(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）；
【化１】
0005461088.tif 000011
［式中、Ａは水素原子、アルキル基、水酸基、−ＣＯＯＲ８（Ｒ８は水素原子又はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）、−ＣＯＮＲ９Ｒ１０（Ｒ９及びＲ１０はそれぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す）又はハロゲンであり、ｑは１〜４の整数であり、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に水素原子又はアルキル基であり、Ｒ５はアルキル基又はハロゲンであり、
Ｒ６は
式（ＩＩ−１）又は（ＩＩ−２）；
【化２】
0005461088.tif 000012
（式中、Ｒ３及びＲ４は前述の通りであり、Ｒ１１はアルキル基又はハロゲンであり、ｍは１〜３の整数である）］で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
式（Ｉ−ａ）；
【化３】
0005461088.tif 000013
［式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子、アルキル基、水酸基、−ＣＯＯＲ８（Ｒ８は水素原子又はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）又はハロゲンであり、Ｒ７は水素原子又はハロゲンであり、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に水素原子又はアルキル基であり、Ｒ５はアルキル基又はハロゲンであり、Ｒ６は式（II−１）又は（II−２）；
【化４】
0005461088.tif 000014
（式中、Ｒ３及びＲ４は前述の通りであり、Ｒ１１はアルキル基又はハロゲンであり、ｍは１〜３の整数である）］で表される請求項１に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１が−ＣＯＯＲ８（Ｒ８はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）であり、Ｒ２がアルキル基又はハロゲンであり、Ｒ７が水素原子又はハロゲンである請求項２に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ１が−ＣＯＯＲ８（Ｒ８はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）であり、Ｒ２がアルキル基であり、Ｒ７が水素原子である請求項３に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２が−ＣＯＯＲ８（Ｒ８はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）であり、Ｒ７が水素原子である請求項２に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項６】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する細胞増殖阻害剤。
【請求項７】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する抗癌剤。
【請求項８】
前記抗癌剤が前立腺癌、転移性肺癌及び乳腺癌からなる群から選択される少なくとも一つの疾患に使用される請求項７に記載の抗癌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物又はその薬理学的に許容される塩、それらを有効成分として含有する細胞増殖阻害剤及び抗癌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
非特許文献１及び非特許文献２には、各々ベンゾチオフェン系化合物が記されている。しかしながら、これらには下記式（Ｉ）で表される本発明化合物は具体的には開示されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９７９）４４（１６）２８８７−２８９２
【非特許文献２】Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ＆  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｅｉｎ（１９８２）３０（３）８９９−９０２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、新規化合物又はその薬理学的に許容される塩、それらを有効成分として含有する細胞増殖阻害剤及び抗癌剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、細胞増殖阻害活性を有する新規化合物を見出した。該新規化合物から細胞増殖阻害活性剤及び抗癌剤として有用である化合物を種々検討した結果、本発明を完成するに至った。即ち本発明は、式（Ｉ）；
【化１】
0005461088.tif 000002
［式中、Ａは水素原子、アルキル基、水酸基、−ＣＯＯＲ８（Ｒ８は水素原子又はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）、−ＣＯＮＲ９Ｒ１０（Ｒ９及びＲ１０はそれぞれ独立に水素原子又はアルキル基を示す）又はハロゲンであり、ｑは１〜４の整数であり、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に水素原子又はアルキル基であり、Ｒ５はアルキル基又はハロゲンであり、
Ｒ６は式（ＩＩ−１）又は（ＩＩ−２）；
【化２】
0005461088.tif 000003
（式中、Ｒ３及びＲ４は前述の通りであり、Ｒ１１はアルキル基又はハロゲンであり、ｍは１〜３の整数である）］で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩、それらを有効成分として含有する細胞阻害活性剤及び抗癌剤に関する。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、新規化合物又はその薬理学的に許容される塩、それらを有効成分として含有する細胞増殖阻害剤及び抗癌剤を提供することできる。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
次に、本発明の式（Ｉ）の化合物のうち、望ましい実施形態のいくつかを記載するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、前記式（Ｉ）の化合物には、後記式（Ｉ
−ａ）、（Ｉ−１）、（Ｉ−２）及び（Ｉ−３）の化合物が含まれる。
式（Ｉ）中に含まれるアルキルとしてはＣ1-6アルキルが望ましく、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル等の直鎖又は分枝状のものが挙げられる。
式（Ｉ）中に含まれるシクロアルキルとしては、Ｃ3-6シクロアルキルが望ましく、例えばシクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル等が挙げられる。
式（Ｉ）中に含まれるハロゲンとしては、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素が用いられ、望ましくは例えばフッ素、塩素又は臭素が用いられる。
前記式（Ｉ）の化合物又はその薬理学的に許容される塩のうち、式（Ｉ−ａ）；
【化３】
0005461088.tif 000004
［式中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に水素原子、アルキル基、水酸基、−ＣＯＯＲ８（Ｒ８は水素原子又はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）又はハロゲンであり、Ｒ７は水素原子又はハロゲンであり、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立に水素原子又はアルキル基であり、Ｒ５はアルキル基又はハロゲンであり、Ｒ６は
式（ＩＩ−１）又は（ＩＩ−２）；
【化４】
0005461088.tif 000005
（式中、Ｒ３及びＲ４は前述の通りであり、Ｒ１１はアルキル基又はハロゲンであり、ｍは１〜３の整数である）］で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩が望ましい。
前記した式（Ｉ−ａ）の化合物中、以下の化合物が更に望ましい。
（１）  Ｒ１が−ＣＯＯＲ８（Ｒ８はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）であり、Ｒ２がアルキル基又はハロゲンであり、Ｒ７が水素原子又はハロゲンである式（Ｉ−ａ）の化合物又はその薬理学的に許容される塩。
（２）  Ｒ１が−ＣＯＯＲ８（Ｒ８はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）であり、Ｒ２がアルキル基であり、Ｒ７が水素原子である（１）に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩。
（３）  Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２が−ＣＯＯＲ８（Ｒ８はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基を示す）であり、Ｒ７が水素原子である（１）に記載の化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【０００８】
前記式（Ｉ）の化合物又はその塩は、公知の類似化合物の製造方法又はそれらに準じた方法によって製造できるが、以下に製法１〜３を例示する。
【０００９】
【化５】
0005461088.tif 000006
式中、ｎは１〜３の整数であり、Ａ、Ｒ３、Ｒ４及びＲ１１は前述の通りであり、Ｒ５はハロゲンである。Ａについては、アルキル基である場合には、炭素数が１から４であることが望ましい。Ｒ１２は水素原子又はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基である。
【００１０】
製法１において、第１工程で式（ＩＩＩ）の化合物と等モル以上のアルコールとを脱水剤を用いて反応させ式（ＩＶ）の化合物を製造し、第２工程で式（ＩＶ）の化合物と塩基を反応させたあと、更にハロゲン化剤を反応させることにより、式（Ｉ−１）の化合物を得る。
【００１１】
第１工程で用いるアルコールとしては、エタノール、２−プロパノール、ｎ−ブチルアルコール、シクロプロピルカルビノール等が挙げられる。
前記アルコールは、式（ＩＩＩ）の化合物に対して１〜２倍モル、望ましくは１．５倍モル使用する。
第１工程で用いる脱水剤としては、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１,１−カルボニルジイミダゾール、１−エチル−３−(３−ジメチルアミノプロヒル)カルボジイミド、Ｎ−クロロスクシンイミドが挙げられる。
前記脱水剤は、式（ＩＩＩ）の化合物に対して１〜２倍モル、望ましくは１．２倍モル使用する。
第１工程の反応は必要に応じて塩基の存在下で行うことができる。塩基としては、例えば、４−ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどの有機塩基；リチウム、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどのアルカリ金属の炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどのアルカリ金属の炭酸水素塩；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウムなどのアルカリ金属の水素化物から１種又は２種以上を適宜選択することができる。
前記塩基は、式（ＩＩＩ）の化合物に対して０．１〜０．５倍モル、望ましくは０．１倍モル使用する。
第１工程の反応は、通常０〜５０℃、望ましくは１０〜３０℃で行い、その反応時間は、通常２〜５時間程度である。
【００１２】
第２工程で用いる塩基としては、例えば、４−ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどの有機塩基；リチウム、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどのアルカリ金属の炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどのアルカリ金属の炭酸水素塩；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウムなどのアルカリ金属の水素化物；ｎ−ブチルリチウム、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）から１種又は２種以上を適宜選択することができる。
前記塩基は、式（ＩＶ）の化合物に対して１〜１．５倍モル、望ましくは１．１倍モル使用する。
第２工程で用いるハロゲン化剤としては、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（一般名；Ｆ−ＴＥＤＡ)、Ｎ，Ｎ’−ジフルオロ−２，２’−ビピリジニウムビステトラフルオロボレート等が挙げられる。
前記ハロゲン化剤は、式（ＩＶ）の化合物に対して１〜１．５当量、望ましくは１．１当量使用する。
第２工程の反応は、通常−１００〜０℃、望ましくは−７８〜−２０℃で行い、その反応時間は、通常０．５〜２時間程度である。
【００１３】
製法１において、式（Ｉ−２）の化合物は、式（Ｉ−１）の化合物に酸を反応させることにより製造できる。
前記酸としては、塩酸、トリフルオロ酢酸を適宜選択することができる。
前記酸は、式（Ｉ−１）の化合物に対して大過剰使用する。
この反応は、通常５０〜１５０℃、望ましくは１００〜１２０℃で行い、その反応時間は、通常６〜１２時間程度である。
【００１４】
製法１の反応は、適当な溶媒の存在下で行うことができる。溶媒としては、反応に不活性な溶媒であればいずれのものでもよく、例えば、ジエチルエーテル、ブチルメチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタンのようなエーテル類；クロロベンゼン、ジクロロベンゼン、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン、トリクロロエタン、ジクロロエチレンのようなハロゲン化炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；アセトニトリル、プロピオニトリル、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルホルムアミド、ホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ヘキサメチルホスホリックトリアミド、スルホラン、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸のような極性溶媒；メタノール、エタノール、プロパノール、ｎ−ブタノール、ｔ−ブタノールのようなアルコール類及び水から１種又は２種以上を適宜選択することができる。
製法１の反応は，必要に応じ不活性ガスの存在下で行うことができる。該不活性ガスは、例えば窒素ガス、アルゴンガスなどから適宜選択することができる。
【００１５】
【化６】
0005461088.tif 000007
式中、ｎは１〜３の整数であり、Ａ、Ｒ３、Ｒ４及びＲ１１は前述の通りであり、Ｒ５はハロゲンである。Ａについては、アルキル基である場合には、炭素数が１から４であることが望ましい。Ｒ１３はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基である。
【００１６】
製法２において、第１工程で式（ＩＶ）の化合物と塩基を反応させて式（Ｖ）の化合物を製造し、第２工程で式（Ｖ）の化合物と酸を反応させて式（ＶＩ）の化合物を製造し、第３工程で式（ＶＩ）の化合物とアルコールとを脱水剤を用いて反応させて式（Ｖ）の化合物を製造し、第４工程で式（Ｖ）の化合物に塩基の存在下でハロゲン化剤を反応させることにより、式（Ｉ−１）の化合物を得る。
【００１７】
第１工程で用いられる塩基としては、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、ｎ−ブチルリチウム等が挙げられる。
前記塩基は、式（ＩＶ）の化合物に対して１倍モル、望ましくは１．１倍モル使用する。
この反応は、通常−１００〜０℃、望ましくは−７８〜−２０℃で行い、その反応時間は、通常０．５〜２時間程度である。
【００１８】
第２工程で用いる酸としては、塩酸、トリフルオロ酢酸を適宜選択することができる。
前記酸は、式（Ｖ）の化合物に対して大過剰使用する。
この反応は、通常５０〜１５０℃、望ましくは１００〜１２０℃で行い、その反応時間は、通常６〜１２時間程度である。
【００１９】
第３工程で用いるアルコールとしては、エタノール、２−プロパノール、ｎ−ブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、シクロプロピルカルビノール等が挙げられる。
前記アルコールは、式（ＶＩ）の化合物に対して１〜２倍モル、望ましくは１．５倍モル使用する。
第３工程で用いる脱水剤としては、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド、１,１−カルボニルジイミダゾール、１−エチル−３−(３−ジメチルアミノプロヒル)カルボジイミドが挙げられる
前記脱水剤は、式（ＩＩＩ）の化合物に対して１〜２倍モル、望ましくは１．２倍モル使用する。
第３工程は、必要に応じて塩基の存在下で行うことができる。塩基としては、例えば、４−ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどの有機塩基；リチウム、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどのアルカリ金属の炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどのアルカリ金属の炭酸水素塩；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウムなどのアルカリ金属の水素化物から１種又は２種以上を適宜選択することができる。
前記塩基は、式（ＶＩ）の化合物に対して０．１〜０．５倍モル、望ましくは０．５倍モル使用する。
この反応は、通常０〜５０℃、望ましくは１０〜３０℃で行い、その反応時間は、通常２〜５時間程度である。
【００２０】
第４工程で用いるハロゲン化剤としては、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（一般名；Ｆ−ＴＥＤＡ)、Ｎ，Ｎ’−ジフルオロ−２，２’−ビピリジニウムビステトラフルオロボレート、Ｎ−クロロスクシンイミド等が挙げられる。
前記ハロゲン化剤は、式（Ｖ）の化合物に対して１〜６当量、望ましくは２〜４当量使用する。
第４工程で用いる塩基としては、例えば、４−ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどの有機塩基；リチウム、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどのアルカリ金属の炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどのアルカリ金属の炭酸水素塩；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウムなどのアルカリ金属の水素化物等から１種又は２種以上を適宜選択することができる。
前記塩基は、式（ＶＩ）の化合物に対して１〜５倍モル、望ましくは２〜４倍モル使用する。
この反応は、通常０〜５０℃、望ましくは１０〜３０℃で行い、その反応時間は、通常２〜４時間程度である。
【００２１】
製法２の工程は、製法１の溶媒で使用したものが使用できる。
製法２の工程は、製法１と同じ不活性ガスが使用できる。
【００２２】
【化７】
0005461088.tif 000008
式中、ｎは１〜３の整数であり、Ａ、Ｒ３、Ｒ４及びＲ１１は前述の通りであり、Ｒ５はアルキル基である。Ａについては、アルキル基である場合には、炭素数が１から４であることが望ましい。Ｒ１３はシクロアルキルで置換されてもよいアルキル基である。
【００２３】
製法３において、塩基の存在下で式（Ｖ）の化合物とハロゲン化アルキルを反応させることにより、式（Ｉ−３）の化合物を得る。
【００２４】
前記ハロゲン化アルキルとしては、ヨウ化メチル、ヨウ化エチル等が挙げられる。
前記ハロゲン化アルキルは、式（Ｖ）の化合物に対して２〜５倍モル、望ましくは３〜４倍モル使用する。
前記塩基としては、例えば、４−ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリンなどの有機塩基；リチウム、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属；炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムなどのアルカリ金属の炭酸塩；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムなどのアルカリ金属の炭酸水素塩；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウムなどのアルカリ金属の水素化物等から１種又は２種以上を適宜選択することができる。
前記塩基は、式（Ｖ）の化合物に対して１〜２倍モル、望ましくは１〜１．５倍モル使用する。
この反応は、通常０〜１００℃、望ましくは２０〜６０℃で行い、その反応時間は、通常２〜４時間程度である。
【００２５】
製法３の反応は、製法１の溶媒で使用したものが使用できる。
製法３の反応は、製法１と同じ不活性ガスが使用できる。
【００２６】
前記式（Ｉ）及び（Ｉ−ａ）の化合物は、細胞増殖阻害活性を有する新規な化合物であり、細胞増殖阻害剤として有効である。前記式（Ｉ）及び（Ｉ−ａ）の化合物を有効成分として含む抗癌剤として用いる場合、例えば前立腺癌、転移性肺癌、乳腺癌等の上皮系悪性腫瘍に加え、悪性黒色腫、悪性神経鞘腫等の非上皮系悪性腫瘍の治療薬として有用である。
【００２７】
本発明の式（Ｉ）及び（Ｉ−ａ）の化合物は通常、一般的な医薬製剤の形態（例えば、第１２改正日本薬局方に規定する方法）で用いられる。この医薬製剤は通常使用される充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤等の希釈剤あるいは賦形剤を用いて調製される。医薬製剤としては各種の形態が治療目的に応じて選択でき、錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、液剤、懸濁剤、乳剤、注射剤（液剤、懸濁剤等）、スプレー、エアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、経皮剤（パッチ剤、マトリクス剤、テープ）等が一例として挙げられる。
【００２８】
錠剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で公知のものを広く使用でき、例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤、白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤、第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤、グリセリン、デンプン等の保湿剤、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコール等の滑沢剤等が例示できる。更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
【００２９】
丸剤の形態に成形するに際しては、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤、アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤、ラミナランカンテン等の崩壊剤等が例示できる。
【００３０】
坐剤の形態に成形するに際しては、担体として従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチレングリコール、カカオ脂、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセライド等を挙げることができる。
【００３１】
注射剤として調製される場合には、液剤、乳剤及び懸濁剤は殺菌され、かつ血液と等張であるのが望ましく、これら液剤、乳剤及び懸濁剤の形態に成形するに際しては、希釈剤としてこの分野において慣用されているものを全て使用でき、例えば水、乳酸水溶液、エチルアルコール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を挙げることができる。なお、この場合等張性の溶液を調製するに充分な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを医薬製剤中に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を添加してもよい。更に必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等や他の医薬品を医薬製剤中に含有せしめてもよい。
【００３２】
本発明の式（Ｉ）及び（Ｉ−ａ）の化合物の投与方法は特に制限はなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等に応じた方法で経口的又は非経口的に投与される。例えば経口的に投与される場合には、錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤等が望ましい態様として挙げられる。非経口的には、局所投与剤、注射剤、経皮剤、経鼻剤、経肺剤、坐剤等の形で投与することができる。注射剤の場合には単独であるいはブドウ糖、アミノ酸等の通常の補液と混合して静脈内投与され、更には必要に応じて単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与されるのが望ましい態様である。また、坐剤の場合には直腸内投与されるのが望ましい態様である。
【００３３】
本発明の式（Ｉ）及び（Ｉ−ａ）の化合物の投与量は用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度等により適宜選択される。
【００３４】
（実施例）
以下に本発明の実施例を説明する。但し、本発明はこれらのみに限られるものではない。
【００３５】
実施例１
２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  エチルエステル（化合物Ｎｏ.１）の製造
（１）３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸１．００ｇ（３．９４ｍｍｏｌ、１当量）を窒素雰囲気下で乾燥クロロホルム９．４ｍｌに溶解し、これにエチルアルコール０．２７２ｇ（５．９０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド０．９７６ｇ（４．７３ｍｍｏｌ、１．２当量）及び４−ジメチルアミノピリジン０．０４８ｇ（０．３９ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えて、室温で１５０分間攪拌した。反応液のろ過を行い、そのろ液から溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：３）で精製して、無色油状の３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  エチルエステル０．７８ｇ（収率７０％；ＨＰＬＣ純度９４．１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）の分析結果
１．３９（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ、１．６８（ｓ，６Ｈ）ｐｐｍ、２．６２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３５（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．３７（ｑ，２Ｈ）ｐｐｍ、７．５９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７７（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００３６】
（２）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例１（１）で得られた３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  エチルエステル０．７８ｇ（２．７６ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥テトラヒドロフラン２１．３ｍｌに溶かし、ドライアイス−アセトン浴を用いて−７８℃まで冷却を行い、これにリチウムジイソプロピルアミン溶液を約３分間滴下した。−７８℃で２０分間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、３０分間攪拌した。その後、再びドライアイス−アセトン浴を用いて、−７８℃まで冷却を行い、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製）０．９７８ｇ（２．７６ｍｍｏｌ、１当量）を投入した。−７８℃で５０分間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、６０分間攪拌した。水１５ｍｌ、酢酸エチル３０ｍｌを加え、１５分間攪拌し抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定塩酸、水、飽和食塩水の順で洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１．５）で精製し、更にジエチルエーテルで懸濁分散洗浄を３回行い、ろ過、乾燥した後に、目的物である２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  エチルエステル０．２１ｇ（収率２８％；ＨＰＬＣ純度９５．４％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．４１（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ、１．６８（ｍ，１２Ｈ）ｐｐｍ、２．５４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．６３（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３６（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．４０（ｑ，２Ｈ）ｐｐｍ、７．７７（ｍ，４Ｈ）ｐｐｍ
【００３７】
実施例２
２，３，３，４−テトラメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル（化合物Ｎｏ．２）の製造
（１）３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸１４．８ｇ（０．０５８ｍｏｌ、１当量）を窒素雰囲気下で乾燥クロロホルム１３９ｍｌに溶かし、これにメチルアルコール３．５ｍｌ（０．０８５ｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド１４．４ｇ（０．０７０ｍｏｌ、１．２当量）及び４−ジメチルアミノピリジン０．７ｇ（０．００６ｍｏｌ、０．１当量）を加えて、室温で２時間攪拌した。反応液のろ過を行い、そのろ液から溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）で精製し、乾燥した後、白色固体の３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル１２．７ｇ（収率８１％；ＨＰＬＣ純度８２．２％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．６８（ｓ，６Ｈ）ｐｐｍ、２．６３（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３５（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、３．９４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、７．６０（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００３８】
（２）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例２（１）で得られた３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル４．００ｇ（０．０１５ｍｏｌ、１当量）を乾燥テトラヒドロフラン１１７ｍｌに溶かし、ドライアイス−アセトン浴を用いて、−７８℃まで冷却を行い、リチウムジイソプロピルアミン溶液を約１５分間滴下した。−７８℃で６０分間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、１２０分間攪拌した。その後、再びドライアイス−アセトン浴を用いて、−７８℃まで冷却を行い、水５ｍｌを加えた。−７８℃で３０分間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、６０分間攪拌した。次いで、水３０ｍｌ、酢酸エチル５０ｍｌを加え抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定塩酸、水、飽和食塩水の順で洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１．５）で精製し、更にジエチルエーテルで懸濁分散洗浄を３回行い、ろ過、乾燥した後に、３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル０．４６ｇ（収率１２％；ＨＰＬＣ純度９６．１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．６８（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ、１．８１（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ、２．５６（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．６５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３７（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、３．９６（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、４．８９（ｓ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．５９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．６８（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７１（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．８０（ｄ，１Ｈ）
【００３９】
（３）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例２（２）で得た３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル１００ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６ｍｌに溶かし、室温で水素化ナトリウム（６０％含有品）１０ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ、１．２５当量）を加えて、２時間攪拌した。次いで、乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド７００ｍｇにヨウ化メチル１００ｍｇ（０．７０ｍｍｏｌ、３．５当量）を溶解させた溶液を注ぎ加えた。室温で１時間攪拌した後、４０℃から５０℃で１時間攪拌した。水６ｍｌ、酢酸エチル１０ｍｌを加え抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層は１規定濃度塩酸、水、飽和食塩水で洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）で精製し、更に容量比が酢酸エチル１、ｎ−へキサン１の混合溶媒を用いて分散洗浄を行い、ろ過、乾燥した後、目的物である２，３，３，４−テトラメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステルが３２ｍｇ（収率３１％；ＨＰＬＣ純度９５．１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．７０（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ、１．９２（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ、２．５０（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．７０（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３７（ｄ，２Ｈ）ｐｐｍ、３．４７（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．９３（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、７．４９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．５５（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．６９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７５（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００４０】
実施例３
２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル（化合物Ｎｏ．３）の製造
（１）実施例２（２）で得た３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル３０ｍｇ（０．０６０ｍｍｏｌ）をジオキサン２ｍｌに加えてから、濃塩酸２ｍｌを注ぎ加え、１２０℃で８時間攪拌した。更に濃塩酸２ｍｌ加えてから、１２０℃で３時間攪拌した。室温まで冷却を行った後、水５ｍｌ、酢酸エチル５ｍｌを加え抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層は飽和食塩水で２回洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮し、油状物質の３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸２８１ｍｇを得た。（ＨＰＬＣ純度９２．５％）
【００４１】
（２）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例３（１）で得られた３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸２８１ｍｇを乾燥クロロホルム５ｍｌに溶解し、これにｔｅｒｔ−ブチルアルコール１５４ｍｇ、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド４２０ｍｇ及び４−ジメチルアミノピリジン１６ｍｇを加え、室温で２４時間攪拌した。反応液のろ過を行い、そのろ液から溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）で精製し、油状物質の３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル５０ｍｇ（収率１５４％；ＨＰＬＣ純度９０．７％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．５９−１．８０（ｍ，２１Ｈ）ｐｐｍ、２．５２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．５５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３７（ｄ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．８８（ｓ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．３５（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．６０（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．６７（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７１（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００４２】
（３）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例３（２）で得られた３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル５０ｍｇを乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｍｌに溶かし、これに水素化ナトリウム（６０％含有品）１０ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ、４当量）を室温で添加した。室温で２時間攪拌を行った後、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製）８４ｍｇ（０．２４ｍｍｏｌ、４当量）を添加した。室温で２時間攪拌した後、水３ｍｌ、酢酸エチル１０ｍｌを加えて抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定塩酸、飽和食塩水の順で２回洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをジエチルエーテルで分散懸濁洗浄を４回行って精製し、乾燥した後、目的物である２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｔｅｒｔ−ブチルエステル２７ｍｇ（収率８０％；ＨＰＬＣ純度９５．１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．６２−１．７８（ｍ，２１Ｈ）ｐｐｍ、２．５４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．５４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３６（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、７．４５−７．７３（ｍ，４Ｈ）ｐｐｍ
【００４３】
実施例４
４−クロロ−２−（４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２−フルオロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル（化合物Ｎｏ．４）の合成
（１）２，４−ジクロロアセトフェノン２３ｇ、Ｓ−アリルイソチウロニウム塩酸塩２４．３ｇ及びテトラ（ｎ−ブチル）アンモニウムヨージド４．１ｇをトルエン９４ｍｌ中７０℃で攪拌しながら水酸化ナトリウム水溶液（２０ｗｔ％、６３．３ｇ）を約２０分かけて滴下した。滴下終了後、温度を９０℃まで昇温し９０分攪拌した。更に水酸化ナトリウム水溶液（２０ｗｔ％、６３．３ｇ）を約２０分かけて滴下して、滴下終了後２時間攪拌した。反応溶液を室温まで冷却した後、反応溶液を分液ロートに移し１規定塩酸で中和した後、酢酸エチルで２回抽出を行った。抽出物を二層分離し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１９）で精製し、油状物質の２−クロロ−４−(２−メチルアリルチオ)アセトフェノン２１．７ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．８２（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．５７（２Ｈ，ｓ），４．８９（１Ｈ，ｓ），４．９５（１Ｈ，ｓ），７．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．４，２．０Ｈｚ），７．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ），７．５０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ）．
【００４４】
（２）無水塩化アルミニウム（１６．２ｇ）をクロロホルム３３ｍｌ中で攪拌しながら、実施例４（１）で得られた２−クロロ−４−（２−メチルアリルチオ）アセトフェノン９．８ｇ及び氷酢酸２．４ｇのクロロホルム２２ｍｌ溶液を氷冷下で滴下した。滴下終了後、氷浴を除き、反応混合物を室温で６時間攪拌した後、氷中へ投入した。混合物を分液ロートへ移し、クロロホルムで３回抽出を行った。抽出物を二層分離し、得られた有機層を飽和食塩水で１回洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ヘキサン＝１：１９）で精製し、油状物質の１−（４−クロロ−３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−５−イル）エタノン３．３ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．５７（６Ｈ，ｓ），２．５９（３Ｈ，ｓ），３．２０（２Ｈ，ｓ），７．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）．
【００４５】
（３）実施例４（２）で得られた１−（４−クロロ−３，３−ジメチル−２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−５−イル）エタノン（３．３ｇ）を氷酢酸（２０ｍｌ）に溶解し、３０％過酸化水素水（４．７ｍｌ）を室温で加えた。混合物を９０℃まで加熱し、４時間攪拌した。更に３０％過酸化水素水１．６ｇを加え２時間攪拌した後、室温まで冷却した。反応混合物をチオ硫酸ナトリウム水に投入し、水酸化ナトリウムで中和した後、酢酸エチルで３回抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：９〜３：７）で精製し、白色固体の１−（４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−イル）エタノン１．９ｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．７３（６Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｓ），７．４３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），７．６６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ）．
【００４６】
（４）氷冷下で次亜塩素酸ナトリウム水溶液に２５％水酸化ナトリウム水溶液３．３ｇを滴下し、室温まで昇温した後、テトラ（ｎ−ブチル）アンモニウムヨージド０．２５ｇを加えた。実施例４（３）で得られた化合物１．９ｇをクロロホルム２０ｍｌに溶かした溶液を滴下し、室温で２時間攪拌した。更にテトラ（ｎ−ブチル）アンモニウムヨージド０．１２ｇ及び次亜塩素酸ナトリウム水溶液１１．８ｇを加え室温で２０時間攪拌した後、チオ硫酸ナトリウム水溶液−氷へゆっくりと投入した。混合物を分液ロートに移し、クロロホルムで１回洗浄を行った。水層を分離し、クロロホルム層を水酸化ナトリウム水溶液（１規定）で抽出した後、合わせた水層に氷冷下で濃塩酸をゆっくりと加えｐＨ１に調整した。この混合物を酢酸エチルで１回抽出した。抽出物を二層分離して、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮し、４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸（１．３ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）による分析結果
１．６２（６Ｈ，ｓ），３，６４（２Ｈ，ｓ），７．７８（２Ｈ，ｓ），１４．０（１Ｈ，ｂｒｓ）．
【００４７】
（５）実施例４（４）で得られた４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸（１．３ｇ）、メタノール（０．２２５ｇ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．１６ｇ）及び４−ジメチルアミノピリジン（０．０５７ｇ）をクロロホルム（２０ｍｌ）に加え、室温で３時間攪拌した。反応液のろ過を行い、そのろ液を減圧濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝２：４）で精製し、白色固体の４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル（０．７６ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．７３（６Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｓ），３．９５（３Ｈ，ｓ），７．６４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ）．
【００４８】
（６）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例４（５）で得られた４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル（０．４５ｇ）を乾燥テトラヒドロフラン（２０ｍｌ）に溶解し、リチウムジイソプロピルアミン溶液を−７８℃で約５分間滴下した。３０分攪拌した後、温度を０℃まで昇温し、１時間攪拌した。再度−７８℃まで冷却し、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製）（０．５５６ｇ）を加え３０分攪拌した後、温度を０℃まで昇温した。３０分攪拌した後、氷浴を除き、室温で３０分攪拌した。少量の水を加え反応を停止させ、酢酸エチルを加え抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定の塩酸、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４〜１：１）で精製し、目的物である４−クロロ−２−（４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２−フルオロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−時ヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸メチルエステル（１２．４ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．７４（９Ｈ，ｓ），１．８９（３Ｈ，ｓ），３．４０（２Ｈ，ｓ），３．９７（３Ｈ，ｓ），７．２−７．７（４Ｈ，ｍ）．
【００４９】
実施例５
２−（３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボニル)−２−フルオロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボン酸  メチルエステル（化合物Ｎｏ．５）の合成
（１）３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボン酸（参考文献：ＷＯ２００６００９７３４）（４ｇ）をクロロホルム（２０ｍｌ）に溶解し、メタノール（０．８ｇ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（４．１ｇ）及び４−ジメチルアミノピリジン（０．２ｇ）を室温で加え１時間攪拌した。反応液のろ過を行い、そのろ液を減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）で精製し、白色固体の３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボン酸メチルエステル（０．９６ｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．６６（６Ｈ，ｓ），３．３２（２Ｈ，ｓ），３．９３（３Ｈ，ｓ），７．５２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．８２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．６Ｈｚ），７．８５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．６Ｈｚ）．
【００５０】
（２）窒素雰囲気下で、実施例５（１）で得られた３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボン酸  メチルエステル（０．４ｇ）を乾燥テトラヒドロキシフラン（２０ｍｌ）に溶解し、リチウムジイソプロピルアミン溶液を−７８℃を約３分間滴下した。−７８℃で３０分攪拌した後、０℃で３０分、室温で３０分攪拌した。再度−７８℃まで冷却し、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製）（０．８３６ｇ）を加え３０分攪拌した後、温度を０℃まで昇温した。３０分攪拌した後、氷浴を取り除き、室温で３０分攪拌した。１Ｎの塩酸（１０ｍｌ）を加え反応停止させ、酢酸エチルで３回抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）及び分取用薄層クロマトグラフィーで精製し、目的物である２−（３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボニル)−２−フルオロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボン酸  メチルエステル３１ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．６−１．８（１２Ｈ，ｍ），３．２７（２Ｈ，ｓ），３．９２（３Ｈ，ｓ），７．４−８．１（６Ｈ，ｍ）．
【００５１】
実施例６
２−（３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボニル）−２−フルオロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボン酸  エチルエステル(化合物Ｎｏ．６）の合成
（１）実施例５（１）の工程にて、メタノールの代わりにエタノールを用い、４−クロロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  エチルエステルを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．３９（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），１．６７（６Ｈ，ｓ），３．３１（２Ｈ，ｓ），４．３８（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ），７．５１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），７．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．６Ｈｚ），７．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．６，１．６Ｈｚ）．
【００５２】
（２）実施例５（２）の工程と同様にして、２−（３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボニル）−２−フルオロ−３，３−ジメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−４−カルボン酸  エチルエステルを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；クロロホルム標準）による分析結果
１．４１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．６−１．８（１２Ｈ，ｍ），３．３２（２Ｈ，ｓ），４．４１（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），７．５９（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．６５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），７．９（３Ｈ，ｍ），８．１（１Ｈ，ｍ）．
【００５３】
実施例７
２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｉｓｏ−プロピルエステル（化合物Ｎｏ．７）の合成
（１）３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸１．００ｇ（３．９４ｍｍｏｌ、１当量）を窒素雰囲気下で乾燥クロロホルム９．５ｍｌに溶かし、これに２−プロパノール０．３５５ｇ（５．９０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド０．９７６ｇ（４．７３ｍｍｏｌ、１．２当量）及び４−ジメチルアミノピリジン０．０４８ｇ（０．３９ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えて、室温で２４０分間攪拌した。反応液のろ過を行い、そのろ液から溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：３）で精製し、融点１０４〜１０８℃の３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｉｓｏ−プロピルエステル０．７９ｇ（収率６８％；ＨＰＬＣ純度８３．７％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．２９（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ、１．６８（ｓ，６Ｈ）ｐｐｍ、２．６１（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３４（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、５．２７（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．５９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７２（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００５４】
（２）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例７（１）で得た３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｉｓｏ−プロピルエステル０．７６ｇ（２．５６ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥テトラヒドロフラン２０．０ｍｌに溶かし、ドライアイス−アセトン浴を用いて−７８℃まで冷却を行い、これにリチウムジイソプロピルアミン溶液を約３分間で滴下した。−７８℃で２０分間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、３０分間攪拌した。その後、再びドライアイス−アセトン浴を用いて、−７８℃まで冷却を行い、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製）０．９０７ｇ（２．５６ｍｍｏｌ、１当量）を投入した。−７８℃で１時間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、６０分間攪拌した。水１５ｍｌ、酢酸エチル３０ｍｌを加え、１５分間攪拌し抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定塩酸、水、飽和食塩水の順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１．５）で精製し、得られた目的フラクションをジエチルエーテルで懸濁分散洗浄を４回行い、ろ過、乾燥した後、目的物である２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｉｓｏ−プロピルエステル０．２１ｇ（収率７％；ＨＰＬＣ純度９５．９％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．４０（ｄ，６Ｈ）ｐｐｍ、１．６８（ｍ，１２Ｈ）ｐｐｍ、２．５４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．６２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３６（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、５．３０（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７１（ｍ，４Ｈ）ｐｐｍ
【００５５】
実施例８
２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｎ−ブチルエステル（化合物Ｎｏ．８）の合成
（１）３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸１．００ｇ（３．９４ｍｍｏｌ、１当量）を窒素雰囲気下で乾燥クロロホルム９．５ｍｌに溶かし、これに１−ブタノール０．４３７ｇ（５．９０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド０．９７６ｇ（４．７３ｍｍｏｌ、１．２当量）及び４−ジメチルアミノピリジン０．０４８ｇ（０．３９ｍｍｏｌ、０．１当量）を加えて、室温で２５５分間攪拌した。反応液のろ過を行い、そのろ液から溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）で精製し、無色油状の３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｎ−ブチルエステル１．０４ｇ（収率８５％；ＨＰＬＣ純度９６．６％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
０．９９（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ、１．４８（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、１．７５（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、２．６２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３５（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．３３（ｔ，２Ｈ）ｐｐｍ、７．５９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７７（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００５６】
（２）別反応容器に窒素雰囲気下で、実施例８（１）で得た、３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｎ−ブチルエステル１．０４ｇ（３．３５ｍｍｏｌ、１当量）を乾燥テトラヒドロフラン２７ｍｌに溶かし、ドライアイス−アセトン浴を用いて−７８℃まで冷却を行い、これにリチウムジイソプロピルアミン溶液を約８分間で滴下した。−７８℃で２０分間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、３０分間攪拌を行った。その後、再びドライアイス−アセトン浴を用いて、−７８℃まで冷却を行い、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製）１．７８ｇ（５．０３ｍｍｏｌ、１．５当量）を投入した。−７８℃で１時間攪拌した後、浴を氷浴に変更し、６０分間攪拌した。水１５ｍｌ、酢酸エチル３５ｍｌを加え、１５分間攪拌し抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定塩酸、水、飽和食塩水の順で洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１．５）で精製し、得られた目的フラクションをジエチルエーテルで懸濁分散洗浄を３回行い、ろ過、乾燥した後、目的物である２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  ｎ−ブチルエステル０．２１ｇ（収率２１％；ＨＰＬＣ純度９５．６％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）により分析した結果
１．００（ｔ，３Ｈ）ｐｐｍ、１．４８（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、１．７０（ｍ，１２Ｈ）ｐｐｍ、１．７５（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、２．５４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．６３（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３６（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．３７（ｔ，２Ｈ）ｐｐｍ、７．７１（ｍ，３Ｈ）ｐｐｍ、７．８０（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００５７】
実施例９
７−クロロ−２−（７−クロロ−３，３，３−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２−フルオロ−３，３，３−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル（化合物Ｎｏ．９）の合成
窒素雰囲気下、7−クロロ−３，３，３−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル２．０ｇを無水テトラヒドロキシフラン５９ｍｌに溶かし、ドライアイス−アセトン浴を用いて−７８℃まで冷却を行い、これにリチウムジイソプロピルアミン溶液を注射器でゆっくりと加えた。−７８℃で３０分攪拌した後、０℃まで昇温し、１時間攪拌した。その後、再びドライアイス−アセトン浴を用いて−７８℃まで冷却し、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製）（２．３４ｇ）を加え、１時間攪拌した後、温度を０℃まで昇温した。１時間攪拌した後、氷浴を除き、室温まで昇温し、３０分攪拌した。少量の水を加え反応を停止させ、酢酸エチルを加え抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定の塩酸、飽和食塩水の順で洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２）で精製し、目的物である７−クロロ−２−（７−クロロ−３，３，３−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２−フルオロ−３，３，３−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル２７０ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．５７（３Ｈ，ｓ），１．６（６Ｈ，ｍ），１．７８（３Ｈ，ｍ），２．４９（３Ｈ，ｓ），２．５９（３Ｈ，ｓ），３．４１（２Ｈ，ｓ），３．９６（３Ｈ，ｓ），７．５８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ），７．７６（３Ｈ，ｓ）．
【００５８】
実施例１０
２−クロロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル（化合物Ｎｏ．１０）の合成
実施例２（２）で得た３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステル３０ｍｇ（０．０５９５ｍｍｏｌ、１当量）を窒素雰囲気下で乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５ｍｌに溶かし、水素化ナトリウム（６０％含有品）１０ｍｇ（７．９４ｍｍｏｌ、４．２当量）を加え、室温で２時間攪拌した。次いで、Ｎ−クロロスクシンイミド３２ｍｇ（７．９４ｍｍｏｌ、４．２当量）を加え、室温で１時間攪拌した。水３ｍｌ、酢酸エチル１０ｍｌを加え抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層は１規定濃度塩酸、水、飽和食塩水の順で洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）で精製し、目的フラクションをジエチルエーテルで懸濁分散洗浄を４回行い、ろ過、乾燥した後、目的物である２−クロロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  メチルエステルが３．４ｍｇ（収率１１％；ＨＰＬＣ純度９４．９％）得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
１．６８（ｍ，１２Ｈ）ｐｐｍ、２．４５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．６６（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３５（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、３．９７（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、７．６３（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．６９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７９（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．９７（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、
【００５９】
実施例１１
２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  シクロプロピルメチルエステル（化合物Ｎｏ．１１）の合成
（１）３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸３９ｍｇ（０．０７９ｍｍｏｌ、１当量）を窒素雰囲気下で乾燥クロロホルム５ｍｌに溶かし、これにシクロプロピルカルビノール１１４ｍｇ（１．５８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド３２７ｍｇ（１．５８ｍｍｏｌ）及び４−ジメチルアミノピリジン１９ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）を加え、室温で２１０分間攪拌した。反応物のろ過を行い、そのろ液から溶媒を留去した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）で精製し、融点１３５〜１３９℃の３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  シクロプロピルメチルエステル３２ｍｇ（収率６０％；ＨＰＬＣ純度９２．４％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
０．４０（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、０．６６（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、１．３１（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ、１．６８（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、１．６９（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、１．８１（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、１．８２（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．５６（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．６５（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．６３（ｄ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．２４（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．９１（ｓ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．６０（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ、７．７１（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、７．８０（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００６０】
（２）窒素雰囲気下で、実施例１１（１）で得た３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ６ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  シクロプロピルメチルエステル２３ｍｇ（０．０４２２ｍｍｏｌ）を乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２ｍｌに溶かし、これに水素化ナトリウム（６０％含有品）３．４ｍｇを室温条件下で添加し、室温で１時間攪拌した。更にこれに水素化ナトリウム（６０％含有品）４．６ｍｇを添加した後、１−クロロメチル−４−フルオロ−１，４−ジアゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンビス（テトラフルオロボレート）（Ｓｅｌｅｃｔｆｌｕｏｒ〔商品名〕ａｌｄｒｉｃｈ社製） ７０ｍｇを添加し、室温で約４時間攪拌した。その後、水２ｍｌ、酢酸エチル４ｍｌを加え抽出を行った。抽出物を二層分離して、得られた有機層を１規定塩酸、飽和食塩水の順で洗浄を行い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧濃縮した。残さをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１）で精製し、無色油状の目的物である２−フルオロ−３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２−（３，３，４−トリメチル−１，１−ジオキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボニル）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−１λ6−ベンゾ［ｂ］チオフェン−５−カルボン酸  シクロプロピルメチルエステル４ｍｇ（収率１７％；ＨＰＬＣ純度７７．１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（重クロロホルム溶媒；ＴＭＳ標準）による分析結果
０．４０（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、０．６６（ｍ，２Ｈ）ｐｐｍ、１．３１（ｍ，１Ｈ）ｐｐｍ、１．５５（ｓ，６Ｈ）ｐｐｍ、１．６９（ｍ，６Ｈ）ｐｐｍ、２．５４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、２．６４（ｓ，３Ｈ）ｐｐｍ、３．３６（ｓ，２Ｈ）ｐｐｍ、４．２０（ｄ，２Ｈ）ｐｐｍ、７．７１（ｍ，３Ｈ）ｐｐｍ、７．８２（ｄ，１Ｈ）ｐｐｍ
【００６１】
前記製法１〜３又はそれらに準じた方法で製造した実施例１〜１１の化合物及びその物性を表１に示した。
【００６２】
【表１】
0005461088.tif 000009
【００６３】
前記製法１〜３又はそれらに準じた方法で製造した実施例１〜１１の化合物の細胞増殖阻害活性について以下の評価試験を行い、その評価を表２に示した。
【００６４】
［三次元培養による細胞増殖阻害活性の評価試験］
ヒト前立腺癌細胞株（ＰＣ−３）、ヒト肺癌リンパ節転移細胞株（ＣＯＲ−Ｌ２７９）及びヒト乳腺癌細胞株（ＭＣＦ−７）に対する実施例の化合物の細胞増殖阻害活性の評価試験を行った。
ＰＣ−３細胞は１０％牛胎児血清（ＦＢＳ）（ＨｙＣｌｏｎｅ社製、カタログ番号ＳＨ３００７０．０３）を含むＦ−１２Ｋａｉｇｈｎ’ｓ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ培地（ギブコ社、カタログ番号２１１２７−０２２）で培養した。
ＣＯＲ−Ｌ２７９細胞は１０％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ社製、カタログ番号ＳＨ３００７０．０３）を含むＲｏｓｗｅｌｌ  Ｐａｒｋ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ’ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ（ＲＰＭＩ）１６４０培地（シグマ社製、カタログ番号Ｒ８７５８−５００ＭＬ）で培養した。
ＭＣＦ−７は１０％ＦＢＳ（ＨｙＣｌｏｎｅ社製、カタログ番号ＳＨ３００７０．０３）を含むＭＩＮＩＭＵＭ  ＥＳＳＥＮＴＩＡＬ  ＭＥＤＩＵＭ  ＥＡＧＬＥ（シグマ社製、カタログ番号Ｍ５６５０−５００ＭＬ）で培養した。
次に、培養したそれぞれの細胞を、ＢＤマトリゲル（ＧＦＲ）グロースファクターリディュースト（日本ベクトン・デッィキンソン社製、カタログ番号３５４２３０）と９６ｗｅｌｌ培養プレート（ＭＩＣＲＯＰＬＡＴＥ  ９６ｗｅｌｌ〔商品名〕、IWAKI社製）を用いて三次元培養した。
９６ｗｅｌｌ培養プレートにｂａｓｅ  ｌａｙｅｒとして５０μｌのゲルを形成し、その上にｃｅｌｌ  ｌａｙｅｒとして１×１０４個／ｍｌに調製したそれぞれの培養細胞を等容量のマトリゲルと懸濁させ、細胞混合懸濁ゲルとして５０μｌ重層させた。ゲルが完全に固まったのを確認した後、化合物処理群としてＮｏ．１乃至１１の化合物の含まれる培養培地１００μｌを添加し、ＰＣ−３細胞は３７℃で５日間、ＣＯＲ−Ｌ２７９細胞及びＭＣＦ−７細胞は３７℃で３日間培養した。なお、化合物処理群の各化合物の最終濃度は０．１、１及び１０μＭとなるように調整し、細胞に添加した。
コントロール群として、化合物を含まない培養培地を前記と同様に細胞に処理し、培養した。
【００６５】
三次元培養後の化合物処理群及びコントロール群の培地にＣｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔ  Ｒｅａｇｅｎｔ  ＳＦ（ナカライテスク社製）を２０μＬ添加し、３７℃で１〜６時間反応させた。
コントロール群の吸光度が１程度になった時点で化合物処理群の吸光度を測定し、細胞増殖阻害活性の評価を行った。吸光度は、マイクロプレート分光光度計Ｓｐｅｃｔｒａ  ＭＡＸ  Ｍ２（モレキュラーデバイス社製）を用いて、４５０ｎｍで測定した。
細胞増殖阻害活性は、コントロール群の値を生存率１００％とし、以下の式で細胞増殖阻害率として算出した。
細胞増殖阻害率が１０％以上の場合、細胞増殖阻害活性があるものとし、２０％以上の場合、強い細胞増殖阻害活性があるものとした。
【００６６】
細胞増殖阻害率（％）＝｛１００−（化合物処理群の吸光度／コントロール群の吸光度）｝×１００
【００６７】
【表２】
0005461088.tif 000010
【００６８】
すべての化合物は、ＣＯＲ−Ｌ２７９の癌細胞株に対して細胞増殖阻害効果がみられた。化合物Ｎｏ．１、２、４、７、１０及び１１は、３種類のすべての癌細胞株に対して細胞増殖阻害率が１０％以上を示し細胞増殖阻害効果がみられた。また、化合物Ｎｏ．１、２、４、７及び１０は３種類すべての癌細胞株に対して細胞増殖阻害率が２０％以上を示しており、強い細胞増殖阻害活性がみられた。本発明の化合物は、細胞増幅阻害活性剤又は抗癌剤としての有用性を示した。
【産業上の利用可能性】
【００６９】
本発明は、細胞増殖阻害剤又は抗癌剤をはじめとして広く産業上利用できる。