(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0005565841.tif 000020
［式中：
ｎは、０、１、又は２であり；
Ｒ１とＲ２は、水素、飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル又はＣ３−１２シクロアルキル、及び置換又は未置換のフェニル又はベンジルより独立して選択され；
Ｒ３は、水素であり；
Ｒ４は、置換又は未置換のＣ６−Ｃ１０アリール又はＣ１−Ｃ９ヘテロアリール（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）；又は、置換又は未置換の単環系又は二環系Ｃ３−１２シクロアルキル又はＣ１−Ｃ９ヘテロシクリル（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）である］の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ１とＲ２が、水素、Ｃ１−４アルキル、及びＣ３−４シクロアルキルより独立して選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１とＲ２が、水素及びＣ１−４アルキルより独立して選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１とＲ２が、水素及びメチルより独立して選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がＨである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４が置換又は未置換フェニルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
ｎが０である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
【化２】
0005565841.tif 000021
６−（メチルカルバモイル）−４−［（４−メチルフェニル）アミノ］キノリン−３−カルボン酸；
【化３】
0005565841.tif 000022
４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸である、請求項１に記載の化合物又はこれらの医薬的に許容される塩。
【請求項９】
療法に使用の、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれかに記載の化合物又はその医薬的に許容される塩の治療有効量と少なくとも１つの医薬的に許容される賦形剤を含んでなる医薬組成物。
【請求項１１】
少なくとも１つのさらなる医薬活性化合物を含んでなる、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
さらなる医薬活性化合物が抗腫瘍活性を有する、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、黄斑浮腫、及び乾癬より選択される障害の治療に使用の、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩の、癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、黄斑浮腫、及び乾癬より選択される障害の治療用医薬品の製造のための使用。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、キノリン誘導体に、そして療法におけるその使用に関する。より特別には、本発明は、癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、黄斑浮腫、及び乾癬の治療のためのキノリン誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
血管新生は、既存の血管からの新たな毛細管の伸出であり、胚発生、器官形成、組織再生、及び再構築に不可欠である［Folkman, J. & Shing, Y. (1992) J. Biol. Chem. 267, 10931-10934］。それはまた、腫瘍の成長及び転移、心臓血管系疾患、糖尿病性網膜障害、慢性関節リウマチ、及び乾癬が含まれる多様な病理学的状態の発症及び進行に貢献する［Folkman, J. (1995) Nat. Med. 1, 27-312］。血管新生と脈管形成は、内皮細胞の増殖、遊走、及び分化、細胞外マトリックスの分解、管形成、及び新たな毛細枝の出芽が含まれる複雑な多工程プロセスである［Hanahan, D. & Folkman, J. (1996) Cell 86, 353-364; Risau, W. (1997) Nature (London) 386, 671-674］。血管新生プロセスの複雑性は、一過的にスイッチをオン・オフすることが可能である、多数の制御部分がこの系に存在することを示唆する。組織中の血管新生表現型のスイッチは、血管新生の刺激因子と阻害剤の間の均衡の局所的な変化に依存すると考えられている［Folkman, J. (1995) N. Engl. J. Med. 333, 1757-1763］。
【０００３】
記載されている多くの血管新生因子の中で、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）／血管透過性亢進因子は、血管内皮細胞への顕著な特異性がある、最もよく特性決定された陽性調節因子の１つである［Senger, D. R., Galli, S. J., Dvorak, A. M., Perruzzi, C. A., Harvey, V. S. & Dvorak. H. F. (1983) Science 219, 983-985; Ferrara, N. & Henzel, W. J. (1989) Biochem. Biophys. Res. Commun. 161,851-858; Gospodarowicz, D., Abraham, J. A. & Schilling, J. (1989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86, 7311-7315］。ＶＥＧＦの生体作用には、内皮細胞の増殖、遊走、分化の刺激、管形成、血管透過性の増加、及び血管完全性の維持が含まれる［Mustonen, T. & Alitalo, K. (1995) J. Cell Biol. 129, 895-898; Ferrara, N. & Davis-Smyth, T. (1997) Endocr. Rev. 18, 4-25; Thomas, K. (1996) J. Biol. Chem. 271, 603-606; Risau, W. (1997) Nature (London) 386, 671-674; Breier, G. & Risau, W. (1997) Trends Cell Biol. 6, 454-456］。ＶＥＧＦによって誘導される血管新生応答は、内皮系統の血管細胞上で主に発現されているチロシンキナーゼ受容体によって媒介される［Mustonen, T. & Alitalo, K. (1995) J. Cell Biol. 129, 895-898; De Vries, C., Escobedo, J. A., Ueno, H., Huck, K., Ferrara, N. & Williams, L. T. (1992) Science 255, 989-99; Terman, B. I., Dougher-Vermazen, M., Carrion, M. E., Dimitrov, D., Armellino, D. C., Gospodorawicz, D. & Bohlen, P. (1992) Biochem. Biophys. Res. Commun.187, 1579-1586］。
【０００４】
活性化された内皮細胞の活性化、生存、標的指向、及び遊走の基本的な工程である、内皮細胞膜（ＥＣＭ）への細胞接着の阻害は、抗血管新生のために最も有望な標的機序の１つであろう。これらの機序には、ＶＥＧＦが関与するだけでなく、これらの相互作用の多くは、多機能細胞接着受容体のファミリーであるインテグリンによっても媒介される。インテグリンファミリーのメンバーは、細胞−細胞、細胞−細胞外マトリックス、及び細胞−病原体の相互作用に媒介する非共有結合性のα／βヘテロ二量体である。今日までに、１９種の異なるインテグリンαサブユニットと８種の異なるβサブユニットが知られていて、これらは、組み合わされて、リガンド特異性が異なる少なくとも２５種の異なるα／βヘテロ二量体を形成する。多くのインテグリンの細胞外ドメインのリガンドは、細胞外マトリックスのタンパク質であり、インテグリンの細胞内ドメインは、キナーゼのような細胞内成分や細胞骨格へ直接的又は間接的に連結している。インテグリンは、二方向性のシグナル伝達受容体として役立ち、それによりタンパク質の活性と遺伝子発現は、その細胞外ドメインへのリガンド結合に応じてインテグリンによって変化される（これは、表返しの（outside-in）シグナル伝達とも呼ばれる）。一方、インテグリンの親和性は、インテグリンの細胞外ドメインへのタンパク質の結合のような、細胞内の変化に応じて調整される（これは、裏返しの（inside-out）シグナル伝達と呼ばれる）［Humphries (2000) Biochem Soc Trans. 28, 311; Hynes (2002) Cell, 110, 673］。
【０００５】
活性化内皮細胞に対するインテグリンパターンに関するいくつかの研究、血管新生動物モデルにおいて抗体、ペプチド、及び低分子を用いたマウス遺伝子ノックアウト及び阻害の研究は、血管新生の必須工程に関与するインテグリンとＥＣＭタンパク質についての情報を提供してきた［Brooks (1994) Science, 264, 569; Brooks (1996) Eur J Cancer, 32A, 2423; Mousa (2002), Curr Opin Chem Biol, 6, 534; Hynes (2002) Nature Medicine, 8, 918; Kim (2000) Am J Pathol, 156, 1345］。この研究より、フィブロネクチン受容体のα−ｖ−β−３、α−ｖ−β−５、及びフィブロネクチン受容体のα５β１が血管新生に必須の役割を担うと思われた。ヒト腫瘍の血管ではα５β１発現が有意にアップレギュレートされていて、増殖因子での刺激後、そしてひとたび発現されたならば、α−５−β−１は、内皮細胞の生存及び遊走を in vitro 及び in vivo で調節する。
【発明の概要】
【０００６】
本発明者が実施した実験によれば、フィブロネクチン受容体、α−５−β−１の阻害だけが、血管新生におけるその仮説の役割と完全に一致している生物学的データをこれまでもたらしてきた。故に、どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、α−５−β−１は、抗血管新生薬の開発に好ましい標的である可能性があり、必然的に、腫瘍、眼、及び炎症プロセスにおける新血管形成の治療に対して大きな療法ポテンシャルを有する可能性があると考えられる。
【０００７】
今回、本発明者は、ある種の側鎖パターンを有する新規キノリン誘導体がインテグリンと、潜在的にはチロシンキナーゼ、特にフィブロネクチン受容体、α−５−β−１を効果的に遮断することが可能であることを見出した。
【０００８】
この分野の同様の類似体と比較すると、本発明の化合物は、改善された溶解特性も有する。
従って、１つの側面によれば、本発明は、式（Ｉ）：
【０００９】
【化１】
0005565841.tif 000002
【００１０】
［式中：
ｎは、０、１、又は２であり；
Ｒ１とＲ２は、水素、飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル又はＣ３−１２シクロアルキル；及び置換又は未置換のフェニル又はベンジルより独立して選択され；
Ｒ３は、水素、又は飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル又はＣ３−１２シクロアルキルであり；
Ｒ４は、置換又は未置換のＣ６−Ｃ１０アリール又はＣ１−Ｃ９ヘテロアリール（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）；又は、置換又は未置換の単環系又は二環系Ｃ３−１２シクロアルキル又はＣ１−Ｃ９ヘテロシクリル（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）である］の化合物、並びにその医薬的に許容される塩に関する。
【００１１】
さらなる側面によれば、本発明は、療法に使用の、上記に定義されるような式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩に関する。
さらなる側面によれば、本発明は、癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、慢性炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、腫瘍成長、及び黄斑浮腫のような疾患の治療に使用の、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩に関する。
【００１２】
なおさらなる側面によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩の、癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、慢性炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、腫瘍成長、及び黄斑浮腫のような疾患の治療用医薬品を製造することへの使用に関する。
【００１３】
別の側面によれば、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその医薬的に許容される塩の治療有効量をそのような治療を必要とする哺乳動物へ投与することによる、癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、慢性炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、腫瘍成長、及び黄斑浮腫より選択される障害の治療の方法を提供する。
【００１４】
本発明のさらなる側面及び態様は、特許請求項において定義される通りである。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は、標識α−５−β−１受容体（上）及びα−ｖ−β−３（下）とフィブロネクチン由来のペプチドより入手したＳＨＧシグナルの時間の関数としてのプロットであり、この受容体のコンホメーション変化を示す。
【図２】図２は、本発明の化合物の存在下での標識α−５−β−１受容体（上）及びα−ｖ−β−３（下）とフィブロネクチン由来のペプチドより入手したＳＨＧシグナルの時間の関数としてのプロットであり、本発明の化合物によるα−５−β−１受容体の阻害（コンホメーション変化の欠落）と、α−ｖ−β−３の非阻害（コンホメーション変化）を示す。
【図３】図３は、皮下移植肺癌細胞を受けたマウスの、本発明の化合物の経口及び静脈内（２５ｍｇ／ｋｇ／日）投与による療法の日数を関数とする、担体のみの投与と比較した腫瘍体積（ｍｌ）のプロットである。
【図４】図４は、本発明の化合物を５０ｍｇ／ｋｇで経口投与したマウスにおける、レーザー誘発脈絡膜新血管形成（ＣＮＶ）の阻害を表す棒グラフである。
【図５】図５は、レーザー誘発ＣＮＶマウスモデルにおける網膜上皮の画像である：ほとんど円形の領域は、破壊された網膜色素上皮（ＲＰＥ）及びブルッフ膜（ＢＭ）である。白い領域は、血管のレーザースポット中への内方成長を示す。左側は、新血管の塊状の内方成長がある対照網膜であり、右側は、本発明の化合物での処置後に、ごくわずかな血管の内方成長（周縁部のみ）がある網膜である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、黄斑浮腫、及び乾癬、等のような疾患及び状態を哺乳動物において治療するために利用し得る、キノリン−３−カルボン酸誘導体とそのエステルに関する。
【００１７】
本発明の化合物の製造は、十分当業者の能力内にある。１例として、本発明のキノリン−３−カルボン酸エステルは４工程手順で生成し得て、ここでは、はじめに好適なアニリン誘導体を好適なモノ若しくはジエチルエステルと反応させ、生成した中間体を環化させてキノリン−４−オール誘導体を得てから、これを対応するハロゲン誘導体へ変換して、最後に、好適なアミンと反応させて、キノリン−３−カルボン酸エステルを生成する。次いで、このキノリン−３−カルボン酸エステルを加水分解して、対応する酸を得ることができる。この合成全体を反応スキーム１に図解する。
【００１８】
反応スキーム１
【００１９】
【化２】
0005565841.tif 000003
【００２０】
上記の反応系列に関して言えば、好適な反応成分並びに反応条件を選択することは、十分に当業者の能力内にある。
本発明の化合物を製造するのに有用な別の合成法を反応スキーム２に図解する。この場合、合成は、ｐ−ブロモアニリンより始めて、最終工程でアミド基を導入する。
【００２１】
反応スキーム２
【００２２】
【化３】
0005565841.tif 000004
【００２３】
要約すると、本発明の化合物へ行き着くには、基：Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４を導入する順序においていくつかの方法があり、そのいずれも当業者によく知られている。
本明細書に利用する「アルキル」という用語は、単独で、又は別の基の一部として、直鎖において１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０の炭素を含有する、非環式の直鎖又は分岐鎖残基、即ち、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルを意味する。アルキル基は、好ましくは、直鎖に１、２、３、又は４の炭素を含有して、それはまた、１、２、又は３のハロゲン基で置換されてよく、該基は、それぞれの可変基（variable）に関して定義されるように、どの利用可能な点で同じであっても異なっていてもよい。そのような置換アルキル基が存在するとき、好ましいハロゲンは、−ＣＦ３、−ＣＨＦ２、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦＣＨ２Ｆ、等におけるように、フッ素である。
【００２４】
他に示さなければ、別の基の一部として本明細書に利用される「低級アルキル」という用語には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、又はイソブチルのような、１、２、３、又は４の炭素を含有する、飽和又は不飽和で、直鎖及び分岐鎖の炭化炭素がともに含まれる。
【００２５】
本明細書において上記に注記するように、考慮されるアルキル基は、不飽和（アルケニル又はアルキニル）ヒドロカービル残基であってよい。
本明細書においてそれ自体で、又は別の基の一部として使用される「アルケニル」という用語は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含有する、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０の炭素の直鎖又は分岐鎖残基を意味する。好ましくは、直鎖のビニル、２−プロペニル、３−ブテニル、２−ブテニル、４−ペンテニル、３−ペンテニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、４−ヘプテニル、３−オクテニル、３−ノネニル、４−デセニル、３−ウンデセニル、４−ドデセニル、等にあるように、１つの炭素−炭素二重結合が存在する。アルケニル基は、好ましくは、その直鎖に２、３、又は４の炭素を含有する。アルケニル基の直鎖又は分岐鎖部分は、１、２、又は３のハロゲンによって置換されていてもよく、該ハロゲンは、同じでも異なっていてもよく、好ましいハロゲンは、フッ素である。
【００２６】
本明細書においてそれ自体で、又は別の基の一部として使用される「アルキニル」という用語は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有する、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０の炭素の直鎖又は分岐鎖残基を意味する。好ましくは、２−プロピニル、３−ブチニル、２−ブチニル、４−ペンチニル、３−ペンチニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、２−ヘプチニル、３−ヘプチニル、４−ヘプチニル、３−オクチニル、３−ノニニル、４−デシニル、等のような直鎖に、１つの炭素−炭素三重結合が存在する。アルキニル基は、好ましくは、その直鎖に１、２、３、又は４の炭素を含有する。アルキニル基の直鎖部分は、１、２、又は３のハロゲン基によって置換されていてもよく、該ハロゲンは、同じでも異なっていてもよく、好ましいハロゲンは、フッ素である。
【００２７】
本明細書に単独で、又は別の基の一部として利用する「シクロアルキル」という用語には、１つの環と全部で３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２の炭素、好ましくは３又は４の炭素を含有して、環を形成する、飽和の環式ヒドロカービル基、又は一部不飽和の（１又は２の二重結合を含有する）環式ヒドロカービル基が含まれ、これには、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、等が含まれる。環式ヒドロカービルは、単環系、二環系、又は三環系でよい。シクロアルキル基は、同じでも異なっていてもよい、１、２、又は３のハロゲンによって置換されていてもよく、好ましいハロゲンは、フッ素である。
【００２８】
本明細書に使用するように、そして他に特定されなければ、「ヘテロシクリル」という用語は、アジリジニル、アゼチジニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロピリジル、ジヒドロピロリル、ジオキソラニル、ジオキサニル、ジチアニル、ジチオラニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、モルホリニル、オキサタニル、オキシラニル、ピロリジニル、ピロリジノニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリジニル、キヌクリジニル、スルファロニル、３−スルホレニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジル、チエタニル、チイラニル、チオラニル、チオモルホリニル、トリチアニル、トロパニル、単糖、等のように、好ましくはＮ、Ｏ、及びＳより選択される１以上のヘテロ原子（複数）を含有する非芳香族の環式基を意味する。
【００２９】
「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を意味する。
本明細書に使用するように、「アリール」という用語は、フェニル又はナフチルのような芳香族基、等を意味する。
【００３０】
本明細書に使用するように、「ヘテロアリール」という用語は、ピリジル、キノリニル、フラニル、チエニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、イソキノリニル、ナフチリジニル、イミダゾリル、フェナジニル、フェノチアジニル、フタラジニル、インドリル、ピリダジニル、キナゾリニル、キノリジニル、キノキサリニル、テトラヒドロイソキノリニル、ピラジニル、インダゾリル、インドリニル、ピリミジニル、チオフェネチル、ピラニル、カルバゾリル、クロマニル、シンノリニル、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾジオキサニル、ベンゾジオキセピニル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾベンゾオキサジアゾリル、ベンゾオキサジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾモルホリニル、ベンゾセレナジアゾリル、ベンゾチエニル、プリニル、プテリジニル、等のような、好ましくはＮ、Ｏ、及びＳより選択される１以上のヘテロ原子（複数）を含有する、単環系、二環系、又は三環系の複素芳香族基を意味する。
【００３１】
本明細書に使用するように、そして他に特定されなければ、「置換（された）」という用語は、その実体が、飽和又は不飽和で、分岐鎖、非分岐鎖、又は環式の低級アルキル、ヒドロキシル、アミン、スルフィド、シリル、ハロゲン、ニトリル、カルボン酸、スルホン酸、低級アルコキシ、低級アルキル二級若しくは三級アミン、低級アルキルアミド、低級アルキルエーテル、低級アルキルケトン、低級アルキルスルフィド、低級アルキルカルボン酸エステル、低級アルキルスルホン酸エステル、低級アルキルスルホン、低級アルキルスルホキシド、低級アルキルスルホンアミド、低級アルキルアルコール、低級アルキルアセチル、低級ジアルキルジスルフィド、等より選択される少なくとも１つの部分で置換されていることを意味する。
【００３２】
このように、第一の側面により、本発明は、式（Ｉ）：
【００３３】
【化４】
0005565841.tif 000005
【００３４】
［式中：
ｎは、０、１、又は２であり；好ましくは、ｎは、０又は１であり、より好ましくは、ｎは、０であり；
Ｒ１とＲ２は、水素、飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル又はＣ３−１２シクロアルキル；及び置換又は未置換のフェニル又はベンジルより独立して選択され；
Ｒ３は、水素、又は飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル又はＣ３−１２シクロアルキルであり；
Ｒ４は、置換又は未置換のＣ６−Ｃ１０アリール又はＣ１−Ｃ９ヘテロアリール（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）；又は、置換又は未置換の単環系又は二環系Ｃ３−１２シクロアルキル又はＣ１−Ｃ９ヘテロシクリル（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）である］の化合物、並びにその医薬的に許容される塩に関する。
【００３５】
本発明の１つの態様において、Ｒ１とＲ２は、水素と飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル又はＣ３−１２シクロアルキルより、例えば、水素と飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−６アルキル又はＣ３−６シクロアルキル、例えば、Ｃ１−４アルキル及びＣ３−４シクロアルキル、特に、飽和のＣ１−４アルキル及びＣ３−４シクロアルキルより独立して選択される。例えば、Ｒ１とＲ２は、水素と飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−４アルキル、特に、水素と飽和Ｃ１−４アルキル、例えば、水素、メチル、エチル、及びプロピル、特に、水素とメチルよりのように、水素と飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−６アルキルより独立して選択されてよい。
【００３６】
１つの態様において、Ｒ１とＲ２の少なくとも１つは水素でない。１つの態様において、Ｒ１は水素であって、Ｒ２は水素でない。
式（Ｉ）の化合物において、Ｒ３は、水素、又は飽和又は不飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル、例えば、Ｃ１−６アルキル、又はＣ１−４アルキル；又はＣ３−１２シクロアルキル、例えば、Ｃ３−６シクロアルキル又はＣ３−４シクロアルキルである。
【００３７】
１つの態様において、Ｒ３は、水素、又は飽和で分岐鎖又は非分岐鎖のＣ１−１０アルキル、例えば、Ｃ１−６アルキル、又はＣ１−４アルキル；又はＣ３−１２シクロアルキル、例えば、Ｃ３−６シクロアルキル又はＣ３−４シクロアルキルである。
【００３８】
好ましくは、Ｒ３は、水素、又は好ましくは飽和Ｃ１−６アルキル、特に、水素、又は好ましくは飽和Ｃ１−４アルキルである。
１つの特別な態様において、Ｒ３は、水素である。別の特別な態様において、Ｒ３は、水素でない。
【００３９】
本発明の式（Ｉ）の化合物において、Ｒ４は、置換又は未置換のＣ６−Ｃ１０アリール又はＣ１−Ｃ９ヘテロアリール（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）；又は置換又は未置換の単環系又は二環系Ｃ３−１２シクロアルキル又はＣ１−Ｃ９ヘテロシクリル（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）である。１つの態様において、Ｒ４は、置換又は未置換のＣ６−Ｃ１０アリール又はＣ１−Ｃ９ヘテロアリール（ここでヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、及びＳより独立して選択される）であり；特にＲ４は、置換又は未置換のＣ６−Ｃ１０アリール、例えば、置換又は未置換のフェニルである。
【００４０】
このように、１つの態様において、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ’）：
【００４１】
【化５】
0005565841.tif 000006
【００４２】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びｎは、上記に定義される通りであり、ｍは、０〜５、例えば、１〜３、又は１〜２、特に１であり；そしてＲ５は、上記に定義されるような置換基であり、好ましくは、好ましくは飽和Ｃ１−Ｃ６アルキル及びＣ１−Ｃ６アルコキシ、より好ましくはＣ１−Ｃ４アルキル及びＣ１−Ｃ４アルコキシ、例えば、メチル、エチル、メトキシ、及びエトキシのようなＣ１−Ｃ３アルキル及びＣ１−Ｃ３アルコキシ、例えば、メチル及びメトキシより選択される］によって表すことができる。
【００４３】
１つの態様では、式（Ｉ’）の化合物において、ｍは、０又は１、例えば１である。
１つの特別な態様では、式（Ｉ’）の化合物において、ｍは１であり、Ｒ５は、パラ位にあって、即ち、本発明の化合物は、式（Ｉ”）
【００４４】
【化６】
0005565841.tif 000007
【００４５】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５、及びｎは、上記に定義される通りである］によって表すことができる。
１つの態様において、本化合物は、６−（メチルカルバモイル）−４−［（４−メチルフェニル）アミノ］キノリン−３−カルボン酸；６−（メチルカルバモイル）−４−［（４−メチルフェニル）アミノ］キノリン−３−カルボン酸エチル；４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸エチル；４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸ブチル；４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸メチル；及び４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸、又はこれらの医薬的に許容される塩より選択される。
【００４６】
反対のことが示されなければ、又は文脈より明らかでなければ、本明細書における式（Ｉ）の化合物へのどの言及にも、式（Ｉ’）又は（Ｉ”）の化合物へ言及することが企図されて、これらはともに式（Ｉ）の範囲内に含まれる態様である。
【００４７】
本発明の化合物は、塩として提示し得て、これらも本発明の範囲内にある。医薬的に許容される（即ち、無毒の生理学的に許容される）塩が好ましい。
例えば、本発明の化合物は、例えば、アミノ官能基で、酸付加塩を形成することができる。これらは、例えば、鉱酸、例えば、硫酸、リン酸、又はハロゲン化水素酸のような強い無機酸；未置換であるか又は、例えば、ハロゲンによって置換されている１〜４の炭素原子のアルカンカルボン酸、例えば、酢酸、飽和又は不飽和ジカルボン酸、例えば、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、フタル酸又はテレフタル酸、ヒドロキシカルボン酸、例えば、アスコルビン酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、又はクエン酸、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸又はグルタミン酸、又はリジン又はアルギニン）、又は安息香酸のような強い有機カルボン酸とともに；又は、未置換であるか又は、例えば、ハロゲンによって置換されている（Ｃ１−Ｃ４）アルキル又はアリールスルホン酸、例えば、メチル又はｐ−トルエン−スルホン酸のような有機スルホン酸とともに生成されてよい。所望されるならば、追加的に存在する塩基性の中心を有する、対応する酸付加塩も生成することができる。
【００４８】
少なくとも１つの酸基（例えば、ＣＯＯＨ）を有する式Ｉの化合物も、塩基とともに塩を生成することができる。塩基との好適な塩は、例えば、アルカリ金属又はアルカリ土類金属塩、例えば、ナトリウム、カリウム、又はマグネシウム塩のような金属塩、又はアンモニアとの塩、又はモルホリン、チオモルホリン、ピペリジン、ピロリジン、モノ、ジ、又はトリ低級アルキルアミン（例えば、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ジエチル、ジイソプロピル、トリエチル、トリブチル、又はジメチル−プロピルアミン）、又はモノ、ジ、又はトリヒドロキシ低級アルキルアミン（例えば、モノ、ジ、又はトリエタノールアミン）のような有機アミンとの塩である。さらに、対応する内部塩も形成され得る。医薬使用に不適であるが、例えば、式Ｉの遊離化合物又はそれらの医薬的に許容される塩の単離又は精製に利用し得る塩も含まれる。
【００４９】
本発明の治療薬剤の投与には、本発明の薬剤の治療有効量の投与が含まれる。本明細書に使用する「治療有効量」という用語は、本発明の組成物の投与によって治療可能な状態を治療又は予防する治療薬剤の量を意味する。その量は、検出可能な治療又は予防又は改善効果を示すのに十分な量である。その効果には、例えば、本明細書に収載する状態の治療又は予防を含めてよい。被検者にとっての正確な有効量は、その被検者のサイズと全般状態、治療される状態の特質及び程度、治療医の推奨事項、及び投与用に選択される治療薬剤又は治療薬剤の組合せに依存するものである。従って、正確な有効量を前もって正確に特定することは、有用でない。しかしながら、経口投与の場合、投与量は、式（Ｉ）の化合物の約０．０１ｍｇ／日〜約１０００ｍｇ／日、又はその医薬的に許容される塩の対応量を変動するだろう。
【００５０】
本発明による組成物は、どの投与経路（例、経口、静脈内、皮膚又は皮下、経鼻、筋肉内、又は腹腔内）用にも製造することができる。担体又は他の材料の正確な特質は、投与経路に依存するものである。非経口投与では、発熱物質を含まずに、必須のｐＨ、等張性、及び安定性を有する非経口的に許容される水溶液剤を利用する。当業者には、好適な溶液剤を調製することが十分可能であり、数多くの方法が文献に記載されている。
【００５１】
本明細書に記載の医薬的に許容される賦形剤、例えば、運搬体、アジュバント、担体、又は希釈剤は、当業者によく知られていて、誰もが容易に利用可能である。医薬的に許容される担体は、活性化合物に対して化学的に不活性であり、使用の条件下で有害な副作用も毒性も有さないものであり得る。医薬製剤の例は、「レミントン：調剤の科学及び実践（Remington: The Science and Practice of Pharmacy）」A. R. Gennaro, 監修、Lippincott, Williams and Wilkins, 第20版（2000）に見出すことができる。
【００５２】
本発明の化合物のすべての立体異性体が、混合物において、又は純粋又は実質的に純粋な形態のいずれかで考慮される。本発明の化合物は、Ｒ置換基のいずれも含めて、炭素原子のいずれでも不斉中心を有する可能性がある。必然的に、式Ｉの化合物は、鏡像異性体又はジアステレオマーの形態、又はそれらの混合物で存在する可能性がある。その製造法は、出発材料として、ラセミ体、鏡像異性体、又はジアステレオマーを利用することができる。ジアステレオマー又は鏡像異性体の生成物を製造する場合、それらは、例えば、クロマトグラフィー又は分別結晶化である、慣用の方法によって分離することができる。
【００５３】
式（Ｉ）による化合物は、癌、糖尿病性網膜障害、加齢関連黄斑変性、炎症、卒中、虚血性心筋、アテローム性動脈硬化症、黄斑浮腫、及び乾癬のような様々な疾患を治療するのに有用であろう。この治療は、予防的、一時緩和的、又は治癒的であり得る。
【００５４】
本発明の化合物は、過剰増殖疾患の治療に有用な1以上の追加薬物（例えば、細胞増殖抑制剤）と組み合わせて使用又は投与してよい。これらの成分は、同じ製剤中にあっても、同時又は連続投与のために別々の製剤にあってもよい。本発明の化合物はまた、癌の治療のために、放射線のような他の治療法と組み合わせて使用又は投与してよい。上記に示すような使用のための細胞増殖抑制剤の例は、ＤＮＡアルキル化化合物、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ＲＮＡ及びＤＮＡ合成に干渉する化合物、細胞骨格を重合化する化合物、並びに細胞骨格を脱重合化する化合物である。
【００５５】
本発明を以下の非限定的な実施例によって例解する。
【実施例】
【００５６】
実施例１：６−（メチルカルバモイル）−４−［（４−メチルフェニル）アミノ］キノリン−３−カルボン酸エチル
【００５７】
【化７】
0005565841.tif 000008
【００５８】
（ａ）中間化合物：２−［（４−ブロモフェニルアミノ）メチレン］マロン酸ジエチルエステルの製造：
【００５９】
【化８】
0005565841.tif 000009
【００６０】
２０ｍＬマイクロ波バイアルに４−ブロモアニリン（６．８８１ｇ，４０．０ミリモル）、エトキシメチレンマロン酸ジエチル（８．６５０ｇ，４０．０ミリモル）、及びトルエン（５ｍＬ）を入れた。このバイアルに蓋をして、この混合物を１５０℃で３０分間マイクロ波加熱した。冷却後、この溶液を５０ｍＬの激しく撹拌したイソヘキサン上へ注いだ。濃厚な白色の沈殿が生成して、この懸濁液をさらに１５分間撹拌した。この懸濁液を濾過して、生成物を２０ｍＬのイソヘキサンで洗浄した。生成物を真空で乾燥させて、１１．６７８ｇ（８５％）の２−［（４−ブロモ−フェニルアミノ）メチレン］マロン酸ジエチルエステルを得た。MS (ESI+) m/z 342, 344 (MH+)。
【００６１】
（ｂ）中間化合物：６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボン酸エチルエステルの製造：
【００６２】
【化９】
0005565841.tif 000010
【００６３】
２０ｍＬマイクロ波バイアルに２−［（４−ブロモ−フェニルアミノ）メチレン］マロン酸ジエチルエステル（１．７１１ｇ，５．０ミリモル）とＰＯＣｌ３（塩化ホスホリル、１０．０ｍＬ，１６．８ｇ，１０９ミリモル）を入れた。このバイアルに蓋をして、この混合物を１８０℃まで（気圧に注意しながら）５分にわたり段階的にマイクロ波加熱してから、１８０℃で３０分間保った。過剰のＰＯＣｌ３を蒸発させて、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）と２Ｎ  ＮａＯＨ（水溶液）（４０ｍＬ）の間で分配した。水層をＣＨ２Ｃｌ２（２ｘ４０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ２ＣＯ３で乾燥させて、蒸発させた。残渣をカラム（シリカゲル、溶出液としてＣＨ２Ｃｌ２）で精製した。純粋な画分をプールし、蒸発させ、残渣を真空で乾燥させて、０．８２１ｇ（５２％）の６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボン酸エチルエステルを得た。MS (ESI+) m/z 314, 316 (MH+)。
【００６４】
（ｃ）中間化合物：６−ブロモ−４−ｐ−トリル−アミノキノリン−３−カルボン酸エチルエステルの製造：
【００６５】
【化１０】
0005565841.tif 000011
【００６６】
２０ｍＬマイクロ波バイアルに６−ブロモ−４−クロロ−キノリン−３−カルボン酸エチルエステル（０．７８６ｇ，２．５０ミリモル）、ｐ−トルイジン（０．２６８ｇ，２．５０ミリモル）及び乾燥１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）を入れた。このバイアルに蓋をして、この混合物を１５０℃で３０分間マイクロ波加熱した。冷却後、黄色い沈殿が生成していた。この懸濁液を２Ｎ  ＮａＯＨ（水溶液）（１００ｍＬ）上へ注いで、水層をＣＨ２Ｃｌ２（３ｘ８０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせてＨ２Ｏ（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、蒸発させた。残渣をカラム（シリカゲル、イソヘキサン／ＥｔＯＡｃ  １：１）で精製した。純粋な画分を合わせ、蒸発させ、残渣を真空で乾燥させて、０．７４８ｇ（７８％）の６−ブロモ−４−ｐ−トリル−アミノキノリン−３−カルボン酸エチルエステルを得た。MS (ESI+) m/z 385, 387 (MH+)。
【００６７】
（ｄ）２ｍＬマイクロ波バイアルに６−ブロモ−４−ｐ−トリル−アミノキノリン−３−カルボン酸エチルエステル（０．１００ミリモル）、Herrmann パラダサイクル（ｔｒａｎｓ−ジ（μ−アセタート）−ビス［ｏ−（ジｏ−トリルホスフィノ）ベンジル］ジパラジウム（ＩＩ），４．７ｍｇ，０．００５０ミリモル）、［（ｔ−Ｂｕ）３ＰＨ］ＢＦ４（５．９ｍｇ，０．０２０ミリモル）、Ｍｏ（ＣＯ）６（５２．８ｍｇ，０．２０ミリモル）、１．５当量のメチルアミン（ＴＨＦ中２Ｍ）、及び乾燥ＴＨＦ（１．０ｍＬ）を入れた。最後に、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン、０．０４５μＬ，０．３０ミリモル）を加えて、このバイアルにすぐに Teflon セプタムで蓋をして、１３０℃で５分間、マイクロ波で照射した。揮発物質を減圧で除去して、残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、６−（メチルカルバモイル）−４−［（４−メチルフェニル）アミノ］−キノリン−３−カルボン酸エチルを得た。
【００６８】
実施例２：６−メチルカルバモイル−４−ｐ−トリルアミノ−キノリン−３−カルボン酸
【００６９】
【化１１】
0005565841.tif 000012
【００７０】
６−（メチルカルバモイル）−４−［（４−メチルフェニル）アミノ］キノリン−３−カルボン酸エチルを、ＮａＯＨ（水溶液）を使用する塩基性条件下で加水分解した。最終生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【００７１】
実施例３：４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸エチル
【００７２】
【化１２】
0005565841.tif 000013
【００７３】
（ａ）中間化合物：２−［（４−ブロモフェニルアミノ）メチレン］マロン酸ジエチルエステルの製造：
【００７４】
【化１３】
0005565841.tif 000014
【００７５】
４−ブロモアニリン（１０ｇ，０．０５８モル）と１２．５８ｇのジエトキシメチレンマロネート（１当量）を密封管において１５０℃で３時間加熱した。次いで、この反応混合物を冷やしてヘキサンで希釈すると、このとき固体生成物が析出した。この固形物を濾過し、ヘキサンで数回洗浄し、真空で乾燥させて、１７．８ｇ（８９％）の２−［（４−ブロモ−フェニルアミノ）メチレン］マロン酸ジエチルエステルを得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.03 (d, 1H, J = 13 Hz, -NH-), 8.48 (d, 1H, J =13 Hz, -CH=C), 7.49 (m, 2H, 芳香族), 7.10-7.01 (m, 2H, 芳香族), 4.42-4.22 (m, 4H, -CH2-CH3), 1.45-1.26 (m, 6H, -CH2-CH3); LC-MS (m/z) 343.9 (M+1)。
【００７６】
（ｂ）中間化合物：６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボン酸エチルエステルの製造：
【００７７】
【化１４】
0005565841.tif 000015
【００７８】
２−［（４−ブロモフェニルアミノ）メチレン］マロン酸ジエチルエステル（５ｇ）をＰＯＣｌ３（塩化ホスホリル、３１．５ｍＬ）とともに密封管において１５０℃で約６時間加熱した。過剰のＰＯＣｌ３をロータリーエバポレーターによって除去して、粗製の混合物をジクロロメタンで希釈した。このジクロロメタン抽出物を１０％  ＮａＯＨ溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／酢酸エチル  ８０：２０）によって精製して、２．３ｇ（５０％）の６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボン酸エチルエステルを得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.22 (s, 1H, 芳香族), 8.60 (d, 1H, J = 2.1 Hz, 芳香族), 8.04 (d, 1H, J = 9 Hz, 芳香族), 7.95-7.85 (m, 1H, 芳香族), 4.53 (q, 2H, J = 7 Hz, -CH2-), 1.50 (t, 3H, J = 7 Hz, -CH3); LC-MS (m/z) 315.8 (M+1)。
【００７９】
（ｃ）中間化合物：６−ブロモ−４−［（４−メトキシフェニル）−アミノ］キノリン−３−カルボン酸エチルの製造：
【００８０】
【化１５】
0005565841.tif 000016
【００８１】
ｐ−アニシジン（０．４３ｇ）と６−ブロモ−４−クロロキノリン−３−カルボン酸エチルエステル（１ｇ）をジオキサン中に混合して、マイクロ波反応器において１５０℃で３０分間照射した。この反応混合物を石油エーテルで希釈した。入手した固体生成物を濾過して乾燥させて、１．３ｇ（１００％）の６−ブロモ−４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］キノリン−３−カルボン酸エチルを得た。1H NMR ( 300 MHz, CDCl3) δ 11.41 (s, 1H, -NH-), 9.22 (s, 1H, 芳香族), 8.20 (d, 1H, J = 8.2 Hz, 芳香族), 7.77 (d, 1H, J = 8.2 Hz, 芳香族), 7.64 (s, 1H, 芳香族), 7.15 (d, 2H, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.99 (d, 2H, J = 8.1 Hz, 芳香族), 4.47 (q, 2H, J = 7 Hz, -CH2-), 3.89 (s, 3H, -OCH3), 1.47 (t, 3H, J = 7 Hz, -CH3); LC-MS (m/z) 401.0 (M+1)。
【００８２】
（ｄ）ＴＨＦへ６−ブロモ−４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］キノリン−３−カルボン酸エチル（０．２５ｇ，０．６２３ミリモル）に続いて Herrmann パラダサイクル（ｔｒａｎｓ−ジ（μ−アセタート）−ビス［ｏ−（ジｏ−トリルホスフィノ）ベンジル］ジパラジウム（ＩＩ），０．０３１ミリモル）、［（ｔ−Ｂｕ）３ＰＨ］ＢＦ４（テトラフルオロホウ酸ホスホニウムトリ三級ブチル、０．１２５ミリモル）、Ｍｏ（ＣＯ）６（モリブデンヘキサカルボニル、１．２４６ミリモル）、メチルアミン（１．５当量、ＴＨＦ中２Ｎ）、及びＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン、１．８６９ミリモル）を加えた。この反応混合物をマイクロ波反応器において１３０℃で５分間照射した。この反応混合物を濃縮してから、カラム（シリカゲル、ジクロロメタン／メタノール  ９８：２）で精製して、０．２５ｇ（７１％）の４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸エチルを得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.96 (s, 1H, -NH-) 9.24 (s, 1H, 芳香族), 8.14-7.98 (m, 2H, 芳香族), 7.73 (s, 1H, 芳香族), 7.16 (d, 2H, J = 9 Hz, 芳香族), 6.98 (d, 2H, J = 9 Hz, 芳香族), 4.46 (q, 2H, J = 7 Hz, -CH2-), 3.87 (s, 3H, -OCH3), 1.48 (t, 3H, J = 7Hz, -CH3); LC-MS (m/z) 380.0 (M+1)。
【００８３】
実施例４：４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸
【００８４】
【化１６】
0005565841.tif 000017
【００８５】
４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸エチル（０．２ｇ）をＬｉＯＨ（８５．５ｍｇ）とともに６ｍＬのＭｅＯＨ：ＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（２：２：２）において一晩撹拌した。この反応混合物を濃縮して、水層を酢酸エチルで洗浄した。水層を集めて、ＨＣｌ水溶液で酸性化して、生じた沈殿を濾過して乾燥させて、０．１４２ｇ（６０％）の４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）−キノリン−３−カルボン酸を得た。1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.05 (s, 1H, 芳香族), 8.20 (s, 1H, 芳香族), 8.12-7.81 (m, 2H, 芳香族), 7.27 (d, 2H, J = 9.9 Hz, 芳香族), 7.06 (d, 2H, J = 9.9 Hz, 芳香族), 3.88 (s, 1H, -OCH3), 2.82 (s, 3H, -NCH3); LC-MS (m/z) 352.0 (M+1)。
【００８６】
実施例５：４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸ブチル
【００８７】
【化１７】
0005565841.tif 000018
【００８８】
４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）−キノリン−３−カルボン酸（０．１ｇ）のジクロロメタン懸濁液へＥＤＣ．ＨＣｌ（１−エチル−３−（３−ジメチル−アミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、０．１６１ｇ）、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール、０．０４２ｇ）、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン、０．１７ｇ）、及びｎ−ブタノール（２５ｍＬ）を加えて、この反応混合物を室温で３時間撹拌した。水系の後処理の後で、この反応混合物を抽出し、濃縮し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて粗生成物を得て、これを後にカラムクロマトグラフィーによって精製して、０．０５ｇ（収率５５％）の４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸ブチルを得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.84 (s, 1H, -NH-), 9.21 (s, 1H, 芳香族), 8.05 (d, 1H, J = 8.8 Hz, 芳香族), 7.97 (d, 1H, J = 8.8 Hz, 芳香族), 7.80 (s, 1H, 芳香族), 7.16 (d, 2H,J = 8.7 Hz, 芳香族), 6.96 (d, 2H, J = 8.7 Hz, 芳香族), 5.60 (s,1H, -NHCH3-), 4.41 (t, 2H, J = 6.6Hz, -O-CH2-), 3.87 (s, 3H, -OCH3), 2.88 (s, 3H, -NCH3), 1.92-1.75 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-), 1.65-1.46 (m, 2H, -O-CH2-CH2-CH2-), 1.12-0.98 (m, 3H, -CH3); LC-MS (m/z) 407.9 (M+1)。
【００８９】
実施例６：４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸メチル
【００９０】
【化１８】
0005565841.tif 000019
【００９１】
０．１ｇの４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）−キノリン−３−カルボン酸のジクロロメタン懸濁液へＥＤＣ．ＨＣｌ（１−エチル−３−（３−ジメチル−アミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、０．１６１ｇ）、ＨＯＢｔ（Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール、０．０４２ｇ）、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン、０．１７ｇ）、及び２０ｍＬのメタノールを加えて、この反応混合物を室温で３時間撹拌した。水系の後処理の後で、この反応混合物を抽出し、濃縮し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させて粗生成物を得て、これを後にカラムクロマトグラフィーによって精製して、０．０６２ｇ（６０％）の４−［（４−メトキシフェニル）アミノ］−６−（メチルカルバモイル）キノリン−３−カルボン酸メチルを得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 11.51 (s, 1H, -NH-), 9.12 (s, 1H, 芳香族), 8.38-8.15 (m, 2H, 芳香族), 8.10 (s, 1H, 芳香族), 7.23 (d, 2H, J = 9Hz, 芳香族), 7.02 (d, 2H, J = 9 Hz, 芳香族), 4.02 (s, 3H, -OCH3), 3.90 (s, 3H, -OCH3), 2.92 (s, 3H, -NCH3); LC-MS (m/z) 365.9 (M+1)。
【００９２】
生物学的試験
インテグリンアッセイ
本アッセイは、Biodesy（カリフォルニア州バーリンゲーム、アメリカ）によって実施された。大学と市販の供給元より精製インテグリンを入手した。大学の供給元よりα−５−β−１及びα−ｖ−β−３を組換え可溶性タンパク質（細胞外ドメイン）として入手した。
【００９３】
上記３種のタンパク質のそれぞれに対して、インテグリン用に開発された標準標識プロトコールを適用した。すべてのタンパク質を、約４：１の平均標識：タンパク質比で成功裡に標識した。２種の可溶性標識タンパク質（α５β１及びαｖβ３）は、バックグラウンドＳＨＧ（光第二次高調波発生）シグナルを産生した。それらはまた、ＧＲＧＤＳＰ（ＲＧＤ−ペプチド、フィブロネクチン由来ペプチド：Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ）への曝露時に、コンホメーション変化シグナルをもたらした。このペプチドを４００μＭで加えると、シグナル変化は即時的であった（図１）。
【００９４】
次に、実施例４を１００μＭで標識タンパク質とともに２０分間プレインキュベートした。次いで、ＲＧＤペプチド（４００μＭ）を加えてこのタンパク質を刺激して、各化合物について阻害を試験した。
【００９５】
実施例４は、α−５−β−１におけるＲＧＤ誘導性のコンホメーション変化を妨げたので、ＲＧＤ誘導性コンホメーション変化の有効な阻害剤である。一方、α−ｖ−β−３におけるコンホメーション変化は明白であったので、実施例４は、このタンパク質に対しては効果を及ぼさなかった（図２）。
【００９６】
腫瘍異種移植片モデル
雌性６週齢ＳＣＩＤマウスを腫瘍試験に使用した。対数期で増殖しているほぼ１０６個のヒトＣａｌｕ−６肺癌細胞を採取して培地に再懸濁させて、１００ｍｌ容量中の単一細胞溶液を各動物の右脇腹に皮下移植した。１０匹のマウスを処置群に使用して、１０匹のマウスを対照群に使用した。腫瘍が３００ｍｍ３のサイズに達したときに、１００μｌの担体又は活性物質（２５ｍｇ／ｋｇ／日）のいずれかでの経口投与又は静脈内注射による全身処置を開始して、１日１回で全１７日間続けた。移植後５〜１０日目には、目視できる腫瘍が存在した。指定日に、デジタルカリパスで一次腫瘍を測定した。既報の公式：長さｘ幅２ｘ０．５２に従って腫瘍体積を計算した。実施例４をマウスへ投与（静脈内及び経口投与、２５ｍｇ／ｋｇ／日）すると、本化合物のこの動物モデルにおける有効性の確信的な結果を示した（図３）。経口処置では５２％、そして静脈内処置では７１％の腫瘍体積の阻害があり、本発明のこの化合物は、大きな抗腫瘍効果を有する。本発明のこの化合物はまた、両群において血管新生を有意に阻害する。
【００９７】
レーザー誘発性マウス眼モデル
このモデルにおいて、実施例４は、単独で、５０ｍｇ／ｋｇ／日で経口投与したときに、眼におけるＣＮＶ（脈絡膜新血管形成）増殖を対照と比較して４２％で有意に阻害した（図４及び図５）。このＣＮＶのレーザー誘発性モデルは、高齢者の失明の主因である加齢関連黄斑変性（ＡＭＤ）の滲出型において生じるＣＮＶの多くの特徴を模倣するきわめて再現可能なモデルである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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