(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象に共投与されるビタミンＤ3サプリメントおよびビタミンＤ2サプリメントを含む、前記対象の治療で使用するための薬剤であって、ビタミンＤ3サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ3であり、ビタミンＤ2サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ2であり、ここで２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2に対する比率が（質量またはモルで）少なくとも１．５：１である、薬剤。
【請求項２】
ビタミンＤ3サプリメントを含む、対象の治療で使用するための薬剤であって、ビタミンＤ3サプリメントがビタミンＤ2サプリメントとともに対象に共投与されるためのものであり、ビタミンＤ3サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ3であり、ビタミンＤ2サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ2であり、ここで２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2に対する比率が（質量またはモルで）少なくとも１．５：１であり、前記共投与は、前記２つのサプリメントが、それらの両方が重なり合った時間中にそれらのそれぞれの薬理学的効果を発揮することができる方式で投与されることを含み、したがって前記サプリメントの投与が（ａ）同時である、または治療過程中（ｂ）異なる時刻であるが一方のサプリメント（または少なくとも１種のその代謝産物）が血清中で検出できる間にもう一方のサプリメントが投与されることを含む、薬剤。
【請求項３】
ビタミンＤ2サプリメントを含む、対象の治療で使用するための薬剤であって、ビタミンＤ2サプリメントがビタミンＤ3サプリメントとともに対象に共投与されるためのものであり、ビタミンＤ3サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ3であり、ビタミンＤ2サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ2であり、ここで２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2に対する比率が（質量またはモルで）少なくとも１．５：１であり、前記共投与は、前記２つのサプリメントが、それらの両方が重なり合った時間中にそれらのそれぞれの薬理学的効果を発揮することができる方式で投与されることを含み、したがって前記サプリメントの投与が（ａ）同時である、または治療過程中（ｂ）異なる時刻であるが一方のサプリメント（または少なくとも１種のその代謝産物）が血清中で検出できる間にもう一方のサプリメントが投与されることを含む、薬剤。
【請求項４】
治療上有効な量のビタミンＤ3サプリメントを投与すること、およびビタミンＤ2サプリメントをビタミンＤの毒性を低減するのに有効な量で投与するものである、請求項１から３までのいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項５】
ビタミンＤ3サプリメントのビタミンＤ2サプリメントに対する比率が、１００：１〜１．５：１の範囲である、請求項１から４までのいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項６】
投与が２５−ヒドロキシビタミンＤ3を２μｇ／ｋｇ／日を超える量である、請求項１から５までのいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項７】
ビタミンＤ3サプリメントおよびビタミンＤ2サプリメントを互いに６時間以内に投与するものであり、前記投与は、（ｉ）最初にビタミンＤ3サプリメント投与し、次いでビタミンＤ2サプリメントを、ビタミンＤ3サプリメントまたはその代謝産物のどちらかが血清中で検出可能である時点に投与することを含んでもよく、または（ii）最初にビタミンＤ2サプリメント投与し、次いでビタミンＤ3サプリメントを、ビタミンＤ2サプリメントまたはその代謝産物のどちらかが血清中で検出可能である時点に投与することを含んでもよい、請求項１から６までのいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項８】
（ａ）前記ビタミンＤサプリメントの投与が、ビタミンＤの不足および／または欠乏症と診断された患者に対するものである、および／または
（ｂ）前記ビタミンＤサプリメントの投与が、対象の血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を少なくとも３０ｎｇ／ｍＬに上昇させ、および／または維持するのに十分な量で行われる、請求項１から７までのいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項９】
前記対象がヒトである、請求項１から８までのいずれか１項に記載の薬剤。
【請求項１０】
５０μｇを超える２５−ヒドロキシビタミンＤ3であるビタミンＤ3サプリメント、２５−ヒドロキシビタミンＤ2であるビタミンＤ2サプリメントおよび医薬として許容し得る賦形剤を含有し、ここで２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2に対する比率が（質量またはモルで）少なくとも１．５：１である、単位剤形を含む組成物。
【請求項１１】
ビタミンＤ2サプリメントが、ビタミンＤの毒性を低減するのに有効な量で存在する、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
ビタミンＤ3サプリメントのビタミンＤ2サプリメントに対する比率が、１００：１〜１．５：１の範囲である、請求項１０または１１に記載の組成物。
【請求項１３】
ビタミンＤ3サプリメントのビタミンＤ2サプリメントに対する比率が、少なくとも２：１である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
ビタミンＤ3サプリメントおよびビタミンＤ2サプリメントを共投与するためのキットであって、ビタミンＤ3サプリメントおよびビタミンＤ2サプリメントの少なくとも１種、ならびに対象にビタミンＤ3サプリメントおよびビタミンＤ2サプリメントを共投与するための指示を与える説明書を含み、ビタミンＤ3サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ3であり、ビタミンＤ2サプリメントが２５−ヒドロキシビタミンＤ2であり、ここで２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2に対する比率が（質量またはモルで）少なくとも１．５：１である、キット。
【請求項１５】
（ａ）ヒト対象に前記サプリメントを投与するための説明書をさらに含む、および／または
（ｂ）ビタミンＤの不足および／または欠乏と診断された患者に前記サプリメントを投与するための説明書をさらに含む、および／または
（ｃ）前記サプリメントの少なくとも１種が単位剤形である、請求項１４に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
米国特許法第１１９条第（ｅ）項により２００７年４月２５日に出願の米国特許仮出願第６０／９１３８４９号に基づく利益をこれによって請求する。
【０００２】
本開示は、広くは、ビタミンＤ3、プロホルモンである２５−ヒドロキシビタミンＤ3、活性型ホルモンである１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3、またはビタミンＤ3類似体（ヒドロキシおよびジヒドロキシ形態を含む）を使用する治療に付随する毒性を低減するための方法および剤形に関する。
【背景技術】
【０００３】
２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3（合わせて「２５−ヒドロキシビタミンＤ」と呼ぶ）として知られるビタミンＤ代謝産物は、血流中のカルシウムおよびリンの正常濃度を維持することに寄与するビタミンＤホルモンのための脂溶性ステロイドプロホルモンである。主として肝臓中に存在する１種または複数の酵素によって、プロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、ビタミンＤ2（エルゴカルシフェロール）から産生され、２５−ヒドロキシビタミンＤ3はビタミンＤ3（コレカルシフェロール）から産生される。２種の該プロホルモンは、また、肝臓中に見出されるものと同一または類似の酵素を含む腸細胞などの肝臓外の特定細胞中でビタミンＤ2およびビタミンＤ3（合わせて「ビタミンＤ」と呼ぶ）から産生される場合がある。
【０００４】
該プロホルモンは、腎臓中でさらに代謝されて効力のあるホルモンになる。プロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、代謝されて１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2として知られるホルモンとなり、同様に、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、代謝されて１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3（カルシトリオール）となる。プロホルモンからのこれらのホルモンの産生は、また、腎臓外の、必要とされる酵素（群）を含んでいる細胞中で行われる場合がある。
【０００５】
ビタミンＤホルモンは、ヒトの健康に関して、細胞内ビタミンＤ受容体（ＶＤＲ）によって媒介される必須の役割を有する。詳細には、ビタミンＤホルモンは、小腸による食事性カルシウムの吸収および腎臓によるカルシウムの再吸収を制御することによって血中カルシウム濃度を調節する。過剰なホルモン濃度は、一過性または長期性のいずれにせよ、異常に高められた尿中カルシウム（高カルシウム尿症）、血中カルシウム（高カルシウム血症）、および血中リン（高リン血症）につながる場合がある。ビタミンＤホルモンは、また、細胞の分化および増殖、副甲状腺による副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）分泌、ならびに骨の正常な形成および代謝の調節に関与している。さらに、ビタミンＤホルモンは、筋骨格、免疫およびレニン−アンジオテンシン系を正常に機能させるのに必要とされる。ビタミンＤホルモンに関するその他多くの役割は、ほとんどあらゆるヒト組織中で報告されている細胞内ＶＤＲの存在、およびビタミンＤに応答する各種遺伝子に基づいて仮定され、説明されている。
【０００６】
特定の組織に対するビタミンＤホルモンの作用は、それらのホルモンが該組織中の細胞内ＶＤＲに結合（またはＶＤＲを占拠）する程度によって左右される。プロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、ＶＤＲに対して本質的に同一の、ビタミンＤホルモンのそれに比べて少なくとも１００分の１未満と見積もられる親和性を有する。結果として、生理学的濃度の２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、前以てビタミンＤホルモンへの代謝がなければ、あったとしてもわずかな生物学的活性しか有さない。しかし、正常に比べて１０〜１，０００倍高い超生理学的濃度の２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、ＶＤＲを十分に占拠し、ビタミンＤホルモンのような作用を発揮する可能性がある。
【０００７】
プロホルモンおよびビタミンＤホルモンの血中濃度は、両方とも、日光曝露または栄養非補給食（ｕｎｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ  ｄｉｅｔ）から継続的で十分なビタミンＤの供給を受けるなら、１日を通して一定であるのが通常である。しかし、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度は、現在利用可能なビタミンＤサプリメントの、特に、ビタミンＤ欠乏症、くる病または骨軟化症を予防するのに必要とされる最小量を大きく超える投与量での投与後に、著しく増大する場合がある。血中プロホルモン濃度も、２５−ヒドロキシビタミンＤ2または２５−ヒドロキシビタミンＤ3の急速静脈内投与後に、あるいは即放性形態のこれら化合物の投与後に、著しく増大する場合がある。
【０００８】
２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3の産生は、ビタミンＤ不足またはビタミンＤ欠乏症（あるいは、ビタミンＤ不足症）などの状態のように、ビタミンＤが供給不足である場合に減退する。２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3の低い産生は、２５−ヒドロキシビタミンＤの低い血中濃度につながる。不十分なビタミンＤ供給は、日光に曝露されることの少ない、ビタミンＤ摂取が慢性的に不十分な、または脂溶性ビタミン（ビタミンＤなど）の低下した腸吸収をもたらす状態または肥満外科手術などの臨床処置に苦しむ個体で発生することが多い。最近、北部地方に住むほとんどの個体は、ビタミンＤ供給が不十分であることが報告されている。未治療で放置すると、不十分なビタミンＤ供給は、くる病および骨軟化症を含む深刻な骨障害を引き起こす場合があり、骨粗鬆症、脊椎および股関節の非外傷性骨折、肥満、糖尿病、筋力低下、免疫不全、自己免疫障害、高血圧、乾癬ならびに各種癌を含むその他多くの障害の発生原因となる可能性がある。
【０００９】
米国科学アカデミーの医学研究所（ＩＯＭ）は、健康な個体に対するビタミンＤの適正摂取量（ＡＩ）は、個体の年齢および性別に応じて１日につき２００〜６００ＩＵの範囲であると結論付けている［参照により組み込まれる、食事摂取基準の科学的評価に関する常任委員会、「食事摂取基準：カルシウム、リン、マグネシウム、ビタミンＤ、およびフッ素」Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、ＤＣ：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  Ｐｒｅｓｓ（１９９７）］。ビタミンＤのＡＩは、主として、ビタミンＤ欠乏症、くる病または骨軟化症を予防するのに十分な血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度（または少なくとも１１ｎｇ／ｍＬ）に基づいて制定された。ＩＯＭは、また、より高い投与量が、高カルシウム尿症、高カルシウム血症、ならびに心不整脈、痙攣、および全身性の血管とその他軟組織の石灰化を含む関連続発症のリスク増加に関連しているという証拠に基づいて、ビタミンＤに対して１日につき２，０００ＩＵの最大許容摂取量を確立した。
【００１０】
現在利用可能な経口ビタミンＤ3サプリメントは、最適な血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を安全に達成しかつ維持するための理想からかけ離れている。これらの製剤は、典型的には、４００ＩＵ〜５，０００ＩＵのビタミンＤ3を含有し、消化管での急速または即放用に製剤化されている。ビタミンＤの充足にしばしば必要とされるような慢性的高投与量で投与する場合、これらの製品は、毒性をもたらす可能性がある。
【００１１】
特定の個体において、ＵＬを超えるビタミンＤ3の栄養補給がしばしば必要とされるが、現在利用可能な経口ビタミンＤ3サプリメントは、毒性を生じさせる可能性のある高投与量のビタミンＤ化合物を投与することの諸問題を考慮すれば、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ3濃度を最適濃度に維持するのに十分には適さない。
【００１２】
２５−ヒドロキシビタミンＤ3の投与は、血中および細胞内２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度の急増またはスパイクをもたらし、それによって高カルシウム血症および高カルシウム尿症として現われる毒性を助長する場合がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
明らかに、現在利用可能な経口ビタミンＤサプリメントを用いて直面する安全性の問題を考慮すれば、ビタミンＤ栄養補給のための代わりの手段が必要とされる。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明は、広くは、効果的かつ安全に、血中２５−ヒドロキシビタミンＤを最適濃度（患者に対して＞３０ｎｇ／ｍＬの２５−ヒドロキシビタミンＤ、または＞７５ｎモル／Ｌと規定される）まで戻し、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度をこのような最適濃度で維持する方法、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度のこのような最適濃度未満への降下を予防する方法、および二次性副甲状腺機能亢進症を予防または治療する方法に関する。
【００１５】
血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ3の過剰上昇は、毒性を生じさせる場合がある。心不整脈、痙攣、および全身性の血管およびその他軟質組織の石灰化を含むこのような毒性の１つの発現は、高められた血清中カルシウム濃度に帰すことができる。本発明は、プロホルモン２５−ヒドロキシビタミンＤ3を使用する治療に付随する毒性を、２５−ヒドロキシビタミンＤ2の共投与によって低減または排除できるという立証に基づく。本発明は、また、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2との共投与は、どちらか単独の投与に比べて毒性をもたらさないで、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度をより効果的に高めることができるという発想に基づく。
【００１６】
本発明は、かくして、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を安全かつ効果的な方法で正常（少なくとも３０ｎｇ／ｍＬ）または正常濃度よりも高い濃度まで戻すために、正常より低い血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度の発生または重症度を抑えるために、および／または二次性副甲状腺機能亢進症を予防または治療するために使用できる方法、組成物、剤形、およびキットに関する。
【００１７】
一態様において、本発明の方法は、１種または複数のビタミンＤ3サプリメントの投与に付随するビタミンＤの毒性を低減するために、対象、動物またはヒト患者に十分な量の１種または複数のビタミンＤ2サプリメントと共に投与することを含む。典型的な実施形態において、本明細書中で言及されるビタミンＤ3サプリメントは、ビタミンＤ3（コレカルシフェロール）、２５−ヒドロキシビタミンＤ3、１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3、または１，２５−ジヒドロキシ−１９−ノル−ビタミンＤ3、１α−ヒドロキシビタミンＤ3、および当技術分野で周知のその他の化合物を含むビタミンＤ3類似体（既知のヒドロキシおよびジヒドロキシ形態のすべてを含む）である。典型的な実施形態において、本明細書中で言及されるビタミンＤ2サプリメントは、エルゴカルシフェロールまたは２５−ヒドロキシビタミンＤ2または１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2、および当技術分野で周知のその他の化合物である。
【００１８】
１種または複数のビタミンＤ2サプリメントは、治療の過程中に別々にまたはいくつかの組合せで投与することができ；同様に、１種または複数のビタミンＤ3サプリメントは、治療の過程中に別々にまたはいくつか組合せで投与することができる。好ましくは、ビタミンＤ3サプリメントは、治療上有効な量（例えば、低ビタミンＤ症および／または二次性副甲状腺機能亢進症を予防または治療するのに有効な量）で投与されるが、ビタミンＤ2サプリメントは、ビタミンＤの毒性を低減するのに有効な量で投与される。いくつかの実施形態において、ビタミンＤ2サプリメントの投与は、通常的には有害作用または毒性を生じると予想される量でのビタミンＤ3サプリメントの投与を可能にする。ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントは、同一または異なる経路、例えば、経口、静脈内、局所、腹膜内、および／または経皮で、同じまたは別の組成物で投与できる。ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントは、同時に、または同時ではないが治療過程中の部分的に重複する時点で（例えば、１日おきにまたは同一日の異なる時点で）投与できる。好ましくは、ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントは、同一日に投与される。
【００１９】
典型的な実施形態において、ビタミンＤ3サプリメントのビタミンＤ2サプリメントに対する比率（質量またはモルで）は、１００：１〜１：２０、例えば、７５：１、６０：１、５０：１、４０：１、３０：１、２０：１、１５：１、１０：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１．５：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：１０、または１：１５の範囲でよい。本明細書中で試験した比率は、質量で測定した比率であったが、試験したＤ2およびＤ3化合物の分子量は類似しており；活性は、モル基準であり、したがって、結果はモルで測定された比率に対して同様にあてはまると予想される。
【００２０】
別の態様において、本発明の方法は、患者にビタミンＤ3サプリメントを、任意選択で治療上有効な量で提供すること、およびこのようなビタミンＤ3サプリメントの投与に付随する有害作用は、ビタミンＤ2サプリメントの共投与によって低減され得ることを患者に情報提供することを含む。
【００２１】
１つの典型的な実施形態において、該方法は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3と２５−ヒドロキシビタミンＤ2との組合せを単一の複合製剤で、または２つの別個の製剤で、静脈内、経口、局所、腹膜内および経皮を含む各種経路を介して共投与することを含む。関連する実施形態において、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を高めるのに、好ましくは２５−ヒドロキシビタミンＤ3濃度を３０ｎｇ／ｍＬまたはそれ以上まで高めるのに治療上有効な量で投与され、２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、毒性を低減する量で投与される。２５−ヒドロキシビタミンＤ3のある量の２５−ヒドロキシビタミンＤ2との共投与は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を単独で投与するのに比較して、毒性のレベルを有意に低減するか、あるいは毒性の危険を低下させながら、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を効果的に高めることができる。したがって、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を、より迅速かつ安全に高めることができ、および／またはより多量の２５−ヒドロキシビタミンＤ3を投与できる。
【００２２】
別の実施形態において、本発明は、コレカルシフェロールを単独で投与するのに比較して安全上の利点を有する、エルゴカルシフェロールとコレカルシフェロールとの共投与のための方法を提供する。
【００２３】
別の実施形態において、本発明は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3をエルゴカルシフェロールと共投与する、またはコレカルシフェロールを２５−ヒドロキシビタミンＤ2と共投与する方法を提供する。
【００２４】
本発明の方法において、ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントの投与量は、一緒に、またはそれらの投与が本発明中に記載の安全上の利益を達成する時間枠内に別々に投与される。例えば、２５−ヒドロキシビタミンＤ2を、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を投与する１時間前、６時間前、１２時間前、２４時間前、または２日前に投与できる。逆に、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を、２５−ヒドロキシビタミンＤ2を投与する１時間前、６時間前、１２時間前、２４時間前、または２日前に投与できる。別法として、患者に、ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントをそれぞれ１週につき少なくとも１回（または２または３回）服用する限り、２５−ドロキシビタミンＤ3を１週につき１、２または３回、２５−ヒドロキシビタミンＤ2を１週につき１、２または３回服用するような指示を与えることができる。２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ジドロキシビタミンＤ3またはこれらの組合せは、任意選択で他の治療薬と一緒に、上記実施形態により、１日につき約１〜１００μｇの累積投与量で、１日につき約５〜５０μｇ、例えば、約１０〜２５μｇの好ましい投与量で投与することができる。
【００２５】
別の関連する態様において、本発明は、ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントの両方を含有する組成物を提供する。いくつかの実施形態において、ビタミンＤ3サプリメントは、治療上有効な量で存在し、一方、ビタミンＤ2サプリメントは、毒性を低減する量で存在する。いくつかの実施形態において、ビタミンＤ3サプリメントは、単独で投薬されるなら、有害作用または毒性をもたらすと予想される量で存在する。該組成物は、任意の上記ビタミンＤ2サプリメントおよび／またはビタミンＤ3サプリメントを任意の上記比率で含有できる。典型的な実施形態において、該組成物は、単位投与量につき約１〜１００μｇの範囲、例えば、単位投与量につき約１０、２５、５０、７５または１００μｇの累積単位投与量（２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3を合わせた総量）である。他の典型的な実施形態において、該組成物は、約１０、２５、５０、７５または１００μｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ3、および毒性を低減する量の付加的な２５−ヒドロキシビタミンＤ2を含む単位投与量である。
【００２６】
典型的な実施形態では、２５−ヒドロキシビタミンＤ3に加えてある量の２５−ヒドロキシビタミンＤ2が、１つの製剤中に含められ、治療を必要とするヒトまたは動物に経口で毎日投与される。別の実施形態では、ある量の２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3が、静脈内投与に適した１つの等張性無菌製剤中に含められ、治療を必要とするヒトまたは動物に週に３回徐々に注射される。
【００２７】
さらに別の態様において、本発明のキットは、ビタミンＤ3サプリメントを任意に治療上有効な量で収容した容器を、患者にこのようなビタミンＤ3サプリメントの投与に付随する有害作用は、ビタミンＤ2サプリメントの共投与によって低減され得ることを情報提供する貼付説明書と共に含む。該キットは、任意に毒性を低減する量のビタミンＤ2サプリメントをさらに含むことができる。
【００２８】
前述の簡単な説明は、一般に、本発明の特徴とする態様の概略を述べたものであり、後に続くより完全な詳細説明をよりよく理解するための助けとして役立つはずである。このような説明に関して、本発明は、本明細書に記載の製造方法または詳細、化学組成、または使用分野に限定されないことを明瞭に理解すべきである。製造、化学組成、使用、または適用に関する任意の他の変形形態は、本発明の代替の実施形態として明らかであると考えるべきである。具体的構成に関する他の利点およびより完全な評価、組成に関する変形形態、ならびに本発明の化学的および物理的特性は、詳細な説明の吟味により得られるであろう。
【００２９】
また、本明細書中で使用される語法および術語は、説明のためのものであり、限定するものと見なされるべきでないと解されたい。本明細書中で「含む」、「有する」および「含有する」およびその変形体を使用することは、その後に挙げられる品目、およびその等価体、ならびに付加的品目およびその等価体を包含することを意味する。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】２５−ヒドロキシビタミンＤ2と２５−ヒドロキシビタミンＤ3との各種組合せを投与されたラットにおける、総２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度の分析結果を示す図である。図１で、＊はｐ＜０．０５の、＊＊はＰ＜０．００１の、＊＊＊はＰ＜０．０００１の統計的有意性を意味する。
【図２】２５−ヒドロキシビタミンＤ2と２５−ヒドロキシビタミンＤ3との各種組合せを投与されたラットにおける、血清中カルシウム濃度の分析結果を示す図である。
【図３】２５−ヒドロキシビタミンＤ2と２５−ヒドロキシビタミンＤ3との各種組合せを投与されたラットの腎臓における、ＣＹＰ２４濃度の分析結果を示す図である。図３で、＊は、Ｐ＜０．０５の統計的有意性を意味する。
【図４】２５−ヒドロキシビタミンＤ2と２５−ヒドロキシビタミンＤ3との各種組合せを投与されたラットにおける、１，２５−ヒドロキシビタミンＤ3濃度の分析結果を示す図である。
【図５】２５−ヒドロキシビタミンＤ2と２５−ヒドロキシビタミンＤ3との各種組合せを投与されたラットにおける、２５−ヒドロキシビタミンＤ2の代謝産物濃度の分析結果を示す図である。
【図６】２５−ヒドロキシビタミンＤ2と２５−ヒドロキシビタミンＤ3との各種組合せを投与されたラットにおける、血清中カルシウム濃度の分析に関する異なる研究の結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本発明は、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を効果的かつ安全に最適濃度（ヒト対象および患者に対して＞３０ｎｇ／ｍＬの２５−ヒドロキシビタミンＤと規定される）まで戻すために、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度をこのような最適濃度に維持するために、血中２５−ヒドロキシビタミンＤの最適未満の濃度への降下を予防するために、および二次性副甲状腺機能亢進症を予防または治療するために、ビタミンＤサプリメントを必要とする対象、動物またはヒト患者に、２５−ヒドロキシビタミンＤ3に加えて十分な量の２５−ヒドロキシビタミンＤ2を組み合わせて投与する方法に関する。
【００３２】
本発明の方法、組成物およびキットは、１種または複数のビタミンＤ3サプリメントの投与に付随する毒性を、１種または複数のビタミンＤ2サプリメントを共投与することによって低減または排除することに関連する。ビタミンＤ3サプリメントに加えてビタミンＤ2サプリメントを共投与することは、ＣＹＰ２４などの異化酵素の誘導低減をもたらし、それによって、どちらか単独の投与に比べて血清中総２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度のより効果的な上昇をもたらす。有利には、ビタミンＤ3サプリメントのビタミンＤ2サプリメントに対する比率は、２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、より容易に２４，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2に異化され、一方、２５−ヒドロキシビタミンＤ3は、より容易に活性型１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の形態に代謝、異化されるという観察に基づいて、少なくとも１：１、１．５：１、２：１、３：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、１５：１、２０：１、３０：１、４０：１、５０：１、６０：１、７５：１、１００：１またはそれ以上である。
【００３３】
ビタミンＤ3サプリメントとビタミンＤ2サプリメントとの共投与は、そうではない方法では有害作用のない慢性投与のための上限界に近い、上限界、上限界を超えると考えられる量での、またはほぼ１μｇ／ｋｇ／日（ＵＬをベースにして）を超えるビタミンＤ3のその等価量（１週間に１、２または３回の投与に分割して）での、または２〜６μｇ／ｋｇ／日を超える２５−ヒドロキシビタミンＤ3のその等価量（１週間に１、２または３回の投与に分割して）での、または０．０１〜０．０２μｇ／ｋｇ／日を超える１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の等価量（１週間に１、２または３回の投与に分割して）でのビタミンＤ3サプリメントの投与を可能にすることができる。したがって、５０μｇを超えるビタミンＤ3、５０μｇを超える２５−ヒドロキシビタミンＤ3、または１μｇを超える１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3を含有する単位剤形が考えられる。
【００３４】
本明細書中で使用する場合、以下の定義は、本発明を理解する上で当業者を援助するのに有用であろう。
【００３５】
用語「共投与」は、ビタミンＤ2サプリメントまたはビタミンＤ3サプリメントに関して使用する場合、その２つの薬剤が、それらの両方が部分的に重なり合った時間中にそれらのそれぞれの薬理学的効果を発揮する方式で投与されることを意味する。該薬剤は、同じ製剤でまたは別の製剤で、同時にまたは異なる時刻に、同一経路または異なる経路で投与できる。例えば、共投与は、ビタミンＤ2サプリメントを投与した後の、ビタミンＤ2サプリメントまたは少なくとも１種もしくはすべての代謝産物のどちらかが血清中で検出できるある時点、例えば、６時間、８時間、１２時間、２４時間（１日）、または２日以内に、ビタミンＤ3サプリメントを投与することを含むことができる。別法として、共投与は、ビタミンＤ3サプリメントを投与した後の、ビタミンＤ3サプリメントまたは少なくとも１種もしくはすべての代謝産物のどちらかが血清中で検出できるある時点、例えば、６時間、８時間、１２時間、２４時間（１日）、または２日以内にビタミンＤ2サプリメントを投与することを含むことができる。別の実施形態では、患者に、ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントのそれぞれを１週につき少なくとも１回（または２または３回）服用する限り、ビタミンＤ3サプリメントを１週につき１、２または３回、ビタミンＤ2サプリメントを１週につき１、２または３回服用するような一般的指示を与えることができる。
【００３６】
用語「治療上有効な量」は、患者の状態によって左右され、所望の臨床効果を達成するのに、例えば、検査室の試験値を正常範囲または患者の状態に対して推奨される範囲に維持するのに有効な量、あるいは臨床徴候または疾患症状の発生または重症度を低減するのに有効な量である。いくつかの実施形態において、治療上有効な量は、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度または２５−ヒドロキシビタミンＤ3濃度を約３０ｎｇ／ｍＬ（約７５ナノモル／Ｌに相当）以上に概して維持するのに有効な量である。このような濃度は、長期、例えば、少なくとも１カ月、少なくとも３カ月、少なくとも６カ月、９カ月、１年、またはそれ以上にわたって維持できる。他の実施形態において、治療上有効な量は、血清中副甲状腺ホルモン（ｉＰＴＨ）濃度の、治療なしのベースライン濃度から少なくとも１５％、２０％、２５％または３０％の低減を達成するのに概して有効な量である。さらに他の実施形態において、治療上有効な量は、ステージ３については３５〜７０ｐｇ／ｍＬ（３．８５〜７．７ピコモル／Ｌに相当）であり、ステージ４については７０〜１１０ｐｇ／ｍＬ（７．７〜１２．１ピコモル／Ｌに相当）であり、ステージ５については１５０〜３００ｐｇ／ｍＬ（１６．５〜３３．０ピコモル／Ｌに相当）である、ＣＫＤのステージに特異的であるｉＰＴＨの目標範囲（Ｋ／ＤＯＱＩガイドラインＮｏ．１中に規定されている）に到達するのに概して有効な量である。ビタミンＤ3サプリメントの量に関して使用する場合、「治療上有効な」は、単独で投与される場合でのビタミンＤ3サプリメントの有効量、あるいはビタミンＤ2サプリメントと組み合わせて投与される場合でのビタミンＤ3サプリメントの有効量のどちらかを指すことができる。
【００３７】
本明細書中で使用する場合、用語「ビタミンＤの毒性」は、２５−ヒドロキシビタミンＤの過剰投与および過剰に高められた血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度から被る、悪心、嘔吐、多尿、高カルシウム尿症、高カルシウム血症、および高リン血症を含む有害作用を指すことを意味する。いくつかの実施形態において、毒性は、血清中カルシウムの１０．２ｍｇ／ｄＬを超える上昇、および／または血清中リンの４．６ｍｇ／ｄＬを超える上昇、および／または血清中カルシウム×リン産生物の５５を超える上昇、および／または尿中カルシウム：クレアチニン率の３００ｍｇ／２４時間を超える上昇によって明白になる。
【００３８】
「ビタミンＤの不足および欠乏症」は、一般に、３０ｎｇ／ｍＬ（約７５ナノモル／Ｌに相当）未満の血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を有することと定義される（参照により本明細書中に組み込まれる、国立腎臓財団（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）のガイドライン、ＮＫＦ、Ａｍ．Ｊ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓ．４２：Ｓ１〜Ｓ２０２（２００３））。
【００３９】
特記しない限り、「２５−ヒドロキシビタミンＤ2／２５−ヒドロキシビタミンＤ3」は、本明細書中で使用される場合、２５−ヒドロキシビタミンＤ2、２５−ヒドロキシビタミンＤ3、またはこれらの組合せを包含すると解釈される。
【００４０】
特記しない限り、「２５−ヒドロキシビタミンＤ」は、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3を集合的に指すと解釈される。例えば、分析された２５−ヒドロキシビタミンＤの血中濃度には、存在するなら、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3の両方が含まれる。
【００４１】
用語「ビタミンＤ2サプリメント」は、本明細書中で使用する場合、ビタミンＤ3サプリメントの投与に付随するビタミンＤの毒性を低減する能力を保持する、エルゴカルシフェロール、２５−ヒドロキシビタミンＤ2、または１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ2の前駆体、類似体または誘導体を指す。
【００４２】
用語「ビタミンＤ3サプリメント」は、本明細書中で使用する場合、ビタミンＤ受容体を活性化する、あるいはビタミンＤ受容体を活性化する化合物にヒト中で代謝的に転化され得る、ビタミンＤ3（コレカルシフェロール）、２５−ヒドロキシビタミンＤ3、または１α−ヒドロキシビタミンＤ3をはじめとする１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ3の前駆体、類似体または誘導体を指す。
【００４３】
また、本明細書中で列挙される任意の数値は、低い方の数値から高い方の数値までのすべての値を含み、換言すれば、列挙された最低値と最高値の間の数値のすべての可能な組合せが、本出願中で明白に指定されていると考えるべきであることを、具体的に理解されたい。例えば、濃度範囲または有益な効果の範囲が１％〜５０％と指定されているなら、２％〜４０％、１０％〜３０％、または１％〜３％などの値は、本明細書中で明白に列挙されていると解釈される。これらは、具体的に解釈されるものの例にすぎない。
【００４４】
医学研究所（Ｔｈｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）の食品栄養委員会（Ｔｈｅ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｂｏａｒｄ）は、ビタミンＤに関する推奨摂取許容量（Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  Ｄｉｅｔａｒｙ  Ａｌｌｏｗａｎｃｅ）（ＲＤＡ）を確立する科学的データが不十分であると判定している。代わりに、推奨される摂取量を、健康人での骨の健康で正常なカルシウム代謝を維持するであろう１日当たりビタミンＤ摂取量を表す適正摂取量（Ａｄｅｑｕａｔｅ  Ｉｎｔａｋｅ）（ＡＩ）として呈示している。ＡＩは、一般に、特定の年齢および性別群のほとんどすべてのメンバーにおいてビタミンＤ欠乏症、くる病または骨粗鬆症を予防するのに必要とされる量（または≧１１ｎｇ／ｍＬ）に合致する、またはその量を超えるように設定されている。ビタミンＤに関するＡＩは、マイクログラム（μｇ）または国際単位（ＩＵ）のどちらかとして記載できる。１μｇのビタミンＤの生物学的活性は、４０ＩＵに同等と設定される。乳幼児、子供および成人に関するビタミンＤのＡＩを下表１に示す。
【００４５】
【表１】
0005444212.tif 000002
【００４６】
医学研究所の食品栄養委員会は、１２月齢までの乳児に対して２５μｇ（１，０００ＩＵ）の、子供、成人、妊娠期および授乳期の女性に対して５０μｇ（２，０００ＩＵ）のビタミンＤに関する許容上限摂取量（ＵＬ）を設定している。一般に、ＵＬは、健康に有害な作用をもたらしそうにないビタミンＤの１日当たり最大摂取量に設定される。ＵＬを超える長期摂取は、健康に有害な作用のリスクを増大させる可能性がある。乳児、子供および成人に対するビタミンＤのＵＬを下表２に示す。
【００４７】
【表２】
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【００４８】
他の報告は、９５μｇ／日（＝３８００ＩＵ）が、有害作用が観察される最低投与量であると指摘している。
【００４９】
本発明の組成物、方法およびキットは、ビタミンＤの栄養補給を必要とする任意の対象を、ビタミンＤの不足または欠乏症を予防的に防止するように、または低い血清中ビタミン２５（ＯＨ）Ｄ濃度を正常範囲もしくはそれ以上に治療的に充足するように治療するのに有用である。本発明の組成物および方法は、また、低いビタミンＤ濃度に由来する二次性副甲状腺機能亢進症を予防または治療するのに有用である。一般に、５ｎｇ／ｍＬ未満の血清中２５（ＯＨ）Ｄ値は、くる病および骨粗鬆症と関連する重症の欠乏症を暗示する。正常範囲の下端として、３０ｎｇ／ｍＬが提唱されているが、より最近の研究は、ＰＴＨ濃度およびカルシウム吸収は、血清中総２５（ＯＨ）Ｄ濃度がほぼ４０ｎｇ／ｍＬに到達するまで最適化されないことを示唆している［Ｖｉｅｔｈ，Ｒ．Ｐｒｏｇ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．２００６  Ｓｅｐ；９２（１）：２６〜３２も参照されたい］。用語「対象」には、本明細書中で使用する場合、ヒト、哺乳動物（例えば、イヌ、ネコ、げっ歯類、ヒツジ、ウマ、ウシ、ヤギ）、獣医動物および動物園動物が含まれる。
【００５０】
ビタミンＤの栄養補給を必要とする患者には、健康な対象、およびビタミンＤの不足または欠乏症の危険にさらされている対象、例えば、ステージ１、２、３、４または５の慢性腎臓病を有する対象；ビタミンＤ強化牛乳を飲用しない乳児、子供および成人（例えば、乳糖不耐性の対象、牛乳アレルギーを有する対象、牛乳を摂取しないベジタリアン、および母乳栄養乳児）；くる病を有する対象；黒い皮膚を有する対象（例えば、米国で、１５〜４９歳のアフリカ系アメリカ人女性の４２％は、ビタミンＤ欠乏であるが、白人女性では４％である）；高齢者（日光曝露中に皮膚内でビタミンＤを合成する能力が低下し、また、屋内により多く留まりそうな人）；施設に収容された成人（アルツハイマー病または精神病を有する対象を含む屋内に留まりそうな人）；露出された皮膚のすべてを覆う対象（特定の宗教または文化のメンバーなど）；日焼け止めを常用する対象（例えば、日光保護係数（Ｓｕｎ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ）（ＳＰＦ）が８の日焼け止めを塗布すると、ビタミンＤの産生が９５％まで低下し、ＳＰＦ値が大きいほど、皮膚でのビタミンＤの産生がさらに減少する可能性がある）；脂肪吸収不全症候群を有する対象（限定はされないが、嚢胞性線維症、胆汁鬱滞性肝疾患、その他の肝疾患、胆嚢疾患、膵臓酵素欠乏症、クローン病、炎症性腸疾患、スプルーまたはセリアック病、あるいは胃および／または腸の部分または全部の外科的除去を含む）；炎症性腸疾患を有する対象；クローン病を有する対象；小腸切除を受けた対象；歯肉疾患を有する対象；フェニトイン、フォスフェニトイン、フェノバルビタール、カルバマゼピンおよびリファンピンをはじめとするビタミンＤの異化を増大させる薬物を服用している対象；コレスチラミン、コレスチポール、オルリスタット、ミネラルオイル、および脂肪代替物をはじめとするビタミンＤの吸収を低下させる医薬を服用している対象；ケトコナゾールをはじめとするビタミンＤの活性化を阻害する医薬を服用している対象；コルチコステロイドをはじめとするカルシウム吸収を低下させる医薬を服用している対象；肥満を有する対象（体脂肪貯蔵部に蓄えられたビタミンＤは生物学的に利用されにくい）；骨粗鬆症を有する対象および／または閉経後女性が含まれる。ビタミンＤの食事摂取基準に関する医学研究所の報告によれば、食品摂取データは、若年および高齢女性の両方にとってのビタミンＤの中位摂取量が現推奨量よりも低いことを示唆しており；データは、若年および高齢女性の５０％超がビタミンＤの推奨量を摂取していないことを示唆している。本発明の方法から任意選択で除外されるのは、腎性骨ジストロフィー（骨軟化症および嚢胞性線維性骨炎を含む）を患う対象の治療処置である。
【００５１】
他の態様において、本発明の組成物および方法は、ビタミンＤに応答する疾患、すなわち、ビタミンＤ、２５（ＯＨ）Ｄまたは活性型ビタミンＤ（例えば、１，２５（ＯＨ）2Ｄ）が疾患の開始または進行を予防するか、あるいは疾患の徴候または症状を減弱する疾患の予防または治療処置に有用である。ビタミンＤに応答するこのような疾患には、癌（例えば、乳房、肺、皮膚、黒色腫、結腸、結腸直腸、直腸、前立腺および骨の癌）が含まれる。１，２５（ＯＨ）2Ｄは、いくつかの細胞に関してインビトロで細胞分化を誘導し、および／または細胞増殖を阻害することが観察されている。ビタミンＤに応答する疾患には、また、自己免疫疾患、例えば、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、リウマチ様関節炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、強皮症、線維症、グレーブス病、橋本病、急性または慢性の移植拒絶、急性または慢性の移植片対宿主病、炎症性腸疾患、クローン病、全身性紅斑性狼瘡、シェーグレン症候群、湿疹および乾癬、皮膚炎（アトピー性皮膚炎、接触性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎および／または慢性皮膚炎を含む）が含まれる。ビタミンＤに応答する疾患には、また、他の炎症性疾患、例えば、喘息、慢性閉塞性肺疾患、多嚢胞性腎臓病（ＰＫＤ）、多嚢胞性卵巣症候群、膵炎、腎炎、肝炎、および／または感染症が含まれる。ビタミンＤに応答する疾患には、高血圧および心血管疾患が含まれることも報告されている。したがって、本発明は、心血管疾患の危険にさらされているまたは該疾患を患う対象、例えば、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、冠動脈疾患、脳血管疾患、末梢血管疾患、心筋梗塞、心筋虚血、脳虚血、脳卒中、鬱血性心不全、心筋症、肥満またはその他の体重障害、脂質障害（例えば、高脂血症、糖尿病付随性異脂肪血症および混合性異脂肪血症、低アルファリポタンパク血症、高クリセリド血症、高コレステロール血症および低ＨＤＬ（高密度リポタンパク）を含む異脂肪血症）、代謝性障害（例えば、メタボリック症候群、ＩＩ型糖尿病、Ｉ型糖尿病、高インスリン血症、耐糖能障害、インスリン抵抗性、神経障害、腎障害、網膜症、糖尿病性足部潰瘍および白内障を含む糖尿病性合併症）、および／または血栓症を有する対象の予防または治療処置を考えている。
【００５２】
本発明は、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3の経口、静脈内および局所製剤を含む組成物、ならびにこのような製剤を投与して、ビタミンＤの栄養補給に付随する深刻な副作用、すなわちビタミンＤの毒性をもたらすことなしに、２５−ヒドロキシビタミンＤの不足および欠乏症を治療する方法を含む。
【００５３】
本発明の組成物には、毎日の便利な経口投与のために２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3を組み込んだ、高度に安定な医薬製剤が含まれる。開示される組成物は、ビタミンＤまたは２５−ヒドロキシビタミンＤのこれまでの既知製剤と比較して、長期にわたる継続的な規則的投与で、血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を最適濃度に戻す上での卓越した有効性、および卓越した安全性という二重の予想外の利益を伴う、持続的な血中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度をもたらす。
【００５４】
本発明の別の実施形態では、２５−ヒドロキシビタミンＤ3と組み合わせた２５−ヒドロキシビタミンＤ2の、静脈内投与に適した無菌の等張性製剤を調製できる。このような製剤は、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3を無水のエタノール、プロピレングリコールまたはその他の適切な溶媒に溶解すること、および生じた溶液を適切な容積の注射用水中で界面活性剤、塩類および保存剤と混合することによって調製される。このような製剤は、ヘパリンロックを介して注射器から、あるいは時間をかけて絶え間なく注射される大量の無菌溶液（例えば、生理食塩水溶液）に添加することによって、即時的にまたは徐々に投与できる。
【００５５】
剤形は、また、保存または安定化用補助剤などの補助剤を含むことができる。それらの剤形は、また、他の治療上価値のある物質を含むことができ、あるいは本明細書中および特許請求の範囲中で指定される１種を超える化合物を混合物の状態で含むことができる。
【００５６】
有利には、ビタミンＤ2サプリメントとビタミンＤ3サプリメントとの組合せは、他の治療薬と一緒に、上記実施形態により、１日につき１〜２００μｇの投与量で経口または静脈内にて投与することができ、好ましい投与総量は１日につき５〜１０μｇである。本発明の化合物を他の治療薬と組み合わせて投与する場合、投与される組合せにおける各化合物の比率は、扱われる個々の疾患状態によって左右される。例えば、ビタミンＤ2サプリメントおよびビタミンＤ3サプリメントを、１種または複数のカルシウム塩（カルシウムサプリメントまたは食事性リン酸塩結合剤として意図された）、ビスホスホネート、カルシウム擬似薬、ニコチン酸、鉄、リン酸塩結合剤、活性型ビタミンＤステロール、血糖および高血圧調節薬、ならびに各種抗悪性腫瘍薬と共に経口で投与することを選択できる。さらに、２５−ヒドロキシビタミンＤ2および２５−ヒドロキシビタミンＤ3を、または２５−ヒドロキシビタミンＤ2およびコレカルシフェロールを、または２５−ヒドロキシビタミンＤ3およびエルゴカルシフェロールを、活性型ビタミンＤステロール、血糖および高血圧調節薬、各種抗悪性腫瘍薬と共に静脈内で投与することを選択できる。実際、所望される目的が疾患状態の治療的処置である場合には、より高投与量の本発明化合物が使用され、一方、予防目的に対しては、より低い投与量が一般には使用され、任意の所定の症例において投与される具体的投与量は、当業者に周知であるように、投与される具体的化合物、治療すべき疾患、対象の状態、および薬物の活性または対象の応答を変更する可能性のある他の関連する医学的事実に従って調節されると解される。
【００５７】
記載の送達系にビタミンＤ3サプリメントとビタミンＤ2サプリメントの組合せを含めることは、生じる製剤が、ビタミンＤ3とビタミンＤ2との両方の内分泌系を安全に支援するのに有用であることを可能にする。現在利用可能なビタミンＤサプリメントおよび２５−ヒドロキシビタミンＤ3の以前に上市された経口製剤は、一方または他方の系だけを支援する。
【実施例】
【００５８】
以下の実施例により本発明をさらに説明するが、該実施例を本発明の範囲を限定するものと解釈すべきでない。
【００５９】
（実施例１）
２５−ヒドロキシビタミンＤ3と２５−ヒドロキシビタミンＤ2との各種組合せの共投与は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3単独での治療で観察される毒性を軽減する
２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2との共投与に付随する毒性の低減を２５−ヒドロキシビタミンＤ3単独と比較して調べるために、９０匹の雄性スプラーグドーリーラットを、２５−ヒドロキシビタミンＤ3と２５−ヒドロキシビタミンＤ2との各種組合せで連続して５日間静脈内で治療する。研究開始の１日前に、ラットを、ランダムに選択し、群に割り振り、表３に従って治療した。
【００６０】
【表３】
0005444212.tif 000004
【００６１】
各動物の日々の治療については、ふさわしい成分を静脈内で投与した。毎日の治療は、それぞれの日に３時間の時間枠内で実施した。治療の初日（投与前）、および２日目にあたる２４時間（０時間は最初に注射した時刻である）の時点に、第２回目の投与を行う前に、群１〜１５の動物から頚静脈カテーテルを通して非保存用チューブ（ｕｎｐｒｅｓｅｒｖｅｄ  ｔｕｂｅ）中に血液（〜１ｍＬ）を採取した。血清を分離し、新たなチューブに移し、ほぼ−８０℃で直ちに凍結した。６日目にあたる１２０時間の時点で、すべての動物を屠殺するに先立ってすべての動物から頚静脈カテーテルを通して非保存用チューブ中に血液（〜２ｍＬ）を採取した。血清を分離し、新たなチューブに移し、ほぼ−８０℃で直ちに凍結した。また、６日目にあたる１２０時間の時点（最終投与の２４時間後）ですべての動物を二酸化炭素吸入で安楽死させ、心穿刺で全血を採取した。血液を非保存用チューブ（すなわち、レッドストッパー付き）中に入れた。血清を分離し、新たなチューブ（１ｍＬアリコート）に移し、ほぼ−８０℃で直ちに凍結した。次いで、すべての動物を剖検に付した。自己分解性変化を避けるために、死体の剖検は、できるだけ早く実施した。各動物について、剖検は、臨床的に記録されるすべての病変に対する言及を含む外部検査、ならびに内部「簡略」検査からなる。
【００６２】
最初の投与後１２０時間の時点の血清検体中の総２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を、タンデム質量分光検出を利用する高速液体クロマトグラフィー法を使用して測定した。該方法を利用して、血清中の２５−ヒドロキシビタミンＤ3および２５−ヒドロキシビタミンＤ2の個々の濃度を測定し、その濃度の和として総濃度を決定した。最終投与の２４時間後の時点で動物から採取した血清を、２５−ヒドロキシビタミンＤ3、２５−ヒドロキシビタミンＤ2、およびそれらの代謝産物の濃度変化について分析した。
【００６３】
腎臓中でのＣＹＰ２４の誘導を次のように測定した：腎臓の８分の１（１／８）を、薄く切り、トリゾール（ＴＲＩｚｏｌ）法を使用するＲＮＡ単離のためにホモジナイズした。ｃＤＮＡ合成の後、Ｃｙｐ２４ｍＲＮＡ濃度を評価し、リアルタイムＲＴ−ＰＣＰで特異的ＣＹＰ２４プローブを使用してＧａｐｄｈ  ｍＲＮＡに対して正規化した。
【００６４】
図１で、２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度は、ラットに２５−ヒドロキシビタミンＤ3を単独または示した投与と組み合わせて５日間毎日投与した場合の、血清中総２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度の上昇を示す。
【００６５】
下表４は、５日間の投与研究に続く動物の肉眼剖検で観察された発見を示す。重篤な毒性の徴候（肺内血液）は、最高投与量の２５−ヒドロキシビタミンＤ3（６μｇ／ｋｇ）を単独で受け入れた動物群でのみ観察された。
【００６６】
【表４】
0005444212.tif 000005
【００６７】
図２で、血清中カルシウム濃度は、６μｇ／ｋｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ3を単独で受け入れた群１１において、最高の血清中カルシウム到達濃度が観察されたことを示している。これらの動物は、また、肉眼剖検で毒性の徴候を呈した。毒性は、２５−ヒドロキシビタミンＤの総投与量レベルが６μｇ／ｋｇを超えた場合でも、２５−ヒドロキシビタミンＤ2の共投与によって減弱または排除された。
【００６８】
この研究の結果は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の投与に付随する血清中カルシウムの上昇をはじめとする毒性を、２５−ヒドロキシビタミンＤ2の共投与によって低減または排除できることを示している。添加される２５−ヒドロキシビタミンＤ2の比率が小さくても（１：６０）、２５−ヒドロキシビタミンＤ3によって引き起こされる血清中カルシウムの上昇を有意に低減できる。最も極端な例で、５日間の治療期間にわたって６μｇ／ｋｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ3を投与された動物は、高カルシウム血症を示し、治療された６匹中４匹の動物が剖検で肺組織内に血液を呈示した。驚くべきことに、動物に０．１μｇ／ｋｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ3を６μｇ／ｋｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ2と共投与すると、血清中カルシウム濃度は正常に近づき、動物は毒性のいかなる徴候も示さなかった。毒性を誘発した２５−ヒドロキシビタミンＤ3量の２倍である２５−ヒドロキシビタミンＤ総量（６μｇ／ｋｇ／日の２５−ヒドロキシビタミンＤ3および６μｇ／ｋｇ／日の２５−ヒドロキシビタミンＤ2）を動物に投与した場合でさえ、安全上の利益は維持された。これらの研究は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3療法における保護薬としての２５−ヒドロキシビタミンＤ2の有用性を立証している。
【００６９】
図３のデータは、２５−ヒドロキシビタミンＤ3と２５−ヒドロキシビタミンＤ2との共投与が、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の単独での投与に比較して、ＣＹＰ２４のより少ない上向き調節をもたらすことを示している。したがって、該データは、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2と一緒の共投与が、どちらか単独の投与に比べて、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度をより効果的に上昇させることができることを示唆している。
【００７０】
（実施例２）
２５−ヒドロキシビタミンＤ3と２５−ヒドロキシビタミンＤ2との各種組合せの共投与が、２５−ヒドロキシビタミンＤ3単独での治療によって観察される毒性を軽減することについてのもう１つの研究
２５−ヒドロキシビタミンＤ3の２５−ヒドロキシビタミンＤ2との共投与の効果を２５−ヒドロキシビタミンＤ3の単独と比較して評価するために、１０２匹の雄性スプラーグドーリーラットで、もう１つの研究を実施した。約３日齢で体重が約１７５〜２５０ｇのラットをそれぞれ６匹のオスの群に分割した。該群に、下表５に従って、２５−ヒドロキシビタミンＤ3と２５−ヒドロキシビタミンＤ2との各種組合せ（または同容積の対照ビヒクル）を、頚静脈カテーテルを介する静脈内にて１日１回で連続５日間投与した。
【００７１】
【表５】
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【００７２】
投与は、日々同様な時刻に、先回の投与時刻と３時間の時間枠内で実施した。０日目（治療初日）に分析用血液を採取し、１日に２回動物を監視した。５日目に先回投与の２４時間後に、すべての群からの動物を安楽死させ、心穿刺により血液を採取した。すべてのラットを簡略剖検に付した。
【００７３】
治療５日目のラットの血清中カルシウム濃度は、図６に示され、実施例１についての上記データを裏付けている。例えば、４μｇ／ｋｇまたは８μｇ／ｋｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ3の単独投与は、高カルシウム血症を生じさせるのに、８μｇ／ｋｇの２５−ヒドロキシルビタミンＤ3の８μｇ／ｋｇの２５−ヒドロキシルビタミンＤ2との組合せ投与は、正常な血清中カルシウム濃度をもたらし、２５−ヒドロキシビタミンＤ2を含めることにより、２５−ヒドロキシビタミンＤ3に付随する毒性を軽減できたことを示している。
【００７４】
（実施例３）
ビタミンＤホルモンの高投与量製剤で治療される進行性前立腺癌患者における効力および安全性研究
２５−ヒドロキシビタミンＤ2経口製剤の効力および安全性を、１週間に１回の高投与量カルシトリオールで治療されている進行性前立腺癌を有する患者についての３カ月間の研究で検討した。この研究では、２５−ヒドロキシビタミンＤ2は、軟質ゼラチンカプセルに製剤化した。高投与量のカルシトリオールおよびドセタキセルでの治療を受けている進行性前立腺癌を有する４０名の患者を２つの均等な群に分割した。週１回のカルシトリオール投与に加え、群＃１には２〜２０μｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ2を与え、一方、群＃２にはプラセボを与える。登録に先立って、すべての対象は、血清中カルシウム、血漿中全分子ＰＴＨ、および血清中２５−ヒドロキシビタミンＤの治療前ベースライン値を確立するために、少なくとも１週間隔離されて空腹時早朝血液検体を２回提出する。血清中カルシウムおよび血清中２５−ヒドロキシビタミンＤを測定するために、週１回のカルシトリオールの投与２４時間後に、各対象からさらなる空腹時血液検体および２４時間尿収集物を収得する。研究の初めから終わりまで、すべての対象は、栄養士の継続した指導の下に、元素としてほぼ１，０００〜１，５００ｍｇの１日当たりカルシウム摂取量（自己選択の食事および必要ならカルシウムサプリメントから）に固守する。研究終結の時点で、検査データを、ベースライン値についての適正な補正の後に、治療群に関しておよび試験製剤に関して解析する。すべての群は、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ（範囲：１０．７〜２０．９ｎｇ／ｍＬ）および血清中カルシウム（範囲：８．７２〜９．３１ｍｇ／ｄＬ）に関して類似の平均ベースライン値を有すると予想される。プラセボ（対照）群では、血清中カルシウムに関する検査平均値の研究過程にわたる増加が観察されると予想されるが、治療群では、血清中カルシウム濃度のはるかにより小さな変化（例えば、無変化または増加の縮小）が観察されると予想される。２５−ヒドロキシビタミンＤ2を与えた治療群の対象は、最初の２〜３カ月間の投与中に、漸増する血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を示し、その後、定常状態に到達すると予想される。１０．２ｍｇ／ｄＬを超える血清中カルシウムとして定義される高カルシウム血症の発現は、治療群に比べてプラセボ群でより頻繁に観察されると予想される。この研究からのデータは、高投与量のカルシトリオールで前立腺癌患者を治療する際の血清中カルシウムの上昇を、治療計画に２５−ヒドロキシビタミンＤ2を付加することによって、全体的に調節または軽減できることを立証すると予想される。
【００７５】
（実施例４）
ビタミンＤ欠乏症を示している終末ステージの腎臓病患者における効力および安全性研究
静脈内２５−ヒドロキシビタミンＤ3／２５−ヒドロキシビタミンＤ2組合せの、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤを最適濃度（＞３０ｎｇ／ｍＬ）に戻す上での効果および安全性を、定期的血液透析を必要とし、かつビタミンＤ不足と診断された終末ステージの腎臓病（ＥＳＲＤ）を有する患者についての３カ月間の研究で調べた。この研究で調べる製剤は、２０μｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ3を単独で（試験製剤＃１）、または１０μｇの２５−ヒドロキシビタミンＤ2と組み合わせて（試験製剤＃２）含有する等張性無菌水性溶液である。全部で７５名の健康な白人、アジア人、ヒスパニックおよびアフリカ系アメリカ人対象が、この研究に参加し、そのすべては、定期的血液透析を少なくとも４カ月間続け、１５ｎｇ／ｍＬ未満の血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を有する。登録に先立って、すべての対象は、血清中カルシウム、血漿中全分子ＰＴＨ、および血清中２５−ヒドロキシビタミンＤの治療前ベースライン値を確立するために、少なくとも１週間隔離されて空腹時早朝血液検体を２回提出する。１日目の朝に、対象は、３つの治療群の１つにランダムに割り振られ、試験製剤＃１または＃２での、あるいは似合ったプラセボでの週３回の投与を開始する。すべての投与は、定期的に予定された血液透析の際に行われ、血液透析機から出て行く血液中に徐々に注射する（１〜５分間にわたる時間）ことによって完遂される。血清中カルシウム、血漿中全分子ＰＴＨおよび血清中２５−ヒドロキシビタミンＤを測定するために、４分の１の間隔で各対象からさらなる空腹時血液検体および２４時間尿収集物を収得する。研究の初めから終わりまで、すべての対象は、栄養士の継続した指導の下に、元素としてほぼ１，０００〜１，５００ｍｇの１日当たりカルシウム摂取量（自己選択の食事および必要ならカルシウムサプリメントから）を固守する。研究終結の時点で、検査データを、ベースライン値についての適正な補正の後に、治療群に関しておよび試験製剤に関して解析する。すべての群は、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ（範囲：１０．７〜１１．９ｎｇ／ｍＬ）、血漿中全分子ＰＴＨ（範囲：４５．３〜５２．１ｐｇ／ｍＬ）および血清中カルシウム（範囲：８．７２〜９．３１ｍｇ／ｄＬ）に関して類似の平均ベースライン値を有すると予想される。プラセボ（対照）群では、研究過程にわたって、いずれの検査平均値も有意な変化は観察されないと予想される。２５−ヒドロキシビタミンＤ3の単独を与えた治療群、または２５−ヒドロキシビタミンＤ3／２５−ヒドロキシビタミンＤ2の組合せを与えた治療群の両方の対象は、最初の３カ月間の投与中に、漸増する血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を示し、その後、定常状態濃度に到達すると予想される。平均血清中カルシウムは、２５−ヒドロキシビタミンＤ3を与えた治療群においてベースラインから有意に増加すると予想され、プラセボ群で観察されるものと比べて有意に高いと予想される。２５−ヒドロキシビタミンＤ3／２５−ヒドロキシビタミンＤ2の組合せを与えた治療群の対象は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の単独治療群について観察されるものに比べて有意に低い血清中カルシウム濃度を示すが、プラセボ群で観察されるものと比べて有意に異なることはないと予想される。１０．２ｍｇ／ｄＬを超える血清中カルシウムとして定義される高カルシウム血症の発現は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3のみを与えた治療群でより頻繁に観察されると予想される。この研究からのデータは、２５−ヒドロキシビタミンＤ2と組み合わせた２５−ヒドロキシビタミンＤ3の静脈内製剤が、２５−ヒドロキシビタミンＤ3の単独からなる製剤と比べて、血清中カルシウム濃度の有意な上昇を引き起こさないで、血清中２５−ヒドロキシルビタミンＤを増加させる上で等しいかあるいはより有効であることを立証すると予想される。この研究からの結論は、２５−ヒドロキシビタミンＤ3と２５−ヒドロキシビタミンＤ2を組み合わせることは、血清中２５−ヒドロキシビタミンＤ濃度を高める安全な方策であることを支持すると予想される。
【００７６】
本明細書中で引用されるすべての特許、刊行物および参考文献は、ここで参照により完全に組み込まれる。本開示と組み込まれる特許、刊行物および参考文献との間に矛盾が存在する場合には、本開示が、優先するものとする。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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