(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗癌剤と一緒になって癌疾患の予防および／または治療の方法に用いるためのナノ粒子であって、該ナノ粒子が、正の表面電荷を有し、そして患者に投与され、該ナノ粒子と該抗癌剤とが該患者の体内に同時に存在すること、および該ナノ粒子と該抗癌剤とが別々に投与されることによって特徴づけられ、該ナノ粒子が、多縮合アミノシランを含むコーティングを備えている、ナノ粒子。
【請求項２】
前記ナノ粒子が、磁性材料でなる、請求項１に記載のナノ粒子。
【請求項３】
前記ナノ粒子が、強磁性、反強磁性、反フェリ磁性または超常磁性の材料でなる、請求項２に記載のナノ粒子。
【請求項４】
前記ナノ粒子が、正に分極化および／または正にイオン化され得る物質からのコーティングを備えている、請求項１または２に記載のナノ粒子。
【請求項５】
前記正に分極化および／または正にイオン化され得る物質が、アミノ基および／または窒素原子を含む、請求項４に記載のナノ粒子。
【請求項６】
前記ナノ粒子が、鉄酸化物、マグネタイト、マグヘマイトまたはＭ（ＩＩ）Ｆｅ２Ｏ４（ＭはＺｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｄ、ＢａまたはＭｎを表す）を含む、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【請求項７】
前記抗癌剤が、細胞分裂阻害剤、細胞障害剤、抗増殖剤、消炎剤、抗遊走剤、抗血管新生剤、抗炎症剤、抗細菌剤または微小管インヒビターである、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【請求項８】
前記ナノ粒子が、注射または点滴に適した製剤中に存在する、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【請求項９】
前記コーティングが、３−アミノプロピルトリエトキシシラン、２−アミノエチル−３−アミノプロピルトリメトキシシラン、トリメトキシシリル−プロピル−ジエチレントリアミンまたはＮ−（６−アミノヘキシル）−３−アミノプロピルトリメトキシシランを含む、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【請求項１０】
前記ナノ粒子が、正の電荷を補償するカルボキシル基を含むさらなる外側コーティングをさらに備えている、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【請求項１１】
前記ナノ粒子が、５〜２５ｎｍの中間直径を有する、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【請求項１２】
ハイパーサーミア、磁性流体ハイパーサーミア、磁性流体を用いる温熱療法、放射線療法および／または化学療法に用いるための、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【請求項１３】
前記抗癌剤が、アクチノマイシンＤ、アミノグルテチミド、アムサクリン、アナストロゾール、プリンおよびピリミジン塩基のアンタゴニスト、アントラサイクリン、アロマターゼインヒビター、アスパラギナーゼ、抗エストロゲン剤、ベキサロテン、ブレオマイシン、ブセレリン、ブスルファン、カンプトテシン誘導体、カペシタビン、カルボプラチン、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン、クラドリビン、シクロホスファミド、シタラビン、シトシンアラビノシド、アルキル化細胞分裂阻害剤、ダカルバジン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドセタキセル、エピルビシン、エストラムスチン、エトポシド、エキセメスタン、フルダラビン、フルオロウラシル、葉酸アンタゴニスト、ホルメスタン、ゲムシタビン、グルココルチコイド、ゴセレリン、ホルモンおよびホルモンアンタゴニスト、ハイカムチン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イマチニブ、イリノテカン、レトロゾール、リュープロレリン、ロムスチン、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキサート、ミルテホシン、マイトマイシン、有糸分裂インヒビター、ミトキサントロン、ニムスチン、オキサリプラチン、パクリタキセル、ペントスタチン、プロカルバジン、タモキシフェン、テモゾロミド、テニポシド、テストラクトン、チオテパ、チオグアニン、トポイソメラーゼインヒビター、トポテカン、トレオスルファン、トレチノイン、トリプトレリン、トロホスファミド、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、細胞分裂阻害に活性がある抗生物質、アクチノマイシンＤ、アミノグルテチミド、アントラサイクリン、アロマターゼインヒビター、抗エストロゲン剤、ブセレリン、葉酸アンタゴニスト、ゴセレリン、ホルモンアンタゴニスト、ハイカムチン、ヒドロキシ尿素、レトロゾール、有糸分裂インヒビター、タモキシフェン、テストラクトン、シロリムス（ラパマイシン）、エベロリムス、ピメクロリムス、ソマトスタチン、タクロリムス、ロキシスロマイシン、デュネマイシン（Ｄｕｎａｉｍｙｃｉｎ）、アスコマイシン、バフィロマイシン、エリスロマイシン、ミデカマイシン、ジョサマイシン、コンカナマイシン、クラリスロマイシン、トロレアンドマイシン、ホリマイシン（Ｆｏｌｉｍｙｃｉｎ）、セリバスタチン、シンバスタチン、ロバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、アトルバスタチン、プラバスタチン、ピタバスタチン、４−ヒドロキシオキシシクロホスファミド、トロホスファミド、ベンダムスチン、チモシンα−１、アクラルビシン、フルダラビン−５’−リン酸二水素、プリンおよびピリミジン塩基のアンタゴニスト、ヒドロキシカルバミド、アルデスロイキン、ペガスパルガーゼ、レトロゾール、アミノグルテチミド、アドリアマイシン、アジスロマイシン、スピラマイシン、セファランチン、エポチロンＡおよびＢ、ミトキサントロン、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル、ｃ−ｍｙｃアンチセンス、ｂ−ｍｙｃアンチセンス、ベツリン酸、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体、メラニン細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）、活性型プロテインＣ、ＩＬ−１βインヒビター、フマル酸およびそのエステル、デルミシジン（Ｄｅｒｍｉｃｉｄｉｎ）、カルシポトリオール、タカルシトール、ラパコール、β−ラパコン、ポドフィロトキシン、ベツリン、ポドフィリン酸２−エチルヒドラジド、モルグラモスチム（ｒｈｕＧＭ−ＣＳＦ）、ペグインターフェロンα−２ｂ、レノグラスチム（ｒ−ＨｕＧ−ＣＳＦ）、フィルグラスチム、マクロゴール、ダカルバジン、レトロゾール、ゴセレリン、セファロマンニン、トラスツズマブ、エキセメスタン、バシリキシマブ、ダクリズマブ、セレクチン（サイトカインアンタゴニスト）、ＣＥＴＰインヒビター、カドヘリン、サイトカインインヒビター、ＣＯＸ−２インヒビター、ＮＦｋＢ、アンギオペプチン、シプロフロキサシン、カンプトテシン、フルロブラスチン（Ｆｌｕｒｏｂｌａｓｔｉｎ）、ｂＦＧＦアンタゴニスト、プロブコール、プロスタグランジン、１，１１−ジメトキシカンチン−６−オン、１−ヒドロキシ−１１−メトキシカンチン−６−オン、スコポレチン、コルヒチン、ＮＯ供与体、四硝酸ペンタエリスリトール、シドノンイミン、Ｓ−ニトロソ誘導体、タモキシフェン、スタウロスポリン、β−エストラジオール、α−エストラジオール、エストリオール、エストロン、エチニルエストラジオール、ホスフェストロール、メドロキシプロゲステロン、シピオン酸エストラジオール、安息香酸エストラジオール、トラニラスト、カメバカウリン（Ｋａｍｅｂａｋａｕｒｉｎ）、ベラパミル、
チロシンキナーゼインヒビター（チロホスチン）、シクロスポリンＡ、パクリタキセルおよびその誘導体（例えば、６−α−ヒドロキシ−パクリタキセル）、バッカチン、タキソテール、モフェブタゾン、アセメタシン、ジクロフェナク、ロナゾラク、ダプソン、ｏ−カルバモイルフェノキシ酢酸、リドカイン、ケトプロフェン、メフェナム酸、ピロキシカム、メロキシカム、リン酸クロロキン、ペニシラミン、ヒドロキシクロロキン、オーラノフィン、金チオリンゴ酸ナトリウム、オキサセプロール、セレコキシブ、β−シトステロール、アデメチオニン、ミルテカイン、ポリドカノール、ノニバミド、レボメントール、ベンゾカイン、エスシン、エリプチシン、Ｄ−２４８５１（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）、コルセミド、サイトカラシンＡ−Ｅ、インダノシン、ノコダゾール、バシトラシン、ビトロネクチンレセプターアンタゴニスト、アゼラスチン、遊離核酸、ウイルス伝達物質に組み込まれた核酸、ＤＮＡおよびＲＮＡフラグメント、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター−１、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター−２、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ＶＥＧＦインヒビター、ＩＧＦ−１、抗生物質（例えば、セファドロキシル、セファゾリン、セファクロル、セフォキシチン、トブラマイシン、ゲンタマイシン、ペニシリン、ジクロキサシリン、オキサシリン）の群由来の活性薬剤、スルホンアミド、メトロニダゾール、抗血栓剤、アルガトロバン、アスピリン、アブシキシマブ、合成アンチトロンビン、ビバリルジン、クマジン、エノキサパリン、ＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ血小板膜レセプター、第Ｘａ因子インヒビターに対する抗体、ヘパリン、ヒルジン、ｒ−ヒルジン、ＰＰＡＣＫ、プロタミン、プロウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ワルファリン、ウロキナーゼ、血管拡張剤、ジピラミドール（Ｄｉｐｙｒａｍｉｄｏｌ）、トラピジル、ニトロプルシド、ＰＤＧＦアンタゴニスト、トリアゾロピリミジン、セラミン、ＡＣＥインヒビター、カプトプリル、シラザプリル、リシノプリル、エナラプリル、ロサルタン、チオプロテアーゼインヒビター、プロスタサイクリン、バピプロスト、インターフェロンα、βおよびγ、ヒスタミンアンタゴニスト、セロトニン遮断薬、アポトーシスインヒビター、アポトーシスレギュレーター、ＮＦ−ｋＢまたはＢｃｌ−ｘＬアンチセンスオリゴヌクレオチド、ハロフジノン、ニフェジピン、トコフェロール、トラニラスト、モルシドミン、茶ポリフェノール、没食子酸エピカテキン、没食子酸エピガロカテキン、ボスウェリア酸およびその誘導体、レフルノミド、アナキンラ、エタネルセプト、スルファサラジン、エトポシド、ジクロキサシリン、テトラサイクリン、トリアムシノロン、ムタマイシン（Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ）、プロカインイミド（Ｐｒｏｃａｉｎｉｍｉｄ）、レチノイン酸、キニジン、ジソピラミド、フレカイニド、プロパフェノン、ソタロール、アミオダロン、天然のおよび合成的に得られたステロイド（例えば、ブリオフィリン（Ｂｒｙｏｐｈｙｌｌｉｎ）Ａ、イノトジオール、マキロシド（Ｍａｑｕｉｒｏｓｉｄ）Ａ、ガラキノシド（Ｇｈａｌａｋｉｎｏｓｉｄ）、マンソニン（Ｍａｎｓｏｎｉｎ）、ストレブロシド（Ｓｔｒｅｂｌ��ｓｉｄ）、ヒドロコルチゾン、ベタメタゾン、デキサメタゾン）、フェノプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセン、フェニルブタゾン、アシクロビル、ガンシクロビル、ジドブジン、抗真菌剤、クロトリマゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、ケトコナゾール、ミコナゾール、ナイスタチン、テルビナフィン、クロロキン、メフロキン、キニーネ、天然テルペノイド、ヒポカエスクリン（Ｈｉｐｐｏｃａｅｓｃｕｌｉｎ）、バーリントゲノール（Ｂａｒｒｉｎｇｔｏｇｅｎｏｌ）−Ｃ２１−アンゲリカ酸、１４−デヒドロアグロスチスタチン（Ｄｅｈｙｄｒｏａｇｒｏｓｔｉｓｔａｃｈｉｎ）、アグロスケリン（Ａｇｒｏｓｋｅｒｉｎ）、アグロスチスタチン（Ａｇｒｏｓｔｉｓｔａｃｈｉｎ）、１７−ヒドロキシアグロスチスタチン（Ｈｙｄｒｏｘｙａｇｒｏｓｔｉｓｔａｃｈｉｎ）、オバトジオーリド（Ｏｖａｔｏｄｉｏｌｉｄｅ）、４，７−オキシシクロアニソメル酸（Ｏｘｙｃｙｃｌｏａｎｉｓｏｍｅｌｓａｕｒｅ）、バッカリノイド（Ｂａｃｃｈａｒｉｎｏｉｄｅ）Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３およびＢ７、ツベイモシド、ブルセアノール（Ｂｒｕｃｅａｎｏｌｅ）Ａ、ＢおよびＣ、ブルセアンチノシド（Ｂｒｕｃｅａｎｔｉｎｏｓｉｄｅ）Ｃ、ヤダンジオシドＮおよびＰ、イソデオキシエレファントピン（Ｉｓｏｄｅｏｘｙｅｌｅｐｈａｎｔｏｐｉｎ）、トメンファントピン（Ｔｏｍｅｎｐｈａｎｔｏｐｉｎ）ＡおよびＢ、コロナリン（Ｃｏｒｏｎａｒｉｎ）Ａ、Ｂ、ＣおよびＤ、ウルソール酸、ヒプタチン酸（Ｈｙｐｔａｔｓａｕｒｅ）Ａ、ゼオリン、イソ−イリドジャーマナル（Ｉｒｉｄｏｇｅｒｍａｎａｌ）、メイテンフォリオール（Ｍａｙｔｅｎｆｏｌｉｏｌ）、エフサンチン（Ｅｆｆｕｓａｎｔｉｎ）Ａ、エクシサニン（Ｅｘｃｉｓａｎｉｎ）ＡおよびＢ、ロンギカウリン（Ｌｏｎｇｉｋａｕｒｉｎ）Ｂ、スクルポネアチン（Ｓｃｕｌｐｏｎｅａｔｉｎ）Ｃ、カメバウニン（Ｋａｍｅｂａｕｎｉｎ）、ロイカメニン（Ｌｅｕｋａｍｅｎｉｎ）ＡおよびＢ、１３，１８−デヒドロー６−アルファ−セネシオイルオキシチャパリン（Ｓｅｎｅｃｉｏｙｌｏｘｙｃｈａｐａｒｒｉｎ）、タキサマイリンＡおよびＢ、レジニロール（Ｒｅｇｅｎｉｌｏｌ）、トリプトリド、シマリン、アポシマリン、アリストロキア酸、アノプテリン（Ａｎｏｐｔｅｒｉｎ）、ヒドロキシアノプテリン（Ｈｙｄｒｏｘｙａｎｏｐｔｅｒｉｎ）、アネモニン、プロトアネモニン、ベルベリン、塩化ケリブリン（Ｃｈｅｌｉｂｕｒｉｎ）、シクトキシン、シノコクリン（Ｓｉｎｏｃｏｃｕｌｉｎ）、コンブレスタチン（Ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ）ＡおよびＢ、クドライソフラボン（Ｃｕｄｒａｉｓｏｆｌａｖｏｎ）Ａ、クルクミン、ジヒドロニチジン、塩化ニチジン、１２−ベータ−ヒドロキシプレグナジエン−３，２０−ジオン、ビロボール、ギンコール、ギンコール酸、ヘレナリン、インジシン、インジシン−Ｎ−オキシド、ラシオカルピン、イノトジオール、配糖体１ａ、ポドフィロトキシン、ジャスティシジン（Ｊｕｓｔｉｃｉｄｉｎ）ＡおよびＢ、ラレアチン（Ｌａｒｒｅａｔｉｎ）、マロテリン（Ｍａｌｌｏｔｅｒｉｎ）、マロトクロマノール、イソブチリルマロトクロマノール、マキロシド（Ｍａｑｕｉ��ｏｓｉｄ）Ａ、マーカンチン（Ｍａｒｃｈａｎｔｉｎ）Ａ、メイタンシン、リコリジシン（Ｌｙｃｏｒｉｄｉｃｉｎ）、マーゲチン（Ｍａｒｇｅｔｉｎ）、パンクラチスタチン、リリオデニン、ビスパルテノリジン（Ｂｉｓｐｓｒｔｈｅｎｏｌｉｄｉｎ）、オキソウシンスニン（Ｏｘｏｕｓｈｉｎｓｕｎｉｎ）、アリストラクタム−ＡＩＩ、ビスパルテノリジン（Ｂｉｓｐａｒｔｈｅｎｏｌｉｄｉｎ）、ペリプロコシド（Ｐｅｒｉｐｌｏｃｏｓｉｄ）Ａ、ガラキノシド（Ｇｈａｌａｋｉｎｏｓｉｄ）、ウルソール酸、デオキシプソロスペルミン（Ｄｅｏｘｙｐｓｏｒｏｓｐｅｒｍｉｎ）、サイコルビン（Ｐｓｙｃｏｒｕｂｉｎ）、リシンＡ、サンギナリン、マニュウェイツ酸（Ｍａｎｗｕｗｅｉｚｓａｕｒｅ）、メチルソルビホリン（Ｍｅｔｈｙｌｓｏｒｂｉｆｏｌｉｎ）、スファテリアクロメン（Ｓｐｈａｔｈｅｌｉａｃｈｒｏｍｅｎ）、スチゾフィリン（Ｓｔｉｚｏｐｈｙｌｌｉｎ）、マンソニン（Ｍａｎｓｏｎｉｎ）、ストレブロシド（Ｓｔｒｅｂｌｏｓｉｄ）、アカゲリン（Ａｋａｇｅｒｉｎ）、ジヒドロウサンバラエンシン（Ｄｉｈｙｄｒｏｕｓａｍｂａｒａｅｎｓｉｎ）、ヒドロキシウサンバリン（Ｈｙｄｒｏｘｙｕｓａｍｂａｒｉｎ）、ストリキノペンタミン（Ｓｔｒｙｃｈｎｏｐｅｎｔａｍｉｎ）、ストリキノフィリン（Ｓｔｒｙｃｈｎｏｐｈｙｌｌｉｎ）、ウサンバリン（Ｕｓａｍｂａｒｉｎ）、ウサンバレンシン（Ｕｓａｍｂａｒｅｎｓｉｎ）、ベルベリン、リリオデニン、オキソウシンスニン（Ｏｘｏｕｓｈｉｎｓｕｎｉｎ）、ダフノレチン、ラリシレシノール、メトキシラリシレシノール、シリンガレシノール、ウンベリフェロン、アフロモゾン（Ａｆｒｏｍｏｓｏｎ）、アセチルビスミオン（Ａｃｅｔｙｌｖｉｓｍｉｏｎ）Ｂ、デスアセチルビスミオン（Ｄｅｓａｃｅｔｙｌｖｉｓｍｉｏｎ）Ａ、ビスミオン（Ｖｉｓｍｉｏｎ）ＡおよびＢ：を含む群から選択される、前記請求項のいずれかの項に記載のナノ粒子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、治療上活性物質を細胞（特に癌細胞）の中へ送達するための、ナノ粒子を含む組成物および該組成物の使用に関する。粒子は、細胞の中へ大量に取り込まれるように化学的に設計される。細胞の中への送達のために、ナノ粒子と治療上活性物質との間の直接的結合は必要とされない。ナノ粒子および抗癌剤からの医薬品組成物は、抗癌剤の効力を増大させ、そして副作用を減少させる。
【背景技術】
【０００２】
ナノ粒子は、細胞（特に腫瘍細胞）により、エンドサイトーシスによって取り込まれ得ることが知られている。細胞内移行可能なナノ粒子の調製のための方法は、ＤＥ１９７２６２８２．１に記載されている。ナノ粒子の取り込みは、高純度の細胞材料のインビトロ試験によって分析され得る。ＤＥ１９９１２７９８Ｃ１は、組織材料由来の任意の細胞が培養され得る方法を記載している。これらの方法によって、粒子は、特定の腫瘍細胞の中へ大量に取り込まれるように化学的に設計され得る。治療物質を送達システムとしてのナノ粒子に結合させることによってそれらの効力を増大させるための方法もまた知られており、そして研究の目的である。例えば、ＤＥ１００５９１５１Ａでは、物質は、イオン性相互作用によって結合され、その結合体が、腫瘍組織に蓄積される。しかし、治療物質は、細胞内に放出されずに、間質で放出される。抗体またはペプチド（例えば、ＴＡＴペプチド）の支援による腫瘍細胞の中へのナノ粒子の送達もまた知られている。しかし、その種の送達は、ナノ粒子の腫瘍細胞の中の比較的低い蓄積をもたらすのみであり、したがって、治療目的のためには用いられ得ない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明は、癌疾患の治療および予防のための組成物および該組成物の使用を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
上記目的は、請求項１の医薬品組成物および該医薬品組成物の使用によって達成される。
【０００５】
さらなる好都合な実施態様が、従属請求項、実施例ならびに図面および明細書から生じる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００６】
本発明は、変性した細胞に対する高い親和性を有するナノ粒子、少なくとも１つの治療上活性物質（特に抗癌剤）、ならびに少なくとも１つの薬理学的に許容可能な担体、医薬品添加物および／または溶媒から構成される医薬品組成物に関する。
【０００７】
製剤学（製剤技術）で通常用いられる物質が、薬理学的に許容可能な担体、医薬品添加物および／または溶媒として用いられ得、液状の医薬品組成物が好ましい。
【０００８】
水または生理的食塩水が溶媒として用いられ得る。必要に応じて、エタノールのような共溶媒が、１０容量％までの量で用いられ得る。
【０００９】
より具体的には、上記医薬品組成物は、点滴または注射のための溶液である。ナノ粒子のこのような溶液、例えば生理的食塩水での溶液は、間質性または腫瘍内の適用に適している。さらに、動脈内または静脈内の適用は、全身に影響を及ぼす非固形型および／または転移型の腫瘍の全身性治療を可能にする。
【００１０】
ナノ粒子および少なくとも１つの治療物質（特に少なくとも１つの抗癌剤）が、必ずしも１つの単一の溶液（好ましくは注射または点滴のための溶液）に含まれる必要はない。本発明の医薬品組成物はまた、２つの溶液から構成され得、一方の溶液は、ナノ粒子を含み、そして他方の溶液は、少なくとも１つの治療上活性物質（特に少なくとも１つの抗癌剤）を含み、そして両溶液は同時に適用され得る。
【００１１】
本明細書に記載のナノ粒子が、治療物質（特に抗癌剤）を、変性した細胞の中へ送達し得ることが驚くべきことに見出されたことは、本発明の本質である。変性した細胞という用語は、発癌遺伝子細胞、腫瘍細胞および癌細胞をいい、すなわち完全に変性した細胞または完全な変性への途中にある細胞をいう。したがって、変性した細胞という用語は、増殖が制御されない細胞をいう。よって、治療物質（特に抗癌剤）は、本明細書に記載のナノ粒子が不在の場合よりも存在する場合の方が、変性した細胞によってよく取り込まれる。変性した細胞の中への治療物質の取り込みの改良によって、該物質（特に抗癌剤）の活性は著しく増大され、そして該物質の副作用は減少する。
【００１２】
活性の増大とは、同量の治療上活性物質（特に抗癌剤）が、ナノ粒子が不在の場合よりも存在する場合の方が、より有効であることを意味する。治療物質（特に抗癌剤）の副作用の減少とは、同じ効力または量の抗癌剤で、ナノ粒子が不在の場合よりも存在する場合の方が、健常な細胞に対する損傷が減少することを意味することが意図される。
【００１３】
したがって、効力の増大の条件は、細胞の中への大量のナノ粒子の送達と同時に、治療物質が細胞の中へ取り込まれ得ることである。明らかに、粒子結合による細胞膜の嵌入によって、膜を貫通する通路の制御が少なくとも部分的に解除し、したがって、治療上活性物質のための完全に新しい送達チャンネルが形成される。ナノ粒子および治療物質（特に抗癌剤）の濃度の、間質での局所的な増大が達成され得る場合に、それは好都合である。これは、例えば混合物の間質性投与または適切な蓄積方策（例えば、制御された放出、レセプターまたは粒子表面上のリガンドによって認識される他の生体分子の認識（ターゲッティング））によって実現され得る。ナノ粒子の間質性投与の後に、治療物質を全身性適用することも可能である。ナノ粒子の細胞内取り込みは、数時間〜数日内に生じる。したがって、物質はまた、エンドサイトーシスの期間に数回投与され得る。物質の全身性投与は、特に、物質が代謝されなければならない場合に必要とされる。
【００１４】
ナノ粒子は、正の表面電荷を有すべきである。このようなナノ粒子は、変性した細胞（特に癌細胞）によって特によく取り込まれる。
【００１５】
ナノ粒子上の、生理的条件下で正の表面電荷は、ナノ粒子が、正に分極化および／または正にイオン化され得るコーティングを備えることによって、達成され得る。
【００１６】
正に分極化および／または正にイオン化され得るこのようなコーティングは、ナノ粒子を、正に分極化および／または正にイオン化され得る物質でコーティングすることによって得られ得る。このような物質は、例えばアミノ基、または対応するｐＨでプロトン化形態で存在するプロトン化可能な窒素原子を含み得る。
【００１７】
正の表面電荷とは、各ナノ粒子の正に荷電した表面、あるいは正に荷電または正に分極化され得る表面を意味することが意図される。ナノ粒子の表面は、生理的条件下で、正に分極化または正に荷電されるようにするべきである。
【００１８】
好ましい実施態様において、正に荷電されている、正に荷電され得るまたは正に分極化され得る表面またはコーティングは、正の電荷を補償または過補償さえする保護層によってカバーされ、したがって、全体で中性のまたは負に荷電さえした外側表面が得られる。正に荷電されているまたは正に分極化され得るコーティングが、体組織または腫瘍組織による分解に対して十分に安定である場合には、上記正の電荷を補償する外側層は必要とされない。好ましい実施態様において、ナノ粒子は、多縮合アミノシランからのコーティングおよびおそらくさらに、正の荷電を補償するカルボキシル基を含むコーティングを備える。
【００１９】
正に荷電されている、あるいは正に分極化され得るまたは正に荷電され得るコーティングは、緩慢な生分解が所望されるので、好ましくは生物学的に安定なまたは生物学的に不活性な物質、例えば、高分子から構成される。
【００２０】
以下が、生物学的に安定な高分子として用いられ得る：ポリアクリルアミド、ポリアクリロニトリル、ポリアミド、ポリエーテルアミド、ポリエチレンアミン、ポリイミド、ポリカーボネート、ポリカーボウレタン、ポリビニルケトン、ポリハロゲン化ビニル、ポリハロゲン化ビニリデン、ポリビニルエーテル、ポリイソブチレン、ポリビニル芳香族、ポリビニルエステル、ポリビニルピロリドン、ポリオキシメチレン、ポリテトラメチレンオキシド、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリウレタン、ポリエーテルウレタン、シリコーンポリエーテルウレタン、シリコーンポリウレタン、シリコーンポリカーボネートウレタン、ポリオレフィンエラストマー、ポリイソブチレン、ＥＰＤＭゴム、フルオロシリコーン、カルボキシメチルキトサン、ポリアリールエーテルエーテルケトン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリエチレンテレフタレート、ポリバレレート、カルボキシメチルセルロース、セルロース、レーヨン、三酢酸レーヨン、硝酸セルロース、酢酸セルロース、ヒドロキシエチルセルロース、酪酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸エチルビニルコポリマー、ポリスルホン、エポキシ樹脂、ＡＢＳ樹脂、ＥＰＤＭゴム、シリコーン（例えば、ポリシロキサン、ポリジメチルシロキサン）、ポリビニルハロゲンおよびコポリマー、セルロースエーテル、三酢酸セルロース、キトサンおよび上記物質のコポリマーおよび／または混合物。
【００２１】
生物学的に安定な高分子は、正の、あるいは正に分極化または正に荷電され得る基（例えば、アミノ基または窒素原子）を十分な量備えるべきである。通常、正に荷電したコーティングは、ナノ粒子あたり、平均で少なくとも５０、好ましくは少なくとも１００、そして特に好ましくは少なくとも５００のカチオン基を備え、この基は、正に分極化および／または正に荷電され得、例えば、アミノ基である。
【００２２】
好ましい実施態様において、上記コーティングは、必要な安定性を達成するために公知の手順に従って多縮合されているモノマーのアミノシラン（例えば、３−アミノプロピルトリエトキシシラン、２−アミノエチル−３−アミノプロピルトリメトキシシラン、トリメトキシシリル−プロピル−ジエチレントリアミンまたはＮ−（６−アミノヘキシル）−３−アミノプロピルトリメトキシシラン）から構成される。適切な方法は、例えば、ＤＥ１９６１４１３６ＡまたはＤＥ１９５１５８２０Ａに記載されている。
【００２３】
電荷を補償し、そして細胞識別を増大させるために、正に荷電した層またはコーティングは、好ましくは生物学的に分解性の高分子または生分解性の物質のさらなるコーティングでカバーされ得る。
【００２４】
以下の生分解性の高分子が好ましく用いられる：ポリバレロラクトン、ポリ−ε−デカラクトン、ポリラクトン酸、ポリグリコール酸、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリラクチドおよびポリグリコリドのコポリマー、ポリ−ε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリヒドロキシブチレート、ポリヒドロキシバレレート、ポリヒドロキシブチレート−コ−バレレート、ポリ（１，４−ジオキサン−２，３−ジオン）、ポリ（１，３−ジオキサン−２−ジオン）、ポリ−パラ−ジオキサノン、ポリ無水物（例えば、ポリ無水マレイン酸）、ポリヒドロキシメタクリレート、フィブリン、ポリシアノアクリレート、ポリカプロラクトンジメチルアクリレート、ポリ−β−マレイン酸、ポリカプロラクトンアクリル酸ブチル、多ブロック高分子（例えば、オリゴカプロラクトンジオールおよびオリゴジオキサノンジオール由来）、ポリエーテルエステル多ブロック高分子（例えば、ＰＥＧおよびポリ（ブチレンテレフタレート））、ポリピボットラクトン、ポリグリコール酸トリメチルカーボネート、ポリカプロラクトングリコリド、ポリ（γ−グルタミン酸エチル）、ポリ（ＤＴＨ−イミノカーボネート）、ポリ（ＤＴＥ−コ−ＤＴ−カーボネート）、ポリ（ビスフェノールＡイミノカーボネート）、ポリオルトエステル、ポリグリコール酸トリメチルカーボネート、ポリトリメチルカーボネート、ポリイミノカーボネート、ポリ（Ｎ−ビニル）−ピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエステルアミド、グリコール化ポリエステル、ポリホスホエステル、ポリホスファゼン、ポリ［（ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン］、ポリヒドロキシペンタン酸、ポリ無水物、ポリエチレンオキシドプロピレンオキシド、軟質ポリウレタン、骨格にアミノ酸残基を有するポリウレタン、ポリエーテルエステル（例えば、ポリエチレンオキシド、ポリアルケンオキサレート、ポリオルトエステルおよびそれらのコポリマー）、脂質、カラゲナン、フィブリノーゲン、澱粉、コラーゲン、タンパク質に基づく高分子、ポリアミノ酸、合成ポリアミノ酸、ゼイン、修飾されたゼイン、ポリヒドロキシアルカノエート、ペクチン酸、アクチン酸、修飾されたおよび修飾されていないフィブリンおよびカゼイン、カルボキシメチルサルフェート、アルブミン、ヒアルロン酸、キトサンおよびその誘導体、ヘパラン硫酸およびその誘導体、ヘパリン、コンドロイチン硫酸、デキストラン、β−シクロデキストリン、アルギネート、グリコサミノグリカン、糖類、多糖類、プロテオグリカン、糖タンパク質、ＰＥＧとポリプロピレングリコールとを有するコポリマー、アラビアゴム、グアー、ゼラチン、コラーゲン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドコラーゲン、脂質、リン脂質、上記物質の修飾およびコポリマーおよび／または混合物。
【００２５】
α−ヒドロキシカルボン酸に基づく高分子またはコポリマー（例えば、ポリ乳酸、ポリラクチド、ポリグリコール酸、ポリグリコリドおよびそれらのコポリマー）が特に好ましい。さらにポリオール（例えば、ポリエチレングリコール）およびポリ酸（例えば、ポリアクリル酸）ならびに炭水化物および糖（特にデキストラン）が好ましい。
【００２６】
他の好ましい実施態様において、本発明のナノ粒子は、さらに第３のコーティングを備える、または第３のコーティングでカバーされる。コーティングは、保護被覆、バリア層として、または細胞識別の目的のために働き得る。
【００２７】
細胞特異的コーティングは、特定の細胞（例えば、特定の細菌細胞または特定の腫瘍細胞）に対するナノ粒子の親和性を増大させ、したがって、細胞識別のために役立つ。好ましくは、このような細胞特異的ナノ粒子は、それらの表面上の官能性によって、増大した親和性を有する細胞の中に蓄積し、したがって、腫瘍特異的になる。例えば、該技術によって、特定の型の癌のための腫瘍特異的ナノ粒子を設計することが可能である。
【００２８】
特定の細胞に対する親和性をさらに増大させるために、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、組換え抗体、二重特異性抗体、抗体フラグメント、アプタマー、Ｆａｂフラグメント、Ｆｃフラグメント、ペプチド、ペプチド模倣物、ギャップマー、リボザイム、ＣｐＧオリゴマー、ＤＮＡザイム、リボスイッチおよび／または脂質が、ナノ粒子の外側層または被覆に結合され得、および／または付着され得、および／または組み込まれ得る。これらの化合物は、特定の細胞（例えば腫瘍細胞）を認識し得るように設計され、ナノ粒子の細胞識別をさらに増大させる。
【００２９】
ナノ粒子自身は、好ましくは磁性材料、強磁性、反強磁性、フェリ磁性、反フェリ磁性または超常磁性の材料から構成され、さらに鉄酸化物（特に超常磁性の鉄酸化物）または酸化物層を備えた純鉄から構成されることが好ましい。このようなナノ粒子は、交流磁場によって加熱され得る。ナノ粒子を含む組織は、５０℃よりも高く加熱され得る。腫瘍細胞あたり、ナノ粒子の形態で１０００ｐｇまでおよびそれ以上の鉄が取り込まれ得るので、このような高温が達成され得る。
【００３０】
好ましくは、ナノ粒子は、鉄酸化物および特にマグネタイト（Ｆｅ３Ｏ４）、マグヘマイト（γ−Ｆｅ２Ｏ３）またはこれらの２つの酸化物の混合物から構成され、そして好ましくは超常磁性である。一般に、好ましいナノ粒子は、式ＦｅＯＸ（Ｘは１〜２の数を表す）によって表され得る。しかし、ナノ粒子を非磁性材料、例えば、二酸化ケイ素（ＳｉＯ２）（下記参照）に組み込むことも可能である。好ましくは、ナノ粒子は、５００ｎｍ未満の直径を有する。好ましくは、ナノ粒子は、１５ｎｍの中間直径を有するか、または好ましくは１〜１００ｎｍのサイズの範囲の中にあり、そして１０〜２０ｎｍの範囲の中にあることが特に好ましい。
【００３１】
式ＦｅＯＸ（Ｘは１．０〜２．０の範囲の中の数である）の磁性材料に加えて、一般式Ｍ（ＩＩ）Ｆｅ２Ｏ４（ＭはＣｏ、Ｎｉ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｄ、Ｂａまたは他のフェライトである）の材料もまた、本発明に従って用いられ得る。好ましくは、鉄原子と異なる金属原子が７０金属原子％以下、特に３５金属原子％以下の量で含まれる。好ましくは、ナノ粒子は、９８質量％よりも多くまで、Ｆｅ（ＩＩＩ）とＦｅ（ＩＩ）との両方を、好ましくは１：１〜１：３の比で含む鉄酸化物が存在する。さらに、本明細書で挙げられるような磁性材料が組み込まれている、および／または付着されているシリカまたは高分子の粒子もまた適切である。
【００３２】
また、用いられるナノ粒子のコアは、非磁性材料から構成されていてもよい。例えば、高分子（例えば、ＰＬＧＡ、ポリアクリルアミド、ポリブチルシアノアクリレート）、金属およびすべての酸化物材料（例えば、ＭｇＯ、ＣａＯ、ＴｉＯ２、ＺｒＯ２、ＳｉＯ２、Ａｌ２Ｏ３）由来のナノ粒子が用いられ得る。エンドサイトーシスを行う能力は、粒子のコアではなく被覆に依存するので、上記方法によって腫瘍特異的被覆でコーティングされ得る任意の材料が、本発明に従って適切である。
【００３３】
好ましくは、ナノ粒子またはナノスケールの粒子は、１００ｎｍ以下、好ましくは５０ｎｍ以下の平均粒子直径を有し、そして３０ｎｍ以下の平均粒子直径を有することが特に好ましい。好ましくは、中間粒子直径は、１〜４０ｎｍであり、３〜３０ｎｍであることがさらに好ましく、そして５〜２５ｎｍであることが特に好ましい。
【００３４】
驚くべきことに、このようなナノ粒子は、特定の細胞型の中への治療物質の送達に非常に適しており、それによって治療物質の効力の著しい増大を引き起こす。該治療物質は、好ましくは、抗癌剤、細胞分裂阻害剤、細胞障害剤、抗増殖剤、消炎剤、抗遊走剤、抗血管新生剤、抗炎症剤、抗細菌剤および／または微小管インヒビターである。
【００３５】
細胞障害性および／または細胞分裂阻害性の化合物、すなわち、細胞障害性および／または細胞分裂阻害性の特性を有する化学物質として、アルキル化剤、細胞分裂阻害性の特性を有する抗生物質、代謝拮抗剤、微小管インヒビターおよびトポイソメラーゼインヒビター、白金を含む化合物および他の細胞分裂阻害剤（例えば、アスパラギナーゼ、トレチノイン、アルカロイド、ポドフィロトキシン、タキサンおよびミルテホシン（登録商標））、ホルモン、免疫調節物質、モノクローナル抗体、シグナル伝達物質（シグナル伝達のための分子）およびサイトカインが、特に用いられ得る。
【００３６】
アルキル化剤の例としては、特にクロレタミン、シクロホスファミド、トロホスファミド、イホスファミド、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、チオテパ、カルムスチン、ロムスチン、ダカルバジン、プロカルバジン、テモゾロミド、トレオスルファン、エストラムスチンおよびニムスチンが挙げられる。
【００３７】
細胞分裂阻害性の特性を有する抗生物質の例としては、ダウノルビシンおよびリポソームのダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、ダクチノマイシン、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、エピルビシン（４−エピ−アドリアマイシン）、イダルビシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、アムサクリンおよびアクチノマイシンＤが挙げられる。
【００３８】
メトトレキサート、５−フルオロウラシル、６−チオグアニン、６−メルカプトプリン、フルダラビン、クラドリビン、ペントスタチン、ゲムシタビン、シタラビン、アザチオプリン、ラルチトレキセド、カペシタビン、シトシンアラビノシド、チオグアニンおよびメルカプトプリンが、代謝拮抗剤（代謝拮抗性の薬剤）の例として挙げられ得る。
【００３９】
ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、エトポシドおよびテニポシドは、アルカロイドおよびポドフィロトキシンとして分類される。さらに、白金を含む化合物が、本発明に従って用いられ得る。シスプラチン、カルボプラチンおよびオキサリプラチンが、白金を含む化合物の例である。微小管インヒビターの例としては、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビノレルビン）およびパクリタキセル（タキソール（登録商標））およびパクリタキセルの誘導体のようなアルカロイドが挙げられる。トポイソメラーゼインヒビターの例としては、エトポシド、テニポシド、カンプトテシン、トポテカンおよびイリノテカンが挙げられる。
【００４０】
パクリタキセルおよびドセタキセルは、タキサン化合物の例であり、そして他の細胞分裂阻害性の薬剤（他の細胞分裂阻害剤）の例としては、ヒドロキシカルバミド（ヒドロキシ尿素）、イマチニブ、ミルテホシン（登録商標）、アムサクリン、トポテカン（トポイソメラーゼ−Ｉのインヒビター）、ペントスタチン、ベキサロテン、トレチノインおよびアスパラギナーゼが挙げられる。モノクローナル抗体の化合物の種類の代表としては、特にトラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標）としてもまた知られている）、アレムツズマブ（マブキャンパス（登録商標）としてもまた知られている）およびリツキシマブ（マブセラ（登録商標）としてもまた知られている）がある。
【００４１】
本発明によれば、例えば、グルココルチコイド（プレドニゾン）、エストロゲン（ホスフェストロール、エストラムスチン）、ＬＨＲＨ（ブセレリン、ゴセレリン、リュープロレリン、トリプトレリン）、フルタミド、酢酸シプロテロン、タモキシフェン、トレミフェン、アミノグルテチミド、ホルメスタン、エキセメスタン、レトロゾールおよびアナストロゾールのようなホルモンもまた用いられ得る。免疫調節物質、サイトカイン、抗体およびシグナル伝達物質の種類としては、インターロイキン−２、インターフェロン−α、エリスロポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、トラスツズマブ（ハーセプチン（登録商標））、リツキシマブ（マブセラ（登録商標））、ゲフィチニブ（イレッサ（登録商標））、イブリツモマブ（ゼバリン（登録商標））、レバミソールおよびレチノイドが挙げられる。
【００４２】
さらに可能な治療物質としては、アクチノマイシンＤ、アミノグルテチミド、アントラサイクリン、アロマターゼインヒビター、抗エストロゲン剤、ブセレリン、葉酸アンタゴニスト、ゴセレリン、ホルモンアンタゴニスト、ハイカムチン、ヒドロキシ尿素、有糸分裂インヒビター、タモキシフェン、テストラクトン、シロリムス（ラパマイシン）、エベロリムス、ピメクロリムス、ソマトスタチン、タクロリムス、ロキシスロマイシン、デュネマイシン（Ｄｕｎａｉｍｙｃｉｎ）、アスコマイシン、バフィロマイシン、エリスロマイシン、ミデカマイシン、ジョサマイシン、コンカナマイシン、クラリスロマイシン、トロレアンドマイシン、ホリマイシン（Ｆｏｌｉｍｙｃｉｎ）、セリバスタチン、シンバスタチン、ロバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、アトルバスタチン、プラバスタチン、ピタバスタチン、４−ヒドロキシオキシシクロホスファミド、トロホスファミド、ベンダムスチン、チモシンα−１、アクラルビシン、フルダラビン−５’−リン酸二水素、プリンおよびピリミジン塩基のアンタゴニスト、ヒドロキシカルバミド、アルデスロイキン、ペガスパルガーゼ、レトロゾール、アミノグルテチミド、アドリアマイシン、アジスロマイシン、スピラマイシン、セファランチン、エポチロンＡおよびＢ、ミトキサントロン、アザチオプリン、ミコフェノール酸モフェチル、ｃ−ｍｙｃアンチセンス、ｂ−ｍｙｃアンチセンス、ベツリン酸、カンプトテシン、カンプトテシン誘導体、メラニン細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）、活性型プロテインＣ、ＩＬ−１βインヒビター、フマル酸およびそのエステル、デルミシジン（Ｄｅｒｍｉｃｉｄｉｎ）、カルシポトリオール、タカルシトール、ラパコール、β−ラパコン、ポドフィロトキシン、ベツリン、ポドフィリン酸２−エチルヒドラジド、モルグラモスチム（ｒｈｕＧＭ−ＣＳＦ）、ペグインターフェロンα−２ｂ、レノグラスチム（ｒ−ＨｕＧ−ＣＳＦ）、フィルグラスチム、マクロゴール、ダカルバジン、セファロマンニン、トラスツズマブ、エキセメスタン、バシリキシマブ、ダクリズマブ、セレクチン（サイトカインアンタゴニスト）、ＣＥＴＰインヒビター、カドヘリン、サイトカインインヒビター、ＣＯＸ−２インヒビター、ＮＦｋＢ、アンギオペプチン、シプロフロキサシン、カンプトテシン、フルロブラスチン（Ｆｌｕｒｏｂｌａｓｔｉｎ）、ｂＦＧＦアンタゴニスト、プロブコール、プロスタグランジン、１，１１−ジメトキシカンチン−６−オン、１−ヒドロキシ−１１−メトキシカンチン−６−オン、スコポレチン、コルヒチン、ＮＯ供与体、四硝酸ペンタエリスリトール、シドノンイミン、Ｓ−ニトロソ誘導体、スタウロスポリン、β−エストラジオール、α−エストラジオール、エストリオール、エストロン、エチニルエストラジオール、ホスフェストロール、メドロキシプロゲステロン、シピオン酸エストラジオール、安息香酸エストラジオール、トラニラスト、カメバカウリン（Ｋａｍｅｂａｋａｕｒｉｎ）、ベラパミル、チロシンキナーゼインヒビター（チロホスチン）、シクロスポリンＡ、パクリタキセルおよびその誘導体（例えば、６−α−ヒドロキシ−パクリタキセル）、バッカチン、タキソテール、モフェブタゾン��アセメタシン、ジクロフェナク、ロナゾラク、ダプソン、ｏ−カルバモイルフェノキシ酢酸、リドカイン、ケトプロフェン、メフェナム酸、ピロキシカム、メロキシカム、リン酸クロロキン、ペニシラミン、ヒドロキシクロロキン、オーラノフィン、金チオリンゴ酸ナトリウム、オキサセプロール、セレコキシブ、β−シトステロール、アデメチオニン、ミルテカイン、ポリドカノール、ノニバミド、レボメントール、ベンゾカイン、エスシン、エリプチシン、Ｄ−２４８５１（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）、コルセミド、サイトカラシンＡ−Ｅ、インダノシン、ノコダゾール、バシトラシン、ビトロネクチンレセプターアンタゴニスト、アゼラスチン、遊離核酸、ウイルス伝達物質に組み込まれた核酸、ＤＮＡおよびＲＮＡフラグメント、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター−１、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター−２、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ＶＥＧＦインヒビター、ＩＧＦ−１、抗生物質（例えば、セファドロキシル、セファゾリン、セファクロル、セフォキシチン、トブラマイシン、ゲンタマイシン、ペニシリン、ジクロキサシリン、オキサシリン）の群由来の活性薬剤、スルホンアミド、メトロニダゾール、抗血栓剤、アルガトロバン、アスピリン、アブシキシマブ、合成アンチトロンビン、ビバリルジン、クマジン、エノキサパリン、ＧｐＩＩｂ／ＩＩＩａ血小板膜レセプター、第Ｘａ因子インヒビターに対する抗体、ヘパリン、ヒルジン、ｒ−ヒルジン、ＰＰＡＣＫ、プロタミン、プロウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、ワルファリン、ウロキナーゼ、血管拡張剤、ジピラミドール（Ｄｉｐｙｒａｍｉｄｏｌ）、トラピジル、ニトロプルシド、ＰＤＧＦアンタゴニスト、トリアゾロピリミジン、セラミン、ＡＣＥインヒビター、カプトプリル、シラザプリル、リシノプリル、エナラプリル、ロサルタン、チオプロテアーゼインヒビター、プロスタサイクリン、バピプロスト、インターフェロンα、βおよびγ、ヒスタミンアンタゴニスト、セロトニン遮断薬、アポトーシスインヒビター、アポトーシスレギュレーター、ＮＦ−ｋＢまたはＢｃｌ−ｘＬアンチセンスオリゴヌクレオチド、ハロフジノン、ニフェジピン、トコフェロール、トラニラスト、モルシドミン、茶ポリフェノール、没食子酸エピカテキン、没食子酸エピガロカテキン、ボスウェリア酸およびその誘導体、レフルノミド、アナキンラ、エタネルセプト、スルファサラジン、エトポシド、ジクロキサシリン、テトラサイクリン、トリアムシノロン、ムタマイシン（Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ）、プロカインイミド（Ｐｒｏｃａｉｎｉｍｉｄ）、レチノイン酸、キニジン、ジソピラミド、フレカイニド、プロパフェノン、ソタロール、アミオダロン、天然のおよび合成的に得られたステロイド（例えば、ブリオフィリン（Ｂｒｙｏｐｈｙｌｌｉｎ）Ａ、イノトジオール、マキロシド（Ｍａｑｕｉｒｏｓｉｄ）Ａ、ガラキノシド（Ｇｈａｌａｋｉｎｏｓｉｄ）、マンソニン（Ｍａｎｓｏｎｉｎ）、ストレブロシド（Ｓｔｒｅｂｌｏｓｉｄ）、ヒドロコルチゾン、ベタメタゾン、デキサメタゾン）、フェノプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセン、フェニルブタゾン、アシクロビル、ガンシクロビル、ジドブジン、抗真菌剤、クロトリマゾール、フルシトシン、グリセオフルビン、ケトコナゾール、ミコナゾール、ナイスタチン、テルビナフィン、クロロキン、メフロキン、キニーネ、天然テルペノイド、ヒポカエスクリン（Ｈｉｐｐｏｃａｅｓｃｕｌｉｎ）、バーリントゲノール（Ｂａｒｒｉｎｇｔｏｇｅｎｏｌ）−Ｃ２１−アンゲリカ酸、１４−デヒドロアグロスチスタチン（Ｄｅｈｙｄｒｏａｇｒｏｓｔｉｓｔａｃｈｉｎ）、アグロスケリン（Ａｇｒｏｓｋｅｒｉｎ）、アグロスチスタチン（Ａｇｒｏｓｔｉｓｔａｃｈｉｎ）、１７−ヒドロキシアグロスチスタチン（Ｈｙｄｒｏｘｙａｇｒｏｓｔｉｓｔａｃｈｉｎ）、オバトジオーリド（Ｏｖａｔｏｄｉｏｌｉｄｅ）、４，７−オキシシクロアニソメル酸（Ｏｘｙｃｙｃｌｏａｎｉｓｏｍｅｌｓａｕｒｅ）、バッカリノイド（Ｂａｃｃｈａｒｉｎｏｉｄｅ）Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３およびＢ７、ツベイモシド、ブルセアノール（Ｂｒｕｃｅａｎｏｌｅ）Ａ、ＢおよびＣ、ブルセアンチノシド（Ｂｒｕｃｅａｎｔｉｎｏｓｉｄｅ）Ｃ、ヤダンジオシドＮおよびＰ、イソデオキシエレファントピン（Ｉｓｏｄｅｏｘｙｅｌｅｐｈａｎｔｏｐｉｎ）、トメンファントピン（Ｔｏｍｅｎｐｈａｎｔｏｐｉｎ）ＡおよびＢ、コロナリン（Ｃｏｒｏｎａｒｉｎ）Ａ、Ｂ、ＣおよびＤ、ウルソール酸、ヒプタチン酸（Ｈｙｐｔａｔｓａｕｒｅ）Ａ、ゼオリン、イソ−イリドジャーマナル（Ｉｒｉｄｏｇｅｒｍａｎａｌ）、メイテンフォリオール（Ｍａｙｔｅｎｆｏｌｉｏｌ）、エフサンチン（Ｅｆｆｕｓａｎｔｉｎ）Ａ、エクシサニン（Ｅｘｃｉｓａｎｉｎ）ＡおよびＢ、ロンギカウリン（Ｌｏｎｇｉｋａｕｒｉｎ）Ｂ、スクルポネアチン（Ｓｃｕｌｐｏｎｅａｔｉｎ）Ｃ、カメバウニン（Ｋａｍｅｂａｕｎｉｎ）、ロイカメニン（Ｌｅｕｋａｍｅｎｉｎ）ＡおよびＢ、１３，１８−デヒドロー６−アルファ−セネシオイルオキシチャパリン（Ｓｅｎｅｃｉｏｙｌｏｘｙｃｈａｐａｒｒｉｎ）、タキサマイリンＡおよびＢ、レジニロール（Ｒｅｇｅｎｉｌｏｌ）、トリプトリド、シマリン、アポシマリン、アリストロキア酸、アノプテリン（Ａｎｏｐｔｅｒｉｎ）、ヒドロキシアノプテリン（Ｈｙｄｒｏｘｙａｎｏｐｔｅｒｉｎ）、アネモニン、プロトアネモニン、ベルベリン、塩化ケリブリン（Ｃｈｅｌｉｂｕｒｉｎ）、シクトキシン、シノコクリン（Ｓｉｎｏｃｏｃｕｌｉｎ）、コンブレスタチン（Ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ）ＡおよびＢ、クドライソフラボン（Ｃｕｄｒａｉｓｏｆｌａｖｏｎ）Ａ、クルクミン、ジヒドロニチジン、塩化ニチジン、１２−ベータ−ヒドロキシプレグナジエン−３，２０−ジオン、ビロボール、ギンコール、ギンコール酸、ヘレナリン、インジシン、インジシン−Ｎ−オキシド、ラシオカルピン、イノトジオール、配糖体１ａ、ポドフィロトキシン、ジャスティシジン（Ｊｕｓｔｉｃｉｄｉｎ）ＡおよびＢ、ラレアチン（Ｌａｒｒｅａｔｉｎ）、マロテリン（Ｍａｌｌｏｔｅｒｉｎ）、マロトクロマノール、イソブチリルマロトクロマノール、マキロシド（Ｍａｑｕｉｒｏｓｉｄ）Ａ、マーカンチン（Ｍａｒｃｈａｎｔｉｎ）Ａ、メイタンシン、リコリジシン（Ｌｙｃｏｒｉｄｉｃｉｎ）、マーゲチン（Ｍａｒｇｅｔｉｎ）、パンクラチスタチン、リリオデニン、ビスパルテノリジン（Ｂｉｓｐｓｒｔｈｅｎｏｌｉｄｉｎ）、オキソウシンスニン（Ｏｘｏｕｓｈｉｎｓｕｎｉｎ）、アリストラクタム−ＡＩＩ、ビスパルテノリジン（Ｂｉｓｐａｒｔｈｅｎｏｌｉｄｉｎ）、ペリプロコシド（Ｐｅｒｉｐｌｏｃｏｓｉｄ）Ａ、ガラキノシド（Ｇｈａｌａｋｉｎｏｓｉｄ）、ウルソール酸、デオキシプソロスペルミン（Ｄｅｏｘｙｐｓｏｒｏｓｐｅｒｍｉｎ）、サイコルビン（Ｐｓｙｃｏｒｕｂｉｎ）、リシンＡ、サンギナリン、マニュウェイツ酸（Ｍａｎｗｕｗｅｉｚｓａｕｒｅ）、メチルソルビホリン（Ｍｅｔｈｙｌｓｏｒｂｉｆｏｌｉｎ）、スファテリアクロメン（Ｓｐｈａｔｈｅｌｉａｃｈｒｏｍｅｎ）、スチゾフィリン（Ｓｔｉｚｏｐｈｙｌｌｉｎ）、マンソニン（Ｍａｎｓｏｎｉｎ）、ストレブロシド（Ｓｔｒｅｂｌｏｓｉｄ）、アカゲリン（Ａｋａｇｅｒｉｎ）、ジヒドロウサンバラエンシン（Ｄｉｈｙｄｒｏｕｓａｍｂａｒａｅｎｓｉｎ）、ヒドロキシウサンバリン（Ｈｙｄｒｏｘｙｕｓａｍｂａｒｉｎ）、ストリキノペンタミン（Ｓｔｒｙｃｈｎｏｐｅｎｔａｍｉｎ）、ストリキノフィリン（Ｓｔｒｙｃｈｎｏｐｈｙｌｌｉｎ）、ウサンバリン（Ｕｓａｍｂａｒｉｎ）、ウサンバレンシン（Ｕｓａｍｂａｒｅｎｓｉｎ）、ベルベリン、リリオデニン、オキソウシンスニン（Ｏｘｏｕｓｈｉｎｓｕｎｉｎ）、ダフノレチン、ラリシレシノール、メトキシラリシレシノール、シリンガレシノール、ウンベリフェロン、アフロモゾン（Ａｆｒｏｍｏｓｏｎ）、アセチルビスミオン（Ａｃｅｔｙｌｖｉｓｍｉｏｎ）Ｂ、デスアセチルビスミオン（Ｄｅｓａｃｅｔｙｌｖｉｓｍｉｏｎ）Ａ、ビスミオン（Ｖｉｓｍｉｏｎ）ＡおよびＢが挙げられる。
【００４３】
したがって、少なくとも１つの治療上活性物質が、エンドサイトーシスによって、腫瘍細胞により大部分が取り込まれる細胞内移行可能なナノ粒子と組み合わせて投与されることが本発明に必須である。ナノ粒子、例えば、ＤＥ１９７２６２８２Ａに記載のようなものは、正常細胞よりも腫瘍細胞によってより高い程度で取り込まれる。鉄酸化物ナノ粒子を用いるインビトロの試験によって示され得るように、特定の腫瘍細胞系では、１０００ｐｇ／細胞より多くの鉄がナノ粒子の形態で取り込まれる。該目的のために、ナノ粒子は、電子顕微鏡分析によって示され得るように、細胞の中へ大量に送達される。インビトロの試験では、ここで驚くべきことに、該ナノ粒子および少なくとも１つの治療上活性物質（特に細胞分裂阻害剤または抗癌剤）の医薬品組成物の投与は、投与された物質の効力を増大させることが見出された。該効果はまた、ナノ粒子と細胞分裂阻害剤との間に（共有、イオン性または吸着の）結合が存在しない場合にも観察された。細胞分裂阻害剤とナノ粒子との間の結合は、結合反応によって細胞分裂阻害剤がその効力を失う場合、または結合が強すぎて細胞内取り込みの際に細胞分裂阻害剤の放出を妨げる場合にのみ、該結果に影響を及ぼす。
【００４４】
したがって、該ナノ粒子および少なくとも１つの治療上活性物質からの医薬品組成物は、癌疾患、潰瘍、腫瘍、カルシノーマおよび増殖に欠陥がある細胞の予防および治療に理想的に適している。
【００４５】
ナノ粒子および活性物質からの本発明の組成物が用いられ得る癌および腫瘍の型の例としては、以下のものが挙げられる：腺癌、脈絡膜黒色腫、急性白血病、聴神経鞘腫、膨大部癌、肛門癌、星状細胞腫、基底細胞癌、膵臓癌、結合組織腫瘍、膀胱癌、気管支癌、非小細胞気管支癌、乳癌、バーキットリンパ腫、子宮体癌、ＣＵＰ症候群、大腸癌、小腸癌、小腸腫瘍、卵巣癌、子宮内膜癌、脳室上衣腫、上皮癌、ユーイング腫瘍、胃腸癌、胆嚢癌、胆癌、子宮癌、子宮頚部癌、神経膠芽腫、婦人科癌、耳、鼻および咽喉の腫瘍、血液新形成、有毛細胞白血病、尿道癌、皮膚癌、脳腫瘍（神経膠腫）、脳腫瘍転移、精巣癌、脳下垂体腫瘍、カルチノイド、カポジ肉腫、喉頭癌、生殖細胞腫瘍、骨癌、結腸直腸癌、頭頚部腫瘍（頚部、鼻および耳の領域に位置する腫瘍）、結腸癌、頭蓋咽頭腫、口内および唇上の癌、肝臓癌、肝臓腫瘍転移、白血病、眼瞼腫瘍、肺癌、悪性リンパ腫（ホジキン／非ホジキン）、リンパ腫、胃癌、悪性黒色腫、悪性新生物、胃腸管悪性腫、乳癌（カルシノーマ）、直腸癌、髄芽腫、黒色腫、髄膜腫、ホジキン病、菌状息肉腫、鼻癌、神経鞘腫、神経芽細胞腫、腎臓癌、腎細胞癌、非ホジキンリンパ腫、乏突起膠腫、食道癌（カルシノーマ）、溶骨性腫瘍および骨芽細胞腫瘍、骨肉腫、卵巣癌（カルシノーマ）、膵臓癌（カルシノーマ）、陰茎癌、形質細胞腫、頭頚部扁平上皮癌、前立腺癌、咽喉癌、直腸癌（カルシノーマ）、網膜芽細胞腫、膣癌、甲状腺癌、シュネーベルク肺癌、食道癌、有棘細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫（菌状息肉腫）、胸腺腫、管癌、眼腫瘍、尿道癌、泌尿器腫瘍、尿路上皮癌、外陰癌、疣贅の出現、軟部組織腫瘍、軟部組織肉腫、ウィルムス腫瘍、頚部癌および舌癌。
【００４６】
固形腫瘍が特に好ましい。前立腺癌、脳腫瘍、肉腫、子宮頚部癌、卵巣癌、乳癌、気管支癌、黒色腫、頭頚部腫瘍、食道癌、直腸癌、膵臓癌、膀胱癌および腎臓癌、肝臓、脳およびリンパ節での腫瘍転移が特に好ましい。
【００４７】
さらに、通常のハイパーサーミア、磁性流体ハイパーサーミアまたは磁性流体を用いる温熱療法、放射線療法および／または通常の化学療法と組み合わせた、本発明の組成物の適用および使用が特に好ましい。したがって、本発明の組成物によって、癌の治療のための通常の方法が都合よく補完される。
【００４８】
したがって、本発明はまた、本発明の医薬品組成物とハイパーサーミア、温熱療法、放射線療法および／または化学療法との組み合わせにも関する。
【００４９】
このような組み合わせの例としては、磁性流体ハイパーサーミアまたは磁性流体を用いる温熱療法と組み合わせた、本発明の医薬品組成物の使用が挙げられる。超常磁性ナノ粒子を用いる場合、交流磁場が、ナノ粒子の種々の緩和プロセスを誘発するための外部刺激として作用する。特に、該プロセスによって、ナノ粒子およびその周囲が加熱される。本発明によれば、交流磁場によって誘発される該プロセスは、変性した細胞を加熱するために用いられ、それによって治療上活性物質は、当該細胞の死滅をいっそうより迅速に引き起こし得る。
【００５０】
したがって、医薬品組成物は、変性した細胞種または外来細胞によって特徴づけられる疾患の治療と予防との両方のために用いられる。ここで、本発明のナノ粒子の、外来のまたは変性した細胞と健常な自己細胞との間の識別、および該細胞の中への治療上活性物質の送達に関する特性が、都合よく用いられ得る。変性した細胞は、特に癌細胞または増殖に欠陥がある細胞、および狭窄または再狭窄組織である。外来細胞としては、特に細菌が挙げられる。
【００５１】
活性成分の効力は、ナノ粒子が活性成分を変性した細胞の中へ送達することができることによって増大する。ナノ粒子と治療上活性物質とを含む医薬品組成物の適用が、さらに放射線療法または化学療法またはハイパーサーミア、またはハイパーサーミアおよび化学療法、またはハイパーサーミアおよび放射線療法と組み合わされる場合、治療の効力はさらに改良され得る。
【００５２】
したがって、本発明によれば、活性成分の効力は、活性成分の局所的、局所領域的または細胞内濃度の増大の結果として増大し、そして治療上活性物質の全身性毒性および副作用は減少する。
【実施例】
【００５３】
実施例１
細胞分裂阻害性のマイトマイシンの効力の増大（インビトロ）
腫瘍細胞の治療のためのマイトマイシンの効力の増大を、インビトロの試験によって証明できた。インビトロの試験は、神経膠芽腫であるヒト細胞系ＲＵＳＩＲＳ１（脳腫瘍）を用いて行った。神経膠芽腫細胞を患者の腫瘍組織から取り、そしてＤＥ１９９１２７９８Ｃ１に記載のように培養した。２×１０６のＲＵＳＩＲＳ１細胞を、マイトマイシン／ナノ粒子の混合物の効力を試験するために、それぞれ、２５ｍｌの細胞培養培地（Ｄ−ＭＥＭ＋２０％ＦＢＳ＋１．２ｍｌのピルビン酸）を有する７５ｃｍ３の細胞培養ボトル中に調製した。１３６μｌの磁性流体であるＭＦＬ  ＡＳ  Ｍ０１（多縮合Ｎ−（２−アミノエチル）−３−（トリメトキシシリル）プロピルアミン（製造メーカー：ＭａｇＦｏｒｃｅ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＧｍｂＨ，ベルリン，ドイツ）でコーティングされた鉄酸化物ナノ粒子）（ＣＦｅ＝２ｍｏｌ／ｌ）および３９０μｌのマイトマイシン溶液（０．９％ＮａＣｌ中１ｍｇ／ｍｌ）をその細胞懸濁液に添加した。細胞に添加する前に、ナノ粒子の試料を３７℃に１５分間加熱し、そして室温で１０分間静置させた。マイトマイシンを有するがナノ粒子を有しないコントロール試料を同じ方法で調製した。
【００５４】
ナノ粒子の、マイトマイシンの効力に対する影響は、図１〜６によって示され得る。マイトマイシン溶液以外何も添加しなかった細胞は、４８時間のインキュベーション後にのみ著しい損傷を示した。対照的に、細胞分裂阻害剤および粒子とインキュベートした細胞は、３時間後に既に著しい損傷を示した。鉄酸化物ナノ粒子の細胞の中への取り込みは、細胞の茶色の呈色によって証明され得る。コントロール実験は、ナノ粒子単独（マイトマイシンを有しない）もまた取り込まれるが、同様の高い細胞損傷を引き起こさないことを示した。迅速な細胞損傷（３時間後）は、粒子とマイトマイシンとが同時に存在する場合にのみ生じる。したがって、マイトマイシンもまた、粒子のエンドサイトーシスによって送達され、それによって著しい細胞損傷を引き起こした。
【００５５】
実施例２
抗生物質のセファマンドールの効力の増大（インビトロ）
セファマンドール（ＣＡＳ番号３００３４−０３−８）は、細菌感染と戦うために用いられる。２０００年に、癌細胞に対する効力が、驚くべきことに、肝臓腫瘍転移の生検材料で見出された（ＭａｇＦｏｒｃｅ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）。しかし、この物質の癌細胞と戦う潜在力は、かなり低いと考えられている。発明者らの実験は、腫瘍細胞の破壊（インビトロ）は、通常、０．５ｍｇ／ｍｌ以上の濃度（細胞培養培地中の濃度）を用いることによってのみ達成され得ることを示した。しかし、腫瘍細胞の治療におけるセファマンドールの効力を、ナノ粒子の同時適用によって強烈に増大させることが可能である。
【００５６】
インビトロの実験は、細胞系ＢＴ２０（乳癌）およびＷｉＤｒ（結腸癌）を用いて行った。腫瘍細胞を患者の腫瘍組織から取り、そしてＤＥ１９９１２７９８Ｃ１に記載のように培養した。２×１０６の細胞を、セファマンドール／ナノ粒子の混合物の効力を試験するために、それぞれ、２５ｍｌの細胞培養培地（ＷｉＤｒ細胞についてはＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ＋１．２ｍｌのピルビン酸、またはＢＴ２０細胞についてはＢＭＥ＋１０％ＦＢＳ＋ピルビン酸＋５ｍｌの非必須アミノ酸＋５ｍｌグルタミン）を有する７５ｃｍ３の細胞培養ボトル中に調製した。１３６μｌの磁性流体であるＭＦＬ  ＡＳ  Ｍ０１（多縮合Ｎ−（２−アミノエチル）−３−（トリメトキシシリル）プロピルアミン（製造メーカー：ＭａｇＦｏｒｃｅ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＧｍｂＨ，ベルリン，ドイツ）でコーティングされた鉄酸化物ナノ粒子）（ＣＦｅ＝２ｍｏｌ／ｌ）および３９０μｌのセファマンドール溶液（０．９％ＮａＣｌ中１ｍｇ／ｍｌの原液）をその細胞懸濁液に添加した。したがって、細胞培養培地（２５ｍｌ）中のセファマンドールの濃度は、０．０１６ｍｇ／ｍｌであった。よって、純粋なセファマンドールの効力の閾値を著しく下回った。
【００５７】
７２時間のインキュベーション後、図７〜１２によって示されるように、著しい細胞損傷を観察できた。７２時間後、３０．５％のＢＴ２０細胞および２４％のＷｉＤｒ細胞が死滅した。選択された濃度のセファマンドールまたはナノ粒子単独のいずれも細胞の死滅を引き起こし得ない（０％の死滅細胞）。セファマンドールとナノ粒子との組み合わせのみが、その腫瘍細胞の著しい損傷をもたらす。これは、細胞の中へのセファマンドールの送達のためである。
【００５８】
実施例３
ナノ粒子、薬理学的活性成分および溶媒からの医薬品組成物の調製
約１ｍｇの細胞分裂阻害剤（または１〜１０ｍｍｏｌ、好ましくは２〜６ｍｍｏｌの細胞分裂阻害剤）を１ｍｌの超常磁性鉄酸化物ナノ粒子の水性懸濁剤（２ｍｌ／ｌの鉄濃度）に添加する。
【００５９】
細胞分裂阻害剤が、水に十分に溶解しない場合には、溶液の２０容量％までの量の共溶媒が用いられ得る。ＤＭＳＯ、ＤＭＳ、エタノール、酢酸エチルエステルまたは他の生理学的に許容可能な溶媒が、共溶媒として用いられ得る。
【００６０】
実施例４
１ｍｇのカルムスチンまたは１ｍｇのシスプラチンまたは１ｍｇのエピルビシンまたは１．５ｍｇのゲムシタビンまたは１ｍｇのイマチニブまたは０．８ｍｇのパクリタキセルまたは１．２ｍｇのビンブラスチンまたは１ｍｇのビンクリスチンまたは１．５ｍｇのアドリアマイシンまたは１ｍｇのオキサシリンまたは１ｍｇのテトラサイクリンまたは１ｍｇのテモゾロミドを、１ｍｌの磁性流体であるＭＦＬ  ＡＳ  Ｍ０１（多縮合Ｎ−（２−アミノエチル）−３−（トリメトキシシリル）プロピルアミン（製造メーカー：ＭａｇＦｏｒｃｅ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＡＧ，ベルリン，ドイツ）でコーティングされた鉄酸化物ナノ粒子）（ＣＦｅ＝２ｍｏｌ／ｌ）に添加し、そして完全に混合する。
【００６１】
実施例５
細胞分裂阻害性のミトキサントロンの効力の増大（インビトロ）
原発性前立腺癌細胞をＤＥ１９９１２７９８Ｃ１に記載のように培養した。２×１０６の細胞を、ミトキサントロン／ナノ粒子の混合物の効力を試験するために、それぞれ、２５ｍｌの細胞培養培地を有する７５ｃｍ３の細胞培養ボトル中に調製した。１３６μｌの磁性流体であるＭＦＬ  ＡＳ  Ｍ０１（多縮合Ｎ−（２−アミノエチル）−３−（トリメトキシシリル）プロピルアミン（製造メーカー：ＭａｇＦｏｒｃｅ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＧｍｂＨ，ベルリン，ドイツ）でコーティングされた鉄酸化物ナノ粒子）（ＣＦｅ＝２ｍｏｌ／ｌ）および３９０μｌのミトキサントロン溶液（０．９％ＮａＣｌ中１ｍｇ／ｍｌの原液）をその細胞懸濁液に添加した。著しい細胞損傷を、７２時間のインキュベーション後に観察できた。細胞分裂阻害性のエピルビシンおよびドセタキセル（ポリオキシエチレンソルビトール；ポリソルベート８０中に溶解させた）を用いた場合、同様の効果を示した。
【００６２】
実施例６
細胞分裂阻害性の５−フルオロウラシルの効力の増大（インビトロ）
原発性直腸癌細胞をＤＥ１９９１２７９８Ｃ１に記載のように培養した。２×１０６の細胞を、５−フルオロウラシル／ナノ粒子の混合物の効力を試験するために、それぞれ、２５ｍｌの細胞培養培地を有する７５ｃｍ３の細胞培養ボトル中に調製した。１３６μｌの磁性流体であるＭＦＬ  ＡＳ  Ｍ０１（多縮合Ｎ−（２−アミノエチル）−３−（トリメトキシシリル）プロピルアミン（製造メーカー：ＭａｇＦｏｒｃｅ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＧｍｂＨ，ベルリン，ドイツ）でコーティングされた鉄酸化物ナノ粒子）（ＣＦｅ＝２ｍｏｌ／ｌ）および３９０μｌの５−フルオロウラシル溶液（０．９％ＮａＣｌ中１ｍｇ／ｍｌの原液）をその細胞懸濁液に添加した。著しい細胞損傷を、７２時間のインキュベーション後に観察できた。細胞分裂阻害性のイリノテカンおよびオキサリプラチンを用いた場合、同様の効果を示した。
【００６３】
実施例７
細胞分裂阻害性のカルボプラチンの効力の増大（インビトロ）
原発性気管支癌細胞（非小細胞肺癌；ＮＳＣＬＣ）をＤＥ１９９１２７９８Ｃ１に記載のように培養した。２×１０６の細胞を、カルボプラチン／ナノ粒子の混合物の効力を試験するために、それぞれ、２５ｍｌの細胞培養培地を有する７５ｃｍ３の細胞培養ボトル中に調製した。１３６μｌの磁性流体であるＭＦＬ  ＡＳ  Ｍ０１（多縮合Ｎ−（２−アミノエチル）−３−（トリメトキシシリル）プロピルアミン（製造メーカー：ＭａｇＦｏｒｃｅ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＧｍｂＨ，ベルリン，ドイツ）でコーティングされた鉄酸化物ナノ粒子）（ＣＦｅ＝２ｍｏｌ／ｌ）および３９０μｌのカルボプラチン溶液（０．９％ＮａＣｌ中１ｍｇ／ｍｌの原液）をその細胞懸濁液に添加した。著しい細胞損傷を、７２時間のインキュベーション後に観察できた。細胞分裂阻害性のエピルビシンおよびドセタキセル（ポリオキシエチレンソルビトール；ポリソルベート８０中に溶解させた）を用いた場合、同様の効果を示した。
【００６４】
実施例８〜１９６：
実施例２の実験手順に対応して、以下の７細胞系を、表１に列挙した活性成分を用いてインビトロで試験した：ａ）神経膠芽腫ヒト細胞系ＲＵＳＩＲＳ１；ｂ）乳癌細胞系ＢＴ２０；ｃ）結腸癌細胞系ＷｉＤＲ；ｄ）気管支癌細胞ＮＳＣＬＣ；ｅ）直腸癌細胞およびｆ）前立腺癌細胞系ＤＵ１４５。
【００６５】
すべての場合で、細胞分裂阻害剤の増大した活性を観察できた。活性の増大を、それぞれの細胞分裂阻害剤の後ろの括弧中に示す。ここで、（＋）は、約５〜８０％の増大を意味し、そして（＋＋）は、８０〜５００％の増大を意味する。
【００６６】
【表１】
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【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】０．９％ＮａＣｌ中のマイトマイシンの添加３時間後のＲＵＳＩＲＳ１細胞を示す。
【図２】０．９％ＮａＣｌ中のマイトマイシン＋ナノ粒子の添加３時間後のＲＵＳＩＲＳ１細胞を示す。
【図３】０．９％ＮａＣｌ中のマイトマイシンの添加２４時間後のＲＵＳＩＲＳ１細胞を示す。
【図４】０．９％ＮａＣｌ中のマイトマイシン＋ナノ粒子の添加２４時間後のＲＵＳＩＲＳ１細胞を示す。
【図５】０．９％ＮａＣｌ中のマイトマイシンの添加４８時間後のＲＵＳＩＲＳ１細胞を示す。
【図６】０．９％ＮａＣｌ中のマイトマイシン＋ナノ粒子の添加４８時間後のＲＵＳＩＲＳ１細胞を示す。
【図７】４８時間後のＲＵＳＩＲＳ１細胞（コントロール）を示す。
【図８】セファマンドールを有するがナノ粒子を有しないコントロールとして７２時間後のＢＴ２０細胞を示す。
【図９】ナノ粒子およびセファマンドールとの７２時間のインキュベーション後のＢＴ２０細胞を示す。
【図１０】ナノ粒子およびセファマンドールとの７２時間のインキュベーション後のＢＴ２０細胞を示す。
【図１１】セファマンドールを有するがナノ粒子を有しないコントロールとして７２時間後のＷｉＤｒ細胞を示す。
【図１２】ナノ粒子およびセファマンドールとの７２時間のインキュベーション後のＷｉＤｒ細胞を示す。
【図１３】ナノ粒子およびセファマンドールとの７２時間のインキュベーション後のＷｉＤｒ細胞を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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