(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
リファブチン、クラリスロマイシン、クロファジミン、ポリエチレングリコールおよび薬理学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物であって、経口投与のための固体剤形であり、ポリエチレングリコールは、（ｉ）５０００〜１２０００ダルトンの平均分子量を有し、かつ、（ｉｉ）クロファジミンの量に対して３００〜７００重量％であり、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して１０〜１５重量％、およびリファブチンの量に対して２０〜２５重量％である、医薬組成物。
【請求項２】
前記リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンが、９±０．５：１９±０．５：２±０．５の重量比で存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ポリエチレングリコールが、７０００〜９０００ダルトンの平均分子量である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
セルロース、ステアリン酸Ｍｇ、ポリソルベート８０、またはこれらの組み合わせをさらに含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
リファブチン、クラリスロマイシン、クロファジミン、ポリエチレングリコールおよび薬理学的に許容されるキャリアを配合することを含む、請求項１に記載の医薬組成物を製造する方法であって、ポリエチレングリコールは、（ｉ）５０００〜１２０００ダルトンの平均分子量を有し、かつ、（ｉｉ）クロファジミンの量に対して３００〜７００重量％であり、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して１０〜１５重量％、およびリファブチンの量に対して２０〜２５重量％である、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００８年２月８日出願の米国特許仮出願第６１／０６５１４４号の優先権を主張するものであり、その内容は参照することで本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、典型的には、下痢、筋痙攣、腹部痛、体重減少および直腸出血、疲労、貧血、瘻孔、穿孔、腸閉塞、ならびに頻繁な外科的処置の必要性を特徴とする、病因が未知の障害である。これには、クローン病、潰瘍性大腸炎、非定型大腸炎（indeterminate colitis）、顕微鏡的大腸炎、およびコラーゲン形成大腸炎を含む数多くの障害が包含される。このような障害は、時には、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）に類似する、臨床的により良性またはより軽度の症状で開始することがあり、これが、続いてＩＢＳに伴う炎症の増大へと進行し、最終的には末期のＩＢＤを発症する場合がある。ＩＢＤおよびＩＢＳの正確な原因は依然として分かっていない。しかし、マイコバクテリウム・アヴィウム・亜種パラチュバキュローシス（Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis）（ＭＡＰ）、ならびに恐らくはその様々な系および亜系が、種々の異なる疾患に関与しており、クローン病患者の大部分において感染の役割を果たしている可能性があり、上記で挙げたその他の炎症性腸障害と共に存在している場合があることを示す基本的な証拠(evidence base)が急速に得られつつある。
【０００３】
従って、ＭＡＰ感染ＩＢＤ、および特にクローン病の効果的な治療が求められていた。Ｂｏｒｏｄｙによる特許文献１（「Ｂｏｒｏｄｙ」）には、マクロライドクラリスロマイシンおよびクロファジミンと組み合わせたリファブチンを用いることによるＩＢＤの治療が記載されている。これらは、同時に経口摂取されるように処方されたが、別々の錠剤およびカプセルとしてであった。このカプセルおよび錠剤を同時に摂取することは、これらの医薬の望ましくない相互作用を引き起こすことが見出され、それにはクラリスロマイシンを抑えることによる血清中リファブチンの著しい増加が含まれ、そのクラリスロマイシンの血清中濃度は、その後の薬物動態学的研究により、推奨される経口薬物用量の場合であっても最適以下であることが見出されており、耐性が発生する恐れがある（非特許文献１）。逆に、これが作り出した状況は、例えば白血球減少症またはぶどう膜炎の誘発に近い可能性がある有害作用範囲の境界である血中薬物レベルを何人かの患者が有するというものであった。さらに、別々の薬物によるクロファジミンのレベルは、平衡に到達するのが遅かった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許第６，２７７，８６３号
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Hafrier, R., et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1998, 42, 631-639
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述の望ましくない相互作用およびＢｏｒｏｄｙの所望されない結果を考慮すると、これらの欠点に対処するための改良された製剤が求められていた。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
１つの局面では、本開示は、リファブチン、クラリスロマイシン、クロファジミン、および薬理学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物を提供し、ここで、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して１０〜１５重量％、およびリファブチンの量に対して２０〜２５重量％である。
【０００８】
１つの態様では、本開示は、患者において、クラリスロマイシンによって引き起こされるリファブチンの低下した代謝を上昇させる方法を提供し、この方法は、リファブチンおよびクラリスロマイシンと共にクロファジミンをこの患者へ共投与することを含み、ここで、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して６〜１８重量％である。
【０００９】
さらに、患者において、リファブチンによって引き起こされるクラリスロマイシンの上昇した代謝を低下させる方法も提供され、この方法は、リファブチンおよびクラリスロマイシンと共にクロファジミンをこの患者へ共投与することを含み、ここで、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して６〜１８重量％である。
【００１０】
ある態様において、本開示は、マイコバクテリウム・パラチュバキュローシス（Mycobacterium paratuberculosis）感染に罹患しているか、または罹患しやすい患者を治療する方法を提供し、この方法は、９±０．５：１９±０．５：２±０．５の重量比のリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンを単一剤形でこの患者へ共投与することを含む。
【００１１】
さらに、患者におけるマイコバクテリウム・パラチュバキュローシス感染の発生を抑制する方法も意図しており、この方法は、それを必要とする患者に対して、（ｉ）２２５ｍｇ±２ｍｇリファブチン、（ｉｉ）４７５ｍｇ±２ｍｇクラリスロマイシン、および（ｉｉｉ）５０ｍｇ±１ｍｇクロファジミンを、１日１回、同時に共投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
以下の図は、本組成物および本方法の例示的な局面を示すものであり、いかなる形でも制限することを意図するものではない。
【００１３】
【図１ａ】図１ａは、それぞれ直線および片対数プロットにより、クラリスロマイシン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図１ｂ】図１ｂは、それぞれ直線および片対数プロットにより、クラリスロマイシン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図２ａ】図２ａは、それぞれ直線および片対数プロットにより、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図２ｂ】図２ｂは、それぞれ直線および片対数プロットにより、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図３ａ】図３ａは、それぞれ直線および片対数プロットにより、リファブチン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図３ｂ】図３ｂは、それぞれ直線および片対数プロットにより、リファブチン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図４ａ】図４ａは、それぞれ直線および片対数プロットにより、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図４ｂ】図４ｂは、それぞれ直線および片対数プロットにより、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図５ａ】図５ａは、それぞれ直線および片対数プロットにより、クロファジミン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【図５ｂ】図５ｂは、それぞれ直線および片対数プロットにより、クロファジミン平均血漿中濃度−時間プロファイルを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
１．  組成物
本説明は、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンを含む組成物、ならびにこれを用いる方法を提供する。この組成物のリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンは、改良された薬物動態特性が得られる比率で提供される。本組成物は、既存製剤の投与からもたらされる、潜在的に有害であるリファブチン血清中濃度の上昇を低減する。既存製剤とは対照的に、本組成物は、さらに、患者の血中薬物レベルを有害作用範囲よりも十分に低く、例えば白血球減少症またはぶどう膜炎と関連する範囲よりも低く維持するという利点も提供する。さらに、本組成物は、既存製剤と比較してクラリスロマイシンの血清中濃度をより高いレベルにも維持し、それによって、耐性の発生が抑制される。さらに、本組成物により、患者の血清中クロファジミン最小効果レベルへこれまでの製剤よりも速く到達することが可能となる。
【００１５】
１つの態様では、本組成物は、リファブチン、クラリスロマイシン、クロファジミン、および薬理学的に許容されるキャリアを含み、ここで、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して５〜１８重量％（７〜１６重量％、９〜１４重量％、９〜１２重量％、１０〜１５重量％、または０〜１１重量％など）、およびリファブチンの量に対して１０〜２５重量％（１２〜２５％、１２〜２３％、１５〜２５％、１５〜２３％、１８〜２５％、１８〜２３％、２０〜２５％、２０〜２３％、または２１〜２３％など）である。
【００１６】
さらなる態様では、本組成物は、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンを、約９：１９：２の重量比で含み、ここで、これらの変数の各々は、±２、１、０．５、または０．２５（例：９±０．５：１９±５：２±０．５）の範囲で自由に変化させることができる。例えば、ある例では、本組成物は、９０ｍｇのリファブチン（±３０、２０、１０、５、２、または１ｍｇ）、１９０ｍｇのクラリスロマイシン（±６０、４０、２０、１０、５、２、または１ｍｇ）、および２０ｍｇのクロファジミン（±１０、７、５、２、または１ｍｇ）を含む。別の例では、本組成物は、４５ｍｇのリファブチン（±１５、１０、７、５、２、または１ｍｇ）、９５ｍｇのクラリスロマイシン（±３０、２０、１０、５、２、または１ｍｇ）、および１０ｍｇのクロファジミン（±６、５、２、または１ｍｇ）を含む。
【００１７】
ある例では、本組成物は、活性成分の１もしくは２つ以上の生物学的利用能を改善することができる吸収促進剤をさらに含む。吸収促進剤の量は、クロファジミンの量に対して３００〜７００重量％であってよく、４００〜６００％、または４５０〜５５０％、または４７５〜５２５％を含む。特定の態様では、吸収促進剤は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であり、例えば、平均分子量が、１０００〜１５０００、または５０００〜１２０００、または７０００〜９０００、または７５００〜８５００を含む２００〜２０，０００であるポリエチレングリコールであり、例えばＰＥＧ８０００である）。
【００１８】
本組成物は、１もしくは２つ以上の追加の賦形剤をさらに含んでよく、ＭＣＣ−Ｔａｂｕｌｏｓｅタイプ２００、ステアリン酸Ｍｇ、ＳＬＳ−Ｅｍａｌ  １０Ｐｗｄ  ＨＤ、ポリソルベート（ポリソルベート８０など）、またはこれらすべてを含むこれらの組み合わせ、などである。ある例では、本組成物は、ポリエチレングリコールおよびポリソルベート８０などのポリソルベートの両方を含み、ここで、ポリソルベートの量は、クロファジミンの量に対して３０〜１２０重量％（５０〜１００％、５０〜８５％、または６０〜７５％など）である。本組成物と共に使用することが意図される追加の賦形剤については、以下でさらに説明する。
【００１９】
本組成物は、１もしくは２つ以上のイオン性または非イオン性界面活性剤をさらに含んでよい。特に、本組成物は、ラウリル硫酸ナトリウムを含んでよい。
【００２０】
１つの態様では、本組成物は、単一の剤形として提供され、例えば、錠剤、カプセル、カプレット、またはロゼンジなどである。追加の意図される剤形については、以下でさらに説明する。
【００２１】
２．  治療の方法
本組成物は、マイコバクテリウム・パラチュバキュローシス（ＭＡＰ）感染に罹患しているか、または罹患しやすい患者の治療に有用である。ある例では、このような治療は、サルコイドーシスに加えて、クローン病、潰瘍性大腸炎、非定型大腸炎、顕微鏡的大腸炎、およびコラーゲン形成大腸炎などの炎症性腸疾患（ＩＢＤ）の治療を含む。好ましい態様では、本方法は、クローン病または大腸炎の治療に有用である。
【００２２】
従って、１つの態様では、本方法は、マイコバクテリウム・パラチュバキュローシス感染に罹患しているか、または罹患しやすい患者を治療する方法を含み、この方法は、８〜１０：１８〜２０：１〜２．５の重量比（例えば、８．５〜９．５：１８．５〜１９．５：１．５〜２．５の重量比、または９：１９：２の比であり、ここで、各変数は、±０．５または０．２５の範囲で自由に変化させることができる）のリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンを単一剤形としてこの患者に共投与することを含む。別の態様では、本方法は、９０ｍｇのリファブチン（±３０、２０、１０、５、２、または１ｍｇ）、１９０ｍｇのクラリスロマイシン（±６０、４０、２０、１０、５、２、または１ｍｇ）、および２０ｍｇのクロファジミン（±１０、７、５、２、または１ｍｇ）を含有する単一投与量を有する組成物を含んでよい。別の態様では、本方法は、４５ｍｇのリファブチン（±１５、１０、７、５、２、または１ｍｇ）、９５ｍｇのクラリスロマイシン（±３０、２０、１０、５、２、または１ｍｇ）、および１０ｍｇのクロファジミン（±６、５、２、または１ｍｇ）を有する組成物を含んでよい。
【００２３】
ある例では、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンは、治療の第一の期間（例えば、１週間、２週間、または３週間を含む１〜３週間）、以下の量で１日に１回共投与される：（ｉ）リファブチン８０〜１００ｍｇ（８５〜９５ｍｇまたは９０ｍｇ±１．５ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン１８０〜２００ｍｇ（１８５〜１９５ｍｇまたは１９０ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン１５〜２５ｍｇ（１７〜２３ｍｇまたは２０±１ｍｇなど）。この方法は、治療の第二の期間（例えば、４〜１０週間）において、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの量を、８〜１０：１８〜２０：１〜２．５の重量比（例えば、８．５〜９．５：１８．５〜１９．５：１．５〜２．５の重量比、または９：１９：２の比であり、ここで、各変数は、±０．５または０．２５の比の範囲で自由に変化させることができる）を維持した状態で直線的に増加させる工程をさらに含んでよい。態様では、直線的に増加させるリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの量は、治療の第二の期間中、最大量である（ｉ）リファブチン４２０〜４８０ｍｇ（４４０〜４６０ｍｇまたは４５０ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン９２０〜９８０ｍｇ（９４０〜９６０ｍｇまたは９５０ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン８０〜１２０ｍｇ（９０〜１１０ｍｇまたは１００ｍｇなど）を超えない。特定の例では、直線的に増加させるリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの量は：
ａ）２週間の間、１日に１回、（ｉ）リファブチン１６０〜２００ｍｇ（１７０〜１９０ｍｇまたは１８０ｍｇ±２ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン３６０〜４００ｍｇ（３７０〜３９０ｍｇまたは３８０ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン３０〜５０ｍｇ（３５〜４５ｍｇまたは４０ｍｇ±１ｍｇなど）；
ｂ）２週間の間、１日に１回、（ｉ）リファブチン２５０〜２９０ｍｇ（２６０〜２８０ｍｇまたは２７０ｍｇ±２ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン５５０〜５９０ｍｇ（５６０〜５８０ｍｇまたは５７０ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン５０〜７０ｍｇ（５５〜６５ｍｇまたは６０ｍｇ±１．５ｍｇなど）；
ｃ）２週間の間、１日に１回、（ｉ）リファブチン３４０〜３８０ｍｇ（３５０〜３７０ｍｇまたは３６０ｍｇ±２ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン７４０〜７８０ｍｇ（７５０〜７７０ｍｇまたは７６０ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン６０〜１００ｍｇ（７０〜９０ｍｇまたは８０ｍｇ±１．５ｍｇなど）；ならびに、
ｄ）１週間の間、１日に１回、（ｉ）リファブチン４２０〜４８０ｍｇ（４４０〜４６０ｍｇまたは４５０ｍｇ±２ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン９２０〜９８０ｍｇ（９４０〜９６０ｍｇまたは９５０ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン８０〜１２０ｍｇ（９０〜１１０ｍｇまたは１００ｍｇ±１．５ｍｇなど）、
を含む。
【００２４】
特定の態様では、この方法は、上記の工程ｄ）に続いて、治療の第三の期間中、１日に１回、（ｉ）リファブチン４２０〜４８０ｍｇ（４４０〜４６０ｍｇまたは４５０ｍｇ±２ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン９２０〜９８０ｍｇ（９４０〜９６０ｍｇまたは９５０ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン８０〜１２０ｍｇ（９０〜１１０ｍｇまたは１００ｍｇ±１．５ｍｇなど）を同時に共投与する工程をさらに含む。ある態様では、治療の第三の期間は、１、２、４、６、８、１２週間；３、６、もしくは１２ヶ月間、またはこれより長い期間である。１つの態様では、治療の第三の期間は、ＭＡＰ感染が治療されるまで、例えば、根絶、低減の時点まで、または少なくとも感染の進行が停止される時点まで、継続する。
【００２５】
ある例では、この方法は、ＭＡＰ感染が治療された後、例えばＭＡＰ感染の再発を抑制するかまたは予防するために、１日に１回、（ｉ）リファブチン２１０〜２４０ｍｇ（２２０〜２３０ｍｇまたは２２５ｍｇ±２ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン４６０〜４９０ｍｇ（４７０〜４８０ｍｇまたは４７５ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン４０〜６０ｍｇ（４５〜５５ｍｇまたは５０ｍｇ±１ｍｇなど）を患者へ同時に共投与する工程をさらに含む。ある例では、患者は、過去にリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの組み合わせで治療されたことがあった。さらに、患者におけるマイコバクテリウム・パラチュバキュローシス感染の発生を抑制する方法も意図されており、この方法は、それを必要とする患者へ、１日１回、（ｉ）リファブチン２１０〜２４０ｍｇ（２２０〜２３０ｍｇまたは２２５ｍｇ±２ｍｇなど）、（ｉｉ）クラリスロマイシン４６０〜４９０ｍｇ（４７０〜４８０ｍｇまたは４７５ｍｇ±２ｍｇなど）、および（ｉｉｉ）クロファジミン４０〜６０ｍｇ（４５〜５５ｍｇまたは５０ｍｇ±１ｍｇなど）を同時に共投与することを含む。
【００２６】
本方法は、患者において、クラリスロマイシンによって引き起こされるリファブチンの低下した代謝を上昇させる方法をさらに意図しており、この方法は、リファブチンおよびクラリスロマイシンと共にクロファジミンをこの患者へ共投与することを含み、ここで、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して５〜１８重量％であり、例えば、６〜１８重量％、７〜１６重量％、９〜１４重量％、９〜１２重量％、１０〜１５重量％、または１０〜１１重量％である。
【００２７】
別の態様では、本方法は、患者において、リファブチンによって引き起こされるクラリスロマイシンの上昇した代謝を低下させる方法をさらに含み、この方法は、リファブチンおよびクラリスロマイシンと共にクロファジミンをこの患者へ共投与することを含み、ここで、クロファジミンの量は、クラリスロマイシンの量に対して５〜１８重量％であり、例えば、６〜１８重量％、７〜１６重量％、９〜１４重量％、９〜１２重量％、１０〜１５重量％、または１０〜１１重量％である。
【００２８】
本方法は、患者において、クラリスロマイシンによって引き起こされるリファブチンの低下した代謝を上昇させる方法をさらに意図しており、この方法は、リファブチンおよびクラリスロマイシンと共にクロファジミンをこの患者へ共投与することを含み、ここで、クロファジミンの量は、リファブチンの量に対して１０〜２５重量％であり、例えば、１２〜２５重量％、１２〜２３重量％、１５〜２５重量％、１５〜２３重量％、１８〜２５重量％、１８〜２３重量％、２０〜２５重量％、２０〜２３重量％、または２１〜２３重量％である。
【００２９】
別の態様では、本方法は、患者において、リファブチンによって引き起こされるクラリスロマイシンの上昇した代謝を低下させる方法をさらに含み、この方法は、リファブチンおよびクラリスロマイシンと共にクロファジミンをこの患者へ共投与することを含み、ここで、クロファジミンの量は、リファブチンの量に対して１０〜２５重量％であり、例えば、１２〜２５重量％、１２〜２３重量％、１５〜２５重量％、１５〜２３重量％、１８〜２５重量％、１８〜２３重量％、２０〜２５重量％、２０〜２３重量％、または２１〜２３重量％である。
【００３０】
特定の例では、上記の方法におけるリファブチン代謝の上昇は、クロファジミンの投与後に、患者血清中のリファブチンまたは２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第一のＣmaxを測定し、この第一のＣmaxを、リファブチンまたは２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＣmaxと比較することによって評価される。リファブチンまたは２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＣmaxは、例えば、文献から、類似の身体プロファイル（年齢、健康状態、代謝、および／もしくは疾患プロファイル、など）を有する１もしくは２人以上の他の患者から、もしくは過去の同一の患者から得られた平均値または中間値を例とする基準値に対応していてよい。例えば、ある態様では、リファブチンまたは２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＣmaxは、第二の患者の血清で測定され、ここで、第二の患者は、クロファジミンの共投与は行わず、リファブチンおよびクラリスロマイシンを共投与された患者である。別の態様では、リファブチンまたは２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＣmaxは、同一の患者の血清で過去に測定されたものであり、ここで、同一の患者は、クロファジミンの共投与は行わず、リファブチンおよびクラリスロマイシンを共投与されていた。
【００３１】
１つの態様では、リファブチンの第一のＣmaxは、リファブチンの第二のＣmaxと比較して、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、または４０％減少している。別の態様では、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第一のＣmaxは、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＣmaxと比較して、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、または４０％減少している。
【００３２】
ある例では、上記の方法におけるリファブチン代謝の上昇は、クロファジミンの共投与後に、患者血清中の２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第一のＡＵＣ0-24を測定し、この第一のＡＵＣを、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＡＵＣ0-24と比較することによって評価される。２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＡＵＣ0-24は、文献から、類似の身体プロファイル（年齢、健康状態、代謝、および／もしくは疾患プロファイル、など）を有する１もしくは２人以上の他の患者から、もしくは過去の同一の患者から得られた平均値または中間値を例とする基準値に対応していてよい。例えば、特定の例では、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＡＵＣ0-24は、第二の患者の血清で測定され、ここで、第二の患者は、クロファジミンの共投与は行わず、リファブチンおよびクラリスロマイシンを共投与された患者である。別の態様では、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの第二のＡＵＣ0-24は、同一の患者の血清で過去に測定されたものであり、ここで、同一の患者は、クロファジミンの共投与は行わず、リファブチンおよびクラリスロマイシンを共投与されていた。
【００３３】
１つの態様では、第一のＡＵＣ0-24は、第二のＡＵＣ0-24と比較して、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、または４０％減少している。
【００３４】
本方法に用いられる組成物について、ある例では、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの少なくとも２つが、単一剤形へ共製剤される。例えば、ある例では、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの各々が、単一剤形へ共製剤される。
【００３５】
上述のいずれの組成物も、本方法で使用されることが意図される。例えば、ある例では、本方法は、活性成分の１もしくは２つ以上の生物学的利用能を改善することができる吸収促進剤を含む組成物の使用を意図している。吸収促進剤の量は、クロファジミンの量に対して３００〜７００重量％であってよい（４００〜６００％、４５０〜５５０％、または４７５〜５２５％など）。特定の態様では、吸収促進剤は、ポリエチレングリコールであり、例えば、平均分子量が２００〜２０，０００（１０００〜１５０００、５０００〜１２０００、７０００〜９０００、または７５００〜８５００など）であるポリエチレングリコールであり、例えばＰＥＧ８０００である。
【００３６】
３．  マイコバクテリア抽出物または産物を用いて免疫化を誘導する方法
本方法は、炎症性腸疾患の治療のための方法をさらに意図しており、この方法は、そのような治療を必要とする患者に効果量のリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンを、本明細書で述べる比、用量、および／または剤形で投与すること、ならびにマイコバクテリアの抽出物または産物の免疫量でその患者を免疫すること、を含む。例えば、過去に治療を受けたことのない患者、または現在抗炎症治療を受けている患者を、免疫薬としてのマイコバクテリアの抽出物または産物（生存状態もしくは死亡状態のマイコバクテリアからの、またはその抽出された壁成分およびＤＮＡ成分）で免疫化し、免疫化された患者内の白血球を刺激することによって治療することができる。このような免疫薬は、Ｍ．バッカエ（M. vaccae）またはＭ．フレイ（M. phlei）などの公知の非病原性マイコバクテリアからの抽出物または産物であってよい。本明細書で用いる「マイコバクテリアの抽出物または産物」という表現は、アジュバントを含むかもしくは含まない、全死滅させた（whole-killed）マイコバクテリアまたはマイコバクテリアの抽出物を意味する。適切なマイコバクテリアの産物または抽出物の例は、Bioniche of London、オンタリオ州、カナダ、より入手可能であるRegressinである。
【００３７】
マイコバクテリアの産物を用いて、この産物を免疫賦活薬として用いることで患者を反復的に免疫することができる。マイコバクテリアの産物は、経口、静脈内、筋肉内、または皮下など複数の経路のいずれを介しても投与することができる。このような免疫化は、ＭＡＰ感染を軽減するかまたはこれを患者から取り除くことさえ可能であり、この疾患を抑制もしくは治癒する能力、または患者を長期間にわたる寛解の状態とする能力を有する。
【００３８】
マイコバクテリアの産物または抽出物の投与は、通常、週１回から月１回であるが、これよりも頻度が高くても低くてもよい。適切な治療計画は、いずれの特定のケースにおいても、本明細書の教示事項から、医師によって容易に得ることができる。マイコバクテリアの産物または抽出物は、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの投与の前、後、またはこれと同時に投与してよい。
【００３９】
マイコバクテリアの抽出物の用量は、２５〜５００μｇ、例えば５０〜５００μｇの範囲で、いずれの頻度で投与してもよい。特定の態様では、適切な免疫賦活は、週１回から月１回、通常は週１回または月１回のレジメンによって維持することができる。
【００４０】
別の態様では、マイコバクテリウム・フレイの抽出物（例：Regressin）による治療は、週１回の免疫化プログラムを含み、患者が熱、悪寒、および吐き気を発症するまで、抽出物の用量を毎週２０〜８０μｇ、例えば４０〜６０μｇまたは５０μｇ増加させて行く。
【００４１】
続いて、用量を２０〜８０μｇ、例えば４０〜６０μｇまたは５０μｇ減少させて低いレベルとし、患者は月１回のペースで維持免疫化（maintenance immunization）を継続する。この治療は、６週間などの４〜８週間から最長で１〜２年間もしくはそれを超える期間の月１回の免疫化プログラムまで継続してよい。
【００４２】
別の形態の治療では、標準的な抗炎症治療を反復的なRegressinによる免疫化と組み合わせることができる。
【００４３】
マイコバクテリア抽出物と組み合わせて用いられるリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの用量は、上述のものに対応する。本明細書で述べるリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミン、ならびにマイコバクテリア抽出物に対する用量および治療計画のすべての組み合わせが意図される。
【００４４】
４．  追加薬剤
本方法は、サラゾピリン、オルサラジン、またはメサラジンなどの抗ＴＢ薬、ならびにその他の認知度の低いアミノサリチル酸などの１もしくは２つ以上の追加薬剤と組み合わせての使用もさらに意図している。４−アミノサリチル酸または５−アミノサリチル酸を、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンと組み合わせることができる。これらの追加薬剤の用量は、一般的に公知である。例えば、サラゾピリンに対する典型的な用量範囲は、１日あたり５００ｍｇから４ｇの範囲であり、オルサラジンまたはメサラジンに対しては、１日あたり５００ｍｇから３ｇの範囲である。
【００４５】
従って、本方法は、結核に対して効果的である１もしくは２つ以上の薬剤をさらに含んでよい。
【００４６】
このような追加薬剤は、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの投与の前、後、またはこれと同時に投与してよい。さらに、このような薬剤は、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンを含むものと同一の剤形（例：錠剤、カプセル、カプレットなど）の一部分として投与してよく、または異なる剤形として投与してもよい。
【００４７】
５．  剤形
本組成物は、粉末化された形態のリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの少なくとも１つを含む錠剤の形態で利用可能であってよい。ある例では、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの２つもしくはすべてが粉末化された形態である。別の選択肢として、本組成物は、マイクロカプセル化された形態のリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの少なくとも１つを含む錠剤カプセルの形態であってもよい。ある例では、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの２つもしくはすべてがマイクロカプセル化された形態である。別の可能性として、本組成物は、粉末化された形態のリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの少なくとも１つを含み、残りの薬剤がマイクロカプセル化された形態で存在する錠剤カプセルの形態であってよい。さらなる可能性として、本組成物は、微粒剤化された形態で存在するリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの１もしくは２つ以上を含む錠剤カプセルの形態であってよい。追加の可能性では、本組成物は、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの１もしくは２つ以上を含む錠剤がカプセル内にある形態、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの１もしくは２つ以上を含むカプセルが錠剤内にある形態、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの１もしくは２つ以上を含むカプセルがその他の薬剤を含む外カプセル内にある形態、または上記のいずれかの組み合わせであってよい。
【００４８】
さらなる態様では、本組成物は、リファブチンを含む内カプセルを、クラリスロマイシンおよびクロファジミンを含む外カプセル内に有し、ここで、クラリスロマイシンおよびクロファジミンは、粉末化、マイクロカプセル化、または微粒剤化された形態で存在してよい。
【００４９】
本方法は、上述のようにリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンを含む１もしくは２つ以上の錠剤／カプセルを投与することにより、またはこれらの各々を別々に投与することによって実施してよい。好ましい態様では、リファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンは、単一用量で同時に投与される。
【００５０】
本組成物は、医薬組成物の作製に関して本技術分野で公知の手段で作製することができ、混和（blending）、粉砕、均質化、懸濁、溶解、乳化、分散、および、該当する場合は、選択された賦形剤、希釈剤、キャリア、およびアジュバントとのリファブチン、クラリスロマイシン、およびクロファジミンの混合（mixing）を含む。
【００５１】
経口投与に対しては、本組成物は、錠剤、ロゼンジ、丸薬、トローチ、カプセル、エリキシール剤、粉末の形態であってよく、凍結乾燥粉末、溶液、顆粒、懸濁液、エマルジョン、シロップ、およびチンキを含む。徐放性（slow-release）または遅延放出性（delayed-release）の形態を作製してもよく、例えば、コーティングした粒子、多層錠、または微粒剤の形態である。
【００５２】
経口投与のための固体剤形は、薬理学的に許容されるバインダー、甘味剤、崩壊剤（disintegrating agents）、希釈剤、香味剤、コーティング剤、保存剤、滑沢剤、および／または時間遅延剤（time delay agents）を含んでよい。適切なバインダーとしては、アラビアガム、ゼラチン、コーンスターチ、トラガカントガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が挙げられる。適切な甘味剤としては、スクロース、ラクトース、グルコース、アスパルテーム、またはサッカリンが挙げられる。適切な崩壊剤としては、コーンスターチ、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、キサンタンガム、ベントナイト、アルギン酸、または寒天が挙げられる。適切な希釈剤としては、ラクトース、ソルビトール、マンニトール、デキストロース、カオリン、セルロース、炭酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、またはリン酸二カルシウムが挙げられる。適切な香味剤としては、ハッカ油、冬緑油、チェリー、オレンジ、またはラズベリー香味剤が挙げられる。適切なコーティング剤としては、アクリル酸および／もしくはメタクリル酸ならびに／またはこれらのエステルのポリマーまたはコポリマー、ワックス、脂肪アルコール、ゼイン、シェラック、またはグルテンが挙げられる。適切な保存剤としては、安息香酸ナトリウム、ビタミンＥ、アルファ−トコフェロール、アスコルビン酸、メチルパラベン、プロピルパラベン、または亜硫酸水素ナトリウムが挙げられる。適切な滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、またはタルクが挙げられる。適切な時間遅延剤としては、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルが挙げられる。
【００５３】
経口投与のための液体剤形は、上記の剤に加えて、液体キャリアを含んでよい。適切な液体キャリアとしては、水、オリーブ油、ピーナッツ油、ゴマ油、ヒマワリ油、サフラワー油、落花生油、ココナッツ油などの油、液体パラフィン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、グリセロール、脂肪アルコール、トリグリセリド、またはこれらの混合物が挙げられる。
【００５４】
経口投与のための懸濁液は、分散剤および／または懸濁剤をさらに含んでよい。適切な懸濁剤としては、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アルギン酸ナトリウム、またはセリルアルコールが挙げられる。適切な分散剤としては、レシチン、ステアリン酸などの脂肪酸のポリオキシエチレンエステル、ポリオキシエチレンソルビトールモノ−もしくはジ−オレエート、−ステアレート、または−ラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノ−もしくはジ−オレエート、−ステアレート、または−ラウレート、などが挙げられる。
【００５５】
経口投与のためのエマルジョンは、１もしくは２つ以上の乳化剤をさらに含んでよい。適切な乳化剤は、上記で例示した分散剤、またはアラビアゴムもしくはトラガカントゴムなどの天然ゴムが挙げられる。
【００５６】
当業者であれば、本明細書で述べた事項について、その変形、変更、およびその他の実行を、本開示の趣旨および範囲から逸脱することなく思いつくであろう。従って、これらは、前述の例示的な記述のみに限定されるべきではない。
【００５７】
本明細書で述べる態様を含む、本組成物および方法で用いられ得る追加の例示的な特徴については、その全体が参照により組み入れられる本明細書で挙げる文書を参照されたい。上述の例示的な態様と本明細書で引用した文書および参考文献に記載の特徴との間の効果のある組み合わせはすべて、潜在的に特許可能な態様であると見なされる。
【実施例】
【００５８】
ここで本組成物および方法の局面が全般的に説明されたが、これらは、本組成物および方法発明の特定の特徴ならびに態様を説明する目的だけのために含まれるものであって、限定することを意図するものではなく、以下の実施例を参照することで、これらはより容易に理解されるであろう。
【００５９】
１．  生物学的利用能の実験
本実験は、１）吸収の速度および度合いの測定ならびに比較、ならびに、２）クラリスロマイシン、リファブチン、およびクロファジミンの組み合わせ生成物（以降、「三種混合」（"triple combination"））である２つの試験製剤の安全性および許容性の評価、を目的として行った。
【００６０】
本実験は、無作為オープンラベル単一用量１元２群平行試験計画（randomized, open-label, single-dose, 1-way 2-arm parallel design）に従い、２４人の正常で健康な喫煙しない男女の被験者に対して行った。すべての被験者が実験を完了し、そのデータを用いて薬物動態解析および統計解析を行った。
【００６１】
被験者は、投与の前日に診療所へ入院し、投与後２４．００時間の血液採取まで滞在し、その時点で退院が許され、その後、続いての血液採取のために診療所を訪れることが求められた。実験期間の第１日に、高脂肪食の後、被験者は三種混合のカプセル（乾燥製剤）を２個、または三種混合のカプセル（ＰＥＧ製剤）を２個の投与を受けた。
【００６２】
実験期間中、薬物動態および統計解析のために、各被験者から１９個の血液サンプルを採取した。全実験期間にわたって、男性被験者からはおよそ２３６．５ｍＬの血液を採取し、女性被験者からはおよそ２４１．５ｍＬの血液を採取した。これらの容量は、以下でさらに述べるように、必要なすべてのサンプルを含む。
【００６３】
無作為スキーム（randomization scheme）は、コンピュータによって作製され、被験者は、期間Ｉの投与の前に１５個の治療のシーケンス（15 treatment sequence）を割り当てられた。
【００６４】
これはオープンラベル実験であった；しかし、生物分析グループには無作為スキームについて知らせなかった。このスキームは、本実験の生物分析の部分の完了後にのみ、統計および報告の目的で公表した。
【００６５】
水は、投与の１．０時間前まで、および投与の１．０時間後は、随意提供された。高脂肪食の間にすべての被験者に提供された全乳を除いては、この期間に摂取が許された唯一の液体は周囲温度の投与用の水２４０ｍＬのみであった。
【００６６】
少なくとも１０時間の一晩の空腹状態の後、被験者は、薬物投与の３０分前に高脂肪食を開始した。被験者は、この食事を３０分間もしくはそれ未満で食べ終えたが；実験薬物は、食事開始の３０分後に投与した。ＦＤＡ標準高脂肪朝食は以下から構成されていた：バターによる目玉焼き２個、ベーコン２枚、バターを塗ったトースト２枚、ハッシュブラウンポテト４オンス、および全乳８液量オンス（約２４０ｍＬ）。
【００６７】
投与後少なくとも４時間は食事を禁止した。投与後４．５、９．５、および１３．５時間にて、標準化された食事および飲料を被験者へ供給した。食事および飲料はすべてアルコール、グレープフルーツ製品、キサンチン、およびカフェインを含んでおらず、両実験治療に対して同一とした。
【００６８】
投薬治療
少なくとも１０時間の一晩の空腹状態の後、および高脂肪食の開始後３０分にて、被験者は、無作為スキームに従う実験期間の第１日の０．００時に以下の治療の１つを受けた：
治療Ａ：周囲温度の水２４０ｍＬと共に三種混合カプセル（乾燥製剤）を２個（治療用量＝クラリスロマイシン１９０ｍｇ、リファブチン９０ｍｇ、およびクロファジミン２０ｍｇ）
治療Ｂ：周囲温度の水２４０ｍＬと共に三種混合カプセル（ＰＥＧ製剤）を２個（治療用量＝クラリスロマイシン１９０ｍｇ、リファブチン９０ｍｇ、およびクロファジミン２０ｍｇ）
【００６９】
薬物は経口投与した。薬物は、１度に１もしくは２個以上のカプセルとして投与された。カプセルはすべて１分以内に摂取された。
【００７０】
血液処理
全実験期間にわたって、男性被験者からはおよそ２３６．５ｍＬの血液を採取し、女性被験者からは２４１．５ｍＬの血液を採取し、その詳細を以下に示す：
【００７１】
【表１】
0005572872.tif 000002
【００７２】
実験期間の間、直接静脈穿刺またはVasofix（登録商標）静脈カテーテルにより、予め冷却しラベルを施した、抗凝血剤としてエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）カリウムを含有する採血チューブを用い、各被験者から１９個の血液サンプル（各サンプリング時点に対して１×４ｍＬおよび１×６ｍＬチューブ）を採取した。血液サンプルは、投与後、０．００（投与前）、０．２５、０．５０、０．７５、１．００、１．５０、２．００、２．５０、３．００、４．００、６．００、８．００、１０．００、１２．００、１６．００、２４．００、４８．００、６０．００、および９６．００時間にて採取した。血漿中濃度分析用のすべての採血の時刻を記録した。
【００７３】
クラリスロマイシンおよび１４−ヒドロキシクラリスロマイシンの測定には６ｍＬチューブを用いた。リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンの測定には４ｍＬのチューブを用いた。
【００７４】
血液サンプルは、遠心分離まで氷浴に保存し、できる限り早く、冷蔵条件下（４℃）、３５００ｒｐｍにて７分間遠心分離した。各採血チューブから回収した血漿を、予め冷却しラベルを施したポリプロピレンチューブに等分した。６ｍＬチューブから少なくとも１．５ｍＬの血漿を第一のポリプロピレンチューブへ移し、存在する場合は、残りの血漿すべてを第二のポリプロピレンチューブへ移した。サンプルを氷浴へ保存し、直立状態で急速冷凍し、続いて、分析を行うまで−７０±１０℃で保存した。
【００７５】
別の手順では、血液サンプルは、遠心分離まで氷浴に保存し、できる限り早く、冷蔵条件下（４℃）、３５００ｒｐｍにて７分間遠心分離した。各採血チューブから回収した血漿を、予め冷却しラベルを施したポリプロピレンチューブに等分した。４ｍＬチューブから少なくとも０．８ｍＬの血漿を第一のポリプロピレンチューブへ移し、存在する場合は、残りの血漿すべてを第二のポリプロピレンチューブへ移した。サンプルを氷浴へ保存し、直立状態で急速冷凍し、続いて、分析を行うまで−７０±１０℃で保存した。
【００７６】
実験の臨床部分の完了後、すべてのサンプルについて、血漿サンプル中のクラリスロマイシンおよび１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、または血漿サンプル中のリファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンの分析を行った。
【００７７】
測定
本実験では、クラリスロマイシンおよび１４−ヒドロキシクラリスロマイシンの、ならびにリファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンの血漿中濃度について直接測定を行った。
【００７８】
クラリスロマイシンおよび１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンの血漿中濃度から薬物動態パラメータを得た。
【００７９】
生物分析
クラリスロマイシンおよび１４−ヒドロキシクラリスロマイシン  −  これらの分析物についての情報は、本技術分野で公知の通常の方法を用いることで得た。
【００８０】
リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミン − リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、クロファジミン、および内部標準ジルチアゼムを、ヒト血漿０．２０ｍＬから固相抽出によって有機媒体中へ抽出した。この抽出物のアリコートを高速液体クロマトグラフィへ注入し、質量分析器を用いて検出した。分析物は、逆相クロマトグラフィによって分離した。このアッセイの評価は、リファブチンに対しては９．９９６ｎｇ／ｍＬから１２７９．４７０ｎｇ／ｍＬ、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンに対しては２．４９９ｎｇ／ｍＬから３１９．９１７ｎｇ／ｍＬ、およびクロファジミンに対しては４．９９７ｎｇ／ｍＬから６３９．５８６ｎｇ／ｍＬのヒト血漿中濃度の範囲を含む８点検量線（濃度ゼロは除く）を作成することによって行った。
【００８１】
この検量線の傾きおよび切片を、重み付け直線回帰解析（weighted linear regression
analysis）で決定した（Ｉ／濃度2）。２本の検量線および２連のＱＣサンプル（３つの濃度レベルにて）を実験サンプルの各バッチと共に解析した。ピーク面積比を用いて、標準、品質管理サンプル、および未知の実験サンプルの濃度を検量線から決定した。
【００８２】
薬物動態解析
クラリスロマイシン、リファブチン、およびクロファジミン、ならびに代謝物１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、および２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンに対する以下の薬物動態パラメータを、標準的な非コンパートメント法（non-compartmental methods）によって算出した：ＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf、Ｃmax、Ｔmax、ｔ1/2、Ｋel、およびＭ／Ｐ比。
【００８３】
統計解析システム（ＳＡＳ）の一般線形モデル（ＧＬＭ）手順を用いて、対数変換したＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf、およびＣmax、ならびに未変換のｔ1/2、Ｋel、およびＭ／Ｐ比について、有意水準０．０５にて分散分析（ＡＮＯＶＡ）を行った。被験者内変動係数（ＣＶ）は、ＡＮＯＶＡ表から平均二乗誤差（ＭＳＥ）を用いて算出した。幾何平均の比、および９０％幾何信頼区間（９０％Ｃ．Ｉ．）は、対数変換したＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf、およびＣmaxの最小二乗平均の、乾燥およびＰＥＧ製剤の間での違いに基づいて算出した。Ｔmaxは、ノンパラメトリック法を用いて解析した。
【００８４】
両治療について得られたクラリスロマイシン、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンに対する薬物動態パラメータは以下の通りであった：
【００８５】
一次パラメータ：
−ＡＵＣ0-t＝線形台形法を用いて算出した、ゼロ時間から濃度測定可能な最終時間までの濃度−時間曲線の曲線下面積
−ＡＵＣ0-inf＝ゼロ時間から無限大時間までの濃度−時間曲線の曲線下面積
−Ｃmax＝投与後の最大血漿中濃度
【００８６】
二次パラメータ：
−ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf＝ＡＵＣ0-tのＡＵＣ0-infに対する比
−Ｔmax＝ピーク血漿中濃度到達時間
−Ｋel＝一次最終消失速度定数
−ｔ1/2＝最終半減期（terminal half-life）
−Ｍ／Ｐ比＝ＡＵＣ0-infに対する代謝物／親物質比−（モル単位への変換は、比の算出の前に行う）
【００８７】
算術平均、標準偏差（ＳＤ）、およびＣＶを、各サンプリング時間および製剤について、クラリスロマイシン、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンの血漿中濃度に対して、ならびにＰＫパラメータ、ＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf、Ｃmax、Ｔmax、ｔ1/2、Ｋel、およびＭ／Ｐ比に対して算出した。
【００８８】
ＡＮＯＶＡ（以下の因子による：治療、期間、シーケンス、シーケンス内の被験者）を、ＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf、Ｃmaxの対数変換データに対して実施した。ＡＮＯＶＡは、ｔ1/2、Ｋel、およびＭ／Ｐ比の比較のために、未変換データに対しても実施した。ＡＮＯＶＡはすべてＳＡＳ  ＧＬＭ手順によって実施した。Ｔmaxは、ノンパラメトリック法を用いて解析した。両群における治療効果の同等性は、ウィルコクソン順位和検定を用いて評価した。すべての解析について、「Ｆ」に関連するｐ値が０．０５０と等しいかもしくはこれ未満の場合に、効果が統計的に有意であるとみなした。
【００８９】
ＡＮＯＶＡの結果、および対数変換されたＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf、Ｃmaxデータの相互比較に基づいて、被験者内ＣＶ、幾何平均の相対比（次の式に従って算出：ｅ[乾燥-PEG]×１００％）、および９０％幾何Ｃ．Ｉ．を決定した。
【００９０】
２４人の被験者が本実験に参加し、２４人の実験を完了した被験者（群あたり１２人）からのサンプルに対して、薬物濃度の分析を行った。
【００９１】
主に使用した統計ソフトウェアは、ＳＡＳ（登録商標）、バージョン８．２であった。すべての解析は、統計プログラムのＳＡＳ（登録商標）スイートのプラットフォーム上で実施し、ＢＣＲの薬物動態学および統計部門（Pharmacokinetics and Statistics Department of BCR）のスタッフによって作製され確認されたコード化された手順を用いた。
【００９２】
平均年齢３１歳（範囲＝１８から４５歳）の２４人の被験者（男性１２人、および女性１２人）が実験に参加し、これを完了した。実験を完了した被験者の平均身長は１７０ｃｍ（範囲＝１４９から１８７ｃｍ）であり、平均体重は７１ｋｇ（範囲＝４８から１０４ｋｇ）であった。被験者の平均ＢＭＩは２４．７ｋｇ／ｍ2（範囲＝１８．６から２９．７ｋｇ／ｍ2）であった。実験を完了した被験者の構成は、コーカサス系が９人、アジア系が５人、黒人系が５人、およびヒスパニック系が４人、ならびにムラート系が１人であった。
【００９３】
生物分析の結果
クラリスロマイシンおよび１４−ヒドロキシクラリスロマイシン  −  これらの分析物についての情報は、本技術分野で公知の通常の方法を用いることで得た。
【００９４】
リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミン  −  血漿サンプルを、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンについて分析した。
【００９５】
本方法の正確度および精度は、操作内（分析内  −  表２）および操作間（分析間  −
表３）の両方について、定量の最下限（ＬＬＯＱ）、および検量線／標準曲線の範囲内で調製したヒト血漿中の３種類の濃度の品質管理サンプル（ＱＣ高、ＱＣ中、およびＱＣ低）の解析によって評価した。各濃度レベルにおいて決定された正確度および精度は、それぞれ、パーセント相対誤差（％ＲＥ）およびパーセント変動係数（％ＣＶ）として報告した。
【００９６】
【表２】
0005572872.tif 000003
【００９７】
【表３】
0005572872.tif 000004
【００９８】
マトリックス中の長期的安定性  −  リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンのヒト血漿中における長期的安定性は、調製したばかりの（凍結せず）ＱＣサンプル（ＱＣ低およびＱＣ高）の濃度を、調製してから時間が経過した同濃度のＱＣサンプルと比較することによって決定することができる。
【００９９】
薬物動態プロファイル
クラリスロマイシン、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンの平均血漿中濃度−時間プロファイル（直線および片対数プロット）を、それぞれ、図１、２、３、４、および５に示す。
【０１００】
クラリスロマイシン、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンに対する平均薬物動態パラメータを、それぞれ、以下の表４、５、６、７、および８にまとめる。
【０１０１】
【表４】
0005572872.tif 000005
【０１０２】
【表５】
0005572872.tif 000006
【０１０３】
【表６】
0005572872.tif 000007
【０１０４】
【表７】
0005572872.tif 000008
【０１０５】
【表８】
0005572872.tif 000009
【０１０６】
クラリスロマイシン、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンに対するＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、ＡＵＣ0-t／ＡＵＣ0-inf、およびＣmaxについての相対的生物学的利用能の解析結果を、そ
れぞれ、以下の表９、１０、１１、１２、および１３にまとめる。
【０１０７】
【表９】
0005572872.tif 000010
【０１０８】
【表１０】
0005572872.tif 000011
【０１０９】
【表１１】
0005572872.tif 000012
【０１１０】
【表１２】
0005572872.tif 000013
【０１１１】
【表１３】
0005572872.tif 000014
【０１１２】
薬物動態の結論
群あたり１２人の実験を完了した被験者からのデータに基づいて、クラリスロマイシン、１４−ヒドロキシクラリスロマイシン、リファブチン、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチン、およびクロファジミンのデータの薬物動態を、以下の治療から評価した：
治療Ａ：三種混合カプセル（乾燥製剤）
治療Ｂ：三種混合カプセル（ＰＥＧ製剤）
【０１１３】
クラリスロマイシンの薬物動態解析：
三種混合カプセル（乾燥製剤）の単一経口投与後のクラリスロマイシンのピークおよび全身曝露は、三種混合カプセル（ＰＥＧ製剤）と比較して、約２５％および約２０％低かった。さらに、統計結果より、ＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、およびＣmaxに対する幾何平均比（乾燥／ＰＥＧ）の９０％信頼区間は、それぞれ、４７．５８％から１３５．６９％、４８．３３％から１３５．０３％、および４６．５７％から１２０．８８％であることが示された。
【０１１４】
クラリスロマイシン２５０ｍｇの単一投与により、Ｃmaxは７８０±２５０ｎｇ／ｍＬとなった。乾燥およびＰＥＧ製剤の三種混合カプセルから得られた結果は、文献による知見とおおよそ適合するものであった。Chu et al. (1993)は、クラリスロマイシンのピーク濃度の上昇は用量に対して非直線的に発生すると報告しており、このことから、文献値と三種混合カプセルの乾燥およびＰＥＧ製剤から得られた値との間のいずれの僅かな不適合性をも説明され得る。
【０１１５】
しかし、この２種類の製剤の間にて、クラリスロマイシンの曝露速度（Ｔmax）に有意の差はなく、乾燥およびＰＥＧ製剤間の吸収速度が類似していることを示している（メジアンＴmax４．００時間）。同様に、消失半減期も、乾燥およびＰＥＧ製剤間で類似していることが分かった（ｐ値＞０．０５）。
【０１１６】
１４−ヒドロキシクラリスロマイシンの薬物動態解析：
三種混合カプセル（乾燥製剤）の単一経口投与後の代謝物１４−ヒドロキシクラリスロマイシンのピークおよび全身曝露は、三種混合カプセル（ＰＥＧ製剤）と比較して、約１２％および約７％低かった。さらに、統計結果より、ＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、およびＣmaxに対する幾何平均比（乾燥／ＰＥＧ）の９０％信頼区間は、それぞれ、６５．１１％から１３３．２０％、６５．４３％から１３２．５７％、および６１．７２％から１２５．４３％であることが示された。
【０１１７】
親化合物と同様に、この２種類の製剤の間にて、１４−ヒドロキシクラリスロマイシンの曝露速度（Ｔmax）に有意の差はなく、乾燥およびＰＥＧ製剤間の吸収速度が類似していることを示している（メジアンＴmax４．００時間）。同様に、消失半減期も、乾燥およびＰＥＧ製剤間で類似していることが分かった（ｐ値＞０．０５）。
【０１１８】
リファブチンの薬物動態解析：
三種混合カプセル（乾燥製剤）の単一経口投与後のリファブチンのピークおよび全身曝露は、三種混合カプセル（ＰＥＧ製剤）と比較して、約１１％および約２３％低かった。さらに、統計結果より、ＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、およびＣmaxに対する幾何平均比（乾燥／ＰＥＧ）の９０％信頼区間は、それぞれ、５７．１２％から１０３．８０％、５３．０２％から１０１．１３％、および７１．４４％から１１０．２３％であることが示された。
【０１１９】
Gatti et al. (1998)は、消耗症候群を持つかまたは持たないＨＩＶ感染患者におけるリファブチンの吸収および処分に関する比較実験を行った。この研究によると、リファブチンの単一用量３００ｍｇを空腹状態で投与した後のＣmax（ピーク濃度）は、消耗症候群を持たない１０人のＨＩＶ患者において３４０±１４０ｎｇ／ｍｌであることが見出された。
【０１２０】
しかし、この２種類の製剤の間にて、リファブチンの曝露速度（Ｔmax）に有意の差はなく、乾燥およびＰＥＧ製剤間の吸収速度が類似していることを示している（メジアンＴmax６．００時間）。同様に、消失半減期も、乾燥およびＰＥＧ製剤間で類似していることが分かった（ｐ値＞０．０５）。
【０１２１】
２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの薬物動態解析：
三種混合カプセル（乾燥製剤）の単一経口投与後の代謝物２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンのピークおよび全身曝露は、三種混合カプセル（ＰＥＧ製剤）と比較して、約２６％低かった。さらに、統計結果より、ＡＵＣ0-tおよびＣmaxに対する幾何平均比（乾燥／ＰＥＧ）の９０％信頼区間は、それぞれ、５５．１９％および９７．７１％であることが示された。被験者のおよそ６５％は、ＡＵＣ0-infの外挿が２０％超であることから、ＡＵＣ0-inf、Ｋel、およびｔ1/2の統計解析から除外した。従って、薬物動態の考察は、ＡＵＣ0-infの結果に基づいたものではなかった。
【０１２２】
親化合物と同様に、この２種類の製剤の間にて、２５−Ｏ−デスアセチルリファブチンの曝露速度（Ｔmax）に有意の差はなく、乾燥およびＰＥＧ製剤間の吸収速度が類似していることを示している（乾燥およびＰＥＧのメジアンＴmaxは、それぞれ、６．０１時間および７．０４時間）。同様に、消失半減期も、乾燥およびＰＥＧ製剤間で類似していることが分かった（ｐ値＞０．０５）。
【０１２３】
クロファジミンの薬物動態解析：
三種混合カプセル（乾燥製剤）の単一経口投与後のクロファジミンのピーク曝露は、三種混合カプセル（ＰＥＧ製剤）と比較して、約１９％（Ｃmax）高かった。しかし、合計の全身曝露は（ＡＵＣ0-t）、この２種類の製剤間において類似しており、幾何平均比が１０２％であることが分かった。統計結果より、ＡＵＣ0-tおよびＣmaxに対する幾何平均比（乾燥／ＰＥＧ）の９０％信頼区間は、それぞれ、６６．１２％から１５８．５２％、および８３．２６％から１６９．０２％であることが示された。被験者のおよそ５０％（治療Ａ）および７５％（治療Ｂ）は、ＡＵＣ0-infの外挿が２０％超であることから、ＡＵＣ0-inf、Ｋel、およびｔ1/2の統計解析から除外した。従って、薬物動態の考察は、ＡＵＣ0-infの結果に基づいたものではなかった。
【０１２４】
Nix et al. (2004)は、２００ｍｇの用量を投与後の適合する値を報告した。Ｃmaxは２２７ｎｇ／ｍＬであることが分かった。これらの値は、本実験において三種混合カプセルの投与から得られた値と適合している。
【０１２５】
しかし、この２種類の製剤の間にて、クロファジミンの曝露速度（Ｔmax）に有意の差はなく、乾燥およびＰＥＧ製剤間の吸収速度が類似していることを示している（メジアンＴmaxは８．００時間）。同様に、消失半減期も、乾燥およびＰＥＧ製剤間で類似していることが分かった（ｐ値＞０．０５）。
【０１２６】
結論：
クラリスロマイシン、リファブチン、クロファジミン、およびこれらの代謝物の相対的生物学的利用能を、２つの治療からのピーク曝露および合計の全身曝露を測定、比較することによって評価した（ＡＵＣ0-t、ＡＵＣ0-inf、およびＣmaxを用いて）。
【０１２７】
クラリスロマイシン、リファブチン、およびこれらの代謝物に対する合計の全身曝露（ＡＵＣ）の乾燥／ＰＥＧ幾何平均比は、約７％から２６％低かった。同様に、ＰＥＧ製剤と比較して、クラリスロマイシン、リファブチン、およびこれらの代謝物に対するピーク全身曝露（Ｃmax）の乾燥／ＰＥＧ幾何平均比は、約１１％から２６％低いことが分かった。しかし、クロファジミンに対する合計の全身曝露（ＡＵＣ0-t）は、乾燥製剤およびＰＥＧ製剤の間で類似していた。乾燥製剤のピーク曝露は、ＰＥＧ製剤のそれと比較して約１９％（Ｃmax）高かった。ピーク濃度に到達する時間は、乾燥またはＰＥＧ製剤治療群からのいずれの分析物に対しても有意の差はなかった。
【０１２８】
全体として、三種混合（乾燥およびＰＥＧ製剤）は、約１９０ｍｇのクラリスロマイシン、約９０ｍｇのリファブチン、および約２０ｍｇのクロファジミンの単一用量として十分に許容され、大きな安全性の問題は発生しなかった。
【０１２９】
２．  文献値とのＣmaxの比較
クロファジミン  −  Ｃmaxｆｅｄ＝２２７ｎｇ／ｍｌ、２００ｍｇ投与後（Nix, et al, 2004）
【０１３０】
三種混合（乾燥剤形）３８．３２±２０．９８ｎｇ／ｍＬ。三種混合（ＰＥＧ剤形）２９．８２±１１．３７ｎｇ／ｍＬ（２０ｍｇによる生物学的利用能実験）。用量２０ｍｇの場合のＣmaxは２３ｎｇ／ｍＬである。
【０１３１】
リファブチン  −  消耗症候群を持たない１０人のＨＩＶ患者における、リファブチンの単一用量３００ｍｇの空腹時投与後のＣmax（ピーク濃度）は、３４０±１４０ｎｇ／ｍＬであった（消耗症候群を持つまたは持たないＨＩＶ感染患者におけるリファブチンの吸収および処分に関する比較実験（Gatti G, Di Biagio A, De Pascalis C, Guerra M, Bassetti M, Bassetti D. Int Conf AIDS. 1998; 12: 554 (abstract no. 32171)）。
【０１３２】
三種混合（乾燥剤形）１５１．４１±６０．４７ｎｇ／ｍＬ。三種混合（ＰＥＧ剤形）１６６．３９±４４．３７ｎｇ／ｍＬ（９０ｍｇによる生物学的利用能実験）。用量９０ｍｇの場合のＣmaxは１０２ｎｇ／ｍＬである。
【０１３３】
クラリスロマイシン − ５００ｍｇ（１２５ｍｇカプセルを４個、Abbott Laboratories
）を１２時間毎に５回投与。代謝物に対するＣmax ２４１０±６７０ｍｇ／ｍＬおよび６６０±２１０ｎｇ／ｍＬ。２５０ｍｇの単一投与の場合のＣmaxは７８０±２５０ｎｇ／
ｍＬであった。
【０１３４】
三種混合（乾燥剤形）４５０．６９±２５１．３０。三種混合（ＰＥＧ剤形）５４９．１８±２５３．４１（１９０ｍｇによる生物学的利用能実験）。用量１９０ｍｇの場合のＣmaxは５９３ｎｇ／ｍＬである。
【０１３５】
均等物
当業者であれば、通常の実験を超えることを行うことなく、本明細書で述べる化合物、組成物、およびこれらを用いる方法に対する数多くの均等物を認識しているか、または確認することができるであろう。そのような均等物は、本開示の範囲内であると見なされ、以下の態様によって含まれる。
【０１３６】
本出願全体を通して引用されるすべての参考文献、特許、および公開特許出願の内容、ならびにこれらに関連する図は、その全体が参照することで本明細書に組み入れられる。
【０１３７】
当業者であれば、概説するように、本発明の範囲から逸脱することなく、具体的な態様で示される本発明に対して数多くの変形および／または変更が可能であることが理解されるであろう。本態様は、従って、あらゆる点において説明のためものであり、限定するものではないと見なされるべきである。
【図１ａ】
0005572872.tif 000015
【図１ｂ】
0005572872.tif 000016
【図２ａ】
0005572872.tif 000017
【図２ｂ】
0005572872.tif 000018
【図３ａ】
0005572872.tif 000019
【図３ｂ】
0005572872.tif 000020
【図４ａ】
0005572872.tif 000021
【図４ｂ】
0005572872.tif 000022
【図５ａ】
0005572872.tif 000023
【図５ｂ】
0005572872.tif 000024