(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１１０】
0005481008.tif 000117
［式中、Arは、非置換または1〜5のR6によってさらに置換されるフェニルであり；
R1は、水素、アルキル、トリフルオロメチル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、シアノ、アリール、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選ばれる1つまたは複数の基によって任意に置換され、
R2は、ヒドロキシ、アミノ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび-NR4R5からなる群から選択され、前記アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、アミノ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、シクロアルキル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、-NR4R5、-OC(O)OR8、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選択される1つまたは複数の基によって任意に置換され；
R3は、水素およびアルキルからなる群から選択され；
R4およびR5は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる1つまたは複数の基によって任意に置換され；
または、R4およびR5は、それらが結合している原子と合わせて4〜8員の複素環を形成し、前記4〜8員の複素環は1つまたは複数のN、O、S原子を含み、また、前記4〜8員の複素環は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、=O ,-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選択される１つまたは複数の基によって任意に置換され；
R6は、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アルキルまたはアルコキシルからなる群から選択され、前記アルキルまたはアルコキシルは非置換、またはそれぞれ1つまたは複数のハロゲンによって置換され；
R7はアルキルであり；
R8はアルキルおよびシクロアルキルからなる群から選択される。］
で表される化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
R1はトリフルオロメチルである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
【化１１１】
0005481008.tif 000118
【化１１２】
0005481008.tif 000119
からなる群から選択される請求項1に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
請求項1〜３のいずれか1項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩であって、
前記塩は、前記化合物と、リンゴ酸、乳酸、マレイン酸、塩酸、メタンスルホン酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸、酢酸およびトリフルオロ酢酸からなる群から選択される酸とから形成される。
【請求項５】
塩が塩酸塩である、請求項４に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
式（ＩA）：
【化１１３】
0005481008.tif 000120
［式中、Arは、非置換または1〜5のR6によってさらに置換されるフェニルであり；
R1は、水素、アルキル、トリフルオロメチル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、シアノ、アリール、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選択される1つまたは複数の基によって任意に置換され；
R3は、ヒドロゲンおよびアルキルからなる群から選択され；
R6は、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アルキルおよびアルコキシルからなる群から選択され、前記アルキルまたはアルコキシルは非置換、またはそれぞれ1つまたは複数のハロゲンにより置換され；
Xはハロゲンである。］
で表される、請求項1に記載の式（I）の化合物を合成する中間体である化合物。
【請求項７】
R1はトリフルオロメチルである、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
式（IB）：
【化１１４】
0005481008.tif 000121
［式中、R1は、アルキル、トリフルオロメチル及びシクロアルキルからなる群から選択され、前記アルキルまたはシクロアルキルは、それぞれハロゲン、シアノ、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選択される1つまたは複数の基によって任意に置換され；
R2は、ヒドロキシ、アミノ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび-NR4R5からなる群から選択され、前記アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、アミノ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、シクロアルキル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、-NR4R5、-OC(O)OR8、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選択される1つまたは複数の基によって任意に置換され；
R3は、水素およびアルキルからなる群から選択され；
R4およびR5は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選択される1つまたは複数の基によって任意に置換され；
または、R4およびR5は、それらが結合している原子と合わせて4〜８員の複素環を形成し、前記4〜8員の複素環は1つまたは複数のN、O、S原子を含み、また、前記4〜8員の複素環は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、ヘテロサイクリルアルキル、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選択される1つまたは複数の基によって任意に置換され；
R7はアルキルであり；
R8は、アルキルおよびシクロアルキルからなる群から選択される。］
で表される、請求項1に記載の式（I）の化合物を合成する中間体である化合物。
【請求項９】
R1はトリフルオロメチルである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
請求項６に記載の式（IA）で表される化合物の調製プロセスであって、下記のステップを含む前記調製プロセス：
【化１１５】
0005481008.tif 000122
氷水浴中で、出発物質であるピラジン-2-メチルアミンに酸無水物を滴下して、室温下で攪拌してアミド生成物を得るステップ；
【化１１６】
0005481008.tif 000123
前記アミド生成物とオキシ塩化リンを室温で混合し、次いで、加熱還流により五酸化リンと反応させて、縮合生成物であるイミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１１７】
0005481008.tif 000124
前記イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を、エタノール溶媒中でPd/C触媒により水素還元反応させ、R1およびR３置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１１８】
0005481008.tif 000125
縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドおよびトリエチルアミンの存在下、ジクロロメタン溶媒中で縮合反応により、R1およびR3置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体をカルボン酸と反応させるステップ；
【化１１９】
0005481008.tif 000126
得られた縮合生成物を、室温、無水エタノール溶媒中でハロゲン化コハク酸イミドと反応させ、式（IA）で表される化合物を得るステップ。
【請求項１１】
請求項８に記載の式（IB）で表される化合物の調製プロセスであって、下記のステップを含む前記調製プロセス：
【化１２０】
0005481008.tif 000127
室温で、R1置換のイミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体をエタノール溶媒中で水素により還元させ、次いで、エタノール溶媒中で二炭酸ジ-tert-ブチルと反応させてアミノ保護し、アミノ保護R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１２１】
0005481008.tif 000128
得られたアミノ保護R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を、エタノール溶媒中でハロゲン化コハク酸イミドと室温で反応させ、ハロゲン化合物を得るステップ；
【化１２２】
0005481008.tif 000129
一酸化炭素雰囲気下、油浴中で、得られたハロゲン化合物をメタノール溶媒中でコバルトオクタカルボニルおよびクロロ酢酸エステルと反応させ、エステル置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１２３】
0005481008.tif 000130
塩基の存在下で、得られたエステル置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を加水分解して、そのカルボン酸を得るステップ；
【化１２４】
0005481008.tif 000131
得られたカルボン酸化合物を、ドライアイス−アセトン浴中でハロゲン化アルキルと反応させ、アルキル置換カルボン酸を得るステップ；
【化１２５】
0005481008.tif 000132
さらに、前記アルキル置換カルボン酸をエステル化して、ケトン置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１２６】
0005481008.tif 000133
または、縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドおよびトリエチルアミンの存在下、前記アルキル置換カルボン酸をジクロロメタン溶媒中でN-メトキシルメチルアミンと反応させるステップ；
【化１２７】
0005481008.tif 000134
得られた縮合化合物をテトラヒドロフラン溶媒中でグリニャール試薬と反応させ、ケトン置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１２８】
0005481008.tif 000135
酸の存在下で、前記ケトン置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体からアミノ保護基を脱保護して、式（IB）で表される中間体を得るステップ。
【請求項１２】
請求項1〜３のいずれか1項に記載の式（I）で表される化合物の調製プロセスであって、下記のステップを含む前記調製プロセス：
【化１２９】
0005481008.tif 000136
一酸化炭素雰囲気下、油浴中で、請求項4に記載の式（IA）で表される化合物をメタノール溶媒でジコバルトオクタカルボニルおよびクロロ酢酸エステルと反応させ、次いで、得られた生成物を塩基の存在下、室温で加水分解し、酸性化することにより、カルボン酸を得るステップ；
【化１３０】
0005481008.tif 000137
前記得られたカルボン酸を、縮合剤の存在下で、アミンまたはエタノールと室温で反応させ、または1-ハロゲン化カルボン酸と反応させ、次いで、酸の存在下でアミノ保護基を脱保護して、式（I）で表される化合物を得るステップ。
【請求項１３】
請求項1〜３のいずれか1項に記載の式（I）で表される化合物の調製プロセスであって、下記のステップを含む前記調製プロセス：
【化１３１】
0005481008.tif 000138
縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドの存在下で、請求項８の式（IB）で表される化合物をカルボン酸と反応させ、縮合生成物を得て、さらに酸の存在下で、アミノ保護基を脱保護して、式（I）で表される化合物を得るステップ。
【請求項１４】
前記式（I）で表される化合物を酸と反応させて酸付加塩を得るステップがさらに含まれ、前記酸は、リンゴ酸、乳酸、マレイン酸、塩酸、メタンスルホン酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸、酢酸およびトリフルオロ酢酸からなる群から選択される請求項１２または１３に記載の調製プロセス。
【請求項１５】
塩が塩酸塩である、請求項１４に記載の調製プロセス。
【請求項１６】
有効な治療用量での請求項1〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１７】
2型糖尿病、高血糖症、肥満症またはインスリン抵抗性の治療用の薬剤を調製するための請求項1〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１８】
請求項1〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含有するジペプチジルぺプチダーゼIVの触媒活性の阻害剤。
【請求項１９】
2型糖尿病、高血糖症、肥満症またはインスリン抵抗性を治療するための薬剤の調製における、請求項１６に記載の医薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（I）で表される新規のテトラヒドロ・イミダゾ[1.5-α]ピラジン誘導体、その調製方法、それを含有する医薬組成物およびその治療的使用、特にジペプチジル・ペプチダーゼ
IV阻害剤としての医薬的使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
糖尿病は複数の病因に由来し、インスリン分泌および／またはその機能障害による糖、脂質および蛋白質の代謝異常に伴う血漿グルコースレベルの上昇または高血糖により特徴付けられる疾患過程を示す。糖尿病は古来の疾患であり、人体内のインスリンが絶対または相対的に不足することによって、血液中のグルコースの濃度が向上し、尿において大量のグルコースが放出されるとともに、多飲、多尿、多食、体重減少、眩暈、虚弱などの症状が現れる。
【０００３】
持続的な、または制御されていない高血糖は、罹病率および致死率の増加および早発性につながる。一般的に、異常なグルコース恒常性は、脂質、リポ蛋白質およびアポリポ蛋白質代謝の変化ならびに他の代謝および血行動態疾患と直接および間接的に関連する。2型糖尿病患者では、冠状動脈性心臓病、脳卒中、末梢血管障害、高血圧、腎症、神経症、および網膜症などの大血管および微小血管合併症の危険性が特に増大する。そのため、グルコース恒常性、脂質代謝および高血圧の治療的制御が、糖尿病の臨床治療では非常に重要である。
【０００４】
糖尿病には一般に認識される2つの型がある。1型糖尿病、つまり、インスリン依存性糖尿病（IDDM）では、患者はグルコース利用を調節するホルモンであるインスリンをほとんどまたは全く産生しない。2型糖尿病、つまり、インスリン非依存性糖尿病（NIDDM）では、患者は多くの場合、糖尿病ではない被験者と比べ、同じかまたは高い血漿インスリンレベルを有する。しかし、これらの患者は、主なインスリン感受性組織、例えば、筋肉、肝臓および脂肪組織におけるグルコースおよび脂質代謝へのインスリンの刺激効果に対する耐性を発現し、血漿インスリンレベルが上昇しているとしても、顕著なインスリン耐性を克服するには不十分である。
【０００５】
インスリン耐性は、そもそもインスリン受容体の数が減少するためではなく、インスリンが受容体に結合した後の異常によるものであり、これはまだ理解されていない。このインスリン応答性に対する耐性により、インスリンに依存した筋肉でのグルコース取り込み、酸化および貯蔵の活性化が不十分になり、脂肪組織での脂肪分解ならびに肝臓でのグルコース産生および分泌の抑制が不十分なものとなる。
【０００６】
ジペプチジル・ぺプチダーゼIV（DPP−IV）は、最後から２番目の位置にプロリン残基を含有するポリペプチドからN末端ジペプチドを開裂するセリンプロテアーゼである。哺乳類系でのDPP-IVの生物学的役割については、まだ完全には明らかになっていないが、ニューロペプチド代謝、T細胞活性化、癌細胞の内皮への接着と侵入、およびHIVのリンパ球様細胞への進入において重要な役割を担うと考えられている（国際公開第98／19998号パンフレット）。
【０００７】
最近、DPP-IVはGLP-1の分泌を抑制できることが発見された。さらに詳細には、DPP-IVはGLP-1のアミノ末端His-Alaジペプチドを開裂し、GLP-1(7-36)NH2を不活性化してGLP-1(9-36)NH2を与える（Endocrinology，1999，140：5356-5363）。身体的環境においては、血液循環における全GLP-1の半減期は短い。DPP-IVにより分解された後のGLP-1の不活性代謝物は、GLP-1受容体と結合し、活性型GLP-1に拮抗し、GLP-1に対する生理学的反応を縮めることができる。しかし、DPP-IV阻害剤は、内因性またはさらに外因性GLP-1を不活性化しないように保護してGLP-1の生物活性を著しく向上させることができる（5〜10倍）。GLP-1は膵臓のインスリン分泌の主な刺激物質であり、グルコース処理に直接的な有益な効果があるので、DPP-IV阻害はインスリン非依存性糖尿病（NIDDM）を治療する魅力的な手段のように思われる（米国特許第6110949号明細書（特許文献１）)。
【０００８】
今までに、いくつかのDPP-IV阻害剤が開示されている（米国特許第5462928号明細書（特許文献２）、
同第5543396号明細書（特許文献３）、国際公開第95／15309号パンフレット（特許文献４）、同第2003／004498号パンフレット（特許文献５）、同第2003／082817号パンフレット（特許文献６）、同第2004／032836号パンフレット（特許文献７）、
同第2004／085661号パンフレット（特許文献８）)。ここで、シタグリプチン（Sitagliptin）(MK-0431、メルク)はDPP-IVの優れた阻害活性と選択性を表している。これらの中で、シタグリプチンは2006年に発売になった。
【化１】
0005481008.tif 000002
【０００９】
いくつかのDPP-IV阻害剤が開示されているが、今のところ、効果的が持続する薬物がまだない。いくつかの性質が改善されたDPP-IV阻害剤が求められている。
【００１０】
本発明の目的は、DPP-IVの活性を阻害し、糖尿病や類似の疾患の治療に利用され、または症状を緩和する薬物として利用される一連の化合物を提供することにある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第6110949号明細書
【００１２】
【特許文献２】米国特許第5462928号明細書
【００１３】
【特許文献３】米国特許第5543396号明細書
【００１４】
【特許文献４】国際公開第95／15309号パンフレット
【００１５】
【特許文献５】国際公開第2003／004498号パンフレット
【００１６】
【特許文献６】国際公開第2003／082817号パンフレット
【００１７】
【特許文献７】国際公開第2004／032836号パンフレット
【００１８】
【特許文献８】国際公開第2004／085661号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１９】
従来技術に不足するものを克服するために、本発明は、式（I）で表されるテトラヒドロイミダゾ[1,5-α]ピラジン誘導体およびその互変異性体、鏡像異性体、ジアステレオ異性体、ラセミ体、それらの薬学的に許容される塩およびそれらの代謝物、代謝前駆体またはプロドラッグを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
【化２】
0005481008.tif 000003
式中、
R1は、水素、アルキル、トリフルオロメチル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選ばれるが、前記アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールはそれぞれハロゲン、シアノ、アリール、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよく、好ましくはトリフルオロメチルである。
【００２１】
R2は、ヒドロキシ、アミノ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび-NR4R5からなる群から選ばれるが、前記アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールはそれぞれハロゲン、アミノ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、シクロアルキル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、-NR4R5、-OC(O)OR8、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよい。
【００２２】
R3は、水素およびアルキルからなる群から選ばれる。
R4およびR5は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選ばれるが、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロサイクリルアリール、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよい。
または、R4およびR5は、それらが結合している原子と合わせて4〜8員の複素環を形成し、前記4〜8員の複素環は1つまたは複数のN、O、S原子を含み、また、このように構成された4〜8員の複素環は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、オキソ、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよい。
【００２３】
R6は、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アルキルおよびアルコキシルからなる群から選ばれるが、前記アルキルまたはアルコキシルは非置換、またはそれぞれさらに1つまたは複数のハロゲンで置換される。
R7はアルキルである。
R8はアルキルとシクロアルキルからなる群から選ばれる。
【００２４】
本発明による薬学的に許容される塩は、本発明の化合物と、リンゴ酸、乳酸、マレイン酸、塩酸、メタンスルホン酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸、酢酸およびトリフルオロ酢酸からなる群から選ばれる酸とから形成される塩である。
本発明の代表的な化合物は、表１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を含むが、これらに限定されない。
【００２５】
【表１】
0005481008.tif 000004
【表２】
0005481008.tif 000005
【表３】
0005481008.tif 000006
【表４】
0005481008.tif 000007
【表５】
0005481008.tif 000008
【００２６】
さらに、本発明は、式（I）で表される化合物の合成中間体である式（IA）で表される化合物に関する。
【化３】
0005481008.tif 000009
式中、
Arは、非置換または1〜5のR6でさらに置換されるフェニルである。
R1は、水素、アルキル、トリフルオロメチル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選ばれるが、前記アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、シアノ、アリール、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよく、好ましくはトリフルオロメチルである。
R3は、水素およびアルキルからなる群から選ばれる。
R6は、ハロゲン、シアノ、ヒドロキシ、アルキルおよびアルコキシルからなる群から選ばれるが、前記アルキルまたはアルコキシルは非置換、またはそれぞれ1つまたは複数のハロゲンで置換される。
Xはハロゲンである。
【００２７】
さらに、本発明は、式（I）で表される化合物の合成中間体である式（IB）で表される化合物に関する。
【化４】
0005481008.tif 000010
式中、
R1は、水素、アルキル、トリフルオロメチル、シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選ばれるが、前記アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、シアノ、アリール、ヒドロキシおよびアミノからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよく、好ましくはトリフルオロメチルである。
【００２８】
R2は、ヒドロキシ、アミノ、アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリール、ヘテロアリールおよび-NR4R5からなる群から選ばれるが、前記アルキル、アルコキシル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、アミノ、シアノ、ヒドロキシ、アルキル、シクロアルキル、アルコキシル、アリール、ヘテロアリール、-NR4R5、-OC(O)OR8、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよい。
【００２９】
R3は、水素およびアルキルからなる群から選ばれる。
R4およびR5は、それぞれ独立して、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選ばれるが、前記アルキル、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、それぞれハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、シクロアルキル、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよい。
または、R4およびR5は、それらが結合している原子と合わせて4〜８員の複素環を形成し、前記4〜8員の複素環は1つまたは複数のN、O、S原子を含み、また、このように構成された4〜8員の複素環は、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる１つまたは複数の基で任意に置換されてもよい。
R7はアルキルである。
R8は、アルキルおよびシクロアルキルからなる群から選ばれる。
【００３０】
本発明の別の態様は、式（IA）で示される中間体の調製プロセスであり、該調製プロセスは下記のステップを含む：
【化５】
0005481008.tif 000011
氷水浴中で、出発物質であるピラジン-2-メチルアミンに酸無水物を滴下して、室温で攪拌してアミド生成物を得るステップ；
【化６】
0005481008.tif 000012
前記アミド生成物とオキシ塩化リンを室温で混合し、次いで、加熱還流により五酸化リンと反応させて、縮合生成物であるイミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化７】
0005481008.tif 000013
前記イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を、エタノール溶媒中でPd／C触媒により水素還元反応させ、R1およびR3置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化８】
0005481008.tif 000014
縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドおよびトリエチルアミンの存在下、ジクロロメタン溶媒中で縮合反応により、前記R1およびR3置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体をカルボン酸と反応させるステップ；
【化９】
0005481008.tif 000015
得られた縮合生成物を、室温、無水エタノール溶媒中でハロゲン化コハク酸イミドと反応させ、式（IA）で表される中間体を得るステップ。
【００３１】
本発明の別の態様は、式（IB）で示される中間体の調製プロセスであり、該調製プロセスは下記のステップを含む：
【化１０】
0005481008.tif 000016
室温で、R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体をエタノール溶媒中で水素化により還元させ、次いで、エタノール溶媒中で二炭酸ジ-tert-ブチルと反応させてアミノ保護し、アミノ保護R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１１】
0005481008.tif 000017
得られたアミノ保護R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を、エタノール溶媒中でハロゲン化コハク酸イミドと室温で反応させ、ハロゲン化合物を得るステップ；
【化１２】
0005481008.tif 000018
一酸化炭素雰囲気下、油浴中で、得られたハロゲン化合物をメタノール溶媒中でコバルトオクタカルボニルおよびクロロ酢酸と反応させ、エステル置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１３】
0005481008.tif 000019
塩基の存在下で、得られたエステル置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を加水分解して、そのカルボン酸を得るステップ；
【化１４】
0005481008.tif 000020
得られたカルボン酸化合物を、ドライアイス−アセトン浴中でハロゲン化アルキルと反応させ、アルキル置換カルボン酸を得るステップ；
【化１５】
0005481008.tif 000021
さらに、前記アルキル置換カルボン酸をエステル化して、ケトン置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１６】
0005481008.tif 000022
または、縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドおよびトリエチルアミンの存在下、前記アルキル置換カルボン酸をジクロロメタン溶媒中でN-メトキシルメチルアミンと反応させるステップ；
【化１７】
0005481008.tif 000023
得られた縮合化合物をテトラヒドロフラン溶媒中でグリニャール試薬と反応させ、ケトン置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップ；
【化１８】
0005481008.tif 000024
酸の存在下で、前記ケトン置換のテトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体からアミノ保護基を脱保護して、式（IB）で表される前記中間体を得るステップ。
【００３２】
また、本発明の別の態様は、式（I）で示される化合物の調製プロセスであり、該調製プロセスは下記のステップを含む：
【化１９】
0005481008.tif 000025
一酸化炭素雰囲気下、油浴中で、式（IA）で表される中間体をメタノール溶媒中でコバルトオクタカルボニルおよびクロロ酢酸と反応させ、次いで、得られた生成物を塩基の存在下、室温で加水分解し、酸性化することにより、カルボン酸を得るステップ；
【化２０】
0005481008.tif 000026
前記得られたカルボン酸を、縮合剤の存在下で、アミンまたはエタノールと室温で反応させ、または1-ハロゲン化カルボン酸と反応させ、次いで、酸の存在下でアミノ保護基を脱保護して、式（I）で表される化合物を得るステップ。
【００３３】
本発明の別の態様は、式（I）で示される化合物の調製プロセスであり、該調製プロセスは下記のステップを含む：
【化２１】
0005481008.tif 000027
縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドの存在下で、式（IB）で表される中間体をカルボン酸と反応させ、縮合生成物を得て、さらに酸の存在下で、アミノ保護基を脱保護して、式（I）で表される化合物を得るステップ。
【００３４】
また、前記式（I）で表される化合物の調製プロセスは、前記得られた式（I）で表される化合物を酸と反応させて酸付加塩を得るステップもさらに含み、その酸付加塩は前記化合物と、ホスホン酸、リンゴ酸、乳酸、マレイン酸、塩酸、メタンスルホン酸、硫酸、ホスホン酸、クエン酸、酒石酸、酢酸およびトリフルオロ酢酸からなる群から選ばれる酸とから形成されるが、好ましくは塩酸である。
【００３５】
本発明は、有効な治療用量での本発明による化合物またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【００３６】
本発明の別の態様は、2型糖尿病、高血糖症、肥満症またはインスリン抵抗性の治療用の薬剤を調製するための本発明による化合物またはその薬学的に許容される塩の使用に関する。
【００３７】
本発明の別の態様は、ジペプチジルぺプチダーゼIVを、式（I）で表される任意の化合物またはその薬学的に許容される塩と接触させることを特徴とするジペプチジルぺプチダーゼIVの触媒活性の阻害方法に関する。
【００３８】
本発明の別の態様は、2型糖尿病、高血糖症、肥満症またはインスリン抵抗性を治療するための、式（I）で表される任意の化合物、その塩または医薬組成物の使用に関する。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
特別な説明がない限り、明細書および特許請求の範囲に使用されている次の用語は下記のような意味を有する。
【００４０】
「アルキル」とは、C1-C20の直鎖と分岐鎖基を含む飽和脂肪族炭化水素基を指す。アルキルとして、好ましくは、メチル、エチル、プロピル、2-プロピル、ｎ-ブチル、イソブチル、t-ブチル、ペンチルなどの1〜10個の炭素原子を有するものである。さらに好ましくは、メチル、エチル、プロピル、2-プロピル、ｎ-ブチル、イソブチル、t-ブチルなどの1〜4個の炭素原子を有する低級アルキルである。アルキルは、置換または非置換のものであってもよい。置換の場合、その置換基としては、独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、-OC(O)OR8、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる1つまたは複数のものが好ましい。
【００４１】
「シクロアルキル」とは、3〜8員の全炭素単環、全炭素5員／6員または6員／6員の縮合二環または多環式縮合環（「縮合」環系とは、系中のそれぞれの環がいずれも系中のその他の環と隣接した１対の炭素原子を共有することを言う）基を指すが、その中で、１つまたは複数の環は１つまたは複数の二重結合を有してもよいが、完全に共役したπ電子系を有する環はない。シクロアルキル基の例としては、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサン、シクロヘキサジエン、アダマンタン、シクロヘプタン、シクロヘプタトリエンなどである。シクロアルキル基は、置換または非置換のものであってもよい。置換の場合、その置換基としては、独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる1つまたは複数のものが好ましい。
【００４２】
「アリール」とは、少なくとも１つの芳香環、すなわち、共役π電子系を有する系を指し、全炭素環アリール、ヘテロアリールおよびビアリール基を含む。アリールは、置換または非置換のものであってもよい。置換の場合、その置換基としては、独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる1つまたは複数のものが好ましい。
【００４３】
「ヘテロアリール」とは、環原子として1〜3個のN、OおよびSからなる群から選ばれるヘテロ原子を有し、残りの環原子がCであるアリールを指す。前記環は、5員または6員の環である。ヘテロアリール基の例としては、フリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、N-アルキルピロリル、ピリミジニル、ピラジニル、イミダゾリルなどが含まれる。ヘテロアリール基は、置換または非置換のものであってもよい。置換の場合、その置換基としては、独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる1つまたは複数のものが好ましい。
【００４４】
「ヘテロサイクリルアルキル」とは、5〜9個の環原子を有する単環または縮合環基を指すが、その中で、1つまたは2つの環ヘテロ原子はN、OおよびS(O)n（nは0〜2の整数）からなる群から選ばれるものであり、その他の環原子はCであり、また、前記環は1つまたは複数の二重結合を有してもよいが、完全に共役したπ電子系を有しない。置換されていないヘテロサイクリルアルキルは、ピロリジル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホルニル、チオモルホルニル、ホモピペラジニルなどを含むが、これらに限定されない。ヘテロサイクリルアルキルは、置換または非置換のものであってもよい。置換の場合、その置換基としては、独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる1つまたは複数のものが好ましい。
【００４５】
「ヒドロキシ」とは-OH基を指す。
「アルコキシル」とは、-O-（アルキル）と-O-（非置換シクロアルキル）を指す。代表的な例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシロキシなどを含むが、これらに限定されない。アルコキシルは、置換または非置換のものであってもよい。置換の場合、その置換基としては、独立してハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アルコキシル、アルキル、シアノ、アリール、ヘテロサイクリルアルキル、ヘテロアリール、カルボニル、ヒドロキシアルキル、-SO2R7、-NR4R5、-C(O)NR4R5、-C(O)R7、カルボン酸およびカルボン酸エステルからなる群から選ばれる1つまたは複数のものが好ましい。
「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を指すが、フッ素または塩素が好ましい。
「トリフルオロメチル」とは、-CF3基を指す。
「アミノ」とは、-NH2基を指す。
「シアノ」とは、-C≡N基を指す。
「カルボニル」とは、C(=O)基を指す。
「カルボン酸」とは、（アルキル）C(=O)OH基を指す。
「カルボン酸エステル」とは、（アルキル）C(=O)O（アルキル）を指す。
「ヒドロキシアルキル」とは、ヒドロキシにより置換されたアルキル基を指す。
【００４６】
「医薬組成物」とは、本願に記載される1つ若しくは複数の化合物またはその生理学的／薬学的に許容される塩、またはそれらのプロドラッグと、生理学的／薬学的に許容される担体や賦形剤といったその他の化学成分との混合物を指す。医薬組成物の目的は生体への化合物の投与を容易にすることである。
【００４７】
本発明の化合物の合成方法
本発明の目的を達成するために、本発明は下記のような技術的手段を適用する。
【００４８】
本発明の式（I）で表される化合物の調製プロセスであり、下記のステップを含む：
【化２２】
0005481008.tif 000028
氷水浴中で、出発物質であるピラジン-2-メチルアミンに酸無水物を滴下して、室温で攪拌してアミド生成物を得るステップと；前記アミド生成物とオキシ塩化リンを室温で混合し、次いで、加熱還流により五酸化リンと反応させて、縮合生成物であるイミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を得るステップと；前記イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を、エタノール溶媒中でPd／C触媒により水素還元反応させ、R1置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップと；縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドおよびトリエチルアミンの存在下、ジクロロメタン溶媒中で縮合反応により、前記R1置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体をカルボン酸と反応させるステップと；得られた縮合生成物を、室温、無水エタノール溶媒中でハロゲン化コハク酸イミドと反応させ、式（IA）で表される中間体を得るステップと；一酸化炭素雰囲気下、油浴中で、式（IA）で表される中間体をメタノール溶媒中でコバルトオクタカルボニルおよびクロロ酢酸と反応させ、次いで、酸の存在下、室温で、得られた生成物を加水分解し、そのカルボン酸を得るステップと；前記得られたカルボン酸を、縮合剤の存在下で、アミンまたはエタノールと室温で反応させ、または1-ハロゲン化カルボン酸エステルと反応させ、次いで、酸の存在下でアミノ保護基を脱保護して、式（I）で表される化合物を得るステップ。
【００４９】
本発明の式（I）で表される化合物の調製プロセスであり、下記のステップを含む：
【化２３】
0005481008.tif 000029
室温で、R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体をエタノール溶媒中で水素により還元させ、次いで、エタノール溶媒中で二炭酸ジ-tert-ブチルと反応させてアミノ保護し、アミノ保護R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を得るステップと；得られたアミノ保護R1置換イミダゾール[1,5-α]ピラジン誘導体を、エタノール溶媒中でハロゲン化コハク酸イミドと室温で反応させ、ハロゲン化合物を得るステップと；一酸化炭素雰囲気下、油浴中で、得られたハロゲン化合物をメタノール溶媒中でコバルトオクタカルボニルおよびクロロ酢酸と反応させ、エステル置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップと；塩基の存在下で、得られたエステル置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を加水分解して、そのカルボン酸を得るステップと；
得られたカルボン酸化合物を、ドライアイス−アセトン浴中でハロゲン化アルキルと反応させ、アルキル置換生成物を得るステップと；さらに、前記アルキル置換生成物のカルボキシルをエステル化して、式（IB）で表される中間体を得るステップと；また、縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドの存在下で、得られたカルボン酸化合物をジクロロメタン溶媒中でN-メトキシルメチルアミンと反応させるステップと；得られた縮合化合物をテトラヒドロフラン溶媒中でグリニャール試薬と反応させ、ケトン置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体を得るステップと；酸の存在下で、ケトン置換テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン誘導体からアミノ保護基を脱保護して、式（IB）で表される前記中間体を得るステップと；式（IB）で表される中間体を、縮合剤のビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリドの存在下でカルボン酸と反応させて縮合生成物を得て、さらに、酸の存在下でアミノ保護基を脱保護して、式（I）で表される化合物を得るステップ。
【００５０】
式(I)で表される精製された化合物は、メタノール、ジクロロメタンまたは酢酸エステル溶媒中で酸と直接反応させると、酸付加塩が得られる。
【００５１】
好適な実施形態
次の実施例は本発明の説明に供するが、本発明の範囲を制限するものとして考えられるべきではない。
【実施例】
【００５２】
化合物の構造は1H
NMRとMSによって同定された。1H NMRの化学シフト（d）はppm（10-6）で表された。1H
NMRはBruker AVANCE-400装置によって測定された。溶媒は重メタノール（CD3OD）、重クロロホルム（CDC13）および重ジメチルスルホキシド（DMSO-d6）で、内部標準はテトラメチルシラン（TMS）であった。化学シフトはppm（10-6）で表された。
MSは、FINNIGAN
LCQAd (ESI)質量分析計（メーカー：Therm、型式：Finnigan LCQ advantage MAX）によって測定された。
IC50はNovoStar酵素結合免疫測定法（ELISA）（ドイツBMG社）によって測定された。
薄層シリカゲルは煙台黄海（Yantai
Huanghai）のHSGF254または青島のGF254シリカゲルプレートであった。
カラムクロマトグラフィーは、一般的に煙台黄海の200〜300メッシュのシリカゲルを担体として使用した。
特別な説明がない限り、全ての実施例は窒素雰囲気下で実施された。
窒素雰囲気とは、1Lの窒素で充填された風船が付いた反応フラスコを指す。
水素雰囲気とは、1Lの水素で充填された風船が付いた反応フラスコを指す。
【実施例１】
【００５３】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩
【化２４】
0005481008.tif 000030
【化２５】
0005481008.tif 000031
【００５４】
ステップ1
2,2-ジメチル-5-[2-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-アセチル]-[1,3]ジオキサン-4,6-ジオン
2,2-ジメチル-[1,3]ジオキサン-4,6-ジオン（5.69
g、39.5 mmol）をジクロロメタン400mLに攪拌しながら溶かしてから、氷水浴中で、(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酢酸1a（7.15
g、37.6 mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（7.34 g、60.2 mmol）を加えた。次いで、ジクロロメタン250 mLに懸濁させた1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩（8.28
g、43.2 mmol）をゆっくりと滴下した。室温で36時間攪拌した後、5％の硫酸水素カリウム溶液（250 mL×7）と飽和食塩水（250 mL×2）で反応混合物を洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して、表題化合物である2,2-ジメチル-5-[2-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-アセチル]-[1,3]ジオキサン-4,6-ジオン1b（11.4
g、収率96％）を白色固体として得た。
MS m／z (ESI): 315.5 [M-1]
【００５５】
ステップ2
3-オキソ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸エチルエステル
2,2-ジメチル-5-[2-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-アセチル]-[1,3]ジオキサン-4,6-ジオン1b（15.72
g、49.6 mmol）をエタノール280mLに攪拌しながら溶かしてから、反応混合物を油浴中で70℃、一晩加熱した。冷却後、この混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である3-オキソ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸エチルエステル1c（12g、収率88％）を黄色のオイルとして得た。
MS m／z (ESI): 259 [M-1]
【００５６】
ステップ3
3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブト-2-エン酸エチルエステル
3-オキソ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸エチルエステル1c（24.6
g、94.5 mmol）をメタノール240mLに溶かしてから、この溶液に酢酸アンモニウム（36.4 g、473 mmol）を加えた。この反応混合物を3時間加熱還流させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、残渣に水100
mLを加えた。酢酸エチル（200 mL×3）で前記混合物を抽出し、合わせた有機相を200 mLの飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して減圧下で濃縮することによって、淡黄色の固体が得られた。前記得られた固体を80℃で酢酸エチル50
mLに溶解し、該溶液中に50 mLのｎ-へキサンおよび種晶を添加した。この混合物を室温まで冷却し、30分間後にｎ-へキサン100mLを加えた。この混合物を冷蔵庫に一晩保存し、減圧下でろ過して、表題化合物である3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブト-2-エン酸エチルエステル1d（19.5
g、収率80％）を白色の固体として得た。
MS m／z (ESI): 260.1 [M+1]
【００５７】
ステップ4
(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸エチルエステル
3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブト-2-エン酸エチルエステル1d（4.1 g、15.8 mmol）を高圧蒸気滅菌器に入れてから、70mLのメタノール、二炭酸ジ-tert‐ブチル（3.8 g、17.4 mmol）、クロロ(1,5-シクロオクタジエン)ロジウム（I）二量体（32 mg、0.0632
mmol）および(R)-1-[(S)-2-(ジフェニルホスフィノ)フェロセニル）]-エチル-tert-ブチルホスフィン（68 mg、0.126 mmol）を添加した。この反応混合物を30℃、6.67気圧で24時間水素化させた。この混合物をろ過し、ろ液を減圧下で濃縮した。次いで、50℃で残渣にメタノール34 mLを加えてから、完全に溶解するまで水12 mLを加えた。室温まで冷却した後、該混合物を冷蔵庫に一晩保存し、次いでろ過した。固体生成物をメタノール／水（v：v = 3：2）の混合溶媒で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物である(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸エチルエステル1e（4 g、収率70％）を淡黄色の固体として得た。
MS m／z (ESI): 362.4 [M+1]
【００５８】
ステップ5
(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸
(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸エチルエステル1e（10 g、27.7 mmol）と水酸化ナトリウム（3.32 g、83.1 mmol）を、メタノール100mLおよび水50 mLの混合溶媒に攪拌しながら溶解させた。該反応混合物を40〜45℃で1〜1.5時間反応させてから、一部の溶液を減圧下で蒸発させた。残渣に水を加えて、氷水浴中で1
N塩酸によりpHを2〜3に調整した。この混合物を酢酸エチル（200 mL×3）で抽出し、合わせた有機相を飽和食塩水200 mLで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮してから、酢酸エチル／ｎ-へキサンから再結晶させ、直接次のステップに使われた表題化合物である(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸1f（9.2 g）を白色の固体として得た。
MS m／z (ESI): 332.3 [M-1]
参考文献：Tetrahedron Asymmetry, 2006,
17(2), 205-209
【００５９】
ステップ6
C-ピラジン-2-イル-メチルアミン
ピラジン-2-カルボニトリル1g（10.5
g、100 mmol）を1,4ジオキサン150 mＬに攪拌しながら溶解し、次いでラネーニッケル（1.0 g）を250 mＬの高圧蒸気滅菌器に入れた。この反応混合物を、60℃、40気圧で8時間水素化させ、ろ過し、減圧下で濃縮して、表題化合物であるC-ピラジン-2-イル-メチルアミン1h（10.7
g、収率98％）を褐色のオイルとして得た。
MS
m／z (ESI): 110 [M+1]
【００６０】
ステップ7
2,2,2-トリフルオロ-N-ピラジン-2-イルメチル-アセトアミド
C-ピラジン-2-イル-メチルアミン1h（10.9
g、100 mmol）を反応フラスコに入れて、氷水浴にて0℃に冷却し、1時間内に20
mLの無水トリフルオロ酢酸をゆっくりと滴下した。この反応混合物は室温で2時間反応させ、出発物質が消失するまで薄層クロマトグラフィーにより監視した。次いで該反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である2,2,2-トリフルオロ-N-ピラジン-2-イル-メチル-アセトアミド1i（21.0
g）を褐色のオイルとして得た。
MS
m/z (ESI): 206.1 [M+1]
【００６１】
ステップ8
3-トリフルオロメチル-イミダゾ[1,5-a]ピラジン
2,2,2-トリフルオロ-N-ピラジン-2-イル-メチル-アセトアミド1i（21.0
g, 100 mmol）を室温で反応フラスコに入れ、オキシ塩化リン100 mLを加えた。室温で30分間攪拌した後、溶液中に五酸化リン（17.8 g、125
mmol）を加えた。この反応混合物を5時間加熱還流し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。オキシ塩化リンを除去し、脱イオン水で反応系を急冷した。氷水浴中で、この混合物を20％水酸化ナトリウム溶液によりpH
5〜6に調整した。次に酢酸エチル（250 mL×4）で該混合物を抽出し、合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である3-トリフルオロメチル-イミダゾ[1,5-α]ピラジン1j（12.0
g、収率65％）を黄色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 188.0 [M+1]
1H NMR (400 MHz, CDCl3):
δ
9.15 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.81 (d, 1H)
【００６２】
ステップ9
3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン
3-トリフルオロメチル-イミダゾ[1,5-a]ピラジン1j（12.0
g、64.2 mmol）を攪拌しながら無水エタノール150 mLに溶解し、この溶液中に10％Pd/C (500 mg)を添加した。この反応混合物を水素雰囲気下、室温で一晩攪拌した。粗粒シリカゲルパッドで反応混合物をろ過し、減圧下で濃縮して、表題化合物である3-フルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン1k（12.2
g、収率99％）を褐色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3):
δ
6.84 (s, 1H), 4.10 (m, 4H), 3.26 (m, 2H), 1.81 (s, 1H)
【００６３】
ステップ10
(R)-[3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-3-(3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸1k
(8.6 g, 45 mmol)およびトリエチルアミン9.4 mLを、窒素雰囲気下で、ジクロロメタン300 mLに攪拌しながら溶解させた。室温で5分間攪拌した後、この溶液に3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン1f（15.0
g、45 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド(17.1 g, 67.3 mmol)を順次加えた。この混合物を室温で2時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視し、次いで減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-3-(3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル1l(20.0
g、収率88％）を白色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ
7.25 (m, 1H), 7.11 (m, 1H), 7.032 (s, 1H), 4.93 (m, 2H), 4.35 (m, 3H), 4.05 (m,
2H), 2.99 (m, 2H), 2.73 (m, 2H), 1.34 (s, 9H)
【００６４】
ステップ11
(R)-[3-(1-ブロモ-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-[3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-3-(3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル1l（20.0
g、39.6 mmol）を無水エタノール300 mLに攪拌しながら溶解し、次いでこの溶液に、1-ブロモ-2,5-ピロリジンジオン（14.1 g、79.2
mmol）を室温で加えた。1時間の攪拌後、この混合物に炭酸カリウム（10.9 g、79.2 mmol）および二炭酸ジ-tert-ブチル(8.6 g, 39.6
mmol)を加え、1時間攪拌してから、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。粗粒シリカゲルパッドで反応混合物をろ過して炭酸カリウムを除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-3-(1-ブロモ-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル1m（20.0
g、収率86％）を白色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CDCl3):
δ
7.063 (m, 1H), 6.88 (m, 1H), 4.72 (s, 1H), 4.56 (s, 1H), 4.13 (m, 3H), 3.88 (m,
2H), 2.94 (m, 2H), 2.62 (m, 2H), 1.36 (s, 9H)
【００６５】
ステップ12
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル
ジコバルトオクタカルボニル（4.02
g、11.76 mmol）、クロロ酢酸エチル（0.71 g、5.88 mmol）、炭酸カリウム（1.62 g、11.76 mmol）およびメタノール50 mLを反応フラスコに入れた。5分間攪拌した後、(R)-[3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-3-(1-ブロモ-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル1m（2.3
g、3.92 mmol）を加えた。この反応混合物を油浴中60℃で反応させると、該反応混合物の色が暗褐色から紫に変化した。2時間後、エレクトロスプレーイオン化（ESI）質量分析で出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物は減圧下で濃縮した。得られた残渣はシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル1n（1.1
g、収率50％）を白色の固体として得た。。
MS
m/z (ESI): 565.0 [M+1]
参考文献：
Journal of Organometallic Chemistry, 1985, 285(1-3), 293-303
【００６６】
ステップ13
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル1n（0.12
g、2.12 mmol）を、酢酸エチル5 mL中2.2 N塩酸溶液に加えた。この反応混合物を5時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩1（0.12
g、収率94.3％）を淡黄色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 465.2 [M+1]
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ
7.101-7.08 (m, 1H), 6.906-6.864 (m, 1H), 5.343-4.995 (m, 2H), 4.221-4.093 (m,
5H), 3.954 (s, 3H), 2.978-2.937 (m, 2H), 2.71-2.643 (m, 2H), 2.061 (s, 2H)
【実施例２】
【００６７】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(2-メタンスルホニル-エチル)-アミド・塩酸塩
【化２６】
0005481008.tif 000032
【化２７】
0005481008.tif 000033
【００６８】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル1n（2.0 g、3.5 mmol）を、メタノール50 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液に4 N水酸化ナトリウム（30 mL）を加えた。この反応混合物を、薄層クロマトグラフィーにより出発物質の消失が示されるまで、室温で1時間反応させ、さらに2 Nの塩酸溶液でpH
3に調整した。この反応混合物を酢酸エチル（50 mL×4）で抽出し、合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（1.9 g）を淡黄色の固体として得た。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.29-7.226
(m, 1H), 7.121-7.082 (m, 1H), 5.151-5.028 (m, 2H), 4.409-4.064 (m, 5H),
2.984-2.769 (m, 4H), 1.417-1.255 (m, 9H)
【００６９】
ステップ2
(R)-[3-[1-(2-メタンスルホニル-エチルカルバモイル)-3-テトラフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-テトラフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15 g、0.27
mmol）、2-メタンスルホニルエチルアミン（65.5 mg、0.41 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.104 g、0.41 mmol）を、ジクロロメタン5 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(2-メタンスルホニル-エチルカルバモイル)-3-テトラフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-テトラフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル2b（60
mg、収率34％）を白色の固体として得た。
参考文献：Journal of Organic Chemistry,
2006, 71(3), 1220-1225
【００７０】
ステップ3
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(2-メタンスルホニル-エチル)-アミド・塩酸塩
(R)-[3-[1-(2-メタンスルホニル-エチルカルバモイル)-3-テトラフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-テトラフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル2b（0.06
g、0.091 mmol）を少量の酢酸エチルに溶解し、該溶液に酢酸エチル4 mL中3.1 N塩酸を添加した。この反応混合物を、薄層クロマトグラフィーにより出発物質の消失が示されるまで、室温で4時間反応させて、さらに減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(2-メタンスルホニル-エチル)-アミド・塩酸塩2（60
mg）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 556.3 [M+1].
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ7.44-7.35
(m, 1H), 7.30-7.21 (m, 1H), 5.15-5.02 (m, 2H), 4.53-4.45 (m, 2H), 4.34-4.27 (m,
2H), 4.05-3.94 (m, 4H), 3.89-3.62 (s, 4H), 3.12-3.07 (m, 2H), 3.03-2.82 (m, 2H).
【実施例３】
【００７１】
(R)-3-アミノ-1-[1-(モルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化２８】
0005481008.tif 000034
【化２９】
0005481008.tif 000035
【００７２】
ステップ1
(R)-[3-[1-(モルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（60 mg、0.109 mmol）、モルホリン（19 mg、0.218 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（53.5 mg、0.218
mmol）を、ジクロロメタン5mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にトリエチルアミン（0.1 mL、0.65
mmol）を添加した。この反応混合物を、薄層クロマトグラフィーにより出発物質の消失が示されるまで、室温で一晩反応させ、さらに減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(モルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル3a（60
mg、収率89％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 620.0 [M+1]。
【００７３】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-(モルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-(モルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル3a（0.07
g、0.11 mmol）を少量の酢酸エチルに溶解し、該溶液に酢酸エチル6 mL中3.1 N塩酸を添加した。この反応混合物を、薄層クロマトグラフィーにより出発物質の消失が示されるまで、室温で4時間反応させて、さらに減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-(モルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩3（70
mg）を淡黄色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 520.2 [M+1].
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ7.42-7.37
(m, 1H), 7.26-7.22 (m, 1H), 5.15-5.05 (m, 2H), 4.53-4.44 (m, 2H), 4.34-4.26 (m,
2H), 4.02-3.94 (m, 4H), 3.89-3.84 (m, 1H), 3.76-3.61 (m, 4H), 3.11-3.06 (m,
2H), 3.05-2.83 (m, 2H).
【実施例４】
【００７４】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸シアノメチルアミド・塩酸塩
【化３０】
0005481008.tif 000036
【化３１】
0005481008.tif 000037
【００７５】
ステップ1
(R)-[3-[1-(シアノメチル-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27 mmol）、硫酸アミノアセトニトリル（85 mg、0.41 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.206 g、0.81 mmol）およびトリエチルアミン（0.37 mL、2.7 mmol）を、ジクロロメタン10mLに攪拌しながら添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(シアノメチル-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル4a（150
mg、収率94.4％）を白色の固体として得た。
【００７６】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸シアノメチル-アミド・塩酸塩
(R)-[3-[1-(シアノメチル-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル4a（0.3
g、0.25 mmol）をジクロロメタン10mLに溶解し、該溶液にトリフルオロ酢酸5 mLを添加した。この反応混合物を、薄層クロマトグラフィーにより出発物質の消失が示されるまで、室温で1時間反応させ、減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸シアノメチルアミド・塩酸塩4（130
mg）を淡黄色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 489.2 [M+1]。
【実施例５】
【００７７】
(R)-3-アミノ-1-[1-(4-メチル-ピラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩
【化３２】
0005481008.tif 000038
【化３３】
0005481008.tif 000039
【００７８】
ステップ1
(R)-[3-[1-(4-メチル-ピラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）、1-メチルピラジン（54 mg、0.54 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54
mmol）を、ジクロロメタン8 mLに攪拌しながら溶解した。次いで該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62
mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(4-メチル-ピラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル5a（80
mg、収率49％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 633.2 [M+1]。
【００７９】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-(4-メチル-ピラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩
(R)-[3-[1-(4-メチル-ピラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル5a（0.08
g、0.126 mmol）を、酢酸エチル6 mL中3.1 N塩酸溶液に溶解させた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-(4-メチル-ピラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩5（90
mg）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 533.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ7.45-7.38
(m, 1H), 7.27-7.23 (m, 1H), 5.10-5.05 (m, 2H), 4.35-4.28 (m, 2H), 4.10-4.09 (m,
1H), 4.00-3.95 (m, 2H), 3.68-3.56 (m, 4H), 3.35-3.24 (m, 4H), 3.13 (m, 2H),
3.00-2.88 (m, 5H).
【実施例６】
【００８０】
(R)-3-アミノ-1-[1-(1,1-ジオキソ-チオモルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化３４】
0005481008.tif 000040
【化３５】
0005481008.tif 000041
【００８１】
ステップ1
(R)-[3-[1-(1,1-ジオキソ-チオモルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）、チオモルホリン-1,1-ジオキシド・塩酸塩（73 mg、0.54 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54 mmol）およびトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）を、ジクロロメタン8 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にN,N-ジメチルホルムアミド4 mLを添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(1,1-ジオキソ-チオモルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル6a（170
mg、収率94％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 668.1 [M+1]。
【００８２】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-(1,1-ジオキソ-チオモルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-(1,1-ジオキソ-チオモルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル6a（0.15
g、0.22 mmol）を、酢酸エチル4 mL中3.1 N塩酸溶液に溶解させた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-(1,1-ジオキソ-チオモルホリン-4-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩6（140
mg）を淡黄色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 568.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ7.45-7.39
(m, 1H), 7.29-7.20 (m, 1H), 5.10-5.04 (m, 2H), 4.35-4.28 (m, 2H), 4.16-4.09 (m,
2H), 4.02-3.93 (m, 5H), 3.27-3.13 (m, 4H), 3.18-3.04 (m, 2H), 2.99-2.85 (m,
2H).
【実施例７】
【００８３】
(R)-1-{7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペラジン-4-カルボン酸アミド・塩酸塩
【化３６】
0005481008.tif 000042
【化３７】
0005481008.tif 000043
【００８４】
ステップ1
(R)-[3-[1-(4-カルバモイル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）、ピペリジン-4-カルボン酸アミド(70 mg, 0.54 mmol)およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54
mmol）を、ジクロロメタン8mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62
mmol）およびN,N-ジメチルホルムアミド4 mLを順次添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(4-カルバモイル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル7a（180
mg、収率98％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 660.9 [M+1]。
【００８５】
ステップ2
(R)-1-{7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペリジン-4-カルボン酸アミド・塩酸塩
(R)-[3-[1-(4-カルバモイル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル7a（0.18
g、0.27 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル6 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3.5時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-1-{7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペリジン-4-カルボン酸アミド・塩酸塩7（0.12
g、収率74％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 561.2 [M+1].
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ7.42-7.31
(m, 1H), 7.28-7.16 (m, 1H), 5.17-4.97 (m, 2H), 4.43-4.24 (m, 2H), 4.20-4.03 (m,
1H), 4.03-3.89 (m, 2H), 3.30-3.18 (m, 2H), 3.17-3.06 (m, 2H), 3.03-2.72 (m,
4H), 2.65-2.53 (m, 1H), 2.15-2.03 (m, 2H), 1.93-1.83 (m, 2H), 1.77-1.60 (m,
2H).
【実施例８】
【００８６】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルアミド・塩酸塩
【化３８】
0005481008.tif 000044
【化３９】
0005481008.tif 000045
【００８７】
ステップ1
(R)-[3-(1-メチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）、メチルアミン塩酸塩（36.5 mg、0.54
mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54
mmol）を、ジクロロメタン8 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-メチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル8a（150
mg、収率98.6％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 563.9 [M+1]。
【００８８】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルアミド・塩酸塩
(R)-[3-(1-メチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル8a（0.15
g、0.27 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル5 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で4時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルアミド・塩酸塩8（0.135
g、収率90％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 464.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD):
δ7.40-7.38
(m, 1H), 7.23 (m, 1H), 5.13-5.04 (m, 2H), 4.31-4.25 (m, 2H), 4.07 (m, 1H), 3.96
(m, 2H), 3.10 (m, 2H), 2.99-2.76 (m, 5H).
【実施例９】
【００８９】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ジメチルアミド・塩酸塩
【化４０】
0005481008.tif 000046
【化４１】
0005481008.tif 000047
【００９０】
ステップ1
(R)-[3-(1-ジメチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]- カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）、ジメチルアミン塩酸塩（44 mg、0.54
mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54
mmol）を、ジクロロメタン8 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62
mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-ジメチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]- カルバミン酸-tert-ブチルエステル9a（120
mg、収率77％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 578.1 [M+1]。
【００９１】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロ-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピリジン-1-カルボン酸ジメチルアミド・塩酸塩
(R)-[3-(1-ジメチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-
カルバミン酸-tert-ブチルエステル9a（0.138 g、0.245 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル4
mL中2.3 Nの塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロ-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピリジン-1-カルボン酸ジメチルアミド・塩酸塩9（0.12
g、収率98％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 478.2 [M+1]。
【実施例１０】
【００９２】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸・塩酸塩
【化４２】
0005481008.tif 000048
【化４３】
0005481008.tif 000049
【００９３】
ステップ1
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（218 mg、0.4 mmol）を反応フラスコに入れ、次いで該フラスコにエタノール5 mL中塩酸溶液を添加した。該反応混合物を室温で反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸・塩酸塩10（60 mg、収率30.8％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 451.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.416-7.37
(m, 1H), 7.281-7.234 (m, 1H), 5.189-5.053 (m, 2H), 4.361-4.286 (m, 1H),
4.15-3.999 (m, 2H), 3.941-3.925 (m, 2H), 3.212-2.883 (m, 2H), 2.861-2.805 (m,
2H).
【実施例１１】
【００９４】
(R)-3-アミノ-1-[1-(3-アミノ-ピペリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩
【化４４】
0005481008.tif 000050
【化４５】
0005481008.tif 000051
【００９５】
ステップ1
ピペリジン-3-イル-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-ピペリジン-3-イル-アミン・塩酸塩11a（3
g、22.1 mmol）と炭酸カリウム（6.1 g、44.2 mmol）をメタノール60 mLに攪拌しながら溶解した。30分間攪拌後、該混合物に二炭酸ジ-tert-ブチル（4.8
g、22.1 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物であるピペリジン-3-イル-カルバミン酸-tert-ブチルエステル11b（1.3
g、収率29％）をオイルとして得た。
MS
m/z (ESI): 201.0 [M+1]。
【００９６】
ステップ2
(R)-(1-{7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペリジン-3-イル)-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.12 g、0.218 mmol）、ピペリジン-3-イル-カルバミン酸-tert-ブチルエステル11b（0.173 g、0.545 mmol）およびトリエチルアミン（0.275 g、2.18 mmol）を、ジクロロメタン12 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該混合物にビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.138 g、0.545 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-(1-{7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペリジン-3-イル)-カルバミン酸-tert-ブチルエステル11c（0.1 g、収率63％）を油として得た。
MS m/z (ESI): 733.1 [M+1]。
【００９７】
ステップ3
(R)-3-アミノ-1-[1-(3-アミノ-ピペリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩
(R)-(1-{7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペリジン-3-イル)-カルバミン酸-tert-ブチルエステル11c（0.1
g、0.163 mmol）を、酢酸エチル10 mL中2.3 N塩酸溶液に加えた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-(3-アミノ-ピペリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩11（0.09
g、収率98％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 533.3 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ 7.415-7.396 (m, 1H), 7.26-7.2154 (m, 1H),
5.131-4.085 (m, 11H), 3.994-2.837 (m, 8H), 2.11-1.846 (m, 5H).
【実施例１２】
【００９８】
(R)-3-アミノ-1-[1-(ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化４６】
0005481008.tif 000052
【化４７】
0005481008.tif 000053
【００９９】
ステップ1
(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）、ピロリジン（38.4 mg、0.54 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54
mmol）をジクロロメタン8 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル12a（120
mg、収率74％）を白色の固体として得た。
【０１００】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-(ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル12a（0.12
g、0.199 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル4 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-(ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩12（0.10
g、収率94％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 504.2 [M+1]。
【実施例１３】
【０１０１】
(R)-3-アミノ-1-[1-(ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩
【化４８】
0005481008.tif 000054
【化４９】
0005481008.tif 000055
【０１０２】
ステップ1
(R)-4-{7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27 mmol）、ピペラジン-1-カルバミン酸-tert-ブチルエステル（100.6 mg、0.54 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54 mmol）およびトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）を、ジクロロメタン6 mLに攪拌しながら溶解させた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-4-{7-[3-tret-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル13a（200
mg、収率99％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 719.0 [M+1]。
【０１０３】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-(ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩
(R)-4-{7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル13a（0.12
g、0.199 mmol）を反応フラスコに入れ、次いで該フラスコにメタノール5 mL中2.3Ｎ塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、次いで減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-(ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・二塩酸塩13（0.10
g、収率94％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 504.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.45-7.40 (m, 1H), 7.26-7.23 (m, 1H), 5.10-5.04
(m,  2H), 4.71-4.46 (m, 2H), 4.42-4.24 (m, 2H), 4.18-4.06 (m, 2H),
4.06-3.89 (m, 3H), 3.78-3.55 (m, 4H), 3.24-3.06 (m, 2H), 3.06-2.80 (m, 2H).
【実施例１４】
【０１０４】
(R)-3-アミノ-1-[1-((R)-3-ヒドロキシ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化５０】
0005481008.tif 000056
【化５１】
0005481008.tif 000057
【０１０５】
ステップ1
(R)-[3-[1-((R)-3-ヒドロキシ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27 mmol）、(R)-3-ピロリジノール（47 mg、0.54 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54 mmol）およびトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）を、ジクロロメタン6 mLに撹拌しながら溶解させた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-((R)-3-ヒドロキシ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル14a（90
mg、収率53％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 620.0 [M+1]。
【０１０６】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-((R)-3-ヒドロキシ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-((R)-3-ヒドロキシ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル14a（90
mg、0.15 mmol）を、酢酸エチル10 mL中2.3 N塩酸溶液に加えた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-((R)-3-ヒドロキシ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩14（60
mg、収率72％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 520.3 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ 7.417-7.372 (m, 1H), 7.275-7.234 (m, 1H),
5.527-4.87 (m, 2H), 4.87-4.346 (m, 1H), 4.346-4.117 (m, 2H), 4.117-3.352 (m,
8H), 3.349-2.98 (m, 2H), 2.98-2.088 (m, 2H), 2.088-2.029 (m, 2H).
【実施例１５】
【０１０７】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸シクロプロピルアミド・塩酸塩
【化５２】
0005481008.tif 000058
【化５３】
0005481008.tif 000059
【０１０８】
ステップ1
(R)-[3-(1-シクロプロピルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.2 g、0.36 mmol）、シクロプロピルアミン（0.05 g、0.54 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.18 g、0.72 mmol）を、ジクロロメタン20 mLに攪拌しながら溶解させ、該溶液に室温でトリエチルアミン（0.36 g、3.6 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で2時間反応させ、次いで減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-シクロプロピルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル15a（0.1
g、収率45％）をオイルとして得た。
【０１０９】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸シクロプロピルアミド・塩酸塩
(R)-[3-(1-シクロプロピルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル15a（0.1
g、0.16 mmol）を、酢酸エチル5 mL中2.2 N塩酸溶液に加えた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸シクロプロピルアミド・塩酸塩15（82
mg、収率95％）を淡黄色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 490.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ 7.423-7.174 (m, 2H), 5.284-4.872 (m, 2H),
4.716-2.019 (m, 10H), 2.019 (s, 2H), 1.349-1.191 (m, 2H), 0.907-0.596 (m, 2H).
【実施例１６】
【０１１０】
(R)-({7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-アミノ)-酢酸メチルエステル・塩酸塩
【化５４】
0005481008.tif 000060
【化５５】
0005481008.tif 000061
【０１１１】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）およびメチルグリシネート塩酸塩（512 mg、0.408
mmol）をジクロロメタン8 mLに溶解し、該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62
mmol）を添加した。5分間攪拌後、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54
mmol）を添加した。この反応混合物を室温で20時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-({7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-アミノ)-酢酸メチルエステル16a（90 mg、収率53.6％）を淡黄色の油として得た。
【０１１２】
ステップ2
(R)-({7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-アミノ)-酢酸メチルエステル16a（0.09
g、0.145 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル4 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-({7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-アミノ)-酢酸メチルエステル・塩酸塩16（80
mg、収率99％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 522.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.47-7.30 (m, 1H), 7.30-7.14 (m, 1H), 5.23-5.00
(m, 2H), 4.39-4.20 (m, 2H), 4.18-4.06 (m, 3H), 4.17-4.07 (m, 3H), 4.01-3.89 (m,
2H), 3.84-3.24 (m, 3H), 3.20-2.76 (m, 4H).
【実施例１７】
【０１１３】
(R)-1-[1-(4-アセチル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化５６】
0005481008.tif 000062
【化５７】
0005481008.tif 000063
【０１１４】
ステップ1
(R)-[3-[1-(4-アセチル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27 mmol）、1-ピペラジン-1-イル-エタノン塩酸塩（90 mg、0.54 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54 mmol）を、ジクロロメタン8
mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(4-アセチル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル17a（80
mg、収率45％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 660.9 [M+1]。
【０１１５】
ステップ2
(R)-1-[1-(4-アセチル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-(4-アセチル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル17a（0.08
g、0.12 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル2 mL中2.7 Nの塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-1-[1-(4-アセチル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩17（70
mg、収率98％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 561.2 [M+1].
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.50-7.36 (m, 1H), 7.33-7.15 (m, 1H), 5.23-4.97
(m, 2H), 4.60-4.06 (m, 5H), 4.06-3.88 (m, 2H), 3.88-3.48 (m, 6H), 3.24-2.71 (m,
4H), 2.26-2.12 (m, 3H).
【実施例１８】
【０１１６】
(R)-3-アミノ-1-[1-((2R)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化５８】
0005481008.tif 000064
【化５９】
0005481008.tif 000065
【０１１７】
ステップ1
(R)-[3-[1-((2R)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニル-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27
mmol）、(R)-ピロリジン-2-イル-メタノール（54.6
mg、0.54 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54
mmol）およびトリエチルアミン（0.25 mL、1.62
mmol）を、ジクロロメタン8 mLに攪拌しながら溶解させた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-((2R)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル18a（120
mg、収率70％）を無色のオイルとして得た。
MS m/z (ESI): 633.9 [M+1]。
【０１１８】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-((2R)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-((2R)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル18a（0.12
g、0.19 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル4 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-((2R)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩18（0.12 g、収率88％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 534.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ7.39-7.35
(m, 1H), 7.23-7.19 (m, 1H), 5.16-5.04 (m, 2H), 4.33-4.26 (m, 2H), 4.15-4.09 (m,
2H), 3.98 (m, 1H), 3.86-3.57 (m, 5H), 3.04 (m, 2H), 2.93-2.86 (m, 1H),
2.82-2.72 (m, 1H)
【実施例１９】
【０１１９】
(R)-4-{7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペラジン-2-オン・塩酸塩
【化６０】
0005481008.tif 000066
【化６１】
0005481008.tif 000067
【０１２０】
ステップ1
(R)-[3-オキソ-3-[1-(3-オキソ-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（150 mg、0.27 mmol）、ピペラジン-2-オン（60 mg、0.6 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスホン酸クロリド（0.138 g、0.54 mmol）、トリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）およびジクロロメタン8 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコにN,N-ジメチルホルムアミド10 mLを添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-オキソ-3-[1-(3-オキソ-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル19a（140
mg、収率82％）を無色のオイルとして得た。
MS m/z (ESI): 632.7 [M+1]。
【０１２１】
ステップ2
(R)-4-{7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペラジン-2-オン・塩酸塩
(R)-[3-オキソ-3-[1-(3-オキソ-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル19a（0.14
g、0.22 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル4 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-4-{7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボニル}-ピペラジン-2-オン・塩酸塩19（0.12
g、収率93％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 533.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ 7.38 (m, 1H), 7.24-7.22 (m, 1H), 5.08-5.01 (m,
2H), 4.57 (m, 2H), 4.32-4.27 (m, 2H), 4.08 (m, 1H), 3.97-3.94 (m, 4H), 3.47 (m,
2H), 3.11 (m, 2H), 2.97-2.84 (m, 2H).
【実施例２０】
【０１２２】
(R)-3-アミノ-1-[1-(チアゾリジン-3-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化６２】
0005481008.tif 000068
【化６３】
0005481008.tif 000069
【０１２３】
ステップ1
(R)-[3-オキソ-3-[1-(チアゾリジン3-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15 g、0.27
mmol）、チアゾリジン（57 mg、0.6 mmol）、トリエチルアミン（0.275 g、2.72 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.138 g、0.544
mmol）を、ジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解させた。この反応混合物を室温で2時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-オキソ-3-[1-(チアゾリジン-3-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル20a（0.15
g、収率89％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 644.1 [M+23]。
【０１２４】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-(チアゾリジン-3-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-オキソ-3-[1-(チアゾリジン-3-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル20a（0.15
g、0.24 mmol）を、酢酸エチル5 mL中2.2 N塩酸溶液に添加した。この反応混合物を室温で4時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-(チアゾリジン-3-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩20（100
mg、収率75％）を淡黄色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 522.1 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ 7.447-7.358 (m, 1H), 7.3-7.204 (m, 1H),
5.217-5.05 (m, 2H), 4.752-4.461 (m, 2H), 4.37-4.284 (m, 2H), 4.284-4.086 (m,
2H), 4.086-3.952 (m, 2H), 3.719-3.607 (m, 1H), 3.211-2.827 (m, 4H), 2.827-2.784
(m, 2H).
【実施例２１】
【０１２５】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(ピリジン-3-イル)アミド・二塩酸塩
【化６４】
0005481008.tif 000070
【化６５】
0005481008.tif 000071
【０１２６】
ステップ1
(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピリジン-3-イル-カルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15 g、0.272 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液に3-アミノピリジン（38.4 mg、0.41
mmol）、トリエチルアミン（0.275 g、2.72 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.138 g、0.544 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピリジン-3-イルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル21a（0.1 g、収率58.8％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 627.1 [M+1]。
【０１２７】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(ピリジン-3-イル)アミド・二塩酸塩
(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピリジン-3-イル-カルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル21a（0.1 g、0.16 mmol）を、酢酸エチル10 mL中2.2 N塩酸溶液に添加した。この反応混合物を室温で4時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(ピリジン-3-イル)アミド・二塩酸塩21（80 mg、収率89％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 527.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 9.584 (s, 1H), 8.88-8.857 (m, 1H), 8.63-8.601 (m, 1H), 8.115-8.07
(m, 1H), 7.438-7.215 (m, 2H), 5.209-5.137 (m, 2H), 4.87-3.937 (m, 5H),
3.34-2.902 (m, 5H), 2.061 (m, 2H).
【実施例２２】
【０１２８】
(R)-3-アミノ-1-[1-(4-メタンスルホニル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化６６】
0005481008.tif 000072
【化６７】
0005481008.tif 000073
【０１２９】
ステップ1
(R)-[3-[1-(4-メタンスルホニル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15
g、0.27 mmol）、1-メタンスルホニル-ピペラジン（0.109
g、0.55 mmol）およびトリエチルアミン（0.38 mL、2.7 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.139
g、0.55 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(4-メタンスルホニル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル22a（0.2
g）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 696.9 [M+1]。
【０１３０】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-(4-メタンスルホニル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-(4-メタンスルホニル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル22a（0.19
g、0.27 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル4 mL中2.7N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、(R)-3-アミノ-1-[1-(4-メタンスルホニル-ピペラジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩22（170
mg、収率99％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 597.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.46-7.34 (m, 1H), 7.33-7.20 (m, 1H), 5.18-5.07
(s, 1H), 5.06-4.97 (s, 1H), 4.56-4.28 (m, 4H), 4.17-4.07 (m, 1H), 4.03-3.78 (m,
4H), 3.73-3.17 (m, 3H), 3.16-2.75 (m, 8H).
【実施例２３】
【０１３１】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルエステル・塩酸塩
【化６８】
0005481008.tif 000074
【化６９】
0005481008.tif 000075
【０１３２】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.16
g、0.29 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にエタノール（0.05 mL、0.87 mmol）、トリエチルアミン（0.202
mL、1.45 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.148 g、0.58 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で5時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルエステル23a（0.1
g）を無色の油として得た。
MS
m/z (ESI): 579.0 [M+1]。
【０１３３】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルエステル23a（0.09
g、0.156 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル4 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルエステル・塩酸塩23（80
mg、収率99％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 479.1 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.50-7.45 (m, 1H), 7.40-7.18 (m, 1H), 5.20-5.00
(m, 2H), 4.5-4.22 (m, 4H), 4.15-4.06 (m, 1H), 4.06-3.89 (m, 2H), 3.23-2.78 (m,
4H), 1.40-1.48 (m, 3H).
【実施例２４】
【０１３４】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸アミド・塩酸塩
【化７０】
0005481008.tif 000076
【化７１】
0005481008.tif 000077
【０１３５】
ステップ1
(R)-[3-(1-カルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15
g、0.27 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.206 g、1.08 mmol）およびトリエチルアミン（0.25
mL、1.62 mmol）を、テトラヒドロフラン10 mLに攪拌しながら溶解した。10分間攪拌した後、炭酸アンモニウム（78 mg、0.81 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-カルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル24a（0.162
g）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 549.9 [M+1]。
【０１３６】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸アミド・塩酸塩
(R)-[3-(1-カルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル24a（0.16
g、0.29 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル5 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸アミド・塩酸塩24（150
mg、収率95％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 450.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.40-7.36 (m, 1H), 7.28-7.22 (m, 1H), 5.14-5.05
(m, 2H), 4.34-4.27 (m, 2H), 4.10-4.07 (m, 1H), 3.99-3.94 (m, 1H), 3.21-3.09 (m,
2H), 3.02-2.85 (m, 1H), 2.82-2.76 (m, 1H).
【実施例２５】
【０１３７】
(R)-3-アミノ-1-[1-((R)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化７２】
0005481008.tif 000078
【化７３】
0005481008.tif 000079
【０１３８】
ステップ1
(R)-[3-[1-((R)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15
g、0.27 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.140 g、0.54 mmol）、トリエチルアミン（0.4 mL、2.6
mmol）および(R)-3-フルオロピロリジン・塩酸塩（68 mg、0.54 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解させた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-((R)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-アミノカルバミン酸-tert-ブチルエステル25a（0.162
g）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 622.0 [M+1]。
【０１３９】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-((R)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-((R)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル25a（0.15
g、0.27 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル5 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-((R)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩25（140
mg、収率94％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 522.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.42-7.37 (m, 1H), 7.26-7.22 (m, 1H), 5.47-5.29
(m, 1H), 5.18-5.10 (m, 2H), 4.56-4.48 (m, 1H), 4.37-4.28 (m, 2H), 4.16-3.89 (m,
5H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.16-3.11 (m, 2H), 3.07-2.77 (m, 2H), 2.39-2.03 (m,
2H).
【実施例２６】
【０１４０】
(R)-3-アミノ-1-[1-((s)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化７４】
0005481008.tif 000080
【化７５】
0005481008.tif 000081
【０１４１】
ステップ1
(R)-[3-[1-((S)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15
g、0.27 mmol)、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.140 g、0.54 mmol）、トリエチルアミン（0.4 mL、2.6
mmol）および(S)-3-フルオロピロリジン・塩酸塩（68 mg、0.54 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解させた。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-((S)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル26a（0.15
g、収率89％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 622.0 [M+1]。
【０１４２】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-((S)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-((S)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル26a（0.15
g、0.24 mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル5 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で3時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-((S)-3-フルオロ-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩26（140
mg、収率94％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 522.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.42-7.37 (m, 1H), 7.26-7.22 (m, 1H), 5.47-5.29
(m, 1H), 5.18-5.10 (m, 2H), 4.56-4.48 (m, 1H), 4.37-4.28 (m, 2H), 4.16-3.89 (m,
5H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.16-3.11 (m, 2H), 3.07-2.77 (m, 2H), 2.39-2.03 (m,
2H).
【実施例２７】
【０１４３】
(R)-1-(1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化７６】
0005481008.tif 000082
【化７７】
0005481008.tif 000083
【０１４４】
ステップ1
3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
3-トリフルオロメチル-イミダゾ[1,5-a]ピラジン1j（3.5
g、18.7 mmol)をエタノール50 mLに溶解し、次いで該溶液に10％Pd/C（0.5 g）を攪拌しながら添加した。この反応混合物を水素雰囲気下で反応が終了するまで一晩反応させた。この反応混合物をセライトパッドでろ過し、該ろ液を減圧下で濃縮した。得られた残渣はエタノール100
mLで洗浄した。この反応混合物に、エタノール100 mL中の二炭酸ジ-tert-ブチル（6.2 g、28.1 mmol）溶液を攪拌しながら滴下した。滴下終了後、反応が終了するまでこの反応混合物を30分間さらに攪拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27a（3.7
g、収率68％）を白色の固体として得た。
【０１４５】
ステップ2
1-ブロモ-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル
100
mLの乾燥したフラスコ中で、前のステップで得られた化合物の3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27a（300
mg、1.04 mmol）をエタノール50 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にN-ブロモコハク酸イミド（369 mg、2.08 mmol）を添加した。この反応混合物を反応が終了するまで室温で1時間攪拌した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である1-ブロモ-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27b（220
mg、収率57.8％）を白色の固体として得た。
【０１４６】
ステップ3
3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸-7-tert-ブチルエステル-1-メチルエステル
ジコバルトオクタカルボニル（5.54
g、16.2 mmol）および炭酸カリウム（11.2 g、81.1 mmol）をメタノール100 mLに攪拌しながら溶解させた。この反応混合物を60℃で15分間攪拌し、次いで該溶液に1-ブロモ-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27b（3
g、8.11 mmol）およびクロロ酢酸メチル（5.25 g、48.6 mmol）を添加した。この反応混合物を一酸化炭素雰囲気下で6時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。室温に冷却後、シリカゲルパッドでこの反応混合物をろ過し、メタノールで洗浄した。このろ液を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸-7-tert-ブチルエステル-1-メチルエステル27c（1.92
g、収率67％）を白色の固体として得た。（参考文献：J. Organomet. Chem, 1985, 293）
MS
m/z (ESI): 350.5 [M+1]。
【０１４７】
ステップ4
3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸-7-tert-ブチルエステル
3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸-7-tert-ブチルエステル-1-メチルエステル27c（1.92
g、5.5 mmol）をメタノール50 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液に4 N水酸化ナトリウム30 mLを添加した。この反応混合物を室温で30分間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物は2
N塩酸でpH 4〜5に調整し、次いで酢酸エチル（100 mL×3）で抽出した。合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して、直接次のステップで使われた表題化合物である3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸-7-tert-ブチルエステル27d（2
g）を白色の固体として得た。
【０１４８】
ステップ5
1-(メトキシ-メチル-カルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル
3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸-7-tert-ブチルエステル27d（1.84
g、5.5 mmol）およびN-メトキシメチルアミン（0.805 g、8.25 mmol）をジクロロメタン50 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にトリエチルアミン（3
mL、22 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（2.1 g、8.25 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である1-(メトキシ-メチル-カルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27e（2.1
g）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 379.1 [M+1]。
【０１４９】
ステップ6
1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル
1-(メトキシ-メチル-カルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27e（0.3
g、0.79 mmol）をテトラヒドロフラン20 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液に臭化メチルマグネシウム（1.13 mL、1.58 mmol）を0℃で滴下した。この反応混合物を0℃で1.5時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物に飽和塩化アンモニウム50
mLおよび飽和塩水10 mLを添加した。該混合物は酢酸エチル（50 mL×3）で抽出した。合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27f（0.24
g、収率90％）を黄色のオイルとして得た。
MS
m/z (ESI): 334.0 [M+1]。
【０１５０】
ステップ7
1-(3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-イル)-エタノン
1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27f（0.24
g、0.72 mmol）を少量の酢酸エチルに溶解し、次いで酢酸エチル5 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、直接次のステップに使われた表題化合物である1-(3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-イル)-エタノン27gを得た。
【０１５１】
ステップ8
(R)-[3-(1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
1-(3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-イル)-エタノン27g（192
mg、0.72 mmol）および(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸1f（0.24
g、0.72 mmol）をジクロロメタン20 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にトリエチルアミン（0.4 mL、2.88 mmol）を添加した。攪拌して十分混合させた後、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.275
g、1.08 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル27h（0.3
g）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 449.2 [M+1]。
【０１５２】
ステップ9
(R)-1-(1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-(1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル27h（0.3
g、0.55 mmol）を酢酸エチル2 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液に酢酸エステル5 mL中2.4 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-1-(1-アセチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩27（0.15
g、収率57％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 548.9 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ 7.37 (m, 1H), 7.26 (m, 1H), 5.09 (m, 1H), 5.02
(d, 1H), 4.87-3.92 (m, 5H), 3.1-2.78 (m, 4H), 2.57 (d, 2H), 2.04 (d, 1H).
【実施例２８】
【０１５３】
(R)-3-アミノ-1-(1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化７８】
0005481008.tif 000084
【化７９】
0005481008.tif 000085
【０１５４】
ステップ1
1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル
1-(メトキシ-メチル-カルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル27e（0.3
g、0.79 mmol）をテトラヒドロフラン20 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液に臭化シクロペンチルマグネシウム（0.79 mL、1.58 mmol）を0℃で滴下した。この反応混合物を0℃で3時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物に飽和塩化アンモニウム50
mLおよび飽和食塩水10 mLを添加した。粗混合物は酢酸エチル（100 mL×3）で抽出した。合わせた有機相は無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル28a（0.1
g、収率30％）を黄色のオイルとして得た。
MS
m/z (ESI): 388.1 [M+1]。
【０１５５】
ステップ2
シクロペンチル-(3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-イル)-メタノン
1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-カルボン酸-tert-ブチルエステル28a（0.1
g、0.258 mmol）を少量の酢酸エチルに攪拌しながら溶解し、次いで酢酸エチル5 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で2時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、直接次のステップに使われた表題化合物であるシクロペンチル-(3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-イル)-メタノン28bを得た。
MS
m/z (ESI): 288.2 [M+1]。
【０１５６】
ステップ3
(R)-[3-(1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
シクロペンチル-(3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-イル)-メタノン28b（83
mg、0.258 mmol）および(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸1f（0.129
g、0.388 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にトリエチルアミン（0.143 mL、1.03 mmol）を添加した。攪拌して十分混合させた後、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.099
g、0.388 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル28c（0.11
g、収率72％）を橙色のオイルとして得た。
MS
m/z (ESI): 602.9 [M+1]。
【０１５７】
ステップ4
(R)-3-アミノ-1-(1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-(1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル28c（0.11
g、0.183 mmol）を酢酸エチル2 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液に酢酸エチル5 mL中2.4 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-(1-シクロペンタンカルボニル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩28（80
mg、収率81％）を黄色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 503.2 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ 7.41 (m, 1H), 7.25 (m, 1H), 5.10 (d, 1H), 4.87
(s, 1H), 4.37-3.91 (m, 6H), 3.14-2.82 (m, 4H), 2.03-1.72 (m, 8H).
【実施例２９】
【０１５８】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(2-ジメチルアミノ-エチル)-アミド・二塩酸塩
【化８０】
0005481008.tif 000086
【化８１】
0005481008.tif 000087
【０１５９】
ステップ1
(R)-[3-[1-(2-ジメチルアミノ-エチルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15
g、0.27 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.14 g、0.54 mmol）およびトリエチルアミン（0.25
mL、1.62 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解し、該溶液にN,N’-ジメチルエタン-1，2-ジアミン（48
mg、0.54 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-(2-ジメチルアミノ-エチルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル29a（0.1
g）を白色の固体として得た。
【０１６０】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(2-ジメチルアミノ-エチル)-アミド・二塩酸塩
(R)-[3-[1-(2-二メチルアミノ-エチルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル29a（0.10
g、0.16 mmol）を酢酸エチル2 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液に酢酸エチル6 mL中2.4 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で4時間反応させて、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣に5mLの酢酸エチルを加え、ろ過した。得られた白色の個体を酢酸エチルで洗浄し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(2-ジメチルアミノ-エチル)-アミド・二塩酸塩29（80
mg、収率63％）を白色の固体として得た。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.46-7.39 (m, 1H), 7.29-7.23 (m, 1H), 5.18-5.09
(m, 2H), 4.37-4.27 (m, 2H), 4.15-4.09 (m, 1H), 4.00-3.95 (m, 1H), 3.77-3.75 (m,
2H), 3.39-3.35 (m, 2H), 3.13-3.12 (m, 2H), 3.02 (s, 3H), 3.01 (m, 4H),
2.98-2.88 (m, 1H).
【実施例３０】
【０１６１】
(R)-3-アミノ-1-[1-((S)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
【化８２】
0005481008.tif 000088
【化８３】
0005481008.tif 000089
【０１６２】
ステップ1
(R)-[3-[1-((S)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15
g、0.27 mmol）、(S)-ピロリジン-2-イル-メタノール（54.62
mg、0.54 mmol）およびトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）をジクロロメタン10 mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.14
g、0.54 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-[1-((s)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル30a（0.2
g）を白色の固体としてを得た。
【０１６３】
ステップ2
(R)-3-アミノ-1-[1-((S)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩
(R)-[3-[1-((S)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル30a（0.16
g、0.25 mmol）とジクロロメタン2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコにメタノール5 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-3-アミノ-1-[1-((S)-2-ヒドロキシメチル-ピロリジン-1-カルボニル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブタン-1-オン・塩酸塩30（120
mg、収率84％）を白色の固体として得た。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ7.34-7.30 (m, 1H), 7.19-7.12 (m, 1H), 5.10-4.92
(m, 2H), 4.27-4.25 (m, 2H), 4.21-4.18 (m, 1H), 4.06-3.98 (m, 2H), 3.91-3.90 (m,
1H), 3.84-3.80 (m, 1H), 3.72-3.48 (m, 3H), 3.03-2.99 (m, 2H), 2.93-2.73 (m,
2H), 2.01-1.85 (m, 4H).
【実施例３１】
【０１６４】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(ピリジン-2-イル)アミド・二塩酸塩
【化８４】
0005481008.tif 000090
【化８５】
0005481008.tif 000091
【０１６５】
ステップ1
(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15
g、0.27 mmol）、2-アミノピリジン（51 g、0.54 mmol）およびトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）をジクロロメタン10
mLに攪拌しながら溶解させた。20分間攪拌後、該溶液にビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.14 g、0.54 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル31a（0.1
g、収率59％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 627.1 [M+1]。
【０１６６】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(ピリジン-2-イル)アミド・二塩酸塩
(R)-[3-オキソ-3-[1-(ピリジン-2-イル-カルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル31a（0.10
g、0.16 mmol）とジクロロメタン2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコにメタノール5 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(ピリジン-2-イル)アミド・二塩酸塩31（80
mg、収率95.2％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 527.1 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CD3OD): δ8.48 (m, 2H), 8.08-8.05 (m, 1H), 7.65-7.63 (m,
1H), 7.45-7.41 (m, 1H), 7.27-7.26 (m, 1H), 5.24-5.17 (m, 2H), 4.43-4.34 (m,
2H), 4.14 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.21-3.03 (m, 2H), 2.96-2.72 (m,
2H).
【実施例３２】
【０１６７】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(4-フルオロ-フェニル)-アミド・塩酸塩
【化８６】
0005481008.tif 000092
【化８７】
0005481008.tif 000093
【０１６８】
ステップ1
(R)- (1-(4-フルオロ-フェニルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-３-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.15 g、0.27 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.14 g、0.54 mmol）およびトリエチルアミン（0.25 mL、1.62 mmol）をジクロロメタン10
mLに攪拌しながら溶解し、該溶液に4-フルオロアニリン（0.06 g、0.54 mmol)を1回添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)- (1-(4-フルオロ-フェニルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-３-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-カルバミン酸-tert-ブチルエステル32a（0.12 g、収率69％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 643.9 [M+1]。
【０１６９】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(4-フルオロ-フェニル)-アミド・塩酸塩
(R)- (1-(4-フルオロ-フェニルカルバモイル)-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル]-３-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-カルバミン酸-tert-ブチルエステル32a（0.12 g、0.186
mmol）および酢酸エチル2 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル8 mL中2.7 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(4-フルオロ-フェニル)-アミド・塩酸塩32（110 mg、収率100％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 544.1 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO): δ10.124 (d, 1H), 8.190 (s, 2H), 7.849 (s, 1H), 7.552 (m,
1H), 7.157 (d, 2H), 5.023 (m, 2H), 4.231 (m, 2H), 3.897 (m, 3H), 3.014 (m, 4H),
2.0 (m, 2H).
【実施例３３】
【０１７０】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ベンジルエステル・塩酸塩
【化８８】
0005481008.tif 000094
【化８９】
0005481008.tif 000095
【０１７１】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ベンジルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.24
g、0.44 mmol）、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（0.072 g、0.53 mmol）およびN-(3-ジメチルアミノプロピル)-N'-エチルカルボジイミド・塩酸塩（0.102
g、0.53 mmol)をジクロロメタン10mLに攪拌しながら溶解し、次いで該溶液にベンジルアルコール（0.1 mL、0.88 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧圧縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ベンジルエステル33a（0.056
g、収率20％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 640.9 [M+1]。
【０１７２】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ベンジルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ベンジルエステル33a（0.056
g、0.087 mmol）および酢酸エチル2 mL中2.7 N塩酸溶液を反応フラスコに入れた。該反応混合物を室温で2時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ベンジルエステル・塩酸塩33（0.043
g、収率86％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 541.2 [M+1]。
1H NMR(400
MHz, CD3OD): 7.526-7.498 (m, 2H), 7.498-7.364 (m, 5H), 5.415 (s,
2H), 5.121-5.003 (m, 2H), 4.498-3.820 (m, 5H), 3.341-2.903 (m, 4H).
【実施例３４】
【０１７３】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-エトキシカルボニルオキシ)-エチルエステル・塩酸塩
【化９０】
0005481008.tif 000096
【化９１】
0005481008.tif 000097
【０１７４】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-エトキシカルボニルオキシ)-エチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.275 g、0.5
mmol）および4 mLのN,N-ジメチルホルムアミドを反応管に入れ、次いでカルボン酸1-クロロエチルエステル（0.092 g、0.6
mmol）、ヨウ化カリウム（0.0415 g、0.25 mmol）および炭酸カリウム（0.083 g、0.6 mmol）を攪拌しながら順次添加した。次いで反応管を密封した。この反応混合物を油浴中65℃で2時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。室温まで冷却した後、前記反応管に水40 mLを加えた。酢酸エチル（25 mL×3）でこの反応混合物を抽出し、合わせた有機相を水（20 mL×2）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-エトキシカルボニルオキシ)-エチルエステル34a（0.26 g、収率78.1％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 666.9 [M+1], 689.1 [M+23]。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.08 (m,
2H), 6.90 (m, 1H), 5.36 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 5.01 (m, 1H), 4.27-3.94 (m, 6H),
3.0 (m, 2H), 2.68 (m, 1H), 1.71 (d, 3H), 1.61 (s, 2H), 1.40 (s, 9H).
【０１７５】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-エトキシカルボニルオキシ)-エチルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-エトキシカルボニルオキシ)-エチルエステル34a（0.26 g、0.39 mmol）および酢酸エチル5 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル3 mL中6.5 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で6時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-エトキシカルボニルオキシ)-エチルエステル・塩酸塩34（0.2 g、収率85％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 567.0 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ7.30 (m,
1H), 7.15 (m, 1H), 6.96 (m, 1H), 5.06 (m, 2H), 4.32 (t, 1H), 4.24 (m, 3H), 4.03
(m, 2H), 3.60 (m, 1H), 2.88 (d, 2H), 2.67 (m, 2H), 1.93 (s, 1H), 1.65 (t, 3H).
【実施例３５】
【０１７６】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロピルエステル・塩酸塩
【化９２】
0005481008.tif 000098
【化９３】
0005481008.tif 000099
【０１７７】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロピルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.3 g、0.54
mmol）を50 mL容の反応フラスコに入れ、次いでジクロロメタン10 mL、イソプロパノール2 mLおよびトリエチルアミン0.3 mLを添加した。1分間攪拌した後、該溶液にビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.277 g、1.09 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で2時間攪拌し、次いでイソプロパノール10 mLとイソプロポキシナトリウム（0.177 g、2.16 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で1.5時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物に飽和塩化アンモニウム10 mLを加えて、白色の沈殿物を生成させた。該沈殿物をシリカゲルパッドでろ過し、ろ液に水50 mLを加えた。このろ液を酢酸エチル（25 mL×5）で抽出し、合わせた有機相を飽和食塩水30 mLで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥してから、ろ過して減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)- 7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロピルエステル35a（0.185 g、収率57.8％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 593.0 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.146-7.082
(m, 1H), 6.929-6.883 (m, 1H), 5.405-5.010 (m, 3H), 4.219-3.937 (m, 5H),
3.022-2.307 (m, 4H), 1.484-1.242 (m, 15H).
【０１７８】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロピルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロピルエステル35a（0.17 g、0.29 mmol）および酢酸エチル10 mLを反応フラスコに入れた。次いで、氷水浴で、該反応フラスコに酢酸エチル5 mL中5.5 N塩酸溶液を添加した。添加後、氷水浴を除去した。この反応混合物を室温で2時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、ｎ-へキサン（10 mL×2）で洗浄した。このろ液を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロピルエステル・塩酸塩35（0.15 g、収率97.8％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 493.1 [M+1]。
1H NMR(400 MHz, DMSO): δ7.631-7.482 (m, 2H), 5.159-4.308 (m, 3H), 4.285-3.742
(m, 5H), 3.110-2.735 (m, 4H), 1.473-1.063 (m, 6H).
【実施例３６】
【０１７９】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル・塩酸塩
【化９４】
0005481008.tif 000100
【化９５】
0005481008.tif 000101
【０１８０】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.3 g、0.54
mmol）、ジクロロメタン10 mLおよびtert-ブタノール5
mLを100 mL容の反応フラスコに入れ、次いでトリエチルアミン0.3 mL及びビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.277 g、1.09 mmol）を攪拌しながら添加した。室温で2時間攪拌してから、該溶液にtert-ブタノール10mLおよびカリウムtert-ブトキシド（0.24 g、2.16 mmol）を加えた。この反応混合物を室温で2時間さらに攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物に飽和塩化アンモニウム10 mLを加えて、白色の沈殿物を生成させた。該沈殿物を100〜200メッシュのシリカゲルパッドでろ過し、ろ液に水50 mLを加えて、酢酸エチル（25 mL×5）で該ろ液を抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水30 mLで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥してから、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル36a（0.11
g、収率33.6％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 629.2 [M+23]。
1H NMR(400 MHz, CH3OD): δ7.255-7.090
(m, 2H), 5.077-4.964 (m, 2H), 4.500-4.227 (m, 3H), 4.227-4.032 (m, 2H),
2.994-2.744 (m, 4H), 1.496-1.202 (m, 18H).
【０１８１】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル36a(0.094 g、0.15 mmol）および酢酸エチル10 mLを反応フラスコに入れ、氷水浴中で、該反応フラスコに酢酸エチル3 mL中5.5 N塩酸溶液を添加した。添加後、氷水浴を除去した。この反応混合物を室温で3時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、ｎ-へキサン20 mLで洗浄した。このろ液を減圧下で濃縮し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-tert-ブチルエステル・塩酸塩36（0.084 g、収率100％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 507.0 [M+1]。
1H NMR(400 MHz, CH3OD): δ7.431-7.387
(m,1H), 7.246-7.198 (m, 1H), 5.108-4.981 (m, 2H), 4.354-3.926 (m, 5H),
3.174-3.095 (m, 2H), 2.996-2.896 (m, 2H), 1.276 (s, 9H).
【実施例３７】
【０１８２】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-1-イソプロポキシカルボニルオキシ-エチルエステル・塩酸塩
【化９６】
0005481008.tif 000102
【化９７】
0005481008.tif 000103
【０１８３】
ステップ1
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロポキシカルボニルオキシ-エチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.275 g、0.5
mmol）およびN,N-ジメチルホルムアミド4 mLを反応管に入れ、2aが溶解されるまで攪拌してから、引き続き該溶液にカルボン酸1-クロロエチルイソプロピル（0.1 g、0.6 mmol）、ヨウ化カリウム（0.0415 g、0.25 mmol）および炭酸カリウム（0.083 g、0.6 mmol）を添加した。添加後、前記反応管を密封した。この反応混合物を油浴中65℃で2時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視し、次いで油浴を除去した。室温まで冷却した後、前記反応管に水40 mLを加えた。この反応混合物を酢酸エチル（25 mL×3）で抽出した。薄層クロマトグラフィーにより水相に生成物がないことが示された後、有機相を回収した。次いで、水（20 mL×2）で洗浄した後、合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-1-イソプロポキシカルボニルオキシ-エチルエステル37a（0.29 g、収率85.3％）を黄色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 698.0(M+18)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ7.12 (m,
1H), 7.05 (m, 1H), 6.92 (m, 1H), 5.38 (d, 1H), 5.15 (d, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.94
(m, 1H), 4.23-3.94 (m, 5H), 2.98 (m, 2H), 2.70 (m, 1H), 1.70 (d, 2H), 1.62 (s,
1H), 1.40 (s, 9H).
【０１８４】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸イソプロポキシカルボニルオキシ-エチルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸1-イソプロポキシカルボニルオキシ-エチルエステル37a（0.29 g、0.43
mmol）および酢酸エチル5 mLを反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル3 mL中6.5 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で4時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸-1-イソプロポキシカルボニルオキシ-エチルエステル・塩酸塩37（0.24
g、収率91.2％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 581.1 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ7.38 (m,
1H), 7.25 (m, 1H), 6.96 (m, 1H), 5.10 (m, 2H), 4.88 (m, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.11
(m, 2H), 3.95 (m, 2H), 3.05 (m, 2H), 3.00 (m, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.03 (m, 3H),
1.64 (m, 3H).
【実施例３８】
【０１８５】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-シクロへキシルオキシカルボニルオキシ)-エチルエステル・塩酸塩
【化９８】
0005481008.tif 000104
【化９９】
0005481008.tif 000105
【０１８６】
ステップ1
(R)-7-[3- tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-シクロへキシルオキシカルボニルオキシ)-エチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（0.275 g、0.5
mmol）およびN,N-ジメチルホルムアミド4 mLを反応管に入れた。2aが溶解するまで攪拌した後、次いで該溶液にカルボン酸1-クロロエチルシクロへキシル（0.124
g、0.6 mmol）、ヨウ化カリウム（0.0415 g、0.25 mmol）および炭酸カリウム（0.083 g、0.6 mmol）を順次添加した。添加後、前記反応管を密封した。この反応混合物を油浴中65℃で2時間反応させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視し、次いで油浴を除去した。室温まで冷却後、前記反応管に水40 mLを添加した。この反応混合物を酢酸エチル（30 mL×3）で抽出した。合わせた有機相は水30 mLおよび飽和食塩水30 mLで順次洗浄した。前記合わせた有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-
tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-シクロへキシルオキシカルボニルオキシ)-エチルエステル38a（0.25 g、収率69.4％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 721.0 [M+1]。
【０１８７】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-シクロへキシルオキシカルボニルオキシ)-エチルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3- tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-シクロへキシルオキシカルボニルオキシ)-エチルエステル38a（0.25
g、0.347 mmol）および酢酸エチル5 mLを反応フラスコに入れ、該フラスコに酢酸エチル3 mL中6.5 N塩酸溶液を攪拌しながら添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸(1-シクロへキシルオキシカルボニルオキシ)-エチルエステル・塩酸塩38（0.22 g、収率96.1％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 621.1 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ7.30 (m,
1H), 7.16 (m, 1H), 6.95 (m, 1H), 5.10 (m, 1H), 4.64 (m, 1H), 4.29 (d, 2H), 4.02
(d, 2H), 3.61 (s, 1H), 2.87 (d, 2H), 2.70 (s, 1H), 2.65 (m, 1H), 1.93 (s, 3H),
1.74 (s, 2H), 1.64 (m, 3H), 1.47 (m, 3H), 1.31 (m, 3H).
【実施例３９】
【０１８８】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩
【化１００】
0005481008.tif 000106
【化１０１】
0005481008.tif 000107
【０１８９】
ステップ1
8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸7-tert-ブチルエステル
3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸7-tert-ブチルエステル27d（0.85
g、2.54 mmol）を、無水トルエン25 mLおよび無水テトラヒドロフラン8 mLの混合物に溶解させた。この反応フラスコをドライアイス・アセトン浴中に入れ、-78℃に冷やしてから、該フラスコ中にテトラメチルエチレンジアミン（1.32
mL、8087 mmol）を添加した。ここへｎ-ブチルリチウム（5.55
mL、8.87 mmol）を5分間かけて滴下した。-78℃で15分間反応させた後、ヨードメタン（0.4 mL、6.34 mmol）を滴下した。この反応混合物を-78℃で10分間反応させ、次いで室温に昇温させ、薄層クロマトグラフィーにより出発物質の消失が示されるまで、さらに2時間反応させた。この反応混合物に引き続き飽和塩化アンモニウム15
mLおよび水20 mLを添加した。この混合物を2 N塩酸でpH3〜4に調整し、酢酸エチル（30 mL×3）で抽出した。合わせた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸7-tert-ブチルエステル39a（0.215
g、収率24.3％）を白色の固体として得た。
【０１９０】
ステップ2
8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸7-tert-ブチルエステル1-メチルエステル
8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸7-tert-ブチルエステ39a（0.349
g、1 mmol）をN,N-ジメチルホルムアミド15 mLに溶解し、該溶液に重炭酸ナトリウム（0.84 g、10 mmol）を攪拌しながら添加した。次いでヨードメタン（0.43
g、3 mmol）を滴下した。この反応混合物を室温で40時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸7-tert-ブチルエステル1-メチルエステル39b（0.5
g、収率100％）を黄色のオイルとして得た。
MS
m/z (ESI): 364.0 [M+1]。
1H NMR
(400 MHz, CDCl3): δ 5.85 (t, 1H), 4.24 (t, 2H), 4.04 (t, 2H), 3.93
(s, 3H), 1.56 (d, 3H), 1.51 (s, 9H).
【０１９１】
ステップ3
8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩
8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1,7-ジカルボン酸7-tert-ブチルエステル1-メチルエステル39b（0.35
g、0.96 mmol）を反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル10 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で2時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、表題化合物である8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩39cの粗製品（0.4
g）を黄色のオイルとして得た。
1H NMR
(400 MHz, CDCl3): δ 7.10 (m, 1H), 6.91 (m, 1H), 5.57 (m, 1H), 5.45
(m, 2H), 4.18 (m, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.36 (t, 1H), 2.98 (m, 2H), 2.26 (m, 2H),
1.60 (d, 3H), 1.40 (s, 9H).
【０１９２】
ステップ4
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-８-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル
8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩39cの粗製品（0.289 g、0.96 mmol）および(R)-3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-酪酸1f（0.353 g、1.06
mmol）をジクロロメタン10 mLに溶解し、次いでトリエチルアミン（0.4 mL、2.9 mmol）およびビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（0.368 g、1.45 mmol）を攪拌しながら添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-８−メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル39d（0.43 g、収率77.2％）を黄色のオイルとして得た。
MS m/z (ESI): 579.1 [M+1]。
【０１９３】
ステップ5
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル39d（0.23 g、0.4 mmol）を反応フラスコに入れ、次いで該フラスコに酢酸エチル5 mL中2.3 N塩酸溶液を添加した。この反応混合物を室温で2時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮して、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩39（0.205 g、収率100％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 479.1 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.33 (m, 1H), 6.93 (m, 1H), 5.58 (m,
1H), 5.02 (m, 1H), 4.33 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.43 (t, 2H), 3.06 (m, 2H), 2.49
(m, 2H), 1.57 (d, 3H).
【実施例４０】
【０１９４】
【実施例４１】
【０１９５】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-(S)-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩、および、(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-(R)-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩
【化１０２】
0005481008.tif 000108
【化１０３】
0005481008.tif 000109
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩39（141
mg、29.5 mmol）のキラル分割を、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用いて行った。鏡像異性体はキラルカラムにより分離した（分離条件：キラルカラムChiralcel
AD-H、移動相：ｎ-へキサン：イソプロパノール：ジエチルアミン＝70：30：0.1、流速：1.0
mL/min）。その対応組成物を収集し、溶媒はロータリーエバポレーターを用いて除去した。得られた残渣は室温で4時間真空乾燥させ、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-(S)-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩40（57
mg、11.9 mmol）と(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-(R)-8-メチル-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸メチルエステル・塩酸塩41（50
mg、10.5 mmol）を得た。
【実施例４２】
【０１９６】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルアミドトリフルオロ酢酸塩
【化１０４】
0005481008.tif 000110
【化１０５】
0005481008.tif 000111
【０１９７】
ステップ1
(R)-[3-(1-エチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（180
mg、0.33 mmol）をテトラヒドロフラン10 mLに溶解し、次いで該溶液にエチルアミン塩酸塩（269 mg、3.3 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（168
mg、0.66 mmol）およびトリエチルアミン（367 mg、3.63 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で4時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーで出発物質が消失するまで監視した。次いでこの反応混合物をろ過して減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-エチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル42a（190
mg、収率＞100％）を白色の固体として得た。
MS
m/z (ESI): 600.1 [M+23]。
【０１９８】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルアミドトリフルオロ酢酸塩
(R)-[3-(1-エチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル42a（190
mg、0.33 mmol）をジクロロメタン10mLに溶解し、次いで該溶液にトリフルオロ酢酸（750 mg、6.6 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で2時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸エチルアミドトリフルオロ酢酸塩42（120 mg、収率76.4％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 478.1 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 1.68-1.24
(m, 3H), 2.79-3.01 (m, 2H), 3.10 (s, 2H), 3.33-3.41 (m, 2H), 4.24-4.30 (d, 2H),
5.03-5.18 (m, 2H), 7.14-7.23 (m, 1H), 7.36-7.37 (d, 1H).
【実施例４３】
【０１９９】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ブチルアミドトリフルオロ酢酸塩
【化１０６】
0005481008.tif 000112
【化１０７】
0005481008.tif 000113
【０２００】
ステップ1
(R)-[3-(1-ブチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（180
mg、0.33 mmol）をジクロロメタン10 mLに溶解した後、ブチルアミン塩酸塩（193 mg、2.64 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（167
mg、0.66 mmol）およびトリエチルアミン（100 mg、0.99 mmol）を添加した。反応混合物を室温で一晩攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-ブチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル43a（120
mg、収率60％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 606.0 [M+1]。
【０２０１】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ブチルアミドトリフルオロ酢酸塩
(R)-[3-(1-ブチルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル43a（120
mg、0.198 mmol）をジクロロメタン10 mLに溶解し、次いで該溶液にトリフルオロ酢酸（452
mg、3.97 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で2時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸ブチルアミドトリフルオロ酢酸塩43（70 mg、収率70％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 506.1 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 0.93-0.99
(m, 3H), 1.34-1.41 (m, 2H), 1.59-1.62 (m, 2H), 2.80-2.98 (m, 3H), 3.07-3.15 (m,
2H), 3.37 (m, 1H), 3.90-3.91 (d, 2H), 4.06-4.07 (m, 1H), 4.27-4.34 (m, 2H),
5.03-5.15 (m, 2H), 7.20-7.37 (m, 2H).
【実施例４４】
【０２０２】
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸プロピルアミドトリフルオロ酢酸塩
【化１０８】
0005481008.tif 000114
【化１０９】
0005481008.tif 000115
【０２０３】
ステップ1
(R)-[3-(1-プロピルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル
(R)-7-[3-tert-ブトキシカルボニルアミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸2a（190
mg、0.345 mmol）をジクロロメタン10 mLに溶解し、次いで該溶液にプロピルアミン（163 mg、2.76 mmol）、ビス（2-オキソ-3-オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（176
mg、0.69 mmol）およびトリエチルアミン（105 mg、1.04 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で一晩攪拌し、クロマトグラフィーで出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-[3-(1-プロピルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル44a（70
mg、収率34.3％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 614.1 [M+23]。
【０２０４】
ステップ2
(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸プロピルアミドトリフルオロ酢酸塩
(R)-[3-(1-プロピルカルバモイル-3-トリフルオロメチル-5,6-ジヒドロ-8H-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-7-イル)-3-オキソ-1-(2,4,5-トリフルオロ-ベンジル)-プロピル]-カルバミン酸-tert-ブチルエステル44a（70 mg、0.118 mmol）をジクロロメタン10       mLに溶解し、次いで該溶液にトリフルオロ酢酸（270
mg、2.37 mmol）を添加した。この反応混合物を室温で攪拌しながら1時間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより出発物質が消失するまで監視した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物である(R)-7-[3-アミノ-4-(2,4,5-トリフルオロ-フェニル)-ブチリル]-3-トリフルオロメチル-5,6,7,8-テトラヒドロ-イミダゾ[1,5-a]ピラジン-1-カルボン酸プロピルアミドトリフルオロ酢酸塩44（25 mg、収率43.1％）を白色の固体として得た。
MS m/z (ESI): 492.1 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 0.90-1.00
(m, 3H), 1.60-1.66 (m, 2H), 2.75-2.84 (m, 1H), 2.93-2.99 (m, 1H), 3.09 (s, 2H),
3.94-3.95 (d, 2H), 4.07 (m, 1H), 4.24-4.29 (m, 2H), 5.03-5.13 (m, 2H),
7.19-7.23 (t, 1H), 7.36-7.38 (d, 1H).
【試験例】
【０２０５】
薬理試験（DPP-IV阻害活性の測定）
本発明の化合物のDPP-IV阻害活性を以下の方法により測定した。それぞれの化合物の阻害率または50％阻害濃度IC50（該酵素活性を50％阻害する被験化合物の濃度）は、基質を混合した一定量の酵素と異なる濃度の被験化合物とをインキュベートすることにより測定した。
【０２０６】
DPP-IV阻害活性の測定
材料と方法：
（材料）
a.
96ウェル白色プレート（BMG）
b.
Tris緩衝液：2 mMのTris緩衝液100 mLを調製するため、まず、0.0242 gのTrisを約90 mLの蒸留水に溶解させた。該溶液のpH値を、塩酸および水酸化ナトリウムで8.00に調整し、次いで蒸留水で該溶液を希釈し、全容量を100
mLとした。
c.
Tris緩衝液に溶解し2 mMの溶液としたDPP-IV酵素（カルビオケム、カタログ番号317630）
d.
蒸留水に溶解し1 mMの溶液としたDPP-IV-Glo（登録商標）基質（プロメガ、カタログ番号G8350）
e.
DPP-IV-Glo（登録商標）緩衝液（プロメガ、カタログ番号G8350）
f.
ルシフェリン検出試薬（プロメガ、カタログ番号G8350）
g.
DMSO
h.
蒸留水
（方法）
次の手順に沿って測定を行った。
1．DPP-IV-Gloを解凍し、使用前に室温に戻した。
2．凍結されたルシフェリン検出試薬を、使用前に室温に戻した。
3．DPP-IV-Gloを超純水と短時間混合し、1
mMの基質を調製した。
4．ルシフェリン検出試薬をDPP-IV-Gloと伴に褐色のフラスコに入れた。この際、、ルシフェリン検出試薬は1分未満で溶解した。
5．被験化合物をDMSOに溶解し、最終濃度の50倍とした。
6．それぞれの試験管に50倍濃度の被験化合物2μlを添加し、陰性対照とブランク対照には2μlのDMSOを添加した。
7．それぞれの試験管にTris緩衝液46μlを添加し、ブランク対照にはTris緩衝液48μlを添加した。
8．陰性対照試験管および試験管のそれぞれにDPP-IV酵素2μlを添加した。
9．試験管を振盪し、遠心分離した。次いで試験管中の物質を96穴プレートに移した。
10．基質とDPP-IV-G1oを1：49の割合で混合し、該混合物を十分振盪し、さらに使用前に室温で30〜60分間静置した。
11．96ウェルプレートの板のそれぞれのウェルにDPP-IV-Gloと基質との混合溶液50μlを入れた後、シーリングフィルムで密封した。
12．プレートシェーカーを用いて300-500
rpm/30秒で、ゆっくりと96ウェル中の物質を混合させた後、該プレートを室温で30分〜3時間静置した。
13．発光値を測定した。
阻害率の定義：[1-(S-B)/(N-B)]*100%
S：サンプル
B：ブランク対照
N：陰性対照
【０２０７】
【表６】
0005481008.tif 000116
【０２０８】
試験の結果、本発明の化合物のDPP-IVに対する50％阻害濃度IC50値は0.005μM〜0.216μMの範囲にあった。大部分の本発明の化合物は、MK-0431のIC50値（0.023
μM）と比較し、DPP-IVに対して優れた阻害活性を示した。