(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効量の下記
【化４６】
0005461009.tif 000078
から成る群から選択される化合物、及びこれらの医薬的に許容されうる塩、エステル、アミド又はカーボネートから成る群から選択される、治療を必要とする患者のアルツハイマー病、ハンチントン病及びパーキンソン病からなる群から選択される神経病を治療するための薬剤。
【請求項２】
前記組成物が下記
【化４７】
0005461009.tif 000079
の化合物である請求項１に記載の薬剤。
【請求項３】
前記化合物が下式
【化１７】
0005461009.tif 000080
の化合物である請求項１に記載の薬剤。
【請求項４】
活性成分と医薬グレードの担体との単位投与量から成り、アルツハイマー病、ハンチントン病及びパーキンソン病からなる群から選択される神経病を治療するための医薬組成物であって、該活性成分が下記
【化４６】
0005461009.tif 000081
から成る群から選択される化合物、又はこれらの医薬的に許容されうる塩、エステル、アミド、カーボネート又は立体異性体である医薬組成物。
【請求項５】
前記活性成分が下記
【化４７】
0005461009.tif 000082
の化合物である請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記活性成分が下式
【化１７】
0005461009.tif 000083
の化合物である請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記組成物が経口又は非経口投与のための組成物である請求項４〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記組成物が更に第２の活性成分を含む請求項４〜６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願：本出願は２００５年６月８日出願の米国仮出願番号６０／６８８，７６７に基づくものであり、またこれによる優先権を主張するものであり、当該出願内容は引用することにより本明細書に組み込まれているものとする。
助成金：本研究は国立衛生研究所（ＮＩＨ）助成金番号ＮＳ３０６８７及び加齢研究所助成金番号４０９６７による助成を受けた。従って、米国政府は本出願において開示された対象について特定の権利を有する。
この発明は、一般的に神経病やこれに限定されない疾患の患者の治療に関する。より具体的には、本出願で開示した対象の方法は、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ化合物の有効量を該患者に投与し、それにより該疾患を治療することに関する。
【背景技術】
【０００２】
ニューロトロフィン（神経栄養因子）は、ニューロン（神経細胞）を含む特定の細胞の発生、機能及び／又は生存における役割を演ずるポリペプチドである。神経細胞の死又は機能障害は多くの神経病に直接関係していると見なされている。ニューロトロフィン局在性、ニューロトロフィンの発現レベル及び／又は、ニューロトロフィンを結合する受容体の発現レベルの変化は、従って神経細胞の変性又は機能不全に関連すると示唆されてきた。この変性又は機能不全は特にアルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、及び筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）その他に生ずる可能性がある。また、ニューロトロフィンは、例えば、鬱病、肥満症、及び末梢組織の虚血などの非神経病に関連する基本機構の媒介となる。
【０００３】
様々なニューロトロフィンが同定されており、神経成長因子（ＮＧＦ）、ニューロトロフィン−３（ＮＴ−３），ニューロトロフィン−４／５（ＮＴ−４／５）、ニューロトロフィン−６（ＮＴ−６）及び脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）等が挙げられる。ニューロトロフィンは、プロニューロトロフィンとして知られている前駆体型及び成熟型の両者で発見されている。成熟型は、約１２０アミノ酸長のタンパク質であり、生理的状態では安定な、近似的に２５ｋＤａの非共有結合性ホモダイマーとして存在する。各ニューロトロフィンモノマーは、ニューロトロフィンファミリーを通して比較的高程度のアミノ酸保存を示し、ループ１，２及び４と呼ばれる、３個の溶媒に露出したβ−ヘアピンループを持つ。
【０００４】
成熟したニューロトロフィンは優先的に受容体Ｔｒｋ及びｐ７５ＮＴＲと結合するが、成熟型ではタンパク質分解より除去されるＮ−末端領域を持つプロニューロトロフィンは、主にｐ７５ＮＴＲ受容体と相互作用し、またＮ−末端領域を介して選別受容体ソルティリン(Fahnestock,M.,Michalski,B.,Xu, B.,Coughlin,M.D.(2001)Mol Cell Neurosci 18,210-220;Harrington,A.W.他(2004)Proc Natl Acad Sci USA 101,6226-6230;Nykjaer,A.他(2004)Nature 427,843-848)と相互作用する。ｐ７５ＮＴＲ受容体はＴｒｋｓと相互作用し、Ｔｒｋのシグナリングを修飾するが、独立してＩＲＡＫ／ＴＲＡＦ６／ＮＦκＢ、ＰＩ３／ＡＫＴ等のプロ生存シグナル，及びＮＲＡＧＥ／ＪＮＫ(Mamidipudi, V., Li, X., Wooten,M.W.(2002)J Biol Chem 277,28010-28018;Roux,P.P.,Bhakar,A.L.,Kennedy,T.E.,Barker,P.A.(2001)J Biol Chem 276,23097-23104;Salehi,A.H.,他(2000)Neuron 27,279-288)の様なプロアポトティックシグナル等の幾つかのシグナリングシステムと結合する。
【０００５】
機能的配位子、Ｔｒｋ又はその他の受容体の共発現、及び下流のシグナリング要素の発現に依存して、ｐ７５ＮＴＲは細胞の生存と死を促す。ｐｒｏ−ＮＧＦは、ｐ７５ＮＴＲを介して上頸神経節神経と乏突起神経膠芽細胞の死を引き起こし、そのｐ７５ＮＴＲやソルチリン(sortilin)への結合関与は細胞死経路を活性化させることが分かってきた(Nykjaer, A. et al., (2004) Nature 427, 843-848; Lee, R., Kermani, P., Teng, K.K., Hempstead, B.L. (2001) Science 294, 1945-1948; Beattie, M.S., et al. (2002) Neuron 36, 375-386)。
【０００６】
治療目的で投与されると、ニューロトロフィンは、低い血清中半減期を示す不安定性、恐らく低い経口生体利用性及び中枢神経系への制限された透過性(Podulso,J.F.,Curran,G.L.(1996)Brain Res Mol Brain Res 36,280-286;Saltzman,W.M.,Mak,M.W.,Mahoney,M.J.,Duenas, E.T.,Cleland,J.L.(1999)Pharm Res 16, 232-240;Partridge,W.M.(2002)Adv Exp Med Bio513,397-430)など、最適以下の薬理的特徴を示す。さらに、三重受容体シグナリングネットワークの作用を持つことで得られるニューロトロフィンの非常に多面的な効果は、不都合な効果の可能性を増す。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
不幸なことに、今までは、技術的及び倫理的考察が、ニューロトロフィンに基づく治療薬の開発を阻害した。例えば、組み換えＤＮＡ技術を用いて十分量の純粋なニューロトロフィンを生産することは技術的に困難である。さらに、ニューロトロフィンを生産するためにヒト胎児細胞を用いることは可能であるが、この様な細胞（通常流産胎児から得るが）を用いることについて生ずる倫理的派生問題は、このアプローチを用いることをほとんど不可能にした。
今までの研究により、ＢＤＮＦタンパク質の種々のドメインに相当する合成ペプチドが、軸索突起の増殖を促進するＢＤＮＦ効果を達成しうることが示された(O'Leary and Hughes, 2003; Williams et al., 2005; Fletcher and Hughes, 2006)。これらの合成ＢＤＮＦペプチドがＴｒｋＢ受容体を活性化させるかどうか、及びこれらが非ＴｒｋＢ機構により神経組織栄養効果を達成するかどうかについてはまだ知られていないが、これらのペプチドは実際の医学的化合物を構成するには大きすぎる（分子量が約2000）。
従って、これらの疾患を治療する場合に用いるための神経栄養因子に基づく小分子（例えば、分子量が５００未満、有効な薬剤として特徴的である）非ペプチド剤又はペプチド剤の開発を求めるニーズがある。特に、神経栄養因子タンパク質の重要領域に似て、ＴｒｋＢ受容体を活性化させることのできる小分子を特定するニーズがある。更に、有害なｐ７５ＮＴＲとの潜在的相互作用を避ける又は最小限にするために、ＴｒｋＢ受容体やソルチリン受容体を目標とする小分子へのニーズがある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
ここには、本発明を開示するいくつかの実施態様を示すが、これらの実施態様には多くの変化や変更が可能である。ここには、これらの変化や変更のうちの単に模範例を示すに過ぎない。示した実施態様の一つ又はそれ以上の代表的特徴もまた模範例に過ぎない。このような実施態様は典型的にこれらの特徴を持ったり持たなかったりすることができる。また、同様に、これらの特徴は、ここに記載されたかされないかにかかわらず、ここに開示された発明の他の実施態様に適用することができる。過剰な繰り返しを避けるために、ここには本発明の特徴の可能な全ての組み合わせを記載又は示唆したりはしない。
【０００９】
ここに開示するのは、神経病又は非神経病の患者の疾患を治療する方法であって、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ小分子化合物の有効量を該患者に投与する方法である。
【００１０】
いくつかの実施態様において、この疾患は、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、レット症候群、てんかん、パーキンソン病、脊髄損傷、脳梗塞、低酸素症、虚血症、脳損傷、糖尿病性神経障害、末梢性神経障害、神経移植合併症、運動ニューロン病、多発性硬化症、ＨＩＶ痴呆症、末梢神経障害、聴力損失、鬱病、肥満症、メタボリックシンドローム、痛み、癌、及びその他のＴｒｋＢを発現する細胞の変性又は機能不全を含む病気からなる群から選択される。
いくつかの実施態様において、患者はヒト患者である。
また、ここに開示するのは、神経細胞の生存を促進する方法又は神経機能を促進する方法であって、神経細胞を、ＴｒｋＢ受容体分子に特異的に結合する及び／又は調節する能力を持つ化合物で処理することからなる方法である。
更に、ここに開示するのは、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ化合物である。
いくつかの実施態様において、このＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ化合物は、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）のβ−ターンループの類似体である。
いくつかの実施態様において、この化合物は、図１に例証された薬理作用団と実質的に同一である薬理作用団からなる。
いくつかの実施態様において、この化合物は小分子又は小ペプチドである。
いくつかの実施態様において、このＢＤＮＦのβ−ターンループは、ループ２である。
【００１１】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（Ｉ）
【化１】
0005461009.tif 000002
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基及びジアルキルカルバモイル基からなる群から選択され；Ｘ１及びＸ２は、独立して、ＣＨ２基及びＮＲ４基（式中、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；Ｄ１は水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、水酸基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アラルコキシ基及び下式の基
【化２】
0005461009.tif 000003
（式中、各Ｒ５及びＲ６は水素原子、アルキル基、アラルキル基又はアリール基である。）からなる群から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００１２】
いくつかの実施態様において、この化学式(I)の化合物は、下記構造
【化３】
0005461009.tif 000004
又はその立体異性体である。
【００１３】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（II）
【化４】
0005461009.tif 000005
（式中、Ｌ１及びＬ３は、独立して、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基、アリーレン基、アラルキレン基及び置換アリーレン基からなる群から選択され；Ｌ２は、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基、アリーレン基、アラルキレン基、置換アリーレン基、
【化５】
0005461009.tif 000006
からなる群から選択され；Ｌ４は、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基であり；Ｚ１、Ｚ２及びＺ３は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基及びアラルキル基から選択され；Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５及びＸ６は、独立して、Ｎ又はＣＨ基であり；Ｙ１、Ｙ２及びＹ３は、独立して、カルボニル基、スルホニル基又はメチレン基であり；Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４及びＤ５は、独立して、水素原子、アルキル基、ハロ基、水酸基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アラルコキシ基、アシルオキシ基、カルボキシル基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000007
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００１４】
いくつかの実施態様において、この化学式(II)の化合物は、下記
【化７】
0005461009.tif 000008
から成る群から選択される。
【００１５】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（III）
【化８】
0005461009.tif 000009
（式中、Ｌ５は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；Ｘ７及びＸ８は、独立して、Ｎ又はＣＨ基であり；Ｒ１０及びＲ１１は、独立して、水素原子、ハロ基、アルキル基及びシアノ基から成る群から選択され；Ｄ６、Ｄ７及びＤ８は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000010
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００１６】
いくつかの実施態様において、この化学式（III）の化合物は、下記化合物
【化９】
0005461009.tif 000011
である。
【００１７】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（IV）
【化１０】
0005461009.tif 000012
（式中、Ｘ９及びＸ１０は、独立して、ＣＨ２基又はＮＲ４基（式中、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）であり；Ｒ１２は、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基、アシル基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基及びジアルキルカルバモイル基からなる群から選択され；Ｒ１３は、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基及びジアルキルカルバモイル基からなる群から選択され；Ｒ１４及びＲ１５は、独立して、水素原子、アルキル基、置換アルキル基及びアラルキル基からなる群から選択され；Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、水酸基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アラルコキシ基、及び
【化２】
0005461009.tif 000013
（式中、Ｒ５及びＲ６は水素原子、アルキル基、アラルキル基又はアリール基から選択される。）からなる群から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００１８】
いくつかの実施態様において、この化学式（IV）の化合物は、下記化合物
【化１１】
0005461009.tif 000014
又はその立体異性体である。
【００１９】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（Ｖ）
【化１２】
0005461009.tif 000015
（式中、Ｌ６及びＬ７は、独立して、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；Ｘ１１は、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２基又はＮＲ１７基であり（式中、Ｒ１７は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）；Ｘ１２、Ｘ１３及びＸ１４は、独立して、Ｎ又はＣＨ基であり；Ｘ１５は、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１８基（式中、Ｒ１８は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から成る群から選択され；Ｄ９、Ｄ１０、Ｄ１１及びＤ１２は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、アシルオキシ基、カルボキシル基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000016
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００２０】
いくつかの実施態様において、この化学式（Ｖ）の化合物は、下記化合物
【化１３】
0005461009.tif 000017
又はその立体異性体である。
【００２１】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（VI）
【化１４】
0005461009.tif 000018
（式中、Ｌ８は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；Ｘ１６は、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１９基（式中、Ｒ１９は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；Ｘ１７は、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２基及びＮＲ２０基（式中、Ｒ２０は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；Ｘ１８及びＸ１９は、独立して、Ｎ及びＣＨ基から選択され；Ｄ１３及びＤ１４は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000019
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００２２】
いくつかの実施態様において、この化学式（VI）の化合物は、下記化合物
【化１５】
0005461009.tif 000020
である。
【００２３】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（VII）
【化１６】
0005461009.tif 000021
（式中、ｍ及びｎは、独立して、１又は２であり；各Ｌ９及びＬ１０は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；Ｘ２０及びＸ２１は、独立して、ＣＨ基、ＣＨ２基、Ｎ及びＮＲ４基（式中、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；Ｘ２２は、水素原子及びハロ基から選択され；各Ｄ１５及びＤ１６は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000022
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００２４】
いくつかの実施態様において、この化学式（VII）の化合物は、下記化合物
【化１７】
0005461009.tif 000023
である。
【００２５】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（VIII）
【化１８】
0005461009.tif 000024
（式中、Ｌ１１は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；Ｘ２３は、Ｎ又はＣＨ基を表し；Ｒ２１及びＲ２２は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基及びハロ基から成る群から選択され；Ｄ１７、Ｄ１８及びＤ１９は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000025
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００２６】
いくつかの実施態様において、この化学式（VIII）の化合物は、下記化合物
【化１９】
0005461009.tif 000026
から成る群から選択される。
【００２７】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（IX）
【化２０】
0005461009.tif 000027
（式中、Ｌ１２は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；Ｘ２４は、Ｎ又はＣＨ基を表し；Ｒ２３は、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基及びハロ基から成る群から選択され；Ｄ２０、Ｄ２１、Ｄ２２、Ｄ２３及びＤ２４は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000028
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００２８】
いくつかの実施態様において、この化学式（IX）の化合物は、下記化合物
【化２１】
0005461009.tif 000029
である。
【００２９】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（Ｘ）
【化２２】
0005461009.tif 000030
（式中、ｔは１又は２であり；各Ｌ１３は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；Ｘ２５及びＸ２６は、Ｎ及びＣＨ基から選択され；Ｘ２７は、Ｎ、ＣＨ基、ＣＨ２基及びＮＲ２５基（式中、Ｒ２５は水素原子又はアルキル基を表す。）から選択され；Ｒ２４は、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基及びハロ基から選択され；Ｄ２５及び各Ｄ２６は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000031
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００３０】
いくつかの実施態様において、この化学式（Ｘ）の化合物は、下記化合物
【化２３】
0005461009.tif 000032
である。
【００３１】
いくつかの実施態様において、このループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（XI）
【化２４】
0005461009.tif 000033
（式中、Ｘ２８は、ＣＨ２基、Ｏ、Ｓ及びＮＲ２６基（式中、Ｒ２６は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；Ｘ２９は、Ｎ又はＣＨ基を表し；Ｘ３０は、ＣＨ２基又はＮＲ２７基を表し（式中、Ｒ２７は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）；Ｘ３１は、Ｎ又はＣＨ基を表し；Ｄ２７、Ｄ２８及び各Ｄ２９は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000034
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００３２】
いくつかの実施態様において、この化学式（XI）の化合物は、下記化合物
【化２５】
0005461009.tif 000035
である。
【００３３】
いくつかの実施態様において、その化合物は、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ親化合物の誘導体であり、この誘導体もまたＴｒｋＢ受容体に結合特異性及び／又は調節特異性を持つか、又はＴｒｋＢ受容体に結合特異性及び／又は調節特異性を持つようにインビボで形質転換された誘導体である。いくつかの実施態様において、この誘導体は、前記親化合物に比べて、潜在能力、選択性、親水性、親油性、両親媒性、溶解性、生物学的利用能、及び肝臓疾患への耐性から成る群から選択される少なくとも１つの特徴の増大を示す。
本発明の目的は、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）小分子を用いて、神経細胞の生存を促進する方法、又は神経細胞又はその他の細胞の機能を促進する方法を提供することである。
本発明により全体的又は部分的に扱われ、上記のように本明細書に記載された本出願に開示された対象物の特定の目的、他の目的及び側面は、本明細書で以下に記載するように、添付した実施例と関係して取り上げられた時、記載が進むにつれて明らかとなるであろう。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３４】
本明細書では以下の略語を用いる。
２Ｄ：２次元の；３Ｄ：３次元の；Ａβ：アミロイド−β；Ａｂ：抗体；ＡＤ：アルツハイマー病；ＡＬＳ：筋萎縮性側索硬化症；ＢＣＡ：ビシンコニン酸；ＢＤＮＦ：脳由来の神経栄養因子；ｂ．ｉ．ｄ．：１日２回；ｃｍ：センチメートル；ｄ：日；Ｄ：ダルトン；ＤＭＥＭ：ダルベッコ変法イーグル培地；ＥＣＬ：電気発生化学発光；ＥＤＴＡ：エチレンジアミン４酢酸；ＥＬＩＳＡ：固相酵素免疫測定法；ＥＲＫ：細胞外シグナル制御タンパク質キナーゼ；ＦＢＳ：仔牛胎児血清；ｇ：グラム；ｈ：時間；ＨＢＡ：水素結合受容体；ＨＢＤ：水素結合供与体；ＨＤ：ハンチントン病；ＨＥＰＥＳ：４−２−ヒドロキシエチル−１−ピペラジンエタンスルホン酸；ＨＲＰ：セイヨウワサビペルオキシダーゼ；ＩｇＧ：免疫グロビンＧ；ＩＰ：腹腔内の；ＩＶ：静脈内；Ｋ３２：３２番目リジン残基；ｋｃａｌ：キロカロリー；ｋｇ：キログラム；ＭＢＰ：ミエリン塩基性タンパク質；ｍｇ：ミリグラム；ｍｉｎ：分；ｍｌ：ミリリットル；ｍＭ：ミリモル；ｍｏｌ：モル；ＭＴＴ：３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウム臭化物；ＭＷ：分子量；ＮａＣｌ：塩化ナトリウム；ｎｇ：ナノグラム；ｎＭ：ナノモル；ＮＳ：有意でない；ＮＭＲ：核磁気共鳴；ＮＧＦ：神経成長因子；ｎＭ：ナノモル；Ｐ：確率；ｐ７５ＮＴＲ：ｐ７５神経栄養受容体；ＰＢＳ：リン酸緩衝塩；ＰＤ：パーキンソン病；ｐｍｏｌ：ピコモル；ＰＭＳＦ：フェニルメチルスルホニルフッ化物；ＰＯ：経口の（口から）；ｐｒｏ−ＮＧＦ：ＮＧＦの非処理の前駆体；ＰＶＤＦ：ポリビニリジンジフッ化物；ＳＤＳ：ドデシル硫酸ナトリウム；ＳＥ：標準誤差；ｓ．ｅ．ｍ．：測定の標準誤差；Ｔｒｉｓ：２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール；ＴＵＮＥＬ：末端デオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ媒介デオキシウリジン３リン酸ニック−エンドラベリング；μｇ：マイクログラム；μｌ：マイクロリットル；μＭ：マイクロモル；％：パーセント；℃：摂氏度；>：と等しく又はより大きく；>：より大きく；<：と等しく又はより小さく；<：より小さく
【００３５】
神経病及び他の疾患を含む特定の疾患を持つ患者では、ニューロトロフィン局在性、ニューロトロフィン発現レベル、及び／又はニューロトロフィンと結合する受容体の発現レベルの変化が生じうる。従って、上記の疾患に罹る患者に、対応するニューロトロフィン因子又はこの類似体を提供することで、この様な神経病は緩和されるか、又は予防できる。いくつかのケースでは、ニューロトロフィンの機能の阻害が有効である。本明細書に初めて開示するように、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ非ペプチド化合物を患者に投与することにより、該疾患を治療する方法、及び／又は神経細胞の生存を促進する方法が提供される。
本明細書において開示する発明の方法及び化合物は、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ化合物に関する。本明細書で用いるように、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ化合物のコンピューターによるスクリーニングによる発見は、神経及び他の細胞の生存をポジティブに制御するに適している。詳しくは、ニューロトロフィンに対し栄養性応答を示す細胞において、この化合物は生存シグナリングを促進することができる。
【００３６】
Ｉ．定義
本明細書で用いる用語は詳細な実施態様を記載する目的のためであり、限定することを意図するものではないことを理解されたい。明細書とクレームに渡って、記載された化学式とその名前は、全ての光学異性体及び立体異性体を含み、このような異性体とその混合物が存在するラセミ混合物をも含む。
もし別に定義されなければ、本明細書で用いた全ての技術的及び科学的用語は、本明細書で開示した対象物に関わる同業者の１人に通常理解される意味と同じである。本明細書に記載した事柄と同様又は等価な全ての方法及び物質は、本明細書に開示した対象物の実施又は試験において用いることができるが、本明細書では代表的な方法及び物質を記載する。
長年にわたる特許法協定に従い、原文の"不定冠詞−ある（a, an）""定冠詞−その（the）"は、クレイムを含む本出願で用いられる場合、"１又は２以上"を意味する。従って、例えば、"ある担体"は、１又は２以上の担体の混合物、２又は３以上の担体の混合物、等々を表す。
もし別途示されなければ、明細書及び請求の範囲で用いられる構成要素の量、反応条件、等々を表す全ての数は、用語"約"で全ての事例において修正されると理解すべきである。従って、それと反対に示されない場合は、本明細書及び添付した請求の範囲に述べられた数字的なパラメーターは、本明細書に開示された対象物により見出された好ましい特性によって変わりうる近似的なものである。
重さ、時間、投与量、その他の量のような測定しうる値に関して、本明細書で用いられた、用語"約"は、特定の値から、或る例では±２０％又は±１０％、他の例では±５％、更に他の例では±１％、更にまた他の例では±０．１％の変化量を含み、この様なものとして、この様な変化量は開示した方法を実行する上で適切である。
【００３７】
本明細書に使用されているように、用語"神経病"は、神経系細胞の損傷により特徴付けられる全ての疾患を含み、また制限付けることなく、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、てんかん、パーキンソン病、脊髄損傷、脳梗塞、低酸素症、虚血症、脳損傷、糖尿病性神経障害、末梢性神経障害、神経移植合併症、多発性硬化症、末梢神経障害、及びその他のＴｒｋＢを発現する細胞の変性又は機能不全を含む病気が挙げられる。
【００３８】
本明細書で用いるように、用語"アルキル基"は、線状の（即ち"直鎖の"）、分枝状の、又は環状の（"シクロアルキル基"）、飽和又は少なくとも部分的にまたある場合は完全に不飽和な（即ち、アルケニル基及びアルキニル基）炭化水素鎖を包含するＣ１〜２０を表し、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、オクチル基、エテニル基、プロペニル基、ブテニル基、ペンテニル基、ヘキセニル基、オクテニル機、ブタジエニル基、プロピニル基、メチルプロペニル基、ブチニル基、ペンチニル基、ヘキシニル機、ヘプチニル基及びアレニル基が挙げられる。"分枝した"とは、メチル基、エチル基、又はプロピル基のような、低級アルキル基が直鎖状のアルキル鎖に付加したアルキル基を表す。"低級アルキル基"は、例えば、１，２，３，４，５，６，７，又は８炭素原子のような、１〜約８までの炭素原子、を有するアルキル基（即ち、Ｃ１−８アルキル基）を表す。"高級アルキル基"は、例えば、１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，又は２０炭素原子、の様な約１０〜約２０の炭素原子を持つアルキル基を表す。或る実施態様において、"アルキル基"は、特に、Ｃ１〜８直鎖アルキル基を表す。別な実施態様において、"アルキル基"は、特に、Ｃ１〜８分岐鎖アルキル基を表す。
【００３９】
アルキル基は、任意に、１又は２以上の、同一又は異なってもよいアルキル基置換基により置換できる（"置換アルキル基"）。"アルキル基の置換基"としては、アルキル基、置換アルキル基、ハロ基、アリールアミノ基、アシル基、水酸基、アリールオキシル基、アルコキシル基、アルキルチオ基、アリールチオ基、アラルキルオキシル基、アラルキルチオ基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、オキソ基及びシクロアルキル基が挙げられるが、これらに制限されない。任意に、アルキル鎖にそって１又は２以上の酸素原子、イオウ原子又は置換又は非置換の窒素原子を挿入できるが、ここで窒素置換基は、水素原子、低級アルキル基（以下"アルキルアミノアルキル基"と呼ぶ）又はアリール基である。
この様に、本明細書で用いられるように、用語"置換アルキル基"は、ここで定義されたように、１又は２以上の原子又はアルキル基の官能基が、他の原子又は官能基で置き換えられたアルキル基を含み、例えば、アルキル基、置換アルキル基、ハロゲン原子、アリール基、置換アリール基、アルコキシル基、水酸基、ニトロ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、硫酸塩基及びメルカプト基が挙げられる。
【００４０】
さらに、本明細書で用いるように、用語アルキル基及び／又は"置換アルキル基"には、"アリル基"又は"アリル型基"が含まれる。用語"アリル型基"又は"アリル基"は、−ＣＨ２ＨＣ＝ＣＨ２基及び置換により作られたその誘導体を表わす。用語アルキル基及び／又は"置換アルキル基"は、アリル基、メチルアリル基、ジメチルアリル基、等々のようなアリル基を含むが、これらに制限されない。用語"アリル位"又は"アリル部位"は、アリル型基の飽和した炭素原子を表す。従って、アリル位に付加する水酸基又は他の置換基のような官能基は、"アリル型基"と表わす。
【００４１】
本明細書で用いる用語"アリール基"は、互いに縮合し、共有結合で連結した、又はメチレン基又はエチレン基部分のような、しかしこれらに制限されない、共通の官能基に結合した単一の芳香族環、又は、多環の芳香族環であることができる芳香族置換基を指す。共通の連結基はまた、ベンゾフェノンの場合のようなカルボニル基、又はジフェニルエーテルにおけるような酸素分子、又はジフェニルアミンにおけるような窒素分子でもあることができる。用語"アリール基"は、特に、複素環式芳香族化合物を含む。芳香族環は、例えば、フェニル基、ナフチル基、ビフェニル基、ジフェニルエーテル基、ジフェニルアミン基及びベンゾフェノン基からなる。特別な実施態様において、用語"アリール基"は、約５〜約１０の炭素原子、例えば、５，６，７，８，９又は１０炭素原子、からなる環状芳香族を意味し、また５−及び６−員環炭化水素及び複素環式芳香族環を含む。
【００４２】
アリール基は同一又は異なる１又は２以上のアリール基置換基で任意に置換しうる（"置換アリール基"）。"アリール基の置換基"としては、アルキル基、置換アルキル基、アリール基、置換アリール基、アラルキル機、水酸基、アルコキシル基、アリールオキシル基、アラルキルオキシル基、カルボキシル基、アシル基、ハロ基、ニトロ基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルオキシル基、アシルアミノ基、アロイルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、アリールチオ基、アルキルチオ基、アルキレン基及び−ＮＲ’Ｒ’’基を含み、ここでＲ’及びＲ’’は、それぞれ独立して、水素原子、アルキル基、置換アルキル基、アリール基、置換アリール基及びアラルキル基であってもよい。
【００４３】
従って、本明細書で用いられたように、用語"置換アリール基"は、本明細書で定義されたようなアリール基を含み、前記アリール基の１又は２以上の原子又は官能基は、他の原子又は、例えば、アルキル基、置換アルキル基、ハロゲン原子、アリール基、置換アリール基、アルコキシル基、水酸基、ニトロ基、アミノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、硫酸塩基及びメルカプト基を含む、官能基と置き換えうる。
アリール基の特別な例としては、シクロペンタジエニル基、フェニル基、フラン基、チオフェン基、ピロール基、ピラン基、ピリジン基、イミダゾール基、ベンジミダゾール基、イソチアゾール基、イソキサゾール基、ピラゾール基、ピラジン基、トリアジン基、ピリミジン基、キノリン基、イソキノリン基、インドール基、カルバゾール基、等々が挙げられるが、これらに制限されない。
【００４４】
本明細書で用いる、次のような化学式で表される構造：
【化２９】
0005461009.tif 000036
は、環状構造を表し、例えば、置換基Ｒを含む、３−炭素、４−炭素、５−炭素、６−炭素等々の脂肪族及び／又は芳香族環状化合物を表わすが、ここでＲ基は、存在しても、存在しなくともよく、存在する場合は、１又は２以上のＲ基は各々、環状構造の１又は２以上の可能な炭素原子上で置換されるものであるが、上記の環状化合物に制限されない。Ｒ基が存在するか否か及びＲ基の数は、整数ｎ値で決められる。各Ｒ基は、もし１以上ならば、他のＲ基上ではなく、環状構造の可能な炭素原子上で置換される。例えば、ｎが０〜２の整数である構造：
【化３０】
0005461009.tif 000037
は、以下の化合物群：
【化３１】
0005461009.tif 000038
等々を含むが、これらに制限されない。
【００４５】
ｎが１である、構造：
【化３２】
0005461009.tif 000039
は、以下のような化合物：
【化３３】
0005461009.tif 000040
を含み、ここで、１つのＲ置換基は、他の表示された置換基により占領されてないベンゾフラン親構造上のどの炭素原子にも付加することができて、上記の場合は、炭素原子６はＸで置換され、また炭素原子２はＹで置換されている。
【００４６】
環状（環）構造において結合を表す破線は、その結合が環上に存在しても、しなくとも良いことを示す。環状構造において結合を表す線が破線であることは、環状構造が飽和環状構造、部分飽和環状構造及び不飽和環状構造からなる群から選択されることを意味する。
芳香族環又は複素環式芳香族環の指定された原子が"存在しない"と規定された場合、指定された原子は直接結合により置き換えられる。連結基又はスペーサー基が存在しないと規定された場合、連結基又はスペーサー基は直接結合により置き換えられる。
【００４７】
"アルキレン基"は、例えば、１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，又は２０個の炭素原子である、１〜約２０個の炭素原子を持つ、直鎖型又は分枝型の２価の脂肪族炭化水素群を表わす。アルキレン基は直鎖、分枝又は環状であることができる。アルキレン基もまた、任意に、不飽和であり、及び／又は１又は２以上の"アルキル基置換基"により置換されていてもよい。アルキレン基に沿って、任意に、１又は２以上の酸素原子、イオウ原子、又は置換又は非置換窒素原子（これはまた"アルキルアミノアルキル基"とも呼ばれる）とが挿入され、ここで窒素置換基は既述のようにアルキル基でアラルキレン基の例としては、メチレン（−ＣＨ２−）基；エチレン（−ＣＨ２−ＣＨ２−）基、プロピレン（−（ＣＨ２）３−）基；シクロへキシレン（−Ｃ６Ｈ１０−）基；−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−基；−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−基；−（ＣＨ２）ｑ−Ｎ（Ｒ）−（ＣＨ２）ｒ−基があり、ここでｑ及びｒの各々は、独立して０〜約２０の整数であり、例えば、０，１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７，１８，１９，又は２０であり、またＲは水素原子又は低級アルキル基：メチレンジオキシル（−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−）基；及びエチレンジオキシル（−Ｏ−（ＣＨ２）２−Ｏ−）基でアラルキレン基は、約２〜３個の炭素原子を持ち、またさらに６〜２０個の炭素原子を持つことができる。
【００４８】
"アリーレン基"は、２価のアリール基をいう。典型的なアリーレン基は、フェニレン基であり、これは、お互いにオルト、メタ又はパラ位に結合可能な環の炭素原子を有し、具体的には下記に示す：
【化３４】
0005461009.tif 000041
このアリーレン基は、ナフチレン基又は２価のフルオレン部分であってもよい。このアリーレン基はまた任意に、１又は２以上の、同一又は異なってもよい"アリール基置換基"アルキル基置換基により置換されていてもよい（"置換アリーレン基"）。
"アラルキレン基"は、アルキル基とアリール基の両方を含む２価基をいう。例えば、アラルキレン基は、２つのアルキル基と１つのアリール基（即ち、−アルキル基−アリール基−アルキル基−）、１つのアルキル基と１つのアリール基（即ち、−アルキル基−アリール基−）、又は１つのアルキル基と２つのアリール基（即ち、−アリール基−アルキル基−アリール基−）を有するものであってもよい。
【００４９】
本明細書で用いるように、用語"アシル基"は、そのカルボキシル基の−ＯＨ基が他の置換基に置き変えられた有機酸基を表す（例えば、ＲＣＯ−で代表されるように、Ｒは、本明細書で定義されたようなアルキル基又はアリール基である）。従って、用語"アシル基"は、特に、アセチルフラン基及びフェナシル基のようなアリールアシル基を含む。アシル基の特別な例は、アセチル基及びベンゾイル基である。
【００５０】
"環状"及び"シクロアルキル"は、例えば、３，４，５，６，７，８，９又は１０個の炭素原子のような、約３〜約１０個の炭素原子の非芳香族型モノ又はマルチ環状系を指す。シクロアルキル基は任意に部分的に不飽和であることができる。シクロアルキル基は、また任意に、本明細書で定義したようにアルキル基置換基で置換することができる。環状アルキル鎖に沿って、１又は２以上の酸素原子、イオウ原子、又は、窒素置換基が水素原子、アルキル基、置換アルキル基、アリール基、又は置換アリール基である置換、又は非置換の窒素原子を任意に挿入でき、このようにして複素環式基を提供する。代表的なモノサイクリックなシクロアルキル環としてはシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロへキシル基、シクロヘプチル基、等々があるが、これらに制限されない。更に、シクロアルキル基は、任意に既述のように定義されたアルキレン基、例えばメチレン基、エチレン基、プロピレン基等々、のような、連結基で、任意に、置換できる。この様な場合、シクロアルキル基は、例えば、シクロプロピルメチル基及びシクロブチルメチル基等々を指す。更に、多環シクロアルキル環としては、アダマンチル基、オクタヒドロナフチル基、デカリン、樟脳、カンファン及びノラダマンチルがある。
【００５１】
"アルコキシル基"又は"アルコキシアルキル基"はアルキル−Ｏ−基を指し、ここでアルキル基は既述の通りである。本明細書で用いる"アルコキシル基"は、炭素数が１〜２０であってもよく、直鎖型、分枝型、又は環状、飽和又は不飽和オキソ炭化水素鎖を含むことができ、例えば、メトキシル基、エトキシル基、プロポキシル基、イソプロポキシル基、ブトキシル基、ｔ−ブトキシル基及びペントキシル基が挙げられる。
"アリールオキシル基"はアリール−Ｏ−基を指し、ここでアリール基は、既述の通りであり、置換アリール基を含む。本明細書で用いる"アリールオキシル基"という語は、フェニルオキシル基、又はヘキシルオキシル基及びアルキル基、置換アルキル基、ハロ基又はアルコキシル置換フェニルオキシル基又はヘキシルオキシル基を指すことができる。
"アラルキル基"はアリール−アルキル−基を指し、ここでアリール基及びアルキル基は既述の通りであり、置換アリール基及び置換アルキル基を含む。アラルキル基の例としては、ベンジル基、フェニルエチル基、又はナフチルメチル基がある。
"アラルキルオキシル基"は、アラルキル−Ｏ−基を指し、ここでアラルキル基は既述の通りでアラルキルオキシル基の例としては、ベンジルオキシル基がある。
【００５２】
"アルキルアミノ基"は−ＮＨＲ基を指し、Ｒは、既述したようなアルキル基又は置換アルキル基である。
"ジアルキルアミノ基"は−ＮＲＲ’基を指し、各Ｒ及びＲ’は、独立して既述の通りのアルキル基及び／又は置換アルキル基でアラルキルアミノ基の例としては、エチルメチルアミノ基、ジメチルアミノ基及びジエチルアミノ基がある。
"アルコキシカルボニル基"はアルキル−Ｏ−ＣＯ−基を指す。アルコキシカルボニル基の例としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ブチルオキシカルボニル基及びｔ−ブチルオキシカルボニル基がある。
"アリールオキシカルボニル基"はアリール−Ｏ−ＣＯ−基を指す。アリールオキシカルボニル基の例としては、フェノキシ−及びナフトキシ−カルボニル基がある。
"アラルコキシカルボニル基"はアラルキル−Ｏ−ＣＯ−基を指す。アラルコキシカルボニル基の例としては、ベンジルオキシカルボニル基がある。
"カルバモイル基"はＨ２Ｎ−ＣＯ−基を指す。
【００５３】
"アルキルカルバモイル基"はＲ’ＲＮ−Ｏ−基を指し、ここでＲ及びＲ’の一つは水素原子であり、またＲ及びＲ’の他の一つは、既述の通りのアルキル基及び／又は置換アルキル基である。
"ジアルキルカルバモイル基"はＲ’ＲＮ−ＣＯ−基を指し、ここでＲ及びＲ’の各々は独立して既述の通りのアルキル基及び／又は置換アルキル基を表わす。
"アシルオキシル基"はアシル−Ｏ−基を指し、ここでアシル基は既述の通りである。
"アシルアミノ基"は、アシル−ＮＨ−基を指し、ここでアシル基は既述のとおりである。
用語"アルケニレン基"は、炭素−炭素二重結合を持つ非環式炭素鎖（即ち、開かれた鎖構造）を示し、１又は２以上の回数、任意に、置換できる、ＣｎＨ２ｎー２という化学式で表される。代表的なアルケニレン基としては、エテニレン基、プロペニレン基、１−又は２−ブテニレン基、１−又は２−ペンチレン基等々があるが、これらに制限されない。
"アロイルアミノ基"はアロイル−ＮＨ−基を指し、ここでアロイル基は既述の通りである。
【００５４】
用語"アミノ基"は、−ＮＨ２基を指す。
用語"カルボニル基"は、−（Ｃ＝Ｏ）−基を指す。
用語"カルボキシル基"は、−ＣＯＯＨ基を指す。
用語"シアノ基"は、−ＣＮ基を指す。
本明細書で用いられる用語"ハロ基"、"ハロゲン化物"又は"ハロゲン原子"は、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基及びヨード基を指す。
用語"水酸基"は、−ＯＨ基を指す。
用語"ヒドロキシアルキル基"は、１個の−ＯＨ基で置換されたアルキル基を指す。
用語"メルカプト基"は、−ＳＨ基を指す。
用語"メルカプトアルキル基"は、−ＳＲ基を指し、Ｒは、アルキル基又は置換アルキル基である。
用語"オキソ基"は、１個の炭素原子が一個の酸素原子で置き換えられた、本明細書で既述の、化合物を指す。
用語"ニトロ基"は、−ＮＯ２基を指す。
用語"チオ基"は、１個の炭素原子又は酸素原子が、１個のイオウ原子で置き換えられた、本明細書に既述の、化合物である。
用語"硫酸塩基"は、−ＳＯ４基を指す。
用語"スルホニル基"は、−Ｓ（＝Ｏ）２−基を指す。
【００５５】
用語"シクロアルケニル基"は、例えば、環当たり、３，４，５，６，７又は８炭素原子のように、環当たり３又は４以上の炭素原子を有する、１環、２環、３環又は４環を持つ、１又は２以上の環を有する部分的に不飽和な環状炭化水素基を指す。典型的なシクロアルケニル基としては、シクロプロペニル基、シクロブテニル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基等々があるが、これらに制限されない。
用語"置換シクロアルケニル基"は、可能な付加部位に１又は２以上の置換基で、好ましくは１，２，３又は４置換基で、置換されたシクロアルケニル基を指す。典型的な置換基としては、アルキル基、置換アルキル基、ハロ基、アリールアミノ基、アシル基、水酸基、アリールオキシル基、アルコキシル基、アルキルチオ基、アリールチオ基、アラルキルオキシル基、アラルキルチオ基、カルボキシル基、アルコキシカルボニル基、オキソ基及びシクロアルキル基があるが、これらに制限されない。
【００５６】
用語"独立して選択される"が用いられる場合、指定された置換基（例えば、Ｒ１及びＲ２基のようなＲ基又はＸ基及びＹ基）は同一又は異なる。例えば、Ｒ１及びＲ２ともに置換アルキル基である、又はＲ１は水素原子であり、Ｒ２は置換アルキル基である等々。
"Ｒ"、"Ｒ’"、"Ｘ"、"Ｙ"、"Ｙ’"、"Ａ"、"Ａ’"、"Ｂ"、"Ｌ"、又は"Ｚ"基は、本明細書において特に特定しない場合、名前を持つ官能基として当業者に認識される構造を一般的に持つ。表示の目的のために、上述のある代表的"Ｒ"，"Ｘ"及び"Ｙ"基は、以下のように定義される。これらの定義は、本開示を閲覧する通常の技術者にとって自明である定義を、補助し例示することを意図しており、除外するものではない。
【００５７】
本明細書で用いる用語"治療"は、動物又は哺乳動物、特にヒトの病気、疾患及び／又は（不健康）状態について全ての治療をカバーしており、また以下３点を含む：即ち（ｉ）病気、疾患及び／又は状態に罹りやすい、又は病気、疾患及び／又は状態を引き起こしうる作用因子に曝される危険性のあるヒトが病気、疾患及び状態に罹ることを防止すること；だが、この作用因子を持つと診断されてない；（ｉｉ）病気、疾患及び／又は状態を阻害すること、即ち、病気の伸展を止めること；
及び（ｉｉｉ）病気、疾患及び／又は状態を軽減すること、即ち、病気、疾患及び／又は状態からの回復を起こすこと。
【００５８】
用語"類似物"は、他の既知の化合物と同様な機能及び／又は構造特性を有する化合物、又は生物原料、即ちポリペプチド又はその断片、の既知の化合物のような、既知の化合物の断片を表わす。
"結合特異性"は、他のタンパク質又は他の種類の分子の相補的部位を認識し、相互作用することができる、蛋白質又は他の種類の分子の活性を表わす。この明細書では、用語 結合特異性とは、他の分子よりも一つのタイプの分子に優先的に結合することのできる分子の能力をいう。例えば、ＴｒｋＡやＴｒｋＣとは反対に、ＴｒｋＢに優先的に結合するＢＤＮＦ類似物の持つ能力を、結合特異性ということができる。ある受容体に対して結合特異性を持つ分子は、その受容体に結合し、その受容体を活性化し、及びその受容体を阻害することのうちの一つ又はそれ以上の目的のために用いることができる。
【００５９】
用語"調節特異性"は、選択的に一つの受容体の活性を調節することのできる分子に関して用いる。その分子は、ある受容体の活性を、他の受容体よりも大いに調節し、又はある受容体群に属する一つの受容体の活性を調節することができる。例えば、ＢＤＮＦ類似物は、ＴｒｋＢの活性を特異的に調節することができるが、ＴｒｋＡやＴｒｋＣの活性を調節することはない。活性の調節として、アップレギュレーション、ダウンレギュレーション、活性化、部分的活性化、アゴニスム(agonism)、アンタゴニスム、部分的アンタゴニスム、阻害、部分的阻害、又はこれらの混合が挙げられるが、これらに限定されない。ある受容体に対して調節特異性を持つ分子は、例えば、その受容体に結合してその受容体を活性化したり、又はその受容体に結合してその受容体を阻害するために用いることができる。
用語"結合特異性及び／又は調節特異性"とは、指定した受容体に結合することができる、指定した受容体の活性を調節することができる、又は指定した受容体に結合してその活性を調節することができる分子に関する。
【００６０】
本明細書で用いる用語"薬理作用団"は、選択された生物効果、即ち、酵素の阻害、受容体への結合、イオンのキレーション等々、を発揮することができる分子部分の特別なモデル又は表現を指す。選択された薬理作用団は、１以上の生化学的効果を持つことができる、即ち一つの酵素の阻害剤であり、また第２の酵素の作用剤であることができる。治療薬は１又は２以上の薬理作用団を含み、これらは同一又は異なる生化学的活性を有する。
本明細書で用いられる用語"誘導体"は、親化合物と差異をつけるために化学的に修飾した化合物を指す。この様な化学的な修飾としては、例えば、水素原子をアルキル基、アシル機、又はアミノ基での置き換えを挙げることができる。誘導体は、例えば、グリコシル化、ペグ化、又は類似した工程で修飾可能であり、親化合物の少なくとも１個の生物学的又は免疫学的機能を保持する。
【００６１】
用語"小分子"及び"小ペプチド"は、分子量が１０００以下の化合物のことをいう。幾つかの実施態様において、この小分子又は小ペプチドは、分子量が７５０以下の化合物のことをいう。幾つかの実施態様において、この小分子又は小ペプチドは、分子量が５００以下の化合物のことをいう。
用語"ペプチド"は、各アミノ酸のアミノ基と隣接するアミノ酸のカルボキシル基との間のアミド結合により連結された複数のアミノ酸から成るポリマーのことをいう。このペプチドを形成する各アミノ酸単位は、"残基"という。従って、"アミノ酸残基"とは、２０個の標準アミノ酸のうちの一つ、又は非標準アミノ酸であって、そのアミノ基からプロトンを失ったもの、そのカルボキシル基から水酸基を失ったもの、若しくはその両方を失ったもの、の１価又は２価のラジカルをいう。また、用語"ペプチド"は、そのアミノ末端、カルボキシル末端、一つ若しくはそれ以上のアミノ酸側鎖、又はこれらの組み合わせが、例えば、アシル化、アルキル化、還元若しくはアミド生成又はペプチド化学の分野で知られたその他の方法を通じて、化学的に修飾され又は変性された、ペプチドの誘導体をいう。
用語"立体異性体"は、それが与えられた化合物についていわれる場合には、その分野でよく理解されており、同じ分子式を持つが異なる化合物のことをいい、他方の化合物を形成する一団の原子が、空間的に異なる配置をしているが、他方の化合物の一団の原子が、一方の化合物の一団の原子とは、お互いの結合が似ている（即ち、光学異性体、ジアステレオマー又は幾何異性体）。
【００６２】
用語"親水性"は、水に対して親和性を持つ；水を直ちに吸収する及び／又は水に溶ける、の様にこの分野の共通のやり方で用いられる。
用語"親油性"は、脂質に対する親和性、脂質と結合する傾向、又は脂質に溶解可能であるとして、この分野共通のやり方で用いられる。
本明細書で用いられる用語"両親媒性"は、別々に、疎水性領域と、親水性領域を有する構造を表す。従って、構造の一部は水性媒体及び他の極性媒体と有利に相互作用し、構造の他の部分が非極性媒体と有利に相互作用する。
本明細書で用いられる用語"溶解度"は、特定の温度で、指定量の溶媒に溶ける溶質の最大量を表す。
本明細書で用いられる"生体利用性"は患者に投与された指定量の化合物の全体的利用度（即ち、血液／血漿中濃度）を指す。この用語は更に、作用部位に到達する化合物の速度及び、吸収率を含む。
【００６３】
ＩＩ．化合物
本発明は、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ化合物を提供する。幾つかの実施態様において、この化合物は、ニューロトロフィンβ−ターンループの類似体である。幾つかの実施態様において、このニューロトロフィンは脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）である。幾つかの実施態様において、このβ−ターンループはＢＤＮＦのループ２である。これらの化合物は、神経病（例えば、神経変性疾患）を含むがこれに限定されない疾患の治療や予防に用いられるここで開示される医薬化合物と医療方法に従って用いることができる。
幾つかのＴｒｋＢ結合及び／又は調節化合物は、アゴニスト機能を示し、従って、ＴｒｋＢ活性を促進する。幾つかのＴｒｋＢ結合及び／又は調節化合物は、部分的アゴニスト機能を示す。これらの化合物は、ＴｒｋＢ活性を促進するため、又は幾つかのケースでは内因性ＢＤＮＦの機能を部分的に阻害するために用いられる。ＢＤＮＦ機能を阻害することは、てんかん又は過剰なＢＤＮＦ機能が根源的な病気のメカニズムに貢献するようなその他の疾患の予防若しくは治療に有用であることを示す。幾つかのＴｒｋＢ結合及び／又は調節化合物は、アゴニスト機能を示さず、従って、ＴｒｋＢアンタゴニストとして有用であることを示す。
本発明のＴｒｋＢ結合及び／又は調節化合物は、天然素材から単離できるし、市販品を購入することができるし、又は合成有機化学の分野で知られた方法により合成することができる。
【００６４】
ＩＩ．Ａ．構造
本出願に開示した対象物に従い、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つＢＤＮＦβ−ターンループ２の代表的化合物又は類似体は、化学式（１）〜（ＸＩ）のうちの一つの構造を持つ化合物を含む。
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、化学式（Ｉ）
【化１】
0005461009.tif 000042
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基及びジアルキルカルバモイル基からなる群から選択され；
Ｘ１及びＸ２は、独立して、ＣＨ２基及びＮＲ４基（式中、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；
Ｄ１は水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、水酸基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アラルコキシ基及び下式の基
【化２】
0005461009.tif 000043
（式中、各Ｒ５及びＲ６は水素原子、アルキル基、アラルキル基又はアリール基である。）からなる群から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００６５】
幾つかの実施態様において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は水素原子、Ｘ１及びＸ２はＮＨ基、Ｄ１はアルコキシ基である。幾つかの実施態様において、化学式（Ｉ）の化合物は下記
【化３】
0005461009.tif 000044
又はその立体異性体である。
【００６６】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、化学式（II）
【化４】
0005461009.tif 000045
（式中、Ｌ１及びＬ３は、独立して、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基、アリーレン基、アラルキレン基及び置換アリーレン基からなる群から選択され；
Ｌ２は、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基、アリーレン基、アラルキレン基、置換アリーレン基、
【化５】
0005461009.tif 000046
からなる群から選択され；
Ｌ４は、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基であり；
Ｚ１、Ｚ２及びＺ３は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基及びアラルキル基から選択され；
Ｘ３、Ｘ４、Ｘ５及びＸ６は、独立して、Ｎ又はＣＨ基であり；
Ｙ１、Ｙ２及びＹ３は、独立して、カルボニル基、スルホニル基又はメチレン基であり；
Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４及びＤ５は、独立して、水素原子、アルキル基、ハロ基、水酸基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アラルコキシ基、アシルオキシ基、カルボキシル基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000047
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００６７】
幾つかの実施態様において、Ｌ１及びＬ３は、独立して、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基又はフェニレン機である。幾つかの実施態様において、Ｄ２及びＤ３は、水酸基又はカルバモイル基である。幾つかの実施態様において、Ｘ３及びＸ４はＮである。幾つかの実施態様において、化学式（ＩＩ）の化合物は下記
【化７】
0005461009.tif 000048
から成る群から選択される。
【００６８】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（III）
【化８】
0005461009.tif 000049
（式中、Ｌ５は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；
Ｘ７及びＸ８は、独立して、Ｎ又はＣＨ基であり；
Ｒ１０及びＲ１１は、独立して、水素原子、ハロ基、アルキル基及びシアノ基から成る群から選択され；
Ｄ６、Ｄ７及びＤ８は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000050
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００６９】
幾つかの実施態様において、Ｒ１０及びＲ１１は、シアノ基である。幾つかの実施態様において、Ｄ６は、水酸基である。幾つかの実施態様において、Ｄ７は、ＮＲ５Ｒ６である。幾つかの実施態様において、Ｄ８は、アシルアミノ基である。幾つかの実施態様において、化学式（III）の化合物は下記
【化９】
0005461009.tif 000051
である。
【００７０】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（IV）
【化１０】
0005461009.tif 000052
（式中、Ｘ９及びＸ１０は、独立して、ＣＨ２基又はＮＲ４基（式中、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）であり；
Ｒ１２は、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基、アシル基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基及びジアルキルカルバモイル基からなる群から選択され；
Ｒ１３は、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、アシル基、アルコキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基及びジアルキルカルバモイル基からなる群から選択され；
Ｒ１４及びＲ１５は、独立して、水素原子、アルキル基、置換アルキル基及びアラルキル基からなる群から選択され；
Ｒ１６は、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、水酸基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アラルコキシ基、及び
【化２】
0005461009.tif 000053
（式中、Ｒ５及びＲ６は水素原子、アルキル基、アラルキル基又はアリール基から選択される。）からなる群から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００７１】
幾つかの実施態様において、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４及びＲ１５は、水素原子又はアルキル基である。幾つかの実施態様において、Ｘ９及びＸ１０は、ＮＲ４基である。幾つかの実施態様において、Ｒ１６は、ＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５及びＲ６は水素原子又はアルキル基である。）である。幾つかの実施態様において、化学式（IV）の化合物は下記
【化１１】
0005461009.tif 000054
又はその立体異性体である。
【００７２】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（Ｖ）
【化１２】
0005461009.tif 000055
（式中、Ｌ６及びＬ７は、独立して、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；
Ｘ１１は、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２基又はＮＲ１７基であり（式中、Ｒ１７は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）；
Ｘ１２、Ｘ１３及びＸ１４は、独立して、ＣＨ基又はＮであり；
Ｘ１５は、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１８基（式中、Ｒ１８は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から成る群から選択され；
Ｄ９、Ｄ１０、Ｄ１１及びＤ１２は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、アシルオキシ基、カルボキシル基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000056
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００７３】
幾つかの実施態様において、Ｄ９、Ｄ１０、Ｄ１１及びＤ１２は、水酸基、アルコキシ基又はカルバモイル基である。幾つかの実施態様において、化学式（V）の化合物は下記
【化１３】
0005461009.tif 000057
又はその立体異性体である。
【００７４】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（VI）
【化１４】
0005461009.tif 000058
（式中、Ｌ８は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；
Ｘ１６は、Ｏ、Ｓ及びＮＲ１９基（式中、Ｒ１９は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；
Ｘ１７は、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２基及びＮＲ２０基（式中、Ｒ２０は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；
Ｘ１８及びＸ１９は、独立して、Ｎ及びＣＨ基から選択され；
Ｄ１３及びＤ１４は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000059
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００７５】
幾つかの実施態様において、Ｄ１３及びＤ１４は、水素原子又はアルキル基である。幾つかの実施態様において、化学式（VI）の化合物は下記
【化１５】
0005461009.tif 000060
である。
【００７６】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（VII）
【化１６】
0005461009.tif 000061
（式中、ｍ及びｎは、独立して、１又は２であり；
各Ｌ９及びＬ１０は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；
Ｘ２０及びＸ２１は、独立して、ＣＨ基、ＣＨ２基、Ｎ及びＮＲ４基（式中、Ｒ４は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；
Ｘ２２は、水素原子及びハロ基から選択され；
各Ｄ１５及びＤ１６は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000062
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００７７】
幾つかの実施態様において、Ｘ２２は、ハロ基である。幾つかの実施態様において、各Ｄ１５及びＤ１６は、水酸基である。幾つかの実施態様において、化学式（VII）の化合物は下記
【化１７】
0005461009.tif 000063
である。
【００７８】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（VIII）
【化１８】
0005461009.tif 000064
（式中、Ｌ１１は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；
Ｘ２３は、Ｎ又はＣＨ基を表し；
Ｒ２１及びＲ２２は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基及びハロ基から成る群から選択され；
Ｄ１７、Ｄ１８及びＤ１９は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000065
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００７９】
幾つかの実施態様において、Ｒ２１及びＲ２２は、アルキル基である。
幾つかの実施態様において、Ｄ１７、Ｄ１８及びＤ１９は、水酸基、アルコキシ基及びカルバモイル基から選択される。幾つかの実施態様において、化学式（VIII）の化合物は下記
【化１９】
0005461009.tif 000066
から成る群から選択される。
【００８０】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（IX）
【化２０】
0005461009.tif 000067
（式中、Ｌ１２は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；
Ｘ２４は、Ｎ又はＣＨ基を表し；
Ｒ２３は、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基及びハロ基から成る群から選択され；
Ｄ２０、Ｄ２１、Ｄ２２、Ｄ２３及びＤ２４は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000068
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００８１】
幾つかの実施態様において、Ｄ２０、Ｄ２１、Ｄ２２、Ｄ２３及びＤ２４は、水酸基、アルコキシ基及びカルバモイル基から選択される。幾つかの実施態様において、Ｒ２３は、アルキル基である。幾つかの実施態様において、化学式（IX）の化合物は下記
【化２１】
0005461009.tif 000069
である。
【００８２】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（Ｘ）
【化２２】
0005461009.tif 000070
（式中、ｔは１又は２であり；
各Ｌ１３は、存在してもしなくてもよく、存在する場合には、Ｃ１〜Ｃ５のアルキレン基を表し；
Ｘ２５及びＸ２６は、Ｎ及びＣＨ基から選択され；
Ｘ２７は、Ｎ、ＣＨ基、ＣＨ２基及びＮＲ２５基（式中、Ｒ２５は水素原子又はアルキル基を表す。）から選択され；
Ｒ２４は、水素原子、アルキル基、アラルキル基、アリール基及びハロ基から選択され；
Ｄ２５及び各Ｄ２６は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000071
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００８３】
幾つかの実施態様において、Ｄ２５及び各Ｄ２６は、水酸基及びアルコキシ基から選択される。幾つかの実施態様において、Ｒ２４は、アルキル基である。幾つかの実施態様において、化学式（X）の化合物は下記
【化２３】
0005461009.tif 000072
である。
【００８４】
幾つかの実施態様において、ループ２ＢＤＮＦ類似化合物は、下記化学式（XI）
【化２４】
0005461009.tif 000073
（式中、Ｘ２８は、ＣＨ２基、Ｏ、Ｓ及びＮＲ２６基（式中、Ｒ２６は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択され；
Ｘ２９は、Ｎ又はＣＨ基を表し；
Ｘ３０は、ＣＨ２基又はＮＲ２７基を表し（式中、Ｒ２７は水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）；
Ｘ３１は、Ｎ又はＣＨ基を表し；
Ｄ２７、Ｄ２８及び各Ｄ２９は、独立して、水素原子、アルキル基、アリール基、アラルキル基、ハロ基、水酸基、アルコキシ基、アラルコキシ基、アリールオキシ基、メルカプト基、メルカプトアルキル基、カルボキシル基、アシルオキシ基、アルキルオキシカルボニル基、アリールオキシカルボニル基、アラルコキシカルボニル基、アシルアミノ基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基、ジアルキルカルバモイル基、
【化６】
0005461009.tif 000074
（式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９は、独立して、水素原子、アルキル基、アラルキル基及びアリール基から選択される。）から選択される。）
で表される構造を持つ化合物、又はその医薬的に許容されうる塩である。
【００８５】
幾つかの実施態様において、Ｄ２７、Ｄ２８及び各Ｄ２９は、独立して、水酸基又はアルコキシ基である。幾つかの実施態様において、化学式（ＸＩ）の化合物は下記
【化２５】
0005461009.tif 000075
である。
【００８６】
ここで開示した化合物は、ＴｒｋＢ受容体分子に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ親化合物の誘導体であって、ＴｒｋＢ受容体に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ誘導体をも含む。この誘導体は、親化合物に比べて、潜在能力、選択性、親水性、親油性、両親媒性、溶解性、生物学的利用能、及び肝臓疾患への耐性から成る群から選択される少なくとも１つの特徴の増大を示すことができる。
幾つかの実施態様において、この化合物は、ＴｒｋＢ受容体に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ親化合物の誘導体であって、親化合物又は親化合物の他の誘導体にインビボで形質転換されて、ＴｒｋＢ受容体に結合特異性及び／又は調節特異性を持つ誘導体である。このような誘導体は、幾つかの実施態様において、プロドラッグと呼ばれる。プロドラッグは、インビボで化学的に加水分解し（即ち、ｐＨの変化により触媒された加水分解）又は酵素により加水分解する結合を含む。このような結合として、エステル、アミド及びカーボネートが挙げられるが、これらに限定されない。インビボでのこのような結合の加水分解は、例えば、アルコールやアミンのような水素供与部分（成分）の存在を示す。
幾つかの実施態様において、本明細書で開示した化合物は、図１に表示した薬理作用団と実質的に同一の薬理作用団を含むことができることを理解すべきである。
その様な化合物の代表例としては、化学式（Ｉ）〜（ＸＩ）が挙げられるが、これらに制限されない。
【００８７】
ＩＩ．Ｂ．製剤
本明細書で開示した化合物は、好ましい投与ルートに適応したルーティン手順に従い製剤化できる。従って、本明細書で開示した化合物は、油性又は水性の媒体を使った懸濁液、溶液、又は乳状液の様な形をとることができ、また浮遊剤、安定剤、及び／又は分散剤を含むことができる。本明細書で開示した化合物は、埋め込み、又は注射のための調整品として製剤化できる。従って、例えば、上記化合物は、適切な高分子又は疎水性材料（例えば、許容可能な油のなかの乳濁液）、又はイオン交換樹脂、又は発泡溶解誘導体（例えば、発泡溶解塩）と共に製剤化できる。又は、活性な構成要素は、例えば、無菌で発熱物質を含まない水のような、適切な媒体と使用前に混合するための粉末状であることができる。各々の投与方法に対する適切な製剤については、Remington:The Science and Practice of Pharmacy,A.Gennaro,編,第20版,Lippincott,Williams & Wilkins,Philadelphia,Pa.に、見出すことができる。
【００８８】
例えば、非経口投与のための製剤は共通の添加物として、無菌水又は無菌生理食塩水、ポリエチレングリコールのようなポリアルキレングリコール、植物由来の油、水和化したナフタレン等々が含まれる。特に、生体許容性、生体分解可能ラクチド重合体、ラクチド／グリコール・コポリマー、又はポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン・コポリマーは活性化合物の放出を制御するための有用な添加物となることができる。他の潜在的に有用な非経口の運搬システムとしては、エチレン−酢酸ビニル・コポリマー粒子、浸透圧ポンプ、埋め込み輸液システム、及びリポソームが挙げられる。吸入投与に対する製剤は、例えば、ラクトースを添加物として含み、又は、例えば、ポリオキシエチレン−９−アウリルエーテル、グリココレート及びデオキシコレートを含む水溶液であることができて、又は点鼻液の形での投与に対する油性溶液であることができて、又は鼻腔内に作用させるゲルとして含む。非経口性投与の製剤は、また、舌下錠投与のためのグリココレート、直腸投与のためのメトキシサリチル酸塩、又は膣投与のためのクエン酸を含むことができる。
【００８９】
静脈内投与のための製剤は、無菌の等張緩衝液による溶液を含むことができる。必要な場合、この製剤は、また、溶解補助剤及び注射部位の苦痛緩和のための局所麻酔を含むことができる。一般的に、構成要素は単一投薬形態において、例えば、活性試薬の量を示すアンプル又は小袋のような密封した容器の中に、凍結乾燥粉末又は無水濃縮物として、別々に、又は混合して提供される。化合物を輸液として投与する場合、無菌の医薬用級の水、生理食塩水、又はデキストローズ／水を入れた輸液ビンを伴う製剤として調剤できる。化合物を注射で投与する場合、注射のための無菌水アンプル、又は生理食塩水のアンプルが提供され、投与に先立って構成成分を混合できる。
適切な製剤としては、さらに抗酸化剤、緩衝、靜菌薬、殺菌性抗生物質、及び意図されている受容者の体液と等張な調整液をつくる溶質を含むことができる、水性及び非水性無菌注射溶液；懸濁剤及び増粘剤を含むことができる水性及び非水性の無菌懸濁液がある。
【００９０】
上記化合物の組成物は、少量の湿潤剤又は乳化剤、又はｐＨ緩衝剤を含むことができる。上記化合物からなる組成物は、液体溶液、懸濁液、乳濁液、錠剤、ピル、カプセル、持続放出製剤、又は粉末であることができる。
上記化合物は座薬として、伝統的結合剤及びトリグリセリドのような担体と共に調剤できる。
経口調剤は医薬品級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、サッカリンナトリウム、セルローズ、炭酸カルシウム等々のような標準的担体を含むことができる。
本出願で開示した化合物からなる医薬品調剤は、化合物の放出を制御し、それによって、化合物を指定時刻に、又は持続した放出を行う、試薬を含むことができる。
【００９１】
ＩＩ．Ｃ．担体
医薬的に許容される担体は、当業者にはよく知られており、約０．０１から約０．１Ｍ、及び好ましくは０．０５Ｍリン酸緩衝液及び０．８％生理食塩水を含むが、これに制限されない。そのような医薬的に許容された担体は、水性又は非水性溶液、懸濁液、及び乳濁液である。
本出願で開示された対象物の使用に適した、非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油のような植物油、及びオレイン酸エチルの様な注射可能有機エステルを含むが、これらに制限されない。
本出願で開示した対象物への使用に適した水性担体としては、生理食塩水及び緩衝液媒体を含め、水、エタノール、アルコール性／水性溶液、グリセロール、乳濁液又は懸濁液が挙げられるが、これらに制限されない。経口担体は、エリクシル剤、シロップ、カプセル、錠剤、等々であることができる。
本出願で開示した対象物への使用に適した液性担体は、溶液、懸濁液、乳濁液、シロップ、エリクシル、及び与圧化合物を調製して用いることができる。活性な構成成分は、水、有機溶媒、両者の混合物、又は医薬的に許容される油又は脂肪の様な、医薬的に許容可能な液性担体に溶解又は懸濁できる。液性担体は、溶解補助剤、乳化剤、緩衝液、保存液、甘味、芳香試薬、懸濁剤、濃縮剤、着色剤、粘性制御剤、安定剤、又は浸透圧制御因子のような、他の適切な医薬的な添加物を含むことができる。
【００９２】
本出願で開示した対象物への使用に適した液性担体は、水（部分的に上記のような添加物、例えば、セルローズ誘導体、好ましくは、カルボキシメチルセルローズナトリウム溶液を部分的に含む）、アルコール（１水酸基を有するアルコール及び例えば、グリコールのような、多価水酸基アルコールを含む）及びこれらの誘導体、及び油（例えば、分画されたココナッツ油及びラッカセイ油）を含むが、これらに制限されない。非経口投与のためには、担体はまたエチルオレイン酸塩、及びイソプロピルミリスチン酸塩のような、油性エステルを含むことができる。無菌の液性担体は、非経口の投与の為の化合物からなる無菌の液性形態で有用である。本明細書で開示された、与圧化合物のための液性担体は、ハロゲン化した炭化水素又は多の医薬的に許容された噴射剤であることができる。
本出願で開示した対象物の使用のために適切な固体担体は、ラクトース、デンプン、グルコース、メチル−セルローズ、ステアリン酸マグネシウム、リン酸２カルシウム、マンニトール等々のような不活性物質を含むが、これらに制限されない。固体担体はさらに、芳香剤、潤滑剤、可溶剤、懸濁剤、充填剤、滑走剤、圧縮補助剤、結合剤、又は錠剤―粉砕剤のような、１又は２以上の物質を含み；これはカプセル化した材料でもあることができる。粉末状の担体は、細かく分割した固体で、細かく分割した活性化合物との混合物である。錠剤として、活性化合物は、必要な圧縮特性を持つ担体と適切な割合に混ぜられ、望みの形、大きさに圧縮される。粉末及び錠剤は、好ましくは、９９％までの活性化合物を含む。適切な固体担体としては、例えば、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、滑石、砂糖、ラクトース、デクストリン、デンプン、ゲラチン、セルローズ、ポリビニルピロリジン、低融点ワックス及びイオン交換樹脂が挙げられる。
【００９３】
本出願で開示した対象物への使用に適した非経口担体としては、塩化ナトリウム溶液、リンゲル−デキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸リンゲル及び不揮発油があるが、これらに制限されない。静脈内担体としては、流動性及び栄養補強剤、リンゲル−デキストロース等に基づく電解質補強剤がある。保存剤及び他の添加物も存在可能であり、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、不活性ガス、等々がある。
本出願で開示した対象物への使用に適した担体は、必要に応じて、技術上従来の技術で用いられる、錠剤分解物質、稀釈剤、顆粒化剤、潤滑剤、結合材等々と、混合される。担体はまた、技術上既知であるが、反応により化合物に悪影響を与えない方法を用いて無菌化できる。
【００９４】
ＩＩ．Ｄ．塩
開示した化合物は、さらに医薬上許容される塩からなることができること、を理解すべきである。
この様な塩としては、医薬上許容される酸添加による塩、医薬上許容される塩基添加による塩、医薬上許容される金属塩、アンモニウム及びアルキル化したアンモニウム塩が挙げられるが、これらに制限されない。
酸添加塩としては、有機酸のみならず、無機酸の塩が含まれる。適切な無機酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、リン酸、硫酸、硝酸、等々がある。適切な有機酸の代表的な例としては、ギ酸、酢酸、トリクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、安息香酸、ケイ皮酸、クエン酸、フマル酸、グリコール酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、シュウ酸、ピクリン酸、ピルビン酸、サリチル酸、コハク酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、酒石酸、アスコルビン酸、パモ酸、ビスメチレンサリチル酸、エタンスルホン酸、グルコン酸、シトラコン酸、アスパルチン酸、ステアリン酸、パルミチン酸、ＥＤＴＡ，グリコール酸、ｐ−アミノ安息香酸、グルタミン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、過塩素酸塩、硼酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、グリセロリン酸塩、ケトグルタール酸塩等々が挙げられる。
【００９５】
塩基添加塩としては、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、テトラメチルアンモニウムヒロロキシド、トリエチルアミン、ジベンジルアミン、エフェナミン、デヒドロアビエチルアミン、Ｎ−エチルピペリジン、ベンジルアミン、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、エチルアミン、例えば、リジン及びアルギニンジシクロヘキシルアミンのような塩基性アミノ酸、等々が挙げられるが、これらに制限されない。
金属塩の例としては、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム塩等々が挙げられる。
アンモニウム及びアルキル化アンモニウム塩の例としては、アンモニウム、メチルアンモニウム、ジメチルアンモニウム、トリメチルアンモニウム、エチルアンモニウム、ヒドロキシエチルアンモニウム、ジエチルアンモニウム、ブチルアンモニウム、テトラメチルアンモニウム塩等々が挙げられる。有機塩基の例としては、リジン、アルギニン、グアニジン、ジエタノールアミン、コリン等々がある。
【００９６】
ＩＩ．Ｅ．トレーサー
本出願で開示した対象物の幾つかの実施態様において、ＢＤＮＦ模倣化合物はインビボ（すなわち、患者生体の中）又はインビトロ（すなわち、患者生体の外）で検知できるトレーサー（探索子）又はラベル（標識）を含む。幾つかの実施態様において、該トレーサーは、インビボにおいて、シンチグラフ法、磁気共鳴画像、超音波、又は蛍光のような、しかしこれらに限られない、非侵襲的方法で検知できる。トレーサーは、ＢＤＮＦ模倣化合物、薬物担体、又はこれらの組合せと接合体を作る、又は別な方法で結合する。患者に標識化した組成物を投与した後、またインビボにおける局在のための充分な時間経過後、該化合物の生体分布が可視化できる。例えば、放射性トレーサーで標識化したＢＤＮＦ模倣化合物を用いて、インビボにおいてＴｒｋＢ発現が変化した腫瘍又はたの病理学的状態を検出できる。
幾つかの実施態様において、該標識を、シンチグラフ画像法によって検知する。シンチグラフ画像法には、SPECT(Single Photon Emission Computed Tomography,単一光子放射型コンピュータ断層撮影法)、PET(Positron Emission Tomography，ポジトロン放射型断層撮影法）、ガンマカメラ画像、及び直線走査がある。ガンマカメラ及び直線走査は、各々単一平面内の放射能を検知する機器を代表する。多くのＳＰＥＣＴシステムは、１又は２以上の分析対象物の周りを回転するガンマカメラを使用する、したがって１次元以上の放射能を積算する。ＰＥＴシステムは、多次元の放射能を検知する輪状に並んだ検知器からなる。
【００９７】
シンチグラフ画像法を用いる場合、検知できるトレーサー又は、標識は、１８フッ素、６４銅、６５銅、６７ガリウム、６８ガリウム、７７硼素、８０ｍ硼素、９５ルテニウム、９７ルテニウム、１０３ルテニウム、１０５ルテニウム、９９ｍテクネチウム、１０７水銀、２０３水銀、１２３ヨウ素、１２４ヨウ素、１２５ヨウ素、１２６ヨウ素、１３１ヨウ素、１３３ヨウ素、１１１インジウム、１１３ミンジウム、９９ｍレニウム、１０５レニウム、１０１レニウム、１８６レニウム、１８８レニウム、１２１ムテルリウム、１２２ｍテルリウム、１２５ｍテルリウム、１６５ツリウム、１６７ツリウム、１６８ツリルム及び上記核種の窒化物又は酸化物型からなる群から選択した放射性核種標識を含むことができるが、これらに制限されない。
開示した方法に従って用いられるための分子を放射性核種標識する方法は、当業界で既知である。例えば、ＢＤＮＦ模倣化合物は、放射性核種が直接この化合物に結合するように誘導化できる。従って、本明細書の化学式（Ｉ〜ＸＩ）に記載されたＢＤＮＦ模倣化合物の中の１水素原子を放射性核種で置き換えることができる。あるいは、放射性核種又は放射性トレーサーは、化学式（Ｉ〜ＸＩ）のＢＤＮＦ模倣化合物と、アルキレン基のような適切な有機連結分子を介して結合できる。
放射性核種を含む組成物を用いる場合、標識化された標的分子を含む組成物に、アスコルビン酸、ゲンチジン酸、又は他の適切な抗酸化物質の様な、放射性分解損傷を防ぐ、又は最小限にするための安定剤を加えることができる。
【００９８】
ＩＩＩ．使用方法
本出願で開示した対象物は、神経病（例えば、神経変性疾患）を含むが、これに限らない、及び患者における病気を治療する新しい方法を提供する。より具体的には、本出願で開示した対象物の方法は、ＴｒｋＢ受容体分子に対して結合特異性、及び／又は調節特異性を有する化合物を、病気を治療するための患者に、投与することを含む。生存シグナルを誘導するため、及び／又は神経機能を亢進するために、有効量の該化合物を投与することができる。該化合物を用いて、非神経細胞の好ましい機序を促進することができる。また、該化合物を用いて、内因性ＢＤＮＦを部分的に、又は完全に阻害することができる。
治療する病気は、ニューロトロフィンのＴｒｋＢ受容体への結合を、少なくとも部分的に介する、如何なる健康状態、及びＴｒｋＢ受容体は存在するが、必ずしもその状態に因果的に結びつかない健康状態でもあり得る。ニューロトロフィンは、その健康状態において、存在しても、不在でもあり得る。そのような病気としては、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、レット症候群、パーキンソン病、脊髄損傷、脳梗塞、低酸素症、虚血症、脳損傷、糖尿病性ニューロパチー、末梢性ニューロパチー、神経移植合併症、多発性硬化症、末梢神経障害、ＴｒｋＢを発現する細胞の変性又は機能障害を含む状態、を含むが、これらに限られない。治療すべき病気としてはさらに、躁鬱、肥満症、末梢組織の虚血状態を含む。表１に、ＴｒｋＢ関与が結びつけられている様々な病気を載せる。
【００９９】
【表１】
0005461009.tif 000076
【０１００】
本出願で開示した対象物はさらに、神経細胞及び非神経細胞を含む、細胞生存又は細胞機能を促進する方法を提供する。代表的な神経細胞としては、海馬錐体細胞、皮質細胞、線条体細胞、黒質細胞、運動神経細胞、プルキニエ細胞、後根神経節細胞が挙げられるが、これらに制限されない。
非神経細胞としては、血管内皮細胞があるが、これに限らない。該方法は、神経細胞又は非神経細胞をＴｒｋＢ受容体分子に対する結合特異性又は調節特異性を有する化合物で処理することを含み、これにより該化合物は、生存シグナリング、及び／又は細胞機能の亢進を誘発する。
化学式（Ｉ〜ＸＩ）のＢＤＮＦ模倣化合物は、インビボ及びインビトロ両場面で使うことができる。幾つかの実施態様において、ＢＤＮＦ模倣化合物をインビトロ法におけるＢＤＮＦに対するコスト削減のための代替え物として用いることができる。幾つかの実施態様において、ＢＤＮＦ模倣化合物を、幹細胞に関する方法においても用いることができる。従って、幾つかの実施態様において、幹細胞を未分化状態に保つ、又は幹細胞を分化誘導させるために、ＢＤＮＦ模倣化合物を用いることができる。例えば、本明細書で開示したようにＢＤＮＦ模倣化合物を、ＢＤＮＦ模倣化合物による置き換え以外のＢＤＮＦを用いる、本技術分野において現在可能な方法において用いることができる(Huang,E.J.,Reichardt,L.F.(2003)Annu Rev Biochem72,609-642;Banker、G.,Goslin,K.(編)(1996)Culturing Nerve Cells,第10,14章(Cambridge,Massachusetts:The MIT Press)）。
【０１０１】
ＩＩＩ．Ａ．投与
本出願で開示した対象物は、患者におけるＴｒｋＢ結合、又はＴｒｋＢ調節を介した疾病を改善するためにＴｒｋＢ受容体化合物に対する結合、及び／又は調節特異性、を有する化合物を投与する方法を提供する。該方法は、本明細書で開示したいずれかの化合物のような、ＴｒｋＢ受容体に対する結合、及び／又は調節特異性を有する化合物の有効量を患者に投与することを含むことができる。
本明細書で用いるように、投与は当業者に知られている様々な方法の中のどの方法を用いても、達成又は行うことができる。上記化合物を、例えば、皮下に、静脈内に、非経口的に、腹腔内に、皮内に、筋肉内に、局所的に、腸内に（例えば、経口的に）、直腸に、鼻腔内に、口内に、舌下に、膣内に、吸入スプレイで、医薬ポンプ又は埋め込んだリザーバーを通して、通常の非毒性の生理的に許容される担体又は媒体を含む投薬投与量を投与できる。
さらに、本出願で開示された化合物は、処置の必要に応じて、局所的領域に投与されうる。これは、例えば、シアラスチックメンブレン又は繊維のような膜も含め、手術の間の局所的輸液、局所的適用、経皮パッチ、注射、カテーテル、座薬、埋め込み（埋め込みは、任意に、多孔性、非多孔性、又はゼラチン性の材料である）によって行われるが、これらに制限されない。
【０１０２】
上記化合物が投与される形状（例えば、シロップ、エリクシル、カプセル、錠剤、溶液、発泡体、乳濁液、ゲル、ゾル）は、化合物が投与される経路に部分的に依存するであろう。例えば、粘膜（例えば、口内粘膜、直腸、小腸粘膜、気管粘膜）投与のために、鼻ドロップ、噴霧質、吸入物、ネブライザー、点眼又は座薬が用いられる。本明細書で開示した化合物及び薬剤は、鎮痛剤、抗炎症剤、麻酔剤及びＴｒｋＢ介在性疾患の１又は２以上の症状又は原因を調節できる他の薬剤のような、他の生物活性のある薬剤と共に投与することができる。
さらに、投与は、適切な期間、複数の投薬量を患者に投与することを含むことができる。この様な投与療法は日常業務の方法に従い、本明細書に開示の総説に基づき決定できる。
幾つかの実施態様において、投与は、細胞内又は細胞微少環境における化合物の濃度が約０．１０μＭと約５０μＭの間に達するように、患者に単独又は複数の投薬量を投与することを含む。
本出願で開示した対象物の化合物は、医薬品における単独の活性薬剤として用いることができる、又は、例えばニューロトロフィン、又は神経変性疾病における神経生存又は軸索成長を促進することができる他の因子又は薬物のような、他の活性な成分と組み合わせて（例えば、互いに時間的に近い投与、又は同じ処方）用いることができる。例えば、患者にＴｒｋＢ受容体分子に対する結合、及び／又は調節特異性を持つ化合物と、ｐ７５ＮＴＲ受容体分子に対する結合、及び／又は調節特異性を持つ化合物第２の化合物との投与によって、相乗効果が提供される。ｐ７５ＮＴＲ受容体分子に対する結合特異性を有する代表的化合物については、本明細書の参考文献に全体が取り込まれている２００６年４月３日出願の米国特許番号１１／３９６，９３６に考察されている。
【０１０３】
ＩＩＩ．Ｂ．  投与量
本明細書で開示した化合物の投与のために、齧歯動物モデルに投与する投与量に基づく、ヒト投与量に外挿する従来の方法は、マウス投与量をヒト投与量に換算する換算因子を用いて行うことができる：ｋｇあたりのヒト投与量＝ｋｇ当たりのマウス投与量ｘ１２(Freireich他、(1966)Cancer Chemotherapy Rep.50,219-244)。また、薬剤投与量は、体重よりも体表面積平方メートル当たりのミリグラムでも与えられるが、その理由は、この方法がある種の代謝的及び排出機能に対し、良い相関を与えるからである。さらに、体表面積は、異なる動物種のみならず、成人及び子供の投薬量のための共通分母として用いられる(Freireich他、(1966)Cancer Chemotherapy Rep.50,219-244)。要約すると、すべての与えられた動物種におけるｍｇ／ｋｇ投与量を等価なｍｇ／ｓｑｍ投与量として表すために、投薬量に適切なｋｍ因子を掛ける。ヒト成人では、１００ｍｇ／ｋｇは１００ｍｇ／ｋｇｘ３７ｋｇ／ｓｑｍ＝３７００ｍｇ／ｍ２である。
本明細書に開示している化合物がこの模倣化合物又は断片の形をとることができる範囲で、活性及び有効量の投与量は変わりうることを理解しなければならない。しかしながら、当業者は本出願で開示した対象物により想定されるタイプの化合物の活性を容易に検定できる。
本明細書で開示した化合物は、単位投与量で用いることができて、例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.,Easton,PA,1980)に記載されているように、製剤技術でよく知られている如何なる方法によっても製造できる。
【０１０４】
投与量範囲が、特定の化合物及びその有効性に依存することは、当業者によりよく認識されている。投与量範囲は、神経病及び神経病に結びついた症状を改善する、及び／又は神経細胞の生存が達せられるという好ましい効果を得るほど充分多量であり、処置できない様々な副作用を引き起こす程に多量でないと理解すべきである。治療有効性に対する適切な範囲は、投与経路、年齢、及び治療される患者の状態に応じて当業者により直ちに決定されるであろう。如何なる複雑な事態に対しても、個々の医師は投与量を調節することができる。本明細書で討議された化合物を、本出願で開示した対象物に従って用いた場合、許容できない毒性効果は起こらないであろう。
本明細書で開示された化合物の有効量は、測定できる生物学的応答をもたらすに充分な量からなる。本明細書で開示した対象物の治療化合物中の活性構成成分の実際の薬用濃度は、特定の患者、及び／又は使用に対する好ましい治療効果を達成するために有効な、活性化合物の量を投与するために変わりうる。好ましくは、最小薬用量を投与することであり、また薬用量は、薬用量規定毒性がない場合、最小有効薬用量まで上げられる。通常の当業者は、治療上有効薬用量の決定及び調整について、及び何時またどの様にその様な調整を行うかという事と共に、熟知している。
【０１０５】
さらに、本出願で開示した対象物の方法に関して、好ましい患者は、脊椎動物の患者である。好ましい脊椎動物は、温血動物であり；好ましい温血脊椎動物は、哺乳動物である。本出願で開示した対象物の原理は、用語"患者"に含まれている、全ての脊椎動物に関して有効であることを示すが、本出願で開示した方法により治療される患者は、好ましくはヒトである。この文脈では、脊椎動物とは、神経変性疾患の治療が望まれる全ての脊椎動物種であると理解すべきである。本明細書で用いるように、用語"患者"は、ヒト及び動物患畜（患禽）を含む。従って、獣医の治療上の使用は、本出願で開示された対象物に基づき提供される。
従って、本出願で開示された対象物は、ヒト及び、シベリアタイガーのような、絶滅の危機にあるために重要な哺乳類；ヒトによる消費のために農場で飼育される経済的に重要な哺乳類；及び／又は、ペット又は動物園で飼われている動物のような、ヒトにとって社会的に重要な動物などの、哺乳類の治療に提供される。この様な動物の例としては、ネコ及び犬のような肉食動物；ピッグ、ホッグ及び野生イノシシのような豚及び／又は牛、雄牛、羊、キリン、鹿、山羊、バイソン、及びラクダ；馬のような反芻動物及び／又は有蹄類が含まれるが、これらに限らない。また、絶滅危惧種の及び／又は動物園のトリ類、及びニワトリ、及びより具体的には、七面鳥、鶏、アヒル、ガチョウ、ホロホロ鳥等々の家禽の治療を含め、トリの治療が提供されるが、これらのトリ類はまた、ヒトにとっても経済的にも重要である。従って、また家畜としての豚、反芻動物、有蹄類、馬（競走馬も含め）、家禽類等々、の治療も提供される。
【０１０６】
ＩＩＩ．Ｃ．コーティング
幾つかの実施態様において、本出願で開示した対象物の化合物を、コーティングをして用いることができる。例えば、医療デバイスと接触する組織又は体液中の神経、及び／又は非神経細胞生存を促進するため、又は医療デバイスと接触する領域のＴｒｋＢ発現変化を伴う病理学的状態を治療するために、化学式（Ｉ〜ＸＩ）のＢＤＮＦ模倣化合物を、手術道具、バイオセンサー、及び移植部材のような、医療デバイスをコーティングするために用いることができる。幾つかの実施態様において、医療デバイスは、人工内耳、神経系のインターフェースとなる電子デバイス、又は神経再生を支持するようデザインされた合成マトリックスである。
該模倣化合物は、様々な方法で医療デバイスにコーティングされる。例えば、該模倣化合物を、液体担体に懸濁又は溶解し、医療デバイス上にコーティングし、乾燥する。あるいは、該模倣化合物を、デバイスの化学的に官能化した表面に結合させる、又は医療デバイスの高分子コーティングの中に埋め込む、又は結合させることができる。幾つかの実施態様において、コーティングされた該デバイスは、例えば、ステンレス鋼、ニッケル、チタン、アルミニウム、銅、金、銀、プラチナ、及びこれらの組合せのような、金属表面を持つことができる。幾つかの実施態様において、該デバイスは、ガラス又は高分子表面を持つことができる。
【実施例】
【０１０７】
以下の実施例は本出願で開示した対象物の実例を提供するものである。本開示及び当業者の一般レベルを考慮して、以下の実施例は例示だけが目的であり、本出願で開示した対象物の精神及び範囲から離れることなく、無数の変化、修正、変換を用いることができることは、当業者に理解されるだろう。
【０１０８】
実施例のための材料及び方法
計算的研究
計算的研究は、Ａccelrys(San Diego,California,United States of America)から得たAccelrys Catalyst(R)及びInsightIIシステムを用いて行った。
【０１０９】
抗体とタンパク質
モノクローナル抗リン酸化ＥＲＫＴ２０２／Ｙ２０４抗体，ポリクローナル抗ＥＲＫ４２／４４抗体，モノクローナル抗リン酸化ＡＫＴＳ４７３抗体，ポリクローナル抗ＡＫＴ抗体，ポリクローナル抗リン酸化ＮＦκＢ−ｐ６５（Ｓｅｒ５６３）抗体，及び部位特異的ポリクローナル抗ＴｒｋＹ４９０抗体は、Cell Signaling Technology,Inc.(Beverly,Massachusetts,United States of America)より得た。モノクローナル抗アクチン抗体は、Ｓigma-Aldrich Corp.(St.Louis,Missouri,United States of America)より得た。ポリクローナルＴｒｋＡ及びＴｒｋＢ抗体は、Upstate USA, Inc.(Charlottesville,Virginia,United States of America)より得た。組み換えヒトＮＧＦは、Invitrogen(Carlsbad,California,United States of America)より得て、またＢＤＮＦはSigma-Aldrich(St.Louis,Missouri,United States of America)より得た。
海馬神経細胞はＥ１６−１７マウス胎児より前述(Yang,T.他(2003)J Neurosci 23,3353-3363)の様に調整した。低密度培養は、各ウェルにポリ−Ｌ−リジン−塗布Ａ／２プレートに２５μｌの細胞懸濁液（２０００神経細胞／ウェル；１２，５００細胞／ｃｍ２）、２５μｌの１０％ＦＢＳ含有ＤＭＥＭ、及び様々な濃度の組み換えＢＤＮＦ，ＮＧＦ，又はＴｒｋＢ−結合性化合物を加えて、開始した。
【０１１０】
培養４８時間後に、与えられた細胞がＭＴＴを青色ホルマザン産物に変換するか否かの視覚的測定による標準的な形態学的基準のコンビネーションを用いて、生存細胞を、前述(Longo,F.M.,Manthorpe,M.,Xie,Y.M.,Varon,S. 1997)J Neurosci Res 48,1-17)のように検定した。要約すると、生存神経細胞数は、各ウェル中の、形態学的に原型を保ち、また青色産物で満たされた、全細胞数を計数して測定した(Longo,F.M.,Manthorpe,M.,Xie,Y.M.,Varon,S. 1997)J Neurosci Res 48,1-17)。ニューロトロフィン及び化合物の各濃度に対して、デュプリケート（二重）のウェルを計数し、結果値を平均化した。各化合物の活性は、盲検計数で確認した。計数は２５ｎｇ／ｍｌＢＤＮＦによる生存数又はベースライン生存数により規格化した。SYSTAT software Inc.(Richmond,California,United State of America)から得たSigmaplotにより、用量依存性曲線のフィッティングを行った。
シグナリング経路阻害研究のために、LY294002,PD98059(EMD Biosciences/Calbiochem,SanDiego, California, United States of Americaより得た)を、それぞれ最終濃度２５μＭ，５０μＭ，及び２．５μｇ／ｍｌ培養細胞に加え、同時にＢＤＮＦ，又はＴｒｋＢ結合性化合物を加えた。シグナリング阻害剤を加えた全ての研究に対して、生存細胞の検定は４８時間後に行った。
【０１１１】
タンパク質抽出及びウェスタンブロット解析
Ｔｒｋ，ＡＫＴ，及びＥＲＫ活性化の検定のために、Ｅ１６−１７マウス由来の海馬神経を、ポリ−Ｌ−リジン塗布の６ウェルプレート(Corning,Inc.,Corning,New York,United States of America)中、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭを用いて培養し、その後ニューロトロフィン又は化合物を添加する２時間前に、無血清ＤＭＥＭ中でインキュベートした。指定した時点で、神経細胞を採取し、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，ｐＨ８．０，１３７ｍＭ  ＮａＣｌ，１％ｌｇｅｐａｌＣＡ−６３０，１０％グリセロール、１ｍＭ  ＰＭＳＦ，１０μｇ／ｍｌアプロチニン、１μｇ／ｍｌロイペプチン、５００μＭオルソバナジン酸塩(Zhou,J.,Valletta,J.S.,Grimes,M.L.,Mobley,W.C.(1995)J Neurochem 65,1146-1156)を含む溶解緩衝液中で可溶化した。細胞溶解液を遠心し、上清を集め、タンパク質濃度をＰｉｅｒｃｅ(Rockford, Illinois,United States of America)より得たＢＣＡタンパク質アッセイ試薬を用いて測定した。
ウェスタンブロットは前述(Yang,T.他(2003)J Neurosci 23,3353-3363)の様に行った。ウェスタンブロットシグナルは、Amersham(Piscataway,New Jersey,United States of America)から得たＥＣＬ化学発光システムを用いて測定した(Yang,T.他(2003)J Neurosci 23,3353-3363)。抗Ｔｒｋ抗体の存在を検出するために、Amersham/Pharmacia Biotech (Piscataway,New Jersey,United States of America)より得た西洋わさびペルオキシダーゼ結合ヤギ抗ウサギＩｇＧを転写膜（ブロット）のプローブとして用いた。シグナルをAmersham Biosciences(Piscataway, New Jersey,United States of America)から得たＥＣＬ化学発光システムにより検知した。負荷したタンパク量に差異があるので、転写膜を切り取り、Sigma(St.Louis,Missouri,United States of America)より得た抗β−アクチンモノクローナル抗体により再プローブしてタンパク量を比較した。
【０１１２】
実施例１
計算によるモデリング、薬理作用団の生成、仮想的及び機能的スクリーニング
受容体と相互作用する可能性が高いループ構造を模倣し、化合物産出性の薬理作用団を作り出すために、次の２条件を仮定した：（１）リガンド（配位子）ペプチド構造の自由度はタンパク質中に存在することにより制限を受ける；（２）標的とした受容体サブサイト（副部位）においてループ構造の変化を伴う"誘導適合"は殆どない、又はその構造変化は小分子リガンドの柔軟性により対応する。これらの２条件を適用した場合、天然のリガンドに似た様態で、受容体と相互作用する小分子コンフォメーションの相互作用／活性化が可能となる。
単一ループのＢＤＮＦループ２構造を模倣した化合物を探し出すことに努力を集中した。計算的研究により、インサイテュー（原位置）で束縛されたループ２骨格、及び側鎖構造の近位部分は、自由度を制限し、またループ分子動力学シミュレーションからのサンプル集合から選択した中間構造を抽出し、薬理原子団モデルの作成に用いた。薬理原子団に関与する残基は、ＢＤＮＦのＳｅｒ４５，Ｌｙｓ４６及びＧｌｎ４８であった（図１）。薬理原子団フィーチャーの配置の指針を、ループ系統発生論及び側鎖化学から得た。
薬理原子団に対し、５．５００，０００個以上の化合物の夫々より、平均３５個の配座異性体をスクリーンして、内部エネルギーの計算値が１０ｋｃａｌ／ｍｏｌ以下である約３０００個を得た。此の数は、目視検査、計算した血管脳障壁透過性、及び仮想的に浅い受容体結合ポケットとの適合可能性及び官能基の最大順応性に基づく他の予想される医薬的特性により、約５０個に減少した。
【０１１３】
実施例２
海馬神経生存を促進する化合物
ＢＤＮＦループ２モデル（図１）及び小規模インビトロ生物検定に基づく高効率仮想的スクリーニングを用いて、潜在的神経栄養活性を有する化学的に様々な化合物を同定することができる。インシリコ（計算機）により約５．５００，０００個の化合物をスクリーニングして、３２化合物から１５個の陽性化合物を選びインビトロのスクリーニングに付した（４７％）。
ＢＤＮＦループ２模倣化合物の作用機序を理解し、また標的受容体、ＴｒｋＢ，を介する働きを推量するテストを行うために、ＢＤＮＦが神経細胞生存を促進する培養条件で胎児海馬神経細胞を用いて、模倣化合物の生存促進活性の用量依存関係をＢＤＮＦと比較した。この培養において、ＴｒｋＡ発現は殆ど無いので、主にＴｒｋＢ及びｐ７５ＮＴＲを経由したＢＤＮＦが、神経栄養活性を媒介した(Brann,A.B.,他、(1999)J Neurosci 19,8199-8206;Bui,N.T.他、(2002)J Neurochem 81,594-605)。
化合物４（ＢＤ２−４）はＥ１６海馬神経細胞死を防ぐこと、及び化合物４により促進された神経突起アウトグロース長はＢＤＮＦで見られる結果と似ているということが、研究によって示された。図２を参照のこと。化合物１〜４（ＢＤ２−１，ＢＤ２−２，ＢＤ２−３，及びＢＤ２−４夫々は；図３Ａ〜Ｅ）の用量依存性プロフィールによると、ＥＣ５０値は、０．１〜１．０ｎＭの範囲であり、またＢＤＮＦ応答の５０〜２００％の固有な活性を示した。さらに、部分的作用薬に対して予想されたように、ＢＤＮＦの最大有効濃度（５０ｎｇ／ｍＬ）存在下で化合物４は、ＢＤＮＦ活性の阻害を起こした。図４参照のこと。化合物１〜４の構造は、以下の表２に示されている。
【０１１４】
【表２】
0005461009.tif 000077
【０１１５】
最初に同定した４個の化合物の中の１個、化合物４はLipinski基準(Lipinski, C.A.,(2000)J Pharm Toxicol Methods 44,235-249)及び血管脳障壁計算(Fu,X.C,Chen,C.X.,Liang,W.Q.,Yu,Q.S.(2001)Acta Pharmacol Sin 22,663-668;Clark,D.E.,(2002)J Pharm Sci 88,815-821)による最も"薬物類似"特性を持つことが予想される。従って、化合物４をさらに詳細な機構的研究のために選択した。
【０１１６】
実施例３
ＴｒｋＢ受容体を活性化する化合物
ＢＤＮＦループ２模倣化合物とＴｒｋＢ受容体との相互作用を検定するために、化合物４によるＴｒｋＡ，ＴｒｋＢ及びＴｒｋＣ活性化能を一連のウェスタンブロット実験により比較した。これらの研究により、ＢＤＮＦ模倣化合物が、ＴｒｋＢのみを活性化するという高レベルの特異性を持つことが分かった。
図５Ａの最上部２パネルは、ＴｒｋＢを発現するＮＩＨ３Ｔ３において、ＢＤＮＦ及び化合物４（ＢＤ２−４）は、Ｔｒｋリン酸化（最上部のパネルに抗ＴｒｋＹ４９０抗体によるプローブで示されている）により明らかになったようにＴｒｋＢを活性化することを示す。培養液（ＣＭ）単独又はＮＧＦによる処理では、ＴｒｋＢを活性化しない。上部の２番目のパネルは、抗ＴｒｋＢ抗体を用いたウェスタンブロットが、存在するＴｒｋＢ全量を示す。図５Ａの下部２パネルでは、ＴｒｋＡを発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞を用いた。ＮＧＦは、Ｔｒｋリン酸化で明らかなように、ＴｒｋＡを活性化したが、ＢＤＮＦ及び化合物４は活性化しなかった。
図５Ｂでは、ＴｒｋＣを発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞を用いた。最下部のパネルでは、抗ＴｒｋＣ抗体のプローブによる存在するＴｒｋＣ全量を示す。ＮＴ−３はＴｒｋのリン酸化を促進する（上部パネル）が、培養液（ＣＭ）単独、ＢＤＮＦ，及び化合物４は活性化しない。
【０１１７】
実施例４
ハンチントン病モデルにおける化合物活性
キノリン酸誘発の線条ニューロン細胞死はハンチントン病（ＨＤ）の確立したモデルである。以前の研究によると、ＢＤＮＦ機能はＨＤにおいて損なわれ、またＢＤＮＦ投与がキノリン酸誘発細胞死を防ぐ。Perez-Navarro,E.,他(2000)J.Neurochem 75,2190-2199;及びKells,A.P.,他(2004)Mol Ther 9,682-688を参照のこと、これらは本明細書に参考文献として全体が取り込まれている。
第６Ａ図に示すように、７．５ｍＭキノリン酸添加は、培養液（ＣＭ）単独と比較して約５０％のマウスＥ１６線条ニューロン細胞死をもたらす。０から１．５ｎｇ／ｍＬの用量範囲を越えるＢＤＮＦ、及び１０〜１０００ｎＭの用量範囲を越えるＢＤ２−４は、キノリン酸誘発細胞死を減少させる上で同様の効率を示す。
Ｋ２５２ａ阻害剤は、良く特性が研究されたＴｒｋＢ受容体活性化の阻害剤である。図６Ｂに示すように、Ｋ２５２ａはキノリン酸誘発細胞死に効果を持たないが、細胞死を防ぐＢＤＮＦ及びＢＤ２−４の活性を妨害する。これらの知見は、ＢＤ２−４効果は、ＴｒｋＢ受容体活性化能を介することを確認する。
図６Ｂに示す結果と同様の研究が行われ、ＤＡＲＰ３２−陽性神経細胞のみが検定された。ＤＡＲＰ３２陽性神経細胞は、ＨＤにおいて特に脆弱な線条体内に存在する。図６Ｃに示すように、ＢＤ２−４はＤＡＲＰ３２−陽性神経細胞をＢＤＮＦの場合と同様の効率で保護する。図６Ｃはさらに、この保護は、ＴｒｋＢを介するものであり、またＢＤ２−４の効率は、ＢＤＮＦの効率と似ていることを示す。図６Ｂに示すように、阻害剤Ｋ２５２ａの添加は、細胞死を防ぐＢＤＮＦ及びＢＤ２−４の活性を減少させる（図６Ｃ）。
【０１１８】
実施例５
パーキンソン病モデルにおける化合物活性
ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を１−メチル−４−フェニルピリジニウム（ＭＰＰ＋）に暴露した結果もたらされる細胞死は、良く特性が研究されたパーキンソン病（ＰＤ）のモデルである。Presgraves,S.P.,他(2004)Exp Neurol 190,157-170,及びDluzen,D.E.,他(2004)Neuroscience 128,201-208を参照、これらは本明細書の参考文献にその全体が取り込まれている。ＢＤＮＦはまた、ドーパミン産生神経細胞を保護することで知られている。さらに、ＭＰＰ＋は霊長類にＰＤ−類似の状態を引き起こす。
パーキンソン病モデル検定のために、最終分化してドーパミン産生の表現形質（Presgraves,S.P.,他(2004)Exp Neurol 190,157-170)になった後のヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を用いた。ヒトＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽細胞腫を１０％仔牛血清、１００μｇ／ｍＬペニシリン、１００μｇ／ｍＬストレプトマイシン、０．２５μｇ／ｍＬアンホテリシンＢ，及び０．０１μＭ非必須アミノ酸を補強したダルベッコ変法イーグル培地中で集密状態まで増殖させ、その後分化のために継代した。分化のために、該細胞を１０μＭレチノイン酸を含む同一培地中で３日間培養し；その後３日間の分化のために、培地を除き、１６０ｎＭのホルボールエステル１２−Ｏ−テトラデカノイル−ホルボール−１３−アセテート（ＴＰＡ）を含む培地に置き換えた。次ぎに細胞を、１００μＭ ＭＰＰ＋を加える３日前に、ＤＭＥＭ中に、ある用量範囲のＢＤ２−４又はＢＤＮＦ（１ｘ１０−１２Ｍから１ｍＭ）で３０分間処理した。ＭＰＰ＋を培地に加えた後、細胞死の異なる側面を正確に測定するＭＴＴ及び乳酸デヒドロゲナーゼ法（ＬＤＨ）により、ＭＰＰ＋の細胞毒性を６，１２，２４及び４８時間シスター培養を検定した。さらに、ＭＰＰ＋誘発細胞死に対する固定用量のＢＤ２−４及びＢＤＮＦの神経細胞保護効果をＴｒｋＢ阻害剤Ｋ２５２ａ（２００ｎＭ）存在下及び非存在下で検定した。
図７に示すように、ＴｒｋＢ阻害剤Ｋ２５２ａはドーパミン産生神経細胞の細胞生存率を僅かに低下させるという効果があった。ＭＰＰ＋は実質的に全ての細胞死を促進した。ＭＰＰ＋の細胞死誘導活性は、ＢＤＮＦ及びＢＤ２−４により顕著に、同程度阻害された。Ｋ２５２ａはＢＤＮＦ及びＢＤ２−４により生じた保護効果を顕著に阻害し、このことはこの保護効果はＴｒｋＢ活性化を介するものであることを示す。平均値±ＳＥを示す。
【０１１９】
実施例６
アルツハイマー病モデルにおける化合物活性
ＢＤＮＦ模倣化合物の持つＡβ−誘発神経変性阻害能を、該化合物のアルツハイマー病治療能のモデルとして試験した。Ｅ１６−１７海馬神経細胞を６日間成熟させ、３日間、Ａβオリゴマー調剤（Dahlgren,K.N.,他(2002)J Biol Chem 277,32046-32053）、ニューロトロフィン及びニューロトロフィン模倣化合物の指定した組合せとインキュベートした。３日間のインキュベーション後、生存神経細胞を、標準的基準に従い検定した（Massa,S.M.,他(2006)J Neurosci 26,5288-5300）。
図８に示すように、Ａβ１−４２オリゴマー（１０μＭ）添加により、生存神経細胞は約４０％減少したが、対照Ａβｓｃｒａｍｂｌｅｄオリゴマーでは減少が見られなかった。ＮＧＦは、Ａβ誘発変性を阻止できなかった。ＮＧＦ ｐ７５ＮＴＲ受容体（２００６年４月３日申請の米国特許出願番号11/396,936に記載）のリガンドとして働くことが知られている、ＮＧＦ模倣化合物ＬＭ１１Ａ−３１は、Ａβ誘発変性を阻止した。この阻害活性自体は、ＮＧＦで阻害され、ｐ７５ＮＴＲ受容体上でＮＧＦとＬＭ１１Ａ−３１の競合すること、及び競合による防御効果であることと一致する。ＢＤＮＦ模倣化合物ＢＤ２−４（化合物４）及びＢＤ２−２４（化合物２４）はＡβ誘発変性を阻止する上でＢＤＮＦと同程度有効であった。これらの研究により初めて、ＢＤＮＦはＡβオリゴマー誘発変性を阻害できること、及びＢＤＮＦ模倣化合物が、ＢＤＮＦ蛋白質と同様に有効にＡβオリゴマー誘発変性を阻害することが示された。
【０１２０】
参考文献
以下に記載する参考文献及び本明細書に引用した全ての参照文献は、これらが補足し、説明し、背景を提供し、又は方法、技術及び／又は本明細書で使用される化合物を教示する限り、本明細書に参照文献として取り込まれている。
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以前に権利主張された対象物の様々な詳細については、本明細書で権利主張した対象物の観点から離れない限り変更されうることは理解されるであろう。さらに、前述の記載は、例示の目的だけに行われ、限定を目的にしたものではない。
【図面の簡単な説明】
【０１２３】
【図１】ループ２を含むヒトＢＤＮＦペプチドの１部分のＸ線結晶構造のリボン表示である。水素結合フィーチャーを、受容体と供与体の位置を示す相対的位置を示す一対の球で表す。各々一対の球の１つは、モデルにおける想定される受容体／供与体フィーチャー上に中心を置き、一方他の球（即ち、矢で示した端に中心を持つ球）は、相互作用の可能性を有する全ての分子上の相補的フィーチャーの標的位置を示す。球の直径は、３Ｄ配座ライブラリースキャンとマッチする化学的フィーチャーに対する空間的な許容性を表す。
【図２】培地（ＣＭ）のみ、又はＢＤＮＦ又は化合物４（図においては、ＬＭ２２Ａ−４又はＢＤ２−４とも示される）を含む培地で処理されたＥ１６マウス海馬培養神経細胞の一連の蛍光顕微鏡写真であり、化合物４はＢＤＮＦに類似した神経栄養効果を持つことを示す。神経細胞は、ＧＡＰ４３抗体により免疫染色されている。
【図３】図３Ａ〜Ｅは、マウスＥ１６海馬神経細胞を用いた、一連のＢＤＮＦ（図３Ａ），化合物１（ＢＤ２−１とも示される、図３Ｂ）、化合物２（ＢＤ２−２とも示される、図３Ｃ），化合物３（ＢＤ２−３とも示される、図３Ｄ）、及び化合物４（ＢＤ２−４とも示される、図３Ｅ）の神経細胞生存率の用量応答曲線である。生存率は、形態学的に無傷であり、同時に青色ホルマザンＭＴＴ変換産物で満たされた各ウェル中の全細胞数として測定した（Longo,F.M.,Manthorpe,M.,Xie,Y.M.,及びVaron,S.(1997)J Neurosci Res 48,1-17）。計数は２５ｎｇ／ｍＬ ＢＤＮＦで得られた生存率に標準化した。生存率は、４８時間後検定した。符号及びバーは平均値＋／−ｓ．ｅ．ｍを示し、また線はデータに対し単一上昇指数関数モデルを適合させたものである。
【図４】神経細胞生存率（マウスＥ１６海馬神経細胞）を無処理（ＣＭ），ＢＤＮＦ（５０ｎｇ／ｍＬ）処理、化合物４（ＢＤ２−４）処理、又はＢＤＮＦ及び化合物４の組合せ（ＢＤＮＦ＋ＢＤ２−４）処理について比較した棒グラフであり、化合物４が部分的にＢＤＮＦの作用薬であることを示す。これは、小分子ＢＤＮＦ模倣化合物が部分的作用薬として機能できることを示す初めての観測である。
【図５】図５Ａは、ＴｒｋＢ（上部の２パネル）又はＴｒｋＡ（下部の２パネル）を発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるＹ４９０でのＴｒｋリン酸化の促進により示されたＴｒｋ活性化をモニターするウェスタンブロットのディジタル合成画像であり、ＢＤＮＦ及び化合物４（ＢＤ２−４）（ブロットにおける各レーンの上部に示されている）がＴｒｋＢを活性化するがＴｒｋＡを活性化せず、他方ＮＧＦ（左より２つ目のカラム）はＴｒｋＡを活性化するがＴｒｋＢを活性化しないことを示す。各一対の上部のレーンは抗ｐ−ＴｒｋＹ４９０抗体（ｐ−ＴｒｋＹ４９０）による染色を示し、他方各一対の下部のレーンは全ＴｒｋＢ又はＴｒｋＡを示す。ＣＭは培養液を示す。図５Ｂは、ＴｒｋＣを発現するＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるＹ４９０でのＴｒｋリン酸化の促進により示されたＴｒｋＣ活性化をモニターするウェスタンブロットのディジタル合成画像である。ＢＤＮＦ及び化合物４（ＢＤ２−４）（右側２レーン）はＴｒｋＣを活性化しないが、ＮＴ−３（左から２本目のレーン）はＴｒｋＣを活性化する。ＣＭは培養液を示す。
【図６】図６Ａは、マウスＥ１６の線条神経細胞のキノリン酸誘発性細胞死が、異なる濃度のＢＤＮＦ及び化合物４（ＢＤ２−４）により阻害されることを示す棒グラフである。キノリン酸誘発細胞死は、ハンチントン病（ＨＤ）における神経細胞死のモデルとして使われている。７．５ｍＭのキノリン酸処理が、ＢＤＮＦ非存在下で、培養液（ＣＭ）処理と比較し約５０％の細胞死を引き起こした。バーは平均値±ｓ．ｅ．ｍを示す。図６Ｂは、キノリン酸誘発マウスＥ１６線条神経細胞死のＢＤＮＦ及び化合物４（ＢＤ２−４）による阻害に対する、Ｋ２５２ａ（ＴｒｋＢ受容体活性化阻害剤）の効果を示す棒グラフである。ＣＭは培養液を表し、またＱＵＩＮはキノリン酸を表す。バーは平均値±ｓ．ｅ．ｍを表し、また＊＊はｐ<０．００５ステューデントｔテストを示す。図６Ｃは、Ｄａｒｐ３２−陽性神経細胞を使ったのみで、図６Ｂに記載したものと似た研究結果の棒グラフである。バーは平均値±ｓ．ｅ．ｍを表し、また＊＊＊はｐ<０．００５ステューデントｔテストを示す。
【図７】ＢＤＮＦ模倣化合物がパーキンソン病（ＰＤ）における神経細胞死を防ぐことを示す棒グラフである。左より２本目の棒で示すように、ＴｒｋＢ阻害剤Ｋ２５２ａは、培養液（ＣＭ）のみで処理した細胞と比較して、ＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽細胞の生存率を下げる効果を殆ど持たない。神経毒素１−メチル−４−フェニルピリジニウム（ＭＰＰ＋、１００μＭ）は、実質的に全ての細胞死を促進した。ＢＤＮＦ及びＢＤ２−４（化合物４）は、ＭＰＰ＋の細胞死誘発活性を同程度阻害した（即ち細胞死から保護した）。Ｋ２５２ａは、ＢＤＮＦ及びＢＤ２−４の保護効果を阻害し（グラフ右方の２本の棒）、この保護効果がＴｒｋＢの活性化を介することを示す。平均値±ＳＥを示す。一元配置ＡＮＯＶＡ（分散分析）により、薬剤条件間で有意の効果があることが示された（Ｆ＝６４８．２，Ｐ<０．０００１）．＊＊＊；ＭＰＰ＋に対しＰ<０．００１、＃；ＣＭに対しＰ<０．００１．
【図８】ＢＤＮＦ及びＢＤＮＦ模倣化合物が、Ｅ１６−１７海馬神経細胞のＡβ誘発性神経変性を防ぐことを示す棒グラフである。培養液（ＣＭ）中の神経細胞生存率及び１０μＭ ＡβＳｃｒａｍｂｌｅｄオリゴマー添加による神経細胞生存率はグラフの左側の２本の棒により陽性対照として示されている。細胞を、各棒の下に示したように、１０μＭ  Ａβ１−４２単独；又はＮＧＦとＬＭ１１Ａ−３１の一つの組合せである、ＮＧＦ（１００ｎｇ／ｍＬ）とＮＧＦ模倣化合物ＬＭ１１Ａ−３１（１００ｎＭ）との組合せ；化合物４（ＢＤ２−４，５００ｎＭ）との組合せ；化合物２４（ＢＤ２−２４，５００ｎＭ）との組合せ；又は２０又は１００ｎｇ／ｍＬのＢＤＮＦとの組合せで処理した。対照ＡβＳｃｒａｍｂｌｅｄオリゴマー添加では効果がないが、Ａβ１−４２オリゴマーの添加により神経細胞の生存率は約４０％低下するという結果になった。ＢＤＮＦ模倣化合物ＢＤ２−４及びＢＤ２−２４は、Ａβ―誘発性神経変性を阻害する上でＢＤＮＦと同程度有効であった。平均値±ＳＥを示し、またＣＭベースラインの生存率に対して＊＊＊はｐ<０．００１であった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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