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 (d, J=6.99 Hz, 6 H) 1.78 (s, 3 H) 2.01 (s, 6 H) 2.05 (s, 3 H) 2.86 (sept, J=6.99 Hz, 1 H) 3.80 (ddd, J=9.95, 4.59, 2.25 Hz, 1 H) 4.06 - 4.13 (m, 1 H) 4.19 - 4.27 (m, 1 H) 4.96 (d, J=9.95 Hz, 1 H) 5.10 (s, 2 H) 5.16 - 5.25 (m, 1 H) 5.33 (t, J=9.17 Hz, 1 H) 5.40 - 5.49 (m, 1 H) 6.79 (d, J=1.40 Hz, 1 H) 6.85 (dd, J=7.93, 1.40 Hz, 1 H) 7.26 - 7.52 (m, 6 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 579[M+Na]+.
（４）参考例１−４  化合物（Ａ４）
【００６３】
【化１３】
0005505741.tif 000015
【００６４】
化合物（Ａ３）（１９．１ｇ，３４．３ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍＬ）溶液に１０％パラジウム活性炭（１．８ｇ）を加え、水素雰囲気下、室温にて２時間攪拌した。反応液をセライト濾過後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１→１：１）にて精製し、無色アモルファスとして化合物（Ａ４）（１２．３ｇ，７７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.89 Hz, 6 H) 1.83 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.82 (sept, J=6.89 Hz, 1 H) 3.87 (ddd, J=9.60, 3.85, 2.25 Hz, 1 H) 4.14 - 4.21 (m, 1 H) 4.27 - 4.36 (m, 1 H) 4.59 (d, J=9.33 Hz, 1 H) 5.23 - 5.39 (m, 3 H) 6.70 (dd, J=7.93, 1.71 Hz, 1 H) 6.77 (d, J=1.71 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.91 (d, J=7.93 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 489[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 501[M+Cl]−.
（５）参考例１−５  化合物（Ａ５）
【００６５】
【化１４】
0005505741.tif 000016
【００６６】
化合物（Ａ４）（１２．３ｇ，２６．３ｍｍｏｌ）の酢酸（１２０ｍＬ）溶液に、臭素（４．２ｇ，２６．３ｍｍｏｌ）を室温にて滴下した。反応混合液を１．５時間攪拌し、氷水（１５０ｍＬ）を加えた。この混合物を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を２−プロパノール（２０ｍＬ）に溶解し、ヘキサン（５０ｍＬ）を滴下した。混合物を４℃で１時間攪拌し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の化合物（Ａ５）（９．８ｇ，６８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12 - 1.26 (m, 6 H) 1.89 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.07 (s, 3 H) 2.13 (s, 3 H) 3.22 (sept, J=6.74 Hz, 1 H) 3.87 (ddd, J=9.48, 3.73, 2.18 Hz, 1 H) 4.14 - 4.22 (m, 1 H) 4.28 - 4.36 (m, 1 H) 4.53 (d, J=9.33 Hz, 1 H) 5.16 - 5.39 (m, 3 H) 6.82 (s, 1 H) 7.14 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 567[M+Na]+, 569[M+2+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 579[M+Cl]−, 581[M+2+Cl]−.
（６）参考例１−６  化合物（Ａ６）
【００６７】
【化１５】
0005505741.tif 000017
【００６８】
化合物（Ａ５）（１２．２ｇ，２２．３ｍｍｏｌ）のメタノール（１２０ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（２４ｍＬ）と水（２４ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間、さらに５０℃で１０時間攪拌し、溶媒を減圧下留去した。  
得られた残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０６ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下４℃にてトリエチルアミン（１８．６ｍＬ，１３４ｍｍｏｌ）とクロロトリメチルシラン（１４．３ｍＬ，１１２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を４℃にて１時間攪拌し、氷水（１５０ｍＬ）を加えた。この混合物をトルエンで３回抽出し、合わせた有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、油状の化合物（Ａ６）（１７．４ｇ）を得た。これを精製せずに次の反応に用いた。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm -0.28 (s, 9 H) 0.08 (s, 9 H) 0.19 (s, 9 H) 0.20 (s, 9 H) 0.29 (s, 9 H) 1.16 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.21 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 3.17 - 3.37 (m, 1 H) 3.41 - 3.56 (m, 3 H) 3.62 - 3.72 (m, 1 H) 3.76 - 3.86 (m, 1 H) 4.46 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 6.64 (s, 1 H) 7.47 (s, 1 H).
（７）参考例１−７  化合物（Ａ７）
【００６９】
【化１６】
0005505741.tif 000018
【００７０】
化合物（Ａ６）（１３．４ｇ，１５．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１４０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（７．７ｍＬ，２０．０ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、同温にて５分間攪拌した。次いで４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒド（３．２ｇ，１５．９ｍｍoｌ）のＴＨＦ（２４ｍL）溶液を１５分かけて滴下し、同温にて４５分間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）を加えた。この混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【００７１】
得られた残渣をメタンスルホン酸（０．９ｇ）を含むメタノール（２００ｍＬ）溶液に溶解し、室温で０．５時間攪拌した。トリエチルアミンで中和し、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム：メタノール＝１０：１→８：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（Ａ７）（５．７５ｇ，７３％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.01 and 1.04 (each d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.18 and 1.19 (each d, J=6.88 Hz, 3 H) 2.24 and 2.26 (each s, 3 H) 2.95 - 3.07 (m, 1 H) 3.35 - 3.69 (m, 5 H) 3.78 - 3.87 (m, 1 H) 4.37 - 4.50 (m, 1 H) 5.59 (s, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.98 - 7.10 (m, 2 H) 7.24 - 7.30 (m, 1 H) 7.33 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 479[M-OH]+, 481[M+2-OH]+．
（８）参考例１−８  中間体（Ａ）
【００７２】
【化１７】
0005505741.tif 000019
【００７３】
化合物（Ａ７）（５．７ｇ，１１．５ｍｍｏｌ）をピリジン（３４ｍＬ）に溶解した。この溶液に無水酢酸（１７ｍＬ）と４−ジメチルアミノピリジン（１０ｍｇ）を加え、室温で０．５時間攪拌した。氷水（５００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、粗化合物（８．５ｇ）を得た。
【００７４】
この粗化合物（８．５ｇ）のクロロホルム（８０ｍＬ）とアセトニトリル（８０ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下、４℃にてＥｔ3ＳｉＨ（２．７ｍＬ，１７．０ｍｍｏｌ）とＢＦ3・Ｅｔ2Ｏ（２．２ｍＬ，１７．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温まで温めた後に、同温で０．５時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をヘキサン：酢酸エチル＝４：１混合液から結晶化し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の中間体（Ａ）（５．３ｇ，６８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.93 (sept, J=6.68 Hz, 1 H) 3.76 (ddd, J=9.87, 4.51, 2.25 Hz, 1 H) 3.87 (s, 2 H) 4.06 (dd, J=12.51, 2.25 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.51, 4.51 Hz, 1 H) 4.49 (d, J=9.64 Hz, 1 H) 5.10 - 5.33 (m, 3 H) 6.59 (d, J=8.39 Hz, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.00 (s, 1 H) 7.20 (dd, J=8.39, 2.49 Hz, 1 H) 7.34 (d, J=2.49 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 713[M+Na]+, 715[M+2+Na]+．
また、中間体（Ａ）は参考例１−９、１０、１１に記載の方法でも合成することができる。
（９）参考例１−９  化合物（Ａ８）
【００７５】
【化１８】
0005505741.tif 000020
【００７６】
３−イソプロピルフェノール（１６０ｇ，１．１８ｍｏｌ）の酢酸（１．６Ｌ）溶液に、氷冷で内温１９℃を超えないように臭素（４６９ｇ，２．９４ｍｏｌ）の酢酸（３２０ｍＬ）溶液を３２分かけて滴下し、室温で１時間攪拌した。トルエン（１．６Ｌ）を加えた後に氷冷し、内温２０℃を超えないように１０％亜硫酸ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）を滴下して有機層を分離した。その有機層を１０％亜硫酸ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）、１０％塩化ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、淡黄色油状化合物（Ａ８）（３４２ｇ，９９％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.25 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 5.40 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.61 (s, 1 H).
（１０）参考例１−１０  化合物（Ａ９）
【００７７】
【化１９】
0005505741.tif 000021
【００７８】
化合物（Ａ８）（５１２ｇ，１．７４ｍｏｌ）のクロロホルム（１．７４Ｌ）溶液に、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３６４ｍＬ，２．０９ｍｏｌ）を加えて氷冷した。クロロメチルメチルエーテル（１５９ｍＬ，２．０９ｍｏｌ）を６０分かけて滴下し、室温で１時間攪拌した。反応液を氷冷し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５Ｌ）を滴下して有機層を分離した。その有機層を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５Ｌ）、水（１．５Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を減圧蒸留（０．９３〜１．５ｈｐａ，１２２℃〜１３７℃）にて精製し、淡黄色油状化合物（Ａ９）（５４８ｇ，９６％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.28 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.52 (s, 3 H) 5.23 (s, 2 H) 7.06 (s, 1 H) 7.69 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 339[M+H]+, 341[M+2+H]+.
（１１）参考例１−１１  中間体（Ａ）
化合物（Ａ９）（２１０ｇ，０．６２１ｍｏｌ）のＴＨＦ（３．１Ｌ）溶液に、アルゴン雰囲気下−８６〜−７４℃にて２．７６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（２３６ｍＬ，０．６５２ｍｏｌ）を２０分かけて滴下し、同温にて３５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（３０５ｇ，０．６５２ｍｏｌ）のＴＨＦ（８９０ｍＬ）溶液を３８分かけて滴下し、同温にて５０分間攪拌した。さらにトリメチルクロロシラン（８２．８ｍＬ，０．６５２ｍｍｏｌ）を４分かけて滴下し、同温にて３時間撹拌した。次いで２．７６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３２６ｍＬ，０．９０１ｍｏｌ）を２３分かけて滴下し、同温にて４０分間攪拌した。最後に４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒド（１３６ｇ，０．６８３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８９０ｍL）溶液を４３分かけて滴下し、同温にて３５分間撹拌した。反応液に水（３．１Ｌ）を加えて室温まで温めた。トルエン（３．１Ｌ）を加えて有機層を分離し、溶媒を減圧下留去した。
【００７９】
得られた残渣（６３３ｇ）をメタノール（３．１Ｌ）に溶解し、メタンスルホン酸（４．０３ｍＬ，０．０６２１ｍｏｌ）を加えて１時間加熱還流を行った。反応液を室温まで冷却後、トリエチルアミン（１７．３ｍＬ，０．１２４ｍｏｌ）で中和し、反応混合物を濃縮した。濃縮物（４１３ｇ）をトルエン（１．１Ｌ）に溶解し、水（１．６５Ｌ）で３回洗浄した。その有機層をトルエン（０．５５Ｌ）で希釈し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．５５Ｌ）で抽出した。その水層をトルエン（１．６５Ｌ）で洗浄し、２Ｍ塩酸水溶液（０．４３Ｌ）を加えて酸性にした。これをトルエン（１．１Ｌ）にて抽出した。その有機層を１０％塩化ナトリウム水溶液（１．１Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。
【００８０】
得られた残渣（２７３ｇ）をＴＨＦ（１．０１Ｌ）に溶解し、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７７６ｍＬ，４．５３ｍｏｌ）、無水酢酸（３８１ｍＬ，４．０３ｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（６１５ｍｇ，５．０４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２１時間攪拌した。反応液を氷冷して水（１．０Ｌ）とトルエン（１．０Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。
得られた残渣（３９０ｇ）をアセトニトリル（３．８５Ｌ）に溶解し、水（９．０７ｍＬ，０．５０４ｍｏｌ）、ｔ−ＢｕＭｅ２ＳｉＨ（３３４ｍＬ，２．０２ｍｏｌ）を加え、氷冷後ＴＭＳＯＴｆ（３９２ｍＬ，２．１７ｍｏｌ）を３０分かけて滴下した。同温で１時間撹拌後、無水酢酸（９５．２ｍＬ，１．０１ｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、さらに同温で１５分間撹拌した。反応液にトルエン（３．８５ｍＬ）と３％炭酸水素ナトリウム水溶液（１．９２Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を３％炭酸水素ナトリウム水溶液（１．９２Ｌ）、１０％塩化ナトリウム水溶液（１．９２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣を２−プロパノール（１．４２Ｌ）から結晶化し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の中間体（Ａ）（２０１ｇ，４７％；４工程）を得た。
【００８１】
参考例２  中間体（Ｂ）の製造
【００８２】
【化２０】
0005505741.tif 000022
【００８３】
（１）参考例２−１  化合物（Ｂ１）
【００８４】
【化２１】
0005505741.tif 000023
【００８５】
化合物（Ａ１）（２７．４ｇ，０．１０４ｍｏｌ）と炭酸カリウム（２１．７ｇ，０．１５６ｍｏｌ）のアセトニトリル懸濁液（２００ｍＬ）にヨウ化メチル（９．８ｍＬ，０．１５６ｍｏｌ）を加え４０℃で２．５時間攪拌した。ヨウ化メチル（３．５ｍＬ，０．０５２ｍｏｌ）を更に加え、同温で１時間攪拌した。不溶物をろ過し、ろ液を酢酸エチルで希釈した。有機層を水、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−(ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、淡黄色油状の化合物（Ｂ１）（２４．５ｇ，８５％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.24 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 2.87 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.88 (s, 3 H) 6.58 - 6.65 (m, 1 H) 6.70 (d, J=1.87 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=8.08 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 277[M+H]+.
（２）参考例２−２  化合物（Ｂ２）
【００８６】
【化２２】
0005505741.tif 000024
【００８７】
化合物（Ｂ１）（２４．５ｇ，８８．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３４ｍＬ，８８．６ｍｍｏｌ）を滴下し、同温にて５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（３７．６ｇ，８０．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液を２５分かけて滴下し、同温にて１０分間攪拌した。反応液に氷と水を加え、混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【００８８】
得られた残渣をメタンスルホン酸（１．５５ｇ，１６．１ｍｍｏｌ）を含むメタノール（３８０ｍＬ）溶液に溶解し、室温で２時間攪拌した。トリエチルアミン（１１．２ｍＬ，８０．５ｍｍｏｌ）で中和し、反応混合物を濃縮した。
【００８９】
得られた残渣（３０．２ｇ）をピリジン（１００ｍＬ）に溶解し、無水酢酸（１００ｍＬ）を加え、室温で１４時間攪拌した。氷水（４００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を１Ｍ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝６：４）にて精製し、淡黄色油状の化合物（Ｂ２）（３２．８ｇ，８０％；３工程）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.23 (d,J=6.92 Hz, 6 H) 1.84 (s, 3 H) 1.97 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.10 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.92 Hz, 1 H) 3.32 (s, 3 H) 3.87 (s, 3 H) 4.04 (ddd, J=10.18, 4.74, 2.41 Hz, 1 H) 4.17 - 4.23 (m, 1 H) 4.28 - 4.36 (m, 1 H) 5.25 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 5.36 (d, J=10.18 Hz, 1 H) 5.60 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.79 (dd, J=8.08, 1.55 Hz, 1 H) 7.26 - 7.33 (m, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 533[M+Na]+.
（３）参考例２−３  化合物（Ｂ３）
【００９０】
【化２３】
0005505741.tif 000025
【００９１】
化合物（Ｂ２）（３２．８ｇ，６４．０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１５０ｍＬ）とアセトニトリル（１５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、４℃にてＥｔ3ＳｉＨ（２１ｍＬ，１２８ｍｍｏｌ）とＢＦ3・Ｅｔ2Ｏ（４９ｍＬ，３８５ｍｍｏｌ）を加え、同温で１時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）にて精製し、淡黄色ガム状の化合物（Ｂ３）（２２．９ｇ，７４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.99 Hz, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.07 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.96 Hz, 1 H) 3.80 - 3.87 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 4.09 - 4.16 (m, 1 H) 4.22 - 4.29 (m, 1 H) 4.88 - 4.95 (m, 1 H) 5.18 - 5.27 (m, 1 H) 5.32 - 5.38 (m, 2 H) 6.71 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.83 (dd, J=7.93, 1.55 Hz, 1 H) 7.23 - 7.30 (m, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 503[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 515[M+Cl]−.
（４）参考例２−４  化合物（Ｂ４）
【００９２】
【化２４】
0005505741.tif 000026
【００９３】
化合物（Ａ４）の代わりに化合物（Ｂ３）を用いて、参考例１−５と同様の方法で淡黄色アモルファスの化合物（Ｂ４）（２５．５ｇ，９６％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.80 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.09 (s, 3 H) 3.31 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.77 - 3.82 (m, 1 H) 3.83 (s, 3 H) 4.10 - 4.17 (m, 1 H) 4.22 - 4.30 (m, 1 H) 4.83 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.17 - 5.38 (m, 3 H) 6.75 (s, 1 H) 7.49 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 581[M+Na]+, 583[M+2+Na]+.
（５）参考例２−５  化合物（Ｂ５）
【００９４】
【化２５】
0005505741.tif 000027
【００９５】
化合物（Ａ５）の代わりに化合物（Ｂ４）を用いて、参考例１−６と同様の方法で茶色油状の化合物（Ｂ５）（３０．３ｇ）を得た。これを精製せずに次の反応に用いた。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm -0.32 (s, 9 H) 0.09 (s, 9 H) 0.18 (s, 9 H) 0.20 (s, 9 H) 1.19 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 3.26 - 3.44 (m, 3 H) 3.52 - 3.58 (m, 2 H) 3.65 - 3.75 (m, 3 H) 3.76 - 3.83 (m, 1 H) 3.80 (s, 3 H) 4.60 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 6.72 (s, 1 H) 7.51 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 701[M+Na]+, 703[M+2+Na]+.
（６）参考例２−６  化合物（Ｂ６）
【００９６】
【化２６】
0005505741.tif 000028
【００９７】
化合物（Ａ６）の代わりに化合物（Ｂ５）を用いて、参考例１−７と同様の方法で茶色アモルファスの化合物（Ｂ６）（１４．７ｇ，６０％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.23 and 1.25 (each d, J=6.84 Hz, 6 H) 1.80 (s, 2 H) 2.27 and 2.29 (each s, 3 H) 2.30 - 2.58 (m, 2 H) 2.82 - 3.06 (m, 2 H) 3.34 and 3.35 (each s, 3 H) 3.38 - 3.86 (m, 6 H) 4.56 - 4.73 (m, 1 H) 5.53 (d, J=3.11 Hz, 1 H) 6.75 - 7.35 (m, 5 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 493[M-OH]+, 495[M+2-OH]+
（７）参考例２−７  中間体（Ｂ）
【００９８】
【化２７】
0005505741.tif 000029
【００９９】
化合物（Ａ７）の代わりに化合物（Ｂ６）を用いて、参考例１−８と同様の方法で無色アモルファスの中間体（Ｂ）（１４．２ｇ，８８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.11 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.75 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.90 (sept, J=6.68 Hz, 1 H) 3.71 - 3.90 (m, 3 H) 3.86 (s, 3H) 3.85 - 3.87 (m, 1 H) 4.05 - 4.15 (m, 1 H) 4.19 - 4.28 (m, 1 H) 4.77 - 4.85 (m, 1 H) 5.11 - 5.23 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.54 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.17 (dd, J=8.24, 2.64 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=2.64 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 685[M+Na]+, 687[M+2+Na]+．
参考例３  中間体（Ｃ）の製造
【０１００】
【化２８】
0005505741.tif 000030
【０１０１】
化合物（６Ａ）の代わりに化合物（Ｂ５）、４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒドの代わりに４−ブロモベンズアルデヒドを用いて、参考例１−７および参考例１−８と同様の方法で淡黄色アモルファスとして化合物（Ｃ）（２．２６ｇ）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.04 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.09 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.76 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.91 - 3.06 (m, 1 H) 3.80 - 3.88 (m, 4 H) 3.91 (d, J=5.13 Hz, 2 H) 4.06 - 4.18 (m, 1 H) 4.20 - 4.31 (m, 1 H) 4.82 - 4.93 (m, 1 H) 5.15 - 5.43 (m, 3 H) 6.77 (s, 1 H) 6.92 (d, J=8.55 Hz, 2 H) 7.11 (s, 1 H) 7.36 (d, J=8.55 Hz, 2 H).
参考例４  中間体（Ｄ）の製造
【０１０２】
【化２９】
0005505741.tif 000031
【０１０３】
（１）参考例４−１  化合物（Ｄ１）
【０１０４】
【化３０】
0005505741.tif 000032
【０１０５】
２，２−ジメチル−３−ブテノイックアシッド（J. Org. Chem., 第65巻, 8402項，2000年）（５．４２ｇ，４７．５ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、塩化オキサリル（４．４３ｍＬ，４９．９ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３滴）を加え、室温で１．５時間攪拌した。その後反応液を氷冷し、トリエチルアミン（１９．９ｍＬ，１４３ｍｍｏｌ）とα−アミノイソブチリックアシッドメチルエステル塩酸塩（１０．９ｇ，７１．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を３Ｍ塩酸水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）にて精製し、無色粉末の化合物（Ｄ１）（９．３８ｇ，９３％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.27 (s, 6 H) 1.51 (s, 6 H) 3.73 (s, 3 H) 5.17 - 5.32 (m, 2 H) 6.02 (dd, J=17.56, 10.57 Hz, 1 H) 6.25 (br. s., 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 214[M+H]+.
（２）参考例４−２  中間体（Ｄ）
【０１０６】
【化３１】
0005505741.tif 000033
【０１０７】
化合物（Ｄ１）（９．３８ｇ，４３．９ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液に４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１６．５ｍＬ，６６．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。その後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣を水に溶解し、３Ｍ塩酸水溶液を加えて中和した。この混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、無色粉末の中間体（Ｄ）（８．１９ｇ，９４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d)δ ppm 1.29 (s, 6 H) 1.54 (s, 6 H) 5.16 - 5.36 (m, 2 H) 6.01 (dd, J=17.49, 10.65 Hz, 1 H) 6.14 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 200[M+H]+, 222[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 198[M-H]−.
参考例５  中間体（Ｅ）の製造
【０１０８】
【化３２】
0005505741.tif 000034
【０１０９】
アルゴン雰囲気下、中間体（Ａ）（５．０ｇ，７．２３ｍｍｏｌ）、中間体（Ｄ）（２．５９ｇ，１３．０ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（３２８ｍｇ，１．４５ｍｍｏｌ）、トリ-Ｏ-トリルホスフィン（８８０ｍｇ，２．８９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３．０ｍＬ，９．００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２４ｍＬ）懸濁液を、マイクロウェーブ照射下１２０℃で２０分間攪拌した。反応液をセライトろ過し、酢酸エチルで洗浄した。ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１→酢酸エチル）にて精製し、淡黄色粉末の中間体（Ｅ）（４．５９ｇ，７８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.16, 1.18 (each d,
J=6.84 Hz, each 3 H) 1.40 (s, 6 H) 1.54 - 1.58 (m, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.36 (s, 3 H) 2.98 - 3.10 (m, 1 H) 3.71 - 3.79 (m, 1 H) 3.94 (s, 2 H) 4.01 - 4.08 (m, 1 H) 4.24 (dd, J=12.43, 4.51 Hz, 1 H) 4.47 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 5.07 - 5.32 (m, 3 H) 6.31 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.35 (s, 1 H) 6.55 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.77 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.12 - 7.18 (m, 1 H) 7.26 (s, 1 H) .
MS ESI/APCI Dual posi : 810[M+H]+, 832[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 808[M-H]−.
参考例６  中間体（Ｆ）の製造
【０１１０】
【化３３】
0005505741.tif 000035
【０１１１】
中間体Ａの代わりに中間体Ｂを用いて参考例５と同様の方法で黄色粉末の中間体（Ｆ）（２．０３ｇ，８７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.17, 1.14 (each d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.55 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.98 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.94 - 3.03 (m, 1 H) 3.76 - 3.83 (m, 1 H) 3.84 - 3.95 (m, 4 H) 4.06 - 4.15 (m, 1 H) 4.16 - 4.25 (m, 1 H) 4.81 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 5.12 - 5.20 (m, 1 H) 5.23 - 5.35 (m, 2 H) 6.29 (s, 1H) 6.31 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.52 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.67 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 7.06 - 7.14 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 782[M+H]+, 804[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 780[M-H]−.
参考例７  中間体（Ｇ）の製造
【０１１２】
【化３４】
0005505741.tif 000036
【０１１３】
中間体（Ａ）の代わりに中間体（Ｃ）を用いて参考例５と同様の方法で淡黄色アモルファスの中間体（Ｇ）（８５４ｍｇ，６０％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.08 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.12 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 6 H) 3.06 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.78 - 3.83 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 3.97 (s, 2 H) 4.07 - 4.18 (m, 1 H) 4.17 - 4.27 (m, 1 H) 4.87 (dd, J=6.76, 2.88 Hz, 1 H) 5.16 - 5.25 (m, 1 H) 5.27 - 5.40 (m, 2 H) 6.18 - 6.33 (m, 2 H) 6.54 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.77 (s, 1 H) 7.03 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.10 (s, 1 H) 7.29 (d, J=8.08 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 768[M+H]+, 790[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 766[M-H]−.
参考例８  中間体（Ｈ）の製造
【０１１４】
【化３５】
0005505741.tif 000037
【０１１５】
アルゴン雰囲気下、中間体（Ａ）（２１６ｇ，０．３１２ｍｏｌ）、２，２−ジメチル−３−ブテノイックアシッド（５３．４ｇ，０．４６７ｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（３．５０ｇ，１５．６ｍｍｏｌ）、トリ-Ｏ-トリルホスフィン（９．４８ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（８６．９ｍＬ，０．６２３ｍｏｌ）のアセトニトリル（６２３ｍＬ）懸濁液を、３時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却した後にクロロホルム（３００ｍＬ）とメタノール（１００ｍＬ）を加えて希釈し、セライトろ過した。ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣を酢酸エチル（１．３２Ｌ）に溶解させた。１Ｍ塩酸水溶液（０．９６Ｌ）、１０％塩化ナトリウム水溶液（１．２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、ろ液にさらに酢酸エチル（１．２Ｌ）を追加して、イソプロピルアミン（２８．２ｍＬ，０．３２７ｍｏｌ）を加え、氷浴中で１時間撹拌した。析出した沈殿をろ過して中間体（Ｈ）のイソプロピルアミン塩を得た。この塩を酢酸エチル（１．２Ｌ）、１Ｍ塩酸水溶液（５００ｍＬ）に溶解させて３０分間撹拌し、有機層を分離した。その有機層を１０％塩化ナトリウム水溶液（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去して無色のアモルファスとして中間体（Ｈ）（２０７ｇ，８８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.43 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.98 (sept, J=6.80 Hz, 1 H) 3.70 - 3.80 (m, 1 H) 3.91 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.18 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.35 Hz, 1 H) 4.43 - 4.50 (m, 1 H) 5.11 - 5.20 (m, 1 H) 5.22 - 5.33 (m, 2 H) 6.33 - 6.49 (m, 2 H) 6.68 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.06 - 7.14 (m, 1 H) 7.23 (d, J=1.40 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 747[M+Na]+.
参考例９  中間体（Ｉ）の製造
【０１１６】
【化３６】
0005505741.tif 000038
【０１１７】
２−アミノイソ酪酸（１５０ｇ，１．４５ｍｏｌ）を水（２．２Ｌ）に溶解し、炭酸ナトリウム（４６５ｇ，４．３９ｍｏｌ）を加えた。反応液を氷冷し、クロロギ酸ベンジル（２２７ｍＬ，１．６０ｍｏｌ）の１、４−ジオキサン（０．６３Ｌ）溶液を内温が１０℃を超えないように４５分かけて滴下した。室温で一晩撹拌後、反応液に水（３．５Ｌ）とトルエン（１．０Ｌ）を加え、水層を分離した。その水層にｐＨ＝１になるまで濃塩酸（７００ｍＬ）を滴下した。酢酸エチル（１．０Ｌ）を加えて１時間撹拌し、有機層を分離した。その有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥して乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【０１１８】
得られた残渣（３３８ｇ）をクロロホルム（１．７Ｌ）に溶解し、氷冷下Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（２５３ｇ，１．５６ｍｏｌ）を内温が２０℃を超えないように少量ずつ加えた。室温で３０分間撹拌後、再度氷冷して１，２−ジアミノ−２−メチルプロパン（１３８ｇ，１．５６ｍｏｌ）を２５分かけて滴下した。室温で１晩撹拌後、１０％炭酸カリウム水溶液（１．７Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥して乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【０１１９】
得られた残渣（４１７ｇ）をＴＨＦ（２．０Ｌ）に溶解し、Ｂｏｃ２Ｏ（３５５ｇ，１．６３ｍｏｌ）を加えて、室温で１．５時間撹拌した。その後反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥して乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【０１２０】
得られた残渣（５４９ｇ）をメタノール（２．７５Ｌ）に溶解し、１０％水酸化パラジウム（２７．５ｇ）を加え、水素雰囲気下室温にて４．５時間攪拌した。反応液をセライト濾過後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をヘプタン：酢酸エチル＝２：１混合液（１．７５Ｌ）から結晶化し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の中間体（Ｉ）（１９３ｇ，５３％；４工程）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.27 (s, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.43 (s, 9 H) 1.53 (br. s, 2 H) 3.39 (d, J=6.53 Hz, 2 H) 4.78 (br. s, 1 H) 8.04 (br. s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 274[M+H]+, 296[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 308[M+Cl]−.
実施例１−１
【０１２１】
【化３７】
0005505741.tif 000039
【０１２２】
中間体（Ｅ）（２００ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ）（５７ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（６５ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０ｍＬ）溶液にＮ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）（７１ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）を加え、室温で８時間攪拌した。反応液を水（５０ｍＬ）にあけ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝９：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（１−１）（１３２ｍｇ，６１％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.92Hz, each 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.23 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.41 (t, J=5.67 Hz, 2 H) 2.90 - 3.03 (m, 1 H) 3.25 - 3.34 (m, 2 H) 3.71 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.59, 2.18 Hz, 1 H) 4.23 - 4.32 (m, 1 H) 4.44 - 4.52 (m, 1 H) 5.11 - 5.20 (m, 1 H) 5.22 - 5.33 (m, 2 H) 6.33 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.41 (br. s., 1 H) 6.51 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 6.77 (br. s., 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.12 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 7.26 (s, 1 H) .
MS ESI/APCI  Dual posi : 880[M+H]+, 902[M+Na]+.
MS ESI/APCI  Dual nega : 914[M+Cl]−.
実施例１−２
【０１２３】
【化３８】
0005505741.tif 000040
【０１２４】
化合物（１−１）（１２７ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）のメタノール（２．０ｍＬ）溶液にナトリウムメトキシド（４．８８Ｍ / ＭｅＯＨ，１０μＬ）を加え、室温で１時間攪拌した。ドライアイスを少量加えて、反応液を中和し、溶媒を減圧下留去した。
【０１２５】
得られた残渣をＮＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム：メタノール＝９：１→６：４）で精製し、無色アモルファスの化合物（１−２）（７７ｍｇ，８０％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.10 (d, J=6.92 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.23 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.40 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 2.87 - 2.96 (m, 1 H) 3.28 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.34 - 3.41 (m, 2 H) 3.43 - 3.50 (m, 1 H) 3.51 - 3.57 (m, 1 H) 3.67 (dd, J=12.15, 2.52 Hz, 1 H) 3.84 (d, J=11.46 Hz, 1 H) 3.89 (s, 2 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.75 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.11 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H) .
MS ESI/APCI Dual posi : 670[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 668[M-H]−, 704[M+Cl]−.
Anal. Calcd for C37H55N3O8・1.4H2O: C, 63.94; H，8.38； N，6.05. Found: C, 64.13; H, 8.39; N, 5.88.
実施例２−１
【０１２６】
【化３９】
0005505741.tif 000041
【０１２７】
Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（２−１）（１０３ｍｇ，４７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.14, 1.16 (each d, J=6.99 Hz, each 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.71 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.79 - 2.87 (m, 4 H) 2.87 - 2.99 (m, 1 H) 3.56 - 3.66 (m, 4 H) 3.75 - 3.94 (m, 3 H) 4.12 - 4.20 (m, 1 H) 4.25 - 4.34 (m, 1 H) 4.44 - 4.52 (m, 1 H) 5.23 - 5.32 (m, 3 H) 6.30 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.53 (s, 1 H) 6.68 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.05 - 7.12 (m, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 836[M+H]+, 858[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 834[M-H]−, 870[M+Cl]−.
実施例２−２
【０１２８】
【化４０】
0005505741.tif 000042
【０１２９】
化合物（１−１）の代わりに化合物（２−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（２−２）（５２ｍｇ，６６％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.10 (d, J=6.42 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.70 (br. s, 4 H) 2.90 - 2.95 (m, 1 H) 3.36 - 3.39 (m, 2 H) 3.43 - 3.61 (m, 7 H) 3.65 - 3.69 (m, 1 H) 3.84 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.88 (s, 2 H) 4.46 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.76 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.95 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 668[M+H]+, 690[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 666[M-H]−, 702[M+Cl]−.
実施例３−１
【０１３０】
【化４１】
0005505741.tif 000043
【０１３１】
Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（３−１）（１３５ｍｇ，６１％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.37 (s, 6 H) 1.60 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.33 - 2.41 (m, 7 H) 2.88 - 3.04 (m, 1 H) 3.60 - 3.70 (m, 4 H) 3.72 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.59, 2.33 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.59, 4.51 Hz, 1 H) 4.43 - 4.54 (m, 1 H) 5.10 - 5.20 (m, 1 H) 5.22 - 5.32 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.86 (s, 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.08 - 7.14 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 892[M+H]+, 914[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 926[M+Cl]−.
実施例３−２
【０１３２】
【化４２】
0005505741.tif 000044
【０１３３】
化合物（１−１）の代わりに化合物（３−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（３−２）（７９ｍｇ，７９％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4)δ ppm 1.10 (d, J=6.88 Hz, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.16 (s, 3 H) 2.22 - 2.38 (m, 7 H) 2.87 - 2.96 (m, 1 H) 3.35 - 3.41 (m, 2 H) 3.42 - 3.51 (m, 2 H) 3.51 - 3.56 (m, 1 H) 3.56 - 3.71 (m, 5 H) 3.84 (d, J=12.38 Hz, 1 H) 3.88 (s, 2 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.75 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.09 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 682[M+H]+, 704[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 680[M-H]−, 716[M+Cl]−.
実施例４−１
【０１３４】
【化４３】
0005505741.tif 000045
【０１３５】
Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−エチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色ガム状の化合物（４−１Ａ）（８７．９ｍｇ，３８％）と無色ガム状の化合物（４−１Ｂ）（４２．９ｍｇ，１９％）を得た。
【０１３６】
化合物（４−１Ａ）
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.07 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.12 -1.16 (m, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.34 - 2.44 (m, 9 H) 2.90 - 3.05 (m, 1 H) 3.60 - 3.72 (m, 4 H) 3.72 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.36, 1.94 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.36, 4.43 Hz, 1 H) 4.48 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 5.15 (t, J=9.79 Hz, 1 H) 5.22 - 5.31 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.2 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.2 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.86 - 6.93 (m, 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.11 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 907[M+H]+, 929[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 941[M+Cl]−.
化合物（４−１Ｂ）
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.03 - 1.19 (m, 9 H) 1.37 (s, 6 H) 1.62 (s, 6 H) 1.71 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.33 - 2.46 (m, 6 H) 2.93 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.58 - 3.71 (m, 4 H) 3.73 - 3.91 (m, 3 H) 4.12 - 4.21 (m, 1 H) 4.24 - 4.34 (m, 1 H) 4.48 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 5.21 - 5.34 (m, 3 H) 6.30 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.53 (s, 1 H) 6.68 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 865[M+H]+, 887[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 899[M+Cl]−.
実施例４−２
【０１３７】
【化４４】
0005505741.tif 000046
【０１３８】
化合物（４−１Ａ）（８７．９ｍｇ，０．０９７３ｍｍｏｌ）と化合物（４−１Ｂ）（４２．９ｍｇ，０．０４８６ｍｍｏｌ）にトリエチルアミン／水／メタノール（１／１／５，５ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１晩攪拌し、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝８：２）で精製し、無色アモルファスの化合物（４−２）（７９．２ｍｇ，７８％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 0.98 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.88 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.23 - 2.42 (m, 9 H) 2.85 - 2.99 (m, 1 H) 3.35 - 3.41 (m, 2 H) 3.42 - 3.48 (m, 1 H) 3.50 - 3.56 (m, 1 H) 3.55 - 3.71 (m, 5 H) 3.81 - 3.90 (m, 3 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.71 - 6.77 (m, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.98 (s, 1 H) 7.09 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 696[M+H]+, 718[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 694[M-H]−.
Anal. Calcd for C39H57N3O8・1.2H2O : C, 65.3; H, 8.34; N, 5.86. Found : C, 65.3; H, 8.36; N, 5.68.
実施例５−１
【０１３９】
【化４５】
0005505741.tif 000047
【０１４０】
中間体（Ｅ）（２０５ｍｇ，０．２５３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（６８ｍｇ，０．５０６ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピペリジン（６５ｍｇ，０．５０６ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０ｍＬ）溶液にＥＤＣ・ＨＣｌ（９７ｍｇ，０．５０６ｍｍｏｌ）を加え、７０℃で２時間攪拌した。反応液を水（５０ｍＬ）にあけ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝３：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（５−１）（８０ｍｇ，３４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.30 - 1.49 (m, 2 H) 1.38 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.84 (d, J=12.75 Hz, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.27 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.81 (t, J=12.28 Hz, 2 H) 2.97 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.76 (ddd, J=10.03, 4.66, 2.25 Hz, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.25 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.66 Hz, 1 H) 4.33 - 4.53 (m, 3 H) 5.10 - 5.34 (m, 3 H) 6.31 (d, J=15.00 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=15.00 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.97 - 7.04 (m, 2 H) 7.11 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 920[M+H]+．
MS ESI/APCI Dual nega : 954[M+Cl]−．
実施例５−２
【０１４１】
【化４６】
0005505741.tif 000048
【０１４２】
化合物（１−１）の代わりに化合物（５−１）を用いて、実施例１−２と同様の方法で、無色アモルファスの化合物（５−２）（３３ｍｇ，５３％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.08 (d, J=6.42 Hz, 6 H) 1.21 - 1.32 (m, 2 H) 1.35 (s, 6 H) 1.43 (s, 6 H) 1.73 (br. s., 2 H) 2.16 (s, 6 H) 2.28 (s, 3H) 2.28 - 2.37 (m, 1 H) 2.89 (sept, J=6.42 Hz, 1 H) 3.31 - 3.33 (m, 2 H) 3.44 (t, J=8.71 Hz, 1 H) 3.48 - 3.56 (m, 1 H) 3.66 (dd, J=11.92, 2.75 Hz, 1 H) 3.83 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.86 (s, 2 H) 4.45 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.35 - 6.41 (m, 1 H) 6.43 - 6.47 (m, 1 H) 6.72 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.78 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.21 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 710[M+H]+．
MS ESI/APCI Dual nega : 708[M-H]−．
Anal. Calcd for C40H59N3O8・1.5H2O : C, 65.19; H, 8.50; N, 5.70. Found : C, 64.81; H, 8.46; N, 5.61.
実施例６−１
【０１４３】
【化４７】
0005505741.tif 000049
【０１４４】
中間体（Ｅ）（６８０ｍｇ，０．７４６ｍｍｏｌ）のクロロホルム（５．０ｍＬ）溶液にＣＤＩ（１８２ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。次いで、１，２−ジアミノ−２−メチルプロパン（７９ｍｇ，０．８９５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１８時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで２回抽出した。合わせた有機層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝８５：１５）で精製し、無色アモルファスの化合物（６−１）（１４０ｍｇ，２１％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.11 - 1.17 (m, 6 H) 1.11 (s, 6 H) 1.39 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.31 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.89 - 3.05 (m, 1 H) 3.14 (d, J=5.91 Hz, 2 H) 3.76 (ddd, J=9.71, 4.51, 2.10 Hz, 1 H) 3.93 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.51, 2.10 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.51, 4.51 Hz, 1 H) 4.49 (d, J=7.46 Hz, 1 H) 5.11 - 5.20 (m, 1 H) 5.23 - 5.31 (m, 2 H) 6.26 (s, 1 H) 6.29 - 6.38 (m, 1 H) 6.48 - 6.57 (m, 1 H) 6.69 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.97 - 7.03 (m, 3 H) 7.12 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 880[M+H]+.
実施例６−２
【０１４５】
【化４８】
0005505741.tif 000050
【０１４６】
化合物（１−１）の代わりに化合物（６−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（６−２）（１０４ｍｇ，９８％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.02 (s, 6 H) 1.05 - 1.10 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.29 (s, 3 H) 2.85 - 2.93 (m, 1 H) 3.09 (s, 2 H) 3.34 - 3.39 (m, 2 H) 3.42 - 3.47 (m, 1 H) 3.52 (t, J=9.40 Hz, 1 H) 3.63 - 3.69 (m, 1 H) 3.80 - 3.85 (m, 1 H) 3.86 (s, 2 H) 4.46 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.35 - 6.41 (m, 1 H) 6.44 - 6.51 (m, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.78 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.06 - 7.10 (m, 1 H) 7.23 (s, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 670[M+H]+, 692[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 668[M-H]-, 704[M+Cl]−.
また、化合物（６−２）は、次の実施例６−３及び６−４に記載の方法でも合成することができる。
【０１４７】
実施例６−３
【０１４８】
【化４９】
0005505741.tif 000051
【０１４９】
中間体（Ｈ）（２０５ｇ，０．２７３ｍｏｌ）、中間体（Ｉ）（９７．０ｇ，０．３５５ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（６２．７ｇ，０．４１０ｍｏｌ）、トリエチルアミン（１１４ｍＬ，０．８１９ｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．９８Ｌ）溶液にＥＤＣ・ＨＣｌ（７８．５ｇ，０．４１０ｍｏｌ）を加え、室温で１１時間攪拌した。反応液にトルエン（１．０Ｌ）と１０％塩化ナトリウム水溶液（２．０Ｌ）を加え、有機層を分離した。水層をトルエン（１．０Ｌ）から抽出し、合わせた有機層を５％塩化ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を２−プロパノール（３００ｍＬ）に５０℃で溶解させ、ヘプタン（２．７Ｌ）を滴下した。混合溶液を氷冷で１時間攪拌し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の化合物（６−３）（２２１ｇ，８３％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.26 (s, 6 H) 1.39 (s, 6 H) 1.44 (s, 9 H) 1.55 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.97 (sept, J=6.88 Hz, 1 H) 3.41 (d, J=5.60 Hz, 2 H) 3.72 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.02 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.51 Hz, 1 H) 4.45 - 4.52 (m, 1 H) 4.65 (s, 1 H) 5.11 - 5.19 (m, 1 H) 5.22 - 5.33 (m, 2 H) 6.29 - 6.39 (m, 1 H) 6.46 - 6.57 (m, 2 H) 6.69 (d, J=8.00 Hz, 1 H) 6.96 - 7.03 (m, 2 H) 7.11 (dd, J=8.00, 1.63 Hz, 1 H) 7.24 - 7.26 (m, 1 H) 7.59 (br. s, 1 H).
実施例６−４
化合物（６−３）（２２０ｇ，０．２２５ｍｏｌ）のクロロホルム（３．０Ｌ）溶液に、室温でトリフルオロ酢酸（２９７ｍＬ，３．８８ｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、同温にて２０時間攪拌した。反応液をトルエン（３．０Ｌ）で希釈して濃縮した。残渣を酢酸エチル（３．０Ｌ）に溶解し、１０％炭酸ナトリウム水溶液（１．２Ｌ）、飽和食塩水（１．０Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。
【０１５０】
得られた残渣（２４０ｇ）をメタノール（１．５Ｌ）に溶解し、氷冷後トリエチルアミン（０．３Ｌ）、水（０．３Ｌ）を加えた。室温で１３時間撹拌後、更にメタノール（１．５Ｌ）、トリエチルアミン（０．３Ｌ）、水（０．３Ｌ）を加えて室温で２０時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、メタノールで共沸した。得られた残渣をＮＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィ−（酢酸エチル：エタノール：水＝１５：２：１→１０：２：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（６−２）（１２９ｇ，８６％；２工程）を得た。
【０１５１】
実施例７−１
【０１５２】
【化５０】
0005505741.tif 000052
【０１５３】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）を用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（７−１）（１１２ｍｇ，７４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12, 1.14 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.37 (s, 6 H) 1.51 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.23 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.41 (t, J=6.22 Hz, 2 H) 2.86 - 2.99 (m, 1 H) 3.25 - 3.33 (m, 2 H) 3.76 - 3.90 (m, 6 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.26 (m, 1 H) 4.76 - 4.85 (m, 1 H) 5.13 - 5.22 (m, 1 H) 5.26 - 5.36 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.37 (s, 1 H) 6.50 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.61 - 6.67 (m, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.06 - 7.12 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 852[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 886[M+Cl]−.
実施例７−２
【０１５４】
【化５１】
0005505741.tif 000053
【０１５５】
化合物（１−１）の代わりに化合物（７−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（７−２）（６９ｍｇ，７８％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.21 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.39 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 2.93 - 3.02 (m, 1 H) 3.24 - 3.39 (m, 4 H) 3.42 - 3.48 (m, 1 H) 3.49 - 3.54 (m, 1 H) 3.58 - 3.65 (m, 1 H) 3.80 - 3.87 (m, 4 H) 3.91 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.80 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.08 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.80 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 684[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 682[M-H]−, 718[M+Cl]−.
Anal. Calcd for C38H57N3O8・1.7H2O: C, 63.88; H, 8.52; N, 5.88. Found: C, 63.84; H, 8.41; N, 5.75.
実施例８−１
【０１５６】
【化５２】
0005505741.tif 000054
【０１５７】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにＮ−ｔ−ブトキシカルボニルエチレンジアミンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（８−１）（１４５ｍｇ，８９％）を得た。
MS ESI/APCI Dual posi : 924[M+H]+，946[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 958[M+Cl]−.
実施例８−２
【０１５８】
【化５３】
0005505741.tif 000055
【０１５９】
化合物（８−１）のクロロホルム（３．０ｍｌ)溶液に、トリフルオロ酢酸（６００μＬ）を加えて室温で３時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝９５：５→６０：４０）で精製して、無色アモルファスの化合物（８−２）（６８ｍｇ、５５％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.14，1.16 (each d, J=6.37 Hz, each 3 H) 1.32 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.98 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.90 - 3.02 (m, 1 H) 3.22 - 3.34 (m, 2 H) 3.48 - 3.57 (m, 2 H) 3.76 - 3.96 (m, 6 H) 4.07 - 4.14 (m, 1 H) 4.17 - 4.25 (m, 1 H) 4.79 - 4.87 (m, 1 H) 5.12 - 5.22 (m, 1 H) 5.24 - 5.36 (m, 2 H) 6.32 (s, 1 H) 6.40 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.51 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.65 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 6.82 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.07 - 7.13 (m, 1 H) 7.28 - 7.31 (m, 1 H) 8.04 (br. s., 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 824[M+H]+, 846[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 858[M+Cl]−.
実施例８−３
【０１６０】
【化５４】
0005505741.tif 000056
【０１６１】
化合物（１−１）の代わりに化合物（８−２）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（８−３）（２２ｍｇ，４４％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d４) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.63 - 2.71 (m, 2 H) 2.94 - 3.03 (m, 1 H) 3.23 (t, J=5.96 Hz, 2 H) 3.28 - 3.39 (m, 4 H) 3.43 - 3.48 (m, 1 H) 3.48 - 3.54 (m, 1 H) 3.62 (dd, J=12.15, 5.73 Hz, 1 H) 3.79 - 3.88 (m, 2 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.40 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.07 (s, 1 H) 7.11 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.26 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 656[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 654[M-H]−, 690[M+Cl]−.
実施例９−１
【０１６２】
【化５５】
0005505741.tif 000057
【０１６３】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（９−１）（４２ｍｇ，３８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12, 1.14 (each d, J=6.99 Hz, each 3 H) 1.37 (s, 6 H) 1.58 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.79 - 2.86 (m, 4 H) 2.88 - 2.99 (m, 1 H) 3.57 - 3.64 (m, 4 H) 3.76 - 3.95 (m, 6 H) 4.07 - 4.14 (m, 1 H) 4.18 - 4.26 (m, 1 H) 4.77 - 4.84 (m, 1 H) 5.13 - 5.22 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.29 (d, J=16.16 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.16 Hz, 1 H) 6.64 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.77 - 6.83 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.05 - 7.11 (m, 1 H) 7.22 (br. s., 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 850[M+H]+, 872[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 884[M+Cl]−.
実施例９−２
【０１６４】
【化５６】
0005505741.tif 000058
【０１６５】
化合物（１−１）の代わりに化合物（９−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（９−２）（２７ｍｇ，９４％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d４) δ ppm 1.14, 1.16 (each d, J=6.42Hz, each 3 H)  1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.69 (br. s., 4 H) 2.95 - 3.03 (m, 1 H)  3.28 - 3.38 (m, 2 H) 3.42 - 3.52 (m, 2 H) 3.53 - 3.65 (m, 5 H) 3.80 - 3.84 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.06 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 682[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 680[M-H]−, 716[M+Cl]−.
実施例１０−１
【０１６６】
【化５７】
0005505741.tif 000059
【０１６７】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにＮ−メチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの粗化合物（１０−１）（１００ｍｇ）を得た。この物をさらに精製することなく、次の反応に用いた。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12 (d, J=8.5 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=8.5 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.56 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.38 - 2.50 (m, 4 H) 2.85 - 3.02 (m, 1 H) 3.61 - 3.74 (m, 4 H) 3.76 - 3.84 (m, 1 H) 3.81 - 3.96 (m, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.75 - 4.88 (m, 1 H) 5.11 - 5.24 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.22 - 6.38 (m, 1 H) 6.43 - 6.54 (m, 1 H) 6.59 - 6.70 (m, 2 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 - 7.02 (m, 1 H) 7.04 - 7.12 (m, 1 H) 7.20 - 7.26 (m, 1 H)．
実施例１０−２
【０１６８】
【化５８】
0005505741.tif 000060
【０１６９】
化合物（１−１）の代わりに化合物（１０−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１０−２）（８．０ｍｇ，９％；２工程）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d４) δ ppm 1.09 - 1.16 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 2.12 - 2.16 (m, 3 H) 2.23 - 2.33 (br. s., 4 H) 2.30 (s, 3 H) 2.92 - 3.01 (m, 1 H) 3.28 (s, 2 H) 3.30 - 3.38 (m, 1 H) 3.41 - 3.51 (m, 2 H) 3.55 - 3.66 (m, 5 H) 3.78 - 3.86 (m, 4 H) 3.90 (s, 2 H) 4.59 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.33 - 6.39 (m, 1 H) 6.42 - 6.47 (m, 1 H) 6.72 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.90 (s, 1 H) 7.04 - 7.11 (m, 2 H) 7.19 - 7.24 (m, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 696[M+H]+, 718[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 694[M-H]-, 730[M+Cl]−.
実施例１１−１
【０１７０】
【化５９】
0005505741.tif 000061
【０１７１】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−エチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で淡黄色アモルファスの化合物（１１−１）（２００ｍｇ，８９％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.07 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.11 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.59 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.36 - 2.44 (m, 6 H) 2.93 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.61 - 3.71 (m, 4 H) 3.77 - 3.84 (m, 1 H) 3.83 - 3.94 (m, 5 H) 4.05 - 4.16 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.76 - 4.86 (m, 1 H) 5.14 - 5.23 (m, 1 H) 5.25 - 5.37 (m, 2 H) 6.29 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.64 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 6.77 - 6.86 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 879[M+H]+, 901[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 913[M+Cl]−.
実施例１１−２
【０１７２】
【化６０】
0005505741.tif 000062
【０１７３】
化合物（４−１Ａ）、化合物（４−１Ｂ）の代わりに化合物（１１−１）を用いて実施例４−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１１−２）（１１８ｍｇ，７３％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 0.97 (t, J=7.11 Hz, 3 H) 1.10 - 1.19 (m, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.26 - 2.42 (m, 9 H) 2.97 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.32 - 3.40 (m, 2 H) 3.43 - 3.48 (m, 1 H) 3.48 - 3.55 (m, 1 H) 3.55 - 3.72 (m, 5 H) 3.79 - 3.89 (m, 4 H) 3.91 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.5 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.5 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.04 - 7.14 (m, 2 H) 7.23 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 710[M+H]+, 732[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 744[M+Cl]−.
Anal. Calcd for C40H59N3O8・1.5H2O : C, 65.2; H, 8.48; N, 5.70. Found : C, 65.1; H, 8.38; N, 5.64.
実施例１２−１
【０１７４】
【化６１】
0005505741.tif 000063
【０１７５】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）を用いて実施例５−１と同様の方法で、無色アモルファスの化合物（１２−１）（５５ｍｇ、４０％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12, 1.14 (each d, J=6.92 Hz, each 3 H) 1.28 - 1.47 (m, 8 H) 1.60 (s, 6 H) 1.73 - 1.89 (m, 5 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.22 - 2.35 (m, 10 H) 2.73 - 2.99 (m, 3 H) 3.76 - 3.84 (m, 1 H) 3.84 - 3.90 (m, 5 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.26 (m, 1 H) 4.34 - 4.50 (m, 2 H) 4.75 - 4.86 (m, 1 H) 5.13 - 5.23 (m, 1 H) 5.26 - 5.39 (m, 2 H) 6.30 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.63 (d, J=8.39 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.94 - 7.01 (m, 2 H) 7.04 - 7.11 (m, 1 H) 7.23 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 892[M+H]+, 914[M+Na]+.
実施例１２−２
【０１７６】
【化６２】
0005505741.tif 000064
【０１７７】
化合物（１−１）の代わりに化合物（１２−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１２−２）（５５ｍｇ，８２％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.24 - 1.33 (m, 2 H) 1.37 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 1.75 (br. s, 2 H) 2.17 (s, 6 H) 2.30 - 2.39 (m, 4 H) 2.93 - 3.01 (m, 1 H) 3.28 - 3.38 (m, 5 H) 3.43 - 3.47 (m, 1 H) 3.47 - 3.53 (m, 1 H) 3.62 (dd, J=12.15, 5.73 Hz, 1 H) 3.80 - 3.86 (m, 3 H) 3.91 (s, 2 H) 4.48 (br. s., 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.40 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.06 - 7.11 (m, 2 H) 7.23 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 724[M+H]+, 746[M+Na]+ .
MS ESI/APCI Dual nega : 722[M-H]−, 758[M+Cl]−.
Anal. Calcd for C41H61N3O8・2.5H2O: C, 64.04; H，8.65; N，5.46. Found: C, 64.01; H, 8.38; N，5.49．
実施例１３−１
【０１７８】
【化６３】
0005505741.tif 000065
【０１７９】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）を用いて実施例６−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１３−１）（１．９８ｇ，９９％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.10 (s, 6 H) 1.12 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.56 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.85 - 3.02 (m, 1 H) 3.13 (d, J=5.91 Hz, 2 H) 3.76 - 3.84 (m, 1 H) 3.81 - 3.96 (m, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.75 - 4.88 (m, 1 H) 5.11 - 5.24 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.22 - 6.38 (m, 1 H) 6.43 - 6.54 (m, 1 H) 6.59 - 6.70 (m, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 - 7.02 (m, 2 H) 7.04 - 7.12 (m, 1 H) 7.20 - 7.26 (m, 1 H)．
実施例１３−２
【０１８０】
【化６４】
0005505741.tif 000066
【０１８１】
化合物（１−１）の代わりに化合物（１３−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１３−２）（１．０ｇ，６５％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.01 (s, 6 H) 1.09 - 1.15 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.43 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.91 - 3.00 (m, 1 H) 3.08 (s, 2 H) 3.27 - 3.36 (m, 5 H) 3.41 - 3.46 (m, 1 H) 3.47 - 3.52 (m, 1 H) 3.60 (dd, J=11.92, 5.96 Hz, 1 H) 3.80 - 3.84 (m, 4 H) 3.90 (s, 2 H) 4.59 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.36 - 6.41 (m, 1 H) 6.45 - 6.50 (m, 1 H) 6.71 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.90 (s, 1 H) 7.06 (s, 1 H) 7.07 - 7.10 (m, 1 H) 7.20 - 7.25 (m, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 684[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 682[M-H]-, 718[M+Cl]−.
実施例１４−１
【０１８２】
【化６５】
0005505741.tif 000067
【０１８３】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに４−アミノ−１−ｔ−ブトキシカルボニルピペリジンを用いて実施例１−１と同様の方法で淡黄色の油状化合物（１４−１）（２００ｍｇ，ｑｕａｎｔ．）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.11 (d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.25 - 1.33 (m, 2 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 9 H) 1.48 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.79 - 1.93 (m, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.90 - 2.98 (m, 3 H) 3.75 - 4.00 (m, 9 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.79 - 4.86 (m, 1 H) 5.19 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 5.26 - 5.35 (m, 2 H) 6.09 (s, 1 H) 6.26 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.65 (d, J=8.32 Hz, 1 H) 6.74 - 6.83 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (dd, J=8.32, 2.72 Hz, 1 H) 7.22 (d, J=2.72 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 965[M+H]+, 987[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 999[M+Cl]−.
実施例１４−２
【０１８４】
【化６６】
0005505741.tif 000068
【０１８５】
化合物（１４−１）（１８５ｍｇ，０．１９２ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（４５０μＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣にトリエチルアミン／水／メタノール（１／１／５，４ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で一晩攪拌した。溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝８：２）で精製し、無色アモルファスの化合物（１４−２）（１０３ｍｇ，７７％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.14 (d, J=5.50 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=5.50 Hz, 3 H) 1.27 - 1.35 (m, 2 H) 1.37 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 1.78 (d, J=11.46 Hz, 2 H) 2.33 (s, 3 H) 2.56 - 2.68 (m, 2 H) 2.95 - 3.03 (m, 3 H) 3.33 - 3.37 (m, 2 H) 3.43 - 3.48 (m, 1 H) 3.49 - 3.53 (m, 1 H) 3.57 - 3.66 (m, 1 H) 3.68 - 3.75 (m, 1 H) 3.81 - 3.84 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.34 - 6.43 (m, 1 H) 6.45 - 6.56 (m, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.04 - 7.16 (m, 2 H) 7.26 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 696[M+H]+, 718[M+Na]+.
実施例１５−１
【０１８６】
【化６７】
0005505741.tif 000069
【０１８７】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｇ）を用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１５−１）（１０３ｍｇ，９４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.05 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.49 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.46 (s, 6 H) 2.64 - 2.78 (m, 2 H) 3.04 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.38 - 3.49 (m, 2 H) 3.78 - 3.83 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.87 - 4.04 (m, 2 H) 4.08 - 4.18 (m, 1 H) 4.18 - 4.30 (m, 1 H) 4.87 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.16 - 5.27 (m, 1 H) 5.28 - 5.44 (m, 2 H) 6.35 (s, 1 H) 6.40 - 6.57 (m, 2 H) 6.77 (s, 1 H) 7.01 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.13 (s, 1 H) 7.32 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.40 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 839[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 873[M+Cl]−.
実施例１５−２
【０１８８】
【化６８】
0005505741.tif 000070
【０１８９】
化合物（４−１Ａ）、化合物（４−１Ｂ）の代わりに化合物（１５−１）を用いて実施例４−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１５−２）（６２．１ｍｇ，７５％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.07 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.09 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.23 (s, 6 H) 2.41 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.10 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.26 - 3.30 (m, 2 H) 3.35 - 3.45 (m, 2 H) 3.45 - 3.52 (m, 1 H) 3.54 - 3.60 (m, 1 H) 3.62 - 3.69 (m, 1 H) 3.79 - 3.89 (m, 4 H) 3.99 (s, 2 H) 4.65 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.52 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 7.07 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.23 (s, 1 H) 7.31 (d, J=8.25 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 670[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 704[M+Cl]−.
Anal. Calcd for C37H55N3O8・1.0H2O : C, 64.6; H, 8.36; N, 6.11. Found : C, 64.5; H, 8.31; N, 6.02.
実施例１６−１
【０１９０】
【化６９】
0005505741.tif 000071
【０１９１】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｇ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１６−１）（９０ｍｇ，５５％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.06 (d, J=6.6 Hz, 3 H) 1.11 (d, J=6.6 Hz, 3 H) 1.35 (s, 6 H) 1.77 (s, 6 H) 2.00 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.25 (br. s., 2 H) 2.78 - 2.88 (m, 4 H) 2.96 - 3.12 (m, 1 H) 3.55 - 3.65 (m, 4 H) 3.78 - 3.88 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.88 - 4.04 (m, 2 H) 4.09 - 4.18 (m, 1 H) 4.20 - 4.30 (m, 1 H) 4.88 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.15 - 5.27 (m, 1 H) 5.28 - 5.44 (m, 2 H) 6.22 - 6.33 (m, 1 H) 6.41 - 6.55 (m, 1 H) 6.72 - 6.85 (m, 2 H) 6.96 - 7.06 (m, 2 H) 7.14 (s, 1 H) 7.23 - 7.32 (m, 2 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 836[M+H]+.
実施例１６−２
【０１９２】
【化７０】
0005505741.tif 000072
【０１９３】
化合物（１−１）の代わりに化合物（１６−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１６−２）（５２ｍｇ，７０％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.06 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.07 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.34 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 2.67 (br. s., 4 H) 3.04 - 3.12 (m, 1 H) 3.27 - 3.30 (m, 2 H) 3.33 - 3.38 (m, 2 H) 3.43 - 3.49 (m, 1 H) 3.50 - 3.61 (m, 3 H) 3.61 - 3.66 (m, 1 H) 3.80 (s, 3 H) 3.83 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.92 - 4.00 (m, 2 H) 4.63 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.33 - 6.39 (m, 1 H) 6.44 - 6.49 (m, 1 H) 6.86 (s, 1 H) 7.06 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.21 (s, 1 H) 7.27 (d, J=8.25 Hz, 2 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 668[M+H]+, 690[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 666[M-H]−, 702[M+Cl]−.
実施例１７−１
【０１９４】
【化７１】
0005505741.tif 000073
【０１９５】
中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｇ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１７−１）（１８７ｍｇ，９５％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d)δ ppm 1.05 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.59 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.26 (s, 3 H) 2.32 - 2.40 (m, 4 H) 2.96 - 3.12 (m, 1 H) 3.59 - 3.71 (m, 4 H) 3.79 - 3.84 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.90 - 4.05 (m, 2 H) 4.10 - 4.16 (m, 1 H) 4.21 - 4.28 (m, 1 H) 4.87 (d, J=9.64 Hz, 1 H) 5.16 - 5.27 (m, 1 H) 5.29 - 5.44 (m, 2 H) 6.28 (d, J=16.4 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.4 Hz, 1 H) 6.77 (s, 1 H) 6.83 (s, 1 H) 7.01 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.13 (s, 1 H) 7.25 - 7.32 (m, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 850[M+H]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 884[M+Cl]−.
実施例１７−２
【０１９６】
【化７２】
0005505741.tif 000074
【０１９７】
化合物（４−１Ａ）、化合物（４−１Ｂ）の代わりに化合物（１７−１）を用いて実施例４−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１７−２）（１２７ｍｇ，８４％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δ ppm 1.05 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 1.07 (d, J=6.65  Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.14 (s, 3 H) 2.23 - 2.40 (m, 4 H) 3.06 - 3.16 (m, 1 H) 3.34 - 3.42 (m, 2 H) 3.46 - 3.52 (m, 1 H) 3.51 - 3.73 (m, 6 H) 3.79 - 3.91 (m, 4 H) 3.98 (s, 2 H) 4.65 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 7.08 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.23 (s, 1 H) 7.29 (d, J=8.25 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 682[M+H]+, 704[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 716[M+Cl]−.
Anal. Calcd for C38H55N3O8・1.6H2O : C, 64.2; H, 8.25; N, 5.91. Found : C, 64.3; H, 8.08; N, 5.89.
試験例１
（１）ヒトＳＧＬＴ１を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の作製
ヒトＳＧＬＴ１蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミン２０００（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ１発現細胞は、５００μｇ／ｍＬの濃度のジェネティシンの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。
（２）ヒトＳＧＬＴ２を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の作製
方法Ａ（ＷＯ２００７／１３６１１６に記載の方法）：ヒトＳＧＬＴ２カルボキシ末端の最終残基にＬｅｕＧｌｕＳｅｒＡｒｇＧｌｙＰｒｏＶａｌが付加された蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミン２０００（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ２発現細胞は、５００μｇ／ｍＬの濃度のハイグロマイシンＢの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。本安定発現細胞を用いて算出された結果を表１に方法Ａとして示した。
【０１９８】
方法Ｂ：ヒトＳＧＬＴ２蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミンＬＴＸ（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ２発現細胞は、１０００μｇ／ｍＬの濃度のジェネティシンの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。本安定発現細胞を用いて算出された結果を表１に方法Ｂとして示した。
（３）安定発現細胞におけるナトリウム依存的糖取り込み阻害試験
上記で調製した安定発現細胞を用いて下記試験を行った。
【０１９９】
前処理用緩衝液（１４０ｍＭ  塩化コリン、２ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４）２００μＬをＳＧＬＴ１安定発現細胞に、または方法Ａでは２ｍＬ、方法Ｂでは２００μＬを各ＳＧＬＴ２安定発現細胞に加え、２０分間インキュベーションした。前処理用緩衝液を除去し、試験化合物を含む取り込み用緩衝液（［14Ｃ］メチル  α−Ｄ−グルコピラノシドを含むメチル  α−Ｄ−グルコピラノシド（１ｍＭ）、１４０ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４）を７５μＬ（ＳＧＬＴ１および方法Ｂの場合）、または２００μＬ（方法Ａの場合）加え、３７℃にて３０分（ＳＧＬＴ１）または６０分（ＳＧＬＴ２）取り込み反応を行った。反応後細胞を洗浄用緩衝液（１０ｍＭ  メチル  α−Ｄ−グルコピラノシド、１４０ｍＭ  塩化コリン、２ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４）２００μＬ（ＳＧＬＴ１および方法Ｂの場合）、または２ｍＬ（方法Ａの場合）で２回洗浄し、０．２５Ｍ  ＮａＯＨ溶液７５μＬ（ＳＧＬＴ１および方法Ｂの場合）、または４００μＬ（方法Ａの場合）に溶かした。液体シンチレーター（パーキンエルマー社）を加えよく混和した後、β 線測定装置を用いて放射活性を測定した。対照群として試験化合物を含まない取り込み用緩衝液を調製した。また基礎取り込み用としてＮａＣｌに代えて塩化コリンを含む取り込み用緩衝液を調製した。
ＩＣ50値を求めるにあたり、適当な６濃度の試験化合物を用い、対照群の糖取り込み量（１００％）に対し、糖取り込み量が５０％阻害される試験化合物濃度（ＩＣ50値）を算出した。試験結果を表１に示す。
【０２００】
【表１】
0005505741.tif 000075
表１より、本発明化合物は、強いＳＧＬＴ１阻害活性を有し、また、ＳＧＬＴ２阻害活性も弱いがある程度の活性を有することが示された。
【０２０１】
試験例２  ストレプトゾトシン糖尿病モデルラットにおける血糖値上昇抑制作用確認試験
（１）糖尿病モデルラットの作製
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社，雄性）について約１６時間の絶食後、エーテル麻酔下でストレプトゾトシン（ＳＴＺ）５０ｍｇ／ｋｇを尾静脈内投与し、糖尿病モデルラットを作製した。７週齢のＳＤ／ＩＧＳラットを同様にエーテル麻酔下，１．２５ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸生理食塩液１ｍＬ／ｋｇを尾静脈内投与し、正常対照ラットを作製した。ＳＴＺまたは１．２５ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸生理食塩液投与１週間後に、ラットを経口グルコース負荷試験に供した。
（２）経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）
糖尿病モデルラットを約１６時間の絶食後、薬物投与群には、０．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）水溶液に溶解した薬物（１ｍｇ／ｋｇ）を，対照群には０．５％ＣＭＣ水溶液のみ経口投与した。薬物として、WO07/136116に開示された化合物１０、１１および３３、並びに、本発明化合物１−２、５−２、６−２、１３−２、１５−２を用いた。薬物投与直後に、グルコース溶液（２ｇ／ｋｇ）を経口投与し、薬物投与前（０ｔｉｍｅ）、及び、経口投与０．２５、０．５、１、１．５、２時間後の計６点で採血した。
【０２０２】
採血は、無麻酔下で尾静脈よりヘパリンコート採血管を用いて行い、遠心分離後、血漿を分取した。血漿中グルコース濃度の定量は、グルコースＣIIテストワコー（和光純薬株式会社）を用いて測定した。血糖値上昇抑制作用強度は、各薬物投与群の経口投与後1時間までの各血糖値より薬物投与前の血糖値を差し引いた値から、台形法を用いて血糖値-時間曲線下面積の増加量（ΔＡＵＣ）を算出し、対照群のそれに対する降下の割合で表記した。
【０２０３】
結果を表２及び表３に示す。
【０２０４】
試験例３
（１）ＷＯ０７／１３６１１６に開示された化合物の経口投与後１週間までの腎臓中濃度推移
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社，雄性，非絶食）に、０．５％ＣＭＣ水溶液にて調製した化合物１０、３３（各１ｍｇ／ｋｇ）、および化合物１１（０．３ｍｇ／ｋｇ）を経口投与した。薬物投与後２４、７２、１６８時間にエーテル麻酔下、後大静脈より全採血し、安楽死確認後に腎臓を摘出した。生理食塩液で組織表面を洗浄後、重量を測定し４倍量の精製水を加え氷冷下ホモジナイズした。ホモジネートに内標準物質を含むアセトニトリル／メタノール溶液を加えて除タンパクした後、上清をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（アプライドバイオシステムズAPI3000）に供した。ポジティブイオンモードのエレクトロスプレーイオン化法にて生成した薬物由来のイオンを選択反応モニタリングにて検出した。得られた抽出イオンクロマトグラムのピーク面積から内標準法にてホモジネート中薬物濃度を算出した。
ここで、化合物１０および３３の内部標準物質には、（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−１−［５−（４−エトキシベンジル）−２−メトキシ−４−メチルフェニル］−１−チオ−Ｄ−グルシトール，エチル−Ｄ５を用い、化合物１１の内部標準物質には、化合物１１（トリスヒドロキシメチル−Ｄ６；−Ｃ（ＣＤ２ＯＨ）３）を用いた。
【０２０５】
実験結果を表２に示す。
【０２０６】
（２）本発明化合物の３日間反復経口投与後の腎臓中濃度
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社，雄性，非絶食）に、０．５％ＣＭＣ水溶液にて調製した本発明化合物１−２、５−２、６−２、１３−２、１５−２（３ｍｇ／ｋｇ）を１日１回３日間連続経口投与した。最終日の薬物投与後４８時間にイソフルラン麻酔下、後大静脈より全採血し、安楽死確認後に腎臓を摘出した。生理食塩液で組織表面を洗浄後、重量を測定し４倍量の精製水を加え氷冷下ホモジナイズした。ホモジネート中薬物濃度の測定は、試験例３（１）と同じ方法で、内部標準物質に化合物１１を用い、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより行った。  
【０２０７】
実験結果を表３に示す。
【０２０８】
【表２】
0005505741.tif 000076
ＷＯ２００７／１３６１１６に開示の化合物１０、１１および３３は、下記である。
【０２０９】
【化７３】
0005505741.tif 000077
【０２１０】
【表３】
0005505741.tif 000078
ＷＯ２００７／１３６１１６号に開示の化合物は１ｍｇ／ｋｇ経口投与後の糖負荷試験において、強い血糖低下作用を示した。しかし、１ｍｇ／ｋｇ経口投与した１、３及び７日後において腎臓中の化合物濃度があまり減少せず、７日後でも化合物は排泄されず腎臓に残留する傾向が見られた（表２）。
【０２１１】
一方、本発明の化合物は上記先行技術化合物と同様に強い血糖降下作用を有した。また、３ｍｇ／ｋｇの用量で３日間連続投与したにも関わらず、投与２日後に意外にも化合物は腎臓に残留しないという特徴を示した（表３）。
【０２１２】
この相違の原因として、本発明化合物は、小腸での吸収が少なく、吸収された化合物も腎臓に残留されずに排泄されることが想定される。
【０２１３】
したがって、本発明化合物は、体内残留性の傾向がなく、連続投与による副作用及び毒性が少ない医薬品として実用性に優れた性質を有すると考えられる。
【産業上の利用可能性】
【０２１４】
本発明により、ＳＧＬＴ１阻害活性が強く、かつ体内貯留性の傾向がない食後高血糖改善薬を提供することができ、ＳＧＬＴ１活性を阻害することが有効な食後高血糖に由来する疾患の治療・予防に貢献することを通じて、人類の健康の増進に寄与し、健全な医薬品産業の発達を図ることができる。